ES2951837T3 - Derivados de imidazol pentacíclicos condensados como moduladores de la actividad de TNF - Google Patents

Abstract

Un compuesto de fórmula (I) como se define en el presente documento, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, que son potentes moduladores de la actividad del TNF a humano, son por consiguiente beneficiosos en el tratamiento y/o prevención de diversas dolencias humanas, incluidos trastornos autoinmunes e inflamatorios; trastornos neurológicos y neurodegenerativos; dolor y trastornos nociceptivos; Desordenes cardiovasculares; desordenes metabólicos; trastornos oculares; y trastornos oncológicos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Derivados de imidazol pentacíclicos condensados como moduladores de la actividad de TNF

La presente invención se refiere a una clase discreta de derivados de imidazol pentacíclicos condensados y a su uso en terapia. Más particularmente, la presente invención se refiere a derivados de benzimidazol pentacíclicos condensados sustituidos farmacológicamente activos. Estos compuestos actúan como moduladores de la señalización de TNFα y son, en consecuencia, beneficiosos como agentes farmacéuticos, especialmente en el tratamiento de trastornos inflamatorios y autoinmunitarios adversos, trastornos neurológicos y neurodegenerativos, dolor y trastornos nociceptivos, trastornos cardiovasculares, trastornos metabólicos, trastornos oculares y trastornos oncológicos.

TNFα es el miembro prototípico de la superfamilia del factor de necrosis tumoral (TNF) de proteínas que comparten una función primaria de regulación de la supervivencia celular y la muerte celular. Una característica estructural común a todos los miembros conocidos de la superfamilia de TNF es la formación de complejos triméricos que se unen con, y activan, receptores de la superfamilia del TNF específicos. A modo de ejemplo, TNFα existe en las formas soluble y transmembrana y señaliza a través de dos receptores, conocidos como TNFR1 y TNFR2, con criterios de valoración funcionales distintos.

Diversos productos capaces de modular la actividad de TNFα ya están disponibles en el mercado. Todos están aprobados para el tratamiento de trastornos inflamatorios y autoinmunitarios tales como artritis reumatoide y enfermedad de Crohn. Todos los productos aprobados en la actualidad son macromoleculares y actúan inhibiendo la unión de TNFα humano con su receptor. Los inhibidores de TNFα macromoleculares típicos incluyen anticuerpos anti-TNFa; y proteínas de fusión de receptores de TNFα solubles. Los ejemplos de anticuerpos anti-TNFα disponibles en el mercado incluyen anticuerpos completamente humanos tales como adalimumab (Humira®) y golimumab (Simponi®), anticuerpos quiméricos tales como infliximab (Remicade®) y fragmentos Fab' pegilados tales como certolizumab pegol (Cimzia®). Un ejemplo de una proteína de fusión del receptor de TNFα disponible en el mercado es etanercept (Enbrel®).

Los miembros de la superfamilia de TNF, incluyendo el propio TNFα, están implicados en una diversidad de funciones fisiológicas y patológicas que se cree que desempeñan un papel en una serie de afecciones de importancia médica significativa (véase, por ejemplo, M.G. Tansey y D.E. Szymkowski, Drug Discovery Today, 2009, 14, 1082-1088; y F.S. Carneiro et al., J. Sexual Medicine, 2010, 7, 3823-3834).

Los compuestos de acuerdo con la presente invención, que son potentes moduladores de la actividad de TNFa, son por lo tanto beneficiosos en el tratamiento y/o la prevención de diversas enfermedades humanas. Éstas incluyen trastornos autoinmunitarios e inflamatorios; trastornos neurológicos y neurodegenerativos; dolor y trastornos nociceptivos; trastornos cardiovasculares; trastornos metabólicos; trastornos oculares; y trastornos oncológicos.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención también son potentes inhibidores de CD 11b expresado en granulocitos en células sanguíneas humanas, lo que confirma su capacidad para actuar como potentes moduladores de TNFα en células humanas, como se demuestra por el bajo valor de CI⁵⁰ del compuesto libre ("CI⁵⁰ libre") en el ensayo de sangre completa humana descrito en el presente documento.

Adicionalmente, los compuestos de acuerdo con la presente invención pueden ser beneficiosos como patrones farmacológicos para su uso en el desarrollo de nuevos ensayos biológicos y en la búsqueda de nuevos agentes farmacológicos. Por lo tanto, en una realización, los compuestos de la presente invención pueden ser útiles como radioligandos en ensayos para detectar compuestos farmacológicamente activos. En una realización alternativa, determinados compuestos de la presente invención pueden ser útiles para acoplar con un fluoróforo para proporcionar conjugados fluorescentes que pueden utilizarse en ensayos (por ejemplo un ensayo de polarización de fluorescencia) para detectar compuestos farmacológicamente activos.

El documento WO 2013/186229 se refiere a derivados de bencimidazol sustituidos que son moduladores de la señalización de TNFa.

El documento WO 2015/086525 se refiere a derivados de imidazol tricíclicos condensados que son moduladores de la señalización de TNFa.

El documento WO 2016/050975 se refiere a derivados de imidazol pentacíclicos condensados que son moduladores de la señalización de TNFa.

La solicitud de patente internacional en tramitación PCT/EP2018/060489 se refiere a una clase discreta de derivados de imidazol pentacíclicos condensados que son moduladores de la señalización de TNFa.

La presente invención proporciona un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

en donde

X representa N o C-F;

R1 representa hidrógeno o metilo (incluyendo -CD³);

R2 representa hidroxi o ciano;

R3 representa hidroxi o ciano; y

R2 es diferente de R3.

La presente invención también proporciona un compuesto que es 3-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-6-fluoro-13-oxo-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa-3(8),4,6,9,14(19),15,17-heptaen-5-il]pirimidin-2-il]-3-hidroxi-1-metilciclobutan-1-carbonitrilo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención están abarcados dentro del ámbito genérico del documento WO 2016/050975. No existe, sin embargo, ninguna divulgación específica en la misma de un compuesto como se ha definido anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

La presente invención también proporciona un compuesto como se ha definido anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

En otro aspecto, la presente invención proporciona un compuesto como se ha definido anteriormente, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento y/o la prevención de un trastorno inflamatorio o autoinmunitario, un trastorno neurológico o neurodegenerativo, dolor o un trastorno nociceptivo, un trastorno cardiovascular, un trastorno metabólico, un trastorno ocular o un trastorno oncológico.

Para su uso en medicina, las sales de los compuestos de la invención serán sales farmacéuticamente aceptables. Otras sales pueden, sin embargo, ser útiles en la preparación de los compuestos de la invención o de sus sales farmacéuticamente aceptables. Los principios habituales que subyacen a la selección y la preparación de sales farmacéuticamente aceptables se describen, por ejemplo, en Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, ed. P.H. Stahl & C.G. Wermuth, Wiley-VCH, 2002.

Cuando los compuestos de la invención tienen uno o más centros asimétricos, pueden existir en consecuencia como enantiómeros. Cuando los compuestos de acuerdo con la invención poseen dos o más centros asimétricos, adicionalmente pueden existir como diastereómeros. Debe entenderse que la invención se extiende al uso de todos estos enantiómeros y diastereómeros y a mezclas de los mismos en cualquier proporción, incluyendo racematos. La fórmula (I) y las fórmulas representadas en lo sucesivo en el presente documento pretenden representar todos los estereoisómeros individuales y todas las posibles mezclas de los mismos, salvo que se indique o se muestre lo contrario.

De manera adecuada, los grupos R2 y R3 de compuestos de fórmula (I) están dispuestos cis uno con respecto al otro.

Debe entenderse que, cada átomo individual presente en la fórmula (I) o en las fórmulas representadas en lo sucesivo en el presente documento, puede estar presente, de hecho, en forma de cualquiera de sus isótopos de origen natural, prefiriéndose el isótopo o isótopos más abundantes. Por lo tanto, a modo de ejemplo, cada átomo de hidrógeno individual presente en la fórmula (I) o en las fórmulas representadas en lo sucesivo en el presente documento, puede estar presente como un átomo de 1H, 2H (deuterio; D) o 3H (tritio; T), preferentemente 1H. De forma similar, a modo de ejemplo, cada átomo de carbono individual presente en la fórmula (I) o en las fórmulas representadas en lo sucesivo en el presente documento, puede estar presente como un átomo de 12C, 13C o 14C, preferentemente 12C.

En una primera realización, X representa N. En una segunda realización, X representa C-F.

En una primera realización, R1 representa hidrógeno. En una segunda realización, R1 representa metilo. En un primer aspecto de la segunda realización, R1 representa -CD³. En un segundo aspecto de la segunda realización, R1 representa -CH³.

En una primera realización, R2 representa hidroxi. En una segunda realización, R2 representa ciano.

En una primera realización, R3 representa hidroxi. En una segunda realización, R3 representa ciano.

De manera adecuada, R3 representa hidroxi y R2 representa ciano.

De manera adecuada, R3 representa ciano y R2 representa hidroxi.

Las subclases particulares de compuestos de acuerdo con la presente invención incluyen los compuestos de fórmula (IIA) y (IIB) y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos:

en donde X y R1 son como se han definido anteriormente.

Los compuestos novedosos específicos de acuerdo con la presente invención incluyen cada uno de los compuestos cuya preparación se describe en los Ejemplos adjuntos y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención son beneficiosos en el tratamiento y/o la prevención de diversas enfermedades humanas. Éstas incluyen trastornos autoinmunitarios e inflamatorios; trastornos neurológicos y neurodegenerativos; dolor y trastornos nociceptivos; trastornos cardiovasculares; trastornos metabólicos; trastornos oculares; y trastornos oncológicos.

Los trastornos inflamatorios y autoinmunitarios incluyen trastornos autoinmunitarios sistémicos, trastornos endocrinos autoinmunitarios y trastornos autoinmunitarios específicos de órgano. Los trastornos autoinmunitarios sistémicos incluyen lupus eritematoso sistémico (LES), psoriasis, artropatía psoriásica, vasculitis, miopatía inflamatoria (incluyendo polimiositis, dermatomiositis y miositis por cuerpos de inclusión), esclerodermia, esclerosis múltiple, esclerosis sistémica, espondilitis anquilosante, artritis reumatoide, artritis inflamatoria no específica, artritis inflamatoria juvenil, artritis idiopática juvenil (incluyendo formas oligoarticulares y poliarticulares de las mismas), anemia de enfermedad crónica (AEC), enfermedad de Still (inicio juvenil y/o en adulto), enfermedad de Behcet y síndrome de Sjogren. Los trastornos endocrinos autoinmunitarios incluyen tiroiditis. Los trastornos autoinmunitarios específicos de órgano incluyen enfermedad de Addison, anemia hemolítica o perniciosa, lesión de riñón aguda (LRA; incluyendo LRA inducida por cisplatino), nefropatía diabética (ND), uropatía obstructiva (incluyendo uropatía obstructiva inducida por cisplatino), glomerulonefritis (incluyendo síndrome de Goodpasture, glomerulonefritis mediada por complejo inmunitario y glomerulonefritis asociada a anticuerpos citoplasmáticos antineutrófilos (ACAN)), nefritis lúpica (NL), enfermedad de cambio mínimo, enfermedad de Graves, púrpura trombocitopénica idiopática, enfermedad inflamatoria intestinal (incluyendo enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, colitis indeterminada y reservoritis), pénfigo, dermatitis atópica, hepatitis autoinmunitaria, cirrosis biliar primaria, neumonitis autoinmunitaria, carditis autoinmunitaria, miastenia grave, infertilidad espontánea, osteoporosis, osteopenia, enfermedad ósea erosiva, condritis, degeneración y/o destrucción de cartílago, trastornos fibrosantes (incluyendo diversas formas de fibrosis hepática y pulmonar), asma, rinitis, enfermedad pulmonar obstructiva crónica (EPOC), síndrome de dificultad respiratoria, septicemia, fiebre, distrofia muscular (incluyendo distrofia muscular de Duchenne), rechazo de trasplante de órganos (incluyendo rechazo de aloinjertos renales), escleritis (incluyendo escleritis en arteritis de células gigantes), arteritis de Takayasu, hidradenitis supurativa, pioderma gangrenoso, sarcoidosis, polimialgia reumática y espondiloartritis axial.

Los trastornos neurológicos y neurodegenerativos incluyen enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington, isquemia, ictus, esclerosis lateral amiotrófica, lesión de la médula espinal, traumatismo craneal, ataques y epilepsia.

Los trastornos cardiovasculares incluyen trombosis, hipertrofia cardíaca, hipertensión, contractilidad irregular del corazón (por ejemplo, durante la insuficiencia cardíaca) y trastornos sexuales (incluyendo disfunción eréctil y disfunción sexual femenina). Los moduladores de la función de TNFα también pueden ser útiles en el tratamiento y/o la prevención del infarto de miocardio (véase J.J. Wu et al., JAMA, 2013, 309, 2043-2044).

Los trastornos metabólicos incluyen diabetes (incluyendo diabetes mellitus insulinodependiente y diabetes juvenil), dislipidemia y síndrome metabólico.

Los trastornos oculares incluyen retinopatía (incluyendo retinopatía diabética, retinopatía proliferativa, retinopatía no proliferativa y retinopatía del prematuro), edema macular (incluyendo edema macular diabético), degeneración macular relacionada con la edad (DMRE), vascularización (incluyendo vascularización corneana y neovascularización), oclusión de la vena retiniana y diversas formas de uveítis (incluyendo iritis) y queratitis.

Los trastornos oncológicos, que pueden ser agudos o crónicos, incluyen trastornos proliferativos, especialmente cáncer y complicaciones asociadas con el cáncer (incluyendo complicaciones esqueléticas, caquexia y anemia). Las categorías particulares del cáncer incluyen tumor maligno hemático (incluyendo leucemia y linfoma) y tumor maligno no hematológico (incluyendo cáncer de tumor sólido, sarcoma, meningioma, glioblastoma multiforme, neuroblastoma, melanoma, carcinoma gástrico y carcinoma de células renales). La leucemia crónica puede ser mieloide o linfoide. Las variedades de leucemia incluyen leucemia linfoblástica de linfocitos T, leucemia mielógena crónica (CML), leucemia linfocítica/linfoide crónica (CLL), tricoleucemia, leucemia linfoblástica aguda (ALL), leucemia mielógena aguda (AML), síndrome mielodisplásico, leucemia neutrófila crónica, leucemia linfoblástica aguda de linfocitos T, plasmacitoma, leucemia inmunoblástica de células grandes, leucemia de células del manto, mieloma múltiple, leucemia megacarioblástica aguda, leucemia megacariocítica aguda, leucemia promielocítica y eritroleucemia. Las variedades de linfoma incluyen linfoma neoplásico, linfoma de Hodgkin, linfoma no hodgkiniano, linfoma linfoblástico de linfocitos T, linfoma de Burkitt, linfoma folicular, linfoma MALT1 y linfoma de zona marginal. Las variedades de tumor maligno no hematológico incluyen cáncer de la próstata, pulmón, mama, recto, colon, ganglio linfático, vejiga, riñón, páncreas, hígado, ovario, útero, cuello uterino, cerebro, piel, hueso, estómago y músculo. También pueden usarse moduladores de la función de TNFα para aumentar la seguridad del efecto antineoplásico potente de TNF (véase F.V. Hauwermeiren et al., J. Clin. Invest., 2013, 123, 2590-2603).

La presente invención también proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en asociación con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables.

Las composiciones farmacéuticas de acuerdo con la invención pueden tomar una forma adecuada para administración oral, bucal, parenteral, nasal, tópica, oftálmica o rectal, o una forma adecuada para la administración por inhalación o insuflación.

Para la administración oral, las composiciones farmacéuticas pueden adoptar la forma de, por ejemplo, comprimidos, trociscos o cápsulas preparadas por medios convencionales con excipientes farmacéuticamente aceptables tales como agentes aglutinantes (por ejemplo, almidón de maíz pregelatinizado, polivinilpirrolidona o hidroxipropilmetilcelulosa); cargas (por ejemplo, lactosa, celulosa microcristalina o hidrógeno fosfato cálcico); lubricantes (por ejemplo, estearato de magnesio, talco o sílice); disgregantes (por ejemplo, almidón de patata o glicolato sódico); o agentes humectantes (por ejemplo, lauril sulfato sódico). Los comprimidos pueden estar recubiertos por métodos bien conocidos en la técnica. Las preparaciones líquidas para administración oral pueden adoptar la forma de, por ejemplo, soluciones, jarabes o suspensiones o pueden presentarse como un producto seco para su constitución con agua u otro vehículo adecuado antes de su uso. Dichas preparaciones líquidas pueden prepararse por medios convencionales con aditivos farmacéuticamente aceptables tales como agentes de suspensión, agentes emulsionantes, vehículos no acuosos o conservantes. Las preparaciones también pueden contener sales tamponantes, agentes aromatizantes, agentes colorantes o agentes edulcorantes, según sea adecuado.

Las preparaciones para administración oral pueden formularse de manera adecuada para proporcionar la liberación controlada del principio activo.

Para administración bucal, las composiciones pueden adoptar la forma de comprimidos o grageas formulados de forma convencional.

Los compuestos de la invención pueden formularse para administración parenteral mediante inyección, por ejemplo, mediante inyección de embolada o infusión. Las formulaciones para inyección pueden presentarse en una forma farmacéutica unitaria, por ejemplo, en ampollas de vidrio o recipientes multidosis, por ejemplo, viales de vidrio. Las composiciones para inyección pueden adoptar tales formas como suspensiones, soluciones o emulsiones en vehículos oleaginosos o acuosos y pueden comprender agentes de formulación, tales como agentes de suspensión, estabilizantes, conservantes y/o de dispersión. Como alternativa, el principio activo puede estar en forma de polvo para constitución con un vehículo adecuado, por ejemplo, agua estéril libre de pirógenos, antes de su uso.

Además de las formulaciones descritas anteriormente, los compuestos de la invención también pueden formularse como una preparación de depósito. Dichas formulaciones de larga acción pueden administrarse mediante implante o mediante inyección intramuscular.

Para administración nasal o administración por inhalación, los compuestos de acuerdo con la presente invención pueden administrarse convenientemente en forma de una presentación de pulverización en aerosol para envases presurizados o un nebulizador, con el uso de un propulsor adecuado, por ejemplo, diclorodifluorometano, fluorotriclorometano, diclorotetrafluoroetano, dióxido de carbono u otro gas o mezcla de gases adecuados.

Las composiciones pueden, si se desea, presentarse en un envase o dispositivo dosificador que puede contener una o más formas de dosificación unitarias que contienen el principio activo. El envase o dispositivo dispensador puede estar acompañado de instrucciones para administración.

Para administración tópica, los compuestos para su uso en la presente invención pueden formularse convenientemente en una pomada adecuada que contiene el componente activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos particulares incluyen, por ejemplo, aceite mineral, petróleo líquido, propilenglicol, polioxietileno, polioxipropileno, cera emulsionante y agua. Como alternativa, los compuestos de uso en la presente invención pueden formularse en una loción adecuada que contiene el principio activo suspendido o disuelto en uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables. Los vehículos particulares incluyen, por ejemplo, aceite mineral, monoestearato de sorbitán, polisorbato 60, cera de ésteres cetílicos, alcohol cetearílico, alcohol bencílico, 2-octildodecanol y agua.

Para administración oftálmica los compuestos para su uso en la presente invención pueden formularse convenientemente como suspensiones micronizadas en solución salina estéril, de pH ajustado, isotónica, con o sin un conservante tal como un agente bactericida o fungicida, por ejemplo, nitrato fenilmercúrico, cloruro de bencilalconio o acetato de clorhexidina. Como alternativa, para la administración oftálmica pueden formularse compuestos en una pomada tal como vaselina.

Para administración rectal los compuestos para su uso en la presente invención pueden formularse convenientemente como supositorios. Estos pueden prepararse mezclando el componente activo con un excipiente no irritante adecuado que es sólido a temperatura ambiente pero líquido a temperatura rectal y, por lo tanto, se derretirá en el recto para liberar el componente activo. Dichos materiales incluyen, por ejemplo, manteca de cacao, cera de abeja y polietilenglicoles.

La cantidad de un compuesto para su uso en la invención requerida para la profilaxis o el tratamiento de una afección particular variará dependiendo del compuesto elegido y la afección del paciente que ha de tratarse. En general, sin embargo, las dosificaciones diarias pueden variar de aproximadamente 10 ng/kg a 1000 mg/kg, normalmente de 100 ng/kg a 100 mg/kg, por ejemplo, de aproximadamente 0,01 mg/kg a 40 mg/kg de peso corporal, para administración oral o bucal, de aproximadamente 10 ng/kg a 50 mg/kg de peso corporal para administración parenteral y de aproximadamente 0,05 mg a aproximadamente 1000 mg, por ejemplo de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 1000 mg para administración nasal o administración por inhalación o insuflación.

Si se desea, un compuesto de acuerdo con la presente invención puede coadministrarse con otro agente farmacéuticamente activo, por ejemplo, una molécula antinflamatoria.

Los compuestos de fórmula (I) anteriores pueden prepararse mediante un proceso que comprende hacer reaccionar un compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula (IV):

en donde X, R1, R2 y R3 son como se han definido anteriormente, L1 representa un grupo saliente adecuado, M1 representa un resto de ácido borónico -B(OH)² o un éster cíclico del mismo formado con un diol orgánico, por ejemplo, pinacol, 1,3-propano-diol o neopentilglicol, en presencia de un catalizador de metal de transición.

El grupo saliente L1 es normalmente un átomo de halógeno, por ejemplo, bromo.

El catalizador de metal de transición de uso en la reacción entre compuestos (III) y (IV) es adecuadamente tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) o [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferroceno]dicloropaladio(II) o cloro(2-diclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropil-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladio(II) (XPhos Pd G2). El catalizador de metal de transición puede utilizarse normalmente junto con 2-diclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo (XPhos) o tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio. La reacción se realiza adecuadamente en presencia de fosfato potásico o carbonato potásico. La reacción se lleva a cabo de manera conveniente a una temperatura elevada en un disolvente adecuado, por ejemplo, un éter cíclico, tal como 1,4-dioxano, opcionalmente en mezcla con agua.

Los intermedios de fórmula (IV) anteriores en donde M1 representa un éster cíclico de un resto de ácido borónico -B(OH)² formado con pinacol pueden prepararse haciendo reaccionar bis(pinacolato)diboro con un compuesto de fórmula (V):

en donde L2 representa un grupo saliente adecuado; en presencia de un catalizador de metal de transición.

El grupo saliente L2 es normalmente un átomo de halógeno, por ejemplo cloro.

El catalizador de metal de transición de uso en la reacción entre bis(pinacolato)diboro y el compuesto (V) es convenientemente tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0), que puede utilizarse junto con 2-diclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo (XPhos) o tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio. La reacción se realiza adecuadamente en presencia de acetato potásico. La reacción se lleva a cabo de manera conveniente a una temperatura elevada en un disolvente adecuado, por ejemplo un éter cíclico, tal como 1,4-dioxano.

Los intermedios de fórmula (V) anteriores en donde R1 es metilo pueden prepararse a partir del correspondiente compuesto de fórmula (V) en donde R1 es hidrógeno por reacción con un haluro de metilo, por ejemplo, yodometano. La reacción de metilación se realiza en general en presencia de una base, por ejemplo, una base de sililamida tal como bis(trimetilsilil)amida potásica. La reacción puede llevarse a cabo de manera conveniente en un disolvente adecuado, por ejemplo, un disolvente de éter cíclico tal como tetrahidrofurano.

El intermedio de fórmula (V) anterior en donde R1 es hidrógeno y L2 representa cloro se desvela específicamente en el documento WO 2016/050975, como también lo son los intermedios de fórmula (IV) anterior en donde R1 es respectivamente hidrógeno o -CD³ y M1 representa 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxa-borolan-2-ilo.

Los intermedios de fórmula (III) en donde R3 es hidroxi pueden prepararse haciendo reaccionar un intermedio de fórmula (VI) con un intermedio de fórmula (VII),

en donde X, L1 y R2 son como se han definido anteriormente y L3 es un grupo saliente adecuado; en presencia de n-BuLi.

El grupo saliente L3 es normalmente un átomo de halógeno, por ejemplo, cloro o yodo.

La reacción se efectúa convenientemente en diclorometano a baja temperatura de acuerdo con métodos bien conocidos por el experto en la materia.

Los intermedios de fórmula (III) en donde R3 es ciano pueden prepararse a partir de intermedios de fórmula (VIII),

en donde X y L1 son como se han definido anteriormente, por reacción con ácido tetrafluorobórico a temperatura elevada.

Como alternativa, cuando X representa C-F, el intermedio de fórmula (VIII) puede oxidarse primero en el epóxido correspondiente en presencia de ácido 3-cloroperoxibenzoico, en un disolvente adecuado, por ejemplo, diclorometano, seguido de reacción con borohidruro sódico en un disolvente adecuado, por ejemplo, etanol o metanol o una mezcla de los mismos.

Los intermedios de fórmula (VIII) pueden prepararse por métodos análogos a aquellos descritos en los Ejemplos adjuntos o por métodos convencionales bien conocidos en la técnica.

Cuando se obtiene una mezcla de productos a partir de cualquiera de los procesos descritos anteriormente para la preparación de compuestos de acuerdo con la invención, el producto deseado puede separarse de la misma en una fase adecuada por métodos convencionales tales como HPLC preparativa; o cromatografía en columna utilizando, por ejemplo, sílice y/o alúmina junto con un sistema de disolventes adecuado.

Cuando los procesos descritos anteriormente dan lugar a mezclas de estereoisómeros, estos isómeros pueden separarse por técnicas convencionales. En particular, cuando se desea obtener un enantiómero particular, este puede producirse a partir de una mezcla de enantiómeros correspondiente usando cualquier procedimiento convencional adecuado para resolver enantiómeros. Por lo tanto, por ejemplo, los derivados diastereoméricos, por ejemplo, sales, pueden producirse por reacción de una mezcla de enantiómeros, por ejemplo, un racemato, y un compuesto quiral apropiado, por ejemplo, un ácido o base quiral. Después, los diastereómeros pueden separarse por cualquier medio conveniente, por ejemplo, por cristalización, y el enantiómero deseado recuperarse, por ejemplo, por tratamiento con un ácido en el caso donde el diastereómero es una sal. En otro proceso de resolución, un racemato puede separarse usando HPLC quiral. Por otra parte, si se desea, un enantiómero particular puede obtenerse usando un intermedio quiral adecuado en uno de los procesos descritos anteriormente. Como alternativa, un enantiómero particular puede obtenerse realizando una biotransformación enzimática específica del enantiómero, por ejemplo una hidrólisis de éster usando una esterasa, y después purificando únicamente el ácido hidrolizado enantioméricamente puro del antípodo de éster sin reaccionar. La cromatografía, la recristalización y otros procedimientos de separación convencionales también pueden usarse cuando se desee obtener un isómero geométrico particular. Alternativamente, el enantiómero no deseado puede racemizarse en el enantiómero deseado, en presencia de un ácido o una base, de acuerdo con los métodos conocidos por el experto en la materia, o de acuerdo con los métodos descritos en los Ejemplos adjuntos.

Durante cualquiera de las secuencias sintéticas anteriores puede ser necesario y/o deseable proteger grupos sensibles o reactivos en cualquiera de las moléculas afectadas. Esto puede conseguirse mediante grupos protectores convencionales, tales como aquellos descritos en Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; y T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 3a edición, 1999. Los grupos protectores pueden eliminarse en cualquier fase posterior conveniente utilizando métodos conocidos de la técnica.

Los compuestos de acuerdo con la presente invención neutralizan con potencia la actividad de TNFα en una línea celular indicadora derivada de HEK-293 disponible en el mercado conocida como HEK-Blue™ CD40L. Esta es una estirpe celular estable transfectada en HEK-293 que expresa SEAP (fosfatasa alcalina embrionaria secretada) bajo el control del promotor mínimo de IFNp fusionado a cinco sitios de unión de NF-kB. La secreción de SEAP por estas células se estimula de una manera dependiente de la concentración por TNFα. Cuando se someten a ensayo en el bioensayo de HEK-293, al que también se hace referencia en el presente documento como el ensayo de genes indicadores, los compuestos de la presente invención exhiben un valor de CI⁵⁰ de 10 nM o más (el experto en la materia apreciará que una cifra de CI⁵⁰ menor indica un compuesto más activo).

Adicionalmente, los compuestos de acuerdo con la presente invención son potentes inhibidores de CD11 b expresados en granulocitos en células sanguíneas humanas, cuando se prueban en el ensayo de sangre completa humana como se describe en el presente documento. Cuando se prueban en este ensayo, los compuestos de la presente invención exhiben un CI⁵⁰ para el compuesto libre (en lo sucesivo en el presente documento denominado "CI⁵⁰ libre") de 15 nM o menos (el experto apreciará que, en un ensayo tal, un valor más bajo de CI⁵⁰ denota un compuesto superior, es decir, un compuesto que presenta una mayor inhibición de la expresión de CD11b en los granulocitos y que, en consecuencia, es un mejor modulador del TNFa).

Ensayo de gen indicador

Inhibición de la activación de NF- ^k B inducida por TNFa

La estimulación de células HEK-293 por TNFα conduce a la activación de la ruta de NF-kB. La línea celular indicadora usada para determinar la actividad de TNFα se obtuvo de InvivoGen. HEK-Blue™ CD40L es una línea celular estable transfectada en HEK-293 que expresa SEAP (fosfatasa alcalina embrionaria secretada) bajo el control del promotor mínimo de IFNp fusionado a cinco sitios de unión de NF-^kB. La secreción de SEAP por estas células se estimula de una manera dependiente de la dosis por TNFa, con una CE50 de 0,5 ng/ml para TNFα humano. Los compuestos se diluyeron a partir de soluciones madre de DMSO 10 mM (concentración de ensayo final de DMSO al 0,3 %) para generar una curva de dilución en serie con factor de dilución 3 de 10 puntos (por ejemplo, concentración final de 30.000 nM a 2 nM). El compuesto diluido se preincubó con TNFα durante 60 minutos antes de la adición a una placa de microtitulación de 384 pocillos y se incubó durante 18 h. La concentración final de TNFα en la placa de ensayo fue de 0,5 ng/ml. La actividad de SEAP se determinó en el sobrenadante usando un sustrato colorimétrico, por ejemplo, medios de detección QUANTI-Blue™ o HEK-Blue™ (InvivoGen). El porcentaje de inhibición de los compuestos se calculó frente al TNFα que contenía DMSO solo (control) y la inhibición máxima se generó con un exceso de anticuerpo monoclonal bloqueante anti-TNFα. Se construyó una curva de inhibición en ActivityBase usando un modelo logístico de 4 parámetros (XLfit™). El punto de inflexión entre los efectos mínimo y máximo ajustados del inhibidor da el valor de CI⁵⁰.

Cuando se somete a prueba en el ensayo de gen indicador, se descubrió que los compuestos de los Ejemplos adjuntos mostraban valores de CI⁵⁰ de 10 nM o mejores.

Cuando se somete a prueba en el ensayo de gen indicador, los compuestos de los Ejemplos adjuntos muestran valores de CI⁵⁰ generalmente en el intervalo de aproximadamente 0,01 nM a 10 nM.

Ensayo de detección de sangre entera humana TNF

Los compuestos de acuerdo con los Ejemplos se evaluaron en un ensayo de sangre completa humana dirigido por TNFα expresado endógenamente midiendo la expresión de CD11b en granulocitos en sangre completa humana expuesta a zymosan. Zymosan se une a TLR2 y otros receptores, que conduce a la señalización de NF-^kB que, a su vez, induce la producción de mediadores proinflamatorios, incluyendo TNFa. A su vez, TNFα puede estimular la expresión de CD11b en granulocitos.

Los compuestos se diluyeron de soluciones de trabajo de DMSO 10 mM (concentración final de ensayo de DMSO al 0,2 %) para generar una curva de dilución seriada 2,5 veces de 10 puntos (por ejemplo, concentración final de 20.000 nM a 5,3 nM). El compuesto diluido se preincubó con sangre entera humana anticoagulada con EDTA durante 60 minutos a 37 °C antes de la estimulación con 1 ug/ml de zymosan. Después de 3 horas de estimulación con zymosan, la sangre completa se tiñó con anticuerpos anti CD45 y anti CD11b marcados con fluorescencia. Las muestras se fijaron y los glóbulos rojos se lisaron antes del análisis con un FACS CANTO II.

El análisis FACS (Clasificación de células activadas por fluorescencia) se realizó con el software FloJo. Se usó SSC-A (área de dispersión lateral del pico) y la señal CD45 para identificar granulocitos, seguido de SSC-A y SSC-W (ancho de dispersión lateral del pico) para seleccionar células individuales. Se usaron perlas MESF (moléculas de fluorocromo soluble equivalente) para calibrar la señal de CD11 b en granulocitos de una célula individual. La activación de CD11 b se inhibió de manera dependiente de la dosis por el inhibidor de TNFa.

El porcentaje de inhibición de los compuestos se calculó frente al TNFα que contenía DMSO solo (control) y la inhibición máxima se generó con un exceso de anticuerpo monoclonal bloqueante anti-TNFa. Se construyó una curva de inhibición en ActivityBase usando un modelo logístico de 4 parámetros (XLfit™). El punto de inflexión entre los efectos mínimo y máximo ajustados del inhibidor da el valor de CI⁵⁰.

Cuando se probaron, los compuestos de los Ejemplos adjuntos exhibieron valores de CI⁵⁰ que variaban entre aproximadamente 50 nM y aproximadamente 300 nM.

Ensayo de unión a sangre humana

El objeto de este ensayo es determinar la fracción no unida en sangre de los compuestos de acuerdo con la invención. El compuesto de acuerdo con la presente invención se prepara en sangre específica de especie. La solución de sangre se añade a un lado de la membrana en un sistema de diálisis en equilibrio mientras que el tampón (tampón fosfato 100 mM pH 7,4) se añade al otro lado. Se deja que el sistema alcance el equilibrio a 37 °C. El compuesto en ambos lados de la membrana se mide mediante CL-Em /EM y se calcula la fracción de compuesto no unido.

Se toman muestras de sangre usando heparina de litio como el anticoagulante y se usa para el ensayo en las 24 horas. Las soluciones del compuesto de prueba (1 μM; 0,5 % de concentración final de DMSO) se preparan en sangre humana que se ha diluido en una dilución 1:1 (v:v) en tampón fosfato 100 mM. El experimento se realiza usando diálisis de equilibrio con los dos compartimentos separados por una membrana semipermeable. El tampón (tampón fosfato 100 mM; pH 7,4) se añade a un lado de la membrana y la solución de sangre que contiene el compuesto de ensayo se añade al otro lado. Después del equilibrio durante 4 h a 37 °C en una incubadora con CO² al 5 % y agitación a 300 rpm en un agitador orbital, se toman muestras de ambos lados de la membrana. Las muestras se emparejan en matriz mediante la adición de tampón o sangre a las muestras relevantes (es decir, se añade tampón a las muestras de sangre y se añade sangre a las muestras de tampón). La proteína se precipita después de las muestras emparejadas con la matriz mediante la adición de un patrón interno que contiene metanol (200 pI de metanol con IS a 100 μl de muestra) seguido de centrifugación a 4 °C a 2500 rpm durante 30 min. El sobrenadante se diluye después con agua antes del análisis. Las incubaciones del compuesto de prueba se realizan por duplicado. Un compuesto de control, haloperidol, se incluye en cada experimento.

Se mide la fracción no unida en sangre (Fu) y el porcentaje de recuperación. También se miden los datos de relación de área de pico para todas las muestras.

Cuando se probaron, los compuestos de los Ejemplos adjuntos exhiben una fracción no unida en la sangre, expresada como un porcentaje, que varía entre aproximadamente el 1 % y aproximadamente el 7 %.

Una CI⁵⁰ calculada para el compuesto libre (en lo sucesivo en el presente documento denominada "CI⁵⁰ libre") que tiene en cuenta la extensión de la fracción no unida en la sangre se determinó multiplicando la CI⁵⁰ generada a partir del primer ensayo (ensayo de detección de sangre entera humana) por la fracción no unida (Fu), generada a partir del segundo ensayo (ensayo de unión a sangre humana).

Cuando se probaron, los compuestos de los Ejemplos adjuntos exhiben valores de CI⁵⁰ libre en el análisis de sangre completa humana de 15 nM o mejor. El experto en la materia entenderá que un valor "mejor" de CI⁵⁰ es un valor más bajo de CI50.

Específicamente, el compuesto del Ejemplo 2 exhibe un valor de CI⁵⁰ libre de aproximadamente 12 nM; el compuesto de los Ejemplos 1 y 3 exhibe un valor de CI⁵⁰ libre de aproximadamente 6 nM; el compuesto del Ejemplo 5 exhibe un valor de CI⁵⁰ de aproximadamente 5 nM; y los Ejemplos 4, 6 y 7 exhiben un valor de CI⁵⁰ libre mejor que 4 nM. Los siguientes Ejemplos ilustran la preparación de compuestos de acuerdo con la invención.

Ejemplos

Abreviaturas

DCM: diclorometano EtOAc: acetato de etilo

MeOH: metanol THF: tetrahidrofurano

DMSO: dimetilsulfóxido

MeCN: acetonitrilo EtOH: Etanol

TBME: Metil terc-butil éter

XPhos: 2-diciclohexilfosfin-2',4',6'-triisopropilbifenilo

t.a.: temperatura ambiente h: hora

M: masa TR: tiempo de retención

HPLC: Cromatografía líquida de alto rendimiento

CLEM: Cromatografía líquida Espectrometría de masas

ES+: Ionización positiva por electropulverización

Nomenclatura

Los nombres IUPAC de todos los Intermedios y Ejemplos descritos en este documento se generaron usando PipelIne Pilot (versión 2018) que usa el software OEMMetachem versión 1.4.5. proporcionada por OpenEye Scientific.

Condiciones analíticas

Todos los espectros de RMN se obtuvieron a 250 MHz, 300 MHz, 400 MHz o 500 MHz.

Todas las reacciones que implican reactivos sensibles al aire o a la humedad se realizaron en una atmósfera de nitrógeno usando disolventes secados y materiales de vidrio.

Determinación de datos por CLEM

Método 1

Método 1: Realizado usando un sistema CL-EM Agilent 1200RR-6140, con una bomba binaria Agilent y un módulo Agilent DAD (230-400 nm). 6140 detección de masas (ES) 100-1000 m/z.

Columna: XBridge C18, 2,1 x 20 mm, 2,5 |jm

Fase móvil A: Formiato de amonio 10 mM en agua Solución de amoníaco al 0,1 %

Fase móvil B: Acetonitrilo agua al 5 % solución de amoníaco al 0,1 %

Gradiente: Tiempo % de A % de B

0,00 95,10 5,00

4,00 5,00 95,00

5,00 5,00 95,00

5,10 95,00 5,00

Flujo: 1 ml/min

Tiempo de ejecución: 6 min

Método 2

Método 2: Sistema bruto 2 (básico): realizado con un sistema CL-EM Agilent 1260-6120, con una bomba binaria Agilent y un módulo Agilent DAD (240-400 nm). 6120 detección de masas (ES) 120-1000 m/z.

Columna: XBridge C18, 2,1 x 20 mm, 2,5 jm

Fase móvil A: Formiato de amonio 10 mM en agua Solución de amoníaco al 0, %

Fase móvil B: Acetonitrilo agua al 5 % solución de amoníaco al 0,1 %

Gradiente: Tiempo % de A % de B

0,00 95,00 5,00

1,50 5,00 95,00

2,25 5,00 95,00

2,50 95,00 5,00

Caudal: 1 ml/min

Tiempo de ejecución: 3,5 min

Método 3

Método 3: Sistema bruto 2 (básico): realizado con un sistema CL-EM Agilent 1260-6120, con una bomba binaria Agilent y un módulo Agilent DAD (240-400 nm). 6120 detección de masas (ES) 120-1000 m/z.

Columna: XBridge C18, 2,1 x 20 mm, 2,5 |jm

Fase móvil A: Formiato de amonio 10 mM en agua Solución de amoníaco al 0,1 % Fase móvil B: Acetonitrilo agua al 5 % solución de amoníaco al 0,1 %

Gradiente:

Tiempo % de A % de B

0,00 95.00 5.00

4.00 5.00 95.00

5.00 5.00 95.00

5.00 95.00 5.00

Caudal: 1 ml/min

Tiempo de ejecución 6 min

Método 4

Aparato Waters UPLC-SQD, ionización: electropulverización en modo positivo y/o negativo (ES+/-), condiciones cromatográficas: columna: Acquity CSH C18 1,7 jm - 2,1 x 50 mm, disolventes: A: H²O (ácido fórmico al 0,1 %) B: CH³CN (ácido fórmico al 0,1 %), temperatura de la columna: 45 °C, caudal: 1,0 ml/min, gradiente (2,5 min): del 5 al 100 % de B.

INTERMEDIO 1

(1R,11R)-5-cloro-18-(difluorometoxi)-12-metil-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,191icosa-3 (8),4.6.9.14(19).15,17-heptaen-13-ona

A una solución de (7R,14R)-11-cloro-1-(difluorometoxi)-6,7-dihidro-7,14-metanobencimidazo[1,2-£)][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona (documento WO 2016/050975, Ejemplo 11) (10 g, 26,6 mmol) en THF seco (135 ml) enfriado a -78 °C en nitrógeno, se le añadió bis(trimetilsilil)amida potásica (1 M en THF, 30 ml, 30 mmol) gota a gota durante 15 minutos. La mezcla resultante se agitó a -78 °C durante 1 h antes de la adición de yodometano (2,5 ml, 40 mmol) gota a gota durante 5 minutos. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 1 h, después se dejó calentar lentamente a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reacción se vertió en solución acuosa saturada de cloruro de amonio (600 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 800 ml). Los extractos orgánicos se secaron (Na₂SO₄), se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por cromatografía ultrarrápida sobre sílice (elución con 5 % de MeOH/DCM) proporcionó el compuesto del título (9,12 g, 88 %) como un sólido beige.

5^h (300 MHz, DMSO-de) 8,33-8,21 (m, 1H), 7,87-7,33 (m, 5H), 7,22 (dd, J 8,7, 2,1 Hz, 1H), 6,23 (d, J 7,1 Hz, 1H), 5,22 (d, J 7,1 Hz, 1H), 3,55-3,41 (m, 1H), 3,33 (s, 3H), 2,81 (d, J 13,8 Hz, 1H). CLEM (ES+) [M+H]+ 390,0, TR 1,10 minutos (Método 2).

INTERMEDIO 2

(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-12-met¡l-5-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-2,9.12-tr¡azapentac¡clo[ 9.8.1.02.10.03.8.014.191¡cosa-3(8),4.6.9.14(19).15.17-heptaen-13-ona

El Intermedio 1 (4 g, 10,3 mmol) en 1,4-dioxano (42 ml) se trató con bis(pinacolato)diboro (3,9 g, 15 mmol) y acetato potásico (3 g, 30,6 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó y se lavó abundantemente con nitrógeno. Se añadió tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (484 mg, 0,51 mmol) y tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio (390 mg, 1,03 mmol) y la mezcla de reacción se desgasificó y se lavó con nitrógeno antes de calentar durante la noche a 140 °C. Se añadió más bis(pinacolato)diboro (2,6 g, 10,3 mmol) y la mezcla de reacción se calentó a 140 °C durante 24 h. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc y salmuera, la fase orgánica se separó, se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con EtOAc/MeOH del 0 al 10 %) para producir el compuesto del título (2,5 g, 50 %) como un sólido blanco.

CLEM (ES+) [M+H]+ 482, TR 2,40 minutos (Método 3).

INTERMEDIO 3

3-(5-bromop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-h¡droxi-1-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

1-metil-3-oxo-ciclobutanocarbonitrilo (2,0 g, 18,3 mmol) y 5-bromo-2-yodo-pirimidina (6 g, 21,0 mmol), ambos disponibles en el mercado, se disolvieron en DCM (100 ml). La mezcla se enfrió a -78 °C antes de la adición gota a gota de n-butil-litio (8,4 ml, 21 mmol, 2,5 mol/l). La mezcla se agitó a -78 °C durante una hora antes de calentar lentamente a t.a. y se agitó durante una hora adicional. La mezcla se filtró a través de un separador de fases, se lavó con DCM, se concentró al vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con EtOAc al 0-10 %/hexano) para dar el isómero principal no deseado, 700 mg y fracciones mixtas (1,7 g) que contienen ambos isómeros con una proporción aproximada de 1:1. La fracción mixta se combinó y se purificó mediante CL preparativa para proporcionar el compuesto del título como un sólido amarillo (700 mg, 10 %)

CLEM (ES+) [M+H]+ 250/270, TR 0,90 minutos (Método 3).

INTERMEDIO 4

(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-6-fluoro-5-(4.4.5.5-tetramet¡l-1.3.2-d¡oxaborolan-2-¡l)-2,9.12-tr¡azapentac¡clo[ 9.8.1.02.10.03.8.014.191¡cosa-3(8),4.6.9.14(19).15.17-heptaen-13-ona

(7R,14R)-11-cloro-1-(difluorometoxi)-10-fluoro-6,7-dihidro-7,14-metanobencimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona (Ejemplo 10 del documento WO 2016/050975) (150 mg, 0,38 mmol) en 1,4-dioxano (1,3 ml, 15 mmol) se añadió a bis(pinacolato)diboro (145,1 mg, 0,57 mmol) y se añadieron acetato potásico (112 mg, 1,14 mmol), tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio (14 mg, 0,038 mmol) y tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (18 mg, 0,019 mmol). La mezcla de reacción se desgasificó durante 10 minutos antes de calentarla hasta 140 °C en un tubo sellado durante 3 horas en el microondas. Después este tiempo se añadió agua y EtOAc a la mezcla de reacción. Las dos fases se separaron y se extrajo la capa acuosa con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se filtraron a través de un separador de fases y el disolvente se evaporó. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con EtOAc/isohexano del 0 al 100 % y después DCM/MeOH del 0 al 15 %). Las fracciones que contenían el producto se combinaron y el disolvente se evaporó para producir el compuesto del título como un sólido gris (145 mg, 79 %).

CLEM (ES+) [M+H]+ 486, TR 1,90 minutos (Método 3).

INTERMEDIO 5

3-(5-bromo-3-fluorop¡rid¡n-2-¡l)-3-h¡drox¡-1-met¡l ciclobutano-1-carbonitrilo

Una solución de n-butil-litio (2,5 M en hexano, 12,54 ml, 31,3 mmol) se añadió gota a gota a una solución de 2,5-dibromo-3-fluoropiridina (7,99 g, 31,3 mmol) en tolueno (200 ml) a -70 °C y, después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a - 70 °C durante 1 h. Una solución de 1-metil-3-oxociclobutanocarbonitrilo (3,00 g, 26,1 mmol) en tolueno (50 ml) se añadió gota a gota a la mezcla de reacción a -70 °C y la solución resultante se agitó después durante 2 horas a -70 °C.

La mezcla de reacción se dejó calentar hasta 0 °C y se añadió una solución saturada de cloruro de amonio (50 ml) a 0 °C. La mezcla resultante se extrajo con EtOAc (2 x 100 ml) y las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO₄, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con MeOH/DCM al 0-2 %) para proporcionar el compuesto del título (857 mg, 11,5 %).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-de) 8: 1,29 (s, 3 H), 2,6 (d, J=13,3 Hz, 1 H), 2,89 (dd, J=1,8 & 13,3 Hz, 1 H), 6,21 (s, 1 H), 8,17 (dd, J=1,8 & 10,2 Hz, 1 H), 8,53 (t, J=1,8 Hz, 1 H).

INTERMEDIO 6

3-met¡l¡den-1-(morfol¡n-4-carbox¡m¡do¡l)c¡clobutano-1-carbon¡trilo

Se disolvió 3-metilencidobutanocarbonitrilo (8 g, 83,3 mmol) en tetrahidrofurano (100 ml) y se añadió gota a gota diisopropilamida de litio (46 ml, 92 mmol, 2,0 mol/l) a -78 °C. La mezcla se agitó a -78 °C durante 1 hora antes de añadir gota a gota la solución de morfolin-4-carbonitrilo (9,4 ml, 92 mmol) en THF (20 ml). La mezcla se agitó a -78 °C durante 1 hora adicional. La reacción se inactivó con una solución saturada de NH4Cl y se extrajo dos veces con TMBE. Las fases orgánicas se combinaron y se concentraron. El material bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con MeOH/DCM al 0-20 %) para dar el compuesto del título (8,0 g, 47 %).

CLEM (ES+) [M+H]+ 206, TR 0,68 minutos (Método 3).

INTERMEDIO 7

1-(5-bromop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-metil¡denc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

Se suspendió 5-bromo-1,2,3-triazina disponible en el mercado (1,30 g, 8,13 mmol) en MeCN (5 ml) y se enfrió en un baño de hielo. Una solución de Intermedio 6 (1,83 g, 8,92 mmol) en MeCN (10 ml) se añadió después gota a gota. Después de agitar durante 10 min, se retiró el baño de hielo y la reacción se calentó a 45 °C durante la noche. La mezcla se redujo al vacío y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con EtOAc/isohexano al 0-25 %). Las fracciones relevantes se combinaron y se concentraron para dar el compuesto del título como un aceite amarillo que solidificó al reposar (375 mg, 18,5 %).

CLEM (ES+) [M+H]+ 250/252, TR 1,99 minutos (Método 3).

INTERMEDIO 8

1-(5-bromop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-h¡droxi-3-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

El Intermedio 7 (375 mg, 1,50 mmol) en ácido tetrafluorobórico (2,5 ml, 19 mmol) se calentó a 70 °C durante 6 h antes de enfriar. La reacción se inactivó mediante la adición de una solución saturada de bicarbonato sódico. Después se añadió EtOAc y las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo de nuevo con EtOAc. La fase orgánica combinada se secó, se filtró y se redujo al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con 20-50 % de EtOAc/isohexano). Las fracciones relevantes se combinaron y se concentraron al vacío para dar el producto como una mezcla de isómeros. Estas se separaron después mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (110 mg, 27 %).

CLEM (ES+) [M+H]+ 268/270, TR 0,93 minutos (Método 3).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-da) 59,10 (s, 2H), 2,95 - 2,85 (m, 2H), 2,84 - 2,75 (m, 2H), 1,21 (s, 3H). INTERMEDIO 9

1-(5-bromo-3-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)-3-met¡l¡denc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

En un matraz de fondo redondo de 3 bocas de 1 l¡tro, en n¡trógeno, se comb¡naron 5-bromo-2,3-d¡fluorop¡r¡d¡na (25,0 g, 126 mmol) y 3-met¡lenc¡clobutanocarbon¡tr¡lo (16 ml, 152 mmol) en tolueno anh¡dro (250 ml). La soluc¡ón se enfr¡ó a 0 °C (baño de h¡elo/sal). Después se añad¡ó b¡s(tr¡met¡ls¡l¡l)am¡da sód¡ca (242 ml, 145 mmol) a través de un embudo de goteo. Durante la ad¡c¡ón, la temperatura sub¡ó a 12 °C durante un corto t¡empo. Cuando se completó la ad¡c¡ón, la reacc¡ón se ag¡tó durante 45 m¡nutos a 0 °C. La mezcla de reacc¡ón se vert¡ó en ác¡do cítr¡co 1 M (200 ml), las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 250 ml). Los extractos orgán¡cos comb¡nados se pasaron a través de un separador de fases, se f¡ltraron y se concentraron al vacío para dar un ace¡te marrón. Éste se pur¡f¡có con cromatografía en columna ultrarráp¡da sobre síl¡ce (grad¡ente de eluc¡ón con EtOAc/¡sohexano al 0-20 % para proporc¡onar el compuesto del título como un sól¡do blanco (25,2 g, 75 %)

CLEM (ES+) [M+H]+ 267/269, TR 1,09 m¡nutos (Método 2).

INTERMEDIO 10

5-(5-bromo-3-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)-1-oxasp¡ro[2.31hexano-5-carbon¡tr¡lo

Se añad¡ó ác¡do 3-cloroperox¡benzo¡co (2,69 g, 12,0 mmol) a una soluc¡ón de Intermedio 9 (1,50 g, 5,62 mmol) en DCM (60 ml) y se ag¡tó a temperatura amb¡ente durante la noche. La reacc¡ón se ¡nact¡vó con una soluc¡ón sat. ac. de Na2S2O5, se d¡luyó con DCM y se separaron las capas. La capa orgán¡ca se lavó dos veces con b¡carbonato sat. y después agua antes de concentrar al vacío. Este res¡duo se pur¡f¡có con cromatografía en columna ultrarráp¡da sobre síl¡ce (grad¡ente de eluc¡ón con 10-30 % de EtOAc/¡sohexano). Las fracc¡ones relevantes se comb¡naron y se concentraron al vacío para dar un sól¡do blanquec¡no (1,10 g, 69 %).

CLEM (ES+) [M+H]+ 283/285, 1,53 m¡nutos (Método 3).

INTERMEDIO 11

1-(5-bromo-3-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l)-3-h¡drox¡-3-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

Intermedio 10 (900 mg, 3,18 mmol) se disolvió en EtOH anhidro (30 ml), se agitó durante 10 min. Después se añadió MeOH anhidro (5 ml) para ayudar a la solubilidad, seguido de borohidruro sódico (425 mg, 11,1 mmol). Después de 6,5 h, la reacción se inactivó repartiendo entre cloruro de amonio sat. ac. y EtOAc. Las capas se separaron y la capa acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. La fase orgánica combinada se lavó con salmuera y después se secó, se filtró y se redujo al vacío. El residuo bruto se purificó con cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con 30-45 % de EtOAc/isohexano). Las fracciones relevantes se combinaron y se concentraron al vacío para dar el producto como una mezcla de isómeros. Éstas se separaron por HPLC preparativa para proporcionar el Intermedio 11 como un sólido blanco (52 mg, 6 %)

CLEM (ES+) [M+H]+ 285/287, TR 1,28 minutos. (Método 3).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,69 - 8,62 (m, 1H), 8.36 (dd, J = 10,0, 1,9 Hz, 1H), 5,54 (s, 1H), 2,97 (d, J = 12,7 Hz, 2H), 2,80 (d, J = 12,7 Hz, 2H), 1,05 (s, 3H).

EJEMPLO 1

3-[5-[(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-13-oxo-12-(tr¡deuter¡omet¡l)-2.9.12-tr¡azapentac¡clo[9.8.1.02,10.03.8.014.191¡cosa-3(8).4.6.9.14(19).15.17-heptaen-5-¡l1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l1-3-h¡droxi-1-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

(7R,14R)-11-cloro-1-(difluorometoxi)-6-(trideutero)metil-6,7-dihidro-7,14-metanobencimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocina-5(14H)-ona (Intermedio 159 del documento WO 2016/050975) (700 mg, 1,44 mmol), El Intermedio 3 (461 mg, 1,72 mmol), fosfato potásico tribásico (1252 mg, 5,78 mmol) y tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio (66 mg, 0,174 mmol) se suspendieron en una mezcla de 1,4-dioxano (15 ml, 175 mmol) y agua (2 ml). La mezcla se desgasificó/se purgó con nitrógeno 3 veces antes de la adición de tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (70 mg, 0,074 mmol). La mezcla se desgasificó/se purgó con nitrógeno y se calentó en un microondas a 110 °C durante 2,5 horas. La mezcla se diluyó después con agua y se extrajo dos veces con EtOAc. Los extractos orgánicos se combinaron, se secaron y se concentraron al vacío. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con EtOAc/isohexano al 0-100 % y MeOH/DCM al 0-10 %) para dar el compuesto del título (343 mg, 31 %).

CLEM (ES+) [M+H]+ 546, TR 1,97 minutos (Método 1).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 89,11 (s, 2H), 8,28 (dd, J = 6,1, 3,3 Hz, 1H), 7,83 - 7,74 (m, 2H), 7,69 (t, J = 73,0 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,55 - 7,46 (m, 2H), 6,32 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,26 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 3,53 (dt, J = 14,1, 7,2 Hz, 1H), 2,96 - 2,86 (m, 2H), 2,85 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 2,81 - 2,72 (m, 2H), 1,45 (s, 3H).

EJEMPLO 2

3-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-13-oxo-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,191icosa-3(8).4.6.9.14(19).15.17-heptaen-5-¡l1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l1-3-h¡droxi-1-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

Un matraz de tres bocas secado a la llama bajo nitrógeno se cargó con (6R,12R)-2-cloro-11-(difluorometoxi)-7,12 dihidro-6H-6,12-metanobencimidazo[2,1-c][1,4]benzodiazepina (Ejemplo 11 del documento WO 2016/050975 (750 mg, 1,996 mmol)), Precatalizador XPhos(PiAllyl) (67 mg, 0,099 mmol), acetato potásico (494 mg, 4,98 mmol) y bis(pinacolato)diboro (532 mg, 2,10 mmol) antes de evacuar y volver a llenar con nitrógeno tres veces. Después, se añadió 1,4-dioxano (4 ml) y la mezcla se agitó a 100 °C. Después de 3,5 horas, una solución de Intermedio 3 (589 mg, 2,20 mmol) en 1,4-dioxano seco (2 ml) seguido de una solución acuosa de fosfato potásico tribásico (1,5 ml, 3,0 mmol). Se continuó la agitación a 100 °C durante 19 horas antes de que la mezcla se enfriara a t.a. se vertió en salmuera (100 ml), se diluyó con EtOAc (100 ml) y se repartió. Los lavados acuosos se volvieron a extraer con EtOAc (100 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. La purificación por cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con MeOH en DCM (0 al 5 %), seguida de trituración del producto en Et2O para producir el compuesto del título como un sólido tostado (511 mg, 49 %).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 89,16 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 9,11 (s, 2H), 8,23 (dd, J = 5,7, 3,8 Hz, 1H), 7,81 - 7,73 (m, 2H), 7,70 (t, J = 73 Hz, 1H), 7,63 (dd, J = 8,5, 1,8 Hz, 1H), 7,55 - 7,46 (m, 2H), 6,38 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,91 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,50 (dt, J = 13,6, 7,1 Hz, 1H), 2,96 - 2,87 (m, 2H), 2,81 - 2,72 (m, 3H), 1,45 (s, 3H)

CLEM (ES+) [M+H]+ 529, TR 1,45 minutos (Método 3)

EJEMPLO 3

3-[5-[(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-6-fluoro-13-oxo-2.9.12-tr¡azapentac¡clo[9.8.1.02,10.03.8.014.191¡cosa-3(8).4.6.9.14(19).15.17-heptaen-5-¡l1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l1-3-h¡droxi-1-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

El Intermedio 4 (910 mg, 1,69 mmol), El Intermedio 3 (500 mg, 1,87 mmol), fosfato potásico tribásico (1,10 g, 5,08 mmol) y tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio (65 mg, 0,171 mmol) se suspendieron en 1,4-dioxano (20 ml) y se añadió agua (5 ml). La reacción se desgasificó con tres ciclos de vacío y nitrógeno antes de la adición de tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (80 mg 0,085 mmol). La reacción se desgasificó/se rellenó de nuevo y se calentó a 100 °C durante 4,5 h antes de dejarla enfriar a t.a. O/N. La reacción se repartió entre salmuera y EtOAc y las capas se separaron. La capa orgánica se retiró y la acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc. La fase orgánica combinada se secó, se filtró y se redujo al vacío. El residuo se trituró en DCM y se filtró. El material se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con MeOH/DCM al 0-20 %) y las fracciones relevantes se combinaron y se concentraron para dar el compuesto del título como un sólido amarillo pálido (465 mg, 50 %).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 89,17 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 9,01 (d, J = 1,7 Hz, 2H), 8,27 - 8,20 (m, 1H), 7,69 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 7,62 (t, J = 73,0 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,54 - 7,48 (m, 2H), 6,36 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,92 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,55 - 3,45 (m, 1H), 2,92 (d, J = 13,5 Hz, 2H), 2,82 - 2,70 (m, 3H), 1,46 (s, 3H).

CLEM (ES+) [M+H]+ 547, 1,74 minutos (Método 1).

EJEMPLO 4

3-[5-[(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-12-met¡l-13-oxo-2.9.12-tr¡azapentac¡clo[9.8.1.02,10.03.8.014.191¡cosa-3.5.7.9.14(19).15.17-heptaen-5-¡l1-3-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l1-3-h¡droxi-1-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

Una solución de K³PO⁴ (521 mg, 2,38 mmol) en agua (3,75 ml) se añade a una mezcla de Intermedio 5 (226 mg, 794 |jmol) e Intermedio 2 (382 mg, 793 |jmol) en 1,4-dioxano (15 ml). Una vez que se burbujeó argón a través de esta solución, se añadió [bis(difenilfosfino)ferroceno]-dicloropaladio(II) (30 mg, 40 jmol). La mezcla de reacción resultante se calentó a reflujo durante 4 h, después se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en agua (50 ml). Esta solución se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 x 50 ml), se secaron sobre MgSO₄, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (gradiente de elución con MeOH/DCM al 0-5 %) para proporcionar el compuesto del título (192 mg, 43 %) como un sólido beige.

CLEM (ES+) [M+H]+ 560, TR 1,28 minutos.

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6: 1,33 (s, 3 H), 2,78 a 2,85 (m, 3 H), 2,96 (d ancho, J=12,2 Hz, 2 H), 3,36 (s, 3 H), 3,52 (m, 1 H), 5,24 (d, J=7,2 Hz, 1 H), 6,16 (s, 1 H), 6,30 (d, J=7,2 Hz, 1 H), 7,47 a 7,52 (m, 2 H), 7,60 (dd, J=1,7 & 8,5 Hz, 1 H), 7,68 (t, J=73,3 Hz, 1 H), 7,75 (m, 2 H), 7,95 (dd, J=2,0 & 12,0 Hz, 1 H), 8,27 (m, 1 H), 8,65 (t, J=2,0 Hz, 1 H).

EJEMPLO 5

3-[5-[(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-13-oxo-2.9.12-tr¡azapentac¡clo[9.8.1.02.10.03.8.014,191¡cosa-3.5.7.9.14(19).15.17-heptaen-5-¡l1-3-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l1.-3-h¡drox¡-1-metilc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

Una solución de K³PO⁴ (535 mg, 2,45 mmol) en agua (2,5 ml) se añade a una mezcla de intermedio 5 (232,5 mg, 815.4 jm ol) y (7R,14R)-1-(difluorometoxi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobencim¡dazo[1,2-b][2,5]benzodiazoc¡n-5(14H)-ona (Intermedio 171 del documento WO 2016/050975) (381 mg, 815.4 jm ol) en 1,4-dioxano (10 ml). Una vez que se burbujeó argón a través de esta solución, se añadió [bis(difenilfosfino)ferroceno]-dicloropaladio(N) (31,4 mg, 40,8 jmol). La mezcla de reacción resultante se calentó a reflujo durante 4 h, después se enfrió a temperatura ambiente y se vertió en agua (50 ml). Esta solución se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con agua (2 x 50 ml), se secaron sobre MgSO₄, se filtraron y se concentraron al vacío. El residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida (MeOH/DCM al 0 - 5 %) para proporcionar el compuesto del título (67 mg, 15 %) como un sólido beige.

CLEM (ES+) [M+H]+ 546, TR 1,21 minutos (Método 4).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 6: 1,34 (s, 3 H), 2,75 (d, J=13,4 Hz, 1 H), 2,80 (d ancho, J=13,4 Hz, 2 H), 2,96 (d ancho, J=13,4 Hz, 2 H), 3,49 (m, 1 H), 4,89 (t, J=6,9 Hz, 1 H), 6,16 (s, 1 H), 6,36 (d, J=7,2 Hz, 1 H), 7,48 a 7,53 (m, 2 H), 7,58 (dd, J=1,8 & 8,6 Hz, 1 H), 7,68 (t, J=73,3 Hz, 1 H), 7,73 (m, 2 H), 7,94 (dd, J=1,8 & 11,9 Hz, 1 H), 8,23 (m, 1 H), 8,65 (t, J=1,8 Hz, 1 H), 9,13 (d, J=6,9 Hz, 1 H).

EJEMPLO 6

1-[5-[(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-12-met¡l-13-oxo-2.9.12-tr¡azapentac¡clo[9.8.1.02.10.03.8.014.191¡cosa-3(8).4.6.9.14(19).15.17-heptaen-5-¡l1p¡r¡m¡d¡n-2-¡l1-3-h¡drox¡-3-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

El Intermedio 2 (140 mg, 0,29 mmol), El Intermedio 8 (85 mg, 0,32 mmol), fosfato potásico tribásico (185 mg, 0,85 mmol) y tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio (11 mg, 0,029 mmol) se disolvieron en 1,4-dioxano (5 ml) y se añadió agua (1 ml). La reacción se desgasificó con tres ciclos de vacío y nitrógeno antes de la adición de tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (14 mg, 0,015 mmol). La reacción se desgasificó/se rellenó con nitrógeno de nuevo y se calentó a 100 °C durante 5 h antes de dejarla enfriar a t.a. durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y agua, se pasó por un separador de fases y la fase orgánica se redujo al vacío. Se purificó con cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (elución en gradiente con EtOAc/isohexano al 50-100 % y después MeOH/DCM al 0-10 %). Las fracciones deseadas se combinaron y se concentraron al vacío para proporcionar el compuesto del título como un sólido blanco (56 mg, 36 %).

CLEM (ES+) [M+H]+ 543, TR 1,67 minutos (Método 1).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 89,16 (s, 2H), 8,34 - 8,21 (m, 1H), 7,83 - 7,74 (m, 2H), 7,71 - 7,63 (m, 1H), 7,70 (t, J = 73,6 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 6,32 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 5,52 (s, 1H), 5,27 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 3,61 - 3,47 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 3,05 - 2,91 (m, 2H), 2,89 - 2,79 (m, 3H), 1,24 (s, 3H)

EJEMPLO 7

1-[5-[(1R.11R)-18-(d¡fluorometox¡)-12-met¡l-13-oxo-2.9.12-tr¡azapentac¡clo[9.8.1.02,10.03.8.014.191¡cosa-3(8).4.6.9.14(19).15.17-heptaen-5-¡l1-3-fluorop¡r¡d¡n-2-¡l1-3-h¡droxi-3-met¡lc¡clobutano-1-carbon¡tr¡lo

El Intermedio 2 (95 mg, 0,16 mmol), El Intermedio 11 (50 mg, 0,18 mmol), fosfato potásico tribásico (100 mg, 0,46 mmol) y tetrafluoroborato de triciclohexilfosfonio (10 mg, 0,026 mmol) se disolvieron en 1,4-dioxano (2,0 ml) y se añadió agua (0,5 ml). La reacción se desgasificó con tres ciclos de vacío y nitrógeno antes de la adición de tris(dibencilidenacetona)dipaladio(0) (10 mg, 0,011 mmol). La reacción se desgasificó/se rellenó de nuevo con nitrógeno y se calentó a 100 °C durante 5 h antes de dejarla enfriar a t.a. La reacción se diluyó con DCM y agua, se pasó por un separador de fases y la fase orgánica se redujo al vacío. Se purificó con cromatografía en columna ultrarrápida sobre sílice (elución en gradiente con EtOAc/isohexano t al 50-100 % y después MeOH/DCM al 0-15 %). Las fracciones deseadas que eluyen a aproximadamente MeOH/DCM al 10 % se combinaron y se concentraron al vacío para dar una espuma de color amarillo pálido, se purificaron adicionalmente por HPLC preparativa y se liofilizaron durante la noche para producir el compuesto del título como un polvo blanco (20 mg, 23 %)

CLEM (ES+) [M+H]+ 560, TR 1,81 minutos (Método 1).

RMN 1H (400 MHz, DMSO-d6) 88,75 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 8,31 - 8,25 (m, 1H), 8.12 (dd, J = 11,8, 1,9 Hz, 1H), 7,90 -7,68 (m, 3H), 7.65 (dd, J = 8,6, 1,7 Hz, 1H), 7,53 - 7,49 (m, 2H), 6,31 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 5,55 (s, 1H), 5,27 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 3,65 - 3,44 (m, 1H), 3,37 (s, 3H), 3,04 (d, J = 12,2 Hz, 2H), 2,85 (d, J = 13,3 Hz, 3H), 1,10 (s, 3H)

Claims (15)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

en donde

X representa N o C-F;

R1 representa hidrógeno o metilo (incluyendo -CD³);

R2 representa hidroxi o ciano;

R3 representa hidroxi o ciano; y

R2 es diferente de R3

2. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 representado por la fórmula (IIA) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

en donde X y R1 son como se define en la reivindicación 1.

3. Un compuesto de acuerdo con la reivindicación 1 representado por la fórmula (IIB) o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo:

en donde X y R1 son como se define en la reivindicación 1.

4. Un compuesto como se reivindica en la reivindicación 1 que es:

3-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-13-oxo-12-(trideuteriometil)-2,9,12

triazapentacido[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa-3(8),4,6,9,14(19),15,17-heptaen-5-il]pirimidin-2-il]-3-hidroxi-1-metilciclobutano-l-carbonitrilo;

3-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-13-oxo-2,9,12-triazapentacido[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa3(8),4,6,9,14(19),15,17-heptaen-5-il]pirimidin-2-il]-3-hidroxi-1-metilcidobutano-1-carbonitrilo;

3-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-12-metil-13-oxo-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa-3,5,7,9,14(19),15,17-heptaen-5-il]-3-fluoropiridin-2-il]-3-hidroxi-1-metilciclobutano-1-carbonitrilo;

3-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-13-oxo-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa-3,5,7,9,14(19),15,17-heptaen-5-il]-3-fluoropiridin-2-il]-3-hidroxi-1-metilciclobutano-1-carbonitrilo;

1-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-12-metil-13-oxo-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa-3(8),4,6,9,14(19),15,17-heptaen-5-il]pirimidin-2-il]-3-hidroxi-3-metilciclobutano-1-carbonitrilo; o

1-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-12-metil-13-oxo-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa-3(8),4,6,9,14(l9),15,17-heptaen-5-il]-3-fluoropiridin-2-il]-3-hidroxi-3-metilciclobutano-1-carbonitrilo,

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

5. Un compuesto que es 3-[5-[(1R,11R)-18-(difluorometoxi)-6-fluoro-13-oxo-2,9,12-triazapentaciclo[9.8.1.02,10.03,8.014,19]icosa-3(8),4,6,9,14(19),15,17-heptaen-5-il]pirimidin-2-il]-3-hidroxi-1-metilciclobutan-1-carbonitrilo o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

6. Un compuesto como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en terapia.

7. Un compuesto como se ha definido en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento y/o la prevención de un trastorno inflamatorio o autoinmunitario, un trastorno neurológico o neurodegenerativo, dolor o un trastorno nociceptivo, un trastorno cardiovascular, un trastorno metabólico, un trastorno ocular o un trastorno oncológico.

8. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicación 7 en donde el trastorno inflamatorio o autoinmunitario se selecciona del grupo que consiste en psoriasis, espondilitis anquilosante, artropatía psoriásica, artritis reumatoide, artritis idiopática juvenil, espondiloartritis axial, hidradenitis supurativa, enfermedad inflamatoria intestinal, enfermedad de Behcet, esclerodermia, esclerosis sistémica, esclerosis múltiple, lupus eritematoso sistémico, nefritis lúpica, trastornos fibrosantes y nefropatía diabética; la enfermedad neurológica o neurodegenerativa se selecciona del grupo que consiste en enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Parkinson y lesión de la médula espinal; el trastorno cardiovascular se selecciona del grupo que consiste en hipertrofia cardiaca e infarto de miocardio; el trastorno metabólico se selecciona del grupo que consiste en diabetes y síndrome metabólico; el trastorno ocular es retinopatía; y el trastorno oncológico se selecciona del grupo que consiste en malignidad hematológica y neoplasia no hematológica (incluyendo cáncer de tumor sólido, sarcoma, meningioma, glioblastoma multiforme, neuroblastoma, melanoma, carcinoma gástrico y carcinoma de células renales).

9. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicación 8 en donde la enfermedad inflamatoria intestinal se selecciona de la enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, colitis indeterminada y reservoritis.

10. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicación 8 en donde el trastorno fibrosante se selecciona de fibrosis hepática y pulmonar.

11. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicación 8 en donde la diabetes se selecciona de diabetes mellitus insulinodependiente y diabetes juvenil; y en donde la retinopatía se selecciona de retinopatía diabética, retinopatía proliferativa, retinopatía no proliferativa y retinopatía del prematuro.

12. Un compuesto o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso de acuerdo con la reivindicación 8 en donde la neoplasia maligna hematológica se selecciona de leucemia y linfoma y en donde la neoplasia maligna no hematológica se selecciona de cáncer de tumor sólido, sarcoma, meningioma, glioblastoma multiforme, neuroblastoma, melanoma, carcinoma gástrico y carcinoma de células renales.

13. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto como se define en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en asociación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

14. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 13 que comprende además un principio farmacéuticamente activo adicional.

15. Un proceso para preparar un compuesto de fórmula (I), como se define en la reivindicación 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo,

comprendiendo dicho proceso hacer reaccionar un compuesto de fórmula (III) con un compuesto de fórmula (IV):

en donde X, R1, R2 y R3 son como se han definido en la reivindicación 1, L1 representa un grupo saliente adecuado y M1 representa un resto de ácido borónico -B(OH)² o un éster cíclico del mismo formado con un diol orgánico; en presencia de un catalizador de metal de transición.