FI85504C - Medel foer bestaemning av peroxidasaktiviteten tillsammans med en stabilisator, dess framstaellningsfoerfarande och anvaendning. - Google Patents

Medel foer bestaemning av peroxidasaktiviteten tillsammans med en stabilisator, dess framstaellningsfoerfarande och anvaendning. Download PDF

Info

Publication number
FI85504C
FI85504C FI864815A FI864815A FI85504C FI 85504 C FI85504 C FI 85504C FI 864815 A FI864815 A FI 864815A FI 864815 A FI864815 A FI 864815A FI 85504 C FI85504 C FI 85504C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
solution
penicillin
tetraalkylbenzidine
preparation
agent
Prior art date
Application number
FI864815A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI85504B (fi
FI864815A (fi
FI864815A0 (fi
Inventor
Hans Erwin Pauly
Herbert Schwarz
Original Assignee
Behringwerke Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Behringwerke Ag filed Critical Behringwerke Ag
Publication of FI864815A0 publication Critical patent/FI864815A0/fi
Publication of FI864815A publication Critical patent/FI864815A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI85504B publication Critical patent/FI85504B/fi
Publication of FI85504C publication Critical patent/FI85504C/fi

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/72—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving blood pigments, e.g. haemoglobin, bilirubin or other porphyrins; involving occult blood
    • G01N33/721—Haemoglobin
    • G01N33/725—Haemoglobin using peroxidative activity
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/26—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase
    • C12Q1/28—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving oxidoreductase involving peroxidase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2326/00—Chromogens for determinations of oxidoreductase enzymes
    • C12Q2326/10—Benzidines
    • C12Q2326/12—3,3',5,5'-Tetramethylbenzidine, i.e. TMB
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/904—Oxidation - reduction indicators

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Dram (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Ultra Sonic Daignosis Equipment (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)

Description

1 85504
Valmiste peroksidaasiaktiivisuuden määrittämiseksi stabi-loimisaineen kanssa, valmistusmenetelmä ja valmisteen käyttö Tämä keksintö koskee valmistetta peroksidaasiaktii-5 visuuden määrittämiseksi värireaktion avulla sekä sen valmistusmenetelmää ja käyttöä.
Oleellista edellytystä sille, että yleiseen käyttöön saatiin entsyymi-immunoanalyysit, jotka olivat toteamisherk-kyyden suhteen samanveroisia kuin radioimmunologiset mene-10 telmät, merkitsi stabiilien osoittajaentsyymien ja niihin kuuluvien erittäin herkkien värinmuodostusreagenssien käyttöön tulo, joiden avulla näiden osoittajaentsyymien katalyyttinen aktiivisuus voitiin rekisteröidä mittausteknisesti yksinkertaisella tavalla. Erikoisen sopiviksi osoittaja-15 entsyymeiksi osoittautuivat tällöin oksidoreduktaasit glu-koosioksidaasi ja peroksidaasi. Peroksidaasin reaktiot kuuluvat yleisesti useimmin käytettyihin entsymaattisiin osoi-tusreaktioihin. Esimerkiksi kaikki teoksessa "Methods of Enzymatic Analysis", H.U. Bergmeyer, toim., 3. painos, osa 20 1, ss. 210-221, Verlag Chemie, Weinheim (1983) kuvatut mene telmät perustuvat, kuten glukoosin määritys glukoosioksidaa-sin avulla, vetyperoksidin stökiometriseen tuottamiseen. Tämä voidaan sitten muuttaa peroksidaasin katalysoimassa värittömän substraatin hapetuksessa värilliseksi tuotteeksi, 25 joka voidaan yksinkertaisesti määrittää kvantitatiivisesti spektrofotometrian avulla.
*" ; Tähän peroksidaasin katalysoimaan reaktioon sopivia ’ ' väriä tuottavia systeemejä on siksi tutkittu ja kuvattu suuri määrä (katso Bergmeyer) . Kun on kysymyksessä peroksi-30 daasiaktiivisuuden määrittäminen entsyymi-immunoanalyyseis-sä, vastaavat vain harvat vaatimuksia, erityisesti toteamis-: : : herkkyyden suhteen. Yleensä pitäisi väriä tuottavan subst raatin sallia suuri muuttumisnopeus ja siitä pitäisi muo-dostua tuote, jonka väri pysyy ja jolla on suuri molaari-35 nen ekstintiokerroin. Lisäksi pitäisi suosia aineita, joi- 2 85504 den käsittely ei aiheuta vaaraa terveydelle. Kaupallisissa peroksidaasiin perustuvien entsyymi-immunoanalyysien testitarvikepakkauksissa käytetään ennen kaikkea o-feny-leenidiamiinia (OPD) ja yhdistettä 2,21-atsinodi-(3-ety-5 leenibentsotiatsoliinisulfonaatti-6) (ABTS). Sekä OPD että myös ABTS ovat, kuten useimmat peroksidaasin substraatit, mutageenisia. Eräs usein käytettyjen substraattien ryhmä ovat bentsidiini-tyyppiä olevat, joihin myös tetrametyyli-bentsidiini (TMB) kuuluu. TMB on turvallinen ei-mutageeni-10 nen korvike bontsidiinityyppiä oleville karsinogeenisille peroksidaasin substraateille, kuten mm. bentsidiinille, diaminobentsidiinille. Lukuisissa tutkimuksissa ei ilmennyt yhtäkään osoitusta tämän bentsidiinijohdannaisen muta-geenisista ominaisuuksista (Tetrahedron 30, 3299 (1976); 15 Cancer Lett. 1, 39 (1975); J. Forensic Sei. 21, 816 (1976). Erinäiset käyttäjät ovat vuodesta 1974 asti käyttäneet TMB:tä hemoglobiinin tai sytokromi P 450:n pseudoperoksi-daasiaktiivisuuden määrittämiseen ja jo Liem et ai., Anal. Biochem. 98, 388-393 (1979) peroksidaasiaktiivisuuden osoit-20 tamiseen immunikomplekseissa immunoperoksidaasi-värjäystek-niikalla. Nämä julkaisun tekijät viittaavat johtopäätöksessään sivulla 392 TMB:n hyviin väriominaisuuksiin, mutta kuitenkin myös sen vähäiseen liukenevuuteen tavallisesti käytettyihin puskurisysteemeihin ja sen hapetuksen kautta 25 tapahtuvaan hajoamiseen.
Eräs huono puoli tähän asti käytetyissä väriä tuot-”* ; tavissa systeemeissä, joissa käytetään TMBttä peroksidaasin osoittamiseen, on TMB:n vähäinen stabiilisuus käyttövalmiis-sa seoksissa. Silloinkin kun peroksidaasia ei ole läsnä, 30 aiheuttaa vetyperoksidi jo muutamissa tunneissa värinmuo-dostusta, jonka johdosta substraattiliuokset tulevat kel-: : : paamattomiksi entsyymi-immunoanalyysikäyttöön suuren nolla- koearvonsa vuoksi.
Tästä syystä oli olemassa tarve löytää peroksidaasin .··,·. 35 määritykseen soveltuva, tetra-alkyylibentsidiiniä sisältävä 3 85504 valmiste, jolla ei ole yllä mainittua huonoa puolta. Sellainen valmiste, sen valmistaminen ja käyttö ovat tämän keksinnön aiheena.
Yllättäen todettiin, että voidaan saada stabiili-5 suudeltaan aikaisempia oleellisesti parempi tetra-alkyyli-bentsidiinivalmiste lisäämällä tätä yhdistettä tai jotakin sen johdannaista sisältävään liuokseen penisilliiniä tai penisilliinijohdannaisia, jotka muodostuvat penisilliinin happamassa hydrolyysissä, konsentraatioksi, joka on välil-10 tä 2,7 yumool.ia/1 - 2,7 mmoolia/1, mieluimmin väliltä 13,5 yumoolia/1 - 135 yumoolia/1, ja säätämällä liuoksen pH välille 2,5 - 6, sekoittamalla liuos veteen valmistetun puskuri-liuoksen kanssa, joka sisältää sopivan pitoisuuden vetyperoksidia. Kun sellaisten valmisteiden, joihin ei ole teh-15 ty tällaista lisäystä, reagenssinollakoearvo kohoaa kelpaamattoman suureksi yhdessä tai useammassa tunnissa, paranee pysyvyys penisilliiniä tai sen johdannaisia lisäämällä yhdeksi tai useammaksi viikoksi.
Keksintö koskee siten nestemäisen sekoitteen muodos-20 sa olevaa valmistetta, jonka avulla voidaan osoittaa ja määrittää peroksidaasi, joka valmiste sisältää pääasiallisesti vettä sisältävässä liuoksessa tetra-alkyylibentsidiiniä tai sen suoloja, penisilliiniä tai penisilliinin kaksiren-kaisesta perusrakenteesta heikosti happamassa hydrolyysissä 25 muodostuvia jakautumistuotteita, esimerkiksi penisilliini-. happoa tai 6-aminopenisilliinihappoa tai myös ei-rengas- ·· ; maista penisilliiniamiinia pitoisuutena 2,7 yumoolia/1 - 2,7 mmoolia/1, peroksidia peroksidaasin substraatiksi pitoisuu-teen 0,5 - 50 mmoolia/1 ja puskuriaineita.
30 Lopullinen aine voidaan valmistaa liuottamalla kiin- - \ - teässä muodossa oleva sekoite, esimerkiksi lyofilisaatti, :V: granulaatti tai tabletti, joka sisältää nestemäiseen val misteeseen käytetyt aineosat tetra-alkyylibentsidiinin, penisilliinin tai sen jakautumistuotteet, peroksidit ja 35 puskuriaineet sellaisissa määräsuhteissa, että liuotettaessa < 85504 määrättyyn tilavuuteen pääasiallisesti vettä sisältävää liuotinta, aineosat ovat läsnä mainittuina pitoisuuksina. Kiinteä valmiste voi lisäksi vielä sisältää lisäaineita, kuten esimerkiksi liukastavaa ainetta, täyteainetta ja 5 hajotusainetta, esimerkiksi polyeteeniglykolia, virtsa- ainetta ja bikarbonaattia.
Tetra-alkyylibentsidiininä soveltuvat käytettäviksi ennen kaikkea sellaiset, jotka sisältävät yhdestä kolmeen hiiliatomia alkyyliosassa, mieluimmin 3,3', 5,51-tetrame-10 tyylibentsidiini (TMB) tai sen dihydrokloridi. Penisilliininä käytetään mieluimmin penisilliini G:tä ja V:tä. Perok-sidina soveltuvat käytettäviksi natriumperboraatti, vetyperoksidi nestemäisessä muodossa tai kiinteänä virtsa-aine-adduktina tai myös vetyperoksidin muodostumista aikaan saa-15 va systeemi, joka koostuu D-glukoosista ja glukoosioksidaa-sista, jolloin konsentraatio säädetään välille 0,5 - 10 m-moolia/1. Puskuriaineista pidetään parhaina lyotrooppisia aineita, kuten sitraattia ja asetaattia pitoisuuksina 5-100 mmoolia/1.
20 Valmistettaessa nestemuodossa olevaa valmistetta liuotetaan tetra-alkyylibentsidiini ensimmäiseen happameen liuokseen, jossa on laimennettua suolahappoa tai muurahaishappoa ja jonka pH-arvo on 1,5 - 2,0. Penisilliini tai sen happamassa hydrolyysissä muodostuvat jakautumistuotteet li-25 sätään mieluimmin tähän liuokseen.
Toinen, vähemmän hapan liuos valmistetaan liuotta-I maila peroksidi tai lisäämällä se, kun käytetään vetyperok- sidiliuosta. Puskurointiin käytetään esimerkiksi etikkahap-poa tai mononatrium- tahi monokaliumsitraattia, joiden pH-30 arvo voidaan säätää natriumhydroksidin avulla välille 3-6. Mainitut penisilliinin jakautumistuotteet lisätään tähän : toiseen liuokseen, ellei niitä tai penisilliiniä vielä ole lisätty happamampaan liuokseen.
Sekoittamalla nämä kaksi liuosta määrätyssä suhtees-.·*.*. 35 sa saadaan käyttövalmis valmiste.
5 85504
Keksintöä valaisevat lähemmin seuraavat esimerkit, sen rajoittumatta niihin.
Esimerkkejä 1. Käyttövalmiin TMB-substraattivalmisteen valmistus 5 Kantaliuos 1: TMB-dihydrokloridia liuotettiin se koittaen pitoisuudeksi 5 g/1, s.o. 16 mmoolia/1, kahdesti tislattuna veteen ja pH säädettiin 5 N suolahapon avulla l,5:ksi. Tähän liuokseen lisättiin sekoittaen penisilliini G:tä, siten että loppukonsentraatio oli 200 mg/1, s.o.
10 0,56 mmoolia/1.
Vertailun vuoksi valmistettiin kantaliuos 1 lisäämättä penisilliiniä.
Kantaliuos 2: 900 ml:aan kahdesti tislattua vettä lisättiin 1,4 ml jääotikkaa, 1,5 ml 1 N NaOH ja 250 mg, 15 s.o. 3 mmoolia H2O2 virtsa-ainevetyperoksidi-adduktia. Kun liukeneminen oli tapahtunut täydellisesti, täytettiin kahdesti tislatulla vedellä 1 l:ksi.
Käyttöliuos: Yksi tilavuusosa kantaliuosta 1 ja 10 tilavuusosaa kantaliuosta 2 sekoitettiin keskenään.
20 Tämän liuoksen optinen tiheys oli aallonpituudella 650 nm 0,025. Kun oli lisätty 5-kertainen tilavuus 0,5 N rikkihappoa, oli aallonpituudella 450 nm mitattu ekstinktio 0,008.
2. Käyttöliuoksen pysyvyystutkimus 25 TMB-käyttöliuosta valmistettiin esimerkin 1 mukai sesti ja sitä säilytettiin jääkaapissa 4-8°C:ssa. Samalla · : tavalla valmistettiin ja säilytettiin esimerkin 1 mukainen käyttövalmis liuos, johon ei kuitenkaan lisätty penisillii-ni G:tä. Määrätyn säilytysajan jälkeen otettiin näistä käyt- 30 töliuoksista näytteitä, laimennettiin 5-kertaisella tila-: : : vuudella 0,5 N rikkihappoa ja määritettiin ekstinktio 450 nm:n aallonpituudella (TMB) . Tulokset on koottu seuraavaan taulukkoon.
6 8S504
TAULUKKO
Peroksidaasin määritykseen tarkoitettujen käyttö-liuosten reagenssinollakoearvojen stabiilius, kun on laimennettu 6-kertaisesti 0,5 N rikkihapolla.
5 Reagenssinollakoearvoja, kun säilytys 4°C:ssa on kestänyt 0 2 24 48 7 14 tuntia tuntia tuntia tuntia päivää päivää TMB-käyttö- 0,008 0,015 0,006 0,008 0,014 0,024 liuos, jossa 10 on penisilliiniä TMB-käyttö- 0,010 0,038 0,105 0,365 liuos, jossa ei ole penisilliiniä a · * * *

Claims (8)

7 85504
1. Valmiste peroksidaasiaktiivisuuden osoittamiseksi ja määrittämiseksi, joka valmiste sisältää jotakin tet-5 ra-alkyylibentsidiiniä tai jotakin sen suolaa, jotakin pe-roksidia tai vetyperoksidia tuottavaa systeemiä ja puskuri-ainetta, tunnettu siitä, että valmiste sisältää penisilliiniä tai jotakin sen happamassa hydrolyysissä muodostuvaa jakautumistuotetta.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen valmiste, tun nettu siitä, että tetra-alkyylibentsidiini sisältää alkyyliosassa yhdestä kolmeen hiiliatomia.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen valmiste, tunnettu siitä, että tetra-alkyylibentsidiini on 3,3'- 15 5,5'-tetrametyylibentsidiini.
4. Menetelmä patenttivaatimuksen 1 mukaisen valmisteen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että tetra-alkyylibentsidiini liuotetaan happoon ja liuokseen lisätään jotakin penisilliiniä ja tämä liuos sekoitetaan toisen liu- 20 oksen kanssa, joka sisältää peroksidia ja puskurlaineita.
5. Menetelmä peroksidaasiaktiivisuuden osoittamiseen ja määrittämiseen soveltuvan valmisteen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että tetra-alkyylibentsidiiniä tai jotakin sen suolaa liuotetaan liuokseen, jonka pH on 1,5- 25 2, ja tähän liuokseen lisätään jotakin penisilliiniä tai jotakin penisilliinin happamassa hydrolyysissä saatua jakautumistuotetta konsentraatioksi 2,7 yumoolia/1 - 2,7 m-moolia/1, lopputilavuutta tarkoittaen, ja tämä liuos sekoitetaan toisen liuoksen kanssa, joka sisältää peroksidia 30 ja puskuriaineita.
6. Patenttivaatimuksen 5 mukainen menetelmä, t u n - :Y: n e t t u siitä, että jos käytetään penisilliinin jakau- tumistuotteita, nämä lisätään liuokseen, joka sisältää pe- ....: roksidia ja puskuriaineita. • * .•v. 35
7. Patenttivaatimuksen 1 mukaisen valmisteen käyttö analyyttisissä menetelmissä, joissa osoitetaan tai määri-: ‘ tetään peroksidaasi- tai pseudoperoksidaasiaktiivisuutta.
8 85504
FI864815A 1985-11-28 1986-11-26 Medel foer bestaemning av peroxidasaktiviteten tillsammans med en stabilisator, dess framstaellningsfoerfarande och anvaendning. FI85504C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
DE3541979 1985-11-28
DE19853541979 DE3541979A1 (de) 1985-11-28 1985-11-28 Mittel zur bestimmung von peroxidase-aktivitaet mit stabilisator, verfahren zur herstellung und seine verwendung

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI864815A0 FI864815A0 (fi) 1986-11-26
FI864815A FI864815A (fi) 1987-05-29
FI85504B FI85504B (fi) 1992-01-15
FI85504C true FI85504C (fi) 1992-04-27

Family

ID=6287014

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI864815A FI85504C (fi) 1985-11-28 1986-11-26 Medel foer bestaemning av peroxidasaktiviteten tillsammans med en stabilisator, dess framstaellningsfoerfarande och anvaendning.

Country Status (15)

Country Link
US (1) US4891314A (fi)
EP (1) EP0224813B1 (fi)
JP (1) JPH0722519B2 (fi)
AT (1) ATE56991T1 (fi)
AU (1) AU611629B2 (fi)
CA (1) CA1291401C (fi)
DE (2) DE3541979A1 (fi)
DK (1) DK571186A (fi)
ES (1) ES2018154B3 (fi)
FI (1) FI85504C (fi)
GR (1) GR3001137T3 (fi)
MX (1) MX170909B (fi)
NO (1) NO171417C (fi)
PT (1) PT83825B (fi)
ZA (1) ZA868981B (fi)

Families Citing this family (23)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3541978A1 (de) * 1985-11-28 1987-06-04 Behringwerke Ag Mittel zur bestimmung von peroxidase-aktivitaet, verfahren zur herstellung und seine verwendung
US4895798A (en) * 1987-11-13 1990-01-23 Miles, Inc. Test devices for determination of occult blood
IE68446B1 (en) * 1989-07-19 1996-06-12 Noctech Technology Limited A colour stable chromogen composition
US5225325A (en) * 1990-03-02 1993-07-06 Ventana Medical Systems, Inc. Immunohistochemical staining method and reagents therefor
US5532138A (en) * 1990-04-26 1996-07-02 Behringwerke Ag Method and kits for determining peroxidatively active catalysts
US5215885A (en) * 1990-10-23 1993-06-01 Beckman Instruments, Inc. Stable two-part chromogen substrate
US5206150A (en) * 1990-10-26 1993-04-27 University Of Kentucky Research Foundation Composition of, method of producing and method of using a stabilized formulation for assaying peroxidase activity
DE4037764A1 (de) 1990-11-28 1992-06-04 Behringwerke Ag Waschloesung fuer festphasen-immunometrische verfahren, die stabilisatoren fuer das markierungssystem enthaelt und ihre verwendung
DE4037776A1 (de) * 1990-11-28 1992-06-04 Behringwerke Ag Waschloesung fuer festphasen-immunometrisches verfahren, die einen komplexbildner fuer metallionen enthaelt und ihre verwendung
GB9027131D0 (en) * 1990-12-14 1991-02-06 Rice Evans Catherine Diagnostic test
US5332662A (en) * 1992-07-31 1994-07-26 Syntex (U.S.A.) Inc. Methods for determining peroxidatively active substances
US5447868A (en) * 1993-09-14 1995-09-05 Propper Manufacturing Co. Inc. Method, reagent and kit for the detection of fecal occult blood
US5650284A (en) * 1995-03-14 1997-07-22 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Enhancing the sensitivity of immunoassay procedures by use of antibodies directed to the product of a reaction between probe labels and assay substrates
US5925532A (en) * 1995-03-14 1999-07-20 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Enhancing the sensitivity of immunoassay procedures by use of antibodies directed to the product of a reaction between probe labels and assay substrates
DE19544150C2 (de) * 1995-11-16 2002-06-13 Seramun Diagnostica Gmbh Stabile 3,3',5,5'-Tetramethylbenzidin-Lösungen
US5804404A (en) * 1996-01-22 1998-09-08 Dako Corporation Stable substrate-chromogen solutions for enenzyme activity detection
CN1114830C (zh) * 1997-06-18 2003-07-16 金红军 过氧化物酶测定用显色底物组合物
ATE236402T1 (de) 1997-07-15 2003-04-15 Kem En Tec As Vorgefärbte 3,3',5,5'-tetramethylbenzidin- substrate zum nachweis von enzymaktivität
CN101354354B (zh) * 2007-07-23 2010-06-23 深圳市生科源技术有限公司 一种过氧化物酶测定用显色液体系及其制备方法
ES2581387T3 (es) 2008-03-26 2016-09-05 Institute Of Technology Sligo Una composición antimicrobiana
CN103712982B (zh) * 2013-12-13 2016-02-03 山东博科生物产业有限公司 一种高灵敏度的tmb显色液及其制备方法
CN103884563B (zh) * 2014-04-10 2016-08-17 上海太阳生物技术有限公司 过氧化物酶（pox）染色液（化学染色法）
CN105116141B (zh) * 2015-07-02 2016-09-14 深圳市卫光生物制品股份有限公司 一种单组份tmb显色液及其制备方法

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE2460903C3 (de) * 1974-12-21 1981-12-24 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Neue 3,3',5,5'-Tetraalkylbenzidine
JPS5263794A (en) * 1975-11-21 1977-05-26 Shionogi Seiyaku Kk Test piece for latent blood
US4077772A (en) * 1977-05-31 1978-03-07 Baxter Travenol Laboratories, Inc. Method for the determination of hemoglobin in trace amounts
US4340394A (en) * 1979-11-13 1982-07-20 Miles Laboratories, Inc. Stabilization of benzidine-type indicators with various enhancers
US4503143A (en) * 1982-08-20 1985-03-05 Btc Diagnostics Limited Partnership Enzyme immunoassay with two-part solution of tetramethylbenzidine as chromogen
US4504579A (en) * 1982-11-08 1985-03-12 Abbott Laboratories Stabilized peroxidase compositions
ZA841078B (en) * 1983-03-01 1984-09-26 Warner Lambert Co Peroxidase activity detection composition
EP0121137A1 (en) * 1983-04-04 1984-10-10 Combustion Engineering, Inc. Seal welded tube sleeve
US4789630A (en) * 1985-10-04 1988-12-06 Cetus Corporation Ionic compounds containing the cationic meriquinone of a benzidine
DE3541978A1 (de) * 1985-11-28 1987-06-04 Behringwerke Ag Mittel zur bestimmung von peroxidase-aktivitaet, verfahren zur herstellung und seine verwendung

Also Published As

Publication number Publication date
US4891314A (en) 1990-01-02
AU611629B2 (en) 1991-06-20
DE3674549D1 (de) 1990-10-31
FI85504B (fi) 1992-01-15
NO171417B (no) 1992-11-30
ES2018154B3 (es) 1991-04-01
EP0224813B1 (de) 1990-09-26
AU6577986A (en) 1987-06-04
DK571186D0 (da) 1986-11-27
NO171417C (no) 1993-03-10
CA1291401C (en) 1991-10-29
ZA868981B (en) 1987-07-29
GR3001137T3 (en) 1992-06-25
DK571186A (da) 1987-05-29
JPH0722519B2 (ja) 1995-03-15
PT83825A (de) 1986-12-01
EP0224813A1 (de) 1987-06-10
NO864775D0 (no) 1986-11-27
ATE56991T1 (de) 1990-10-15
FI864815A (fi) 1987-05-29
FI864815A0 (fi) 1986-11-26
MX170909B (es) 1993-09-22
DE3541979A1 (de) 1987-06-04
PT83825B (pt) 1989-06-30
JPS62130700A (ja) 1987-06-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI85504C (fi) Medel foer bestaemning av peroxidasaktiviteten tillsammans med en stabilisator, dess framstaellningsfoerfarande och anvaendning.
Steiner et al. Respiratory inhibition and hypoglycemia by biguanides and decamethylenediguanidine
Porstmann et al. Comparison of chromogens for the determination of horseradish peroxidase as a marker in enzyme immunoassay
Booth et al. The biochemistry of aromatic amines. 3. Enzymic hydroxylation by rat-liver microsomes
EP0068356B1 (de) Mittel und Verfahren zum Nachweis von Wasserstoffperoxid oder Peroxidasen
US3092464A (en) Blood detecting composition
van Den Bossche et al. The biochemical mechanism of action of the antinematodal drug tetramisole
Kasidas et al. A new enzymatic method for the determination of glycollate in urine and plasma
EP0185057A4 (en) PEROXIDASE ENZYMACTIVITY TEST PROCEDURE.
US5206150A (en) Composition of, method of producing and method of using a stabilized formulation for assaying peroxidase activity
EP0307975A2 (en) Improvements relating to assay reagents
WO1986004610A1 (en) Stabilized enzyme substrate solutions
EP0068438B1 (de) Mittel und Verfahren zum Nachweis von Wasserstoffperoxid
FI85877C (fi) Medel foer bestaemning av peroxidasaktivitet, foerfarande foer dess framstaellning och dess anvaendning.
US4239649A (en) Cholesterol standard
US5266472A (en) Stabilization of the enzyme urate oxidase in liquid form
Kurfurst et al. Bioluminescence emission from the reaction of luciferase-flavin mononucleotide radical with superoxide ion
US6852503B1 (en) Compositions and methods for utilizing mixed substrate solutions of luminols and dioxetanes
JPH06508759A (ja) ペルオキシダーゼをベースとする検定における検出を改善するための発色性基質
EP0279614A2 (en) Stable peroxide substrate formulation
KR100209097B1 (ko) 퍼옥시다아제의 기질인 티엠비의 안정화된 조성물
Ismail et al. KINETICS OF ASPRIN HYDROLYSIS IN AQUEOUS SOLUTIONS OF SURFACTANTS. III: SODIUM LAURYL SULFATE
KAMACHI et al. Spectrophotometric assay for lipase in serum using a chromogenic substrate, orange I laurate
HU200506B (en) Reagent to the detection of the glucose in biological samples
WO1989003030A1 (en) Stable reagent for determining bilirubin in serum

Legal Events

Date Code Title Description
PC Transfer of assignment of patent

Owner name: DADE BEHRING MARBURG GMBH

MM Patent lapsed

Owner name: DADE BEHRING MARBURG GMBH