FI67367C - Foerfarande foer framstaellning av psykofarmakologiska hexa- och heptapeptider innehaollande en sulfongrupp - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av psykofarmakologiska hexa- och heptapeptider innehaollande en sulfongrupp Download PDF

Info

Publication number
FI67367C
FI67367C FI782195A FI782195A FI67367C FI 67367 C FI67367 C FI 67367C FI 782195 A FI782195 A FI 782195A FI 782195 A FI782195 A FI 782195A FI 67367 C FI67367 C FI 67367C
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
cys
tyr
phe
asp
group
Prior art date
Application number
FI782195A
Other languages
English (en)
Other versions
FI67367B (fi
FI782195A (fi
Inventor
Hendrik Marie Greven
Original Assignee
Akzo Nv
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Akzo Nv filed Critical Akzo Nv
Publication of FI782195A publication Critical patent/FI782195A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI67367B publication Critical patent/FI67367B/fi
Publication of FI67367C publication Critical patent/FI67367C/fi

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
    • C07KPEPTIDES
    • C07K7/00Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/16Oxytocins; Vasopressins; Related peptides
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • YGENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10STECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S930/00Peptide or protein sequence
    • Y10S930/01Peptide or protein sequence
    • Y10S930/26Containing cys-cys disulfide bridge between nonadjacent cysteine residues

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

L^Yj rBl KUULUTUSiULKAISU „ jSÄÄ lBJ UTLÄGGN J NGSSICRIFT 6/367 ^ ^ (51) K*.lt/mcCt3 C 07 C T03/52 SUOM I — FI N LAN D (21) Piteirttlhdc^mu* —PMunuraöknln* 782195 (22) H»k«mhp*Ni — Anc&kjlinftdaf 07.07.78 ' * (23) Alkupewt—GIWjh*«d«| 07.07.78 (41) Tullut jtttklMfcil — Bllvlt offumHf j ^ q -| ^
Patentti· ia rekisterihallitut .... ________ . , . ...._ ' (44) Nihtivilaipsiion ]a kuuL|ulkalsMi pwm. — ,, 0/
Patent· och registerstyrelsen ' Arabian uthfd odi uti-skrtftM publlcar«f ill. I I . ÖH
(32)(33)(31) W**r ·ωο»ν·υ»_β·«*«ι priority 13-07-77 Hollanti-Hoi 1and(NL) 7707781 (71) Akzo N.V., IJssellaan 82, Arnhem, Hoilanti-Hoiland(NL) (72) Hendrik Marie Greven, Heesch, Hoi 1 anti-Hoi 1 and(NL) (7^+) Oy Koister Ab (5*0 Menetelmä psykofarmakologisten, su 1foryhmän sisältävien heksa- ja heptapeptidien valmistamiseksi - Förfarande för f ramstä11 ning av psykofarmakologiska hexa- och heptapeptider innehällande en sulfo-grupp
Keksintö koskee menetelmää uusien kaavan I mukaisten peptidien ja niiden funktionaalisten johdannaisten valmistamiseksi,
K-L-Cys-L-Tyr-L-P'ne-L-Glu (X-, ) -L-Asp (X ) -B I
! so3h jossa X^ ja X2 tarkoittavat nydroksia tai aminoa ja B on hydroksi tai aminohappotähde, joka on L-Asp-OH, L-Asn-OH, L-Glu-OH, L-Gln-OH, L-Ser-Oh tai -HN-A-COOH, jossa A on 1 - noin 6 hiiliatomia sisältävä alkylideeniryhmä. Nämä yhdisteet ovat psykofarmakologisesti aktiivisia ja ne sopivat mielenterveydellisten sairauksien hoitoon, jossa halutaan aivotoiminnan piristymistä, esim. vanhentumisen ja/tai muistin katoamisen hoitoon.
Julkaisusta 157 NEUROPHARMACOL 4 (1965) on tunnettua, että nonapeptidijohdannaisella (Lys)-vasopressiini-sinkkitannaatilla on tiettyjä psykofarmakologisia ominaisuuksia, kun sitä annetaan ro- 67367 tille, joilta aivolisäke tai sen takalohko on poistettu. Erityisesti nonapeptidin väitettiin pystyvän estämään välillisen pako-reaktion sammuminen. On tunnettua, että vasopressiinin ja sen funktionaalisten johdannaisten äärimmäisen voimakas verenpainetta lisäävä vaikutus saavat kuitenkin aikaan hyvin epämiellyttävän sivuvaikutuksen .
US-patenttijulkaisussa 3 835 110 kuvattu pentapeptidi, jonka kaava on:
H-L-Cys-L-Tyr-L-Phe-L-Glu(X)-L-Asp(X)-OH
ja sen dimeeri, joka on muodostunut disulfidi (S-S)-sillan kautta, estävät välillisen välttämisreaktion sammumisen ainakin samassa määrässä kuin nonapeptidit edellä (varsinkin, kun niitä annetaan ihonalaisesti), mutta sillä ei ole lainkaan verenpainetta lisäävää vaikutusta. Epäkohtana useimmilla tämän ryhmän peptideillä on kuitenkin erinomaisen huono liukoisuus useimpiin liuottimiin, minkä seurauksena näiden peptidien puhdistaminen, tavallisten analyysien suorittaminen ja farmaseuttinen käsittely on äärimmäisen vaikea ja aikaa vievä tehtävä.
Vasopressiinipolypeptidi-johdannaisia on edelleen kuvattu US-patenteissa 3 299 036, 3 422 083 ja 3 743 726. US-patentissa 3 299 036 esitetyt yhdisteet ovat erityisen käyttökelpoisia tihku-verenvuodon ennalta torjunnassa ja hoidossa. US-patentin 3 422 083 mukaisissa polypeptideissä on ainakin yksi oC~(metylideeni)-ryhmä korvattu typpiatomilla ja US-patentin 3 743 726 mukaiset yhdisteet ovat oktapeptidejä, jotka kiihdyttävät välillisen pakoreaktion saavuttamista ja estävät sen sammumista. Patenteista, jotka kohdistuvat sulfonoituihin/sulfatoituihin peptideihin, mainittakoon US 3 579 494 ja US 3 705 140.
Kaavan I mukaiset uudet peptidit estävät välillisen pako-reaktion sammumisen rotilla. Lisäksi ne ovat aktiivisia muistin-katoamistesteissä rotilla, mistä käy ilmi, että nämä peptidit voivat palauttaa ja/tai estää muistinmenetyksen. Nämä uudet peptidit ovat paremmin liukenevia useimpiin liuottimiin kuin US-patentissa 3 835 110 kuvatut. Erityisen edullisia ovat ne peptidit, joissa B on aminohappotähde L-Asp-OH, ja joiden on havaittu olevan erityisen sopivia suun kautta annettaviksi, sillä niillä on 3 67367 selvästi parempi vaikutus suun kautta. Alkylideeniryhmällä A (kaava I) tarkoitetaan suoraa tai haarautunutta alkylideenihiili-vetyä, joka on substituoimaton.
Kaavan I mukaisia peptidejä ja niiden funktionaalisia johdannaisia voidaan valmistaa siten, että peptididimeeri, jonka kaava on:
H-L-Cys-L-Tyr-L-Phe-L-Glu(X,)-L-Asp(X-)-B
| i. z ii
H-L-Cys-L-Tyr-L-Phe-L-Glu (X-^ -L-Asp (X2) -B
jossa X^, X2 ja B tarkoittavat samaa kuin edellä ja jossa Cys:n aminoryhmä(t), Tyrin hydroksiryhmä ja/tai yksi tai useampi vapaa karboksyyliryhmä mahdollisesti on suojattu suojaryhmillä, tai sen funktionaalinen johdannainen sulfonoidaan, minkä jälkeen mahdolliset suojaryhmät poistetaan ja haluttaessa saatu peptidi muutetaan funktionaaliseksi johdannaiseksi.
Kaavan II mukaisia lähtöaineita voidaan valmistaa sinänsä tunnetulla tavalla esimerkiksi siten, että a) kondensoidaan kondensoimisaineen (1) läsnäollessa aminohappo tai peptidi, joka sisältää vapaan karboksyyliryhmän (ja jossa muut reaktiiviset ryhmät on suojattu), (2) yhdisteen (aminohapon, peptidin) kanssa, joka sisältää vapaan aminoryhmän (ja jossa muut reaktiiviset ryhmät samoin ovat suojatut); tai b) kondensoidaan aminohappo tai peptidi, joka sisältää aktivoidun karboksyyliryhmän ja jossa muut reaktiiviset ryhmät ovat valinnaisesti suojattuja, (2) yhdisteen (aminohapon, peptidin) kanssa, joka sisältää vapaan NH2~ryhmän (ja jossa muut reaktiiviset ryhmät on suojattu), tai c) kondensoidaan aminohappo tai peptidi, joka sisältää va paan karboksyyliryhmän (ja jossa muut reaktiiviset ryhmät on suojattu) , (2) yhdisteen (aminohapon, peptidin) kanssa, joka sisältää aktivoidun aminoryhmän (ja jossa muut reaktiiviset ryhmät valinnaisesti on suojattu); minkä jälkeen S-suojaryhmä, mikäli läsnä, ja valinnaisesti muut suojaryhmät poistetaan.
Menetelmät karboksyyliryhmän aktivoimiseksi ovat alaan perehtyneiden tuntemia ja käsittävät tämän muuttamisen happohalidiksi, atsidiksi, anhydridiksi, imidatsolidiksi tai aktivoiduksi esteriksi, kuten N-hydroksisukkiini-imidiesteriksi tai p-nitrofenyyliesteriksi.
--------_ - T
67367
Aminoryhmä voidaan aktivoida alaan perehtyneiden tuntemin menetelmin, kuten muuttamalla aminoryhmä fosfiittiamidiksi, tai käyttämällä "fosfori-atso"-menetelmää. Kts. kumpaakin aktivoimis-menetelmää varten: Houben Weyl, Methoden der Organischen Chemie, 4.painos, nide XV/2 (Georg Thieme Verlag, Stuttgart, (1974), johon tässä viitataan.
Tavallisimmat menetelmät edellä mainittuja kondensaatioreak-tioita varten ovat: karbodi-imidi-menetelmä, atsidi-menetelmä, seka-anhydridi-menetelmä ja aktivoitu esteri-menetelmä, kuten ovat kuvanneet E.Schröder ja K.Lubke teoksessa The Peptides, osa I, 1965 (Academic Press), johon tässä viitataan. Ns. Merrifield'in "kiintofaasi menetelmää, jota on kuvattu julkaisussa 85 J.AMER.CKEM.SOC. 2149 (1963), johon tässä viitataan, voidaan edelleen myös käyttää tässä kuvattujen peptidien ja peptidi-johdannaisten valmistukseen.
Reaktiiviset ryhmät, jotka eivät ota osaa kondensaatioreak-tioon, suojataan tehokkaasti sopivilla ns. "suojaryhmillä", jotka vuorostaan voidaan myöhemmin helposti poistaa hydrolysoimalla tai pelkistämällä. Esimerkiksi karboksyyliryhmä voidaan tehokkaasti suojata esteröimällä ainakin stökiometr.isesti tehokkaalla määrällä me-tanolia, etanolia, tertiääristä butanolia, bentsyylialkoholia tai p-nitrobentsyylialkoholia, tai vaihtoehtoisesti muuttamalla tunnetuin menetelmin amidiksi, esimerkiksi kuten on kuvattu teoksessa Houben Weyl; Methoden der Organischen Chemie, 4.painos, nide XV/1, s. 315-. Tämä jälkimmäinen. suojaryhraa on kuitenkin hyvin vaikea poistaa, niin että on suositeltavaa, että tätä ryhmää käytetään ainoastaan C-pääteaminohapon karboksyyliryhmän suojaamiseksi lopullisessa peptidissä. Tässä tapauksessa peptidi synteesi johtaa suoraan yleisen kaavan 11 peptidin amidiin.
Rvhmät, jotka voivat tehokkaasti suojata aminoryhmän, ovat yleensä sopivia happorynrniä, esimerkiksi happoryhmä, joka on johdettu sopivista alifaattisista, aromaattisista, aralifaattisista tai heterosyklisistä karboksyylihapoista (kuten etikkahaposta, bentsoe-hapos ca, ppridiini-K.arboksyylihaposta) , tai happoryhmä, joka on johdettu hiilihaposta, (kuten etoksi-karbonyyli, bentsyylioksi-karbo-nyyli, t-butyylioksi-karbonyyli tai p-metoksibentsyylioksi-karbo-nyyli), tai happoryhmä, joka on johdettu sulfonihaposta (kuten bent-seenisuifonyyli tai p-tolueenisulfonyyli). Myös muita ryhmiä voidaan käyttää, kuten substituoituja tai substituoimattomia aryyli- tai aralkyyli-ryhmiä, esimerkiksi bentsyyli ja trifenyyli-metyyli, tai ryhmiä, kuten o-nitrofenyylisulfenyy1i tai 2-bentsoyyli-l-metyyli- vinyyli. (Kts. Houben Weyl, Methoden der Organischen Chemie, 4.pai nos, nide XV/1, s. 46-).
5 67367
Kysteiinin merkaptoryhmä esimerkiksi voidaan tehokkaasti suojata asyloimalla tai (ar)alkyloimalla. Sopivia asyyliryhmiä ovat asetyyli tai bentsoyyli; tavallisia (ar)alkyyliryhmiä ovat tart.-butyyli, bentsyyli, p-NC^-bentsyyli, trityyli tai asetamidometyyli.
(Kts. Houben Weyl; johon jo on viitattu, nide XV/1, s. 736-). Tämä merkaptoryhmä voidaan kuitenkin "suojata" myös SO^H-ryhmällä. Usein on edullista ja suositeltavaa, vaikka se ei olekaan absoluuttisen olennaista, että myös tyrosiinin hydroksyyliryhmä suojataan; tämä ryhmä suojataan edullisesti tertiäärisellä butvyliryhmäilä.
Nämä suojaryhmät voidaan poistaa alaan perehtyneiden tuntemilla erilaisilla tavanomaisilla menetelmillä riippuen ko. suojaryh-män luonteesta, esimerkiksi hydrolysoimalla trifluori-etikkahapon, jodivedyn tai bromivedyn avulla jääetikassa, tai pelkistämällä, kuten katalyyttisellä hydrauksella tai natriumilla nestemäisessä ammoniakissa. (Kts. julkaisut, joihin edellä on viitattu.)
Kysteiinin merkaptoryhmän suojauksen purkaminen johtaa yleensä peptidin täydelliseen tai osittaiseen dimeroitumiseen.
Peptidi, josta 3-suojaus on poistettu, dimeroituu täydellisesti hapettamalla kahden monomeeri-peptidi-molekyyiin merkaptoryh-mät antamaan disulfidi. Tämä hapettaminen saatetaan tapahtumaan tavalla, joka on tällaisille hapetuksille tavallinen ja alaan perehtyneiden tuntema, esimerkiksi hapettamalla kaliumferrisyanidilla, jodilla tai etyylijodidilla tai hapettamalla ilmalla tai hapella vedessä tai nestemäisessä ammoniakissa. Kun suojaryhmien sopiva valinta on tehty, on myös mahdollista suorittaa hapettaminen vielä suojatulla peptidillä, esimerkiksi tunnetuin menetelmin, kuten käsittelemällä S-trityyli-suojatulla peptidillä, esimerkiksi tunnetuin menetelmin, kuten käsittelemällä S-trityyli-suojattua peptidiä jodilla sopivassa liuottimessa, kuten metanolissa, trityyliryhmä lohkeaa pois samalla kun syntynyt -SH-ryhmä hapettuu disulfidiksi. (Kts. Houben Weyl; nide XV/1, s. 800 — ) .
Dimeeri voidaan valmistaa myös suoraan tavallisen peptidi-synteesin kautta. Suojatun kysteiinin asemesta käytetään näissä aminohappojen synteeseissä kystiiniä. Tällä suoralla tiellä on tietenkin se etu, että S-suojaryhmiä ei tarvitse käyttää.
Kaavan II mukaisen dimeerin tai sen funktionaalisen johdannaisen sulfonointi suoritetaan edullisesti sopivan alkalimetalli- 6 67367 vetysulfiitin avulla, erityisesti natriumsulfiitin (Na^SO^) tai natriumvetysulfiitin (NaHSO^) avulla, sopivassa inertissä liuotti-messa, edullisesti vedessä. Sulfonointi suoritetaan yleensä huoneen lämpötilassa tai jonkin verran alemmassa lämpötilassa (noin 0°C:sta ylöspäin 25°C:seen). Peptidi/sulfiitti-suhde tässä sulfonoinnissa on edullisesti noin yhdestä ekvivalentista peptidiä noin 2 ekvivalenttiin sulfiittia.
On suositeltavaa, että jotakin hapetinta, kuten tehokas määrä Na^^Og, myös lisätään reaktioseokseen.
Käsitteellä "funktionaalinen johdannainen" ymmärretään: a) suoloja, jotka on muodostettu peptidin reaktiolla emäksen kanssa, edullisesti emäksen, joka on johdettu alkalimetallista, esimerkiksi NaOH:n tai Na2C03:n tai NaHCO^in kanssa; b) estereitä, jotka edullisesti on johdettu alifaattisista alkoholeista, joissa on 1 - noin 18 hiiliatomia, erityisesti alka-noleista, joissa on 1 - noin 6 hiiliatomia, kuten metanolista, etanolista, propanolista, isopropanolista, butanolista, amyylialkoho-lista ja isoamyylialkoholista; c) amideja tai alkyyli-substituoituja amideja, joiden alkyyli-ryhmässä (ryhmissä) on 1-4 C-atomia; ja d) metallikomplekseja, jotka on muodostettu saattamalla tässä tarkoitettuja peptidejä kosketukseen metallin, edullisesti sinkin, niukkaliukoisen suolan, hydroksidin tai oksidin kanssa.
Suoloja voidaan saada suoraan reaktioympäristöstä, jossa peptidit valmistetaan, tai niitä voidaan valmistaa myöhemmin peptidin reaktiolla emäksen kanssa. Natriumsuolat ovat edullisia.
Tässä kuvattujen peptidien estereitä voidaan saada esteröi-mällä peptidihappo tavalliseen tapaan. On kuitenkin edullista, että esteriryhmä tuodaan peptidi-synteesin aikana, nimittäin käyttämällä lähtöaineena ko. aminohapon haluttua esteriä itse aminohapon asemesta. Tämä jälkimmäinen menetelmä on edullinen sikäli, että esteri-ryhmä toimii myös suojaryhmänä.
Amideja voidaan valmistaa peptidiesterin aminolyysillä. On myös edullista tässä tapauksessa, että haluttu amidiryhmä on läsnä lähtöaineessa. Jos esimerkiksi halutaan kaavan I, jossa B edustaa aminohappotähdettä -Ser-Oh, mukaisen peptidin amidia, silloin on miltei edullisinta, että aminohapposeriinin amidia käytetään lähtöaineena itse aminohapon asemesta.
Kaavan I mukaisilla peptideillä, ja niiden funktionaalisilla johdannaisilla on arvokkaita psykofarmakologisia ominaisuuksia. Eri-
II
7 67367 tyisesti ne estävät välillisen välttämiskäyttäytymisen sammumisen ja ovat aktiivisia muistinkato-testissä, joka tässä jo edellä kuvattiin, niin että ne ovat erittäin sopiva tiettyjen mielenterveydellisten sairauksien, joissa halutaan aivotoiminnan piristystä, kuten vanhentumisen tai muistinkatoamisen hoitoon.
Peptidejä käytetään tehokkaissa määrissä tunnettujen kanti-mien kanssa ja edullisesti niitä käytetään annoksina 0,01:stä 10 mg:aan kilogrammaa kohti kehon painoa päivittäin, riippuen muodosta, jossa niitä annetaan.
Keksinnön mukaisia peptidejä voidaan antaa joko suun kautta tai ruoansulatuskanavan ulkopuolisesta farmaseuttisesti vaikuttavien kantimien avulla, jotka ovat alaan perehtyneiden tuntemia. Ruiskeena antoa varten ne liuotetaan, suspendoidaan tai emulgoidaan sopivaan nesteeseen, steriloidaan ja täytetään sitten ampulleihin aseptisissa olosuhteissa. Sekoitettuina sopivien tukiaineiden ja täyteaineiden kanssa tässä tarkoitettuja peptidejä voidaan edelleen tarjota muodossa, joka sopii suun kautta annettavaksi, kuten tabletteina, pillereinä, rakeina tai kapseleina. Tässä kuvattuja peptidejä voidaan lisäksi antaa peräpuikon muodossa tai suihkeena.
Suun kautta annettava muoto on edullinen.
Varsin arvokkaita valmisteita saadaan, kun tässä tarkoitettuja peptidejä valmistetaan muodossa, joka antaa pitkitetyn vaikutuksen. Edullisesti käytetään metallikomplekseja. Näitä metallikomplekseja voidaan saada saattamalla peptidit kosketukseen niukkaliukoisten metal lisuolojen , metallihydroksidien tai -oksidien kanssa, jotka ovat alalla tunnettuja. Metallifosfaatteja, metallipyrofosfaatteja ja rae-tallipolyfosfaatteja käytetään yleensä niukkaliukoisina metallisuoloina.
Metallit, joita voidaan käyttää tässä menetelmässä, ovat jaksottaisen järjestelmän b-ryhmiin kuuluvia metalleja, kuten esimerkiksi koboltti, nikkeli, kupari, rauta ja edullisesti sinkki sekä myös metalleja jaksoittaisen järjestelmän pääryhmistä, jotka metallit pystyvät muodostamaan komplekseja, kuten magnesium ja alumiini. Näiden metallikompleksien valmistus tapahtuu tavalliseen tapaan.
Metallikomplekseja voidaan saada lisäämällä peptidiä ja niuk-kaliukoista metallisuolaa, metallihydroksidia tai metallioksidia vesipitoiseen väliaineeseen. Metallikompleksi voidaan saada myös lisäämällä alkalinen väliaine peptidin ja liukoisen metallisuolan vesipitoiseen liuokseen, minkä tuloksena muodostuu liukenematon peptidi-metallihydroksidi-kompleksi.
Metallikompleksi voidaan lisäksi saada lisäämällä peptidi, liukoinen metallisuola ja liukoinen suola vesipitoiseen,edullises- -- ' ΤΓ~ 8 67367 ti emäksiseen väliaineeseen, minkä tuloksena muodostuu liukenematon neptidi-metallisuolakompleksi in situ.
Metallikompleksit voidaan käyttää suoraan suspensioina tai niitä voidaan esimerkiksi pakastekuivata ja myöhempänä ajankohtana uudelleensuspendoida alalla tunnetuin tavanomaisin menetelmin.
Yleisen kaavan I mukaisia peptidejä ja sen peptidi-johdannaisia, jotka ovat edullisia, ovat ne peptidit, joissa B on aminohappotähde L-Asp-OH. Nämä jälkimmäiset peptidit poikkeavat tunnetuista, aikaisemmin nimetyistä U.S.-patentin 3 335 110 mukaisista pen-tapeptideistä ei ainoastaan huomattavasti parantuneen liukoisuuden vaan ennenkaikkea selvästi paremman aktiivisuuden ansiosta suun kautta. Tämä aktiivisuuden parantuminen suun kautta ei ole yhteydessä lisääntyneeseen liukoisuuteen; yleisen kaavan I mukaiset peptidit, joissa B edustaa hydroksiryhmää, ovat myös helppoliukoisia, mutta niissä ei ilmene merkittävää parannusta aktiivisuudessa suun kautta verrattuna U.S.-patentin 3 835 110 tunnettuihin pentapeotideihin.
Seuraavat huomautukset tehdään seuraavien esimerkkien ja vaatimusten suhteen: I. Jos optista muotoa ei ole ilmoitettu, tarkoitetaan L-muotoa.
II. Seuraavia lyhennyksiä on käytetty suoja- ja aktivoimis-ryhnille: Z = bentsyylioksikarbonyyli tBu - tertiäärinen butyyli
Me = metyyli
Bzl = bentsyyli.
III. Seuraavat lyhennykset on annettu käytetyille liuottimille ja reagoiville aineille:
Bu = butanoli
Pv - pyridiini
Ac = etikkahappo
Wa = vesi DMF = dimetyyliformamidi DCCI = disykloheksyylikarbodi-inidi DCCU = disykbheksyyliurea HOBT = N-hydroksibentstriatsoli.
IV. Seuraavia lyhennyksiä on käytetty aminohapporyhmille:
Cys = kysteinyyli
Tyr = tyrosyyli 67367
Phe = fenyylialanyyli
Gin = glutaminyyli; samanlainen kuin Glu(NH2)
Asn = asparaginyyli; samanlainen kuin Asp(NH2)
Glu = glutamyyli
Asp = aspartyyli
Ser = seryyli
Ryhmä -HN-A-COOH käsittää mm. aminohappotähteet: glysyyli, alanyyli, valyyli, leusyyli ja isoleusyyli; aminohappotähteellä -Cys- on
S03H
rakennekaava:
S-SO.,H
CH~ I o
1 II
-HN-CH-C-
Vaikka keksintöä on kuvattu edellä spesifisten suoritusmuotojen suhteen, käyvät lukuisat vaihtelut ja muunnelmat selvästi ilmi alaan perehtyneelle, poikkeamatta keksinnön piiristä ja hengestä, kuten edellä kuvattiin, oheisissa patenttivaatimuksissa on määritelty ja kuten seuraavissa esimerkeissä on osoitettu.
Lähtöaineiden valmistus A. Suojattujen penta- ja heksapeptidien valmistus 1. Z-Cys(Bzl)-Tyr-Phe-Gln-Asn-OH (kts. USP 3 335 110) 0,26 ml N-etyylimorfoliinia lisätään 1 g:aan Z-Cys(Bzl)-Tyr-OH liuotettuna 10 ml:aan THF,ja liuos jäähdytetään -10°C:seen, minkä jälkeen lisätään 0,26 ml isobutyyliklooriformiaattia. Noin 10 minuutin sekoittamisen jälkeen -10°C:ssa lisätään 0,8 g H-Phe-Gln-Asn-OH ja 0,26 ml N-etyylimorfoliiniä noin 10 niissä jäähdytettyä DMF. Noin 30 minuutin sekoittamisen jälkeen -10°C:ssa, noin 2 tunnin jälkeen 0°C:ssa ja noin 18 tunnin jälkeen 20°C:ssa reaktioseos kaadetaan veteen ja pH asetetaan välille 3-4. Muodostunut jähmeä aine poistetaan linkoamalla. Näin saatu tuote kiteytetään etanoli/vedestä (1:1). Sulamispiste 219°C (hajoaa); Rf Bu:Py:Ac:Wa:ssa (4:0,75:0,25:1) = 0,44 Si02:lla, Rf Bu:Ac:Wa:ssa (4:1:1) = 0,34 Sioilla.
10 67367
2. Z-Cys(Bzl)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Asp-OH
4,54 g kohdassa 1 saatua peptidiä liuotetaan 400 ml:aan DMF ja liuos jäähdytetään -5°C:seen, minkä jälkeen lisätään peräkkäin 1,25 g Η-Asp(OtBu)-OtBu, 0,81 g HOBT ja 1,14 g DCCI. Seosta sekoitetaan noin 30 minuuttia -5°C:ssa, noin 1 tunti 0°C:ssa ja noin 15 tuntia huoneen lämpötilassa.
Muodostunut DCHU suodatetaan erilleen ja suodos kaadetaan 1500 ml:aan etyyliasetaattia, joka sisältää 30 ml etanolia. Näin muodostuneet kiteet suodatetaan erilleen ja kuivataan, t-butyyli-esterin saalis: 4,05 g; sulamispiste 190°C (hajoaa). Saatu t-butyy-liesteri hydrolysoidaan tämän jälkeen seoksessa, jossa on 40 ml 90-%:sta trifluorietikkahappoa ja 0,5 ml anisolia, huoneen lämpötilassa. 30 minuutin sekoittamisen jälkeen seos kaadetaan 300 ml: aan eetteriä, minkä jälkeen saadut kiteet suodatetaan erilleen ja kuivataan.
Saalis (peptidihappoa): 3,5 g; sulamispiste 224-225°C; Rf Bu:Ac:Wa:ssa (4:1:1) = 0,25 Si09:lla.
3. Seuraavat peptidit saadaan tavalla, joka vastaa kohdassa 2 kuvattua tapaa: a) Z-Cys(Bzl)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Glu-OH,
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (4:1:1) = 0,30 (SiC>2), b) Z-Cys(Bzl)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ser-OH,
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (4:1:1) = 0,10 (Si09), c) Z-Cys(Bzl)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-OH,
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (4:1:1) = 0,35 (SiC^) d) Z-Cys(Bzl)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Val-OH,
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (4:1:1) = 0,37 (Si0o).
B. Dimeerien valmistus suojatuista penta- ja heksapeptideistä 1. (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-OH)2 5,0 g kohdassa A.l. saatua suojattua pentapeptidiä liuotetaan noin 1000 ml:aan nestemäistä ammoniakkia. 15 minuutin sekoittamisen jälkeen lisätään sitten 2 ekvivalenttia NaNH2 liuokseen.
Senjälkeen lisätään liuokseen natriumia kunnes ilmestyy sininen väri, joka kestää noin 30 sekuntia, minkä jälkeen ammoniakin annetaan haihtua ilmaan. Jäännös lisätään noin 500 ml:aan vettä ja ekvimolaariseen määrään HC1, Na:n ja NaNH2:n suhteen. Seoksen pH asetetaan 6,3:aan, minkä jälkeen lisätään pieni määrä kuoarikloridia seokseen ja johdetaan ilmaa sen läpi 24 tuntia. Tertiäärinen reaktio
II
11 67367 -SH-ryhmille on silloin negatiivinen. Reaktioseos pannaan tämän jälkeen happoioni-vaihtokolonniin, minkä jälkeen seosta eluoidaan 2-% : sella etikkahappoliuoksella, kunnes kloridi-ioneja ei enää voida osoittaa. Peptidi eluoidaan tämän jälkeen pylväästä etikka-hapon 50-%:sella liuoksella. Eluaatti pakastekuivataan sitten ja suspendoidaan veteen, jolloin pH pidetään 4,l:ssä. Näin saadut kiteet suodatetaan erilleen ja kuivataan. Sulamispiste 240°C (hajoaa); Rf Bu:Ac:Wa:ssa (4:1:5) = 0,44 Sioilla.
2. Seuraavat dimeerit saadaan tavalla, joka vastaa kohdassa B.l. annettua tapaa:
* O
a) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Asp-OH)2; sp. 230 C (hajoaa);
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (3:1:1) = 0,10 (Si09), ' λ o b) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Glu-OH)2; sp. 200 C (hajoaa);
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (3:1:1) = 0,14 (SiC^), c) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ser-OH)2: sp. 180°C (hajoaa);
Rf Bu:Ac:V7a:ssa (3:1:1) = 0,07 (SiC^) , d) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-OH)2 f sp. 184°C (hajoaa);
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (3:1:1) = 0,15 (SiC^) , e) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Val-OH)2r sp. 190°C (hajoaa);
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (3:1:1) = 0,17 (SiO„), I ^ f) (H-Cys-Tyr-Phe-Glu-Asp-OH)9; g) (H-Cys-Tyr-Phe-Glu-Asn-OH)9; h) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asp-OH)9; ja j) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-OC1^H22)^·
Dimeerit (f), (g), (h) ja (j) on esitetty jo U.S.-patentissa n:o 3 835 110.
C. Dimeerien suora synteesi S-suojatun kysteiinin käyttämisen asemesta lähtöaminohappona käytetään tässä synteesissä N-suojattua aminohappokystiiniä.
1) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Asp-OH)^
Yksi ekvivalentti (Boc-Cys-OH)2 yhdistetään noin 2 ekvivalenttiin H-Tyr-Phe-Gln-Asn-Asp(OtBu)-OtBu esimerkin A.2. HOBT/DCCI-me-netelmän avulla, minkä tuloksena saadaan suojattu dimeeri: f (Boc-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Asp(OtBu)-OtBu)^
Boc- ja OtBu-suojaryhmät poistetaan nyt samanaikaisesti käsittelemällä trifluorietikkahapon ja anisolin seoksella esimerkissä A.2. kuvatuissa olosuhteissa.
12 67 3 67 (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Asp-OH)2 in saalis on 68 % laskettuna suojatusta kystiini-lähtöaineesta.
Rf Bu:Ac:Wa:ssa (3:1:1) = 0,10 SiC^slla, sulamispiste 230°C (hajoaa) .
2) Seuraavat dimeerit valmistetaan samalla tavalla kuin kohdassa C (1) :
f T
a) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-OMe)2 yhdistämällä (Boc-Cys-OH)^ H-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-OMe:n kanssa, mitä seuraa Boc-ryhmän lohkaisu trifluorietikkahapolla.
v 1 b) (H-Cys-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-Nt^)2 yhdistämällä (Boc-Cys-OH)0 H-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-NH2:n kanssa, mitä seuraa Boc-ryhmän lohkaiseminen trifluorietikkahapolla.
Esimerkki I
H-Cys(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-OH
5,0 g kohdassa B.l. saatua dimeeriä suspendoidaan 50 ml:aan vettä, minkä jälkeen suspensioon lisätään 2 ekvivalenttia natrium-sulfiittia ja 1 ekvivalentti natriumtetrationaattia (Ν335^0^) huoneen lämpötilassa (25°C). 1 minuutin sekoittamisen jälkeen saadaan liuos. Tämä liuos pannaan emäsioninvaihtopylvääseen (DEAE asetaatin muodossa), minkä jälkeen pylväs eluoidaan 2-%:sella etikkahappoliuok-sella kunnes eluaatti ei enää sisällä suoloja. Peptidi eluoidaan senjälkeer. pylväästä suoraviivaisella nousulla 0-20-%:sella etikka-happoliuoksella. Pelkästään haluttua peptidiä sisältävät jakeet, mikä määritetään ohutlevykromatografiaa käyttäen, kootaan ja pakas-tekuivataan. Sulamispiste 200°C (hajoaa); Rf Bu:Ac:Wa:ssa (3:1:1) = 0,30 (Si02).
Esimerkki II
Seuraavat peptidit valmistetaan tavalla, joka vastaa esimerkissä I kuvattua tapaa: a) H-Cys(SO^H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Asp-OH; Rf = 0,54 b) H-Cys(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Glu-OH; Rf = 0,60 c) H-Cys(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ser-OH; Rf = 0,30 d) H-Cys(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-OH; Rf = 0,40 e) H-Cys-(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Val-OH; Rf = 0,43 f) H-Cys-(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-OMe; Rf = 0,65 g) H-Cys(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-Ala-NH2; Rf = 0,55 h) H-Cys- (SC>3H)-Tyr-Phe-Glu-Asp-OH; Rf = 0,4 5
II
13 6 7367 j) H-Cys-(S03H)-Tyr-Phe-Glu-Asn-OH; Rf ^ 0,41 k) H-Cys(S03H)-Tyr-Phe-Gln-Asp-OH; Rf = 0,40 l) H-Cys (SO^H)-Tyr-Phe-Gln-Asn-OC^-^H^; Rf = 0,55 Peptideillä (a):sta (e):hen on sulamispiste 240 C:n yläpuolella. Rf-arvot on mitattu Bu:Ac:Wa:ssa (3:1:1) SiC^rlla.

Claims (4)

14 67367
1. Menetelmä psykofarmakologisten kaavan I mukaisten peptidien ja niiden funktionaalisten johdannaisten valmistamiseksi, H-L-Cys-L-Tyr-L-Phe-L-Glu(X )-L-Asp(X_)-B I so3h jossa X-^ ja X2 tarkoittavat hydroksia tai aminoa ja B on hydroksi tai aminohappotähde, joka on L-Asp-OH, L-Asn-OH, L-Glu-OH, L-Gln-OH, L-Ser-OH tai -HN-A-COOH, jossa A on 1 - noin 6 hiiliatomia sisältävä alkylideeniryhmä, tunnettu siitä, että peptidi-dimeeri, jonka kaava on: H-L-Cys-L-Tyr-L-Phe-L-Glu(Χχ)-L-Asp(X2)-B H-L-Cys-L-Tyr-L-Phe-L-Clu(X1)-L-Asp(X2)-B 11 jossa , X2 ja B tarkoittavat samaa kuin edellä ja jossa Cys:n aminoryhmä(t), Tyrin hydroksiryhmä ja/tai yksi tai useampi vapaa karboksyyliryhmä mahdollisesti on suojattu suojaryhmillä, tai sen funktionaalinen johdannainen sulfonoidaan, minkä jälkeen mahdollisesti suojaryhmät poistetaan ja haluttaessa saatu peptidi muutetaan funktionaaliseksi johdannaiseksi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että sulfonointiaineena käytetään alkalimetallisulfiittia tai alkalimetallivetysultiittia.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä tunnettu siitä, että sulfonointi suoritetaan hapettimen läsnäollessa .
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että hapetin on Na2S^O^. Il
FI782195A 1977-07-13 1978-07-07 Foerfarande foer framstaellning av psykofarmakologiska hexa- och heptapeptider innehaollande en sulfongrupp FI67367C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NL7707781 1977-07-13
NL7707781A NL7707781A (nl) 1977-07-13 1977-07-13 Psychofarmacologische peptiden.

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI782195A FI782195A (fi) 1979-01-14
FI67367B FI67367B (fi) 1984-11-30
FI67367C true FI67367C (fi) 1985-03-11

Family

ID=19828866

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI782195A FI67367C (fi) 1977-07-13 1978-07-07 Foerfarande foer framstaellning av psykofarmakologiska hexa- och heptapeptider innehaollande en sulfongrupp

Country Status (16)

Country Link
US (1) US4203975A (fi)
JP (1) JPS5419934A (fi)
AU (1) AU519567B2 (fi)
BE (1) BE868953A (fi)
CA (1) CA1108123A (fi)
DE (1) DE2830489A1 (fi)
DK (1) DK149454C (fi)
ES (1) ES471672A1 (fi)
FI (1) FI67367C (fi)
FR (1) FR2397395A1 (fi)
GB (1) GB2001076B (fi)
IE (1) IE47547B1 (fi)
LU (1) LU79960A1 (fi)
NL (1) NL7707781A (fi)
SE (1) SE443789B (fi)
ZA (1) ZA783713B (fi)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
AU530062B2 (en) * 1979-02-21 1983-06-30 Akzo N.V. Psycho-pharmacological peptides
JPH0195597U (fi) * 1987-12-17 1989-06-23
US9908972B2 (en) * 2013-05-22 2018-03-06 National Institute Of Advanced Industrial Science And Technology Photodegradable cross-linking agent, photodegradable gel, cell culture instrument, cell arrangement-sorting apparatus, cell arrangement method, cell sorting method, tissue forming method, and tissue
CN105764921B (zh) * 2013-09-17 2020-06-30 台湾浩鼎生技股份有限公司 用于诱导免疫反应的糖疫苗组合物及其治疗癌症的用途
US10980894B2 (en) 2016-03-29 2021-04-20 Obi Pharma, Inc. Antibodies, pharmaceutical compositions and methods
AU2017252128B2 (en) 2016-04-22 2024-06-06 Obi Pharma, Inc. Cancer immunotherapy by immune activation or immune modulation via Globo series antigens
EP3490592A4 (en) 2016-07-27 2020-03-25 OBI Pharma, Inc. IMMUNOGENIC / THERAPEUTIC GLYCAN COMPOSITIONS AND USES THEREOF
TWI786054B (zh) 2016-07-29 2022-12-11 台灣浩鼎生技股份有限公司 人類抗體、醫藥組合物、及其方法

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3803119A (en) * 1970-04-20 1974-04-09 Daiichi Seiyaku Co Pantetheine-s-sulfonic acid derivatives and salts thereof
NL175293C (nl) * 1972-02-08 1984-10-16 Akzo Nv Werkwijze ter bereiding of vervaardiging van een farmaceutisch preparaat met psychofarmacologische werking, alsmede werkwijze voor het bereiden van een van vasopressine afgeleid peptide.

Also Published As

Publication number Publication date
SE443789B (sv) 1986-03-10
NL7707781A (nl) 1979-01-16
BE868953A (fr) 1979-01-12
GB2001076A (en) 1979-01-24
FI67367B (fi) 1984-11-30
DE2830489A1 (de) 1979-01-25
FR2397395A1 (fr) 1979-02-09
JPS5419934A (en) 1979-02-15
GB2001076B (en) 1982-01-27
JPS6220200B2 (fi) 1987-05-06
DK149454B (da) 1986-06-16
FR2397395B1 (fi) 1981-01-16
LU79960A1 (fr) 1979-04-09
ZA783713B (en) 1979-07-25
AU519567B2 (en) 1981-12-10
CA1108123A (en) 1981-09-01
IE47547B1 (en) 1984-04-18
DK314978A (da) 1979-01-14
ES471672A1 (es) 1979-09-16
US4203975A (en) 1980-05-20
FI782195A (fi) 1979-01-14
AU3778078A (en) 1980-01-10
IE781291L (en) 1979-01-13
SE7807759L (sv) 1979-01-14
DK149454C (da) 1986-11-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US5100875A (en) Novel peptides having plateler aggregation inhibitory activity
EP0425212B1 (en) Cyclic anti-aggregatory peptides
US4935491A (en) Effective antagonists of the luteinizing hormone releasing hormone which release negligible histamine
KR910001724B1 (ko) 향정신성 펩티드류의 제조방법
US5623050A (en) Stable polypeptides having c-AMP production enhancing activity and the use thereof
US3842064A (en) Psychopharmacologically active tetra-,penta-,hexa-,and hepta-peptides
FI67367C (fi) Foerfarande foer framstaellning av psykofarmakologiska hexa- och heptapeptider innehaollande en sulfongrupp
US4104371A (en) Psychopharmacologically active peptides and peptide-derivatives, and the use thereof
EP0037516A1 (en) N-omega substituted derivatives of 1-Desamino-vasopressin analogs
US3856770A (en) Psychopharmacologically active tetra-, penta-, hexa-, and heptapeptides
US4623640A (en) Peptides
FR2557114A1 (fr) Nouveaux derives de la gonadoliberine, procede pour leur preparation et compositions pharmaceutiques les contenant
US4444682A (en) Method of sulfation
US4389342A (en) Synthetic hormone-like peptides and method for their synthesis
US4501733A (en) Polypeptides, a process for their preparation, their use, and a _process for the purification of polypeptides
Žertová et al. Amino and deamino analogs of 8-D-homoarginin-vasopressin with modified tyrosine in position 2: synthesis and some biological properties
US3835110A (en) Vasopressin peptides having psychopharmacological activity
JPH07316193A (ja) ペプチド誘導体およびその用途
US4271152A (en) Psycho-pharmacological peptides
EP0217804A1 (en) ANALOGS OF SUBSTANCES P.
FI77874C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya, terapeutiskt anvaendbara peptider.
GAZIS et al. Synthesis and biological activities of oxytocin and lysine vasopressin analogs containing glutamic acid γ‐hydrazide in position 4
US6297354B1 (en) Pentapeptide LHRH antagonists
Procházka et al. The analogs of oxytocin and D-homoarginine vasopressin with bulky substituted phenylalanine in position 2
Schwartz et al. Insulin peptides. Part XXIII. The synthesis of a hexadecapeptide derivative related to the B chain of human insulin

Legal Events

Date Code Title Description
MM Patent lapsed

Owner name: AKZO N.V.