FI88041C - Pyrido/3,2,1-ij/-1,3,4-bensoxadiazin-6-karboxylsyraderivat - Google Patents

Description

1 88041

Pyrido[3,2,1-ij ] -1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyyli-hnppojohdnnna i a 1 a

Jakamalla erotettu FI-patenttihakemuksesta 87 3940 5

Keksintö koskee uusia pyridotS^l-ijl-l^^-bents-oksadiatsiini-6-karboksyylihappojohdannaisia, joilla on kaava 10 o F coor1 if Jj (III)

I!) O N

XK/ jossa X’ on halogeeniatomi, R1 on vety tai karboksiryhmän suojaradikaali, joka on alempi alkyyli, bentsyyli tai 20 alempi alkanoyylioksialkyyli, R2 on alempi alkyyliradikaa-li, joka voi olla substituoitu fluoriatomilla, ja R3 on vety tai mahdollisesti hydroksiradikaalilla tai di(alempi alkyyli)aminoradikaalilla substituoitu alempi alkyyliradi-kaali.

25 Keksinnön mukaiset yhdisteet ovat käyttökelpoisia välituoteyhdisteinä valmistettaessa terapeuttisesti aktiivisia pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsodiatsiinijohdannaisia, erityisesti 10-substituoitu-9-fluori-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyy-30 lihappojohdannaisia, joilla on kaava 2 88041

O

F Jk. COOR1 i' *JL y (i) R6-N N ^

5 R5 O N

^ V

jossa R1 on vety tai karboksiryhmän suojaradikaali, joka on alempi alkyyli, bentsyyli tai alempi alkanolyylioksialkyy-10 li; R2 on alempi alkyyliradikaali, joka voi olla substitu-oitu fluoriatomilla; R3 on vety tai mahdollisesti hydroksi-radikaalilla tai di(alempi alkyyli)aminoradikaalilla subs-tituoitu alempi alkyyliradikaali; R5 on alempi alkyyliradikaali ja R6 on di(alempi alkyyliamino)-alempi alkyyliradi-15 kaali, tai Rs ja Rfl yhdessä viereisen typpiatomin kanssa muodostavat piperatsiinirenkaan, joka voi olla substituoi-tu 3-asemassa metyylillä tai fenyylillä ja/tai N-substitu-oitu metyylillä, etyylillä, asetyylillä tai aminobentsyy-lillä; morfolinorenkaan; 1,1-dioksiditiomorfolinorenkaan; 20 pyrrolidiinirenkaan, joka on 3-asemassa substituoitu ami- nolla, metyyliaminolla, etyyliaminolla, aminometyylillä, metyyliaminometyylillä, etyyliaminometyylillä, metoksilla tai kloorilla ja 4-asemassa metyylillä tai metoksilla; imidatsolirenkaan, joka voi olla substituoitu 4-asemassa 25 metyylillä; tai piperidiinirenkaan, joka voi olla substituoitu aminometyylillä, hydroksilla, aminolla, metyyliaminolla tai metoksilla; sekä kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti sopivia suoloja sekä hydraatteja tai sol-vaatteja tai näiden suoloja, jotka ovat käyttökelpoisia 30 tehoaineina antibakteerisissa aineissa.

Termi "alempi" tarkoittaa hiiliketjua, joka edullisesti sisältää enintään 7 hiiliatomia.

R1 on vety tai karboksisuojaradikaali, joka tarkoittaa esim. alempaa alkyyliä (esim. metyyli, etyyli, n-pro-35 pyyli tai t-butyyli); tai esim. alempaa alkanoyylioksial- I: 3 38041 kyyllä (esim. asetoksimetyyli, pivaloyylioksimetyyli, 1-asetoksietyyli ja 1-pivaloyylioksietyyli).

R2 on mahdollisesti fluoriatomilla substituoitu alempi alkyyllradikaali, joka sisältää edullisesti 1-4 5 hiiliatomia ja on erityisesti metyyli, etyyli, n-propyyli, isobutyyli, n-butyyli tai vastaava.

R3 on vety tai mahdollisesti hydroksiradikaalilla tai di(alempi alkyyli)aminoradikaalilla substituoitu alempi alkyyllradikaali, Joka sisältää edullisesti 1-4 hillo liatomia ja on erityisesti metyyli, etyyli, n-propyyli, isobutyyli, n-butyyli tai vastaava. Di(alempi alkyyli)ami-no voi olla esim. dimetyyliamino tai dietyyliamino.

R5 on alempi alkyyllradikaali ja R6 on di(alempi alkyyliamino)-alempi alkyyllradikaali, tai R5 ja R6 yhdessä 15 viereisen typpiatomin kanssa muodostavat piperatsiiniren-kaan, joka voi olla substituoitu 3-asemassa metyylillä tai fenyylillä ja/tai N-substituoitu metyylillä, etyylillä, asetyylillä tai aminobentsyylillä; morfolinorenkaan; 1,1-dioksiditiomorfolinorenkaan; pyrrolidiinirenkaan, joka on 20 3-asemassa substituoitu aminolla, metyyliaminolla, etyyli -aminolla, aminometyylillä, metyyliaminometyylillä, etyyli-aminometyylillä, metoksilla tai kloorilla ja 4-asemassa metyylillä tai metoksilla; imidatsolirenkaan, joka voi olla substituoitu 4-asemassa metyylillä; tai piperidiini-25 renkaan, joka voi olla substituoitu aminometyylillä, hydr-oksilla, aminolla, metyyliaminolla tai metoksilla.

Erityisen edullisia R5R6N-:n esittämiä radikaaleja kaavassa I ovat 1-piperatsinyyli, 4-metyyli-l-piperatsin-yyli, 3-metyyli-l-piperatsinyyli, 3-fenyyli-l-piperatsin-30 yyli, 4-etyyli-l-piperatsinyyli, 4-(4-aminobentsyyli)-l- piperatsinyyli, 4-asetyyli-1-piperatsinyyli, morfolino, l-dioksidi-4-tiomorfolinyyli, 4-(aminometyyli)-l-piperi-dyyli, 4-hydroksi-l-piperidyyli, 3-amino-l-pyrrolidinyyli, 3-(mctyy1iomino)-1-pyrioLIdinyyli, 3-(etyyliamlno)-1-pyi -35 rolidinyyli, 3-(aminometyyli)-l-pyrrolidinyyli, 3-[(metyy- 4 88041 1iamino)metyyli]-1-pyrrolidinyyli, 3-[(etyyliamino) metyyli]-1-pyrrolidinyyli, 3-metoksi-l-pyrrolidinyyli, 3-kloo-ri-1-pyrrolidinyyli, 1-imidatsolyyli, 4-metyyli-l-imidat-solyyli ja vastaavat.

5 Uusia 10-substituoitu-9-fluori-7-okso-2,3-dihydro- 7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyy-lihappojohdannaisia, jotka ovat kaavan I mukaisia, sekä niiden farmaseuttisesti sopivia suoloja ja hydraatteja tai solvaatteja ja näiden suoloja voidaan valmistaa säätiö tamalla edellä mainittu kaavan III mukainen yhdiste rea goimaan amiinin kanssa, jolla on yleinen kaava HN-R5 i R6 (IV) 15 jossa R5 ja R6 ovat edellä määriteltyjä, ja sen jälkeen tarvittaessa poistamalla suojaradikaali.

Kaavan III mukainen välituoteyhdiste voidaan valmistaa esimerkiksi seuraavan reaktiokaavion a) tai b) mu-20 kaisesti.

5 88041 a ) x.XjXN02 ρβ1>Ιΐ5ίγΞ) χ·^Χνη2 h5C2°CH-C(COOC2H5)_2

OH OH

(A) (B)

H5C2OOC H5C2OOC

F^Ti ν^00=2Η5 Fksk ^°30°2115 k II II OH-suoiaus L 11 H svklisointi ^ x' |k -* Χ’·Τη " OH OR' (C) (O) F YSY^T"COOC2H5 f VYV'000^115 k I J aminointi k U N-suojaus OR' OR' nh2 (E) (F) o o F ^r^V^Sr^00002145 F \^?Ni^k^'COOC2H5 vi/^sAn^ alkylointi suojauksen poisto i 1 -” & Lr2 -

OR' NHR" N R

R11 (G) (H) oh nhr2 oi- (Va) (lila) 6 88041 b)

h5c2°OC

;x?y™ 'rrW

OH --► (c; (J) ;rrV“~ °R' ' "> ^fY N-suojaus OR' NH2 ” --* (E) (F)

O

F WVCOOC2H5 0 -Λ1/ FrxVCOOC2H5 .:. °R' NHR" * suojauksen poisto ;:: OR' N-r2 L· (G) * <H)

0H NHR2 o I

x>2

R J

(Va) (Ilia) 7 38041 joissa R2, R3 ja X' ovat samoja kuin edellä määriteltiin; R' on suojaradikaali, kuten bentsyyli, metoksibentsyyli, metoksimetyyli, metoksietoksimetyyli, tetrahydropyranyyli, allyyli, t-butyyli, t-butyylidimetyylisilyyli, asetyyli, 5 bentsoyyli ja vastaava; R" on suojaradikaali, kuten form-yyli, asetyyli, trifluoriasetyyli, bentsoyyli, etoksikar-bonyyli, 2,2,2-trikloorietoksikarbonyyli, fenoksikarbonyy-li, bentsyylioksikarbonyyli, t-butoksikarbonyyli ja vastaava, ja R"' on vetyatomi tai etyyliradikaali.

10 Jos kaavan IV mukainen yhdiste sisältää amino- tai monoalkyyliaminosubstituentin, mainittu substituentti voidaan haluttaessa suojata aminosuojaradikaalilla, kuten formyylillä, asetyylillä, trifluoriasetyylillä, bentsoyy-lillä, etoksikarbonyylillä, 2,2,2-trikloorietoksikarbonyy-15 Iillä, fenoksikarbonyylillä, bentsyylioksikarbonyylillä, t-butoksikarbonyylillä ja vastaavalla.

Reaktio kaavan III mukaisen yhdisteen ja kaavan IV mukaisen amiinin tai sopivasti suojatun amiinin välillä voidaan tarvittaessa suorittaa liuottimen kanssa tai ilman 20 sitä, edullisesti kohotetussa lämpötilassa riittävän ajan niin, että reaktio voi täysin tapahtua. Sopiva reaktioläm-pötila on alueella noin 30 - 200 °C, edullisesti 80 - 150 °C, jotta saadaan riittävän suuri reaktionopeus.

Reaktio suoritetaan edullisesti happoakseptorin, 25 kuten trietyyliamiinin, pyridiinin, pikoliinin, N,N-dime- tyylianiliinin, 1,8-diatsabisyklo[5.5.0]undek-7-eenin, l,4-diatsabisyklo[2.2.2]oktaanin, alkalimetallihydroksi-dien, alkalimetallikarbonaattien ja vastaavien läsnäollessa. Vaihtoehtoisesti voidaan kaavan IV mukaisen amiinin 30 ylimäärää käyttää happoakseptorina.

Sopivia liuottimia tähän reaktioon ovat ei-reaktii-viset liuottimet, kuten asetonitriili, alkoholit, dimetyy-lisulfoksidi, dimetyyliformamidi, dimetyyliasetamidi, py-ridiini, pikoliini, lutidiini. N,N'-dimetyylipropyyliurea 35 ja vastaavat. Voidaan myös käyttää kahden tai useamman liuottimen seoksia.

β 38041

Suojaradikaali voidaan haluttaessa poistaa reaktion jälkeen alan ammattimiesten tuntemilla menetelmillä. Esimerkiksi formyyliradikaali voidaan poistaa happo- tai emäshydrolyysillä, edullisesti emähydrolyysillä, ja bent-5 syylioksiradikaali voidaan poistaa hydrogenolyysillä.

Kaavan III mukaisista välituotteista esimerkkejä ovat seuraavat: 9.10- difluori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido-[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappo, 10 etyyli-9,10-difluori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyri- do[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksylaatti; bentsyyli-9,10-dif luori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksylaat-ti; 15 9,10-difluori-3-(2-fluorietyyli)-7-okso-2,3-dihydro-7H- pyrido[3,2, 1-ij ] -1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyyli-happo, 9.10- difluori-2,3-dimetyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyri-do[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappo, 20 9,10-difluori-2-(hydroksimetyyli)-3-metyyli-7-okso-2,3- dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappo, ja 9.10- difluori-2-[(dimetyyliamino)metyyli]-3-metyyli-7-ok-so-2,3-dihydro-7H-pyrido[3, 2,1-ij ] -1,3,4-bentsoksadiatsii- 25 ni-6-karboksyylihappo.

Kaavan IV mukainen amiini, jota käytetään edellä olevassa reaktiossa, on esimerkiksi piperatsiini, 4-metyy-lipiperatsiinl, 3-metyylipiperatsiini, 3-fenyylipiperat-siini, morfOliini, tiomorfOliini, 4-(aminometyyli)piperi- 30 diini, 4-aminopiperidiini, 4-(metyyliamino)piperidiini, 4-(bentsyylioksikarbonyyliamino)piperidiini/ 4-(bentsyyli-oksikarbonyylimetyyliamino)piperidiini, 4-hydroksipiperi-diini, 4-metoksipiperidiini, 3-[(metyyliamino)metyyli]pyr-rolidiini, 3-[(etyyliamino)metyyli]pyrrolidiini, 3-metok- 35 sipyrrolidiini, 3-aminopyrrolidiini, 3-(bentsyylioksikar- i 9 38041 bonyyliamino)pyrrolidiini, 3-(metyyliamino Jpyrrolidiini, 3-(bentsyylioksikarbonyylimetyyliamino)pyrrolidiini, imidatsoli, 4-metyyli-imidatsoli ja vastaavat.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti 5 sopivien suolojen tai mainittujen suolojen hydraattien tai solvaattien valmistus voidaan suorittaa sinänsä tunnetulla tavalla, esimerkiksi saattamalla kaavan I mukainen kar-boksyylihappo reagoimaan ekvivalenttisen määrän kanssa haluttua emästä, tai päinvastoin, saattamalla kaavan I 10 mukainen emäs reagoimaan orgaanisen tai epäorgaanisen hapon kanssa. Reaktio suoritetaan mukavasti liuottimessa, kuten vedessä tai orgaanisessa liuottimessa (esim. etanolissa, metanolissa, asetonissa ja vastaavissa). Lämpötila, jossa suolamuodostus suoritetaan, ei ole kriittinen. Suo-15 lanmuodostus suoritetaan yleensä huoneenlämmössä, mutta voidaan myös suorittaa lämpötilassa hiukan yli tai alle huoneenlämmön, esimerkiksi alueella 0 - +50 °C.

Esimerkkejä farmaseuttisesti sopivista hapoista, joita voidaan käyttää edellä olevassa menetelmässä, ovat 20 kloorivety-, bromivety-, rikki-, fosfori-, typpi-, muura-hais-, etikka-, propioni-, meripihka-, glykoli-, maito-, omena-, viini-, sitruuna-, askorbiini-, maleiini-, hydrok-simaleiini-, fenyylietikka-, bentsoe-, 4-aminobentsoe-, antraniili-, 4-hydroksibentsoe-, salisyyli-, aminosalisyy--/-/ 25 li-, nikotiini-, metaanisulfoni-, etaanisulfoni-, hydrok- sietaanisulfoni-, bentseenisulfoni-, p-tolueenisulfoni-, glukoni-, glukuroni-, galakturoni-, asparagiini- ja gluta-miinihappo; metioniini, tryptofaani, lysiini ja arginiini ja vastaavat.

30 Happoadditiosuolat voidaan muuttaa vapaaseen muo toon käsittelemällä emäksellä, kuten metallihydroksidilla, ammoniakilla ja vastaavilla.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden emäksiset suolat voidaan valmistaa saattamalla kaavan I mukainen yhdiste 35 reagoimaan metalliemäksen tai amiinin, kuten alkali- ja 10 38041 maa-alkalihydroksidin tai orgaanisen amiinin kanssa. Esimerkkejä kationina käytetyistä metalleista ovat natrium, kalium, magnesium, kalsium ja vastaavat. Esimerkkejä amiineista ovat dietanoliamiini, N,N-dibentsyylietyleenidi-5 amiini, koliini, etyleenidiamiini ja vastaavat.

Kaavan I mukaisten yhdisteiden happoadditiosuolat tai emäksiset suolat eroavat vastaavasta vapaasta muodosta tietyissä fysikaalisissa ominaisuuksissa, kuten vesiliukoisuudessa .

10 Kaavan I mukaiset yhdisteet ja niiden farmaseutti sesti sopivat suolat voivat esiintyä ei-solvatoituneina sekä solvaatteina, mukaan luettuna hydraattimuodot. Hyd-raatio voidaan saada aikaan automaattisesti valmistusprosessin kulun aikana tai se voi tapahtua vaiheittain tulok-15 sena alunperin vedettömän tuotteen hygroskooppisista ominaisuuksista. Hydraatin kontrolloitua valmistusta varten täysin tai osittain vedetön tuote voidaan asettaa kosteaan ilmakehään (esim. noin lämpötilassa +10 - +40 °C). Solvaatteja farmaseuttisesti sopivien liuottimien kanssa, 20 kuten etanolin kanssa, voidaan saada esim. kiteytyksen aikana.

Tietyillä tämän keksinnön tarjoamilla yhdisteillä on asymmetriakeskuksia. Puhdas D-isomeeri, puhdas L-iso-meeri sekä niiden seokset, mukaan luettuna rasemiset seok-25 set, sisältyvät myös tähän keksintöön.

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä, niiden suoloilla, hydraateilla ja solvaateilla on laaja antibakteerinen vai-·· kutus gram-positiivisia ja gram-negatiivisia organismeja sekä Mycoplasmaa vastaan, ja niitä voidaan käyttää infek-. : . 30 tiosairauksien hoitoon ja ennaltaehkäisyyn. Näiden yhdisteiden in vitro- ja in vivo -antibakteeriset aktiivisuudet on esitetty seuraavassa: li 88 0 41 1. In vitro -antibakteeriset aktiivisuudet Kaavan I mukaisten edustavien pyrido[3,2,1,-ij]- 1,3,4-bentsoksadiatsiinijohdannaisten, niiden suolojen, hydraattien ja solvaattien antibakteerisia aktiivisuuksia 5 in vitro tutkittiin standardikäytössä olevalla agarlaimen-nusmenetelmällä [katso: Chemotherapy, 22 (1974), 1 126]. Niiden minimi-inhibiittorikonsentraatiot (MIC; yksikössä pg/ml) on esitetty taulukossa 1 ja taulukossa 2. Tässä käytetyt yhdisteet valmistettiin vastaavissa esimerkeissä, 10 kuten jäljempänä on mainittu.

12 3 8 041 in <"> o C> o *“» ^ΟΟΟΟΓ^σιιββοιβίηοοη ^ o ^ Ν η Ν · •“ — — — — or->mr-o^«'< — r-^- ο o o o o O f-* «*> Ο Ο Ο Ο Ο O ο ο «Τ' cT ο*~ θ~ -.Λβββν''βηΟΓ'^* »η σ' ο σ· σ' ^ 0 ^ rs, σ% ^ σι - ^ ^ ~ ~ - -

>- ^/‘’"J'ooOOOO-'-'OOO

ο ο ο ο ο ο ^ ο ο σ ο Ä »-* »n «·ν m m m “* » ΙΛ O N O O V ΐηο«ΛΙ/ΐνΐ>-σΓ>0'Νβ»ΛΝ»ιΝ £ * ο ο — ο — — γ>»^οοοο·~* — '-'Ο^'^ο'^ο \ > „ r 1' r < r.

ζρ o o o o σ σ — ιβοοοοσο*->οοσι»οοο p«» mmm {j ·- o o n o O ^ »nomoonjfOmioiN^mrgem H ___ -λ O O M O N »· »Λ ΙΝΝΟ-’-Ο^ΝνΛΟΠίΝΟΡ'Ο 5* Π n ~ ·' r' ~ *** vJ O O O o O O — «ΛΟΟΟΟΟΟ10 --ΟΟΌΟΟΟ c o •r-v «.Ό ij jj o m •H U) o o m r# o m r-i π σ<ι © m σ* eoomiomomo y o — oo·— o ·· ►- n n n n r>r>f«o<^N»n·- ς- O O O O O O ΓΛ r>0000 ©©0©~-ve000

Ci CJ w

Ξ E

Ή ·Η o o «> © m m *> cooeoomm o «o *-> o ^ f. r» »· n n ** r>rNr*r^»-^-r^m^-r^m ^ ri w *- 0000000 οοοοοοο^γίοοιν <-»o i_j m — M -v a» C Ή O Λ tn .U -—i ®mrim m o a o n y jj"“ ovoose «joo o o o *0 o o o o o o mc»o^-ooo\eioom o cd o V" ^ —- r» o rs o o cn © m γν n o σ — O — mmorsmor*© |_J <. >< rt Γ n rt ·. ». «s,

k-J O O ‘ OOOOCM VO O O O O O, r> O ΐβ rs» O O O

.J -i - -i''- -i vi mmommm

Hr* σ» o·» o σ> σν m niNtNmm^opicir^morsiof^ ® οο<ηΐΝοοη« n»ooooor^rnooo — o — o « r t. r k ·> »N»->-r'r-r'f'^rrrr>-rr o o o o o o vo ooooooooooornooo m m o O' vo o o e mmmootNOvr^er^oomom ·- ο m «n r- r** m <Noo»-*-oo^-r*oiN^o»No f*· r· r~ r· » k r. rv r r-r- ^r-^r'r-r-r'·-.

··· O O »— O O O ΓΝ V0000000O000O000 . · n n m m n r-* mm • · O σ' m σ' Ό vo ΓΛ.-.-ίΝΓΝΓΝθνηο·-ΟΗ3«·Νθ·- - ^ ^o»»r-tmm«n *-ooooo — iN*-o^t-*o»-o * “ o o o ^ N ^ΟΟΟΟΟΟνβΟΟΟΟΟΟΟ r-ι n m m »·ν mmm . W O' O o σ θ' n ρ^ΜΝη·-οοθ·*ΟβΝθ^ 1 >.. vn o n in n n n »· nooooo — fNfNoiNrvo-o • - · o o o o o o σι ooooooooooooooo • * <* rt • 1 n n „ * , f r* V Γ4 vi) - --· ' - s s - a to om U K . n u «J -r * U ® m £ ® £ ne om ^s^Qj^voevo UH vo θ' « «r ^ • * .JOJ σ%φΐ-»ΓΝΓΝ^ &.<m n< r>« vo mn* OU _ £ 0 V «η*· ·< n m υ ·~* « »-u . c^-ocee-o-o***oo= uooo-vh<“o £ .. . p— r-u — w,j‘i=Su.u. cc -) m u. < So . — EE X) ·-«►-« ._ so *j ien»-«u-e ... O -J”?""'.*" Cl -ii'.ec-Uoiii. 5 . I r, u333ttl€J—"jj®!—«C«i= ®®U -00-> - • T, . u u ^ —1 -* Ό ι/ι—'Ό CTU::~ C~*<0 ·-* -· O Crt . '; ^n333aauJ"nco« o .e o> σ- n e i ‘•>W«V-^---<3CVi--l4U3^^ E •H-^o’oinnn^-'^oH^uooooaiuocijun.

±J O O O O 2 Ή 'K ^ UUCUCPOO^fiUi.

- jj.^.Ouuuouw.ij uu c. Z) *j cr* u u

TiipSOUuuOiJr-wuejtii·* *j— *ι«λ« - ' H '£*OOOOOV^Vvuu^Z*«V3«*mZm 1‘ 5 OUuOuy^cuyoj=i;^.-iu>ccceJ! •H CnoOoOOO *;t*U^iOUu>J>4 0 0 0 4·« * £ t 3 — — *^u - ... 0S'1Jr‘5'i'i’i,2i.^n?0Uu '<Aj53Ooowc . · O^^CfClMCICI&'O'O'Soe < . ly ^ v li u *J *J C -1 -"· C c »» m _4 n u v, m η n 0 _ • ’ » ®wtnvitov>wW<uwwuiujiB)o»o*B»o«o.inv) 13 38041

Taulukko 2

Anaerobiset Antibakteerinen kirjo mikro-organismit MIC (pg/ml) 5 _Yhdiste esimerkistä 5

Bacteroides fragilis ATCC 23745 0,78

Bacteroiden fragilis NR 2579 3,13

Bacteroides fragilis NR 2582 0,78

Bacteroides fragilis NR 2583 0,39 10 Bacteroides fragilis NR 2584 0,78

Bacteroides distasonis NR 2578 0,78

Bacteroides thetaiotaomicron NR 2588 1,56

Bifidobacterium adolescentis ATCC 15703 0,39

Clostridium botulinum NR 2611 0,10 15 Clostridium perfringens NR 2612 0,39

Clostridium moniliforme ATCC 25546 0,78

Fusobacterium varium ATCC 8501 12,5

Peptococcus prevotii ATCC 9321 1,56

Peptococcus variabilis ATCC 14955 0,78 20 Peptostreptococcus anaerobius NR 2743 0,39

Propionibacterium acnes ATCC 11828 0,78

Mycoplasma

Mycoplasma hominis NR 2952 0,10 : 25 _

In vivo - terapeuttinen vaikutus Jäljempänä esitetyn esimerkin 5 mukaan valmistettujen pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiinijohdannais-30 ten antibakteerisia aktiivisuuksia in vivo tutkittiin Escherichia coli ML4707:n, Pseudomonas aeruginosa 4au542:n ja Streptococcus pneumoniae 6-001:n aiheuttamaa kuolettavaa infektiota vastaan.

ICR-hiiret, jotka painoivat noin 20 g, tartutettiin 35 vatsaontelon sisäisellä injektiolla vastaavalla bakteeri- 14 38041 suspensiolla. Koeyhdisteet annettiin oraalisesti 5 päivän aikana. Vastaava 50-% risesti tehokas annos (Εϋ^0/ mg/kg), joka suojaa 50 % eläimistä tartunnan aiheuttamalta kuolemalta, on esitetty taulukossa 3.

5

Taulukko 3

Antibakteeriset aktiivisuudet in vivo systeemistä infektiota vastaan hiirissä (ED50, mg/kg) 10 Bakteeri

Escherichia Pseudomonas Streptococcus Yhdiste coli ML4707 aeruginosa pneumoniae _4au542_6-100_ s.c. p.o._p. o._p.o._ 15 Esimerkki 5 0,06 0,11 13,4 10,3 3. Akuutti myrkyllisyys Jäljempänä esimerkeissä 5, 6, 7, 13 ja 14 saatujen 20 yhdisteiden vastaavat LD50-arvot ovat enemmän kuin 2 000 mg/kg. Näiden yhdisteiden akuutti myrkyllisyys tutkittiin antamalla niitä oraalisesti ICR-hiirille.

Kaavan I mukaisilla yhdisteillä, niiden suoloilla, hydraateilla ja solvaateilla on laaja antimikrobinen kirjo 25 gram-positiivisia ja gram-negatiivisia bakteereita sekä

Mycoplasmaa vastaan, erityisesti niitä vastaan, jotka ovat resistenttejä erilaisille antibiooteille, kuten penisilliineille, kefalosporiineille, aminoglykosideille, tetra-sykliineille ja vastaaville.

·. 30 Lisäksi kaavan I mukaisilla yhdisteillä, niiden suoloilla, hydraateilla ja solvaateilla on alhainen myrkyllisyys ja voimakas ja laaja antimikrobinen vaikutus. Yhdisteiden suojavaikutukset systeemisiin bakteeri-infektioihin hiirissä ovat suuremmat kuin synteettisillä anti-35 bakteerisilla aineilla, jotka ovat kaupallisesti saatavis- 15 38041 sa. Siksi näitä yhdisteitä voidaan tehokkaasti käyttää hyväksi ehkäistäessä tai hoidettaessa gram-positiivisten ja gram-negatiivisten bakteerien ja bakteeriperäisten mikro-organismien aiheuttamia sairauksia ihmisissä ja eläi-5 missä.

Esimerkiksi seuraavien mikro-organismien tai seu-raavien mikro-organismien seosten aiheuttamia sairauksia voidaan hoitaa ja/tai ehkäistä: Staphylococcus, Streptococcus, Aerococcus, Enterococcus, Micrococcus, Lactobacil-10 lus, Bifidobacterium, Clostridium, Eubacterium, Peptococ- cus, Peptostreptococcus, Propionibacterium, Escherichia, Citrobacter, Campylobacter, Enterobacter, Klebsiella, Proteus, Pseudomonas, Serratia, Salmonella, Shigella, Vibrio, Aeromonas, Haemophilus, Neisseria, Acinetobacter, Alcali-15 genes, Bordetella, Bacteroides, Fusobacterium, Mycoplasma ja muut mikro-organismit.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, niiden suoloja, hyd-raatteja ja solvaatteja voidaan antaa oraalisesti tai ei-oraalisesti ihmisille tai eläimille erilaisilla tavanomai-20 silla antomenetelmillä.

Lisäksi kaavan I mukaisia yhdisteitä, niiden suoloja, hydraatteja ja solvaatteja käytetään yksinään tai koostumuksina apuaineiden, sideaineiden, liukastusainei-den, humektanttien jne. kanssa, esimerkiksi yleisten lää-25 ketieteellisten koostumusten, kuten tablettien, rakeiden, sokeripäällysteisten tablettien, jauheen, kapseleiden, geelien, kuivasiirapin, siirapin, ampullien, suspension, nesteen, emulsion, voiteiden, pastan, kreemin, peräpuikkojen ja vastaavien muodossa.

30 Edelleen voidaan käyttää liukenemista auttavia ai neita, imeytymistä nopeuttavia aineita, pinta-aktiivisia aineita ja vastaavia, sekä muita muotoilemiseen tarvittavia lisäaineita, ts. mitä tahansa farmaseuttisesti sopivia muotoja.

TTT __ i6 88 0 41

Kaavan I mukaisia yhdisteitä, niiden suoloja, hyd-raatteja ja solvaatteja voidaan käyttää yksinään tai seoksena kahdesta tai useammasta erilaisesta yhdisteestä ja yhdisteiden määrä on noin 0,1 - 99,5 %, edullisesti 0,5 5 - 95 %, perustuen koko lääketieteellisen koostumuksen pai noon.

Lääketieteellinen koostumus, joka sisältää kaavan I mukaista yhdistettä, sen suolaa, hydraattia tai solvaat-tia, voidaan muodostaa kaavan I mukaisen yhdisteen yhdis-10 telmänä tai niiden seoksena muiden tavanomaisten yhdisteiden kanssa, jotka ovat farmaseuttisesti vaikuttavia.

Kaavan I mukaisen yhdisteen annostus potilaalle päivässä voi vaihdella riippuen yksittäisestä henkilöstä, eläinlajista, niiden painosta ja hoidettavasta tilasta, 15 mutta on yleensä alueella 0,5 - 500 mg päivässä painokiloa kohti, edullisesti noin 1 - 300 mg.

Isokinoliineja, joissa on fuusioitunut oksametylee-nirengas (ts. jotka muodostavat pyrido[l,2,3-de]-l,4-bentsoksatsiinijohdannaisia), tunnetaan esimerkiksi EP-20 hakemusjulkaisusta 47 005. Kaavan I mukaiset yhdisteet eroavat merkittävästi näistä yhdisteistä kuitenkin siinä, että niissä on kaksi vierekkäistä typpiatomia fuusioituneessa renkaassa, jolloin ne muodostavat pyrido[3,2,1-ij]- 1,4-bentsoksadiatsiineja. Näillä yhdisteillä on, kuten 25 edellä on osoitettu, erinomainen ja laaja antibakteerinen aktiivisuus gram-positiivisia ja gram-negatiivisia bakteereja sekä Mycoplasmaa vastaan.

Seuraavat esimerkit valaisevat kaavan III mukaisten välituotteiden valmistamista sekä niiden käyttöä.

30 Lähtöaineen valmistus

Viite-esimerkki

Dietyyli-N-(3,4-dif luori-2-hydroksifenyyli)aminome- tyleenimalonaatin valmistus a) Liuosta, jossa oli 2,3-difluori-6-nitrofenonia 35 (500 mg) metanolissa (7 ml), hydrattiin 5 % Pd/C:n (60 mg) 17 88041 yllä 6 tuntia. Reaktioseos suodatettiin typpivirrassa ja suodos haihdutettiin, jolloin saatiin 414 mg epäpuhdasta 2-amino-5,6-difluorifenolia.

b) Edellä saadun amiinin (414 mg) ja dietyylietok-5 simetyleenimalonaatin (618 g) seosta kuumennettiin 130 °C:ssa typpiatmosfäärissä 5 minuuttia. Saatua kiinteää jäännöstä trituroitiin etanolin kanssa ja suodatettiin, jolloin saatiin 590 mg dietyyli-N-(3,4-difluori-2-hydrok-sifenyyli)aminometyleenimalonaattia; sp. 178 - 180 °C; MS 10 m/z 315 (Mf). Suorittamalla emäliuokselle silikageelipyl-väskromatografia käyttäen eluenttina CHCl3/asetonia (20:1) saatiin vielä 59 mg kiteitä.

Etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-dif luori-4-hydroksi-3-kinoliinikarboksylaatti (tapa 1) 15 c) Seokseen, jossa oli dietyyli-N-(3,4-difluori- 2-hydroksifenyyli)aminometyleenimalonaattia (80 mg) ja vedetöntä kaliumkarbonaattia (70 mg) kuivassa dimetyyli-formamidissa (1,5 ml), lisättiin bentsyylibromidia (30 μΐ). Seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 2 tuntia. Liuot-20 timen poiston jälkeen alipaineessa jäännös liuotettiin di-kloorimetaaniin ja sakka suodatettiin pois. Suodos pestiin vedellä, kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja haihdutettiin. Kiteinen jäännös pestiin n-heksaanilla ja uudelleenkiteytettiin metanolista, jolloin saatiin dietyy-25 li-N-(2-bentsyylioksi-3,4-difluorifenyyliJaminometyleeni- malonaattia (90 mg); sp. 87 °C; MSm/z 405 (M*).

d) Edellä saadun malonaatin (280 mg) liuosta dife-nyylieetterissä (2,8 ml) kuumennettiin 250 °C:ssa 30 minuuttia typpiatmosfäärissä. Reaktioseoksen jäähdytyksen 30 jälkeen reaktioväliaineessa syntynyt etanoli poistettiin alipaineessa. Tummanruskealle liuokselle suoritettiin pyl-vässilikageelikromatografia (10 g) eluoiden peräkkäin bentseenillä, dikloorimetaanilla ja dikloorimetaani/aseto-nilla (30:1). Puhtaat fraktiot yhdistettiin ja liuotin 35 poistettiin alipaineessa, jolloin saatiin kiteinen jään- ie 88 041 nös. Jäännös pestiin n-heksaanin ja etyyliasetaatin seoksella, jolloin saatiin 90 mg etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-4-hydroksi-3-kinoliinikarboksylaattia.

Analyyttinen näyte; sp. 200 - 201 °C; MS m/z 359 5 (M*); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä metanolista.

Etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-dif luori-4-hydroksi-3-kinoliinikarboksylaatin valmistus (tapa 2) Etyyli-6,7-difluori-4,8-dihydroksi-3-kinoliinikarb-oksylaatin (300 mg) sekoitettuun liuokseen kuivassa dime-10 tyyliformamidissa (6 ml) lisättiin vedetöntä kaliumkarbo naattia (308 mg) ja sitten bentsyylikloridia (145 μΐ). Seosta sekoitettiin 55 - 65 °C;ssa 11 tuntia. Reaktioseos laimennettiin vedellä (30 ml) ja uutettiin kloroformilla. Uute kuivattiin vedettömällä natriumsulfaatilla ja kon-15 sentroitiin alipaineessa. Jäännös kromatografoitiin sili- kageelillä (7 g) käyttäen asetoni/kloroformia (1:20) elu-enttina, jolloin saatiin 113 mg etyyli-8-bentsyylioksi- 6,7-difluori-4-hydroksi-3-kinoliinikarboksylaattia; sp.

200 - 201 °C? MS m/z 359 (M*); uudelleenkiteytyksen jälkeen 20 metanolista.

Etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-1-(formyylime-tyyliamino) -4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksy-laatin valmistus e) Kun etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-4-hydr-25 oksi-3-kinoliinikarboksylaatin (410 mg) ja vedettömän ka liumkarbonaatin (315 mg) seosta kuivassa dimetyyliformami-dissa (10 mg) oli sekoitettu huoneenlämmössä 3 tuntia, lisättiin 0-(2,4-dinitrofenyyli)hydroksyyliamiinia (260 mg). Seosta sekoitettiin huoneenlämmössä vielä 6,5 tuntia. 30 Liuottimen poistamisen jälkeen alipaineessa jäännökseen lisättiin vettä (12 ml) ja seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 3 tuntia. Sakka kerättiin suodattamalla ja pestiin kylmällä vedellä ja sitten eetterillä, jolloin saatiin 405 mg etyyli-l-amino-bentsyylioksi-6,7-difluori-4-okso-l,4-35 dihydro-3-kinoliinikarboksylaattia.

i is 88041

Analyyttinen näyte; sp. 143 - 144 °C; MS m/z 374 (M*); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä metanolista.

f) 90-%:ista muurahaishappoa (0,60 ml) lisättiin etikka-anhydridiin (1,51 ml) 0 °C:ssa. Seosta sekoitettiin 5 0 °C:ssa 15 minuuttia, 50 °C:ssa 15 minuuttia ja jäähdytet tiin sitten 0 °C:seen. Tähän liuokseen lisättiin tipoittain edellä saadun amiinin (400 mg) liuos 98-%:isessa muurahaishapossa (2,1 ml). Seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 2 päivää. Reaktioseos haihdutettiin alipaineessa, jolloin 10 saatiin kiteinen jäännös, joka uudelleenkiteytettiin etanolista, jolloin saatiin 410 mg etyyli-8-bentsyylioksi- 6,7-difluori-1-(formyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kino-liinikarboksylaattia; sp. 188 - 190 °C; MS m/z 402 (M*).

g) Edellä saadun formamidin (400 mg), vedettömän 15 kaliumkarbonaatin (275 mg) ja vedettömän dimetyyliformami- din (17 ml) seosta sekoitettiin huoneenlämmössä 1,5 tuntia. Metyylijodidia (0,19 ml) lisättiin seokseen ja sekoittamista jatkettiin 2,5 tuntia. Liuotin poistettiin alipaineessa ja jäännös jaettiin kloroformiin ja veteen. 20 Orgaaninen kerros kuivattiin vedettömällä natriumsulfaa-tilla ja konsentroitiin kuiviin alipaineessa. Jäännös kiteytettiin etanolista, jolloin saatiin 335 mg etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-1-(formyylimetyyliamino) -4-okso-1,4-dihydro-3-kinoliinikarboksylaattia; sp. 180 - 181 25 °C; MS m/z 416 (M*).

6,7-difluori-8-hydroksi-l-(metyyliamino)-4-okso- 1,4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihapon valmistus h) Etyyli-8-bentsyylioksi-6,7-difluori-1-(formyy-limetyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarboksy- 30 laattia (330 mg) hydrattiin 5 % Pd/C:n (50 mg) yllä kloroformissa (14 ml) 4 tuntia. Reaktioseos laimennettiin meta-nolilla (14 ml) ja suodatettiin. Suodatinkakku pestiin kloroformi/metanolilla (1:1). Yhdistetty suodos haihdutettiin ja jäännös uudelleenkiteytettiin etanolista, jolloin 35 saatiin 239 mg etyyli-6,7-difluori-l-(formyylimetyyliami- 20 8 8 0 41 no )-8-hydroksi-4-okso-l, 4-dihydro-3-kinoliinikarboksylaat-tia; sp. 221 - 225 °C (haj.); MS m/z 326 (M*).

1) Edellä saadun esterin (210 mg) ja 0,5 N natrium-hydroksidin (5,2 ml) seosta kuumennettiin 100 °C:ssa 2 tun-5 tia typpiatmosfäärissä. Reaktioseos tehtiin happamaksi etikkahapolla (0,16 ml). Erottunut sakka suodatettiin, pestiin vedellä ja kuivattiin alipaineessa, jolloin saatiin 168 mg 6,7-difluori-8-hydroksi-l-(metyyliamino)-4-okso-1,4-dihydro-3-kinoliinikarboksyylihappoa.

10 Analyyttinen näyte; sp. 248 - 250 °C (haj.); MS m/z 270 (M*); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä etanolista.

Esimerkki 1 9,10-dif luori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyri- do[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyy-15 lihapon valmistus

Viite-esimerkissä i) saadun 6,7-difluori-8-hydrok-si-1-(metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarbok-syylihapon (105 mg), paraformaldehydin (150 mg) ja kuivan dioksaanin (5 ml) seosta kuumennettiin 100 °C:ssa 3 tuntia 20 alipaineessa typpiatmosfäärissä. Liuottimen poiston jälkeen alipaineessa jäännökseen lisättiin dimetyyliformami-dia (20 ml) ja seosta sekoitettiin 20 minuuttia ja suodatettiin sitten. Suodatinkakku pestiin dimetyyliformamidil-la ja yhdistetty suodos haihdutettiin alipaineessa. Jään-25 nös trituroitiin veden kanssa ja suodatettiin, jolloin saatiin 97 mg 9,10-difluori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyri do[3,2,1 -1j]-1,3,4-bontsoksadi atsl1ni-6-karboknyy-lihappoa.

Analyyttinen näyte; sp. 290 - 292 °C (haj.); MS m/z 30 282 (M*); valmistettiin uudelleenkiteyttämällä dimetyyli- formamidista.

21 λ 3 0 41

Esimerkki 2 9,10-difluori-2,3-dimetyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij] -l,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karbok-syylihapon valmistus 5 Viite-esimerkissä i) saadun 6,7-difluori-8-hydrok- si-1-(metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarbok-syylihapon (50 mg), 90-%risen asetaldehydin (1 ml) ja di-oksaanin (5 ml) seosta kuumennettiin 100 °C:ssa 3 tuntia typpiatmosfäärissä. Reaktioseos haihdutettiin alipainees-10 sa, jolloin saatiin 52 mg 9,10-difluori-2,3-dimetyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiat-siini-6-karboksyylihappoa; sp. 285 - 289 °C; MS m/z 296 (M*).

Esimerkki 3 15 9,10-difluori-2- (hydroksimetyyli)-3-metyyli-7-okso- 2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadi-atsiini-6-karboksyy1ihapon valmistus

Viite-esimerkissä i) saadun 6,7-difluori-8-hydrok-si-1-(metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinoliinikarbok-20 syylihapon (50 mg), glykolaldehydidietyyliasetaalin (45 μΐ) ja pyridiini-p-tolueenisulfonaatin (7 mg) suspensiota kuivassa dioksaanissa (2 ml) kuumennettiin 110 °C:ssa 5 tuntia typpiatmosfäärissä. Kun liuotin oli poistettu alipaineessa, kiteinen jäännös pestiin vedellä ja metanolil-25 la, jolloin saatiin 52 mg 9,10-difluori-2-(hydroksimetyy-li)-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]- l,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappoa; sp. 254 - 258 °C (haj.); MS m/z 312 (M+).

Esimerkki 4 30 9,10-difluori-2-[(dimetyyliamino)metyyli]-3-metyy- li-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,l-ij]-l,3,4-bent soksadiatsiini-6-karboksyy lihappo-p-tolueeni-sulfonaatin valmistus

Viite-esimerkissä i) saadun 6,7-difluori-8-hydrok-35 si-1-(metyyliamino)-4-okso-l,4-dihydro-3-kinollinikarbok- 22 88 041 syylihapon (50 mg), dimetyyliaminoasetaldehydidimetyyli-asetaalin (37 mg) ja p-tolueenisulfonihappomonohydraatin (53 mg) suspensiota kuivassa dioksaanissa (2 ml) kuumennettiin 110 °C:ssa 17 tuntia typpiatmosfäärissä. Kun liuo-5 tin oli poistettu alipaineessa, jäännös uudelleenkiteytet-tiin metanolista, jolloin saatiin 61 mg 9,10-difluori-2-t ( dimetyyliamino)metyyli]-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyy-lihappo-p-tolueenisulfonaattia; sp. 232 - 236 °C (haj.); 10 FAB-MS m/z 340 (MH*).

Esimerkki 5 (käyttöesimerkki) 9-fluori-3-metyyli-10-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)- 7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij] -1,3,4-bents-oksadiatsiini-6-karboksyylihapon valmistus 15 Esimerkissä 1 saadun 9,10-difluori-3-metyyli-7-ok- so-2,3-dihydro-7H-pyrido[3, 2,1-ij ] -1,3,4-bentsoksadiatsii-ni-6-karboksyylihapon (30 mg), N-metyylipiperatsiinin (47 pl) ja kuivan pyridiinin (3 ml) seosta kuumennettiin 100 - 110 °C:ssa 9 tuntia typpiatmosfäärissä. Pyridiini pois- 20 tettiin alipaineessa ja jäännös uudelleenkiteytettiin metanolista, jolloin saatiin 23 mg 9-fluori-3-metyyli-10-( 4-metyyli-l-piperatsinyyli ) - 7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido-[3,2,1-ij ] -1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappoa; sp. 268 - 269 °C (haj.); MS m/z 362 (M*).

25 Seuraavat yhdisteet saatiin esimerkin 5 kanssa ana logisella tavalla (käyttöesimerkkejä): 23 8 8 0 41 o

C02H

R5R6N

5 ON

X CH3

Esim. R5R6-N Sulamispiste Uudelleen- MS m/z nro °C kiteytys- 10 _ liuotin - / \ ----—-- 6 HN N- 240 ™ 245 MeOH 349 (MH*) (* ' f (haj.) 7 HN7 ^N- 237λ/ 239 MeOH/CHCl3 362 (M*) 15 CH3"^ ^ (haj . ) /-\ 8 HN N- 256^259 DMF 425 (MH*) (*

Ph^ ' (haj.) 20 9 0^ ^N- > 300 EtOH/CHCl3 349 (M*) 10 ^N- > 300 (haj . ) DMF 365 (M*) 11 H2N238 <v»242 MeOH 377 (MH*)1* (haj.) 12 HO-( N- 256^ 258 MeOH/CHCl3 363 (M*) 30 _ H N- 13 CH3N f 242 λ/244 DMF 377 (MH*) (* (haj.) (jatkuu...) 24 8 8 0 41

Esim. R5R6-N Sulamispiste Uudelleen- MS m/z nro °C kiteytys- ____liuotin_ 5 H N- 14 02Η5Ν\^—f 251a; 252 EtOH 391 (MH1) (1 _(haj.) H N- 14a AcNv^-/ 239 a; 241 EtOH 405 (MH1) (1 10 (haj . ) CH3 CH3 15 266 η; 268 EtOH 365 (MH1) CH3 ( haj . ) 15 16 284 a; 286 DMF 350 (MH1) HO ^ f ( ha j . ) CH3-r=rr^ 17 N- 280^284 MeOH/CHCl3/Et20 20 N:==-/ (haj.) 345 (MH1) (1

FAB-MS

25 Seuraavat yhdisteet valmistettiin esimerkeissä 2, 3 ja 4 kuvatuista yhdisteistä tavalla, joka oli analoginen esimerkissä 5 käytetyn tavan kanssa (käyttöesimerkkejä): 25 8 8 041 o f c°2li 5 R5R6N n O N_ V CH3 R3 10 Esim. R5R6-N Sulamispiste Uudelleen- MS m/z nro R3 °C kiteytys- ___liuotin_ 18 HN^ ^N- CH3 240242 MeOH 362 (M*) 15 N / (haj.) 19 CH3lT\ CH3 203/v206 EtOH 376 (MH*) l* 20 20 CH3N N- CH2OH 229^231 MeOH 393 (MH*) (* ' f (haj . ) / \ 21 CH3N N- 210/V212 MeOH 420 (MH*) ( N 1 CH2N(CH3)2 25 _

*) FAB-MS

Esimerkki 22 (käyttöesimerkki) 10-[3-(bentsyylioksikarbonyyliamino)-1-pyrrolidin-30 yyli]-9-fluori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H- pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karbok-syylihapon valmistus

Esimerkissä 1 saadun 9,10-difluori-3-metyyli-7-ok-so-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-i j ] -1,3,4-bentsoksadiatsii-35 ni-6-karboksyylihapon (28 mg), 3-(bentsyylioksikarbonyyli- 26 88041 amino)pyrrolidiinin (94 mg) ja kuivan pyridiinin (3 ml) seosta kuumennettiin 100 °C:ssa 3 tuntia typpiatmosfäärissä. Pyridiini poistettiin alipaineessa ja jäännös uudel-leenkiteytettiin metanolista, jolloin saatiin 36 mg 10-5 [3-(bentsyylioksikarbonyyliamino)-l-pyrrolidinyyli]-9- f luori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij ] - 1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappoa; sp. 227 - 230 °C; MS m/z 482 (M*).

Esimerkki 23 (käyttöesimerkki) 10 9-f luori-3-metyyli-10- (4-metyyli-l-piperatsinyyli) - 7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij ] -1,3,4-bents-oksadiatsiini-6-karboksyylihapon valmistus fluori-boraanivälituotteen kautta a) Esimerkissä 1 saadun 9,10-difluori-3-metyyli-7- 15 okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,l-ij]-l,3,4-bentsoksadiat- siini-6-karboksyylihapon (100 mg) ja 60-%:isen fluoriboo-rihapon vesiliuoksen (1 ml) seosta kuumennettiin 90 °C:ssa 12 tuntia. Kun reaktioseos oli jäähdytetty huoneen lämpötilaan, sakka kerättiin suodattamalla, pestiin metanolilla 20 ja kuivattiin alipaineessa, jolloin saatiin 110 mg epäpuhdasta 9,10-difluori-6-{[(difluoriboryyli)oksi]karbonyy-li}-3-metyyli-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,l-ij]-l,3,4-bents-oksadiatsin-7-onia; FAB-MS m/z 331 (MH*).

b) Edellä saadun boraanivälituotteen (33 mg) sekoi- 25 tettuun liuokseen dimetyylisulfoksidissa (1 ml) lisättiin N-metyylipiperatsiinia (15 μΐ) ja trietyyliamiinia (20 μΐ). Kun oli sekoitettu huoneenlämmössä 3 tuntia, seos lyofolisoitiin. Jäännös kiteytettiin metanolista, jolloin saatiin 28 mg 6-{[(difluoriboryyli)oksi]karbonyyli}-9-30 fluori-3-metyyli-10-(4-metyyli-l-piperatsinyyli )-2,3-di- hydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsin-7-onia keltaisina kiteinä; sp. 228 - 230 °C (haj.); FAB-MS m/z 411 (MH*).

c) Edellä saadun boraanivälituotteen (5 mg) liuok-35 seen 95-%:isessa etanolissa (1 ml) lisättiin trietyyli- i 27 88 0 41 amiinia (3 μΐ). Kun oli palautusjäähdytetty 4 tuntia, reaktioseos jäähdytettiin huoneenlämpöön. Erottunut sakka kerättiin suodattamalla, jolloin saatiin 9-fluori-3-metyy- li-10-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-7-okso-2,3-dihydro-7H-5 pyrido-[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyyli-happoa; sp. 268 - 269 °C (haj.).

Esimerkki 24 9-fluori-3-metyyli-10-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)- 7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij ] -1,3,4-bents-10 oksadiatsiini-6-karboksyylihapon valmistus asetok- siboraanivälituotteen kautta a) Esimerkissä 1 saadun 9,10-difluori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiat-siini-6-karboksyylihapon (100 mg), etikka-anhydridin (1 15 ml) ja triasetoksiboraanin (100 mg) seosta kuumennettiin 140 °C:ssa 15 minuuttia. Reaktioseos haihdutettiin alipaineessa. Jäännöstä trituroitiin asetonin kanssa ja suodatettiin, jolloin saatiin 138 mg 6-{[(diasetoksiboryyliJoksi] karbonyyli} -9 ,10-difluori-3-metyyli-2,3-dihydro-7H-py-20 rido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsin-7-onia; FAB-MS m/z 411 (MH*) .

b) Edellä saadun booraanivälituotteen (41 mg) liuokseen dimetyylisulfoksidissa (1 ml) lisättiin N-metyy-lipiperatsiinia (15 μΐ) ja trietyyliamiinia (20 μΐ). Kun 25 seosta oli sekoitettu huoneenlämmössä 2 tuntia, reaktio-seos lyofilisoitiin. Jäännös kiteytettiin metanoli/eette-ristä, jolloin saatiin 34 mg 6-{[(diasetoksiboryyliJoksi]-karbonyyli}-9-fluori-3-metyyli-10-(4-metyyli-l-piperatsin-yyli )-2,3-dihydro-7H-pyrido[3,2,1-ij ] -1,3,4-bentsoksadiat-30 sin-7-onia keltaisina kiteinä; sp. 156 - 157 °C (haj.); FAB-MS m/z 491 (MH*).

c) Edellä saatua boraanivälituotetta (5 mg) suspen-doitiin asetoniin (0,1 ml) ja lisättiin konsentroitua HCl:a (2,5 μΐ). Reaktioseosta sekoitettiin huoneenlämmössä 35 30 minuuttia ja jäähdytettiin jäähauteessa. Erottunut sak- 28 88Q41 ka kerättiin suodattamalla ja sakka liuotettiin 95-%:iseen etanoliin (0,1 ml). Liuokseen lisättiin trietyyliamiinia (2 μΐ) ja seosta palautusjäähdytettiin 1 tunti. Kun liuos oli jäähdytetty huoneenlämpöön, erottunut sakka kerättiin 5 suodattamalla, jolloin saatiin 9-fluori-3-metyyli-10-(4-metyyli-l-piperatsinyyli)-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido-[3,2,l-ij]-l,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappoa; sp. 268 - 269 °C (haj. ).

Esimerkit 25 ja 26 (käyttöesimerkkejä) 10 Seuraavat yhdisteet saatiin lähtien esimerkissä 1 saadusta yhdisteestä käyttäen menetelmää, joka oli analoginen esimerkin 5 tai esimerkin 22 menetelmien kanssa.

0

15 F C°2H

n

0 N

^CH-j 20

Esim. r5R6-N Sulamispiste Uudelleen- MS m/z nro °C kiteytys- ___liuotin_ ch30, 25 *#·ι—\ 25 N- 221 - 230 EtOH/ 379 (MH*) H2N ^^ (haj.) heksaani CH, 3 30 *'|—\ 26 N- 240 - 241 MeOH 363 (MH*) H2N·^—/

Claims (2)

29 88041

1. Pyrido[3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-kar- 5 boksyylihappojohdannaiset, jotka ovat käyttökelpoisia vä lituotteina ja joilla on kaava O COOR1 10 jl li (J (III) O N ^''r3 ^R2 15 jossa X' on halogeeniatomi; R1 on vety tai karboksiryhmän suojaradikaali, joka on alempi alkyyli, bentsyyli tai alempi alkanoyylioksialkyyli; R2 on alempi alkyyliradikaa-li, joka voi olla substituoitu fluoriatomilla, ja R3 on 20 vety tai mahdollisesti hydroksiradikaalilla tai di(alempi alkyyli)aminoradikaalilla substituoitu alempi alkyyliradi-kaali, jolloin läsnä olevat amino-, hydroksi- ja/tai karb-oksiryhmät voivat olla suojattuja.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, joka on 25 9,10-difluori-3-metyyli-7-okso-2,3-dihydro-7H-pyrido- [3,2,1-ij]-1,3,4-bentsoksadiatsiini-6-karboksyylihappo. 30 Θ8041