FI96602B - Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten tetratsolijohdannaisten valmistamiseksi - Google Patents

Description

- 96602

Menetelmä terapeuttisesti aktiivisten tetratsolijohdannaisten valmistamiseksi

Jakamalla erotettu hakemuksesta 880868 5 Tämä keksintö koskee menetelmää uusien 3-hydroksi- 3-metyyliglutaryyli-koentsyymi-A(HMG-CoA)-reduktaasientsyymin inhibiittorien valmistamiseksi. Nämä yhdisteet ovat käyttökelpoisia hoidettaessa veren liiallista kolesterolipitoisuut-10 ta, veren runsasta lipoproteiinipitoisuutta ja ateroskleroo-sia.

Luonnolliset käymistuotteet kompaktiini (R=H), jonka ovat esittäneet A. Endo, et ai. julkaisussa Journal of Antibiotics, 29, 1346 - 1348 (1976), ja mevinoliini (R«CH3), 15 jonka ovat esittäneet A.W. Alberts, et ai. julkaisussa J.

Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A., 77, 3957 (1980), ovat erittäin aktiivisia veren liiallista kolesterolipitoisuutta alentavia aineita, jotka rajoittavat kolesterolin biosynteesiä estämällä HMG-CoA-reduktaasientsyymiä, joka on reaktionopeutta ra-20 joittava entsyymi, ja luonnollinen kohde kolesterogenesiksen säätelyyn nisäkkäillä ihminen mukaan lukien. Kompaktiinilla (R=H) ja mevinoliinilla (R=CH3, tunnetaan myös lovastatiini-na) on alla esitetyt rakenteet: chT *H I f 3 N*CH3 30

’ kompaktiini, R=H

mevinoliini, R=CH3

Patenteissa ja muissa julkaisuissa on esitetty myös 35 lukuisia rakenteellisesti samankaltaisia synteettisiä yhdisteitä, jotka ovat hyödyllisiä veren liiallisen kolesterolipi- - 96602 2 toisuuden hoidossa. Tähän läheisimmin liittyvää synteesitek-niikkaa on seuraavassa julkaisussa.

US-patenttijulkaisussa 4 198 425, joka on julkaisu 15. huhtikuuta 1980 (S. Mistui et ai.), esitetään uusia meva-5 lonolkatonijohdoksia, jotka ovat hyödyllisiä hoidettaessa veren runsasrasvaisuutta ja joilla on yleinen kaava 15 R3 jossa A on suora sidos, metyleeni, etyleeni, trimetyleeni tai vinyleeniryhmä ja R3, R4 ja R5 ovat erilaisia substituentteja.

GP-patenttihakemuksessa 24 348, joka on julkaistu 4. maaliskuuta 1981, esitetään uusia veren kolesterolia ja 20 rasvoja vähentäviä yhdisteitä, joiden rakenne on

HCT

25 I

E

30 jossa A on H tai metyyli; E on suora sidos, -CH2-, -(CH2)2-, -(CH2)3- tai -CH=CH-; R1, R2 ja R3 kukin on erilainen substi-tuentti, ja vastaavia dihydroksihappoja, jotka saadaan lakto-nirenkaan hydrolyyttisellä avaamisella.

35 US-patenttijulkaisussa 4 375 475, joka on julkaistu 1. maaliskuuta 1983 (A.K. Willard et ai.), esitetään oleelli- il i il» n i at - s 96602 3 sesti samoja rakenteita, ja se on yhdenmukainen edellä mainitun EP-patenttihakemuksen 24 348 kanssa.

EP-patenttihakemuksessa 68 038, joka on julkaistu 5. tammikuuta 1983, esitetään ja sen patenttivaatimusten koh-5 teenä on erotettu transenantiomeeri, jolla on rakenne ./tr 10 F i 3 -

15 X

“3 sen valmistusmenetelmä ja sen farmaseuttisesti koostumuksia ja vastaava dihydroksihappo tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävä suola.

20 Kansainvälisessä patenttihakemuksessa WO 84/02131, joka on julkaistu 7. kesäkuuta 1984, esitetään mevalonolakto-nianalogeja, joilla on rakenne 2 . 25 f 30 ** jossa toinen ryhmistä R ja R° on R5 ja toinen on primaarinen tai sekundaarinen C^-alkyyli, C3.6-35 sykloalkyyli tai fenyyli-(CH2)n-; X on -(CH2)„- tai -CH«CH-; 4 96602 n on O, 1, 2 tai 3; R6

2 on -CH-CH,-C-CH2-COOH ja I 2 I

OH OH

5 R4, R5, R5· ja R6 ovat erilaisia substituentteja.

Kansainvälisessä patenttihakemuksessa WO 84/02903, joka on julkaistu 2. elokuuta 1984, esitetään mevalonolakto-nianalogeja, joilla on rakenteet

10 R3 X-2 ?5β X-Z

ρθ-φ,! OCfQ" R ra a1 ra

15 IA IB

^^(CH2)q- joissa X on -(CH2)n-, ; n on 0, 1, 2 tai 3 ja kumpikin q on 0 tai toinen on 0 ja toi-20 nen 1 ja R6

Z - -CH-CH2-C-CH2-COOH ja I 2 I 2 OH OH

EP-patenttihakemuksessa 142 146, joka on julkaistu 25 22. toukokuuta 1985, esitetään mevinoliinin kaltaisten veren liiallista kolesterolipitoisuutta alentavien aineiden okso-analogeja, joilla on rakenne

HO

30 0R1 s°

E

z 35 jossa E on -CH2-CH2-, -CH«CH- tai -(CH2)3-, ja

il? Hitti) Η1Ί» 1 ·: J

♦ 96602 5

O

E® ° R12

K7"S

» 00-““’· * CCT

joissa pisteviiva tarkoittaa mahdollisia kaksoissidoksia, joita on 0, 1 tai 2.

15 Julkaisussa J. Med. Chem., 28, 347-358 (1985) G.E.

Stokker et ai. raportoivat 5-substituoitujen 3,5-dihydroksi-valeriaanahappojen sarjan ja niiden johdannaisten valmistusta ja testausta.

Julkaisussa J. Med. Chem., 29, 159-169 (1986) W.F.

20 Hoffman et ai. esittävät 7-(substituoitu aryyli)-3,5-dihyd-roksi-6-hepteenihapposarjan ja niiden laktonijohdannaisten valmistusta ja testausta. Yhdellä raportoidun sarjan edullisista yhdisteistä on rakenne i

Cl

Julkaisussa J. Med. Chem., 29, 170-181 (1986) G.E.

35 Stokker et ai. raportoivat 7-[3,5-disubstituoitu-(1,1’-dife- • < 6 96602 nyyli)-2-yyli]-3,5-dihydroksi-6-hepteenihapposarjän ja niiden laktonien synteesiä. Kahdella tässä artikkelissa raportoiduista edullisista yhdisteistä on rakenteet V "cf 7 z * 5

UULc: Xl X.CB

Qg JJ J

C1 CH3 US-patenttijulkaisussa 4 613 610, joka on julkaistu 23. syyskuuta 1986 (J.R. Wareing), esitetään mevalonolaktonin 15 pyratsolianalogeja ja sen johdannaisia, jotka ovat hyödyllisiä hoidettaessa veren runsasta lipoproteiinimäärää ja ate-roskleroosia ja joilla on yleinen kaava R6 20 R5 -R7 R2 R1 jossa X on -(CH2)n-, -CH=CH-, -CH=CH-CH2- tai -CH2-CH=CH-; n on 0, 1, 2 tai 3 ja R1, R2, R3, R4, R5, R6, R7 ja Z ovat erilaisia substituentteja.

30 Mikään mainituista patenteista tai artikkeleista ei esitä tai ehdota mahdollisuutta valmistaa tämän keksinnön mu-kaisia yhdisteitä. Ainutlaatuinen rakenteellinen ominaispiirre, jonka mukaan kyseisiin yhdisteisiin liitetään tetratsoli-osa, eroaa oleellisesti tekniikan tasosta, johon edellä on 35 viitattu.

•« !l - m t il ii (ltd,-.

966C2 7 Tämä keksintö koskee menetelmää sellaisten uusien veren liiallista kolesterolipitoisuutta alentavien yhdisteiden valmistamiseksi, joilla on kaava 5 r5 R5 OH OH 0 ' l^l r2T^JJ JL^ ch R *EJJ .Λ^οη3 10 ^ W IIa Rl w *» joissa R1 ja R4 kumpikin erikseen on vety, halogeeni, C^-al-kyyli, Cx_4-alkoksi tai trifluorimetyyli; R2, R3, R5 ja R6 ku-15 kin erikseen on vety, halogeeni, Cx_4-alkyyli tai Cx_4-alkoksi; n on 1; ja R7 on vety, hydrolysoituva esteriryhmä tai kationi, joka muodostaa myrkyttömän farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan.

Termeillä "Cx_4-alkyyli", "Cx_6-alkoksikarbonyyli" ja 20 "Cx_4-alkoksi" tästä eteenpäin ja patenttivaatimuksissa käytettäessä (ellei lauseyhteydessä toisin ilmoiteta) tarkoitetaan suoraketjuisia tai haaroittuneita alkyyli- tai alkoksi-ryhmiä kuten metyyli, etyyli, propyyli, isopropyyli, butyyli, isobutyyli, t-butyyli, amyyli, heksyyli jne. Edullisesti nämä . 25 ryhmät sisältävät 1-4 hiiliatomia ja edullisimmin ne sisältä vät 1 tai 2 hiiliatomia. Ellei yksittäisissä tapauksissa toisin määritellä, termi "halogeeni" käytettäessä tästä eteenpäin ja patenttivaatimuksissa on tarkoitettu käsittämään kloorin, fluorin, bromin ja jodin, kun taas termi "halogeni-30 di” käytettäessä tästä eteenpäin ja patenttivaatimuksissa on tarkoitettu käsittämään klooridi-, bromidi- ja jodidianionit. Termi "kationi, joka muodostaa myrkyttömän farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan", käytettäessä tästä eteenpäin ja patenttivaatimuksissa on tarkoitettu käsittämään myrkyttömät 35 alkalimetallisuolat kuten natrium-, kalium-, kalsium- ja mag- 8 96602 nesium-, ammoniumsuolat ja suolat myrkyttömien amiinien kuten trialkyyliamiinien, dibentsyyliamiinin, pyridiinin, N-metyy-limorfoliinin, N-metyylipiperidiinin ja muiden amiinien kanssa, joita on käytetty suolanmuodostukseen karboksyylihappojen 5 kanssa. Ellei toisin määritellä, termillä "hydrolysoituva ester iryhmä" tarkoitetaan tästä eteenpäin ja patenttivaatimuksissa esteriryhmää, joka on fysiologisesti hyväksyttävä ja hydrolysoituva fysiologisissa olosuhteissa, kuten C^-alkyy-li-, fenyylimetyyli- ja pivaloyylioksimetyyliesteriryhmiä.

10 Kaavojen Ila ja 11b mukaisissa yhdisteissä on kaik kien kaksoissidosten tarkoitettu olevan trans-konfiguraatios-sa, eli (E), kuten tässä käytetyissä rakennekaavoissa on osoitettu. Näitä yhdisteitä valmistetaan keksinnön mukaisesti siten, että 15 a) yhdiste, jolla on kaava

Rs r4.^jJ-r6 20 R3 JL>s/CH20r Ιβ r1 V=-n . 25 jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja R6 ovat edellä määritellyt, ‘ saatetaan reagoimaan joko trifenyylifosfiinin kanssa fosfo- niumsuolan saamiseksi, jolla on kaava

RS

30 r4^^-R6 \o11 r2-P IJ I ph 35 vrjr R V=-N If il: »lunnia ·= 96602 9 jossa R11 on substituoitu tai substituoimaton fenyyli, tai fosfiitin kanssa fosfonaatin saamiseksi, jolla on kaava R3 5 C H 2— P — < 0 R10)

r2-P li I

k* J' ^CH3 10 ίΓ V / V=-n ig jossa R10 on C^-alkyyli; b) jompikumpi vaiheen a) tuotteista saatetaan rea-15 goimaan aldehydin kanssa, jolla on kaava OR12 OR12 0

V1—*V'A'«S

20 0 jossa R9 on hydrolysoituva esteriryhmä ja R12 on t-butyylidi-fenyylisilyyli, inertissä orgaanisessa liuottimessa vahvan emäksen läsnä ollessa; ja c) vaiheen b) tuote desilyloidaan reaktiolla desi-25 lylointiaineen kanssa inertissä orgaanisessa liuottimessa ja siten, että läsnä on pieni määrä orgaanista happoa, jolloin muodostuu kaavan Ha mukainen yhdiste, jossa R7 on helposti hydrolysoituva esteriryhmä; ja haluttaessa d) lohkaistaan funktionaalinen esteriryhmä R7 emäk-30 sen avulla tapahtuvalla hydrolyysillä orgaanisessa liuottimessa kaavan Ha mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa R7 on X*, jossa X+ on kationi; ja haluttaessa e) tehdään vaiheen d) tuote happamaksi kaavan Ila mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa R7 on vety; ja halut- 35 taessa « a « i 96602 10 f) syklisoidaan valheen e) tuote kaavan Hb mukaisen yhdisteen saamiseksi, aktivoimalla karboksyyliradikaali karbodi-imidillä inertissä, orgaanisessa liuottimessa.

Kaavan le mukaisia lähtöaineita voidaan valmistaa 5 erilaisilla menetelmillä, edullisesti käyttäen lähtöaineena yhdisteitä, joilla on kaava IV

R5 R*—t> 6

10 Γ R

2^yl,8 iv 15 R1 joissa R1, R2, R3, R4, R5 ja R6 ovat edellä määritellyt ja Re on vety, C^-alkoksikarbonyyli tai metyyli. Tällaisia mene- 20 telmiä on kuvattu patenttihakemuksessa 880 868.

Keksinnön mukaista menetelmää kaavojen Ha ja Hb mukaisten yhdisteiden valmistamiseksi havainnollistaa seuraa-va reaktiokaavio 1.

* | : |»t iilll Ilta:.: 966G2 11

Reaktiokaavio 1 R5 R«i5“ 4V-R6 5 R11 R3 T c„^11 2 Xr11 λΓΝ R2 "v^il J^^CHa 'ÖR‘ * w * JL^CHgBi-

Rs-S Jj X ,ch3 ys «ry 3 R= ^ r4-S3"r6

Ie 0 P3 »10 ^^JL/CH2—P—< OR10) r2-h li ίΓ

20 Rl W

Reaktiokaaviossa 1 R1, R2, R^, R^, R5 ja R6 ovat kuten aikaisemmin on määritelty. Kaavan Ie mukaisen allyy- libromidin voidaan antaa reagoida tavanomaisella tavalla fosfiinien kuten trifenyylifosfiinin kanssa inertissä : 25 orgaanisessa liuottimessa kuten sykloheksaanissa, jolloin 11 muodostuu fosfoniumsuolaa, jolla on kaava If, jossa R on fenyyli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai kahdella _^-alkyyli- tai kloorisubstituen-tilla, ja X on bromi, kloori tai jodi. Vaihtoehtoisesti 30 kaavan Ie mukaisen allyylibromidin voidaan antaa reagoida tavanomaisella tavalla fosfiittien kuten trimetyyli- i fosfiitin tai trietyylifosfiitin kanssa joko laimenta- mattomana tai inertissä orgaanisessa liuottimessa, ja edullisesti laimentamattomana, jolloin muodostuu kaavan 3 5 Ig mukaista fosfonaattia, jossa R**® on C -alkyyli.

1-4 • r 96602 12

Kaavojen If tai Ig mukaiset välituotteet voidaan sitten muuntaa kaavojen Ha ja Hb mukaisiksi veren liiallista kolesterolipitoisuutta alentaviksi yhdisteiksi reak-tiokaaviossa 2 esitetyn reaktiosarjän mukaisesti.

5 Reaktiokaavio 2 10 * /CH,- z ·> ti 'ίΓ If tai Ig

x2~c I J

tr H-CH.

15 OR12 OR12 O

0 5 Π 20 ** r3 OR12 of2 o

25 R2—OR9 XII

\ f®3

KM

30 r5 1 RA—R6 0H 0H 0

35 k2—^ 0r9 X

iA;ch, * w 3 i| IN 4 MM III*» 966G2 13

Reaktiokaaviossa 2 r\ r2 , r2 , R4, R·* ja R6 ovat g kuten aikaisemmin on määritelty, R on hydrolysoituva 1 2 esteriryhmä, R on t-butyylidifenyylisilyyli ja 0 - /R11 II in ©/ 11 /T) in 5 Z on —P—(0RX ), tai — P—Rx X2' , jossa R1 on

\RU

1 1 C^_^-alkyyli, R on fenyyli, joka on aubstituoimaton tai substituoitu yhdellä tai kahdella ^-alkyyli- tai kloorisubstituentilla, ja X on bromi, kloori tai jodi.

10 Kaavan If mukaisen fosfoniumsuolan tai kaavan Ig mukai sen fosfonaatin voidaan antaa reagoida kaavan XI mukaisen silyylillä suojatun aldehydin kanssa, joka itse on valmistettu menetelmillä, jotka on esitetty julkaisussa Tetrahedron Letters, 25, 2435 (1984) ja myös US-patentti-15 julkaisussa 4 571 428, jolloin muodostuu kaavan XII mukaista, silyylillä suojattua yhdistettä. Reaktio voidaan suorittaa inertissä orgaanisessa liuottimessa kuten tet--rahydrofuraanissa tai N,N-dimetyyliformamidissa vahvan emäksen esimerkiksi litiumdi-isopropyyliamidin, kalium-t-20 butoksidin ja n-butyylilitiumin läsnä ollessa lämpötilassa noin -78°C:sta noin 0°C:een. Kaavan XII mukainen yhdiste voidaan sitten desilyloida hyvin tunnetuilla menetelmillä kuten 48-%: isella vetyf luoridihapolla ja edullisesti tetrabutyyliammoniumfluoridilla inertissä orgaanisessa 25 liuottimessa kuten tetrahydrofuraanissa ja asetonitriilis- sä siten, että läsnä on pieni määrä orgaanista happoa, jolloin muodostuu kaavan X mukaisia erytroyhdisteitä.

Saatu kaavan X mukainen yhdiste voidaan sitten muuntaa yleisten kaavojen Ha ja Hb mukaisiksi yhdisteiksi ta-30 vanomaisella, alan asiantuntijoiden hyvin tuntemalla ta- : valla.

Kaavojen Ha ja Hb mukaiset yhdisteet ovat kom-petitiivisiä estäjiä entsyymille 3-hydroksi-3-metyyliglu-taryyli-koentsyymi-A-reduktaasi, joka on reaktionopeut-35 ta säätelevä entsyymi kolesterolin biosynteesissä, ja ϋ,<<Π9 ✓ Ουυ L 14 siltä syystä ne ovat selektiivisiä kolesterolin biosynteesin tukahduttajia eläimillä ihmisen mukaan lukien. Niin ollen ne ovat hyödyllisiä hoidettaessa veren liiallista kolesteroli-ja lipoproteiinipitoisuutta ja ateroskleroosia. Kaavojen Ha 5 ja Hb mukaisten yhdisteiden biologinen aktiivisuus voidaan osoittaa kolesterolin biosynteesin estämisellä rotilla.

In vivo akuutti kolesterolin biosynteesin estäminen rotilla

Urospuolisia Wistar-rottia (160-200 g, sijoitettu!-10 na 2 häkkiä kohti) pidettiin normaalilla ruokavaliolla (Purina Rat Chow ja vesi, mielin määrin) vähintään seitsemän päivää käänteisessä valaistusaikataulussa (pimeää klo 7.00 - klo 17.00). Ruoka poistettiin 15 tuntia ennen annostusta. Yhdisteet annettiin klo 8.00 mahalaukun sisäisellä intubaatiolla 15 käyttäen 0,5 - 1,0 ml testattavien yhdisteiden natriumsuolo-jen, laktoneiden tai estereiden vesi- tai propyleeniglykoli-liuoksia. Verrokit saivat samat tilavuudet väliainetta.

Kolmekymmentä minuuttia testattavien aineiden saamisen jälkeen rotille injektoitiin intraperitoneaalisesti 20 0,9 ml 0,9-%:ista NaCl:a, joka sisälsi ruumiin painokiloa kohti noin 120 Ci natrium[l-14C]asetaattia (1-3 mCi/mmol). 60 minuutin liittymisajan kuluttua rotat lopetettiin ja otettiin maksa- ja verinäytteet. Osat plasmasta (1,0 ml), jotka oli saatu sentrifugoimalla hepariinia + EDTA:11a käsiteltyä ver-25 ta, ja osat maksahomogenaateista (ekvivalentti 0,50 g:n kanssa maksan märkäpainoa) vietiin radioaktiivisesti leimattujen 3-hydroksisterolien määritykseen. Sterolien eristäminen mak-sanäytteillä noudatti Katesin menetelmää, joka on esitetty teoksessa Techniques in Lipidology, (M. Kates, toim.) s. 349, 30 360-363, North Holland Pubi. Co., Amsterdam, 1972, kun taas plasmanäytteet saippuoitiin suoraan, ja sen jälkeen eristettiin digitoniinilla saostuvat sterolit. 14C-leimatut sterolit määritettiin kvantitatiivisesti nestetuikelaskennalla (hyötysuhde korjattu). Keskimääräinen estämisprosentti 14C:n liit-35 tymiselle maksan ja plasman kolesteroliin laskettiin käsitel-

Il Itt.t IIIII I I 1 St 96602 15 tyjen eläimien ryhmille ja verrattiin samanaikaisesti hoidettujen verrokkien keskiarvoihin.

Siten edellä esitetty koe antaa informaatiota testattavien aineiden kyvystä tukahduttaa kolesterolin de novo 5 biosynteesiä in vivo rotilla oraalisesti annosteltaessa. Esimerkiksi, käytettäessä edellä esitettyä koetta esimerkin 6 yhdisteelle saatiin 50 % estävä annos (ED50) sekä plasman että maksan kolesterolille, joka oli verrattavissa mevinolii-nilla (lovastatiini) saatuihin arvoihin käytettäessä saman-10 laista menetelmää [Alberts, et ai., Proc. Natl. Acad. Sei., 77, 3957-3961 (1980)].

Seuraavissa esimerkeissä, jotka valaisevat keksintöä lähemmin, kaikki lämpötilat on annettu Celsius-asteina. Sulamispisteet rekisteröitiin Thomas-Hoover kapillaarisula-15 mispistelaitteella ja kiehumispisteet määritettiin annetuissa paineissa (mmHg) ja molemmat lämpötilat ovat korjaamattomia. Protoniresonanssispektrit (XH-NMR) rekisteröitiin Bruker AM 300, Bruker WM 360 tai Varian T-60 CW spektrometreillä. Kaikki spektrit määritettiin CDCl3:ssa, DMSO-d6:ssa tai D20:ssa 20 ellei toisin mainita, ja kemialliset siirtymät on ilmoitettu 6-arvoina alempaan kenttään päin sisäisestä standardista tet-rametyylisilaanista (TMS), ja protonien väliset kytkeytymis-vakiot on ilmoitettu hertseinä (Hz). Jakautumistapoja on merkitty seuraavasti: s on singletti, d on dupletti, t on trip-25 letti, q on kvartetti, m on multipletti, leveä on leveä piikki, ja dd on dupletin dupletti. Hiili-13-ydinmagneettiset re-sonanssispektrit (13C-NMR) rekisteröitiin Bruker AM 300 tai Bruker WM 360 -spektrometreillä, ja spektrit olivat leveävöi-siä, joista kaikki protonit oli dekoplattu. Kaikki spektrit 30 määritettiin CDCl3:ssa, DMS0-d6:ssa tai D20:ssa ellei toisin mainita käyttäen sisäistä deuteriumlukkoa, ja kemialliset siirtymät on ilmoitettu δ-arvoina alempaan kenttään päin tet-rametyylisilaanista. Infrapunaspektrit (IR) määritettiin Ni-colet MX-1 FT spektrometrillä 4000 cm'1:stä 400 cm-1:iin, jol-35 loin laite oli kalibroitu polystyreenikalvon kohdalla 96602 16 1601 cm'1:n olevan absorption avulla, ja ne on ilmoitettu käänteissenttimetreinä (cm'1). Suhteelliset Intensiteetit on ilmoitettu seuraavasti: s (voimakas), m (keskimääräinen) ja w (heikko).

5 Kaasukromatografia-massaspektrit (GC-MS) määritet tiin Finnigan 4500 -kaasukromatografilla-kvadrupolimassa-spektrometrillä ionisaatiopotentiaalilla 70 eV. Massaspekt-rejä rekisteröitiin myös Kratos MS-50-laitteella käyttäen nopeilla atomeilla pommittavaa tekniikkaa (FAB). Massaspektri-10 tiedot on ilmoitettu muodossa: alkuperäinen ioni (M*) tai protonoitu ioni (M+H)*.

Analyyttinen ohutkerroskromatografia (TLC) suoritettiin ennalta päällystetyillä silikageelilevyillä (60F-254) ja ne saatiin näkyviin käyttäen UV-valoa, jodihöyryjä ja/tai 15 värjäämällä yhdellä seuraavista reagensseista: a) fosfomolyb-deenihapon metanoliliuoksella (2 %) kuumentaen; b) reagens-silla a) ja sen jälkeen 2 % kobolttisulfaatilla 5-M H2S04:ssa kuumentaen. Pylväskromatografia, johon viitataan myös flash-pylväskromatograflana, suoritettiin lasipylväässä käyttäen 20 hienojakoista silikageeliä (32-63 pm silikageeli-H) ja hieman ilmanpainetta suurempia paineita ja ilmoitettuja liuottimia. Kaikki liuottimien haihduttamiset suoritettiin alipaineessa. Tässä hakemuksessa käytettynä termi heksaanit tarkoittaa iso-meeristen C6-hiilivetyjen seosta kuten American Chemical So-25 ciety on spesifioinut, ja termillä "inertti" kaasukehä tar-*l koitetaan argon- tai typpikehää ellei toisin ilmoiteta.

Esimerkki 1 3,3-bis-(4-fluorifenyyli)-1-bromi-2-(1-metyyli-1H-tetratsol-5-yyli)-2-propeeni (yhdiste Ie) 30 A. 5-etyyli-l-metyyli-lH-tetratsoli

Lietteeseen, jossa oli 1,5-dimetyylitetratsolia (4,9 g, 0,05 mmol) kuivassa tetrahydrofuraanissa (50 ml), lisättiin 2,5-M n-butyylilitiumin heksaaniliuosta (20 ml, 0,05 mol) 15 minuutin aikana -78°C:ssa inertissä kaasukehäs-35 sä. Tätä seosta sekoitettiin 30 minuuttia, ja tänä aikana i| ·. iti·» n *·** < 4 96602 17 muodostui keltainen saostuma. Sitten lisättiin metyylijodidia (3,7 ml, 0,06 mol) 15 minuutin aikana. Sen jälkeen, kun oli sekoitettu vielä 30 minuuttia, kirkasta reaktloseosta laimennettiin vedellä ja uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 50 ml).

5 Vesikerros pestiin kloroformilla (2 x 25 ml), ja yhdistetyt orgaaniset kerrokset kuivattiin natriumsulfaatilla ja väke-vöitiin alipaineessa, jolloin saatiin öljymäistä ainetta, öljy puhdistettiin tislaamalla, jolloin saatiin 5,2 g (92 %) otsikon yhdistettä; kp. = 89-90°C paineessa 6,67 Pa 10 (0,05 mmHg).

^-NMR (CDC13) 6: 4,05 (s, 3H), 2,86 (q, 2H), 1,41 (t, 3H) 13C-NMR (CDCI3) 6: 156,0, 33,24, 16,75, 11,20 B. 1,l-bis-(4-fluorifenyyli)-2-(1-metyyli-lH-tet-15 ratsol-5-yyli)propanoli

Liuokseen, jossa oli 5-etyyli-l-metyyli-lH-tetrat-solia (5,6 g, 0,05 mol) [valmistettu kohdassa A] 60 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania, lisättiin 2,5-M n-butyylilitiumia (20 ml, 0,05 mol) heksaanissa 5 minuutin aikana -78°C:ssa 20 (hauteen lämpötila) inertissä kaasukehässä. Seosta sekoitettiin 30 minuuttia, ja lisättiin viiden minuutin aikana liuosta, jossa oli 4,4'-difluoribentsofenonia (10,8 g, 0,5 mol) 25 ml:ssa kuivaa tetrahydrofuraania. Tätä seosta sekoitettiin vielä kaksi tuntia samalla, kun hauteen lämpötila nousi hi-25 taasti -20°C:een. Reaktio lopetettiin 1-M HCl:lla, ja seosta uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 50 ml) ja kloroformilla (3 x 50 ml). Yhdistetyt orgaaniset kerrokset kuivattiin natrium-sulfaatilla ja väkevöitiin alipaineessa, jolloin saatiin valkoista kiinteää ainetta. Kiinteä aine puhdistettiin kiteyttä-30 mällä etanoli/heksaaniseoksesta, jolloin saatiin 10,8 g • (65 %) otsikon yhdistettä? sp. * 160-161°C.

IR (KBr) vBex: 3400 cm'1.

3H NMR (CDCI3) 6: 7,8 - 7,02 (m, 8H), 5,95 (s, 1H), 4,65 (q, 1H), 3,98 (s, 3H), 1,29 (d, 2H).

18 9 c 6 C 2 13C NMR (CDC13) 6: 162,57, 162,37, 159,14, 156,71, 142,48, 140,54, 128,25, 128,13, 127,52, 127,42, 114,67, 114,41, 114,38, 78,56, 36,99, 33,43, 14,52.

Analyysi C17H16F2N40: lie 5 Laskettu: C, 61,81; H, 4,88; N, 16,96 Havaittu: C, 61,79; H, 4,90; N, 17,09 C. 1,l-bis-(4-fluorifenyyli)-2-(1-metyyli-lH-tet-ratsol-5-yyli)-l-propeeni

Lietettä, jossa oli 1,l-bis-(4-fluorifenyyli)-2-(Ι-ΙΟ metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)propanolia (8,25 g, 0,025 mol) [valmistettu kohdassa B] ja 100 mg p-tolueenisulfonihappomo-nohydraattia ksyleenissä (60 ml), kuumennettiin palautusjääh-dyttäen 12 tunnin ajan käyttäen Deanin & Starkin vedenkeräys-laitetta. Reaktioseosta pestiin 1-M NaOHrlla (10 ml), kun se 15 oli vielä lämmin, ja vedellä (100 ml). Orgaanisen kerroksen väkevöinti antoi tuotteen likaisen valkoisina kiteinä. Ne puhdistettiin uudelleenkiteyttämällä etanoli/heksaaniseokses-ta, jolloin saatiin 7,1 g (91 %) otsikon yhdistettä valkoisina kiteinä; sp.= 146-147°C.

20 IR (KBr) 1575; 1500 cm'1.

XH NMR (CDCI3) 6: 7,42 - 6,85 (m, 8H), 3,53 (s, 3H), 2,14 (s, 3H); 13C NMR (CDCI3) 6: 163,37, 163,08, 160,13, 155,61, 144,60, 145,34, 136,47, 136,42, 136,24, 136,19, 131,65, . 25 131,54, 131,11, 131,01, 119,53, 115,51, 115,27, 115,22, 33,50, 21,20.

Analyysi ^17^14^2^4: lie Laskettu: C, 65,37; H, 4,51; N, 17,94 Havaittu: C, 65,64; H, 4,61; N, 18,09 30 D. 3,3-bis-(4-fluorifenyyli)-l-bromi-2-(1-metyyli- lH-tetratsol-5-yyli)-2-propeeni

Lietettä, jossa oli 1,l-bis-(4-fluorifenyyli)-2-(1-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-l-propeenia (61,46 g, 0,197 mol) [valmistettu kohdassa C], N-bromisukkinimidiä (35,06 g, 35 0,197 mol) ja katalyyttinen määrä atsobisisobutyronitriiliä «m-iimta 966C2 19 tai bentsoyyliperoksidia hiilitetrakloridissa (1,2 litraa), kuumennettiin palautusjäähdyttäen inertissä kaasukehässä kahden tunnin ajan. Reaktioseos jäähdytettiin ympäristön lämpötilaan, ja kiinteä aine reaktioseoksesta suodatettiin. Suodos 5 väkevöitiin alipaineessa, ja saatu kiinteä aine uudelleenki-teytettiin tolueeni/heksaaniseoksesta, jolloin saatiin 72 g (93 %) otsikon yhdistettä valkoisina kiteinä; sp. = 159-160°C.

IR (KBr) 1600 cm"1.

10 XH NMR (CDC13) 6: 7,5 - 7,1 (m, 8H), 4,44 (s, 2H), 3,53 (s, 3H).

13C NMR (CDCI3) 6: 163,94, 163,74, 160,60, 160,45, 143,42, 149,68, 135,20, 135,15, 134,69, 131,43, 131,31, 130,90, 130,80, 119,57, 115,94, 115,77, 115,65, 115,50.

15 Analyysi C17H13F2BrN4:lle

Laskettu: C, 52,19; H, 3,34; N, 14,32 Havaittu: C, 52,58; H, 3,47; N, 14,49

Esimerkki 2 [1,l-bls-(4-fluorifenyyli)-2-(1-metyyli-lH-tetrat-20 sol-5-yyli)-l-propen-3-yyli]trifenyylifosfoniumbromidi (Yhdiste If)

Lietettä, jossa oli 3,3-bis-(4-fluorifenyyli)-l-bromi-2-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-2-propeenia (1,95 g, 0,005 mol) [valmistettu esimerkissä 1] ja trifenyylifosfiinia 25 (1,3 g, 0,005 mol) sykloheksaanissa (25 ml), kuumennettiin • 4 palautusjäähdyttäen. Reaktioseos tuli kirkkaaksi 30 minuutin kuluttua, ja valkoinen saostuma ilmeistyi tunnin kuluttua. Seosta kuumennettiin kahdeksan tuntia lisää, jäähdytettiin ympäristön lämpötilaan, ja kiinteä aine kerättiin suodatta-30 maila ja pestiin dietyylieetterillä. Tämä valkoinen jauhe ·. kuivattiin vakuumissa 50°C:ssa, jolloin saatiin 3,0 g (92 %) otsikon yhdistettä; sp. = 254-255°C.

IR (KBr) vBajc: 3450, 1600, 1500, 1425 cm"1.

XH NMR (DMS0-d6) 6: 7,92 - 6,80 (m, 23H), 4,94 35 (6d, 2H), 3,83 (s, 3H); 966 C2 20 13C NMR (DMS0-d6) 6: 163,53, 163,36, 160,28, 160,87, 154,04, 153,89, 152,76, 135,11, 134,79, 134,16, 133,68, 133,54, 130,53, 130,45, 130,35, 130,21, 130,07, 118,02, 116,89, 116,18, 115,89, 115,62, 115,32, 111,43, 111,39, 5 34,22, 28,88, 28,22.

Analyysi C35H28BrF2N4P: lie

Laskettu: C, 64,31; H, 4,32; N, 8,57

Havaittu: C, 64,02; H, 4,37; N, 8,89

Esimerkki 3 10 Metyyli-(±)-erytro-9,9-bis-(4-fluorifenyyli)-3,5- dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-6,8-nonadi-enoaatti (Yhdiste Ila)

Lietteeseen, jossa oli fosfoniumbromidia (0,326 g, 0,5 mmol) [valmistettu esimerkissä 2] ja metyylierytro-3,5-15 bis(difenyyli-t-butyylisilyylioksi)-6-oksoheksanoaattia [valmistettu yleisten menetelmien mukaan, jotka on esittänyt P.

Kapa, et ai. julkaisussa Tetrahedron Letters, 2435-2438 (1984) ja US-patenttijulkaisussa 4 571 428, joka on julkaistu 18. helmikuuta 1986, P.K. Kapa] (0,26 g, 0,4 mmol) kuivassa 20 dimetyyliformamidissa (1 ml), lisättiin kalium-t-butoksidia (0,067 g, 0,6 mmol) -20°C:ssa (hauteen lämpötila) inertissä kaasukehässä. Liete muuttui punaiseksi liuokseksi, ja sitä sekoitettiin 18 tuntia -10°C:ssa. Reaktio täydennettiin lisäämällä ammoniumkloridiliuosta (10 ml) ja uuttamalla mety-25 leenikloridilla (2 x 30 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin, jolloin saatiin öljymäinen aine. öljy puhdistettiin laskemalla se silikageelityynyn läpi, ja pääfraktio eristettiin öljynä (160 mg), öljyä (160 mg) sekoitettiin 1-M tetra-n-butyyliammoniumfluoridin tetrahydro-30 furaaniliuoksen kanssa (2 ml) ja muutaman pisaran kanssa jää-etikkaa 18 tunnin ajan. Reaktioseos kaadettiin veteen (10 ml), ja sitä uutettiin etyyliasetaatilla (3 x 20 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin natriumsulfaatilla ja väkevöitiin, jolloin saatiin öljyä, öljy puhdistettiin silikageeli-35 flashpylväskromatografisesti eluoiden etyyliasetaatti/heksaa- li lii I Hill I I 11l· ! 21 9(5602 niseoksella (2:1), jolloin saatiin 0,08 g (75 %) otsikon yhdistettä öljynä. MS (CI): m/e - 471 (M+H)*:lle; *H NMR (CDClj) 6: 7,26 - 6,6 (m, 9H), 5,37 (dd, 1H), 4,44 (m, 1H), 4,24 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,56 (s, 3H), 2,47 5 (d, 2H), 1,58 (m, 2H).

Polaarisempi fraktio eristettiin myös (20 mg), ja se identifioitiin vastaavaksi trans-laktoniksi.

Esimerkki 4

Dimetyyli-[3,3-bis-(4-fluorifenyyli)-2-(1-metyyli-10 lH-tetratsol-5-yyli)-2-propen-l-yyli]fosfonaatti (Yhdiste Ig) Lietettä, jossa oli 3,3-bis-(4-fluorifenyyli)-l-bromi-2-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-2-propeenia (1,17 g, 3.0 mmol) ja trimetyylifosfiittia (0,41 g, 3,3 mmol), kuumennettiin 100°C:ssa 5 minuuttia. Kun seos oli jäähdytetty ympä- 15 ristön lämpötilaan, ylimääräinen trimetyylifosfiittl poistettiin vakuumissa, jolloin saatiin vaalea keltainen kiinteä aine. Tämä kiinteä aine uudelleenkiteytettiin etyyliasetaatti/-heksaaniseoksesta, jolloin saatiin otsikon yhdiste puhtaana valkoisena kiinteänä aineena; sp. = 140-141°C.

20 IR (KBr) 1604, 1511 cm-1 1H-NMR (CDClj) 6: 7,7 - 6,8 (8H, m), 3,6 (3H, s), 3,5 (3H, s), 3,42 (3H, s), 3,2 (2H, d)

Analyysi C19H1903N4P: lie Laskettu: C, 54,29; H, 4,56; N, 13,33 25 Havaittu: C, 53,83; H, 4,48; N, 13,50 Esimerkki 5

Metyyli-(±)-erytro-9,9-bis-(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-(1-metyyli)-lH-tetratsol-5-yyli)-6,8-nonadi-enoaatti (Yhdiste Ha) 30 Liuokseen, jossa oli fosfonaattia (0,84 g, 2.0 mmol) [valmistettu esimerkissä 4], lisättiin yksi ekvivalentti n-BuLi (2,0 mmol) -78°C:ssa (kuiva jää/asetoni), ja saatua syvän punaisen väristä liuosta sekoitettiin -78°C:ssa 15 minuuttia. Lisättiin metyylierytro-3,5-bis(difenyyli-t- 35 butyylisilyylioksi)-6-oksoheksanoaattia [valmistettu yleisten « 22 C fy&r.n ✓ V.·’ L l.

menetelmien mukaan, jotka on esittänyt P. Kapa et ai., julkaisussa Tetrahedron Letters, 2435-2438 (1984) ja US-patent-tijulkaisussa 4 571 428, joka on julkaistu 18. helmikuuta 1986, P. Kapa] (1,30 g, 2,0 mmol) THF:ssa (2 ml), ja seosta 5 sekoitettiin 24 tuntia. Reaktioseoksen annettiin lämmitä huoneen lämpötilaan tämän ajan kuluessa. Reaktio lopetettiin lisäämällä 5 ml NH.Cl:a, ja sitten sitä uutettiin etyyliasetaatilla (2 x 20 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin (Na2S04) ja haihdutettiin alipaineessa keltaiseksi öljyksi, öljyä sekoi-10 tettiin 1-M tetra-n-butyyliammoniumfluoridin tetrahydrofuraa-niliuoksen (4 ml) kanssa, joka sisälsi muutaman pisaran jää-etikkaa, 24 tunnin ajan. Reaktioseos kaadettiin veteen (20 ml), ja sitä uutettiin metyleenikloridilla (3 x 20 ml). Orgaaninen kerros kuivattiin (Na2S04) ja väkevöitiin, ja öljy 15 puhdistettiin silikageeliflashpylväskromatografialla eluoiden etyyliasetaatti/heksaaniseoksella (2:1), jolloin saatiin 0,284 g (41 %) otsikon yhdistettä öljynä. MS (CI): m/e = 471 (M+H) + :lle 1H-NMR (CDC13) 6: 7,26 - 6,6 (9H, m), 5,29 (1H, 20 dd), 4,42 (1H, m), 4,28 (1H, m), 3,69 (3H, s), 3,54 (3H, s), 2,42 (2H, d), 1,5 (2H, m)

Esimerkki 6 (Esterin Ha, jossa R7«C2H5, muuttaminen suolaksi Ha, jossa R7=Na*) ; 25 Natrium-(±)-erytro-9,9-bis-(4-fluorifenyyli)-3,5- dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-6,8-nonadi-enoaatti

Liuokseen, jossa oli etyyli-9,9-bis(4-fluorifenyy-li)-3,5-dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-6,8-no-30 nadienoaattia (1,231 g, 2,54 mmol) (valmistus esitetty hake-’ muksessa 880 868) 35 ml:ssa tetrahydrofuraania 0°C:ssa, li sättiin plsaroittain 1-M NaOH-liuosta 2,54 ml (1,0 ekvivalentti). Lisäysnopeuden tulisi olla tarpeeksi hidas estämään reaktioseoksen värin muuttumisen syvän kullan ruskeaksi tai 35 punertavaksi. Reaktioseosta sekoitettiin 30 minuuttia il' t&tiitmifl .1 y \~ V- <..·· ,:.

23

Olissa, jolloin muodostui kirkas homogeeninen liuos. Reak-tioseoksen annettiin lämmitä ympäristön lämpötilaan, ja saippuoi tumisen annettiin jatkua vielä tunnin. Analyyttinen TLC eluoiden 20 % MeOHilla CHCl3:ssa (V/V) osoitti halutun tuot-5 teen kohdalla Rf = 0,2. Suurin osa orgaanisesta liuottimesta haihdutettiin alipaineessa (2,67 kPa, 20 mmHg), noin 10°C:ssa. Saatua paksua siirappia laimennettiin 4 ml:11a vettä, ja sitten liuos kylmäkuivattiin paineessa 1,33 Pa (0,01 mmHg), jolloin saatiin 1,126 g (100 %) otsikon yhdis-10 tettä natriumsuolana, joka näyttää sisältävän noin yhden moolin vettä; sp. > 100°C, hajosi.

IR (KBr) vBax: 3400 (hyvin leveä), 1600 (s), 1575 (s), 1513 (s), 1438 (s), 1404 (s), 1225 (s), 1156 (s), 838 (s) cm-1; 15 ^-NMR (DMS0-d6) 6: 7,3 - 7,4 (4H, m), 7,06 (1H, le veä, D20:lla vaihtuva), 7,00 - 7,06 (2H, m), 6,87 - 6,91 (2H, m), 6,49 (1H, d, J«15,7 Hz), 5,13 (1 H, dd, J»5,4, 15,7 Hz), 5,05 (1H, leveä, D20:lla vaihtuva), 4,14 (1H, m), 3,74 (3H, s), 3,62 (1H, m), 1,99 (1H, dd, J-3,7, 13,5 Hz), 1,80 (1H, 20 dd, J=8,5, 13,5 Hz), 1,43 (1H, m), 1,30 (1H, m) ppm; 13C NMR (DMS0-d6) 6: 175,87, 161,85 (d, ^.,=246, 1 Hz), 161,37 (d, 1JC.P=246,9 Hz), 153,08, 144,97, 139,88, 136,40, 135,51, 132,22 (d, 3Jc_r=8,3 Hz), 130,97 (d, 3Jc_r=8,3 Hz), 124,66, 121,74, 115,42 (d, 2JC_P-21,9 Hz), 115,12 (d, 25 2JC_F=23,4 Hz), 68,23, 65,71, 44,50, 43,55, 33,45 ppm;

Analyysi C23H21F2N404Na H20:lle Laskettu: C, 55,64; H, 4,67; N, 11,28 Havaittu: C, 55,24; H, 4,65; N, 10,85 Esimerkki 7 30 (Yhdisteen Ila syklisointi laktomiksi Hb)

Trans-6-[4,4-bis-(4-fluorifenyyli)-3-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-1,3-butadienyyli]tetrahydro-4-hydroksi-2H-pyran-2-oni A. (±)-erytro-9,9-bis-(4-fluorifenyyli)-3,5-dihyd-35 roksi-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-6,8-nonadieenihappo Liuosta, jossa oli etyyli-(±)-erytro-9,9-bis-(4-; fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5- 24 0 π 9 y c u u /.

yyli)-6,8-nonadienoaattia (0,64 g, 1,32 mmol) 25 mltssa tet-rahydrofuraania 0°C:ssa, käsiteltiin 1,32 ml:11a 1,0 molaa-rista NaOH-liuosta. Vaalean keltaista suspensiota sekoitettiin 0°C:ssa kaksi tuntia, jolloin muodostui kirkas vaalean 5 keltainen liuos. Raakaa reaktioseosta laimennettiin 5 ml:11a HCl:n vesiliuosta (2-M), ja orgaaninen aine uutettiin etyyliasetaattiin (40 ml x 2). Orgaaniset uuttoliuokset yhdistettiin, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin alipaineessa, jolloin saatiin vaalean keltainen kumimainen aine. Raakaa dihyd-10 roksihappoa kuivattiin voimakkaasti suurtyhjössä (1,33 Pa, huoneen lämpötilassa 24 tuntia) ennen alistamista seuraavaa vaiheeseen.

B. Trans-6-[4,4-bis-(4-fluorifenyyli)-3-(1-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-l,3-butadienyyli]tetrahydro-4-hydroksi-15 2H-pyran-2-oni

Kuiva happo yllä olevasta vaiheesta A liuotettiin 100 ml:aan kuivaa metyleenikloridia argonkehässä, huoneen lämpötilassa, ja sen jälkeen lisättiin 1,7 g (4,0 mmol) 1-sykloheksyyli-3-(2-morfolinoetyyli)karbodi-imidimeto-p-to-20 lueenisulfonaattia. Laktonointi oli tapahtunut alle 15 minuutissa, kuten osoitti analyyttinen TLC (Rf=0,12) eluoitaessa kolme kertaa 50 % etyyliasetaatilla heksaaneissa. Suurin osa orgaanisesta liuottimesta haihdutettiin alipaineessa, ja jäännös pestiin vedellä (40 ml), ja sen jälkeen sitä uutet-. 25 tiin etyyliasetaatilla (40 ml x 2). Orgaaniset kerrokset yh- • 4 distettiin, kuivattiin MgS04:lla ja väkevöitiin alipaineessa, jolloin saatiin 0,54 g (89,7 %) tuotetta. Puhdas näyte tuotteesta saatiin laskemalla se ohuen silikageelikerroksen läpi eluoiden 40 % etyyliasetaatilla heksaaneissa (V/V), jolloin 30 saatiin otsikon yhdistettä, joka näyttää sisältävän noin kak-. si moolia vettä. MS (CI) : m/e) 1 438 (M+H)1:lle; IR (KBr) vBax: 3425 (leveä), 1738 (vs), 1600 (s), 1513 (s), 1225 (vs), 1156 (s), 1038 (s) , 838 (s) cm'1? 1H-NMR (CDC13) 6: 7,26 - 7,21 (2H, m), 7,14 (2H, 35 d, J=8,7 Hz), 6,86 (4H, d, J=6,8 Hz), 6,72 (1H, dd, J-0,8, il : IBr IMI Min : i 966G? 25 15,6 Hz), 5,34 (1H, dd, J-7,1, 15,6 Hz), 5,18 (1H, m), 4,37 (1H, m), 3,57 (3H, s), 2,68 (1H, dd, J-4,5, 18 Hz), 2,60 (1H, ddd, J=3,63, 2,5, 18 Hz), 2,44 (1H, d, J=2,6 Hz, D20:lla vaihtuva), 2,00 (1H, dt, J=18, 1,7 Hz), 1,79 (1H, td, J-2,7, 5 18 Hz) ppm; 13C NMR (CDC13) 6: 169,20, 163, 162,5, 153,20, 148,81, 135,61, 134,95, 132,45 (d, 3JC_F=8 Hz), 132,52, 131,51, (d, 3Jc_p-8 Hz), 130,04, 120,44, 115,95, (d, 2JC_F«21,9 Hz), 115,83 (d, 2JC.P=21,9 Hz), 75,67, 62,54, 38,58, 35,58, 10 33,64 ppm:

Analyysi C23H20F2N403 2H20:lle Laskettu: C, 58,22; H, 5,10; N, 11,81

Havaittu: C, 59,06; H, 4,45; N, 11,25 Näyte laktonista edellä kiteytettiin sykloheksaani-15 bentseeniseoksesta, jolloin saatiin otsikon yhdiste kiteisenä kiinteänä aineena, joka sisälsi noin yhden moolin bentseeniä; sp. = 105-106°C.

Analyysi C23H20F2N403 C6H6:lle Laskettu: C, 67,48; H, 5,07; N, 10,85 20 Havaittu: C, 67,44; H, 5,23; N, 10,59

Esimerkki 8 (Esterin 11a, jossa R7=t-butyyli, muuttaminen suolaksi Ha, jossa R7 = 0'Na+)

Natrium-(±)-erytro-9,9-bis-(4-fluori-2-metyylife-25 nyyli)-3,5-dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-6,8- • < nonadienoaatti

Liuokseen, jossa oli t-butyyli-9,9-bis-(4-fluori-2-metyylifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)-6,8-nonadienoaattia (1,65 g, 3,05 g) [valmistus esitet-30 ty hakemukssa 880 868] etanolissa (50 ml), lisättiin natrium-hydroksidia (3,05 ml, 1-M liuosta, 3,05 mmol), ja liuosta sekoitetaan huoneen lämpötilassa kolme tuntia ja 50°C:ssa yksi tunti. Liuos väkevöitiin vakuumissa, jolloin saatiin 1,3 g otsikon yhdistettä, joka näyttää sisältävän noin yhden moolin 35 vettä; sp. = 215-225°C (hajoaa).

966G2 26

Analyysi C25H25F2N404Na H20:lle Laskettu: C, 57,26; H, 5,19; N, 10,69 Havaittu: C, 57,30; H, 5,20; N, 10,00

Esimerkki 9 5 (Esterin Ha, jossa R7=C2H5, muuttaminen suolaksi

Ila, jossa R7-Na+)

Natrium-(±)-(E),(E)-erytro-9-(4-fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetrasol-5-yyli)-9-fenyylinona-6,8-dienoaattihydraatti 10 Liuosta, jossa oli etyyli-(±)-(E),(E)-erytro-9-(4- fluorifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-(l-metyyli-lH-tetrasol-5-yyli)-9-fenyylinona-6,8-dienoaattia (160 mg, 0,343 mmol) (valmistus esitetty hakemuksessa 880 868) EtOH:ssa (5 ml), käsiteltiin 1-M NaOHrlla, (343 μΐ, 0,343 mmol), ja saatua 15 liuosta sekoitettiin 23°C:ssa yksi tunti. Liuotin poistettiin haihduttamalla, ja jäännös liuotettiin veteen (2 ml) ja kyl-mäkuivattiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste vaaleana ruskeana kiinteänä aineena (155 mg); sp. 130-137°C.

IR (KBr) vB«: 3400 (leveä), 1560, 1510 cm'1; 20 1H-NMR (DMS0-d6) 6: 7,50 - 6,80 (m, 9H), 6,51 (d, J=15,7 Hz, 1H), 5,15 (dd, J=5,4 Hz, J'=15,7 Hz, 1H), 4,15 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,65 (leveä, 1H), 3,35 (leveä, 2H), 1,95 (m, 2H), 1,40 (m, 2H) ppm; 13C NMR (DMS0-d6) 6: 176,42, 163,42, 153,17, 146,07, 25 140,03, 139,73, 135,70, 135,64, 132,20, 132,09, 128,72, 128,42, 128,07, 127,98, 124,83, 121,51, 115,51, 115,22, 66,22, 65,69, 44,46, 43,59, 33,42 ppm.

Analyysi C23H22FN404Na H20:lle Laskettu: C, 57,74; H, 5,06; N, 11,72 30 Havaittu: C, 58,70; H, 5,10; N, 11,16

Esimerkki 10 (Esterin Ila, jossa R7=CH3, muuttaminn suolaksi Ila, jossa R7=Na*)

Natrium-(±)-(E)-erytro-9,9-difenyyli-3,5-dihydrok-35 si-8-(l-metyyli-lH-tetratsol-5-yyli)nona-6,8-dienoaattihyd raatti lit; V i t «k <.. U u έ 27

Metyyli-(E)-9,9-difenyyli-3,5-dihydroksi-8-(1-me-tyyli-lH-tetrasol-5-yyli)nona-6,8-dienoaatti (470 mg, 1,08 mmol) (valmistus esitetty hakemuksessa 880 868) liuotettiin etanoliin (10 ml), ja sitä käsiteltiin 1-M NaOHrlla 5 (1,08 ml). Reaktioseosta sekoitettiin yhden tunnin ajan.

Liuotin haihdutettiin, ja jäännös pakastekuivattiin, jolloin saatiin vaalea keltainen jauhe (500 mg, 100 %); sp. = 145-150°C.

IR (KBr) v3400 (leveä), 1610, 1425, 1360 cm"1; 10 1H-NMR (DMS0-d6) 6: 7,60 - 6,60 (m, 10H), 6,52 (d, J=16 Hz, 1H), 5,12 (dd, J-16 Hz, J'=5,5 Hz, 1H), 4,20 - 4,05 (m, 1H), 3,80 - 3,55 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,10 (leveä s, 2H), 2,10 - 1,10 (m, 5H) ppm;

Analyysi C23H23N404Na H20:lle 15 Laskettu: C, 59,99; H, 5,47; N, 12,17 Havaittu: C, 59,18; H, 5,46; N, 10,96

Esimerkki 11 (Esterin Ha, jossa R7=C2H5, muuttaminen suolaksi Ha, jossa R7=Na+) 20 Liuosta, jossa oli etyyli-(±)-(E)-erytro-9,9-bis- (4-metoksifenyyli)-3,5-dihydroksi-8-(1-metyyli-lH-tetrasol- 5-yyli)nona-6,8-dienoaattia (95 mg, 0,196 mmol) (valmistus esitetty hakemuksessa 880 868) etanolissa (15 ml), käsiteltiin 1-M NaOH-liuoksella, (196 1), ja seosta sekoitettiin 25 23°C:ssa yksi tunti. Liuotin poistettiin haihduttamalla, ja jäännös liuotettiin veteen (2 ml) ja pakastekuivattiin, jolloin saatiin otsikon yhdiste ruskeana jauheena (95 mg, 100 %); sp. 175-180°C.

IR (KBr) vB„: 3400 (leveä), 1600, 1575, 1510 cm-1; 30 XH-NMR (DMS0-d6) 6: 7,70 - 6,65 (m, 9H), 6,55 (d, J=15,5 Hz, 1H), 5,08 (dd, J=5,6 Hz, J’=15,7 Hz, 1H), 4,14 (leveä, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,67 (s, 3H), 3,66 (s, 3H), 2,10 - 1,80 (leveä, 2H), 1,50 - 1,20 (leveä, 2H) ppm; 13C-NMR (DMS0-d6) 6: 159,25, 158,80, 153,78, 138,13, 35 132,75, 131,88, 131,60, 131,42, 131,30, 130,41, 128,68, •

^ V- L

28 128,53, 125,72, 113,74, 113,48, 68,56, 65,89, 55,14, 54,99, 44,68, 43,68, 33,34.

Analyysi C25H27NaN406 2H20:lle Laskettu: C, 55,76; H, 5,81; N, 10,41 5 Havaittu: C, 54,43; H, 5,04; N, 8,15 < ” i t I in \ mi 11 »» - *

Claims (3)

1. 25 Arsv^>s^'CHeBp Ιβ R* 4- «M I r Li 3 Rl w 30 jossa R1, R2, R3, R4, R5 ja R6 ovat edellä määritellyt, saatetaan reagoimaan joko trifenyylifosfiinin kanssa fos-foniumsuolan saamiseksi, jolla on kaava C :<£ΓΛ« ^ <..· L ο ι 30 R5 R^PjJ-R6 5 ^3C ^CHp—Φ^-R11 Rij*YY x*u W^CH3 r1 V=-n If 10 jossa R1 on substituoitu tai substituoimaton fenyyli, tax fosfiitin kanssa fosfonaatin saamiseksi, jolla on kaava R9 R^Pjj-R6
2. 15. IT P p3 II .n V^^Jv^CHg — P —<OR10) r2 λ— || 'l J) >L ..CHg R V=-N Σ9 20 jossa R10 on C^-alkyyli; b) jompikumpi vaiheen a) tuotteista saatetaan reagoimaan aldehydin kanssa, jolla on kaava OR12 OR12 0 25 hyJv^v-^S)r9 o jossa R9 on hydrolysoituva esteriryhmä ja R12 on t-butyy-lidifenyylisilyyli, inertissä orgaanisessa liuottimessa 30 vahvan emäksen läsnä ollessa; ja c) vaiheen b) tuote desilyloidaan reaktiolla desi-lylointiaineen kanssa inertissä orgaanisessa liuottimessa ja siten, että läsnä on pieni määrä orgaanista happoa, jolloin muodostuu kaavan Ha mukainen yhdiste, jossa R7 on 35 helposti hydrolysoituva esteriryhmä; ja haluttaessa • · ,· ' 1 t 9660? d) lohkaistaan funktionaalinen esteriryhmä R7 emäksen avulla tapahtuvalla hydrolyyslllä orgaanisessa liuotti-messa kaavan Xla mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa R7 on X*, jossa X* on kationi; ja haluttaessa 5 e) tehdään valheen d) tuote happamaksi kaavan Ha mukaisen yhdisteen saamiseksi, jossa R7 on vety; ja haluttaessa f) syklisoidaan vaiheen e) tuote kaavan Hb mukaisen yhdisteen saamiseksi, aktivoimalla karboksyyliradikaali 10 karbodi-imidillä inertissä, orgaanisessa liuottimessa. c./r^ro ^ V- L v... .: 32 Förfarande för framställning av terapeutiskt aktiva tetrazolderivat med formeln 5 1’ R» R4±S +|“R6 R4_P' ^Ur6 ?h ° 2TJ T r« R2fc U X CH „<YC 3 Rl II. eller Rl ^ «b väri R1 och R2 oberoende av varandra är väte, halogen, C1.4-15 alkyl, C1.4-alkoxi eller trifluormetyl; R2, R3, R5 och R6 oberoende av varandra är väte, halogen, Cx_4-alkyl eller C1.4-alkoxi; n är 1; och R7 är väte, en hydrolyserbar ester-grupp eller en katjon, som bildar ett ogiftigt, farraaceu-tiskt godtagbart sait, kännetecknat därav, 20 att a) en förening med formeln R9 25 «3 R^Ns^J^>^,CH2Br Ie r^ i"i y 1 pu Rl w 30 väri R1, R2, R3, R4, R5 och R6 är ovan definierade, omsätts antingen med ett trifenylfosfin för erhällande av ett fos-foniumsalt med formeln :| : tl* SM: ltl« · 2 • · 0/ζ<Γ.ο s ^ O L> / R5 r4"^5”r6 5 /CHj—^r-Rl1 ^ ίΡΥΥ \r11 o·'-h, \\ I CH Rl W 10 väri R11 är en substituerad eller osubstituerad fenyl, eller med ett fosfit för erhällande av ett fosfonat med formeln pj R4.L?4j-R6 15. o p3 I II in --P — < OR10) R2-P Il ίΓ R V=-N τ<3 20 väri R10 är C^-alkyl; b) nägondera av produkterna av steg a) omsätts med en aldehyd med formeln OR12 OR12 0 . 25 γΑΛ,» χι o väri R9 är en hydrolyserbar estergrupp och R12 är t-butyl-difenylsilyl, i ett inert organiskt lösningsmedel i när- 30 varo av en stark bas; och c) produkten av steg b) desilyleras medelst en reaktion med ett desilyleringsämne i ett inert organiskt lösningsmedel i närvaro av en liten mängd av en organisk syra, varvid en förening med formeln Ha bildas, i vilken
3. 35 R7 är en lätt hydrolyserbar estergrupp; och om sä önskas • or rr o ✓ '.j L <>- £ d) en funktionell estergrupp R7 avspjälkas medelst hydrolys som utförs med en bas i ett organiskt lösningsmedel för erhällande av en förening med formeln Ha, väri R7 Mr X*, väri X* är en katjon; och om sä önskas, 5 e) produkten av steg d) surgörs för erhällande av en förening med formeln Ha, väri R7 är väte; och om sä önskas, f) produkten av steg e) cykliseras medelst aktive-ring av karboxylradikalen med karbodiimid i ett inert orga-10 niskt lösningsmedel för erhällande av en förening med formeln Hb. I ; - Itf'i IM II!«' · I