FI88393B - Foerfarande foer framstaellning av 17-substituerade androsta-1,4-dien-3-onderivat - Google Patents

Description

1 88393

MENETELMÄ 17-SUBSTITUOITUJEN ANDROSTA-1,4-DIEN-3-0NIJOHDANNAISTEN VALMISTAMISEKSI

Tämä keksintö koskee menetelmää uusien 17-substituoitujen androsta-1,4-dien-3-onijohdannaisten valmistamiseksi, niitä 5 sisältäviä farmaseuttista koostumusta ja niiden käyttöä terapiassa.

Perustutkimus ja kliiniset tulokset osoittavat, että and-rogeenien aromatisoidut metaboliitit, t.s. estrogeenit, ovat sellaisia hormoneja, jotka aikaansaavat patogeenisiä 10 solumuutoksia, jotka liittyvät eräiden hormoneista riippuvien syöpäkasvaimien, kuten rinta-, kohdun limakalvon ja m u na s a rj a s yö p ä ka s v a imien kasvuun.

Estrogeenit ovat myös syynä hyvänlaatuisen eturauhasen liikakasvun syntymiseen.

.-.-.15 Endogeeniset estrogeenit muodostuvat viime kädessä joko androsteenidionista tai testosteronista, jotka ovat välittömiä prekursoreita.

Keskeisen tärkeä reaktio on steroidisen renkaan A aromati-sointi, joka tapahtuu entsyymi-aromataasi11 a. Koska aroma-:Y;20 tisointi on ainutlaatuinen reaktio ja viimeinen estrogee-nien biosynteesien reaktiosarjoissa, on kuviteltu, että „·. ; aromataasin tehokkaalla inhibitiolla, jonka aikaansaa yh- disteet, jotka kykenevät vaikuttamaan aromatisointivaiheis-sa, voi olla hyödyllistä käyttöä kiertävien estrogeenien •...•25 määrän, estrogeenista riippuvien prosessien reproduktion :*·: ja estrogeenista riippuvien kasvaimien kontrol 1 oimi- . .·. sessa.

Tunnettuja steroidisia aineita, joilla on esitetty olevan aromataasia inhiboiva vaikutus, ovat esimerkiksi A^-testo- 2 88393 lolaktoni (US-patentti 2,744,120); 4-hydroksi-androst-4--eeni-3,17-dioni ja sen esterit (kts. esimerkiksi US-patentti 4,235,893); 10-(1,2-propadienyyli)-estr-4-eeni--3,17-dioni (US-patentti 4,289,762); 10-(2-propynyyli)-5 -estr-4-eeni-3,17-dioni (J.Am.Chem.Soc., 103, 3321 (1981) ja US-patentti 4,322,416) ; 19-tioandrosteenijohdannaiset (EPO-patenttihakemus 100566); androsta-4,6-dieeni-3,17--dioni, androsta-1,4,6-trieeni-3,17-dioni (GB-patentti-hakemus 2,100,601A) ja androsta-1,4-dieeni-3,17-dioni 10 (Cancer Res. (Suppl.) 42, 3327 (1982)).

Tämän keksinnön mukaiset uudet yhdisteet ovat tehokkaita estrogeenibiosynteesin inhibiittoreita, johtuen niiden kyvystä inhiboida androgeenien aromatisoitumista estrogeeniksi.

15 Edelleen uusilla yhdisteillä on androgeeninen aktiivisuus, joka voisi avustaa gonadotropiinierittymisen vähenemisen kautta niiden inhibiittorivaikutusta estrogeenisynteesissä.

Itse asiassa esim. premenopaussitilanteessa aromataasisynteesiä säätelevät gonadotropiinit ja uudet yhdisteet voivat 20 tehokkaasti vähentää estrogeeneja kahdella tasolla, inhiboimalla aromataasiakti ivisuutta (aromataas i - i nhi bi tori nen -/-.: vaikutus) ja aromataasi synteesiä (antigonadotropinen vai-kutus).

Tämä keksintö koskee yhdisteitä, joilla on seuraava yleinen 25 kaava (I) UKp JL, (tv - ^ chr2 3 88393 jossa kumpikin tähteistä R ja Rg on toisistaan riippumatta vety tai Cj-Cg-alkyyli, R1 on vety, halogeeni tai Cj-Cg--a 1 kyyli; R2 on vety tai C|-Cg-alkyyli, R^ on vety tai fluori, Rg on a) vety tai C^-Cg-alkyyli, b) fenyyli, joka on 5 substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai kahdella subs-tituentilla, jotka toisistaan riippumatta ovat C^-Cg-al-kyyli, halogeeni tai amino, c) asyyliryhmä tai d) hydroksi-suojaryhmä, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja.

10 -Cg-alkyyliryhmä on mieluimmin -C^-alkyyliryhmä, erityi sesti metyyli, etyyli, propyyli tai tert.-butyyli, vielä mieluimmin metyyli tai etyyli. Näistä esimerkeistä käy ilmi, että alkyyliryhmä voi olla haarautunut tai suoraketjuinen ryhmä.

15 Haiogeeniatomi on esim. kloori, fluori tai bromi, erityisesti kloori tai fluori, vielä mieluimmin fluori.

Kun Rg on asyyliryhmä, happotähde voi olla fysiologisesti hyväksyttävän hapon tähde. Edullisia esimerkkejä fysiologisesti hyväksyttävistä hapoista ovat korkeintaan 15 hiili- 20 atomia sisältävät karboksyylihapot.

Karboksyylihapot voivat myös olla tyydyttämättömiä, haarautuneita, moniemäksisiä tai substituoituja tavanomaiseen tapaan, esimerkiksi okso-, hydroksyyli- tai aminoryhmi11ä tai halogeeniatomei1 la.

:25 Sopivia ovat myös sykloal ifaattiset, aromaattiset, seka- aromaattis-alifaattiset ja heterosykliset hapot, jotka voi-vat myös olla substi tuoi tu ja tavalliseen tapaan. Esimerkkejä tällaisista hapoista ovat etikkahappo, propionihappo, voi happo, valeriaanahappo, kapronihappo, heptaani happo, . 30 undekyylihappo, trimetyylietikkahappo, dietyylietikkahappo, tert.-butyylietikkahappo, fenyylietikkahappo, sykiopentyyli- 4 88393 propionihappo, öljyhappo, maitohappo, monokloorietikka-happo, dikloorietikkahappo, trikloorietikkahappo, amino-etikkahappo, meripihkahappo, adipiinihappo, bentsoehappo ja nikotiinihappo. Sopivia ovat myös tavalliset epäorgaa-5 niset hapot, esimerkiksi rikkihappo, typpihappo ja fosfori happo .

Vielä mieluimmin kun R5 on asyyliryhmä, happotähde on erityisesti jonkin seuraavista hapoista etikka-, propioni-, valeriaana-, undekyyli-, trimetyylietikka-, fenyylietikka-, 10 syklopentyylipropioni-, öljy-, monokloorietikka-, aminoetikka-, meripihka-, bentsoe-, rikki- tai fosforihapon tähde.

OR5-hydroksisuojaryhmä on ryhmä, erityisesti eetteri ryhmä, joka on muutettavissa hydroksiryhmäksi lievissä reaktio-oloissa, esim. happohydrolyysi11ä. Esimerkkejä ovat asetaa-15 lieetterit, enolieetterit ja silyy1ieetterit. Erityisen edullisia hydroksisuojaryhmiä ovat CH3 CH3-fi_ ^\^0Alk CH, — C — CH- (CH-)-Si- I_' L 3 33 CH3 O- CJ °’A,K iO s joissa M on -0- tai -Cl^- ja Alk on alempialkyyliryhmä, vielä mieluimmin suojaryhmiä ovat 21-tetrahydropyranyyli tai trimetyylisilyyli. Alempialkyyli on tyypillisesti 20 C1-Cg-alkyyli, mieluimmin C1-C^-alkyyli.

5 88393

Kuten edellä jo mainittiin keksintö koskee myös kaavan (I) mukaisten yhdisteiden farmaseuttisesti hyväksyttäviä suoloja.

Edullisia suoloja keksinnön mukaan ovat kaavan (I) mukais-5 ten yhdisteiden, joissa Rg on moniemäksisen, mieluimmin kaksiemäksisen hapon tähde, suolat farmaseuttisesti hyväksyttävien emästen kanssa.

Emäkset voivat olla sekä epäorgaanisia emäksiä, kuten esimerkiksi ai kaiimetal1i-, esim. natrium- tai kalium- tai 10 maa-alkalimetalli-, esim. kalsium- tai magnesiumhydroksi-deja ja orgaanisia emäksiä, kuten esimerkiksi alkyyliamii-neja, esim. metyyliamiini tai trietyyliamiini, aralkyyli-amiineja, esim. bentsyyliamiini, dibentsyyliamiini, o(-tai (b> -fenyyl ietyyl iami ini tai heterosykl i s iä amiineja, 15 kuten esim. piperidiini, 1-metyylipiperidiini, piperat-siini tai morfoliini.

Edellä esitetty keksinnön mukaisten yhdisteiden kaava si-sältää kaikki kaavan (I) mukaisten yhdisteiden, joissa : Rg on Cj-Cg-al kyyl i, mahdolliset isomeerit, erityisesti ;:20 Z- ja E-isomeerit sekä erikseen että seoksena.

Tämän selityksen kaavoissa katkoviivat (''') osoittavat, että substituentit ovat o(-konfiguraatiossa, t.s. renkaan tason alapuolella, kun taas paksut yhtenäiset viivat osoittavat, että substituentit ovat /3-konfiguraa-25 tiossa, t.s. renkaan tason yläpuolella, aaltoviivat ( λ^λ ) .**. osoittavat, että ryhmät voivat olla sekä °^-konfiguraa-tiossa että ^-konfiguraatiossa.

: Edullisia keksinnön mukaisia yhdisteitä ovat kaavan (I) mu- kaiset yhdisteet, joissa R ja R3 ovat toisistaan riippu-30 matta vety tai Cj-C^-alkyyli, R^ on vety, fluori, kloori, tai Cj-C^-alkyyli, R2 on vety tai C^-C^-alkyyli, R4 on 6 88593 vety tai fluori, R& on vety, C1-C^-alkyy!i tai asyyliryh-mä, joka on johdettu haposta, joka on etikka-, propioni-, valeriaana-, undekyyli-, fenyylietikka-, sykiopentyyli-propioni-, öljy-, aminoetikka-, meripihka-, rikki- tai 5 fosfori happo, ja näiden farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

Esimerkkejä keksinnön mukaisista erityisestä yhdisteistä ovat: 6- metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni; 10 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-di en-17/3-ol-3-oni; 7- metyyli-6-metyleeniandrosta-t,4-dien-17/3-ol-3-oni; 4-kloori-6-metyleeniandrosta-1,4-di en-17/1 -ol-3-oni; 4- k 1 oori-1 -metyyl i - 6-metyl eeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni; 4-kloori-7-metyyl i-6-metyl eeniandrosta-1 ,4-dien-17/3-ol-3-oni; 15 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/*-ol-3-oni-17-propionaatti; 1-metyyli-6-metyleeniand ro sta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17--propionaatti; 7-metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17--propionaatti; 20 6-metyl eeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17-sulfaatti; '·/ 1-metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-oi-3-oni- 17--sulfaatti, ja 7-metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17--sulfaatti, ja 25 näiden mahdolliset farmaseuttisesti hyväksyttävät suolat.

7 88393

Keksinnön mukaiset yhdisteet ja niiden suolat voidaan saada menetelmällä, jossa a) dehydrataan kaavan (II) mukainen yhdiste •Wn R, CHR2 jossa R, Rp R2> R3, ja Rg tarkoittavat samaa kuin . , 5 edellä, tai b) kaavan (III) mukainen yhdiste OR, i “3 I T_1 STr i •'ΧΤΤ'·.

0 CHR2 jossa R, R2, R3, R^ ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä, 8 88393 saatetaan reagoimaan hydrohalogenointiaineen kanssa, jolloin saadaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa R^ on halogeeni ja R, R2> P'4 ja Rg tarkoittavat samaa kuin edellä, tai 5 c) kaavan (IV) mukainen yhdiste OR,

R

__i (IV) R1 jossa R, R^, Rj, R^ ja R^ tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan formaldehydi1ähteen, mieluimmin para-formaldehydin kanssa, tai kaavan R^CHO (V) mukaisen alde-hydin, jossa R'2 on C1-Cg-alkyy 1i, ja kaavan (VI) mukaisen 10 amiinin tai sen suolan kanssa

Ra · ’;': nnh (VI) /

Ra jossa kumpikin ryhmistä R , jotka voivat olla samanlaiset d 15 tai erilaiset, on aiempialkyyli, ja kaavan (I) mukainen yhdiste muutetaan haluttaessa toiseksi kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi, ja/tai muodostetaan haluttaessa kaavan (I) mukaisen yhdisteen suola tai vapaa kaavan (I) mukainen yhdiste saadaan haluttaessa sen suolasta ja/tai 9 88393 kaavan (I) mukaisen yhdisteen isomeerien seos erotetaan haluttaessa yksittäisiksi isomeereiksi.

Kaavan (II) mukaisen yhdisteen dehydraus voidaan suorittaa käsittelemällä sopivalla dehydrausaineel1 a, esim. dikloori-5 disyanobentsokinoni11 a (DDQ), seieenidioksidi11 a tai klora-niililla. Mieluimmin tällainen reaktio suoritetaan käsittelemällä DDQ:11 a inertissä 1iuottimessa, kuten dioksaanis-sa, bentseenissä, tolueenissa tai di kloori metaanissa lämpötilassa, joka vaihtelee noin 40°C:sta - noin 120°C:seen, 10 ja reaktioaika vaihtelee noin 12 tunnista noin 72 tuntiin.

Hydrohalogenointiaine, joka reagoi kaavan (III) mukaisen yhdisteen kanssa, on esimerkiksi ha 1ogeenivetyhappo tai trihalogeeniboraani. Kaavan (III) mukaisen yhdisteen reaktio haiogeenivetyhapon tai trihalogeeniboraanin kanssa voi-15 daan suorittaa tunnettujen menetelmien mukaisesti, esim.

Camerino et ai., 1956, Γ1 Farmaco _Π, 586 ja vastaavasti A. Bowers et ai., 1958, Tetrahedron 3, 14. Kun halogeeni-vetyhappo on kloorivety- tai bromivetyhappo, tämä reaktio suoritetaan mieluimmin etikkahapossa tai etanolissa lämpö-;; 20 tilassa, joka vaihtelee noin 0°C:sta - noin 100°C:seen.

·:· Käytettäessä trihalogeeniboraania, esim. boori tri f 1 uoridia reaktio suoritetaan mieluimmin inertissä 1iuottimessa, kuten dietyylieetterissä, bentseenissä tai dikloorimetaanissa lämpötilassa, joka vaihtelee noin -30°C:sta - noin 50°C:seen.

: 25 Kaavan (VI) mukaisessa yhdisteessä R :n ollessa alempial- ... d kyyli, esim. -C^-alkyyli, se on mieluimmin metyyli tai · etyyli, erityisesti metyyli. Kaavan (VI) mukaisen yhdisteen suola on esim. epäorgaanisen hapon, mieluimmin halogeeni-vetyhapon, erityisesti kloorivetyhapon kanssa saatu suola.

.·. : 30 Kaavan (IV) mukaisen yhdisteen reaktio formaldehydilähteen tai kaavan (V) mukaisen ai dehydi n ja kaavan (VI) mukaisen yhdisteen suolan kanssa suoritetaan mieluimmin korkealla 10 68393 kiehuvassa alkoholissa, erityisesti isopentanolissa lämpötiloissa, jotka ovat noin 1300C tai korkeampia kuin 130°C, ja reaktioajat vaihtelevat noin 3 tunnista noin yhteen päivään. Edullisessa suoritusmuodossa formaldehydilähde tai 5 kaavan (V) mukainen aldehydi saatetaan ensin reagoimaan kaavan (VI) mukaisen yhdisteen suolan kanssa, jonka jälkeen näin saatuun Mannich-suolaan lisätään kaavan (IV) mukainen yhdiste.

Kuten edellä esitettiin kaavan (I) mukainen yhdiste voi-10 daan muuttaa toiseksi kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi tunnetuilla menetelmillä. Esimerkiksi vapaa hydroksiryhmä voidaan eetteröidä reaktiolla sopivan alkyyli- tai fenyyli-halogenidin kanssa emäksen, kuten NaOH:n, K0H:n, NagCO-^n, ^COg-'n, NaH:n, NaNH^.'n, natriummetoksidin tai natriumetok-15 sidin läsnäollessa 1iuottimessa, joka on esimerkiksi meta-noli, etanoli, dioksaani, asetoni, dimetyyliformamidi, hek-sametyylifosfori triamidi, tetrahydrofuraani, vesi tai näiden seokset, lämpötilassa, joka vaihtelee mieluimmin noin 0°C:sta - noin 150°C:seen.

20 Vastaavasti vapaa hydroksiryhmä voidaan muuttaa suojatuksi hydroksiryhmäksi tavanomaisilla alalla tunnetuilla menetelmillä, esim. silyylieetteri voidaan saada reaktiolla sopivan silyylihalogenidin kanssa emäksen läsnäollessa käyttäen tavanomaisia menetelmiä. Edelleen eetteröity hydroksiryhmä 25 voidaan muuttaa vapaaksi hydroksiryhmäksi tunnetuilla menetelmillä, esimerkiksi käsittelemällä pyridiinihydrokloridi1 - ' la tai vahvalla hapolla, kuten HBr:11ä tai H1:11ä tai Lewis- hapolla, kuten BFg:11 a tai AI Cl g:11 a tai AIBrg:11 a tiolin läsnäollessa tai trimetyy1ijodi si1aanil1 a .

30 Vapaa hydroksiryhmä voidaan esteröidä tunnettujen menetelmien mukaisesti, jolloin saadaan kaavan (I) mukainen yhdiste, jossa Rg on edellä määritelty asyyliryhmä.

11 88393

Esimerkiksi vapaa hydroksiryhmä voidaan muuttaa esteröi-dyksi hydroksiryhmäksi käsittelemällä sopivalla asylointi-aineella, esim. sopivan hapon reaktiokykyisellä johdannaisella, kuten anhydridillä tai halogenidilla, mieluimmin 5 hapon kloridilla ja emäksisen aineen, mieluimmin orgaanisen emäksen, kuten pyridiinin läsnäollessa. Reaktio voidaan suorittaa lämpötilassa, joka vaihtelee noin huoneen lämpötilasta noin 100°C:seen.

Tarvittaessa reaktiokykyiset funktionaaliset ryhmät voidaan 10 suojata sopivilla suojaavilla reagenssei1 la, jotka voidaan poistaa reaktion jälkeen kemian kirjallisuudesta tunnetuilla menetelmillä.

Myös kaavan (I) mukaisen yhdisteen mahdollinen suolan muodostus sekä suolan muuttaminen vapaaksi yhdisteeksi ja kaa-15 van (I) mukaisen yhdisteen isomeerien seoksen erottaminen yksittäisiksi isomeereiksi voidaan suorittaa sinänsä tunnettujen tavanomaisten menetelmien mukaisesti.

Esimerkiksi geometristen isomeerien seoksen erottaminen voidaan tehdä jakokiteyttämäl1ä tai erottamalla pyiväskromato-: :20 grafisesti.

T Kaavan (II) mukainen yhdiste voidaan saada sinänsä tunnetuil la menetelmillä lähtemällä kaavan (VII) mukaisesta yhdisteestä, esim. menetelmällä, jonka on esittänyt K.Annen, 1982, Synthesis, 34. Mieluimmin kaavan (VII) mukainen yhdiste saa-:‘:25 tetaan reagoimaan substituoimattoman tai sopivasti Cj-Cg-a1 kyylilla substituoidun formaldehydi-dietyyliasetaalin kanssa keittäen palautusjäähdyttäen kloroformissa fosfo-ryylikloridi n ja natriumasetaatin läsnäollessa. Vaihtoehtoisesti sama reaktio voidaan suorittaa muissa inerteissä · 30 1 iuottimissa, esim. 1,2-dikloorietaanissa, dietyyl ieette- rissä tai dioksaanissa ja muiden sopivien kondensointiai-neiden, esim. fosforipentakloridin tai p-tolueenisulfoni-hapon läsnäollessa.

12 88393 CH- |R5

Sch fir*4

ÄvU

f T I (VII)

Kaavan (III) mukaiset yhdisteet voidaan valmistaa tunnettujen menetelmien mukaisesti esimerkiksi kaaviossa esitetyllä tavalla: jXr_* " X>„ m"' r t r .....

"^C·.

Kaavan (II) mukaisen yhdisteen epoksidointi kaavan (VIII) 5 mukaisen yhdisteen saamiseksi voidaan suorittaa käsittelemällä sopivalla hapetusaineella, mieluimmin konsentroidulla, esim. 36 %:isella ^(^-.lla ai kohol i sessa ai kaiihydrok-sidiliuoksessa, mieluimmin metanolisessa KOH- tai NaOH-liuoksessa lämpötilassa, joka vaihtelee esim. 0°C:sta -10 25°C:seen, reaktioajan ollessa noin 2 tunnista useaan päivään. Kaavan (VIII) mukaisen yhdisteen dehydraus kaavan 13 88393 (III) mukaisen yhdisteen saamiseksi voidaan suorittaa käsittelemällä sopivalla dehydrausaineella, esim. dikloori-disyanobentsokinonilla keittäen palautusjäähdyttäen liuotti-messa menetel män mukaan, jonka on esittänyt H.J. Ringold 5 et ai., 1962, Chemistry and Industry 211. Kaavan (IV) mukaiset yhdisteet voidaan saada lähtemällä kaavan (VII) mukaisista yhdisteistä. Kaksoissidoksen liittäminen 1-asemään voidaan tehdä aikaisemmin kuvattujen menetelmien mukaan (H.J. Ringold et ai. 1962, Chem. and Ind. 211).

°r5

X^X

R1 .:.10 Tämän keksinnön mukaiset yhdisteet ovat androgeenit estrogeeneiksi muuttavan biotransformaation inhibiittoreita, t.s. ne ovat steroidisia aromataasi-inhibiittoreita.

Näiden yhdisteiden aromataasi-inhibitio-aktiivisuus todettiin käyttämällä rotilla in vivo testiä, jonka on kuvannut :::15 Brodie (A.M.H. Brodie et ai., Steroids, 2§> 693, 1981), testiä hiukan muunnettiin. Täysikasvuiset naarasrotat käsiteltiin kaksi kertaa subkutaanisesti 100 I.U.:lla raskaana olevan tamman seerumi-gonadotropiinia (pregnant : mare's serum gonadotropin = PMSG) neljän päivän jaksoissa 20 munasarja-aromataasiakti ivisuuden lisäämiseksi. Kolme päivää toisen PMSG-käsittelyn jälkeen kuuden eläimen ryhmille 14 88393 annettiin jokaiselle oraalisesti ja/tai subkutaanisesti uusia aromataasi-inhibiittoreita. Eläimet tapettiin 24 tuntia myöhemmin, mikrosomit eristettiin munasarjoista ja niiden aromataasi-aktiivisuus määritettiin Thomsonin ja 5 Siiterin esittämällä testillä (J. Biol. Chem. 249, 5364, 1974). Tämä menetelmä määrittää aromatisoitumisnopeuden mittaamalla jj/2, ,2^ -^H^J-androsteenidionista vapautuneen ^^Chn määrän. Inkuboinnit suoritettiin 30 minuuttia 1 mlrssa inkubointi 1iuosta, joka sisälsi 0,1 mg mikroso-10 maalisia proteiineja, 100 nM^H^-androsteenidionia ja 100 pM NADPH:ta.

Uusilla yhdisteillä todettiin merkityksellinen aromataasi-aktiivisuuden inhibitio.

Tämän keksinnön mukaisten yhdisteiden androgeeninen ominai-15 suus todettiin esim. niiden sitoutumisaffiniteetista androgeeni reseptori lie.

Sitoutumisaffiniteetti sytoplasmisi11 e androgeeni ( rotan eturauhanen) reseptorei 11 e määritettiin standardi dekstraani-päällystetyllä aktiivihii1iadsorptio-tekniika 11 a (Raynaud J.P.

Z0 et ai. J. Steroid. Biochem. 6, 615-622, 1975).

Eturauhaskudos, joka saatiin sekä adrenaal iektomi soi dui sta että orkidektomisoiduista Sprague-Dawley-rotista, homogenoitiin (1:10 paino:til) 10 mM:ssa tris-HCl-puskuria, pH 7,4, : joka sisälsi 1,5 nM EDTA:ta ja 1 mM di t i otre i toi i a , mootto- ·/ 2 5 ri käyttöi sessä kudosmyl 1 yssä (tissue grinders). Homogenaat-ti sentrifugoitiin 105000 x g 1 tunti 2°C:ssa. Sytosoli-eriä (0,2 ml) inkuboitiin 2 tuntia 0°C:ssa testattavien yhdisteiden erilaisten konsentraatioiden kanssa, käytettiin rinnakkaisliuoksia, ja jokaisessa oli sama määrä LM-30 -5 >^s-di hydrotestosteronia (DHT, lopullinen konsentraatio 15 88393 1 nM 0,4 ml:ssa inkubointi1iuosta ). Sen jälkeen vapaa radioaktiivisuus adsorboitiin 0,2 ml: aan dekstr a anipa ällötettyä aktiivihii1isuspensiota ja sentrifugoiti in 1500 x g 10 minuuttia, jonka jälkeen sitoutunut radioaktiivisuus liuok-5 sessa määritettiin nestetuikernittaukse11 a Rialumassa.

Jokaisen yhdisteen konsentraatio, joka vaadittiin, jotta 3 spesifinen H-DHT-sitoutuminen aleni 50 %:lla ( IC^) määri-tettiin käyrästä, jossa oli sitoutunut radioaktiivisuus vastaan log vastaava konsentraatio.

10 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-onilla, t.s. tämän keksinnön tyypillisellä yhdisteellä saadut tulokset ja rakenteellisesti vastaavan, tunnetun yhdisteen 6-metyleeni-androsta-1,4-dieeni~3,17-dionin, joka on kuvattu julkaistussa GB-patenttihakemuksessa No 2177700, tulokset on esi-15 tetty seuraavassa taulukossa.

TAULUKKO And rogeenireseptori-sitoutumisaffiniteetti • · • · • · · > — --- - - — - - - — ----·| - ---- - - ____ ____ * ψ.

Yhdiste IC5Q (nM) * 6-mety 1 een i a ndros ta- 1 ,4- - d i en -17^/3 - o 1 - 3-o n i 8 + 2 * · · ·« * ‘.20 6-metyleeniandrosta-1 ,4-• · « -dieeni-3, 17-dioni + g2 ♦ » * » · • · ·*·*.· · · ^ r " “ - — — - -- * · · «· » · · * • / ·· ‘ * 3 kokeen keskiarvo +_ S.E.

• · • · 16 88393

Taulukosta käy selville, että tämän keksinnön mukainen 6--metyleeniandrosta-1,4-dien-17/J-ol-3-oni omaa hyvin korkean affiniteetin androgeeni reseptori 11 e, ollen 76-kertaa tehokkaampi kuin vastaava aikaisemmin kuvattu 17-ketojoh-5 dannainen.

Uudet yhdisteet niiden aromataasia inhiboivan kyvyn ja sen seurauksena estrogeeni-pitoisuuksia alentavan kyvyn nojalla ovat käyttökelpoisia hoidettaessa tai ehkäistäessä erilaisia hormooneista riippuvia sairauksia, t.s. rinta-, 10 kohdun limakalvon, munasarja- ja haimasyöpää, naisnisäi- syyttä (gynecomastia), hyvänlaatuista rintakasvainta, endo-metriosista, polykystistä munasarjakasvainta ja ennenaikaista sukukypsyyttä.

Uusia yhdisteitä voidaan käyttää myös hoidettaessa miesten 15 hedelmättömyyttä, johon liittyy siittiöiden harvalukuisuus (oligospermia), ja niitä voidaan käyttää naisilla hedel- · mällisyyden säätelemiseksi, koska yhdisteet pystyvät estämään ovulaation ja hedelmöittyneen munasolun uppoutumisen kohdun limakalvoon (egg nidation).

20 Johtuen yhdisteiden korkeasta terapeuttisesta indeksistä keksinnön mukaisia yhdisteitä voidaan käyttää turvallisesti lääkeaineissa. Esimerkiksi keksinnön mukaisten yhdisteiden keskimääräinen akuutti myrkyllisyys (LD^q) havait- ·· tiin häviävän pieneksi määritettäessä hiirellä nousevien 25 annosten yksinkertaisella annostuksella ja mitattuna seit semäntenä päivänä käsittelyn jälkeen.

Keksinnön mukaiset yhdisteet voidaanannostel1 a useissa an-nosmuodoissa, esim. oraalisesti tabletteina, kapseleina, sokerilla tai kalvolla päällystettyinä tabletteina, neste-30 mäisinä liuoksina tai suspensioina; rektaalisesti supposi-torioina; parenteraalisesti esim. lihaksensisäisesti tai laskimonsisäisesti injektiona tai infuusiona.

,7 88393

Annos riippuu potilaan iästä, painosta, olosuhteista ja annostamistavasta; esimerkiksi annos, joka annetaan oraalisesti täysikasvuisille ihmisille, voi vaihdella noin 10 mg:sta noin 200-400 mg:aan per annos, 1-5 kertaa päi-5 vässä.

Keksintö koskee farmaseuttisia koostumuksia, jotka sisältävät keksinnön mukaisen yhdisteen yhdessä farmaseuttisesti hyväksyttävän täyteaineen kanssa (joka voi olla kanto-aine tai laimennusaine).

10 Keksinnön mukaisia yhdisteitä sisältävät farmaseuttiset koostumukset valmistetaan tavallisesti tavanomaisten mene-| telmien mukaisesti ja annostellaan farmaseuttisesti sopi vassa muodossa.

Esimerkiksi kiinteät, oraaliset muodot voivat sisältää yh-15 dessä aktiiviyhdisteen kanssa 1aimennusaineita, esim. laktoosia, dekstroosia, sakkaroosi a, selluloosaa, maissi tärkkelystä tai perunatärkkelystä; voiteluaineita, esim. pii-happoa, talkkia, steariinihappoa, magnesium- tai kalsium-stearaattia ja/tai polyetyleeniglykoleja; sideaineita, 20 esim. tärkkelyksiä, arabikumeja, liivatetta, metyylisei 1u-loosaa, karboksimetyylisei 1 uioosaa tai polyvinyylipyrroli-donia; hajottavia aineita, esim. tärkkelystä, aigiinihappoa, alginaatteja tai natriumtärkkelysglykolaattia; kuohuseoksia; väriaineita, makeutusaineita; kostuttavia aineita, kuten le-..:25 sitiiniä, polysorbaatteja, 1auryylisulfaatteja ja yleensä farmaseuttisissa valmisteissa käytettäviä myrkyttömiä ja farmakologisesti inaktiivisia aineita. Mainitut farmaseut-ti set valmisteet voidaan valmistaa tunnetulla tavalla, esimerkiksi sekoitus-, rakeistamis-, tabletointi-, sokeri-..-30 päällystys- tai kaivo-päällystysmenetelmi11ä.

Nestemäiset dispersiot oraaliseen annostukseen voivat olla esim. siirappeja, emulsioita ja suspensioita.

is 88393

Siirapit voivat sisältää kantoaineena esimerkiksi sakkaroosia tai sakkaroosia glyseriinin ja/tai mannitolin ja/tai sorbitolin kanssa.

Suspensiot ja emulsiot voivat sisältää kantoaineena esimer-5 kiksi 1uonnonkumia, agaria, natriuma1ginaattia, pektiiniä, metyyliselluloosaa, karboksimetyylisei 1 uioosaa tai polyvi-nyy1i a 1koholi a.

Suspensiot tai liuokset lihaksensisäisiin injektioihin voivat sisältää yhdessä aktiiviaineen kanssa farmaseutti-10 sesti hyväksyttävän kantoaineen, esim. steriiliä vettä» oliiviöljyä, etyy1ioieaattia, glykoleja, esim. propyleeni-glykolia ja haluttaessa sopivan määrän 1idokaiinihydro-kloridia.

Liuokset laskimonsisäisiin injektioihin tai infuusioihin 15 voivat sisältää kantoaineena esimerkiksi steriiliä vettä tai mieluimmin ne voivat olla steriilien, vesipitoisten, isotonisten suolaliuosten muodossa.

Suppositoriot voivat sisältää yhdessä aktiiviaineen kanssa farmaseuttisesti hyväksyttävän kantoaineen, esim. kaa-20 kaovoin, polyetyleeniglykolin, polyoksietyleenisorbitaani- ·· rasvahappoesteri-pinta-aktiivisen aineen tai lesitiinin.

19 88393

Seuraavat esimerkit kuvaavat keksintöä, sitä kuitenkaan rajoittamatta.

ESIMERKKI 1 0,50 g 6-metyleeniandrost-4-en-17/3-oi-3-onia ja 0,57 g 5 diklooridisyanobentsokinonia keitetään palautusjäähdyttäen 20 mlrssa vedetöntä dioksaania noin 15 tuntia. DDQ:n poistamiseksi suspensio suodatettiin alumiinioksidin läpi.

Liuotin haihdutetaan, jonka jälkeen jäännös liuotetaan etyyliasetaattiin, orgaaninen kerros pestään vedellä, kui-10 vataan natriumsulfaati11 a ja liuotin poistetaan tyhjössä.

Raakatuote kromatografoidaan piihappogeeli11ä käyttäen eluointiaineena n-heksaani/dietyylieetteri-seosta (20/80), saadaan 0,25 g puhdasta 6-metyleeniandrosta-1,4-dien- 1 7/3 --ol-3-onia, sul.p. 135-136°C. maks = 247 ιγι (£ 13,750).

15 Saatu: C 80,01; H 8,95, ^20^24^2 vastaa C 80,49; H 8,78.

Edellä kuvatulla menetelmällä voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni; * 1 -etyyl i-6-metyl eeniandrosta-1,4-dien-1 7fi -oi-3-oni; .-.-.20 4-metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni; - 4-etyyl i-e-metyleeniandrosta-l^-dien-n/^-ol-S-oni; 6-etylideeniandrosta-1,4-dien-17/3-oi-3-oni; 6-propylideeniandrosta-1,4-dien-17/3 -ol-3-oni; 1-metyyli-6-etylideeniandrosta-1,4-dien-17/3-oi-3-oni.

25 ESIMERKKI 2

Liuos, jossa on 4,5-epoksi-6-metyleeniandrost-1-en-17/3 -.·. -ol-3-onia (1 g) jääetikassa (10 ml), käsitellään kaasumai- ; sellä kloorivedyllä 30 minuutin ajan huoneen lämpötilassa.

Sakka suodatetaan, pestään dietyylieetterillä, kuivataan ja 20 88393 kromatografoidaan piihappogeel il 1 ä käyttäen eluointi ainee-na heksaani/etyyliasetaattia, saadaan 0,8 g puhdasta 4--kloori-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-oi-3-onia.

Saatu C 72,35; H 7,35; Cl 10,58. Kaava ^20^*25^^O2 vastaa 5 C 72,18; H 7,52; Cl 10,68.

MS (m/z): 332.

Edellä kuvatulla menetelmällä voidaan valmistaa lähtemällä sopivasta 4,5-epoksijohdannaisesta ja käyttämällä kaasumaista halogeenivetyä, seuraavat yhdisteet: 10 4-bromi-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni; 4-fluori-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/^-ol-3-oni; 4-kloori-1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/.l--ol-3-oni; 4-bromi-1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17 } - 15 -oi-3-oni; 4-f 1uori- 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-- o 1 - 3 - o n i; 4-kloori-6-etyl ideeniandrosta-1,4-dien-17/¾-oi-3-oni; 4-bromi-6-etylideeniandrosta-1 ,4-dien-17/3-ol-3-oni; ;; 20 4-f 1 uori-6-etyl ideeniandrosta-1,4-dien-17/.1-oi-3-oni, ja 4-kl oori-7-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-1 7y3--ol-3-oni.

ESIMERKKI 3

Seosta, jota sekoitetaan ja jossa on 5,31 g (0,177 moolia) 25 paraformaldehydiä ja 17,32 g (0,212 moolia) dimetyyliamiini-hydrokloridia 200 ml:$sa isopentanolia, keitetään palautus-jäähdyttäen (lämpötila noin 131°C) typpiatmosfäärissä astiassa, joka on varustettu Dean-Stark-erotuslaitteella.

Noin 60 ml isopentanolin ja erottuneen veden seosta kerä-.30 tään ja hylätään. Reaktioastian sisälämpötila lasketaan sen jälkeen 10-15°C:seen ja 4,55 g (0,016 moolia) bolde-nonia (t.s. androsta-1,4-dien-17/3-ol-3-onia) lisätään 21 88393 reaktioseokseen, jota taas kuumennetaan palautusjäähdyttäen 15 tuntia.

Jäähdytetään, jonka jälkeen seos käsitellään 60 ml:lla 0,1 N NaOH-liuosta ja sekoitetaan 30 minuuttia. Orgaaninen 5 faasi erotetaan, pestään vedellä ja haihdutetaan tyhjössä (ulkopuolinen lämpötila 80°C), saadaan noin 80 ml suspensiota. Supernatantti erotetaan, muodostunut sakka pestään kaksi kertaa 10 ml:n annoksilla heksaania ja sen jälkeen kiteytetään 25 ml:sta etanolin ja veden 70:30-seosta. Suoda-10 tettu valkoinen sakka kuivataan tyhjössä 40°C:ssa, näin saadaan 1,55 g (0,0052 moolia) 6-metyleeniandrosta-1,4-dien--17^-ol-3-onia, sul.p. 135-1 37°C.

Edellä kuvatun menetelmän mukaisesti ja lähtemällä sopivasta kaavan (II) mukaisesta yhdisteestä, voidaan valmistaa 15 myös seuraavat 7- ja/tai 16-substituoidut johdannaiset yksittäisinä epimeereinä tai niiden seoksina: 1,7-dimetyyl i-16-f 1 uori-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-1 7/¾ -! - o 1 - 3 - o n i; 16-f 1 uori-6-metyleeniandrosta- 1 ,4-dien- 1 7/3-oi-3-oni; '-•;20 16-f 1 uori -1-metyyl i-6-metyl eeniandrosta-1,4-dien-1 7/3 - ···· -oi -3-oni; 1 , 7-di metyyl i-6-metyl eeni androsta-1,4-di en- 1 7/3-oi-3-oni; 16-fl uori-7-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-l y3 --ol-3-oni; -'25 4,16-difluori-1,7-dimetyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien- . -17/3-ol-3-oni, ja 7-metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17^3-ol-3-oni. ESIMERKKI 4

Seosta, jossa on natriumasetaattia (1 g), absoluuttista :.'--30 kloroformia (30 ml), forma 1 dehydi-di etyyl i asetaa 1 ia (30 ml, 0,24 moolia), fosforyyliklori di a (3,8 ml, 0,04 moolia) ja 22 88393 1β -metyyli-androst-4-en-1Ί β -ol-3-oni-17-asetaattia (0,93 g, 2,7 mmoolia), sekoitetaan keittäen samalla palautusjäähdyttäen noin 7 tuntia, t.s. kunnes lähtöaine katoaa. Suspension annetaan jäähtyä ja siihen lisätään tipoittain sa-5 maila voimakkaasti sekoittaen kyllästettyä natriumkarbonaat-tiliuosta kunnes vesi kerroksen pH tulee alkaliseksi (-x»1 tunti). Orgaaninen kerros erotetaan, neutraloidaan vedellä ja kuivataan natriumsulfaatilla. Konsentroidaan alennetussa paineessa, jonka jälkeen öljymäinen jäännös puhdistetaan 10 kromatografisesti piihappogeelillä käyttäen eluointiaineena heksaani/etyyliasetaattia. Näin saadaan puhdas 1/3-metyyli--6-metyleeniandrost-4-en-17^-ol-3-oni-17-asetaatti (0,575 g).

IR (KBr): 3100 (6-CH2), 1725( 1 7-asetoksi) 1680 (3-okso), 1 5 1630, 1660 cm"1 (Δ4 ja 6=CH2).

Samalla tavalla voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: 1/3-etyyli-6-metyleeniandrost-4-en-17^/3-ol-3-oni-17--asetaatti; - 1β -metyyli-6-etylideeniandrost-4-en-17/3-oi-3-oni- 17-20 -asetaatti, ja 1 /3 "etyy 1 i-6-ety 1 i deeniandrost-4-en- 1 lp-oi -3-oni -1 7- .

-asetaatti.

ESIMERKKI 5 6-metyleeniandrost-4-en-17β -oi-3-oni (5 g) liuotetaan 200 25 mlraan metanolia ja jäähdytetään 0°C:seen. Sen jälkeen lisätään jääkylmää 36 %:ista H202:ta (17 ml) ja 2 %:ista NaOH:ta (9 ml).

Seosta sekoitetaan 1 tunti, annetaan seistä 5°C:ssa 20 tuntia, jonka jälkeen kaadetaan 1400 ml:aan jäävettä samalla 30 voimakkaasti sekoittaen, tuote suodatetaan, pestään vedel lä ja kuivataan, saadaan 4,2 g (80 %) 4,5-epoksi-6-mety- 23 88393 leeniandrosta-17/4-ol-3-onia ('X /β -epoksidiseos).

4.5- epoksi-6-mety1eeniandrosta-17/3-ol-3-oni (3 g) ja di-klooridisyanobentsokinonia (1,7 g) liuotetaan 60 ml:aan vedetöntä dioksaania ja kuumennetaan palautusjäähdyttäen 5 noin 15 tuntia. Jäähtynyt liuos suodatetaan alumiinioksidin läpi ja liuotin haihdutetaan tyhjössä. Jäännös otetaan talteen etyyliasetaatilla, orgaaninen, kerros pestään vedellä, kuivataan ja liuotin poistetaan tyhjössä. Raakatuote kromatografoidaan piihappogeelillä käyttäen eluointiainee-10 na heksaani/etyyliasetaattia, saadaan 1,5 g puhdasta 4,5--epoksi-6-metyleeniandrost-1-en-17/{)-ol-3-onia.

NMR S p.p.m.: 0,77 (3H, s); 1,13 (3H, s); 3,71 (1H, d); 3,75 (1H, m); 5,03 (2H, m); 5,86 (1H, d); 6,78 (1H, d).

Edellä kuvatulla menetelmällä ja käyttäen sopivaa 6-alky-15 1ideeniandrost-4-eeni-3,17-dionia, voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: 1-metyyl i-4,5-epoksi-6-metyleeniandrost-1-en-17//3-ol-3-oni; 1-etyyli-4,5-epoksi-6-metyleeniandrost-1-en-17/3-oi-3-oni; 4.5- epoksi-6-etyl ideeniandrost-1-en-1 7/5-oi-3-oni; •&-0 1-metyyl i-4,5-epoksi-6-etyl ideeniandrost-1-en-1^/3 -ol- :V: -3-oni, ja ;Y: 1 - etyyl i-4,5-epoksi-6-etylideeniandrost-1-en-17/3-ol-3-oni .

ESIMERKKI 6

Liuos, jossa on 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-1 7/3-oi-3-onia .:.25 (1,0 g) pyridiinissä (10 ml), käsitellään 5°C:ssa propio- nyy1iklori di 11 a (1,08 ml). Reaktioseoksen annetaan seistä sitä samalla sekoittaen huoneen lämpötilassa yön yli. Sen : jälkeen se kaadetaan vesi-jää-seokseen, tuote eristetään uuttamalla etyyliasetaatilla. Orgaaniset uutteet pestään 30 2 N kloorivetyhapolla, vedellä, kuivataan (Na^SO^) ja haihdutetaan.

24 88393

Muodostunut raakatuote kiteytetään n-heksaani/eetteristä, saadaan 0,95 g 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17^4-oi-3--oni-17-propionaattia, sul.p. 123-125°C.

NMR p.p.m.: 0,88 (3H,s); 1,17 (6H, s+t); 2,35 (2H, m); 5 4,66 ( 1H, m); 5,02 (2H, m); 6,25 (2H, m); 7,09 (1H, d).

Työskentelemällä samalla tavalla ja lähtemällä sopivista steroideista, voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17-asetaatti; 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3 -oi-3-oni-17-valeraatti; 10 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17y3 - ol-3-oni-17-sykiopentyyli- propionaatti; 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17-oleaatti; 6-metyleeniand rosta-1,4-dien-17^3-ol-3-oni-17-hemisukki-naatti ; 15 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17- -asetaatti; 1-metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17^-ol-3-oni-17--propionaatti; 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17-20 -valeraatti; 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17--undekylaatti; 1-metyyl i-6-metyl eeni androsta-1,4-dien-17^/3-oi-3-oni -1 7-- sykiopentyylipropionaatti; 25 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-1 7/3-oi-3-oni-1 7- -oleaatti; 1-metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-oi-3-oni-17--hemisukkinaatti; 6- metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17-undekylaatti, 30 ja 7- metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-1 7/3 -ol-3-oni-17--propi onaatt i.

25 88393 ESIMERKKI 7

Fosforyyliklori di a (0,13 ml) lisätään liuokseen, jossa on 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3 -ol-3-onia (2,5 g) 2,3--dihydropyraanissa (10 ml). Annetaan seistä 4 tuntia 18° 5 C:ssa, jonka jälkeen liuos laimennetaan eetterillä, pestään vesipitoisella natriumkarbonaatilla ja vedellä, kuivataan natriums ui faati11a ja haihdutetaan kuiviin tyhjössä.

öljymäinen jäännös puhdistetaan kromatografoimal1 a piihappo-geelillä, eluointiaineena käytetään heksaani/etyyliasetaattia.

10 Näin saadaan puhdas 17/3-(tetrahydropyran-2'-yylioksi)-6--metyleeniandrosta-1,4-dien-3-oni (2,66 g).

Saatu C 78,49; H 8,83, kaava C25H34°3 vastaa C 78,53; H 8,90.

Edellä kuvatun menetelmän mukaisesti lähtemällä sopivasta yhdisteestä voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: . .15 17/3 -(tetrahydropyran-2'-yylioksi)-6-etylideeniandrosta- . -1,4-dien-3-oni; 17/¾ - (tetrahydropyran-2 ' - yyl ioksi)-1 -metyyl i-6-metyleeni--- androsta-1,4-dien-3-oni; 17/3-(tetrahydropyran-2 1 -yyl ioksi)-1 -metyyl i-6-etyl ideeni -V.20 androsta-1,4-dien-3-oni; ' 17/j-(tetrahydropyran-21-yylioksi)-7-metyyli-6-metyleeni- androsta-1,4-dien-3-oni; 1 7/3 - (tetrahydropyran-2 1 -yyl ioksi) -7-metyyl i-6-etylideeni-androsta-1,4-dien-3-oni; .;.25 1 7/3-(tetrahydropyran-2 1-yyl ioksi)-1,7-dimetyyl i-6-mety- ··' 1 eeniandrosta-1,4-dien-3-oni, ja " 17/3-(tetrahydropyran-2'-yylioksi)-1,7-dimetyyli-6-etyli- : deeniandrosta-1,4-dien-3-oni .

26 8 8 3 93 ESIMERKKI 8

Liuokseen, jossa on 6-metyleeniandrosta-1, 4-d i en-1 7^2-oi --3-oni (1,2 g, 4 mmoolia) pyridiinissä (40 ml), lisätään katalyyttinen määrä 4-dimetyyliaminopyridiiniä. Seosta 5 sekoitetaan ja se jäähdytetään -15°C:seen ja käsitellään kloorisulfonihapolla (1,33 ml, 20 mmoolia), annetaan seistä 4 tuntia huoneen lämpötilassa, jonka jälkeen laimennetaan natriumhydroksidi 1iuoksel1 a. Vesipitoinen liuos pestään etyyli eetterillä, hapotetaan 2 N kloori vetyhapolla ja 10 uutetaan metyleenikloridi11 a. Orgaaniset uutteet kuivataan Na2S0^:llä ja haihdutetaan alennetussa paineessa, saadaan 0,95 g melko puhdasta 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3 --ol-3-oni-17-sulfaattia.

NMR &p.p.m.: 0,75 (3H, s); 1,05 (3H, s); 4,05 (1H, m); 15 4,85 (2H, m); 5,9 (1H, d); 5,97 (1H, dd); 6,82 (1H, d).

Edellä kuvatun menetelmän mukaisesti voidaan valmistaa seuraavat yhdisteet: 6- etyleeniandrosta-1,4-dien-17/3 -ol-3-oni-17-sulfaatti; 1 -metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17^/a -ol-3-oni-17-20 -sulfaatti; · Y· 1-metyyli-6-etylideeniandrosta-1,4-dien-17^o -ol-3-oni-- 17-sulfaatti; 7- metyyli-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17^? -ol-3-oni--17-sulfaatti, ja .2 5 7-metyyli-6-etylideeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni- ;; -17-sulfaatti.

ESIMERKKI 9 6-metyleeniandrosta-1,4-dien-17/3-ol-3-oni-17-sulfaatti (1,89 g, 0,005 moolia) liuotetaan 0,5 N etanoliseen NaOH-30 liuokseen (10 ml). Liuos laimennetaan asetonilla. 10 minuutin kuluttua muodostunut natriumsuola kerätään suodatta- 27 8 8 393 maila ja pestään etyylieetteri 11ä.

Saatu C 59,87 %\ H 6,31 X; Na 5,71 %; S 7,94 % kaava ^Q^^NaO^S vastaa C 60,00 %; H 6,25 %; Na 5,75 7»; S 8,00 %.

5 Samalla tavalla voidaan valmistaa seuraavien yhdisteiden natrium suolat: 6-etyl ideeniandrosta-1,4-dien-17/3 -oi - 3- oni-17-sulfaatt i ; 1-metyyl i-6-metyleeniandrosta-1,4-dien-1 7/3 - oi-3-oni -1 7 --sulfaatti, ja 10 1-me tyy I i-6-e tyl i deeni androsta-1 ,4-d i en-1 7/3 -ol-3-oni- - 1 7-sul faatt-i .

Claims (2)

28 88393

1. Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisten 17-substi-tuoitujen androsta-1,4-dien-onijohdannaisten valmistami-5 seksi, joiden kaava (I) on 0Rr j^y-j I ( D R1 CHR2 15 jossa kumpikin tähteistä R ja R3 on toisistaan riippumatta vety tai C,-C6-alkyyli, R, on vety, halogeeni tai Ci~c6-alkyyli, R2 on vety tai C,-C6-alkyyli, R< on vety tai 20 fluori, Rs on a) vety tai C,-C6-alkyyli, b) fenyyli, joka on substituoimaton tai substituoitu yhdellä tai kahdella substituentilla, jotka ovat toisistaan riippumatta C,-C6-alkyyli, halogeeni tai amino, c) asyyliryhmä tai d) hyd-roksisuojaryhmä, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävi-25 en suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että a) dehydrataan kaavan (II) mukainen yhdiste 0RC CS j5 1 crH31 1_1 (TY 0 · ,l'K Γ li 3 Rt CHR2 29 88393 jossa R, R,, R2, R3, R4, ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, tai b) kaavan (III) mukainen yhdiste 5 0RC CH, 10 - I (III) 0* CHR2 15 jossa R, R2, R3/ R4 ja Rs tarkoittavat samaa kuin edellä, saatetaan reagoimaan hydrohalogenointiaineen kanssa, kaavan (I) mukaisen yhdisteen valmistamiseksi, jossa R, on halogeeni ja R, R2, R3, R< ja Rs tarkoittavat samaa kuin 20 edellä, tai c) kaavan (IV) mukainen yhdiste 0RC 25 R R4 30 *IV) • : T ^ s Rl jossa R, R,, R3, R4 ja R5 tarkoittavat samaa kuin edellä, 35 saatetaan reagoimaan formaldehydilähteen tai kaavan (V) mukaisen aldehydin R'2CHO, jossa R'2 on Ο,-Cj-alkyyli, ja / kaavan (VI) mukaisen amiinin tai sen suolan kanssa 30 88393 J^>NH (VI) 5 jossa kumpikin R,-ryhmä, jotka voivat olla samanlaiset tai erilaiset, on alempialkyyli, ja kaavan (I) mukainen yhdiste voidaan haluttaessa muuttaa toiseksi kaavan (I) mukaiseksi yhdisteeksi ja/tai haluttaessa voidaan muodostaa kaavan (I) mukaisen yhdisteen suola tai saada vapaa kaa-10 van (I) mukainen yhdiste sen suolasta, ja/tai kaavan (I) mukaisen yhdisteen isomeerien seos voidaan haluttaessa erottaa yksittäisiksi isomeereiksi.

2. Menetelmä patenttivaatimuksessa 1 esitetyn kaavan (I) 15 mukaisen yhdisteen tai sen farmaseuttisesti hyväksyttävän suolan valmistamiseksi, tunnettu siitä, että yhdiste on 6-metyleeniandrosta-l, 4-dien-17j(?-ol-3-oni; 4-kloori-6-metyleeniandrosta-l,4-dien-l7/3-ol-3-oni, tai 6-metyleeniandrosta-l,4-dien-170-ol-3-oni-17-propionaat-20 ti. 25 1. Förfarande för framställning av terapeutiskt användba- ra 17-substituerade androsta-l,4-dien-onderivat med formeln (I) 7 Π °Rr

30 CH T5 R f I 35 <u CHR2 3i 88393 i vilken var och en av resterna R och Rj är oberoende av varandra väte eller C,-C6-alkyl, R, är väte, halogen eller C,-C6-alkyl, R2 är väte eller C,-C6-alkyl, R4 är väte eller fluor, Rs är a) väte eller C,-C6-alkyl, b) fenyl, som är 5 osubstituerad eller substituerad med en eller tvä substi-tuenter, vilka är oberoende av varandra C,-C6-alkyl, halogen eller amino, c) en acylgrupp eller d) en hydro-xiskyddsgrupp, och deras farmaceutiskt godtagbara salter, kannetecknat därav, att man 10 a) dehydrerar en förening med formeln (II) 0RC C<3 I 5 R 15. jH3 I _1 (ID 0 ^ \ R I ll R3 Rt CHR2 20 i vilken R, R,, R2, R}, R,, och R5 betecknar detsamma som ovan, eller b) omsätter en förening med fontein (III) 25 0RC w .5 :3 >.PPV 3; ” rfx ..... : σ chr2 '·/*: 35 i vilken R, R2, R3, R4 och Rs betecknar detsamma som ovan, .···. med ett hydrohalogeneringsmedel för att framställa en 32 88393 förening med formeln (I), i vilken R, är halogen och R, R2, R3, R4 och Rs betecknar detsamma soin ovan, eller c) omsätter en förening med formeln (IV) 5 or5 ” Ä - R1 15. vilken R, R,, R3, R4 och R5 betecknar detsamma som ovan, med en formaldehydkä11a eller med en aldehyd med formeln (V) R'2CHO, i vilken R'2 är C,-C6-alkyl, och med en amin med formeln (VI) eller ett sait därav,

20 J^>NH (VI) i vilken var och en av R,-grupperna, vilka kan vara lika eller olika, är lägalkyl, och man kan omvandla, om sä önskas, en förening med formeln (I) tili en annan fö-25 rening med formeln (I) och/eller, om sä önskas, kan man bilda ett sait av en förening med formeln (I) eller erhälla en fri förening med formeln (I) frlin dess sait, och/eller, om sä önskas, kan man separera en blandning av isomerer av föreningen med formeln (I) tili enskilda 30 isomerer.

2. Förfarande för framställning av en förening med for-raeln (I) angiven i patentkravet 1 eller ett farmaceutiskt godtagbart sait därav, kännetecknat därav, att föreningen 35 är 6-metylenandrosta-l,4-dien-17/3-ol-3-on; 4-klor-6-metylenandrosta-l,4-dien-l7i8-ol-3-on, eller 6-metylenandrosta-l, 4-dien-17j8-ol-3-on-17-propionat.