FI77873C - Foerfarande foer framstaellning av nya, terapeutiskt anvaendbara polypeptider. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av nya, terapeutiskt anvaendbara polypeptider. Download PDFInfo
- Publication number
- FI77873C FI77873C FI833706A FI833706A FI77873C FI 77873 C FI77873 C FI 77873C FI 833706 A FI833706 A FI 833706A FI 833706 A FI833706 A FI 833706A FI 77873 C FI77873 C FI 77873C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- cys
- pro
- asn
- peptide
- acid
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
- C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
- C07K7/16—Oxytocins; Vasopressins; Related peptides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
- Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y10S930/00—Peptide or protein sequence
- Y10S930/01—Peptide or protein sequence
- Y10S930/15—Oxytocin or vasopressin; related peptides
Description
! 77873
Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten polypep-tidien valmistamiseksi
Keksintö koskee menetelmää uusien, terapeuttises-5 ti käyttökelpoisten polypeptidien valmistamiseksi, joilla
on kaava I
H-L-pGlu-L-Asn-L-Cys-L-Pro-L-A-Y
I I
R
10 jossa
I . I
R on H-Cys-OH tai H-pGlu-Asn-Cys-Pro-A-Y, A on aminohapporadikaali Arg tai Leu, ja Y on ryhmä -OH tai -Gly-OH, tai niiden amidien tai happoadditiosuolojen valmista-15 miseksi.
Keksintö liittyy polypeptideihin, joita pidetään pääasiassa vasopressiinin ja oksitosiinin osina.
Sekä oksitosiini että vasopressiini ovat peptidejä, joita lukuunottamatta niiden hormonaalisia vaikutuksia kut-20 sutaan myös neuropeptideiksi, nimittäin peptideiksi, jotka muun muassa vaikuttavat muistiprosesseihin.
Nyt on yllättäen löydetty kaavan I mukaiset peptidit, jotka eivät enää omaa oksitosiinin ja vasopressiinin hormonaalisia vaikutuksia, vaan joilla on suurempi ja tar-25 kemmin määrätty vaikutus muistiprosesseihin.
Kaavan I mukaiset peptidit ja peptidijohdannaiset voidaan valmistaa tavanomaisella peptidien valmistustavalla.
Keksinnön mukaiselle menetelmälle uusien polypepti-30 dien valmistamiseksi on tunnusomaista se, mitä on esitetty patenttivaatimuksen 1 tunnusmerkkiosassa.
Tavanomaisesti polypeptidit valmistetaan liittämällä vaaditut aminohapot kondensoimalla, joko homogeenisessä faasissa tai käyttämällä niin kutsuttua kiinteää 35 faasia.
Kondensointi homogeenisessä faasissa voidaan suorittaa seuraavasti: 2 77873 a) sellaisen aminohapon tai peptidin kondensoiminen, jolla on vapaa karboksyyliryhmä ja suojatut muut reagoivat ryhmät, aminohapon tai peptidin kanssa, jolla on vapaa aminoryhmä ja suojatut muut reagoivat ryhmät, kon- 5 densaatioaineen läsnäollessa, b) sellaisen aminohapon tai peptidin kondensoiminen, jolla on aktivoitu karboksyyliryhmä ja lisäksi suojatut muut reagoivat ryhmät, aminohapon tai peptidin kanssa, jolla on vapaa aminoryhmä ja lisäksi suojatut muut rea- 10 goivat ryhmät, tili c) sellaisen aminohapon tai peptidin kondensoiminen, jolla on vapaa karboksyyliryhmä ja suojatut muut reagoivat ryhmät, aminohapon tai peptidin kanssa, jolla on aktivoitu aminoryhmä ja lisäksi suojatut muut reagoivat 15 ryhmät.
Karboksyyliryhmän aktivointi voi muun muassa tapahtua muuttamalla karboksyyliryhmä happohalogenidiksi, atsidiksi, anhydridiksi, imidatsolidiksi tai aktivoiduksi esteriksi, kuten N-hydroksisukkiini-imidiksi, N-hydrok-20 sibentstriatsoliksi tai p-nitrofenyyliesteriksi.
Aminoryhmä voidaan aktivoida muuttamalla se fos-fiittiamidiksi tai käyttämällä "fosforatso"-menetelmää.
Yleisimmät menetelmät edellä oleville kondensointi-reaktioille ovat: karbodi-imidimenetelmä, atsidimenetel-25 mä, seka-anhydridimenetelmä ja aktivoitujen esterien me netelmä, kuten on kuvattu julkaisussa "The Peptides", osa I, 1965 (Academic Press), E. Schröder ja K. Liibke.
Kuitenkin on myös mahdollista valmistaa kaavan I mukaisia yhdisteitä Merrifieldin "kiinteän faasin" me-30 netelmällä, joka on kuvattu julkaisussa J.Amer.Chem. Soc.
85, 2149 (1963). Valmistettavien peptidien aminohappojen kytkeminen alkaa karboksipäätesivusta. Tätä varten on tarpeen olla kiinteä kantaja-aine, jossa reagoivat ryhmät ovat läsnä tai johon sellaiset ryhmät voidaan liittää.
35 Tämä kantaja voi olla esimerkiksi bentseenin ja divinyyli- % 3 77873 bentseenin kopolymeeri, jolla on reagoivia kloorimetyyli-ryhmiä, tai polymeerinen kantaja, joka on tehty reagoivaksi hydroksimetyylillä tai bentsyyliamiinilla.
Jos käytetään esimerkiksi kloorimetyyliryhmiä si-5 sältävää kantajaa, ensimmäisen oC-aminosuojatun aminohapon sitoutuminen kantajaan tapahtuu esterisitoutumisen kautta. Kaavan I mukaisen peptidin synteesissä, jossa kaavassa Y edustaa ryhmää Gly-OH, tästä reaktiosta saadaan ensimmäisessä tapauksessa: 10 _ R.-N-CH--C-0-CH-- kiinteä kantaja 1 Λ 2 II 2 H O - jossa on oC-aminosuojaava ryhmä.
Ryhmän R^ suojaamisen jälkeen seuraava 06-aminosuo-15 jattu aminoryhmä voidaan kytkeä kondensaatioreaktiolla, ja oC-aminoryhmän suojauksen poistamisen jälkeen aminohappo voidaan kytkeä, jne. Useimmissa tapauksissa on edullista, että reaktion väliaineessa on huomattava ylimäärä jokaista oc-aminosuojattua aminohappoa, joka väliaine edel-20 leen kiinteän kantajan lisäksi sisältää esimerkiksi me-tyleenikloridia tai dimetyyliformamidin ja metyleeniklo-ridin seosta.
Halutun aminohappoketjun synteesin jälkeen peptidi vapautetaan kantajasta esimerkiksi HF:llä tai trifluori-25 metaanisulfonihapolla. Peptidi voidaan myös poistaa kantajasta, mm. pilkkomalla ammoniakilla, jolloin saadaan suoraan peptidin amidi.
Reagoivat ryhmät, jotka eivät osallistu kondensaa-tioreaktioon, ovat suojattuja ryhmillä, jotka voidaan taas 30 hyvin helposti poistaa esimerkiksi hydrolysoimalla tai pelkistämällä. Niinpä karboksyyliryhmä voidaan tehokkaasti suojata esimerkiksi esteröimällä metanolilla, etanolilla, tertiäärisellä butanolilla, bentsyylialkoholilla tai p-nitrobentsyylialkoholilla.
4 77873
Ryhmät, jotka voivat tehokkaasti suojata aminoryh-män, ovat tavallisesti happoryhmiä, esimerkiksi happoryh-mä, joka on johdettu alifaattisesta, aromaattisesta, ara-lifaattisesta tai heterosyklisestä karboksyylihaposta, ku-5 ten etikkahappo, bentsoehappo tai pyridiinikarboksyylihap-po, tai happoryhmä, joka on johdettu hiilihaposta, kuten etoksikarbonyyli-, bentsyloksikarbonyyli-, t-butoksikarbo-nyyli- tai p-metoksi-bentsyloksikarbonyyliryhmä, tai happoryhmä, joka on johdettu sulfonihaposta, kuten bentseeni-10 sulfonyyli- tai p-tolueenisulfonyyliryhmä, mutta myös muita ryhmiä voidaan käyttää, kuten substituoituja tai subs-tituoimattomia aryyli- tai aralkyyliryhmiä, esimerkiksi bentsyyli- ja trifenyylimetyyliryhmät, tai ryhmiä kuten orto-nitrofenyylisulfenyyli ja 2-bentoyyli-l-metyylivinyyli. 15 On suositeltavaa suojata arginiinin guanidiiniryhmä.
Tavanomaisia suojaavia ryhmiä tässä yhteydessä ovat argi-niinille nitro- tai Mbs-ryhmä.
Vaikka edellä mainituissa aminohappokondensaati-oissa voidaan käyttää aminohappoa kystiini, on edullista 20 käyttää aluksi aminohappoa kysteiini, jossa tioliryhmä (-SH) on suojattu tavanomaisella SH-suojaavalla ryhmällä kuten asetamidometyyli tai trityyli. Sen jälkeen, kun lopullinen haluttu aminohappoketju (jossa on kysteinyyli kystinyylin sijasta) on rakennettu, peptidissä läsnäole-25 van kysteinyylijäännöksen tioliryhmä kytketään sitten tunnetulla tavalla (kun se on tarkoituksenmukaista tiolia suo-jaavan ryhmän poistamisen jälkeen) toisen kysteiinimole-kyylin tioliryhmään tai saman peptidin toisen molekyylin tioliryhmään.
30 N-pääteasemassa oleva aminohappo pGlu peptidissä voidaan keksinnön mukaan saada käyttämällä aminohappoa pyroglutamiinihappo aminohappokondensaatioissa. Kuitenkin on edullista syntetisoida haluttu peptidi käyttäen glu-tamiinia (pyroglutamiinihapon sijasta) ja muuttaa näin 5 77873 valmistetun peptidin glutaminyyliryhmä yleisesti tunnetulla tavalla pyroglutamiinihapon jäännökseksi sen jälkeen, kun kondensaatioreaktiot ovat tapahtuneet, ja poistaa käytetyt suojaavat ryhmät.
5 Suojaavat ryhmät voidaan lohkaista pois erilai silla tavanomaisilla menetelmillä, riippuen kyseessä olevan ryhmän tyypistä, esimerkiksi trifluorietikkahapolla tai metaanisulfonihapolla.
Happoadditiosuolat voidaan saada suoraan eristä-10 mällä peptidi halutun hapon väliaineesta; vaihtoehtoisesti saatu peptidi voidaan myöhemmin muuttaa happoadditio-suolaksi peptidin reaktiolla hapon, kuten HCl, HBr, fosfo-rihappo, rikkihappo, etikkahappo, maleiinihappo, viinihappo, sitruunahappo tai polyglutamiinihappo, kanssa.
15 Homogeenisessa kondensaatiomenetelmässä kaavan I
mukaisten peptidien amidit valmistetaan edullisesti käyttämällä peptidisynteesissä aminohappoa, joka jo on varustettu halutulla amidiryhmällä. Ne voidaan kuitenkin myös valmistaa myöhemmässä vaiheessa tavanomaisella tavalla 20 muuttamalla saatu peptidi amidiksi. "Kiinteä faasi" - menetelmässä amidit voidaan saada käsittelemällä ammoniakilla.
Amidit, joita edullisesti käytetään, ovat substi-tuoimattomia amideja, monometyyliamidi tai dimetyyliami-25 di, tai monoetyyliamidi tai dietyyliamidi.
Keksinnön mukaisilla peptideillä on, kuten on jo edellä mainittu, psykofarmakologista vaikutusta ja vaikuttavat erityisesti muistiprosesseihin; tämä vaikutus on merkittävästi ja silmiinpistävästi suurempi kuin tunnet-30 tujen neuropeptidien, kuten oksitosiinin ja vasopressii-nin vaikutus.
6 77873 Tämän keksinnön mukaiset peptidit, joissa A edustaa Arg:ia, parantavat suuresti muistin kestämistä ja ovat yleensä käytettävissä tapauksissa, joissa halutaan henkisen suorituskyvyn virkistämistä, kuten depressioiden hoidossa, 5 mutta erityisesti hoidettaessa häiriöitä oppimis- ja muisti-prosesseissa, jollaisia voi esimerkiksi ilmetä vanhemmissa ihmisissä (seniilisyys).
Tämän keksinnön mukaiset peptidit, joissa A edustaa Leu:a, hidastavat muistin kestämistä ja takaisinsaan-10 tia. Näitä peptidejä käytetään sen vuoksi tapauksissa, jolloin halutaan keskushermostojärjestelmän hidastumista; niitä voidaan yleensä käyttää esimerkiksi pakkomielleneu-roosien ja muiden epätarkoituksenmukaisen käyttäytymisen muotojen hoitamisessa.
15 Keksinnön mukaisia peptidejä voidaan antaa suun kautta, peräsuolen kautta, ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta kielen alle tai nenän sisään. Ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta ja nenänsisäisesti antamiset ovat edullisia.
Peptidit sekoitetaan siksi edullisesti farmaseut-20 tisesti sopivien apuaineiden kanssa, jotka tekevät peptidit sopiviksi annettavaksi ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti tai nenän sisään, jolloin saadaan liuoksia, suspensioita (joissa sopivia mikrokoteloitumisen kautta), emulsioita ja suihkeita.
25 Sopivien apuaineiden kanssa sekoitettuna näitä peptidejä voidaan myös käyttää muodossa, joka on sopiva suun kautta annettavaksi, kuten pillereinä, tabletteina ja rakeina. Näitä peptidejä voidaan antaa myös peräpuikon muodossa.
30 Keksinnön mukaisia peptidejä tai peptidijohdannai sia käytetään edullisesti annoksina 1 ng - 5 ^ug kg:a kohti päivässä annettuna ruoansulatuskanavan ulkopuolisesti tai nenän sisään. Suositeltava annos ihmiselle annettuna on välillä 1 ja 100 ^ug päivässä. Suun kautta ja perä-35 suolen kautta annettuna annos on yleensä 10 - 100 kertaa suurempi.
7 77873
Seuraava on selvityksenä esimerkkien suhteen, jotka seuraavat.
I. Siinä missä ei mainita optisia konfiguraatioita, tarkoitetaan L-muotoa.
5 II. Seuraavia lyhennyksiä käytetään käytetyille suojaavil- le tai aktivoiville ryhmille:
Scm = S-karbometoksisulfenyyli tBu = tertiäärinen butyyli Me = metyyli 10 Mbs = 4-metoksibentseenisulfonyyli Z = bentsyylioksikarbonyyli Trt = trityyli.
III. Seuraavia lyhennyksiä käytetään käytetyille liuot-timille tai reagensseille: 15 EtOH = etanoli
BuOH = butanoli Py = pyridiini HOAc = etikkahappo Am = amyylialkoholi 20 t.-BuOH = tert.-butanoli
EtAC = etyyliasetaati MeOH = metanoli DCHA = disykloheksyyliamiini DMF = dimetyyliformamidi 25 THF = tetrahydrofuraani DCC = disykloheksyylikarbodi-imidi DCU = disykloheksyyliurea TFA = trifluorietikkahappo N.E.M. = N-etyylimorfoliini 30 HOBt = N-hydroksibentstriatsoli IV. Seuraavia lyhennyksiä käytetään aminohapporyhmille: Gly = glysyyli
Arg = arginyyli Pro = prolyyli 77873 8
Cys = kysteinyyli Asp = aspartyyli Asn = asparaginyyli Glu = glutamyyli 5 Gin = glutaminyyli pGlu = pyroglutamyyli
Esimerkki 1 1. Z-Arg(Mbs)-OtBu 42,5 g (59,01 millimoolia) Z-Arg(Mbs)-OH.DCHA:ta 10 suspendoitiin 500 ml:aan EtAc ja 150 ml:aan t^O, johon oli liuotettu 9,97 g (73,21 millimoolia) KHSO^. Kun kaikki aine oli liuennut, kerrokset erotettiin ja orgaaninen kerros pestiin 100 ml:lla 30-%:ista NaCl-liuosta. Orgaaninen kerros kuivattiin Na2SO^:lla ja haihdutettiin 15 sitten kuiviin. 135 ml isobuteenia kondensoitiin -30°C:ssa, jonka jälkeen lisättiin Z-Arg(Mbs)-OH-liuos 400 ml:ssa CH2CI2 ja 5 ml konsentroitua l^SO^. Seosta sekoitettiin 4 päivää, jonka jälkeen isobuteeni haihdutettiin pois. Orgaaninen kerros vietiin erotussuppiloon, jonka jälkeen 20 lisättiin vettä, jossa oli riittävä määrä ^2^20^/ että
pH:ksi tuli 7. Kerrokset erotettiin sen jälkeen ja orgaaninen kerros pestiin 3 x 100 ml:11a 5-%ista KHSO^ ja 30-%:ista NaCl-liuosta. Orgaaninen kerros kuivattiin Na«SO.: 11a. Petrolieetterin lisäämisen jälkeen 2 4 J
25 muodostui sakka, joka suodatettiin pois ja pestiin pet-rolieetterillä.
Saanto: 18,61 g (59,0 %).
Rf CHC13:MeOH :ssa (8:2) = 0,84 (Si02).
2. H-Arg(MbS)-OtBu 30 18,00 g Z-Arg(Mbs)-OtBu:ta, 180 ml:ssa MeOH:a, hydrattiin 5-%:isen Pd/C:n ja vedyn kanssa. Sen jälkeen Pd/C suodatettiin pois ja liuos haihdutettiin kuiviin. Jäännös (vaahto) haihdutettiin jälleen ja liuotettiin 200 ml:aan EtAc, ja kiinteä aine, joka ei liuen-35 nut, suodatettiin pois. Suodos haihdutettiin sitten kuiviin kunnes vaahto oli jäljellä.
9 77873
Saanto: 12,72 g (93 %).
Rf CHCl3:Me0H:H20:ssa (70:30:5) = 0,63 (SiC>2) .
3. Z-Pro-Arg(Mbs)-OtBu 5,15 g (38,11 millimoolia) HOBt ja 7,23 g (34,94 5 millimoolia) DCC lisättiin peräkkäin seokseen, jossa oli 12,72 g (31,76 millimoolia) H-Arg(Mbs)-OtBu ja 7,92 g (31,76 millimoolia) Z-Pro-OH -5°C:ssa. Sen jälkeen seosta sekoitettiin 15 minuuttia -5°C:ssa, 45 minuuttia 0°C:ssa ja yön yli huoneenlämmössä. DCU suodatettiin pois ja liu-10 os haihdutettiin. Sen jälkeen jäljelle jäänyt öljy liuotettiin 500 ml:aan etyyliasetaattia, ja liuos uutettiin sitten 3 x 100 ml:lla 5-%:ista KHSO., 5-%:ista NaHCO, 4 3 ja vettä. Orgaaninen kerros kuivattiin Na2SO^:lla ja haihdutettiin kuiviin. Saatu öljy liuotettiin sitten me-15 tanoliin. Ö1jynnäköinen tuote saatiin lisäämällä vettä. Saanto: 16,75 g (85,9 %).
RRf tolueeni:EtOH :ssa (8:2) = 0,40 (Si02).
4. S-Pro-Arg(Mbs)-OH
15 g (23,74 millimoolia) Z-Pro-Arg(Mbs)-OtBu:a 20 liuotettiin 150 ml:aan 90-%:ista TFA ja 1,5 ml:aan anisolia ja seosta sekoitettiin 1 tunti. Sen jälkeen reak-tioseos pantiin 1 500 ml:aan eetteriä, joka sai aikaan öljyn erottumisen. Sakan yllä oleva neste dekantoitiin sitten ja öljy sekoitettiin eetterin kanssa. Eetteri de-25 kantoitiin. öljy liuotettiin sitten 100 ml:aan CH2C12 ja lisättiin pisaroittain eetteriiin, jolloin saatiin sakka. Sakka suodatettiin pois ja kuivattiin KOH:lla.
Saanto: 12,51 g (91,5 %).
Rf CH2Cl2:MeOH:vedessä (70:30:5) = 0,46 (Si02).
30 5. Z-Pro-Arg(Mbs)-Gly-NH2
Liuos, jossa oli 2,54 g (22,94 millimoolia) H-Gly-NH2: HC1 25 ml:ssa DMF, johon oli lisätty 2,89 ml (22,94 millimoolia) NEM, lisättiin seokseen, jossa oli 12 g (20,85 millimoolia) Z-Pro-Arg(Mbs)-OH ja 5,64 g (41,70 35 millimoolia) HOBt 180 ml:ssa DMF -10°C:ssa. 4,75 g (22,95 millimoolia) DCC lisättiin tähän reaktioseokseen -10°C:ssa.
10 77873
Seosta sekoitettiin sitten 1 tunti -10°C:ssa ja yön yli 4°C:ssa. Sen jälkeen DCU suodatettiin pois ja suo-dosta haihdutettiin kunnes havaittiin öljy. Jälkimmäinen liuotettiin 200 ml:aan seosta, jossa oli 2-BuOH 5 CH2Cl2:ssa (2:3) ja uutettiin 3 x 50 ml:lla 5-%:ista KHSC>4, 5-%:ista NaHCO^ ja 30-%:ista NaCl-liuosta. Orgaaninen kerros kuivattiin sitten Na2S04:lla. Pet-rolieetteriä lisättiin orgaaniseen kerrokseen, jolloin saatiin sakka. Sakka suodatettiin pois ja pestiin petro-10 lieetterillä.
Saanto: 94,3 % = 12,42 g.
Rf CHCl3:Me0H:H20 :ssa (70:30:5) = 0,77 (Si02>.
6. Trt-Cys(Trt)-Pro-Arg(Mbs)-Gly-NH2 1,75 g (2,77 millimoolia)Z-Pro-Arg(Mbs)-Gly-NH2 15 50 ml:ssa DMF hydrattiin H2:n ja5-%:isen Pd/C:n kanssa. Pd/C suodatettiin pois ja seos jäähdytettiin -10 C:seen, jonka jälkeen lisättiin peräkkäin 1,35 g (2,71 millimoolia) Trt-Cys(Trt)-OH, 0,70 g (5,16 millimoolia) HOBt ja 0,59 g DCC. Seosta sekoitettiin sitten 15 minuut-20 tia -10°C:ssa, sitten 1 tunti 0°C:ssa, ja sen jälkeen yön yli huoneenlämmössä. Reaktioseos jäähdytettiin -25°C:seen, muodostunut DCU suodatettiin pois ja suodos haihdutettiin, jolloin jäi öljy.
Tämä öljy liuotettiin 50 ml:aan 2-BuOH:n ja CH2Cl2:n 25 seosta (2:3) ja uutettiin 3 x 15 ml:lla 5-%:ista NaHCO^, 5-%:ista KHSO^ ja 30-%:ista NaCl-liuosta.
Orgaaninen kerros kuivattiin Na2S04:lla ja haihdutettiin kuiviin.
Saanto: 2,70 g (96 %).
30 Rf CHCl3:Me0H:H20 :ssa (70:30:5) = 0,82 (Si02).
7. H-Cys(Tr^-Pro-Arg(Mbs)-Gly-NH2 6,85 g (6,31 millimoolia) Trt-Cys(Trt)-Pro-Arg (Mbs)-Gly-NH2 liuotettiin 40 ml:aan etikkahappoa. 4 ml vettä lisättiin hitaasti tähän liuokseen. Kun liuosta 3 5 oli sekoitettu vielä tunti huoneenlämmössä, lisättiin i 11 77873 vielä 40 ml vettä, jolloin saatiin sakka. Tämä sakka suodatettiin pois, suodos haihdutettiin, jolloin saatiin öljy, ja öljy liuotettiin 70 ml:aan 2-BuOH:CH2Cl2 (2:3) ja uutettiin 3 x 10 ml:11a 5-%:ista NaHCO^ ja 3 x 5 10 ml:lla 30-%:ista NaCl-liuosta. Orgaaninen kerros kui vattiin Na2SO^:lla. Eetterin lisäys antoi sakan, joka suodatettiin pois ja kuivattiin.
Saanto: 5,08 g (89 %).
Rf CHCl3:MeOH:H20 :ssa (70:30:5) = 0,71 (Si02).
10 8. Z-Gln-Asn-Cys(Trt)-Pro-Arg(Mbs)-Gly-NH2 0,66 g (4,87 millimoolia) HOBt ja 0,85 g (4,10 millimoolia) DCC lisättiin peräkkäin liuokseen, jossa oli 3,42 g (4,06 millimoolia) kohdassa 7. saatua peptidiä ja 1,60 millimoolia) Z-Cln-Asn-OH 50 ml:ssa DMF -10°C:ssa.
15 Kun seosta oli sekoitettu 24 tuntia, se jäähdytettiin -25°C:seen ja muodostunut DCU suodatettiin pois. Suodos kaadettiin 100 ml:aan 5-%:ista NaHCO^, jolloin saatiin sakka. Sakka suodatettiin pois ja pestiin 3 kertaa vedellä ja kuivattiin sitten.
20 Saanto: 4,0 g (80,8 %).
Rf CH2Cl2:Me0H:H20 :ssa (70:30:5) = 0,70 (Sit^).
9. Z-Gln-Asn-Cys(Scm)-Pro-Arg-Gly-NI^ 4.0 g (3,23 millimoolia) kohdassa 8. saatua peptidiä liuotettiin 100 ml:aan metanolia ja 100 ml:aan CJ^C^.
25 Sen jälkeen lisättiin 0,6 ml S-karboksimetyylisulfenyyli-kloridia. Kun seosta oli sekoitettu 1 tunti, muodostunut sakka suodatettiin pois ja pestiin eetterillä.
Saanto: 2,00 g (57 %)
Rf CH2Cl2:Me0H:H20 :ssa (70:30:5) = 0,55 (SK>2)
30 H-Cys-OH
10. Z-Cln-Asn-Cys-Pro-Arg(Mbs)-Gly-NH2.HC1 2.00 g (1,84 millimoolia) kohdassa 9. saatua peptidiä liuotettiin 100 ml:aan metanolia, jonka jälkeen lisättiin 0,65 g (3,68 millimoolia) H.Cys-OH.HCl.I^O.
35 Seosta sekoitettiin 1 tunti, jonka jälkeen lisättiin 100 ml eetteriä, ja muodostui sakka. Neste dekantoitiin ja 12 77873 kiteitä sekoitettiin kahdesti eetterin kanssa. Jäännös liuotettiin sitten hyvin pieneen määrään metanolia ja puhdistettiin kromatografiällä.
Saanto: 650 mg (31,3 %) 5 Rf Bu0H:H0Ac:H20 :ssa (67:10:23) = 0,31 (Si02).
H-Cys-OH
11. pGlu-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2.asetaatti 450 mg (0,40 millimoolia) kohdassa 10. saatua peptidiä liuotettiin seokseen, jossa oli 12,5 ml TFA, 10 0,13 ml MeSO^H ja 0,01 ml tioanisolia ja sekoitettiin 5 tuntia. Reaktioseos kaadettiin sitten eetteriin, jolloin saatiin öljy. Sakan yllä oleva neste dekantoitiin ja öljy sekoitettiin kahdesti eetterin kanssa, öljy liuotettiin sitten t.BuOH:n ja H20:n seokseen (1:1) ja pan-15 tiin vaihtumaan asetaattimuodossa olevan ioninvaihtajän kanssa (Dowex 2X-8) ja pakastekuivattiin sitten.
Saanto: 300 mg.
Pakastekuivattu aine liuotettiin 10 ml:aan 50-%:ista HOAc ja sekoitettiin 6 tuntia 50°C:ssa, jonka 20 jälkeen se jälleen pakastekuivattiin. Aine puhdistettiin sitten kromatografiällä.
Saanto: 84 mg.
Rf 1-Bu0H:H0AC:H20 :ssa (2:1:1) = 0,14 (Si02, Woelm).
Esimerkki 2
25 H-Cys-OH
1. Z-Gln-Asn-Gys-Pro-Leu-Gly-NH2.HCl 2,6 g (3 millimoolia) Z-Gln-Asn-Cys(Scm)-Pro-Leu-Gly-NH2 (valmistettu samanlaisella tavalla kuin on kuvattu esimerkissä 1; Rf CH2Cl2:MeOH:ssa 8:2 = 0,60 Sioilla) 30 liuotettiin 30 ml:aan DMF, jonka jälkeen 0,78 g (4,4 millimoolia) H-Cys-OH.HCl.H20 lisättiin. Kun oli sekoitettu 2 1/2 tuntia huoneenlämmössä, reaktioseos kaadettiin eetteriin, joka sai aikaan peptidin erottumisen öljynä, öljy liuotettiin pieneen määrään MeOH ja puhdistettiin (Sepha-35 dex®) -pylväällä, käyttäen metanolia eluenttina.
13 77873
Scianto: 0,65 g (24 %) .
Rf = 0,36 1-Bu0H:H0Ac:H20 (4:1:1) = 0,36 Sioilla.
H-Cys-OH
2. pGlu-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2.asetaatti 5 0,65 g (0,71 millimoolia) kohdassa 1. saatua pep tidiä liuotettiin 75 ml:aan TFA, 1,2 ml:aan metaanisulfoni-happoa ja 0,25 ml:aan tioanisoli. Kun seosta oli sekoitettu 2 tuntia, 100 ml eetteriä lisättiin, jolloin saatiin sakka. Tämä sakka sekoitettiin kahdesti eetterin kansio sa ja dekantoitiin. Kiinteä aine liuotettiin t-Bu0H:H20- seokseen (1:1), pantiin vaihtumaan Dowex® (2X-8 Ac-):n kanssa ja pakastekuivattiin sitten. Pakastekuivattu aine puhdistettiin kromatografisesti (Merckin® C-tyyppinen käyttövalmis pylväs) 1-Bu0H:H0Ac:H20 (3:1:1) eluenttina. Saatu aine 15 puhdistettiin sitten Craigin jakaantumisella, käyttäen 1-BuOH:HOAc:H20 (4:1:5).
Saanto: 137 mg (22 %).
Rf l-BuOH:pyridiini:HOAc:H20 (8:3:1:4) = 0,26 (SiC>2,
Woelm).
20 Esimerkki 3
H-Cys-OH
1. Z-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg(Mbs)-OtBu.HCl 2,2 g (2,06 millimoolia) Z-Gln-Asn-Cys(Scm)-Pro-Arg(Mbs)-OtBu (saatu samankaltaisella mentelmällä kuin 25 on kuvattu esimerkissä 1; Rf CH2C12:MeOH:H20 (70:30:5) = 0,94 Sioilla) liuotettiin 20 ml: aan MeOH, jonka jälkeen lisättiin 0,35 g (1,96 millimoolia) H-Cys-OH.H2O.HCl sekoittaen ja seosta sekoitettiin 1 tunti. Saatiin sakka lisäämällä 20 ml eetteriä. Neste dekantoitiin ja kiintei-30 tä aineita sekoitettiin kahdesti 100 ml:n kanssa eetteriä.
Kiinteä aine liuotettiin sitten 200 ml:aan CH2C12 ja uutettiin 2 x 100 ml:11a vettä. Vesikerros pakastekuivattiin. Saanto: 1,85 g (74 %).
Rf CH2Cl2:Me0H:H20 (70:30:5) = 0,37 Sioilla.
35 H-Cys-OH
2. pGlu-Asn-Cys-Pro-Arg-OH.asetaatti 14 77873 180 mg (0,16 millimoolia) kohdassa 1. saatua peptidiä liuotettiin 3,7 ml:aan TFA:a, 0,37 ml:aan tioanisolia ja 0,9 ml:aan metaanisulfonihappoa, ja seosta sekoitettiin 5 tuntia huoneen lämmössä. Sen jälkeen reaktioseos kaa-5 dettiin 25 ml:aan eetteriä ja saatu sakka suodatettiin pois ja pestiin eetterillä. Kiinteä aine liuotettiin t-BuOH:iin ja veteen (1:1) ja pantiin vaihtumaan asetaatti-muodossa olevan ioninvaihtimen kanssa (Dove?^ 2X-8). Ionin-vaihdin suodatettiin pois ja liuos pakastekuivattiin.
10 Kiinteä aine liuotettiin sitten 10 ml:aan 50-%:ista etik-kahappoa, sekoitettiin 5 tuntia 50°C:ssa ja pakastekuivattiin uudelleen. Tämä tuote puhdistettiin kromatokrafises-ti (Merckf^in käyttövalmis pylväs), käyttäen l-BuOH:HOAc: H20 (1:1:1) eluenttina.
15 Saanto: 47 mg (40 %) .
Rf 2-BuOH:Py:25-% NH30H:H20 (20:20:3:15) = 0,21 (Si02)
Esimerkki 4 Käyttäen samanlaista menetelmää kuin on kuvattu esimerkissä 1.11, 20 Z-Cln-Asn-Cys-Pro-Leu-OtBu.HC1
H-Cys-OH
(Rf l-Bu0H:Py:H0Ac:H20:ssa (8:3:1:4) = 0,12) muutettiin
PGlu-Asn-^ys-Pro-Leu-OH
25 H-Cys-OH.asetaatiksi
Rf l-BuOH:HOAc:H20:ssa (2:1:1) = 0,40 (SiC>2) .
Esimerkki 5 1. (Z-Gln-Asn-Cys-Pro-Arg(Mbs)-OtBu)0 I * 1,62 g (1,33 millimoolia) 30 Z-Gln-Asn-Cys(Trt)-Pro-Arg(Mbs)-OtBu ^saatu samankaltaisella menetelmällä kuin esimerkissä 1; Rf CHCl3:MeOH: H20:ssa (70:30:5) = 0,70 (Si02)^ liuotettiin 292 ml:aan 0,005 M jodiliuosta etikkahapossa. Kun oli sekoitettu 1 tunti huoneen lämmössä, lisättiin hitaasti natriumtiosul- 35 faattiliuosta, kunnes havaittiin vaaleankeltainen liuos. Seuraavaksi lisättiin 1,33 ml 1 N NaOH-liuosta ja 250 ml vettä, ja saatu sakka poistettiin suodattamalla ja pestiin vedellä. Uudelleenkiteyttäminen suoritettiin MeOH/eette- 15 77873 rissa. Saanto: 1,03 g (79 %) .
Rf CH2Cl2:MeOH:ssa (8:2) = 0,35 (SiC>2) .
2. (pGlu-Asn-Cys-Pro-Arg-OH)^ ( 1,03 g (0,53 millimoolia) edellä kuvattua suojattua 5 dimeeriä liuotettiin sekoittaen 10 ml:aan TFA:a, johon oli lisätty 6,1 g metaanisulfonihappoa ja 0,6 g tioanisolia. Kun liuos oli seissyt huoneen lämmössä 5 tuntia, se lisättiin pisaroittain 100 ml:aan eetteriä ja saatu sakka poistettiin suodattamalla ja pestiin eetterillä. Seuraavaksi 10 yhdiste liuotettiin l:l-seokseen t-BuOH:a ja H2<0:ta, vaihdettiin käyttäen asetaattimuodossa olevaa ioninvaihdinta (Dovex® 2X-8) ja pakastekuivattiin. Pakastekuivattu aine (690 mg) liuotettiin 10 ml:aan 50-%:ista HOAc-liuosta ja pidettiin 5 tunnin ajan 50°C:ssa. Pakastekuivauksen jäl-15 keen yhdiste puhdistettiin kromatografisesti Si02-pylvääl-lä eluointisysteemillä l-BuOH:HOAc:H20 (1:1:1).
Saanto: 150 mg.
Rf 1-BuOH:HOAc:H20:ssa (1:2:1) = 0,42 (Si02; Woelm).
Esimerkki 6 20 Yhdiste Z-Gln-Asn-Cys(Trt)-Pro-Arg(Mbs)-Gly-NH2 (saatu esimerkin mukaisesti) käsiteltiin I2:lla tavalla, joka kuvattiin esimerkissä 5.1., jonka jälkeen peptidi (pGlu-Asn-Cys-Pro-Arg-Gly-NH2)2 saatiin kuten esimerkissä 5.2. on kuvattu.
25 Rf 1-BuOH:HOAc:H20:ssa (1:2:1) = 0,27 (Si02, Woelm).
Esimerkki 7 (Z-Gln-Asn-Cys-Pro-Leu-OtBu)2 valmistettiin samankaltaisella menetelmällä kuin esimerkissä 5.
0,7 g tätä peptidiä liuotettiin 75 ml:aan TFA:a, 30 1,2 ml:aan metaanisulfonihappoa ja 0,25 ml:aan tioaniso lia. 2 tunnin sekoittamisen jälkeen lisättiin 100 ml eetteriä, mikä johti sakan muodostumiseen, joka sitten pestiin eetterillä. Sen jälkeen kiinteä aine liuotettiin t-BuOH:H20-seokseen (1:1), vaihdettiin Dove?P^ (2X-8 35 Ac ):lla, ja kun se oli pakastekuivattu, se puhdistettiin 16 77873 kromatografisesti SiC^-pylväällä, jolloin saatiin pGlu-Asn-Cys-Pro-Leu-OH)2:n asetaattisuola.
Rf l-Bu0H:Py:H0Ac:H20:ssa (8:3:1:4) = 0,22 (Si02)
Esimerkki 8 5 Samalla tavalla valmistettiin (pGlu-Asn-Cys-Pro-Leu-Gly-NH2)2.
Rf l-Bu0H:H0Ac:H20:ssa (1:2:1) = 0,26 (Si02).
Claims (2)
1. Menetelmä uusien, terapeuttisesti käyttökelpoisten polypeptidien valmistamiseksi, joilla on kaava I 5 H-L-pGlu-L-Asn-L-Cys-L-Pro-L-A-Y _ R jossa I I R on H-Cys-OH tai H-pGlu-Asn-Cys-Pro-A-Y, 10. on aminohapporadikaali Arg tai Leu, ja Y on ryhmä -OH tai -Gly-OH, tai niiden amidien tai happoadditiosuolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että 15 (1) kaavan I mukaista polypeptidiä vastaavasta suojatusta polypeptidistä poistetaan suojaava ryhmä tai suojaavat ryhmät, tai (2) kondensoidaan peptidi, jolla on kaava 20 H-L-Gln-L-Asn-L-Cys-L-Pro-L-A-Y R jossa R, A ja Y merkitsevät samaa kuin edellä, jolloin glutaminyyliradikaali muuttuu pyroglutamyyliradikaaliksi, 25 ja haluttaessa saatu kaavan I mukainen peptidi muutetaan ami-dikseen tai happoadditiosuolakseen.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että peptidi 30 H-L-Gln-L-Asn-L-Cys-L-Pro-L-A-Y R jossa yksi tai useampi aminohapporadikaali on varustettu 35 suojaavalla ryhmällä, vapautetaan suojaavasta ryhmästä tai suojaavista ryhmistä, jonka jälkeen glutaminyyliradiaali muutetaan pyroglutamyyliradikaaliksi.
Applications Claiming Priority (4)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
NL8203949 | 1982-10-13 | ||
NL8203949 | 1982-10-13 | ||
NL8204881 | 1982-12-17 | ||
NL8204881 | 1982-12-17 |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI833706A0 FI833706A0 (fi) | 1983-10-12 |
FI833706A FI833706A (fi) | 1984-04-14 |
FI77873B FI77873B (fi) | 1989-01-31 |
FI77873C true FI77873C (fi) | 1989-05-10 |
Family
ID=26645813
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI833706A FI77873C (fi) | 1982-10-13 | 1983-10-12 | Foerfarande foer framstaellning av nya, terapeutiskt anvaendbara polypeptider. |
Country Status (13)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4487765A (fi) |
EP (1) | EP0106404B1 (fi) |
KR (1) | KR910001724B1 (fi) |
AU (1) | AU557985B2 (fi) |
CA (1) | CA1239394A (fi) |
DE (1) | DE3375143D1 (fi) |
DK (1) | DK467183A (fi) |
ES (1) | ES8501364A1 (fi) |
FI (1) | FI77873C (fi) |
GR (1) | GR78967B (fi) |
HU (1) | HU189757B (fi) |
IE (1) | IE56021B1 (fi) |
PT (1) | PT77474B (fi) |
Families Citing this family (19)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
IE58407B1 (en) * | 1984-04-13 | 1993-09-22 | Akzo Nv | Peptides |
US4748154A (en) * | 1985-12-24 | 1988-05-31 | Takeda Chemical Industries, Ltd. | Peptide derivatives, their production and use |
KR0141693B1 (ko) * | 1988-08-12 | 1998-06-15 | 나까무라 하루후미 | 펩티드 유도체 및 항치매제 |
KR0144005B1 (ko) * | 1988-08-12 | 1998-07-01 | 나까무라 하루후미 | 펩티드 및 항치매제 |
DE69013742T2 (de) * | 1989-04-15 | 1995-03-23 | Nippon Chemiphar Co | Peptide und diese Peptide enthaltende Wirkstoffe gegen Dementia. |
US5078435A (en) * | 1991-01-08 | 1992-01-07 | The Young Industries, Inc. | Self-aligned flanged coupling |
GB2269821B (en) * | 1992-08-08 | 1996-06-05 | Shanghai Inst Biochemistry | Memory enhancing peptides and pharmaceutical compositions containing them |
CN1036010C (zh) * | 1992-08-08 | 1997-10-01 | 中国科学院上海生物化学研究所 | 记忆增强肽及其应用 |
WO1995001368A1 (en) * | 1993-06-29 | 1995-01-12 | Ferring B.V. | Improved synthesis of cyclic peptides |
US5500413A (en) * | 1993-06-29 | 1996-03-19 | Ferring Ab | Process for manufacture of 1-deamino-8-D-arginine vasopressin |
US5674850A (en) * | 1993-12-23 | 1997-10-07 | Ferring Ab | High purity desmopressin produced in large single batches |
US5482931A (en) * | 1993-06-29 | 1996-01-09 | Ferring Ab | Stabilized pharmaceutical peptide compositions |
HU221617B1 (hu) * | 1993-06-29 | 2002-12-28 | Ferring B.V. | Vizes készítmény dezmopresszin nazális adagolására |
SE9400918L (sv) * | 1994-03-18 | 1995-09-19 | Anne Fjellstad Paulsen | Stabiliserad komposition för oral administrering av peptider |
RU2067000C1 (ru) * | 1994-06-29 | 1996-09-27 | Владислав Исакович Дейгин | Пептид и способ его получения |
EP0919567B1 (en) * | 1996-04-15 | 2001-10-24 | Kabushiki Kaisha Yakult Honsha | Novel peptides and nootropic agent |
US5763398A (en) * | 1996-06-20 | 1998-06-09 | Ferring B.V. | Nasal administration of desmopressin |
US5922680A (en) * | 1996-10-23 | 1999-07-13 | Ferring, B.V. | Stabilized composition for oral administration of peptides |
CN1154656C (zh) * | 2000-06-30 | 2004-06-23 | 上海中科英泰生物技术有限公司 | 一类记忆增强肽和它们的用途 |
-
1983
- 1983-10-03 IE IE2332/83A patent/IE56021B1/en not_active IP Right Cessation
- 1983-10-06 AU AU19932/83A patent/AU557985B2/en not_active Ceased
- 1983-10-06 DE DE8383201428T patent/DE3375143D1/de not_active Expired
- 1983-10-06 EP EP83201428A patent/EP0106404B1/en not_active Expired
- 1983-10-07 PT PT77474A patent/PT77474B/pt not_active IP Right Cessation
- 1983-10-11 GR GR72661A patent/GR78967B/el unknown
- 1983-10-11 DK DK467183A patent/DK467183A/da unknown
- 1983-10-11 ES ES526402A patent/ES8501364A1/es not_active Expired
- 1983-10-12 FI FI833706A patent/FI77873C/fi not_active IP Right Cessation
- 1983-10-12 HU HU833530A patent/HU189757B/hu not_active IP Right Cessation
- 1983-10-12 CA CA000438769A patent/CA1239394A/en not_active Expired
- 1983-10-12 KR KR1019830004831A patent/KR910001724B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1983-10-17 US US06/542,774 patent/US4487765A/en not_active Expired - Fee Related
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
IE832332L (en) | 1984-04-13 |
CA1239394A (en) | 1988-07-19 |
HU189757B (en) | 1986-07-28 |
EP0106404A3 (en) | 1985-08-14 |
DK467183A (da) | 1984-04-14 |
PT77474A (en) | 1983-11-01 |
ES526402A0 (es) | 1984-11-16 |
IE56021B1 (en) | 1991-03-27 |
DK467183D0 (da) | 1983-10-11 |
FI833706A (fi) | 1984-04-14 |
GR78967B (fi) | 1984-10-02 |
FI833706A0 (fi) | 1983-10-12 |
EP0106404B1 (en) | 1988-01-07 |
KR910001724B1 (ko) | 1991-03-22 |
US4487765A (en) | 1984-12-11 |
PT77474B (en) | 1986-02-12 |
DE3375143D1 (en) | 1988-02-11 |
KR840009069A (ko) | 1984-12-24 |
EP0106404A2 (en) | 1984-04-25 |
ES8501364A1 (es) | 1984-11-16 |
AU557985B2 (en) | 1987-01-15 |
AU1993283A (en) | 1984-04-19 |
FI77873B (fi) | 1989-01-31 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
FI77873C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya, terapeutiskt anvaendbara polypeptider. | |
US20190177392A1 (en) | Synthesis of glp-1 peptides | |
CN101918429B (zh) | 肽的生产和纯化方法 | |
US4368192A (en) | Peptides | |
DK149862B (da) | Analogifremgangsmaade til fremstilling af lh-rh-analoge dekapeptidamider eller et salt eller et metalkompleks deraf | |
JPH0610184B2 (ja) | 非天然アミノ酸 | |
US6235876B1 (en) | Liquid phase process for the preparation of GNRH peptides | |
FI82255C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya gonadoliberinderivat som paoverkar djurens foeroekningsprocesser. | |
KR870001145B1 (ko) | 펩타이드의 제조방법 | |
US4491541A (en) | Peptides | |
US4301066A (en) | Preparation of (D-Trp 6)-LH-RH via the heptapeptide H-Ser-Tyr-D-Trp-Leu-Arg-Pro-Gly-NH2 | |
JPH0631314B2 (ja) | 新規なゴナドリベリン誘導体 | |
JPH06179697A (ja) | ブラジキニン拮抗作用をもつ新規の擬似ペプチド化合物 | |
IE47448B1 (en) | Analogs of somatostatin and process for the manufacture thereof | |
US4444682A (en) | Method of sulfation | |
JPH047360B2 (fi) | ||
US4271152A (en) | Psycho-pharmacological peptides | |
JPS62209096A (ja) | バソプレシン化合物 | |
FI77874B (fi) | Foerfarande foer framstaellning av nya, terapeutiskt anvaendbara peptider. | |
Ovchinnikov et al. | Atriopeptins. I. Synthesis of C-terminal fragments | |
WO2023110781A1 (en) | Manufacturing process for the production of linaclotide | |
JPS6028996A (ja) | ポリペプチドの製法 | |
HU190207B (en) | Process for production of new gonadoliberine derivatives | |
EP1348714A1 (en) | Polypeptide useful as anti-allergic/antiasthmatic, methods for the preparation thereof and pharmaceutical compositions containing such polypeptide and their use | |
HU177132B (hu) | Eljárás ACTH hatású, terc-butilezett triptofánt tartalmazó peptidek előállítására |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
MM | Patent lapsed | ||
MM | Patent lapsed |
Owner name: AKZO N.V. |