FI70330C - Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar - Google Patents
Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar Download PDFInfo
- Publication number
- FI70330C FI70330C FI851009A FI851009A FI70330C FI 70330 C FI70330 C FI 70330C FI 851009 A FI851009 A FI 851009A FI 851009 A FI851009 A FI 851009A FI 70330 C FI70330 C FI 70330C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- sample
- measuring vessel
- liquid
- radiation
- antigen
- Prior art date
Links
Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
Description
70330
Menetelmä immunomääritysten suorittamiseksi
Keksintö koskee fluorometristä tai fosforimetristä im-munomääritysmenetelmää, jossa fluoresoivalla tai fosfori-soivalla merkkiaineella leimattu vasta-aine tai antigeeni 5 kiinnitetään mittausastian sisäseinämään.
Fluorometrisissä immunomäärityksissä (FIA) antigeeni tai vasta-aine on adsorboitu esim. polystyreenistä tai po-lyakryylistä valmistettuihin kyvetteihin tai mikrotiitte-rilevyihin. Tämän ns. kiinteään faasiin sidotun antigee-10 nin tai vasta-aineen annetaan reagoida tutkittavassa näytteessä olevan vasta-aineen, tai vastaavasti antigeenin, ja fluoresoivalla molekyylillä leimatun vasta-aineen tai vastaavasti antigeenin kanssa. Mitä vähemmän näytteessä on vasta-ainetta tai antigeeniä, sitä enemmän merkittyä ai-15 netta tarttuu kiinteään faasiin. Kun nestefaasiin jäänyt merkitty vasta-aine tai antigeeni erotetaan, ja mitataan kiinteään faasiin tarttuneen merkityn aineen määrä fluoro-metrillä, saadaan selville vasta-aineen tai antigeenin pitoisuus näytteessä.
20 Tunnetuissa menetelmissä ylimääräinen leimattu vasta- aine tai antigeeni joudutaan pesemään pois ennen fluorometristä mittausta.
Tämän keksinnön tarkoituksena on saada aikaan fluoro-metrinen kiinteän faasin immunomääritysmenetelmä, jossa 25 ylimääräistä merkkiainetta ei tarvitse poistaa mittausas-tiasta ennen fluorometristä mittausta.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä antigeeni tai vasta-aine on kiinnitetty mittausastian seinämään tai pohjaan ja fluoresenssisäteily mitataan seinämän tai pohjan läpi. Kun 30 näytteen ja lisätyn, merkityn vasta-aineen tai antigeenin reaktio kiinteän faasin antigeenin, tai vastaavasti vasta-aineen kanssa, on tapahtunut, lisätään mittausastiaan näytettä tiheämpää nestettä, joka syrjäyttää näytteen altaan, 70330 Tämän keksinnön mukaisessa menetelmässä voidaan mit-tausastian tyhjentäminen ja pesu jättää pois. Näin kaikki määritykseen liittyvät nesteensiirrot ovat nesteen lisäyksiä. Tämä nopeuttaa määritystä ja helpottaa ratkaisevasti 5 sen automatisointia.
Kun menetelmässä näytteeseen lisätään näytettä tiheämpää nestettä, on neste sopivammin värjätty siten, että se absorboi voimakkaasti valoa joko fluoresenssin eksitaatio-tai emissioaallonpituudella tai molemmilla, ollen siis 10 väriltään esim. mustaa. Näin fluoresenssi voidaan mitata myös suoraan alhaalta päin ylimäärämerkkiaineen tai taustasäteilyn häiritsemättä. Sopivimmin menetelmä toteutetaankin siten, että kiinteä faasi on mittausastian pohjalla ja sekä eksitaatiovalo johdetaan mittausastiaan että 15 fluoresenssivalo kerätään ilmaisimelle mittausastian poh- j an läpi.
Menetelmässä lisättävän nesteen ja väriaineen tulee luonnollisestikin olla sellaisia, etteivät ne mittausta häiritsevästi vaikuta antigeenin ja vasta-aineen väliseen 20 reaktioon eivätkä estä merkkiainetta fluoresoimasta.
Mahdollisen värjäyksen tulee olla niin voimakas, että näytteen vapaassa nesteessä olevan merkkiaineen fluoresenssia ei näy merkittävästi mittauskanavassa. Jos värjätty neste sekoittuu näytteeseen, on absorptiokertoimen 25 oltava erittäin suuri. Jos värjätty neste ei sekoitu näytteeseen ja on sitä raskaampaa, riittää luokkaa 1/mm oleva absorptiokerroin, jos värjätyn nestekerroksen paksuus on useita millimetrejä.
Vettä tiheämmäksi, sekoittamattomaksi nesteeksi sovel-30 tuvat hyvin esim. sellaiset fluoratut hiilivedyt, jotka ovat huoneen lämpötilassa nestemäisiä, kuten esim. tri-klorotrifluoroetaani (Freon - 113) ja dibromotetrafluoro-etaani (Freon - 11^B2). Nämä voidaan värjätä mustiksi esim. hienolla hiilijauheella (noella).
35 Erään suoritusmuodon mukaisesti lisätään mittausas- 70330 tiaan näytettä tiheämpää nestettä, jonka annetaan jähmettyä ennen mittausta.
Luonnollisesti menetelmää voidaan soveltaa myös menetelmään, jossa käytetään hyväksi fosforesenssia.
Claims (5)
1. Menetelmä immunomääritysten suorittamiseksi, jossa fluoresoivalla tai fosforisoivalla merkkiaineella leimattua, mittausastian pohjaan tai sivuseinämiin kiinnitettyä 5 vasta-ainetta tai antigeeniä eksitoidaan sopivalla säteilyllä ja mitataan vasta-aineesta tai antigeenistä emittoitunutta fluoresenssi- tai fosforesenssisäteilyä, tunnettu siitä, että ennen mittausta mittausastiaan annostellaan näytettä tiheämpää nestettä, joka syrjäyttää i0 näytteen altaan, ja että sekä eksitaatiosäteily johdetaan näytteeseen että fluoresenssi- tai fosforesenssisäteily kerätään ilmaisimelle mittausastian seinämän tai pohjan läpi.
2. Vaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu säitä, että mittausastiaan annostellaan näytettä tiheämpää 15 nestettä, joka absorboi voimakkaasti eksitaatiosäteilyn aallonpituudella.
3. Vaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mittausastiaan annostellaan näytettä tiheämpää nestettä, joka absorboi voimakkaasti emis- 20 siosäteilyn aallonpituudella. Vaatimuksen 2 tai 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että näytettä tiheämpi neste on mustaa.
5. Jonkin vaatimuksen 2...^ mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sekä eksitaatiosäteily joh- 25 detaan näytteeseen että fluoresenssi- tai fosforisenssisä-teily kerätään ilmaisimelle mittausastian pohjan läpi.
6. Jonkin vaatimuksen 1...5 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että mittausastiaan annostellaan näytettä tiheämpää nestettä, jonka annetaan jähmettyä mit- 30 tausastiassa.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI851009A FI70330C (fi) | 1984-03-14 | 1985-03-13 | Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar |
Applications Claiming Priority (4)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| FI841023A FI841023A0 (fi) | 1984-03-14 | 1984-03-14 | Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar |
| FI841023 | 1984-03-14 | ||
| FI851009 | 1985-03-13 | ||
| FI851009A FI70330C (fi) | 1984-03-14 | 1985-03-13 | Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar |
Publications (4)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI851009A0 FI851009A0 (fi) | 1985-03-13 |
| FI851009L FI851009L (fi) | 1985-09-15 |
| FI70330B FI70330B (fi) | 1986-02-28 |
| FI70330C true FI70330C (fi) | 1986-09-15 |
Family
ID=26157579
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI851009A FI70330C (fi) | 1984-03-14 | 1985-03-13 | Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| FI (1) | FI70330C (fi) |
-
1985
- 1985-03-13 FI FI851009A patent/FI70330C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| FI851009L (fi) | 1985-09-15 |
| FI70330B (fi) | 1986-02-28 |
| FI851009A0 (fi) | 1985-03-13 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| FI96639C (fi) | Omavarainen immunokoe-elementti | |
| US4777145A (en) | Immunological assay method using magnetic particles | |
| US4731337A (en) | Fluorimetric immunological assay with magnetic particles | |
| JP2591738B2 (ja) | 特異的結合アッセイにおける成分の分離，混合および検出のための方法および装置 | |
| US5376249A (en) | Analysis utilizing isoelectric focusing | |
| AU668212B2 (en) | Indirect fluorescent assay of blood samples | |
| WO2011136485A2 (en) | Centrifugal micro-fluidic device and method for immunoassay | |
| FR2282115A1 (fr) | Procede pour detecter dans une solution a titrer, la presence d'un coordinat dans une substance inconnue suceptible de le contenir | |
| US8980572B2 (en) | Methods of signal generation and signal localization for improvement of signal readability in solid phase based bioassays | |
| WO2014146215A1 (en) | Method and apparatus for time-resolved fluorescence immunoassay testing | |
| US20210208075A1 (en) | Autofluorescence quenching assay and device | |
| US4758523A (en) | Immunoassay method for removing excess tracer | |
| ES2321740T3 (es) | Procedimiento para la deteccion rapida y sencilla de celulas y biomoleculas con ayuda de particulas paramagneticas. | |
| FI70330C (fi) | Foerfarande foer utfoering av immunobestaemningar | |
| US4847194A (en) | Colorimetric detection of delta-5-3-ketosteroid isomerase and immunoassay based thereon | |
| DE19631855A1 (de) | Verfahren zur Erfassung von Oberflächenantigenen oder Strukturmerkmalen von Zellen, Partikeln oder Makromolekülen | |
| Grenner et al. | Multilayer fluorescent immunoassay technique. | |
| KR20020083479A (ko) | 바이오-디바이스와, 정량 측정 장치 및 그를 사용하는정량 측정 방법 | |
| FI90800B (fi) | Biospesifinen määritysmenetelmä sekä tuote määritystä varten | |
| JPS63500962A (ja) | 酵素ラベルを使用することによる免疫学的測定方法 | |
| CA2859018A1 (en) | Attenuating dye for interrogating fluorescence from multiple surfaces, corresponding method | |
| FI91920C (fi) | Menetelmä biospesifisen moniparametrisen määritysmenetelmän tarkkuuden parantamiseksi | |
| FI90695B (fi) | Biospesifinen määritysmenetelmä | |
| CN117169519A (zh) | 用于检测样本中tt3和/或tt4的解离剂和试剂盒 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed |
Owner name: LABSYSTEMS OY |