ES3048909T3

ES3048909T3 - Long-acting amylin receptor agonists and uses thereof

Info

Publication number: ES3048909T3
Application number: ES22714958T
Authority: ES
Inventors: Milata Mary Abraham; Daniel Anthony Briere; Lili Guo; Samantha Grace Lyons Keyser; John Lee; Hongchang Qu
Original assignee: Eli Lilly and Co
Current assignee: Eli Lilly and Co
Priority date: 2021-03-03
Filing date: 2022-03-02
Publication date: 2025-12-12
Anticipated expiration: 2042-03-02
Also published as: RS67305B1; PL4301770T3; TWI815327B; TW202400632A; JP7635412B2; AR126036A1; EP4301770A1; PT4301770T; MX2023010319A; DK4301770T3; IL304885A; AU2022228541B2; JP2024508312A; LT4301770T; EP4643872A2; BR112023015038A2; WO2022187305A1; SI4301770T1; TW202300508A; US12115210B2

Abstract

La presente divulgación se relaciona con el campo de la medicina. Más específicamente, se relaciona con el tratamiento de la diabetes, la obesidad y/o el control crónico del peso, la dislipidemia y/o la EHNA. La divulgación se refiere a compuestos que agonizan el receptor de amilina y pueden reducir la ingesta de alimentos, el peso corporal, la glucosa y/o los triglicéridos, por lo que pueden usarse para tratar la diabetes, la obesidad y/o la dislipidemia. La presente divulgación también incluye composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos y sus usos terapéuticos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

[0001] DESCRIPCIÓN

[0003] Agonistas del receptor de amilina de acción prolongada y usos de los mismos

[0005] La presente descripción se refiere al campo de la medicina. Más particularmente, la presente descripción se encuentra en el campo del tratamiento de la diabetes, obesidad y/o control de peso crónico, dislipidemia y/o esteatohepatitis no alcohólica (NASH, por sus siglas en inglés). La descripción se refiere a compuestos que agonizan el receptor de amilina y, por lo tanto, pueden reducir la ingesta de alimentos, el peso corporal, la glucosa, la HbA1c (hemoglobina glucosilada) y/o los triglicéridos, y pueden utilizarse para tratar la diabetes, la obesidad y/o el control de peso crónico, la dislipidemia y/o la NASH. La presente descripción también incluye composiciones farmacéuticas que contienen dichos compuestos y usos terapéuticos de dichos compuestos y composiciones farmacéuticas.

[0007] Durante las últimas décadas, la prevalencia de la diabetes ha seguido aumentando. La diabetes mellitus tipo 2 (“ T2DM” ) es la forma más común de diabetes y representa el 90 % de todos los tipos de diabetes. La T2DM se caracteriza por niveles altos de glucosa en sangre y se asocia principalmente con la resistencia a la insulina. Los tratamientos deseados para los pacientes con diabetes deberían reducir la glucosa en sangre y estabilizar la HbA1c.

[0008] La obesidad es un trastorno médico complejo que resulta en una acumulación excesiva de masa de tejido adiposo. Hoy en día, la obesidad es un problema de salud pública mundial que a menudo se asocia con resultados de la salud y morbilidades no deseados. Los tratamientos deseados para pacientes con obesidad deben reducir el exceso de peso corporal, mejorar las comorbilidades relacionadas con la obesidad, y/o mantener la reducción de peso a largo plazo.

[0009] La dislipidemia es un nivel anormal de colesterol y otros lípidos, también llamados grasas, en la sangre. La dislipidemia aumenta el riesgo de obstrucción arterial (ateroesclerosis) y de infartos, accidentes cerebrovasculares u otros problemas circulatorios, especialmente en personas fumadoras.

[0011] NASH significa esteatohepatitis no alcohólica. Es la manifestación hepática de un trastorno metabólico y la forma más grave de la esteatosis hepática no alcohólica (NAFLD, por sus siglas en inglés). La NASH está estrechamente relacionada con las comorbilidades de la diabetes y la obesidad.

[0013] La amilina es una hormona peptídica de 37 aminoácidos que se secreta conjuntamente con la insulina de las células beta pancreáticas y es deficiente en personas con diabetes. Inhibe la secreción de glucagón, retrasa el vaciamiento gástrico y actúa como agente saciante. En consecuencia, la amilina ayuda a regular la cantidad de glucosa en el organismo después de las comidas. Sin embargo, las propiedades fisicoquímicas de la amilina humana dificultan su uso como fármaco farmacéutico. Por ejemplo, la amilina es difícil de formular ya que es químicamente inestable y precipita a pH fisiológico, lo que requiere su formulación en solución ácida. Además, la semivida de este medicamento es inferior a una hora y se administra con las comidas, por lo que un paciente necesitaría varias dosis al día para utilizar este medicamento en terapia.

[0015] La pramlintida es un péptido agonista de amilina disponible comercialmente que se utiliza para el tratamiento de la diabetes como complemento de la insulina. La pramlintida es químicamente inestable a pH neutro debido a la presencia de un enlace disulfuro (-S-S-) y a la desamidación. Por lo tanto, se proporciona en una formulación ácida. En comparación con la amilina humana, los aminoácidos en las posiciones 25, 28 y 29 de la pramlintida están sustituidos por prolina. Estas modificaciones reducen la tendencia del péptido a la fibrilogénesis. Sin embargo, la pramlintida aún presenta una semivida plasmática muy corta y, por lo tanto, debe inyectarse de dos a tres veces al día, lo que puede ocasionar molestias y un cumplimiento deficiente y, posteriormente, una eficacia incompleta o inferior a la óptima. Además, su formulación de bajo pH no es compatible con la formulación de pH neutro utilizada para la insulina y los análogos de GLP-1, lo que dificulta su administración conjunta con dichos compuestos, que podrían tener sinergia y, por lo tanto, una mayor eficacia clínica.

[0017] La amilina humana se une a dos complejos receptores distintos. Estos dos complejos también contienen el receptor de calcitonina y las proteínas de actividad del receptor, RAMP1 o RAMP3. El receptor de calcitonina se encuentra en muchos tejidos del cuerpo y se cree que participa en la regulación del metabolismo óseo. Sin embargo, aparte de la regulación ósea, se conoce muy poco sobre la fisiología de los receptores de calcitonina en seres humanos y, por lo tanto, el riesgo de toxicidad inespecífica podría aumentar con una molécula con alta afinidad por los receptores de calcitonina. Por lo tanto, se cree que los polipéptidos a base de amilina con mayor selectividad por el receptor de amilina en comparación con el receptor de calcitonina podrían ofrecer un perfil farmacocinético y farmacológico ventajoso.

[0019] Dada la estrecha relación entre el receptor de calcitonina y el receptor de amilina, cabe esperar cierta reactividad cruzada con el receptor de calcitonina de los agonistas del receptor de amilina. Por ejemplo, la pramlintida, un péptido agonista de la amilina, tiene cierta afinidad por el receptor de calcitonina, aunque es 14 veces más potente en este receptor.

[0021] Se han descrito polipéptidos que comprenden péptidos agonistas de amilina humana y que poseen un resto de unión a albúmina. Véanse los documentos WO 2010/046357, WO 2009/034119 y WO 2009/034119. Aunque estos polipéptidos con restos de unión a albúmina muestran propiedades farmacocinéticas (PK) o farmacodinámicas (PD) mejoradas en comparación con la pramlintida, aún pueden presentar una estabilidad física deficiente en determinadas condiciones. Además, los polipéptidos generalmente no muestran selectividad por el receptor de amilina frente al receptor de calcitonina. El documento US2014/0087995 se refiere a polipéptidos que comprenden péptidos agonistas de amilina con selectividad por el receptor de amilina con respecto al receptor de calcitonina. Sin embargo, sigue existiendo la necesidad de candidatos a fármacos peptídicos agonistas de amilina con mayor potencia, menor riesgo de desarrollo, menor riesgo de inmunogenicidad, mejor estabilidad química y compatibilidad con la formulación a un pH neutro.

[0023] Se necesitan compuestos (por ejemplo, péptidos) que muestren selectividad para el agonismo del receptor de amilina sobre el receptor de calcitonina. Además, se necesitan agonistas del receptor de amilina con un tiempo de acción prolongado y potencia conservada. Los compuestos terapéuticamente deseables agonizarán el receptor de amilina y proporcionarán una o más propiedades ventajosas, tales como la reducción de cualquiera de los siguientes: la ingesta de alimentos, el peso corporal, los niveles de glucosa en sangre, la HbA1c, los triglicéridos o los niveles de insulina. Además, los compuestos terapéuticamente deseables pueden tener una o más propiedades ventajosas adicionales, tales como un tiempo de acción prolongado con potencia conservada o mejorada para agonizar el receptor de amilina, un bajo riesgo de respuesta inmunogénica o un bajo riesgo de fibrilación.

[0025] Además, se desea la combinación de un agonista del receptor de amilina de la presente descripción, opcionalmente junto con una incretina o un análogo de incretina, para proporcionar tratamiento para la diabetes, la obesidad, la NASH o la dislipidemia. Dicha combinación también será preferiblemente más eficaz que cualquiera de las moléculas por separado. Por ejemplo, dicho tratamiento con dicha combinación puede permitir el uso de dosis más bajas de una o ambas moléculas en comparación con cada molécula por separado, lo que podría conducir a menos efectos secundarios (o una menor duración de una u otra terapia) manteniendo la eficacia. Se cree que la una o más combinaciones novedosas proporcionadas en la presente memoria serán tratamientos eficaces para la diabetes, la obesidad, la NASH y/o la dislipidemia.

[0027] Por consiguiente, la presente descripción proporciona un método para tratar la diabetes, la obesidad, la NASH y/o la dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que requiere dicho tratamiento una cantidad eficaz de un agonista del receptor de amilina de la presente invención y una cantidad eficaz de un agente adicional.

[0029] Por consiguiente, la presente descripción describe compuestos (péptidos) novedosos que agonizan el receptor de amilina y presentan una o más de las siguientes propiedades: (1) reducción eficaz de la ingesta de alimentos y del peso corporal; (2) disminución de los niveles de glucosa e insulina; (3) menor riesgo de inmunogenicidad y bajo riesgo de fibrilación en comparación con la pramlintida; (4) semivida considerablemente más prolongada en comparación con la pramlintida. La semivida prolongada de los compuestos descritos en la presente memoria permitirá la dosificación semanal de estos compuestos para su uso en terapia.

[0031] Una realización de la presente descripción es un compuesto que comprende: Xaa-C-Xaa<3>-TATCAT-Xaa-Xaa-Xaa-AE-Xaa-LVRSS-Xaa<2i>-Xaa<22>-FGP-Xaa<26>-LPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde Xaaes K o yE; Xaa<3>es E, N o G; Xaaes G o Q; Xaaes Orn o K; Xaaes L o aMeL; Xaaes aMeF o F; Xaa<2i>es N o H; Xaa<22>es NMeD, NMeN o N; Xaa<26>es I o K, o una sal farmacéutica aceptable del mismo. (Id. de sec. n.°:i4). Opcionalmente, los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°: i4 comprenden además un elemento adicional para extender el perfil de acción temporal de este compuesto. Estos elementos adicionales incluyen, con o sin un enlazador y en cualquier posición adecuada de la secuencia, la porción Fc de una inmunoglobulina, fragmentos de la porción Fc de la inmunoglobulina, seroalbúmina humana (HSA), una variante de VHH (dominio variable de anticuerpos de cadena pesada), un nanocuerpo, fragmentos de seroalbúmina humana, monoácido C<20>, un diácido C<20>y un resto de polietilenglicol (PEG) u otros tipos de polímeros de alto peso molecular. Preferiblemente, el elemento adicional se une opcionalmente con un enlazador a una lisina del compuesto. Además, en cualquiera de las realizaciones descritas en la presente memoria, los péptidos agonistas de amilina y los compuestos que comprenden los péptidos agonistas de amilina pueden comprender además dichos elementos, ya sea además de cualquier elemento ya presente que esté unido o enlazado a la secuencia peptídica y que extienda el perfil de acción temporal, o como alternativa a un elemento existente.

[0032] En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:i4, Xaa<26>es lisina. En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:i4, la lisina en la posición 26, si está presente, está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (YE)<2>-CO-(CH<2>)<i8>-CO<2>H. En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:i4, la lisina en la posición 26, si está presente, está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: AEEA<2>-yE-CO-(CH<2>)-CO<2>H. En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:i4, la lisina en la posición 26, si está presente, está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: yE-AEEA<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H. En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°: i4, la lisina en la posición 26, si está presente, está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (yE)<2>-AEEA-CO-(CH<2>)-CO<2>H. En otras realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:i4, la lisina en la posición 26, si está presente, está unida a un ácido graso a través de otro enlazador conocido en la técnica. Además, en cualquiera de las realizaciones descritas en la presente memoria, los péptidos agonistas de amilina y los compuestos que comprenden los péptidos agonistas de amilina pueden comprender otro enlazador para unir el ácido graso según las fórmulas descritas en la presente memoria.

[0034] En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:14, Xaa<1>es lisina. En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:14, la lisina en la posición 1, si está presente, está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (YE)<2>-CO-(CH<2>)<i8>-CO<2>H. En otras realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:14, la lisina en la posición 1, si está presente, está unida a un ácido graso a través de otro enlazador conocido en la técnica.

[0036] En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:14, hay un puente disulfuro entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7. En una realización preferida de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:14, hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7.

[0038] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>(Id. de sec. n.°:1). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH (Id. de sec. n.°:1). A continuación se muestra una representación del Compuesto I utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (<y>E) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeN en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0039]

[0042] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:1. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:1.

[0044] En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:1, la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador. En una realización preferida de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:1, la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (yE)2-CO-(CH2)l8-CO2H.

[0046] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (yE)<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:2). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (<y>E)2-CO-(CH2)8-C02H (Id. de sec. n.°:2). A continuación se muestra una representación del Compuesto II utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (<y>E) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeN en la posición 22, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0047]

[0049] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:2. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:2.

[0051] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>(Id. de sec. n.°:3). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH (Id. de sec. n.°:3). A continuación se muestra una representación del Compuesto III utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (en donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0052]

[0055] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:3. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con el Compuesto III (Id. de sec. n.°:3).

[0056] En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:3, la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador. En una realización preferida de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:3, la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos de la fórmula: (<y>E)<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H.

[0058] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (<y>E)<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:4). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (yE)2-c 0-(CH2)i 8-CO2H (Id. de sec. n.°:4). A continuación se muestra una representación del Compuesto IV utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (<y>E) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0059]

[0062] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:4. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:4.

[0063] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH<2>(Id. de sec. n.°:5). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH (Id. de sec. n.°:5). A continuación se muestra una representación del Compuesto V utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción de cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0064]

[0066] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:5. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:5.

[0068] En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:5, la lisina en la posición 1 está unida a un ácido graso a través de un enlazador. En una realización preferida de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:5, la lisina en la posición 1 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (<y>E)<2>-CO-(CH<2>)<l 8>-CO<2>H.

[0070] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 1 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (<y>E)<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:6). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 1 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (yE)2-CO-(c H2)i 8-C02H (Id. de sec. n.°:6). A continuación se muestra una representación del Compuesto VI utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con las excepciones de la lisina en la posición 1, las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0071]

[0074] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:6. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con el Compuesto VI (Id. de sec. n.°:6).

[0075] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-aMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH<2>(Id. de sec. n.°:7). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-aMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH<2>(Id. de sec. n.°:7). A continuación se muestra una representación del Compuesto VII con la excepción de las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeL en la posición 12, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0076]

[0079] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:7. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:7.

[0080] En algunas realizaciones de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:7, la lisina en la posición 1 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos. En una realización preferida de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:7, la lisina en la posición 1 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (<y>E)<2>-CO-(CH2)<l 8>-CO2H.

[0082] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-aMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 1 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (yE)<2>-<c>0-(CH2)8-CO2H (Id. de sec. n.°:8). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: KCETATCATG-Orn-aMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 1 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: (yE)2-CO-(CH2)i 8-C02H (Id. de sec. n.°:8). A continuación se muestra una representación del Compuesto VIII utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción de la lisina en la posición 1, las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeL en la posición 12, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0083]

[0086] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:8. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:8.

[0087] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia:<y>E-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: AEEA<2>-YE-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:9). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: yE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: AEEA<2>-YE-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:9). A continuación se muestra una representación del Compuesto IX utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0088]

[0091] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:9. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:9.

[0092] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia:<y>E-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: YE-AEEA<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:10). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: YE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: YE-AEEA<2>-CO-(CH<2>)<i8>-CO<2>H (Id. de sec. n.°:10). A continuación se muestra una representación del Compuesto X utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0093]

[0096] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:10. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99 % de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:10.

[0097] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia:<y>E-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (YE)<2>-AEEA-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:11). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: yE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (YE)<2>-AEEA-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:11). A continuación se muestra una representación del Compuesto XI utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0098]

[0100] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:11. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:11.

[0102] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: YE-CNTATCATQ-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: AEEA<2>-YE-CO-(CH<2>)-CO<2>H (id. de sec. n.°:12). Una realización alternativa consiste en la siguiente secuencia:<y>E-CNTATCATQ-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un ácido graso a través de un enlazador según la fórmula: AEEA<2>-YE-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:12). A continuación se muestra una representación del Compuesto XII utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (YE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, ornitina en la posición 11, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0103]

[0105] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:12. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:12.

[0107] Una de las realizaciones de la presente memoria comprende la siguiente secuencia: YE-CGTATCATG-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: YE<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:13). Una realización alternativa de la presente memoria consiste en la siguiente secuencia: YE-CGTATCATG-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7, y en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: YE<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H (Id. de sec. n.°:13). A continuación se muestra una representación del Compuesto XIII utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (YE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, ornitina en la posición 11, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0108]

[0110] Como alternativa, el compuesto puede tener al menos de aproximadamente un 90% aaproximadamente un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°: 13. Como alternativa, el compuesto puede tener al menos aproximadamente un 90 %, 91 %, 92 %, 93 %, 94 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 % o un 99%de similitud de secuencia con la Id. de sec. n.°:13.

[0112] La presente descripción proporciona un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:1, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:2, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:3, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:4, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:5, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:6, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:7, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:8, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:9, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:10, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:11, un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:12, y/o un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:13, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos. La presente descripción proporciona también una composición farmacéutica que comprende un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, y uno o más portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables. La presente descripción proporciona también una composición farmacéutica que comprende un compuesto que consiste en la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, y uno o más portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

[0114] La presente descripción proporciona además compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:22, Id. de sec. n.°:23, Id. de sec. n.°:24, Id. de sec. n.°:25, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos. En otra realización, la presente descripción proporciona compuestos que consisten en la Id. de sec. n.°:22, Id. de sec. n.°:23, Id. de sec. n.°:24, Id. de sec. n.°:25, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos. Preferiblemente, los compuestos de Id. de sec. n.°:22, Id. de sec. n.°:23, Id. de sec. n.°:24, Id. de sec. n.°:25 comprenden un puente disulfuro o tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7. Más preferiblemente, los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:22, Id. de sec. n.°:23, Id. de sec. n.°:24, Id. de sec. n.°:25 tienen un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7 y unido a un resto enlazador de ácidos grasos. Preferiblemente, el resto de ácido graso está unido a una lisina.

[0116] La presente descripción proporciona un método para tratar la diabetes, la obesidad, la dislipidemia y/o la NASH, en un paciente, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos, o composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos. La presente descripción proporciona además un método para reducir la ingesta de alimentos, reducir el peso corporal, reducir la glucosa en sangre, reducir la HbA1c y/o reducir los triglicéridos, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos, o composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos. Preferiblemente, la presente descripción proporciona un método para tratar la diabetes, la obesidad, la dislipidemia y/o la NASH, en un paciente, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:2, o composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos. Más preferiblemente, la presente descripción proporciona un método para tratar la diabetes en un paciente, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:2, o composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos. Como alternativa, la presente descripción proporciona un método para tratar la obesidad en un paciente, que comprende administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:2, o composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos.

[0118] La presente solicitud proporciona los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos, o composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos para su uso en terapia. La presente solicitud proporciona además los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos, o composiciones farmacéuticas que comprenden los mismos para su uso en el tratamiento de la diabetes, la obesidad, la dislipidemia y/o la NASH. La presente solicitud también proporciona el compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, o composiciones farmacéuticas que comprenden el mismo para su uso en terapia, el tratamiento de la diabetes, la obesidad, la dislipidemia y/o la NASH. Más preferiblemente, la presente solicitud proporciona el compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, o composiciones farmacéuticas que comprenden el mismo para su uso en el tratamiento de la diabetes. Como alternativa, la presente solicitud proporciona el compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, o composiciones farmacéuticas que comprenden el mismo para su uso en el tratamiento de la obesidad. Como alternativa, la presente solicitud proporciona el compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, o composiciones farmacéuticas que comprenden el mismo para su uso en el tratamiento de la dislipidemia. Como alternativa, la presente solicitud proporciona el compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, o composiciones farmacéuticas que comprenden el mismo para su uso en el tratamiento de la NASH.

[0120] La presente solicitud proporciona los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéutica aceptable de los mismos, o composiciones que comprenden los mismos, para su uso en la reducción de la ingesta de alimentos, reducción del peso corporal, reducción de la glucosa en sangre, reducción de la HbA1c y/o reducción de los triglicéridos. Más preferiblemente, la presente solicitud proporciona los compuestos que comprenden la Id. de sec. n.°:2 o una sal farmacéutica aceptable de los mismos, o composiciones que comprenden los mismos para su uso en la reducción de la ingesta de alimentos, reducción del peso corporal, reducción de la glucosa en sangre, reducción de la HbA1c y/o reducción de los triglicéridos.

[0122] La presente descripción proporciona además el uso de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14 o una sal farmacéutica aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la diabetes, la obesidad, la dislipidemia y/o la NASH. Preferiblemente, la presente descripción proporciona además el uso de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la diabetes, la obesidad, la dislipidemia y/o la NASH.

[0124] La presente descripción proporciona además el uso de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14 o una sal farmacéutica aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para reducir la ingesta de alimentos, reducir el peso corporal, reducir la glucosa en sangre, reducir la HbA1c y/o reducir los triglicéridos. Preferiblemente, la presente descripción proporciona además el uso de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéutica aceptable del mismo, en la fabricación de un medicamento para reducir la ingesta de alimentos, reducir el peso corporal, reducir la glucosa en sangre, reducir la HbA1c y/o reducir los triglicéridos.

[0126] A menos que se defina lo contrario, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente memoria tienen el mismo significado que entiende normalmente un experto en la técnica a la que pertenece la descripción. Aunque cualquier método y material similar o equivalente a los descritos en la presente memoria se pueden utilizar en la práctica o prueba de los péptidos agonistas de amilina, composiciones farmacéuticas y métodos, en la presente memoria se describen los métodos y materiales preferidos.

[0128] Además, la referencia a un elemento mediante el artículo indefinido “ un” o “ uno/a” no excluye la posibilidad de que esté presente más de un elemento, a menos que el contexto requiera claramente que haya un y solo un elemento. Por lo tanto, el artículo indefinido “ un” o “ uno/a” suele significar “ al menos uno/a” .

[0130] Como se utiliza en la presente memoria, “ aproximadamente” significa dentro de un intervalo estadísticamente significativo de un valor o valores, tal como, por ejemplo, una concentración, longitud, peso molecular, pH, similitud de secuencia, intervalo de tiempo, temperatura, volumen, etc., indicados. Tal valor o intervalo puede estar dentro de un orden de magnitud, típicamente dentro del 20 %, más típicamente dentro del 10 %, e incluso más típicamente dentro del 5 % de un valor o intervalo dado. La variación permisible que abarca “ aproximadamente” dependerá del sistema particular en estudio y se puede apreciar fácilmente por un experto en la técnica.

[0132] Como se utiliza en la presente memoria, y en referencia a uno o más receptores, “ actividad” , “ activar” , “ de activación” y similares significan la capacidad de un compuesto, tal como un péptido de la presente memoria, para unirse e inducir una respuesta en el uno o más receptores, según lo medido utilizando ensayos conocidos en la técnica, tales como los ensayosin vitroque se describen a continuación.

[0134] Como se utiliza en la presente memoria, el término “ aminoácido” significa tanto aminoácidos de origen natural como aminoácidos no codificados. Como se conoce en la técnica, un aminoácido es una molécula que, desde un punto de vista químico, se caracteriza por la presencia de uno o más grupos amina y uno o más grupos de ácido carboxílico y puede contener otros grupos funcionales. Además, los aminoácidos se representan típicamente mediante códigos estándar de una letra (por ejemplo, L = leucina), así como residuos alfa-metil sustituidos de aminoácidos naturales (por ejemplo, a-metil leucina o aMeL, y a-metil fenilalanina o aMeF) y otros aminoácidos no codificados determinados, tales como “ yE” , “ NMeN” , “ NMeD” , “ Orn” y similares. Las estructuras de los aminoácidos no codificados de la presente descripción aparecen a continuación:

[0135]

[0137] Como se utiliza en la presente memoria, “<y>E” significa ácido gamma-glutámico (donde el enlace peptídico se forma utilizando el grupo ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma, en lugar de la posición alfa típica). Como se utiliza en la presente memoria, “ Orn” significa L-ornitina. Como se utiliza en la presente memoria, “ aMeL” significa alfa-metil-L-leucina. Como se utiliza en la presente memoria, “aMeF” significa alfa-metil-L-fenilalanina. Como se utiliza en la presente memoria, “ NMeN” significa N-metil-asparagina y “ NMeD” significa N-metil-ácido aspártico.

[0138] Como se utiliza en la presente memoria, “AEEA” significa ácido 2-[2-(2-amino-etoxi)-etoxi]acético. La estructura aparece a continuación:

[0141]

[0143] Como se utiliza en la presente memoria, “ péptido agonista de amilina” significa un compuesto, tal como un péptido o polipéptido sintético, que activa un receptor diana y produce al menos un efectoin vivooin vitroprovocado por un agonista natural de dicho receptor.

[0144] Como se utiliza en la presente memoria, “ control de peso crónico” significa un método mediante el cual se mantiene la pérdida de peso como complemento a una dieta baja en calorías y al aumento de la actividad física en personas que actualmente están o han estado caracterizadas previamente como obesas.

[0145] El término “ diabetes” se refiere a una enfermedad en la que se altera la capacidad del organismo para producir o responder a la hormona insulina, lo que provoca un metabolismo anómalo de los carbohidratos y niveles elevados de glucosa en sangre y orina. Como se utiliza en la presente memoria, el término diabetes puede referirse a una afección crónica que afecta a la forma en que el organismo procesa el azúcar en sangre o la glucosa, por ejemplo, diabetes mellitus tipo 2 (T2DM); una afección crónica en la que el páncreas produce poca o nada de insulina, por ejemplo, diabetes mellitus tipo 1 (T1DM); una afección en la que el azúcar en sangre es elevado, pero no lo suficiente como para ser diabetes tipo 2, por ejemplo, prediabetes; una forma de azúcar en sangre elevado que afecta a las mujeres embarazadas, por ejemplo, diabetes gestacional.

[0146] El término “ dislipidemia” se refiere a un trastorno del metabolismo de las lipoproteínas, que incluye la sobreproducción o deficiencia de lipoproteínas. Las dislipidemias pueden manifestarse por un aumento de las concentraciones de colesterol total, lipoproteínas de baja densidad (LDL) y triglicéridos, y/o una disminución de la concentración de lipoproteínas de alta densidad (HDL) en sangre. La dislipidemia puede o no desarrollarse en relación con la diabetes. Como se utiliza en la presente memoria, “ ácido graso” consiste en una cadena lineal de un número par de átomos de carbono, con átomos de hidrógeno a lo largo de la cadena y un grupo carboxilo (-COOH) en un extremo (monoácido) o en ambos extremos (diácido) de la cadena. En una realización preferida, el resto de “ ácidos grasos” es un diácido C<20>.

[0149]

[0151] Como se utiliza en la presente memoria, “ puente tioacetal” se refiere a la síntesis orgánica de un grupo tioacetal para volver a puentear funcionalmente el uno o más enlaces disulfuro dentro de las estructuras peptídicas. A continuación se muestra un puente tioacetal (-S-CH<2>-S-) con un grupo metileno insertado entre dos átomos de azufre.

[0154]

[0156] Como se utiliza en la presente memoria, el término “tratamiento” o “ tratar” se refiere al manejo y cuidado de un paciente con una afección para la que está indicada la administración de un agonista peptídico del receptor de amilina con el fin de combatir o aliviar los síntomas y complicaciones de la afección. El tratamiento incluye la administración de un compuesto o una composición farmacéutica que contenga un compuesto de los compuestos descritos en la presente memoria a un paciente que lo necesite para prevenir la aparición de síntomas o complicaciones, aliviar dichos síntomas o complicaciones, o eliminar la enfermedad, afección o trastorno. Preferiblemente, el tratamiento incluye la administración de un compuesto o composición farmacéutica que contenga un compuesto de la presente descripción a un paciente que lo necesite para lograr una pérdida neta de peso corporal, una reducción de la ingesta de alimentos, una reducción de los niveles de glucosa en sangre, una reducción de la HbA1c y/o una reducción de los niveles de triglicéridos. El paciente a tratar es un mamífero, y preferiblemente un ser humano.

[0158] Como se utiliza en la presente memoria, la expresión “ cantidad eficaz” se refiere a una cantidad o dosis de uno o más de los compuestos de la presente memoria, tras una administración de una o varias dosis a un individuo que lo necesite, que proporcione el efecto deseado en tal individuo bajo diagnóstico o tratamiento (es decir, que pueda producir una diferencia clínicamente medible en un estado del individuo, tal como, por ejemplo, una pérdida neta de peso corporal, una reducción de la ingesta de alimentos, una reducción de los niveles de glucosa en sangre, una reducción de la HbA1c y/o una reducción de los niveles de triglicéridos). Un experto en la técnica puede demostrar fácilmente una cantidad eficaz mediante técnicas conocidas y observando los resultados obtenidos en circunstancias análogas. Para determinar la cantidad eficaz para un individuo, se consideran diversos factores, incluyendo, pero sin limitación, la especie del mamífero, su tamaño, edad y estado de salud general, la enfermedad o trastorno específicos implicados, el grado de afectación o la gravedad de la enfermedad o trastorno, la respuesta del individuo, el compuesto particular administrado, el modo de administración, las características de biodisponibilidad de la preparación administrada, la pauta posológica seleccionada, el uso de medicación concomitante y otras circunstancias relevantes. Preferiblemente, una cantidad eficaz de un compuesto o composición farmacéutica que contenga un compuesto de la presente descripción administrada a un paciente que lo necesite dará como resultado una pérdida neta de peso corporal, una reducción de la ingesta de alimentos, una reducción de los niveles de glucosa en sangre, una reducción de la HbA1c y/o una reducción de los niveles de triglicéridos. Una dosis puede incluir una dosis de carga inicial más alta, seguida de una dosis más baja. Una dosis eficaz de los compuestos proporcionados en la presente memoria puede estar entre 0,05 pg/kg y 5000 pg/kg o de 0,01 nmol/kg a 1000 nmol/kg.

[0160] Como se utiliza en la presente memoria, “ semivida” o “W ’ significa un tiempo que tarda la mitad de una cantidad de un compuesto, tal como el péptido de la presente memoria, en eliminarse de un fluido u otro espacio fisiológico, tal como suero o plasma, de un individuo mediante procesos biológicos. Como alternativa, t i</2>también puede significar el tiempo que tarda una cantidad de tal péptido en perder la mitad de su actividad farmacológica, fisiológica o radiológica.

[0162] Como se utiliza en la presente memoria, “ concentración eficaz máxima media” o “ CE<50>” significa una concentración del compuesto que produce una activación/estimulación del 50 % de un criterio de valoración del ensayo, tal como una curva de respuesta a la dosis.

[0164] Como se utiliza en la presente memoria, “ acción prolongada” significa que la afinidad de unión y la actividad de una composición de la presente memoria se mantienen durante un período mayor que la del péptido o proteína naturales, lo que permite una dosificación con una frecuencia al menos tan baja como una vez al día o incluso tres veces por semana, dos veces por semana, una vez por semana o mensualmente. El perfil de acción temporal de los compuestos de la presente memoria puede medirse mediante métodos de prueba farmacocinéticos conocidos, tales como los descritos en los ejemplos a continuación.

[0166] El término “ NASH” se refiere a la esteatohepatitis no alcohólica, también conocida como esteatosis hepática. “ NASH” también se refiere a la inflamación y el daño hepático causados por la acumulación de grasa en el hígado. “ NASH” también se refiere a un subtipo de esteatosis hepática no alcohólica (“ NAFLD” ). En algunas realizaciones, “ NASH” puede ser sinónimo de “ NAFLD” .

[0168] El término “ obesidad” , como se utiliza en la presente memoria, se refiere a un trastorno que implica un exceso de grasa corporal que aumenta el riesgo de problemas de salud. El término “ obesidad” también se refiere a un peso superior al considerado saludable para una estatura determinada. El término “ obesidad” también se refiere a un IMC superior a 30,0 o a un IMC de 27,0 o superior (sobrepeso) con al menos una comorbilidad relacionada con el peso (por ejemplo, hipertensión, diabetes mellitus tipo 2 o dislipidemia).

[0170] Como se utiliza en la presente memoria, el índice de masa corporal (IMC) se refiere al peso de una persona en kilogramos dividido por el cuadrado de su altura en metros.

[0172] Como se utiliza en la presente memoria, “ paciente” e “ individuo” se utilizan indistintamente y significan un mamífero, preferiblemente un ser humano. En determinadas realizaciones, el paciente, preferiblemente un ser humano, se caracteriza además por una enfermedad, trastorno o afección que se beneficiaría de la administración de un compuesto que agoniza los receptores tanto de amilina como de calcitonina.

[0174] En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto descrito en la presente memoria pueden administrarse por vía oral a pacientes que necesiten dicho tratamiento. Las composiciones farmacéuticas que comprenden un compuesto descrito en la presente memoria pueden administrarse por vía parenteral a pacientes que necesiten dicho tratamiento. La administración parenteral puede realizarse mediante inyección subcutánea, intramuscular o intravenosa mediante una jeringa, opcionalmente una jeringa tipo pluma o un inyector mecánico. Alternativamente, la administración parenteral se puede realizar por medio de una bomba de infusión. Las realizaciones de los compuestos descritos en la presente memoria proporcionan composiciones farmacéuticas adecuadas para su administración a un paciente que comprenden administrar a un paciente que lo necesite una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto descrito en la presente memoria y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Dichas composiciones farmacéuticas pueden prepararse mediante cualquier diversidad de técnicas utilizando excipientes convencionales para productos farmacéuticos, que se conocen bien en la técnica. (Remington's Pharmaceutical Sciences, 21.a Edición, University of the Sciences in Philadelphia, Filadelfia, PA, EE. UU. (2006)).

[0176] Como se utiliza en la presente memoria, “ similitud de secuencia” significa una propiedad cuantitativa de dos o más secuencias de ácidos nucleicos o secuencias de aminoácidos de compuestos biológicos, tales como, por ejemplo, una correspondencia a lo largo de toda la longitud o una ventana de comparación de las dos o más secuencias. La similitud de secuencia se puede medir mediante (1) el porcentaje de identidad o (2) el porcentaje de similitud. El porcentaje de identidad mide el porcentaje de residuos idénticos entre dos compuestos biológicos dividido entre la longitud de la secuencia más corta, mientras que el porcentaje de similitud mide las identidades e incluye, además, los huecos de secuencia y la similitud de residuos en la evaluación. Los métodos y algoritmos para determinar la similitud de secuencia se conocen bien en la técnica y, por lo tanto, no es necesario describirlos exhaustivamente en la presente memoria. Un porcentaje específico de posiciones idénticas de nucleótidos o aminoácidos es de al menos aproximadamente el 75 %, 80 %, 85 %, 86, 76, 88, 89, 90, 91, 92, 93, 94, 95, 96, 97, 98, 99 % o superior.

[0178] Los compuestos descritos en la presente memoria pueden utilizarse en combinación simultánea, separada o secuencial con uno o más agentes terapéuticos adicionales útiles para inducir la pérdida de peso, tratar la diabetes, afecciones relacionadas con la diabetes, la obesidad y/o el control crónico del peso, la dislipidemia y/o la NASH. Los ejemplos no limitativos de los agentes terapéuticos adicionales que pueden combinarse con los compuestos reivindicados incluyen: insulina o análogos de insulina; biguanidas; sulfonilureas; tiazolidinedionas; inhibidores de la dipeptidil peptidasa-4 (“ DPP-4” ); inhibidores del transportador de glucosa dependiente de sodio (SGLT2); compuestos incretínicos, tales como el péptido similar al glucagón-1 (GLP-1) o análogos de GLP-1, el polipéptido inhibidor gástrico (GIP) o análogos de GlP, oxintomodulina o análogos de oxintomodulina; compuestos agonistas del factor de diferenciación del crecimiento-15 (GDF15); análogos del péptido YY (PYY); agonistas duales de GIP/GLP-1; triagonistas de Gcg/GIP/GLP-1 (triagonistas de glucagón, GIP y GLP-1); o combinaciones de cualquiera de los agentes anteriores. Los compuestos reivindicados y el uno o más agentes terapéuticos adicionales pueden administrarse conjuntamente a través de la misma vía y dispositivo de suministro, tal como una sola pastilla, cápsula, comprimido o formulación inyectable; o administrarse por separado, ya sea simultáneamente en dispositivos o vías de suministro separados; o administrarse secuencialmente.

[0180] Otra realización de la presente descripción es un método para tratar una afección en un paciente que lo necesite, seleccionada del grupo que consiste en: diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar al paciente una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con una cantidad eficaz de una incretina o un análogo de incretina. Preferiblemente, una realización de la presente descripción es un método para tratar una afección en un paciente que lo necesite, seleccionada del grupo que consiste en: diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar al paciente una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con una cantidad eficaz de una incretina o un análogo de incretina.

[0182] En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar una afección en un paciente que lo necesite, seleccionada de un grupo que consiste en: diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un agonista de GLP-1. En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un agonista de GLP-1 que comprende el Compuesto XVII (Id. de sec. n.°:18). En otra realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un agonista de GLP-1 que comprende el Compuesto XVII (Id. de sec. n.°:18).

[0184] En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un análogo de oxintomodulina. En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un análogo de oxintomodulina que comprende el Compuesto XVIII (Id. de sec. n.°:19). En otra realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un análogo de oxintomodulina que comprende el Compuesto XVIII (Id. de sec. n.°:19).

[0186] En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un triagonista de glucagón, GIP y GLP-1. En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un triagonista de glucagón, GIP y GLP-1 que comprende el Compuesto XIX (Id. de sec. n.°:20). En otra realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un triagonista de glucagón, GIP y GLP-1 que comprende el Compuesto XIX (Id. de sec. n.°:20).

[0188] En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un agonista dual de GIP/GLP-1. En una realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un agonista dual de GIP/GLP-1 que comprende la Id. de sec. n.°:21. En otra realización particular de la presente descripción se proporciona un método para tratar a un paciente con diabetes, obesidad, NASH y/o dislipidemia, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad eficaz de un compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, junto con un agonista dual de GIP/GLP-1 que comprende la Id. de sec. n.°:21.

[0190] Otra realización de la presente descripción es el compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:1, Id. de sec. n.°:2, Id. de sec. n.°:3, Id. de sec. n.°:4, Id. de sec. n.°:5, Id. de sec. n.°:6, Id. de sec. n.°:7, Id. de sec. n.°:8, Id. de sec. n.°:9, Id. de sec. n.°:10, Id. de sec. n.°:11, Id. de sec. n.°:12, Id. de sec. n.°:13 o la Id. de sec. n.°:14, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en una combinación separada, simultánea o secuencial con una incretina o un análogo de incretina para el tratamiento de la diabetes, la obesidad, la NASH y/o la dislipidemia. Preferiblemente, una realización de la presente descripción es el compuesto que comprende la Id. de sec. n.°:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en una combinación separada, simultánea o secuencial con una incretina o un análogo de incretina para el tratamiento de la diabetes, la obesidad, la NASH y/o la dislipidemia. Más preferiblemente, la incretina o análogo de incretina es un agonista dual de GIP/GLP-1 que comprende la Id. de sec. n.°:21.

[0192] Determinadas abreviaturas utilizadas en la presente memoria se definen de la siguiente manera: “ACN” se refiere a acetonitrilo; “AMY1R” se refiere al receptor de amilina 1; “ cAMP” se refiere al monofosfato de adenosina cíclico; “ CT” se refiere a calcitonina; “ DCM” se refiere a diclorometano; “ DIEA” se refiere a diisopropiletilamina; “ DMF” se refiere a N,N-dimetilformamida; “ DMSO” se refiere a dimetilsulfóxido; “ DODT” se refere a 2,2'-(etilendioxi)dietanotiol; “ FBS” se refiere al suero fetal bovino; “ Fmoc” se refiere a fluorenilmetiloxicarbonilo; “ GDF15” se refiere al factor de diferenciación del crecimiento 15; “ GPCR” se refiere a uno o más receptores acoplados a la proteína G; “ HEPES” se refiere al ácido 4-(2-hidroxietil)-1-piperazinaetanosulfónico; “ HTRF” se refiere a fluorescencia homogénea resuelta en el tiempo; “ IBMX” se refiere a la 1-metil-3-isobutilxantina; “ MEM” se refiere al medio esencial mínimo; “ Mtt” se refiere a 4-metiltritilo; “ NASH” se refiere a esteatosis hepática no alcohólica; “ NEAA” se refiere a aminoácido no esencial; “ PyAOP” se refiere a hexafluorofosfato de (7-azabenzotriazol-1-iloxi)tripirrolidinofosfonio; “ RP-HPLC” se refiere a cromatografía líquida de alto rendimiento de fase reversa; “ TCEP” se refiere a clorhidrato de tris(2-carboxietil)fosfina; “ TFA” se refiere al ácido trifluoroacético; y “ TRIS” se refiere a tris(hidroximetil)aminometano.

[0194] Ejemplo 1: Preparación y purificación de los compuestos I y II

[0196] El Compuesto I y el Compuesto II se obtienen según las siguientes etapas. Primero, se sintetiza el Compuesto I (Id. de sec. n.°:1) mediante la química de fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc)/terc-butilo (t-Bu) en un sintetizador de péptidos multiplex Symphony de 12 canales (Protein Technologies, Inc., Tucson, AZ).

[0198] Para la síntesis a escala de 0,13 mmol se utiliza resina de poliestireno Amida Rink MBHA LL (Novabiochem, sub: 0,35 mequiv./g, malla 100-200, Cat. n.° 855045). Se utilizan grupos protectores de cadena lateral estándar. Se utiliza Boc-Glu-OtBu para la posición 1. Se utiliza Fmoc-Lys(Mtt)-OH para la lisina en la posición 26. Los grupos Fmoc se eliminan antes de cada etapa de acoplamiento (2 x 7 minutos) utilizando piperidina al 20% en DMF. Todos los acoplamientos de aminoácidos se realizan durante 30 minutos a 60 °C utilizando una relación molar equivalente de aminoácido Fmoc (0,3 M), diisopropilcarbodiimida (0,9 M) y oxima (0,9 M), con un exceso molar de 7,7 veces sobre la carga peptídica teórica. Los acoplamientos de aminoácidos después de aMeF en la posición 15 y NMeN en la posición 22 se realizan durante 3 h y 6 h, respectivamente, a 60 °C. Para el Compuesto I (Id. de sec. n.°:1), la resina se trata con un cóctel de escisión en este momento (las condiciones se describen después de los procedimientos para la adición del resto enlazador de ácidos grasos para generar el Compuesto II). A continuación se muestra un esquema del Compuesto I (Id. de sec. n.°:1) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeN en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0199]

[0201] A continuación, la resina se lava minuciosamente con DCM 6 veces para eliminar la DMF residual. El grupo protector Mtt de la lisina en la posición 26 se elimina selectivamente de la resina peptídica utilizando dos tratamientos con hexafluoroisopropanol al 30 % (Oakwood Chemical) en DCM (tratamiento de 2 x 40 minutos). La unión posterior del resto enlazador de ácidos grasos se realiza mediante el acoplamiento de Fmoc-ácido glutámico a-t-butil éster (Fmoc-Glu-OtBu, Ark Pharm, Inc.), mono-OtBu-ácido eicosanoico (WuXi AppTec, Shanghái, China). Se utiliza un exceso de reactivos de 3 veces (AA:PyAOP:DIEA = 1:1:1 mol/mol) por cada acoplamiento de 1 hora.

[0203] Una vez completada la síntesis, la resina peptídica se lava con DCM, y después se seca completamente al aire. La resina seca se trata con 10 ml de cóctel de escisión (TFA:DODT:TIS:H<2>O = 89:3:3:5 v/v) durante 2 horas a temperatura ambiente. La resina se elimina por filtración, se lava dos veces cada vez con 2 ml de TFA puro, y los filtrados combinados se tratan con éter dietílico frío 4 veces (-20 °C) para precipitar el péptido en bruto. A continuación, la suspensión de péptido/éter se centrifuga a 3500 rpm durante 2 min para formar un sedimento sólido, el sobrenadante se decanta, y el sedimento sólido se tritura con éter dos veces más. Para formar el puente tioacetal, el sedimento, tras secarse al aire, se disuelve en 5 ml de tampón de fosfato de potasio 20 mM y 3 ml de ACN. Una vez disuelto completamente, con agitación constante, se añaden TCEP en H<2>O (30 pM, 5 equiv.), diyodometano (8equiv.) y trietilamina (10 equiv.) y se dejan en agitación durante 5-30 min. La LCMS se utiliza para monitorizar la reacción, que normalmente se completa en 5 minutos. Una vez completada la reacción, se añade a la mezcla 1 ml de H<2>O con TFA al 0,1 %, así como 6 ml de ácido acético. Si la solución está turbia, se añade más ACN según sea necesario.

[0205] El péptido en bruto se purifica mediante RP-HPLC en una columna Phenomenex PhenylHexyl (5 pm, 100 A, 250 x 21,2 mm, número de pieza: 00G-4257-P0-AX) con un gradiente lineal utilizando un sistema de tampón de acetonitrilo al 100 % y TFA al 0,1 %/agua. La pureza del péptido se evalúa mediante RP-HPLC analítica utilizando una columna Waters Symmetry Shield RP18 (3,5 um, 6 x 100 mm, número de pieza: 186000179) y el criterio de grupo es >95 %. La pureza del grupo principal del Compuesto II (Id. de sec. n.°:2) es >98,4 %. La posterior liofilización del conjunto principal de productos produce la sal<t>F<a>del péptido liofilizado. El peso molecular del Compuesto I (Id. de sec. n.°:1) se determina por LC/MS (Observado: [M+3H]<3+>= 1315,2; Calc. [M+3H]<3+>= 1315,5; PM observado (prom.) = 3942,6; Calc. PM (promedio) = 3943,4). El peso molecular del Compuesto II (Id. de sec. n.°: 2) se determina por LC/MS (Observado: [M+3H]<3+>= 1509,5; Calc. [M+3H]<3+>= 1509,7; PM observado (prom.) = 4525,5; Calc. PM (prom.) = 4526,1). A continuación se muestra un esquema del Compuesto II (Id. de sec. n.°:2) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeN en la posición 22, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0206]

[0208] Pueden utilizarse procesos similares a los descritos anteriormente, conocidos por los expertos en la técnica, para sintetizar la cadena principal peptídica, conjugar el resto enlazador de ácidos graso, examinar la pureza y confirmar el peso molecular de los compuestos de la invención descritos en la presente memoria.

[0209] Ejemplo 2: Preparación y purificación de los compuestos III y IV

[0210] Los compuestos III y IV se preparan según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0211] A continuación se muestra un esquema del Compuesto III (Id. de sec. n.°:3) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (<y>E) en la posición 1 (en donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0212]

[0214] El peso molecular del Compuesto III (Id. de sec. n.°:3) se determina por LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1314,9; Calc.

[0215] [M+3H]3+ = 1315,8; PM observado (prom.) = 3941,7; Calc. PM (prom.) = 3944,4).

[0216] A continuación se muestra un esquema del Compuesto IV (Id. de sec. n.°:4) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0217]

[0219] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1509,7; Calc. [M+3H]3+ = 1510,0; PM observado (prom.) = 4526,1; Calc. PM (prom.) = 4527,1).

[0220] Ejemplo 3: Preparación y purificación del Compuesto V y VI

[0221] Los compuestos V y VI se preparan según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0222] A continuación se muestra un esquema del Compuesto V (Id. de sec. n.°:5) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción de cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0223]

[0225] El peso molecular del Compuesto V (Id. de sec. n.°:5) se determina por LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1314,9; Calc.

[0226] [M+3H]3+ = 1315,5; PM observado (prom.) = 3941,7; Calc. PM (promedio) = 3943,4).

[0227] A continuación se muestra un esquema del Compuesto VI (Id. de sec. n.°:6) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción de la lisina en la posición 1, las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeF en la posición 15, NMeD en la posición 22, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0228]

[0230] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1509,4; Calc. [M+3H]3+ = 1509,7; PM observado (prom.) = 4525,2; Calc. PM (prom.) = 4526,1).

[0231] Ejemplo 4: Preparación y purificación del Compuesto VII y VIII

[0232] Los compuestos VII y VIII se preparan según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0233] A continuación se muestra un esquema del Compuesto VII (Id. de sec. n.°:7) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción de las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeL en la posición 12, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0234]

[0236] El peso molecular del Compuesto VII (Id. de sec. n.°:7) se determina por LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1317,9; Calc.

[0237] [M+3H]3+ = 1318,1; PM observado (prom.) = 3950,7; Calc. PM (prom.) = 3951,4).

[0238] A continuación se muestra un esquema del Compuesto VIII (Id. de sec. n.°:8) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción de la lisina en la posición 1, las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, aMeL en la posición 12, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0239]

[0241] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1512,2; Calc. [M+3H]3+ = 1512,4; PM observado (prom.) = 4533,6; Calc. PM (prom.) = 4534,2).

[0242] Ejemplo 5: Preparación y purificación del Compuesto IX

[0243] El Compuesto IX se elabora según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0244] A continuación se muestra un esquema del Compuesto IX (Id. de sec. n.°:9) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0245]

[0247] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1558,3; Calc. [M+3H]3+ = 1558,8; PM observado (prom.) = 4671,9; Calc. PM (prom.) = 4673,3).

[0248] Ejemplo 6: Preparación y purificación del Compuesto X

[0249] El Compuesto X se elabora según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0251] A continuación se muestra un esquema del Compuesto X (Id. de sec. n.°: 10) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (<y>E) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0252]

[0254] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1558,5; Calc. [M+3H]3+ = 1558,8; PM observado (prom.) = 4672,5; Calc. PM (prom.) = 4673,3).

[0255] Ejemplo 7: Preparación y purificación del Compuesto XI

[0256] El Compuesto XI se elabora según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0258] A continuación se muestra un esquema del Compuesto XI (Id. de sec. n.°:11) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0259]

[0261] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1553,2; Calc. [M+3H]3+ = 1553,4; PM observado (prom.) = 4656,6; Calc. PM (prom.) = 4657,2).

[0262] Ejemplo 8: Preparación y purificación del Compuesto XII

[0263] El Compuesto XII se elabora según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0264] A continuación se muestra un esquema del Compuesto XII (Id. de sec. n.°: 12) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0265]

[0267] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1577,4; Calc. [M+3H]3+ = 1577,8; PM observado (prom.) = 4729,2; Calc. PM (prom.) = 4730,3).

[0268] Ejemplo 9: Preparación y purificación del Compuesto XIII

[0269] El Compuesto XIII se elabora según los procesos descritos en el Ejemplo 1.

[0270] A continuación se muestra un esquema del Compuesto XIII (Id. de sec. n.°:13) utilizando los códigos de aminoácidos estándar de una sola letra con la excepción del ácido glutámico (yE) en la posición 1 (donde el enlace peptídico se forma utilizando su grupo de ácido carboxílico de cadena lateral en la posición gamma en lugar de la posición alfa típica), las cisteínas en las posiciones 2 y 7, Orn en la posición 11, lisina en la posición 26, y tirosina en la posición 37, donde se han expandido las estructuras de estos residuos de aminoácidos:

[0271]

[0273] El peso molecular se determina mediante LC/MS (Observado: [M+3H]3+ = 1481,2; Calc. [M+3H]3+ = 1481,3; PM observado (prom.) = 1440,6; Calc. PM (prom.) = 4441,0).

[0274] Preparación del puente de enlace disulfuro

[0276] Para formar el puente disulfuro, la solución de oxidación se prepara añadiendo 10 gotas de solución de yodo (yodo al 2 % en AcOH) a 40 ml de una solución de MeCN al 20 %/AcOH al 20 %/agua al 60 % en un matraz. Por separado, se elabora una solución peptídica disolviendo el sedimento peptídico, tras el secado al aire en 5 ml de AcOH. Con agitación, la solución peptídica se añade gota a gota a la solución de oxidación. Se añade más solución de yodo (yodo al 2 % en AcOH) según sea necesario para mantener una solución de color amarillo claro en el matraz. El color marrón claro/amarillo se mantiene durante 5 minutos después de añadir toda la solución peptídica. El yodo sobrante se neutraliza añadiendo una gota de ácido ascórbico saturado a la solución de oxidación. La solución se filtra con un filtro de 0,45 |jm y el péptido está listo para la purificación.

[0278] Ejemplo 10: Actividad funcional in vitro de los péptidos agonistas de la amilina

[0280] Los receptores AMY1 y CT son GPCR que están acoplados funcionalmente a las proteínas Gas. La estimulación de estos receptores produce un aumento de la producción de AMPc intracelular, que se puede detectar utilizando tecnologíasin vitroestándar. La actividadin vitrode los péptidos se mide por la cantidad de AMPc formada en células humanas con sobreexpresión de AMY1R y CTR.

[0282] Los receptores CT humanos se expresan de forma estable en células de vejiga urinaria humana (UM-UC-3 o UMUC3) bajo el control de un vector de expresión pcDNA. La estirpe celular UMUC3 se cultiva en MEM 1X (Meditech Inc., 17-305-CV) complementado con FBS al 10 %, solución antibiótica/antimicótica al 1 %, piruvato de sodio 1 mM, 1X MEM NEAA y 1X GlutaMAX-I. El plásmido de ADN de CTa-pcDNA3.1Hygro(+)(T2616) humano se transfecta en células UMUC3 utilizando reactivo de transfección LipofectAMINE 2000 (Invitrogen, 11668-019). Tras 20 días de selección, se miden los niveles de ARNm de diferentes clones para confirmar la expresión de hCTR. Para determinar la función de las células hCTR sobreexpresadas, se miden los niveles intracelulares de AMPc en respuesta a la calcitonina de salmón y se comparan con la expresión del ARNm de hCTR en cada clon.

[0284] Las estirpes celulares estables de AMY1R humano se generan mediante la transfección adicional de RAMP1-pCMVpuroPB (T14213) humano en células del clon hCTR UMUC3. Tras la selección, se miden los niveles de ARNm de RAMP1 humano de diferentes clones para confirmar la expresión de AMY1R humano.

[0286] Se cultivan células hAMY1R en MEM 1X (Corning) complementado con FBS al 10 %, solución antibiótica/antimicótica al 1 %, piruvato de sodio 1 mM, 1X<m>E<m>N<e>A<a>,<1>X GlutaMAX-1, 200 jg/m l de higromicina B, y 0,4 jg/m l de puromicina. Las células hCTR se cultivan en el mismo medio que carece de puromicina. Las células cultivadas se cultivan hasta alcanzar una confluencia del 70 % y se incuban durante una noche con medio fresco.

[0288] El día del ensayo, se dispensan 10 j l de tampón de ensayo (MEM sin rojo fenol (Corning, cat. n.° 17-305-CV), caseína al 0,1 %, IBMX 0,5 mM, HEPES 5 mM, pH 7,4) en cada pocillo de placas de color blanco de 384 pocillos recubiertas de poli-D-lisina (Corning, cat. n.° 354661). Se añaden péptidos diluidos en DMSO (200 nl/pocillo) en una dilución en serie de 1:3 utilizando el manipulador acústico de líquidos ECHO (Beckman). Las células cultivadas se separan con TrypLE Express (Gibco), se suspenden de nuevo en tampón de ensayo y en cada pocillo se dispensan 10 j l con 1200 células/pocillo (hCTR) o 1500 células/pocillo (hAMY1R). Las placas se incuban a temperatura ambiente durante 1 hora.

[0290] La cantidad de AMPc intracelular se cuantifica mediante la tecnología HTRF (fluorescencia homogénea resuelta en el tiempo; Cisbio) según las instrucciones del proveedor. Brevemente, se incuban 10 j l de conjugado de AMPc-d2 y 10 j l de conjugado anti-AMPc-criptato en tampón de lisis con las células tratadas a temperatura ambiente durante 60 min. La señal HTRF se detecta inmediatamente mediante un lector de placas Envision (Perkin-Elmer) para calcular la relación de fluorescencia entre 665 y 620 nm. Los datos brutos se convierten en la cantidad de AMPc (pmol/pocillo) mediante una curva estándar de AMPc generada para cada experimento. Los valores relativos de CE<50>se calculan a partir del intervalo superior-inferior de la curva de concentración-respuesta definida utilizando CT de salmón 1 nM (Bachem) como máximo y tampón solo como mínimo, con un programa de ajuste de curvas logísticas de cuatro parámetros (Genedata Screener<®>v12.0.4). Los compuestos de la presente solicitud muestran actividad selectiva en el receptor de amilina frente al receptor de calcitonina, como se muestra en la Tabla 1.

[0292] Tabla 1. Comparación de los datos de actividad funcional en los receptores de amilina y calcitonina

[0294]

[0295]

[0298] Ejemplo 11: Afinidad de uniónin vitrode péptidos agonistas de amilina con respecto a los receptores hAMYI y hCT

[0299] Las membranas de células humanas con sobreexpresión de AMY1R y CTR (descritas en el Ejemplo 10) se aislaron mediante un método estándar y se utilizaron para los ensayos de unión. Las constantes de disociación en equilibrio (Kd) para las diversas interacciones receptor/radioligando se determinan mediante análisis de unión de saturación utilizando los mismos reactivos y tampones que se describen a continuación para las pruebas de compuestos. Los valores de Kd determinados para las preparaciones de receptores utilizadas en este estudio son los siguientes: hAMY1R, 0,067 nM; receptor de calcitonina humano (hCTR), 0,046 nM.

[0301] Protocolo de unión de hAMY1R

[0303] La afinidad de unión al receptor (Ki) de los péptidos agonistas de rAMY, hCT y hAMY se determina mediante un ensayo de filtro de unión competitiva a radioligando. El tampón de ensayo consiste en (en mM) HEPES 50, pH 7,1, MgCh 5, KCl 5, bacitracina al 0,2 % (p/v), saponina al 0,003 % (p/v) y se utiliza para diluir la preparación del radioligando y la membrana. Las reacciones de unión se llevan a cabo en un volumen total de reacción de 0,1 ml en un bloque de ensayo de poliestireno de 96 pocillos profundos. La amilina de rata yodada (síntesis personalizada ViTrax; 2200 Ci/mmol; 125I-rAMY) se diluye inicialmente a aproximadamente 50 pM en el tampón de ensayo. Los compuestos de prueba y la unión no específica (NSB, definida como rAMY 300 nM) se añaden a alícuotas de tampón de radiactividad. Brevemente, los compuestos de prueba se diluyen a una concentración inicial de 200 nM, se diluyen en serie en etapas cuádruples en 125I-rAMY y, a continuación, se transfieren 0,05 ml de compuesto de prueba diluido, NSB o unión total (definida como 125I-rAMY puro) al bloque de ensayo de poliestireno de 96 pocillos. La reacción de unión se inicia mediante la adición de 0,05 ml de hAMY1R de 200 pg/ml diluido en tampón de ensayo a la radiactividad. Los bloques de ensayo se agitan suavemente en vórtice, se sellan con parafilm y se incuban a TA durante aproximadamente 20 horas. Treinta minutos antes de finalizar la incubación, se sumergen esteras filtrantes (esteras filtrantes impresas Perkin Elmer, cat. n.° 1450-421) en una solución que consiste en tampón de ensayo sin saponina pero complementada con seroalbúmina bovina sin ácidos grasos (FAF-BSA) al 0,1 % (p/v) y polietilenimina (PEI) al 0,5 % (v/v). Al final de la incubación, el ligando unido se separa del libre mediante la adición de un tampón de inactivación enfriado con hielo que consiste en NaCl 100 mM y TRIS-HCl 50 mM a pH 7,1 y se recoge inmediatamente sobre la estera filtrante mediante filtración al vacío con un recolector de filtros TomTec de 96 pocillos, utilizando el siguiente protocolo de filtración (Tiempo de secado, 7; Repetición del ciclo 3, 0; Tiempo de lavado, 1; Tiempo de remojo, 1; Tiempo de 1.a aspiración, 4; Tiempo de lavado/aspiración, 7; Tiempo de 2.a aspiración, 4; Presión de aire: 2 PSI). El intervalo de concentración de ensayo final para los péptidos ensayados en las curvas de respuesta es de 100 nM - 0,00038 nM.

[0304] Protocolo de unión de hCTR

[0306] La afinidad de unión al receptor (Ki) de los péptidos agonistas de rAMY, hCT y hAMY en las membranas de hCTR se determina mediante un ensayo de filtro de unión competitiva a radioligando. Los procedimientos del ensayo son similares a los del ensayo de unión de hAMY1R, excepto que se utiliza 125I-hCT (síntesis personalizada ViTrax; 2200 Ci/mmol) como ligando caliente. Las reacciones de unión se llevan a cabo en un volumen de reacción total de 0,2 ml con 125I-hCT 14 pM y 20 pg/ml de membrana hCTR, y se incuban durante 20 horas. El intervalo de concentración de ensayo final para los péptidos ensayados en las curvas de respuesta es de 2500 nM - 0,00128 nM. Los compuestos de la presente solicitud muestran actividad selectiva en el receptor de amilina frente al receptor de calcitonina, como se muestra en la Tabla 2.

[0307] Tabla 2. Uniónin vitro(Ki) a los receptores humanos de amilina y calcitonina

[0310]

[0313] Ejemplo 12: Efectosin vivosobre la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratas normales

[0315] Ratas macho Sprague Dawley de Envigo RMS (Indianápolis, IN) se mantienen con una dieta de pienso (2014; Teklad Global, Envigo RMS, Indianápolis, IN) y se alojan individualmente en una instalación con temperatura controlada (72,0 °F; 22,2 °C) con un ciclo de luz invertido de 12:12 horas (APAGADO a las 10:00) y libre acceso a alimento y agua. A las 10 semanas de edad, se registra el peso corporal en estado posprandial y el peso inicial con alimento, y a los animales se les administra una única inyección subcutánea (SC) de vehículo o péptido acilado (1 ml/kg), seguida de mediciones diarias del peso corporal y la ingesta de alimentos durante 4 días posteriores a la dosis. El análisis del área bajo la curva (AUC) se calcula tanto para el peso corporal como para la ingesta de alimentos frente al vehículo.

[0316] Tabla 3: Cambios en el peso corporal y la ingesta de alimentos durante 4 días en ratas Sprague Dawley tras una dosis única de péptido agonista de amilina de acción prolongada

[0318]

[0319]

[0321] Ejemplo 13: Efectosin vivosobre la ingesta de alimentos y el peso corporal en ratas con obesidad inducida por la dieta Ratas macho Long Evan de Envigo RMS (Indianápolis, IN) a las 14 semanas de edad reciben una dieta rica en grasas (40 % de kcal procedentes de grasas, TD.95217; Envigo RMS, Indianápolis, IN) hasta las 35-45 semanas de edad. Los animales se alojan individualmente en instalaciones con temperatura controlada (75,0 °F; 23,9 °C) con un ciclo de luz/oscuridad inverso de 12 horas (luces APAGADAS a las 10:00) y libre acceso a alimento y agua. Se registra el peso corporal y se determina la composición corporal (masa grasa) mediante análisis de resonancia magnética nuclear cuantitativa (ECHO MRI, analizador de composición 3-1; Echo Medical Systems, Houston, TX), seguido de una asignación aleatoria en grupos experimentales (n = 5). A las ratas se les administran inyecciones subcutáneas de vehículo o péptido (1 ml/kg) cada tres días (días 1, 4, 7, 10 y 13). Se registra el peso corporal diario y los cambios al final del tratamiento (día 14) se calculan como porcentajes respecto al peso previo al tratamiento (día 1). La composición corporal se determina el día 14 y los cambios en la masa grasa y la masa libre de grasa (peso corporal -masa grasa) se calculan a partir de los valores previos al tratamiento como cambios en gramos.

[0322] Tabla 4: Cambios en el peso corporal en un estudio de 2 semanas en ratas con obesidad inducida por dieta con péptidos agonistas de amilina

[0324]

[0325]

[0328] Ejemplo 14: Farmacocinética en ratas macho Sprague-Dawley

[0330] Se evalúa la farmacocinética del Compuesto II (Id. de sec. n.°:2), el Compuesto IV (Id. de sec. n.°:4), el Compuesto VI (Id. de sec. n.°:6) y el Compuesto VIII (Id. de sec. n.°:8) tras una única administración subcutánea de 30 nmol/kg a ratas Sprague Dawley macho. Se extraen muestras de sangre 1, 3, 6, 12, 24, 48, 72 y 96 horas después de la dosis SC. Las concentraciones plasmáticas individuales resultantes se utilizan para calcular los parámetros farmacocinéticos. Las concentraciones plasmáticas de péptidos (K<3>EDTA) se determinan mediante un método de LC/MS cualificado que mide la masa intacta de los péptidos. Cada péptido y un análogo como patrón interno se extraen del plasma. Se utiliza un Thermo Q-Exactive de alta resolución para la detección por Lc /MS. Los parámetros farmacocinéticos medios se muestran en la Tabla 5.

[0332] Tabla 5. Parámetros farmacocinéticos medios de los péptidos tras una única administración subcutánea de 30 nmol/kg a ratas Sprague Dawley macho.

[0334]

[0337] Ejemplo 15: Farmacocinética en macacos cangrejeros macho

[0339] Se evalúa la farmacocinética del Compuesto II (Id. de sec. n.°:2), el Compuesto IV (Id. de sec. n.°:4), el Compuesto VI (Id. de sec. n.°:6) y el Compuesto VIII (Id. de sec. n.°:8) tras una única administración subcutánea de 20 nmol/kg a macacos cangrejeros macho. Se extraen muestras de sangre 1,3, 6, 12, 24, 48, 72, 120, 168, 240, 336, 408, 504 horas posteriores a la dosis SC. Las concentraciones plasmáticas individuales resultantes se utilizan para calcular los parámetros farmacocinéticos. Las concentraciones plasmáticas de péptidos (K<3>EDTA) se determinan mediante un método de LC/MS cualificado que mide la masa intacta de los péptidos. Cada péptido y un análogo como patrón interno se extraen del plasma. Se utiliza un Thermo Q-Exactive de alta resolución para la detección por LC/MS. Los parámetros farmacocinéticos medios se muestran en la Tabla 6.

[0341] Tabla 6. Parámetros farmacocinéticos medios de los péptidos tras una única administración subcutánea de 20 nmol/kg a macacos cangrejeros.

[0343]

[0344]

[0347] Ejemplo 16: Evaluación del riesgo de inmunogenicidad

[0349] Ensayo de intemalización de células dendríticas (CD)

[0351] Este ensayo evalúa la capacidad de las CD humanas para internalizar los anticuerpos ensayados. Las células CD14+ se cultivan y se diferencian en CD inmaduras con IL-4 y GM-CSF. Los anticuerpos ensayados, el control de isotipo o un control positivo se incuban previamente con el agente de detección (Fab-QSY7-TAMRA) en una relación 1:1 para formar un complejo y a continuación se añaden a los cultivos. Las células se incuban durante un día. Tras la internalización y la escisión, se detecta una señal TAMRA positiva mediante citometría de flujo y se calcula un índice de internalización normalizado utilizando el control de isotipo IgG1-EN y el anticuerpo anti-CXCR.

[0353] Ensayo MAPPS (proteómica de péptidos asociados al MHC)

[0355] MAPPS perfila los péptidos presentados en MHC-II en células dendríticas humanas tratadas con las moléculas ensayadas. Las células CD14+, aisladas de las PBMC de donantes humanos sanos, se cultivan y se diferencian en CD inmaduras mediante incubación con IL-4 y GM-CSF. El día 4, el medio de cultivo se reemplaza por medio fresco que contiene las moléculas ensayadas. El día 5, se añade LPS para transformar las células en CD maduras. El día 6, las células se lisan en tampón RIPA con inhibidores de proteasa. La inmunoprecipitación de los complejos MHC-II se realiza utilizando un anticuerpo anti-MHC-II biotinilado acoplado a microesferas de estreptavidina. El complejo unido se eluye y se filtra. Los péptidos MHC-II aislados se analizan mediante un espectrómetro de masas. Las identificaciones de péptidos se generan mediante un proceso proteómico interno que utiliza algoritmos de búsqueda sin enzimas y una base de datos bovina/humana con secuencias de prueba adjuntas a la base de datos. Se utiliza un flujo de trabajo KNIME para procesar los archivos de identificación de las muestras. Los péptidos identificados a partir de los artículos de prueba se alinean contra la secuencia original de la molécula de prueba. El resultado se utiliza para determinar el porcentaje de donantes que muestran péptidos MHC-II de regiones de la molécula de prueba. El Compuesto II, el Compuesto IV, el Compuesto VI, el Compuesto VIII, un compuesto representativo del documento US 9.023789 (en lo sucesivo en la presente memoria “ Compuesto '789” ) y la pramlintida se ensayan en el ensayo MAPP. El Compuesto II, el Compuesto IV, el Compuesto VI y el Compuesto VIII no muestran péptidos en los complejos MHC-II del ensayo. El compuesto '789 muestra un grupo peptídico que abarca los residuos 8-23 en los complejos MHC-II. La pramlintida muestra dos grupos peptídicos que, en total, abarcan los residuos 1-34 que se muestran en los complejos MHC-II.

[0357] TCEM informático (motivo expuesto a linfocitos T)

[0359] Este análisis evalúa la probabilidad de que grupos de péptidos específicos, identificados por MAPPS, activen las células T CD4+. Las secuencias peptídicas identificadas mediante MAPPS que contienen residuos no germinales se introducen en una página de predicción de unión al MHCII de la ImmunoEpitope Database (IEDB) Analysis Resource. Se selecciona el método de predicción recomendado por la IEDB. La predicción considera los 27 alelos HLA-DR, -DP y -DQ más frecuentes para cubrir una fracción significativa de la población humana. Cada secuencia de entrada, con una longitud igual o superior a 15 residuos, se divide en 15 meros superpuestos, separados por un aminoácido, para abarcar toda la secuencia. Para cada péptido, se genera un rango de percentil comparando la puntuación del péptido con las puntuaciones de cinco millones de 15 meros aleatorios seleccionados de la base de datos SWISSPROT. Los aminoácidos ubicados en las supuestas posiciones P-1, P2, P3, P5, P7 y P8 del registro generan el TCEM, y el riesgo se define en función de la presencia de residuos no germinales en estas posiciones. Los residuos no germinales y la probabilidad de unión del núcleo a múltiples alelos se indican en una representación gráfica y se consideran para la evaluación del riesgo de inmunogenicidad.

[0361] Unión al suero por MS

[0363] Este ensayo evalúa la unión inespecífica de un candidato de prueba a proteínas séricas humanas. Los anticuerpos analizados se recubren sobre una microplaca Immulon 4 HBX. Tras el bloqueo, se añade suero humano y se incuba durante la noche. La placa se lava y las proteínas unidas se eluyen, reducen, alquilan y digieren. Los péptidos se analizan mediante un espectrómetro de masas. La identificación de péptidos se genera mediante un proceso proteómico interno que utiliza algoritmos de búsqueda con especificidad de enzimas trípticas y una base de datos humana con las secuencias de las moléculas de prueba adjuntas. Los iones se cuantifican mediante herramientas proteómicas internas (Chrom-Alignment, Metaconsense y Quant) y se analizan en JMP mediante análisis unidireccional/plataforma de la prueba de la t de Student de cada par. Análisis de log2auc para iones mediante JMP: Ajuste de Y por X por cada ion/comparar medias/todos los pares, HSD de Tukey.

[0365] Ensayo de proliferación de linfocitos T

[0367] Este ensayo evalúa la capacidad de los anticuerpos ensayados o péptidos MAPPS ensayados para activar los linfocitos T CD4+ mediante la inducción de la proliferación celular. Las Pb Mc agotadas en células T c D8+ se preparan y etiquetan con CFSE. Cada muestra se ensaya con un medio de control, hemocianina de lapa californiana (KLH; control clínico positivo), anticuerpos ensayados o péptidos MAPPS ensayados. Los cultivos se incuban durante 7 días. El día 7, las muestras se analizan mediante citometría de flujo.

[0369] Reactividad preexistente (formato de ensayo ACE)

[0371] Este ensayo evalúa la presencia de anticuerpos preexistentes (ADA) contra las moléculas ensayadas en suero humano normal (NHS) sin tratamiento previo. El NHS diluido se incuba durante una noche en una placa de estreptavidina Pierce recubierta con moléculas biotiniladas ensayadas. Al día siguiente, las proteínas de unión capturadas se eluyen con ácido, se les aplica un recubrimiento duro con una placa de mesoescala (MSD) y se detectan con una combinación de molécula marcada con biotina y estreptavidina marcada con rutenio. Si hay anticuerpos antifármaco presentes, estos se unirán al fármaco marcado y la señal resultante se denomina señal de nivel 1 (expresada como electroquimioluminiscencia). Esta señal se confirma en el nivel 2 añadiendo un exceso de molécula de ensayo no marcada en la etapa de detección, lo que da como resultado la supresión de la señal de nivel 1. La presencia de anticuerpos antifármaco preexistentes se expresa como la magnitud del percentil 90 de la inhibición de nivel 2. El percentil 90 de la inhibición de nivel 2 es una herramienta estadística para evaluar la magnitud de la especificidad de la reactividad de nivel 1. Este percentil 90 se utiliza para clasificar las moléculas en términos de riesgo de ADA.

[0373] Tabla 7. Resumen de evaluación del riesgo de inmunogenicidad

[0375]

[0378] Ejemplo 17: Eficaciain vivodel Compuesto II en ratas con obesidad inducida por la dieta (OID) junto con otros compuestos incretínicos

[0380] Este estudio se lleva a cabo para investigar el efecto del Compuesto II en la diabetes y/o la obesidad en ratas con OID cuando se administra junto con otros compuestos incretínicos, incluyendo un agonista de GLP-1 (Compuesto XVII), un análogo de oxintomodulina (Compuesto XVIII) y un triagonista de glucagón, GLP-1 y GIP (Compuesto XIX). En los siguientes estudios se utilizan ratas macho Long Evans (Envigo) con obesidad inducida por la dieta (OID), mantenidas con una dieta rica en calorías desde su llegada a Lilly (TD95217; Teklad, Madison, WI). Los animales se alojan individualmente en instalaciones con temperatura controlada (24 °C) con un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas (luces encendidas a 2200) y libre acceso a alimento (TD95217) y agua.

[0381] Las ratas se asignan aleatoriamente según su peso corporal, de modo que cada grupo experimental tenga un peso corporal similar. Los pesos corporales oscilan entre 529 y 823 gramos.

[0383] Cada grupo contiene cinco ratas. El vehículo y el Compuesto II (1 nmol/kg) se disuelven en vehículo (Tris-HCl 20 mM a pH 8 PS80 al 0,02 %) y se administran mediante inyección subcutánea (SC) (1 ml/kg) a ratas con OID con acceso a alimento a voluntad de 30 a 90 minutos antes del inicio del ciclo de oscuridad cada 3 días durante 14 días. Las inyecciones SC se realizan los días 1, 4, 7, 10 y 13. El peso corporal y la ingesta de alimentos se miden diariamente durante todo el estudio. Los cambios absolutos en el peso corporal se calculan restando el peso corporal del mismo animal antes de la primera inyección de la molécula.

[0385] Al final del estudio, se extrae sangre para medir la glucosa en sangre y la insulina plasmática. La glucosa en sangre se mide con glucómetros AccuChek (Roche, Indianápolis, IN). La insulina se mide mediante ELISA (MSD, Rockville, MD).

[0387] Todos los datos se presentan como media ± SEM de 5 animales por grupo. El análisis estadístico se realiza mediante ANOVA unidireccional, seguido de la prueba de comparación múltiple de Tukey para comparar los grupos de tratamiento con el grupo de vehículo o entre sí. Las diferencias significativas se identifican con p<0,05.

[0389] Tabla 8: Efecto del Compuesto II con y sin combinaciones con el Compuesto XVII, el Compuesto XVIII o el Compuesto XIX sobre el peso corporal y la ingesta acumulada de alimentos.

[0391]

[0394] Se observa una mayor pérdida de peso con la combinación del Compuesto II con el Compuesto XVII, el Compuesto XVIII o el Compuesto XIX que con el Compuesto II solo.

[0396] Id. de sec. n.°:1: Compuesto I

[0398] YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0400] Id. de sec. n.°:2: Compuesto II

[0402] YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0404] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0406] en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula (yE)<2>-CO-(CH<2>)<18>-CO<2>H

[0408] Id. de sec. n.°: 3: Compuesto III

[0410] YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0411] Id. de sec. n.°:4: Compuesto IV

[0412] YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0413] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0414] en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula (<y>E)<2>-CO-(CH<2>)<l 8>-CO<2>H

[0415] Id. de sec. n.°: 5: Compuesto V

[0416] KCETATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0417] Id. de sec. n.°:6 Compuesto VI

[0418] KCETATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH<2>

[0419] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0420] en donde la lisina en la posición 1 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula (yE)<2>-CO-(CH<2>)i<8>-CO<2>H

[0421] Id. de sec. n.°: 7: Compuesto VII

[0422] KCETATCATG-Orn-aMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH<2>, en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0423] Id. de sec. n.°:8: Compuesto VIII

[0424] KCETATCATG-Orn-aMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH<2>

[0425] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0426] en donde la lisina en la posición 1 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula (<y>E)<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H

[0427] Id. de sec. n.°:9: Compuesto IX

[0428] YE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0429] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0430] en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula AEEA<2>-YE-CO-(CH<2>)<l 8>-CO<2>H

[0431] Id. de sec. n.°:10: Compuesto X

[0432] YE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0433] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0434] en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula YE-AEEA<2>-CO-(CH<2>)<l 8>-CO<2>H

[0435] Id. de sec. n.°:11: Compuesto XI

[0436] YE-CNTATCATGKLAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0437] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0438] en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula (yE)<2>-AEEA-CO-(CH<2>)<l 8>-CO<2>H

[0439] Id. de sec. n.°:12: Compuesto XII

[0440] YE-CNTATCATQ-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0441] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0442] en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula AEEA<2>-YE-CO-(CH<2>)<l 8>-CO<2>H

[0443] Id. de sec. n.°:13: Compuesto XIII

[0444] YE-CGTATCATG-Orn-LAEFLVRSSNNFGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0445] en donde hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0446] en donde la lisina en la posición 26 está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula<y>E<2>-CO-(CH<2>)-CO<2>H

[0447] Id. de sec. n.°: 14: Compuesto XIV

[0448] X<a a 1>-C-X<aa3>-TATCAT-X<a a 10>-X<a a 11>-X<a a 12>-AE-X<a a 15>-LVRSS-X<aa21>-X<aa22>-FGP-X<a a 26>-LPPTEVGSNTY-<NH2.>

[0449] en donde

[0450] Xaa<1>es K o yE

[0451] Xaa<3>es E, N o G

[0452] Xaa<10>es G o Q;

[0453] Xaan es Orn o K;

[0454] Xaa<12>es L o aMeL

[0455] Xaa<15>es aMeF o F

[0456] Xaa<21>es N o H

[0457] Xaa<22>es NMeD, NMeN o N

[0458] Xaa<26>es I o K

[0459] Id. de sec. n.°:15: Compuesto XV; Pramlintida

[0460] KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGPILPPTNVGSNTY-NH<2>

[0461] En donde hay un puente disulfuro entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0462] Id. de sec. n.°:16: Compuestos XVI; hCT

[0463] CGNLSTCMLGTYTQDFNKFHTFPQTAIGVGAP-NH<2>

[0464] En donde hay un puente disulfuro entre las cisteínas en las posiciones 1 y 7

[0465] Id. de sec. n.°: 17: hAMY

[0466] KCNTATCATQRLANFLVHSSNNFGAILSSTNVGSNTY-NH<2>

[0467] En donde hay un puente disulfuro entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7

[0468] Id. de sec. n.°:18 Compuesto XVII

[0469] H-Aib-EGTFTSDVSSYLEGQAAK((2-[2-(2-Amino-etoxi)-etoxi]-acetil)<2>-(YGlu)-CO-(CH<2>)<16>-CO<2>H)EFIAWLVRGRGId. de sec. n.°:19 Compuesto XVIII

[0470] H-Aib-QGTFTSDYSKYLDEKKAK((2-[2-(2-Amino-etoxi)-etoxi]-acetil)2-(YGlu)-CO-(CH2)<i8>-CO2H)EFVEWLLEGGPSSG-NH2

[0471] Id. de sec. n.°:20 Compuesto XIX

[0472] Y-Aib-QGTFTSDYSI-aMeL-LDKK((2-[2-(2-Amino-etoxi)-etoxi]-acetil)-(YGlu)-CO-(CH2)<i8>-CO2H)AQ-Aib-AFIEYLLEGGPSSGAPPPS-NH<2>

[0473] Id. de sec. n.°:21

[0474] YX<1>EGTFTSDYSIX<2>LDKIAQKAFVQWLIAGGPSSGAPPPS

[0475] en donde X<1>es Aib; X<2>es Aib; K en la posición 20 se modifica químicamente a través de la conjugación con el grupo épsilon-amino de la cadena lateral de K con (2-[2-(2-Amino-etoxi)-etoxi]-acetil)2-(YGlu)-CO-(CH2)<i8>-CO2H; y el aminoácido carboxiterminal está amidado como una amida primaria carboxiterminal.

[0476] Id. de sec. n.°:22: Cadena principal del Compuesto I

[0477] YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeN-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0478] Id. de sec. n.°:23: Cadena principal del Compuesto III

[0479] YE-CNTATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPKLPPTEVGSNTY-NH<2>

[0480] Id. de sec. n.°:24: Cadena principal del Compuesto V

[0481] KCETATCATG-Orn-LAE-aMeF-LVRSSN-NMeD-FGPILPPTEVGSNTY-NH<2>

[0482] Id. de sec. n.°: 25: Cadena principal del Compuesto VII

[0483] KCETATCATG-Orn-aMeL-AEFLVRSSHNFGPILPPTEVGSNTY-NH<2>

Claims

1. REIVINDICACIONES

Un compuesto que comprende:

X<a a 1->C-X<aa3->-TATCAT- X<aa10>“ X<aa11>“X<a a 12>-AE-X<a a 15>-LVRSS-X<aa21>“X<aa22>“ FGP-X<aa26->-LPPTEVGSNTY (SEQ ID NO: 14),

en la que

Xaa<1>es K o yE;

Xaa<3>es E, N o G;

Xaa<10>es G o Q;

Xaan es Orn o K;

Xaa<12>es L o aMeL;

Xaa<15>es aMeF o F;

Xaa<21>es N o H;

Xaa<22>es NMeD, NMeN o N; y Xaa<26>es I o K,

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

El compuesto según la reivindicación 1, en el que

Xaa<1>es<y>E;

Xaa<3>es N;

Xaa<10>es G;

Xaan es Orn;

Xaa<12>es L;

Xaa<15>es aMeF;

Xaa<21>es N;

Xaa<22>es NMeN; y

Xaa<26>es K (SEQ ID NO:22),

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

El compuesto según la reivindicación 1, en el que

Xaa<1>es<y>E;

Xaa<3>es N;

Xaa<10>es G;

Xaan es Orn;

Xaa<12>es L;

Xaa<15>es aMeF;

Xaa<21>es N;

Xaa<22>es NMeD; y

Xaa<26>es K (SEQ ID NO:23),

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. El compuesto según la reivindicación 2 o 3, en el que la lisina en Xaa<26>está unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (YE)<2>-CO-(CH<2>)<i8>-CO<2>H.

5. El compuesto según la reivindicación 1, en el que

Xaa<1>es K;

Xaa<3>es E;

Xaa<iü>es G;

Xaa<11>es Orn;

Xaa<i2>es L;

Xaaes aMeF;

Xaa<2i>es N;

Xaa<22>es NMeD; y

Xaa<26>es I (SEQ ID NO:24),

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. El compuesto según la reivindicación i, en el que

Xaaes K;

Xaa<3>es E;

Xaa<iü>es G;

Xaaes Orn;

Xaa<i2>es aMeL;

Xaa<i5>es F;

Xaa<2i>es H;

Xaa<22>es N; y

Xaa<26>es I (SEQ ID NO:25),

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

7. El compuesto según la reivindicación 5 o 6, en el que la lisina en Xaaestá unida a un resto enlazador de ácidos grasos según la fórmula: (YE)<2>-CO-(CH<2>)<i8>-CO<2>H.

8. El compuesto según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que hay un puente tioacetal entre las cisteínas en las posiciones 2 y 7.

9. El compuesto según la reivindicación i, en el que el compuesto se selecciona del grupo que consiste en la SEQ ID NO:i, SEQ ID NO:2, SEQ ID NO:3, SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5, SEQ ID NO:6, SEQ ID NO:7, SEQ ID NO:8, SEQ ID NO:9, SEQ ID NO:i0, SEQ ID N O :ii, SEQ ID NO:i2 y la SEQ ID NO:i3, o una sal farmacéutica del mismo.

10. Un compuesto que consiste en la SEQ ID NO:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

i09

11. Un compuesto que consiste en la SEQ ID NO:4 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

12. Un compuesto que consiste en la SEQ ID NO:6, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

13. Un compuesto que consiste en la SEQ ID NO:8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

14. Un compuesto que comprende la SEQ ID NO:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

15. Un compuesto que comprende la SEQ ID NO:4 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

16. Un compuesto que comprende la SEQ ID NO:6, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

17. Un compuesto que comprende la SEQ ID NO:8, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

18. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y uno o más portadores, diluyentes o excipientes farmacéuticamente aceptables.

19. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

20. El compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento de una afección seleccionada del grupo que consiste en diabetes tipo 2, obesidad, dislipidemia y NASH.