FI93357C - 8-hydroksi-1-amino-4-okso-1,4-dihydro-3-kinoliinijohdannaisia - Google Patents

Description

93357 8-hydroks±-l-amino-4-okso-l, 4-d±hydro-3-kinoli±ni johdannaisia

Jakamalla erotettu FI-patenttihakemuksesta 87 3940 5

Keksintö koskee uusia 8-hydroksi-l-amino-4-okso- 1,4-dihydro-3-kinoliinijohdannaisia, joilla on kaava

O

10 v ^ I

F C00H

<V> OH NHR2 15 jossa R1 on imidatsoli- tai 4-metyyli-l-piperatsiinirengas Ja R2 on alempi alkyyliradikaali.

Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia välltuoteyhdisteinä valmistettaessa terapeuttisesti aktii-20 visia pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiinijohdannaisia, erityisesti 10-substituoitu-9-fluori-7-okso-2,3-di-hydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-kar-boksyylihappojohdannaisia, joilla on kaava .25 0 p cooh R1 (I) 30 0^ yNv ,

^ R

• · · · c e >.

• i ‘

• < C

jossa R1 ja R2 ovat edellä määriteltyjä sekä niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja ja kaavan I mukaisten 35 yhdisteiden tai niiden suolojen hydraatteja ja solvaatte- 2 93357

Ja, Jotka ovat käyttökelpoisia tehoaineina antibakteeri-sissa aineissa.

Termi "alempi" tarkoittaa hiiliketjua, Joka edullisesti sisältää enintään 7 hiiliatomia.

5 Alempi alkyyliradikaali sisältää edullisesti 1-4 hiiliatomia Ja on erityisesti metyyli, etyyli, n-propyli, isopropyyll, n-butyyli tai vastaava.

Uusia 10-substituoitu-9-fluori-7-okso-2,3-dihydro-pyrido[3,2,1-ij ]-l,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyyli-10 happojohdannaisia, Jotka ovat kaavan I mukaisia, sekä niiden farmaseuttisesti sopivia suoloja Ja hydraatteja tai solvaatteja Ja näiden suoloja voidaan valmistaa saattamalla edellä mainittu kaavan V mukainen yhdiste reagoimaan formaldehydin tai sen polymeerin tai asetaalin kanssa.

15 Kaavan V mukainen välituoteyhdiste voidaan valmis taa esimerkiksi seuraavan reaktiokaavion a) tai b) mukaisesti.

c · V ·. · • · m 3 93357 a) pelkistys HgCgOCH-C(COOCgHg)^ χ.Λγ^Νθ2 χ.Α^Λ.^

OH OH

(A) (B) h5c2ooc cooc2h5

Ny/ Δ 5 h.c2ooc cooc2h5 L· H U ΟΗ-suojaus F il , -** I II I] syklisomti T H X· ' * OH ] h (C) 0R’ (D)

OH

COOC2H5 O

1 T ] . . . P v^Ok/C00C2H5 aminointi ^ jj jj N-suo jaus ^ OR*

0R' NH

(E) NH2 (F)

O

F ^^JL^COOC2H5 ,? TT 11 ii-i . 3.· F Jl . C00CoHc I || Il alkylomti 2 5 -* I l| l[ suojauksen I | X*^<V^N^ -,P-oisto > 0R' NHR" » |

OR* N-R

(G) (H) R" *!Γ1^ 1 aminointi + * ; * ? I suojauksen poisto p C00H ^ 0

aminointi ^ COOH

x' —-Tr—> LH I

I (HR ) 0H NHR2 R T I ,

OH NHR

(Va) (V) 4 93357

p H5C2OOCn^COOC2H5 OH

JT Π jj F COOC2H5 T h -> Λλν^

OH X' I

0H OH-suojaus (C) (J)

OH

p ___Jl .COOC-H,, 25 0 I 11 COOC_Hc , xSvA Fnv^nv/\/ 2 5 X' jP N aminointi^ jj jj 0R x' i N-suojaus^ OR' nh2 (F) 0 H C00CoHc f 25 0 L M M _ I COOC-H-.

x· ir ,,, . ^. 7f yr I I alkylointi^ I || || • I -~~T^ S suojauksen OR' NHR" X' poisto ^ OR' N-R2

(G) I

(H) R" aminointi + suojauksen poisto

V

o o c Fv/\/^s/C00S fV^/V C00h . —LL JJ aminointi i^s. JJs^ „ s x' ^ ^ l/]^ Ϊ OH NHR2 ,HR> R 0H NHR2 (Va) (V) 5 93357 joissa R1 ja R2 ovat samoja kuin edellä määriteltiin, X' on vety Ja R' on suojaradikaali, kuten bentsyyli, metoksi-bentsyyli, metoksietoksimetyyli, tetrahydropyranyyli, al-lyyli, t-butyyli, t-butyylidimetyylisilyyli, asetyyli, 5 bentsoyyli ja vastaava ja R" on suojaradikaali, kuten for-myyli, asetyyli, trifluoriasetyyli, bentsoyyli, etoksikar-bonyyli, 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli, fenoksikarbonyy-li, bentsyylioksikarbonyyli, t-butoksikarbonyyli ja vastaava .

10 Kaavan V mukainen yhdiste on uusi yhdiste ja tämä yhdiste voidaan valmistaa edellä olevan reaktiokaavion a) tai b) mukaisesti, mukaan lukien viimeinen vaihe, jossa yhdiste (H) tai (Va) saatetaan reagoimaan kaavan HR1 mukaisen aminon kanssa, jolloin R1 on edellä määritelty.

15 Kaavan V mukaisten yhdisteiden reaktio formaldehy din tai sen polymeerin tai asetaalin kanssa voidaan haluttaessa suorittaa liuottimessa, kuten dioksaanissa, tetra-hydrofuraanissa, asetonitriilissä, kloroformissa, dimetyy-liformamidissa, dimetyylisulfoksidissa, N,N'-dimetyylipro-20 pyyliureassa, etikkahapossa ja vastaavissa. Voidaan myös käyttää kahden tai useamman liuottimen seoksia.

Reaktio voidaan tarpeen vaatiessa suorittaa happo-katalyytin, kuten etikkahapon, kloorivetyhapon, rikkihapon, metaanisulfonihapon, p-tolueenisulfonihapon, pyridii- 25 ni-p-tolueenisulfonaatin, rauta(III)kloridin, sinkkiklori- din, klooridimetyylisilaanin, Nafion-H:n (perfluorattu hartsisulfonihappo; Aldrich Chemical Co., Inc.), Amberlyst 15:n (voimakkaan hapan, makroretikulaarinen hartsi; Aid-rich Chemical Co., Inc.) ja vastaavien läsnäollessa.

30 Reaktiolämpötlla voi vaihdella suhteellisen laajal- .,. la alueella. Yleensä reaktio suoritetaan lämpötilassa 20 - “·· 150 °C.

Edullisessa tämän keksinnön mukaisessa toteutusmuodossa käytetään noin 1 moolia tai ylimäärää formaldehydiä 35 tai sen polymeeriä tai asetaalia moolia kohti kaavan V mukaista yhdistettä.

«. · «. · 6 93357

Kaavan V mukaisista lähtöaineista voidaan esittää esimerkit 6-fluori-8-hydroksi-7-(1-imidatsolyy1i)-1-(metyy1iamino)- 4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihappo ja 5 6-fluori-8-hydroksi-l-(metyyllamino)-7-( 4-metyyli-l-piper- atsinyyli )-4-okso-l, 4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihappo.

Esimerkkejä yhdisteistä, joiden voidaan antaa reagoida kaavan V mukaisen yhdisteen kanssa, ovat formaldehydi, sen polymeerit, kuten paraformaldehydi, sen asetaalit, 10 kuten dimetoksimetaani ja vastaavat.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti sopivien suolojen tai mainittujen suolojen hydraattien tai solvaattien valmistus voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla; esimerkiksi saattamalla kaavan 1 mukainen karbok-15 syylihappo reagoimaan ekvivalenttisen määrän kanssa ha luttua emästä tai päinvastoin, saattamalla kaavan I mukainen emäs reagoimaan orgaanisen tai epäorgaanisen hapon kanssa. Reaktio voidaan suorittaa mukavasti liuottimessa, kuten vedessä tai orgaanisessa liuottimessa (esim. etano-20 lissa, metanolissa, asetonissa ja vastaavissa). Lämpöti la, jossa suolanmuodostus suoritetaan, ei ole kriittinen. Suolanmuodostus suoritetaan yleensä huoneenlämmössä, mutta voidaan myös suorittaa lämpötiloissa hiukan yli ja alle huoneenlämmön, esimerkiksi alueella 0 - +50 °C.

25 Esimerkkejä farmaseuttisesti sopivista hapoista, * ** joita voidaan käyttää, ovat kloorivety-, bromivety-, rik ki-, fosfori-, typpi-, muurahais-, etikka-, propioni-, meripihka-, glykoli-, maito-, omena-, viini-, sitruuna-, askorbiini-, maleiini-, hydroksimaleiini-, fenyylietik-30 ka-, bentsoe-, 4-aminobentsoe-, antraniili-, 4-hydroksi-... bentsoe-, salisyyli-, aminosalisyyli-, nikotiini-, metaa- ··* nisulfoni-, etaanisulfoni-, hydroksietaanisulfoni-, bent- eeenisulfonl-, p-tolueenisulfoni-, glukoni-, glukuroni-, galakturoni-, asparagiini- ja glutamiinihappo; metioniini, 35 tryptofaani, lysiini, arglnlinl ja vastaavat.

t · i · ··· 7 93357

Happoadditiosuolat voidaan muuttaa vapaaseen muotoon käsittelemällä emäksellä, kuten metallihydroksidilla, ammoniakilla ja vastaavilla.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden emäksiset suolat 5 voidaan valmistaa saattamalla kaavan 1 mukainen yhdiste reagoimaan metalliemäksen tai amiinin, kuten alkali- tai maa-alkallmetallihydroksldin tai orgaanisen amiinin kanssa. Esimerkkejä kationina käytetyistä metalleista ovat natrium, kalium, magnesium, kalsium ja vastaavat. Eslmerk-10 kejä amiineista ovat dietanoliamiini, N,N-dibentsyyliety-leenidiamilnl, koliini, etyleenidiamlini ja vastaavat.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden happoadditiosuolat tai emäksiset suolat eroavat vastaavasta vapaasta muodosta tietyissä fysikaalisissa ominaisuuksissa, kuten vesiliu-15 koisuudessa.

Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseuttisesti sopivat suolat voivat esiintyä ei-solvatoituneina sekä solvaatteina, mukaan luettuna hydraattimuodot. Hyd-raatio voidaan saada aikaan automaattisesti valmistuspro-20 sessin kulun aikana tai se voi tapahtua vaiheittain tuloksena alunperin vedettömän tuotteen hygroskooppisista ominaisuuksista. Hydraatin kontrolloitua valmistusta varten täysin tai osittain vedetön tuote voidaan asettaa kosteaan ilmakehään (esim. noin lämpötilassa +10 - +40 °C). Solvaat-25 te ja farmaseuttisesti sopivien liuottimien kanssa, kuten • e ** *° etanolin kanssa, voidaan saada esim. kiteytyksen aikana.

Tietyillä keksinnön tarjoamilla yhdisteillä on asymmetriakeskuksla. Puhdas D-isomeeri, puhdas L-isomeeri sekä niiden seokset, mukaan luettuna raseemiset seokset, 30 sisältyvät myös keksintöön.

... Kaavan I mukaisilla yhdisteillä, niiden suoloilla, 1... hydraateilla ja soi vaateilla on laaja antibakteerinen vai kutus gram-positiivisia ja gram-negatiivisia organismeja sekä Mycoplasmaa vastaan ja niitä voidaan käyttää infek-35 tiosairauksien hoitoon ja ennaltaehkäisyyn. Näiden keksin nön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden in vitro- ja in c · ··« 8 93357 vivo -antlbakteeriset aktiivisuudet; on esitetty seuraavassa: 1. In vitro -antlbakteeriset aktiivisuudet

Kaavan I mukaisten edustavien pyrido[3,2,1-ij]-5 1,3,4-bentsoksadiatsiinijohdannaisten, niiden suolojen, hydraattien ja solvaattien antibakteerisia aktiivisuuksia in vitro tutkittiin standardikäytössä olevalla agarlaimen-nusmenetelmällä [katso: Chemotherapy, 22, (1974), 1126]. Niiden minimi-inhibiittorikonsentraatiot (MIC, yksikössä 10 pg/ml) on esitetty taulukossa 1 ja taulukossa 2. Tässä käytetyt yhdisteet valmistettiin vastaavissa esimerkeissä, kuten jäljempänä on mainittu.

Taulukko 1 15

Aerobiset mikro-organismit Yhdiste esimerkistä _2_2 a)

Gram-positiiviset bakteerit

Bacillus subtllis PCI 219 0,20 0,05 20 Staphylococcus aureus FDA 209P JC-1 0,39 0,39

Staphylococcus aureus NR 2855 0,78 0,20

Staphylococcus aureus Smith 0,39 0,20

Staphylococcus epidermidis IFO 12993 0,39 0,39

Staphylococcus epidermidis NR 2942 0,39 0,39 25 Enterococcus faecalis NR 2943 12,5 3,13 • < * **'c Alcaligenes faecalis IFO 13111 3,13 0,39

Citrobacter freundii IFO 12681 0,10 0,013

Enterobacter aerogenes NR 2945 0,10 0,013

Enterobacter cloacae NR 2946 0,05 0,025 30 Escherichia coli NIHJ JC-2 0,10 0,025 ... Escherichia coli NR 2630 0,0065 0,013 1.. Klebsiella pneumoniae FDA PCI 602 0,39 0,10

Bordetella bronchiseptlca ATCC 4617 3,13 0,20

Proteus rettgeri ATCC 14505 1,56 0,20 35 Proteus vulgaris 0X19 ATCC 6898 0,013 0,013 ♦ • 4 9 93357

Taulukko 1 (jatkuu)

Pseudomonas aeruginosa A3 3,13 0,20

Pseudomonas aeruginosa NR 2950 6,25 0,78 5 Pseudomonas stutzeri IFO 12695 0,0033 0,025

Serratla marcescens IFO 12648 0,78 0,10

Salmonella typhimurium IFO 12529 0,05 0,025 10 Taulukko 2

Antibakteerlnen kirjo

Anaerobiset mikro-organismit MIC (pg/ml) _Yhdiste esim, nro 2a 15 Bacteroides fragilis ATCC 23745 0,78

Bacteroides fragilis NR 2579 3,13

Bacteroides fragilis NR 2582 0,78

Bacteroides fragilis NR 2583 0,39

Bacteroides fragilis NR 2584 0,78 20 Bacteroides distasonis NR 2578 0,78

Bacteroides thetalotaomicron NR 2588 1,56

Bifidobacterium adolescentis ATCC 15703 0,39

Clostiridium botulinum NR 2611 0,10

Clostridium perfringens NR 2612 0,39 25 Clostridium monlliforme ATCC 25546 0,78 * r : '·ι Fusobacterium varium ATCC 8501 12,5

Peptococcus prevotii ATCC 9321 1,56

Peptococcus variabilis ATCC 14955 0,78

Peptostreptococcus anaerobius NR 2743 0,39 30 Propionibacterium acnes ATCC 11828 0,78 »t ·

Mycoplasma

Mycoplasma homlnls NR 2952 0,10 35 _ t · ··« 10 93357 2. In vivo -terapeuttinen vaikutus Jäljempänä esitetyn esimerkin 2a) mukaisesti valmistettu jen pyrido[3,2,l-ij]-l,3,4-bentsoksadiatsiinijoh-dannaisten antibakteerisia aktiivisuuksia in vivo tutkit-5 tiin Escherichia coli ML4707:n, Pseudomonas aeruginosa 4au542:n ja Streptococcus pneumoniae 6-001:n aiheuttamaa kuolettavaa infektiota vastaan. ICR-hliret, jotka painoi-vat noin 20 g, tartutettiin vatsaontelon sisäisellä injektiolla vastaavalla bakteerisuspensiolla. Koeyhdiste annet-10 tiin oraalisesti 5 päivän aikana. Vastaava 50-%:isesti tehokas annos (EDS0/ mg/kg), joka suojaa 50 % eläimistä tartunnan aiheuttamalta kuolemalta, on esitetty taulukossa 3.

Taulukko 3 15

Antibakteeriset aktiivisuudet in vivo systeemistä infektiota vastaan hiirissä (ED^, mg/kg)

Bakteeri 20 Escherichia Pseudomonas Streptococcus

Yhdiste coli ML 4707 aeruginosa pneumoniae _4au5.4?_6-001_ _8tfij_P«Q«_P ifl.t_P»Q»_

Esimerkki 25 2a) 0,06 0,11 13,4 10,3 • · * e t» • «o 3. Akuutti myrkyllisyys Jäljempänä esimerkeissä 2 ja 2a) saatujen yhdistei-30 den vastaavat LDS0-arvot ovat enemmän kuin 2 000 mg/kg.

... Näiden yhdisteiden akuutti myrkyllisyys tutkittiin anta- ‘-It maila niitä oraalisesti ICR-hiirille.

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä, niiden suoloilla, hydraateilla ja solvaateilla on laaja antimikrobinen kirjo 35 gram-positiivisia ja gram-negatiivisia bakteereita sekä a il 11 93357

Mycoplasmaa vastaan, jotka ovat resistenttejä erilaisille antibiooteille, kuten penisilliineille, kefalosporiineil-le, aminoglykosldeille, tetrasykliineille ja vastaaville.

Lisäksi kaavan I mukaisilla yhdisteillä, niiden 5 suoloilla, hydraatellla ja solvaatellla on alhainen myrkyllisyys ja voimakas ja laaja antimikrobinen vaikutus. Yhdisteiden suojavaikutukset systeemisiin bakteeri-infektioihin hiirissä ovat suuremmat kuin synteettisillä anti-bakteerlsilla aineilla, jotka ovat kaupallisesti saatavis-10 sa. Siksi näitä yhdisteitä voidaan tehokkaasti käyttää hyväksi ehkäistäessä tai hoidettaessa gram-positiivisten ja gram-negatiivisten bakteerien ja bakteeriperäisten mikro-organismien aiheuttamia sairauksia ihmisissä ja eläimissä.

Esimerkiksi seuraavien mikro-organismien tai seu-15 raavien mikro-organismien seosten aiheuttamia sairauksia voidaan hoitaa ja/tai ehkäistä: Staphylococcus, Streptococcus, Aerococcus, Enterococcus, Micrococcus, Lactobacillus, Bifidobacterium, Clostridium, Eubacterium, Peptococ-cus, Peptostreptococcus, Propionibacterlum, Escherichia, 20 Citrobacter, Campylobacter, Enterobacter, Klebsiella, Proteus, Pseudomonas, Serratia, Salmonella, Shigella, Vibrio, Aeromonas, Haemophilus, Neisseria, Acinetobacter, Alcali-genes, Bordetella, Bacteroldes, Fusobacterium, Mycoplasma ja muut mikro-organismit.

25 Kaavan I mukaisia yhdisteitä, niiden suoloja, hyd- • '·“ raatteja ja solvaatteja voidaan antaa oraalisesti tai ei- oraalisesti ihmisille tai eläimille erilaisilla tavanomaisilla antomenetelmillä.

Lisäksi kaavan I mukaisia yhdisteitä, niiden suolo-30 ja, hydraatteja ja solvaatteja käytetään yksinään tai ... koostumuksina apuaineiden, nestemäisten laimennusaineiden, sideaineiden, liukastusainelden, humektanttien jne. kanssa, esimerkiksi yleisten lääketieteellisten koostumusten, kuten tablettien, rakeiden, sokeripäällysteisten tablet-35 tien, jauheen, kapseleiden, geelien, kuivasiirapin, siira- l « 12 93357 pin, ampullien, suspension, nesteen, emusIon, voiteiden, pastan, kreemin, peräpuikkojen ja vastaavien muodossa.

Edelleen voidaan käyttää liukenemista auttavia aineita, imeytymistä nopeuttavia aineita, pinta-aktiivisia 5 aineita ja vastaavia, sekä muita formulointiin tarvittavia lisäaineita, ts. mitä tahansa farmaseuttisesti sopivia muotoja.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, niiden suoloja, hyd-raatteja ja solvaatteja voidaan käyttää yksinään tai seok-10 sena kahdesta tai useammasta erilaisesta yhdisteestä, ja yhdisteiden määrä on noin 0,1 - 99,5 %, edullisesti 0,5 -95 % perustuen koko lääketieteellisen koostumuksen painoon.

Lääketieteellinen koostumus, joka voi sisältää kaa-15 van I mukaista yhdistettä, sen suolaa, hydraattia tai soivaa ttia, voidaan muodostaa kaavan I mukaisen yhdisteen yhdistelmänä tai niiden seoksena muiden tavanomaisten yhdisteiden kanssa, jotka ovat farmaseuttisesti vaikuttavia.

Kaavan I mukaisen uuden yhdisteen annostus poti-20 laalle päivässä voi vaihdella riippuen yksittäisestä henkilöstä, eläinlajista, niiden painosta ja hoidettavasta tilasta, mutta on yleensä alueella 0,5 - 500 mg päivässä painokiloa kohti, edullisesti noin 1 - 300 mg.

Isokinoliineja, joissa on fuusioitunut oksametylee-25 nirengas (ts. jotka muodostavat pyrido[l,2,3-de]-l,4-* c‘ bentsoksateiinijohdannaisia), tunnetaan esimerkiksi EP- hakemusjulkaisusta 47 005. Kaavan I mukaiset yhdisteet eroavat merkittävästi näistä yhdisteistä kuitenkin siinä, että niissä on kaksi vierekkäistä typpiatomia fuusioitu-30 neessa renkaassa, jolloin ne muodostavat pyrido[3,2,l-ij]-,..c 1,4-bentsoksadiatsiineja. Näillä yhdisteillä on, kuten edellä on osoitettu, erinomainen ja laaja aktibakteerinen aktiivisuus gram-positiivisia ja gram-negatiivisia bakteereja sekä Mycoplasmaa vastaan.

35 «. ·

VM

il 13 93357

Seuraavat esimerkit valaisevat kaavan V mukaisten välituotteiden valmistamista sekä niiden käyttöä vastaavien kaavan I mukaisten lopputuotteiden valmistamiseksi. Lähtöaineen valmistus 5 Viite-esimerkki

Dietyyli-N- (3,4-dif luori-2-hydroksif enyyli ) aminome-tyleenimalonaatin valmistus a) Liuosta, jossa oli 2,3-difluori-6-nitrofenolla (500 mg) metanollssa (7 ml), hydrattiln 5 % Pd/C:n yllä 10 (60 mg) 6 tuntia. Reaktioseos suodatettiin typpivirrassa ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 414 g epäpuhdasta 2-amino-5,6-difluorifenolla.

b) Edellä saadun amiinin (414 mg) ja dietyylietok-simetyleenimalonaatin (618 mg) seosta kuumennettiin 15 130 °C:ssa typpiatmosfäärissä 5 minuuttia. Saatua kiteistä jäännöstä trituroltlln etanolin kanssa ja suodatettiin, Jolloin saatiin 590 mg dietyyli-N-(3,4-difluori-2-hydrok-sifenyyli)aminometyleenimalonaattia; sp. 178 - 180 °C; MS m/z 315 (M*). Suorittamalla emäliuokselle silikageelipyl-20 väskromatografia käyttäen eluenttina CHCl3/asetonia (20:1) saatiin vielä 59 mg kiteitä.

Etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-dlfluori-4-hydroksi-3-kinoliinikarboksylaatti (tapa 1) c) Seokseen, jossa oli dietyyli-N-(3,4-difluori-2- 25 hydroksi f enyyli )amlnometyylimalonaattia (80 mg) ja vede- r r töntä kaliumkarbonaattia (70 mg) kuivassa dime tyyli f orm-amidissa (1,5 ml), lisättiin bentsyyllbromidia (30 μΐ). Seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 2 tuntia. Liuottimen poiston jälkeen alipaineessa jäännös liuotettiin dlkloori-30 metaaniin ja sakka suodatettiin pois. Suodos pestiin ve-dellä, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Kiteinen jäännös pestiin n-heksaanilla ja uu-delleenkiteytettiin metanolista, jolloin saatiin dietyyli-N-(2-bentsyylioksi-3,4-dif luorifenyyli )aminometyylimalo-35 naatti (90 mg); sp. 87 °C; MS m/z 405 (M*).

14 93357 d) Edellä saadun malonaatln (280 mg) liuosta dife-nyylieetterissä (2,8 ml) kuumennettiin 250 °C:ssa 30 minuuttia typpiatmosfäärissä. Reaktioseoksen jäähdytyksen jälkeen reaktioväliaineessa syntynyt etanoli poistettiin 5 alipaineessa. Tummanruskealle liuokselle suoritettiin pyl-väs-silikageellkromatografia (10 g) eluoiden peräkkäin bentseenillä, dikloorimetaanilla ja dikloorimetaani/asetonilla (30:1). Puhtaat fraktiot yhdistettiin ja liuotin poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin kiteinen jään-10 nös. Jäännös pestiin n-heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella, jolloin saatiin 90 mg etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-4-hydroksi-3-kinoliinikarboksylaattia.Analyyttinen näyte; sp. 200 - 201 eC; MS m/z 359 (M*); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä metanolista.

15 Etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-di fluori-4-hydroksi-3- kinoliinikarboksylaatin valmistus (tapa 2)

Etyyli-6,7-difluori-4,8-dihydroksi-3-kinoliinikarb-oksylaatin (300 mg) sekoitettuun liuokseen kuivassa dime-tyyliformamidissa (6 ml) lisättiin vedetöntä kaliumkarbo-20 naattia (308 mg) ja sitten bentsyylikloridia (145 μΐ).

Seosta sekotettlln 55 - 65 °C:ssa 11 tuntia. Reaktioseos laimennettiin vedellä (30 ml) ja uutettiin kloroformilla. Uute kuivattiin vedettömällä natrlumsulfaatilla ja konsentroitiin alipaineessa. Jäännös kromatografoltiin sllika-25 geelillä (7 g) käyttäen asetoni/kloroformia (1:20) eluent- m r * tina, jolloin saatiin 113 mg etyyli-8-bentsyylloksi-6,7- difluorl-4-hydroksl-3-klnoliinlkarboksylaattia; sp. 200 -201 °C; MS m/z 359 (M*), uudelleenkiteytyksen jälkeen metanolista.

30 Etyyli-8-bent8yylioksi-6,7-difluori-l-(formyylime- 3 tyyli amino) -4-okso-l, 4-dihydro-3-kinoliinikarboksy- laatin valmistus e) Kun etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-4-hydr-oksi-3-kinoliinikarboksylaatin (410 mg) ja vedettömän ka- 35 liumkarbonaatin (315 mg) seosta kuivassa dimetyyliformami- s

WU

15 93357 dlssa (10 mg) oli sekoitettu huoneenlämmössä 3 tuntia, lisättiin 0-(2,4-dinitrofenyyli)hydroksyyllamllnla (260 mg). Seosta sekoitettiin huoneenlämmössä vielä 6,5 tuntia. Liuottimen poistamisen jälkeen alipaineessa lisättiin 5 jäännökseen vettä (12 ml) ja seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 3 tuntia. Sakka kerättiin suodattamalla ja pestiin kylmällä vedellä ja sitten eetterillä, jolloin saatiin 405 mg etyyli-l-amino-8-bentsyylioksi-6,7-difluori- 4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksylaattia. Analyytti-10 nen näyte; sp. 143 - 144 °C; MS m/z 374 (M*); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä metanolista.

f) 98 % muurahaishappoa (0,60 ml) lisättiin etikka-anhydridiin (1,51 ml) 0 °C:ssa. Seosta sekoitettiin 0 °C:ssa 15 minuuttia, 50 °C:ssa 15 minuuttia ja jäähdytet-15 tiin sitten 0 °C:seen. Tähän liuokseen lisättiin tipoittain edellä saadun amiinin (400 mg) liuos 98 % muurahaishapossa, Jolloin saatiin kiteinen jäännös, joka uudelleenkitey-tettiin etanolista, jolloin saatiin 410 mg etyyli-8-bents-yylioksi-6,7-difluori-1-(formyyliamino)-4-okso-l,4-dihyd-20 ro-3-kinoliinikarboksylaattia; sp. 188 - 190 °C; MS m/z 402 (M*).

g) Edellä saadun formamidin (400 mg), vedettömän kaliumkarbonaatin (275 mg) ja vedettömän dimetyyliformami-din (17 ml) seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 1,5 tun- 25 tla. Metyylijodidia (0,19 ml) lisättiin seokseen ja se-’· * koittamista jatkettiin 2,5 tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa ja jäännös jaettiin kloroformiin ja veteen. Orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaa-tllla ja konsentroitiin kuiviin alipaineessa. Jäännös ki-30 täytettiin etanolista, jolloin saatiin 335 mg etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-1-(formyylimetyyliamino)-4-okso-l ,4-dihydro-3-kinoliinikarboksylaattia; sp. 180 - 181 °C; MS m/z 416 (M*).

35 16 93357 6,7-difluori-8-hydroksl-l-(metyyliamino)-4-okso- 1,4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihapin valmistus h) Etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-l-(formyyli-metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksylaat- 5 tia (330 mg) hydrattiin 5 % Pd/C:n yllä (50 mg) kloroformissa (14 ml) 4 tuntia. Reaktioseos laimennettiin metano-lilla (14 ml) ja suodatettiin. Suodatinkakku pestiin klo-roformi/metanolilla (1:1). Yhdistetty suodos haihdutettiin ja jäännös uudelleenkiteytettiin etanolista, jolloin saa-10 tiin 239 mg etyyli-6,7-difluori-l-(formyylimetyyliamino)- 8-hydroksi-4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksylaattia; sp. 221 - 225 °C (haj.); MS m/z 326 (M1).

i) Edellä olevan esterin (210 mg) ja 0,5 N natrium-hydroksidin (5,2 ml) seosta kuumennettiin 100 °C:ssa 2 tun- 15 tia typpiatmosfäärissä. Reaktioseos tehtiin happamaksi etikkahapolla (0,16 ml). Erottunut sakka suodatettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin alipaineessa, jolloin saatiin 168 mg 6,7-difluori-8-hydroksi-l-(metyyliamino)-4-okso-1,4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihappoa. Analyytti-20 nen näyte; sp. 248 - 250 °C (haj.); MS m/z 270 (M1); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä etanolista.

Esimerkki 1 6-f luori-8-hydroksi-7- (1-imidatsolyyli )-1-(metyyli- * amino) -4-okso-l, 4-dihydro-3-kinoliinikarboksyyliha- 25 pon valmistus * 1 Karbonyylidi-imidatsolia (32 mg) lisättiin sekoi tettuun liuokseen, joka sisälsi viite-esimerkissä i) saatua 6,7-difluori-8-hydroksi-l-(metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihappoa (50 mg) kuivassa di-30 metyyliformamidissa (2 ml). Sekoittamista jatkettiin huoneenlämmössä 2 tuntia ja sitten 80 °C:ssa 5 tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa ja jäännös suspendoitiin veteen ja pH säädettiin arvoon 5 etikkahapolla. Erottunut sakka suodatettiin ja pestiin metanolilla, jolloin saatiin 35 mg 35 6-fluori-8-hydroksi-7-(1-imidatsolyyli)-1-(metyyliamino)-

II

& l V

17 93357 4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihappoa vaaleankeltaisena jauheena; FAB-MS m/z 319 (MH1); 1NMR (d6DMSO) 6: 2,82 (3H, s), 7,10 (1H, d, J - 10,7 Hz), 7,61 (1H, d), 7,75 (1H, d), 8,62 (1H, s), 8,92 (1H, s) ja 15,33 (1H, 5 br.s).

Esimerkki 2 (käyttöesimerkki) 9-fluori-10- (1-imidatsolyyli)-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido [3,2,1-i j ] -1,3,4-bentsoksadiatsii-ni-6-karboksyylihapon valmistus 10 Esimerkissä 1 saadun 6-fluori-8-hydroksi-7-(1-imid- atsolyyli)-l-(metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinolii-nikarboksyylihapon (15 mg) suspensiota 35-%:isen formaliinin (1 ml) j a dioksaanin (1 ml) seoksessa kuumennettiin 100 - 110 °C:ssa 1,5 tuntia typpiatmosfäärissä. Liuotin 15 poistettiin alipaineessa ja kiteinen jäännös pestiin meta-nolilla, jolloin saatiin 15 mg 9-fluori-10-(1-imidatsolyy-li)-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]- 1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappoa vaaleanpunaisena jauheena. Analyyttinen näyte; sp. >300 °C; FAB-MS 20 m/z 331 (MH1); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä dime-tyyliformamldista ja eetteristä.

Analogisella tavalla seuraava kaavan V mukainen lähtöyhdiste muutetaan vastaavaksi kaavan I mukaiseksi tuotteeksi. Yksityiskohtaisemmin kaavan V mukaisten yhdis-25 teiden käyttöä selvitetään tämän hakemuksen kantahakemuk-‘ ‘ sessa, FI-patenttihakemuksessa 87 3940.

2a) 6-fluori-8-hydroksi-l-(metyyliamino)-7-(4-metyyli-l- piperatsinyyli) -4-okso-l, 4-dihydro-3-kinoliinikarboksyyli-happo; hydrokloridi saatiin keltaisina kiteinä, FAB-MS m/z 30 350 (MH1~)-HC1. Tätä puhdistamatonta kiteistä ainetta käy tettiin suoraan puhdistamatta sitä edelleen 9-fluorl-3-metyyli-10-( 4-metyyli )-l-piperatsinyyli-7-okso-2,3-dihy-dro-H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karbok-syylihapon syklisointlin; vaaleankeltaiset kiteet, sp. 268 35 - 269 eC (haj.); MS m/z 362 (M1).

* t. V

Claims (3)

18 93357 1. 8-hydroksi-l-amino-4-okso-l,4-dihydro-3-kino- liinijohdannaiset, joilla on kaava 5 0 F C00H (V) 10 'lp OH NHR jossa R1 on imidatsoli- tai 4-metyyli-l-piperatsiinirengas ja R2 on alempi alkyyliradikaali.

2. Förening enligt patentkravet 1, kfinne-t e c k n a d dfirav, att den fir 6-fluor-8-hydroxi-7- (1-imidazolyl )-l-(metylamino)-4-oxo-l, 4-dihydro-3-kinolin-20 karboxylsyra.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tun nettu siitä, että se on 6-fluori-8-hydroksi-7-(1-imi-datsolyyli)-1-(metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kino-liinikarboksyylihappo.

3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, t u n - 20. e t t u siitä, että se on 6-fluori-8-hydroksi-l-(metyy-liamino)-7-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-4-okso-l,4-dihyd-ro-3-kinoliinikarboksyylihappo. 9 · · C il 19 93357 1. 8-hydroxi-l-amino-4-oxo-l,4-dihydro-3-kinolin-derlvat med formeln 5 O F COOH T if if (v) 10 j^l N ^ OH NHR2 15. vilken R1 fir en imidazol- eller 4-metyl-l-plperazlnrlng och R2 är en lfigre alkylradlkal.

3. Förening enligt patentkravet 1, kfinne-t e c k n a d dfirav, att den fir 6-fluor-8-hydroxi-l- (metylamino)-7-(4-raetyl-l-piperazinyl)-4-oxo-l,4-dihydro- 3-kinolinkarboxyl-syra. • ·· c < C (•I