ES3068321T3 - 4h-pyrrolo[3,2-c]pyridin-4-one compounds - Google Patents

Abstract

Compuestos de fórmula (I), fórmula (I), procesos para su producción y su uso como productos farmacéuticos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Compuestos de 4h-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[0003] Ámbito de aplicación de la invención

[0004] La invención se refiere a compuestos 4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona sustituidos, un proceso para su producción y usos de los mismos.

[0005] ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0006] La familia de los receptores tirosina quinasa del factor de crecimiento epidérmico (EGFR o receptor EGF) consta de 4 miembros: EGFR (Erbb1, Her1), ERBB2 (Her2), ERBB3 (Her3) y ERBB4 (Her4). El EGFR media en la activación de las vías de señalización MAPK y PI3K, regulando así la proliferación, diferenciación, migración y supervivencia celular (Pao et al., 2010). La amplificación, la sobreexpresión y las mutaciones del gen EGFR se observan con frecuencia en diversas indicaciones de cáncer y se asocian a un mal pronóstico (Gridelli et al., 2015). En el adenocarcinoma de pulmón, las mutaciones del EGFR son prevalentes en aproximadamente el 15 % de los pacientes occidentales y hasta el 50 % de los pacientes de Asia oriental (Paez et al., 2004). Estas mutaciones suelen producirse en uno de los cuatro exones, los exones 18-21, en el dominio quinasa del EGFR (Paez et al., 2004). Las mutaciones activadoras más comunes en el EGFR son una mutación puntual en el exón 21, que sustituye una arginina por una leucina (L858R), y una pequeña deleción dentro del marco en el exón 19 que elimina cuatro aminoácidos (del 19/del 746-750) (Pao et al., 2010). Los inhibidores aprobados por la FDA gefitinib, erlotinib y afatinib, dirigidos contra mutaciones en los exones 18, 19 y 21 del EGFR, son eficaces en los pacientes, pero la respuesta no suele ser duradera (Mok et al., 2009; Sequist et al., 2013). La resistencia se produce con frecuencia en estos pacientes en respuesta a la adquisición de una segunda mutación, T790M (Pao et al., 2005). Los inhibidores de segunda generación, por ejemplo, el afatinib, actúan de forma irreversible sobre esta mutación, pero siguen siendo potentes inhibidores del EGFR de tipo salvaje, lo que provoca una toxicidad limitada por la dosis y una falta de eficacia en los pacientes. Un inhibidor irreversible de tercera generación, el osimertinib, que maximiza la actividad hacia T790M mientras minimiza la actividad hacia EGFR de tipo salvaje, es eficaz en pacientes mutantes T790M y actualmente es el tratamiento estándar para pacientes T790M positivos (Mok et al., 2017). Osimertinib también está aprobado como terapia de primera línea para pacientes con mutaciones de los exones 19 o 21 del EGFR (Soria et al., 2018).

[0007] Sin embargo, los pacientes también desarrollan resistencia a los inhibidores irreversibles del EGFR de tercera generación, tal como el osimertinib. Uno de los principales mecanismos de resistencia a osimertinib identificados es la mutación de la cisteína en la posición 797 a una serina, lo que provoca la pérdida de la cisteína que interactúa covalentemente y la pérdida de sensibilidad a los inhibidores irreversibles del EGFR, momento en el que los pacientes en progresión solo tienen actualmente opciones de tratamiento limitadas (Thress et al., 2015; Oxnard et al., 2018). Tales mutaciones C797S también pueden producirse cuando se utiliza osimertinib como terapia de primera línea, en ausencia de la mutación T790M (Ramalingham et al., 2018a; Ramalingham et al., 2018b). Una nueva terapia dirigida capaz de abordar específicamente la mutación de resistencia adquirida EGFR-C797S sería muy beneficiosa para estos pacientes.

[0008] Por el contrario, y con la excepción de A763_Y764insFQEA, las pequeñas inserciones en el marco del exón 20 del EGFR son resistentes a todos los inhibidores del EGFR aprobados clínicamente a dosis alcanzables en pacientes con cáncer de pulmón y constituyen una necesidad médica no cubierta (Yasuda et. al., 2013).

[0009] Los pacientes con inserciones en el exón20 del EGFR, tales como V769_D770insASV, D770_N771insSVD, D770_N771insNPG, N771_P772insH, H773_V774insH, H773_V774insNPH, V774_C775insHV muestran tasas de respuesta especialmente bajas a todas las terapias dirigidas al EGFR actualmente aprobadas, lo que se traduce en una supervivencia libre de progresión significativamente reducida, así como en una supervivencia global (Chen et al., 2016). Esto se ha demostrado para los inhibidores de primera generación erlotinib y gefitinib, así como para el inhibidor de segunda generación afatinib (Chen et al., 2016; Yang et al., 2015).

[0010] Por lo tanto, el tratamiento estándar para los pacientes con inserción de exón20 en EGFR es actualmente la quimioterapia.

[0011] El mismo perfil de resistencia se ha observado para las mutaciones de inserción del exón20 en ERBB2 (por ejemplo, ERBB2 A775_G776insYVMA con la prevalencia más alta), otro miembro de la familia del receptor EGF (Arcila et al., 2012) y algunas de las mutaciones poco comunes del EGFR como L681Q (Chiu et al., 2015).

[0012] Varios inhibidores irreversibles se encuentran actualmente en ensayos clínicos para el tratamiento de pacientes con inserción del exón20 del EGFR: Osimertinib, aprobado inicialmente para el tratamiento de pacientes con NSCLC mutante T790M (Floc'h et al., 2018); poziotinib (HM-781-36B), un inhibidor pan-Her no aprobado dirigido a EGFR, Her2/neu y Her4 (Robichaux et al., 2018); así como TAK-788 (AP32788) (Doebele et al., ASCO 2018).

[0013] De ellos, se han publicado los primeros datos clínicos de poziotinib y TAK-788. Ambos compuestos muestran claramente su eficacia clínica en pacientes con inserción del exón20 del EGFR. Sin embargo, en ambos ensayos clínicos se han notificado acontecimientos adversos importantes, mediados por la inhibición del EGFR de tipo salvaje, y estos acontecimientos adversos pueden limitar la utilidad clínica.

[0014] Más recientemente, se han publicado nuevos datos preclínicos de dos compuestos adicionales que muestran actividad sobre las inserciones del exón20 del EGFR: TAS6417 (TCP-064) y el compuesto 1a (Hasako et al., 2018; Jang et al., 2018). Aún no se dispone de resultados clínicos de estos dos compuestos.

[0015] La solicitud de patente internacional publicada con el número WO 2016/120196 A1 se refiere a compuestos de 4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona que inhiben la quinasa Bub1, a procesos para su producción y a su uso como parmacéuticos.

[0016] En resumen, el EGFR mutante es una diana farmacológica prometedora para el tratamiento del cáncer. En particular, los pacientes con resistencia primaria a las terapias anti-EGFR aprobadas, debido a inserciones del exón20 del EGFR, tienen pocas opciones de tratamiento hasta la fecha y hay una gran necesidad de nuevas alternativas y/o terapias mejoradas para proporcionar a estos pacientes una terapia eficaz y bien tolerable (Oxnard et al., 2013). Por lo tanto, los inhibidores potentes del EGFR mutante, en particular del EGFR mutante con mutaciones de inserción en el exón20 que muestran una selectividad mejorada frente al EGFR de tipo salvaje, representan compuestos valiosos que deberían complementar las opciones terapéuticas, ya sea como agentes únicos o en combinación con otros fármacos.

[0017] SUMARIO DE LA INVENCIÓN

[0018] La invención proporciona compuestos que inhiben un EGFR mutante; específicamente, un EGFR que comprende una o más mutaciones de inserción del exón 20, una mutación L858R, o una pequeña deleción dentro del marco del exón 19, en presencia o ausencia de una mutación C797S. Además, estos compuestos tienen una actividad reducida frente al EGFR de tipo salvaje.

[0019] Se ha descubierto ahora que los compuestos de la presente invención tienen propiedades sorprendentes y ventajosas.

[0020] En particular, se ha encontrado sorprendentemente que dichos compuestos de la presente invención inhiben eficazmente EGFR mutante con mutaciones de inserción en el exón 20, en particular los que albergan una inserción en el exón 20 D770_N771ins SVD con un IC<50>inferior a 5 nM. Además, se ha descubierto que estos compuestos también muestran potencia celular por debajo de 1 µM en las líneas celulares de EGFR V769_D770insASV, D770_N771insSVD, D770_N771insNPG, N771_P772insH o H773_V774insNPH con inserción en el exón 20 que albergan BA/F3. Además, los compuestos aquí descritos son activos en líneas celulares BA/F3 que albergan D770_N771insSVD C797S. Además, los compuestos aquí descritos inhiben potentemente la proliferación de líneas celulares BA/F3 portadoras de mutaciones activadoras del EGFR con o sin mutaciones de resistencia adquirida C797S (EGFR E746_A750del, L858R, E746_A750del C797S, L858R C797S), mutaciones poco comunes del EGFR (EGFR L681Q) o inserción del exón20 de ERBB2 A775_G776enYVMA.

[0021] Sorprendentemente, estos compuestos muestran además una selectividad de al menos 5 veces en un ensayo anti proliferativo de líneas celulares BA/F3 que albergan EGFR D770_N771ins SVD con inserción del exón 20 frente a células BA/F3 que albergan EGFR de tipo salvaje y, por tanto, pueden utilizarse para el tratamiento o profilaxis de enfermedades de crecimiento, proliferación y/o supervivencia celular incontrolados, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas, o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas o enfermedades que se acompañan de crecimiento, proliferación y/o supervivencia celulares incontrolados, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas mediadas por EGFR mutante con mutaciones de inserción en el exón 20 y/o reducen (o bloquean) la proliferación en células que albergan mutaciones de inserción en el exón 20 de EGFR, por ejemplo, tumores hematológicos, tumores sólidos y/o metástasis de los mismos, por ejemplo, leucemias y síndrome mielodisplásico, linfomas malignos, tumores de cabeza y cuello, incluyendo tumores cerebrales y metástasis cerebrales, tumores de tórax, imcluyendo tumores de pulmón de células no pequeñas y de células pequeñas, tumores gastrointestinales, tumores endocrinos, tumores mamarios y otros tumores ginecológicos, tumores urológicos, incluyendo tumores renales, de vejiga y de próstata, tumores cutáneos y sarcomas, y/o metástasis de los mismos.

[0022] Descripción de la invención

[0023] La presente invención se define en el juego de reivindicaciones adjunto. El presente texto abarca procedimientos de preparación de compuestos de la presente invención, dichos procedimientos comprenden los pasos descritos en la Sección Experimental de la presente memoria. Dichos procedimientos no forman parte de la presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas.

[0024] Definiciones

[0025] El término "que comprende" utilizado en la especificación incluye "que consiste en".

[0026] Si se hace referencia a "mencionado anteriormente" o"supra"dentro de la descripción, se hace referencia a cualquiera de las divulgaciones realizadas dentro de la especificación en cualquiera de las páginas precedentes. Si se hace referencia a "descrito en la presente memoria", "como se menciona en el presente texto" o "establecido en la presente memoria" dentro de la descripción, se hace referencia a cualquiera de las divulgaciones realizadas dentro de la especificación en cualquiera de las páginas anteriores o posteriores.

[0027] "Adecuado" en el sentido de la invención significa químicamente posible de fabricar por procedimientos conocidos por un experto.

[0028] Los términos mencionados en el presente texto tienen el siguiente significado:

[0029] Por "átomo halógeno", "halo-" o "Hal-" se entiende un átomo de flúor, cloro, bromo o yodo.

[0030] El término "alquilo C<1>-C<6>" significa un grupo hidrocarbonado monovalente, lineal o ramificado, saturado, que tiene 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono, por ejemplo un grupo metilo, etilo, propilo, butilo, pentilo, hexilo, iso-propilo, iso-butilo, sec-butilo, terc-butilo, isopentilo, 2-metilbutilo, 1-metilbutilo, 1-etilpropilo, 1,2-dimetilpropilo, neo-pentilo, 1,1-dimetilpropilo, 4-metilpentilo, 3-metilpentilo, 2-metilpentilo, 1-metilpentilo, 2-etilbutilo, 1-etilboutilo, 3,3-dimetilbutilo, 2,2-dimetilbutilo, 1,1-dimetilbutilo, 2,3-dimetilbutilo, 1,3-dimetilbutilo o 1,2-dimetilbutilo, o un isómero de los mismos. En particular, dicho grupo tiene 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono ("alquilo C<1>-C<4>"), por ejemplo, un grupo metilo, etilo, propilo, butilo, iso-propilo, isobutilo, sec-butilo o terc-butilo, más particularmente de 1, 2 o 3 átomos de carbono ("alquilo C<1>-C<3>"), por ejemplo, un grupo metilo, etilo, n-propilo o isopropilo.

[0031] El término "haloalquilo C<1>-C<4>" significa un grupo hidrocarbonado monovalente, lineal o ramificado, saturado, en el que el término "alquilo C<1>-C<4>" es como se definesupra,y en el que uno o más de los átomos de hidrógeno están sustituidos, idéntica o diferentemente, por un átomo de halógeno, es decir, de manera que cada átomo de halógeno es independiente del otro. En particular, dicho átomo de halógeno es F. Dicho grupo haloalquilo C<1>-C<4>es, por ejemplo, -CF<3>, -CHF<2>, -CH<2>F, -CF<2>CF<3>, -CH<2>CH<2>F, -CH<2>CHF<2>, -CH<2>CF<3>, -CH<2>CH<2>CF<3>, o -CH(CH<2>F)<2>.

[0032] El término "fluoroalquilo C<2>-C<3>" significa un grupo hidrocarbonado monovalente, lineal o ramificado, saturado, en el que el término "alquilo C<2>-C<3>" es como se definesupra,y en el que uno o más de los átomos de hidrógeno están sustituidos por un átomo de fluoro. Dicho grupo fluoroalquilo C<2>-C<3>es, por ejemplo, -CF<2>CF<3>, -CH<2>CH<2>F, -CH<2>CHF<2>, -CH<2>CF<3>, -CH<2>CH<2>CF<3>, o - CH(CH<2>F)<2>.

[0033] El término "alcoxi C<1>-C<4>" debe entenderse como un grupo hidrocarbonado lineal o ramificado, saturado, monovalente, de fórmula -O-alquilo, en el que el término "alquilo" se definesupra, por ejemplo,un grupo metoxi, etoxi, n-propoxi, iso-propoxi, n-butoxi, iso-butoxi, terc-butoxi o sec-butoxi, o un isómero de los mismos.

[0034] Salvo que se defina de otro modo, por "heterocicloalquilo de 5 a 6 miembros" o "anillo heterocíclico de 5 a 6 miembros" se entenderá un anillo de hidrocarburo saturado, monovalente y monocíclico que contenga 4 o 5 átomos de carbono y un grupo que contenga un heteroátomo seleccionado entre O y NR, en el que R significa un átomo de hidrógeno, un grupo alquilo C<1>-C<3>o un grupo haloalquilo C<1>-C<3>, siendo posible que dicho grupo heterocicloalquilo esté unido al resto de la molécula a través de cualquiera de los átomos de carbono.

[0035] En particular, dicho heterocicloalquilo es un anillo de 5 miembros, tal como tetrahidrofuranoilo, pirazolidinilo, o un anillo de 6 miembros, tal como tetrahidropiranilo, piperidinilo, por ejemplo.

[0036] El término "C<1>-C<6>", como se utiliza en el presente texto, por ejemplo, en el contexto de la definición de "alquilo C<1>-C<6>" o "haloalquilo C<1>-C<6>" significa un grupo alquilo que tiene un número finito de átomos de carbono de 1 a 6,es decir, 1, 2, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono. Debe entenderse además que dicho término "C<1>-C<6>" debe interpretarse como cualquier subintervalo comprendido en el mismo, por ejemplo. C<1>-C<6 ,>C<2>-C<6 ,>C<3>-C<6 ,>C<1>-C<2 ,>C<1>-C<3 ,>especialmente C<1>-C<2,>C<1>-C<3,>C<1>-C<4,>.

[0037] El término "C<1>-C<4>", tal como se utiliza en el presente texto, por ejemplo, en el contexto de la definición de "alquilo C<1>-C<4>", "haloalquilo C<1>-C<4>", "alcoxi C<1>-C<4>" o "haloalcoxi C<1>-C<4>" significa un grupo alquilo que tiene un número finito de átomos de carbono de 1 a 4, es decir, 1, 2, 3 o 4 átomos de carbono. Debe entenderse además que dicho término "C<1>-C<4>" debe interpretarse como cualquier subintervalo comprendido en el mismo, por ejemplo, C<1>-C<4>, C<2>-C<4>, C<3>-C<4>, C<1>-C<2>, C<1>-C<3>, particularmente, C<1>-C<2>, C<1>-C<3>, C<1>-C<4>, en el caso de "haloalquilo C<1>-C<6>" o "haloalcoxi C<1>-C<4>" aún más particularmente C<1>-C<2>.

[0038] Además, tal como se utiliza en la presente memoria, el término "C<3>-C<6>", como se utiliza en el presente texto, por ejemplo, en el contexto de la definición de "cicloalquilo C<3>-C<6>", significa un grupo cicloalquilo que tiene un número finito de átomos de carbono de 3 a 6, es decir, 3, 4, 5 o 6 átomos de carbono. Debe entenderse además que dicho término "C<3>-C<6>" debe interpretarse como cualquier subintervalo comprendido en el mismo,por ejemplo, C<3>-C<6>, C<4>-C<5>, C<3>-C<5>, C<3>-C<4>, C<4>-C<6>, C<5>-C<6;>particularmente, C<3>-C<6>.

[0039] El término "sustituido" significa que uno o más átomos de hidrógeno del átomo o grupo designado se sustituyen por una selección del grupo indicado, siempre que no se supere la valencia normal de dicho átomo en las circunstancias existentes y que la sustitución dé lugar a un compuesto estable. Las combinaciones de sustituyentes y/o variables sólo son admisibles si tales combinaciones dan lugar a compuestos estables.

[0040] El término "opcionalmente sustituido" significa sustitución opcional con los grupos, radicales o fracciones especificados.

[0041] Por sustituyente del sistema de anillos se entiende un sustituyente unido a un sistema de anillos aromáticos o no aromáticos que, por ejemplo, sustituye a un hidrógeno disponible en el sistema de anillos.

[0042] Como se utiliza en la presente memoria, el término "uno o más", por ejemplo, en la definición de los sustituyentes de los compuestos de las fórmulas generales de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, se entiende en el sentido de "uno, dos, tres, cuatro, cinco, particularmente uno, dos, tres o cuatro, más particularmente uno, dos o tres, incluso más particularmente uno o dos".

[0043] Cuando en la presente memoria se utilice la forma plural de la palabra compuestos o sales, se entenderá que se refiere también a un único compuesto o sal.

[0044] Por "compuesto estable" o "estructura estable" se entiende un compuesto que es lo suficientemente robusto como para sobrevivir al aislamiento hasta un grado útil de pureza a partir de una mezcla de reacción, y a la formulación en un agente terapéutico eficaz.

[0045] Los compuestos de la presente invención contienen uno o más centros asimétricos, dependiendo de la ubicación y naturaleza de los diversos sustituyentes deseados. Los átomos de carbono asimétricos pueden estar presentes en la configuración (R) o (S), lo que puede dar lugar a mezclas racémicas en el caso de un único centro asimétrico, y a mezclas diastereoméricas en el caso de múltiples centros asimétricos. En determinados casos, es posible que la asimetría también esté presente debido a la rotación restringida sobre un enlace dado, por ejemplo, el enlace central que une dos anillos aromáticos sustituidos de los compuestos especificados.

[0046] Los sustituyentes de un anillo también pueden estar presentes en forma cis o trans.

[0047] Los compuestos preferentes son los que producen la actividad biológica más deseable.

[0048] También se divulgan estereoisómeros separados, puros o parcialmente purificados o mezclas racémicas o diastereoméricas de los compuestos de la presente invención. La purificación y la separación de tales materiales pueden realizarse mediante técnicas estándar conocidas en la técnica.

[0049] Los isómeros ópticos pueden obtenerse por resolución de las mezclas racémicas de acuerdo con procedimientos convencionales, por ejemplo, mediante la formación de sales diastereoisoméricas utilizando un ácido o una base ópticamente activos o la formación de diastereómeros covalentes. Ejemplos de ácidos apropiados son el tartárico, el diacetiltartárico, el ditoluoyltartárico y el canforsulfónico. Las mezclas de diastereoisómeros pueden separarse en sus diastereómeros individuales en función de sus diferencias físicas y/o químicas por procedimientos conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante cromatografía o cristalización fraccionada. A continuación, las bases o ácidos ópticamente activos se liberan de las sales diastereoméricas separadas. Un procedimiento diferente para la separación de isómeros ópticos implica el uso de cromatografía quiral (por ejemplo, columnas de HPLC), con o sin derivatización convencional, elegida de forma óptima para maximizar la separación de los enantiómeros. Daicel fabrica columnas de HPLC quirales adecuadas, por ejemplo, Chiracel OD y Chiracel OJ entre muchas otras, todas ellas seleccionables de forma rutinaria. También son útiles las separaciones enzimáticas, con o sin derivatización. Los compuestos ópticamente activos de la presente invención pueden obtenerse igualmente mediante síntesis quirales utilizando materiales de partida ópticamente activos.

[0050] Para limitar los distintos tipos de isómeros entre sí, se hace referencia a la Sección E de las Reglas de la IUPAC (Pure Appl Chem 45, 11-30, 1976).

[0051] La presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas, incluye todos los posibles estereoisómeros de los compuestos de la presente invención, como estereoisómeros únicos, o como cualquier mezcla de dichos estereoisómeros, por ejemplo, R- o S-isómeros, en cualquier relación. El aislamiento de un único estereoisómero, por ejemplo, un único enantiómero o un único diastereómero, de un compuesto de la presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas, se consigue mediante cualquier procedimiento adecuado del estado de la técnica, tal como la cromatografía, especialmente la cromatografía quiral, por ejemplo.

[0052] Además, los compuestos de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas pueden existir como tautómeros. Por ejemplo, cualquier compuesto de la presente invención que contenga una fracción de pirazol como grupo heteroarilo, por ejemplo, puede existir como un tautómero 1H, o un tautómero 2H, o incluso una mezcla en cualquier cantidad de los dos tautómeros, o una fracción de triazol, por ejemplo, puede existir como un tautómero 1H, un tautómero 2H, o un tautómero 4H, o incluso una mezcla en cualquier cantidad de dichos tautómeros 1H, 2H y 4H, a saber :

[0054]

[0056] La presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas, incluye todos los tautómeros posibles de los compuestos de la presente invención, como tautómeros únicos, o como cualquier mezcla de dichos tautómeros, en cualquier relación.

[0057] Además, los compuestos de la presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas, pueden existir como N-óxidos, que se definen en que al menos un nitrógeno de los compuestos de la presente invención está oxidado. La presente invención incluye todos los N-óxidos posibles.

[0058] Además,los compuestos de la presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas, pueden presentarse en forma de base libre, de ácido libre, o como un zwitterión, o que existan en forma de una sal. Dicha sal puede ser cualquier sal, ya sea una sal de adición orgánica o inorgánica, particularmente cualquier sal de adición orgánica o inorgánica farmacéuticamente aceptable, utilizada habitualmente en farmacia.

[0059] El término "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a una sal de adición ácida, inorgánica u orgánica, relativamente no tóxica, de un compuesto de la presente invención. Por ejemplo, véase S. M. Berge et al. "Sales farmacéuticas", J. Pharm. Sci.1977, 66, 1-19.

[0060] Una sal farmacéuticamente aceptable adecuada de los compuestos de la presente invención es una sal de adición ácida de un compuesto de la presente invención que contenga un átomo de nitrógeno, en una cadena o en un anillo, que sea suficientemente básica, tal como una sal de adición ácida con un ácido inorgánico, tal como ácido clorhídrico, bromhídrico, yodhídrico, sulfúrico, bisulfúrico, fosfórico o nítrico, o con un ácido orgánico, tal como ácido fórmico, acético, acetoacético, pirúvico, trifluoroacético, propiónico, butírico, hexanoico, heptanoico, undecanoico, láurico, benzoico, salicílico, 2-(4-hidroxibenzoil)-benzoico, canforico, cinámico, ciclopentanopropiónico, diglucónico, 3-hidroxi-2-naftoico, nicotínico, pamoico, pectínico, persulfúrico,3-fenilpropiónico, pícrico, piválico, 2-hidroxietanosulfónico, itacónico, sulfámoico, trifluorometanosulfónico, dodecilsulfúrico, etanosulfónico, bencenosulfónico, para-toluenosulfónico, metanosulfónico, 2-naftalenosulfónico, naftalinedisulfónico, ácido camforosulfónico, cítrico, tartárico, esteárico, láctico, oxálico, malónico, succínico, málico, adípico, algínico, maleico, fumárico, D-glucónico, mandélico, ascórbico, glucoheptanoico, glicerofosfórico, aspártico, sulfosalicílico, hemisulfúrico o tiociánico.

[0061] Además, otra sal farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la presente invención que es suficientemente ácida, es una sal de metal alcali, que es una sal de sodio o potasio, una sal de metal alcalinotérreo, que es una sal de calcio o magnesio, una sal de amonio o una sal con una base orgánica que proporciona un catión fisiológicamente aceptable, que es una sal con N-metil-glucamina, dimetil-glucamina, etil-glucamina, lisina, diciclohexilamina, 1,6-hexadiamina, etanolamina, glucosamina, sarcosina, serinol, tris-hidroxi-metil-aminometano, aminopropandiol, sovak-base, o 1-amino-2,3,4-butantriol. Además, los grupos básicos que contienen nitrógeno pueden cuaternizarse con agentes como haluros de alquilo inferior, que son cloruros, bromuros o yoduros de metilo, etilo, propilo y butilo; sulfatos de dialquilo, que son sulfatos de dimetilo, dietilo o dibutilo; y sulfatos de diamilo, haluros de cadena larga, que son cloruros, bromuros y yoduros de decilo, laurilo, miristilo y estrearilo, haluros de aralquilo, que son bromuros de bencilo y fenetilo.

[0062] Los expertos en la técnica reconocerán además que es posible preparar sales de adición ácida de los compuestos reivindicados por reacción de los compuestos con el ácido inorgánico u orgánico apropiado utilizando cualquiera de los procedimientos conocidos. Alternativamente, las sales de metales alcalinos y alcalinotérreos de los compuestos ácidos de la presente invención se preparan haciendo reaccionar los compuestos de la presente invención con la base apropiada mediante una variedad de procedimientos conocidos.

[0063] La presente invención,como se define en las reivindicaciones adjuntas, incluye todas las sales posibles de los compuestos de la presente invención, como sales individuales, o como cualquier mezcla de dichas sales, en cualquier relación.

[0064] En el presente texto, en particular en la Sección Experimental, para la síntesis de productos intermedios y de ejemplos de la presente invención, cuando se menciona un compuesto como forma de sal con la base o el ácido correspondientes, la composición estequiométrica exacta de dicha forma de sal, como se obtiene mediante el procedimiento de preparación y/o purificación respectivo, es, en la mayoría de los casos, desconocida.

[0065] Salvo que se especifique lo contrario, los sufijos de nombres químicos o fórmulas estructurales relativos a sales, tales como "clorhidrato", "trifluoroacetato", "sal sódica", o "x HCl", "x CF<3>COOH", "x Na<+>", deben entenderse no como una especificación estequiométrica, sino únicamente como una forma salina.

[0066] Esto se aplica de forma análoga a los casos en los que se han obtenido productos intermedios de síntesis o compuestos ejemplo o sales de los mismos, mediante los procedimientos de preparación y/o purificación descritos, como solvatos, tales como hidratos, con composición estequiométrica desconocida (si está definida).

[0067] Las sales incluyen sales insolubles en agua y, particularmente, sales solubles en agua.

[0068] El término "combinación" en la presente invención se utiliza como lo conocen los expertos en la técnica y puede estar presente como una combinación fija, una combinación no fija o un kit de piezas.

[0069] Una "combinación fija" en la presente invención se utiliza como la conocen los expertos en la técnica y se define como una combinación en la que dicho primer principio activo y ducho segundo principio activo están presentes juntos en una dosis unitaria o en una única entidad. Un ejemplo de "combinación fija" es una composición farmacéutica en la que dicho primer principio activo y dicho segundo principio activo están presentes en una mezcla para su administración simultánea, tal como en una formulación. Otro ejemplo de "combinación fija" es una combinación farmacéutica en la que dicho primer principio activo y dicho segundo principio activo están presentes en una unidad sin estar mezclados.

[0070] Una combinación no fija o "kit de partes" en la presente invención se utiliza como es conocido por los expertos en la técnica y se define como una combinación en la que dicho primer principio activo y dicho segundo principio activo están presentes en más de una unidad. Un ejemplo de combinación no fija o kit de partes es una combinación en la que dicho primer principio activo y dicho segundo principio activo adicional están presentes por separado. Los componentes de la combinación no fija o del kit de piezas pueden administrarse por separado, secuencialmente, simultáneamente, concurrentemente o escalonados cronológicamente. Combinaciones de acuerdo con la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas.

[0071] El término "agentes (quimioterapéuticos) contra el cáncer" se refiere a cualquier agente que reduzca la supervivencia o proliferación de una célula cancerosa, que son:

[0072] 131l-chTNT, abarelix, abiraterona, aclarubicina, ado-trastuzumab emtansina, afatinib, aflibercept, aldesleukina, alemtuzumab, ácido alendrónico, alitretinoína, altretamina, amifostina, aminoglutetimida, hexil aminolevulinato, amrubicina, amsacrina, anastrozol, ancestim, anetol ditioletiona, angiotensina II, antitrombina III, aprepitant, arcitumomab, arglabina, trióxido de arsénico, asparaginasa, axitinib, azacitidina, basiliximab, belotecán, bendamustina, belinostat, bevacizumab, bexaroteno, bicalutamida, bisantreno, bleomicina, bortezomib, buserelina, bosutinib, brentuximab vedotin, busulfán, cabazitaxel, cabozantinib, folinato cálcico, levofolinato cálcico, capecitabina, capromab, carboplatino, carfilzomib, carmofur, carmustina, catumaxomab, celecoxib, celmoleukina, ceritinib, cetuximab, clorambucil, clormadinona, clormetina, cidofovir, cinacalcet, cisplatino, cladribina, ácido clodrónico, clofarabina, copanlisib, crisantaspasa, ciclofosfamida, ciproterona, citarabina, dacarbazina, dactinomicina, darbepoetina alfa, dabrafenib, dasatinib, daunorrubicina, decitabina, degarelix, denileucina diftitox, denosumab, depreótido, deslorelina, dexrazoxano, cloruro de dibrospidio, dianhidrogalactitol, diclofenaco, docetaxel, dolasetrón, doxifluridina, doxorrubicina, doxorrubicina estrona, dronabinol, eculizumab, edrecolomab, acetato de eliptinio, eltrombopag, endostatina, enocitabina, enzalutamida, epirubicina, epitiostanol, epoetina alfa, epoetina beta, epoetina zeta, eptaplatina, eribulina, erlotinib, esomeprazol, estradiol, estramustina, etopósido, everolimus, exemestano, fadrozol, fentanilo, filgrastim, fluoximesterona, floxuridina, fludarabina, fluorouracilo, flutamida, ácido folínico, formestano, fosaprepitant, fotemustina, fulvestrant, gadobutrol, gadoteridol, ácido gadoterico meglumina, gadoversetamida, ácido gadoxético, nitrato de galio, ganirelix, gefitinib, gemcitabina, gemtuzumab, glucarpidasa, glutoxim, GM-CSF, goserelina, granisetrón, factor estimulante de colonias de granulocitos, dihidrocloruro de histamina, histrelina, hidroxicarbamida, semillas de I-125, lansoprazol, ácido ibandrónico, ibritumomab tiuxetan, ibrutinib, idarubicina, ifosfamida, imatinib, imiquimod, improsulfán, indisetrón, ácido incadrónico, mebutato de ingenol, interferón alfa, interferón beta, interferón gamma, iobitridol, iobenguano (123l), iomeprol, ipilimumab, irinotecán, itraconazol, ixabepilona, lanreotida, lapatinib, lasocolina, lenalidomida, lenograstim, lentinan, letrozol, leuprorelina, levamisol, levonorgestrel, levotiroxina sódica, lisurida, lobaplatino, lomustina, lonidamina, masoprocol, medroxiprogesterona, megestrol, melarsoprol, melfalán, mepitiostano, mercaptopurina, mesna, metadona, metotrexato, metoxsaleno, metilaminolevulinato, metilprednisolona, metiltestosterona, metirosina, mifamurtida, miltefosina, miriplatino, mitobronitol, mitoguazona, mitolactol, mitomicina, mitotano, mitoxantrona, mogamulizumab, molgramostim, mopidamol, clorhidrato de morfina, sulfato de morfina, nabilona, nabiximols, nafarelina, naloxona pentazocina, naltrexona, nartograstim, nedaplatino, nelarabina, ácido neridrónico, nivolumabpentetreotida, nilotinib, nilutamida, nimorazol, nimotuzumab, nimustina, nitracrina, nivolumab, obinutuzumab, octreotida, ofatumumab, mepesuccinato de omacetaxina, omeprazol, ondansetrón, oprelvekin, orgoteína, orilotimod, osimertinib, oxaliplatino, oxicodona, oximetolona, ozogamicina, terapia génica p53, paclitaxel, palifermina, semilla de paladio-103, palonosetrón, ácido pamidrónico, panitumumab, pantoprazol, pazopanib, pegaspargasa, PEG-epoetina beta (metoxi PEG-epoetina beta), pembrolizumab, pegfilgrastim, peginterferón alfa-2b, pemetrexed, pentazocina, pentostatina, peplomicina, Perflubutano, perfosfamida, Pertuzumab, picibanil, pilocarpina, pirarubicina, pixantrona, plerixafor, plicamicina, poliglusam, fosfato de poliestradiol, polivinilpirrolidona hialuronato sódico, polisacárido-K, pomalidomida, ponatinib, porfimer sódico, poziotinib, pralatrexato, prednimustina, prednisona, procarbazina, procodazol, propranolol, quinagolida, rabeprazol, racotumomab, cloruro de radio-223, radotinib, raloxifeno, raltitrexed, ramosetrón, ramucirumab, ranimustina, rasburicasa, razoxano, refametinib, regorafenib, ácido risedrónico, renio-186 etidronato, rituximab, romidepsina, romiplostim, romurtida, roniciclib, samario (153Sm) lexidronam, sargramostim, satumomab, secretina, sipuleucel-T, sizofiran, sobuzoxane, glicididazol sódico, sorafenib, estanozolol, estreptozocina, sunitinib, talaporfina, tamibaroteno, tamoxifeno, tapentadol, tasonermin, teceleukina, nofetumomab merpentan con tecnecio (99mTc), 99mTc-HYNIC-[Tyr3]-octreotida, tegafur, tegafur gimeracil oteracil, temoporfina, temozolomida, temsirolimus, teniposida, testosterona, tetrofosmina, talidomida, tiotepa, timalfasina, tirotropina alfa, tioguanina, tocilizumab, topotecán, toremifeno, tositumomab, trabectedina, tramadol, trastuzumab, trastuzumab emtansina, treosulfán, tretinoína, trifluridina tipiracilo, trilostano, triptorelina, trametinib, trofosfamida, trombopoyetina, triptófano, ubenimex, valatinib, valrubicina, vandetanib, vapreotida, vemurafenib, vinblastina, vincristina, vindesina, vinflunina, vinorelbina, vismodegib, vorinostat, vorozol, microesferas de vidrio de itrio-90, zinostatina, estimulámero de zinostatina, ácido zoledrónico o zorubicina.

[0074] Por "polipéptido del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR)" se entiende un polipéptido que tiene aproximadamente 95 % de identidad de secuencia de aminoácidos con la secuencia proporcionada en UniProt Accession Nº P00533-1 o un fragmento de la misma. En algunas realizaciones, el fragmento EGFR se une a un ligando EFGR y/o tiene actividad quinasa. Los polipéptidos EGFR mutantes incluyen los que tienen una inserción entre, por ejemplo, los aminoácidos V769 y D770 o entre D770 y N771. En otras realizaciones, la identidad de la secuencia de aminoácidos es del 96, 97, 98, 99 o 100 % con UniProt Accession Nº P00533-1.

[0076] Una secuencia ejemplar de longitud completa del EGFR humano, que indica V769, D770 y N771 en negrita, se proporciona en UniProt Accession Nº P00533-1, que se reproduce a continuación:

[0078]

[0079]

[0081] Un polinucleótido ejemplar que codifica EGFR se proporciona en secencia de referencia del NCBI: NM_001346897.1, que se reproduce a continuación:

[0082]

[0083]

[0084]

[0085]

[0088] 

[0089]

[0091] Los intermedios utilizados para la síntesis de los compuestos de las reivindicaciones 1-4 como se describen a continuación, así como su uso para la síntesis de los compuestos de las reivindicaciones 1-4, son un aspecto adicional de la presente invención. Los productos intermedios preferidos son los ejemplos de productos intermedios que se divulgan a continuación.

[0092] Procedimiento general

[0093] Los compuestos de acuerdo con la invención pueden prepararse según los siguientes esquemas 1 - 4.

[0094] Los esquemas y procedimientos descritos a continuación muestran rutas sintéticas a los compuestos de fórmula general (I) de la invención como se definen en las reivindicaciones adjuntas. Es evidente para el experto en la técnica que el orden de las transformaciones como se ejemplifica en los esquemas puede modificarse de varias maneras. Además, la interconversión de cualquiera de los sustituyentes, R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>y PG puede conseguirse antes y/o después de las transformaciones ejemplificadas.. Estas modificaciones pueden consistir en la introducción de grupos protectores, la escisión de grupos protectores, la reducción u oxidación de grupos funcionales, la halogenación, la metalización, la sustitución u otras reacciones conocidas por el experto en la técnica. Estas transformaciones incluyen las que introducen una funcionalidad que permite una mayor interconversión de los sustituyentes. Los grupos protectores apropiados y su introducción y escisión son bien conocidos por el experto en la técnica. En los párrafos siguientes se describen ejemplos concretos.

[0095]

[0097] Esquema1: Ruta para la preparación de compuestos de fórmula general (I), en la que R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, X, Y, m y n tienen el significado que se da para la fórmula general (I) y PG puede ser hidrógeno u opcionalmente un grupo protector adecuado, por ejemplo, terc-butoxicarbonilo (Boc).

[0098] Los compuestos de fórmula1, 2,y4están disponibles comercialmente o pueden prepararse de acuerdo con procedimientos disponibles en el dominio público, como es comprensible para el experto en la técnica. En los párrafos siguientes se describen ejemplos concretos.

[0099] Una piperadin-2,4-diona de fórmula general convenientemente sustituida (Compuesto de fórmula1), tal como, por ejemplo, 2,4-piperadinediona, puede hacerse reaccionar con un isotiocianato convenientemente sustituido (Compuesto de fórmula2), tal como, por ejemplo, 3-fluorofenilisotiocianato, en un sistema disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, acetonitrilo, en presencia de una base adecuada, tal como, por ejemplo, trietilamina o DBU, a temperaturas que se encuentran en el intervalo entre -78 °C y 100 °C, en algunas realizaciones la reacción se lleva a cabo a 0 °C o 100 °C, para proporcionar la fórmula general(3).Reacciones similares se han llevado a cabo en la literatura (D. E. Worrall, J. Am. Chem. Soc., 1940, 62, 675).

[0100] Los productos intermedios de fórmula general (3) pueden convertirse en productos intermedios de fórmula general (5) por reacción con una amina adecuada (compuestos de fórmula general4), tal como, por ejemplo 4-(aminometil)piridina, en un sistema de disolventes adecuado, tal como, por ejemplo, etanol y acetato de etilo, a una temperatura comprendida entre la temperatura ambiente y el punto de ebullición de los disolventes respectivos, en algunas realizaciones, la reacción se lleva a cabo en el punto de ebullición de los disolventes respectivos, por lo que el agua formada en la reacción se elimina de la reacción por procedimientos conocidos por los expertos en la técnica, tales como, por ejemplo, eliminación azeotrópica de agua (condiciones de Dean-Stark) o con tamices moleculares, para proporcionar la fórmula general(5).

[0101] Los intermedios de fórmula general(3)y los intermedios de fórmula general(5)en los que PG representa un grupo protector pueden convertirse en productos intermedios en los que PG representa un átomo de hidrógeno utilizando condiciones de desprotección estándar conocidas por los expertos en la técnica. Cuando PG es un grupo protector, tal como, por ejemplo, terc-butoxicarbonilo (Boc), la desprotección puede llevarse a cabo usando ácidos, tales como, por ejemplo, ácido clorhídrico y ácido trifluoroacético, en un sistema disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, diclorometano y dioxano, a una temperatura comprendida entre 0°C y el punto de ebullición de los disolventes respectivos, en una realización la reacción se lleva a cabo a temperatura ambiente, para proporcionar compuestos de fórmula general(3)e intermedios de fórmula general(5)en los que PG es átomo de hidrógeno.

[0102] Los productos intermedios de fórmula general(5)se hacen reaccionar con una base y/o reactivo oxidante, en una realización un agente oxidante, tal como, por ejemplo peróxido de hidrógeno o SIBX (ácido yodoxibenoico estabilizado, en un sistema disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, metanol, en un intervalo de temperaturas comprendido entre -30°C y el punto de ebullición del disolvente respectivo, en una realización la reacción se lleva a cabo en el punto de ebullición del disolvente respectivo, para proporcionar compuestos de fórmula general(I).

[0103] Opcionalmente, este tipo de reacciones pueden llevarse a cabo con un aditivo, tal como, por ejemplo, un ácido o una base, tal como, por ejemplo, ácido acético o ácido trifluoroacético, y trietilamina o diispropiletilamina.

[0104] Los productos intermedios de fórmula general(5)podrían convertirse en compuestos de fórmula general(I)calentándolos térmicamente en un disolvente adecuado a temperaturas elevadas, que podrían estar por encima del punto de ebullición de dicho disolvente, tal como, por ejemplo, RT a 250 °C. Estas reacciones podrían llevarse a cabo opcionalmente en recipientes en los que pueda aumentarse la presión, tal como, por ejemplo, en un autoclave. Los productos intermedios de fórmula general(5)también pueden convertirse en compuestos de fórmula general(I)mediante calentamiento térmico en presencia de un catalizador metálico, tal como, por ejemplo, paladio sobre carbón activado, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DMF, DMA, EtOH, MeOH, NMP, a temperaturas elevadas, tales como, por ejemplo, RT a 150 °C. Opcionalmente, estos tipos de reacciones pueden llevarse a cabo con un aditivo, tal como, por ejemplo, un ácido o base, tal como, por ejemplo, ácido acético o ácido trifluoroacético, y trietilamina o diispropiletilamina, para proporcionar compuestos de fórmula general(I)..

[0106]

[0108] Esquema 2: Procedimiento para la preparación de compuestos de fórmula general(4),en los que R<4>, R<5>, R<6>, X, Y, m y n tienen el significado que se da para la fórmula general (I).

[0109] Los compuestos de fórmula general (6) pueden convertirse en compuestos de fórmula general (7) mediante tratamiento con un nucleófilo adecuado, tal como, por ejemplo, aminas, alcoholes, alcóxidos metálicos, azidas, tioles o tiolatos metálicos, en condiciones básicas, neutras, ácidas, catalíticas, en una realización en condiciones básicas, en un disolvente adecuado o utilizando el nucleófilo como disolvente, tal como, por ejemplo, DMF, tetrahidrofurano (THF), en un intervalo de temperatura de -78 °C al punto de ebullición del disolvente respectivo, en una realización la reacción se lleva a cabo -10 °C al punto de ebullición del disolvente respectivo, para proporcionar la fórmula general(7).Tales reacciones de sustitución ya se han descrito anteriormente (Clark et al., J. Med. Chem., 2008, 51, 6631 - 6634; Guo et al., Tetrahedron Letts., 2013, 54, 3233 - 3237; Watterson et al., J. Med. Chem., 2007, 50, 3730 - 3742; Bellale et al., J. Med. Chem., 2014, 57, 6572 - 6582; Klimesova et al., Eur. J. Med. Chem., 1996, 31, 389 - 395; Leroy et al., Synth. Commun., 1997, 27, 2905 - 2916; LaMattina et al., J. Org. Chem., 1981, 46, 4179 - 4182; Beugelmans et al., Tetrahedron, 1983, 39, 4153 - 4162).

[0110] Los compuestos de fórmula general(7)pueden convertirse en compuestos de fórmula general(4)mediante muchos procedimientos reductores conocidos por los expertos en la técnica, utilizando numerosos reactivos y condiciones de reacción diferentes; tales procedimientos y reactivos pueden llevarse a cabo con hidruros metálicos, tales como, por ejemplo, hidruro de litio y aluminio en THF (Bullock et al., J. Am. Chem. Soc., 1956, 78, 490, Wang et al., J. Org. Chem., 2006, 71, 4021 - 3160), o utilizando zinc en ácido acético (Rabe, Chem. Ber., 1913, 46, 1024), o utilizando diborano (De Munno et al., Heterocycles, 1996, 43, 1893 - 1900), o utilizando procedimientos de hidrogenación catalítica, por ejemplo, hidrógeno y paladio sobre carbono en condiciones ácidas (Stokker et al., J. Med. Chem., 1981, 24, 115 - 117; Bertini et al., J. Med. Chem., 2005, 48, 664 - 670), hidrógeno y níquel en condiciones básicas (Walpole et al., J. Med. Chem., 1993, 36, 2362 - 2372, Kuramochi et al., Bioorg. Med. Chem., 2005, 13, 4022 - 4036.)

[0111]

[0114] Esquema 3:Procedimiento para la preparación de compuestos de fórmula general2,en los que R<1a>representa metilo o difluorometilo correspondiente a R<1>en la fórmula general(I)con el significado de metoxi y difluorometoxi. La síntesis de los compuestos9y10se refiere a la sustitución alcoxi del anillo fenilo. Sin embargo, el producto que contiene isotiocianato2y la síntesis del mismo (es decir,10→2o11→2) es general a grupos R<1>de acuerdo con la fórmula general(I)..

[0116] Los compuestos de fórmula general(8),pueden convertirse en compuestos de fórmula general(9),utilizando diversos procedimientos conocidos por los expertos en la técnica. Tales transformaciones podrían consistir, por ejemplo, en alquilatar el alcohol fenólico con reactivos alquilantes, tal como, por ejemplo, haluros de alquilo, sulfonatos de alquilo, en los que estos grupos alquilo pueden contener opcionalmente fluoruros, grupos alcoxilo. Los expertos en la técnica conocen estas reacciones de alquilación utilizando diversos métodos: i) K<2>CO<3>en un disolvente, tal como DMF, acetona o DMFA (véanse las enseñanzas de Muro et al., J. Med. Chem., 2009, 52, 7974 y WO2009/20990 A1); ii) KOH en EtOH (véanse las enseñanzas de Macias et al., J. Agric. Food Chem., 2006, 54, 9843); iii) reacción de Mitsunobu (véanse las enseñanzas de US2006/122168 A1 y EP2151431 A1) para proporcionar productos intermedios de fórmula general(9)..

[0118] Los compuestos de fórmula general(9)pueden convertirse en compuestos de fórmula general(10)por procedimientos de reducción y estos procedimientos son conocidos por los expertos en la técnica. Estas reducciones pueden llevarse a cabo utilizando: i) hidrógeno gaseoso y un catalizador (para Pd/C como catalizador véanse las enseñanzas de Chan et al., J. Am. Chem. Soc., 2011, 133, 2989; para el platino véanse las enseñanzas de Niemann et al., J. Am. Chem Soc., 1941, 63, 2204; para Raney-Nickel véanse las enseñanzas de US2009/253767 A1); ii) hierro y cloruro de amonio (véanse las enseñanzas de Sweeney et al., Bioorg. Med. Chem. Lett., 2008, 18, 4348); iii) ditionito sódico (véanse las enseñanzas de Chong et al., J. Med. Chem., 2012, 55, 10601); iv) zinc y cloruro de amonio (véanse las enseñanzas del documento WO2010/42699 A1) para proporcionar productos intermedios de fórmula general(10).

[0120] Los compuestos de fórmula general(10)pueden convertirse en compuestos de fórmula general(2)utilizando reactivos, tales como, por ejemplo, tiofosgeno, disulfuro de carbono, 1,1"-tiocarbonildi-2(1H)-piridona o 1,1'-tiocarbonildiimidazol, en una realización tiofosgeno, en condiciones básicas, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, diclorometano, cloroformo, acetona, o mezclas bifásicas, tales como, por ejemplo, diclorometano, cloroformo con soluciones básicas acuosas, en otra realización, diclorometano con una solución acuosa saturada de hidrogenocarbonato sódico o carbonato sódico, en un intervalo de temperaturas en un intervalo entre -78 °C y el punto de ebullición del disolvente respectivo, en otra realización la reacción se lleva a cabo de 0°C a temperatura ambiente, para proporcionar compuestos de fórmula general(2).Estas reacciones de transformación ya se han descrito anteriormente (Harris et al., J. Med. Chem., 2005, 48, 1610; Degorce et al., Tetrahedron Lett., 2011, 52, 6719; WO2016/91845 A1; Fairhurst et al., Org. Lett., 2005, 7, 4697; Chaskar et al., Synth. Commun., 2008, 38, 16940; US2004/122237 A1).

[0121]

[0123] Esquema4: Ruta para la preparación de compuestos de fórmula general (I), en la que R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, X, Y, m y n tienen el significado que se da para la fórmula general (I) y PG representa hidrógeno o un grupo protector adecuado,por ejemplo,terc-butoxicarbonilo (Boc).

[0124] Los compuestos similares a los de fórmula general12son conocidos por los expertos en la técnica y sus síntesis se han comunicado en la bibliografía (véanse las enseñanzas de Voss et al., WO2015/22073 A1; Hart et al., WO2016/100166 A1; Anderson et al., J. Med. Chem., 2007, 50, 2647; Vanotti et al., J. Med. Chem., 2008, 51, 487). Los compuestos de fórmula general(12)podrían convertirse en compuestos de fórmula general(13)utilizando procedimientos de bromación estándar que son conocidos por los expertos en la técnica (WO2016/100166 A1). Tales bromaciones podrían llevarse a cabo utilizando un agente bromante, tal como, por ejemplo, N-bromosuccinimida, en un disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, DMF, en un intervalo de temperatura de -78 °C al punto de ebullición de dicho disolvente, en una realización el intervalo de temperatura es de 0°C a RT. Los productos intermedios de fórmula general(13)pueden hacerse reaccionar con anilinas adecuadas, tales como, por ejemplo, 2-difluorometoxianilina, en presencia de una base, tal como, por ejemplo, bis(trimetilsilil)amida de litio (LHMDS), en presencia de un catalizador, tal como, por ejemplo, un ligando adecuado, en una realización 2-(diterc-butilfosfino)-2',4',6'- triisopropil-3,6-dimetoxi-1,1'-bifenilo (tBuBrettPhos) y en presencia de un precatalizador, tal como, por ejemplo, un precatalizador de paladio, en otra realización cloro[2-(diciclohexilfosfino)-3,6-dimetoxi-2',4',6'-trisopropil-1,1'-bifenil][2-(2-aminoetil)fenil]paladio(II) (aducto de éter MTBE BrettPhos-PreCat) en un sistema disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, tetrahidrofurano (THF), a una temperatura en un intervalo entre 0 °C y 200 °C. En una realización, la reacción se lleva a cabo a 80 °C, para obtener compuestos de fórmula general (I). Se han llevado a cabo transformaciones similares, tal y como se ha descrito (WO2015/193339 A1).

[0125]

[0128] Esquema5: Ruta para la preparación de compuestos de fórmula general (I), en la que R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, X, Y, m y n tienen el significado que se da para la fórmula general (I) y PG representa hidrógeno o un grupo protector adecuado, por ejemplo, terc-butoxicarbonilo (Boc).

[0130] Pueden prepararse compuestos similares a los de fórmula general(14)de acuerdo con el procedimiento descrito por el Esquema 1 bajo el uso de 4-(aminometil)-3-hidroxipiridina en lugar del producto intermedio(4).Los productos intermedios de fórmula general(14)pueden convertirse en compuestos de fórmula general(I)por reacción con un alcohol adecuado en condiciones de Mitsunobu (las enseñanzas de Oyo Mitsunobu, Synthesis, 1981, 1-28 o Tsunoda et al., Tetrahedron Lett, 1994, 35, 5081) tal como, por ejemplo, oxetan-3-ilmetanol, en presencia de (tributilfosforanilideno)acetonitrilo o trifenilfosfina junto con azodicarboxilato de diisopropilo en un sistema disolvente adecuado, tal como, por ejemplo, dioxano o THF, a una temperatura comprendida entre la temperatura ambiente y el punto de ebullición de los disolventes respectivos.

[0132] El experto en la técnica sabe que, si un compuesto de partida o intermedio presenta varios centros reactivos, puede ser necesario bloquear temporalmente uno o varios de ellos mediante grupos protectores, con el fin de permitir que la reacción se desarrolle específicamente en el centro reactivo deseado.

[0134] Los compuestos dee acuerdo con la invención se aíslan y purifican de una manera conocida per se, por ejemplo, destilando el disolventein vacuoy recristalizando el residuo obtenido a partir de un disolvente adecuado o sometiéndolo a uno de los procedimientos de purificación habituales, tal como la cromatografía sobre un material de soporte adecuado. Además, puede aplicarse la HPLC preparativa de fase inversa. Los procedimientos de la presente invención que posean una funcionalidad suficientemente básica o ácida en forma de sal, tal como, en el caso de un compuesto de la presente invención que sea suficientemente básico, una sal de trifluoroacetato o formiato, por ejemplo, o, en el caso de un compuesto de la presente invención que sea suficientemente ácido, una sal de amonio, por ejemplo. Una sal de este tipo puede transformarse en su forma de base libre o de ácido libre, respectivamente, por diversos procedimientos conocidos por el experto en la técnica, o utilizarse como sales en ensayos biológicos posteriores. Además, el proceso de secado durante el aislamiento de los compuestos de la presente invención puede no eliminar completamente las trazas de cosolventes, especialmente como el ácido fórmico o el ácido trifluoroacético, para dar solvatos o complejos de inclusión. El experto en la técnica reconocerá qué solvatos o complejos de inclusión son aceptables para su uso en ensayos biológicos posteriores. Debe entenderse que la forma específica (por ejemplo, sal, base libre, ácido libre, solvato, complejo de inclusión) de un compuesto de la presente invención, tal como se ha aislado y descrito en la presente memoria, no es necesariamente la única forma en la que dicho compuesto puede aplicarse a un ensayo biológico para cuantificar la actividad biológica específica.

[0136] Las sales de los compuestos de fórmula (I) de acuerdo con la invención pueden obtenerse disolviendo el compuesto libre en un disolvente adecuado (por ejemplo, una cetona, tal como acetona, metiletilcetona o metilisobutilcetona, un éter, tal como éter dietílico, tetrahidrofurano o dioxano, un hidrocarburo clorado, tal como el cloruro de metileno o el cloroformo, o un alcohol alifático de bajo peso molecular, tal como, metanol, etanol o isopropanol) que contenga el ácido o la base deseados, o al que se añada a continuación el ácido o la base deseados. El ácido o la base pueden emplearse en la preparación de la sal, según se trate de un ácido o una base mono o polibásica y según la sal que se desee, en una relación equimolar o diferente. Las sales se obtienen filtrando, reprecipitando, precipitando con un disolvente no adecuado para la sal o evaporando el disolvente. Las sales obtenidas pueden convertirse en compuestos libres que, a su vez, pueden convertirse en sales. De este modo, las sales farmacéuticamente inaceptables, que pueden obtenerse, por ejemplo, como productos de proceso en la fabricación a escala industrial, pueden convertirse en sales farmacéuticamente aceptables mediante procesos conocidos por el experto en la técnica. so especialmente preferidos los hidrocloruros y el proceso utilizado en la sección de ejemplos.

[0137] Los diastereómeros puros y los enantiómeros puros de los compuestos y sales de acuerdo con la invención pueden obtenerse, por ejemplo, mediante síntesis asimétrica, utilizando compuestos de partida quirales en síntesis o dividiendo mezclas enantioméricas y diasterioméricas obtenidas en síntesis.

[0138] Las mezclas enantioméricas y diastereoméricas pueden dividirse en enantiómeros puros y diastereómeros puros por procedimientos conocidos por el experto en la técnica. En una realización, las mezclas diastereoméricas se separan por cristalización, en particular cristalización fraccionada, o cromatografía. Las mezclas enantioméricas pueden separarse, por ejemplo, formando diastereómeros con un agente auxiliar quiral, resolviendo los diastereómeros obtenidos y eliminando el agente auxiliar quiral. Como agentes auxiliares quirales pueden utilizarse, por ejemplo, ácidos quirales para separar bases enantioméricas, tal como, por ejemplo, el ácido mandélico, y bases quirales para separar ácidos enantioméricos mediante la formación de sales diastereoméricas. Además, los derivados diastereoméricos, tal como los ésteres diastereoméricos, pueden formarse a partir de mezclas enantioméricas de alcoholes o mezclas enantioméricas de ácidos, respectivamente, utilizando ácidos quirales o alcoholes quirales, respectivamente, como agentes auxiliares quirales. Además, pueden utilizarse complejos diastereoméricos o clatratos diastereoméricos para separar mezclas enantioméricas. Alternativamente, las mezclas enantioméricas pueden dividirse utilizando columnas de separación quirales en cromatografía. Otro procedimiento adecuado para el aislamiento de enantiómeros es la separación enzimática.

[0139] Opcionalmente, los compuestos de la fórmula (I) definidos en las reivindicaciones adjuntas pueden convertirse en sus sales u, opcionalmente, las sales de los compuestos de la fórmula (I) pueden convertirse en los compuestos libres. Los procesos correspondientes son habituales para el experto.

[0140] Utilidad comercial

[0141] Como se menciona supra, los compuestos de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, sorprendentemente se han encontrado para inhibir eficazmente EGFR mutante en una célula (por ejemplo, una célula cancerosa) en contacto con el compuesto, induciendo así la muerte celular (por ejemplo, apoptosis) y, por tanto, pueden utilizarse para el tratamiento o profilaxis de enfermedades de crecimiento, proliferación y/o supervivencia celular incontrolada, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas, o enfermedades que cursan con crecimiento, proliferación y/o supervivencia celular incontrolada, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas, o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas, particularmente en las que el crecimiento, proliferación y/o supervivencia celular incontrolados, respuestas inmunitarias celulares inapropiadas, o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas están mediados por EGFR mutante, tales como, por ejemplo, neoplasia benigna y maligna, más específicamente tumores hematológicos, tumores sólidos, y/o metástasis de los mismos,por ejemplo,leucemias y síndrome mielodisplásico, linfomas malignos, tumores de cabeza y cuello, incluyendo tumores cerebrales y metástasis cerebrales, tumores de tórax, incluyendo tumores pulmonares de células no pequeñas y de células pequeñas, tumores gastrointestinales, tumores endocrinos, tumores mamarios y otros tumores ginecológicos, tumores urológicos, incluyendo los de riñón, vejiga y próstata, tumores cutáneos y sarcomas, y/o sus metástasis, especialmente tumores hematológicos, tumores sólidos, y/o metástasis de mama, vejiga, hueso, cerebro, sistema nervioso central y periférico, cuello uterino, colon, glándulas endocrinas (por ejemplo,tiroides y corteza suprarrenal), tumores endocrinos, endometrio, esófago, tumores gastrointestinales, células germinales, riñón, hígado, pulmón, laringe e hipofaringe, mesotelioma, ovario, páncreas, próstata, recto, renal, intestino delgado, tejidos blandos, estómago, piel, testículos, uréter, vagina y vulva, así como las neoplasias malignas, incluyendo los tumores primarios en dichos órganos y los correspondientes tumores secundarios en órganos distantes ("metástasis tumorales"). Los tumores hematológicos pueden ejemplificarse, por ejemplo, con formas agresivas e indolentes de leucemia y linfoma, concretamente la enfermedad no Hodgkins, la leucemia mieloide crónica y aguda (CML/AML), la leucemia linfoblástica aguda (ALL), la enfermedad de Hodgkins, el mieloma múltiple y el linfoma de células T. También se incluyen el síndrome mielodisplásico, la neoplasia de células plasmáticas, los síndromes paraneoplásicos y los cánceres de sitio primario desconocido, así como las neoplasias relacionadas con el SIDA.

[0142] Los compuestos de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, son para usos como se definen en las reivindicaciones adjuntas.

[0143] Por "enfermedad hiperproliferativa" se entiende una enfermedad, tal como el cáncer, asociada a niveles inapropiadamente altos de división celular, niveles inapropiadamente bajos de apoptosis, o ambos. El término "inapropiado" en el contexto de la presente invención, en particular en el contexto de "respuestas inmunitarias celulares inapropiadas, o respuestas inflamatorias celulares inapropiadas", tal como se utiliza en la presente memoria, debe entenderse en el sentido general de una respuesta, que es menor o mayor de lo normal, y que está asociada con, es responsable de, o da lugar a, la patología de dichas enfermedades.

[0144] En realizaciones particulares, el uso es en el tratamiento o profilaxis de enfermedades, especialmente el tratamiento, en el que las enfermedades son tumores hematológicos, tumores sólidos y/o metástasis de los mismos.

[0145] Los trastornos hiperproliferativos son la psoriasis, los queloides y otras hiperplasias que afectan la piel, la hiperplasia benigna de prostata (HBP), los tumores sólidos, tales como los cánceres de mama, vías respiratorias, cerebro, órganos reproductores, tubo digestivo, vías urinarias, ojo, hígado, piel, cabeza y cuello, tiroides, paratiroides y sus metástasis a distancia. Estos trastornos también incluyen linfomas, sarcomas y leucemias. Ejemplos de cáncer de mama son el carcinoma ductal invasivo, el carcinoma lobulillar invasivo, el carcinoma ductal in situ y el carcinoma lobulillarin situ.

[0146] Algunos ejemplos de cánceres de las vías respiratorias son el carcinoma pulmonar de células pequeñas y no pequeñas, así como el adenoma bronquial y el blastoma pleuropulmonar.

[0147] Algunos ejemplos de cánceres cerebrales son el glioma de tronco cerebral e hipoftálmico, el astrocitoma cerebeloso y cerebral, el meduloblastoma, el ependimoma, así como el tumor neuroectodérmico y pineal.

[0148] Los tumores de los órganos reproductores masculinos son el cáncer de próstata y el cáncer de testículo. Los tumores de los órganos reproductores femeninos incluyen son el cáncer de endometrio, cuello uterino, ovario, vagina y vulva, así como el sarcoma de útero.

[0149] Los tumores del tubo digestivo son los cánceres de ano, colon, colorrectal, esófago, vesícula biliar, estómago, páncreas, recto, intestino delgado y glándulas salivales.

[0150] Los tumores del tracto urinario son los cánceres de vejiga, pene, riñón, pelvis renal, uréter, uretra y papila renal humana.

[0151] Los cánceres oculares son el melanoma intraocular y el retinoblastoma.

[0152] Algunos ejemplos de cánceres de hígado son el carcinoma hepatocelular (carcinomas de células hepáticas con o sin variante fibrolamelar), el colangiocarcinoma (carcinoma de vías biliares intrahepáticas) y el colangiocarcinoma hepatocelular mixto.

[0153] Los cánceres de piel son el carcinoma escamoso, el sarcoma de Kaposi, el melanoma maligno, el papiloma sinonasal invertido, el carcinoma escamoso sinonasal asociado al papiloma sinonasal invertido, el cáncer de piel de células de Merkel y el cáncer de piel no melanoma.

[0154] Los cánceres de cabeza y cuello son el cáncer laríngeo, hipofaríngeo, nasofaríngeo, orofaríngeo, el papiloma sinonasal invertido, el carcinoma escamoso sinonasal asociado al papiloma sinonasal invertido, el cáncer de labio y cavidad oral y el escamoso. Los linfomas son el linfoma relacionado con el SIDA, el linfoma no Hodgkin, el linfoma cutáneo de células T, el linfoma de Burkitt, la enfermedad de Hodgkin y el linfoma del sistema nervioso central. Los sarcomas son el sarcoma de partes blandas, el osteosarcoma, el histiocitoma fibroso maligno, el linfosarcoma y el rabdomiosarcoma.

[0155] Las leucemias son la leucemia mieloide aguda, la leucemia linfoblástica aguda, la leucemia linfocítica crónica, la leucemia mielógena crónica y la leucemia de células pilosas.

[0156] Estos trastornos han sido bien caracterizados en humanos, pero también existen con una etiología similar en otros mamíferos, y pueden ser tratados mediante la administración de composiciones farmacéuticas de la presente invención.

[0157] El término "tratar" o "tratamiento", como se indica en este documento, se utiliza convencionalmente, por ejemplo, la gestión o el cuidado de un sujeto con el fin de combatir, aliviar, reducir, aliviar, mejorar la condición de una enfermedad o trastorno, tal como un carcinoma.

[0158] En diversas realizaciones, las enfermedades de dicho procedimiento son tumores hematológicos, tumores sólidos y/o metástasis de los mismos.

[0159] Los compuestos de la presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas, pueden utilizarse en terapia y prevención, es decir, profilaxis, especialmente del crecimiento tumoral y metástasis, especialmente en tumores sólidos de todas las indicaciones y etapas con o sin pretratamiento del crecimiento tumoral.

[0160] Composiciones farmacéuticas de los compuestos de la invención

[0161] Esta invención como se define en las reivindicaciones adjuntas también se refiere a composiciones farmacéuticas que contienen uno o más compuestos de la presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas. Estas composiciones pueden utilizarse para conseguir el efecto farmacológico deseado administrándolas a un paciente que las necesite. Un paciente, a efectos de esta invención, es un mamífero, incluyendo un ser humano, que necesita tratamiento para una afección, trastorno o enfermedad concretos.

[0162] Por lo tanto, la presente invención incluye composiciones farmacéuticas como se definen en las reivindicaciones adjuntas.

[0163] Un portador o auxiliar farmacéuticamente aceptable puede ser un portador no tóxico e inocuo para un paciente en concentraciones coherentes con la actividad eficaz del principio activo, de modo que cualquier efecto secundario atribuible al portador no vicie los efectos beneficiosos del principio activo. Los soportes y auxiliares son todo tipo de aditivos que ayudan a que la composición sea adecuada para su administración.

[0164] Una cantidad farmacéuticamente eficaz de compuesto puede ser aquella cantidad que produce un resultado o ejerce la influencia prevista sobre la afección concreta que se está tratando.

[0165] Los compuestos de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, pueden administrarse con portadores o auxiliares farmacéuticamente aceptables bien conocidos en la técnica utilizando cualquier forma de dosificación unitaria convencional eficaz, incluidas preparaciones de liberación inmediata, lenta y temporizada, por vía oral, parenteral, tópica, nasal, oftálmica, óptica, sublingual, rectal, vaginal y similares.

[0166] Para la administración oral, los compuestos pueden formularse en preparaciones sólidas o líquidas, tales como cápsulas, píldoras, comprimidos, troqueles, pastillas, fundidos, polvos, soluciones, suspensiones o emulsiones, y pueden prepararse de accuerdo con procedimientos conocidos en la técnica para la fabricación de composiciones farmacéuticas. Las formas de dosificación unitarias sólidas pueden ser una cápsula que puede ser del tipo ordinario de gelatina de cáscara dura o blanda que contiene auxiliares, por ejemplo, tensioactivos, lubricantes y cargas inertes, tales como lactosa, sacarosa, fosfato cálcico y almidón de maíz.

[0167] En otra realización, los compuestos de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, pueden comprimirse con bases convencionales para comprimidos, tales como lactosa, sacarosa y almidón de maíz, en combinación con aglutinantes, tales como acacia, almidón de maíz o gelatina, agentes desintegradores destinados a facilitar la ruptura y disolución del comprimido tras su administración, tal como almidón de patata, ácido algínico, almidón de maíz y goma guar, goma tragacanto, acacia, lubricantes destinados a mejorar la fluidez de la granulación del comprimido y evitar la adhesión del material del comprimido a las superficies de las matrices y los punzones, por ejemplo, talco, ácido esteárico o estearato de magnesio, calcio o zinc, tintes, colorantes y aromatizantes, tales como menta, aceite de gaulteria o aroma de cereza, destinados a mejorar las cualidades estéticas de los comprimidos y hacerlos más aceptables para el paciente. Entre los excipientes adecuados para su uso en formas farmacéuticas líquidas orales se incluyen el fosfato dicálcico y diluyentes,tales como agua y alcoholes, por ejemplo, etanol, alcohol bencílico y alcoholes polietilénicos, con o sin adición de un tensioactivo, agente de suspensión o agente emulsionante farmacéuticamente aceptable. Otros materiales diversos pueden estar presentes como recubrimientos o para modificar de otro modo la forma física de la unidad de dosificación. Por ejemplo, los comprimidos, píldoras o cápsulas pueden estar recubiertos de goma laca, azúcar o ambos. Los polvos y gránulos dispersables son adecuados para la preparación de una suspensión acuosa. Proporcionan el ingrediente activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, un agente de suspensión y uno o más conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspensión adecuados son, por ejemplo, los mencionados anteriormente.

[0168] También puede haber excipientes adicionales, por ejemplo, los edulcorantes, aromatizantes y colorantes descritos anteriormente.

[0169] Las composiciones farmacéuticas de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, también pueden presentarse en forma de emulsiones de aceite en agua. La fase oleosa puede ser un aceite vegetal, tal como la parafina líquida o una mezcla de aceites vegetales. Los agentes emulsionantes adecuados pueden ser (1) gomas naturales, tales como la goma acacia y la goma tragacanto, (2) fosfátidos naturales, tales como la soja y la lecitina, (3) ésteres o ésteres parciales derivados de ácidos grasos y anhídridos de hexitol, por ejemplo, monooleato de sorbitán, (4) productos de condensación de dichos ésteres parciales con óxido de etileno, por ejemplo, monooleato de sorbitán polioxietilenado. Las emulsiones también pueden contener agentes edulcorantes y aromatizantes.

[0170] Las suspensiones oleosas pueden formularse suspendiendo el principio activo en un aceite vegetal, tal como, por ejemplo, aceite de arachis, aceite de oliva, aceite de sésamo o aceite de coco, o en un aceite mineral, tal como la parafina líquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, tal como, por ejemplo, cera de abejas, parafina dura o alcohol cetílico. Las suspensiones también pueden contener uno o más conservantes, por ejemplo, p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo; uno o más colorantes; uno o más aromatizantes; y uno o más edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina.

[0171] Los jarabes y elixires pueden formularse con agentes edulcorantes, tales como, por ejemplo, glicerol, propilenglicol, sorbitol o sacarosa. Tales fórmulas pueden contener también un demulcente y un conservante, tales como los parabenos metílico y propílico, y agentes aromatizantes y colorantes.

[0172] Los compuestos de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, también pueden administrarse por vía parenteral, es decir, subcutánea, intravenosa, intraocular, intrasinovial, intramuscular o interperitoneal, como dosificaciones inyectables del compuesto en, por ejemplo, un diluyente fisiológicamente aceptable con un portador farmacéutico que puede ser un líquido estéril o una mezcla de líquidos, tales como agua, solución salina, dextrosa acuosa y soluciones de azúcar relacionadas, un alcohol como etanol, isopropanol o alcohol hexadecilico, glicoles, tales como el propilenglicol o el polietilenglicol, cetales de glicerol, tales como el 2,2-dimetil-1,1-dioxolano-4-metanol, éteres, tales como el poli(etilenglicol) 400, un aceite, un ácido graso, un éster de ácido graso o, un glicérido de ácido graso, o un glicérido de ácido graso acetilado, con o sin la adición de un tensioactivo farmacéuticamente aceptable, tal como un jabón o un detergente, un agente de suspensión, tal como pectina, carbómeros, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa o carboximetilcelulosa, o un agente emulsionante y otros adyuvantes farmacéuticos.

[0173] Los aceites que pueden utilizarse en las formulaciones parenterales de esta invención, tal como se definen en las reivindicaciones adjuntas, son los de origen petrolífero, animal, vegetal o sintético, por ejemplo, aceite de maní, aceite de soja, aceite de sésamo, aceite de semilla de algodón, aceite de maíz, aceite de oliva, vaselina y aceite mineral. Los ácidos grasos adecuados incluyen el ácido oleico, el ácido esteárico, el ácido isosteárico y el ácido mirístico. Ésteres de ácidos grasos adecuados son, por ejemplo, el oleato de etilo y el miristato de isopropilo. Los jabones adecuados incluyen sales de ácidos grasos de metales alcalinos, amonio y trietanolamina, y los detergentes adecuados incluyen detergentes catiónicos, por ejemplo, haluros de dimetildialquilamonio, haluros de alquilpiridinio y acetatos de alquilamina; detergentes aniónicos, por ejemplo, sulfonatos de alquilo, arilo y olefina, sulfatos de alquilo, olefina, éter y monoglicéridos, y sulfosuccinatos; detergentes no iónicos, por ejemplo, óxidos de aminas grasas, alcanolamidas de ácidos grasos y poli(oxietileno-oxipropileno)s o copolímeros de óxido de etileno u óxido de propileno; y detergentes anfóteros, por ejemplo, alquil-beta-aminopropionatos y sales de amonio cuarternario de 2-alquilimidazolina, así como mezclas.

[0174] Las composiciones parenterales de esta invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas, contendrán típicamente desde aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 25 % en peso del ingrediente activo en solución. También pueden utilizarse ventajosamente conservantes y tampones. Para minimizar o eliminar la irritación en el punto de inyección, tales composiciones pueden contener un tensioactivo no iónico que tiene un equilibrio hidrófilolipófilo (HLB) en una realización de aproximadamente 12 a aproximadamente 17. La cantidad de tensioactivo en tal formulación en una realización que se encuentra en el intervalo entre aproximadamente el 5 % y aproximadamente el 15 % en peso. El tensioactivo puede ser un único componente que tenga el HLB mencionado o puede ser una mezcla de dos o más componentes que tengan el HLB deseado.

[0175] Como ejemplos de tensioactivos utilizados en formulaciones parenterales cabe citar la clase de ésteres de ácidos grasos de polietileno sorbitán, por ejemplo, el monooleato de sorbitán y los aductos de alto peso molecular de óxido de etileno con una base hidrófoba, formados por la condensación de óxido de propileno con propilenglicol. Las composiciones farmacéuticas pueden presentarse en forma de suspensiones acuosas inyectables estériles. Tales suspensiones pueden formularse de acuerdo con procedimientos conocidos utilizando agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspensión, tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato sódico, polivinilpirrolidona, goma tragacanto y goma acacia; agentes dispersantes o humectantes que pueden ser un fosfátido natural , tal como la lecitina, un producto de condensación de un óxido de alquileno con un ácido graso, por ejemplo, estearato de polioxietileno, un producto de condensación de óxido de etileno con un alcohol alifático de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenooxicetanol, un producto de condensación de un óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un hexitol, por ejemplo, monooleato de polioxietileno sorbitol, o un producto de condensación de un óxido de etileno con un éster parcial derivado de un ácido graso y un anhídrido de hexitol, por ejemplo, monooleato de polioxietileno sorbitán.

[0176] La preparación inyectable estéril también puede ser una solución o suspensión inyectable estéril en un diluyente o disolvente no tóxico aceptable para la administración parenteral. Los diluyentes y disolventes que pueden emplearse son, por ejemplo, agua, solución de Ringer, soluciones isotónicas de cloruro sódico y soluciones isotónicas de glucosa. Además, los aceites fijos estériles se emplean convencionalmente como disolventes o medios de suspensión. Para ello, puede emplearse cualquier aceite fijo y suave, incluyendo los mono o diglicéridos sintéticos. Además, los ácidos grasos, tales como el ácido oleico pueden utilizarse en la preparación de inyectables. Una composición de la invención como se define en las reivindicaciones adjuntas también puede administrarse en forma de supositorios para la administración rectal del fármaco. Estas composiciones pueden prepararse mezclando el fármaco con un excipiente adecuado que no irrite, que sea sólido a temperaturas normales pero líquido a la temperatura rectal y que, por tanto, se funda en el recto para liberar el fármaco. Tales materiales son, por ejemplo, la manteca de cacao y el polietilenglicol.

[0177] Las formulaciones de liberación controlada para administración parenteral incluyen liposomas, microesferas poliméricas y formulaciones de gel polimérico conocidas en la técnica.

[0178] Puede ser deseable o necesario introducir la composición farmacéutica al paciente a través de un dispositivo de administración mecánica. La construcción y el uso de dispositivos mecánicos de administración para la administración de agentes farmacéuticos son bien conocidos en la técnica. Las técnicas directas de administración, por ejemplo, la administración de un fármaco directamente al cerebro suele implicar la colocación de un catéter de administración de fármacos en el sistema ventricular del paciente para evitar la barrera hematoencefálica. Uno de estos sistemas de administración implantables, utilizado para el transporte de agentes a regiones anatómicas específicas del cuerpo, se describe en la patente de Estados Unidos nº 5,011,472, concedida el 30 de abril de 1991.

[0179] Las composiciones de la invención, tal como se definen en las reivindicaciones adjuntas, también pueden contener otros ingredientes convencionales farmacéuticamente aceptables, generalmente denominados portadores o diluyentes, según sea necesario o se desee. Pueden utilizarse procedimientos convencionales para preparar tales composiciones en formas de dosificación apropiadas.

[0180] Tales ingredientes y procedimientos incluyen los descritos en las siguientes referencias: Powell, M.F. y otros, "Compendium of Excipients for Parenteral Formulations" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1998, 52(5), 238-311; Strickley, R.G "Parenteral Formulations of Small Molecule Therapeutics Marketed in the United States (1999)-Part-1" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1999, 53(6), 324-349; y Nema, S. y otros, "Excipients and Their Use in Injectable Products" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1997, 51(4), 166-171.

[0181] Los ingredientes farmacéuticos de uso común que pueden utilizarse según convenga para formular la composición para su vía de administración prevista incluyen:

[0182] agentes acidificantes (ejemplos: ácido acético, ácido cítrico, ácido fumárico, ácido clorhídrico, ácido nítrico); agentes alcalinizantes (ejemplos: solución de amoníaco, carbonato amónico, dietanolamina, monoetanolamina, hidróxido potásico, borato sódico, carbonato sódico, hidróxido sódico, trietanolamina, trolamina); adsorbentes (ejemplos: celulosa en polvo y carbón activado);

[0183] propulsores de aerosoles (ejemplos: dióxido de carbono, CCl<2>F<2>, F<2>ClC-CClF<2>y CClF<3>);

[0184] agentes de desplazamiento del aire (ejemplos: nitrógeno y argón);

[0185] conservantes antifúngicos (ejemplos: ácido benzoico, butilparabeno, etilparabeno, metilparabeno, propilparabeno, benzoato sódico);

[0186] conservantes antimicrobianos (ejemplos: cloruro de benzalconio, cloruro de bencetonio, alcohol bencílico, cloruro de cetilpiridinio, clorobutanol, fenol, alcohol feniletílico, nitrato fenilmercúrico y timerosal);

[0187] antioxidantes (ejemplos: ácido ascórbico, palmitato de ascorbilo, butilhidroxianisol, butilhidroxitolueno, ácido hipofosforoso, monotioglicerol, galato de propilo, ascorbato sódico, bisulfito sódico, sulfoxilato de formaldehído sódico, metabisulfito sódico);

[0188] materiales aglutinantes (ejemplos: polímeros en bloque, caucho natural y sintético, poliacrilatos, poliuretanos, siliconas, polisiloxanos y copolímeros de estireno-butadieno); agentes tamponantes (ejemplos: metafosfato potásico, fosfato dipotásico, acetato sódico, citrato sódico anhidro y citrato sódico dihidrato);

[0189] agentes portadores (ejemplos: jarabe de acacia, jarabe aromático, elixir aromático, jarabe de cereza, jarabe de cacao, jarabe de naranja, jarabe, aceite de maíz, aceite mineral, aceite de maní, aceite de sésamo, cloruro sódico bacteriostático inyectable y agua bacteriostática inyectable);

[0190] agentes quelantes (ejemplos: edetato disódico y ácido edético);

[0191] colorantes (ejemplos: FD&C Rojo n.º 3, FD&C Rojo n.º 20, FD&C Amarillo n.º 6, FD&C Azul n.º 2, D&C Verde n.º 5, D&C Naranja n.º 5, D&C Rojo n.º 8, caramelo y rojo óxido férrico);

[0192] agentes clarificantes (ejemplos: bentonita);

[0193] agentes emulsionantes (ejemplos: acacia, cetomacrogol, alcohol cetílico, monoestearato de glicerilo, lecitina, monooleato de sorbitán, monoestearato de polioxietileno 50);

[0194] agentes encapsulantes (ejemplos: gelatina y ftalato de acetato de celulosa);

[0195] saborizantes (por ejemplo, aceite de anís, aceite de canela, cacao, mentol, aceite de naranja, aceite de menta y vainillina);

[0196] humectantes (ejemplos: glicerol, propilenglicol y sorbitol);

[0197] agentes levigantes (ejemplos: aceite mineral y glicerina);

[0198] aceites (ejemplos: aceite de arachis, aceite mineral, aceite de oliva, aceite de maní, aceite de sésamo y aceite vegetal); bases de pomada (ejemplos: lanolina, pomada hidrófila, pomada de polietilenglicol, vaselina, vaselina hidrófila, pomada blanca, pomada amarilla y pomada de agua de rosas);

[0199] potenciadores de la penetración (administración transdérmica) (ejemplos: alcoholes monohidroxi o polihidroxi, alcoholes mono o polivalentes, alcoholes grasos saturados o insaturados, ésteres grasos saturados o insaturados, ácidos dicarboxílicos saturados o insaturados, aceites esenciales, derivados fosfatidílicos, cefalina, terpenos, amidas, éteres, cetonas y ureas);

[0200] plastificantes (ejemplos: ftalato de dietilo y glicerol);

[0201] disolventes (ejemplos: etanol, aceite de maíz, aceite de semilla de algodón, glicerol, isopropanol, aceite mineral, ácido oleico, aceite de maní, agua purificada, agua para inyección, agua estéril para inyección y agua estéril para irrigación);

[0202] agentes endurecedores (ejemplos: alcohol cetílico, cera de ésteres cetílicos, cera microcristalina, parafina, alcohol estearílico, cera blanca y cera amarilla);

[0203] bases de supositorio (ejemplos: manteca de cacao y polietilenglicoles (mezclas));

[0204] surfactantes (ejemplos: cloruro de benzalconio, nonoxinol 10, oxtoxinol 9, polisorbato 80, lauril sulfato sódico y monopalmitato de sorbitán);

[0205] agentes de suspensión (ejemplos: agar, bentonita, carbómeros, carboximetilcelulosa sódica, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, caolín, metilcelulosa, tragacanto y veegum);

[0206] Agentes edulcorantes (ejemplos: aspartamo, dextrosa, glicerol, manitol, propilenglicol, sacarina sódica, sorbitol y sacarosa);

[0207] antiadherentes de comprimidos (ejemplos: estearato de magnesio y talco);

[0208] aglutinantes de comprimidos (ejemplos: acacia, ácido algínico, carboximetilcelulosa sódica, azúcar comprimible, etilcelulosa, gelatina, glucosa líquida, metilcelulosa, polivinilpirrolidona no reticulada y almidón pregelatinizado); Diluyentes de comprimidos y cápsulas (ejemplos: fosfato cálcico dibásico, caolín, lactosa, manitol, celulosa microcristalina, celulosa en polvo, carbonato cálcico precipitado, carbonato sódico, fosfato sódico, sorbitol y almidón);

[0209] agentes de recubrimiento de comprimidos (ejemplos: glucosa líquida, hidroxietilcelulosa, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, metilcelulosa, etilcelulosa, ftalato de acetato de celulosa y goma laca); excipientes de compresión directa de comprimidos (por ejemplo, fosfato cálcico dibásico);

[0210] desintegrantes de comprimidos (ejemplos: ácido algínico, carboximetilcelulosa cálcica, celulosa microcristalina, polacrillina potásica, polivinilpirrolidona reticulada, alginato sódico, almidón glicolato sódico y almidón); deslizantes para comprimidos (ejemplos: sílice coloidal, almidón de maíz y talco);

[0211] lubricantes para comprimidos (ejemplos: estearato de calcio, estearato de magnesio, aceite mineral, ácido esteárico y estearato de zinc);

[0212] Opacificantes de comprimidos/cápsulas (ejemplos: dióxido de titanio);

[0213] agentes abrillantadores de comprimidos (ejemplos: la cera de carnuba y la cera blanca);

[0214] agentes espesantes (ejemplos: cera de abejas, alcohol cetílico y parafina);

[0215] agentes de tonicidad (ejemplos: dextrosa y cloruro sódico);

[0216] agentes que aumentan la viscosidad (por ejemplo, ácido algínico, bentonita, carbómeros, carboximetilcelulosa sódica, metilcelulosa, polivinilpirrolidona, alginato de sodio y tragacanto); y

[0217] agentes humectantes (ejemplos: heptadecaetileno oxicetanol, lecitinas, monooleato de sorbitol, monooleato de sorbitol polioxietilenado y estearato de polioxietileno).

[0218] Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas, pueden ilustrarse como sigue:

[0219] Solución i.v. estéril: Se puede hacer una solución de 5 mg/ml del compuesto deseado de esta invención utilizando agua inyectable estéril, y se ajusta el pH si es necesario. La solución se diluye para su administración a 1 - 2 mg/ml con dextrosa estéril al 5 % y se administra en perfusión i.v. durante aproximadamente 60 minutos.

[0220] Polvo liofilizado para administración i.v: Puede prepararse una preparación estéril con (i) 100 - 1000 mg del compuesto deseado de esta invención como polvo liofilizado, (ii) 32- 327 mg/ml de citrato sódico, y (iii) 300 - 3000 mg de Dextrano 40. La formulación se reconstituye con solución salina inyectable estéril o dextrosa al 5 % hasta una concentración de 10 a 20 mg/ml, que se diluye de nuevo con solución salina o dextrosa al 5 % hasta 0,2 - 0,4 mg/ml, y se administra en bolo intravenoso o por infusión intravenosa durante 15 - 60 minutos.

[0221] Suspensión intramuscular: Puede prepararse la siguiente solución o suspensión, para inyección intramuscular: 50 mg/ml del compuesto deseado, insoluble en agua, de esta invención

[0222] 5 mg/ml de carboximetilcelulosa sódica

[0223] 4 mg/ml TWEEN 80

[0224] 9 mg/ml de cloruro sódico

[0225] 9 mg/ml de alcohol bencílico

[0226] Cápsulas de cáscara dura: Se prepara un gran número de cápsulas unitarias rellenando cápsulas galantinas duras estándar de dos piezas, cada una con 100 mg de principio activo en polvo, 150 mg de lactosa, 50 mg de celulosa y 6 mg de estearato de magnesio.

[0227] Cápsulas de gelatina blanda: Se prepara una mezcla de principio activo en un aceite digerible, tal como aceite de soja, aceite de semilla de algodón o aceite de oliva y se inyecta mediante una bomba de desplazamiento positivo en gelatina fundida para formar cápsulas de gelatina blanda que contienen 100 mg del principio activo. Las cápsulas se lavan y se secan. El principio activo puede disolverse en una mezcla de polietilenglicol, glicerina y sorbitol para preparar una mezcla medicamentosa miscible en agua.

[0228] Comprimidos: Un gran número de comprimidos se preparan por procedimientos convencionales de modo que la unidad de dosificación es de 100 mg de principio activo, 0,2 mg. de dióxido de silicio coloidal, 5 mg de estearato de magnesio, 275 mg de celulosa microcristalina, 11 mg. de almidón y 98,8 mg de lactosa. Pueden aplicarse recubrimientos acuosos y no acuosos adecuados para aumentar la palatabilidad, mejorar la elegancia y la estabilidad o retrasar la absorción.

[0229] Comprimidos/cápsulas de liberación inmediata: Se trata de formas de dosificación orales sólidas fabricadas mediante procesos convencionales y novedosos. Estas unidades se toman por vía oral sin agua para una disolución y administración inmediatas del medicamento. El principio activo se mezcla en un líquido que contiene ingredientes, tales como azúcar, gelatina, pectina y edulcorantes. Estos líquidos se solidifican en comprimidos sólidos o cápsulas mediante técnicas de liofilización y extracción en estado sólido. Los compuestos farmacológicos pueden comprimirse con azúcares y polímeros viscoelásticos y termoelásticos o componentes efervescentes para producir matrices porosas destinadas a la liberación inmediata, sin necesidad de agua.

[0230] Dosis y administración

[0231] Basándose en técnicas de laboratorio estándar conocidas para evaluar compuestos útiles para el tratamiento de trastornos hiperproliferativos y trastornos angiogénicos, mediante pruebas de toxicidad estándar y mediante ensayos farmacológicos estándar para la determinación del tratamiento de las afecciones identificadas anteriormente en mamíferos, y mediante la comparación de estos resultados con los resultados de medicamentos conocidos que se utilizan para tratar estas afecciones, puede determinarse fácilmente la dosificación eficaz de los compuestos de la presente invención para el tratamiento de cada indicación deseada. La cantidad de principio activo que debe administrarse en el tratamiento de una de estas afecciones puede variar ampliamente en función de consideraciones como el compuesto y la unidad de dosificación concretos empleados, el modo de administración, el periodo de tratamiento, la edad y el sexo del paciente tratado, y la naturaleza y el alcance de la afección tratada.

[0232] La cantidad total del principio activo a administrar se encontrará generalmente entre aproximadamente 0,001 mg/kg y aproximadamente 200 mg/kg de peso corporal al día, y preferiblemente entre aproximadamente 0,01 mg/kg y aproximadamente 20 mg/kg de peso corporal al día. Las pautas de dosificación clínicamente útiles oscilarán entre una o tres veces al día y una vez cada cuatro semanas. Además, es posible que las "vacaciones farmacológicas", en las que un paciente no recibe la dosis de un fármaco durante un determinado periodo de tiempo, sean beneficiosas para el equilibrio general entre el efecto farmacológico y la tolerabilidad. Es posible que una dosis unitaria contenga desde aproximadamente 0,5 mg hasta aproximadamente 1500 mg de principio activo, y puede administrarse una o más veces al día o menos de una vez al día. La dosificación media diaria para la administración por inyección, incluyendo las inyecciones intravenosas, intramusculares, subcutáneas y parenterales, y el uso de técnicas de infusión será, en otras realizaciones, de 0,01 a 200 mg/kg de peso corporal total. En determinadas realizaciones,la pauta posológica rectal media diaria será en particular de 0,01 a 200 mg/kg de peso corporal total. En otras realizaciones, la pauta posológica vaginal media diaria será de 0,01 a 200 mg/kg de peso corporal total. En otras realizaciones, la pauta posológica tópica media diaria será de 0,1 a 200 mg administrados entre una y cuatro veces al día. En otras realizaciones, la concentración transdérmica será la necesaria para mantener una dosis diaria de 0,01 a 200 mg/kg. En otras realizaciones, la pauta posológica media diaria por inhalación será de 0,01 a 100 mg/kg de peso corporal total.

[0233] Por supuesto, el régimen de dosificación inicial y continuado específico para cada paciente variará en función de la naturaleza y gravedad de la afección, según lo determine el médico encargado del diagnóstico, la actividad del compuesto específico empleado, la edad y el estado general del paciente, el momento de la administración, la vía de administración, la tasa de excreción del fármaco, las combinaciones de fármacos y otros factores similares. El modo de tratamiento deseado y el número de dosis de un compuesto de la presente invención o de una sal o éster farmacéuticamente aceptable o de una composición del mismo pueden ser determinados por los expertos en la técnica mediante pruebas de tratamiento convencionales.

[0234] Terapias combinadas

[0235] Los compuestos de la presente invención, como se definen en las reivindicaciones adjuntas pueden administrarse como único agente farmacéutico o en combinación con uno o más principios activos farmacéuticos cuando la combinación no cause efectos adversos inaceptables. Estos agentes farmacéuticos combinados pueden ser otros agentes que tienen efectos antiproliferativos, tales como, por ejemplo, para el tratamiento de tumores hematológicos, tumores sólidos y/o metástasis de los mismos y/o agentes para el tratamiento de efectos secundarios no deseados. La presente invención se refiere también a tales combinaciones.

[0236] Otros agentes anti-hiper-proliferativos adecuados para su uso con la composición de la invención son aquellos compuestos reconocidos para ser utilizados en el tratamiento de enfermedades neoplásicas en Goodman y Gilman The Pharmacological Basis of Therapeutics (Novena Edición), editor Molinoff et al., publ. por McGraw-Hill, páginas 1225-1287, (1996), especialmente (quimioterapéuticos) agentes anti-cáncer como se define supra. La combinación puede ser una combinación no fija o una combinación de dosis fija, según el caso.

[0237] Los procedimientos de ensayo de una propiedad farmacológica o farmacéutica concreta son bien conocidos por los expertos en la técnica.

[0238] Los experimentos de prueba a modo de ejemplo descritos en la presente memoria sirven para ilustrar la presente invención, como se define en las reivindicaciones adjuntas.

[0239] Los siguientes ejemplos ilustran la invención con mayor detalle. Otros compuestos de acuerdo con la invención, cuya preparación no se describe explícitamente, pueden prepararse de manera análoga.

[0240] El término "de acuerdo con" dentro de la sección experimental se utiliza en el sentido de que el procedimiento al que se hace referencia debe utilizarse "de forma análoga a".

[0241] SECCIÓN EXPERIMENTAL

[0242] Los nombres químicos se generaron utilizando el software ACD/Name de ACD/Labs. En algunos casos se utilizaron nombres generalmente aceptados de reactivos disponibles en el mercado en lugar de los nombres químicos generados mediante ACD/Name.

[0243] En la siguiente Tabla 1 se enumeran las abreviaturas utilizadas en este apartado y en la sección de Ejemplos en la medida en que no se expliquen en el cuerpo del texto. Otras abreviaturas tienen sus significados habitualesperse para el experto.

[0244] Tabla 1:Abreviaturas

[0245]

[0246]

[0248] Otras abreviaturas tienen sus significados habitualesper separa el experto en la técnica.

[0249] Los diversos aspectos de la invención descritos en la presente solicitud se ilustran mediante los siguientes ejemplos. Los ejemplos de experimentos descritos en la presente memoria sirven para ilustrar la presente invención.

[0250] SECCIÓN EXPERIMENTAL - PARTE GENERAL

[0251] Todos los reactivos, cuya síntesis no se describe en la parte experimental fueron adquiridos comercialmente, o son compuestos conocidos o pueden formarse a partir de compuestos conocidos mediante procedimientos conocidos por un experto en la técnica.

[0252] Los compuestos y productos intermedios de ejemplo producidos de acuerdo con los procedimientos de la invención pueden requerir purificación. La purificación de compuestos orgánicos es bien conocida por el experto en la técnica y puede haber varias formas de purificar el mismo compuesto. En algunos casos, puede no ser necesaria ninguna purificación. En algunos casos, los compuestos pueden purificarse por cristalización. En algunos casos, las impurezas pueden eliminarse mediante trituración con un disolvente adecuado. En algunos casos, los compuestos pueden purificarse mediante cromatografía, en particular cromatografía en columna flash, utilizando, por ejemplo, cartuchos de gel de sílice preempaquetados, por ejemplo, Biotage SNAP cartidges KP-Sil<®>o KP-NH<®>en combinación con un sistema autopurificador Biotage (SP4<®>o Isolera Four<®>) y eluyentes, tales como gradientes de acetato de hexano/etilo o DCM/metanol. En la cromatografía en columna flash, puede utilizarse gel de sílice no modificado ("normal"), así como gel de sílice funcionalizado con aminofases. Si en la sección experimental se hace referencia a la cromatografía en columna flash o a la cromatografía flash sin especificar una fase estacionaria, se utilizó gel de sílice normal.

[0253] En algunos casos, los compuestos pueden purificarse mediante HPLC preparativa utilizando, por ejemplo, un sistema autopurificador de Waters equipado con un detector de matriz de diodos y/o un espectrómetro de masas de ionización por electrospray en línea en combinación con una columna de fase inversa preempaquetada adecuada y eluyentes, tales como gradientes de agua y acetonitrilo que pueden contener aditivos, tales como ácido trifluoroacético, ácido fórmico o amoníaco acuoso.

[0254] En algunos casos, los procedimientos de purificación descritos anteriormente pueden proporcionar aquellos compuestos de la presente invención que posean una funcionalidad suficientemente básica o ácida en forma de sal, tal como, en el caso de un compuesto de la presente invención que sea suficientemente básico, una sal de trifluoroacetato o formiato, por ejemplo, o, en el caso de un compuesto de la presente invención que sea suficientemente ácido, una sal de amonio, por ejemplo. Una sal de este tipo puede transformarse en su forma de base libre o de ácido libre, respectivamente, por diversos procedimientos conocidos por el experto en la técnica, o utilizarse como sales en ensayos biológicos posteriores. Debe entenderse que la forma específica (por ejemplo, sal, base libre) de un compuesto de la presente invención, como se ha aislado y descrito en la presente memoria, no es necesariamente la única forma en la que dicho compuesto puede aplicarse a un ensayo biológico para cuantificar la actividad biológica específica.

[0255] Métodos analíticos de LC-MS:

[0256] Método 1:

[0257] Instrumento: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Columna: Acquity UPLC BEH C181,750×2,1 mm; eluyente A: agua ácido fórmico 0,1 vol % (99%), eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 0-1,6 min, 1-99 % B, 1,6-2,0 min 99% B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 60 °C; escaneo DAD: 210-400 nm.

[0258] Método 2:

[0259] Instrumento: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Columna: Acquity UPLC BEH C181,750x2,1mm; eluyente A: agua amoníaco acuoso 0,2 vol % (32 %), eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 0-1,6 min, 1-99 % B, 1,6-2,0 min 99% B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 60 °C; escaneo DAD: 210-400 nm.

[0260] Método 3:

[0261] Instrumento: Sistema Waters Acquity UPLC H-Class; Columna: Acquity CSH C181,7 µm 2,1x50 mm; eluyente A: agua ácido fórmico 0,1 vol. %, eluyente B: acetonitrilo, eluyente C: amoníaco 2 vol. % (28 %) en agua, eluyente D: ácido fórmico en agua 2 vol. %; gradiente: 0-1,2 min 2-95 % B con A y 5 % D a lo largo, 1,2-1,4 min.95 % B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 40 °C; PDA: 215-350 nm.

[0262] Método 4:

[0263] Instrumento: Sistema Waters Acquity UPLC H-Class; Columna: XBridge BEH C182,5 µm 2,1 x 50 mm; eluyente A: agua ácido fórmico 0,1 vol %, eluyente B: acetonitrilo, eluyente C: amoníaco 2 vol % (28%) en agua, eluyente D: ácido fórmico en agua 2 vol %; gradiente: 0-1,2 min 2-95 % B con A y 5 % C a lo largo, 1,2-1,4 min 95 % B; flujo 0,8 ml/min; temperatura: 40 °C; PDA: 215-350 nm.

[0264] Método 5:

[0265] Instrumento MS: SHIMADZU LCMS-2020; Instrumento HPLC: LabSolution Versión 5,72; Columna: Kinetex@5um EVO C18 30 x 2,1mm; eluyente A: TFA en agua 0,0375 % (v/v), eluyente B: TFA en acetonitrilo 0,01875 %: gradiente: 0,0 min 0 % B → 3,00 min 60 % B → 3,50 min 60 % B → 3,51 min 0 % B → 4,00 min 0 % B; caudal: 0,8 ml/mezcla; temperatura del horno: 50 °C; detección UV: 220 nm y 254 nm.

[0266] Método 6:

[0267] Instrumento: Agilent 1290 UPLCMS 6230 TOF; Säule: BEH C 18 1,7 µm, 50x2,1mm; Eluyente A: Wasser Ameisensäure 0,05 % (99 %); Eluyente B: Acetonitril Ameisensäure 0,05 % (99 %); Gradiente: 0-1,7 min 2-90 % B, 1,7-2,0 min 90 % B; flujo 1,2 ml/min; temperatura: 60 °C; escaneo DAD: 190-400 nm.

[0268] Métodos preparativos de LC-MS:

[0269] Método 7:

[0270] Instrumento: Waters Autopurification MS SingleQuad; Columna: Waters XBrigde C185µ 100x30mm; eluyente A: agua amoníaco acuoso 0,2 vol. % (32 %), eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 0-5,5 minutos 5-100 % B; flujo 70 ml/minuto; temperatura: 25 °C; escaneo DAD: 210-400 nm

[0271] Método 8:

[0272] Instrumento: Waters Autopurification MS SingleQuad; Columna: Waters XBrigde C185µ 50x50mm; eluyente A: agua ácido fórmico 0,1 vol%, eluyente B: metanol; gradiente: 0-0,50 min.20 % B; caudal 50 a 100 ml/min, 0,50-8,00 min.20 - 60 % B; caudal 100 ml/min, temperatura: 25 °C; escaneo DAD: 210-400 nm

[0273] Método 9:

[0274] Instrumento: Labomatic HD-5000, cabezal de bomba HDK-280, módulo de gradiente NDB-1000, colector de fracciones Labomatic Labocol Vario 2000, detector UV Knauer Azura UVD 2.1S, software Prepcon 5. Columna: Chromatorex C1810µM 120x30 mm; Eluyente A: agua ácido fórmico 0,1%; Eluyente B: acetonitrilo; gradiente: dado para productos intermedios y ejemplos, velocidad 150 ml/min, temperatura 25 °C.; UV 220 nm.

[0275] Método 10:

[0276] Instrumento: Labomatic HD-5000, cabezal de bomba HDK-280, módulo de gradiente NDB-1000, colector de fracciones Labomatic Labocol Vario 2000, detector UV Knauer Azura UVD 2.1S, software Prepcon 5. Columna: Chromatorex C1810µM 120x30 mm; Eluyente A: amoníaco en agua 0,1 %; Eluyente B: acetonitrilo; gradiente: dado para productos intermedios y ejemplos, tasa150 ml/min, temperatura 25°C.; UV 250 nm

[0277] Método 11:

[0278] Instrumento: Labomatic HD-5000, cabezal de bomba HDK-280, módulo de gradiente NDB-1000, colector de fracciones Labomatic Labocol Vario 2000, detector UV Knauer Azura UVD 2.1S, software Prepcon 5. Columna: Chromatorex C1810µM 300x50 mm; Eluyente A: amoníaco en agua 0,1 %; Eluyente B: acetonitrilo; gradiente: dado para productos intermedios y ejemplos, velocidad 250 ml/min, temperatura 25 °C.; 250 nm UVEspectros de NMR:

[0279] Las multiplicidades de las señales de protones en los espectros de<1>H NMR que se dan en los párrafos siguientes reflejan la forma de señal observada y no tienen en cuenta ningún fenómeno de señal de orden superior. Por regla general, los datos de desplazamiento químico se refieren al centro de la señal en cuestión. En el caso de multipletes anchos, se especifica un ntervalo. Las señales ocultas por el disolvente o el agua se asignaron de forma provisional o no figuran en la lista. Las señales fuertemente ensanchadas -por ejemplo, las causadas por la rotación rápida de las fracciones moleculares o por el intercambio de protones- también se han asignado de forma provisional (a menudo se refieren multipletes amplios o singletes amplios) o no se muestran.

[0280] Los datos de<1>H-NMR de los compuestos seleccionados se enumeran en forma de la lista de picos<1>H-NMR. Para cada pico de señal se indica el valor δ en ppm, seguido de la intensidad de la señal, entre paréntesis. Los pares valor δ-intensidad de señal de diferentes picos están separados por comas. Por lo tanto, una lista de picos se describe mediante la forma general: δ<1>(intensidad<1>), δ<2>(intensidad<2>), ... , δ<i>(intensidad<i>), ... , δ<n>(intensidad<n>). La intensidad de una señal aguda se correlaciona con la altura (en cm) de la señal en un espectro de NMR impreso. Cuando se comparan con otras señales, estos datos pueden correlacionarse con las relaciones reales de las intensidades de las señales. En el caso de señales amplias, se muestran más de un pico, o el centro de la señal junto con su intensidad relativa, en comparación con la señal más intensa que aparece en el espectro. Una lista de picos de<1>H-NMR es similar a una lectura clásica de<1>H-NMR y, por tanto, suele contener todos los picos enumerados en una interpretación clásica de NMR. Además, de forma similar a las impresiones clásicas de<1>H-NMR, las listas de picos pueden mostrar señales de disolventes, señales derivadas de estereoisómeros del compuesto diana concreto, picos de impurezas, picos satélites de<13>C y/o bandas laterales giratorias. Los picos de estereoisómeros, y/o los picos de impurezas se muestran típicamente con una intensidad menor en comparación con los picos del compuesto diana (por ejemplo, con una pureza > 90 %). Tales estereoisómeros y/o impurezas pueden ser típicos del proceso de fabricación concreto y, por tanto, sus picos pueden ayudar a identificar una reproducción del proceso de fabricación sobre la base de "huellas dactilares de subproductos". Un experto que calcule los picos del compuesto diana mediante procedimientos conocidos (MestReC, simulación ACD, o mediante el uso de valores de expectativa evaluados empíricamente), puede aislar los picos del compuesto diana según sea necesario, utilizando opcionalmente filtros de intensidad adicionales. Esta operación sería similar a la selección de picos en la interpretación clásica de<1>H-NMR. En la publicación "Citation of NMR Peaklist Data within Patent Applications" puede encontrarse una descripción detallada de la comunicación de datos de NMR en forma de listas de picos (cf. http://www.researchdisclosure.com/searching-disclosures, Research Disclosure Database Number 605005, 2014, 01 ago 2014). En la rutina de recogida de picos, descrita en la base de datos de divulgación de la investigación número 605005, el parámetro "MinimumHeight" puede ajustarse entre el 1 % y el 4 %. Sin embargo, dependiendo de la estructura química y/o dependiendo de la concentración del compuesto medido puede ser razonable establecer el parámetro "Altura mínima" <1 %.

[0281] Síntesis de compuestos de productos intermedios 1

[0282] Productos intermedios 1-1

[0283] 3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridina-4-carbonitrilo

[0285]

[0287] 3-cloropiridina-4-carbonitrilo(CAS 68325-15-5, 1,40 g, 10,1 mmol) y (1,4-dioxan-2-il)metanol (CAS 143669-41-4, 1,31 g, 11,1 mmol) se disolvieron en THF (45 ml). Se añadió terc-butóxido potásico (1,03 g, 9,14 mmol) y la mezcla se agitó durante 1 h a 0°C. La mezcla de reacción se diluyó lentamente con solución de cloruro amónico sat. y se extrajo con EtOAc (3x). La fase orgánica se lavó con salmuera y se filtró sobre un filtro hidrófugo, se concentró a presión reducida y se purificó mediante cromatografía flash (sílice, gradiente hexano / EtOAc 0 - 100 %; gradiente EtOAc / EtOH 0-35 %) para dar 1,18 g del compuesto del título (rendimiento del 53 %).

[0289] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 8,72 (s, 1H), 8,23 - 8,46 (m, 1H), 7,68 - 7,86 (m, 1H), 4,32 (d, 2H), 3,40 -3,99 (m, 7H).

[0290] LC-MS (procedimiento 2): R<t>= 0,77 min; MS (ESlpos): m/z = 221 [M+H]<+>

[0291] Productos intermedios 1-2

[0292] 3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridina-4-carbonitrilo

[0293]

[0295] A una disolución de [(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metanol (CAS 1620510-50-0, 1,00 g, 7,62 mmol) en THF (20 ml) a 0°C se añadió lentamente hidruro sódico (366 mg, 9,15 mmol, pureza del 60 %). La mezcla de reacción se agitó durante 3 h a RT. Se añadió 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 1,06 g, 7,62 mmol) en THF (10 ml) y la mezcla se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se apagó con 1N HCl hasta pH = 7. La suspensión se filtró a través de un papel de filtro hidrófobo y la torta de filtración se lavó con EtOAc. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante cromatografía flash (sílice básica, gradiente hexano / EtOAc 0-100 %) para dar 355 mg del compuesto del título (rendimiento del 20 %).

[0297] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 8,75 (s, 1H), 8,40 (d, 1H), 7,78 (d, 1H), 4,44 (dd, 1H), 4,23 (dd, 1H), 3,87 (dd, 1H), 3,71 (dt, 1H), 3,50 (td, 1H), 3,35 - 3,41 (m, 1H), 2,65 - 2,71 (m, 1H), 2,45 - 2,49 (m, 1H), 2,29 - 2,35 (m, 3H), 2,24 (ddd, 1H).

[0298] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,72 min; MS (ESlpos): m/z = 234,2 [M+H]<+>

[0299] Productos intermedios 1-3

[0300] 3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridina-4-carbonitrilo

[0302]

[0304] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-1 con 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 764 mg, 5,51 mmol) y [4-metilmorfolin-2-il]metanol (CAS 40987-46-0, 940 mg, 7,17 mmol) como materiales de partida; se prepararon 836 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 59 %) del compuesto del título.

[0306] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,893 (0,97), 1,920 (1,44), 1,947 (1,07), 1,954 (0,50), 1,962 (0,54), 1,983 (1,01), 1,991 (1,03), 2,011 (0,58), 2,019 (0,52), 2,197 (16,00), 2,518 (0,41), 2,589 (0,80), 2,593 (0,82), 2,617 (0,73), 2,621 (0,74), 2,766 (0,66), 2,770 (0,95), 2,794 (0,63), 2,798 (0,89), 3,513 (0,60), 3,520 (0,73), 3,541 (1,36), 3,547 (1,39), 3,570 (0,80), 3,575 (0,67), 3,793 (0,74), 3,796 (1,10), 3,801 (1,12), 3,805 (0,92), 3,808 (0,85), 3,814 (0,79), 3,821 (1,18), 3,826 (1,18), 3,833 (1,27), 3,839 (0,66), 4,316 (5,03), 4,329 (4,72), 7,772 (2,40), 7,774 (2,63), 7,785 (2,49), 8,381 (3,41), 8,393 (3,28), 8,714 (4,32).

[0307] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 234,2 [M+H]<+>

[0308] Productos intermedios 1-4

[0309] 3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridina-4-carbonitrilo

[0311]

[0313] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-2 con 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 1,00 g, 7,24 mmol) y [(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metanol (1,00 g, pureza del 95 %, 7,24 mmol; CAS 1620510-51-1) como materiales de partida; se prepararon 823 mg (pureza del 99 %, rendimiento del 48 %) del compuesto del título.

[0315] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,211 (0,52), 2,219 (0,64), 2,236 (0,66), 2,240 (0,68), 2,245 (0,68), 2,249 (0,72), 2,266 (0,69), 2,274 (0,63), 2,306 (16,00), 2,472 (0,48), 2,475 (0,50), 2,518 (1,22), 2,522 (0,71), 2,658 (0,56), 2,664 (1,27), 2,671 (0,67), 2,687 (0,47), 2,694 (0,96), 2,701 (0,47), 3,356 (1,17), 3,378 (1,16), 3,384 (1,30), 3,406 (1,20), 3,472 (0,50), 3,478 (0,58), 3,499 (0,80), 3,506 (0,81), 3,525 (0,71), 3,532 (0,61), 3,685 (0,44), 3,692 (0,86), 3,698 (0,45), 3,720 (0,66), 3,856 (0,80), 3,864 (0,81), 3,884 (0,73), 3,892 (0,72), 4,209 (1,03), 4,223 (1,01), 4,234 (1,29), 4,249 (1,23), 4,417 (1,25), 4,429 (1,28), 4,443 (1,03), 4,454 (0,99), 7,778 (2,39), 7,780 (2,38), 7,790 (2,45), 7,792 (2,50), 8,391 (3,23), 8,403 (3,11), 8,745 (3,91).

[0316] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 234 [M+H]<+>

[0317] Productos intermedios 1-5

[0318] (2S)-2-{[(4-cianopiridin-3-il)oxi]metil}morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0320]

[0322] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-1 con 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 2,55 g, 18,4 mmol) y (2S)-2-(hidroximetil)morfolina-4-carboxilato de terc-butilo (CAS 135065-76-8, 4,00 g, 18,4 mmol) como materiales de partida; se prepararon 4,82 g (pureza del 90 %, rendimiento del 74 %) del compuesto del título.

[0324] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,41 (s, 9H), 2,72 - 3,05 (m, 2H), 3,46 (a d, 1H), 3,67 - 3,82 (m, 2H), 3,82 - 3,88 (m, 1H), 4,00 (s, 1H), 4,37 (a d, 2H), 7,79 (d, 1H), 8,40 (d, 1H), 8,73 (s, 1H).

[0325] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,06 min; MS (ESlpos): m/z = 320 [M+H]<+>

[0326] Productos intermedios 1-6

[0327] 3-[2-(1,4-dioxan-2-yl)ethoxy]pyridin-4-carbonitrilo

[0329]

[0331] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-2 con 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 2,10 g, 15,1 mmol) y 2-(1,4-dioxan-2-il)etan-1-ol (CAS 151720-04-6, 2,00 g, 15,1 mmol) como materiales de partida; se prepararon 2,89 g (pureza del 99 %, rendimiento del 81 %) del compuesto del título.

[0332] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,754 (0,63), 1,768 (1,37), 1,774 (0,82), 1,781 (0,98), 1,790 (2,18), 1,803 (3,39), 1,810 (2,10), 1,817 (1,93), 1,824 (3,23), 1,838 (2,78), 1,855 (2,41), 1,867 (2,45), 1,869 (2,40), 1,874 (2,53), 1,886 (2,23), 1,902 (0,99), 1,910 (0,87), 1,922 (0,67), 2,326 (0,72), 2,668 (0,69), 3,223 (4,26), 3,247 (5,57), 3,250 (5,62), 3,276 (5,26), 3,428 (1,77), 3,434 (1,89), 3,455 (4,59), 3,462 (4,80), 3,483 (3,76), 3,489 (3,97), 3,530 (3,36), 3,535 (3,38), 3,558 (4,71), 3,564 (5,40), 3,585 (1,93), 3,592 (3,08), 3,626 (4,58), 3,631 (4,33), 3,654 (3,70), 3,659 (4,02), 3,668 (1,98), 3,673 (1,97), 3,680 (2,77), 3,687 (2,85), 3,693 (2,89), 3,706 (6,98), 3,712 (6,06), 3,724 (1,75), 3,735 (3,40), 3,759 (4,77), 3,766 (4,02), 3,788 (4,04), 3,794 (3,73), 4,315 (0,93), 4,329 (1,18), 4,339 (3,54), 4,354 (6,92), 4,359 (5,21), 4,370 (6,49), 4,384 (3,79), 4,392 (1,47), 4,408 (0,68), 7,778 (9,22), 7,790 (9,58), 8,380 (10,88), 8,392 (10,45), 8,698 (16,00).

[0333] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,64 min; MS (ESlpos): m/z = 235 [M+H]<+>

[0334] Productos intermedios 1-7

[0335] 3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridina-4-carbonitrilo

[0337]

[0339] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-2 con 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 948 mg, 6,84 mmol) y (5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metanol (1,00 g, 6,84 mmol; CAS 54321-57-2) como materiales de partida; se prepararon 1,31 g (pureza del 95 %, rendimiento del 73 %) del compuesto del título.

[0341] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,014 (0,69), 1,048 (16,00), 1,172 (0,55), 1,200 (0,51), 1,263 (13,01), 1,987 (0,92), 2,518 (0,62), 2,523 (0,43), 3,313 (1,67), 3,340 (2,27), 3,342 (2,21), 3,542 (2,95), 3,570 (2,39), 3,604 (1,50), 3,627 (1,97), 3,734 (1,24), 3,760 (3,08), 3,781 (2,25), 3,787 (2,73), 3,791 (1,58), 3,796 (0,77), 3,802 (0,63), 4,356 (3,63), 4,365 (4,41), 7,780 (3,42), 7,792 (3,63), 8,387 (4,49), 8,399 (4,29), 8,715 (5,54).

[0342] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,75 min; MS (ESlpos): m/z = 249 [M+H]<+>

[0343] Productos intermedios 1-8

[0344] 3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridina-4-carbonitrilo

[0346]

[0348] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-1 con 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 1,00 g, 7,22 mmol) y [(2R)-1,4-dioxan-2-il]metanol (CAS406913-88-0, 938 mg, 7,94 mmol) como materiales de partida; se prepararon 490 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 29 %) del compuesto del título. Rotación óptica:[α]<D>= - 1,68° /- 0,35° (c = 7 mg/ml, metanol)

[0350] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ ppm= 3,41 - 3,53 (m, 2 H), 3,59 - 3,72 (m, 2 H), 3,75 - 3,81 (m, 1 H), 3,82 - 3,87 (m, 1 H), 3,87 - 3,95 (m, 1 H), 4,27 - 4,37 (m, 2 H), 7,77 - 7,80 (m, 1 H), 8,38 - 8,41 (m, 1 H), 8,71 - 8,73 (m, 1 H).

[0351] Productos intermedios 1-9

[0352] (3R)-3-{[(4-cianopiridin-3-il)oxi]metil}morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0354]

[0356] A una solución de (3S)-3-(hidroximetil)morfolina-4-carboxilato deterc-butil (4,30 g, 19,8 mmol) en THF (28 ml) a 0°C se añadió lentamente hidruro de sodio (1,55 g, pureza del 55 %, 35,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h. Se añadió 3-fluoropiridina-4-carbonitrilo (CAS 113770-88-0, 2,42 g, 19,8 mmol) en THF (14 ml) y la mezcla se agitó durante 4 h a 0 ºC. La mezcla de reacción se apagó con 2N HCl hasta pH = 6 - 7 y se extrajo con EE. La capa orgánica se filtró a través de un papel de filtro hidrófugo y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-7 %) para dar 4 g del compuesto del título (rendimiento del 70 %).

[0357] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,95 min; MS (ESlpos): m/z = 264 [M+H]<+>

[0358] Productos intermedios 1-10

[0359] (2R)-2-{[(4-cianopiridin-3-il)oxi]metil}morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0361]

[0363] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-1 con 3-cloropiridina-4-carbonitrilo (CAS 68325-15-5, 3,25 g, 23,5 mmol) y (2R)-2-(hidroximetil)morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (CAS 135065-71-3, 5,10 g, 23,5 mmol) como materiales de partida; se prepararon 6,92 g (pureza del 90 %, rendimiento del 83 %) del compuesto del título.

[0365] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,41 (s, 9H), 2,73 - 3,00 (m, 2H), 3,39 - 3,50 (m, 1H), 3,75 (m, 2H), 3,82 -3,89 (m, 1H), 3,95 - 4,00 (m, 1H), 4,37 (a d, 2H), 7,79 (d, 1H), 8,40 (d, 1H), 8,73 (s, 1H).

[0366] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,04 min; MS (ESlpos): m/z = 320 [M+H]<+>

[0367] Productos intermedios 1-11

[0368] 3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-carbonitrilo

[0370]

[0372] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-9 con 3-fluoropiridina-4-carbonitrilo (878 mg, 7,19 mmol) y (1S)-1-[1,4-dioxan-2-il]etan-1-ol (CAS 1372875-59-6, 950 mg, 7,19 mmol) como materiales de partida, se prepararon 1,68 g (pureza del 95 %, rendimiento del 95 %) del compuesto del título.

[0374] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO- d<6>): δ ppm= 0,988 (0,85), 1,004 (0,92), 1,056 (0,59), 1,071 (0,60), 1,154 (4,47), 1,166 (0,63), 1,172 (9,29), 1,189 (4,59), 1,276 (12,44), 1,292 (12,55), 1,325 (11,08), 1,341 (11,16), 1,987 (16,00), 2,518 (1,63), 2,522 (1,05), 3,300 (0,46), 3,396 (1,81), 3,421 (2,99), 3,424 (2,99), 3,429 (1,78), 3,450 (5,06), 3,457 (3,42), 3,472 (1,97), 3,478 (1,62), 3,485 (2,38), 3,497 (2,19), 3,500 (1,91), 3,525 (2,26), 3,552 (1,16), 3,559 (1,31), 3,582 (2,48), 3,588 (2,91), 3,611 (1,70), 3,616 (2,62), 3,638 (4,15), 3,642 (3,63), 3,664 (3,89), 3,671 (4,01), 3,676 (1,93), 3,683 (1,76), 3,685 (1,80), 3,689 (1,79), 3,695 (1,76), 3,701 (1,17), 3,704 (1,27), 3,707 (1,26), 3,710 (1,28), 3,744 (1,82), 3,750 (3,32), 3,757 (1,01), 3,778 (3,94), 3,784 (2,19), 3,807 (1,47), 3,813 (1,33), 3,906 (1,40), 3,912 (1,35), 3,935 (1,24), 3,941 (1,18), 3,999 (1,24), 4,016 (3,72), 4,034 (3,66), 4,052 (1,20), 4,804 (0,41), 4,821 (1,95), 4,836 (3,43), 4,852 (2,64), 4,864 (1,34), 7,755 (3,58), 7,757 (3,60), 7,769 (4,33), 7,771 (3,80), 7,783 (3,28), 7,785 (3,20), 8,351 (4,95), 8,363 (4,90), 8,368 (4,48), 8,380 (4,17), 8,749 (6,40), 8,772 (5,46).

[0375] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,64 min; MS (ESlpos): m/z = 235 [M+H]<+>

[0376] Productos intermedios 1-12

[0377] 3-{(1R)-1-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-carbonitrilo

[0379]

[0380] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-9 con 3-fluoropiridina-4-carbonitrilo (905 mg, 7,42 mmol) y (1R)-1-[1,4-dioxan-2-il]etan-1-ol (CAS 1372881-98-5, 980 mg, 7,42 mmol) como materiales de partida, se prepararon 1,39 g (pureza del 95 %, rendimiento del 76 %) del compuesto del título.

[0382] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO- d<6>): δ ppm= 1,274 (0,82), 1,289 (0,87), 1,322 (16,00), 1,337 (15,97), 1,984 (0,48), 2,331 (0,56), 2,673 (0,57), 3,427 (2,95), 3,448 (3,45), 3,455 (3,30), 3,471 (3,27), 3,482 (2,59), 3,496 (3,79), 3,499 (3,36), 3,524 (3,41), 3,580 (1,59), 3,586 (1,80), 3,609 (2,32), 3,615 (2,92), 3,636 (5,12), 3,662 (3,60), 3,668 (3,70), 3,680 (2,08), 3,687 (1,49), 3,693 (1,53), 3,698 (1,52), 3,704 (1,41), 3,746 (3,19), 3,754 (1,74), 3,775 (2,26), 3,903 (2,52), 3,909 (2,44), 3,932 (2,24), 3,937 (2,13), 4,818 (0,65), 4,833 (2,08), 4,845 (2,30), 4,849 (2,22), 4,861 (2,00), 4,876 (0,57), 7,766 (5,15), 7,778 (5,29), 8,348 (0,42), 8,365 (6,23), 8,377 (6,01), 8,743 (0,51), 8,765 (9,13).

[0383] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,67 min; MS (ESlpos): m/z = 235 [M+H]<+>

[0384] Productos intermedios 1-71

[0385] 3-[1-(4-metilmorfolin-2-il)etoxi]isonicotinonitrilo

[0387]

[0389] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 1-9 con 3-fluoropiridina-4-carbonitrilo (824 mg, 6,75 mmol) y 1-(4-metilmorfolin-2-il)etanol (980 mg, 6,75 mmol, CAS 1540922-49-3) como materiales de partida; se prepararon 817 mg (pureza del 99 %, rendimiento del 48 %) del compuesto del título tras cromatografía en columna usando el Biotage Isolera.

[0391] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,285 (4,44), 1,300 (4,47), 1,318 (5,38), 1,333 (5,31), 1,848 (0,57), 1,874 (0,94), 1,901 (0,63), 1,927 (0,93), 1,933 (0,66), 1,953 (2,04), 1,961 (1,23), 1,981 (1,32), 1,990 (0,60), 2,188 (16,00), 2,518 (1,33), 2,522 (0,90), 2,572 (0,89), 2,600 (0,79), 2,718 (0,54), 2,746 (0,52), 2,839 (0,64), 2,867 (0,60), 3,485 (0,78), 3,488 (0,66), 3,491 (0,85), 3,516 (1,00), 3,522 (0,92), 3,544 (0,48), 3,550 (0,42), 3,562 (0,44), 3,568 (0,54), 3,573 (0,73), 3,578 (0,77), 3,587 (0,81), 3,593 (0,83), 3,598 (0,85), 3,604 (0,71), 3,772 (0,51), 3,777 (0,56), 3,781 (0,78), 3,786 (0,61), 3,789 (0,59), 3,794 (0,56), 3,800 (0,46), 3,805 (0,46), 3,809 (0,64), 3,814 (0,50), 3,817 (0,45), 4,818 (0,60), 4,833 (0,97), 4,848 (0,79), 4,858 (0,65), 4,862 (0,67), 4,874 (0,57), 7,746 (1,41), 7,760 (2,88), 7,772 (1,71), 8,341 (1,93), 8,355 (2,69), 8,368 (2,12), 8,745 (2,34), 8,766 (2,68).

[0392] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,32 min; MS (ESlpos): m/z = 248 [M+H]<+>

[0393] Síntesis de compuestos de productos intermedios 2

[0394] Productos intermedios 2-1

[0395] 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina

[0397]

[0399] Se cargó un autoclave con 3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridina-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-1, 1,17 g, 5,34 mmol), amoníaco (19 ml, 7,0 M en metanol, 850 mmol) y Raney-Níquel (CAS 7440-02-0, 783 mg, 50 % humedecido) y la mezcla se agitó bajo atmósfera de hidrógeno de 25 bar a RT durante 22 h. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de celita, se eluyó con metanol y los filtrados combinados se concentraron a presión reducida. El residuo se utilizó directamente en el siguiente paso sin purificación adicional (1,13 g, rendimiento del 94 %).

[0400] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 8,24 (s, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,38 (d, 1H), 4,09 (d, 2H), 3,73 - 3,91 (m, 3H), 3,59 - 3,73 (m, 4H), 3,46 - 3,52 (m, 2H), 3,39 - 3,45 (m, 2H).2,06 (a., 2H).

[0401] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,54 min; MS (ESlpos): m/z = 225 [M+H]<+>

[0402] Productos intermedios 2-2

[0403] 1-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)methanamina

[0405]

[0407] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-2, 355 mg, 1,52 mmol) como material de partida; se prepararon 350 mg del compuesto del título (rendimiento del 89 %).

[0409] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 8,24 - 8,31 (m, 1H), 8,17 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 4,18 - 4,27 (m, 1H), 4,00 (dd, 1H), 3,86 (dd, 1H), 3,63 - 3,75 (m, 3H), 3,42 - 3,55 (m, 1H), 3,36 - 3,41 (m, 1H), 2,67 (dq, 1H), 2,40 - 2,47 (m, 1H), 2,19 - 2,31 (m, 4H), 1,63 - 2,19 (m, 2H).

[0410] Productos intermedios 2-3

[0411] 1-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina

[0413]

[0415] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridina-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-3, 836 mg, 3,58 mmol) como material de partida; se prepararon 860 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 91 %) del compuesto del título.

[0417] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,68 - 1,84 (s a, 2H), 1,85 - 1,94 (t, 1H), 1,94 - 2,05 (td, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,57 - 2,64 (d, 1H), 2,73 - 2,83 (d, 1H), 3,46 - 3,63 (t, 1H), 3,63 - 3,73 (s, 2H), 3,73 - 3,86 (m, 3H), 4,10 (a d, 2H), 7,34 - 7,44 (d, 1H), 8,10 - 8,20 (d, 1H), 8,21 - 8,30 (s, 1H).

[0418] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,56 min; MS (ESlpos): m/z = 238 [M+H]<+>

[0419] Productos intermedios 2-4

[0420] 1-(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina

[0422]

[0424] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-4, 823 mg, 3,53 mmol) como material de partida; se prepararon 798 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 86 %) del compuesto del título.

[0426] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,865 (0,49), 2,199 (0,64), 2,210 (1,08), 2,228 (0,99), 2,233 (0,96), 2,236 (0,96), 2,254 (0,85), 2,263 (0,81), 2,269 (0,55), 2,284 (16,00), 2,327 (0,53), 2,430 (0,78), 2,439 (0,81), 2,447 (0,65), 2,518 (2,11), 2,523 (1,42), 2,649 (0,75), 2,654 (1,38), 2,660 (0,91), 2,669 (0,65), 2,674 (0,60), 2,678 (0,83), 2,684 (1,22), 2,690 (0,66), 3,361 (1,52), 3,365 (1,53), 3,388 (1,10), 3,469 (0,59), 3,474 (0,65), 3,496 (1,15), 3,502 (1,16), 3,523 (0,75), 3,528 (0,68), 3,683 (2,49), 3,690 (2,42), 3,712 (0,79), 3,719 (1,11), 3,846 (1,01), 3,853 (1,04), 3,873 (0,94), 3,880 (0,91), 3,982 (0,79), 3,997 (0,86), 4,007 (1,03), 4,021 (0,96), 4,215 (1,01), 4,226 (1,09), 4,240 (0,86), 4,250 (0,84), 7,379 (0,99), 7,389 (1,01), 8,168 (1,06), 8,179 (1,11), 8,259 (1,53).

[0427] Productos intermedios 2-5

[0428] (2S)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolin-4-carboxylato de terc-butilo

[0430]

[0432] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con (2S)-2-{[(4-cianopiridin-3-il)oxi]metil}morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 1-5, 5,75 g, 18,0 mmol) como material de partida; se prepararon 6,00 g (pureza del 95 %, rendimiento del 98 %) del compuesto del título.

[0433] 1H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,41 (s, 9H), 3,16 (s, 2H), 3,39 - 3,49 (m, 2H), 3,66 - 3,79 (m, 5H), 3,79 -3,98 (m, 3H), 4,07 - 4,20 (m, 3H), 7,39 (d, 1H), 8,19 (d, 1H), 8,27 (s, 1H).

[0434] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,84 min; MS (ESlpos): m/z = 324 [M+H]<+>

[0435] Productos intermedios 2-6

[0436] 1-{3-[2-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}methnamina

[0438]

[0440] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-[2-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridina-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-6, 2,89 g, 12,3 mmol) como material de partida; se prepararon 2,22 g (pureza del 90 %, rendimiento del 68 %) del compuesto del título.

[0442] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,536 (0,40), 1,729 (1,99), 1,751 (3,41), 1,765 (5,01), 1,785 (6,00), 1,804 (5,59), 1,817 (5,34), 1,834 (4,06), 1,852 (2,92), 1,870 (2,15), 2,326 (1,02), 2,669 (1,04), 3,159 (0,53), 3,208 (5,54), 3,235 (8,67), 3,261 (7,11), 3,424 (3,46), 3,430 (3,63), 3,451 (7,09), 3,457 (7,51), 3,479 (5,43), 3,485 (5,78), 3,528 (4,90), 3,534 (5,03), 3,557 (6,69), 3,563 (7,65), 3,584 (3,06), 3,590 (4,57), 3,622 (8,16), 3,653 (8,66), 3,688 (14,98), 3,697 (16,00), 3,731 (13,03), 3,759 (6,36), 4,136 (7,05), 4,152 (13,01), 4,167 (8,38), 7,385 (5,36), 7,394 (5,58), 8,163 (5,21), 8,172 (5,56), 8,224 (7,44).

[0443] Productos intermedios 2-7

[0444] 1-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina

[0446]

[0448] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridina-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-7, 1,30 g, 5,24 mmol) como material de partida; se prepararon 1,26 g (pureza del 90 %, rendimiento del 86 %) del compuesto del título.

[0450] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,014 (0,96), 1,049 (16,00), 1,201 (0,72), 1,262 (13,58), 1,751 (0,48), 2,518 (2,17), 2,523 (1,47), 3,308 (2,76), 3,539 (2,43), 3,567 (1,99), 3,601 (1,13), 3,623 (1,75), 3,694 (1,97), 3,720 (2,07), 3,746 (2,38), 3,783 (0,46), 4,128 (3,01), 4,136 (2,80), 7,386 (0,85), 8,181 (0,83), 8,237 (0,96).

[0451] Productos intermedios 2-8

[0452] 1-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina

[0454]

[0456] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridina-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-8, 1,24 g, 5,63 mmol) como material de partida; se prepararon 1,56 g (pureza del 80%, rendimiento del 99%) del compuesto del título.

[0458] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,232 (0,52), 1,845 (1,06), 2,518 (2,37), 2,523 (1,54), 3,159 (14,24), 3,171 (14,33), 3,376 (0,69), 3,379 (0,65), 3,404 (2,41), 3,419 (0,41), 3,428 (3,79), 3,431 (3,86), 3,439 (0,59), 3,447 (0,69), 3,455 (2,71), 3,465 (1,97), 3,474 (0,57), 3,486 (2,71), 3,493 (2,97), 3,508 (1,01), 3,520 (2,61), 3,592 (0,45), 3,601 (1,92), 3,608 (2,10), 3,630 (2,77), 3,636 (3,65), 3,659 (5,73), 3,661 (5,45), 3,683 (16,00), 3,700 (1,95), 3,754 (3,49), 3,762 (2,18), 3,784 (2,51), 3,794 (0,57), 3,812 (0,61), 3,823 (2,48), 3,829 (3,16), 3,842 (0,81), 3,849 (2,07), 3,856 (6,45), 3,868 (1,93), 3,874 (1,37), 3,880 (1,69), 3,887 (1,30), 3,892 (1,13), 3,899 (0,89), 4,087 (11,44), 4,099 (10,46), 4,111 (2,62), 4,125 (1,15), 7,380 (4,02), 7,391 (4,11), 7,411 (0,67), 7,423 (0,67), 8,168 (6,28), 8,179 (6,26), 8,184 (1,58), 8,196 (1,02), 8,230 (10,21), 8,274 (1,76).

[0459] Productos intermedios 2-9

[0460] (3R)-3-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0462]

[0464] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con (3R)-3-{[(4-cianopiridin-3-il)oxi]metil}morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 1-9, 4,00 g, 12,5 mmol) como material de partida; se prepararon 3,65 g del compuesto del título (rendimiento del 86%).

[0466] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,038 (0,41), 1,055 (0,77), 1,073 (0,44), 1,363 (10,92), 1,754 (6,47), 2,200 (1,02), 2,325 (1,05), 2,330 (1,42), 2,334 (1,05), 2,521 (5,72), 2,526 (3,72), 2,667 (0,88), 2,672 (1,22), 2,676 (0,89), 3,057 (1,02), 3,068 (1,10), 3,087 (1,65), 3,090 (1,62), 3,097 (1,89), 3,101 (1,73), 3,120 (2,21), 3,130 (2,39), 3,168 (16,00), 3,210 (1,86), 3,235 (0,59), 3,240 (1,07), 3,258 (1,25), 3,265 (1,40), 3,286 (1,75), 3,294 (2,07), 3,316 (3,15), 3,365 (3,67), 3,372 (3,73), 3,395 (1,88), 3,402 (1,68), 3,462 (1,41), 3,470 (1,43), 3,503 (3,53), 3,534 (2,78), 3,682 (7,14), 3,764 (1,68), 3,774 (1,81), 3,792 (3,17), 3,802 (2,81), 3,820 (1,93), 3,855 (0,89), 3,859 (1,19), 3,865 (1,80), 3,869 (2,32), 3,873 (3,62), 3,882 (2,64), 3,886 (3,02), 3,889 (2,79), 3,893 (4,31), 3,899 (3,39), 3,902 (2,87), 3,927 (2,09), 4,111 (1,76), 4,227 (3,64), 4,303 (0,96), 4,315 (1,37), 4,329 (3,71), 4,331 (3,43), 4,338 (1,95), 4,345 (2,50), 7,401 (2,60), 8,192 (2,81), 8,337 (2,91).

[0467] LC-MS (procedimiento 1): Rt = 0,49 min; MS (ESlpos): m/z = 324 [M+H]<+>

[0468] Productos intermedios 2-10

[0469] (2R)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0470]

[0472] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con (2R)-2-{[(4-cianopiridin-3-il)oxi]metil}morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 1-10, 6,92 g, 21,7 mmol) como material de partida; se prepararon 6,95 g del compuesto del título (pureza del 90%, rendimiento del 89%).

[0474] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,41 (s, 9H), 2,70 - 3,01 (m, 2H), 3,17 (d, 3H), 3,41 - 3,52 (m, 1H), 3,63 -3,70 (m, 2H), 3,70 - 3,81 (m, 2H), 3,82 - 4,00 (m, 2H), 4,08 - 4,18 (m, 3H), 7,39 (d, 1H), 8,18 (d, 1H), 8,25 (s, 1H). LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,84 min; MS (ESlpos): m/z = 324 [M+H]<+>

[0475] Productos intermedios 2-11

[0476] 1-{3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metanamina

[0478]

[0480] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-11, 1,68 g, 7,17 mmol) como material de partida; se prepararon 1,49 g (pureza del 90 %, rendimiento del 78 %) del compuesto del título.

[0481] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,2 min; MS (ESlpos): m/z = 239 [M+H]<+>

[0483] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0,990 (0,87), 1,006 (0,89), 1,058 (0,73), 1,073 (0,73), 1,165 (0,76), 1,216 (15,68), 1,232 (16,00), 1,256 (14,15), 1,272 (13,96), 1,755 (9,46), 1,917 (0,88), 3,240 (0,43), 3,265 (0,46), 3,276 (0,41), 3,293 (0,54), 3,302 (0,81), 3,325 (0,68), 3,338 (0,50), 3,350 (0,56), 3,371 (0,56), 3,378 (0,58), 3,400 (2,78), 3,412 (2,79), 3,426 (5,84), 3,438 (5,24), 3,453 (6,52), 3,459 (6,28), 3,466 (5,96), 3,479 (2,46), 3,486 (3,26), 3,493 (2,78), 3,521 (0,49), 3,529 (0,67), 3,535 (0,58), 3,564 (2,05), 3,572 (2,72), 3,580 (2,41), 3,600 (6,11), 3,609 (5,52), 3,617 (4,09), 3,634 (11,25), 3,637 (11,05), 3,756 (8,08), 3,785 (6,75), 3,889 (2,49), 3,894 (2,48), 3,917 (2,26), 3,922 (2,16), 4,540 (1,04), 4,555 (3,05), 4,569 (4,27), 4,580 (2,83), 4,584 (2,84), 7,369 (3,21), 7,379 (4,91), 8,135 (3,33), 8,146 (5,23), 8,157 (3,20), 8,261 (4,69), 8,275 (4,23).

[0484] Productos intermedios 2-12

[0485] 1-{3-[(1R)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metanamina

[0487]

[0489] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-{(1R)-1-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridina-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-12, 1,39 g, 5,93 mmol) como material de partida; se prepararon 1,36 g (pureza del 95 %, rendimiento del 91 %) del compuesto del título.

[0490] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,216 (0,81), 1,232 (0,99), 1,255 (15,91), 1,271 (16,00), 1,753 (0,71), 3,290 (0,44), 3,399 (0,54), 3,412 (2,42), 3,424 (0,71), 3,437 (3,81), 3,440 (3,42), 3,453 (0,77), 3,459 (2,72), 3,465 (5,00), 3,485 (1,48), 3,494 (2,02), 3,573 (1,45), 3,580 (1,70), 3,598 (2,00), 3,603 (3,43), 3,609 (3,84), 3,616 (2,24), 3,622 (2,04), 3,628 (1,97), 3,634 (4,41), 3,638 (4,68), 3,645 (2,04), 3,662 (5,32), 3,672 (6,05), 3,713 (0,63), 3,757 (2,28), 3,764 (2,39), 3,787 (1,75), 3,790 (1,84), 3,887 (2,14), 3,894 (2,12), 3,916 (1,94), 3,922 (1,85), 4,535 (0,53), 4,550 (1,85), 4,564 (2,15), 4,566 (2,17), 4,579 (1,80), 4,595 (0,50), 7,381 (3,18), 7,393 (3,14), 8,144 (4,36), 8,156 (4,13), 8,257 (0,50), 8,272 (6,58).

[0491] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,21 min; MS (ESlpos): m/z = 239 [M+H]<+>

[0492] Productos intermedios 2-71

[0493] 1-{3-[1-(4-metilmorfolin-2-il)etoxi]piridin-4-il}metanamina

[0495]

[0497] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 2-1 con 3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-carbonitrilo (producto intermedio 1-71, 815 mg, 3,30 mmol) como material de partida; se prepararon 810 mg (pureza del 99 %, rendimiento del 97 %) del compuesto del título.

[0498] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,227 (3,82), 1,242 (3,97), 1,254 (4,80), 1,270 (4,60), 1,850 (1,08), 1,862 (1,12), 1,876 (1,43), 1,888 (1,42), 1,903 (0,90), 1,915 (1,07), 1,928 (0,67), 1,937 (0,65), 1,945 (0,81), 1,957 (1,14), 1,965 (0,95), 1,973 (0,53), 1,985 (0,64), 1,993 (0,48), 2,152 (0,51), 2,183 (16,00), 2,332 (0,45), 2,518 (2,14), 2,522 (1,29), 2,575 (1,38), 2,602 (1,24), 2,673 (0,44), 2,692 (0,68), 2,720 (0,63), 2,834 (0,79), 2,862 (0,75), 3,475 (0,48), 3,480 (0,56), 3,487 (0,60), 3,504 (1,27), 3,508 (1,56), 3,514 (1,44), 3,536 (1,04), 3,542 (1,01), 3,563 (0,49), 3,568 (0,50), 3,575 (0,48), 3,588 (0,47), 3,667 (1,61), 3,793 (1,27), 3,821 (1,05), 4,561 (0,97), 7,374 (1,24), 8,138 (1,27), 8,267 (1,31).

[0499] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,11 min; MS (ESlpos): m/z = 252 [M+H]<+>

[0500] Síntesis de compuestos de productos intermedios 3

[0501] Productos intermedios 3-1

[0502] 1-cloro-3-isotiocianato-2-metoxibenceno

[0504]

[0506] La 3-cloro-2-metoxianilina (CAS 51114-68-2, 8,4 ml, 63 mmol) se disolvió en DCM (100 ml) y se añadió solución de bicarbonato sódico sat. (100 ml). A la mezcla enfriada con hielo se añadió lentamente tiofosgeno (5,4 ml, 70 mmol). La reacción se agitó a 0 °C durante 2 h. A RT se separó la capa de DCM y se lavó con solución de bicarbonato sódico sat., se filtró a través de un filtro hidrófobo y se concentró a presión reducida para dar el compuesto del título (12,97 g, rendimiento del 100 %) que se utilizó directamente en el paso siguiente.

[0508] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 7,51 (dd, 1H), 7,35 (dd, 1H), 7,20 (t, 1H), 3,85 - 3,91 (m, 3H).

[0509] Productos intermedios 3-4

[0510] 1-fluoro-3-isotiocianato-2-metoxibenceno

[0512]

[0513] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 3-1; 3-fluoro-2-metoxianilina (CAS 437-83-2, 5,00 g, 35,4 mmol) como material de partida; se prepararon 6,24 g del compuesto del título (rendimiento del 96 %).

[0515] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 7,32 (m, 1H), 7,10 - 7,19 (m, 2H), 3,96 (d, 3H).

[0516] Productos intermedios 3-18

[0517] 1-cloro-5-fluoro-3-isotiocianato-2-metoxibenceno

[0519]

[0521] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 3-1 con 3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilina (1,00 g, 5,70 mmol) como material de partida; se prepararon 1,17 g del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 90 %).

[0522] 1H RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 3,86 (s, 3 H) 7,38 (dd, 1H) 7,58 (dd, 1H).

[0523] Productos intermedios 3-29

[0524] 1-cloro-2-etil-3-isotiocianatobenceno

[0526]

[0528] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 3-1; 3-cloro-2-etilanilina (5,00 g, pureza del 85 %, 27,3 mmol) como material de partida, se preparó el compuesto del título 6,29 g (pureza del 85 %, rendimiento del 99 %).

[0530] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,009 (7,50), 1,027 (16,00), 1,046 (7,55), 1,090 (0,44), 1,109 (0,89), 1,128 (0,44), 2,590 (2,26), 2,608 (6,71), 2,627 (6,58), 2,646 (2,00), 5,199 (6,39), 6,533 (4,44), 6,539 (4,27), 6,553 (5,20), 6,559 (4,97), 6,821 (3,47), 6,841 (5,70), 6,861 (2,75), 7,056 (0,43), 7,060 (0,52).

[0531] Productos intermedios 3-65

[0532] 2-etil-1-fluoro-3-isotiocianatobenceno

[0534]

[0536] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 3-1; 2-etil-3-fluoroanilina (2,50 g, 18,0 mmol, CAS 1139437-61-8) como material de partida, se preparó el compuesto del título 3,0 g (pureza del 90 %, rendimiento del 83 %).

[0538] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,108 (7,13), 1,127 (16,00), 1,146 (7,13), 2,462 (0,95), 2,483 (1,27), 2,517 (0,79), 2,522 (0,48), 2,637 (0,95), 2,641 (1,11), 2,655 (3,17), 2,659 (3,17), 2,674 (3,17), 2,678 (3,17), 2,693 (0,95), 2,697 (0,95), 3,461 (0,48), 3,477 (0,63), 3,484 (0,63), 3,506 (1,11), 3,528 (2,06), 3,537 (2,69), 3,625 (3,01), 3,648 (1,11), 3,663 (0,63), 3,669 (0,63), 7,185 (1,11), 7,189 (1,11), 7,205 (1,58), 7,209 (2,53), 7,212 (1,27), 7,229 (1,43), 7,233 (1,74), 7,243 (1,27), 7,246 (1,43), 7,263 (3,80), 7,266 (2,38), 7,282 (2,53), 7,296 (2,38), 7,301 (2,38), 7,317 (2,53), 7,322 (0,79), 7,337 (0,79).

[0539] Síntesis de compuestos de productos intermedios 4

[0540] Productos intermedios 4-1

[0541] 5-[(3-[cloro-2-metoxifenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0543]

[0545] A una solución enfriada con hielo de 1-cloro-3-isotiocianato-2-metoxibenceno (producto intermedio 3-1, 4,00 g, 20,0 mmol) y 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato deterc-butil (CAS 845267-78-9, 4,27 g, 20,0 mmol) en acetonitrilo (92 ml) se añadió DBU gota a gota (4,5 ml, 30 mmol). La mezcla de reacción se agitó a RT durante toda la noche. A la mezcla de reacción se añadió agua helada (200 mL) y HCl conc. (2 mL). La mezcla se agitó durante 20 min. y se extrajo con DCM. La fase orgánica se filtró sobre un filtro hidrófugo, se conentró a presión reducida y se purificó por cromatografía flash (sílice, gradiente hexano / EtOAc 0-50 %) para dar 6,54 g del compuesto del título (rendimiento del 71 %).

[0547] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 13,36 (s a, 1H), 7,73 (d, 1H), 7,47 (dd, 1H), 7,22 (t, 1H), 3,76 - 3,82 (m, 5H), 2,88 (t, 2H), 1,48 (s, 9H).

[0548] LC-MS (procedimiento 1): Rt = 1,49 min; MS (ESlpos): m/z = 413,1 [M+H]<+>

[0549] Productos intermedios 4-4

[0550] 5-[(3-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0552]

[0554] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 4-1 con 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato deterc-butilo (CAS 845267-78-9, 7,26 g, 34,1 mmol) y 1-fluoro-3-isotiocianato-2-metoxibenceno (producto intermedio 3-4, 6.24 g, 34,1 mmol) como materiales de partida; se prepararon 9,49 g del compuesto del título (rendimiento del 67 %) tras agitar el producto en MeOH, filtrar y secar el precipitadoin vacuo.

[0556] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 13,37 (s a, 1H), 7,58 (a d, 1H), 7,23 - 7,30 (m, 1H), 7,09 - 7,21 (m, 1H), 4,10 (s a, 1H), 3,78 (t, 2H), 3,17 (s, 3H), 2,88 (a t, 2H), 1,48 (s, 9H).

[0557] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,66 min; MS (ESlpos): m/z = 397,3 [M+H]<+>

[0558] Productos intermedios 4-7

[0559] 5-[(2,3-diclorofenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0561]

[0563] El 1,2-dicloro-3-isotiocianatobenceno (CAS 6590-97-2, 5,00 g, 24,5 mmol) y el 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (CAS 845267-78-9, 5,22 g, 24,5 mmol) se solubilizaron en acetonitrilo (55 ml), se añadió cuidadosamente DBU (5,5 ml, 37 mmol) a 0 °C bajo atmósfera de argón y la mezcla se agitó toda la noche a RT. La mezcla de reacción se diluyó con HCl (200 ml, 1N en agua) y se agitó durante 30 min. a RT. El sólido resultante se filtró, la torta de filtración se lavó con agua y se secó a 50 °C en estufa de vacío durante la noche para dar 9,40 g del compuesto del título (rendimiento del 92 %).

[0564] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,467 (16,00), 1,484 (0,56), 1,622 (0,34), 1,644 (0,25), 1,661 (0,20), 1,674 (0,17), 1,898 (0,19), 1,913 (0,31), 1,927 (0,19), 2,075 (0,20), 2,327 (0,18), 2,518 (0,60), 2,523 (0,39), 2,621 (0,30), 2,647 (0,32), 2,665 (0,24), 2,669 (0,29), 2,673 (0,25), 3,249 (0,25), 3,459 (0,23), 3,473 (0,39), 3,487 (0,22), 3,538 (0,28), 3,561 (0,29), 3,727 (0,50), 7,357 (0,17), 7,377 (0,36), 7,383 (0,28), 7,397 (0,28), 7,544 (0,27), 7,547 (0,33), 7,560 (0,29), 7,564 (0,31), 7,568 (0,25), 7,580 (0,18).

[0565] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 416 [M-H]-Productos intermedios 4-10

[0566] 5-[(3-[cloro-2-metilfenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0568]

[0570] De acuerdo con el procedimiento descrito para el producto intermedio 4-1; 1-cloro-3-isotiocianato-2-metilbenceno (CAS 19241-35-1; 2,50 g, 13,6 mmol) y 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato deterc-butilo (CAS 845267-78-9, 2.9 g, 13,6 mmol) como materiales de partida; se prepararon 4,68 g del compuesto del título (rendimiento del 78 %), tras adición de HCl ,filtración ,y secado del precipitadoin vacuo.

[0572] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 15,73 (s, 1H), 12,77 (s a, 1H), 7,45 (d, 1H), 7,30 (t, 1H), 7,19 (d, 1H), 3,78 (t, 2H), 2,85 (t, 2H), 2,20 (s, 3H), 1,48 (s, 9H).

[0573] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,72 min; MS (ESlpos): m/z = 397,3 [M+H]<+>

[0574] Productos intermedios 4-18

[0575] 5-[(3-[cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0577]

[0579] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 4-1 con 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato deterc-butilo (CAS 845267-78-9, 1,15 g, 5,38 mmol) y 1-cloro-5-fluoro-3-isotiocianato-2-metoxibenceno (producto intermedio 3-18, 1,17 g, 5,38 mmol) como materiales de partida; se prepararon 1,42 g del compuesto del título (pureza del 75 %, rendimiento del 46 %).

[0581] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,154 (0,88), 1,172 (1,70), 1,189 (0,80), 1,484 (16,00), 1,987 (3,28), 2,518 (0,89), 2,522 (0,61), 2,883 (0,73), 2,899 (0,40), 3,359 (0,69), 3,644 (4,46), 3,760 (7,94), 3,774 (0,44), 3,782 (1,03), 3,798 (0,53), 4,017 (0,69), 4,035 (0,69), 6,400 (0,60), 6,405 (0,53), 6,427 (1,00), 7,498 (0,41).

[0582] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,73 min; MS (ESlpos): m/z = 431 [M+H]<+>

[0583] Productos intermedios 4-29

[0584] 5-[(3-cloro-2-etilfenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1 (2H)-carboxilato de terc-butilo

[0586] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 4-1 con 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato deterc-butilo (CAS 845267-78-9, 5,77 g, 27,0 mmol) y 2-cloro-1-etil-3-isotiocianatobenceno (producto intermedio 3-29, 6,29 g, pureza del 85 %, 27,0 mmol) como materiales de partida; se prepararon 6,35 g del compuesto del título (pureza del 85 %, ndimiento del 49 %).

[0588] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,063 (0,89), 1,082 (2,14), 1,100 (0,95), 1,362 (0,65), 1,478 (16,00), 1,486 (1,29), 2,518 (0,64), 2,523 (0,44), 2,631 (0,70), 2,650 (0,69), 2,850 (0,41), 2,866 (0,78), 2,883 (0,43), 3,775 (0,51), 3,791 (0,90), 3,807 (0,46), 7,212 (0,46), 7,214 (0,44), 7,232 (0,62), 7,234 (0,61), 7,293 (0,62), 7,313 (1,08), 7,332 (0,53), 7,440 (0,61), 7,443 (0,62), 7,460 (0,49), 7,463 (0,45).

[0589] Productos intermedios 4-38

[0590] 5-[(3-[fluoro-2-metilfenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0592]

[0594] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 4-1 con 2,4-dioxopiperidina-1-carboxilato de terc-butilo (CAS 845267-78-9, 8,19 g, 38,4 mmol) y 1-fluoro-3-isotiocianato-2-metilbenceno (CAS 363179-58-2, 6.42 g, 38,4 mmol) como materiales de partida; se prepararon 11,1 g del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 72 %) tras agitar el producto en MeOH, filtrar y secar el precipitadoin vacuo.

[0596] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO- d<6>): δ [ppm]= 1,479 (16,00), 2,084 (2,80), 2,088 (2,74), 2,834 (0,58), 2,850 (1,12), 2,866 (0,61), 3,768 (0,64), 3,784 (1,16), 3,800 (0,59), 7,073 (0,61), 7,093 (0,71), 7,186 (0,59), 7,299 (0,45), 7,316 (0,42).

[0597] Productos intermedios 4-40

[0598] 5-{[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluorofenil]carbamotioil}-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0600]

[0602] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 4-1 con 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato deterc-butilo (CAS 845267-78-9, 7,85 g, 36.8 mmol) y 2-(2,2-difluoroetil)-1-fluoro-3-isotiocianatobenceno (CAS 2311902-79-9, 8,00 g, 36,8 mmol) como materiales de partida; se prepararon 12,1 g del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 72 %).

[0604] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,471 (16,00), 2,518 (0,65), 2,523 (0,43), 2,788 (0,47), 2,804 (0,87), 2,820 (0,50), 3,166 (3,72), 3,754 (0,60), 3,770 (1,08), 3,786 (0,57), 7,149 (0,62), 7,169 (0,70), 7,271 (0,58), 7,446 (0,46), 7,462 (0,43).

[0605] Productos intermedios 4-65

[0606] 5-[(2-etil-3-fluorofenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato de terc-butilo

[0608] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 4-1 con 2,4-dioxopiperidin-1-carboxilato deterc-butilo (CAS 845267-78-9, 7,85 g, 36,8 mmol) y 2-etil-1-fluoro-3-isotiocianatobenceno (producto intermedio 3-65, 3,00 g, 16,6 mmol) como materiales de partida; se prepararon 5,46 g del compuesto del título (pureza del 95%, rendimiento del 79%).

[0610] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,066 (1,02), 1,085 (2,41), 1,104 (1,06), 1,477 (16,00), 1,486 (1,04), 2,074 (0,65), 2,518 (1,12), 2,522 (0,92), 2,538 (0,61), 2,858 (0,69), 3,771 (0,55), 3,787 (0,98), 3,803 (0,50), 7,092 (0,50), 7,112 (0,55), 7,186 (0,45), 7,311 (0,44), 7,327 (0,41).LC-MS (Método 2): Rt = 0,72 min; MS (ESlpos): m/z = 395 [M+H]<+>

[0611] Síntesis de compuestos de productos intermedios 5

[0612] Productos intermedios 5-1

[0613] N-(3-(cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0615]

[0617] A una disolución de 5-[(3-cloro-2-metoxifenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de butilo (producto intermedio 4-1, 6,54 g, 15,8 mmol) en diclorometano (94 ml) se añadió TFA (12 ml, 160 mmol) y la mezcla se agitó 1,5 h a RT. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y el residuo se disolvió en EtOAc y se lavó con solución de bicarbonato sódico sat. y salmuera. La capa orgánica se filtró a través de un filtro hidrófobo y el filtrado se secó hasta sequedad. El residuo se purificó mediante cromatografía flash (sílice, gradiente hexano / EtOAc 20-100 %) para dar 4,06 g del compuesto del título (rendimiento del 78 %).

[0619] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 16,45 (d, 1H), 14,69 (s, 1H), 14,33 (s, 1H), 9,37 (s a, 1H), 8,18 (s a, 1H), 7,76 - 7,87 (m, 1H), 7,37 - 7,45 (m, 1H), 7,15 - 7,23 (m, 1H), 3,73 - 3,76 (m, 3H), 3,43 (td, 1H), 3,27 - 3,32 (m, 1H), 2,79 (t, 1H), 2,59 - 2,69 (m, 1H).

[0620] LC-MS (procedimiento 1): Rt = 1,19 min; MS (ESlpos): m/z = 313 [M+H]<+>

[0621] Productos intermedios 5-4

[0622] N-(3-fluoro-2-(metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0624]

[0626] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 con 5-[(3-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato deterc-butil (producto intermedio 4-4, 9,49 g, 23,9 mmol) como material de partida, se prepararon 6,98 g del compuesto del título (rendimiento del 89 %) tras 15 min de agitación y se utilizaron en los pasos siguientes sin purificación adicional.

[0628] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 16,48 (d, 1H), 14,63 (s, 0,5H), 14,28 (s, 0,5H), 9,34 (s a, 0,5H), 8,16 (s a, 0,5H), 7,65 (t, 1H), 6,97 - 7,37 (m, 2H), 3,79 - 3,85 (m, 3H), 3,35 - 3,46 (m, 1H), 3,26 - 3,32 (m, 1H), 2,78 (t, 1H), 2,63 (t, 1H).

[0629] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,46 min; MS (ESlpos): m/z = 297,1 [M+H]<+>

[0630] Productos intermedios 5-7

[0631] N-(2,3-(diclorofenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0633]

[0635] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 con 5-[(2,3-diclorofenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 4-7, 9,40 g, 22,5 mmol) como material de partida; se prepararon 5,71 g del compuesto del título (rendimiento del 62 %) tras agitar durante la noche.

[0637] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,018 (1,18), 1,050 (1,33), 1,072 (0,81), 1,102 (0,59), 1,132 (0,81), 1,154 (1,84), 1,172 (3,17), 1,189 (1,84), 1,199 (0,88), 1,231 (1,92), 1,259 (1,40), 1,486 (0,66), 1,593 (1,33), 1,626 (1,18), 1,695 (1,25), 1,727 (1,18), 1,907 (2,14), 1,987 (5,97), 2,322 (3,17), 2,326 (4,28), 2,331 (3,17), 2,518 (15,85), 2,522 (9,44), 2,638 (11,06), 2,664 (7,82), 2,669 (7,52), 2,673 (5,53), 2,798 (8,11), 3,436 (9,81), 4,017 (1,18), 4,035 (1,11), 5,560 (1,33), 5,579 (1,25), 7,392 (4,42), 7,410 (10,03), 7,430 (9,22), 7,565 (12,24), 7,585 (16,00), 7,605 (9,51), 8,134 (0,74), 8,197 (4,35), 9,418 (3,91), 14,273 (6,93), 14,665 (6,64), 16,114 (1,03), 16,295 (9,95), 16,352 (5,82), 16,503 (1,11).

[0638] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,55 min; MS (ESlpos): m/z = 316 [M-H]-.

[0639] Productos intermedios 5-10

[0640] N-(3-(cloro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0642]

[0644] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 conterc-butil 5-[(3-cloro-2-metilfenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato (producto intermedio 4-10, 4.67 g, 11,8 mmol) como material de partida, se prepararon 3,54 g del compuesto del título (rendimiento del 91 %) después de 3 h y se utilizaron en los pasos siguientes sin purificación adicional.

[0646] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 16,42 (d, 1H), 14,01 - 14,37 (m, 1H), 8,14 - 9,40 (m, 1H), 7,43 (a t, 1H), 7,16 - 7,32 (m, 2H), 3,42 - 3,48 (m, 1H), 3,26 - 3,34 (m, 1H), 2,78 (t, 1H), 2,60 - 2,68 (m, 1H), 2,12 - 2,21 (m, 3H). LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,60 min; MS (ESlpos): m/z = 297,4 [M+H]<+>.

[0647] Productos intermedios 5-18

[0648] N-(3-(cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0650]

[0652] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 con 5-[(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 4-18, 1,42 g, 3,30 mmol) como material de partida; se prepararon 690 mg del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 60 %).

[0653] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,61 - 2,70 (m, 1H), 2,80 (m, 1H), 3,25 - 3,32 (m, 1H), 3,38 - 3,47 (m, 1H), 3,74 (s, 3H), 7,39 - 7,62 (m, 1H), 7,83 - 8,02 (m, 1H), 8,20 - 8,33 (s, 0,5H), 9,33 - 9,57 (s, 0,5H), 14,53 (s, 0,5H), 14,93 (s, 0,5H), 16,29 (s, 0,5H), 16,36 (s, 0,5H).

[0654] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,57 min; MS (ESlneg): m/z = 329 [M-H]-.

[0655] Productos intermedios 5-29

[0656] N-(3-(cloro-2-etilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0658]

[0660] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 con 5-[(3-cloro-2-etilfenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridina-1(2H)-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 4-29, 2.35 g, pureza del 75 %, 4,29 mmol) como material de partida; se prepararon 1,22 g del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 87 %).

[0662] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,048 (7,06), 1,067 (16,00), 1,086 (7,43), 1,107 (1,58), 1,124 (1,32), 1,143 (0,50), 1,154 (1,34), 1,172 (2,43), 1,190 (1,24), 1,232 (0,50), 1,988 (4,56), 2,318 (0,47), 2,323 (1,05), 2,327 (1,56), 2,332 (1,11), 2,336 (0,47), 2,518 (5,61), 2,523 (4,03), 2,581 (2,03), 2,600 (6,41), 2,619 (6,62), 2,642 (4,59), 2,661 (2,69), 2,669 (1,90), 2,673 (1,27), 2,678 (0,58), 2,771 (2,35), 2,789 (4,82), 2,807 (2,58), 3,287 (1,61), 3,294 (1,79), 3,305 (3,11), 3,312 (3,14), 3,323 (2,06), 3,330 (2,35), 3,415 (1,53), 3,422 (1,66), 3,433 (2,56), 3,441 (2,45), 3,452 (1,40), 3,459 (1,24), 4,017 (1,03), 4,035 (1,00), 7,166 (0,95), 7,176 (0,58), 7,179 (0,58), 7,248 (0,71), 7,259 (6,30), 7,268 (3,58), 7,275 (4,43), 7,287 (7,20), 7,294 (3,90), 7,303 (3,56), 7,324 (0,87), 7,392 (1,85), 7,400 (1,37), 7,407 (1,85), 7,415 (1,74), 7,419 (2,40), 7,426 (1,77), 7,436 (1,77), 7,443 (1,45), 8,174 (1,77), 9,335 (1,42), 14,111 (2,98), 14,452 (2,74), 16,428 (7,88), 16,441 (7,38).

[0663] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,28 min; MS (ESlpos): m/z = 311 [M+H]<+>.

[0664] Productos intermedios 5-38

[0665] N-(3-fluoro-2-(metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0667]

[0669] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 con 5-[(3-fluoro-2-metilfenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato deterc-butiloo (producto intermedio 4-38, 11.1 g, 29,1 mmol) como material de partida, se prepararon 7,25 g del compuesto del título (rendimiento del 84%) tras 15 min de agitación y se utilizaron en los pasos siguientes sin purificación adicional.

[0671] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,172 (0,55), 1,987 (1,05), 2,063 (16,00), 2,518 (1,49), 2,523 (1,01), 2,612 (1,94), 2,631 (3,67), 2,649 (2,11), 2,761 (1,99), 2,779 (4,22), 2,798 (2,26), 3,280 (1,36), 3,287 (1,47), 3,298 (2,58), 3,305 (2,57), 3,315 (1,39), 3,322 (1,33), 3,410 (1,40), 3,417 (1,48), 3,428 (2,27), 3,435 (2,22), 3,446 (1,27), 3,454 (1,15), 7,112 (1,56), 7,119 (0,96), 7,132 (2,25), 7,141 (3,30), 7,161 (2,66), 7,168 (2,15), 7,192 (1,12), 7,243 (0,73), 7,262 (1,15), 7,272 (0,99), 7,279 (1,25), 7,292 (1,27), 7,308 (1,21), 7,328 (0,45), 8,150 (1,43), 9,317 (1,16), 14,003 (2,32), 14,321 (2,05), 16,439 (5,35), 16,468 (4,62).

[0672] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,47 min; MS (ESlpos): m/z = 281 [M+H]<+>.

[0673] Productos intermedios 5-40

[0674] N-[2-(2,2-[difluoroetil)-3-fluorofenil]-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0675]

[0677] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 con 5-{[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluorofenil]carbamotioil}-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 4-40, 12,1 g, 28,0 mmol) como material de partida; se prepararon 8,81 g del compuesto del título (pureza del 95%, rendimiento del 90%).

[0679] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,145 (0,50), 1,154 (1,98), 1,172 (3,87), 1,190 (1,88), 1,441 (0,60), 1,987 (7,01), 2,323 (1,39), 2,327 (1,98), 2,332 (1,39), 2,518 (8,20), 2,523 (5,52), 2,617 (6,21), 2,635 (11,74), 2,653 (7,04), 2,665 (3,21), 2,669 (3,14), 2,673 (2,21), 2,769 (5,92), 2,786 (10,81), 2,803 (6,18), 3,059 (7,57), 3,067 (7,93), 3,104 (15,40), 3,111 (15,40), 3,148 (7,93), 3,307 (9,36), 3,434 (8,96), 4,000 (0,56), 4,017 (1,65), 4,035 (1,65), 4,053 (0,53), 6,057 (3,27), 6,067 (6,55), 6,077 (2,98), 6,198 (6,18), 6,208 (13,09), 6,217 (6,12), 6,339 (2,81), 6,348 (6,12), 6,358 (3,01), 7,165 (5,62), 7,185 (7,24), 7,207 (6,64), 7,227 (8,53), 7,242 (9,39), 7,265 (9,26), 7,288 (3,31), 7,393 (2,38), 7,413 (5,55), 7,430 (6,51), 7,459 (4,53), 7,479 (1,45), 8,152 (5,29), 9,352 (4,96), 14,013 (9,02), 14,389 (7,90), 16,346 (15,47), 16,353 (16,00).

[0680] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,48 min; MS (ESlpos): m/z = 331,1 [M+H]<+>.

[0681] Productos intermedios 5-65

[0682] N-(2-etil-3-fluorofenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0684]

[0686] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 5-1 con 5-[(2-etil-3-fluorofenil)carbamotioil]-4-hidroxi-6-oxo-3,6-dihidropiridin-1(2H)-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 4-65, 5,46 g, pureza del 71 %, 9,83 mmol) como material de partida; se prepararon 4,0 g del compuesto del título (pureza del 70 %, rendimiento del 97 %).

[0687] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: 1,052 (6,61), 1,071 (16,00), 1,089 (6,75), 1,116 (0,56), 1,224 (4,60), 1,734 (1,58), 2,326 (0,43), 2,472 (1,56), 2,518 (2,10), 2,523 (1,69), 2,647 (0,85), 2,659 (0,85), 2,664 (0,98), 2,668 (1,03), 2,673 (0,80), 2,782 (0,89), 3,423 (0,82), 4,037 (0,62), 7,160 (2,35), 7,288 (0,98), 8,170 (0,48), 14,073 (0,46), 14,414 (0,52).

[0688] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,18 min; MS (ESlpos): m/z = 295 [M+H]<+>.

[0689] Síntesis de compuestos de productos intermedios 6

[0690] Productos intermedios 6-1

[0691] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0693]

[0694] Una mezcla deN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 498 mg, 1,59 mmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 0,5 g, 2,23 mmol) se agitó durante 4 h a 120 °C. La mezcla de reacción se purificó mediante cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-30 %) para dar 325 mg del compuesto del título (rendimiento del 39 %).

[0696] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 14,79 (s, 1H), 13,69 (t, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,81 (dd, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,26 - 7,33 (m, 2H), 7,11 (t, 1H), 4,67 (d, 2H), 4,16 (t, 2H), 3,84 - 3,95 (m, 2H), 3,74 - 3,79 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,59 - 3,70 (m, 2H), 3,45 - 3,54 (m, 2H), 3,11 - 3,20 (m, 2H), 2,78 (t, 2H).

[0697] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,07 min; MS (ESlpos): m/z = 519,2 [M+H]<+>.

[0698] Productos intermedios 6-2

[0699] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0701]

[0703] Una mezcla deN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 866 mg, 2,77 mmol) y 1-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-8, 776 mg, pureza del 80 %, 2.77 mmol) en ACN (22 ml) se trató conN,O-bis(trimetilsilil)acetamida (2,05 ml, 8,6 mmol, CAS 10416-59-8) y se agitó a 80 °C durante 4 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida y se purificó mediante cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-20 %) para dar 1,23 g (pureza del 95 %, rendimiento del 81 %) del compuesto del título.

[0705] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,78 (t, 2H), 3,16 (td, 2H), 3,40 - 3,54 (m, 3H), 3,59 - 3,69 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 3,73 - 3,79 (m, 1H), 3,83 - 3,95 (m, 2H), 4,16 (t, 2H), 4,67 (d, 2H), 7,11 (t, 1H), 7,27 - 7,33 (m, 2H), 7,73 (s a, 1H), 7,81 (dd, 1H), 8,24 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 13,69 (s, 1H), 14,79 (s, 1H).

[0706] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,09 min; MS (ESlpos): m/z = 519 [M+H]<+>

[0707] Productos intermedios 6-4

[0708] 4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida

[0710]

[0712] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-4, 179 mg, 604 µmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 190 mg, 845 µmol) como materiales de partida; Se prepararon 120 mg del compuesto del título (rendimiento del 34 %) tras calentar durante 2 h y purificar por cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[0713] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 14,74 (s, 1H), 13,70 (a t, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,64 - 7,73 (m, 2H), 7,30 (d, 1H), 7,02 - 7,14 (m, 2H), 4,67 (d, 2H), 4,13 - 4,21 (m, 2H), 3,84 - 3,95 (m, 2H), 3,59 - 3,77 (m, 4H), 3,40 - 3,53 (m, 2H), 3,13 - 3,22 (m, 2H), 2,68 - 2,80 (m, 2H), 1,59 (s a, 1H), 0,93 - 1,39 (m, 1H).

[0714] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,01 min; MS (ESlpos): m/z = 503 [M+H]<+>.

[0715] Productos intermedios 6-7

[0716] N-(2,3-diclorofenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino)]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0718]

[0720] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(2,3-diclorofenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbothioamida (producto intermedio 5-7, 160 mg, 504 µmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 158 mg, 706 µmol) como materiales de partida; se prepararon 110 mg del compuesto del título (rendimiento del 35 %) tras y calentamiento durante 2 h y purificación mediante cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[0722] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 14,90 (s, 1H), 13,66 (t, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,75 (s a, 1H), 7,55 (dd, 1H), 7,51 (dd, 1H), 7,28 - 7,38 (m, 3H), 4,68 (d, 3H), 4,14 - 4,21 (m, 2H), 3,87 - 3,90 (m, 1H), 3,72 - 3,76 (m, 1H), 3,64 - 3,67 (m, 1H), 3,58 - 3,63 (m, 1H), 3,35 - 3,53 (m, 3H), 2,79 (t, 2H).

[0723] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,08 min; MS (ESlpos): m/z = 523 [M+H]<+>.

[0724] Productos intermedios 6-10

[0725] N-(3-cloro-2-metilfenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0727]

[0729] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1; N-(3-cloro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-10, 189 mg, 637 µmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 200 mg, 892 µmol) como materiales de partida; se prepararon 180 mg del compuesto del título (rendimiento del 56 %) tras calentar durante 2 h y purificar por cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[0731] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 14,54 (s, 1H), 13,64 (a t, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,69 (s a, 1H), 7,28 - 7,37 (m, 2H), 7,13 - 7,26 (m, 2H), 4,65 (d, 2H), 4,14 - 4,20 (m, 2H), 3,74 - 3,88 (m, 3H), 3,63 - 3,71 (m, 2H), 3,42 - 3,53 (m, 2H), 3,14 - 3,31 (m, 2H), 2,77 (t, 2H), 2,16 (s, 3H).

[0732] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,09 min; MS (ESlpos): m/z = 501 [M+H]<+>.

[0733] Productos intermedios 6-11

[0734] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0736]

[0738] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 142 mg, 407 µmol) y 1-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-2, 116 mg, 489 µmol) como materiales de partida; se prepararon 85.6 mg del compuesto del título (rendimiento del 36 %) tras calentamiento durante 3 h y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 6,00 min 30 - 70 % B).

[0740] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 14,79 (s, 1H), 13,67 (a t, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,81 (dd, 1H), 7,73 (s a, 1H), 7,28 - 7,33 (m, 2H), 7,11 (t, 1H), 4,67 (a d, 2H), 4,31 (dd, 1H), 4,05 (dd, 1H), 3,90 (dd, 1H), 3,67 -3,73 (m, 4H), 3,50 (td, 1H), 3,34 - 3,40 (m, 1H), 3,13 - 3,21 (m, 2H), 2,79 (t, 2H), 2,63 - 2,70 (m, 1H), 2,19 - 2,33 (m, 4H), 1,46 - 1,76 (m, 1H).

[0741] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,08 min; MS (ESlpos): m/z = 532,5 [M+H]<+>

[0742] Productos intermedios 6-12

[0743] N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-(((3-hidroxipiridin-4-il)metil)amino)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida

[0745]

[0747] Una mezcla de 4-(aminometil)piridin-3-ol (CAS 20485-35-2, 75 g, 0,604 mol) yN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-4, 150 g, 0,506 mol) en DMA (1,2 l) se agitó a 120 °C durante 2,5 h bajo nitrógeno. La mezcla se concentró al vacío para eliminar la mayor parte del disolvente.. La solución de color marrón oscuro se añadió lentamente a EtOAc (8 l) con agitación. La mezcla resultante se lavó con agua (2,5 l) y salmuera (2,5 l x 2). La fase orgánica se secó con sulfato de sodio, se filtró y se concentró al vacío. El residuo se mezcló con EtOAc (300 ml) y se filtró. La torta filtrada se secó al vacío para dar el compuesto del título (87 g, rendimiento del 47 %) como sólido amarillo.

[0749] <1>H RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 14,73 (s, 1H), 13,69 (t, 1H), 10,28 (s, 1H), 8,21-8,13 (m, 2H), 7,67-7,66 (m, 2H), 7,10 (a.s, 1H), 7,09-7,04 (m, 2H), 4,61 (d, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,16 (t, 2H), 2,77 (t, 2H).

[0750] Productos intermedios 6-15

[0751] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0752]

[0754] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-4, 100 mg, 320 µmol) y 1-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-3, 114 mg, 480 µmol) como materiales de partida; se prepararon 74,3 mg (pureza del 80 %, rendimiento del 35 %) del compuesto del títuo tras calentamiento durante 4 h y purificación por cromatografía flash (sílice de fase amino, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[0756] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,880 (0,45), 2,176 (4,07), 2,186 (0,73), 2,191 (0,45), 2,518 (1,66), 2,523 (1,13), 2,787 (0,65), 2,799 (0,61), 3,162 (0,56), 3,169 (0,54), 3,533 (0,46), 3,539 (0,45), 3,711 (9,24), 3,819 (0,47), 3,823 (0,40), 4,149 (0,65), 4,161 (1,12), 4,176 (0,61), 4,655 (0,80), 4,670 (0,82), 5,759 (16,00), 7,086 (0,63), 7,107 (1,27), 7,127 (0,73), 7,283 (0,77), 7,287 (0,81), 7,302 (0,77), 7,306 (1,39), 7,318 (0,80), 7,723 (0,53), 7,803 (0,59), 7,806 (0,60), 7,823 (0,57), 7,827 (0,53), 8,234 (1,27), 8,246 (1,26), 8,392 (1,87), 14,791 (1,01).

[0757] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,84 min; MS (ESlpos): m/z = 532 [M+H]<+>

[0758] Productos intermedios 6-18

[0759] N-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0761]

[0763] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-18, 100 mg, 302 µmol) y 1-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-3, 108 mg, 453 µmol) como materiales de partida; se prepararon 166 mg (pureza del 70 %, rendimiento del 70 %) del compuesto del título tras purificación por cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[0765] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,881 (0,59), 1,908 (0,51), 1,984 (0,51), 1,991 (0,55), 2,174 (5,75), 2,185 (0,88), 2,191 (2,53), 2,518 (2,46), 2,523 (1,65), 2,581 (0,55), 2,609 (0,49), 2,785 (0,52), 2,798 (0,96), 2,815 (0,60), 3,096 (0,44), 3,161 (0,55), 3,168 (0,51), 3,387 (0,97), 3,535 (0,57), 3,542 (0,68), 3,700 (7,75), 3,786 (0,69), 3,791 (0,73), 3,795 (0,71), 3,810 (0,63), 3,815 (0,70), 3,823 (0,75), 4,115 (0,52), 4,119 (0,55), 4,128 (0,53), 4,154 (0,77), 4,166 (0,94), 4,181 (0,60), 4,672 (0,76), 4,687 (0,77), 5,759 (16,00), 7,267 (0,58), 7,275 (0,65), 7,287 (0,58), 7,295 (0,63), 7,313 (0,77), 7,325 (0,74), 7,792 (0,49), 8,046 (0,50), 8,053 (0,50), 8,073 (0,47), 8,080 (0,47), 8,238 (1,20), 8,250 (1,12), 8,267 (0,55), 8,279 (0,66), 8,399 (1,72), 15,080 (0,94).

[0766] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,11 min; MS (ESlpos): m/z = 550 [M+H]<+>

[0767] Productos intermedios 6-19

[0768] N-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0770]

[0772] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-18, 100 mg, 302 µmol) y 1-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-1, 94,9 mg, 423 µmol) como materiales de partida, se prepararon 160 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 89 % ) del compuesto del título tras purificación por cromatografía flash (sílice, DCM / EtOH 0-30 %).

[0774] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

) δ [ppm]: 0,821 (0,41), 0,904 (0,45), 1,035 (8,84), 1,052 (16,00), 1,070 (9,56), 1,154 (1,90), 1,172 (3,66), 1,189 (1,72), 1,987 (6,85), 2,518 (1,36), 2,522 (0,92), 2,790 (0,61), 3,157 (0,42), 3,404 (1,39), 3,417 (1,49), 3,421 (4,01), 3,434 (4,35), 3,439 (4,40), 3,452 (4,43), 3,457 (1,21), 3,461 (0,53), 3,469 (1,28), 3,501 (0,40), 3,652 (0,66), 3,655 (0,65), 3,702 (7,42), 3,750 (0,43), 3,785 (0,67), 3,788 (0,43), 3,890 (0,58), 3,999 (0,46), 4,017 (1,36), 4,035 (1,39), 4,053 (0,47), 4,156 (0,56), 4,165 (0,77), 4,179 (0,54), 4,343 (2,52), 4,356 (4,91), 4,368 (2,35), 4,683 (0,68), 4,697 (0,68), 7,272 (0,48), 7,280 (0,60), 7,293 (0,51), 7,300 (0,64), 7,305 (0,63), 7,317 (0,62), 7,800 (0,42), 8,032 (0,40), 8,040 (0,42), 8,059 (0,41), 8,066 (0,40), 8,242 (0,98), 8,254 (0,94), 8,394 (1,43), 15,078 (0,82).

[0775] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,14 min; MS (ESlpos): m/z = 537 [M+H]<+>

[0776] Productos intermedios 6-20

[0777] N-(3-fluoro-2-(metoxifenil)-4-{[(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0779]

[0781] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-4, 200 mg, 675 µmol) y 1-(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-4, 208 mg, 877 µmol) como materiales de partida, se prepararon 105 mg (pureza del 99 %, rendimiento del 30 %) del compuesto del título tras calentar durante 3 h y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[0783] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,195 (0,50), 2,203 (0,62), 2,221 (0,73), 2,224 (0,80), 2,229 (0,79), 2,232 (0,77), 2,250 (0,69), 2,258 (0,63), 2,287 (16,00), 2,322 (0,48), 2,326 (0,65), 2,331 (0,46), 2,518 (2,86), 2,522 (1,80), 2,645 (0,60), 2,651 (1,24), 2,658 (0,75), 2,664 (0,58), 2,668 (0,75), 2,673 (0,96), 2,680 (1,16), 2,687 (0,56), 2,760 (1,14), 2,776 (2,31), 2,793 (1,34), 3,134 (0,86), 3,142 (0,98), 3,152 (1,59), 3,158 (1,51), 3,167 (0,87), 3,175 (0,73), 3,347 (1,31), 3,371 (1,26), 3,375 (1,37), 3,398 (1,19), 3,473 (0,50), 3,480 (0,60), 3,501 (0,98), 3,507 (0,98), 3,527 (0,72), 3,533 (0,60), 3,677 (0,56), 3,683 (1,07), 3,690 (0,58), 3,704 (0,46), 3,711 (0,82), 3,718 (0,41), 3,780 (13,85), 3,783 (13,72), 3,884 (0,99), 3,892 (0,99), 3,912 (0,89), 3,920 (0,88), 4,029 (0,98), 4,044 (1,01), 4,054 (1,17), 4,070 (1,12), 4,291 (1,18), 4,302 (1,21), 4,317 (1,03), 4,327 (0,97), 4,658 (1,87), 4,674 (1,89), 7,044 (0,58), 7,049 (1,31), 7,065 (1,59), 7,069 (2,63), 7,075 (1,64), 7,085 (1,41), 7,090 (0,58), 7,096 (1,44), 7,101 (1,44), 7,117 (0,56), 7,122 (0,41), 7,296 (2,20), 7,308 (2,24), 7,653 (1,44), 7,658 (0,89), 7,670 (1,15), 7,676 (0,86), 7,704 (1,58), 8,236 (3,27), 8,247 (3,17), 8,411 (4,92), 13,661 (0,56), 13,676 (1,10), 13,690 (0,53), 14,736 (2,92).

[0784] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,62 min; MS (ESlpos): m/z = 516 [M+H]<+>

[0785] Productos intermedios 6-21

[0786] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0788]

[0790] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 200 mg, 639 µmol) y 1-(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-4, 197 mg, 831 µmol) como materiales de partida, se prepararon 102 mg (pureza del 99 %, rendimiento del 30 %) del compuesto del título tras calentar durante 3 h a 120 °C y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[0792] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2,288 (3,78), 2,327 (0,47), 2,518 (1,87), 2,523 (1,27), 2,651 (0,43), 2,665 (0,45), 2,669 (0,59), 2,673 (0,55), 2,679 (0,47), 2,769 (0,69), 2,786 (1,40), 2,803 (0,81), 3,141 (0,53), 3,148 (0,61), 3,157 (0,97), 3,164 (0,93), 3,174 (0,53), 3,181 (0,44), 3,346 (0,55), 3,372 (0,52), 3,506 (0,45), 3,684 (0,50), 3,712 (16,00), 3,883 (0,44), 3,891 (0,53), 3,912 (0,42), 4,293 (0,54), 4,304 (0,56), 4,319 (0,47), 4,329 (0,44), 4,663 (1,08), 4,679 (1,10), 7,088 (1,04), 7,108 (2,24), 7,128 (1,28), 7,285 (1,42), 7,289 (1,49), 7,301 (1,47), 7,305 (1,46), 7,309 (1,44), 7,312 (1,47), 7,726 (0,92), 7,794 (1,07), 7,797 (1,08), 7,814 (1,02), 7,818 (0,96), 8,238 (1,81), 8,250 (1,65), 8,413 (3,11), 13,667 (0,68), 14,787 (1,82).

[0793] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,68 min; MS (ESlpos): m/z = 532 [M+H]<+>

[0794] Productos intermedios 6-22

[0795] (2S)-2-[({4-[({5-[(3-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il]amino)metil]piridin-3-il]oxi)metil]-4-morfolin-carboxilato de terc-butilo

[0796]

[0798] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbothioamida (producto intermedio 5-4, 1,00 g, 3,37 mmol) y (2S)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolin-4-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 2-5, 1,53 g, 4,72 mmol) como materiales de partida; se prepararon 1,43 g (pureza del 70 %, rendimiento del 49 %) del compuesto del título tras calentar durante 6 h y purificar por cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH al 0-20 %).

[0799] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,035 (6,69), 1,052 (16,00), 1,070 (7,70), 1,394 (4,63), 1,401 (2,39), 1,405 (3,46), 2,331 (0,41), 2,518 (1,92), 2,523 (1,41), 2,673 (0,42), 3,404 (1,10), 3,417 (1,21), 3,422 (3,66), 3,435 (3,78), 3,440 (3,26), 3,452 (3,33), 3,457 (1,19), 3,469 (1,18), 3,780 (2,11), 3,782 (2,08), 3,797 (0,42), 3,857 (0,84), 3,860 (0,83), 4,219 (0,41), 4,231 (0,42), 4,344 (2,52), 4,356 (4,87), 4,369 (2,35), 8,241 (0,54), 8,253 (0,53), 8,402 (0,81), 14,735 (0,40).

[0800] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,19 min; MS (ESlpos): m/z = 602 [M+H]<+>

[0801] Productos intermedios 6-24

[0802] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[2-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0804]

[0806] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 200 mg, 639 µmol) y 1-(3-{2-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-6, 198 mg, 831 µmol) como materiales de partida, se prepararon 110 mg (pureza del 96 %, rendimiento del 31 %) del compuesto del título tras calentar durante 3 h a 130 °C y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[0807] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

) δ [ppm]: 1,792 (0,45), 1,812 (0,43), 1,838 (0,40), 1,850 (0,42), 2,518 (1,13), 2,523 (0,78), 2,763 (0,87), 2,771 (0,86), 2,780 (0,52), 2,786 (0,47), 3,140 (0,51), 3,148 (0,57), 3,156 (0,97), 3,164 (0,96), 3,173 (0,50), 3,181 (0,43), 3,197 (0,60), 3,224 (0,94), 3,227 (0,95), 3,253 (0,64), 3,445 (0,75), 3,452 (0,83), 3,471 (0,48), 3,480 (0,60), 3,545 (0,45), 3,551 (0,53), 3,573 (0,70), 3,580 (0,81), 3,605 (0,86), 3,611 (1,14), 3,617 (0,53), 3,638 (0,55), 3,644 (0,47), 3,689 (0,92), 3,697 (1,10), 3,712 (16,00), 3,718 (2,12), 3,744 (0,88), 3,749 (0,65), 4,203 (0,84), 4,219 (1,35), 4,232 (0,58), 4,238 (0,56), 4,656 (1,44), 4,670 (1,43), 7,089 (1,01), 7,110 (2,16), 7,130 (1,25), 7,286 (1,37), 7,289 (1,46), 7,306 (2,13), 7,310 (1,42), 7,317 (1,10), 7,726 (0,93), 7,802 (1,03), 7,806 (1,05), 7,823 (0,99), 7,826 (0,93), 8,225 (1,23), 8,237 (1,18), 8,373 (1,98), 13,695 (0,65), 14,792 (1,75).

[0808] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,90 min; MS (ESlpos): m/z = 533 [M+H]<+>

[0809] Productos intermedios 6-27

[0810] (2S)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0812]

[0814] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-18, 225 mg, 680 µmol) y (2S)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 2-5, 308 mg, 952 µmol) como materiales de partida; se prepararon 150 mg (pureza del 80 %, rendimiento del 28 %) del compuesto del título tras calentar durante 6 h y purificar por cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-20 %).

[0816] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,035 (2,70), 1,052 (5,86), 1,070 (3,02), 1,232 (0,46), 1,389 (16,00), 1,405 (6,16), 1,419 (1,21), 2,331 (0,75), 2,430 (0,47), 2,447 (0,51), 2,518 (3,46), 2,523 (2,53), 2,673 (0,75), 2,772 (0,61), 2,789 (1,14), 2,805 (0,74), 3,137 (0,46), 3,145 (0,53), 3,154 (0,79), 3,161 (0,75), 3,405 (0,58), 3,417 (0,72), 3,422 (1,54), 3,435 (1,70), 3,440 (1,70), 3,445 (0,63), 3,452 (1,56), 3,457 (0,61), 3,469 (0,63), 3,655 (0,79), 3,699 (12,68), 3,719 (0,53), 3,732 (0,75), 3,738 (0,84), 3,757 (0,49), 3,764 (0,44), 3,787 (2,07), 3,821 (0,49), 3,842 (0,93), 3,870 (0,40), 4,225 (1,58), 4,237 (1,60), 4,344 (0,84), 4,357 (1,63), 4,370 (0,82), 4,681 (1,14), 4,696 (1,11), 5,759 (0,75), 7,267 (0,93), 7,275 (1,12), 7,287 (0,96), 7,295 (1,05), 7,311 (0,79), 7,323 (0,79), 7,799 (0,77), 8,031 (0,67), 8,038 (0,68), 8,057 (0,67), 8,065 (0,63), 8,245 (1,81), 8,257 (1,63), 8,290 (0,54), 8,410 (2,60), 13,671 (0,58), 15,074 (1,58). LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,30 min; MS (ESlpos): m/z = 636 [M+H]<+>

[0817] Productos intermedios 6-29

[0818] N-(3-cloro-2-etilfenil)-4-[({3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0819]

[0821] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-2-etilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-29, 300 mg, 965 µmol) y 1-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-3, 321 mg, 1,35 mmol) como materiales de partida, se prepararon 300 mg (pureza del 80 %, rendimiento del 47 %) del compuesto del título tras calentamiento durante 6 h y purificación por cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-20 %).

[0823] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 0,798 (0,84), 0,814 (0,93), 0,821 (0,93), 0,840 (0,43), 0,886 (0,53), 0,904 (1,07), 0,922 (0,50), 1,035 (9,51), 1,052 (16,00), 1,066 (1,09), 1,070 (9,08), 1,073 (1,50), 1,232 (0,45), 1,874 (0,59), 1,901 (0,47), 1,907 (0,59), 1,983 (0,41), 1,990 (0,52), 2,178 (5,56), 2,195 (1,38), 2,202 (0,47), 2,331 (0,74), 2,518 (3,86), 2,522 (2,50), 2,580 (0,57), 2,591 (1,05), 2,610 (1,21), 2,673 (0,95), 2,784 (0,95), 2,817 (0,50), 3,162 (0,41), 3,172 (0,69), 3,179 (0,65), 3,404 (1,33), 3,417 (1,38), 3,421 (3,41), 3,434 (3,43), 3,439 (3,91), 3,452 (4,01), 3,457 (1,15), 3,469 (1,19), 3,529 (0,57), 3,535 (0,57), 3,735 (0,55), 3,784 (0,47), 3,788 (0,47), 3,792 (0,47), 3,812 (0,64), 3,816 (0,62), 4,111 (0,41), 4,123 (0,48), 4,138 (0,83), 4,149 (0,83), 4,154 (0,88), 4,168 (0,74), 4,343 (2,64), 4,356 (5,06), 4,368 (2,39), 4,636 (0,93), 4,651 (0,93), 7,205 (1,50), 7,208 (1,38), 7,218 (2,69), 7,296 (1,02), 7,305 (1,02), 7,308 (1,05), 7,315 (1,17), 7,327 (0,55), 7,701 (0,64), 8,228 (1,50), 8,240 (1,38), 8,282 (0,47), 8,385 (2,07), 13,654 (0,43), 14,636 (1,17).

[0824] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,14 min; MS (ESlpos): m/z = 530 [M+H]<+>

[0825] Productos intermedios 6-30

[0826] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0828]

[0830] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-1, 200 mg, 639 µmol) y 1-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-7, 210 mg, 831 µmol) como materiales de partida; 55,0 mg (pureza del 98 %, rendimiento del 15 %) del compuesto del título tras calentar durante 3 h a 130 °C y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 -55 % B).

[0832] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,042 (9,29), 1,249 (8,31), 2,518 (2,85), 2,523 (1,83), 2,752 (0,79), 2,768 (1,57), 2,785 (0,95), 3,147 (0,74), 3,156 (1,18), 3,164 (1,13), 3,299 (1,11), 3,533 (1,90), 3,562 (1,50), 3,628 (0,50), 3,648 (1,21), 3,658 (1,28), 3,667 (1,26), 3,691 (1,55), 3,713 (16,00), 3,720 (1,14), 3,795 (0,51), 3,806 (0,64), 3,817 (0,52), 4,154 (0,42), 4,164 (0,43), 4,180 (1,25), 4,191 (1,23), 4,198 (1,31), 4,212 (1,18), 4,225 (0,43), 4,663 (1,86), 4,678 (1,86), 7,088 (1,13), 7,108 (2,42), 7,128 (1,39), 7,286 (1,58), 7,290 (1,68), 7,305 (2,17), 7,310 (1,58), 7,316 (1,59), 7,729 (1,16), 7,799 (1,26), 7,803 (1,27), 7,819 (1,18), 7,823 (1,14), 8,241 (1,91), 8,253 (1,81), 8,397 (3,02), 13,669 (0,43), 13,683 (0,81), 14,792 (2,17).

[0833] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,04 min; MS (ESlpos): m/z = 547 [M+H]<+>

[0834] Productos intermedios 6-33

[0835] 4-[({3-[(5,5-[dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0837]

[0839] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1; N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-1, 200 mg, 675 µmol) y 1-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-7, 221 mg, 877 µmol) como materiales de partida, se prepararon 130 mg (pureza del 96 %, rendimiento del 35 %) del compuesto del título tras calentar durante 2 h a 130°C y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[0841] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,043 (15,59), 1,251 (13,74), 2,518 (2,60), 2,523 (1,78), 2,742 (1,25), 2,759 (2,52), 2,775 (1,52), 3,134 (1,00), 3,142 (1,15), 3,152 (1,86), 3,158 (1,79), 3,167 (1,02), 3,175 (0,86), 3,300 (1,91), 3,535 (3,14), 3,563 (2,56), 3,622 (0,60), 3,630 (0,81), 3,650 (1,97), 3,659 (2,07), 3,668 (2,14), 3,692 (2,45), 3,722 (1,19), 3,782 (15,81), 3,785 (16,00), 3,796 (0,91), 3,808 (1,03), 3,819 (0,82), 3,832 (0,62), 4,155 (0,57), 4,165 (0,61), 4,181 (1,80), 4,192 (1,83), 4,198 (1,91), 4,212 (1,68), 4,225 (0,61), 4,238 (0,55), 4,658 (2,20), 4,672 (2,17), 7,029 (0,54), 7,045 (0,69), 7,050 (1,65), 7,065 (1,84), 7,069 (2,29), 7,071 (2,14), 7,077 (2,06), 7,085 (1,65), 7,093 (0,69), 7,098 (1,72), 7,103 (1,74), 7,119 (0,69), 7,124 (0,54), 7,307 (0,94), 7,317 (0,99), 7,657 (1,74), 7,662 (1,08), 7,676 (1,36), 7,681 (1,03), 7,708 (1,84), 8,254 (0,72), 8,404 (0,81), 13,678 (0,65), 13,693 (1,25), 13,707 (0,60), 14,741 (3,47).

[0842] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,94 min; MS (ESlpos): m/z = 531 [M+H]<+>

[0843] Productos intermedios 6-35

[0844] 4-{[(3-{2-[1,4-dioxan-2-il]etoxi-piridin-4-il)metil]amino}-N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida

[0845]

[0847] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1; N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-4, 200 mg, 675 µmol) y 1-(3-{2-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-6, 209 mg, 877 µmol) como materiales de partida, se prepararon 137 mg (pureza del 96 %, rendimiento del 38 %) del compuesto del título.

[0848] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,83 min; MS (ESlpos): m/z = 517 [M+H]<+>

[0850] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,757 (0,42), 1,778 (0,61), 1,793 (0,89), 1,813 (0,86), 1,822 (0,55), 1,826 (0,49), 1,833 (0,54), 1,840 (0,80), 1,852 (0,85), 1,857 (0,64), 1,868 (0,60), 2,518 (2,52), 2,523 (1,61), 2,674 (0,45), 2,735 (0,74), 2,752 (1,68), 2,761 (1,69), 2,769 (1,02), 2,777 (0,89), 3,134 (1,00), 3,142 (1,11), 3,151 (1,92), 3,159 (1,89), 3,168 (0,98), 3,175 (0,85), 3,198 (1,19), 3,224 (1,91), 3,228 (1,91), 3,254 (1,24), 3,421 (0,47), 3,425 (0,68), 3,446 (1,52), 3,453 (1,67), 3,472 (0,99), 3,481 (1,19), 3,545 (0,92), 3,552 (1,09), 3,574 (1,39), 3,580 (1,60), 3,606 (1,73), 3,612 (2,26), 3,618 (1,04), 3,639 (1,07), 3,645 (0,93), 3,690 (1,77), 3,697 (2,11), 3,709 (0,79), 3,719 (3,54), 3,728 (1,41), 3,735 (0,73), 3,744 (1,71), 3,751 (1,33), 3,782 (15,79), 3,784 (16,00), 4,203 (1,78), 4,219 (2,73), 4,232 (1,20), 4,237 (1,18), 4,653 (2,89), 4,667 (2,88), 7,030 (0,49), 7,046 (0,68), 7,051 (1,63), 7,067 (1,82), 7,070 (3,31), 7,077 (2,11), 7,086 (1,65), 7,092 (0,71), 7,098 (1,72), 7,103 (1,73), 7,119 (0,68), 7,124 (0,52), 7,303 (1,99), 7,314 (2,03), 7,660 (1,68), 7,665 (1,06), 7,677 (1,35), 7,683 (1,07), 7,703 (1,84), 8,226 (1,84), 8,237 (1,79), 8,373 (2,98), 13,689 (0,64), 13,704 (1,28), 13,718 (0,60), 14,740 (3,42).

[0851] Productos intermedios 6-37

[0852] N-(3-fluoro-2-(metoxifenil)-4-{[(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0854]

[0856] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-4, 200 mg, 675 µmol) y 1-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-2, 224 mg, 945 µmol) como materiales de partida; se prepararon 134 mg del compuesto del título (rendimiento del 38 %) tras calentamiento durante 1 h a 124 °C y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[0857] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,205 (0,86), 2,226 (1,57), 2,254 (1,23), 2,290 (15,27), 2,327 (1,28), 2,654 (2,07), 2,681 (1,95), 2,762 (2,11), 2,779 (3,81), 2,795 (2,41), 3,155 (3,13), 3,374 (3,80), 3,401 (2,16), 3,482 (0,97), 3,504 (1,80), 3,531 (1,16), 3,686 (1,75), 3,714 (1,51), 3,784 (16,00), 3,888 (1,65), 3,916 (1,59), 4,031 (1,27), 4,047 (1,48), 4,057 (1,61), 4,073 (1,47), 4,294 (1,53), 4,304 (1,57), 4,320 (1,45), 4,328 (1,29), 4,661 (3,52), 4,675 (3,54), 7,031 (0,48), 7,052 (1,50), 7,070 (3,26), 7,087 (1,82), 7,099 (1,95), 7,122 (0,79), 7,299 (2,83), 7,311 (2,84), 7,655 (2,12), 7,672 (2,11), 7,706 (2,52), 8,239 (3,08), 8,250 (2,98), 8,414 (5,21), 13,678 (1,85), 14,738 (3,80).

[0858] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,64 min; MS (ESlpos): m/z = 516 [M+H]<+>

[0859] Productos intermedios 6-38

[0860] 4-[[3-[(5,5-[dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]metilamino]-N-(3-fluoro-2-metilfenil)-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida

[0862]

[0864] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-fluoro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-38, 350 mg, 1,25 mmol) y 1-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-7, 315 mg, 1,25 mmol) como materiales de partida; se prepararon 192 mg del compuesto del título (rendimiento del 27%) tras calentar durante 3 h a 120 °C y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 11, gradiente: 0,00 - 2,00 min 30 % B, 2,00 - 14,00 min 30 - 70 % B).

[0866] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,046 (16,00), 1,253 (14,02), 2,045 (8,35), 2,050 (8,21), 2,063 (1,09), 2,521 (2,37), 2,525 (1,62), 2,741 (1,29), 2,757 (2,61), 2,774 (1,60), 3,145 (1,01), 3,152 (1,15), 3,161 (1,90), 3,168 (1,80), 3,178 (0,99), 3,185 (0,85), 3,298 (1,92), 3,534 (3,17), 3,562 (2,60), 3,617 (0,65), 3,626 (0,83), 3,647 (2,00), 3,656 (2,10), 3,666 (2,13), 3,690 (2,57), 3,719 (1,29), 3,780 (0,43), 3,793 (0,82), 3,803 (1,04), 3,814 (0,83), 3,828 (0,60), 4,148 (0,72), 4,159 (0,78), 4,174 (2,17), 4,186 (2,01), 4,194 (2,14), 4,208 (2,03), 4,220 (0,76), 4,234 (0,69), 4,647 (3,08), 4,662 (3,06), 7,040 (0,87), 7,061 (1,78), 7,074 (1,74), 7,085 (1,37), 7,094 (2,40), 7,189 (0,89), 7,208 (1,38), 7,225 (1,30), 7,244 (0,54), 7,295 (2,49), 7,307 (2,52), 7,686 (1,77), 8,237 (2,54), 8,249 (2,42), 8,393 (3,97), 13,662 (1,07), 14,520 (2,54).

[0867] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,98 min; MS (ESlpos): m/z = 515 [M+H]<+>

[0868] Productos intermedios 6-40

[0869] N-[2-(2,2-[difluoroetil)-3-fluoro-fenil]-4-[[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]metilamino]-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida

[0870]

[0872] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluorofenil]-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-40, 100 mg, 303 µmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 95,0 mg, 424 µmol) como materiales de partida; se prepararon 19,5 mg del compuesto del título (rendimiento del 10 %) tras purificación por cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[0873] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,07 min; MS (ESlpos): m/z = 537 [M+H]<+>

[0874] Productos intermedios 6-41

[0875] (2S)-2-{[(4-{[(5-{[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluorofenil]carbamotioil}-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)amino]metil}piridin-3-il)oxi]metil}morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0877]

[0879] Una mezcla deN-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluorofenil]-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-40, 200 mg, 605 µmol) y (2S)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolin-4-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 2-5, 274 mg, 848 µmol) en ACN (2,5 ml) se trató conN,O-bis-(trimetilsilil)acetamida (111 µl, 0,6 mmol, CAS 10416-59-8) y se agitó a 80 °C durante 5 h. La reacción se trató con otro equivalente (111 µl, 0,6 mmol) deN,O-bis-(trimetilsiliil)acetamida y se agitó a 80 °C durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó en DCM y se purificó por cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-20 %) para dar 255 mg (rendimiento del 45 %) del compuesto del título.

[0880] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,25 min; MS (ESlpos): m/z = 636 [M+H]<+>

[0881] Productos intermedios 6-42

[0882] (2S)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-2-metilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il]amino)metil]piridin-3-il]oxi)metil]morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0883]

[0886] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-10, 350 mg, 1,18 mmol) y (2S)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolin-4-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 2-5, 381 mg, 1,18 mmol) como material de partida; se prepararon 208 mg del compuesto del título (pureza del 99 %, rendimiento del 29 %) tras calentar durante 3 h y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 11, 0,00-1,00 min 30 % B, 1,00-12,74 min 30-68,9 % B, 12,74 - 14,19 min 68,9 B, 14,19 - 14,45 min 68,9 - 70 % B).

[0888] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,396 (16,00), 2,077 (0,96), 2,158 (7,73), 2,520 (2,53), 2,525 (1,63), 2,542 (0,50), 2,747 (0,68), 2,763 (1,35), 2,780 (0,85), 3,146 (0,53), 3,153 (0,62), 3,162 (0,99), 3,169 (0,96), 3,434 (0,57), 3,441 (0,60), 3,710 (0,46), 3,723 (0,54), 3,730 (0,70), 3,737 (0,68), 3,749 (0,56), 3,756 (0,45), 3,837 (0,42), 4,213 (1,89), 4,225 (1,86), 4,648 (1,39), 4,663 (1,40), 7,153 (0,57), 7,170 (1,15), 7,196 (0,92), 7,216 (1,36), 7,236 (0,59), 7,294 (0,89), 7,306 (0,92), 7,326 (1,13), 7,329 (1,10), 7,346 (0,85), 7,349 (0,79), 7,691 (0,91), 8,237 (2,11), 8,249 (1,94), 8,399 (3,05), 13,653 (0,59), 14,540 (1,38).

[0890] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,17 min; MS (ESlpos): m/z = 602 [M+H]<+>

[0892] Productos intermedios 6-43

[0894] (3R)-3-[({4-[({5-[(3-cloro-2-metilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il]amino)metil]piridin-3-il]oxi)metil]-4-carboxilato de terc-butilo

[0896]

[0899] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-1 conN-(3-cloro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-10, 350 mg, 1,18 mmol) y (3R)-3-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolin-4-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 2-9, 381 mg, 1,18 mmol) como materiales de partida; se prepararon 184 mg del compuesto del título (pureza del 99 %, rendimiento del 26 %) tras calentar durante 3 h y mediante HPLC preparativa (procedimiento 11, 0,00-1,00 min 30 % B, 1,00-12,74 min 30-68,9 % B, 12,74 - 14,19 min 68,9 B, 14,19 - 14,45 min 68,9 - 70 % B).

[0900] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,339 (2,92), 2,087 (1,31), 2,161 (16,00), 2,521 (1,63), 2,525 (1,08), 2,676 (0,52), 2,708 (0,66), 2,725 (1,74), 2,742 (1,82), 2,757 (0,75), 3,140 (1,42), 3,147 (1,59), 3,156 (2,44), 3,163 (2,41), 3,319 (0,58), 3,365 (1,06), 3,372 (1,25), 3,395 (0,56), 3,402 (0,54), 3,478 (0,92), 3,507 (1,00), 3,651 (0,51), 3,797 (0,72), 3,821 (0,64), 3,957 (0,67), 3,985 (0,59), 4,236 (1,53), 4,415 (0,46), 4,441 (0,83), 4,625 (2,12), 4,639 (2,15), 7,160 (1,07), 7,178 (2,26), 7,200 (2,08), 7,220 (3,03), 7,239 (1,27), 7,291 (1,19), 7,301 (1,19), 7,329 (2,50), 7,332 (2,34), 7,349 (1,83), 7,352 (1,71), 7,691 (1,99), 8,240 (3,22), 8,252 (3,11), 8,489 (2,72), 13,669 (0,94), 14,536 (3,05). LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,17 min; MS (ESlpos): m/z = 602 [M+H]<+>

[0901] Productos intermedios 6-44

[0902] N-(3-cloro-2-metil-fenil)-4-[[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]metilamino]-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida

[0904]

[0906] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-10, 200 mg, 674 µmol) y 1-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-7, 200 mg, pureza del 85 %, 674 µmol) como materiales de partida; se prepararon 328 mg del compuesto del título (pureza del 97 %, rendimiento del 89 %).

[0908] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,047 (14,25), 1,253 (12,85), 2,077 (16,00), 2,162 (14,45), 2,520 (1,87), 2,525 (1,19), 2,742 (1,21), 2,759 (2,44), 2,775 (1,45), 3,147 (0,98), 3,154 (1,11), 3,163 (1,80), 3,170 (1,74), 3,180 (0,98), 3,186 (0,82), 3,297 (1,66), 3,327 (2,92), 3,533 (2,87), 3,561 (2,30), 3,617 (0,55), 3,626 (0,77), 3,646 (1,84), 3,655 (1,96), 3,664 (1,91), 3,689 (2,20), 3,718 (1,12), 3,791 (0,79), 3,802 (0,97), 3,812 (0,78), 3,826 (0,56), 4,147 (0,62), 4,158 (0,66), 4,173 (1,85), 4,184 (1,77), 4,193 (1,88), 4,206 (1,73), 4,220 (0,66), 4,233 (0,60), 4,644 (2,79), 4,659 (2,74), 7,158 (1,13), 7,175 (2,37), 7,200 (1,72), 7,220 (2,58), 7,239 (1,09), 7,298 (1,31), 7,310 (1,39), 7,328 (2,08), 7,332 (2,01), 7,348 (1,56), 7,351 (1,42), 7,689 (1,69), 8,245 (0,80), 8,399 (1,03), 13,621 (0,57), 13,635 (1,07), 14,542 (2,54).

[0909] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,06 min; MS (ESlpos): m/z = 531 [M+H]<+>

[0910] Productos intermedios 6-47

[0911] 4-[[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]metilamino]-N-(3-fluoro-2-metil-fenil)-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida

[0912]

[0914] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-fluoro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-38, 300 mg, 1,07 mmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 240 mg, 1,07 mmol) como materiales de partida; se prepararon 156,3 mg del compuesto del título (pureza del 93 %, rendimiento del 71 %).

[0915] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 0,000 (0,70), 1,998 (0,55), 2,033 (16,00), 2,038 (15,45), 2,064 (3,23), 2,508 (3,78), 2,513 (2,36), 2,737 (2,61), 2,754 (5,23), 2,771 (2,96), 3,142 (2,39), 3,151 (3,71), 3,158 (3,53), 3,168 (2,07), 3,393 (2,34), 3,418 (3,51), 3,421 (3,41), 3,446 (3,16), 3,461 (1,34), 3,482 (2,56), 3,488 (2,76), 3,506 (1,42), 3,516 (2,71), 3,579 (1,64), 3,585 (1,94), 3,608 (2,49), 3,614 (2,79), 3,641 (5,03), 3,670 (1,97), 3,735 (2,71), 3,744 (2,66), 3,769 (2,09), 3,837 (2,39), 3,844 (2,81), 3,871 (4,35), 3,883 (1,72), 3,890 (1,32), 3,895 (1,57), 3,902 (1,32), 3,907 (1,44), 3,914 (1,14), 3,926 (0,62), 4,108 (0,85), 4,120 (0,95), 4,134 (3,73), 4,145 (6,69), 4,158 (3,48), 4,171 (0,87), 4,184 (0,75), 4,624 (4,75), 4,639 (4,68), 7,028 (1,64), 7,050 (3,46), 7,062 (3,48), 7,073 (2,79), 7,081 (4,60), 7,179 (1,62), 7,198 (2,71), 7,215 (2,51), 7,235 (1,00), 7,333 (1,12), 7,676 (3,41), 8,321 (0,42), 13,651 (2,04), 14,509 (4,80).

[0916] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,85 min; MS (ESlpos): m/z = 487 [M+H]<+>

[0917] Productos intermedios 6-50

[0918] N-(3-cloro-2-metil-fenil)-4-[[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]metilamino]-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida

[0920]

[0922] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-10, 200 mg, 674 µmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 151 mg, 674 µmol) como materiales de partida; 150,0 mg del compuesto del título (pureza del 96 %, rendimiento del 42 %).

[0923] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,077 (1,64), 2,162 (16,00), 2,520 (2,60), 2,525 (1,64), 2,751 (1,41), 2,768 (2,82), 2,784 (1,63), 3,156 (1,22), 3,165 (1,94), 3,172 (1,87), 3,404 (1,32), 3,429 (1,94), 3,432 (1,93), 3,457 (1,81), 3,472 (0,72), 3,493 (1,40), 3,500 (1,50), 3,518 (0,79), 3,528 (1,45), 3,591 (0,91), 3,597 (1,05), 3,619 (1,35), 3,626 (1,54), 3,650 (2,14), 3,653 (2,65), 3,660 (0,95), 3,682 (1,04), 3,748 (1,44), 3,756 (1,54), 3,781 (1,16), 3,849 (1,30), 3,855 (1,59), 3,883 (2,54), 3,894 (0,99), 3,901 (0,68), 3,906 (0,89), 3,913 (0,76), 3,918 (0,79), 3,925 (0,62), 3,930 (0,51), 4,118 (0,55), 4,129 (0,59), 4,144 (2,26), 4,155 (4,42), 4,168 (2,30), 4,181 (0,52), 4,194 (0,48), 4,648 (3,19), 4,663 (3,19), 7,159 (1,24), 7,176 (2,55), 7,203 (1,84), 7,222 (2,83), 7,242 (1,22), 7,290 (2,72), 7,302 (2,78), 7,330 (2,22), 7,333 (2,19), 7,349 (1,69), 7,353 (1,54), 7,691 (1,83), 8,233 (4,07), 8,245 (3,96), 8,383 (6,40), 13,623 (0,61), 13,637 (1,14), 14,544 (2,74).

[0924] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,94 min; MS (ESlpos): m/z = 503 [M+H]<+>

[0925] Productos intermedios 6-52

[0926] N-(3-(cloro-2-etil-fenil)-4-[[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]metilamino]-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida

[0928]

[0930] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-etilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-29, 150 mg, 483 µmol) y 1-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-1, 108 mg, 483 µmol) como materiales de partida; se prepararon 150,0 mg del compuesto del título (pureza del 90 %, rendimiento del 54 %) mediante cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 1-13 %).

[0932] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ ppm= 1,01 - 1,11 (m, 4 H), 2,56 - 2,65 (m, 2 H), 2,73 - 2,81 (m, 2 H), 3,12 - 3,22 (m, 2 H), 3,39 - 3,54 (m, 3 H), 3,58 - 3,69 (m, 2 H), 3,73 - 3,80 (m, 1 H), 3,88 (s, 2 H), 4,09 - 4,23 (m, 2 H), 4,11 -4,15 (m, 1 H), 4,57 - 4,71 (m, 2 H), 7,16 - 7,25 (m, 2 H), 7,28 - 7,36 (m, 2 H), 7,32 (s, 1 H), 7,66 - 7,75 (m, 1 H), 8,07 - 8,11 (m, 1 H), 8,21 - 8,26 (m, 1 H), 8,33 - 8,43 (m, 1 H), 13,60 - 13,70 (m, 1 H), 14,59 - 14,67 (m, 1 H). LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,15 min; MS (ESlpos): m/z = 517 [M+H]<+>

[0933] Productos intermedios 6-53

[0934] N-(3-cloro-2-etilfenil)-4-{[(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0936]

[0938] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-etilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 5-29, 210 mg, 676 µmol) y 1-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-8, 185 mg, pureza del 90 %, 743 µmol) como materiales de partida; se prepararon 320,0 mg del compuesto del título (rendimiento del 86 %) mediante cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 1-15 %).

[0940] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,036 (8,39), 1,040 (4,03), 1,053 (16,00), 1,059 (9,01), 1,071 (8,71), 1,078 (3,84), 2,066 (0,41), 2,518 (1,19), 2,523 (0,81), 2,577 (0,95), 2,596 (2,98), 2,614 (2,87), 2,632 (0,86), 2,757 (1,69), 2,774 (3,38), 2,790 (1,92), 3,152 (1,31), 3,159 (1,49), 3,169 (2,36), 3,174 (2,23), 3,185 (1,26), 3,403 (1,67), 3,405 (1,77), 3,418 (1,45), 3,423 (4,19), 3,427 (2,48), 3,430 (2,54), 3,435 (4,26), 3,440 (3,60), 3,453 (4,76), 3,457 (2,12), 3,470 (1,96), 3,492 (1,59), 3,498 (1,73), 3,516 (0,85), 3,526 (1,70), 3,589 (1,03), 3,594 (1,21), 3,617 (1,57), 3,623 (1,85), 3,651 (3,24), 3,679 (1,31), 3,745 (1,75), 3,754 (1,70), 3,779 (2,03), 3,847 (1,59), 3,853 (1,84), 3,880 (2,81), 3,893 (1,13), 3,900 (0,84), 3,905 (1,04), 3,912 (0,89), 3,917 (0,95), 3,924 (0,75), 3,929 (0,59), 3,936 (0,44), 4,116 (0,64), 4,127 (0,69), 4,142 (2,65), 4,154 (5,01), 4,167 (2,53), 4,180 (0,60), 4,193 (0,55), 4,343 (2,64), 4,356 (5,10), 4,369 (2,52), 4,647 (3,70), 4,662 (3,66), 7,209 (5,05), 7,211 (4,85), 7,222 (8,23), 7,231 (0,55), 7,293 (2,86), 7,307 (4,24), 7,319 (3,43), 7,331 (1,67), 7,706 (2,31), 8,234 (3,16), 8,246 (3,01), 8,383 (5,19), 13,642 (0,84), 13,657 (1,55), 13,672 (0,72), 14,639 (4,11).

[0941] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,17 min; MS (ESlpos): m/z = 517 [M+H]<+>

[0942] Productos intermedios 6-55

[0943] (2R)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-2-etilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0945]

[0947] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-etilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-29, 300 mg, 965 µmol) y (2R)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil)morfolin-4-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 2-10, 312 mg, 965 µmol) como materiales de partida; 476,0 mg del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 76 %) mediante cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 1-10 %).

[0949] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,036 (1,51), 1,055 (3,57), 1,073 (1,55), 1,393 (16,00), 2,518 (1,71), 2,523 (1,10), 2,590 (1,19), 2,609 (1,16), 2,751 (0,68), 2,769 (1,33), 2,785 (0,84), 3,165 (0,96), 3,171 (0,92), 3,431 (0,55), 3,438 (0,59), 3,729 (0,71), 3,749 (0,48), 3,756 (0,41), 3,835 (0,41), 4,210 (1,81), 4,222 (1,76), 4,646 (1,35), 4,662 (1,35), 5,758 (7,84), 7,202 (2,06), 7,214 (2,99), 7,296 (1,00), 7,304 (1,58), 7,316 (1,60), 7,328 (0,75), 7,703 (0,94), 8,236 (1,90), 8,248 (1,81), 8,398 (2,84), 13,671 (0,64), 14,632 (1,67).

[0950] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,32 min; MS (ESlpos): m/z = 616 [M+H]<+>

[0951] Productos intermedios 6-56

[0952] (2S)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-2-etilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[0954]

[0956] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-etilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-29, 300 mg, 965 µmol) y (2S)-2-({[4-(aminometil)piridin-3-il]oxi}metil) morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 2-5, 312 mg, 965 µmol) como materiales de partida;se prepararon 479,0 mg del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 77 %) tras purificación por cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 1-10 %).

[0958] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 14,55 - 14,67 (m, 1H), 13,60 - 13,72 (m, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,24 (d, 1H), 7,70 (s a, 1H), 7,16 - 7,36 (m, 4H), 5,70 - 5,80 (m, 1H), 5,66 - 5,81 (m, 1H), 4,59 - 4,73 (m, 2H), 4,12 - 4,27 (m, 2H), 3,80 - 3,99 (m, 2H), 3,65 - 3,78 (m, 2H), 3,37 - 3,50 (m, 1H), 3,10 - 3,22 (m, 2H), 2,70 - 2,99 (m, 4H), 2,55 - 2,64 (m, 2H), 1,30 - 1,46 (m, 9H), 1,01 - 1,12 (m, 3H).

[0959] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,32 min; MS (ESlpos): m/z = 616 [M+H]<+>

[0960] Productos intermedios 6-57

[0961] N-(3-(cloro-2-metoxifenil)-4-([{3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0963]

[0965] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 300 mg, 959 µmol) y 1-{3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-11, 251 mg, 1,06 mmol) como materiales de partida; se prepararon 384 mg del compuesto del título (pureza del 99 %, rendimiento del 74 %) como mezcla de diastereómeros.

[0967] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 0,064 (0,95), 1,239 (2,82), 1,255 (2,83), 1,279 (2,06), 1,295 (2,09), 2,518 (1,11), 2,523 (0,82), 2,761 (0,76), 2,777 (0,86), 3,141 (0,52), 3,148 (0,60), 3,157 (1,00), 3,164 (0,99), 3,181 (0,43), 3,417 (0,87), 3,443 (0,88), 3,455 (0,44), 3,462 (0,47), 3,470 (0,68), 3,476 (0,41), 3,591 (0,40), 3,597 (0,65), 3,620 (0,88), 3,632 (0,76), 3,639 (0,41), 3,647 (0,54), 3,653 (0,56), 3,672 (0,40), 3,678 (0,44), 3,711 (16,00), 3,732 (0,56), 3,766 (0,89), 3,772 (0,52), 3,794 (0,57), 4,651 (1,27), 4,665 (1,31), 4,682 (0,58), 7,090 (0,70), 7,110 (1,53), 7,131 (0,88), 7,287 (1,67), 7,289 (1,87), 7,300 (1,26), 7,305 (1,12), 7,309 (1,02), 7,314 (0,67), 7,726 (0,98), 7,791 (0,95), 7,794 (0,96), 7,811 (0,90), 7,815 (0,85), 8,198 (1,34), 8,211 (1,99), 8,223 (0,91), 8,416 (1,88), 8,432 (1,35), 13,666 (0,43), 13,675 (0,50), 14,790 (1,61).

[0968] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,96 min y Rt = 0,98 min; MS (ESlpos): m/z = 533,2 [M+H]<+>

[0969] Productos intermedios 6-60

[0970] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{(1R)-1-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0972]

[0973] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 300 mg, 959 µmol) y 1-{3-[(1R)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metanamina (producto intermedio 2-12, 251 mg, 1,06 mmol) como materiales de partida; se prepararon 346 mg (pureza del 99 %, rendimiento del 67 %) del compuesto del título.

[0975] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO- d<6>): δ [ppm]= 1,278 (5,25), 1,294 (5,21), 2,073 (0,98), 2,331 (0,40), 2,518 (2,02), 2,522 (1,36), 2,673 (0,42), 2,749 (0,74), 2,765 (0,56), 2,775 (0,83), 2,792 (0,42), 3,140 (0,62), 3,147 (0,73), 3,156 (1,17), 3,164 (1,16), 3,417 (0,81), 3,441 (1,16), 3,445 (1,15), 3,469 (1,68), 3,475 (0,85), 3,503 (0,74), 3,570 (0,47), 3,576 (0,55), 3,598 (0,72), 3,604 (0,82), 3,631 (1,87), 3,638 (0,97), 3,646 (0,63), 3,652 (0,78), 3,657 (1,02), 3,663 (0,93), 3,670 (0,52), 3,677 (0,47), 3,710 (16,00), 3,758 (0,87), 3,767 (0,74), 3,790 (0,67), 3,920 (0,78), 3,926 (0,76), 3,949 (0,72), 3,955 (0,66), 4,646 (1,57), 4,653 (1,48), 4,662 (1,63), 4,682 (0,73), 7,092 (1,08), 7,112 (2,33), 7,133 (1,33), 7,287 (1,60), 7,290 (1,60), 7,302 (1,73), 7,306 (1,61), 7,310 (1,69), 7,314 (1,68), 7,725 (1,16), 7,791 (1,23), 7,794 (1,22), 7,811 (1,17), 7,814 (1,08), 8,210 (2,42), 8,222 (2,24), 8,430 (3,36), 13,651 (0,41), 13,665 (0,79), 14,786 (2,12).

[0976] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,96 min; MS (ESlpos): m/z = 533 [M+H]<+>

[0977] Productos intermedios 6-62

[0978] N-(3-fluoro-2-metilfenil)-4-{[(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida

[0980]

[0982] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 conN-(3-fluoro-2-metilfenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-38, 197 mg, 704 µmol) y 1-(3-{[-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-3, 167 mg, 704 µmol) como materiales de partida; se prepararon 170 mg del compuesto del título (pureza del 93 %, rendimiento del 45 %) tras purificación por HPLC de fase inversa (básica).

[0984] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO- d<6>): δ [ppm]= 1,035 (0,65), 1,053 (1,08), 1,070 (0,68), 1,848 (1,00), 1,876 (1,47), 1,901 (1,11), 1,953 (0,45), 1,962 (0,59), 1,982 (1,04), 1,990 (1,08), 2,010 (0,69), 2,019 (0,57), 2,040 (7,36), 2,044 (6,91), 2,177 (16,00), 2,518 (1,64), 2,522 (1,10), 2,578 (0,88), 2,607 (0,81), 2,756 (0,84), 2,770 (1,72), 2,789 (2,10), 2,817 (1,02), 3,149 (0,83), 3,156 (0,97), 3,166 (1,67), 3,173 (1,63), 3,182 (0,94), 3,318 (0,50), 3,501 (0,55), 3,507 (0,70), 3,529 (1,25), 3,535 (1,29), 3,557 (0,76), 3,563 (0,62), 3,784 (0,93), 3,788 (0,90), 3,791 (0,76), 3,812 (1,29), 3,815 (1,26), 3,829 (0,63), 3,837 (0,57), 4,112 (0,53), 4,124 (0,56), 4,138 (1,82), 4,150 (1,97), 4,154 (2,08), 4,168 (1,68), 4,180 (0,56), 4,194 (0,52), 4,636 (2,30), 4,651 (2,34), 7,034 (0,71), 7,055 (1,49), 7,070 (1,47), 7,079 (1,12), 7,089 (1,98), 7,185 (0,72), 7,204 (1,19), 7,221 (1,13), 7,241 (0,44), 7,295 (2,26), 7,306 (2,30), 7,679 (1,46), 8,227 (3,76), 8,239 (3,55), 8,383 (5,45), 13,662 (0,88), 14,516 (2,06).

[0985] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,62 min; MS (ESlpos): m/z = 500 [M+H]<+>

[0986] Productos intermedios 6-65

[0987] 4-{[(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-N-(2-etil-3-fluorofenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida

[0988]

[0990] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 con N-(2-etil-3-fluorofenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (300 mg, 1,02 mmol) y 1-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (229 mg, 1,02 mmol) como materiales de partida; se prepararon 218 mg del compuesto del título (pureza del 90 %, rendimiento del 38%) tras evaporación del disolvente, filtración y lavado del sólido con ACN.

[0991] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0,057 (1,12), 1,042 (7,32), 1,061 (16,00), 1,080 (7,29), 1,231 (0,88), 1,751 (0,58), 2,074 (6,86), 2,522 (5,66), 2,753 (3,09), 2,770 (6,11), 2,787 (3,52), 3,156 (2,86), 3,166 (4,42), 3,172 (4,30), 3,181 (2,51), 3,402 (2,65), 3,427 (3,92), 3,430 (3,92), 3,455 (3,70), 3,471 (1,62), 3,491 (2,84), 3,498 (3,08), 3,516 (1,51), 3,526 (2,87), 3,589 (1,80), 3,594 (1,99), 3,617 (2,79), 3,623 (3,19), 3,650 (5,74), 3,679 (2,35), 3,745 (3,17), 3,754 (3,06), 3,778 (2,46), 3,846 (2,80), 3,853 (3,24), 3,881 (4,78), 3,893 (1,98), 3,900 (1,58), 3,905 (1,80), 3,911 (1,59), 3,918 (1,69), 3,925 (1,36), 3,936 (0,73), 4,117 (1,01), 4,129 (1,14), 4,143 (4,20), 4,155 (7,71), 4,168 (3,95), 4,181 (1,08), 4,194 (0,91), 4,632 (5,48), 4,646 (5,40), 7,029 (2,23), 7,051 (3,97), 7,074 (2,84), 7,091 (3,92), 7,110 (5,33), 7,191 (2,31), 7,207 (2,86), 7,211 (3,55), 7,228 (3,42), 7,248 (1,35), 7,351 (1,30), 7,701 (4,14), 8,329 (0,48), 8,476 (0,42), 13,662 (1,51), 13,676 (2,76), 13,691 (1,37), 14,588 (6,37).

[0992] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,92 min; MS (ESlpos): m/z = 501 [M+H]<+>

[0993] Productos intermedios 6-68

[0994] 4-{[(3-{[5,5-[dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-N-(2-etil-3-fluorofenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida

[0996]

[0998] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 con N-(2-etil-3-fluorofenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (300 mg, 102 mmol) y 1-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (257 mg, 1,02 mmol) como materiales de partida; se prepararon 360 mg del compuesto del título (pureza del 93 %, rendimiento del 62 %) tras purificación por cromatografía en columna.<1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,014 (0,69), 1,044 (16,00), 1,061 (7,08), 1,080 (3,30), 1,172 (0,52), 1,200 (0,60), 1,251 (13,22), 1,987 (0,87), 2,745 (1,36), 2,761 (2,65), 2,779 (1,61), 3,164 (2,11), 3,170 (2,09), 3,295 (1,79), 3,532 (2,73), 3,560 (2,19), 3,615 (0,59), 3,624 (0,79), 3,644 (1,91), 3,653 (2,05), 3,664 (1,79), 3,688 (2,07), 3,718 (1,01), 3,778 (0,45), 3,789 (0,91), 3,801 (1,07), 3,812 (0,86), 3,824 (0,63), 4,145 (0,65), 4,156 (0,71), 4,172 (1,96), 4,182 (1,95), 4,191 (2,02), 4,205 (1,76), 4,218 (0,69), 4,231 (0,59), 4,644 (3,11), 4,658 (3,10), 7,029 (0,86), 7,050 (1,63), 7,074 (1,12), 7,091 (1,71), 7,111 (2,37), 7,189 (0,89), 7,208 (1,52), 7,225 (1,39), 7,245 (0,52), 7,295 (2,40), 7,306 (2,41), 7,700 (1,92), 8,235 (3,11), 8,247 (2,98), 8,389 (5,24), 13,661 (0,71), 13,675 (1,32), 13,688 (0,68), 14,587 (3,04).

[0999] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,03 min; MS (ESlpos): m/z = 529 [M+H]<+>

[1000] Productos intermedios 6-71

[1001] N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-({[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]metil}amino)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida

[1003]

[1005] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 6-41 con N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-hidroxi-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 5-1, 300 mg, 959 µmol) y 1-[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]metanamina (producto intermedio 2-71, 265 mg, 1,06 mmol) como materiales de partida; se prepararon 360 mg del compuesto del título (pureza del 93 %, rendimiento del 62 %) tras purificación por cromatografía en columna.

[1007] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,014 (0,69), 1,044 (16,00), 1,061 (7,08), 1,080 (3,30), 1,172 (0,52), 1,200 (0,60), 1,251 (13,22), 1,987 (0,87), 2,745 (1,36), 2,761 (2,65), 2,779 (1,61), 3,164 (2,11), 3,170 (2,09), 3,295 (1,79), 3,532 (2,73), 3,560 (2,19), 3,615 (0,59), 3,624 (0,79), 3,644 (1,91), 3,653 (2,05), 3,664 (1,79), 3,688 (2,07), 3,718 (1,01), 3,778 (0,45), 3,789 (0,91), 3,801 (1,07), 3,812 (0,86), 3,824 (0,63), 4,145 (0,65), 4,156 (0,71), 4,172 (1,96), 4,182 (1,95), 4,191 (2,02), 4,205 (1,76), 4,218 (0,69), 4,231 (0,59), 4,644 (3,11), 4,658 (3,10), 7,029 (0,86), 7,050 (1,63), 7,074 (1,12), 7,091 (1,71), 7,111 (2,37), 7,189 (0,89), 7,208 (1,52), 7,225 (1,39), 7,245 (0,52), 7,295 (2,40), 7,306 (2,41), 7,700 (1,92), 8,235 (3,11), 8,247 (2,98), 8,389 (5,24), 13,661 (0,71), 13,675 (1,32), 13,688 (0,68), 14,587 (3,04).

[1008] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 1,03 min; MS (ESlpos): m/z = 529 [M+H]<+>

[1009] Producto intermedio 12

[1010] 3-((3-fluoro-2-(metoxifenil)amino)-2-(3-hidroxipiridin-4-il)-6,7-dihidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-4(5H)-ona

[1012]

[1014] A una suspensión deN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-(((3-hidroxipiridin-4-il)metil)amino)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-12, 41 g, 101,88 mmol) en MeOH (410 ml) se añadió TFA (0,75 ml, 10,13 mmol), seguido de peróxido de hidrógeno (18 ml, 30 % en agua). La mezcla se calentó a 60 °C y se agitó durante 16 h. Se añadieron más TFA (6,8 ml, 91,84 mmol) y peróxido de hidrógeno (1,5 ml, 30 % en agua). La suspensión se agitó a 60 °C durante 3 h más. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se dejó reposar toda la noche. La suspensión se combinó con un segundo lote que se generó de forma idéntica. La suspensión combinada se filtró y la torta se lavó con agua (250 ml) y MeOH (150 ml), y después se sumergió en MeOH (150 ml). La suspensión se filtró. La torta filtrada se lavó con etanol (75 ml) y se secó al vacío para dar el título del compuesto (25,4 g, rendimiento del 33,8 %) como sólido amarillo.

[1016] <1>H RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ = 11,45 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,39 (d, 1H), 7,18 (s, 1H), 6,67 (t, 1H), 6,54 (t, 1H), 6,04 (d, 1H), 3,92 (s, 3H), 3,40 (t, 2H), 2,90 (t, 2H).

[1017] LC-MS (procedimiento 5): Rt = 1,851 min; m/z = 369,0 (M H)<+>

[1018] Productos intermedios 22-1

[1019] (2S)-2-[({4-[3-(3-fluoro-2-(metoxianilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[1021]

[1023] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con (2S)-2-[({4-[({5-[(3-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 6-22, 1,43 g, 2,38 mmol) como material de partida; se prepararon 572 mg (pureza del 80 %, rendimiento del 34 %) del compuesto del título tras purificación por cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[1025] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,035 (0,86), 1,053 (1,99), 1,071 (0,88), 1,380 (0,83), 1,401 (6,79), 1,409 (16,00), 2,518 (1,63), 2,523 (1,18), 2,842 (0,65), 2,859 (1,16), 2,877 (0,76), 3,178 (0,95), 3,301 (0,60), 3,398 (0,50), 3,404 (0,61), 3,415 (0,94), 3,418 (0,82), 3,422 (1,10), 3,435 (0,77), 3,440 (0,72), 3,452 (0,50), 3,553 (0,42), 3,560 (0,43), 3,750 (0,64), 3,760 (0,40), 3,851 (0,50), 3,858 (0,40), 3,873 (0,46), 3,906 (6,63), 3,936 (0,57), 3,939 (0,59), 3,950 (0,46), 4,343 (0,56), 4,356 (0,65), 5,759 (1,09), 5,993 (0,75), 6,013 (0,76), 6,485 (0,50), 6,489 (0,49), 6,492 (0,42), 6,513 (0,45), 6,516 (0,42), 6,627 (0,54), 6,642 (0,52), 7,147 (0,86), 7,280 (1,09), 7,293 (1,13), 7,509 (0,98), 8,025 (1,38), 8,038 (1,27), 8,401 (2,10), 11,020 (0,61).

[1026] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,12 min; MS (ESlpos): m/z = 568 [M+H]<+>

[1027] Productos intermedios 22-2

[1028] 3-(3-fluoro-2-(metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1029]

[1031] (2S)-2-[({4-[3-(3-fluoro-2-(metoxianilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 22-1, 572 mg, 1.01 mmol) se solubilizó en diclorometano (7,2 ml) y se añadió TFA (780 µl, 10 mmol). La mezcla se agitó durante 2 h a RT. La mezcla se evaporó y se purificó por cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH 0-20 %) para dar 352 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 71 %) del compuesto del título.

[1033] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,53 - 2,78 (m, 4H), 2,80 - 2,90 (m, 3H), 3,38 - 3,47 (m, 3H), 3,55 - 3,66 (m, 1H), 3,83 - 3,90 (m, 1H), 3,91 - 3,95 (s, 3H), 4,07 - 4,16 (m, 1H), 4,29 - 4,39 (m, 1H), 6,01 (d, 1H), 6,44 - 6,56 (m, 1H), 6,65 (dt, 1H), 7,17 (s, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,53 (s, 1H), 8,01 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 11,10 (s, 1H).

[1034] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,84 min; MS (ESlpos): m/z = 468 [M+H]<+>

[1035] Productos intermedios 27-1

[1036] (2S)-2-[({4-[3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[1038]

[1040] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con (2S)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 6-27, 150 mg, 236 µmol) como material de partida, 73,5 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 47 %) del compuesto del título.

[1041] 1H-RMN (400MHz, DMSO-d6): δ [ppm]= 1,40 (s, 9H), 2,52 - 2,53 (m, 2H), 2,70 - 3,03 (m, 1H), 2,87 (a t, 2H), 3,42 (td, 2H), 3,46 - 3,61 (m, 1H), 3,71 - 3,79 (m, 1H), 3,82 (s, 4H), 3,93 (a d, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,27 - 4,33 (dd, 1H), 5,85 (dd, 1H), 6,55 (dd, 1H), 7,11 (s, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,60 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,44 (s, 1H), 11,17 (s, 1H). LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,19 min; MS (ESlpos): m/z = 602 [M+H]<+>

[1042] Productos intermedios 27-2

[1043] 3-(3-(cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1044]

[1046] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 22-2 con (2S)-2-[({4-[3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 27-1, 73,0 mg, 121 µmol) como material de partida; se prepararon 56,3 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 88 %) del compuesto del título tras purificación por cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH al 0-15 %).

[1048] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,51 - 2,58 (m, 2H), 2,61 - 2,75 (m, 2H), 2,77 - 2,94 (m, 3H), 3,38 - 3,48 (m, 1H), 3,56 (td, 1H), 3,76 - 3,92 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 4,10 (dd, 1H), 4,29 (dd, 1H), 5,85 (dd, 1H), 6,57 (dd, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 8,09 (d, 1H), 8,43 (s, 1H), 11,22 (s, 1H).

[1049] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,93 min; MS (ESlpos): m/z = 502 [M+H]<+>.

[1050] Productos intermedios 41-1

[1051] (2S)-2-{[(4-{3-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluoroanilino]-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il}piridin-3-il)oxi]metil}morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[1053]

[1055] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con (2S)-2-{[(4-{[(5-{[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluorofenil]carbamotioil}-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)amino]metil}piridin-3-il)oxi]metil}morfolin-4-carboxilato de terc-butilo (producto intermedio 6-41, 266 mg, 418 µmol) como material de partida; se prepararon 33,0 mg (pureza del 65 %, rendimiento del 9%) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 30 % B, 0,50-6,00 min 30-70 % B).

[1056] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,16 min; MS (ESlneg): m/z = 600 [M-H]-Productos intermedios 41-2

[1057] 3-[2-(2,2-[difluoroetil)-3-fluoroanilino]-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1058]

[1060] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 22-2 con (2S)-2-{[(4-{3-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluoroanilino]-4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il}piridin-3-il)oxi]metil}morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 41-1, 33,0 mg, 54,9 µmol) como material de partida; se prepararon 22,0 mg (pureza del 65 %, rendimiento del 52 %) del compuesto del título tras purificación por cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH 0-10 %).

[1061] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,92 min; MS (ESlneg): m/z = 500 [M-H]-Productos intermedios 42-1

[1062] (2S)-2-[({4-[3-(3-cloro-2-metilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]-morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[1064]

[1066] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con (2S)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-2-metilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 6-42, 207 mg, 344 µmol) como material de partida; se prepararon 27,8 mg (pureza del 90%, rendimiento del 13 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 9, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-4,65 min 15-44,9 % B, 4,65 - 5,94 min 44,9 % B, 5,94 -7,29 min 44,9 - 55 % B).

[1068] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,414 (16,00), 2,349 (5,99), 2,520 (0,82), 2,525 (0,50), 2,853 (0,68), 2,870 (1,29), 2,887 (0,75), 3,405 (0,49), 3,410 (0,53), 3,422 (0,95), 3,428 (0,93), 3,439 (0,48), 3,445 (0,43), 3,554 (0,43), 3,560 (0,45), 4,294 (0,43), 4,304 (0,45), 6,191 (0,69), 6,195 (0,66), 6,211 (0,71), 6,214 (0,69), 6,719 (0,48), 6,735 (1,31), 6,738 (1,11), 6,747 (0,85), 6,767 (0,82), 7,175 (0,83), 7,232 (0,92), 7,245 (0,92), 7,351 (0,48), 7,998 (1,24), 8,010 (1,16), 8,378 (1,84), 11,016 (0,78).

[1069] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,92 min; MS (ESlpos): m/z = 568 [M+H]<+>

[1070] Productos intermedios 42-2

[1071] 3-(3-(cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1073]

[1075] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 22-2 con (2S)-2-[({4-[3-(3-cloro-2-metilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 42-1, 30,0 mg, 52,8 µmol) como material de partida, se prepararon 19,0 mg (pureza del 92 %, rendimiento del 71 %) del compuesto del título tras filtración a través de una columna SCX-2 (lavado con MeOH seguido de elución con 1M de amoníaco en MeOH).

[1077] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,235 (1,09), 2,334 (1,58), 2,338 (0,84), 2,362 (16,00), 2,520 (7,24), 2,525 (4,55), 2,545 (1,21), 2,570 (1,33), 2,575 (1,40), 2,601 (1,20), 2,676 (1,83), 2,680 (1,06), 2,705 (1,02), 2,713 (0,99), 2,732 (1,01), 2,740 (0,93), 2,758 (1,50), 2,787 (0,62), 2,846 (1,74), 2,863 (4,52), 2,880 (2,07), 2,894 (1,12), 3,300 (4,30), 3,410 (1,44), 3,416 (1,55), 3,427 (2,54), 3,433 (2,52), 3,445 (1,29), 3,585 (0,65), 3,593 (0,77), 3,612 (1,20), 3,620 (1,22), 3,640 (0,69), 3,646 (0,62), 3,851 (0,59), 3,868 (0,92), 3,875 (0,91), 3,902 (1,40), 3,930 (1,00), 4,073 (1,20), 4,090 (1,18), 4,098 (1,63), 4,116 (1,39), 4,274 (1,41), 4,282 (1,45), 4,299 (1,18), 4,307 (1,08), 5,528 (0,41), 6,196 (1,85), 6,200 (1,81), 6,215 (2,00), 6,219 (1,86), 6,726 (1,04), 6,730 (1,33), 6,746 (3,44), 6,750 (2,92), 6,761 (2,53), 6,780 (2,58), 6,800 (0,88), 7,192 (2,31), 7,231 (3,82), 7,244 (3,92), 7,364 (4,42), 7,980 (4,81), 7,993 (4,51), 8,370 (6,73), 8,397 (0,45), 11,102 (2,40).

[1078] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,52 min; MS (ESlpos): m/z = 468 [M+H]<+>

[1079] Productos intermedios 43-1

[1080] (3R)-3-[({4-[3-(3-cloro-2-metilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]-morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[1082]

[1084] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con (3R)-3-[({4-[({5-[(3-cloro-2-metilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (180 mg, 299 µmol) como material de partida; se prepararon 35,1 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 19 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 9, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-4,23 min 15-41,9 % B, 4,23- 5,60min 41,9 % B, 5,60 - 7,37 min 41,9 - 55 % B).

[1086] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,344 (16,00), 2,357 (14,22), 2,520 (2,49), 2,525 (1,70), 2,891 (0,42), 2,923 (1,43), 3,384 (1,03), 3,405 (2,12), 3,412 (2,73), 3,417 (2,74), 3,435 (1,48), 3,555 (0,76), 3,577 (0,85), 3,680 (1,24), 3,709 (1,06), 3,840 (1,02), 3,860 (0,92), 3,952 (1,42), 3,982 (1,23), 4,301 (0,62), 6,161 (1,64), 6,165 (1,44), 6,179 (1,77), 6,184 (1,67), 6,725 (0,94), 6,740 (3,11), 6,745 (3,77), 6,765 (1,40), 6,785 (0,46), 7,187 (1,94), 7,309 (2,75), 7,322 (2,75), 7,351 (4,78), 7,971 (1,97), 7,983 (1,88), 8,445 (5,01), 11,063 (1,60).

[1087] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,92 min; MS (ESlpos): m/z = 568 [M+H]<+>

[1088] Productos intermedios 43-2

[1089] 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(3R)-morfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1091]

[1093] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 22-2 con (3R)-3-[({4-[3-(3-cloro-2-metilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahydro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolin-4-carboxilato detercbutilo (producto intermedio 43-1, 30,0 mg, 52,8 µmol) como material de partida se prepararon 25,3 mg (pureza del 97 %, rendimiento del 99 %) del compuesto del título tras filtración a través de una columna SCX-2 (lavado con MeOH seguido de elución con 1M de amoníaco en MeOH).

[1095] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,235 (0,47), 2,334 (1,10), 2,338 (0,53), 2,367 (16,00), 2,383 (0,45), 2,520 (5,15), 2,525 (3,36), 2,676 (1,09), 2,680 (0,50), 2,825 (1,81), 2,842 (3,79), 2,860 (2,41), 2,888 (0,56), 2,945 (0,90), 2,976 (0,54), 3,155 (0,67), 3,371 (1,08), 3,398 (1,36), 3,416 (2,04), 3,426 (3,16), 3,433 (2,75), 3,444 (2,06), 3,450 (1,95), 3,471 (0,57), 3,720 (1,01), 3,747 (0,86), 3,794 (1,03), 3,816 (0,90), 4,192 (0,59), 4,208 (0,66), 4,218 (1,25), 4,232 (1,21), 4,252 (1,38), 4,261 (1,46), 4,277 (0,69), 4,286 (0,59), 6,222 (1,82), 6,225 (1,83), 6,241 (1,98), 6,245 (1,89), 6,731 (1,15), 6,735 (1,43), 6,751 (3,26), 6,754 (2,74), 6,769 (2,24), 6,790 (2,51), 6,809 (0,87), 7,172 (2,36), 7,217 (2,75), 7,230 (2,77), 7,391 (4,55), 7,941 (1,75), 7,953 (1,66), 8,359 (2,93), 12,612 (0,40).

[1096] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,53 min; MS (ESlpos): m/z = 468 [M+H]<+>

[1097] Productos intermedios 55-1

[1098] (2R)-2-[({4-[3-(3-cloro-2-etilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il]oxi)metil]-morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[1099]

[1101] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con (2R)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-2-etilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 6-55, 473 mg, 768 µmol) como material de partida; se prepararon 57,0 mg (pureza del 95%, rendimiento del 12 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 10 % B, 0,50-11,05 min 10-34,4 % B, 11,05 - 12,46 min 34,4 % B, 12,46 - 24,12 min 34,4 - 60 % B) seguido de cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-12 %).

[1102] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,26 min; MS (ESlpos): m/z = 582 [M+H]<+>

[1103] Productos intermedios 55-2

[1104] 3-(3-(cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2R)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1106]

[1108] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 22-2 con (2R)-2-[({4-[3-(3-cloro-2-etilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolin-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 55-1, 70,4 mg, 121 µmol) como material de partida; se prepararon 58,0 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 95 %) del compuesto del título tras purificación por cromatografía flash (sílice, DCM / EtOH gradiente de trietilamina 1-40 %).

[1110] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 10,96 - 11,17 (m, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,69 - 8,02 (m, 1H), 7,37 - 7,51 (m, 1H), 7,19 (s, 2H), 6,65 - 6,86 (m, 2H), 6,15 - 6,24 (m, 1H), 6,12 - 6,31 (m, 1H), 4,26 - 4,36 (m, 1H), 4,06 - 4,14 (m, 1H), 3,85 - 3,96 (m, 2H), 3,58 - 3,67 (m, 1H), 3,40 - 3,46 (m, 2H), 3,35 - 3,39 (m, 1H), 2,69 - 2,96 (m, 7H), 2,56 -2,64 (m, 1H), 1,19 - 1,27 (m, 6H).

[1111] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,99 min; MS (ESlneg): m/z = 480 [M-H]-Productos intermedios 56-1

[1112] (2S)-2-[({4-[3-(3-cloro-2-etilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]-morfolina-4-carboxilato de terc-butilo

[1113]

[1115] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con (2S)-2-[({4-[({5-[(3-cloro-2-etilfenil)carbamotioil]-6-oxo-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il}amino)metil]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 6-56, 476 mg, 772 µmol) como material de partida; se prepararon 68,0 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 14 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 20 % B, 0,50-12,99 min 20-40 % B, 12,99 - 15,46 min 40 % B, 15,46 - 24,12 min 40 - 55 % B) seguido de cromatografía flash (sílice, gradiente DCM / EtOH 0-12 %).

[1116] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,26 min; MS (ESlpos): m/z = 582 [M+H]<+>

[1117] Productos intermedios 56-2

[1118] 3-(3-c(cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1120]

[1122] Usando un procedimiento análogo al descrito para el producto intermedio 22-2 con (2S)-2-[({4-[3-(3-cloro-2-etilanilino)-4-oxo-4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirrolo[3,2-c]piridin-2-il]piridin-3-il}oxi)metil]morfolina-4-carboxilato deterc-butilo (producto intermedio 56-1, 70,4 mg, 121 µmol) como material de partida; se prepararon 46,9 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 78 %) del compuesto del título tras purificación por cromatografía flash (sílice en fase amino, gradiente DCM / EtOH 1-35 %).

[1124] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 11,09 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,96 (d, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,19 (d, 2H), 6,68 -6,84 (m, 2H), 6,23 (dd, 1H), 4,24 - 4,34 (m, 1H), 4,03 - 4,16 (m, 1H), 3,82 - 3,96 (m, 2H), 3,57 - 3,65 (m, 1H), 3,39 - 3,48 (m, 2H), 2,82 - 2,94 (m, 5H), 2,64 - 2,79 (m, 2H), 2,54 - 2,60 (m, 1H), 1,23 (t, 3H).

[1125] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,99 min; MS (ESlneg): m/z = 480 [M-H]-Ejemplos

[1126] Ejemplo 1

[1127] 3-(3-(cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1128]

[1130] A una suspensión de N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-1, 140 mg, 240 µmol) en MeOH (2,7 ml) se añadió TFA (42 µl, 540 µmol) seguido de peróxido de hidrógeno acuoso (94 µl, pureza del 35 %, 1,08 mmol) y la mezcla se calentó a 50 °C durante 17 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta RT y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó mediante HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B) para dar 70 mg del compuesto del título (rendimiento del 51 %).

[1132] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,86 (t, 2H), 3,37 - 3,57 (m, 4H), 3,70 - 3,90 (m, 4H), 3,88 (s, 3H), 3,92 -4,08 (m, 1H), 4,10 - 4,20 (m, 1H), 4,28 (dd, 1H), 6,15 (t, 1H), 6,68 (d, 2H), 7,16 (s a, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,52 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 11,07 (s, 1H).

[1133] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,98 min; MS (ESlpos): m/z = 485 [M+H]<+>

[1134] Ejemplo 2

[1135] 3-(3-(cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoisómero 1)

[1137]

[1139] El compuesto del título del ejemplo 1 (140 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1,27 mg a Rt = 14,0 - 17,0 min) y el enantiómero 2 (25 mg a Rt = 20,0 -24,8 min, véase el ejemplo 3).

[1140] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1141] Instrumento: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000; columna: Celulosa SB 5µ, 250x30 mm; eluyente A: hexano 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: 2-propanol; isocrático: 50 % A 50 % B; flujo 50 ml/min; UV: 254 nm.

[1142] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1143] Instrumento: Agilent HPLC 1260; columna: Celulosa SB 3µ, 100x4,6 mm; eluyente A: hexano 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: 2-propanol; isocrático: 50 % A 50 % B, flujo 1,4 ml/min; temperature: 25 °C; UV: 254 nm

[1144] HPLC quiral analítica: Rt = 4,49 min.

[1145] Rotación Óptica:

[1147] La síntesis enantioselectiva confirmó que el compuesto del título es 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona. Se prepararon 872 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 72 %) del compuesto del título de forma análoga al ejemplo 1 usandoN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-2, 1,23 g, 2,36 mmol) como material de partida, seguido de purificación con HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15% B, 0,50-6,00 min 15-55 % B).

[1149] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,86 (t, 2H), 3,38 - 3,47 (m, 3H), 3,53 (td, 1H), 3,69 - 3,78 (m, 2H), 3,83 (dd, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,90 (m, 1H), 3,98 - 4,08 (m, 1H), 4,12 - 4,18 (m, 1H), 4,28 (dd, 1H), 6,12 - 6,17 (quin, 1H), 6,66 - 6,71 (m, 2H), 7,16 (s, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,52 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 11,07 (s, 1H).

[1150] HPLC quiral analítica: Rt = 4,46 min.

[1151] Rotación Óptica:

[1153] Ejemplo 3

[1154] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1156]

[1158] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 1. La separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento véase el ejemplo 2) dio 25 mg del compuesto del título (a Rt = 20,0 - 24,8 min).

[1159] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 2): R<t>= 6,56 min.

[1160] Rotación Óptica:

[1162]

[1164] Ejemplo 4

[1165] 2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1166]

[1168] De forma análoga al ejemplo 1, se utilizó 4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-4, 120 mg, 239 µmol) para preparar 25,7 mg del compuesto del título (rendimiento del 21 %) tras calentar 25 horas y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B).

[1170] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,86 (t, 2H), 3,37 - 3,57 (m, 4H), 3,66 - 3,89 (m, 4H), 3,91 (s, 3H), 3,98 -4,09 (m, 1H), 4,09 - 4,20 (m, 1H), 4,28 (dd, 1H), 6,00 (d, 1H), 6,45 - 6,54 (m, 1H), 6,64 (m, 1H), 7,16 (s a, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,53 (s, 1H), 8,04 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 11,05 (s, 1H).

[1171] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,92 min; MS (ESlpos): m/z = 469 [M+H]<+>

[1172] Ejemplo 5

[1173] 2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1175]

[1177] El compuesto del título del ejemplo 4 (26 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 11 mg, a R<t>= 8,2 - 9,1 min, rendimiento del 10 %) y el enantiómero 2 (12 mg, a R<t>= 9,7 - 10,7 min, véase el ejemplo 6).

[1178] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1179] Instrumento: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000; columna: Celulosa SB 5µ, 250x30 mm; eluyente A: MTBE 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 2-60 % B en 20 min; flujo 50 ml/min; UV: 280 nm

[1180] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1181] Instrumento: Agilent HPLC 1260; columna: Celulosa SB 3µ, 100x4.6 mm; eluyente A: MTBE 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 2-60 % B en 7 min, flujo 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm HPLC quiral analítica: Rt = 4,34 min.

[1182] Rotación Óptica:

[1183] Ejemplo 6

[1184] 2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1186]

[1188] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 4. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 5) para dar 12 mg del compuesto del título (a Rt = 9,7 -10,7 min, rendimiento del 11 %).

[1189] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 5): R<t>= 5,11 min.

[1190] Rotación Óptica:

[1192] Ejemplo 7

[1193] 3-(2,3-dicloroanilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1195]

[1197] Por analogía con el ejemplo 1, se utilizóN-(2,3-diclorofenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-7, 110 mg, 210 µmol) para preparar 34,6 mg del compuesto del título (rendimiento del 32 %) tras calentar durante 25 horas y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B).

[1199] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,86 (a t, 2H), 3,35 - 3,45 (m, 3H), 3,47 - 3,56 (m, 1H), 3,65 - 3,75 (m, 2H), 3,75 - 3,88 (m, 2H), 3,93 - 4,04 (m, 1H), 4,06 - 4,20 (m, 2H), 6,27 (dd, 1H), 6,83 - 6,91 (m, 2H), 7,17 (s a, 1H), 7,26 (d, 1H), 7,66 (s, 1H), 8,08 (d, 1H), 8,38 (s, 1H), 11,21 (s, 1H).

[1200] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,01 min; MS (ESlpos): m/z = 489 [M+H]<+>

[1201] Ejemplo 8

[1202] 3-(2,3-dicloroanilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1204]

[1206] El compuesto del título del ejemplo 7 (27 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 10 mg) y el enantiómero 2 (12 mg, véase el ejemplo 9).

[1207] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1208] Instrumento: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000; columna: Celulosa SB 5µ, 250x30 mm; eluyente A: MTBE 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 2-60 % B en 20 min; flujo 50 ml/min; UV: 280 nm

[1209] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1210] Instrumento: Agilent HPLC 1260; columna: Celulosa SB 3µ, 100x4.6 mm; eluyente A: MTBE 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 2-60 % B en 7 min, flujo 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm HPLC quiral analítica: Rt = 5,11 min.

[1211] Rotación Óptica:

[1213] Ejemplo 9

[1214] 3-(2,3-dicloroanilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1216]

[1218] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 7. Separación de enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: ver ejemplo 8) para dar 12 mg del compuesto del título.

[1219] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 8): R<t>= 6,74 min.

[1220] Rotación Óptica:

[1222] Ejemplo 10

[1223] 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1225]

[1227] De forma análoga al ejemplo 1, se utilizóN-(3-cloro-2-metilfenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-10, 180 mg, 358 µmol) para preparar 12,1 mg del compuesto del título (rendimiento del 7 %) tras calentamiento durante 25 horas y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B).

[1229] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,35 (s, 3H), 2,86 (a t, 2H), 3,37 - 3,47 (m, 3H), 3,55 (a dd, 1H), 3,67 -3,85 (m, 3H), 3,89 (a d, 1H), 4,01 (a dd, 1H), 4,08 - 4,18 (m, 1H), 4,24 (dd, 1H), 6,20 (d, 1H), 6,71 - 6,80 (m, 2H), 7,19 (s a, 1H), 7,24 (d, 1H), 7,37 (s, 1H), 8,01 (d, 1H), 8,37 (s, 1H), 11,05 (s, 1H).

[1230] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,02 min; MS (ESlpos): m/z = 469 [M+H]<+>

[1231] Ejemplo 11

[1232] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1234]

[1236] De forma análoga al ejemplo 1,N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-yl]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida (producto intermedio 6-11, 82 mg, 139 µmol) para preparar 11 mg del compuesto del título (rendimiento del 15 %) tras calentar durante 17 horas y purificar por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B).

[1238] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 11,51 - 12,57 (m, 1H), 8,40 (s a, 1H), 8,04 (s a, 1H), 7,62 (s a, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,19 (s a, 1H), 6,71 (a d, 2H), 6,15 (dd, 1H), 4,40 (s a, 2H), 3,90 (s, 4H), 3,85 (s a, 1H), 3,60 (a d, 3H), 3,40 - 3,51 (m, 3H), 3,01 (s a, 1H), 2,74 - 2,96 (m, 3H), 2,22 - 2,43 (m, 2H).

[1239] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,55 min; MS (ESlpos): m/z = 498,2 [M+H]<+>

[1240] Rotación Óptica:

[1242] Ejemplo 12

[1243] 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1245]

[1247] La 3-(3-Fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-hidroxipiridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 12, 150 mg, 407 µmol) se disolvió en dioxano (4,8 ml). La mezcla de reacción se desgasificó con argón. Después se añadieron (tributilfosfanilideno)acetonitrilo (384 µl, 1,5 mmol, CAS 157141-27-0) y (4-metilmorfolin-2-il)metanol (CAS 40987-46-0, 80,0 mg, 610 µmol) y la mezcla se agitó a 50 °C durante 30 h. La mezcla se concentró a presión reducida y se añadió solución de bicarbonato sódico sat. La mezcla se extrajo con DCM. La fase orgánica se filtró sobre un filtro hidrófugo, se concentró a presión reducida y se purificó por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 1 % B, 0,50 - 27,40 min 1 - 50 % B) para dar 16,2 mg del compuesto del título (rendimiento del 8 %).

[1249] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 11,05 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,52 (s, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,64 (td, 1H), 6,50 (ddd, 1H), 6,01 (d, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,15 (dd, 1H), 3,88 - 4,00 (m, 5H), 3,67 (td, 1H), 3,37 - 3,47 (m, 2H), 2,85 (t, 2H), 2,77 (a d, 1H), 2,66 - 2,70 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,04 (td, 1H), 1,91 (t, 1H).

[1250] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,92 min; MS (ESlpos): m/z = 482,3 [M+H]<+>

[1251] Ejemplo 13

[1252] 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1254]

[1256] El compuesto del título del ejemplo 12 (19 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1,6 mg, a R<t>= 6,7 - 8,7 min, rendimiento del 3 %) y el enantiómero 2 (7 mg, a Rt = 8,9 - 11,9 min, véase el ejemplo 14).

[1257] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1258] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 250x20; eluyente A: acetonitrilo 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: etanol; isocrático: 93 % A 7 % B; flujo 20 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nmProcedimiento HPLC quiral analítica:

[1259] Instrumento: Waters Alliance 2695; columna: Chiralcel OD-H 5µ, 100x4,6; eluyente A: etanol 0,1 vol. % dietilamina (99 %); eluyente B: etanol; isocrático: 90 % A 10 % B, flujo 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm HPLC quiral analítica: Rt = 2,91 min.

[1261] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 11,05 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,16 (s, 1H), 6,64 (td, 1H), 6,50 (t, 1H), 6,01 (d, 1H), 4,34 (dd, 1H), 4,15 (dd, 1H), 3,89 - 3,99 (m, 5H), 3,67 (td, 1H), 3,38 -3,46 (m, 2H), 2,85 (t, 2H), 2,77 (a d, 1H), 2,61 - 2,71 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 1,98 - 2,16 (m, 1H), 1,91 (t, 1H).Ejemplo 14

[1262] 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1264]

[1266] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 12. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 13) para dar 7 mg del compuesto del título (a Rt = 8,9 -11,9 min , rendimiento del 3 %).

[1267] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 13): R<t>= 3,70 min.

[1269] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 11,05 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,02 (a d, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,16 (s a, 1H), 6,59 - 6,70 (m, 1H), 6,50 (a t, 1H), 6,01 (a d, 1H), 4,34 (a dd, 1H), 4,15 (a dd, 1H), 3,86 - 4,00 (m, 5H), 3,60 - 3,74 (m, 1H), 3,40 - 3,48 (m, 2H), 2,85 (a t, 2H), 2,77 (a d, 1H), 2,63 - 2,70 (m, 1H), 2,20 (s, 3H), 1,99 - 2,09 (m, 1H), 1,91 (a t, 1H).

[1270] Ejemplo 15

[1271] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1272]

[1274] Por analogía con el ejemplo 1, se utilizóN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-15, 74,0 mg, 139 µmol) se utilizó para preparar 24,1 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 31 %) del compuesto del título tras calentamiento durante 18 horas y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B).

[1276] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,86 - 1,95 (t, 1H), 2,00 - 2,09 (td, 1H), 2,20 (s, 3H), 2,66 (a d, 1H), 2,73 -2,81 (a d, 1H), 2,86 (t, 2H), 3,42 (td, 2H), 3,61 - 3,73 (td, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,91 - 4,02 (m, 2H), 4,16 (dd, 1H), 4,33 (dd, 1H), 6,15 (t, 1H), 6,69 (d, 2H), 7,16 (s, 1H), 7,28 (d, 1H), 7,53 (s, 1H), 8,03 (d, 1H), 8,40 (s, 1H), 11,07 (s, 1H). LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,97 min; MS (ESlpos): m/z = 498 [M+H]<+>

[1277] Ejemplo 16

[1278] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1280]

[1282] El compuesto del título del ejemplo 15 (24,1 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1,8 mg, a R<t>= 17,4 - 21,8, rendimiento del 11 %) y el enantiómero 2 (7 mg, a Rt = 12,5 - 14,5 min, véase el ejemplo 17).

[1283] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1284] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: Chiralpak IF 5µ, 250x30; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol 0,1 vol % dietilamina; isocrático: 50 %A+50 %B; flujo: 40 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1285] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1286] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: Chiralpak IF 3µ, 100x4,6; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol; isocrático: 50 %A+50 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1287] HPLC quiral analítica: Rt = 4,55 min.

[1289] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,232 (1,95), 1,259 (0,49), 1,888 (0,59), 1,914 (1,04), 1,941 (0,65), 2,016 (0,40), 2,037 (0,73), 2,045 (0,70), 2,065 (0,49), 2,206 (9,36), 2,327 (0,42), 2,518 (1,60), 2,523 (1,15), 2,540 (16,00), 2,646 (0,75), 2,670 (0,96), 2,673 (0,98), 2,758 (0,81), 2,787 (0,77), 2,841 (1,13), 2,858 (2,36), 2,876 (1,27), 3,405 (0,89), 3,410 (0,98), 3,422 (1,69), 3,428 (1,67), 3,439 (0,85), 3,445 (0,77), 3,638 (0,41), 3,644 (0,49), 3,666 (0,89), 3,672 (0,89), 3,694 (0,54), 3,700 (0,52), 3,883 (15,90), 3,933 (0,86), 3,952 (0,89), 3,960 (1,15), 3,976 (0,47), 3,983 (0,40), 4,137 (0,82), 4,154 (0,74), 4,163 (1,02), 4,179 (0,84), 4,315 (0,97), 4,324 (1,01), 4,341 (0,80), 4,349 (0,72), 6,139 (1,35), 6,151 (2,23), 6,163 (1,38), 6,681 (4,49), 6,692 (3,40), 6,694 (3,35), 7,163 (1,58), 7,274 (1,81), 7,287 (1,83), 7,533 (3,41), 8,021 (1,20), 8,034 (1,14), 8,402 (1,87), 11,066 (1,70).

[1290] Ejemplo 17

[1291] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1293]

[1295] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 15. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 16) para dar 7 mg del compuesto del título (a Rt = 12,5 - 14,5 min).

[1296] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 16): R<t>= 2,93 min.

[1297] Ejemplo 18

[1298] 3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1300]

[1302] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 conN-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-18, 166 mg, 302 µmol) como material de partida; se prepararon 13,0 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 8 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[1304] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,88 (t, 1H), 1,93 - 2,05 (dt, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,60 - 2,66 (d, 1H), 2,70 -2,77 (d, 1H), 2,86 (t, 2H), 3,37 - 3,48 (m, 2H), 3,56 - 3,68 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,90 (a d, 2H), 4,15 (m, 1H), 4,27 (dd, 1H), 5,85 (dd, 1H), 6,56 (dd, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,64 (s, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,43 (s, 1H), 11,18 (s, 1H).

[1305] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,00 min; MS (ESlpos): m/z = 516 [M+H]<+>

[1306] Ejemplo 19

[1307] 3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1309]

[1311] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 conN-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-19, 160 mg, 298 µmol) como material de partida; se prepararon 3,90 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 2 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[1313] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,86 (t, 2H), 3,37 - 3,45 (m, 3H), 3,47 - 3,61 (m, 1H), 3,62 - 3,77 (m, 3H), 3,77 - 3,87 (m, 6H), 3,94 - 4,01 (m, 1H), 4,07 - 4,20 (m, 1H), 4,24 (dd, 1H), 5,85 (dd, 1H), 6,56 (dd, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,60 - 7,66 (d, 1H), 8,11 (a d, 1H), 8,42 (s, 1H), 11,19 (s, 1H).

[1314] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,01 min; MS (ESlpos): m/z = 503 [M+H]<+>

[1315] Ejemplo 20

[1316] 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1318]

[1320] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 conN-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridina-3-carbotioamida (producto intermedio 6-20, 102 mg, 197 µmol) como material de partida; se prepararon 27,9 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 26 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 10 % B, 0,50 - 6,00 min 10 - 50 % B).

[1321] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,51 min; MS (ESlpos): m/z = 482 [M+H]<+>

[1323] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2,274 (13,29), 2,304 (1,76), 2,318 (0,55), 2,404 (0,46), 2,426 (0,88), 2,434 (0,91), 2,449 (0,43), 2,454 (0,88), 2,458 (1,03), 2,463 (1,43), 2,468 (1,37), 2,473 (1,55), 2,518 (5,99), 2,523 (4,32), 2,775 (0,40), 2,798 (0,70), 2,815 (1,49), 2,822 (0,88), 2,832 (0,91), 2,841 (1,16), 2,858 (0,79), 2,908 (1,13), 2,938 (1,00), 3,294 (0,43), 3,406 (0,64), 3,423 (1,46), 3,429 (1,19), 3,438 (1,37), 3,453 (0,58), 3,459 (0,55), 3,546 (1,13), 3,573 (1,76), 3,589 (1,13), 3,594 (1,22), 3,600 (1,28), 3,618 (0,61), 3,816 (0,94), 3,840 (1,83), 3,847 (1,95), 3,868 (1,06), 3,875 (0,97), 3,938 (16,00), 3,951 (2,07), 4,374 (1,67), 4,386 (2,71), 4,414 (0,46), 6,011 (1,89), 6,031 (1,89), 6,514 (1,03), 6,518 (0,97), 6,535 (1,28), 6,539 (1,34), 6,541 (1,19), 6,545 (0,94), 6,562 (1,19), 6,565 (1,06), 6,655 (0,97), 6,670 (1,03), 6,675 (1,70), 6,691 (1,55), 6,696 (0,82), 6,711 (0,67), 7,176 (2,07), 7,310 (3,71), 7,323 (3,68), 7,514 (0,43), 7,527 (0,52), 7,533 (0,58), 7,601 (4,56), 7,977 (5,29), 7,990 (4,50), 8,067 (0,61), 8,080 (0,55), 8,358 (6,27), 8,439 (0,73), 12,011 (2,13).

[1324] Ejemplo 21

[1325] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1327]

[1329] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-21, 99.5 mg, 187 µmol) como material de partida; se prepararon 4,70 mg (pureza del 98 %, rendimiento del 5 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 10 % B, 0,50 - 6,00 min 10 - 50 % B).

[1331] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,232 (0,45), 2,276 (9,36), 2,426 (0,63), 2,434 (0,67), 2,456 (0,51), 2,464 (0,76), 2,472 (0,79), 2,518 (1,95), 2,523 (1,26), 2,539 (9,95), 2,806 (0,54), 2,823 (1,37), 2,841 (1,19), 2,860 (0,60), 2,910 (0,85), 2,940 (0,76), 3,408 (0,49), 3,425 (1,12), 3,431 (0,95), 3,441 (1,04), 3,454 (0,49), 3,460 (0,44), 3,544 (0,71), 3,572 (1,31), 3,588 (0,84), 3,594 (0,92), 3,599 (0,96), 3,617 (0,47), 3,817 (0,72), 3,841 (1,23), 3,847 (1,34), 3,868 (0,69), 3,875 (0,63), 3,912 (16,00), 3,924 (0,49), 4,376 (1,24), 4,387 (2,11), 6,151 (1,35), 6,162 (2,22), 6,175 (1,39), 6,718 (3,50), 6,720 (3,93), 6,731 (4,23), 7,179 (1,54), 7,299 (2,18), 7,312 (2,21), 7,614 (3,34), 7,983 (1,76), 7,995 (1,68), 8,362 (2,68), 12,027 (1,61).

[1332] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,54 min; MS (ESlpos): m/z = 498 [M+H]<+>

[1333] Ejemplo 22

[1334] 2-(3-{[(2S)-4-(2,2-difluoroetil)morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1335]

[1338] 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 22, 50,0 mg, 107 µmol) se solubilizó en DMF (1,6 ml), se añadieron trietilamina (89 µl, 640 µmol) y trifluorometanosulfonato de 2,2-difluoroetilo (64 µl, 480 µmol) y la mezcla se agitó durante 1 h a RT. La mezcla se purificó por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B) para dar 11,3 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 18 %) del compuesto diana.

[1340] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,24 (t, 1H), 2,34 - 2,40 (dd, 1H), 2,78 (m, 1H), 2,78 - 2,81 (m, 1H), 2,83 (m, 1H), 2,85 - 2,90 (t, 2H), 2,90 - 2,97 (d, 1H), 3,38 - 3,47 (m, 2H), 3,68 (dt, 1H), 3,89 - 3,92 (s, 3H), 3,92 - 4,03 (m, 2H), 4,17 (dd, 1H), 4,29 (dd, 1H), 5,97 - 6,02 (d, 1H), 6,02 - 6,34 (tt, 1H), 6,47 - 6,54 (m, 1H), 6,64 (td, 1H), 7,16 (s, 1H), 7,29 (d, 1H), 7,54 (s, 1H), 8,02 (d, 1H), 8,40 (s, 1H), 11,03 (s, 1H).

[1342] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,04 min; MS (ESlpos): m/z = 532 [M+H]<+>

[1344] Ejemplo 23

[1346] 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-(2,2,2-trifluoroetil)morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1348]

[1351] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 22 con 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrol[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 22, 35,0 mg, 74,9 µmol) y trifluorometanosulfonato de 2,2,2-trifluoroetilo (CAS 6226-25-1, 16 µl, 110 µmol) como materiales de partida; se prepararon 11,9 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 27 %) del compuesto del título tras HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 6,00 min 30 - 70 % B).

[1353] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,231 (0,47), 1,264 (0,47), 2,326 (2,22), 2,331 (1,58), 2,359 (0,93), 2,387 (1,69), 2,414 (1,15), 2,518 (7,61), 2,522 (5,31), 2,668 (2,30), 2,673 (1,58), 2,805 (1,18), 2,836 (2,55), 2,853 (3,44), 2,870 (1,79), 2,936 (1,26), 2,964 (1,11), 3,196 (0,54), 3,205 (0,61), 3,221 (1,54), 3,230 (1,58), 3,247 (1,51), 3,255 (1,47), 3,271 (0,61), 3,281 (0,54), 3,400 (1,26), 3,406 (1,33), 3,417 (2,37), 3,423 (2,26), 3,434 (1,15), 3,440 (1,08), 3,654 (0,54), 3,660 (0,65), 3,674 (0,72), 3,683 (1,18), 3,688 (1,15), 3,711 (0,68), 3,912 (16,00), 3,934 (1,11), 3,966 (1,11), 3,983 (0,72), 3,999 (0,75), 4,008 (0,65), 4,157 (1,04), 4,174 (1,00), 4,183 (1,51), 4,199 (1,22), 4,277 (1,40), 4,286 (1,36), 4,303 (1,04), 4,312 (0,86), 5,989 (1,94), 6,010 (1,97), 6,472 (0,86), 6,475 (0,86), 6,493 (1,26), 6,497 (1,26), 6,502 (0,93), 6,520 (1,18), 6,523 (1,04), 6,611 (0,90), 6,626 (1,04), 6,632 (1,54), 6,647 (1,51), 6,652 (0,75), 6,668 (0,65), 7,161 (2,22), 7,278 (3,52), 7,291 (3,55), 7,535 (4,77), 8,018 (4,38), 8,030 (4,02), 8,391 (6,17), 11,018 (2,48).

[1354] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,09 min; MS (ESlpos): m/z = 550 [M+H]<+>

[1355] Ejemplo 24

[1356] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[2-(4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1358]

[1360] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[2-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-24, 105 mg, 197 µmol) como material de partida; se prepararon 43,5 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 42 %) del compuesto del título tras HPLC preparativa (procedimiento 7).

[1362] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,817 (0,39), 1,834 (1,18), 1,849 (1,57), 1,861 (1,08), 1,876 (0,49), 2,518 (3,04), 2,522 (2,06), 2,673 (0,59), 2,833 (0,88), 2,846 (1,87), 2,863 (0,98), 3,204 (0,88), 3,231 (1,47), 3,260 (1,08), 3,312 (1,28), 3,396 (1,67), 3,408 (2,16), 3,413 (2,16), 3,426 (1,28), 3,456 (1,18), 3,462 (1,08), 3,484 (0,98), 3,490 (0,98), 3,521 (0,79), 3,525 (0,88), 3,549 (1,08), 3,554 (1,18), 3,582 (0,69), 3,625 (1,28), 3,648 (1,37), 3,668 (2,45), 3,678 (0,98), 3,693 (1,37), 3,716 (1,28), 3,745 (0,98), 3,858 (16,00), 4,226 (1,37), 4,241 (2,94), 4,257 (1,37), 6,103 (1,47), 6,115 (2,06), 6,127 (1,47), 6,640 (5,60), 6,650 (3,63), 7,108 (1,77), 7,287 (2,65), 7,299 (2,75), 7,458 (3,93), 8,020 (3,04), 8,033 (2,85), 8,350 (4,32), 11,191 (1,96).

[1363] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,68 min; MS (ESlpos): m/z = 499 [M+H]<+>

[1364] Ejemplo 25

[1365] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[2-(4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1367]

[1369] El compuesto del título del ejemplo 24 (40 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 18,0 mg, a R<t>= 18,8 - 21,3 min, pureza del 96 %) y el enantiómero 2 (17 mg, a Rt = 21,7 - 24,5 min, véase el ejemplo 26).

[1370] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1371] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SB 5µ, 250x30; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo 0,1 vol % dietilamina; gradiente: 0-20 min 2-60 % B; flujo: 40 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1372] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1373] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4,6; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; gradiente: 0-7 min 2-60 % B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1374] HPLC quiral analítica: Rt = 4,94 min.

[1375] Rotación Óptica:

[1377] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

) δ [ppm]= 1,835 (1,01), 1,851 (1,31), 1,862 (0,93), 1,877 (0,41), 2,518 (1,52), 2,522 (0,99), 2,834 (0,77), 2,846 (1,61), 2,852 (1,47), 2,864 (0,82), 2,869 (0,80), 3,205 (0,76), 3,231 (1,30), 3,235 (1,27), 3,261 (0,85), 3,391 (0,83), 3,397 (0,91), 3,408 (1,57), 3,415 (1,62), 3,430 (0,98), 3,457 (0,99), 3,463 (1,01), 3,485 (0,84), 3,491 (0,79), 3,522 (0,72), 3,527 (0,76), 3,551 (0,96), 3,556 (1,07), 3,584 (0,57), 3,624 (1,00), 3,649 (1,11), 3,654 (1,11), 3,671 (1,96), 3,680 (0,81), 3,687 (0,53), 3,695 (1,23), 3,718 (1,09), 3,723 (1,01), 3,747 (0,79), 3,859 (16,00), 4,227 (1,22), 4,242 (2,58), 4,258 (1,21), 6,105 (1,40), 6,118 (1,81), 6,129 (1,46), 6,641 (5,45), 6,651 (3,33), 6,654 (3,12), 7,110 (1,60), 7,288 (2,35), 7,300 (2,36), 7,306 (0,49), 7,462 (3,57), 8,023 (2,38), 8,035 (2,27), 8,353 (3,43), 11,186 (1,77).

[1378] Ejemplo 26

[1379] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[2-(4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoisómero 2)

[1381]

[1383] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 24. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 25) para dar 25 mg del compuesto del título (a Rt = 21,7 - 24,5 min, rendimiento del 19 %).

[1384] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 25): R<t>= 5,49 min.

[1385] Rotación Óptica:

[1387] Ejemplo 27

[1388] 3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1389]

[1391] 3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 27, 24,0 mg, 47,8 µmol) se solubilizó en metanol (650 µl), se añadieron formaldehído (7,2 µl, pureza del 37 %, 96 µmol) y ácido acético (2,7 µl, 48 µmol) y la mezcla se agitó durante 15 min a RT. Se añadió triacetoxiborohidruro sódico (15,2 mg, 71,7 µmol) y la mezcla se agitó durante 1h a RT. La mezcla se diluyó con metanol, se filtró a través de una columna SCX y se lavó con metanol y amoníaco (7 M en metanol). El filtrado se evaporó y se purificó por HPLC preparativa (procedimiento 9, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B) para obtener 17,3 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 61 %) del compuesto del título como su sal de formiato.

[1392] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,01 min; MS (ESlpos): m/z = 516 [M+H]<+>

[1394] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 2,189 (13,49), 2,330 (5,06), 2,729 (5,60), 2,861 (7,86), 3,348 (16,00), 3,419 (15,57), 3,624 (4,81), 3,830 (14,46), 3,908 (6,49), 7,633 (4,30), 8,098 (4,59), 8,146 (8,39).

[1395] 3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxi-anilino)-2-[3-[[(2S)-4-metilmorfolin-4-ium-2-il]metoxi]-4-piridil]-1,5,6,7-tetrahidropirrol[3,2-c]piridin-4-ona;formiato se solubilizaron en DCM y se lavaron con NaHCO<3>acuoso saturado y salmuera para obtener 9,00 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 33 %) del compuesto diana como su base libre.

[1397] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,79 - 1,96 (t, 1H), 1,97 - 2,05 (td, 1H), 2,19 (s, 3H), 2,63 (a d, 1H), 2,71 -2,82 (a d, 1H), 2,86 (t, 2H), 3,43 (td, 2H), 3,58 - 3,67 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,87 - 4,01 (m, 2H), 4,14 (dd, 1H), 4,29 (dd, 1H), 5,85 (dd, 1H), 6,56 (dd, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,33 (d, 1H), 7,64 (d, 1H), 8,07 - 8,12 (d, 1H), 8,43 (s, 1H), 11,18 (s, 1H).

[1398] Ejemplo 28

[1399] 3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-(2,2,2-trifluoroetil)morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1401]

[1403] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 22 con 3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 27, 25,0 mg, 49,8 µmol) y 2,2,2-trifluoroetil trifluorometansulfonato (CAS 6226-25-1, 11 µl, 75 µmol) como materiales de partida; se prepararon 15,1 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 49 %) del compuesto del título tras HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 6,00 min 30 - 70 % B).

[1404] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 2,35 (t, 1H), 2,77 - 2,95 (m, 4H), 3,21 (dd, 2H), 3,42 (td, 2H), 3,60 - 3,69 (m, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,88 - 4,01 (m, 2H), 4,14 - 4,28 (m, 2H), 5,84 (dd, 1H), 6,56 (dd, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,32 (d, 1H), 7,62 - 7,66 (m, 1H), 8,10 (d, 1H), 8,43 (s, 1H), 11,16 (s, 1H).

[1405] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,19 min; MS (ESlpos): m/z = 584 [M+H]<+>

[1406] Ejemplo 29

[1407] 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1409]

[1411] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 conN-(3-cloro-2-etilfenil)-4-[({3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-29, 300 mg, 566 µmol) como material de partida; se prepararon 3,00 mg (pureza del 85 %, rendimiento del 1 %) del compuesto del título tras HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 6,00 min 30 - 70 % B).

[1413] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 0,851 (0,47), 1,210 (0,41), 1,230 (2,24), 1,352 (0,41), 2,206 (1,49), 2,331 (2,92), 2,336 (1,36), 2,518 (16,00), 2,522 (10,31), 2,539 (1,02), 2,673 (3,05), 2,678 (1,42), 2,864 (0,41), 6,728 (0,41), 6,735 (0,47), 7,188 (0,47), 7,201 (0,47), 7,962 (0,54), 7,975 (0,47), 8,365 (0,68).

[1414] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,07 min; MS (ESlpos): m/z = 496 [M+H]<+>

[1415] Ejemplo 30

[1416] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1418]

[1420] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-[({3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-30, 55,0 mg, 101 µmol) como material de partida; se prepararon 28,00 mg (pureza del 98 %, rendimiento del 53 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 6,00 min 30 - 70 % B).

[1421] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,066 (9,57), 1,234 (8,81), 2,074 (0,42), 2,326 (1,06), 2,331 (0,74), 2,518 (3,90), 2,522 (2,65), 2,668 (1,04), 2,673 (0,76), 2,819 (1,08), 2,837 (2,21), 2,853 (1,18), 3,398 (1,96), 3,409 (1,62), 3,416 (1,61), 3,427 (2,05), 3,580 (0,57), 3,588 (0,65), 3,609 (1,17), 3,618 (1,13), 3,629 (1,85), 3,654 (1,43), 3,657 (1,70), 3,679 (1,32), 3,709 (0,74), 3,868 (16,00), 3,894 (0,49), 3,902 (0,53), 3,910 (0,64), 3,918 (0,58), 3,927 (0,42), 4,155 (0,76), 4,171 (0,72), 4,181 (1,01), 4,198 (0,88), 4,295 (0,97), 4,304 (0,99), 4,322 (0,76), 4,330 (0,67), 6,143 (1,40), 6,155 (1,71), 6,167 (1,40), 6,653 (0,46), 6,663 (5,26), 6,673 (3,14), 6,676 (2,88), 7,138 (1,48), 7,270 (2,51), 7,283 (2,51), 7,475 (3,39), 8,033 (3,36), 8,045 (2,98), 8,404 (4,26), 11,073 (1,66).

[1422] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,80 min; MS (ESlpos): m/z = 513 [M+H]<+>

[1423] Ejemplo 31

[1424] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoísmero 1)

[1426]

[1428] El compuesto del título del ejemplo 30 (26,3 mg) se separó en enantiómeros por HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 11,00 mg, a R<t>= 10,7 - 13,4 min) y el enantiómero 2 (10 mg, a Rt = 14,0 -19,9 min, véase el ejemplo 32).

[1429] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1430] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 250x20; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol 0,1 vol % dietilamina; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 20 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1431] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1432] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 100x4,6; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm HPLC quiral analítica: Rt = 6,72 min.

[1433] Ejemplo 32

[1434] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoísmero 2

[1435]

[1437] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 30. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 31) para dar 10 mg del compuesto del título (a Rt = 14,0 - 19,9 min).

[1438] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 31): R<t>= 10,04 min.

[1439] Ejemplo 33

[1440] 2-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1442]

[1444] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1; 4-{[(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-33, 125 mg, 236 µmol) como material de partida, se prepararon 15,00 mg (pureza del 80 %, rendimiento del 10 %) del compuesto del título tras HPLC preparativa (procedimiento 7).

[1446] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,068 (15,53), 1,236 (15,37), 2,517 (2,98), 2,522 (2,00), 2,817 (1,52), 2,834 (3,10), 2,851 (1,65), 2,903 (0,47), 2,921 (0,89), 2,936 (0,48), 3,402 (2,87), 3,408 (2,55), 3,415 (2,29), 3,431 (3,39), 3,580 (0,97), 3,588 (1,12), 3,609 (2,52), 3,618 (2,17), 3,633 (3,03), 3,651 (2,10), 3,661 (2,34), 3,677 (2,32), 3,706 (1,26), 3,900 (16,00), 3,917 (5,39), 3,933 (0,80), 3,942 (0,71), 4,147 (1,18), 4,163 (1,12), 4,173 (1,56), 4,189 (1,34), 4,294 (1,63), 4,302 (1,37), 4,320 (1,26), 4,329 (0,93), 4,769 (0,55), 4,780 (0,55), 4,787 (0,58), 4,797 (0,52), 5,696 (0,85), 5,759 (1,92), 5,985 (0,55), 6,000 (1,88), 6,020 (1,84), 6,455 (0,97), 6,476 (1,43), 6,479 (1,49), 6,503 (1,30), 6,597 (0,86), 6,612 (1,11), 6,618 (1,49), 6,625 (0,60), 6,633 (1,47), 6,638 (0,71), 6,653 (0,62), 7,141 (2,11), 7,277 (3,15), 7,289 (3,21), 7,297 (1,00), 7,479 (4,43), 7,531 (1,26), 8,030 (3,74), 8,042 (3,54), 8,399 (6,35), 11,053 (2,30), 11,085 (0,73).

[1447] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,71 min; MS (ESlpos): m/z = 497 [M+H]<+>

[1448] 2-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoisómero 1)

[1449]

[1451] El compuesto del título del ejemplo 33 (15,0 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 5,00 mg, a Rt = 10,9 - 13,1 min, rendimiento del 32 %) y el enantiómero 2 (4 mg, a R<t>= 13,5 - 18,3 min, véase el ejemplo 34).

[1452] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1453] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 250x20; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 20 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1454] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 100x4.6; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm HPLC quiral analítica: Rt = 6,58 min.

[1455] Rotación Óptica:

[1457] Ejemplo 34

[1458] 2-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1460]

[1462] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 33. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 33) para dar 4 mg del compuesto del título (a Rt = 13,5 - 18,3 min, rendimiento del 24 %).

[1463] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 33): R<t>= 9,21 min.

[1464] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,046 (0,67), 1,068 (13,52), 1,108 (0,86), 1,185 (0,55), 1,236 (13,07), 1,259 (0,64), 2,084 (0,44), 2,331 (0,49), 2,518 (2,88), 2,523 (1,93), 2,673 (0,47), 2,817 (1,52), 2,834 (3,11), 2,851 (1,67), 3,403 (2,57), 3,409 (2,57), 3,416 (2,39), 3,431 (2,89), 3,581 (0,83), 3,589 (0,95), 3,611 (1,68), 3,618 (1,66), 3,633 (2,61), 3,652 (1,72), 3,661 (2,23), 3,678 (1,86), 3,707 (1,00), 3,901 (16,00), 3,917 (1,07), 3,926 (0,91), 3,934 (0,65), 3,943 (0,58), 4,148 (1,01), 4,165 (0,96), 4,174 (1,36), 4,190 (1,18), 4,294 (1,36), 4,303 (1,36), 4,320 (1,03), 4,329 (0,91), 6,000 (1,83), 6,021 (1,91), 6,455 (0,83), 6,459 (0,87), 6,476 (1,19), 6,480 (1,27), 6,486 (0,94), 6,503 (1,10), 6,506 (1,01), 6,597 (0,86), 6,612 (1,01), 6,618 (1,47), 6,633 (1,44), 6,638 (0,75), 6,654 (0,61), 7,141 (2,15), 7,277 (2,70), 7,290 (2,68), 7,479 (4,53), 8,030 (2,67), 8,043 (2,48), 8,400 (4,07), 11,054 (2,33).

[1465] Ejemplo 35

[1466] 2-(3-{2-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1468]

[1470] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con 4-{[(3-{2-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)metil]amino}-N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-35, 130 mg, 252 µmol) como material de partida, se prepararon 30,0 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 22 %) del compuesto racémico del título tras HPLC preparativa (procedimiento 7).

[1472] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6

): δ [ppm]= 1,229 (0,48), 1,827 (0,71), 1,843 (1,74), 1,859 (2,06), 1,869 (1,50), 1,885 (0,63), 2,331 (0,40), 2,517 (2,30), 2,522 (1,50), 2,539 (4,51), 2,669 (0,55), 2,673 (0,48), 2,831 (1,19), 2,842 (2,22), 2,848 (2,06), 2,858 (1,19), 2,865 (1,11), 3,162 (1,27), 3,174 (0,71), 3,207 (1,35), 3,233 (2,14), 3,236 (2,14), 3,262 (1,58), 3,406 (4,44), 3,412 (3,88), 3,428 (2,22), 3,456 (1,90), 3,462 (1,82), 3,484 (1,50), 3,490 (1,50), 3,522 (1,27), 3,527 (1,35), 3,550 (1,66), 3,556 (1,90), 3,578 (0,95), 3,583 (1,27), 3,624 (2,22), 3,651 (2,14), 3,671 (3,25), 3,681 (1,50), 3,695 (2,22), 3,700 (1,98), 3,716 (2,06), 3,721 (1,98), 3,728 (1,35), 3,745 (1,50), 3,780 (0,71), 3,862 (0,95), 3,889 (16,00), 3,906 (1,19), 4,074 (0,71), 4,222 (2,14), 4,238 (3,96), 4,253 (1,82), 4,754 (0,55), 5,960 (1,98), 5,981 (1,98), 6,430 (0,95), 6,433 (0,95), 6,451 (1,43), 6,455 (1,43), 6,461 (0,95), 6,478 (1,19), 6,482 (1,11), 6,572 (0,95), 6,587 (1,11), 6,593 (1,58), 6,608 (1,58), 6,613 (0,79), 6,628 (0,63), 7,108 (2,30), 7,292 (2,77), 7,305 (2,77), 7,455 (4,67), 8,017 (2,61), 8,030 (2,46), 8,344 (4,04), 11,175 (2,46).

[1473] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,63 min; MS (ESlpos): m/z = 483 [M+H]<+>

[1474] 2-(3-{2-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona racémica (25,0 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 12,00 mg, a Rt = 15,1 - 17,0 min) y el enantiómero 2 (4 mg, a Rt = 19,8 - 26,8 min, véase el ejemplo 36).

[1475] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1476] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: Chiralpak IF 5µ, 250x30; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol 0,1 vol % dietilamina; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 50 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1477] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1478] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: Chiralpak IF 3µ, 100x4,6; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1479] HPLC quiral analítica: Rt = 4,68 min.

[1480] Rotación Óptica:

[1482] Ejemplo 36

[1483] 2-(3-{2-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1485]

[1487] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 35. La separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento véase el ejemplo 35) dio 4 mg del compuesto del título (a Rt = 19,8 -26,8 min).

[1488] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 35): Rt = 6,58 min.

[1489] Rotación Óptica:

[1491] Ejemplo 37

[1492] 3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1494]

[1496] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1; N-(3-fluoro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-37, 130 mg, 252 µmol) como material de partida, se prepararon 35,00 mg (pureza del 92 %, rendimiento del 27 %) del compuesto del título tras HPLC preparativa (procedimiento 7).

[1497] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,277 (13,00), 2,292 (1,54), 2,307 (0,96), 2,324 (0,70), 2,329 (0,89), 2,334 (0,66), 2,407 (0,69), 2,428 (1,27), 2,435 (1,36), 2,520 (2,98), 2,525 (1,88), 2,667 (0,63), 2,671 (0,83), 2,676 (0,62), 2,777 (0,67), 2,801 (0,82), 2,818 (1,61), 2,825 (0,99), 2,835 (1,02), 2,844 (1,23), 2,860 (0,82), 2,911 (1,23), 2,940 (1,09), 3,388 (0,53), 3,408 (0,96), 3,425 (1,66), 3,431 (1,41), 3,441 (1,54), 3,455 (0,69), 3,548 (1,12), 3,576 (1,89), 3,592 (1,35), 3,597 (1,35), 3,602 (1,33), 3,621 (0,70), 3,626 (0,70), 3,783 (1,37), 3,785 (1,33), 3,818 (1,11), 3,843 (1,97), 3,849 (2,06), 3,870 (1,11), 3,878 (0,99), 3,941 (16,00), 3,954 (1,12), 4,078 (0,56), 4,349 (0,43), 4,358 (0,42), 4,376 (1,85), 4,388 (2,91), 4,416 (0,47), 6,013 (1,90), 6,034 (1,91), 6,516 (0,95), 6,520 (0,92), 6,537 (1,27), 6,541 (1,33), 6,547 (0,95), 6,564 (1,12), 6,568 (1,03), 6,657 (0,94), 6,672 (1,04), 6,678 (1,61), 6,693 (1,51), 6,698 (0,80), 6,714 (0,65), 7,180 (2,21), 7,313 (3,72), 7,325 (3,57), 7,605 (4,51), 7,980 (4,40), 7,993 (4,17), 8,360 (6,21), 8,414 (0,59), 12,014 (2,24).

[1498] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,51 min; MS (ESlpos): m/z = 482 [M+H]<+>

[1499] Ejemplo 38

[1500] 2-[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]-3-(3-fluoro-2-metil-anilino)-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1502]

[1504] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1; 4-[[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]metilamino]-N-(3-fluoro-2-metil-fenil)-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridin-5-carbotioamida (producto intermedio 6-38, 190 mg, 369 µmol) como material de partida, se prepararon 30,2 mg (pureza del 98%, rendimiento del 17%) del compuesto del título tras HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 5,59 min 15 - 51,7 % B, 5,59 - 5,88 min 51,7 % B, 5,88 - 5,93 min 51,7 - 52,1 % B, 5,93 - 5,95 min 52,1 % B, 5,95 - 6,32 min 52,1-55 % B)

[1506] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,073 (16,00), 1,243 (14,37), 2,177 (9,43), 2,180 (9,37), 2,520 (3,20), 2,525 (2,30), 2,542 (0,63), 2,826 (1,74), 2,843 (3,73), 2,861 (2,01), 3,406 (3,15), 3,417 (2,63), 3,424 (2,71), 3,434 (3,36), 3,569 (0,91), 3,577 (1,10), 3,598 (1,87), 3,607 (1,84), 3,643 (4,40), 3,671 (4,37), 3,699 (1,24), 3,881 (0,69), 3,890 (0,81), 3,898 (1,03), 3,907 (0,94), 3,915 (0,67), 3,923 (0,65), 4,121 (1,26), 4,137 (1,17), 4,147 (1,71), 4,163 (1,45), 4,265 (1,62), 4,274 (1,65), 4,291 (1,24), 4,300 (1,11), 6,059 (2,34), 6,080 (2,42), 6,427 (1,06), 6,449 (1,94), 6,470 (1,21), 6,721 (0,73), 6,742 (1,51), 6,759 (1,47), 6,779 (0,63), 7,168 (2,42), 7,232 (4,19), 7,244 (4,24), 7,308 (4,82), 7,997 (5,22), 8,009 (4,80), 8,373 (6,80), 11,029 (2,61).

[1507] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,74 min; MS (ESlpos): m/z = 481 [M+H]<+>

[1508] Ejemplo 39

[1509] 2-[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]-3-(3-fluoro-2-metil-anilino)-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1510]

[1512] El compuesto del título del ejemplo 38 (30,2 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 10,00 mg, Rt = 30,4 - 36,0 min, rendimiento del 5 %) y el enantiómero 2 (9 mg, Rt = 45,9 - 51,7 min).

[1513] Procedimiento HPLC quiral preparativa: NPB

[1514] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: Chiralpak IF 5µ, 250x30; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol 0,1 vol % dietilamina; isocrático: 90 %A+10 %B; flujo: 50 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1515] Procedimiento HPLC quiral analítica: NPB

[1516] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: Chiralpak IF 3µ, 100x4,6; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol; isocrático: 90 %A+10 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1517] HPLC quiral analítica: Rt = 11,60 min.

[1518] Rotación Óptica:

[1520] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 0,700 (5,10), 0,744 (1,84), 0,764 (1,85), 0,836 (0,93), 0,854 (1,20), 1,073 (15,11), 1,152 (5,69), 1,235 (8,54), 1,243 (16,00), 1,296 (2,78), 1,350 (0,95), 1,378 (0,62), 1,672 (0,88), 2,179 (9,59), 2,525 (2,28), 2,827 (1,75), 2,844 (3,61), 2,861 (1,95), 3,407 (3,22), 3,418 (2,68), 3,424 (2,72), 3,434 (3,38), 3,570 (0,86), 3,578 (1,00), 3,599 (1,76), 3,607 (1,71), 3,644 (4,10), 3,671 (4,05), 3,700 (1,09), 3,882 (0,67), 3,890 (0,80), 3,899 (1,00), 3,907 (0,92), 3,915 (0,66), 3,924 (0,61), 4,121 (1,09), 4,138 (1,06), 4,147 (1,50), 4,164 (1,30), 4,267 (1,44), 4,275 (1,48), 4,292 (1,11), 4,301 (1,01), 6,060 (2,24), 6,080 (2,31), 6,428 (1,04), 6,450 (1,90), 6,472 (1,17), 6,722 (0,70), 6,742 (1,49), 6,759 (1,45), 6,780 (0,58), 6,959 (0,44), 7,170 (2,40), 7,201 (0,51), 7,222 (0,55), 7,234 (1,95), 7,246 (1,95), 7,309 (4,47), 7,999 (1,12), 8,010 (1,08), 8,375 (1,57), 11,031 (2,61).

[1521] Ejemplo 40

[1522] 3-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluoro-anilino]-2-[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1523]

[1525] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 con N-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluorofenil]-4-{[(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-40, 19,5 mg, 36,3 µmol) como material de partida; se prepararon 3,80 mg (pureza del 92 %, rendimiento del 19 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 6,00 min 30 - 70 % B).

[1527] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,86 (t, 2H), 3,22 - 3,30 (m, 1H), 3,39 - 3,48 (m, 3H), 3,50 - 3,58 (td, 1H), 3,67 - 3,93 (m, 5H), 3,97 - 4,06 (m, 1H), 4,09 - 4,18 (m, 1H), 4,25 - 4,31 (dd, 1H), 6,07 - 6,17 (d, 1H), 6,29 - 6,63 (c, 2H), 6,83 - 6,94 (m, 1H), 7,10 (s, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,37 (d, 2H), 8,00 (d, 1H), 8,38 (s, 1H), 11,07 (s, 1H). LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,99 min; MS (ESlpos): m/z = 503 [M+H]<+>

[1528] Ejemplo 41

[1529] 3-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluoroanilino]-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1531]

[1533] 3-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluoroanilino]-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 41, 22,0 mg, 43,9 µmol) se suspendió en MeOH, se añadieron formaldehído (6,6 µl, pureza en agua del 37 % , 88 µmol) y ácido acético (2,5 µl, 44 µmol). La mezcla de reacción se agitó durante 15 min a temperatura ambiente. Se añadió triacetoxiborohidruro sódico (13,9 mg, 65,8 µmol) y la mezcla se agitó durante 1 h a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de una columna SCX y se lavó con MeOH y amoníaco (7M en MeOH). El filtrado amoniacal se evaporó y se purificó por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B) para dar 8,8 mg (pureza del 90 %, rendimiento del 35 %) del compuesto del título.

[1535] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 2,07 (m, 3H), 2,22 (s, 3H), 2,63 - 2,83 (m, 2H), 2,86 (t, 2H), 3,27 - 3,31 (m, 1H), 3,35 - 3,38 (m, 1H), 3,42 (td, 2H), 3,68 (td, 1H), 3,91 - 4,00 (m, 2H), 4,12 - 4,19 (dd, 1H), 4,33 (dd, 1H), 6,13 (d, 1H), 6,29 - 6,64 (m, 1H), 6,89 (c, 1H), 7,07 - 7,14 (m, 1H), 7,33 - 7,40 (t, 2H), 7,99 (d, 1H), 8,39 (s, 1H), 11,07 (s, 1H).

[1536] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 0,98 min; MS (ESlpos): m/z = 516 [M+H]<+>

[1537] Ejemplo 42

[1538] 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1540]

[1542] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 41 con 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 42, 18,0 mg, 38,5 µmol) como material de partida; se prepararon 10,9 mg (pureza del 94 %, rendimiento del 55 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 -55 % B).

[1544] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,234 (0,45), 1,874 (1,12), 1,901 (1,88), 1,928 (1,19), 2,006 (0,51), 2,015 (0,63), 2,035 (1,18), 2,043 (1,18), 2,064 (0,68), 2,072 (0,56), 2,207 (15,79), 2,324 (0,67), 2,329 (0,91), 2,334 (0,71), 2,338 (0,45), 2,357 (16,00), 2,374 (1,16), 2,520 (2,98), 2,525 (1,85), 2,647 (1,22), 2,671 (1,61), 2,676 (1,69), 2,736 (1,32), 2,764 (1,23), 2,847 (1,67), 2,865 (3,57), 2,882 (1,86), 3,411 (1,24), 3,417 (1,33), 3,428 (2,40), 3,434 (2,36), 3,445 (1,17), 3,451 (1,06), 3,639 (0,62), 3,645 (0,95), 3,667 (1,35), 3,672 (1,38), 3,695 (0,78), 3,701 (0,66), 3,937 (1,97), 3,960 (1,51), 4,111 (1,22), 4,128 (1,10), 4,137 (1,63), 4,153 (1,36), 4,253 (1,46), 4,262 (1,52), 4,279 (1,14), 4,287 (1,03), 6,190 (1,81), 6,194 (1,78), 6,209 (1,99), 6,213 (1,81), 6,722 (0,90), 6,726 (1,25), 6,742 (3,67), 6,746 (2,96), 6,753 (2,81), 6,773 (2,59), 6,792 (0,84), 7,190 (2,30), 7,232 (3,39), 7,244 (3,38), 7,377 (4,48), 7,990 (3,43), 8,003 (3,19), 8,370 (5,23), 11,051 (2,53).

[1545] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,52 min; MS (ESlpos): m/z = 482 [M+H]<+>

[1546] Ejemplo 43

[1547] 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1549]

[1551] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 41 con 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(3R)-morfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (30,0 mg, 64,1 µmol) como material de partida; se prepararon 7,0 mg (pureza del 94 %, rendimiento del 21 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 15 % B, 0,50 - 6,00 min 15 - 55 % B).

[1552] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= -0,002 (3,00), 0,879 (0,57), 2,085 (5,27), 2,272 (14,21), 2,318 (0,47), 2,382 (16,00), 2,397 (1,43), 2,423 (1,05), 2,431 (1,10), 2,460 (1,63), 2,518 (5,17), 2,523 (3,38), 2,660 (0,46), 2,810 (0,81), 2,828 (2,27), 2,845 (1,96), 2,864 (0,87), 2,909 (1,32), 2,938 (1,16), 3,411 (0,70), 3,428 (1,64), 3,435 (1,37), 3,444 (1,50), 3,464 (0,63), 3,540 (1,08), 3,568 (2,41), 3,595 (2,18), 3,620 (0,70), 3,818 (1,11), 3,844 (2,09), 3,864 (1,06), 3,872 (0,93), 4,357 (1,94), 4,368 (3,51), 4,395 (0,46), 6,209 (1,79), 6,212 (1,85), 6,228 (1,98), 6,232 (1,91), 6,756 (1,10), 6,760 (1,40), 6,776 (3,46), 6,779 (2,93), 6,793 (2,52), 6,813 (2,75), 6,833 (0,95), 7,200 (2,25), 7,250 (3,55), 7,263 (3,70), 7,431 (4,31), 7,946 (3,93), 7,958 (3,66), 8,338 (5,51), 12,003 (2,32).

[1553] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,57 min; MS (ESlpos): m/z = 512 [M+H]<+>

[1554] Ejemplo 44

[1555] 3-(3-cloro-2-metil-anilino)-2-[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1557]

[1559] De forma analoga al ejemplo 1,N-(3-cloro-2-metil-fenil)-4-[[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]metilamino]-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida (producto intermedio 6-44, 320 mg, 603 µmol) se utilizó para preparar 32 mg del compuesto del título (pureza del 98 %, rendimiento del 10 %) tras agitación durante 2 h a temperatura ambiente y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-5,92 min 15-54,2 % B, 5,92- 7,34 min 54,2 % B, 7,34 - 7,42 min 54,2 - 55 % B).

[1561] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,072 (14,59), 1,241 (13,05), 2,325 (0,47), 2,329 (0,73), 2,344 (16,00), 2,520 (1,82), 2,525 (1,27), 2,671 (0,54), 2,828 (1,59), 2,845 (3,40), 2,862 (1,80), 3,402 (2,68), 3,417 (2,39), 3,423 (2,57), 3,431 (2,75), 3,565 (0,87), 3,574 (1,01), 3,595 (1,70), 3,603 (1,65), 3,640 (3,45), 3,668 (4,15), 3,697 (1,17), 3,872 (0,64), 3,880 (0,75), 3,888 (0,95), 3,897 (0,88), 3,905 (0,63), 3,914 (0,58), 4,122 (1,12), 4,139 (1,05), 4,149 (1,54), 4,165 (1,34), 4,254 (1,47), 4,263 (1,52), 4,281 (1,10), 4,289 (0,98), 6,196 (1,81), 6,199 (1,76), 6,215 (1,97), 6,218 (1,81), 6,705 (0,97), 6,709 (1,30), 6,725 (3,57), 6,729 (2,82), 6,738 (2,56), 6,757 (2,50), 6,778 (0,82), 7,165 (2,26), 7,230 (3,85), 7,243 (3,87), 7,323 (4,45), 8,004 (5,13), 8,016 (4,69), 8,374 (6,56), 11,049 (2,45).

[1562] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,79 min; MS (ESlpos): m/z = 497 [M+H]<+>

[1563] Ejemplo 45

[1564] 3-(3-cloro-2-metil-anilino)-2-[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1565]

[1567] El compuesto del título del ejemplo 44 (32,0 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 15,50 mg, R<t>= 12,1 - 14,2 min) y el enantiómero 2 (12,6 mg, Rt = 14,5 - 19,0 min, véase el ejemplo 46).

[1568] Procedimiento HPLC quiral preparativa: POB

[1569] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 250x20; eluyente A: etanol 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: metanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 10 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nmProcedimiento HPLC quiral analítica: POB

[1570] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 100x4.6; eluyente A: etanol 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: metanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm

[1571] HPLC quiral analítica: Rt = 3,52 min.

[1572] Rotación Óptica:

[1574] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,050 (0,51), 1,070 (14,54), 1,119 (0,40), 1,137 (0,77), 1,155 (0,80), 1,190 (0,47), 1,239 (13,63), 2,085 (0,73), 2,318 (0,77), 2,323 (1,71), 2,327 (2,48), 2,332 (2,11), 2,342 (16,00), 2,518 (7,25), 2,523 (5,03), 2,660 (0,73), 2,665 (1,64), 2,669 (2,30), 2,673 (1,60), 2,679 (0,73), 2,825 (1,60), 2,842 (3,43), 2,859 (1,86), 3,306 (0,95), 3,399 (2,77), 3,415 (2,44), 3,421 (2,59), 3,429 (2,84), 3,563 (0,87), 3,572 (1,02), 3,592 (1,71), 3,601 (1,68), 3,638 (3,46), 3,665 (4,15), 3,695 (1,17), 3,869 (0,77), 3,878 (0,77), 3,886 (0,95), 3,894 (0,87), 3,903 (0,62), 3,911 (0,58), 4,120 (1,13), 4,137 (1,06), 4,147 (1,53), 4,163 (1,31), 4,252 (1,46), 4,261 (1,53), 4,278 (1,09), 4,287 (0,98), 6,193 (1,82), 6,197 (1,75), 6,212 (1,93), 6,216 (1,82), 6,703 (0,98), 6,707 (1,28), 6,723 (3,50), 6,727 (2,81), 6,736 (2,59), 6,756 (2,51), 6,775 (0,84), 7,162 (2,22), 7,228 (3,64), 7,241 (3,64), 7,321 (4,48), 8,002 (4,30), 8,014 (4,01), 8,372 (5,94), 11,046 (2,48).

[1575] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,80 min; MS (ESlpos): m/z = 497 [M+H]<+>

[1576] Ejemplo 46

[1577] 3-(3-cloro-2-metil-anilino)-2-[3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]-4-piridil]-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1578]

[1580] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 44. Separación de enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: ver ejemplo 45) para dar 12,6 mg del compuesto del título (Rt = 14,5 - 19,0 min). HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 45): Rt = 4,43 min.

[1581] Rotación Óptica:

[1583] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 0,748 (0,44), 0,764 (0,44), 1,053 (0,52), 1,070 (14,81), 1,154 (1,45), 1,239 (13,86), 2,085 (1,85), 2,318 (0,46), 2,323 (0,99), 2,327 (1,45), 2,332 (1,39), 2,342 (16,00), 2,518 (4,03), 2,523 (2,82), 2,540 (0,54), 2,665 (0,89), 2,669 (1,25), 2,673 (0,85), 2,825 (1,61), 2,843 (3,39), 2,859 (1,81), 3,399 (2,78), 3,415 (2,48), 3,421 (2,64), 3,429 (2,88), 3,563 (0,83), 3,572 (0,99), 3,593 (1,69), 3,601 (1,67), 3,638 (3,49), 3,665 (4,15), 3,695 (1,15), 3,869 (0,83), 3,878 (0,77), 3,886 (0,95), 3,895 (0,89), 3,903 (0,64), 3,912 (0,58), 4,120 (1,09), 4,137 (1,03), 4,147 (1,53), 4,163 (1,33), 4,252 (1,45), 4,261 (1,51), 4,278 (1,09), 4,287 (0,97), 6,193 (1,77), 6,197 (1,75), 6,212 (1,97), 6,216 (1,85), 6,703 (0,95), 6,707 (1,27), 6,723 (3,51), 6,727 (2,82), 6,736 (2,58), 6,756 (2,54), 6,775 (0,85), 7,162 (2,26), 7,228 (3,10), 7,241 (3,12), 7,321 (4,45), 8,002 (2,54), 8,015 (2,36), 8,372 (3,89), 11,046 (2,46). LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,80 min; MS (ESlpos): m/z = 497 [M+H]<+>

[1584] Ejemplo 47

[1585] 2-[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]-3-(3-fluoro-2-metil-anilino)-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1587]

[1589] De forma analoga al ejemplo 1, se utilizó 4-[[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]metilamino]-N-(3-fluoro-2-metil-fenil)-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida (producto intermedio 6-47, 399 mg, 820 µmol) para preparar 135 mg del compuesto del título (pureza del 97 %, rendimiento del 35 %) tras agitación durante una noche a 60 °C y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 9, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B).

[1591] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,154 (4,20), 1,172 (8,22), 1,189 (3,94), 1,987 (16,00), 2,185 (2,36), 2,189 (2,36), 2,518 (0,75), 2,522 (0,47), 2,843 (0,44), 2,860 (0,94), 2,877 (0,50), 3,398 (0,42), 3,425 (1,01), 3,451 (0,56), 3,709 (0,44), 3,740 (0,57), 3,999 (1,26), 4,017 (3,61), 4,035 (3,57), 4,053 (1,15), 4,125 (0,48), 4,230 (0,43), 4,239 (0,42), 5,758 (0,88), 6,052 (0,58), 6,072 (0,60), 6,459 (0,48), 7,186 (0,59), 7,234 (1,00), 7,247 (1,01), 7,345 (1,17), 7,990 (1,32), 8,002 (1,20), 8,361 (1,76), 11,030 (0,60).

[1592] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,65 min; MS (ESlpos): m/z = 453 [M+H]<+>

[1593] Ejemplo 48

[1594] 2-[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]-3-(3-fluoro-2-metil-anilino)-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1596]

[1598] El compuesto del título del ejemplo 47 (15,0 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 3,0 mg, R<t>= 5,5 - 6,2 min) y el enantiómero 2 (2,0 mg, Rt = 9,0 -9,9 min, véase el ejemplo 49).

[1599] Procedimiento HPLC quiral preparativa: MTBE

[1600] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SB 5µ, 250x30; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 55 %B+45 %A; flujo: 80 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm;

[1601] Procedimiento HPLC quiral analítica: MTBE

[1602] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4,6; eluyente A: metil terc-butil éter 0,2 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 50 %A+50 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 280 nm;

[1603] HPLC quiral analítica: Rt = 2,90 min.

[1604] Rotación Óptica:

[1606] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= -0,008 (0,55), 0,000 (16,00), 0,008 (0,53), 0,700 (0,57), 0,752 (0,76), 0,770 (0,76), 1,140 (1,18), 1,160 (2,36), 1,234 (1,64), 1,296 (0,42), 2,189 (11,55), 2,191 (11,53), 2,521 (2,85), 2,525 (1,90), 2,846 (2,15), 2,863 (4,59), 2,880 (2,42), 3,401 (1,96), 3,410 (1,71), 3,417 (1,88), 3,428 (4,95), 3,444 (1,64), 3,454 (2,68), 3,505 (0,67), 3,510 (0,82), 3,532 (1,56), 3,539 (1,58), 3,560 (1,14), 3,569 (1,03), 3,712 (2,13), 3,721 (1,35), 3,743 (2,76), 3,750 (1,24), 3,771 (1,14), 3,778 (0,84), 3,800 (1,69), 3,806 (1,85), 3,829 (1,52), 3,835 (1,54), 3,885 (1,66), 3,912 (1,22), 3,992 (0,42), 4,001 (0,68), 4,008 (1,01), 4,017 (1,14), 4,025 (1,10), 4,033 (0,93), 4,042 (0,78), 4,049 (0,53), 4,103 (1,71), 4,119 (1,24), 4,129 (2,26), 4,145 (1,73), 4,233 (2,09), 4,243 (2,05), 4,259 (1,54), 4,269 (1,33), 6,056 (2,82), 6,076 (2,91), 6,440 (1,29), 6,463 (2,36), 6,484 (1,46), 6,734 (0,89), 6,754 (1,85), 6,771 (1,77), 6,792 (0,72), 7,187 (2,91), 7,237 (3,80), 7,250 (3,82), 7,348 (5,65), 7,994 (2,64), 8,006 (2,47), 8,365 (4,17), 11,029 (3,12).

[1607] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,66 min; MS (ESlpos): m/z = 453 [M+H]<+>

[1608] Ejemplo 49

[1609] 2-[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]-3-(3-fluoro-2-metil-anilino)-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1610]

[1612] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 47. Separación de enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: ver ejemplo 48) para dar 2,0 mg del compuesto del título (Rt = 9,0 - 9,9 min). HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 48): R<t>= 4,67 min.

[1613] Rotación Óptica:

[1615] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: -0,008 (0,54), 0,000 (16,00), 0,008 (0,54), 0,700 (0,74), 0,752 (0,54), 0,771 (0,57), 0,854 (0,52), 1,139 (0,91), 1,160 (1,70), 1,234 (2,19), 1,296 (0,52), 2,087 (0,66), 2,189 (11,26), 2,191 (11,28), 2,521 (4,55), 2,525 (3,00), 2,846 (2,09), 2,863 (4,47), 2,880 (2,36), 3,401 (1,99), 3,410 (1,67), 3,417 (1,87), 3,428 (4,87), 3,444 (1,65), 3,454 (2,65), 3,505 (0,69), 3,510 (0,84), 3,532 (1,52), 3,539 (1,55), 3,560 (1,13), 3,569 (1,03), 3,712 (2,09), 3,721 (1,35), 3,744 (2,70), 3,750 (1,23), 3,771 (1,16), 3,778 (0,81), 3,800 (1,67), 3,806 (1,77), 3,829 (1,50), 3,835 (1,52), 3,885 (1,62), 3,912 (1,20), 3,992 (0,42), 4,001 (0,66), 4,009 (0,98), 4,017 (1,11), 4,025 (1,08), 4,033 (0,91), 4,042 (0,76), 4,049 (0,54), 4,103 (1,70), 4,119 (1,20), 4,129 (2,19), 4,145 (1,72), 4,233 (2,04), 4,243 (2,04), 4,259 (1,52), 4,269 (1,33), 6,055 (2,75), 6,076 (2,85), 6,440 (1,25), 6,463 (2,31), 6,484 (1,45), 6,734 (0,86), 6,754 (1,79), 6,772 (1,72), 6,792 (0,74), 7,187 (2,83), 7,237 (3,37), 7,250 (3,42), 7,349 (5,43), 7,994 (2,24), 8,007 (2,14), 8,365 (3,56), 11,030 (3,02).

[1616] Ejemplo 50

[1617] 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1619]

[1621] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 1 conN-(3-cloro-2-metil-fenil)-4-[[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]metilamino]-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida (producto intermedio 6-50, 150 mg, 298 µmol) como material de partida, se prepararon 35,0 mg (rendimiento del 25 %) del compuesto racémico del título tras HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-6,00 min 15-55 % B). LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,71 min; MS (ESlpos): m/z = 469 [M+H]<+>

[1622] 3-(3-cloro-2-metil-anilino)-2-[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona racémica (35,0 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 12,5 mg, R<t>= 14,3 - 16,6 min) y el enantiómero 2 (13,4 mg, Rt = 21,1 -25,3 min, véase el ejemplo 51).

[1623] Procedimiento HPLC quiral preparativa: MTBE

[1624] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SB 5µ, 250x30; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: gradiente; flujo: 40 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nmProcedimiento HPLC quiral analítica: MTBE

[1625] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4,6; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: gradiente; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1626] HPLC quiral analítica: Rt = 3,23 min.

[1627] Rotación Óptica:

[1629] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,234 (0,41), 2,338 (0,44), 2,355 (16,00), 2,520 (2,76), 2,524 (1,87), 2,847 (1,60), 2,864 (3,40), 2,882 (1,80), 3,398 (1,50), 3,410 (1,20), 3,416 (1,35), 3,427 (3,93), 3,432 (2,41), 3,444 (1,16), 3,451 (2,30), 3,502 (0,46), 3,508 (0,60), 3,530 (1,13), 3,537 (1,16), 3,558 (0,85), 3,566 (0,78), 3,711 (1,87), 3,718 (1,04), 3,740 (2,36), 3,768 (0,89), 3,775 (0,60), 3,796 (1,27), 3,802 (1,36), 3,825 (1,15), 3,831 (1,16), 3,883 (1,23), 3,909 (0,88), 3,994 (0,48), 4,001 (0,77), 4,009 (0,80), 4,018 (0,79), 4,025 (0,69), 4,033 (0,55), 4,104 (1,32), 4,120 (0,96), 4,130 (1,76), 4,146 (1,34), 4,223 (1,59), 4,232 (1,56), 4,249 (1,15), 4,258 (1,00), 6,190 (1,73), 6,194 (1,69), 6,210 (2,01), 6,213 (1,79), 6,718 (0,97), 6,722 (1,27), 6,738 (3,59), 6,742 (2,81), 6,751 (2,54), 6,771 (2,47), 6,790 (0,80), 7,184 (2,17), 7,234 (3,49), 7,247 (3,51), 7,364 (4,36), 7,999 (3,35), 8,012 (3,08), 8,365 (4,78), 11,044 (2,32). LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 469 [M+H]<+>

[1630] La síntesis enantioselectiva a partir de 1-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metanamina (producto intermedio 2-8) confirmó el compuesto del título como 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona.

[1631] Ejemplo 51

[1632] 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1634]

[1636] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 50. La separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 50) dio 13,4 mg del compuesto del título (Rt = 21,1 - 25,3 min).

[1637] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 50): R<t>= 5,22 min.

[1638] Rotación Óptica:

[1640] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,173 (0,44), 1,234 (0,51), 2,355 (16,00), 2,521 (2,29), 2,525 (1,50), 2,848 (1,58), 2,865 (3,44), 2,882 (1,83), 3,346 (0,44), 3,399 (1,49), 3,410 (1,19), 3,416 (1,34), 3,428 (3,98), 3,432 (2,45), 3,444 (1,19), 3,452 (2,35), 3,503 (0,46), 3,508 (0,62), 3,531 (1,13), 3,538 (1,20), 3,558 (0,84), 3,567 (0,81), 3,711 (1,90), 3,718 (1,09), 3,740 (2,39), 3,768 (0,88), 3,775 (0,62), 3,797 (1,26), 3,803 (1,39), 3,825 (1,14), 3,832 (1,17), 3,883 (1,25), 3,910 (0,90), 3,995 (0,49), 4,001 (0,76), 4,010 (0,82), 4,018 (0,79), 4,026 (0,71), 4,035 (0,56), 4,042 (0,40), 4,104 (1,30), 4,121 (0,95), 4,130 (1,77), 4,147 (1,36), 4,224 (1,60), 4,233 (1,58), 4,250 (1,15), 4,259 (0,99), 6,191 (1,74), 6,195 (1,73), 6,210 (1,96), 6,214 (1,81), 6,719 (0,94), 6,723 (1,27), 6,738 (3,57), 6,743 (2,82), 6,752 (2,56), 6,771 (2,49), 6,791 (0,81), 7,185 (2,19), 7,235 (3,09), 7,248 (3,12), 7,365 (4,33), 8,000 (2,48), 8,013 (2,34), 8,366 (3,75), 11,045 (2,33).

[1641] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 469 [M+H]<+>

[1642] Ejemplo 52

[1643] 3-(3-cloro-2-etil-anilino)-2-[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]-1,5,6,7-tetrahidropirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1645]

[1647] De forma análoga al ejemplo 1, se utilizóN-(3-cloro-2-etil-fenil)-4-[[3-(1,4-dioxan-2-ilmetoxi)-4-piridil]metilamino]-6-oxo-2,3-dihidro-1H-piridina-5-carbotioamida (producto intermedio 6-52, 150 mg, 290 µmol) para preparar 23,2 mg del compuesto del título (pureza del 95 %, rendimiento del 16 %) tras agitación durante 4 h a 60 °C y purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 10% B, 0,50-8,06 min 10-20 % B, 8,06-9,02 min 20 % B, 9,02-24,12 min 20-50 %, 24,12-27,44 min 50 % B).)

[1649] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ ppm= 1,23 (t, 3 H), 2,86 (s, 4 H), 3,38 - 3,46 (m, 4 H), 3,49 - 3,58 (m, 1 H), 3,68 -3,78 (m, 2 H), 3,78 - 3,85 (m, 1 H), 3,86 - 3,92 (m, 1 H), 3,98 - 4,06 (m, 1 H), 4,09 - 4,17 (m, 1 H), 4,21 - 4,28 (m, 1 H), 6,22 (dd, 1 H), 6,67 - 6,78 (m, 2 H), 7,20 (d, 2 H), 7,45 (s, 1 H), 7,98 (d, 1 H), 8,32 - 8,39 (m, 1 H).

[1650] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,08 min; MS (ESlpos): m/z = 483 [M+H]<+>

[1651] Ejemplo 53

[1652] 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1654]

[1656] El compuesto del título del ejemplo 52 (23,2 mg) se separó en enantiómeros por HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (enantiómero 1, 6,0 mg, R<t>= 6,6 - 7,-3 min) y el enantiómero 2 (5,0 mg, R<t>= 10,7 - 11,6 min, véase el ejemplo 54).

[1657] Procedimiento HPLC quiral preparativa: MTBE

[1658] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SB 5µ, 250x30; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 50 %A+50 %B; flujo: 60 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1659] Procedimiento HPLC quiral analítica: MTBE

[1660] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4,6; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 50 %A+50 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1661] HPLC quiral analítica: Rt = 2,40 min.

[1663] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,23 (t, 3H), 2,81 - 2,91 (m, 4H), 3,40 -3,45 (m, 3H), 3,53 (dt, 1H), 3,69 -3,79 (m, 2H), 3,79 - 3,85 (m, 1H), 3,86 - 3,93 (m, 1H), 3,99 - 4,06 (m, 1H), 4,12 (dd, 1H), 4,24 (dd, 1H), 6,23 (dd, 1H), 6,69 - 6,78 (m, 2H), 7,15 - 7,23 (m, 2H), 7,43 - 7,47 (m, 1H), 7,98 (d, 1H) 8,36 (s, 1 H), 11,03 (s a, 1H). La síntesis enantioselectiva confirmó que el compuesto del título es 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona. De forma análoga al ejemplo 1, el compuesto del título (25 mg, rendimiento del 7,6 %) se preparó usandoN-(3-cloro-2-etilfenil)-4-{[(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi} piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-53, 320 mg, 0,62 mmol) como material de partida, seguido de purificación con HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 5 % B, 0,50-7,99 min 5-60 % B, 7,99-11,2060 % B).

[1665] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 11,03 (s, 1H), 8,36 (s, 1H), 7,98 (d, 1H), 7,43 - 7,49 (m, 1H), 7,15 - 7,24 (m, 2H), 6,68 - 6,80 (m, 2H), 6,14 - 6,28 (m, 1H), 4,21 - 4,33 (m, 1H), 4,10 - 4,17 (m, 1H), 4,00 - 4,05 (m, 1H), 3,70 - 3,92 (m, 4H), 3,51 - 3,59 (m, 1H), 3,39 - 3,47 (m, 3H), 2,81 - 2,90 (m, 4H), 1,23 (t, 3H).

[1666] Ejemplo 54

[1667] 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1669]

[1671] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 52. La separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 53) dio 5,0 mg del compuesto del título (Rt = 10,7 -11,6 min).

[1672] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 53): R<t>= 3,22 min.

[1674] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,14 - 1,34 (m, 6H), 2,81 - 2,91 (m, 4H), 3,38 - 3,48 (m, 3H), 3,55 (dd, 1H), 3,69 - 3,85 (m, 3H), 3,85 - 3,93 (m, 1H), 3,99 - 4,06 (m, 1H), 4,09 - 4,17 (m, 1H), 4,25 (dd, 1H), 6,23 (dd, 1H), 6,69 - 6,79 (m, 2H), 7,14 - 7,23 (m, 2H), 7,39 - 7,49 (m, 1H), 7,91 - 8,04 (m, 1H), 8,31 - 8,40 (m, 1H), 10,97 - 11,12 (m, 1H).

[1675] Ejemplo 55

[1676] 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1677]

[1679] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 41 con 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2R)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 55, 58,0 mg, 120 µmol) como material de partida; se prepararon 27,5 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 44 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 7,00 min 30 -70 % B).

[1681] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,23 (t, 3H), 1,90 (t, 1H), 1,99 - 2,09 (td, 1H), 2,21 (s, 3H), 2,63 - 2,71 (d, 1H), 2,73 - 2,78 (d, 1H), 2,78 - 2,89 (m, 4H), 3,40 - 3,47 (td, 2H), 3,67 (td, 1H), 3,92 - 3,98 (m, 2H), 4,14 (dd, 1H), 4,27 (dd, 1H), 6,23 (dd, 1H), 6,71 - 6,78 (m, 2H), 7,16 - 7,21 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,97 (d, 1H), 8,36 (s, 1H), 11,04 (s, 1H).

[1682] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,10 min; MS (ESlpos): m/z = 496 [M+H]<+>

[1683] Ejemplo 56

[1684] 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1686]

[1688] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 41 con 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (producto intermedio 56, 68,0 mg, 141 µmol) como material de partida; se prepararon 37,8 mg (pureza del 95%, rendimiento del 51 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00 - 0,50 min 30 % B, 0,50 - 7,00 min 30 -70 % B).

[1690] <1>H-RMN (400MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,23 (t, 3H), 1,90 (t, 1H), 2,00 - 2,08 (td, 1H), 2,21 (s, 3H), 2,63 - 2,72 (d, 1H), 2,72 - 2,81 (d, 1H), 2,81 - 2,90 (m, 4H), 3,44 (td, 2H), 3,67 (td, 1H), 3,91 - 3,99 (m, 2H), 4,13 (dd, 1H), 4,29 (dd, 1H), 6,23 (dd, 1H), 6,71 - 6,78 (m, 2H), 7,16 - 7,21 (m, 2H), 7,46 (s, 1H), 7,97 (d, 1H), 8,36 (s, 1H), 11,04 (s, 1H).

[1691] LC-MS (procedimiento 2): Rt = 1,10 min; MS (ESlpos): m/z = 496 [M+H]<+>

[1692] Ejemplo 57

[1693] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1694]

[1696] En un tubo de microondas, una solución deN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-([{3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}metil)amino]-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-57, 380 mg, 713 µmol) en metanol (1,5 ml) se trató con TFA (55µl, 710 µmol) seguido de peróxido de hidrógeno (9,2µl, 0,106mmol), se calentó a 60 °C y se agitó durante 16h. La mezcla de reacción se concentró hasta sequedad a presión reducida, se disolvió en DMSO y se purificó por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-5,00 min 15-50 % B, 5,00-8,00 min 50 % B) para dar tras liofilización el producto deseado (174mg, rendimiento del 44 %) como mezcla de dos estereoisómeros.

[1698] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,176 (0,47), 1,192 (0,46), 1,245 (3,61), 1,261 (3,63), 1,326 (5,41), 1,342 (5,34), 2,074 (0,90), 2,518 (2,00), 2,523 (1,30), 2,832 (0,58), 2,853 (1,78), 2,871 (2,29), 2,889 (1,20), 3,374 (0,58), 3,402 (1,93), 3,412 (1,77), 3,419 (2,47), 3,427 (2,74), 3,435 (1,67), 3,442 (1,31), 3,455 (1,30), 3,464 (0,88), 3,485 (1,04), 3,493 (0,81), 3,500 (0,81), 3,522 (0,58), 3,614 (0,42), 3,643 (1,28), 3,650 (1,69), 3,669 (0,97), 3,699 (1,00), 3,725 (1,81), 3,734 (0,89), 3,748 (1,07), 3,754 (0,91), 3,768 (0,44), 3,777 (0,54), 3,783 (0,42), 3,806 (1,65), 3,813 (2,16), 3,823 (1,17), 3,836 (1,62), 3,843 (1,75), 3,850 (1,00), 3,863 (9,50), 3,890 (16,00), 3,919 (0,92), 3,948 (0,61), 4,068 (2,33), 4,626 (0,70), 4,630 (0,86), 4,643 (1,15), 4,653 (0,66), 4,658 (0,86), 6,133 (0,95), 6,143 (2,18), 6,148 (0,96), 6,151 (1,32), 6,158 (1,98), 6,167 (1,48), 6,638 (1,70), 6,643 (2,02), 6,653 (3,46), 6,678 (0,58), 6,690 (6,05), 6,699 (2,71), 6,706 (2,31), 7,122 (0,98), 7,161 (1,50), 7,264 (0,72), 7,285 (0,52), 7,294 (1,80), 7,299 (2,64), 7,307 (1,85), 7,312 (2,64), 7,440 (2,17), 7,519 (3,36), 7,631 (0,44), 7,998 (3,33), 8,011 (3,08), 8,031 (2,20), 8,044 (1,98), 8,396 (4,10), 8,411 (2,66), 11,072 (1,20), 11,085 (1,69).

[1699] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,72 min; MS (ESlpos): m/z = 499 [M+H]<+>

[1700] Ejemplo 58

[1701] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoísmero 1)

[1703]

[1705] El compuesto del título del ejemplo 57 (170 mg) se separó en estereoisómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (estereoisómero 1, 58 mg, R<t>= 16,2-18,8 min) y el estereoisómero 2 (35 mg, R<t>= 19,3-21,6 min, véase el ejemplo 60).

[1706] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1707] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SC 5µ, 250x30; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol 0,1 vol % dietilamina; gradiente: 0-15 min 20-30 % B; flujo: 40 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1708] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1709] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SC 3µ, 100x4,6; eluyente A: hexano dietilamina 0,1 vol % ; eluyente B: etanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm HPLC quiral analítica: Rt = 5,19 min.

[1711] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,157 (0,42), 1,326 (5,83), 1,342 (5,94), 2,518 (2,45), 2,523 (1,64), 2,854 (1,00), 2,872 (2,23), 2,889 (1,30), 3,159 (0,76), 3,172 (0,81), 3,403 (0,88), 3,409 (0,98), 3,420 (1,66), 3,427 (1,98), 3,435 (0,89), 3,456 (1,40), 3,469 (0,49), 3,485 (1,09), 3,493 (0,89), 3,500 (0,89), 3,522 (0,63), 3,530 (0,42), 3,699 (1,04), 3,725 (1,77), 3,748 (1,00), 3,755 (0,79), 3,777 (0,55), 3,783 (0,42), 3,806 (1,16), 3,812 (1,76), 3,824 (0,88), 3,836 (1,39), 3,843 (1,20), 3,850 (0,51), 3,890 (16,00), 3,919 (1,02), 3,948 (0,70), 4,631 (0,81), 4,646 (0,95), 4,659 (0,80), 6,143 (1,46), 6,151 (1,29), 6,159 (1,42), 6,167 (1,47), 6,679 (0,61), 6,691 (6,25), 6,699 (2,81), 6,706 (2,43), 6,727 (0,42), 7,159 (1,65), 7,298 (2,69), 7,311 (2,69), 7,518 (3,71), 7,998 (3,52), 8,010 (3,22), 8,395 (4,49), 11,084 (1,82).

[1712] Rotación Óptica:

[1714] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,72 min; MS (ESlpos): m/z = 499 [M+H]<+>

[1715] Ejemplo 59

[1716] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(1S)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoísmero 2)

[1718]

[1720] El compuesto del título del ejemplo 57 (170 mg) se separó en estereoisómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título estereoisómero 2 (35 mg, Rt = 19,3-21,6 min, véase el ejemplo 58 para el procedimiento de separación).

[1721] HPLC quiral analítica: Rt = 5,91 min.

[1723] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 0,798 (0,48), 0,815 (0,56), 0,822 (0,55), 0,905 (0,48), 1,084 (0,46), 1,137 (0,84), 1,156 (0,69), 1,233 (1,00), 1,246 (6,21), 1,261 (6,32), 2,084 (0,60), 2,332 (0,57), 2,518 (3,49), 2,522 (2,23), 2,673 (0,60), 2,833 (1,01), 2,850 (2,05), 2,867 (1,22), 3,308 (0,48), 3,373 (0,98), 3,402 (2,29), 3,412 (2,05), 3,418 (2,16), 3,427 (2,02), 3,435 (1,84), 3,442 (1,19), 3,465 (0,79), 3,607 (0,46), 3,614 (0,62), 3,643 (2,17), 3,670 (1,14), 3,726 (0,62), 3,732 (0,73), 3,738 (0,65), 3,744 (0,72), 3,751 (0,57), 3,757 (0,63), 3,762 (0,57), 3,768 (0,57), 3,805 (1,25), 3,815 (1,51), 3,821 (1,12), 3,834 (1,01), 3,844 (1,36), 3,850 (1,08), 3,863 (16,00), 3,889 (0,74), 4,625 (0,83), 4,637 (0,87), 4,641 (0,90), 4,653 (0,81), 6,133 (1,40), 6,143 (1,44), 6,147 (1,32), 6,157 (1,50), 6,639 (2,71), 6,643 (3,20), 6,653 (5,57), 6,663 (0,45), 7,120 (1,71), 7,294 (2,55), 7,307 (2,61), 7,438 (3,73), 8,031 (2,89), 8,043 (2,69), 8,411 (4,05), 11,071 (1,88).

[1724] Rotación Óptica:

[1725] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,72 min; MS (ESlpos): m/z = 499 [M+H]<+>

[1726] Ejemplo 60

[1727] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(1R)-1-(1,4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoísmero 1)

[1729]

[1731] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 57 conN-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-{[(3-{(1R)-1-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-60, 340 mg, 638 µmol) como material de partida; se prepararon 76,0 mg (pureza del 99 %, rendimiento del 24 %) del compuesto del título (estereoisómero 1, Rt = 18,7-22,0 min) tras purificación por HPLC preparativa (procedimiento 10, gradiente: 0,00-0,50 min 15 % B, 0,50-5,00 min 15-50 % B, 5,00-8,00 min 50 % B) seguido de preparación quiral. HPLC. Además, se aislaron 7 mg del estereoisómero 2 (ejemplo 61) (Rt = 16,5-17,9 min).

[1732] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1733] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SB 5µ, 250x30; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: etanol 0,1 vol % dietilamina; isocrático: 80 %A+20 %B; flujo: 60 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1734] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1735] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4,6; eluyente A: hexano dietilamina 0,1 vol % ; eluyente B: etanol; isocrático: 80 %A+20 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm HPLC quiral analítica: Rt = 6,96 min.

[1737] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,245 (5,93), 1,261 (5,97), 2,518 (0,96), 2,522 (0,61), 2,833 (0,89), 2,850 (1,81), 2,868 (1,07), 3,374 (0,88), 3,398 (1,92), 3,402 (2,05), 3,412 (1,84), 3,418 (1,88), 3,427 (1,81), 3,435 (1,62), 3,442 (1,07), 3,465 (0,71), 3,608 (0,45), 3,614 (0,62), 3,643 (2,07), 3,669 (1,04), 3,726 (0,57), 3,733 (0,70), 3,736 (0,65), 3,744 (0,69), 3,751 (0,53), 3,757 (0,58), 3,762 (0,53), 3,768 (0,55), 3,805 (1,12), 3,815 (1,32), 3,821 (0,99), 3,834 (0,89), 3,844 (1,24), 3,850 (0,97), 3,864 (16,00), 3,890 (0,81), 4,068 (0,46), 4,626 (0,76), 4,637 (0,80), 4,641 (0,83), 4,653 (0,76), 6,133 (1,41), 6,143 (1,51), 6,148 (1,26), 6,158 (1,48), 6,638 (2,78), 6,643 (3,34), 6,653 (5,70), 6,663 (0,46), 7,122 (1,57), 7,294 (2,67), 7,307 (2,70), 7,440 (3,53), 8,031 (3,75), 8,044 (3,34), 8,411 (4,42), 11,072 (1,72).

[1738] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,72 min; MS (ESlpos): m/z = 499 [M+H]<+>

[1739] Ejemplo 61

[1740] 3-(3-(cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{(1R)-1-[(1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (Estereoisómero 2)

[1741]

[1743] Para la preparación del compuesto del título como mezcla de dos diastereómeros, véase el ejemplo 60. La separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: véase el ejemplo 60) dio 7,0 mg del compuesto del título (Rt = 9,4 - 10,8 min).

[1744] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 60): R<t>= 6,10 min.

[1745] Rotación Óptica:

[1747] Ejemplo 62

[1748] 3-(3-fluoro-2-metilanilino)-2-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1750]

[1752] A una solución deN-(3-fluoro-2-metilfenil)-4-{[(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotio amida (producto intermedio 6-62, 110 mg, 220 µmol) en ácido acético (1,1 ml) se añadió peróxido de hidrógeno acuoso (45 µl, pureza del 30 %, 440 µM) y la mezcla se calentó a 80 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se apagó con solución saturada de tiosulfato sódico y el pH 7 se ajustó añadiendo solución acuosa de hidróxido sódico 4M. Tras la adición de DCM, la mezcla se agitó durante 15 min a RT. Las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM. Las capas orgánicas combinadas se secaron con papel de filtro hidrófobo y se concentraron a presión reducida. La mezcla se purificó por prep. HPLC (procedimiento 10) para dar el compuesto del título; 28 mg (pureza del 97 %, rendimiento del 26 %).

[1754] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d<6>): δ [ppm]= 1,877 (1,11), 1,904 (1,76), 1,931 (1,15), 2,007 (0,48), 2,016 (0,62), 2,036 (1,18), 2,044 (1,14), 2,064 (0,65), 2,074 (0,91), 2,188 (9,04), 2,191 (9,20), 2,204 (16,00), 2,326 (0,50), 2,518 (1,93), 2,522 (1,23), 2,647 (1,09), 2,669 (1,06), 2,673 (1,34), 2,743 (1,21), 2,770 (1,13), 2,844 (1,64), 2,861 (3,54), 2,878 (1,85), 3,410 (1,18), 3,415 (1,29), 3,426 (2,35), 3,432 (2,33), 3,443 (1,13), 3,449 (1,04), 3,642 (0,55), 3,648 (0,70), 3,670 (1,28), 3,675 (1,30), 3,698 (0,76), 3,703 (0,63), 3,935 (1,65), 3,942 (1,53), 3,951 (0,92), 3,962 (1,44), 3,967 (1,29), 4,109 (1,20), 4,126 (1,08), 4,135 (1,56), 4,151 (1,27), 4,276 (1,43), 4,285 (1,48), 4,301 (1,18), 4,310 (1,07), 6,056 (2,20), 6,076 (2,25), 6,442 (1,00), 6,464 (1,83), 6,486 (1,13), 6,735 (0,68), 6,755 (1,42), 6,772 (1,36), 6,793 (0,57), 7,188 (2,26), 7,230 (3,88), 7,242 (3,85), 7,346 (4,43), 7,979 (5,07), 7,991 (4,58), 8,368 (6,78), 11,029 (2,41).

[1755] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,46 min; MS (ESlpos): m/z = 466 [M+H]<+>

[1756] Ejemplo 63

[1757] 3-(3-fluoro-2-metilanilino)-2-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1759]

[1761] El compuesto del título del ejemplo 62 (21 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (estereoisómero 1, 7,0 mg, R<t>= 7,1-8,1 min) y el estereoisómero 2 (9,0 mg, Rt = 9,4 -10,8 min, véase el ejemplo 64).

[1762] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1763] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SB 5µ, 250x30; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 50 %A+50 %B; flujo: 60 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1764] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1765] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4.6; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 50 %A+50 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1766] HPLC quiral analítica: Rt = 2,60 min.

[1767] Rotación Óptica:

[1769] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO- d<6>): δ [ppm]= 1,232 (0,89), 1,877 (1,15), 1,904 (1,74), 1,931 (1,14), 2,008 (0,48), 2,016 (0,62), 2,036 (1,17), 2,044 (1,15), 2,064 (0,65), 2,073 (0,56), 2,188 (9,17), 2,191 (9,34), 2,204 (16,00), 2,322 (0,45), 2,327 (0,62), 2,332 (0,45), 2,518 (2,49), 2,523 (1,54), 2,646 (1,12), 2,669 (1,21), 2,673 (1,46), 2,743 (1,23), 2,770 (1,15), 2,844 (1,60), 2,861 (3,42), 2,878 (1,82), 3,410 (1,23), 3,415 (1,32), 3,426 (2,40), 3,432 (2,38), 3,444 (1,15), 3,449 (1,07), 3,641 (0,56), 3,648 (0,70), 3,670 (1,28), 3,675 (1,31), 3,698 (0,76), 3,703 (0,61), 3,935 (1,67), 3,942 (1,57), 3,951 (0,95), 3,962 (1,45), 4,109 (1,14), 4,126 (1,03), 4,135 (1,51), 4,152 (1,21), 4,276 (1,39), 4,285 (1,43), 4,301 (1,14), 4,310 (1,03), 6,056 (2,16), 6,076 (2,23), 6,442 (1,01), 6,464 (1,85), 6,486 (1,14), 6,735 (0,67), 6,755 (1,42), 6,772 (1,37), 6,793 (0,56), 7,188 (2,29), 7,230 (3,04), 7,243 (3,00), 7,345 (4,40), 7,979 (3,05), 7,991 (2,83), 8,368 (4,67), 11,030 (2,40).

[1770] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,46 min; MS (ESlpos): m/z = 466 [M+H]<+>

[1771] Ejemplo 64

[1772] 3-(3-fluoro-2-metilanilino)-2-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1773]

[1775] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 63. Separación de enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento: ver ejemplo 63) para dar 9,0 mg del compuesto del título (Rt = 9,4 - 10,8 min). HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 63): R<t>= 3,37 min.

[1776] Rotación Óptica:

[1778] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO- d<6>): δ [ppm]= 1,232 (0,99), 1,877 (1,12), 1,904 (1,80), 1,931 (1,15), 2,008 (0,49), 2,016 (0,64), 2,036 (1,17), 2,044 (1,15), 2,065 (0,66), 2,073 (0,57), 2,188 (9,36), 2,191 (9,48), 2,204 (16,00), 2,323 (0,47), 2,327 (0,62), 2,332 (0,47), 2,518 (2,39), 2,522 (1,44), 2,647 (1,15), 2,669 (1,24), 2,673 (1,48), 2,743 (1,24), 2,770 (1,16), 2,844 (1,63), 2,861 (3,47), 2,878 (1,82), 3,410 (1,27), 3,415 (1,36), 3,426 (2,43), 3,432 (2,39), 3,443 (1,17), 3,449 (1,07), 3,642 (0,56), 3,648 (0,70), 3,670 (1,30), 3,675 (1,30), 3,698 (0,75), 3,703 (0,63), 3,935 (1,71), 3,942 (1,60), 3,962 (1,47), 4,109 (1,17), 4,126 (1,03), 4,135 (1,51), 4,152 (1,22), 4,276 (1,40), 4,285 (1,45), 4,301 (1,13), 4,310 (1,03), 6,056 (2,19), 6,076 (2,26), 6,442 (1,05), 6,464 (1,87), 6,486 (1,15), 6,735 (0,70), 6,755 (1,43), 6,772 (1,38), 6,793 (0,56), 7,188 (2,30), 7,230 (3,03), 7,243 (3,07), 7,346 (4,46), 7,979 (3,01), 7,992 (2,84), 8,368 (4,73), 11,030 (2,43).

[1779] LC-MS (procedimiento 6): Rt = 0,46 min; MS (ESlpos): m/z = 466 [M+H]<+>

[1780] Ejemplo 65

[1781] 2-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1783]

[1785] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 62 con 4-{[(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-N-(2-etil-3-fluorofenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotiamida (producto intermedio 6-65, 215 mg, 429 µmol) como material de partida; se prepararon 76,0 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 36 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (condiciones básicas).

[1786] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: 1,097 (0,45), 1,206 (6,70), 1,225 (16,00), 1,244 (6,93), 2,322 (0,88), 2,327 (1,21), 2,332 (0,88), 2,518 (4,46), 2,522 (2,73), 2,664 (1,18), 2,669 (1,70), 2,673 (2,02), 2,697 (3,88), 2,715 (3,73), 2,732 (1,31), 2,847 (3,66), 2,864 (7,84), 2,881 (4,11), 3,404 (3,38), 3,415 (2,84), 3,420 (3,17), 3,432 (8,74), 3,437 (5,90), 3,449 (2,86), 3,457 (4,93), 3,506 (1,16), 3,511 (1,46), 3,533 (2,58), 3,540 (2,78), 3,562 (2,02), 3,570 (1,77), 3,711 (3,25), 3,719 (1,53), 3,726 (2,41), 3,738 (2,86), 3,749 (3,64), 3,756 (2,33), 3,777 (2,11), 3,783 (1,59), 3,804 (2,97), 3,810 (3,25), 3,833 (2,65), 3,839 (2,67), 3,887 (2,80), 3,915 (2,07), 4,005 (0,73), 4,013 (1,16), 4,021 (1,72), 4,029 (1,94), 4,036 (1,90), 4,045 (1,57), 4,054 (1,36), 4,061 (0,97), 4,106 (3,19), 4,123 (2,20), 4,132 (4,05), 4,149 (3,10), 4,246 (3,66), 4,255 (3,60), 4,272 (2,73), 4,281 (2,45), 6,084 (4,91), 6,104 (5,10), 6,433 (2,28), 6,454 (4,07), 6,476 (2,61), 6,720 (1,92), 6,741 (3,81), 6,758 (3,70), 6,778 (1,62), 7,180 (5,15), 7,199 (8,92), 7,212 (8,89), 7,427 (9,02), 7,964 (12,58), 7,976 (11,33), 8,358 (15,85), 11,012 (5,43).

[1787] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 467 [M+H]+

[1788] Ejemplo 66, ejemplo 67

[1789] 2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1790] 2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1791] Ejemplo 66

[1792] 2-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1794]

[1796] El compuesto del título del ejemplo 65 (74 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (estereoisómero 1, 30 mg, Rt = 4,5-5,3 min) y el estereoisómero 2 (31 mg, Rt = 5,3-6,2 min, véase el ejemplo 67).

[1797] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1798] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC; Columna: YMC Cellulose SB 10µ, 250x50; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: metanol; isocrático: 90 %A+10 %B; flujo: 150 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1799] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1800] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4,6; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: metanol; isocrático: 90 %A+10 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1801] HPLC quiral analítica: R<t>= 4,41 min.

[1802] Rotación Óptica:

[1804] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,097 (0,44), 1,104 (0,61), 1,206 (6,68), 1,225 (16,00), 1,243 (7,03), 2,074 (3,21), 2,322 (1,00), 2,326 (1,39), 2,332 (1,01), 2,518 (6,14), 2,522 (3,75), 2,664 (1,33), 2,669 (1,92), 2,673 (2,17), 2,696 (3,92), 2,715 (3,83), 2,732 (1,29), 2,846 (3,62), 2,864 (7,78), 2,881 (4,15), 3,404 (3,29), 3,414 (2,85), 3,420 (3,24), 3,431 (8,73), 3,437 (6,06), 3,448 (2,90), 3,457 (4,88), 3,505 (1,14), 3,511 (1,37), 3,533 (2,57), 3,540 (2,76), 3,562 (1,97), 3,570 (1,73), 3,711 (3,19), 3,719 (1,56), 3,726 (2,37), 3,738 (2,90), 3,749 (3,58), 3,755 (2,31), 3,777 (1,96), 3,783 (1,46), 3,804 (2,93), 3,810 (3,13), 3,833 (2,59), 3,839 (2,71), 3,887 (2,80), 3,914 (2,06), 4,013 (1,15), 4,020 (1,68), 4,029 (1,97), 4,036 (1,90), 4,045 (1,59), 4,053 (1,40), 4,060 (0,95), 4,106 (3,06), 4,122 (2,09), 4,132 (3,85), 4,148 (2,90), 4,245 (3,58), 4,255 (3,47), 4,271 (2,68), 4,280 (2,36), 6,083 (4,88), 6,104 (5,09), 6,433 (2,24), 6,454 (4,08), 6,476 (2,56), 6,720 (1,80), 6,741 (3,65), 6,758 (3,54), 6,778 (1,53), 7,179 (5,11), 7,199 (8,20), 7,211 (8,15), 7,426 (8,99), 7,963 (9,54), 7,976 (8,80), 8,357 (13,39), 11,012 (5,48).

[1805] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 467 [M+H]<+>

[1806] Ejemplo 67

[1807] 2-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1809]

[1811] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 65. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento ver ejemplo 66) para dar 31 mg del compuesto del título.

[1812] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 63): R<t>= 4,49 min.

[1813] Rotación óptica:[a]<D>= 22,51° /- 0,86° (c = 1,0 g/ 100 ml en cloroformo)

[1815] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,104 (0,57), 1,164 (0,90), 1,206 (6,89), 1,225 (16,00), 1,244 (7,18), 2,322 (0,60), 2,326 (0,81), 2,332 (0,59), 2,518 (3,44), 2,522 (2,12), 2,665 (0,84), 2,669 (1,32), 2,677 (1,68), 2,696 (3,95), 2,715 (3,83), 2,732 (1,33), 2,847 (3,68), 2,864 (7,81), 2,881 (4,16), 3,404 (3,21), 3,415 (2,88), 3,421 (3,23), 3,432 (8,92), 3,437 (6,02), 3,449 (2,91), 3,457 (4,87), 3,506 (1,11), 3,511 (1,37), 3,533 (2,61), 3,540 (2,72), 3,562 (2,00), 3,570 (1,74), 3,712 (3,25), 3,719 (1,51), 3,726 (2,32), 3,738 (2,93), 3,749 (3,59), 3,756 (2,31), 3,777 (1,96), 3,784 (1,44), 3,804 (2,94), 3,810 (3,18), 3,833 (2,64), 3,839 (2,70), 3,887 (2,87), 3,915 (2,12), 4,005 (0,70), 4,014 (1,17), 4,020 (1,70), 4,029 (2,01), 4,037 (1,92), 4,045 (1,57), 4,053 (1,42), 4,060 (0,95), 4,106 (3,05), 4,123 (2,12), 4,132 (3,86), 4,148 (2,88), 4,246 (3,51), 4,255 (3,49), 4,271 (2,68), 4,281 (2,35), 6,084 (4,92), 6,105 (5,14), 6,433 (2,23), 6,454 (4,07), 6,476 (2,59), 6,720 (1,81), 6,741 (3,64), 6,758 (3,58), 6,778 (1,55), 7,180 (5,16), 7,199 (7,86), 7,212 (7,80), 7,426 (9,02), 7,963 (7,86), 7,976 (7,32), 8,358 (12,12), 11,012 (5,54).

[1816] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,70 min; MS (ESlpos): m/z = 467 [M+H]+

[1817] Ejemplo 68

[1818] 2-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1819]

[1821] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 62 con 4-{[(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)metil]amino}-N-(2-etil-3-fluorofenil)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-68, 350 mg, 662 µmol) como material de partida; se prepararon 82 mg (pureza del 85 %, rendimiento del 21 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (condiciones básicas).

[1823] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,051 (1,89), 1,073 (11,18), 1,171 (0,57), 1,182 (0,76), 1,197 (3,04), 1,216 (5,73), 1,234 (3,31), 1,243 (10,52), 2,326 (0,46), 2,518 (1,69), 2,522 (1,07), 2,539 (16,00), 2,669 (0,94), 2,673 (0,76), 2,688 (1,36), 2,706 (1,38), 2,828 (1,23), 2,845 (2,62), 2,862 (1,40), 3,412 (2,22), 3,422 (1,93), 3,428 (1,91), 3,440 (2,37), 3,574 (0,81), 3,582 (0,90), 3,604 (1,34), 3,612 (1,29), 3,629 (0,40), 3,646 (2,91), 3,674 (3,37), 3,703 (0,90), 3,896 (0,52), 3,903 (0,59), 3,912 (0,74), 3,920 (0,70), 3,929 (0,49), 3,938 (0,47), 4,129 (0,89), 4,146 (0,81), 4,155 (1,16), 4,172 (1,00), 4,284 (1,20), 4,292 (1,15), 4,310 (0,88), 4,319 (0,81), 5,758 (2,21), 6,089 (1,68), 6,110 (1,75), 6,420 (0,77), 6,443 (1,38), 6,464 (0,88), 6,709 (0,64), 6,729 (1,28), 6,746 (1,24), 6,767 (0,55), 7,165 (1,72), 7,200 (2,88), 7,213 (2,92), 7,249 (0,48), 7,369 (0,47), 7,382 (0,67), 7,392 (2,91), 7,972 (3,81), 7,985 (3,48), 8,067 (0,61), 8,080 (0,54), 8,372 (5,10), 8,439 (0,78), 11,018 (1,92).

[1824] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,79 min; MS (ESlpos): m/z = 495 [M+H]+

[1825] Ejemplo 69, ejemplo 70

[1826] 2-(3-{[(2R)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1827] 2-(3-{[(2S)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1828] Ejemplo 69

[1829] 2-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1831]

[1833] El compuesto del título del ejemplo 68 (32 mg) se separó en enantiómeros mediante HPLC quiral preparativa para dar el compuesto del título (estereoisómero 1, 13 mg, Rt = 36,8-46,0 min) y el estereoisómero 2 (10 mg, Rt = 21,9-26,4 min, véase el ejemplo 70).

[1834] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1835] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC-4; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 250X20; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: 2-propanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 10 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nmProcedimiento HPLC quiral analítica:

[1836] Instrumento: Thermo Fisher UltiMate 3000; Columna: Chiralcel OD-H 5µ, 100x4,6; eluyente A: hexano 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: 2-propanol; isocrático: 70 %A+30 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm HPLC quiral analítica: Rt = 7,38 min.

[1837] Rotación óptica:[α]<D>= -24,42° /- 0,72° (c = 1,0 g/100 ml cloroformo)

[1839] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0,698 (1,11), 0,742 (0,61), 0,834 (0,47), 0,851 (0,63), 1,072 (16,00), 1,147 (1,48), 1,195 (4,00), 1,214 (8,27), 1,233 (6,80), 1,242 (15,37), 1,294 (0,70), 2,322 (0,63), 2,326 (0,85), 2,331 (0,63), 2,517 (3,89), 2,522 (2,40), 2,664 (1,17), 2,668 (1,54), 2,673 (1,19), 2,687 (1,95), 2,705 (1,86), 2,722 (0,66), 2,826 (1,78), 2,843 (3,74), 2,860 (2,02), 3,411 (3,06), 3,420 (2,79), 3,427 (2,73), 3,440 (3,33), 3,573 (0,89), 3,581 (1,05), 3,603 (1,84), 3,611 (1,82), 3,646 (3,73), 3,674 (4,44), 3,703 (1,16), 3,893 (0,70), 3,901 (0,84), 3,910 (1,06), 3,918 (0,98), 3,926 (0,71), 3,935 (0,66), 4,126 (1,20), 4,143 (1,14), 4,152 (1,62), 4,169 (1,39), 4,281 (1,52), 4,290 (1,61), 4,307 (1,22), 4,316 (1,10), 6,088 (2,37), 6,108 (2,47), 6,417 (1,08), 6,440 (1,96), 6,461 (1,24), 6,707 (0,87), 6,728 (1,74), 6,745 (1,70), 6,765 (0,75), 7,159 (2,50), 7,197 (3,08), 7,209 (3,08), 7,378 (4,32), 7,967 (2,35), 7,980 (2,25), 8,368 (3,77), 11,014 (2,75).

[1840] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,78 min; MS (ESlpos): m/z = 495 [M+H]+

[1841] Ejemplo 70

[1842] 2-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1844]

[1846] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 68. Separación de los enantiómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento ver ejemplo 69) para dar 10 mg del compuesto del título.

[1847] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 69): R<t>= 5,50 min.

[1848] Rotación óptica:[α]<D>= 33,52° /- 1,07° (c = 1,0 g/ 100ml en Cloroformo)

[1850] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 0,852 (0,50), 1,072 (16,00), 1,147 (0,81), 1,195 (3,63), 1,214 (8,06), 1,233 (5,99), 1,242 (15,29), 2,322 (0,67), 2,326 (0,93), 2,331 (0,67), 2,518 (4,20), 2,522 (2,70), 2,664 (1,19), 2,668 (1,61), 2,673 (1,22), 2,687 (1,88), 2,705 (1,81), 2,722 (0,65), 2,826 (1,76), 2,843 (3,72), 2,860 (1,98), 3,411 (2,99), 3,420 (2,72), 3,427 (2,69), 3,440 (3,28), 3,573 (0,90), 3,582 (1,04), 3,603 (1,85), 3,611 (1,82), 3,646 (3,73), 3,674 (4,50), 3,703 (1,19), 3,893 (0,69), 3,901 (0,82), 3,910 (1,04), 3,918 (0,98), 3,927 (0,70), 3,935 (0,65), 4,126 (1,23), 4,143 (1,15), 4,152 (1,63), 4,169 (1,40), 4,281 (1,53), 4,290 (1,62), 4,307 (1,24), 4,316 (1,12), 6,088 (2,36), 6,108 (2,47), 6,419 (1,10), 6,440 (1,96), 6,461 (1,24), 6,707 (0,90), 6,728 (1,77), 6,744 (1,72), 6,765 (0,75), 7,159 (2,47), 7,196 (3,38), 7,209 (3,41), 7,378 (4,36), 7,967 (2,84), 7,980 (2,69), 8,368 (4,39), 11,014 (2,71).

[1851] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,78 min; MS (ESlpos): m/z = 495 [M+H]+

[1852] Ejemplo 71

[1853] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1854]

[1856] Usando un procedimiento análogo al descrito para el ejemplo 62 con N-(3-cloro-2-metoxifenil)-4-({[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]metil}amino)-2-oxo-1,2,5,6-tetrahidropiridin-3-carbotioamida (producto intermedio 6-71, 420 mg, 769 µmol) como material de partida; se prepararon 139 mg (pureza del 95 %, rendimiento del 33 %) del compuesto del título tras purificación por HPLC preparativa (condiciones básicas).

[1858] <1>H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 1,277 (4,27), 1,293 (4,32), 1,333 (0,47), 1,350 (0,67), 1,358 (4,99), 1,374 (4,94), 1,824 (0,55), 1,851 (0,91), 1,878 (0,61), 1,893 (0,74), 1,906 (0,40), 1,920 (1,17), 1,934 (0,70), 1,947 (0,76), 1,956 (0,54), 1,965 (0,55), 1,987 (0,64), 1,995 (0,65), 2,128 (0,82), 2,159 (7,74), 2,180 (8,74), 2,322 (0,51), 2,326 (0,68), 2,332 (0,49), 2,518 (2,39), 2,522 (1,49), 2,577 (0,56), 2,606 (0,54), 2,642 (0,72), 2,665 (0,85), 2,669 (1,29), 2,673 (1,01), 2,748 (1,31), 2,775 (1,22), 2,835 (0,82), 2,852 (2,10), 2,867 (2,15), 2,882 (1,06), 3,403 (1,26), 3,414 (1,72), 3,420 (2,29), 3,437 (1,06), 3,546 (0,63), 3,551 (0,64), 3,640 (0,42), 3,663 (1,06), 3,668 (1,07), 3,680 (0,51), 3,691 (0,88), 3,696 (0,73), 3,712 (0,46), 3,717 (0,51), 3,724 (0,46), 3,729 (0,51), 3,738 (0,48), 3,743 (0,44), 3,750 (0,47), 3,754 (0,43), 3,867 (12,16), 3,891 (16,00), 3,969 (0,62), 3,993 (0,54), 4,637 (0,80), 4,650 (1,17), 4,659 (0,74), 4,665 (1,09), 4,675 (0,61), 6,146 (2,23), 6,155 (2,15), 6,162 (1,69), 6,170 (2,32), 6,642 (2,11), 6,647 (2,51), 6,657 (4,69), 6,667 (0,52), 6,672 (0,41), 6,680 (0,65), 6,692 (5,88), 6,701 (2,71), 6,709 (2,25), 7,122 (1,19), 7,160 (1,40), 7,290 (2,01), 7,300 (2,69), 7,303 (2,35), 7,313 (2,45), 7,426 (0,41), 7,435 (2,71), 7,520 (3,23), 7,989 (3,33), 8,002 (3,13), 8,019 (2,70), 8,031 (2,40), 8,402 (3,96), 8,421 (3,26), 11,070 (1,28), 11,110 (1,54).

[1859] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,54 min; MS (ESlpos): m/z = 512 [M+H]+

[1860] Ejemplo 72, ejemplo 73, ejemplo 74, ejemplo 75

[1861] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1R)-1-[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1862] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1S)-1-[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1863] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1R)-1-[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1864] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1S)-1-[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

[1865] Ejemplo 72

[1866] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 1)

[1867]

[1869] El compuesto del título del ejemplo 71 (135 mg) se separó en cuatro estereoisómeros mediante HPLC quiral preparativa. Se obtuvo el estereoisómero 1 del compuesto del título, (20 mg, R<t>= 6,8-7,6 min) además del estereoisómero 2 (27 mg, R<t>= 9,6-10,9 min., véase el ejemplo 73), el estereoisómero 3 (37 mg, véase el ejemplo 74) y el estereoisómero 4 (37 mg, véase el ejemplo 75).

[1870] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1871] Instrumento: PrepCon Labomatic HPLC 4; Columna: YMC Cellulose SB 10µ, 250x50; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 80 %A+20 %B; flujo: 140 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1872] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1873] Instrumento: Waters Alliance 2695; Columna: YMC Cellulose SB 3µ, 100x4,6; eluyente A: metil terc-butil éter 0,1 vol % dietilamina; eluyente B: acetonitrilo; isocrático: 80 %A+20 %B; flujo: 1,4 ml/min; temperatura: 25 °C; UV: 254 nm

[1874] HPLC quiral analítica: R<t>= 3,85 min.

[1875] Rotación Óptica:

[1877] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: 1,137 (0,95), 1,159 (0,63), 1,232 (0,54), 1,277 (5,83), 1,293 (5,97), 1,826 (0,63), 1,853 (1,16), 1,880 (0,71), 1,907 (0,46), 1,928 (0,77), 1,935 (0,78), 1,956 (0,45), 2,160 (9,53), 2,326 (0,58), 2,522 (2,28), 2,579 (0,94), 2,608 (0,86), 2,665 (0,41), 2,669 (0,54), 2,673 (0,40), 2,748 (0,95), 2,776 (0,90), 2,835 (1,17), 2,852 (2,46), 2,869 (1,37), 3,402 (1,17), 3,413 (1,92), 3,419 (1,92), 3,431 (0,97), 3,523 (0,52), 3,545 (0,95), 3,551 (0,92), 3,573 (0,56), 3,660 (0,71), 3,670 (0,67), 3,690 (0,73), 3,866 (16,00), 3,891 (0,61), 4,649 (0,83), 4,659 (0,85), 4,664 (0,85), 4,675 (0,80), 5,758 (1,51), 6,145 (1,46), 6,155 (1,45), 6,159 (1,36), 6,169 (1,48), 6,643 (2,83), 6,647 (3,21), 6,657 (5,61), 6,667 (0,55), 7,123 (1,81), 7,291 (2,03), 7,303 (2,10), 7,435 (3,81), 8,018 (1,65), 8,031 (1,59), 8,420 (2,63), 11,071 (2,01).

[1878] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,53 min; MS (ESlpos): m/z = 512 [M+H]<+>

[1879] Ejemplo 73

[1880] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 2)

[1881]

[1883] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 71. Separación de los estereoisómeros por HPLC quiral preparativa (procedimiento ver ejemplo 72) para dar 27 mg del compuesto del título estereoisómero 2.

[1884] HPLC quiral analítica (procedimiento: véase el ejemplo 72): R<t>= 5,24 min.

[1885] Rotación Óptica:

[1887] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: 1,137 (0,95), 1,159 (0,63), 1,232 (0,54), 1,277 (5,83), 1,293 (5,97), 1,826 (0,63), 1,853 (1,16), 1,880 (0,71), 1,907 (0,46), 1,928 (0,77), 1,935 (0,78), 1,956 (0,45), 2,160 (9,53), 2,326 (0,58), 2,522 (2,28), 2,579 (0,94), 2,608 (0,86), 2,665 (0,41), 2,669 (0,54), 2,673 (0,40), 2,748 (0,95), 2,776 (0,90), 2,835 (1,17), 2,852 (2,46), 2,869 (1,37), 3,402 (1,17), 3,413 (1,92), 3,419 (1,92), 3,431 (0,97), 3,523 (0,52), 3,545 (0,95), 3,551 (0,92), 3,573 (0,56), 3,660 (0,71), 3,670 (0,67), 3,690 (0,73), 3,866 (16,00), 3,891 (0,61), 4,649 (0,83), 4,659 (0,85), 4,664 (0,85), 4,675 (0,80), 5,758 (1,51), 6,145 (1,46), 6,155 (1,45), 6,159 (1,36), 6,169 (1,48), 6,643 (2,83), 6,647 (3,21), 6,657 (5,61), 6,667 (0,55), 7,123 (1,81), 7,291 (2,03), 7,303 (2,10), 7,435 (3,81), 8,018 (1,65), 8,031 (1,59), 8,420 (2,63), 11,071 (2,01).

[1888] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,53 min; MS (ESlpos): m/z = 512 [M+H]+

[1889] Ejemplo 74

[1890] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 3)

[1892]

[1894] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 71. Para la separación de los estereoisómeros 3 y 4 (véase el ejemplo 75) se realizó primero una HPLC quiral preparativa utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 72. Una fracción (Rt = 5,5-6,5 min.) se separó adicionalmente mediante otra HPLC quiral preparativa utilizando el siguiente procedimiento para dar 37 mg del compuesto del título estereoisómero 3.

[1895] Procedimiento HPLC quiral preparativa:

[1896] Instrumento: Sepiatec: Prep SFC100; Columna: Chiralpak IG 5µ 250x30mm; eluyente A: CO2; eluyente B: 2-propanol 0,4 vol % dietilamina; isocrático: 40 %B; flujo: 100 mL/min; temperatura: 40 °C; BPR: 150bar; UV: 254 nm

[1897] Procedimiento HPLC quiral analítica:

[1898] Instrumento: Agilent: 1260, Aurora SFC-Modul; Columna: Chiralpak IG 5µ 100x4.6mm; eluyente A: CO2; eluyente B: 2-propanol 0,4 vol % dietilamina; isocrático: 40 %B; flujo: 4 mL/min; temperatura: 37,5 °C; BPR: 100bar; UV: 254 nm

[1899] HPLC quiral analítica: R<t>= 3,98 min.

[1900] Rotación Óptica:

[1902] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: 0,697 (0,90), 1,026 (1,27), 1,042 (1,28), 1,088 (0,45), 1,137 (0,56), 1,232 (1,77), 1,293 (0,50), 1,358 (5,47), 1,374 (5,50), 1,893 (0,68), 1,920 (1,22), 1,947 (0,76), 1,959 (1,07), 1,966 (0,44), 1,987 (0,74), 1,995 (0,74), 2,016 (0,44), 2,180 (9,88), 2,327 (0,45), 2,523 (1,85), 2,643 (0,83), 2,669 (1,19), 2,749 (0,84), 2,776 (0,82), 2,847 (0,81), 2,865 (1,90), 2,882 (1,25), 3,409 (0,92), 3,419 (1,42), 3,425 (1,62), 3,439 (0,79), 3,640 (0,45), 3,663 (0,82), 3,668 (0,85), 3,691 (0,49), 3,712 (0,49), 3,718 (0,58), 3,724 (0,55), 3,730 (0,61), 3,738 (0,58), 3,744 (0,54), 3,750 (0,58), 3,755 (0,50), 3,891 (16,00), 3,970 (0,75), 3,993 (0,66), 4,638 (0,75), 4,653 (0,92), 4,666 (0,75), 6,146 (1,43), 6,154 (1,30), 6,162 (1,45), 6,170 (1,48), 6,681 (0,60), 6,693 (6,14), 6,701 (2,75), 6,709 (2,40), 6,729 (0,44), 7,162 (1,65), 7,301 (1,65), 7,313 (1,71), 7,521 (3,68), 7,990 (1,16), 8,002 (1,10), 8,403 (1,76), 11,111 (1,82).

[1903] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,53 min; MS (ESlpos): m/z = 512 [M+H]+

[1904] Ejemplo 75

[1905] 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona (estereoisómero 4)

[1907]

[1909] Para la preparación del compuesto racémico del título, véase el ejemplo 71. Para la separación de los estereoisómeros 3 (véase el ejemplo 74) y 4 (ejemplo 75) se realizó primero una HPLC quiral preparativa utilizando el procedimiento descrito en el ejemplo 72. Una fracción (Rt = 5,5-6,5 min.), se separó adicionalmente mediante otra HPLC quiral preparativa (procedimiento ver ejemplo 74) para dar 37 mg del compuesto del título estereoisómero 4.

[1910] HPLC quiral analítica: Rt = 7,23 min.

[1911] Rotación óptica:[α]D = -24,97° /- 0,50° (c = 1,0 g/ 100ml en Cloroformo)

[1912] 1H-RMN (400 MHz, DMSO-d6) delta [ppm]: 0,697 (2,05), 0,742 (1,32), 0,760 (1,30), 0,832 (0,55), 0,851 (0,74), 0,973 (0,66), 0,984 (0,67), 0,991 (0,96), 0,999 (0,64), 1,009 (0,72), 1,026 (0,75), 1,042 (0,77), 1,070 (0,82), 1,088 (1,27), 1,106 (1,27), 1,151 (4,27), 1,232 (4,01), 1,293 (1,22), 1,358 (5,91), 1,373 (6,07), 1,894 (0,71), 1,921 (1,28), 1,948 (0,80), 1,959 (1,52), 1,988 (0,82), 1,995 (0,85), 2,017 (0,51), 2,181 (10,00), 2,322 (0,74), 2,326 (0,99), 2,331 (0,74), 2,522 (4,96), 2,643 (0,98), 2,669 (1,77), 2,749 (0,99), 2,777 (0,93), 2,849 (0,99), 2,865 (2,18), 2,882 (1,43), 3,408 (1,14), 3,424 (1,91), 3,640 (0,51), 3,663 (0,93), 3,668 (0,95), 3,692 (0,56), 3,718 (0,67), 3,730 (0,69), 3,743 (0,64), 3,750 (0,64), 3,891 (16,00), 3,969 (0,87), 3,993 (0,79), 4,638 (0,82), 4,653 (1,03), 4,667 (0,80), 6,145 (1,44), 6,154 (1,38), 6,161 (1,41), 6,169 (1,51), 6,681 (0,63), 6,693 (5,87), 6,701 (2,92), 6,709 (2,49), 6,729 (0,47), 7,162 (1,85), 7,300 (1,91), 7,313 (1,96), 7,520 (3,80), 7,990 (1,46), 8,002 (1,40), 8,402 (2,29), 11,110 (1,99).

[1913] LC-MS (procedimiento 6): R<t>= 0,53 min; MS (ESlpos): m/z = 512 [M+H]+

[1914] SECCIÓN EXPERIMENTAL - ENSAYOS BIOLÓGICOS

[1915] La actividad farmacológica de los compuestos de acuerdo con la invención puede evaluarse utilizando ensayosin vitro-y/oin vivo, como sabe el experto en la técnica. Los siguientes ejemplos describen la actividad biológica de los compuestos de acuerdo con la invención.

[1916] Los compuestos ejemplo de acuerdo con la invención se probaron en ensayos biológicos seleccionados una o más veces. Cuando se analizan más de una vez, los datos se presentan como valores medios o como valores medianos, en los que

[1917] •el valor medio, también se refiere a el valor medio aritmético, representa la suma de los valores obtenidos dividida por el número de veces probadas, y

[1918] •el valor mediano representa el número medio del grupo de valores cuando se clasifican en orden ascendente o descendente. Si el número de valores del conjunto de datos es impar, la mediana es el valor medio. Si el número de valores del conjunto de datos es par, la mediana es la media aritmética de los dos valores medios.

[1919] Los ejemplos se sintetizaron una o más veces. Cuando se sintetizan más de una vez, los datos de los ensayos biológicos representan valores medios o valores medianos calculados utilizando conjuntos de datos obtenidos de las pruebas de uno o más lotes sintéticos.

[1920] La actividadin vitrode los compuestos de la presente invención puede demostrarse en los siguientes ensayos:

[1921] Expresión y purificación de las proteínas EGFR utilizadas en los ensayos bioquímicos de quinasaLas diferentes proteínas EGFR utilizadas en los ensayos bioquímicos de inhibición de la actividad quinasa se generaron internamente mediante expresión en células de insecto utilizando el sistema Baculo Virus y posterior purificación como se describe en los párrafos siguientes.

[1922] Construcciones de expresión:

[1923] Los cADNs que codifican las distintas secuencias proteicas de EGFR humana (P00533) se optimizaron para su expresión en células eucariotas y fueron sintetizadas mediante la tecnología GeneArt de Life Technologies. Estas secuencias de ADN codificaban la siguiente secuencia:

[1924] Construcción EGFR #1 aminoácido R669 a A1210

[1925] Construcción EGFR #2 aminoácido R669 a A1210 y la inserción de la secuencia de aminoácidos ASV entre V769 y D770

[1926] Construcción EGFR #3 aminoácido R669 a A1210 y la inserción de la secuencia de aminoácidos SVD entre D770 y N771

[1927] Además, todas las construcciones EGFR #1 a #3 codificaban: en el término N un sitio de corte de la proteasa TEV (Tobacco etch virus) (DYDIPTTENLYFQG), en el término C dos codones de parada y además secuencias 5' y 3' att-ADN para Gateway Cloning.

[1928] Cada una de las cuatro construcciones EFGR se subclonó utilizando la tecnología Gateway en el vector de destino pD-Ins1. El vector pD-Ins1 es un vector de transferencia de baculovirus (en base a el vector pVL1393, Pharmingen) que proporciona una fusión N-terminal de una etiqueta GST a la construcción genética integrada. Los vectores de transferencia respectivos se denominaron pD-Ins1_ EGFR #1, pD-Ins1_ EGFR #2, pD-Ins1_ EGFR #3.

[1929] Secuencias de aminoácidos del EGFR:

[1930] GST-EGFR nº 1 (tipo salvaje)

[1931]

[1932] GST-EGFR nº 3 (SVD entre D770 y N771)

[1933]

[1935] Generación de Baculovirus recombinantes:

[1936] En enfoques independientes, cada uno de los tres vectores de transferencia se co-transfectó en células Sf9 con ADN de Baculovirus (Flashbac Gold DNA, Oxford Expression Technologies) utilizando Fugene HD (Roche). Transcurridos 5 días, el sobrenadante de las células transfectadas que contenían el baculovirus recombinante que codificaba las distintas proteínas EGFR se utilizó para seguir infectando células Sf9 con el fin de amplificar el virus y controlar el título del virus utilizando qPCR.

[1937] Expresión de EGFR en células Sf9 utilizando biorreactor:

[1938] Las células Sf9 cultivadas (medio Insect-xpress, Lonza, 27 °C) en un biorreactor Wave con una bolsa de cultivo desechable se infectaron a una densidad celular de 106 células/ml con una de las cepas de baculovirus recombinante a una multiplicidad de infección de 1 y se incubaron durante 48 horas. A continuación, se recogieron las células mediante centrifugación y se congeló el sedimento celular a -80 °C.

[1939] Purificación de las proteínas de fusión GST-EGFR:

[1940] La purificación de las proteínas de fusión GST-EGFR se realizó mediante cromatografía de afinidad utilizando la matriz Glutathion Sepharose 4B (GE Healthcare Life Sciences).

[1941] Las células granuladas (procedentes de 4 l de cultivo celular) se resuspendieron en tampón de lisis (50 mM HEPES pH 7,4, 150 mM NaCl, 5 % de glicerol, 1 mM MgCl2, 1 mM MnCl2, 0,5 mM Na3VO4) y se lisaron mediante un ciclo de congelación-descongelación seguido de una incubación en hielo durante 60 min. El sobrenadante se centrifugó a 4000 x g durante 30 min. a 4 °C. A continuación, el sobrenadante se incubó con la matriz de glutatión sefarosa 4B (en un frasco de vidrio girando durante 16 h, a 4 °C) para la unión de la proteína de fusión GST EGFR, se enjuagó con tampón de lavado y, por último, la proteína unida se eluyó utilizando tampón de elusión (tampón de lisis más 25 mM de glutatión) y se congeló con nitrógeno líquido.

[1942] Ensayo de quinasa WT-EGFR

[1943] La actividad inhibitoria de los compuestos de la presente invención contra el Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) de tipo salvaje se cuantificó empleando el ensayo EGFR en base a TR-FRET como se describe en los párrafos siguientes.

[1944] Se utilizó como quinasa la proteína de fusión recombinante de glutatión-S-transferasa (GST) N-terminal y un fragmento de EGFR humano (aminoácidos R669 a A1210), expresada en células de insecto Sf9 y purificada mediante cromatografía de afinidad utilizando glutatión sefarosa como se ha descrito anteriormente. Como sustrato para la reacción de quinasa se utilizó el péptido biotinilado biotin-Ahx-AEEEEYFELVAKKK (término C en forma de amida), que puede adquirirse, por ejemplo, en la empresa Biosynthan GmbH (Berlín-Buch, Alemania).

[1945] Para el ensayo, se pipetearon 50 nl de una solución 100 veces concentrada del compuesto de ensayo en DMSO en una placa negra de microtitulación de bajo volumen de 384 pocillos o en una placa negra de microtitulación de 1536 pocillos (ambas de Greiner Bio-One, Frickenhausen, Alemania), 2 µl de una solución de EGFR en tampón acuoso de ensayo [50 mM Hepes pH 7,0, 10 mM MgCl2, 1mM ditiotreitol, 0,5 mM EGTA, 0,3 mM ortovanadato sódico activado, 0,005 % (p/v) albúmina de suero bovino, 0,005 % (v/v) Tween-20] y se incubó la mezcla durante 15 min a 22 °C para permitir la unión previa de los compuestos de ensayo a la enzima antes del inicio de la reacción de quinasa. A continuación, se inició la reacción de quinasa se mediante la adición de 3 µl de una solución de trifosfato de adenosina (ATP, 3,33 mM => la concentración final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 2 mM) y sustrato (1,67 µM => la concentración final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 1 µM) en tampón de ensayo, y la mezcla resultante se incubó durante un tiempo de reacción de 30 minutos a 22 °C. La concentración de EGFR se ajustó según la actividad del lote de enzima y se eligió de forma adecuada para mantener el ensayo dentro del intervalo lineal, una concentración típica es de 7.6 pg/µl. La reacción se detuvo mediante la adición de 3 µl de una solución de reactivos de detección HTRF (83,3 nM de estreptavidina-XL665 [Cisbio Bioassays, Codolet, Francia] y 1,67 nM PT66-Tb-Cryptate, un anticuerpo antifosfotirosina marcado con criptato de terbio de Cisbio Bioassays [en lugar del criptato PT66 Tb también puede utilizarse PT66 Eu Chelate de Perkin Elmer]) en una solución acuosa de EDTA (133,3 mM de EDTA, 0,2 % (p/v) de seroalbúmina bovina en 50 mM de HEPES pH 7,5).

[1947] La mezcla resultante se incubó 1 h a 22 °C para permitir la unión del péptido fosforilado biotinilado a la estreptavidina-XL665 y al PT66-Tb-Criptato. Posteriormente se evaluó la cantidad de sustrato fosforilado midiendo la transferencia de energía de resonancia del PT66-Tb-Criptato a la estreptavidina-XL665. Por lo tanto, las emisiones de fluorescencia a 620 nm y 665 nm tras excitación a 337 nm se midieron en un lector HTRF, por ejemplo, un Pherastar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Alemania) o un Viewlux (Perkin-Elmer). La relación entre las emisiones a 665 nm y a 622 nm se tomó como medida de la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reacción enzimática sin inhibidor = 0 % de inhibición, todos los demás componentes del ensayo pero sin enzima = 100 % de inhibición). Por lo general, los compuestos de ensayo se ensayaron en la misma microplaca en 11 concentraciones diferentes en el intervalo de 20 µM a 0,07 nM (20 µM, 5,7 µM, 1,6 µM, 0,47 µM, 0,13 µM, 38 nM, 11 nM, 3,1 nM, 0,9 nM, 0,25 nM y 0,07 nM, las series de dilución preparadas por separado antes del ensayo a nivel de las soluciones 100 veces concentradas en DMSO mediante diluciones seriadas, las concentraciones exactas pueden variar en función de los pipeteadores utilizados) en valores duplicados para cada concentración y los valores de IC<50>se calcularon utilizando el software Genedata Screener™<.>

[1949] Ensayo de quinasa exón20-mutant-EGFR(D770_N771insSVD)

[1951] La actividad inhibitoria de los compuestos de la presente invención contra un Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) con una inserción de la secuencia de aminoácidos SVD entre D770 y N771 se cuantificó empleando el ensayo de actividad quinasa basado en TR-FRET como se describe en los párrafos siguientes.

[1952] Se utilizó como quinasa una proteína de fusión recombinante de glutatión-S-transferasa (GST) N-terminal y un fragmento de variante de EGFR humano (aminoácidos R669 a A1210 con inserción de la secuencia de aminoácidos SVD entre D770 y N771("EGFR ins SVD"),expresada en células de insecto Sf9 y purificada mediante cromatografía de afinidad utilizando glutatión sefarosa como se ha descrito anteriormente. Como sustrato para la reacción de quinasa se utilizó el péptido biotinilado biotin-Ahx-AEEEEYFELVAKKK (término C en forma de amida) que puede adquirirse, por ejemplo, en la empresa Biosynthan GmbH (Berlín-Buch, Alemania).

[1954] Para el ensayo, se pipetearon 50 nl de una solución 100 veces concentrada del compuesto de ensayo en DMSO en una placa negra de microtitulación de bajo volumen de 384 pocillos o en una placa negra de microtitulación de 1536 pocillos (ambas de Greiner Bio-One, Frickenhausen, Alemania), 2 µl de una solución de EGFR en tampón acuoso de ensayo [50 mM Hepes pH 7,0, 10 mM MgCl2, 1 mM ditiotreitol, 0,5 mM EGTA, 0,3 mM ortovanadato sódico activado, 0,005 % (p/v) albúmina de suero bovino, 0,005 % (v/v) Tween-20] y se incubó la mezcla durante 15 min a 22 °C para permitir la unión previa de los compuestos de ensayo a la enzima antes del inicio de la reacción quinasa. A continuación, se inició la reacción de quinasa se mediante la adición de 3 µl de una solución de trifosfato de adenosina (ATP, 3,33 mM => la concentración final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 2 mM) y sustrato (1,67 µM => la concentración final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 1 µM) en tampón de ensayo, y la mezcla resultante se incubó durante un tiempo de reacción de 30 minutos a 22 °C. La concentración de EGFR se ajustó según la actividad del lote de enzima y se eligió de forma adecuada para mantener el ensayo dentro del intervalo lineal, una concentración típica es de 15 pg/µl. La reacción se detuvo mediante la adición de 3 µl de una solución de reactivos de detección de HTRF (83,3 nM de estreptavidina-XL665 [Cisbio Bioassays, Codolet, Francia] y 1,67 nM PT66-Tb-Cryptate, un anticuerpo antifosfotirosina marcado con criptato de terbio de Cisbio Bioassays [en lugar del criptato PT66 Tb también puede utilizarse PT66 Eu Chelate de Perkin Elmer]) en una solución acuosa de EDTA (133,3 mM de EDTA, 0,2 % (p/v) de seroalbúmina bovina en 50 mM de HEPES pH 7,5).

[1956] La mezcla resultante se incubó 1 h a 22 °C para permitir la unión del péptido fosforilado biotinilado a la estreptavidina-XL665 y al PT66-Tb-Criptato. Posteriormente se evaluó la cantidad de sustrato fosforilado midiendo la transferencia de energía de resonancia del PT66-Tb-Criptato a la estreptavidina-XL665. Por lo tanto, las emisiones de fluorescencia a 620 nm y 665 nm tras excitación a 337 nm se midieron en un lector HTRF,por ejemplo,un Pherastar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Alemania) o un Viewlux (Perkin-Elmer). La relación entre las emisiones a 665 nm y a 622 nm se tomó como medida de la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reacción enzimática sin inhibidor = 0 % de inhibición, todos los demás componentes del ensayo pero sin enzima = 100 % de inhibición). Por lo general, los compuestos de ensayo se ensayaron en la misma microplaca en 11 concentraciones diferentes en el intervalo de 20 µM a 0,07 nM (20 µM, 5,7 µM, 1,6 µM, 0,47 µM, 0,13 µM, 38 nM, 11 nM, 3,1 nM, 0,9 nM, 0,25 nM y 0,07 nM), las series de dilución preparadas por separado antes del ensayo a nivel de las soluciones 100 veces concentradas en DMSO mediante diluciones seriadas, las concentraciones exactas pueden variar en función de los pipeteadores utilizados) en valores duplicados para cada concentración y los valores de IC<50>se calcularon utilizando el software Genedata Screener™<.>

[1957] Ensayo de quinasa exón20-mutant-EGFR(V769_D770insASV)

[1958] La actividad inhibitoria de los compuestos de la presente invención contra un Receptor del Factor de Crecimiento Epidérmico (EGFR) con una inserción de la secuencia de aminoácidos ASV entre V769 y D770 se cuantificó empleando el ensayo de actividad quinasa basado en TR-FRET como se describe en los párrafos siguientes. Se utilizó como quinasa una proteína de fusión recombinante de glutatión-S-transferasa (GST) término N y un fragmento de variante de EGFR humano (aminoácidos R669 a A1210 con inserción de la secuencia de aminoácidos ASV entre V769 y D770;("EGFR ins ASV"),expresada en células de insecto Sf9 y purificada mediante cromatografía de afinidad utilizando glutatión sefarosa como se ha descrito anteriormente. Como sustrato para la reacción de quinasa se utilizó el péptido biotinilado biotin-Ahx-AEEEEYFELVAKKK (término C en forma de amida) que puede adquirirse, por ejemplo, en la empresa Biosynthan GmbH (Berlín-Buch, Alemania).

[1959] Para el ensayo, se pipetearon 50 nl de una solución 100 veces concentrada del compuesto de ensayo en DMSO en una placa negra de microtitulación de bajo volumen de 384 pocillos o en una placa negra de microtitulación de 1536 pocillos (ambas Greiner Bio-One, Frickenhausen, Alemania), 2 µl de una solución de EGFR en tampón acuoso de ensayo [50 mM Hepes pH 7,0, 10 mM MgCl2, 1mM ditiotreitol, 0,5 mM EGTA, 0,3 mM ortovanadato sódico activado, 0,005 % (p/v) albúmina de suero bovino, 0,005% (v/v) Tween-20] y se incubó la mezcla durante 15 min a 22 °C para permitir la unión previa de los compuestos de ensayo a la enzima antes del inicio de la reacción de quinasa. A continuación, se inició la reacción de quinasa se mediante la adición de 3 µl de una solución de trifosfato de adenosina (ATP, 3,33 mM => la concentración final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 2 mM) y sustrato (1,67 µM => la concentración final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 1 µM) en tampón de ensayo, y la mezcla resultante se incubó durante un tiempo de reacción de 30 minutos a 22 °C. La concentración de EGFR se ajustó según la actividad del lote de enzima y se eligió de forma adecuada para mantener el ensayo dentro del intervalo lineal, una concentración típica es de 2,5 pg/µl. La reacción se detuvo mediante la adición de 3 µl de una solución de reactivos de detección HTRF (83,3 nM de estreptavidina-XL665 [Cisbio Bioassays, Codolet, Francia] y 1,67 nM PT66-Tb-Cryptate, un anticuerpo antifosfotirosina marcado con criptato de terbio de Cisbio Bioassays [en lugar del criptato PT66 Tb también puede utilizarse PT66 Eu Chelate de Perkin Elmer]) en una solución acuosa de EDTA (133,3 mM de EDTA, 0,2 % (p/v) de seroalbúmina bovina en 50 mM de HEPES pH 7,5).

[1960] La mezcla resultante se incubó 1 h a 22 °C para permitir la unión del péptido fosforilado biotinilado a la estreptavidina-XL665 y al PT66-Tb-Criptato. Posteriormente se evaluó la cantidad de sustrato fosforilado midiendo la transferencia de energía de resonancia del PT66-Tb-Criptato a la estreptavidina-XL665. Por lo tanto, las emisiones de fluorescencia a 620 nm y 665 nm tras excitación a 337 nm se midieron en un lector HTRF, por ejemplo, un Pherastar (BMG Labtechnologies, Offenburg, Alemania) o un Viewlux (Perkin-Elmer). La relación entre las emisiones a 665 nm y a 622 nm se tomó como medida de la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reacción enzimática sin inhibidor = 0 % de inhibición, todos los demás componentes del ensayo pero sin enzima = 100 % de inhibición). Por lo general, los compuestos de ensayo se ensayaron en la misma microplaca en 11 concentraciones diferentes en el intervalo de 20 µM a 0,07 nM (20 µM, 5,7 µM, 1,6 µM, 0,47 µM, 0,13 µM, 38 nM, 11 nM, 3,1 nM, 0,9 nM, 0,25 nM y 0,07 nM, las series de dilución preparadas por separado antes del ensayo a nivel de las soluciones 100 veces concentradas en DMSO mediante diluciones seriadas, las concentraciones exactas pueden variar en función de los pipeteadores utilizados) en valores duplicados para cada concentración y los valores de IC<50>se calcularon utilizando el software Genedata Screener<™>. La Tabla 2 muestra los resultados de la inhibición en el ensayo bioquímico del EGFR mutante.

[1961] Tabla 2:

[1963]

[1964]

[1965]

[1966]

[1969] Ensayo de Bub1 quinasa de alto ATP

[1971] La actividad inhibidora de Bub1 de los compuestos de la presente invención a una concentración elevada de ATP se cuantificó empleando el ensayo de quinasa de ATP elevado TR-FRET de Bub1 como se describe en los párrafos siguientes.

[1973] Se utilizó como enzima el dominio catalítico recombinante marcado N-terminalmente con His<6>de Bub1 humana (aminoácidos 704-1085), expresado en células de insecto (Hi5) y purificado mediante cromatografía de afinidad Ni-NTA y posterior cromatografía de exclusión por tamaño. Como sustrato para la reacción de quinasa se utilizó el péptido biotinilado biotina-Ahx-VLLPKKSFAEPG - SEC ID 5 (término C en forma amida) que puede adquirirse, por ejemplo, de la empresa Biosyntan (Berlín, Alemania).

[1975] Para el ensayo, se pipetearon 50 nl de una solución 100 veces concentrada del compuesto de ensayo en DMSO en una placa negra de microtitulación de bajo volumen de 384 pocillos o en una placa negra de microtitulación de 1536 pocillos (ambas Greiner Bio-One, Frickenhausen, Alemania), 3 µl de una solución de adenosín-trifosfato (ATP, 3,33 mM => la conc. final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 2 mM) y sustrato (1,67 µM => la conc. final en el volumen de ensayo de 5 µl es de 1 µM) en tampón de ensayo acuoso [50 mM Tris/HCl pH 7,5, 10 mM cloruro magnésico (MgCl<2>), 200 mM cloruro de potasio (KCI), 1,0 mM ditiotreitol (DTT), 0.1 mM de ortovanadato sódico, 1 % (v/v) de glicerol, 0,01 % (p/v) de albúmina de suero bovino (BSA), 0,005 % (v/v) de Trition X-100 (Sigma), 1xmezcla completa de inhibidores de la proteasa sin EDTA(Roche)]. A continuación se inició la reacción de quinasa añadiendo 2 µl de una solución de Bub1 en tampón de ensayo y la mezcla resultante se incubó durante un tiempo de reacción de 60 min a 22 °C. La concentración de Bub1 se ajustó en función de la actividad del lote de enzimas y se eligió la adecuada para que el ensayo estuviera dentro del intervalo lineal; una concentración típica es de unos 200 ng/ml. La reacción se detuvo añadiendo 3 µl de una solución de reactivos de detección TR-FRET (0,167 µM de estreptavidina-XL665 [Cisbio Bioassays, Codolet, Francia] y 1,67 nM de anticuerpo antifosfo-serina [Merck Millipore, cat. # 35-002] y 0,67 nM de anticuerpo IgG anti-ratón marcado LANCE EU-W1024 [Perkin-Elmer, producto no. AD0077, como alternativa se puede utilizar un anticuerpo IgG anti-ratón marcado con criptato de terbio de Cisbio Bioassays]) en una solución acuosa EDTA (83,3 mM EDTA, 0,2 % (p/v) albúmina de suero bovino en 100 mM HEPES pH 7,5).

[1977] La mezcla resultante se incubó 1 h a 22 °C para permitir la formación del complejo entre el péptido biotinilado fosforilado y los reactivos de detección. Posteriormente, la cantidad de sustrato fosforilado se evaluó midiendo la transferencia de energía de resonancia del euquelato a la estreptavidina-XL. Por lo tanto, las emisiones de fluorescencia a 620 nm y 665 nm tras excitación a 350 nm se midieron en un lector TR-FRET, por ejemplo un Pherastar o Pherastar FS (ambos de BMG Labtechnologies, Offenburg, Alemania) o un Viewlux (Perkin-Elmer). La relación entre las emisiones a 665 nm y a 622 nm se tomó como medida de la cantidad de sustrato fosforilado. Los datos se normalizaron (reacción enzimática sin inhibidor = 0 % de inhibición, todos los demás componentes del ensayo pero sin enzima = 100 % de inhibición). Por lo general, los compuestos de ensayo se ensayaron en la misma microplaca en 11 concentraciones diferentes en el intervalo de 20 µM a 0,07 nM (20 µM, 5,7 µM, 1,6 µM, 0,47 µM, 0,13 µM, 38 nM, 11 nM, 3,1 nM, 0,9 nM, 0,25 nM y 0,07 nM, las series de dilución preparadas por separado antes del ensayo a nivel de las soluciones 100 veces concentradas en DMSO mediante diluciones seriadas, las concentraciones exactas pueden variar en función de los pipeteadores utilizados) en valores duplicados para cada concentración y los valores de IC<50>se calcularon un ajuste de 4 parámetros. La Tabla 3 muestra los resultados de la inhibición en el ensayo de quinasa de alto ATP de Bub1.

[1978] Tabla 3:

[1979]

[1980]

[1983] Los compuestos de la presente invención pueden mostrar propiedades ventajosas adicionales, tales como una inhibición más potente del EGFR mutante con inserciones de exón20 que la inhibición del EGFR de tipo silvestre, lo que puede ser útil para reducir la toxicidad potencial derivada de una inhibición excesiva del EGFR de tipo silvestre.

[1985] Descripción de datos celulares (WT, insSVD)

[1986] Se transfectaron células 293T de ATCC con constructos de expresión pBABEpuro para WT EGFR o EGFR-insSVD y el vector de empaquetamiento pCL-Eco utilizando el reactivo de transfección Fugene-6 de Promega. Las placas se incubaron a 37 °C durante 48 h. Los retrovirus se recogieron filtrando el sobrenadante de los medios a través de un filtro de 0,45 µm.

[1987] Las células Ba/F3 compradas a DSMZ se cultivaron en RPMI 10% FBS 10 ng/ml IL-3 y se infectaron con sobrenadante retroviral filtrado a una dilución 1:2. Se añadió polibreno a una concentración de 8 µg/ml, se centrifugaron las placas durante 90 min y se incubaron durante toda la noche a 37°C. Se añadieron 2 µg/ml de puromicina a las células infectadas 24 h después de la infección y las células se cultivaron continuamente en presencia de puromicina y 10 ng/ml de IL-3. A continuación se generaron líneas celulares Ba/F3 con expresión estable: Ba/F3-EGFR-WT, Ba/F3-EGFR-insSVD, (Ba/F3- vector-control).

[1988] Para los ensayos de supervivencia celular, las células Ba/F3 se cultivaron a una densidad de 1-2 millones de células por ml, se centrifugaron y resuspendieron en medio sin IL-3, y se repusieron a una concentración de 200.000-500.000 células por ml. Las células que expresaban de forma ectópica WT EGFR o EGFR-insSVD se colocaron en placas con 10 ng/ml de EGF de grado de cultivo Millipore. Las células que expresaban ectópicamente el vector vacío pBABEpuro se sembraron con 10 ng/ml de IL-3.

[1989] 2 días después, las células se sembraron en 50 µl en una placa de 384 pocillos a una concentración de 4000 células por pocillo para las células ensayadas en ausencia de IL-3 y de 2000 células por pocillo para las células ensayadas en presencia de IL-3. Se añadieron 100 nl de compuesto a cada pocillo utilizando una cabeza de alfiler de 100 nl, y las placas se incubaron a 37 °C durante 48 h.

[1990] La viabilidad celular se midió añadiendo 20 µl de reactivo de viabilidad celular luminiscente Cell Titer-Glo diluido 1:3 en PBS. Las placas se sellaron con Perkin Elmer Top-Seal, se invirtieron varias veces para mezclar y se centrifugaron inmediatamente a 1000 rpm durante 2 min. Las placas se incubaron en condiciones de poca luz durante 8-10 minutos y se midió la luminiscencia. Los valores de IC<50>para los ejemplos se muestran en la Tabla 4.

[1991] Tabla 4:

[1993]

[1994]

[1995]

[1997] En contraste con los compuestos reivindicados de la presente invención, los compuestos reivindicados en el estado de la técnica más cercano WO 2016/120196 no muestran las propiedades combinadas ventajosas descritas anteriormente. Esto puede verse en la Tabla 5.

[1998] Tabla 5:

[2000]

[2002] Descripción de datos celulares (células Ba/F3 que sobreexpresan EGFR mutante diferente de insSVD)Se transfectaron células 293T de ATCC con constructos de expresión pBABEpuro para EGFR mutante (V769_D770insASV, D770_N771insNPG, N771_P772insH, H773_V774insNPH, E746_A750del, L858R, D770_N771insSVD C797S, E746_A750del C797S, L858R C797S, L861Q) o ERBB2 mutante (A775_G776insYVMA) y el vector de empaquetamiento pCL-Eco utilizando el reactivo de transfección Fugene-6 de Promega. Las placas se incubaron a 37 °C durante 48 h. Los retrovirus se recogieron filtrando el sobrenadante de los medios a través de un filtro de 0,45 µm.

[2003] Las células Ba/F3 compradas a DSMZ se cultivaron en RPMI 10% FBS 10 ng/ml IL-3 y se infectaron con sobrenadante retroviral filtrado a una dilución 1:2. Se añadió polibreno a una concentración de 8 µg/ml, se centrifugaron las placas durante 90 min y se incubaron durante toda la noche a 37°C. Se añadieron 2 µg/ml de puromicina a las células infectadas 24 h después de la infección y las células se cultivaron continuamente en presencia de puromicina y 10 ng/ml de IL-3. A continuación se generaron líneas celulares Ba/F3 con expresión estable: Ba/F3-EGFR-V769_D770insASV, Ba/F3-EGFR-D770_N771insNPG, Ba/F3-EGFR-N771_P772insH, Ba/F3-EGFR-H773_V774insNPH, Ba/F3-EGFR-E746_A750del, Ba/F3-EGFR-L858R, Ba/F3-EGFR-D770_N771insSVD C797S, Ba/F3-EGFR-E746_A750del C797S, Ba/F3-EGFR-L858R C797S, Ba/F3-EGFR L861Q y Ba/F3-ERBB2-A775_G776insYVMA (Ba/F3-vector-control).

[2004] Para los ensayos de supervivencia celular, las células Ba/F3 se cultivaron a una densidad de 1-2 millones de células por ml, se centrifugaron y resuspendieron en medio sin IL-3, y se repusieron a una concentración de 200.000-500.000 células por ml. Las células que expresaban ectópicamente WT EGFR se cultivaron con 10 ng/ml de EGF de grado de cultivo Millipore y las células Ba/F3 que contenían EGFR mutante o ERBB2 mutante se cultivaron sin EGF. Las células que expresaban ectópicamente el vector vacío pBABEpuro se sembraron con 10 ng/ml de IL-3.

[2005] 2 días después, las células se sembraron en 50 µl en una placa de 384 pocillos a una concentración de 4000 células por pocillo para las células ensayadas en ausencia de IL-3 y de 2000 células por pocillo para las células ensayadas en presencia de IL-3. Se añadieron 100 nl de compuesto a cada pocillo utilizando una cabeza de alfiler de 100 nl, y las placas se incubaron a 37 °C durante 48 h.

[2006] La viabilidad celular se midió añadiendo 20 µl de reactivo de viabilidad celular luminiscente Cell Titer-Glo diluido 1:3 en PBS. Las placas se sellaron con Perkin Elmer Top-Seal, se invirtieron varias veces para mezclar y se centrifugaron inmediatamente a 1000 rpm durante 2 min. Las placas se incubaron en condiciones de poca luz durante 8-10 minutos y se midió la luminiscencia. Los valores de IC<50>para los ejemplos se muestran en las Tablas 6, 7, 8 y 9.

[2007] Descripción de datos celulares (células PC9, EGFRex19del)

[2008] Las células PC9 se adquirieron a ATCC. Se sembraron 400 células PC9 por pocillo en medio de crecimiento (DMEM, 10 % FCS) en una placa de 384 pocillos (CORNING #3571). Placa de referencia de siembra para la determinación del tiempo cero el mismo día. Todas las placas se incubaron durante la noche a 37 °C. Transcurridas 24 horas, se añadió el compuesto de ensayo en dilución de 7 pasos utilizando la impresora HP Compound y se incubó a 37 °C durante 72 horas. Transcurridos 3 días, se añadieron 30 µl/pocillo de solución CTG (solución Promega Cell Titer Glo; catálogo #G755B y #G756B) a cada pocillo, se incubaron durante 30 minutos y se leyó la placa en PheraStar. La proliferación se calcula restando los valores de luminiscencia del día cero de los valores del día 4 y comparándolos con los pocillos no tratados.

[2009] Los valores de IC<50>se determinaron utilizando el ajuste de cuatro parámetros. Los valores de IC<50>para los ejemplos se muestran en la Tabla 9.

[2010] Descripción de datos celulares (células HCC-827, EGFRex19del)

[2011] Las células HCC-827 se adquirieron a ATCC. Se sembraron 400 células HCC-829 por pocillo en medio de crecimiento (RPMI1640, 10 % FCS) en una placa de 384 pocillos (CORNING #3571). Placa de referencia de siembra para la determinación del tiempo cero el mismo día. Todas las placas se incubaron durante la noche a 37 °C. Transcurridas 24 horas, se añadió el compuesto de ensayo en dilución de 7 pasos utilizando la impresora HP Compound y se incubó a 37 °C durante 72 horas. Transcurridos 3 días, se añadieron 30 µl/pocillo de solución CTG (solución Promega Cell Titer Glo; catálogo #G755B y #G756B) a cada pocillo, se incubaron durante 30 minutos y se leyó la placa en PheraStar. La proliferación se calcula restando los valores de luminiscencia del día cero de los valores del día 4 y comparándolos con los pocillos no tratados.

[2012] Los valores de IC<50>se determinaron utilizando el ajuste de cuatro parámetros. Los valores de IC<50>para los ejemplos se muestran en la Tabla 9.

[2013] Tabla 6: (mutaciones de inserción del exón 20 del EGFR)

[2015]

[2016]

[2018] Tabla 7: (mutaciones activadoras clásicas y raras del EGFR)

[2020]

[2022] Tabla 8: (espacio de resistencia adquirido)

[2024]

[2026] Tabla 9: (mutantes ERBB2, PC9, HCC-827)

[2028]

[2029]

[2031] Referencias:

[2032] Arcila et al., 2012: Arcila et al., Clin Cancer Res.2012 Sep 15;18(18):4910-8.

[2033] Chenet al.,2016: Chen et al., Onco Targets Ther.2016 Jul 8;9:4181-6

[2034] Chiu y otros, 2015 : Chiu et al., J Thorac Oncol.2015;10: 793-799

[2035] Doebele y otros, 2018 : Doebele et al.. Poster 338, presented at the 54th Annual Meeting of the American Society of Clinical Oncology, June 1-5, 2018, Chicago, Illinois

[2036] Floc'h et al., 2018 : Floc'h et al., Mol Cancer Ther.2018 Mayo 17(5) : 885-896

[2037] Hasako y otros, 2018: Hasako et al., Mol Cancer Ther.2018 Aug ;17(8):1648-1658

[2038] Jang y otros, 2018: Jang et al., Angew Chem Int Ed Engl.2018 Sep 3; 57(36): 11629-11633

[2039] Moket al.,2009 : Mok et al., N Engl J Med.2009 Sep 3;361(10):947-57

[2040] Moket al.,2017: Mok et al., N Engl J Med.2017 Feb 16;376(7):629-640

[2041] Oxnardet al.,2013: Oxnard et al., J Thorac Oncol.2013 Feb; 8(2): 179-184

[2042] Oxnardet al.,2018: Oxnard et al., JAMA Oncol.2018;4(11):1527-1534

[2043] Paezet al.,2004 : Paez et al., Science.2004 Jun 4;304(5676):1497-500

[2044] Paoet al.,2005: Pao et al., PLoS Med.2005 Mar;2(3):e73

[2045] Paoet al.,2010: Pao y Chmielecki, Nat Rev Cancer.2010 Nov;10(11):760-74

[2046] Ramalingam et al.,2018a: Ramalingam et al., J Clin Oncol.2018 Mar 20;36(9):841-849.

[2047] Ramalingam et al., 2018b: Ramalingam et al., ESMO 2018; Annals Oncol.2018 Oct : 29 (Suppl 8) Robichaux y otros, 2018 : Robichaux et al., Nat Med.2018 Mayo;24(5):638-646

[2048] Sequistet al.,2013: Sequist et al., J Clin Oncol.2013 Sep 20;31(27):3327-34

[2049] Soria y otros, 2018: Soria et al., N Engl J Med.2018 Ene 11;378(2):113-125.

[2050] Thress y otros, 2015: Thress et al., Nat Med.2015 Jun; 21(6): 560-562.

[2051] Yanget al.,2015: Yang et al., Lancet Oncol.2015 Jul;16(7):830-8

[2052] Yasuda, 2013: Yasuda, Sci Transl Med.2013 Dic 18;5(216):216ra177.

Claims (48)

1. REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I):

en el que:

R<1>representa metilo, etilo, trifluorometilo, 2,2-difluoroetilo, ciano, cloro, bromo, metoxi o difluorometoxi;

R<2>representa hidrógeno, metilo, etilo, fluoro, cloro o bromo;

R<3>representa hidrógeno o fluoro;

R<4>representa hidrógeno o metilo,

R<5>independientemente en cada ocurrencia representa hidrógeno, trifluorometilo o alquilo C<1>-C<3>, estando R<5>unido a cualquier átomo de carbono del anillo;

R<6>independientemente en cada ocurrencia representa hidrógeno, alquilo C<1>-C<3>o haloalquilo C<1>-C<3>;

R<7>representa alquilo C<1>-C<3>o haloalquilo C<2>-C<3>;

R<8>representa alquilo C<1>-C<3>o haloalquilo C<2>-C<3>;

X representa NR<7>u O;

Y representa NR<8>u O;

m representa 0, 1, 2 o 3;

n representa 0 o 1;

o un N-óxido, una sal o un tautómero de dicho compuesto, o una sal de dicho N-óxido o tautómero.

2. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1, en el que:

R<1>representa metilo, etilo, cloro, metoxi o difluorometoxi;

R<2>representa metilo, etilo, fluoro o cloro;

R<3>representa hidrógeno o fluoro;

R<4>representa hidrógeno o metilo,

R<5>representa hidrógeno, metilo o trifluorometilo, estando R<5>unido a cualquier átomo de carbono del anillo; R<6>representa hidrógeno, metilo o trifluorometilo;

R<7>representa alquilo C<1>-C<2>o fluoroalquilo C<2>-C<3>;

R<8>representa alquilo C<1>-C<2>o fluoroalquilo C<2>-C<3>;

X representa NR<7>u O;

Y representa NR<8>u O;

m representa 0, 1 o 2;

n representa 0 o 1;

o un N-óxido, una sal o un tautómero de dicho compuesto, o una sal de dicho N-óxido o tautómero.

3. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, en el que:

R<1>representa metilo, etilo, cloro o metoxi;

R<2>representa, fluoro o cloro;

R<3>representa hidrógeno o fluoro;

R<4>representa hidrógeno;

R<5>representa hidrógeno o metilo, estando R<5>unido a cualquier átomo de carbono del anillo;

R<8>representa hidrógeno;

R<7>representa metilo;

R<8>representa metilo, 2,2,2-trifluoroetilo o 2,2-difluoroetilo;

X representa NR<7>u O;

Y representa NR<8>u O;

m representa 0, 1 o 2;

n representa 0 o 1;

o un N-óxido, una sal o un tautómero de dicho compuesto, o una sal de dicho N-óxido o tautómero.

4. El compuesto de fórmula (I) de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que se selecciona del grupo que consiste en:

3-(3-(cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(2,3-dicloroanilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 3-(2,3-dicloroanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 3-(2,3-dicloroanilino)-2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2S)-4-(2,2-difluoroetil)morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-(2,2,2-trifluoroetil)morfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[2-(4-dioxan-2-il)etoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{2-[(2R)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{2-[(2S)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-5-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-4-(2,2,2-trifluoroetil)imorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2R)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(2S)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2R)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2S)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{2-[(2R)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{2-[(2S)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona.

3-(3-fluoro-2-metoxianilino)-2-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-3-(3-fluoro-2-metilanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2S)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metilanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluoroanilino]-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-[2-(2,2-difluoroetil)-3-fluoroanilino]-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-{3-[(5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2R)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-3-(3-fluoro-2-metilanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metilanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(3-fluoro-2-metilanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-{3-[(1,4-dioxan-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-etilanilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{1-[1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{(1S)-1-[(2S)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{(1S)-1-[(2R)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{(1R)-1-[(2S)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-(3-{(1R)-1-[(2R)-1,4-dioxan-2-il]etoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metilanilino)-2-{3-[(4-metilmorfolin-2-il)metoxi]piridin-4-il}-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-fluoro-2-metilanilino)-2-(3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoxi}piridin-4-il)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona 2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2R)-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2R)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

2-(3-{[(2S)-5,5-dimetil-1,4-dioxan-2-il]metoxi}piridin-4-il)-3-(2-etil-3-fluoroanilino)-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({1-[4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1R)-1-[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1S)-1-[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1R)-1-[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

3-(3-cloro-2-metoxianilino)-2-[3-({(1S)-1-[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]etil}oxi)piridin-4-il]-1,5,6,7-tetrahidro-4H-pirrolo[3,2-c]piridin-4-ona

5. Un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en el tratamiento o profilaxis de una enfermedad.

6. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 5, en el que las enfermedades son enfermedades hiperproliferativas y/o trastornos que responden a la inducción de la muerte celular.

7. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 6, en el que las enfermedades y/o trastornos hiperproliferativos que responden a la inducción de la muerte celular son tumores hematológicos, tumores sólidos y/o metástasis de los mismos.

8. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el tumor alberga un EGFR mutante y/o metástasis del mismo.

9. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el tumor es cáncer de pulmón, particularmente cáncer de pulmón que alberga un EGFR mutante con mutación de inserción en el exón 20, y/o metástasis del mismo.

10. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el tumor es cáncer de pulmón, en particular cáncer de pulmón que alberga un EGFR mutante con deleciones dentro del marco en el exón 19 o mutaciones puntuales en el exón 21, y/o metástasis del mismo.

11. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 10, en el que el EGFR mutante con deleciones dentro del marco en el exón 19 es EGFR E746_A750del.

12. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 10, en el que el EGFR mutante con mutaciones puntuales en el exón 21 es L858R.

13. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el tumor es cáncer de pulmón, particularmente cáncer de pulmón que alberga un EGFR mutante con una mutación de resistencia adquirida D770_N771insSVD C797S, E746_A750del C797S, o L858R C797S, y/o metástasis del mismo.

14. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 7, en el que el tumor es cáncer de pulmón, particularmente cáncer de pulmón que alberga un ERBB2 mutante con mutaciones de inserción en el exón 20, y/o metástasis del mismo.

15. El compuesto para uso de acuerdo con la reivindicación 14, en el que el ERBB2 mutante con mutaciones de inserción en el exón 20 es ERBB2 A775_G776insYVMA.

16. Una composición farmacéutica que comprende al menos un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.

17. La composición de acuerdo con la reivindicación 16 para su uso en el tratamiento de tumores hematológicos, tumores sólidos y/o metástasis de los mismos.

18. Una combinación que comprende uno o más primeros principios activos seleccionados de un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, y uno o más segundos principios

activos seleccionados de agentes quimioterapéuticos anticancerígenos y agentes anticancerígenos específicos de diana.

19. Un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en un procedimiento de inhibición de la actividad quinasa del receptor EGF en una célula cancerosa, comprendiendo el procedimiento el contacto de la célula cancerosa con un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que la célula cancerosa se deriva de un cáncer seleccionado del grupo que consiste en leucemia, síndrome mielodisplásico, linfoma maligno, tumores de cabeza y cuello, tumores gastrointestinales, tumores endocrinos, tumores mamarios y otros tumores ginecológicos, tumores urológicos, tumores cutáneos y sarcomas.

20. El compuesto para uso de la reivindicación 19, en el que la célula cancerosa esin vitrooin vivo.

21. Un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en un procedimiento para reducir la supervivencia de una célula cancerosa o inducir la muerte de una célula cancerosa, comprendiendo el procedimiento el contacto de una célula cancerosa que comprende una mutación en un receptor EGF con un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.

22. El compuesto para uso de cualquiera de las reivindicaciones 19 a 21, en el que el receptor EGF comprende una mutación en el exón 20.

23. El compuesto para uso de la reivindicación 21 o 22, en el que la célula cancerosa se deriva de un cáncer seleccionado del grupo que consiste en leucemia, síndrome mielodisplásico, linfoma maligno, tumores de cabeza y cuello, tumores gastrointestinales, tumores endocrinos, tumores mamarios y otros tumores ginecológicos, tumores urológicos, tumores cutáneos y sarcomas.

24. El compuesto para uso de la reivindicación 23, en el que la célula cancerosa se deriva de un cáncer seleccionado del grupo que consiste en papiloma sinonasal invertido o carcinoma sinanonasal de células escamosas asociado a papiloma sinonasal invertido.

25. Un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en un procedimiento de tratamiento del cáncer en un sujeto, comprendiendo el procedimiento administrar al sujeto una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.

26. Un compuesto de fórmula general (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en un procedimiento de tratamiento del cáncer en un sujeto, en el que el cáncer es o ha adquirido resistencia a una terapia anti-receptor de EGF, comprendiendo el procedimiento administrar al sujeto una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4.

27. Un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en un procedimiento de mejora de la eficacia de una terapia anti-EGF-receptor, comprendiendo el procedimiento administrar al sujeto una terapia anti-EGF-receptor en combinación con un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el cáncer se selecciona del grupo que consiste en leucemia, síndrome mielodisplásico, linfoma maligno, tumores de cabeza y cuello, tumores de tórax, tumores gastrointestinales, tumores endocrinos, tumores mamarios y otros tumores ginecológicos, tumores urológicos, tumores cutáneos y sarcomas.

28. El compuesto para uso de la reivindicación 25 o 26, en el que el cáncer se selecciona del grupo que consiste en leucemia, síndrome mielodisplásico, linfoma maligno, tumores de cabeza y cuello, tumores de tórax, tumores gastrointestinales, tumores endocrinos, tumores mamarios y otros tumores ginecológicos, tumores urológicos, tumores cutáneos y sarcomas.

29. El compuesto para uso de la reivindicación 28, en el que el cáncer se selecciona del grupo que consiste en papiloma sinonasal invertido o carcinoma sinanonasal de células escamosas asociado a papiloma sinonasal invertido.

30. El compuesto para uso de la reivindicación 28, en el que el tumor del tórax es cáncer de pulmón de células no pequeñas.

31. El compuesto para uso de cualquiera de las reivindicaciones 19 a 30, en el que el receptor EGF comprende una mutación.

32. El compuesto para uso de la reivindicación 31, en el que el receptor EGF comprende una mutación en el exón 20.

33. El compuesto para uso de la reivindicación 32, en el que el receptor EGF comprende una inserción en el exón 20.

34. El compuesto para uso de la reivindicación 33, en el que el receptor EGF comprende una inserción entre los aminoácidos V769-D770 y/o entre D770-N771.

35. El compuesto para uso de la reivindicación 34, en el que la inserción es una inserción ASV y/o SVD.

36. El compuesto para uso de la reivindicación 33, en el que el receptor EGF comprende una inserción ASV entre los aminoácidos V769-D770 y/o una inserción SVD entre los aminoácidos D770-N771.

37. Un procedimiento de selección de un paciente para el tratamiento del cáncer con un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, comprendiendo el procedimiento detectar la presencia de una mutación en el exón 20 del receptor EGF en una muestra biológica del sujeto, determinando así que el paciente debe ser tratado con dicho compuesto.

38. Un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 para su uso en un procedimiento para tratar a un paciente con cáncer, comprendiendo el procedimiento administrar al sujeto una terapia anti-receptor de EGF en combinación con un compuesto de fórmula general (I) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el sujeto se selecciona para la terapia detectando la presencia de una mutación en el exón 20 del receptor de EGF en una muestra biológica del sujeto.

39. El compuesto para uso de la reivindicación 37 o 38, en el que el receptor EGF comprende una inserción en el exón 20.

40. El compuesto para uso de la reivindicación 39, en el que el receptor EGF comprende una inserción entre los aminoácidos V769-D770 y/o entre los aminoácidos D770-N771.

41. El compuesto para uso de la reivindicación 40, en el que la inserción es una inserción ASV y/o SVD.

42. El compuesto para uso de la reivindicación 39, en el que el receptor EGF comprende una inserción ASV entre los aminoácidos V769-D770 y/o una inserción SVD entre los aminoácidos D770-N771.

43. El compuesto para uso de cualquiera de las reivindicaciones 19, 21, 27, 37 y 38, en el que el cáncer es cáncer de pulmón, particularmente cáncer de pulmón que alberga un EGFR mutante con deleciones dentro del marco en el exón 19 o mutaciones puntuales en el exón 21, y/o metástasis del mismo.

44. El compuesto para uso de la reivindicación 43, en el que el EGFR mutante con deleciones dentro del marco en el exón 19 es EGFR E746_A750del.

45. El compuesto para uso de la reivindicación 43, en el que el EGFR mutante con mutaciones puntuales en el exón 21 es L858R.

46. El compuesto para uso de cualquiera de las reivindicaciones 19, 21, 27, 37 y 38, en el que el cáncer es cáncer de pulmón, particularmente cáncer de pulmón que alberga un EGFR mutante con una mutación de resistencia adquirida D770_N771insSVD C797S, E746_A750del C797S, o L858R C797S, y/o metástasis del mismo.

47. El compuesto para uso de cualquiera de las reivindicaciones 19, 21, 27, 37 y 38, en el que el cáncer es cáncer de pulmón, particularmente cáncer de pulmón que alberga un ERBB2 mutante con mutaciones de inserción en el exón 20, y/o metástasis del mismo.

48. El compuesto para uso de la reivindicación 47, en el que el ERBB2 mutante con mutaciones de inserción en el exón 20 es ERBB2 A775_G776insYVMA.