FI82835C - Askorbat-2-polyfosfatestrar och foerfarande foer deras framstaellning. - Google Patents
Askorbat-2-polyfosfatestrar och foerfarande foer deras framstaellning. Download PDFInfo
- Publication number
- FI82835C FI82835C FI870763A FI870763A FI82835C FI 82835 C FI82835 C FI 82835C FI 870763 A FI870763 A FI 870763A FI 870763 A FI870763 A FI 870763A FI 82835 C FI82835 C FI 82835C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- ascorbate
- process according
- reaction
- ascorbic acid
- reaction mixture
- Prior art date
Links
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 claims description 212
- 229960005070 ascorbic acid Drugs 0.000 claims description 58
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 44
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 35
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 27
- 235000010323 ascorbic acid Nutrition 0.000 claims description 25
- 239000011668 ascorbic acid Substances 0.000 claims description 24
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- 229920000388 Polyphosphate Polymers 0.000 claims description 18
- 239000001205 polyphosphate Substances 0.000 claims description 18
- 239000001226 triphosphate Substances 0.000 claims description 14
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 13
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims description 12
- -1 tertiary amine salts Chemical class 0.000 claims description 12
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 11
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 claims description 11
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 239000002585 base Substances 0.000 claims description 9
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims description 7
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 claims description 7
- 150000002431 hydrogen Chemical class 0.000 claims description 6
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 150000000996 L-ascorbic acids Chemical class 0.000 claims description 5
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 claims description 5
- 235000011176 polyphosphates Nutrition 0.000 claims description 5
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims description 5
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N Metaphosphoric acid Chemical compound OP(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 150000001340 alkali metals Chemical class 0.000 claims description 4
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 4
- HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N furfural Chemical group O=CC1=CC=CO1 HYBBIBNJHNGZAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 239000011707 mineral Substances 0.000 claims description 4
- 150000003512 tertiary amines Chemical class 0.000 claims description 4
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 claims description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims description 3
- 239000003513 alkali Substances 0.000 claims description 2
- 125000000753 cycloalkyl group Chemical group 0.000 claims description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 2
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 239000002184 metal Substances 0.000 claims description 2
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 claims description 2
- 125000001997 phenyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C(*)C([H])=C1[H] 0.000 claims description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 claims 1
- CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N hydroxymethyl Chemical compound O[CH2] CBOIHMRHGLHBPB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 claims 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 claims 1
- LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N teixobactin Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@H]1C(N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C[C@@H]2NC(=N)NC2)C(=O)N[C@H](C(=O)O[C@H]1C)[C@@H](C)CC)=O)NC)C1=CC=CC=C1 LMBFAGIMSUYTBN-MPZNNTNKSA-N 0.000 claims 1
- SUZJDLRVEPUNJG-UHFFFAOYSA-K tripotassium 2,4,6-trioxido-1,3,5,2lambda5,4lambda5,6lambda5-trioxatriphosphinane 2,4,6-trioxide Chemical compound [K+].[K+].[K+].[O-]P1(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)O1 SUZJDLRVEPUNJG-UHFFFAOYSA-K 0.000 claims 1
- 239000002211 L-ascorbic acid Substances 0.000 description 40
- 235000000069 L-ascorbic acid Nutrition 0.000 description 40
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 22
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 22
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 22
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 15
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 14
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M potassium hydroxide Inorganic materials [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 14
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 13
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 13
- CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N D-isoascorbic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-DUZGATOHSA-N 0.000 description 12
- SUQVNMZSSKXYRH-ZAFYKAAXSA-N [(2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3-hydroxy-5-oxo-2h-furan-4-yl] [hydroxy(phosphonooxy)phosphoryl] hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)=C1O SUQVNMZSSKXYRH-ZAFYKAAXSA-N 0.000 description 11
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 10
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 7553-56-2 Chemical compound [I] ZCYVEMRRCGMTRW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 9
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 9
- 239000011630 iodine Substances 0.000 description 9
- 229910052740 iodine Inorganic materials 0.000 description 9
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 9
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 8
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 8
- 235000021317 phosphate Nutrition 0.000 description 8
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 8
- MIJPAVRNWPDMOR-ZAFYKAAXSA-N L-ascorbic acid 2-phosphate Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP(O)(O)=O)=C1O MIJPAVRNWPDMOR-ZAFYKAAXSA-N 0.000 description 7
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 7
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 7
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 7
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 6
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 6
- 229940072107 ascorbate Drugs 0.000 description 6
- 125000005341 metaphosphate group Chemical group 0.000 description 6
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 6
- 238000006366 phosphorylation reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000047 product Substances 0.000 description 6
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 6
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J ATP(4-) Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)[C@@H](O)[C@H]1O ZKHQWZAMYRWXGA-KQYNXXCUSA-J 0.000 description 5
- ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N Adenosine triphosphate Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)C(O)C1O ZKHQWZAMYRWXGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N Ammonium bicarbonate Chemical compound [NH4+].OC([O-])=O ATRRKUHOCOJYRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 229910000013 Ammonium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 5
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 5
- 235000012538 ammonium bicarbonate Nutrition 0.000 description 5
- 239000001099 ammonium carbonate Substances 0.000 description 5
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 5
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 5
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 5
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 4
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000209140 Triticum Species 0.000 description 4
- 235000021307 Triticum Nutrition 0.000 description 4
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 4
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 4
- 230000007071 enzymatic hydrolysis Effects 0.000 description 4
- 238000006047 enzymatic hydrolysis reaction Methods 0.000 description 4
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 4
- 229910052816 inorganic phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 4
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 4
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 4
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 4
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 4
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 4
- POXUQBFHDHCZAD-UHFFFAOYSA-N 2-(2,2-dimethyl-1,3-dioxolan-4-yl)-3,4-dihydroxy-2h-furan-5-one Chemical compound O1C(C)(C)OCC1C1C(O)=C(O)C(=O)O1 POXUQBFHDHCZAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 4-(chloromethyl)-2-(4-methylphenyl)-1,3-thiazole Chemical compound C1=CC(C)=CC=C1C1=NC(CCl)=CS1 MOMKYJPSVWEWPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- DFJLOQHIFSBONA-ZAFYKAAXSA-N [(2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3-hydroxy-5-oxo-2h-furan-4-yl] phosphono hydrogen phosphate Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)=C1O DFJLOQHIFSBONA-ZAFYKAAXSA-N 0.000 description 3
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 3
- AZSFNUJOCKMOGB-UHFFFAOYSA-K cyclotriphosphate(3-) Chemical compound [O-]P1(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)O1 AZSFNUJOCKMOGB-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 3
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 3
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 3
- 125000002467 phosphate group Chemical group [H]OP(=O)(O[H])O[*] 0.000 description 3
- 230000026731 phosphorylation Effects 0.000 description 3
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 3
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 3
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 3
- 235000019983 sodium metaphosphate Nutrition 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000180278 Copernicia prunifera Species 0.000 description 2
- 235000010919 Copernicia prunifera Nutrition 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GFTKVOMEANZUPE-BBMIDSLUSA-J O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP(O)([O-])=O)=C1[O-] Chemical compound O.O.[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP(O)([O-])=O)=C1[O-] GFTKVOMEANZUPE-BBMIDSLUSA-J 0.000 description 2
- 102000045595 Phosphoprotein Phosphatases Human genes 0.000 description 2
- 108700019535 Phosphoprotein Phosphatases Proteins 0.000 description 2
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 244000061456 Solanum tuberosum Species 0.000 description 2
- 235000002595 Solanum tuberosum Nutrition 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N adenosine Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H]1O OIRDTQYFTABQOQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 2
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 2
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 2
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- 238000005538 encapsulation Methods 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 2
- 229940005740 hexametaphosphate Drugs 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N isobutanol Chemical compound CC(C)CO ZXEKIIBDNHEJCQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 150000004712 monophosphates Chemical group 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- 150000003013 phosphoric acid derivatives Chemical class 0.000 description 2
- 150000003014 phosphoric acid esters Chemical class 0.000 description 2
- 230000000865 phosphorylative effect Effects 0.000 description 2
- 125000006239 protecting group Chemical group 0.000 description 2
- YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N trichloroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(Cl)(Cl)Cl YNJBWRMUSHSURL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000011178 triphosphate Nutrition 0.000 description 2
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SWTGJCNCBUCXSS-ISUZDFFFSA-N (2r)-3,4-dihydroxy-2-[(4s)-2-phenyl-1,3-dioxolan-4-yl]-2h-furan-5-one Chemical compound OC1=C(O)C(=O)O[C@@H]1[C@H]1OC(C=2C=CC=CC=2)OC1 SWTGJCNCBUCXSS-ISUZDFFFSA-N 0.000 description 1
- CCBICDLNWJRFPO-UHFFFAOYSA-N 2,6-dichloroindophenol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1N=C1C=C(Cl)C(=O)C(Cl)=C1 CCBICDLNWJRFPO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 3,5-dimethylcyclopentane-1,2-dione Chemical compound CC1CC(C)C(=O)C1=O MIDXCONKKJTLDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 4-Nitrophenyl Phosphate Chemical compound OP(O)(=O)OC1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 XZKIHKMTEMTJQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000006770 Ascorbic Acid Deficiency Diseases 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M Bicarbonate Chemical compound OC([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910014033 C-OH Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002126 C01EB10 - Adenosine Substances 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical compound [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910014570 C—OH Inorganic materials 0.000 description 1
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910021578 Iron(III) chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000000994 L-ascorbates Chemical class 0.000 description 1
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 206010047623 Vitamin C deficiency Diseases 0.000 description 1
- DZCCNVQWGRCKKG-NLBXRHDGSA-I [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)=C1[O-] Chemical compound [Na+].[Na+].[Na+].[Na+].[Na+].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O)=C1[O-] DZCCNVQWGRCKKG-NLBXRHDGSA-I 0.000 description 1
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008351 acetate buffer Substances 0.000 description 1
- 125000002777 acetyl group Chemical class [H]C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960005305 adenosine Drugs 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 239000000908 ammonium hydroxide Substances 0.000 description 1
- 150000001450 anions Chemical class 0.000 description 1
- 230000003042 antagnostic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 239000003125 aqueous solvent Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000005842 biochemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000012490 blank solution Substances 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 235000013736 caramel Nutrition 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001460 carbon-13 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N carbonic acid Chemical group OC(O)=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000007806 chemical reaction intermediate Substances 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010949 copper Substances 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 1
- 229910001873 dinitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 1
- 230000008034 disappearance Effects 0.000 description 1
- 238000000921 elemental analysis Methods 0.000 description 1
- 238000004146 energy storage Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000004519 grease Substances 0.000 description 1
- 244000144993 groups of animals Species 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N heavy water Substances [2H]O[2H] XLYOFNOQVPJJNP-ZSJDYOACSA-N 0.000 description 1
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 1
- GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N hydron Chemical class [H+] GPRLSGONYQIRFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K iron trichloride Chemical compound Cl[Fe](Cl)Cl RBTARNINKXHZNM-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 125000000654 isopropylidene group Chemical group C(C)(C)=* 0.000 description 1
- 229910001416 lithium ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 239000000155 melt Substances 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- MEFBJEMVZONFCJ-UHFFFAOYSA-N molybdate Chemical compound [O-][Mo]([O-])(=O)=O MEFBJEMVZONFCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 description 1
- 238000006864 oxidative decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000010979 pH adjustment Methods 0.000 description 1
- ZSBGSQHBWLTTMB-NLBXRHDGSA-N pentaazanium [[[(2R)-2-[(1S)-1,2-dihydroxyethyl]-3-oxido-5-oxo-2H-furan-4-yl]oxy-oxidophosphoryl]oxy-oxidophosphoryl] phosphate Chemical compound P([O-])(=O)(OP(=O)([O-])OP(=O)([O-])[O-])OC=1C(=O)O[C@@H](C1[O-])[C@@H](O)CO.[NH4+].[NH4+].[NH4+].[NH4+].[NH4+] ZSBGSQHBWLTTMB-NLBXRHDGSA-N 0.000 description 1
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- OQZCJRJRGMMSGK-UHFFFAOYSA-M potassium metaphosphate Chemical compound [K+].[O-]P(=O)=O OQZCJRJRGMMSGK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229940099402 potassium metaphosphate Drugs 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 1
- 208000010233 scurvy Diseases 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- GCLGEJMYGQKIIW-UHFFFAOYSA-H sodium hexametaphosphate Chemical compound [Na]OP1(=O)OP(=O)(O[Na])OP(=O)(O[Na])OP(=O)(O[Na])OP(=O)(O[Na])OP(=O)(O[Na])O1 GCLGEJMYGQKIIW-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 235000019982 sodium hexametaphosphate Nutrition 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 239000001577 tetrasodium phosphonato phosphate Substances 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- PBSRSWFGYPZDAU-FFIPNUABSA-H trimagnesium;[(2r)-2-[(1s)-1,2-dihydroxyethyl]-3-oxido-5-oxo-2h-furan-4-yl] phosphate Chemical compound [Mg+2].[Mg+2].[Mg+2].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP([O-])([O-])=O)=C1[O-].OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(OP([O-])([O-])=O)=C1[O-] PBSRSWFGYPZDAU-FFIPNUABSA-H 0.000 description 1
- UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N triphosphoric acid Chemical compound OP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O UNXRWKVEANCORM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
- C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
- C07F9/02—Phosphorus compounds
- C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
- C07F9/655—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms
- C07F9/65515—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having oxygen atoms, with or without sulfur, selenium, or tellurium atoms, as the only ring hetero atoms the oxygen atom being part of a five-membered ring
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/02—Nutrients, e.g. vitamins, minerals
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Obesity (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Hematology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Nutrition Science (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
1 82835
Askorbaatti-2-polyfosfaattiestereitä ja menetelmä niiden valmistamiseksi
Esillä oleva keksintö koskee uusia askorbaatti-2-5 polyfosfaattiestereitä samoin kuin menetelmää tällaisten esterien ja niitä vastaavien suolojen syntetisoimiseksi. Erityisemmin se koskee L-askorbaatti-2-trifosfaattia, jonka on osoitettu olevan vitamiini C:n uusi stabiili muoto, ja jota voidaan valmistaa ja ottaa talteen pienemmin kus-10 tannuksin kuin aikaisempia vitamiini C:n stabiileja muotoja, kuten monofosfaattimuotoa, L-askorbaatti-2-fosfaattia.
L-askorbiinihappo ja D-isoaskorbiinihappo ovat kaksi stereoisomeeristä, 6 hiiliatomia sisältävää askorbiini-happoa, joilla on monia käyttöjä ravinnossa, rehussa ja 15 monissa vähäpätöisemmissä tuotteissa. L-askorbiinihapon käyttökelpoisuus johtuu pääasiallisesti sen vitamiini C-aktiviteetista, voimakkaasta pelkistystehosta ja alhaisesta myrkyllisyydestä, kun taas D-isoaskorbiinihapon käyttö riippuu sen voimakkaasta pelkistysvoimasta ja sen alhai-20 sista valmistuskustannuksista verrattuna L-askorbiinihap- poon. D-isoaskorbiinihapon käyttö ravinto- ja rehuaineissa on rajoitettu sen alhaisen vitamiini C-aktiviteetin johdosta ja sen vastustavasta vaikutuksesta L-askorbiinihapon absorptioon ruoansulatuskanavassa. Koska L-askorbiinihappo 25 pelkistää happea, menetetään vitamiinia usein sen joutuessa kosketukseen ilman kanssa elintarvikkeiden ja rehun käsittelyn ja varastoinnin aikana. Kauan aikaa happamassa väliaineessa, erityisesti lämmössä varastoitaessa L-askorbiinihappo tuhoutuu myös toisen prosessin vaikutuksesta, 30 jolloin molekyyli dehydratoituu. Niinpä ravintofysiologit ja ravintoalan tiedemiehet ovat kauan etsineet sellaista vitamiini C:n muotoa, joka on stabiili ilman ja hapon suhteen, erityisesti ilman suhteen.
Kahta menetelmää on käytetty viime aikoina askor-35 biinihapon stabiliteetin parantamiseksi; L-askorbiinihapon kiinteiden kiteiden kapselointia ja molekyylissä olevan 2 82835 funktionaalisen eenidioliryhmän korvaamista kemiallisesti.
Vitamiini C:n rasvalla kapseloiduilla muodoilla on useita puutteellisuuksia. Mitä suurempia ovat päällystetyn L-askorbiinihapon kiteet, sitä vaikeampaa on jakaa pääl-5 lystetty vitamiini elintarvikkeeseen tai rehuun, erityisesti jos elintarvike tai rehu on hienojakoista. Toisaalta, mitä pienempiä ovat L-askorbiinihapon kiteet, sitä epätäydellisempi on kapselointi. Tyypillisesti kiteet, joiden koko on 250 - 300 mikrometriä (50 - 60 meshiä), 10 päällystetään käyttäen 15 - 50 % päällelisättyä rasvaa.
Elintarvikkeen tai rehun käsittelyn aikana voi suojaava rasvapäällyste sulaa pois tai hankautua irti kiteistä. Kapseloidut osaset päällystetään triglyserideillä, jotka sulavat 50 - 60 °C:ssa; tai vahalla, kuten karnauballa, 15 joka sulaa noin 85 °C:ssa. On ilmeistä, että karnauballa päällystetty L-askorbiinihappo ei ole helposti sulavaa ja sen vuoksi se ei ole käyttökelpoista elollisille olennoille. L-askorbiinihappoa on myös kapseloitu käyttäen polymeerejä, jotka liukenevat hitaasti vapauttaen vitamiini 20 C:tä. Elintarvikkeiden tai rehujen käsittelyn aikana tämän tyyppiset päällystetyt muodot voivat aiheuttaa vitamiinin huomattavia häviöitä.
L-askorbiinihapon kemiallisesti muunnetut muodot väistävät ne pulmat, jotka koskevat päällystettyjen muoto-25 jen stabiliteettia, hiukkassuuruutta ja biologista hyväk-sikäytettävyyttä. Kemiallisesti muunnetut muodot stabiloidaan happea vastaan substituoimalla L-askorbiinihapon 2- tai 3-metyylieetterit, 2-sulfaattiesteri, 2-fosfaatti-esteri ja 2,2-bis(L-askorbyyli)fosfaattiesteri. Näistä 30 esimerkeistä L-askorbiinihapon 2-fosfaattiesteri on osoittautunut olevan vitamiini C:n aktiivinen muoto apinoissa ja ilmeisesti muissa kädellisissä, kuten ihmisessä [L. J. Machlin et ai., Am. J. Clin. Nutr. 32 (1979), s. 325]. 2-sulfaattiesteri ei ole aktiivinen vitamiini C:n lähde 35 marsuissa ja apinoissa [L. J. Machlin, Am. J. Clin. Nutr.
29 (1976), s. 825], mutta sen on aktiivinen kaloissa ja 3 82835 mahdollisesti äyriäisissä (Crustacea) [J. E. Halver et ai., N. Y. Acad. Sei. 258 (1975), s. 81]. Metyyliesterit ovat noin 5 %:n verran aktiivisia marsuissa [P. W. Lu et ai., J. Ag. Food. Chem. 32 (1984), s. 21].
5 L-askorbaatti-2-fosfaatti (ASMP) on ollut tunnettu vuodesta 1961 lähtien, jolloin sen ensimmäiseksi esittivät italialaiset tutkijat [E. Cutolo ja A. Larizza, Gazz. Chim. Ital. 91, (1961), s. 964], Toiset tutkijat ovat sen jälkeen parantaneet L-askorbaatti-2-fos£aatin kemiallista 10 synteesiä niin, että 86 % magnesiumsuolaa voidaan eristää miltei puhtaassa muodossa ilman kromatografista puhdistamista lähdettäessä L-askorbiinihaposta (P. A. Seib et ai., US-patenttijulkaisu 4 179 455; joulukuun 18, 1979). Menetelmät 2,2-bis(L-askorbyyli)fosfaatin valmistamiseksi ovat 15 kohtalaisen menestykselliset (saanto noin 30 %) [C. H. Lee et ai., Carbohydrate Res. 67 (1978), s. 127], mutta dias-korbyylifosfaatin vitamiini C-aktiviteettia ei tunneta.
L-askorbaatti-2-pyrofosfaattia (L-askorbaatti-2-difosfaattia) on valmistettu saattamalla fosforioksiklori-20 di reagoimaan 5,6-0-isopropylideeni-L-askorbiinihapon kanssa veden, asetonin ja pyridiinin seoksessa [H. Nomura et ai., Chem. Phar. Bull., Japani, 17 (1969), s. 381]. Py-rofosfaattiesteriä saatiin vain 5 %:n saannoin ja se oli puhdistettava kolmesta muusta reaktiotuotteesta käyttämäl-25 lä ioninvaihtokromatografiaa. Alhainen saanto ja vaikea puhdistaminen tekevät L-askorbaatti-2-pyrofosfaatista stabiilin vitamiini C:n epäkäytännöllisen lähteen kaupallisia tarkoituksia silmällä pitäen.
Esillä oleva keksintö pohjautuu osaksi askorbiini-30 hapon uuden stabiilin muodon, nimittäin askorbaatti-2-po-lyfosfaatin (ASPP) ja sen vastaavien suolojen keksimiseen (kationeina esim. alkalimetalli tai ammonium, joskin käytännössä voidaan käyttää mitä tahansa toivottua suolan muodostavaa kationia).
< 82835
Keksintö koskee täten askorbaatti-2-polyfosfaatti-yhdisteitä, joilla on kaava
CH,OH
I 2
5 X-C-Y
O* f n 10 H /0 0 0
• H II II
0-A, ^ 0-P--0-P--O-P-O-A.
Il I
ö-a2 o-a3 0-A4 _ q 15 jossa X ja Y ovat erilaisia ja ne valitaan kumpikin ryh mästä -H ja -OH; q on 1 - 4, ja A3, A2, A3, A4 ja A5 valitaan ryhmästä vety ja suolanmuodostavat kationit.
Eräs erityisen edullinen esimerkki keksinnön mukaisesta uudesta koostumuksesta on L-askorbaatti-2-trifos-20 faatti, jolla ionisoituneessa muodossa on kaava
CH20H
HCOH
25 y°\
/ NsO II
H / 0 0 0
f H II H
0' 0-P-0-P-0-P-0'
I I I
30 0' O" 0‘
Yleisesti keksinnön mukainen askorbaatti-2-polyfos-faatin synteesi käsittää reaktioseoksen muodostamisen, joka sisältää asianmukaiset määrät askorbiinihappoa tai sen 35 johdannaista, metafosforihapon vesiliukoista suolaa, vettä ja riittävästi emästä seoksen pH:n saamiseksi vähintään 5 82835 suunnilleen arvoon 9. Tämän seoksen annetaan sen jälkeen reagoida riittävän pitkän ajan polyfosforylointireaktion aikaansaamiseksi (esim. 1-24 tuntia ja edullisemmin 1 -12 tuntia). Tämän reaktion aikana reaktioseoksen pH pide-5 tään kuitenkin suunnilleen arvon 9 yläpuolella, tavallisesti lisäämällä aika-ajoin emästä. Polyfosforyloitua tuotetta voidaan käyttää välittömästi tai sen syötäväksi kel-paavia suoloja voidaan helposti ottaa talteen käyttämällä pylväskromatograflaa.
10 Edullisimmassa menetelmässä valmistetaan L-askor- baatti-2-trifosfaattia (ASTP) saattamalla L-askorbiinihap-po (alunperin 1-molaarinen liuos) reagoimaan 2 ekvivalentin kanssa natriummetafosfaattia vedessä lämpötilassa 32 -35 °C samalla, kun läsnä on riittävästi kalium- tai nat-15 riumhydroksidia reaktioseoksen pH-arvon pitämiseksi välil lä 10,5 - 12 koko reaktiojakson ajan.
Yksityiskohtaisemmin sanottuna, askorbiinihappoyh-diste valitaan edullisesti ryhmästä askorbiinihappo, as-korbiinihapon alkali- ja maa-alkalimetallisuolat, askor-20 biinihapon tertiääriset amiinisuolat sekä sellaiset askor-biinihapon johdannaiset, joissa asemassa C6 on emässtabiili suojaryhmä. Esimerkkejä viimeksimainittua tyyppiä olevista yhdisteistä ovat askorbiinihapon 5,6-asetaali- ja 5,6-ke-taalijohdannaiset, kuten 5,6-0-bentsylideeni-L-askorbiini-25 happo ja 5,6-0-isopropylideeni-L-askorbiinihappo.
Keksinnön edullisimmassa muodossa askorbiinihappo-reaktantti valitaan ryhmästä, johon kuuluvat seuraavan kaavan mukaisen yhdisteen 4 stereoisomeeriä:
30 H-C-OH
Q-C-M
I /-°\ 111 H-C ^^C=0
c cN
35 Z--0 OH
n 6 82835 jossa Z valitaan ryhmästä vety, alkalimetallit, maa-alka-limetallit ja tertiääriset amiinit, n on Z:n valenssi ja Q ja M ovat erilaiset ja valitaan ryhmästä -H ja -OH; sekä yhdisteet, joilla on kaava 5 η h2-oo^ l > H-C-0 I /\ iv 10 H-C^ 00 I_ / e · cr
zr - o/ \)H
ni 15 jossa Zx valitaan ryhmästä vety, alkalimetallit, maa-alka- limetallit ja tertiääriset amiinit, nx on Z1:n valenssi ja Y tarkoittaa sykloalkyylejä, joissa on 5 - 7 hiiliatomia, tai ryhmää, jolla on kaava 20
C V
Xr2 jossa Rx tarkoittaa vetyä, fenyyliä, furfuraalia tai alkyy-25 liryhmiä, joissa on 1 - 4 hiiliatomia, ja R2 tarkoittaa vetyä tai alkyyliryhmiä, joissa on 1 - 4 hiiliatomia.
Fosforylointiaine on metafosforihapon suola, M,(P03‘)y, joka on syklinen polyfosfaattianioni, jolla on negatiivinen varaus y, 2y-atomin rengaskoko ja Mx on metal-30 li-ioni, jonka kationinen varaus neutraloi fosfaatin negatiivisen varauksen. Siinä tapauksessa, että y * 3, fosforylointiaine on helposti saatavissa oleva trifosfaatti, ts.: li 7 82835 'N/0
O O y0~ VI
et iS
5 -</ \
Muita metafosfaattisuolojen yksittäisiä lajeja ovat tetra-, penta- ja heksametafosfaattisuolat. Lukuisat meta-fosfaattiseokset ovat mahdollisia. Edullisimpia suoloja 10 ovat aikaiimetallisuolat, kuten natrium-, tai kaliummeta-fosfaatti, vaikka muitakin suoloja voidaan käyttää.
Reaktantit sekoitetaan edullisesti vesipitoiseen liuottimeen, joka ei vaikuta haitallisesti toivottuun poly fosforylointireaktioon. Vesi on edullisin reaktion väli-15 aine. Riittävästi emästä lisätään, edullisesti jaksoittaisella tavalla reaktion aikana reaktioseoksen pitämiseksi pH-arvossa vähintään noin 9 koko komponenttien välisen reaktion ajan. Jos pH on liian alhainen, on ASPP:n muodos-tumisnopeus alhainen, kun taas jos pH on liian korkea 20 (suurempi kuin noin 13), niin tällöin erittäin konsentroidut hydroksidi-ionit reagoivat ensisijassa metafosfaatti-reagentin kanssa verrattuna reaktioon askorbaatin kanssa. Hyvin korkea emäksisyys hävittää täten fosforylointirea-genssin. Sitä paitsi, pH-arvon ollessa suurempi kuin noin 25 12, alkaa sivutuotetta kerääntyä reaktioseokseen, kuten ylimääräinen absorptionauha kohdassa 313 nm osoittaa lopullisen reaktioseoksen ultravioletti(UV)-spektrissä. pH-arvon 12 alapuolella on lopullisen reaktiotuotteen UV-spektri oleellisesti yksi ainoa absorptionauha, jonka ab-30 sorptiomaksimi on kohdassa 258 nm. Näistä syistä tällöin reaktion edullisemmat pH-arvot ovat välillä noin 10 - 12,5 ja edullisemmin välillä noin 10,5 - 12, kysymyksen ollessa trifosforyloinnista.
Reaktioseokseen lisätyn emäksen tulee olla oleelli-35 sesti siihen sekoittuva, emäsvoimakkuudeltaan sopiva toi votun reaktio-pH-arvon saavuttamiseksi, eikä se saa ai-
___ - I
8 82835 heuttaa metafosfaattireagenssin saostumista. Alkalimetal-lihydroksideihin kuuluvat emäkset ovat suositeltavia.
ASPP:n tuotannon lisäämiseksi tulee reagenssien konsentraatiota valvoa tietyssä määrin. Kun pH-arvoa sää-5 detään natrium- tai kaliumhydroksidin avulla, tulisi kaavan IV mukaisen askorbiinihapon tai sen johdannaisen alku-konsentraation olla noin 0,5 - 4 M, kun taas metafosfaatin moolisuhteen askorbaattiin nähden tulisi olla suunnilleen 1,5 - 3. Edullisimmassa menetelmässä ASTP:n valmistamisek-10 si tulisi näiden alueiden olla 0,75 - 1,5 M ja moolisuh teen 1,5 - 3.
Reaktion ylempi lämpötilaraja valitaan siten, että askorbiinihapon häviö saadaan mahdollisimman pieneksi reaktion aikana, että sivutuotteen, jonka UV-absorbanssi 15 on kohdassa 313 nm, määrä saadaan mahdollisimman pieneksi ja toivotun ASPP:n UV-absorbanssi kohdassa 258 nm mahdollisimman suureksi. Lämpötilan alarajan määrää se reaktio-ajan pituus, joka tarvitaan muuttamaan askorbaatti enim-missä määrin fosfaattiesteriksi. Yleisesti ottaen lämpöti-20 la-alue L-askorbaatti-2-trifosfaatin valmistamiseksi on 20 - 80 °C, edullisen alueen ollessa välillä 25 - 55 °C. 2-fosforyloidun askorbiinihapon valmistamiseksi suurempi-molekyylipainoisesta metafosfaatista kuin trimetafosfaa-tista, käytettyä lämpötilaa kohotetaan jonkin verran meta-25 fosfaatin molekyylikoon suuretessa. Esimerkiksi heksameta- fosfaattia käytettäessä on reaktiolämpötila 50 - 80 °C. Reaktio suoritetaan yleensä poistamalla ilma lähtöaineena käytetyn askorbiinihapon hapettumisen aiheuttaman hajoamisen estämiseksi.
30 Korkeiden ASPP-saantojen saavuttamiseen tarvittava reaktioaika riippuu lämpötilasta, pH-arvosta ja reaktant-tien konsentraatiosta. Korkea pH, korkea lämpötila ja korkea reaktanttien konsentraatio suosivat lyhyitä reaktioai-koja. Kun esimerkiksi 1,0 M L-askorbiinihappoa saatetaan 35 reagoimaan 2,0 M natriummetafosfaatin kanssa 55 °C:ssa pH-arvossa noin 11, reagoi L-askorbiinihappo käytännöllises- 9 82835 ti katsoen kokonaisuudessaan 1 tunnin kuluessa. Käytettäessä samoja olosuhteita, lukuun ottamatta sitä, että lämpötila säädetään 33 °C:seen, tarvitaan 8 tuntia, kunnes kaikki L-askorbaatti on reagoinut. Kun 1 M askorbiinihap-5 poa saatettiin reagoimaan 2 M trimetafosfaatin kanssa 35 °C:ssa ja pH-arvossa noin 11 tai noin 10, oli 8 tunnin kuluttua todettavissa vastaavasti 93 %:n ja 33 %:n 2-fosfo-ryloituminen.
Sen jälkeen, kun polyfosforylointireaktio on tapah-10 tunut täydellisesti, säädetään reaktion pH välille 3-8 tai edullisemmin pH-arvoon 7 syömäkelpoisella mineraaliha-polla tai orgaanisella hapolla. Vesipitoinen reaktioseos ei sisällä epäterveellisiä liuottimia tai reagensseja, mutta se sisältää sen sijaan mineraalisia ravintoaineita, 15 ja kysymyksen ollessa L-askorbiinihapon polyfosfaattieste- reistä, myös vitamiini C-aktiviteettia. Hyvin pieni määrä askorbiinihaposta muuttuu karamelliksi reaktioseoksen al-kalisella pH-alueella, mikä antaa miellyttävän tuoksun ja vaaleankeltaisen värin. Niinpä uskotaan, että koko reak-20 tioseos voidaan lisätä ruokaan tai rehuun poistamalla tai poistamatta reaktiovettä ennen ravinnon antamista.
Jos askorbaatti-2-polyfosfaatti halutaan vapaaksi epäorgaanisista fosfaattisuoloista, voidaan erottaminen ja puhdistus suorittaa helposti käyttämällä ioninvaihtopyl-25 väskromatografiaa. Esimerkiksi kysymyksen ollessa ASTP:sta, voidaan reaktioseos säätää pH-arvoon 8,5 sekoittamalla voimakkaasti happaman kationinvaihtohartsin kanssa, joka on vety-ioni-muodossa. Kationinvaihtohartsi poistetaan nopeasti suodattamalla ja seos lisätään bikarbo-30 naattimuodossa olevan, voimakkaasti emäksisen anioninvaih- tohartsin muodostaman pylvään päälle. Eluointi 0,4 M ammo-niumbikarbonaatilla poistaa epäorgaaniset fosfaatit ja eluointi 0,5 M ammoniumbikarbonaatilla eluoi puhtaan as-korbaatti-2-trifosfaatin. Pylväsefluentin haihdutus pois-35 taa enimmän veden ja kaiken ammoniumbikarbonaatin. ASTP:n suoloja minkä tahansa toivotun kationin kanssa voidaan sen 10 82835 jälkeen valmistaa johtamalla ASTP:n jäljellä oleva ammo-niumsuola valikoidussa katlonlmuodossa olevan katlonln-valhtohartsin läpi. ASTP:n puhdistus voitaisiin myös saavuttaa käyttämällä hllllpylväskromatograflaa, kuten on 5 esitetty artikkelissa Takeda Chem. Industries, Jpn. Kokal
Tokyo Koho, JP 59 36, s. 539 [Chem. Abstr. 101 (1984), 10695p].
Askorbaatln muiden 2-polyfosfaattiesterien puhdistamiseksi ASTP:n puhdistamisen ohella saattaa olla välttä-10 mätöntä säätää eluoivien suola- ja emäsliuosten konsent-raatiota ASTP:lle käytettyjen vastaavien liuosten kosent-raatiota vastaaviksi.
Askorbiinihapon 2-polyfosfaattiestereitä voidaan käyttää 2-monofosfaattiesterin valmistamiseksi. Hapossa 15 pH-arvossa 0-1 askorbaatti-2-polyfosfaatissa oleva line aarinen fosfaattiketju hydrolysoituu pikemminkin fosforyy-litähtelden välillä kuin askorbaatissa olevan 0-2-aseman ja 2-fosforyylitähteen välillä. Trifosfaattiesteri hydrolysoituu pääasiallisesti L-askorbaatti-2-fosfaatiksi ja 20 jonkin verran L-askorbiinihapoksi.
Kuten mainittiin, keksinnön mukaisten yhdisteiden tärkein hyöty on vitamiini C:n stabiili lähde, joka on vastustuskykyinen hapettumista sekä hapanta tai entsymaattista hydrolyysiä vastaan. L-askorbiinihapon reaktion 25 avulla saatuja tuotteita voidaan käyttää lisäaineina ruoassa tai rehussa. D-isoaskorbiinihapon reaktion avulla saatuja tuotteita voidaan käyttää sekoitettuina fosfataa-sientsyymin kontrolloitujen määrien kanssa pelkistysvoiman jatkuvan saannin aikaansaamiseksi.
30 Yllättäen on todettu, että ASTP on kestävämpi ha pettumista vastaan kuin ASMP. Lisäksi L-askorbaatti stabiloituu itsehapettumista vastaan ASTP:n vaikutuksesta vesipitoisessa väliaineessa pH-arvossa 7, mahdollisesti ASTP:n kyvyn ansiosta kelatoida 2-valenssisia mineraali-ioneja, 35 kuten kuparia ja rautaa. Sellaisenaan keksinnön mukaisilla yhdisteillä on parantuneet stabiliteettiominaisuudet verrattuna aikaisempaan monofosfaattijohdannaiseen.
11 82835
Esillä olevan keksinnön avulla valmistettu L-askor-baatin 2-fosfaattiesterien alin jäsen on 2-trifosfaatties-teri, joka muistuttaa adenosiinitrifos£aattia (ATP). ATP:tä on läsnä kaikissa soluissa; se on energian kemial-5 linen varastomuoto ja se osallistuu lukuisiin biokemialli siin reaktioihin elävissä organismeissa.
L-askorbiinihapon 2-trifosfaattiesteri on vitamiini C:n aktiivinen muoto marsuissa (ks. kuvio 1) ja melko varmasti kaikissa muissa eläimissä. Fosfataasientsyyme-10 jä on läsnä kaikkien eläinten ruoansulatuskanavassa ja tämä entsyymi poistaa 3 fosfaattitähdettä ASTPrstä vaiheittaisella tavalla, kunnes L-askorbiinihappo vapautuu. Fos-faattitähteiden vaiheittainen poistuminen adenosiinitri-fosfaatista (ATP), jolloin samalla vapautuu adenosiinia ja 15 epäorgaanista fosfaattia fosfataasin vaikutuksesta, on osoitettu useita kertoja (D. L. M. Verheydes et ai., J. Am. Chem. Soc. 87 (1965), s. 2257; ja L. A. Heppel et ai., J. Biol. Chem. 237 (1962), s. 841]. Niinpä odotetaan, että ASTP:lle löytyy käyttöä elintarvikkeissa ja rehuissa sekä 20 ravitsemus- että mahdollisesti toiminnallisissa tarkoituksissa. ASTPrtä, samoin kuin ASMPttä, voidaan käyttää myös kokoveren stabiloimiseen [G. L. Moore et ai., Transfusion 21 (1981), s. 723].
L-askorbaatln vapauttamiseen ASTPrstä tarvitaan 3 25 erillistä vaihetta, kun sitä vastoin tarvitaan vain 1 vaihe tällaiseen vapauttamiseen askorbaattimonofosfaatista ASMP. Tämän vuoksi esitetään teoria, että ASTP:n parantunut hydrolyyttinen stabiliteetti verrattuna ASMP:hen voidaan selittää tämän tekijän avulla. Kuitenkin ASTPzn pa-30 rantunut hapetusstabiliteetti ASMP;hen verrattuna on yllättävä, kuten taulukossa III on esitetty. ASMP tuhoutuu täysin vetyperoksidihapetuksen vaikutuksesta, kun taas samoissa olosuhteissa 55 % ASTPrstä säilyy. Joka tapauksessa otaksutaan, että ASTP ja muut ASPP-esterit voivat 35 muodostaa vitamiini C:n stabiilin lähteen elintarvikkeissa ja rehussa, joissa ASMP hydrolysoituu hapon tai entsyymin 12 82835 vaikutuksesta L-askorbiinihapoksi, mistä on seurauksena vitamiini C:n aktiviteetin häviötä. Muissa järjestelmissä, jotka sisältävät rajoitetut määrät fosfataasia, ASMP:n ja ASPP:n seos voi aikaansaada L-askorbiinihapon hitaan ja 5 pitkäaikaisen vapautumisen pitemmän ajanjakson kuluessa kuin yksistään ekvivalenttinen määrä ASMP:tä. Joissakin järjestelmissä saattaa ASPP:n entsymaattisen hydrolyysin vaikutuksesta vapautunut fosfaattimäärä olla kyllin suuri estämään kilpailukykyisesti fosfataasientsyymin vaikutuk-10 sen niin, että 2-fosforyloidun johdannaisen häviö saattai si pienentyä ja aiheuttaa askorbiinihapon vapautumisen hyvin alhaisen nopeuden. Vitamiini C:n hapettumishäviön elintarvikkeissa ja rehuissa, jotka sisältävät ASPP:tä, voitaisiin myös odottaa olevan hidas verrattuna niihin, 15 jotka sisältävät ASMP:tä.
Ainoa kuvio esittää diagrammin marsun syöttötutki-muksesta, joka on suoritettu keksinnön mukaisen edullisen yhdisteen, nimittäin L-askorbaatti-2-trifosfaatin vitamiini C-aktiviteetin osoittamiseksi todeksi.
20 Seuraavat esimerkit esittävät edullisimpia syntee sejä keksinnön mukaisille yhdisteille.
Esimerkki 1 250 ml:n laboratoriokolviin kiinnitettiin pH-elekt-rodi, magneettinen sekoitustanko, typpikaasun sisäänsyöt-25 töjohto ja byretti. Laboratoriokolviin, joka oli asetettu vesihauteeseen, jonka lämpötila oli 33 - 35 °C, lisättiin perättäisesti 55 ml vettä, 10 g (57 mmol; 1,03 M) L-askor-biinihappoa ja 10 M natriumhydroksidia pH-arvoon noin 11,0. Joukkoon lisättiin natrium- tai kaliumtrimetafos-30 faattia (puhtaus 95 - 97 %; noin 114 mmol), reaktioseosta huuhdeltiin jatkuvasti typellä ja pH pidettiin välillä 10,9 - 11,2 lisäämällä aika-ajoin 10 M kaliumhydroksidia. Reaktioseosta sekoitettiin jatkuvasti ja lopetettiin 8 tunnin reaktioajan kuluttua. Reaktioseos, jonka kokonais-35 tilavuus oli noin 100 ml, laimennettiin 250 ml:n tilavuuteen vedellä ja tietty määrä (5,0 ml) titrattiin välittö- i3 82835 mästi 0,05 N jodin vesiliuoksella. Joditiitteri (2,82 ml) osoitti, että läsnä oli 6,2 % reagoimatonta L-askorbaat-tia.
Toinen erä (2,0 ml) laimennettua reaktioseosta lai-5 aiennettiin edelleen (6 250-kertaisesti) 0,01 M natriumkar-bonaattipuskurilla pH-arvossa 10. Laimennetun seoksen, joka oli pH-arvossa 10, annettiin seistä 2 tuntia, jonka ajan kuluessa L-askorbaatti tuhoutui 02-hapetuksen johdosta, kuten osoitettiin erillisessä kokeessa.
10 Tässä erillisessä kokeessa reaktantit sekoitettiin pH-arvoa säätämättä (jolloin pH-arvoksi saatiin noin 3), seos laimennettiin pH-arvossa 10 ja absorbanssilukema kohdassa 258 nm ja pH-arvossa 10 oli 0,004 kahden tunnin pituisen seisotuksen jälkeen. Sen jälkeen, kun laimennettu 15 trifosforylointireaktioseos oli seissyt 2 tuntia pH-arvos-sa 10, oli UV-absorbanssi kohdassa 258 nm 0,537, mikä osoitti L-askorbaatin 92,3 %:n suuruista 2-fosforyloitumista [olettaen ^-arvoksi 16 pH-arvossa 10 2-fosforyloi-duille estereille; kts. artikkeli Lee et ai., Carbohydrate 20 Res. 67, (1978), s. 127]. UV-absorbanssin suhde kohtien 313 nm ja 258 nm välillä oli 0,014, mikä osoitti hyvin pientä sivutuotteen määrää reaktioseoksessa.
Fosforihappoa tai kloorivetyhappoa lisättiin sen jälkeen reaktioseokseen pH-arvoon 7,0 ja seos haihdutet-25 tiin vaaleankeltaiseksi kiinteäksi aineeksi. Vaihtoehtoi sesti L-askorbaatti-2-trifosfaatti (ASTP) eristettiin puhtaassa muodossa pylväskromatografian avulla. Reaktio-seoksen (lopullinen tilavuus noin 100 ml) pH säädettiin arvoon 8,5 lisäämällä voimakkaasti hapanta kationinvaihto-30 hartsia (H*-muotoa), hartsi poistettiin ja seos laimennettiin 250 ml:n tilavuuteen.
40 ml:n suuruinen erä pantiin bikarbonaattimuodossa olevan voimakkaasti emäksisen anioninvaihtohartsin muodostaman pylvään päälle (5 x 40 cm; 200 - 400 meshiä). Epäor-35 gaaniset fosfaattisuolat, jotka todettiin molybdaattirea-genssin avulla, eluoituivat ensiksi 0,4 M ammoniumbikarbo- 14 82835 naatilla virtausnopeuden ollessa 1-2 ml/min. Tämän jälkeen eluoitui askorbaatti-2-trifosfaatti, joka todettiin UV-absorbanssin avulla kohdassa 258 nm, käytettäessä 0,5 M ammoniumbikarbonaattia. Fraktioiden yhdistämisen jälkeen 5 haihdutettiin liokset kuiviin ja vettä lisättiin kahdesti ja seos haihdutettiin uudelleen. ASTP:n siirappimainen ammoniumsuola liuotettiin veteen, johdettiin natriummuo-dossa olevan voimakkaasti happaman kationinvaihtohartsin läpi ja pylväästä saatu efluentti haihdutettiin amorfisek-10 si kiinteäksi aineeksi. Natriumsuola antoi oikean alkuaineanalyysin, 31P—, ΧΗ- ja 13C-NMR-spektrit sekä UV-ominai-suudet, jotka olivat yhtäpitävät natrium-L-askorbaatti-2-trifosfaatin kanssa.
Analyysi kaavalle: C6H7015P3Na4.2H20: 15 Laskettu: C 13,33 H 2,04 P 17,22 Na 17,04
Saatu: C 13,19 H 1,83 P 16,73 Na 17,84
Esimerkki 2
Toinen trifosforylointireaktio suoritettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, paitsi että lähtöaineena oli 20 5,6-asetaalijohdannainen, 5,6-0-isopropylideeni-L-askor- biinihappo (12, 3 g).
Jodititraus osoitti noin 10 % reagoimatonta L-as-korbiinihappoa ja UV-absorptio kohdassa 258 nm osoitti 86 %:n 2-trifosforyloitumista.
25 Isopropylideenisuojaryhmän poistamiseksi laimennet tua reaktioseosta (150 ml) käsiteltiin voimakkaasti happa-malla kationinvaihtohartsilla (vetymuoto) pH-arvoon 3,0. Hartsi poistettiin nopeasti suodattamalla ja 5,6-asetaalin poistumisen edistymistä valvottiin käyttämällä ohutkerros-30 kromatografiaa. Sen jälkeen kun asetaalihydrolyysi oli tapahtunut täydellisesti, seos säädettiin pH-arvoon 8,0 käyttämällä natrium- tai kaliumhydroksidia. Reaktiotuotteiden eristäminen suoritettiin loppuun esimerkissä 1 kuvatulla tavalla.
is 82835
Esimerkki 3
Trifosforylointireaktio suoritettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, paitsi että käytettiin D-isoaskorbiini-happoa L-askorbiinihapon sijasta.
5 D-isoaskorbiinihapon muuttamisessa sen 2-trifos- faattiesteriksi saavutettiin noin 90 %:n saanto, ja tuotteen eristäminen suoritettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla.
Esimerkki 4 10 Tässä kokeessa vaihdeltiin esimerkissä 1 kuvatun trifosforylointireaktion pH-arvoa.
Kun L-askorbiinihappoa (10 g) sekoitettiin natrium-metafosfaatin (36,6 g; 2 ekvivalenttia) kanssa, oli reak-tioseoksen pH noin 3. 12 tuntia kestäneen, 35 °C:ssa suori-15 tetun reaktion jälkeen fosforyloitumista ei ollut tapahtunut, mikä todettiin jodititrauksen, UV-analyysin ja ohut-kerroskromatografian avulla. 10 päivää kestäneen sekoituksen jälkeen UV-koe osoitti kohdassa 258 nm 5 %:n suuruista 2-trifosforyloitumista.
20 Kun reaktioseoksen pH kohotettiin arvoon 10 ja pi dettiin siinä 8 tuntia käyttämällä natrium- tai kaliumhyd-roksidia, osoitti jodititraus noin 65 % reagoimatonta L-askorbiinihappoa, kun taas UV-absorptio kohdassa 258 nmm osoitti noin 33 %:n suuruista 2-trifosforyloitumista.
25 Kun reaktioseoksen pH pidettiin välillä 12,8 - 13,1, osoitti jodititraus 40 % reagoimatonta L-askorbiini-happoa ja UV-analyysi osoitti 52 %:n suuruista 2-trifosforyloitumista .
Lisäksi, kun reaktio suoritettiin pH-välillä 12,8 -30 13,1, kohdassa 313 nm saadun UV-absorbanssin tuloksen suh de kohdassa 258 nm saatuun vastaavaan tulokseen oli 0,12, mikä osoitti sivutuotteen muodostumista reaktioseokseen.
Kun reaktioseoksen pH pidettiin edullisimmalla pH-alueella 10,5 - 12 käyttämällä natriumhydroksidia, osoitti 35 jodititraus 5 % reagoimatonta L-askorbiinihappoa ja UV-analyysi osoitti 87 %:n suuruista 2-trifosforyloitumista.
i6 82835
Esimerkki 5
Fosforylointireaktio suoritettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, paitsi että L-askorbiinlhapon konsent-raatiota pienennettiin arvosta 1 M arvoon 0,5 M.
5 8 tunnin pituisen reaktioajan jälkeen jodititraus antoi 32 %:n suuruisen määrän reagoimatonta L-askorbaat-tia, kun taas UV-analyysi osoitti 65 %:n suuruista 2-tri-fosforyloitumista.
Kun L-askorbaatin kosentraatio pidettiin arvossa 10 IM, mutta trimetafosfaatin molaariset ekvivalentit muutettiin arvosta 2 arvoon 3, ei 2-trifosfaatin saanto noussut 93 %:n yläpuolelle.
Esimerkissä 1 kuvatun reaktion lämpötilaa vaihdeltiin myös arvosta 20 °C arvoon 80 °C. Sunnilleen yli 60 °C:n 15 yläpuolella olevissa lämpötiloissa 2-trifosfaatin saanto pienenee, samalla kun suhde A313 Μ/Α25β ^ suurenee. Reaktio-lämpötilan ollessa 20 °C reaktioseos sisälsi 8 tunnin kuluttua 25 % reagoimatonta lähtöainetta ja 75 % 2-trifos-faattiesteriä.
20 On myös osoitettu, että L-askorbaatin 2-monofos- faattiesterin, ASMP:n, käyttäytyminen entsyymifosfataasin suhteen on erilainen kuin 2-trifosfaattiesterin, ASTP:n, käyttäytyminen. ASMP luovuttaa L-askorbiinihappoa nopeammin kuin ASTP, kun näitä aineita käsitellään perunasta 25 saadulla puhdistetulla fosfataasilla (taulukko 1). Lisäksi ASTP on vastustuskykyisempi hapon katalysoimaa L-askorbaatin vapautumista vastaan kuin ASMP (kts. "sokea"-reaktioita taulukossa I). Puskuriliuoksessa, jonka pH on 5, ASTP ei vapauttanut lainkaan L-askorbaattia 20 tunnin jälkeen 30 verrattuna ASMP:n vapauttamaan noin 15 %:n määrään.
i7 82835
Taulukko I
L-askorbaatti-2-fosfaatln (ASMP) ja L-askorbaatti-2-trifosfaatin (ASTP) entsymaattinen hydrolyysi käyttäen 5 perunasta saatua happofosfataasia. L-askorbaattia vapautui (%) entsymolyysin aikana(*.
___Substraatti_
Reaktio- _ASMP_ASTP_ 10 aika, h_Sokea Fosfataasi_Sokea Fosfataasi 0,25 0 9,3 00 0,50 0 18,6 0 0 1.0 0 35,5 0 0 2.0 2,9 60,5 0 0 15 3,0 4,6 77,3 0 0,4 4.0 4,6 88,4 0 0,8 8.0 8,1 100 0 3,5 20,0 14,5 100 0 8,5 20 *’ Entsymolyysi suoritettiin 25 °C:ssa sekoittamalla 200 mikromoolia magnesium-L-askorbaatti-2-fosf aattia tai ammonium-L-askorbaatti-2-trifosfaattia 100 ml:ssa 0,05 M asetaattipuskuriliuosta (pH 5,0), joka sisälsi noin 400 mg leipurin painohiivaa ja 2 yksik-25 köä fosfataasia (1 yksikköaktiviteetti hydrolysoi 1 pmoolin p-nitrofenyylifosfaattia pH-arvossa 4,8 ja 37 °C:ssa). Määrätyn reaktioajan kuluttua otettiin tietty erä (5 ml), sekoitettiin 5,0 ml:n kanssa seosta, jossa oli 12 % trikloorietikkahappoa/4 % me-30 tafosforihappoa, ja seos suodatettiin. Tietty määrä (5 ml) suodosta titrattiin 2,6-dikloorifenoli-indo-fenolilla vaaleanpunaiseen päätepisteeseen asti. "Sokealiuokset" sisälsivät kaikki reagenssit fosfataasia lukuunottamatta.
18 82835 ASTP:n paljon suurempi stabiliteetti fosfataasiin nähden verrattuna ASMP:hen todettiin myös malliravintojärjestelmässä (taulukko II). Sekoitettaessa vehnäjauhon laimean suspension kanssa 25 °C:ssa ASMP hydrolysoitui täydel-5 lisesti 1 tunnissa, kun taas ASTP tarvitsi noin 10 - 12 tunta 95 %:n hydrolyysitulokseen.
Taulukko II
L-askorbaatti-2-fosfaatin (ASMP) Ja L-askorbaatti-10 2-trifosfaatin (ASTP) entsymaattinen hydrolyysi vehnäjau hon läsnäollessa. L-askorbaattia vapautui (%) entsymolyy-sin aikana**.
_Substraatti_ 15 Reaktio- _ASMP_ASTP__ aika, h_Sokea Fosfataasi_Sokea Fosfataasi 0,25 0 47,1 0 0 0,50 0 76,2 0 1,2 1.0 0 100 0 3,5 20 2,0 2,9 100 0 29,6 3.0 4,6 100 0 65,8 4.0 4,6 100 0 86,9 5.0 5,8 100 0 93,1 20.0 14,5 100 0 95,0 25 _ *’ Entsymolyysi ja vapautuneen L-askorbaatin titraus suoritettiin taulukon I alaviitteessä kuvatulla tavalla, paitsi että fosfataasina oli vehnäjauhossa läsnäoleva fosfataasi. 2 g vehnäjauhoa käytettiin 30 100 ml:n suuruiseen entsymolyysireaktioseokseen.
L-askorbaatti-2-trifosfaattia on suunnilleen 2 kertaa niin valkea hapettaa kuin L-askorbaatti-2-monofosfaat-tia. Kun ASTP:tä ja ASMP:tä käsiteltiin identtisissä olo-35 suhteissa (pH 7; 25 °C) vetyperoksidilla 8 päivää, säilyi 77 % ASTPrtä reagoimattomana, kun taas 44 % ASMP:tä säilyi reagoimattomana. 14 päivää kestäneen hapetuksen jälkeen reagoimattomana oli jäljellä 0 % ASMPrtä, kun ASTP:tä oli i i9 82835 55 %. Lähtöyhdiste, L-askorbiinihappo, tuhoutui tuntia lyhyemmässä ajassa (taulukko III). ASTP on ilmeisesti paljon kestävämpi elintarvikkeissa ja rehuissa, jotka sisältävät fosfaattientsyymiä tai hapettavia aineita, kuten happea.
5
Taulukko III
L-askorbaatin ja sen fosfaattiesterien stabiliteetti (% jäljellä), kun ne on saatettu reagoimaan vetyperoksidin vesiliuoksella1*.
10 _L-askorbaattijohdannainen
Reaktioaika Lähtöyhdiste ASMP1** ASTP1**_ 0,25 h 56,9 98,7 98,6 1,0 h 0 97,1 98,3 15 1 pv 0 93,9 96,7 3 pv 0 77,7 87,6 6 pv 0 64,1 83,3 8 pv 0 44,1 77,0 14 pv_0_0_55,2_ 20 *’ Reaktioseos sisälsi 0,05 ml vetyperoksidin 30- %:ista vesiliuosta ja 200 mikromoolia L-askorbaattia tai sen 2-fosforyloitua johdannaista 100 ml:ssa 0,05 M TRIS-puskuriliuosta (pH 7,0). Määrätyn reaktioajan kuluttua tietty määrä (1 ml) reaktioseosta, joka si-25 sälsi 2-fosforyloitua esteriä, laimennettiin 10-ker- taisella määrällä TRIS-puskuriliuosta pH-arvossa 7, ja seoksen UV-absorbanssi luettiin kohdassa 258 nm. L-askorbiinihapon häviön seuraamiseksi tietty määrä (1 ml) reaktioseosta laimennettiin 2-%:isella meta-30 fosforihapolla ja UV-absorbanssi luettiin kohdassa 245 nm.
**) ASMP - L-askorbaatti-2-fosfaatti ASTP L-askorbaatti-2-trifosfaatti 35 Esimerkki 6
Englantilaisia lyhjytkarvaisia marsuja majoitettiin erillisissä häkeissä ja niille syötettiin Purina-merkkistä marsunravintoa 1 viikon pituisen mukauttamisjakson ajan.
20 82835
Nuoret marsut (190 - 250 g) jaettiin 4 ryhmään, joissa kussakin oli 10 eläintä:
Yhdelle ryhmälle syötettiin ravintoa, josta puuttui vitamiini C (Reid-Briggs'in marsujen dieetti; U.S. Biochemi-5 cals, Cleveland, Ohio, USA).
Toinen ryhmä sai saman ruokavalion, mutta täydennettynä 5,0 mg:11a L-askorbiinihappoa kg:aa kohti kehonpainoa päivässä.
Kolmas ryhmä sai 15,4 mg puhdistettua tetranatrium-L-as-10 korbaatti-2-trifosfaattidihydraattia(L-askorbaatti-2-tri- P04; puhdistettu) kg:aa kohti kehonpainoa päivässä.
Neljäs ryhmä sai 15,4 mg tetranatrium-L-askorbaatti-2-tri-fosfaattidihydraattia (L-askorbaatti-2-tri-P04; reaktio-seos) sekoitettuna esimerkissä 1 esitetyn reaktioseoksen 15 sivutuotteiden kanssa, paitsi että pieni määrä reaktio- seoksessa olevaa reagoimatonta L-askorbiinihappoa tuhoutui 02-hapetuksen johdosta (15,4 mg tetranatrium-L-askorbaatti-2-trifosfaattidihydraattia on ekvivalenttinen 5,0 mg:n kanssa L-askorbiinihappoa).
20 Vitamiini C:tä annettiin suun kautta kalibroidulla ruiskulla liuoksista, jotka pidettiin 5 °C:ssa, paitsi että L-askorbiinihappoliuos valmistettiin tuoreena päivittäin.
Eläinten painot merkittiin muistiin päivittäin ja jokaisen ryhmän artimeettiset keskiarvot laskettiin ja 25 niitä verrattiin kuviossa.
Tämän kokeen tarkoituksena oli osoittaa todeksi L-askorbaatti-2-trifosfaatin vitamiini C-aktiviteetti marsuissa.
ASTP:n vitamiini C-aktiviteetti käy selvästi ilmi 30 kuviossa 1 olevista käyristä. L-askorbaatti-2-trifosfaat- tia annettiin eläimille joko puhtaassa muodossa (käyrä, joka on varustettu merkinnällä "L-askorbaatti-2-tri-P04, puhdistettu") tai seoksena trifosforylointireaktioseoksen kaikkien tuotteiden kanssa (käyrä, joka on varustettu mer-35 kinnällä "L-askorbaatti-2-tri-P04, reaktioseos" ).
2i 82835
Eläinryhmät, joille annettiin jompaa kumpaa ASTP:n muotoa, kasvoivat yhtä suurella nopeudella kuin sen ryhmän eläimet, joille annettiin ekvivalenttinen määrä L-askor-biinihappoa. Kuitenkin niiden eläinten ryhmä, joille ei 5 annettu lainkaan vitamiini C:n täydennyslähdettä, menettivät painoa ja kasvoivat huonosti alkaen suunnilleen syöt-tökokeen 14. päivästä. Eläimet, joille syötettiin ASTP:tä vitamiini C:n lähteenä, olivat elinvoimaisen terveitä koko kokeen ajan, eivätkä osoittaneet mitään vitamiini C:n puu-10 toksen kliinisiä merkkejä.
Esimerkki 7
Askorbiinihapon 2-polyfosforylointi suoritettiin esimerkissä 1 kuvatulla tavalla, paitsi että 1,0 M L-as-korbiinihappoa (alkuperäinen konsentraatio) saatettiin 15 reagoimaan 2,0 M matriumheksametafosfaatin kanssa lämpöti lassa 75 - 80 °C ja pH:ssa 11,5 - 12,0. 2 tuntia kestäneen reaktioajan jälkeen todettiin 42 % reagoimatonta L-askor-baattia jodititraus) ja 49 %:n suuruinen fosforyloituminen (UV-analyysi). Tällöin noin 10 %:lle lähtöaineena käyte-20 tystä L-askorbaatista ei pystytä antamaan selitystä, mikä osoittaa lähtöaineen jonkin asteista häviämistä reaktion korkeassa pH-arvossa ja lämpötilassa.
Reaktioseoksen ohutkerroskromatografia (TLC) suoritettiin käyttämällä selluloosalla päällystettyä taipuisaa 25 kalvoa. Sen jälkeen, kun kromatografinen kalvo oli täpli- tetty reaktioseoksella, kehitettiin kromatogrammi käyttämällä veden, etanolin, isobutanolin, isopropanolin, väkevän ammoniumhydroksidin ja trikloorietikkahapon seosta [30:35:15:20:0,4:5 (til./til./til./til./til./paino)]. Kun 30 kuivattu kromatogrammi oli suihkutettu ferrikloridin 1- %:isella etanoliliuoksella, reaktioseos antoi 6 vaaleanpunaista komponenttia. Voimakkaimmilla täplillä osoittautui olevan yhtäläinen liikkuvuus kuin L-askorbaatin 2-mono-, 2-di- ja 2-trifosfaattiestereiden täplillä. L-askorbaatin 35 korkeammat fosfaattiesterit antoivat epäselviä vaaleanpunaisia täpliä.
Claims (21)
1. I I 5 O-Aj O-Aj 0-A4 15 l· jossa X ja Y ovat erilaisia ja ne valitaan kumpikin ryhmästä -H ja -OH; q on 1 - 4, ja Alr A2, A3/ A4 ja As valitaan ryhmästä vety ja suolanmuodostavat kationit.
1. Askorbaatti-2-polyfosfaattiyhdisteet, joilla on kaava 5 CH.OH » 2 X-C-Y 1° >° H /0 0 0 / tl H II
0-A. 0--P--0-P---O-P-O-A,
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen yhdiste, tun nettu siitä, että se on askorbaatti-2-trifosfaatti.
3. Menetelmä askorbaatti-2-polyfosfaattiyhdisteiden syntetisoimiseksi, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää vaiheet, joissa: 25 muodostetaan reaktioseos, joka sisältää asianmukai set määrät: (1) askorbiinihappoa tai sen johdannaista, (2) metafosforihapon liukoista suolaa, (3) vettä, ja 30 (4) riittävästi emästä seoksen pH:n säätämiseksi vä hintään suunnilleen arvoon 9; ja seos saatetaan reagoimaan askorbaatti-2-polyfosfaa-tin muodostamiseksi ja mainitun reaktion aikana reaktio-seoksen pH pidetään vähintään suunnilleen arvossa 9. 23 82835
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktantti (1) valitaan ryhmästä askorbiinihappo, askorbiinihapon alkali- ja tertiää-riset amiinisuolat sekä askorbiinihapon johdannaiset, 5 joissa on asemassa C6 oleva emässtabiili suojaryhmä.
5. Patenttivaatimuksen 4 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktantti (1) valitaan ryhmästä, johon kuuluvat seuraavan kaavan III mukaisen yhdisteen neljä stereoisomeeriä 10 Γ Ί H^-C-OH Q-C-M l/\ H-C ^C=0
6. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktantti (2) valitaan ryh- 10 mästä natrium- ja kaliumtrimetafosfaatti.
7. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pH pysytetään tasolla, joka on välillä noin 9-13.
8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että pH-taso on välillä noin 10 - 12,5.
9. Patenttivaatimuksen 8 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että pH-taso on välillä noin 11 - 12.
10. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktio suoritetaan lämpötilassa, joka on noin 20 - 80 °C.
11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lämpötila on noin 30 - 50 °C.
12. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktion annetaan tapahtua noin 1-25 tunnin ajan.
13. Patenttivaatimuksen 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu aika on noin 1-12 30 tuntia.
14. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että reaktantin (1) konsentraatio on noin 0,5 - 4 molaarinen reaktioseoksessa, samalla kun reaktantin (2) moolisuhde reaktanttiin (1) nähden on noin 35 1,5 - 3. 25 82 835
15. Patenttivaatimuksen 14 mukainen menetelmä, tunnettu siltä, että ensimmäisen reaktantin kon-sentraatio on noin 0,75 - 1,5 molaarinen.
15 C = / V Z-‘0 OH J n jossa Z valitaan ryhmästä vety, alkalimetallit, maa-alka-limetallit ja tertiääriset amiinit, n on Z:n valenssi ja Q 20 ja M ovat erilaiset ja valitaan ryhmästä -H ja -OH; sekä yhdisteet, joilla on kaava IV H2—C—0V I /Y
25 H-C-0 iv H-C ^ ^"C=0 I / C— Z^-0^ \)H 30. nx jossa Zl valitaan ryhmästä vety, alkalimetallit, maa-alka-limetallit ja tertiääriset amiinit, nx on Zx:n valenssi ja Y tarkoittaa sykloalkyylejä, joissa on 5 - 7 hiiliatomia, 35 tai ryhmää, jolla on kaava V 24 8 2 8 3 5 Λ C V \ R2 5 jossa Rx tarkoittaa vetyä, fenyyliä, furfuraalia tai alkyy-liryhmiä, joissa on 1 - 4 hiiliatomia, ja R2 tarkoittaa vetyä tai alkyyliryhmiä, joissa on 1 - 4 hiiliatomia.
16. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, 5 tunnettu siitä, että menetelmä käsittää vaiheen, jossa reaktioseoksen pH:ta säädetään lisäämällä siihen happoa sen jälkeen, kun reaktio on päättynyt.
17. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mainittu happo on syötäväksi 10 kelpaava mineraali- tai orgaaninen happo.
18. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että happoa lisätään reaktioseok-seen pH:n alentamiseksi suunnilleen arvoon 7.
19. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, 15 tunnettu siitä, että menetelmä käsittää vaiheen askorbaatti-2-polyfosfaatin talteenottamiseksi reaktio-seoksesta .
20. Patenttivaatimuksen 19 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että talteenottovaihe käsittää 20 vaiheet, joissa reaktioseos johdetaan ioninvaihtopylvään läpi ja askorbaatti-2-polyfosfaatin suola otetaan talteen.
21. Patenttivaatimuksen 16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää vaiheen, jossa mainittua askorbaatti-2-polyfosfaattia käsitellään 25 hapon kanssa etusijassa L-askorbaatti-2-polyfosfaatin muodostamiseksi . 26 82835
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US06/749,081 US4647672A (en) | 1985-06-25 | 1985-06-25 | Ascorbate 2-polyphosphate esters and method of making same |
| US74908185 | 1985-06-25 | ||
| PCT/US1986/001299 WO1987000172A1 (en) | 1985-06-25 | 1986-06-18 | Ascorbate 2-polyphosphate esters and method of making same |
| US8601299 | 1986-06-18 |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI870763A FI870763A (fi) | 1987-02-23 |
| FI870763A0 FI870763A0 (fi) | 1987-02-23 |
| FI82835B FI82835B (fi) | 1991-01-15 |
| FI82835C true FI82835C (fi) | 1991-04-25 |
Family
ID=25012170
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI870763A FI82835C (fi) | 1985-06-25 | 1987-02-23 | Askorbat-2-polyfosfatestrar och foerfarande foer deras framstaellning. |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4647672A (fi) |
| EP (1) | EP0229154B1 (fi) |
| JP (1) | JPS63500240A (fi) |
| CA (1) | CA1246593A (fi) |
| DE (1) | DE3676671D1 (fi) |
| DK (1) | DK170283B1 (fi) |
| ES (1) | ES8707220A1 (fi) |
| FI (1) | FI82835C (fi) |
| IN (1) | IN163317B (fi) |
| IS (1) | IS1304B6 (fi) |
| PH (1) | PH22988A (fi) |
| SG (1) | SG56193G (fi) |
| WO (1) | WO1987000172A1 (fi) |
Families Citing this family (21)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4814192A (en) * | 1987-11-18 | 1989-03-21 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Process for preserving raw fruits and vegetables using ascorbic acid esters |
| US4975293A (en) * | 1988-01-11 | 1990-12-04 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Process for preserving raw fruit and vegetable juices using cyclodextrins and compositions thereof |
| JP2747001B2 (ja) * | 1989-04-18 | 1998-05-06 | 昭和電工株式会社 | Ｌ―アスコルビン酸―２―リン酸エステル類の製造法 |
| UA19385A1 (uk) * | 1989-04-27 | 1997-12-25 | Сендзю Фармасьютікал Ко. Лтд. | Фофоліпідhі похідhі та композиція, яка має аhтиоксидаhтhу та іhгібуючу активhість щодо пероксидів ліпідів |
| US5118817A (en) * | 1989-10-31 | 1992-06-02 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Process for production of 2-phosphated esters of ascorbic acid |
| US5149829A (en) * | 1991-01-14 | 1992-09-22 | Hoffmann-La Roche Inc. | Method of preparing dry, concentrated salts of ascorbate 2-polyphosphate |
| DE59206973D1 (de) * | 1991-04-10 | 1996-10-02 | Hoffmann La Roche | Trocknungsverfahren zur Herstellung von Ascorbinsäure-2-Monophosphaten |
| US5110950A (en) * | 1991-06-12 | 1992-05-05 | Kansas State University Research Foundation | Method of preparing 2-phosphorylated compounds of ascorbic acid |
| WO1994000595A1 (en) * | 1992-06-25 | 1994-01-06 | Diversey Corporation | Phosphate analysis |
| CN1208041A (zh) * | 1995-11-28 | 1999-02-17 | 北京市潮白河新技术研究所 | 抗坏血酸衍生物 |
| US5937790A (en) * | 1996-12-18 | 1999-08-17 | Showa Denko Kabushiki Kaisha | Anti-stress agent for animals and a method of reducing stress in animals |
| CA2230774C (en) * | 1997-03-18 | 2007-06-26 | F. Hoffmann-La Roche Ag | Manufacture of ascorbyl monophosphates |
| DE19831056A1 (de) * | 1998-07-13 | 2000-01-20 | Basf Ag | Verfahren zur Herstellung von Salzen von Ascorbyl-2-phosphorsäureestern |
| ES2186607T3 (es) | 1999-06-07 | 2003-05-16 | Hoffmann La Roche | Procedimiento de purificacion de l-ascorbilo 2-monofosfato. |
| AU2003222155A1 (en) * | 2002-04-02 | 2003-10-20 | Ganado Research, L.L.C. | Composition and method to improve quality and yield of meat products |
| US20060189579A1 (en) * | 2003-09-02 | 2006-08-24 | Stewart Anderson | Method of stabilizing ascorbyl phosphate and salts thereof |
| US8275866B2 (en) * | 2007-11-13 | 2012-09-25 | At&T Intellectual Property I, L.P. | Assigning telecommunications nodes to community of interest clusters |
| US10226422B2 (en) | 2013-01-23 | 2019-03-12 | Bottled Science Limited | Skin enhancing beverage composition |
| CN103396442B (zh) * | 2013-08-21 | 2015-09-09 | 安徽天寅生物技术有限公司 | 水溶性维生素c偏磷酸钠钙及其制备方法 |
| CN103554070A (zh) * | 2013-11-08 | 2014-02-05 | 李玉成 | 抗坏血酸氧铋、其制备方法及应用 |
| JP6292640B2 (ja) * | 2014-05-30 | 2018-03-14 | Ｓｂｉファーマ株式会社 | 臓器保存液 |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4179445A (en) * | 1976-05-06 | 1979-12-18 | Kansas State University Research Foundation | Method of preparation of 2-phosphate esters of ascorbic acid |
-
1985
- 1985-06-25 US US06/749,081 patent/US4647672A/en not_active Expired - Lifetime
-
1986
- 1986-06-11 IS IS3109A patent/IS1304B6/is unknown
- 1986-06-11 IN IN449/MAS/86A patent/IN163317B/en unknown
- 1986-06-12 CA CA000511388A patent/CA1246593A/en not_active Expired
- 1986-06-18 WO PCT/US1986/001299 patent/WO1987000172A1/en active IP Right Grant
- 1986-06-18 JP JP61503565A patent/JPS63500240A/ja active Granted
- 1986-06-18 DE DE8686904521T patent/DE3676671D1/de not_active Expired - Lifetime
- 1986-06-18 EP EP86904521A patent/EP0229154B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1986-06-24 ES ES556503A patent/ES8707220A1/es not_active Expired
- 1986-06-24 PH PH33940A patent/PH22988A/en unknown
-
1987
- 1987-02-23 FI FI870763A patent/FI82835C/fi not_active IP Right Cessation
- 1987-02-24 DK DK092987A patent/DK170283B1/da not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-05-03 SG SG561/93A patent/SG56193G/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| DK170283B1 (da) | 1995-07-24 |
| DE3676671D1 (de) | 1991-02-07 |
| DK92987D0 (da) | 1987-02-24 |
| ES556503A0 (es) | 1987-07-16 |
| PH22988A (en) | 1989-02-24 |
| FI870763A (fi) | 1987-02-23 |
| FI870763A0 (fi) | 1987-02-23 |
| SG56193G (en) | 1993-07-09 |
| DK92987A (da) | 1987-02-24 |
| EP0229154A1 (en) | 1987-07-22 |
| IS3109A7 (is) | 1986-12-26 |
| WO1987000172A1 (en) | 1987-01-15 |
| CA1246593A (en) | 1988-12-13 |
| JPH0521114B2 (fi) | 1993-03-23 |
| FI82835B (fi) | 1991-01-15 |
| US4647672A (en) | 1987-03-03 |
| EP0229154B1 (en) | 1990-12-27 |
| ES8707220A1 (es) | 1987-07-16 |
| JPS63500240A (ja) | 1988-01-28 |
| IS1304B6 (is) | 1987-11-25 |
| IN163317B (fi) | 1988-09-03 |
| EP0229154A4 (en) | 1987-10-06 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI82835C (fi) | Askorbat-2-polyfosfatestrar och foerfarande foer deras framstaellning. | |
| Nomiya et al. | Syntheses, crystal structures and antimicrobial activities of polymeric silver (I) complexes with three amino-acids [aspartic acid (H 2 asp), glycine (Hgly) and asparagine (Hasn)] | |
| US4179445A (en) | Method of preparation of 2-phosphate esters of ascorbic acid | |
| KR101832396B1 (ko) | 에르고티오네인 및 이것의 유사체의 합성법 | |
| US6121464A (en) | Preparation of salts of ascorbyl 2-phosphoric esters | |
| Rajasekhar et al. | Green Synthesis and Bioactivity of 2-Amino-4H-chromen-4-yl-phosphonates | |
| EP0313874B1 (en) | Disulfur analogs of LL-E33288 antitumor agents | |
| EP0138558A2 (en) | Phospholipids and their production and use | |
| Hoch et al. | Synthesis of 6-deoxy-6-sulfo-α-D-glucopyranosyl phosphate | |
| EP2701514A1 (en) | Modification of trehalose-6-phosphate levels in plants | |
| Shusheng et al. | Simple and efficient synthesis of novel glycosyl thiourea derivatives as potential antitumor agents | |
| Tellamekala et al. | Green one-pot synthesis of N-bisphosphonates as antimicrobial and antioxidant agents | |
| CA1108631A (en) | Bis-(2-ammonium-2-hydroxymethyl-1,3-propanediol) (2r- cis)-(3-methyloxiranyl)-phosphonate | |
| DK167810B1 (da) | Alkylphyosphonoserin, fremgangsmaade til fremstilling deraf og farmaceutisk praeparat indeholdende en saadan forbindelse | |
| JPS594438B2 (ja) | アスコルビン酸の燐酸エステルの製法 | |
| US3027371A (en) | Molybdenum-containing derivatives of 1-hydroxy-2-pyridinethiones and method of preparing same | |
| SE430507B (sv) | Forfarande for framstellning av ett 9-hydroxietoximetyl-guaninderivat | |
| EP1409494B1 (en) | Stabilized derivatives of ascorbic acid -3- phosphate | |
| Gundluru et al. | Design and synthesis of diethyl (substituted 2‐benzylbenzofuran‐3‐yl) phosphonates as antioxidant and antimicrobial agents | |
| NO170761B (no) | Askorbat-2-polyfosfatforbindelser og fremgangsmaate til fremstilling derav | |
| CN107383090B (zh) | 一种磷酸肌酸钠的合成工艺 | |
| Van Houten et al. | Synthesis and characterization of α-phosphorylated ketones: Models for the molybdopterin precursor | |
| Sawai et al. | Preparation of cyclic AMP derivatives by intramolecular phosphodiester bond formation catalyzed by Pb2+ ion | |
| Postel et al. | Autocleavage of O-Isopropylidene Protected O-Phosphono-and O-Thionophosphono Esters of Sugars | |
| Li et al. | Synthesis and properties of N-(diisopropyloxyphosphoryl)-cysteine and its derivatives |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FG | Patent granted |
Owner name: DSM IP ASSETS B.V. |
|
| MA | Patent expired |