FR2459802A1 - Acides 6-amino-spiro(penam-2,4'-piperidine)-3-carboxyliques, procede de preparation et compositions pharmaceutiques - Google Patents

Abstract

A.SUBSTANCES APPARENTEES AUX ACIDES 6-AMINO-PENICILLANIQUES. B.ACIDES 6-AMINO-SPIRO PENAM-2,4-PIPERIDINE-3-CARBOXYLIQUES, LEURS SELS DE METAUX ALCALINS ET LEURS ESTERS DE FORMULE: (CF DESSIN DANS BOPI) DANS LAQUELLE R REPRESENTE DE L'HYDROGENE, UN RADICAL BENZYLE OU UN ION DE METAL ALCALIN ET R REPRESENTE UN GROUPE METHYLE, PHENYLE OU BENZYLE, AINSI QUE LEURS SELS D'ADDITION D'ACIDE MINERAUX OU ORGANIQUES. C.INTERMEDIAIRES POUR LA SYNTHESE DE SUBSTANCES APPARENTEES AUX PENICILLINES ET SUBSTANCES UTILISABLES POUR LE TRAITEMENT DE MALADIES INFECTIEUSES PROVOQUEES PAR LES BACTERIES.

Description

1 2459802

La présente invention se raopporte à des nouveaux composés chimiques: à des acides 6-amino-sniroq/3nam-2,4'-oioéridine/-3-carboxylieues, aux sels et aux esters de ces acides, ainsi qu'à leur procédé de répoaration et à leurs applications. Ces acides 6-amino-spiro/_enam-2,4 '-Diéridine/-3carboxyliques sont des composés analogues aux acides 6-aminopénicillaniques, mais dans lesquels l'atome de carbone en position 2 du noyau "pénam" (voir définition ci-dessous) est substitué par une chaîne 3azaDentaméthylène qui forme avec cet atome de carbone un hétérocycle. Ces composes comportent donc un hétérocycle spirannique constitué par le noyau pénam et par un hétérocycle

monocyclique saturé possédant un atome d'azote.

Ces composés sont des précurseurs des nouvelles pénicillines qui font l'objet d'une demande de brevet distincte déposée conjointement par la demanderesse. Ils présentent cependant une activité antibiotique propre,

nullement négligeable quand on la compare à celle de l'acide 6-amino-

pénicillanique correspondant, et ce pour un spectre antibactérien étendu.

Les nouveaux composés de l'invention consistent en des acides 6-amino-

spiro/nénam-2,4'-p-ipéridine/-3-carboxyliques répondant à la formule générale:

H CH -CH

2 \ _ S s 4312 21",2 CH- CH i 2c. 4I'N-RB (I) 16 I 1 'I5't 6'/,,

1 4 3C CH2-CH2

NO- CH 2 2

0 \COOR

dans laquelle R1représente de l'hydrogène, un radical benzyle ou un ion de métal alcalin et R2 représente un groupe méthyle, phényle ou benzyle,

ainsi que leurs sels d'addition d'acide minéraux ou organiques.

Etant donné l'existence de trois centres asymétriques en C3, C5 et C6, ces composés peuvent se présenter sous la forme d'un mélange de 8 isomères qui peuvent être groupés en 4 diastéréoisomères racémiques. La cinétique des réactions conduit en fait à la formation de 3 seulement de ces racémiques: alpha, bêta et gamma. Le composé racémique alpha, dont la configuration relative correspond à celle de la pénicilline, est isolé préférentiellement

à partir du mélange réactionnel.

Dans la présente spécification, la nomenclature utilisée est celle présentée par R.J. STOODLEY dans "Progress in Organic Chemistry" 8,(1973), 102-103. En particulier, on désigne par "pénam" le noyau suivant: 0A Les composés de formule générale (I) sont orépares par un procédé en plusieurs stades qui est caractérisé en ce que: (1) on fait réagir du 2formyl-2-phtalimido-acétate de tert.butyle de formule (II) avec un acide alpha-amino-4-mercapto-l-R2-4-pipéridineacétiaue de

formule (III) pour obtenir l'isomère gamma d'un 4-carboxy-alpha-

phtalimido-8-R 2-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acetate de tert. butyle de formule (IV), selon l'équation: + COOH tert.C4H9 (II) (III) o0 COOH COOH tert. C4H9 (2) on épimérise l'isomère gamma (V) par chauffage avec de la l'équation: (Iv) de formule (IV) en isomère alpha de formule pyridine ou de la diéthylamine, selon pyridine isomere gamma. . > diéthylamine (Iv) isomère alpha (v)

(3) on prépare le 4-benzyloxycarbonyl-alpha-phtalimido-8-R2-1-thia-3,8diaza-

spiro/4.5/decane-2-acetate de tert.butyle de formule (VI) par réaction de l'isomère alpha de formule (V) avec du diazophénylméthane ou un halogénure de benzyle, selon l'équation:

(V) + /CH=N2

ou -

(V) + CH2-Hal t 0 I tert.C4H9 tert.CH /SNi /sCl

CH J

C- OCH2

(VI) (4) on effectue ensuite la déphtalimidation du composé de formule (VI) par

hydrazinolyse, ce qui donne l'alpha-amino-4-benzyloxycarbonyl-8-R2-1-thia-

3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétate de tert.butyle de formule (VII), selon l'équation: NH2-NH2 H2\ s I C, (VI) CH CH c

NC \N. CH

tert.C H H j=0 CH2 (VII) (5) on désalkyle sélectivement le groupement ester tert.butylique du composé (VII) par traitement de celui-ci en solution dans du nitrométhane avec de l'acide chlorhydrique gazeux, ce qui donne le dichlorhydrate de l'acide

,8-diazaspiroiIi. 5_7d-cane-2-

alpha-amino-4-benzyloxyvcarbonyl-8R2-1-thia-3,8-diazaspro/,5dcane-2-

acétique de formule (VIII) selon l'équation: HC1 (VII) H2N\

-/CH 11N

COOCH C000H \!.c.. o

- sX -

H C2H01

\

H,C=,?

C2 9\/

(VIII)

(6) on bloque le groupement alpha-amino du composé (VIII) au moyen de chlorure

de trityle, obtenant ainsi l'acide 4-benzyloxycarbonyl-8-R2-alpha-

tritylamino-l-thia-3,8-diazaspiro/h.5/décane-2-acetique de formule (IX), selon l'équation:

(VIII) + (C6H5)3-C-Cl -

/ H's CHU C Ci" COOH Ct î (IX) (7) on cyclise ensuite le composé de formule (IX), de préférence à chaud, par

réaction avec un carbodiimide (en abrégé CI), pour obtenir le 1'-R2-6-

trityleamino-spiro pénam-2,4'-pipéridine/-3-carboxylate de benzyle de formule (X), selon l'équation:

CH{ -C\H

CH_--CH2

_ xCI (C6H5)3=C-NH-CH- CHS\ / 2 (IX) --- l 1 N__C / 2 /2 C=O I CH 2) (x)

(8) on traite ensuite le composé de formule (X) avec de l'acide p-toluène-

sulfonique (p-TS) pour obtenir le 6-amino-1'-R2-spiro/pénam-2,4'-

pipéridine/-3-carboxylate de benzyle de formule (I), sous forme de di-p-

toluènesulfonate selon l'équation: p-TS (X) H2N-CH--CH q 0 N 0u 2p-TS (r) avec 1 = -CH2C6H5 (9) on soumet finalement le composé de formule (I) o R1 représente le radical

benzyle,-à une hydrogénolyse, obtenant ainsi l'acide 6-amino-l'-R2-spiro-

/pénam-2,4'-pipéridine7-3-carboxylique correspondant de formule (I) sous forme de di-p-toluénesulfonate selon l'équation: H

2459802

H H 2N-CH- CH--S\ 1H 2 CU22

2 2 2

(I) avec Ri =-CH2 2. N-R. 2-TS

0 \ CH-C H2

C=O 2

! OH (I) avec Ri = H -l J

dans toutes ces formules, R2 étant un groupe méthyle, phényle ou benzyle.

Il est évident que pour obtenir les composés de formule (I) o R1 représente un groupe benzyle et R2 représente un groupe méthyle, phényle ou benzyle, on se borne à exécuter uniquement les stades (1) à (8) du procé6dé

décrit ci-dessus.

Pour obtenir les composés de formule (I) o R1 représente l'ion d'un métal alcalin et R2 un groupe méthyle, phényle ou benzyle, on neutralise de

manière connue en soi avec un hydroxyde de métal alcalin l'acide 6-aminol'-

R2-spiro/penam-2,4'-pipéridine/-3-carboxyliaue obtenu au stade (9).

La préparation du 2-formyl-2-phtalimido-acétate de tert.butyle de

formule (II) est décrite dans la littérature (J. SHEEHAN & al., J.Am.Chem. Soc.

76,(1954),158-160).

La préparation de l'acide alpha-amino-4-mercapto-l-R2-4-pipéridine-

acétique de formule (IIi) peut se faire conformément aux stades suivants: (a) réaction de 2-isocyanoacétate d'éthyle avec une 1-R2-4-pipéridone en présence d'une suspension d'hydrure de sodium dans du t6trahydrofuranne pour obtenir l'alpha-formamido-l-R2-nipéridine- ' -acetate d'éthyle selon l'équation: 0 0

C=N-CH2-C + B 2- O - \ C-NH /C-O-C2H5

0-C2H5 H C

R2 (b) chauffage à reflux de l'alpoha-formamido-l-R2-piperidine- A 'acétate d'éthyle avec du pentasulfure de phosphore en solution dans l'acétonitrile, pour obtenir le 8-R2-1-thia-3,8-diazaspiro/4. 5/déc-2-ène4-carboxylate d'éthyle selon l'équation: 6 24S9 Oi o

C-NB C-O-C H-

/ \EX/C O2q5 o

H C/ 25

C=O !

O-C2H5

N R2 (c) décyclisation du 8-R2-1-thia-3,8-diazasniro/. 5/déc-2-ène-4carboxylate d'éthyle par chauffage avec de l'acide chlorhydrique aqueux, ce qui donne l'acide alpha-amino-4-mercapto-l-R2-4-pipéridineacétique de formule (III) désiré, sous forme de dichlorhydrate, suivant l'qéauation:

11C1 HS

+ 9- t HNC C N-R2. 2HCl

+ 2-O H2N,%CH

N 2 11

\ C=O

0=0=

C=O \

/ OH

o (III) C2H5

dans toutes ces formules R étant un groupe méthyle, phényle ou benzyle.

On peut séparer éventuellement les deux formes énantioeres des comnoses de formule (III), ce qui permet d'obtenir directement le diastérgoisomère (IV)

optiquement pur.

Application des composés de l'invention.

L'intérêt des composés de la présente invention réside dans le fait qu'ils conduisent par des réactions simples et connues en elles-mêmes à de nouvelles familles de composés analogues aux pénicillines. Ces composés se différencient structurellement des pénicillines traditionnelles par la présence de l'hétérocycle monocyclique saturé azoté en position 2, à la place d'un substituant gem-diméthyle. Ces nouveaux composés répondent à la formule générale (XI) suivante: (XI)

245980O

dans laquelle R représente un groupe méthyle, phényle ou benzyle (R = R2 ci-

dessus). Ces composés, leur procédé de préparation et leurs applications font

l'objet de la demande de brevet déposée conjointement par la demanderesse.

Les substituants Z1 et Z2 sont les substituants traditionnels connus dans la chimie des pénicillines, tels que ceux présentés par exemple dans

ULLMANNS ENCYKLOPAEDIE der TECHNISCHEN CHEMIE, 4e éd., vol.7,(1974),651 et 652.

A titre d'exemple, on peut obtenir à partir des composés de l'invention les acides de formule (XI) dans lesquelles Z1 représente de l'hydrogène et Z2 représente un radical choisi parmi les radicaux 2-phénylacétyle (voir l'exemple II ci-après), 2,6-diméthoxybenzoyle, 5-méthyl-3-phényl-4isoxazole-carbonyle et 2-amino-2-phénylacétyle, ou bien Z1 et Z2 représentent ensemble un radical bivalent Z3, de préférence le radical (hexahydro-lH-azépin -l-yl)méthylène,

ainsi que leurs sels non toxiques pharmaceutiquement acceptables.

Les composés de formule (XI) dans lesquels Z1 représente de l'hydrogène et Z2 un radical choisi parmi ceux cités précédemment sont obtenus en soumettant les composés de la présente invention à une réaction d'acylation avec un composé de formule Z2Y dans laquelle Z2 a la signification donnée

ci-dessus et Y est un atome d'halogène ou un groupe hydroxyle.

Lorsque le composé de départ utilisé pour préparer les composés de formule (XI) est un acide 6-amino-spiro/éonam-2,4'-pipéridine/-3- carboxylique de formule (I) dans laquelle R est un radical benzyle, le procédé de synthèse des composés de formule (XI) comporte évidemment une seconde étape qui consiste en une hydrogénolyse des esters bensyliques obtenus en acides

correspondants.

Les composés de formule Z2Y, servant d'agents d'acylation pour le groupe amino en position 6, peuvent être des halogénures d'acide (Y = halogène) ou un acide libre (Y = OH); dans cette dernière éventualité l'opération d'acylation se fait en présence d'un agent de couplage, par exemple un carbodiimide, comme le diisopropylcarbodiimide. En outre, lorsque les composés de formule Z2Y contiennent un groupe amino libre, ce dernier peut gtre protégé de manière connue en soi, par exemple par un groupement benzyloxycarbonyle, lequel est

éliminé ensuite pendant l'opération d'hydrogénolyse.

Ainsi pour introduire les radicaux Z2 cités précédemment, par exemple, on peut utiliser comme agent d'acylation le chlorure de phénylacétyle, le

chlorure de 2,6-diméthoxybenzoyle, le chlorure de 5-méthyl-3-phényl-4-

isoxazole-carbonyle et la N-(benzyloxycarbonyl)-D(--.-2-phénylglycine.

Par "sels non toxiques pharmaceutiquement acceptables", on entend notamment les sels de métaux, comme le sodium, le potassium, le calcium et 8 24598-0o

l'aluminium, les sels d'ammonium et les sels d'amines comme les trialkyl-

amines, notamment la triéthylamine, la procaine, la dibenzylamine, la N-

benzyl-bêta-phénéthylamine, la l-éphénamine, la N,N' -dibenzyl-éthylène-

diamine, la déhydroabiétylamine, la N,N'-bis-déhydroabiétyléthylenediamine, les N-(alkyle inférieur)pipéridines, comme la Néthylpipéridine et de manière plus générale les sels déjà connus pour les pénicillines G et V (voir ULLMANNS ENCYKLOPAEDIE, loc.cit., p.653). Ces sels peuvent être obtenus à

partir des acides correspondants par des méthodes connues en elles-mêmes.

Lorsque dans la formule (XI) le radical Z2 est par exemple le radical 2amino-2-phénylacétyle, les composés peuvent se présenter également sous la forme de sels d'addition d'acides pharmaceutiquement acceptables, comme par exemple les acides acétique, citrique, succinique, ascorbique, chlorhydrique,

bromhydrique, sulfurique ou phosphorique.

Les composés de formule (XI) dans lesquelles Z1 et Z2 représentent un radical bivalent Z3 sont obtenus à partir des composés de l'invention par réaction avec un dérivé activé d'un composé de formule Z3=0, Z3 ayant la même signification que précédemment. Ainsi, par exemple, lorsque le radical Z3 est

le radical (hexahydro-lH-azépin-l-y-l)méthylène, on fait réagir un acide 6-amino-

spiro/pénam-2,4'-pipéridine/7-3-carboxylique ou l'un de ses esters, avec un dérivé activé de l'hexahydro-lH-azépine-l-carboxaldéhyde. Les dérivés actives des composés Z3--O0 sont généralement le chlorure d'amide correspondant obtenu par l'action du chlorure d'oxalyle, ou encore le complexe obtenu par l'action

du sulfate de diméthyle.

Les composés de formule (XI) ainsi que leurs sels non toxiques pharmaceutiquement acceptables sont utilisés en tant qu'agents antibactériens, en tant que suppléments diététiques pour la nourriture des animaux et comme agents thérapeutiques pour les animaux, de même que pour l'homme dans le traitement des maladies infectieuses provoquées par les bactéries Gram-positives

ou Gram-négatives.

Ces composés possèdent en effet un spectre très vaste d'activité anti-

bactérienne, à la fois contre les bactéries Gram-nositives et Gramnégatives, mais ils sont tout particulièrement efficaces pour combattre les souches de

bactéries productrices de bRta-lactamases.

En particulier, ils présentent des activités antibactériennes supérieures à celles des pénicillines correspondantes, ainsi qu'il est démontré par les essais comparatifs décrits dans la demande de brevet déposée conjointement par

la demanderesse et à laquelle on renvoie le lecteur pour une description plus

détaillée.

Les exemples qui suivent illustrent la présente invention.

9 24598o Préparation des acides alnha-amino-4-mercapto-l-R2--niperidineacétigues de

formule (III).

Stade (a)

a.l. alpha-Formamido-l-méthyl-pipéridine- L 4'e-acétate d'éthyle.

Dans une suspension de 24,35 g d'hydrure de sodium à environ 50% dans 635 ml de tétrahydrofuranne sec, on introduit sous vigoureuse agitation à la température ambiante, la solution de 57,4 g (0,51 mole) de 2isocyanoacétate d'éthyle et de 57,4 g (0,51 mole) de 1-methyl-4piperidone dans 380 ml de têtrahydrofuranne. L'agitation est poursuivie pendant 3 heures et on laisse reposer le mélange de réaction durant une nuit. Apres évaporation de l'excès de solvant sous vide, on traite- le résidu avec précaution par une solution de 76 g d'acide acétioue glacial dans 634 ml d'eau. La décomposition étant achevée, on alcalinise avec du carbonate de sodium et on-extrait avec du

dichlorométhane. Après évaporation du solvant on obtient 53,5 g d'alpha-

formamido-l-méthyl-pinéridine- -acétate d'éthyle. Rendement: 46,6%.

P.F.: 116-7 C (acétate d'éthyle) Chromatographie sur plaque de silice en couche mince: 1 tache Analyse pour CllH18N203 (P.M. 226,281): calculé (%) : N 12,38 trouvé (%): 12,31

a.2. l-Benzyl-alpha-formamido-nipéridine- 4' -acétate d'éthyle.

La préparation est la même qu'en a.l., sauf qu'on remplace la l-méthyl-

4-pipéridone par la quantité correspondante de 1-benzyl-4-niuéridone et que le

dichlorométhane peut aussi être remplacé par du benzène.

Rendement: 60% P.F.: 87-8 C (acétate d'éthyle) Chromatographie sur plaque de silice en couche mince: 1 tache Analyse pour C17H22N203 (P.M. 302,379) : calculé (%): C 67,77 H 7,33 N 9,26 trouvé (%): 66,77 7,29 8,94

a.3. alpha-Formamido-l-Dhényl-Di eridine-4 ' -acétate d'éthyle.

La préparation est la même qu'en a.l., sauf qu'on remplace la l-m6thyl-

pipéridone par la quantité correspondante de l-phényl-pipéridone. Le mélange réactionnel est agité pendant une heure à la température ambiante, puis porté à 40-45 C; ensuite, il est agité pendant 3 heures à la température ordinaire

et enfin, maintenu au repos -endant une nuit. Rendement: 59%.

P.F.: 135-6 C (acétate d'éthyle) Analyse pour C16H20N203 (P.M.: 288,34) caleulé (%): C 66,64 H 6,99 N 9,72 trouvé (%): C 67,89

24599O

H 6,87

N 9,75

Stade (b) _J . 577dc 4a xa ethye

b.l. 8-M6thyl-l-thia-3,8-diazaspiro/.5/dec-2-ène- -carboxylate d' thyle.

A la solution de 56,6 g (0,25 mole) d'alpha-formamido-l-méthyl-

pipéridine- 4' I-acétate d'éthyle dans 265 ml d'acétonitrile, on ajoute en une fois 11,1 g de pentasulfure de phosphore. Après chauffage à reflux du

mélange réactionnel pendant 1 1/2 heure, on laisse refroidir et on filtre.

Puis on évapore le filtrat et l'on reprend le résidu dans 500 ml de benzène.

On filtre, on évapore de nouveau à siccité et on distille deux fois pour

obtenir finalement le 8-méthyl-l-thia-3,8-diazaspiro/W.5/dec-2-ène-4-

carboxylate d'éthyle avec un rendement de 40%.

P.Eb.: 115-60C/0,OO1 mm Hg -1 Spectre infrarouge (film): 1750 cm1 (ester) Analyse pour CllH18N202S (P.M. 242,326): calcule (%): C 54,52 H 7,49 N 11, 56 S 13,23 trouvé (%): 54,36 7,37 11,53 12,91

b.2. 8-Benzyl-l-thia-3,8-diazaspiro/R.5/dec-2-ène-4carboxylate d' thyle.

Ce produit est préparé de la même manière qu'en b.l., en partant toutefois de l-benzyl-alpha-formamido-oipoéridine-A 4'-_ac9tate d'éthyle, en chauffant la solution de ce produit avant l'addition du pentasulfure de phosphore et en ne chauffant le mélange de réaction à reflux que pendant

minutes seulement.

On fait passer le résidu sur colonne de Kieselgel Merck 60 en utilisant

du chloroforme comme éluant, obtenant ainsi le 8-benzyl-l-thia-3,8diazaspiro-

/1.5/-déc-2-ène-4-carboxylate d'éthyle avec un rendement de 33%.

P.F. 67-68 C.

Spectre infrarouge (KBr): 1742 cm-1 (ester) Spectre de masse: M m/e = 318 Analyse pour C17H22N202S (P.M. 318,445): calculé (%): C 64,12 H 8,96 N 8, 80 S 10,07 trouvé (%): 65,78 7,14 8,54 9,52

b.3. 8-Phényl-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/déc-2-ène-4-carboxylate d'éthyle.

A une solution de 144 g (0,5 mole) d'alpha-formamido-l-phényl-

pipéridine- ' a 'l-acétate d'éthyle dans 600 ml d'acétonitrile, chauffée à 60-

65 C, on ajoute sous atmosphère d'azote et en une fois, 22,3 g de pentasulfure de phosphore (0,10 mole). On chauffe le-mélange réactionnel à reflux pendant minutes. On ajoute encore ll g de pentasulfure de phosphore et le reflux

est prolongé pendant 30 minutes. On refroidit et on évapore presque à sec.

il 245980O Le résidu est repris par un litre de benzène, on décante et on extrait

nouveau par deux fois 500 ml de benzène.

Les phases benzéniques sont réunies et évaporées à siccité. On obtient 111 g de 8-phényl-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/d&c-2-ène-4-carboxylate d'éthyle brut qui sont utilises dans le stade c) sans autre purification.

Spectre de masse: M+' m/e = 304.

Stade (c)

c. 1. Acide alpha-amino-h-mercapto-l-méthyl-4-piopridineacStique (dichlorhydra-

te). On chauffe à reflux pendant 4 heures la solution de 113 g (0,466 mole) de 8-méthyl-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5 /7dc-2-ène-4-carboxylate d'éthyle dans litres d'acide chlorhydrique environ 6 N. On décolore la solution avec du charbon activé et on évapore à sec. On élimine les traces d'eau par entraînement au benzène et à l'isopropanol. Puis on dissout le résidu dans 1,5 litre d'éthanol, on concentre à un volume d'environ 400 ml et on laisse

cristalliser. On obtient ainsi 104,7 g de dichlorhydrate de l'acide alpha-

amino-4-mercapto-l-méthyl-4-pipéridine acétique.

Rendement: 81%.

P.F. 201-2 C (décomposition) Spectre infrarouge (KBr): 1730 cm-1 (carbonyle) Avec une solution aqueuse de FeC13: coloration bleu fonce Analyse pour C8H16N202S. 2 HC1 (P.M.: aminoacide seul = 204,298; + 2 HC1 =

277,288):

calcul (%): C 34,66 H 6,54 N 10,11 Cl 25,58 trouvé (%): 34,38 6,63 o10,14 25,97 c.2. Acide alpha-amino-l-benzyl-4-mercapto-4-pipéridineacétique (dichlorhydrate)

La préparation est la meme qu'en c.l., à partir de 8-benzyl-l-thia-3,8-

diazaspiro/h.5/dec-2-ène-4-carboxylate d'éthyle. Le produit obtenu est trituré

dans de l'alcool isopropylique et séché. Rendement: 95%.

P.F.: 172-174 C (retient de l'alcool isopropylique) Spectre infrarouge (KBr): 1730 cm-1 (carboxyle) Analyse pour C14H20N202S. 2 HC1 (P.M.: aminoacide seul = 280,396; + 2 HC1 =

353,326):

calculé (%): C 45,58 H 6,28 N 7,93 Cl- 20,07 S 9,07 trouvé (%): 46,18 6, 37 7,47 19,31 8,28

c.3. Acide alpha-amino-4-mercapto-l-phényl-4-pip6ridineacétique (dichlorhydra-

te). On chauffe à reflux (1100 C) pendant 4 heures la solution de 111 g de 8-phényl-1-thia-3,8-diazaspiro/.. 5/déc-2-ène-4-carboxylate d' éthyle obtenue en b.3. dans 4 litres d'acide chlorhydrique 6N. On décolore la solution avec du charbon activé, puis on évapore à sec. On élimine les traces d'eau-par

entra nement avec deux litres de benzène et 1 litre d'alcool isopropylique.

Le résidu est repris par un litre d'éther. On filtre les cristaux et on sèche.

On obtient ainsi 109,2 g de dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-4-

mercapto-l-phényl-4-pipéridineacétique. Rendement: 64% (pour les stades consécutifs b.3. et c.3.) P.F.: 198-200 C (décomposition) Spectre infrarouge (KBr): 1725 cm-1 (CO); 745 cm phenyle) Analyse pour C13H18N202S.2HCl (P.M. 339,29) calculé (%): -C 46,o2 H 5,97 N 8,26 Cl 20, 90 trouvé (%): 43,6 6,15 7,60 20,63

Exemple 1. Préparation des acides 6-amino-spiro/nénam-2 4'-pipéridine7-3-

carboxyliques. Stade (1)

1.1. 4-Carboxy-8-méthyl-alpha-phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/W. 5/décane-2-

acétate de tert.butyle (isomère gamma).

A la solution de 166,9 g (0,57 mole) de 2-formyl-2-phtalimido-acétate de tert.butyle dans 1150 ml d'éthanol préchauffé à 60 C, on ajoute une

solution de 160 g (0,57 mole) du dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-4-

mercapto-l-méthyl-4-pipéridineacétique et 235,6 g (1,73 mole) d'acétate de

sodium (cristallisé avec trois molécules d'eau) dissous dans 1150 ml d'eau.

On agite pendant environ 10 minutes puis on laisse reposer pendant 24 heures.

On filtre le précipité, on le rince à l'eau et on le sèche. On obtient

223 g de l'isomère gamma de 4-carboxy-8-méthyl-alpha-phtalimido-l-thia-3, 8-

diazaspiro/4.5/décane-2-acétate de tert.butyle. Rendement. 81%.

P.F.: 276-8 C (décomposition) Spectre infrarouge (KBr): 3290 cm-1 (NH) Analyse pour C23 H29N306S (P.M. 475,575): calculé (%): C 58,09 H 6,15 N 8, 84 S 6,74 trouvé (%): 58,19 6,20 8,48 6,71

1.2. 8-Benzyl-4-carboxy-alpha-phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/. 5/décane2-

acétate de tert.butyle (isomère gamma).

La préparation est la même qu'en 1.1., mais à partir de la quantité

correspondante du dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-l-benzyl-4mercapto-4-

pipéridineacétique. Le rendement est de 72% (en deux jets). Les eauxmères du

24598O0

premier jet sont extraites au benzène et le résidu de l'évaporateur est

cristallisé dans l'acétate d'éthyle.

P.F.: 208-9 C (décomposition)

Spectre infrarouge (Y3r ou CHC13): 3300 cm (NTH).

Analyse pour C29H33N306S (P.M. 551,673): calcul (%): C 63,12 H 6,02 N 7, 61 S 5,81 trouvé (%): 60,92 6,06 7,80 5,62

1.3. 4-Carboxy-8-phényl-alpha-phtalimido-l1-thia-3,8-diazaspiro/4. 5/decane-2-

acétate de tert.butyle (isomère gamma).

Ce composé est préparé par le orocédé décrit en 1.1. mais à partir de

la quantité correspondante du dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-lphényl-

4-mercapto-4-pipéridineacétique. Le produit obtenu est lavé successivement à l'eau, à l'éthanol glace

et à l'éther. Rendement: 68%.

P.F.: 211-213 C.

Spectre infrarouge (KBr): 3270 cm-1 (NH), 1710 cm-1 (carboxyle) Spectre RMN (DMSO-TrS): 4 H (phtalyle): singulet à 8,0 ppm H (phényle): multiplet à 7,4 à 6,6 ppm h: doublet à 5,2 ppm Halpha H (pipéridine + H2 + H) :multiplet à 4,0 à 1,5 ppm 9 H (t.butyle): singulet à 1,4 ppm Halpha et H2 sont couples, J = 8,3 Fz Stade (2)

2.1. 4-Carboxy-8-méthyl-alpha-phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/decane2-

acétate de tert.butyle (isomère alpha).

On chauffe pendant 24 heures à reflux 183,9 g (0,38 mole) de l'isomère gamma obtenu en 1.1. dans 920 ml de pyridine. On filtre à chaud, on lave le

précipité avec de la pyridine puis avee de l'éther éthylique et l'on sèche.

Après 8 heures de dessication à 140 C sous vide poussé, on obtient un premier

jet de 110 g (29,9%) d'isomère alpha fondant à 278-80 C (décomposition).

On concentre le filtrat pyridinique de manière à avoir environ 5 ml de pyridine par gramme de produit et on répète l'opération. En cinq opérations

* on obtient l'isomère alpha désiré avec un rendement de 91,1%.

Spectre infrarouge (KBr): 3340 cm-1 (NE) Analyse pour C23H29N306S (P.M. 475,575): calculé (%): C 58,09 H 6,15 N 8,84 S 6,74 trouvé (%): 57,28 6, 08 8,73 6,72 st

14 2459802

-.2. 8-Benzyl-4-carboxy-alpha-phtalimido-l-thia-3,3-diazaspiro/W.5/décane2-

acétate de tert.butyle (isomère alpha).

On chauffe à reflux pendant 6 heures 123 g d'isomère gamma obtenu en 1.2. dans 2 litres de diéthylamine et on laisse reposer une nuit. On filtre, on lave le précipité avec un peu de diéthylamine et ensuite avec de l'éther éthylique. On sèche le précipité et l'on obtient ainsi 103,9 g de l'isomère

alpha désiré.

Rendement: 84,5%.

P.F.: 230-2 C (décomposition) Spectre infrarouge (KBr): 3348 cm-1 (NH) Spectre RMN (CDC13-TMS): H4: doublet à 4,2 ppm; couplé avec H3 aminé, J = 12,5 Hz (le couplage résiste au traitement avec D20) Spectre de masse: M m/e = 551 Analyse pour C29H33N306S (P.M. 551,673): calculé (%): C 63,12 H 6,02 N 7,61 trouvé (%): 63,35 6,99 7,83

2.3. 4-Carboxy-8-phényl-alpha-phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane2-

acétate de tert.butyle (isomère alpha) Sous atmosphère d'azote, on chauffe vers 100 C, pendant 8 heures, 127 g (0,236 mole) de l'isomère gamma obtenu en 1.3. dans 700 ml de pyridine. On laisse reposer la solution pendant 2 jours au réfrigérateur. L'isomère alpha

cristallise. Il est filtré, lavé plusieurs fois par un mélange glacé acétone-

hexane (2:8), puis par de l'hexane seul. On obtient 25 g de l'isomère alpha

désiré.

Comme en 2.1., l'opération peut être répétée plusieurs fois afin

d'obtenir un rendement élevé en isomère alpha.

P.F.: 229-2300C (déc.) -1 Spectre infrarouge (KBr): 3325 cm (NH) Analyse pour C28H31N306S (P.M. 537,62) calculé (%): C 62,55 H 5,81 N 7,82 trouvé (%): 61,47 5,72 7,63 Stade (3)

3.1. 4-Benzyloxycarbonyl-8-méthyl-alpha-ohtalimido-l-thia-3,8diazasoiro/Z.5/-

décane-2-acétate de tert.butyle.

On chauffe à reflux une suspension de 100 g (0,21 mole) de l'isomère

alpha de 4-carboxy-8-méthyl-alnha-nhtalimido-1-thia-3,8-diazaspiro/i. 5/décane-

2-acétate de tert.butyle obtenu en 2.1. dans 1,5 litre de chloroforme et l'on

introduit lentement sous bonne agitation une solution 0,41 molaire de diazo-

245980a phénylméthane dans le chloroforme jusqu'à refus (environ 40%d'excès pour obtenir une estérification quasi complète). Apres une nuit de repos, on décompose l'excès de diazophénylméthane par addition d'acide formique et on

lave la solution ainsi obtenue avec une solution aqueuse saturée d'hydrogéno-

carbonate de sodium. On sèche la solution organique sur du sulfate de sodium anhydre et on l'évapore ensuite à sec. Après cristallisation dans de

l'acétonitrile on obtient 94,6 g de 4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-alpha-

phtalimido-l-thia-3,8-diazaspDiro/l.5/décane-2-acétate de tert.butyle.

Rendement: 79,6%.

P.F.: 173-5 C.

Spectre infrarouge (KBr): 3340 cm-1 (NH) Chromatographie sur plaque de silice en couche mince: 1 tache Spectre RMN (CDCl3-Ts);: H4: doublet à 3, 72 ppm; couplé avec H3 amine, J = 13,3 Hz Analyse pour C30H35N306S (P.M. 565,7): calculé (%): C 63,70 H 6,31 N 7,43 S 5,67 trouvé (%): 63,62 6,31 7,43 5,70

3.2. 8-Benzyl-4-benzyloxycarbonyl-alpha-phtalimido-l-thia-3,8diazaspiro/4.5/7-

décane-2-acétate de tert.butyle.

La préparation est la meme qu'en 3.1., mais en utilisant l'isomère alla

de 8-benzyl-4-carboxy-alpha-Dhtalimido-1-thia-3,8-diazaspiro/P.57décane-2-

acétate de tert.butyle obtenu en 2.2.

Rendement: 80% P.F.: 193-193,5 C (acétonitrile) Chromatographie sur plaque de silice en couche mince: 1 tache Spectre infrarouge (KBr): 3345 cm-1 (NH) Spectre RMN (CDC13-TM4S): H4: doublet à 3,78 ppm; couplé avec H3 aminé, J = 13,3 Hz N-CH2: singulet à 3,45 ppm Analyse pour C36H39N3065S (P.M. 641,798): calculé (%): C 67,37 H 6,13 N 6,55 trouvé (%) : 66,86 6,07 6,48

3.3. 4-Benzyloxycarbonyl-8-ophényl-alpha-phtalimido-1-thia-3,8diazasoiro/4.5/-

décane-2-acétate de tert.butyle.

A 24 g (0,0447 mole) de l'isomère alpha de 4-carboxy-8-phényl-alpha-

phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétate de tert.butyle obtenu en 2.3. et mis en solution dans 200 ml de N,N-dim6thylformamide, on ajoute 17 g

16 2459802

(0,10 mole) de bromure de benzyle dissous dans 20 ml du même solvant.

On agite à la température ambiante pendant la nuit.

Le mélange réactionnel est versé sur de la glace. On l'extrait trois

fois par 500 ml d'acétate d'éthyle et on lave la phase organique successive-

ment avec un peu d'eau, avec une solution saturée d'hydrogénocarbonate de

sodium et à nouveau avec un peu d'eau.

On sèche et on évapore à siccité. Après recristallisation dans

l'acétate d'éthyle, on obtient 18,8 g de 4-benzyloxycarbonyl-8-phénylalpha-

phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétate de tert.butyle.

Rendement: 66%.

P.F.: 184-185 C.

Spectre infrarouge (KBr): 3340 cm- (NH); 1735, 1710 cm- (CO); 750 cm-

(phényle). Analyse pour C 35H 37N306 (P.M. 627,74)

Y P 35 37 306 5

calculé (%): C 66,96 H 5,94 N 6,70 trouvé (%): 67,34 5,76 6,54 Stade (4)

4.1. alpha-Amino-4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-l-thia-3,8-diazaspiro/]. 57-

décane-2-acétate de tert.butyle.

A une solution de 113,2 g (0,2 mole) de 4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-

alpha-phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/I.5/7décane-2-acétate de tert. butyle (obtenu en 3.1.) dans 730 ml de dioxane, on ajoute 13,4 g d'hydrate d'hydrazine. Après 24 heures, on ajoute encore 6 g d'hydrate d'hydrazine et on filtre après 24 heures. On évapore le mélange et on dissout le résidu dans 1 litre de benzène, on filtre après 24 heures et l'on fait passer le nouveau résidu obtenu par évaporation à travers une colonne de Kieselgel 60 Merck, en utilisant comme éluant un mélange benzene-méthanol 9/1. On obtient ainsi une

solution de l'alpha-amino-4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-l-thia-3,8diazaspiro-

/4.5/décane-2-acétate de tert.butyle que l'on soumet telle quelle au stade 5.1.

4.2. alpha-Amino-8-benzyl-4-benzyloxycarbonyl-l-thia-3,8-diazaspiro/W. 5/décane-

2-acétate de tert.butyle.

A une solution de 42 g (0,065 mole) de 8-benzyl-4-benzyloxycarbonyl-

alpha-phtalimido-l-thia-3,8-diazaspiro/I.5/déecane-2-acétate de tert. butyle (obtenu en 3.2.) dans 300 ml de dioxane, on ajoute 8 g (0,155 mole) d'hydrate d'hydrazine. On filtre après 4 jours le mélange, on évapore a sec le filtrat

et on reprend le résidu dans 600 ml de benzène.

Après 24 heures, on filtre, on évapore de nouveau à sec le filtrat et on fait cristalliser le résidu dans de l'acétonitrile. On obtient ainsi

1' alpha-amino-8-benzyl-4-benzyloxycarbonyl-l-thia-3,8-diazaspiro/I. 5/décane-

17 245980a

2-acétate de tert.butyle avec un rendement de 80%.

P.F.: 140-1 C.

Spectre infrarouge (KBr): 3340 cm-1 (NH) Spectre de masse: M m/e = 511; /M + / +' m/e = 512 Analyse pour C28H37N304S (P.M.511,694): calculé (): C 65,72 H 7,28 N 8,21 trouvé (%): 66,34 7,20 8,26

4.3. alpha-Amino-4-benzyloxycarbonyl-8-phényl-1-thia-3,8-diazaspiro/4.5/-

décane-2-acetate de tert.butyle.

18,6 g (0,03 mole) de 4-benzyloxycarbonyl-8-phényl-alpnha-phtalimido-1-

thia-3,8-diazaspiro/h.5/décane-2-acétate de tert.butyle (obtenu en 3.3.) sont mis en suspension dans 50 ml de N,N'-diméthylformamide. On y ajoute goutte goutte, à 0 C et sous atmosphère d'azote, une solution contenant 2 g (0,04 mole) d'hydrate d'hydrazine dans 20 ml de N,N-diméthylformamide. On laisse revenir à la température ambiante et on agite pendant une heure. On refroidit le mélange réactionnel de nouveau vers 0 C et on le neutralise

lentement par addition de 33,75 ml d'une solution normale d'acide chlorhydri-

que. On agite encore 2 heures à la température ambiante. Le mélange réaction-

nel se prend en masse. On ajoute 300 ml d'eau, et on extrait au chloroforme.

La phase organique est lavée à l'eau, séchée sur du sulfate de sodium, puis évaporée à siccité. Le résidu est trituré dans de l'éther, filtré et le

précipité est lavé à l'éther. On recueille ainsi 12,8 g d'alpha-amino-4-

benzyloxycarbonyl-8-phényl-l1-thia-3,8-diazaspiro/l.5/7décane-2-acétate de

tert.butyle. Rendement: 86,7%.

P.F.: 167-8 (décomposition)

-l -1 -

Spectre infrarouge (KBr): 3480, 3425 cm- (NH2), 1720 cm (CO), 760 cm (phényle) Analyse pour C27H35N304S (P.M. 497,64): calculé (%): C 65,16 H 7,09 N 8,44 C- néant trouvé (): 63,92 7,10 8,83 Stade (5)

5.1. Acide alpoha-amino-4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-l-thia-3,8diazaspoiro-

/4.5/décane-2-acétique (dichlorhydrate).

Après évaporation de la solution de l'alnha-amino-4-benzyloxycarbonyl-

8-méthyl-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acetate de tert.butyle (obtenu en 4.1.) on dissout le résidu dans 1 litre de nitrométhane et l'on refroidit la solution à 0 C en faisant passer un courant d'HCl gazeux pendant 1 1/2 heure. On laisse le produit au repos durant 2 heures à 0 C, puis on évapore l'excès de solvant et de HC1 sous vide à 30 C, en remplaçant le nitrométhane

2459802.

par de l'alcool isopropylique. On filtre le précipité, on le sèche, obtenant

ainsi 40,2 g du dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-4-benzyloxcarbonyl8-

méthyl-l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétique. Rendement: 44,4%.

P.F.: 171-2 C.

Spectre de masse: pas de M ', mais M-44 (C02): m/e = 335. Analyse pour C18H 25N304S. 2HC1 (P.M. de l'acide 379,488; du dichlorhydrate

452,418):

calculé (%): C 47,79 H 6,02 N 9,29 S 7,09 CI- 15,67 trouvé (%): 46,01 5, 97 9,09 6,82 15,44

5.2. Acide alpha-amino-8-benzyl-4-benzyloxycarbonyl-l-thia-3,8-diazaspiro-

/4.57/décane-2-acétique (dichlorhydrate).

/ La préparation est la même qu'en 5.1., sauf que le résidu est repris dans du benzène au lieu de l'être dans de l'alcool isopropylique. On obtient

56,5 g du dichlorhydraté de l'acide désiré. Rendement: 91,1%.

P.F.: décomposition vers 175 C.

Spectre RMN (CDC13-TMS): HOOC-CH: doublet à 5,25 ppm H2: doublet à 4,08 ppm H4: singulet à 3,65 ppm Analyse pour C24H29N304S.2HC1 (P.M. de l'acide 455,586; du dichlorhydrate

528,516):

calculé (%): C 54,54 H 5,91 N 7,95 C1 13,41 trouvé (%): 52,36 5,97 7,57 13,19

5.3. Acide alpha-amino-4-benzyloxycarbonyl-8-phényl-l-thia-3,8-diazaspiro-

/7.57décane-2-acétique (dichlorhydrate).

On fait passer un courant d'acide chlorhydrique gazeux dans une

suspension de 11 g (0,0206 mole) de l'alpha-amino-4-benzyloxycarbonyl-8-

phényl-l-thia-3,8-diazaspiro/4.57décane-2-acétate de tert.butyle (obtenu en 4.3.) dans 200 ml de nitrométhane. Après une heure, on obtient une solution presque limpide. On filtre sur terre à diatomées et on évapore à siccité. Le résidu est repris par de l'éther, filtré et lavé à l'éther. On obtient 9,4 g

du dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-4-benzyloxycarbonyl-8-phényl-lthia-

3,8-diazaspiro/4.57décane-2-acétique. Rendement: 95,5%.

P.F.: 164-167 C (décomposition)

-1 -1

Spectre infrarouge (KBr): 1730 cm 1 (CO); 755 cm1 (phényle).

Analyse pour C23H27N304S.2HC1 (P.M. 514,54) calculé (%): C 53,69 H 5,68 N 8,17 Cl- 13,78 trouvé (Z): 51,55 5,83 7,84 12,92 Stade (6)

6.1. Acide 4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-alpha-tritylamino-1-thia-3,8diazaspi-

ro/4.5/décane-2-acétiaue. On met en suspension 53,91 g (0,118 mole) du dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-1-thia3,8-diazaspirol. 5/décane-2- acétique (obtenu en 5.1.) et 98,7 g (0,354 mole) de chlorure de trityle dans 1,2 litre de dichlorométhane refroidi à -lO C, et l'on traite lentement cette suspension (en 1/2 heure) avec 95,5 g de triéthylamine. On maintient le mélange réactionnel pendant 2 à 3 heures à 0 C, puis on le laisse reposer

durant une nuit à la température ordinaire.

Après filtration, lavage à l'eau et dessication sur du sulfate de sodium anhydre, on évapore la solution sous vide. On met le résidu de l'évaporation en suspension dans de l'alcool isopropylique et l'on agite

mécaniquement pendant 15 heures. On filtre et on sèche le gateau de filtration.

On obtient ainsi 88 g de l'acide 4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-alphatritylamin-

l-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétique qui contient du triphénylméthanol

comme impureté. Ce produit est utilisé tel quel au stade 7.1 suivant.

6.2. Acide 8-benzyl-4-benzyloxycarbonyl-alpha-tritylamino-l-thia-3,8diazaspi-

ro/4.5/décane-2-acétique. On le prépare comme en 6.1. au départ du dichlorhydrate de l'acide

alpha-amino-8-benzyl-4-benzyloxycarbonyl-l1-thia-3,8-diazaspiro/l. 5/décane-2-

acétique obtenu en 5.2.; on obtient 80 g de l'acide désiré contenant du triphénylméthanol comme impureté. Ce produit est utilisé tel quel au stade

7.2. suivant.

P.F.: 148-149 C.

6.3. Acide 4-benzyloxycarbonyl-8-phényl-alpha-tritylamino-l-thia-3,8-

diazaspiro/4.5/décane-2-acétique.

9,1 g (0,0177 mole) du dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-4-benzylo-

xycarbonyl-8-phényl-l-thia-3,8-diazaspiro/.57décane-2-acétique (obtenu en 5.3.) sont mis en suspension dans 150 ml de dichlorométhane. On refroidit vers -20 C et on ajoute en une fois 18,6 g (0,0668 mole) de chlorure de trityle. En maintenant la température vers -20 C, on traite cette suspension lentement

(1 heure) avec 17,6 g (0,17 mole) de triéthylamine dans 100 ml de dichloro-

tentre méthane. On agite le mélange réactionnel encore pendant une heure/lu et -20 C, puis on le laisse au repos pendant une nuit au réfrigérateur. On le verse sur un mélange glace-eau (pH environ 11) et on neutralise jusqu'à pH 6 par addition d'acide phosphorique à 85%. La phase aqueuse est extraite 3 fois par 100 ml de dichlorométhane; les extraits sont lavés à l'eau et séchés sur du sulfate de

sodium. On évapore à siccité, sous vide poussé, au bain-marie à 20-25 C.

2459802

L'acide 4-benzyloxycarbonyl-8-phényl-alpha-tritylamino-l-thia-3,8-

diazaspiro/lT.5/décane-2-acétique obtenu est utilisé sans autre purification

dans le stade suivant (7.3.).

Stade (T) 7.1. 1 '-Méthyl-6-tritylamino-spiro/Pénam-2,4'-ipéridine7-3carboxylate de benzyle. On laisse reposer pendant 3 semaines à la température ordinaire un

mélange de 88 g d'acide 4-benzyloxycarbonyl-8-méthyl-alpha-tritylamino-lthia-

3,8-diazaspiro/k.5/décane-2-acétique (obtenu en 6.1.) et de 88 g de diiso-

propylcarbodiimide dans 300 ml de chloroforme. Après filtration et évaporation sous vide de l'excès de solvant et de réactif, on fait passer le résidu à travers une colonne de Kieselgel 60 Merck en utilisant du chloroforme comme éluant. Après deux passages, on obtient 25,2 g du composé désiré, contaminé par de la 1,3-diisopropylurée. La réunion des éluats et leur concentration à

siccité donnent le 1'-méthyl-6-tritylamino-spiro/iénam-2,4'-pipéridine/-3-

carboxylate de benzyle. Rendement- 35%.

Spectre infrarouge (KBr): 3342 cm-1 (NH); 1785 cm-1 (bêta-lactame); 1745 cm-1 (ester) Spectre RMN (CHC13-TMS): -CH2-: singulet à 5,12 ppm H3: singulet à 4,60 ppm

H5 doublet à 4,35 ppm-

H6: doublet à 4,43 ppm E5 et H6 sont couplés, J = 4,1 Hz Spectre de masse: M m/e = 603, 7.2. 1 '-Benzyl-6-tritylamino-spiro/_énam-2,4' pipéridine7-3-carboxylate de

benzyle.

On peut effectuer la réaction entre l'acide 8-benzyl-4-benzyloxycarbonyl-

alpha-tritylamino-l-thia-3,8-diazaspiro/]. 57décane-2-acétique (obtenu en 6.2.)

et la diisopropylcarbodiimide (80 g) dans du chloroforme (400 ml), du dichloro-

méthane ou dans un mélange de nitrométhane et de chloroforme, soit à la température ordinaire en abandonnant le mélange pendant 4 semaines, soit à chaud (50 C) pendant 12 heures. Dans un cas comme dans l'autre on sépare par filtration la 1,3-diisopropylurée formée, on évapore le solvant et le réactif en excès et l'on fait passer le résidu dans une colonne Kieselgel 60 Merck en

utilisant du chloroforme comme éluant. Dans tous les cas, on obtient le 1'-

benzyl-6-tritylamino-spiro/pénam-2,4'-pinéridine/-3-carboxylate de benzyle

cristallisant dans l'éther avec 25 à 40% de rendement.

P.F.: 191-2 C (acétonitrile) 21 245980a Spectre infrarouge (.Br): 3320 cm (NH); 1790 cm (beta-lactame); 1750 cm1 (ester). Spectre RMN (CDC13-TMtS): -COO-CH2: singulet à 5,50 ppm >N-CH[(-'/: singulet à 4,12 ppm H: singulet à 4,50 ppm

3 PM

H5 doublet à 4,32 ppm H6: doublet à 4,39 ppm H5 et H6 sont couples, J = 4 Hz Spectre de masse: 'M' m/e = 679 Analyse pour O3H41.303S (P.M. 679,891) : calculé (%): C 75,92 H 6,08 N 6,18 S 4,71 trouvé (%): 78,00 6,01 6,56 4, 39 7.3. 1'-Phényl-6-tritylamino-spiro/_enam-2,4'-pipéridine/-3carboxylate de benzyle.

A 32 g d'acide 4-benzyloxrycarbonyl-8-phényl-alpha-tritylamino-l-thia-

3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétique brut isolé au stade précédent (6.3.) et mis en suspension dans 150 ml de nitrométhane anhydre, on ajoute goutte à goutte, une solution de 10 g (0,079 mole) de diisopropylcarbodiimide dans ml de dichlorométhane. L'agitation est maintenue à la température ordinaire pendant une fuit. On évapore le solvant sous vide (température du bain-marie: C). Le résidu, après lavage à l'hexane, est chromatographi8 sur colonne de

silice (éluants: benzène puis chloroforme).

On obtient 7,74 g de 1'-phenyl-6-tritylamino-spiro/penam-2,4'-pipéri-

dine/-3-carboxylate de benzyle. Rendement: 61% (pour les deux stades

consécutifs 6.3. et 7.3.).

P.F.: 200-201 C.

Spectre infrarouge (KBr): 1775 cm-1 (CO bUta-lactame); 1745 cm- (ester).

Analyse pour C42H39 N33s (P.M. 665,82) calculé (%): C 75,76 H 5,90 N 6,31 trouvé (%): 76,74 5,82 6,30 Stade (8)

8.1. Di-p-toluènesulfonate de 6-amino-1'-méthyl-spiro/_énam-2,4'pipéridine_-

3-carboxylate de benzyle.

On agite à la température ambiante pendant 4 heures un mélange de 16 g

(0,0266 mole) de 1'-méthyl-6-tritylamino-spiro/pénam-2,4'-pipéridine/-3-

carboxylate de benzyle (obtenu en 7.1.) et de 10,12 g (0,053 mole) d'acide p-

toluènesulfonique dans 160 ml d'acétone. Après filtration et dessication on

obtient 15 g (79,9% de rendement) du produit désir6.

P.F.: 182-3 C.

Spectre infrarouge (KBr): 2930 cm1 (NH3+); 1794 cm-1 (ester) Spectre RMN (DMSO-TMS): H3: singulet à h,98 b'm H5: doublet à 5,18 gpm H6: doublet à 5,57 pDm H5 et H6 sont couples, Analyse pour C32H39N309S3 (P.M. base = 361,472; sel = calculé (%): C 54,45 H 5,57 N 5,95 trouvé (%): 54,12 5,54 5,98 (bêta-lactame); 1745 cm J = 4,1 Hz

705,886):

S 13,62

13,46

8.2. Di-p-toluènesulfonate de 6-amino-1'-benzyl-spiro/énam-2,4'ipéridine/-

3-carboxylate de benzyle.

On agite à la température ambiante 18,7 g (0,027 mole) de 1'-benzyl-6-

tritylamino-spiroLpénam-2,4'-Dipéridine/-3-carboxylate de benzyle (obtenu en 7.2.) avec 10,3 g d'acide p-toluènesulfonique dans 100 ml d'acétone. On

filtre après 5 heures et on sèche le résidu. Rendement:' 80%.

P.F.: environ 158 C (décomposition).

-1 -

Spectre infrarouge (KBr): 1790 cm (beta-lactame); 1740 cm-1 (ester) Spectre RMN (DMSO-TMS): fN-CH2: singulet à 4,38 pm H3: singulet à 4,55 pnp -COOCH2 Q: singulet à 5,20 pom H5: doublet à 5,20 poDm H6: doublet à 5,56 ppm H5 et H6 sont couplés, Spectre de masse: pas de M' m/e = 381: 2,

-CH2-)

COOCH2-

J = 5,3 Hz

Analyse pour C24H27N303S.

caleulé (%): trouvé (%):

2C7H803S

C 58,37

57,78

172: LCH3 c SO 7+.

(P.M. base: 437,570; sel:

H 5,54 N 5,37 S

,69 5,37

781,984):

12,30 11,92

23 2459802

8.3. Di-p-toluènesulfonate de 6-amino-1 '-phényl-spiro/o6nam-2,4'pipnéridine/-

3-carboxylate de benzyle.

On agite à la température ambiante, pendant 6 heures, un mélange de

1,33 g (0,002 mole) de 1'-phényl-6-tritylamino-spiro/_nam-2,4h'pip6ridine/-

3-carboxylate de benzyle (obtenu en 7.3.) et de 0,76 g d'acide p-toluène-

sulfonique dans 10 ml d'acétone.

Après filtration et dessication, on obtient 1,40 g de di-p-toluène-

sulfonate de 6-amino-1'-phényl-spiro/o6nam-2,41'-pip6ridine/-3carboxylate de

benzyle. Rendement: 92%.

P.F.: 168-169 C (décomposition).

Spectre infrarouge (KBr): 1785 cm1 (CO beta-lactame); 1732 cm (ester).

Analyse pour C37 H41N 308S3 (P.M. sel: 767,92) calculé (%): C 57,87 H 5, 38 N 5,47 trouvé (%): 57,49 5,54 5,19 Stade (9)

9.1. Di-p-toluènesulfonate d'acide 6-amino-1 '-méthyl-spiro/penam-2,4'-

pipéridine/-3-carboxylique. On soumet une solution de 2,5 g (0,00354 mole) de di-p-toluènesulfonate de 6-amino-1'-méthyl-spirojpénam-2,4'pipéridine/-3-carboxylate de benzyle (obtenu en 8.1.) dans 1,5 litre d'éthanol à une hydrogénolyse dans un appareil de Parr sous 3,2 kg/cm2 d'hydrogène, en présence de 2 g de charbon palladié (à 10% de Pd). Après 90 minutes, on filtre, on évapore à sec le filtrat et on le lyophilise dans 600 ml d'eau. On obtient 1,8 g de di-p-toluènesulfonate

d'acide 6-amino-1'-méthyl-spiro/pénam-2,41' -piperidine/-3-carboxylique.

Rendement: 83%.

P.F.: environ 155-60 C (début de décomposition).

Spectre infrarouge (KBr): 2920 cm1 (NH3); 1795 cm- (bêta-lactame); 1730 cm (carboxyle) Spectre RMN (D20-DSS): H5: doublet à 5,15 ppm H6: doublet à 5,70 ppm

H5 et H6 sont couplés, J = 4,1 Hz.

Analyse pour C25H33N309S3 (P.M. acide 271,355; sel 615,769): calculé (%): C 48,76 H 5,40 N 6,82 S 15,62 trouvé (%): 44,71 5,86 6,07 14,27

9.2. Di-p-toluène-sulfonate d'acide 6-amino-1 '-benzyl-spiro/ npnam-2,4'-

pipéridine/-3-carboxylique.

La préparation est la même qu'en 9.1., au départ du di-p-toluène-

sulfonate de 6-amino-1 '-benzyl-spiro/ne6nam-2,4'-pipéridine/-3carboxylate de

benzyle. Rendement: 67,4%.

P.F.: décomposition vers 115-120 C.

Spectre infrarouge (KBr): 2930 cm- (NH; 1790 cm (b+ta-lactame); 1735 cm(carboxyle) Spectre RMN (DMSO-TMS): \N-CH2 Q: singulet à 4,4 ppm H3: singulet à 4,67 ppm H5: doublet à 5,15 nppm H6: doublet à 5,53 ppm H et H6 sont couplés, J = 4,7 Hz environ Analyse pour C17H21N303S.2C7H803S (P. M. acide 347,445; sel 691,859): caleulé (%) C 53,80 H 5,39 N 6,07 trouvé (%): 52,05 5,65 6,00

9.3. Di-p-toluènesulfonate de l'acide 6-amino-1'-phényl-spiroLp6namni-2,4 '-

pipéridine/-3-carboxylique.

L'hydrogénolyse est effectuée comme en 9.1. au départ du di-p-

toluènesulfonate de 6-amino-1'-phényl-soiro/énam-2,4'-pipéridine/-3-

carboxylate de benzyle. Rendement: 38%.

P.F.: 228-230 C (décomposition) Spectre infrarouge (KBr): 1785 cm-1 (CO beta-lactame) Spectre RMN (DMSO-TMS): H3: singulet à 4,67 pnm H5: doublet à 5,13 ppm H6: doublet à 5,53 ppm

H5 et H6 sont couples, J = 4,4 Hz.

Analyse pour C30H35N309S3 (P.M. sel: 677,80) caleulé (%): C 53,16 H 5,20 N 6,20 trouvé (%): 48,88 4,92 6,02 Exemple 2. Préparation d'un composé analogue à la oénicilline G.

2.1. 1l'-Méthyl-6-(2-phénylacétamido)-spiro/énam-2,4'-pipéridine/-3carboxyla-

te de benzyle.

la base

* On libère/de son sel le di-p-toluènesulfonate de 6-amino-1'-méthyl-

spiro/p6nam-2,4'-pipéridine/-3-carboxylate de benzyle (8,5 g = 0,012 mole) cité à l'exemple 1.8.1. par dissolution dans 200 ml de dichlorom6thane et addition de 2,44 g (0,024 mole) de triéthylamine, on refroidit la solution à -100 C et on la traite simultanément avec une solution de 1,86 g (0,012 mole) de chlorure de phénylacétyle dans 40 ml de dichlorométhane et avec une solution de 1,24 g (0,012 mole) de triéthylamine dans 40 mil de dichlorom6thane;

la durée de l'addition est d'environ 1 heure.

On continue à agiter pendant 2 heures en laissant la temnperature revenir à 0 C, on lave la solution successivement avec de l'eau, une

solution saturée d'hydrogénocarbonate de sodium et de nouveau avec de l'eau.

Après évaporation à sec, on obtient 4,4 g de l'-méthyl-6-(2phenylacétamido)-

spiro/pénam-2,4'-pipéridine/-3-carboxylate de benzyle. Rendement: 76,2%.

P.F.: 124-5 C.

Spectre infrarouge (K3r): 3318 cm-1 (NH); 1670 cm- (amide); 1800 cm(beta-

lactame); 1740 cm-1 (ester); 690, 740 cm-1 (phényle monosubstitué) Spectre RMN (CDC13-rlS): H3: singulet à 4,52 nopm H5: doublet à 5,47 pom H6: doublet à 5,65 ppm

H5 et H6 sont couplés, J = 4,1 Hz.

Spectre de masse: M m/e = 479

2.2. Acide l'-méthyl-6-(2-phénylacétamido)-spiro/oenam-2,4'-pipéridine/-3-

carboxylique. Sous une pression d'hydrogène de 3,2 kg/cm2 en présence de 4,4 g de charbon palladié à 10%, on hydrog6nolyse dans un appareil de Parr pendant

1 heure une solution de h,4 g (0,091 mole) du l'-méthyl-6-(2phénylacétamido)-

spira/ pénam-2,4'-pipéridine/-3-carboxylate de benzyle (pr6paré en 2.1.)dans 800 ml d'éthanol. Puis on filtre et on laisse digérer le précipité dans 1,5 litre d'un mélange méthanol-eau 9/1 pendant 1 heure. L'évaporation à sec

du filtrat fournit 1,6 g de l'acide 1'-méthyl-6-(2-phénylacétamido)-spiro-

/pénam-2,4'-pipéridine/-3-carboxylique. Rendement: 44,8%.

P.F.: 189-190 C (décomposition) Spectre infrarouge (KBr): 1770 cm-1 (betalactame)

Spectre de masse: M - 44 (C02): m/e = 345.

Analyse pour C19H23N304S (P.M. 389,483) calculé (%): C 58,59 H 5,95 N 10, 78 S 8,23 trouvé (%): 56,7 6,1 10,20 7,20

Propriétés pharmacologiques.

On a effectué divers essais comparatifs concernant l'activité biologique intrinsèque des composés de formule (I) conformes à l'invention vis-à-vis de diverses souches bactériennes du type Gram-positif ou Gram-négatif. D'une

manière générale, les bactéries peuvent offrir de la résistance aux antibioti-

ques suivant deux mécanismes:

- par libération d'une beta-lactamase qui hydrolyse le cycle lactame de l'anti-

biotique; dans l'affirmative on indique ceci en abregé par le signe P, dans la négative par le signe P-; 26 24598o0

- par imperméabilité de la paroi cellulaire de la bactérie envers l'antibioti-

que; dans l'affirmative on indique ceci en abrégé par le signe I, dans la négative par le signe I. On donne d'abord i-apres quelques renseignements sur l'origine et les caractéristiques des souches bactériennes utilisées.

Souches bactériennes GAM +.

STAPHYLOCOCCUS AUREUS 6538 (P) (I-)

Il s'agit d'une coaue Gram-positive particulièrement sensible aux pénicillines, et qui présente un mécanisme de résistance peu important. Cette souche de staphylocoque est donc représentative d'une sensibilité maximum de l'espèce;

STAPHYLOCOCCUS AUREUS 52149 (P+) (I-)

I1 s'agit d'une coque Gram-positive dont la sensibilité intrinsèque du récepteur est équivalente à celle de la souche précédente, mais qui produit une bfta-lactamase typique de l'espèce qui la rend résistante à toutes les

pénicillines sensibles à l'hydrolyse.

Souches bactériennes GRAM.

ESCHERICHIA COLI B. (P-) (I-)

Il s'agit d'une souche classique de collection d'Escherichia Coli, qui produit très peu de b9ta-lactamase (de type I) et est donc très sensible aux pénicillines. En ce qui concerne la classification des bgtalactamases, on utilise ici celle proposée par M.H. RICHMOND et R.B. SYKES dans Advances in

Microbial Physiology,9,(1973),pages 43 et 45.

ESCHERICHIA COLI B-AMPI-R (P+) (I-).

Il s'agit d'un mutant de la souche précédente, créé par la demanderesse.

Cette souche, par contre, est hyper-productrice de la bUta-lactamase de type I déjà produite par la souche-mère Eschérichia Coli B. Elle présente une résistance accrue aux pénicillines, oui est liée semble-t-il directement à la

production de la bgta-lactamase.

ESCHERICHIA COLI B-c (P-) (I) Mutant pleiotropique créé à partir de l'E. Coli B; résistant aux

pénicillines par hyper-imperméabilité.

ESCHERICHIA COLI K12 (P-) (I-)

Souche classique de collection; faible productrice d'une b8ta-lactamase

de type I; sensible aux pénicillines.

ESCHERICHIA COLI K12-z. (P-) (I-) Mutant pleiotropique de la précédente; très sensible aux pénicillines

27 2459802

par perméabilité accrue.

ESCHERICHIA COLI K12-4 (P-) (I+)

Mutant pleotropique de E. Coli K12; résistant aux pénicillines nar imperméabilité.

ESCHERICHIA COLI K12-44. (P-) (I-)

Mutant non producteur de bgta-lactamase, obtenu à partir d'une souche

de E. Coli K12.

ESCHERICHIA COLI K12-44-S (P-) (I-)

Mutant pleotropique obtenu à partir de E. Coli K12-44; non producteur

de beta-lactamase et sensible aux pénicillines par hyper-perméabilité.

ESCHERICHIA COLI K12-44-R (P-) (I)

Mutant pleiotropique obtenu à partir de E. Coli K12-44; non producteur

de beta-lactamase et résistant aux pénicillines par imperméabilité.

Nota: les épisomes TZ-, RP1, RP1* ont été transférés à diverses souches de la série E. Coli K12-44, qui deviennent par exemple:

E.COLI K12-44-TEM

E.COLI K12-44-S-TEM

E.COLI K12-44-R-TEM.

L'épisome TEM est notamment responsable de la production d'une bêta-

lactamase de type III (P). L'épisome RP1 est notamment responsable de la

production d'une bêta-lactamase de type III (P+) et d'un facteur de pénicil-

line-résistance attribué à une imperméabilité (I +). L'épisome RP1* est une

forme modifiée du précédent qui ne détermine plus la production de la bUta-

lactamase (P-) mais a conservé le facteur d'imperméabilité (I+).

AEROBACTER CLOACAE P99 (P+) (I-)

Est une souche typique de cette espèce; elle est caractérisée par la production abondante d'une bêta-lactamase de type I.

AEROBACTER CLOACAE 1321 E (P-) (I-)

Est un mutant non producteur d'une beta-lactamase de A. CLOACAE P99.

KLEBSIELLA AEROGENES 1082 E (P) (I-) Souche type de l'espèce; productrice d'une bêta-lactamase de type IV.

KLEBSIELLA AEROGENES K1 (P-) (I-)

C'est un mutant non producteur de bita-lactamase de K. AEROGENES 1082 E.

Essais comparatifs d'activité.

Au tableau I suivant, on compare l'activité antibactérienne du di-p-

toluènesulfonate de l'acide 6-amino-l'-méthyl-sniro/nEnarm-2. '-niéridine/-3-

28 2 45980.

carboxylique obtenu en 9.1. (désigné en abrégé par A.9.1.) et du di-ptoluène-

sulfonate de l'acide 6-amino-1 '-benzyl-spirob énam-2,4'-oipéridine/-3-

carboxylique obtenu en 9.2. (désigné en abrégé par A.9.2.), avec celle de leur homologue l'acide 6-aminopénicillanique (en abrégé 6-APA) qui est la base de toutes les pénicillines et qui ne se différencie de l'A.9.1. et de 1'A.9.2. que par la présence en position 2 d'un groupe gem-diméthyle (au lieu du groupe 3-azapentaméthylène caractéristique des composés de la présente invention). On effectue en même temps une comparaison avec l'activité de l'Ampicilline (en abrégé AMPI), qui est une pénicilline réputée. Pour les quatre substances faisant l'objet de la comparaison, on cherche la concentration minimum inhibitrice (en abrégé MIC) de la croissance des bactéries, cette concentration étant exprimée en micromoles/ml et déterminée par la méthode suivante: Les produits à tester sont introduits en concentrations croissantes dans un milieu de culture gélosé en boites de Petri. Un inoculateur multiple

est utilisé pour déposer simultanément des gouttes (soit en tout 10 micro-

litres) d'inoculum (suspension à environ 105 bactéries par ml} à la surface du milieu. Après incubation à 37 C pendant 24 heures, la croissance des

bactéries est observée. Par définition, la MIC est exprimée par la concentra-

tion minimum inhibant la multiplication des bactéries.

TABLEAU I

Souche bactérienne A 9.1. A 9.2. 6-APA AMPI Gram-positive

S.AURJEUS 6538 (P-)(I-)

S.AUREUS 52149 (P)(I-)

Gram-néative

E.COLI B (P-)(I-)

E.COLI B-c (P-)(I+)

E.COLI B-AMPI R (P+)(I-)

E.COLI K12-z (P-)(I-)

E.COLI K12 (P-)(I)

E.COLI K12-4 (P-)(I+)

E.COLI K12-44-S (P-)(I-)

E.COLI K12-44-S-RP1: (P-)(I+)

E.COLI K12-44-S-TEM (P+)(I-)

E.COLI K12-44-S-RP1 (P)(I+)

E.COLI K12-44 (P)(I-)

E.COLI K12-44-RPl: (P-)(I+)

16 16 250-500

16 16 250-500

-8 4-8 4-8 3i

62-125

> 500

> 500-1000

500-1000

62-125

31 500) 1000

0,06 >1000 l 1000

29 245980 2

Souche bactérienne A 9.1. A 9.2. 6-APA AMPI Gram-nGative E.COLI K12-44TE:. (?)(i) 31 250 > 1000 > 1000

E.COLI K12-44-RP1 (P+)(I) 62 500 >1000 > 1000

E.COLI K12-44-R (P)(I+) 8 62 62-125 125

E.COLI K12-44-R-RP1l ( P-)(I) 16 62 500 > 1000 E.COLI K12-44-R-TEi (P+)(I+ ) 31 250 >1000 > 1000 E.COLI K12-44-R-RP?1 (P+)(I+) 125 >iOCO >1000 > 1000

A.CLOACAE 1321 E (P-)(I-) 8 16 62 8

A.CLOACAE P99 (P+)(I-) 8 16 62 > 1000

K.AEROGENES K1 (P-)(I-) 16 16 62-250 4

K.AEROGENES 1082E (P)(I) 250 1000 >500-2000 >1000

Par le tableau I on voit clairement que les composés A 9.1. et A 9.2.

conformes à l'invention sont actifs à des concentrations beaucoup plus basses que le composé 6-APA de l'état de la technique, aussi bien envers les bactéries qui libèrent une bSta-lactamase qu'envers celles qui développent de l'imperméabilité envers l'antibiotique testé. De plus, envers les bactéries Gram-négatives, les composés A 9.1. et A 9.2. ont une activité qui est même

très supérieure à celle d'une pénicilline vraie (Ampicilline).

Il découle de ces résu2ats que les composés de formule (I) conformes à l'invention peuvent etre utilisés en tant qu'agents antibactériens et comme agents thérapeutiques pour l'homme et pour les animaux dans le traitement des

maladies infectieuses causées par les bactéries Gram-positives et Gram-

négatives. En particulier, ils sont très efficaces pour combattre les souches de bactéries Gram-iégatives résistantes, quel que soit le mode de résistance offert par les bactéries,c'est-à-dire par libération de betalactamases et/ou

par imperméabilité de la paroi cellulaire.

Dans ces applications, les composés de formule (I) peuvent 8tre administrés par voie orale ou parentérale, à des doses comparables à celles utilisées couramment pour l'amnicilline (0,7 à 7 g par jour), ces doses étant bien entendu susceptibles d'adaptation en fonction du malade et de la

maladie à traiter.

Du 245980O R e v e n d i c at ions 1. Acides 6-amino-spiro/pénam-2,4'pipéridine/-3-carboxyliques répondant à la formule générale CH -C '

- 2 2

H2N-CH -CH C N-R2

H2N-HH-CH

I CH2_CH--

N-CHN2CH

O COOR

dans laquelle R1 représente de l'hydrogène, un radical benzyle ou un ion de métal alcalin et R2 représente un groupe méthyle, phényle ou benzyle,

ainsi que leurs sels d'addition d'acides minéraux ou organiques.

2. Acide 6-amino-l'-méthyl-spiro/pénam-2,4'-pipéridine/-3-carboxylique, son

ester benzylique et leurs p-toluènesulfonates.

3. Acide 6-amino-1'-benzyl-spiro/pénamn-2,4 '-pioéridine/-3-carboxylique, son

ester benzylique et leurs p-toluenesulfonates.

4. Acide 6-amino-1 '-phényl-spiro/oénam-2,4'-pi-opridine/-3-carboxylique, son

ester benzylique et leurs p-toluénesulfonates.

5. Procédé de préparation des composés selon l'une quelconque des revendica-

tions 1 à 4, caractérisé en ce que (1) on fait réagir du 2-formyl-2phtalimido-acétate de tert.butyle de formule 0 H

X \C 0

N-CH c ô O-tert.C4H9 avec un acide alpha-amino-4-mercapto-l-R2-4pipéridineacétique de formule

HS CH-- CH

2 \CEH_ C2

COOH

(2) on épimérise l'isomère gamma du 4-carboxy-alpha-phtalimido-8-R2-1thia-

3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétate de tert.butyle ainsi obtenu de formule 1 -'J3 245980o t' xN CH2-CH i H -CH' S(% CH -CH NB1 2

N 'I 'N -CH 2 2

il H COOH O O0 -tert.C4H9 en l'isomère alpha, par chauffage avec de la pipéridine ou de la diéthylamine, (3) on fait réagir l'isomère alpha ainsi obtenu avec du diazophénylmêthane ou un halogénure de benzyle,

(4) on soumet à une hydrazinolyse le 4-benzyloxycarbonyl-alpha-phtalimido-

8-R2-1-thia-3,8-diazaspiro/..5/decane-2-acétate de tert.butyle ainsi obtenu de formule O0 T C _S-c 2 N-R

CHCH SI NCH2CH, 2

N NN " C'N - H 2

o / \H 0=0,

0 0-tert. C4H9 %-CH2-

(5) on traite avec de l'acide chlorhydrique gazeux l'alpha-amino-4-

benzyloxycarbonyl-8-R2-1-thia-3,8-diazaspiro/4.5/décane-2-acétate de tert. butyle ainsi obtenu de formule H2Ns CH -CH2x

CH -CN- CH CH 2HH2

4 N9 \ CH 2

H C=O

00-tert.C4H9 /

O-CH2_

(6) on fait réagir le dichlorhydrate de l'acide alpha-amino-4-benzyloxy-

carbonyl-8-R2-1-thia-3,8-diazaspiro/. 5_/décane-2-acétique ainsi obtenu de formule

H N CH -CH2.H0

H2N\ CH2-CH _ 2

C -/N-CH 2 2

C O

H 0=0

OOH

O-CH2-

DI

32 2459802

avec le chlorure de trityle,

(7) on cyclise l'acide 4-benzyloxycarbonyl-8-R2-alpha-tritylamino-l-thia-

3,8-diazaspiro/N.5/décane-2-acétique ainsi obtenu de formule

C-NH S C CH2-CH2

(C6H5)3=C-NH 011C CH2N

0 C C N-R C

CH-CH 2 H--< 2

A H 'C=O

0 OH C

0011 'b-CH2 par réaction, de préférence à chaud, avec un carbodiimide,

(8) on traite le l'-R2-6-tritylamino-spiro/p6nam-2,4'-pipéridine/-3-

carboxylate de benzyle ainsi obtenu de formule

(C6H5)3=C-NH-CH--CH C 2 N-R

(c6H5 3 1 l'-,CH -CH-

C- N- CH 2 2

0=0

0-CH2- C

avec l'acide p-toluènesulfonique et (9) lorsqu'on désire obtenir un composé de formule (I) dans laquelle R1 est de l'hydrogène, on soumet à une hydrogénolyse le di-p-toluènesulfonate de 6-amino-l'-R2-spiro/pnam-2, 4' -pipéridine/-3-carboxylate de benzyle ainsi obtenu de formule H2N-H-CH CH,,, CN-R2. 2 p-TS

N - CH 2 C2- 2

//c _ _

O C=O

O-CH -2>

dans ces formules p-TS représentant l'acide p-toluénesulfonique et R2

ayant la signification donnée à la revendication 1.

6. Utilisation des composés selon l'une quelconque des revendications 1 à 4

pour la synthèse de composés de formule

1-S CH2 CH22\

N-CH- CH C N-R

2 N- CH 2-C 2

COOH dans laquelle

33 2459801

R2 représente un groupe méthyle, phényle ou benzyle, Z1 repr6sente un atome d'hydrogène et Z2 un radical choisi parmi les radicaux connus en chimie des pénicillines, de préférence les radicaux

2-phenylacétyle, 2,6-dimethoxybenzoyle, 5-méthyl-3-phényl-4-isoxazole-

carbonyle et 2-amino-2-phénylacétyle ou bien Z et Z représentent 1 2

ensemble un radical bivalent, de préférence le radical (hexahydro-lH-

az6pin-l-yl)méthylène,

ainsi que leurs sels non toxiques pharmaceutiquement acceptables.

7. Composition pharmaceutique contenant une quantité therapeutiquement effica-

ce d'un composé selon l'une quelconque des revendications 1 à 4, en

association avec un excipient pharmaceutiquement acceptable.