ES2966383T3 - Composición para el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal - Google Patents

Composición para el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal Download PDF

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Abstract

Se divulga una composición farmacéutica que comprende al menos un probiótico y al menos un caroteno, para el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal. La asociación de estos ingredientes permitió obtener un claro efecto sinérgico. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Composición para el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal
CAMPO DE LA INVENCIÓN
La presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos un probiótico y al menos un caroteno, para el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal.
La asociación de estos ingredientes permitió obtener un claro efecto sinérgico.
ESTADO LA TÉCNICA
El cuerpo humano contiene un registro más de células microbianas (~1014) que las células humanas. Estos microorganismos prácticamente colonizan todas las superficies del cuerpo humano que están expuestas al entorno externo, incluyendo la piel, la cavidad oral, el tracto respiratorio, urogenital y gastrointestinal y todos juntos constituyen el microbioma. De estos sitios del cuerpo, el tracto gastrointestinal (GI) es, con diferencia, el órgano más densamente colonizado. La compleja comunidad de microorganismos que residen en el tracto gastrointestinal o lo atraviesan se denomina microbiota intestinal (MI).
El tracto GI es un ecosistema complejo y dinámico que contiene una colección diversa de microorganismos. La gran mayoría de todas las células microbianas en el tracto gastrointestinal humano son bacterias porque pertenecen, a nivel de filo, a dos filos, elBacteroidetesy elFirmicutes.La fisiología del huésped y la microbiota intestinal están íntimamente relacionadas. Esto es evidente por el hecho de que cada región anatómica distinta a lo largo del tracto gastrointestinal se caracteriza por sus propias condiciones físico-químicas, y de que estas condiciones cambiantes ejercen una presión selectiva sobre la microbiota. Las condiciones físico-químicas que influyen en la composición de la microbiota intestinal incluyen: motilidad intestinal, pH, potencial redox, suministro de nutrientes, secreciones del huésped (p. ej., ácido clorhídrico, enzimas digestivas, bilis y moco) y la presencia de una válvula ileocecal intacta. Por tanto, el tracto GI alberga muchos nichos distintos, cada uno de los cuales contiene un ecosistema microbiano diferente que varía de acuerdo con la ubicación dentro del tracto GI. Esto ya se demuestra por el hecho de que la densidad microbiana aumenta a lo largo del tracto gastrointestinal. De hecho, por gramo de contenido intestinal, la densidad microbiana aumenta de 101-104 células microbianas en el estómago y el duodeno, de 104-108 células en el yeyuno y el íleon, de 1010-1012 células del colon y las heces.
Recientemente, se estimó que el genoma colectivo de la MI humana (es decir, el microbioma intestinal humano) contiene 3,3 millones de genes microbianos, lo que supone ~150 veces más genes que el genoma humano. La presencia de esta amplia gama de genes, además del genoma propio de la solicitante, sugiere que se puede esperar una profunda influencia de los microorganismos intestinales en el cuerpo humano.
La MI juega un papel importante en los procesos metabólicos, nutricionales, fisiológicos e inmunológicos del cuerpo humano. Ejerce importantes actividades metabólicas al extraer energía de polisacáridos dietéticos que de otro modo serían indigeribles, tales como el almidón resistente y las fibras dietéticas. Estas actividades metabólicas también conducen a la producción de nutrientes fundamentales tales como ácidos grasos de cadena corta (AGCC), vitaminas (p. ej., vitamina K, vitamina B12 y ácido fólico) y aminoácidos, que los seres humanos no pueden producir por sí mismos.
Algunos de estos metabolitos relacionados con la microbiota, tales como los AGCC y los ácidos biliares, desempeñan un papel fundamental, por ejemplo, en la regulación de la homeostasis de la glucosa del huésped. De hecho, la composición y función de la microbiota pueden integrar los estados funcionales de la ingesta de alimentos, afectando la homeostasis energética de todo el cuerpo, la tolerancia a la insulina y la respuesta glucémica en estado estacionario y durante la progresión de la obesidad y la T2DM.
Los AGCC, incluidos el acetato, el propionato y el butirato, son metabolitos ampliamente estudiados que se producen mediante la fermentación bacteriana de polisacáridos. Se ha informado que la complementación dietética con AGCC mejora la tolerancia a la glucosa y la sensibilidad a la insulina tanto en seres humanos delgados como obesos y diabéticos. Los ácidos biliares se derivan del catabolismo del colesterol hepático. Los ácidos biliares recién sintetizados se conjugan y transportan a la vesícula biliar y la contracción posprandial de la vesícula biliar vacía los ácidos biliares hacia la luz intestinal. Además de su papel en la digestión de las grasas de la dieta, los ácidos biliares ahora se reconocen como importantes reguladores del metabolismo de los lípidos, la homeostasis energética y el control glucémico, y pueden interactuar fuertemente con la microbiota intestinal.
Otro papel importante de la MI es que interviene en la defensa contra patógenos a través de mecanismos tales como la resistencia a la colonización y la producción de compuestos antimicrobianos. Además, la MI participa en el desarrollo, la maduración y el mantenimiento de las funciones sensoriales y motoras del GI, la barrera intestinal y el sistema inmunológico de las mucosas.
La MI y el huésped han evolucionado conjuntamente. La evolución humana ha tenido lugar en medio de un mundo de microorganismos. Los microorganismos simbióticos han ocupado los nichos que ofrece el tracto gastrointestinal y probablemente se adaptaron a las circunstancias locales. Esto, a su vez, puede haber influido en la evolución humana en términos de necesidades metabólicas y nutricionales. En última instancia, el hombre depende de su MI para una serie de funciones vitales y, por tanto, estos microorganismos intestinales pueden contribuir a la salud. La alteración de la composición de la microbiota, también conocida como disbiosis, se ha reconocido en diversas enfermedades, muchas de las cuales están asociadas con el tracto GI.
De hecho, se ha sugerido un papel de la MI en la patogénesis de varias enfermedades y trastornos. Múltiples estudios realizados en los últimos años plantean la hipótesis de que el microbioma es de vital importancia para las funciones normales del huésped, mientras que las interacciones deterioradas del microbioma del huésped contribuyen a la patogénesis de numerosos trastornos comunes. De estos, recientemente se ha prestado mucha atención a la participación del microbioma en la patogénesis de la intolerancia a la glucosa, la diabetes mellitus tipo 2 (T2DM) y otros trastornos metabólicos que comprenden el síndrome metabólico (MetS), incluida la obesidad y la enfermedad del hígado graso no alcohólico y sus complicaciones.
En particular, varios estudios sugirieron una asociación entre la alteración composicional y funcional del microbioma (disbiosis) y el riesgo de desarrollar patologías asociadas al síndrome metabólico, como la obesidad y la T2DM.
En un estudio de 292 individuos daneses, se informó que los participantes con resistencia a la insulina (así como con mayor adiposidad) se caracterizan por una situación de disbiosis debido a una mayor abundancia deProteobacteriayBacteroidetes.Otro estudio describió una mayor abundancia de los mismos filos en hombres diabéticos, así como una correlación positiva entreBacteroidetes a Firmicutesratio y niveles elevados de glucosa en plasma. Además, Qin et al. informaron en su cohorte de 345 individuos chinos la asociación entre T2DM y niveles más altos de E. coli yBacteroidetes,así comoAkkermansia muciniphilay diversosClostridiia.
No solo la T2DM parece estar relacionada con la microbiota disbiótica, sino que también la obesidad, una enfermedad compleja caracterizada por un exceso de acumulación de grasa corporal y un factor de riesgo bien establecido para la aparición de hiperglucemia y resistencia a la insulina, se ha asociado con cambios a nivel de filo en la composición de la MI. De hecho, se ha informado que los sujetos obesos y no obesos tienen un perfil microbiano intestinal diferente. En particular, la riqueza microbiana es en general mayor en sujetos delgados que en sujetos obesos que tienen una relación menor deBacteroidetesaFirmicutes,y esto se correlaciona con un perfil metabólico más saludable.
Una de las características patogénicas subyacentes de la obesidad y la T2DM es la presencia de inflamación sistémica de bajo grado. Cuando el tejido adiposo se vuelve hipertrófico, secreta factores proinflamatorios (adipocinas) que provocan la infiltración de leucocitos, liberando a su vez citocinas que inducen resistencia a la insulina y, en consecuencia, hiperglucemia, es decir, T2DM. La hiperglucemia prolongada "agota" las células beta productoras de insulina, lo que finalmente resulta en una reducción de la producción endógena de insulina. Los efectos negativos sobre la hiperglucemia a largo plazo a veces se denominan glucotoxicidad y actúan en combinación con la lipotoxicidad, es decir, influencias negativas sobre las células beta pancreáticas debido al aumento de los niveles sanguíneos de ácidos grasos libres.
Si bien se ha discutido en gran medida que el tejido adiposo es una fuente importante de inflamación, la microbiota intestinal está ahora emergiendo como otro contribuyente a la inflamación sistémica. Una hipótesis que vincula la obesidad y la resistencia a la insulina con cambios en la microbiota intestinal es la "hipótesis del epitelio permeable", según la cual la disbiosis inducida por una "dieta occidental" grasa da como resultado una mayor permeabilidad intestinal, lo que permite que las endotoxinas bacterianas entren en la circulación. Estas endotoxinas tales como los lipopolisacáridos (LPS) desencadenan, a su vez, una inflamación de bajo grado que conduce a resistencia a la insulina (RI) y, en consecuencia, a hiperglucemia.
Por lo tanto, los factores dietéticos promueven indirectamente una inflamación de bajo grado a través de modificaciones de la microbiota intestinal. De hecho, la "dieta occidental" tiene un contenido notoriamente bajo de fibra de origen vegetal y se asocia con una diversidad microbiana intestinal reducida en comparación con las dietas ricas en fibra. Se ha informado que las fibras dietéticas son fermentadas por microbios comensales de AGCC, tales como acetato, propionato y butirato, que sirven como fuentes de energía para los colonocitos, regulan los niveles de pH intestinal y afectan el metabolismo energético del huésped. Específicamente, se ha demostrado que el butirato regula la maduración de las células dendríticas humanas e inhibe las interacciones inflamatorias adipocitos-macrófagos, mientras que el propionato reduce la producción de adipocinas en el tejido adiposo. Por lo tanto, una reducción en el contenido de fibra puede resultar en una menor diversidad microbiana y niveles más bajos de metabolitos microbianos beneficiosos, incluidos AGCC y ácidos biliares secundarios. Por lo tanto, la falta de fibra puede contribuir a la inflamación sistémica de bajo grado típica de los pacientes obesos y/o con T2DM.
Dado que se sabe que la MI juega un papel importante en la salud y las enfermedades humanas, la manipulación de estos microorganismos mediante probióticos, prebióticos y simbióticos son enfoques atractivos para mejorar y mantener la salud. Según la definición formulada por la Organización Mundial de la Salud (OMS), los probióticos son "microorganismos vivos que, cuando se administran en cantidades adecuadas, confieren un beneficio para la salud del huésped. Además, los prebióticos se utilizan para manipular la composición de la microbiota en el tracto gastrointestinal. La definición de prebióticos es incluso más genérica que la de probióticos: "ingredientes alimentarios no digeribles que, cuando se consumen en cantidades suficientes, estimulan selectivamente el crecimiento y/o la o las actividades de uno o un número limitado de géneros/especies microbianos en la microbiota intestinal que confieren beneficios para la salud al huésped". Mezclas de probióticos y prebióticos se denominan simbióticos.
El documento US2007/178078 describe un método para potenciar el equilibrio de bacterias beneficiosas y nocivas en el tracto gastrointestinal de un animal que padece o está en riesgo de padecer enfermedad inflamatoria intestinal (EII) mediante la administración de una composición que comprende un antioxidante y un probiótico.
Se han atribuido numerosos efectos beneficiosos para la salud a los microorganismos probióticos. En general, estos beneficios para la salud se pueden clasificar en tres niveles de acción probiótica. En primer lugar, los microorganismos probióticos pueden actuar directamente con el tracto GI (nivel 1), por ejemplo mediante interacción directa con la MI o mediante actividades enzimáticas. En segundo lugar, pueden interactuar directamente con la capa mucosa intestinal y el epitelio (nivel 2), influyendo así en la función de la barrera intestinal y en el sistema inmunológico de la mucosa. En tercer lugar, los probióticos pueden tener efectos fuera del tracto GI (nivel 3), por ejemplo, en el sistema inmunológico sistémico y otros órganos, tales como el hígado y el cerebro. En general, el mecanismo de acción de los probióticos es bastante heterogéneo y depende de la cepa específica de microorganismo utilizada.
Como se ha comentado anteriormente, la disbiosis de la microbiota intestinal se ha asociado con un número creciente de enfermedades. Dado que se demostró que es posible modular la composición de la microbiota intestinal mediante probióticos/prebióticos, la intervención probiótica/prebiótica tiene el potencial de contrarrestar la disbiosis intestinal y así restaurar la salud. De hecho, la terapia con probióticos no solo introduce cepas bacterianas con propiedades antiinflamatorias, sino que también induce aumentos de la relaciónBacteroidetesIFirmicutesy de cepas beneficiosas específicas como se demuestra en estudios en animales y seres humanos. Es importante destacar que la mejora exitosa de la microbiota a través de probióticos/prebióticos ha mostrado resultados prometedores en la prevención y el tratamiento de la obesidad y enfermedades relacionadas, incluso sin modular la ingesta calórica. Por ejemplo, el tratamiento con probióticos redujo los niveles de glucosa en sangre y hemoglobina A1c en pacientes con T2DM y puede tener efectos antidiabéticos al proteger las células beta pancreáticas del daño. Además, estudios en individuos sanos y obesos demuestran una expansión de las bacterias beneficiosas de la MI, tales como especies deBifidobacteriayFaecalibacterium prausnitziidurante el tratamiento prebiótico. Además, la administración del prebiótico oligofructosa en ratones obesos regula el apetito, reduce la obesidad y los trastornos metabólicos relacionados. Estas mejoras están asociadas con un aumento de 100 veces en la abundancia deAkkermansia muciniphila,mayor crecimiento deBifidobacteriayLactobacilli,y expresión de péptidos antimicrobianos por parte del huésped. Dado que cada vez hay más pruebas de que la disbiosis de la microbiota intestinal está asociada con la patogénesis de trastornos tanto intestinales como extraintestinales, tales como la enfermedad inflamatoria intestinal, el síndrome del intestino irritable (SII) y la enfermedad celíaca, la alergia, el asma, el síndrome metabólico, enfermedades cardiovasculares y obesidad, es un objeto de la presente invención proporcionar un producto que sea capaz de superar los inconvenientes de los tratamientos conocidos y al mismo tiempo aumentar la eficacia de las terapias dirigidas al tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal.
SUMARIO DE LA INVENCIÓN
El objetivo anterior se ha conseguido mediante una dosis unitaria farmacéutica que comprende al menos un probiótico y al menos un caroteno, como se reivindica en la reivindicación 1.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a la dosis unitaria farmacéutica para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
En otro aspecto, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos un probiótico, al menos un caroteno y al menos una xantofila.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a la composición farmacéutica para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma, en la que dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a un complemento alimenticio que comprende la dosis unitaria farmacéutica o la composición farmacéutica e ingredientes alimentarios adecuados.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a un kit que comprende:
i) una primera formulación que comprende al menos un probiótico y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables;
ii) una segunda formulación que comprende al menos un caroteno y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, y opcionalmente al menos una xantofila,
iii) un folleto que comprende instrucciones para usar el kit según se reivindica, para uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal, y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
En otro aspecto, la presente invención se refiere a un probiótico para la producción endógena de ácido abscísico en presencia de un caroteno, para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere al ácido abscísico obtenido mediante un probiótico en presencia de un caroteno, para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma. BREVE DESCRIPCIÓN DE LAS FIGURAS
Las características y ventajas de la presente invención resultarán evidentes a partir de la siguiente descripción detallada, los ejemplos de trabajo proporcionados con fines ilustrativos y las figuras adjuntas, en las que:
- la Figura 1 muestra los resultados de la incubación de probióticos con betacaroteno, en términos de producción de ácido abscísico, según el Ejemplo 1;
- la Figura 2 muestra los resultados de la incubación de probióticos con diferentes carotenoides, en términos de producción de ácido abscísico, según el Ejemplo 1;
- la Figura 3 muestra los resultados de la incubación del probiótico con un caroteno y una xantofila, en términos de producción de ácido abscísico, según el Ejemplo 1;
- la Figura 4 muestra la experimentaciónin vivocon voluntarios sanos, según el Ejemplo 1.
DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN
Por lo tanto, el objeto de la invención es una dosis unitaria farmacéutica que comprende al menos un probiótico y al menos un caroteno, en donde dicho al menos un probiótico está en una cantidad de al menos 1 x 108 UFC y no superior a 5x109 UFC, y dicho al menos un caroteno está en una cantidad de 3-30 mg, y en donde dicho al menos un probiótico es un microorganismo que pertenece a la especieBacillus coagulans, Bacillus clausii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei, Bifidobacterium longum,o una combinación de los mismos. Preferiblemente, dicho al menos un probiótico es un microorganismo perteneciente a la especieBacillus coagulans, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus,o una combinación de los mismos.
Preferiblemente, dicho al menos un probiótico está en una cantidad de al menos 1x109 UFC.
Más preferiblemente, dicho al menos un probiótico está en una cantidad de 1,2 x 109 UFC a 5x109 UFC, más preferiblemente 1,5x109 UFC a 4x109 UFC.
Dicho al menos un caroteno es un carotenoide que no contiene oxígeno, siendo a-caroteno, p-caroteno, Y-caroteno, 5-caroteno, £-caroteno, licopeno, licoperseno, fitoflueno, hexahidrolicopeno, toruleno, zeacaroteno o una mezcla de los mismos.
Preferiblemente, dicho al menos un caroteno es a-caroteno, p-caroteno, Y-caroteno, 5-caroteno, £-caroteno, licopeno o una mezcla de los mismos.
En una realización preferida, dicho al menos un caroteno es p-caroteno.
Preferiblemente, dicho al menos un caroteno está en una cantidad no superior a 25 mg.
Más preferiblemente, dicho al menos caroteno está en una cantidad no superior a 20 mg, más preferiblemente no superior a 10 mg.
En realizaciones preferidas, dicho al menos un caroteno está en una cantidad de 3 a 7 mg.
En realizaciones preferidas, la composición farmacéutica comprende liposomas que llevan al menos un caroteno.
Preferiblemente, dichos liposomas comprenden fosfolípidos seleccionados de fosfolípidos naturales, ácido fosfatídico, fosfatidilcolina, fosfatidilglicerol, fosfatidiletanolamina, fosfatidilserina, PEG-fosfolípido o mezclas de los mismos.
Más preferiblemente, dichos liposomas comprenden fosfolípidos seleccionados de fosfolípidos de soja, fosfolípidos del huevo, fosfolípidos de girasol, fosfatidilcolina del huevo, fosfatidilcolina de soja, fosfatidilcolina de soja hidrogenada, fosfatidilcolina de girasol, esfingomielina, didecanoil fosfatidilcolina, dilauroil fosfatidilcolina, dimiristoil fosfa tidilcolina, dipalmitoil fosfatidilcolina, distearoil fosfatidilcolina, dioleil fosfatidilcolina, palmitoil-oleil fosfatidilcolina, dilinoleoil fosfatidilcolina, dierucoil fosfatidilcolina, didecanoil fosfatidilglicerol, dilauroil fosfatidilglicerol, dimiristoil fosfatidilglicerol, dipalmitoil fosfatidilglicerol, distearoil fosfatidilglicerol, dioleil fosfatidil glicerol, palmitoil-oleil fosfatidilglicerol, dilinoleoil fosfatidilglicerol, dierucoil fosfatidilglicerol, didecanoil fosfatidiletanolamina, dilauroil fosfatidiletanolamina, dimiristoil fosfatidil-etanolamina, dipalmitoil fosfatidiletanolamina, distearoil fosfatidiletanolamina, dioleil fosfatidiletanolamina, palmitoil-oleil fosfatidiletanolamina, dilinoleoil fosfatidiletanolamina, dierucoil fosfatidiletanolamina, dilauroil fosfatidilserina, dimiristoil fosfatidilserina, dipalmitoil fosfatidilserina, distearoil fosfatidilserina, dioleil fosfatidilserina, dilinoleoil fosfatidilserina, o una mezcla de los mismos.
En realizaciones preferidas, dichos liposomas comprenden lecitina, que es una mezcla de glicerofosfolípidos que incluyen fosfatidilcolina, fosfatidiletanolamina, fosfatidilinositol y ácido fosfatídico.
Preferiblemente, dicho al menos un probiótico está en una cantidad de 1x108 UFC a 5x109 UFC y dicho al menos un caroteno se encuentra en una cantidad no superior a 25 mg.
Preferiblemente, dicho al menos un probiótico está en una cantidad de al menos 1x109 UFC y dicho al menos un caroteno está en una cantidad no superior a 25 mg, más preferiblemente dicho al menos un probiótico está en una cantidad de 1,2 x109 UFC a 5x109 UFC y dicho al menos un caroteno se encuentra en una cantidad no superior a 20 mg.
En realizaciones particularmente preferidas, la dosis unitaria farmacéutica comprende al menos un probiótico que pertenece a la especieBacillus coagulans, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus,o una combinación de los mismos, en una cantidad de 1x108 UFC a 5x109 UFC y p-caroteno en cantidad no superior a 10 mg.
En una realización particularmente preferida, la dosis unitaria farmacéutica comprende al menos un probiótico perteneciente a la especieBacillus coagulans, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus,o una combinación de los mismos, en una cantidad de 1,2x109 UFC a 2x109 UFC y p-caroteno en una cantidad de 3-7 mg.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a la dosis unitaria farmacéutica para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
Como se demostrará en los siguientes Ejemplos, en primer lugar, se ha encontrado sorprendentemente que el probiótico de la invención es capaz de producir ácido abscísico (ABA) que, como se explicó anteriormente mejora los parámetros metabólicos que se encuentran alterados en condiciones de disbiosis y patologías atribuibles a la misma. En este sentido, la presente invención también se refiere a un probiótico para la producción endógena de ácido abscísico para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma.
En segundo lugar, se descubrió inesperadamente que un probiótico en presencia de un caroteno y en las cantidades indicadas produce ácido abscísico en niveles significativamente más altos que los observados para el probiótico solo en las mismas condiciones. Los resultados que se presentan a continuación muestran claramente que se obtiene un efecto sinérgico inesperado.
Se sabe que altas concentraciones de glucosa estimulan a las células p-pancreáticas a liberar ácido abscísico, que a su vez induce la liberación de insulina de las mismas. Además, la concentración plasmática de ácido abscísico aumenta en los seres humanos después de un exceso de glucosa, lo que indica que el ácido abscísico es, en efecto, una hormona humana endógena. Se ha demostrado experimentalmente que, incluso en dosis extremadamente bajas, el ácido abscísico tiene un efecto de mejora del control de la glucemia sin aumentar la secreción de insulina y, por tanto, sin representar un daño potencial para la población de células beta pancreáticas, a diferencia de las estrategias terapéuticas actuales.
El efecto observado por la dosis unitaria farmacéutica descrita anteriormente es particularmente ventajoso, ya que permite solucionar los inconvenientes de la técnica anterior, incluidos los relacionados con las terapias hipoglucemiantes convencionales, que provocan un aumento no deseado de la secreción de insulina. Este efecto también es inesperado, dado que el ácido abscísico induce células p-pancreáticas a liberarin vitroinsulina después de la administración de altas concentraciones de glucosa.
Como se analiza en el Estado de la Técnica, la perturbación de la composición de la microbiota intestinal da como resultado una mayor permeabilidad intestinal, lo que permite que las endotoxinas bacterianas ingresen al torrente sanguíneo; esto desencadena una inflamación sistémica de bajo grado, que a su vez conduce a resistencia a la insulina, hiperglucemia, dislipidemia y conduce a la acumulación de grasa corporal (obesidad). Los resultados presentados en los Ejemplos que figuran más adelante indican que la ingesta diaria de la dosis unitaria farmacéutica descrita anteriormente mejora significativamente la mayoría de los marcadores metabólicos alterados en una condición de disbiosis y que causan T2D y síndrome metabólico. En particular, la reducción significativa de la hs-CRP, un marcador de inflamación sistémica de bajo grado, sugiere una acción beneficiosa del probiótico combinado con un caroteno para reducir la permeabilidad intestinal. Como consecuencia, se observa una mejora significativa del colesterol total, HDL, LDL, TG, IMC y circunferencia de la cintura. Además, la producción de ácido abscísico por el probiótico combinado con un caroteno permite la estimulación autocrina de la proliferación del probiótico, contribuyendo así a su colonización del intestino. La producción de ácido abscísico por el probiótico combinado con un caroteno también permite el efecto sistémico beneficioso ya informado del ácido abscísico sobre la regulación de la glucemia. De hecho, la ingesta del probiótico combinado con un caroteno aumenta el ABA plasmático basal 2,3 veces en todos los sujetos, alcanzando así concentraciones en el intervalo de actividades que tienen efectos beneficiosos sobre la hiperglucemia.
Entre las patologías atribuibles a la disbiosis de la microbiota intestinal se pueden mencionar las siguientes: resistencia a la insulina, enfermedad inflamatoria intestinal, síndrome del intestino irritable (SII), enfermedad celíaca, alergia, asma, diabetes no insulinodependiente (DMNID), síndrome X, obesidad, trastorno de ovario poliquístico (SOP), síndrome de pelo-AN, atrofia del SIDA, fallo de crecimiento intrauterino, fallo de crecimiento posnatal, síndrome de Prader-Willi, diabetes tipo 2, complicaciones diabéticas, hiperglucemia, dislipidemia, síndrome metabólico, hipertensión, enfermedades cardiovasculares.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere al ácido abscísico para su uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y a patologías atribuibles a la misma.
En otro aspecto, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende al menos un probiótico, al menos un caroteno y al menos una xantofila, como se reivindica.
Dicha al menos una xantofila es un carotenoide que contiene oxígeno.
Una xantofila puede ser aloxantina, cintiaxantina, pectenoxantina, p-criptoxantina, criptomonaxantina, crustaxantina, gazaniaxantina, HO-clorobacteno, loroxantina, luteína, licoxantina, rodopina, rodopinol, saproxantina, zeaxantina, oscillaxantina, flixantofila, rodovibrin, esferoideno, diadinoxantina, luteoxantina, mutatoxantina, citroxantina, furanóxido de zeaxantina, violaxantina, neocromo, foliacromo, trolicromo, vaucheriaxantina, rodopinal, warmingona, torularhodinaldehído, torularhodina, éster metílico de torularhodina, astaceno, astaxantina, cantaxantina, capsantina, capsorubina, criptocapsina, 2,2'-dicetospirilloxantina, equinenona, 3'-hidroxiequinenona, flexixantina, 3-HO-cantaxantina, hidroxiesferiodenona, okenona, pectenolona, feniconona, fenicopterona, rubixantona, sifonaxantina, astaceína, fucoxantina, isofucoxantina, fisalien, sifoneína, p-apo-2'-carotenal, apo-2-licopenal, apo-6'-licopenal, azafrinaldehído, bixina, citranaxantina, crocetina, crocetinsemialdehído, crocina, hopkinsiaxantina, apo-6'-licopenoato de metilo, paracentrona, sintaxantina, actinioeritrina, p-carotenona, peridinina, piroxantininol, semi-a-carotenona, semi-p-carotenona, trifasiaxantina, eschscholtzxantina, eschscholtzxantona, rodoxantina, tangeraxantina, nonaprenoxantina, decaprenoxantina, bacterioruberina o una mezcla de los mismos.
Preferiblemente, dicha al menos una xantofila es aloxantina, cintiaxantina, pectenoxantina, p-criptoxantina, criptomonaxantina, crustaxantina, gazaniaxantina, HO-clorobacteno, loroxantina, luteína, licoxantina, rodopina, rodopinol, saproxantina, astaxantina, zeaxantina, violaxantina o una mezcla de los mismos.
Más preferiblemente, dicha al menos una xantofila es astaxantina, luteína, zeaxantina, violaxantina o una mezcla de las mismas.
Preferiblemente, dicha al menos xantofila está en una cantidad no superior a 1 mg.
En realizaciones preferidas, dicha al menos xantofila está en una cantidad de 0,05-0,5 mg.
En realizaciones más preferidas, dicha al menos xantofila está en una cantidad de aproximadamente 0,1 mg.
En realizaciones preferidas, la composición farmacéutica comprende liposomas que portan al menos un caroteno, al menos una xantofila o una combinación de los mismos.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a la composición farmacéutica para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
Como quedará claro a partir de los Ejemplos de trabajo proporcionados más adelante, se observó que la presencia de una xantofila sola reduce significativamente la producción de ácido abscísico por parte del probiótico. A la inversa e inesperadamente, cuando el probiótico está en presencia de al menos un caroteno y al menos una xantofila, la producción de ácido abscísico por parte del probiótico aumenta drásticamente. Los resultados que se presentan a continuación muestran claramente que se obtiene un efecto sinérgico inesperado.
En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a un complemento alimenticio que comprende la dosis unitaria farmacéutica o la composición farmacéutica e ingredientes alimentarios adecuados.
La dosis unitaria farmacéutica de la invención, así como la composición farmacéutica y el complemento alimenticio pueden comprender, además, excipientes farmacéuticamente aceptables. Por "excipiente" se entiende un compuesto o una mezcla del mismo adecuado para uso en una formulación farmacéutica o alimentaria. Por ejemplo, un excipiente para uso en una formulación farmacéutica generalmente no debería causar una reacción adversa en un sujeto, ni debería inhibir significativamente la eficacia de los principios activos.
Excipientes adecuados son agentes acidificantes, correctores de acidez, antiaglomerantes, antioxidantes, cargas, agentes de resistencia, agentes gelificantes, agentes de recubrimiento, almidones modificados, agentes secuestrantes, espesantes, edulcorantes, diluyentes, disolventes, agentes desagregantes, deslizantes, colorantes, aglutinantes, lubricantes, estabilizadores, adsorbentes, conservantes, agentes humectantes, saborizantes, sustancias formadoras de película, emulsionantes, agentes humectantes, retardantes de liberación y mezclas de los mismos.
Preferiblemente, dichos excipientes son almidón, almidón modificado, celulosa, celulosa modificada, celulosa microcristalina, carboximetilcelulosa sódica, pectina, tragacanto, manitol, fosfato dicálcico, goma xantana, carragenano, alginato sódico, goma guar, maltodextrina, dióxido de silicio o mezclas de los mismos.
La composición de la presente invención se puede preparar mediante métodos conocidos en la técnica. De hecho, para la administración oral, los componentes pueden, por ejemplo, mezclarse con uno o más excipientes, encerrados en una cápsula de gel blando, cápsula, tableta, mini-tableta, micro-tableta, gránulo, micro-gránulo, gránulos, multipartículas, partículas micronizadas, polvo, solución, suspensión, dispersión, emulsión, gel, gota o aerosol, preferiblemente cápsula. En un aspecto adicional, la presente invención se refiere a un kit según lo reivindicado que comprende:
i) una primera formulación que comprende al menos un probiótico y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables; ii) una segunda formulación que comprende al menos un caroteno y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, y opcionalmente al menos una xantofila,
iii) un folleto que incluye instrucciones para utilizar el kit,
para uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
La dosis unitaria farmacéutica de la invención, así como la composición farmacéutica, el complemento alimenticio y el kit, podrán administrarse por vía oral, sublingual o bucal, preferentemente, por vía oral.
Debe entenderse que todos los aspectos identificados como preferidos y ventajosos para la dosis unitaria farmacéutica deben considerarse igualmente preferidos y ventajosos también para la composición farmacéutica, el complemento alimenticio, el kit y los usos de los mismos.
Debe entenderse también que todas las combinaciones de aspectos preferidos de la dosis unitaria farmacéutica de la invención, así como de la composición farmacéutica, el complemento alimenticio, el kit y usos de los mismos, como se informó anteriormente, deben considerarse descritos con ello.
A continuación se muestran ejemplos de ytrabajo de la presente invención proporcionados con fines ilustrativos.
EJEMPLOS
Materiales
Bacillus coagulansera de ATCC (Virginia, EE.UU.) y de tabletas disponibles comercialmente (Thorne Research, Dover, Reino Unido). La mezcla deLactobacillus plantarumyBacillus coagulansera de ProLife, un producto disponible comercialmente de Zeta Farmaceutici (Sandrigo, Vicenza, Italia);Lactobacillus rhamnoususera de Kaleidon 60, un producto disponible comercialmente de Malesci (Grassina, Florencia, Italia). El betacaroteno y el medio LB se adquirieron de Sigma (Milán, Italia); zeaxantina se obtuvo de BioReagents (Montigny, Francia). El kit ELISA de ácido abscísico se adquirió de Agdia Biofords (Evry Cedex, Francia).
Ejemplo 1.
Cultivo de células bacterianas
Los probióticos liofilizados se cultivaron por separado en medio LB en matraces agitadores equipados con tapa ventilada a 37 °C durante 24 horas. Después del crecimiento, cada una de las suspensiones de probióticos se diluyó con medio LB para alcanzar aproximadamente 0,1 D.O. a 600 nm. A 3,5 ml de cada una de las suspensiones diluidas se le añadieron 500 pl de:
i) liposomas vacíos,
ii) liposomas que contienen 1 mg de caroteno,
iii) liposomas que contienen 0,1 mg de xantofila,
iv) conteniendo los dos liposomas caroteno y xantofila, y se incubaron con agitación a 350 rpm a 37 °C durante 24 horas. Al final de la incubación, cada una de las suspensiones de probióticos se sedimentó mediante centrifugación a 3000 xg durante 10 minutos. Se recuperó el sobrenadante, se le añadieron 4 volúmenes de metanol y se almacenó a -20°C durante 24 horas. El sedimento se lavó una vez con tampón salino, se centrifugó a 3000 xg durante 10 minutos, se resuspendió en 2 ml de metanol, se sonicó en hielo y se almacenó a -20 °C durante 24 horas.
Preparación de liposomas
Se disolvieron 4 mg de caroteno y 0,4 mg de xantofila cada uno en 200 pl de cloroformo mediante agitación vorticial. Para cada preparación de liposomas se disolvieron 200 mg de lecitina en 500 pl de cloroformo. Se agregaron soluciones de cloroformo de caroteno y xantofila, por separado, a la solución de lecitina de cloroformo, se agitaron y se secaron completamente con N<2>para crear una fina capa en la pared interior de un Corex de vidrio. La capa delgada se desprendió con 2 ml de medio LB mediante agitación vorticial a máxima velocidad y finalmente la solución obtenida se sonicó en hielo para obtener liposomas. La concentración final de caroteno y xantofila en 500 gl de cada preparación de liposomas utilizada para la incubación de bacterias fue de 1 mg y 0,1 mg, respectivamente.
Para preparar liposomas vacíos o liposomas con caroteno o liposomas con xantofila, se añadió a la solución de lecitina cloroformo el mismo volumen de cloroformo, es decir, 200 gl, utilizado para disolver el caroteno y la xantofila.
Detección de ácido abscísico producido por bacterias
La cuantificación de ácido abscísico (ABA) se realizó tanto en sedimentos como en sobrenadantes obtenidos como se describe anteriormente (véase Cultivo de células bacterianas). Brevemente, después de 24 horas a -20 °C en metanol, los sedimentos y los sobrenadantes se centrifugaron a 3000 xg durante 5 minutos. El sobrenadante de cada muestra centrifugada se recuperó, se liofilizó, se resuspendió en 500 gl de tampón TRIS proporcionado por el kit ABA ELISA y se filtró con spin-x en microcentrífuga durante 30 min a velocidad máxima. La medición de ABA se realizó por cuadruplicado en cada muestra de acuerdo con las instrucciones del fabricante del kit ELISA.
Discusión de resultados
En la Figura 1A se informó de la comparación entre un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas vacíos, y un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas que contienen 1 mg de beta-caroteno. Está claramente demostrado que, en presencia de beta-caroteno, la producción de ácido abscísico aumenta drásticamente, es decir, aproximadamente 6,6 veces mayor (p = 0,0093).
El ácido abscísico producido corresponde a 0,1 gg/10(9) bacterias. Considerando el contenido bacteriano intestinal (en el colon) de 10(12) bacterias/g, la cantidad de ácido abscísico producidoio vivo,si todas las bacterias por g de intestino fueranBacillus coagulaos,habría sido 100 gg/10(12) bacterias/g. En otras palabras, 50 gg de ácido abscísico por cada 0,5 g de contenido intestinal. Suponiendo hipotéticamente que el contenido deBacilllus coagulaosde 1/100 bacterias/g del contenido intestinal, 50 g de ese contenido intestinal serían suficientes para alcanzar la cantidad de ácido abscísico necesaria.
En la Figura 1B, se informó de la comparación entre un cultivo deBacillus coagulaos, Lactobacillus plaotarumy liposomas vacíos, y un cultivo deBacillus coagulaos, Lactobacillus plaotarumy liposomas que contienen 1 mg de beta-caroteno. Está claramente demostrado que, en presencia de beta-caroteno, la producción de ácido abscísico aumenta drásticamente, es decir, aproximadamente 7,5 veces más.
En la Figura 1C, se informó de la comparación entre un cultivo deLactobacillus rhamoosusy liposomas vacíos, y un cultivo deLactobacillus rhamoosusy liposomas que contienen 1 mg de beta-caroteno. Está claramente demostrado que, en presencia de beta-caroteno, la producción de ácido abscísico aumenta drásticamente, es decir, aproximadamente 20 veces más.
En la Figura 2 se informóde la comparación entre:
- un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas vacíos,
- un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas que contienen 1 mg de beta-caroteno,
- un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas que contienen 0,1 mg de zeaxantina,
- un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas que contienen 0,1 mg de astaxantina,
Se demuestra claramente que, en presencia de beta-caroteno, la producción de ácido abscísico aumenta drásticamente, es decir, aproximadamente 5 veces mayor, mientras que en presencia de una xantofila, la producción de ácido abscísico se reduce inesperada y significativamente.
En la Figura 3 se informó de la comparación entre:
- un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas vacíos,
- un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas que contienen 1 mg de beta-caroteno,
- un cultivo deBacillus coagulaosy liposomas que contienen 1 mg de beta-caroteno y 0,1 mg de zeaxantina.
Está claramente demostrado que, en presencia de beta-caroteno y zeaxantina, la producción de ácido abscísico aumenta drásticamente, es decir, 10 veces mayor en comparación con el cultivo deBacillus coagulaossolo, y 5 veces mayor en comparación con el cultivo deBacillus coagulaosen presencia de beta-caroteno solo.
Estos resultados fueron absolutamente inesperados y significativos, especialmente en vista del hecho de que una xantofila, cuando está presente sola, reduce la producción de ácido abscísico del probiótico, mientras que en presencia concomitante de un caroteno, se observa claramente un efecto sinérgico.
Detección de ABA en plasma humano
Se centrifugaron muestras de sangre humana (5 ml), extraídas en heparina, inmediatamente después de la extracción a 2000 xg durante 10 minutos. Se extrajeron inmediatamente dos mililitros de plasma con 4 volúmenes de metanol, se almacenaron a -20 °C durante 24 horas y luego se centrifugaron a 3000 xg durante 5 minutos. El sobrenadante se recuperó, se liofilizó, se resuspendió en 250 pl de tampón TRIS proporcionado por el kit ABA ELISA y se filtró con spin-x en microcentrífuga durante 30 min a velocidad máxima. La medición de ABA se realizó por cuadruplicado en cada muestra de acuerdo con las instrucciones del fabricante del kit ELISA.
Voluntarios humanos
Se indicó a cuatro voluntarios sanos que no cambiaran sus hábitos alimentarios durante el período del estudio y que tomaran una tableta deBacillus coagulansque contiene 2x109 UFC (Thorne Research, Dover, Reino Unido) y una tableta que contiene 7 mg de beta-caroteno (Natural Point, Milán, Italia) al día, antes del desayuno. Al inicio del estudio (día 1) y después de 15 días de tratamiento (día 15), se tomó una muestra de sangre de cada sujeto, después de ayunar durante la noche, y se midieron la circunferencia de la cintura y el IMC. La medición de la glucemia en ayunas (GEA), el colesterol total, LDL y HDL y los triglicéridos se realizó en el laboratorio de química clínica del Hospital Policlínico IRCCS San Martino-IST en Génova. La medición de hs-CRP se realizó utilizando un kit ELISA específico (Cayman Chemical, Michigan, EE.UU.) de acuerdo con las instrucciones del fabricante.
En la Tabla 1 que figura a continuación se informan los valores medios de los parámetros metabólicos de cuatro sujetos tratados durante 15 días conBacillus coagulansy beta-caroteno.
Tabla 1.
Como se informa en el Estado de la Técnica, la perturbación de la composición de la microbiota intestinal da como resultado una mayor permeabilidad intestinal, lo que permite que las endotoxinas bacterianas ingresen al torrente sanguíneo; esto desencadena una inflamación sistémica de bajo grado, que a su vez conduce a resistencia a la insulina, hiperglucemia, dislipidemia y conduce a la acumulación de grasa corporal (obesidad). Los resultados resumidos en la Tabla 1 indican que la ingesta diaria de un probiótico y caroteno mejora significativamente la mayoría de los marcadores metabólicos alterados en una condición de disbiosis y que causan T2D y síndrome metabólico. En particular, la reducción significativa de la hs-CRP, un marcador de inflamación sistémica de bajo grado, sugiere una acción beneficiosa del probiótico combinado con un caroteno para reducir la permeabilidad intestinal. Como consecuencia, se observa una mejora significativa del colesterol total, HDL, LDL, TG, IMC y circunferencia de la cintura en todos los sujetos. Además, la producción de ABA por un probiótico combinado con un caroteno (mostrado en las Figs. 1A, 2) permite la estimulación autocrina de la proliferación del probiótico, contribuyendo a su colonización del intestino. La producción de ABA por un probiótico combinado con un caroteno también permite el efecto sistémico beneficioso ya informado del ABA sobre la regulación de la glucemia. De hecho, la ingesta de probióticos combinados con un caroteno aumentó el ABA plasmático basal 2,3 veces en todos los sujetos (Fig. 4), alcanzando así concentraciones en el intervalo de actividades que tienen efectos beneficiosos sobre la hiperglucemia.
En la Figura 4 se informó de la comparación entre la concentración plasmática de ácido abscísico al inicio del estudio (t0) y después de 15 días (t15). La concentración plasmática aumenta de media y significativamente 2,3 veces alcanzando un valor estable y eficaz de 3,4 nM (correspondiente a 4,45 pg en el torrente sanguíneo).

Claims (15)

REIVINDICACIONES
1. Una dosis unitaria diaria farmacéutica que comprende al menos un probiótico y al menos un caroteno, en donde dicho al menos un probiótico es un microorganismo que pertenece a la especieBacilluscoagulans, Bacillus clausii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacilluscasei, Bifidobacterium longum,o una combinación de los mismos y está en una cantidad de al menos 1x108 UFC y no superior a 5x109 UFC, y dicho al menos un caroteno se encuentra en una cantidad de 3-30 mg.
2. La dosis unitaria farmacéutica de la reivindicación 1, en donde dicho al menos un probiótico es un microorganismo que pertenece a la especieBacillus coagulans, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus,o una combinación de los mismos.
3. La dosis unitaria farmacéutica de la reivindicación 1 o 2, en donde dicho al menos un probiótico está en una cantidad de al menos 1 x 109 UFC.
4. La dosis unitaria farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 -3, en donde dicho al menos un probiótico está en una cantidad de 1,2 x 109 UFC a 5x109 UFC.
5. La dosis unitaria farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en donde dicho al menos un caroteno es a-caroteno, p-caroteno, Y-caroteno, 5-caroteno, £-caroteno, licopeno o una mezcla de los mismos, preferiblemente pcaroteno.
6. La dosis unitaria farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 -5, en donde dicho al menos un caroteno está en una cantidad no superior a 25 mg.
7. La dosis unitaria farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en donde dicho al menos un probiótico está en una cantidad de 1,5 x 109 UFC a 4x109 UFC y dicho al menos un caroteno se encuentra en una cantidad no superior a 20 mg.
8. La dosis unitaria farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 -7, para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal, y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
9. La dosis unitaria farmacéutica para uso de la reivindicación 8, en donde dichas patologías son resistencia a la insulina, enfermedad inflamatoria intestinal, síndrome del intestino irritable (SII), y enfermedad celíaca, alergia, asma, diabetes no insulinodependiente (DMNID), síndrome X, obesidad, trastorno de ovario poliquístico (SOP), síndrome de pelo-AN, atrofia del SIDA, fallo de crecimiento intrauterino, fallo de crecimiento posnatal, síndrome de Prader-Willi, diabetes tipo 2, complicaciones diabéticas, hiperglucemia, dislipidemia, síndrome metabólico, hipertensión, enfermedad cardiovascular.
10. Una composición farmacéutica que comprende la dosis unitaria farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 -7, y al menos una xantofila.
11. La composición farmacéutica de la reivindicación 10, en donde dicha al menos una xantofila es astaxantina, luteína, zeaxantina, violaxantina o una mezcla de las mismas.
12. La composición farmacéutica de la reivindicación 10 u 11, en donde dicha al menos una xantofila está en una cantidad no superior a 1 mg.
13. Un kit que comprende:
i) una primera formulación que comprende al menos un probiótico perteneciente a la especieBacillus coagulans, Bacillus clausii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei, Bifidobacterium longum,o una combinación de los mismos, y esté en una cantidad de al menos 1x108 UFC y no superior a 5x109 UFC y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables;
ii) una segunda formulación que comprende al menos un caroteno en una cantidad de 3-30 mg, y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables, y opcionalmente al menos una xantofila,
iii) un folleto que incluye instrucciones para utilizar el kit,
para uso simultáneo, separado o secuencial en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho al menos un probiótico en presencia de al menos un caroteno produce una cantidad terapéuticamente eficaz de ácido abscísico.
14. Un probiótico para la producción endógena de ácido abscísico en presencia de un caroteno, para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho probiótico es un microorganismo perteneciente a la especieBacillus coagulans, Bacillus clausii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei, Bifidobacterium longum,o una combinación de los mismos, y está en una cantidad diaria de al menos 1x108 UFC y no superior a 5x109 UFC, y dicho que al menos un caroteno se encuentra en una cantidad diaria de 3 a 30 mg.
15. Ácido abscísico obtenido endógenamente por un probiótico en presencia de un caroteno, para uso en el tratamiento de la disbiosis de la microbiota intestinal, y patologías atribuibles a la misma, en donde dicho probiótico es un microorganismo perteneciente a la especieBacillus coagulans, Bacillus clausii, Lactobacillus reuteri, Lactobacillus plantarum, Lactobacillus rhamnosus, Lactobacillus casei, Bifidobacterium longum,o una combinación de los mismos, y en una cantidad diaria de al menos 1x108 UFC y no superior a 5x109 UFC, y dicho al menos un caroteno se encuentra en una cantidad diaria de 3 a 30 mg.
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