ES2941363T3

ES2941363T3 - Péptido novedoso y uso del mismo

Info

Publication number: ES2941363T3
Application number: ES17831188T
Authority: ES
Inventors: Hae Jin Kim; Eun Joung Moon; Duk Soon Hwang
Original assignee: Ensol Biosciences Inc
Current assignee: Ensol Biosciences Inc
Priority date: 2016-07-20
Filing date: 2017-03-24
Publication date: 2023-05-22
Anticipated expiration: 2037-03-24
Also published as: US10544190B2; US20190161517A1; CN109476702A; EP3489253A4; WO2018016714A1; CN109476702B; KR20180010127A; EP3489253B1; EP3489253A1; KR101829631B1; JP6858325B2; JP2019526530A

Abstract

La presente invención proporciona un péptido que consiste en la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 1 o la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO: 2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo y un uso del mismo. La presente invención puede inhibir la entrada de beta-amiloide en el cerebro. Además, la presente invención se puede aplicar más fácilmente con respecto a la supresión de la función intracerebral de beta-amiloide y, por lo tanto, es ventajosa porque tiene una aplicabilidad excelente. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Péptido novedoso y uso del mismo

Campo técnico

La presente invención se refiere a un péptido novedoso, y más particularmente a un péptido novedoso que presenta un efecto de inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro y al uso del mismo.

Antecedentes de la técnica

Se sabe que el beta-amiloide, que actúa en el cerebro, provoca enfermedades, tales como enfermedad de Alzheimer, demencias tales como demencia vascular, demencia alcohólica y demencia con cuerpos de Lewy, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro (Irvine GB, El-Agnaf OM, Shankar GM, Walsh DM. “Protein aggregation in the brain: the molecular basis for Alzheimer's and Parkinson's diseases” Mol Med. 2008; 14(7-8):451-64, etc.). En particular, la enfermedad de Alzheimer (EA) es la enfermedad degenerativa cerebral más común que provoca demencia, representando el 55-70% de todas las demencias. La mayoría de los fármacos desarrollados actualmente para la demencia son inhibidores de la acetilcolinesterasa que inhiben la degradación de la acetilcolina, que es un neurotransmisor muy importante para la función de la memoria (patente estadounidense n.° 4.895.841, etc.). Los inhibidores de la acetilcolinesterasa se centran en aliviar los síntomas más que en eliminar su causa. Los principales efectos secundarios de estos fármacos incluyen la hiperactividad del sistema nervioso parasimpático debido al aumento excesivo de acetilcolina, lo que provoca acontecimientos adversos digestivos y neuropsiquiátricos tales como diarrea grave, náuseas, vómitos, depresión, ansiedad, insomnio, dolores de cabeza y similares. Estos fármacos son difíciles de usar como agentes terapéuticos prácticos para la enfermedad de Alzheimer.

Mientras tanto, los péptidos que comprenden la secuencia específica de aminoácidos (DAEF) son conocidos como péptidos neuroprotectores que inhiben la citotoxicidad neuronal inducida por beta-amiloide (publicación de patente internacional n.° WO 2006/031330 A2). GUTLER et al., “A Quantitative Analysis of Spontaneous Isoaspartate Formation from N-terminal Asparaginyl and Aspartyl Residues”, Amino Acids, (20130124), vol. 44, páginas 1205 - 1214, dan a conocer un péptido similar, DGEF, pero como péptido modelo para estudiar la formación de isoAsp en el extremo N-terminal. Se sabe que tales péptidos sólo reducen o previenen los efectos inducidos por beta-amiloide, tales como la fosforilación de la proteína tau o la muerte de células neuronales. Además, dado que un péptido neuroprotector de este tipo debe atravesar la barrera hematoencefálica (BHE) para mostrar efectos en el cerebro, hay que aplicar medios adicionales para su entrada en el cerebro (por ejemplo, un catéter insertado mediante neurocirugía, etc.), lo que se considera difícil.

Por consiguiente, es necesario desarrollar fármacos que puedan aplicarse más fácilmente con el objetivo de inhibir la acción intracerebral del beta-amiloide.

[Lista de referencias]

[Bibliografía de patentes]

(Documento de patente 1) Patente estadounidense n.° 4.895.841,23 de enero de 1990, Resumen (Documento de patente 2) Publicación de patente internacional n.° WO 2006/031330 A2, 23 de marzo de 2006, Reivindicaciones

[Bibliografía no de patentes]

(Documento no de patente 1) Irvine GB, El-Agnaf OM, Shankar GM, Walsh DM. “Protein aggregation in the brain: the molecular basis for Alzheimer's and Parkinson's diseases” Mol Med. 2008; 14 (7-8) :451-64 Divulgación de la invención

Problema técnico

El problema técnico que va a resolverse por la presente invención es proporcionar un péptido novedoso que tenga una alta aplicabilidad.

Además, el otro problema técnico que va a resolverse por la presente invención es proporcionar el uso del péptido de la presente invención.

Los problemas técnicos que van a resolverse por la presente invención no se limitan a lo anterior, y los expertos en la técnica comprenderán fácilmente los problemas técnicos adicionales, que no se mencionan en el presente documento, a partir de la siguiente descripción.

Solución al problema

Las realizaciones de la presente invención se reflejan en las reivindicaciones independientes 1 a 3. Las realizaciones preferidas de la presente invención se reflejan en las reivindicaciones dependientes 4 y 5. La presente invención proporciona un péptido que consiste en la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:1 (DGEFF) o la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2 (DGEF) para su uso como medicamento, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la secuencia de aminoácidos, D designa ácido aspártico (Asp), G designa glicina (Gly), E designa ácido glutámico (Glu) y F designa fenilalanina (Phe).

Los aminoácidos que constituyen el péptido incluyen las formas L-, D- y DL-, todas las cuales están incorporadas en los aminoácidos del péptido de la presente invención. Además, será evidente que D puede interpretarse como que tiene un significado que incluye ácido aspártico, así como aspartato, como el aminoácido. Además, será evidente que E puede interpretarse como que tiene un significado que incluye ácido glutámico, así como glutamato, como aminoácido.

Los ejemplos de la sal farmacéuticamente aceptable pueden incluir clorhidrato, sulfato, fosfato, acetato, citrato, tartrato, succinato, lactato, maleato, fumarato, oxalato, metanosulfonato y para-toluenosulfonato.

Tanto la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:1 (DGEFF) como la secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2 (DGEF) incluyen DGEF en común. Los presentes inventores han comprobado que el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención, que tiene la secuencia común, es eficaz para inhibir la entrada de beta-amiloide en el cerebro mediante las siguientes pruebas.

De este modo, la presente invención puede inhibir más directa y fácilmente la acción intracerebral (deposición intracerebral, etc.) de beta-amiloide. Específicamente, la presente invención puede inhibir fácilmente la acción intracerebral de beta-amiloide incluso sin la aplicación de medios adicionales (por ejemplo, un catéter insertado por neurocirugía, etc.) para atravesar la barrera hematoencefálica. Además, la presente invención puede inhibir la entrada de sólo beta-amiloide en el cerebro, mostrando así efectos más directos sobre las enfermedades, síntomas y similares relacionados con el beta-amiloide. Esto se debe a que el tratamiento, la prevención y el alivio de enfermedades y síntomas provocados por la acción intracerebral de beta-amiloide pueden ser posibles mediante la supresión de la acción intracerebral de beta-amiloide debido a la inhibición de la entrada de betaamiloide en el cerebro.

La inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro puede resultar de la supresión de la unión de betaamiloide y RAGE (receptor para productos finales de glicación avanzada) usando el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención. RAGE es un receptor para el transporte de beta-amiloide al interior del cerebro, y el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención se une a RAGE en lugar de beta-amiloide, suprimiendo así la unión de beta-amiloide a RAGE, por lo que puede inhibirse la entrada de beta-amiloide en el cerebro.

Por tanto, la presente invención proporciona el uso del péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención, y preferiblemente el uso del mismo para la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro o para el tratamiento o la prevención de al menos uno seleccionado de entre la enfermedad de Alzheimer, demencias, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro. En este caso, el término “tratamiento” significa en sentido amplio la reducción o el alivio de los síntomas, y el término “prevención” se usa con un significado amplio que incluye la inhibición de la progresión de la enfermedad desde la fase asintomática previa a la enfermedad. Las demencias pueden ser al menos una seleccionada de entre demencia de Alzheimer, demencia vascular, demencia alcohólica y demencia con cuerpos de Lewy. Al menos una seleccionada de entre enfermedad de Alzheimer, demencias, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro puede provocarse por la deposición de beta-amiloide en el cerebro.

El tratamiento o la prevención puede deberse a la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro.

Asimismo, el tratamiento o la prevención puede deberse a al menos una seleccionada de entre la inhibición de la deposición de beta-amiloide en el cerebro y la inhibición de la inflamación del cerebro.

La inhibición de la deposición de beta-amiloide puede resultar de la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro. Por tanto, la presente invención proporciona un inhibidor para la inhibición de la entrada de betaamiloide en el cerebro, que comprende el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención.

Además, la presente invención proporciona una composición para el tratamiento o la prevención de al menos una seleccionada de entre enfermedad de Alzheimer, demencias, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro, que comprende el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención. La composición puede ser una composición farmacéutica.

El inhibidor o la composición contiene como principio activo el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención.

El inhibidor o la composición contiene además un aditivo farmacéuticamente aceptable, y puede componerse del péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención y el aditivo tal como se indicó anteriormente.

El péptido de la presente invención puede prepararse mediante métodos normalmente útiles en el campo de la química peptídica. Por ejemplo, el péptido puede prepararse mediante el método dado a conocer por Schroder y Lubke, rThe Peptides- vol. 1, Academic Press, Nueva York (1965), o mediante el método tal como síntesis en disolución o síntesis sólida.

Los ejemplos del procedimiento para formar un enlace peptídico pueden incluir un método de acil azida, un método de acil haluro, un método de acil imidazol, un método de carbodiimida, un método de fosfonio, un método de anhídrido, un método de anhídrido mixto, un método de oxidación-reducción y el uso del reactivo K de Woodward.

Antes de la reacción de condensación, un grupo carboxilo, un grupo amino o similar, que no participe en la reacción, puede protegerse, y un grupo carboxilo que participe en la reacción de condensación puede activarse mediante métodos conocidos en la técnica.

Los ejemplos del grupo funcional para proteger el grupo carboxilo pueden incluir grupos formadores de ésteres, tales como metilo, terc-butilo, arilo, pentafluorofenilo, bencilo, para-metoxibencilo y metoxietoximetilo.

Los ejemplos del grupo funcional para proteger el grupo amino pueden incluir tritilcarbonilo, ariloxicarbonilo, ciclohexiloxicarbonilo, tricloroetiloxicarbonilo, benciloxicarbonilo, terc-butoxicarbonilo, y/o 9-fluorenilmetiloxicarbonilo.

Los ejemplos de la forma activa del grupo carboxilo pueden incluir anhídrido mixto, azida, cloruro de acilo y éster activo [éster con alcohol (por ejemplo, pentaclorofenol, 2,4-dinitrofenol, alcohol cianometílico, p-nitrofenol, N-hidroxi-5-norboreno-2,3-dicarboxilimida, N-hidroxisuccinimida, N-hidroxiftalimida o 1-hidroxibenzotriazol)].

El disolvente que puede usarse en la reacción de condensación para formar un enlace peptídico puede incluir benceno, tolueno, hexano, acetona, nitrometano, ciclohexano, éter, cloroformo, diclorometano, acetato de etilo, N,N-dimetilformamida, dimetilsulfóxido, piridina, dioxano, tetrahidrofurano, agua, metanol y etanol, que pueden usarse solos o en combinación.

La temperatura de reacción puede oscilar entre -70°C y 100°C, que es lo que se aplica normalmente en una reacción, y preferiblemente entre -30°C y 30°C.

La reacción de desprotección para retirar el grupo protector del péptido puede llevarse a cabo usando un compuesto ácido, un compuesto base o un metal de transición, que pueda retirar el grupo protector sin influir en el enlace peptídico, dependiendo del tipo de grupo protector.

La reacción de desprotección puede realizarse mediante tratamiento con ácido usando, por ejemplo, cloruro de hidrógeno, bromuro de hidrógeno, fluoruro de hidrógeno, ácido acético, ácido metanosulfónico, ácido trifluorometanosulfónico, ácido trifluoroacético, trimetilclorosilano, o mezclas de los mismos.

Cuando la reacción de desprotección se lleva a cabo mediante tratamiento con ácido, puede promoverse mediante la adición de un adyuvante tal como anisol, fenol o tioanisol.

Alternativamente, la reacción de desprotección puede realizarse mediante tratamiento con base usando, por ejemplo, amoníaco, dietilamina, hidrazina, morfolina, N-metilpirrolidina, piperidina, carbonato de sodio, o mezclas de los mismos. Alternativamente, la reacción de desprotección puede realizarse mediante tratamiento con metales de transición usando, por ejemplo, cinc, mercurio, paladio/hidrógeno, etc.

Tras la finalización de la reacción, el péptido puede purificarse usando un procedimiento típico de purificación de péptidos, tal como extracción, separación en capas, precipitación de sólidos, recristalización o cromatografía en columna.

Además, el péptido según la presente invención puede convertirse en una variante del mismo o en una sal farmacéuticamente aceptable del mismo usando un procedimiento típico.

El péptido según la presente invención puede sintetizarse usando un sintetizador automático de péptidos, o puede producirse mediante manipulación genética. Por ejemplo, se elabora mediante manipulación genética un gen de fusión que codifica para una proteína de fusión que consiste en una pareja de fusión y el péptido según la presente invención, y a continuación se usa para transformar un microorganismo huésped, y la proteína de fusión se expresa en el microorganismo huésped, después de lo cual el péptido según la presente invención se escinde o separa de la proteína de fusión usando una proteasa o un compuesto, obteniéndose así el péptido deseado.

El péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención se administra por vía parenteral en una cantidad de 200 mg/día a 500 mg/día, y preferiblemente de 267 mg/día a 400 mg/día. Tras la administración oral, la cantidad de la misma corresponde a de 2 a 5 veces la cantidad tras la administración parenteral. La administración puede realizarse una vez al día o varias veces al día, y la cantidad de la misma puede basarse en un adulto (que pese 60 kg), pero puede variar en función del peso, el estado corporal y similares. El péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención puede administrarse principalmente por vías parenterales, por ejemplo, inyección tópica, inyección intravenosa o subcutánea, administración intracerebroventricular o intraespinal, administración transdérmica, o administración intranasal o intrarrectal. En algunos casos, es posible la administración oral.

El péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo, el inhibidor o la composición según la presente invención puede formularse en forma de inyección, supositorio, polvo, gota nasal, gránulo, comprimido o parche transdérmico, junto con un aditivo farmacéuticamente aceptable.

El aditivo farmacéuticamente aceptable puede aplicarse dependiendo de una variedad de factores bien conocidos por los expertos en la técnica, incluyendo, por ejemplo, un material bioactivo específico, su concentración, estabilidad y biodisponibilidad prevista; trastornos y enfermedades que van a tratarse o afecciones asociadas a los mismos; individuos que van a tratarse, su edad, tamaño y estado general de salud; y vías de administración de la composición, por ejemplo, vías nasal, oral, ocular, tópica, dérmica y muscular, pero la presente invención no se limita a las mismas. El aditivo farmacéuticamente aceptable, que se usa para la administración del material bioactivo, además de la vía de administración oral, puede incluir una disolución acuosa que incluya D5W (5% de glucosa en agua), dextrosa y una sal fisiológica en una cantidad dentro del 5% de su volumen. Para la inyección intralesional tópica, puede usarse cualquier hidrogel inyectable para potenciar los efectos terapéuticos y aumentar la duración de los mismos. El aditivo farmacéuticamente aceptable puede contener componentes adicionales para mejorar la estabilidad de los componentes activos, tales como conservantes y antioxidantes. El péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo, el inhibidor, o la composición según la presente invención puede formularse mediante métodos apropiados en el campo relacionado, y por ejemplo, se formula preferiblemente de modo que sea adecuado para cada enfermedad o componente según los métodos divulgados en Remington's Pharmaceutical Science, Mack Publishing Company, Easton PA (último).

El péptido de la presente invención puede almacenarse en una solución salina, o puede liofilizarse en una ampolla después de la adición de manitol o sorbitol y puede administrarse después de su disolución en solución salina.

Además, la presente invención proporciona un método de inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro, que comprende administrar el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención a un mamífero, incluyendo un ser humano, que necesite la administración. Además, la presente invención proporciona un método de tratamiento o prevención de al menos una seleccionada de entre enfermedad de Alzheimer, demencias, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro, que comprende administrar el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención a un mamífero, incluyendo un ser humano, que necesite la administración. Además, la presente invención proporciona el uso del péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención en la elaboración de un inhibidor para inhibir la entrada de beta-amiloide en el cerebro. Además, la presente invención proporciona el uso del péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención en la elaboración de un medicamento para el tratamiento o la prevención de al menos una seleccionada de entre la enfermedad de Alzheimer, demencias, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro. El péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo administrado puede ser un péptido o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo en una cantidad eficaz.

A menos que se mencione lo contrario, las cuestiones descritas en relación con el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo, el uso, el inhibidor, la composición y el método según la presente invención se aplican por igual entre sí en el mismo alcance a menos que sean contradictorios entre sí.

Efectos ventajosos de la invención

La presente invención es eficaz para inhibir la entrada de beta-amiloide en el cerebro. Además, la presente invención puede aplicarse más fácilmente en asociación con la inhibición de la acción intracerebral de betaamiloide, presentando así una alta aplicabilidad.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 son gráficos que muestran los resultados de la evaluación del efecto de la inhibición de la entrada de beta-amiloide en sangre en el cerebro según una realización de la presente invención;

la figura 2 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto sobre la recuperación del aprendizaje y la memoria en los animales según una realización de la presente invención;

la figura 3 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto de la reducción del beta-amiloide 1-42 según una realización de la presente invención;

la figura 4 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto de la reducción del TNF-alfa según una realización de la presente invención; y

la figura 5 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto de la reducción de GFAP según una realización de la presente invención.

Modo de la invención

No se conoce un péptido o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención. La publicación de patente internacional n.° WO2006/031330 A2 da a conocer péptidos relacionados con betaamiloide, pero todos estos péptidos están asociados con la reducción o prevención de efectos inducidos por la acción de beta-amiloide solo, particularmente los efectos de inhibir la fosforilación de la proteína tau inducida por beta-amiloide o la muerte celular neuronal y, por tanto, se conocen solamente como péptidos neuroprotectores. Se sabe que estos péptidos neuroprotectores inhiben los efectos inducidos por el beta-amiloide, tal como la muerte celular neuronal y la fosforilación de la proteína tau. Los efectos de los péptidos neuroprotectores son diferentes del efecto de inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro según la presente invención. La presente invención tiene un efecto de inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro y, por tanto, puede presentar una alta aplicabilidad debido a la aplicación sin necesidad de atravesar la barrera hematoencefálica (BHE), mientras que el péptido neuroprotector tiene que atravesar la barrera hematoencefálica (BHE) para presentar actividad intracerebral del mismo. En última instancia, el péptido neuroprotector requiere medios adicionales para entrar en el cerebro (por ejemplo, un catéter insertado por neurocirugía, etc.) para la actividad deseada, pero la presente invención también tiene un efecto inesperado con respecto al péptido neuroprotector en que no requiere medios adicionales para entrar en el cerebro. Así pues, el efecto de la presente invención no sólo es completamente diferente, sino también imprevisible, de los efectos de los péptidos divulgados en la publicación internacional n.° WO 2006/031330 A2. Además, tal como se muestra en los siguientes resultados de las pruebas, los péptidos neuroprotectores no muestran el efecto de inhibir la entrada de beta-amiloide en el cerebro, y por tanto, puede reconfirmarse que la presente invención no sólo es completamente diferente de tales péptidos, sino que también tiene un efecto impredecible.

Los siguientes ejemplos, ejemplos comparativos y ejemplos de preparación permiten una mejor comprensión de la presente invención, en donde los ejemplos y los ejemplos de preparación se exponen simplemente para ilustrar la presente invención, pero no deben interpretarse como limitativos de la presente invención.

Los reactivos usados en los siguientes ejemplos y similares están disponibles comercialmente y son los mejores productos, y se adquieren de Sigma-Aldrich, salvo que se indique lo contrario. Para los siguientes resultados de prueba, se midieron las medias y las desviaciones estándar y se evaluó la significación estadística, según fuera necesario.

<Preparación del péptido>

Los péptidos que se muestran en la tabla 1 a continuación fueron preparados por AnyGen Co, Ltd., Corea. Específicamente, estos péptidos se sintetizaron mediante un método de fase sólida usando las propiedades químicas del Fmoc (9-fluorenil-metoxicarbonilo). Más concretamente, se unió un extremo C-terminal del péptido a 0,55 mmol/g de una resina en fase sólida (resina Wang; Sigma-Aldrich). El acoplamiento del aminoácido Fmoc-Phe-OH se llevó a cabo junto con O-benzotriazol-N,N,N',N'-tetrametil-uronio-hexafluoro-fosfato (HBTU). La cadena lateral del aminoácido se protegió con terc-butilo y terc-butiloxicarbonilo. La desprotección y separación de la resina se realizaron a temperatura ambiente durante 3 h usando una disolución mixta que comprendía ácido trifluoroacético y agua en una razón de 95:5 (v/v). El péptido en bruto se lavó repetidamente con dietil éter, se secó a vacío y, a continuación, se purificó mediante cromatografía de líquidos de alta resolución en fase inversa (RP-HPLC) usando una columna Shimpak ODS C18 de Shimadzu de 5 |im (20 * 250 mm). El péptido purificado se identificó mediante RP-HPLC analítica usando una columna Shimpak ODS C18 de 5 |im (4,6 * 250 mm). El peso molecular del péptido sintetizado se midió usando un espectrómetro de masas con ionización por desorción láser asistida por matriz (MALDI) (Axima CFR, Kratos Analytical, Manchester, RU).

[Tabla 1]

En la tabla 1, D designa ácido aspártico (Asp), G designa glicina (Gly), E designa ácido glutámico (Glu), F designa fenilalanina (Phe), A designa alanina (Ala), V designa valina (Val), K designa lisina (Lys), M designa metionina (Met) y R designa arginina (Arg).

<Evaluación del efecto de la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro I>

Se verificó experimentalmente la inhibición de la entrada de beta-amiloide 1-42 en sangre en el cerebro mediante el péptido del ejemplo 1. Específicamente, para evaluar el efecto del péptido del ejemplo 1 en la inhibición de la entrada de beta-amiloide 1-42 en el cerebro, que es la causa de la enfermedad de Alzheimer, se añadieron 2 ml de hexafluoroisopropanol (HFIP) a 1 mg de beta-amiloide 1-42 (American Peptide Company, Sunnyvale, CA, EE.UU.), se dejó reposar a temperatura ambiente durante 3 días y se alicuotaron 100 |il de cada uno en tubos. Después de la evaporación del hexafluoroisopropanol (HFIP) usando un vacío rápido, se colocaron 10 |il de una disolución anhidra de DMSO (dimetilsulfóxido) en uno de los tubos alicuotados, a fin de realizar una disolución suficiente, después de lo cual se añadieron 400 |il de solución salina tamponada con fosfato (PBS), preparando así una disolución de beta-amiloide 1-42 de 25 |iM.

Se dividieron los ratones ICR (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, EE.UU.) en un grupo normal, un grupo de control y dos grupos de prueba. A los respectivos grupos de prueba se les administró por vía intraperitoneal el péptido del ejemplo 1 en cantidades de 2,5 mg/kg y 25 mg/kg, y al grupo de control se trató de la misma manera que al grupo de prueba, con la excepción de que en lugar del péptido del ejemplo 1 se usó un excipiente (DMSO al 10% en solución salina, 10 ml/kg). Después de 20 min, se inyectaron por vía intravenosa (i.v.) a través de la vena caudal 400 |il de beta-amiloide 1-4225 |iM al grupo de control y a los grupos de prueba. Además, el grupo normal se trató de la misma manera que el grupo de control, con la excepción de que no se añadió beta-amiloide 1-42. 10 min después de la inyección de beta-amiloide en la vena caudal, se recogieron aproximadamente 50 |il de sangre de la vena infraorbital de cada ratón usando un tubo capilar heparinizado con sodio, después lo cual se sometió inmediatamente al ratón a eutanasia con gas de dióxido de carbono (CO²) y después se extrajo el hemisferio derecho del ratón y se almacenó en nitrógeno líquido. Todas las muestras de sangre recogidas se centrifugaron a 13.000 rpm durante 10 min. Se aisló el sobrenadante, se colocó en el tubo preparado, y se diluyó a 1/4000, seguido de ELISA (ensayo de inmunoadsorción ligado a enzimas o ensayo inmunoespecífico ligado a enzimas) de beta-amiloide 1-42.

Se añadieron 3 ml de un tampón RIPA (tampón de ensayo de radioinmunoprecipitación) al hemisferio derecho congelado, se sometió a sonicación y se centrifugó, después de lo cual se aisló el sobrenadante, seguido de la medición de la concentración de proteínas mediante el ensayo de BCA (ensayo del ácido bicinconínico). El ensayo de BCA se realizó según el protocolo del kit (Thermo Scientific, Waltham, M^a, EE.UU., n.° de cat. 23227). La concentración de beta-amiloide 1-42 en el cerebro se midió mediante ELISA en un homogeneizado en RIPA. El ELISA se realizó según el protocolo del kit (IBL International, Hamburgo, Alemania, n.° de código 27711). Los resultados se muestran en la figura 1. La figura 1 son gráficos que muestran los resultados de la evaluación del efecto de inhibir la entrada de beta-amiloide en sangre en el cerebro según una realización de la presente invención, ilustrando el gráfico izquierdo de la figura 1 los resultados de la medición de la concentración de betaamiloide en el cerebro en el grupo normal, grupo de control y dos grupos de prueba (un grupo de prueba al que se le administraron 2,5 mg/kg de péptido y un grupo de prueba al que se le administraron 25 mg/kg de péptido), e ilustrando el gráfico derecho de la misma los resultados de la medición de la concentración de beta-amiloide en sangre (plasma). Tal como se muestra en la misma, las concentraciones de beta-amiloide 1-42 en el cerebro se midieron en 195,5±5,6 pg/mg y 187,8±2,4 pg/mg en el grupo de prueba al que se le administraron por vía intraperitoneal 2,5 mg/kg de péptido del ejemplo 1 y el grupo de prueba al que se le administraron por vía intraperitoneal 25 mg/kg de péptido del ejemplo 1, respectivamente, lo que indica que el nivel de beta-amiloide en el cerebro disminuyó de forma dependiente de la concentración en comparación con el grupo de control. Estos resultados se consideraron estadísticamente significativos (p<0,01). Por otra parte, los niveles plasmáticos de beta-amiloide no fueron muy diferentes en ninguno de los grupos de control y de prueba. Por consiguiente, la entrada de beta-amiloide 1-42 en sangre en el cerebro podría inhibirse de manera dependiente de la concentración por el péptido del ejemplo 1.

Por tanto, el péptido de la presente invención puede inhibir la entrada de beta-amiloide 1-42 en sangre en el cerebro, posibilitando así el tratamiento y/o la prevención de la enfermedad de Alzheimer, demencias tales como la demencia vascular, la demencia alcohólica y la demencia con cuerpos de Lewy, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington, y/o la inflamación del cerebro.

Se conocen que las enfermedades provocadas por la deposición de beta-amiloide que se introduce en el cerebro son la enfermedad de Alzheimer, demencias tales como la demencia vascular, la demencia alcohólica y la demencia con cuerpos de Lewy, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington, la inflamación del cerebro y similares (Irvine GB, El-Agnaf OM, Shankar GM, Walsh DM. Protein aggregation in the brain: the molecular basis for Alzheimer's and Parkinson's diseases. Mol Med. 2008; 14(7-8):451-64, etc.), y el péptido de la presente invención puede inhibir la entrada de beta-amiloide 1-42 en sangre en el cerebro, permitiendo así el tratamiento y/o la prevención de tales enfermedades.

<Evaluación de los efectos de recuperación del aprendizaje y la memoria usando modelos animales>

Se verificaron experimentalmente los efectos de recuperación del aprendizaje y la memoria del péptido del ejemplo 1. Específicamente, para evaluar el efecto del péptido del ejemplo 1 sobre la inhibición de la reducción del aprendizaje y la memoria, que son síntomas de la enfermedad de Alzheimer, se usaron para las pruebas modelos de ratón transgénico doble (ratón DTg, Jackson Laboratory, EE.UU.) de 30 semanas de edad que tenían enfermedad de Alzheimer humana inducida, obtenidos de una manera en la que un gen derivado del ser humano de la proteína precursora de beta-amiloide APP (APPsw; mutación amiloide) que tiene mutación sueca y un gen derivado del ser humano en forma de deleción del exón 9 del gen de gamma secretasa PS1 se sobreexpresaron en el cerebro mediante manipulación genética.

Se sabe que los ratones DTg muestran placas amiloides en el cerebro aproximadamente 1,5 meses después del nacimiento, con disfunciones cognitivas mostradas a partir de los 4-5 meses (Oakley H, Cole SL, Logan S, Maus E, Shao P, Craft J, Guillozet-Bongaarts A, Ohno M, Disterhoft J, Van Eldik L, Berry R, Vassar R. “Intraneuronal beta-amyloid aggregates, neurodegeneration, and neuron loss in transgenic mice with five familial Alzheimer's disease mutations: potential factors in amyloid plaque formation.” J Neurosci. 4 de octubre de 2006; 26 (40):10129-40), y se usaron como modelos animales para determinar si el péptido del ejemplo 1 presenta efectos de recuperación del aprendizaje y la memoria.

Los animales de experimentación se aclimataron en una sala de animales después de su adquisición según las Directrices para ensayos con animales de experimentación y se trataron según el Plan Experimental con Animales aprobado. Las condiciones de prueba se mantuvieron a una temperatura de 23±1°C y una humedad del 50±5%, y el ciclo de luz/oscuridad fue de 12 h (apagado de luces a las 07:00 - encendido de luces a las 19:00). Durante las pruebas, los animales pudieron para consumir agua y pienso a voluntad. Los animales de prueba se dividieron en dos grupos de 10 animales cada uno, siendo un grupo el grupo de control y el otro grupo el grupo de prueba. En el grupo de prueba, el péptido del ejemplo 1 se administró por vía intraperitoneal a una dosis de 50 mg/kg usando una jeringa una vez al día, 5 veces a la semana, durante un total de 13 semanas. El grupo de control se trató de la misma manera que el grupo de prueba, con la excepción de que en lugar del péptido del ejemplo 1 se usó un excipiente (DMSO al 10% en solución salina, 10 ml/kg). 10 semanas después de la administración del péptido del ejemplo 1, se realizó una vez una prueba de comportamiento (prueba del laberinto en Y).

La prueba del laberinto en Y es un experimento para observar la tendencia voluntaria de un animal a buscar un nuevo entorno usando la capacidad de memoria a corto plazo. La prueba se llevó a cabo colocando el animal en el centro de un laberinto y permitiéndole moverse libremente por el laberinto durante 8 min para, de este modo, observar visualmente y registrar el orden en que el animal entra en cada rama. La alternancia espontánea (%) se calculó mediante la siguiente ecuación.

Alternancia espontánea (%) = {(número de alternancia real)/(número de alternancia total-2)} x 100

El número de alternancia real se aumentó en uno cuando el animal entraba sucesivamente en tres ramas diferentes sin repetir rama. El tratamiento estadístico de los resultados de las pruebas se realizó usando el programa SPSS (IBM SPSS Statistics). La significación estadística se evaluó para el grupo de control frente al grupo de prueba (al que se le administró el péptido del ejemplo 1) usando una prueba de la t para datos independientes. Se aceptó la significación a p<0,05 y p<0,01. Los resultados se muestran en la figura 2.

La figura 2 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto sobre la recuperación del aprendizaje y la memoria en los animales según una realización de la presente invención. Tal como se muestra en la figura 2, los valores de alternancia espontánea se midieron en un 49,44±3,88% en el grupo de control y en un 63,22±2,56% en el grupo de prueba al que se le administró el péptido del ejemplo 1. En el grupo de prueba al que se le administró el péptido del ejemplo 1, los efectos de aprendizaje y memoria se recuperaron significativamente (P<0,01).

Por tanto, puede concluirse que el péptido del ejemplo 1 es eficaz para recuperar el aprendizaje y la memoria. Por consiguiente, se considera que el tratamiento y/o la prevención de la enfermedad de Alzheimer, demencias tales como la demencia vascular, la demencia alcohólica y la demencia con cuerpos de Lewy, la enfermedad de Parkinson y similares, que se tratan y/o previenen mediante la recuperación del aprendizaje y la memoria, son posibles mediante la recuperación del aprendizaje y la memoria por medio del péptido de la presente invención. <Evaluación del efecto del cambio de biomarcador en modelos animales>

Para evaluar el efecto del cambio del biomarcador usando modelos animales en los que se puso fin a un periodo de administración de un total de 13 semanas en la prueba <Evaluación de los efectos de recuperación del aprendizaje y la memoria usando modelos animales>, se realizó la siguiente prueba. Después de poner fin a la administración intraperitoneal durante un total de 13 semanas, los modelos animales se sometieron a eutanasia usando dióxido de carbono (CO²) y se extrajo inmediatamente su cerebro. Durante la extracción del cerebro, se extrajo todo el cerebro para no arañarlo y se lavó suavemente con solución salina. Los hemisferios cerebrales se separaron uno del otro usando un bisturí quirúrgico, y el hemisferio izquierdo se colocó en un tubo EP (tubo Eppendorf) preparado, se enfrió rápidamente en nitrógeno líquido y se almacenó en un congelador a -80°C hasta el siguiente experimento.

El hemisferio izquierdo, almacenado en un congelador a -80°C, se introdujo en un tampón RIPA (tampón de ensayo de radioinmunoprecipitación) y se sometió a sonicación, con lo que se preparó un homogeneizado cerebral. Después de esto, se midió la cantidad de proteína mediante el ensayo de BCA (ensayo del ácido bicinconínico). El ensayo de BCA se realizó según el protocolo del kit (Thermo Scientific, Saltham, MA, EE.UU., n.° de cat. 23227). El nivel de expresión del biomarcador se midió mediante ELISA, y el ensayo ELISA se realizó según el kit {amiloide-beta(1-42) kit de Elisa: IBL International, Hamburgo, Alemania (27711), kit de ELISA TNF-alfa: Koma Biotech, Seúl, Corea (K0331186P), kit de Elisa GFAP: Millipore Corporation, Billerica, MA, EE.UU. (NS830)}. Una vez finalizadas todas las reacciones, se midió el valor de DO (densidad óptica) de la muestra a 450 nm utilizando un espectrofotómetro y se calculó la concentración usando un programa de análisis cuantitativo.

Los biomarcadores medidos mediante ELISA fueron beta-amiloide 1-42, TNF-alfa y GFAP (proteína ácida fibrilar glial). El nivel de expresión del biomarcador medido mediante ELISA se determinó calculando el valor medio y la desviación estándar en cada uno de los grupos de control y de prueba (un grupo al que se le administró 50 mg/kg del péptido del ejemplo 1).

Los resultados se muestran en las figuras 3 a 5.

La figura 3 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto de la reducción del beta-amiloide 1-42 según una realización de la presente invención. Tal como se muestra en la figura 3, la concentración de beta-amiloide 1-42 del grupo de control se midió en 76,03±25,63 ng/mg de proteína, y la concentración de betaamiloide 1-42 del grupo de prueba se midió en 57,56±28,47 ng/mg de proteína, que se redujo ligeramente en comparación con el grupo de control.

La figura 4 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto de la reducción del TNF-alfa según una realización de la presente invención. Tal como se muestra en la figura 4, la concentración de TNF-alfa del grupo de control se midió en 1109,91±285,30 pg/mg de proteína, y la concentración de TNF-alfa del grupo de prueba se midió en 798,99±172,90 pg/mg de proteína, que se redujo de manera estadísticamente significativa (p<0,05) en comparación con el grupo de control. El TNF-alfa es un factor inflamatorio, cuya reducción puede interpretarse como una inhibición de la inflamación. Basándose en estos resultados, puede concluirse que el péptido del ejemplo 1 inhibe la inflamación del cerebro.

La figura 5 es un gráfico que muestra los resultados de la evaluación del efecto de la reducción de GFAP según una realización de la presente invención. Tal como se muestra en la figura 5, en el marcador de astrocitos GFAP (proteína ácida fibrilar glial), la concentración de GFAP del grupo de control se midió en 70,61±26,82 ng/mg de proteína, y la concentración de GFAP del grupo de prueba se midió en 47,63±24,92 ng/mg de proteína, que se redujo ligeramente en comparación con el grupo de control. Basándose en los resultados de la prueba de biomarcadores, tras la administración a largo plazo del péptido del ejemplo 1, puede confirmarse que se reduce el nivel de beta-amiloide en el cerebro y que se suprime la respuesta inflamatoria. También se considera que este cambio en el biomarcador respalda los resultados de la mejora de la recuperación del aprendizaje y la memoria en los animales que utilizan el péptido del ejemplo 1.

Basándose en los resultados anteriores, el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención puede tratar y/o prevenir la enfermedad de Alzheimer, demencias tales como la demencia vascular, la demencia alcohólica y la demencia con cuerpos de Lewy, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington, y/o la inflamación del cerebro, y el tratamiento y/o la prevención de las mismas pueden deberse a la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro, la inhibición de la deposición de beta-amiloide en el cerebro y/o la inhibición de la inflamación del cerebro.

<Evaluación del efecto de la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro II>

Basándose en los resultados de la prueba del ejemplo 1, se realizó la siguiente prueba para evaluar si el ejemplo 2 y los ejemplos comparativos 1 y 2, además del ejemplo 1, son eficaces para inhibir la entrada de beta-amiloide 1-42 en el cerebro.

El péptido del ejemplo 2 es un péptido (DGEF) que consiste en cuatro aminoácidos obtenido mediante la exclusión de F terminal del péptido del ejemplo 1, el péptido del ejemplo comparativo 1 es un péptido que consiste en la secuencia de aminoácidos clave (DAEF) entre los péptidos neuroprotectores dados a conocer en la publicación internacional n.° WO 2006/031330 A2, y el péptido del ejemplo comparativo 2 es un péptido que tiene el mayor efecto entre los péptidos neuroprotectores que se conoce que comprenden la secuencia de aminoácidos correspondiente.

Específicamente, se añadieron 2 ml de hexafluoroisopropanol (HFIP) a 1 mg de beta-amiloide 1-42 (American Peptide Company, Sunnyvale, CA, EE.UU.), se dejó reposar a temperatura ambiente durante 3 días y se alicuotaron 100 |il de cada uno en tubos. Después de la evaporación del hexafluoroisopropanol (HFIP) usando un vacío rápido, se colocaron 10 |il de una disolución anhidra de DMSO (dimetilsulfóxido) en uno de los tubos alicuotados, a fin de realizar una disolución suficiente, después de lo cual se añadieron 400 |il de solución salina tamponada con fosfato (PBS), preparando así una disolución de beta-amiloide 1-4225 |iM.

Se dividieron los ratones ICR (The Jackson Laboratory, Bar Harbor, ME, EE.UU.) en un grupo normal, un grupo de control y cuatro grupos de prueba. A los respectivos grupos de prueba se les administró por vía intraperitoneal el péptido de cada uno del ejemplo 1, ejemplo 2, ejemplo comparativo 1 y ejemplo comparativo 2 en cantidades de 25 mg/kg, y el grupo de control se trató de la misma manera que el grupo de prueba, con la excepción de que en lugar del péptido se usó un excipiente (DMSO al 10% en solución salina, 10 ml/kg). Después de 20 min, se inyectaron por vía intravenosa (i.v.) a través de la vena caudal 400 |il de beta-amiloide 1-4225 |iM al grupo de control y a los grupos de prueba. Además, el grupo normal se trató de la misma manera que el grupo de control, con la excepción de que no se añadió beta-amiloide 1-42. 10 min después de la inyección de beta-amiloide en la vena caudal, se recogieron aproximadamente 50 |il de sangre de la vena infraorbital de cada ratón usando un tubo capilar heparinizado con sodio, después de lo cual se sometió inmediatamente al ratón a eutanasia con gas de dióxido de carbono (CO²) y, a continuación, se extrajo el hemisferio derecho del ratón y se almacenó en nitrógeno líquido. Todas las muestras de sangre recogidas se centrifugaron a 13.000 rpm durante 10 min. Se aisló el sobrenadante, se colocó en el tubo preparado, y se diluyó a 1/4000, seguido de ELISA (ensayo de inmunoadsorción ligado a enzimas o ensayo inmunoespecífico ligado a enzimas) de beta-amiloide 1-42.

Se añadieron 3 ml de un tampón RIPA (tampón de ensayo de radioinmunoprecipitación) al hemisferio derecho congelado, se sometió a sonicación y se centrifugó, después de lo cual se aisló el sobrenadante, seguido de la medición de la concentración de proteínas mediante el ensayo de BCA (ensayo de ácido bicinconínico). El ensayo de BCA se realizó según el protocolo del kit (Thermo Scientific, Waltham, M^a, EE.UU., n.° de cat. 23227). La concentración de beta-amiloide 1-42 en el cerebro se midió mediante ELISA en un homogeneizado en RIPA. El ELISA se realizó según el protocolo del kit (IBL International, Hamburgo, Alemania, n.° de código 27711). Los resultados se muestran en la tabla 2 a continuación.

[Tabla 2]

Tal como es evidente a partir de la tabla 2, el péptido del ejemplo 2 inhibió eficazmente la entrada de betaamiloide en el cerebro, al igual que el péptido del ejemplo 1. Como el péptido del ejemplo 1, el péptido del ejemplo 2 pudo inhibir la entrada de beta-amiloide en el cerebro para suprimir así la deposición de beta-amiloide en el cerebro. Por consiguiente, también se considera que el péptido del ejemplo 2 permite el tratamiento y/o la prevención de la enfermedad de Alzheimer, demencias tales como la demencia vascular, la demencia alcohólica y la demencia con cuerpos de Lewy, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington y/o la inflamación del cerebro, asociadas con la deposición de beta-amiloide en el cerebro, y dicho tratamiento y/o prevención pueden deberse a la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro, la inhibición de la deposición de beta-amiloide en el cerebro y/o la inhibición de la inflamación del cerebro.

Sin embargo, los péptidos de los ejemplos comparativos 1 y 2 no inhibieron la entrada de beta-amiloide en el cerebro, a diferencia del péptido del ejemplo 1.

Por consiguiente, puede concluirse que el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención presenta efectos muy diferentes de los efectos de los péptidos neuroprotectores conocidos. Por consiguiente, la presente invención puede aplicarse fácilmente porque la acción intracerebral del betaamiloide puede inhibirse incluso sin medios adicionales para atravesar la barrera hematoencefálica.

Además, la presente invención puede inhibir la acción intracerebral de beta-amiloide fundamentalmente, y puede aplicarse más directamente en asociación con la inhibición de la acción intracerebral de beta-amiloide y, por tanto, presenta una alta aplicabilidad.

<Evaluación del efecto de la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro III>

La unión de los péptidos de los ejemplos 1 y 2 a RAGE se evaluó mediante la siguiente prueba, mediante lo cual se confirmó la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro mediante la supresión de la unión de betaamiloide a RAGE.

Esto se basa en el hecho de que RAGE (receptor para productos finales de glicación avanzada), que se expresa en la membrana de las células endoteliales de la barrera hematoencefálica, desempeña un papel en el transporte de beta-amiloide al cerebro, y también en el hecho de que los inhibidores para inhibir la unión de RAGE y betaamiloide tienen efectos terapéuticos o preventivos en la enfermedad de Alzheimer, el trastorno cognitivo o las demencias, asociados con la deposición de proteína beta-amiloide en los tejidos cerebrales (Neurology. 8 de junio de 2004; 62(11):1984-1989; J Clin Invest. Abril de 2012; 122(4):1377-1392 etc.).

Específicamente, la capacidad de unión del péptido del ejemplo 1 o 2 a RAGE se midió usando MST (termoforesis a microescala).

Usando un kit {kit de marcaje de proteínas Monolith NT™ RED-NHS (L001, NanoTemper Technologies)}, se unió una proteína recombinante de dominio extracelular RAGE (11629-H08H, Sino Biological Inc.) a un colorante fluorescente ROJO NT-647-NHS y luego se purificó. A continuación, se preparó una disolución de RAGE en la que la concentración de RAGE marcado con colorante fluorescente ROJO NT-647-NHS en una disolución de tampón MST (Tris-HCl 50 mM pH 7,4, NaCl 150 mM, MgCh 10 mM, Tween-20 al 0,05%) era de 20 |iM. Además, se preparó una disolución de péptido en una serie de dilución de 16 etapas, en la que se repitió la dilución con el tampón MST hasta que la concentración del péptido del ejemplo 1 o del ejemplo 2 se convirtió en 1,52 nM partiendo de 50 |iM. Después de eso, la disolución de RAGE y la disolución de péptido se mezclaron en cantidades de 100 |il cada una, se inyectaron en un tubo capilar y se colocaron entonces en el orden de concentración en una bandeja Monolith NT.115 (G009, NanoTemper technologies). Se ejecutó el software según el método operativo de Monolith NT.115. Se repitió el mismo procedimiento tres veces y se obtuvo el valor medio de Kd (constante de disociación).

Por consiguiente, la Kd entre RAGE y el péptido del ejemplo 1 fue de 76,86 nM y la Kd entre RAGE y el péptido del ejemplo 2 fue de 80,89 nM, lo que indica que ambos péptidos de los ejemplos 1 y 2 se acoplaron con RAGE para suprimir así la unión de beta-amiloide y RAGE, inhibiendo así la entrada de beta-amiloide en el cerebro. En conclusión, el péptido de la presente invención puede suprimir la unión de RAGE y beta-amiloide, inhibiendo así la entrada de beta-amiloide en el cerebro, mediante lo cual puede evitarse fundamentalmente la acción intracerebral de beta-amiloide. Por tanto, se considera que el péptido o la sal farmacéuticamente aceptable del mismo según la presente invención permite el tratamiento y/o la prevención de la enfermedad de Alzheimer, las demencias tales como la demencia vascular, la demencia alcohólica y la demencia con cuerpos de Lewy, la enfermedad de Parkinson, la enfermedad de Huntington, y/o la inflamación del cerebro, asociadas con la deposición de beta-amiloide en el cerebro. Además, la presente invención puede aplicarse más directa y fácilmente en asociación con la inhibición de la acción intracerebral de beta-amiloide y, por tanto, presenta una alta aplicabilidad.

<Ejemplo de preparación> Preparación de una forma de dosificación para inyección

Se disolvieron 500 mg de un péptido preparado de la misma manera que en el ejemplo 1 o 2 en solución salina para obtener 10 ml de una disolución. Esta disolución se cargó en una ampolla inyectable, con lo que se obtuvo una forma de dosificación inyectable del ejemplo de preparación 1 o 2.

Aplicabilidad industrial

La presente invención es eficaz para inhibir la entrada de beta-amiloide en el cerebro. Además, la presente invención puede aplicarse más fácilmente en asociación con la inhibición de la acción intracerebral de betaamiloide, presentando así una alta aplicabilidad. Por tanto, la presente invención es aplicable a nivel industrial.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Péptido que consiste en una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

2. Péptido que consiste en una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:1 o una secuencia de aminoácidos de SEQ Id NO:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo para su uso como medicamento.

3. Composición farmacéutica para su uso en el tratamiento o la prevención de al menos una seleccionada de entre enfermedad de Alzheimer, demencias, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro, que comprende un péptido que consiste en una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:1 o una secuencia de aminoácidos de SEQ ID NO:2, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

4. Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 3, en la que el al menos una seleccionada de entre enfermedad de Alzheimer, demencias, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Huntington e inflamación del cerebro se provoca por la deposición de beta-amiloide en el cerebro.

5. Composición farmacéutica para su uso según la reivindicación 3, en la que el tratamiento o la prevención se debe a la inhibición de la entrada de beta-amiloide en el cerebro.