FI70670B

FI70670B - FOERFARANDE FOER FRAMSTAELLNING AV EN STABIL CONCENTRATION CISPLATIN-LOESNING I ETT LOESNINGSMEDEL

Info

Publication number: FI70670B
Application number: FI810934A
Authority: FI
Inventors: Murray Arthur Kaplan; Alphonse Peter Granatek
Original assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1980-03-31
Filing date: 1981-03-26
Publication date: 1986-06-26
Also published as: AU6816681A; GB2074028B; NZ196519A; ES500869A0; JPS6360008B2; KR830004849A; IL62517A; NO811081L; ZA812084B; DE3112272A1; AR225500A1; NL8101531A; FR2480605B1; KR860000841B1; DK158564B; PT72774B; DK158564C; PT72774A; PH17152A; IE810715L

Description

1 706701 70670

Menetelmä stabiilin, väkevän cisplatin-liuoksen valmistamiseksi liuottimeenMethod for preparing a stable, concentrated solution of cisplatin in a solvent

Keksinnön kohteena on menetelmä stabiilin, väkevän 5 cisplatin-liuoksen valmistamiseksi liuottimeen, erityisesti vesipitoiseen polyetyleeniglykoliin, metoksipolyetyleeni-glykoliin tai niiden seoksiin, jotka sisältävät kloridi-ioneja luovuttavaa ainetta.The invention relates to a process for preparing a stable, concentrated solution of cisplatin in a solvent, in particular aqueous polyethylene glycol, methoxy polyethylene glycol or mixtures thereof containing a chloride ion donor.

Platinayhdisteet ovat ainutlaatuinen ryhmä yhdisteitä 10 kasvaintenvastaisten aineiden joukossa. Rosenberg ja hänen kollegansa havaitsivat ensiksi 1965 niillä olevan antibioottista tehoa /Rosenberg, B. et ai. Nature (Lontoo) 205 (1965) 698-6997 ja sen jälkeen Rosenberg kollegoineen huomasi niiden olevan tehokkaita kasvaintenvastaisia aineita eläimille 15 /Rosenberg, B. et ai., Nature (Lontoo) 222 (1969) 385-3867·Platinum compounds are a unique group of compounds among 10 antitumor agents. Rosenberg and colleagues first discovered in 1965 that they have antibiotic efficacy / Rosenberg, B. et al. Nature (London) 205 (1965) 698-6997 and subsequently Rosenberg and colleagues found them to be effective antitumor agents for animals 15 / Rosenberg, B. et al., Nature (London) 222 (1969) 385-3867 ·

Rakenteeltaan ne ovat kompleksiyhdisteitä, joiden kes-kusatomina on platina ja tämän ympärillä erilaisina järjestelminä klooriatomeja tai ammoniakkiryhmiä joko cis- tai trans-asennossa tasoon nähden. Kahden eniten tutkitun plati-20 nayhdisteen diagrammit ovat seuraavat:In structure, they are complex compounds with platinum as the central atom and chlorine atoms or ammonia groups as various systems around it in either the cis- or trans-position relative to the plane. The diagrams of the two most studied Plati-20 compounds are as follows:

ClCl

Cl NH0 /-7 3 Cl NH0 /*7 /** / 25 Cl NH3 C1 'nh3Cl NH0 / -7 3 Cl NH0 / * 7 / ** / 25 Cl NH3 C1 'nh3

ClCl

Cis-platina(II)diammono- Cis-platina(IV)diammonotetra- dikloridi kloridi 30Cis-platinum (II) diammono- Cis-platinum (IV) diammonotetradichloride chloride 30

Kuten voidaan nähdä ovat cis-platina(II)diammono-dikloridi-yhdisteen kaikki klooriatomit ja ammoniakkiryhmät samassa tasossa. Tätä yhdistettä, joka nykyään tunnetaan Yhdysvalloissa hyväksytyllä nimellä (United States Adopted 35 Name, USAN) cisplatin, on syntetisoitu seuraavan reaktion mukaisesti: 70670 2 NH .Cl 4 K2Z"PtCl47 + 2NH3 -> cis-/Pt (NH3) 2C127 + 2KC1 /*ks. Kauffman, G.B. et al.f Inorganic Synthesis, J. Kleinberg 5 (toim.), sivut 239-245, McGraw-Hill Book Co., Inc., New York, 19637.As can be seen, all the chlorine atoms and ammonia groups of the cis-platinum (II) diammono dichloride compound are in the same plane. This compound, currently known as the United States Adopted 35 Name (USAN) cisplatin, has been synthesized according to the following reaction: 70670 2 NH .Cl 4 K2Z "PtCl47 + 2NH3 -> cis- / Pt (NH3) 2C127 + 2KCl / * See Kauffman, GB et al., Inorganic Synthesis, J. Kleinberg 5 (ed.), pp. 239-245, McGraw-Hill Book Co., Inc., New York, 19637.

Breusova-Baidala, Y.G. et ai. käsittelevät julkaisussa Akademia Nauk SSSR, nro 6, sivut 1239-1242 (kesäkuu 1974) cis-platina(II)diammonodikloridin hidasta isomeroitumista 10 trans-muotoon vesiliuoksessa.Breusova-Baidala, Y.G. et al. discuss in Akademia Nauk SSSR, No. 6, pages 1239-1242 (June 1974) the slow isomerization of cis-platinum (II) diammonodichloride to the 10 trans form in aqueous solution.

Reishus, J.W. ja Martin, D.S. (Journal of the American Chemical Society 83 (1961) 2457-2462) kuvaavat cisplatinin hapanta hydrolyysiä 25°C:ssa ja 35°C:ssa. Näissä tutkimuksissa käytettiin vesiliuoksia, joiden pitoisuudet olivat 15 1,5 x 10 3 M, 2,5 x 10 3 M ja 5,0 x 10 3 M, jotka vastaavat pitoisuuksia 0,45, 0,75 ja 1,5 mg/ml. Kirjoittajat esittävät, että hydrolyysikäyrien alun (toisin sanoen nolla-kohdan) määrittämisessä oli epäselvyyttä, koska näytteiden täydelliseen liukenemiseen tarvittiin 10-30 minuuttia näinkin pienissä pi-20 toisuuksissa.Reishus, J.W. and Martin, D.S. (Journal of the American Chemical Society 83 (1961) 2457-2462) describe the acid hydrolysis of cisplatin at 25 ° C and 35 ° C. Aqueous solutions of 1.5 x 10 3 M, 2.5 x 10 3 M and 5.0 x 10 3 M corresponding to 0.45, 0.75 and 1.5 mg / ml were used in these studies. . The authors suggest that there was ambiguity in determining the beginning (i.e., zero point) of the hydrolysis curves because complete dissolution of the samples took 10-30 minutes at such low concentrations of pi-20.

Rozencweig, M. et ai., esittävät julkaisussa Annals of Internal Medicine 86 (1977) 803-812 yhteenvedon tuloksista, joita saatiin erilaisissa esikliinisissä ja kliinisissä tutkimuksissa cisplatinin käytöstä eläinten kokeellisissa 25 kasvaimissa sekä ihmisten erityyppisissä kasvaimissa. He esittävät, että tutkimuksissa käytetty lääke, joka on ammattitaitoisten tutkijoiden saatavissa laitoksen The Investigational Drug of the Cancer Therapy Evaluation Program of the National Cancer Institute kautta, toimitettiin valkoi-30 sena lyofilisoituna jauheena lääkepulloissa, jotka sisälsivät 10 mg cisplatinia, 90 mg natriumkloridia, 100 mg mannito-lia (U.S.P.) ja suolahappoa pH:n säätämiseksi. Lisättäessä tuote 10 ml:aan steriiliä vettä ruiskeita varten (U.S.P.) saatiin liuos, jossa oli 1 mg cisplatinia, 10 mg mannitolia 35 ja 9 mg NaCl.Rozencweig, M. et al., In Annals of Internal Medicine 86 (1977) 803-812, summarize the results obtained in various preclinical and clinical studies on the use of cisplatin in animal experimental tumors as well as in different types of human tumors. They state that the drug used in the studies, which is available to qualified researchers through The Investigational Drug of the Cancer Therapy Evaluation Program of the National Cancer Institute, was supplied as a white lyophilised powder in vials containing 10 mg cisplatin, 90 mg sodium chloride, 100 mg of mannitol (USP) and hydrochloric acid to adjust the pH. Addition of the product to 10 mL of sterile water for injections (U.S.P.) provided a solution of 1 mg cisplatin, 10 mg mannitol 35, and 9 mg NaCl.

Julkaisussa Cancer Chemotherapy Reports 57 (1973) 465-471 Talley, R.W. et ai., kuvaavat tuloksia, joita he 3 70670 saivat kliinisen tutkimuksensa ensimmäisessä vaiheessa cisplatinin käytöstä käsitellessään sillä 65 ihmispotilasta, joilla oli erilaisia kasvaimia. Samoin kuin edellisessäkin julkaisussa National Cancer Institute toimitti lääkkeen heil-5 le pulloissa, jotka sisälsivät 10 mg cisplatinia, 90 mg natriumkloridia ja 100 mg mannitolia, jotka käytettiin lisäten 10 ml steriiliä vettä.In Cancer Chemotherapy Reports 57 (1973) 465-471 Talley, R.W. et al., describe the results they obtained in the first phase of their clinical study of 3,70670 in the treatment of cisplatin in 65 human patients with various tumors. As in the previous publication, the National Cancer Institute supplied the drug to heil-5 le in bottles containing 10 mg of cisplatin, 90 mg of sodium chloride and 100 mg of mannitol, which were used with the addition of 10 ml of sterile water.

Russof, A.H. et ai., kuvaavat julkaisussa Cancer 30 (1972) 1451-1456 tuloksia, jotka he saivat käyttäessään 10 cisplatinia 31 ihmispotilaalle, joilla oli erityyppisiä kasvaimia. He ilmoittavat National Cancer Instituten toimittaman lääkkeen valmistajan olleen Ben Venue Laboratories, Inc. ja että se sisälsi pulloa kohti 10 mg cisplatinia, 10 mg (sic) mannitolia ja 9 mg (sic) NaCl:a ja että kellervän valkoinen 15 jauhe liukeni helposti 8-10 ml:aan steriiliä vettä.Russof, A.H. et al., in Cancer 30 (1972) 1451-1456, describe the results they obtained using 10 cisplatin in 31 human patients with different types of tumors. They state that the drug supplied by the National Cancer Institute was manufactured by Ben Venue Laboratories, Inc. and contained 10 mg of cisplatin, 10 mg (sic) mannitol and 9 mg (sic) NaCl per bottle and that the yellowish-white powder 15 readily dissolved 8- To 10 ml of sterile water.

Joitakin cisplatinin kemiaa ja farmaseuttisia muotoja koskevia tietoja on esitetty sivuilla 1-5 ja 31-32, julkaisussa "Clinical Brochure, cis-platinum (II) diamminedichloride (NSC-119875)", H. Haldelsman et ai.. Investigational Drug 20 Branch, Cancer Chemotherapy Evaluation Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute (tarkistettu painos elokuu 1974). Julkaisun sivut 31 ja 32 käsittelevät cisplatin-valmistetta, jota N.C.I. toimittaa ilmaiseksi tutkijoille näiden suorittamia syövän kemoterapian kliinisiä 25 tutkimuksia varten ja ne kuuluvat seuraavasti:Some information on the chemistry and pharmaceutical forms of cisplatin is given on pages 1-5 and 31-32, "Clinical Brochure, cis-Platinum (II) diamminedichloride (NSC-119875)", H. Haldelsman et al., Investigational Drug 20 Branch, Cancer Chemotherapy Evaluation Program, Division of Cancer Treatment, National Cancer Institute (revised edition August 1974). Pages 31 and 32 discuss the preparation of cisplatin described by N.C.I. provide free of charge to researchers for their 25 clinical trials of cancer chemotherapy and are as follows:

Farmaseuttiset tiedot NSC-119875 cis-diammonodiklooriplatina (II)Pharmaceutical information NSC-119875 cis-diammonodichloroplatinum (II)

Annosmuoto : Jokaisen 20 ml:n piilasipullon sisältö 10 mg/pullo on lähes valkoisena lyofilisoituna kak- 30 kuna. Kukin pullo sisältää 10 mg NSC- 119875:ä; 90 mg natriumkloridia; 100 mg mannitolia sekä suolahappoa pH:n säätämiseksi .Dosage form: Each 20 ml silicon vial contains 10 mg / vial of almost white lyophilised cake. Each vial contains 10 mg of NSC-119875; 90 mg sodium chloride; 100 mg of mannitol and hydrochloric acid to adjust the pH.

Liuoksen valmistus : Saatettaessa pullon sisältö käyttömuo-35 10 mg/pullo toon 10 ml:lla steriiliä vettä ruiskei ta varten (Sterile Water for Injection, USP) yksi ml saatua liuosta sisältää 4 70670 1 mg:n yhdistettä NSC-119875, 10 mg mannitolia ja 9 mg natriumkloridia ja sen pH on alueella 3,5 - 4,5.Preparation of the solution: When reconstituting the vial with 35 ml of 10 mg sterile water for injection (USP), one ml of the resulting solution contains 4,70670 1 mg of NSC-119875, 10 mg of mannitol and 9 mg of sodium chloride and has a pH in the range of 3.5 to 4.5.

Säilytys : Kuivat, avaamattomat pullot tulisi säi- 5 lyttää jääkaappilämpötilassa (4-8°C).Storage: Dry, unopened bottles should be stored at refrigerator temperature (4-8 ° C).

Pysyvyys : Vioittumattomien pullojen varastointi- stabiilisuus on yksi vuosi kun ne säilytetään jääkaappilämpötilassa (4-8°C). Stabiilisuussuosituksia saatetaan tar-10 kistaa sen jälkeen kun kaksivuotinen varastointitutkimus on saatettu loppuun. Saatettaessa käyttömuotoon suosituksen mukaisesti on tuloksena vaaleankeltainen liuos, joka on huoneenlämpötilassa 15 (22°C) pysyvä vain yhden tunnin normaa lissa huonevalaistuksessa ja vain kahdeksan tuntia huoneenlämpötilassa (22°C) valolta suojattuna. Käyttömuotoon saatetut liuokset voivat muodostaa sakkaa 20 tunnin kuluessa jääkaappilämpötilassa (4-8°C).Stability: Undamaged bottles have a storage stability of one year when stored at refrigerator temperature (4-8 ° C). The stability recommendations may be revised after the completion of the two-year storage study. Reconstitution as recommended results in a pale yellow solution that is stable at room temperature 15 (22 ° C) for only one hour under normal room lighting and only eight hours at room temperature (22 ° C) protected from light. The reconstituted solutions may precipitate within 20 hours at refrigerator temperature (4-8 ° C).

Varoitus : Lyofilisoidut annostusmuodot eivät si sällä säilöntäaineita ja sen vuoksi neuvotaan hylkäämään liuokset kahdek-25 san tunnin kuluttua niiden saattamises ta käyttömuotoon.Warning: Lyophilized dosage forms do not contain preservatives and therefore it is advisable to discard the solutions eight to 25 hours after reconstitution.

Elokuu, 1974August, 1974

Clinical Drug Distribution Section Drug Development Branch 30Clinical Drug Distribution Section Drug Development Branch 30

Julkisessa GB-patenttihakemuksessa nro 2 021 946A kuvataan cisplatinin stabiileja vesiliuoksia, joiden cisplatin-pitoisuus on noin 0,1-1,0 mg/ml ja pH alueella 2,0-3,0. Liuokset voivat sisältää myös myrkytöntä, farmaseuttisesti hyväk-35 syttävää, epäorgaanista kloridi-ioneja muodostavaa ainetta kuten natriumkloridia ja lisäainetta kuten mannitolia.GB Publication No. 2,021,946A describes stable aqueous solutions of cisplatin having a cisplatin concentration of about 0.1-1.0 mg / ml and a pH in the range of 2.0-3.0. The solutions may also contain a non-toxic, pharmaceutically acceptable, inorganic chloride ion-forming agent such as sodium chloride and an additive such as mannitol.

Vaikkakin tällaisessa vesiväliaineessa voidaan saada 5 70670 aikaan huoneenlämpötilassa cisplatinin stabiileja liuoksia, joiden cisplatin-pitoisuus voi olla jopa noin 1 mg/ml, voi cisplatin kiteytyä kylmässä jos cisplatin-pitoisuus on olennaisesti yli 0,5 mg/ml. Tämän kiteytyneen cisplatinin uudel-5 leen liuottamista ei voida suorittaa helposti ravistelemalla huoneen lämpötilassa vaikkakin voidaan saada uudelleen liuos lämmittämällä 37°C:een. Koska lämpötiloja kuljetuksen aikana ja myynnin jälkeisen varastoinnin aikana ei voida valvoa ja koska cisplatinin kiteytyminen pulloissa aiheuttaisi 10 hankalia ongelmia sitä käyttävälle lääkärille, on cisplatinin maksimipitoisuus tällaisessa vesiväliaineessa käytännössä noin 0,5 mg/ml.Although stable solutions of cisplatin with a cisplatin concentration of up to about 1 mg / ml can be obtained in such an aqueous medium at room temperature, the cisplatin concentration can crystallize in the cold if the cisplatin concentration is substantially above 0.5 mg / ml. Redissolution of this crystallized cisplatin cannot be easily accomplished by shaking at room temperature, although the solution can be reconstituted by heating to 37 ° C. Because temperatures during transport and after-sales storage cannot be controlled, and because crystallization of cisplatin in bottles would cause 10 inconvenient problems for the physician using it, the maximum concentration of cisplatin in such an aqueous medium is in practice about 0.5 mg / ml.

Nyt on yllättäen havaittu, että keksinnön mukaisella menetelmällä, jolle on tunnusomaista, että liuottimeen liuo-15 tetaan cisplatinia 2,5-22 mg/ml, edullisesti 10-15 mg/ml, jolloin liuotin sisältää 31-90 % polyetyleeniglykolia, jonka keskimääräinen molekyylipaino on noin 150-9000, tai metoksi-polyetyleeniglykolia, jonka keskimääräinen molekyylipaino on noin 300-6000, tai näiden seosta, ja 69-10 % vettä sekä aina-20 kin yhtä myrkytöntä, farmaseuttisesti hyväksyttävää kloridi-ioneja luovuttavaa ainetta määrän, joka on vähintään noin ekvivalenttinen liuoksessa olevan cisplatin-määrän kanssa, saadaan stabiili väkevä cisplatin-liuos.It has now surprisingly been found that the process according to the invention, characterized in that cisplatin 2.5-22 mg / ml, preferably 10-15 mg / ml, is dissolved in the solvent, the solvent containing 31-90% of polyethylene glycol having an average molecular weight is about 150-9000, or methoxy polyethylene glycol having an average molecular weight of about 300-6000, or a mixture thereof, and 69-10% water and at least 20 non-toxic, pharmaceutically acceptable chloride ion donors in an amount of at least approximately equivalent to the amount of cisplatin in solution, a stable concentrated solution of cisplatin is obtained.

Tämä keksinnön mukaisella menetelmällä saatava 25 cisplatin-liuos voi sisältää jopa 22 mg cisplatinia millilit-rassa liuosta vaikkakin suositeltava maksimi on noin 15 mg/ml. Esillä olevan keksinnön mukaisesti saatavia cisplatin-liuok-sia, jotka ovat sisältäneet 15 mg cisplatinia/ml, on säilytetty 4°C:n lämpötilassa 12 kuukauden ajan cisplatinin kitey-30 tymättä. Tällaisia liuoksia on myös jäädytetty -60°C:ssa ja sen jälkeen sulatettu huoneen lämpötilassa eikä cisplatinin saostumista ole ilmennyt. Esillä olevan keksinnön mukaisesti valmistettujen liuosten cisplatin-pitoisuudet voivat siten käytännössä olla 30 kertaisia verrattuna aikaisemmin tunnetun 35 tekniikan mukaisesti valmistettujen vesiliuosten pitoisuuksiin.This cisplatin solution obtained by the process of the invention may contain up to 22 mg of cisplatin per ml of solution, although the recommended maximum is about 15 mg / ml. The cisplatin solutions of the present invention containing 15 mg cisplatin / ml have been stored at 4 ° C for 12 months without crystallization of cisplatin. Such solutions have also been frozen at -60 ° C and then thawed at room temperature and no precipitation of cisplatin has occurred. Thus, the cisplatin concentrations of the solutions prepared according to the present invention can be practically 30 times higher than the concentrations of the aqueous solutions prepared according to the prior art.

Lisäksi keksinnön mukaisella menetelmällä saatavien 6 70670 väkevien cisplatin-liuosten vaatimat kuljetus-, varastointeja muut kustannukset yksikköannosta kohti ovat alemmat kuin tunnetuilla vesiliuoksilla. Vaikkakin tunnetun lyofilisoidun kiinteän tuotteen kuljetus- ja varastointikustannukset myös 5 ovat alhaisemmat, ovat lyofilisointiin tarvittavat aika ja kustannukset jopa suuremmat kuin tämä säästö.In addition, the transport, storage and other costs per unit dose required for the 6,70670 concentrated cisplatin solutions obtained by the process of the invention are lower than with known aqueous solutions. Although the transport and storage costs of the known lyophilized solid product are also lower, the time and cost required for lyophilization are even greater than this saving.

Esillä olevan keksinnön edullisessa suoritusmuodossa liuotin sisältää 90 % polyetyleeniglykolia, jonka keskimääräinen molekyylimassa on noin 350-450, ja noin 10 % vettä.In a preferred embodiment of the present invention, the solvent contains 90% polyethylene glycol having an average molecular weight of about 350-450 and about 10% water.

10 Edullisesti liuos sisältää noin 5-20 mg cisplatinia/ml ja edullisimmin noin 10-15 mg/ml. Myrkytöntä, farmaseuttisesti hyväksyttävää kloridi-ioneja luovuttavaa ainetta on läsnä edullisesti ainakin noin kaksi ekvivalenttia liuoksessa olevaa cisplatin-ekvivalenttia kohti. Voidaan käyttää kloridi-15 ionipitoisuuksia, jotka ovat jopa 50 ekvivalenttia tai enemmänkin yhtä cisplatin-ekvivalenttia kohti riippuen cisplatin-pitoisuudesta, läsnä olevan veden prosentuaalisesta määrästä ja kulloinkin kysymyksessä olevasta kloridi-ionien luovutta-jareagenssista, mutta tavallisesti näin suuret kloridi-ioni-20 pitoisuudet eivät ole tarpeen eivätkä toivottuja. Alan ammattimiehet tulevat huomaamaan, että cisplatin-pitoisuuden ollessa suuri ja veden osuuden ollessa pieni olisi mahdotonta liuottaa kloridi-ioneja luovuttavaa ainetta kuten esim. natriumkloridia riittävä määrä 50 kloridi-ioniekvivalentin 25 saattamiseksi liuokseen yhtä cisplatin-ekvivalenttia kohti. Edelleen, epäorgaanisen kloridisuolan kyllästetty tai lähes kyllästetty liuos ei ole suositeltava, koska tällöin on mahdollista kiteytyminen kylmässä. Yllä esitetty tilanne, 50 ekvivalenttia kloridi-ioneja cisplatin-ekvivalenttia kohti, 30 voitaisiin saavuttaa käyttäen suolahappoa kloridi-ionilähtee-nä, mutta tällöin saataisiin liuos, jonka happamuus olisi toivottua suurempi, toisin sanoen pH toivottua alempi. On havaittu, että ylimäärin happamet liuokset ovat jonkin verran vähemmän stabiileja kuin kohtuullisemmin happamet liuokset.Preferably, the solution contains about 5-20 mg cisplatin / ml, and most preferably about 10-15 mg / ml. The non-toxic, pharmaceutically acceptable chloride ion donor is preferably present in at least about two equivalents per equivalent of cisplatin in solution. Chloride-15 ion concentrations of up to 50 equivalents or more per cisplatin equivalent can be used, depending on the cisplatin concentration, the percentage of water present and the chloride ion donor reagent in question, but usually such high chloride ion-20 concentrations. are neither necessary nor undesirable. It will be appreciated by those skilled in the art that at high cisplatin concentrations and low water content, it would be impossible to dissolve a chloride ion donor such as sodium chloride in an amount sufficient to bring 50 chloride ion equivalents per equivalent of cisplatin into solution. Further, a saturated or nearly saturated solution of the inorganic chloride salt is not recommended because crystallization in the cold is possible. The situation described above, 50 equivalents of chloride ions per equivalent of cisplatin, could be achieved by using hydrochloric acid as the chloride ion source, but this would give a solution with a higher acidity than desired, i.e. a lower pH than desired. It has been found that excessively acidic solutions are somewhat less stable than more moderately acidic solutions.

35 Liuosten pH on edullisesti noin 1,5-4,5. Katsotaan edulliseksi käyttää noin 2-10 ekvivalenttia kloridi-ioneja cisplatin-ekvivalenttia kohti ja edullisimmaksi noin 3-7 ekvivalenttia 1 70670 kloridi-ioneja cisplatin-ekvivalenttia kohti.The pH of the solutions is preferably about 1.5-4.5. It is preferred to use about 2-10 equivalents of chloride ions per equivalent of cisplatin, and most preferably about 3-7 equivalents of 1,70670 chloride ions per equivalent of cisplatin.

Kloridi-ioneja voidaan saattaa liuokseen lisäämällä suolahappoa, myrkytöntä farmaseuttisesti sopivaa metalli-halogenidia kuten natriumkloridia, kaliumkloridia, kalsium-5 kloridia tai magnesiumkloridia, tai myrkyttömän, farmaseuttisesti hyväksyttävän amiinin kuten trietyyliamiinin hydro-kloridisuolaa, tai näiden seoksia. Edullinen kloridi-ioneja muodostava reagenssi on suolahappo, natriumkloridi tai näiden seos.Chloride ions can be dissolved by the addition of hydrochloric acid, a non-toxic pharmaceutically acceptable metal halide such as sodium chloride, potassium chloride, calcium chloride or magnesium chloride, or a non-toxic pharmaceutically acceptable amine such as the hydrochloride salt of triethylamine, or mixtures thereof. The preferred chloride ion generating reagent is hydrochloric acid, sodium chloride or a mixture thereof.

10 Polyetyleeniglykoleilla ja metoksipolyetyleeni- glykoleilla on yleiset kaavatPolyethylene glycols and methoxy polyethylene glycols have general formulas

H (0CH„CHo) OH ja CH-, (0CHoCHo) OCHQH (OCHCHO) OH and CH-, (OCHCHO) OCHQ

z z n J 5 z l n 3 15 vastaavasti, ja niitä on saatavana kaupallisesti CARBOWAX-polyetyleeniglykoleina ja CARBOWAX-metoksipolyetyleeni-glykoleina. Pidetään parhaimpana käyttää CARBOWAX-polyetylee-niglykolien SENTRY-laatuja, jotka täyttävät ravinto- ja lääkeaineille asetetut U.S.P.-, N.F.- ja F.C.C.-laatuvaatimuk-20 set. Joukolle CARBOWAX-polyetyleeniglykoleja ja CARBOWAX- metoksipolyetyleeniglykoleja on annettu tyypilliset molekyy-limassa-alueet taulukoissa 1 ja 2.z z n J 5 z l n 3 15, respectively, and are commercially available as CARBOWAX polyethylene glycols and CARBOWAX methoxy polyethylene glycols. It is preferred to use SENTRY grades of CARBOWAX polyethylene niglycols that meet the U.S.P., N.F., and F.C.C. quality requirements for nutrients and drugs. Typical molecular weight ranges are given in Tables 1 and 2 for the set of CARBOWAX polyethylene glycols and CARBOWAX methoxy polyethylene glycols.

Taulukko 1 CARBOWAX Tyypillinen molekyylimassa- 25 Polyetyleeniglykoli alue 200 190 - 210 300 285 - 315 400 380 - 420 600 570 - 630 30 1000 950 - 1050 1540 1300 - 1600 4000 3000 - 3700 6000 7000 - 9000 8 70670Table 1 CARBOWAX Typical molecular weight- Polyethylene glycol range 200 190 - 210 300 285 - 315 400 380 - 420 600 570 - 630 30 1000 950 - 1050 1540 1300 - 1600 4000 3000 - 3700 6000 7000 - 9000 8 70670

Taulukko 2 CARBOWAX Tyypillinen molekyylimassa-Table 2 CARBOWAX Typical molecular weight

Metoksipolyetyleeniglykoli alue 350 335 - 365 5 550 525 - 575 750 715 - 785 2000 1815 - 2150Methoxy polyethylene glycol range 350 335 - 365 5 550 525 - 575 750 715 - 785 2000 1815 - 2150

Polyetyleeniglykolien tiedetään muodostavan komplek-10 seja joidenkin epäorgaanisten suolojen kanssa. Siten polyetyleeniglykolien reaktio ammoniumkobolttitiosyanaatin kanssa, jolloin muodostuu sininen kompleksi, on perusta kolori-metriselle menetelmälle polyetyleeniglykolien pitoisuuden määrittämiseksi erilaisissa seoksissa. Uskotaan, että 15 cisplatinin ainutlaatuinen pysyvyys esillä olevan keksinnön mukaisissa liuoksissa voi johtua cisplatinin ja polyetyleeni-glykolin välille muodostuneesta kompleksista, mutta tämä on vain teoria eikä ole keksinnön osa. Osoituksia kompleksin muodostumisesta on havaittu TLC-menetelmässä. Käytettäessä 20 alla kuvattua tekniikkaa muodostaa vesiliuoksessa oleva cisplatin täplän suunnilleen kohtaan Rf 0,65. Käytettäessä cisplatinin liuosta, jossa liuottimena on 90 % polyetyleeni-glykoli 400:aa ja 10 % 1^0 (tai 10 % 0,5-N HC1) saadaan kuitenkin täplä Rf-arvoon 0,3, josta johtaa juovia kohtaan noin 25 Rf 0,65. Laimentaminen huomattavilla vesimäärillä näyttää välittömästi rikkovan kompleksin, koska yllä mainitun PEG-I^O (tai HC1)-liuoksen laimentaminen viidellä tilavuusosalla vettä saa aikaan sen, että cisplatin-täplä on vain kohdassa Rf 0,65.Polyethylene glycols are known to form complexes with some inorganic salts. Thus, the reaction of polyethylene glycols with ammonium cobalt thiocyanate to form a blue complex is the basis of a colorimetric method for determining the content of polyethylene glycols in various blends. It is believed that the unique stability of cisplatin in the solutions of the present invention may be due to the complex formed between cisplatin and polyethylene glycol, but this is only a theory and does not form part of the invention. Indications of complex formation have been observed by TLC. Using the technique described below, a spot of cisplatin in aqueous solution forms a spot at approximately Rf 0.65. However, using a solution of cisplatin in which the solvent is 90% polyethylene glycol 400 and 10% 1 O 0 (or 10% 0.5 N HCl) gives a spot with an Rf of 0.3, resulting in streaks at about 25 Rf 0 65. Dilution with substantial amounts of water appears to immediately disrupt the complex, as diluting the above PEG-I 2 O (or HCl) solution with five volumes of water results in a cisplatin spot only at Rf 0.65.

30 Ohutkerroskromatografia (TLC)30 Thin layer chromatography (TLC)

Laitteet ja reaqenssit (a) TLC-levyt - EM Laboratories silica gel 60-levyt, luettelo nro 5763, tai vastaavat.Apparatus and Reagents (a) TLC Plates - EM Laboratories silica gel 60 plates, Catalog No. 5763, or equivalent.

(b) Eluentti - asetoni/1 N HNO^ (9:1). Valmistetaan päi- 35 vittäin.(b) Eluent - acetone / 1 N HNO 2 (9: 1). Prepared daily.

(c) Kehite - Liuotetaan 5,6 g stannokloridia 10 mitään väkevää HC1. Lisätään 90 ml tislattua vettä ja 0,2 g 9 70670 KI. Sekoitetaan hyvin. Valmistetaan päivittäin.(c) Development - Dissolve 5.6 g of stannous chloride 10 in any concentrated HCl. Add 90 ml of distilled water and 0.2 g of 9,70670 KI. Mix well. Prepared daily.

(d) Laboratoriolämpökaappi asetettuna 100°C:een.(d) Laboratory oven set at 100 ° C.

Menetelmä (a) Näyte laimennetaan viisinkertaisella tilavuudella 5 dimetyyliformamidia (DMF) £Burdick and Jackson, tis lattu lasiastiassa.7.Method (a) Dilute the sample five times with 5 volumes of dimethylformamide (DMF) in a Burdick and Jackson distilled glass vessel.7.

(b) TLC-levylle viedään 5 mikrolitran näytetäplät ja 5 mikrolitran täplät standardiliuosta, joka sisältää cisplatinia (ja transplatinaa ja platina B:tä mikäli 10 se katsotaan tarpeelliseksi) pitoisuutena, joka on suunnilleen sama kuin analysoitavan näytteen pitoisuuden oletetaan olevan. Kehitetään 10 cm:n korkeuteen TLC-säiliössä, joka on etukäteen tasapainotettu eluen-tilla. Kuivatut levyt kehitetään juurivalmistetulla 15 kehiteliuoksella ja pannaan lämpökaappiin 100°C:een 10 minuutiksi. Havaitaan keltaiset/purppuranpunaiset vyöhykkeet.(b) Place 5 microlitre sample spots and 5 microliter spots of standard solution containing cisplatin (and transplatinum and platinum B if considered necessary) on a TLC plate at a concentration approximately equal to that assumed to be the concentration of the sample to be analyzed. Develop to a height of 10 cm in a TLC tank pre-equilibrated with eluent. The dried plates are developed with the freshly prepared developer solution and placed in an oven at 100 ° C for 10 minutes. Yellow / purple zones are observed.

(c) Likimääräiset Rf-arvot: 0,65 - cisplatin 20 0,76 - transplatina 0,9 - platina B.(c) Approximate Rf values: 0.65 - cisplatin 20 0.76 - transplatin 0.9 - platinum B.

Tämän keksinnön mukaisten liuosten HPLC-kokeet cisplatin-pitoisuuden määrittämiseksi voidaan suorittaa niiden menetelmien mukaisesti, jotka on kuvattu kollegojemme 25 tekemässä julkisessa GB-patenttihakemuksessa nro 2 021 946A. Edullinen liikkuva faasi on etyyliasetaatti/metanoli/dimetyy-liformamidi/tislattu vesi (25/16/5/5). Vertailunäytteenä on edullisesti dimetyyliformamidiin liuotettu cisplatin, pitoisuutena 1 mg/ml. Analysoitavat näytteet laimennetaan dimetyy-30 liformamidilla cisplatinin likimääräiseen pitoisuuteen 1 mg/ml.HPLC experiments to determine the cisplatin content of the solutions of this invention can be performed according to the methods described in GB Public Application No. 2,021,946A to our colleagues. The preferred mobile phase is ethyl acetate / methanol / dimethylformamide / distilled water (25/16/5/5). The reference sample is preferably cisplatin dissolved in dimethylformamide at a concentration of 1 mg / ml. The samples to be analyzed are diluted with dimethyl-30-lformamide to an approximate concentration of cisplatin of 1 mg / ml.

Tämän keksinnön mukaiset liuokset voivat haluttaessa sisältää tavanomaisia, fysiologisesti hyväksyttäviä lisäaineita kuten esim. mannitolia, vaikkakaan niiden läsnäolosta ei ole havaittu olevan erityistä etua.The solutions of this invention may, if desired, contain conventional, physiologically acceptable additives such as, for example, mannitol, although their presence has not been found to be of particular benefit.

35 Tähän mennessä suoritettujen stabiilisuuskokeiden pe rusteella on tämän keksinnön mukaisten liuosten ennakoitu stabiilisuus (määriteltynä tehon vähenemisenä 10 %:lla) yli 10 70670 kaksi vuotta huoneenlämmössä.Based on the stability tests performed so far, the solutions of this invention have a predicted stability (defined as a 10% reduction in potency) of more than 10,70670 for two years at room temperature.

Tämän keksinnön edullisen suoritusmuodon mukaan liuokset ovat steriilejä ja pyrogeenittomia ja ne on pakattu ste-riileihin, pyrogeenittomiin säiliöihin. Tällaiset liuokset 5 voidaan sitten laimentaa esimerkiksi ruiskeisiin tarkoitetulla steriilillä vedellä (Sterile Water for Injection, U.S.P.) tai steriilillä normaalisuolaliuoksella (Sterile Normal Saline Solution U.S.P.) ja antaa lihakseen tai laskimonsisäisesti. Näiden liuosten sterilointikeinot ovat hyvin tunnettuja alal-10 la. Pidetään edullisena liuosten suodattamista steriilin, pyrogeenittoman 0,22 mikronin Millipore-suotimen läpi aseptista tekniikkaa noudattaen steriilissä typpikehässä.According to a preferred embodiment of the present invention, the solutions are sterile and pyrogen-free and are packaged in sterile, pyrogen-free containers. Such solutions may then be diluted, for example, with sterile water for injections (Sterile Water for Injection, U.S.P.) or sterile Normal Saline Solution (U.S.P.) and administered intramuscularly or intravenously. Means for sterilizing these solutions are well known in the art. It is preferred to filter the solutions through a sterile, pyrogen-free 0.22 micron Millipore filter using aseptic technique in a sterile nitrogen atmosphere.

Millipore on Millipore Corporation-yhtymän rekisteröity tavaramerkki membraanisuotimille. Steriili suodos otetaan sterii-15 leihin, pyrogeenittomiin säiliöihin ja sillä täytetään lopuksi, haluttuja määriä käyttäen, sopivat steriilit pyrogeenit-tomat lääkepullot, jotka suljetaan steriileillä, pyrogeenit-tomilla tulpilla, (edullisesti teflon-pinnoitteisilla) ja peitetään alumiinikansin.Millipore is a registered trademark of the Millipore Corporation for membrane filters. The sterile filtrate is taken up in sterile vials, pyrogen-free containers and finally filled, using the desired amounts, into suitable sterile pyrogen-free vials which are closed with sterile, pyrogen-free stoppers (preferably Teflon-coated) and covered with aluminum caps.

20 Käytettäessä väkeviä liuoksia syövän hoitoon ne lai mennetaan haluttuun pitoisuuteen (tyypillisesti 1 mg cisplatinia ml:ssa) esimerkiksi ruiskeisiin tarkoitetulla steriilillä vedellä (U.S.P.), steriilillä normaalisuolaliuoksella (U.S.P.) tai steriilillä glukoosiliuoksella (Sterile 25 Glucose Solution) ja käytetään injektioina lihakseen tai laskimoon, tai intravenöösinä infuusiona, jotka ovat ennestään tunnettuja cisplatin-valmisteiden käyttötapoja alalla. Yleisesti käytetyt annokset, joiden hyväksyttävä myrkyllisyys on 2 lievästä kohtuulliseen, ovat alueella 60-100 mg/M intravenöö- 30 sisti joko kerta-annoksena tai jaettuna 3-5 vuorokauden ajal- 2 le ja ne toistetaan 4 viikon välein. Annos 60 mg/M vastaa karkeasti ottaen annostusta 1,5 mg/kg, joka puolestaan vastaa karkeasti määrää 105 mg potilaalle, joka painaa 70 kg. Joskus käytetään samanaikaisesti hoitoa muilla kemoterapeut-35 tisilla aineilla parhaiden tulosten saavuttamiseksi.When concentrated solutions are used to treat cancer, they are diluted to the desired concentration (typically 1 mg cisplatin per ml) with, for example, sterile water for injections (USP), sterile normal saline (USP) or sterile glucose solution (Sterile 25 Glucose Solution) and used as an injection. or by intravenous infusion, which are previously known uses of cisplatin preparations in the art. Commonly used doses with an acceptable toxicity of 2 mild to moderate are in the range of 60-100 mg / M intravenously, either as a single dose or divided over 3-5 days 2 and repeated every 4 weeks. A dose of 60 mg / M roughly corresponds to a dose of 1.5 mg / kg, which in turn roughly corresponds to 105 mg for a patient weighing 70 kg. Sometimes treatment with other chemotherapeutic agents is used concomitantly for best results.

Tässä ja patenttivaatimuksissa käytetyillä sanonnoil- 11 70670 la "ekvivalentteja" kloridi-ionia "ekvivalenttia" kohti cisplatinia tarkoitetaan mooliekvivalentteja. Siten esimerkiksi käytettäessä suositeltavia määriä noin 3-7 ekvivalenttia kloridi-ioneja yhtä cisplatin-ekvivalenttia kohti 5 käytettäisiin noin 3-7 moolia NaCl:ää yhtä cisplatin-moolia kohti mutta noin 1,5-3,5 moolia CaC^Jta cisplatin-moolia kohti, jne.As used herein and in the claims, the terms "equivalents" of chloride ion per "equivalent" of cisplatin refer to molar equivalents. Thus, for example, using the recommended amounts of about 3-7 equivalents of chloride ions per equivalent of cisplatin would use about 3-7 moles of NaCl per mole of cisplatin but about 1.5-3.5 moles of CaCl 2 per mole of cisplatin , and so on.

Platina B on mielivaltaisesti valittu ilmaisu, jota käytetään tässä tarkoitettaessa cisplatinin hapanta reak-10 tiotuotetta, joka on puolet tunnetusta Magnus red-komplek-sista ja jonka rakenteen on oletettu olevan seuraavanlainen : s4n © cfl Cl © 15 \\Platinum B is an arbitrarily chosen term used herein to refer to the acidic reaction product of cisplatin, which is half of the known Magnus red complex and is assumed to have the following structure: s4n © cfl Cl © 15 \\

Pt Ν^Ν\ι 20 Tätä keksintöä valaistaan seuraavilla esimerkeillä.Pt Ν ^ Ν \ ι 20 The present invention is illustrated by the following examples.

Esimerkki 1Example 1

Stabiili väkevä cisplatinliuos (10 mq/ml), liuottimena 25 90 % polyetyleeniqlykoli 400 - 10 % 1 N HC1Stable concentrated cisplatin solution (10 mq / ml), solvent 90% polyethylene glycol 400 - 10% 1 N HCl

Cisplatin (500 mg) lietettiin liuokseen, jonka muodostivat 5 ml 1 N HC1 ja 45 polyetyleeniglykoli 400:aa.Cisplatin (500 mg) was slurried in a solution of 5 mL of 1 N HCl and 45 polyethylene glycol 400.

Kun oli sekoitettu 2,5 vuorokauden ajan huoneenlämmössä (astian ollessa suojattu valolta alumiinifoliolla), saatiin 30 kirkas keltainen liuos. Liuos jaettiin eriin, jotka pantiin kullanruskeisiin lääkepulloihin, suljettiin teflon-pinnoit-teisilla tulpilla ja tiivistettiin alumiinikansin ja käytettiin varastointistabiilisuuskokeissa eri lämpötiloissa.After stirring for 2.5 days at room temperature (with the vessel protected from light with aluminum foil), a clear yellow solution was obtained. The solution was aliquoted into amber vials, sealed with Teflon-coated stoppers, and sealed with aluminum caps and used in storage stability experiments at various temperatures.

Kahden viikon varastoinnin jälkeen 45°C:ssa ohutkerroskro-35 matografia (TLC) osoitti jälkiä transplatinasta ja noin 1 % platina B:tä. Kaksiviikkoisen varastoinnin jälkeen 56°C:ssa TLC osoitti näytteessä olevan < 1 % transplatinaa 12 70670 ja noin 3 % platina B:tä. Näytteet, joita oli varastoitu kaksi viikkoa 56°C:ssa laimennettiin 4-, 9- ja 19-kertai-silla tilavuusmäärillä vettä, jolloin saatiin kirkkaat liuokset, jotka sisälsivät cisplatinia 2, 1 ja 0,5 mg/ml 5 vastaavasti. Heikko samennus muodostui kuhunkin laimennettuun näytteeseen, kun niitä oli pidetty noin 13 tuntia huoneenlämpötilassa.After two weeks of storage at 45 ° C, thin layer chromatography (TLC) showed traces of transplatinum and about 1% platinum B. After two weeks of storage at 56 ° C, TLC showed <1% transplatinum 12 70670 and about 3% platinum B in the sample. Samples stored for two weeks at 56 ° C were diluted with 4-, 9-, and 19-fold volumes of water to give clear solutions containing cisplatin 2, 1, and 0.5 mg / ml, respectively. Slight turbidity formed in each diluted sample after about 13 hours at room temperature.

Esimerkki 2Example 2

Stabiili, väkevä cisplatin-lluos (10 mg/ml), liuot-10 timena 90 %, polyetyleeniglykoli 400 - 10 % 0,5 N HC1 5 ml puhdistettua vettä (U.S.P.) ja 5,0 ml IN HC1 sekoitettiin ja liuokseen lisättiin 90,0 ml polyetyleeniglykoli 300:aa. Saatuun liuokseen lisättiin 500 mg cisplatinia, seos suojattiin valolta alumiinifoliolla ja se-15 koitettiin huoneen lämpötilassa 24 tunnin ajan, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLC osoitti ainoastaan cisplatin-vyöhykkeen ja mahdollisesti jälkiä transplatinasta. 2 ml:n erät liuosta pantiin kullanruskeisiin 17 ml:n lääkepulloihin, suljettiin teflon-pinnoittei-20 silla tulpilla, peitettiin alumiinikansilla ja niille tehtiin varastointistabiilisuuskokeet eri lämpötiloissa. Yksi näytepullo jäädytettiin kuivassa jää-asetonihauteessa tunnin ajan, minkä jälkeen sen annettiin lämmetä huoneen lämpötilaan. Saatiin kirkas liuos, jossa ei ollut jälkiä 25 saostumasta. Kun näytteitä oli varastoitu kolme kuukautta 37°C:ssa ja 45°C:ssa, TLC osoitti näytteissä olevan 1-2 % platina B:tä ja mahdollisia jälkiä transplatinasta. Kun näytteitä oli varastoitu kuukauden ajan 56°C:ssa, osoitti TLC platina B:tä olevan yli 5 % mutta vähemmän kuin 10 % 30 ja jälkiä transplatinasta. Näytteet, joita oli säilytetty 37°C:ssa ja 45°C:ssa kolme kuukautta ja 56°C:ssa kuukausi, laimennettiin nelinkertaisella tilavuusmäärällä puhdistettua vettä (U.S.P.), jolloin saatiin kirkkaat liuokset, jotka sisälsivät cisplatinia 2 mg/ml. Laimennetut liuokset säi-35 lyivät kirkkaina 24 tuntia kestäneen säilytyksen aikana 13 70670 huoneenlämpötilassa.Stable, concentrated cisplatin solution (10 mg / ml), solvent 90%, polyethylene glycol 400-10% 0.5 N HCl 5 ml of purified water (USP) and 5.0 ml of 1N HCl were mixed and 90 ml of 1N HCl was added to the solution. 0 ml of polyethylene glycol 300. To the resulting solution was added 500 mg of cisplatin, the mixture was protected from light with aluminum foil, and stirred at room temperature for 24 hours to give a clear solution. TLC of the freshly prepared solution showed only the cisplatin band and possibly traces of transplatin. 2 ml aliquots of the solution were placed in golden brown 17 ml vials, sealed with Teflon-coated stoppers, covered with aluminum lids and subjected to storage stability tests at different temperatures. One sample bottle was frozen in a dry ice-acetone bath for 1 hour, then allowed to warm to room temperature. A clear solution was obtained with no traces of precipitation. After three months of storage at 37 ° C and 45 ° C, TLC showed 1-2% platinum B and possible traces of transplatinum in the samples. After storage of the samples for one month at 56 ° C, TLC showed platinum B to be greater than 5% but less than 10% and traces of transplatinum. Samples stored at 37 ° C and 45 ° C for three months and 56 ° C for one month were diluted with four volumes of purified water (U.S.P.) to give clear solutions containing cisplatin 2 mg / ml. The diluted solutions remained clear during storage for 24 hours at 13,70670 room temperature.

Esimerkki 3Example 3

Stabiili, väkevä cisplatinin (10 mg/ml) ja CaCl2:n (20 mg/ml) liuos, liuottimena 90 % polyetyleeniglykoli 5 400:aa - 10 % 0,5 N HC1 2 g "reagent grade" vedetöntä CaCljia liuotettiin seokseen, jossa oli 5 ml puhdistettua vettä (U.S.P.) ja 5 ml LN HC1. Polyetyleeniglykoli 400:aa (89 ml) lisättiin niin, että tilavuudeksi tuli 100 ml. 50 ml:aan tätä liuos-10 ta lisättiin 550 mg cisplatinia, seos suojattiin valolta alumiinifoliolla ja sekoitettiin huoneen lämpötilassa 24 tunnin ajan, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLC:ssa oli ainoastaan cisplatin-vyöhyke ja mahdollisesti jälkiä transplatinasta. 2 ml:n erät liuosta 15 pantiin 17 ml:n kullanruskeisiin lääkepulloihin, suljettiin teflon-pinnoitteisin tulpin, peitettiin alumiinikansilla ja niille tehtiin varastointistabiilisuuskokeet eri lämpötiloissa. Yksi näytepullo pantiin kuivaan jää-asetonihau-teeseen 0,5 tunniksi ja näyte jäätyi kirkkaaksi geeliksi.Stable, concentrated solution of cisplatin (10 mg / ml) and CaCl 2 (20 mg / ml), solvent 90% polyethylene glycol 5,400 - 10% 0.5 N HCl 2 g of "reagent grade" anhydrous CaCl 2 was dissolved in a mixture of was 5 mL of purified water (USP) and 5 mL of LN HCl. Polyethylene glycol 400 (89 ml) was added to a volume of 100 ml. To 50 ml of this solution was added 550 mg of cisplatin, the mixture was protected from light with aluminum foil and stirred at room temperature for 24 hours to give a clear solution. TLC of the freshly prepared solution showed only a cisplatin band and possibly traces of transplatin. 2 ml aliquots of solution 15 were placed in 17 ml amber vials, sealed with Teflon-coated stoppers, covered with aluminum lids and subjected to storage stability tests at different temperatures. One sample bottle was placed in a dry ice-acetone bath for 0.5 hours and the sample froze to a clear gel.

20 Sen annettiin sitten lämmetä huoneen lämpötilaan ja saatiin kirkas liuos. Kolmikuukautisen varastoinnin jälkeen 37°C:ssa TLC osoitti, että läsnä oli 1-2 % platina B:tä ja mahdollisia jälkiä transplatinasta. Kolmikuukautisen varastoinnin jälkeen 45°C:ssa TLC osoitti läsnä olevan noin 25 5 % platina B:tä ja mahdollisia jälkiä transplatinasta.It was then allowed to warm to room temperature to give a clear solution. After three months of storage at 37 ° C, TLC showed the presence of 1-2% platinum B and possible traces of transplatinum. After three months of storage at 45 ° C, TLC showed the presence of about 25% platinum B and possible traces of transplatinum.

Kun oli varastoitu kuukauden ajan 56°C:ssa osoitti TLC, että näytteessä oli 8-10 % platina B:tä ja jälkiä transplatinasta. Näytteet, joita oli säilytetty 37°C:ssa ja 45°C:ssa kolme kuukautta ja 56°C:ssa kuukausi, laimennet-30 tiin nelinkertaisella tilavuusmäärällä puhdistettua vettä (U.S.P.), jolloin saatiin kirkkaat liuokset, jotka sisälsivät cisplatinia 2 mg/ml. Laimennetut liuokset säilyivät kirkkaina 24 tuntia kestäneen säilytyksen aikana huoneen lämpötilassa.After storage for one month at 56 ° C, TLC showed that the sample contained 8-10% platinum B and traces of transplatinum. Samples stored at 37 ° C and 45 ° C for three months and at 56 ° C for one month were diluted with 4 volumes of purified water (USP) to give clear solutions containing cisplatin 2 mg / ml. . The diluted solutions remained clear during storage for 24 hours at room temperature.

14 7067014 70670

Esimerkki 4Example 4

Stabiili, väkevä cisplatinin (noin 22 mg/ml) ja CaC^in (25 mg/ml) liuos, liuottimena 90 % polyetyleeni- glykolia - 10 % 0,5 N HC1 5 3 ml:aan liuosta, jossa oli 90 % polyetyleenigly- koli 400:aa ja 10 % 0,5 N HC1 lisättiin 45 mg cisplatinia ja seosta sekoitettiin noin tunnin ajan huoneen lämpötilassa, jolloin saatiin kirkas liuos. Lisättiin vielä 30 mg cisplatinia (kaikkiaan 25 mg/ml) ja seosta sekoitet-10 tiin noin 45°C:ssa tunnin ajan ja sitten huoneen lämmössä 18 tuntia, jolloin tapahtui melkein täydellinen liukeneminen. Vähäinen määrä liukenematonta ainesta poistettiin suodattamalla. Suodoksen TLC:ssa oli ainoastaan cisplatin-vyöhyke ja mahdollisesti jälkiä transplatinasta. Jäljelle 15 jäänyt suodos pantiin 17 ml:n lääkepulloon, suljettiin teflon-pinnoitteisella tulpalla, peitettiin alumiinikannella ja pidettiin 45°C:ssa kolme kuukautta. Kun näytettä oli pidetty kolme kuukautta 45°C:ssa osoitti TLC, että näytteessä oli 1-2 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa.Stable, concentrated solution of cisplatin (approximately 22 mg / ml) and CaCl 2 (25 mg / ml), solvent 90% polyethylene glycol - 10% 0.5 N HCl 5 in 3 ml solution containing 90% polyethylene glycol coli 400 and 10% 0.5 N HCl were added 45 mg of cisplatin and the mixture was stirred for about an hour at room temperature to give a clear solution. An additional 30 mg of cisplatin (25 mg / ml in total) was added and the mixture was stirred at about 45 ° C for 1 hour and then at room temperature for 18 hours with almost complete dissolution. A small amount of insoluble matter was removed by filtration. The TLC of the filtrate showed only a cisplatin band and possibly traces of transplatin. The remaining filtrate was placed in a 17 ml vial, closed with a Teflon-coated stopper, covered with an aluminum cap and kept at 45 ° C for three months. After three months at 45 ° C, TLC showed that the sample contained 1-2% platinum B and no transplatinum.

20 Laimennettaessa säilytetty liuos puhdistetulla vedellä (U.S.P.) cisplatin-pitoisuuteen 2mg/ml saatiin kirkas liuos, joka säilyi kirkkaana oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia.Dilution of the stored solution with purified water (U.S.P.) to a cisplatin concentration of 2 mg / ml gave a clear solution which remained clear after standing at room temperature for 24 hours.

Esimerkki 5 25 Stabiili, väkevä cisplatinin (12 mg/ml) ja NaCl:n (10 mg/ml) liuos liuottimena 90 % polyetyleeniglykoli 400:aa ja 10 % 0,5 N HClExample 5 Stable, concentrated solution of cisplatin (12 mg / ml) and NaCl (10 mg / ml) as solvent in 90% polyethylene glycol 400 and 10% 0.5 N HCl

Natriumkloridi (100 mg) liuotettiin liuokseen, jossa oli 5 ml puhdistettua vettä (U.S.P.) ja 5 ml 1 N HCl.Sodium chloride (100 mg) was dissolved in a solution of 5 mL of purified water (U.S.P.) and 5 mL of 1 N HCl.

30 Tähän liuokseen lisättiin 90 ml polyetyleeniglykoli 400:aa ja seosta sekoitettiin 15 minuuttia. 50 ml:aan näin saatua liuosta lisättiin 500 mg cisplatinia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa pimeässä 3 vuorokautta, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen 35 TLC:ssa oli ainoastaan cisplatin-täplä. Juuri valmistetulle 70670 liuokselle suoritettu tehokkaasti erottava nestekromatog-rafia (high performance liguid chromatography, HPLC)-koe osoitti sen sisältävän 12 mg cisplatinia millilitrassa. Näyte-erät suljettiin 17 ml:n kullanruskeisiin pulloihin 5 kuten esimerkissä 3 on kuvattu ja niille tehtiin varastoin-tistabiilisuuskokeet eri lämpötiloissa. Kun näytettä oli säilytetty kolme kuukautta 37°C:ssa, osoitti TLC että siinä oli platina B:tä alle 1 % eikä lainkaan transplatinaa. Kun näytettä oli säilytetty kuukauden ajan 56°C:ssa, TLC 10 osoitti että siinä oli 1-2 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa. Laimennettaessa varastoidut näytteet puhdistetulla vedellä (U.S.P:) cisplatinin-pitoisuuteen 2 mg/ml saatiin kirkkaat liuokset, jotka säilyivät kirkkaina oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia.To this solution was added 90 ml of polyethylene glycol 400, and the mixture was stirred for 15 minutes. To 50 ml of the solution thus obtained was added 500 mg of cisplatin, and the mixture was stirred at room temperature in the dark for 3 days to give a clear solution. TLC of the freshly prepared solution 35 had only a cisplatin spot. High performance liguid chromatography (HPLC) of the freshly prepared 70670 solution showed it to contain 12 mg of cisplatin per milliliter. Sample aliquots were sealed in 17 ml amber bottles 5 as described in Example 3 and subjected to storage stability tests at various temperatures. After three months of storage at 37 ° C, TLC showed less than 1% platinum B and no transplatinum. After storage of the sample for one month at 56 ° C, TLC 10 showed that it contained 1-2% platinum B and no transplatinum. Dilution of stored samples with purified water (U.S.P.) to a cisplatin concentration of 2 mg / ml gave clear solutions which remained clear after standing at room temperature for 24 hours.

15 3 kuukautta 45°C:ssa, 6 kuukautta 37°C:ssa ja 8 kuukautta huoneenlämpötilassa varastoiduille näytteille suoritetut HPLC-kokeet osoittivat vastaaviksi tehohäviöiksi 6,6 %, 6,1 % ja 2,3 %.HPLC experiments performed on samples stored for 3 months at 45 ° C, 6 months at 37 ° C and 8 months at room temperature showed corresponding power losses of 6.6%, 6.1% and 2.3%.

Esimerkki 6 20 Stabiili, väkevä cisplatinin (11,4 mg/ml) ja NaCl:n liuos, liuottimena 90 % polyetyleeniglykoli 400:aa -_ 10 % vettäExample 6 Stable, concentrated solution of cisplatin (11.4 mg / ml) and NaCl, 90% polyethylene glycol as solvent, 400% water

Liuokseen, jossa oli 50 mg NaCl, 5 ml puhdistettua vettä (U.S.P.) ja 45 ml polyetyleeniglykoli 400:aa lisät-25 tiin 500 mg cisplatinia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa pimeässä 6 tuntia, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLC:ssa oli ainaostaan cisplatin-täplä; HPLC osoitti sen sisältävän 11,4 mg cisplatinia ml:ssa. Näyte-erät suljettiin 17 ml:n kullan-30 ruskeisiin pulloihin kuten on kuvattu esimerkissä 3 ja niille tehtiin varastointistabiilisuuskokeet eri lämpötiloissa.To a solution of 50 mg NaCl, 5 mL purified water (U.S.P.), and 45 mL polyethylene glycol 400 was added 500 mg cisplatin and the mixture was stirred at room temperature in the dark for 6 hours to give a clear solution. TLC of the freshly prepared solution showed only a cisplatin spot; HPLC showed it to contain 11.4 mg cisplatin per ml. Sample aliquots were sealed in 17 ml gold-30 brown flasks as described in Example 3 and subjected to storage stability tests at various temperatures.

-Kun näytteitä oli säilytetty 37°C:ssa ja 45°C:ssa 3 kuukautta, TLC osoitti, että niissä oli 1 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa. Kun näytettä oli säilytetty 56°C:ssa 35 yksi kuukausi, osoitti TLC että siinä oli 2-3 % platina B:tä 1« 70670 eikä lainkaan transplatinaa. Laimennettaessa varastoidut näytteet puhdistetulla vedellä (U.S.P.) cisplatin-pitoi-suuteen 2 mg/ml saatiin kirkkaat liuokset, jotka säilyivät kirkkaina oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia.-After samples were stored at 37 ° C and 45 ° C for 3 months, TLC showed that they contained 1% platinum B and no transplatinum. After storage of the sample at 56 ° C for 35 months, TLC showed that it contained 2-3% platinum B 1 70670 and no transplatinum. Dilution of stored samples with purified water (U.S.P.) to a cisplatin concentration of 2 mg / ml gave clear solutions which remained clear after standing at room temperature for 24 hours.

5 3 kuukautta 45°C:ssa, 6 kuukautta 37°C:ssa ja 7 kuu kautta huoneenlämpötilassa säilytettyjen näytteiden HPLC-kokeet osoittivat vastaaviksi tehohäviöiksi 6,1 %, 7,0 % ja 0,9 %.HPLC experiments of samples stored for 3 months at 45 ° C, 6 months at 37 ° C and 7 months at room temperature showed corresponding power losses of 6.1%, 7.0% and 0.9%.

Esimerkki 7 10 Stabiili, väkevä cisplatin-liuos (10 mg/ml) liuotti mena 90 % polyetyleeniglykoli 600:aa - 10 % 0,5N HC1 Liuokseen, jossa oli 2,5 ml puhdistettua vettä (U.S.P), 2,5 ml IN HC1 ja 45 ml polyetyleeniglykoli 600:aa, lisättiin 500 mg cisplatinia ja seosta sekoitettiin huoneen 15 lämpötilassa pimeässä 5 tuntia, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLCrssa oli ainoastaan cisplatin-täplä. Näytteet juuri valmistetusta liuoksesta laimennettiin 1-, 2-, 3-, 4-, 5- ja 9-kertaisilla tilavuus-määrillä puhdistettua vettä (U.S.P); näissä laimennetuissa 20 liuoksissa ei ilmennyt merkkejä kiteytymisestä kun niitä oli säilytetty 16 tuntia huoneenlämpötilassa tai 4°C:ssa. Näyte-erät juuri valmistetusta liuoksesta suljettiin 17 ml:n kullanruskeisiin lääkepulloihin kuten on esitetty esimerkissä 3 ja niille tehtiin varastointistabiilisuuskokeet eri 25 lämpötiloissa. Kun näytteitä oli säilytetty 37°C:ssa ja 45°C:ssa kolme kuukautta, osoitti TLC että niissä oli 1 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa. Kuukauden pituisen varastoinnin jälkeen 56°C:ssa osoitti TLC platina B:tä olevan 3,4 % eikä lainkaan transplatinaa. Laimennettaessa 30 varastoidut näytteet puhdistetulla vedellä (U.S.P) cisplatin-pitoisuuteen 2 mg/ml saatiin kirkkaat liuokset, jotka säiluivät kirkkaina oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia.Example 7 A stable, concentrated solution of cisplatin (10 mg / ml) dissolved 90% polyethylene glycol 600 - 10% 0.5N HCl in a solution of 2.5 ml purified water (USP), 2.5 ml 1N HCl. and 45 ml of polyethylene glycol 600, 500 mg of cisplatin was added and the mixture was stirred at room temperature in the dark for 5 hours to give a clear solution. The TLC of the freshly prepared solution contained only a cisplatin spot. Samples of the freshly prepared solution were diluted 1, 2, 3, 4, 5, and 9 volumes with purified water (U.S.P.); these diluted 20 solutions showed no evidence of crystallization after storage for 16 hours at room temperature or 4 ° C. Aliquots of the freshly prepared solution were sealed in 17 ml amber vials as shown in Example 3 and subjected to storage stability tests at various temperatures. After storage of the samples at 37 ° C and 45 ° C for three months, TLC showed that they contained 1% platinum B and no transplatinum. After one month of storage at 56 ° C, TLC showed platinum B to be 3.4% and no transplatinum at all. Dilution of 30 stored samples with purified water (U.S.P) to a cisplatin concentration of 2 mg / ml gave clear solutions that remained clear after standing at room temperature for 24 hours.

17 7067017 70670

Esimerkki 8Example 8

Stabiili/ väkevä cisplatinin (10 mg/ml) ja NaCltn (10 mg/ml) liuos liuottimena 90 % polyetyleeniglykoli 400:aa - 10 % 0,2 N HC1 5 Liuokseen, jossa oli 0,5 g NaCl, 4 ml puhdistettua vettä (U.S.P.), 1 ml 1 N HC1 ja 45 ml polyetyleeniglykoli 400:aa, lisättiin 250 mg cisplatinia ja seosta sekoitettiin huoneen lämpötilassa pimeässä 4 tuntia, jolloin saatiin kirkas keltainen liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLC:ssa 10 oli ainoastaan cisplatin-täplä. Laimennettaessa juuri valmistettu liuos 1-, 2-, 3-, 4-, 5- ja 9-kertaisilla tilavuusmäärillä puhdistettua vettä saatiin kirkkaat liuokset, jotka säiluivät kirkkaina oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia. 1-, 2-, 3-, 4- ja 5-kertaisissa laimennoksissa 15 ei ilmennyt kiteytymistä, kun niitä pidettiin 4°C:ssa 24 tuntia. Näyte-erät juuri valmistetusta liuoksesta suljettiin 17 ml:n kullanruskeisiin lääkepulloihin kuten on kuvattu esimerkissä 3 ja niille tehtiin varastointistabiili-suuskokeet eri lämpötiloissa. Kolmikuukautisen varastoinnin 20 jälkeen 37°C:ssa TLC osoitti, että näytteessä oli 1 % platina B:tä ja mahdollisesti jälkiä transplatinasta. Kolmikuukautisen varastoinnin jälkeen 45°C:ssa TLC osoitti, että näytteessä oli 5 % platina B:tä ja mahdollisesti jälkiä transplatinasta. Kuukauden ajan 56°C:ssa säilytetyn 25 näytteen TLC osoitti, että läsnä oli 2-3 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa. Laimennettaessa varastoidut näytteet puhdistetulla vedellä (U.S.P.) cisplatin-pitoisuu-teen 2 mg/ml saatiin kirkkaat liuokset, jotka säilyivät kirkkaina oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia.Stable / concentrated solution of cisplatin (10 mg / ml) and NaCl (10 mg / ml) as solvent 90% polyethylene glycol 400 - 10% 0.2 N HCl 5 To a solution of 0.5 g NaCl in 4 ml purified water ( USP), 1 ml of 1 N HCl and 45 ml of polyethylene glycol 400, 250 mg of cisplatin were added and the mixture was stirred at room temperature in the dark for 4 hours to give a clear yellow solution. TLC 10 of the freshly prepared solution showed only a cisplatin spot. Dilution of the freshly prepared solution with 1-, 2-, 3-, 4-, 5-, and 9-fold volumes of purified water gave clear solutions which remained clear after standing at room temperature for 24 hours. 1-, 2-, 3-, 4- and 5-fold dilutions of 15 showed no crystallization when kept at 4 ° C for 24 hours. Aliquots of the freshly prepared solution were sealed in 17 ml amber vials as described in Example 3 and subjected to storage stability tests at various temperatures. After three months of storage at 37 ° C, TLC showed that the sample contained 1% platinum B and possibly traces of transplatinum. After three months of storage at 45 ° C, TLC showed that the sample contained 5% platinum B and possibly traces of transplatinum. TLC of 25 samples stored at 56 ° C for one month showed the presence of 2-3% platinum B and no transplatinum. Dilution of stored samples with purified water (U.S.P.) to a cisplatin concentration of 2 mg / ml gave clear solutions that remained clear after standing at room temperature for 24 hours.

30 Esimerkki 930 Example 9

Stabiili, väkevä cisplatin (2,5 mg/ml), NaCl:n (9 mg/ml) ja mannltolin (12,5 mg/ml) liuos, liuottimena happameksi tehty polyetyleeniglykoli 6000:n 31-prosenttinen (paino/tilavuus) vesiliuos 35 Natriumkloridia (0,9 g), mannitolia (1,25 g) ja polyetyleeniglykoli 6000:a (31,3 g) liuotettiin sellaiseen 18 70670 määrään puhdistettua vettä (U.S.P:) että saatiin 100 ml liuosta ja liuos tehtiin sitten happameksi pH-arvoon 2,2 1 N suolahapolla (0,7 ml). Lisättiin cisplatin (255 mg) ja seosta sekoitettiin pimeässä 3 vuorokautta huoneen 5 lämpötilassa, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLC:ssa oli ainoastaan cisplatin-vyöhyke. Näyte-erät juuri valmistetusta liuoksesta suljettiin 17 ml:n kullanruskeisiin lääkepulloihin kuten on kuvattu esimerkissä 3 ja niille tehtiin varastointistabiilisuuskokeet 10 45°C:ssa ja 56°C:ssa. Kun näytteitä oli varastoitu kaksi kuukautta 45°C:ssa ja 56°C:ssa, osoitti TLC että niissä oli platina B:tä alle 1 % eikä lainkaan transplatinaa. Laimennettaessa varastoidut näytteet yhtä suurilla tilavuus-määrillä puhdistettua vettä (U.S.P.) saatiin kirkkaat 15 liuokset jotka säilyivät kirkkaina oltuaan 24 tuntia huoneenlämpötilassa .Stable, concentrated solution of cisplatin (2.5 mg / ml), NaCl (9 mg / ml) and mannltol (12.5 mg / ml), 31% (w / v) aqueous solution of polyethylene glycol acidified as solvent 35 Sodium chloride (0.9 g), mannitol (1.25 g) and polyethylene glycol 6000 (31.3 g) were dissolved in 18,70670 volumes of purified water (USP :) to give 100 ml of solution and the solution was then acidified to pH to 2.2 with 1 N hydrochloric acid (0.7 mL). Cisplatin (255 mg) was added and the mixture was stirred in the dark for 3 days at room temperature to give a clear solution. TLC of the freshly prepared solution showed only a cisplatin band. Aliquots of the freshly prepared solution were sealed in 17 ml amber vials as described in Example 3 and subjected to storage stability tests at 45 ° C and 56 ° C. After two months of storage at 45 ° C and 56 ° C, the samples showed that they contained less than 1% platinum B and no transplatinum. Dilution of stored samples with equal volumes of purified water (U.S.P.) gave clear solutions that remained clear after 24 hours at room temperature.

Esimerkki 10Example 10

Stabiili, väkevä cisplatinln (15,8 mg/ml) ja NaCl:n (10 mg/ml) liuos, liuottimena polyetyleeniglykoli 400:n 20 90-prosenttinen vesiliuosStable, concentrated solution of cisplatin (15.8 mg / ml) and NaCl (10 mg / ml), polyethylene glycol 400 90% aqueous solution as solvent

Polyetyleeniglykoli 400 (90 ml) liuotettiin liuokseen, jossa oli 1,0 g NaCl:a 10 ml:ssa puhdistettua vettä (U.S.P.). 60 ml:aan saatua liuosta lisättiin 900 mg cispla-tinia, ja seosta sekoitettiin pimeässä 5 tuntia huoneen-25 lämpötilassa, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLCsssa oli ainoastaan cisplatin-vyöhyke? HPLC-koe osoitti sen sisältävän 15,8 mg cisplatinia ml:ssa. Laimennettaessa juuri valmistettu liuos nelinkertaisella tilavuusmäärällä puhdistettua vettä(U.S.P.) saatiin kirkas 30 liuos, joka säilyi kirkkaana oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia. Näyte-erät juuri valmistetusta liuoksesta suljettiin 17 ml:n kullanruskeisiin näytepulloihin kuten on kuvattu esimerkissä 3 ja niille tehtiin varastointistabiilisuuskokeet eri lämpötiloissa. Kun näytettä oli varastoitu 35 kaksi kuukautta 45°C:ssa osoitti TLC 1,5 % platina B:tä 19 70670 eikä lainkaan transplatinaa. Kuukauden kestäneen varastoinnin jälkeen 56°C:ssa TLC psoitti 2 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa. 56°C:ssa varastoitu näyte laimennettiin pitoisuuteen 2 mg/ml steriilillä ruiskeisiin tarkoi-5 tetulla vedellä ja 45°C:ssa varastoitu näyte laimennettiin cisplatin-pitoisuuksiin 2,5 ja 5,0 mg/ml steriilillä ruiskeisiin tarkoitetulla vedellä. Ne molemmat muodostivat kirkkaat liuokset, jotka säilyivät kirkkaina oltuaan huoneenlämpötilassa 24 tuntia.Polyethylene glycol 400 (90 mL) was dissolved in a solution of 1.0 g NaCl in 10 mL purified water (U.S.P.). To 60 ml of the resulting solution was added 900 mg of cisplatin, and the mixture was stirred in the dark for 5 hours at room temperature to give a clear solution. The TLC of the freshly prepared solution contained only the cisplatin zone? HPLC showed it to contain 15.8 mg of cisplatin per ml. Dilution of the freshly prepared solution with four times the volume of purified water (U.S.P.) gave a clear solution which remained clear after standing at room temperature for 24 hours. Aliquots of the freshly prepared solution were sealed in 17 ml amber sample bottles as described in Example 3 and subjected to storage stability tests at various temperatures. After storage of the sample for 35 two months at 45 ° C, TLC showed 1.5% platinum B 19 70670 and no transplatinum. After one month of storage at 56 ° C, TLC pitted 2% platinum B and no transplatinum at all. The sample stored at 56 ° C was diluted to 2 mg / ml with sterile water for injections and the sample stored at 45 ° C was diluted to cisplatin concentrations of 2.5 and 5.0 mg / ml with sterile water for injections. They both formed clear solutions which remained clear after standing at room temperature for 24 hours.

10 HPLC-kokeet näytteistä, joita oli varastoitu 3 kuu kautta 45°C:ssa, 6 kuukautta 37°C:ssa ja 8 kuukautta huoneenlämpötilassa osoittivat vastaaviksi tehohäviöiksi 7,6 %, 7,6 % ja 0 %.HPLC experiments on samples stored for 3 months at 45 ° C, 6 months at 37 ° C and 8 months at room temperature showed corresponding power losses of 7.6%, 7.6% and 0%.

Esimerkki 11 15 Stabiili, väkevä cisplatinin (15 mg/ml) ja CaC^sn (25 mg/ml) liuos, liuottimena polyetyleeniglykoli 400:n 90-prosenttinen vesiliuosExample 11 Stable, concentrated solution of cisplatin (15 mg / ml) and CaCl 2 (25 mg / ml), polyethylene glycol 400 90% aqueous solution as solvent

Liuokseen, jossa oli 2,5 g CaC^sa 10 ml:ssa puhdistettua vettä (U.S.P.), lisättiin 90 ml polyetyleeniglykoli 20 400:aa ja saatua liuosta sekoitettiin 10 minuuttia. 50 ml:aan yllä mainittua liuosta lisättiin 750 mg cisplatinia ja seosta sekoitettiin pimeässä 5 tuntia huoneenlämpötilassa, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLC:ssa oli ainoastaan cisplatin-vyöhyke. Laimennettaessa 25 juuri valmistettu liuos 1-, 2-, 5- ja 10-kertaisilla tila-vuusmäärillä puhdistettua vettä (U.S.P.) saatiin kirkkaat liuokset. Näyte-erät juuri valmistetusta liuoksesta suljettiin 17 ml:n kullanruskeisiin lääkepulloihin kuten on kuvattu esimerkissä 3 ja niille tehtiin varastointistabiili-30 suuskokeet 45°C:ssa ja 56°C:ssa. Kaksi kuukautta kestäneen varastoinnin jälkeen 45°C:ssa TLC osoitti 1,5 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa. Kuukauden pituisen varastoinnin jälkeen 56°C:ssa TLC osoitti 2,5-5 % platina B:tä eikä lainkaan transplatinaa. 56°C:ssa varastoitu näyte 20 7 0 6 7 0 laimennettiin pitoisuuteen 2 mg/ml ja 45°C:ssa varastoitu näyte laimennettiin cisplatin-pitoisuuksiin 2,5 ja 5,0 mg/ml steriilillä, ruiskeisiin tarkoitetulla vedellä.To a solution of 2.5 g of CaCl 2 in 10 mL of purified water (U.S.P.) was added 90 mL of polyethylene glycol 20,400 and the resulting solution was stirred for 10 minutes. To 50 ml of the above solution was added 750 mg of cisplatin, and the mixture was stirred in the dark for 5 hours at room temperature to give a clear solution. TLC of the freshly prepared solution showed only a cisplatin band. Dilution of the freshly prepared solution with 1-, 2-, 5-, and 10-fold volumes of purified water (U.S.P.) gave clear solutions. Aliquots of the freshly prepared solution were sealed in 17 ml amber vials as described in Example 3 and subjected to storage stability tests at 45 ° C and 56 ° C. After two months of storage at 45 ° C, TLC showed 1.5% platinum B and no transplatinum. After one month of storage at 56 ° C, TLC showed 2.5-5% platinum B and no transplatinum. The sample stored at 56 ° C was diluted to 2 mg / ml and the sample stored at 45 ° C was diluted to cisplatin concentrations of 2.5 and 5.0 mg / ml with sterile water for injections.

Ne muodostivat kirkkaat liuokset, jotka säilyivät kirk-5 kaina oltuaan huoneen lämpötilassa 24 tuntia.They formed clear solutions which remained on Kirk-5 after 24 hours at room temperature.

Esimerkki 12Example 12

Steriili, stabiili, väkevä cisplatin-liuos liuottimena 90 % polyetyleeniglykoli 400:aa - 10 % 0,5 N HC1 (etikettimerkintä on 15 mg/ml tehokasta cisplatinia).Sterile, stable, concentrated solution of cisplatin as solvent 90% polyethylene glycol 400 to 10% 0.5 N HCl (labeled with 15 mg / ml effective cisplatin).

10 Huomautus: Cisplatin on mahdollinen karsinogeeni.10 Note: Cisplatin is a potential carcinogen.

Koko menetelmän suorittamisen ajan täytyy käyttää suoja-vaatetusta, - käsineitä, -naamaria, -silmälaseja ja -päähinettä. Kaikki työskentelyalueet ja laitteet täytyy puhdistaa huolellisesti, jotta vältytään saasteelta myö-15 hemmin.Protective clothing, gloves, mask, goggles and headgear must be worn throughout the procedure. All work areas and equipment must be thoroughly cleaned to avoid contamination as soon as possible.

Resepti 1 ml:ssa liuosta 10,0 mlrssa liuosta Cisplatin 0,015 g ^ 0,150 gRecipe in 1 ml of solution in 10.0 ml of solution Cisplatin 0.015 g ^ 0.150 g

Natriumkloridi 0,015 g 0,150 g 20 0,5 N suolahappo^ 0,10 ml 1,0 mlSodium chloride 0.015 g 0.150 g 20 0.5 N hydrochloric acid ^ 0.10 ml 1.0 ml

Polyetyleeniglykoli 400 (SENTRY grade) q.s. 1,0 mlsksi q.s. 10,9 ml:ksi ^ Tämä cisplatin-määrä vastaa tehokkuutta 1000 ^ug/mg. Tarvittavan cisplatin-määrän laskemiseksi käytetään 25 seuraavaa kaavaa: 1000 x 0,015 g_ _ tarvittava cisplatin-määrä, gPolyethylene glycol 400 (SENTRY grade) q.s. 1.0 mlsksi q.s. To 10.9 ml This amount of cisplatin corresponds to an efficacy of 1000 ug / mg. The following formula is used to calculate the amount of cisplatin required: 1000 x 0.015 g_ _ amount of cisplatin required, g

Cisplatin teho, ^,ug/mg (2)Cisplatin potency, μg / mg (2)

Litra 0,5 N suolahappoa valmistetaan seuraavasti: 30 1. Pannaan 957,25 ml steriiliä, ruiskeisiin tarkoitettua vettä (U.S.P.) puhtaaseen 1 litran erlen-meyer-pulloon.A liter of 0.5 N hydrochloric acid is prepared as follows: 1. Place 957.25 mL of sterile water for injections (U.S.P.) in a clean 1-liter Erlen-Meyer flask.

2. Sekoittaen tehokkaasti lisätään hitaasti ja varovasti 42,75 ml väkevää suolahappoa. Sekoitetaan 10 minuuttia. Suljetaan pullo puhtaalla butyylikumitulpalla.2. With vigorous stirring, slowly and carefully add 42.75 ml of concentrated hydrochloric acid. Stir for 10 minutes. Close the bottle with a clean butyl rubber stopper.

21 7067021 70670

Työskentelyohjeet valmistettaessa 1 litra steriiliä liuosta 1. Pannaan 100 ml 0,5 N suolahappoa puhtaaseen, kalibroituun Erlenmeyer - pulloon, jossa on sopiva sekoitin 5 kuten esimerkiksi 6 cm:n teflon-pinnoitteinen magneetti-sekoitin.Instructions for working 1 liter of sterile solution 1. Place 100 ml of 0.5 N hydrochloric acid in a clean, calibrated Erlenmeyer flask fitted with a suitable stirrer 5 such as a 6 cm Teflon-coated magnetic stirrer.

2. Lisätään tasaisesti sekoittaen 15,0 g natrium-kloridia. Sekoitetaan kunnes suola on täysin liuennut.2. Add 15.0 g of sodium chloride with uniform stirring. Stir until the salt is completely dissolved.

3. Lisätään nopeasti sekoittaen 750 ml polyetyleeni-10 glykoli 400:aa (SENTRY grade) ja sekoitetaan 5 minuutin ajan.3. Add 750 ml of polyethylene-10 glycol 400 (SENTRY grade) with rapid stirring and stir for 5 minutes.

4. Poistetaan magneettisekoitin ja valutetaan siitä nesteylimäärä takaisin pulloon.4. Remove the magnetic stirrer and drain the excess liquid back into the flask.

5. Lisätään varovasti 15,0 g aktiivista cisplatinia.5. Carefully add 15.0 g of active cisplatin.

15 6. Lisätään polyetyleeniglykoli 400:aa (SENTRY grade) 1 litran merkkiin saakka (kaikkiaan tarvitaan 880 ml polyetyleeniglykoli 400:aa).15 6. Add polyethylene glycol 400 (SENTRY grade) up to the 1 liter mark (a total of 880 ml of polyethylene glycol 400 is required).

7. Pannaan teflonsekoitin takaisin seokseen ja suljetaan pullo puhtaalla butyylikumitulpalla.7. Put the Teflon mixer back in the mixture and close the bottle with a clean butyl rubber stopper.

20 8. Kääritään pullo alumiinifolioon sen suojaamiseksi tarkoin valolta.20 8. Wrap the bottle in aluminum foil to protect it tightly from light.

9. Sekoitetaan tehokkaasti 24-48 tunnin ajan tavallisessa huoneenlämpötilassa. Pitäisi muodostua kirkas liuos. Jos 48 tunnin kuluessa ei muodostu kirkasta liuosta, voidaan 25 seosta lämmittää 37-40°C:ssa 2-6 tuntia valolta ja ilmalta suojattuna, jolloin jäljellä oleva cisplatin liukenee nopeasti. Jäähdytetään 23-27°C:een.9. Stir vigorously for 24-48 hours at normal room temperature. A clear solution should form. If no clear solution forms within 48 hours, the mixture can be heated at 37-40 ° C for 2-6 hours protected from light and air, allowing the remaining cisplatin to dissolve rapidly. Cool to 23-27 ° C.

10. Käyttäen aseptista tekniikkaa suodatetaan tumman keltainen liuos täysin steriilissä typpikehässä sopivan, 30 steriilin pyrogeenittoman 0,22 mikronin Millipore-suotimen läpi. Otetaan steriili suodos steriiliin, pyrogeenittomaan Erlerftieyer-pulloon. Suljetaan pullo steriilillä, pyrogee-nittomalla butyylikumitulpalla. Liuosta voidaan säilyttää pimeässä.10. Using aseptic technique, filter the dark yellow solution through a suitable sterile pyrogen-free 0.22 micron Millipore filter under a completely sterile nitrogen atmosphere. Take a sterile filtrate into a sterile, pyrogen-free Erlerftieyer flask. Close the bottle with a sterile, pyrogen-free butyl rubber stopper. The solution can be stored in the dark.

35 11. Steriilit, pyrogeenittomat kullanruskeat lääke- 22 70670 pullot täytetään halutuilla määrillä steriiliä liuosta. Lääkepullot suljetaan steriileillä, pyrogeenittomilla teflon-tulpilla. Tiivistetään steriileillä alumiinikansilla.35 11. Sterile, pyrogen-free amber vials are filled with the desired amounts of sterile solution. The vials are closed with sterile, pyrogen-free Teflon stoppers. Sealed with sterile aluminum lids.

12. Lääkepullot tulisi varustaa seuraavalla varoi-5 tusetiketillä:12. Vials should be labeled with the following warning label:

Ei käytettäväksi suoraan intramuskulaaristi tai intravenöösisti x x PEG-400-liuos voidaan laimentaa 14 osalla steriiliä vettä ruiskeita varten (Sterile Water for 10 Injection, U.S.P.) tai steriiliä normaalisuolaliuosta (Sterile Normal Saline Solution, U.S.P.), jolloin saadaan pitoisuudeltaan 1 mg/ml cisplatin-liuos.Not for direct intramuscular or intravenous use xx PEG-400 solution can be diluted with 14 parts of Sterile Water for Injection (USP) or Sterile Normal Saline Solution (USP) to give cisplatin at a concentration of 1 mg / ml. solution.

Jos halutaan suurempia pitoisuuksia, voidaan käyttää vastaavasti pienempiä steriili vesi- tai suolaliuos-15 määriä. Laimennettuja liuoksia voidaan käyttää intravenöösisti ja ne ovat stabiileja tavanomaisessa huoneenlämpötilassa (22-26°C) vähintäin 48 tuntia. Laimennettuja liuoksia ei pidä jäähdyttää jääkaappi-lämpötilaan, koska tällöin voi muodostua kiteitä.If higher concentrations are desired, correspondingly smaller amounts of sterile aqueous or saline solution may be used. The diluted solutions can be administered intravenously and are stable at normal room temperature (22-26 ° C) for at least 48 hours. Diluted solutions should not be cooled to refrigerator temperature as crystals may form.

20 13. Lääkepullot säilytetään pimeässä.20 13. Keep the vials in the dark.

Esimerkki 13Example 13

Stabiili, väkevä cisplatinln (2,5 mg/ml), NaCl:n (9 mg/ml) CaCl?:n (15 mg/ml) ja mannltolin (10 mg/ml) liuos, liuottimena happameksl tehty polyetyleeniglykoli 400;n 25 31-prosenttinen vesiliuosStable, concentrated solution of cisplatin (2.5 mg / ml), NaCl (9 mg / ml), CaCl 2 (15 mg / ml) and mannltol (10 mg / ml), acidified polyethylene glycol 400; 31% aqueous solution

Natriumkloridia (0,9 g), CaC^ (1,5 g) ja mannitolia (1,0 g) liuotettiin seokseen, jossa oli 31,25 ml polyetyleeniglykoli 400:aa ja 40 ml puhdistettua vettä (U.S.P.). Liuos tehtiin happameksi pH-arvoon 2,2 1 N HCltlla (0,4 ml), 30 lisättiin 255 mg cisplatinia, tilavuus saatettiin 100 ml:ksi lisäämällä puhdistettua vettä (U.S.P.) ja seosta sekoitettiin pimeässä 5 tuntia huoneenlämpötilassa, jolloin saatiin kirkas liuos. Juuri valmistetun liuoksen TLC:ssa oli ainoastaan cisplatin-vyöhyke.Sodium chloride (0.9 g), CaCl 2 (1.5 g), and mannitol (1.0 g) were dissolved in a mixture of 31.25 mL of polyethylene glycol 400 and 40 mL of purified water (U.S.P.). The solution was acidified to pH 2.2 with 1 N HCl (0.4 mL), 255 mg of cisplatin was added, the volume was adjusted to 100 mL by the addition of purified water (U.S.P.), and the mixture was stirred in the dark for 5 hours at room temperature to give a clear solution. TLC of the freshly prepared solution showed only a cisplatin band.

23 7067023 70670

Esimerkki 14Example 14

Toistetaan esimerkin 5 mukainen yleinen menetelmä paitsi että siinä käytetty natriumkloridi korvataan ekvivalentilla määrällä magnesiumkloridia, jolloin saadaan 5 stabiili, väkevä cisplatin-liuos.The general procedure of Example 5 is repeated except that the sodium chloride used therein is replaced with an equivalent amount of magnesium chloride to give a stable, concentrated solution of cisplatin.

Esimerkki 15Example 15

Toistetaan esimerkin 5 mukainen yleinen menetelmä paitsi että siinä käytetty natriumkloridi korvataan ekvivalentilla määrällä trietyyliamiinihydrokloridia, jolloin 10 saadaan stabiili, väkevä cisplatin-liuos.The general procedure of Example 5 is repeated except that the sodium chloride used therein is replaced with an equivalent amount of triethylamine hydrochloride to give a stable, concentrated solution of cisplatin.

Esimerkki 16Example 16

Toistetaan esimerkin 5 mukainen yleinen menetelmä paitsi että siinä käytetty polyetyleeniglykoli 400 korvataan ekvivalenteilla tilavuuksilla polyetyleeniglykoleja 200 ja 15 300, vastaavasti, jolloin saadaan stabiilit, väkevät cisplatin-liuokset.The general procedure of Example 5 is repeated except that the polyethylene glycol 400 used therein is replaced with equivalent volumes of polyethylene glycols 200 and 300,300, respectively, to give stable, concentrated cisplatin solutions.

Esimerkki 17Example 17

Toistetaan esimerkin 9 mukainen yleinen menetelmä paitsi että siinä käytetty polyetyleeniglykoli 6000 korva-20 taan ekvivalenteilla painomäärillä polyetyleeniglykoleja 1000 ja 4000, vastaavasti, jolloin saadaan stabiilit, väkevät cisplatin-liuokset.The general procedure of Example 9 is repeated except that the polyethylene glycol 6000 used therein is replaced with equivalent amounts by weight of polyethylene glycols 1000 and 4000, respectively, to give stable, concentrated cisplatin solutions.

Claims

24 70670

A process for preparing a stable, concentrated solution of cisplatin in a solvent, characterized in that cisplatin is dissolved in 2.5 to 22 mg / ml, preferably 10 to 15 mg / ml, wherein the solvent contains 31 to 90% of polyethylene glycol having an average molecular weight of about 150-9000, or methoxy polyethylene glycol having an average molecular weight of about 300-6000, or a mixture thereof, and 69-10% water and at least one non-toxic, pharmaceutically acceptable chloride ion donor in an amount at least about equivalent in solution with the amount of cisplatin present.

Process according to Claim 1, characterized in that cisplatin 10 to 15 mg / ml and NaCl to 10 to 15 mg / ml are dissolved in the solvent, the solvent containing 90% polyethylene glycol having an average molecular weight of about 350 to 450, and 10% water.