FI94095C

FI94095C - Ruiskutettu varjoaine

Info

Publication number: FI94095C
Application number: FI900347A
Authority: FI
Inventors: Jo Klaveness; Per Strande
Original assignee: Nycomed As
Priority date: 1987-07-24
Filing date: 1990-01-23
Publication date: 1995-07-25
Also published as: GR3004614T3; IE61263B1; AU2087088A; NO900269L; EP0300828A1; DK14490A; WO1989000988A1; GB8717625D0; ES2030170T3; DE3869256D1; IE882247L; ZA885411B; DK14490D0; HU884573D0; NO900269D0; HU210550B; NO180747C; HUT53585A; NZ225551A; JP2563555B2

Description

, 94095

Ruiskutettu varjoaine Tämä keksintö koskee ruiskutettavaa varjoainetta lääketieteellistä röntgen- ja ultraäänikuvausta varten ja 5 sen valmistusta

On ehdotettu maksassa ja pernassa olevien vaurioiden osoittamisen parantamista käyttämällä varjoaineita, jotka kerääntyvät näihin elimiin. On ehdotettu muutamia 10 aineita, mutta tällä hetkellä ei sellaista tuotetta ole kaupan, ja jokaisella tähän mennessä ehdotetuista varjoaineista on joitakin haittapuolia.

Koska maksan ja pernan retikuloendoteliaalisen systeemin tiedetään vangitsevan hiukkasia fagosytoosin avul-15 la, soveltuvat hiukkasmuodossa olevat varjoaineet erityi sen hyvin näiden elinten näkyväksi tekemiseen. Tässä yhteydessä on ehdotettu jodattujen öljyjen emulsioita, erityisesti unikonsiemenöljyn jodattuja etyyliestereitä. (Vermess, M., et ai., Radiology 137 (1980) 217). Nämä ai-20 neet ovat kuitenkin osoittautuneet liian myrkyllisiksi.

Toinen mahdollisuus on käyttää liposomeja, jotka sisältävät veteen liukenevia jodattuja varjoaineita. (Havron A. et ai., Radiology, 140 (1981) 507). Koska kuhunkin liposomiin voidaan kuitenkin sisällyttää vain ra-25 joitettu määrä jodia, on välttämätöntä antaa suhteellisen suuria määriä lipidejä, jotta aikaansaataisiin riittävä kontrastin vahvistuminen. Tämä aiheuttaa helposti tulppia keuhkojen hiussuoniin. Lisäksi liposomien on todettu olevan suhteellisen pysymättömiä säilytettäessä (Shulkin, 30 P.M. et ai., J.Microencapsul., 1 (1984) 73).

Submikronikokoa olevia toriumdioksidihiukkasia on käytetty maksan tekemiseen näkyväksi, ja ne ovat osoittaneet tehokasta kontrastin vahvistamista kliinisissä kokeissa, mutta niiden käyttö on lopetettu johtuen hiukkasia ten erittäin pitkällisestä pysymisestä maksassa. Tämä on yhdessä toriumille ominaisen radioaktiivisuuden kanssa 2 94095 johtanut vakaviin haitallisiin sivuvaikutuksiin, mukaan lukien kasvain ja fibroosi. (Thomas, S.F., Radiology, 78 (1962) 435).

On myös ehdotettu sellaisten hiukkasten käyttöä, 5 jotka sisältävät vesiliukoisen röntgenvarjoaineen jodipa-midin etyyliesteriä (Violante, M.R. et ai., Invest. Radioi., 2, (1984) 133). Etyyliesterit eivät kuitenkaan ole aineenvaihdunnallisesti riittävän labiileja ja pysyisivät siten todennäköisesti maksassa pitkähkön ajan. Sekä 10 tämä esteri että unikonsiemenöljyn jodattu etyyliesteri aikaansaivat todellakin lipidivakuolien lisääntymistä hepatosyyteissä laskimoon antamisen jälkeen. (Vermess et ai., Radiology, 137 (1980) 217) ja Violante, M.R.,

Invest. Radioi., 2 (1984) 133). Sellaiset morfologiset 15 muutokset osoittavat haitallista vaikutusta hepatosyytteihin.

Nyt on todettu, että erityisen hyödyllinen varjoaine maksan ja pernan näkyväksi tekemistä varten käsittää hiukkasmaisia lipofiilisiä jodia sisältäviä estereitä, 20 jotka ovat aineenvaihdunnallisesti labiileja muodostaen vesiliukoisia aineita, jotka ovat oleellisesti ei-myrkyl-lisiä ja eivät pysyttäydy kohde-elimissä.

Keksintö koskee ruiskutettavaa varjoainetta, jolle on tunnusomaista, että se sisältää veteen liukenematonta 25 jodattua esteriä, jonka kaava on R2 1 * 3 R C0.0.CH.0.C0R (I) jossa R1 ja R3, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, 30 tarkoittavat substituoitua tai substituoimatonta C^Q-ali-faattista, C7_20-aralifaattista tai C6_20-aryyliryhmää tai C1.20-heterosyklinen ryhmä, jossa on yksi tai useampia hete-roatomeja, jotka on valittu joukosta O, S ja N; ja R2 on vety tai substituoitu tai substituoimaton ali-35 faattinen, aryyli- tai aralifaattinen ryhmä, tai R2 ja R3 muodostavat yhdessä substituoidun tai sub-stituoimattoman C1.4-alkyleeniryhmän, 94095 3 jolloin molekyyli sisältää vähintään yhden jodiato-min ja on metaboluituvissa tuotteiksi, jotka liukenevat kehon nesteisiin, ja jolloin esteri on hiukkasmuodossa suspensiossa 5 ruiskeeseen soveltuvassa nesteessä, ja sen keskimääräinen hiukkaskoko on 0,01 - 3 pm.

Keksintö koskee myös menetelmää tällaisen varjoaineen valmistamiseksi. Menetelmälle on tunnusomaista, että kaavan (I) mukainen yhdiste saostetaan liuoksesta 10 veteen sekoittuvassa liuottimessa lisäämällä vettä sekoittaen voimakkaasti hiukkaskoon aikaansaamiseksi, joka on 0,01 - 3 pm, minkä jälkeen seostetut hiukkaset suspendoi-daan ruiskeeseen soveltuvaan nesteeseen.

Vaihtoehtoisesti varjoaine voidaan valmistaa mene-15 telmällä, jolle on tunnusomaista, että i) kaavan I mukainen kiinteä yhdiste murskataan mekaanisesti hiukkaskoon aikaansaamiseksi, joka on 0,01 -3 pm, ja ii) muodostunut hiukkasmainen yhdiste suspendoidaan 20 ruiskeeseen soveltuvaan nesteeseen.

Kun kaavassa I ryhmä R3 ei ole yhdistynyt R2:een, aineenvaihduntatuotteet ovat R1C00H, R3C00H ja R2CH0. Kun R3 ja R2 muodostavat yhdessä alkyleeniryhmän, tuotteet ovat R1C00H ja HOOC(R3*R2)CHO.

25 R2 on sopivasti vety tai valinnaisesti substituoitu

Ci.g-alifaattinen ryhmä, C6_10-aryyliryhmä tai C7_20-aralifaat-tinen ryhmä.

Alifaattiset ryhmät voivat olla suoraketjuisia tai haarautuneita, tyydytettyjä tai tyydyttämättömiä, ja ovat 30 esimerkiksi alkyyli- ja alkenyyliryhmiä, esim. metyyli-, * etyyli-, isopropyyli-, butyyli- tai allyyliryhmä. Arali-faattiset ryhmät käsittävät monokarbosyklisiä aryylialkyy-liryhmiä; esimerkiksi bentsyyliryhmiä. Aryyliryhmät käsittävät mono- tai bisyklisiä aryyliryhmiä, esimerkiksi fe-35 nyyli-, tolyyli- tai naftyyliryhmän. Heterosykliset ryhmät 94095 4 käsittävät 5- tai 6-jäsenisiä heterosyklisiä ryhmiä, joissa on mieluimmin yksi heteroatomi, esimerkiksi furyyli-, tienyyli- tai pyridyyliryhmän.

Mahdollisia substituentteja yllä olevissa hiilive-5 tyryhmissä R1, R2 ja R3 ovat hydroksyyli-, eetteröity hyd-roksyyli-, esteröity hydroksyyli-, eetteröity tioli-, N-alkyyliamino-, N-C^-asyyliamino-, N-C^g-asyyli-N-C^g-alkyy li amino-, karbamoyyli- ja N-C^g-alkyylikarbamoyyliryh-mä ja halogeeniatomit. Huomattakoon, että sellaisiin aro-10 maattisiin renkaisiin kuin fenyyli voi kuulua C^g-alkyyli-ryhmiä, kuten tolyyliryhmässä. Substituentit voivat olla läsnä yhdistelmänä, ja siten esimerkiksi N-asyyli- ja N-alkyyliryhmissä voi olla hydroksi- tai eetteröityjä tai esteröityjä hydroksyyliryhmiä.

15 Eetteröityjä hydroksyyliryhmiä ovat C1.5-alkoksiryh- mät, kuten esimerkiksi metoksiryhmät. Esteröityjä hydroksyyliryhmiä ovat Ci.g-asyloksiryhmät, kuten esimerkiksi asetoksiryhmät.

Halogeeniatomeihin kuuluvat fluori, kloori, bromi 20 ja jodi. Missä tahansa erityisessä ryhmässä voi olla läsnä useampia kuin yksi halogeeniatomi, kuten trifluorimetyyli-ryhmässä. Erityisen hyvänä pidettyä on, että molekyyli kokonaisuudessaan sisältää useita jodiatomeja, esimerkiksi vähintään kolme.

2q Erityisen hyvänä pidettyä on, että vähintään toinen ryhmistä R1 ja R3 on jodattu fenyyliryhmä, mieluimmin tri-jodifenyyliryhmä. Sellainen ryhmä voidaan valita siitä hyvin laajasta valikoimasta sellaisia ryhmiä, joka on läsnä kaupallisissa karboksyylihappo- tai amidi-röntgenvarjo-30 aineissa. Sellaisia ryhmiä ovat 2,4,6-trijodifenyyliryh-* mät, joissa on 3- ja/tai 5-asemissa ryhmiä, jotka on valittu karbamoyyli-, N-alkyylikarbamoyyli- tai N-hydroksi-alkyylikarbamoyyli-, asyyliamino-, N-alkyyliasyyliamino-ja asyyliaminometyyliryhmistä. Sellaisissa ryhmissä ovat 35 asyyliryhmät tavallisesti asetyyliryhmiä ja N-alkyyliasyy-liaminoryhmät ovat tavallisesti N-metyyliasetaminoryhmiä.

N-hydroksialkyylikarbamoyyliryhmät sisältävät tavallisesti 1,3- tai 2,3-dihydroksipropyyliryhmän hydroksialkyyli- osana.

5 94095

On tärkeää, että keksinnön mukainen varjoaine on 5 suurin piirtein veteen liukenematon, ja hiukkasmuodossa annettaessa sen sieppaa siten haltuunsa maksa tai perna. On mahdollista, että läsnä on suhteellisen hydrofiilisiä ryhmiä, kuten esimerkiksi hydroksyyli, edellyttäen että jäljellä oleva osa molekyylistä on riittävän lipofiilinen 10 takaamaan minimaalisen yleisen vesiliukoisuuden. Aineenvaihdunnallisen entsymaattisen pilkkoutumisen jälkeen on kuitenkin tärkeää, että aineenvaihduntatuotteet ovat riittävän vesiliukoisia fysiologisessa pH:ssa erittyäkseen kohde-elimistä. Niiden tulisi myös itse olla fysiologises-15 ti hyväksyttäviä.

On havaittu, että laskimoon annettaessa keksinnön mukaiset hiukkasmaiset yhdisteet näyttää sieppaavan maksan ja pernan retikuloendoteliaalinen systeemi, jolloin tuloksena oleva hiukkasten kerääntyminen auttaa suuresti näiden 20 elinten kuvaamista. Toisaalta maksan fagosytoosia suorittavat solut (Kupffer-solut) sisältävät lysosomeja, jotka omaavat laajan valikoiman hydrolyyttisiä entsyymejä, mukaan lukien muutamia esteraaseja. Kun hiukkaset on fago-sytoitu, ne joutuvat siten lysosomeihin ja muutetaan vesi-25 liukoisiksi tuotteiksi, jotka myöhemmin eritetään. Suh teellinen nopeus, jolla yhdisteet muuttuvat vesiliukoisiksi tuotteiksi, vähentää merkittävästi myrkyllisten reaktioiden vaaraa.

Liposomeihin verrattaessa keksinnön mukaisten kiin-30 teän varjoaineen hiukkasten jodipitoisuus on hyvin paljon suurempi. Halutun kontrastitason, jonka aikaansaa tietty jodimäärä, saavuttamiseksi tarvitsee siten käyttää paljon pienempi määrä ainetta, ja keuhkotulppien tuottamisen vaara vähenee suuresti. Lisäksi keksinnön mukainen hiukkasma-35 teriaali, joka on tavallisesti kiteistä, on yleensä paljon stabiilimpia säilytettäessä kuin aikaisemmin ehdotetut * liposomit.

6 94095

Keksinnön mukaiset varjoaineet aikaansaavat jodi-pitoisuutensa vuoksi röntgenkuvan erinomaisen vahvistumisen. Suhteellisen raskaiden jodiatomien läsnäolosta johtuen hiukkaset heijastavat ultraääntä, ja niitä voidaan 5 myös käyttää ultraäänikuvien tekemiseen intensiivisiksi.

Ruiskutettava neste voi olla mikä tahansa steriili fysiologisesti hyväksyttävä neste, kuten esimerkiksi fysiologinen suolaliuos, joka voi edullisesti sisältää fysiologisesti hyväksyttävää stabiloimisainetta, kuten esi-10 merkiksi polyvinyylipyrrolidonia, jonka molekyylipaino on esimerkiksi noin 30 000 daltöniä, tai polysorbaattia, esimerkiksi polysorbaatti 80:tä.

Varjoaineita voidaan käyttää ihmisen tai muun eläimen kuin ihmisen maksan ja/tai pernan röntgen- ja ultraää-15 nikuvien tekemiseen intensiivisiksi, jossa menetelmässä ne annetaan suonen sisään, yleensä laskimoon, ennen kuvaamista.

Kaavan I mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa millä tahansa sopivalla tavalla. Yleensä yhdisteet muodoste-20 taan esteröimällä kaavan R1C00H mukainen happo tai sen funktionaalinen johdannainen kaavan X-CHR2·0·COR3 mukaisen yhdisteen avulla, jossa kaavassa X on hydroksyyliryhmä tai sellainen poistuva ryhmä kuin halogeeniatomi tai mesylok-si- tai tosyloksiryhmä. Kun X edustaa poistuvaa ryhmää, 25 kaavan R^OOH mukaisen hapon funktionaalinen johdannainen on yleensä sellainen suola kuin kaliumsuola. Sellainen reaktio suoritetaan yleensä liuoksessa, esimerkiksi sellaisessa polaarisessa liuottimessa kuin dimetyyliformami-di. Esteröinti voidaan myös suorittaa antamalla yhdisteen 30 XCHR2·0·COR3, jossa X on OH, reagoida hapon R^OOH kanssa sellaisen kytkentäaineen kuin di-imidi, esim. disyklohek-syylikarbodi-imidi, läsnä ollessa tai happohalogenidin R1C0Hal kanssa, jossa Hai on sellainen halogeeniatomi kuin kloori.

35 Kun kahden ryhmän R1 ja R3 on tarkoitus olla samoja, esteröinti voidaan suorittaa antamalla kaavan R2CHX2, jossa 94095 7 X on poistuva ryhmä, mukaisen yhdisteen reagoida hapon R1COOH sellaisen funktionaalisen johdannaisen kuin suola kanssa.

Keksinnön mukaisen varjoaineen hiukkasmuoto voidaan 5 edullisesti valmistaa seostamalla liuoksesta veteen sekoittuvassa liuottimessa, kuten esimerkiksi etanolissa, lisäämällä vettä, joka voi sopivasti sisältää sellaista stabiloimisainetta kuin polyvinyylipyrrolidoni, sekoittaen voimakkaasti, esim. käyttäen ultraääntä. Tällä tavoin on 10 mahdollista saada hiukkasia, joiden keskimääräinen läpimitta on suuruusluokkaa 1,0 mikronia. Mekaaninen rouhinta, esimerkiksi sopivaan hiukkaskokoon, on myös sopivaa. Hiukkaset voidaan sitten suspendoida ruisketta varten tarkoitettuun nesteeseen, johon yllä viitattiin.

15 Seuraavat esimerkit on tarkoitettu ainoastaan va laiseviksi:

Yleinen menetelmä alfa-kloorialkyyliestereiden syn-tetisoimiseksi alfa-(aryylitio)-alkyyliestereistä

Kuivassa dikloor imet äänissä olevaa sulfuryyliklori-20 dia (2 M) lisätään tipoittain 0 °C:ssa liuokseen, jossa on alfa-(aryylitio)-alkyyliesteriä (1,0 ekviv.) kuivassa di-kloorimetaanissa (0,5 M). Seosta sekoitetaan ympäristön lämpötilassa ennen kuin lisätään syklohekseeniä (1,0 ekviv.) kuivassa dikloorimetaanissa (2 M) tipoittain 25 0 °C:ssa. Sekoittamista jatketaan 1 tunnin ajan ympäristön lämpötilassa ennen kuin liuotin poistetaan ja jäännös tislataan tyhjössä.

Välituote 1 l-(fenyylitio)-etyylipivalaatti 30 1-kloorietyylifenyylisulfidia (11,0 g, 61,9 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (110 ml) 0 eC:ssa, lisätään liuokseen, jossa on pivalihappoa (5,75 g, 56,3 mmoolia) ja kalium-t-butoksidia (6,32 g, 56,3 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (110 ml). Seosta sekoitetaan ympäristön 35 lämpötilassa 24 tunnin ajan ennen kuin lisätään vettä ja 94095 8 tuote uutetaan dietyylieetteriin. Eetteriliuosta pestään 1 M natriumhydroksidilla ja neljä kertaa suolavedellä ennen kuin se kuivataan (MgS04) ja haihdutetaan. Tislaamalla saatiin 8,47 g (63 %), k.p. 80 eC (0,06 mm Hg). 1H-NMR 5 (DMS0-d6); delta = 1,10 (s, (CH3)3); 1,46 (d, J * 7 Hz, CH3); 6,20 (q, 3=7 Hz, CH); 7,3 - 7,5 miljoonasosaa (m, 5H).

Välituote 2 1-kloorietyylipivalaatti 10 Otsakkeen yhdiste valmistetaan välituotteesta 1 käyttäen yllä yksityiskohtaisesti esitettyä yleistä menetelmää. Määrä: S02C12 (23,1 mmoolia, 1,1 ekviv.). Reaktioaika: 2 tuntia. Saanto: 49 %. K.p. 40 °C (10 mm Hg).

1H-NMR (DMS0-d6): delta = 1,16 (s, (CH3)3; 1,74 (d, J = 6 15 Hz, CH3); 6,55 miljoonasosaa (q, J = 6 Hz, CH).

Välituote 3 (Fenyylitio)-metyylifenyyliasetaatti

Cesiumkarbonaattia (12,9 g, 39,6 mmoolia) lisätään liuokseen, jossa on fenyylietikkahappoa (5,40 g, 39,6 20 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (60 ml). Seosta sekoitetaan 60 °C:ssa 15 minuutin ajan ja se jäähdytetään 0 °C:seen ennen kuin lisätään kloorimetyylifenyylisulfidia (5,76 g, 36 mmoolia) tipoittain. Sekoittamista jatketaan 0 °C:ssa 30 minuutin ajan, sitten ympäristön lämpötilassa 3,5 tun-25 nin ajan ja lopuksi 70 °C:ssa 30 minuutin ajan ennen kuin lisätään vettä ja tuote uutetaan dietyylieetteriin. Eetteriliuosta pestään 1 M natriumhydroksidilla ja 4 kertaa suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja haihdutetaan. Raaka tuote käytetään vaiheessa välituote 4 ilman lisäpuhdistusta.

30 Saanto: 8,10 g (87 %). 1H-NMR (CDC13): delta = 3,65 (s, CH2S); 5,39 (s, CH2); 7,2 - 7,4 miiljoonasosaa (m, 5H).

94095 9 Välituote 4

Kloorimetyylifenyyliasetaatti

Otsakkeen yhdiste valmistetaan välituotteesta 3 käyttäen yllä yksityiskohtaisesti esitettyä yleistä mene-5 telmää.

Määrä: S02C12 (19,0 mmoolia, 1,3 ekviv.). Reaktioaika 2,5 tuntia. Saanto (kokonaissaanto kummastakin vaiheesta): 1,46 g (50 %), k.p. 68 - 72 eC (0,001 mm Hg).

1H-NMR (CDC13): delta - 3,69 (s, CH2); 5,68 (s, CH2C1); 10 7,2-7,4 miljoonasosaa (m, 5H).

Välituote 5 (Fenyylitio)-metyyli-2-tiofeenikarboksylaatti

Cesiumkarbonaattia (8,14 g, 25,0 mmoolia) lisätään liuokseen, jossa on fenyylietikkahappoa (3,20 g, 25,0 15 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (40 ml). Seosta sekoitetaan 60 °C:ssa 25 minuutin ajan ja se jäähdytetään 0 eC:seen ennen kuin lisätään kloorimetyylifenyylisulfidia (3,60 g, 22,7 mmoolia) tipoittain. Sekoittamista jatketaan 0 °C:ssa 30 minuutin ajan, sitten ympäristön lämpötilassa 2 tunnin 20 ajan ja lopuksi 70 °C:ssa 15 minuutin ajan ennen kuin lisätään vettä ja tuote uutetaan dietyylieetteriin. Eetteri-liuosta pestään 1 M natriumhydroksidilla ja 4 kertaa suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja haihdutetaan. Raaka tuote käytetään vaiheessa välituote 6 ilman lisäpuhdistusta. 25 Saanto: 4,76 g (80 %). 1H-NMR (CDC13): delta = 5,59 (s, CH2); 7,0 - 7,9 miljoonasosaa (m, 8H).

Välituote 6

Kloorimetyyli-2-tiofeenikarboksylalatti

Otsakkeen yhdiste valmistetaan välituotteesta 5 30 käyttäen yllä yksityiskohtaisesti esitettyä yleistä menetelmää .

Määrä: S02C12 (18,6 mmoolia, 1,2 ekviv.). Reaktioaika 1 tunti. Saanto: 83 %. K.p. 67 - 69 °C (0,12 mbaria). 1H-NMR (CDCI3): delta = 5,90 (s, CH2); 7,0 - 8,0 miljoonas-35 osaa (m, 3H).

94095 10 Välituote 7 (Fenyylitio) -metyyli-4-metoksi-3-metyylibentsoaatti

Cesiumkarbonaattia (13,00 g, 40,0 mmoolia) lisätään liuokseen, jossa on 4-metoksi-3-metyylibentsoehappoa 5 (6,65 g, 40,0 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (50 ml) ympäristön lämpötilassa. Seosta sekoitetaan 65 °C:ssa 20 minuutin ajan ja se jäähdytetään 0 °C:seen ennen kuin lisätään tipoittain kloorimetyylifenyylisulfidia (5,76 g, 36 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (10 ml). Sekoittamista 10 jatketaan 0 °C:ssa 30 minuutin ajan, sitten ympäristön lämpötilassa 2 tunnin ajan ja lopuksi 70 °C:ssa 1 tunnin ajan ennen kuin lisätään vettä ja tuote uutetaan dietyyli-eetteriin. Eetteriliuosta pestään 1 M natriumhydroksidilla ja 4 kertaa suolavedellä, kuivataan (MgS04) ja haihdute-15 taan. Raaka tuote käytetään vaiheessa välituote 8 ilman lisäpuhdistusta. Saanto: 9,60 g (83 %). 1H-NMR (CDC13): delta = 2,25 (s, CH3); 3,85 (s, 0CH3); 5,63 (s, CH2); 7,1 - 7,6 miljoonasosaa (m, 8H).

Välituote 8 2 0 Kloorimetyy1i-4-metoksi-3-metyy1ibentsoaatti

Otsakkeen yhdiste valmistetaan välituotteesta 7 käyttäen yllä yksityiskohtaisesti esitettyä yleistä menetelmää .

Määrä: S02C12 (30,0 mmoolia, 1,2 ekviv.). Reaktioai-25 ka: 1,5 tuntia. Saanto: 90 %. K.p. 100 - 102 eC/10 mm Hg. 1H-NMR (CDC13); delta = 2,26 (s, CH3); 3,87 (s, 0CH3); 5,94 (s, CH2); 7,1 - 7,6 miljoonasosaa (m, 3H).

Välituote 9 l-kloori-2-fenyylietyyliasetaatti 30 Valmistetaan noudattaen menetelmää, joka on annettu julkaisussa Neuenschwander, Markus et ai., Helv. Chim. Acta, 61 (1978) 2047. Raaka tuote käytetään esimerkissä 12 ilman lisäpuhdistusta. Saanto: 81 %. 1H-NMR (CDC13): delta = 1,98 (s, CH3); 3,25 (m, CH2); 6,52 (m, CH); 7,1 -35 7,3 miljoonasosaa (m, 5H).

11 y4U95

Esimerkki 1

Pivaloyloksimetyyli-5- (N-asetyyliamino )-3-( N-ase-tyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trijodibentseenikarboksylaatti

Kloorimetyylipivalaattia (12,0 ml, 82,6 mmoolia), 5 joka on kuivassa DMF:ssa (130 ml), lisätään tipoittain 20 minuutin aikana 50 °C:ssa liuokseen, jossa on kalium-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trij o-dibentseenikarboksylaattia (50,0 g, 75,0 mmoolia) ja nat-riumjodidia (600 mg, 4,0 mmoolia) kuivassa dimetyyliform-10 amidissa (DMF) (750 ml). Saostuma poistetaan suodattamalla sen jälkeen kun on sekoitettu 4 tunnin ajan ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin (400 ml) ja pestään neljä kertaa kyllästetyllä natriumvetykarjbonaattiliuoksella. Sen jälkeen kun on kui-15 vattu magnesiumsulfaatin avulla, liuotin poistetaan alennetussa paineessa ja jäännös uudelleenkiteytetään asetonista, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: 26,6 g (53 %); s.p. 232 - 234 eC. 1H-NMR (CDC13): delta = 1,26 (s, C(CH3)3); 1,82 (s, N(CH3)COCH3; 2,22 (s, NC0CH3); 3,08 (s, 20 NCH3); 6,02 (s, CH2); 8,15 miljoonasosaa (s, NH).

Esimerkki 2

Di- [ 5- (N-asetyyliamino) -3- (N-asetyyli-N-metyyliamino )-2,4, 6-trijodifenyylikarbonyloksi]metaani

Dijodimetaania (300 μΐ, 3,8 mmoolia) lisätään ti-25 poittain 5 minuutin aikana 60 °C:ssa liuokseen, jossa on kalium-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)- 2,4,6-trijodibentseenikarboksylaattia (5,0 g, 7,5 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (75 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 4 päivän ajan, saostuma poistetaan suodattamalla ja liuotin 30 poistetaan alennetussa paineessa. Jäännöstä hierretään lämpimän dioksaanin kanssa ja suodatetaan, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 3,35 g (67 %).

1H-NMR (DMSO-d6): delta = 1,70 (s, N(CH3)COCH3) ; 2,10 (s, NC0CH3); 3,00 (s, NCH3); 6,28 (s, CH2); 10,13 mil-35 joonasosaa (s, NH).

94095 12

Esimerkki 3 1-(pivaloylyloksi)etyyli-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4, 6-trijodibentseenikarboksy-laatti 5 1-kloorietyylipivalaattia (0,40 g, 3,3 mmoolia) (välituote 2), joka on kuivassa DMF:ssa (6 ml), lisätään tipoittain 50 eC:ssa liuokseen, jossa on kalium-5-(N-asetyyliamino ) -3- (N-asetyyli-N-metyyliamion)-2,4,6-trij odi-bentseenikarboksylaattia (2,00 g, 3,0 mmoolia) ja natrium-10 jodidia (24 mg, 0,16 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (30 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 20 tunnin ajan, saostuma poistetaan suodattamalla ja liuotin poistetaan alennetussa paipneessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin (40 ml) ja pestään neljä kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-15 liuoksella. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesiumsulfaatin avulla, liuotin poistetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 1,85 g (81 %). Puhtaus HPLC:n mukaan: 97 %. Uudelleenkiteyttämällä asetonista saadaan puhtaudeksi 98 % (HPLC). 1H-NMR (DMSO-d6): 20 delta = 1,19 (s, (CH3)3; 1,59 (d, J = 6 Hz, CH3); 1,66 (s, N(CH3 )C0CH3); 2,04 (s, NCOCH3); 2,96 (s, NCH3); 7,06 miljoonasosaa (m, CH).

Esimerkki 4 1-( asetyloksi )-etyyli-5-( N-asetyyliamino )-3-( N-ase-25 tyyli-N-metyyliamino )-2,4,6-trijodibentseenikarboksylaatti 1-kloorietyyliasetaattia (Neuenschwander, Markus et ai., Helv. Chim. Acta, 61 (1978) 2047) (4,38 g, 35,7 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (50 ml), lisätään tipoittain 50 °C:ssa liuokseen, jossa on kalium-5-(N-asetyy-30 liamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trij odibent- seenikarboksylaattia (21,64 g, 32,5 mmoolia) ja natriumjo-didia (0,26 g, 1,75 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (320 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 20 tunnin ajan, saostuma poistetaan suodattamalla ja liuotin poistetaan alennetussa 35 paineessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin (300 ml) ja 94095 13 pestään neljä kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-liuoksella. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesiumsulfaatin avulla, liuosta käsitellään aktiivihiilellä ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsak-5 keen yhdiste: saanto 20,61 g (89 %). Puhtaus HPLC:n mukaan: 99 %. 1H-NMR (DMS0-d6): delta - 1,60 (d, J = 6 Hz, CH3); 1,66 (s, N(CH3)COCH3); 2,04 (s, NC0CH3); 2,11 (s, 0C0CH3); 2,96 (s, NCH3); 7,08 (q, J - 6 Hz, CH); 10,11 mil-j oonasosaa (s, NH).

10 Esimerkki 5

Pivaloyloksimetyyli- 5- (N-asetyyliamino) -3- (metyyli-aminokarbonyyli)-2,4,6-trij odibentseenikarboksylaatti

Kloorimetyylipivalaattia (7,62 g, 50,6 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (84 ml), lisätään tipoittain 15 50 °C:ssa liuokseen, jossa on kalium-5-(N-asetyyliamino)- 3-(metyyliaminokarbonyyli)-2,4, 6-trijodibentseenikarboksy-laattia (30,00 g, 46,0 mmoolia) ja natriumjodidia (0,37 g, 2.5 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (450 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 4 tunnin ajan, saostuma poistetaan suodattamal- 20 la ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa. Jäännöstä hierretään ja pestään toistuvasti vedessä ja se uudelleen-kiteytetään lopuksi isopropanolista. Saanto: 32,30 g (96 %). Puhtaus HPLC:n mukaan: 98 %. 1H-NMR (DMSO-d6): delta = 1,20 (s, (CH3)3; 2,02 (s, CH3CO); 2,73 miljoonasosaa 25 (d, J = 5 Hz, NCH3); 5,95 (s, CH2); 8,4 - 8,7 (m, NHCH3); 10,00 (S, NH).

Esimerkki 6 (2-tienyylikarbonyloksi)-metyyli-5-(N-asetyyliamino ) -3- ( N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trij odibentseeni-30 karboksylaatti

Kloorimetyyli-2-tiofeenikarboksylaattia (0,63 g, 3.6 mmoolia) (välituote 6), joka on kuivassa DMF:ssa (70 ml), lisätään tipoittain 50 °C:ssa liuokseen, jossa on cesium-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino) - 35 2,4,6-trijodibentseenikarboksylaattia (3,00 g, 3,9 94095 14 nunoolia) ja natriumjodidia (28 mg, 0,19 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (45 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 4 tunnin ajan, saostuma poistetaan suodattamalla ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan klorofor-5 mlin (50 ml) ja pestään neljä kertaa kyllästetyllä nat-riumvetykarbonaattlliuoksella. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesiumsulfaatin avulla, poistetaan liuotin alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 2,46 g (89 %). Puhtaus HPLC:n mukaan 97 %. 1H-NMR 10 (DMS0-d6): delta « 1,66 (s, N(CH3)COCH3); 2,04 (s, NC0CH3); 2,96 (s, NCH3); 6,18 (s, CH2); 7,2 - 8,1 (m, 3H); 10,11 miljoonasosaa (s, NH).

Esimerkki 7

Fenyyliasetyloksimetyyli-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-15 asetyyli-N-metyyliamino)-2,4, 6-tri jodibentseenikarboksy- laatti

Kloorimetyylifenyyliasetaattia (1,02 g, 5,5 mmoolia) (välituote 4), joka on kuivassa DMF:ssa (50 ml), lisätään tipoittain 50 °C:ssa liuokseen, jossa on cesium-20 5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4, 6- trijodibentseenikarboksylaattia (3,80 g, 5,0 mmoolia) ja natriumjodidia (37 mg, 0,25 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (70 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 4 tunnin ajan, poistetaan saostuma suodattamalla ja liuotin poistetaan alen-25 netussa paineessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin (50 ml) ja pestään neljä kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbo-naattiliuoksella. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesium-sulfaatin avulla, poistetaan liuotin alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 2,50 g 30 (64 %). Puhtaus HPLC:n mukaan: 97 %. 1H-NMR (CDC13): delta = 1,78 (s, N(CH3)C0CH3); 2,21 (s, NC0CH3); 3,05 (s, NCH3); 3,72 (s, CH2); 6,01 (s, 0CH2); 7,30 (s, C6H5); 7,79 miljoonasosaa (s, NH).

94095 15

Esimerkki 8 4-metoksi-3-metyylibentsoyloksimetyyli-5-(N-asetyy-11amino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4, 6-trijodibent-seenikarboksylaatti 5 Kloorimetyyli-4-metoksi-3-metyylibentsoaattia (välituote 8) (2,38 g, 11,0 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (100 ml), lisätään tipoittain 50 °C:ssa liuokseen, jossa on kalium-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyy-liamino)-2,4,6-trijodibentseenikarboksylaattia (6,70 g, 10 10,0 mmoolia) ja natriumjodidia (75 mg, 0,50 mmoolia) kui vassa DMF:ssa (140 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 4,5 tunnin ajan ja 16 tunnin ajan huoneen lämpötilassa, poistetaan saostuma suodattamalla ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin 15 (100 ml) ja pestään neljä kertaa kyllästetyllä natriumve- tykarbonaattiliuoksella. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesiumsulfaatin avulla, poistetaan liuotin alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 7,00 g (87 %). Puhtaus HPLCrn mukaan: 93 %. 1H-NMR (CDC13); 20 delta = 1,77 (s, N(CH3)C0CH3); 2,20 (s, NC0CH3); 2,26 (s, CH3); 3,05 (S, NCH3); 3,87 (s 0CH3); 6,25 (s, 0CH2); 7,1 - 7,7 (m, 3H).

Esimerkki 9

Pivaloyloksimetyyli-3- (alfa- (3- (N-ase t yyli-N-metyy-25 liamino)-5-(metyyliaminokarbonyyli )-2,4,6-trijodibentsoyy- liamino)-(N-asetyyliamino))-5-(N-(2-hydroksietyyli)amino-karbonyyli)-2,4,6-trijodibentseenikarboksylaatti

Kloorimetyylipivalaattia (0,83 g, 5,5 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (50 ml), lisätään tipoittain 30 50 °C:ssa liuokseen, jossa on cesium-3-(alfa-(3-(N-asetyy- li-N-metyyliamino)-5-(metyyliaminokarbonyyli )-2,4,6-trijo-dibentsoyyliamino) (N-asetyyliamino)) -5- (N- (2-hydroksietyyli ) -aminokarbonyyli )-2,4,6-trijodibentseenikarboksy-laattia (7,00 g, 5,0 mmoolia) ja natriumjodidia (37 mg, 35 0,25 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (70 ml). Liuotin poistetaan 94095 16 alennetussa paineessa sen jälkeen kun on sekoitettu 7 tunnin ajan. Jäännöstä hierretään, pestään ja suodatetaan toistuvasti, ensin CHCl3:n ja lopuksi H20:n kanssa. Saanto: 5,70 g (82 %). Puhtaus HPLC:n mukaan: 95 %.

5 Anal. C30H31I6N5O6: Laskettuna C 26,05 %; H 2,26 %, I 55,06 %. Saatu C 25,98 %? H 2,20 %; I 54,90 %. Sekä 1H-että 13C-NMR ovat samanlaisia otsakkeen yhdisteellä ja lähtöaineella (vapaana karboksyylihappona) lukuunottamatta itse karboksyyliryhmää, joka on otsakkeen yhdisteessä es-10 teröity. Otsakkeen yhdisteen pivaloyloksimetyyliryhmän 1H-NMR (DMS0-d6) on: delta = 1,18 (s, (CH3)3 ja 5,93 miljoonasosaa (s, CH2). CH2-ryhmän kemiallinen siirtymä on esimerkin 1 mukainen (delta = 5,97 miljoonasosaa DMS0-d6:ssa) eikä kloorimetyylipivalaatin, joka on lähtö-15 aine, mukainen (delta = 5,84 miljoonasosaa).

Esimerkki 10

Asetyloksimetyyli-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyy-li-N-metyyliamino)-2,4,6-trijodibentseenikarboksylaatti

Kloorimetyyliasetaattia (Neuenschwander, Markus et 20 ai., Helv. Chmi. Acta 61 (1978) 2047) (2,30 g, 21,2 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (100 ml), lisätään ti-poittain 50 °C:ssa liuokseen, jossa on cesium-5-(N-asetyyliamino )-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trij odibent-seenikarboksylaattia (13,4 g, 17,7 mmoolia) ja natriumjo-25 didia (133 mg, 0,89 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (210 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 21 tunnin ajan, saostuma poistetaan suodattamalla ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin (200 ml) ja pestään neljä kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-30 liuoksella. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesiumsulfaatin avulla, poistetaan liuotin alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 2,50 g (64 %).

Anal. C15H15I3N206: laskettuna C 25,74 %, H 2,16 %, N 4,00 %. Saatu C 25,63 %, H 2,19 %, N 4,19 %. 1H-NMR 35 (DMS0-d6): delta = 1,67 (s, N(CH3)COCH3); 2,05 (s, NC0CH3); 94095 17 2,14 (s, OCOCH3); 2,98 (s, NCH3); 5,94 (s, CH2); 9,93 miljoonasosaa (s, NH).

Esimerkki 11

Asetyloksifenyylimetyyli-5-(N-asetyyliamino)-3-(N-5 asetyyli-N-metyyliamino-2,4,6-trijodibentseenikarboksy- laatti

Kloorimetyylifenyyliasetaattia (Neuenschwander,

Markus et ai., Helv. Chim. Acta, 61 (1978) 2047) (1,59 g, 8,6 mmoolia), joka on kuivassa DMF:ssa (20 ml), lisätään 10 tipoittain 50 eC:ssa liuokseen, jossa on cesium-5-(N-ase-tyyliamino )-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino )-2,4,6-trijodi-bentseenikarboksylaattia (7,28 g, 9,6 mmoolia) ja natrium-jodidia (64 mg, 0,42 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (100 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 20 tunnin ajan, saostuma 15 poistetaan suodattamalla ja liuotin poistetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin (200 ml) ja pestään kaksi kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbonaatti-liuoksella ja kaksi kertaa vedellä. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesiumsulfaatin avulla, poistetaan liuotin 20 alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 4,80 g (72 %). 1H-NMR (CDC13). delta « 1,78 (s, N(CH3)COCH3); 2,20 (s, NC0CH3); 2,20 (s, OCOCH3); 3,04 (s, NCH3); 7,3 - 7,7 (m, 5H); 7,97 (s, CH); 8,39 miljoonasosaa (s, NH).

25 Esimerkki 12 l-asetyloksi-2-f enyylietyyli-5- (N-asetyyliamino) -3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trijodibentseenikarbok-sylaatti l-kloori-2-fenyylietyyliasetaattia (välituote 9) 30 (4,20 g, 21,1 mmoolia), joka on kuivassa DMFtssa (25 ml), lisätään tipoittain 50 °C:ssa liuokseen, jossa on kalium- 5- (N-asetyyliamino) -3- (N-asetyyli-N-metyyliamino )-2,4,6-trijodibentseenikarboksylaattia (15,5 g, 23,2 mmoolia) ja natriumjodidia (158 mg, 1,0 mmoolia) kuivassa DMF:ssa (300 35 ml). Sen jälkeen kun on sekoitettu 21 tunnin ajan, poiste-

IS

94095 taan saostuma suodattamalla ja liuotion poistetaan alennetussa paineessa. Jäännös liuotetaan kloroformiin (200 ml) ja pestään neljä kertaa kyllästetyllä natriumvetykarbo-naattllluoksella. Sen jälkeen kun on kuivattu magnesium-5 sulfaatin avulla, liuotin poistetaan alennetussa paineessa, jolloin saadaan otsakkeen yhdiste: saanto 6,70 g (40 %). 1H-NMR (CDC13); delta = 1,80 (s, N(CH3)C0CH3); 2,20 (s, NC0CH3); 3,05 (s, NCH3); 3,30 (m, CH2); 7,1 - 7,3 (m, 5H ja CH).

10 Hlukkasvalmlste 1

Polyvinyylipyrrolidonia (1,00 g, mol.p. 30 000 dal-tonia) liuotetaan tislattuun veteen (25,0 ml) ja suodatetaan sellaisen kalvosuodattimen lävitse, jonka huokoskoko on 0,22 mikrometriä. Suodatettu liuos, jossa on esimerkin 15 1 tuotetta (0,1 g) 96 % etanolissa (5,0 ml), lisätään hi taasti polyvinyylipyrrolidoniliuokseen sekoittaen voimakkaasti käyttäen ultraääniaaltoja.

Muodostuneet mikrohiukkaset sentrifugoidaan ja pestään toistuvasti. Hiukkasten kokoa ja kokojakaumaa voidaan 20 analysoida valo- ja elektronimikroskopian avulla. Keskimääräinen läpimitta on 1,0 mikrometriä, joka on myös pää-fraktion läpimitta.

Hlukkasvalmlste 2

Murskaamalla mekaanisesti esimerkin 1 tuote saadaan 25 hiukkasia, joiden keskimääräinen läpimitta on 8 mikro-metriä.

Hlukkasvalmlste 3

Polyvinyylipyrrolidonia (1,00 g, mol.p. 40 000 dal-tonia) liuotetaan tislattuun veteen (25,0 ml) ja suodate-30 taan sellaisen kalvosuodattimen lävitse jonka huokoskoko on 0,22 mikrometriä. Suodatettu liuos (0,22 mikrometriä), jossa on esimerkin 2 tuotetta (0,2 g) metanolissa (5,0 ml), lisätään hitaasti polyvinyylipyrrolidoniliuokseen sekoittaen voimakkaasti käyttäen ultraääniaaltoja. Muodos-35 tuneet mikrohiukkaset sentrifugoidaan ja pestään tois- 94095 19 tuvastl. Hiukkasten kokoa ja kokojakaumaa voidaan analysoida valo- ja elektronimikroskopian avulla. Keskimääräinen läpimitta on 0,2 mikrometriä, joka on myös pääfraktion läpimitta.

5 Hiukkasvalmiste 4

Polyvinyylipyrrolidonia (1,00 g, mol.p. 40 000 dal-tonia) liuotetaan tislattuun veteen (25,0 ml) ja suodatetaan sellaisen kalvosuodattimen lävitse, jonka huokoskoko on 0,22 mikrometriä. Suodatettu liuos (0,22 mikrometriä), 10 jossa esimerkin 3 tuotetta (0,1 g) 96 % etanolissa (5,0 ml), lisätään hitaasti polyvinyylipyrrolidoniliuokseen sekoittaen voimakkaasti käyttäen ultraääniaaltoj a. Muodostuneet mikrohiukkaset sentrifugoidaan ja pestään toistuvasti. Hiukkasten kokoa ja kokojakaumaa voidaan analysoida 15 valo- ja elektronimikroskopian avulla. Keskimääräinen läpimitta on 2,0 mikrometriä, joka on myös pääfraktion läpimitta.

Farmaseuttinen valmiste 1

Hiukkasvalmisteen 1 hiukkaset (1,0 g) dispergoidaan 20 steriiliksi suodatettuun isotooniseen 0,9 % natriumklori- di/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml) sekoittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaatu homogeeninen suspensio.

Farmaseuttinen valmiste 2 25. Hiukkasvalmisteen 1 hiukkaset (1,0 g) suspendoidaan steriiliksi suodatettuun 0,9 % natriumkloridi/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml), joka sisältää polyvinyylipyrrolidonia (4,0 g, mol.p. 40 000), sekoittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaatu homogeeninen suspen-30 sio.

Farmaseuttinen valmiste 3

Hiukkasvalmisteen 1 hiukkaset (1,0 g) suspendoidaan steriiliksi suodatettuun 0,9 % natriumkloridi/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml), joka sisältää poly-35 vinyylipyrrolidonia (4,0 g, mol.p. 40 000 daltöniä) ja on 20

94U9S

säädetty pH:hon 7,4 lisäämällä 0,1 N natriumhydroksidia, sekoittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaatu homogeeninen suspensio.

Farmaseuttinen valmiste 4 5 Hiukkasvalmisteen 3 hiukkaset (1,0 g) dispergoidaan steriiliksi suodatettuun isotooniseen 0,9 % natriumklori-di/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml) sekoittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaatu homogeeninen suspensio.

10 Farmaseuttinen valmiste 5

Hiukkasvalmisteen 3 hiukkaset (1,0 g) suspendoidaan steriiliksi suodatettuun 0,9 % natriumkloridi/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml), joka sisältää poly-vinyylipyrrolidonia (4,0 g, mol.p. 40 000 daltonia), se-15 koittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaatu homogeeninen suspensio.

Farmaseuttinen valmiste 6

Hiukkasvalmisteen 3 hiukkaset (1,0 g) suspendoidaan steriiliksi suodatettuun 0,9 % natriumkloridi/ruiskeeseen 20 tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml), joka sisältää poly-vinyylipyrrolidonia (4,0 g, mol.p. 40 000 daltonia) ja on säädetty pH:hon 7,4 lisäämällä 0,1 N natriumhydroksidia, sekoittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaantu homogeeninen suspensio.

25 Farmaseuttinen valmiste 7

Hiukkasvalmisteen 4 hiukkaset (1,0 g) dispergoidaan steriiliksi suodatettuun isotooniseen 0,9 % natriumkloridi/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml) sekoittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaatu homogeeninen 30 suspensio.

Farmaseuttinen valmiste 8

Hiukkasvalmisteen 4 hiukkaset (1,0 g) suspendoidaan steriiliksi suodatettuun 0,9 % natriumkloridi/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml), joka sisältää poly-35 vinyylipyrrolidonia (4,0 g, mol.p. 40 000 daltonia), se- 94095 21 koittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaatu homogeeninen suspensio.

Farmaseuttinen valmiste 9

Hiukkasvalmisteen 4 hiukkaset (1,0 g) suspendoidaan 5 steriiliksi suodatettuun 0,9 natriumkloridi/ruiskeeseen tarkoitettu vesi -liuokseen (100 ml), joka sisältää poly-vinyylipyrrolidonia (4,0 g, mol.p. 40 000 daltonia) ja on säädetty pH:hon 7,4 lisäämällä 0,1 N natriumhydroksidia, sekoittaen voimakkaasti, kunnes on aikaansaantu homogeeni-10 nen suspensio.

Biohajoitus in vitro

Jauhettua esimerkin 1 tuotetta suspendoidaan Seronormiin (5 mg/ml) (Seronorm on Nycomed AS:n tavaramerkki) pH:ssa 7,4 ja sekoitetaan 37 eC:ssa. Kontrolliksi 15 koe suoritetaan myös fosfaatilla puskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) pH:ssa 7,4. Eri ajankohtina otetaan näytteitä supernatantista pullon sentrifugoinnin jälkeen (4 000 kierrosta minuutissa, 10 minuuttia). Isopaguen (5-(N-ase-tyyliamino) -3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4, 6-trijodi-20 bentseenikarboksyylihappo) vapautumista analysoidaan HPLC:n avulla. Yli 50 % aineesta on hydrolysoitunut 6 tunnin aikana ja 24 tunnin kuluttua 90 % on hydrolysoitunut. PBS:ssa ei voitu todeta hydrolyysiä.

Jauhettua esimerkin 3 tuotetta suspendoidaan 25 Seronormiin (0,5 mg/ml) pH:ssa 7,4 ja sekoitetaan 37 °C:ssa. Kontrolliksi koe suoritetaan myös fosfaatilla puskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) pH:ssa 7,4. Eri ajankohtina otetaan näytteitä supernatantista sen jälkeen kun pullo on sentrifugoitu (4 000 kierrosta minuutissa, 10 30 minuuttia). Isopaquen (5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli- N-metyyliamino)-2,4,6-trijodibentseenikarboksyylihappo) vapautumista analysoidaan HPLC:n avulla. 4,1 % aineesta on hydrolysoitunut 24 tunnin kuluessa. PBS:ssa 0,12 % on hydrolysoitunut 72 tunnin aikana.

94095 22

Jauhettua esimerkin 10 tuotetta suspendoidaan Seronormiin (0,5 mg/ml) pH:ssa 7,4 ja sekoitetaan 37 eC:ssa. Kontrolliksi koe suoritetaan myös fosfaatilla puskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) pH:ssa 7,4. Eri ajan-5 kohtina otetaan näytteitä supernatantista sen jälkeen kun pullo on sentrifugoitu (4 000 kierrosta minuutissa, 10 minuuttia). (Isopaguen (5-(N-asetyyliamino)-3- (N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trijodibentseenikarboksyylihappo) vapautumista analysoidaan HPLC:n avulla. Aine on hydroly-10 soitunut täydellisesti 2 tunnin kuluttua Seronormissa. PBSrssa on 58 % hydrolysoitunut 72 tunnin aikana.

Jauhettua esimerkin 4 tuotetta suspendoidaan Seronormiin (0,5 mg/ml) pH:ssa 7,4 ja sekoitetaan 37 °C:ssa. Kontrolliksi koe suoritetaan myös fosfaatilla 15 puskuroidussa suolaliuoksessa (PBS) pH:ssa 7,4. Eri ajankohtina otetaan näytteitä supernatantista pullon sentrifu-goinnin jälkeen (4 000 kierrosta minuutissa 10 minuuttia). Isopaguen(5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliami-no)-2,4,6-trij odibentseenikarboksyylihappo) vapautumista 20 analysoidaan HPLCrn avulla. 29 % aineesta on hydrolysoitunut 2 tunnin inkubaation aikana ja hydrolyysi on tapahtunut täydellisesti 24 tunnin jälkeen Seronormissa. PBS:ssa on 34 % hydrolysoitunut 24 tunnin aikana.

Metabolia in vivo 25 Farmaseuttisen valmisteen 2 hiukkaset ruiskutetaan rottien häntälaskimoon. Annos on 200 mg/kg, ruiskutus-nopeus 1 ml/min ja konsentraatio 10 mg/ml. 30 minuutin kuluttua ruiskeen antamisen jälkeen noin 35 % annoksesta löydetään maksasta. Tämä otto antaa tulokseksi 0,9 mg I/g 30 maksaa. Jodipitoisuus vähenee sitten vähitellen 7 %:ksi 6 tunnin kuluttua. 24 tuntia ruiskeen jälkeen ei maksassa voida todeta jodia. Sapesta ja virtsasta otetaan näytteitä ensimmäisen 3 tunnin aikana ruiskeen jälkeen. Erittyminen näiden reittien kautta on vastaavasti 49 ja 16 % ruis-35 kutetusta annoksesta. Kaikki jodi erittyy Isopaguena 94095 23 (5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trijodibentseenikarboksyylihappo). 24 tunnin pituisen ajan kuluessa kaikki jodi erittyy virtsan tai ulosteiden kautta yhtä suurina määrinä (noin 50 % kumpikin).

5 Farmaseuttisen valmisteen 8 hiukkaset ruiskutetaan rottien häntälaskimoon. Annos on 200 mg/kg, ruiskutusno-peus 1 ml/min ja konsentraatio 10 mg/ml. 30 minuuttia ruiskeen antamisen jälkeen yli 80 % annoksesta löytyy maksasta. Tämä otto tuottaa tulokseksi 1,8 mg I/g maksaa. 10 Jodipitoisuus vähenee sitten vähitellen 1-2 %:ksi 72 tunnin kuluttua. Yksi viikko ruiskeen jälkeen ei jodia voida todeta maksassa. Sapesta ja virtsasta otetaan näytteitä ensimmäisen 3 tunnin aikana ruiskeen jälkeen. Erittyminen näiden reittien kautta on vastaavasti 9,5 ja 42 % 15 ruiskutetusta annoksesta. Kaikki jodi erittyy Isopaquena (5-(N-asetyyliamino)-3-(N-asetyyli-N-metyyliamino)-2,4,6-trijodibentseenikarboksyylihappo). 7 päivän aikana kaikki jodi erittyy virtsan tai ulosteiden kautta yhtä suurina määrinä (noin 50 % kumpikin).

Claims

94095

1 I 3 R CO.O.CH.O.COR (I) jossa R1 ja R3, jotka voivat olla samoja tai erilaisia, 10 tarkoittavat substituoitua tai substituoimatonta C^Q-ali- faattista, C7_20-aralifaattista tai C6_20-aryyliryhmää tai CLjo-heterosyklinen ryhmä, jossa on yksi tai useampia hete-roatomeja, jotka on valittu joukosta O, S ja N; ja R2 on vety tai substituoitu tai substituoimaton ali-15 faattinen, aryyli- tai aralifaattinen ryhmä, tai R2 ja R3 muodostavat yhdessä substituoidun tai sub-stituoimattoman C1.4-alkyleeniryhmän, jolloin molekyyli sisältää vähintään yhden jodiato-min ja on metaboluituvissa tuotteiksi, jotka liukenevat 20 kehon nesteisiin, ja jolloin esteri on hiukkasmuodossa suspensiossa ruiskeeseen soveltuvassa nesteessä, ja sen keskimääräinen hiukkaskoko on 0,01 - 3 pm.

1. Ruiskutettava varjoaine, tunnettu siitä, että se sisältää veteen liukenematonta jodattua este- 5 riä, jonka kaava on B2

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen aine, t u n -25 n e t t u siitä, että kaavan I mukaisessa yhdisteessä R1 ja/tai R3 on jodattu fenyyliryhmä.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen aine, tunnettu siitä, että R1 ja/tai R3 on trijodifenyyliryhmä.

4. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen aineen 30 valmistamiseksi, tunnettu siitä, että kaavan (I) : mukainen yhdiste saostetaan liuoksesta veteen sekoittu vassa liuottimessa lisäämällä vettä sekoittaen voimakkaasti hiukkaskoon aikaansaamiseksi, joka on 0,01 - 3 pm, minkä jälkeen seostetut hiukkaset suspendoidaan ruiskeeseen 35 soveltuvaan nesteeseen. 94095

5. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen aineen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että i) kaavan I mukainen kiinteä yhdiste murskataan mekaanisesti hiukkaskoon aikaansaamiseksi, joka on 0,01 - 5. pm, ja ii) muodostunut hiukkasmainen yhdiste suspendoidaan ruiskeeseen soveltuvaan nesteeseen. » ψ 94095