FI66347B - Foerfarande foer framstaellning av tetracyklo(4,3,0,02,4,03,7)nonanaminoderivat anvaendbara saosom antivirusmedel - Google Patents

Foerfarande foer framstaellning av tetracyklo(4,3,0,02,4,03,7)nonanaminoderivat anvaendbara saosom antivirusmedel Download PDF

Info

Publication number
FI66347B
FI66347B FI783948A FI783948A FI66347B FI 66347 B FI66347 B FI 66347B FI 783948 A FI783948 A FI 783948A FI 783948 A FI783948 A FI 783948A FI 66347 B FI66347 B FI 66347B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
group
formula
exo
hydrogen atom
compound
Prior art date
Application number
FI783948A
Other languages
English (en)
Other versions
FI66347C (fi
FI783948A (fi
Inventor
Douglas Lintin Swallow
Original Assignee
Ici Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ici Ltd filed Critical Ici Ltd
Publication of FI783948A publication Critical patent/FI783948A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI66347B publication Critical patent/FI66347B/fi
Publication of FI66347C publication Critical patent/FI66347C/fi

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C217/00—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton
    • C07C217/78—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton
    • C07C217/80—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C07C217/82—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings of the same non-condensed six-membered aromatic ring
    • C07C217/84—Compounds containing amino and etherified hydroxy groups bound to the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the same carbon skeleton having amino groups and etherified hydroxy groups bound to carbon atoms of non-condensed six-membered aromatic rings of the same non-condensed six-membered aromatic ring the oxygen atom of at least one of the etherified hydroxy groups being further bound to an acyclic carbon atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/16—Antivirals for RNA viruses for influenza or rhinoviruses
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C211/00—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C211/01—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C211/16—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton containing rings other than six-membered aromatic rings
    • C07C211/19—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to acyclic carbon atoms of a saturated carbon skeleton containing rings other than six-membered aromatic rings containing condensed ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C211/00—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C211/43—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C211/44—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton having amino groups bound to only one six-membered aromatic ring
    • C07C211/45—Monoamines
    • C07C211/48—N-alkylated amines
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C211/00—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton
    • C07C211/43—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton
    • C07C211/44—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton having amino groups bound to only one six-membered aromatic ring
    • C07C211/52—Compounds containing amino groups bound to a carbon skeleton having amino groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of the carbon skeleton having amino groups bound to only one six-membered aromatic ring the carbon skeleton being further substituted by halogen atoms or by nitro or nitroso groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2601/00—Systems containing only non-condensed rings
    • C07C2601/12—Systems containing only non-condensed rings with a six-membered ring
    • C07C2601/14—The ring being saturated
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C2603/00—Systems containing at least three condensed rings
    • C07C2603/56—Ring systems containing bridged rings
    • C07C2603/86—Ring systems containing bridged rings containing four rings

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Description

It 1-fcrTI r·! KUULUTUSJULKAISU , , *. - n W (11) utlAcgningsskrift 6 634 7 (51) IC*Jk!/l*.Cl.3 c 07 c 87/40 SUOMI—FIN LAND (21) iwta-p.w-w,, 783948 ...x (22) H* »whylWt—AwBlwhurfi 21.12.78 (23) AUcapiM—GHdgbmrfag 21.12.78 (41) TMht IvtklMfcsl — Mvfc offwttt 23.06.79
Patentti* jft fklrttrihtlltell . MPittrtfcilpion h fc—Uufcii— ,.__
Patent· och regkterstyrelsen ' ' AmbIcm uthfd odi udjunTriU^ 29.06.84 P2)(33)(31) etueiiMw—a^ird 22.12.77
Englanti-England(GB) 53446/77 (71) Imperial Chemical Industries Limited, Imperial Chemical House,
Millbank, London SW1P 3JF, Englanti-England(GB) (72) Douglas Lintin Swallow, Macclesfield, Cheshire, Englanti-England(GB) (74) Oy Kolster Ab (54) Menetelmä virusvastaisina aineina käyttökelpoisten tetrasyklo-/4,3,0,02»\0^»7/nonaaniami nojohdannaisten valmistamiseksi -Förfarande för f ramstäl lning av tetracyklo/4,3,0,02>i*,03>7J7nonan-aminoderivat användbara säsom antivirusmedel
Keksinnön kohteena on menetelmä sellaisten tetrasyklo-2 4 3 7 /4,3,0,0Z' , 0J ' _7nonaanin amino johdannaisten valmistamiseksi, joilla on virusvastaisia ominaisuuksia.
“ 2 4 3 7
On tunnettua, että 8-aminotetrasyklo/4,3,0,0Z' ,0J _7nonaa-nilla on virusvastaisia ominaisuuksia (GB-patenttijulkaisu 1 180 749). On myös tunnettua, että 1-aminoadamantaanilla on influenssavirus &2in vastainen vaikutus (W.L. Davies ym., Science, 1964 , 144, 862). Nyt on keksitty, että tunnetulla yhdisteellä 8-aminometyyli-tetrasyklo/4,3,0,02,4,03'^nonaanilla (H.K. Hall, J. Org. Chem. , 1960, 2_5, 42) ja sen useilla uusilla substituoi-duilla johdannaisilla on erittäin aktiivinen lukuisten influenssavirusten vastainen vaikutus sekä in vitro että in vivo.
2 4 3 7
Tetrasyklo/4,3,0,0 ,0J _7nonaanirengassysteemi numeroidaan 2 seuraavasti: 66347 5
JU
2 r^\ """ 3
JM
9'-U
8-asemassa oleva substituentti, joka on hiiliatomien 1,6,7,8 ja 9 muodostaman tason yläpuolella, määritellään ekso-konfiguraation omaavaksi. 8-asemassa oleva substituentti, joka on tämän tason alapuolella, määritellään endo-konfiguraation omaavaksi.
Keksinnön kohteena on tarkemmin sanottuna menetelmä virus-vastaisten tetrasyklononaanijohdannaisten valmistamiseksi, joiden kaava on: : - \ / 11 \ / ' | A~nh2 R1 3 jossa R on vetyatomi tai 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyliradi- kaali ja A on radikaali, jonka kaava on CH„CH» tai CH-R2, jossa 4 2 2 R on vetyatomi tai 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyliradikaali, sykloheksyyliradikaali, fenyylialkyyliradikaali, jonka alkyyli- osassa on 1-6 hiiliatomia, tai fenyyliradikaali, joka voi olla substituoitu halogeeniatomilla tai metyyli- tai metoksiryhmällä; 4 sillä edellytyksellä, että A:n ollessa CHR , vähintään toinen 4 ryhmistä R ja R on muu kuin vety, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditiosuolojen valmistamiseksi.
Huomattakoon, että kaavan II mukainen yhdiste voi esiintyä useina isomeerimuotoina johtuen substituenttien A, R1 ja R2 geometrisesta sijoittumisesta toisiinsa nähden. On selvää, että tämä keksintö sulkee piiriinsä kaikki nämä isomeerit, joko erillisinä tai seoksina.
2
Huomattakoon myös, että kaavan II mukaisessa ekso- tai 3 66347 endo-isomeerissa on yksi tai kaksi asyraraetriakeskusta, nimittäin hiiliatomit, joihin R3 ja ovat sitoutuneet. Kun läsnä on kaksi asymmetriakeskusta, kukin ekso- ja endo-isomeeri voi tietenkin esiintyä kahtena diastereoisomeerimuotona. Minkä tahansa kaavan II mukaisen yksityisen isomeerin raseeminen muoto voidaan sen vuoksi hajottaa kahdeksi optiseksi aktiiviseksi enantiomeeriksi.
On selvää, että tämä keksintö sulkee piiriinsä kaavan II mukaisen yksityisen isomeerin raseemisen muodon, ja lisäksi minkä tahansa optisen isomeerin, jolla on keksinnön mukaisesti valmistettujen yhdisteiden hyödylliset, edellä määritellyt ominaisuudet, alan asiantuntijoiden ollessa yleisesti tietoisia siitä, kuinka sellaiset isomeerit, sekä geometriset että optiset, ovat erotettavissa, ja kuinka niiden biologiset ominaisuudet ovat määritettävissä.
3
Kun R on alkyyliradikaali, se on erityisesti metyyliradi- kaali.
4
Kun R on alkyyliradikaali, se on erityisesti metyyli-, etyyli-, n-propyyli- tai i-propyyliradikaali.
4
Kun R on fenyyliradikaali, se on erityisesti 3-fenyyli- propyyliradikaali.
4 4
Kun R on fenyyliradikaali, R :n valinnanvarainen substi-tientti on erityisesti fluori-, kloori- tai bromiatomi tai metyyli- tai metoksiradikaali. Tällaisen valinnanvaraisen substi-tuentin ensisijainen paikka on fenyyliradikaalin 4-asema.
Sopiva farmaseuttisesti hyväksyttävä kaavan II mukaisen yhdisteen happoadditiosuola on esimerkiksi suola, joka on muodostettu epäorgaanisen hapon, esimerkiksi kloorivetyhapon, bromivety-hapon, rikkihapon tai fosforihapon kanssa tai suola, joka on muodostettu karboksyylihapon, esimerkiksi etikkahapon, bentsoehapon, mantelihapon, viinihapon, adipiinihapon, maitohapon, sitruunahapon, glukonihapon, oksaalihapon tai meripihkahapon kanssa, tai suola, joka on muodostettu sulfonihapon, esimerkiksi metaanisul-fonihapon tai £-tolueenisulfonihapon kanssa.
Keksinnön mukaisesti valmistettavien yhdisteiden ensisijaisen ryhmän muodostavat kaavan II mukaiset yhdisteet, joissa R3 on vetyatomi tai metyyliradikaali ja A on radikaali, jonka kaava on Cf^CH^ tai CHR^, jossa on metyyliradikaali tai fenyyliradikaali.
Erityisen ensisijainen keksinnön mukaisesti valmistettavien 4 66347 yhdisteiden ryhmän muodostavat kaavan II mukaiset yhdisteet, jois- 3 4 sa R on vetyatomi ja A on radikaali, jonka kaava on CHR , jossa 4 R on metyyliradikaali.
Kaksi erityisen ensisijaista yhdistettä ovat kaavan II
3 mukaiset yhdisteet, joissa R on vetyatomi ja A, jolla on ekso-konfiguraatio, on radikaali, jonka kaava on CHR4*, jossa R4 on metyyliradikaali, se on kaksi diastereosisomeeria, joita on selostettu käyttämällä nimitystä ekso-8-(1-aminoetyyli)tetrasyklo-/_4,3,0, '4 ,0^'^7nonaani.
Keksinnölle on tunnusomaista, että pelkistetään yhdiste, jonka kaava on
{ / III
1/ „ L3 jossa B on metyleeniradikaali tai suora sidos ja X on syano- tai karbamoyyliradikaali tai radikaali, jonka kaava on
R4-C=N-R5 IV
5 jossa R on vetyatomi tai hydroksiradikaali tai radikaali, jonka kaava on Mg-Y, jossa Y on kloori-, bromi- tai jodiatomi, sillä 4 edellytyksellä, että kun B on metyleeniradikaali, R on vetyatomi, ja sillä edellytyksellä, että kun B on suora sidos, ainakin toi- 3 4 nen radikaaleista R ja R on muu kuin vetyatomi; minkä jälkeen haluttaessa valmistetaan yhdiste, joka on optisesti aktiivinen enantiomeeri, kaavan II mukainen raseeminen yhdiste hajotetaan, minkä jälkeen jos kaavan II mukainen yhdiste on saatu vapaan emäksen muodossa ja halutaan saada suola, emäksen annetaan reagoida hapon kanssa, josta saadaan farmaseuttisesti hyväksyttävä anioni.
Menetelmä voidaan toteuttaa käyttämällä hydridikompleksi-pelkistintä, esimerkiksi litiumaluminiunmhydridiä, laimentimessa tai liuottimessa, kuten eetterissä. Reaktio on nopeutettavissa 5 66347 tai suoritettavissa loppuun kuumentamalla. Vaihtoehtoisesti menetelmä voidaan toteuttaa hydraamalla katalyytin, kuten aluminium-oksidilla olevan rodiumin läsnäollessa laimentimessa tai liuotti-messa, kuten etanolissa. Reaktiota voidaan jouduttaa tai se voidaan saattaa loppuun suorittamalla hydraus korkean paineen alaisena, esimerkiksi 50 ilmakehän paineessa ja/tai korkeassa lämpötilassa, esimerkiksi 60-65°C:ssa.
4
Kaavan III mukaista lähtöainetta, jossa R on muu kuin vetyatomi ja on Mg-Y, voidaan valmistaa antamalla sopivan 8-syaaniyhdisteen reagoida Grignard-reagenssin kanssa, esimerkiksi kuten esimerkeissä 1 ja 2 on selostettu.
Kaavan III mukaista lähtöainetta, jossa R^ on hydroksiradi-kaali, voidaan valmistaa antamalla vastaavan karbonyyliyhdisteen reagoida hydroksyyliamiinin kanssa, esimerkiksi esimerkissä 3 se- 4 lostetulla tavalla. Karbonyyliyhdiste, jossa R on muu kuin vety-atomi, voidaan valmistaa Grignard-reaktion avulla vastaavasta 8-syaaniyhdisteestä, esimerkiksi esimerkissä 3 selostetulla tavalla.
Välituotetta, josta saadaan kaavan III mukaista lähtöai- 3 netta, jossa R on alkyyliradikaali, voidaan valmistaa alkyloi-malla vastaava 8-syaaniyhdiste, esimerkiksi esimerkissä 6 selos-tetylla tavalla.
Kaavan III mukaista lähtöaineyhdistettä, jossa B on metylee- 3 niradikaali, R on vetyatomi ja X on syaaniradikaali, voidaan valmistaa esimerkissä 7 selostetulla tavalla.
Kuten edellä on mainittu, keksinnön mukaisesti valmistetut yhdisteet ovat aktiivisia monenlaisia viruksia vastaan. Tämä aktiivisuus on osoitettavissa in vitro-kokeen avulla virusta vastaan, joka on lisääntynyt vasikan munuaissoluissa, mutta on paremmin osoitettavissa virusvastaisessa kokeessa, käyttämällä virusta, joka on lisääntynyt fretin (Foetorius furo) henkitorvenrenkaissa. Tämä jälkimmäinen koe on paljon luotettavampi aktiivisuuden indikaattori, koska siinä käytetään lämminverisestä eläimestä saatuja segmenttejä elimestä, johon määrätty hormoni vaikuttaa, jolloin koe vastaa puhtaan in vitro-kokeen ja puhtaan in vivo-kokeen välillä olevaa koetta. Keksinnön mukaiset edulliset yhdisteet pystyvät hiirillä kokeiltaessa hyvin heikentämään influenssavirusten kasvua infektion saaneiden eläinten keuhkoissa.
6 66347
Fretin henkitorvirenkaita käyttäen tapahtuva koe suoritetaan seuraavalla tavalla:
Kolmen kuukauden ikäisen fretin henkitorvi irrotetaan aseptista tekniikkaa käyttäen ja leikataan poikittaissuunnassa kudos-renkaiksi. Yhdestä henkitorvesta saadaan noin 30-40 rengasta.
Kukin rengas sijoitetaan steriloituun lasiseen koeputkeen (9 x 1 cm) ja peitetään 0,5 ml:lla steriloitua elatusainetta, jossa on sopivana konsentraationa koeyhdistettä. Käytetyt yhdisteiden loppukonsentraatiot ovat 45 ^ug/ml, 9 yug/ml, 1,8 ^ug/ml, 0,4 /ug/ml, 0,08 ^ug/ml ja nolla. Kunkin konsentraation osalta käytetään kolme koeputkea. Putkia haudotaan yön ajan 37°C:ssa kehikossa, jota pyöritetään kevyesti kunkin henkitorvirenkaan pysyttämiseksi ravin toainekylvyssä.
Seuraavana aamuna kukin rengas tutkitaan pienitehoisella mikroskoopilla, jotta voitaisiin suunnilleen määrittää, kuinka suuri osa renkaan sisäaukon värekarvoista yhä sykähtelee. Arvosteluasteikko on: 4 100 % värekarvoista sykähtelee yhä 3 75 % " 2 50 % " " 1 25 % " " 0 0 % " Tämä alkututkimus osoittaa, onko yhdiste yksinään myrkyllinen värekarvaepiteelille. Sen jälkeen kukin putki infektoidaan lisäämällä standardimäärä influenssavirusta ja jätetään hautumaan kahdeksi tunniksi 37°C:seen. Tämän ajan kuluessa virus absorboituu kunkin renkaan soluille ja soluihin ja tartuntaprosessi käynnistyy. Kahden tunnin kuluttua viruspitoiset nesteet dekantoidaan pois, renkaat pestään kevyesti tuoreella elatusaineella ja sitten lisätään vielä 0,5 ml yhdistettä sisältävää väliainetta. Sitten niitä haudotaan 37°C:ssa, kuten aikaisemminkin seuraavaan aamuun asti, jolloin suoritetaan värekarvaepiteelin toinen tarkastus.
Infektoimattoman kontrollikokeen arvostelu paljastaa lääkkeen myrkyllisyyden määrän, infektoidun, mutta lääkettä sisältämättömän kontrollikokeen arvostelu virusvälitteisen vaurion määrän, ja lääkekäsittelykokeen arvostelu suojauksen määrän. Kustakin putkesta poistetaan väliaine ja yhdistetään kahdesta muusta put- 7 66347 kesta saadun saman lääkekonsentraation omaavan väliaineen kanssa. Yhdistettyjä näytteitä käsitellään 0,3 ml:n kanssa steriloitua härän valkuaisplasmaa, pakastetaan -20°C:ssa ja varastoidaan viruksen myöhempää titrausta varten. Kuhunkin 3 putken erään lisätään tuoretta lääkeaineliuosta ja jatketaan hautomista. Edellä mainittu käsittely uusitaan vielä kolme kertaa, joten kustakin lääkelaimennuksesta ja kontrolleista saadaan, kaikkiaan, 4 väliaine-erää. Jäätyneet väliainenäytteet sulatetaan ja lämmitetään 37°C:seen ja niiden sisältämät virukset titrataan primäärisissä vasikanmunuaissoluissa käyttämällä julkaistua kvantitatiivista verenadsorptiomenetelmää (N.B. Finter, Ann. N.Y. Acad. Sei., 1970, 173, 131). Tällä tavalla voidaan verrata sekä visuaalisesti että kvantitatiivisesti kokeiltavan yhdisteen vaikutusta influenssaviruksen lisääntymiseen henkitorven värekarvaepiteelin palasissa.
Kaikki tässä patenttiselityksessä esimerkkeinä mainitut yhdisteet ovat aktiivisia tässä kokeessa influenssaviruksia A^ ja | A2 vastaan ja eräät yhdisteet ovat aktiivisia myös influenssa-A^- j virusta vastaan. Täten kaikki tässä patenttivaatimuksessa esimerkkeinä mainitut yhdisteet ovat tässä kokeessa aktiivisia influens-sa-A2HK-virusta vastaan konsentraation ollessa 5 yug/ml tai alhai- ! sempi, ja niiden myrkyllisyys/aktiivisuus-suhde on välillä 9 -yli 550. Tunnettu yhdiste 8-aminotetrasyklo/4 ,3,0,0Z' ,0* _7nonaa-ni ei ole tässä kokeessa aktiivinen influenssa A^HK-virusta vastaan konsentraation ollessa 50 yug/ml.
Influenssaviruksen vastainen koe hiiriä käyttäen suoritetaan seuraavalla tavalla:
Kahden hiiriryhmän, joissa kummassakin on kymmenen spesifisesti tauditonta valkoista uroshiirtä, joiden paino on 20-22 g, hiirille annetaan kullekin suun kautta kokeiltavaa yhdistettä, yhdelle ryhmälle 125 mg/kg (2,5 mg/hiiri) ja yhdelle ryhmälle 50 mg/kg (1,0 mg/hiiri). Kolmannelle 10 hiiren ryhmälle ei anneta yhdistettä ja sitä käytetään kontrolliryhmänä. Kahden tunnin kuluttua hiiret sijoitetaan erikseen aerosolilokeroon ja niitä käsitellään 0,5 tunnin ajan influenssa-virus-aerosolilla. Tunnin kuluttua infektoinnista ja uudelleen neljä tuntia infektoinnin jälkeen kahden ensimmäisen ryhmän hiirille annetaan suun kautta kokeiltavaa yhdistettä. Seuraavana päivänä samoille hiirille 8 66347 annetaan kokeiltavaa yhdistettä klo 09.00, 13.00 ja 17.00. 48 tuntia infektoinnin jälkeen kaikki hiiret tapetaan ja keuhkot leikataan irti. Kunkin erillisen ryhmän keuhkot jaetaan kahteen viiden ryhmään, ja keuhkojen pinnan vammautumisen tutkimisen jälkeen kukin kuudesta ryhmästä homogenisoidaan sekoittimessa Hank'in steriilin suolaliuoksen kanssa. Homogenisaatit sentrifugoidaan kudos-jätteiden poistamiseksi ja pintakerros pullotetaan ja laimennetaan 9 osalla naudan albumiiniplasmaa. Laimennettuja pintakerroksia varastoidaan sitten -20°C:ssa, kunnes kunkin viruskonsentraatio voidaan määrittää edellä selostetun kvantitatiivisen verenadsorp-tiomenetelmän mukaisesti. Täten virusten lisääntymistä lääkkeellä käsiteltyjen hiirien keuhkoissa voidaan verrata virusten lisääntymiseen käsittelemättömissä hiirissä ja saadaan arvioiduksi lääkkeen teho.
Koeyhdistettä saavilla hiirillä ei esiinny ilmeisiä myr-kyllisyysoireita, joiden voitaisi katsoa aiheutuvan tässä kokeessa käytetystä yhdisteestä.
Keksinnön mukaisesti valmistettuja yhdisteitä voidaan käyttää farmaseuttisina koostumuksina.
Hoidettaessa influenssainfektiota tällaista koostumusta käyttäen, suositellaan käytettäväksi koostumusta, joka mahdollistaa tetrasyklononaanijohdannaisten vapautumisen viruksia tuhoavin määrin kehon osissa, joissa virukset normaalisti lisääntyvät, esimerkiksi sienet nenässä, suussa, kurkussa ja keuhkoputkissa, joko aplikoimalla yhdistelmää suoraan noihin osiin, tai epäsuorasti siten, että vereen tulee annostuksen jälkeen riittävästi virus-vastaista yhdistettä.
Sellaisia ensisijaisia suoraan aplikoitavia yhdisteitä ovat, esimerkiksi, pastillit, jotka voivat liueta hitaasti suussa, suun ja sen yhteydessä olevien kanavien huuhtelemiseksi aktiivisen aineosan liuoksella tai suspensiolla, ja nenäsuihkeet hyväksyttävässä nesteessä olevan liuoksen tai suspension muodossa, tai kuiva jauhemainen aerosoli, joka sisältää tetrasyklononaani-johdannaista hienojakoisen jauheen muodossa, joita kutakin voidaan hengittää sisään ja jotka saostuvat nenän ja keuhkoputken kanaviin, ja ensisijaisia suun kautta aplikoitavia yhdistelmiä ovat esimerkiksi tabletit, joita käytettäessä konsentraatio veressä saadaan riittävän suureksi.
9 66347
Sopiva ihmiselle tarkoitettu tabletti tai lääkenappi sisältää 100-500 mg virusvastaista yhdistettä, tai 10-200 mg edullista yhdistettä. Ihmiselle influenssan ennakolta ehkäisemiseksi tai hoitamiseksi tarkoitettu hoito-ohje on 1-3 tablettia 2-4 kertaa päivässä.
Ihmiselle tarkoitettu sopiva nenäsuihke tai aerosoli sisältää 2 mg - 300 mg tetrasyklononaani-johdannaista ml:ssaliuosta tai suspensiota tai 2 mg - 40 mg edullista keksinnön mukaisesti valmistettua yhdistettä ml:ssa ja ihmisen influenssan ennakolta ehkäisemiseksi tai hoitamiseksi potilaan nenään tiputetaan tai suihkutetaan noin 0,25 ml - 1 ml sellaista liuosta tai suspensiota 3-6 kertaa päivän aikana.
Farmaseuttinen koostumus voi sisältää myös muita tunnettuja käyttökelpoisia yhdisteitä, esimerkiksi virusvastaisia aineita, kuten amantadiinia, tungosta nenässä vähentäviä aineita, kuumelääk-keitä tai antiseptisiä aineita.
Keksintöä valaistaan esimerkein, jolloin esimerkissä 9 on osoitettu esimerkin 8 mukaisen yhdisteen absoluuttinen konfiguraatio.
Esimerkki 1
Metyylimagnesiumjodidi-liuosta valmistettiin magnesiumista (12,0 g) ja metyylijodidista (71,0 g) eetterissä (400 ml). Eetteri tislattiin pois ja korvattiin samanaikaisesti kuivalla tolueenilla (300 ml). Tolueeniliuokseen lisättiin 8-syanotetrasyklo-/4,3,0,0^ ' ^ , 0^ ' ^Jnonaania (58,0 g) (valmistettu Schrauzer’in ja Glocker'in selostamalla menetelmällä, Chem. Ber. , 1964, 9_7, 2451 ja sen on osoitettu (kaasu-neste-kromatografisesti) olevan ekso-ja endo-seosta suhteessa 3,6:1) ja seosta lämmitettiin kiehuttaen, kunnes koko nitriilimäärä oli reagoinut (noin kuusi tuntia). Tämä liuos jäähdytettiin ympäristön lämpötilaan ja sekoittaen lisättiin hitaasti suspensio, jossa oli litiumaluminiumhydridiä (7,6 g) kui- ! vassa eetterissä (200 ml). Seosta lämmitettiin kiehuttaen kuusi tuntia, jäähdytettiin ympäristön lämpötilaan ja ylimääräinen li-tiumaluminiumhydridi tuhottiin lisäämällä vettä varovaisesti tiputtamalla ja voimakkaasti sekoittaen. Sitten lisättiin Grignard-kompleksin laimeata kaustista soodaliuosta (15 ml, 18,6-norm.
NaOH 50 ml:ssa vettä). Saostuneet kiinteät aineet suodatettiin i 10 66347 erilleen nesteistä ja pestiin perusteellisesti eetterillä. Yhdistetyt nesteet ja pesuliuokset kuivattiin vedettömällä kaliumkarbonaatilla, suodatettiin ja käsiteltiin ylimäärin käytetyllä kuivalla kloorivetykaasulla. Näin saatiin 8-(l-aminoetyyli)tetrasyklo-/4,3,0,0^'4,0^'^7nonaani-hydrokloridia, joka suodatettiin erilleen, pestiin eetterillä, kuivattiin ja kiteytettiin uudelleen isoprop-yylialkoholista. Tämän tuotteen sulamispiste oli 265,5-266°C. Esimerkki 2
Samalla tavalla kuin esimerkissä 1, mutta käyttämällä metyyli jodidin asemesta sopivaa alkyyli-, aralkyyli- tai aryylihalo-genidia, valmistettiin seuraavia analogisia yhdisteitä: d CH-NHL.HX « ^ R4
Halogenidi R4 X Sp. °C
Etyylijodidi -CH2CH3 Cl 229-231 n-propyylibromidi -CH2CH2CH3 bentsoaatti 185-187 CH3 i-propyylibromidi -CH^" bentsoaatti 176-178 \ch3 sykloheksyybromidi bentsoaatti 114-116 fenyylipropyylibromidi C1 148-150 bromibentseeni *^3 bentsoaatti 158-160 p-klooribromibentseeni Cl bentsoaatti 198-201 p-bromianisoli 0CH3 bentsoaatti 188-191 p-bromitolueeni CH3 bentsoaatti 217-219 n 66347
Esimerkki 3
Ekso-8- (1-hydroksi-iminoetyyli) tetrasykli,3,0,02,4,03'jfao-naania (3,0 g) liuotettiin kuivaan eetteriin (20 ml) ympäristön lämpötilassa ja lisättiin tiputtamalla ja sekoittaen kiehuvaan suspensioon, jossa oli litiumaluminiumhydridiä (1,0 g) kuivassa eetterissä (50 ml). Lisäyksen päätyttyä seosta lämmitettiin kie- Λ huttaen vielä 16 tuntia, jäähdytettiin ja ylimääräisen litiumalu-miniumhydridin tuhoamiseksi lisättiin varovaisesti tiputtamalla vettä. Kiinteät aineet suodatettiin erilleen orgaanisesta faasista ja pestiin perusteellisesti eetterillä. Orgaaninen faasi ja pesunesteet yhdistettiin, kuivattiin vedettömällä ^CO^Ha, suodatettiin ja käsiteltiin liuoksen kanssa, jossa oli ylimäärin kuivaa kloorivetyä eetterissä. Näin saatiin valkeaa ekso-8-(1-amino-etyyli)tetrasyklo^l ,3,0,02'4,03,^nonaani-hydrokloridisakkaa, joka kiteytettiin uudellen isopropyylialkoholista. Uudelleen kiteytetyn tuotteen sp. oli 254-255°C.
Lähtöaineena käytettyä ekso-8-(1-hydroksi-iminoetyyli)tetrasyk-- 2 4 3 7 10^4,3,0,0 ' ,0 ' _/nonaania voidaan valmistaa seuraavalla tavalla: 8-syaanitetrasyklo£?,3,0,02'4,03 '^_7nonaania (29 g) käsiteltiin magnesiumista (6,0 g) ja metyylijodidista (35,5 g) valmistetun magnesiumjodidin kanssa, kuten esimerkissä 1, jolloin saatiin nitriilin Grignard-kompleksin tolueeniliuosta. Tämä liuos jäähdytettiin 5°C:n alapuolelle jäähauteessa ja sekoittaen ja jäähdyttäen lisättiin tiputtamalla kylmä liuos, jossa oli jääetikkahappoa (25 ml) vedessä (25 ml). Lämpötilan ei annettu kohota 15°C:n yläpuolelle. Paksuun suspensioon lisättiin vettä (150 ml) ja sekoittamista jatkettiin, kunnes kiinteät aineet olivat liuenneet. Orgaaninen faasi erotettiin, pestiin kolme kertaa vedellä (20 ml), kuivattiin vedettömällä magnesiumsulfaatilla ja suodatettiin. Toluee-ni haihdutettiin pois pyörivässä haihduttimessa ja jäljelle jäänyt öljy tislattiin suurvakuumissa. Näin saatiin ekso- ja endo-8-asetyylitetrasyklo£4,3,0,02'4,03 '^.7nonaanin seosta, kp. 6 6°C/0,5 mm.
Edellä mainittu asetyylijohdannainen (16,2 g) liuotettiin etanoliin (60 ml) ja liuokseen lisättiin hydroksyyliamiini-hydro-kloridia (7,6 g) ja kuivaa natriumasetaattia (12,3 g). Seosta lämmitettiin kiehuttaen ja lisättiin vettä pienin erin, kunnes kiinteät aineet olivat liuenneet täydellisesti. Lämmittämistä kiehut- 12 6634 7 taen jatkettiin 21 tuntia, ja sen jälkeen liuos jäähdytettiin jää-hauteessa. Liuoksesta kiteytyi erilleen valkeaa kiinteää ainetta ja se suodatettiin erilleen. Kiteytettäessä uudelleen etanolin ja veden seoksesta (70:30) saatiin ekso-8- (l-hydroksi-iminoetyyli)tetra-syklo^.4,3,0,0^ ' ^ , 0^ ' ^Jnonaania, sp. 103-104°C.
Esimerkki 4
2 4 3 V
Ekso-8-syaano-endo-8-metyy litetrasyklo^? ,3,0,0 ' ,0J ' Jr\o~ naania (2,0 g) lisättiin hitaasti suspensioon, jossa oli litium-aluminiumhydridiä (0,6 g) dietyylieetterissä (25 ml). Seosta lämmitettiin kiehuttaen 16 tuntia. Ylimääräinen pelkistysaine tuhottiin lisäämällä varovaisesti vettä. Valkea sakka suodatettiin erilleen, pestiin hyvin eetterillä ja pesunesteet ja suodos yhdistettiin, kuivattiin vedettömällä ^CO^illa ja käsiteltiin liuoksen kanssa, jossa oli ylimäärin kloorivetyä eetteriin liuotettuna.
2/4 3 7
Saatiin ekso-8-aminometyyli-endo-8-metyylitetrasyklo£3,3,0,0 ' ,0 '_J-nonaanihydrokloridia, jonka sp. isopropanoli/etyyliasetaatti-seok-sesta (til. suhde 25:75) uudelleen kiteyttämisen jälkeen oli 245-246°C.
Lähtöaineena käytettyä ekso-8-syaano-endo-8-metyylitetra- 2 4 3 7 syklo£?,3,0,0 ' ,0 '_7nonaania voidaan valmistaa G.N.Schrauzer1 in ja P. Glockner'in menetelmällä (Chem. Ber. 1964 , 9_7, 2451). Mainittuja saantoja ei voitu saada ja puhtaan aineen saamiseksi oli suoritettava työläs pylväskromatograafinen puhdistuskäsittely. Tämä osoitettiin, kaasu-neste-kromatografisesti, sisältävän 95 % ekso-nitriiliä ja 5 % endo-nitriiliä.
Esimerkki 5
Endo-8-syaano-ekso-metyylitetrasyklo/3,3,0,0^ ,0^ r]j7nonaa- nia (80 % endo-syaano-isomeeria, 500 mg) pelkistettiin litiumalu- miniumhydridillä (0,5 g) ja reaktioseosta käsiteltiin edelleen tarkalleen samalla tavalla kuin esimerkissä 4. Näin saatiin endo- 2 4 3 7 8-aminometyyli-ekso-8-metyylitetrasyklo/3,3,0,0^^,0-5 _7nonaani-hydrokloridia (80 % endo-aminometyyliä, 20 % ekso-aminometyyliä), sp. 222°C.
Lähtöaineena käytettyä endo-nitriili-isomeeriä voidaan saada seuraavalla tavalla: -3
Butyylilitiumia (15,4 ml 1,43 x 10 -molaarista tetra- 13 6634 7 hydrofuraani-liuosta, 0,022 moolia) lisättiin hitaasti liuokseen, jossa oli di-isopropyyliamiinia (2,22 g, 0,022 moolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (10 ml), ^:n suojaamana 5-10°C:ssa ja sekoitettiin 15 minuuttia. Tämä liuos jäähdytettiin -78°C:seen ja siihen lisättiin 8-syaani-tetrasyklo/4,3,0,0^'4,0^'_7nonaania (3,045 g, 0,022 moolia) liuotettuna heksametyylifosforiamidiin (4,5 g).
Seosta sekoitettiin tunnin ajan -78°C:ssa. Lisättiin tiputtamalla, myös -78°C:ssa, liuos, jossa oli metyylijodidia (3,55 g, 0,025 moolia) kuivassa tetrahydrofuraanissa (5 ml) ja seosta sekoitettiin tässä lämpötilassa 1,5 tuntia ja sitten 16 tuntia ympäristön lämpötilassa. Lisättiin vettä (20 ml), tetrahydrofuraani haihdutettiin pois vakuumissa ja jäljelle jäänyt seos uutettiin kloroformilla (3 x 15 ml). Uute kuivattiin MgSO^rllä, suodatettiin ja liuotin poistettiin vakuumissa. Jäännös kromatografoitiin piigeelillä tolueenin ollessa eluointiaineena, jolloin saatiin endo-8-syano- 2 4 3 7 ekso-8-metyylitetrasyklo/M ,3,0,0Z' ,O'3'_7nonaania (80 % endo-sya-no-isomeeriä, 20 % ekso-syano-isomeeria, kaasuneste-kromatografoin-nin perusteella), kp. 118-120°C/18 mm.
Esimerkki 6 8-syanometyylitetrasyklo/4,3,0,O2,0^'^7nonaania (0,5 g) pelkistettiin litiumaluminiumhydridillä (0,5 g) käyttämällä esimerkissä 3 selostettua menetelmää. Näin saatiin 8-(2-aminoetyyli)-tetrasyklo£5,3,0,02'^,02'^7nonaani-hydrokloridia, sp. 252-254°C.
Lähtöaineena käytettyä 8-syaanimetyylitetrasyklo- 7.4,3,0,0 ' ,0 '_7nonaania voidaan saada seuraavasti:
Liuokseen, jossa oli 8-syanotetrasyklo/T,3,0,02'4,03'^7no-naania (87 g) hiilitetrakloridissa (600 ml) lisättiin fosforipen-takloridia (168 g). Seosta lämmitettiin kiehuttaen 60 tuntia, jäähdytettiin ja kaadettiin seokseen, jossa oli murskattuja jäitä ja vettä (1 1). Seosta sekoitettiin 30 minuuttia ja orgaaninen kerros erotettiin. Tämä pestiin 10 %-isella (paino/tilav.) natrium-karbonaatin vesiliuoksella (200 ml) kyllästetyllä suolaliuoksella (100 ml) ja kuivattiin sitten vedettömällä kaliumkarbonaatilla.
Sen jälkeen suodosta haihdutettiin liuottimen poistamiseksi vakuumissa ja sitten tislattiin vakuumissa, jolloin saatiin 8-syaano- 8-klooritetrasyklo7j4,3,0 , O2 ' ^ , 0^'Z.7nonaania , kp. 136-140°C/20 mm, 83 %:n saannoin.
14 6 63 4 7 Tämä kloorinitriili (13,45 g) liuotettiin etanoliin (60 ml), jäähdytettiin 0°C:seen jäissä ja sekoittaen ja jäähdyttäen lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli natriumhydroksidia (2,4 g) vedessä (20 ml). Lisättiin tiputtamalla vetyperoksidia /27 ml 29-%:ista /paino/tilav.) vesiliuosta/, jolloin muodostui sakea valkea sakka. Tätä seosta sekoitettiin kolme tuntia 0°C:ssa ja sitten kaksi tuntia huoneen lämpötilassa. Valkea sakka suodatettiin erilleen ja pantiin talteen. Suodosta haihdutettiin vakuumissa etanolin poistamiseksi ja vesipitoinen jäännös uutettiin kloroformilla (100 ml). Orgaaninen faasi kuivattiin, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin valkeaa kiinteää ainetta. Tämä kiinteä aine ja valkea sakka yhdistettiin ja kiteytettiin uudelleen etanolista, jolloin saatiin 8-kloori-8-karbamoyylitetrasyklo-/4,3,0,0^'^,0^'^7nonaania, sp. 124-126°C.
Tätä klooriamidia (19,75 g) lämmitettiin kiehuttaen 40 minuutin ajan typen suojaamana seoksessa, jossa oli kaliumhydroksi-dia (16,8 g) ja n-propanolia (200 ml). Propanoli haihdutettiin pois vakuumissa ja jäännös jaettiin eetteriin ja veteen (100 ml kumpaakin) liukeneviin osiin. Orgaaninen faasi pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella (50 ml), kuivattiin vedettömällä I^CO^lla, suodatettiin ja liuos haihdutettiin pois. Jäljelle jäänyt öljy tis- — 2 4 3 7-7 lättiin vakuumissa, jolloin saatiin 8-oksotetrasyklo/4,3,0,0 ' ,0 '_7-nonaania, kp. 124-130°C/20 mm.
Natriumhydridiä (2,4 g, pesty öljyttömäksi) käsiteltiin dimetyylisulfoksidin (100 ml) kanssa ja lämmitettiin typen suojaamana 75-80°C:ssa 35 minuuttia. Seos jäähdytettiin ympäristön lämpötilaan ja tiputtamalla lisättiin liuos, jossa oli dietyylisyaano-metyylifosfonaattia (17,7 g) kuivassa tetrahydrofuraanissa (100 ml). Seosta sekoitettiin 30 minuuttia. Sitten lisättiin tiputtamalla liuos, jossa oli edellä mainittua ketonia (13,4 g) dimetyylisulfoksidin (100 ml) ja tetrahydrofuraanin (100 ml) seoksessa ja sekoitettiin 16 tuntia huoneen lämpötilassa. Tuote kaadettiin veteen (1 000 ml) ja seos uutettiin eetterillä (5 x 100 ml). Yhdistetyt uutteet pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin kaliumkarbonaatilla, suodatettiin ja haihdutettiin kuiviin. Tislaamalla vakuumissa saatiin 8-syaanometyleenitetrasyklo-/4,3,0,0^,03,^/nonaania, kp. 138-140°C/18 mm.
15 66347 Tämä tyydyttämätön nitriili (6,17 g) pelkistettiin vety- atmosfäärissä huoneen lämpötilassa ja paineessa, jolloin läsnä oli 5-paino-%:ista palladium-puuhiili-katalyyttiä (1,7 g) etanoliliuok- sessa (200 ml). Kun vetyä ei absorboitunut enempää, reaktioseos suodatettiin ja liuotin haihdutettiin pois, jolloin saatiin 8- _ 2 4 3 7 syaanometyylitetrasyklo^M ,3,0,0 ' ,0 7 /nonaania, identifioituna massaspektrin, m/e = 159, infrapuna-spektrin ja NMR-spektrin perusteella, jota käytettiin enempää puhdistamatta.
Esimerkki 7
Liuokseen, jossa oli endo-8- (1- hydroksi-iminoetvvli) tetra-— 2 4 3 7 syklo/4,3,0,0 7 ,0 7Jnonaania (1,0 g) etanolissa (50 ml) lisättiin 5-paino-%:ista rodium-alumiinioksidi-seosta (0,3 g). Seosta hydrattiin autoklaavissa 60-65°C:ssa 24 tuntia atmosfäärin vety-paineessa. Suodattamalla tuote erilleen ja haihduttamalla sen jälkeen liuotin varovaisesti pois, saatiin endo-8-(1-aminoetyyli)tet-2 4 3 7 _ rasyklo/3,3,0,0Z,q,0J7_7nonaania vaaleankeltaisena öljynä. Hydro-kloridia, sp. isopropanolista suoritetun uusintakiteytyksen jälkeen 265,5-266,5°C, valmistettiin lisäämällä HCl:n eetteriliuosta vapaan emäksen eetteriliuokseen.
Lähtöaineena käytettyä endo-8- (1- hydroksi-iminoetyyli) tetra-syklo/*4,3,0,0Δ 74, 0J 7 ynonaania voidaan valmistaa seuraavasti:
Valmistettaessa ekso-8- (1-hydroksi-iminoetyyli) tetrasyklo-— 2 4 3 7- /4,3,0,0 7 ,0 7 __/nonaania esimerkissä 3 selostetulla tavalla, jäljelle jäi reaktionesteitä, jotka sisälsivät sekä ekso- että endo-oksiimi-isomeereja. Haihdutettaesa etanoli liuoksesta vakuumissa seoksena olleet isomeerit saostuivat tarttuisana kiinteänä aineena. Tästä aineesta otettuja näytteitä (kutakin 2,0 g) käsiteltiin kui-vakolonni-kromatografiaa käyttäen 1,0 kg:n piigeeliä (Kieselgel 60, osaskoko 0,063 - 0,2 mm) käyttämällä kehitysliuottimena tolueenin ja etyyliasetaatin seosta näiden tilavuussuhteen ollessa 9:1. Erottuneiden aineiden paikka kolonnissa määritettiin ottamalla näytteitä, minkä jälkeen suoritettiin ohutkerros-kromatografinen analyysi. Kolonnin alueet, joissa oli puhdasta ekso- ja puhdasta endo-isomee-ria, poistettiin ja eluoitiin erikseen etyyliasetaatilla. Haihduttamalla eluaatit kuiviin, puhtaisen isomeerin kokonaissaannoksi saa-tiinnoinl,2 g, mutta ekso-isomeerin todellinen osuus vaihteli välillä 0,8 - 0,2 g ja endo-isomeerin välillä 0,4 - 1,0 g riippuen kolonniin pannun näytteen isomeerisuhteesta.
16 66347
Edellä esitetyllä menetelmällä erotetun ekso-isomeerin sp. oli 103-104°C ja endo-isomeerin 80-83°C.
Esimerkki 8
Esimerkissä 3 saatu ekso-8-(1-aminoetyyli)tetrasyklo-£4,3,0,0 ,0^'^7nonaani-hydroklodiri on kahden diastereoisomeerin seosta, jotka kummatkin puolestaan ovat kahden optisen isomeerin seoksia. Sama koskee esimerkin 7 endo-isomeeria. Nämä diastereo-isomeerit ovat identifioitavissa erillisinä täplinä ohutkerros-kromatografisessa analyysissä piigeelilevyillä käytettäessä jompaa kumpaa kahdesta liuotinsysteemistä. Täplät voidaan saada näkyviksi liuotinsysteemissä (1) joko jodihöyryllä tai seriumammoniumnitraat-ti/rikkihappo-suihkeella käsittelyn ja lämmittämisen jälkeen, tai syteemissä (2) l-%:isella (paino/tilav.) ninhydriinin butanoli-suihkeella.
Systeemi (1) tolueeni/etanoli/etyyliasetaatti/ammoniakki (om.p. 0,880) 6:4:2:0,25 v/v/v/v, .
Systeemi (2) asetoni/ammoniakki (om.p. 0,880) 40:0,5 v/v. R^-arvot Systeemi (1) Systeemi (2) ylempi ekso-täplä 0,48 0,60 alempi ekso-täplä 0,43 0,54 ylempi endo-täplä 0,48 0,51 alempi endo-täplä 0,40 0,40 13
Nuo 4 diastereomeeriä voidaan identifioida myös C-NMR -resonanssien avulla sivuketjun kiertävästä hiiliatomista, kun taas kaikkien suhteelliset määrät voidaan saada piikin korkeudesta. Kunkin diastereomeerin todelliset siirtymäarvot vaihtelevat jonkin verran konsentraatiosta ja suolatyypistä riippuen, mutta esimerkissä 4 saadulle perushydrikloridi-seokselle saatiin seuraavat arvot:
Kemiallinen siirtymä tetrametyyli-siläänistä, ppm ylempi ekso-täplä 51,9 alempi ekso-täplä 52,80 ylempi endo-täplä 52,82 alempi endo-täplä 53,6
Ekso-diastereomeerien erottaminen onnistui seuraavalla ta valla: 17 66347
Liuokseen, jossa oli ekso-8-(1-aminoetyyli)tetrasvklo-£3,3,0,0^'^,0^'^7nonaania (32,2 g) kuivassa eetterissä (250 ml), lisättiin liuos, jossa oli L-(+)-viinihappoa (7,16 g, 0,25 mooli-osaa) etanolin (100 ml) ja kuivan eetterin (300 ml) seoksessa. Viinihapposuola-sakka suodatettiin erilleen, pestiin kuivalla eetterillä ja fraktiokiteytettiin viisi kertaa etanolista. Lopullinen tuote oli puhdasta ylemmän ekso-täplän tartraattia (9,0 g), joka muutettiin emäksen kautta hydrokloridiksi (4,3 g), jonka sp. oli 257-259°C.
Vaikkakin tämän erotusmenetelmän voitiin odottaa aiheuttavan diastereomeerin yhden optisesti aktiivisen isomeerin erottumisen, edellä saadun tuotteen kierto oli nolla polarimetrissä tutkittaessa ja sen osoitettiin NMR:n avulla, optista siirtymäreagenssia käyttäen, olevan seosta, jossa optisten isomeerien määrät ovat yhtä suuret.
Lisättäessä vielä erä L-(+)-viinihappoa (7,15 g, 0,25 mooli-osaa) edellä ensimmäisestä saostuksesta saatuihin nesteisiin, saatiin tarttuisaa sakkaa, josta kahden etanolista suoritetun fraktio- i kiteytyksen ja tätä seuranneen hydrokloridiksi muuttumisen jäi- j keen saatiin puhdasta alemman ekso-täplän ainetta. Kiteytettäessä ! tätä hydrokloridia uudelleen etanolista, saatu ensimmäinen erä oli hyvin pieni (0,12 g) ja jäännöstä oli 1,74 g. Ensimmäinen erä osoittautui olevan optisesti aktiivista, = +22° ja NMR-analyysissä optisen siirtymäreagenssin yhteydessä se näytti olevan puhdasta optista isomeeriä.
Alemman ekso-täplän erottuminen suuremmassa mittakaavassa saatiin aikaan ottamalla talteen amiini emäksenä kaikista edellä saaduista fraktiokiteytysnesteistä (yhteensä 13,3 g), liuottamalla kuivaan eetteriin (100 ml) ja lisäämällä liuos, jossa oli D-(-)-mantelihappoa (6,2 g, 0,25 mooliosaa) etanolin (10 ml) ja kuivan eetterin (50 ml) seoksessa. Saostunut suola (14,6 g) fraktiokiteytettiin kahdesti etyyliasetaatista, muutettiin hydrokloridiksi ja kiteytettiin lopuksi uudelleen etanolista, jolloin saatiin puhdasta alempaa ekso-täplän hydrokloridia (3,0 g), sp. 266-268°C. Tämän kierto oli nolla ja se oli NMR:n perusteella, optista siirtymäreagenssia käytettäessä, seosta, jossa oli samat määrät kahta optista isomeeriä.
ie 6 634 7
Samanlaista erotusmenetelmää sovellettiin endo-amiini-emäkseen (10,8 g), jota oli saatu esimerkissä 7. L-( + )-tartraatti-suola fraktiokiteytettiin viisi kertaa isopropanolista, jolloin saatiin puhdasta ylemmän endo-täplän tartraatti-monohydraattia (1,16 g), sp. 195-205°C. Jäännökset muutettiin takaisin emäkseksi.
D-(-)-mandelaattisuolaa valmistettiin eetterissä, jossa oli vähän alkoholia. Saatiin kolme erää. Erä 1 fraktiokiteytettiin kolme kertaa etyyliasetaateista, jolloin saatiin puhdasta ylemmän endo-täplän mandelaattia, sp. 191-192°C (0,38 g), kun taas erät 2 ja 3 yhdistettiin ja kiteytettiin neljä kertaa uudelleen etyyliasetaatista, jolloin saatiin puhdasta alemman endo-täplän mandelaattia (1,1 g), sp. 166-167°C.
Esimerkki 9
Liuosta, jossa oli ekso-8-(1-hydroksi-iminoetyyli)tetrasyklo- 2 2 3 7 /4,3,0,0 ' ,0 7_7nonaania (4,0 g), saatu esimerkin 3 viimeisessä osassa, pyridiinin (35 ml) ja etikkahappoanhydridin (30 ml) seoksessa, lämmitettiin kiehuttaen 48 tuntia. Liuottimet poistettiin vakuumissa ja mustaa jäännöstä ravisteltiin eetterin kanssa (3 x 50 ml:n erin). Musta kiinteä aine poistettiin suodattamalla ja suo-dos uutettiin 10-%-isella (paino/tilav.) natriumvetykarbonaatin vesiliuoksella (3 x 20 ml:11a). Orgaaninen faasi kuivattiin ja haihdutettiin kuiviin, jolloin saatiin ruskeaa öljyä (4,3 g), joka kro-matografoitiin sen jälkeen piigeelillä käyttämällä eluointiaineena tolueeni/eetteri-seosta tilavuussuhteessa 9:1. Fraktiot, jotka sisälsivät yhden ainoan täplän ainetta, jonka R^-arvo oli 0,36 pii-geeli-ohutkerroskromatografilevyillä, jotka oli kehitetty tolueeni/ etyyliasetaatti-seoksella 9:1 (v:v), yhdistettiin ja haihdutettiin kuiviin hartsiksi, joka kiteytettiin petrolieetteristä (kp. 40-60°C). Saatiin nahanväristä kiinteää ainetta (0,618 g), joka sen jälkeen sublimoitiin, jolloin saatiin 8-/Ϊ-(diasetyyliamino)etylideeni/- 2 a 3 7 tetrasyklo £4,3,0,0Δ ’ , O'3' _7nonaanin E-isomeeria (0,60 g) (rakenne todettu NMR:n avulla). Haihdutettaessa petrolieetterinesteet pois kiteytymästä, saatiin väritöntä öljyä, joka tislattiin vakuumissa, jolloin saatiin 8-/I-(diasetyyliamino)etylideeni/tetrasyklo-/7,3,0,02'4,0^'^7nonaanin Z-isomeeria, kp. 65-76°/0,05 mm (rakenne todettu NMR:n avulla) (Z- ja E-nimityksiä kaksoissidos-isomerian osalta on selostettu artikkelissa J. Org. Chem. , 1970, 3J5, 2849).
19 66347 E-isomeeria (377 g) hydrattiin platinaoksidin (100 mg) läsnäollessa etanolissa (15 ml) huoneen lämpötilassa ja paineessa.
Kun vetyä oli absorboitunut teoreettinen määrä, reaktioseos suodatettiin ja liuotin haihdutettiin pois, jolloin jäljelle jäi väritöntä hartsia. Uuttamalla tätä kiehuvalla petrolieetterilla (kp. 60-80°C) ja jäähdyttämällä sen jälkeen uutteet, saatiin amorfista valkeaa, kiinteää ainetta, sp. 112-128°C, joka identifioitiin yh-disteeksi 8-/1-(asetyyliamino)etyyli7tetrasyklo/4,3,0,0 ' ,0 _7~ nonaani.
Tämä tuote hydrolysoitiin väkevällä kaliumhydrosidin alko- holiliuoksella kiehuttamalla 36 tuntia. Haihduttamalla etanoli pois, laimentamalla vedellä ja uuttamalla eetterillä, kuivaamalla sen jälkeen ja saostamalla kloorivedyn eetteriliuoksella, saatiin *- 2 4 3 7 8-(1-aminoetyyli)tetrasyklo/J,3,0,0 ' ,0 _7nonaani-hdyrokloridia. Tämä tuote identifioitiin ohutlevykromatografiaa käyttäen seokseksi, jossa oli alemman ekso-täplän diastereoisomeeria ja alemman endo-täplän diastereoisomeeria.
Se tosiseikka, että tätä tuotetta valmistettiin suorittamalla tunnetun stereokemiallisen rakenteen omaavan kaksoissidoksen cis-hydraus, mahdollistaa näiden kahden diastereoisomeerin absoluuttisen rakenteen määrittämisen. Tämä puolestaan mahdollistaa ylemmän ekso-täplän ja ylemmän endo-täplän diastereoisomeerien absoluuttisen rakenteen määrittämisen. Nämä määritykset ovat seu-raavat: ώ \ i 10 \-chch3 nh2
Diastereoisomeeri Absoluuttinen konfiguraatio
ylempi ekso-täplä 8S,10S ja 8R,10R
alempi ekso-täplä 8S,10R ja 8R,10S
ylempi endo-täplä 8R,10R ja 8S,10S
alempi endo-täplä 8R,10S ja 8S,10R.
20 66347
Esimerkki 10
Liuosta, jossa oli ekso-8-(1-hydroksi-imioetyyli)tetrasyklo-/4,3,0,0 ' ,0 '_7nonaania (1,77 g) ja kobolttikloridiheksahydraat-tia (4,76 g) etanolissa (100 ml), käsiteltiin huoneen lämpötilassa natriumboorihydridillä (3,8 g) pieniä erinä sekoittaen ja jäähdyttäen lämpötilan pitämiseksi alle 20°C:ssa. Lisäyksen päätyttyä seosta sekoitettiin 2 tuntia huoneen lämpötilassa ja seosta kuumennettiin sitten palautusjäädhyttäen 2 tuntia. Musta suspensio suodatettiin piimään lävitse ja väritön suodos haihdutettiin tyhjössä, jolloin saatiin tahmea kiinteä aine. Tämä uutettiin eetterillä ja 2-n NaOH-vesiliuoksella. Orgaaninen faasi pestiin kyllästetyllä suolaliuoksella, kuivattiin vedettömällä kaliumkarbonaatilla, suodatettiin ja sitä käsiteltiin ylimäärällä kloorivedyn eetteriliuos-ta. Saatu valkoinen ekso-8-(1-aminoetyyli)tetrasyklo/4,3,0,02,4,03,Z7~ nonaani-hydrokloridi-saostuma suodatettiin pois ja pestiin eetterillä ja kuivattiin. Ohutkerroskromatograginen analyysi osoitti, että se oli puhdasta ja sillä oli esimerkissä 8 esitetyt kahden ekso-diastereoisomeerin R^-arvot.
Esimerkki 11 Käytettiin samaa menetelmää ja samoja määriä kuin esimerkissä 10, paitsi että kobolttikloridiheksahydraatti korvattiin nikkeli-kloridiheksahydraatilla ja koko reaktio suoritettiin huoneen lämpötilassa 20 tunnin aikana. Ensimmäisessä hydrokloridituotteessa oli jälkiä epäpuhtauksista, jotka poistettiin kiteyttämällä isopropa-nolista. Ohutkerroskromatografinen analyysi osoitti lopullisen tuotteen olevan puhdasta ja sen sp. oli 266-267°C.

Claims (4)

  1. 21 66347
  2. 1. Menetelmä virusvastaisina aineina käyttökelpoisten tetrasyklo£2,3,0,0^'4,03 ' nonaani amino johdannaisten valmistamiseksi, joiden kaava on -f~ANH2 R3 3 jossa R on vetyatomi tai 1-3 hiiliatomia sisältävä alkyyliryhmä 4 4 ja A on ryhmä, jonka kaava on CH2CH2 tai CH-R , jossa R on vety-atomi tai 1-6 hiiliatomia sisältävä alkyyliryhmä, sykloheksyyli-ryhmä, fenyylialkyyliryhmä, jonka alkyyliosa sisältää 1-6 hiili-atomia, tai fenyyliryhmä, joka voi olla substituoitu halogeeni- atomilla tai metyyli- tai metoksiryhmällä, sillä edellytyksellä, 4 3 4 että A:n ollessa CHR ainakin toinen ryhmistä R ja R on muu substituentti kuin vety, ja niiden farmaseuttisesti hyväksyttävien happoadditio-suolojen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että pelkistetään yhdiste, jonka kaava on P7 III '---i— BX » 3 R 3 jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, B on metyleeniryhmä tai suora sidos ja X on syano- tai karbamoyyliryhmä tai ryhmä, jonka kaava on R4-C=N-R5 IV 22 6 6 3 4 7 4 5 jossa R tarkoittaa samaa kuin edellä, R on vetyatomi tai hyd- rcksiiyhmä tai ryhmä, jonka kaava on Mg-Y, jossa Y on kloori-, bromi- tai jodiatomi, sillä edellytyksellä, että B:n ollessa mety-leeniryhmä on vetyatomi, ja sillä edellytyksellä, että B:n ollessa suora sidos ainakin toinen ryhmistä RJ ja R on jokin muu substituentti kuin vety; minkä jälkeen haluttaessa valmistaa optisesti aktiivinen enantiomeeri, kaavan II mukainen raseeminen yhdiste hajotetaan tavanomaisin menetelmin; minkä jälkeen jos kaavan II mukainen yhdiste on saatu vapaana emäksenä, ja halutaan valmistaa suola, emäs saatetaan reagoimaan hapon kanssa, joka luovuttaa farmaseuttisesti hyväksyttävän anionin.
  3. 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että pelkistys suoritetaan litiumaluminiumhydridillä. 66347 23 2 4 3 V
  4. 1. Förfarande för framställning av tetracyklo/M »3,0,0 ' ,Q '_7-nonaminoderivat, vilka är användbara säsom antivirusmedel och vilka har formeln '-----/— ANH2 II R3 3 väri R är en väteatom eller en alkylgrupp med 1-3 kolatoraer och 4 4 A är en grupp med formeln Cl^CI^ eller CH-R , väri R är en väteatom eller en alkylgrupp med 1-6 kolatomer, en cyklohexylgrupp, en fenylalkylgrupp med 1-6 kolatomer i alkyldelen eller en fenyl-grupp, vilken kan vara substituerad med en halogenatom eller en 4 metyl- eller metoxigrupp, under förbehäll att dk A är CHR , minst O Λ den ena av grupperna RJ och R4 är nagon annan substituent än väte, och deras farmaceutiskt godtagbara syraaadditionssalter, kännetecknat därav, att man reducerar en förening med formeln ώ / -- BX K3 3 väri R har ovan angiven betydelse, B är en metylengrupp eller en direkt bindning och X är en cyano- eller karbamoylgrupp eller en grupp med formeln 4 5 R -C=N-R IV i
FI783948A 1977-12-22 1978-12-21 Foerfarande foer framstaellning av tetracyklo(4,3,0,02,4,03,7)nonanaminoderivat anvaendbara saosom antivirusmedel FI66347C (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB5344677 1977-12-22
GB5344677 1977-12-22

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI783948A FI783948A (fi) 1979-06-23
FI66347B true FI66347B (fi) 1984-06-29
FI66347C FI66347C (fi) 1984-10-10

Family

ID=10467839

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI783948A FI66347C (fi) 1977-12-22 1978-12-21 Foerfarande foer framstaellning av tetracyklo(4,3,0,02,4,03,7)nonanaminoderivat anvaendbara saosom antivirusmedel

Country Status (20)

Country Link
US (2) US4357352A (fi)
EP (1) EP0002896B1 (fi)
JP (1) JPS5490167A (fi)
AT (1) AT363923B (fi)
AU (1) AU517387B2 (fi)
CA (1) CA1118792A (fi)
CS (1) CS208769B2 (fi)
DD (1) DD140843A5 (fi)
DE (1) DE2861796D1 (fi)
DK (1) DK150299C (fi)
ES (1) ES476241A1 (fi)
FI (1) FI66347C (fi)
HU (1) HU177222B (fi)
IL (1) IL56167A (fi)
IT (1) IT1110868B (fi)
NO (1) NO149471C (fi)
NZ (1) NZ189087A (fi)
PT (1) PT68974A (fi)
SU (1) SU1156591A3 (fi)
YU (1) YU40544B (fi)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA822158B (fi) * 1980-12-30 1984-10-01
US4668703A (en) * 1983-07-07 1987-05-26 Syntex (U.S.A.) Inc. γ-allenyl-γ-aminobutyric acids
JPS63188770U (fi) * 1987-05-25 1988-12-05
US5414011A (en) * 1987-09-11 1995-05-09 Syntex (U.S.A.) Inc. Preservative system for ophthalmic formulations
US6150398A (en) * 1991-05-08 2000-11-21 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Methods for the treatment of cancer
US5645988A (en) * 1991-05-08 1997-07-08 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Methods of identifying drugs with selective effects against cancer cells
US20030225044A1 (en) * 2002-06-03 2003-12-04 Bachman Stephen E. Method to increase serum levels of vitamins in animals including humans

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3418368A (en) * 1965-03-24 1968-12-24 Smith Kline French Lab Pentacyclo[6.2.0.02,6.03,10.05,9] decaneamines
US3456008A (en) * 1965-10-11 1969-07-15 Smithkline Corp Aminopolycyclodecanes
CH472364A (de) 1966-12-22 1969-05-15 Geigy Ag J R Verfahren zur Herstellung eines neuen polycyclischen Amins
US3496228A (en) * 1967-02-16 1970-02-17 Smithkline Corp Aminotricyclononanes and the salts thereof

Also Published As

Publication number Publication date
DE2861796D1 (en) 1982-06-24
FI66347C (fi) 1984-10-10
DD140843A5 (de) 1980-04-02
IL56167A0 (en) 1979-03-12
DK150299B (da) 1987-02-02
DK560278A (da) 1979-06-23
NO149471B (no) 1984-01-16
JPS6214539B2 (fi) 1987-04-02
PT68974A (en) 1979-01-01
IT7852360A0 (it) 1978-12-19
AU517387B2 (en) 1981-07-30
ES476241A1 (es) 1979-04-16
NO149471C (no) 1984-04-25
IT1110868B (it) 1986-01-06
YU40544B (en) 1986-02-28
NO784325L (no) 1979-07-27
HU177222B (en) 1981-08-28
AT363923B (de) 1981-09-10
IL56167A (en) 1982-09-30
ATA913078A (de) 1981-02-15
YU303778A (en) 1983-01-21
SU1156591A3 (ru) 1985-05-15
AU4224178A (en) 1979-06-28
JPS5490167A (en) 1979-07-17
US4357352A (en) 1982-11-02
US4454157A (en) 1984-06-12
CA1118792A (en) 1982-02-23
CS208769B2 (en) 1981-09-15
DK150299C (da) 1987-10-26
FI783948A (fi) 1979-06-23
NZ189087A (en) 1980-11-14
EP0002896B1 (en) 1982-05-05
EP0002896A1 (en) 1979-07-11

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI77018C (fi) Analogifoerfarande foer framstaellning av antidepressivt aktiv (-)-enantiomer av n-metyl-n-/3-(2-metylfenoxi) -3-fenylpropyl/amin och dess farmaceutiskt godtagbara salt.
JP4102022B2 (ja) ノイラミニダーゼ阻害剤として有用な置換シクロペンタン及びシクロペンテン化合物
US6284798B1 (en) Guanidine derivatives, methods of preparing them and their use as drugs
EP0288188B1 (en) 1-phenyl-3-naphthalenyloxy-propanamines
US4051256A (en) Guanidine derivatives
HU197875B (en) Process for producing polycyclic aromatic amino-alcanol derivatives and pharmaceutical compositions containing themas active components
EP0303961A2 (en) Novel antidepressants
PL115117B1 (en) Method of manufacture of novel carbonyl substituted 1-sulfonylobenzimidazoles
FI66347C (fi) Foerfarande foer framstaellning av tetracyklo(4,3,0,02,4,03,7)nonanaminoderivat anvaendbara saosom antivirusmedel
IE47608B1 (en) Antiviral tetracyclononane derivatives,processes for their manufacture and pharmaceutical compositions containing them
US4806568A (en) Gossypol derivatives
CA1087180A (en) Guanidine derivatives
US4755601A (en) Nonyl prenyl-N heterocyclics
JP2016509000A (ja) 抗ウイルス化合物
SU1025327A3 (ru) Способ получени производных арилоксиаминобутанола или их солей
Berner et al. Antiviral. 1. 2-(. alpha.-hydroxybenzyl) imidazo [4, 5-c] pyridine
SE434835B (sv) N-(1-metyl-2-pyrrolidinylmetyl)-2,3-dimetoxi-5-metylsulfamoyl-bensamid, dess framstellning och farmakologisk komposition innehallande denna nya bensamid
PL114054B1 (en) Process for preparing tetracyclononane derivatives
EP0433526A1 (de) Mittel zur Behandlung von Herz-Kreislauf-Erkrankungen, insbesondere von Arrythmien
EP4293017A1 (en) 2-acetamido-6-hydroxy-benzothiophene derivatives with antiviral activity
SU816402A3 (ru) Способ получени аминопроизводных2-МЕТил-5-(2-ОКСиСТиРил)-1,3,4-ТиА-диАзОлА или иХ СОлЕй
FI63227C (fi) Foerfarande foer framstaellning av nya terapeutiskt anvaendbara n-(2-(2-furyl)-etyl)-aminderivat
AU2003212040C1 (en) Substituted Cyclopentane And Cyclopentene Compounds Useful As Neuraminidase Inhibitors
JPS63238060A (ja) キノリン誘導体
PL115155B1 (en) Method of manufacture of novel carbonyl substituted 1-sulfonylobenzimidazoles

Legal Events

Date Code Title Description
MA Patent expired
MA Patent expired

Owner name: IMPERIAL CHEMICAL INDUSTRIES LIMITED