FI65370C - Foerfarande foer framstaellning av ett fast farmaceutiskt preparat - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av ett fast farmaceutiskt preparat Download PDFInfo
- Publication number
- FI65370C FI65370C FI782442A FI782442A FI65370C FI 65370 C FI65370 C FI 65370C FI 782442 A FI782442 A FI 782442A FI 782442 A FI782442 A FI 782442A FI 65370 C FI65370 C FI 65370C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- cws
- oil
- rubra
- suspension
- mannitol
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/74—Bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
- A61K47/14—Esters of carboxylic acids, e.g. fatty acid monoglycerides, medium-chain triglycerides, parabens or PEG fatty acid esters
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
- A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
- A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55566—Emulsions, e.g. Freund's adjuvant, MF59
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55511—Organic adjuvants
- A61K2039/55583—Polysaccharides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
- A61K2039/555—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by a specific combination antigen/adjuvant
- A61K2039/55588—Adjuvants of undefined constitution
- A61K2039/55594—Adjuvants of undefined constitution from bacteria
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
- A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
- A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Mycology (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Medicinal Preparation (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Description
2 65370 yhdistettiin öljyyn ja siitä muodostettiin tehokkaaksi käyttö-preparaatiksi sopiva öljy/vesi-suspensio. On esimerkiksi ilmoitettu, että mikro-organismista Mycobacterium bovis BCG peräisin oleva CWS, joka on käsitelty mineraaliöljyllä (esim. öljyllä Drakeol 6 VR) ja suspendoitu 0,2 % Tween 80 (tavaramerkki) sisältävään fysiologiseen suolaliuokseen oli tehokas ehkäisemään kasvaimien kasvua tai takauttamaan esiintyviä kasvaimia eläimissä /T.Azuma et ai.,
Gann (Cancer), £5, 493-505 (1974); T. Yoshimoto et ai., Gann (Cancer) , 67, 441-445 (1976) ja B. Zbar et ai.., J. Nath. Cancer Inst., 52, 1571-1577, (1974)J, ja tällainen öljyynsidottu BCG-CWS vaikutti kasvaimia omaavien potilaitten elinikää pidentävästi ja immunologista tilaa parantavasti /Y. Yamamura et ai., Gann (Cancer) 67, 669-677 (1976), Y. Yamamura et ai., Gann (Cancer) 66, 355-363 (1975) ja K. Yasumoto et ai., Gann (Cancer), 67, 787-795 (19762/·
On myös ilmoitettu, fettä mikro-organismista Nocardia rubra peräisin olevan öljyynsidotun CWS-aineen suspensio, joka oli valmistettu olennaisesti samalla tavalla kuin edellä, oli tehokas immunointiaineena ihmisen kasvaimien suhteen £i. Yamamura et. ai., Gann (Cancer) , 67, 669-677 (19 7 62.7-
Vaikka öljyynsidotulla CWS-aineella edellä esitetyn selostuksen mukaan eläviin mikro-organismeihin verrattuna on monia etuja immunointiaineena pienemmän komplikaation ja helpomman laadunvalvonnan vuoksi, on hankalaa ja haitallista, että öljyynsidotun CWS-aineen suspensio on epästabiili eikä sitä voida pitää samassa tilassa kauempaa kuin noin yhden vuorokauden preparaattien laadun huononematta ja niiden voimakkuuden sekä aktiivisuuden pienenemättä. Niinpä on ollut tarpeen valmistaa näitä öljyynsidotun CWS-aineen suspensioita joka kerta välittömästi ennen käyttöä, ts. välittömästi ennen potilaille antoa, mutta koska tämä on varsin monimutkaista ja epämukavaa hoidon yhteydessä, on ollut itse asiassa mahdotonta käyttää tällaisia suspensiopreparaatteja käytännön terapiaan sairaaloissa .
Niiden hankaluuksien ja haittojen poistamiseksi, jotka liittyvät edellä selostettuun öljyynsidotun CWS-aineen suspensiopreparaat-tiin, niin että preparaattia voitaisiin käyttää tehokkaasti ja käytännöllisesti sairaaloissa, on nyt etsitty menetelmää sellaisten öljyynsidotun CWS-aineen stabiilien preparaattien valmistamiseksi, joita voidaan säilyttää pitkiä aikoja niiden aktiivisuuden heikkene-mättä. Perusteellisten tutkimusten tuloksena on onnistuttu aikaan- 3 65370 saamaan öljyynsidotun CWS-aineen kiinteä preparaatti, joka on stabiili ja joka ihanteellisesti soveltuu sekä teolliseen valmistukseen että sairaalakäyttöön.
Keksinnön mukainen menetelmä on tunnettu siitä, että pakkas-kuivataan suspensio, joka sisältää solunseinämärankoa, (R) (S)
Miglyol^ia, Drakeol-6VR:a, skvaleenia tai vitamiini A-palmi-taattia kantajaöljynä, polyoksieteenisorbitaaniesteriä sus-pendointiaineena ja sokeria tai sokerialkoholia dispergoin-tiaineena.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä käytettävä CWS on peräisin mikro-organismista Nocardia rubra.
Keksinnön mukaisessa menetelmässä käytettävää CWS-ainetta voidaan valmistaa fraktioimalla ja puhdistamalla viljellyistä bakteereista saatujen solujen seinämiä tavanmukaieesti /Ϊ. Azuma et ai., J. Nath. Cancer Inst., 52, 95 (1974) ja I. Azuma et ai., Biken J. , 1_8, 1 (1975)_7·
Eräs esimerkki tällaisesta CWS-preparaatista on esitetty myöhemmin tässä selityksessä.
Keksinnön mukaan käytettävänä kantajaöljynä on öljy, joka on omiaan tehostamaan apuaine- ja kasvaimia vastustavaa vaikutusta. Kantoaineöljynä on skvaleeni, Miglyol , Drakeol- _ ® 6VR tai vitamiini A-palmitaatti. On huomattava, että yllä mainitut kantajaöljyt ovat tehokkaita ja hyödyllisiä CWS-aineen kuljetuksessa halutulle alueelle (esim. thymus-solualueelle), saattaen CWS-aineen pysymään tällä alueella melko pitkän ajan ja vahvistaen sen immunoivaa vaikutusta.
Yllä mainituista kantajaöljyistä on keksinnön mukaan edullisinta käyttää eläinöljyjä, erikoisesti esim. skvaleenia, 4 65370 koska tällainen öljy on peräisin luonnosta ja sillä sen vuoksi on affiniteettia elävää ihmiskehoa kohtaan.
Keksinnön mukaan käytettävänä suspendointiaineena voi olla tavanmukainen emulgaattori kuten hiilivety (esim. jauhettu arabikumi, tragantti, agar-agar, pektiiniaineet, natrium-alginaatti, metyyliselluloosa, karboksimetyyliselluloosa), proteiini tai fosfolipidi (esim. deutoplasm, kaseiini, gelatiini, lesitiini), polyalkoholiesteri /esim. polyoksi-etyleenisorbitaani-monolauraatti (Tween-20), -monopalmitaat-ti (Tween-40), -monostearaatti (Tween-60), mono-oleaatti (Tween-80), sorbitaani-monolauraatti (Span-20), monopalmi-taatti (Span-40), -monostearaatti (Span 60), -mono-oleaatti (Span-80j7# joista edullisimmin käytetään polyalkoholieste-riä, erikoisesti polyoksietyleenisorbitaaniesteriä kuten polyoksietyleenisorbitaanimono-oleaattia.
Esimerkkejä käytettäväksi sopivasta dispergointiaineesta ovat sokeri ja sokerialkoholit kuten glukoosi, mannitoli, sorbitoli, sopivimmin sokerialkoholit, erikoisesti mannitoli.
Kiinteään farmaseuttiseen preparaattiin sisältyvän disper-gointiaineen tehokkuuden suhteen on huomattava, että tämä aine ei ole vain edullinen helpottaessaan farmaseuttisen preparaatin muodostamista suspensioksi, vaan myös tehdessään valmistetun suspension isotoniseksi.
Keksinnön mukaiseen kiinteään preparaattiin sisällytettävien eri komponenttien (ts. CWS, kantoaineöljy, suspendointiaine ja dispergointiaine) suhteelliset määrät voidaan valita vapaasti, ja näiden komponenttien edulliset ja hyväksyttävät suhteet ilmenevät jäljempänä esitetyistä sovellutusesimerkeistä.
5 65370
Kiinteä farmaseuttinen preparaatti voidaan esimerkiksi valmistaa suspendoimalla kaikkien yllä mainittujen komponenttien seos tavan-mukaisesti ja kylmäkuivaamalla näin saatu suspensio. Tarkemmin sanoen esim. CWS viedään kudoksenhomogenointilaitteeseen, siihen lisätään kantoaineöljy ja seos jauhetaan haluttaessa notkeaksi tahnaksi; seokseen lisätään tipottain suspendointiainetta sisältävä dispergointiaineen vesiliuos, ja seos jauhetaan sekä homogenoidaan yhtenäisen suspension aikaansaamiseksi, minkä jälkeen näin valmistettu suspensio siirretään pieneen pulloon, pakastetaan nopeasti esim. nesteytettyä typpeä käyttäen ja kylmäkuivataan.
Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettua kiinteää farmaseuttista preparaattia voidaan käyttää suspendoimalla se uudelleen lisäämällä siihen steriloitua vettä ennen antoa potilaille. Preparaatin hyödylliset ja edulliset ominaisuudet ilmenevät seuraavasta: 1) Keksinnön mukaisesti valmistettua kiinteää farmaseuttista preparaattia voidaan säilyttää paljon kauemmin kuin vastavalmistettua öljyynsidotun CWS-aineen suspensiota, ja säilytyksen aikana ei vain sen fysikaalinen stabiliteetti, vaan myös sen vaikutuskyky pysyy oleellisesti muuttumattomana.
Tässä yhteydessä on huomattava, että öljyynsidotun CWS-aineen vas-tavalmistettu suspensio hajoaa tavallisesti ainakin 1 tunnin aikana epäyhtenäiseksi ja epätasaiseksi suspensioksi, jota on vaikea palauttaa yhtenäiseksi suspensioksi, ja joka sen vuoksi pitkähkön säi-lytysajan jälkeen ei osoita siihen sisältyvän CWS-aineen alkuperäistä terapeuttista tehokkuutta.
2) Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistettu kiinteä farmaseuttinen preparaatti voidaan helposti palauttaa öljyynsidotun CWS-aineen yhtenäiseksi suspensioksi, joka on erittäin stabiili samassa tilassa kuin vastavalmistettu suspensio, yksinkertaisesti lisäämällä kiinteään preparaattiin steriloitua vettä, vieläpä sen pitkäaikaisen säilytyksen jälkeen. Tällainen uudelleensuspendoitu preparaatti voi osoittaa samaa aktiivisuutta kuin öljyynsidotun CWS-aineen vastavalmistettu suspensio ja voi osoittaa CWS-sisällös-tä johtuvaa suurempaa terapeuttista tehokkuutta kuin pitkähkön ajan säilytetty, edellä mainitulla tavalla valmistettu öljyynsidotun CWS-aineen tunnettu suspensio.
65370 3) Tähän saakka on öljyynsidotun CWS-aineen suspensio valmistettu kussakin tapauksessa välittömästi ennen antoa potilaalle. Koska kuitenkin CWS-aineen yksi annos on hyvin pieni (esim. noin* 100-300 yug), öljyynsidotun CWS-aineen suspension valmistaminen on varsin hankalaa, ja on erittäin vaikeaa valmistaa joka kerta saman tietyn CWS-määrän sisältävää samanlaatuista suspensiota.Vaikka suurempi määrä öljyynsidotun CWS-aineen suspensiota valmistettaisiin yhdellä kertaa näiden haittojen välttämiseksi, jää kuitenkin jäljelle se epäkohta, että suspensio on hyvin epästabiili, eikä sitä voida kauaa säilyttää, kuten edellä on mainittu, minkä vuoksi suurinta osaa suspensiosta ei voida terapeuttisesti käyttää ja se on hylättävä. Tämän keksinnön periaatteiden mukaisesti on kuitenkin helppoa ja mahdollista suuressa määrin valmistaa kiinteää preparaattia, joka sisältää tietyn pienen määrän öljyynsidottua CWS-ainetta, sekä valvoa tuotteen laatua.
Yllä mainitut suurempi stabiliteetti ja suurempi vaikutuskyky, joita keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetusta kiinteästä preparaatista saatu suspensio osoittaa, näyttävät perustuvan siihen, että öljyynsidottu CWS voi dispergoitua tasaisesti tällaiseen uudelleenvalin!stettuun suspensioon ja että dispergoitu öljyynsi-dottu CWS voi esiintyä pienien hiukkasten (läpimitta esim. noin 5 ^η) muodossa, niiden liimautumatta yhteen suuremmiksi osasiksi.
Tämä keksintö on siis ratkaissut ne ongelmat, jotka ovat liittyneet öljyynsidottuun CWS-aimeeseen perustuvan kasvaimia vastustavan aineen tuottamiseen teollisessa mittakaavassa ja laadultaan hyvänä. Nämä tavoitteet voidaan nyt helposti saavuttaa, jolloin myös CWS-aineen käyttö sairaaloissa tulee mahdolliseksi, mikä merkitsee uraauurtavaa parannusta syövänhoitoalalla.
Seuraavassa on esitetty farmakologisia ja farmaseuttisia koetuloksia, jotka kuvaavat keksinnön mukaisen kiinteän farmaseuttisen preparaatin etuja.
Materiaalit ja menetelmät
Apuaineet: CWS-aineen valmistus mikro-organismista Nocardia rubra (myöhemi merkintä N. rubra) on edellä selostettu.
Drakeol 6VR (Pennsylvania Refining Co., Butler, USA), skvaleenia f :: 7 65370 (Tokyo Kasei Co., Ltd.,. Japani) käytettiin öljyinä öljyyn-sidotun CWS-aineen valmistamiseen N. rubra-aineesta.
Antigeenit: m-£3-(4'-monofenyyliatso)-fenyyli7-N-asetyyli-L-tyrosiini (ABA-N-asetyyli-tyrosiini) ja ABA-bakteeriperäinen α-amylaasi (ABA-BaA) valmistettiin artikkelissa J. Biol.
Chem. 238, 1726-1730 (1959) selostetulla menetelmällä. Bakteeriperäistä a-amylaasia (nesteytyvä tyyppi, Lot n:o E5X01) puhdistettuna Bacillus subtilis-mikro-organismista (Seikagaku Kogyo Co., Ltd., Japani).
Kasvaimet: Käytettiin hiirien C57BL/6J leukemiaa EL4, hiirien DBA/2 mastocytomaa P815-X2, hiirien BALB/c kasvainta Meth A ja 3-metyyli-kolantreenilla hiirissä C57BL/6J aiheutettua fibrosarkoomaa, merkinneitään MC104. EL4, mastocytoma P815-X2 ja Meth A ylläpidettiin sarjasiirrolla mahaletkulla vastaavissa samanikäisissä naarashiirissä. Kasvainta MC104 sarjasiir-rettiin ihonalaisesti samanikäisiin hiiriin.
Hiiret: Lajeja BALB/c, C578BL/6J ja DBA/2 olevia 6-8 viikon ikäisiä naarashiiriä, jotka oli toimittanut Shizuoka Jikken Dobutsu Nokyo, Shizuoka, Japani. Eläimille annettiin ruokaa (toimittaja Oriental Yeast Ind., Japani) ja vettä rajoituksetta.
Väliaineliuos: Eagle*n minimaalista perusvällainetta (MEM), joka sisältää 100 yksikköä/ml penisilliiniä ja 100 ^ug/ml streptomysiiniä, toimitti Research Foundation for Microbial Diseases, Osaka University, Japani. Väliainetta RPMI-1640 kudosviljelyä varten toimitti Nissui Seiyaku Co., Ltd.,
Japani. Vasikan sikiön seerumin (Lot n:o 4055722) hankintapaikka oli Flow Laboratories (Rockville, USA), ja seerumi inaktivoitiin kuumentamalla sitä lämpötilassa 56°C 30 minuutin ajan ennen käyttöä.
Välitön solumyrkyllisyyskoe: Kasvainsolujen (Meth A) suspensio MEM-liuoksessa sekoitettiin yhtä suureen tilavuuteen öljyyn-sidottua CWS-ainetta tai öljypisaroitten kanssa, ja seosta pidettiin 60 minuutin ajan jääkylmässä vesihauteessa. Kasvainsolujen elinkykyisyys määritettiin eosiinin Y-eristämiskokeella.
8 65370
Apuaineen aktiivisuuden määritys aikaansaamalla viivästetty yliherkkyys: Marsuille annettiin primaarinen immunointi kaikkiin neljään käpälään käyttäen yhteensä 50 ^ug ABA-N-ase-tyylityrosiinia joko N. rubra-CWS~aineen kanssa tai ilman sitä erilaisissa kantoaineöljyissä vesi/öljy-emulsiona.
2 viikkoa myöhemmin suoritettiin ihokoe käyttäen 100 ^ug ainetta ABA-BaA, ja reaktio mitattiin 24 ja 48 tuntia koe-antigeenin ihonsisäisen ruiskutuksen jälkeen.
Soluvälitteinen solumyrkyllisyyskoe: Hiiriä C57BL/6J (h-2^) immunoitiin vatsaontelon sisäisesti elinkykyisillä mastocytoma P815-X2 (H-2 )-aineen kasvainsoluilla joko öljyynsidotun N. rubra-CWS-aineen kanssa tai ilman sitä. 11. päivänä immunoinnin jälkeen suoritettiin solumyrkyllisyyskoe käyttä- 51 mällä immunoiduista hiiristä saatuja pernasoluja sekä Cr-merkittyjä mastocytoma P815-X2-soluja sen menetelmän mukaan, joka on selostettu kirjoituksessa Brunner et ai.. Immunology, 18, 501-515 (1970), tosin muutamin muunnoksin. /T. Taniyama et ai.. Japani, J. Microbiol. Ή), 255-264 (1975^7· Pernasolujen (effektorisolut) ja ^Cr-merkittyjen mastocytoma P815-X2-so-lujen (kohdesolut) määrien välinen suhde oli 100:1. Kohde-solujen hajoama ilmoitettiin spesifisen kohdesoluhajoaman prosenttiarvona seuraavan kaavan mukaan:
Spesifinen kohdesolujen hajoama _ spesifisen kohdesoluhajoaman vapautuminen maksimivapautuminen - välitön vapautuminen
Maksimi kromin vapautuminen mitattiin käyttäen täydellistä solunhajotusta, jossa pelkkiä kohdesoluja pakastettiin ja sulatettiin kaksi kertaa.
öljyynsidotun CWS-aineen valmistus mikro-organismista N. rubra: Kiinteä CWS-preparaatti valmistettiin kuten on selostettu seuraavissa sovellutusesimerkeissä.
Tulokset:
Erilaisilla öljyillä käsitellyn N. rubra-CWS-aineen vaikutus soluvälitteiseen myrkyllisyyteen allogeenisissä hiirissä: 9 65370 N. rubra-CWS-ainetta käsiteltiin skvaleenilla tai Drakeol-6VR-Ö1- jyllä, ja se suspendoitiin 0,9-prosenttiseen fysiologiseen suola- 0
liuokseen, joka sisälsi 0,2 % "Tween" 80-liuosta. Hiiriä C57BL/6J
inununoitiin mastocytoma-solujen ja apuaineiden seosta käyttäen, kuten edellä on selostettu. Kuten taulukosta I ilmenee, Drakeol-6VR-fysiologisella suolaliuoksella, skvaleeni-suolaliuoksella tai skvaleeni-mannitolilla käsitellyt N. rubra-CWS-preparaatit olivat selvästi tehokkaita apuaineita effektorisolujen indusoimi-seksi allogeenisten hiirien pernassa. Osoittautui myös, että ne kylmäkuivatut apuaineet, jotka suspendoitiin uudelleen lisäämällä steriloitua vettä ennen käyttöä, olivat yhtä tehokkaita kuin juuri ennen käyttöä valmistetut apuaineet.
Välitön solumyrkyn isyys kasvainsoluja kohtaan:
Kuten taulukosta II ilmenee, mikään tutkituista N. rubra-CWS-ainetta sisältävistä preparaateista ei osoittanut solumyrkyl-lisyyttä, kun mainittuja apuaineita ja kasvainsoluja (Meth A hiirissä BALB/c) pidettiin 60 minuutin ajan jäävesihauteessa, mutta sensijaan kylmäkuivattu preparaatti, joka oli valmistettu O, 2 % "Tween" 80 sisältävästä skvaleeni-0,9 %:n suolaliuoksesta, osoitti tiettyä myrkyllisyyttä kasvainsoluja kohtaan. Vasta-valmistettu preparaatti ei ollut myrkyllinen samoissa olosuhteissa. Skvaleeni-mannitolilla käsitelty kylmäkuivattu N. rubra- CWS-preparaatti ei kuitenkaan ollut solumyrkyllinen.
Ö1jyynsidotun N. rubra-CWS-aineen kasvaimia vastustava vaikutus:
Skvaleenilla tai Drakeol 6VR-öljyllä käsitellyn ja 0,2 % ainetta "Tween"<S>80 sisältävään 5,6-prosenttiseen mannitoliliuokseen suspendoidun N. rubra-CWS-aineen kasvaimen-vastaista vaikutusta tutkittiin käyttämällä siirrettäviä kasvaimia samanikäisissä hiirissä. Kuten taulukoista III, IV, V ja VI ilmenee, erilaisilla öljyillä käsitellyillä N. rubra-CWS-prepa-raateilla oli likimain sama aktiivisuus kasvaimien EL-4-leukemia, Meth A ja MC104 kasvun ehkäisemisen suhteen vastaavissa samanikäisissä hiirissä. Kuten taulukosta III ilmenee, N. rubra-CWS-aineen ehkäisevä vaikutus kasvaimen Meth A kasvuun hiirissä BALB/c ei osoittautunut eroavan vastavalmistetusta Drakeol-suolaliuos-preparaatista ja skvaleeni-mannitoli-preparaateista, jotka preparaatit oli kylmäkuivattu ja suspendoitu steriloidulla vedellä ennen käyttöä.
10 65370 Ö1jynkoostumuksen vaikutus viivästyneeseen yliherkkyysreaktioon marsuissa: N. rubra-CWS-ainetta suspendoitiin öljyyn (esim. Drakeol 6VR), (5) skvaleeni ja Arlacel ^ A:n (Atlas Chemie, Essen, rasvahappoes-tereihin sorbitaanin ja/tai glyserolin kanssa perustuva emulgaat-tori) seokseen (suhteessa 85:15), ja suspensio sekoitettiin sen jälkeen ABA-N-asetyylityrosiini-liuokseen, joka sisälsi N. rubra-CWS-ainetta tai oli ilman sitä, vesi/öljy-emulsioksi. Marsuja immu-noitiin ruiskuttamalla niihin lihaksensisäisesti yllämainittua apuaineen ja antigeenin seosta. 2 viikkoa myöhemmin suoritettiin iho-koe aineella ABA-BaA, ja ihoreaktioarvo luettiin 24 ja 48 tunnin kuluttua koeantigeenin ihonsisäisestä ruiskutuksesta. Kuten taulukosta VII ilmenee, positiivinen ihoreaktio aineen ABA-BaA suhteen todettiin marsuilla, jotka oli immunoitu ABA-N-asetyylityrosiinin yhdessä N. rubra-CWS-aineen ja skvaleenin tai öljyn Drakeol 6VR kanssa muodostamalla vesi/öljy-emulsiolla.
Koetulokset on esitetty seuraavissa taulukoissa:
Taulukko I
Ö1jyynsidotun N. rubra-CWS-aineen vaikutus soluvälitteiseen myrkyllisyyteen kasvaimen mastocytoma P815-X2-soluja kohtaan hiirissä C57BL/6J.
Hiirien immunointiaine Spesifinen kohdesolujen hajoaminen (%)
Koe 1 a) Koe 2 b)
Mastocytoma P815-X2-solut (1 x 10*) + N. rubra-CWS-skvaleeni-mannitoli 64,2 41,1 + N. rubra-CWS-Drakeol 6VR-mannitoli - 58,3 + N. rubra-CWS-skvaleeni-fysiologinen suolaliuos 50,4 — + N. rubra-CWS-Drakeol 6VR-fysiologinen suolaliuos 26,9 28,4 + skvaleeni-mannitoli 8,2 14,1 + Drakeol 6VR-mannitoli - 8,7 + skvaleeni-fysiologinen suolaliuos 2,3 + Drakeol 6VR-fysiologinen suolaliuos 0,7 16.8
Mastocytoma P815-X2-solut (3 x 10^) pelkästään 87,9 67,5 11 65370
Kolme hiirtä C57BL/6J kussakin ryhmässä immunoitiin vatsaontelon sisäisesti mastocytoma-solujen ja öljyynsidotun N. rubra-CWS-aineen seoksella. 11 päivää myöhemmin solujen välittämä myrkyllisyys mää- 51 ritettiin inkuboimalla immunoitujen hiirien pernasoluja ja Cr-merkittyjä mastocytoma-soluja (suhteessa 100:1) 20 tunnin ajan. Kaikki kokeet suoritettiin kaksi kertaa.
a) Käytettiin vastavalmistettua apuainetta.
b) Kylmäkuivatut aineet suspendoitiin uudelleen lisäämällä steriloitua vettä ennen käyttöä.
Taulukko II
öl jyynsidotun N. rubra-CWS-aineen välitön solunyrkyllisyys kasvainsolu-ja (Meth A) kohtaan in vitro.
Aine, johon kasvainsolut N. rubra-CWS- Elinkykyisyys (%) sekoitettiin pitoisuus Vastaval- Kylmä- mistettu kuivattu N. rubra-CWS-skvaleeni- 2 mg/ml 90,0 89,7 mannitoli Λ . nn n nr. _ 0,4 mg/1 88,8 85,0 N. rubra-CWS-skvaleeni- 2 mg/ml 92,3 87,0 fysiologinen suolaliuos 0>4 mg/ml 87,9 91,7 N. rubra-CWS-Drakeol 6VR- 2 mg/ml 86,7 85,8 fysiologinen suolaliuos 0>4 mg/ml 86,4 84,7 öljypisarat skvaleeni-mannitoli - 83,3 87,1 s kva le en i-fysiologinen suolaliuos - 75,7 45,5
Drakeol 6VR-fysiologinen suolaliuos - 87,1 79,1 MEM - 100 100
Kasvainsolujen (Meth A hiiristä BALB/c) suspensiota (4 x 10^/ml MEM-aineessa) sekoitettiin öljyynsidotun N. rubra-CWS-aineen tai öljypisaroitten kanssa, ja seosta pidettiin jäävesihauteessa, minkä jälkeen kasvainsolujen elinkykyisyys tutkittiin eosiinin Y eristä-miskokeella.
Luvut esittävät suhteellisia arvoja verrattuna MEM-liuoksessa olevien kasvainsolujen elinkykyisyyteen.
\
Kasvaimien (Meth A) kasvun ehkäisy Öljyynsidotun N. rubra-CWS- aineen avulla naarashiirissä BALB/c.
12
Taulukko III
65370
Preparaatit Vastavalmistettu a) Kylmäkuivattu b) N. rubra-CWS (100 ,ug) käsitelty öljyllä:'' skvaleeni 10/10 9/10°^
Drakeol 6VR 10/10
Kontrolli (öljypisarat) skvaleeni 0/10 0/10,
Drakeol 6VR 0/10
Kasvainsolujen (Meth A, 2 x 10^) ja öl jyynsidotun N. rubra-CViS-aineen (100 yug) tai öljypisaroitten seosta annettiin ihonsisäisesti naarashiiriin BALB/c.
Luvut esittävät tuloksia 4 viikkoa antamisen jälkeen.
a) N. rubra-CWS käsiteltiin erilaisilla öljyillä ja suspendoitiin 0,2 % "Tween"®80 sisältävään 0,9-prosenttiseen suolaliuokseen. Preparaatti valmistettiin juuri ennen käyttöä.
b) Erilaisilla öljyillä käsitelty N. rubra-CWS suspendoitiin 0,2 % "Tween"®80 sisältävään mannitoliin, ja suspensio kylmä-kuivattiin. Preparaatit suspendoitiin uudelleen steriloidulla vedellä ennen käyttöä.
c) Kasvaimettomien hiirien lukumäärä/tutkittujen hiirien lukumäärä.
Kasvaimien (Meth A) kasvun ehkäisy öljyynsidotun N. rubra-CWS- aineen avulla hiirissä BALB/c.
65370 13
Taulukko IV
Preparaatit a) Kokeen numero 0823 1108 N. rubra-CWS (100 /ug) käsitelty seoksilla: ' skvaleeni-mannitoli 10/10 8/10 b)
Drakeol 6VR-mannitoli 10/10 10/10
Miglyol-mannitoli 10/10 10/10
Kontrolli (öljypisarat) skvaleeni-mannitoli 2/10 0/10
Drakeol 6VR-mannitoli 0/10 0/10
Miglyol-mannitoli 2/10 0/10 MEM 0/10 0/10
Seosta, joka käsitti 3-metyylikolantreenilla aiheutettua fibro-sarkoomaa (Meth A)(1 x 10^) ja 100 yug öljyynsidottua N. rubra-CWS-ainetta tai öljypisaroita, annettiin ihonsisäisesti naaras-hiiriin BALB/c. Luvut esittävät 42 päivää antamisen jälkeen saatuja tuloksia.
a) Kylmäkuivatut aineet suspendoitiin uudelleen steriloidulla vedellä ennen käyttöä.
b) Kasvaimettomien hiirien lukumäärä/tutkittujen hiirien lukumäärä.
Taulukko V
Kasvaimien (MC104) kasvun ehkäisy öljyynsidotun N. rubra-CWS- aineen avulla naarashiirissä C57BL/6J.
65370 14
Preparaatit a) Kokeen numero 0819 1109 N. rubra-CWS (100 ,ug) käsitelty seoksilla: ' skvaleeni-mannitoli 6/10 10/10 b)
Drakeol 6VR-mannitoli 7/10 7/10
Miglyol-mannitoli 7/10 10/10
Kontrolli (öljypisarat) skvaleeni-mannitoli 0/10 0/10
Drakeol 6VR-mannitoli 0/10 0/10
Miglyol-mannitoli 0/10 0/10
Seosta, joka käsitti 3-metyylikolantreenilla aiheutettua fibro-sarkoomaa (MC104), (1 x 10^) ja 100 ^ug öljyynsidottua N. rubra-CWS-ainetta tai öljypisaroita, annettiin ihonsisäisesti naarashii-riin C57BL/6J. Luvut esittävät 42 päivää antamisen jälkeen saatuja tuloksia.
a) Kylmäkuivatut aineet suspendoitiin uudelleen steriloidulla vedellä ennen käyttöä.
b) Kasvaimettomien hiirien lukumäärä/tutkittujen hiirien lukumäärä.
15
Kasvaimien (EL-4-leukemia) kasvun ehkäisy öljyynsidotun N. rubra- CWS-aineen avulla naarashiirissä C57BL/6J.
65370
Taulukko VI
Preparaatit a) Kokeen numero 0284 0830 0907 N. rubra-CWS (100 ,ug) käsitelty seoksilla: skvaleeni-mannitoli 8/10 9/10 7/10 b)
Drakeol 6VR-mannitoli 5/10 7/10 5/10
Miglyol-mannitoli 4/10 8/10 8/10
Kontrolli (öljypisarat) skvaleeni-mannitoli 0/10 0/10 0/10
Drakeol 6VR-mannitoli 0/10 0/10 0/10
Miglyol-mannitoli 0/10 0/10 0/10 MEM 0/10 0/10 0/10
Seosta, joka käsitti EL-4-leukemiasoluja (1 x 10^) ja 100 ^,ug öl-jyynsidottua N. rubra-CWS-ainetta tai öljypisaroita, annettiin ihonsisäisesti naarashiiriin C57BL/6J. Luvut esittävät 28 päivää antamisen jälkeen saatuja tuloksia.
a) Kylmäkuivatut aineet suspendoitiin uudelleen steriloidulla vedellä ennen käyttöä.
b) Kasvaimettomien hiirien lukumäärä/tutkittUjen hiirien lukumäärä.
Taulukko VII 65370 16 ölynkoostumuksen vaikutus viivästyneeseen yliherkkyysreaktioon ABA-N-asetyylityrosiinin suhteen marsuissa.
Marsuja immunoitiin ABA-N- Ihoreaktio ABA- asetyylityrosiinilla bakteeriperäisen yhdessä seuraavien a-amylaasin suhteen aineiden kanssa: N. rubra-CWS (100 ,ug) seoksessa: *
Drakeol 6VR-Arlacel A (85:15) 23,4 + 0,8 mm 25,7 + 0,7 mm skvaleeni-Arlacel A (35:15) 20,1 + 1,3 17,9 ± 1,0
Kontrolli ^Drakeol 6VR-Arla- ^ ^ cel A (85:15^7
Kussakin ryhmässä 5 marsua immunoitiin 50 ^ug:lla ABA-N-asetyyli-tyrosiinia, joka oli suspendoitu, joko yhdessä N. rubra-CWS-aineen (100 ^ug) tai ilman sitä, erilaisiin öljykantoaineisiin vesi/öljy-emulsioksi. 2 viikkoa immunoinnin jälkeen suoritettiin ihokoe käyttäen 100 yUg ABA-bakteeriperäiötä a-amylaasia.
a) Keskimääräinen ihoreaktio (kovettuman läpimitta) + keskivirhe.
Seuraavissa esimerkeissä käytetty Nocardia rubra-CWS valmistettiin seuraavalla tavalla:
Nocardia rubraa viljeltiin väliaineessa, joka sisälsi 2 % poly-peptonia ja 1 % hiivauuttelta (pH 7,0) lämpötilassa 30°C 3 vuorokautta, ja viljelmäneste (18 1) suodatettiin. Noin 400 g kosteaa huovastoa suspendoitiin 1 litraan vettä, ja suspensiota jauhettiin Dyncmill-laitteella (tavaramerkki) (kuulien läpimitta 0,1-0,2 nm; 3000 kierrosta/ minuutti; 2 litraa/tunti) kolme kertaa. Saatu aine puskuroitiin pH -arvoon 7,5, ja sitä käsiteltiin nukleaaseilla (DNase ja RNase) 30 minuutin ajan ja lingottiin sen jälkeen g-arvolla 800 15 minuuttia. Erottunutta nestettä lingottiin edelleen (30 minuuttia g-arvolla 10 000 - 20 000). Saostumat kerättiin, ne suspendoitiin 1 litraan asetonia ja suspensiota hämmennettiin 24 tunnin ajan. Saostuma erotettiin suodattamalla, suspendoitiin 1 litraan 2-prosent-tista "Tritone" © X-100-liuosta, suspensiota hämmennettiin 24 tun- 65370 tia, minkä jälkeen sitä lingottiin 30 minuuttia g-arvolla 10 000 -20 000. Saostumaa käsiteltiin jälleen "Tritone"^ X-100-liuoksella samoin kuin edellä. Saatu saostuma pestiin 1 litralla etanolin ja veden seosta (suhteessa 1:1) sekä sitten kaksi kertaa 1 litralla vettä, minkä jälkeen saostumaa lingottiin 30 minuuttia g-arvolla 10 000 - 20 000. Saostuma suspendoitiin veronaalipuskuriin (pH 9,5), sitä käsiteltiin pronaasilla (50 mg) hämmentäen huoneenlämpötilassa 24 tuntia ja lingottiin sen jälkeen 30 minuuttia g-arvolla 10 000 -20 000. Saostuma pestiin kolme kertaa 1 litralla vettä, ja sitä lingottiin 30 minuutin ajan g-arvolla 10 000 - 20 000. Saostuma pestiin 1 litralla dietyylieetterin ja etanolin seosta (suhteessa 1:1), kuivattiin alennetussa paineessa huoneenlämpötilassa 3 vuorokauden ajan, jauhettiin ja seulottiin (125 yU), jolloin saatiin noin 7 g hienojakoista N. rubra-CWS-jauhetta.
Keksinnön mukainen kiinteä preparaatti suspendoidaan uudelleen steriloituun veteen ja sitä annetaan potilaille keuhkopussin sisäisesti, viottumakohtaan, ihonsisäisesti, ihonalaisesti, lihaksensisäisesti tai vatsaontelonsisäisesti, CWS-määrän yhdessä annoksessa ollessa 10-2000 yug, sopivimmin 10-300 yUg.
Keksinnön mukaista menetelmää selitetään tarkemmin seuraavien esimerkkien avulla.
Esimerkki 1 N. rubra-CWS - ainetta 4 mg
Miglyolia 2 pisaraa O, 2 % "Tween"®80 sisältävää 5,6-prosenttista mannitoliliuosta 1 ml 140 mg N. rubra-CWS-ainetta vietiin kudoksenhomogenointilaitteeseen, joka oli varustettu teflonsurvimella (Takashima Shoten Co., Ltd., Japani). 70 pisaraa miglyolia lisättiin 27-numeron injektioneulas ta CWS-aineeseen, ja seos jauhettiin tasaiseksi tahnaksi nopeudella 1000 kierrosta/minuutti. Sen jälkeen tahnaan lisättiin 35 ml manni-tolin 5,6-prosenttista vesiliuosta, joka sisälsi 0,2 % ainetta "Tween"® 80, ja jauhatusta jatkettiin kunnes saatiin N»rubra-CWS-aineeseen liitettyjen pienien öljypisaroitten yhtenäinen suspensio. Kylmäkuivatun materiaalin valmistamiseksi N. rubra-CWS-aineen öl-jyynsidottu suspensio siirrettiin 35:een pieneen pulloon (tilavuus 10 ml), pakastettiin nopeasti nesteytettyä typpeä käyttäen ja kui- 18 6S370 vattiin sen jälkeen huoneenlämpötilassa. 1 ml steriloitua vettä lisätään kylmäkuivattuun materiaaliin suspension muodostamiseksi ennen käyttöä.
Esimerkki 2 N. rubra-CWS-ainetta 4 mg
Drakeol 6VR 2 pisaraa O, 2 % "lVieen,,<e80 sisältävää 5.6- prosenttista mannitoliliuosta 1 ml
Esimerkissä 1 käytetyn miglyolin sijasta käytettiin öljyä Drakeol 6VR, ja seosta käsiteltiin samalla tavalla kuin esimerkissä 1 on selostettu kiinteän preparaatin muodostamiseksi.
Esimerkki 3 N. rubra-CWS-ainetta 4 mg skvaleenia 2 pisaraa O, 2 %' ’'Tween"*80 sisältävää 5.6- prosenttista mannitoliliuosta 1 ml
Esimerkissä 1 käytetyn miglyolin sijasta käytettiin skvaleenia ja seosta käsiteltiin samalla tavalla kuin esimerkissä 1 on selostettu kiinteän preparaatin muodostamiseksi.
Esimerkki 4 N-· rubra-CWS-ainetta 4 mg
Vitamiini A-palmitaattia 2 pisaraa 0,2 % "Tween,,<a80 sisältävää 5.6- prosenttista mannitoliliuosta 1 ml
Esimerkissä 1 käytetyn miglyolin sijasta käytettiin vitamiini A-palrnitaattia, ja seosta käsiteltiin samalla tavalla kuin esimerkissä 1 on selostettu kiinteän preparaatin muodostamiseksi.
Esimerkki 5 N. rubra-CWS-ainetta 4 mg
Miglyolia 2 pisaraa O, 2 % "Tween"®80 sisältävää 5-prosenttista glukoosiliuosta 4 ml
Esimerkissä 1 käytetyn 5,6-prosenttisen mannitoliliuoksen sijasta käytetiin 5-prosenttista glukoosiliuosta, ja seosta käsiteltiin, samalla tavalla kuin esimerkissä 1 oh selostettu kiinteän preparaatin muodostamiseksi;
Claims (5)
1. Menetelmä kiinteän farmaseuttisen preparaatin valmistamiseksi, joka sisältää soluseinämän rankoa, joka on valmistettu fraktioimalla ja puhdistamalla Nocardia rubra'n solunseinä-miä, kantajaöljyä, suspendointiainetta ja dispergointlainetta, tunnettu siitä, että pakkaskuivataan suspensio, joka sisältää solunseinämärankoa, Miglyol® 'ia, Drakeol- 6VE0 :aa, skvaleenia tai vitamiini A-palmitaattia kantajaöljynä, poly-oksieteenisorbitaaniesteriä suspendointiaineena ja sokeria tai sokerialkoholia dispergointiaineena.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että polyoksisorbitaaniesteri on polyoksieteenisorbi-taanimono-oleaatti, siis "Tween-80 "
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että dispergointiaine on glukoosi tai mannitol i.
4. Patenttivaatimuksen 1-4 mukainen menetelmä, tunnet-t u siitä, että mikro-organismista Nocardia rubra peräisin olevan solunseinämärangon skvaleenin (2,6,10,15,19,23-heksa-metyyli-2,6,10,14,18,22-tetrakosaheksaeenln), polyoksiety-leenisorbitaanimono-oleaatin ja mannitolin käsittävä suspensio pakkaskuivataan.
1. Förfarande för framställning av ett fast farmaceutiskt . preparat innehällande cellväggsskelett framställt genom fraktionering och rening av cellväggar frän Nocardia rubra, bärarolja, suspenderingsmedel och dispergeringsmedel, kännetecknat av att en suspension, som inne-h&ller cellväggsskelettet, Miglyol®, Drakeol-6VI^, squalen eller vitamin A-palmitat som bärarolja, en polyoxietensorbitan-ester som suspenderingsmedel och ett socker eller en socker-alkohol som dispergeringsmedel, lyofiliseras.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP9587177A JPS5428813A (en) | 1977-08-09 | 1977-08-09 | Solid preparation containing cell membrane extract substance used as suspension when using same |
| JP9587177 | 1977-08-09 |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| FI782442A FI782442A (fi) | 1979-02-10 |
| FI65370B FI65370B (fi) | 1984-01-31 |
| FI65370C true FI65370C (fi) | 1984-05-10 |
Family
ID=14149407
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| FI782442A FI65370C (fi) | 1977-08-09 | 1978-08-09 | Foerfarande foer framstaellning av ett fast farmaceutiskt preparat |
Country Status (15)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4543253A (fi) |
| JP (1) | JPS5428813A (fi) |
| AU (1) | AU526788B2 (fi) |
| BE (1) | BE869610A (fi) |
| CA (1) | CA1118348A (fi) |
| CH (1) | CH643459A5 (fi) |
| DE (1) | DE2834893A1 (fi) |
| DK (1) | DK153443C (fi) |
| FI (1) | FI65370C (fi) |
| FR (1) | FR2399844A1 (fi) |
| GB (1) | GB2002229B (fi) |
| HU (1) | HU179726B (fi) |
| IT (1) | IT1098381B (fi) |
| NL (1) | NL7808337A (fi) |
| SE (1) | SE447629B (fi) |
Families Citing this family (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA1206416A (en) * | 1982-06-30 | 1986-06-24 | John L. Cantrell | Pyridine soluble extract of a microorganism |
| CA1206415A (en) * | 1982-06-30 | 1986-06-24 | John L. Cantrell | Pyridine soluble extract of a microorganism |
| US4806350A (en) * | 1986-04-18 | 1989-02-21 | Norden Laboratories, Inc. | Vaccine formulation |
| DD273198A5 (de) * | 1986-06-09 | 1989-11-08 | �������@�������k���Kk�� | Verfahren zur herstellung eines modifikationsmittels |
| DE3727987A1 (de) * | 1987-08-21 | 1989-03-02 | Sleytr Uwe B | Pharmazeutische struktur |
| US6090385A (en) * | 1993-12-10 | 2000-07-18 | Maes; Hubert | Method of treating cancer |
| CN1230184C (zh) * | 1998-07-16 | 2005-12-07 | 东市郎 | 以细菌的菌体成分为有效成分的癌免疫治疗用制剂 |
| US20050250175A1 (en) * | 2002-08-02 | 2005-11-10 | Takehiko Nomura | Bacterial cell wall skeleton component preparaion |
| EP1741438A4 (en) * | 2004-04-22 | 2009-08-26 | Dainippon Sumitomo Pharma Co | PHARMACEUTICAL PREPARATION CONTAINING SKELETAL COMPONENT OF BACTERIAL CELL WALL |
| CN115300490B (zh) * | 2021-05-07 | 2024-04-16 | 安徽远望乐桓药业有限公司 | 包含角鲨烯和甘露醇的药物组合物及其用途 |
Family Cites Families (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3185623A (en) * | 1960-05-31 | 1965-05-25 | Smith Fred | Preservation of animal semen |
| US3177117A (en) * | 1961-12-26 | 1965-04-06 | Joseph F Saunders | Process for freezing blood |
| FR2268531B1 (fi) * | 1974-04-25 | 1978-07-21 | Anvar | |
| JPS5132794A (en) * | 1974-06-20 | 1976-03-19 | Anvar | Koshuyokoirusu oyobi ajubantokatsuseiojusuru maikobakuteriumufurakushonnoseiseiho |
| FR2345158A1 (fr) * | 1976-03-26 | 1977-10-21 | Anvar | Agents mitogenes, provenant notamment de peptidoglycanes bacteriens |
| FR2345159A2 (fr) * | 1976-03-26 | 1977-10-21 | Anvar | Agents solubles dans l'eau ayant des proprietes mitogenes et/ou immuno-stimulantes, obtenus a partir de cellules de nocardia, et leurs procedes de preparation |
-
1977
- 1977-08-09 JP JP9587177A patent/JPS5428813A/ja active Granted
-
1978
- 1978-08-02 US US06/930,409 patent/US4543253A/en not_active Expired - Lifetime
- 1978-08-03 GB GB7832134A patent/GB2002229B/en not_active Expired
- 1978-08-04 SE SE7808414A patent/SE447629B/sv not_active IP Right Cessation
- 1978-08-08 IT IT26609/78A patent/IT1098381B/it active
- 1978-08-08 BE BE78189775A patent/BE869610A/xx not_active IP Right Cessation
- 1978-08-09 DK DK352578A patent/DK153443C/da not_active IP Right Cessation
- 1978-08-09 DE DE19782834893 patent/DE2834893A1/de active Granted
- 1978-08-09 NL NL787808337A patent/NL7808337A/xx not_active Application Discontinuation
- 1978-08-09 CA CA000309032A patent/CA1118348A/en not_active Expired
- 1978-08-09 AU AU38791/78A patent/AU526788B2/en not_active Expired
- 1978-08-09 FR FR7823522A patent/FR2399844A1/fr active Granted
- 1978-08-09 CH CH847978A patent/CH643459A5/de not_active IP Right Cessation
- 1978-08-09 HU HU78JU295A patent/HU179726B/hu not_active IP Right Cessation
- 1978-08-09 FI FI782442A patent/FI65370C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SE447629B (sv) | 1986-12-01 |
| FI782442A (fi) | 1979-02-10 |
| GB2002229A (en) | 1979-02-21 |
| FR2399844A1 (fr) | 1979-03-09 |
| FR2399844B1 (fi) | 1982-08-20 |
| SE7808414L (sv) | 1979-02-10 |
| DK153443B (da) | 1988-07-18 |
| NL7808337A (nl) | 1979-02-13 |
| HU179726B (en) | 1982-11-29 |
| JPS5428813A (en) | 1979-03-03 |
| US4543253A (en) | 1985-09-24 |
| DK352578A (da) | 1979-02-10 |
| IT1098381B (it) | 1985-09-07 |
| CH643459A5 (de) | 1984-06-15 |
| DK153443C (da) | 1988-12-05 |
| JPS631291B2 (fi) | 1988-01-12 |
| CA1118348A (en) | 1982-02-16 |
| IT7826609A0 (it) | 1978-08-08 |
| AU526788B2 (en) | 1983-02-03 |
| BE869610A (fr) | 1979-02-08 |
| GB2002229B (en) | 1982-05-26 |
| DE2834893C2 (fi) | 1987-08-27 |
| FI65370B (fi) | 1984-01-31 |
| AU3879178A (en) | 1980-02-14 |
| DE2834893A1 (de) | 1979-02-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4877611A (en) | Vaccine containing tumor antigens and adjuvants | |
| Kato et al. | Effects of oral administration of Lactobacillus casei on antitumor responses induced by tumor resection in mice | |
| DE69718029T2 (de) | Krebs immuntherapie unter verwendung von tumorzellen kombiniert mit lymphozytmischungen | |
| CN109010825B (zh) | 一种阴道原位凝胶制剂及其制备方法和应用 | |
| US6713056B1 (en) | Combined preparation for the treatment of neoplasic diseases or of infectious diseases | |
| JP2004505047A (ja) | 複合治療による癌治療 | |
| FI65370C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av ett fast farmaceutiskt preparat | |
| JPH07119227B2 (ja) | 生体物質処置方法、処置用化合物 | |
| KR101124363B1 (ko) | 면역조절곤란증을 포함하는 질병을 치료하기 위한 그람양성균 제제 | |
| WO2020133643A1 (zh) | 一种人Vγ9Vδ2T细胞扩增培养方法与培养基 | |
| Hattori et al. | Five-year survival rate of gastric cancer patients treated by gastrectomy, large dose of mitomycin-C, and/or allogeneic bone marrow transplantation | |
| US20020164378A1 (en) | Use of bioactive fraction from cow urine distillate ('Go-mutra') as a bio-enhancer of anti-infective, anti-cancer agents and nutrients | |
| JPH02295923A (ja) | 腸内クロストリジウム属細菌の増殖阻害剤 | |
| Alexander et al. | Stimulants of cellular proliferation in wounds | |
| CN108653729B (zh) | 一种阴道泡沫剂及其应用 | |
| JPS5839624A (ja) | 抗腫瘍剤 | |
| CN114599379A (zh) | 一种用于预防或治疗脓毒症的药物组合物、试剂盒及其应用和治疗方法 | |
| Tanaka et al. | Effect of immunotherapy, chemotherapy, and surgery on tumor immunity in mice | |
| Cole et al. | Lymphatic transport of bacteria in surgical infection | |
| AU2005237162B2 (en) | Pharmaceutical composition containing cow urine distillate and an antibiotic | |
| KR820000420B1 (ko) | 세포의 벽조직을 구성하는 고형화된 제약 조성물의 제조방법 | |
| KR20010101065A (ko) | 표고버섯 균사체 추출물 유래의 ｌａｋ 활성증강물질 및이를 함유하는 ｌａｋ 활성증강용 제제 | |
| Lubaroff | HPC-36: An Epithelial Tissue Culture Line Derived From Human Prostate Adenocarcinoma 1, 2, 3 | |
| US20100209394A1 (en) | Mitogen activated protein kinase modulator | |
| KR0183442B1 (ko) | 연쇄상구균 속의 균체와 이를 이용한 항종양제 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MM | Patent lapsed | ||
| MM | Patent lapsed |
Owner name: ENNYU, KATSUSUKE Owner name: AZUMA, ICHIRO Owner name: AOKI, OSAMU Owner name: YAMAMURA, YUICHI |