ES2955294T3 - Forma salina y cristalina de compuesto andrografólido modificado y método de preparación del mismo - Google Patents

Forma salina y cristalina de compuesto andrografólido modificado y método de preparación del mismo Download PDF

Info

Publication number
ES2955294T3
ES2955294T3 ES18805893T ES18805893T ES2955294T3 ES 2955294 T3 ES2955294 T3 ES 2955294T3 ES 18805893 T ES18805893 T ES 18805893T ES 18805893 T ES18805893 T ES 18805893T ES 2955294 T3 ES2955294 T3 ES 2955294T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
compound
crystalline form
formula
cells
added
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES18805893T
Other languages
English (en)
Inventor
Jianhua Xia
Zhigan Jiang
Haiying He
Jing Wang
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Heilongjiang zhenbaodao pharmaceutical co Ltd
Medshine Discovery Inc
Original Assignee
Heilongjiang zhenbaodao pharmaceutical co Ltd
Medshine Discovery Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Heilongjiang zhenbaodao pharmaceutical co Ltd, Medshine Discovery Inc filed Critical Heilongjiang zhenbaodao pharmaceutical co Ltd
Application granted granted Critical
Publication of ES2955294T3 publication Critical patent/ES2955294T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Abstract

La presente invención proporciona una forma salina y cristalina de un compuesto de andrgrafólido modificado y un método de preparación y uso farmacéutico del mismo. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Forma salina y cristalina de compuesto andrografólido modificado y método de preparación del mismo Referencia cruzada a solicitudes de patentes relacionadas
Esta solicitud reivindica prioridad de la Solicitud de Patente China No. 201710373576.6 presentada en la Administración de Propiedad Intelectual Nacional China el 24 de mayo de 2017.
Campo técnico
La presente descripción se refiere a una forma salina y a una forma cristalina de un compuesto modificado de andrografólido, a un método de preparación del mismo y a un uso médico del mismo.
Antecedentes
La fibrosis pulmonar idiopática (FPI) es una neumonía intersticial fibrótica crónica, progresiva, irreversible y letal. "Idiopática" significa que se desconoce la causa exacta de la enfermedad. Los estímulos antigénicos inciertos, tales como fumar y el smog, causan daños repetidos en el tejido pulmonar. Se incrementa la generación de sustancias tales como colágeno para reparar el tejido pulmonar dañado de manera que el intersticio pulmonar se engruesa haciendo que el pulmón se vuelva fibrótico y pierda irreversiblemente la función de suministro de oxígeno a otros tejidos y órganos. En la clínica, la enfermedad se caracteriza principalmente por disnea progresiva causada por hipoxia, tos seca y disminución gradual de la función pulmonar, que conduce rápidamente a insuficiencia respiratoria y muerte. La FPI, también conocida como "cáncer" que no es exactamente un cáncer, tiene características de progresión rápida, discapacidad y mortalidad extremadamente altas, y una vida media prevista de 3 a 5 años después del diagnóstico. Al menos 5 millones de personas sufrieron la enfermedad en 2008 en todo el mundo. El estudio de 2015 ha demostrado que la incidencia global de FPI alcanza los 14-59 casos por 100000, y cada año se confirman entre 30000 y 35000 casos nuevos. Hay alrededor de 600000 pacientes con fibrosis pulmonar idiopática en China y la incidencia de FPI ha aumentado significativamente en los últimos años. Debido a la falta de criterios diagnósticos de FPI unificados y completos, muchos pacientes no han sido diagnosticados definitivamente, por lo que el número real de pacientes supera con creces los 600000. La incidencia de personas mayores de 75 años es 100 veces mayor que la de personas menores de 35 años, y el 70% de los pacientes son fumadores o tienen antecedentes de tabaquismo. El tiempo medio de supervivencia de la FPI es de 2 a 5 años en promedio, y la tasa de mortalidad a los 5 años llega al 70%.
Sumario
La presente descripción proporciona un compuesto de Fórmula (II).
Figure imgf000002_0001
La presente descripción proporciona la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II), que tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo que comprende picos de difracción característicos a ángulos 20 de 10.00±0.2°, 12.91 ±0.2° y 16.27±0.2°.
En algunas realizaciones de la presente descripción, la forma cristalina A tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo que comprende picos de difracción característicos a ángulos 20 de 5.05±0.2°, 10.00±0.2°, 12.91±0.2°, 13.42±0.2°, 14.51 ± 0.2°, 14.94±0.2°, 16.27±0.2° y 18.36±0.2°.
En algunas realizaciones de la presente descripción, la forma cristalina A tiene un patrón de XRPD como se muestra en la figura 1.
En algunas realizaciones de la presente descripción, los datos de análisis del patrón de XRPD de la forma cristalina A son los que se muestran en la Tabla 1:
Tabla 1 Datos de análisis del patrón de XRPD de la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II)
Figure imgf000003_0001
En algunas realizaciones de la presente descripción, la forma A cristalina tiene una curva de calorimetría diferencial de barrido que comprende picos endotérmicos a 119.27°C ± 3°C y 144.42°C ± 3°C.
En algunas realizaciones de la presente descripción, la forma cristalina A tiene un patrón de DSC como se muestra en la FIG. 2.
En algunas realizaciones de la presente descripción, la forma cristalina A tiene una curva de análisis termogravimétrico que muestra una pérdida de peso de 0.1268% ± 0.1% a 120.00°C ± 3°C.
En algunas realizaciones de la presente descripción, la forma cristalina A tiene un patrón de TGA como se muestra en la FIG. 3.
La presente descripción proporciona un método para preparar la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II), que comprende añadir un compuesto de fórmula (II) en cualquier forma a un disolvente orgánico alcohólico y calentar y agitar o recristalizar.
En algunas realizaciones de la presente descripción, el disolvente alcohólico se selecciona del grupo que consiste en metanol, etanol o isopropanol.
En algunas realizaciones de la presente descripción, la agitación se realiza a una temperatura de 35°C a 45°C. En algunas realizaciones de la presente descripción, la agitación se lleva a cabo durante 12 horas a 36 horas.
En algunas realizaciones de la presente descripción, la relación en peso del compuesto de Fórmula (II) al disolvente orgánico alcohólico es de 1:1 a 1:3.
La presente descripción proporciona además el uso del compuesto de fórmula (II) o la forma cristalina A para la preparación de un medicamento para el tratamiento de la fibrosis pulmonar idiopática, infección respiratoria o neumonía.
Definiciones e ilustraciones
A menos que se indique lo contrario, los siguientes términos y frases, tal como se usan aquí, se pretende que tengan los siguientes significados. Una frase o término específico no debe considerarse indefinido o poco claro si no está particularmente definido, sino que debe entenderse en su sentido corriente. Cuando aparece un nombre comercial aquí, se pretende hacer referencia a su producto correspondiente o a su ingrediente activo.
Los compuestos intermedios de la presente descripción se pueden preparar mediante una variedad de métodos sintéticos bien conocidos por las personas expertas en la técnica, incluidas las realizaciones específicas enumeradas a continuación, combinaciones de los mismos con otros métodos de síntesis química y equivalentes bien conocidos por las personas expertas en la técnica. Las realizaciones preferidas incluyen, pero no se limitan a, ejemplos en la presente descripción.
Las reacciones químicas de las realizaciones específicas de la presente descripción se llevaron a cabo en disolventes adecuados. Se requiere que los solventes sean adecuados para los cambios químicos de la presente descripción y los reactivos y materiales requeridos para ello. Para obtener el compuesto de la presente descripción, a veces es necesario que las personas expertas en la técnica modifiquen o seleccionen etapas sintéticas o esquemas de reacción basados en las realizaciones existentes.
La presente descripción se describirá específicamente mediante los siguientes ejemplos, que no pretenden limitar la presente descripción.
Todos los disolventes usados en la presente descripción están disponibles comercialmente y pueden usarse sin purificación adicional.
En la presente descripción se usan las siguientes abreviaturas: r.t. representa la temperatura ambiente; THF representa tetrahidrofurano; NMP representa N-metilpirrolidona; MeSO3H representa ácido metanosulfónico; DME representa dimetoxietano; DCM representa diclorometano; Xphos representa 2-biciclohexilfosfina-2'4'6'-triisopropilbifenilo; EtOAc representa acetato de etilo; MeOH representa metanol; acetona representa acetona; 2-Me-THF representa 2-metiltetrahidrofurano; IPA representa isopropanol.
Los compuestos se nombran manualmente o por ChemDraw® y los compuestos comerciales usan nombres de productos en el catálogo del proveedor.
Difracción de rayos X de polvo (XRPD) en la presente descripción
Modelo de instrumento: difractómetro de rayos X avanzado Bruker D8
Método de ensayo: Se usan alrededor de 10-20 mg de una muestra para la detección de XRPD.
Parámetros detallados de XRPD:
Tubo de luz: Cu, ka, (A=1.54056Á).
Voltaje del tubo de luz: 40 kV, corriente del tubo de luz: 40 mA
Rendija de divergencia: 0.60 mm
Rendija del detector: 10.50 mm
Rendija antidispersión: 7.10 mm
Intervalo de barrido: 4-40 grados
Tamaño de paso: 0.02 grados
Duración del paso: 0.12 segundos
Velocidad de rotación del plato de muestra: 15 rpm
Calorimetría diferencial de barrido (DSC) en la presente descripción
Modelo de instrumento: calorímetro diferencial de barrido TA Q2000
Método de ensayo: Se toma una muestra (~1 mg) y se coloca en una bandeja de aluminio de DSC para el ensayo. La muestra se calienta de 30°C (temperatura ambiente) a 300°C (o 350°C) a una velocidad de calentamiento de 10°C/min bajo la condición de 50 ml/min N2.
Análisis termogravimétrico (TGA) en la presente descripción
Modelo de instrumento: analizador termogravimétrico TA Q5000IR
Método de ensayo: Se toma una muestra (2 a 5 mg) y se coloca en una bandeja de platino de TGA para el ensayo. La muestra se calienta desde la temperatura ambiente a una velocidad de calentamiento de 10°C/min bajo la condición de 25 ml/min N2. El punto final se fija a 300°C o a una pérdida de peso del 20%.
Efectos técnicos
La forma cristalina del compuesto de Fórmula (II) como se menciona en la presente descripción tiene buena estabilidad y es fácil de preparar un medicamento con ella. Además, tiene un efecto inhibidor evidente sobre las citoquinas implicadas en la vía relacionada con la FPI. El compuesto de Fórmula (II) tiene un efecto inhibidor significativo sobre la FPI como se muestra en un modelo de rata SD de fibrosis pulmonar unilateral izquierda.
Breve descripción de los dibujos
La figura 1 muestra el espectro de XRPD de la radiación Cu-Ka de la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II); La figura 2 muestra el espectro de DSC de la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II);
La figura 3 muestra el espectro de TGA de la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II);
La figura 4 muestra el elipsoide de estereoestructura de una sola molécula del compuesto de fórmula (III-1) que comprende una molécula de un disolvente diclorometano;
La figura 5 muestra el elipsoide de estereoestructura de una bimolécula del compuesto de fórmula (III-1) que comprende una molécula de un disolvente diclorometano;
La figura 6 muestra el diagrama de apilamiento de cristales del compuesto de fórmula (III-1) que comprende una molécula de un disolvente diclorometano a lo largo de la dirección del eje a.
Descripción detallada
Para comprender mejor el contenido de la presente descripción, la presente descripción se describirá adicionalmente a continuación junto con ejemplos específicos. Sin embargo, las realizaciones específicas no pretenden limitar el contenido de la presente descripción.
Ejemplo 1: Preparación del compuesto de Fórmula (II)
Figure imgf000006_0001
Etapa 1: preparación de Compuesto b
El compuesto a (300.00 g, 856.04 mmol) se disolvió en diclorometano (3.00 l) y se le añadieron secuencialmente ciclopentilcarbaldehído (84.85 g, 864.60 mmol) y resina de intercambio iónico-15 (300.00 g). La mezcla se agitó a 20°C durante 12 horas. El sistema se concentró por filtración para dar el Compuesto b en forma de un sólido blanco (300 g, rendimiento: 81.39%).
1H RMN (400MHz, CDCl3) ^ 6.97 (d, J = 6.4 Hz, 1 H), 5.05 (s, 1 H), 4.92 (s, 1 H), 4.62 (s, 2 H), 4.46 (d, J = 6 Hz, 1 H), 4.29-4.26 (m, 1 H), 4.03 (d, J = 10.8 Hz, 1 H), 3.49-3.44 (m, 2 H), 2.59-2.46 (m, 4 H ), 2.21 (s, 1 H), 2.08-1.87 (m, 2 H), 1.85-1.71 (m, 3 H), 1.69-1.56 (m, 9 H), 1.54 (s, 3 H), 1.52-1.26 (m, 3 H), 0.83 (s, 3 H).
Etapa 2: preparación de Compuesto c
El compuesto b (200.00 g, 464.49 mmol) se disolvió en 2000 ml de diclorometano y se le añadieron anhídrido acético (490.50 g, 4.80 mol) y piridina (392.00 g, 4.96 mol) a 0°C. A continuación, la mezcla se agitó a 20°C durante 17 horas. La disolución de reacción se concentró a presión reducida a 35°C, luego se le añadieron 6000 ml de agua y se formaron precipitados. El residuo obtenido tras la filtración se homogeneizó con éter de petróleo (500 ml x 2) para obtener 200 g del Compuesto c en forma de producto en bruto.
1H RMN (400MHz, CDCl3) ^ 7.02 (br. s., 1H), 6.71 (t, J=6.9 Hz, 1H), 6.19 (d, J=3.0 Hz, 1H), 4.88 (s, 1H), 4.62 (d, J=5.5 Hz, 1H), 4.45 (s, 1 H), 4.04 (d, J=11.3 Hz, 1H), 3.55 - 3.36 (m, 2H), 2.63 - 2.52 (m, 1H), 2.48 - 2.38 (m, 2H), 2.35 - 2.23 (m, 1 H), 2.15 - 1.99 (m, 2H), 1.94 - 1.82 (m, 3H), 1.72 (br. s., 3H), 1.64 - 1.45 (m , 6H), 1.39 (s, 3H), 1.27 (br. s., 3H), 0.83 (s, 3H).
Etapa 3: preparación de Compuesto d
El compuesto c (200.00 g, 484.78 mmol) se disolvió en 2000 ml de tetrahidrofurano y se le añadió una disolución de permanganato de potasio (229.83 g, 1.45 mol) disuelta en 2000 ml de agua a 0°C. A continuación, la mezcla se agitó a 20°C durante 6 horas. Se añadieron 1000 ml de salmuera y las capas se separaron. La fase orgánica se concentró a presión reducida. El residuo obtenido se disolvió en acetato de etilo (1000 ml), se le añadieron 9000 ml de éter de petróleo y la mezcla se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida para dar 78 g del Compuesto d en forma de producto en bruto.
1H RMN H (400MHz, CDCl3) ^ 9.65 (d, J=2.0 Hz, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.60 (d, J=6.0 Hz, 1H), 4.43 (s, 1H), 4.03 (d , j=1 1.0 Hz, 1H), 3.53 - 3.42 (m, 2H), 2.55 - 2.21 (m, 5H), 2.14 - 2.06 (m, 2H), 1.86 - 1.80 (m, 1H), 1.72 - 1.67 (m, 3H) ), 1.61 - 1.43 (m, 7H), 1.38 (s, 3H), 1.26 - 1.09 (m, 3H), 0.83 - 0.66 (m, 3H).
Etapa 4: preparación de Compuesto e
El compuesto d (70.00 g, 202.02 mmol) se disolvió en 1000 ml de tetrahidrofurano y se le añadió borohidruro de sodio (22.93 g, 606.06 mmol) a 0°C. Luego, la mezcla se agitó a 25°C durante 4 horas, se inactivó con 500 ml de agua y se extrajo con acetato de etilo (200 ml x 5). La fase orgánica se combinó, se lavó con una disolución saturada de cloruro de sodio (200 mL*1), se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice con un sistema eluyente de PE:EA = 10:1 a 2:1 para dar el Compuesto e (40 g, rendimiento: 56.8%).
1H RMN H (400 MHz, CDCl3) □□4.87 (s, 1 H), 4.61 (d, j = 6 Hz, 2 H), 4.03 (d, j = 11.2 Hz, 1 H), 3.75 (s, 1 H), 3.52-3.43 (m, 3 H), 2.44-2.41 (m, 2 H), 2.08-1.75 (m, 3 H), 1.74-1.66 (m , 7 H), 1.57-1.54 (m, 6 H), 1.37 (s, 4 H), 1.26-1.25 (m, 3 H), 0.77 (s, 3 H).
Etapa 5: preparación de Compuesto f
El compuesto e (35.00 g, 100.42 mmol) se disolvió en 500 ml de diclorometano y se le añadieron tetrabromuro de carbono (36.63 g, 110.46 mmol) y trifenilfosfina (28.97 g, 110.46 mmol) a 25°C. La mezcla se agitó a 25°C durante 4 horas, se inactivó con agua (200 ml) y se extrajo con diclorometano (200 ml x 3). La fase orgánica se combinó, se lavó con una disolución saturada de cloruro de sodio (200 mL*1), se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida. El residuo obtenido se purificó por cromatografía en columna de gel de sílice con un sistema eluyente de PE:EtOAc = 10:1 a 5:1 para dar el Compuesto f (40 g, rendimiento: 96.82%).
1H RMN H (400MHz, CDCl3) ^ 4.89 (s, 1 H), 4.61 (d, j= 6 Hz, 1 H), 4.53 (s, 1 H), 4.02 (d, j= 11.2 Hz, 1 H), 3.55-3.52 (m, 3 H), 3.46-3.29 (m, 1 H), 2.42 (s, 1 H), 2.08 (s, 1 H), 2.04-1.84 (m, 4 H), 1.84-1.81 (m, 3 H), 1.72-1.70 (m, 3 H), 1.59-1.54 (m, 6 H), 1.38 (s, 3 H), 1.26-1.22 (m, 3 H ), 0.78 (s, 3H).
Etapa 6: preparación de Compuesto h
Se disolvieron 276 g (84 mg, 0.73 mmol) de 1 -metilpiperidin-4-ol en N,N-dimetilformamida (10 ml) y se le añadió hidruro de sodio (32 mg, 1.01 mmol) a 0°C y la mezcla se agitó a 0°C durante 15 minutos. Se añadió el compuesto f (300 mg, 0.73 mmol) a la disolución de reacción y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas. Se añadió agua (5 ml) a la disolución de reacción. La mezcla se extrajo con acetato de etilo (30 ml). La fase orgánica se lavó con agua (10 ml x 3), se secó sobre sulfato de sodio anhidro y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida seguido de aislamiento por medio de cromatografía líquida preparativa para dar el Compuesto h (20 mg, rendimiento: 6.1%).
EM m/z (ESI): 446.6 [M+1]
1H RMN (400 MHz, CDCh) □□ 8.44-8.55 (m, 1H), 4.54-4.66 (m, 4H), 4.02-4.07 (m, 1H), 3.40-3.53 (m, 3H), 2.96-3.16 (m, 3H), 2.77-2.92 (m, 2H), 2.56-2.65 (m, 3H), 2.25-2.40 (m, 2H), 1.45-2.03 (m, 19H), 1.30 (s, 3H), 1.15-1.26 (m, 3H), 0.76 (s, 3H).
Etapa 7: preparación del compuesto de Fórmula (II)
El compuesto h (1.55 kg, 3.28 mol) se disolvió en acetona (15.5 l). A continuación, la disolución se añadió a un reactor de 30 l con la temperatura controlada a 22°C. Se añadió una disolución acuosa de ácido cítrico (550.5 g, 2.62 mol) en acetona (7.8 l). La reacción se agitó a 22°C durante 17.7 h y luego se precipitó una gran cantidad de sólidos en la disolución de reacción. La mezcla se filtró bajo nitrógeno. La torta del filtro se lavó con acetona (5.0 l x 4) y se filtró de nuevo. La torta del filtro se añadió a un reactor de 30 l a 22°C y luego se añadió acetona (15.5 l). La disolución de reacción se agitó a 22°C durante 21.4 h adicionales y luego se filtró bajo nitrógeno. La torta del filtro se secó en un horno de vacío a 40°C durante 48 h para obtener el compuesto de fórmula (II) en forma de un sólido en bruto blanquecino (1.3067 kg).
Ejemplo 2: preparación de la forma cristalina A
El compuesto de Fórmula (II) en forma de un sólido en bruto blanquecino (1091.8 g, 1.96 mol) se añadió a un matraz de 5 l con la temperatura controlada a 40°C, y luego se le añadió MeOH (3037 ml). Después de la adición, la reacción se agitó a 40°C durante 24 h. La disolución de reacción se filtró mientras estaba caliente. La torta del filtro se lavó con MeOH (200 ml) y luego se filtró para dar un producto en bruto. El producto en bruto se secó en un horno de vacío para dar la forma cristalina A en forma de un sólido blanco fino (869.34 g).
Ejemplo 3: preparación del compuesto de Fórmula (III)
Figure imgf000007_0001
El Compuesto h (1.0 g, 2.24 mmol) se disolvió en acetona (10 ml) y se le añadió una disolución de i (1.3 g, 3.36 mmol) en acetona (5 ml) a 15°C. Después de la adición, la reacción se agitó a 15°C durante 1 h más y luego se filtró. La torta del filtro se lavó con acetona (20 ml) y se filtró nuevamente. La torta de filtro se secó en un horno de vacío para dar el compuesto de Fórmula (III) en forma de un sólido blanco (0.92 g).
Se incubó un monocristal del compuesto de fórmula (III) en una mezcla de disolventes de diclorometano y metanol (relación en volumen de diclorometano:metanol = 3:7), y se confirmó que tenía la configuración absoluta que se muestra en la fórmula (III-1).
Figure imgf000008_0001
Según la configuración del compuesto de fórmula (III-1), se especuló que el compuesto de fórmula (II) tenía la configuración absoluta que se muestra en la fórmula (II-1).
Figure imgf000008_0002
Los datos del monocristal del compuesto de fórmula (III-1) fueron los siguientes.
Información de refinamiento de la estructura cristalina del compuesto de Fórmula (III-1)
Figure imgf000008_0003
Figure imgf000009_0001
Parámetros de coordenadas atómicas y valores de factor de temperatura equivalente del compuesto de Fórmula (III-1)
Figure imgf000009_0002
Figure imgf000010_0001
Figure imgf000011_0001
Figure imgf000012_0001
Figure imgf000013_0001
Las longitudes de enlace y los ángulos de enlace de los átomos enlazados en el compuesto de Fórmula (III-1)
Figure imgf000013_0002
Figure imgf000014_0001
Figure imgf000015_0001
Figure imgf000016_0001
Figure imgf000017_0001
Figure imgf000018_0001
Figure imgf000019_0001
Figure imgf000020_0001
Figure imgf000021_0001
Figure imgf000022_0001
Figure imgf000023_0001
Figure imgf000024_0002
Valores del ángulo de torsión del compuesto de Fórmula (III-1)
Figure imgf000024_0001
Figure imgf000025_0001
Figure imgf000026_0001
Figure imgf000027_0001
Ejemplo Experimental 1: ensayo de estabilidad del solido de la forma cristalina A bajo condiciones de alta temperatura y alta humedad
Se pesaron aproximadamente 100 mg de forma cristalina A por duplicado, se colocaron en el fondo de un vial de vidrio y se esparcieron en forma de capa delgada. El vial se selló con papel de aluminio que se perforó para generar unos pequeños orificios para garantizar que la muestra pudiera entrar en contacto completo con el aire ambiente. El vial se colocó en una cámara con temperatura y humedad constantes de 40°C y 75%. Las muestras se colocaron en las condiciones anteriores y se analizaron el día 5 y el día 10. Los resultados del ensayo se compararon con los resultados del ensayo inicial medidos el día 0. Los resultados del ensayo se muestran en la Tabla 2 a continuación.
Tabla-2. Ensayo de estabilidad del sólido de la forma cristalina A
Figure imgf000028_0002
Conclusión experimental: la forma cristalina de la presente descripción tenía buena estabilidad y era fácil preparar con ella un medicamento.
Ejemplo Experimental 2: ensayo de estabilidad física del sólido de la forma cristalina A bajo diferentes condiciones de temperatura, humedad y luz
Se pesaron aproximadamente 100 mg de forma cristalina A por duplicado, se colocaron en el fondo de un vial de vidrio y se esparcieron en forma de capa delgada. El vial se selló con papel de aluminio que se perforó para generar unos pequeños orificios para garantizar que la muestra pudiera entrar en contacto completo con el aire ambiente. Las 4 muestras preparadas se colocaron en condiciones de 25°C/92.5% de humedad relativa, 60°C, 40°C/75% y luz. Se examinó la estabilidad física de las muestras el día 10. Mientras tanto, se pesaron adicionalmente aproximadamente 100 mg de forma cristalina A en forma de sólido, se colocaron en el fondo de un vial de vidrio, se sellaron con un tapón de rosca y se almacenaron a -20°C para usar como control. El día 10, se tomaron todas las muestras y se devolvieron a temperatura ambiente. Se observó el cambio de apariencia de las muestras y se examinó la forma cristalina de las muestras mediante XRPD. La estabilidad física del sólido de la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II) se determinó comparando las muestras aceleradas con la muestra de control. Los resultados del ensayo de estabilidad física de la forma cristalina A en forma de sólido se muestran en la Tabla-3 a continuación.
Tabla-3. Ensayo de estabilidad física del sólido de la forma cristalina A en diferentes condiciones de temperatura, humedad y luz
Figure imgf000028_0001
Ejemplo Experimental 3: estudio de polimorfismo del compuesto de fórmula (II)
El compuesto de fórmula (II) se disolvió en un disolvente correspondiente y se agitó a 40°C durante 2 días en la oscuridad. A continuación, la disolución se centrifugó para obtener un precipitado que se secó y se sometió a detección de XRPD. Los resultados se muestran en la Tabla 4 a continuación.
Tabla 4. Estudio de Polimorfismo del compuesto de fórmula (II)
Figure imgf000028_0003
Como puede verse en la tabla anterior, la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II) era estable en las condiciones de los disolventes anteriores.
Ensayo bioquímico 1: liberación de IL-6 de células THP-1
Propósito:
Evaluar el efecto inhibitorio del compuesto sobre la liberación de IL-6 inducida por LPS de las células THP-1 midiendo el nivel de IL-6 en el sobrenadante del cultivo celular.
Materiales:
Línea celular: línea celular THP-1
Medio de cultivo de células THP-1 (RPMI 1640, Gibco n° 22400-089, 10% de suero Gibco n° 10099-141)
LPS, 1 mg/ml (Sigma n2 L5293)
DPBS (Hyclone, #SH30028.01B)
Kit CBA de IL-6 humana, BD#558276
Kit CBA de tampón maestro de proteína soluble humana, BD#558265
Dexametasona: J&K#308890
Placa de células de 96 pocillos, Corning#
Incubadora de CO2 , Thermo#371
Centrífuga, Eppendorf #5810R
Contador de células Vi-cell, Beckman Coulter
FACSCalibur, BD# 97500540
Procedimientos y métodos experimentales:
a) Siembra de células en placas
1) El medio se precalentó en un baño de agua a 37°C;
2) La suspensión celular en el matraz de cultivo se mezcló bien, se transfirió a un tubo de centrífuga y se centrifugó a 1200 rpm durante 5 minutos a temperatura ambiente. Se descartó el sobrenadante y se añadió medio de cultivo hasta un volumen de 10 ml para resuspender los sedimentos celulares;
3) 1 Se pipeteó 1 ml de la resuspensión celular y se contó con Vi-cell;
4) Las células THP-1 se diluyeron con medio de cultivo a 5 x 105 células/ml y las células diluidas se añadieron a una placa de 96 pocillos (100 μl/pocillo, 5x105 células/pocillo);
b) Carga de compuesto:
1) El compuesto se disolvió en DMSO para dar una disolución de 30 mM y luego la disolución se diluyó tres veces con DMSO en 4 gradientes, que fueron 30 mM, 10 mM, 3 mM y 1 mM, respectivamente. Para cada gradiente, se añadieron 4 μl de la disolución a 1 ml de medio de cultivo para formar una mezcla con una concentración de 120 μM, 40 μM, 12 μM o 4 μM, respectivamente. A continuación, se añadieron 50 μl de la mezcla a un pocillo que contenía células hasta una concentración final de 30 μM, 10 μM, 3 μM o 1 μM, respectivamente. Se añadió dexametasona como fármaco positivo a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 100 nM.
c) Estimulación celular
Se diluyó 1 mg/ml de una disolución de LPS a 800 ng/ml con medio de cultivo y se añadió la disolución diluida al pocillo de cultivo celular a razón de 50 μl por pocillo.
d) Incubación y detección de células
La placa de cultivo celular se colocó en una incubadora a 37°C y se incubó durante 24 horas. Luego, se recogió el sobrenadante y se detectó el nivel de IL-6 en él mediante CBA. Los resultados experimentales se muestran en la Tabla 5:
Tabla 5. Resultados del factor inflamatorio IL-6 detectado por CBA - tasa de inhibición @10uM
Figure imgf000030_0001
Ensayo bioquímico 2: liberación de citoquinas implicadas en la vía Th1 tales como TNF-a e IL-6 de células de bazo de ratón
Propósito:
Evaluar el efecto inhibidor del compuesto sobre la liberación inducida por LPS de citoquinas implicadas en la vía Th1, tales como TNF-a e IL-6, de células de bazo de ratón midiendo los niveles de citoquinas implicadas en la vía Th1, tales como TNF-a y IL-6 en el sobrenadante de cultivo de células de bazo de ratón.
Materiales experimentales:
Células: células de bazo aisladas de los bazos de ratones C57BL/6 normales
Medio de cultivo para células de bazo de ratón (RPMI 1640, Gibco n° 22400-089, 10% de suero Gibco n° 10099-141) Tampón de lisis de eritrocitos, Gibco A10492-01
LPS, Sigma#L2630
DPBS, Hyclone, #SH30028.01B
Kit CBA TNF-a de ratón, BD#558299
Kit CBA IL-6 CB de ratón, BD#558310
Kit CBA de tampón maestro de proteína soluble de ratón, BD 558267
Dexametasona: J&K#308890
Pirfenidona: TA00720266
Placa de células de 96 pocillos, Costar 3799
Incubadora de CO2 , Thermo#371
Centrífuga, Eppendorf #5810R
Contador de células Vi-cell, Beckman Coulter
Citómetro de flujo BD FACSCanto II, 338962
Procedimientos y métodos experimentales:
a) Aislamiento y siembra de células de bazo de ratón en placas
1) Los ratones se sacrificaron en condiciones asépticas y los bazos se recogieron y trituraron en un filtro que tenía un tamaño de poro de 70 gm. Se recogió la suspensión celular obtenida.
2) La suspensión celular se transfirió a un tubo de centrífuga, donde se centrifugó a 1200 rpm a temperatura ambiente durante 5 minutos y se descartó el sobrenadante;
3) Se añadió tampón de lisis de eritrocitos en una relación de 5 ml/bazo. Las células se volvieron a suspender y se dejaron reposar durante 5 minutos;
4) Se añadieron 3 volúmenes de DPBS a la suspensión celular. La mezcla se centrifugó a 1200 rpm a temperatura ambiente durante 5 minutos y se descartó el sobrenadante;
5) Las células fueron resuspendidas y contadas con Vi-cell. Luego, las células se ajustaron a una concentración de 1x106/ml;
6) Las células se añadieron a una placa de 96 pocillos (100 μl/pocillo, 1x105 células/pocillo);
b) Estimulación celular
Se formuló LPS con medio de cultivo en forma de una disolución de 4 μg/ml y luego se añadió la disolución al pocillo de cultivo celular a razón de 50 μl por pocillo.
c) Carga de compuesto:
El compuesto se disolvió en DMSO para dar una disolución de 100 mM y luego la disolución se diluyó con DMSO para obtener 3 gradientes, que fueron 30 mM, 10 mM y 3 mM, respectivamente. Para cada gradiente, se añadieron 4 μl de la disolución a 1 ml de medio de cultivo para formar una mezcla con una concentración de 120 μM, 40 μM o 12 μM, respectivamente. Se añadieron 50 μl de la mezcla al pocillo correspondiente hasta una concentración final de 30 μM, 10 μM o 3 μM, respectivamente. Se añadió dexametasona como fármaco positivo a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 100 nM. Se añadió pirfenidona como compuesto de referencia a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 500 μM.
d) Incubación y detección de células
La placa de cultivo celular se colocó en una incubadora a 37°C y se incubó durante 24 horas. A continuación, se recogió el sobrenadante y se detectaron mediante CBA los niveles de TNF-a e IL-6 en el mismo.
Ensayo bioquímico 3: liberación de citoquinas implicadas en la vía Th1, tales como IFN-y e IL-2, de células de bazo de ratón
Propósito:
Evaluar el efecto inhibitorio del compuesto sobre la liberación de citoquinas implicadas en la vía Th1, tales como IFN-y e IL-2, de células de bazo de ratón midiendo los niveles de citoquinas implicadas en la vía Th1, tales como IFN-y e IL-2 en el sobrenadante de cultivo de células de bazo de ratón.
Materiales experimentales:
Células: células de bazo aisladas de los bazos de ratones C57BL/6 normales
Medio de cultivo para células de bazo de ratón (RPMI 1640, Gibco n° 22400-089, 10% de suero Gibco n° 10099-141) Tampón de lisis de eritrocitos, Gibco A10492-01
Anticuerpo anti-CD3 de ratón, BD 553057
DPBS, Hyclone, #SH30028.01B
Kit de CBA para IFN-y de ratón, BD#558296
Kit de CBA para IL-2 de ratón, BD#558310558297
Kit CBA de tampón maestro de proteína soluble de ratón, BD 558267
Dexametasona: J&K#308890
Pirfenidona: TA00720266
Placa de células de 96 pocillos, Costar 3599
Incubadora de CO2 , Thermo#371
Centrífuga, Eppendorf #5810R
Contador de células Vi-cell, Beckman Coulter
Citómetro de flujo BD FACSCanto II, 338962
Procedimientos y métodos experimentales:
a) Siembra de anticuerpo anti-CD3 de ratón en placas
El anticuerpo anti-CD3 de ratón diluido a 5 μg/ml con DPBS se añadió a una placa de 96 pocillos a 100 μl/pocillo. La placa de cultivo se dejó reposar a 4°C durante la noche;
b) Aislamiento y siembra de células de bazo de ratón en placas
1) Los ratones se sacrificaron en condiciones asépticas y los bazos se recogieron y trituraron en un filtro que tenía un tamaño de poro de 70 μm. Se recogió la suspensión celular obtenida.
2) La suspensión celular se transfirió a un tubo de centrífuga, donde se centrifugó a 1200 rpm a temperatura ambiente durante 5 minutos y se descartó el sobrenadante;
3) Se añadió tampón de lisis de eritrocitos en una proporción de 5 ml/bazo. Las células se volvieron a suspender y se dejaron reposar durante 5 minutos;
4) Se añadieron 3 volúmenes de DPBS a la suspensión celular. La mezcla se centrifugó a 1200 rpm a temperatura ambiente durante 5 minutos y se descartó el sobrenadante;
5) Las células fueron resuspendidas y contadas con Vi-cell. Luego, las células se ajustaron a una concentración de 1x106/ml;
c) Estimulación celular
1) La placa de 96 pocillos se retiró de 4°C y se lavó dos veces con DPBS;
2) Las células se añadieron a los pocillos revestidos con el anticuerpo anti-CD3 de ratón a razón de 50 μl/pocillo, es decir, 1x105 células/pocillo; y mientras tanto, las células se añadieron a pocillos sin revestir en la misma cantidad, como control negativo;
d) Carga de compuesto:
El compuesto se disolvió en DMSO para dar una disolución de 100 mM y luego la disolución se diluyó con DMSO para obtener 3 gradientes, que fueron 30 mM, 10 mM y 3 mM, respectivamente. Para cada gradiente, se añadieron 4 μl de la disolución a 1 ml de medio de cultivo para formar una mezcla con una concentración de 120 μM, 40 μM o 12 μM, respectivamente. Se añadieron 50 μl de la mezcla al pocillo correspondiente hasta una concentración final de 30 μM, 10 μM o 3 μM, respectivamente. Se añadió dexametasona como fármaco positivo a un pocillo diferente con células a una concentración final de 100 nM. Se añadió pirfenidona como compuesto de referencia a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 500 μM.
e) Incubación y detección de células
La placa de cultivo celular se colocó en una incubadora a 37°C y se incubó durante 24 horas. A continuación, se recogió el sobrenadante y se detectaron mediante CBA los niveles de IFN-y e IL-2 en él.
Ensayo bioquímico 4: liberación de citoquinas implicadas en la vía Th2 como IL-13 de células de bazo de ratón Propósito:
Evaluar el efecto inhibitorio del compuesto sobre la liberación inducida por LPS de citoquinas implicadas en la vía Th2, tales como IL-13, de células de bazo de ratón midiendo los niveles de citoquinas implicadas en la vía Th2, tales como IL-13, en el sobrenadante de cultivo de células de bazo de ratón.
Materiales experimentales:
Células: Células CD4+ aisladas y clasificadas de los bazos de ratones C57BL/6 normales
Medio de cultivo celular (RPMI 1640, Gibco n° 22400-089, 10% de suero Gibco n° 10099-141)
Tampón de lisis de eritrocitos
Anticuerpo anti-CD3 de ratón, BD 553057
Anticuerpo anti-IFNy de ratón, BD 554430
Anticuerpo anti-IL-12 de ratón, BD 553375
IL-4 de ratón, PeproTech 214-14
Kit de aislamiento de células T CD4+ de ratón, STEMCELL 19852A
DPBS, Hyclone, #SH30028.01B
Kit de CBA para IL-13 de ratón, BD 558349
Kit de CBA de tampón maestro de proteína soluble de ratón, BD 558267
Dexametasona: J&K#308890
Pirfenidona: TA00720266
Placa de células de 96 pocillos, Costar 3599
Incubadora de CO2 , Thermo#371
Centrífuga, Eppendorf #5810R
Contador de células Vi-cell, Beckman Coulter
Citómetro de flujo BD FACSCanto II, 338962
Procedimientos y métodos experimentales:
a) Revestimiento de anticuerpo anti-CD3 de ratón
El anticuerpo anti-CD3 de ratón diluido a 5 μg/ml con DPBS se añadió a una placa de 96 pocillos a 100 μl/pocillo. La placa de cultivo se dejó reposar a 4°C durante la noche;
b) Aislamiento y siembra de células T CD4+ de bazo de ratón en placas
1) Los ratones se sacrificaron en condiciones asépticas y los bazos se recogieron y trituraron en un filtro que tenía un tamaño de poro de 70 μm. Se recogió la suspensión celular obtenida.
2) La suspensión celular se transfirió a un tubo de centrífuga, donde se centrifugó a 1200 rpm a temperatura ambiente durante 5 minutos y se descartó el sobrenadante;
3) Se añadió tampón de lisis de eritrocitos en una relación de 5 ml/bazo. Las células se volvieron a suspender y se dejaron reposar durante 5 minutos;
4) Se añadieron 3 volúmenes de DPBS a la suspensión celular. La mezcla se centrifugó a 1200 rpm a temperatura ambiente durante 5 minutos y se descartó el sobrenadante;
5) Las células fueron resuspendidas y contadas con Vi-cell. Luego, las células se ajustaron a una concentración de 1x10678/ml;
6) Las células T CD4+ se aislaron usando el kit de aislamiento de células T CD4+ de ratón, y las células aisladas se ajustaron a una concentración de 1 x 106/ml;
7) La placa de 96 pocillos que se había revestido durante la noche se retiró de 4°C y se lavó dos veces con DPBS; 8) Las células T CD4+ aisladas se añadieron a los pocillos revestidos con el anticuerpo anti-CD3 a razón de 50 μl/pocillo, es decir, 1x105 células/pocillo; y mientras tanto, las células T CD4+ se añadieron a pocillos sin revestir en la misma cantidad, como control negativo;
c) Inducción de células Th2
El anticuerpo anti-IPNY de ratón y el anticuerpo anti-IL-12 se añadieron simultáneamente al medio de cultivo a una concentración de 40 μg/ml y se añadió IL-4 de ratón a una concentración de 40 ng/ml. Se preparó una disolución de inducción y se añadió a los pocillos que habían sido sembrados con células y revestidos con anticuerpo anti-CD3 a razón de 50 μl/pocillo. Se dejaron tres pocillos sin la adición de la disolución de inducción y se usaron como control; d) Carga de compuesto:
El compuesto se disolvió en DMSO para dar una disolución de 100 mM y luego la disolución se diluyó con DMSO para obtener 3 gradientes, que fueron 30 mM, 10 mM y 3 mM, respectivamente. Para cada gradiente, se añadieron 4 μl de la disolución a 1 ml de medio de cultivo para formar una mezcla con una concentración de 120 μM, 40 μM o 12 μM, respectivamente. Se añadieron 50 μl de la mezcla al pocillo correspondiente hasta una concentración final de 30 μM, 10 μM o 3 μM, respectivamente. Se añadió dexametasona como fármaco positivo a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 100 nM. Se añadió pirfenidona como compuesto de referencia a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 500 μM.
e) Incubación y detección de células
La placa de cultivo celular se colocó en una incubadora a 37°C y se incubó durante 72 horas. Luego, se recogió el sobrenadante y se detectó el nivel de IL-13 en el mismo mediante CBA.
Ensayo bioquímico 5: liberación de TGF-p de macrófagos peritoneales de ratón
Propósito:
Evaluar el efecto inhibitorio del compuesto sobre la liberación de TGF-p de macrófagos peritoneales de ratón midiendo el nivel de TGF-p en el sobrenadante de cultivo de macrófagos peritoneales de ratón.
Materiales experimentales:
Células: macrófagos recogidos por lavado peritoneal de ratones Balb/c normales
Medio de cultivo celular (RPMI 1640, Gibco n° 22400-089, 10% de suero Gibco n° 10099-141)
TNF-a de ratón, PeproTech 315-01A
IL-4 de ratón, PeproTech 214-14
DPBS, Hyclone, #SH30028.01B
Kit ELISA para TGF-p de ratón, R&D MB100B
Dexametasona: J&K#308890
Pirfenidona: TA00720266
Placa de células de 48 pocillos, Costar 3548
Incubadora de CO2 , Thermo#371
Centrífuga, Eppendorf #5810R
Contador de células Vi-cell, Beckman Coulter
Lector de microplacas, Molecular Devices SpectraMax i3
Procedimientos y métodos experimentales:
a) Recogida y siembra de macrófagos peritoneales de ratón en placas.
1) Los ratones se sacrificaron en condiciones asépticas y se abrió la piel abdominal para exponer la pared abdominal; 2) Se pipetearon 5 ml de medio RPMI 1640 sin suero con una jeringa de 5 ml. La pared abdominal se levantó suavemente con pinzas con una mano y el medio de cultivo se inyectó lentamente en la cavidad abdominal con una jeringa con otra mano;
3) Después de lavar completamente la cavidad abdominal con el medio de cultivo, el medio de cultivo de la cavidad abdominal se aspiró lentamente con una jeringa y se transfirió a un tubo de centrífuga;
4) La suspensión celular obtenida se centrifugó a 1200 rpm a temperatura ambiente durante 5 minutos y se descartó el sobrenadante;
5) Las células se resuspendieron en medio de cultivo que contenía suero al 10%, se sembraron en placas Petri y se incubaron a 37°C durante 2 horas. Luego, las células suspendidas se lavaron con DPBS;
6) Los macrófagos adherentes se despegaron con medio de cultivo y se contaron con Vi-C6ll. Luego las células se ajustaron a una concentración de 1.6x1067/ml;
7) Los macrófagos se añadieron a una placa de 48 pocillos a razón de 250 ql/pocillo, es decir, 4x105 células/pocillo; b) Estimulación celular:
1) Después de unir las células a la pared, el medio de cultivo se reemplazó con medio RPMI 1640 sin suero, 250 ql/pocillo;
2) Se preparó una disolución estimulante que contenía TNFα e IL-13, ambos a una concentración de 80 ng/ml, con medio sin suero y se añadió a los pocillos sembrados con células a 125 μl/pocillo. Se dejaron tres pocilios sin la adición de la disolución estimulante y se usaron como control blanco;
c) Carga de compuesto:
El compuesto se disolvió en DMSO para dar una disolución de 100 mM y luego la disolución se diluyó con DMSO para obtener 3 gradientes, que fueron 30 mM, 10 mM y 3 mM, respectivamente. Para cada gradiente, se añadieron 4 μl de la disolución a 1 ml de medio de cultivo para formar una mezcla con una concentración de 120 μM, 40 μM o 12 μM, respectivamente. Se añadieron 125 μl de la mezcla al pocillo correspondiente hasta una concentración final de 30 μM, 10 μM o 3 μM, respectivamente. Se añadió dexametasona como fármaco positivo a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 100 nM. Se añadió pirfenidona como compuesto de referencia a un pocillo diferente que contenía células a una concentración final de 500 μM.
e) Incubación y detección de células
La placa de cultivo celular se colocó en una incubadora a 37°C y se incubó durante 24 horas. Luego, se recogió el sobrenadante y se detectó el nivel de TGF-p en él mediante ELISA.
Los resultados del cribado in vitro de citoquinas de los ensayos bioquímicos 2~5 se muestra en la Tabla 6.
Tabla 6. Resultados in vitro del cribado de citoquinas para el compuesto de Fórmula (II)
Figure imgf000035_0001
Conclusión: El compuesto de fórmula (II) tuvo un efecto inhibitorio evidente sobre las citoquinas implicadas en las vías relacionadas con Th1 y Th2 y el factor de fibrosis TGF-p.
Resultados del ensayo de eficacia in vivo:
Se demostró mediante un modelo de rata SD de fibrosis pulmonar unilateral izquierda que el compuesto de fórmula (II) tenía un efecto inhibitorio significativo sobre la FPI.

Claims (14)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de Fórmula (II).
Figure imgf000036_0001
2. Una forma cristalina A del compuesto de fórmula (II) según la reivindicación 1, que tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo que comprende picos de difracción característicos a ángulos 20 de: 10.00±0.2°, 12.91 ±0.2° y 16.27±0.2°.
3. La forma cristalina A según la reivindicación 2, que tiene un patrón de difracción de rayos X de polvo que comprende picos de difracción característicos a ángulos 20 de: 5.05±0.2°, 10.00±0.2°, 12.91±0.2°, 13.42±0.2°, 14.51 ±0.2°, 14.94±0.2°, 16.27±0.2° y 18.36±0.2°.
4. La forma cristalina A según la reivindicación 3, que tiene un patrón de XRPD como se muestra en la FIG. 1.
5. La forma cristalina A según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, que tiene una curva de calorimetría diferencial de barrido que comprende picos endotérmicos a 119.27°C ± 3°C y 144.42°C ± 3°C.
6. La forma cristalina A según la reivindicación 5, que tiene un patrón de DSC como se muestra en la FIG. 2.
7. La forma cristalina A según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, que tiene una curva de análisis termogravimétrico que muestra una pérdida de peso de 0.1268% ± 0.1% a 120.00°C ± 3°C.
8. La forma cristalina A según la reivindicación 7, que tiene un patrón de TGA como se muestra en la FIG. 3.
9. Un método para preparar la forma cristalina A del compuesto de fórmula (II) según la reivindicación 2, que comprende añadir un compuesto de fórmula (II) en cualquier forma a un disolvente orgánico alcohólico y calentar y agitar o recristalizar.
10. El método según la reivindicación 9, en el que el disolvente alcohólico se selecciona del grupo que consiste en metanol, etanol o isopropanol.
11. El método según la reivindicación 9, en el que la agitación se realiza a una temperatura de 35°C a 45°C.
12. El método según la reivindicación 9, en el que la agitación se lleva a cabo durante 12 horas a 36 horas.
13. El método según la reivindicación 9, en el que la relación en peso del compuesto de Fórmula (II) al disolvente orgánico alcohólico es de 1:1 a 1:3.
14. El compuesto de fórmula (II) según la reivindicación 1 o la forma cristalina A según una cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4 para uso en el tratamiento de fibrosis pulmonar idiopática, infección respiratoria o neumonía.
ES18805893T 2017-05-24 2018-05-24 Forma salina y cristalina de compuesto andrografólido modificado y método de preparación del mismo Active ES2955294T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710373576 2017-05-24
PCT/CN2018/088168 WO2018214929A1 (zh) 2017-05-24 2018-05-24 一种穿心莲内酯改构化合物的盐型、晶型及其制备方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2955294T3 true ES2955294T3 (es) 2023-11-29

Family

ID=64396260

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES18805893T Active ES2955294T3 (es) 2017-05-24 2018-05-24 Forma salina y cristalina de compuesto andrografólido modificado y método de preparación del mismo

Country Status (6)

Country Link
US (1) US11299482B2 (es)
EP (1) EP3632909B1 (es)
CN (1) CN110650953B (es)
ES (1) ES2955294T3 (es)
PT (1) PT3632909T (es)
WO (1) WO2018214929A1 (es)

Family Cites Families (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20170354639A1 (en) * 2014-10-24 2017-12-14 Biogen Ma Inc. Diterpenoid derivatives and methods of use thereof
CN105367558B (zh) * 2015-08-27 2018-07-03 沈阳药科大学 穿心莲内酯衍生物及其制备方法和用途
CN106800551B (zh) * 2015-11-26 2021-05-11 黑龙江珍宝岛药业股份有限公司 穿心莲内酯改构化合物
WO2017088738A1 (zh) * 2015-11-26 2017-06-01 南京明德新药研发股份有限公司 穿心莲内酯改构化合物

Also Published As

Publication number Publication date
EP3632909B1 (en) 2023-07-12
PT3632909T (pt) 2023-09-27
WO2018214929A1 (zh) 2018-11-29
CN110650953A (zh) 2020-01-03
CN110650953B (zh) 2023-01-10
EP3632909A4 (en) 2020-12-23
US20210284630A1 (en) 2021-09-16
US11299482B2 (en) 2022-04-12
EP3632909A1 (en) 2020-04-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
UA121138C2 (uk) Нафтиридинові сполуки як інгібітори jak-кінази
RU2686722C1 (ru) Новые кристаллы урацильного соединения
UA124271C2 (uk) ПІРАЗОЛ[1,5-a]ПІРИМІДИНИ ТА ЇХНІ СОЛІ, ФАРМАЦЕВТИЧНІ КОМПОЗИЦІЇ НА ЇХ ОСНОВІ ТА ЇХ ЗАСТОСУВАННЯ ДЛЯ ЛІКУВАННЯ РАКУ
BR112015002524B1 (pt) Derivados de alquilpirimidina, composição farmacêutica que os compreende e uso dos mesmos
EP3150592B1 (en) Alk kinase inhibitor, and preparation method and use thereof
ES2772682T3 (es) Cristal de imidazooxazina, composición farmacéutica que contiene dicho cristal, y método de producción de dicho cristal
BR112020008015A2 (pt) composto derivado da pirimidina como inibidor da quinase jak
EP3395817B1 (en) Pyrido[1,2-a]pyrimidone analog, crystal form thereof, intermediate thereof and preparation method therefor
BR112021008323A2 (pt) sulfonamida substituída com trifluorometil como inibidor seletivo de bcl-2
WO2016165618A1 (zh) 一种艾德力布的无定型物及其制备方法
WO2023160727A1 (zh) 吲唑类化合物用于治疗银屑病的用途
CN115850291A (zh) 喜树碱衍生物及其用途
CN114736214B (zh) 一种倍半萜衍生物、其药物组合物及其制备方法和用途
US8853194B2 (en) Sterol derivatives and their synthesis and use
ES2955294T3 (es) Forma salina y cristalina de compuesto andrografólido modificado y método de preparación del mismo
KR20210068008A (ko) Fgfr4 억제제로서 사용된 융합된 환 유도체
EP3403651A1 (en) Isocorydine derivatives, preparation method and use thereof
CN104603133B (zh) 用于治疗癌症和免疫抑制的组合疗法
US20220153704A1 (en) Crystal form e of bulleyaconitine a, preparation method therefor and application thereof
CN114644642B (zh) 一种噻吩并吡啶化合物的晶型a、制备方法及其药物组合物
BR112019015399A2 (pt) Moduladores de rorgama e usos dos mesmos
JP2022517396A (ja) Ｅｇｆｒ阻害剤の塩、結晶形及びその製造方法
CN109810058B (zh) 紫金龙素类衍生物及其药物组合物、制备方法和用途
CN108290919A (zh) 具有上皮屏障增强特性的阿奇霉素衍生物
JP2022507244A (ja) インターロイキン１βに関連する病態の治療のためのピリジン－スルホンアミド化合物