FI70246B - Foerfarande foer framstaellning av alfa-galaktosidas fri av inertas och anvaendning av det saolunda erhaollna enzymet - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av alfa-galaktosidas fri av inertas och anvaendning av det saolunda erhaollna enzymet Download PDF

Info

Publication number
FI70246B
FI70246B FI824151A FI824151A FI70246B FI 70246 B FI70246 B FI 70246B FI 824151 A FI824151 A FI 824151A FI 824151 A FI824151 A FI 824151A FI 70246 B FI70246 B FI 70246B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
alpha
galactosidase
raffinose
saolunda
inertas
Prior art date
Application number
FI824151A
Other languages
English (en)
Other versions
FI824151L (fi
FI824151A0 (fi
FI70246C (fi
Inventor
Roberto Olivieri
Paolo Pansolli
Eugenio Fascetti
Pierluigi Ciuffolotti
Original Assignee
Anic Spa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Anic Spa filed Critical Anic Spa
Publication of FI824151A0 publication Critical patent/FI824151A0/fi
Publication of FI824151L publication Critical patent/FI824151L/fi
Publication of FI70246B publication Critical patent/FI70246B/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI70246C publication Critical patent/FI70246C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/24—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)
    • C12N9/2402—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12N9/2465—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2) hydrolysing O- and S- glycosyl compounds (3.2.1) acting on alpha-galactose-glycoside bonds, e.g. alpha-galactosidase (3.2.1.22)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L11/00—Pulses, i.e. fruits of leguminous plants, for production of food; Products from legumes; Preparation or treatment thereof
    • A23L11/30—Removing undesirable substances, e.g. bitter substances
    • A23L11/33—Removing undesirable substances, e.g. bitter substances using enzymes; Enzymatic transformation of pulses or legumes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/14—Fungi; Culture media therefor
    • C12N1/16—Yeasts; Culture media therefor
    • C12N1/18—Baker's yeast; Brewer's yeast
    • C12N1/185—Saccharomyces isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/645—Fungi ; Processes using fungi
    • C12R2001/85—Saccharomyces
    • C12R2001/865—Saccharomyces cerevisiae
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S435/00—Chemistry: molecular biology and microbiology
    • Y10S435/8215—Microorganisms
    • Y10S435/911—Microorganisms using fungi
    • Y10S435/94—Saccharomyces
    • Y10S435/942—Saccharomyces cerevisiae

Description

70246
Menetelmä invertaasista vapaan alfa-galaktosidaasin valmistamiseksi ja täten saadun entsyymin käyttö Förfarande för framställning av aifa-galaktosidas fri sv invertas och användning av det sälunda erhällna enzymet
Keksinnön kohteena on menetelmä a 1 fa-ga1 a kto sidaasi -entsyymin (E.C.).( 1.2.2.) valmistamiseksi viljelemällä kannan Saccharomyces cerevisiae NRRL-Y-12057 mutanttia, ja keksinnön kohteena on myös raffinoosin ja stakkioosin hydro-5 lyysi tätä entsyymiä käyttämällä.
Sokerijuurikkaissa melko suurin määrin esiintyvä tri-sakkaridi raffinoosi estää sakkaroosin kiteytymistä ja pienentää täten uutossaantoja.
Tämä asianalaita on sokeritehtaiden vakava taloudel-10 linen ongelma, ja raffinoosin hydrolyysia vaaditaan näin ollen sekä kvantitatiivisen saannon että uutetun sokerin kiteyttämisprosessin hyötysuhteen parantamiseksi.
Monissa julkaisuissa on selitetty entsyymiprosesseja raffinoosin hydrolysoimiseksi käyttämällä entsyymejä, jotka 15 on saatu seuraaviin sukuihin Absidia, Aspergillus, Bacillus, Circinella, Escherichia, Micrococcus, Mortierella, Penicil-1ium ja muihin kuuluvien mikro-organismien useista lajeista (kts. esim. US-patenttijulkaisuja 3 647 625 ja 3 367 526).
Monia mikro-organismeja viljeltäessä solu-uute si-20 sältää alfa-galaktosidaasin lisäksi myös invertaasia niin, että sokerijuurikasmelassien käsittelyn aikana raffinoosin entsymaattiseen hydrolyysiin liittyy myös sakkaroosin haitallinen hydrolyysi.
On myös tunnettua, että soijapavut edustavat prote-25 iinien tärkeää lähdettä, joita proteiineja käytetään monenlaisten ruokatavaroiden valmistamiseksi ihmiskäyttöön.
Soijapapujauhoissa esiintyvät varsinkin suuret stak-kioosi- ja ra ffinoosimäärät asettavat tarkat rajoitukset niiden käytölle ruokatavaratuotteita massatuotantoon valmis-30 tettaessa. Ihminen ei kuten tunnettua voi sulattaa tällaisia sokereita puuttuvan alfa-galrktosidaasientsyymin takia, eivätkä suoliston limakalvot voi edes hajottaa näitä soke- 70246 reita. vaan sen sijaan tapahtuu käymistä suoliston mikro-organismien vaikutuksesta siten, että voi esiintyä ilmavaivoja, joihin usein liittyy ripuli. Samoja ongelmia esiintyy myös s o i j ap apjma i don sulatuksessa, joka maito on lehmänmaidon var-5 sin hyvä korvike, varsinkin niissä ruoansulatusjärjestelmis-s n , jotka eivät siedä m aitoa puuttuvan laktoosin sulatuskyvyn takia.
Nyt on todettu, että oligosakkaridien ja monosakkari-dien hajottaminen sekä soijapapujauhoissa että soijapapumai-1Π dossa S.cerevisiae -solujen (solu-uutteen tai puhdistetun entsyymin) avulla poistaa ilmavaivaisuuden ja antaa tuotteelle suuren taloudellisen arvon.
Keksinnön eräänä tarkoituksena on itse asiassa aikaansaada uusi konstitutiivinen mu tantti kannasta Saccharomyces 15 cerevisiae NJRRL-Y —12057, joka on selitetty 31.12. 1980 jätetyssä FI-patenttihakemuksessa no. 804090. Tämä mutantti kehittää suurin määrin alfa-galaktosidaasia, joka on täysin puhdas inverta a sista riippumatta siitä, lisätäänkö galaktoo-sia viljelyväliaineeseen vai ei. Galaktoosi on sitävastoin 20 välttämätön a 1 fa-ga1aktosidaasin sopivan aktivitee11itason saavuttamiseksi villikantojen käymisreaktiossa.
Koska lisäksi tämän keksinnön kohteena oleva entsy-maattinen aktiviteetti soveltuu käytettäväksi ruokatavaroiden valmistusprosessissa, on oleellista, että käytettävä 25 mikro-organismi on yleensä turvallisena pidetty, kuten juuri on asianlaita mikro-organismin S.cerevisiae suhteen, poikkeuksena monista muista mikro-organismeista, joita on selitetty alfa-galaktosidaasin tuottajina.
Tämän keksinnön kohteena oleva mikro-organismi on 50 saatu kohdistamalla ultraviolettisäteilyä huomattavan pitkäksi ajaksi kantaan S.cerevisiae var. oleaqinosus K R R L - Y -12057. Pesäkkeet, jotka mutanttia kehittävän käsittelyn jälkeen eloonjääneet mikro-organismit muodostavat a g a r -agar-pitoise 11 a vi 1 je1yvä1iainee 11a, on analysoitu tarkoi-35 tuksella määrittää niiden kyky muodostaa a 1 fa-ga1akto sidaa-siaktivitee11ia vi 1 je 1 yvä1iaineissa, joista galaktoosi on poistettu.
Il 5 70246 Tällaista menetelmää soveltaen on eristetty klooni, joka kykenee muodostamaan a 1 fa-galaktosidaasia suuria määriä myös siinä tapauksessa, että mitään induktoria ei ole läsnä. Tämä uusi mi k ro-organismi on talletettu 7.7. 1981 laitokseen Northern 5 Regional Center US Department of Agriculture, Peoria (I 12), jossa sille on annettu deponointitunnus NRRL-Y-12533 .
Tämän kannan eräitä fysiologisia tunnusmerkkejä on lueteltu seuraavassa ja verrattu vastaavan villin kannan (NRRL-Y-12037 ) tunnusmerkkeihin.
10 1. Hiililähteiden hyödyksikäyttö a ) Käyminen NRRL-Y-12037 Mutantti glukoosi + + galaktoosi + + 13 maltoosi + + melibioosi + + raffinoosi + + trehaloosi b) assimilaatio 20 glukoosi + + galaktoosi + + maltoosi + + trehaloosi + + raffinoosi + + 25 melibioosi + + D-mannitoli glyseroli + + °tanoli + + DL-maitohappo 30 2. AIfa-galaktosidaasin muodostuminen galaktoosianminaisaktivitee11i (yksikkö/kuivapaino ) viljelyvällaineissa NRRL-Y-12057 mutantti 1 g/1 2200 11000 200 1100 4 70246 * perusvi1je 1yaineen koostumus oli glukoosia 10 g/1, ureaa 2 g/1, Nah^PO^a 2 g/1, MgSO^ . 7H20:a 0,5 g/1, hiiva-uutetta 2 g/1 (grammaa litraa kohden).
Vi1je 1yvä1iaine a 1 fa-ga1aktosidaasin valmistamiseksi 5 mutanttia käyttäen sisältää assimiloituvaa hiililähdettä, typpi1ähde11ä ja minera a 1isuo 1 oja .
Hii1i1 ähteinä voidaan käyttää glukoosia, melibioosia, glyserolia ja galaktoosia. Typpilähteenä voidaan käyttää mais siuute11a , hiivauutetta, lihauutetta, kaseiinihydroly-10 satteja, soijapapujauhoja, ammoniumsuoloja ja ureaa.
Sopivan vilelyväliaineen koostumus voi esimerkiksi olla seuraava: maissiuutetta 20 g/1 glukoosia 10g/l 15 NaH2P04:a 2 g/1 M g S 0 ^.7 H 2 0:a 0,5 g/1.
Tällaisen vi1je 1yvä1iaineen pH-alue on rajoissa 4...7, edullisesti 5...6, lämpötila on rajoissa 20 °C ...40 °C, edullisesti rajoissa 25 °C...30 °C.
20 Käymisen kestoaika voi vaihdella rajoissa 16...72 tuntia, jolloin edullinen alue on rajoissa 30...40 tuntia.
Käymisen päätyttyä koottuja soluja voidaan käyttää sellaisenaan tai kuivana jauheena. Vaihtoehtoisesti voidaan myös käyttää tällaisten solujen raakoja 'ai puhdistet-25 tuja uutteita.
Tätä varten solut murskataan soveltamalla jotain sopivaa menetelmää, ja käytetään raakaa tai puhdistettua ent-syymipitoista uutetta. Lopuksi mainittakoon, että eräs ylimääräinen tekninen tai taloudellinen parannus voidaan 30 saavuttaa immobi1isoimalla entsyymi siten, että se yhdistetään (v.akromolekyylisiin yhdisteisiin, muodostetaan kemiallisia sidoksia kantaja-aineen kanssa tai ionityyppisiä sidoksia. Voidaan myös fysikaalisesti immobi1iso idä entsyymi tai niitä sisältävät solut.
35 Seuraavat esimerkit havainnollistavat tämän keksinnön eräitä suoritusmuotoja.
Il 70246
Esimerkki 1
Valmistettiin viljelyllerni, jonka koostumus oli seura a v a : glukoosia 10g/l 5 maissiuutetta 20 g/1
NaH2P04:a 2 g/1
MgSO^ . 7^0 : a 0,5 g/1 pH 6,0 ( NaOH:1 la) Täten valmistetun väliaineen 100 ml:n panoksia pan-10 tiin 500 m 1 : n pulloihin ja steriloitiin 30 minuuttia 116 cC :ssa. Täten käsiteltyihin pulloihin ympättiin kannan 5. cerevisiae NRRL-Y-12533 viljelmää, joka oli kasvatettu 48 tuntia 30 °C:ssa ravinteella Potato Dextrose Agar Slants (Difco). Inkuboitiin 48 tuntia 30 °C:ssa kehällä sekoittaen 15 220 kierr/min, ja koottiin biomassa linkoamalla viljely- liemi. 100 ml rata lientä saatiin 600 mg kuivia mikrobisoluja, joissa oli 11000 yksikköä a 1 fa-ga 1aktosidaasia grammaa k o h d e n .
Kostean tahnan entsymaattinen aktiviteetti määritet-20 tiin seuraavassa selitettävällä tavalla.
Valmistettiin raffinoosipentahydraatin 37-prosentti-nen liuos (paino/tilavuussuhde) 0,1 M natriumasetaattipusku-rissa, pH = 5,0.
100 mitään täten valmistettua liuosta, jota edellä 25 oli inkuboitu sekoitti m essa termostaatin säätämässä lämpötilassa (40 °C), lisättiin 1 g kosteita soluja. Alkaen ajankohdasta 0 ja sitten 10 minuutin välein poistettiin 0,5 ml reaktioseosta, joka lisättiin 10,5 inl:asn 0,01 N H C1 : a. Täten saatu suspensio sentrifugoitiin biomassan poistami-30 seksi, ja kirkaan pinnalle nousevan kerroksen galaktoosi-pitoisuus mitattiin soveltamalla koemenetelmää Boehringer Mannheim Lactose-Galactose Testing Method.
Edellä selitetyn menetelmän avulla suoritettu koe antoi seuraavat tulokset: 6 70246
Tuotettu gslaktoosimäärä
Reaktioaika, min (mikroinooleja näytettäessä) U 166 10 538 5 20 888 30 1,227 40 1,711 50 1,955 60 2,222 10 Kun yksikkö määritelläan entsyymi määräksi, joka edellä selitetyissä koeolosuhteissa kehittää tunnin kuluessa yhden mikromoolin galaktoosia, oli tuloksena, että ytidessä grammassa selluloosatahnaa oli 2 056 yksikköä alfa-galaktosidaasia. Koska kokeillun selluloosatahnan kuiva-15 ainepitoisuus oli 18,7 % tahnan kosteasta painosta, oli kuivien mikrobiso 1ujen aktiviteetti 11 000 yksikköä grammaa kohden.
Esimerkki 2
Raffinoosin hydrolyysi sakkaroosin raakaliemiä kitey-20 tettäessä.
Raffinoosin hydrolyysi suoritettiin käyttämällä sakkaroosin (raakasokerin) raakaliemiä, jotka olivat kotoisin Celanossa (L'Aquila, Italia) olevista sokeritehtaista, jolloin liemien koostumus oli seuraava: 25 Kuiva-ainepitoisuudet: 65...70 Bx kuiva-aineen prosenttimääräinen koostumus: sakkaroosia 68 % raffinoosia 1,8 ei-sokereita 30¾
30 Säädettiin 0,5 kg suuruisen raakaliernimäärän pH
arvoon 5 lisäämällä siihen 5 ml konsentroitua rikkihappoa ja pantiin liemi pulloon, jota ravistettiin ravistimessa, jonka lämpötila pidettiin termostaatin avulla 40 °C:ssa.
Raffinoosin hydrolyysi käynnistyi, kun oli lisätty 35 5 g (kuivapainona) esimerkin 1 mukaan valmistettua solu- biomassaa. Pullosta otettiin määrätyin aikavälein näytteitä raffinoosin entsymaattisen hydrclyysin kehittämien galaktoo-sipitoisuuksien määrittämiseksi (Enzymic Method Boehringer Mannheim Lactose-Galactose Test). Reaktion kineettistä
II
70246 trendiä valvottiin, kunnes 60 % koko raffinoosipitoisuudesta oli hydrolysoitunut.
Hydrolysoitunut materiaalimäärä oli 0,5, 1,5, 3, 5, 8 ja 12 tunnin jälkeen vastaavasti 10% , 2 0% , 30% , 40% , 50% S ja 60%.
il ime r k k i 3
Soijapapujauhoissa olevan stakkioosin ja raffinoosin hydrolyysi.
Pantiin 0,7 kg soijapapujauhoja (ADM-TNF-40) Demaco-10 tyyppiseen jauhesekoittimeen, ja lisättiin siihen 0,2 1 vettä.
Sekoittamisen tuloksena saatiin homogeeninen taikina-main en massa, johon lisättiin 160 g esimerkin 1 mukaisella tavalla valmistettua solu-biomassaa (kuivapainona).
15 Sen jälkeen, kun oli sekoitettu tunnin ajan 40 °C:ssa, poistettiin 12a suuruinen näyte, josta hiilihydraatit poistettiin 200 nl:lla etanolin ja veden 70:30 seosta. Uuttaminen toistettiin kolmasti, minkä jälkeen uute tehtiin happa-meksi ja erotettiin sentrifugoinalla kiinteistä aineista.
20 Pinnalle nouseva kerros konsentroitiiin alipaineessa 400 ml:n tilavuuteen. Samanlainen uuttaminen suoritettiin soijajauho näytteellä (kontrolli), johon oli kohdistettu sama käsittely , mutta lisäämättä siihen mitään biomassaa.
Sokerien (stakkioosin, raffinoosin, sakkaroosin) k v a n-25 titatiivinen analyysi suoritettiin paineen alaisella neste-kromatografiamenetelmällä (Hupe and Busch 1010B) ja seuraa-vissa olosuhteissa. Eluenttina H^O/CH^CN (30:70), pylväässä: Hibar N H ^ (Merck), virtausmäärä: 2 ml/min, paine 14,7 MPa.
Soijapapujauheen (kontrollin) sokeripitoisuudet 50 (näytettä ei käsitelty entsymaattista aktiviteettia omaavilla soluilla), olivat prosenttimäärinä: stakkioosia 5,5%, raffi-noosia 1,5% ja sakkaroosia 6%, kun taas entsyymillä tunnin ajan käsitellyissä jauhoissa oli stakkioosia 0,1%, raffi-noosia 1% ja sakkaroosia 9,2%.
55 Esimerkki 4
Soijapapumaidossa olevan stakkioosin ja raffinoosin hydrolyysi.
Lietettiin 10 g soijapapujauhoja (ADG-TNF-4G) 200 " 70246 nl:aan vettä ja lämmitettiin kiehumapisteeseen. Täten saatua lietettä sentrifugoitiin 5 minuuttia 5000 kierr /min liukenemattoman jäännöksen erottamiseksi pinnalle nousseesta liuoksesta, joka oli ns. soijapapumaitoa.
5 Puolet tästä liuoksesta pantiin pulloon, jota sekoitet tiin 40 °C:ssa (termostaa11ihautee 11 a ) ja lisättiin 0,5 g kosteita Saceharomyces cerevisiae NRRL-Y-12533 -soluja (kuivapaino 100 mg). Haudottiin 4 tuntia, minkä jälkeen seos sentrifugoitiin ja määritettiin k v a n -10 titatiivisesti 50 m 1: n suuruisen osan olioosakkaridipi- toisuudet. Samanlainen määritys tehtiin samalla s c i j a -papumaitotilavuudella, jota ei oltu käsitelty mikrobi-soluilla (kontrolli).
Sekä kontrolliin että näytteeseen lisättiin 120 15 ml absoluuttista etanolia, mikä johti proteiinisakan muodostumiseen. Sakka erotettiin suodattamalla liuoksesta, jonka alkuperäinen tilavuus 50 ml palautettiin alipaineessa haihduttamalla. Ruiskutettiin 20 mikro-litran suuruisia panoksia nestepainokromatografiin 20 (Hupe and Busch 101GB) sokerien kvantitatiiviseksi mää rittämiseksi edellisessä esimerkissä selitetyllä tavalla. Tulokset, jotka on lausuttu oligosakkaridien morn ä ä r ä n ä soijapapumaidon 100 m 1:a kohden, olivat seuraa-v a t : 25 Raffinoosia Stakkioosia Yhteensä Hydrolyysi °o
Kontrolli 60 220 280 0 Käsitelty maito 45 50 95 66.
il

Claims (4)

70246
1. Menetelmä invertaasista vapaan aifa-galaktosidaasin valmistamiseksi, tunnettu siitä, että uutta kantaa Saccharomyces cerevisiae NRRL-Y-12533, joka kykenee tuottamaan «C -galaktosidaasia ilman lisättyä mdusona, 6a-5 laktoosia, viljellään nestemäisessä viljelyväliameessa, joka sisältää hiililähteen, typpilähteen sekä raineraalisuoloja ja jonka pH on alueella 4-7, lämpötilassa 20 °C - 40 °C 16-72 tunnin ajan ja otetaan talteen alfa-6alaktosidaasientsyymin sisältävä solumassa.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tun nettu siitä, että typpilähteenä voidaan Käyttää ureaa, lihauutetta, hiivauutetta, maissin liotusnestettä ja kaseimihydrolysaatteja.
3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, t u n -15 n e t t u siitä, että hulilähteenä voidaan käyttää glukoosia, melibioosia ja galaktoosia.
4. Menetelmä soijapapumaidossa olevien oligosakkaridien hydrolysoimiseksi, tunnettu siitä, että soija-papumaito saatetaan kosketukseen solujen kanssa, joilla on alfako galaktosidaasi aktiviteettia ja jotka on saatu viljelemällä uutta kantaa Saccharomyces cerevisiae NRRL-Y- 12635.
FI824151A 1981-12-03 1982-12-02 Foerfarande foer framstaellning av alfagalactosidas fri av invertas och anvaendning av det saolunda erhaollna enzymet FI70246C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
IT2542481 1981-12-03
IT25424/81A IT1140312B (it) 1981-12-03 1981-12-03 Procedimento per la produzione di alfa-galattosidasi e impieghi dell'enzima cosi' ottenuto

Publications (4)

Publication Number Publication Date
FI824151A0 FI824151A0 (fi) 1982-12-02
FI824151L FI824151L (fi) 1983-06-04
FI70246B true FI70246B (fi) 1986-02-28
FI70246C FI70246C (fi) 1986-09-15

Family

ID=11216659

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI824151A FI70246C (fi) 1981-12-03 1982-12-02 Foerfarande foer framstaellning av alfagalactosidas fri av invertas och anvaendning av det saolunda erhaollna enzymet

Country Status (8)

Country Link
US (1) US4431737A (fi)
EP (1) EP0081262B1 (fi)
CA (1) CA1191801A (fi)
DE (1) DE3269023D1 (fi)
DK (1) DK535382A (fi)
FI (1) FI70246C (fi)
IT (1) IT1140312B (fi)
NO (1) NO161810C (fi)

Families Citing this family (28)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4643901A (en) * 1983-06-10 1987-02-17 Universal Foods Corporation Yeast strains, method of production and use in baking
JPS61231993A (ja) * 1985-04-09 1986-10-16 Oriental Yeast Co Ltd 新規パン酵母
US4908221A (en) * 1986-01-16 1990-03-13 Barrett Lawrence G Irradiator and method of using irradiator to irradiate
US4760264A (en) * 1986-01-16 1988-07-26 Barrett Lawrence G Irradiator and method of using irradiator to irradiate
US5055401A (en) * 1987-04-10 1991-10-08 Alko Ltd. Construction of new α-galactosidase producing yeast strains and the industrial application of these strains
NZ233582A (en) * 1989-05-16 1992-05-26 Akpharma Inc Formerly Aek Dev Oral composition comprising alpha-galactosidase
JPH07102138B2 (ja) * 1989-07-19 1995-11-08 日本甜菜製糖株式会社 新規組換えプラスミド
US5130239A (en) * 1990-03-08 1992-07-14 Kabushiki Kaisha Hayashibara Seibutsu Kagaku Kenkyujo Process for preparing lactosucrose high-content power
US5445957A (en) * 1994-02-10 1995-08-29 Triarco Industries, Inc. Enzyme food supplement composition containing beta-fructofuranosidase, cellulase and hemicellulase
DK1046719T3 (da) * 1999-04-20 2004-09-20 Cargill Bv D-galactosesammensætning og fremgangsmåde til fremstilling deraf
US6537785B1 (en) 1999-09-14 2003-03-25 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Methods of treating lysosomal storage diseases
US6770468B1 (en) 1999-09-14 2004-08-03 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Phosphodiester-α-GlcNAcase of the lysosomal targeting pathway
CA2343545A1 (en) * 2000-04-10 2001-10-10 Kraft Foods, Inc. Low-cost soy proteinaceous food ingredients
US6455095B2 (en) * 2000-05-30 2002-09-24 Thermobean L.P. Thermogenic, appetite suppressing, gas suppressing, complete legume protein formulae; thermobean™
US20020102329A1 (en) * 2000-07-22 2002-08-01 Michael Lanahan Methods for high-temperature hydrolysis of galactose-containing oligosaccharides in complex mixtures
US6797309B2 (en) * 2000-08-18 2004-09-28 Solae, Llc Soy protein product and process for its manufacture
EP1321527A4 (en) * 2000-08-30 2004-08-11 Amano Enzyme Inc METHOD FOR INCREASING THE YIELD OF OLIGOSACCHARIDES WITH ALPHA-GALACTOSYL AND ANTI-CANDIDA AGENTS
US6905856B2 (en) 2001-12-21 2005-06-14 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Soluble GlcNAc phosphotransferase
US6800472B2 (en) * 2001-12-21 2004-10-05 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Expression of lysosomal hydrolase in cells expressing pro-N-acetylglucosamine-1-phosphodiester α-N-acetyl glucosimanidase
US20030124652A1 (en) * 2001-12-21 2003-07-03 Novazyme Pharmaceuticals, Inc. Methods of producing high mannose glycoproteins in complex carbohydrate deficient cells
RU2004130451A (ru) * 2002-03-13 2005-09-10 Соули, Ллс (Us) Белковые концентраты сои с низким содержанием неусваиваемых олигосахаридов и способ их получения
US8676383B2 (en) 2002-12-23 2014-03-18 Applied Biosystems, Llc Device for carrying out chemical or biological reactions
JP2008514549A (ja) * 2004-09-14 2008-05-08 エリクシアー ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 制御された炭水化物消化のための併用療法
WO2006058092A2 (en) * 2004-11-22 2006-06-01 Cargill, Incorporated Monosaccharide production system
US20070227406A1 (en) * 2006-02-24 2007-10-04 Jon Korbonski Pallet table
US8403284B2 (en) * 2008-06-27 2013-03-26 Jon Korbonski Pallet assembly
ES2351296B8 (es) 2009-04-08 2012-07-03 Universidade Da Coruña Cepas de s. cerevisiae capaces de crecer en medios con melibiosa, estaquiosa y rafinosa.
CN106998751A (zh) * 2014-05-29 2017-08-01 俄亥俄州大豆协会 植物粉中抗营养物质的减少

Family Cites Families (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1485502A (en) * 1974-06-05 1977-09-14 Aarhus Oliefabrik As Process for removal of water-soluble carbohydrates in the production of plant protein products
CH627626A5 (fr) * 1978-01-04 1982-01-29 Nestle Sa Procede d'elimination des sucres flatulents du soja.
IT1130242B (it) * 1980-02-01 1986-06-11 Anic Spa Procedimento per la produzione dell'enzima alfa-galattosidasi e per l'idrolisi del raffinosio mediante l'impiego dell'enzima stesso

Also Published As

Publication number Publication date
NO824019L (no) 1983-06-06
FI824151L (fi) 1983-06-04
EP0081262A2 (en) 1983-06-15
EP0081262A3 (en) 1983-10-19
EP0081262B1 (en) 1986-02-05
US4431737A (en) 1984-02-14
NO161810C (no) 1989-09-27
CA1191801A (en) 1985-08-13
DE3269023D1 (en) 1986-03-20
IT8125424A0 (it) 1981-12-03
IT1140312B (it) 1986-09-24
NO161810B (no) 1989-06-19
DK535382A (da) 1983-06-04
FI824151A0 (fi) 1982-12-02
FI70246C (fi) 1986-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI70246B (fi) Foerfarande foer framstaellning av alfa-galaktosidas fri av inertas och anvaendning av det saolunda erhaollna enzymet
US5429828A (en) Hemicellulase supplement to improve the energy efficiency of hemicellulose-containing animal feed
Takasaki Studies on Sugar-isomerizing Enzyme: Production and Utilization of Glucose Isomerase from Streptomyces sp.
EP0249435B1 (en) Method for producing yeast extract
Han et al. Phytase production by Aspergillus ficuum on semisolid substrate
US4762788A (en) Process for producing cellulolytic enzymes
Cruz et al. Microbial α‐galactosidase for soymilk processing
Chen et al. Production of glucose isomerase by Streptomyces flavogriseus
Suzuki et al. Studies on the decomposition of raffinose by α-galactosidase of mold: Part I. α-galactosidase formation and hydrolysis of raffinose by the enzyme preparation
Bhasin et al. Optimization of fermentation medium for the production of glucose isomerase using Streptomyces sp. SB-P1
SU1190992A3 (ru) Способ получени 2,5-дикето- @ -глюконовой кислоты
Fadel et al. Cellulases and animal feed production by solid-state fermentation by Aspergillus fumigatus NRCF-122 mutant
EP0332108B1 (en) Process for the preparation of difructose dianhydride III
EP0448430B1 (fr) Composition d'enzymes adaptée à l'hydrolyse des polysaccharides d'un substrat lignocellulosique, sa préparation et son utilisation
IE51009B1 (en) Production of alpha-galactosidase and hydrolysis of raffinose
Yoshida et al. Production and application of maltose phosphorylase and trehalose phosphorylase by a strain of Plesiomonas
Kapnoor et al. Production of α-Galactosidase by Aspergillus oryzae through solid-state fermentation and its application in soymilk Galactooligosaccharide hydrolysis
Shamala et al. Fermentation of starch hydrolysates by Lactobacillus plantarum
Priem et al. Production of β-1.4-xylanase in continuous culture by Aureobasidium Pullulans CBS 58475
CN105602969A (zh) 一种酯酶及其应用
Bekkarevich et al. Cultivation of a novel cellulase/xylanase producer, Trichoderma longibrachiatum mutant TW 1-59-27: Production of the enzyme preparation and the study of its properties
Fadel et al. Studies on activation of amylolytic enzymes production by gamma irradiated Aspergillus niger using some surfactants and natural oils under solid state fermentation
Bhatia et al. Production of high‐fructose syrup by a heat‐fixed Lactobacillus sp.
Rakshit et al. Cellulase production by a partially catabolite-resistant mutant of Trichoderma reesei
CN115747080A (zh) 一种食用菌菌丝体浸粉及其制备方法与其作为发酵氮源的应用

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: ENICHEM SYNTHESIS S.P.A.