ES3053262T3 - Compounds for the treatment of malaria - Google Patents

Abstract

Se proporcionan compuestos de bis(aminoestirilpiridinio) de fórmula (I) y sus sales farmacéuticamente aceptables para su uso como medicamento. Además, se proporcionan múltiples compuestos novedosos de bis(aminoestirilpiridinio) de fórmula (I). La presente invención se refiere a compuestos de fórmula (I) y composiciones para su uso en el tratamiento de una enfermedad cuya etiología se basa en la agregación proteica. En particular, los compuestos son útiles en el tratamiento, la prevención o la mejora de la malaria, o de sus síntomas, complicaciones y/o secuelas. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0002] Compuestos para el tratamiento del paludismo

[0003] Campo de la invención

[0004] La presente invención se refiere a los campos de la medicina y la parasitología y, en particular, a compuestos y composiciones beneficiosos para la salud humana, útiles como medicamentos para el tratamiento de enfermedades, en particular, del paludismo.

[0005] Antecedentes de la técnica

[0006] El documento WO2011065980A2 describe colorantes, composiciones y métodos útiles para la detección de agregados de proteínas. Uno de dichos colorantes es el compuesto YAT2150 que se incluye en el producto comercial mundialmente conocido Proteostat<®>. Este producto se ha comercializado desde hace más de una década únicamente con el fin de detectar la agregación de proteínas para ensayos cualitativos y cuantitativos en el campo de la biomedicina. Hasta donde saben los inventores, no se ha divulgado ningún efecto médico o farmacéutico de YAT2150 ni de ningún otro compuesto divulgado en el documento WO2011065980A2. YAT2150 corresponde a la siguiente fórmula:

[0009]

[0011] El paludismo es una enfermedad provocaca por parásitos protozoarios del géneroPlasmodium, que se transmite por la picadura de mosquitos hembra del géneroAnopheles. Cinco especies provocan la enfermedad en seres humanos (P. falciparum,P. vivax, P. malariae, P. ovale y P. knowlesi), donde viven y se multiplican primero en los hepatocitos (en concreto, en la fase hepática) y después en los glóbulos rojos (en concreto, en la fase sanguínea).P. falciparumes la especie más mortal y más virulenta, especialmente cuando la infección se produce en niños pequeños y mujeres embarazadas. Cada ciclo de multiplicación del parásito en fase sanguíneo dura 48-72 horas y conduce a la destrucción del eritrocito hospedador. Se manifiesta con síntomas leves tales como fiebre y cefalea, pero si no se trata, puede derivar rápidamente en complicaciones potencialmente mortales, tales como el paludismo cerebral.

[0012] Existen varios fármacos capaces de eliminar los parásitos plasmodiales y se usan para tratar el paludismo. La terapia de combinación basada en artemisinina (TCA, por sus siglas en inglés) es actualmente el tratamiento de primera línea para el paludismo falciparum, junto con una combinación no ACT de amodiaquina-sulfadoxina-pirimetamina. Sin embargo, la eficacia de estos tratamientos está disminuyendo debido a la evolución galopante de la resistencia por parte delPlasmodium.De hecho, los tratamientos antipalúdicos de primera línea anteriores, tales como la cloroquina y la sulfadoxina-pirimetamina, ya se habían eliminado progresivamente debido a la resistencia a los fármacos y, por consiguiente, al fracaso del tratamiento. Por lo tanto, parece claro que el arsenal de fármacos antipalúdicos actualmente disponible es insuficiente, y el despliegue de compuestos novedosos es una necesidad urgente para avanzar hacia la erradicación de la enfermedad. En esas líneas, el hecho de que sólo exista una pequeña colección de fármacos antipalúdicos pertenecientes a un puñado de familias químicas contribuye significativamente a la resistencia del parásito a todos los fármacos desplegados contra él. Para aquellas moléculas que pertenecen a las clases químicas a las que pertenecen los antipalúdicos utilizados actualmente, podría lograrse resistencia con relativa rapidez a través de la adaptación de mecanismos de resistencia ya existentes. Sin embargo, la resistencia se ralentizaría considerablemente en el caso de aquellas moléculas pertenecientes a familias químicas en las que no se ha descrito ningún antipalúdico hasta la fecha.

[0013] En estas líneas, una característica no deseable es la resistencia que emerge rápidamente a través de la modificación de un único gen. Como ejemplo de esto, la resistencia a las aminoquinolinas cloroquina y piperaquina se ha asociado a distintos conjuntos de mutaciones puntuales en el gen que codifica para el transportador de resistencia a cloroquina PfCRT deP. falciparum. PfCRT es una bomba de eflujo desarrollada por el parásito para expulsar la cloroquina y que hizo que este fármaco fuera prácticamente inútil como antipalúdico en muchas áreas del mundo.

[0014] Además, entre las características deseables de los compuestos antipalúdicos aún por descubrir se incluiría el direccionamiento a varias fases del parásito (tanto en el ser humano como en el mosquito), una síntesis fácil y barata, baja toxicidadin vivoy potencial para formulaciones de administración oral.

[0015] En vista de lo anterior, es de gran interés encontrar nuevas terapias y compuestos para el tratamiento de sujetos que padecen paludismo, que puedan evitar una emergencia rápida de resistencias hacia ellos mientras se dirigen a varias fases del patógeno y, por lo tanto, garanticen la eficacia de la terapia a largo plazo.

[0016] Sumario de la invención

[0017] El problema que ha de resolverse por la presente invención es proporcionar compuestos útiles para el tratamiento de enfermedades, en particular el paludismo, en un sujeto que lo necesite.

[0018] Sorprendentemente, los inventores han descubierto que un compuesto, en el presente documento denominado AID-X-2020, muestra una destacada actividad antipalúdica mediante la inhibición del crecimiento dePlasmodium falciparumen fases críticas del parásito. Estos efectos antipalúdicos de AID-X-2020 conducen por consiguiente a la detención del ciclo de vida del patógeno en la fase de trofozoíto y a una reducción significativa del crecimiento del parásito en nuevos glóbulos rojos (GR) invadidos. Además, se ha descubierto que el mecanismo subyacente a dicha actividad antipalúdica es la inhibición de los agregados de proteínas, que parece ser un mecanismo muy deseable de los fármacos antipalúdicos porque la agregación de proteínas en los parásitos del paludismo es prominente en la mayoría de las fases del patógeno tanto en el hospedador humano como en el mosquito. Adicionalmente, la interrupción de la agregación de proteínas generalizada se dirige a muchos productos génicos dePlasmodium, por lo tanto, es poco probable que se produzca una rápida evolución de la resistencia del parásito a los inhibidores de la agregación de proteínas.

[0019] AID-X-2020 tiene el mismo resto orgánico que YAT2150 descrito anteriormente en el documento WO2011065980A2. No obstante, el compuesto sintetizado en la presente invención difiere de YAT2150 en que incluye dos aniones bromuro, mientras que YAT2150 comprende en cambio dos aniones yoduro.

[0020] YAT2150 es el compuesto del producto comercial Proteostat<®>, que lleva más de una década comercializándose únicamente con el fin de realizar ensayos de control de agregación de proteínas. En esas líneas, YAT2150 se ha utilizado como colorante para detectar la agregación de proteínas, por lo que el experto no esperaría que este compuesto tuviera efecto alguno sobre los agregados de proteínas ni sobre el crecimiento dePlasmodium. De hecho, no cabría esperar un efecto antiagregante de YAT2150 teniendo en cuenta que cualquier compuesto utilizado como colorante para detectar la agregación de proteínas debería ser neutro en cuanto a la actividad medida por el colorante. Por lo tanto, a partir de las enseñanzas del documento WO2011065980A2, el experto no deduciría el efecto de inhibición de YAT2150 sobre los agregados de proteínas y la actividad antipalúdica observada en el presente documento.

[0021] Los ejemplos de trabajo expuestos en el presente documento proporcionan datos experimentales detallados que demuestran el efecto antipalúdico de AID-X-2020 a través de la inhibición del crecimiento deP. falciparum, que compromete la viabilidad del parásito en fases tempranas de la infección. Además, los inventores han sido capaces de describir que el mecanismo subyacente a dicha actividad antipalúdica es la inhibición de la agregación de proteínas. En el presente documento también se ha demostrado que AID-X-2020 es seguro para su administraciónin vivoa dosis terapéuticas. Por lo tanto, el compuesto descrito en el presente documento muestra un claro potencial para convertirse en un tratamiento eficaz de primera línea contra el paludismo.

[0022] El EJEMPLO 1 muestra que AID-X-2020 tiene una actividad antipalúdica sobresaliente, que es comparable o incluso superior a la de otros tratamientos antipalúdicos actualmente en uso y conocidos en la técnica. Otros colorantes para la agregación de proteínas tales como la Tioflavina T (ThT) y el rojo Congo utilizados en el presente documento como controles no presentan ninguna actividad antipalúdica, lo que sugiere que esto no es una característica común a todos los colorantes que detectan la agregación de proteínas, sino más bien un efecto específico e inesperado de AID-X-2020.

[0023] El EJEMPLO 2 muestra que AID-X-2020 es capaz de detener el ciclo de vida del parásito en la fase de trofozoíto cuando se añade a las fases de anillo. Por lo tanto, los resultados evidencian el potencial de AID-X-2020 para presentar su elevada actividad antipalúdica en las fases más tempranas de la infección, lo que es fundamental para que un tratamiento antipalúdico sea altamente eficaz. Asimismo, en las formas tardías dePlasmodiumhay una reducción significativa del crecimiento del parásito en los nuevos GR invadidos. Además, el EJEMPLO 6 muestra que AID-X-2020 también es capaz de inhibir la transición del gametocito a oocineto, a diferencia de DONE3TCI, un compuesto antiagregante de proteínas que anteriormente había demostrado tener una elevada actividad antipalúdica.

[0024] Los EJEMPLOS 3, 4 y 5 muestran que AID-X-2020 es un inhibidor fuerte de la agregación de proteína Aβ40 y consistentemente capaz de desregular rápidamente la proteostasis celular. Por ende, el posible mecanismo subyacente a la actividad antipalúdica de AID-X-2020 se basa en su capacidad antiagregante de proteínas.

[0025] En el EJEMPLO 8, se sintetizaron dieciocho compuestos, que son representativos de compuestos incluidos en la fórmula (I) distintos de AID-X-2020. Diecisiete de estos compuestos (EMA357, EMA359, EMA366, EMA368, EMA377, PRC-5, PRC-8, PRC-14, PRC-15, PRC-20, PRC-25, PRC-28, PRC-29, PRC-31, PRC-39, PRC-42 y PRC-50) se sometieron a ensayo y todos muestran una potente actividad antipalúdica, comparable a la actividad antipalúdica de AID-X-2020, e incluso superior en cuatro casos (Tabla 4). Por lo tanto, las pruebas del EJEMPLO 8 confirman que análogos estructurales de AID-X-2020, con el armazón de bis(aminoestirilpiridinio) central, presentan propiedades biológicas similares, en particular la actividad antipalúdica.

[0026] El EJEMPLO 9 muestra que AID-X-2020 es activo contra las cepas deP. falciparumresistentes a cloroquina, artemisina y multirresistentes, lo que confirma que el compuesto pertenece a una familia química en la que no se ha descrito ningún antipalúdico hasta la fecha, siendo por lo tanto un nuevo fármaco antipalúdico potencial sin resistencia potencial en comparación con los antipalúdicos existentes.

[0027] Cabe destacar, en línea con los EJEMPLOS 3, 4 y 5, que el EJEMPLO 10 muestra que AID-X-2020 es capaz de desensamblar fibrillas de Aβ40 preformadas, confirmando no sólo su actividad como inhibidor de la agregación de un modelo de péptidos amiloidógenos, sino también su actividad desagregante.

[0028] El EJEMPLO 11 muestra que en los glóbulos rojos parasitados (GRp), AID-X-2020 se ubica principalmente en el citosol en asociación con las regiones del retículo endoplásmico. Estos hallazgos son coherentes en la función de AID-X-2020 como inhibidor de la agregación de proteínas capaz de interrumpir el agresoma del parásito.

[0029] El EJEMPLO 12 muestra que el tratamiento con AID-X-2020 provoca una disminución de la carga de proteínas agregadas en parásitos vivos, lo que es coherente con el mecanismo de acción de este fármaco como se describe en ejemplos previos.

[0030] El EJEMPLO 13 muestra la capacidad de AID-X-2020 para bloquear el desarrollo de gametocitosin vitrode forma considerablemente más eficiente que DONE3TCI, en línea con los resultados mostrados en el EJEMPLO 6.

[0031] El EJEMPLO 14 muestra la presencia de formas de anillo circulantes del parásito a través de la observación microscópica de muestras clínicas de sangre teñidas con AID-X-2020 de una persona infectada de paludismo. En conjunto, los inventores han descubierto diferentes compuestos que tienen una gran actividad antipalúdica a través de la inhibición de la agregación de proteínas enPlasmodium,que reducen significativamente la viabilidad del parásitoin vitroy bloquean eficazmente el desarrollo de gametocitos dePlasmodiumen fases sanguíneas. Estos compuestos pertenecen a una clase estructural novedosa de antipalúdicos con un mecanismo de acción que potencialmente se dirige a muchos genes, por lo que es poco probable que se produzca una aparición rápida de resistencia a dichos compuestos, lo que los convierte en buenos candidatos para contribuir significativamente a la erradicación del paludismo.

[0032] En general, los compuestos de la presente invención abarcan las propiedades más deseables de los futuros antipalúdicos con el fin de minimizar el riesgo de evolución de la resistencia: (i) un alto índice terapéutico que permita la administración de dosis elevadas; (ii) clasificación en un grupo químico en el que no se han descrito antipalúdicos hasta la fecha para minimizar el riesgo de adaptación de los mecanismos de resistencia existentes; y (iii) una diana presente en varias fases del patógeno y que no sea un producto de un único gen para reducir las posibilidades de que pueda surgir resistencia rápidamente.

[0033] En consecuencia, un primer aspecto de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)

[0036]

[0038] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso como medicamento, donde:

[0039] A es un anión;

[0040] L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno), 1,4-fenilenbis(metileno) y una cadena de oligometileno (C<2>-C<12>), donde de uno a tres grupos metileno de la cadena de oligometileno (C<2>-C<12>) pueden estar sustituidos con átomos de oxígeno;

[0041] R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), hidroxi-alquilo (C<1>-C<4>), ciano-alquilo (C<1>-C<4>), alcanoiloxi (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), fenilo, alcanoílo (C<1>-C<4>), alcanosulfonilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonilo, naftalenosulfonilo yp-toluenosulfonilo, o como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-alquilpiperazina (C<1>-C<2>) y morfolina;

[0042] R<3>y R<6>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), nitro, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), benceno-sulfonamido, naftalenosulfonamido yp-toluenosulfonamido; y

[0043] R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), halógeno, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, amino-alquilo (C<1>-C<4>), alquilamino (C<1>-C<2>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>), naftalenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>) yp-toluenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>).

[0045] El primer aspecto puede formularse como alternativa en relación con el compuesto como se ha definido anteriormente para su uso como principio activo farmacéutico o para tratar una enfermedad. Como alternativa, la invención también se refiere al uso de los compuestos definidos anteriormente para la fabricación de un medicamento o una composición farmacéutica. Como alternativa, la invención también se refiere a un método para prevenir y/o tratar una enfermedad en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se define en el primer aspecto de la invención.

[0047] Un segundo aspecto de la invención se refiere a un compuesto como se define en el primer aspecto de la invención, para su uso en el tratamiento, la prevención o la mejora del paludismo, o los síntomas, complicaciones y/o secuelas del mismo. Como alternativa, la invención se refiere al uso de un compuesto como se define en el primer aspecto para la fabricación de un medicamento para el tratamiento, la prevención o la mejora del paludismo, o los síntomas, complicaciones y/o secuelas del mismo. Como alternativa, la invención se refiere a un método para tratar, prevenir o mejorar el paludismo, o los síntomas, complicaciones y/o secuelas del mismo, en un sujeto que lo necesite, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto como se define en el primer aspecto de la invención.

[0049] Un tercer aspecto de la invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto como se define en el primer aspecto de la invención, junto con cantidades adecuadas de excipientes o portadores farmacéuticamente aceptables.

[0051] Un cuarto aspecto de la invención se refiere a un compuesto de fórmula (I)

[0054]

[0057] o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde:

[0059] A es un anión;

[0060] L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en etileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, heptametileno, octametileno, nonametileno, decametileno, undecametileno, dodecametileno, 3-oxapentametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 3,6,9-trioxaundecametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) y 1,4-fenilenbis(metileno);

[0061] R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), hidroxi-alquilo (C<1>-C<4>), ciano-alquilo (C<1>-C<4>), alcanoiloxi (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), fenilo, alcanoílo (C<1>-C<4>), alcanosulfonilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonilo, naftalenosulfonilo yp-toluenosulfonilo o, como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-alquilpiperazina (C<1>-C<2>) y morfolina;

[0062] R<3>y R<6>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), nitro, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido yp-toluenosulfonamido; y

[0063] R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), halógeno, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, amino-alquilo (C<1>-C<4>), alquilamino (C<1>-C<2>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>), naftalenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>) yp-toluenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>);

[0064] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>y R<8>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno); con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es etileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, decametileno, dodecametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0065] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, tetrametileno, 3-oxapentametileno, 1,2-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0066] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son fenilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, octametileno, decametileno, dodecametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0067] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son HO-CH<2>-CH<2>- y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno;

[0068] con la condición de que cuando R<1>y R<7>son etilo, R<2>y R<8>son HO-CH<2>-CH<2>- y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es etileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno o heptametileno;

[0069] con la condición de que cuando R<1>y R<7>son metilo, R<2>y R<8>son NC-CH<2>- y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es 1,2-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno),

[0070] con la condición de que cuando R<1>y R<7>son acetilo y R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>y R<8>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno);

[0071] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<6>, R<7>y R<8>son metilo y R<4>y R<5>son hidrógeno, L no es trimetileno ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0072] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<4>, R<5>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, tetrametileno o decametileno;

[0073] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo, R<3>y R<6>son hidrógeno y R<4>y R<5>son metilo, L no es decametileno;

[0074] con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son pirrolidino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0075] con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son piperidino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno); y

[0076] con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son 4-metilpiperazino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno.

[0078] Un quinto aspecto de la invención se refiere a un proceso para la preparación del compuesto de fórmula (I) de acuerdo con el cuarto aspecto, que comprende las siguientes etapas:

[0080] A) hacer reaccionar 4-metilpiridinas de fórmula (II) con reactivos alquilantes de fórmula (III), donde X es un grupo saliente común, tal como haluro, aciloxi, sulfonato o sulfato; y

[0081] B) hacer reaccionar el compuesto de fórmula (IV) resultante con un 4-aminobenzaldehído de fórmula (V), y, en caso necesario, mediante transformación convencional de los grupos funcionales que están presentes en los radicales R<1>-R<8>de acuerdo con el cuarto aspecto.

[0084]

[0087] A lo largo de la descripción y las reivindicaciones, el término "comprender" y sus variaciones no pretenden excluir otras características técnicas, aditivos, componentes o etapas. Los objetos adicionales, las ventajas y las características de la invención serán evidentes para los expertos en la materia tras examinar la descripción o pueden aprenderse poniendo en práctica la invención. Además, la presente invención cubre todas las posibles combinaciones de realizaciones particulares y preferidas descritas en el presente documento. Los siguientes ejemplos y dibujos se proporcionan en el presente documento con fines ilustrativos y sin pretender ser limitantes de la presente invención.

[0089] Descripción de los dibujos

[0090] LaFIG.1muestra la fase de inhibición del crecimiento deP.falciparumdurante 48 h de tratamiento con AID-X-2020200 nM. El fármaco se añadió a cultivos de parásitos sincronizados en las fases de anillo o trofozoíto. Se prepararon frotis de sangre teñidos con Giemsa en los puntos temporales indicados entre 0 y 48 h de incubación, y se contaron los números de fases de anillo, trofozoítos tempranos, trofozoítos tardíos y esquizontes en muestras de al menos 100 GRp para cada punto temporal. (A) Las barras indican los porcentajes de fases de desarrollo presentes en los respectivos frotis sanguíneos. (B) Imágenes representativas de GRp en el ensayo en el que se añadió AID-X-2020 en la fase de anillo.

[0091] LaFIG.2muestra el efecto de AID-X-2020 a diferentes concentraciones sobre la agregaciónin vitrode Aβ40. (A) Ensayo de fluorescencia de ThT, que muestra el efecto de AID-X-2020 sobre la inhibición de la agregación de Aβ40. u.a.: unidades arbitrarias. λ: longitud de onda (nm). (B) El análisis por TEM muestra agregados de fibrillas amiloides de muestras que contienen AID-X-2020 y muestras de Aβ40 sin tratar de control. En presencia de AID-X-2020, los agregados son más pequeños y están más fragmentados que aquellos sin tratar.

[0092] LaFIG.3muestra el efecto de AID-X-2020 sobre marcadores de agregación de proteínas en cultivos vivos deP. falciparum. (A-C) Ensayos de transferencia Western para la detección de proteínas ubiquitinadas en cultivos tratados (A) durante 24 h con AID-X-2020 90 nM o (C) durante 90 min con concentraciones diferentes del compuesto. (B) corresponde a un control sin tratar. Se usa anticuerpo anti-espectrina como control de carga mostrado en la parte inferior de cada gel. (D) Ensayo de transferencia puntual de las mismas muestras de panel C usando un anticuerpo contra fibrillas amiloides. (E) Isobolograma de la interacción entre AID-X-2020 (Y) y artemisinina (A) a diferentes relaciones Y:A.

[0093] LaFIG.4muestra los resultados de un ensayo de inhibiciónin vitrode la transición de gametocitos a oocinetos enP. berghei.(A) Esquema del protocolo experimental. Para la producción de oocinetos, se recogieron gametocitos de sangre portadora de ratón infectado con CTRP-GFP dePlasmodium berghei, que expresa GFP cuando alcanza la fase de oocineto. El efecto de AID-X-2020 y DONE3TCI sobre la conversión de gametocitos en oocinetos se evaluó en placas de 96 pocillos, sembrando cada cultivo con concentraciones crecientes de los compuestos durante 24 h de incubación.24 h después, las muestras se analizaron en un citómetro de flujo para seleccionar la población de células positivas para GFP. (B) Efecto de DONE3TCI y AID-X-2020 sobre la producción de oocinetos. Dado que la proteína CTRP sólo se expresa en los oocinetos, la presencia de una señal de fluorescencia es representativa de CTRP-GFP deP.bergheialcanzando la fase de oocineto (acontecimientos GFP+, %), mientras que la falta de fluorescencia es representativa de CTRP-GFP deP.bergheique no alcanza la fase de oocineto. La administración de AID-X-2020 a 0,5 µM suprime la producción de oocinetos por el parásito, mientras que la administración de DONE3TCI hasta 2 µM no muestra ningún efecto observable sobre el desarrollo de oocinetos. LaFIG. 5muestra ensayos de inhibición del crecimiento de AID-X-2020in vitroen cepas deP. falciparumresistentes a la cloroquina y a la artemisinina. (A) Cepa W2 resistente a cloroquina y cepas M579I y R561H resistentes a artemisinina comparadas con la cepa precursora 3D7 y (B) cepas Cam 3.II R561H y R539T resistentes a artemisinina comparadas con la cepa precursora Cam 3.II (cepa resistente a cloroquina y sulfadoxina/pirimetamina) y con 3D7 (cepa sensible a cloroquina). En ambos paneles se muestran las medias ± DE.

[0094] LaFIG. 6muestra el efecto de AID-X-2020 sobre Aβ40 preagregada. (A) Esquema del ensayo. (B) Ensayo de fluorescencia de ThT. u.a.: unidades arbitrarias. Se representa el valor medio de intensidad de fluorescencia de cada muestra en cada longitud de onda. (C) Análisis por TEM de las muestras después de 48 h de incubación. LaFIG.7muestra el análisis por ThT del efecto de AID-X-2020 sobre la agregaciónin vitrode péptidos agregativos presentes en proteínas deP. falciparum. (A) Ensayo de inhibición de la agregación. (B) Ensayo de desagregación. En ambos paneles se representa el valor medio de intensidad de fluorescencia de cada muestra en cada longitud de onda.

[0095] LaFIG.8 muestra la localización subcelular de AID-X-2020 en GRp. (A) Análisis de colocalización por microscopía confocal de fluorescencia en diferentes fases sanguíneas deP.falciparumde AID-X-2020 con el marcador citoplasmático ER-Tracker<™>Verde. La imagen de fusión corresponde únicamente a los canales rojo (AID-X-2020) y verde (ER tracker). Los coeficientes de correlación de solapamiento de Manders se indican en cifras amarillas. (B) Análisis correlativo de microscopía óptica y electrónica. Las estrellas de la imagen superpuesta indican tres regiones de ER. Se incluye la micrografía ampliada del panel inferior derecho para una mejor identificación de las estructuras subcelulares.

[0096] LaFIG.9muestra la fluorescencia de ThT de extractos de cultivo deP. falciparumnormalizados para tener igual contenido de proteínas, sin tratar o tratados con AID-X-2020 a su CI<10>(27 nM) y CI<50>(90 nM)in vitro, durante 90 min y 4 h. Se muestra como referencia un extracto de proteínas de GR no parasitados. Se representa el valor medio de intensidad de fluorescencia de cada muestra en cada longitud de onda.

[0097] LaFIG.10muestra la agregación de proteínas en cultivos vivos deP. falciparum. La fluorescencia de ThT de los extractos de cultivo deP. falciparumse normalizaron para que tuvieran igual contenido de proteínas, sin tratar o tratados con AID-X-2020 a su CI<10>(27 nM) y CI<50>(90 nM)in vitro, durante 30 h. Se muestra como referencia un extracto de proteínas de GR no parasitados. Se representa el valor medio de intensidad de fluorescencia de cada muestra en cada longitud de onda.

[0098] LaFIG. 11muestra la actividadin vitrode AID-X-2020 y DONE3TCI sobre gametocitos tempranos y tardíos dePlasmodium. Las barras representan la media ± DE de dos experimentos independientes.

[0099] LaFIG. 12muestra la tinción con AID-X-2020 de una muestra clínica de una infección porP. falciparum. DIC: imagen de contraste de interferencia diferencial. El panel de fusión se refiere únicamente a las imágenes de fluorescencia. Las puntas de flecha indican los tres glóbulos rojos infectados porP. falciparumpresentes en los dos campos microscópicos mostrados.

[0100] Descripción detallada de la invención

[0101] Definiciones

[0102] Excipiente: Los términos "excipiente" y "portador" se usan indistintamente y se refieren a una sustancia inerte añadida a, por ejemplo, una composición farmacéutica, para facilitar adicionalmente la administración de un compuesto de la presente divulgación.

[0103] Prevenir: Los términos "prevenir", "prevención", "profilaxis" y variantes de los mismos como se usan en el presente documento, se refieren, por ejemplo, a

[0104] (i) retrasar parcial o totalmente el inicio de una enfermedad, trastorno y/o afección divulgados en el presente documento;

[0105] (ii) retrasar parcial o totalmente el inicio de uno o más síntomas, características o manifestaciones clínicas, complicaciones o secuelas de una enfermedad, trastorno y/o afección particulares divulgados en el presente documento;

[0106] (iii) retrasar parcial o totalmente el inicio de uno o más síntomas, características o manifestaciones, complicaciones o secuelas de una enfermedad, trastorno y/o afección particulares divulgados en el presente documento;

[0107] (iv) retrasar parcial o totalmente la progresión de una enfermedad, trastorno y/o afección particulares divulgados en el presente documento; y/o

[0108] (v) reducir el riesgo de desarrollar una patología asociada a la enfermedad, trastorno y/o afección divulgados en el presente documento.

[0109] Sujeto: Los términos "sujeto", "paciente", "individuo", "hospedador" y variantes de los mismos se usan indistintamente y se refieren a cualquier sujeto mamífero, en particular, seres humanos, pero también incluyendo, sin limitación, seres humanos, animales domésticos (por ejemplo, perros, gatos y similares), animales de granja (por ejemplo, vacas, ovejas, cerdos, caballos y similares) y animales de laboratorio (por ejemplo, mono, ratas, ratones, conejos, cobayas y similares) para quienes se desea un diagnóstico, tratamiento o terapia. Las composiciones y métodos descritos en el presente documento son aplicables tanto a la terapia humana como a aplicaciones veterinarias.

[0110] Sujeto que lo necesite: Como se usa en el presente documento, "sujeto que lo necesite" incluye sujetos, tales como sujetos mamíferos, que se beneficiarían de la administración de las composiciones de la divulgación.

[0111] Cantidad terapéuticamente eficaz: Como se usa en el presente documento, la expresión "cantidad terapéuticamente eficaz" es la cantidad de un compuesto/composición de la presente divulgación que es suficiente para producir un efecto terapéutico, farmacológico y/o fisiológico deseado en un sujeto que lo necesite.

[0112] Tratamiento: Los términos "tratar", "tratamiento", "terapia", como se usan en el presente documento, se refieren a, por ejemplo, la reducción de la gravedad de la enfermedad o afección divulgada en el presente documento; la mejora o eliminación de uno o más síntomas, complicaciones o secuelas asociados a una enfermedad divulgada en el presente documento (por ejemplo, el paludismo); la provisión de efectos ventajosos a un sujeto con una afección/enfermedad divulgada en el presente documento, sin curar necesariamente la enfermedad o afección. El término incluye también la profilaxis o la prevención de una enfermedad o afección o de síntomas, complicaciones o secuelas de la misma. El término se refiere a una intervención clínica o nutricional para prevenir la enfermedad o afección; curar la enfermedad o afección; retrasar el inicio de la enfermedad o afección; retrasar el inicio de un síntoma, complicación o secuela; reducir la gravedad de la enfermedad o afección; reducir la gravedad de un síntoma, complicación o secuela; mejorar uno o más síntomas; mejorar una o más complicaciones; mejorar una o más secuelas; prevenir uno o más síntomas; prevenir una o más complicaciones; prevenir una o más secuelas; retrasar uno o más síntomas; retrasar uno o más síntomas; retrasar una o más complicaciones; retrasar una o más secuelas; aliviar uno o más síntomas; aliviar una o más complicaciones; aliviar una o más secuelas; acortar la duración de uno o más síntomas; acortar la duración de una o más complicaciones; acortar la duración de una o más secuelas; reducir la frecuencia de uno o más síntomas; reducir la frecuencia de una o más complicaciones; reducir la frecuencia de una o más secuelas; reducir la gravedad de uno o más síntomas; reducir la gravedad de una o más complicaciones; reducir la gravedad de una o más secuelas; mejorar la calidad de vida; aumentar la supervivencia; impedir la reaparición de la enfermedad o afección; retrasar la reaparición de la enfermedad o afección; o cualquier combinación de los mismos, por ejemplo, con respecto a lo que se espera en ausencia del tratamiento con el compuesto/composición de la presente divulgación. Síntoma: Como se usa en el presente documento, el término "síntoma" se refiere a un signo, indicio o prueba, subjetivos o físicos, de enfermedades o alteraciones físicas observadas por el sujeto. En general, el término se refiere a cualquier fenómeno mórbido o desviación de lo normal en estructura, función o sensación, experimentado por el paciente e indicativo de enfermedad. Los síntomas son sentidos o percibidos por la persona que los experimenta, pero pueden no ser percibidos fácilmente por los demás. En algunos aspectos, un síntoma puede ser un síntoma leve, un síntoma moderado o un síntoma grave. Como se usa en el presente documento, la expresión "síntoma leve" se refiere a un síntoma que no pone en peligro la vida y no requiere, por ejemplo, tratamiento de cuidados intensivos (por ejemplo, en la UCI de un hospital). Como se usa en el presente documento, la expresión "síntoma moderado" se refiere a un síntoma que requiere vigilancia porque puede llegar a ser potencialmente mortal y puede requerir, por ejemplo, hospitalización. Como se usa en el presente documento, la expresión "síntoma grave" se refiere a un síntoma que pone en peligro la vida y requiere, por ejemplo, tratamiento de cuidados intensivos (por ejemplo, en la UCI de un hospital).

[0113] Complicación: Como se usa en el presente documento, el término "complicación" se refiere a un proceso o episodio patológico que se produce durante una enfermedad o afección y que no forma parte esencial de la misma; que puede ser el resultado de la enfermedad o afección o de causas independientes. En consecuencia, el término complicación se refiere a problemas médicos/clínicos que se observan en sujetos diagnosticados de una enfermedad o afección divulgada en el presente documento, por ejemplo, el paludismo. En algunos aspectos, una complicación puede ser temporal. En algunos aspectos, una complicación puede ser crónica o permanente.

[0114] Secuela: Como se usa en el presente documento, el término "secuela" se refiere a una complicación a largo plazo, crónica o permanente.

[0115] Sal farmacéuticamente aceptable: Como se usa en el presente documento, la expresión "sal farmacéuticamente aceptable" se refiere a que la sal derivada del compuesto correspondiente es adecuada para su administración a un sujeto para lograr los tratamientos descritos en el presente documento, sin efectos secundarios excesivamente perjudiciales a la luz de la intensidad de la enfermedad y la necesidad del tratamiento.

[0116] Compuestos de fórmula (I) o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos

[0117] En algunas realizaciones del primer aspecto, la invención proporciona una familia de compuestos de bis(aminoestirilpiridinio) que contienen una cadena de unión para conectar ambos restos aminoestirilpiridinio, sustituidos de forma diferente con anillos de piridinio y aminofenilo. En una realización particular, la invención proporciona una familia de compuestos homodiméricos de bis(aminoestirilpiridinio), es decir, R<1>= R<7>, R<2>= R<8>, R<3>= R<6>y R<4>= R<5>o,como alternativa, cuando se usan en combinación, R<1>-N-R<2>= R<7>-N-R<8>, R<3>= R<6>y R<4>= R<5>. En otra realización particular, la invención proporciona una familia de compuestos heterodiméricos de bis(aminoestirilpiridinio).

[0118] En algunas realizaciones, la invención se refiere a sales de compuestos de fórmula (I). Los ejemplos de sales pueden ser, pero sin limitación, clorhidrato, bromhidrato, sulfato, nitrato, fosfatos, acetato, propionato, benzoato, maleato, hemimaleato, fumarato, lactato, tartrato, citrato, succinato, hemisuccinato, glicolato, gluconato, tosilato, mesilato, esilato, napsilato, isetionato, besilato, hexanoato, octanoato, decanoato, oleato o estearato.

[0119] Se entiende que puesto que los compuestos descritos en la presente invención comprenden grupos catiónicos, también habrá presentes contraiones aniónicos. Cualquier anión puede servir para este fin si no interfiere con el uso de los compuestos. Los ejemplos de aniones que pueden servir como contraiones pueden incluir, pero sin limitación, aniones haluro, tales como bromuro (Br-), yoduro (I-) o cloruro (Cl-), aniones sulfonato, tales como mesilato, tosilato, esilato, isetionato, napsilato o besilato, o cualesquier otros aniones farmacéuticamente aceptables, tales como los derivados de ácidos carboxílicos (acetato, propionato, maleato, benzoato, fumarato), hidroxiácidos (citrato, lactato, succinato, tartrato) o ácidos grasos (hexanoato, octanoato, decanoato, oleato, estearato). En particular, los aniones se seleccionan del grupo que consiste en yoduro, bromuro y cloruro.

[0120] Los expertos en la materia también deberían apreciar que el número estequiométrico de contraión o contraiones que equilibran la carga o cargas del compuesto puede ser el mismo o puede ser diferente, siempre que los contraiones equilibren la carga o cargas del compuesto. La combinación de contraiones puede seleccionarse de cualquiera de los aniones mencionados anteriormente.

[0121] En algunas realizaciones, el dirradical, también denominado enlazador dirradical (L), que conecta los dos restos aminoestirilpiridinio es una cadena de oligometileno de 2 a 12 átomos de carbono, en los que de uno a tres grupos metileno pueden reemplazarse opcionalmente por átomos de oxígeno.

[0122] En algunas realizaciones, el dirradical puede ser un grupo orto, meta o para-fenileno (1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) o 1,4-fenilenbis(metileno).

[0123] En algunas realizaciones, los restos aminoestirilpiridinio pueden estar sin sustituir u opcionalmente sustituidos en la posición 3 (R<4>y R<5>) del anillo de piridinio con un grupo alquilo (C<1>-C<4>), un átomo de halógeno, un grupo amino, un grupo amino-alquilo (C<1>-C<4>), un grupo alquilamino (C<1>-C<2>)-alquilo (C<1>-C<4>), un grupo alcanamido (C<1>-C<4>), un grupo alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), un grupo bencenosulfonamido, un grupo naftalenosulfonamido, un grupo toluenosulfonamido. Más particularmente, el anillo de piridinio contiene hidrógeno en la posición 3 o está sustituido en la posición 3 con cloro, bromo, un grupo amino o un grupo metilo.

[0124] En algunas realizaciones, los restos aminoestirilpiridinio pueden estar sustituidos en el grupo amino (R<1>, R<2>, R<7>y R<8>) con un grupo alquilo (C<1>-C<4>), un grupo hidroxi-alquilo (C<1>-C<4>), un grupo ciano-alquilo (C<1>-C<4>), un grupo alcanoiloxi (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), un grupo fenilo, un grupo alcanosulfonilo (C<1>-C<4>), un grupo bencenosulfonilo, un grupo naftalenosulfonilo o un grupo toluenosulfonilo. Más particularmente, el grupo amino está sustituido con dos grupos metilo, etilo, fenilo o 2-acetiloxietilo o está sustituido con un grupo metilo y uno 2-cianoetilo.

[0125] En algunas realizaciones, el átomo de nitrógeno del grupo amino del resto aminoestirilpiridinio puede formar parte de un heterociclo tal como azetidina, pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina o morfolina. Más particularmente, el átomo de nitrógeno del grupo amino es parte de un anillo de pirrolidina, uno de piperidina, uno de piperazina o uno de morfolina.

[0126] En algunas realizaciones, los restos aminoestirilpiridinio pueden estar sustituidos en la posición 2 del anillo de fenilo (R<3>y R<6>) con un grupo alquilo (C<1>-C<4>), un grupo nitro, un grupo amino, un grupo alquilamino (C<1>-C<4>), un grupo alcanamido (C<1>-C<4>), un grupo alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), un grupo bencenosulfonamido, un grupo naftalenosulfonamido o un grupo toluenosulfonamido. Como alternativa, los restos aminoestirilpiridinio pueden estar sustituidos en la posición 2 del anillo de fenilo (R<3>y R<6>) con un grupo hidroxi, un grupo alcoxi (C<1>-C<4>) o un grupo alcanoiloxi (C<1>-C<4>). En una realización particular, los restos aminoestirilpiridinio están sustituidos en la posición 2 del anillo de fenilo con un grupo hidroxi. Más particularmente, el compuesto es dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)-2-hidroxiestiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-69).

[0127] En algunas realizaciones, el compuesto para su uso es de acuerdo con el primer aspecto, donde:

[0128] L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno), 1,4-fenilenbis(metileno) y una cadena de oligometileno (C<4>-C<12>), donde de uno a tres grupos metileno de la cadena de oligometileno (C<4>-C<12>) pueden estar sustituidos con átomos de oxígeno;

[0129] R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en alquilo (C<1>-C<2>), cianoalquilo (C<1>-C<2>) y fenilo o, como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-metilpiperazina y morfolina;

[0130] R<3>y R<6>son hidrógeno; y

[0131] R<4>y R<5>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, cloro, bromo, fluoro y yodo.

[0132] En una realización particular, el compuesto para su uso es de acuerdo con el primer aspecto, donde:

[0133] L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en 1,3-fenilenbis(metileno), 1,4-fenilenbis(metileno), una cadena de oligometileno C<4>y una cadena de oligometileno (C<8>-C<12>), donde dos o tres grupos metileno de las cadenas de oligometileno pueden estar sustituidos con dos o tres átomos de oxígeno;

[0134] R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en alquilo (C<1>-C<2>), cianoalquilo C<2>y fenilo, o como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente de pirrolidina y morfolina;

[0135] R<3>y R<6>son hidrógeno; y

[0136] R<4>y R<5>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, cloro y bromo.

[0137] En algunas realizaciones, el compuesto para su uso de acuerdo con el primer aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en:

[0138] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io} (EMA368); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperidin-1-il)estiril]piridin-1-io};

[0139] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0140] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperazin-1-il)estiril]piridin-1-io};

[0141] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA366);

[0142] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA357); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)-2-nitroestiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0143] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (EMA359); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-acetoxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-hidroxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(etano-1,2-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0144] dibromuro de 1,1'-(propano-1,3-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0145] dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-5);

[0146] dibromuro de 1,1'-(pentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0147] dibromuro de 1,1'-(hexano-1,6-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0148] dibromuro de 1,1'-(heptano-1,7-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0149] dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-8);

[0150] dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25);

[0151] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (AID-X-2020); dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); dicloruro de 1,1'-(3-oxapentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0152] diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-20); dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-28); dibromuro de 1,1'-[1,2-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0153] dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-31); dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-29); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-39);

[0154] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-42); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-50); y dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-amino-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io}.

[0156] En una realización particular, el compuesto para su uso de acuerdo con el primer aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en:

[0158] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (AID-X-2020); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA357); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (EMA359); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA366); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io} (EMA368); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0159] dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-5);

[0160] dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-8);

[0161] dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-20); dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25);

[0162] dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-28); dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-29); dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-31); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-39);

[0163] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-42); y dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-50).

[0165] En una realización más particular, el compuesto para su uso de acuerdo con el primer aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en:

[0167] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (AID-X-2020); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA357); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (EMA359); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0168] dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-8);

[0169] dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25);

[0170] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-39);

[0171] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-42); y dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-50).

[0173] En una realización incluso más particular, el compuesto para su uso de acuerdo con el primer aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en:

[0175] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (AID-X-2020); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0176] dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); y dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25).

[0178] Tabla 1. Estructuras químicas de los compuestos AID-X-2020, EMA357, EMA359, EMA366, EMA368, EMA377, PRC-5, PRC-8, PRC-14, PRC-15, PRC-20, PRC-25, PRC-28, PRC-29, PRC-31, PRC-39, PRC-42, PRC-50 y PRC-

[0179] 69.

[0181]

[0182] continuación

[0183]

[0184]

[0185]

[0186]

[0188] En una realización particular, el compuesto para su uso de acuerdo con el primer aspecto de la invención es de fórmula (VI) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo (también denominado en el presente documento AID-X-2020).

[0191]

[0193] En una realización más particular, el compuesto para su uso es de fórmula (VI), donde el anión (A) es bromuro. Como se ha analizado, dentro de los compuestos abarcados por la fórmula (I), se proporcionan compuestos de aminoestirilpiridinio novedosos (cuarto aspecto de la invención).

[0194] En algunas realizaciones, el compuesto es de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención, donde:

[0195] L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en tetrametileno, pentametileno, hexametileno, heptametileno, octametileno, nonametileno, decametileno, undecametileno, dodecametileno, 3-oxapentametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 3,6,9-trioxaundecametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) y 1,4-fenilenbis(metileno);

[0196] R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<2>), ciano-alquilo (C<1>-C<2>) y fenilo, o como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-metilpiperazina y morfolina;

[0197] R<3>y R<6>son hidrógeno; y

[0198] R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, cloro, bromo, fluoro y yodo;

[0199] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>y R<8>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno); con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno, pentametileno, hexametileno, decametileno, dodecametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0200] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno, 3-oxapentametileno, 1,2-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0201] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son fenilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno, pentametileno, hexametileno, octametileno, decametileno, dodecametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0202] con la condición de que cuando R<1>y R<7>son metilo, R<2>y R<8>son NC-CH<2>- y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es 1,2-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0203] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<6>, R<7>y R<8>son metilo y R<4>y R<5>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno);

[0204] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<4>, R<5>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno ni decametileno;

[0205] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo, R<3>y R<6>son hidrógeno y R<4>y R<5>son metilo, L no es decametileno;

[0206] con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son pirrolidino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno); y

[0207] con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son piperidino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno).

[0209] En una realización particular, el compuesto es de acuerdo con el cuarto aspecto, donde:

[0211] L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en tetrametileno, octametileno, nonametileno, decametileno, undecametileno, dodecametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 3,6,9-trioxaundecametileno, 1,3-fenilenbis(metileno) y 1,4-fenilenbis(metileno);

[0212] R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en alquilo (C<1>-C<2>), cianoalquilo (C<2>) y fenilo o, como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de pirrolidina y morfolina;

[0213] R<3>y R<6>son hidrógeno; y

[0214] R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, cloro y bromo;

[0215] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>y R<8>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno); con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno, decametileno, dodecametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno); con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0216] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son fenilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno, octametileno, decametileno, dodecametileno, 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

[0217] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<6>, R<7>y R<8>son metilo y R<4>y R<5>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno);

[0218] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<4>, R<5>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno ni decametileno;

[0219] con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo, R<3>y R<6>son hidrógeno y R<4>y R<5>son metilo, L no es decametileno; y

[0220] con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son pirrolidino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno).

[0222] En algunas realizaciones, el compuesto es como se describe en el cuarto aspecto de la invención, donde R<1>= R<7>, R<2>= R<8>, R<3>= R<6>y/o R<4>= R<5>o, como alternativa, cuando se usan en combinación, R<1>-N-R<2>= R<7>-N-R<8>, R<3>= R<6>y/o R<4>= R<5>. En realizaciones particulares, el compuesto es como se describe en el cuarto aspecto de la invención, donde R<1>= R<7>, R<2>= R<8>, R<3>= R<6>y R<4>= R<5>o,como alternativa, cuando se usan en combinación, R<1>-N-R<2>= R<7>-N-R<8>, R<3>= R<6>y R<4>= R<5>. En consecuencia, en una realización particular, el compuesto como se describe en el cuarto aspecto de la invención es un homodímero.

[0224] En algunas realizaciones, el compuesto es de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención, donde

[0226] R<1>, R<7>(R<1>= R<7>) y R<2>, R<8>(R<2>= R<8>) son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, etilo, fenilo, 2-hidroxietilo, 2-cianoetilo y 2-(acetiloxi)etilo o, como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>= R<7>-N-R<8>se selecciona del grupo que consiste en un anillo de pirrolidina, piperidina, piperazina y morfolina; y/o

[0227] R<3>, R<6>(R<3>= R<6>) son radicales seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, nitro, amino, acetamido, metanosulfonamido, bencenosulfonamido yp-toluenosulfonamido; y/o

[0228] R<4>, R<5>(R<4>= R<5>) son radicales seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, cloro, bromo, fluoro, yodo, amino, acetamido, metanosulfonamido, bencenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, aminometilo, acetamidometilo, metanosulfonamidometilo, bencenosulfonamidometilo yp-toluenosulfonamidometilo.

[0229] Como alternativa, los restos aminoestirilpiridinio pueden estar sustituidos en la posición 2 del anillo de fenilo (R<3>y R<6>) con un grupo hidroxi, un grupo alcoxi (C<1>-C<4>) o un grupo alcanoiloxi (C<1>-C<4>). En una realización particular, los restos aminoestirilpiridinio están sustituidos en la posición 2 del anillo de fenilo con un grupo hidroxi. Más particularmente, el compuesto es dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)-2-hidroxiestiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-69).

[0230] En realizaciones particulares, el compuesto es de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención, donde

[0231] R<1>, R<7>(R<1>= R<7>) y R<2>, R<8>(R<2>= R<8>) son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, etilo, fenilo, 2-hidroxietilo, 2-cianoetilo y 2-(acetiloxi)etilo o, como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>= R<7>-N-R<8>se selecciona del grupo que consiste en un anillo de pirrolidina, piperidina, piperazina y morfolina;

[0232] R<3>, R<6>(R<3>= R<6>) son radicales seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, nitro, amino, acetamido, metanosulfonamido, bencenosulfonamido y p-toluenosulfonamido; y

[0233] R<4>, R<5>(R<4>= R<5>) son radicales seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, cloro, bromo, fluoro, yodo, amino, acetamido, metanosulfonamido, bencenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, aminometilo, acetamidometilo, metanosulfonamidometilo, bencenosulfonamidometilo yp-toluenosulfonamidometilo.

[0234] En particular, el compuesto de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en: dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io} (EMA368); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperidin-1-il)estiril]piridin-1-io};

[0235] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0236] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperazin-1-il)estiril]piridin-1-io};

[0237] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA366); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)-2-nitroestiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0238] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (EMA359); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-acetoxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-hidroxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(etano-1,2-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0239] dibromuro de 1,1'-(propano-1,3-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0240] dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-5);

[0241] dibromuro de 1,1'-(pentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0242] dibromuro de 1,1'-(hexano-1,6-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0243] dibromuro de 1,1'-(heptano-1,7-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0244] dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-8);

[0245] dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25);

[0246] dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); dicloruro de 1,1'-(3-oxapentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0247] diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-20); dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-28); dibromuro de 1,1'-[1,2-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

[0248] dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-31); dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-29); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-39);

[0249] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-42); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-50); y dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-amino-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io).

[0250] En una realización más particular, el compuesto de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en:

[0251] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io} (EMA368); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0252] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA366); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (EMA359); dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-5);

[0253] dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-8);

[0254] dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25);

[0255] dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-20); dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-28); dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-31); dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-29); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-39);

[0256] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-42); y dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-50).

[0257] En una realización incluso más particular, el compuesto de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en:

[0258] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (EMA359); dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0259] dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-8);

[0260] dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25);

[0261] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-39);

[0262] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-42); y dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-50).

[0263] En una realización incluso más particular, el compuesto de acuerdo con el cuarto aspecto de la invención se selecciona del grupo que consiste en:

[0264] dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377);

[0265] dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14); dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15); y dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25).

[0266] Las estructuras químicas de los compuestos mencionados se divulgan en la Tabla 1 presentada anteriormente. En algunas realizaciones, la invención también se refiere a combinaciones que comprenden al menos un compuesto descrito en el presente documento y uno o más agentes terapéuticos. El compuesto y el otro agente terapéutico pueden formularse para una administración separada, secuencial, simultánea o en mezcla en una composición farmacéutica.

[0267] En realizaciones particulares, el otro agente terapéutico es un fármaco antipalúdico. Los ejemplos no limitantes de fármacos antipalúdicos son arteméter, artesunato, dihidroartemisinina, lumefantrina, mefloquina, tafenoquina, amodiaquina, piperaquina, atovacuona, pirimetamina, pironaridina, artemisinina, cloroquina, doxiciclina o quinina. En una realización particular, la composición comprende AID-X-2020 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende EMA357 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende EMA359 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende EMA366 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende EMA368 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende EMA377 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-5 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC8 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-14 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-15 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-20 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-25 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-28 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-29 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-31 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-39 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-42 y uno o más agentes terapéuticos. En otra realización particular, la composición comprende PRC-50 y uno o más agentes terapéuticos. Como alternativa, la composición comprende PRC-69 y uno o más agentes terapéuticos.

[0268] Usos médicos de los compuestos/composiciones

[0269] Uso como medicamento

[0270] Como se ha descrito anteriormente, los ejemplos de la presente invención proporcionan pruebas de la actividad antipalúdica de los compuestos descritos en el presente documento. Por lo tanto, la presente invención describe por primera vez el efecto positivo de los compuestos de la invención en el tratamiento, la prevención o la mejora de una enfermedad, síntomas, complicaciones y/o secuelas de la misma.

[0271] La invención también abarca los compuestos/composiciones descritos en el presente documento para el tratamiento de una afección patológica o enfermedad susceptible de mejora mediante la inhibición de la agregación de proteínas que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de al menos un compuesto/composición descrito en el presente documento.

[0272] Uso en el tratamiento del paludismo

[0273] La presente invención se refiere además a un compuesto/composición descrito en el presente documento, para su uso en el tratamiento, la prevención y/o la mejora de una enfermedad infecciosa, síntomas, complicaciones y/o secuelas de la misma. En una realización particular, la presente invención se refiere a un compuesto/composición descrito en el presente documento, para su uso en el tratamiento de una enfermedad infecciosa.

[0274] En una realización particular, la enfermedad infecciosa puede ser, pero sin limitación, el paludismo. En una realización particular, la presente invención se refiere a un compuesto/composición descrito en el presente documento, para uso en el tratamiento del paludismo.

[0275] La invención abarca también un método de tratamiento, prevención y/o mejora de una enfermedad infecciosa (por ejemplo, el paludismo), síntomas, complicaciones y/o secuelas de la misma que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto o composición de la invención.

[0276] La invención abarca también un método de tratamiento, prevención y/o mejora de una enfermedad infecciosa (por ejemplo, el paludismo), síntomas, complicaciones y/o secuelas de la misma mediante la inhibición de la agregación de proteínas que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto o composición de la invención.

[0277] La invención abarca también un método de tratamiento, prevención y/o mejora del paludismo, síntomas, complicaciones y/o secuelas del mismo que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, sal del mismo o composición de la invención. En una realización particular, la invención comprende un método de tratamiento del paludismo que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto, sal del mismo o composición de la invención.

[0278] En algunas realizaciones, la administración del compuesto/composición de la invención da como el resultado el tratamiento, la prevención o la mejora de al menos un síntoma de paludismo seleccionado del grupo que consiste en: fiebre, tos, escalofríos, temblores, cefalea, mialgias, dolor muscular o articular, malestar general, sudoración profusa, fatiga, postración, náuseas, vómitos, diarrea, dolor abdominal, respiración rápida, alta frecuencia rápida, anemia, acidosis, convulsiones, coma, heces sanguinolentas, insuficiencia renal, edema pulmonar, ictericia y/o baja saturación de oxígeno en sangre, particularmente una saturación de oxígeno SaO<2>o SpO<2>< 92 %.

[0279] Como sabe el experto en la materia, SaO<2>es una medición alternativa de la saturación de oxígeno en sangre, que se refiere a la saturación de oxígeno medida en las arterias y la última se refiere a la saturación de oxígeno medida por pulsioximetría. En esta descripción pueden usarse indistintamente medidas de SaO<2>equivalentes a medidas de SpO<2>. En algunas realizaciones, la administración del compuesto/composición de la invención produce al menos un resultado (es decir, efecto) seleccionado, pero sin limitación, del grupo que consiste en:

[0280] - reducción de la transmisión del parásito a los mosquitos;

[0281] - remisión del paludismo;

[0282] - reducción de la duración de los síntomas del paludismo;

[0283] - reducción de la gravedad de los síntomas del paludismo (por ejemplo, reducción del ingreso en la UCI);

[0284] - reducción de la carga dePlasmodium(por ejemplo,Plasmodium falciparum);

[0285] - retraso de la progresión de la enfermedad;

[0286] - mejora de la saturación de oxígeno en sangre; y

[0287] - reducción de la duración de la baja saturación de oxígeno en sangre (es decir, hipoxemia).

[0288] En algunas realizaciones, la administración del compuesto/composición de la invención al sujeto puede evitar la hospitalización o reducir el tiempo de hospitalización, evitar el ingreso en la UCI (es decir, eliminar la necesidad de tratamiento en la UCI), retrasar la necesidad de tratamiento en la UCI, reducir (acortar) el tiempo de tratamiento en la UCI, reducir la tasa de mortalidad de los pacientes, aumentar la tasa de supervivencia de los pacientes, reducir la probabilidad de muerte del paciente, aumentar las posibilidades de supervivencia del paciente, disminuir el riesgo de muerte del paciente, reducir la gravedad de al menos un síntoma, reducir la gravedad de al menos una complicación, reducir la gravedad de al menos una secuela, reducir la duración de al menos un síntoma, reducir la duración de al menos una complicación, reducir la duración de al menos una secuela, reducir la transmisión de enfermedades o cualquier combinación de los mismos. En consecuencia, la presente divulgación proporciona métodos para evitar o reducir la hospitalización, reducir (acortar) el tiempo de tratamiento en la UCI, retrasar la necesidad de tratamiento en la UCI, evitar el ingreso en la UCI (es decir, eliminar la necesidad de tratamiento en la UCI), reducir la tasa de mortalidad de los pacientes, aumentar la tasa de supervivencia de los pacientes, reducir la probabilidad de muerte del paciente, aumentar las posibilidades de supervivencia del paciente, disminuir el riesgo de muerte del paciente, reducir la gravedad de al menos un síntoma, reducir la gravedad de al menos una complicación, reducir la gravedad de al menos una secuela, reducir la duración de al menos un síntoma, reducir la duración de al menos una complicación, reducir la duración de al menos una secuela, reducir la transmisión de enfermedades o cualquier combinación de los mismos, en un sujeto y comprende administrar el compuesto/composición al sujeto.

[0289] Uso en el tratamiento de otras enfermedades

[0290] Como se ha descrito anteriormente, los EJEMPLOS 3-5 de la presente invención proporcionan pruebas de la capacidad de los compuestos descritos en el presente documento para inhibir la agregación de proteínas (por ejemplo, proteínas β-amiloides). Además, la presente invención proporciona pruebas de la capacidad de los compuestos para desensamblar también proteínas agregativas (EJEMPLO 10). Por lo tanto, las pruebas del presente documento muestran el potencial de los compuestos y composiciones de la presente invención para tener un efecto positivo en el tratamiento, la prevención o la mejora de una enfermedad, síntomas, complicaciones y/o secuelas de la misma, donde la enfermedad se caracteriza por la agregación de proteínas.

[0291] Por lo tanto, la presente invención también se refiere a los compuestos/composiciones descritos en el presente documento para su uso en el tratamiento, la prevención y/o la mejora de enfermedades caracterizadas por la agregación de proteínas, síntomas, complicaciones y/o secuelas de la misma. Como alternativa, la invención se refiere al uso de los compuestos descritos en el presente documento para la fabricación de una formulación o medicamento para el tratamiento de una enfermedad caracterizada por la agregación de proteínas. La invención abarca también un método de tratamiento de una enfermedad caracterizada por la agregación de proteínas, que comprende administrar al menos un compuesto o composición descritos en el presente documento.

[0292] Los agregados proteínicos, tales como los amiloides y los priones, se descubrieron por primera vez en las enfermedades neurodegenerativas y se atribuyeron rápidamente a un estado patológico de la proteína, que de otro modo estaría correctamente plegada. Muchas patologías se refieren a un fallo en el plegamiento de las proteínas y a la agregación de intermedios parcialmente plegados, incluyendo las enfermedades de Alzheimer, Parkinson y Huntington, la esclerosis lateral amiotrófica, encefalopatías espongiformes transmisibles tales como la enfermedad de Creutzfeldt-Jacob y la tembladera, y la ataxia espinocerebelosa, por nombrar solo algunas. También se ha demostrado la citotoxicidad de la agregación de proteínas en la raíz del árbol evolutivo, donde la susceptibilidad de las bacterias al mal plegamiento de las proteínas se ha propuesto como diana de futuros antibióticos.

[0293] Por consiguiente, en una realización, la enfermedad puede ser, pero sin limitación, una enfermedad neurodegenerativa o una infección bacteriana. En una realización particular, la enfermedad es una enfermedad neurodegenerativa. En particular, la enfermedad neurodegenerativa es una enfermedad conformacional.

[0294] En una realización particular, la enfermedad neurodegenerativa puede ser, pero sin limitación, la enfermedad de Alzheimer (EA), la enfermedad de Parkinson (EP), la enfermedad de Huntington (EH), la esclerosis lateral amiotrófica (ELA), la enfermedad priónica (EPr), la enfermedad de Gehrig, la fibrosis quística, la enfermedad de Gaucher, la demencia fronto-temporal (DFT), la degeneración corticobasal, la parálisis supranuclear progresiva (PSP), la encefalopatía traumática crónica (ETC), la atrofia multisistémica (AMS), la atrofia muscular espinal (AME), la demencia con cuerpos de Lewy (DCL) y enfermedades de las motoneuronas (EMN).

[0295] En una realización particular, la enfermedad priónica puede ser, pero sin limitación, la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob (ECJ), la enfermedad de Creutzfeldt-Jakob variante (ECJv), la tembladera y la ataxia espinocerebelosa (AEC), el síndrome de Gerstmann-Straussler-Scheinker, el insomnio familiar fatal o el Kuru.

[0296] Productos que comprenden los compuestos/composiciones

[0297] En algunas realizaciones, la composición descrita en el presente documento está en una forma farmacéutica, tal como una cápsula, un polvo, una suspensión, un comprimido, una crema tópica o una pomada.

[0298] La expresión "forma farmacéutica" se entiende en su sentido más amplio, incluyendo cualquier composición que comprenda un principio activo, en este caso, un compuesto de fórmula (I) o la composición descrita en el presente documento junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable (también denominado nutracéuticamente aceptable o aceptable en veterinaria). La expresión "forma farmacéutica" no se limita a los medicamentos, sino que incluye, por ejemplo, composiciones farmacéuticas, composiciones nutracéuticas o composiciones veterinarias. Una forma farmacéutica puede adoptar diferentes nombres dependiendo de la vía de aprobación reglamentaria del producto y también dependiendo del país.

[0299] Una composición nutracéutica también puede denominarse, por ejemplo, complemento alimenticio o complemento dietético. Se entiende por composición nutracéutica una preparación o producto destinado a complementar la dieta, hecho de compuestos por lo general utilizados en productos alimenticios, que proporcionan nutrientes o ingredientes beneficiosos que por lo general no se ingieren en la dieta normal o que pueden no consumirse en cantidades suficientes. Las composiciones nutracéuticas por lo general se comercializan "sin receta médica", es decir, sin prescripción.

[0300] En algunas realizaciones, la composición descrita en el presente documento se formula como forma farmacéutica en la que los compuestos descritos en el presente documento son el único agente activo o se mezclan con uno o más agentes activos y/o se mezclan con excipientes farmacéuticamente aceptables/nutracéuticamente aceptables/aceptables en veterinaria. En particular, el agente o agentes activos adicionales son otros agentes antipalúdicos que no son antagonistas de los compuestos descritos en el presente documento que forman la composición de la invención. Dependiendo de la formulación, el agente antipalúdico adicional puede añadirse solo o junto con portadores o ingredientes adecuados.

[0301] La expresión "farmacéuticamente aceptables/nutracéuticamente aceptables/aceptables en veterinaria" está reconocida en la técnica e incluye excipientes, compuestos, materiales, composiciones, portadores, vehículos y/o formas farmacéuticas que son, dentro del alcance del buen criterio médico, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de un sujeto (por ejemplo, un ser humano) sin toxicidad excesiva, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, acordes con una relación beneficio/riesgo razonable. Cada portador, excipiente, etc. también debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con los otros ingredientes de la formulación. Pueden encontrarse portadores, excipientes, etc. adecuados en los textos farmacéuticos/nutracéuticos/veterinarios habituales.

[0302] Por lo tanto, algunas realizaciones de la invención se refieren a una composición farmacéutica, una composición nutracéutica y una composición veterinaria que comprenden un compuesto de la invención descrito en el presente documento junto con al menos un excipiente farmacéuticamente aceptable/nutracéuticamente aceptable/aceptable en veterinaria como se ha descrito anteriormente. Los excipientes se seleccionan, sin limitación, del grupo que comprende: cargas/diluyentes/agentes espesantes, aglutinantes, antiadherentes, disgregantes, recubrimientos, agentes antiaglomerantes, antioxidantes, lubricantes, edulcorantes, aromatizantes, colores o tensioactivos.

[0303] En cada caso, la presentación de la composición se adaptará al tipo de administración utilizada. Por lo tanto, la composición puede presentarse en forma de soluciones o en cualquier otra forma de administración clínicamente admisible y en una cantidad terapéuticamente eficaz. La composición farmacéutica puede formularse, por lo tanto, en preparaciones sólidas, semisólidas o líquidas, tales como comprimidos, cápsulas, polvos (tales como los derivados de liofilización (secado por congelación) o secado al aire), gránulos, soluciones, supositorios, geles o microesferas. En una realización particular, la composición se formula para su administración en forma líquida o forma sólida.

[0304] En una realización particular, la composición está en forma sólida tal como comprimidos, pastillas para chupar, dulces, comprimidos masticables, chicles, cápsulas, sobres, polvos, gránulos, partículas recubiertas o comprimidos recubiertos, píldoras, trociscos, comprimidos y cápsulas gastrorresistentes, tiras y películas dispersables. Más particularmente, la composición está en forma de una cápsula, un polvo, un comprimido, una píldora, pastillas para chupar, sobres, barras o gránulos. En una realización más particular, la composición está en forma de una píldora, un comprimido o una cápsula.

[0305] En otra realización, la composición está en forma líquida tal como soluciones orales, gotas, suspensiones (por ejemplo, aceite), emulsiones y jarabes.

[0306] En algunas realizaciones, la composición está en forma de una suspensión oleosa que se administra sola o mezclada con un líquido. Esta forma es particularmente útil para niños y bebés. La suspensión oleosa comprende al menos un aceite comestible tal como aceite de oliva, aceite de maíz, aceite de soja, aceite de linaza, aceite de girasol o aceite de arroz. El aceite está presente en una cantidad de, por ejemplo, al menos el 70 % peso/peso. En una realización particular, la suspensión oleosa comprende también al menos un excipiente que es un emulsionante, estabilizante o agente antiaglomerante, en una cantidad del 0,1-15 % p/p. Son agentes adecuados el dióxido de silicio, gel de sílice, sílice coloidal, sílice precipitada, talco, silicato de magnesio, lecitina, pectina, almidón, almidones modificados, goma konjac, goma xantana, goma gellan, carragenano, alginato de sodio, mono o diglicéridos de ácidos grasos tales como monoestearato de glicerol o monooleato de glicerol y ésteres cítricos de mono o diglicéridos. En particular, las composiciones comprenden compuestos de fórmula (I) donde los contra aniones son ácidos grasos.

[0307] Los comprimidos orales con frecuencia se trituran para facilitar su ingestión a los niños. Por consiguiente, en otra realización, la composición está en forma de un jarabe, gránulos, polvos o comprimidos que pueden disolverse en agua. En particular, la composición comprende además un agente aromatizante.

[0308] En una realización particular, los compuestos/composiciones de la invención se formulan para la administración oral. Se prefiere la administración oral para el paludismo no complicado (la mayoría de los casos en residentes de áreas endémicas) y como prevención (por ejemplo, para viajeros a áreas endémicas).

[0309] En otras realizaciones, por ejemplo, en casos de paludismo grave, los compuestos/composiciones de la invención pueden estar en forma de un inyectable para, por ejemplo, la administración intravenosa o intraperitoneal.

[0310] La composición de la invención se dirige también a las fases de mosquito del parásito del paludismo e inhibe la maduración de algunas de ellas, por lo que también puede suministrarse directamente a los mosquitos para bloquear en el insecto el ciclo de vida delPlasmodium.Esta estrategia debería evitar los costosos ensayos clínicos y, por lo tanto, conduciría a una formulación mucho menos cara.

[0311] Por lo tanto, en otra realización, la composición se administra directamente contra los mosquitos. En particular, la composición se administra contra hembras de mosquitosAnopheles. En otra realización, la composición se administra en combinación con atrayentes de mosquitos. Más particularmente, la composición está en forma de dispensadores o pulverizadores, que pueden suministrarse en superficies tales como paredes o mosquiteras.

[0312] Proceso para la preparación de compuestos de fórmula (I)

[0313] La presente invención también se refiere a un proceso para la preparación de compuestos de fórmula (I) que comprende hacer reaccionar 4-metilpiridinas de fórmula (II) con reactivos alquilantes de fórmula (III), donde X es un grupo saliente común, tal como haluro, aciloxi, sulfonato o sulfato, seguido de hacer reaccionar el compuesto de fórmula (IV) resultante con un 4-aminobenzaldehído de fórmula (V), y, seguido, en caso necesario, de transformación convencional de los grupos funcionales presentes en los radicales R<1>-R<8>. El experto en la materia ha de entender que los reactivos utilizados en el proceso de preparación se seleccionan de acuerdo con los radicales del compuesto del cuarto aspecto de la invención destinado a prepararse.

[0316]

[0318] Ejemplos

[0319] EJEMPLO 1: Efecto inhibidor de AID-X-2020 sobre P. falciparum in vitro

[0320] Los inventores de la presente invención realizaron un estudio del efecto antipalúdico de AID-X-2020, en comparación con compuestos conocidos por su actividad antipalúdica y colorantes en cultivosin vitrodeP. falciparum.

[0321] 1.1. Materiales y métodos

[0322] 1.1.1 Aspectos generales de los procedimientos de síntesis

[0323] Todos los reactivos y disolventes se obtuvieron de proveedores comerciales y se usaron sin purificación adicional. La cromatografía automática en columna ultrarrápida se realizó en un CombiFlash Rf 150 (Teledyne Isco) con cartuchos de gel de sílice prerrellenados RediSep Rf. Los puntos de fusión se determinaron en tubos capilares abiertos con un aparato de punto de fusión MFB 595010M Gallenkamp. Los espectros de IR se ejecutaron en un espectrofotómetro Perkin-Elmer Spectrum RX I. Los valores de absorción se expresan como números de onda (cm<-1>). Se registraron espectros de RMN<1>H de 400 MHz y espectros de RMN<1>H de 500 MHz/<13>C de 125 MHz en un espectrómetro Varian Mercury 400 y un espectrómetro Bruker Avance Neo 500 MHz, respectivamente, en los Centres Cientifics i Tecnològics de la Universitat de Barcelona (CCiTUB). Los desplazamientos químicos se indican en ppm (escala δ) con respecto a las señales del disolvente (DMSO-d<6>a 2,50 y 39,5 ppm en los espectros de RMN de<1>H y<13>C, respectivamente; CD<3>OD a 3,31 ppm en los espectros de RMN<1>H) y las constantes de acoplamiento se indican en hercios (Hz). Los espectros de masas de alta resolución se realizaron en los CCiTUB con un espectrómetro de LC/MSD TOF Agilent Technologies.

[0324] 1.1.2 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (AID-X-2020) Una mezcla de 1,10-dibromodecano (1,50 g, 5,00 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (1,2 ml, 1,14 g, 10,7 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (5 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 40 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío,se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 40 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío,se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (2,48 g, 96 %) en forma de un aceite de color pardo que solidificó al reposar; pf: 69-71 °C; IR (RTA) v: 3443, 3396, 3027, 2988, 2921, 2851, 1635, 1512, 1483, 1471, 1391, 1224, 1143, 1031, 870, 838, 710, 597, 559 cm<-1>; RMN<1>H (500 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,20-1,32 (m, 12H), 1,89 (tt,J = J'= 7,5 Hz, 4H), 2,40 (s, 6H), 2,52 (s, 6H), 4,50 (t,J =7,5 Hz, 4H), 7,95 (d,J= 6,0 Hz, 2H), 8,85 (dd,J= 6,0 Hz,J' =1,5 Hz, 2H), 8,96 (s a, 2H); RMN<13>C (125 MHz, DMSO-d<6>)δ: 16,3 (2 CH<3>), 19,6 (2 CH<3>), 25,4 (2 CH<2>), 28,3 (2 CH<2>), 28,7 (2 CH<2>), 30,5 (2 CH<2>), 59,7 (2 CH<2>), 127,9 (2 CH), 137,6 (2 C), 141,5 (2 CH), 142,8 (2 CH), 157,6 (2 C); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<24>H<38>N<2>]<2+>/2: 177,1512, encontrado 177,1513.

[0325] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (514 mg, 1,00 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (390 mg, 2,20 mmol) en n-butanol (5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 4 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/solución de amoníaco 7N en MeOH 9:1), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (351 mg, 42 %) en forma de un aceite de color rojo que se solidificó al reposar; pf: 173-174 °C; IR (RTA) v: 3399, 2975, 2927, 2853, 1641, 1574, 1520, 1479, 1404, 1351, 1311, 1260, 1219, 1186, 1128, 1076, 1011, 958, 807, 572 cm<-1>; RMN<1>H (500 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,13 (t,J =7,0 Hz, 12H), 1,21-1,31 (m, 12H), 1,87 (tt,J= 7,5 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 3,43 (c,J= 7,0 Hz, 8H), 4,37 (t,J =7,5 Hz, 4H), 6,74 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,08 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,64 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,88 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,26 (d,J= 6,5 Hz, 2H), 8,66 (dd, J = 6,5 Hz,J'= 1,5 Hz, 2H), 8,73 (s a, 2H); RMN<13>C (125 MHz, DMSO-d<6>)δ: 12,5 (4 CH<3>), 16,5 (2 CH<3>), 25,5 (2 CH<2>), 28,4 (2 CH<2>), 28,7 (2 CH<2>), 30,5 (2 CH<2>), 43,9 (4 CH<2>), 58,9 (2 CH<2>), 111,3 (4 CH), 113,4 (2 CH), 119,8 (2 CH), 122,1 (2 C), 130,8 (4 CH), 132,9 (2 C), 140,5 (2 CH), 142,4 (2 CH), 143,3 (2 CH), 149,5 (2 C), 152,4 (2 C); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<46>H<64>N<4>]<2+>/2: 336,2560, encontrado: 336,2550.

[0326] 1.1.3 Ensayo de inhibición del crecimiento deP. falciparum

[0327] Se sincronizaron parásitos deP. falciparumde la cepa 3D7 MRA-102 (BEI Resources, gestionada por ATCC) con sorbitol al 5 % para obtener un cultivo enriquecido en parásitos en fase de anillo. Tras el proceso de sincronización, se estableció un nuevo cultivo a 1,5 % de parasitemia y 2 % de hematocrito y se transfirieron alícuotas de 150 µl del mismo a placas de 96 pocillos.

[0328] Se realizó la caracterización de AID-X-2020 en cultivos deP. falciparum in vitroy se incluyeron otros colorantes como controles: ThT y Rojo Congo. En cada pocillo se añadieron las cantidades necesarias de péptidos, compuestos antipalúdicos y colorantes a diferentes concentraciones y por triplicado. También se incluyeron un control de crecimiento positivo de parásitos sin tratar y un control de crecimiento negativo de parásitos tratados con una dosis letal de cloroquina (1 µM).

[0329] Los parásitos se cultivaron durante 48 h, un ciclo de replicación completo, en condiciones de cultivo convencionales (5 % de O<2>, 5 % de CO<2>y 90 % de N<2>a 37 °C). Después del período de incubación, se mezclaron 3 µl de cultivo de cada pocillo con 197 µl de PBS que contenía Syto 11 0,1 µM (Thermo Fisher Scientific Inc), para obtener una concentración final de aproximadamente 1-10 × 10<6>células/ml.

[0330] La parasitemia se evaluó mediante citometría de flujo usando un citómetro de flujo LSRFortessa (BD Biosciences, San José, CA, EE. UU.) con los 4 láseres, configuración convencional de 20 parámetros. La población unicelular se seleccionó en un diagrama de dispersión hacia delante. La señal de fluorescencia de Syto 11 se detectó excitando las muestras a 488 nm y recogiendo la emisión con un filtro de paso de banda de 530/30 nm.

[0331] La inhibición del crecimiento se calculó tomando como valores de referencia tanto la velocidad de crecimiento del cultivo sin tratar como la velocidad de crecimiento del cultivo tratado con cloroquina. Los datos de inhibición del crecimiento se transformaron a través de ajuste sigmoidal y se usaron para determinar los valores de CI<50>de los compuestos que realmente inhibían el crecimiento del parásito.

[0332] 1.2. Resultados

[0333] Los resultados obtenidos indicaron que AID-X-2020 tiene una potente actividad antipalúdicain vitro,con una CI<50>de 90 ± 2 nM, comparable e incluso superior a otros compuestos descritos anteriormente que tienen actividad antipalúdica (Tabla 2). Otros colorantes de agregación de proteínas, tales como ThT y Rojo Congo, no presentaron una actividad antiplasmódica significativa.

[0334] Tabla 2. Actividad anti alúdicain vitrode diferentes com uestos.

[0337]

[0338]

[0340] Tabla 3. Estructuras uímicas de comuestos sometidos a ensao ara determinar la actividad anti alúdicain vitro.

[0341]

[0342] continuación

[0343]

[0344] continuación

[0347]

[0349] AID-X-2020 pertenece a una familia química en la que hasta ahora no se ha descrito ningún fármaco antipalúdico. Por lo tanto, se realizó un estudioin vitrosobre el efecto de inhibición de AID-X-2020 sobre cada fase del parásito.EJEMPLO 2: Efecto de inhibición de AID-X-2020 sobre cada fase del parásito P. falciparum in vitro

[0350] El objetivo de este experimento era la evaluación del efecto de inhibición de AID-X-2020 sobre cada fase del parásito: anillos, trofozoítos tempranos, trofozoítos maduros y esquizontes.

[0351] 2.1. Materiales y métodos

[0352] Para el análisis de inhibición de la fase de crecimiento, se sincronizaron cultivos deP.falciparumen las fases de anillo o trofozoíto mediante tratamiento repetido con sorbitol al 5 % o Percoll al 70 %, respectivamente. La mitad de cada cultivo permaneció sin tratar y la otra mitad se trató con la CI<80>de AID-X-2020. En diferentes puntos temporales, las muestras de cultivo se tiñeron con Giemsa y el número de anillos, trofozoítos tempranos y maduros y esquizontes se contó mediante examen microscópico de al menos 100 GRp para cada muestra. Las imágenes se tomaron con un microscopio Nikon Eclipse 50i equipado con una cámara DS-Fi1 (Nikon).

[0353] 2.2. Resultados

[0354] Cuando se añadió a fases de anillo en su CI<80>, AID-X-2020 detuvo el ciclo de vida del patógeno en la fase de trofozoíto (FIG.1), mientras que cuando el fármaco se administró a cultivos que contenían formas tardías dePlasmodium, los parásitos pudieron completar su maduración intraeritrocítica y salir del GRp, aunque su crecimiento en el interior de los nuevos GR invadidos se detuvo en la fase de trofozoíto temprano.

[0355] EJEMPLO 3: Efecto de AID-X-2020 sobre la agregación in vitro de Aβ40

[0356] Con el fin de determinar el mecanismo de acción de AID-X-2020 sobre la inhibición deP.falciparumque se comprobó anteriormentein vitro,se estudió en primer lugar el efecto de AID-X-2020 sobre la agregación de Aβ40in vitro. Se usó el fragmento 1-40 del péptido amiloide-β (Aβ40) como modelo de péptido altamente agregante para evaluar el posible efecto antiagregante de AID-X-2020. En primer lugar, se realizó un análisisin vitrode la agregación de Aβ40 mediante el ensayo de fluorescencia de ThT. En segundo lugar, para descartar la posibilidad de que la disminución de la fluorescencia de ThT se debiera a la presencia de AID-X-2020, las muestras de Aβ40 tratadas con AID-X-2020 se examinaron mediante microscopía electrónica de transmisión (TEM, por sus siglas en inglés).

[0357] 3.1. Materiales y métodos

[0358] 3.1.1 Análisisin vitrode la agregación de Aβ40

[0359] Para el análisisin vitrode la agregación del fragmento 1-40 del péptido Aβ (Aβ40), se disolvió 1 mg de Aβ40 (GenScript) en 500 µl de 1,1,1,3,3,3-hexafluoro-2-propanol (HFIP, Fluka) con agitación enérgica durante 1 h y se sometió a ultrasonidos durante 30 min en un baño de ultrasonidos. Posteriormente, la solución se agitó durante 1 h y se mantuvo a 4 °C durante 30 min. Se prepararon alícuotas, HFIP se evaporó bajo una corriente de nitrógeno durante unos segundos y el péptido se almacenó a -20 °C. Antes de su uso, las alícuotas de Aβ40 se resuspendieron con DMSO, se sometieron a ultrasonidos durante 10 min, se diluyeron a 25 µM en PBS con diferentes concentraciones de compuestos de ensayo (AID-X-20200,1 µM, AID-X-20201 µM y AID-X-202010 µM) y se incubaron durante 24 h a 37 °C y 1400 rpm. La muestra final siempre contenía menos del 5 % de DMSO para evitar la interferencia de este disolvente en la formación de fibrillas amiloides de Aβ40. Por último, el tratamiento con ThT se realizó como se ha descrito anteriormente.

[0360] Se añadió ThT 25 µM a cada muestra y se midió la fluorescencia excitando las muestras a 440 nm y registrando la emisión de 465 nm a 600 nm. Se realizó una medición en blanco de cada muestra antes de añadir ThT.

[0361] 3.1.2 Microscopía electrónica de transmisión (MET)

[0362] Para el análisis de agregación de péptidosin vitro, se preparó una solución de Aβ4025 µM como se ha explicado anteriormente y se incubó durante 48 h a 37 °C y 1400 rpm en presencia de concentraciones crecientes de AID-X-2020 (0, 0,1, 1 y 10 µM). Una rejilla de cobre recubierta de carbono se depositó sobre una gota de 50 µl de cada solución durante 30 min. A continuación, el exceso de líquido se eliminó con papel de filtro y la rejilla se colocó encima de una gota de agua durante 30 s y, por último, se tiñó negativamente durante 2 min con 20 µl de acetato de uranilo al 2 %. Las muestras se observaron usando un microscopio electrónico de transmisión JEM 1010 (JEOL Ltd., Japón). Las imágenes se obtuvieron con una cámara CCD Orius (Gatan, Inc., EE. UU.).

[0363] 3.2. Resultados

[0364] De acuerdo con los ensayos de fluorescencia de ThT (FIG.2(A)), AID-X-2020 es un inhibidor potente de la agregación de Aβ40. Incluso a 10 nM, muy por debajo de su CI<50>en cultivos deP. falciparum, AID-X-2020 impide en gran medida la fibrilogénesis de Aβ40. Por lo tanto, la inhibición de la agregación de proteínas podría ser el principal mecanismo responsable de la actividad antipalúdica de este compuesto.

[0365] Para descartar la posibilidad de que la disminución de la fluorescencia de ThT observada en los ensayos de agregación de Aβ40 fuera resultado de un impedimento estérico impuesto a la unión de ThT a las fibrillas amiloides por la presencia de AID-X-2020, se usó TEM para examinar muestras de Aβ40 tratadas con AID-X-2020 (FIG.2(B)). Las imágenes de TEM mostraron que los agregados de fibrillas amiloides de las muestras que contenían AID-X-2020 eran más pequeños y estaban más fragmentados que los presentes en Aβ40 sin tratar de control, respaldando la función de este compuesto como inhibidor de la agregación de proteínas.

[0366] EJEMPLO 4: Estudio de la correlación entre la actividad antipalúdica in vitro de AID-X-2020 y la alteración de la homeostasis proteica en los parásitos tratados

[0367] Para explorar si existía una correlación entre la actividad antipalúdicain vitroobservada de AID-X-2020 y una alteración de la homeostasis proteica en los parásitos tratados, se realizaron transferencias puntuales y transferencias Western de extractos proteicos de cultivos deP.falciparumtratados con AID-X-2020, donde se examinó la presencia de proteínas ubiquitinadas y de fibrillas amiloides.

[0368] 4.1. Materiales y métodos

[0369] Los cultivos de la cepa 3D7 deP.falciparumse sincronizaron con sorbitol en fases de anillo, y después de 24 h se trataron durante 90 min con concentraciones de AID-X-2020 que variaron de 33 nM a 33 µM. Después de ese tiempo, los cultivos se centrifugaron y los sedimentos se lavaron una vez con PBS helado complementado con cóctel inhibidor de proteasas sin EDTA (PIC, Roche; 1 comprimido de PIC/10 ml PBS). Para transferencias Western antiubiquitina, el PBS también se complementó con N-etilmaleimida 20 mM. Una vez lavados, los sedimentos de parásitos se trataron con saponina al 0,15 % a 4 °C durante 15 min y se lavaron por centrifugación (10.000× g, 15 min, 4 °C) con PBS debidamente complementado hasta que no se observó hemoglobina en el sobrenadante. Los extractos de proteínas se cuantificaron con el ensayo del ácido bicinchonínico (ThermoFisher Scientific), siguiendo las instrucciones del fabricante.

[0370] Para transferencias puntuales, se aplicaron puntualmente gotas de 4 µl de extracto de saponina que contenían 0,5 o 1 mg/ml de proteína sobre una membrana de nitrocelulosa. Una vez que los extractos de proteínas fueron totalmente absorbidos por las membranas, se incubaron durante 3 h en solución de bloqueo: leche en polvo al 5 % en TBS-Tween (tris-base 200 mM, NaCl 1,5 M, Tween-20 al 0,1 %. Las membranas bloqueadas se lavaron 3 × 5 min con TBS-Tween y se incubaron durante la noche a 4 °C con anticuerpo policlonal de conejo contra fibrillas amiloides OC (Millipore) diluido 1:500 en solución de bloqueo o anticuerpo monoclonal de ratón contra espectrina α/β (Sigma) 1:10.000 en TBS-Tween.

[0371] Para las transferencias Western, se incubaron 15 µg de proteínas extraídas con saponina durante 5 min a 95 °C diluidas en solución de Laemmli (SDS 0,14 M, tris-HCl 0,125 M, pH 6,8, glicerol al 20 %, 2-mercaptoetanol al 10 %, azul de bromofenol 3 mM) y se resolvieron mediante SDS-PAGE en geles de acrilamida bis-tris al 12 % (Bio-Rad) que se ejecutaron a 80 V hasta que las muestras entraron en el gel de resolución y a 120 V posteriormente. Las proteínas se transfirieron del gel a membranas de difluoruro de polivinilideno activadas con metanol al 100 %. Después de la transferencia, las membranas se bloquearon con solución de bloqueo durante 1 h a temperatura ambiente, se lavaron 3 × 5 min con TBS-Tween y se sondaron durante la noche a 4 °C con anticuerpo policlonal de conejo antiubiquitina (Cell Signaling Technology) diluido 1:1.000 en solución de bloqueo, o anticuerpo monoclonal de ratón antiespectrina α/β (Sigma) 1:10.000 en TBS-Tween. A continuación, las membranas se lavaron 5 veces con TBS-Tween y se incubaron durante 1 h con anticuerpo IgG de cabra anti-conejo (Upstate) o de cabra anti-ratón (Amersham Life Science, Inc.) conjugado con peroxidasa de rábano picante diluido 1:10.000 en TBS-Tween. Tras sondar con anticuerpos secundarios, para las membranas de transferencia puntual y transferencia Western, se realizaron cuatro lavados con TBS-Tween y un último lavado con TBS y se vertió sustrato de peroxidasa (Reactivo de detección de transferencia Western ECL Prime, Amersham Life Science, Inc.) sobre la membrana y se midió la señal quimioluminiscente en un lector LAS 4000 (ImageQuant) a diferentes tiempos de exposición.

[0372] 4.2. Resultados

[0373] A la concentración de 90 nM, próxima a su CI<50>in vitro,

el tratamiento con AID-X-2020 de los cultivos de P.falciparumprodujo una reducción de las proteínas ubiquitinadas a lo largo del tiempo (FIG.3(A)), coherente con un efecto inhibidor de la agregación de proteínas. La exposición durante sólo 90 min a AID-X-2020 > 3 µM inhibió la formación de fibrillas amiloides (FIG.3(D)), pero produjo un aumento simultáneo de proteínas ubiquitinadas (FIG.3(C)). Estos resultados sugieren un efecto causal entre la disminución de la agregación de proteínas y un efecto perjudicial sobre el parásito que, en última instancia, conduce a una rápida desregulación generalizada de la proteostasis.

[0374] EJEMPLO 5: Ensayo sobre el efecto de la combinación de AID-X-2020 y artemisinina

[0375] Se ha descrito que la artemisina, uno de los antipalúdicos más potentes en uso, provoca daño/desplegamiento de proteínas e inhibe el plegamiento de proteínas recién sintetizadas, lo que probablemente induce la agregación de proteínas. Como se muestra en los ejemplos anteriores, AID-X-2020 parece inhibir la agregación de proteínas, la acción opuesta de la artemisinina. Por lo tanto, este estudio se realizó para confirmar la capacidad de AID-X-2020 para inhibir la agregación de proteínas.

[0376] 5.1. Materiales y métodos

[0377] Para los ensayos de AID-X-2020 y artemisinina, se prepararon diluciones en serie de ambos compuestos a diferentes relaciones de concentración (1:0, 0:1, 1:1, 1:2, 2:1, 1:5 y 5:1).

[0378] Para evaluar el efecto sinérgico de AID-X-2020 y artemisinina, los valores de CI<50>para cada compuesto individual de las mezclas se calcularon como se ha descrito anteriormente y se representaron en un isobolograma (valor "x" = CI<50>de AID-X-2020 y valor "y" = CI<50>de artemisinina). Los valores de concentración inhibidora fraccionaria (CIF) se calcularon dividiendo la CI<50>de uno de los compuestos de la mezcla por la CI<50>del mismo compuesto en la mezcla de relación 1:0 o 0:1.

[0379] 5.2. Resultados

[0380] Cuando los cultivos deP. falciparumse trataron con artemisinina y AID-X-2020 combinados en diferentes relaciones, los valores de ΣCIF resultantes fueron siempre superiores a 1,5 (FIG.3(E)), lo que indica una acción antagonista de ambos fármacos. Por lo tanto, la viabilidad del parásito fue significativamente superior a la esperada si las actividades de ambos fármacos fueran aditivas, reforzando de este modo la hipótesis de que AID-X-2020 tiene una actividad inhibidora de la agregación de proteínas que antagoniza el efecto antipalúdico de la artemisinina, y viceversa.

[0381] EJEMPLO 6: Efecto de AID-X-2020 en la fase de insecto del patógeno (la transición de gametocito a oocineto)Dado que se sabe quePlasmodiumtiene agregados de proteínas en las fases de mosquito dePlasmodium,se sometió a ensayo el efecto de AID-X-2020 en una de las etapas clave del desarrollo del patógeno en el insecto, en concreto, la transición de gametocito a oocineto. Los gametocitos son la única fase de los parásitos del paludismo presente en la circulación sanguínea capaz de transmitir la infección al mosquito vector tras su ingestión por una hembra deAnophelesque se alimente de sangre. Por lo tanto, las estrategias de bloqueo de la transmisión son uno de los principales enfoques que se están estudiando para interrumpir el ciclo de vida dePlasmodium,pero los fármacos activos en esta etapa crítica son escasos.

[0382] 6.1. Materiales y métodos

[0383] 6.1.1 Ensayo de inhibición de la transición de gametocito a oocineto

[0384] Ocho días antes de la producción de oocinetos, se administraron 200 µl de CTRP-GFP dePlasmodium berghei(que expresa GFP cuando alcanza la fase de oocineto) (Vlachou, D.et al., 2004) en solución de crioconservación (pellet de GR:RPMI:glicerol al 30 % en agua, 1:1:2) i.p. a un ratón BALB/c. Cuatro días después, este ratón fue el donante para infectar i.p. con 5×10<7>glóbulos rojos parasitados en 200 µl de PBS a tres ratones que una hora antes de la infección habían sido pretratados i.p. con fenilhidrazina (120 µl de una solución 10 mg/ml en PBS).

[0385] Para la producción de oocinetos, se recogió hasta 1 ml de sangre portadora de gametocitos de cada animal mediante punción intracardíaca y se diluyó en 30 ml de medio de oocinetos: 10,4 g/l de RPMI complementado con NaHCO<3>al 2 % p/v, hipoxantina al 0,05 % p/v, ácido xanturénico al 0,02 % p/v, penicilina 50 U/ml y estreptomicina 50 µg/ml (Invitrogen), suero fetal bovino inactivado por calor al 20 % (FBS, Invitrogen), HEPES 25 mM, pH 7,4.

[0386] El efecto de AID-X-2020 y DONE3TCI sobre la conversión de gametocitos en oocinetos se evaluó en tres réplicas independientes mediante la siembra de 120 µl de cada cultivo mezclados con concentraciones crecientes de los compuestos en placas de 96 pocillos e incubación durante 24 h a 21 °C con agitación orbital a 50 rpm.24 h después, las muestras se diluyeron 1:100 en PBS y se analizaron en un citómetro de flujo LSRFortessa<™>(BD Biosciences) configurado con los 5 láseres, configuración convencional de 20 parámetros. Se seleccionó la población de células positivas para GFP y se contó usando un láser de excitación de 488 nm y un filtro colector de emisión de 525/40 nm. Se usó el software BD FACSDiva (BD biosciences) para la recogida de datos y el software Flowing 2.5.1 (Centro de Biotecnología de Turku) para el análisis.

[0387] 6.2. Resultados

[0388] Los ensayos de inhibiciónin vitrode la transición de gametocito a oocineto en el parásito murino del paludismoPlasmodium bergheiindicaron que aproximadamente 0,5 µM de AID-X-2020 anulaban la producción de oocinetos en este modelo (FIG.4(A)). Por otra parte, el inhibidor de la agregación de proteínas DONE3TCI, que mostró una actividad antipalúdica potente en cultivosin vitrodeP. falciparum, con una CI<50>de aprox. 80 nM (Tabla 2), no tuvo un efecto observable sobre el desarrollo de oocinetos hasta una concentración de 2 µM (FIG. 4(B)). Entonces puede usarse AID-X-2020 para detener el ciclo de vida de los parásitos del paludismo en el mosquito hospedador.

[0389] EJEMPLO 7: Ensayos de toxicidad in vivo de AID-X-2020 y DONE3TCI

[0390] 7.1. Materiales y métodos

[0391] Se mantuvieron ratones BALB/c hembra y macho (Laboratorios Janvier) con acceso ilimitado a comida y agua en condiciones ambientales convencionales (20-24 °C y ciclo de luz/oscuridad de 12/12 h). Se sometieron a ensayo tres dosis de 100 µl de una solución de AID-X-2020 preparada para administrar 0,0959, 0,3069 y 0,9822 mg/kg. En primer lugar, la dosis más baja se inyectó por vía intravenosa a una hembra y un macho de ratón. Se usó una corriente de oxígeno con isoflurano al 4 % para anestesiar a los ratones, que a continuación se mantuvieron durante todo el procedimiento (menos de 3 minutos) con isoflurano al 2,5 %.

[0392] Después de la administración, los ratones se observaron y se siguieron diferentes parámetros relacionados con su comportamiento (letargo, alteraciones de la motilidad, convulsiones, coma, automutilación, agresividad, vocalizaciones, movimientos estereotipados) y condiciones físicas (dolor, alteraciones respiratorias, taquicardia o bradicardia, deshidratación, pérdida de pelo, pérdida de peso corporal, dermatitis, mala higiene, prurito, lagrimeo). Si después de 48 h no se observaron efectos nocivos, se administró la siguiente dosis a otros dos ratones macho y hembra. Se observó a todos los ratones durante 14 días después del tratamiento para detectar efectos secundarios a largo plazo.

[0393] El cuidado de los animales y el protocolo seguido en este caso se adhirieron a las directrices nacionales e internacionales específicas establecidas en el Real Decreto español 53/2013, que se basa en el Reglamento europeo 2010/63/UE.

[0394] 7.2. Resultados

[0395] Los ensayos de toxicidadin vivoen ratones indicaron que AID-X-2020 y DONE3TCI empezaron a inducir efectos adversos en ratones hembra a los 10 mg/kg. En ratones macho se empezó a observar toxicidad a los 17 y 3 mg/kg para AID-X-2020 y DONE3TCI, respectivamente.10 mg/kg es entonces una dosis máxima provisional de referencia para futuros ensayos preclínicos.

[0396] En cultivos de células endoteliales de la vena umbilical humana, se determinó que la concentración de AID-X-2020 necesaria para la reducción de la viabilidad celular en un 50 % (CC<50>) era de 3,4 µM, lo que dio lugar a un índice terapéutico (CC<50>/CI<50>) de 37,8. A pesar de esta toxicidadin vitrorelativamente elevada, los ensayos de toxicidadin vivoindicaron que AID-X-2020 comienza a inducir efectos adversos en ratones hembras y machos a 10 y 17 mg/kg, respectivamente.

[0397] EJEMPLO 8: Efecto inhibidor de otros compuestos de fórmula (I) sobre P. falciparum in vitro

[0398] Se sintetizaron dieciocho compuestos, que son representativos de compuestos incluidos en la fórmula (I) distintos de AID-X-2020, y se realizó un estudio del efecto antipalúdico de diecisiete de estos compuestos. A continuación se comparó la actividad antipalúdica de estos compuestos con la de AID-X-2020 (CI<50>= 0,09 µM).

[0399] 8.1 Materiales y métodos

[0400] 8.1.1 Aspectos generales de los procedimientos de síntesis

[0401] Las etapas y condiciones que se refieren a aspectos generales de los procedimientos de síntesis se realizaron como se describe en la sección 1.1.1 del EJEMPLO 1.

[0402] 8.1.2 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA357) El compuesto EMA357 se preparó siguiendo las primeras etapas y condiciones que se describen para la síntesis del compuesto AID-X-2020 (sección 1.1.2 del EJEMPLO 1 - 1.<er>párrafo) hasta que se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io).

[0403] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (257 mg, 0,50 mmol) y 4-(dimetilamino)benzaldehído (149 mg, 1,00 mmol) enn-butanol (2,5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 16 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo pegajoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/solución de amoníaco 7N en MeOH 9,5:0.5 a 8:2), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (127 mg, 33 %) en forma de un aceite de color rojo; IR (RTA) v: 3390, 2925, 2852, 1640, 1573, 1525, 1478, 1435, 1364, 1310, 1218, 1185, 1170, 1128, 944, 814 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 1,29-1,43 (m, 12H), 1,97 (m, 4H), 2,55 (s, 6H), 3,06 (s, 12H), 4,40 (t,J= 7,6 Hz, 4H), 6,79 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,14 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,64 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,81 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,18 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,47 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 8,56 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<42>H<56>N<4>]<2+>/2: 308,2247, encontrado: 308,2241.

[0404] 8.1.3 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)(metil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (EMA359)

[0405] El compuesto EMA359 se preparó siguiendo las primeras etapas y condiciones que se describen para la síntesis del compuesto AID-X-2020 (sección 1.1.2 del EJEMPLO 1 - 1.<er>párrafo) hasta que se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io).

[0406] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (257 mg, 0,50 mmol) y 3-[(4-formilfenil)(metil)amino]propanonitrilo (188 mg, 1,00 mmol) enn-butanol (2,5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 16 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/solución de amoníaco 7N en MeOH 9:1), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)(metil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io} (204 mg, 48 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 130-131 °C; IR (RTA)v: 3377, 2925, 2854, 1633, 1578, 1523, 1478, 1383, 1311, 1218, 1184, 1117, 959, 808 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 1,31-1,43 (m, 12H), 1,97 (m, 4H), 2,56 (s, 6H), 2,76 (t,J= 6,8 Hz, 4H), 3,13 (s, 6H), 3,83 (t,J =6,8 Hz, 4H), 4,41 (t,J =7,6 Hz, 4H), 6,87 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,20 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,68 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,82 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,20 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,50 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 8,59 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<46>H<58>N<6>]<2+>/2: 347,2356, encontrado: 347,2348.

[0407] 8.1.4 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (EMA366) El compuesto EMA366 se preparó siguiendo las primeras etapas y condiciones que se describen para la síntesis del compuesto AID-X-2020 (sección 1.1.2 del EJEMPLO 1 - 1.<er>párrafo) hasta que se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io).

[0408] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (257 mg, 0,50 mmol) y 4-(difenilamino)benzaldehído (273 mg, 1,00 mmol) enn-butanol (2,5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 16 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/solución de amoníaco 7N en MeOH 9:1 a 85:15), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (236 mg, 46 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 163-165 °C; IR (RTA) v: 3352, 3186, 2929, 2854, 1658, 1581, 1510, 1485, 1388, 1318, 1285, 1222, 1192, 1178, 1138, 973, 820, 757, 697, 571 cm<-1>; RMN<1>H (500 MHz, CD<3>OD)δ: 1,30-1,43 (m, 12H), 1,98 (tt,J=J' =7,5 Hz, 4H), 2,57 (s, 6H), 4,45 (t,J= 7,5 Hz, 4H), 7,00 (d,J= 8,5 Hz, 4H), 7,11-7,17 (m, 12H), 7,29 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,34 (ddm,J= 8,5 Hz,J'= 7,5 Hz, 8H), 7,63 (d,J= 8,5 Hz, 4H), 7,81 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,24 (d,J= 6,5 Hz, 2H), 8,57 (dd,J= 6,5 Hz,J' =1,5 Hz, 2H), 8,65 (s, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<62>H<64>N<4>]<2+>/2: 432,2560, encontrado: 432,2565.

[0409] 8.1.5 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io} (EMA368) El compuesto EMA368 se preparó siguiendo las primeras etapas y condiciones que se describen para la síntesis del compuesto AID-X-2020 (sección 1.1.2 del EJEMPLO 1 - 1.<er>párrafo) hasta que se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io).

[0410] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (257 mg, 0,50 mmol) y 4-(pirrolidin-1-il)benzaldehído (175 mg, 1,00 mmol) enn-butanol (2,5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 22 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color rojo resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 10:0 a 9,3:0,7), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io} (233 mg, 56 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 167-168 °C; IR (RTA) v: 3391, 2928, 2850, 1641, 1617, 1571, 1523, 1478, 1387, 1303, 1218, 1177, 1136, 961, 807 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,21-1,31 (m, 12H), 1,86 (m, 4H), 1,98 (t,J= 5,6 Hz, 8H), 2,48 (s, 6H), 3,01 (t,J =5,6 Hz, 8H), 4,36 (t,J= 7,6 Hz, 4H), 6,62 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,09 (d,J = 16,0Hz, 2H), 7,66 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,89 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,26 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,65 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 8,72 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<46>H<60>N<4>]<2+>/2: 334,2404, encontrado: 334,2410.

[0411] 8.1.6 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (EMA377) El compuesto EMA377 se preparó siguiendo las primeras etapas y condiciones que se describen para la síntesis del compuesto AID-X-2020 (sección 1.1.2 del EJEMPLO 1 - 1.<er>párrafo) hasta que se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io).

[0412] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (514 mg, 1,00 mmol) y 4-morfolinobenzaldehído (383 mg, 2,00 mmol) enn-butanol (5,0 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 4 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 10:0 a 9:1), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io} (281 mg, 33 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 153-155 °C; IR (RTA)v: 3390, 2925, 2851, 1642, 1580, 1519, 1478, 1447, 1428, 1381, 1358, 1307, 1247, 1222, 1187, 1134, 1110, 1049, 925, 810, 635, 604, 572 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 1,30-1,42 (m, 12H), 1,98 (tt,J=J'= 7,6 Hz, 4H), 2,57 (s, 6H), superpuesta en parte con la señal del disolvente 3,30 (t,J =4,8 Hz, 8H), 3,83 (t,J =4,8 Hz, 8H), 4,43 (t,J =7,6 Hz, 4H), 7,02 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,25 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,69 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,81 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,23 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,54 (dd,J= 6,8 Hz,J'= 1,6 Hz, 2H), 8,63 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<46>H<60>N<4>O]<2+>/2: 350,2353, encontrado: 350,2361. 8.1.7 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-5) Una mezcla de 1,4-dibromobutano (0,23 ml, 416 mg, 1,93 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (15 ml) y el sólido de color beige restante se secó al vacío,se recogió en MeOH (5 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 15 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío,se obtuvo dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (757 mg, 88 %) en forma de un sólido de color beige; pf: 109-110 °C; IR (RTA) v: 3431, 3360, 3041, 1641, 1621, 1512, 1472, 1460, 1234, 1149, 1027, 847, 706 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 2,10 (tm,J =7,2 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 2,59 (s, 6H), 4,62 (t a,J= 7,2 Hz, 4H), 7,87 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 8,71 (dd,J= 6,4 Hz,J'= 1,6 Hz, 2H), 8,81 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<18>H<26>N<2>]<2+>/2: 135,1043, encontrado: 135,1051.

[0413] Una solución de dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (669 mg, 1,55 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (604 mg, 3,41 mmol) enn-butanol (8 ml) se trató con doce gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 4 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso resultante se purificó dos veces mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/solución de amoníaco 7N en MeOH 95:5 a 85:15), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (511 mg, 44 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 275-276 °C; IR (RTA) v: 3406, 2964, 1641, 1577, 1522, 1484, 1467, 1434, 1402, 1372, 1350, 1307, 1262, 1220, 1191, 1132, 1067, 975, 810 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 1,21 (t,J= 7,2 Hz, 12H), 2,07 (m, 4H), 2,54 (s, 6H), 3,49 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 4,48 (m, 4H), 6,76 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,10 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,61 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,81 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,17 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,47 (dd,J= 6,8 Hz,J'= 1,6 Hz, 2H), 8,56 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<40>H<52>N<4>]<2+>/2: 294,2091, encontrado: 294,2098.

[0414] 8.1.8 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-8) Una mezcla de 1,8-dibromooctano (0,37 ml, 546 mg, 2,00 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) se calentó a 120 °C durante 4 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar a temperatura ambiente el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (15 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío,se recogió en MeOH (5 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 15 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío,se obtuvo dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (510 mg, 52 %) en forma de un sólido de color beige; pf: 183-184 °C; IR (RTA) v: 3459, 3026, 2925, 2853, 1639, 1511, 1484, 1460, 1444, 1393, 1337, 1230, 1141, 1020, 951, 839, 711 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 1,41 (m, 8H), 2,00 (tt,J= 7,6 Hz,J'= 7,2 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 2,59 (s, 6H), 4,53 (t,J= 7,6 Hz, 4H), 7,86 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 8,68 (dd,J= 6,4 Hz,J'= 1,6 Hz, 2H), 8,77 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<22>H<34>N<2>]<2+>/2: 163,1356, encontrado: 163,1358.

[0415] Una solución de dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (410 mg, 0,84 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (328 mg, 1,85 mmol) enn-butanol (4,5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 17 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 95:5 a 85:15), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (230 mg, 34 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 235-236 °C; IR (RTA)v: 3393, 2970, 2928, 1641, 1570, 1521, 1478, 1404, 1350, 1310, 1259, 1219, 1185, 1128, 1076, 960, 807, 702 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 1,21 (t,J =7,2 Hz, 12H), 1,41 (m, 8H), 1,87 (tt,J=J'= 7,2 Hz, 4H), 2,54 (s, 6H), 3,48 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 4,40 (t,J= 7,2 Hz, 4H), 6,76 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,10 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,61 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,79 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,16 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,46 (dd,J= 6,8 Hz,J' =1,6 Hz, 2H), 8,55 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<44>H<60>N<4>]<2+>/2: 322,2404, encontrado: 322,2417.

[0416] 8.1.9 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-25) Una mezcla de 1,9-dibromononano (0,41 ml, 577 mg, 2,02 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (665 mg, 66 %) en forma de un aceite de color pardo que se solidificó al reposar; pf: 88-90 °C; IR (RTA) v: 3435, 2933, 2852, 1638, 1505, 1469, 1335, 1228, 1152, 1138, 1023, 834, 754, 729, 707 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,17-1,31 (m, 10H), 1,88 (tt,J=J' =7,2 Hz, 4H), 2,39 (s, 6H), 2,51 (s, 6H), 4,49 (t,J =7,2 Hz, 4H), 7,94 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 8,84 (d a,J= 6,4 Hz, 2H), 8,94 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<23>H<36>N<2>]<2+>/2: 170,1434, encontrado 170,1435.

[0417] Una solución de dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (250 mg, 0,50 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (195 mg, 1,10 mmol) en n-butanol (2,5 ml) se trató con cuatro gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 4 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 95:5 a 85:15). A continuación se evaporaron las fracciones que contenían el producto deseado y el residuo se disolvió en isopropanol caliente (15 ml) y tras añadir Et<2>O (30 ml) y extraer los líquidos, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (193 mg, 47 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 138-142 °C; IR (RTA) v: 3381, 2920, 2852, 1642, 1567, 1519, 1482, 1402, 1347, 1308, 1258, 1217, 1185, 1126, 1070, 954, 807 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,13 (t,J= 7,2 Hz, 12H), 1,22-1,31 (m, 10H), 1,87 (tt,J = J'= 7,2 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 3,43 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 4,36 (t,J= 7,2 Hz, 4H), 6,74 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,08 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,64 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,87 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,26 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,66 (dd,J= 6,8 Hz,J' = 1,6 Hz, 2H), 8,73 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<45>H<62>N<4>]<2+>/2: 329,2482, encontrado: 329,2485.

[0418] 8.1.10 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)his{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-14) Una mezcla de 1,11-dibromoundecano (0,47 ml, 627 mg, 2,00 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en CH<2>Cl<2>(1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (0,98 g, 93 %) en forma de un aceite de color pardo; IR (RTA) v: 3403, 3020, 2924, 2853, 1638, 1510, 1481, 1466, 1389, 1229, 1146, 1026, 843, 707 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD) δ: 1,29-1,42 (m, 14H), 1,99 (tt,J=J' = 7,6 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 2,59 (s, 6H), 4,52 (t,J= 7,6 Hz, 4H), 7,86 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 8,67 (dd,J= 6,4 Hz,J' = 1,6 Hz, 2H), 8,76 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<25>H<40>N<2>]<2+>/2: 184,1590, encontrado: 184,1598.

[0419] Una solución de dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (396 mg, 0,75 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (293 mg, 1,65 mmol) enn-butanol (3,75 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 4 h, y a continuación se concentró a presión reducida, para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (180 mg, 28 %) en forma de un sólido de color rojo, que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional; pf: 81-82 °C; IR (RTA) v: 3389, 2924, 2847, 1641, 1572, 1522, 1478, 1405, 1351, 1310, 1259, 1217, 1186, 1157, 1133, 1075, 1008, 959, 808, 783, 701 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,12 (t,J= 6,8 Hz, 12H), 1,20-1,31 (m, 14H), 1,86 (tt,J=J' = 7,2 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 3,43 (c,J= 6,8 Hz, 8H), 4,36 (t,J = 7,2Hz, 4H), 6,74 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,08 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,64 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,88 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,26 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,65 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 8,73 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<47>H<66>N<4>]<2+>/2: 343,2638, encontrado: 343,2640.

[0420] 8.1.11 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-15) Una mezcla de 1,12-dibromododecano (656 mg, 2,00 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en CH<2>Cl<2>(1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (850 mg, 78 %) en forma de un aceite de color pardo que solidificó al reposar; pf: 82-83 °C; IR (RTA) v: 3438, 3373, 2994, 2923, 2853, 1636, 1516, 1466, 1387, 1332, 1228, 1147, 1027, 856, 837, 721, 709, 619, 592 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD) δ: 1,28-1,41 (m, 16H), 1,99 (tt,J=J' = 7,6 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 2,59 (s, 6H), 4,52 (t,J= 7,6 Hz, 4H), 7,86 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 8,68 (dd,J= 6,4 Hz,J' = 1,6 Hz, 2H), 8,77 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<26>H<42>N<2>]<2+>/2: 191,1669, encontrado: 191,1675.

[0421] Una solución de dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (379 mg, 0,70 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (273 mg, 1,54 mmol) en n-butanol (3,5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 4,5 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 95:5), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (116 mg, 19 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 112-114 °C; IR (RTA)v:3400, 2971, 2927, 2852, 1641, 1574, 1519, 1477, 1435, 1403, 1348, 1312, 1259, 1219, 1188, 1157, 1126, 1077, 961, 824, 789, 571 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>) δ: 1,13 (t,J =7,2 Hz, 12H), 1,19-1,32 (m, 16H), 1,88 (tt,J=J' = 7,2 Hz, 4H), 2,48 (s, 6H), 3,43 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 4,36 (t,J =7,2 Hz, 4H), 6,74 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,08 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,64 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,88 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,26 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,66 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 8,73 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<48>H<68>N<4>]<2+>/2: 350,2717, encontrado: 350,2721.

[0422] 8.1.12 Síntesis de diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-20)

[0423] Una mezcla de 1,2-bis(2-yodoetoxi)etano (0,27 ml, 548 mg, 1,48 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,37 ml, 353 mg, 3,29 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (620 mg, 72 %) en forma de un aceite de color pardo que se solidificó al reposar; pf: 135-136 °C; IR (RTA) v: 3426, 3029, 2983, 2937, 2878, 1636, 1510, 1476, 1450, 1369, 1353, 1327, 1297, 1247, 1230, 1217, 1139, 1102, 1091, 1026, 992, 977, 912, 886, 813, 713, 704, 609, 558 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>) δ: 2,39 (s, 6H), 2,53 (s, 6H), 3,48 (s, 4H), 3,84 (t,J= 5,2 Hz, 4H), 4,64 (t,J= 5,2 Hz, 4H), 7,95 (d,J= 6,0 Hz, 2H), 8,71 (dd,J= 6,0 Hz,J'= 1,6 Hz, 2H), 8,81 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<20>H<30>N<2>O<2>]<2+>/2: 165,1148, encontrado 165,1147.

[0424] Una solución de diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (409 mg, 0,70 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (273 mg, 1.54 mmol) enn-butanol (3,5 ml) se trató con seis gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 4,5 h, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 95:5), para proporcionar diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (200 mg, 32 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 71-72 °C; IR (RTA) v: 3417, 2967, 2920, 2859, 1640, 1567, 1519, 1477, 1435, 1404, 1350, 1307, 1258, 1218, 1184, 1154, 1128, 1072, 1009, 812, 700, 603 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,12 (t,J= 7,2 Hz, 12H), 2,44 (s, 6H), 3,43 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 3,54 (s, 4H), 3,85 (t,J =5,2 Hz, 4H), 4,53 (t,J =5,2 Hz, 4H), 6,72 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,04 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,61 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,83 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,22 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,54 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 8,61 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<42>H<56>N<4>O<2>]<2+>/2: 324,2196, encontrado: 324,2197.

[0425] 8.1.13 Síntesis de dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-28)

[0426] Una mezcla debis[2-(2-cloroetoxi)etil] éter (0,26 ml, 307 mg, 1,33 mmol), 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) y Nal (15 mg, 0,10 mmol) se calentó a 120 °C durante 4 h. A continuación, se añadió isopropanol (1,5 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (467 mg, 79 %) en forma de un aceite de color pardo; IR (RTA) v: 3371, 3043, 2923, 2871, 1639, 1510, 1480, 1449, 1233, 1086, 1026, 931, 836, 706 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>) δ: 2,38 (s, 6H), 2,52 (s, 6H), 3,38 (tm,J =4,8 Hz, 4H), 3,49 (tm,J =4,8 Hz, 4H), 3,87 (t,J =4,8 Hz, 4H), 4,67 (t,J= 4,8 Hz, 4H), 7,93 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 8,75 (dd,J= 6,4 Hz,J' = 1,6 Hz, 2H), 8,85 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<22>H<34>N<2>O<3>]<2+>/2: 187,1279, encontrado 187,1292.

[0427] Una solución de dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (190 mg, 0,43 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (164 mg, 0,93 mmol) en n-butanol (2,2 ml) se trató con cuatro gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante la noche, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 95:5 a 85:15), para proporcionar dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (55 mg, 17 %) en forma de un aceite de color rojo; IR (RTA) v: 3364, 2970, 2925, 2859, 1640, 1573, 1522, 1479, 1436, 1406, 1352, 1311, 1260, 1223, 1187, 1156, 1132, 1075, 1011, 814, 700, 607 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,12 (t,J =7,2 Hz, 12H), 2,44 (s, 6H), superpuesta en parte 3,42 (tm,J= 4,8 Hz, 4H), 3,43 (c,J = 7,2Hz, 8H), 3,52 (tm,J =4,8 Hz, 4H), 3,86 (t,J =4,8 Hz, 4H), 4,54 (t,J= 4,8 Hz, 4H), 6,73 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,05 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,62 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,85 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,22 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,57 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 8,63 (s a, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<44>H<60>N<4>O<3>]2<+>/2: 346,2327, encontrado: 346,2328.

[0428] 8.1.14 Síntesis de dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-29)

[0429] Una mezcla de 1,4-bis(bromometil)benceno (527 mg, 2,00 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) se calentó a 120 °C durante 2 h. A continuación, se añadió isopropanol (4 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (813 mg, 85 %) en forma de un sólido de color blanco; pf: > 300 °C; IR (RTA) v: 3008, 2984, 2920, 1634, 1507, 1484, 1448, 1364, 1339, 1297, 1248, 1223, 1142, 1039, 1027, 961, 931, 887, 866, 770, 744, 608, 557 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>) δ: 2,37 (s, 6H), 2,50 (s, 6H), 5,74 (s, 4H), 7,59 (s, 4H), 7,96 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 8,94 (dd,J= 6,4 Hz,J'= 1,6 Hz, 2H), 9,03 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<22>H<26>N<2>]<2+>/2: 159,1043, encontrado 159,1032.

[0430] Una solución de dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (231 mg, 0,48 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (156 mg, 0,88 mmol) en n-butanol (2 ml) se trató con cuatro gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante la noche, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 95:5). Las fracciones que contenían el producto deseado se evaporaron y el residuo aceitoso resultante se disolvió en isopropanol caliente (15 ml) y se trató con Et<2>O (40 ml), extrayendo el líquido. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (320 mg, 84 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 246-248 °C; IR (RTA) v: 3380, 2969, 2910, 1635, 1567, 1520, 1478, 1446, 1356, 1312, 1260, 1211, 1185, 1151, 1128, 1074, 1013, 970, 813, 701, 645 cm<-1>; RMN<1>H (500 MHz, DMSO-d<6>)δ: 1,12 (t,J= 7,0 Hz, 12H), 2,46 (s, 6H), 3,43 (c,J= 7,0 Hz, 8H), 5,62 (s, 4H), 6,73 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,06 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,58 (s, 4H), 7,63 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,88 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,27 (d,J= 6,5 Hz, 2H), 8,76 (dd,J= 6,5 Hz,J' = 1,5 Hz, 2H), 8,83 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<44>H<52>N<4>]<2+>/2: 318,2091, encontrado: 318,2090.

[0431] 8.1.15 Síntesis de dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-31)

[0432] Una mezcla de 1,3-bis(bromometil)benceno (527 mg, 2,00 mmol) y 3,4-dimetilpiridina (0,49 ml, 467 mg, 4,36 mmol) se calentó a 120 °C durante 2 h. A continuación, se añadió isopropanol (4 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (785 mg, 82 %) en forma de un sólido de color de color pardo; pf: 152-153 °C; IR (RTA) v: 3460, 3414, 3006, 2920, 1636, 1509, 1480, 1450, 1387, 1362, 1340, 1225, 1163, 1139, 1020, 856, 842, 740, 705, 692, 652, 613 cm<-1>; RMN<1>H (500 MHz, DMSO-d<6>)δ: 2,40 (s, 6H), 2,52 (s, 6H), 5,77 (s, 4H), 7,47-7,55 (m, 3H), 7,80 (t,J= 2,0 Hz, 1H), 7,98 (d,J= 6,0 Hz, 2H), 8,94 (dd,J= 6,0 Hz,J' = 1,5 Hz, 2H), 9,10 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<22>H<26>N<2>]<2+>/2: 159,1043, encontrado 159,1042.

[0433] Una solución de dibromuro de1,1'-[1,3-fenilenbis(metilen)]bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (231 mg, 0,48 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (156 mg, 0.88 mmol) enn-butanol (2 ml) se trató con cuatro gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante la noche, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 100:0 a 95:5). Las fracciones que contenían el producto deseado se evaporaron y el residuo aceitoso resultante se disolvió en isopropanol caliente (15 ml) y se trató con Et<2>O (40 ml), extrayendo el líquido. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io} (20 mg, 5 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 66-67 °C; IR (RTA) v: 3347, 2969, 2920, 1639, 1572, 1523, 1479, 1438, 1406, 1350, 1310, 1261, 1213, 1187, 1151, 1128, 1076, 1013, 971, 808, 785, 740, 700 cm<-1>; RMN<1>H (500 MHz, DMSO-d<6>) δ: 1,13 (t,J= 7,0 Hz, 12H), 2,48 (s, 6H), 3,43 (c,J= 7,0 Hz, 8H), 5,64 (s, 4H), 6,74 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,08 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,49-7,51 (m, 3H), 7,60 (s a, 1H), 7,64 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,90 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,29 (d,J= 7,0 Hz, 2H), 8,74 (dd,J= 7,0 Hz,J'= 1,5 Hz, 2H), 8,82 (s a, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<44>H<52>N<4>]<2+>/2: 318,2091, encontrado: 318,2090.

[0434] 8.1.16 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estireno]piridin-1-io} (PRC-39) Una mezcla de 1,10-dibromodecano (0,44 ml, 587 mg, 1,96 mmol) y 4-metilpiridina (0,43 ml, 412 mg, 4,42 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color pardo restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(4-metilpiridin-1-io) (751 mg, 79 %) en forma de un aceite de color anaranjado que se solidificó al reposar; pf: 56-57 °C; IR (RTA) v: 3350, 3013, 2920, 2852, 1638, 1516, 1469, 1379, 1219, 1171, 1030, 828, 730, 710 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>) δ: 1,17-1,31 (m, 12H), 1,87 (tt,J = J' = 7,2 Hz, 4H), 2,61 (s, 6H), 4,53 (t,J= 7,2 Hz, 4H), 7,99 (d,J= 6,4 Hz, 4H), 8,96 (d,J= 6,4 Hz, 4H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<22>H<34>N<2>]<2+>/2: 163,1356, encontrado 163,1360.

[0435] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(4-metilpiridin-1-io) (243 mg, 0,50 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (156 mg, 0,88 mmol) en n-butanol (2 ml) se trató con cuatro gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante la noche, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 100:0 a 95:5). Las fracciones que contenían el producto deseado se evaporaron y el residuo aceitoso resultante se disolvió en isopropanol caliente (15 ml) y se trató con Et<2>O (2 × 40 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estirilo]piridin-1-io} (132 mg, 33 %) en forma de un sólido de color rojo; pf: 157-159 °C; IR (RTA) v: 3404, 2969, 2920, 1646, 1572, 1521, 1471, 1434, 1403, 1348, 1325, 1272, 1192, 1169, 1150, 1011, 827, 704, 572, 561 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD) δ: 1,21 (t,J= 7,2 Hz, 12H), 1,31-1,42 (m, 12H), 1,96 (tt,J = J' = 7,2 Hz, 4H), 3,48 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 4,40 (t,J =7,2 Hz, 4H), 6,76 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,05 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,59 (d,J= 8,8 Hz, 4H), 7,83 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,95 (d,J= 6,8 Hz, 4H), 8,55 (d,J= 6,8 Hz, 4H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<44>H<60>N<4>]<2+>/2: 322,2404, encontrado: 322,2395.

[0436] 8.1.17 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-42) Una mezcla de 1,10-dibromodecano (0,44 ml, 587 mg, 1,96 mmol) y 3-bromo-4-metilpiridina (0,49 ml, 759 mg, 4,41 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color azulado restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3-bromo-4-metilpiridin-1-io) (605 mg, 48 %) en forma de un aceite de color pardo que solidificó al reposar; pf: 63-64 °C; IR (RTA) v: 3454, 3387, 2988, 2921, 2851, 1632, 1497, 1465, 1375, 1317, 1186, 1174, 1084, 1031, 864, 719, 697, 579 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>) δ: 1,19-1,32 (m, 12H), 1,90 (tt,J=J' = 7,2 Hz, 4H), 2,61 (s, 6H), 4,54 (t,J =7,2 Hz, 4H), 8,16 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 9,04 (dd,J= 6,4 Hz,J' = 1,6 Hz, 2H), 9,49 (d,J= 1,6 Hz, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<22>H<32>Br<2>N<2>]<2+>/2: 241,0461, encontrado 241,0453.

[0437] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3-bromo-4-metilpiridin-1-io) (322 mg, 0,50 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (195 mg, 1,10 mmol) en n-butanol (2 ml) se trató con cuatro gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante la noche, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/MeOH 100:0 a 90:10), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (45 mg, 9 %) en forma de un sólido de color púrpura; pf: 136-138 °C; IR (RTA) v: 3396, 2969, 2924, 2852, 1634, 1567, 1520, 1454, 1406, 1350, 1293, 1269, 1171, 1149, 1075, 1011, 806, 689, 567 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD) δ: 1,22 (t,J= 7,2 Hz, 12H), 1,31-1,43 (m, 12H), 1,97 (tt,J = J' = 7,6 Hz, 4H), 3,51 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 4,39 (t,J= 7,6 Hz, 4H), 6,79 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,24 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,64 (d,J= 9,2 Hz, 4H), 7,94 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,23 (d,J= 6,8 Hz, 2H), 8,52 (d a,J= 6,8 Hz, 2H), 9,02 (d,J= 1,2 Hz, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<44>H<58>Br<2>N<4>]<2+>/2: 400,1509, encontrado: 400,1512.

[0438] 8.1.18 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (PRC-50) Una mezcla de 1,10-dibromodecano (0,44 ml, 587 mg, 1,96 mmol) y 3-cloro-4-metilpiridina (484 mg, 3,79 mmol) se calentó a 120 °C durante 3 h. A continuación, se añadió isopropanol (2 ml) y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante 1 h. La mezcla se dejó enfriar hasta temperatura ambiente, el residuo de color pardo resultante se lavó con Et<2>O helado (2 × 20 ml) y el aceite pegajoso de color azulado restante se secó al vacío, se recogió en MeOH (1 ml) y se trató con Et<2>O frío (2 × 20 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3-cloro-4-metilpiridin-1-io) (614 mg, 58 %) en forma de un aceite de color azulado que solidificó al reposar hasta convertirse en un sólido rosa claro; pf: 167-168 °C; IR (RTA) v: 3411, 2945, 2924, 2896, 2859, 1638, 1504, 1468, 1449, 1366, 1311, 1250, 1219, 1200, 1169, 1099, 1025, 1007, 955, 865, 769, 726, 703, 596 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, DMSO-d<6>) δ: 1,21-1,31 (m, 12H), 1,90 (tt,J=J' = 7,6 Hz, 4H), 2,61 (s, 6H), 4,54 (t,J= 7,6 Hz, 4H), 8,18 (d,J= 6,4 Hz, 2H), 9,01 (dd,J= 6,4 Hz,J' = 1,6 Hz, 2H), 9,43 (d,J= 1,6 Hz, 2H); EMAR-IEN+ m/z calculado para [C<22>H<32>Cl<2>N<2>]<2+>/2: 197,0966, encontrado 197,0967.

[0439] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3-cloro-4-metilpiridin-1-io) (222 mg, 0,40 mmol) y 4-(dietilamino)benzaldehído (156 mg, 0,88 mmol) en n-butanol (1,6 ml) se trató con cuatro gotas de piperidina y la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante la noche, y a continuación se concentró a presión reducida. El residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/solución de amoníaco 7N en MeOH 100:0 a 90:10), para proporcionar dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io} (54 mg, 15 %) en forma de un sólido de color púrpura; pf: 124-126 °C; IR (RTA) v: 3396, 2967, 2924, 2852, 1633, 1572, 1520, 1455, 1405, 1349, 1294, 1269, 1176, 1150, 1074, 1037, 1012, 972, 917, 808, 699, 612, 570 cm<-1>; RMN<1>H (500 MHz, CD<3>OD)δ: 1,22 (t,J= 7,0 Hz, 12H), 1,32-1,42 (m, 12H), 1,97 (tt,J=J' = 7,5 Hz, 4H), 3,51 (c,J= 7,0 Hz, 8H), 4,39 (t,J= 7,5 Hz, 4H), 6,79 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,25 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 7,64 (d,J= 9,0 Hz, 4H), 7,96 (d,J= 16,0 Hz, 2H), 8,26 (d,J= 6,5 Hz, 2H), 8,49 (d a,J= 6,5 Hz, 2H), 8,91 (d,J= 1,5 Hz, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<44>H<58>Cl<2>N<4>]<2+>/2: 356,2014, encontrado: 356,2020.

[0440] 8.1.19 Síntesis de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)-2-hidroxiestril]-3-metilpiridin-1-io} (PRC-69)

[0441] El compuesto PRC-69 se preparó siguiendo las primeras etapas y condiciones que se describen para la síntesis del compuesto AID-X-2020 (sección 1.1.2 del EJEMPLO 1 - 1.<er>párrafo) hasta que se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io).

[0442] Una solución de dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis(3,4-dimetilpiridin-1-io) (307 mg, 0,60 mmol) y acetato de 5-(dietilamino)-2-formilfenilo (309 mg, 1,31 mmol) enn-butanol (3 ml) se trató con nueve gotas de DBU y la mezcla de reacción se agitó bajo irradiación de microondas a 140 °C, 1 bar, 80 W durante 15 min. A continuación, se concentró a presión reducida y el residuo aceitoso de color negro resultante se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida automática (CH<2>Cl<2>/isopropanol 90:10 a 75:25). Las fracciones que contenían el producto deseado se trataron con Cs<2>CO<3>en MeOH, hasta que el color cambió de rojo a azul. La solución se evaporó a presión reducida y el sólido se suspendió en CH<2>Cl<2>. La suspensión se filtró, el filtrado se evaporó y el sólido resultante se lavó con EtOAc (5 × 10 ml), extrayendo los líquidos. Tras secar el residuo al vacío, se obtuvo dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)-2-hidroxiestirilo]-3-metilpiridin-1-io} (12 mg, 2 %) en forma de un sólido de color azul; pf: 169-171 °C; IR (RTA) v: 3277, 2924, 2853, 1556, 1512, 1395, 1373, 1350, 1243, 1186, 1104, 1075, 1011, 962, 771, 682 cm<-1>; RMN<1>H (400 MHz, CD<3>OD)δ: 1,18 (t,J =7,2 Hz, 12H), 1,23-1,40 (m, 12H), 1,89 (m, 4H), 2,37 (s, 6H), 3,41 (c,J= 7,2 Hz, 8H), 4,18 (t,J =7,2 Hz, 4H), 6,01 (d,J= 2,0 Hz, 2H), 6,16 (dd,J= 9,2 Hz,J' = 2,0 Hz, 2H), 6,89 (d,J= 15,2 Hz, 2H), 7,45 (dm,J= 9,2 Hz, 2H), 7,89 (d,J= 7,2 Hz, 2H), 8,05 (d,J= 7,2 Hz, 2H), 8,11 (s a, 2H), 8,30 (d,J= 15,2 Hz, 2H); EMAR-IEN+m/zcalculado para [C<46>H<64>N<4>O<2>]<2+>/2: 352,2509, encontrado: 352,2514.

[0443] 8.1.20 Ensayo de inhibición del crecimiento deP. falciparum

[0444] El ensayo de inhibición del crecimiento deP. falciparumpara los compuestos EMA357, EMA359, EMA366, EMA368, EMA377, PRC-5, PRC-8, PRC-14, PRC-15, PRC-20, PRC-25, PRC-28, PRC-29, PRC-31, PRC-39, PRC-42 y PRC-50 se realizó siguiendo las mismas etapas y condiciones utilizados en la sección 1.1.2 del EJEMPLO 1. Los resultados obtenidos se compararon a continuación con los valores obtenidos anteriormente para AID-X-2020 (CI<50>= 0,09 µM).

[0445] 8.2. Resultados

[0446] Los resultados obtenidos indicaron que todos los compuestos presentan una buena actividad antipalúdica, especialmente EMA357, EMA359, EMA377, PRC-8, PRC-14, PRC-15, PRC-25, PRC-39, PRC-42 y PRC-50, que tienen una potente actividad antipalúdica, similar a la de AID-X-2020. En particular, PRC-25 muestra la mayor actividad antipalúdica entre los compuestos sometidos a ensayo, con una CI<50>de 47 nM (FIG.4).

[0447] Tabla 4. Actividad antipalúdicain vitrode EMA357, EMA359, EMA366, EMA368, EMA377, PRC-5, PRC-8, PRC-14,

[0449] PRC-15 PRC-20 PRC-25 PRC-28 PRC-29 PRC-31 PRC-39 PRC-42 PRC-50.

[0452]

[0454] EJEMPLO 9: AID-X-2020 también es activo contra cepas de P. falciparum resistentes a cloroquina y artemisinina

[0455] El objetivo de este experimento era evaluar si AID-X-2020 es activo contra cepas deP.falciparumresistentes a cloroquina y artemisinina y, por lo tanto, evaluar el potencial de un nuevo fármaco resistente antipalúdico en comparación con los antipalúdicos existentes.

[0456] 9.1 Materiales y métodos

[0457] 9.1.1 Ensayos de inhibición del crecimiento deP. falciparum

[0458] Se procesaron parásitosP. falciparumde cepas sensibles a cloroquina (cepa 3D7) y resistentes a cloroquina y artemisinina como se describe en la sección 1.1.3 del EJEMPLO 1.

[0459] En particular, las cepas resistentes deP.falciparumfueron las siguientes: (1) cepa W2 MRA-157 (BEI Resources, gestionada por ATCC) que es resistente a cloroquina; (2) cepas 3D7 que albergan las mutaciones K13 asociadas a la resistencia a artemisinina, ya sea M579I o R561H (ambas proporcionadas por el Dr. David A. Fidock y referenciadas en Stokes, B.H.et al., 2021); (3) Cepa Cam 3.II resistente a cloroquina y sulfadoxina/pirimetamina; y (4) cepa Cam 3.II modificada para portar mutaciones K13 asociadas a cepas resistentes a artemisinina, ya sea R561H o R539T, por lo que son cepas multirresistentes. Todas las cepas Cam 3.II (3) y (4) fueron proporcionadas por el Dr. David A. Fidock y se referencian en Straimer, J.et al., 2015 y Stokes, B.H.et al., 2021.

[0460] A continuación, se añadió a cada pocillo la cantidad necesaria de AID-X-2020 a diferentes concentraciones (0,0001, 0,001, 0,01, 1 y 10 µM) y por triplicado.

[0461] Se comparó el efecto de AID-X-2020 de cepas resistentes a cloroquina y artemisinina con la actividad de AID-X-2020 de parásitosP.falciparumde la cepa 3D7 sensibles a cloroquina.

[0462] 9.2. Resultados

[0463] Los resultados confirman que AID-X-2020 también fue muy activo contra la cepa W2 resistente a cloroquina (CI<50>de 90 ± 1 nM) y contra varias cepas resistentes a artemisinina con valores de CI<50>que varían de 90 a 160 nM, en comparación con las cepas precursoras 3D7 y Cam3.ll (FIG.5). Los resultados no muestran un aumento significativo de la CI<50>con respecto a las cepas precursoras correspondientes, excepto en el caso de M579I (valorpde 0,02); todos los demás valores p > 0,15), de acuerdo con un modo de acción de AID-X-2020 diferente del de la artemisinina. Este resultado también es coherente con la CI<50>calculada de AID-X-2020 en la cepa W2 deP falciparumresistente a cloroquina (FIG.5(A)), indistinguible de su actividad en la cepa 3D7 sensible a cloroquina.

[0464] Los resultados sugieren que la resistencia se ralentiza significativamente para AID-X-2020, una molécula que pertenece a una familia química en la que no se ha descrito ningún antipalúdico hasta la fecha. Por lo tanto, la sensibilidad a AID-X-2020 de la cepa W2 resistente a cloroquina indica que el modo de acción antipalúdico de AID-X-2020 no está relacionado con el de la cloroquina. De forma análoga, datos que muestran una sensibilidad de las cepas resistentes a artemisinina a AID-X-2020 similar a la de las líneas precursoras no resistentes correspondientes, sugieren claramente que los modos de acción antipalúdicos de ambos fármacos no están relacionados. De hecho, se observó una acción antagonista de la artemisinina y AID-X-2020 en cultivos deP. falciparum, lo que indica que sus efectos principales sobre el patógeno son opuestos (EJEMPLO 5). Por lo tanto, en estas circunstancias, puede decirse que AID-X-2020 es un nuevo fármaco antipalúdico potencialmente resistente en comparación con los antipalúdicos existentes.

[0465] EJEMPLO 10: AID-X-2020 también es capaz de desensamblar fibrillas preformadas de Aβ40

[0466] El EJEMPLO 3 confirmó que AID-X-2020 es un fuerte inhibidor de la agregación de Aβ40 en formación, lo que sugiere que la inhibición de la agregación de proteínas fue el mecanismo responsable de la actividad antipalúdica de este compuesto. En el presente ejemplo, los inventores sometieron a ensayo además la posibilidad de desagregación de péptidos agregativos ya formados.

[0467] 10.1 Materiales y métodos

[0468] 10.1.1 Ensayoin vitrode agregación y desagregación de péptidos agregativos

[0469] Para someter a ensayo el efecto de AID-X-2020 sobre las fibrillas amiloides ya formadas, se diluyeron soluciones de Aβ40 DMSO a 25 µM en PBS y se incubaron como se ha indicado anteriormente para permitir la formación de fibrillas. A continuación, Se añadió AID-X-2020 a diferentes concentraciones (AID-X-20200,1 µM, AID-X-20201 µM y AID-X-2020 10 µM) y la mezcla se incubó en las mismas condiciones durante otras 24 h. Las muestras finales siempre contenían menos del 5 % de DMSO para evitar la interferencia de este disolvente en la formación de fibrillas amiloides de Aβ40. Por último, El tratamiento con ThT y el análisis por TEM se realizaron como se describe en la sección 3.1 del EJEMPLO 3. El análisis de la inhibición de la agregación y de la desagregación realizado con péptidos agregativos presentes en proteínas deP. falciparumse realizó de la misma manera.

[0470] También se sometieron a ensayo las actividades de inhibición de la agregación y desagregación con seis péptidos agregantivos presentes en proteínas deP. falciparumcon las SEQ ID NO: 1-6 (NVNIYN, LYWIYY, NFNNIYH, NNFYYNN, LISFIL, LQSNIG) con el fin de determinar los efectos de AID-X-2020 directamente sobre los péptidos deP. falciparum. En este caso se añadió AID-X-2020 a 0,1 µM y 1 µM.

[0471] 10.2. Resultados

[0472] También se observó que AID-X-2020 a concentraciones > 90 nM desensamblaba las fibrillas Aβ40 preformadas (FIG.

[0473] 6). Tanto los ensayos de inhibición de la agregación como los de desagregaciónin vitromuestran la presencia de agregados amorfos característicos a AID-X-20200,1 µM, que podrían representar una especie intermedia entre las fibrillas maduras de Aβ40 y las estructuras protofibrilares desensambladas que se encuentran a concentraciones más altas del fármaco. Estas actividades de inhibición de la agregación y desagregación también se observaron con los seis péptidos agregativos presentes en las proteínas deP. falciparum(FIG.7).

[0474] Los resultados confirman la actividadin vitrode AID-X-2020 como inhibidor de la agregación de un péptido amiloidogénico modelo como Aβ40 y de péptidos agregativos presentes en proteínas deP. falciparum, como ya se ha demostrado en los EJEMPLOS 3, 4 y 5. El presente ejemplo demuestra además la actividad desagregante de AID-X-2020, más allá de su capacidad para inhibir la agregación de proteínas.

[0475] EJEMPLO 11: Localización subcelular de AID-X-2020 en GRp

[0476] 11.1 Materiales y métodos

[0477] 11.1.1 Microscopía de fluorescencia

[0478] Para la tinción de AID-X-2020, se incubó un cultivo de 3D7 deP.falciparumen RPMIc durante 30 min a 37 °C con 4,5 µM del compuesto y 4 µg/ml de Hoechst 33342.

[0479] Para los estudios de colocalización, se incluyeron 0,5 µM de ER Tracker<™>Verde (BODIPY<™>FL Glibenclamida, Thermo Fisher Scientific) en la solución. Las células se colocaron en un sistema de portaobjetos de cámara LabTek<™>II de 8 pocillos (Thermo Fisher Scientific), se aclararon con PBS templado y se diluyeron 1:20 para su observación en un microscopio confocal Leica TCS SP5 (Leica Camera, Mannheim, Alemania) equipado con un objetivo de 63× de 1,4 NA. Hoechst 33342 se excitó con un láser de diodo a 405 nm, ER Tracker Verde con la línea de 488 nm de un láser de argón y AID-X-2020 con un láser en estado sólido bombeado por diodo a 561 nm. Las emisiones de fluorescencia correspondientes se recogieron en los intervalos de, respectivamente, 415-460, 490-590 y 600-700 nm.

[0480] Para evitar la interferencia entre las distintas señales de fluorescencia, se realizó un barrido secuencial por líneas. Para cuantificar el coeficiente de solapamiento de Manders, las imágenes se analizaron usando el pluginJust Another Colocalization Plugin(JACoP) del software Fiji. Para evitar artefactos de fijación, todos los datos de microscopía de fluorescencia presentados en este trabajo se obtuvieron con células vivas.

[0481] 11.1.2 Microscopía óptica y electrónica correlativa (CLEM)

[0482] Se preparó un cultivo de glóbulos rojos con parasitemia del 0,5 % para CLEM permitiendo su unión a concanavalina. En resumen, a µ-Plato 35 mm, Alto, Cuadrícula-500 (ibidi GmbH, Gräfelfing, Alemania) se recubrió durante 20 min a 37 °C con una solución de concanavalina A 50 mg/ml en ddH<2>O y los pocillos se aclararon con PBS precalentado antes de la siembra de parásitos. Los GR infectados porP. falciparumse lavaron dos veces con PBS, se depositaron en el plato y se incubaron durante 10 min a 37 °C; posteriormente, los GR no unidos se lavaron con tres aclarados de PBS. A continuación, los glóbulos rojos sembrados se incubaron con AID-X-20203 µM y los núcleos se teñieron con Hoechst 333422 µg/ml. La preparación se observó con un microscopio confocal Zeiss LSM880 (Carl Zeiss, Jena, Alemania), con λex/em respectivas para AID-X-2020 y Hoechst 33342 de 405/415-520 nm y 561/565-600 nm. Las imágenes se obtuvieron desde áreas correspondientes a una coordenada específica de la cuadrícula del plato mediante barridos de mosaico que se unieron en mosaicos más grandes. Una imagen de campo claro facilitó el reconocimiento de las coordenadas de la cuadrícula desde la placa donde se encontraban las células seleccionadas para la CLEM.

[0483] Tras la adquisición de imágenes confocales, las células se lavaron tres veces con tampón de fijación TEM (paraformaldehído al 2 % y glutaraldehído al 2,5 % en PBS) durante 5 min cada una. A continuación, el tampón de fijación se cambió por tetróxido de osmio al 1 % y ferricianuro de potasio al 0,8 % en tampón de fijación y se incubó a 4 °C durante 45 min, seguido de tres lavados de 5 min con ddH<2>O. A continuación, se realizó un procedimiento de deshidratación aumentando gradualmente la concentración de etanol: 50 % (10 min), 70 % (10 min), 80 % (10 min), 90 % (5 min, 3×), 96 % (5 min, 3×) y 100 % (5 min, 3×). En este punto, la parte de plástico del plato se separó cuidadosamente de la parte de cristal que contenía las muestras, que se incluyó en resina Spurr mediante incubaciones sucesivas con diferentes proporciones de resina/etanol, empezando con 1/3 durante 1 h, 1/1 durante 1 h, 3/1 durante 1 h y 1/0 durante la noche. Tras el procedimiento de inclusión, se rellenó una cápsula BEEM<®>que contenía resina Spurr polimerizada con un pequeño volumen de resina líquida para obtener una interfase en la que se colocó el plato. La cápsula BEEM<®>se incubó a 70 °C durante 72 h, y la parte de cristal del plato se retiró sumergiendo las muestras de forma alterna en nitrógeno líquido y agua hirviendo. Cuando se rompió el cristal, las células permanecieron adheridas a la resina, que posteriormente se cortó en un micrótomo con un marcador de diamante para obtener portaobjetos de resina de 100 nm de grosor, que se montaron sobre una rejilla de cobre recubierta de carbono y se tiñeron negativamente con acetato de uranilo al 2 % durante 2 min y se lavaron con ddH<2>O durante 1 min. Las muestras se observaron en un microscopio electrónico de transmisión JEM 1010. Las imágenes se procesaron para el análisis por CLEM usando el plug-in CORRELIA del software Fiji (versión 2.0.0-pre-8).

[0484] 11.2. Resultados

[0485] El análisis de colocalización por microscopía de fluorescencia confocal (FIG. 8(A)) y los datos correlativos de microscopía óptica y electrónica (FIG.8(B)) confirmaron la presencia de AID-X-2020 principalmente en el citosol del parásito, en particular en asociación con regiones del retículo endoplásmico.

[0486] La localización citosólica del inhibidor de la agregación de proteínas AID-X-2020 en regiones ER rugosas dePlasmodium, donde se sintetizan las proteínas, es coherente con el probable papel de este fármaco en la alteración del agresoma de un parásito aún por describir.

[0487] EJEMPLO 12: Análisis cuantitativo de la agregación de proteínas en células vivas de Plasmodium tras eltratamiento con AID-X-2020

[0488] El objetivo de este experimento era comprobar directamente el nivel de agregación de proteínas en células vivas dePlasmodiumtras el tratamiento con AID-X-2020.

[0489] 12.1 Materiales y métodos

[0490] 12.1.1 Análisis cuantitativo de la agregación de proteínas en cultivos vivos deP.falciparum. Para sondear directamente el nivel de agregación de proteínas en células vivas dePlasmodiumtras el tratamiento con AID-X-2020, se desarrolló un método basado en ThT para medir la agregación de proteínas en cultivos de parásitos.

[0491] Los cultivos deP. falciparumenriquecidos en fases tempranas se trataron con la CI<10>(27 nM) y la CI<50>(90 nM) de AID-X-2020 o se dejaron sin tratar. Después de 90 min, 4 h y 30 h, se realizó una purificación con Percoll para aislar las células parasitadas de los GR no infectados. Después de la purificación con Percoll, los sedimentos de parásitos en fase tardía y una suspensión de glóbulos rojos no infectados de control que contenía la misma proporción de células que los cultivos purificados se resuspendieron en 50 µl de tampón de lisis (NaCl 4,5 mg/ml en agua complementada con un cóctel de inhibidores de proteasa sin EDTA, PIC, Hoffman-La Roche, Basilea, Suiza; 1 comprimido de PIC/10 ml de agua) y se incubaron durante la noche, a 4 °C con agitación, con el objetivo de liberar su contenido interior. Después de este tiempo, las muestras lisadas se centrifugaron y el contenido de proteínas en el sobrenadante se cuantificó con el ensayo del ácido bicinconínico (Thermo Fisher Scientific), siguiendo las instrucciones del fabricante. Se diluyeron 30 µg de proteína de cada sobrenadante con PBS hasta un volumen final de 70 µl y se sembraron en una placa de color negro de 96 pocillos por triplicado. La fluorescencia de ThT se midió como se ha descrito anteriormente.

[0492] 12.2. Resultados

[0493] La fluorescencia de ThT de extractos de cultivo, normalizados para tener el mismo contenido de proteínas, presentó un espectro de emisión reducido en muestras que habían sido tratadas durante sólo 90 min con AID-X-202090 nM, la CI<50>del compuestoin vitro(FIG. 9). Tras 4 h de tratamiento, la disminución de la fluorescencia de ThT fue más evidente, incluso en cultivos tratados con la CI<10>de AID-X-2020 (27 nM). Esta señal reducida aún podía detectarse claramente tras 30 h de tratamiento con 90 nM (FIG.10).

[0494] Estos resultados que indican una disminución relevante de la carga de proteínas agregadas en parásitos vivos tras el tratamiento con AID-X-2020 a concentraciones fisiológicamente relevantes apoyan un modo de acción de este fármaco que consiste en la inhibición de la agregación de proteínas en el patógeno.

[0495] EJEMPLO 13: Actividad de AID-X-2020 sobre gametocitos de Plasmodium

[0496] En el EJEMPLO 6 se estudió la inhibición de la transición de gametocito a oocineto para determinar si AID-X-2020 era capaz de detener el ciclo de vida de los parásitos del paludismo en el mosquito hospedador.

[0497] En cambio, el objetivo del presente estudio era determinar si AID-X-2020 es capaz de dirigirse a los gametocitos, la fase sexual del ciclo de vida de los parásitos del paludismo y la única fase de los parásitos del paludismo presente en la circulación sanguínea capaz de transmitir la infección al mosquito vector, y donde los fármacos activos en esta etapa crítica son escasos.

[0498] 13.1 Materiales y métodos

[0499] Se mantuvieron cultivos de la cepaNF54-gexp02-Tom de P. falciparum(desarrollada y autentificada por Portugaliza, H.P.et al., 2019 y cedida amablemente por el profesor Alfred Cortés), en condiciones convencionales en medio RPMI complementado con Albumax II al 0,5 % y colina 2 mM, se sincronizaron en fases de anillo con lisis de sorbitol y se diluyeron al 2 % de parasitemia. Para provocar la conversión sexual, se retiró la colina del medio y los cultivos se mantuvieron en las mismas condiciones durante 48 h después de la sincronización (ciclo 0). En el siguiente ciclo (ciclo 1), los parásitos se trataron con N-acetilglucosamina 50 mM (GlcNac) con el fin de matar los parásitos asexuales y se mantuvieron en RPMI complementado con suero humano al 10 %. El medio se renovó a diario y la GlcNac se mantuvo durante 4 días.

[0500] Para determinar el efecto de AID-X-2020 y DONE3TCI en gametocitos tempranos, el cultivo se distribuyó por triplicado (200 µl/pocillo, placas de 96 pocillos) y se añadieron los fármacos en el ciclo 1 y se mantuvieron durante 48 h en el cultivo. Se prepararon controles de parásitos sin tratar, así como de parásitos tratados con una dosis letal de cloroquina. La gametocitemia se controló a diario mediante microscopía óptica hasta que la mayoría de los parásitos (~ 90 %) pudieron identificarse como gametocitos en fase V. En este punto, se prepararon frotis de Giemsa de cada pocillo y se contaron manualmente los gametocitos maduros (dos investigadores con ocultación a la asignación de grupos contaron 10.000 células por cada duplicado). Para someter a ensayo el efecto de AID-X-2020 y DONE3TCI en gametocitos tempranos, los cultivos se hicieron crecer durante 14 días, cuando la mayoría de los parásitos podían identificarse como gametocitos en fase V. Posteriormente, el cultivo se trató durante 48 h con los fármacos y se determinó la gametocitemia como se ha indicado anteriormente.

[0501] 13.2. Resultados

[0502] AID-X-2020 bloqueó eficazmente el desarrollo de gametocitos deP. falciparumen fase V tempranos y madurosin vitrocon CI<50>respectivas de 95 ± 3 nM y 103 ± 3 nM (FIG. 11), cercanas a las obtenidas para las fases sanguíneas asexuales (EJEMPLO 6). Para la aminoquinolina paninhibidora amiloide DONE3TCI los valores de CI<50>en gametocitos tempranos y tardíos fueron 285 ± 56 nM y 78 ± 12 nM, respectivamente.

[0503] Por lo tanto, además de su actividad contra las fases sanguíneas asexuales dePlasmodium, AID-X-2020 muestra una marcada actividad contra la fase sexual del ciclo de vida de los parásitos del paludismo, allanando el camino para la exploración de este fármaco como potencial terapia antiplasmódica multifase.

[0504] EJEMPLO 14: Observación microscópica de muestras clínicas

[0505] 14.1 Materiales y métodos

[0506] Las muestras clínicas de paludismo fueron facilitadas por elCentre de Salut Internacional i Malalties Transmissibles Drassanes-Vall d'Hebron.Se diluyeron cinco µl de sangre de una persona infectada de paludismo en 100 µl de RPMIc. La solución se tiñó con Hoechst 333422 µg/ml y AID-X-202018 µM y se incubó durante 30 min antes de centrifugar a 5000×g durante 30 s y desechar el sobrenadante. A continuación, el sedimento se resuspendió en 100 µl de PBS y se colocaron 5 µl de la suspensión en un portaobjetos de 8 pocillos (lbidi) con 200 µl de PBS. La muestra se observó en un microscopio de fluorescencia Olympus IX-51 con un objetivo de 100× y un filtro SPRED (λex: 586/20 nm, λem: 628/32 nm).

[0507] 14.2. Resultados

[0508] La observación microscópica de muestras de sangre clínicas teñidas con AID-X-2020 de una infección porP. falciparumpermitió identificar las formas de anillo circulantes del parásito que se detectan en el diagnóstico del paludismo.

[0509] REFERENCIASWO2011065980A2

[0510] Vlachou, D.; Zimmermann, T.; Cantera, R.; Janse, C. J.; Waters, A. P.; Kafatos, F. C.Real-time, in vivo analysis of malaria ookinete locomotion and mosquito midgut invasion. Cell. Microbiol.2004, 6 (7), 671-685.

[0511] Stokes, B.H., Dhingra, S.K., Rubiano, K., Mok, S., Straimer, J., Gnädig, N.F.,et al. Plasmodium falciparum K13 mutations in Africa and Asia impact artemisinin resistance and parasite fitness. eLife2021;10.

[0512] Straimer, J., Gnädig, N.F., Witkowski, B., Amaratunga, C., Duru, V., Ramadani, A.P., Dacheux, M., Khim, N., Zhang, L., Lam, S., Gregory, P.D., Urnov, F.D., Mercereau-Puijalon, O., Benoit-Vical, F., Fairhurst, R.M., Ménard, D., Fidock, D.A.K13-propeller mutations confer artemisinin resistance in Plasmodium falciparum clinical isolates. Science2015, 347:428- 431.

[0513] Portugaliza, H.P., Llorà-Batlle, O., Rosanas-Urgell, A., Cortés, A.Reporter lines based on the gexp02 promoter enable early quantification of sexual conversion rates in the malaria parasite Plasmodium falciparum. Sci Rep2019, 9, 14595.

Claims (10)

1. REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso como medicamento, donde:

A es un anión;

L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno), 1,4-fenilenbis(metileno) y una cadena de oligometileno (C<2>-C<12>), donde de uno a tres grupos metileno de la cadena de oligometileno (C<2>-C<12>) pueden estar sustituidos con átomos de oxígeno;

R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), hidroxi-alquilo (C<1>-C<4>), ciano-alquilo (C<1>-C<4>), alcanoiloxi (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), fenilo, alcanoílo (C<1>-C<4>), alcanosulfonilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonilo, naftalenosulfonilo yp-toluenosulfonilo, o como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-alquilpiperazina (C<1>-C<2>) y morfolina;

R<3>y R<6>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), nitro, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido y p-toluenosulfonamido; y

R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), halógeno, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido, p-toluenosulfonamido, amino-alquilo (C<1>-C<4>), alquilamino (C<1>-C<2>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>), naftalenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>) y p-toluenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>).

2. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperidin-1-il)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperazin-1-il)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)-2-nitroestiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-acetoxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-hidroxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(etano-1,2-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(propano-1,3-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(pentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(hexano-1,6-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(heptano-1,7-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dicloruro de 1,1'-(3-oxapentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-[1,2-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io}; y

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-amino-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io}.

3. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 2, donde el compuesto es de Fórmula (VI)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. El compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 3, donde A es bromuro.

5. Un compuesto de fórmula (I)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso en el tratamiento, la prevención o la mejora del paludismo, o los síntomas, complicaciones y/o secuelas de la misma, donde:

A es un anión;

L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno), 1,4-fenilenbis(metileno) y una cadena de oligometileno (C<2>-C<12>), donde de uno a tres grupos metileno de la cadena de oligometileno (C<2>-C<12>) pueden estar sustituidos con átomos de oxígeno;

R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), hidroxi-alquilo (C<1>-C<4>), ciano-alquilo (C<1>-C<4>), alcanoiloxi (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), fenilo, alcanoílo (C<1>-C<4>), alcanosulfonilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonilo, naftalenosulfonilo yp-toluenosulfonilo, o como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-alquilpiperazina (C<1>-C<2>) y morfolina;

R<3>y R<6>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), nitro, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido yp-toluenosulfonamido; y

R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), halógeno, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, amino-alquilo (C<1>-C<4>), alquilamino (C<1>-C<2>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>), naftalenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>) y p-toluenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>).

6. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de fórmula (I)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde:

A es un anión;

L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno), 1,4-fenilenbis(metileno) y una cadena de oligometileno (C<2>-C<12>), donde de uno a tres grupos metileno de la cadena de oligometileno (C<2>-C<12>) pueden estar sustituidos con átomos de oxígeno;

R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), hidroxi-alquilo (C<1>-C<4>), ciano-alquilo (C<1>-C<4>), alcanoiloxi (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), fenilo, alcanoílo (C<1>-C<4>), alcanosulfonilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonilo, naftalenosulfonilo yp-toluenosulfonilo, o como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-alquilpiperazina (C<1>-C<2>) y morfolina;

R<3>y R<6>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), nitro, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido yp-toluenosulfonamido; y

R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), halógeno, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, amino-alquilo (C<1>-C<4>), alquilamino (C<1>-C<2>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>), naftalenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>) yp-toluenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>),

junto con cantidades adecuadas de excipientes o portadores farmacéuticamente aceptables.

7. Un compuesto de fórmula (I)

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, donde:

A es un anión;

L es un dirradical seleccionado del grupo que consiste en etileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, heptametileno, octametileno, nonametileno, decametileno, undecametileno, dodecametileno, 3-oxapentametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 3,6,9-trioxaundecametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) y 1,4-fenilenbis(metileno);

R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), hidroxi-alquilo (C<1>-C<4>), ciano-alquilo (C<1>-C<4>), alcanoiloxi (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), fenilo, alcanoílo (C<1>-C<4>), alcanosulfonilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonilo, naftalenosulfonilo yp-toluenosulfonilo o, como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>se seleccionan independientemente del grupo que consiste en un anillo de azetidina, pirrolidina, piperidina, azepina, piperazina, 4-alquilpiperazina (C<1>-C<2>) y morfolina;

R<3>y R<6>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>), nitro, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido y p-toluenosulfonamido; y

R<4>y R<5>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, alquilo (C<1>-C<4>),

halógeno, amino, alquilamino (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido, naftalenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, amino-alquilo (C<1>-C<4>), alquilamino (C<1>-C<2>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), alcanosulfonamido (C<1>-C<4>)-alquilo (C<1>-C<4>), bencenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>), naftalenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>) yp-toluenosulfonamido-alquilo (C<1>-C<4>);

con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>y R<8>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno); con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es etileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, decametileno, dodecametileno, 3,6-dioxaoctametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, tetrametileno, 3-oxapentametileno, 1,2-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son fenilo y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno, octametileno, decametileno, dodecametileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno);

con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son HO-CH<2>-CH<2>- y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es tetrametileno;

con la condición de que cuando R<1>y R<7>son etilo, R<2>y R<8>son HO-CH<2>-CH<2>- y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es etileno, trimetileno, tetrametileno, pentametileno, hexametileno o heptametileno;

con la condición de que cuando R<1>y R<7>son metilo, R<2>y R<8>son NC-CH<2>- y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es 1,2-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno),

con la condición de que cuando R<1>y R<7>son acetilo, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>y R<8>son hidrógeno, L no es 1,4-fenilenbis(metileno);

con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<3>, R<6>, R<7>y R<8>son metilo y R<4>y R<5>son hidrógeno, L no es trimetileno ni 1,4-fenilenbis(metileno);

con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<4>, R<5>, R<7>y R<8>son metilo y R<3>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, tetrametileno o decametileno;

con la condición de que cuando R<1>, R<2>, R<7>y R<8>son etilo, R<3>y R<6>son hidrógeno y R<4>y R<5>son metilo, L no es decametileno;

con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son pirrolidino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno ni 1,4-fenilenbis(metileno);

con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son piperidino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno, 1,2-fenilenbis(metileno), 1,3-fenilenbis(metileno) ni 1,4-fenilenbis(metileno); y

con la condición de que cuando R<1>-N-R<2>y R<7>-N-R<8>son 4-metilpiperazino y R<3>, R<4>, R<5>y R<6>son hidrógeno, L no es trimetileno.

8. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 7, donde R<1>= R<7>, R<2>= R<8>, R<3>= R<6>y R<4>= R<5>o, como alternativa, cuando se usan en combinación, R<1>-N-R<2>= R<7>-N-R<8>, R<3>= R<6>y R<4>= R<5>.

9. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 8, donde:

R<1>, R<7>y R<2>, R<8>son radicales seleccionados independientemente del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, etilo, fenilo, 2-hidroxietilo, 2-cianoetilo y 2-(acetiloxi)etilo o, como alternativa, cuando se toman en combinación, R<1>-N-R<2>= R<7>-N-R<8>se selecciona del grupo que consiste en un anillo de pirrolidina, piperidina, piperazina y morfolina; R<3>, R<6>son radicales seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, nitro, amino, acetamido, metanosulfonamido, bencenosulfonamido yp-toluenosulfonamido; y

R<4>, R<5>son radicales seleccionados del grupo que consiste en hidrógeno, metilo, cloro, bromo, fluoro, yodo, amino, acetamido, metanosulfonamido, bencenosulfonamido,p-toluenosulfonamido, aminometilo, acetamidometilo, metanosulfonamidometilo, bencenosulfonamidometilo yp-toluenosulfonamidometilo.

10. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 9, donde el compuesto se selecciona del grupo que consiste en:

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(pirrolidin-1-il)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperidin-1-il)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-morfolinoestiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-metil-4-[(E)-4-(piperazin-1-il)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(difenilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dimetilamino)-2-nitroestiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[(2-cianoetil)metilamino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-acetoxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-{(E)-4-[bis(2-hidroxietil)amino]estiril}-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(etano-1,2-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(propano-1,3-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(butano-1,4-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(pentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(hexano-1,6-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(heptano-1,7-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(octano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(nonano-1,9-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(undecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(dodecano-1,12-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dicloruro de 1,1'-(3-oxapentano-1,5-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; diyoduro de 1,1'-(3,6-dioxaoctano-1,8-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dicloruro de 1,1'-(3,6,9-trioxaundecano-1,11-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-[1,2-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-[1,3-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-[1,4-fenilenbis(metileno)]bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]-3-metilpiridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io};

dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-bromo-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io}; dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-cloro-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io}; y dibromuro de 1,1'-(decano-1,10-diil)bis{3-amino-4-[(E)-4-(dietilamino)estiril]piridin-1-io}.