FI85596B - Foerfarande foer framstaellning av en aerosolspray som innehaoller liposomer, daervid anvaend foerpackning och anvaendning av en komposition i foerpackningen. - Google Patents

Description

1 85596

Menetelmä liposomeja sisältävän aerosolisumutteen valmistamiseksi, siinä käytettävä pakkaus ja koostumuksen käyttö pakkauksessa

Esillä oleva keksintö kohdistuu menetelmään li-5 posomeja sisältävien aerosolisumutteiden valmistamiseksi, valmistuksessa käytettävään pakkaukseen ja koostumuksen käyttöön pakkauksessa. Erityisesti keksintö kohdistuu sellaisten valmisteiden valmistukseen, jotka sisältävät aktiivista ainetta ja liposomaalista kantajaa ja joissa 10 käytetään paineistettua aerosolisysteemiä.

Tiettyjä terapeuttisesti aktiivisia yhdisteitä annetaan potilaille inhaloimalla, toisin sanoen niitä annetaan hengitysteiden alueelle nenän tai suun kautta höyrynä tai kaasuna, tai sumuna yhdessä kantajamateriaa-^•3 Iin kanssa, joka on höyryn tai kaasun muodossa. Samal la tavalla tietyissä ihon käsittelyissä, esimerkiksi hoidettaessa avoimia haavoja tai nyrjähdyksiä, hoidettaessa dermatologisia tiloja, tai kosmeettisissa tarkoituksissa, voi olla toivottavaa antaa aktiivis-20 ta yhdistettä suihkuttamalla sitä kaasuna tai höyry nä tai sumuna. Joka tapauksessa on toivottavaa, että niin suuri osa kuin mahdollista aktiivisesta ainees-ta saavuttaisi halutun vaikutuskohdan, ja joskus ....: että aktiivinen yhdiste pysyisi jonkin aikaa koskemat- : 25 tomana halutussa vaikutuspaikassa. Toisin sanoen, et- _···[ tä aktiivista yhdistettä annettaisiin ilman, että se hajoaa siirrettäessä tai välittömästi kosketuksessa potilaan kanssa.

Niinpä esimerkiksi annettaessa anti-astmaattis-20 ta keuhkoputkia laajentavaa yhdistettä, joka tunnetaan bitolterolina (kuvattu GB-patentissa nro 1 298 771), - on toivottavaa annostella yhdistettä tavalla, jolla saavutetaan suurin mahdollinen tunkeutuminen keuhko-putkiin, jolloin saavutetaan aktiivisen yhdisteen te-35 hokkaimmat pitoisuudet tarpeellisissa vaikutuskohdissa. 1 · · 2 85596

Aiemmin on esitetty sellaisten liposomival-misteiden valmistusta, jotka sisältävät biologisesti aktiivisia yhdisteitä, ja tällaisia valmisteita on kuvattu esimerkiksi GB-julkaisuissa nro 1 575 343, 1 575 344 5 ja 2 013 609A. Kuitenkin näissä tunnetuissa valmisteis sa liposomaalinen materiaali on aiemmin valmistettu ja kuivattu, tyypillisesti lyofilisaatiolla (kylmäkuivaa-malla). Liposomaalinen materiaali saatetaan sitten käyttövalmiiksi sekoittamalla veteen.

10 Myös aerosolivalmisteita, jotka sisältävät eri laisia kosmeettisia ja terapeuttisia aineita, tunnetaan -katso esimerkiksi GB-julkaisuja nro 780 885, 993 702, 1 302 671, 1 381 184, 1 516 195 ja 2 001 334A. Kuitenkin, vaikka nämä tunnetut aerosolivalmisteet voivat sisältää 15 lipidisiä aineksia, nämä ainekset ovat poikkeuksetta pelkästään dispergoivina, suspensoivina, emulgoivina tai vastaavina aineina. Edelleen tällaisilla valmisteilla on tarkoitus tuottaa joko kuivaa sumutetta, niin että minkäänlainen liposomaalinen muodostuminen ei ole 20 mahdollista, tai milloin on kyseessä voiteen muodostumi nen kuten julkaisussa nro 780 885, valmisteet ovat vesipitoisena emulsiona, jossa minkä tahansa läsnä ole-.. van lipidin tarkoituksena on toimia pelkästään emulgoi- ' 1. vana tai vastaavana aineena. Samalla tavalla, kuten on 25 kuvattu GB-patenttijulkaisuissa nro 1 281 696 ja : 1 352 062, lesitiiniä voidaan käytttää hyvin pieninä ...· määrinä valokuvausprosessissa osana aerosolista kehitti.: täjävalmistetta, joka sisältää vettä, erottamaan ponne- aine kehitysliuoksesta.

30 Lisäksi US-patentissa nro 3 594 476 on esitetty lesitiiniaerosolien valmistusta käytettäväksi keuhko-sairauksien hoidossa, nämä aerosolit voivat mahdolli-• sesti sisältää muita terapeuttisia aineita kuten anti biootteja. Kuvatussa valmistusmenetelmässä valmiste-* : 35 taan ensin DL-dipalmitoyyli-Cfc-lesitiinin suspensio ve- 3 85596 teen (tai suolaliuokseen), minkä tahansa lääkeaineen ollessa liuotettuna veteen tai suolaliuokseen, sitten suspensio saatetaan sumun muotoon, eli siitä valmistetaan aerosoli, ultraäänigeneraattorissa käyttäen kanta-5 jana ilmavirtaa. Niinpä kuvatussa menetelmässä joudutaan käyttämään suhteellisen kallista ultraäänilaitteistoa lopullisen lesitiinin ja veden seoksen valmistamiseksi, samoin siinä täytyy käyttää seosta, joka sisältää lesitiiniä suspendoituna veteen. Ultraäänilaite voi myös 10 olla meluisa, ja voi olla ylipäänsä sopimaton käytettäväksi .

Edelleen US-patentissa nro 4 371 451 on esitetty lesitiinipohjaisten keittoastioiden pinnan irroitus-valmisteita, jotka sisältävät vettä, lesitiiniä ja di-15 metyylieetteriä ponneaineena. Kun tässä julkaisussa valmisteet otetaan aerosolisäiliöistä, saadaan lesitiinistä nopeasti kuivuva ja ohut päällyste, joka ei vaahtoa, eikä liposomaalista materiaalia sellaisenaan. Jälleen tässä tarkoituksessa käytettävät 20 valmisteet valmistetaan seoksesta, joka koostuu kiin teän lesitiinin suspensiosta vesipitoisessa kantajassa, toisin sanoen lesitiini dispergoidaan dimetyyli-Y; eetterin ja veden liuokseen, tai dimetyylieetterin ja ...: vesipitoisen etanolin liuokseen. Samoin keittoastioi- : .25 den voiteluaineita, jotka sisältävät lesitiiniä, kuva- ’.Y taan GB-patenttijulkaisussa nro 1 463 964. Kuitenkin tässä julkaisussa lesitiini on sekoitettu suhteelli- * « ;··* sen suureen määrään öljymäisiä aineita, jotta saatai- * · * “·*·* siin vesi-öljy-emulsio, ja riittävään määrään liposo- 30 min muodostumisen estymiseksi.

Vireillä olevassa hakemuksessamme nro 84-20850, Y : julkaistu 20 maaliskuuta 1985, GB-2 145 107A, olemme kuvanneet menetelmän liposomien valmistamiseksi, jon- " . ka menetelmän mukaisesti saatetaan kosketuksiin pai- . 35 neen alaisena ainakin kaksi erillistä komponenttia, toi- # · · • · 4 85596 sen komponentin sisältäessä vettä ja toisen komponentin sisältäessä lipidistä materiaalia, ja johdetaan seos paineen alaisena suuttimen tai muun vastaavan läpi, jolloin saadaan aerosolisumutetta, joka sisältää liposomeja.

5 Aiemmassa hakemuksessa esitetyssä menetelmässä val mistetaan liposomeja in situ tai valmistelematta käyttäen paineistettua aerosolisysteemiä. Tämän saavuttamiseksi vesipitoinen ensimmäinen komponentti ja toinen komponentti, joka sisältää kuivan lipidimateriaalin, sekoitetaan 10 sumuttamalla, jolloin muodostuu sumua, jossa liposomit voivat olla joko sellaisenaan tai liposomaalisena kantajana yhdelle tai useammalle aktiiviselle aineelle, yleensä biologisesti aktiiviselle aineelle ja/tai aineelle, joka on käyttökelpoinen käsiteltäessä tai hoidettaessa 15 ihmisen tai eläimen kehoa.

Aiemman keksinnön etuna on se, että aktiivinen aine ja vesi, ja/tai ponneaine ja vesi, voidaan käytännöllisesti katsoen pitää erillään kunnes halutun annnoksen jakaminen tapahtuu. On korostettava, että erottamalla 20 ainekset, jotka voivat mahdollisesti vaikuttaa toisiinsa johtaen hajoamiseen, voidaan saavuttaa riittävän pitkä elinikä, joka mahdollistaa menetelmän käytön monissa erilaisissa käytännön yhteyksissä. Samaan aikaan kuiten- • · · kin voi olla tiettyjä yhteyksiä, joissa seurauksena ole-* '25 va pitkä elinikä ei ole toivottu tai tarpeellinen.

: Olemme nyt yllättäen havainneet, että liposomeja voidaan valmistaa valmistelematta paljon yksinkertai-: semmalla menetelmällä, esimerkiksi käytettäväksi sei- laisissa yhteyksissä, liuottamalla lipidikomponentti 30 orgaaniseen liuottimeen, ja yhdistämällä näin valmistet- tu liuos veteen, jolloin saadaan yhdistetyn materiaa-Iin varasto. Yhdistelmä, joka sisältää usean annoksen systeemin, voidaan sopivasti sekoittaa joko ennen pakkausta ja/tai muuten ennen käyttöä, esimerkiksi emul-35 goimalla liuos ja vesi, ja annoksia kyseisen seoksen yh- 85596 5 distelmästä voidaan päästää suuttimen läpi, esim. sumutus-suuttimessa, jolloin saadaan erillisiä annoksia aeroso-lisumutteena, joka sisältää liposomeja.

Niinpä esillä oleva keksintö kohdistuu menetel-5 mään valmistaa liposomeja, jonka menetelmän mukaisesti valmistetaan lipidikomponentista liuos orgaaniseen liuot-timeen, yhdistetään näin valmistettu liuos toiseen komponenttiin, joka sisältää vettä, muodostetaan yhdistelmästä läheinen seos, ja johdetaan osa saadun seoksen 10 yhdistelmästä paineen alaisena suuttimen läpi, esim. su-mutussuuttimen tai vastaavan, jolloin saadaan aerosoli-sumutetta, joka sisältää liposomeja.

Keksinnön mukaiselle menetelmälle, pakkaukselle ja käytölle on tunnusomaista se, mitä vaatimuksissa 1, 15 9 ja 14 esitetään.

Samoin kuin aiemmassa hakemuksessamme, esillä olevassa keksinnössä liposomit valmistetaan ennalta valmistelematta käyttäen paineista aerosolisysteemiä. Kuitenkin esillä olevassa menetelmässä vesipitoinen komponent-20 ti ja lipidikomponentin liuos orgaanisessa liuottimessa yhdistetään ensin, jolloin muodostuu yhdistetyn materiaalin varasto, joka tarjoaa moniannos-systeemin (esimerkiksi ne esipakataan yhdessä), jonka jälkeen systeemistä muodostetaan seos, tyypillisesti vesipitoinen emulsio, . . 25 joka voidaan johtaa suuttimen läpi paineen alaisena, • · ·’·’ jolloin muodostuu erillisiä annoksia sumutteena, jossa liposomit voivat olla sellaisenaan tai liposomaalisena • · : kantajana yhdelle tai useammalle muulle aineelle. Niinpä esillä olevan keksinnön eräässä edullisessa sovellutus-30 muodossa muodostetaan liposomaalinen aerosoli, joka si-sältää liposomaalista kantajaa ja erillistä aktiivista ainetta, joka yleensä on biologisesti aktiivinen ja/tai käyttökelpoinen hoidettaessa tai käsiteltäessä ihmisen tai eläimen kehoa tai kasveja. Tällaiset aktiiviset ai-35 neet ovat yleensä ei-lipidisiä aineita, vaikkakin jois-' ‘ sain tapauksissa lipidi voi olla aktiivisen ryhmän kan- ta jana, esimerkiksi liittyneenä tähän.

6 85596

Vaihtoehtoisesti keksintöä voidaan käyttää valmistettaessa ja tuotettaessa liposomaalista aerosolia sellaisenaan, toisin sanoen ilman erillistä aktiivista yhdistettä tai muuta ainetta. Tällaisille aerosoleille löy-5 tyy monenlaista käyttöä, joko valmistettaessa liposomeja per se erilaisia sovellutuksia varten, tai terapiassa. Erityisesti ne ovat hyödyllisiä synnytyksissä, joissa vastasyntyneillä on hengitysvaikeuksia (hengitysvaje-synd-rooma), näitä voidaan auttaa hengittämään normaalimmin 10 antamalla lipidistä ainetta keuhkoputkien alueelle kor vaamaan luonnollisten keuhkojen pinta-aineiden alhaiset pitoisuudet, joita on havaittu näillä vastasyntyneillä.

Kuitenkin edullisesti mukana on erillistä aktiivista ainetta, jota voi olla joko liuoksessa vesipitoi-15 sessa komponentissa tai liuoksessa orgaanisessa liuot- timessa. Toisaalta, on erillistä aktiivista ainetta mukana tai ei, lipidiliuoksen ja vesipitoisen komponentin, jonka muodostamassa systeemissä yleensä on enemmän kuin yksikköannos aktiivista ainetta, kutakin yh-20 distelmää käytetään jakamaan yksikköannoksia sumutteena.

Keksinnön menetelmässä sumuttamisen vaikutus seokseen johtaa liposomaalisen materiaalin muodostumiseen. Tyypillisesti sekoitusvaihe tuottaa seoksen, V: joka sellaisenaan tai sumutuksen aikana koostuu vesi- ....:25 pitoisesta emulsiosta, joka sisältää lipidimisellejä, : .-. joista liposomaalinen materiaali voi muodostua. Tässä .···. suhteessa, ja koska emme halua, että esillä oleva kek- sintö rajoittuisi mihinkään tiettyyn hypoteesiin, uskomme, että liposomien muodostuminen tapahtuu sumutet-• 30 taessa aiemmin muodostetun lipidimisellejä sisältävän vesipitoisen emulsion hajotessa, kun orgaaninen liuo-‘ * tin haihtuu sumutettaessa, ja stabilointivaikutus, jo- : ka sillä on lipidifaasiin, pienenee tai häviää koko- ....: naan. Emulsiossa olevat yksiseinäiset misellit voivat ....:35 aueta, ja näin muodostuneet lipidikerrokset voivat kiin- • « » 7 85596 nittäytyä toisten koskemattomien misellien ympärille muodostaen kaksiseinäistä materiaalia, toisin sanoen lipo-somia.

Edelleen kun aktiivista ainetta on mukana, lipo-somaalinen materiaali sisältää aktiivisen aineen vesipitoisessa väliaineessa joko koteloidussa muodossa lipidi-kerrosten välissä tai kerrostettuna lipidimolekyylien väliin. Vaihtelemalla olosuhteita, joissa seos muodostetaan ja/tai sumutetaan, liposomien koko ja vapaan ja sidotun aktiivisen aineen suhteelliset osuudet voivat vaihdella laajalla alueella, jälkimmäinen aina 100-prosenttiseen sitoutumiseen. Esimerkiksi muodostamalla ja/tai sumuttamalla aerosoliseos eriasteisilla sekoituksilla, esimerkiksi yksinkertaisesti sekoittamalla yhdessä yhdistettyjä komponentteja, tai turbulenttisissa olosuhteissa, jotka voidaan kehittää vaikkapa sekoituskam-miossa ja/tai siihen liittyvän syötön avulla ja/tai su-mutesuuttimessa, voidaan valmistaa sumutetta, jossa on joko suuri osuus vapaata aktiivista ainetta - jolloin saadaan nopea vaikutus hitaasti vapautuvalla aktiivisella aineella - tai jossa on alhaisempi osuus vapaata aktiivista ainetta - jolloin saadaan hitaampi vaikutus pitkäaikaisesti ja kontrolloidusti vapautuvalla aktiivisel-la aineella. Niinpä jälkimmäisessä tapauksessa voidaan • · valmistaa valmistetta, joka sisältää aktiivista ainet- : ta, jossa suuri osuus materiaalista saadaan "suojatussa” muodossa haluttuun vaikutuskohtaan, ja/tai muuten vaikut-: tamaan hidastetulla tavalla.

Keksinnön mukainen menetelmä sopii käytettäväksi valmistettaessa valmisteita, joissa on monentyyppisiä biologisesti aktiivisia aineita ja/tai muita aineita, ... jotka ovat käyttökelpoisia hoidettaessa tai käsiteltäes sä ihmisen tai eläimen kehoa tai kasveja. Tyypillises-ti menetelmää voidaan käyttää valmistettaessa valmisteita, s 85596 jotka sisältävät terapeuttisesti aktiivisia yhdisteitä, sisältäen myös eläinlääketieteessä käytettävät, samoin kuin biologisesti aktiiviset reagenssit, kosmeettises-ti aktiivisia aineita, yhdisteitä, joilla on ravintoar-5 voa, ja muita aineita, joita käytetään hoidettaessa tai käsiteltäessä ihmisen tai eläimen kehoa. Valmisteet voivat myös sisältää kasvien käsittelyssä käytettäviä aineita kuten herbisidejä, pestisidejä, kasvien kasvun säätelijöinä käytettäviä aineita ja vastaavia.

10 Sopivia kosmeettisesti aktiivisia aineita ovat tuotteet, jotka on tarkoitettu ihon ja hiusten hoitoon, esimerkiksi kosteuttavat aineet, keinotekoiset ruske-tusaineet (mahdollisesti yhdessä väriaineiden kanssa), palamista estävät aineet, antiperspirantit, deodoran-15 tit, kasvovedet ja virkistävät, sävyttävät, arpeuttavat, keratolyyttiset ja ihokarvoja poistavat tuotteet, hajustettu vesi, eläin- ja kasvikudoksista valmistetut uutteet, hiusvärit, hilseenestoaineet, talin eritystä ehkäisevät aineet, hapetusaineet, esim. valkaisuaineet 20 ja pelkistävät aineet.

Terapeuttisesti aktiivisina aineina voidaan mainita vitamiinit, steroidit, esim. kortikosteroidit, hormonit, aktiiviset peptidit, entsyymit, rokotteet, Ύ: tulehduksenvastaiset aineet, antibiootit ja bakterisidit.

____:25 Kuitenkin keksinnön mukainen menetelmä on erityisen so- : piva annettaessa terapeuttisesti aktiivisia yhdisteitä *-·· inhalointiterapiana, kuten keuhkoputkia laajentavia ja anti-astmaattisia yhdisteitä, samoin kuin kasvainten vastaisia aineita. Tällaiset yhdisteet, jotka ovat lipo-'•’•130 somaalisen kantajan sisällä tai kerällä, kykenevät tun keutumaan keuhkoputkien haaroihin, näin tehden terapian tehokkuuden edullisesti modifioitavaksi. Samalla taval-·} ' la menetelmällä on erityisiä etuja hoidettaessa avohaa- voja, esim. suoliston haavautumia, joissa liposomaalis-.35 ta kantajaa voidaan myös käyttää samaan aikaan (edistä- · · 9 85596 mään) modifioitua vaikutusta, tehden mahdolliseksi, että käsittely oleellisesti rajoittuu haavaumaan ilman selvää systeemistä hajaantumista.

Yllä esitetyn mukaisesti, ja vain esimerkkinä, 5 voidaan mainita seuraavat yksittäiset yhdisteet ja an totavat :

Aktiivinen yhdiste Yhdisteen tyyppi Antotapa

Stanotsoli Anabolinen steroidi Paikallinen (esim. avoimen 10 haavan käsittely)

Hydrokortisoni Tulehduksen vastai- Paikallinen nen steroidi

Beetametasoni Tulehduksen vastai- Paikallinen (ja sen esterit, nen steroidi 15 esim. valeraatti)

Bitolteroli Katekolamiinibron- Inhalaatio (ja sen suolat, kodilaattori esim. mesylaatti)

Salbutamoli Katekolamiinibron- Inhalaatio 20 kodilaattori

Teofylliini Ksanteenibronko- Inhalaatio dilaattori

Natriumkromigly- Ei-steroidinen Inhalaatio • kaatti anti-astmaattinen ____25 N-asetyylimuramyyli- Makrofagia aktivoiva Inhalaatio/ : L-alanyyli-D-isoglu- aine (kasvainten vas- Intranasaa- tamiini (adjuvantti- .

dipeptidi) täinen dipeptidi) Imen

Propranololi P-salpaava aine ja Oraalinen/- ehkäisyaine intravaginaa- - 30 linen

Tietysti alan ammattimiehille on selvää, että lukui- siä muita aktiivisia aineita voidaan käyttää. Edelleen : : - vaikka paikalliset, inhalointi, intranasaaliset ja oraa- ____: liset antotavat ovat eniten käytettyjä, voidaan myös .35 muita antotapoja käyttää, milloin se on tarkoituksenmukais- 10 85596 ta. Esimerkiksi valmisteita, jotka on valmistettu keksinnön mukaisella menetelmällä ja jotka sisältävät sopivaa aktiivista ainetta, voidaan antaa suoraan vaikka silmään tai jopa suonensisäisesti.

5 Lisäksi voidaan mainita biologisesti aktiivisia aineita, jotka voivat olla myös terapeuttisesti aktiivisia, kuten rokotteet, tai muita biologisesti aktiivisia aineita, jotka ovat käyttökelpoisia reagenssei-na, kuten antigeenit ja/tai vasta-aineet, esim. anti-10 kanin IgG. Tämän tyyppiset reagenssit voivat olla käyttökelpoisia testattaessa verinäytteitä, tyypillisesti tut- , kittaessa onko kyseessä sairaus vaiko ei.

Keksinnön mukaisesti valmistettu liposomaali-nen aine voi olla positiivisesti tai negatiivisesti va-15 rautunutta tai neutraalia. Aine sisältää lipidimateriaa-lia, joka on vesipitoisessa dispersiossa tai suspensiossa, ja voi sisältää yhtä tai useampaa muuta aktiivista ainetta. Edelleen lipidimateriaali voi olla yksi-lamellisena ja/tai monilamellisena lipidisenä kaksois-20 kerroksena, joissa voi olla mukana mikä tahansa maini tuista muista aktiivisista aineista.

Liposomaalinen materiaali tyypillisesti koostuu mistä tahansa amfipaattisesta lipidistä, joka sopii •Y: liposomien valmistukseen ja jolla on yleensä kaava:

25 X-Y

: jossa X on polaarinen hydrofiilinen ryhmä ja Y on ei-po- laarinen hydrofobinen ryhmä.

“1 Edullisesti kuitenkin liposomaalinen materiaali sisältää fosfolipidin, ja vielä edullisemmin se on fos-- · 30 folipidi, joka sisältää fosfatidyylikoliinin. Esimer kiksi dipalmitoyylifosfatidyylikoliinia sellaisenaan tai lesitiinin muodossa; fosfadityylietanolamiinia; Ϋ · fosfatidyyliseriiniä; fosfatidyylisfingomyeliiniä? ____: 35 fosfatidyylikardiolipiiniä; fosfatidyyliplasmalogeenia; ____: fosfatidiinihappoa; ja/tai fosfatidiiniserebrosidia voidaan li 85596 käyttää lipidisenä materiaalina. Liposomaalinen materiaali voi myös koostua fosfolipidistä, esim. lesitiinistä, yksin tai yhdessä kolesterolin kanssa ja/tai ainakin yhdestä yhdisteestä, joka voi antaa varauksen liposomaa-5 liseen materiaaliin. Niinpä esimerkiksi varaus voidaan saada liposomaaliseen materiaaliin käyttämällä disetyyli-fosfaattia tai fosfatidiinihappoa, jotka voivat antaa negatiivisen varauksen lipidimateriaaliin, tai stearyy-liamiinia, joka voi antaa positiivisen varauksen lipidi-10 materiaaliin.

Yllä kuvattujen aineiden käyttö ja niiden suhteet, samoin kuin käytettävissä olevien materiaalien laaja valinnanvara ja vaihtelut niiden suhteissa ovat alan ammat-timiehille tunnettuja. Yleisesti ottaen laajalla alueel-15 la lipidisten materiaalien suhteissa saadaan haluttua liposomaalista materiaalia, edellyttäen että lipidinen komponentti ei yleensä sisällä enempää kuin noin 50 pai-no-% kolesterolia ja/tai enempää kuin noin 20 paino-% ainetta, joka aikaansaa varauksen.

20 Kuitenkin vain esimerkkinä eräässä edullisessa keksinnön mukaisessa sovellutusmuodossa lipidikomponent-ti voi sisältää fosfatidyylikoliinia ja kolesterolia, tyypillisesti suhteellisina moolisuhteina noin 8: noin 1-2, esim. noin 8,5 : 1.

'-'-25 Toisessa edullisessa keksinnön mukaisessa sovel- : lutusmuodossa lipidikomponentti voi sisältää fosfatidyy- likoliinia, kolesterolia ja disetyylifosfaattia, tyy-. pillisesti suhteellisina moolisuhteina noin 8: noin 1-2: noin 1 - 0,05, esim. noin 8,5 : 1 : noin 0,7 - 0,07.

30 Edelleen eräässä keksinnön mukaisessa sovellu tusmuodossa lipidikomponentti voi sisältää fosfatidyylikoliinia, kolesterolia ja fosfatidiinihappoa, tyypillisesti suhteellisina moolisuhteina noin 8: noin 1-2 : "·: noin 1 - 0,1, esim. noin 8,5 : 1 : noin 0,1.

i2 85596

Vielä eräässä edullisessa keksinnön mukaisessa sovellutusmuodossa lipidikomponentti voi sisältää fos-fatidyylikoliinia, kolesterolia ja stearyyliamiinia, tyypillisesti suhteellisina moolisuhteina noin 8: 5 noin 1-2: noin 1 - 0,05, esim. noin 8,5 : 1 : noin 0,06.

Vaihtoehtoisesti lipidikomponentti voi sisältää esimerkiksi: seoksen, jossa on fosfatidyylikoliinia, esim. lesitiiniä, ja fosfatidiinihappoa, esim. suhteessa 10 noin 60 : noin 1 ; seoksen, jossa on fosfatidyylikoliinia, esim. lesitiiniä, ja disetyylifosfaattia, esim. suhteessa noin 15 : noin 1; tai edullisimmin, pelkästään lesitiiniä.

15 Keksinnössä tuotetun liposomaalisen materiaalin pH on fysiologisella alueella, joten se on edullisesti välillä noin 6,8 - 7,4, edullisemmin välillä noin 7 -7,4. Systeemi, joka sisältää kyseisen liuoksen ja kyseisen vesipitoisen komponentin, voi myös sisältää 20 puskurointiainetta määrän, joka on sopiva aikaansaamaan ja säilyttämään haluttu pH, ja sopiva tähän tarkoitukseen on fosfaattipuskuri, joka tyypillisesti sisältää natriumdivetyfosfaattia ja dinatriumvetyfosfaattia. Kuitenkin joissain tapauksissa, esim. kun aktiivinen ’** ' 25 aine koostuu tietyistä aktiivisista yhdisteistä tai ·„: * reagensseista, kuten testimerkkiaineesta, pH voi olla : .* fysiologisen alueen ulkopuolella. Niinpä esimerkiksi : hydrokortisonin ollessa kyseessä pH voi olla alle 5 * * « stabiilisuussyistä.

30 Keksinnössä käytettävä orgaaninen liuotin voi ____; olla mikä tahansa liuotin, joka liuottaa valitun lipi- dikomponentin, ja joka muuten on sopiva aiotussa käyttötarkoituksessa. Liuotin on kuitenkin edullisesti fy-siologisesti hyväksyttävä, ja sellainen, johon sekä 35 lipidikomponentti että muu aktiivinen aine liukenee.

i3 85596 Tässä suhteessa edullisia liuottimia ovat suhteellisen haihtuvat orgaaniset liuottimet, esimerkiksi alkoholit, kuten etanoli ja isopropyylialkoholi, kloroformi (paikallisten määräysten kohteena) ja eetteri. Myös toinen 5 komponentti, joka sisältää vettä, voi sisältää pieniä määriä yhteensopivaa orgaanista liuotinta,kuten etanolia, esimerkiksi määrän, joka voi olla aina 10 paino-%.

Keksinnön edullisessa sovellutusmuodossa aerosoli valmistetaan käyttäen yhtä tai useampaa aerosolin ponne-10 ainetta. Tämä ponneaine tai nämä ponneaineet voivat olla systeemissä, joka sisältää mainitun liuoksen ja mainitun vesipitoisen komponentin ja/tai ne syötetään erikseen. Edullisesti kuitenkin käytetään yhtä systeemiä, joka sisältää yhtä tai kahta ponneainetta, kyseistä liuosta 15 ja kyseistä vesipitoista komponenttia.

Tyypillisesti ponneaine koostuu hiilivedystä tai halogenoidusta hiilivedystä tai näiden seoksesta. Esimerkkejä sopivista ponneaineista ovat propaani, butaani, puristettu ilma, typpi, dimetyylieetteri, ja ponneaine 20 11 (trikloorifluorimetaani), vaikkakin diklooridifluori- metaani ja diklooritetrafluorietaani tai näiden seokset ovat edullisimpia. Ponneaine voi olla valmistettu alhaisen paineen ponneaineeksi, joka kehittää paineita vä-Iillä noin 25 - 30 psi, kuten diklooridifluorimetaanin 25 ja diklooritetrafluorietaanin seos painosuhteessa 20 :80.

• - ; Vaihtoehtoisesti ponneaine voi olla suhteellisen suuren : : paineen ponneaine, joka kehittää aina noin : 70 psin paineen, kuten diklooridif luorimetaanin ja dikloo- ritetrafluorietaanin seos painosuhteessa 80:20.

30 Keksinnön mukaisessa menetelmässä valittua valmis- . tetta voidaan jakaa käyttäen erilaisia tavanomaisia su- muteventtiilijärjestelmiä. Kuitenkin milloin valmiste sisältää aktiivista ainetta, joka halutaan jakaa kontrol-loituina erillisinä annoksina, valmisteen annetaan edul-35 lisesti purkautua suuttimen läpi paineen alaisena käyt- n 85596 täen annosteluventtiiliä, jolloin saadaan haluttu mitattu annos kyseistä aktiivista ainetta kullakin venttiilin käytöllä.

Keksinnön mukaisessa menetelmässä myös emulsion 5 täytyy sisältää riittävästi vettä lipidien hydratoi- miseksi. Niinpä vaikka käytettävä veden ja lipidin painosuhde voi olla niin alhainen kuin 2:1, on edullista käyttää veden ja lipidin painosuhdetta, joka on ainakin noin 5:1, edullisemmin ainakin noin 10:1, esi-10 merkiksi noin 20:1 tai suurempi, esim. aina 30:1. Li säksi täytyy käyttää riittävästi orgaanista liuotinta liuottamaan lipidikomponentti, jotta vältettäisiin kiinteiden lipidipartikkeleiden vedessä muodostaman dispersion muodostuminen. Myös seoksessa olevan veden 15 määrän tulee yleensä olla suurempi kuin ponneaineen määrä (jos se sekoitetaan tähän), ja edullisesti vettä on ylimäärin ainakin noin 1,5 : 1 minkä tahansa siihen sekoitettavan ponneaineen suhteen. Edelleen mitkään emulsiossa olevat aineet ja/tai niiden määrät eivät 20 saa olla sellaisia, että ne häiritsevät minkä tahansa valitun vesi/lipidi-seoksen kykyä muodostaa liposomeja.

Niinpä seuraavassa esitetään eri aineksille edulliset määrien vaihteluvälit laskettuna koko systee-min painosta ja edulliset painosuhteet: Vesi - ainakin 25 45 % ja enintään 97 %, edullisemmin noin 45 % - 70 %; : Lipidi - ei enempää kuin 25 %, edullisemmin noin 2 % - : ' : noin 10 %; Ponneaine - noin 5 % - noin 50 %, edulli semmin noin 20 % - 45 %; Liuotin - noin 4 % - 20 %; Vesi/lipidi - noin 2:1, edullisemmin noin 5:1 - 30:1; 30 Liuotin/lipidi - noin 40:1 tai alempi, esim. 2:1 tai alempi; Vesi/liuotin - ainakin noin 1:1, edullisemmin ainakin noin 4:1; Vesi/ponneaine - noin 1,1:1 -’·“ 20:1; Ponneaine/liuotin - noin 1,3:1 - 12:1.

is 85596

Keksintö käsittää myös pakkauksen käytettäväksi liposomaalisen aerosolin valmistuksessa, joka pakkaus koostuu ainakin yhdestä kammiosta, joka sisältää lipidi-komponentin liuoksen orgaanisessa liuottimessa ja vesi-5 pitoisen komponentin, ensimmäisessä kammiossa ja/tai toisessa kammiossa on ainakin yhtä ponnekaasuainetta, ja pakkauksessa on järjestelmä, jolla voidaan suutti-men läpi ottaa seosta, joka sisältää lipidiliuosta ja vesipitoista komponenttia, sumutteena paineessa, joka 10 on kehitetty ponnekaasuaineen tai -aineiden avulla.

Edullisesti pakkaus sisältää aktiivista ainetta, joka on määritelty edellä, orgaanisen liuottimen muodostamassa liuoksessa tai vesipitoisessa komponentissa, esim. vedessä. Edullisessa myös ulostulolaitteisto on 15 sellainen, että aktiivista ainetta voidaan ottaa ulos mi tattu määrä pakkauksesta, vaikka haluttaessa voidaan käyttää jatkuvan virtauksen venttiiliä. Yleensä aktiivinen aine, lipidiliuos ja vesipitoinen komponentti, ja ponneaine ovat sellaisia kuin edellä on kuvattu kek-20 sinnön mukaisen menetelmän yhteydessä.

Keksinnön mukaisessa pakkauksessa ensimmäinen kammio voi olla aerosolikanisteri tai -pussi, ja mikä tahan-sa toinen kammio voi olla toinen aerosolikanisteri tai -pussi. Milloin käytetään kahta kammiota, ne on edulli-25 sesti järjestetty siten, että ensimmäinen on toisen sisässä (tai päinvastoin), ja venttiili on sijoitettu ulomman kanisterin sisälle tai yläpuolelle tai toiseen kam-mioon. Kuitenkin vielä edullisemmin keksinnön mukainen • : - pakkaus sisältää joko yhden kanisterin, jossa on kaik- 30 ki tarvittavat ainekset ja ponneaine, tai kanisterin, jossa on sisällä taipuisa pussi, jossa on tarpeelliset .**.·. ainekset, kun taas ponneaine on pussin ja kanisterin vä lisessä tilassa. Jälkimmäisessä tapauksessa veden ja ponneaineen suhde on yleensä lähellä edellä annettua ie 85596 ylärajaa, noin 20:1, koska kahden kammion pakkauksessa tarvitaan yleensä paljon vähemmän ponneainetta.

Vaihtoehtoisesti muunnelmassa keksinnön mukainen pakkaus voi käsittää ainakin ensimmäisen kammion, joka 5 sisältää lipidikomponentin liuoksen orgaanisessa liuotti- messa, systeemin vesipitoisen komponentin syöttämiseksi kammioon, jolloin ensimmäinen kammio, toinen kammio ja/tai vesipitoinen komponentti sisältää ainakin yhtä ponneainetta, ja pakkauksessa on järjestelmä kyseisen liuoksen ja vesipi-10 toisen komponentin syöttämiseksi suuttimen läpi sumutteena paineessa, joka on kehitetty ponneainemateriaalilla tai - materiaaleilla.

Tällaista modifioitua pakkausta voidaan käyttää valmistettaessa pakkaus, jossa on sekä liuos että ve-15 spipitoinen komponentti hetkellä, jona pakkauksesta annetaan potilaalle. Tällä tavalla vesi ja lipidi voidaan pitää erillään kunnes pakkausta käytetään, esim. farmasiassa, ensimmäisessä kammiossa on venttiilisys-teemi, joka mahdollistaa vesipitoisen komponentin pää-20 syn kammioon käytön yhteydessä. Tämän jälkeen potilas (tai lääkäri) voi itse ottaa tarpeellisia yksikköan-noksia täytetystä pakkauksesta, joka sisältää sekä li-pidiliuoksen että vesipitoisen komponentin.

* : : Edellä esitetystä kuvauksesta on ymmärrettä- *:·*: 25 vissä, että käytettäessä esillä olevaa keksintöä yk-sikköannos aktiivista ainetta, joka saadaan kullakin edellä kuvatun pakkauksen käyttökerralla, vaihtelee - laajasti riippuen lukuisista tekijöistä, esimerkiksi: Γ" 1. Aktiivisen aineen konsentraatio pakkaus- ' ‘ 30 systeemissä; 2. Käytetyn annosventtiilin koko; ‘ ' 3. Purkautumissuuttimen koko; ja : 4. Jatkuvavirtausventtiileissä toiminnan kesto.

—: 35 Edelleen liposomin kokoa voidaan säädellä pää- ____: asiassa (me uskomme) paineella, joka kehitetään ponne- li i7 85596 aineen tai -aineiden avulla ja/tai sumutettavan seoksen viskositeetilla. Yleisesti ottaen, mitä voimakkaammin komponentteja sekoitetaan, esim. alussa ravistamalla, tai purkautumisvaiheessa, sitä pienempi on liposomien 5 koko. Kuitenkin sekoitettujen komponenttien jakamiseen käytettävän venttiilin purkautumis- tai jakosuuttimen koko vaikuttaa myös valmistettavien liposomien kokoon, ja edullisesti tällaisen purkautumissuuttimen koko vaih-telee välillä noin 350 - 450 mikronia.

10 Toisaalta kun yllä kuvatut parametrit on kerran valittu, saatavasta annostasosta voidaan helposti olla varmoja, samoin kuin minkä tahansa aktiivisen aineen määrästä ja saatavien liposomien koosta.

Kuten on selvää niille, jotka tuntevat aktiivis-15 ten aineiden muotoilun kantajamateriaalien kanssa, aktii visen aineen pitoisuudella liposomaalisessa kantajassa, joka on valmistettu esillä olevan keksinnön mukaisesti, on selvä vaikutus päivittäiseen annostasoon, joka on · valittu koko valmisteelle. Niinpä tällainen päivittäi-20 nen annostaso riippuu valmisteen valinnasta, joka riip puu esitetyistä kriteereistä, joita kohdataan minkä - tahansa valmisteen yhteydessä.

Lisäksi esitetään koostumus, jota käytetään valmistettaessa useita liposomaalista materiaalia sisältä- 25 ; viä yksikköannoksia, joka koostumus sisältää vesipitois ta komponenttia ja lipidikomponentin liuosta orgaanises- - sa liuottimessa, koostumuksen mahdollisesti sisältäessä ponneainemateriaalia tai -materiaaleja ja/tai aktiivista ainetta, joka on määritelty edellä.

Lisäksi kuvataan liposomaalista materiaalia tai liposomaalista koostumusta, jota käytetään valmistettaessa sumutetta tässä kuvatulla menetelmällä, tai käytettä-— väksi tässä kuvatussa pakkauksessa.

ie 85596

Seuraavat esimerkit havainnollistavat keksinnön mukaista menetelmää, pakkausta ja käyttöä.

Annetuissa esimerkeissä valmisteet sisältävät ammoniummolybdaattia elektronitiheänä materiaalina, jo-5 ka oli mukana vain merkkiaineena helpottamaan liposo- mien havaitsemista ja niiden halkaisijan mittausta käyttäen elektronimikroskooppia. Niille, jotka ovat perehtyneet farmaseuttisiin valmisteisiin, on tietysti selvää, että ammoniummolybdaattia, joka on melkoisen myr-10 kyllinen aine, ei saa olla osana todellista valmistetta, jota annetaan potilaalle. Ammoniummolybdaatin poisjättämisellä ei ole haitallista vaikutusta aktiivisen aineen pitoisuuteen ja niinpä missä tahansa esimerkeissä esitetyissä valmisteissa molybdaattimerkintäaine voidaan 15 jättää pois ilman haittaa, ja saatuja tuloksia voidaan saada sitä ilman.

Myös vaikka voidaan esittää esimerkkejä monista erilaisista aktiivisen aineen pitoisuuksista, ja vaikka näillä vuorostaan saadaan monia erilaisia vapaan ja si-20 toutuneen aktiivisen aineen pitoisuuksia käytettäessä, jälleen on valmisteisiin perehtyneelle selvää, että an-nostaso ja valitun valmisteen laatu mihin tahansa pak- • « kaukseen riippuu halutusta annostasosta, samoin kuin tarvittavasta tai halutusta tasapainosta sitoutumattoman · 25 ja sitoutuneen aktiivisen aineen välillä.

: : Niinpä aktiivista ainetta voidaan ottaa tunne- : tun standardoidun annostason yli tai alle (tai vaikka sen verran) , jolloin saadaan mikä tahansa vaikutuksen vaihtelu, jota vaikutuksen vaihtelua voidaan lisätä ____; 30 valitun pitoisuusasteen avulla.

· · • a 1 i 85596 19

Esimerkki 1 300 mg munalesitiiniä ja 4 mg stanotsololia liuotettiin 558 mgraan etyylialkoholia (B.P.) ja näin saatu liuos siirrettiin standardoituun 25 ml:n lasiseen aero-5 solipulloon (inhalaatiotyyppinen). Tähän lisättiin 9,0 ml vesipitoista ammoniummolybdaattiliuosta (0,5paino-%) ja 3,0 g diklooridifluorimetaania. Sitten pullo suljettiin tavanomaisella 60 mikrolitran mittausventtiilillä ja tavanomainen painonuppi, jossa oli halkaisijaltaan 10 450 mikronin suutin, asennettiin siihen. Pulloa ravis tettiin, jotta saataisiin emulsio alkoholisesta ja vesipitoisesta liuoksesta, ja näin saatua emulsiota sulautettiin aerosolina. Saadusta aerosolisumutteesta saatiin yksilamellisia ja monilamellisia liposomeja, joiden hal-15 kaisijät olivat välillä 30 nm - 1000 nm. Kullakin mit- taventtiilin toimintakerralla purkautui 20 mikrogrammaa stanotsololia, josta 13 mikrogrammaa oli liittynyt liposomeihin.

Esimerkit 2-6 20 Seurattiin esimerkin 1 menetelmää, mutta suori tettiin variaatioita, jotka on esitetty seuraavassa taulukossa saatujen tulosten kanssa. 1 » · • · 20 85596

•H I

S I I S "m

.¾ is έ «S

:ro ΐι ,2 ot -H

H d)H ' — C

Φ S S rrt O O ‘ , 3

C:3 md «Tl · -P-HC

3 :ro ro-H o Tr o -i z Ti -h ro d

•P&OTQ m cn 3 E > OT

lili §11 t a sss, SgA ^ r S Ic 3° kii -3 a-äxs a» i §f S ms ή · λ; m o H n _ iti ro d :ro w oi d .

31¾ S $ “ * c ° g a o !”|| ύ w :td ro ro o o o o . S :§ ot C p Q,Hgg KT CO 02; -d j C M <c S :!3 SP. ’E ^ G H 3 -h r*· S-1¾ g 1^12 o°

Aai iitS Is :$ nj ro Λ Λί ^ d in a-n m n •H γΗρ-Ι B -P d •Pot pro ro o ' m -p to yOgd U, U, OTUdM-HÖ S £37} o o ui \ \ m 3'H v q § 538 vo vo r- u u rfd'i Q A? d c -i ^ -5 -5 ot 1-1 >, « i'ooO -S V» C i> rp .5 8 9 d ro -P ro -P ro v Q 1¾ c o in o o «5 ti gn ti - - « «> ·. ro £ d ot -h -n

SiSo- a^-S-gp*!? 5l82 ps|«sg .

. · · . W M E -n -P r-

.-' d d §H (D S SS

2 . -P -H P d > OT O

..... "d ·Η . Crl ·Η 0(N

‘ d d^ VO ΓΜ οί VO VO P -Η d ro d ·η I

• SEP 1-1 ^ f" —· 1-1 m -p -P ro ro ^ ··· fr ·§ B Ή (N CM Ή ,-i d ti Tl 5 S f °° :-: w a: ^ cn r—i (»h S !3 1j O % 3 ro S ro & ro -h τι d -P -i vo >i.d · tt -P o

Ti n H O -H -H -P un : : - Q — Q < * <—j > d oo ... rod d S -h 5J o

S S a -h q > (N

--- « ro * S -H S ^ i - - O d , d d d S 00 «3 00 ® ® «> Ä-h 8 o rt? ^ -H d 2 ot ro P p ·:··; 3 3,23^3.%

·* . 33 -333 SF

: -S 5^,5-83^.33 "ji ·_ o -h n ro c m ή OT^ O O O O O 5«ΙδΊ^Ί'5 <8 o C UI O O & 3 il

. M VO (N r—I VO VO i (3 5 Ji H

-· ti £ 2 £ .!2 S ---1 flj Qjrorow^ja ro

, ξ,-Η tn tJ II II II

: "·· £ * S Ö C > fc. tn

ti v£/ -N ^ \ Q

| fNmrr^vo-vJ

OT-H

MM

2i 85596

Esimerkit 7-9

Valmistettiin kolme aerosolisysteemiä, jotka sisälsivät bitolterolimesylaattia, seuraavasti:

Lipidifaasi valmistettiin yhdistämällä lesitiini-5 liuos (300 mg/ml) ja bitolterolimesylaatti (1 mg/ml) etyylialkoholissa. Eri määriä lipidifaasia (0,5, 1,0 ja 3,0 ml vastaavasti) lisättiin eri määriin 0,5 % p/til ammoniummolybdaattiliuosta vedessä (5,0, 5,0 ja 3,0 ml vastaavasti) erillisissä aerosolipulloissa. Ponneaine 10 12:a eli diklooridifluorimetaania (2,6 g) lisättiin ku hunkin pulloon ja pullot suljettiin kukin tavanomaisella 15 mm, 100 mikrolitran mittausventtiilillä, jolloin saatiin kolme näytettä, joissa oli vastaavasti lipidifaasin ja vesifaasin suhteet 1:10, 1:5 ja 1:1 ja jotka vastaa-15 vasti sisälsivät noin 92, noin 85 ja noin 54 paino-% vettä laskettuna lipidi- ja vesifaasien kokonaispainosta. Pulloja ravisteltiin voimakkaasti faasien sekoittamiseksi.

Kahdessa ensimmäisessä näytteessä (1:10 ja 1:5 lipidifaasi :vesifaasisuhteet) valkoinen emulsio havaittiin 20 kirkkaan ponneainefaasin päällä. Kolmannessa näytteessä kirkas liuos havaittiin kirkkaan ponneainekerroksen päällä.

Kondensoitujen bitolterolimesylaatti-aerosolien elektronimikroskooppitutkimus suoritettiin näytteistä su- ____: 25 muttamalla paljastuvia liposomeja, joita on läsnä kaikis- : .·. sa kolmessa sumutevalmisteessa, vaikkakin rajoitettu mää- rä näytteessä, jossa lipidifaasin ja vesipitoisen faasin suhde oli 1:1. Laimentamalla näytettä tuotettujen liposo-mien määrä kasvoi huomattavasti, mistä voidaan vetää joh-30 topäätös, että kolmas näyte sisälsi riittämättömästi vesipitoista faasia, jotta lipidikerroksessa ollut lesitii-ni olisi hydratoitunut täydellisesti sumutettaessa.

- Tuloksena lääkeaineen sitoutumismäärityksistä saa- ____: tiin 59, 60 ja 10 paino-%, joka jälleen osoittaa, että 35 liposomit eivät olleet täydellisesti muodostuneet kolmannessa näytteessä. Kaikista kolmesta näytteestä saatiin ; erittäin hienoa aerosolisumutetta, kun käytettiin paino- nuppia (valmistaja Coster), johon oli sovitettu "säteet-täisen syötön" liitos mekaanisen hajoamisen aikaansaami-40 seksi.

Claims (17)

22 85596

1. Menetelmä liposomien valmistamiseksi lipidikom-ponentin ja veden sisältävästä seoksesta, jolloin lipidi- 5 komponentista valmistetaan liuos orgaaniseen liuottimeen, yhdistetään näin saatu liuos toiseen komponenttiin, joka sisältää vettä, ja muodostetaan yhdistelmästä seos, tunnettu siitä, että osa yhdistelmästä johdetaan kyseisenä seoksena paineen alaisena suuttimen läpi niiden 10 läheisen seoksen muodostamiseksi, jolloin muodostuu aero-solisumutetta, joka sisältää liposomeja.

2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aktiivinen aine, joka on biologisesti aktiivista ja/tai käyttökelpoista hoidet- 15 taessa tai käsiteltäessä ihmisen tai eläimen kehoa tai kasveja, on mukana yhdistelmässä.

3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aktiivinen aine on liuotettuna orgaaniseen liuottimeen.

4. Patenttivaatimuksen 2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että aktiivinen aine on: (i) terapeuttisesti tai kosmeettisesti aktiivista; (ii) biologisesti aktiivinen reagenssi; (iii) yksi tai useampi yhdiste, jolla on ravin- : 25 toarvoa; tai (iv) pestisidi, herbisidi tai kasvin kasvua säätelevä aine.

5. Minkä tahansa edellä esitetyn patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että li-30 pidikomponentti sisältää fosfolipidistä materiaalia ja on valittu siten, että saadaan positiivisesti varautunut, negatiivisesti varautunut tai neutraali liposomi, ja edullisesti fosfolipidi on fosfatidyylikoliini, fosfati-dyylietanolamiini tai fosfatidyyliseriini, ja lipidikom-35 ponentti sisältää edullisesti yhtä tai useampaa näistä 23 8 5 596 aineista sellaisenaan tai yhtä tai useampaa näistä aineista yhdessä kolesterolin ja/tai ainakin yhden yhdisteistä disetyylifosfaatti, fosfatidiinihappo tai stearyy-liamiini kanssa.

6. Minkä tahansa edellä esitetyn patenttivaatimuk sen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vesipitoinen komponentti sisältää puskurointiainetta.

7. Minkä tahansa yllä esitetyn patenttivaatimuksen mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sumu- 10 tuspaine saadaan aikaan vähintään yhdellä aerosolipon- neaineella.

8. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 2-7 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että seos suihkutetaan tavalla, jolla saadaan mitattu annos kyseistä 15 aktiivista ainetta.

9. Liposomaalisen aerosolin valmistuksessa käytettävä pakkaus, joka sisältää yhden tai useamman kammion ja ulostulojärjestelmän, tunnettu siitä, että ainakin ensimmäisessä kammiossa on lipidikomponentin liuos 20 orgaanisessa liuottimessa ja vesipitoinen komponentti, jolloin ensimmäinen kammio ja/tai toinen kammio sisältää ainakin yhtä ponneainetta, ja ulostulojärjestelmä on sellainen, jonka avulla voidaan ottaa suuttimen kautta seosta, joka sisältää lipidiliuoksen ja vesipitoisen kom-: - 25 ponentin, sumutteena paineen alaisena, joka on saatu aikaan ponneaineella tai -aineilla.

10. Patenttivaatimuksen 9 mukainen pakkaus, tunnettu siitä, että ensimmäisessä kammiossa on aktiivista ainetta, joka on käyttökelpoista käsiteltäessä 30 ihmisen tai eläimen kehoa, mutta joka ei ole terapeuttisesti käyttökelpoista ainetta tai joka on käyttökelpoista hoidettaessa tai käsiteltäessä kasveja.

11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen pakkaus, tunnettu siitä, että ulostulojärjestelmä on sel- 35 lainen, että pakkauksesta voidaan ottaa mitattu annos kyseistä aktiivista ainetta. 24 8 5 596

12. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 9-11 mukainen pakkaus, tunnettu siitä, että lipidi-liuos, vesipitoinen komponentti, ponneaine(-et), ja aktiivinen aine ovat patenttivaatimuksessa 3-7 määritel- 5 tyjä, paitsi että aktiivinen aine ei ole terapeuttisesti aktiivinen.

13. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 9-12 mukainen pakkaus käytettäväksi liposomaalisen aerosolin valmistuksessa, tunnettu siitä, että pakkaus si- 10 sältää ainakin ensimmäisen kammion, jossa on lipidikom- ponentin liuos orgaanisessa liuottimessa, systeemin vesipitoisen komponentin syöttämiseksi kammioon, jolloin ensimmäinen kammio, toinen kammio ja/tai vesipitoinen komponentti sisältää ainakin yhtä ponneainetta, ja pakkaus 15 sisältää ulostulojärjestelmän, jonka avulla voidaan ottaa suuttimen kautta seosta, joka sisältää kyseisen liuoksen ja vesipitoisen komponentin, sumutteena paineen alaisena, joka on saatu aikaan ponneaineella tai -aineilla.

14. Koostumuksen, joka sisältää vesipitoisen kom-20 ponentin ja lipidikomponentin liuoksen orgaanisessa liuottimessa, ja mahdollisesti ponneainetta tai -aineita ja/tai aktiivista ainetta, joka on määritelty patenttivaatimuksessa 2, paitsi terapeuttisesti käyttökelpoista ainetta, käyttö jonkin patenttivaatimuksen 9-13 mukai-25 sessa pakkauksessa useiden yksikköannosten saamiseksi, jotka sisältävät liposomaalista materiaalia.

15. Patenttivaatimuksen 14 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että koostumus sisältää noin 45 -70 paino-% vettä, noin 2-10 paino-% lipidiä, noin 4 - 30 20 paino-% orgaanista liuotinta, ja mahdollisesti noin 20-45 painoprosenttia ponneainetta.

16. Patenttivaatimuksen 14 tai 15 mukainen käyttö, tunnettu siitä, että koostumuksen ainesten painosuhteet ovat seuraavat: Vesi: lipidi - noin 5:1 - 35 noin 30:1; Liuotin: lipidi - noin 40:1 tai alempi, esim. li 25 8 5 596 1,86:1; Vesi: liuos - ainakin noin 4:1; Vesi: ponneaine -noin 1,1:1 - noin 20:1; ja/tai Ponneaine: liuotin - noin 1,3:1 - noin 12:1.

17. Minkä tahansa patenttivaatimuksen 14 - 16 rau-5 kainen käyttö, tunnettu siitä, että koostumuksen lipidiliuos, vesipitoinen komponentti, ponneaine(-et), ja aktiivinen aine ovat patenttivaatimuksissa 3-7 määriteltyjä, paitsi terapeuttisesti käyttökelpoista ainetta. 26 85596