FI120642B - Mikrokapseloidut liposomikoostumukset - Google Patents

Mikrokapseloidut liposomikoostumukset Download PDF

Info

Publication number
FI120642B
FI120642B FI20075739A FI20075739A FI120642B FI 120642 B FI120642 B FI 120642B FI 20075739 A FI20075739 A FI 20075739A FI 20075739 A FI20075739 A FI 20075739A FI 120642 B FI120642 B FI 120642B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
heraprotein
modified
weight
microcapsulated
concentrate
Prior art date
Application number
FI20075739A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI20075739A0 (fi
FI20075739A (fi
Inventor
Jouko Savolainen
Raimo Hiltunen
Kaj Mahlberg
Kaarlo Jaakkola
Original Assignee
Biomed Oy
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Biomed Oy filed Critical Biomed Oy
Priority to FI20075739A priority Critical patent/FI120642B/fi
Publication of FI20075739A0 publication Critical patent/FI20075739A0/fi
Priority to PCT/FI2008/050571 priority patent/WO2009050333A1/en
Priority to EP08840644.2A priority patent/EP2197493B1/en
Priority to DK08840644.2T priority patent/DK2197493T3/en
Publication of FI20075739A publication Critical patent/FI20075739A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI120642B publication Critical patent/FI120642B/fi

Links

Classifications

    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/02—Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/04—Making microcapsules or microballoons by physical processes, e.g. drying, spraying
    • B01J13/043—Drying and spraying
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
    • A23J1/205—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey from whey, e.g. lactalbumine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J1/00—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites
    • A23J1/20—Obtaining protein compositions for foodstuffs; Bulk opening of eggs and separation of yolks from whites from milk, e.g. casein; from whey
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23J—PROTEIN COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS; WORKING-UP PROTEINS FOR FOODSTUFFS; PHOSPHATIDE COMPOSITIONS FOR FOODSTUFFS
    • A23J3/00—Working-up of proteins for foodstuffs
    • A23J3/04—Animal proteins
    • A23J3/08—Dairy proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
    • A23P10/30—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23P—SHAPING OR WORKING OF FOODSTUFFS, NOT FULLY COVERED BY A SINGLE OTHER SUBCLASS
    • A23P10/00—Shaping or working of foodstuffs characterised by the products
    • A23P10/30—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives
    • A23P10/35—Encapsulation of particles, e.g. foodstuff additives with oils, lipids, monoglycerides or diglycerides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/12—Materials from mammals; Compositions comprising non-specified tissues or cells; Compositions comprising non-embryonic stem cells; Genetically modified cells
    • A61K35/20—Milk; Whey; Colostrum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1271—Non-conventional liposomes, e.g. PEGylated liposomes, liposomes coated with polymers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/10—Dispersions; Emulsions
    • A61K9/127—Liposomes
    • A61K9/1275—Lipoproteins; Chylomicrons; Artificial HDL, LDL, VLDL, protein-free species thereof; Precursors thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5052—Proteins, e.g. albumin
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01J—CHEMICAL OR PHYSICAL PROCESSES, e.g. CATALYSIS OR COLLOID CHEMISTRY; THEIR RELEVANT APPARATUS
    • B01J13/00—Colloid chemistry, e.g. the production of colloidal materials or their solutions, not otherwise provided for; Making microcapsules or microballoons
    • B01J13/02—Making microcapsules or microballoons
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00—Function of food ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2250/00—Food ingredients
    • A23V2250/54—Proteins
    • A23V2250/542—Animal Protein
    • A23V2250/5424—Dairy protein
    • A23V2250/54252—Whey protein

Description

MIKROKAPSELOIDUT LIPOSOMIKOOSTUMUKSET TEKNIIKAN ALA
Keksintö koskee liposomikoostumuksien alaa ja erityisesti mikrokapseloituja li-5 posomikoostumuksia, käytettäviksi sellaisinaan tai kantajina ja kuljettimina, ja valmisteita ja koostumuksia biologisesti vaikuttavien aineiden, kuten lisäravinto-aineiden, jättien ja kasvisuutteiden toimittamiseksi, ja farmakologisesti vaikuttavia aineita, kuten lääkeaineet ja hormonit, paikallista tai systeemistä vaikutusta varten.
10
TUNNETTU TEKNIIKKA
Elintarvikkeet ja muut oleelliset ainekset ja aineet kuten vitamiinit ja mineraalit toimitetaan suun kautta nautittuina. Lisäravintoaineet ja farmaseuttisesti vaikuttavat aineet aikaansaadaan tyypillisesti kiintoaineannoksen muotoihin, kuten pääl-15 lystetyt tabletit, puristetut tabletit, puristetut kapselit ja gelatiinikapselit, jotka ovat yleensä helppoja ja suhteellisen halpahintaisia valmistaa, helposti annosteltavia ja jokseenkin vakaita. Annostusmuoto vaikuttaa biologisesti vaikuttavan yhdisteen imeytymiseen ja biologiseen hyötyosuuteen.
20 Monessa tapauksessa vaikuttavia aineita kuten lääkeaineita ja lisäravintoaineita käsittävät kiintoaineannoksen muodot eivät ole optimaalinen muoto vaikuttavien aineiden antamiseksi, koska useat yhdisteet hajoavat vatsassa. Vatsahappojen aikaansaama hajoaminen vähentää suun kautta annettujen kiinteiden aineiden hoitovastetta. Tarvitaan tyypillisesti suurempia pitoisuuksia vaikuttavia aineita lääkeai-25 neiden ja lisäravintoaineiden tehokkuuden säilyttämiseksi, mikä lisää epätavoitel-tuja sivuvaikutuksia.
Suun kautta annetun aineen vaikuttavuus riippuu pääasiassa ainemäärästä, joka saavuttaa verenkierron ja nopeudesta, jossa se saavuttaa verenkierron. Aineen 30 vaikuttavuutta voidaan parantaa lisäämällä imeytymisen nopeutta ja laajuutta, vähentäen siten annostusmuodossa tarvittavan vaikuttavan aineen määrää. Aineen 2 saannin lisääminen on käynyt yhä tärkeämmäksi ja alalla on ehdotettu monia ratkaisuja.
On yleisesti tunnettua, että vaikuttavan materiaalin imeytymisnopeus ja määrän 5 laajuus tai suhde, joka imeytyy verrattuna annosteltuun määrään, riippuvat annos-tusmuodosta ja toimitusjärjcstclmästä, vaikuttavan materiaalin fysiokemiallisista ominaisuuksista, kuten liukoisuus, annos, antokohta, imeytymiskohdan verisuoni-tus, kosketusaika imeytymispinnan kanssa ja pH imeytymiskohdassa.
10 Suun kautta tapahtuneen annostuksen jälkeen kiintoaineannoksen muodot imeytyvät kaksivaiheisessa prosessissa, käsittäen kiintoaineannostusmuodon hajoamisen ja vaikuttavan yhdisteen imeytymisen liuoksesta.
Termiä “ensikiertovaikutus” käytetään karakterisoimaan vaikuttavan yhdisteen 15 fraktiota, joka metaboloituu ensialtistuksessa suolen seinämälle ja maksalle. Kaikki maha-suo likanavasta imeytyneet suun kautta annetut yhdisteet siirtyvät porttilaskimoon ja maksaan ennen siirtymistä systeemiseen kiertoon. Tämä tarkoittaa sitä, että ennen kuin mahalaukun ja suoliston limakalvon kautta imeytynyt vaikuttava yhdiste voi siirtyä yleiseen kiertoon, sen on kuljettava maksaan kautta.
20
Polaariset lipidit omaavat lipofiilisen ja hydrofiilisen ryhmän samoissa molekyyleissä, ja keskinäisvaikutuksessa veden kanssa ne kasautuvat itsestään ja muodostavat kolloidisia hiukkasia. Liposomit ovat pallon muotoisia hiukkasia sisältäviä lipidejä. Niissä voi olla yksi, usea tai moni kalvoja. Liposomeja käytetään laajasti 25 vaikuttavien aineiden toimituskuljettimina lääke-, kosmetiikka-, elintarvike- ja ravinneteollisuudessa, päällystysteollisuudessa ja ekologiassa. Ne parantavat vaikuttavan aineen liukenevuutta, suojaavat herkkiä vaikuttavia molekyylejä ja parantavat solujen välistä imeytymää, muuttavat farmakokinetiikkaa ja biodistribuu-tiota.
30 3
Useat liposomituotteet, jotka parantavat imeytymää tai edistävät eri aineiden toimitusta, ovat alalla tunnettuja. Liposomikantajien parenteraalisia ja paikallisia käyttöjä esitetään julkaisussa "Liposome Technology", 2nd Ed, Voi. I (1993) G. Gregoriadis ed., CRC Press, Boca Raton, Fla. Liposomikantajat suojaavat lää-5 keainetta vihamielisiä ympäristöjä vastaan ja aikaansaavat lääkeaineen kontrolloidun vapautumisen, kun se kiertää veressä tai on immobilisoitu kohdekudoksen kuten ihon kohdalla.
Julkaisu US 4 762 720 esittää liposomikoostumuksia, jotka pystyvät pitämään 10 suurempia lääkeaineiden määriä pienellä fosfolipidimäärällä, käsittäen pakaste-kuivatetut MLV :t (monilamellaarisia vesikkeleitä) tai SUV :t (pieniä yksilamellaa-risia vesikkeleitä) vesiväliaineessa, vaikuttavan ainesosan ja divalentin kationin läsnä ollessa, regeneroiden LUV:t (suuria yksilamellaarisia vesikkeleitä), sulkeut-taen mainitun vaikuttavan ainesosan.
15
Suun kautta annettuihin liposomeihin liittyvät erilaiset ongelmat. Vatsan alhainen pH ja sappisuolojen ja lipaasien läsnäolo pyrkivät epävakauttamaan vaikuttavan aineen - liposomikompleksin. Pysyvyyttä voidaan lisätä käyttäen stabiilimpia kak-soiskerroksia [bilayers], monilamellaarisia liposomeja ja kapselointia erilaisiin 20 kapseleihin.
Liposomit ovat erittäin alttiita tuholle imeytymän kautta retokulo-endoteliaalisen järjestelmän (RES), tunnetaan myös makro fagijärjcstclmänä, toimesta, mikä voi aiheuttaa sulkeutetun (entrapped) vaikuttavan aineen alihyödynnän ja tuhlauksen. 25 Eräs tapa suojata liposomeja RES-järjestelmältä ja säätää vapautusprofnlia on kapseloida lääkeaineen sisältävät liposomit polymeerimatriisiin, mikrokapselin muotoon. Tällaisia “mikrokapseloidun liposomin" järjestelmiä on tutkittu eri tarkoituksiin, myös bioaktiivisten molekyylien vapauttamiseksi, kuten kuvataan julkaisussa Dhoot, N.O., Wheatley, M.A., 2003. Mikroencapsulated Liposomes in 30 Controlled Drug delivery: Strategies to Modulate Drug Release and Eliminate the Burst Effect. J Pharm Sciences, Vol. 92, No. 3. Hyvin monenlaisista fosfolipideis- 4 tä kuten fosfatidyylikoliinista (PC), fosfatidyyliglyserolista (PG) ja palmitoyyli-fosfatidyylikoliinista koostuvia liposomeja on käytetty tällaisissa järjestelmissä mikrokapseloinnissa käytettyjen polymeerien kuten alginaatin, akasiagelatiinin, arabikumin ja pelkän gelatiinin yhteydessä.
5
Mikrokapseloitujen liposomijärjcstclmien on osoitettu pidentävän lääkeaineen viipymiä in vivo ja myös tuovan esille korkeampia immuunivasteita kuin li-posomit yksinään. Ristisitovana ionina käytettiin tyypillisesti ionia Ca2+ li-posomeissa, jotka on kapseloituina alginaattiin, joka on vesiliukoinen polysakka-10 ridi. Havaittiin vaikuttavan yhdisteen vapautumisen nopea alkupurske, kun li-posomit oli kapseloitu Ca-alginaattia ja Al-alginaattia olevalla päällysteellä. Lääkeaineen vapautumisen nopeutta voidaan vastaavasti muuntaa muuttamalla lipidi-kaksoiskerroksen koostumusta ja muuttamalla alginaatin pitoisuutta. Alginaatti-mikrokapseleiden päällystäminen nopeutta säätävällä kokovalintaisella, kationisia 15 polypeptidejä kuten poly-L-lysiiniä ja poly-L-omitiinia olevalla kalvolla lisää järjestelmän potentiaalia. Alginaattia käytettäessä valmistettujen mikrokapseloitu-jen tuotteiden keskimääräinen hiukkaskoko on tyypillisesti noin 20 pm ja valmistusmenetelmä hyödyntää noin 90 celsiusasteen lämpötiloja, saostusta, Ca- tai Alio nien käyttöä ja sähkökenttää.
20
Mikrokapselointiin on myös ehdotettu arabikumia tai gelatiinin ja arabikumin yhdistelmää, yhdistelmä tarvitsee kuitenkin tyypillisesti entsymaattisen tai kemiallisen käsittelyn glutaarialdehydillä vahvistamaan sidontaa. Arabikumi pystyy kapseloimaan vain sen omaa painoa enimmällään vastaavan vaikuttavan yhdisteen 25 määrän.
Liposomituotteissa käytettävät fosfolipidit ovat tyypillisesti peräisin kasveista, pääasiassa soijasta, ja munista. Kasveista peräisin olevien fosfolipidien koostumus eroaa merkittävästi ihmisen fosfo lipideistä, koska ne eivät sisällä serebrosidejä 30 eivätkä myöskään sfingomyeliinejä, ja munista johdetut fosfolipidit vastaavat Iin- 5 nuista peräisin olevia fosfolipidejä. Ne metaboloituvat maksassa, vapauttaen siten vaikuttavat aineet.
Hera on tavallinen meijeriteollisuuden sivutuote, erityisesti juustotuotannossa ja 5 maitoteollisuudessa. Hera sisältää heraproteiineja, jotka kuuluvat rakenteellisesti globuliiniryhmään, pääainesosana tyypillisesti β-lactoglobuliini, noin 50 - 60 pai-no-% proteiinisisällöstä, α-laktalbumiinia, naudan seerumialbumiinia ja immuno-globuliineja. Vaikuttavuudessa vastaavia proteiineja on myös toimitettavissa synteettisesti käyttäen sopivia menetelmiä, jotka perustuvat siihen, että esim. kaseii-10 niin lisätään sulfhydryyliryhmiä, mutta ne eivät ole elintarvikelaatua.
Luonnon heraproteiineja on ehdotettu usean aineen mikrokapseloiviksi aineiksi ja esimerkiksi julkaisu US 4 790 998 esittää menetelmää mikrokapselien tuottamiseksi luonnon heraproteiinitiivisteistä emulgoivina aineina ja lipofiilisina aineina, 15 kuten sitrusöljy. Menetelmässä tuotettiin keskihalkaisijaltaan 1 pm olevia mikro-kapseleita käyttäen kuumennusta lämpötilassa 75 °C. Luonnon heraproteiinien käyttöön liittyvät kuitenkin useat ongelmat.
Heraproteiinien toiminnallisia ominaisuuksia voidaan parantaa muuntamalla pro-20 teiinimolekyylit sulfitolyysillä, kuten kuvataan julkaisussa US 6 797 810. Muunnetut heraproteiinit sisältävät tyypillisesti 2-4 vapaata SH-ryhmää, kun ei-muunnetut heraproteiinit sisältävät keskimäärin vähemmän kuin yhden. Muunnos tuottaa useita edullisia ominaisuuksia, kuten parannettu proteiini verkko, emulsion ja geelin muodostuminen, ja parannettu sulavuus ja antioksidanttiteho. Muunnetut 25 heraproteiinit soveltuvat lääke- ja elintarviketeollisuuden sovelluksiin, kuten kuvataan julkaisussa WO 2005/036 977.
Edellä mainitun perusteella on nähtävissä, että tarvitaan vaihtoehtoisia ja parannettuja liposomikoostumuksia ja kantajia ja kuljettimia vaikuttavien aineiden, 30 kuten lääkeaineiden ja lisäravintoaineiden ja vastaavien toimittamiseksi kohteelle annettaviksi sopivin keinoin.
6
MÄÄRITELMÄT
Termi vaikuttavan aineen käytettävyys tarkoittaa tässä vaikuttavan aineen imeytymisen täydellisyyttä.
5 Termi biologinen hyötyosuus tarkoittaa kliinistä in vivo käytettävyyden kuvausta ja ilmaisee laajuutta, jossa aine saavuttaa verenkierron. Biologinen hyötyosuus määritellään osuutta annetun annoksen prosenttimäärää kohti, joka lopulta imeytyy muuttumattomana.
10 KEKSINNÖN YHTEENVETO
Esillä oleva keksinöllä aikaansaadaan mikrokapseloituja liposomikoostumuksia, jotka ovat hyödyllisiä sellaisinaan tai kantajina ja kuljettimina, ja valmisteita ja koostumuksia biologisesti vaikuttavien aineiden, kuten lisäravinteiden, yrttien ja kasvisuutteiden, ja farmakologisesti vaikuttavien aineiden, kuten lääkeaineet ja 15 hormonit, kuljettimina paikallista tai systeemistä vaikutusta varten. Liposomi-koostumukset mikrokapseloidaan muunnetuilla heraproteiineilla. Biologisesti vaikuttavat aineet sisältävät puhdistettuja ainesosia kuten lääkeaineita ja hormoneja, lisäravinteita, vitamiineja ja mineraaleja, ja puolipuhdistettuja ainesosia kuten kasvisuutteita ja joitakin näiden yhdistelmiä. Keksintö koskee erityisesti mikro-20 kapseloituja liposomikoostumuksia käsittäen liposomit ja muunnetut heraprote-iiniseokset käsittäen heraproteiinitiivisteen ja/tai heraproteiini-isolaatin ja muunnetun heraproteiinitiivisteen ja/tai muunnetun heraproteiini-iso laatin, ja liposomit käsittävät nautaeläimistä ja/tai sioista saatavan lipidikoostumuksen.
25 Esillä olevan keksinnön mukaiset mikrokapseloidut liposomikoostumukset, kantajat, kuljettimet ja valmisteet käsittävät liposomeja, jotka koostuvat biologisesti vaikuttavista nautaeläimien, erityisesti peurojen kuten porojen, tai sikojen aivoista ja selkäytimestä saatavista lipideistä, kun lipidit ovat esimerkiksi lesitiiniä, kera-midia, fosfatidyylietanoliamiinia, fosfatidyylikoliinia, fosfatidyyliseriiniä, kar-30 diolipiiniä ja vastaavaa, mikrokapseloituna muunnetulla heraproteiinilla.
7
Liposomit voivat olla monen tyyppisiä, MLV (monilamellaarisia vesikkeleitä) tai SUV (pieniä yksilamellaarisia vesikkeleitä) tai LUV (suuria yksilamellaarisia vesikkeleitä). Yksi tai useampi biologisesti vaikuttava aine voidaan sulkea liposomi-koostumuksiin, edullisesti liposomeihin.
5
Esillä olevan keksinnön mikrokapseloidut liposomikoostumukset käsittävät jauheen, jonka keskimääräinen hiukkaskoko on välillä 0,1 - < 10 pm, edullisesti 0,5 -3 pm. Sitä voidaan käyttää annostelussa suun kautta tabletteina, kapseleina, suspensioina tai jauheina, aerosoleissa tai sumuttimissa jauheena käyttäen tunnettuja 10 aerosoli- tai pumppusumutustoimituslaitteita, sisältäen karkeat nestesumuttimet, nestepisaroiden kolloidisuspensioiden aerosolit kaasukantajassa kuten happi-, typpi- tai hiilivetyponneaineessa, ja nestepisaroiden tilapäissuspensiot kantajassa, parenteraalista annostusta, kielenalaista annostusta, poskiannostusta, nenäannos-tusta ja paikallista annostusta varten salvoina, geeleinä ja voiteina myöhempää 15 paikallista tai systeemistä vaikutusta varten.
Esillä oleva keksintö aikaansaa lisäksi parannettuja menetelmiä biologisesti vaikuttavien lipidien ja erityisesti fosfolipidien antamiseksi ihmis- tai eläinkohteelle, käsittäen keksinnön mukaisen mikrokapseloidun liposomikoostumuksen antami-20 sen.
Esillä oleva keksintö aikaansaa lisäksi parannettuja menetelmiä biologisesti vaikuttavien aineiden kuten lääkeaineiden ja lisäravinteiden antamiseksi ihmis- tai eläinkohteelle, käsittäen ainakin yhden, keksinnön mukaisen biologisesti vaikut-25 tavan aineen sisältävän mikrokapseloidun liposomikoostumuksen antamisen.
Esillä oleva keksintö aikaansaa lisäksi menetelmän mikrokapseloitujen liposomi-koostumuksien, kantajien ja kuljettimien, ja biologisesti vaikuttavia aineita kuten lääkeaineita tai lisäravinteita käsittävien valmisteiden valmistamiseksi, kohteelle 30 annettaviksi.
8
KEKSINNÖN YKSITYISKOHTAINEN KUVAUS
Esillä oleva keksintö aikaansaa mikrokapseloituja liposomikoostumuksia, kantajia ja kuljettimia, ja valmisteita, menetelmiä niiden valmistamiseksi ja menetelmiä niiden antamiseksi. Esillä oleva keksintö aikaansaa erityisesti koostumukset bio-5 logisesti vaikuttavien lipidien ja valinnaisesti muiden biologisesti vaikuttavien aineiden kuten lääkeaineiden, hormonien ja lisäravintoaineiden ja vastaavien antamiseksi. Mikrokapseloidut liposomikoostumukset käsittävät biologisesti vaikuttavia lipidejä ja valinnaisesti yhden tai useamman biologisesti vaikuttavan aineen, mikrokapseloituna muunnetuilla heraproteiineilla. Esillä oleva keksintö aikaansaa 10 lisäksi menetelmät mikrokapselo itujen liposomikoostumuksien antamiseksi, käsit täen biologisesti vaikuttavia lipidejä ja muita biologisesti vaikuttavia aineita. Esillä olevan keksinnön koostumukset, kantajat, kuljettimet ja valmisteet ja menetelmät aikaansaavat parannuksia aikaisemmin käytettyihin tavanomaisiin välineisiin verrattuna, lisäämällä biologisesti vaikuttavan aineen imeytymisnopeutta ja bio Ιοί 5 gista hyötyosuutta ja monessa tapauksessa myös vähentämällä biologisesti vaikut tavan aineen annosteltavaa määrää.
Keksinnön mukainen mikrokapselo itu liposomikoostumus, kantaja, kuljetin tai valmiste käsittää liposomeja, jotka voivat olla erityyppisiä, kuten pieniä yksila-20 mellaarisia vesikkeleitä (SUV), suuria yksilamellaarisia vesikkeleitä (LUV), mo-nilamellaarisia vesikkeleitä (MLV) tai oligolamellaarisia vesikkeleitä tai mitä tahansa näiden yhdistelmiä. Liposomeissa lipidikaksoiskerrokset koostuvat pääasiassa fosfolipideistä, jotka ovat amfifulisiä; niissä on hydrofiilinen pää ja lipofuli-nen häntä. Vesiliuoksessa lipidit jäijestyvät kerroksiksi, jotka muodostavat umpi-25 naisia vesikkeleitä, kuten keinosoluja.
Liposomit, jotka esillä olevassa keksinnössä voivat myös toimia biologisesti vaikuttavan aineen kapseloivana liposomiaineena, käsittävät biologisesti vaikuttavia nautaeläimistä tai sioista saatavia lipidejä. Liposomit mikrokapseloidaan muunne-30 tulla heraproteiinilla.
9
Biologisesti vaikuttavat lipidit käsittävät lipidikoostumuksen, muodostaen lipidi-vesikkeleitä ja liposomeja, käsittäen nautaeläimissä ja sioissa luonnollisesti esiintyviä lipidejä, tai vastaavia synteettisesti valmistettuja lipidejä. Lipidikoostumus on saatavilla nautaeläimien tai sikojen aivoista ja selkäytimestä. Lipidit ovat edul-5 lisesti peuraeläimistä, kuten poroista tai sioista saatavaa lipidiä. On tärkeä, että lipidit ovat nisäkkäistä, erityisesti nautaeläimistä ja sioista saatavaa lipidiä, koska näiden fosfolipidikoostumukset ovat oleellisesti samankaltaisia kuin ihmisen fos-fo lipidikoostumus.
10 Lipidit ovat saatavissa käyttäen sopivia menetelmiä käsittäen uuton. Menetelmässä raa’an lipidiseoksen tuottamiseksi keksinnön mukaiseen mikrokapseloituun liposomikoostumukseen sopivaksi, nautaeläimistä, erityisesti peuroista ja/tai sioista saatavat aivot ja/tai selkäytimet uutetaan orgaanisilla liuottimilla ja liuottimet haihdutetaan. Aivo- ja/tai selkäydinmateriaali pakastetaan, sulatetaan, jauhetaan, 15 paistetaan, jäähdytetään, lyofilisoidaan, maseroidaan etanoli-dietyylieettcriscokscssa ja suodatetaan. Suodate haihdutetaan ja jäännös muodostaa raakalipidiseoksen. Raakalipidiseos käsittää nautaeläimille ja sioille ominaisia fosfolipidejä ja glykolipidejä.
20 Esillä olevassa keksinnössä hyödyllisen lipidikoostumuksen (raakalipidiseos), koostumusta esitetään seuraavassa taulukossa 1.
Taulukko 1.
Ainesosa Määrä/paino-%
Lysofosfatidyylikoliini 0 - 1
Sfingomyeliini 5-8
Fosfatidyylikoliini 7-15
Lysofosfatidyylietanoliamiini + fosfatidyyli-L-seriini 2-4 Fosfatidihappo 0-1
Fosfatidyylietanoliamiini 10-20 10
Sulfatidit 1-3
Serebrosidit 10-25
Kolesteroli 25-35
Triglyseridit 10-25
Fosfolipidien ja glykolipidien kokonaismäärä 40 - 65
Lipidikoostumus on nautaeläimistä ja/tai sioista saatavaa koostumusta ja se käsittää 0-1 paino-% lysofosfatidyylikoliinia, 5-8 paino-% sfingomyeliiniä, 7-15 paino-% fosfatidyylikoliinia, 2-4 paino-% lysofosfatidyylietanoliamiinia ja fos-5 fatidyyli-L-seriiniä, 0-1 paino-% fosfatidihappoa, 10-20 paino-% fosfatidyyli-etanoliamiinia, 1-3 paino-% sulfatidejä, 10 - 25 paino-% serebrosidejä, 25 - 35 paino-% kolesterolia ja 10-25 paino-% triglyseridejä.
Esillä olevalle keksinnölle sopivat muunnetut heraproteiiniseokset käsittävät 60 -10 95 paino-% heraproteiinitiivistettä (WPC) ja/tai heraproteiini-isolaattia (WPI), ja 5-40 paino-% muunnettua heraproteiinitiivistettä (MWPC) ja/tai muunnettua heraproteiini-iso laattia (MWPI), laskettuna proteiinipohjan perusteella. Seoksen MWPC/MWPI -määrä riippuu pääasiassa emulsioissa käytetyistä eri lipofiilisistä yhdisteistä.
15
Heraproteiinitiiviste (WPC) käsittää proteiinia, laktoosia, rasvaa, mineraaleja ja kosteutta (vettä) ja se on saativissa herasta esimerkiksi käyttäen ultrasuodatustek-niikkaa ja kuivatusta. Heraproteiinitiiviste, esimerkiksi WPC 80, luku ilmaisee proteiinin prosenttimäärää, käsittää tyypillisesti 80 paino-% proteiinia, 4,7 paino-20 % laktoosia, 6,0 paino-% rasvaa, 2,8 paino-% mineraaleja ja 5,0 paino-% kosteut ta. Käytetään edullisesti heraproteiinitiivistettä (WPC) jonka proteiinisisältö on 70 - 85, edullisesti 75 - 80 paino-%.
Heraproteiini-iso laatii (WPI) on saatavissa herasta esimerkiksi ioninvaihto-25 absorptiotekniikoin ja kuivattaen. Heraproteiini-isolaatti WPI käsittää tyypillisesti 92 paino-% proteiinia, enintään 0,2 paino-% laktoosia, enintään 0,2 paino-% ras- 11 vaa, enintään 4,5 paino-% mineraaleja ja enintään 6,0 paino-% kosteutta. Käytetään edullisesti heraproteiini-isolaattia, jonka proteiinisisältö on 90 - 95 paino-%.
Muunnettu heraproteiinitiiviste ja muunnettu heraproteiini-iso laatii saadaan 5 muuntamalla heraproteiinit sulfitolyysillä, kuten kuvataan julkaisussa US 6 797 810, 15 - 30 % heraproteiinien kaikista disulfidisidoksista pilkkomiseksi, jolloin tuloksena on 2 - 4 kertaa enemmän vapaita sulfhydryyli- (SH-) -ryhmiä proteiinissa, proteiinin koostumuksen kuitenkin pysyessä samana. Vapaat sulfhyd-ryyliryhmät määritetään käyttäen menetelmää, jota kuvataan julkaisuissa Beverid-10 ge, T., Toma, S.J. & Nakai, S. 1974, Determination of SH- and SS- groups in some food proteins using Ellman’s reagent, J. Food Sci. 39, 49-51, ja Chan, K-Y. & Wasserman, B.P. 1993, Direct colorimetric assay of free thiol groups and disulfide bonds in suspensions of solubilized and particulate cereal proteins, Cereal Chem. 70, 22-26. Muunnetun heraproteiinitiivisteen (MWPC) proteiinisisältö on 15 75 - 85, edullisesti 79 - 82 paino-% ja muunnetun heraproteiini-isolaatin (MWPI) proteiinisisältö on 89- 95, edullisesti 90-91 paino-%.
Prosessia heraproteiinien muuntamiseksi sulfitolyysillä, jolla aikaansaadaan muunnetut heraproteiinit esitetään kaavamaisesti kuviossa 1.
20
Kuviossa 1 esitetään tuotantomenetelmä muunnettujen heraproteiinien valmistamiseksi. Heraproteiinitiivistettä vesiliuoksessa, jonka proteiinisisältö on 10 - 11 % (p/t) ja pH 6 - 7, kuumennetaan lämpötilaan 50° - 60 °C. Tämän jälkeen lisätään sulfiittia muodossa 0,01 - 0,06 % (p/t) natriummetabisulfiittia, ja sulfonoin-25 nin/sulfitolyysin reaktioaika on noin 30 min. Seuraavaksi pH säädetään HCkllä vahvuuteen 2-3 vapauttamaan SO2 proteiinin ja jäännössulfiitin sulfonaattijoh-dannaisista. Jäännös- SO2 puhalletaan ilmalla ulos reaktorista ja sitä käytetään uudelleen sulfiittina. Tämän jälkeen pH säädetään välille 4-5 NaOH:lla ja saatu proteiinitiiviste huuhdellaan vedellä ja ultrasuodatetaan pitoisuuteen 10 - 30 % 30 proteiinisisältöä. Muunnettu heraproteiinitiiviste/retentaatti sumutuskuivatetaan muunnetuksi heraproteiinijauheeksi tulo- ja poistoaukkolämpötilassa, vastaavasti 12 160 °C ja 80 °C. Muunnettu heraproteiini-iso laatii on toimitettavissa vastaavalla tavalla heraproteiini-isolaatista.
Muunnettu heraproteiiniseos muodostuu heraproteiinitiivisteestä ja/tai -iso laatista 5 ja muunnetusta heraproteiinitiivisteestä ja/tai -isolaatista, sisältäen 60-95, edullisesti 70 - 90 paino-% heraproteiinitiivistettä ja/tai -isolaattia ja 5 - 40, edullisesti 10 - 30 paino-% muunnettua heraproteiinitiivistettä ja/tai -isolaattia.
Menetelmä keksinnön mukaisen mikrokapseloidun liposomikoostumuksen valio mistamiseksi käsittää vaiheet, jolloin muunnettu heraproteiiniseos sisältäen 60 -95, edullisesti 70 - 90 paino-% heraproteiinitiivistettä ja/tai isolaattia ja 5 - 40, edullisesti 10 - 30 paino-% muunnettua heraproteiinitiivistettä ja/tai isolaattia, ja jonka kokonaisproteiinisisältö on 5 - 14, edullisesti 6 - 12 ja erityisen edullisesti 8 - 10 paino-%, liuotetaan sekoittaen veteen, jonka lämpötila on 30° - 75 °C, edulli-15 sesti 40° - 70 °C, edullisesti steriiliin suodatettuun tai käänteisosmoosi- (RO)-käsiteltyyn vesijohtoveteen, joka on erityisen edullisesti suodatettu käyttäen steriiliä suodatinta, jonka huokoskoko on 0,1 pm, jonka jälkeen lisätään 7-15, edullisesti 8-14 paino-% edellä määriteltyä lipidikoostumusta, sellaisenaan tai samanlaatuisena vesiseoksena kuin edellä, käsittäen biologisesti vaikuttavia nautaeläi-20 mistä ja/tai sioista saatavia lipidejä (tyypillisesti toimitettuna jäähdytettynä raaka-lipidikoostumuksena, joka sulatetaan ennen käyttöä), valinnaisesti sisältäen 16 -26, edullisesti 18-24 paino-% ainakin yhtä biologisesti vaikuttavaa ainetta siihen liuotettuna tai dispergoituna ennen kuin lipidit lisätään seokseen (tai vaihtoehtoisesti biologisesti vaikuttava aine lisätään seuraavassa vaiheessa saatuun lipi-25 di/vesi-suspensioon), saatua seosta sekoitetaan muodostamaan lipidi/vesi-suspension, jonka jälkeen toimitetun suspension pH säädetään välille 5,5 - 8, edullisesti välille 6-7 hapolla tai emäksellä, edullisesti NaOH:lla tai HCl:llä, saatu suspensio lämmitetään lämpötilaan 30° - 80°, edullisesti 45° - 70° ja erityisen edullisesti 50° - 60 °C ja dispergoidaan tai esihomogenisoidaan high-shear-30 sekoittimella muodostamaan emulsion, joka altistetaan homogenisointiin käyttäen korkeapaine- homogenointilaitetta paineessa 50 - 90, edullisesti 60 - 80 baaria, 13 tämän jälkeen emulsio pastöroidaan valinnaisesti lämpötilassa 65° - 85°, edullisesti 70° - 80 °C 10s-5 min ajan, edullisesti 10 s - 3 min ajan tai säteilytetään, tämän jälkeen se jäähdytetään lämpötilaan 10° - 25 °C ja lopuksi kuivatetaan sumu-tuskuivatuksella tai pakastekuivauksella, edullisesti sumutuskuivaimessa tuloauk-5 kolämpötilassa 150° - 180°, edullisesti 155° -165 °C ja poistoaukkolämpötilassa 70° - 90 °C, edullisesti 75° - 85 °C käyttäen ilmaa tai inertissä atmosfäärissä, kuten typessä saaden kuivan jauhemaisen tuotteen.
Emulsioiden valmistuksessa vaihtoreaktio WPC/WPI ja MWPC/MWPI välillä on 10 emulgoinnin ja emulsion muodostuksen kannalta oleellinen. Lämpökäsittely (edullisesti lämpötilassa 70° - 80 °C) parantaa reaktion loppuunsaattamista, ja se on samalla pastörointia ja vähentää mikrobien määrää. Lämpökäsittelyä käytetään homogenoinnin jälkeen ja ennen kuivatusta.
15 Menetelmää keksinnön mukaisen mikrokapseloidun liposomikoostumuksen valmistamiseksi havainnollistetaan edelleen kuviossa 2 esitetyllä vuokaaviolla, joka kuvaa erästä edullista suoritusmuotoa.
Kuviossa 2 muunnettu heraproteiiniseos, joka sisältää MWPC:tä ja WPC:tä (Ac-20 tiWhey®), jonka kokonaisproteiinisisältö on 60-80 g, liuotetaan steriilisuodate-tuun veisjohtoveteen, jonka lämpötila on 30 - 75 °C, sekoittaen, jonka jälkeen lisätään 100 - 120 g lipidikoostumusta ja seosta sekoitetaan, jonka jälkeen saadun suspension pH säädetään välille 5,5 - 8, saatu suspensio lämmitetään lämpötilaan 60 °C ja dispergoidaan tai esihomogenisoidaan korkean leikkausvoiman sekoitti-25 mella muodostamaan emulsion, jolle suoritetaan homogenointi käyttäen korkea-painehomogenointilaitetta paineessa 70 bar, (3x), jonka jälkeen saatu emulsio pastöroidaan lämpötilassa 75 °C 10s-3 min ajan, jäähdytetään lämpötilaan 20 °C ja lopuksi kuivatetaan sumutuskuivatuksella sumutuskuivaimessa tuloaukkoläm-pötilassa 160 °C ja poistoaukkolämpötilassa 80 °C, jolloin saadaan kuiva jauhe-30 mainen tuote.
14
Saadun kuivan jauhemaisen tuotteen kuiva-ainepitoisuus, mikrokapseloitu li-posomikoostumus, on yli 95 paino-%. Keksinnön mukainen mikrokapseloitu li-posomikoostumus käsittää hiukkasia, joiden keskimääräinen hiukkaskoko on välillä 0,1 - < 10, edullisesti välillä 0,5 - 3 pm.
5
Pastöroinnissa emulsion viskositeetti lisääntyy tyypillisesti, ja on siten edullista säätää lämpötilaa ja pastörointiaikaa siten, että emulsion viskositeetti pidetään sopivana sumutuskuivatukselle.
10 Milloin lämpöherkät vaikuttavat aineet kuten proteiinit tai peptidit sisältyvät koostumukseen, tuote voidaan säteilyttää tai koostumukseen voidaan lisätä antimikro-biaalinen aine tai -aineita välillä 0,001 - 1,0 paino-% tyypillisesti olevina määrinä estämään mikrobikontaminaation.
15 Koostumuksessa käytetään edullisesti antioksidantteja välillä 0,001 - 0,5 paino-% olevana määränä tuotteen hapetuksen estämiseksi. Sekä seinä-mä/kuorimateriaaleissa että ydinmateriaaleissa hapetus saattaa alkaa ennen kapselointia, ja on siten edullista pysäyttää ja estää hapetus ja myös suojata tuote hapetukselta varastoinnissa. Lisätyt antioksidantit ovat tehokkaita aineita näihin tarkoi- 20 tuksiin. Sopivat antioksidantit valitaan ryhmästä koostuen askorbiinihaposta, to-koferoleista, askorbyylipalmitaattista, BHA:sta, BHT:stä ja muista alalla tunnetuista antioksidanteista, ja antioksidanttitehon omaavista kasvisuutteista, kuten rosmariiniuute. Vesiliukoiset antioksidantit lisätään heraproteiiniseokseen ja öljy-liukoiset antioksidantit lisätään vuorostaan lipideihin.
25
Koostumukseen voidaan lisäksi sisällyttää monenlaisia muita täyteaineita ja ainesosia, kuten aromiaineita kuten appelsiiniöljy, ja väriaineita kuten karotenoide-ja, niin kauan kuin ne eivät liiaksi haittaa sellaisten vaikuttavien aineiden pysyvyyttä eikä myöskään niiden biologista hyötyosuutta, jotka sisältyvät tai liittyvät 30 tyypillisesti liposomiin välillä 0,001 - 1,0 paino-% olevina määrinä.
15
Kohteelle annettavaksi tarkoitettu yksi tai useampi biologisesti vaikuttava aine voidaan sisällyttää keksinnön mukaiseen koostumukseen välillä 0,001 - 99,9 pai-no-% olevana määränä. Biologisesti vaikuttava aine on biologisesti vaikuttava, kun aine kohdistaa biologisen vaikutuksen organismiin annosteltuna. Sopivat bio-5 logisesti vaikuttavat aineet, jotka voidaan muodostaa esillä olevaan koostumukseen, sisältävät farmaseuttiset aineet kuten lääkeaineet, hormonit, proteiinit, peptidit ja lisäravintoaineet kuten kasvisuutteet, mineraalit, antioksidantit ja vitamiinit.
Lisäravinne määritellään aineena, joka annetaan ruokavalion lisänä kohteelle. Mi-10 kä tahansa lisäravinteen muoto, joka on suljettavissa tai sidottavissa lipidivesikke-liin, voidaan sisällyttää esillä olevan keksinnön koostumuksiin. Sopivat lisäykset sisältävät sekä vesiliukoisia että rasvaliukoisia lisäyksiä, erityisesti antioksidantte-ja, vitamiineja ja mineraaleja, yrttejä ja kasvisuutteita. Edulliset lisäravinteet uutetaan kasveista, erityisesti yrttikasveista, kasveista saatavista fenoliyhdisteistä, ku-15 ten flavonoideista, fenyylipropanoideista ja vastaavista. Esimerkkejä tällaisista lisäravinteista ovat, niihin rajoittumatta, Ginkgo biloba-uute, Kava Kava-uute, Ginseng-uute, Saw Palmetto-uute, glukosamiinisulfaatti, kromipikolinaatti, maa-rianohdakeuute, viinirypälesiemenuute, Ma Huang-uute, Co-Q10-entsyymi, vesiliukoiset vitamiinit kuten vitamiini C, niasiini, vitamiinit B kuten B1 ja B12, ras-20 valiukoiset vitamiinit kuten vitamiinit A, D, E, ja K. Edullisia aineita ovat hermosoluja ja verisuonia suojaavat aineet kuten antioksidantit kuten koentsyymi Q10.
Biologisesti vaikuttavat aineet voidaan kuljettaa yksittäisinä aineina, aineyhdis-25 telminä ja yhdistelminä, jotka voivat sisältää muita toivottuja biologisesti vaikuttavia materiaaleja.
Katsotaan yleisesti, että esillä olevan keksinnön mukaiset mikrokapseloidut li-posomikoostumuksien aineet voidaan annostella suun kautta jauheina, tabletteina, 30 gelatiinikapseleihin sijoitettuna jauheena, suspensiona tai muina suun kautta saatavina valmisteina, aerosoleissa tai sumuttimissa jauheena käyttäen tunnettuja 16 aerosoli- tai pumppusumutustoimituslaitteita sisältäen karkeat nestesumuttimet, aerosolit, jotka sisältävät nestepisaroiden kolloidisuspensioita kantajakaasussa kuten happi-, typpi- tai hiilivetyponneaineessa, ja nestepisaroiden tilapäisiä suspensioita kantajassa, parenteraalisesti, kielenalaisesti, poskiannostuksena, nenäan-5 nostuksena ja paikallisena annostuksena salvoina, geeleinä ja voiteina, alan ammattihenkilöiden tuntemin soveltuvin modifiointi- ja täyteainein.
Keksinnön mukainen liposomikoostumus, joka sisältää biologisesti vaikuttavia lipidejä kapseloituina muunnetuilla heraproteiineilla, aikaansaa parannettuja tapo-10 ja lipidien annostelemiseksi tehokkaasti kohteelle ja pitkäkestoisemman vaikutuksen. Lipidit käsittävät fosfolipidejä, jotka ovat solukalvojen oleellisia rakenneosia ja ylläpitoaineita, ylläpitäen erityisesti solukalvon notkeutta. Mainitut lipidit pyrkivät hakeutumaan erityisesti hermokudokseen ja vaurioituneisiin kohtiin. Ne läpäisevät myös veri-aivorajan ja on osoitettu, että ne vaikuttavat myönteisesti 15 kognitiivisiin toimintoihin kuten muistiin, solun korjautumiseen ja kolesterolisyn-teesiin, alentaen siten seerumin kolesterolia.
Seuraavissa esimerkeissä kuvataan mikrokapseloitua liposomikoostumusta, joka käsittää koentsyymin Q10 biologisesti vaikuttavana aineena. Sopiva CoQlO (ubi-20 kinoni) voidaan annostella kohteelle keksinnön mukaisessa mikrokapseloidussa liposomikoostumuksessa. Annostus voidaan toimittaa harvemmin tasaisen annostuksen säilyttämiseksi, jossa veritasot pysyvät vakaampina kuin tavanomaisten valmisteiden tapauksessa. Esimerkeissä voidaan nähdä, että keksinnön mukaisen mikrokapseloidun liposomikapseloidun CoQlO todettiin aikaansaavan merkittä-25 vän lisäyksen CoQlO -entsyymin biologiseen hyötyosuuteen, ja että eliminaatio oli lisäksi merkittävästi hitaampaa, tavanomaiseen CoQlO -valmisteeseen verrattuna.
Etenkin varsinaisen mikrokapseloidun materiaalin ei tarvitse olla 100 % mikro-30 kapseloitua, ja mikrokapselointisuhdetta voidaan vaihdella ja optimoida välillä 17 noin 0,1 - n. 100 %, edullisesti 50 - 100 %, ja erityisen edullisesti kun kapseloituna on 70- 100 %.
Tässä käytettynä, aineen sanotaan olevan lipidikapseloitu, kun aine esiintyy lipi-5 dipallon pinnalla tai pinnassa. Tämä sisältää esimerkiksi sulkemisen umpinaiseen lipidiä olevan yksikerroksen tai kaksoiskerroksen sisään joko sulauttamalla pienempiä vesikkeleitä aineen ympärille, siirtämällä muodostetun lipidivesikkelin tai liposomin kalvon läpi, muodostamalla lipidivesikkeli tai liposomi aineen sisältävässä liuoksessa, tai sitomalla aine tai varsinainen lipidivesikkelin liposomikalvo. 10 Tällaiset valmisteet edustavat alalla yleisesti tunnettuja valmisteita.
Alan ammattitaidon omaavat henkilöt pystyvät valmistamaan erilaisia ja optimoituja muunnoksia tietyn tyyppisen käytettävän valmisteaineen sisältäviin valmisteisiin tavanomaisten tekniikoiden mukaisesti.
15
Esillä olevan keksinnön koostumukset voidaan annostella kohteelle. Tällaisia kohteita ovat sekä ihmiset että muut nisäkäsorganismit. Keksinnön kannalta on oleellista, että käytetään nisäkkäistä saatavia lipidejä. Aineet kuten lisäravinteet ovat muodostumassa tärkeiksi ainesosiksi myös kesytettyjen nisäkkäiden kuten lem-20 mikkieläinten j a karj an ruokavalio issa.
Koska keksinnön mukainen mikrokapseloitu liposomikoostumus sisältää vain nisäkkäistä saatavia fosfolipidejä, nisäkäskohteen maksassa ei tapahdu näiden yhdisteiden hajoamista ja koostumus kulkeutuu muuttumattomana verenkiertoon. 25 Myös biologisesti vaikuttavat aineet pysyvät siten muuttumattomina kunnes ne saavuttavat verenkierron, tuloksena että materiaalia ei menetetä hajoamisen takia ja näin voidaan vähentää kohteelle annosteltua biologisesti vaikuttavan aineen määrää. Tämän tuloksena tarvitaan vähemmän vaikuttavaa ainetta tavoitellun vaikutuksen saavuttamiseksi, sivuvaikutuksia on vähemmän ja koostumukset ovat 30 kustannustehokkaampia.
18
Mikrokapselointimenetelmä käyttäen muunnettuja heraproteiiniseoksia antaa mahdollisuuden vaikuttaa vaikuttavien aineiden vapautuskohtaan, -reittiin ja suhteeseen ruoansulatuskanavassa ja vapautussuhdetta voidaan alentaa lämpökäsittelyllä.
5
Keksintöä havainnollistetaan seuraavin esimerkein kuvaten eräitä keksinnön edullisia suoritusmuotoja. Alan ammattimiehelle on kuitenkin selvää, että keksintö ei rajoitu näihin esimerkkeihin.
10 Esimerkit
Esimerkki 1
Raakalipidikoostumuksen valmistus
Sioista saatu aivo- ja selkäydinmateriaali jäädytettiin ja varastoitiin lämpötilassa -15 18 °C. Tämän jälkeen se sulatettiin lämpötilassa 22 °C, jauhettiin etanolilla (96 %) 2,5 tunnin ajan, paistettiin lämpötilassa 110 °C, jäähdytettiin huoneen lämpötilaan, jonka jälkeen jäädytettiin lämpötilaan -28° - -32 °C ja pakastekuivatettiin. Pakas-tekuivatettu tuote lämmitettiin lämpötilaan 35 °C, murskattiin ja varastoitiin lämpötilassa - 35 °C. Määrään 10 - 15 kg murskattua tuotetta lisättiin 20 1 etanolia 20 (96 %) ja 5 1 dietyylieetteriä ja seosta sekoitettiin/maseroitiin 16 -20 tunnin ajan, jonka jälkeen se suodatettiin. Suodate haihdutettiin ja saatu rasvajäännös (raakali-pidikoostumus) jäähdytettiin lämpötilaan -18 °C.
Esimerkki 2 25 Ubikinonia sisältävän mikrokapseloidun liposomikoostumuksen valmistus
Mikrokapseloinnissa käytettävää muunnettua heraproteiiniseosta kuvataan seuraavasti: käytettiin muunnettua heraproteiiniseosta (ActiWhey®) sisältäen prote-iinisisällön perusteella laskettua 80 paino-% WPC 80:ä ja 20 paino-% MWPC 80:ä, joka muunnetaan sulfitolyysillä kuten kuvataan julkaisussa US 6 797 810. 30 MWPC-proteiiniseos sisältää 2-4 kertaa enemmän emulgoinnin alussa olevia vapaita sulfhydryyli/SH -ryhmiä kuin samaa proteiinipitoisuutta oleva WPC.
19
Mikrokapselituotteen valmistus suoritettiin seuraavasti: 1. 330 g muunnettua heraproteiiniseosta (Actiwhey®) liuotettiin 1,5 litraan (40° -50 °C) lämmintä RO-vettä (käänteisosmoosi) sekoittaen.
5 2. 330 g esimerkissä 1 valmistettua raakalipidikoostumusta sulatettiin ja lisättiin 1,5 litraan (40° - 50 °C) lämmintä RO-vettä sekoittaen, aikaansaaden suspension.
3. 90 g ubikinonia suspendoitiin edellä saatuun lipidikoostumuksen/fosfolipidien suspensioon sekoittaen, samalla suojellen valolta.
4. Vaiheessa 1. saatu muunnettu heraproteiiniliuos ja vaiheessa 3. saatu lipidi-10 koostumus/fosfolipidi-ubikinonisuspensio sekoitettiin yhteen sekoittaen muodostamaan suspension.
5. Suspension pH säädettiin vahvuuteen 6,5 käyttäen 1,0 M NaOH:a.
6. Suspensioon lisättiin RO-vettä ja täytettiin 3,75 1 tilavuuteen saakka.
7. Suspensio lämmitettiin lämpötilaan 55 °C ja esihomogenisoitiin käyttäen Ultra 15 Turraxia 1 min ajan, jotta saatiin karkea esiemulsio.
8. Saatu esiemulsio ajettiin FT-9 -homogenointilaitteen läpi neljä kertaa 70 baarissa.
9. Seuraavaksi emulsio pastöroitiin lämpötilassa 70 °C 15 s ajan.
10. Tämän jälkeen emulsio jäähdytettiin huoneen lämpötilaan sumutuskuivatusta 20 varten tai varastointilämpötilaan 6 °C.
Antioksidantit
Askorbiinihappoa käytettiin antioksidanttina ja sitä lisättiin muunnettuun herapro-teiiniliuokseen määränä 50 ppm (vaihe 1).
25
Sumutuskuivatus
Pastöroitu ja jäähdytty emulsio sumutuskuivatettiin tulo- ja poistoaukkolämpöti-lassa, vastaavasti 160 °C ja 80 °C. Saatujen mikrokapseleiden kuiva-ainepitoisuus oli 96 - 98 %.
30 20
Analyysi
Mikrokapseloidun jauheen kuiva-ainepitoisuus määritettiin IR -laitteella Scaltec SMO 01 ja se oli 97,1 paino-%.
5 Rasvan pallomainen muoto ja emulsioiden ja mikrokapseloitujen jauheiden ko-ko/halkaisija valokuvattiin ja mitattiin laitteella Olympus BX 60 Sony DXC- 95OP Analysis 3,0.
Kuviossa 3 on nähtävissä, että proteiinipeitettyjen rasvapallosien keskimääräinen 10 hiukkaskoko emulsiossa oli 1 pm tai vähemmän, ja muodoltaan ne olivat erillisiä ja pyöreitä pallosia.
Esimerkki 3.
Ubikinonia käsittävän mikrokapseloidun liposomikoostumuksen tehon ver-15 tailu lääkeaineen kuljettamiseen tarkoitettuun perinteiseen ubikinonivalmis-teeseen
Johdanto
Kontrolloitu lääkeaineen kuljettaminen voidaan saavuttaa luonnollisilla tai syn-20 teettisillä lääkeaineen kuljetuskeinoilla siten, että vaikuttava aine vapautuu materiaalista ennalta suunnitellulla tavalla. Pyrkimyksenä on vapauttaa vaikuttava aine pidemmän ajanjakson aikana siten, että voidaan ylläpitää maksimaalisia terapeuttisia kehon nestetasoja käyttäen minimaalista lääkeainepitoisuutta. Kontrolloitujen kuljetusjärjestelmien avulla voidaan ylläpitää lääkeainetasot halutulla alueella. Ei-25 toksiset, viivytetysti vapauttavat 1 ääkcaineenkuljctusjärjcstclmät voivat myös lisätä potilaan hoitomyöntyvyyttä harvemmilla annostuksilla. Kontrolloitu lääkeaineen kuljetus voi optimoida lääkeaineen käytön.
Tämän esimerkin tarkoituksena oli arvioida muunnetulla heraproteiinilla mikro-30 kapseloidun liposomikoostumuksen vaikutuskykyä (biologisesti vaikuttava kantaja) lääkeaineen kuljettuksessa. Mikrokapseloitu liposomikoostumus (liposomi) 21 valmistettiin perustuen sikojen aivoista ja selkäytimistä uutettuihin steriileihin fosfolipideihin, kuten kuvataan esimerkeissä 1 ja 2. Merkkiaineena lääkeaineen kuljetuksessa ja suolistoon imeytymisessä käytettiin ubikinonia.
5 Seerumipitoisuuksia, jotka saavutettiin heraproteiinilla mikrokapseloidulla li-posomikoostumuksella, verrattiin markkinoilla olevaan kaupalliseen ubi-kinonituotteeseen (PharmaNord, pehmeä gelatiinikapseli 150 mg).
Ubikinoni, vitamiinin kaltainen bentsokinoni, valittiin koska se esiintyy kaikissa 10 ihmisen solun mitokondrioissa. Ubikinoni on oleellinen solun energiantuotannossa. Suuret energiavaatimukset omaavien elimien kuten sydämen, keuhkojen ja maksan ubikinonipitoisuudet ovat korkeimmat.
Ubikinoni toimii myös tärkeänä antioksidanttina sekä mitokondrio- että lipidikal-15 voissa ja se on oleellinen vitamiinin E regeneraatiossa. Ubikinoli, ubikinonin imeytynyt muoto, estää proteiinin ja lipidin hapetuksen solukalvoissa, ja auttaa minimoimaan oksidatiivista vauriota DNA:ssa. Endogeenisesti tuotettujen vapaiden radikaalien katsotaan olevan tärkeitä tekijöitä ikääntymisprosessissa.
20 Ubikinolin tuotanto vähenee lisääntyvän iän myötä. Myös kolesterolia alentavien lääkeaineiden on raportoitu vähentävän seerumin ubikinonitasoja. Lukuun ottamatta eräitä harvinaisia sairaustiloja, lisääntyvä ikä, korkea soluenergian kulutus ja myopatiaoireiden estäminen kolesterolia alentavilla statiineilla hoidettavissa potilaissa ovat indikaatioita ubikinonin supplementaatiolle.
25
Materiaali ja menetelmät
Yhdeksän tervettä vapaaehtoista osallistui muunnettuun kokeeseen. Ennen koetta otettiin seeruminäytteitä lähtökohdan ubikinoni- (Q10) -määrityksille. Keksinnön mukaisen mikrokapseloidun liposomikoostumuksen yhden nauttimisen jälkeen, 30 sisältäen 150 mg Q10 gelatiinikapselina, otettiin verinäytteitä säännöllisin välein 22 (0,5 h, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, 48 h, 72 h, kuten esitetään seuraavassa taulukossa 1).
Kahden viikon huuhtelujakson jälkeen viisi edellä mainituista vapaaehtoisista 5 osallistui verrokkikokeeseen. Kaupallista ubikinonituotetta otettiin sama määrä Q10 (150 mg) yhtenä annoksena.
Kaikkien verinäytteiden seerumi analysoitiin samalla tavalla. Seeruminäytteet pelkistettiin käyttäen NaBH4, muuttaen näytteen ainesosat ubikinoliksi. Näyttei-10 den eri fraktiot erotettiin HPLC:n avulla. Käytettiin sähkökemiallista ilmaisinta, joka ensin hapettaa ja jälleen pelkistää näytteet. Saadut tulokset perustuvat hapetus-pelkistysreaktioiden aiheuttamiin erotuspotentiaaleihin (Nylander M et ai. Plasma levels of coenzyme Q10 before and after oral supplementation: A bioavailability study. CoQ Res. Biol. Med. 1995; 3; 1: 25-32).
15
Tulokset
Tulokset osoittivat, että keksinnön mukainen mikrokapseloitu liposomikoostumus sisältäen Q10 (=koe) saavutti korkeimman Q10 -pitoisuuden 24 h kuluttua (1,87 pmol/l). Sen jälkeen todettiin alenema ja seerumipitoisuudet saavuttivat lähtökoh-20 dan 96 h kuluttua (1,09 pmol/l).
Kaupallinen tuote (=verrokki) saavutti korkeimman seerumipitoisuuden 8 h kuluttua (1,57 pmol/l). Lähtökohdan Q10 -seerumitasot saavutettiin 72 h kuluttua.
25 Oheisessa kuviossa 4 Q10 -imeytymistä koe- ja verrokkituottein esitetään seerumipitoisuuden ja ajan funktiona.
Käyrän alla olevan pinta-alan laskennoissa (kokonais-AUC), joka heijastaa biologista hyötyosuutta ja lääkeaineen imeytymistä suolistossa, käytettiin trapetsi-30 AUC-menetelmää. Lähtökohtaseerumin Q10 pitoisuudet vähennettiin näytteistä (kuten voidaan nähdä taulukossa 1).
23 Käyrän alla laskettu ala mikrokapseloidulle keksinnön mukaiselle liposomikoos-tumukselle, sisältäen 150 mg Q10, oli 43,10 pmol/L χ h ja verrokille 20,34 pmol/L x h. Uusi Q10 -liposomilääkeaineen kuljetusjärjestelmä lisäsi seerumipitoisuuksia yli kaksin verroin. Myös eliminointiaika oli oleellisesti pidempää mik-5 rokapseloidun Q10 -tuotteen kohdalla.
Tarkastelu
Tulokset osoittavat, että rasvaliukoinen ubikinoni, sisällytettynä heraproteiinilla mikrokapseloituun liposomikoostumukseen, voi parantaa ubikinonin imeytymistä 10 suolesta. Koska vesi- ja rasvaliukoiset lääkeaineet voidaan sisällyttää heraproteiinilla mikrokapselo ituun liposomikoostumukseen, uutta lääkeaineen kuljetuskei-noa voidaan käyttää usealle eri lääkeaineille. Käyttäen heraproteiinilla mikrokap-seloitua liposomikoostumusta lääkeaineen määrää voidaan vähentää potilaan hoitoa vaarantamatta. Vaihtoehtoisesti, pidemmät välit lääkeaineen kuljetuksen välil-15 lä voi antaa paremman potilaan hoitomyöntyvyyden.
Taulukko 1: Q10 Tutkimus Koekoostumus T(h) C (pmol/L) C - C T2-T1 (Cl+C2)/2 AUC(Ci- AUCkumu,atavmen _perustaso_>C2)_ 0 1,09 0 0,5 1,15 0,06 0,5 0,030 0,015 0,015 1 1,21 0,12 0,5 0,090 0,045 0,060 2 1,19 0,1 1 0,110 0,110 0,170 4 1,42 0,33 2 0,215 0,430 0,600 8 1,53 0,44 4 0,385 1,540 2,140 24 1,87 0,78 16 0,610 9,760 11,900 48 1,75 0,66 24 0,720 17,280 29,180 72 1,34 0,25 24 0,455 10,920 40,100 96 1,09 0 24 0,125 3,000 43,100 24
Verrokki T (h) C (μπιοΐ/ΐ) C - C T2-T1 (Cl+C2)/2 AUC (Cl- >C2) AUC kumu- _perustaso_latiivinen_ 0 1,09 0 0,5 1,09 0 0,5 0,000 0,000 0,000 1 1,10 0,01 0,5 0,005 0,003 0,003 2 1,12 0,03 1 0,020 0,020 0,023 4 1,24 0,15 2 0,090 0,180 0,203 8 1,57 0,48 4 0,315 1,260 1,463 24 1,47 0,38 16 0,430 6,880 8,343 48 1,4 0,31 24 0,345 8,280 16,623 72 1,09 0 24 0,155 3,720 20,343 96 ei mitattu
Kokonais-AUC 20,34 μιηοΙ/L h

Claims (23)

1. Mikrokapseloitu liposomikoostumus, joka käsittää liposomeja ja modifioitua heraproteiiniseosta, joka sisältää 60 - 95 p-% heraproteiinikonsent- 5 raattia ja/tai heraproteiini-iso kattia ja 5-40 p-% modifioitua heraprote- iinikonsentraattia ja/tai modifioitua heraproteiini-isolaattia, ja liposomit käsittävät nauta ja/tai sikaeläimestä peräisin olevaa lipidikoostumusta.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen mikrokapseloitu liposomikoostumus, 10 tunnettu siitä, että lipidikoostumus käsittää 0-1 p-% lysofosfatidyyliko- liinia, 5-8 p-% of sfingomyeliiniä, 7-15 p-% fosfatidyylikoliinia, 2-4 p-% lysofosfatidyylietanoliamiinia ja fosfatidyyli-L-seriiniä, 0 - 1 p-% fosfatidiinihappoa, 10-20 p-% fosfatidyylietanoliamiinia, 1-3 p-% sul-fatideja, 10-25 p-% kerebrosideja, 25 - 35 p-% kolesterolia ja 10 - 25 p-15 % triglyserideja.
3. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen mikrokapseloitu liposomikoostu mus, tunnettu siitä, että mikrokapseloidun liposomikoostumuksen kuiva-ainepitoisuus on enemmän kuin 95p-% ja keskimääräinen partikkelikoko 20 0.1:stä alle 10:een pm.
4. Patenttivaatimuksen 1 tai 2 mukainen mikrokapseloitu liposomikoostu mus, tunnettu siitä, että keskimääräinen partikkelikoko on 0.5 - 3 pm.
5. Jonkin patenttivaatimuksen 1-4 mukainen mikrokapseloitu liposomikoos tumus, tunnettu siitä, että modifioitu heraproteiiniseos sisältää 70 - 90 p-% heraproteiinikonsentraattia ja/tai heraproteiini-isolaattia ja 10-30 p-% modifioitua heraproteiinikonsentraattia ja/tai modifioitua heraproteiini-isolaattia.
6. Jonkin patenttivaatimuksen 1-5 mukainen mikrokapseloitu liposomikoos-tumus, tunnettu siitä, että mikrokapseloitu liposomikoostumus käsittää yhden tai useamman biologisesti aktiivisen aineen.
7. Patenttivaatimuksen 6 mukainen mikrokapseloitu liposomikoostumus, tunnettu siitä, että biologisesti aktiivinen aine valitaan farmaseuttisista aineista ja ravintolisistä.
8. Patenttivaatimuksen 7 mukainen mikrokapseloitu liposomikoostumus, 10 tunnettu siitä, että farmaseuttinen aine valitaan lääkkeiden, hormonien, proteiinien ja peptidien joukosta ja ravintolisä valitaan kasviuutteiden, mineraalien, antioksidanttien ja vitamiinien joukosta.
9. Jonkin patenttivaatimuksen 1-8 mukainen mikrokapseloitu liposomikoos- 15 tumus, tunnettu siitä, että mikrokapseloitu liposomikoostumus käsittää antioksidanttien, antimikrobisten aineiden ja apuaineiden joukosta valittuja lisäaineita.
10. Menetelmä jonkin patenttivaatimuksen 1 - 9 mukaisen mikrokapseloidun 20 liposomikoostumuksen valmistamiseksi, tunnettu siitä, että menetelmä käsittää vaiheet, missä modifioitu heraproteiiniseos, joka käsittää herapro-teiinikonsentraattia ja/tai heraproteiini-iso kattia ja modifioitua heraprote-iinikonsentraattia ja/tai modifioitua heraproteiini-iso kattia, liuotetaan veteen, sitten lisätään nauta ja/tai sikaeläimestä peräisin olevaa lipidikoostu-25 musta ja seosta sekoitetaan suspension muodostamiseksi, saadun suspensi on pH säädetään välille 5,5 - 8 ja suspensio lämmitetään 30 - 80 °C lämpötilaan ja dispergoidaan tai esihomogenoidaan emulsion muodostamiseksi, joka sitten homogenoidaan 50 - 90 bar paineessa, emulsio valinnaisesti pastöroidaan 65 - 85 °C lämpötilassa tai säteilytetään, jäähdytetään ja kui-30 vataan.
11. Patenttivaatimuksen 10 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lipidi-koostumus käsittää 0-1 p-% lysofosfatidyylikoliinia, 5-8 p-% of sfin-gomyeliiniä, 7-15 p-% fosfatidyyliko 1 i i n ia, 2-4 p-% lysofosfatidyyli-etanoliamiinia ja fosfatidyyli-L-seriiniä, 0-1 p-% fosfatidiinihappoa, 10 - 5 20 p-% fosfatidyylietanoliamiinia, 1-3 p-% sulfatideja, 10 - 25 p-% ke- rebrosideja, 25 - 35 p-% kolesterolia ja 10 - 25 p-% triglyserideja.
12. Patenttivaatimuksen 10 tai 11 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että modifioitu heraproteiiniseos sisältää 60 - 95 p-% heraproteiinikonsentraat- 10 tia ja/tai heraproteiini-isolaattia ja 5-40 p-% modifioitua heraprote- iinikonsentraattia ja/tai modifioitua heraproteiini-iso laattia.
13. Jonkin patenttivaatimuksen 10 - 12 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että modifioitu heraproteiiniseos sisältää 70 - 90 p-% heraproteiinikon- 15 sentraattia ja/tai heraproteiini-iso laattia ja 10 - 30 p-% modifioitua hera- proteiinikonsentraattia ja/tai modifioitua heraproteiini-iso laattia.
14. Jonkin patenttivaatimuksen 10-13 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että modifioidun heraproteiiniseoksen kokonaisproteiinipitoisuus on 5 - 20 14, edullisesti 6-12 p-%.
15. Jonkin patenttivaatimuksen 10-14 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että modifioitu heraproteiiniseos liuotetaan veteen, jonka lämpötila 30 -75, edullisesti 40 - 70°C. 25
16. Jonkin patenttivaatimuksen 10-15 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että lipidikoostumusta lisätään 7-15, edullisesti 8-14 p-%.
17. Jonkin patenttivaatimuksen 10-16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 30 että yksi tai useampi biologisesti aktiivinen aine liuotetaan tai dispergoi- daan lipidikoostumukseen ennen kuin se lisätään veteen liuotettuun modifioituun heraproteiiniseokseen.
18. Jonkin patenttivaatimuksen 10-16 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 5 että yksi tai useampi biologisesti aktiivinen aine lisätään suspensioon, joka on muodostettu, kun lipidikoostumus on lisätty veteen liuotettuun modifioituun heraproteiiniseokseen.
19. Jonkin patenttivaatimuksen 10-18 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 10 että biologisesti aktiivinen aine valitaan farmaseuttisista aineista ja ravin tolisistä.
20. Jonkin patenttivaatimuksen 10-19 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että farmaseuttinen aine valitaan lääkkeiden, hormonien, proteiinien ja 15 peptidien joukosta ja ravintolisä valitaan kasviuutteiden, mineraalien, anti- oksidanttien ja vitamiinien joukosta.
21. Jonkin patenttivaatimuksen 10-20 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että suspension pH säädetään välille 5.5-8 hapon tai emäksen avulla. 20
22. Jonkin patenttivaatimuksen 10-21 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että tuote kuivatan sumutuskuivaamalla tai lyofilisoimalla.
23. Jonkin patenttivaatimuksen 10-22 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, 25 että antioksidanttien, antimikrobisten aineiden ja apuaineiden joukosta va littuja lisäaineita lisätään modifioituun heraproteiiniseokseen tai lipidi-koostumukseen.
FI20075739A 2007-10-19 2007-10-19 Mikrokapseloidut liposomikoostumukset FI120642B (fi)

Priority Applications (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI20075739A FI120642B (fi) 2007-10-19 2007-10-19 Mikrokapseloidut liposomikoostumukset
PCT/FI2008/050571 WO2009050333A1 (en) 2007-10-19 2008-10-14 Microencapsulated liposomal compositions
EP08840644.2A EP2197493B1 (en) 2007-10-19 2008-10-14 Microencapsulated liposomal compositions
DK08840644.2T DK2197493T3 (en) 2007-10-19 2008-10-14 MICROENCAPSULATED LIPOSOMAL COMPOSITIONS

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FI20075739 2007-10-19
FI20075739A FI120642B (fi) 2007-10-19 2007-10-19 Mikrokapseloidut liposomikoostumukset

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI20075739A0 FI20075739A0 (fi) 2007-10-19
FI20075739A FI20075739A (fi) 2009-04-20
FI120642B true FI120642B (fi) 2010-01-15

Family

ID=38656885

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI20075739A FI120642B (fi) 2007-10-19 2007-10-19 Mikrokapseloidut liposomikoostumukset

Country Status (4)

Country Link
EP (1) EP2197493B1 (fi)
DK (1) DK2197493T3 (fi)
FI (1) FI120642B (fi)
WO (1) WO2009050333A1 (fi)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101775429B (zh) * 2010-03-26 2013-04-03 江南大学 乳清蛋白抗氧化肽及其制备方法与它们的用途
ES2395553B1 (es) * 2011-06-22 2013-12-26 Consejo Superior De Investigaciones Científicas (Csic) Procedimiento de obtención de micro-, submicro- y nanocápsulas basado en proteínas del suero de la leche.
EP2901865B1 (en) * 2012-09-28 2018-01-17 Morinaga Milk Industry Co., Ltd. Method for manufacturing denatured whey protein
EP3645092B1 (en) * 2017-06-30 2024-04-03 Avectas Limited Electrospray catheter
FI129256B (fi) * 2018-03-29 2021-10-15 Uniq Bioresearch Oy Menetelmä hera- ja kasviproteiinien muuntelemiseksi ja muunnettujen proteiinien käyttö mikrokapseloinnissa ja kalvoissa
CN109675059A (zh) * 2019-01-23 2019-04-26 青岛大学 一种类杆菌脂质体及其制备方法与应用
CN116158534A (zh) * 2023-02-28 2023-05-26 仙乐健康科技股份有限公司 一种高负载且稳定的蛋白质脂质体

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS6176414A (ja) 1984-09-21 1986-04-18 Shionogi & Co Ltd リポソーム製剤の製法
US4790998A (en) 1986-12-22 1988-12-13 New Zealand Milk Products, Inc. Beverage cloud based on a whey protein-stabilized lipid
US5601760A (en) * 1994-09-01 1997-02-11 The Regents Of The University Of California, A California Corporation Milk derived whey protein-based microencapsulating agents and a method of use
FI107116B (fi) 1998-04-29 2001-06-15 Jouko Savolainen Menetelmä proteiinien eristämiseksi ja muuntelemiseksi
JP2007520202A (ja) * 2003-06-20 2007-07-26 ニュートリニア・リミテッド 生物活性化合物の保護方法及びそれを含む組成物
WO2005036976A1 (en) * 2003-10-15 2005-04-28 Uniq Bioresearch Oy Method for strengthening a protein-containing product and a protein-containing product
US20080044481A1 (en) * 2004-05-27 2008-02-21 Mordechai Harel Microparticles for Oral Delivery
US20070190213A1 (en) * 2004-09-16 2007-08-16 Harden Jerome W Processes for encapsulating protein and products thereof
ES2387816T5 (es) * 2005-04-26 2021-05-04 Univ Massey Encapsulación de lípidos
NO323912B1 (no) * 2005-12-01 2007-07-16 Tine Sa Sammensetning, fremgangsmåte til fremstilling derav, og anvendelse derav.
US20100074986A1 (en) * 2006-11-27 2010-03-25 Bastiaans Johannes Adrianus He Process for the preparation of powdered oils

Also Published As

Publication number Publication date
EP2197493B1 (en) 2017-11-29
WO2009050333A1 (en) 2009-04-23
EP2197493A4 (en) 2013-12-18
EP2197493A1 (en) 2010-06-23
DK2197493T3 (en) 2018-01-08
FI20075739A0 (fi) 2007-10-19
FI20075739A (fi) 2009-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
FI120642B (fi) Mikrokapseloidut liposomikoostumukset
Khorasani et al. Nanoliposome technology for the food and nutraceutical industries
US9381252B2 (en) Nanoparticles for encapsulation of compounds, the production and uses thereof
JP6995620B2 (ja) マルチサプリメント組成物
Demirci et al. Encapsulation by nanoliposomes
WO2009044406A4 (en) Stearically stabilized unilamilar vesicles, process for preparation thereof and use thereof
Jahangir et al. Formulation and Challenges in Liposomal Technology in Functional Food and Nutraceuticals
Shahgholian Encapsulation and Delivery of Nutraceuticals and Bioactive Compounds by Nanoliposomes and Tocosomes as Promising Nanocarriers
EP3283045B1 (en) One-step method for production of ultra-small lipid structures
Jahadi et al. Liposomes as herbal compound carriers: An updated review
EP1877046A2 (de) Topische verwendung von radikalfangenden substanzen zur antipyretischen behandlung
Xia et al. Microencapsulation liposomal technologies in bioactive functional foods and nutraceuticals
US20200338153A1 (en) Anaerobic antioxidant composition
CA3041914C (en) Anaerobic antioxidant composition
Imam et al. Liposomal Carrier Systems
EP3733197A1 (en) Anaerobic antioxidant composition
Chaves et al. Current Applications of Liposomes for the Delivery of Bioactives: A Review on the Encapsulation of Vitamins
WO2023135583A1 (en) Vitamin nanoclusters as therapeutic and nutraceutic agents and carriers
AU2023203576A1 (en) Anaerobic antioxidant composition
Prabu et al. Nanotechnology and Its Role in Nutraceuticals Towards Human Health
Taleuzzaman et al. Liposomes as Drug Carriers
LT6699B (lt) Proliposomų gamybos būdas, naudojant ne daugiau kaip 5 % etanolio, ir jų panaudojimas lipofilinių medžiagų kapsuliavimui
KR20230049123A (ko) 중합된 유청 단백질 캡슐화된 항산화제 화합물 및 이를 제조하기 위한 프로세스
US20120071409A1 (en) Colloidal Liposomal Compositions and Methods

Legal Events

Date Code Title Description
FG Patent granted

Ref document number: 120642

Country of ref document: FI

MM Patent lapsed