ES2939043T3 - Compuestos de 5-metil-4-fluoro-tiazol-2-ilo - Google Patents

Abstract

La presente invención proporciona un compuesto de Fórmula I: o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, y el uso de compuestos de Fórmula I para tratar enfermedades neurodegenerativas, tales como la enfermedad de Alzheimer. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos de 5-metil-4-fluoro-tiazol-2-ilo

La presente invención se refiere a compuestos novedosos de 5-metil-4-fluoro-tiazol-2-ilo, a composiciones farmacéuticas que comprenden los compuestos, a procedimientos de uso de los compuestos para tratar trastornos neurodegenerativos tales como la enfermedad de Alzheimer (EA), y a productos intermedios y procedimientos útiles en la síntesis de los compuestos.

La presente invención se encuentra en el campo del tratamiento de la EA, la parálisis supranuclear progresiva (PSP) y otras enfermedades y trastornos que implican neurodegeneración mediada por tau, conocidos colectivamente como tauopatías.

La EA es un trastorno neurodegenerativo devastador que afecta a millones de pacientes en todo el mundo. A la vista de los agentes actualmente aprobados en el mercado, que sólo aportan beneficios transitorios y sintomáticos al paciente, existe una importante necesidad no cubierta en el tratamiento de la EA.

La oligomerización de la proteína tau asociada a microtúbulos en estructuras filamentosas tales como filamentos helicoidales pareados (PHF) y filamentos rectos o retorcidos, que dan lugar a ovillos neurofibrilares (NFT) e hilos neuropilares (NT), es una de las características patológicas definitorias de la EA y otras tauopatías. Se ha descubierto que el número de NFT en los cerebros de individuos con EA está estrechamente correlacionado con la gravedad de la enfermedad, lo que sugiere que tau tiene un papel clave en la disfunción neuronal y la neurodegeneración (Nelson et al., J. Neuropathol. Exp. Neurol., 71(5), 362 a 381(2012)). Se ha demostrado que la patología tau se correlaciona con la duración de la enfermedad en la PSP; los casos con un curso más agresivo de la enfermedad tienen una mayor carga tau que los casos con una progresión más lenta. (Williams et al., Brain, 130, 1566 a 1576 (2007)).

Los estudios recientes (Yuzwa et al., Nat. Chem. Biol., 4(8), 483 a 490 (2008)) apoyan el potencial terapéutico de los inhibidores de O-GlcNAcasa (OGA) para limitar la hiperfosforilación de tau y la agregación en tau patológica para el tratamiento de la EA y trastornos de neurodegeneración relacionados mediados por tau. Específicamente, el inhibidor de OGA Thiamet-G se ha relacionado con la ralentización de la pérdida de las neuronas motoras en el modelo de ratón tau JNPL3 (Yuzwa et al., Nat. Chem. Biol., 8, 393 a 399 (2012)) y a una reducción de la patología tau y de las neuritas distróficas en el modelo de ratón tau Tg4510 (Graham et al., Neuropharmacology, 79, 307 a 313 (2014)). Por consiguiente, los inhibidores de OGA se reconocen como un enfoque terapéutico válido para reducir la acumulación de formas hiperfosforiladas y patológicas de tau.

El documento WO 2018/109198 A1 y WO 2018/109202 A1 desvelan ciertos inhibidores de OGA útiles para tratar tauopatías, tales como EA y PSP. Además, el documento US 2016/0031871 desvela ciertos inhibidores de la glucosidasa para tratar la enfermedad de Alzheimer.

Se desean inhibidores de OGA que sean penetrantes en el cerebro para proporcionar tratamientos para trastornos de neurodegeneración mediados por tau, tales como la EA y la pSp . La presente invención proporciona ciertos compuestos novedosos que son inhibidores selectivos de OGA. Además, la presente invención proporciona ciertos compuestos novedosos que son potentes inhibidores de la OGA con el potencial de ser suficientemente penetrantes en el cerebro para tratar eficazmente las tauopatías, tales como la EA y la PSP.

Por consiguiente, la presente invención proporciona un compuesto de la Fórmula I:

o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo.

La presente invención también proporciona un procedimiento para tratar la enfermedad de Alzheimer en un paciente que necesita dicho tratamiento, que comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula I o la, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo.

La presente invención también proporciona un procedimiento para tratar la enfermedad de Alzheimer en un paciente que necesita dicho tratamiento, que comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula I o la, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo.

La presente invención también proporciona un procedimiento para tratar parálisis supranuclear progresiva en un paciente que necesita dicho tratamiento, que comprende administrar al paciente una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula I o la, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo. La presente invención también proporciona un procedimiento para tratar trastornos neurodegenarativos mediados por tau en un paciente, que comprende administrar a un paciente que necesita dicho tratamiento una cantidad efectiva de un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo.

Además, esta invención proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo para su uso en terapia, en particular para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer o para su uso en la prevención de la progresión del deterioro cognitivo leve a la enfermedad de Alzheimer. Además, la presente invención proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, para su uso en el tratamiento de la parálisis supranuclear progresiva. Además, la presente invención proporciona un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, para su uso en el tratamiento de trastornos neurodegenarativos mediados por tau.

Aún más, esta invención proporciona el uso de un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer o para prevenir la progresión del deterioro cognitivo leve a la enfermedad de Alzheimer. Además, esta invención proporciona el uso de un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la parálisis supranuclear progresiva. La invención también proporciona el uso de un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento de trastornos neurodegenerativos mediados por tau.

La invención proporciona además una composición farmacéutica, que comprende un compuesto de la invención, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, con uno o más portadores, diluyentes o excipientes aceptables para uso farmacéutico. La invención proporciona además un proceso para preparar una composición farmacéutica, que comprende mezclar un compuesto de la Fórmula I, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, con uno o más portadores, diluyentes o excipientes aceptables para uso farmacéutico.

El deterioro cognitivo leve se ha definido como una fase prodrómica potencial de la demencia asociada a la enfermedad de Alzheimer, con base en la presentación clínica y en la progresión de los pacientes que presentan deterioro cognitivo leve a la demencia de Alzheimer con el paso del tiempo. El término “prevenir la progresión del deterioro cognitivo leve a la enfermedad de Alzheimer” incluye frenar, retrasar, detener o revertir la progresión del deterioro cognitivo leve a la enfermedad de Alzheimer en un paciente.

Como se utiliza en la presente memoria, los términos “tratamiento” o “tratar” incluyen frenar, retrasar, detener o revertir la progresión o la gravedad de un síntoma o trastorno existente.

Como se utiliza en la presente memoria, el término “paciente” se refiere a un ser humano.

Como se utiliza en la presente memoria, la expresión “cantidad efectiva” se refiere a la cantidad o la dosis del compuesto de la invención, o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo que, tras la administración de una sola dosis o de dosis múltiples al paciente, proporciona el efecto deseado en el paciente que está siendo diagnosticado o tratado.

Los expertos en la técnica pueden determinar con facilidad una cantidad efectiva mediante el uso de técnicas conocidas y por medio de la observación de los resultados obtenidos en circunstancias análogas. A la hora de determinar la cantidad efectiva para un paciente, se tienen en cuenta una serie de factores, entre los que se incluyen: la especie del paciente; su tamaño, edad y estado de salud general; la enfermedad o el trastorno específico de que se trate; el grado de afectación o la gravedad de la enfermedad o el trastorno; la respuesta del paciente individual; el compuesto concreto administrado; el modo de administración; las características de biodisponibilidad de la preparación administrada; el régimen de dosis seleccionado; el uso de medicación concomitante; y otras circunstancias pertinentes. Los compuestos de la presente invención son eficaces a una dosis diaria comprendida entre aproximadamente 0,1 y aproximadamente 15 mg/kg de peso corporal.

Los compuestos de la presente invención se formulan preferentemente como composiciones farmacéuticas administradas por cualquier vía que haga que el compuesto esté biodisponible. Lo más preferente es que dichas composiciones sean para administración oral. Dichas composiciones farmacéuticas y los procesos para prepararlas son muy conocidos en la técnica (véase, por ejemplo, Remington: The Science and Practice of Pharmacy, L.V. Allen, editor, 22da edición, Pharmaceutical Press, 2012).

Los compuestos de la Fórmula I, o sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos son particularmente útiles en los procedimientos de tratamiento de la invención, pero son preferentes ciertas configuraciones. La siguiente lista de compuestos de la presente invención describe tales configuraciones. Se entenderá que estas preferencias son aplicables tanto a los procedimientos de tratamiento como a los compuestos de la invención.

Los compuestos de la presente invención incluyen

y sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos.

El compuesto de la Fórmula I en el que los sustituyentes metilo y oxígeno en el anillo de piperidina están en la configuración cis o trans, o la sal aceptable para uso farmacéutico del mismo, se incluyen dentro del alcance de la invención, siendo preferente la configuración cis. Por ejemplo, los expertos en la técnica apreciarán que el metilo en la posición 2 está en la configuración cis con respecto al oxígeno en la posición 4, como se muestra en el Esquema A a continuación:

Además, los expertos en la técnica apreciarán que el metilo en la posición 2 está en la configuración trans con respecto al oxígeno en la posición 4 como se muestra en el Esquema B a continuación:

Aunque la presente invención contempla todos los enantiómeros individuales y los diastereómeros, así como las mezclas de los enantiómeros de dichos compuestos, incluyendo los racematos, es particularmente preferente el compuesto de la Fórmula Ia y sales aceptables para uso farmacéutico de los mismos.

Los isómeros y enantiómeros individuales pueden ser separados o resueltos por los expertos en la técnica en cualquier punto conveniente de la síntesis de los compuestos de la invención, por medio de procedimientos tales como las técnicas de cristalización selectiva o la cromatografía quiral (véase, por ejemplo, J. Jacques, et al., “Enantiomers, Racemates, and Resolutions", John Wiley and Sons, Inc., 1981 y E.L. Eliel and S.H. Wilen, “Stereochemistry of Organic Compounds", Wiley-Interscience, 1994), o cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) (Véase, por ejemplo, T. A. Berger; “Supercritical Fluid Chromatography Primer’, Agilent Technologies, julio de 2015).

Una sal aceptable para uso farmacéutico de los compuestos de la invención se puede formar, por ejemplo, por medio de la reacción de una base libre apropiada de un compuesto de la invención y un ácido aceptable para uso farmacéutico apropiado en un disolvente adecuado bajo condiciones convencionales muy conocidas en la técnica. Véase, por ejemplo, Gould, P.L., “Salt selection for basic drugs’’, International Journal of Pharmaceutics, 33: 201 a 217 (1986); Bastin, R.J., et al., “Salt Selection and Optimization Procedures for Pharmaceutical New Chemical Entities", Organic Process Research and Development, 4: 427 a 435 (2000); y Berge, S.M., et al., “Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Sciences, 66: 1 a 19 (1977).

Los compuestos de la presente invención, o las sales de los mismos, se pueden preparar por medio de una diversidad de procedimientos conocidos por los expertos en la técnica, algunos de los cuales se ilustran en los esquemas, las preparaciones y los ejemplos siguientes. Los productos de cada etapa de los esquemas que se presentan a continuación se pueden recuperar por medio de procedimientos convencionales muy conocidos en la técnica, que incluyen la extracción, la evaporación, la precipitación, la cromatografía, la filtración, la trituración y la cristalización. En los esquemas que se presentan a continuación, todos los sustituyentes, a menos que se indique lo contrario, son los definidos anteriormente. Los reactivos y los materiales de partida están fácilmente disponibles para los expertos en la técnica. Sin limitar el alcance de la invención, los siguientes esquemas, preparaciones y ejemplos se proporcionan para ilustrar mejor la invención. Además, los expertos en la técnica aprecian que los compuestos de la Fórmula la se pueden preparar mediante el uso de un material de partida con la correspondiente configuración estereoquímica, que pueden preparar los expertos en la técnica.

Otras abreviaturas se definen de la siguiente manera: “ACN” se refiere a acetonitrilo; “Ac” se refiere a acetilo; “AcOH” se refiere a ácido acético; “AczO” se refiere a anhídrido acético; “BOC” se refiere a terc-butoxicarbonilo; “CAS Núm.” se refiere a Chemical Abstracts Registry number; “DCM” se refiere a cloruro de metileno o diclorometano; “DIPEA” se refiere a diisopropiletilamina; “DMEA” se refiere a dimetiletilamina; “DMF” se refiere a N,N-dimetilformamida; “DMSO” se refiere a dimetilsulfóxido; “EDTA” se refiere a ácido etilendiaminotetraacético; “ES/MS” se refiere a espectrometría de masas por electropulverización; “EtOAc” se refiere a acetato de etilo; “EtOH” se refiere a etanol o alcohol etílico; “hs” se refiere a horas; “IPA” se refiere a isopropanol o alcohol isopropílico; “IPAm” se refiere a amina isopropílica; “LiHMDS” se refiere a bis(trimetilsilil)amida de litio; “KOtBu” se refiere a tercbutóxido de potasio; “Me” se refiere a metilo; “MTBE” se refiere a metil-terc-butiléter; “min” se refiere a minuto o minutos; “NaOtBu” se refiere a terc-butóxido de sodio; “n-BuLi” se refiere a n-butilitio; “OAc” se refiere a acetato o acetoxi; “TA” se refiere a temperatura ambiente; “SCX” se refiere a intercambio selectivo de cationes; “SFC” se refiere a cromatografía de fluidos supercríticos; “TEA” se refiere a trietilamina; “TFA” se refiere a ácido trifluoroacético; “THF” se refiere a tetrahidrofurano; “TMA” se refiere a trimetilamina; “TMEDA” se refiere a tetrametiletilendiamina; “Tris” se refiere a tris(hidroximetil)aminometano o 2-amino-2-(hidroximetil)propano-1,3-diol; “[a]D20” se refiere a la rotación óptica específica a 20 °C y 589 nm, en el que c es la concentración en g/ml.

Esquema 1

El Esquema 1 representa la síntesis de 5-[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo. La sustitución aromática nucleofílica es muy conocida en la bibliografía. Como tal, en el Esquema 1, la etapa A, aproximadamente 1 equivalente de (2S,4S)-4-hidroxi-2-metil-piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (CAS Núm. 790667-99-1) y aproximadamente 1,5 equivalentes de 5-cloropirazina-2-carbonitrilo (CAS Núm. 36070-75-4) disolvió en un solvente orgánico apropiado, tal como THF o 1,4-dioxano, puede ser tratado con aproximadamente 2 equivalentes de una base adecuada, tal como NaH, NaOtBu, oKOtBu, en aproximadamente 0 °C para aproximadamente 60 min. La mezcla de reacción resultante se puede calentar a TA con agitación durante aproximadamente 3 a 12 hs. El producto de reacción resultante se puede aislar por medio de técnicas muy conocidas en la técnica, tales como extracción, precipitación y filtración. Por ejemplo, la mezcla de reacción se puede diluir con cloruro de amonio acuoso saturado y un disolvente orgánico apropiado, tal como DCM, MTBE o EtOAc, las capas se pueden separar y el extracto orgánico se puede lavar con NaCl saturado, secarse sobre Na²SO⁴ , filtrarse y el filtrado se puede concentrar a presión reducida. El residuo resultante se puede combinar en aproximadamente un 10% de MTBE/heptano, calentarse a unos 45 °C durante unos 30 min y enfriarse a TA con agitación. Los sólidos resultantes se pueden recolectar por filtración para obtener (2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-piperidin-1-carboxilato de tere-butilo, el producto del Esquema 1, la etapa A. Alternativamente, el producto bruto después de la extracción se puede aislar por cromatografía flash sobre gel de sílice mediante el uso de una mezcla apropiada de disolventes orgánicos, por ejemplo 1:0 a 0:1 iso-hexano:EtOAc, para obtener el producto del Esquema 1, la etapa A, después de la evaporación de las fracciones cromatográficas.

La eliminación del grupo protector BOC está bien descrita en la técnica. Como tal, aproximadamente 1 equivalente de (2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-piperidin-1-carboxilato de tere-butilo, el producto del Esquema 1, la etapa A, se puede disolver en un disolvente orgánico adecuado, tal como DCM, y tratarse con un exceso de una solución ácida, tal como HCl en un disolvente alcohólico, tal como MeOH, EtOH, o iPrOH, HCl en un disolvente aprótico polar, tal como 1,4-dioxano, o TFA, puro o en un disolvente orgánico polar, durante aproximadamente 0,1 a 8 hs a aproximadamente 0 °C a TA. El producto de reacción se puede aislar por medio de técnicas muy conocidas en la técnica, tales como la extracción, la precipitación y la filtración. Por ejemplo, la mezcla de reacción se puede repartir entre una mezcla de un disolvente orgánico apropiado, tales como DCM, 2-metiltetrahidrofurano, MTBE, o una mezcla de los mismos, y agua, las capas se pueden separar, y los extractos acuosos se pueden neutralizar con una base acuosa apropiada, tales como NaOH, KOH, o Na²CO³. La mezcla acuosa básica se puede extraer con un disolvente orgánico adecuado, tales como DCM, las capas se pueden separar y los extractos orgánicos se pueden concentrar a presión reducida. El residuo resultante se puede calentar en una mezcla de aproximadamente 10% de ciclopentilo metil éter/heptano, calentarse a aproximadamente 45 °C durante aproximadamente 30 min, y agitarse a TA durante aproximadamente 30 min. Los sólidos resultantes se pueden recolectar por filtración para obtener 5-[[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo, el producto del Esquema 1, la etapa B. Además, los expertos en la técnica reconocerá que la sal HCl correspondiente se puede obtener por medio de tratamiento de (2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-piperidin-1-carboxilato de tere-butilo, el producto del Esquema 1, la etapa A, con HCl en una solución de [[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo, el producto del Esquema 1, la etapa B, la etapa A, con HCl en un disolvente orgánico como se ha descrito anteriormente, con posterior evaporación de los disolventes a presión reducida, para obtener la sal HCl de 5-[[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo.

Esquema 2

El Esquema 2 representa la preparación de los compuestos de la Fórmula la. Como es bien apreciado en la técnica, la aminación reductora entre una amina sustituida y un aldehído aromático se puede llevar a cabo bajo una variedad de condiciones. Por ejemplo, aproximadamente 1 equivalente de N-(4-fluoro-5-formil-tiazol-2-il)acetamida y aproximadamente 1 equivalente de 5-[[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo (o la sal HCl correspondiente) disueltos en un disolvente orgánico adecuado, tal como EtOAc, EtOH o DCM, que contenga además unos 3 equivalentes de una amina orgánica no nucleófila adecuada, tal como DIPEA o piridina, se puede tratar con unos 3 equivalentes de un borohidruro adecuado, tal como Na(OAc)3BH, durante aproximadamente 1,5 hs a 18 hs a aproximadamente TA a 30 °C. El producto de reacción se puede aislar por medio de técnicas muy conocidas en la técnica, tales como filtración, extracción, cromatografía y precipitación/filtración. Por ejemplo, la mezcla de reacción se puede enfriar con Na2CO3 acuoso saturado, extraerse con un disolvente orgánico polar adecuado, tal como EtOAc, separar la capa orgánica y concentrar el extracto orgánico a presión reducida. El residuo resultante se puede someter a cromatografía flash de fase normal sobre gel de sílice, eluyendo con aproximadamente 1:0 a 95:5 iPrOH/DCM o, alternativamente, aproximadamente 1:0 a 1:1 hexanos:EtOAc conteniendo aproximadamente 10% de MeOH, para obtener un residuo, tras evaporación del disolvente. El residuo se puede disolver en aproximadamente 1:1 EtOH/heptano, calentarse a aproximadamente 50 °C durante aproximadamente 30 min, y agitarse a TA durante aproximadamente 10 a 30 min. El sólido resultante se puede recolectar por filtración para obtener N-[5-[[(2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-1-piperidil]metil]-4-fluorotiazol-2-il]acetamida, Fórmula Ia.

Preparaciones y Ejemplos

Las siguientes preparaciones y ejemplos ilustran aún más la invención y representan la síntesis típica de los compuestos de la presente invención. Los reactivos y materiales de partida están fácilmente disponibles o pueden ser fácilmente sintetizados por los expertos en la técnica. Se debe entender que las Preparaciones y los Ejemplos se exponen a modo de ilustración y no de limitación, y que los expertos en la técnica pueden llevar a cabo diversas modificaciones.

La LC-ES/MS se lleva a cabo en un sistema de cromatografía líquida AGILENT® HP1100. Las mediciones de espectrometría de masas por electropulverización (adquiridas en modo positivo y/o negativo) se llevan a cabo en un espectrómetro de masas cuadrupolar con detector selectivo de masas interconectado al HPLC HP1100. Condiciones LC-MS (pH bajo): columna: PHENOMENEX® GEMINI® NX C182,1 x 50 mm 3,0 |jm; gradiente: de 5 a 100% B en 3 min, posteriormente 100% B durante 0,75 min temperatura de la columna: 50 °C /-10 °C; caudal: 1,2 mL/min; Disolvente A: agua desionizada con 0,1% de HCOOH; Disolvente B: ACN con 0,1% de ácido fórmico; longitud de onda 214 nm. Condiciones alternativas de LC-MS (pH alto): columna: Columnas XTERRA® MS C18 de 2,1 x ⁵⁰ mm, 3,5 ^m; gradiente: 5% de disolvente A durante 0,25 min, gradiente de 5% a 100% de disolvente B en 3 min y 100% de disolvente B durante 0,5 min o 10% a 100% de disolvente B en 3 min y al 100% de disolvente B durante 0,75 min; temperatura de la columna: 50 °C /-10 °C; caudal: 1,2 mL/min; Disolvente A: 10 mM NH4HCO3 pH 9; Disolvente B: ACN; longitud de onda: 214 nm.

Preparación 1

2S,4S)-4-[2-(2-acetilhidrazino)-2-oxo-etoxi]-2-metil-piperidin-1-carboxilato de tere-butilo.

Esquema 1, etapa A: A una disolución de (2S,4S)-4-hidroxi-2-metilpiperidin-1-carboxilato de terc-butilo (350 mg, 1,6 mmol) y THF (10 ml) a 0 °C se añade KOtBu (274 mg, 2,4 mmol) en una porción y la mezcla se agita durante 45 min. Se añade 5-cloropirazina-2-carbonitrilo (340 mg, 2,4 mmol) y la mezcla se deja calentar lentamente hasta TA durante 45 min con agitación adicional a TA durante 12 hs. se añade 5-cloropirazina-2-carbonitrilo (340 mg, 2,4 mmol) y la mezcla se deja calentar lentamente hasta TA durante 45 min con agitación adicional a TA durante 12 hs. La mezcla de reacción se diluye con agua (50 ml) y se extrae con EtOAc (3 * 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre MgSO4, se filtran y se concentran a presión reducida para obtener un aceite bruto. El residuo resultante se disuelve en DCM y se purifica por medio de cromatografía flash sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 1:0 a 0:1 iso-Hexano:EtOAc, para dar el compuesto del título (205 mg, 40% de rendimiento) tras la evaporación del disolvente de las fracciones cromatográficas agrupadas. ES/MS (m/z): 263 (M+H-C⁴H⁹).

Procedimiento alternativo para la preparación 1

A un matraz se añade (2S,4S)-4-hidroxi-2-metil-piperidin-1-carboxilato de terc-butilo (40,1 g, 186 mmol), 5-cloropirazin-2-carbonitrilo (39,0 g, 279 mmol) y THF (401 ml) a TA. La mezcla de reacción se agita en un baño de NaCl/agua helada (temperatura interna -5 °C) y a la mezcla se añade NaOtBu (36,9 g, 372 mmol) por porciones a lo largo de 10 min, manteniendo una temperatura interna inferior a 10 °C durante la adición. La mezcla de reacción se agita en un baño de NaCl/agua helada durante 1 hora (temperatura interna -5 °C) y se añaden solución acuosa saturada de NH⁴Cl (300 ml) y agua (100 ml) durante 5 min. La mezcla se transfiere a un embudo de decantación y se extrae con MT^b E (2 * 400 ml). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na²SO⁴ y se concentran a presión reducida para dar un residuo, que se combina con MTBE/heptano al 10% (350 ml). La mezcla resultante se agita enérgicamente en un bloque calefactor a 45 °C durante 30 min, se agita a temperatura ambiente durante 30 min y se filtra. El sólido filtrado se seca al vacío a 40 °C para dar el compuesto del título como sólido marrón pálido (60 g, >99% de rendimiento). ES/MS (m/z): 341 (M+Na).

Preparación 2a

Clorhidrato de 5-[[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo

Esquema 1, etapa B: A una disolución de (2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-piperidin-1-carboxilato de tercbutilo (205 mg, 0,6 mmol) se añade una disolución 4 M de HCl en 1,4-dioxano (5 ml, 20 mmol). La mezcla resultante se agita a TA durante 3,5 hs. La suspensión resultante se concentra a presión reducida y se somete a vacío durante 6 hs para dar el compuesto del título (225 mg, >95% de rendimiento), adecuado para su uso sin purificación adicional. ES/MS (m/z): 219 (M+H).

Preparación 2b

5-[[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo

Esquema 1, etapa B: A un matraz se añade (2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-piperidin-1-carboxilato de tercbutilo (60 g, 188 mmol) y DCM (240 ml) a TA. La suspensión se agita en un baño de hielo y agua (temperatura interna 5 °C) y se añade TFA (240 ml, 3174 mmol) gota a gota durante 15 min con evolución de gas, manteniendo una temperatura interna inferior a 10 °C durante la adición. La mezcla de reacción se agita en un baño de hielo y agua durante 10 min (temperatura interna 5 °C) y se concentra a presión reducida. El residuo resultante se agita en un baño de hielo y agua y se combina con MTBE (200 ml) y agua (200 ml). El filtrado se transfiere a un embudo de decantación y se separan las capas. La capa orgánica se extrae con solución acuosa de TFA al 1% (2 * 100 ml), se extrae de nuevo con solución acuosa de HCl 0,1 M (2 * 100 ml), y la capa orgánica se reserva. Las capas acuosas combinadas se agitan en un baño de agua helada y se añade solución acuosa de NaOH al 50% (42,8 ml, 754 mmol) durante 5 min, manteniendo una temperatura interna inferior a 20 °C durante la adición. La mezcla basificada resultante se extrae con DCM (3 * 300 ml), y los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2SO4y se concentran a presión reducida para dar el primer lote de material bruto. La capa orgánica de la primera parte de la preparación se extrae de nuevo con solución acuosa 2 M de HCl (2 * 100 ml). Las capas acuosas combinadas se agitan en un baño de agua helada y se añade solución acuosa de NaOH al 50% (24,4 ml, 430 mmol) durante 5 min, manteniendo una temperatura interna inferior a 20 °C durante la adición. La mezcla basificada resultante se extrae con DCM (3 * 100 ml) y los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na²SO⁴ y se concentran a presión reducida para dar el segundo lote de material bruto. Los dos lotes de material bruto se combinan con 10% de ciclopentilo metil éter/heptano (181 ml) y la mezcla se agita enérgicamente en un bloque calefactor a 45 °C durante 30 min, se enfría a TA y se agita durante 30 min, y el precipitado resultante se recolecta por filtración. El sólido filtrado se saca al vacío a 40 °C durante 1 hora para dar el compuesto del título como un sólido de color crema (29,2 g, 71% de rendimiento). ES/MS (m/z): 219 (M+H).

Procedimiento alternativo para la preparación 2b

En un matraz se añade (2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metilpiperidin-1-carboxilato de tere-butilo (1,2 g, 3,6 mmol). Se sumerge el matraz en un baño de agua helada y se añade una disolución de HCl 5 M en iPrOH (7,2 ml, 36,2 mmol) durante 2 min. La mezcla de reacción se agita a TA durante 1,5 hs y se concentra a presión reducida. El residuo resultante se reparte entre DCM (10 ml) y NaHCO acuoso saturado (10 ml) y se separan las capas. La capa acuosa se extrae con DCM (2 * 10 ml) y 2-metiltetrahidrofurano (4 * 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na²SO⁴, se filtran y se concentran a presión reducida. El residuo resultante (804 mg, 3,7 mmol) se combina con otro lote de pureza similar (76 mg, 0,3 mmol). El lote mezclado se combina con 10% de ciclopentilo metil éter/heptano (4,4 ml) y la mezcla se agita enérgicamente en un bloque calefactor a 45 °C durante 20 min, se calienta a ^tA y se agita durante 5 min, y el precipitado resultante se recolecta por filtración. El sólido filtrado se seca al vacío a 40 °C durante 1 hora para dar el compuesto del título como sólido de color marrón pálido (649 mg, 74% de rendimiento de los dos lotes combinados). ES/MS (m/z): 219 (M+H).

Preparación 3

N-(4-fluoro-5-formil-tiazol-2-il)carbamato de tere-butilo.

Se añade CsF (227 g, 1480 mmol) a una solución de N-(4-cloro-5-formil-tiazol-2-il)carbamato de tere-butilo (38,8 g, 148 mmol; véase, por ejemplo, N. Masuda, et al., Bioorg. Med. Chem., 12, 6171 a 6182 (2004)) en DMSO (776 ml) a TA. La mezcla de reacción se agita en un bloque de calentamiento a 145 °C con una temperatura interna de 133 °C durante 48 hs y la mezcla se enfría en un baño de agua helada. A la mezcla se añade una solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio (500 ml), NaCl acuoso saturado (500 ml) y EtOAc (500 ml). La mezcla se agita a TA durante 10 min y se filtra a través de tierra de diatomeas y se lava con EtOAc (500 ml). El filtrado se transfiere a un embudo de decantación y se separan las capas, la capa acuosa se extrae con EtOAc (1 L), los extractos orgánicos combinados se lavan con NaCl acuoso saturado (1 L) y la capa acuosa se extrae con EtOAc (300 ml). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2SO4, se filtran y se concentran a presión reducida para dar un residuo. El residuo se pasa a través de una almohadilla de gel de sílice (330 g), eluyendo con EtOAc al 5% en DCM (1,5 L), y el filtrado se concentra para dar un residuo. El residuo resultante se disuelve en IPA (303 ml), se filtra y se purifica por SFC, mediante el uso de una columna IC (derivado de polisacárido de celulosa: tris (3,5-diclorofenilcarbamato, 30 * 250mm, 5 ^), eluyendo con IPA al 10% a 180 ml/min, inyecciones de 3 ml. Las fracciones que contienen producto se concentran a presión reducida para dar el compuesto del título (16,1 g, 49%). ES/MS (m/z): 247 (M+H).

Preparación 4

N-(4-fluoro-5-formil-tiazol-2-il)acetamida

En un recipiente enchaquetado, se añade ZnBr2 (91,9 g, 408 mmol) en una porción a una mezcla de N-(4-fluoro-5-formil-tiazol-2-il)carbamato de tere-butilo (33,5 g, 136 mmol) y DCM (503 ml) a TA. La mezcla de reacción se agita durante toda la noche a una temperatura interna de 37 °C, después se ajusta la temperatura de la chaqueta a -10 °C y se añade THF (111 ml) gota a gota durante 15 minutos, manteniendo una temperatura interna por debajo de 6 °C. A continuación, se ajusta la temperatura de la chaqueta a -30 °C y se añade piridina (110 ml, 1360 mmol) gota a gota durante 5 min, manteniendo una temperatura interna inferior a 5 °C. La temperatura de la chaqueta se ajusta a 0 °C y se añade AczO (116 ml, 1220 mmol) gota a gota durante 5 minutos. La mezcla de reacción se agita durante la noche a una temperatura interna de 37 °C, se enfría a TA y se pasa a través de una almohadilla corta de tierra de diatomeas, eluyendo con THF (500 ml). El filtrado se transfiere a un matraz y la mezcla se concentra a presión reducida para dar un residuo, que se concentra en tolueno (50 ml). Al residuo resultante se le añade una disolución de ácido cítrico monohidratado (57,2 g, 272 mmol) en agua (400 ml) y 2-metiltetrahidrofurano (400 ml) y la mezcla se agita a 40 °C durante 5 min, después se pasa por una almohadilla corta de tierra de diatomeas, eluyendo con 2-metiltetrahidrofurano (100 ml). El filtrado se transfiere a un embudo de decantación y se separan las capas. La capa acuosa se extrae con 2-metiltetrahidrofurano (2 x 250 ml) y los orgánicos combinados se diluyen con agua (500 ml). A la mezcla se añade NaHCO3 sólido por porciones a lo largo de 5 min con agitación hasta que cese la evolución del gas. La mezcla se transfiere a un embudo de decantación y se separan las capas, después se extrae la capa acuosa con 2-metiltetrahidrofurano (200 ml y 100 ml). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2SO4, se filtran y se concentran a presión reducida para dar un residuo. El residuo resultante se disuelve en 2-metiltetrahidrofurano (100 ml) y la mezcla se pasa a través de una almohadilla cortade gel de sílice (250 g), eluyendo con 2-metiltetrahidrofurano (2,5 L). El filtrado se concentra a presión reducida para dar un residuo que se suspende en una mezcla 1:1 de DCM y heptano (202 ml). La mezcla se agita a temperatura ambiente durante 30 min, el sólido resultante se recolecta por filtración y el sólido filtrado se seca al vacío a 40 °C durante 2 hs, para obtener el compuesto del título (18 g, 70% de rendimiento). ES/MS (m/z): 189,0 (M+H).

Procedimiento alternativo para la preparación 4

En una atmósfera inerte, disolver fluoruro de tetrametilamonio tetrahidratado (100 kg, 605 mol) seguido por alcohol isopropílico (453 a 459 kg) y concentrar a presión reducida hasta un volumen aproximado de 150 a 180 L a temperaturas <70 °C. Añadir IPA (453 a 459 kg) y concentrar a presión reducida hasta 150 a 180 L. Repetir hasta que la mezcla tenga un KF < 0,2%. Añadir DMF (546 a 552 kg), calentar a 90 °C y concentrar a presión reducida a aproximadamente 150 L. Añadir nuevamente ^d M^f (453 a 459 kg) y concentrar a presión reducida hasta 150 L. Repetir hasta que la mezcla tenga un límite de IPA residual de <60 ppm. Añadir N-(4-cloro-5-formiltiazol-2-il)acetamida (15 kg, 73,3 mol) y DMF (149 kg), y calentar a 100 °C durante 2 a 4 hs. Ajustar la temperatura a 20 a 25 °C y añadir 2-metiltetrahidrofurano (248 kg). Añadir NH4Cl acuoso al 25% en peso (458 kg) y agitar durante 30 min. Separar las capas y lavar la capa acuosa con 2-metiltetrahidrofurano adicional (248 kg). Separar las capas resultantes, lavar el extracto orgánico combinado con NH4Cl acuoso al 25% en peso (2 x 458 kg) y agitar durante 30 min. Añadir EtOAc (180 kg) y calentar la mezcla de reacción a reflujo durante 1 hora para obtener una solución clara. Concentrar la mezcla a presión reducida a < 55 °C hasta un volumen de aproximadamente 30 L. Añadir acetato de etilo (54 kg) y concentrar la mezcla a presión reducida a < 55 °C hasta un volumen de aproximadamente 30 L. Agitar la mezcla a 20 a 25 °C durante 2 hs bajo nitrógeno. Recolectar los sólidos por filtración y secar al vacío a 55 a 65 °C durante 10 a 12 hs para obtener el compuesto del título (4,5 kg, 82,5% de pureza).

Ejemplo 1

N-[5-[[(2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-1 -piperidil]metil]-4-fluoro-tiazol-2-il]acetamida

Esquema 2: A una solución de N-(4-fluoro-5-formil-tiazol-2-il)acetamida (166 mg, 0,9 mmol) y clorhidrato de 5-[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo (225 mg, 0,9 mmol) en DCM (10 ml) se añade DIPEA (0,46 ml, 2,6 mmol). La solución resultante se agita a TA durante 1,75 hs. A la solución se añade NaBH(OAc)3 (561mg, 2,6 mmol). La solución resultante se agita a temperatura ambiente durante 16 hs. La reacción se apaga lentamente con NaHCO acuoso saturado (5 ml) y la capa acuosa se extrae con DCM (2 x 10 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtró y el filtrado se concentra a presión reducida. El residuo resultante se disuelve en DCM y se purifica por medio de cromatografía flash sobre gel de sílice, eluyendo con un gradiente de 1:0 a 1:1 hexanos:EtOAc seguido por elución con 1:1 a 0:1 hexanos:EtOAc conteniendo 10% de MeOH, para obtener el compuesto del título (52 mg, 15% de rendimiento). ES/MS (m/z): 391 (M+H). [a]D20 = 38° (C = 1,0, MeOH).

Procedimiento alternativo para el Ejemplo 1

A un matraz se añade 5-[[(2S,4S)-2-metil-4-piperidil]oxi]pirazina-2-carbonitrilo (35,6 g, 163 mmol), EtOAc (768 ml), piridina (26,4 ml, 326 mmol) y NaBH(OAc)3 (104 g, 490,7 mmol) a TA. La mezcla de reacción se agita en un bloque calefactor a 31 °C (temperatura interna 30 °C) y se añade N-(4-fluoro-5-formil-tiazol-2-il)acetamida (30,7 g, 163 mmol) por porciones a lo largo de 2 min. La mezcla de reacción se agita en un bloque calefactor a 31 °C durante toda la noche (temperatura interna 30 °C) y se enfría en un baño de agua helada con agitación. A la mezcla resultante se le añade una solución acuosa saturada de NaHCO3 (500 ml) a lo largo de 5 min, manteniendo la temperatura interna por debajo de 10 °C durante la adición. La mezcla resultante se agita a TA durante 15 min, se reparte entre agua (100 ml) y EtOAc (50 ml), y la mezcla se transfiere a un embudo de decantación. Las capas resultantes se separan. La capa acuosa se extrajo con 2-metiltetrahidrofurano (2 x 300 ml). Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2SO4, se filtran y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se combina con una solución acuosa saturada de NaHCO2 (300 ml) y la mezcla se extrae con DCM (3 x 300 ml), dejando la capa marrón de trapo en la fase acuosa. Los extractos orgánicos combinados se secan sobre Na2SO4, se filtran y se concentran a presión reducida. El residuo resultante se purifica por medio de cromatografía flash sobre sílice, eluyendo con un gradiente de 0 a 5% de iPrOH/DCM, y las fracciones que contienen producto se combinan y concentran a presión reducida. El residuo resultante se concentra en heptano (2 x ⁵⁰ ml). El sólido resultante se combina con EtOH/heptano al 50% (318 ml), la mezcla se agita enérgicamente en un bloque calefactor a 50 °C durante 30 min, y se enfría a temperatura ambiente con agitación durante 10 min. El precipitado resultante se recolecta por filtración y la torta de filtración se lava con heptano (25 ml). El sólido recolectado se seca al vacío a TA durante 5 min y se seca al vacío a 40 °C durante la noche para obtener el compuesto del título, N-[5-[[(2S,4S)-4-(5-cianopirazin-2-il)oxi-2-metil-1-piperidil]metil]-4-fluorotiazol-2-il]acetamida, como un sólido cristalino de color crema pálido (47 g, 72% de rendimiento). ES/MS (m/z): 391 (M+H). [a]D20 = 47,2° (C = 0,25, MeOH).

Difracción de Polvos de Rayos X

Los patrones de DRX del sólido cristalino se obtienen en un difractómetro de rayos X Bruker D4 Endeavor, equipado con una fuente de CuKa A = 1,54060 A) y un detector Vantec, operando a 35 kV y 50 mA. La muestra es barrida ópticamente entre 4 y 40° en 20, con un tamaño de etapa de 0,0087° en 20 y una velocidad de barrido de 0,5 segundos/etapa, y con divergencia de 0,6 mm, antidispersión fija de 5,28 y rendijas de detector de 9,5 mm. El polvo seco se coloca en un portamuestras de cuarzo y se obtiene una superficie lisa con un portaobjetos de vidrio. Es bien sabido en la técnica de la cristalografía que, para cualquier forma de cristal dada, las intensidades relativas de los picos de difracción pueden variar debido a la orientación preferente resultante de factores tales como la morfología y el hábito del cristal. Cuando los efectos de la orientación preferente están presentes, las intensidades de los picos se alteran, pero las posiciones de los picos característicos del polimorfo no se modifican. Véase, por ejemplo, The U. S. Pharmacopeia 35 - National Formulary 30 Chapter <941> Characterization of crystalline and partially crystalline solids byX-ray powder diffraction (XRPD) Official 1 de diciembre de 2012 a 1 de mayo de 2013. Además, también es muy conocido en la técnica de la cristalografía que, para cualquier forma de cristal dada, las posiciones de los picos angulares pueden variar ligeramente. Por ejemplo, las posiciones de los picos pueden cambiar debido a una variación en la temperatura o la humedad a la que se analiza una muestra, al desplazamiento de la muestra o a la presencia o ausencia de un estándar interno. En el presente caso, una variabilidad de la posición del pico de ± 0,2 en 20 tendrá en cuenta estas posibles variaciones sin obstaculizar la identificación inequívoca de la forma cristalina indicada. La confirmación de una forma cristalina se puede hacer sobre la base de cualquier combinación única de picos distintivos (en unidades de ° 20), normalmente los picos más prominentes. Los patrones de difracción de la forma de cristal, recolectados a temperatura ambiente y humedad relativa, se ajustaron con base en los picos estándar de NIST 675 a 8,85 y 26,77 grados 2-0.

De este modo, una muestra cristalina del Ejemplo 1 se caracteriza por un patrón XRD mediante el uso de radiación CuKa como teniendo picos de difracción (valores 20) como se describe en la Tabla 1 a continuación. Específicamente, el patrón contiene un pico a 12,1° en combinación con uno o más picos seleccionados del grupo que consiste en 18,5°, 13,0° y 16,0°, con una tolerancia para los ángulos de difracción de 0,2 grados.

Tabla 1: Picos de Difracción de Rayos X en Polvo de la base libre cristalina del Ejemplo 1

Ensayo in vitro de la enzima OGA humana

Generación de enzima OGA

La secuencia de nucleótidos que codifica la O-GIcNAc-p-N-acetilglucosaminidasa humana de longitud completa (NM_012215) se inserta en el vector pFastBacl (Invitrogen) con una etiqueta de extremo N terminal de poli-histidina (HIS). La generación de baculovirus se lleva a cabo de acuerdo con el protocolo del sistema de expresión de baculovirus Bac-to-Bac (Invitrogen). Las células Sf9 se infectan a 1,5 ><106 células/ml mediante el uso de 10 ml de virus P1 por Litro de cultivo y se incuban a 28 °C durante 48 hs. Las células se centrifugan, se enjuagan con PBS y los gránulos se almacenan a -80 °C.

La proteína OGA anterior (His-OGA) se purifica de la siguiente manera: Se lisan 4 L de células en 200 ml de tampón que contiene 50 mM de Tris, pH 8,0, 300 mM de NaCl, 10% de glicerol, 10 mM de Imidazol, 1 mM de Ditiotreitol (DTT), 0,1% de Triton™ X-100, 4 comprimidos de inhibidores de proteasas (completos, sin EDTA, Roche) durante 45 min a 4 °C. A continuación, este lisado celular se centrifuga durante 40 min a 16.500 rpm a 4 °C, y el sobrenadante se incuba con 6 ml de resina Ni-NTA (níquel-ácido nitrilotriacético) durante 2 horas a 4 °C.

A continuación, la resina se empaqueta en la columna y se lava con 50 mM de Tris, pH 8,0, 300 mM de NaCl, 10% de glicerol, 10 mM de Imidazol, 0,1% de Triton™ X-100, 1 mM de DTT, seguido por 50 mM de Tris, pH 8,0, 150 mM de NaCl, 10 mM de Imidazol, 10% de glicerol, 1 mM de DTT. Las proteínas se eluyen con 50 mM de Tris, pH 8,0, 150 mM de NaCl, 300 mM de Imidazol, 10% de glicerol, 1 mM de DTT. Las fracciones que contienen His-OGA se concentran a 6 ml y se cargan en Superdex75 (16/60). La proteína se eluye con 50 mM de Tris, pH 8,0, 150 mM de NaCl, 10% de glicerol, 2 mM de DTT. Se agrupan las fracciones que contienen His-OGA y se mide la concentración de proteínas con BCA (Ensayo Colorimétrico de Bradford).

Ensayo de enzima OGA

La enzima OGA cataliza la eliminación de O-GIcNAc de las proteínas nucleocitoplasmáticas. Para medir esta actividad se utilizó fluoresceína di-N-acetil-p-N-acetil-D-glucosaminida (FD-GIcNAc ,Kim, Eun Ju; Kang, Dae Ook; Love, Dona C.; Hanover, John A. Carbohydrate Research (2006), 341(8), 971 a 982) a una concentración final de 10 |jM (en el formato de ensayo de 96 pocillos) o 6,7 jM (en el formato de ensayo de 384 pocillos). Este sustrato fluorogénico se vuelve fluorescente tras su escisión por OGA, de forma que la actividad enzimática se puede medir por el aumento de fluorescencia detectado a 535 nm (excitación a 485 nm).

El tampón de ensayo se prepara para dar una concentración final de H²NaPO³-HNa²PO³50 mM, 0,01% de albúmina de suero bovino y 0,01% de Triton™ X-100 en agua, a un pH de 7. Los compuestos a ensayar se diluyen en dimetilsulfóxido (DMSO) puro mediante el uso de curvas de respuesta de concentración de diez puntos. La concentración máxima de compuesto en la mezcla de reacción es de 30 o 1 jM. Los compuestos a la concentración adecuada se preincuban con la enzima OGA durante 30 minutos antes de iniciar la reacción por medio de la adición de sustrato. La concentración final de enzima es de 3,24 nM o 0,5 nM, para la concentración máxima de compuesto de 30 o 1 jM, respectivamente. Se deja que las reacciones avancen durante 60 min a temperatura ambiente. A continuación, sin detener la reacción, se lee la fluorescencia. Los valores CI⁵⁰ se calculan por medio del trazado los datos normalizados frente al logaritmo del compuesto y el ajuste de los datos por medio de una ecuación logística de cuatro parámetros.

El compuesto del Ejemplo 1 se probó fundamentalmente como se ha descrito anteriormente y mostró un valor de CI⁵⁰0,343 nM ± 0,141 (n = 3). Estos resultados demuestran que los compuestos del Ejemplo 1 inhibe la actividad de la enzima OGA in vitro.

Claims (12)

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de la fórmula;

o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo.

2. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el metilo en la posición 2 en el anillo de piperidina está en la configuración cis con respecto al oxígeno en la posición 4:

o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo.

3. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que el compuesto es:

o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo.

4. El compuesto de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el compuesto es:

5. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 4, que es cristalino.

6. El compuesto de acuerdo con la reivindicación 5 que está caracterizado por un pico en el espectro de difracción de polvo de rayos X en el ángulo de difracción 2-theta de 12,1° en combinación con uno o más picos seleccionados del grupo que consiste en 18,5°, 13,0° y 16,0° con una tolerancia para los ángulos de difracción de 0,2 grados.

7. Un compuesto o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en terapia.

8. Un compuesto o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer.

9. Un compuesto o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de la progresión del deterioro cognitivo leve a la enfermedad de Alzheimer.

10. Un compuesto o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de parálisis supranuclear progresiva.

11. Una composición farmacéutica, que comprende un compuesto o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, con uno o más portadores, diluyentes o excipientes aceptables para uso farmacéutico.

12. Un procedimiento para preparar una composición farmacéutica, que comprende mezclar un compuesto o una sal aceptable para uso farmacéutico del mismo de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, con uno o más portadores, diluyentes o excipientes aceptables para uso farmacéutico.