FI119451B - Raskauspoikkeavuuksien seulonta ennen synnytystä - Google Patents

Raskauspoikkeavuuksien seulonta ennen synnytystä Download PDF

Info

Publication number
FI119451B
FI119451B FI953830A FI953830A FI119451B FI 119451 B FI119451 B FI 119451B FI 953830 A FI953830 A FI 953830A FI 953830 A FI953830 A FI 953830A FI 119451 B FI119451 B FI 119451B
Authority
FI
Finland
Prior art keywords
syndrome
dimeric
probability
inhibin
hcg
Prior art date
Application number
FI953830A
Other languages
English (en)
Swedish (sv)
Other versions
FI953830A (fi
FI953830A0 (fi
Inventor
Andrew Jonathan Beard
Adrian Charles Dawkes
Christopher John Davies
Original Assignee
Ortho Clinical Diagnostics Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Ortho Clinical Diagnostics Inc filed Critical Ortho Clinical Diagnostics Inc
Publication of FI953830A0 publication Critical patent/FI953830A0/fi
Publication of FI953830A publication Critical patent/FI953830A/fi
Application granted granted Critical
Publication of FI119451B publication Critical patent/FI119451B/fi

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/689—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to pregnancy or the gonads
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61B—DIAGNOSIS; SURGERY; IDENTIFICATION
    • A61B10/00—Other methods or instruments for diagnosis, e.g. instruments for taking a cell sample, for biopsy, for vaccination diagnosis; Sex determination; Ovulation-period determination; Throat striking implements
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/566—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor using specific carrier or receptor proteins as ligand binding reagents where possible specific carrier or receptor proteins are classified with their target compounds
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • G01N33/743—Steroid hormones
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/74—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving hormones or other non-cytokine intercellular protein regulatory factors such as growth factors, including receptors to hormones and growth factors
    • G01N33/76—Human chorionic gonadotropin including luteinising hormone, follicle stimulating hormone, thyroid stimulating hormone or their receptors
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H10/00—ICT specially adapted for the handling or processing of patient-related medical or healthcare data
    • G16H10/40—ICT specially adapted for the handling or processing of patient-related medical or healthcare data for data related to laboratory analysis, e.g. patient specimen analysis
    • G—PHYSICS
    • G16—INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR SPECIFIC APPLICATION FIELDS
    • G16H—HEALTHCARE INFORMATICS, i.e. INFORMATION AND COMMUNICATION TECHNOLOGY [ICT] SPECIALLY ADAPTED FOR THE HANDLING OR PROCESSING OF MEDICAL OR HEALTHCARE DATA
    • G16H50/00—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics
    • G16H50/30—ICT specially adapted for medical diagnosis, medical simulation or medical data mining; ICT specially adapted for detecting, monitoring or modelling epidemics or pandemics for calculating health indices; for individual health risk assessment
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/36—Gynecology or obstetrics
    • G01N2800/368—Pregnancy complicated by disease or abnormalities of pregnancy, e.g. preeclampsia, preterm labour
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/38—Pediatrics
    • G01N2800/385—Congenital anomalies
    • G01N2800/387—Down syndrome; Trisomy 18; Trisomy 13
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/811—Test for named disease, body condition or organ function
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC
    • Y10S—TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y10S436/00—Chemistry: analytical and immunological testing
    • Y10S436/815—Test for named compound or class of compounds
    • Y10S436/817—Steroids or hormones

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Primary Health Care (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Databases & Information Systems (AREA)
  • Data Mining & Analysis (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Surgery (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)
  • Fire Alarms (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)

Description

119451
Raskauspoikkeavuukeien seulonta ennen synnytystä Tämä keksintö koskee menetelmää syntymää edeltävien riskien arvioimiseksi sikiön kromosomaalisille poik-5 keavuuksille, ja laitetta menetelmän suorittamiseksi.
Downin syndrooman ja joidenkin muiden kromosomaa-listen poikkeavuuksien riskin sikiössä tiedetään lisääntyvän äidin iän myötä, ja tämä tieto muodostaa perustan raskaana olevien naisten valinnalle lisätutkimuksia varten. 10 Lisätutkimus Downin syndrooman tapauksessa käsittää näytteen ottamisen lapsivedestä lapsivesipunktiolla, menetelmä, joka itsessään on riski sikiön äidille, keskenmenon aiheuttaminen on tämän menetelmän tunnistettu riski.
Raskauden aikana äitiin liittyviä leimoja Downin 15 syndroomalle käytetään laajalti seulontaa varten, yleisimmät ovat alfa-fetoproteiini (AFP), ihmisen korioninen gonadotrofiini (hCG) (joko koskematon molekyyli tai hCG:n vapaa beta-alayksikkö) ja konjugoimaton oestrioli (UE3). Tällaisten leimojen käyttöä, joita voidaan käyttää yhdis-20 telmässä äidin iän kanssa, koskeviin selityksiin kuuluvat US-patentti 4 874 693? WO 89/00 696 ja WO 90/08 325.
.··♦, Äitien seulonta perustuu naisten alaryhmän valin- * · ;.’l taan, joilla naisilla on suurin riski synnyttää lapsi, * · *. * jolla on poikkeavuus. Näillä naisilla poikkeavuuden riskiä • · ♦ ]·*·* 25 pidetään painavampana asiana kuin invasiivisten diagnos- • · ♦ : ·* tisten menetelmien riskejä. Riski lasketaan kertomalla • ♦ : priori-ikään liittyvä riski todennäköisyyssuhteella. To- ··· ' dennäkö isyys suhde lasketaan leima-analyyttien monimuuttu- jaisten Gaussin jakaumafunktioiden suhteellisista korkeuk-30 sista Downin syndrooman vahingoittamissa ja vahingoitta- • · j"·. mattomissa normaaleissa raskauksissa, vastaten yksittäis- ··· ten leimapitoisuuksien arvoa.
• · · ’·]·* Koska tällä hetkellä käytettävien analyyttien pi- · *··.* toisuudet voivat vaihdella normaalisti gestationaalisen :*·.· 35 iän mukana, analyyttipitoisuudet täytyy arvioida sen mu- · • · • · · • ·· • · 2 119451 kaisesti. Puolestaan näillä analyyteillä on suhteellisen suuri riippuvuus gestaatioiän arvioinnin tarkkuudesta Downin syndrooman vahingoittamien raskauksien tehokasta erottamista varten. Arviointi suoritetaan jakamalla ana-5 lyytin pitoisuus mediaanipitoisuudella, joka oletetaan tietylle gestaatioiälle naisissa, joilla on vahingoittumattomat raskaudet. Tätä kutsutaan mediaanin monikerraksi (MoM) .
Monien analyyttien yhdistelmä tarjoaa enemmän in-10 formaatiota kuin mikään analyytti yksinään. Todennäköi-syyssuhteet, jotka on määritetty monimuuttujayhdistelmäs-tä, on tehokkain menetelmä saada informaatiota, joka koskee naisen riskiä kantaa Downin syndrooman vahingoittamaa lasta.
15 Inhibiini on dimeerinen molekyyli, jossa alfa- ja beta-alayksiköt on kovalenttisesti liitetty toisiinsa kys-teiinisiltojen avulla. Alfa-alayksikkö on ainutlaatuinen inhibiinimolekyylille ja beta-alayksiköllä (joita on kaksi tyyppiä, kutsutaan A ja B) on hieman homologiaa tiettyjen 20 kasvutekijöiden kanssa. Dimeerisen inhibiinin lisäksi tiedetään esiintyvän 'vapaan' alfa-alayksikön muodot (kutsu- ,···, taan 'pro-alfa-N-alfa-C', 'pro-alfa-C' ja 'alfa-C') ja • · beta-beta-dimeeri (kutsutaan aktiviini). Tähän päivään • · *.; mennessä vain dimeerisen inhibiinin on osoitettu antavan • · · ];'·* 25 biologista aktiivisuutta, ja biologinen aktiivisuus alfa- • · * : ·’ alayksikölle on vielä selvennettävä. Lisäksi runsaat mää- : rät immunoreaktiivista alfa-alayksikköä on identifioitu • · · V · biologisissa nesteissä (Schneyer, Mason, Burton, Ziegner ja Crowley, J. Clin. Endocrinol. Metab., 70, 1208 - 1212, 30 1990 ja Lambert-Messerlian, Isaacson, Crowley, Sluss ja • ♦ .***. Schneyer, J. Clin. Endocrinology and Metabolism, 78, 433 - «·· .·, 439, 1994), joiden tiedetään sisältävän myös immunoreak- • * · tiivistä dimeeristä inhibiiniä (Knight, Groome ja Beard, *·..* J. Endocrinology, 129, R9-R12, 1991) .
• · • · · • »« • · • · • · · • ·· * · 3 119451
Inhibiinin rooli on epäselvä, vaikka on olemassa kasvava määrä todisteita, että se voi toimia aivolisäke gonadotrofiinin erityksen säätelijänä tai paikallisessa parakriini/autokriini toiminnossa spesifisillä kudoksilla 5 (katso Burger, Reproductive Medicine Reviews, 1, 1-20, 1992) . On raportoitu, että immunoreaktiivista 'alfa-inhibiiniä' eritetään kuukautiskierron aikana (McLachlan, Robertson, Healy, Burger ja de Kretser, J. Clin. Endocrinology and Metabolism, 65, 954-61, 1987), vastauksessa 10 eksogeeniselle gonadotrofiinistimulaatiolle keinotekoisesti kontrolloitujen kiertojen aikana naisissa (McLachlon, Robertson, Healy, Burger ja de Krestser 1987 ja Robertson, Fertil. Steril. 48, 1001 - 1008, 1987) ja sikiön istukalla raskauden aikana (Tovanabutra, Illingworth, Ledger, 15 Glasier ja Baird, Clin. Endocrinology, 38, 101 - 107, 1993) . Termiä 'immunoreaktiivinen alfa-inhibiini' käytetään tässä yhteydessä, koska kaikki näissä tutkimuksissa ja alla kuvatuissa Downin syndrooman tutkimuksissa käytetyt inhibiinianalyysit olivat joko alfa-alayksikköspesifi- 20 siä määrittelyllä tai edullisesti reagoivat ristiin inhibiinin alfa-alayksikön vapaiden muotojen kanssa (Lambert- .···. Messer lian, Isaacson, Crowley, Sluss ja Schneyer, 1994).
·♦·
Siksi on epätodennäköistä, että immunoreaktiiviset alfa- • « *· inhibiinitasot kuvastavat immunoreaktiivisia dimeerisen • · * • · * .I I 25 inhibiinin tasoja.
« · · • ·* Muut tutkimukset ovat tutkineet 'alfa-inhibiiniä' : :*· ··· · mahdollisena leimana äidin seerumissa Downin syndrooman ·*#* *.* * läsnäololle syntymättömässä lapsessa (van Lith, Pratt,
Beekhuis ja Mantingh, Prenatal Diagnosis, 12, 801 - 806, • · V.J 30 1992; Spencer, Wood ja Anthony, Anal. Clin. Biochem., 30, 219-20, 1993, Cuckle, Holding ja Jones, Prenatal Diag- t*\m nosis, 14, 387 - 390, 1993). 5 %:n väärällä positiivisella
• » I
detektioasteella vain 40 % vahingoittuneista raskauksista • · ···* havaittiin yhdistämällä alfa-inhibiinipitoisuudet äidin i/.i 35 iän kanssa (van Lith, Pratt, Beekhuis ja Mantingh, 1992) • · • · · • *· • t 4 119451 ja alfa-inhibiinipitoisuudet korreloivat myös suuresti vapaan beta-hCG-tasojen (Spencer, Wood ja Anthony, 1993) ja koskemattoman hCG:n kanssa (Cuckle, Holding ja Jones, 1993). Tuloksena päätettiin, että nämä havainnot todennä-5 köisesti olivat todisteena alfa-inhibiinin immunoreaktii-visuuden käyttöä vastaan lisäbiokemiallisena leimana Downin syndrooman seulontaohjelmissa (Spencer, Wood ja Anthony, 1993) . Kun taas Cuckle et ai, 1994 viittaavat tällaiseen käyttöön "rajoitetun arvoisena".
10 Tämä keksintö tarjoaa menetelmän, joka soveltuu syntymää edeltävään seulontaan raskauden poikkeavuuksille, kuten sikiön (erityisesti kromosomaaliset) poikkeavuudet, jossa menetelmässä raskaana olevan naisen verestä mitataan vähintään dimeerisen inhibiinin taso, ja mitattua tasoa 15 yhdessä naisen gestaatioiän kanssa verrataan dimeerisen inhibiinin tason viitearvoihin eri gestaatioiässä a) raskaana olevissa naisissa, jotka kantavat sikiöitä, joilla on poikkeavuus (poikkeavuuksia), jotka ovat seulonnan kohteena, ja b) raskaana olevissa naisissa, jotka kantavat 20 normaaleja sikiöitä, vertailun ollessa viittaava raskaana olevan naisen riskiin kantaa sikiötä, jolla on poik-keavuus, joka on seulonnan kohteena. Keksinnön mukaiselle • · menetelmälle on tunnusomaista se, mitä patenttivaati- • · « • ·* muksessa 1 esitetään.
• · • * * *·*·* 25 Lisäksi keksinnön mukaan tarjoamme laitteen, joka ·* · : *.· käsittää välineen, joka on sovitettu vähintään dimeerisen • · · inhibiinin mittausten saamiseksi raskaana olevan naisen ··· ί .· : verestä, ja tietokonevälmeen tämän tason mittausten vertailemiseksi sarjaan viitetietoja, jolloin määritetään •V. 30 raskauden poikkeavuudet, kuten sikiön (erityisesti kromo- • · .···. somaaliset) poikkeavuudet. Keksinnön mukaiselle laitteelle ·] on tunnusomaista se, mitä patenttivaatimuksessa 5 esite- V.: tään.
···
Erityisesti tässä esitetään analyysin käyttöä, : 35 joka pystyy erottamaan dimeerisen inhibiinin muista • * • * • * · • ♦· • * 5 119451 inhibiinin kaltaisista proteiineista, kuten inhibiini alfa-alayksiköstä äidin seerumissa. Tällainen analyysi käyttää vasta-aineita, jotka sitoutuvat kahteen ainutlaatuiseen sidontakohtaan, jotka on osoitettu dimeerisessä 5 inhibiinimolekyylissä. Yksi vasta-aine sitoutuu spesifi sesti epitooppiin beta-alayksikössä ja toinen vasta-aine sitoutuu alfa-alayksikköön. Kun käytetään yhtä vasta-ainetta kaappaamaan inhibiinimolekyyli ja toinen vasta-aine leimataan sopivalla signaalin synnyttäjällä, saadaan 10 signaali vain silloin, kun koskematon dimeerinen inhibiini on läsnä näytteessä.
Keksinnön menetelmä ja laite ovat erittäin sopivia, kun dimeerinen inhibiini mitataan yhdistelmässä muiden merkkiaineiden mittauksen kanssa, kuten koskematon 15 hCG, alfa-fetoproteiini (AFP), konjugoimaton oestrioli (UE3), raskauteen liittyvä plasma proteiini-A (PAPP-A) ja muut inhibiinin kaltaiset proteiinit, kuten aktiviini, jolloin määritetään yksittäisen naisen riskin indeksi kantaa vahingoittunutta lasta. Keksinnön edullisessa 20 muodossa dimeerisen inhibiinin mittaus yhdistetään hCG:n vapaan beta-alayksikön mittauksen kanssa.
t*..t Maternaalisen kehon neste, josta mittaukset teh- • * .*" dään, on veri.
• · · ·. *' Keksinnön menetelmää ja laitetta voidaan käyttää • · · *·*·* 25 syntymää edeltävään seulontaan laajalle alalle raskauden ·· · ϊ .* poikkeavuuksia. Näihin kuuluvat poikkeavuudet, kuten • * · ektooppinen raskaus ja erityisesti sikiön kromosomaaliset • *· ! poikkeavuudet. Merkittävin ja useimmin esiintyvä kromoso- maalinen poikkeavuus on Downin syndrooma (Trisomia 21) .
jV. 30 Muihin tällaisiin poikkeavuuksiin, jotka voidaan seuloa • · .**·, käyttäen keksintöä, kuuluvat Edwards syndrooma (Trisomia ·«· § 18), Pateaus syndrooma (Trisomia 13), Turner syndrooma, • · · **·' Monosomia X ja Kleinef el terin syndrooma. Menetelmää ·*** voidaan käyttää seulomaan yksittäisiä poikkeavuuksia tai •\j 35 seulomaan poikkeavuuksien ryhmiä yhdessä, esimerkiksi sitä ♦ · • · • · · • · · • · 119451 e voitaisiin käyttää seulomaan sekä Downin että Edwardsin syndrooma.
Mittaukset suoritetaan ja analysoidaan käyttäen keksinnön menetelmää verinäytteillä, jotka on otettu ras-5 kauden sopivan jakson aikana. Edullisesti mittaukset tehdään verinäytteillä, jotka on otettu ensimmäisessä ja toisessa kolmanneksessa ja erityisesti jaksossa välillä kahdeksannen viikon alku ja toisen kolmanneksen loppu. Naisen mitattu seerumiarvo yksittäiselle seerumileimalle jaetaan 10 oletetulla mediaaniarvolla, joka on havaittu naisilla, joilla on vahingoittumattomat raskaudet samassa gestaatio-iässä, jolloin johdetaan mediaanin monikerta (MoM). Lasketaan todennäköisyys, että (MoM)-arvot testattujen seeru-mileimojen yhdistelmälle kuuluvat arvojen monimuuttujaja-15 kaumaan, joka on havaittu vahingoittumattomissa raskauksissa. Sama lasku suoritetaan viittauksella todennäköisyyteen, että arvojen yksittäinen yhdistelmä muodostaa osan monimuuttujajakaumasta, joka on havaittu poikkeavissa raskauksissa. Kahden todennäköisyyden riskiä kutsutaan toden-20 näköisyyssuhteeksi (LR), joka osoittaa todennäköisyyden, että yksittäisellä naisella on vahingoittunut raskaus tai ,*··. ei. Erotusaste monimuuttujajakaumien välillä vahingoittu- • · neille ja vahingoittumattomille raskauksille muuttuu ges- • · *. taatioiän myötä, so. on olemassa jatkuva muutos todenna- • · · ,* ; 25 köisyyden laskentatavassa riippuen gestaatioiästä. Tämä • t · | ·' jatkuva muutos voidaan rakentaa algoritmiksi, jota käyte- • · ϊ·ϊ : tään laskennassa.
• · · V · Yksittäisillä naisilla on priori-ikään liittyvä riski, joka on riippumaton äidin seerumileimapitoisuuksis- :Y: 30 ta. Naisen ikään liittyvä riski, Bayen teoreemalla, modi- :***: fioidaan kertomalla todennäköisyyssuhteella (LR) , joka on • · · .*. saatu aikaisemmin, jolloin johdetaan yhdistetty riski.
• · · *;!;* Tätä yhdistettyä riskiä voidaan sitten käyttää neuvomaan • · *·;·* naista koskien poikkeavuuden suhteellista riskiä keskenme- • · • · · • · · • • • · · • ·· • · 7 119451 non riskin, joka liittyy myöhempään diagnostiseen invasii-viseen menetelmään, vastakohtana.
Keksintöä havainnollistetaan mukana olevilla piirroksilla, jotka koskevat esimerkkiä, joka seuraa niitä ja 5 jossa kuvio 1 on diagrammaattinen esimerkki spesifisestä kaksipaikkaisesta dimeerisestä inhibiinianalyysistä, kuvio 2 on graafinen esitys mediaanidimeerisestä inhibiinipitoisuudesta gestaatioikää vastaan, 10 kuvio 3 on graafinen esitys vapaasta beta-hCG-pi- toisuudesta gestaatioikää vastaan, kuvio 4 on graafinen esitys dimeerisen inhibiinin MoM:n normaalista todennäköisyysjakaumasta, kuvio 5 on graafinen esitys vapaan beta-hCG MoM:n 15 normaalista todennäköisyysjakaumasta ja kuvio 6 on saajan käyttöominaisuuskäyrä (receiver operating characteristic curve) (ROC).
Esimerkki Tämä keksintö liittyy sellaisen analyysin käyt- 20 töön, joka pystyy erottamaan dimeerisen inhibiinin muista inhibiinin kaltaisista proteiineista, kuten inhibiinin ,···. alfa-alayksiköstä, äidin seerumissa. Reagenssit hankittiin • ·
Serotec Ltd:Itä 22 Bankside, Station Road, Kidlington, • · *. I Oxford, 0X5 1JE, UK. Analyysi käyttää vasta-aineita, jotka • · • · · ; 25 sitoutuvat kahteen ainutlaatuiseen sitomispaikkaan, jotka • · · l ·* on ilmaistu dimeerisessä inhibiinimolekyylissä. Yksi vas- • · · ί·ϊ ϊ ta-aine sitoutuu spesifisesti epitooppiin beta-A-alayksi- * kössä ja toinen vasta-aine sitoutuu alfa-alayksikköön. Kun yhtä vasta-ainetta käytetään kaappaamaan inhibiinimolekyy-30 li ja toinen vasta-aine leimataan sopivalla signaalin syn-nyttäjällä, saadaan signaali vain silloin, kun koskematon ··· dimeerinen inhibiini-A on läsnä näytteessä (kuvio 1).
;]** Näytteet otettiin 21 yksittäiseltä naiselta, • · *·;·* joiden on aikaisemmin identifioitu kantavan Downin syndic*.: 35 rooma -lasta, ja sopiva määrä yhteen sopivia kontrolleja • ♦ * * · • ·· • · 1 1 9451 δ (yksittäisiä naisia, jotka kantavat vahingoittumatonta lasta) analysoitiin kaksipaikkaisella immunometrisellä analyysillä, joka on spesifinen dimeeriselle inhibiinille (kuvattu edellä). Yhteensä 189 kontrollinäytettä analysoi-5 tiin.
Analyysi suoritettiin myyjän ohjeiden mukaisesti.
Lyhyesti, juuri ennen analyysiä dimeerisen inhi-biinin analyysissä pieni tilavuus näytettä hapetettiin analyysiherkkyyden lisäämiseksi. Tässä tutkimuksessa di-10 meerinen inhibiinin analyysi suunniteltiin kaappaamaan inhibiini beta-alayksikön kautta ja toisessa vaiheessa pesun jälkeen, toinen vasta-aine (tässä analyysisuunnitelmassa se oli entsyymileimattu vasta-ainefragmentti (Fab)) saatettiin kosketuksiin dimeerisen inhibiinin alfa-15 alayksikön kanssa. Lisäpesun jälkeen, jolloin poistettiin leimattu vasta-aine, signaali tuotettiin käyttäen asiaankuuluvia signaalimekanismireagensseja ja havaittiin tavanomaisella ELISA-levylukijalla. Analyysi kalibroitiin käyttäen gravimetrisesti valmistettuja dimeerisiä inhibiini-20 standardeja. Dimeerisen inhibiinin tasot määritettiin koenäytteissä, jotka sisälsivät tuntemattomat määrät .···. dimeeristä inhibiiniä, vertailemalla näiden standardien ··*· kanssa.
• · · • · *. I Havainnollistamaan kasvua detektiomäärässä, kun • · ♦ • ♦ · ,1 · 25 inhibiinimittaukset yhdistetään toisesta leimasta saatujen • · · j »* tietojen kanssa, toinen analyytti äidin seeruminäytteessä, • · · ί·ί ! vapaa beta-hCG, mitattiin samoissa näytteissä käyttäen ··· ·.·· kaksivaiheista immunometristä analyysiä. Lyhyesti, ana lyytti saatettiin kosketuksiin kiinteä faasi monoklonaali-:V: 30 sella vasta-aineella, joka on spesifinen beta-hCG:lie.
Pesun jälkeen kaapattu vapaa beta-hCG saatettiin kosketuk- /. siin entsyymillä leimatun polyklonaalisen anti-hCG immuno- • · « ;]·* globuliinivalmisteen kanssa. Toisen pesun jälkeen signaa- • · '·;·* lisubstraatti lisättiin ja lähetetty signaali havaittiin.
35 Vapaan beta-hCG:n tasot arvioitiin koenäytteissä vertaile- t · • · • * · • ·· • * 9 119451 maila kalibroijien kanssa, jotka sisälsivät tunnetut määrät vapaata beta-hCG:tä.
Tulokset
Taulukko 1 esittää analyysitiedot molemmille ta-5 pauksille ja kontrolleille.
• · · t · • · • · · ·· 1 • · · • · * · • 1 • · · • · · • · • · • · • · • 1 • 1 • · · * · · • 1 φ · • · · • · · • · • · • · · • · • · • · 1 • 1 • « ··» • · · · • · · • · M1 · f • · · • · * » · • 1» * · · • · 1
• M • I
10 119451
Taulukko 1 Näy- Dimeor. Dimeer. Beta-hCG " Näy- Dlmeer. Dlmeer. Beta- Käy- 0ΪΜ?ΓΓΒΪηΠΓΓΒ?ΐΙ7~
t« Inhib. Inhib. mlU/ml te Inhib. inhib. hCO te inhib. inhib. hCG
ID ne/6 .ui ne/ml ID pg/6,ul ng/ml mlU/ml ID pg/6,ul ng/ml mlU/ml c pii· m—rc;<——Tjn—s^sr dii cir mm—iä/i——isk- ns as '»» lifctsji—ιςπτ J C1 170 1 66/4 27,62 12,73 CIO 3234 111,« 19/7 5,1» C16 25S2 76,62 12,6 5/4
Cl 335 524,06 67.34 31,66 CIO 3247 164,66 30,63 10,»4 C16 2599 153/1 25/9 11,01
Cl 567 41^66 74,11 3,62 D10 4 558 670,49 111,7S 63,31 C16 2615 123/4 20,54 6/8
Cl 668 3274 5,46 47,04 CIO 3260 121,72 36,95 9,13 C16 2600 66,14 11,36 5,94
Cl 809 »IM 18,29 5,01 CIO 3250 242/1 40,3» 11,39 C16 2612 141/6 23,56 9,54 C2 4 66 271, M 61,93 8,89 CIO 32 73 167,60 27,93 7/0 C16 2598 157,13 26,19 12,66 D2 1 091 44»,i» 74,86 16,10 CIO 3235 61,71 10/6 6,66 C16 2613 M9/6 26/ 24,61 C2 4 71 406 71 67 79 5 25 ClO 3236 326,64 54/9 33/2 C16 2617 129/5 21,56 7/6 C2 472 32,03 6,34 11.35 CIO 324» 426,95 71,11 6,»2 D16 106S1 274,09 45,66 19,63 CZ 477 332,06 55,35 5,04 CIO 324» 357,19 59/3 7,7» C16 2601 »4,76 42/6 17,29 C2 46» 124,01 20,66 23,5» CU 2735 233/. 38,9 14,5« C17 282» 57/2 9/ 4,30 CZ 491 56,99 9/9 2,85 C11 2753 107,06 17,95 13,34 C17 2620 123/0 20/5 4,85 10 C2 493 99,64 16,64 11,37 C11 2746 106,0 31/5 14,06 C17 2622 130/6 21,76 20/2 C2 499 935 1,56 1520 C11 271» 112/6 16,72 5,50 C17 2026 124,46 20,75 10,16 C2 500 103/0 17,2 6,51 011 5145 4073/6 626 67 117/ 6 C17 2637 171/0 26,6 21,56 C2 505 9/3 1,54 11/7 CU 2731 343/1 ST/1 54,60 C17 2611 016,40 103/3 »5,4» C3 69 146,15 30,86 2,51 C11 2741 15101 2i,5 10,85 C17 2640 06/2 14,87 3,53 C3 43 22,92 3,5 3,02 CU 2725 lo1a 17,61 4,5» C17 2655 7»,O 12,62 5,49 03 1093 239,7» 39,97 7,23 C11 2747 02,64 37/8 6,70 C17 2610 117/3 19,54 5/5 C3 197 25,64 4/7 2/2 CU 2754 7101 12 2,74 C17 2656 lool# 25/ 5,60 C3 689 91,65 15,27 4 12 CU 274» M·,M 2114 6,16 017 10657 296,1» 49,7 24,54 C3 765 196,16 32,69 11.40 C12 2772 16172 32,62 4/0 016 11261 40153 66,09 12,08 C3 662 225,04 37/1 17,69 C12 2758 240/6 41/5 21/7 Cl» 2714 174/1 29 6 48 C3 »43 32116 53,68 611 C12 275» 1224 20.66 19,1» Cl1 Z711 <47,46 24,51 12,37 C3 964 114/3 19,01 51« C12 2780 94/7 15,73 7,17 Cl1 2717 221,42 38/4 13/1 15 C4 195 167,97 17/9 3 13 C12 2712 M2> 27/7 20/7 Cl1 26M U1«2 25,99 8/1 C4 18t 83/1 13,» 1,85 012 T115 271/2 45/ 17/1 Cl1 2572 1/· 1109 4/1 C4 113 21/2 3,57 6,40 C12 2719 12117 20,03 7,M Cl» 2716 63/3 10,34 2,69 04 1019 157/1 21/ 13,45 C« 2713 117/1 31/7 1/2 Cl» 2591 119/7 124 19,41- C4 322 109/7 1133 3,11 C12 2773 139/7 23/3 13/2 Cl1 2715 3535» 58,98 10,63 C4 521 (7,11 18,19 3,30 C12 2770 116/9 19.92 1,85 Cl» 2571 213,61 47/8 9 92 C4 548 3,24 0 56 3,96 C12 2771 221,10 36/6 13/6 C18 2712 30167 63/5 12,11 CS 269 166,60 26,15 2/9 FI4 CM 2774 16191 32,72 15,40 P16 Cl» 2614 15129 26,3« 12,33 C5 14 99,30 6,05 7/3 C13 2790 23117 311 3,66 Dl» 11464 299/4 47,71 32,32 CS 51 149/1 24,77 3,77 CM 2714 9119 1103 11,41 Cl1 2611 207/2 34/9 17,11 CS 305 169,60 31/ 15,91 C13 2761 12125 20/4 17.01 Cl» 2663 22112 37/9 12/1 05 1090 39192 «5,44 19/5 CM 2713 99/1 1107 5/3 Cl» 2667 19112 28,02 3/5 __ CS 110 549/9 5121 1/1 CM 2775 1S2/1 25/3 8,82 C1» 2663 199/5 33,31 59,61 4iU PI2 C1 343 361/4 10/1 1/7 013 109« 32101 53,94 46,56 Cl» 2610 26147 44/5 10,46 C6 111 222,6» 37,01 3.73 CM 2715 99,13 14,16 9/1 Cl» 2671 212/9 35/ 3,7» C1 322 219/1 43,26 4,63 CIS 7766 141/4 23,76 11,« Cl» 2664 15191 27/5 11,00 C6 326 412»,73 121,12 26/5 CM 2711 9»,10 14/5 9,43 C1» 2674 29116 43,52 20/2 ... C6 321 416,6» 69/5 2,33 C13 2712 2113» 35/ 13,71 Cl1 2611 17,94 14,66 14,13 ; · 01 10« 1620,02 271,67 »/O C14 2570 211/6 35/3 101 C20 2641 196/7 13,31 12,76 «·· D7 1711 244,40 40,h 13/5 C14 2564 157,1» 26/ 23,14 C20 2614 2514» 42/4 4,96 ·· · C7 2565 256/5 43/5 17,44 C14 2553 174/1 29,13 150 020 11491 493/1 10,5« 40/9 ; 1 : C7 2550 141/9 23,51 4,13 C14 2563 191/1 26/8 14,« C20 2645 164,4» 17,41 3,77 • · CT 254» 200,46 33,4 9,11 C14 2554 11172 11,»5 6,63 C20 2644 170/9 26,31 5/4 » . C7 2544 69/1 14,M 9,31 C14 2519 174/1 2»,M »/» C20 2607 200/6 33,4» 3,36 . . ; CT 2534 291/2 46,5» 120 C14 2562 92/7 13,73 6,17 C20 2605 111/7 25,65 23,12 • · ot- CT 2566 311,1» 52,16 7,16 D14 10346 177,73 29/2 14,31 C20 263» UO/3 21/1 5 55 C7 2573 176,15 29/6 6,M C14 25« 57/6 9,53 7,55 C20 2616 60/6 6,41 1219 • · CT 2563 166/0 31/3 10,31 C14 26« 1529« 25,5 10,« C20 2626 174,09 29,11 4,27 . ' C7 2547 239,00 37,67 11/5 C14 2552 237 37 3156 6« C20 2626 109,95 1233 2,76 • · · C7 2536 140,05 23,34 11/1 C1S 26« 155 49 25/1 25 M C21 32« 30165 50/6 12,26 : c» 2550 i»2,»1 27/1 7/3 ci» 2542 »3,« 2?/1 10/4 021 3223 m/» «/7 4230 ... D8 2 276 426/7 71/ 21,02 CM 2526 21160 35/2 75,30 C21 3232 »\«l 23,63 4/9 ? · · C6 2647 495,1» 62/4 51/5 C15 2545 103/6 17,« 9/5 021 40« 294,9» 49,17 14,5»
• C6 2649 11221 20/8 1116 Cl2 2521 116,56 16/3 12 52 C21 3221 129,72 21,62 12,M
C1 2662 391,51 25,25 10,« CIS 2505 165/9 27,66 15,00 C21 3230 97,64 16/1 25,02
CO 2691 276,00 46 33 22,66 CIS 2530 319» 5,33 5/5 C21 322» 161/6 30/1 22,M
C6 2651 516/1 66/ 4 76 CIS 2523 16162 32,61 11,01 C21 322« 296 37 49,73 9 93 C1 2672 297/4 49,54 7 71 015 10461 19251 31,75 17,41 C21 3222 4s//7 7126 221» • J I Qf\ C6 2690 161,0» 26/4 22,2» CIS 2504 4211» 70/5 23,0« C21 3204 221, S3 36,92 9/4 • 2 OW C» 265» 17/0 16,2 272 CIS 2516 137,1» 22/6 13,36 C21 3213 5«6,40 94/ 6,51 .3. C6 2653 193,95 32,31 12,07 C» 3262 229/7 35/1 17,72 , C» 3233 113,M 16/4 6,16 , , 09 3990 4.7/9 76,2» 137/1 ; · · C» 3215 1.1,» 24,22 13,71 ·1.’ C9 3217 357,91 59,64 4,73 C9 3261 167,17 27,« 6/9 ; J C» 3214 902,44 143,74 2 7,65 ··· C» 2793 122,77 20,31 9/5 • C» 5224 9.,55 15,7« 4,00 • · C» 3271 nl,72 18/2 5,1» • ^ ·ϊ 25 C» 28« 21044 40.07 29 14 _ · 2 • 1 » • «» 3 • · 11 119451
Mediaanit regressioyhtälöt johdettiin dimeerisen inhibiinin ja vapaan beta-hCG:n pitoisuuksista mediaanipi-toisuuden, joka havaittiin kukin raskausviikko, luonnollisen logaritmin lineaarisella regressiolla gestaatioikää 5 vastaan vuorokausina, painotettuna lisänäytteiden lukumäärällä kukin raskausviikko. Käytetyt regressioyhtälöt esitetään taulukossa 2.
Taulukko 2 10 Mediaaniregressiot
In Mediaaniras- Dimeerinen vapaa beta-hCG
kaus viikois- inhibiini mIU/ml __sa__ng/ml__ 5 13 27,82 12,73 120 16 26,08 10,35 40 17 29,23 9,18 15 14 19 17,09 3,64
5 20 28,15 6,61 I
3 21 43,25 6,57 ·*· _^_|_LLtJ.. ............... ----- *···: 1 22 69,45 2,33 ·· · r r * * · _ !\\ 1 24 821,12 26,35 20 a a • « f * • a a • · · aaa a • aa • · · * · · a · • · i • · · • Φ • · a • a • a aaa a a a aaa aaa a a aaa a a a a • aa a a a • a a a aa a a a a aaa 9 99 a a 12 119451
Painotetut mediaaniregress ioyhtälöt
Dimeerinen inhi- Vapaa beta-hCG blini n 189 189 korrelaatiokerroin 0,1600 0,8115 5 la_ -0,00254 -0,02558 a:n SE 0,00115 0,00135 b 3,56771 5,25899 b:n SE 0,14211 0,16705 malli: In(mediaani) - a * GA(vuorokausissa) + b 10
Mediaanidimeerinen inhibiinipitoisuus osoitti hieman variaatiota gestaatioiän myötä, kuten on esitetty kuviossa 2. Vastakohtana vapaan beta-hCG:n pitoisuudet osoittivat merkityn laskemisen pitoisuudessa tutkitun ras-15 kauden päivien aikana, kuten on esitetty kuviossa 3.
MoM-arvot laskettiin jakamalla kukin pitoisuus ole-tetulla normaalilla mediaanipitoisuudella siinä gestaatio- • · * * :v. iässä, jälkimmäisen ollessa johdettu taulukossa 2 esite- * · tyistä regressioyhtälöistä. Mediaani MoM dimeeriselle in- * · · .! I 20 hibiinille Downin syndroomatapauksissa oli merkittävästi • · · I ;* kohonnut 1,878 MoM:ssa (95 % Cl 1,539 - 2,751) verrattuna • ♦ · ··· ♦ vahingoittumattomiin kontrolleihin (mediaani MoM 1,30305,
*·* * 95 % Cl 0,9320 - 1,0960). Samalla tavalla vapaa beta-hCG
MoM tapauksissa oli myös merkittävästi kohonnut 2,2687 V,! 25 MoM:ssa (95 % Cl 1,5870 - 3,2470) verrattuna kontrolleihin (mediaani MoM 1,0310, 95 % Cl 0,9090 - 1,1210).
.•I·, Normaalit todennäköisyyspiirrokset sekä dimeerises- • · · M tä inhibiinistä että vapaasta beta-hCG MoM:sta osoittivat • i *" log Gaussin jakaumat sekä tapauksille että kontrolleille • · *,*·· 30 (kuviot 4 ja 5 vastaavasti). MoM:n luonnollisen logaritmin • · • t · • ·· • i 13 119451 keskiarvo ja standardipoikkeamat sekä dlmeeriselle inhi-biinille että vapaalle beta-hCG:lle laskettiin ulkopuolisten, jotka ovat suurempia kuin 3 standardipoikkeamaa keskiarvosta, pois jättämisen jälkeen (Healy, Clinical Chem., 5 25, 675-7, 1979). Korrelaatio dimeerisen inhibiinin ja vapaan beta MoM:n luonnollisen logaritmin välillä oli 0,2547 vahingoittumattomille kontrolleille ja 0,0365 Downin syndrooman tapauksille.
Tilastollinen yhteenveto tiedoista esitetään taulu-10 kossa 3.
··· • · • « ··· tt · • · · • · • · • · • · · • · · • · ·· · • · 1 • · • · • · • · · I » · ··· · »·· • · · • · · • · t · 1 * · · • · ··1 • · • · ··· • · • · · * » t • f ··· • · • · ··· a • · • · t • 1· • · • · · • 1· t 1 14 119451
Taulukko 3 Tilastot
Dimeerinen inhi- Vapaa beta-hCG
_ blini Vähin- Downin Vähin- Downin goittu- synd- goittu- synd- mattomat rooma mattomat rooma kontrol- kontrol- __lit___lit__ 5 Lukumäärä 189 21 189 21
Mediaani 1,0305 1,8784 1,0310 2,2687 95 % Cl medi- 0,9320 1,5390 0,9090 1,5870 aani 1,0960 2,7510 1,1210 3,2470 10. sentiili 0,4686 1,0939 0,4445 1,2825 10 (centile) 90. sentiili 3,3732 7,9258 2,4410 8,8951 (centile)
Intersentiili 0,6160 0,7727 0,6645 0,7556 (intercentile) 15 In (stand.- ··· poikk. ) ·· · • · ....................... 1 " - 1 **. .·’ Raaka In (kes- -0,0233 0,8077 0,0287 1,0206 » · · kiarvo) • 1 · • · mmmmmmmmmmmm^mmmm^^^ : Λ Raaka In 0,7775 0,9337 0,7054 0,7230 ··· 1 .»··, 20 (stand. poikk. ) • · ·
Alhaiset uiko- 610 0 ·1·1: puoliset • · »·· mmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmmm :...: Korkeat uiko- 112 0 .·.1, puoliset • · ___________ _ ..... .........
*·» ..... ............ ........ ........................
25 Trimmattu In 0,0392 0,7878 0,0042 1,0206 ·1. : (keskiarvo) • 1a · • 1 t • ··
• I
15 119451
Dimeerinen inhi- Vapaa beta-hCG
__biini___ Vähin- Downin Vähin- Downin goittu- synd- goittu- synd- mattomat rooma mattomat rooma kontrol- kontrol- __lit___lit__ 95 % Cl In -0,0440 0,5422 -0,0915 0,7114 (keskiarvo) 0,1225 1,0334 0,0999 1,3299 I Trimmattu In 0,5729 0,5461 0,6679 0,7230 (stand.poikk.) 5 Trimmattu näy- 180 19 te
Korrelaatio 0,2547 0,0365
Trimmattu 10 %:ssa; ulkopuoliset ± 3,0 standardipoik-keama 10
Monte-Carlo-simulointimenetelmiä käytettiin arvioimaan detektioprosentit Downin syndroomalle, joka nähtäisiin, jos vapaan beta-hCG:n ja dimeerisen inhibiinin yh- :***: distelmää käytettäisiin raskaana olevien naisten yleiseen ··· 15 populaatioon. Lyhyesti, käyttäen havaittua kaksimuuttuja • e tilastollisia jakaumia siemenenä, satunnaiset näytteet • * Φ •*(*( saatiin näistä jakaumista, jotka vastasivat kooltaan alku- • · | peräistä tietosarjaa 189 kontrollia ja 21 tapausta. Uudet “*,* tilastolliset jakaumat laskettiin näistä simuloiduista • · · *·* * 20 tietosarjoista. 20 000 tapausten ja kontrollien sarjaa saatiin sitten näistä populaatioista ja todennäköisyyssuh- • t :.V teet laskettiin kullekin näytteelle ja kerrottiin priori- ·«· ikäriskillä eri ikäisille naisille, jolloin saatiin yhdis-tetty ikä ja biokemiallinen leima riski. Nämä painotettiin • * · ,··!' 25 eri ikäisten raskaana olevien naisten lukumäärällä, joka • · *!' nähtiin yleisessä populaatiossa Englannille ja Walesille • · V*· jaksolla 1986 - 1988 (Office of Population Census and • · • · · • ·· • · 16 119451
Surveys (OPCS), 1987-1989), jolloin saatiin riskien jakaumat yleisessä populaatiossa, 100 tällaista simulaatiota otettiin huomioon kokeen detektioprosentin (herkkyyden) laskennalle suhteessa vää-5 rän positiivisen prosenttiin (1-spesifisyys) eri Downin syndrooman riskirajatasoille, yhdessä liittyneen 95 % Cl:n kanssa. Nämä tiedot esitetään graafisesti saajan käyttö-ominaisuuskäyrässä (ROC), joka on esitetty kuviossa 6. Tietojen yhteenveto esitetään taulukossa 4.
10
Taulukko 4
Detektioprosentit (Monte-Carlo-simulaatiolla) (Yhdistelmä Detektio- Standardi- 95 % Cl äidin ikä ja prosentti virhe 15 ...____
Dimeerinen 50,9 % 6,2 % 38,41 - 63,29 % inhibiini
Vapaa beta- 57,6 % 7,7 % 42,29 - 72,90 %
hCG
20 Inhibiini ja 66,4 % 8,1 % 50,15 - 82,68 % ,···, vapaa beta-
hCG
• · * • · .... ^_ .
• · “ :Yj ±-inhibiini 8,82 % 3,6 % 1,54 - 16,10 *
• S
• » « • · • · • ·*; 25 kokonaisuudessaan 5 %:n seulontapositiivinen prosentti aas a perustuen 21 vahingoittuneen ja 189 vahingoittumattoman a tapauksen 100 Monte-Carlo-simulaatioon, jotka on mallitet-'•t'm tu synnytyshetkiriskejä vastaan Englannin ja Walesin popu- Y laatiolle jaksolle 1986 - 1988 • a '*:** 30 e · •(*a* 5 %:n seulontapositiivisella määrällä äidin iän ja dimeerisen inhibiinin oletettaisiin havaitsevan 50,9 %
• M
a/ . (95 % CI 38,4 - 63,3 %) Downin syndrooman vahingoittamista ' * raskauksista. Käyttäen äidin ikää ja vapaata beta-hCG:tä • « » • M • · 17 119451 detektioprosentti olisi 57,6 % (95 % CI 42,3 - 72,9 %) samalle 5 %:n seulontapositiiviselle määrälle. Korkein detektioprosentti saataisiin käyttäen molempia leimoja yhdistelmässä äidin iän kanssa. Samalla 5 %:n seulontapo-5 sitiivisella määrällä detektioprosentti olisi 66,4 % (95 % Cl 50,2 - 82,7 %). Kasvu, joka nähdään lisäämällä dimeeri-nen inhibiini äidin iän ja vapaan beta-hCG:n yhdistelmään, on tilastollisesti merkittävä (kasvun keskiarvo 8,8 %, 95 % CI 1,5 - 16,1 %).
10 Tässä tutkimuksessa esitetyt tiedot osoittavat, että verenkierron dimeerisen inhibiinin tasot naisen, joka kantaa lasta, maternaalisessa seerumissa on riskin indeksi, että lapsi on Downin syndrooman vahingoittama. Lisäksi dimeerisen inhibiinin tulokset voidaan myös yhdistää mui-15 den raskauden spesifisten analyyttien kanssa, kuten vapaan beta-hCG:n, jolloin parannetaan Downin syndrooman vahingoittamien raskauksien detektioprosenttia.
Dimeeristen inhibiinipitoisuuksien regressoidun mediaanin stabiilisuus (tutkitun raskauden vuorokausien 20 sisällä) kääntyy alempaan riippuvuuteen todellisesta ges-taatioiästä verrattuna muihin analyytteihin, kuten vapaa • ***; beta-hCG (tässä tutkimuksessa).
• 1 · ;·.·. Dimeerisen inhibiinimittauksen käytöstä äidin see- • · rumissa yhdistettynä äidin iän kanssa (tässä tutkimukses- • · · .! 25 sa) havaitaan 10 % enemmän Downin syndrooman vahingoitta- • m • ! mia raskauksia 5 %:n väärän positiivisen tasolla kuin ai- • · · *;j/ kaisemmin raportoitiin (van Lith, Pratt, Beekhuis ja • · · *·1 1 Mantingh, Prenatal Diagnosis, 12, 801 - 806, 1992), jotka käyttivät alfa-spesifistä kaksipaikkaista inhibiinianalyy- • · 30 siä. Detektioprosentin tarkkuutta voidaan parantaa muiden • · · analyyttitulosten sisällyttämisellä, kuten vapaan beta-hCG:n. Tätä parantumista lisätään alhaisella korrelaatiol- • · 1 la vapaan beta-hCG ja dimeerisen inhibiinin arvojen välil- • m *!1 lä verrattuna tietoihin, jotka on raportoitu aikaisemmissa • · • · · t ·1 • · · • · · • · · • φ 18 119451 tutkimuksissa (Spencer, Wood ja Anthony, Anal. Clin. Biochem., 30, 219 - 220, 1993).
Johtopäätöksenä tässä tutkimuksessa esitetyt tiedot ovat osoittaneet, että äidin immunoreaktiivinen dimeerinen 5 inhibiinipitoisuus on todellakin käyttökelpoinen riskin indeksi naiselle, joka kantaa syntymätöntä lasta, että lapsi on Downin syndrooman vahingoittama. Lisäparannuksia Downin syndrooman vahingoittamien raskauksien detektiop-rosentissa voidaan tehdä yhdistämällä dimeerisen inhibii-10 nin tiedot toisen analyytin tietojen kanssa (vapaa beta-hCG edellä olevassa esimerkissä). Dimeerisen inhibiinin määritelmät ovat siksi käyttökelpoisia lisäbiokemiallisena leimana Downin syndrooman seulontaohjelmissa.
• 1 · • · • · *·« «f · • · · • · • · • • · · • 1 · • · • · · • · · t « • · « 1 • · • · · • •t 1 i»1 • · • · · • · • 1 · • · · • · »»· • · • φ · 1 • · • · · • 1 · • · • · · • · • · ·1· * • · • · • · · • · • · • I1 • ·

Claims (5)

119451 Patentt ivaat imukeet
1. Menetelmä syntymää edeltävien riskien arvioimiseksi sikiön kromosomaalisille poikkeavuuksille, t u n -5 n e t t u siitä, että A) arvioidaan raskaana olevan potilaan ensisijainen riski kantaa sikiötä, jolla on mainittu kromosomaali-nen poikkeavuus, B) mitataan dimeerisen inhibiinin konsentraatio 10 mainitun raskaana olevan potilaan verestä, C) lasketaan mainitun konsentraation normalisoitu arvo jakamalla mainittu konsentraatio mediaanin arvolla, joka havaitaan naispopulaatiolla, jolla on normaali raskaus ja sama raskauden kesto kuin mainitulla raskaana ole- 15 valla potilaalla, D) lasketaan ensimmäinen todennäköisyys, että korjattu normalisoitu arvo on osa Gaussin jakautumaa arvoista, jotka havaitaan normaaleissa raskauksissa, E) lasketaan toinen todennäköisyys, että korjattu 20 normalisoitu arvo on osa Gaussin jakaumaa arvoista, jotka havaitaan raskauksissa, joissa on mainittu kromosomaalinen • · · poikkeavuus, :***: F) lasketaan todennäkö isyys suhde, joka on mainittu • · ·’.*· ensimmäinen todennäköisyys jaettuna mainitulla toisella • · 25 todennäköisyydellä ja • » • · »ta • ,·. G) modifioidaan ensisijainen riski todennäköisyys- • · * "λ* suhteella.
• · · • · · * 2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että vaiheessa B) mainitun poti- • ♦ « *.*.* 30 laan verestä lisäksi mitataan merkkiaineen pitoisuus, joka ··· merkkiaine on koskematon hCG, alfafetoproteiini tai konju- ·*.*. goitumaton estrioli.
• · .···. 3. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, · # tunnettu siitä, että kromosomaalinen poikkeavuus *· 'S 35 on Downin syndrooma, trisomia 18, trisomia 13 tai Turnerin • · *.**: syndrooma. 119451
4. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että kromosomaalinen poikkeavuus on Downin syndrooma, trisomia 18, trisomia 13 tai Turnerin 5 syndrooma.
5. Laite, tunnettu siitä, että se käsittää välineen raskaana olevan potilaan veren dimeerisen in-hibiinin mittausten saamiseksi ja tietokoneen, joka on ohjelmoitu suorittamaan patenttivaatimuksen 1 mukaisen mene- 10 telmän syntymää edeltävien riskien arvioimiseksi. • · · • · • · • · · • · i • · · • · • · · • · · • · * · • 1 · • · · • 1 • · • · • · · • · · ··· · • M • · · • · · * · »Il • ♦ · • · ··· • · • ♦ ··« • · • · « • · · • « ··· ♦ • · ··· * · • · · • M • · · Λ · • ·♦ • · 119451 Fatentkrav
FI953830A 1994-08-13 1995-08-11 Raskauspoikkeavuuksien seulonta ennen synnytystä FI119451B (fi)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB9416415 1994-08-13
GB9416415A GB9416415D0 (en) 1994-08-13 1994-08-13 Antenatel screening for pregnacy abnormalities

Publications (3)

Publication Number Publication Date
FI953830A0 FI953830A0 (fi) 1995-08-11
FI953830A FI953830A (fi) 1996-02-14
FI119451B true FI119451B (fi) 2008-11-14

Family

ID=10759858

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
FI953830A FI119451B (fi) 1994-08-13 1995-08-11 Raskauspoikkeavuuksien seulonta ennen synnytystä

Country Status (10)

Country Link
US (1) US6022695A (fi)
EP (1) EP0701131B1 (fi)
JP (1) JP3626251B2 (fi)
KR (1) KR100389988B1 (fi)
AT (1) ATE213334T1 (fi)
AU (1) AU698204B2 (fi)
CA (1) CA2155919C (fi)
DE (1) DE69525400T2 (fi)
FI (1) FI119451B (fi)
GB (1) GB9416415D0 (fi)

Families Citing this family (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9606261D0 (en) * 1996-03-25 1996-05-29 Johnson & Johnson Clin Diag Prenatal screening for fetal abnormalities
US6620590B2 (en) 1996-07-11 2003-09-16 Isis Innovation Limited Diagnosis of pre-eclampsia
GB9614615D0 (en) * 1996-07-11 1996-09-04 Isis Innovation Diagnosis of pre-eclampsia
US20050131738A1 (en) * 2002-05-15 2005-06-16 Morris Tommy J. System and method for handling medical information
EP1512102A4 (en) 2002-05-15 2010-03-17 Us Gov Sec Army SYSTEM AND METHOD FOR PROCESSING MEDICAL INFORMATION
US7315787B2 (en) * 2003-10-07 2008-01-01 Ntd Laboratories, Inc. Multi-marker screening protocol for fetal abnormalities
WO2005055805A2 (en) * 2003-12-02 2005-06-23 Shraga Rottem An artificial intelligence and device for diagnosis, screening, prevention and treatment of materno-fetal conditions
EP1716419A2 (en) * 2004-02-20 2006-11-02 AplaGen GmbH Method for the detection of autoantibodies against specific peptides and its use in diagnosis and treatment of pregnancy-loss or infertility.
WO2009004340A2 (en) * 2007-07-02 2009-01-08 University Court Of The University Of Edinburgh Identification of ectopic pregnancies
US20100027571A1 (en) * 2008-07-31 2010-02-04 Murdoch Keith M Stabilized near-infrared laser
WO2011144999A1 (en) 2010-05-17 2011-11-24 Sandra Reznik Plasma protein-a2 (papp-a2) as a marker for detecting risk of chromosomal abnormalities

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4874693A (en) * 1986-10-10 1989-10-17 Mark Bogart Method for assessing placental dysfunction
ATE91182T1 (de) * 1987-07-09 1993-07-15 3I Res Expl Ltd Praenatales screening fuer downs-syndrom.
GB8816714D0 (en) * 1988-07-14 1988-08-17 Univ Court Of University Of Gl Switched reluctance motors
EP0409956B2 (en) * 1989-01-17 2004-07-21 MACRI, James N. Down syndrome screening method
GB9224965D0 (en) * 1992-11-28 1993-01-20 Kodak Ltd Antenatal screening for chromosomal abnormalities
GB9410345D0 (en) * 1994-05-24 1994-07-13 Univ Oxford Brookes Method of genetic testing
US5716853A (en) * 1995-07-07 1998-02-10 Chiron Diagnostics Corporation Prenatal down syndrome screening with assays specific for UGP

Also Published As

Publication number Publication date
AU2848795A (en) 1996-02-29
CA2155919C (en) 2007-06-05
DE69525400D1 (de) 2002-03-21
FI953830A (fi) 1996-02-14
AU698204B2 (en) 1998-10-29
FI953830A0 (fi) 1995-08-11
JP3626251B2 (ja) 2005-03-02
GB9416415D0 (en) 1994-10-05
EP0701131A2 (en) 1996-03-13
KR100389988B1 (ko) 2003-12-06
CA2155919A1 (en) 1996-02-14
EP0701131B1 (en) 2002-02-13
JPH09113508A (ja) 1997-05-02
EP0701131A3 (en) 1996-05-29
KR960008312A (ko) 1996-03-22
DE69525400T2 (de) 2002-07-18
US6022695A (en) 2000-02-08
ATE213334T1 (de) 2002-02-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Wald et al. Maternal serum unconjugated oestriol as an antenatal screening test for Down's syndrome
Spencer et al. Maternal serum free β‐hCG and PAPP‐A in fetal sex chromosome defects in the first trimester
Spencer et al. Screening for trisomy 13 by fetal nuchal translucency and maternal serum free β‐hCG and PAPP‐A at 10–14 weeks of gestation
Wald et al. Four‐marker serum screening for Down's syndrome
Spencer Evaluation of an assay of the free beta-subunit of choriogonadotropin and its potential value in screening for Down's syndrome
CA2330538C (en) Antenatal screening for down&#39;s syndrome
US20100120076A1 (en) Method for antenatal estimation of risk of aneuploidy
Canick et al. Second trimester serum markers
Wald et al. The use of free β‐hCG in antenatal screening for Down's syndrome
Meyer et al. Maternal serum placental alkaline phosphatase level and risk for preterm delivery
FI119451B (fi) Raskauspoikkeavuuksien seulonta ennen synnytystä
Cole et al. Urinary screening tests for fetal Down syndrome: II. Hyperglycosylated hCG
Wenstrom et al. α-Fetoprotein, free β-human chorionic gonadotropin, and dimeric inhibin A produce the best results in a three-analyte, multiple-marker screening test for fetal Down syndrome
Cole et al. Hyperglycosylated hCG, a potential alternative to hCG in Down syndrome screening
US6010912A (en) Antenatal screening for chromosomal abnormalities
Petrocik et al. Prenatal screening for Down syndrome with maternal serum human chorionic gonadotropin levels
Palomaki et al. A summary analysis of Down syndrome markers in the late first trimester
KR0171451B1 (ko) 비관혈적인 임산부 혈액 검색에 의해 다운 증후군을 검출하는 방법 및 장치
JP2005246080A (ja) 染色体異常を出生前に評価する装置
Gong et al. Free thyroxine reference interval in each trimester of pregnancy determined with the Roche Modular E-170 electrochemiluminescent immunoassay
JPH03502483A (ja) 胎児のダウン症候群を検出する方法およびその装置
Lee et al. Performance characteristics of the UniCel DxI 800 immunoassay for the maternal serum quadruple test, including median values for each week of gestation, in Korean women
Spencer Screening for Down's syndrome. The role of intact hCG and free subunit measurement
Lambert‐Messerlian et al. Early onset preeclampsia and second trimester serum markers
Bahado-Singh et al. Comparison of urinary hyperglycosylated human chorionic gonadotropin concentration with the serum triple screen for Down syndrome detection in high-risk pregnancies

Legal Events

Date Code Title Description
PC Transfer of assignment of patent

Owner name: ORTHO-CLINICAL DIAGNOSTICS, INC.

Free format text: ORTHO-CLINICAL DIAGNOSTICS, INC.

FG Patent granted

Ref document number: 119451

Country of ref document: FI

MA Patent expired