FI92557C - Menetelmä pastöroidun immunoglobuliinivalmisteen valmistamiseksi - Google Patents

Menetelmä pastöroidun immunoglobuliinivalmisteen valmistamiseksi Download PDF

Info

Publication number
FI92557C
FI92557C FI872578A FI872578A FI92557C FI 92557 C FI92557 C FI 92557C FI 872578 A FI872578 A FI 872578A FI 872578 A FI872578 A FI 872578A FI 92557 C FI92557 C FI 92557C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
immunoglobulin
solution
carboxylic acid
process according
heated
Prior art date
Application number
FI872578A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI92557B (fi
FI872578A0 (fi
FI872578A (fi
Inventor
Hans Mueller
Helmut Geiger
Original Assignee
Centeon Pharma Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=6302735&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=FI92557(C) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Centeon Pharma Gmbh filed Critical Centeon Pharma Gmbh
Publication of FI872578A0 publication Critical patent/FI872578A0/fi
Publication of FI872578A publication Critical patent/FI872578A/fi
Publication of FI92557B publication Critical patent/FI92557B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI92557C publication Critical patent/FI92557C/fi

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K16/00Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61LMETHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor
    • A61L2/0005Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts
    • A61L2/0011Methods or apparatus for disinfecting or sterilising materials or objects other than foodstuffs or contact lenses; Accessories therefor for pharmaceuticals, biologicals or living parts using physical methods
    • A61L2/0023Heat
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

92557
Menetelmä pastöroidun immunoglobuliinivalmisteen valmistamiseksi
Keksintö koskee menetelmää pastöroidun immunoglobu-5 liinivalmisteen valmistamiseksi. Menetelmässä immunoglobu- liinin liuosta kuumennetaan lisääntymiskykyisten taudinaiheuttajien inaktivoimista varten stabilaattoreiden läsnä ollessa ja haluttaessa puhdistetaan.
Syntyi tarve kehittää menetelmä, jossa voidaan pas-10 töroimalla inaktivoida taudinaiheuttajia kuten viruksia immunoglobuliinivalmisteissa samalla säilyttäen immunoglo-buliinin aktiivisuus. Valmistettaessa immunoglobuliineja tavallisten menetelmien mukaisesti pienenee potentiaalinen infektioriski yleisesti. Virusten ja virusperäisten vasta-15 aineiden pitoisuus pienenee selvästi alle käytetyn koesys-teemin toteamisrajan.
Toteamisraja ei kuitenkaan yleensä ole riittävän alhainen, jotta infektioriski olisi yksiselitteisesti poissuljettu. Toisaalta tietyille viruskontaminaatioille 20 ei ole olemassa mitään vastaavaa koesysteemiä. Lämpökäsittely on siten tarkoituksenmukainen.
Denaturoitumisen estämiseksi on tarpeellista stabiloida immunoglobuliini lämmönkehittymisen aikana. Varman inaktivoinnin saavuttamiseksi on välttämätöntä kuumentaa :25 pitemmän aikaa mahdollisimman korkeassa lämpötilassa.
« · · * .·. : EP-A 0 124 506 esittää menetelmä, jossa immunoglo- • · · .1 ’ buliiniliuokseen lisätään ammoniumsulfaattia ja suspensio- • · * . ta kuumennetaan yli 60 tuntia 60 °C:ssa. Jos immunoglobu- • · · *’·* liiniliuos kuitenkin käsitellään tämän patenttijulkaisun 30 esimerkin 16 mukaisesti, syntyy myös polymeeristä immuno-globuliinia. Eurooppalainen farmakopea ei salli lihaksen sisäisesti käytettävän immunoglobuliinin sisältävän enemmän kuin 10 % polymeeristä osuutta.
EP-A- 0 144 714 esittää, että Cohn-fraktio II+III 35 (J. Am. Chem. Soc. 68 (1946) 459) voidaan pastöroida vain 2 92557 lievissä olosuhteissa edullisesti 52 °C:ssa noin 30 minuuttia, jopa vaikka euglobuliini etukäteen erotettiin ja liuos tehtiin dialyysin avulla etanolittomaksi, ja kaikesta huolimatta syntyi aggregaatteja. On kyseenalaista, onko 5 virusinaktivointi mahdollista näissä olosuhteissa.
The Lancet, 19. marraskuuta 1983, sivut 1198-99, esittää menetelmän, jossa ihmisen immunoglobuliinia kuumennetaan liuoksessa, jossa on 45 % (paino:tilavuus) sorbitolia ja 15 % (paino:tilavuus) glysiiniä, 10 tuntia 60 10 °C:ssa, jolloin ei havaittu aktiviteetin menetystä eikä aggregaattipitoisuuden nousua.
Ihmisplasman pastörointimenetelmä, jossa lisätään sokerialkoholeja, aminohappoja tai sakkarideja, esitetään julkaisussa EP-A-0 139 975. Plasman pastöroinnissa muut 15 plasmaproteiinit suojaavat immunoglobuliinin. Albumiinin stabiloiva vaikutus IgG:hen on tunnettu.
Keksinnön kohteena on menetelmä pastöroidun immuno-globuliinivalmisteen valmistamiseksi, jolle menetelmälle on tunnusomaista, että immunoglobuliinin liuosta kuumenne-20 taan pH:ssa 5 - 8,5 ja lämpötilassa noin 60 °C noin 10 -40 tuntia siten, että läsnä on karboksyylihappoa tai sen suolaa määrä, joka on yli kyllästyspitoisuuden ja/tai mono-, di- tai oligosakkaridia. Menetelmässä immunoglobuliinin liuosta siis kuumennetaan karboksyylihapon tai sen : : : 25 suola ja/tai sakkaridin läsnä ollessa, kunnes lisääntymis- kykyiset taudinaiheuttajat, erityisesti hepatiittivirukset • * :·. tai HTLV III ("Aids") -virukset, inaktivoituvat.
Inaktivointiin sopivat olosuhteet ovat tunnettuja • · · alan ammattilaiselle. Tavallinen on lämmitys noin 10 tun-30 tia noin 60 °C:ssa.
Karboksyylihappo on edullisesti alifaattinen kar-boksyylihappo, joka voi edullisesti olla substituoitu toisella tai useammalla karboksyyliryhmällä tai yhdellä tai useammalla aminoryhmillä tai yhdellä tai useammalla hyd-35 roksiryhmillä. Edullisesti siinä on kahdesta kymmeneen 3 92557 hiiliatomia. Edullisesti karboksyylihappo on glysiini, glutamiinihappo, sitruunahappo tai viinihappo.
Edullisesti karboksyylihapon suola on liukoinen metallisuola, erityisesti alkali- tai maa-alkalisuola, 5 erityisesti natrium- tai magnesiumsuola.
Glutamiinihapon suolana käytetään edullisesti alka-lisuolaa, erityisesti mononatriumsuolaa (natriumglutamaat-ti) .
Karboksyylihappoja tai niiden suoloja voidaan lisä-10 tä määränä yli kyllästymispisteen, edullisesti 0,4 - 0,6 g millilitraan stabiloitavaa immunoglobuliiniliuosta.
Edullisesti käytetään sakkaridina mono- tai disak-karidia, erityisen edullisesti sakkaroosia.
Näitä sakkarideja lisätään edullisesti määränä 0,5 15 - 1,0 g stabiloitavan immunoglobuliiniliuoksen millilitraa kohti.
Karboksyylihappoja tai niiden suoloja tai sakkarideja voidaan lisätä stabiloitavaan immunoglobuliiniliuokseen määränä, joka ylittää kyllästysmisrajan.
20 Kun nämä aineet lisätään, immunoglobuliini voi saostua. Tällöin kuumennetaan syntynyttä suspensiota.
pH-arvo säädetään kuumentamista varten arvoon 5 - 8,5, edullisesti arvoon 6,5 - 7,5.
Esitetyn menetelmän mukaisesti voidaan saada pastö- ; 25 roituja immunoglobuliini liuoksia, joiden polymeeripitoi- • · ♦ * .·. suus on alle 10 %. Edullisissa suoritusmuodoissa polymee- • · ♦ ripitoisuus verrattuna kuumentamattomaan immunoglobuliini- • · *. . liuokseen pysyy menetelmän vaihteluvälin alueella.
• ·
Keksinnön mukaisen menetelmän lähtöaineena voi olla 30 puhdistettu immunoglobuliini, jota kirjallisuudessa kutsutaan gammaglobuliiniksi, IgG:ksi, immunoglobuliiniksi G:ksi tai J. Am. Chem. soc. 71 (1949) 541 mukaisesti fraktioksi II. Sellaiset immunoglobuliinit valmistetaan pääasiassa plasmafraktioinnin immunoglobuliinipitoisista 35 fraktioista. Immunoglobuliinipitoiset fraktiot ovat Vox.
4 92557
Sang. 7 (1962) 414 mukaisesti fraktio A ja J. Am. Chem. Soc. 68 (1946) 458 mukaisesti fraktiot II ja III.
Lisäksi voi lähtöaineina olla modifioituja immuno-globuliineja. Sellaisia immunoglobuliineja voidaan muuntaa 5 kemiallisilla, esimerkiksi sulfitolyyttisillä, modifioinneilla tai entsymaattisilla käsittelyillä, esimerkiksi Fc-osien peptisellä katkaisemisella. Immunoglobuliinimolekyy-lin proteolyyttinen katkaisu pepsiinillä pH:ssa 4 johtaa pääasiassa F(ab)2-fragmentteihin, joiden molekyylipaino on 10 noin 100 000 ja analyyttisessä ultrasentrifuugissa määritetty sedimentaatiovakio noin 5 S (S = Svedberg-yksikkö).
Tällaiset tuotteet eivät sisällä katkaisemattoman 7 S immunoglobuliinin (molekyylipaino noin 150 000) lisäksi käytännössä lainkaan immunoglobuliinipolymeeriä. Havaitaan 15 kuitenkin voimakkaammin fragmentoitunut osa, jonka molekyylipaino on pienempi kuin 5 S, konsentraationa alle 10 %.
Yllättäen havaittiin, että esitetty menetelmä sopii myös immunoglobuliiniliuoksille, jotka sisältävät etano-20 lia.
Valmistettaessa puhdistettuja immunoglobuliineja etanolin avulla otetaan usein viimeisenä menetelmävaiheena konsentroinnissa immunoglobuliinin kokonaissaostuma talteen etanolin avulla ja erotetaan saostuma sentrifugoimal- | 25 la. Saostuman liuottamisessa saadaan liuoksia, joiden • · · .*. . jäännösalkoholipitoisuus 10-%:isessa liuoksessa on noin 4 .·, til-%. Etanolin poistaminen tapahtuu tavallisesti pakas- • ♦ *. . tuskuivaamalla tai ultrasuodatuksella. Mikäli alkoholitto- ♦ * · *·’* mien, esimerkiksi ultrasuodatettujen, liuosten kuumentami- 30 nen tapahtuisi stabilaattorin läsnä ollessa, pitäisi tämän jälkeen suorittaa uusi ultrasuodatus näiden lisäaineiden poistamista varten. Menetelmäteknisistä syistä on siten edullista suorittaa kuumentaminen etanolin läsnä ollessa.
Yllättäen havaittiin, että kuumennettaessa immuno-35 globuliineja etanolin läsnä ollessa 60 °C:ssa pitempiä ai- 5 92557 koja, esimerkiksi 40 tuntia, ei havaittu lainkaan aggre-gaatioiden lisääntymistä, kun oli lisätty karboksyylihap-poa.
Tunnettua on, että etanoli denaturoi immunoglobu-5 liinin korkeammissa lämpötiloissa. Tätä vastaavasti saatiin kuumentamalla immunoglobuliineja käyttäen stabilisaattorina karboksyylihappoja tai niiden suoloja ja alkoholin läsnä ollessa suurempia polymeeripitoisuuksia verrattuna työskentelyyn ilman alkoholia.
10 Etanolia sisältävää immunoglobuliiniliuosta on esi merkiksi gammaglobuliinipitoinen fraktio, jota kutsutaan julkaisun Cohn et ai., J. Am. Chem. Soc. 68 (1946) s. 459 eteenpäin, mukaisesti fraktioiksi II+III tai Nitschmannin (Kistner ja Nitschmann, Vox Sang. 7 (1962) 414) mukaisesti 15 fraktioksi A. Tällaiset fraktiot sisältävät gammaglobuliinien lisäksi lipoproteiineja, euglobuliinia, alfa- ja be-ta-globuliinia ja pienempiä määriä albumiinia. Gammaglobuliinin osuus on noin 40 - 80 g 100 g:sta kokonaispröteii-nia. Liuotettaessa 100 g fraktiota II+III 250 ml:aan tis-20 lattua vettä alkoholipitoisuus liuoksessa on 4 - 5 ml/100 ml. Tällainen fraktio II+III voidaan pastöroida keksinnön mukaisella tavalla.
Taulukossa 1 esitetään polymeerisen immunoglobulii-nin pitoisuus kyseistä menetelmää käyttäen verrattuna tek- • ;*· 25 niikan tasoon kuuluvalla menetelmällä saatuun pitoisuu- • · · · .·. teen. Kulloinkin kuumennettiin 10 tuntia 60 °C:ssa. Immu- » I ’ » ··. noglobuliinipitoisuus oli 10-11 g proteiinia/100 ml • · *. . liuosta. pH oli 7.
• * · * • · « · » 6 92557 c: 4> 0 s c •“l Q)
ς β% in %ί ^ «41 β r1 ΙΛ ^ N. »- PO Ό C
8 £ Ο ΙΛ ΙΟ £ 1-1 -1 ** tn ^ ^ ^ ro t g 4ί ·^ <0 g c ^ 1 ϋ s I ° 2 ® 8 ο» "3
{/J "n, _ S
3« o 3 4-» o ε ·.- S >s. 1 O C w '- -¾ h1roro1-1-«-oJrn©rorof\iro ro^ ·1
*515 r.' pT r r N m N N N Kl m «- «“ O
o 2 z ie e 5 s - o e «o “ ® -g e :<0 g
:«S , 5......£ ' ' £ £ g·' S
:I w | — — - <ö .2
e C ·- O Z
Σ ϊ ·- :z .E — 2 « te .£ · '« · 1 1 1 m 1 ' 1 — y e · 1 g
o «o >. > SL i S
— <3 C9 -1 M m _, <n 0 e w **“ Cfl S m s I :|sg§3sssss|ss|| s g g « w S W ^ 4-» o - = .1 e £ -^2 3 3 <0 1-» ·· (0 3 -S 1-1 (0 E ·-
*" β _ _ E
O lya p p l(_ (0 *“ V +J 4-1 11 “1 u» 4-< 4-1 <n aj 1-· 1; -1 C <o <o g g as ® ·“ ’Γ t r 2 2 11 iss£ 3gai-ssl 2 S S i • sali?·?· - - - -see o I .T-Z-T'T'Jj-.-'SSSg -L f f g 3 » P μ β I < ifl M O O O O · EE 2 — craazzzooow·-!- 133 <o e — e C > · o o 1j .1 ra ra LTT y 0 — 00000-1-1.1:«-1-1 oi-·- ·- fceCCCCCOUU — -1-1 e ·1 «
Bv.Soooo--'—'t-rarara oran > j-JXXXXXOOU-OC/)» X z z :ra —1 ; . 1 - 2 * I »f .
··« e M
«. ΐΛίΑΐΛΐηιηΐΛ «Λ ·£1 „♦
• . - m ™ o ™ ™ ™ ™ ~ o o o o o ™ o 1i 1i M
• > 1 , 2 >L ^ OJ N N N N N ΓΜ N N ^ .. 8 ™ <
*· 1· E
• _ «I
. . - Π) • · · s 2 • 1 u a = O <0
Jj N f\J (NJ N
O) 2^»K11-l11MMrOfO1-r-^«-r-T- — fO 1· · ra ™ 2 o' o" σ' o' σ' o' o' o' o' o' o' o' o' o' o' o 2§
M O) Q
(0 O 4-1 · 4-1 ·« g ^ E §3 , o t- 4-» . . ° -1 Λ «— ·»— ¢0
<Λ V
Βαι Ο) w .2 « C ·~ , ο·- αι Η- 4-» — e ο £1 gg Ο'ΤΟ'ίΟ'ίΝΝ'ίΝΝ^'ί >410^ '^α <9 4>> Ο S £ ϊ
s I
< CP
7 92557
Taulukosta havaitaan, että käyttämällä esitettyä menetelmää, on immunoglobuliinin polymeerien ei-toivottu lisääntyminen hyvin vähäistä jopa alkoholin läsnä ollessa. Tämä havainto vahvistettiin myös muilla koemenetelmillä, 5 kuten esimerkiksi määrittämällä antikomplementtiaktiivi- suus.
Kuumennuksessa syntyvää suurimolekyylisten aineiden osuutta voidaan vielä pienentää tunnetuilla menetelmillä.
Tätä tarkoitusta varten on edullista poistaa käy-10 tetty stabilaattori esimerkiksi ultrasuodatuksella vaih tamalla käyttäen sopivaa ioniympäristöä kyseistä valittua puhdistustapaa ajatellen.
Kuumennusaikaa voidaan vaihdella tietyissä rajoissa.
15 Esitetyn menetelmän tehokkuuden osoittamiseksi li sättiin immunoglobuliiniliuokseen, jossa oli proteiinia 9,9 g/100 ml ja etanolia 3,6 g/100 ml, 1 g sakkaroosia ja 0,15 g glysiiniä liuoksen millilitraa kohti. Lisättiin Rous-Sarkom -virusta (RSV) konsentraationa 1 x 104 infek-20 toivaa RSV-yksikköä/ml (E/ml), ja sitten liuosta kuumennettiin 60 °C:seen. Tunnin kestäneen kuumentamisen jälkeen pitoisuus oli pienentynyt toteamisarvon alapuolelle.
Taulukosta 2 voidaan päätellä, ettei kuumentamisella ole vaikutusta vasta-aineaktiivisuuteen.
• · • · * · · • t • · • · • 1 • · · • 1 • · • · 92557 8 (n 3
iH
H O O O O O O O OO
Q) <M (N (N <N (N (N Cg <N (N
Λ t*. r» r* r* r* r» γ·* r^t^· p o o o o o o o oo PS ro m n n n n n n n
H
P
c c P <N 0) 0) & ζ cg o o h <N o co t" h '2 JS rgrgHcorgrg cg oi rg roffl > ^ - •►p o o o o o o o oo
(0 I
p -h ^
ω P -H
(CC p > << 3
P
„ -P
•H
tn ·η
3 -P
d (0 CO CO CO VO VO VO VO VO VO d +J ^ »t gi (Ji Φ a\ 0\ CO (Ti Q)
(U o o o o o o o oo C
E-ι ^ co oo co co co co -h i aj
•H - P
p -H C
cg e P :2 < Q) :3 o -p x.
x -P — p S -h s ·*
H % -p ^ W
3 Jrt <rt Hd >1 (0 in ω e e >1
En £ S . O 0.0 O O OO <U -H rH
£ “ H H H H H HH d =0 3
J f -H X C
d <u *: 3
§ ° 4J -H -H
•I o d tn p j S :«j * -p J ^ :3 >1 d >i a) ~ :3 Λ
H d P
e ..ho
-H e to CO
0 o 1 M cg ! ^ ^ ^ jj h § ; ; d H . :j0 3
··· · 3 ^ H > S
,·, P H de : ws oi -h -h 0 td :\ a; ω -m ; * o G 3 • · (Λ «h td e : : >, H LO ti 6 5 ’ L ^ v v in m 5 t!
P 13 H o O HH e.H O
aOPS > 5 rj 9 tn :3 vovo VO VO VO OO -P™+j •H :r0 O' - - - ^ t, ζ m (4 β w | O OIO O O H H ^ ^ ,J3
tP 3 E
ty d S
•H e B >1 p ^ ^ oi o n
o -H ·Η -H -H N H d -P
p P P P 4J.H-H 3d P p p P P in tn 3 E w <d 3 -H 3 3 -H 3 0 O -H -H ·Η u g n— 3 3 tn 3 3d 3 0 o d tn d o -h H SO S g-H BPP-HO-H 303 •H 3 0 3 3 ·Η 3 3 3 ·Η O ·Η tn -H 10 Λ p* p Ptn p * ,¾ tn .* tn -.a np -h
3 133 Ι3Ι3>ιΙ3^!>;>ι>ι>ι ft 3 H
p 3 (H I—I 3H3HH3H33HHH WPSW
w isO'OisoO'fe&'O'SoO'tntno'OO' — ΡΠ 9 92557
Seuraavat esimerkit valaisevat keksintöä.
Esimerkki 1 200 ml:aan käytännöllisesti katsoen puhdasta immu-noglobuliiniliuosta, jossa oli proteiinia 90 g/1, lisät-5 tiin samalla sekoittaen 120 g natriumglutamaattia (gluta-miinihapon mononatriumsuola). Tällöin immunoglobuliini saostui. pH säädettiin arvoon 7 ja suspensio kuumennettiin 10 tunnin ajaksi samalla sekoittaen 60 °C:seen. Jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja erotettiin saostuma suodatta-10 maila tai sentrifugoimalla. Saostuma liuotettiin tislattuun veteen. Glutamaatti poistettiin dialyysillä tai ul-trasuodatuksella. Liuos säädettiin haluttuun proteiinipitoisuuteen ja tehtiin isotoniseksi.
Saatiin 110 ml tuotetta, jonka proteiinipitoisuus 15 oli 155 g/1. Polymeerien pitoisuus oli 1,6 % (kuumentamaton 1,2 %) .
Esimerkki 2
Immunoqlobuliiniliuoksen kuumentaminen sakkaroosin ia crlvsiinin kanssa 20 89 l:aan immunoglobuliiniliuosta, jossa oli ruoka- suolaa l g/1 ja proteiinia 97 g/1 ja 3,6 til-% etanolia, lisättiin 89 kg sakkaroosia ja 13,3 kg glysiiniä. pH-arvo säädettiin arvoon 7 ja sitten kuumennettiin samalla sekoittaen 10 tuntia 60 °C:ssa. Liuos laimennettiin 100 25 ml: 11a 0,3 g/100 ml ruokasuolaliuosta ja suodatettiin ste- /. rilliksi. Stabilaattorit poistettiin tunnetulla tavalla.
• · :·. Tämän jälkeen tehtiin liuos isotoniseksi ja säädettiin • · · proteiinipitoisuuteen 160 g/1.
’ * Saatiin 51 1 liuosta, jonka polymeeripitoisuus oli 30 2,6 % (2 % kuumentamattomassa liuoksessa). Sakkaroosin jäännöspitoisuus oli 0,04 g/1.
Esimerkki 3 : 100 ml:aan sulfonoitua immunoglobuliinia, jonka : proteiinipitoisuus oli 100 g/1 ja ruokasuolapitoisuus 3 V 35 g/1/ lisättiin 100 g sakkaroosia ja 15 g glysiiniä. pH-ar- 10 92557 vo säädettiin arvoon 7,3 ja sekoitettiin 10 tuntia kuumentaen 60 °C:ssa.
Lopuksi liuos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja laimennettiin 170 ml:11a 0,3 g/100 ml ruokasuolaliuosta.
5 Stabilaattorit poistettiin ultrasuodatuksella. Liuottimen vaihto suoritettiin ruokasuolaliuoksella (0,3 g/100 ml). Immunoglobuliinin liuos tehtiin isotoniseksi ja säädettiin proteiinipitoisuuteen 50 g/1.
Saatiin 195 ml liuosta, jonka polymeeripitoisuus 10 oli 5,6 % (5,8 % kuumentamattomissa liuoksissa).
Esimerkki 4 13,7 1 peptisesti hajoitettua immunoglobuliinia, jonka proteiinipitoisuus oli 180 g/1 ja ruokasuolapitoi-suus 3,2 g/1, laimennettiin 13,5 litralla ruokasuolaliuos-15 ta (0,3 g/100 ml). Lisättiin 27,2 kg sakkaroosia ja 4,08 kg glysiiniä pH:ssa 7 ja kuumennettiin 60 °C:seen samalla sekoittaen. Lopuksi liuos jäähdytettiin huoneen lämpötilaan ja laimennettiin 45 litralla ruokasuolaliuosta (0,3 g/100 ml). Suoritettiin steriilisuodattaminen ja lisätty-20 jen stabilaattoreiden poistaminen ultrasuodatuksella. Tämän jälkeen liuos tehtiin isotoniseksi ja säädettiin proteiinipitoisuuteen 50 g/1. Saatiin 48 1 liuosta, jonka jäännössakkaroosipitoisuus oli 0,01 g/1. Tietyn molekyyli-painon omaavien aineosien pitoisuus määritettiin analyyt-. 25 tisellä ultrasentrifugilla seuraavasti: :1·.· Lähtöaine: S pienempi kuin 5 = 8,8 % • · S noin 5 = 75,5 % « · · S noin 7 = 15,7 % ♦ · · S suurempi kuin 7 = 0 % 30 Kuumennettu tuote: S pienempi kuin 5 = 8,1 % S noin 5 = 77,5 % S noin 7 = 14,4 % : S suurempi kuin 7=0 % 11 92557
Esimerkki 5
Liuotetun etanolipitoisen fraktion II+III kuumentaminen etanolin läsnä ollessa 200 g:aan fraktiota II+III lisättiin 500 ml tislat-5 tua vettä ja liuotettiin sekoittamalla. Liuokseen (noin 700 ml) lisättiin 700 g sakkaroosia ja 0,3 - 0,2 mol/1 glysiiniä. pH-arvo säädettiin arvoon 7 ja kuumennettiin samalla sekoittaen 10 tuntia 60 °C:ssa. Seuraavaksi kuumennettu liuos fraktioitiin. Näin saatiin 304 ml immuno-10 globuliiniliuosta, jonka proteiinipitoisuus oli 66 g/1.
Polymeeripitoisuus oli 1,1 %.
Kuumentamaton vertailutyö, jossa käytettiin 200 g fraktiota II+III, tuotti 208 ml immunoglobuliiniliuosta, jonka proteiinipitoisuus oli 96,8 g/1. Polymeeripitoisuus 15 oli 2,0 %.
• · • · · · • · • · · • · · • » • · « · • · · 1 · • ·

Claims (6)

12 92557
1. Menetelmä puhdistetun immunoglobuliinivalmisteen stabiloimiseksi pastöroinnin aikana, tunnettu 5 siitä, että immunoglobuliinin liuosta kuumennetaan pH:ssa 5 - 8,5 ja lämpötilassa noin 60 °C noin 10 - 40 tuntia siten, että läsnä on karboksyylihappoa tai sen suolaa määrä, joka on yli kyllästyspitoisuuden, ja/tai mono-, di-tai oligosakkaridia.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että karboksyylihappo on mahdollisesti substituoitu alifaattinen karboksyylihappo.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että karboksyylihappo on alifaat- 15 tinen karboksyylihappo, jossa on 2 - 10 hiiliatomia ja joka on substituoitu yhdellä tai kahdella lisäkarboksyy-liryhmällä, yhdellä tai kahdella aminoryhmällä ja/tai yhdellä tai useammalla hydroksyyliryhmällä.
4. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, 20 tunnettu siitä, että karboksyylihappo on glysiini, glutamiinihappo, sitruunahappo tai viinihappo.
5. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sakkaridi on mono- tai di-sakkaridi. ; . 25
6. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, * · · tunnettu siitä, että sakkaridi on glukoosi, fruk- :1. toosi, galaktoosi tai sakkaroosi. • · · « « • ♦ • « ♦ · i3 92557
FI872578A 1986-06-11 1987-06-09 Menetelmä pastöroidun immunoglobuliinivalmisteen valmistamiseksi FI92557C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3619565 1986-06-11
DE19863619565 DE3619565A1 (de) 1986-06-11 1986-06-11 Verfahren zur herstellung einer pasteurisierten immunglobulinpraeparation

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI872578A0 FI872578A0 (fi) 1987-06-09
FI872578A FI872578A (fi) 1987-12-12
FI92557B FI92557B (fi) 1994-08-31
FI92557C true FI92557C (fi) 1997-12-02

Family

ID=6302735

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI872578A FI92557C (fi) 1986-06-11 1987-06-09 Menetelmä pastöroidun immunoglobuliinivalmisteen valmistamiseksi

Country Status (10)

Country Link
EP (1) EP0249167B1 (fi)
JP (1) JPS62292731A (fi)
AT (1) ATE95067T1 (fi)
AU (1) AU598268B2 (fi)
CA (1) CA1340737C (fi)
DE (2) DE3619565A1 (fi)
DK (1) DK296387A (fi)
ES (1) ES2059323T3 (fi)
FI (1) FI92557C (fi)
PT (1) PT85052B (fi)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4762714A (en) * 1986-04-08 1988-08-09 Miles Laboratories, Inc. Preparation of retrovirus-free immunoglobulins
JPH0565233A (ja) * 1991-03-08 1993-03-19 Mitsui Toatsu Chem Inc モノクローナル抗体含有凍結乾燥製剤
DE4344824C1 (de) * 1993-12-28 1995-08-31 Immuno Ag Hochkonzentriertes Immunglobulin-Präparat und Verfahren zu seiner Herstellung
DE10022092A1 (de) * 2000-05-08 2001-11-15 Aventis Behring Gmbh Stabilisiertes Protein-Präparat und Verfahren zu seiner Herstellung
CN104271600B (zh) * 2012-05-14 2018-09-14 诺和诺德股份有限公司 稳定化的蛋白溶液

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS5840532B2 (ja) * 1975-04-08 1983-09-06 カブシキガイシヤ ミドリジユウジ Iga オヨビ igm ノネツアンテイカホウ
EP0035204B2 (en) * 1980-03-05 1991-05-22 Miles Inc. Pasteurized therapeutically active protein compositions
JPS57140724A (en) * 1981-02-25 1982-08-31 Green Cross Corp:The Heat-treatment of aqueous solution containing cold insoluble globulin
ATE36457T1 (de) * 1983-05-02 1988-09-15 Immuno Ag Verfahren zur inaktivierung von vermehrungsfaehigen krankheitserregern.
DE3330770A1 (de) * 1983-08-26 1985-03-14 Behringwerke Ag, 3550 Marburg Verfahren zur pasteurisierung von humanplasma
JPH0669961B2 (ja) * 1984-09-25 1994-09-07 株式会社ミドリ十字 免疫グロブリンの加熱処理方法
JPH0825902B2 (ja) * 1985-02-21 1996-03-13 株式会社ミドリ十字 γ−グロブリンの加熱処理方法
JPH0825903B2 (ja) * 1985-05-16 1996-03-13 株式会社ミドリ十字 γ―グロブリン含有水溶液
IL86417A (en) * 1987-05-22 1992-09-06 Armour Pharma Process for the inactivation of pathogens in biological or pharmaceutical material by mixing with aqueous solution containing a sugar(alcohol)and neutral salts as stabilizers

Also Published As

Publication number Publication date
EP0249167A2 (de) 1987-12-16
AU7408787A (en) 1987-12-17
DK296387D0 (da) 1987-06-10
FI92557B (fi) 1994-08-31
FI872578A0 (fi) 1987-06-09
DE3619565A1 (de) 1987-12-17
FI872578A (fi) 1987-12-12
PT85052A (de) 1987-07-01
JPS62292731A (ja) 1987-12-19
ATE95067T1 (de) 1993-10-15
EP0249167B1 (de) 1993-09-29
CA1340737C (en) 1999-09-14
JPH0525862B2 (fi) 1993-04-14
AU598268B2 (en) 1990-06-21
ES2059323T3 (es) 1994-11-16
DE3787569D1 (de) 1993-11-04
PT85052B (pt) 1990-03-08
DK296387A (da) 1987-12-12
EP0249167A3 (en) 1989-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR940003941B1 (ko) γ-글로부린 수용액의 비루스-불활성화 열처리 방법
US4764369A (en) Undenatured virus-free biologically active protein derivatives
US4540573A (en) Undenatured virus-free biologically active protein derivatives
EP0077870B1 (en) Process for heat treatment of aqueous solution containing human blood coagulation factor viii
JP3874029B2 (ja) 分配剤としてカプリル酸ナトリウムを用いる低温アルブミン分画
SK287633B6 (sk) Spôsob výroby humánneho gamaglobulínu G a humánny gamaglobulín G s inaktivovanými vírusmi
JP2002275090A (ja) 安定化蛋白質調製物およびその調製方法
RU2008916C1 (ru) Способ пастеризации водного раствора иммуноглобулина
US4820805A (en) Undenatured virus-free trialkyl phosphate treated biologically active protein derivatives
FI92557C (fi) Menetelmä pastöroidun immunoglobuliinivalmisteen valmistamiseksi
EP3135687B1 (en) Method for the preparation of immunoglobulins
US5116950A (en) Process for heat treating fibrinogen
US5248767A (en) Process for the preparation of a pasteurized immunoglobulin preparation using ethanol
JPS61194035A (ja) γ−グロブリン製剤
CA2943328C (en) Method for the preparation of immunoglobulins
AU2016231646A1 (en) Method for the preparation of immunoglobulins
KR101146946B1 (ko) 알부민 제제의 제조 방법
KR102372105B1 (ko) 면역글로블린의 제조방법
RU2708394C2 (ru) Способ получения иммуноглобулинов
JP6370853B2 (ja) 免疫グロブリンの調製方法
EP1033136A1 (en) The process of preparing immunoglobulin for intravenous injection by viruses double-sterilized without adding any protectant
TWI712612B (zh) 製備免疫球蛋白溶液的方法
AU717541B2 (en) Inactivation of viruses by incubation with caprylate
NZ724670B2 (en) Method for the preparation of immunoglobulins
JP2000212097A (ja) 伝達性海綿状脳症病原因子を除去する方法

Legal Events

Date Code Title Description
BB Publication of examined application
GB Transfer or assigment of application

Owner name: CENTEON PHARMA GMBH

FG Patent granted

Owner name: AVENTIS BEHRING GMBH

PC Transfer of assignment of patent

Owner name: ZLB BEHRING GMBH

MA Patent expired