FI58502C - Foerfarande foer framstaellning av alkyl-7-deoxi-7-(acors)-alfa-tiolinkosaminider vilka aer mellanprodukter vid framstaellning av substituerade tioanaloger av linkomycin - Google Patents

Description

ΓΛ, KUULUTUSJULKAISU _ Λ _ jMTa ™ (11) utläggningsskiuft 5 8 5 O 2 e%g c (45) r :i tri ti ' r ’ ’ 130.- :- ^ 1 ^ (51) K».ik.3/in*.a.3 o 0? H 15/16 SUO MI-FIN LAND (H) 1715/72 (22) H»fc—ttptlvt—AmChnlnufrt 15.06.72 ' ' (13) AHatpUvft—GlMftwc»d*f 15.06.72 (41) TiHhit JutkMul—Bltvtt aftamN| 30.12 72

Je rekisteri hallitus j. ku^tk^n p*m.-

Petan* och registerstyrelsen · AmMom uth|deeh uti.sicrNtm puMorad 31.10.80 (32)(33)(31) Pyritty *»μΚμμ—Begirt prtocfm 29.06.71 I5.II.7I USA (US) 158075, 19901*6 (71) The Upjohn Company, 301 Henrietta Street, Kalamazoo, Michigan, USA(US) (72) Brian Bannister, Kalamazoo, Michigan, USA(US) (71*) Berggren Oy Ab (51*) Menetelmä välituotteina linkomysiinin substituoitujen tioanalogien valmistuksessa käytettävien alkyyli-7-deoksi-7_(AcORS)-oi-tiolinkos-aminidien valmistamiseksi - Förfarande för framställning av alkyl-7-deoxi~7~(AcORS)-«-tiolinkosaminider, vilka är mellanproduk-ter vid framställning av substituerade tioanaloger av linkomycin Tämä keksintö kohdistuu menetelmään valmistaa alkyyli-(7S)-N-alkanoyyli-2,3,4-tri-0- alkanoyyli-7-deoksi-7-substituoituja tio-1-tio-L-treo-a-D-galakto-oktopyranosideja, joita käytetään välituotteina valmistettaessa antibakteerisesti aktiivista alkyyli-6,7,8-trideoksi-7-substituoitua tio-6-(l-metyyli-trans-^-propyyli-L-pyrrolidin-2-yyli-karbonyyliamino)-l-tio-L-treo-a-D-galakto-okto-pyranosidia, ja joilla välituotteilla on kaava cn3 y S-R-OAc

AcNH-- γΛ \ OAc / \i l/S-Alk OAc jossa Alk on alhainen alkyyli, Ac on alempi alkanoyyli ja R on suora tai haarautunut alkyyliryhmä, jossa on 2-5 hiiliatomia, alkyyli-tio- 58502 alkyyliryhmä, jossa alkyyliryhmässä on 2 tai 3 hiiliatomia, tai sykloheksyyliryhmä.

Kaavan I mukaisia yhdisteitä valmistetaan siten, että alkyyli-6,7-alkanqyyli-imido-6,7,8-tri-deoksi-l-tio-D-erytro-a-D-galakto-okto-pyranosidia, jolla on kaava

AcN^^ D

^- II

η/~\ \0Ac / \j 1/ SAlk OAc jossa Alk tarkoittaa samaa kuin yllä, kuumennetaan syklisen sulfi-din, jolla on kaava rRv , jossa R tarkoittaa samaa kuin yllä, ja 'S*' sellaisen vedettömän hapon kanssa, jolla on kaava AcOH, jossa Ac on alempi alkanoyyli. Siten aikaansaadaan atsiridiinirenkaan avaaminen, jolloin saadaan kaavan I mukainen välituote.

Tämän jälkeen voidaan poistaa asyyliryhmät hydratsinolyysillä sinänsä tunnetulla tavalla (ks. US-patenttia n:o 3 179 565), jolloin saadaan kaavan III mukainen alkyyli-7-deoksi-7-(HORS)-a-tiolinkosami-nidia.

CH^

______x SR-OH

NH„--

2 III

©

Nj_(/ S-Alk

OH

Keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetuista välituotteista saadut yhdisteet (kaava III) ovat käyttökelpoisia samoihin tarkoituksiin kuin US-patentissa n:o 3 380 992 selostettu metyyli-a-tio- linkosaminidi (metyyli-6-amino-6,8-dideoksi-l-tio-D-erytro-a-D-galakto-oktopyranosidi, α-MTL) sekä metyyli-6-amino-7-kloori-6,7,8- 3 58502 trideoksi-l-tio-L-treo- ja D-erytro-a-D-galakto-oktopyranosidit (US-patentit n:o 3 496 163 ja 3 502 648), ja kaavan III mukainen yhdiste voidaan lisäksi asyloida trans-l-metyyli-4-propyyli-L-2-pyrrolidiinikarboksyylihapon kanssa, jolloin muodostuu 7-deoksi-7~(HORS)-linkomysiiniä sekä muiden L-2-pyrrolidiinikarboksyylihappo-jen kanssa, kuten on selostettu näissä patenteissa, tai N-(2-hydrok-sietyyli)-L-2-pyrrolidiinikarboksyylihapon kanssa, jolloin muodostuu yhdisteitä, joilla on kaava CH, 3

_/ S-R-OH

(IV)

Ac-^NH-- γ\

Vl^AlK

OH

jossa R ja Alk tarkoittavat samaa kuin yllä ja Ac^ on L-2-pyrroli-diinikarboksiasyyli tai N-metyyli-, N-etyyli- tai N-(2-hydroksietyy-li)-L-2-pyrrolidiinikarboksiasyyli, joista jokin tai kaikki voidaan substituoida 4-asemassa alhaisella alkyylillä tai alhaisella alkyli-deenilla.

US-patentin 3 544 551 kautta tiedetään, että 7-SH-analogeja voidaan valmistaa kuumentamalla kaavan II atsiridinoyhdistettä, jossa Ac on vety, rikkivedyn kanssa. Tähän asti ei ole ollut mahdollista korvata S-vety suoraan tai epäsuorasti. Keksinnön mukaisen välituotteen kautta saadut yhdisteet ovat lisäksi olennaisesti paljon aktiivisempia kuin vastaavat 7-SH-yhdisteet. Esimerkiksi 7-deoksi-7(S)-(metyylitio)-linkomysiinin vetykloridi on useita kertoja aktiivisempi in vitro kuin linkomysiini, sen sijaan 7-deoksi-7~(S)-merkapto-linkomysiinin vetykloridi on vähemmän aktiivinen kuin linkomysiini.

Tiedetään myös US-patentin 3 702 322 kautta, että 7-OR-analo-geja voidaan valmistaa saattamalla kaavan II yhdiste reagoimaan alkoholin kanssa hapon läsnäollessa. Yritykset valmistaa rikkianalogeja korvaamalla alkoholi merkaptaanilla eivät ole onnistuneet.

Nyt on havaittu, että kaavan II mukaiset yhdisteet läpikäyvät sulfidolyysin, kun niitä kuumennetaan ei-aromaattisen syklisen mono-sulfidin kanssa jääetikassa tai muussa alhaisessa alkaanihapossa. Seuraavat kaavat kuvaavat mahdollisia mekanismeja reaktiossa.

il 58502 ch3 ch3 ch3 jLa------S-CH,CHo0Ac + \__^ OAc ^ 2 2

AcNH----- AcNH------

Jos syklinen sulfidi on epäsymmetrinen, kuten propyleenisulfidin ollessa kysymyksessä, ch2ch2-ch3, ovat kaksi tuotetta mahdollisia, esim CH CH,

! 3 CH 5 CH

I I 3 I 3 -1- S-CH-CH2OAc S-CH2-CH-OAc

AcNH-- AcNH-- | ja

Jos syklinen sulfidi on oksasyklinen tai tiasyklinen esiintyy happi-tai muu rikkiatomi, X, sivuketjussa.

Syklisissä sulfideissa on myös mahdollisuus, että toinen mooli sulfidia reagoi seuraavasti ch3 ch3 --sC? Λ. ---S-(CH2)3-S(CH2)3-OAc (+) Sy y

AcNH-- AcNH--

N

CH, t -5 ! -j-S- (CH2) 3OAc i

AcNH --f-- 5 58502 Tämä reaktion sujuu erityisen hyvin trimetyleenisulfidillä (tietaani) jolloin saadaan suurin piirtein yhtä suuria määriä kumpaakin tuotetta.

Kaikilla yllä mainituilla ei-aromaattisilla syklisillä monosul-fideilla aikaansaadaan haluttu tulos yksinkertaisesti kuumentamalla alkyyli-N-alkanoyyli-6,7-atsiridino-6-deamino-7-deoksi-dc~tiolinkosami-nidi sopivan sulfidin kanssa jääetikan tai muun vedettömän alhaisen alkaanihapon läsnäollessa.

Edullisesti käytetään liuotinta, joka kiehuu noin 70rllo°C:ssa. Tähän tarkoitukseen käytetään tavallisesti ylimäärin sulfidia. Haluttaessa voidaan käyttää sellaisia liuottimia kuin dioksaania, hiili-tetrakloridia, bentseeniä tai tolueenia ja edullisesti sellaisen sulfidin kanssa, joka kiehuu yli noin 110°C. Paineastiaa voidaan edullisesti käyttää alempana kiehuville sulfideille, kuten etyleenisulfidille.

Suhteet eivät ole kriittisiä reaktiolle, mutta ne ovat kriitti-tisiä saannoille. Parhaimmat saannot saadaan siten noin 3-7 ekyiyalen-tilla happoa yhdessä olennaisen ylimäärän kanssa, ainakin kaksinkertaisen määrän kanssaa sulfidia. Tämä on toinen etu käytettäessä sulfidia liuottimena. Käytettäessä sulfidia, kuten etyleenisulfidia, joka kiehuu niin alhaalla, että saadaan reaktioseos, joka palautusjäähdytyksessä kiehuu alle 70°C:ssa, voidaan käyttää ylipainetta. Jos se on sellainen että reaktioseos kiehuu yli noin 110°C:ssa, voidaan käyttää säädettyä kuumennusta. Muulloin kuumennetaan edullisesti palautus-j äähdytyslämpötilassa.

Reaktioseosta voidaan edelleenkäsitellä alalla sinänsä tunnetuilla menetelmillä, kuten vastavirtajakamalla, kromatografoimalla ja liuotinuuttamalla tai kiteyttämällä.

Lähtöaineyhdisteet esiintyvät kahtena epimeerisenä muotona: ch3 --CH3

Ac-N Ac-ϊζ^ y- \ vr ^ \ yx

VjAlk V/SAIR

OAc OAc R-muoto S-muoto R ja S viittaavat 7-asemaan, koska 6-asema on aina R-muodossa. Reaktiossa tapahtuu inversio. Kun esim. etyleenisulfidi saatetaan reagoimaan metyyli-N-asetyyli-2,3,^-tri-0-asetyyli-6(R),7(R)-atsiridino-6-deamino-7-deoksi-A&-tiolinkosaminidin kanssa, saadaan metyyli-N-asetyyli-2, 3,4-tri-0-asetyyli-7-deoksi-7(S)-(2-asetoksietyylitio)-A-tio- 6 58502 linkosaminidia.

Kaavan II mukaisia lähtöaineyhdisteitä saadaan asyloimalla yhdiste, jolla on kaava:

X

Ηϋ^ 3 f)

\*H i/sAlk OH

karboksiasyyliasylointiaineen kanssa, kuten etikkahappoanhydridin tai muun alhaisen alkaanihappoanhydridin tai bentsoyylikloridin tai sen tapaisen karboksiasyylihalidin kanssa sinänsä tunnetulla tavalla. Koska amino- ja hydroksiryhmät asyloituvat eri nopeuksilla voivat N-asyyli ja 0-asyyli olla samoja tai erilaisia.

Koska nämä asyyliryhmät eivät esiinny lopputuotteessa, vaan poistetaan käsittelyssä, on epäolennaista mitä ne ovat, niin kauan kun ne ovat karboksiasyylejä. Sopivia tällaisia karboksiasyyleja ovat alhaiset alkanoyylit.

Kaavan VI lähtöaineyhdisteitä voidaan valmistaa dehydrohalo-genoimalla yhdiste, jolla on kaava CH, 3 / \___✓ Halo NH2-- noj-o 'XoHySAlk

OH

jotka ovat alalla tunnettuja. (US-patentti n:o 3 502 648). Dehydro-halogenointi aikaansaadaan kuumentamalla kaavan VII yhdiste inertis-sä liuottimessa happoa vastaanottavan aineen läsnäollessa. Sopiva tapa on kuumentaa lähtöaineyhdisteen, vedettömän natriumkarbonaatin ja 7 58502 dimetyyliformamidin reaktioseosta palautusjäähdytyslämpötilassa lyhyen aikaa, poistaa liuotin ja kiteyttää sopivasta liuottimesta, esim. metanolista (ks. US-patenttia n:o 3 544 551)· Lähtöainesulfidit ovat tunnettuja yhdistetä.

Asyloimalla keksinnön mukaisella menetelmällä valmistetuista välituotteista saadut yhdisteet (kaava III) L-2-pyrrolidiinikarboni-hapon kanssa saadaan kaavan IV mukaisia yhdisteitä, joissa Ac on L-2-pyrrolidiinikarbonihapon asyyli. Kun Alk on metyyli, R on ety-leeni ja L-2-pyrrolidiinikarboksyylihappo on trans-l-metyyli-4-pro-pyyli-L-2-pyrrolidiinikarboksyylihappo ja konfiguraatio on (S), on yhdiste 7~deoksi-7(S)-'(2-hydroksietyylitio)-linkomysiini, jonka bakteerienvastainen vaikutus on useita kertoja suurempi kuin linko-mysiinillä. Sitä ja sen analogeja voidaan käyttää samoihin tarkoituksiin ja samalla tavoin kuin linkomysiiniä. Alhaisemmilla jäsenillä on parempi gram-negatiivinen aktiviteetti. Taulukossa 1 on esitetty linkomysiinin ja sen 7(S)-7~substituoitujen tioanalogien M.I.C.-arvoja (minimal inhibitory concentration, pienin antibak-teerisen aineen pitoisuus, joka tietyissä olosuhteissa vielä pystyy tappamaan bakteerin tai estämään sen kasvun), kolmen bakteerin suhteen. Koetuloksissa on esitetty keksinnön mukaisten välituotteiden kautta saatujen lopputuotteiden lisäksi myös muita linkomysiini-analogej a.

8 58502

Linkomysiinin (7S)-7-substituoitujen tioanalogien M.I.C.-arvot (^ug/ml) verrattuna linkomysiiniin

Streptococcus Streptococcus Staphylococcus pneumoniae pyogenes aureus

Linkomysiini 0,31 0,31 0,31

Linkomysiinin Esim. n:o tioanalogit (välituote, R-ryhmä josta lopputuote (kaavoissa on saatu) III ja IV)

Et 1 0,04 0,08 0,04 n-Pr 2 0,01 0,04 0,02 i-Pr 3 0,02 0,02 0,02 sykloheksyyli 5 0,125 0,125 0,125 n-Bu 4 0,02 0,125 0,02

Keksintöä selostetaan alla lähemmin esimerkkien avulla, joissa osat on annettu paino-osina, paitsi liuotinsuhteiden ollessa kysymyksessä tai jollei muuta sanota ja c.g.s.-järjestelmää käytetään jollei muuta ole sanottu.

Esimerkki 1

Metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-(2-asetoksietyylitio)- 7-deoksi-a-tiolinkosaminidi 9 58502 CH, CH, 3 3

AcN^ --SCH2CH2OAc _ AcNH-- w· yi OAc

Seosta, jossa on 5,0 g (1 mooliekvivalentti) metyyli-N-asetyyli- 2,3,4-tri-0-asetyyli-6,7-atsiridino-6-deamino-7-deoksi-a-tio-linkos-aminidia, 50 cm^:ä etyleenisulfidia (ti-iraania) ja 5,25 g (7 mooli-ekvivalenttia) jääetikkaa, kuumennetaan koeputkessa 20 tuntia höyry-hauteella. Haihtuvat aineet poistetaan reaktioliuoksesta tislaamalla 100°C:ssa, jäännös liuotetaan metyleenikloridiin ja sekoitetaan natriumbikarbonaatin kyllästetyn vesiliuoksen ylimäärän kanssa. Pesemällä orgaaninen kerros vedellä, kuivaamalla vedettömällä natriumsulfaatil-la ja poistamalla liuotin pyörivällä haihduttimella 40°C:ssa/7 mm Hg, saadaan paksu keltainen siirappi, joka ohutkerroskromatografian mukaan (Si02~geeli, asetoni ja "Skellysolve B" suhteessa 1:1 ("Skelly-solve B" on olennaisesti n-heksaania, jonka kp. 60-68°C, valmistaja Skelly Oil Co.) ei sisällä yhtään lähtöainetta sekä uuden päävyö-hykkeen, jolla on alhaisempi Rf-arvo (0,50 verrattuna 0,69:ään).

Yllä mainittu siirappi, joka sisälsi olennaisen määrän etylee-nisulfidista peräisin olevaa polymeeristä ainetta, kromatografoidaan polymeerisen aineen poistamiseksi. Käytetään 1200 g piioksidia sisältävää pilaria (5,8 x 89 cm) ja liuotinjärjestelmää, jossa on etyyliasetaattia ja "Skellysolve B":tä suhteessa 2:1. Yhden litran esijuok-sun jälkeen otetaan talteen 50 ml:n suuruisia fraktioita kunnes kaikki polymeerinen aine on poistunut ohutkerroskromatografian mukaan.

Sen jälkeen pilari eluoidaan etyyliasetaatilla. Fraktiot 81-170 yhdistetään ja liuotin poistetaan tislaamalla pyörivällä haihduttimella i40°C:ssa/7 mm Hg, jolloin saadaan 5,81 g raakatuotetta.

Raakatuotteen vastavirtajakaminen järjestelmässä 1 etanoli: 1 vesi: 1 etyyliasetaatti: 3 sykloheksaania antaa metyyli-N-asetyyli- 2,3,^-tri-O-asetyyli-7(S)-(2-asetoksietyylitio)-7-deoksi-a-tiolinkos-aminidia, jonka K-arvo on 0,53· Se saadaan värittöminä neuloina etyy-liasetaatti-"Skellysolvesta B" ja sillä on seuraavat ominaisuudet: 10 58502

Sp. 206-7° /ä?D + l80 (c, 0,79, CHClj)

Analyysi: laskettu yhdisteelle C 48,17, H 6,35, N 2,68, S 12,25.

Saatu:C 48,12, H 6,37, N 2,58, S 11,95-

Esimerkki 2

Osa A Metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-(3_asetoksi-propyylitio)-7-deoksi-a-tiolinkosaminidi

Menettelemällä kuten esimerkissä 1 korvaten etyleenisulfidi trimetyleenisulfidilla saadaan metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-(3-asetoksipropyylitio)-7“deoksi-a-tiolinkosaminidia (K = 1,0, 1 etanoli :1 vesi:l etyyliasetaatti:2 sykloheksaania) värittöminä neuloina etyyliasetaatti:"Skellysolvesta B" ja seuraa-villa ominaisuuksilla:

Sp. 172,5-174° /£7d + 178° (c, 0,94, CHC13)

Analyysi: laskettu yhdisteelle C22H35ONS2: C 49,15, H 6,56, N 2,61, S 11,93

Saatu:C 49,31, H 6,58, N 2,68, S 11,83.

Osa B Metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-/3-(3-asetoksi-propyylitio)propyylitio7-7-deoksi-a-tiolinkosaminidi Saadaan myös metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-/3-(3-asetoksipropyylito)propyylitio7-7-deoksi-a-tiolinkosaminidia (K = 2,3, sama liuotinjärjestelmä) värittöminä neuloina, joilla on seuraavat ominaisuudet:

Sp. 117-8° /£7d + 149° (c, 0,997, CHC13)

Analyysi: laskettu yhdisteelle CgcjH^ONSj: C 49,08, H 6,76, N 2,29, S 15,72.

Saatu:C 49,38, H 6,14, N 2,35, S 15,91-

Esimerkki 3

Metyyli-7(S)-(2-asetoksi-l-metyylietyylitio)-N-asetyyli-2,3,4-tri- 0-asetyyli-7-deoksi-a-tiolinkosaminidi ja metyyli-7(S)-(2-asetoksi- 2-metyylietyylitio)-N-asetyyli-2,3,4-tri-O-asetyyli-7-deoksi-a-tiolinkosaminidi

Menettelemällä kuten esimerkissä 1, korvaten etyleenisulfidi propyleenisulfidilla (1,2-epitiopropaani), saadaan seos, jossa on 40 osaa metyyli-7(S)-(2-asetoksi-l-metyylietyylitio)-N-asetyyli- 2,3,4-tri-0-asetyyli-7-deoksi-a-tiolinkosaminidia ja 60 osaa metyyli- 11 5 8502 7(S)-(2-asetoksi-2-metyylietyylitio)-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli- 7-deoksi-a-tiolinkosaminidia (K = 0,83, 1 etanoli :1 vesi:l etyyliasetaatti: 3 sykloheksaania) pieninä värittöminä Iitteinä neuloina etyyliasetaatti:"Skellysolve B":sta ja isomeerien seoksella oli seuraavat ominaisuudet:

Sp. 198-199°C.

/ä7D + 170° (c, 0,94, CHC13)

Analyysi: laskettu yhdisteelle C22H35°ioNS2: C 49,15, H 6,56, N 2,61, S 11,93.

Saatu:C 49,41, H 6,47, N 2,34, S 11,53.

Esimerkki 4

Metyyli-7(S)-(4-asetoksibutyylitio)-7-deoksi-a-tiolinkosaminidi

Menettelemällä kuten esimerkissä 1 korvaten etyleenisulfidi tetrahydrotiofeenilla (tetrametyleenisulfidi) kuumentaen 100°C:ssa 20 tuntia saadaan metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-(4-asetoksibutyylitio)-7~deoksi-a-tiolinkosaminidia (K = 1,32, 1 etanoli:! vesi:l etyyliasetaatti:2 sykloheksaania) hienoina neu-lasrusebteina etyyliasetaatti:"Skellysolve B":sta ja seuraavilla ominaisuuksilla:

Sp. 149-150°C.

/§7d + 171° (c, 0,88, CHCl^)

Analyysi: laskettu yhdisteelle C23H37°10NS2: C 50,07, H 6,76, N 2,54, S 11,62.

Saatu:C 49,97, H 6,86, N 2,50, S 11,35.

Esimerkki 5

Metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-(2-asetoksisyklohek- syyli-tio)-7-deoksi-a-tiolinkosaminidi

Menettelemällä kuten esimerkissä 1 korvaten etyleenisulfidi syklohekseenisulfidillä (7-tiabisyklo-/5.1.0?heptaani) ja kuumentamalla 100°C:ssa 16 tuntia saadaan metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri- 0-asetyyli-7(S)-(2-asetoksisykloheksyylitio)-7-deoksi-a-tiolinkos-aminidia. Vastavirtajakaminen liuotinjärjestelmässä 1 etanoli:1 vesi: 0,5 etyyliasetaatti:3 sykloheksaania antaa tätä tuotetta K-arvolla 0,80. Se saadaan värittöminä neuloina etyyliasetaatista ja seuraavilla ominaisuuksilla:

Sp. 205-6°C.

/$7d + 153° (c, 0,64, CHC13)

Analyysi: laskettu yhdisteelle C25H39®10N^2: C 51,97, H 6,80, N 2,43, S 11,10,

Molekyylipaino 577,70.

12 58502

Saatu:C 51,82, H 6,87, N 2,29, S 11,12,

Molekyylipaino (massakirjo, M+) 577·

Esimerkki 6

Metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-0-asetyyli-7(S)-(5-asetoksipentyylitio)- 7-deoksi-a-tiolinkosaminidi

Menettelmällä kuten esimerkissä 1 saatetaan pentametyleeni-sulfidi (tetrahydrotiopyraani) reagoimaan metyyli-N-asetyyli-2,3,4-tri-O-asetyyli-7(S)-(5-asetoksipentyylitio)-7~deoksi-a-tiolinkos-aminidiksi, jonka K-arvo on 1-9*1 1 etanoli :1 vesi:l etyyliasetaatti: 2 sykloheksaanissa ja jolla on seuraavat ominaisuudet kiteytettynä etyyliasetaatti: "Skel ly solve B" : stä:

Sp. 158-9°C. (neuloja) /£7d + 169° (c, 0,60, chci3)

Analyysi: laskettu yhdisteelle C24H39^10NS2: C 50,95, H 6,95, N 2,48, S 11,34.

Saatu:C 50,88, H 6,98, N 2,41, S 11,22.

Esimerkki 7 (lopputuotteen valmistus) 7-deoksi-7(S)-(2-hydroksietyylitio)-1inkomysiinivetykloridi /Metyyli-6,7,8-trideoksi-7-(2-hydroksietyylitio)-6-trans-(l-metyyli-4-propyyli-L-2-pyrrolidiinikarboksiamino)-l-tio-L-treo-a-D-galaktopyranosidivetykloridi? m Me CH3 I . HC1 M CH, --SCH2CH2-0H \ -5 h2n-- h—/--sch2ch2-oh HO A °, CONH-- l\)H / H0/ °v v;_/SMe Me, 1/ \l I I I |\OH / OH /N\ V . y SMe

Kr

XVIII \j j/ CO· 0»CQ-0‘isoBu XIX

Suspensioon, jossa on 930 mg trans-propyylihygriinihappohydro-kloridia 50 emissä vedetöntä asetonitriiliä, lisätään 995 mg tri-etyyliamiinia. Kiintoaineen liuettua jäähdytetään liuos -5°C:een jää-metanolihauteessa, mikä aikaansaa trietyyliammoniumkloridin erot- 13 58502 tumisen. Tähän liuokseen lisätään 610 mg isobutyylikloroformiaattia, niin että lämpötila ei ylitä -3°C ja reaktioseosta sekoitetaan lämpötilassa, joka on välillä -3°C ja -5°C 20 minuuttia. Sen jälkeen lisätään seka-anhydridiin 700 mg metyyli-7_deoksi-7(S)-(2-hydroksi-etyylitio)-a-tio-linkosaminidia 5 emeissä metanolia ja 5 emeissä vettä, jolloin tri-etyyliammoniumkloridin sakka liukenee heti. Kahden tunnin jälkeen osoittaa ohutkerroskromatografia (Si02-geeli, 1 MeOHrlO CHCl^) aminosokerin häipyneen ja uuden vyöhykkeen kehittyneen, jolla on korkeampi Rf-arvo (0,30). Haihtuva liuotin poistetaan pyörivällä haihduttimella 40°C:ssa/7 mm Hg ja siirappimainen jäännös liuotetaan veden ja metyleenikloridin seokseen ja vesikerroksen pH säädetään arvoon 10 50 $:sella natriumhydroksidin vesiliuoksella. Vesiliuos erotetaan ja uutetaan kahdesti metyleenikloridilla ja yhdistetyt uutteet kuivataan vedettömällä natriumsulfaatilla. Jäljelle jäävä emäksinen vesikerros hylätään.

Poistamalla liuotin metyleenikloiridiuutteesta pyörivällä haihduttimella 40°C:ssa/7 mm Hg, saadaan vaaleankeltainen siirappi, joka kromatografoidaan piioksidilla (480g, pilarin mitat 3,8 x 95 cm, viivetilavuus 850 em^) järjestelmässä 1 metanoli:l kloroformi. 250 3 ... 3 .

cm :n suuruisen esijuoksun jälkeen otetaan talteen 50 cm :n suuruisia fraktioita ja aineen eluointia seuraa ohutkerroskromatografia piioksidilla samassa järjestelmässä.

Fraktiot n:o 25-44 yhdistetään, jolloin saadaan liuottimen poistamisen jälkeen 610 mg väritöntä lasimaista ainetta, joka saatetaan reagoimaan vetykloriidiksi liuottamalla se veteen, johon lisätään suolahapon laimeaa vesiliuosta (N), kunnes saadun liuoksen pH on noin 3* Tämä liuos vaippajäähdytetään ja lyofilisoidaän sen jälkeen, jolloin saadaan 7-deoksi-7(S)-(2-hydroksietyylitio)-linkomysiinivetykloridia (C-3) värittömänä kiintoaineena, jolla on seuraavat ominaisuudet: /ä?D + 114° (c, 0,91, H20)

Analyysi: laskettu yhdisteelle ^20^38^6^2^2: C 47,74, H 7,81, N 5,57, Cl 7,05, S 12,75,

Molekyylipaino vapaalla emäksellä 466,65·

Saatu (korjattu 6,75 $:n H20 suhteen): C 48,05, H 7,70, N 5,10, Cl 6,96, S 12,50,

Molekyylipaino (massakirjo, M+ vapaalla emäksellä) 466. Biologinen aktiviteetti: koelasissa noin 8 kertaa linkomysiini. Tämä yhdiste on noin 8 kertaa aktiivisempi kuin linkomysiini ja sillä on suurempi gram-negatiivinen aktiviteetti elävässä elimistössä ja se on vähemmän myrkyllinen kuin 7-deoksi-7(S)-kloorilinkomysiinivetyklo-ridi.

Claims (1)

1. 58502 Patenttivaatimus Menetelmä valmistaa alkyyli-(7S)-N-alkanoyyli-2,3,4-tri-0-alkanoyyli-7-deoksi-7-substituöituja tio-l-tio-L-treo-a-D-galakto-oktopyranosideja, joita käytetään välituotteina valmistettaessa antibakteerisesti aktiivista alkyyli-6,7,8-trideoksi-7-substitu-oitua tio-6-(l-metyyli-trans-4-propyyli-L-pyrrolidin-2-yyli-karbonyyliamino)-l-tio-L-treo-a-D-galakto-oktopyranosidia, ja joilla välituotteilla on kaava CH, ^---^ y S-R-OAc AcNH-- (I) Acor N v OAc / \j_V S-Alk OAc jossa Alk on alhainen alkyyli, Ac on alempi alkanoyyli ja R on suora tai haarautunut alkyyliryhmä, jossa on 2-5 hiiliatomia, alkyyli-tio-alkyyliryhmä, jossa alkyyliryhmässä on 2 tai 3 hiili-atomia, tai sykloheksyyliryhmä, tunnettu siitä, että alkyyli-6,7-alkanoyyli-imido-6,7,8-tri-deoksi-l-tio-D-erytro-a-D-galakto-oktopyranosidia, jolla on kaava AcN 3 (II) Ac°/ °\| V\|0Ac |/sAlk OAc \ jossa Alk tarkoittaa samaa kuin yllä, kuumennetaan syklisen sulfi-din, jolla on kaava ^R» , jossa R tarkoittaa samaa kuin yllä, ja V sellaisen vedettömän hapon kanssa, jolla on kaava AcOH, jossa Ac,on alempi alkanoyyli.