ES2935887T3 - Rellenos de tejido basados en seda y ácido hialurónico y métodos de uso de los mismos - Google Patents

Rellenos de tejido basados en seda y ácido hialurónico y métodos de uso de los mismos Download PDF

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Abstract

En el presente documento se proporcionan rellenos tisulares basados en fragmentos de proteína de seda y ácido hialurónico y métodos para los mismos. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN
Rellenos de tejido basados en seda y ácido hialurónico y métodos de uso de los mismos
Referencia cruzada a aplicaciones relacionadas
Esta solicitud reivindica el beneficio de las solicitudes de patente provisional de EE. UU. n.° 62/525.131, presentada el 26 de junio de 2017 y 62/641.095, presentada el 9 de marzo de 2018.
Antecedentes de la invención
La seda es un polímero natural producido por una variedad de insectos y arañas. La seda comprende una proteína de núcleo del filamento, la fibroína de seda, y un recubrimiento similar al pegamento que consiste en una proteína no filamentosa, la sericina. La seda se ha estudiado históricamente para su uso en el campo de la medicina. El ácido hialurónico (hialuronano) es un glicosaminoglicano que se distribuye por todo el cuerpo y se encuentra en los tejidos conectivos y epiteliales. Debido a su biocompatibilidad y beneficios estructurales, es un componente útil en dispositivos médicos y materiales implantables.
Los tejidos blandos del cuerpo humano deben sus estructuras en parte a una matriz extracelular que incluye colágeno, elastina y glicosaminoglicano. Pueden aparecer defectos de los tejidos blandos, que distorsionan, deforman o alteran de otro modo las estructuras de los tejidos blandos. Tal estructura se puede restaurar mediante el uso de rellenos de tejido que se pueden depositar en el lugar del defecto para corregir el defecto. Por ejemplo, se pueden colocar rellenos de tejido en el sitio de una arruga facial para corregir la arruga.
Sin embargo, se necesitan nuevos rellenos de tejido en el campo que corrijan una serie de defectos de tejido al mismo tiempo que proporcionen propiedades ajustables, lo que puede permitir adaptar el relleno de tejido al defecto de tejido específico.
El documento US2011189292 divulga un relleno de tejido que comprende fibroína de seda, hialuronano reticulado y lidocaína.
El documento WO2018039496 divulga rellenos de tejido que comprenden ácido hialurónico reticulado con fibroína de seda y un agente anestésico.
El documento CN102836465 divulga composiciones de gel de relleno de tejido, preparadas a partir de fibroína de seda, hialuronato y restos de reticulación.
Sumario de la invención
La invención se define por las reivindicaciones, por las que la reivindicación 1 se dirige a un relleno de tejido biocompatible, que comprende proteína de seda o fragmentos de proteína de seda (FPS), ácido hialurónico (AH) y un agente anestésico, en la que una porción de AH, una porción del FPS, o ambos, está modificado o reticulado por uno o más restos ligadores que comprenden uno o más de una cadena de alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario, en la que los fragmentos de proteína de seda tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, en la que el AH o FPS modificado o reticulado comprende un resto ligador o de reticulación que comprende una cadena de polietilenglicol (PEG), en la que la modificación o reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de agente de reticulación que es un polietilenglicoldiglicidiléter.
Cualquier tema en cuestión que quede fuera del alcance de las reivindicaciones se proporciona únicamente con fines informativos. En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que comprende: un glicosaminoglicano seleccionado del grupo que consiste en ácido hialurónico (AH), carboximetilcelulosa (CMC), almidón, alginato, 4-sulfato de condroitina, 6-sulfato de condroitina, goma xantana, quitosano, pectina, agar, carragenina y goma guar; y un agente activo seleccionado del grupo que consiste en un inhibidor enzimático, un agente anestésico, una neurotoxina medicinal, un antioxidante, un agente antiinfeccioso, un agente antiinflamatorio, un agente bloqueador de luz ultravioleta (UV), un colorante, una hormona, un inmunosupresor y un agente antiinflamatorio; en el que una parte del glicosaminoglicano se reticula mediante restos de reticulación que comprenden uno o más de una cadena alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario; y en el que la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador. El glicosaminoglicano es el ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, la cantidad en % p/p de AH reticulado en relación con la cantidad total de AH es de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación del AH reticulado está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación del AH reticulado es de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 %, o aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación del AH reticulado está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 15 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación del AH reticulado es uno o más de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 % y aproximadamente 15 %.
En algunas realizaciones, el AH reticulado comprende un resto de reticulación que comprende una cadena de polietilenglicol (PEG). En algunas realizaciones, el agente de reticulación y/o el precursor de reticulación comprende un grupo epoxi. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador seleccionado del grupo que consiste en un ligador poliepoxi, un ligador diepoxi, un poliepoxi-PEG, un diepoxi-PEG, un poliglicidil-PEG, un diglicidil-PEG, un poliacrilato-PEG, un diacrilato-PEG, 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), luz ultravioleta, glutaraldehído, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), biscarbodiimida (BCDI), pentaeritritoltetraglicidiléter (PETGE), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, una carbodiimida y cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un compuesto epoxi polifuncional seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), etilenglicoldiglicidiléter (EGDGE), 1,6-hexanodioldiglicidiléter, polietilenglicoldiglicidiléter, polipropilenglicoldiglicidiléter, politetrametilenglicoldiglicidiléter, neopentilglicoldiglicidil éter, poliglicerolpoliglicidiléter, diglicerolpoliglicidiléter, glicerolpoliglicidiléter, trimetilolpropanopoliglicidiléter, pentaeritritolpoliglicidiléter y sorbitolpoliglicidiléter. La reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación que es un polietilenglicoldiglicidiléter (PEGDGE). En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene un Mn medio de aproximadamente 500, aproximadamente 1000, aproximadamente 2000 o aproximadamente 6000. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene de 2 a 25 grupos etilenglicol. En algunas realizaciones de la divulgación, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación seleccionado del grupo que consiste en un ligador de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fibroína de seda de diepoxi, un ligador de fragmento de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fragmento de fibroína de seda de diepoxi, un ligador de fibroína de seda de poliglicidilo, un ligador de fibroína de seda de diglicidilo, un ligador de fragmento de fibroína de seda de poliglicidilo y un ligador de fragmento de fibroína de seda de diglicidilo.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido que comprende además un compuesto orgánico y/o un compuesto inorgánico. En algunas realizaciones, el compuesto inorgánico comprende hidroxiapatita de calcio. En algunas realizaciones, la hidroxiapatita de calcio se formula como partículas que tienen un diámetro entre aproximadamente 1 gm y aproximadamente 100 gm, entre aproximadamente 1 gm y aproximadamente 10 gm, entre aproximadamente 2 gm y aproximadamente 12 gm, entre aproximadamente 3 gm y aproximadamente 10 gm, entre aproximadamente 4 gm y aproximadamente 15 gm, entre aproximadamente 8 gm y aproximadamente 12 gm, entre aproximadamente 5 gm y aproximadamente 10 gm, entre aproximadamente 6 gm y aproximadamente 12 gm, entre aproximadamente 7 gm y aproximadamente 20 gm, entre aproximadamente 9 gm y aproximadamente 18 gm, o entre aproximadamente 10 gm y aproximadamente 25 gm. En algunas realizaciones, la concentración de hidroxiapatita de calcio está entre aproximadamente 0,001 % y aproximadamente 5 %. En algunas realizaciones, la concentración de hidroxiapatita de calcio es de aproximadamente 0,001 %, aproximadamente 0,002 %, aproximadamente 0,003 %, aproximadamente 0,004 %, aproximadamente 0,005 %, aproximadamente 0,006 %, aproximadamente 0,00 aproximadamente 0,008 %, aproximadamente 0,009 %, aproximadamente 0,01 %. aproximadamente 0,011 %, aproximadamente 0,012 %, aproximadamente 0,013 %, aproximadamente 0,014 %, aproximadamente 0,01 aproximadamente 0,016 %, aproximadamente 0,017 %, aproximadamente 0,018 %, aproximadamente 0,019 % o aproximadamente 0,02 %. En algunas realizaciones, la concentración de hidroxiapatita de calcio es de aproximadamente 0,05 %, aproximadamente 0,1 %, aproximadamente 0,15 %, aproximadamente 0,2 %, aproximadamente 0,25 %, aproximadamente 0,3 %, aproximadamente 0,35 %, aproximadamente 0,4 %, aproximadamente 0,45 %, aproximadamente 0,5 %, aproximadamente 0,55 %, aproximadamente 0,6 %, aproximadamente 0,65 %, aproximadamente 0,7 %, aproximadamente 0,75 %, aproximadamente 0,8 %, aproximadamente 0,85 %, aproximadamente 0,9 %, aproximadamente 0,95 %, aproximadamente 1 %, aproximadamente 1,05 %, aproximadamente 1,1 %, aproximadamente 1,15 %, aproximadamente 1,2 %, aproximadamente 1,25 %, aproximadamente 1,3 %, aproximadamente 1,35 %, aproximadamente 1,4 %, aproximadamente 1,45 %, aproximadamente 1,5 %, aproximadamente 1,55 %, aproximadamente 1,6 %, aproximadamente 1,65 %, aproximadamente 1,7 %, aproximadamente 1,75 %, aproximadamente 1,8 %, aproximadamente 1,85 %, aproximadamente 1,9 %, aproximadamente 1,95 % o aproximadamente 2 %. En algunas realizaciones, el compuesto orgánico comprende un aminoácido seleccionado del grupo que consiste en glicina, L-prolina, alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, ácido glutámico, glutamina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptófano, tirosina y valina.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido que comprende AH, en el que el AH se obtiene de la bacteria Streptococcus o de la bacteria Bacillus subtilis.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que comprende: un glicosaminoglicano seleccionado del grupo que consiste en ácido hialurónico (AH), carboximetilcelulosa (CMC), almidón, alginato, 4-sulfato de condroitina, 6-sulfato de condroitina, goma xantana, quitosano, pectina, agar, carragenina y goma guar; y un agente anestésico; en el que una parte del glicosaminoglicano se reticula mediante restos de reticulación que comprenden uno o más de una cadena alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario; y en el que la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador. En algunas realizaciones, el agente anestésico es lidocaína. En algunas realizaciones, la concentración de agente anestésico en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,001 % a aproximadamente 5 %. En algunas realizaciones, la concentración de lidocaína en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,3 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que comprende: un glicosaminoglicano seleccionado del grupo que consiste en ácido hialurónico (AH), carboximetilcelulosa (CMC), almidón, alginato, 4-sulfato de condroitina, 6-sulfato de condroitina, goma xantana, quitosano, pectina, agar, carragenina y goma guar; y un agente anestésico; en el que una parte del glicosaminoglicano se reticula mediante restos de reticulación que comprenden uno o más de una cadena alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario; y en el que la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador; en el que el relleno de tejido es un gel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es un hidrogel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, la concentración total de AH en el relleno de tejido es de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración total de AH en el relleno de tejido es de aproximadamente 15 mg/ml, aproximadamente 16 mg/ml, 17 mg/ml, aproximadamente 18 mg/ml, aproximadamente 19 mg/ml, aproximadamente 20 mg/ml, aproximadamente 21 mg/ml, aproximadamente 22 mg/ml, aproximadamente 23 mg/ml, aproximadamente 24 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml, aproximadamente 26 mg/ml, aproximadamente 27 mg/ml, aproximadamente 28 mg/ml, aproximadamente 29 mg /ml, o aproximadamente 30 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de AH reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de AH reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 15 mg/ml, aproximadamente 16 mg/ml, aproximadamente 17 mg/ml, aproximadamente 18 mg/ml, aproximadamente 19 mg/ml, aproximadamente 20 mg/ml, aproximadamente 21 mg/ml, aproximadamente 22 mg/ml, aproximadamente 23 mg/ml, aproximadamente 24 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml, aproximadamente 26 mg/ml, aproximadamente 27 mg/ml, aproximadamente 28 mg/ml, aproximadamente 29 mg/ml, o aproximadamente 30 mg/ml.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que comprende: un glicosaminoglicano seleccionado del grupo que consiste en ácido hialurónico (AH), carboximetilcelulosa (CMC), almidón, alginato, 4-sulfato de condroitina, 6-sulfato de condroitina, goma xantana, quitosano, pectina, agar, carragenina y goma guar; y un agente anestésico; en el que una parte del glicosaminoglicano se reticula mediante restos de reticulación que comprenden uno o más de una cadena alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario; y en el que la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador; comprendiendo el relleno de tejido proteína de seda o fragmentos de proteína de seda (FPS). En algunas realizaciones, la proteína de seda es fibroína de seda. En algunas realizaciones, la proteína de seda es fibroína de seda sustancialmente desprovista de sericina. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular bajo. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular medio. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular alto. En algunas realizaciones, los fragmentos de proteína de seda (FPS) tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0. En algunas realizaciones, los FPS tienen un grado de cristalinidad de hasta el 60 %. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, la cantidad en % p/p de FPS reticulados con respecto a la cantidad total de FPS es aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación de los FPS reticulados está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación de los FPS reticulados es de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación de los FPS reticulados está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 15 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación de los FPS reticulados es uno o más de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 % y aproximadamente 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que comprende: un glicosaminoglicano seleccionado del grupo que consiste en ácido hialurónico (AH), carboximetilcelulosa (CMC), almidón, alginato, 4-sulfato de condroitina, 6-sulfato de condroitina, goma xantana, quitosano, pectina, agar, carragenina y goma guar; y un agente anestésico; en el que una parte del glicosaminoglicano se reticula mediante restos de reticulación que comprenden uno o más de una cadena alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario; y en el que la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador; comprendiendo el relleno de tejido proteína de seda o fragmentos de proteína de seda (FPS), en el que una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, el FPS reticulado comprende un resto de reticulación que comprende una cadena alcano o alquilo y/o un grupo éter. En algunas realizaciones, el FPS reticulado comprende un resto de reticulación que comprende una cadena de polietilenglicol (PEG). En algunas realizaciones, el FPS reticulado comprende un resto de reticulación que comprende un alcohol secundario. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador. En algunas realizaciones, el agente de reticulación y/o el precursor de reticulación comprende un grupo epoxi. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador seleccionado del grupo que consiste en un ligador poliepoxi, un ligador diepoxi, un poliepoxi-PEG, un diepoxi-PEG, un poliglicidil-PEG, un diglicidil-PEG, un poliacrilato-PEG, un diacrilato-PEG, 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), luz ultravioleta, glutaraldehído, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), biscarbodiimida (BCDI), pentaeritritoltetraglicidiléter (PETGE), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, una carbodiimida y cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un compuesto epoxi polifuncional seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), etilenglicoldiglicidiléter (EGDGE), 1,6-hexanodioldiglicidiléter, polietilenglicoldiglicidiléter, polipropilenglicoldiglicidiléter, politetrametilenglicoldiglicidiléter, neopentilglicoldiglicidiléter, poliglicerolpoliglicidiléter, diglicerolpoliglicidiléter, glicerolpoliglicidiléter, trimetilolpropanopoliglicidiléter, pentaeritritolpoliglicidiléter y sorbitolpoliglicidiléter. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación seleccionado del grupo que consiste en polietilenglicoldiglicidiléter, diepoxi-PEG, PEG-diglicidiléter, polioxietilenbis-glicidiléter, PEGDE y PEGDGE. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene un Mn medio de aproximadamente 500, aproximadamente 1000, aproximadamente 2000 o aproximadamente 6000. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene de 2 a 25 grupos de etilenglicol. En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación seleccionado del grupo que consiste en un ligador de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fibroína de seda de diepoxi, un ligador de fragmento de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fragmentos de fibroína de seda, un ligador de fibroína de seda de poliglicidilo, un ligador de fragmentos de fibroína de seda de diglicidilo, un ligador de fragmentos de fibroína de seda de poliglicidilo y un ligador de fragmentos de fibroína de seda de diglicidilo. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con AH. En algunas realizaciones, una parte del FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es un gel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es un hidrogel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, la concentración total de FPS en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml a aproximadamente 15 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración total de FPS en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml, aproximadamente 0,5 mg/ml, aproximadamente 1 mg/ml, aproximadamente 1,5 mg/ml, aproximadamente 2 mg/ml, aproximadamente 2,5 mg/ml, aproximadamente 3 mg/ml, aproximadamente 3,5 mg/ml, aproximadamente 4 mg/ml, aproximadamente 4,5 mg/ml, aproximadamente 5 mg/ml, aproximadamente 5,5 mg/ml, aproximadamente 6 mg/ml, aproximadamente 6,5 mg/ml, aproximadamente 7 mg/ml, aproximadamente 7,5 mg/ml, aproximadamente 8 mg/ml, aproximadamente 8,5 mg/ml, aproximadamente 9 mg/ml, aproximadamente 9,5 mg/ml, aproximadamente 10 mg/ml, aproximadamente 10,5 mg/ml, aproximadamente 11 mg/ ml, aproximadamente 11,5 mg/ml, aproximadamente 12 mg/ml, aproximadamente 12,5 mg/ml, aproximadamente 13 mg/ml, aproximadamente 13,5 mg/ml, aproximadamente 14 mg/ml, aproximadamente 14,5 mg/ml, o aproximadamente 15 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de FPS reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml a aproximadamente 15 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de FPS reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml, aproximadamente 0,5 mg/ml, aproximadamente 1 mg/ml, aproximadamente 1,5 mg/ml, aproximadamente 2 mg/ml, aproximadamente 2,5 mg/ml, aproximadamente 3 mg/ml, aproximadamente 3,5 mg/ml, aproximadamente 4 mg/ml, aproximadamente 4,5 mg/ml, aproximadamente 5 mg/ml, aproximadamente 5,5 mg/ml, aproximadamente 6 mg/ml, aproximadamente 6,5 mg/ml, aproximadamente 7 mg/ml, aproximadamente 7,5 mg/ml, aproximadamente 8 mg/ml, aproximadamente 8,5 mg/ml, aproximadamente 9 mg/ml, aproximadamente 9,5 mg/ml, aproximadamente 10 mg/ml, aproximadamente 10,5 mg/ml, aproximadamente 11 mg /ml, aproximadamente 11,5 mg/ml, aproximadamente 12 mg/ml, aproximadamente 12,5 mg/ml, aproximadamente 13 mg/ml, aproximadamente 13,5 mg/ml, aproximadamente 14 mg/ml, aproximadamente 14,5 mg/ml, o aproximadamente 15 mg/ ml.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que comprende: un glicosaminoglicano seleccionado del grupo que consiste en ácido hialurónico (AH), carboximetilcelulosa (CMC), almidón, alginato, 4-sulfato de condroitina, 6-sulfato de condroitina, goma xantana, quitosano, pectina, agar, carragenina y goma guar; y un agente anestésico; en el que una parte del glicosaminoglicano se reticula mediante restos de reticulación que comprenden uno o más de una cadena alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario; y en el que la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador; comprendiendo opcionalmente el relleno de tejido proteína de seda o fragmentos de proteína de seda (FPS), en los que una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es un relleno dérmico. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es inyectable. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene un módulo de almacenamiento (G') de aproximadamente 25 Pa a aproximadamente 1500 Pa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene un módulo de almacenamiento (G') de aproximadamente 25 Pa, aproximadamente 26 Pa, aproximadamente 27 Pa, aproximadamente 28 Pa, aproximadamente 29 Pa, aproximadamente 30 Pa, aproximadamente 31 Pa, aproximadamente 32 Pa, aproximadamente 33 Pa, aproximadamente 34 Pa, aproximadamente 35 Pa, aproximadamente 36 Pa, aproximadamente 37 Pa, aproximadamente 38 Pa, aproximadamente 39 Pa, aproximadamente 40 Pa, aproximadamente 41 Pa, aproximadamente 42 Pa, aproximadamente 43 Pa, aproximadamente 44 Pa, aproximadamente 45 Pa, aproximadamente 46 Pa, aproximadamente 47 Pa, aproximadamente 48 Pa, aproximadamente 49 Pa, aproximadamente 50 Pa, aproximadamente 51 Pa, aproximadamente 52 Pa, aproximadamente 53 Pa, aproximadamente 54 Pa, aproximadamente 55 Pa, aproximadamente 56 Pa, aproximadamente 57 Pa, aproximadamente 58 Pa, aproximadamente 59 Pa, aproximadamente 60 Pa, aproximadamente 61 Pa, aproximadamente 62 Pa, aproximadamente 63 Pa, aproximadamente 64 Pa, aproximadamente 65 Pa, aproximadamente 66 Pa, aproximadamente 67 Pa, aproximadamente 68 Pa, aproximadamente 69 Pa, aproximadamente 70 Pa, aproximadamente 71 Pa, aproximadamente 72 Pa, aproximadamente 73 Pa, aproximadamente 74 Pa, aproximadamente 75 Pa, aproximadamente 76 Pa, aproximadamente 77 Pa, aproximadamente 78 Pa, aproximadamente 79 Pa, aproximadamente 80 Pa, aproximadamente 81 Pa, aproximadamente 82 Pa, aproximadamente 83 Pa, aproximadamente 84 Pa, aproximadamente 85 Pa, aproximadamente 86 Pa, aproximadamente 87 Pa, aproximadamente 88 Pa, aproximadamente 89 Pa, aproximadamente 90 Pa, aproximadamente 91 Pa, aproximadamente 92 Pa, aproximadamente 93 Pa, aproximadamente 94 Pa, aproximadamente 95 Pa, aproximadamente 96 Pa, aproximadamente 97 Pa, aproximadamente 98 Pa, aproximadamente 99 Pa, aproximadamente 100 Pa, aproximadamente 101 Pa, aproximadamente 102 Pa, aproximadamente 103 Pa, aproximadamente 104 Pa, aproximadamente 105 Pa, aproximadamente 106 Pa, aproximadamente 107 Pa, aproximadamente 108 Pa, aproximadamente 109 Pa, aproximadamente 110 Pa, aproximadamente 111 Pa, aproximadamente 112 Pa, aproximadamente 113 Pa, aproximadamente 114 Pa, aproximadamente 115 Pa, aproximadamente 116 Pa, aproximadamente 117 Pa, aproximadamente 118 Pa, aproximadamente 119 Pa, aproximadamente 120 Pa, aproximadamente 121 Pa, aproximadamente 122 Pa, aproximadamente 123 Pa, aproximadamente 124 Pa o aproximadamente 125 Pa En algunas realizaciones, en la presente memoria G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 1 Hz. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 5 Hz. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene una viscosidad compleja de aproximadamente 1 Pas a aproximadamente 10 Pas. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene una viscosidad compleja de aproximadamente 1 Pa s, aproximadamente 1,5 Pa s, aproximadamente 2 Pa s, aproximadamente 2,5 Pa s, aproximadamente 3 Pa s, aproximadamente 3,5 Pa s, aproximadamente 4 Pa s, aproximadamente 4,5 Pa s, aproximadamente 5 Pa s, aproximadamente 5,5 Pa s, aproximadamente 6 Pa s, aproximadamente 6,5 Pa s, aproximadamente 7 Pa s, aproximadamente 7,5 Pa s, aproximadamente 8 Pa s s, aproximadamente 8,5 Pas, aproximadamente 9 Pas, aproximadamente 9,5 Pas, o aproximadamente 10 Pas. En algunas realizaciones, la viscosidad compleja se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, la viscosidad compleja se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 1 Hz. En algunas realizaciones, la viscosidad compleja se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 5 Hz.
En una realización, la divulgación se refiere a un método para tratar una afección en un sujeto que lo necesita, y/o a un método de tratamiento cosmético en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un relleno de tejido biocompatible que comprende: un glicosaminoglicano seleccionado del grupo que consiste en ácido hialurónico (AH), carboximetilcelulosa (CMC), almidón, alginato, 4-sulfato de condroitina, 6-sulfato de condroitina, goma xantana, quitosano, pectina, agar, carragenina y goma guar; y un agente anestésico; en el que una parte del glicosaminoglicano se reticula mediante restos de reticulación que comprenden uno o más de una cadena alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario; y en el que la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador; comprendiendo opcionalmente el relleno de tejido proteína de seda o fragmentos de proteína de seda (FPS), en los que una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, la afección es una afección de la piel. En algunas realizaciones, la afección de la piel se selecciona del grupo que consiste en deshidratación de la piel, falta de elasticidad de la piel, aspereza de la piel, falta de tersura en la piel, una línea atrófica en la piel, una estría en la piel, palidez en la piel, una depresión dérmica, una mejilla hundida, un labio fino, un defecto retroorbitario, un pliegue facial y una arruga. En algunas realizaciones, el relleno de tejido se administra en una región dérmica del sujeto. En algunas realizaciones, el método es un aumento, una reconstrucción, el tratamiento de una enfermedad, el tratamiento de un trastorno, la corrección de un defecto o imperfección de una parte, región o área del cuerpo. En algunas realizaciones, el método es un aumento facial, una reconstrucción facial, el tratamiento de una enfermedad facial, el tratamiento de un trastorno facial, el tratamiento de un defecto facial o el tratamiento de una imperfección facial. En algunas realizaciones, el relleno de tejido resiste la biodegradación, la bioerosión, la bioabsorción y/o la biorresorción durante al menos aproximadamente 3 días, aproximadamente 7 días, aproximadamente 14 días, aproximadamente 21 días, aproximadamente 28 días, aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 meses, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 4 meses, aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses. En algunas realizaciones, la administración del relleno de tejido al sujeto da como resultado una respuesta inflamatoria reducida en comparación con la respuesta inflamatoria inducida por un relleno de tejido de control que comprende un polisacárido y lidocaína, en el que el relleno de tejido de control no incluye fragmentos de proteína de seda (FPS). En algunas realizaciones, la administración del relleno de tejido al sujeto da como resultado una mayor producción de colágeno en comparación con la producción de colágeno inducida por un relleno de tejido de control que comprende un polisacárido y lidocaína, en el que el relleno de tejido de control no incluye fragmentos de proteína de seda (FPS).
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En una realización, la divulgación incluye rellenos de tejido que pueden prepararse a partir de seda y ácido hialurónico.
En algunas realizaciones, la invención se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) con un peso molecular medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa. En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) con un peso molecular medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular medio que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular medio que oscila desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular medio que oscila desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular medio que oscila desde aproximadamente 80 kDa hasta aproximadamente 150 kDa.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que están reticulados con FPS hasta aproximadamente un 0 % a un 100 %. En algunas realizaciones, el FPS se reticuló con FPS usando agentes de reticulación tales como BDDE, o uno de los otros agentes de reticulación descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de hasta aproximadamente 100 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y ácido hialurónico (AH), en el que hasta aproximadamente 0 % al 100 % de FPS están reticulados con FPS, y los FPS se reticularon con FPS usando un agente de reticulación tal como BDDE, o uno de los otros agentes de reticulación descritos en el presente documento, y el grado de reticulación de FPS es de hasta aproximadamente 100 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y ácido hialurónico (AH), en el que hasta el 100 % del AH está reticulado con AH usando un agente de reticulación tal como BDDE, o uno de los otros agentes de reticulación descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, hasta aproximadamente 100 % de los FPS se reticulan con FPS, en los que los FPS se reticularon con FPS usando un agente de reticulación tal como BDDE, o uno de los otros agentes de reticulación descritos en el presente documento y el grado de reticulación de FPS es de hasta aproximadamente 100 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y ácido hialurónico (AH), en el que del 0 % al 100 % de AH está no reticulado. En algunas realizaciones, hasta aproximadamente 100 % de los FPS están reticulados, en los que los FPS se reticularon usando un agente de reticulación tal como BDDE, o uno de los otros agentes de reticulación descritos en el presente documento, y el grado de reticulación de FPS es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, todo el AH está no reticulado.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y ácido hialurónico (AH), en el que del 0 % al 100 % de FPS se reticula con AH. En algunas realizaciones, el FPS y el AH se reticularon usando un agente de reticulación tal como BDDE o uno de los agentes de reticulación descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, el grado de reticulación de FPS-AH es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, hasta el 100 % de AH se reticula con AH. En algunas realizaciones, el AH se reticuló con AH usando un agente de reticulación tal como BDDE, o uno de los agentes de reticulación descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, al menos el 0,1 % de AH está no reticulado. En algunas realizaciones, todo el AH está no reticulado.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y ácido hialurónico (AH), en el que al menos el 0,1 % de AH está no reticulado. En algunas realizaciones, hasta aproximadamente 100 % de los FPS están reticulados, en los que los FPS se reticularon usando un agente de reticulación tal como BDDE, o uno de los otros agentes de reticulación descritos en el presente documento, y el grado de reticulación de FPS es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, todo el AH está no reticulado.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y ácido hialurónico (AH), en el que al menos el 0,1 % del FPS están reticulados con AH. En algunas realizaciones, el FPS y el AH se reticularon usando un agente de reticulación tal como BDDE o uno de los agentes de reticulación descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, el grado de reticulación de FPS-AH es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, hasta el 100 % de AH se reticula con AH. En algunas realizaciones, el AH se reticuló con AH usando un agente de reticulación tal como BDDE, o uno de los agentes de reticulación descritos en el presente documento. En algunas realizaciones, al menos el 0,1 % de AH está no reticulado. En algunas realizaciones, todo el AH está no reticulado.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, en el que los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido de gel biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido de hidrogel biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, un polisacárido y agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, en el que los FPS tienen un grado de cristalinidad de aproximadamente 0 % a aproximadamente 60 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, y además incluye un agente activo. En algunas realizaciones, el agente activo puede ser un inhibidor enzimático, un agente anestésico, una neurotoxina medicinal, un antioxidante, un agente antiinfeccioso, vasodilatadores, un agente reflectante, un agente antiinflamatorio, un agente bloqueador de luz ultravioleta (UV), un colorante, una hormona, un inmunosupresor o un agente antiinflamatorio. En una realización, el agente anestésico es lidocaína.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible inyectable que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido. En algunas realizaciones, G' se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 Hz. En una realización, G' se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 1 Hz.
En una realización, la divulgación se refiere a un método para elaborar un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, incluyendo el método proporcionar una solución de FPS y añadir a la solución un potenciador de la gelificación, que puede ser cualquier especie donante de protones.
En una realización, la divulgación se refiere a un método para elaborar un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, incluyendo el método proporcionar una solución de FPS y someter la solución a excitación mecánica.
En una realización, la divulgación se refiere a un método para tratar una afección en un sujeto que lo necesita, incluyendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido. En algunas realizaciones, la afección es una afección de la piel. En algunas realizaciones, la afección de la piel puede ser deshidratación de la piel, falta de elasticidad de la piel, aspereza de la piel, falta de tersura en la piel, una línea atrófica en la piel, una estría en la piel, palidez en la piel, depresión dérmica, una mejilla hundida, una sien hundida, un labio fino, un defecto retroorbitario, un pliegue facial o una arruga.
En una realización, la divulgación se refiere a un método de tratamiento cosmético en un sujeto que lo necesita, incluyendo el método administrar al sujeto una cantidad efectiva de un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido.
En algunas realizaciones, los métodos de la divulgación incluyen la administración de un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, en una región dérmica de un sujeto.
En una realización, un método de la divulgación que incluye la administración de un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, puede ser un aumento, una reconstrucción, tratar una enfermedad, tratar un trastorno, corregir un defecto o imperfección de una parte, región o área del cuerpo.
En una realización, un método de la divulgación que incluye la administración de un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, puede ser un aumento facial, una reconstrucción facial, tratar una enfermedad facial, tratar un trastorno facial, tratar un defecto facial o tratar una imperfección facial.
En una realización, un relleno de tejido biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un polisacárido, administrado según un método de la divulgación, resiste la biodegradación, la bioabsorción y/o la biorresorción durante al menos aproximadamente 3 días después de la administración.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos de reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos de reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua.
En algunas realizaciones, la cantidad en % p/p de FPS reticulado en relación con la cantidad total de FPS es de hasta aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %.
En algunas realizaciones, el grado de reticulación de FPS es de hasta aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 %, o aproximadamente 100 %.
En algunas realizaciones, la cantidad en % p/p de AH reticulado en relación con la cantidad total de AH es de hasta aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 8 3 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %.
En algunas realizaciones, el grado de reticulación de AH es de hasta aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 %, o aproximadamente 100 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador. En algunas realizaciones, el agente de reticulación y/o el precursor de reticulación comprenden un grupo epoxi. En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador. En algunas realizaciones, el agente de reticulación y/o el precursor de reticulación comprenden un grupo epoxi. En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador seleccionado del grupo que consiste en 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), luz ultravioleta, glutaraldehído, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), biscarbodiimida (BCDI), pentaeritritoltetraglicidiléter (PETGE), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, una carbodiimida y cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador seleccionado del grupo que consiste en 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), luz ultravioleta, glutaraldehído, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), biscarbodiimida (BCDI), pentaeritritoltetraglicidiléter (PETGE), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, una carbodiimida y cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina.
En una realización, la divulgación se refiere a un gel de relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, el gel comprende además agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un gel de relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la porción de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, el gel comprende además agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un hidrogel de relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, el hidrogel comprende además agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un hidrogel de relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, el hidrogel comprende además agua.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS tienen un grado de cristalinidad de hasta aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, o más de 60 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS tienen un grado de cristalinidad de hasta aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, o más de 60 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además un agente activo. En algunas realizaciones, el agente activo se selecciona del grupo que consiste en un inhibidor enzimático, un agente anestésico, una neurotoxina medicinal, un antioxidante, un agente antiinfeccioso, un agente antiinflamatorio, un agente bloqueador de luz ultravioleta (UV), un colorante, una hormona, un inmunosupresor y un agente antiinflamatorio. En algunas realizaciones, el agente anestésico es lidocaína.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además un agente activo. En algunas realizaciones, el agente activo se selecciona del grupo que consiste en un inhibidor enzimático, un agente anestésico, una neurotoxina medicinal, un antioxidante, un agente antiinfeccioso, un agente antiinflamatorio, un agente bloqueador de luz ultravioleta (UV), un colorante, una hormona, un inmunosupresor y un agente antiinflamatorio. En algunas realizaciones, el agente anestésico es lidocaína.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido inyectable biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH).
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido inyectable biocompatible, p. ej. un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación automática. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH).
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que tiene un módulo de almacenamiento (G) de aproximadamente 50 Pa a aproximadamente 1500 Pa, p. ej., un relleno dérmico que tiene un módulo de almacenamiento (G') de aproximadamente 50 Pa a aproximadamente 1500 Pa, incluyendo el relleno fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo los FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, G' se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 1 Hz.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible que tiene un módulo de almacenamiento (G) de aproximadamente 50 Pa a aproximadamente 1500 Pa, p. ej., un relleno dérmico que tiene un módulo de almacenamiento (G) de aproximadamente 50 Pa a aproximadamente 1500 Pa, incluyendo el relleno fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo los FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, la reticulación incluye la reticulación de enlaces químicos. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una reticulación de longitud cero. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 1 Hz.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método para elaborar un relleno de tejido biocompatible, p. ej., un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, incluyendo el método proporcionar un composición que comprende FPS y un polisacárido, y añadir a la solución un agente de reticulación, un precursor de reticulación, un agente activador o un potenciador de la gelificación, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos de reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método para elaborar un relleno de tejido biocompatible, p. ej., un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, incluyendo el método proporcionar un composición que comprende FPS y un polisacárido, y añadir a la solución un agente de reticulación, un precursor de reticulación, un agente activador o un potenciador de la gelificación, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos de reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método para tratar una afección en un sujeto que lo necesita, p. ej., una afección de la piel, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un relleno de tejido biocompatible, p. ej., un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos de reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, la afección de la piel se selecciona del grupo que consiste en deshidratación de la piel, falta de elasticidad de la piel, aspereza de la piel, falta de tersura en la piel, una línea atrófica en la piel, una estría en la piel, palidez en la piel, una depresión dérmica, una mejilla hundida, un labio fino, un defecto retroorbitario, un pliegue facial y una arruga. En algunas realizaciones, el relleno de tejido se administra en una región dérmica del sujeto. En algunas realizaciones, el método es un aumento, una reconstrucción, el tratamiento de una enfermedad, el tratamiento de un trastorno, la corrección de un defecto o imperfección de una parte, región o área del cuerpo. En algunas realizaciones, el método es un aumento facial, una reconstrucción facial, el tratamiento de una enfermedad facial, el tratamiento de un trastorno facial, el tratamiento de un defecto facial o el tratamiento de una imperfección facial. En algunas realizaciones, el relleno de tejido resiste la biodegradación, la bioerosión, la bioabsorción y/o la biorresorción durante al menos aproximadamente 3 días, aproximadamente 7 días, aproximadamente 14 días, aproximadamente 21 días, aproximadamente 28 días, aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 meses, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 4 meses, aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método para tratar una afección en un sujeto que lo necesita, p. ej., una afección de la piel, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un relleno de tejido biocompatible, p. ej., un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se retícula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se retícula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, la afección de la piel se selecciona del grupo que consiste en deshidratación de la piel, falta de elasticidad de la piel, aspereza de la piel, falta de tersura en la piel, una línea atrófica en la piel, una estría en la piel, palidez en la piel, una depresión dérmica, una mejilla hundida, un labio fino, un defecto retroorbitario, un pliegue facial y una arruga. En algunas realizaciones, el relleno de tejido se administra en una región dérmica del sujeto. En algunas realizaciones, el método es un aumento, una reconstrucción, el tratamiento de una enfermedad, el tratamiento de un trastorno, la corrección de un defecto o imperfección de una parte, región o área del cuerpo. En algunas realizaciones, el método es un aumento facial, una reconstrucción facial, el tratamiento de una enfermedad facial, el tratamiento de un trastorno facial, el tratamiento de un defecto facial o el tratamiento de una imperfección facial. En algunas realizaciones, el relleno de tejido resiste la biodegradación, la bioerosión, la bioabsorción y/o la biorresorción durante al menos aproximadamente 3 días, aproximadamente 7 días, aproximadamente 14 días, aproximadamente 21 días, aproximadamente 28 días, aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 meses, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 4 meses, aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método de tratamiento cosmético en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad efectiva de un relleno de tejido biocompatible, p. ej., un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos de reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, el relleno de tejido se administra en una región dérmica del sujeto. En algunas realizaciones, el método es un aumento, una reconstrucción, el tratamiento de una enfermedad, el tratamiento de un trastorno, la corrección de un defecto o imperfección de una parte, región o área del cuerpo. En algunas realizaciones, el método es un aumento facial, una reconstrucción facial, el tratamiento de una enfermedad facial, el tratamiento de un trastorno facial, el tratamiento de un defecto facial o el tratamiento de una imperfección facial. En algunas realizaciones, el relleno de tejido resiste la biodegradación, la bioerosión, la bioabsorción y/o la biorresorción durante al menos aproximadamente 3 días, aproximadamente 7 días, aproximadamente 14 días, aproximadamente 21 días, aproximadamente 28 días, aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 meses, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 4 meses, aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método de tratamiento cosmético en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto una cantidad efectiva de un relleno de tejido biocompatible, p. ej., un relleno dérmico, que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, y un polisacárido, teniendo el FPS un peso molecular bajo, un peso molecular medio y/o un peso molecular alto. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, una parte de los FPS están reticulados. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, una parte del polisacárido se reticula con el polisacárido. En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además restos de reticulación, p. ej., restos de reticulación derivados de epoxi. En algunas realizaciones, una parte de la reticulación es una autorreticulación. En algunas realizaciones, la parte de los FPS reticulados es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, la parte de polisacárido reticulado es de hasta aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el polisacárido es ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los FPS están sustancialmente desprovistos de sericina. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, el relleno de tejido se administra en una región dérmica del sujeto. En algunas realizaciones, el método es un aumento, una reconstrucción, el tratamiento de una enfermedad, el tratamiento de un trastorno, la corrección de un defecto o imperfección de una parte, región o área del cuerpo. En algunas realizaciones, el método es un aumento facial, una reconstrucción facial, el tratamiento de una enfermedad facial, el tratamiento de un trastorno facial, el tratamiento de un defecto facial o el tratamiento de una imperfección facial. En algunas realizaciones, el relleno de tejido resiste la biodegradación, la bioerosión, la bioabsorción y/o la biorresorción durante al menos aproximadamente 3 días, aproximadamente 7 días, aproximadamente 14 días, aproximadamente 21 días, aproximadamente 28 días, aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 meses, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 4 meses, aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido biocompatible, que comprende ácido hialurónico (AH) y un agente anestésico, en el que una parte del AH está modificada por uno o más restos ligadores que comprenden uno o más de una cadena de alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario, en el que los restos ligadores están unidos al AH en un extremo del ligador. En algunas realizaciones, la modificación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador. En algunas realizaciones, el AH en el relleno de tejido tiene un grado de modificación (MoD) de aproximadamente 10,0 %, aproximadamente 10,1 %, aproximadamente 10,2 %, aproximadamente 10,3 %, aproximadamente 10,4 %, aproximadamente 10,5 %, aproximadamente 10,6 %, aproximadamente 10,7 %, aproximadamente 10,8 %, aproximadamente 10,9 %, aproximadamente 11,0 %, aproximadamente 11,1 %, aproximadamente 11,2 %, aproximadamente 11,3 %, aproximadamente 11,4 %, aproximadamente 11,5 %, aproximadamente 11,6 %, aproximadamente 11,7 %, aproximadamente 11,8 %, aproximadamente 11,9 %, aproximadamente 12,0 %, aproximadamente 12,1 %, aproximadamente 12,2 %, aproximadamente 12,3 %, aproximadamente 12,4 %, aproximadamente 12,5 %, aproximadamente 12,6 %, aproximadamente 12,7 %, aproximadamente 12,8 %, aproximadamente 12,9 %, aproximadamente 13,0 %, aproximadamente 13,1 %, aproximadamente 13,2 %, aproximadamente 13,3 %, aproximadamente 13,4 %, aproximadamente 13,5 %, aproximadamente 13,6 %, aproximadamente 13,7 %, aproximadamente 13,8 %, aproximadamente 13,9 %, aproximadamente 14,0 %, aproximadamente 14,1 %, aproximadamente 14,2 %, aproximadamente 14,3 %, aproximadamente 14,4 %, aproximadamente 14,5 %, aproximadamente 14,6 %, aproximadamente 14,7 %, aproximadamente 14,8 %, aproximadamente 14,9 %, aproximadamente 15,0 %, aproximadamente 15,1 %, aproximadamente 15,2 %, aproximadamente 15,3 %, aproximadamente 15,4 %, aproximadamente 15,5 %, aproximadamente 15,6 %, aproximadamente 15,7 %, aproximadamente 15,8 %, aproximadamente 15,9 %, aproximadamente 16,0 %, aproximadamente 16,1 %, aproximadamente 16,2 %, aproximadamente 16,3 %, aproximadamente 16,4 %, aproximadamente 16,5 %, aproximadamente 16,6 %, aproximadamente 16,7 %, aproximadamente 16,8 %, aproximadamente 16,9 %, aproximadamente 17,0 %, aproximadamente 17,1 %, aproximadamente 17,2 %, aproximadamente 17,3 %, aproximadamente 17,4 %, aproximadamente 17,5 %, aproximadamente 17,6 %, aproximadamente 17,7 %, aproximadamente 17,8 %, aproximadamente 17,9 %, aproximadamente 18,0 %, aproximadamente 18,1 %, aproximadamente 18,2 %, aproximadamente 18,3 %, aproximadamente 18,4 %, aproximadamente 18,5 %, aproximadamente 18,6 %, aproximadamente 18,7 %, aproximadamente 18,8 %, aproximadamente 18,9 %, aproximadamente 19,0 %, aproximadamente 19,1 %, aproximadamente 19,2 %, aproximadamente 19,3 %, aproximadamente 19,4 %, aproximadamente 19,5 %, aproximadamente 19,6 %, aproximadamente 19,7 %, aproximadamente 19,8 %, aproximadamente 19,9 % o aproximadamente 20,0 %. En algunas realizaciones, la cantidad en % p/p de AH modificado en relación con la cantidad total de AH en el relleno de tejido es aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %.
En algunas realizaciones, el AH modificado incluye AH reticulado, en el que el grado de reticulación del AH reticulado está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación del AH reticulado es de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 %, o aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación del AH reticulado está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 15 %.
En algunas realizaciones, el AH modificado o reticulado comprende un ligador o resto de reticulación que comprende una cadena de polietilenglicol (PEG). En algunas realizaciones, el agente de reticulación y/o el precursor de reticulación comprende un grupo epoxi. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación, un precursor de reticulación o un agente activador seleccionado del grupo que consiste en un ligador poliepoxi, un ligador diepoxi, un poliepoxi-PEG, un diepoxi- PEG, un poliglicidil-PEG, un diglicidil-PEG, un poliacrilato-PEG, un diacrilato-PEG, 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), luz ultravioleta, glutaraldehído, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), biscarbodiimida (BCDI), pentaeritritoltetraglicidiléter (PETGE), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, una carbodiimida y cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtienen usando un compuesto epoxi polifuncional seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), etilenglicoldiglicidiléter (EGDGE), 1,6-hexanodioldiglicidiléter, polietilenglicoldiglicidiléter, polipropilenglicoldiglicidiléter, politetrametilenglicoldiglicidiléter, neopentilglicoldiglicidiléter, poliglicerolpoliglicidiléter, diglicerolpoliglicidiléter, glicerolpoliglicidiléter, trimetilolpropanopoliglicidiléter, pentaeritritolpoliglicidiléter y sorbitolpoliglicidiléter. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación seleccionado del grupo que consiste en polietilenglicoldiglicidiléter, diepoxi-PEG, PEG-diglicidiléter, polioxietilenbis-glicidiléter, PEGDE y PEGDGE. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene un Mn medio de aproximadamente 500, aproximadamente 1000, aproximadamente 2000 o aproximadamente 6000. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene de aproximadamente 2 a aproximadamente 25 grupos etilenglicol. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación seleccionado del grupo que consiste en un ligador de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fibroína de seda de diepoxi, un ligador de fragmento de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fragmento de fibroína de seda diepoxi, un ligador de fibroína de seda de poliglicidilo, un ligador de fibroína de seda de diglicidilo, un ligador de fragmento de fibroína de seda de poliglicidilo y un ligador de fragmento de fibroína de seda de diglicidilo.
En algunas realizaciones, el relleno de tejido incluye además un compuesto orgánico y/o un compuesto inorgánico. En algunas realizaciones, el compuesto inorgánico comprende hidroxiapatita de calcio. En algunas realizaciones, la hidroxiapatita de calcio se formula como partículas que tienen un diámetro entre aproximadamente 1 pm y aproximadamente 100 pm, entre aproximadamente 1 pm y aproximadamente 10 pm, entre aproximadamente 2 pm y aproximadamente 12 pm, entre aproximadamente 3 pm y aproximadamente 10 pm, entre aproximadamente 4 pm y aproximadamente 15 pm, entre aproximadamente 8 pm y aproximadamente 12 pm, entre aproximadamente 5 pm y aproximadamente 10 pm, entre aproximadamente 6 pm y aproximadamente 12 pm, entre aproximadamente 7 pm y aproximadamente 20 pm, entre aproximadamente 9 pm y aproximadamente 18 pm, o entre aproximadamente 10 pm y aproximadamente 25 pm. En algunas realizaciones, la concentración de hidroxiapatita de calcio está entre aproximadamente 0,001 % y aproximadamente 5 %. En algunas realizaciones, la concentración de hidroxiapatita de calcio es de aproximadamente 0,001 %, aproximadamente 0,002 %, aproximadamente 0,003 %, aproximadamente 0,004 %, aproximadamente 0,005 %, aproximadamente 0,006 %, aproximadamente 0,007 %, aproximadamente 0,008 %, aproximadamente 0,009 %, aproximadamente 0,01 %. aproximadamente 0,011 %, aproximadamente 0,012 %, aproximadamente 0,013 %, aproximadamente 0,014 %, aproximadamente 0,015 %, aproximadamente 0,016 %, aproximadamente 0,017 %, aproximadamente 0,018 %, aproximadamente 0,019 % o aproximadamente 0,02 %. En algunas realizaciones, la concentración de hidroxiapatita de calcio es de aproximadamente 0,05 %, aproximadamente 0,1 %, aproximadamente 0,15 %, aproximadamente 0,2 %, aproximadamente 0,25 %, aproximadamente 0,3 %, aproximadamente 0,35 %, aproximadamente 0,4 %, aproximadamente 0,45 %, aproximadamente 0,5 %, aproximadamente 0,55 %, aproximadamente 0,6 %, aproximadamente 0,65 %, aproximadamente 0,7 %, aproximadamente 0,75 %, aproximadamente 0,8 %, aproximadamente 0,85 %, aproximadamente 0,9 %, aproximadamente 0,95 %, aproximadamente 1 %, aproximadamente 1,05 %, aproximadamente 1,1 %, aproximadamente 1,15 %, aproximadamente 1,2 %, aproximadamente 1,25 %, aproximadamente 1,3 %, aproximadamente 1,35 %, aproximadamente 1,4 %, aproximadamente 1,45 %, aproximadamente 1,5 %, aproximadamente 1,55 %, aproximadamente 1,6 %, aproximadamente 1,65 %, aproximadamente 1,7 %, aproximadamente 1,75 %, aproximadamente 1,8 %, aproximadamente 1,85 %, aproximadamente 1,9 %, aproximadamente 1,95 % o aproximadamente 2 %. En algunas realizaciones, el compuesto orgánico comprende un aminoácido seleccionado del grupo que consiste en glicina, L-prolina, alanina, arginina, asparagina, ácido aspártico, cisteína, ácido glutámico, glutamina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, fenilalanina, prolina, serina, treonina, triptófano, tirosina y valina.
En algunas realizaciones, el AH se obtiene de la bacteria Streptococcus o de la bacteria Bacillus subtilis. En algunas realizaciones, el agente activo es lidocaína. En algunas realizaciones, la concentración de agente activo en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,001 % a aproximadamente 5 %. En algunas realizaciones, la concentración de lidocaína en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,3 %.
En algunas realizaciones, el relleno de tejido divulgado en el presente documento es un gel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es un hidrogel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, la concentración total de AH en el relleno de tejido es de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración total de AH en el relleno de tejido es de aproximadamente 15 mg/ml, aproximadamente 16 mg/ml, 17 mg/ml, aproximadamente 18 mg/ml, aproximadamente 19 mg/ml, aproximadamente 20 mg/ml, aproximadamente 21 mg/ml, aproximadamente 22 mg/ml, aproximadamente 23 mg/ml, aproximadamente 24 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml, aproximadamente 26 mg/ml, aproximadamente 27 mg/ml, aproximadamente 28 mg/ml, aproximadamente 29 mg /ml, o aproximadamente 30 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de AH modificado o reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 10 mg/ml a aproximadamente 50 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de AH modificado o reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 15 mg/ml, aproximadamente 16 mg/ml, aproximadamente 17 mg/ml, aproximadamente 18 mg/ml, aproximadamente 19 mg/ml, aproximadamente 20 mg /ml, aproximadamente 21 mg/ml, aproximadamente 22 mg/ml, aproximadamente 23 mg/ml, aproximadamente 24 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml, aproximadamente 26 mg/ml, aproximadamente 27 mg/ml, aproximadamente 28 mg/ml, aproximadamente 29 mg/ml o aproximadamente 30 mg/ml.
En algunas realizaciones, el relleno de tejido divulgado incluye además proteína de seda o fragmentos de proteína de seda (FPS). En algunas realizaciones, la proteína de seda es fibroína de seda. En algunas realizaciones, la proteína de seda es fibroína de seda sustancialmente desprovista de sericina. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 17 kDa y aproximadamente 39 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular bajo. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular medio. En algunas realizaciones, los FPS tienen un peso molecular alto. En algunas realizaciones, los fragmentos de proteína de seda (FPS) tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0. En algunas realizaciones, los FPS tienen un grado de cristalinidad de hasta el 60 %.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido que incluye AH y FPS, en el que una parte de los FPS se modifica o se reticula. En algunas realizaciones, la cantidad en % p/p de FPS modificados o reticulados con respecto a la cantidad total de FPS es aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de modificación o reticulación de los FPS modificados o reticulados está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de modificación o reticulación de los FPS modificados o reticulados es de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente 82 %, aproximadamente ut 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %. En algunas realizaciones, el grado de modificación o reticulación de los FPS modificados o reticulados está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 15 %. En algunas realizaciones, el grado de modificación o reticulación de los FPS modificados o reticulados es uno o más de aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 % y aproximadamente 15 %.
En algunas realizaciones, el FPS modificado o reticulado comprende un ligador o resto de reticulación que comprende una cadena de alcano o alquilo, y/o un grupo éter, en el que el ligador o resto de reticulación está unido al FPS en un extremo del ligador o resto de reticulación. En algunas realizaciones, el FPS modificado o reticulado comprende un ligador o resto de reticulación que comprende una cadena de polietilenglicol (PEG). En algunas realizaciones, el FPS modificado o reticulado comprende un ligador o resto de reticulación que comprende un alcohol secundario. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de modificación o reticulación, un precursor de modificación o reticulación, o un agente activador. En algunas realizaciones, el agente de modificación o reticulación y/o el precursor de modificación o reticulación comprende un grupo epoxi. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de modificación o reticulación, un precursor de modificación o reticulación, o un agente activador seleccionado del grupo que consiste en un ligador poliepoxi, un ligador diepoxi, un poliepoxi-PEG, un diepoxi-PEG, un poliglicidil-PEG, un diglicidil-PEG, un poliacrilato-PEG, un diacrilato-PEG, 1,4-bis(2,3-epoxipropoxi)butano, 1,4-bisglicidiloxibutano, divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), luz ultravioleta, glutaraldehído, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), biscarbodiimida (BCDI), pentaeritritoltetraglicidiléter (PETGE), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, una carbodiimida y cualquier combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtienen usando un compuesto epoxi polifuncional seleccionado del grupo que consiste en 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), etilenglicoldiglicidiléter (EGDGE), 1,6-hexanodioldiglicidiléter, polietilenglicoldiglicidiléter, polipropilenglicoldiglicidiléter, politetrametilenglicoldiglicidiléter, neopentilglicoldiglicidiléter, poliglicerolpoliglicidiléter, diglicerolpoliglicidiléter, glicerolpoliglicidiléter, trimetilolpropanopoliglicidiléter, pentaeritritolpoliglicidiléter y sorbitolpoliglicidiléter.
En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de modificación o reticulación y/o un precursor de modificación o reticulación seleccionado del grupo que consiste en polietilenglicoldiglicidiléter, diepoxi-PEG, PEG-diglicidiléter, polioxietilenbis-glicidiléter, PEGDE y PEGDGE. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene un Mn medio de aproximadamente 500, aproximadamente 1000, aproximadamente 2000 o aproximadamente 6000. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando polietilenglicoldiglicidiléter que tiene de aproximadamente 2 a aproximadamente 25 grupos etilenglicol. En algunas realizaciones, la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de modificación o reticulación y/o un precursor de modificación o reticulación seleccionado del grupo que consiste en un ligador de fibroína de seda de poliepoxi, un ligador de fibroína de seda de diepoxi, un ligador de fibroína de seda de poliepoxi un ligador de fragmentos de fibroína, un ligador de fragmentos de fibroína de seda de diepoxi, un ligador de fibroína de seda de poliglicidilo, un ligador de fibroína de seda de diglicidilo, un ligador de fragmentos de fibroína de seda de poliglicidilo y un ligador de fragmentos de fibroína de seda de diglicidilo.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido que incluye AH y FPS, en el que una parte de los FPS se reticula con AH. En algunas realizaciones, la invención se refiere a un relleno de tejido que incluye AH y FPS, en el que una parte de los FPS se reticula con FPS. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es un gel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es un hidrogel. En algunas realizaciones, el relleno de tejido comprende además agua. En algunas realizaciones, la concentración total de FPS en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml a aproximadamente 15 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración total de FPS en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml, aproximadamente 0,5 mg/ml, aproximadamente 1 mg/ml, aproximadamente 1.5 mg/ml, aproximadamente 2 mg/ml, aproximadamente 2,5 mg/ml, aproximadamente 3 mg/ml, aproximadamente 3.5 mg/ml, aproximadamente 4 mg/ml, aproximadamente 4,5 mg/ml, aproximadamente 5 mg/ml, aproximadamente 5.5 mg/ml, aproximadamente 6 mg/ml, aproximadamente 6,5 mg/ml, aproximadamente 7 mg/ml, aproximadamente 7.5 mg/ml, aproximadamente 8 mg/ml, aproximadamente 8,5 mg/ml, aproximadamente 9 mg/ml, aproximadamente 9.5 mg/ml, aproximadamente 10 mg/ml, aproximadamente 10,5 mg/ml, aproximadamente 11 mg/ml, aproximadamente 11.5 mg/ml, aproximadamente 12 mg/ml, aproximadamente 12,5 mg/ml, aproximadamente 13 mg/ml, aproximadamente 13,5 mg/ml, aproximadamente 14 mg/ml, aproximadamente 14,5 mg/ml, o aproximadamente 15 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de FPS modificado o reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml a aproximadamente 15 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de FPS modificado o reticulado en el relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 mg/ml, aproximadamente 0,5 mg/ml, aproximadamente 1 mg/ml, aproximadamente 1,5 mg/ml, aproximadamente 2 mg/ml, aproximadamente 2,5 mg /ml, aproximadamente 3 mg/ml, aproximadamente 3,5 mg/ml, aproximadamente 4 mg/ml, aproximadamente 4,5 mg/ml, aproximadamente 5 mg/ml, aproximadamente 5,5 mg/ml, aproximadamente 6 mg/ml, aproximadamente 6,5 mg/ml, aproximadamente 7 mg/ml, aproximadamente 7,5 mg/ml, aproximadamente 8 mg/ml, aproximadamente 8,5 mg/ml, aproximadamente 9 mg/ml, aproximadamente 9,5 mg/ml, aproximadamente 10 mg/ml, aproximadamente 10,5 mg/ml, aproximadamente 11 mg/ml, aproximadamente 11,5 mg/ml, aproximadamente 12 mg/ml, aproximadamente 12,5 mg/ml, aproximadamente 13 mg/ml, aproximadamente 13,5 mg/ml, aproximadamente 14 mg/ml, aproximadamente 14.5 mg/ml o aproximadamente 15 mg/ml.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un relleno de tejido que incluye AH modificado o reticulado y/o FPS modificados o reticulados, en el que el relleno de tejido es un relleno dérmico. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es biodegradable. En algunas realizaciones, el relleno de tejido es inyectable. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene un módulo de almacenamiento (G) de aproximadamente 25 Pa a aproximadamente 1500 Pa. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene un módulo de almacenamiento (G') de aproximadamente 25 Pa, aproximadamente 26 Pa, aproximadamente 27 Pa, aproximadamente 28 Pa, aproximadamente 29 Pa, aproximadamente 30 Pa, aproximadamente 31 Pa, aproximadamente 32 Pa, aproximadamente 33 Pa, aproximadamente 34 Pa, aproximadamente 35 Pa, aproximadamente 36 Pa, aproximadamente 37 Pa, aproximadamente 38 Pa, aproximadamente 39 Pa, aproximadamente 40 Pa, aproximadamente 41 Pa, aproximadamente 42 Pa, aproximadamente 43 Pa, aproximadamente 44 Pa, aproximadamente 45 Pa, aproximadamente 46 Pa, aproximadamente 47 Pa, aproximadamente 48 Pa, aproximadamente 49 Pa, aproximadamente 50 Pa, aproximadamente 51 Pa, aproximadamente 52 Pa, aproximadamente 53 Pa, aproximadamente 54 Pa, aproximadamente 55 Pa, aproximadamente 56 Pa, aproximadamente 57 Pa, aproximadamente 58 Pa, aproximadamente 59 Pa, aproximadamente 60 Pa, aproximadamente 61 Pa, aproximadamente 62 Pa, aproximadamente 63 Pa, aproximadamente 64 Pa, aproximadamente 65 Pa, aproximadamente 66 Pa, aproximadamente 67 Pa, aproximadamente 68 Pa, aproximadamente 69 Pa, aproximadamente 70 Pa, aproximadamente 71 Pa, aproximadamente 72 Pa, aproximadamente 73 Pa, aproximadamente 74 Pa, aproximadamente 75 Pa, aproximadamente 76 Pa, aproximadamente 77 Pa, aproximadamente 78 Pa, aproximadamente 79 Pa, aproximadamente 80 Pa, aproximadamente 81 Pa, aproximadamente 82 Pa, aproximadamente 83 Pa, aproximadamente 84 Pa, aproximadamente 85 Pa, aproximadamente 86 Pa, aproximadamente 87 Pa, aproximadamente 88 Pa, aproximadamente 89 Pa, aproximadamente 90 Pa, aproximadamente 91 Pa, aproximadamente 92 Pa, aproximadamente 93 Pa, aproximadamente 94 Pa, aproximadamente 95 Pa, aproximadamente 96 Pa, aproximadamente 97 Pa, aproximadamente 98 Pa, aproximadamente 99 Pa, aproximadamente 100 Pa, aproximadamente 101 Pa, aproximadamente 102 Pa, aproximadamente 103 Pa, aproximadamente 104 Pa, aproximadamente 105 Pa, aproximadamente 106 Pa, aproximadamente 107 Pa, aproximadamente 108 Pa, aproximadamente 109 Pa, aproximadamente 110 Pa, aproximadamente 111 Pa, aproximadamente 112 Pa, aproximadamente 113 Pa, aproximadamente 114 Pa, aproximadamente 115 Pa, aproximadamente 116 Pa, aproximadamente 117 Pa, aproximadamente 118 Pa, aproximadamente 119 Pa, aproximadamente 120 Pa, aproximadamente 121 Pa, aproximadamente 122 Pa, aproximadamente 123 Pa, aproximadamente 124 Pa o aproximadamente 125 Pa. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 1 Hz. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 5 Hz. En algunas realizaciones, G se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene una viscosidad compleja de aproximadamente 1 Pas a aproximadamente 10 Pas. En algunas realizaciones, el relleno de tejido tiene una viscosidad compleja de aproximadamente 1 Pas, aproximadamente 1,5 Pas, aproximadamente 2 Pas, aproximadamente 2,5 Pas, aproximadamente 3 Pas, aproximadamente 3,5 Pas, aproximadamente 4 Pa s, aproximadamente 4,5 Pa s, aproximadamente 5 Pa s, aproximadamente 5,5 Pa s, aproximadamente 6 Pa s, aproximadamente 6,5 Pa s, aproximadamente 7 Pa s, aproximadamente 7,5 Pa s, aproximadamente 8 Pas s, aproximadamente 8,5 Pas, aproximadamente 9 Pas, aproximadamente 9,5 Pas, o aproximadamente 10 Pas. En algunas realizaciones, la viscosidad compleja se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 0,1 a aproximadamente 10 Hz. En algunas realizaciones, la viscosidad compleja se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 1 Hz. En algunas realizaciones, la viscosidad compleja se mide por medio de una tensión oscilatoria de aproximadamente 5 Hz.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método para tratar una afección en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente efectiva de un relleno de tejido que incluye AH modificado o reticulado, y/o FPS modificados o reticulados. En algunas realizaciones, la afección es una afección de la piel. En algunas realizaciones, la afección de la piel se selecciona del grupo que consiste en deshidratación de la piel, falta de elasticidad de la piel, aspereza de la piel, falta de tersura en la piel, una línea atrófica en la piel, una estría en la piel, palidez en la piel, una depresión dérmica, una mejilla hundida, un labio fino, un defecto retroorbitario, un pliegue facial y una arruga.
En algunas realizaciones, la divulgación se refiere a un método de tratamiento cosmético en un sujeto que lo necesita, que comprende administrar al sujeto una cantidad eficaz de un relleno de tejido que incluye AH modificado o reticulado y/o FPS modificados o reticulados. En algunas realizaciones, el relleno de tejido se administra en una región dérmica del sujeto. En algunas realizaciones, el método es un aumento, una reconstrucción, el tratamiento de una enfermedad, el tratamiento de un trastorno, la corrección de un defecto o imperfección de una parte, región o área del cuerpo. En algunas realizaciones, el método es un aumento facial, una reconstrucción facial, el tratamiento de una enfermedad facial, el tratamiento de un trastorno facial, el tratamiento de un defecto facial o el tratamiento de una imperfección facial.
En algunas realizaciones de los métodos descritos en el presente documento, el relleno de tejido resiste la biodegradación, la bioerosión, la bioabsorción y/o la biorresorción durante al menos aproximadamente 3 días, aproximadamente 7 días, aproximadamente 14 días, aproximadamente 21 días, aproximadamente 28 días, aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 meses, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 4 meses, aproximadamente 5 meses o aproximadamente 6 meses. En algunas realizaciones de los métodos descritos en el presente documento, la administración del relleno de tejido al sujeto da como resultado una respuesta inflamatoria reducida en comparación con la respuesta inflamatoria inducida por un relleno de tejido de control que comprende un polisacárido y lidocaína, en el que el relleno de tejido de control no incluye fragmentos de proteína de seda (FPS).
En algunas realizaciones de los métodos descritos en el presente documento, la administración del relleno de tejido al sujeto da como resultado una mayor producción de colágeno en comparación con la producción de colágeno inducida por un relleno de tejido de control que comprende un polisacárido y lidocaína, en el que el relleno de tejido de control no incluye fragmentos de proteína de seda (FPS).
Breve descripción de los dibujos
Las realizaciones divulgadas actualmente se explicarán con más detalle con referencia a los dibujos adjuntos. Los dibujos que se muestran no están necesariamente a escala, sino que generalmente se hace hincapié en ilustrar los principios de las realizaciones actualmente divulgadas.
La Fig. 1 es un diagrama de flujo que muestra diversas realizaciones para producir fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura (FPS) de la presente divulgación.
La Fig. 2 es un diagrama de flujo que muestra diversos parámetros que pueden modificarse durante el proceso de producción de FPS de la presente divulgación durante las etapas de extracción y disolución.
La Fig. 3 es una tabla que resume la concentración de LiBr y carbonato de sodio (Na2CO3) en soluciones de proteína de seda de la presente divulgación.
La Fig. 4 es una tabla que resume la concentración de LiBr y Na2CO3 en soluciones de proteína de seda de la presente divulgación.
La Fig. 5 es una tabla que resume los pesos moleculares de las soluciones de proteína de seda de la presente divulgación.
Las Fig. 6 y 7 son gráficos que representan el efecto del volumen de extracción sobre el % de pérdida de masa.
La Fig. 8 es una tabla que resume los pesos moleculares de la seda disuelta a partir de diferentes concentraciones de LiBr y de diferentes tamaños de extracción y disolución.
La Fig. 9 es un gráfico que resume el efecto del tiempo de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, LiBr a 100 °C y disolución en horno de 100 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 10 es un gráfico que resume el efecto del tiempo de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, LiBr a ebullición y disolución en horno a 60 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 11 es un gráfico que resume el efecto del tiempo de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, LiBr a 60 °C y disolución en horno a 60 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 12 es un gráfico que resume el efecto del tiempo de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, LiBr a 80 °C y disolución en horno a 80 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 13 es un gráfico que resume el efecto del tiempo de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, LiBr a 80 °C y disolución en horno a 60 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 14 es un gráfico que resume el efecto del tiempo de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, LiBr a 100 °C y disolución en horno a 60 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 15 es un gráfico que resume el efecto del tiempo de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, LiBr a 140 °C y disolución en horno a 140 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 16 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura de extracción sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de un tiempo de extracción de 60 minutos, LiBr a 100 °C y disolución en horno a 100 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 17 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura de LiBr sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de un tiempo de extracción de 60 minutos, una temperatura de extracción de 100 °C y una disolución en horno de 60 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 18 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura de LiBr sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de un tiempo de extracción de 30 minutos, una temperatura de extracción de 100 °C y una disolución en horno de 60 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 19 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, tiempo de extracción de 30 minutos y bromuro de litio a 100 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 20 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, tiempo de extracción de 60 minutos y bromuro de litio a 100 °C. (Se varió el tiempo de horno/disolución).
La Fig. 21 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, tiempo de extracción de 60 minutos y bromuro de litio a 140 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 22 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, tiempo de extracción de 30 minutos y bromuro de litio a 140 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 23 es un gráfico que resume el efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, tiempo de extracción de 60 minutos y bromuro de litio a 80 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
La Fig. 24 es un gráfico que resume los pesos moleculares de la seda procesada en condiciones variables, incluido el tiempo de extracción, la temperatura de extracción, la temperatura del bromuro de litio (LiBr), la temperatura del horno para la disolución y el tiempo del horno para la disolución.
La Fig. 25 es un gráfico que resume los pesos moleculares de la seda procesada en condiciones en las que la temperatura del horno/disolución es igual a la temperatura del LiBr.
La Fig. 26 es una imagen de formulaciones de seda/AH en agua o solución salina tamponada con fosfato (PBS) a diversas concentraciones, que demuestra que las formulaciones de seda/AH dan como resultado soluciones opacas y homogéneas. El primer vial sin marcar es un vial de control (22 mg/ml de AH en agua).
La Fig. 27 es una imagen de formulaciones acuosas de seda/AH depositadas en jeringas, que demuestra que las formulaciones de seda/AH dan como resultado soluciones opacas y homogéneas. El control es una solución de 22 mg/ml de AH en agua.
La Fig. 28 es un gráfico que representa el perfil de degradación de los hidrogeles de seda-AH y AH.
La Fig. 29 es una imagen de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de control (relleno de AH comercialmente disponible que incluye lidocaína); el mayor grado de inflamación se refleja en la extensión de las áreas granulomatosas. El relleno comercialmente disponible se indica como material azul/gris. La inflamación granulomatosa asociada al material se puede observar a los 7 días.
La Fig. 30 es una imagen de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de control (relleno de AH comercialmente disponible que incluye lidocaína); el producto comercialmente disponible se indica como material azul/gris. A los 30 días se observa inflamación con fibrosis.
La Fig. 31 es una imagen de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (24 mg/ml de AH, 9,6 mg/ml de seda, reticulado con BDDE); las áreas granulomatosas reducidas en comparación con la inyección de control indican una respuesta inflamatoria aguda insignificante y una mejor biodegradabilidad del relleno de seda-AH en comparación con el control. Hay muy poca inflamación a los 7 días. La inflamación es focal y a veces difícil de encontrar. No se observa material de implante.
La Fig. 32 es una imagen de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (24 mg/ml de AH, 9,6 mg/ml de seda, reticulado con BDDE); a los 30 días la inflamación es extremadamente difícil de encontrar y mínima. No se observa material de implante.
La Fig. 33 es una imagen de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (24 mg/ml de AH, 0,48 mg/ml de seda, reticulado con BDDE); el relleno da como resultado una inflamación focal leve en los 7 días. La inflamación es crónica. Esta inflamación requirió una evaluación minuciosa para identificarla, ya que era focal y mínima. No se observa material de implante.
La Fig. 34 es una imagen de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (24 mg/ml de AH, 0,48 mg/ml de seda, reticulado con BDDE); la imagen de 30 días muestra incluso menos inflamación. Fue incluso más difícil de identificar en comparación con los implantes de 7 días. No se observa material de implante.
La Fig. 35 es un gráfico que representa la medición de la turbidez de un hidrogel de seda-AH. Curva negra (a): transmitancia estándar; curva roja (b): transmitancia más dispersión frontal.
La Fig. 36 es un gráfico que representa la medición de la turbidez del hidrogel de AH sin seda. Curva negra (a): transmitancia estándar; curva roja (b): transmitancia más dispersión frontal.
La Fig. 37 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de control.
La Fig. 38 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de AH de la invención (24 mg/ml de AH, reticulado con PEGDE, muestra C4 - Tabla 25).
La Fig. 39 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (22,8 mg/ml de AH, 1,2 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra L - Tabla 25).
La Fig. 40 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (23,76 mg/ml de AH, 0,24 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra M - Tabla 25).
La Fig. 41 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (22,8 mg/ml de AH, 1,2 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra N - Tabla 25).
La Fig. 42 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (22,8 mg/ml de AH, 1,2 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra O - Tabla 25).
La Fig. 43 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de la degradación del gel a los 7 días posteriores a la implantación (formulaciones de la Tabla 25: las formulaciones reticuladas con BDDE se degradan en su mayoría; puntuación: 0 - normal; 1 - mínima; 2 - leve; 3 - moderada; y 4 - grave).
La Fig. 44 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de migración del gel a los 7 días posteriores a la implantación (formulaciones de la Tabla 25; puntuación: 0 - normal; 1 - mínima; 2 - leve; 3 - moderada y 4 -grave).
La Fig. 45 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de la inflamación a los 7 días posteriores a la implantación (formulaciones de la Tabla 25: no se observó necrosis de tejido, no se observó coagulación de la sangre y se observó un depósito mínimo de colágeno en la formulación de control y en algunas de las formulaciones de prueba); puntuación: 0 - normal, 1 - mínima, 2 - leve, 3 - moderada y 4 - grave).
La Fig. 46 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de 7 días después de la implantación para macrófagos (formulaciones de la Tabla 25; puntuación: 0 - normal; 1 - mínima; 2 - leve; 3 - moderada y 4 - grave).
Las Fig. 47A y 47B muestran la G' de hidrogeles con diversas concentraciones de seda antes y después de la diálisis. Fig. 47A: AH mixta reticulada a 100 g/ml, y Fig. 47B: AH de Mw único reticulado a 25 mg/ml.
Las Fig. 48A y 48B muestran la relación de hinchamiento del hidrogel con diversas concentraciones de seda durante la diálisis. Fig. 48A: AH mixto reticulado a 100 mg/ml, y Fig. 48B: AH de Mw único reticulado a 25 mg/ml.
Las Fig. 49A y 49B muestran las curvas de calibración para soluciones de seda de peso molecular medio y bajo, respectivamente.
Las Fig. 50A y 50B muestran los espectros de absorbancia de geles de seda-AH diluidos con concentración de seda desconocida; la concentración de seda teórica (mg/ml) se muestra para cada muestra de gel de seda-AH en la Tabla 26.
La Fig. 51 muestra la medición de la turbidez del hidrogel de AH sin seda (rojo; mayor transmitancia en todo el intervalo de longitud de onda) y con 3 mg/ml de seda (azul; menor transmitancia en todo el intervalo de longitud de onda); un % de transmitancia más alto indica una muestra menos turbia, con menos opacidad óptica.
Si bien los dibujos identificados anteriormente exponen las realizaciones actualmente divulgadas, también se contemplan otras realizaciones, como se indica en la discusión. Esta divulgación presenta realizaciones ilustrativas a modo de representación y no de limitación.
Descripción detallada de la invención
En el presente documento se divulgan rellenos de tejido que incluyen fragmentos de proteína de seda (FPS). En algunas realizaciones, los rellenos de tejido se preparan a partir de composiciones descritas en el presente documento que pueden incluir FPS y ácido hialurónico (AH). En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden ser rellenos dérmicos.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando AH que tiene un Mw de entre aproximadamente 5 kDa y aproximadamente 5 MDa, entre aproximadamente 100 kDa y aproximadamente 4 MDa, o entre aproximadamente 500 kDa y aproximadamente 3 MDa. En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando AH que tiene un Mw de aproximadamente 50 kDa, aproximadamente 100 kDa, aproximadamente 150 kDa, aproximadamente 200 kDa, aproximadamente 250 kDa, aproximadamente 300 kDa, aproximadamente 350 kDa, aproximadamente 400 kDa, aproximadamente 450 kDa, aproximadamente 500 kDa, aproximadamente 550 kDa, aproximadamente 600 kDa, aproximadamente 650 kDa, aproximadamente 700 kDa, aproximadamente 750 kDa, aproximadamente 800 kDa, aproximadamente 850 kDa, aproximadamente 900 kDa, aproximadamente 950 kDa, aproximadamente 1000 kDa, aproximadamente 1050 kDa, aproximadamente 1100 kDa, aproximadamente 1150 kDa, aproximadamente 1200 kDa, aproximadamente 1250 kDa, aproximadamente 1300 kDa, aproximadamente 1350 kDa, aproximadamente 1400 kDa, aproximadamente 1450 kDa, aproximadamente 1500 kDa, aproximadamente 1550 kDa, aproximadamente 1600 kDa, aproximadamente 1650 kDa, aproximadamente 1700 kDa, aproximadamente 1750 kDa, aproximadamente 1800 kDa, aproximadamente 1850 kDa, aproximadamente 1900 kDa, aproximadamente 1950 kDa, aproximadamente 2000 kDa, aproximadamente 2050 kDa, aproximadamente 2100 kDa, aproximadamente 2150 kDa, aproximadamente 2200 kDa, aproximadamente 2250 kDa, aproximadamente 2300 kDa, aproximadamente 2350 kDa, aproximadamente 2400 kDa, aproximadamente 2450 kDa, aproximadamente 2500 kDa, aproximadamente 2550 kDa, aproximadamente 2600 kDa, aproximadamente 2650 kDa, aproximadamente 2700 kDa, aproximadamente 2750 kDa, aproximadamente 2800 kDa, aproximadamente 2850 kDa, aproximadamente 2900 kDa, aproximadamente 2950 kDa, aproximadamente 3000 kDa, aproximadamente 3050 kDa, aproximadamente 3100 kDa, aproximadamente 3150 kDa, aproximadamente 3200 kDa, aproximadamente 3250 kDa, aproximadamente 3300 kDa, aproximadamente 3350 kDa, aproximadamente 3400 kDa, aproximadamente 3450 kDa, aproximadamente 3500 kDa, aproximadamente 3550 kDa, aproximadamente 3600 kDa, aproximadamente 3650 kDa, aproximadamente 3700 kDa, aproximadamente 3750 kDa, aproximadamente 3800 kDa, aproximadamente 3850 kDa, aproximadamente 3900 kDa, aproximadamente 3950 kDa o aproximadamente 4000 kDa. Cualquiera de los Mw de AH anteriores se puede mezclar con cualquier otro Mw de AH anterior, en cualquier proporción posible. En algunas realizaciones, se elabora un relleno dérmico mezclando un AH de alto Mw que se puede mezclar con un AH de bajo Mw, en el que el AH de alto Mw está en una proporción de aproximadamente 0,01 %, aproximadamente 0,1 %, aproximadamente 0,2 % o aproximadamente 0,3 %, o aproximadamente 0,4 %, o aproximadamente 0,5 %, o aproximadamente 0,6 %, o aproximadamente 0,7 %, o aproximadamente 0,8 %, o aproximadamente 0,9 %, o aproximadamente 1 %, o aproximadamente 2 %, o aproximadamente 3 %, o aproximadamente 4 %, o aproximadamente 5 %, o aproximadamente 6 %, o aproximadamente 7 %, o aproximadamente 8 %, o aproximadamente 9 %, o aproximadamente 10 %, o aproximadamente 11 %, o aproximadamente 12 %, o aproximadamente 13 %, o aproximadamente 14 %, o aproximadamente 15 %, o aproximadamente 16 %, o aproximadamente 17 %, o aproximadamente 18 %, o aproximadamente 19 %, o aproximadamente 20 %, o aproximadamente 21 %, o aproximadamente 22 %, o aproximadamente 23 %, o aproximadamente 24 %, o aproximadamente 25 %, o aproximadamente 26 %, o aproximadamente 27 %, o aproximadamente 28 %, o aproximadamente 29 %, o aproximadamente 30 %, o aproximadamente 31 %, o aproximadamente 32 %, o aproximadamente 33 %, o aproximadamente 34 %, o aproximadamente 35 %, o aproximadamente 36 %, o aproximadamente 37 %, o aproximadamente 38 %, o aproximadamente 39 %, o aproximadamente 40 %, o aproximadamente 41 %, o aproximadamente 42 %, o aproximadamente 43 %, o aproximadamente 44 %, o aproximadamente 45 %, o aproximadamente 46 %, o aproximadamente 47 %, o aproximadamente 48 %, o aproximadamente 49 %, o aproximadamente 50 %, o aproximadamente 51 %, o aproximadamente 52 %, o aproximadamente 53 %, o aproximadamente 54 %, o aproximadamente 55 %, o aproximadamente 56 %, o aproximadamente 57 %, o aproximadamente 58 %, o aproximadamente 59 %, o aproximadamente 60 %, o aproximadamente 61 %, o aproximadamente 62 %, o aproximadamente 63 %, o aproximadamente 64 %, o aproximadamente 65 %, o aproximadamente 66 %, o aproximadamente 67 %, o aproximadamente 68 %, o aproximadamente 69 %, o aproximadamente 70 %, o aproximadamente 71 %, o aproximadamente 72 %, o aproximadamente 73 %, o aproximadamente 74 %, o aproximadamente 75 %, o aproximadamente 76 %, o aproximadamente 77 %, o aproximadamente 78 %, o aproximadamente 79 %, o aproximadamente 80 %, o aproximadamente 81 %, o aproximadamente 82 %, o aproximadamente 83 %, o aproximadamente 84 %, o aproximadamente 85 %, o aproximadamente 86 %, o aproximadamente 87 %, o aproximadamente 88 %, o aproximadamente 89 %, o aproximadamente 90 %, o aproximadamente 91 %, o aproximadamente 92 %, o aproximadamente 93 %, o aproximadamente 94 %, o aproximadamente 95 %, o aproximadamente 96 %, o aproximadamente 97 %, o aproximadamente 98 %, o aproximadamente 99 %, o aproximadamente 99,5 % o aproximadamente 99,9 %.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando FPS de seda que tienen un Mw entre aproximadamente 5 kDa y aproximadamente 35 kDa. En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando FPS de seda que tienen un Mw de aproximadamente 5 kDa, o aproximadamente 6 kDa, o aproximadamente 7 kDa, o aproximadamente 8 kDa, o aproximadamente 9 kDa, o aproximadamente 10 kDa, o aproximadamente 11 kDa, o aproximadamente 12 kDa, o aproximadamente 13 kDa, o aproximadamente 14 kDa, o aproximadamente 15 kD aproximadamente 16 kDa, o aproximadamente
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kDa, o aproximadamente 19 kDa, o aproximadamente 19 kD aproximadamente 20 kDa, o aproximadamente
Figure imgf000028_0002
kDa, o aproximadamente 22 kDa, o aproximadamente 23 k aproximadamente 24 kDa, o aproximadamente 25 kDa, o aproximadamente 26 kDa, o aproximadamente 27 k aproximadamente 28 kDa, o aproximadamente 29 kDa, o aproximadamente 30 kDa.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando una concentración inicial de AH de aproximadamente 80 mg/ml, o aproximadamente 81 mg/ml, o aproximadamente 82 mg, ml o aproximadamente 83 mg/ml, o aproximadamente 84 mg/ml, o aproximadamente 85 mg/ml, o aproximadamente 86 mg/ml, o aproximadamente 87 mg/ml, o aproximadamente 88 mg/ml, o aproximadamente 89 mg/ml, o aproximadamente 90 mg/ml, o aproximadamente 91 mg/ml, o aproximadamente 92 mg/ml, o aproximadamente 93 mg/ml, o aproximadamente 94 mg/ml, o aproximadamente 95 mg/ml, o aproximadamente 96 mg/ml, o aproximadamente 97 mg/ml, o aproximadamente 98 mg/ml, o aproximadamente 99 mg/ml, o aproximadamente 100 mg/ml, o aproximadamente 101 mg/ml, o aproximadamente 102 mg/ml, o aproximadamente 103 mg/ml, o aproximadamente 104 mg/ml, o aproximadamente 105 mg /ml, o aproximadamente
106 mg/ml, o aproximadamente 107 mg/ml, o aproximadamente 108 mg/ml, o aproximadamente 109 mg/ml, o aproximadamente 110 mg/ml, o aproximadamente 111 mg/ml, o aproximadamente 112 mg/ ml, o aproximadamente
113 mg/ml, o aproximadamente 114 mg/ml, o aproximadamente 115 mg/ml, o aproximadamente 116 mg/ml, o aproximadamente 117 mg/ml, o aproximadamente 118 mg/ml, o aproximadamente 119 mg/ml, o aproximadamente
120 mg/ml, o superior.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos descritos en el presente documento tienen una concentración de FPS de seda de aproximadamente 0,1 %, o aproximadamente 0,2 %, o aproximadamente 0,3 %, o aproximadamente 0,4 %, o aproximadamente 0,5 %, o aproximadamente 0,6 %, o aproximadamente 0,7 % o aproximadamente 0,8 %, o aproximadamente 0,9 %, o aproximadamente 1 %, o aproximadamente 1,1 %, o aproximadamente 1,2 %, o aproximadamente 1,3 %, o aproximadamente 1,4 %, o aproximadamente 1,5 %, o aproximadamente 1,6 %, o aproximadamente 1,7 %, o aproximadamente 1,8 %, o aproximadamente 1,9 %, o aproximadamente 2 %, o aproximadamente 2,1 %, o aproximadamente 2,2 %, o aproximadamente 2,3 %, o aproximadamente 2,4 %, o aproximadamente 2,5 %, o aproximadamente 2,6 %, o aproximadamente 2,7 %, o aproximadamente 2,8 %, o aproximadamente 2,9 %, o aproximadamente 3 %, o aproximadamente 3,1 %, o aproximadamente 3,2 %, o aproximadamente 3,3 %, o aproximadamente 3,4 %, o aproximadamente 3,5 %, o aproximadamente 3,6 %, o aproximadamente 3,7 %, o aproximadamente 3,8 % o aproximadamente 3,9 % o aproximadamente 4 % o aproximadamente 4,1 % o aproximadamente 4,2 % o aproximadamente 4,3 % o aproximadamente 4,4 % o aproximadamente 4,5 % o aproximadamente 4,6 % o aproximadamente 4,7 % o aproximadamente 4,8 %, o aproximadamente 4,9 %, o aproximadamente 5 % del AH y FPS de seda totales.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando un reticulante PEGDE que tiene un Mn de aproximadamente 100, aproximadamente 200, aproximadamente
300, aproximadamente 400, aproximadamente 500, aproximadamente 600, aproximadamente 700, aproximadamente 800, aproximadamente 900, aproximadamente 1000, aproximadamente 1100 o aproximadamente 1200.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando condiciones de reacción que incluyen una etapa de reticulación a aproximadamente 35 °C, aproximadamente 36 °C, aproximadamente 37 °C, aproximadamente 38 °C, aproximadamente 39 °C, aproximadamente 40 °C, aproximadamente 41 °C, aproximadamente 42 °C, aproximadamente 43 °C, aproximadamente 44 °C, aproximadamente 45 °C, aproximadamente 46 °C, aproximadamente 47 °C, aproximadamente 48 °C, aproximadamente 49 °C, aproximadamente 50 °C, aproximadamente 51 °C, aproximadamente 52 °C, aproximadamente 53 °C, aproximadamente 54 °C o aproximadamente 55 °C. En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos se elaboran mediante un proceso descrito en el presente documento usando condiciones de reacción que incluyen una etapa de reticulación de aproximadamente 15 minutos, aproximadamente 16 minutos, aproximadamente 17 minutos, aproximadamente 18 minutos, aproximadamente 19 minutos, aproximadamente 20 minutos, aproximadamente 21 minutos, aproximadamente 22 minutos, aproximadamente 23 minutos, aproximadamente 24 minutos, aproximadamente 25 minutos, aproximadamente 26 minutos, aproximadamente 27 minutos, aproximadamente 28 minutos, aproximadamente 29 minutos, aproximadamente 30 minutos, aproximadamente 31 minutos, aproximadamente 32 minutos, aproximadamente 33 minutos, aproximadamente 34 minutos, aproximadamente 35 minutos, aproximadamente 36 minutos, aproximadamente 37 minutos, aproximadamente 38 minutos, aproximadamente 39 minutos, aproximadamente 40 minutos, aproximadamente 41 minutos, aproximadamente 42 minutos, aproximadamente 43 minutos, aproximadamente 44 minutos, aproximadamente 45 minutos, aproximadamente 46 minutos, aproximadamente 47 minutos, aproximadamente 48 minutos, aproximadamente 49 minutos, aproximadamente 50 minutos, aproximadamente 51 minutos, aproximadamente 52 minutos, aproximadamente 53 minutos, aproximadamente 54 minutos, aproximadamente 55 minutos, aproximadamente 56 minutos, aproximadamente 57 minutos, aproximadamente 58 minutos, aproximadamente 59 minutos, aproximadamente 60 minutos, aproximadamente 61 minutos, aproximadamente 62 minutos, aproximadamente 63 minutos, aproximadamente 64 minutos, o aproximadamente 65 minutos.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos incluyen AH libre, por ejemplo, AH no reticulado. En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos incluyen aproximadamente 0,1 %, o aproximadamente 0,2 %, o aproximadamente 0,3 %, o aproximadamente 0,4 %, o aproximadamente 0,5 %, o aproximadamente 0,6 %, o aproximadamente 0,7 %, o aproximadamente 0,8 % o aproximadamente 0,9 % %, o aproximadamente 1 %, o aproximadamente 1,1 %, o aproximadamente 1,2 %, o aproximadamente 1,3 %, o aproximadamente 1,4 %, o aproximadamente 1,5 %, o aproximadamente 1,6 %, o aproximadamente 1,7 %, o aproximadamente 1,8 %, o aproximadamente 1,9 %, o aproximadamente 2 %, o aproximadamente 2,1 %, o aproximadamente 2,2 %, o aproximadamente 2,3 %, o aproximadamente 2,4 %, o aproximadamente 2,5 %, o aproximadamente 2,6 %, o aproximadamente 2,7 %, o aproximadamente 2,8 %, o aproximadamente 2,9 %, o aproximadamente 3 %, o aproximadamente 3,1 %, o aproximadamente 3,2 %, o aproximadamente 3,3 %, o aproximadamente 3,4 %, o aproximadamente 3,5 %, o aproximadamente 3,6 %, o aproximadamente 3,7 %, o aproximadamente 3,8 %, o aproximadamente 3,9 %, o aproximadamente 4 %, o aproximadamente 4,1 %, o aproximadamente 4,2 %, o aproximadamente 4,3 %, o aproximadamente 4,4 %, o aproximadamente 4,5 %, o aproximadamente 4,6 %, o aproximadamente 4,7 %, o aproximadamente 4,8 %, o aproximadamente 4,9 %, o aproximadamente 5 %, aproximadamente 5,1 %, o aproximadamente 5,2 %, o aproximadamente 5,3 %, o aproximadamente 5,4 %, o aproximadamente 5,5 %, o aproximadamente 5,6 %, o aproximadamente 5,7 %, o aproximadamente 5,8 %, o aproximadamente 5,9 %, o aproximadamente 6 %, o aproximadamente 6,1 %, o aproximadamente 6,2 %, o aproximadamente 6,3 %, o aproximadamente 6,4 %, o aproximadamente 6 0,5 %, o aproximadamente 6,6 %, o aproximadamente 6,7 %, o aproximadamente 6,8 %, o aproximadamente 6,9 %, o aproximadamente 7 %, o aproximadamente 7,1 %, o aproximadamente 7,2 %, o aproximadamente 7,3 %, o aproximadamente 7,4 %, o aproximadamente 7,5 %, o aproximadamente 7,6 %, o aproximadamente 7,7 %, o aproximadamente 7,8 %, o aproximadamente 7,9 %, o aproximadamente 8 %, o aproximadamente 8,1 %, o aproximadamente 8,2 %, o aproximadamente 8,3 %, o aproximadamente 8,4 %, o aproximadamente 8,5 %, aproximadamente 8,6 %, aproximadamente 8,7 %, aproximadamente 8,8 %, aproximadamente 8,9 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 9,1 %, aproximadamente 9,2 %, aproximadamente 9,3 %, aproximadamente 9,4 %, o aproximadamente 9,5 %, o aproximadamente 9,6 %, o aproximadamente 9,7 %, o aproximadamente 9,8 %, o aproximadamente 9,9 %, o aproximadamente 10 % del AH total (AH reticulado y AH no reticulado). En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos no incluyen AH libre.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos incluyen AH a aproximadamente 10 mg/ml, aproximadamente 11 mg/ml, aproximadamente 12 mg/ml, aproximadamente 13 mg/ml, aproximadamente 14 mg/ml, aproximadamente 15 mg/ml, aproximadamente 16 mg/ml. ml, aproximadamente 17 mg/ml, aproximadamente 18 mg/ml, aproximadamente 19 mg/ml, aproximadamente 20 mg/ml, aproximadamente 21 mg/ml, aproximadamente 22 mg/ml, aproximadamente 23 mg/ml, aproximadamente 24 mg/ml, aproximadamente 25 mg/ml, aproximadamente 26 mg/ml, aproximadamente 27 mg/ml, aproximadamente 28 mg/ml, aproximadamente 29 mg/ml o aproximadamente 30 mg/ml.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos tienen un MoD de aproximadamente 10,0 %, aproximadamente 10,1 %, aproximadamente 10,2 %, aproximadamente 10,3 %, aproximadamente 10,4 %, aproximadamente 10,5 %, aproximadamente 10,6 %, aproximadamente 10,7 %, aproximadamente 10,8 %, aproximadamente 10,9 %, aproximadamente 11,0 %, aproximadamente 11,1 %, aproximadamente 11,2 %, aproximadamente 11,3 %, aproximadamente 11,4 %, aproximadamente 11,5 %, aproximadamente 11,6 %, aproximadamente 11,7 %, aproximadamente 11,8 %, aproximadamente 11,9 %, aproximadamente 12,0 %, aproximadamente 12,1 %, aproximadamente 12,2 %, aproximadamente 12,3 %, aproximadamente 12,4 %, aproximadamente 12,5 %, aproximadamente 12,6 %, aproximadamente 12,7 %, aproximadamente 12,8 %, aproximadamente 12,9 %, aproximadamente 13,0 %, aproximadamente 13,1 %, aproximadamente 13,2 %, aproximadamente 13,3 %, aproximadamente 13,4 %, aproximadamente 13,5 %, aproximadamente 13,6 %, aproximadamente 13,7 %, aproximadamente 13,8 %, aproximadamente 13,9 %, aproximadamente 14,0 %, aproximadamente 14,1 %, aproximadamente 14,2 %, aproximadamente 14,3 %, aproximadamente 14,4 %, aproximadamente 14,5 %, aproximadamente 14,6 %, aproximadamente 14,7 %, aproximadamente 14,8 %, aproximadamente 14,9 %, aproximadamente 15,0 %, aproximadamente 15,1 %, aproximadamente 15,2 %, aproximadamente 15,3 %, aproximadamente 15,4 %, aproximadamente 15,5 %, aproximadamente 15,6 %, aproximadamente 15,7 %, aproximadamente 15,8 %, aproximadamente 15,9 %, aproximadamente 16,0 %, aproximadamente 16,1 %, aproximadamente 16,2 %, aproximadamente 16,3 %, aproximadamente 16,4 %, aproximadamente 16,5 %, aproximadamente 16,6 %, aproximadamente 16,7 %, aproximadamente 16,8 %, aproximadamente 16,9 %, aproximadamente 17,0 %, aproximadamente 17,1 %, aproximadamente 17.2 %, aproximadamente 17,3 %, aproximadamente 17,4 %, aproximadamente 17,5 %, aproximadamente 17,6 %, aproximadamente 17,7 %, aproximadamente 17,8 %, aproximadamente 17,9 %, aproximadamente 18,0 %, aproximadamente 18,1 %, aproximadamente 18,2 %, aproximadamente 18,3 %, aproximadamente 18,4 %, aproximadamente 18,5 %, aproximadamente 18,6 %, aproximadamente 18,7 %, aproximadamente 18,8 %, aproximadamente 18,9 %, aproximadamente 19,0 %, aproximadamente 19,1 %, aproximadamente 19,2 %, aproximadamente 19,3 %, aproximadamente 19,4 %, aproximadamente 19,5 %, aproximadamente 19,6 %, aproximadamente 19,7 %, aproximadamente 19,8 %, a roximadamente 19,9 % o aproximadamente 20,0 %.
En algunas realizaciones, los rellenos dérmicos tienen una fuerza de inyección de aproximadamente 5 N, aproximadamente 6 N, aproximadamente 7 N, aproximadamente 8 N, aproximadamente 9 N, aproximadamente 10 N, aproximadamente 11 N, aproximadamente 12 N, aproximadamente 13 N, aproximadamente 14 N. N, aproximadamente 15 N, aproximadamente 16 N, aproximadamente 17 N, aproximadamente 18 N, aproximadamente 19 N, aproximadamente 20 N, aproximadamente 21 N, aproximadamente 22 N, aproximadamente 23 N, aproximadamente 24 N o aproximadamente 25 N. En algunas realizaciones, la fuerza de inyección se relaciona con la inyección a través de una aguja de 30 G.
Los rellenos de tejido proporcionados en el presente documento incluyen composiciones que incluyen además uno o más componentes tales como FPS, por ejemplo, FPS reticulados y/o FPS no reticulados, ácido hialurónico, por ejemplo, AH reticulado y/o AH no reticulado. Como se usa en el presente documento, FPS reticulados se refiere a FPS que están reticulados con un FPS idéntico o no idéntico. Los FPS reticulados también pueden denominarse FPS homorreticulados. Como se usa en el presente documento, AH reticulado se refiere a AH que está reticulado con un AH idéntico o no idéntico. El AH reticulado también puede denominarse AH homorreticulado. Los rellenos de tejido proporcionados en el presente documento también pueden incluir FPS reticulados con AH y/o AH reticulado con FPS. Los FPS reticulados con AH y/o AH reticulado con FPS también se pueden denominar FPS-AH reticulado o FPS-AH heterorreticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones de la divulgación son monofásicas. En algunas realizaciones, las composiciones de la invención son bifásicas o multifásicas. En algunas realizaciones, las composiciones de la divulgación incluyen una fase polimérica no reticulada, por ejemplo, FPS no reticulados y/o AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones de la divulgación incluyen una fase reticulada, por ejemplo, FPS reticulados y/o AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones de la divulgación incluyen una fase líquida, por ejemplo, agua y/o una solución acuosa. En algunas realizaciones, la solución acuosa puede incluir FPS. En algunas realizaciones, la fase acuosa puede incluir AH. En algunas realizaciones, la fase líquida puede incluir un polímero no reticulado tal como AH no reticulado y/o FPS no reticulados.
En algunas realizaciones, una composición de la divulgación comprende una fase portadora. Como tales, las composiciones divulgadas pueden ser composiciones monofásicas o multifásicas. Como se usa en el presente documento, el término "fase portadora" es sinónimo de "portador" y se refiere a un material usado para aumentar la fluidez de un hidrogel. Un portador es ventajosamente un portador fisiológicamente aceptable y puede incluir uno o más excipientes convencionales útiles en las composiciones farmacéuticas. Como se usa en el presente documento, el término "un portador fisiológicamente aceptable" se refiere a un portador de acuerdo con, o característico del funcionamiento normal de un organismo vivo. Como tal, la administración de una composición que comprende un hidrogel y un portador no tiene sustancialmente ningún efecto perjudicial a largo plazo o permanente cuando se administra a un mamífero. Los presentes rellenos de tejido incluyen un portador en el que la mayor parte del volumen es agua o solución salina. Sin embargo, otros portadores útiles incluyen cualquier material fisiológicamente tolerable que mejore la capacidad de extrusión o intrusión del hidrogel a través de una aguja o en un entorno hospedador diana. Los portadores potenciales podrían incluir, pero sin limitación, soluciones tampón fisiológicas, suero, otras soluciones de proteínas, geles compuestos de polímeros que incluyen proteínas, glicoproteínas, proteoglicanos o polisacáridos. Cualquiera de los portadores potenciales indicados puede ser de origen natural, totalmente sintético o combinaciones de los mismos.
En una realización, una composición proporcionada en el presente documento incluye uno o más de FPS modificado, FPS reticulado, FPS no reticulado, AH modificado, AH reticulado, AH no reticulado, FPS homorreticulado, AH homorreticulado y FPS-AH heterorreticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado y FPS no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado y AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado y AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS no reticulado y AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS no reticulado y AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS no reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, FPS no reticulado y AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, FPS no reticulado y AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, FPS no reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, AH reticulado y AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, AH reticulado y FPS-AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, AH no reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS no reticulado, AH reticulado y AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS no reticulado, AH reticulado y FPS-AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS no reticulado, AH no reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, FPS no reticulado, AH reticulado y AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, FPS no reticulado, AH reticulado y FPS-AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, FPS no reticulado, AH no reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, AH reticulado, AH no reticulado y FPS-AH reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS no reticulado, AH reticulado, AH no reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado, FPS no reticulado, AH reticulado, AH no reticulado y FPS-AH reticulado.
En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen FPS y ácidos hialurónicos (AH). En un aspecto, las composiciones basadas en FPS/AH descritas en el presente documento incluyen restos reticulados de AH. En algunas realizaciones, las composiciones incluyen restos reticulados de FPS-AH. En algunas realizaciones, las composiciones incluyen AH no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones pueden incluir FPS no reticulado. En algunas realizaciones, las composiciones pueden incluir al menos un agente adicional. En algunas realizaciones, las composiciones incluyen FPS-FPS, FPS-AH y/o AH-AH reticulados, con estabilidad variable, lo que da como resultado composiciones de diversos grados de capacidad de bioabsorción y/o biorresorción.
En algunas realizaciones, el AH se reticula en una matriz. En algunas realizaciones, la matriz de AH encapsula o semiencapsula uno o más FPS. En algunas realizaciones, el AH se reticula con uno o más FPS.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido, o partes de los mismos, son biocompatibles, biodegradables, bioabsorbibles, biorreabsorbibles o una combinación de los mismos. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido proporcionados en el presente documento incluyen un componente fluido, por ejemplo, un solo fluido o una solución que incluye sustancialmente uno o más fluidos. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido incluyen agua o una solución acuosa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido son inyectables, implantables o se pueden suministrar bajo la piel por cualquier medio conocido en la materia tal como, por ejemplo, después de la resección quirúrgica del tejido. En algunas realizaciones, las composiciones son rellenos dérmicos. En algunas realizaciones, las composiciones son estériles.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir aproximadamente un 1 % (p/p) de FPS y aproximadamente un 0,3 % (p/p) de lidocaína.
En el presente documento se proporcionan métodos de fabricación de composiciones que incluyen fragmentos de proteína de seda (FPS) y ácido hialurónico (AH), métodos de suministro de composiciones que incluyen FPS y AH, y métodos de tratamiento que usan composiciones que incluyen FPS y AH.
Definiciones
Como se usa en el presente documento, el término "fibroína" incluye fibroína de gusano de seda, proteína de seda de insecto o araña, o fibroína de seda recombinante. En una realización, la fibroína se obtiene a partir de Bombyx morí.
Como se usa en el presente documento, los términos "sustancialmente libre de sericina" o "sustancialmente desprovisto de sericina" se refieren a fibras de seda en las que se ha retirado la mayoría de la proteína sericina, y/o FPS elaborado a partir de fibras de seda en las que se ha retirado la mayoría de la proteína sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,01 % (p/p) y aproximadamente 10,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,01 % (p/p) y aproximadamente 9,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,01 % (p/p) y aproximadamente 8,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,01 % (p/p) y aproximadamente 7,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,01 % (p/p) y aproximadamente 6,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,01 % (p/p) y aproximadamente 5,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,05 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,1 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 0,5 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 1,0 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 1,5 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 2,0 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen entre aproximadamente 2,5 % (p/p) y aproximadamente 4,0 % (p/p) de sericina. En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen un contenido de sericina entre aproximadamente 0,01 % (p/p) y aproximadamente 0,1 % (p/p). En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen un contenido de sericina por debajo de aproximadamente 0,1 % (p/p). En una realización, fibroína de seda y FPS que están sustancialmente desprovistos de sericina se refiere a fibroína de seda y FPS que tienen un contenido de sericina por debajo de aproximadamente 0,05 % (p/p). En una realización, cuando se añade una fuente de seda a una solución acuosa de carbonato de sodio en ebullición (100 °C) durante un tiempo de tratamiento de entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 60 minutos, se obtiene una pérdida por desgomado de aproximadamente 26 % en peso a aproximadamente 31 % en peso.
Como se usa en el presente documento, el término "sustancialmente homogéneo" puede referirse a fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura que se distribuyen en una distribución normal alrededor de un peso molecular identificado. Como se usa en el presente documento, el término "sustancialmente homogéneo" puede referirse a una distribución uniforme de un aditivo, por ejemplo, lidocaína, en toda la composición de la presente divulgación.
Como se usa en el presente documento, el término "sustancialmente libre de residuos inorgánicos" significa que la composición exhibe residuos del 0,1 % (p/p) o menos. En una realización, sustancialmente libre de residuos inorgánicos se refiere a una composición que exhibe residuos del 0,05 % (p/p) o menos. En una realización, sustancialmente libre de residuos inorgánicos se refiere a una composición que exhibe residuos del 0,01 % (p/p) o menos. En una realización, la cantidad de residuos inorgánicos está entre 0 ppm ("no detectable" o "ND") y 1000 ppm. En una realización, la cantidad de residuos inorgánicos es de ND a aproximadamente 500 ppm. En una realización, la cantidad de residuos inorgánicos es de ND a aproximadamente 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos inorgánicos es de ND a aproximadamente 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos inorgánicos es de ND a aproximadamente 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos inorgánicos es de ND a aproximadamente 100 ppm. En una realización, la cantidad de residuos inorgánicos está entre 10 ppm y 1000 ppm.
Como se usa en el presente documento, el término "sustancialmente libre de residuos orgánicos" significa que la composición exhibe residuos del 0,1 % (p/p) o menos. En una realización, sustancialmente libre de residuos orgánicos se refiere a una composición que exhibe residuos del 0,05 % (p/p) o menos. En una realización, sustancialmente libre de residuos orgánicos se refiere a una composición que exhibe residuos del 0,01 % (p/p) o menos. En una realización, la cantidad de residuos orgánicos está entre 0 ppm ("no detectable" o "ND") y 1000 ppm. En una realización, la cantidad de residuos orgánicos es de ND a aproximadamente 500 ppm. En una realización, la cantidad de residuos orgánicos es de ND a aproximadamente 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos orgánicos es de ND a aproximadamente 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos orgánicos es de ND a aproximadamente 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos orgánicos es de ND a aproximadamente 100 ppm. En una realización, la cantidad de residuos orgánicos está entre 10 ppm y 1000 ppm.
Como se usa en el presente documento, el término "no reticulado" se refiere a la falta de enlaces intermoleculares que unen moléculas de polímero de matriz individuales, macromoléculas y/o cadenas de monómero. Como tal, un polímero de matriz no reticulado no está unido a ningún otro polímero de matriz mediante un enlace intermolecular.
Los rellenos de tejido, las composiciones o partes de los mismos de la presente divulgación exhiben "biocompatibilidad" o son "biocompatibles", lo que significa que las composiciones son compatibles con el tejido vivo o un sistema vivo al no ser sustancialmente tóxicas, dañinas o fisiológicamente reactivas y al no causar rechazo inmunológico. El término "biocompatible" abarca los términos "bioabsorbible", "biorreabsorbible" y "biodegradable", que se definen en el presente documento.
Los rellenos de tejido, las composiciones o partes de los mismos de la presente divulgación pueden ser "bioabsorbibles", "biorreabsorbibles" y/o "biodegradables". Como se usa en el presente documento, el término "bioabsorbible" se refiere a materiales o sustancias que se disipan al implantarse dentro de un cuerpo, independientemente de los mecanismos por los que puede ocurrir la disipación, tales como disolución, degradación, absorción y excreción. Como se usa en el presente documento, el término "bioabsorbible" significa que puede ser absorbido por el cuerpo. Como se usa en el presente documento, el término "biodegradable" se refiere a materiales que pueden descomponerse en condiciones fisiológicas en subproductos. Tales condiciones fisiológicas incluyen, por ejemplo, hidrólisis (descomposición mediante escisión hidrolítica), catálisis enzimática (degradación enzimática), interacciones mecánicas y similares. Como se usa en el presente documento, el término "biodegradable" también abarca el término "biorreabsorbible", que describe un material o sustancia que se descompone en condiciones fisiológicas para degradarse en productos que experimentan biorresorción en el organismo hospedador, es decir, se convierten en metabolitos de los sistemas bioquímicos del organismo hospedador. Como se usa en el presente documento, los términos "biorreabsorbible" y "biorresorción" abarcan procesos tales como la degradación mediada por células, la degradación enzimática y/o la degradación hidrolítica del polímero biorreabsorbible y/o la eliminación del polímero biorreabsorbible del tejido vivo, como se apreciará por el experto en la materia. En algunas realizaciones, las composiciones y los materiales de FPS-AH descritos en el presente documento pueden ser biocompatibles, biorreabsorbibles, bioabsorbibles y/o biodegradables.
Cuando los rellenos de tejido descritos en el presente documento son biodegradables o biorreabsorbibles, pueden resistir la biodegradación o la biorresorción durante al menos aproximadamente 1 día, o al menos aproximadamente
2 días, o al menos aproximadamente 3 días, o al menos aproximadamente 4 días, al menos aproximadamente 5 días, o al menos aproximadamente 10 días, o al menos aproximadamente 15 días, o al menos aproximadame o al menos aproximadamente 25 días, o al menos aproximadamente 30 días, o
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menos aproximadame o al menos aproximadamente 40 días, o al menos aproximadamente 45 días, o menos aproximadame o al menos aproximadamente 60 días, o al menos aproximadamente 70 días, o al menos aproximadame o al menos aproximadamente 90 días, o al menos aproximadamente 100 días, o al menos aproximadamente 110 días, o al menos aproximadamente 120 días, o al menos aproximadamente 130 días, o al menos aproximadamente 140 días, o al menos aproximadamente 140 días, o al menos aproximadamente 150 días, o al menos aproximadamente
160 días, o al menos aproximadamente 170 días, o al menos aproximadamente 180 días, o al menos aproximadamente 190 días, o al menos aproximadamente 200 días, o al menos aproximadamente 250 días, o al menos aproximadamente 300 días, o al menos aproximadamente 1 año, o al menos aproximadamente 2 años o pueden resistir la biodegradación durante menos de aproximadamente 5 días, o como máximo aproximadamente 10 días, o como máximo aproximadamente 15 días, o como máximo aproximadamente 20 días, o como máximo aproximadamente 25 días, o como máximo aproximadamente 30 días, o como máximo aproximadamente 35 días, o como máximo aproximadamente 40 días, o como máximo aproximadamente 45 días, o como máximo aproximadamente 50 días, o como máximo aproximadamente 60 días, o como máximo aproximadamente 70 días, o como máximo aproximadamente 80 días, o como máximo aproximadamente 90 días, o como máximo aproximadamente 100 días, o como máximo aproximadamente 110 días, o como máximo aproximadamente 120 días, o como máximo aproximadamente 130 días, o como máximo aproximadamente 140 días, o como mucho aproximadamente 140 días, o como mucho aproximadamente 150 días, o como mucho aproximadamente 160 días, o como mucho aproximadamente 170 días, o como mucho aproximadamente 180 días, o como mucho aproximadamente 190 días, o como mucho aproximadamente 200 días, o como máximo aproximadamente 250 días, o como máximo aproximadamente 300 días, o como máximo aproximadamente 1 año, o como máximo aproximadamente 2 años.
Cuando los rellenos de tejido descritos en el presente documento son bioabsorbibles, pueden resistir la bioabsorción durante al menos aproximadamente 1 día, o al menos aproximadamente 2 días, o al menos aproximadamente 3 días, o al menos aproximadamente 4 días, al menos aproximadamente 5 días, o al menos aproximadamente 10 días, o al menos aproximadamente 15 días, o al menos aproximadamente 20 días, o al menos aproximadamente 25 menos aproximadamente 30 días, o al menos aproximadamente 35 días, o al menos aproximadamente 40 menos aproximadamente 45 días, o al menos aproximadamente 50 días, o al menos aproximadamente 60 menos aproximadamente 70 días, o al menos aproximadamente 80 días, o al menos aproximadamente 90 días, o al menos aproximadamente 100 días, o al menos aproximadamente 110 días, o al menos aproximadamente 120 días, o al menos aproximadamente 130 días, o al menos aproximadamente 140 días, o al menos aproximadamente 140 días, o al menos aproximadamente 150 días, o al menos aproximadamente 160 días, o al menos aproximadamente 170 días, o al menos aproximadamente 180 días, o al menos aproximadamente 190 días, o al menos aproximadamente 200 días, o al menos aproximadamente 250 días, o al menos aproximadamente 300 días, o al menos aproximadamente 1 año, o al menos aproximadamente 2 años o pueden resistir la bioabsorción durante menos de aproximadamente 5 días, o como máximo aproximadamente 10 días, o como máximo aproximadamente 15 días, o como máximo aproximadamente 20 días, o como máximo aproximadamente 25 días, o como máximo aproximadamente 30 días, o como máximo aproximadamente 35 días, o como máximo aproximadamente 40 días, o como máximo aproximadamente 45 días, o como máximo aproximadamente 50 días, o como máximo aproximadamente 60 días, o como máximo aproximadamente 70 días, o como máximo aproximadamente 80 días, o como máximo aproximadamente 90 días, o como máximo aproximadamente 100 días, o como máximo aproximadamente 110 días, o como máximo aproximadamente 120 días, o como máximo aproximadamente 130 días, o como máximo aproximadamente 140 días, o como máximo aproximadamente 140 días, o como máximo como máximo aproximadamente 150 días, o como máximo aproximadamente 160 días, o como máximo aproximadamente 170 días, o como máximo aproximadamente 180 días, o como máximo aproximadamente 190 días, o como máximo aproximadamente 200 días, o como máximo aproximadamente 250 días, o como máximo aproximadamente 300 días, o como máximo aproximadamente 1 año, o como máximo aproximadamente 2 años.
Como se describe en el presente documento, el grado de biodegradación, bioabsorción y biorresorción puede modificarse y/o controlarse, por ejemplo, añadiendo uno o más agentes a las composiciones descritas en el presente documento que retardan la biodegradación, bioabsorción y/o biorresorción. Además, el grado de biodegradación, bioabsorción y biorresorción puede modificarse y/o controlarse aumentando o disminuyendo el grado de reticulación polimérica presente en los materiales poliméricos descritos en el presente documento. Por ejemplo, la tasa de biodegradación, bioabsorción y/o biorresorción de las composiciones aquí descritas puede incrementarse reduciendo la cantidad de reticulación en los materiales poliméricos descritos en el presente documento. Como alternativa, la tasa de biodegradación, bioabsorción y/o biorresorción de los rellenos de tejido y las composiciones descritas aquí puede disminuirse aumentando la cantidad de reticulación en los materiales poliméricos descritos en el presente documento.
Los rellenos de tejido y las composiciones de la presente divulgación son "hipoalergénicos", lo que significa que es relativamente poco probable que provoquen una reacción alérgica. Tal hipoalergenicidad puede ser evidenciada por los participantes aplicando tópicamente las composiciones de la presente divulgación sobre su piel durante un período de tiempo prolongado. En una realización, el período de tiempo prolongado es de aproximadamente 3 días. En una realización, el período de tiempo prolongado es de aproximadamente 7 días. En una realización, el período de tiempo prolongado es de aproximadamente 14 días. En una realización, el período de tiempo prolongado es de aproximadamente 21 días. En una realización, el período de tiempo prolongado es de aproximadamente 30 días. En una realización, el período de tiempo prolongado se selecciona del grupo que consiste en aproximadamente 1 mes, aproximadamente 2 meses, aproximadamente 3 meses, aproximadamente 4 meses, aproximadamente 5 meses, aproximadamente 6 meses, aproximadamente 7 meses, aproximadamente 8 meses, aproximadamente 9 meses. meses, aproximadamente 10 meses, aproximadamente 11 meses, aproximadamente 12 meses e indefinidamente.
Como se usa en el presente documento, seda de "bajo peso molecular" se refiere a fragmentos de proteína de seda que tienen un peso molecular en el intervalo de aproximadamente 5 kDa a aproximadamente 20 kDa. En algunas realizaciones, un peso molecular bajo diana para ciertos fragmentos de proteína de seda puede ser de aproximadamente 11 kDa.
Como se usa en el presente documento, seda de "peso molecular medio" se refiere a fragmentos de proteína de seda que tienen un peso molecular en el intervalo de aproximadamente 20 kDa a aproximadamente 55 kDa. En algunas realizaciones, un peso molecular bajo diana para ciertos fragmentos de proteína de seda puede ser de aproximadamente 40 kDa.
Como se usa en el presente documento, seda de "peso molecular alto" se refiere a fragmentos de proteína de seda que tienen un peso molecular en el intervalo de aproximadamente 55 kDa a aproximadamente 150 kDa. En algunas realizaciones, un peso molecular bajo diana para ciertos fragmentos de proteína de seda puede ser de aproximadamente 100 kDa a aproximadamente 145 kDa.
En algunas realizaciones, los pesos moleculares descritos en el presente documento, p. ej., FPS de bajo peso molecular, FPS de peso molecular medio, FPS de peso molecular alto, se pueden convertir al número aproximado de aminoácidos contenidos en las respectivas proteínas naturales o recombinantes, tales como proteínas de seda naturales o recombinantes, tal como entenderá un experto en la materia. Por ejemplo, el peso medio de un aminoácido puede ser de aproximadamente 110 dáltones, es decir, 110 g/mol. Por lo tanto, en algunas realizaciones, puede usarse dividir el peso molecular de una proteína lineal entre 110 dáltones para aproximar el número de residuos de aminoácidos que contiene.
Como se usa en el presente documento, el término "polidispersidad" se refiere a una medida de la distribución de la masa molecular en una muestra de polímero dada. La polidispersidad se puede calcular dividiendo el peso molecular promedio en peso (Mw) entre el peso molecular promedio en número (Mn). Como se usa en el presente documento, el término "peso molecular promedio en peso" (Mw) generalmente se refiere a una medida de peso molecular que depende de las contribuciones de las moléculas de polímero según sus tamaños. El peso molecular promedio en peso
M , . w - EiVvAíf
— L - L
se puede definir mediante la fórmula: NiMi , donde M¡ es el peso molecular de una cadena y N¡ es el número de cadenas de ese peso molecular. Como se usa en el presente documento, el término "peso molecular promedio en número" (Mn) generalmente se refiere a una medida de peso molecular que se calcula dividiendo el peso total de todas las moléculas de polímero en una muestra entre el número total de moléculas de polímero en la muestra. El
Mn - —L-L
peso molecular promedio en número se puede definir mediante la fórmula: £w¡ , donde M¡ es el peso molecular de una cadena y Ni es el número de cadenas de ese peso molecular. Por ejemplo, un polímero monodispero, donde todas las cadenas de polímero son iguales, tiene una polidispersidad (Mw/Mn) de 1. En general, los promedios de peso molecular pueden determinarse mediante cromatografía de permeación en gel (GPC) y cromatografía de exclusión por tamaño (SEC). Cuanto mayor sea el índice de polidispersidad, más amplio será el peso molecular.
Como se usa en el presente documento, el término "relleno de tejido" se refiere en términos generales a un material que se puede proporcionar en y alrededor de tejido blando para añadir volumen, añadir soporte o tratar de otro modo una deficiencia del tejido blando. El término "relleno de tejido" también abarca rellenos dérmicos; sin embargo, el término "relleno dérmico" no debe interpretarse como una imposición de limitaciones en cuanto a la localización y el tipo de suministro de tal relleno. No obstante, los rellenos dérmicos descritos en el presente documento pueden abarcar generalmente el uso y el suministro de tales rellenos dérmicos en múltiples niveles debajo de la dermis. Como se usa en el presente documento, el término "tejido blando" puede referirse a aquellos tejidos que conectan, soportan o rodean otras estructuras y órganos del cuerpo. Por ejemplo, los tejidos blandos descritos en el presente documento pueden incluir, sin limitación, piel, tejidos dérmicos, tejidos subdérmicos, tejidos cutáneos, tejidos subcutáneos, tejido intradural, músculos, tendones, ligamentos, tejidos fibrosos, grasa, vasos sanguíneos y arterias, nervios y tejidos sinoviales (intradérmicos).
Como se usa en el presente documento, el término "reticulante derivado de epoxi" se refiere a un puente molecular entre dos restos en la misma cadena polimérica o cadenas separadas, que se obtiene mediante el empleo de un precursor de reticulación que incluye un grupo epóxido, por ejemplo 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), polietilenglicoldiglicidiléter (PEGDE o PEGDGE), o un ligador poliepoxi de fibroína de seda o fragmento de fibroína de seda. Sin querer limitarse a ninguna teoría en particular, al reaccionar con un centro reactivo en una cadena polimérica, incluso en la cadena lateral del polímero, el anillo epóxido se abre para formar un alcohol secundario y un nuevo enlace (Esquema 1). Los grupos reactivos incluyen, pero sin limitación, grupos nucleófilos tales como grupos carboxílicos, grupos amino o grupos hidroxilo.
Esquema 1
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que liga dos restos
Figure imgf000036_0001
que ............
modifica un resto FEGDE que modifica un resto, siendo PEGDE que modifica hidrolizado el otro grupo epoxi restos
O O
(frac, de fibrom.a de seda > Ü ¿.x v O . (frac de fibroma de seda)
W '° '^ X 7
ü O
Precursor de reticulador de Precursor de reticulador de
diepoxi de fibroina de seda diglicidilo de fibroma de seda
Como se usa en el presente documento, "autorreticulación" se refiere a a) reticulación entre dos hebras de polímeros de naturaleza química similar, por ejemplo, reticulación entre dos hebras de ácido hialurónico, o reticulación entre dos hebras de FPS, o b) reticulación entre grupos de reticulación en la misma hebra de polímeros para crear un éster cíclico (lactona), una amida cíclica, un constructo cíclico que incluye un resto de reticulación, o similares, por ejemplo reticulación entre dos grupos en la misma hebra de ácido hialurónico, o reticulación entre dos grupos en la misma hebra de FPS.
Como se usa en el presente documento, "reticulación de longitud cero" y/o "reticulación que incluye un enlace" y/o "reticulación usando un agente activador" se refiere a la reticulación entre dos grupos en hebras de polímero separadas, o la misma hebra de polímero, donde los grupos reaccionan directamente entre sí y no se inserta ningún resto de reticulación adicional entre ellos. La reticulación entre un grupo ácido carboxílico y una amina o alcohol, donde uno de los grupos es activado por un agente activador, por ejemplo una carbodiimida, es un ejemplo de reticulación de longitud cero.
Como se usa en el presente documento, el "efecto Tyndall" y/o "fenómeno de Tyndall" es un evento adverso que ocurre en algunos pacientes a los que se les administran rellenos de tejido. El efecto Tyndall se caracteriza por la aparición de una decoloración azul en el lugar de la piel donde se inyectó un relleno de tejido, lo que representa una composición de relleno dérmico visible a través de la epidermis translúcida. El efecto Tyndall se puede ver cuando materia particulada que dispersa la luz se dispersa en un medio por lo demás transmisor de luz, cuando la sección transversal de las partículas está en un intervalo específico, generalmente algo por debajo o cerca de la longitud de onda de la luz visible. Bajo el efecto Tyndall, la luz de longitud de onda más larga (p. ej., rojo) se transmite en mayor grado a través del medio, mientras que la luz de longitud de onda más corta (p. ej., azul) se refleja en mayor grado a través de la dispersión, dando la impresión general de que el medio es de color azul.
Fragmentos de proteína de seda
En algunas realizaciones, las composiciones basadas en proteína de seda y los fragmentos de proteína de seda, o los métodos para producirlos, pueden incluir los descritos en las publicaciones de solicitud de patente de EE. UU. n.° 2015/00933340, 2015/0094269, 2016/0193130, 2016/0022560, 2016/0022561, 2016/0022562, 2016/0022563, y 2016/0222579, 2016/0281294, y las patentes de EE. UU. n.29.187.538, 9.522.107, 9.517.191,9.522.108, 9.511.012, y 9.545.369.
Como se usa en el presente documento, los fragmentos de proteína de seda (FPS) se refieren generalmente a una mezcla, composición o población de péptidos y/o proteínas que se originan a partir de la seda. En algunas realizaciones, los FPS se producen como soluciones de mezcla de FPS sustancialmente puras y altamente escalables que pueden usarse en múltiples industrias para una variedad de aplicaciones. Las soluciones se generan a partir de material de proteína de seda intacta pura sin procesar y se procesan para retirar cualquier sericina y lograr el peso molecular promedio en peso (MW) y la polidispersidad de la mezcla de fragmentos deseados. Los parámetros del método seleccionado pueden alterarse para lograr distintas características finales del fragmento de proteína de seda según el uso previsto. La solución de fragmento final resultante son fragmentos de proteína de seda pura y agua con niveles de PPM a no detectables de contaminantes del proceso, niveles aceptables en los mercados farmacéutico, médico y cosmético de consumo. La concentración, el tamaño y la polidispersidad de los fragmentos de proteína de seda en la solución pueden alterarse aún más según el uso deseado y los requisitos de rendimiento. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura en la solución están sustancialmente desprovistos de sericina, tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, y tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 3,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura en la solución están sustancialmente desprovistos de sericina, tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, y tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 3,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura en la solución están sustancialmente desprovistos de sericina, tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, y tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 3,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura en la solución están sustancialmente desprovistos de sericina, tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, y tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 3,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura en la solución están sustancialmente desprovistos de sericina, tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa, y tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 3,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura en la solución están sustancialmente desprovistos de sericina, tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 80 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, y tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 3,0.
En una realización, los fragmentos de proteína de seda descritos en el presente documento se pueden preparar en una solución o como un sólido, por lo que el sólido se suspende en una solución fisiológica (p. ej., agua, solución salina y similares) o un gel de AH, como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, los fragmentos de proteína de seda descritos en el presente documento pueden prepararse en liposomas o microesferas antes de depositar los mismos en un gel de AH.
En una realización, las soluciones de seda de la presente divulgación se pueden usar para generar las composiciones de relleno de tejido descritas en el presente documento. En una realización, las soluciones pueden usarse para generar geles que pueden homogeneizarse con AH y agentes adicionales para preparar los rellenos de tejido descritos en el presente documento. Dependiendo de la solución de seda utilizada y los métodos para moldear las películas o geles, se logran diversas propiedades.
En algunas realizaciones, el porcentaje de contenido de FPS, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento es de al menos 0,01 %, o al menos 0,1 %, o al menos 0,2 %, o al menos 0,3 %, o al menos 0,4 %, o al menos 0,5 %, o al menos 0,6 %, o al menos 0,7 %, o al menos 0,8 %, o al menos 0,9 %, o al menos 1 %, o al menos 2 %, o al menos 3 %, o al menos 4 %, o al menos 5 %, o al menos 6 %, o al menos 7 %, o al menos 8 %, o al menos 9 %, o al menos 10 %, o al menos 11 %, o al menos 12 %, o al menos 13 %, o al menos 14 %, o al menos 15 %, o al menos 16 %, o al menos 17 %, o al menos 18 %, o al menos 19 %, o al menos 20 %, o al menos 21 %, o al menos 22 %, o al menos 23 %, o al menos 24 %, o al menos 25 %, o al menos 26 %, o al menos 27 %, o al menos 28 %, o al menos 29 %, o al menos 30 %, o al menos 31 %, o al menos 32 %, o al menos 33 %, o al menos 34 %, o al menos 35 %, o al menos 36 %, o al menos 37 %, o al menos 38 %, o al menos 39 %, o al menos 40 %, o al menos 41 %, o al menos 42 %, o al menos 43 %, o al menos 44 %, o al menos 45 %, o al menos 46 %, o al menos 47 %, o al menos 48 %, o al menos 49 %, o al menos 50 %, o al menos 51 %, o al menos 52 %, o al menos 53 %, o al menos 54 %, o al menos 55 %, o al menos 56 %, o al menos 57 %, o al menos 58 %, o al menos 59 %, o al menos 60 %, o al menos 61 %, o al menos 62 %, o al menos 63 %, o al menos 64 %, o al menos 65 %, o al menos 66 %, o al menos 67 %, o al menos 68 %, o al menos 69 %, o al menos 70 %, o al menos 71 %, o al menos 72 %, o al menos 73 %, o al menos 74 %, o al menos 75 %, o al menos 76 %, o al menos 77 %, o al menos 78 %, o al menos 79 %, o al menos 80 %, o al menos 81 %, o al menos 82 %, o al menos 83 %, o al menos 84 %, o al menos 85 %, o al menos 86 %, o al menos 87 %, o al menos 88 %, o al menos 89 %, o al menos 90 %, o al menos 91 %, o al menos 92 %, o al menos 93 %, o al menos 94 %, o al menos 95 %, o al menos 96 %, o al menos 97 %, o al menos 98 %, o al menos 99 %, o al menos 99,5 %, o al menos 99,9 %.
En algunas realizaciones, el porcentaje de contenido de FPS, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento es de como máximo 0,01 %, o como máximo 0,1 %, o como máximo 0,2 %, o como máximo 0,3 %, o como máximo 0,4 %, o como máximo como máximo 0,5 %, o como máximo 0,6 %, o como máximo 0,7 %, o como máximo 0,8 %, o como máximo 0,9 %, o como máximo 1 %, o como máximo 2 %, o como máximo 3 %, o como máximo 4 %, o como máximo 5 %, o como máximo 6 %, o como máximo 7 %, o como máximo 8 %, o como máximo 9 %, o como máximo 10 %, o como máximo 11 %, o como máximo 12 %, o como máximo 13 %, o como máximo 14 %, o como máximo 15 %, o como máximo 16 %, o como máximo 17 %, o como máximo 18 %, o como máximo 19 %, o como máximo 20 %, o como máximo como máximo 21 %, o como máximo 22 %, o como máximo 23 %, o como máximo 24 %, o como máximo 25 %, o como máximo 26 %, o como máximo 27 %, o como máximo 28 %, o como máximo 29 %, o como máximo 30 %, o como máximo 31 %, o como máximo 32 %, o como máximo 33 %, o como máximo 34 %, o como máximo 35 %, o como máximo 36 %, o como máximo 37 %, o como máximo 38 %, o como máximo 39 %, o como máximo 40 %, o como máximo 41 %, o como máximo 42 %, o como máximo 43 %, o como máximo 44 %, o como máximo 45 %, o como máximo 46 %, o como máximo 47 %, o como máximo 48 %, o como máximo 49 %, o como máximo 50 %, o como máximo 51 %, o como máximo 52 %, o como máximo 53 %, o como máximo 54 %, o como máximo 55 %, o como máximo 56 %, o como máximo 57 %, o como máximo 58 %, o como máximo 59 %, o como máximo 60 %, o como máximo 61 %, o como máximo 62 %, o como máximo 63 %, o como máximo 64 %, o como máximo 65 %, o como máximo 66 %, o como máximo 67 %, o como máximo 68 %, o como máximo 69 %, o como máximo 70 %, o como máximo 71 %, o como máximo 72 %, o como máximo 73 %, o como máximo 74 %, o como máximo 75 %, o como máximo 76 %, o como máximo 77 %, o como máximo 78 %, o como máximo 79 %, o como máximo 80 %, o como máximo 81 %, o como máximo 82 %, o como máximo 83 %, o como máximo 84 %, o como máximo 85 %, o como máximo 86 %, o como máximo 87 %, o como máximo 88 %, o como máximo 89 %, o como máximo 90 %, o como máximo 91 %, o como máximo 92 %, o como máximo 93 %, o como máximo 94 %, o como máximo 95 %, o como máximo 96 %, o como máximo como máximo 97 %, o como máximo 98 %, o como máximo 99 %, o como máximo 99,5 %, o como máximo 99,9 %.
En algunas realizaciones, el porcentaje de contenido de FPS, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento es de aproximadamente 0,01 %, o aproximadamente 0,1 %, o aproximadamente 0,2 %, o aproximadamente 0,3 %, o aproximadamente 0,4 %, o aproximadamente 0,5 %, o aproximadamente 0,6 %, o aproximadamente 0,7 %, o aproximadamente 0,8 %, c aproximadamente 0,9 %, o aproximadamente 1 %, o aproximadamente 2 %, o aproximadamente 3 %, o aproximadamente 4 %, o aproximadamente 5 %, o aproximadamente 6 %, o aproximadamente 7 %, o aproximadamente 8 %, o aproximadamente 9 %, o aproximadamente 10 %, o aproximadamente 11 %, o aproximadamente 12 %, o aproximadamente 13 %, o aproximadamente 14 %, o aproximadamente 15 %, o aproximadamente 16 %, o aproximadamente 17 %, o aproximadamente 18 %, o aproximadamente 19 %, o aproximadamente 20 %, o aproximadamente 21 %, o aproximadamente 22 %, o aproximadamente 23 %, o aproximadamente 24 %, o aproximadamente 25 %, o aproximadamente 26 %, o aproximadamente 27 %, o aproximadamente 28 %, o aproximadamente 29 %, o aproximadamente 30 %, o aproximadamente 31 %, o aproximadamente 32 %, o aproximadamente 33 %, o aproximadamente 34 %, o aproximadamente 35 %, o aproximadamente 36 %, o aproximadamente 37 %, o aproximadamente 38 %, o aproximadamente 39 %, o aproximadamente 40 %, o aproximadamente 41 %, o aproximadamente 42 %, o aproximadamente 43 %, o aproximadamente 44 %, o aproximadamente 45 %, o aproximadamente 46 %, o aproximadamente 47 %, o aproximadamente 48 %, o aproximadamente 49 %, o aproximadamente 50 %, o aproximadamente 51 %, o aproximadamente 52 %, o aproximadamente 53 %, o aproximadamente 54 %, o aproximadamente 55 %, o aproximadamente 56 %, o aproximadamente 57 %, o aproximadamente 58 %, o aproximadamente 59 %, o aproximadamente 60 %, o aproximadamente 61 %, o aproximadamente 62 %, o aproximadamente 63 %, o aproximadamente 64 %, o aproximadamente 65 %, o aproximadamente 66 %, o aproximadamente 67 %, o aproximadamente 68 %, o aproximadamente 69 %, o aproximadamente 70 %, o aproximadamente 71 %, o aproximadamente 72 %, o aproximadamente 73 %, o aproximadamente 74 %, o aproximadamente 75 %, o aproximadamente 76 %, o aproximadamente 77 %, o aproximadamente 78 %, o aproximadamente 79 %, o aproximadamente 80 %, o aproximadamente 81 %, o aproximadamente 82 %, o aproximadamente 83 %, o aproximadamente 84 %, o aproximadamente 85 %, o aproximadamente 86 %, o aproximadamente 87 %, o aproximadamente 88 %, o aproximadamente 89 %, o aproximadamente 90 %, o aproximadamente 91 %, o aproximadamente 92 %, o aproximadamente 93 %, o aproximadamente 94 %, o aproximadamente 95 %, o aproximadamente 96 %, o aproximadamente 97 %, o aproximadamente 98 %, o aproximadamente 99 %, o aproximadamente 99,5 %, o aproximadamente 99,9 %.
En algunas realizaciones, el porcentaje de contenido de FPS, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento está entre aproximadamente 0,01 % y aproximadamente 100 %, o aproximadamente 0,01 % y aproximadamente 99,9 %, o aproximadamente 0,01 % y aproximadamente 75 %; o entre aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 95 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 95 %, o aproximadamente 10 % a aproximadamente 95 %; o entre aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 1 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 2 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 3 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 4 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 5 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 6 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 7 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 8 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 9 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 10 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 11 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 12 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 13 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 14 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 15 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 16 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 17 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 18 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 19 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 20 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 21 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 22 %, o aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 23 %, o de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 24 %, o de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 25 %; o entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 2 %, o aproximadamente 1 % y aproximadamente 3 %, o aproximadamente 1 % y aproximadamente 4 %, o aproximadamente 1 % y aproximadamente 5 %, o aproximadamente 1 % y aproximadamente 6 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 7 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 8 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 9 %, o aproximadamente 1 %. a aproximadamente 10 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 11 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 12 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 13 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 14 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 15 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 16 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 17 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 18 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 19 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 20 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 21 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 22 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 23 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 24 %, o aproximadamente 1 % a aproximadamente 25 %; o entre aproximadamente 10 % y aproximadamente 20 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 25 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 30 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 35 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 40 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 45 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 50 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 55 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 60 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 65 %, o aproximadamente 10 % y aproximadamente 70 %, o aproximadamente 10 % a aproximadamente 75 %, o aproximadamente 10 % a aproximadamente 80 %, o aproximadamente 10 % a aproximadamente 85 %, o aproximadamente 10 % a aproximadamente 90 %, o aproximadamente 10 % a aproximadamente 100 %.
El FPS descrito en el presente documento puede tener una variedad de propiedades mecánicas y físicas dependiendo del grado de cristalinidad de los péptidos y/o proteínas FPS. En una realización, una composición de FPS de la presente divulgación no es soluble en una solución acuosa debido a la cristalinidad de la proteína. En una realización, una composición de FPS de la presente divulgación es soluble en una solución acuosa. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina de aproximadamente dos tercios y una región amorfa de aproximadamente un tercio. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina de aproximadamente la mitad y una región amorfa de aproximadamente la mitad. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 99 % y una región amorfa del 1 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 95 % y una región amorfa del 5 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 90 % y una región amorfa del 10 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 85 % y una región amorfa del 15 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 80 % y una región amorfa del 20 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 75 % y una región amorfa del 25 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 70 % y una región amorfa del 30 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 65 % y una región amorfa del 35 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 60 % y una región amorfa del 40 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 50 % y una región amorfa del 50 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 40 % y una región amorfa del 60 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 35 % y una región amorfa del 65 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 30 % y una región amorfa del 70 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 25 % y una región amorfa del 75 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 20 % y una región amorfa del 80 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 15 % y una región amorfa del 85 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 10 % y una región amorfa del 90 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 5 % y una región amorfa del 90 %. En una realización, los FPS de una composición de la presente divulgación incluyen una parte cristalina del 1 % y una región amorfa del 99 %.
En algunas realizaciones, las propiedades físicas y mecánicas del FPS varían con el grado de presencia en la composición del FPS de las regiones de hélice a y/o espiral aleatoria. En algunas realizaciones, un hidrogel de FPS divulgado en el presente documento tiene una estructura de proteína que está sustancialmente libre de regiones de hélice a y espirales aleatorias. En aspectos de estas realizaciones, un hidrogel tiene una estructura de proteína que incluye, p.ej., aproximadamente 5 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 10 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 20 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 25 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 30 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 35 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 40 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 45 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, o aproximadamente 50 % de regiones de hélices a y espirales aleatorias. En otros aspectos de estas realizaciones, un hidrogel tiene una estructura de proteína que incluye, p.ej., como máximo 5 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 10 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 15 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 20 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 25 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 30 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 35 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 40 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 45 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, como máximo 50 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias. En otros aspectos más de estas realizaciones, un hidrogel tiene una estructura de proteína que incluye, p. ej., aproximadamente 5 % a aproximadamente 10 % de regiones de hélice a y espiral aleatoria, aproximadamente 5 % a aproximadamente 15 % de regiones de hélice a y espiral aleatoria, aproximadamente 5 % a aproximadamente 20 % de regiones de hélice a y espiral aleatoria, aproximadamente 5 % a aproximadamente 25 % de regiones de hélice a y espiral aleatoria, aproximadamente 5 % a aproximadamente 30 % de regiones de hélice a y espiral aleatoria, aproximadamente 5 % a aproximadamente 40 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 10 % a aproximadamente 20 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias, aproximadamente 10 % a aproximadamente 30 % de regiones de hélice a y espirales aleatorias regiones de espiral, aproximadamente 15 % a aproximadamente 25 % de regiones de hélice a y de espiral aleatoria, aproximadamente 15 % a aproximadamente 30 % de regiones de hélice a y espiral aleatoria, o aproximadamente 15 % a aproximadamente 35 % de regiones de hélice a y espiral aleatoria.
En algunas realizaciones, las composiciones de solución FPS de la presente divulgación tienen estabilidad de almacenamiento, es decir, no gelificarán lenta o espontáneamente cuando se almacenan en una solución acuosa y allí, sin agregación aparente de fragmentos y/o aumento en el peso molecular con el tiempo, de 10 días a 3 años dependiendo de las condiciones de almacenamiento, porcentaje de seda y número de envíos y condiciones de envío. Adicionalmente, el pH puede alterarse para prolongar la vida útil y/o apoyar las condiciones de envío al evitar el plegamiento y la agregación prematuros de la seda. En una realización, una composición de solución de FPS de la presente divulgación tiene una estabilidad de almacenamiento de hasta 2 semanas a temperatura ambiente (TA). En una realización, una composición de solución de FPS de la presente divulgación tiene una estabilidad de almacenamiento de hasta 4 semanas a temperatura ambiente. En una realización, una composición de solución de FPS de la presente divulgación tiene una estabilidad de almacenamiento de hasta 6 semanas a temperatura ambiente. En una realización, una composición de solución de FPS de la presente divulgación tiene una estabilidad de almacenamiento de hasta 8 semanas a temperatura ambiente. En una realización, una composición de solución de FPS de la presente divulgación tiene una estabilidad de almacenamiento de hasta 10 semanas a temperatura ambiente. En una realización, una composición de solución de FPS de la presente divulgación tiene una estabilidad de almacenamiento de hasta 12 semanas a temperatura ambiente. En una realización, una composición de solución de FPS de la presente divulgación tiene una estabilidad de almacenamiento que oscila desde aproximadamente 4 semanas hasta aproximadamente 52 semanas a TA. La Tabla 1 a continuación muestra los resultados de la prueba de estabilidad de almacenamiento para las realizaciones de las composiciones de FPS de la presente divulgación.
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Se puede añadir un aditivo conocido tal como una vitamina (p. ej., vitamina C) a una composición de solución de FPS de la presente divulgación para crear un gel que es estable desde 10 días hasta 3 años a temperatura ambiente (TA). Ambos ejemplos, una composición de FPS y la misma con un aditivo, se pueden liofilizar para potenciar el control de almacenamiento que va de 10 días a 10 años, dependiendo de las condiciones de almacenamiento y envío. El polvo de seda liofilizado también se puede usar como materia prima en los mercados médico, de consumo y electrónico. Adicionalmente, el polvo de seda liofilizado se puede resuspender en agua, HFIP o solución orgánica después del almacenamiento para crear soluciones de seda de concentraciones variables, incluidas soluciones de mayor concentración que las producidas inicialmente. En otra realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda se secan utilizando un evaporador rototérmico u otros métodos conocidos en la materia para crear una forma de proteína seca que contiene menos del 10 % de agua en masa.
Los FPS usados en los rellenos de tejido y los métodos divulgados en el presente documento se pueden manipular e incorporar de diversas formas, por ejemplo, en forma de solución, que se puede combinar con otros materiales (p. ej., AH) para preparar las composiciones de relleno de tejido descritas en el presente documento. Los siguientes son ejemplos no limitantes de intervalos adecuados para diversos parámetros en y para la preparación de las soluciones de seda de la presente divulgación. Las soluciones de seda de la presente divulgación pueden incluir uno o más, pero no necesariamente todos, de estos parámetros y pueden prepararse usando diversas combinaciones de intervalos de tales parámetros.
En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 30 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 25 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 20 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 19 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 18 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 17 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 16 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 15 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 14 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 13 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 12 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 11 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 10 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 9 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 8 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 7 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 6 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 3 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 2 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 1 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,9 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,8 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,7 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,6 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,3 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,2 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es inferior al 0,1 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,1 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,2 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,3 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,6 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,7 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,8 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 0,9 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 1 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 2 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 3 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 6 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 7 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 8 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 9 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 10 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 11 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 12 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 13 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 14 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 15 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 16 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 17 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 18 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 19 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 20 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución es superior al 25 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 30 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 25 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 20 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 15 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 10 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 9 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 8 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 7 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 6,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 6 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 5,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 4,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 3,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 3 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 2,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 2,0 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 2,4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre el 0,5 % y el 5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,5 % y 4,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,5 % y 4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,5 % y 3,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,5 % y 3 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,5 % y 2,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 1 y 4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 1 y 3,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 1 y 3 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 1 y 2,5 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 1 y 2,4 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 1 y 2 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 20 % y 30 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 0,1 % y 6 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 6 % y 10 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 6 % y 8 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 6 % y 9 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 10 % y 20 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 11 % y 19 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 12 % y 18 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 13 % y 17 %. En una realización, el porcentaje de seda en la solución está entre 14 % y 16 %.
En una realización, las composiciones de seda descritas en el presente documento pueden combinarse con AH para formar una composición de relleno de tejido. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 30 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 25 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 20 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 19 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 18 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 17 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 16 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 15 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 14 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 13 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 12 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 11 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 10 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 7 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 2 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 1 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,9 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,8 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,7 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,6 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,3 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,2 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,1 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la
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composición de relleno de tejido es superior al 1 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 2 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 7 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 10 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 11 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 12 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 13 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 14 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 15 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 16 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 17 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 18 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 19 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 20 % En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido es superior al 25 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 30 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 25 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 20 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 15 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 10 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 7 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 6,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 5,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 4,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 3,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 2,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 2,0 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 2,4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,5 % y 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,5 % y 4,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,5 % y 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,5 % y 3,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,5 % y 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,5 % y 2,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 1 y 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 1 y 3,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 1 y 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 1 y 2,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 1 y 2,4 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 1 y 2 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 20 % y 30 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 0,1 % y 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 6 % y 10 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 6 % y 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 6 % y 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 10 % y 20 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 11 % y 19 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 12 % y 18 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 13 % y 17 %. En una realización, el porcentaje en peso de seda en la composición de relleno de tejido está entre 14 % y 16 %.
En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es desde no detectable hasta 30 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es desde no detectable hasta 5 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es de 1 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es de 2 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es de 3 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es de 4 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es de 5 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es de 10 %. En una realización, el porcentaje de sericina en la solución o composición de relleno de tejido es de 30 %.
En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 0 a 1 año. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 0 a 2 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 0 a 3 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 0 a 4 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 0 a 5 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 1 a 2 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 1 a 3 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 1 a 4 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 1 a 5 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 2 a 3 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 2 a 4 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 2 a 5 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 3 a 4 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 3 a 5 años. En una realización, la estabilidad de la solución de fragmentos de seda-LiBr es de 4 a 5 años.
En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 10 días a 6 meses. En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 6 meses a 12 meses. En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 12 meses a 18 meses. En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 18 meses a 24 meses. En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 24 meses a 30 meses. En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 30 meses a 36 meses. En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 36 meses a 48 meses. En una realización, la estabilidad de las composiciones de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda que pueden incluirse en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 48 meses a 60 meses.
En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 250 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 5 kDa hasta 150 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 6 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 6 kDa hasta 17 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 17 kDa hasta 39 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 39 kDa hasta 80 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 80 kDa hasta 150 kDa.
En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 250 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 240 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 230 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 220 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 210 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 200 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 190 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 180 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 170 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 160 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 150 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 140 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 130 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 120 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 110 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 100 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 90 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 80 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 70 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 60 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 50 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 40 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 30 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 20 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 kDa hasta 10 kDa.
En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 1 hasta 5 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 5 hasta 10 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 10 hasta 15 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 15 hasta 20 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 20 hasta 25 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 25 hasta 30 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 30 hasta 35 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 35 hasta 40 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 40 hasta 45 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 45 hasta 50 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 50 hasta 55 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 55 hasta 60 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 60 hasta 65 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 65 hasta 70 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 70 hasta 75 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 75 hasta 80 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 80 hasta 85 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 85 hasta 90 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 90 hasta 95 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 95 hasta 100 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 100 hasta 105 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 105 hasta 110 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 110 hasta 115 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 115 hasta 120 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 120 hasta 125 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 125 hasta 130 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 130 hasta 135 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 135 hasta 140 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 140 hasta 145 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 145 hasta 150 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 150 hasta 155 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 155 hasta 160 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 160 hasta 165 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 165 hasta 170 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 170 hasta 175 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 175 hasta 180 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 180 hasta 185 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 185 hasta 190 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 190 hasta 195 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 195 hasta 200 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 200 hasta 205 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 205 hasta 210 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 210 hasta 215 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 215 hasta 220 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 220 hasta 225 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 225 hasta 230 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 230 hasta 235 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 235 hasta 240 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 240 hasta 245 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 245 hasta 250 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 250 hasta 255 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 255 hasta 260 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 260 hasta 265 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio oscila desde 265 hasta 270 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 270 hasta 275 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 275 hasta 280 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 280 hasta 285 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 285 hasta 290 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 290 hasta 295 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 295 hasta 300 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 300 hasta 305 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 305 hasta 310 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 310 hasta 315 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 315 hasta 320 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 320 hasta 325 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 325 hasta 330 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 330 hasta 335 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 35 hasta 340 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 340 hasta 345 kDa. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde 345 hasta 350 kDa.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende uno o más de seda de bajo peso molecular, seda de peso molecular medio y seda de peso molecular alto.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende uno o más de seda de peso molecular bajo, seda de peso molecular medio y seda de peso molecular alto. En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular bajo y seda de peso molecular medio. En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular bajo y seda de peso molecular alto. En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular medio y seda de peso molecular alto. En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular bajo, seda de peso molecular medio y seda de peso molecular alto.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular bajo y seda de peso molecular medio. En algunas realizaciones, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular medio está entre aproximadamente 99:1 y aproximadamente 1:99, entre aproximadamente 95:5 y aproximadamente 5:95, entre aproximadamente 90:10 y aproximadamente 10:90, entre aproximadamente 75:25 y aproximadamente 25:75, entre aproximadamente 65:35 y aproximadamente 35:65, o entre aproximadamente 55:45 y aproximadamente 45:55. En algunas realizaciones, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular medio está entre aproximadamente 99:1 y aproximadamente 55:45, entre aproximadamente 95:5 y aproximadamente 45:55, entre aproximadamente 90:10 y aproximadamente 35:65, entre aproximadamente 75:25 y aproximadamente 15:85, entre aproximadamente 65:35 y aproximadamente 10:90, o entre aproximadamente 55:45 y aproximadamente 1:99. En una realización, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular medio es de aproximadamente 99:1, aproximadamente 98:2, aproximadamente 97:3, aproximadamente 96:4, aproximadamente 95:5, aproximadamente 94:6. aproximadamente 93:7, aproximadamente 92:8, aproximadamente 91:9, aproximadamente 90:10, aproximadamente 89:11, aproximadamente 88:12, aproximadamente 87:13, aproximadamente 86:14, aproximadamente 85:15, aproximadamente 84:16, aproximadamente 83:17, aproximadamente 82:18, aproximadamente 81:19, aproximadamente 80:20, aproximadamente 79:21, aproximadamente 78:22, aproximadamente 77:23, aproximadamente 76:24, aproximadamente 75:25, aproximadamente 74:26, aproximadamente 73:27, aproximadamente 72:28, aproximadamente 71:29, aproximadamente 70:30, aproximadamente 69:31, aproximadamente 68:32, aproximadamente 67:33, aproximadamente 66:34, aproximadamente 65:35, aproximadamente 64:36, aproximadamente 63:37, aproximadamente 62:38, aproximadamente 61:39, aproximadamente 60:40, aproximadamente 59:41, aproximadamente 58:42, aproximadamente 57:43, aproximadamente 56:44, aproximadamente 55:45, aproximadamente 54:46, aproximadamente 53:47, aproximadamente 52:48, aproximadamente 51:49, aproximadamente 50:50, aproximadamente 49:51, aproximadamente 48:52, aproximadamente 47:53, aproximadamente 46:54, aproximadamente 45:55, aproximadamente 44:56, aproximadamente 43:57, aproximadamente 42:58, aproximadamente 41:59, aproximadamente 40:60, aproximadamente 39:61, aproximadamente 38:62, aproximadamente 37:63, aproximadamente 36:64, aproximadamente 35:65, aproximadamente 34:66, aproximadamente 33:67, aproximadamente 32:68, aproximadamente 31:69, aproximadamente 30:70, aproximadamente 29:71, aproximadamente 28:72, aproximadamente 27:73, aproximadamente 26:74, aproximadamente 25:75, aproximadamente 24:76, aproximadamente 23:77, aproximadamente 22:78, aproximadamente 21:79, aproximadamente 20:80, aproximadamente 19:81, aproximadamente 18:82, aproximadamente 17:83, aproximadamente 16:84, aproximadamente 15:85, aproximadamente 14:86, aproximadamente 13:87, aproximadamente 12:88, aproximadamente 11:89, aproximadamente 10:90, aproximadamente 9:91, aproximadamente 8:92, aproximadamente 7:93, aproximadamente 6:94, aproximadamente 5:95, aproximadamente 4:96, aproximadamente 3:97, aproximadamente 2:98 o aproximadamente 1:99. En una realización, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular medio es aproximadamente 9:1, aproximadamente 8:1, aproximadamente 7:1, aproximadamente 6:1, aproximadamente 5:1, aproximadamente 4:1, aproximadamente 3:1, aproximadamente 2:1 o aproximadamente 1:1. En una realización, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular medio es aproximadamente 1:9, aproximadamente 1:8, aproximadamente 1:7, aproximadamente 1:6, aproximadamente 1:5, aproximadamente 1:4, aproximadamente 1:3, aproximadamente 1:2 o aproximadamente 1:1.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular bajo y seda de alto peso molecular. En algunas realizaciones, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular alto está entre aproximadamente 99:1 y aproximadamente 1:99, entre aproximadamente 95:5 y aproximadamente 5:95, entre aproximadamente 90:10 y aproximadamente 10:90, entre aproximadamente 75:25 y aproximadamente 25:75, entre aproximadamente 65:35 y aproximadamente 35:65, o entre aproximadamente 55:45 y aproximadamente 45:55. En algunas realizaciones, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular alto está entre aproximadamente 99:1 y aproximadamente 55:45, entre aproximadamente 95:5 y aproximadamente 45:55, entre aproximadamente 90:10 y aproximadamente 35:65, entre aproximadamente 75:25 y aproximadamente 15:85, entre aproximadamente 65:35 y aproximadamente 10:90, o entre aproximadamente 55:45 y aproximadamente 1:99. En una realización, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo y la seda de peso molecular alto es aproximadamente 99:1, aproximadamente 98:2, aproximadamente 97:3, aproximadamente 96:4, aproximadamente 95:5, aproximadamente 94:6. aproximadamente 93:7, aproximadamente 92:8, aproximadamente 91:9, aproximadamente 90:10, aproximadamente 89:11, aproximadamente 88:12, aproximadamente 87:13, aproximadamente 86:14, aproximadamente 85:15, aproximadamente 84:16, aproximadamente 83:17, aproximadamente 82:18, aproximadamente 81:19, aproximadamente 80:20, aproximadamente 79:21, aproximadamente 78:22, aproximadamente 77:23, aproximadamente 76:24, aproximadamente 75:25, aproximadamente 74:26, aproximadamente 73:27, aproximadamente 72:28, aproximadamente 71:29, aproximadamente 70:30, aproximadamente 69:31, aproximadamente 68:32, aproximadamente 67:33, aproximadamente 66:34, aproximadamente 65:35, aproximadamente 64:36, aproximadamente 63:37, aproximadamente 62:38, aproximadamente 61:39, aproximadamente 60:40, aproximadamente 59:41, aproximadamente 58:42, aproximadamente 57:43, aproximadamente 56:44, aproximadamente 55:45, aproximadamente 54:46, aproximadamente 53:47, aproximadamente 52:48, aproximadamente 51:49, aproximadamente 50:50, aproximadamente 49:51, aproximadamente 48:52, aproximadamente 47:53, aproximadamente 46:54, aproximadamente 45:55, aproximadamente 44:56, aproximadamente 43:57, aproximadamente 42:58, aproximadamente 41:59, aproximadamente 40:60, aproximadamente 39:61, aproximadamente 38:62, aproximadamente 37:63, aproximadamente 36:64, aproximadamente 35:65, aproximadamente 34:66, aproximadamente 33:67, aproximadamente 32:68, aproximadamente 31:69, aproximadamente 30:70, aproximadamente 29:71, aproximadamente 28:72, aproximadamente 27:73, aproximadamente 26:74, aproximadamente 25:75, aproximadamente 24:76, aproximadamente 23:77, aproximadamente 22:78, aproximadamente 21:79, aproximadamente 20:80, aproximadamente 19:81, aproximadamente 18:82, aproximadamente 17:83, aproximadamente 16:84, aproximadamente 15:85, aproximadamente 14:86, aproximadamente 13:87, aproximadamente 12:88, aproximadamente 11:89, aproximadamente 10:90, aproximadamente 9:91, aproximadamente 8:92, aproximadamente 7:93, aproximadamente 6:94, aproximadamente 5:95, aproximadamente 4:96, aproximadamente 3:97, aproximadamente 2:98 o aproximadamente 1:99.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular medio y seda de peso molecular alto. En algunas realizaciones, la relación p/p entre la seda de peso molecular medio y la seda de peso molecular alto está entre aproximadamente 99:1 y aproximadamente 1:99, entre aproximadamente 95:5 y aproximadamente 5:95, entre aproximadamente 90:10 y aproximadamente 10:90, entre aproximadamente 75:25 y aproximadamente 25:75, entre aproximadamente 65:35 y aproximadamente 35:65, o entre aproximadamente 55:45 y aproximadamente 45:55. En algunas realizaciones, la relación p/p entre la seda de peso molecular medio y la seda de peso molecular alto está entre aproximadamente 99:1 y aproximadamente 55:45, entre aproximadamente 95:5 y aproximadamente 45:55, entre aproximadamente 90:10 y aproximadamente 35:65, entre aproximadamente 75:25 y aproximadamente 15:85, entre aproximadamente 65:35 y aproximadamente 10:90, o entre aproximadamente 55:45 y aproximadamente 1:99. En una realización, la relación p/p entre la seda de peso molecular medio y la seda de peso molecular alto es aproximadamente 99:1, aproximadamente 98:2, aproximadamente 97:3, aproximadamente 96:4, aproximadamente 95:5, aproximadamente 94:6.
aproximadamente 93:7, aproximadamente 92:8, aproximadamente 91:9, aproximadamente 90:10, aproximadamente 89:11, aproximadamente 88:12, aproximadamente 87:13, aproximadamente 86:14, aproximadamente 85:15, aproximadamente 84:16, aproximadamente 83:17, aproximadamente 82:18, aproximadamente 81:19, aproximadamente 80:20, aproximadamente 79:21, aproximadamente 78:22, aproximadamente 77:23, aproximadamente 76:24, aproximadamente 75:25, aproximadamente 74:26, aproximadamente 73:27, aproximadamente 72:28, aproximadamente 71:29, aproximadamente 70:30, aproximadamente 69:31, aproximadamente 68:32, aproximadamente 67:33, aproximadamente 66:34, aproximadamente 65:35, aproximadamente 64:36, aproximadamente 63:37, aproximadamente 62:38, aproximadamente 61:39, aproximadamente 60:40, aproximadamente 59:41, aproximadamente 58:42, aproximadamente 57:43, aproximadamente 56:44, aproximadamente 55:45, aproximadamente 54:46, aproximadamente 53:47, aproximadamente 52:48, aproximadamente 51:49, aproximadamente 50:50, aproximadamente 49:51, aproximadamente 48:52, aproximadamente 47:53, aproximadamente 46:54, aproximadamente 45:55, aproximadamente 44:56, aproximadamente 43:57, aproximadamente 42:58, aproximadamente 41:59, aproximadamente 40:60, aproximadamente 39:61, aproximadamente 38:62, aproximadamente 37:63, aproximadamente 36:64, aproximadamente 35:65, aproximadamente 34:66, aproximadamente 33:67, aproximadamente 32:68, aproximadamente 31:69, aproximadamente 30:70, aproximadamente 29:71, aproximadamente 28:72, aproximadamente 27:73, aproximadamente 26:74, aproximadamente 25:75, aproximadamente 24:76, aproximadamente 23:77, aproximadamente 22:78, aproximadamente 21:79, aproximadamente 20:80, aproximadamente 19:81, aproximadamente 18:82, aproximadamente 17:83, aproximadamente 16:84, aproximadamente 15:85, aproximadamente 14:86, aproximadamente 13:87, aproximadamente 12:88, aproximadamente 11:89, aproximadamente 10:90, aproximadamente 9:91, aproximadamente 8:92, aproximadamente 7:93, aproximadamente 6:94, aproximadamente 5:95, aproximadamente 4:96, aproximadamente 3:97, aproximadamente 2:98 o aproximadamente 1:99.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir proteína de seda que comprende seda de peso molecular bajo, seda de peso molecular medio y seda de peso molecular alto. En una realización, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo, la seda de peso molecular medio y la seda de peso molecular alto es de aproximadamente 1:1:8, 1:2:7, 1:3:6, 1:4:5, 1:5:4, 1:6:3, 1:7:2, 1:8:1, 2:1:7, 2:2:6, 2:3:5, 2:4:4, 2:5:3, 2:6:2, 2:7:1,3:1:6, 3:2:5, 3:3:4, 3:4:3, 3:5:2, 3:6:1,4:1:5, 4:2:4, 4:3:3, 4:4:2, 4:5:1,5:1:4, 5:2:3, 5:3:2, 5:4:1,6:1:3, 6:2:2, 6:3:1, 7:1:2, 7:2:1 o 8:1:1. En una realización, la relación p/p entre la seda de peso molecular bajo, la seda de peso molecular medio y la seda de peso molecular alto es de aproximadamente 3:0,1:0,9, 3:0,2:0,8, 3:0,3:0,7, 3:0,4:0,6, 3:0,5:0,5, 3:0,6:0,4, 3:0,7:0,3, 3:0,8:0,2 o 3:0,9:0,1.
En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 5,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 3,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1 hasta aproximadamente 1,5. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 1,5 hasta aproximadamente 2,0. En una realización, los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda incorporados en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tienen una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 2,0 hasta aproximadamente 2,5. En una realización, una composición de la presente divulgación que tiene fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura, tiene una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 2,0 hasta aproximadamente 3,0. En una realización, una composición de la presente divulgación que tiene fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura, tiene una polidispersidad que oscila desde aproximadamente 2,5 hasta aproximadamente 3,0.
En una realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS tiene niveles no detectables de residuos de LiBr. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS está entre 10 ppm y 1000 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS está entre 10 ppm y 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 25 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 50 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 75 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 100 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 500 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 600 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 700 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 800 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 900 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 1000 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 500 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 450 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 350 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 250 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 150 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 100 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 100 ppm a 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 200 ppm a 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 300 ppm a 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de LiBr en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 400 ppm a 500 ppm.
En una realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS que tiene fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura, tiene niveles no detectables de residuos de Na2CO3. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 100 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 500 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 600 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 700 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 800 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 900 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es inferior a 1000 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 500 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 450 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 350 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 250 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 150 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de no detectable a 100 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 100 ppm a 200 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 200 ppm a 300 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 300 ppm a 400 ppm. En una realización, la cantidad de residuos de Na2CO3 en un relleno de tejido descrito en el presente documento que incluye FPS es de 400 ppm a 500 ppm.
En una realización, la solubilidad en agua de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación es de 50 a 100 %. En una realización, la solubilidad en agua de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación es de 60 a 100 %. En una realización, la solubilidad en agua de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación es de 70 a 100 %. En una realización, la solubilidad en agua de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación es de 80 a 100 %. En una realización, la solubilidad en agua es de 90 a 100 %. En una realización, los fragmentos basados en fibroína de seda de la presente divulgación no son solubles en soluciones acuosas.
En una realización, la solubilidad de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación en soluciones orgánicas es de 50 a 100 %. En una realización, la solubilidad de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación en soluciones orgánicas es de 60 a 100 %. En una realización, la solubilidad de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación en soluciones orgánicas es de 70 a 100 %. En una realización, la solubilidad de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación en soluciones orgánicas es de 80 a 100 %. En una realización, la solubilidad de los fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura de la presente divulgación en soluciones orgánicas es de 90 a 100 %. En una realización, los fragmentos basados en fibroína de seda de la presente divulgación no son solubles en soluciones orgánicas.
Los métodos para elaborar fragmentos de proteína de seda usados en las composiciones de la presente divulgación se demuestran en las publicaciones de solicitud de patente de EE. UU. n.° 2015/00933340, 2015/0094269, 2016/0193130, 2016/0022560, 2016/0022561, 2016/0022562, 2016/0022563, y 2016/0222579, 2016/0281294, y las patentes de EE. UU. n.29.187.538, 9.522.107, 9.517.191, 9.522.108, 9.511.012, y 9.545.3 69. Sin embargo, se demuestra un método ejemplar en la Fig. 1, que es un diagrama de flujo que muestra diversas realizaciones para producir fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura (FPS) de la presente divulgación. Debe entenderse que no todas las etapas ilustradas se requieren necesariamente para fabricar todas las soluciones de seda de la presente divulgación. Como se ilustra en la Fig. 1, etapa A , pueden usarse capullos (tratados térmicamente o no tratados térmicamente), fibras de seda, polvo de seda o seda de araña como fuente de seda. Si se parte de capullos de seda cruda de Bombyx mori, los capullos se pueden cortar en trozos pequeños, por ejemplo, trozos de aproximadamente mismo tamaño, etapa B1. Luego, la seda cruda se extrae y se aclara para retirar cualquier sericina, etapa C1a. Esto da como resultado una seda cruda sustancialmente libre de sericina. En una realización, el agua se calienta a una temperatura entre 84 °C y 100 °C (idealmente hirviendo) y luego se añade Na2CÜ3 (carbonato de sodio) al agua hirviendo hasta que el Na2CÜ3 se disuelve por completo. La seda cruda se añade al agua hirviendo/Na2CÜ3 (100 °C) y se sumerge durante aproximadamente 15 a 90 minutos, donde hervir durante más tiempo da como resultado fragmentos de proteína de seda más pequeños. En una realización, el volumen de agua es igual a aproximadamente 0,4 x peso de seda cruda y el volumen de Na2CÜ3 equivale aproximadamente a 0,848 x peso de seda cruda. En una realización, el volumen de agua es igual a 0,1 x peso de seda cruda y el volumen de Na2CÜ3 se mantiene en 2,12 g/l. Esto se demuestra en la Fig. 6 y la Fig. 7 : la masa de seda (eje x) se variaba en el mismo volumen de solución de extracción (es decir, el mismo volumen de agua y concentración de Na2CÜ3) logrando la retirada de sericina (sustancialmente libre de sericina) como lo demuestra una pérdida total de masa de seda de 26 a 31 por ciento (eje y). Posteriormente, se drena la solución de Na2CÜ3 disuelto en agua y el exceso de agua/Na2CÜ3 se retira de las fibras de fibroína de seda (por ejemplo, se saca el extracto de fibroína a mano, se centrifuga usando una máquina, etc.). El extracto de fibroína de seda resultante se aclara con agua entre tibia y caliente para retirar cualquier residuo de sericina adsorbida o contaminante, generalmente a un intervalo de temperatura de aproximadamente 40 °C a aproximadamente 80 °C, cambiando el volumen de agua al menos una vez (repetido durante tantas veces que sea necesario). El extracto de fibroína de seda resultante es una fibroína de seda sustancialmente empobrecida en sericina. En una realización, el extracto de fibroína de seda resultante se aclara con agua a una temperatura de aproximadamente 60 °C. En una realización, el volumen de agua de aclarado para cada ciclo es igual a 0,1 l a 0,2 l x peso de seda cruda. Puede ser ventajoso agitar, girar o hacer circular el agua de aclarado para maximizar el efecto de aclarado. Después de aclarar, se retira el exceso de agua de las fibras de fibroína de seda extraídas (p. ej., se extrae el extracto de fibroína a mano o con una máquina). Como alternativa, se pueden usar métodos conocidos por los expertos en la materia tales como presión, temperatura u otros reactivos o combinaciones de los mismos para el propósito de la extracción de sericina. Como alternativa, la glándula de seda (100 % proteína de seda libre de sericina) se puede retirar directamente de un gusano. Esto daría como resultado una proteína de seda líquida, sin ninguna alteración de la estructura proteica, libre de sericina.
Las fibras de fibroína extraídas se dejan entonces secar por completo. Una vez seca, la fibroína de seda extraída se disuelve usando un solvente que se añade a la fibroína de seda a una temperatura entre ambiente y ebullición, etapa C1b. En una realización, el disolvente es una solución de bromuro de litio (LiBr) (el punto de ebullición del LiBr es de 140 °C). Como alternativa, las fibras de fibroína extraídas no se secan, sino que se humedecen y se colocan en el disolvente; la concentración del disolvente entonces puede variarse para lograr concentraciones similares a cuando se añade seda seca al disolvente. La concentración final del disolvente LiBr puede oscilar desde 0,1 M hasta 9,3 M. La Fig. 8 es una tabla que resume los pesos moleculares de la seda disuelta a partir de diferentes concentraciones de bromuro de litio (LiBr) y de diferentes tamaños de extracción y disolución. La disolución completa de las fibras de fibroína extraídas se puede lograr variando el tiempo y la temperatura del tratamiento junto con la concentración del disolvente de disolución. Se pueden usar otros disolventes que incluyen, pero sin limitación, solución de fosfato, ácido fosfórico, nitrato de calcio, cloruro de calcio u otras soluciones acuosas concentradas de sales inorgánicas. Para garantizar la disolución completa, las fibras de seda deben sumergirse completamente en la solución de disolvente ya calentada y luego mantenerse a una temperatura que oscile entre aproximadamente 60 °C y aproximadamente 140 °C durante 1 a 168 horas. En una realización, las fibras de seda deben sumergirse completamente en la solución de disolvente y luego colocarse en un horno seco a una temperatura de aproximadamente 100 °C durante aproximadamente 1 hora.
La temperatura a la que se añade el extracto de fibroína de seda a la solución de LiBr (o viceversa) tiene un efecto sobre el tiempo requerido para disolver completamente la fibroína y sobre el peso molecular resultante y la polidispersidad de la solución de mezcla de FPS final. En una realización, la concentración de la solución de disolvente de seda es inferior o igual a 20 % p/v. Además, se puede usar la agitación durante la introducción o disolución para facilitar la disolución a temperaturas y concentraciones variables. La temperatura de la solución de LiBr proporcionará control sobre el peso molecular de la mezcla de fragmentos de proteína de seda y la polidispersidad creada. En una realización, una temperatura más alta disolverá más rápidamente la seda, lo que ofrece una mayor escalabilidad del proceso y una producción en masa de solución de seda. En una realización, el uso de una solución de LiBr calentada a una temperatura entre 80 °C y 140 °C reduce el tiempo requerido en un horno para lograr la disolución completa. La variación del tiempo y la temperatura a 60 °C o más del disolvente de disolución alterará y controlará el Mw y la polidispersidad de las soluciones de mezcla de FPS formadas a partir del peso molecular original de la proteína fibroína de seda nativa.
Como alternativa, pueden colocarse capullos enteros directamente en un disolvente, tal como LiBr, evitando la extracción, etapa B2. Esto requiere la filtración posterior de partículas de gusanos de seda de la solución de seda y disolvente y la retirada de sericina usando métodos conocidos en la materia para separar proteínas hidrofóbicas e hidrofílicas, tales como una columna de separación y/o cromatografía, intercambio iónico, precipitación química con sal y/o pH, y/o digestión enzimática y filtración o extracción, todos los métodos son ejemplos comunes y sin limitación para los métodos estándares de separación de proteínas, etapa C2. Los capullos no tratados térmicamente a los que se les retiró el gusano de seda pueden colocarse como alternativa en un disolvente tal como LiBr, evitando la extracción. Los métodos descritos anteriormente se pueden usar para la separación de sericina, con la ventaja de que los capullos no tratados térmicamente contendrán significativamente menos desechos de gusanos.
La diálisis se puede usar para retirar el disolvente de disolución de la solución de fragmento de proteína fibroína disuelta resultante dializando la solución frente a un volumen de agua, etapa E1. La filtración previa antes de la diálisis es útil para retirar cualquier desecho (es decir, vestigios de gusanos de seda) de la solución de seda y LiBr, etapa D En un ejemplo, se usa un filtro de 3 pm o 5 pm con un caudal de 200-300 ml/min para filtrar una solución de seda-LiBr de 0,1 % a 1,0 % antes de la diálisis y la concentración potencial si se desea. Un método descrito en el presente documento, como se describe anteriormente, consiste en usar el tiempo y/o la temperatura para disminuir la concentración de 9,3 M de LiBr a un intervalo de 0,1 M a 9,3 M para facilitar la filtración y la diálisis posterior, en particular cuando se considera la creación de un método de proceso escalable. Como alternativa, sin el uso de tiempo adicional o templado, una solución de fragmento de proteína de seda-LiBr 9,3 M se puede diluir con agua para facilitar la filtración de desechos y la diálisis. El resultado de la disolución en el momento deseado y la filtración templada es una solución de fragmento de proteína de seda-LiBr estable a temperatura ambiente, libre de partículas, translúcida, de un Mw y una polidispersidad conocidos. Es ventajoso cambiar el agua de diálisis con regularidad hasta que se haya retirado el disolvente (p. ej., cambiar el agua después de 1 hora, 4 horas y luego cada 12 horas hasta un total de 6 cambios de agua). El número total de cambios de volumen de agua puede variar basándose en la concentración resultante de disolvente usada para la disolución y fragmentación de proteínas de seda. Después de la diálisis, la solución de seda final puede filtrarse aún más para retirar cualquier desecho restante (es decir, vestigios de gusanos de seda).
Como alternativa, la filtración de flujo tangencial (FFT), que es un método rápido y eficiente para la separación y purificación de biomoléculas, puede usarse para retirar el disolvente de la solución de fibroína disuelta resultante, etapa E2. La FFT ofrece una solución acuosa de fragmentos de proteína de seda altamente pura y permite la escalabilidad del proceso para producir grandes volúmenes de la solución de manera controlada y repetible. La solución de seda y LiBr se puede diluir antes de la FFT (20 % hasta 0,1 % de seda en agua o LiBr). La filtración previa como se describe anteriormente antes del procesamiento de FFT puede mantener la eficiencia del filtro y potencialmente evita la creación de capas límite de gel de seda en la superficie del filtro como resultado de la presencia de partículas de desecho. La filtración previa antes de la FFT también es útil para retirar los desechos restantes (es decir, vestigios de gusanos de seda) de la solución de seda y LiBr que pueden causar la gelificación espontánea o a largo plazo de la solución de solo agua resultante, etapa D. La FFT, recirculante o de un solo paso, se puede usar para la creación de soluciones acuosas de fragmentos de proteína de seda que oscilan desde 0,1 % de seda hasta 30,0 % de seda (más preferiblemente, 0,1 % - 6,0 % de seda). Pueden ser necesarias membranas de FFT de diferentes tamaños de corte basándose en la concentración deseada, el peso molecular y la polidispersidad de la mezcla de fragmentos de proteína de seda en solución. Pueden ser necesarias membranas que oscilan desde 1 hasta 100 kDa para soluciones de seda de peso molecular variable creadas, por ejemplo, variando la duración del tiempo de ebullición de extracción o el tiempo y la temperatura en el disolvente de disolución (p. ej., LiBr). En una realización, se usa una membrana de FFT de 5 o 10 kDa para purificar la solución de mezcla de fragmentos de proteína de seda y para crear la relación final deseada de seda a agua. Además, se pueden usar FFT de un solo paso, FFT y otros métodos conocidos en la materia, tales como un evaporador de película descendente, para concentrar la solución después de la retirada del disolvente de disolución (p. ej., LiBr) (con la concentración deseada resultante que oscila desde 0,1 % hasta 30 % de seda). Esto se puede usar como una alternativa a los métodos de concentración de HFIP estándares conocidos en la materia para crear una solución basada en agua. También se podría usar una membrana de poro más grande para filtrar pequeños fragmentos de proteína de seda y crear una solución de seda de mayor peso molecular con y/o sin valores de polidispersidad más estrictos. La Fig. 5 es una tabla que resume los pesos moleculares para algunas realizaciones de soluciones de proteína de seda de la presente divulgación. Las condiciones de procesamiento de la solución de proteína de seda fueron las siguientes: extracción a 100 °C durante 20 min, aclarado a temperatura ambiente, LiBr en horno a 60 °C durante 4-6 horas. Las condiciones de procesamiento de FFT para películas solubles en agua fueron las siguientes: extracción a 100 °C durante 60 min, aclarado a 60 °C, LiBr a 100 °C en horno a 100 °C durante 60 min. Las Fig. 12-23 demuestran aún más la manipulación del tiempo de extracción, las condiciones de disolución de LiBr y el procesamiento de FFT y los pesos moleculares y polidispersidades de ejemplo resultantes. Estos ejemplos no pretenden ser limitantes, sino más bien demostrar el potencial de especificar parámetros para soluciones de fragmentos de seda de peso molecular específico.
Se realizó un ensayo para la detección de LiBr y Na2CO3 usando un sistema de HPLC equipado con un detector evaporativo de dispersión de luz (ELSD). El cálculo se realizó mediante regresión lineal de las áreas de los picos resultantes para el analito representado frente a la concentración. Se usó más de una muestra de una serie de formulaciones de la presente divulgación para la preparación y el análisis de la muestra. Generalmente, se pesaron cuatro muestras de diferentes formulaciones directamente en un matraz volumétrico de 10 ml. Las muestras se suspendieron en 5 ml de formiato de amonio 20 mM (pH 3,0) y se mantuvieron a 2-8 °C durante 2 horas con sacudidas ocasionales para extraer los analitos de la película. Después de 2 horas, la solución se diluyó con formiato de amonio 20 mM (pH 3,0). La solución de muestra del matraz volumétrico se transfirió a viales de HPLC y se inyectó en el sistema HPLC-ELSD para la estimación de carbonato de sodio y bromuro de litio.
El método analítico desarrollado para la cuantificación de Na2CO3 y LiBr en formulaciones de proteína de seda se encontró que era lineal en el intervalo de 10 - 165 pg/ml, con DER para la precisión de inyección de 2 % y 1 % para el área y 0,38 % y 0,19 % para el tiempo de retención para carbonato de sodio y bromuro de litio respectivamente. El método analítico se puede aplicar para la determinación cuantitativa de carbonato de sodio y bromuro de litio en formulaciones de proteína de seda.
La solución final de fragmentos de proteína de seda consiste en fragmentos de proteína de seda pura y agua con niveles de PPM hasta indetectables de desechos de partículas y/o contaminantes del proceso, incluidos LiBr y Na2CO3. La Fig. 3 y la Fig. 4 son tablas que resumen las concentraciones de LiBr y Na2CO3 en soluciones de la presente divulgación. En la Fig. 3 , las condiciones de procesamiento incluían extracción a 100 °C durante 60 min, aclarado a 60 °C, LiBr a 100 °C en horno a 100 °C durante 60 min. Se variaron las condiciones de FFT, incluido el diferencial de presión y el número de volúmenes de diafiltración. En la Fig.4 , las condiciones de procesamiento incluían hervir a 100 °C durante 60 min, aclarar a 60 °C, LiBr en horno a 60 °C durante 4-6 horas.
Las soluciones de fragmentos de seda y agua, la mezcla de fragmentos de proteína de seda liofilizados o cualquier otra composición que incluya FPS pueden esterilizarse siguiendo métodos estándares en la materia que no se limitan a filtración, calor, radiación o haz de electrones. Se anticipa que la mezcla de fragmentos de proteína de seda, debido a su longitud de polímero de proteína más corta, soportará la esterilización mejor que las soluciones de proteína de seda intactas descritas en la materia. Además, los artículos de seda creados a partir de las mezclas de FPS descritas en el presente documento pueden esterilizarse según corresponda a la aplicación. Por ejemplo, un relleno dérmico de FPS cargado con una molécula para usar en aplicaciones médicas con una herida/incisión abierta, puede esterilizarse mediante métodos estándares, tales como radiación o haz de electrones.
La Fig. 2 es un diagrama de flujo que muestra diversos parámetros que pueden modificarse durante el proceso de producción de una solución de fragmento de proteína de seda de la presente divulgación durante las etapas de extracción y disolución. Los parámetros del método seleccionado pueden alterarse para lograr distintas características de la solución final según el uso previsto, p. ej., el peso molecular y la polidispersidad. Debe entenderse que no todas las etapas ilustradas se requieren necesariamente para fabricar todas las soluciones de seda de la presente divulgación.
En una realización, un proceso para producir una solución de fragmentos de proteína de seda de la presente divulgación incluye formar trozos de capullos de seda a partir del gusano de seda Bombyx morí] extraer los trozos a aproximadamente 100 °C en una solución de agua y Na2CO3 durante aproximadamente 60 minutos, en el que un volumen de agua equivale a aproximadamente 0,4 x peso de seda cruda y la cantidad de Na2CO3 es aproximadamente 0,848 x el peso de los trozos para formar un extracto de fibroína de seda; aclarar tres veces el extracto de fibroína de seda a aproximadamente 60 °C durante aproximadamente 20 minutos por aclarado en un volumen de agua de aclarado, en el que el agua de aclarado para cada ciclo es igual a aproximadamente 0,2 l x el peso de los trozos; retirar el exceso de agua del extracto de fibroína de seda; secar el extracto de fibroína de seda; disolver el extracto seco de fibroína de seda en una solución de LiBr, en la que la solución de LiBr primero se calienta a aproximadamente 100 °C para crear una solución de seda y LiBr y se mantiene; colocar la solución de seda y LiBr en un horno seco a aproximadamente 100 °C durante aproximadamente 60 minutos para lograr la disolución completa y una mayor fragmentación de la estructura de la proteína de seda nativa en una mezcla con el peso molecular y la polidispersidad deseados; filtrar la solución para retirar cualquier desecho restante del gusano de seda; diluir la solución con agua para dar como resultado una solución de seda al 1 %; y retirar el disolvente de la solución usando filtración de flujo tangencial (FFT). En una realización, se usa una membrana de 10 kDa para purificar la solución de seda y crear la relación final deseada de seda a agua. Luego se puede usar FFT para concentrar aún más la solución de seda pura a una concentración de 2 % de seda en agua.
Cada etapa del proceso, desde los capullos crudos hasta la diálisis, es escalable para aumentar la eficiencia en la fabricación. Los capullos enteros se compran actualmente como materia prima, pero también se han usado capullos prelimpiados o capullos sin tratamiento térmico, en los que la retirada de gusanos deja una cantidad mínima de desechos. Cortar y limpiar los capullos es un proceso manual; sin embargo, para aumentar la escalabilidad, este proceso podría requerir menos mano de obra, por ejemplo, usando una máquina automatizada en combinación con aire comprimido para retirar el gusano y cualquier partícula, o usando un molino de corte para cortar los capullos en trozos más pequeños. La etapa de extracción, que actualmente se realiza en lotes pequeños, podría completarse en un recipiente más grande, por ejemplo, una lavadora industrial donde se pueden mantener temperaturas entre 60 °C y 100 °C. La etapa de aclarado también podría completarse en la lavadora industrial, eliminando los ciclos de aclarado manual. La disolución de la seda en solución de LiBr podría ocurrir en un recipiente que no sea un horno de convección, por ejemplo, un reactor de tanque agitado. La diálisis de la seda a través de una serie de cambios de agua es un proceso manual que requiere mucho tiempo y que podría acelerarse cambiando ciertos parámetros, por ejemplo, diluyendo la solución de seda antes de la diálisis. El proceso de diálisis podría escalarse para la fabricación mediante el uso de equipos semiautomáticos, por ejemplo, un sistema de filtración de flujo tangencial.
La variación de los parámetros de extracción (es decir, tiempo y temperatura), LiBr (es decir, la temperatura de la solución de LiBr cuando se añade al extracto de fibroína de seda o viceversa) y disolución (es decir, tiempo y temperatura) da como resultado soluciones de seda y disolvente con diferentes viscosidades, homogeneidades, y colores El aumento de la temperatura para la extracción, el alargamiento del tiempo de extracción, el uso de una solución de LiBr a mayor temperatura en la emersión y con el tiempo al disolver la seda y el aumento del tiempo a la temperatura (p. ej., en un horno como se muestra aquí, o una fuente de calor alternativa) daban todos como resultado soluciones de seda y disolventes menos viscosas y más homogéneas. Si bien casi todos los parámetros daban como resultado una solución de seda viable, se prefieren los métodos que permiten lograr la disolución completa en menos de 4 a 6 horas para la escalabilidad del proceso.
El peso molecular de los fragmentos de proteína de seda puede controlarse basándose en los parámetros específicos utilizados durante la etapa de extracción, incluidos el tiempo y la temperatura de extracción; los parámetros específicos utilizados durante la etapa de disolución, incluida la temperatura de LiBr en el momento de la inmersión de la seda en el bromuro de litio y el tiempo en que la solución se mantiene a temperaturas específicas; y los parámetros específicos utilizados durante la etapa de filtración. Mediante el control de los parámetros del proceso que usan los métodos divulgados, es posible crear soluciones de mezcla de FPS con polidispersidad igual o inferior a 2,5 en una variedad de diferentes pesos moleculares que oscilan desde 1 kDa a 250 kDa, 5 kDa a 200 kDa, 5 kDa a 150 kDa, 10 kDa a 150 kDa o 10 kDa a 80 kDa. Al alterar los parámetros del proceso para lograr soluciones de seda con diferentes pesos moleculares, se puede apuntar a un intervalo de productos finales de mezcla de fragmentos, con una polidispersidad deseada menor o igual a 2,5 basándose en los requisitos de rendimiento deseados. Por ejemplo, una película de seda de peso molecular más bajo que contiene un fármaco puede tener una tasa de liberación más rápida en comparación con una preparación de FPS de peso molecular más alto. Adicionalmente, se pueden lograr soluciones de mezcla de FPS con una polidispersidad superior a 2,5. Además, se pueden mezclar dos soluciones con diferentes pesos moleculares medios y polidispersidades para crear soluciones combinadas. Como alternativa, podría usarse un Glándula de seda líquida (proteína de seda 100 % libre de sericina) que se ha retirado directamente de un gusano en combinación con cualquiera de las soluciones de mezcla de FPS de la presente divulgación. El peso molecular de la composición del fragmento de proteína basada en fibroína de seda pura se determinó mediante cromatografía líquida de alta presión (HPLC) con un detector de índice de refracción (RID). La polidispersidad se calculó usando el software Cirrus GPC Online GPC/SEC, versión 3.3 (Agilent).
Se variaron los parámetros durante el procesamiento de capullos de seda crudos hasta solución de seda. La variación de estos parámetros afectó al Mw de la solución de seda resultante. Los parámetros manipulados incluían (i) tiempo y temperatura de extracción, (ii) temperatura de LiBr, (iii) temperatura del horno de disolución y (iv) tiempo de disolución. El peso molecular se determinó con espectrometría de masas como se muestra en las Fig. 9-25.
Se llevaron a cabo experimentos para determinar el efecto de variar el tiempo de extracción. Las Fig.9-15 son gráficos que muestran estos resultados, y las Tablas 2-8 resumen los resultados. A continuación, se muestra un resumen:
- un tiempo de extracción de sericina de 30 minutos daba como resultado un Mw mayor que un tiempo de extracción de sericina de 60 minutos
- el Mw disminuye con el tiempo en el horno
- LiBr y horno a 140 °C daban como resultado que el extremo inferior del intervalo de confianza estuviera por debajo de un Mw de 9500 Da
- con 30 min de extracción, los puntos temporales de 1 hora y 4 horas tienen seda sin digerir
- con 30 min de extracción, el punto temporal de 1 hora daba como resultado un peso molecular significativamente alto siendo el extremo inferior del intervalo de confianza de 35.000 Da
- el intervalo de Mw alcanzado para el extremo superior del intervalo de confianza era de 18000 a 216000 Da (importante para ofrecer soluciones con límite superior especificado)
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Se llevaron a cabo experimentos para determinar el efecto de variar la temperatura de extracción. La Fig. 16 es un gráfico que muestra estos resultados, y la Tabla 9 resume los resultados. A continuación, se muestra un resumen: - la extracción con sericina a 90 °C daba como resultado un Mw más alto que la extracción con sericina a 100 °C - tanto 90 °C como 100 °C muestran una disminución del Mw con el tiempo en el horno
Tabla 9. El efecto de la temperatura de extracción (90 °C frente a 100 °C) sobre el peso molecular de la seda procesada en las condiciones de 60 min. Temperatura de extracción, bromuro de litio (LiBr) a 100 °C y disolución en horno a 100 °C (se varió el tiempo de horno/disolución).
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Se llevaron a cabo experimentos para determinar el efecto de variar la temperatura del bromuro de litio (LiBr) cuando se añade a la seda. Las Fig. 17-18 son gráficos que muestran estos resultados, y las Tablas 10-11 resumen los resultados. A continuación, se muestra un resumen:
- Sin impacto en Mw o intervalo de confianza (todos los IC ~10500-6500 Da)
- Los estudios ilustraban que la temperatura de disolución de LiBr-seda, a medida que se añade LiBr y comienza a disolverse, cae rápidamente por debajo de la temperatura original de LiBr debido a que la mayor parte de la masa es seda a temperatura ambiente.
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Se llevaron a cabo experimentos para determinar el efecto de la temperatura del horno/disolución. Las Fig. 19-23 son gráficos que muestran estos resultados, y las Tablas 12-16 resumir los resultados. A continuación, se muestra un resumen:
- La temperatura del horno tiene un efecto menor sobre la seda extraída en 60 min que sobre la seda extraída en 30 min. Sin desear limitarse a la teoría, se cree que la seda de 30 minutos se degrada menos durante la extracción y, por lo tanto, la temperatura del horno tiene más efecto sobre la parte de la seda de Mw más alto y menos degradada.
- Para el horno a 60 °C frente a 140 °C, la seda extraída durante 30 min mostraba un efecto muy significativo de un Mw más bajo a una temperatura de horno más alta, mientras que la seda extraída durante 60 min tenía un efecto, pero mucho menor.
- El horno a 140 °C daba como resultado un límite inferior en el intervalo de confianza de ~6000 Da
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Tabla 12. El efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, 30 min. tiempo de extracción y bromuro de litio (LiBr) a 100 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
Tiempo de Temperatura del Tiempo de Mw Desvia Intervalo de confianza PD ebullición horno (°C) horno medio Están
30 100
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25604 1405
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10252
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63943
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2,50
Tabla 13. El efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, 60 min. tiempo de extracción y bromuro de litio (LiBr) a 100 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
Tiempo de Temperatura de Tiempo de Mw Desvia Intervalo de confianza PD ebullición horno (°C) horno medio Están 60 60 27908 200 10735 72552 2,60 60 100 31520 1387 11633 85407 2,71 60 60 27681 1730 11279 72552 2,62 60 100 25082 1248 10520 59803 2,38 60 60 27150 916 11020 66889 2,46
60
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100
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20980 1262
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10073
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43695
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2,08
Tabla 14. El efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, 60 min. tiempo de extracción y bromuro de litio (LiBr) a 140 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
Tiempo de Temperatura de Tiempo de Mw Intervalo de confianza PD ebullición horno (°C) horno medio 60 60 30042 11183 80705 2,69
60
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140
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15548
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7255
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33322
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2,14
Tabla 15. El efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, 30 min. tiempo de extracción y bromuro de litio (LiBr) a 140 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
Tiempo de Temperatura de Tiempo de Mw Intervalo de confianza PD ebullición horno (°C) horno medio 30 60 49656 17306 142478 2,87 30 140 9025 4493 18127 2,01 30 60 59383 17641 199889 3,37
30
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140
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13021
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5987
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28319
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2,17
Tabla 16. El efecto de la temperatura del horno/disolución sobre el peso molecular de la seda procesada en condiciones de temperatura de extracción de 100 °C, 60 min. tiempo de extracción y bromuro de litio (LiBr) a 80 °C (se varió el tiempo de disolución/horno).
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En una realización, los métodos divulgados en el presente documento dan como resultado una solución con características que se pueden controlar durante la fabricación, incluidas, pero sin limitación: Mw: se puede variar cambiando el tiempo y la temperatura de extracción y/o disolución (p. ej., temperatura de LiBr), presión y filtración (por ejemplo, cromatografía de exclusión por tamaño); Estructura - retirada o escisión de la cadena pesada o ligera del polímero de proteína fibroína; Pureza: temperatura de aclarado con agua caliente para mejorar la retirada de sericina o capacidad de filtrado para mejorar la retirada de partículas que afectan negativamente a la estabilidad de almacenamiento de la solución de mezcla de proteína de fragmentos de seda; Color: el color de la solución se puede controlar con, por ejemplo, la temperatura y el tiempo de LiBr; Viscosidad; Claridad; y Estabilidad de la solución. El pH resultante de la solución suele ser de aproximadamente 7 y se puede alterar usando un ácido o una base según corresponda a los requisitos de almacenamiento.
Las soluciones de mezcla de FPS descritas anteriormente pueden utilizarse para producir rellenos de tejido que contienen FPS, como se describe en el presente documento.
Un método para preparar una solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura que tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa incluye las etapas de: desgomar una fuente de seda añadiendo la fuente de seda a una solución acuosa de carbonato de sodio a ebullición (100 °C) durante un tiempo de tratamiento de entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 60 minutos; retirar la sericina de la solución para producir un extracto de fibroína de seda que comprende niveles no detectables de sericina; drenar la solución del extracto de fibroína de seda; disolver el extracto de fibroína de seda en una solución de bromuro de litio que tiene una temperatura inicial al colocar el extracto de fibroína de seda en la solución de bromuro de litio que oscila desde aproximadamente 60 °C hasta aproximadamente 140 °C; mantener la solución de fibroína de seda-bromuro de litio en un horno que tiene una temperatura de aproximadamente 140 °C durante un período de al menos 1 hora; retirar el bromuro de litio del extracto de fibroína de seda; y producir una solución acuosa de fragmentos de proteína de seda, comprendiendo la solución acuosa: fragmentos que tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, y en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprende una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0. El método puede comprender además secar el extracto de fibroína de seda antes de la etapa de disolución. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de bromuro de litio de menos de 300 ppm medidos usando un ensayo de bromuro de litio de cromatografía líquida de alto rendimiento. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de carbonato de sodio de menos de 100 ppm medidos usando un ensayo de carbonato de sodio de cromatografía líquida de alta resolución. El método puede comprender además añadir un agente terapéutico a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una molécula seleccionada entre un antioxidante o una enzima a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una vitamina a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. La vitamina puede ser vitamina C o un derivado de la misma. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede liofilizarse. El método puede comprender además añadir un alfa-hidroxiácido a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El alfa-hidroxiácido puede seleccionarse del grupo que consiste en ácido glicólico, ácido láctico, ácido tartárico y ácido cítrico. El método puede comprender además añadir ácido hialurónico o su forma de sal a una concentración de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 10,0 % a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir al menos uno de óxido de zinc o dióxido de titanio. Se puede fabricar una película a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. La película puede comprender desde aproximadamente 1,0 % en peso hasta aproximadamente 50,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. La película puede tener un contenido de agua que oscila desde aproximadamente 2,0 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso. La película puede comprender desde aproximadamente 30,0 % en peso hasta aproximadamente 99,5 % en peso de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. Se puede fabricar un gel a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. El gel puede comprender desde aproximadamente 0,5 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. El gel puede tener un contenido de seda de al menos 2 % y un contenido de vitaminas de al menos 20 %.
Un método para preparar una solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura que tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa incluye las etapas de: desgomar una fuente de seda añadiendo la fuente de seda a una solución acuosa de carbonato de sodio a ebullición (100 °C) durante un tiempo de tratamiento de entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 60 minutos; retirar la sericina de la solución para producir un extracto de fibroína de seda que comprende niveles no detectables de sericina; drenar la solución del extracto de fibroína de seda; disolver el extracto de fibroína de seda en una solución de bromuro de litio que tiene una temperatura inicial al colocar el extracto de fibroína de seda en la solución de bromuro de litio que oscila desde aproximadamente 60 °C hasta aproximadamente 140 °C; mantener la solución de fibroína de seda-bromuro de litio en un horno que tiene una temperatura de aproximadamente 140 °C durante un período de al menos 1 hora; retirar el bromuro de litio del extracto de fibroína de seda; y producir una solución acuosa de fragmentos de proteína de seda, comprendiendo la solución acuosa: fragmentos que tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, y en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprende una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0. El método puede comprender además secar el extracto de fibroína de seda antes de la etapa de disolución. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de bromuro de litio de menos de 300 ppm medidos usando un ensayo de bromuro de litio de cromatografía líquida de alto rendimiento. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de carbonato de sodio de menos de 100 ppm medidos usando un ensayo de carbonato de sodio de cromatografía líquida de alta resolución. El método puede comprender además añadir un agente terapéutico a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una molécula seleccionada entre un antioxidante o una enzima a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una vitamina a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. La vitamina puede ser vitamina C o un derivado de la misma. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede liofilizarse. El método puede comprender además añadir un alfa-hidroxiácido a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El alfa-hidroxiácido puede seleccionarse del grupo que consiste en ácido glicólico, ácido láctico, ácido tartárico y ácido cítrico. El método puede comprender además añadir ácido hialurónico o su forma de sal a una concentración de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 10,0 % a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir al menos uno de óxido de zinc o dióxido de titanio. Se puede fabricar una película a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. La película puede comprender desde aproximadamente 1,0 % en peso hasta aproximadamente 50,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. La película puede tener un contenido de agua que oscila desde aproximadamente 2,0 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso. La película puede comprender desde aproximadamente 30,0 % en peso hasta aproximadamente 99,5 % en peso de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. Se puede fabricar un gel a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. El gel puede comprender desde aproximadamente 0,5 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. El gel puede tener un contenido de seda de al menos 2 % y un contenido de vitaminas de al menos 20 %.
Un método para preparar una solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura que tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa incluye las etapas de: desgomar una fuente de seda añadiendo la fuente de seda a una solución acuosa de carbonato de sodio a ebullición (100 °C) durante un tiempo de tratamiento de entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 60 minutos; retirar la sericina de la solución para producir un extracto de fibroína de seda que comprende niveles no detectables de sericina; drenar la solución del extracto de fibroína de seda; disolver el extracto de fibroína de seda en una solución de bromuro de litio que tiene una temperatura inicial al colocar el extracto de fibroína de seda en la solución de bromuro de litio que oscila desde aproximadamente 60 °C hasta aproximadamente 140 °C; mantener la solución de fibroína de seda-bromuro de litio en un horno que tiene una temperatura de aproximadamente 140 °C durante un período de al menos 1 hora; retirar el bromuro de litio del extracto de fibroína de seda; y producir una solución acuosa de fragmentos de proteína de seda, comprendiendo la solución acuosa: fragmentos que tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, y en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprende una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0. El método puede comprender además secar el extracto de fibroína de seda antes de la etapa de disolución. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de bromuro de litio de menos de 300 ppm medidos usando un ensayo de bromuro de litio de cromatografía líquida de alto rendimiento. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de carbonato de sodio de menos de 100 ppm medidos usando un ensayo de carbonato de sodio de cromatografía líquida de alta resolución. El método puede comprender además añadir un agente terapéutico a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una molécula seleccionada entre un antioxidante o una enzima a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una vitamina a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. La vitamina puede ser vitamina C o un derivado de la misma. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede liofilizarse. El método puede comprender además la adición de un alfahidroxiácido a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El alfa-hidroxiácido puede seleccionarse del grupo que consiste en ácido glicólico, ácido láctico, ácido tartárico y ácido cítrico. El método puede comprender además añadir ácido hialurónico o su forma de sal a una concentración de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 10,0 % a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir al menos uno de óxido de zinc o dióxido de titanio. Se puede fabricar una película a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. La película puede comprender desde aproximadamente 1,0 % en peso hasta aproximadamente 50,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. La película puede tener un contenido de agua que oscila desde aproximadamente 2,0 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso. La película puede comprender desde aproximadamente 30,0 % en peso hasta aproximadamente 99,5 % en peso de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. Se puede fabricar un gel a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. El gel puede comprender desde aproximadamente 0,5 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. El gel puede tener un contenido de seda de al menos 2 % y un contenido de vitaminas de al menos 20 %.
Un método para preparar una solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura que tiene un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa incluye las etapas de: añadir una fuente de seda a una solución acuosa de carbonato de sodio a ebullición (100 °C) durante un tiempo de tratamiento de entre aproximadamente 30 minutos y aproximadamente 60 minutos para dar como resultado el desgomado; retirar la sericina de la solución para producir un extracto de fibroína de seda que comprende niveles no detectables de sericina; drenar la solución del extracto de fibroína de seda; disolver el extracto de fibroína de seda en una solución de bromuro de litio que tiene una temperatura inicial al colocar el extracto de fibroína de seda en la solución de bromuro de litio que oscila desde aproximadamente 80 °C hasta aproximadamente 140 °C; mantener la solución de fibroína de seda-bromuro de litio en un horno seco que tiene una temperatura en el intervalo de aproximadamente 60 °C a aproximadamente 100 °C durante un período de al menos 1 hora; retirar el bromuro de litio del extracto de fibroína de seda; y producir una solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura, en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprende residuos de bromuro de litio de entre aproximadamente 10 ppm y aproximadamente 300 ppm, en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína de seda comprende residuos de carbonato de sodio de entre aproximadamente 10 ppm y aproximadamente 100 ppm, en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprende fragmentos que tienen un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, y en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprenden una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0. El método puede comprender además secar el extracto de fibroína de seda antes de la etapa de disolución. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de bromuro de litio de menos de 300 ppm medidos usando un ensayo de bromuro de litio de cromatografía líquida de alto rendimiento. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de carbonato de sodio de menos de 100 ppm medidos usando un ensayo de carbonato de sodio de cromatografía líquida de alta resolución. El método puede comprender además añadir un agente terapéutico a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una molécula seleccionada entre un antioxidante o una enzima a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una vitamina a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. La vitamina puede ser vitamina C o un derivado de la misma. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede liofilizarse. El método puede comprender además la adición de un alfa-hidroxiácido a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El alfa-hidroxiácido puede seleccionarse del grupo que consiste en ácido glicólico, ácido láctico, ácido tartárico y ácido cítrico. El método puede comprender además añadir ácido hialurónico o su forma de sal a una concentración de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 10,0 % a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir al menos uno de óxido de zinc o dióxido de titanio.
Se puede fabricar un gel a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. El gel puede comprender desde aproximadamente 0,5 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. El gel puede tener un contenido de seda de al menos 2 % y un contenido de vitaminas de al menos 20 %.
Según los aspectos ilustrados en el presente documento, se divulga un método para preparar una solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura que tiene un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa, incluyendo el método las etapas de: añadir un fuente de seda a una solución acuosa de carbonato de sodio a ebullición (100 °C) durante un tiempo de tratamiento de aproximadamente 30 minutos para dar como resultado el desgomado; retirar la sericina de la solución para producir un extracto de fibroína de seda que comprende niveles no detectables de sericina; drenar la solución del extracto de fibroína de seda; disolver el extracto de fibroína de seda en una solución de bromuro de litio que tiene una temperatura inicial al colocar el extracto de fibroína de seda en la solución de bromuro de litio que oscila desde aproximadamente 80 °C hasta aproximadamente 140 °C; mantener la solución de fibroína de seda-bromuro de litio en un horno seco que tiene una temperatura en el intervalo de aproximadamente 60 °C a aproximadamente 100 °C durante un período de al menos 1 hora; retirar el bromuro de litio del extracto de fibroína de seda; y producir una solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura, en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprende residuos de bromuro de litio de entre aproximadamente 10 ppm y aproximadamente 300 ppm, residuos de carbonato de sodio de entre aproximadamente 10 ppm y aproximadamente 100 ppm, fragmentos que tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 40 kDa hasta aproximadamente 65 kDa, y en el que la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura comprende una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0. El método puede comprender además secar el extracto de fibroína de seda antes de la etapa de disolución. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de bromuro de litio de menos de 300 ppm medidos usando un ensayo de bromuro de litio de cromatografía líquida de alto rendimiento. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede comprender residuos de carbonato de sodio de menos de 100 ppm medidos usando un ensayo de carbonato de sodio de cromatografía líquida de alta resolución. El método puede comprender además añadir un agente terapéutico a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una molécula seleccionada entre un antioxidante o una enzima a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir una vitamina a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. La vitamina puede ser vitamina C o un derivado de la misma. La solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura puede liofilizarse. El método puede comprender además la adición de un alfa-hidroxiácido a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El alfa-hidroxiácido puede seleccionarse del grupo que consiste en ácido glicólico, ácido láctico, ácido tartárico y ácido cítrico. El método puede comprender además añadir ácido hialurónico o su forma de sal a una concentración de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 10,0 % a la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura. El método puede comprender además añadir al menos uno de óxido de zinc o dióxido de titanio.
Se puede fabricar un gel a partir de la solución acuosa de fragmentos de proteína basada en fibroína de seda pura producidos por este método. El gel puede comprender desde aproximadamente 0,5 % en peso hasta aproximadamente 20,0 % en peso de vitamina C o un derivado de la misma. El gel puede tener un contenido de seda de al menos 2 % y un contenido de vitaminas de al menos 20 %.
Ácido hialurónico y geles de ácido hialurónico
Un componente polimérico biodegradable de la presente invención es hialuronato, también conocido como ácido hialurónico (AH). El AH consiste en residuos alternados de ácido D-glucurónico y N-acetil-D-glucosamina. Este polímero soluble en agua se encuentra naturalmente en casi todos los tejidos, especialmente en la matriz extracelular, los ojos y el líquido sinovial de las articulaciones. El AH está disponible comercialmente en forma pura. Los rellenos de AH con partículas de gel pequeñas pueden usarse para estimular la producción natural de colágeno que se supone que es inducida por el estiramiento mecánico de la dermis y la activación de los fibroblastos dérmicos.
La concentración de AH en los rellenos dérmicos resultantes de la invención contribuye a la rigidez y longevidad del relleno dérmico. En algunas realizaciones, una mayor concentración de AH en los rellenos dérmicos resultantes descritos en el presente documento puede aumentar la rigidez y/o la longevidad del relleno dérmico resultante en comparación con un relleno dérmico que tiene una concentración comparativamente menor de AH.
En algunas realizaciones, el AH incorporado en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tiene un peso molecular de 100.000 dáltones o más, 150.000 dáltones o más, 1 millón de dáltones o más, o 2 millones de dáltones o más. En algunas realizaciones, el AH incorporado en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tiene un peso molecular de 100.000 dáltones o menos, 150.000 dáltones o menos, 1 millón de dáltones o menos, o 2 millones de dáltones o menos. En algunas realizaciones, el AH incorporado en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tiene un peso molecular alto (por ejemplo, un peso molecular de AH de aproximadamente 1 MDa a aproximadamente 4 MDa). En algunas realizaciones, el AH incorporado en los rellenos de tejido descritos en el presente documento tiene un peso molecular bajo (p. ej., un peso molecular de AH de menos de aproximadamente 1 MDa).
En algunas realizaciones, la fuente de AH puede ser una sal de hialuronato tal como, por ejemplo, hialuronato de sodio. En algunas realizaciones, el AH está reticulado. El AH reticulado se puede formular en una variedad de formas, tales como membranas, geles, semigeles, esponjas o microesferas. En algunas realizaciones, el AH reticulado está en forma de gel fluido, es decir, toma la forma de su recipiente. La viscosidad de un gel o semigel de AH se puede alterar mediante la adición de AH y/o hialuronato no conjugado. La viscosidad también se puede ajustar variando el grado de reticulación de FPS-FPS, FPS-AH y/o AH-AH como se describe en el presente documento. En alguna realización, aproximadamente de 4 % a aproximadamente 12 % del AH puede reticularse como AH-AH o AH-FPS.
En una realización, las composiciones de FPS descritas en el presente documento pueden combinarse con AH para formar una composición de relleno de tejido. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 99 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 98 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 97 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 96 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 95 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 94 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 93 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 92 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 91 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 90 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 85 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 80 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 75 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 70 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 65 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 60 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 55 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 50 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 45 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 40 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 35 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 30 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 25 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 20 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 19 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 18 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 17 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 16 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 15 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 14 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 13 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 12 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 11 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 10 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 7 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 2 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 1 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,9 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,8 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,7 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,6 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,4 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,3 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,2 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es inferior al 0,1 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,1 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,2 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,3 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,4 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,6 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,7 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,8 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 0,9 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 1 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 2 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 7 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 10 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 11 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 12 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 13 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 14 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 15 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 16 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 17 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 18 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 19 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 20 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 25 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 30 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 35 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 40 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 45 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 50 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 55 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 60 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 65 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 70 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 75 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 80 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 85 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 90 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 91 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 92 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 93 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 94 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 95 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 96 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 97 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es superior al 98 %.
En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,1 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,2 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,3 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,4 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,6 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,7 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,8 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 0,9 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 1 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 2 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 3 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 4 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 7 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 10 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 11 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 12 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 13 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 14 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 15 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 16 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 17 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 18 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 19 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 20 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 25 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 30 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 35 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 40 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 45 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 50 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 55 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 60 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 65 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 70 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 75 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 80 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 85 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 90 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 91 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 92 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 93 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 94 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 95 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 96 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de re leno de tejido es de aproximadamente 97 %. En una rea ización e porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido es de aproximadamente 98 %.
En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 0,1 % y aproximadamente 1 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 0,5 % y aproximadamente 1,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 1 % y aproximadamente 5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 1,5 % y aproximadamente 5,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 2 % y aproximadamente 6 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 2,5 % y aproximadamente 6,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 3 % y aproximadamente 7 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 3,5 % y aproximadamente 7,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 4 % y aproximadamente 8 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 4,5 % y aproximadamente 8,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 5 % y aproximadamente 9 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 5,5 % y aproximadamente 9,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de Ah en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 6 % y aproximadamente 10 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 6,5 % y aproximadamente 10,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 7 % y aproximadamente 11 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 7,5 % y aproximadamente 11,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 8 % y aproximadamente 12 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 8,5 % y aproximadamente 12,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de Ah en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 9 % y aproximadamente 13 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 9,5 % y aproximadamente 13,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 10 % y aproximadamente 14 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 10,5 % y aproximadamente 14,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 11 % y aproximadamente 15 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 11,5 % y aproximadamente 15,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de Ah en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 12 % y aproximadamente 16 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 12,5 % y aproximadamente 16,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 13 % y aproximadamente 17 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 13,5 % y aproximadamente 17,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 14 % y aproximadamente 18 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 14,5 % y aproximadamente 18,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de Ah en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 15 % y aproximadamente 19 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 15,5 % y aproximadamente 19,5 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 16 % y aproximadamente 20 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 20 % y aproximadamente 30 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 30 % y aproximadamente 40 %. En una realización, el porcentaje en peso de Ah en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 40 % y aproximadamente 50 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 50 % y aproximadamente 60 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 60 % y aproximadamente 70 %. En una realización, el porcentaje en peso de AH en la composición de relleno de tejido está entre aproximadamente 80 % y aproximadamente 90 %.
En algunas realizaciones, el porcentaje de AH, en peso, en las composiciones de relleno de tejido descritas en el presente documento es de aproximadamente 1 % a aproximadamente 2 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 3 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 4 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 4 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 5 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 6 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 7 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 8 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 9 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 11 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 12 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 13 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 14 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 15 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 16 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 17 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 18 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 19 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 20 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 21 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 22 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 23 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 24 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 25 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 30 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 40 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 50 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 60 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 70 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 80 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 95 %; o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 20 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 25 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 30 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 35 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 40 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 45 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 50 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 55 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 60 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 65 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 70 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 75 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 80 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 85 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 90 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 95 %.
En algunas realizaciones, el AH descrito en el presente documento se puede adquirir de fuentes comerciales o se puede producir por bacterias Streptococcus equi.
Los rellenos de tejido descritos en el presente documento que incluyen AH pueden caracterizarse por sus actividades biológicas in vitro y actividades biológicas in vivo. Por ejemplo, se pueden realizar ensayos in vitro en una parte de los rellenos de tejido descritos en el presente documento para determinar la toxicidad celular, la resistencia a la degradación enzimática, la inyectabilidad (p. ej., la viscosidad de la solución, el caudal de inyección, el diámetro de la jeringa/aguja) y/o el análisis de la morfología de las partículas. Véase, por ejemplo, Park y col., J. Eur. Acad. Dermatol. Venerol. (2014) 28:565-568. Se pueden realizar ensayos in vivo para determinar los patrones morfológicos iniciales, el relleno restante total presente, las evaluaciones histológicas y pueden incluir el examen de la formación de granulomas o reacciones adversas cutáneas. Véanse, por ejemplo, Park y col., J. Eur. Acad. Dermatol. Venerol. (2014) 28:565-568; y Ramot, et al., Toxicology Pathology (2015) 43: 267-271.
Gelificación
En una realización, los geles de seda se pueden proporcionar con un auxiliar de gelificación. En algunas realizaciones, el auxiliar de gelificación puede ser un ácido, electricidad, mezclado y/o sonicación.
En una realización, cuando se produce un gel de seda, se puede añadir un ácido a una solución de seda descrita en el presente documento para ayudar a facilitar la gelificación. En una realización, cuando se produce un gel de seda que incluye una molécula y/o un agente terapéutico neutro o básico, se puede añadir un ácido para facilitar la gelificación. En una realización, cuando se produce un gel de seda, el aumento del pH (haciendo que el gel sea más básico) aumenta la estabilidad de almacenamiento del gel. En una realización, cuando se produce un gel de seda, el aumento del pH (haciendo que el gel sea más básico) permite que se cargue una mayor cantidad de una molécula ácida en el gel.
En una realización, cuando se produce un gel de seda, se puede pasar electricidad a través de una solución de seda descrita en el presente documento para ayudar a facilitar la gelificación.
En una realización, cuando se produce un gel de seda, se puede usar el mezclado de una solución de seda descrita en el presente documento para ayudar a facilitar la gelificación.
En una realización, cuando se produce un gel de seda, se puede usar la sonicación de una solución de seda descrita en el presente documento para ayudar a facilitar la gelificación.
En una realización, se pueden añadir aditivos naturales al gel de seda para estabilizar aún más los aditivos. Por ejemplo, pueden usarse oligoelementos tales como selenio o magnesio o L-metionina. Además, se pueden añadir recipientes bloqueantes de luz para aumentar aún más la estabilidad.
En algunas realizaciones, se pueden usar potenciadores de gelificación para acelerar la gelificación de FPS. En algunas realizaciones, una solución de FPS se puede mezclar con alcohol puro o una solución de alcohol acuoso a relaciones de volumen variadas acompañado de mezclado, ya sea removido, sacudido o cualquier otra forma de agitación. En algunas realizaciones, a este potenciador de la solución de alcohol se le puede añadir una cantidad de un péptido anfifílico como potenciador adicional del resultado final del gel. El alcance de la aceleración se puede aumentar o disminuir según sea apropiado añadiendo un componente potenciador más grande o más pequeño al sistema.
En algunas realizaciones, la tasa de gelificación se puede potenciar aumentando la concentración de FPS en la solución usada para elaborar un gel. Se pueden usar diversos métodos para ese fin, que incluyen pero sin limitación: diálisis de la solución de FPS intermedia frente a un tampón que incorpora una especie higroscópica tal como polietilenglicol, una etapa de liofilización y/o una etapa de evaporación. El aumento de la temperatura también se puede usar como potenciador del proceso de gelificación. Además, la manipulación del pH intermedio de la solución de seda mediante métodos que incluyen, pero sin limitación, valoración directa e intercambio de gases, se puede usar para potenciar el proceso de gelificación. También se puede usar la introducción de especies iónicas seleccionadas que incluyen calcio y potasio en particular para acelerar la tasa de gelificación.
En algunas realizaciones, la gelificación se puede ayudar mediante el uso de agentes de nucleación, que incluyen especies orgánicas e inorgánicas, tanto solubles como insolubles en un intermedio de FPS. Los agentes de nucleación pueden incluir, pero sin limitación, secuencias peptídicas que se unen a moléculas de seda, seda previamente gelificada y estructuras ricas en láminas p escasamente solubles. En algunas realizaciones, otro medio de acelerar el proceso de gelificación es mediante la introducción de excitación mecánica, que se puede conferir a través de un dispositivo de corte, un dispositivo de ultrasonidos o un mezclador mecánico.
El tiempo necesario para la gelificación completa de la solución de seda puede variar de segundos a horas o días, dependiendo de los valores de los parámetros mencionados anteriormente, así como del estado inicial de agregación y organización que se encuentra en la solución de FPS. La fracción de volumen del potenciador añadido puede variar desde aproximadamente 0 % hasta aproximadamente 99 % del volumen total del sistema (es decir, cualquiera de los componentes puede añadirse en un gran exceso del otro o en cualquier concentración relativa dentro del intervalo). La concentración de la solución de FPS usada puede oscilar desde aproximadamente 1 % (p/v) hasta aproximadamente 20 % (p/v) y cualquier otro intervalo apropiado. El potenciador se puede añadir a la solución de FPS o la solución de FPS se puede añadir al potenciador. El hidrogel de FPS formado se puede reticular adicionalmente química o físicamente para obtener propiedades mecánicas alteradas.
En algunas realizaciones, se añade una solución potenciadora a una solución de FPS, o viceversa, teniendo la solución de FPS una concentración de FPS de aproximadamente 1 % (p/v), aproximadamente 2 % (p/v), aproximadamente 3 % (p/v), aproximadamente 4 % (p/v), aproximadamente 5 % (p/v), aproximadamente 6 % (p/v), aproximadamente 7 % (p/v), aproximadamente 8 % (p/v), aproximadamente 9 % (p/v), aproximadamente 10 % (p/v), aproximadamente 12 % (p/v), aproximadamente 15 % (p/v), aproximadamente 18 % (p/v), aproximadamente 20 % (p/v) /v), aproximadamente 25 % (p/v), o aproximadamente 30 % (p/v). En algunas realizaciones, se añade una solución potenciadora a una solución de FPS, o viceversa, teniendo la solución de FPS una concentración de FPS de al menos 1 % (p/v), al menos 2 % (p/v), al menos 3 % (p/v), al menos 4 % (p/v), al menos 5 % (p/v), al menos 6 % (p/v), al menos 7 % (p/v), al menos 8 % (p/v), al menos 9 % (p/v), al menos 10 % (p/v), al menos 12 % (p/v), al menos 15 % (p/v), al menos 18 % (p/v), al menos 20 % (p/v), al menos 25 % (p/v) o al menos 30 % (p/v). En algunas realizaciones, se añade una solución potenciadora a una solución de FPS, o viceversa, teniendo la solución de FPS una concentración de FPS de aproximadamente 1 % (p/v) a aproximadamente 5 % (p/v), de aproximadamente 1 % (p/v) a aproximadamente 10 % (p/v), de aproximadamente 1 % (p/v) a aproximadamente 15 % (p/v), de aproximadamente 1 % (p/v) a aproximadamente 20 % (p/v), de aproximadamente 1 % (p/v) a aproximadamente 25 % (p/v), de aproximadamente 1 % (p/v) a aproximadamente 30 % (p/v), de aproximadamente 5 % (p/v) a aproximadamente 10 % (p/v), de aproximadamente 5 % (p/v) a aproximadamente 15 % (p/v), de aproximadamente 5 % (p/v) a aproximadamente 20 % (p/v), de aproximadamente 5 % (p/v) a aproximadamente 25 % (p/v), de aproximadamente 5 % (p/v) a aproximadamente 30 % (p/v), de aproximadamente 10 % (p/v) a aproximadamente 15 % (p/v), de aproximadamente 10 % (p/v) v) a aproximadamente 20 % (p/v), de aproximadamente 10 % (p/v) a aproximadamente 25 % (p/v), o de aproximadamente 10 % (p/v) a aproximadamente 30 % (p/v).
Geles e Hidrogeles - Modificación y reticulación
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona composiciones que comprenden uno o más hidrogeles que comprenden uno o más polímeros de matriz reticulada. Como se usa en el presente documento, el término "reticulado" se refiere a los enlaces intermoleculares que unen las moléculas de polímero, macromoléculas y/o cadenas de monómero individuales en una estructura más estable como un gel. Como tal, un polímero de matriz reticulada tiene al menos un enlace intermolecular que une al menos una molécula de polímero individual con otra, donde la primera molécula de polímero individual puede ser de naturaleza química similar o diferente a la otra. Los polímeros de matriz divulgados en el presente documento pueden reticularse usando agentes de reticulación de disulfuros y dialdehídos que incluyen, entre otros, agentes de reticulación basados en PEG multifuncionales, divinilsulfonas, diglicidiléteres y bisepóxidos. Los ejemplos no limitantes de agentes de reticulación de FPS y/o AH incluyen divinilsulfona (DVS), 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE), luz UV, glutaraldehído, 1,2-bis(2,3-epoxipropoxi)etileno (EGDGE), 1,2,7,8-diepoxioctano (DEO), biscarbodiimida (BCD), pentaeritritoltetraglicidiléter (PETGE), dihidrazida adípica (ADH), suberato de bis(sulfosuccinimidilo) (BS), hexametilendiamina (HMDA), 1-(2,3-epoxipropil)-2,3-epoxiciclohexano, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el agente de reticulación de AH puede incluir BDDE o DVS. En algunas realizaciones, el agente de reticulación de AH y/o FPS puede ser BDDE, DVS, luz UV, glutaraldehído o una carbodiimida, como se describe en el presente documento.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden contener un agente de reticulación residual. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden contener solo trazas del agente de reticulación tales como, por ejemplo, no superiores a aproximadamente 2 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,9 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,8 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,7 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,6 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,5 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,4 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,3 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,2 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,1 ppm, o no superiores a aproximadamente 1,0 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,9 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,8 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,7 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,6 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,5 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,4 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,3 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,2 ppm, o no superiores a aproximadamente 0,1 ppm. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden contener trazas de BDDE, pero en una concentración no superior a aproximadamente 2 ppm, no superior a aproximadamente 1,9 ppm, no superior a aproximadamente 1,8 ppm o no superior a aproximadamente 1,7 ppm, o no superior a aproximadamente 1,6 ppm, o no superior a aproximadamente 1,5 ppm, o no superior a aproximadamente 1,4 ppm, o no superior a aproximadamente 1,3 ppm, o no superior a aproximadamente 1,2 ppm, o no superior a aproximadamente 1,1 ppm, o no superior a aproximadamente 1,0 ppm, o no superior a aproximadamente 0,9 ppm, o no superior a aproximadamente 0,8 ppm, o no superior a aproximadamente 0,7 ppm, o no superior a aproximadamente 0,6 ppm, o no superior a aproximadamente 0,5 ppm, o no superior a aproximadamente 0,4 ppm, o no superior a aproximadamente 0,3 ppm, o no superior a aproximadamente 0,2 ppm, o no superior a aproximadamente 0,1 ppm. Como entenderá un experto en la materia, la cantidad de agente de reticulación residual presente en una muestra de relleno de tejido particular puede determinarse mediante cromatografía de gases-espectrometría de masas.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir una matriz que puede incluir una parte de matriz de FPS y una parte de matriz de AH, donde la parte de matriz de FPS incluye una mezcla de FPS reticulado y no reticulado y la parte de matriz de AH incluye una mezcla de AH reticulado y no reticulado.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación incluyen AH modificado con ligador. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la descripción incluyen FPS modificado con ligador. Los reticulantes bifuncionales pueden reaccionar en ambos extremos para conectar dos moléculas de AH diferentes, dos moléculas de FPS diferentes o una molécula de AH con una molécula de FPS. En algunas realizaciones, el agente de reticulación se une con una molécula de AH solo en un extremo, dejando el otro extremo pendiente. En algunas realizaciones, el agente de reticulación se une con una molécula FPS solo en un extremo, dejando el otro extremo pendiente.
Como se usa en el presente documento, el grado de modificación (MoD) se puede definir como (véase por ejemplo J. Kablik et al., Dermatol Surg, 2009 (35): 302-312):
% de grado de modificación total= % de reticulación % de pendiente
Para determinar el MoD, también se puede definir como (véase por ejemplo L. Kenne et al., Carbohydrates Polymers, 2013 (91): 410- 418):
Figure imgf000068_0001
donde nreticulantes ligados es el número de moléculas reticulantes unidas, ndisacáridos de ah es el número de disacáridos en AH, y nUnidades repetidas de fps es el número de unidades repetidas de FPS. Estos números se pueden determinar mediante RMN usando los cambios químicos característicos de reticulante, AH y FPS.
En algunas realizaciones, el MoD está entre aproximadamente 1 % y 25 %, entre aproximadamente 2 % y aproximadamente 20 %, o entre aproximadamente 3,5 % y aproximadamente 17,5 %. En algunas realizaciones, el MoD es de aproximadamente 1,1 %, aproximadamente 1,2 %, aproximadamente 1,3 %, aproximadamente 1,4 %, aproximadamente 1,5 %, aproximadamente 1,6 %, aproximadamente 1,7 %, aproximadamente 1,8 %, aproximadamente 1,9 %, aproximadamente 2,0 %, aproximadamente 2,1 %, aproximadamente 2,2 %, aproximadamente 2,3 %, aproximadamente 2,4 %, aproximadamente 2,5 %, aproximadamente 2,6 %, aproximadamente 2,7 %, aproximadamente 2,8 %, aproximadamente 2,9 %, aproximadamente 3,0 %, aproximadamente 3,1 %, aproximadamente 3,2 %, aproximadamente 3,3 %, aproximadamente 3,4 %, aproximadamente 3,5 %, aproximadamente 3,6 %, aproximadamente 3,7 %, aproximadamente 3,8 %, aproximadamente 3,9 %, aproximadamente 4,0 %, aproximadamente 4,1 %, aproximadamente 4,2 %, aproximadamente 4,3 %, aproximadamente 4,4 %, aproximadamente 4,5 %, aproximadamente 4,6 %, aproximadamente 4,7 %, aproximadamente 4,8 %, aproximadamente 4,9 %, aproximadamente 5,0 %, aproximadamente 5,1 %, aproximadamente 5,2 %, aproximadamente 5,3 %, aproximadamente 5,4 %, aproximadamente 5,5 %, aproximadamente 5,6 %, aproximadamente 5,7 %, aproximadamente 5,8 %, aproximadamente 5,9 %, aproximadamente 6,0 %, aproximadamente 6,1 %, aproximadamente 6,2 %, aproximadamente 6,3 %, aproximadamente 6,4 %, aproximadamente 6,5 %, aproximadamente 6,6 %, aproximadamente 6,7 %, aproximadamente 6,8 %, aproximadamente 6,9 %, aproximadamente 7,0 %, aproximadamente 7,1 %, aproximadamente 7,2 %, aproximadamente 7,3 %, aproximadamente 7,4 %, aproximadamente 7,5 %, aproximadamente 7,6 %, aproximadamente 7,7 %, aproximadamente 7,8 %, aproximadamente 7,9 %, aproximadamente 8,0 %, aproximadamente 8,1 %, aproximadamente 8,2 %, aproximadamente 8,3 %, aproximadamente 8,4 %, aproximadamente 8,5 %, aproximadamente 8,6 %, aproximadamente 8,7 %, aproximadamente 8,8 %, aproximadamente 8,9 %, aproximadamente 9,0 %, aproximadamente 9,1 %, aproximadamente 9,2 %, aproximadamente 9,3 %, aproximadamente 9,4 %, aproximadamente 9,5 %, aproximadamente 9,6 %, aproximadamente 9,7 %, aproximadamente 9,8 %, aproximadamente 9,9 %, aproximadamente 10,0 %, aproximadamente 10,1 %, aproximadamente 10,2 %, aproximadamente 10,3 %, aproximadamente 10,4 %, aproximadamente 10,5 %, aproximadamente 10,6 %, aproximadamente 10,7 %, aproximadamente 10,8 %, aproximadamente 10,9 %, aproximadamente 11,0 %, aproximadamente 11,1 %, aproximadamente 11,2 %, aproximadamente 11,3 %, aproximadamente 11,4 %, aproximadamente 11,5 %, aproximadamente 11,6 %, aproximadamente 11,7 %, aproximadamente 11,8 %, aproximadamente 11,9 %, aproximadamente 12,0 %, aproximadamente 12,1 %, aproximadamente 12,2 %, aproximadamente 12,3 %, aproximadamente 12,4 %, aproximadamente 12,5 %, aproximadamente 12,6 %, aproximadamente 12,7 %, aproximadamente 12,8 %, aproximadamente 12,9 %, aproximadamente 13,0 %, aproximadamente 13,1 %, aproximadamente 13,2 %, aproximadamente 13,3 %, aproximadamente 13,4 %, aproximadamente 13,5 %, aproximadamente 13,6 %, aproximadamente 13,7 %, aproximadamente 13,8 %, aproximadamente 13,9 %, aproximadamente 14,0 %, aproximadamente 14,1 %, aproximadamente 14,2 %, aproximadamente 14,3 %, aproximadamente 14,4 %, aproximadamente 14,5 %, aproximadamente 14,6 %, aproximadamente 14,7 %, aproximadamente 14,8 %, aproximadamente 14,9 %, aproximadamente 15,0 %, aproximadamente 15,1 %, aproximadamente 15,2 %, aproximadamente 15,3 %, aproximadamente 15,4 %, aproximadamente 15,5 %, aproximadamente 15,6 %, aproximadamente 15,7 %, aproximadamente 15,8 %, aproximadamente 15,9 %, aproximadamente 16,0 %, aproximadamente 16,1 %, aproximadamente 16,2 %, aproximadamente 16,3 %, aproximadamente 16,4 %, aproximadamente 16,5 %, aproximadamente 16,6 %, aproximadamente 16,7 %, aproximadamente 16,8 %, aproximadamente 16,9 %, aproximadamente 17,0 %, aproximadamente 17,1 %, aproximadamente 17,2 %, aproximadamente 17,3 %, aproximadamente 17,4 %, aproximadamente 17,5 %, aproximadamente 17,6 %, aproximadamente 17,7 %, aproximadamente 17,8 %, aproximadamente 17,9 %, aproximadamente 18,0 %, aproximadamente 18,1 %, aproximadamente 18,2 %, aproximadamente 18,3 %, aproximadamente 18,4 %, aproximadamente 18,5 %, aproximadamente 18,6 %, aproximadamente 18,7 %, aproximadamente 18,8 %, aproximadamente 18,9 %, aproximadamente 19,0 %, aproximadamente 19,1 %, aproximadamente 19,2 %, aproximadamente 19,3 %, aproximadamente 19,4 %, aproximadamente 19,5 %, aproximadamente 19,6 %, aproximadamente 19,7 %, aproximadamente 19,8 %, aproximadamente 19,9 % o proximadamente 20,0 %.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación incluyen FPS reticulado. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación incluyen AH reticulado. Un fragmento FPS se puede reticular con otro fragmento FPS o con AH. Las especies reticuladas FPS-FPS, FPS-AH y AH-AH se pueden obtener mediante el uso de agentes de reticulación de diversas longitudes, incluida la longitud cero.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden proporcionarse en forma de un hidrogel que tiene AH reticulado y/o FPS reticulado. El AH reticulado y/o el FPS reticulado (o especies FPS-AH reticuladas) pueden tener un grado medible de reticulación. Como se usa en el presente documento, el término "grado de reticulación" se refiere al número de unidades de reticulación (o moléculas o residuos) relativo al número de unidades monoméricas en la macromolécula de polímero, que estaba reticulada. En algunas realizaciones, las unidades monoméricas son los aminoácidos en FPS. En algunas realizaciones, las unidades monoméricas son las unidades monoméricas de disacárido de AH. Por tanto, una composición que tiene una matriz polimérica reticulada con un grado de reticulación del 4 % significa que en promedio hay cuatro moléculas reticulantes por cada 100 unidades monoméricas. Si todos los demás parámetros son iguales, cuanto mayor es el grado de reticulación, más duro se vuelve el gel. Sin limitarse a ninguna teoría de la invención, el grado de reticulación en AH y/o FPS puede dar como resultado materiales o composiciones resultantes más rígidos preparados a partir de los mismos. Por ejemplo, cuanto mayor sea el grado de reticulación, mayor será la probabilidad de que tales materiales persistan en el cuerpo. De hecho, sin limitarse a ninguna teoría, los materiales biocompatibles que incluyen materiales reticulados tendrán tasas variadas de biorresorción, bioabsorción y/o biodegradación dependiendo del grado de reticulación, donde el grado de reticulación es inversamente proporcional a la tasa de bioresorción, bioabsorción y/o biodegradación. Además, una mayor reticulación en los rellenos de tejido descritos en el presente documento puede reducir la hidrofilicidad y la capacidad de elevación de tales rellenos de tejido.
En un ejemplo no limitante, un FPS reticulado que tiene un grado de reticulación de aproximadamente 5 % tiene aproximadamente 5 restos de reticulación por cada 100 unidades monoméricas, p. ej., aminoácidos, en el FPS reticulado.
Los ejemplos no limitativos de un grado de reticulación incluyen de aproximadamente 1 % a aproximadamente 15 %, o de aproximadamente 2 % a aproximadamente 14 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 2 %, de aproximadamente 1,5 % a aproximadamente 2,5 %, o de aproximadamente 2 % a aproximadamente 3 %, de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 3,5 %, o de aproximadamente 3 % a aproximadamente 4 %, o de aproximadamente 3,5 % a aproximadamente 4,5 %, o de aproximadamente 4 % a aproximadamente 5 %, o de aproximadamente 4,5 % a aproximadamente 5,5 %, o de aproximadamente 5 % a aproximadamente 6 %, o de aproximadamente 5,5 % a aproximadamente 6,5 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente 7 %, o de aproximadamente 6,5 % a aproximadamente 7,5 %, o de aproximadamente 7 % a aproximadamente 8 %, o de aproximadamente 7,5 % a aproximadamente 8,5 %, o de aproximadamente 8 % a aproximadamente 9 %, o de aproximadamente 8,5 % a aproximadamente 9,5 %, o de aproximadamente 9 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 9,5 % a aproximadamente 10,5 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 11 %, o de aproximadamente 10,5 % a aproximadamente 11,5 %, o de aproximadamente 11 % a aproximadamente 12 %, o de aproximadamente 11,5 % a aproximadamente 12,5 %, o de aproximadamente 12 % a aproximadamente 13 %, o de aproximadamente 12,5 % a aproximadamente 13,5 %, o de aproximadamente 13 % a aproximadamente 14 %, o de aproximadamente 13,5 % a aproximadamente 14,5 %, o de aproximadamente 14 % a aproximadamente 15 %.
En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 1 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 2 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 3 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 4 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 5 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 6 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 7 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 8 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 9 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 10 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 11 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 12 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 13 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 14 %. En algunas realizaciones, el grado de reticulación es de al menos 15 %.
En algunas realizaciones, una composición de la divulgación comprende FPS reticulado donde el grado de reticulación es de al menos 1 %, al menos 2 %, al menos 3 %, al menos 4 %, al menos 5 %, al menos 6 %, al menos 7 %, al menos 8 %, al menos 9 %, al menos 10 %, al menos 11 %, al menos 12 %, al menos 13 %, al menos 14 % o al menos 15 %. En algunas realizaciones, una composición comprende FPS reticulado donde el grado de reticulación es como máximo 1 %, como máximo 2 %, como máximo 3 %, como máximo 4 %, como máximo 5 %, como máximo 6 %, como máximo 7 %, como máximo 8 %, como máximo 9 %, como máximo 10 %, como máximo 11 %, como máximo 12 %, como máximo 13 %, como máximo 14 %, o como máximo 15 %. En algunas realizaciones, una composición comprende FPS reticulado donde el grado de reticulación es de aproximadamente 1 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 2 % a aproximadamente 11 %, de aproximadamente 3 % a aproximadamente 10 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 5 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 11 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 6 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente 8 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 2 %, de aproximadamente 1,5 % a aproximadamente 2,5 %, o de aproximadamente 2 % a aproximadamente 3 %, o de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 3,5 %, o de aproximadamente 3 % a aproximadamente 4 %, o de aproximadamente 3,5 % a aproximadamente 4,5 %, o de aproximadamente 4 % a aproximadamente 5 %, o de aproximadamente 4,5 % a aproximadamente 5,5 %, o de aproximadamente 5 % a aproximadamente 6 %, o de aproximadamente 5,5 % a aproximadamente 6,5 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente 7 %, o de aproximadamente 6,5 % o aproximadamente 7,5 %, o de aproximadamente 7 % a aproximadamente 8 %, o aproximadamente 7,5 % o aproximadamente 8,5 %, o de aproximadamente 8 % a aproximadamente 9 %, o de aproximadamente 8,5 % a aproximadamente 9,5 %, o de aproximadamente 9 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 9,5 % a aproximadamente 10,5 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 11 %, o de aproximadamente 10,5 % a aproximadamente 11,5 %, o de aproximadamente 11 % a aproximadamente 12 %, o de aproximadamente 11,5 % a aproximadamente 12,5 %, o de aproximadamente 12 % a aproximadamente 13 %, o de aproximadamente 12,5 % a aproximadamente 13,5 %, o de aproximadamente 13 % a aproximadamente 14 %, o de aproximadamente 13,5 % a aproximadamente 14,5 %, o de aproximadamente 14 % a aproximadamente 15 %.
En algunas realizaciones, una composición de la divulgación comprende AH reticulado donde el grado de reticulación es de al menos 1 %, al menos 2 %, al menos 3 %, al menos 4 %, al menos 5 %, al menos 6 %, al menos 7 %, al menos 8 %, al menos 9 %, al menos 10 %, al menos 11 %, al menos 12 %, al menos 13 %, al menos 14 % o al menos 15 %. En algunas realizaciones, una composición comprende AH reticulado donde el grado de reticulación es como máximo 1 %, como máximo 2 %, como máximo 3 %, como máximo 4 %, como máximo 5 %, como máximo 6 %, como máximo 7 %, como máximo 8 %, como máximo 9 %, como máximo 10 %, como máximo 11 %, como máximo 12 %, como máximo 13 %, como máximo 14 %, o como máximo 15 %. En algunas realizaciones, una composición comprende AH reticulado donde el grado de reticulación es de aproximadamente 1 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 2 % a aproximadamente 11 %, de aproximadamente 3 % a aproximadamente 10 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 5 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 11 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 6 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente 8 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 2 %, de aproximadamente 1,5 % a aproximadamente 2,5 %, o de aproximadamente 2 % a aproximadamente 3 %, o de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 3,5 %, o de aproximadamente 3 % a aproximadamente 4 %, o de aproximadamente 3,5 % a aproximadamente 4,5 %, o de aproximadamente 4 % a aproximadamente 5 %, o de aproximadamente 4,5 % a aproximadamente 5,5 %, o de aproximadamente 5 % a aproximadamente 6 %, o de aproximadamente 5,5 % a aproximadamente 6,5 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente 7 %, o aproximadamente 6,5 % o aproximadamente 7,5 %, o de aproximadamente 7 % a aproximadamente 8 %, o aproximadamente 7,5 % o aproximadamente 8,5 %, o de aproximadamente 8 % a aproximadamente 9 %, o de aproximadamente 8,5 % a aproximadamente 9,5 %, o de aproximadamente 9 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 9,5 % a aproximadamente 10,5 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente 11 %, o de aproximadamente 10,5 % a aproximadamente 11,5 %, o de aproximadamente 11 % a aproximadamente 12 %, o de aproximadamente 11,5 % a aproximadamente 12,5 %, o de aproximadamente 12 % a aproximadamente 13 %, o de aproximadamente 12,5 % a aproximadamente 13,5 %, o de aproximadamente 13 % a aproximadamente 14 %, o de aproximadamente 13,5 % a aproximadamente 14,5 %, o de aproximadamente 14 % a aproximadamente 15 %.
En algunas realizaciones, una composición de la descripción comprende FPS-AH reticulado donde el grado de reticulación es de al menos 1 %, al menos 2 %, al menos 3 %, al menos 4 %, al menos 5 %, al menos 6 %, al menos 7 %, al menos 8 %, al menos 9 %, al menos 10 %, al menos 11 %, al menos 12 %, al menos 13 %, al menos 14 % o al menos 15 %. En algunas realizaciones, una composición comprende FPS-AH reticulado donde el grado de reticulación es como máximo 1 %, como máximo 2 %, como máximo 3 %, como máximo 4 %, como máximo 5 %, como máximo 6 %, como máximo como máximo 7 %, como máximo 8 %, como máximo 9 %, como máximo 10 %, como máximo 11 %, como máximo 12 %, como máximo 13 %, como máximo 14 % o como máximo 15 %. En algunas realizaciones, una composición comprende FPS-AH reticulado donde el grado de reticulación es de aproximadamente
1 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 2 % a aproximadamente 11 %, de aproximadamente 3 % a aproximadamente 10 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 5 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 11 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 6 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente 8 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 2 %, de aproximadamente 1,5 % a aproximadamente 2,5 %, o de aproximadamente 2 % a aproximadamente 3 %, o de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 3,5 %, o de aproximadamente 3 % a aproximadamente 4 %, o de aproximadamente 3,5 % a aproximadamente 4,5 %, o de aproximadamente 4 % a aproximadamente 5 %, o de aproximadamente 4,5 % a aproximadamente 5,5 %, o de aproximadamente 5 % a aproximadamente 6 %, o de aproximadamente 5,5 % a aproximadamente 6,5 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente 7 %, o de aproximadamente 6,5 % o aproximadamente 7,5 %, o de aproximadamente 7 % a aproximadamente 8 %, o aproximadamente 7,5 % o aproximadamente 8,5 %, o de aproximadamente 8 % a aproximadamente 9 %, o de aproximadamente 8,5 % a aproximadamente 9,5 %, o de aproximadamente 9 % a aproximadamente 10 %, o de aproximadamente 9,5 % a aproximadamente 10,5 %, o de aproximadamente 10 % a aproximadamente aproximadamente 10,5 % a aproximadamente 11,5 %, o de aproximadam aproximadamente aproximadamente 11,5 %
Figure imgf000071_0001
a aproximadamente
Figure imgf000071_0002
12,5 %, o de aproximadam aproximadamente aproximadamente 12,5 % a aproximadamente 13,5 %, o de aproximadam aproximadamente
Figure imgf000071_0003
aproximadamente 13,5 %
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a aproximadamente 14,5 %, o de aproximadam aproximadamente
Por ejemplo, 1 mol de FPS puede estar reticulado con 1 mol de AH en el que el mol de AH podría tener un peso molecular de aproximadamente 1 kDa a aproximadamente 2 M kDa. En algunas realizaciones, 1 mol de FPS con 1 millón de moles de AH, o viceversa, donde FPS puede ser de 100 Da a 350 kDa, por lo que cualquier porcentaje de cada mol puede estar reticulado o libre. Un método para reticular FPS con otro FPS puede incluir una o más etapas.
En una primera etapa, el epóxido, tal como el BDDE, se añade en exceso a una solución de FPS y se permite que la reacción prosiga. Los epóxidos pueden reaccionar con diversos grupos en la macromolécula de FPS, tales como carboxilo, amina, alcohol, tiol y similares, dando como resultado grupos de enlace tales como ésteres, aminas secundarias o terciarias, éteres, tioéteres y similares. Cuando ambos epóxidos de BDDE han reaccionado con los grupos funcionales en una o más macromoléculas de FPS, el FPS se reticula. En una realización, la reticulación de
AH se puede realizar a través de una reacción con BDDE en condiciones alcalinas para procurar un grupo de enlace covalente entre AH y el reticulante como se describe en Schanté et al., Carbohydrates Polymers (2011) 85:469-489.
El grado de modificación o reticulación puede determinarse mediante RMN de acuerdo con métodos conocidos en la materia (p. ej., Edsman y col., Dermatol. Surg. (2012) 38: 1170-1179).
Los métodos de ligamiento de péptidos son conocidos en la materia. El ligamiento del FPS aislado individual en péptidos de FPS oligoméricos y/o reticulados, como se establece en el presente documento, puede efectuarse mediante procedimientos de conjugación química bien conocidos en la materia, tales como la creación de grupos de enlace peptídicos, el uso de agentes de condensación y el empleo de reactivos de reticulación bifuncionales bien conocidos. La conjugación puede ser directa, lo que incluye grupos de enlace que no implican ningún grupo intermedio, p. ej., grupos de enlace peptídicos directos, o indirecta, en la que el grupo de enlace contiene un resto intermedio, tal como una proteína o un péptido, p. ej., albúmina plasmática u otra molécula espaciadora. Por ejemplo, el grupo de enlace puede ser a través de un reticulante heterobifuncional u homobifuncional, p. ej., carbodiimida, glutaraldehído,
3-(2-piridilditio)propionato de N-succinimidilo (SPDP) y derivados, bis-maleimida, 1-carboxilato de 4-(N-maleimidometil)ciclohexano y similares.
La reticulación también se puede lograr sin reticulantes exógenos utilizando grupos reactivos en las moléculas que se conjugan. Los métodos para reticular químicamente moléculas peptídicas se conocen generalmente en la materia, y se describen una serie de agentes hetero- y homobifuncionales, p. ej., en las pat. de EE. UU. n.° 4.355.023, 4.657.853, 4.676.980, 4.925.921 y 4.970.156, e Immuno Technology Catalogue and Handbook, Pierce Chemical Co. (1989)). Tal conjugación, incluida la reticulación, debe realizarse de manera que no afecte sustancialmente la función deseada del oligómero peptídico o la entidad conjugada con el mismo, incluidos los agentes terapéuticos y los restos capaces de unirse a sustancias de interés.
Un experto en la materia entenderá que se pueden usar ligadores alternativos para ligar péptidos de FPS, por ejemplo, el uso de reticulantes químicos de proteínas. Por ejemplo, un reticulante homobifuncional tal como dihidrocloruro de suberimidato de disuccinimidilo; dihidrocloruro de adipimidato de dimetilo; 1,5,2,4-dinitrobenceno o reticulantes heterobifuncionales tales como 2,3-dibromopropionato de N-hidroxisuccinimidilo; hidrocloruro de 1-etil-3-[3-dimetilaminopropiljcarbodiimida; y 1-carboxilato de succinimidil-4-[n-maleimidometil]-ciclohexano.
La presente divulgación también proporciona composiciones que incluyen FPS reticulado con AH. La reticulación de
FPS con AH puede lograrse por diversos métodos, por ejemplo, por métodos de epóxido, métodos de peryodato y/o métodos de cloruro de tresilo. En algunas realizaciones, los FPS se reticulan con AH usando un epóxido, por ejemplo, un epóxido multifuncional. Por ejemplo, puede usarse un epóxido bifuncional tal como 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE). Otros epóxidos multifuncionales incluyen, pero sin limitación, poliglicerolpoliglicidiléter (PGPGE), pentaeritritolpoliglicidiléter (PEPGE) y diglicerolpoliglicidiléter (DGPGE). La reticulación de longitud cero entre FPS y
AH también se proporciona usando un agente activador.
Un método de reticulación de FPS con otras macromoléculas, por ejemplo AH, puede incluir una o más etapas. En una primera etapa, el epóxido, tal como el BDDE, se añade en exceso a una solución de FPS y se permite que la reacción prosiga. Los epóxidos pueden reaccionar con diversos grupos en la macromolécula de FPS, tales como carboxilo, amina, alcohol, tiol y similares, dando como resultado grupos de enlace tales como ésteres, aminas secundarias o terciarias, éteres, tioéteres y similares. Cuando solo un epóxido ha reaccionado con FPS, queda un epóxido libre enlazado al FPS disponible para la reticulación con otro FPS, o una macromolécula diferente, por ejemplo AH, o similares. El orden de adición de los reactivos puede variar. Por ejemplo, primero se puede añadir BDDE a AH y luego se añade FPS para formar FPS-AH reticulado. En algunas realizaciones, FPS y AH se pueden mezclar primero y luego se añade BDDE a la mezcla. En algunas realizaciones, la adición de BDDE a una mezcla de FPS y AH da como resultado una composición que incluye FPS reticulado con FPS, AH reticulado con AH y FPS reticulado con AH.
En algunas realizaciones, el FPS-AH reticulado se puede preparar usando el método del cloruro de tresilo, que incluye una o más etapas. En una etapa, se puede activar AH reticulado y/o AH no reticulado con cloruro de tresilo, es decir, cloruro de 2,2,2-trifluoroetanosulfonilo, o cualquier otro cloruro de ácido adecuado. El cloruro de tresilo se añade, por ejemplo, gota a gota a una solución de base/disolvente, por ejemplo, solución de piridina/acetona, que contiene AH reticulado y/o no reticulado. En algunas realizaciones, el cloruro de tresilo es reactivo con los cuatro grupos hidroxilo en los anillos de azúcar de AH reticulado y/o no reticulado. En una etapa opcional, se lava el tresilato de AH resultante. En una etapa, se añaden fragmentos de FPS que reaccionarán con el tresilato de AH.
En algunas realizaciones, el método del cloruro de tresilo se puede usar para enlazar un FPS directamente con AH reticulado y/o no reticulado. En otras realizaciones, el método del cloruro de tresilo se puede usar para enlazar un FPS con AH reticulado y/o no reticulado a través de un espaciador, por ejemplo, 6-amino-1-hexanol. En algunas realizaciones, el espaciador puede acoplarse primero con AH reticulado o no reticulado mediante activación y acoplamiento de tresilo. Para acoplar un FPS al espaciador, se repiten a continuación la activación y el acoplamiento del tresilo. Puede usarse cualquier espaciador adecuado, es decir, espaciadores que tengan al menos algunas características similares al 6-amino-1-hexanol, es decir, una amina primaria para acoplarse al tresilato de AH, y un grupo reactivo, por ejemplo, un grupo hidroxilo, para activación y acoplamiento del FPS.
En algunas realizaciones, el cloruro de tresilo no reticula AH. Sin embargo, la matriz de AH usada en el método del cloruro de tresilo puede reticularse para lograr una estabilidad adicional. La reticulación puede efectuarse, por ejemplo, usando un epóxido multifuncional, tal como BDDE, como se ha descrito anteriormente. La reticulación se puede realizar antes o después del acoplamiento peptídico.
El método del cloruro de tresilo tiene ventajas sobre otros métodos de inmovilización, incluido el acoplamiento eficiente en condiciones muy suaves, sin reacciones secundarias durante la activación y el acoplamiento, y los péptidos RGD pueden unirse directamente a los átomos de carbono del soporte de AH.
En diversas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir geles e hidrogeles basados en AH. Basado en AH como se usa en el presente documento se refiere a composiciones o materiales que incluyen AH reticulado y a composiciones que incluyen AH reticulado más uno o más polímeros reticulados. Además, AH puede referirse al ácido hialurónico y cualquiera de sus sales hialuronato, incluidos, entre otros, hialuronato de sodio (NaHA), hialuronato de potasio, hialuronato de magnesio, hialuronato de calcio y combinaciones de los mismos. El uso de más de un polímero biocompatible no se excluye específicamente de la presente descripción. Los rellenos de tejido descritos en el presente documento, que pueden estar en forma de geles e hidrogeles, pueden incluir más de un polímero biocompatible, tal como, por ejemplo, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 o más polímeros biocompatibles además de AH y/o FPS. Los polímeros biocompatibles adecuados incluyen polisacáridos (p. ej., AH, quitosano, sulfato de condroitina, alginato, carboximetilcelulosa), poli(etilenglicol), poli(ácido láctico), poli(metacrilato de hidroxietilo), poli(metacrilato de metilo), proteínas distintas de FPS (p. ej., elastina y colágeno).
El AH descrito en el presente documento puede reticularse intermolecularmente. En algunas realizaciones, la reticulación estabiliza las propiedades físicas de AH. En algunas realizaciones, la presente invención proporciona la formación de AH reticulado estable utilizando epóxidos multifuncionales. Como se usa en el presente documento, el término epóxido "multifuncional" significa un reactivo químico que tiene dos o más epóxidos presentes, tales como epóxidos alifáticos inferiores o sus correspondientes epihalohidrinas. Los ejemplos de epóxidos multifuncionales incluyen, pero sin limitación, el diepóxido 1,4-butanodioldiglicidil éter (BDDE), poliglicerolpoliglicidiléter (PGPGE), pentaeritritolpoliglicidiléter (PEPGE) y diglicerolpoliglicidiléter (DGPGE). En una realización preferida, el diepóxido BDDE se usa como agente de reticulación. Los restos de azúcar de AH se reticulan a través de los dos epóxidos de BDDE. En otras realizaciones, los agentes de reticulación incluyen cuerpos de diepóxido de alquilo tales como diepóxido de 1,3-butadieno, diepóxido de 1,2,7,8-octano, diepóxido de 1,5-hexadieno y similares, cuerpos de diglicidiléter tales como etilenglicoldiglicidiléter, 1,4-butanodioldiglicidiléter, bisfenol A-diglicidiléter y similares, divinilsulfona y epiclorhidrina. Entre ellos, en particular, pueden usarse adecuadamente divinilsulfona, 1,4-butanodioldiglicidiléter y etilenglicoldiglicidiléter. En la presente invención, se pueden usar dos o más tipos de agentes de reticulación combinándolos apropiadamente.
En algunas realizaciones, AH se reticula con AH. Un método de reticulación de AH con AH puede incluir una o más etapas. En una primera etapa, se añade un epóxido, tal como BDDE, a una solución de AH en exceso y se permite que prosiga la reacción. Los epóxidos pueden reaccionar con uno a cuatro de los grupos hidroxilo en los anillos de azúcar de AH para formar de uno a cuatro grupos de enlace éter. Como alternativa, o además de reaccionar con los grupos hidroxilo, el epóxido puede reaccionar con el ácido carboxílico del polisacárido para formar un enlace éster. Cuando ambos epóxidos de BDDE han reaccionado con los grupos funcionales en los anillos de azúcar de una o más macromoléculas de AH, el AH se reticula.
En algunas realizaciones, el agente de reticulación puede ser un agente de reticulación de longitud cero, tal como un enlace químico obtenido empleando un agente activador tal como 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) o BCDI. En algunas realizaciones, el agente activador de reticulación de longitud cero se hace reaccionar con el AH en presencia de N-hidroxisuccinimida (NHS), sulfo-NHS (o sulfonil-NHS) o 4-dimetilaminopiridina (DMAP). En algunas realizaciones, los geles e hidrogeles descritos en el presente documento se forman haciendo reaccionar al menos un polímero biocompatible reticulable, tal como AH y/o una proteína, p. ej. una proteína FPS, o cualquier otra proteína adicional, con al menos un agente activador de la reticulación.
En algunas realizaciones, el FPS-FPS reticulado, el FPS-AH reticulado y/o el AH-AH reticulado pueden tener tiempos de residencia variables después de la aplicación, por ejemplo, después de inyectarse como relleno intradérmico, subdérmico o generalmente, dérmico. En algunas realizaciones, los tiempos de residencia pueden verse afectados en el método de peryodato de sodio dependiendo del número de grupos reactivos en el FPS que están disponibles para enlazarse con otra macromolécula de FPS o con AH. Un ejemplo de un grupo reactivo en FPS que puede enlazarse con AH es una amina primaria. Un FPS que contiene dos grupos reactivos, tales como dos aminas primarias, puede por sí mismo reticular el AH en el método del peryodato, creando así un conjugado más estable. En otras realizaciones, donde solo está presente un grupo reactivo en el FPS, tal como solo una amina primaria, por ejemplo en el extremo amino, se reduce la reticulación de FPS-AH dando como resultado una matriz más biodegradable.
En algunas realizaciones, el AH reticulado con BDDE puede tener un tiempo de residencia variable después de la aplicación, por ejemplo, después de ser inyectado como un relleno intradérmico, subdérmico o generalmente dérmico. En algunas realizaciones, el AH reticulado con BDDE puede persistir en el tejido dérmico cualquier tiempo entre uno y al menos treinta días, dependiendo de la cantidad de reticulación. El tiempo de residencia variable del AH reticulado se puede ajustar introduciendo enlaces hidrolizables durante la reticulación del epóxido. En algunas realizaciones, los materiales reticulados con epóxido a un pH más bajo tienen una mayor cantidad de formación de enlaces éster y, por lo tanto, se hidrolizan más rápidamente.
En una realización, el agente de reticulación es un agente activador de reticulación de longitud cero. Generalmente, los agentes activadores de reticulación de longitud cero acoplan polímeros sin añadir ningún átomo de brazo espaciador adicional y, por lo tanto, los agentes activadores de reticulación de longitud cero no se incorporan a la matriz polimérica reticulada. Los agentes reticulantes de longitud cero adecuados incluyen carbodiimidas, tales como, por ejemplo, 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) y BCDI. Las carbodiimidas no solubles en agua incluyen diciclohexilcarbodiimida (DCC) y diisopropilcarbodiimida (DIC), que también pueden ser adecuadas.
El acoplamiento mediado por carbodiimida entre carboxilatos y grupos funcionales de alcohol o amina se produce fácilmente a temperatura ambiente, pH neutro y en condiciones acuosas. El pH neutro puede estar, por ejemplo, entre aproximadamente 6,0 y aproximadamente 8,0, tal como entre aproximadamente 6,5 y aproximadamente 7,5, tal como aproximadamente 7,0. Normalmente, en agua, el hidrocloruro de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida (EDC) se puede usar para mediar la esterificación entre carboxilatos y alcoholes o la amidación entre carboxilatos y aminas. Por tanto, el AH reticulado se forma explotando los grupos reactivos presentes en el AH (p. ej., carboxilato y alcohol). Además, al aprovechar la alta reactividad de los grupos amina en las proteínas, por ejemplo, las proteínas FPS, se logra la amidación entre las cadenas laterales de lisina de las proteínas con grupos carboxilato de AH para formar hidrogeles reticulados de proteína AH. Los agentes de reticulación y los polímeros que no han reaccionado se pueden retirar mediante diálisis.
En algunas realizaciones, se usa EDC junto con N-hidroxisuccinimida (NHS) o sulfonil-NHS (sulfo-NHS), denominados colectivamente como "NHS" en el presente documento. NHS estabiliza intermedios reactivos formados por EDC; por tanto, la adición de NHS puede aumentar la eficiencia de acoplamiento de EDC. Como alternativa, se puede usar 4-dimetilaminopiridina (DMAP) para catalizar la reacción de acoplamiento.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido basados en AH de la divulgación incluyen composiciones basadas en AH reticulado y composiciones basadas en AH al menos parcialmente reticulado. AH no reticulado como se usa en el presente documento se refiere tanto a cadenas de AH verdaderamente no reticuladas (p. ej., "libres") como a cadenas ligeramente reticuladas y fragmentos de las mismas que generalmente están en forma líquida soluble.
En algunas realizaciones, las composiciones de hidrogel de la divulgación incluyen al menos algún reticulación entre AH y FPS.
Realizaciones ejemplares no limitativas
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular bajo que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3.0, ácido hialurónico (AH), agua y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular medio que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, ácido hialurónico (AH), agua y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular bajo que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3.0, fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular medio que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta el 15 %; en el que la relación p/p entre el FPS de peso molecular bajo y el FPS de peso molecular medio es de aproximadamente 3:1.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular alto que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3.0, ácido hialurónico (AH), agua y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación como resultado del uso de un reticulante derivado de epoxi, p. ej., BDDE, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0 y un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de bajo peso molecular que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3.0, ácido hialurónico (AH), agua y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular medio que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, ácido hialurónico (AH), agua y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular bajo que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3.0, fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular medio que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3,0, ácido hialurónico (AH), agua, y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %; en el que la relación p/p entre el FPS de peso molecular bajo y el FPS de peso molecular medio es de aproximadamente 3:1.
En una realización, la divulgación se refiere a un relleno dérmico biocompatible que incluye fragmentos de proteína de seda (FPS) de peso molecular alto que tienen una polidispersidad de entre aproximadamente 1,5 y aproximadamente 3.0, ácido hialurónico (AH), agua y entre aproximadamente 0,05 % y aproximadamente 0,5 % de lidocaína, p. ej., aproximadamente 0,3 % de lidocaína; en el que una parte de hasta el 100 % p/p de FPS están reticulados, y una parte de hasta el 100 % p/p de AH está reticulado, ocurriendo la reticulación entre uno o más de FPS con FPS, FPS con AH, y AH con AH; ocurriendo la reticulación, incluida la reticulación de longitud cero, como resultado del uso de un agente activador, p. ej., BCDI, y con un grado de reticulación de hasta 15 %.
Agentes adicionales
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento incluyen un agente activo, tal como un fármaco. En algunas realizaciones, el agente activo puede ser uno o más inhibidores enzimáticos, agentes anestésicos, neurotoxinas medicinales, antioxidantes, agentes antiinfecciosos, agentes antiinflamatorios, vasodilatadores, agentes bloqueadores de luz ultravioleta (UV), colorantes (p. ej., colorante, tinta o pigmento para tatuajes), un agente reflectante, hormonas, inmunosupresores y combinaciones de los mismos. Los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir un agente activo seleccionado del grupo que consiste en inhibidores enzimáticos, agentes anestésicos, neurotoxinas medicinales (p. ej., toxina botulínica y toxina de Clostridium), antioxidantes, agentes antiinfecciosos (p. ej., antibióticos), vasodilatadores, colorantes (p. ej., tinta o pigmento para tatuajes, agentes reflectantes, agentes antiinflamatorios, agentes bloqueadores de luz ultravioleta (UV), colorantes, hormonas, inmunosupresores y combinaciones de los mismos.
En algunas realizaciones, el inmunosupresor es rapamicina o un compuesto similar a la rapamicina.
En algunas realizaciones, el agente activo puede ser un antibiótico seleccionado del grupo que consiste en una penicilina (p. ej., penicilina V, amoxicilina), una eritromicina (p. ej., estearato de eritromicina), una lincosamida (p. ej., clindamicina) y una cefalosporina (p. ej., cefalexina), y una combinación de los mismos.
En algunas realizaciones, el agente activo puede ser un vasodilatador seleccionado del grupo que consiste en nitroglicerina, labetalol, trazida, dinitrato de isosorbida, tetranitrato de pentaeritritol, digitálicos, hidralazina, diazóxido, amrinona, L-arginina, sulfato de bametano, fumarato de benciclano, hemisuccinato de benfurodilo, nicotinato de bencilo, hidrocloruro de buflomedil, hidrocloruro de bufenina, hidrocloruro de butalamina, citrato de cetiedilo, ciclonicato, maleato de cinepazida, ciclandelato, dicloroacetato de diisopropilamonio, nicotinato de etilo, hepronicato, nicotinato de hexilo, tartrato de ifenprodil, nicotinato de inositol, hidrocloruro de isoxsuprina, calidinogenasa, nicotinato de metilo, oxalato de naftidrofurilo, citrato de nicametato, niceritrol, nicoboxilo, nicofuranosa, alcohol de nicotinilo, tartrato de alcohol de nicotinilo, óxido nítrico, nonivamida, oxpentifilina, papaverina, papaverolina, pentifilina, peroxinitrito, pinacidilo, pipratecol, propentofiltina, raubasina, suloctidilo, teasuprina, hidrocloruro de timoxamina, nicotinato de tocoferol, tolazolina, nicotinato de xantinol, diazóxido, hidralazina, minoxidilo y nitroprusiato de sodio, y una combinación de los mismos.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir un agente activo en una concentración, en peso, de al menos 0,01 %, o al menos 0,02 %, o al menos 0,03 %, o al menos 0,04 %, o al menos 0,05 %, o al menos 0,06 %, o al menos 0,07 %, o al menos 0,08 %, o al menos 0,09 %, o al menos 0,1 %, o al menos 0,2 %, o al menos 0,3 %, o al menos 0,4 %, o al menos 0,5 %, o al menos 0,6 %, o al menos 0,7 %, o al menos 0,8 %, o al menos 0,9 %, o al menos 1,0 %, o al menos 1,5 %, o al menos 2,0 %, o al menos 2,5 %, o al menos 3,0 %, o al menos 3,5 %, o al menos 4,0 %, o al menos 4,5 %, o al menos 5,0 %, o al menos 5,5 %, o al menos 6,0 %, o al menos 6,5 %, o al menos 7,0 %, o al menos 7,5 %, o al menos 8,0 %, o al menos 8,5 %, o al menos 9,0 %, o al menos 9,5 %, o al menos 10 %, o al menos 15 %, o al menos 20 %, o al menos 25 %, o al menos 30 %, o al menos 35 %, o al menos 40 %, o al menos 45 %, o al menos 50 %.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir un agente activo a una concentración, en peso, de como máximo 0,01 %, o como máximo 0,02 %, o como máximo 0,03 %, o como máximo 0,04 % o como máximo 0,05 %, o como máximo 0,06 %, o como máximo 0,07 %, o como máximo 0,08 %, o como máximo 0,09 %, o como máximo 0,1 %, o como máximo 0,2 %, o como máximo 0,3 %, o como máximo 0,4 %, o como máximo 0,5 %, o como máximo 0,6 %, o como máximo 0,7 %, o como máximo 0,8 %, o como máximo 0,9 %, o como máximo 1,0 %, o como máximo 1,5 %, o como máximo 2,0 %, o como máximo 2,5 %, o como máximo 3,0 %, o como máximo 3,5 %, o como máximo 4,0 %, o como máximo 4,5 %, o como máximo 5,0 %, o como máximo 5,5 %, o como máximo 6,0 %, o como máximo 6,5 %, o como máximo 7,0 %, o como máximo 7,5 %, o como máximo 8,0 %, o como máximo 8,5 %, o como máximo 9,0 %, o como máximo 9,5 %, o como máximo 10 %, o como máximo 15 %, o como máximo 20 %, o como máximo 25 %, o como máximo 30 %, o como máximo 35 %, o como máximo 40 %, o como máximo 45 %, o como máximo 50 %.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir un agente activo en una concentración, en peso, de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 0,1 %, o de aproximadamente 0,05 % a aproximadamente 0,15 %, o de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 0,2 %, o de aproximadamente 0,15 % a aproximadamente 0,25 %, o de aproximadamente 0,2 % a aproximadamente 0,3 %, o de aproximadamente 0,25 % a aproximadamente 0,35 %, o de aproximadamente 0,3 % a aproximadamente 0,4 %, o de aproximadamente 0,35 % a aproximadamente 0,45 %, o de aproximadamente 0,4 % a aproximadamente 0,5 %, o de aproximadamente 0,45 % a aproximadamente 0,55 %, o de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 0,6 %, o de aproximadamente 0,55 % a aproximadamente 0,65 %, o de aproximadamente 0,6 % a aproximadamente 0,7 %, o de aproximadamente 0,65 % a aproximadamente 0,75 %, o de aproximadamente 0,7 % a aproximadamente 0,8 %, o de aproximadamente 0,75 % a aproximadamente 0,85 %, o de aproximadamente 0,8 % a aproximadamente 0,9 %, o de aproximadamente 0,85 % a aproximadamente 0,95 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 2 %, o de aproximadamente 1,5 % a aproximadamente 2,5 %, o de aproximadamente 2 % a aproximadamente e aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 3,5 %, o de aproximadamente 3 % a aproximadamente e aproximadamente 3,5 % a aproximadamente 4,5 %, o de aproximadamente 4 % a aproximadamente e aproximadamente 4,5 % a aproximadamente 5,5 %, o de aproximadamente 5 % a aproximadamente e aproximadamente 5,5 % a aproximadamente 6,5 %, o de aproximadamente 6 % a aproximadamente e aproximadamente 6,5 % a aproximadamente 7,5 %, o de aproximadamente 7 % a aproximadamente e aproximadamente 7,5 % a aproximadamente 8,5 %, o de aproximadamente 8 % a aproximadamente e aproximadamente 8,5 % a aproximadamente 9,5 %, o de aproximadamente 9 % a aproximadamente aproximadamente 10 % a aproximadamente 15 %, o de aproximadamente 15 % a aproximadamente aproximadamente 20 % a aproximadamente 25 %, o de aproximadamente 25 % a aproximadamente aproximadamente 30 % a aproximadamente 35 %, o de aproximadamente 35 % a aproximadamente
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aproximadamente 40 % a aproximadamente 45 %, o de aproximadamente 45 % a aproximadamente 50
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir un agente activo a una concentración, en peso, de aproximadamente 0,01 %, o aproximadamente 0,02 %, o aproximadamente 0,03 %, o aproximadamente 0,04 %, o aproximadamente 0,05 % o aproximadamente 0,06 %, o aproximadamente 0,07 %, o aproximadamente 0,08 %, o aproximadamente 0,09 %, o aproximadamente 0,1 %, o aproximadamente 0,2 %, o aproximadamente 0,3 %, o aproximadamente 0,4 %, o aproximadamente 0,5 %, o aproximadamente 0,6 %, o aproximadamente 0,7 %, o aproximadamente 0,8 %, o aproximadamente 0,9 %, o aproximadamente 1,0 %, o aproximadamente 1,5 %, o aproximadamente 2,0 %, o aproximadamente 2,5 %, o aproximadamente 3,0 %, o aproximadamente 3,5 %, o aproximadamente 4,0 %, o aproximadamente 4,5 %, o aproximadamente 5,0 %, o aproximadamente 5,5 %, o aproximadamente 6,0 %, o aproximadamente 6,5 %, o aproximadamente 7,0 %, o aproximadamente 7,5 %, o aproximadamente 8,0 %, o aproximadamente 8,5 %, o aproximadamente 9,0 %, o aproximadamente 9,5 %, o aproximadamente 10 %, o aproximadamente 11 %, o aproximadamente 12 %, o aproximadamente 13 %, o aproximadamente 14 %, o aproximadamente 15 %, o aproximadamente 16 %, o aproximadamente 17 %, o aproximadamente 18 %, o aproximadamente 19 %, o aproximadamente 20 %, o aproximadamente 21 %, o aproximadamente 22 %, o aproximadamente 23 %, o aproximadamente 24 %, o aproximadamente 25 %, o aproximadamente 26 %, o aproximadamente 27 %, o aproximadamente 28 %, o aproximadamente 29 %, o aproximadamente 30 %, o aproximadamente 31 %, o aproximadamente 32 %, o aproximadamente 33 %, o aproximadamente 34 %, o aproximadamente 35 %, o aproximadamente 36 %, o aproximadamente 37 %, o aproximadamente 38 %, o aproximadamente 39 %, o aproximadamente 40 %, o aproximadamente 41 %, o aproximadamente 42 %, o aproximadamente 43 %, o aproximadamente 44 %, o aproximadamente 45 %, o aproximadamente 46 %, o aproximadamente 47 %, o aproximadamente 48 %, o aproximadamente 49 %, o aproximadamente 50 %.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento incluyen un agente inhibidor de la fibrosis. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir además un compuesto que actúa para tener un efecto inhibidor sobre procesos patológicos en o alrededor del sitio de tratamiento. En ciertos aspectos, el agente activo puede seleccionarse de una de las siguientes clases de compuestos: agentes antiinflamatorios (p. ej., dexametasona, cortisona, fludrocortisona, prednisona, prednisolona, 6a-metilprednisolona, triamcinolona, betametasona y aspirina).
En algunas realizaciones, el agente activo puede incluir, pero sin limitación, antioxidantes y enzimas. En una realización, el agente activo puede incluir, pero sin limitación, selenio, derivados de ubiquinona, antioxidantes basados en tioles, antioxidantes que contienen sacáridos, polifenoles, extractos botánicos, ácido cafeico, apigenina, picnogenol, resveratrol, ácido fólico, vitamina B12, vitamina B6, vitamina B3, vitamina E, vitamina C y sus derivados, vitamina D, vitamina A, astaxatina, luteína, licopeno, ácidos grasos esenciales (omegas 3 y 6), hierro, zinc, magnesio, flavonoides (soja, curcumina, silimarina, picnongeol), factores de crecimiento, aloe, ácido hialurónico, proteínas de la matriz extracelular, células, ácidos nucleicos, biomarcadores, reactivos biológicos, óxido de zinc, peróxido de benzoílo, retinoides, titanio, alérgenos en dosis conocida (para el tratamiento de sensibilización), aceites esenciales incluyendo, pero sin limitación, aceite de citronela romero, y fragancias. Considerando los agentes activos de manera más amplia, los agentes activos pueden incluir agentes terapéuticos tales como moléculas pequeñas, fármacos, proteínas, péptidos y ácidos nucleicos.
En ciertas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir uno o más agentes anestésicos en una cantidad eficaz para mejorar o mitigar el dolor o la incomodidad en el sitio de inyección del relleno de tejido. El anestésico local puede seleccionarse del grupo de ambucaína, amolanona, amilocaína, benoxinato, benzocaína, betoxicaína, bifenamina, bupivacaína, butacaína, butambeno, butanilicaína, butetamina, butoxicaína, carticaína, cloroprocaína, cocaetileno, cocaína, ciclometicaína, dibucaína, dimetisoquina, dimetocaína, diperodón, diciclomina, ecgonidina, ecgonina, cloruro de etilo, etidocaína, beta-eucaína, euprocina, fenalcomina, formocaína, hexilcaína, hidroxitetracaína, p-aminobenzoato de isobutilo, mesilato de leucinocaína, levoxadrol, lidocaína, mepivacaína, meprilcaína, metabutoxicaína, cloruro de metilo, mirtecaína, naepaína, octacaína, ortocaína, oxetazaína, paretoxicaína, fenacaína, fenol, piperocaína, piridocaína, polidocanol, pramoxina, prilocaína, procaína, propanocaína, proparacaína, propipocaína, propoxycaína, pseudococaína, pirrocaína, ropivacaína, alcohol salicílico, tetracaína, tolicaína, trimecaína, zolamina y sales de los mismos.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir lidocaína u otro anestésico mencionado anteriormente en una concentración, en peso, de al menos 0,01 %, o al menos 0,02 %, o al menos 0,03 %, o al menos 0,04 %, o al menos 0,05 %, o al menos 0,06 %, o al menos 0,07 %, o al menos 0,08 %, o al menos 0,09 %, o al menos 0,1 %, o al menos 0,2 %, o al menos 0,3 %, o al menos 0,4 %, o al menos 0,5 %, o al menos 0,6 %, o al menos 0,7 %, o al menos 0,8 %, o al menos 0,9 %, o al menos 1,0 %, o al menos 1,5 %, o al menos
2,0 %, o al menos 2,5 %, o al menos 3,0 %, o al menos 3,5 %, o al menos 4,0 %, o al menos 4,5 %, o al menos 5,0
%, o al menos 5,5 %, o al menos 6,0 %, o al menos 6,5 %, o al menos 7,0 %, o al menos 7,5 %, o al menos 8,0 %, o al menos 8,5 %, o al menos 9,0 %, o al menos 9,5 %, o al menos 10 %.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir lidocaína u otro anestésico mencionado anteriormente en una concentración, en peso, de como máximo 0,01 %, o como máximo 0,02
%, o como máximo 0,03 %, o como máximo 0,04 % o como máximo 0,05 %, o como máximo 0,06 %, o como máximo
0,07 %, o como máximo 0,08 %, o como máximo 0,09 %, o como máximo 0,1 %, o como máximo 0,2 %, o como máximo 0,3 %, o como máximo 0,4 %, o como máximo 0,5 %, o como máximo 0,6 como máxim máximo 0,8 %, o como máximo 0,9 %, o como máximo 1,0 %, o
Figure imgf000078_0001
como máximo 1,5 como máxim máximo 2,5 %, o como máximo 3,0 %, o como máximo
Figure imgf000078_0002
3,5 %, o como máximo 4,0 como máxim máximo 5,0 %, o como máximo 5,5 %, o como máximo 6,0 %, o como máximo 6,5 como máxim máximo 7,5 %, o como máximo 8,0 %, o como máximo 8,5 %, o como máximo 9,0
Figure imgf000078_0003
como máxim máximo 10 %.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir lidocaína u otro anestésico mencionado anteriormente en una concentración, en peso, de aproximadamente 0,01 %, o aproximadamente 0,02 %, o aproximadamente 0,03 %, o aproximadamente 0,04 %, o aproximadamente 0,05 %, o aproximadamente 0,06 %, o aproximadamente 0,07 %, o aproximadamente 0,08 %, o aproximadamente 0,09 %, o aproximadamente 0,1 %, o aproximadamente 0,2 %, o aproximadamente 0,3 %, o aproximadamente 0,4 %, o aproximadamente 0,5 %, o aproximadamente 0,6 %, o aproximadamente 0,7 %, o aproximadamente 0,8 %, o aproximadamente 0,9 %, o aproximadamente 1,0 %, o aproximadamente 1,5 %, o aproximadamente 2,0 %, o aproximadamente 2,5 %, o aproximadamente 3,0 %, o aproximadamente 3,5 % o aproximadamente 4,0 %, o aproximadamente 4,5 %, o aproximadamente 5,0 %, o aproximadamente 5,5 %, o aproximadamente 6,0 %, o aproximadamente 6,5 %, o aproximadamente 7,0 %, o aproximadamente 7,5 %, o aproximadamente 8,0 %, o aproximadamente 8,5 %, o aproximadamente 9,0 %, o aproximadamente 9,5 %, o aproximadamente 10 %.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir lidocaína u otro anestésico mencionado anteriormente en una concentración, en peso, de aproximadamente 0,01 % a aproximadamente 0,02 %, o de aproximadamente 0,03 % a aproximadamente 0,04 %, o de aproximadamente 0,05 % a aproximadamente 0,06 %, a aproximadamente 0,07 %, o de aproximadamente 0,08 % a aproximadamente 0,09 %, o de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 0,2 %, o de aproximadamente 0,3 % a aproximadamente 0,4 %, o de aproximadamente 0,5 % a aproximadamente 0,6 %, o de aproximadamente 0,7 % a aproximadamente 0,8 %, o de aproximadamente 0,9 % a aproximadamente 1,0 %, o de aproximadamente 1 % a aproximadamente 1,5 %, o de aproximadamente 1,5 % a aproximadamente 2,0 %, o de aproximadamente 2,0 % a aproximadamente 2,5 %, o de aproximadamente 2,5 % a aproximadamente 3,0 %, o de aproximadamente 3,0 % a aproximadamente 3,5 %, o de aproximadamente 3,5 % a aproximadamente 4,0 %, o de aproximadamente 4,0 % a aproximadamente 4,5 %, o de aproximadamente 4,5 % a aproximadamente 5,0 %, o de aproximadamente 5,0 % a aproximadamente 5,5 %, o de aproximadamente 5,5 % a aproximadamente 6,0 %, o de aproximadamente 6,0 % a aproximadamente 6,5 %, o de aproximadamente 6,5 % a aproximadamente 7,0 %, o de aproximadamente 7,5 % a aproximadamente 8,0 %, o de aproximadamente 8,0 % a aproximadamente 8,5 %, o de aproximadamente 8,5 % a aproximadamente 9,0 %, o de aproximadamente 9,5 % a aproximadamente 10 %.
En una realización, el agente anestésico es lidocaína, tal como en forma de HCl de lidocaína. Los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden tener una lidocaína u otro anestésico en una concentración de entre aproximadamente 0,1 % y aproximadamente 5 % en peso de la composición, por ejemplo, de aproximadamente 0,2 % a aproximadamente 1,0 % en peso del relleno de tejido. En una realización, el relleno de tejido tiene una concentración de lidocaína de aproximadamente 0,3 % en peso (% p/p) del relleno de tejido. La concentración de lidocaína en los rellenos de tejido descritos en el presente documento puede ser terapéuticamente eficaz, lo que significa que la concentración es adecuada para proporcionar un beneficio terapéutico tal como, por ejemplo, mejorar 0 mitigar el dolor o la incomodidad en el sitio de inyección del relleno de tejido.
Propiedades ópticas
Cuando la luz se encuentra con un material, puede interactuar con él de varias maneras. Estas interacciones dependen de la naturaleza de la luz, es decir, su longitud de onda, frecuencia, energía, etc., y la naturaleza del material. La luz interactúa con un objeto mediante alguna combinación de reflexión y transmitancia con refracción. Un material ópticamente transparente permite que se transmita gran parte de la luz que incide sobre él, y que se refleje poca luz. Los materiales que no permiten la transmisión de la luz se denominan ópticamente opacos, o simplemente opacos.
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona un relleno de tejido descrito en el presente documento que tiene transparencia y/o translucidez. La transparencia (también llamada pelucidez o diafanidad) es la propiedad física de permitir el paso de la luz a través de un material, mientras que la translucidez (también llamada traslucidez o translucencia) solo permite el paso de la luz de forma difusa. La propiedad opuesta es la opacidad. Los materiales transparentes son claros, mientras que a través de los translúcidos no se puede ver claramente. Los rellenos de tejido divulgados en el presente documento pueden exhibir o no propiedades ópticas tales como transparencia y/o translucidez. En algunas realizaciones, incluidos los métodos para el relleno de líneas superficiales, sería una ventaja tener un hidrogel opaco. Los factores usados para controlar las propiedades ópticas de un relleno de tejido incluyen, sin limitación, la concentración de FPS, el grado de cristalinidad y/o la homogeneidad del hidrogel.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento son opacos.
En una realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento es ópticamente transparente. En aspectos de esta realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento transmite, p. ej., aproximadamente el 75 % de la luz, aproximadamente el 80 % de la luz, aproximadamente el 85 % de la luz, aproximadamente el 90 % de la luz, aproximadamente el 95 % de la luz, o aproximadamente el 100 % de la luz. En otros aspectos de esta realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento, p. ej., al menos el 75 % de la luz, al menos el 80 % de la luz, al menos el 85 % de la luz, al menos el 90 % de la luz, o al menos el 95 % de la luz. En otros aspectos más de esta realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento transmite, p. ej., de aproximadamente 75 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 80 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 85 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 90 % a aproximadamente 100 % de la luz, o de aproximadamente 95 % a aproximadamente 100 % de la luz.
En otra realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento es ópticamente opaco. En aspectos de esta realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento transmite, p. ej., aproximadamente el 0,1 % de la luz, aproximadamente el 1 % de la luz, aproximadamente el 10 % de la luz, aproximadamente el 15 % de la luz, aproximadamente el 20 % de la luz, aproximadamente el 25 % de la luz, aproximadamente el 30 % de la luz, aproximadamente el 35 % de la luz, aproximadamente el 40 % de la luz, aproximadamente el 45 % de la luz, aproximadamente el 50 % de la luz, aproximadamente el 55 % de la luz, aproximadamente el 60 % de la luz, aproximadamente el 65 % de la luz, aproximadamente el 70 % de la luz, aproximadamente el 75 % de la luz, aproximadamente el 80 % de la luz, aproximadamente el 85 % de la luz, aproximadamente el 90 % de la luz, aproximadamente el 95 % de la luz, o aproximadamente el 100 % de la luz. En otros aspectos de esta realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento transmite, p. ej., como máximo el 0,1 % de la luz, como máximo el 1 % de la luz, como máximo el 10 % de la luz, como máximo el 15 % de la luz, como máximo 20 % de la luz, como máximo el 25 % de la luz, como máximo el 30 % de la luz, como máximo el 35 % de la luz, como máximo el 40 % de la luz, como máximo el 45 % de la luz, como máximo el 50 % de la luz, como máximo el 55 % de la luz, como máximo el 60 % de la luz, como máximo el 65 % de la luz, como máximo el 70 % de la luz, o como máximo el 75 % de la luz. En otros aspectos de esta realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento transmite, p. ej., al menos el 0,1 % de la luz, al menos el 1 % de la luz, al menos el 10 % de la luz, al menos el 15 % de la luz, al menos 20 % de la luz, al menos el 25 % de la luz, al menos el 30 % de la luz, al menos el 35 % de la luz, al menos el 40 % de la luz, al menos el 45 % de la luz, al menos el 50 % de la luz, al menos el 55 % de la luz, al menos el 60 % de la luz, al menos el 65 % de la luz, al menos el 70 % de la luz, o al menos el 75 % de la luz. En otros aspectos de esta realización, un relleno de tejido descrito en el presente documento transmite, p. ej., de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 20 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 25 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 30 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 70 %, de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 75 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 20 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 25 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 30 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 70 %, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 75 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 20 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 25 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 30 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 70 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 75 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 70 %, o de aproximadamente 25 % a aproximadamente 75 %, de la luz.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido descrito en el presente documento es ópticamente translúcido. En aspectos de estas realizaciones, un relleno de tejido descrito en el presente documento transmite de forma difusa, p. ej., aproximadamente 75 % de la luz, aproximadamente 80 % de la luz, aproximadamente 85 % de la luz, aproximadamente 90 % de la luz, aproximadamente 95 % de la luz, o aproximadamente 100 % de la luz. En otros aspectos de estas realizaciones, un relleno de tejido transmite de forma difusa, p. ej., al menos el 0,1 % de la luz, al menos el 1 % de la luz, al menos el 5 % de la luz, al menos el 10 % de la luz, al menos el 15 % de la luz, al menos el 20 % de la luz, al menos el 25 % de la luz, al menos el 30 % de la luz, al menos el 35 % de la luz, al menos el 40 % de la luz, al menos el 45 % de la luz la luz, al menos el 50 % de la luz, al menos el 55 % de la luz, al menos el 60 % de la luz, al menos el 65 % de la luz, al menos el 70 % de la luz, el 75 % de la luz, al menos el 80 % de la luz, al menos el 85 % de la luz, al menos el 90 % de la luz, o al menos el 95 % de la luz. En otros aspectos de estas realizaciones, un relleno de tejido transmite de forma difusa, p. ej., como máximo el 0,1 % de la luz, como máximo el 1 % de la luz, como máximo el 5 % de la luz, como máximo el 10 % de la luz, como máximo el 15 % de la luz, como máximo el 20 % de la luz, como máximo el 25 % de la luz, como máximo el 30 % de la luz, como máximo el 35 % de la luz, como máximo el 40 % de la luz, como máximo el 45 % de la luz la luz, como máximo el 50 % de la luz, como máximo el 55 % de la luz, como máximo el 60 % de la luz, como máximo el 65 % de la luz, como máximo el 70 % de la luz, el 75 % de la luz, como máximo el 80 % de la luz, como máximo el 85 % de la luz, como máximo el 90 % de la luz, como máximo el 95 % de la luz, o como máximo el 100 % de la luz. En otros aspectos más de estas realizaciones, un relleno de tejido transmite de forma difusa, p. ej., de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 1 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 20 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 30 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 35 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 45 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 50 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 55 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 60 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 65 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 70 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 75 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 80 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 85 % a aproximadamente 100 % de la luz, de aproximadamente 90 % a aproximadamente 100 % de la luz, o de aproximadamente 95 % a aproximadamente 100 % de la luz.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido descrito en el presente documento puede describirse por su coeficiente de atenuación, que se define como una descripción de la capacidad del material para dispersar o absorber la luz.
Las propiedades del relleno de tejido y de la piel pueden influir en la manifestación del evento adverso de efecto Tyndall en la piel después del suministro de ciertos rellenos de tejido conocidos en la materia. Los rellenos con alta rigidez y elasticidad se pueden usar para corregir áreas de la cara como los pliegues nasolabiales, las mejillas y el mentón sin temor a la decoloración facial, ya que los materiales se inyectan en las regiones de la dermis media y profunda. Sin embargo, cuando los rellenos se usan para aplicaciones más superficiales, por ejemplo, para corregir líneas finas de arrugas, o cuando se aplican por error demasiado superficialmente en las regiones superiores de la dermis, a menudo se observa una decoloración azulada de la piel. Este fenómeno, que se cree que es el resultado del efecto Tyndall, deja una decoloración semipermanente de los sitios de aplicación. En algunas realizaciones, el efecto desaparece tras la administración de enzimas, por ejemplo hialuronidasa, para degradar el material de relleno. En consecuencia, el efecto Tyndall es más común en pacientes tratados por arrugas finas superficiales. La manifestación prolongada del efecto Tyndall, típicamente durante el tiempo que dura el relleno en la piel, es un efecto secundario no deseado y un motivo de preocupación para los pacientes.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento mitigan el efecto Tyndall debido a su homogeneidad y la opacidad resultante.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento no dan como resultado el efecto Tyndall, o no dan como resultado ninguna decoloración azul perceptible visualmente como resultado del efecto Tyndall. En algunas realizaciones, la invención se refiere a rellenos de tejido y a métodos para mejorar la apariencia estética, que comprenden administrar, a una región dérmica de un paciente, una composición de relleno dérmico sustancialmente transparente ópticamente que no muestra ningún efecto Tyndall o es insignificante. La aparición de una decoloración azul en el sitio de la piel donde se inyectó un relleno de tejido (efecto Tyndall) es un evento adverso significativo experimentado por algunos pacientes con relleno dérmico. El efecto Tyndall es más común en pacientes tratados por líneas de arrugas finas superficiales. Se han desarrollado realizaciones de la presente invención que proporcionan rellenos translúcidos de larga duración que se pueden inyectar superficialmente para tratar líneas finas y arrugas, incluso en regiones de piel relativamente fina, sin que se produzca ninguna decoloración azul por el efecto Tyndall. Generalmente se entiende por líneas finas o arrugas superficiales aquellas arrugas o pliegues de la piel que se encuentran típicamente en regiones de la cara (frente, canto lateral, borde bermellón/líneas periorales) donde la piel es más fina, es decir, la piel tiene un grosor dérmico de menos de 1 mm. En la frente, el grosor dérmico medio es de aproximadamente 0,95 mm para la piel normal y de aproximadamente 0,81 mm para la piel arrugada. La dermis alrededor del canto lateral es aún más delgada (p. ej., aproximadamente 0,61 mm para la piel normal y aproximadamente 0,41 mm para la piel arrugada). El diámetro exterior medio de una aguja de calibre 30 o 32 (agujas que normalmente se usan para la aplicación de gel en líneas finas) es de aproximadamente 0,30 y aproximadamente 0,24 mm.
En una realización, un relleno de tejido divulgado en el presente documento es ópticamente opaco. En aspectos de esta realización, un relleno de tejido divulgado en el presente documento transmite, p. ej., aproximadamente 5 % de la luz, aproximadamente 10 % de la luz, aproximadamente 15 % de la luz, aproximadamente 20 % de la luz, aproximadamente 25 % de la luz, aproximadamente 30 % de la luz, aproximadamente 35 % de la luz, aproximadamente 40 % de la luz, aproximadamente 45 % de la luz, aproximadamente 50 % de la luz, aproximadamente 55 % de la luz, aproximadamente 60 % de la luz, aproximadamente 65 % de la luz, o aproximadamente 70 % de la luz. En otros aspectos de esta realización, un relleno de tejido divulgado en el presente documento transmite, p. ej., como máximo el 5 % de la luz, como máximo el 10 % de la luz, como máximo el 15 % de la luz, como máximo el 20 % de la luz, como máximo el 25 % de la luz, como máximo el 30 % de la luz, como máximo el 35 % de la luz, como máximo el 40 % de la luz, como máximo el 45 % de la luz, como máximo el 50 % de la luz, como máximo el 55 % de la luz, como máximo el 60 % de la luz, como máximo el 65 % de la luz, como máximo el 70 % de la luz, o como máximo el 75 % de la luz. En otros aspectos de esta realización, un relleno de tejido divulgado en el presente documento transmite, p. ej., de aproximadamente 5 % a aproximadamente 15 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 20 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 25 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 30 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 70 %, de aproximadamente 5 % a aproximadamente 75 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 20 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 25 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 30 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 70 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 75 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 70 % o de aproximadamente 25 % a aproximadamente 75 % de la luz.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento exhibe, p. ej., aproximadamente 5 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 100 % de reducción en el fenómeno de Tyndall. En otros aspectos de estas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento exhibe, p. ej., al menos un 5 %, al menos un 10 %, al menos un 15 %, al menos un 20 %, al menos un 25 %, al menos un 30 %, al menos un 35 %, al menos un 40 %, al menos un 45 %, al menos un 50 %, al menos un 55 %, al menos un 60 %, al menos un 65 %, al menos un 70 %, al menos un 75 %, al menos un 80 %, al menos un 85 %, al menos un 90 %, al menos un 95 % o al menos un 100 % de reducción del fenómeno de Tyndall. En otros aspectos de estas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento exhibe, p. ej., de aproximadamente 20 % a aproximadamente 100 %, de aproximadamente 50 % a aproximadamente 100 %, de aproximadamente 70 % a aproximadamente 100 %, de aproximadamente 15 % a aproximadamente 35 %, de aproximadamente 20 % a aproximadamente 40 %, de aproximadamente 25 % a aproximadamente 45 %, de aproximadamente 30 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 35 % a aproximadamente 55 %, de aproximadamente 40 % a aproximadamente 60 %, de aproximadamente 45 % a aproximadamente 65 %, de aproximadamente 50 % a aproximadamente 70 %, de aproximadamente 55 % a aproximadamente 75 %, de aproximadamente 60 % a aproximadamente 80 %, de aproximadamente 65 % a aproximadamente 85 %, de aproximadamente 70 % a aproximadamente 90 %, de aproximadamente 75 % a aproximadamente 95 %, o de aproximadamente 80 % a aproximadamente 100 %, de reducción del fenómeno de Tyndall.
Contenido de agua
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden incluir agua. Por ejemplo, algunos rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden ser geles, tales como hidrogeles, y pueden incluir agua absorbida, atrapada o dispuesta de otro modo en ellos.
En una realización, el porcentaje de contenido de agua, en peso, en los rellenos de tejido de la presente divulgación es de 1 % a 95 %. En una realización, el porcentaje de contenido de agua, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento es al menos 1 %, o al menos 2 %, o al menos 3 %, o al menos 4 %, o al menos 5 %, o al menos 6 %, o al menos 7 %, o al menos 8 %, o al menos 9 %, o al menos 10 %, o al menos 11 %, o al menos 12 %, o al menos 13 %, o al menos 14 %, o al menos 15 %, o al menos 16 %, o al menos 17 %, o al menos 18 %, o al menos 19 %, o al menos 20 %, o al menos 21 %, o al menos 22 %, o al menos 23 %, o al menos 24 %, o al menos 25 %, o al menos 26 %, o al menos 27 %, o al menos 28 %, o al menos 29 %, o al menos 30 %, o al menos 31 %, o al menos 32 %, o al menos 33 %, o al menos 34 %, o al menos 35 %, o al menos 36 %, o al menos 37 %, o al menos 38 %, o al menos 39 %, o al menos 40 %, o al menos 41 %, o al menos 42 %, o al menos 43 %, o al menos 44 %, o al menos 45 %, o al menos 46 %, o al menos 47 %, o al menos 48 %, o al menos 49 %, o al menos 50 %, o al menos 51 %, o al menos 52 %, o al menos 53 %, o al menos 54 %, o al menos 55 %, o al menos 56 %, o al menos 57 %, o al menos 58 %, o al menos 59 %, o al menos 60 %, o al menos 61 %, o al menos 62 %, o al menos 63 %, o al menos 64 %, o al menos 65 %, o al menos 66 %, o al menos 67 %, o al menos 68 %, o al menos 69 %, o al menos 70 %, o al menos 71 %, o al menos 72 %, o al menos 73 %, o al menos 74 %, o al menos 75 %, o al menos 76 %, o al menos 77 %, o al menos 78 %, o al menos 79 %, o al menos 80 %, o al menos 81 %, o al menos 82 %, o al menos 83 %, o al menos 84 %, o al menos 85 %, o al menos 86 %, o al menos 87 %, o al menos 88 %, o al menos 89 %, o al menos 90 %, o al menos 91 %, o al menos 92 %, o al menos 93 %, o al menos 94 %, o al menos 95 %.
En una realización, el porcentaje de contenido de agua, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento es como máximo 1 %, o como máximo 2 %, o como máximo 3 %, o como máximo 4 %, o como máximo 5 %, o como máximo 6 %, o como máximo 7 % , o como máximo 8 %, o como máximo 9 %, o como máximo 10 como máximo 11 %, o como máximo 12 %, o como máximo 13 %, o como máximo 14 %, o como máximo 15 como máximo 16 %, o como máximo 17 %, o como máximo 18 %, o como máximo 19 %, o como máximo 20 como máximo 21 %, o como máximo 22 %, o como máximo 23 %, o como máximo 24 %, o como máximo 25 como máximo 26 %, o como máximo 27 %, o como máximo 28 %, o como máximo 29 %, o como máximo 30 como máximo 31 %, o como máximo 32 %, o como máximo 33 %, o como máximo 34 %, o como máximo 35 como máximo 36 %, o como máximo 37 %, o como máximo 38 %, o como máximo 39 %, o como máximo 40 como máximo 41 %, o como máximo 42 %, o como máximo 43 %, o como máximo 44 %, o como máximo 45 como máximo 46 %, o como máximo 47 %, o como máximo 48 %, o como máximo 49 %, o como máximo 50 como máximo 51 %, o como máximo 52 %, o como máximo 53 %, o como máximo 54 %, o como máximo 55 como máximo 56 %, o como máximo 57 %, o como máximo 58 %, o como máximo 59 %, o como máximo 60 como máximo 61 %, o como máximo 62 %, o como máximo 63 %, o como máximo 64 %, o como máximo 65 como máximo 66 %, o como máximo 67 %, o como máximo 68 %, o como máximo 69 %, o como máximo 70 como máximo 71 %, o como máximo 72 %, o como máximo 73 %, o como máximo 74 %, o como máximo 75 como máximo 76 %, o como máximo 77 %, o como máximo 78 %, o como máximo 79 %, o como máximo 80 como máximo 81 %, o como máximo 82 %, o como máximo 83 %, o como máximo 84 %, o como máximo 85 como máximo 86 %, o como máximo 87 %, o como máximo 88 %, o como máximo 89 %, o como máximo 90 como máximo 91 %, o como máximo 92 %, o como máximo 93 %, o como máximo 94 %, o como máximo 95 %.
En una realización, el porcentaje de contenido de agua, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento es de 1 % a 2 %, o de 2 % a 3 %, o de 3 % a 4 %, o de 4 % a 5 %, o de 5 % a 6 %, o de 6 % a 7 %, o de 7 % a 8 %, o de 8 % a 9 %, o de 9 % a 10 %, o de 10 % a 11 %, o de 11 % a 12 %, o de 12 % a 13 %, o de 13 % a 14 %, o de 14 % a 15 %, o de 15 % a 16 %, o 16 % o 17 %, o de 17 % a 18 %, o de 18 % a 19 %, o de 19 % a 20 %, o de 20 % a 21 %, o de 21 % a 22 %, o de 22 % a 23 %, o de 23 % a 24 %, o de 24 % a 25 %, o de 25 % a 26 %, o de 26 % a 27 %, o de 27 % a 28 %, o de 28 % a 29 %, o de 30 % a 31 %, o de 31 % a 32 %, o de 32 % a 33 %, o de 33 % a 34 %, o de 34 % a 35 %, o de 35 % a 36 %, o de 36 % a 37 %, o de 37 % a 38 %, o de 38 % a 39 %, o de 39 % a 40 %, o de 40 % a 41 %, o de 41 % a 42 %, o de 42 % a 43 %, o de 43 % a 44 %, o de 44 % a 45 %, o de 45 % a 46 %, o de 46 % a 47 %, o de 47 % a 48 %, o de 48 % a 49 %, o de 49 % a 50 %, o de 50 % a 51 %, o de 51 % a 52 %, o de 52 % a 53 %, o de 53 % a 54 %, o de 54 % a 55 %, o de 55 % a 56 %, o de 56 % a 57 %, o de 57 % a 58 %, o de 58 % a 59 %, o de 59 % a 60 %, o de 60 % a 61 %, o de 61 % a 62 %, o de 62 % a 63 %, o de 63 % a 64 %, o de 64 % a 65 %, o de 65 % a 66 %, o de 66 % a 67 %, o de 67 % a 68 %, o de 68 % a 69 %, o de 69 % a 70 %, o de 70 % a 71 %, o de 71 % a 72 %, o de 72 % a 73 %, o de 73 % a 74 %, o de 74 % a 75 %, o de 75 % a 76 %, o de 76 % a 77 %, o de 77 % a 78 %, o de 78 % a 79 %, o de 79 % a 80 %, o de 80 % a 81 %, o de 81 % a 82 %, o de 82 % a 83 %, o de 83 % a 84 %, o de 84 % a 85 %, o de 85 % a 86 %, o de 86 % a 87 %, o de 87 % a 88 %, o de 88 % a 89 %, o de 89 % a 90 %, o de 90 % a 91 %, o de 91 % a 92 %, o de 92 % a 93 %, o de 93 % a 94 %, o de 94 % a 95 %, o de 95 % a 96 %, o de 96 % a 97 %, o de 97 % a 98 %.
En una realización, el porcentaje de contenido de agua, en peso, en los rellenos de tejido descritos en el presente documento es de aproximadamente 1 %, o aproximadamente 2 %, o aproximadamente 3 %, o aproximadamente 4 %, o aproximadamente 5 %, o aproximadamente 6 % o aproximadamente 7 %, o aproximadamente 8 %, o aproximadamente 9 %, o aproximadamente 10 %, o aproximadamente 11 %, o aproximadamente 12 %, o aproximadamente 13 %, o aproximadamente 14 %, o aproximadamente 15 %, o aproximadamente 16 %, o aproximadamente 17 %, o aproximadamente 18 %, o aproximadamente 19 %, o aproximadamente 20 %, o aproximadamente 21 %, o aproximadamente 22 %, o aproximadamente 23 %, o aproximadamente 24 %, o aproximadamente 25 %, o aproximadamente 26 %, o aproximadamente 27 %, o aproximadamente 28 %, o aproximadamente 29 %, o aproximadamente 30 %, o aproximadamente 31 %, o aproximadamente 32 %, o aproximadamente 33 %, o aproximadamente 34 %, o aproximadamente 35 %, o aproximadamente 36 %, o aproximadamente 37 %, o aproximadamente 38 %, o aproximadamente 39 %, o aproximadamente 40 %, o aproximadamente 41 %, o aproximadamente 42 %, o aproximadamente 43 %, o aproximadamente 44 %, o aproximadamente 45 %, o aproximadamente 46 %, o aproximadamente 47 %, o aproximadamente 48 %, o aproximadamente 49 %, o aproximadamente 50 %, o aproximadamente 51 %, o aproximadamente 52 %, o aproximadamente 53 %, o aproximadamente 54 %, o aproximadamente 55 %, o aproximadamente 56 %, o aproximadamente 57 %, o aproximadamente 58 %, o aproximadamente 59 %, o aproximadamente 60 %, o aproximadamente 61 %, o aproximadamente 62 %, o aproximadamente 63 %, o aproximadamente 64 %, o aproximadamente 65 %, o aproximadamente 66 %, o aproximadamente 67 %, o aproximadamente 68 %, o aproximadamente 69 %, o aproximadamente 70 %, o aproximadamente 71 %, o aproximadamente 72 %, o aproximadamente 73 %, o aproximadamente 74 %, o aproximadamente 75 %, o aproximadamente 76 %, o aproximadamente 77 %, o aproximadamente 78 %, o aproximadamente 79 %, o aproximadamente 80 %, o aproximadamente 81 %, o aproximadamente 82 %, o aproximadamente 83 %, o aproximadamente 84 %, o aproximadamente 85 %, o aproximadamente 86 %, o aproximadamente 87 %, o aproximadamente 88 %, o aproximadamente 89 %, o aproximadamente 90 %, o aproximadamente 91 %, o aproximadamente 92 %, o aproximadamente 93 %, o aproximadamente 94 % o aproximadamente 95 %.
Propiedades mecánicas
Los rellenos de tejido descritos en el presente documento, o los componentes de los mismos, se pueden proporcionar en una serie de estados físicos dependiendo de la terapia seleccionada y del modo de suministro. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación son fluidos, por ejemplo, líquidos. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación son fluidos viscosos. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la invención son sólidos. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación son sólidos elásticos.
Se pueden evaluar una serie de propiedades reológicas al examinar los rellenos de tejido descritos en el presente documento, como se muestra en la Tabla 17:
Tabla 17
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En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación son materiales viscoelásticos que exhiben propiedades mecánicas tanto de materiales elásticos como viscosos. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación pueden describirse como geles. Los métodos para evaluar las propiedades mecánicas o reológicas (p. ej., propiedades viscoelásticas) de un material son conocidos en la materia, tales como por ejemplo se describe en la publicación de solicitud de patente de EE. UU. n.° 2006/0105022 y Stocks, et al., J. Drugs. Dermatol. (2011) 10: 974-980. La viscoelasticidad de un material se puede caracterizar mediante el análisis mecánico dinámico, por ejemplo, aplicando una tensión oscilatoria a una muestra y midiendo la deformación resultante. Los materiales elásticos presentan típicamente tensión y deformación en fase, es decir, la aplicación de tensión da como resultado una deformación inmediata. En materiales viscosos, la deformación se desfasa de la aplicación de tensión en 90 grados. En los materiales viscoelásticos, la diferencia de fase entre la deformación y la tensión es superior a 0, pero inferior a 90 grados. En algunas realizaciones, la viscoelasticidad de los materiales de FPS de la invención se puede caracterizar por medio del módulo dinámico complejo G, que incluye el módulo de almacenamiento G (también denominado módulo elástico), y el módulo de pérdida G” (también denominado módulo viscoso):
G = G' ÍG"
i2 = -1, G' = — cos5 G" = — sin(5.
donde £o , y £° , oo es la amplitud de la tensión, £o es la amplitud de la deformación y 5 es el desplazamiento de fase.
El módulo elástico G' y el módulo de pérdida G" se miden sometiendo una muestra de gel de FPS a una tensión oscilatoria en un reómetro rotacional o de cizallamiento. La muestra se coloca entre dos placas, una fija y otra capaz de girar u oscilar con una frecuencia dada. Los valores del módulo elástico G y el módulo de pérdida G" dependen de la frecuencia. Los intervalos de frecuencia usados para medir el módulo elástico G' y el módulo de pérdida G" están típicamente entre 0,1 y 10 Hz, pero sin limitación. En algunas realizaciones, el módulo elástico G y el módulo de pérdida G" se miden a una frecuencia oscilatoria de 1 Hz.
En algunas realizaciones, las propiedades reológicas de los rellenos de tejido descritos en el presente documento, p. ej., G' y G", se pueden medir con un reómetro de placas paralelas oscilatorias. Se puede usar una placa de diversos diámetros, por ejemplo, 25 mm a una altura de separación entre placas de diversas distancias, por ejemplo 1 mm. Las mediciones se pueden realizar a diversas temperaturas. En algunas realizaciones, las mediciones se realizan a una temperatura constante de 25 °C. En algunas realizaciones, una medición incluye un barrido de frecuencia entre dos valores de frecuencia, por ejemplo de 1 a 10 Hz, a un valor de deformación específico, por ejemplo, a una deformación constante del 2 %. En algunas realizaciones, las mediciones incluyen un aumento logarítmico de la frecuencia, seguido de un barrido de deformación que puede estar por ejemplo entre 1 y 300 % a una frecuencia constante, por ejemplo, 5 Hz con un aumento logarítmico de la deformación. En algunas realizaciones, el módulo de almacenamiento G' y el módulo de pérdida G" se pueden obtener a partir de un barrido de deformación a un valor de deformación porcentual específico, por ejemplo a 1 % de deformación.
En algunas realizaciones, el módulo complejo (es decir, la suma de G' e iG") proporciona una medida completa de la resistencia total a la deformación de un relleno de tejido particular descrito en el presente documento. El módulo complejo se puede probar usando un reómetro donde un relleno de tejido particular (p. ej., un gel) se puede apretar entre dos placas circulares paralelas y se proporciona deformación rotacional variable girando una placa a frecuencias variables.
En algunas realizaciones, las características de un relleno de tejido particular pueden examinarse a través del porcentaje de elasticidad del relleno de tejido, donde el porcentaje de elasticidad es igual a 100 x G'/(G' G").
En algunas realizaciones, las características de un relleno de tejido en particular pueden examinarse a través del coeficiente de recuperación de ese relleno de tejido:
Coeficiente de recuperación= valor de viscosidad obtenido durante el aumento de la frecuencia de barrido
valor de viscosidad obtenido durante la disminución de la frecuencia de barrido
en el que: un coeficiente de recuperación de aproximadamente 1 significa que el relleno de tejido particular (p. ej., un gel) retenía su estructura a pesar de las fuerzas aplicadas; un coeficiente de recuperación superior a 1 significa que el relleno de tejido particular (p. ej., un gel) experimentaba una ruptura estructural; y un coeficiente de recuperación de menos de 1 gel experimentaba un mayor rendimiento estructural.
Sin limitarse a ninguna teoría de la divulgación, el aumento de G' da como resultado un aumento relativo en la capacidad de un material para resistir mejor las alteraciones de forma y el material puede describirse como más firme, más duro o más elástico que un material (p. ej., relleno de tejido de gel) con un G' inferior. Por consiguiente, el aumento de G' puede dar como resultado un aumento correspondiente en la capacidad de un material para proporcionar soporte estructural y/o voluminización.
Sin limitarse a ninguna teoría de la divulgación, el aumento de G" da como resultado un material más viscoso (p. ej. gel) en comparación con un material que tiene un G" inferior. Además, hay una mayor pérdida de energía como calor disipado para materiales con mayor G". En algunas realizaciones, G' aumenta al aumentar el grado de reticulación. En algunas realizaciones, G" aumenta al aumentar el grado de reticulación. En algunas realizaciones, ambos G' y G aumentan al aumentar el grado de reticulación. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' desde aproximadamente menos de 50 Pa hasta aproximadamente más de 15000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' desde aproximadamente 50 Pa hasta aproximadamente 500.000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' desde aproximadamente 100 Pa hasta aproximadamente 500.000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la invención tienen un G' desde aproximadamente 75 Pa hasta aproximadamente 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la descripción tienen un G desde aproximadamente 100 Pa hasta aproximadamente 250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G desde aproximadamente 150 Pa hasta aproximadamente 275 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' desde aproximadamente 150 Pa hasta aproximadamente 500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' desde aproximadamente 250 Pa hasta aproximadamente 750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G desde aproximadamente 375 Pa hasta aproximadamente 675 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G desde aproximadamente 425 Pa hasta aproximadamente 850 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G desde aproximadamente 500 Pa hasta aproximadamente 1000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G desde aproximadamente 650 Pa hasta aproximadamente 1050 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G desde aproximadamente 750 Pa hasta aproximadamente 1250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G desde aproximadamente 950 Pa hasta aproximadamente 1500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de al menos 50 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 225 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 275 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 300 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 325 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 350 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 375 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 400 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 425 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 450 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 475 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de al menos 525 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 550 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 575 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 625 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 650 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 675 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 700 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 725 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 775 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G ' de al menos 800 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 825 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 850 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 875 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 900 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 925 Pa. Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 950 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 975 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de al menos 1050 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de al menos 1200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1300 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1350 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1400 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1450 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 1500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de como máximo 50 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tiene un G' de como máximo 100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 225 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 275 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 300 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 325 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 350 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 375 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 400 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 425 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 450 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 475 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 525 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 550 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 575 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 625 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 650 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 675 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 700 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 725 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 775 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 800 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 825 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 850 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 875 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 900 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 925 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 950 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 975 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1050 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 1200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1300 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1350 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1400 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1450 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 1500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de aproximadamente 50 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 225 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 275 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 300 Pa. Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 325 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 350 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 375 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 400 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 425 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 450 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 475 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 525 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 550 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 575 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 600 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 625 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 650 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 675 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 700 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 725 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 775 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 800 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 825 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 850 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 875 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 900 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 925 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 950 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 975 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1050 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1300 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1350 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 1400 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1450 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de al menos 2000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 2250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 2500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de al menos 2750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 3000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 3250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 3500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 3750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 4000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 4250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 4500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 4750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de al menos 5000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de al menos 5250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 5500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 5750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente al menos 6000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 6250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de al menos 6500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 6750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 7000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 7250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 7500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 7750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 8000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 8250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 8500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 8750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 9000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 9250 Pa. En algunas realizaciones, el tejido los rellenos tienen un G' de al menos 9500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 9750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 10000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 10500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 11000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 11500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 12000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 12500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 13000 Pa. Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 13500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 14000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 14500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de al menos 15000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de como máximo 2000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 2250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 2500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 2750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 3000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 3250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 3500 Pa. Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 3750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 4000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 4250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 4500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 4750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 4250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G’ de como máximo 5000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 5250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 5500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 5750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G’ de como máximo 6000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 6250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 6500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 6750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 7000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 7250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 7500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 7750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 8000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 8250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 8500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 8750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 9000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de como máximo 9250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 9500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 9750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 10000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 10500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 11000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 11500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 12000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 12500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 13000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 13500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 14000
Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 14500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 15000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G de aproximadamente 2000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 2250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 2500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 2750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 3000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 3250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 3500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 3750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 4000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de aproximadamente 4250
Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 4500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 4750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 5000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 5250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 5500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 5750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 5750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 6000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 6250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 6500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 6750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 7000
Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 7250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido los rellenos tienen un G' de aproximadamente 7500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 7750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 8000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 8250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 8500 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G ' de aproximadamente 8750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 9000 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 9250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 9500
Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 9750 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 10000 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G' de aproximadamente 1050 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1250 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1300 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1300 Pa. algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1350 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1400 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1450
Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G' de aproximadamente 1500 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G" desde aproximadamente menos de 5
Pa hasta aproximadamente más de 200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 5 Pa a aproximadamente 200 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 5 Pa a aproximadamente 25 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 15 Pa a aproximadamente 35 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 10 Pa a aproximadamente 50 Pa. En
Figure imgf000088_0001
algunas realizaciones, la los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 15 Pa a aproximadamente 75 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 20 Pa a aproximadamente 85 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 25 Pa a aproximadamente 100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 35 Pa a aproximadamente 125 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 45 Pa a aproximadamente 115 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 75 Pa a aproximadamente 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 100 Pa a aproximadamente 175 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un
G" de aproximadamente 115 Pa a aproximadamente 200 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G" de al menos 5 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 10 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 15 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 20 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 25 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 30 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 35 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 40 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 45 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 50 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 55 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 60 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 65 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 70 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 75 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 80 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 85 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 90 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 95 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 105 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 110 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 115 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 120 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 125 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 130 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 135 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 140 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 145 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 155 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 160 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 165 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 170 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 175 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 180 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 185 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de al menos 190 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 195 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de al menos 200 Pa.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G" de como máximo 5 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 10 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 15 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 20 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 25 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 30 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen una G de como máximo 35 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 40 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 45 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 50 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 55 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 60 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 65 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen una G" de como máximo 70 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 75 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 80 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 85 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 90 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 95 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen una G" de como máximo 105 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 110 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 115 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 120 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G” de como máximo 125 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 130 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 135 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 140 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 145 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 155 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 160 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G” de como máximo 165 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 170 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G” de como máximo 175 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G de como máximo 180 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 185 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 190 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de como máximo 195 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de 200 Pa como máximo.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido de la divulgación tienen un G" de aproximadamente 5 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 10 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 15 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 20 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 25 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 30 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 35 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 40 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 45 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 50 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 55 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 60 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 65 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 70 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 75 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 80 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 85 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 90 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 95 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 100 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 105 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 110 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 115 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 120 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 125 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 130 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 135 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 140 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 145 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 150 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 155 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 160 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 165 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 170 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 175 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 180 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 185 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 190 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 195 Pa. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido tienen un G" de aproximadamente 200 Pa.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento exhibe una viscosidad dinámica. La viscosidad es la resistencia de un fluido al cizallamiento o al flujo causado por la tensión de cizallamiento o la tensión de tracción. La viscosidad describe la resistencia interna de un fluido al flujo causada por la fricción intermolecular ejercida cuando las capas de fluidos intentan deslizarse una sobre otra y puede considerarse como una medida de la fricción del fluido. Cuanto menos viscoso es el fluido, mayor es su facilidad de movimiento (fluidez).
La viscosidad se puede definir de dos maneras; viscosidad dinámica (g; a veces se usa n) o viscosidad cinemática (v). La viscosidad dinámica, también conocida como viscosidad absoluta o compleja, es la fuerza tangencial por unidad de área requerida para mover un plano horizontal con respecto al otro a una velocidad unitaria cuando el fluido lo mantiene a una unidad de distancia. La unidad física del SI de viscosidad dinámica es el pascal-segundo (Pas), que es idéntico a Nm-2s. La viscosidad dinámica se puede expresar como t = g dvx/dz, donde t = tensión de cizallamiento, g = viscosidad dinámica y dvx/dz es el gradiente de velocidad a lo largo del tiempo. Por ejemplo, si un fluido con una viscosidad de un Pas se coloca entre dos placas, y una placa se empuja lateralmente con una tensión de cizallamiento de un Pascal, se mueve una distancia igual al grosor de la capa entre las placas en un segundo. La viscosidad cinemática (v) es la relación entre la viscosidad dinámica y la densidad, una cantidad en la que no interviene ninguna fuerza y se define de la siguiente manera: v = g/p, donde g es la viscosidad dinámica y p es la densidad (kg/m3). La viscosidad cinemática generalmente se mide con un viscosímetro capilar de vidrio que tiene una unidad del SI de m2/s. La viscosidad de un fluido depende de la temperatura y, por tanto, la viscosidad dinámica y cinemática se reseñan en referencia a la temperatura.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento exhibe una viscosidad dinámica de, por ejemplo, al menos 10 Pas, al menos 20 Pas, al menos 30 Pas, al menos 40 Pas, al menos 50 Pa s, al menos 60 Pas, al menos 70 Pas, al menos 80 Pas, al menos 90 Pas, al menos 100 Pas, al menos 125 Pas, al menos 150 Pa- s, al menos 175 Pas, al menos 200 Pas, al menos 225 Pas, al menos 250 Pas, al menos 275 Pas, al menos 300 Pas, al menos 400 Pas, al menos 500 Pas, al menos 600 Pas, al menos 700 Pas, al menos 750 Pas, al menos 800 Pas, al menos 900 Pas, al menos 1.000 Pas, al menos 1.100 Pas, o al menos 1.200 Pas. En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento exhibe una viscosidad dinámica de, por ejemplo, como máximo 10 Pas, como máximo 20 Pas, como máximo 30 Pas, como máximo 40 Pas, como máximo 50 Pa s, como máximo 60 Pas, como máximo 70 Pas, como máximo 80 Pas, como máximo 90 Pas, como máximo 100 Pas, como máximo 125 Pas, como máximo 150 Pa- s, como máximo 175 Pas, como máximo 200 Pas, como máximo 225 Pas, como máximo 250 Pas, como máximo 275 Pas, como máximo 300 Pas, como máximo 400 Pas, como máximo 500 Pas, como máximo 600 Pas, como máximo 700 Pas, como máximo 750 Pas, como máximo 800 Pas, como máximo 900 Pas, o como máximo 1000 Pas. En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento muestra una viscosidad dinámica de, por ejemplo, aproximadamente 10 Pa s a aproximadamente 100 Pas, de aproximadamente 10 Pas a aproximadamente 150 Pas, de aproximadamente 10 Pas a aproximadamente 250 Pas, de aproximadamente 50 Pas a aproximadamente 100 Pas, de aproximadamente 50 Pa s a aproximadamente 150 Pa s, de aproximadamente 50 Pa s a aproximadamente 250 Pa s, de aproximadamente 100 Pas a aproximadamente 500 Pas, de aproximadamente 100 Pas a aproximadamente 750 Pa s, de aproximadamente 100 Pa s a aproximadamente 1000 Pa s, de aproximadamente 100 Pa s a aproximadamente 1200 Pas, de aproximadamente 300 Pas a aproximadamente 500 Pas, de aproximadamente 300 Pa s a aproximadamente 750 Pa s, de aproximadamente 300 Pa s a aproximadamente 1000 Pa s, o de aproximadamente 300 Pas a aproximadamente 1200 Pas.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su G' y/o G" in vivo durante al menos 1 día, o al menos 2 días, o al menos 3 días, o al menos 4 días, o al menos 5 días, o al menos 6 días, o al menos 1 semana, o al menos 2 semanas, o al menos 3 semanas, o al menos 1 mes, o al menos 2 meses, o al menos 3 meses, o al menos 4 meses, o al menos 5 meses, o al menos 6 meses, o al menos 7 meses, o al menos 8 meses, o al menos 9 meses, o al menos 10 meses, o al menos 11 meses, o al menos 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su G' y/o G" in vivo durante como máximo 1 día, o como máximo 2 días, o como máximo 3 días, o como máximo 4 días, o como máximo 5 días, o como máximo 6 días, o como máximo 1 semana, o como máximo 2 semanas, o como máximo 3 semanas, o como máximo 1 mes, o como máximo 2 meses, o como máximo 3 meses, o como máximo 4 meses, o como máximo 5 meses, o como máximo 6 meses, o como máximo 7 meses, o como máximo 8 meses, o como máximo 9 meses, o como máximo 10 meses, o como máximo 11 meses, o como máximo 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su G' y/o G" in vivo durante aproximadamente 1 día, o aproximadamente 2 días, o aproximadamente 3 días, o aproximadamente 4 días, o aproximadamente 5 días, o aproximadamente 6 días, o aproximadamente 1 semana, o aproximadamente 2 semanas, o aproximadamente 3 semanas, o aproximadamente 1 mes, o aproximadamente 2 meses, o aproximadamente 3 meses, o aproximadamente 4 meses, o aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses, o aproximadamente 7 meses, o aproximadamente 8 meses, o aproximadamente 9 meses, o aproximadamente 10 meses, o aproximadamente 11 meses, o aproximadamente 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su elasticidad in vivo durante al menos 1 día, o al menos 2 días, o al menos 3 días, o al menos 4 días, o al menos 5 días, o al menos 6 días, o al menos 1 semana, o al menos 2 semanas, o al menos 3 semanas, o al menos 1 mes, o al menos 2 meses, o al menos 3 meses, o al menos 4 meses, o al menos 5 meses, o al menos 6 meses, o al menos 7 meses, o al menos 8 meses, o al menos 9 meses, o al menos 10 meses, o al menos 11 meses, o al menos 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su elasticidad in vivo durante como máximo 1 día, o como máximo 2 días, o como máximo 3 días, o como máximo 4 días, o como máximo 5 días, o como máximo 6 días, o como máximo 1 semana, o como máximo 2 semanas, o como máximo como máximo 3 semanas, o como máximo 1 mes, o como máximo 2 meses, o como máximo 3 meses, o como máximo 4 meses, o como máximo 5 meses, o como máximo 6 meses, o como máximo 7 meses, o como máximo 8 meses, o como máximo 9 meses, o como máximo 10 meses, o como máximo 11 meses, o como máximo 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su elasticidad in vivo durante aproximadamente 1 día, o aproximadamente 2 días, o aproximadamente 3 días, o aproximadamente 4 días, o aproximadamente 5 días, o aproximadamente 6 días, o aproximadamente 1 semana, o aproximadamente 2 semanas, o aproximadamente 3 semanas, o aproximadamente 1 mes, o aproximadamente 2 meses, o aproximadamente 3 meses, o aproximadamente 4 meses, o aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses, o aproximadamente 7 meses, o aproximadamente 8 meses, o aproximadamente 9 meses, o aproximadamente 10 meses, o aproximadamente 11 meses, o aproximadamente 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su viscosidad in vivo durante al menos 1 día, o al menos 2 días, o al menos 3 días, o al menos 4 días, o al menos 5 días, o al menos 6 días, o al menos 1 semana, o al menos 2 semanas, o al menos 3 semanas, o al menos 1 mes, o al menos 2 meses, o al menos 3 meses, o al menos 4 meses, o al menos 5 meses, o al menos 6 meses, o al menos 7 meses, o al menos 8 meses, o al menos 9 meses, o al menos 10 meses, o al menos 11 meses, o al menos 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su viscosidad in vivo durante como máximo 1 día, o como máximo 2 días, o como máximo 3 días, o como máximo 4 días, o como máximo 5 días, o como máximo 6 días, o como máximo 1 semana, o como máximo 2 semanas, o como máximo como máximo 3 semanas, o como máximo 1 mes, o como máximo 2 meses, o como máximo 3 meses, o como máximo 4 meses, o como máximo 5 meses, o como máximo 6 meses, o como máximo 7 meses, o como máximo 8 meses, o como máximo 9 meses, o como máximo 10 meses, o como máximo 11 meses, o como máximo 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su viscosidad in vivo durante aproximadamente 1 día, o aproximadamente 2 días, o aproximadamente 3 días, o aproximadamente 4 días, o aproximadamente 5 días, o aproximadamente 6 días, o aproximadamente 1 semana, o aproximadamente 2 semanas, o aproximadamente 3 semanas, o aproximadamente 1 mes, o aproximadamente 2 meses, o aproximadamente 3 meses, o aproximadamente 4 meses, o aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses, o aproximadamente 7 meses, o aproximadamente 8 meses, o aproximadamente 9 meses, o aproximadamente 10 meses, o aproximadamente 11 meses, o aproximadamente 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su volumen in vivo durante al menos 1 día, o al menos 2 días, o al menos 3 días, o al menos 4 días, o al menos 5 días, o al menos 6 días, o al menos 1 semana, o al menos 2 semanas, o al menos 3 semanas, o al menos 1 mes, o al menos 2 meses, o al menos 3 meses, o al menos 4 meses, o al menos 5 meses, o al menos 6 meses, o al menos 7 meses, o al menos 8 meses, o al menos 9 meses, o al menos 10 meses, o al menos 11 meses, o al menos 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su volumen in vivo durante como máximo 1 día, o como máximo 2 días, o como máximo 3 días, o como máximo 4 días, o como máximo 5 días, o como máximo 6 días, o como máximo 1 semana, o como máximo 2 semanas, o como máximo como máximo 3 semanas, o como máximo 1 mes, o como máximo 2 meses, o como máximo 3 meses, o como máximo 4 meses, o como máximo 5 meses, o como máximo 6 meses, o como máximo 7 meses, o como máximo 8 meses, o como máximo 9 meses, o como máximo 10 meses, o como máximo 11 meses, o como máximo 1 año.
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden mantener sustancialmente su volumen in vivo durante aproximadamente 1 día, o aproximadamente 2 días, o aproximadamente 3 días, o aproximadamente 4 días, o aproximadamente 5 días, o aproximadamente 6 días, o aproximadamente 1 semana, o aproximadamente 2 semanas, o aproximadamente 3 semanas, o aproximadamente 1 mes, o aproximadamente 2 meses, o aproximadamente 3 meses, o aproximadamente 4 meses, o aproximadamente 5 meses, o aproximadamente 6 meses, o aproximadamente 7 meses, o aproximadamente 8 meses, o aproximadamente 9 meses, o aproximadamente 10 meses, o aproximadamente 11 meses, o aproximadamente 1 año.
Métodos de Fabricación
Los rellenos de tejido proporcionados en el presente documento pueden prepararse combinando un componente basado en FPS con un componente basado en AH con o sin agentes adicionales. En ciertas realizaciones, uno o ambos FPS y AH pueden reticularse antes de la combinación. En algunas realizaciones, el FPS y el AH pueden combinarse y luego reticularse con un agente de reticulación como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, el FPS puede reticularse con un agente de reticulación y luego añadirse a un AH, que puede reticularse o no, y luego la combinación de los mismos puede someterse a reticulación adicional. En algunas realizaciones, el AH puede reticularse con un agente de reticulación y luego añadirse a un FPS, que puede reticularse o no, y luego la combinación de los mismos puede someterse a reticulación adicional.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden prepararse combinando un componente basado en FPS, un componente basado en AH y un agente adicional, como se describe anteriormente en el presente documento. En tales realizaciones, uno o ambos FPS y AH pueden reticularse antes de la combinación. En algunas realizaciones, el FPS y el AH pueden combinarse con el agente adicional y luego reticularse con un agente de reticulación como se describe en el presente documento. En algunas realizaciones, el agente adicional se puede añadir después de combinar el FPS y el AH.
En algunas realizaciones, el relleno de tejido descrito en el presente documento puede incluir FPS y AH en una relación en peso (FPS:AH) de 0,1:1 a 0,1:10, o de 0,1:1 a 0,1:100, o de 0,1:1000; 1:1 a 1:10, o de 1:1 a 1:100, o de 1:1 a 1:1000.
En algunas realizaciones, el relleno de tejido descrito en el presente documento puede incluir FPS y AH en una relación en peso (AH:FPS) de 0,1:1 a 0,1:10, o de 0,1:1 a 0,1:100, o de 0,1:1000; 1:1 a 1:10, o de 1:1 a 1:100, o de 1:1 a 1:1000.
En algunas realizaciones, una combinación de AH/FPS resultante (ya sea reticulada o no reticulada) puede homogeneizarse tal como mediante mezclado mecánico de AH y/o FPS inicialmente reticulados.
En algunas realizaciones, se puede proporcionar una solución de FPS y reticularse con un agente de reticulación para producir un FPS reticulado, al que se puede añadir AH en su forma reticulada, no reticulada o una mezcla de los mismos. A continuación, la mezcla resultante se puede homogeneizar y se puede añadir cualquier agente adicional (p. ej., lidocaína).
En algunas realizaciones, se puede proporcionar una solución de FPS y reticularla con un agente de reticulación en presencia de AH para producir una composición de FPS-AH reticulada, a la que se puede añadir o no AH en su forma no reticulada. A continuación, la mezcla resultante se puede homogeneizar y se puede añadir cualquier agente adicional (p. ej., lidocaína).
En algunas realizaciones, las formulaciones de FPS específicas proporcionadas en el presente documento pueden combinarse con AH, o pueden utilizar los procedimientos de reticulación, usando las preparaciones establecidas en las patentes de EE. UU. n.° 8.288.347 o 8.450.475, o las publicaciones de solicitud de patente de EE. UU. n.° 2006/0105022, 2016/0376382, o 2017/0315828.
En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento pueden incluir una etapa de esterilización donde el relleno de tejido o una parte del mismo se expone, por ejemplo, a temperaturas de 120 °C a aproximadamente 130 °C y presiones de aproximadamente 82.737,12 a aproximadamente 137.895,20 pascales (aproximadamente 12 a aproximadamente 20 libras por pulgada cuadrada) durante un tiempo de aproximadamente 1 a aproximadamente 15 minutos.
En algunas realizaciones, los métodos descritos en el presente documento pueden incluir una etapa de desgasificación en la que se desgasifican las soluciones de FPS, AH o FPS/AH descritas en el presente documento que se usan para preparar los rellenos de tejido resultantes.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento se pueden preparar según los métodos generales descritos en los Ejemplos 5 a 20. En los métodos descritos en los mismos, la seda se puede preparar en una solución acuosa, una solución acuosa/alcohólica, en la que el alcohol puede ser etanol o metanol, por ejemplo. En los métodos descritos en los mismos, cualquiera de los agentes de reticulación descritos en el presente documento puede usarse según corresponda para reticular FPS con FPS, FPS con AH o AH con AH, como entenderá un experto en la materia.
Métodos de tratamiento
En una realización, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden proporcionarse en métodos para tratar una o más afecciones en un paciente que lo necesite. En algunas realizaciones, se puede suministrar una cantidad terapéuticamente eficaz de un relleno de tejido a un tejido de un paciente que lo necesite para tratar una afección u otra deficiencia de tejido.
Como se usa en el presente documento, el término "tratando", "tratar" o "tratamiento" se refiere a reducir o eliminar en un paciente un síntoma cosmético o clínico de una afección, tal como una afección de los tejidos blandos, o retrasar o prevenir en un individuo el inicio de un síntoma cosmético o clínico de una afección.
En algunas realizaciones, la afección tratada por los rellenos de tejido descritos en el presente documento puede incluir una afección de tejidos blandos. Las afecciones de los tejidos blandos incluyen, sin limitación, aumentos, reconstrucciones, enfermedades, trastornos, defectos o imperfecciones de una parte, región o área del cuerpo. En un aspecto, una afección de los tejidos blandos tratada por los rellenos de tejido divulgados incluye, sin limitación, un aumento facial, una reconstrucción facial, una enfermedad facial, un trastorno facial, un defecto facial o una imperfección facial. En algunas realizaciones, una afección de los tejidos blandos tratada con los rellenos de tejido descritos en el presente documento incluye, sin limitación, deshidratación de la piel, falta de elasticidad de la piel, aspereza de la piel, falta de tersura de la piel, una línea atrófica o estría de la piel, palidez de la piel, una depresión dérmica, una mejilla hundida, una sien hundida, un labio fino, un defecto de la uretra, un defecto de la piel, un defecto del seno, un defecto retroorbitario, un pliegue facial o una arruga. En algunas realizaciones, una afección de los tejidos blandos tratada por los rellenos de tejido descritos en el presente documento incluye, sin limitación, una imperfección, defecto, enfermedad y/o trastorno mamario, tal como, p. ej., un aumento mamario, una reconstrucción mamaria, mastopexia, micromastia, hipoplasia torácica, síndrome de Poland, defectos por complicaciones del implante como contracción y/o ruptura capsular; una imperfección, defecto, enfermedad o trastorno facial, tal como, p. ej., un aumento facial, una reconstrucción facial, síndrome de Parry-Romberg, lupus eritematoso profundo, depresiones dérmicas, mejillas hundidas, sienes hundidas, labios finos, imperfecciones o defectos nasales, imperfecciones o defectos retroorbitarios, un pliegue, línea y/o arruga facial como una línea glabelar, una línea nasolabial, una línea perioral y/o una línea de marioneta, y/u otras deformidades o imperfecciones del contorno de la cara; una imperfección, defecto, enfermedad o trastorno del cuello; una imperfección, defecto, enfermedad y/o trastorno de la piel; otras imperfecciones, defectos, enfermedades y/o trastornos de los tejidos blandos, como, p. ej., un aumento o una reconstrucción de la parte superior del brazo, el antebrazo, la mano, el hombro, la espalda, el torso, incluido el abdomen, las nalgas, la parte superior de la pierna, la parte inferior de la pierna, incluidas las pantorrillas, pie, incluida la almohadilla de grasa plantar, ojo, genitales u otra parte, región o área del cuerpo, o una enfermedad o trastorno que afecte a estas partes, regiones o áreas del cuerpo; incontinencia urinaria, incontinencia fecal, otras formas de incontinencia; y enfermedad por reflujo gastroesofágico (ERGE).
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden suministrarse a tejidos blandos que incluyen, sin limitación, piel, tejidos dérmicos, tejidos subdérmicos, tejidos cutáneos, tejidos subcutáneos, tejido intradural, músculos, tendones, ligamentos, tejidos fibrosos, grasa, vasos sanguíneos y arterias, nervios y tejidos sinoviales (intradérmicos).
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento se pueden colocar directamente en una herida para ayudar a curar al proporcionar una matriz biodegradable artificial junto con señales de proliferación, migración y unión celular. En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento se pueden recubrir con una malla biodegradable u otro material implantado, o se pueden formar láminas u otras estructuras, o se pueden mantener en forma hidratada.
En algunas realizaciones, la cantidad de una composición usada con cualquiera de los métodos divulgados en el presente documento se determinará en función de la alteración y/o mejora deseada, la reducción y/o eliminación de un síntoma de afección deseado, el efecto clínico y/o cosmético deseado por el individuo y/o el médico, y la parte o región del cuerpo que se está tratando. La eficacia de la administración de la composición puede manifestarse mediante una o más de las siguientes medidas clínicas y/o cosméticas: forma del tejido blando alterada y/o mejorada, tamaño del tejido blando alterado y/o mejorado, contorno del tejido blando alterado y/o mejorado, y/o función de tejido mejorada, apoyo al crecimiento interno del tejido y/o nueva deposición de colágeno, injerto sostenido del relleno de tejido, satisfacción del paciente y/o calidad de vida mejorada, y disminución del uso de material extraño implantable. Por ejemplo, para los procedimientos de aumento de senos, la eficacia de las composiciones y métodos puede manifestarse mediante una o más de las siguientes medidas clínicas y/o cosméticas: aumento del tamaño de los senos, alteración de la forma de los senos, alteración del contorno de los senos, injerto sostenido, reducción del riesgo de contracción capsular, disminución de la tasa de formación de quistes liponecróticos, mejora de la satisfacción y/o calidad de vida del paciente, y disminución del uso de implantes mamarios.
En algunas realizaciones, la eficacia de los rellenos de tejido y los métodos para tratar un tejido blando facial puede manifestarse mediante una o más de las siguientes medidas clínicas y/o cosméticas: aumento del tamaño, forma y/o contorno de rasgos faciales como aumento del tamaño, forma y/o contorno de labios, mejillas, sien o región de los ojos; alteración del tamaño, forma y/o contorno de los rasgos faciales, como alteración del tamaño, forma y/o contorno de labios, mejillas, sienes o la forma de la región de los ojos; reducción o eliminación de una arruga, pliegue o línea en la piel; resistencia a una arruga, pliegue o línea en la piel; rehidratación de la piel; aumento de la elasticidad de la piel; reducción o eliminación de la aspereza de la piel; aumento y/o mejora de la tersura de la piel; reducción o eliminación de líneas atróficas o estrías; aumento y/o mejora del tono, brillo, luminosidad y/o resplandor de la piel; aumento y/o mejora del color de la piel, reducción o eliminación de la palidez de la piel; injerto sostenido de composición; disminución de los efectos secundarios; satisfacción del paciente y/o calidad de vida mejorada.
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona rellenos de tejido y métodos de tratamiento que implican una región dérmica. Como se usa en el presente documento, el término "región dérmica" se refiere a la región de la piel que comprende la unión epidérmica-dérmica y la dermis, incluidas la dermis superficial (región papilar) y la dermis profunda (región reticular). La piel está compuesta por tres capas primarias: la epidermis, que proporciona impermeabilización y sirve como barrera contra las infecciones; la dermis, que sirve de localización a los anexos de la piel; y la hipodermis (capa adiposa subcutánea). La epidermis no contiene vasos sanguíneos y se nutre por difusión desde la dermis. Los principales tipos de células que componen la epidermis son los queratinocitos, los melanocitos, las células de Langerhans y las células de Merkel.
La dermis es la capa de piel debajo de la epidermis que consiste en tejido conectivo y protege al cuerpo de la tensión y deformación. La dermis está estrechamente conectada a la epidermis por una membrana basal. También alberga muchas terminaciones nerviosas/mecanorreceptoras que proporcionan el sentido del tacto y el calor. Contiene los folículos pilosos, las glándulas sudoríparas, las glándulas sebáceas, las glándulas apocrinas, los vasos linfáticos y los vasos sanguíneos. Los vasos sanguíneos de la dermis nutren y retiran los desechos de sus propias células, así como del estrato basal de la epidermis. La dermis se divide estructuralmente en dos áreas: un área superficial adyacente a la epidermis, llamada región papilar, y un área profunda más gruesa conocida como región reticular.
La región papilar está compuesta de tejido conectivo areolar laxo. Recibe su nombre por sus proyecciones en forma de dedos llamadas papilas que se extienden hacia la epidermis. Las papilas proporcionan a la dermis una superficie "irregular" que se entrelaza con la epidermis, fortaleciendo la conexión entre las dos capas de piel. La región reticular se encuentra profunda en la región papilar y es habitualmente mucho más gruesa. Está compuesta por tejido conectivo irregular denso y recibe su nombre de la densa concentración de fibras colágenas, elásticas y reticulares que se entretejen a lo largo de ella. Estas fibras proteicas dan a la dermis sus propiedades de fuerza, extensibilidad y elasticidad. Dentro de la región reticular también se localizan las raíces del cabello, las glándulas sebáceas, las glándulas sudoríparas, los receptores, las uñas y los vasos sanguíneos. Las estrías del embarazo se localizan por ejemplo en la dermis.
La hipodermis se encuentra debajo de la dermis. Su propósito es unir la región dérmica de la piel al hueso y al músculo subyacentes, así como suministrarle vasos sanguíneos y nervios. Se compone de tejido conectivo laxo y elastina. Los principales tipos de células son los fibroblastos, los macrófagos y los adipocitos (la hipodermis contiene el 50 % de la grasa corporal). La grasa sirve como relleno y aislamiento para el cuerpo.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento se administra a una región dérmica de un individuo mediante inyección en una región dérmica o hipodérmica. En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento se administra a una región dérmica de un individuo mediante inyección en, por ejemplo, una región de unión epidérmica-dérmica, una región papilar, una región reticular o cualquier combinación de las mismas.
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona métodos para tratar una afección de los tejidos blandos de un individuo, incluida la administración de uno o más rellenos de tejido divulgados en el presente documento en un sitio de la afección de los tejidos blandos del individuo, en los que la administración de la composición mejora la afección de los tejidos blandos, tratando así la condición de los tejidos blandos. En algunas realizaciones, una afección del tejido blando es una afección del tejido mamario, una afección del tejido facial, una afección del cuello, una afección de la piel, una afección de la parte superior del brazo, una afección del antebrazo, una afección de la mano, una afección del hombro, una afección de la espalda, una afección del torso, incluida abdominal, una afección de los glúteos, una afección de la parte superior de la pierna, una afección de la parte inferior de la pierna, incluida afección de la pantorrilla, una afección del pie, incluida afección de la almohadilla de grasa plantar, una afección de los ojos, una afección genital o una afección que afecte a otra parte, región o área del cuerpo.
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona métodos para tratar una afección cutánea, incluida la administración a un individuo que padece una afección de la piel de uno o más rellenos de tejido divulgados en el presente documento, en los que la administración del relleno de tejido mejora la afección cutánea, tratando así la afección cutánea. En algunas realizaciones, una afección cutánea incluye deshidratación de la piel, y el método de tratamiento incluye administrar a un individuo que padece deshidratación de la piel uno o más rellenos de tejido divulgados en el presente documento, en el que la administración del relleno de tejido rehidrata la piel, tratando así la deshidratación de la piel. En otro aspecto de estas realizaciones, un método para tratar la falta de elasticidad de la piel incluye administrar a un individuo que padece falta de elasticidad de la piel un relleno de tejido divulgado en el presente documento, en el que la administración del relleno de tejido aumenta la elasticidad de la piel, tratando así la falta de elasticidad de la piel. En otro aspecto más de estas realizaciones, un método para tratar la aspereza de la piel incluye administrar a un individuo que padece aspereza de la piel una composición divulgada en el presente documento, en el que la administración de la composición disminuye la aspereza de la piel, tratando así la aspereza de la piel. En algunas realizaciones, un método para tratar la falta de tersura de la piel incluye administrar a un individuo que padece falta de tersura de la piel un relleno de tejido divulgado en el presente documento, en el que la administración del relleno de tejido hace que la piel se vuelva más tersa, tratando así la falta de tersura de la piel.
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona métodos para tratar una línea atrófica o estría de la piel, incluido la administración a un individuo que padece una línea atrófica o estría de la piel de uno o más rellenos de tejido divulgados en el presente documento, en los que la administración de uno o más rellenos de tejido reduce o elimina la línea atrófica o estría de la piel, tratando así una línea atrófica o estría de la piel. En algunas realizaciones, un método para tratar la palidez de la piel incluye administrar a un individuo que padece palidez de la piel un relleno de tejido divulgado en el presente documento, en el que la administración del relleno de tejido aumenta el tono o el resplandor de la piel, tratando así la palidez de la piel. En algunas realizaciones, un método para tratar las arrugas de la piel incluye administrar a un individuo que padece arrugas en la piel un relleno de tejido divulgado en el presente documento, en el que la administración del relleno de tejido reduce o elimina las arrugas de la piel, tratando así las arrugas de la piel. En otro aspecto más de estas realizaciones, un método para tratar las arrugas de la piel incluye administrar a un individuo un relleno de tejido divulgado en el presente documento, en el que la administración del relleno de tejido hace que la piel sea resistente a las arrugas de la piel, tratando así las arrugas de la piel.
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona la administración de una composición divulgada en el presente documento en la que dicha administración promueve la formación o el depósito de colágeno nuevo. Los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden soportar el crecimiento interno del tejido y la deposición o formación de colágeno nuevo.
Sin limitarse a ninguna teoría de la divulgación, el peso molecular de los FPS usados en la preparación de rellenos de tejido descritos en el presente documento puede ajustarse para proporcionar una respuesta inflamatoria leve en un tejido seleccionado para desencadenar la deposición o formación de colágeno a través de las respuestas de proliferación y maduración de tejido resultante que siguen a la respuesta inflamatoria inicial. De hecho, los FPS de peso molecular más alto pueden dar como resultado una respuesta inflamatoria aumentada, mientras que los FPS de peso molecular más bajo pueden dar como resultado una respuesta inflamatoria escasa o nula.
Sin limitarse a ninguna teoría de la divulgación, los rellenos de tejido descritos en el presente documento proporcionan el atributo inesperado de que la respuesta inflamatoria resultante y, por ello, la formación de colágeno a través de la respuesta de proliferación y maduración de tejido, puede ajustarse porque las soluciones de FPS usadas en el presente documento tienen polidispersidades estrechas en vez de amplias. En una realización, la administración de un relleno de tejido divulgado en el presente documento aumenta la deposición de colágeno nuevo.
En algunas realizaciones, la administración de un tejido divulgado en el presente documento aumenta la deposición o formación de colágeno nuevo en aproximadamente 1 %, aproximadamente 2 %, aproximadamente 3 %, aproximadamente 4 %, aproximadamente 5 %, aproximadamente 6 %, aproximadamente 7 %, aproximadamente 8 %, aproximadamente 9 %, aproximadamente 10 %, aproximadamente 11 %, aproximadamente 12 %, aproximadamente 13 %, aproximadamente 14 %, aproximadamente 15 %, aproximadamente 16 %, aproximadamente 17 %, aproximadamente 18 %, aproximadamente 19 %, aproximadamente 20 %, aproximadamente 21 %, aproximadamente 22 %, aproximadamente 23 %, aproximadamente 24 %, aproximadamente 25 %, aproximadamente 26 %, aproximadamente 27 %, aproximadamente 28 %, aproximadamente 29 %, aproximadamente 30 %, aproximadamente 31 %, aproximadamente 32 %, aproximadamente 33 %, aproximadamente 34 %, aproximadamente 35 %, aproximadamente 36 %, aproximadamente 37 %, aproximadamente 38 %, aproximadamente 39 %, aproximadamente 40 %, aproximadamente 41 %, aproximadamente 42 %, aproximadamente 43 %, aproximadamente 44 %, aproximadamente 45 %, aproximadamente 46 %, aproximadamente 47 %, aproximadamente 48 %, aproximadamente 49 %, aproximadamente 50 %, aproximadamente 51 %, aproximadamente 52 %, aproximadamente 53 %, aproximadamente 54 %, aproximadamente 55 %, aproximadamente 56 %, aproximadamente 57 %, aproximadamente 58 %, aproximadamente 59 %, aproximadamente 60 %, aproximadamente 61 %, aproximadamente 62 %, aproximadamente 63 %, aproximadamente 64 %, aproximadamente 65 %, aproximadamente 66 %, aproximadamente 67 %, aproximadamente 68 %, aproximadamente 69 %, aproximadamente 70 %, aproximadamente 71 %, aproximadamente 72 %, aproximadamente 73 %, aproximadamente 74 %, aproximadamente 75 %, aproximadamente 76 %, aproximadamente 77 %, aproximadamente 78 %, aproximadamente 79 %, aproximadamente 80 %, aproximadamente 81 %, aproximadamente ut 82 %, aproximadamente 83 %, aproximadamente 84 %, aproximadamente 85 %, aproximadamente 86 %, aproximadamente 87 %, aproximadamente 88 %, aproximadamente 89 %, aproximadamente 90 %, aproximadamente 91 %, aproximadamente 92 %, aproximadamente 93 %, aproximadamente 94 %, aproximadamente 95 %, aproximadamente 96 %, aproximadamente 97 %, aproximadamente 98 %, aproximadamente 99 % o aproximadamente 100 %, en relación con el mismo o similar relleno de tejido que comprende AH, pero que carece de FPS.
En algunas realizaciones, la administración de un relleno de tejido divulgado en el presente documento aumenta el depósito o la formación de colágeno nuevo en al menos 1 %, al menos 2 %, al menos 3 %, al menos 4 %, al menos 5 %, al menos 6 %, al menos 7 %, al menos 8 %, al menos 9 %, al menos 10 %, al menos 11 %, al menos 12 %, al menos 13 %, al menos 14 %, al menos 15 %, al menos 16 %, al menos 17 %, al menos 18 %, al menos 19 %, al menos 20 %, al menos 21 %, al menos 22 %, al menos 23 %, al menos 24 %, al menos 25 %, al menos 26 %, al menos 27 %, al menos 28 %, al menos 29 %, al menos 30 %, al menos 31 %, al menos 32 %, al menos 33 %, al menos 34 %, al menos 35 %, al menos 36 %, al menos 37 %, al menos 38 %, al menos 39 %, al menos 40 %, al menos 41 %, al menos 42 %, al menos 43 %, al menos 44 %, al menos 45 %, al menos 46 %, al menos 47 %, al menos 48 %, al menos 49 %, al menos 50 %, al menos 51 %, al menos 52 %, al menos 53 %, al menos 54 %, al menos 55 %, al menos 56 %, al menos 57 %, al menos 58 %, al menos 59 %, al menos 60 %, al menos 61 %, al menos 62 %, al menos 63 %, al menos 64 %, al menos 65 %, al menos 66 %, al menos 67 %, al menos 68 %, al menos 69 %, al menos 70 %, al menos 71 %, al menos 72 %, al menos 73 %, al menos 74 %, al menos 75 %, al menos 76 %, al menos 77 %, al menos 78 %, al menos 79 %, al menos 80 %, al menos 81 %, al menos 82 %, al menos 83 %, al menos 84 %, al menos 85 %, al menos 86 %, al menos 87 %, al menos 88 %, al menos 89 %, al menos 90 %, al menos 91 %, al menos 92 %, al menos 93 %, al menos 94 %, al menos 95 %, al menos 96 %, al menos 97 %, al menos 98 %, al menos 99 %, al menos 100 %, al menos 125 %, al menos 150 %, al menos 175 %, al menos 200 %, al menos 225 %, al menos 250 %, al menos 275 % o al menos 300 %, con respecto al mismo o similar relleno de tejido que comprende AH, pero que carece de FPS.
En algunas realizaciones, la administración de un relleno de tejido divulgado en el presente documento aumenta el depósito o la formación de colágeno nuevo como máximo 1 %, como máximo 2 %, como máximo 3 %, como máximo 4 %, como máximo 5 %, como máximo 6 %, como máximo 7 %, como máximo 8 %, como máximo 9 %, como máximo 10 %, como máximo 11 %, como máximo 12 %, como máximo 13 %, como máximo 14 %, como máximo 15 %, como máximo 16 %, como máximo 17 %, como máximo 18 %, como máximo 19 %, como máximo 20 %, como máximo 21 %, como máximo 22 %, como máximo 23 %, como máximo 24 %, como máximo 25 %, como máximo 26 %, como máximo 27 %, como máximo 28 %, como máximo 29 %, como máximo 30 %, como máximo 31 %, como máximo 32 %, como máximo 33 %, como máximo 34 %, como máximo 35 %, como máximo 36 %, como máximo 37 %, como máximo 38 %, como máximo 39 %, como máximo 40 %, como máximo 41 %, como máximo 42 %, como máximo 43 %, como máximo 44 %, como máximo 45 %, como máximo 46 %, como máximo 47 %, como máximo 48 %, como máximo 49 %, como máximo 50 %, como máximo 51 %, como máximo 52 %, como máximo 53 %, como máximo 54 %, como máximo 55 %, como máximo 56 %, como máximo 57 %, como máximo 58 %, como máximo 59 %, como máximo 60 %, como máximo 61 %, como máximo 62 %, como máximo 63 %, como máximo 64 %, como máximo 65 %, como máximo 66 %, como máximo 67 %, como máximo 68 %, como máximo 69 %, como máximo 70 %, como máximo 71 %, como máximo 72 %, como máximo 73 %, como máximo 74 %, como máximo 75 %, como máximo 76 %, como máximo 77 %, como máximo 78 %, como máximo 79 %, como máximo 80 %, como máximo 81 %, como máximo 82 %, como máximo 83 %, como máximo 84 %, como máximo 85 %, como máximo 86 %, como máximo 87 %, como máximo 88 %, como máximo 89 %, como máximo 90 %, como máximo 91 %, como máximo 92 %, como máximo 93 %, como máximo 94 %, como máximo 95 %, como máximo 96 %, como máximo 97 %, como máximo 98 %, como máximo 99 %, como máximo 100 %, como máximo 125 %, como máximo 150 %, como máximo 175 %, como máximo 200 %, como máximo 225 %, como máximo 250 %, como máximo 275 % o como máximo 300 %, en relación con el mismo o similar relleno de tejido que comprende AH, pero que carece de FPS.
En algunas realizaciones, la administración de un relleno de tejido divulgado en el presente documento aumenta el depósito o la formación de colágeno nuevo en aproximadamente 1 % a aproximadamente 10 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 50 %, de aproximadamente 10 % a aproximadamente 100 %, de aproximadamente 50 % a aproximadamente 150 %, de aproximadamente 100 % a aproximadamente 200 %, de aproximadamente 150 % a aproximadamente 250 %, de aproximadamente 200 % a aproximadamente 300 %, de aproximadamente 350 % a aproximadamente 450 %, de aproximadamente 400 % a aproximadamente 500 %, de aproximadamente 550 % a aproximadamente 650 %, de aproximadamente 600 % a aproximadamente 700 %, en relación con el mismo o similar relleno de tejido que comprende AH, pero que carece de FPS.
En algunas realizaciones, la cantidad de relleno de tejido usada con cualquiera de los métodos divulgados en el presente documento será típicamente una cantidad terapéuticamente eficaz. Como se usa en el presente documento, el término "cantidad terapéuticamente eficaz" es sinónimo de "cantidad eficaz", "dosis terapéuticamente eficaz" y/o "dosis eficaz" y se refiere a la cantidad de relleno de tejido que provocará la respuesta biológica, cosmética o clínica esperada en un paciente que lo necesite. Como ejemplo no limitante, una cantidad efectiva es una cantidad suficiente para lograr una o más de las medidas clínicas y/o cosméticas divulgadas en el presente documento. Los expertos en la materia pueden determinar la cantidad efectiva adecuada que se administrará para una aplicación particular de los métodos divulgados, usando la guía proporcionada en el presente documento. Por ejemplo, se puede extrapolar una cantidad efectiva de todos y cada uno de los ensayos in vitro e in vivo como se describen en el presente documento. Un experto en la materia reconocerá que la afección del individuo puede monitorizarse a lo largo del curso de la terapia y que la cantidad eficaz de una composición divulgada en el presente documento que se administra puede ajustarse en consecuencia.
En algunas realizaciones, la cantidad de un relleno de tejido administrado es de al menos 0,001 g, o al menos 0,002 g, o al menos 0,003 g, o al menos 0,004 g, o al menos 0,005 g, o al menos 0,006 g, o al menos 0,007 g, o al menos 0,008 g, o al menos 0,009 g, o al menos 0,01 g, o al menos 0,02 g, o al menos 0,03 g, o al menos 0,04 g, o al menos 0,05 g, o al menos 0,06 g, o al menos 0,07 g, o al menos 0,08 g, o al menos 0,09 g, o al menos 0,1 g, o al menos 0,2 g, o al menos 0,3 g, o al menos 0,4 g, o al menos 0,5 g, o al menos 0,6 g, o al menos 0,7 g, o al menos 0,8 g, o al menos 0,9 g, o al menos 1 g, o al menos 2 g, o al menos 3 g, o al menos 4 g, o al menos 5 g, o al menos 6 g, o al menos 7 g, o al menos 8 g, o al menos 9 g, o al menos 10 g, o al menos 11 g, o al menos 12 g, o al menos 13 g, o al menos 14 g, o al menos 15 g, o al menos 20 g, o al menos 25 g, o al menos 30 g, o al menos 35 g, o al menos 40 g, o al menos 45 g, o al menos 50 g, o al menos 55 g, o al menos 60 g, o al menos 65 g, o al menos 70 g, o al menos 75 g, o al menos 80 g, o al menos 85 g, o al menos 90 g, o al menos 95 g, o al menos 100 g.
En algunas realizaciones, la cantidad de un relleno de tejido administrado es como máximo 0,001 g, o como máximo
0,002 g, o como máximo 0,003 g, o como máximo 0,004 g, o como máximo 0,005 g, o como máximo 0,006 g, o como máximo 0,007 g, o como máximo 0,008 g, o como máximo 0,009 g, o como máximo 0,01 g, o como máximo 0,02 g, o como máximo 0,03 g, o como máximo 0,04 g, o como máximo 0,05 g, o como máximo 0,06 g, o como máximo 0,07 g, o como máximo 0,08 g, o como máximo 0,09 g, o como máximo 0,1 g, o como máximo 0,2 g, o como máximo 0,3 g, o como máximo 0,4 g, o como máximo 0,5 g, o como máximo 0,6 g, o como máximo 0,7 g, o como máximo 0,8 g, o como máximo 0,9 g, o como máximo 1 g, o como máximo 2 g, o como máximo 3 g, o como máximo 4 g, o como máximo 5 g, o como máximo 6 g, o como máximo 7 g, o como máximo 8 g, o como máximo 9 g, o como máximo 10 g, o como máximo 11 g, o como máximo 12 g, o como máximo 13 g, o como máximo 14 g, o como máximo 15 g, o como máximo 20 g, o como máximo 25 g, o como máximo 30 g, o como máximo 35 g, o como máximo 40 g, o como máximo 45 g, o como máximo 50 g, o como máximo 55 g, o como máximo 60 g, o como máximo 65 g, o como máximo
70 g, o como máximo 75 g, o como máximo 80 g, o como máximo 85 g, o como máximo 90 g, o como máximo 95 g, o como máximo 100 g.
En algunas realizaciones, la cantidad de un relleno de tejido administrado es de aproximadamente 0,001 g o aproximadamente 0,002 g o aproximadamente 0,003 g o aproximadamente 0,004 g o aproximadamente 0,005 g o aproximadamente 0,006 g o aproximadamente 0,007 g o aproximadamente 0,008 g, o aproximadamente 0,009 g, o aproximadamente 0,01 g, o aproximadamente 0,02 g, o aproximadamente 0,03 g, o aproximadamente 0,04 g, o aproximadamente 0,05 g, o aproximadamente 0,06 g, o aproximadamente 0,07 g, o aproximadamente 0,08 g, o aproximadamente 0,09 g, o aproximadamente 0,1 g, o aproximadamente 0,2 g, o aproximadamente 0,3 g, o aproximadamente 0,4 g, o aproximadamente 0,5 g, o aproximadamente 0,6 g, o aproximadamente 0,7 g, o aproximadamente 0,8 g, o aproximadamente 0,9 g, o aproximadamente 1 g, o aproximadamente 2 g, o aproximadamente 3 g, o aproximadamente 4 g, o aproximadamente 5 g, o aproximadamente 6 g, o aproximadamente
7 g, o aproximadamente 8 g, o aproximadamente 9 g, o aproximadamente 10 g, o aproximadamente 11 g, o aproximadamente 12 g, o aproximadamente 13 g, o aproximadamente 14 g, o aproximadamente 15 g, o aproximadamente 20 g, o aproximadamente 25 g, o aproximadamente 30 g, o aproximadamente 35 g, o aproximadamente 40 g, o aproximadamente 45 g, o aproximadamente 50 g, o aproximadamente 55 g, o aproximadamente 60 g, o aproximadamente 65 g, o aproximadamente 70 g, o aproximadamente 75 g, o aproximadamente 80 g, o aproximadamente 85 g, o aproximadamente 90 g, o aproximadamente 95 g, o aproximadamente 100 g.
En algunas realizaciones, la cantidad de un relleno de tejido administrado es de 0,001 g a 0,01 g, o de 0,01 g a 0,1 g, o de 0,1 g a 1 g, o de 1 g a 10 g, o de 10 g a 20 g, o de 20 g a 30 g o 30 g a 40 g o 40 g a 50 g o 50 g a 60 g o 60 g a
70 g o 70 g a 80 g o 80 g a 90 g o 90 g a 100 g.
En algunas realizaciones, el volumen de un relleno de tejido administrado es de al menos 0,01 ml, o al menos 0,02 ml, o al menos 0,03 ml, o al menos 0,04 ml, o al menos 0,05 ml, o al menos 0,06 ml, o al menos 0,07 ml, o al menos
0,08 ml, o al menos 0,09 ml, o al menos 0,10 ml, o al menos 0,15 ml, o al menos 0,20 ml, o al menos 0,25 ml, o al menos 0,30 ml, o al menos 0,35 ml, o al menos 0,40 ml, o al menos 0,45 ml, o al menos 0,50 ml, o al menos 0,55 ml, o al menos 0,60 ml, o al menos 0,65 ml, o al menos 0,70 ml, o al menos 0,75 ml, o al menos 0,80 ml, o al menos 0,85 ml, o al menos 0,90 ml, o al menos 0,95 ml, o al menos 1 ml, o al menos 2 ml, o al menos 3 ml, o al menos 4 ml, o al menos 5 ml, o al menos 6 ml, o al menos 7 ml, o al menos 8 ml, o al menos 9 ml, o al menos 10 ml, o al menos 15 ml, o al menos 20 ml, o al menos 25 ml, o al menos 30 ml, o al menos 35 ml, o al menos 40 ml, o al menos 45 ml, o al menos 50 ml, o al menos 55 ml, o al menos 60 ml, o al menos 65 ml, o al menos 70 ml, o al menos 75 ml, o al menos
80 ml, o al menos 85 ml, o al menos 90 ml, o al menos 95 ml, o al menos 100 ml, o al menos 110 ml, o al menos 120 ml, o al menos 130 ml, o al menos 140 ml, o al menos 150 ml, o al menos 160 ml, o al menos 170 ml, ml, o al menos 190 ml, o al menos 200 ml, o
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al menos 210 ml, o al menos 220 ml, o al menos 230 ml, ml, o al menos 250 ml, o al menos 260 ml, o al menos 270 ml, o al menos 280 ml, o al menos 290 ml, ml, o al menos 325, 350 ml, o al menos 375 ml, o al menos 400 ml, o al menos 425 ml, o al menos 450 ml, o al m 475 ml, o al menos 500 ml, o al menos 525 ml, o al menos 550 ml, o al menos 575 ml, o al
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menos 600 ml, o al m 625 ml, o al menos 650 ml, o al menos 675 ml, o al menos 700 ml, o al menos 725 ml, o al menos 750 ml, o al m 775 ml, o al menos 800 ml, o al menos 825 ml, o al menos 850 ml, o al menos 875 ml, o al menos 900 ml, o al m 925 ml, o al menos 950 ml, o al menos 975 ml, o al menos 1000 ml.
En algunas realizaciones, el volumen de un relleno de tejido administrado es como máximo 0,01 ml, o como máximo
0,02 ml, o como máximo 0,03 ml, o como máximo 0,04 ml, o como máximo 0,05 ml, o como máximo 0,06 ml, o como máximo 0,07 ml, o como máximo 0,08 ml, o como máximo 0,09 ml, o como máximo 0,10 ml, o como máximo 0,15 ml, o como máximo 0,20 ml, o como máximo 0,25 ml, o como máximo 0,30 ml, o como máximo 0,35 ml, o como máximo
0,40 ml, o como máximo 0,45 ml, o como máximo 0,50 ml, o como máximo 0,55 ml, o como máximo 0,60 ml, o como máximo 0,65 ml, o como máximo 0,70 ml, o como máximo 0,75 ml, o como máximo 0,80 ml, o como máximo 0,85 ml,
o como máximo 0,90 ml, o como máximo 0,95 ml, o como máximo 1 ml, o como máximo 2 ml, o como máximo 3 ml, o como máximo 4 ml, o como máximo 5 ml, o como máximo 6 ml, o como máximo 7 ml, o como máximo 8 ml, o como máximo 9 ml, o como máximo 10 ml, o como máximo 15 ml, o como máximo 20 ml, o como máximo 25 ml, o como máximo 30 ml, o como máximo 35 ml, o como máximo 40 ml, o como máximo 45 ml, o como máximo 50 ml, o como máximo 55 ml, o como máximo 60 ml, o como máximo 65 ml, o como máximo 70 ml, o como máximo 75 ml, o como máximo 80 ml, o como máximo 85 ml, o como máximo 90 ml, o como máximo 95 ml, o como máximo 100 ml, o como máximo 110 ml, o como máximo 120 ml, o como máximo 130 ml, o como máximo 140 ml, o como máximo 150 ml, o como máximo 160 ml, o como máximo 170 ml, o como máximo 180 ml, o como máximo 190 ml, o como máximo 200 ml, o como máximo 210 ml, o como máximo 220 ml, o como máximo 230 ml, o como máximo 240 ml, o como máximo 250 ml, o como máximo 260 ml, o como máximo 270 ml, o como máximo 280 ml, o como máximo 290 ml, o como máximo 300 ml, o como máximo 325, 350 ml, o como máximo 375 ml, o como máximo 400 ml, o como máximo 425 ml, o como máximo 450 ml, o como máximo 475 ml, o como máximo 500 ml, o como máximo 525 ml, o como máximo 550 ml, o como máximo 575 ml, o como máximo 600 ml, o como máximo 625 ml, o como máximo 650 ml, o como máximo 675 ml, o como máximo 700 ml, o como máximo 725 ml, o como máximo 750 ml, o como máximo 775 ml, o como máximo 800 ml, o como máximo 825 ml, o como máximo 850 ml, o como máximo 875 ml, o como máximo 900 ml, o como máximo 925 ml, o como máximo 950 ml, o como máximo 975 ml, o como máximo 1000 ml.
En algunas realizaciones, el volumen de un relleno de tejido administrado es de aproximadamente 0,01 ml o aproximadamente 0,02 ml o aproximadamente 0,03 ml o aproximadamente 0,04 ml o aproximadamente 0,05 ml o aproximadamente 0,06 ml o aproximadamente 0,07 ml o aproximadamente 0,08 ml, o aproximadamente 0,09 ml, o aproximadamente 0,10 ml, o aproximadamente 0,15 ml, o aproximadamente 0,20 ml, o aproximadamente 0,25 ml, o aproximadamente 0,30 ml, o aproximadamente 0,35 ml, o aproximadamente 0,40 ml, o aproximadamente 0,45 ml, o aproximadamente 0,50 ml, o aproximadamente 0,55 ml, o aproximadamente 0,60 ml, o aproximadamente 0,65 ml, o aproximadamente 0,70 ml, o aproximadamente 0,75 ml, o aproximadamente 0,80 ml, o aproximadamente 0,85 ml, o aproximadamente 0,90 ml, o aproximadamente 0,95 ml , o aproximadamente 1 ml, o aproximadamente 2 ml, o aproximadamente 3 ml, o aproximadamente 4 ml, o aproximadamente 5 ml, o aproximadamente 6 ml, o aproximadamente 7 ml, o aproximadamente 8 ml, o aproximadamente 9 ml, o aproximadamente 10 ml, o aproximadamente 11 ml, o aproximadamente 12 ml, o aproximadamente 13 ml, o aproximadamente 14 ml, o aproximadamente 15 ml, o aproximadamente 16 ml, o aproximadamente 17 ml, o aproximadamente 18 ml, o aproximadamente 19 ml, o aproximadamente 20 ml, o aproximadamente 21 ml, o aproximadamente 22 ml, o aproximadamente 23 ml, o aproximadamente 24 ml, o aproximadamente 25 ml, o aproximadamente 26 ml, o aproximadamente 27 ml, o aproximadamente 28 ml, o aproximadamente 3 0 ml, o aproximadamente 35 ml, o aproximadamente 36 ml, o aproximadamente 37 ml, o aproximadamente 38 ml, o aproximadamente 39 ml, o aproximadamente 40 ml, o aproximadamente 41 ml, o aproximadamente 42 ml, o aproximadamente 43 ml, o aproximadamente 44 ml, o aproximadamente 45 ml, o aproximadamente 46 ml, o aproximadamente 47 ml, o aproximadamente 48 ml, o aproximadamente 49 ml, o aproximadamente 50 ml, o aproximadamente 51 ml, o aproximadamente 52 ml, o aproximadamente 53 ml, o aproximadamente 54 ml, o aproximadamente 55 ml, o aproximadamente 56 ml, o aproximadamente 57 ml, o aproximadamente 58 ml, o aproximadamente 59 ml, o aproximadamente 60 ml, o aproximadamente 61 ml, o aproximadamente 62 ml, o aproximadamente 63 ml, o aproximadamente 64 ml, o aproximadamente 65 ml, o aproximadamente 66 ml, o aproximadamente 67 ml, o aproximadamente 68 ml, o aproximadamente 69 ml, o aproximadamente 70 ml, o aproximadamente 71 ml, o aproximadamente 72 ml, o aproximadamente 73 ml, o aproximadamente 74 ml, o aproximadamente 75 ml, o aproximadamente 76 ml, o aproximadamente 77 ml, o aproximadamente 78 ml, o aproximadamente 79 ml, o aproximadamente 80 ml, o aproximadamente 81 ml, o aproximadamente 82 ml, o aproximadamente 83 ml, o aproximadamente 84 ml o aproximadamente 85 ml, o aproximadamente 86 ml, o aproximadamente 87 ml, o aproximadamente 88 ml o aproximadamente 89 ml, o aproximadamente 90 ml, o aproximadamente 91 ml, o aproximadamente 92 ml o aproximadamente 93 ml, o aproximadamente 94 ml, o aproximadamente 95 ml, o aproximadamente 96 ml, o aproximadamente 97 ml, o aproximadamente 98 ml, o aproximadamente 99 ml, o aproximadamente 100 ml, o aproximadamente 110 ml, o aproximadamente 120 ml, o aproximadamente 130 ml, o aproximadamente 140 ml, o aproximadamente 150 ml, o aproximadamente 160 ml, o aproximadamente 170 ml, o aproximadamente 180 ml, o aproximadamente 190 ml, o aproximadamente 200 ml, o aproximadamente 210 ml, o aproximadamente 220 ml, o aproximadamente 230 ml, o aproximadamente 240 ml, o aproximadamente 250 ml, o aproximadamente 260 ml, o aproximadamente 270 ml, o aproximadamente 280 ml, o aproximadamente 290 ml, o aproximadamente 300 ml, o aproximadamente 310 ml, o aproximadamente 320 ml, o aproximadamente 330 ml, o aproximadamente 340 ml, o aproximadamente 350 ml, o aproximadamente 360 ml, o aproximadamente 370 ml, o aproximadamente 380 ml, o aproximadamente 390 ml, o aproximadamente 400 ml, o aproximadamente 410 ml, o aproximadamente 420 ml, o aproximadamente 430 ml, o aproximadamente 440 ml, o aproximadamente 450 ml, o aproximadamente 460 ml, o aproximadamente 470 ml, o aproximadamente 480 ml, o aproximadamente 490 ml, o aproximadamente 500 ml, o aproximadamente 510 ml, o aproximadamente 520 ml, o aproximadamente 530 ml, o aproximadamente 540 ml, o aproximadamente 550 ml, o aproximadamente 560 ml, o aproximadamente 570 ml, o aproximadamente 580 ml, o aproximadamente 590 ml, o aproximadamente 600 ml, o aproximadamente 610 ml, o aproximadamente 620 ml, o aproximadamente 630 ml, o aproximadamente 640 ml, o aproximadamente 650 ml, o aproximadamente 660 ml, o aproximadamente 670 ml, o aproximadamente 680 ml, o aproximadamente 690 ml, o aproximadamente 700 ml, o aproximadamente 710 ml, o aproximadamente 720 ml, o aproximadamente 730 ml, o aproximadamente 740 ml, o aproximadamente 750 ml, o aproximadamente 760 ml, o aproximadamente 770 ml, o aproximadamente 780 ml, o aproximadamente 790 ml, o aproximadamente 800 ml, o aproximadamente 810 ml, o aproximadamente 820 ml, o aproximadamente 830 ml, o aproximadamente 840 ml, o aproximadamente 850 ml, o aproximadamente 860 ml, o aproximadamente 870 ml, o aproximadamente 880 ml, o aproximadamente 890 ml, o aproximadamente 900 ml, o aproximadamente 910 ml, o aproximadamente 920 ml, o aproximadamente 930 ml, o aproximadamente 940 ml, o aproximadamente 950 ml, o aproximadamente 960 ml, o aproximadamente 970 ml, o aproximadamente 980 ml, o aproximadamente 990 ml, o aproximadamente 1000 ml.
En algunas realizaciones, el volumen de un relleno de tejido administrado es de 0,01 ml a 0,10 ml, o de 0,10 ml a 1 ml, o de 1 ml a 10 ml, o de 10 ml a 100 ml, o de 50 ml a 100 ml, o de 100 ml a 150 ml o 150 ml a 200 ml o 200 ml a 250 ml o 250 ml a 300 ml o 300 ml a 350 ml o 350 ml a 400 ml o 400 ml a 450 ml o 450 ml a 500 ml o 500 ml a 550 ml o 550 ml a 600 ml o 600 ml a 650 ml o 650 ml a 700 ml o 700 ml a 750 ml o 750 ml a 800 ml o 800 ml a 850 ml, o 850 ml a 900 ml, o 900 ml a 950 ml, o 950 ml a 1000 ml, o 1 ml a 25 ml, o 1 ml a 50 ml, o 1 ml a 75 ml, o 1 ml a 100 ml, o de 10 ml a 25 ml, o de 10 ml a 50 ml, o de 10 ml a 75 ml, o de 100 ml a 250 ml, o de 100 ml a 500 ml, o de 100 ml a 750 ml, o de 100 ml a 1000 ml.
En algunas realizaciones, la divulgación proporciona la administración de un relleno de tejido divulgado en el presente documento. Como se usa en el presente documento, el término "administrar" significa cualquier mecanismo de suministro que proporciona un relleno de tejido divulgado en el presente documento a un individuo que potencialmente da como resultado un resultado beneficioso desde el punto de vista clínico, terapéutico o experimental. El mecanismo de suministro real usado para administrar un relleno de tejido a un individuo puede ser determinado por un experto en la materia teniendo en cuenta factores que incluyen, sin limitación, el tipo de afección, la localización de la afección, la causa de la afección, la gravedad de la afección, el grado de alivio deseado, la duración del alivio deseado, el relleno de tejido particular usado, la tasa de biodegradabilidad, bioabsorción, biorreabsorbilidad, y similares, del relleno de tejido particular usado, la naturaleza de los componentes incluidos en el relleno de tejido particular usado, la vía particular de administración, las características particulares, antecedentes y factores de riesgo del paciente, tales como, p. ej., edad, peso, salud general y similares, o cualquier combinación de los mismos. En un aspecto de esta realización, un relleno de tejido divulgado en el presente documento se administra a una región de un paciente mediante inyección, en el que la región puede estar en la piel, tejidos dérmicos, tejidos subdérmicos, tejidos cutáneos, tejidos subcutáneos, tejido intradural, músculos, tendones, ligamentos, tejidos fibrosos, grasa, vasos sanguíneos y arterias, nervios o tejidos sinoviales (intradérmicos).
En algunas realizaciones, la vía de administración de un relleno de tejido administrado a un paciente se determinará en función del efecto cosmético y/o clínico deseado por el paciente y/o el médico y la parte o región del cuerpo que se está tratando. Un relleno de tejido divulgado en el presente documento puede administrarse por cualquier medio conocido por los expertos en la materia, incluidos, sin limitación, jeringa con aguja, catéter, tópicamente o mediante implantación quirúrgica directa. El relleno de tejido divulgado en el presente documento se puede administrar en una región de la piel tal como, p. ej., una región dérmica o una región hipodérmica. Además, un relleno de tejido divulgado en el presente documento puede administrarse una, dos, tres o una pluralidad de veces según lo requiera la terapia específica.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento es inyectable. Como se usa en el presente documento, el término "inyectable" se refiere a un material de tejido que tiene las propiedades necesarias para administrar el relleno de tejido en una región de la piel de un individuo usando un dispositivo de inyección con una aguja tal como, por ejemplo, una aguja fina. Como se usa en el presente documento, el término "aguja fina" se refiere a una aguja de calibre 27 o menor. En algunas realizaciones, una aguja fina puede ser una aguja de calibre 27 a 30. La inyectabilidad de un relleno de tejido divulgado en el presente documento se puede lograr variando ciertos parámetros de los rellenos de tejido divulgados en el presente documento, por ejemplo, ajustando el grado de reticulación, variando de otro modo los parámetros G' y/o G", añadiendo polímeros no reticulados (p. ej., FPS o AH), y similares.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento es inyectable a través de una aguja fina. En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento es inyectable a través de una aguja de, por ejemplo, calibre 20, calibre 21, calibre 22, calibre 23, calibre 24, calibre 25, calibre 26, o calibre 27, o calibre 28, o calibre 29, o calibre 30, o calibre 31, o calibre 32, o calibre 33, o calibre 34. En algunas realizaciones, el relleno de tejido descrito en el presente documento es inyectable a través de una aguja de calibre 20, calibre 21, calibre 22, calibre 23, calibre 24, calibre 25, calibre 26, calibre 27, o calibre 28, o calibre 29, o calibre 30.
En algunas realizaciones, un relleno de tejido divulgado en el presente documento es inyectable con una jeringa que tiene un volumen de aproximadamente 0,8 a aproximadamente 1,0 ml.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden suministrarse en espacios vacíos en o alrededor de tejidos blandos con el propósito de, por ejemplo, aumento de tejido (p. ej., aumento de senos o glúteos). Cuando se suministran los rellenos de tejido descritos en el presente documento a tales espacios vacíos, se pueden usar jeringas y agujas más grandes (p. ej., agujas de calibre 27 o superiores).
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento se pueden aplicar a una herida sin el uso de una aguja para recubrir la herida o un dispositivo médico próximo a la herida.
En algunas realizaciones, los rellenos de tejido descritos en el presente documento pueden aplicarse a la superficie de un dispositivo médico.
Los siguientes ejemplos se presentan para proporcionar a los expertos en la materia una divulgación y una descripción completas de cómo elaborar y usar las realizaciones descritas, y no pretenden limitar el alcance de lo que los inventores consideran su invención ni tienen la intención de representar que los experimentos a continuación son todos o los únicos experimentos realizados. Se han hecho esfuerzos para garantizar la precisión con respecto a los números usados (p. ej., cantidades, temperatura, etc.), pero se deben tener en cuenta algunos errores y desviaciones experimentales. A menos que se indique lo contrario, las partes son partes en peso, el peso molecular es el peso molecular promedio en peso, la temperatura está en grados centígrados y la presión es la atmosférica o cercana a ella.
Ejemplos
Ejemplo 1: Evaluación Tyndall de geles
Para respaldar aún más las observaciones visuales y llevar a cabo un análisis comparativo del rendimiento de los rellenos dérmicos, se realiza un análisis cuantitativo del efecto Tyndall. Basándose en los conocimientos científicos existentes sobre la dispersión de la luz y la interacción de la luz con la piel, se emplean dos enfoques distintos basados en (a) colorimetría y (b) espectroscopia para cuantificar el efecto Tyndall en la piel. Basándose en estas técnicas, se definen tres parámetros cuantitativos distintos (esquematizados a continuación) para medir el efecto Tyndall in vivo.
Puntuación visual del efecto Tyndall:
La escala tiene un intervalo de 1 a 5 con incrementos de 0,5. Se otorga una puntuación de 1 a los sitios de inyección con tono de piel normal y sin decoloración azul. Se otorga una puntuación máxima de 5 a la decoloración azul gruesa y pronunciada. Se entrena a tres observadores independientes en la escala antes de anonimizar para calificar las muestras de prueba.
Componente azul del color de la piel - "b": se usa un cromámetro para cuantificar el componente de color azul de la luz reflejada desde los sitios de la piel inyectados con los diversos rellenos. Esto se logra usando el componente "b" de la escala de color L-a-b.
"% de luz azul" reflejada por la piel: se usa un espectrofotómetro portátil para cuantificar el % de luz azul reflejada por la piel en el intervalo total de luz visible. Esto se logra integrando el área bajo el espectro de luz visible entre 400-490 nm y normalizándolo por el área total bajo el espectro (400-700 nm).
Se inyectan geles de la presente divulgación y geles comercialmente disponibles por vía intradérmica a través de una aguja apropiada usando una técnica de enhebrado lineal en los muslos de ratas sin pelo de dos meses. Los geles se implantan superficialmente para imitar los procedimientos clínicos de líneas finas. Las pruebas de Tyndall se realizan 48 h después de la implantación del gel. Antes de realizar las pruebas de Tyndall, los animales se sacrifican de forma humanitaria para mejorar el contraste del efecto Tyndall.
Se usa una puntuación visual de 1 a 5 con incrementos de 0,5 para puntuar los sitios de inyección. Los sitios de inyección con una puntuación de 1 no muestran decoloración de la piel, mientras que los sitios de inyección con una puntuación de 5 muestran una decoloración azul intensa de la piel. También se realizan análisis espectroscópicos en los sitios de inyección con la ayuda de un cromatómetro. El componente azul del color de piel "b" y el % de luz azul reflejada por la piel (400-700 nm) se miden de forma independiente.
Ejemplo 2: Pruebas de relleno de tejido in vivo
Los rellenos de tejido preparados según la descripción anterior podrían probarse después de la implantación intradérmica, la implantación muscular y la inyección subcutánea.
Por ejemplo, una dosis de un relleno de tejido podría cargarse en una jeringa e inyectarse por vía intradérmica, intramuscular o subcutánea usando una jeringa de tamaño adecuado que permita el flujo a través de la aguja del relleno de tejido hasta el sitio de inyección.
Después de la inyección inicial frente a un control (p. ej., agua y/o un relleno de tejido basado en AH comercializado, como Juvederm), los sitios de inyección pueden monitorizarse a intervalos de 1 semana o 2 semanas donde se observan en los pacientes los problemas de biocompatibilidad, incluida la citotoxicidad, pirogenicidad, formación de endotoxinas, toxicidad sistémica aguda, toxicidad subcrónica, reactividad intradérmica, genotoxicidad y sensibilización de la piel.
Además, los atributos físicos del relleno de tejido pueden monitorizarse examinando la presencia de fenómeno de Tyndall o la pérdida de volumen, elasticidad o firmeza en el sitio de inyección.
Ejemplo 3: Examen de la reología del relleno de tejido
Podría usarse un reómetro de placas paralelas oscilatorias (Anton Paar Physica MCR 301) para medir las propiedades reológicas de los rellenos de tejido descritos en el presente documento. Se podría utilizar un diámetro de placa de 25 mm con una altura de separación de 1 mm. Las mediciones se pudieron realizar a una temperatura constante de 25 °C. Cada medición consistiría en un barrido de frecuencia de 1 a 10 Hz a una deformación constante de 2 % y un aumento logarítmico de frecuencia seguido de un barrido de deformación de 1 a 300 % a una frecuencia constante de 5 Hz con un aumento logarítmico de deformación. Los resultados de dichos análisis proporcionarían el módulo de almacenamiento G' y el módulo de pérdida G' de cada relleno de tejido probado.
Ejemplo 4: Examen de la opacidad de la solución de seda/AH (no según la invención)
Se prepararon soluciones de AH y seda en agua o solución salina tamponada con fosfato según la Tabla 18.
Tabla 18
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Los resultados de las soluciones descritas en la tabla anterior se muestran en las Fig. 26 y 27. El control de las Fig. 26 y 27 (frasco sin etiquetar en la Fig. 26 y jeringa de control en la Fig. 27) era una solución de AH (22 mg/ml) en agua. Como se ilustra en las Fig. 26 y 27, las soluciones de seda/AH eran homogéneas y visiblemente opacas en comparación con el AH solo.
Ejemplo 5: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: el ácido hialurónico puede disolverse en una solución de NaOH y añadirse a una solución de seda como se describe en el presente documento;
Etapa b: añadir BDDE disuelto en NaOH a la solución de seda/AH/NaOH;
Etapa c: reticular por mezclado con calor;
Etapa d: pasar por una malla metálica y dejar hinchar en agua;
Etapa e: precipitar el gel hinchado en etanol;
Etapa f: lavar con etanol, agua y solución de NaOH;
Etapa g: finalizar la reticulación en solución de etanol/NaOH durante aproximadamente 2 horas con calentamiento (50 °C);
Etapa h: neutralizar el pH de la solución a 7;
Etapa i: lavar y secar el precipitado;
Etapa j: dejar que el polvo seco resultante se hinche hasta formar un gel en una solución tamponada de NaCl al 0,9 %; y
Etapa k: cargar el gel en una jeringa y esterilizar en autoclave para proporcionar el relleno de tejido resultante. Ejemplo 6: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: el ácido hialurónico puede disolverse en una solución de NaOH;
Etapa b: añadir seda en solución de NaOH a una solución de seda y luego añadir BDDE disuelto en NaOH a la solución de seda/AH/NaOH;
Etapa c: reticular por mezclado con calor;
Etapa d: pasar por una malla metálica y dejar hinchar en agua;
Etapa e: precipitar el gel hinchado en etanol;
Etapa f: lavar con etanol, agua y solución de NaOH;
Etapa g: finalizar la reticulación en solución de etanol/NaOH durante aproximadamente 2 horas con calentamiento (50 °C);
Etapa h: neutralizar el pH de la solución a 7;
Etapa i: lavar y secar el precipitado;
Etapa j: dejar que el polvo seco resultante se hinche hasta formar un gel en una solución tamponada de NaCl al 0,9 %; y
Etapa k: cargar el gel en una jeringa y esterilizar en autoclave para proporcionar el relleno de tejido resultante. Ejemplo 7: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: el ácido hialurónico puede disolverse en una solución de NaOH;
Etapa b: añadir BDDE disuelto en NaOH a la solución de AH/NaOH;
Etapa c: añadir la solución de seda a la solución de la etapa y reticular por mezclado con calor;
Etapa d: pasar por una malla metálica y dejar hinchar en agua;
Etapa e: precipitar el gel hinchado en etanol;
Etapa f: lavar con etanol, agua y solución de NaOH;
Etapa g: finalizar la reticulación en solución de etanol/NaOH durante aproximadamente 2 horas con calentamiento (50 °C);
Etapa h: neutralizar el pH de la solución a 7;
Etapa i: lavar y secar el precipitado;
Etapa j: dejar que el polvo seco resultante se hinche hasta formar un gel en una solución tamponada de NaCl al 0,9 %; y
Etapa k: cargar el gel en una jeringa y esterilizar en autoclave para proporcionar el relleno de tejido resultante. Ejemplo 8: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: el ácido hialurónico puede disolverse en una solución de NaOH;
Etapa b: añadir BDDE disuelto en NaOH a la solución de AH/NaOH;
Etapa c: reticular por mezclado con calor;
Etapa d: añadir la solución de seda a la solución de AH/NaOH reticulada, pasar por una malla metálica y dejar que se hinche en agua;
Etapa e: precipitar el gel hinchado en etanol;
Etapa f: lavar con etanol, agua y solución de NaOH;
Etapa g: finalizar la reticulación en solución de etanol/NaOH durante aproximadamente 2 horas con calentamiento (50 °C);
Etapa h: neutralizar el pH de la solución a 7;
Etapa i: lavar y secar el precipitado;
Etapa j: dejar que el polvo seco resultante se hinche hasta formar un gel en una solución tamponada de NaCl al 0,9 %; y
Etapa k: cargar el gel en una jeringa y esterilizar en autoclave para proporcionar el relleno de tejido resultante. Ejemplo 9: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: el ácido hialurónico puede disolverse en una solución de NaOH;
Etapa b: añadir BDDE disuelto en NaOH a la solución de AH/NaOH;
Etapa c: reticular por mezclado con calor;
Etapa d: pasar por una malla metálica y dejar hinchar en agua;
Etapa e: precipitar el gel hinchado en etanol;
Etapa f: lavar con etanol, agua y solución de NaOH;
Etapa g: añadir la solución de seda al material preparado en la etapa f y finalizar la reticulación en solución de etanol/NaOH durante aproximadamente 2 horas con calentamiento (50 °C);
Etapa h: neutralizar el pH de la solución a 7;
Etapa i: lavar y secar el precipitado;
Etapa j: dejar que el polvo seco resultante se hinche hasta formar un gel en una solución tamponada de NaCl al 0,9 %;
Etapa k: cargar el gel en una jeringa y esterilizar en autoclave para proporcionar el relleno de tejido resultante. Ejemplo 10: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede mezclar el hialuronato de sodio con una solución de NaOH y una solución de seda como se describe en el presente documento;
Etapa b: se puede añadir BDDE a la solución de la etapa a;
Etapa c: se deja reaccionar el producto de la etapa b;
Etapa d: se añade amoníaco a la mezcla dializada de la etapa c y la mezcla se vierte en una placa de Petri;
Etapa e: se dejar secar el producto de la etapa d formando una película;
Etapa f: se divide la película de la etapa e en partículas y se hincha en solución salina;
Etapa g: se añade el producto de la etapa f a una jeringa y se esteriliza en autoclave;
Etapa h (opcional): se puede someter el producto de la etapa f a un segundo procedimiento de reticulación final con una solución de BDDE u otro agente de reticulación descrito en el presente documento y lavarse.
Ejemplo 11: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede mezclar el hialuronato de sodio con una solución de NaOH;
Etapa b: se puede añadir una solución de seda a la solución de la etapa a y se puede añadir BDDE;
Etapa c: se deja reaccionar el producto de la etapa b;
Etapa d: se añade amoníaco a la mezcla dializada de la etapa c y la mezcla se vierte en una placa de Petri;
Etapa e: se deja secar el producto de la etapa d formando una película;
Etapa f: se divide la película de la etapa e en partículas y se hincha en solución salina;
Etapa g: se añade el producto de la etapa f a una jeringa y se esteriliza en autoclave;
Etapa h (opcional): se puede someter el producto de la etapa f a un segundo procedimiento de reticulación final con una solución de BDDE u otro agente de reticulación descrito en el presente documento y lavarse.
Ejemplo 12: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede mezclar el hialuronato de sodio con una solución de NaOH;
Etapa b: se puede añadir BDDE a la solución de la etapa a;
Etapa c: se añade el producto de la etapa b a una solución de seda y se deja reaccionar;
Etapa d: se añade amoníaco a la mezcla dializada de la etapa c y la mezcla se vierte en una placa de Petri;
Etapa e: se deja secar el producto de la etapa d formando una película;
Etapa f: se divide la película de la etapa e en partículas y se hincha en solución salina;
Etapa g: se añade el producto de la etapa f a una jeringa y se esteriliza en autoclave;
Etapa h (opcional): se puede someter el producto de la etapa f a un segundo procedimiento de reticulación final con una solución de BDDE u otro agente de reticulación descrito en el presente documento y lavarse.
Ejemplo 13: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede mezclar el hialuronato de sodio con una solución de NaOH;
Etapa b: se puede añadir BDDE a la solución de la etapa a;
Etapa c: se deja reaccionar el producto de la etapa b;
Etapa d: se añade el producto de la etapa c a una solución de seda y luego se añade amoníaco a la mezcla dializada del mismo y la mezcla se vierte en una placa de Petri;
Etapa e: se deja secar el producto de la Etapa d formando una película;
Etapa f: se divide la película de la etapa e en partículas y se hincha en solución salina;
Etapa g: se añade el producto de la etapa f a una jeringa y se esteriliza en autoclave;
Etapa h (opcional): se puede someter el producto de la etapa f a un segundo procedimiento de reticulación final con una solución de BDDE u otro agente de reticulación descrito en el presente documento y lavarse.
Ejemplo 14: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede preparar una solución de seda como se describe en el presente documento, a la que se le puede añadir BDDE en agua;
Etapa b: se puede añadir AH a la solución de la etapa a;
Etapa c: se puede agitar la mezcla de la etapa b (p. ej., 5 minutos) y dejarse reposar durante aproximadamente 1 día; Etapa d: se puede dejar reposar el gel resultante de la etapa c en solución salina durante 1 semana para proporcionar el relleno de tejido resultante.
Ejemplo 15: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede añadir BDDE al agua;
Etapa b: se puede añadir una solución de seda a la solución de la etapa a, a la que luego se puede añadir AH; Etapa c: la mezcla de la etapa b puede agitarse (p. ej., 5 minutos) y dejarse reposar durante aproximadamente 1 día; Etapa d: se puede dejar reposar el gel resultante de la etapa c en solución salina durante 1 semana para proporcionar el relleno de tejido resultante.
Ejemplo 16: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede añadir BDDE al agua;
Etapa b: se puede añadir AH a la solución de la etapa a;
Etapa c: se puede añadir una solución de seda a la mezcla de la etapa b y la mezcla resultante se puede agitar (por ejemplo, 5 minutos) y dejar reposar durante aproximadamente 1 día;
Etapa d: se puede dejar reposar el gel resultante de la etapa c en solución salina durante 1 semana para proporcionar el relleno de tejido resultante.
Ejemplo 17: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede añadir a una solución de seda como se describe en el presente documento AH disuelto (mezclado durante aproximadamente 12 horas a 400 rpm) en solución de NaOH;
Etapa b: se puede desgasificar la solución de la etapa a;
Etapa c: se puede mezclar la solución de la etapa b con un agente reticulante descrito en el presente documento (p. ej., BDDE) a 50 °C durante aproximadamente 10-20 minutos;
Etapa d: se mezcla el gel reticulado con HCl de lidocaína;
Etapa e: se puede llevar a cabo la diálisis de la solución reticulada ajustada durante 3 días, luego 2 días con PBS, luego 1 día con agua;
Etapa f: se liofiliza luego el producto resultante filtrado para obtener sólidos;
Etapa g: se disuelven los sólidos en PBS y luego se incuban;
Etapa h (opcional): se puede añadir AH libre al producto de la etapa g;
Etapa i: se puede esterilizar el producto resultante de la etapa g o h mediante autoclave de vapor.
Ejemplo 18: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede disolver el AH (mezclar durante aproximadamente 12 horas a 400 rpm) en una solución de NaOH; Etapa b: se puede añadir una solución de seda a la solución de la etapa ay la mezcla resultante se puede desgasificar; Etapa c: se puede mezclar la solución de la etapa b con un agente reticulante descrito en el presente documento (p. ej., BDDE) a 50 °C durante aproximadamente 10-20 minutos;
Etapa d: se mezcla el gel reticulado con HCl de lidocaína;
Etapa e: se puede llevar a cabo la diálisis de la solución reticulada ajustada durante 3 días, luego 2 días con PBS, luego 1 día con agua;
Etapa f: se liofiliza luego el producto resultante filtrado para obtener sólidos;
Etapa g: se disuelven los sólidos en PBS y luego se incuban;
Etapa h (opcional): se puede añadir AH libre al producto de la etapa g;
Etapa i: se puede esterilizar el producto resultante de la etapa g o h mediante autoclave de vapor.
Ejemplo 19: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa a: se puede disolver el AH (mezclar durante aproximadamente 12 horas a 400 rpm) en una solución de NaOH; Etapa b: se puede desgasificar la solución de la etapa a;
Etapa c: se puede añadir una solución de seda a la solución de la etapa b y la mezcla resultante se puede mezclar con un agente de reticulación descrito en el presente documento (p. ej., BDDE) a 50 °C durante aproximadamente 10 a 20 minutos;
Etapa d: se mezcla el gel reticulado con HCl de lidocaína;
Etapa e: se puede llevar a cabo la diálisis de la solución reticulada ajustada durante 3 días, luego 2 días con PBS, luego 1 día con agua;
Etapa f: se liofiliza luego el producto resultante filtrado para obtener sólidos;
Etapa g: se disuelven los sólidos en PBS y luego se incuban;
Etapa h (opcional): se puede añadir AH libre al producto de la etapa g;
Etapa i: se puede esterilizar el producto resultante de la etapa g o h mediante autoclave de vapor.
Ejemplo 20: Método de preparación de relleno de tejido propuesto (no según la invención)
Un relleno de tejido de seda/AH como se describe en el presente documento podría prepararse según el siguiente método general:
Etapa: se puede disolver el AH (mezclar durante aproximadamente 12 horas a 400 rpm) en una solución de NaOH; Etapa b: se puede desgasificar la solución de la etapa a;
Etapa c: se puede mezclar la solución de la etapa b con un agente reticulante descrito en el presente documento (p.
ej., BDDE) a 50 °C durante aproximadamente 10-20 minutos;
Etapa d: se puede añadir una solución de seda al producto de la etapa c y la mezcla se puede mezclar con HCl de lidocaína;
Etapa e: se puede llevar a cabo la diálisis de la solución reticulada ajustada durante 3 días, luego 2 días con PBS, luego 1 día con agua;
Etapa f: se liofiliza luego el producto resultante filtrado para obtener sólidos;
Etapa g: se disuelven los sólidos en PBS y luego se incuban;
Etapa h (opcional): se puede añadir AH libre al producto de la etapa g;
Etapa i: se puede esterilizar el producto resultante de la etapa g o h mediante autoclave de vapor.
Ejemplo 21: Formulaciones de relleno dérmico compuestas de seda y ácido hialurónico reticulado con BDDE (no según la invención)
Materiales: 1,4-butanodioldiglicidiléter (BDDE; Sigma-Aldrich); hialuronato de sodio (AH; Lifecore); seda, solución al 6 % (Silk Therapeutics); hidróxido de sodio, solución 0,1 N (BDH); ácido clorhídrico, 5 N (Ricca Chemical); solución salina tamponada con fosfato (PBS; 20x; VWR Life Science).
Variables de formulación: peso molecular de la seda: solución de seda de Mw medio y bajo (6 %); peso molecular de AH: 1,5 MDa y 2,2 MDa; concentración de seda: 1 %v/v (0,6 mg/ml), 2 %v/v (6 mg/ml) 5 %v/v (3 mg/ml) y 20 %v/v (12 mg/ml).
Reticulación de hidrogel: (a) añadir una solución de seda al 6 % a hidróxido de sodio 0,1 N; (b) añadir gradualmente AH en polvo a la solución preparada anteriormente con agitación vertical a una velocidad de 200-400 rpm, dependiendo del contenido de seda; remover suavemente para evitar generar demasiadas burbujas de aire; seguir removiendo hasta que el AH se disuelva por completo; (c) añadir 1 %w/w de BDDE a la solución anterior; (d) calentar a 50 °C y mantener la agitación a 100-200 rpm durante 30 minutos; (e) dejar que el gel reticulado se enfríe por debajo de 30 °C; (f) añadir ácido clorhídrico 5 N para ajustar el pH a 7,0-7,4.
Diálisis con hidrogel: (a) hidratar el módulo de diálisis durante 2 minutos; quitar el exceso de agua y medir la masa total de módulo vacío; (b) añadir aproximadamente 18 g de formulación de hidrogel en el módulo de diálisis; medir la masa total del módulo después de cargarlo con gel; (c) suspender el módulo de diálisis en 2 l de tampón PBS 1x y ajustar la agitación magnética a 200 rpm; registrar la hora en que comienza la diálisis y cambiar el tampón PBS después de 4 h, 24 h y 48 h de diálisis; recoger el gel después de 72 horas.
Caracterización: módulo de almacenamiento de cizallamiento (G') y viscosidad; degradación enzimática; residuos de BDDE; densidad de reticulación; estudio con animales de 30 días; citotoxicidad; endotoxina bacteriana; turbidez. Propiedades viscoelásticas: se usó un reómetro híbrido Discovery HR-1 (TA Instruments) para determinar el módulo de almacenamiento (G') y la viscosidad compleja (n) de las formulaciones de relleno dérmico. Las muestras se probaron pasando la frecuencia de oscilación de 0,1 Hz a 10 Hz con 10 puntos de datos por intervalo decádico. Los datos se registraron y compararon a una tasa de cizallamiento de 5 Hz. Los datos de G' y y para formulaciones de hidrogel (después de la diálisis) con concentración constante de AH y concentración de seda variable se muestran en la Tabla 19. En este lote, se usó AH de peso molecular 1,5 MDa.
Tabla 19: Propiedades viscoelásticas de hidrogeles con concentración constante de AH
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Los datos de G' y y para formulaciones de hidrogel (después de la diálisis) con una concentración total constante de 30 mg/ml de AH y seda se resumen en la Tabla 20.
Tabla 20: Propiedades viscoelásticas de hidrogeles con concentración total constante
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Reversibilidad del hidrogel: Se prepararon y dializaron hidrogeles con y sin proteína de seda. Las composiciones finales fueron 33,3 mg/ml de AH 8 mg/ml de seda para hidrogel de seda-AH y 33,3 mg/ml de AH para hidrogel de AH, respectivamente. Se añadió 1 g ± 100 g de los hidrogeles preparados anteriormente a un vial de vidrio de 20 ml seguido de 3 ml de 16 U/ml de hialuronidasa en 1x PBS. Las muestras se incubaron a 37 °C durante 3 días. También se prepararon muestras de control usando hidrogel de AH sin añadir hialuronidasa. El perfil de degradación se muestra en la Fig. 28. Las muestras de control sin hialuronidasa no se degradaron durante el transcurso de 3 días de incubación. Dentro de las primeras 6 horas de incubación, los hidrogeles absorbieron el tampón y se hincharon, lo que daba como resultado un aumento del porcentaje de masa. El hidrogel de seda-AH y el hidrogel de AH se degradaron por completo después de 3 días de incubación. En presencia de seda, el hidrogel se digirió más rápido que el hidrogel de AH puro. Después de 12 horas de incubación, la enzima digirió aproximadamente el 90 % del hidrogel de seda-AH.
Residuos de reticulante (BDDE): En las muestras enumeradas en la Tabla 19 se analizaron los residuos de BDDE usando GC-FID por Millennium Research Laboratories, Inc. (MRL). El informe de la prueba de MRL MRL18JAN06 indicaba que no se detectaron residuos de BDDE en todas las muestras, cumpliendo los criterios de aceptación de menor o igual a 2 ppm.
Densidad de reticulación: las muestras enumeradas en la Tabla 19 se digirieron completamente con hialuronidasa y se analizaron usando RMN para determinar la densidad de reticulación en términos de porcentaje de modificación. Los resultados de la prueba se enumeran en la Tabla 21 (informe de prueba de MRL MRL18JAN07).
Tabla 21: Grado de modificación porcentual (densidad de reticulación) para diversas formulaciones
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Estudio en animales: se llevó a cabo un estudio en animales de 30 días usando un modelo de conejillo de Indias en las instalaciones de WuXi AppTec Minneapolis, MN, para abordar la preocupación por la seguridad del producto. Hubo 2 puntos de tiempo de finalización en este estudio, 7 días y 30 días, para evaluar la respuesta del tejido. El estudio se resumió en el informe WuXi AppTec D28195 (Proyecto C19879). Se usaron dos muestras de control (Juvederm Ultra Plus y Muestra C2 en la Tabla 19) y 6 formulaciones (Muestra A - F en la Tabla 19) para inyección intradérmica. Las muestras A - F y la muestra de control C2 se esterilizaron con vapor (protocolo 201707289) en Nelson Laboratories, LLC antes de la inyección. El procedimiento del estudio en resumen: en este estudio se usaron veinticuatro animales, doce por duración. Cada animal recibió seis inyecciones intradérmicas dorsales usando la técnica de enhebrado (inyectando una línea en lugar de un bolo): un sitio de control en un lado de la columna vertebral, el segundo sitio de control en el lado contralateral (con lados asignados alternativamente por animal) y cuatro sitios de prueba con no más de una inyección de un artículo de prueba dado (con los lados derecho e izquierdo alternativamente asignados entre los animales). Los animales se observaron diariamente durante todo el estudio para evaluar la salud general. Los animales fueron sacrificados humanitariamente en las fechas de terminación programadas. Los sitios de implante y el tejido circundante de todos los animales se extirparon, se colocaron en formalina y se procesaron en bloques de parafina seguidos de una evaluación histopatológica. Las imágenes histológicas representativas y los hallazgos patológicos se resumen en la Tabla 22. En general, no hubo indicios de sepsis o respuesta inmunológica en ninguno de los sitios de implante.
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Endotoxina bacteriana: Se seleccionaron tres muestras posteriores a la esterilización (muestra A, muestra E y muestra C2) de 7 formulaciones usadas en estudios con animales (enumeradas en la Tabla 19) para la prueba de endotoxina bacteriana. Se usó el método turbidimétrico cinético para determinar el nivel de endotoxinas. Los resultados de las pruebas se enumeran en la Tabla 23 y están por debajo de los criterios de aceptación de 20 UE/ml (informe de estudio de Nelson Labs 1006775-S01).
Tabla 23: Resultados de la prueba de endotoxinas
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Biocompatibilidad - Citotoxicidad: Se seleccionaron cuatro muestras posteriores a la esterilización (muestra A, muestra B, muestra D y muestra E) de 7 formulaciones usadas en estudios con animales (enumeradas en la Tabla 19) para la prueba de citotoxicidad ISO-10993-5 (ISO MEM Elution Using L-929 Mouse Fibroblast Cells). Estas muestras representaban el contenido de seda más alto y más bajo de seda de peso molecular medio y seda de peso molecular bajo en las formulaciones de relleno dérmico probadas. Los informes de prueba indicaron que todas las muestras de prueba obtuvieron una calificación de 0, lo que significa que no son citotóxicas (informes Wuxi AppTec D28287-1, D28287-2, D28287-3, D28287-4).
Turbidez: El hidrogel de AH puro es transparente bajo la luz natural. Cuando se reticuló AH con proteína de seda, el hidrogel se vuelve ligeramente turbio (opaco) y la turbidez depende de la concentración total de seda en la formulación. La turbidez se midió con un espectrofotómetro Lambda X50S UV-Vis (PerkinElmer) equipado con una esfera integradora de InGaAs que tiene la capacidad de recoger la luz dispersada frontalmente además de la luz transmitida estándar. La medición de la turbidez del hidrogel de seda-AH se muestra en la Fig. 35. La curva negra es la transmitancia estándar y la curva roja fue recogida por la esfera, mostrando una dispersión frontal significativa. El hidrogel AH puro sin seda se usó como muestra de control. Las curvas de la Fig. 36 son casi idénticas, lo que indica una dispersión muy pequeña del gel de AH puro. La medición de la turbidez sugería que el hidrogel de seda-AH tiene una capacidad de dispersar luces que podrían eliminar el efecto Tyndall cuando se usa como relleno dérmico.
Conclusiones: Las formulaciones de relleno dérmico se desarrollaron basándose en una concentración constante de AH con diversos contenidos de seda y una concentración total constante. Estas formulaciones proporcionaron un amplio intervalo de módulos de almacenamiento, viscosidad y densidad de reticulación que pueden conducir a diversas aplicaciones. El hidrogel de seda-AH era enzimáticamente reversible. El reticulante residual después de la diálisis de las formulaciones de hidrogel cumplía con los criterios de aceptación. La prueba de citotoxicidad indicaba que los hidrogeles de seda-AH con un contenido de seda que oscilaba desde 0,48 mg/ml hasta 9,6 mg/ml no eran citotóxicos y eran biocompatibles. El estudio con animales de 30 días demostraba que todas las formulaciones con un contenido de seda de hasta 9,6 mg/ml no causaban sepsis y no tenían respuesta inmunológica.
Ejemplo 22: Formulaciones de relleno dérmico compuestas de seda y ácido hialurónico reticulado con PEGDE (PEGDGE)
Reticulante: Poli(etilenglicol)diglicidiléter (PEGDE), peso molecular medio Mn= 500. Condiciones de reacción: las mismas que para la reticulación con BDDE (Ejemplo 21). La cantidad total de PEGDE era equivalente a BDDE en moles.
Tabla 24: Formulación de reticulación de PEGDE y resultados de las pruebas
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(La muestra XHA15M05SM17111602 no es según la invención)
Ejemplo 23: Estudio en animales C20419
Las formulaciones y la caracterización de las muestras para el estudio animal C20419 se muestran en la Tabla 25: (En la tabla 25, el grupo 1 no es según la invención)
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Las Fig. 37 - 46 muestran los resultados del estudio. La Fig. 37 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de control. La Fig.38 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de AH de la invención (24 mg/ml de AH, reticulado con PEGDE, muestra C4 - Tabla 25). La Fig. 39 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (22,8 mg/ml de AH, 1,2 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra L - Tabla 25). La Fig. 40 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (23,76 mg/ml de AH, 0,24 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra M - Tabla 25). La Fig. 41 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (22,8 mg/ml de AH, 1,2 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra N - Tabla 25). La Fig. 42 es una imagen histológica representativa de un área intradérmica en un conejillo de Indias inyectado con un relleno dérmico de seda-AH de la invención (22,8 mg/ml de AH, 1,2 mg/ml de seda, reticulado con PEGDE, muestra O - Tabla 25).
Las Fig. 43 - 46 son representaciones gráficas de los resultados histológicos para las formulaciones de la Tabla 257 días después de la implantación (puntuación: 0 - normal; 1 - mínima; 2 - leve; 3 - moderada y 4 - grave). La Fig. 43 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de la degradación del gel de los 7 días posteriores a la implantación; las formulaciones reticuladas con BDDE se degradan en su mayoría. La Fig. 44 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de los 7 días posteriores a la implantación para la migración del gel. La Fig. 45 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de inflamación de los 7 días posteriores a la implantación; no se observó necrosis de tejido, no se observó coagulación sanguínea y se observó una mínima deposición de colágeno en la formulación de control y algunas de las formulaciones de prueba. La Fig. 46 es un gráfico que muestra los resultados histológicos de los macrófagos de los 7 días posteriores a la implantación.
Ejemplo 24: Propiedades de hidrogeles de seda-AH reticulados con PEGDE: 1) módulo de almacenamiento de cizallamiento (G'), y 2) relación de hinchamiento durante la diálisis
Preparación de relleno dérmico, Materiales: Poli(etilenglicol)diglicidiléter (PEGDE), Mn= 500, Sigma-Aldrich; hialuronato de sodio (AH), Lifecore; seda, solución al 6 %, Silk Inc.; hidróxido de sodio, solución 0,1 N, BDH; ácido clorhídrico, 5 N, Ricca Chemical; solución salina tamponada con fosfato (PBS), 20x, VWR Life Science.
Variables de la formulación del relleno dérmico: peso molecular de la seda: solución de seda de Mw medio y bajo (6 %); peso molecular de AH: 700 KDa y 1,5 MDa; concentración de seda (inicial): 0 - 15 mg/ml.
Reticulación de hidrogel a alta concentración: se añade una solución de seda al 6 % a hidróxido de sodio 0,1 N; se añade gradualmente 100 mg/ml de AH de peso molecular mixto (700 KDa/1,5 MDa = 90/10) a la solución preparada anteriormente con agitación suave hasta que se disuelva completamente el AH; se añade PEGDE a la solución anterior; se calienta al baño maría a 40 °C y se mantiene la reticulación en baño maría durante 45 minutos; se deja enfriar el gel reticulado por debajo de 30 °C; se añade ácido clorhídrico 5 N a 1x PBS, se diluye el gel a 40 mg/ml y se ajusta el pH final a 7,0-7,4.
Reticulación de hidrogel a baja concentración: se añade una solución de seda al 6 % a hidróxido de sodio 0,1 N; se añade gradualmente 25 mg/ml de AH de 1,5 MDa a la solución preparada anteriormente con agitación suave hasta que el AH se disuelva por completo; se añade PEGDE a la solución anterior; se calienta al baño maría a 40 °C y se mantiene la reticulación en baño maría durante 45 minutos; se deja enfriar el gel reticulado por debajo de 30 °C; se añade ácido clorhídrico 5 N al gel reticulado y se ajusta el pH final a 7,0-7,4.
Diálisis de hidrogel: se hidrata el módulo de diálisis (20 KDa de MWCO) durante 2 minutos; se quita el exceso de agua y se mide la masa total módulo vacío; se añaden aproximadamente 18 g de hidrogel en el módulo de diálisis; se mide la masa total del módulo después de cargarlo con gel; se suspende el módulo de diálisis en 2 l de tampón PBS 1x y se ajusta la agitación magnética a 200 rpm; se recoge el gel después de 72 horas de diálisis.
Propiedades viscoelásticas
Se usó un reómetro híbrido Discovery HR-1 (TA Instruments) para determinar el módulo de almacenamiento (G') de las formulaciones de hidrogel. Las muestras se probaron pasando la frecuencia de oscilación de 0,1 Hz a 10 Hz con 10 puntos de datos por intervalo decádico. Los datos se registraron y compararon a una tasa de cizallamiento de 5 Hz. Se muestran los G' de las formulaciones de hidrogel antes y después de la diálisis con una concentración de AH constante y una concentración de seda variable en las Fig. 47A y 47B. Para el hidrogel reticulado con PEGDE a una concentración inicial alta de AH, el impacto de la concentración de seda sobre G' es mínimo debido a la relación relativamente baja de seda a AH total. También se puede aportar al AH mixto que contiene 90 % de peso molecular bajo (700 KDa) que no es sensible a los cambios de concentración de seda. Para el hidrogel reticulado con PEGDE a una concentración inicial baja de AH, el G' aumentaba a medida que se añadía más seda a la formulación. Los cambios en la concentración de seda tenían más impacto sobre G' cuando la concentración inicial de AH era baja y también tenían más impacto en el AH de peso molecular alto (1,5 MDa). No se observaba un impacto sustancial del peso molecular de la seda sobre G' para ambos procedimientos de reticulación.
Relación de hinchamiento durante la diálisis: no había una tendencia clara que mostrara que la cantidad de seda añadida a la formulación de hidrogel tuviera algún impacto en el hinchamiento del gel durante la diálisis para ambos procedimientos de reticulación y no había una diferencia sustancial entre la seda de peso molecular medio y la seda de peso molecular bajo (Figs. 48A y 48B).
La concentración de seda en las formulaciones de hidrogel tenía un impacto mínimo sobre G' si el AH mixto se reticulaba con PEGDE a una concentración inicial alta de AH, pero era proporcional a G' si se reticulaba un solo AH de peso molecular alto a una concentración inicial baja de AH. El peso molecular de la seda en las formulaciones de gel no tenía una diferencia sustancial cuando se comparaba la contribución a G' y el hinchamiento si el AH estaba reticulado con PEGDE.
Ejemplo 25: Concentración de seda en formulaciones de relleno dérmico de seda-AH
Materiales: seda, solución al 6 %, Silk, Inc.; solución salina tamponada con fosfato (PBS), 20x, VWR Life Science; Gel de ácido hialurónico (AH) reticulado.
Equipo: analizador de humedad HE53, Mettler Toledo; espectrofotómetro Cary 100 UV/Vis.
Curva patrón de calibración: se mide el contenido seco para soluciones de seda al 6 % de peso molecular medio y bajo para determinar el contenido seco real (mg/ml) de las soluciones de seda; se crean una serie de soluciones de seda estándares diluyendo la solución de seda al 6 % con PBS 1X (por ejemplo, 1 mg/ml de seda, 0,75 mg/ml de seda, 0,5 mg/ml de seda, 0,25 mg/ml de seda y 0 mg/ml de seda); se mide la absorbancia de cada solución estándar a 275 nm en una cubeta de cuarzo; las mediciones de absorbancia se pueden realizar con un barrido de 200 a 800 nm, un intervalo de datos de 5 nm y una recolección promedio de 0,1 segundos; se traza la absorbancia a 275 nm frente a la concentración de seda (mg/ml) para crear una curva patrón.
Medición de la concentración de seda: se diluyen las muestras de gel de AH con PBS 1x de modo que la absorbancia a 275 nm esté entre 0 y 1,0 (por ejemplo, las muestras se pueden diluir con una relación de 1:12 de gel a PBS 1x, es decir, 1200 % de dilución); se realiza un barrido de absorbancia para la muestra de gel de seda-AH frente a una referencia de PBS 1X entre 200 nm y 800 nm, se mide el pico de absorbancia a 275 nm para cada muestra de gel; se corrigen las señales de absorción de las muestras de gel por la diferencia entre la señal de absorción de la muestra sin seda y la intersección de la curva de calibración, configurando la muestra sin seda para que tenga una concentración de seda de 0 mg/ml; la concentración de seda en las muestras de gel de seda-AH se puede calcular a partir de la curva de calibración y el factor de dilución.
Se crearon curvas de calibración midiendo la absorción a 275 nm para una serie de muestras estándares con diferentes concentraciones de seda que oscilan desde 0 mg/ml hasta 1 mg/ml. Las curvas de calibración para las soluciones de seda de peso molecular medio y bajo se muestran en la Figs. 49A y 49B. Los valores de r2 de 0,99947 para seda de peso molecular medio y 0,99949 para seda de peso molecular bajo demuestran que las curvas de calibración son lineales dentro del intervalo de trabajo de 0-1 mg/ml de concentración de seda. Estas curvas se pueden usar para determinar las concentraciones de seda en muestras de gel.
Determinación de la concentración de seda de hidrogeles de AH-seda: se midió la absorción a 275 nm de hidrogeles de seda-AH diluidos para cada muestra como se muestra en las Fig. 50A y 50B. La concentración de seda de cada muestra se calculó con la curva de calibración y el factor de dilución, resumidos en la Tabla 26.
Tabla 26 - Concentraciones de seda calculadas para geles de seda-AH con una concentración de seda desconocida a partir de la curva de calibración
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Ejemplo 26: Formulaciones de relleno dérmico de seda-AH: opacidad de gel
Materiales: gel de ácido hialurónico (AH) reticulado; solución salina tamponada con fosfato (PBS), 20x, VWR Life Science.
Equipo: Espectrofotómetro Cary 100 UV/Vis.
Preparación de la muestra: se inyectan aproximadamente 2 ml de gel de AH en una cubeta de cuarzo limpia de manera que haya una cantidad mínima de burbujas de aire en la muestra; la inyección con una aguja de 18 G puede ayudar a reducir la cantidad de burbujas en la muestra; se puede añadir una muestra de referencia en blanco de 1x PBS a una segunda cubeta de cuarzo limpia (Nota: para las mediciones de opacidad, se puede usar una cubeta de plástico ya que la cubeta de plástico no tiene absorción en el intervalo visible, 400 nm-800 nm).
Medición de la opacidad del gel: se configura el intervalo de barrido X de 200 nm a 800 nm con un intervalo de datos de 5 nm y un tiempo promedio de 0,1 segundos; se selecciona el modo Y para que sea %T para la medición de la luz transmitida (Nota: la absorción también se puede medir y el %T se puede calcular a partir de los valores de absorción); se realiza un barrido en la muestra de gel frente al patrón de referencia 1X PBS; los datos se pueden guardar como un archivo csv y se puede trazar el espectro.
La opacidad del gel se puede medir usando el espectrofotómetro UV/Vis para luz transmitida estándar. Una muestra ópticamente transparente transmitirá el 100 % de la luz, mientras que una muestra ligeramente turbia u opaca solo transmitirá una parte de esa luz. La Fig. 51 muestra la medición de la turbidez de un hidrogel de AH con y sin seda. La curva azul muestra el % de transmitancia de la luz transmitida para una muestra de gel de seda-AH con 3 mg/ml de seda y 26 mg/ml de AH. La curva roja muestra la luz transmitida para una muestra sin seda y 20 mg/ml de AH, y muestra más transmisión de luz que la muestra con seda. Las mediciones de turbidez sugieren que el gel de seda-AH tiene la capacidad de dispersar la luz visible más que el gel de AH sin seda.
Ejemplo 27: Grado de modificación (MoD) del hidrogel de AH determinado por RMN
El grado de modificación (MoD) se define como la relación estequiométrica de todas las moléculas de reticulante ligadas a los moles de unidades repetitivas de AH. Tanto los ligadores reticulados como los monoligados están incluidos en el MoD. El MoD se determina a partir del espectro de 1H-RMN integrando la señal del grupo N-acetilo en AH a 2,1 ppm y el reticulante BDDE a 1,7 ppm (no según la invención), o el reticulante PEGDE a 3,0-4,5 ppm.
Antes de la degradación enzimática, el hidrogel de AH se dializó en primer lugar frente a una solución de PBS (1X, 2 l x 5) para retirar el agente de reticulación libre. Se usó un módulo de diálisis Slide-A-Lyzer (MWCO 3,5 K, Thermo Scientific, Rockford, IL) y la solución de PBS se agitó a TA durante 72 h. Después de la diálisis, se tomó 1 ml de la solución de hidrogel de Ah y se liofilizó con un liofilizador Labconco FreeZone (2,5 l) para obtener el polvo seco.
Para preparar la muestra de RMN, se colocaron 10 mg del polvo seco en el tubo de RMN (5 mm, Wilmad-LabGlass) y se añadieron 0,6 ml de solución de hialuronidasa (MP Biomedicals, Solon, OH) en óxido de deuterio (D2O, Alfa Aesar, Ward Hill, MA). La cantidad de hialuronidasa era de 5 U por 1 mg de AH. El tubo de RMN se incubó a 37 °C durante la noche para degradar todo el AH. Los espectros de RMN se registraron en un sistema de RMN automatizado Varian MR de 400 MHz. El tiempo de retardo de relajación es de 1 s y el número de barridos es de 256. Todos los datos se procesaron utilizando un software MestReNova (Edición 12.0.2).
Ejemplo 28: Proceso de reticulación de 2 etapas de seda-AH
Se puede formar un hidrogel de seda-AH mediante un proceso de reticulación de 2 etapas para mejorar la eficiencia de la unión de la seda a la AH. Para una formulación dada, en la primera etapa, se añaden toda la proteína de seda y una pequeña parte de AH de peso molecular bajo a una solución de NaOH a pH 10 y luego se hacen reaccionar con una parte del reticulante. Sin desear limitarse a ninguna teoría en particular, se cree que, durante esta etapa, la mayor cantidad posible de seda reacciona con el reticulante. En la segunda etapa, se añade una solución de NaOH para diluir el producto de la etapa 1 y aumentar el pH a 13. Se añaden luego el AH de peso molecular bajo restante, todo el AH de peso molecular alto y el reticulante restante a la solución, y se completa la reacción de reticulación.
Ejemplo 29: Síntesis de hidrogel de AH
El hidrogel de AH se ha sintetizado usando diferentes pesos moleculares de HA, reticulante, tiempo de reacción, temperatura de reacción, concentración de AH, relación de reticulante, proceso de mezclado y método de agitación. Las Tablas 27 y 28 muestran las diversas condiciones de reacción empleadas y los diversos hidrogeles obtenidos.
Tabla 27
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(en la Tabla 28, las muestras con BDDE como reticulante no son según la invención)
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Claims (14)

REIVINDICACIONES
1. Un relleno de tejido biocompatible, que comprende proteína de seda o fragmentos de proteína de seda (FPS), ácido hialurónico (AH) y un agente anestésico, en el que una parte del AH, una parte del FPS, o ambos, se modifica o reticula mediante uno o más restos ligadores que comprenden uno o más de una cadena de alcano o alquilo, un grupo éter y un alcohol secundario,
en el que los fragmentos de proteína de seda tienen un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 1 kDa hasta aproximadamente 250 kDa,
en el que el AH o FPS modificado o reticulado comprende un ligador o resto de reticulación que comprende una cadena de polietilenglicol (PEG),
en el que la modificación o la reticulación se obtiene utilizando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación que es un polietilenglicoldiglicidiléter.
2. El relleno de tejido de la reivindicación 1, en el que la modificación o la reticulación se obtiene usando un agente de reticulación y/o un precursor de reticulación seleccionado del grupo que consiste en un polietilenglicoldiglicidiléter que tiene un Mn medio de aproximadamente 500, aproximadamente 1000, aproximadamente 2000 o aproximadamente 6000, y/o un polietilenglicoldiglicidiléter que tiene de aproximadamente 2 a aproximadamente 25 grupos de etilenglicol.
3. El relleno de tejido de la reivindicación 1 o 2, en el que el agente anestésico es lidocaína, preferiblemente a una concentración desde aproximadamente 0,001 % hasta aproximadamente 5 %.
4. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que la concentración de AH en el relleno de tejido es desde aproximadamente 10 mg/ml hasta aproximadamente 50 mg/ml.
5. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que la proteína de seda es fibroína de seda, preferiblemente fibroína de seda sustancialmente desprovista de sericina.
6. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el FPS tiene un peso molecular promedio en peso medio que oscila desde aproximadamente 5 kDa hasta aproximadamente 150 kDa.
7. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el FPS tiene un peso molecular promedio en peso que oscila desde aproximadamente 6 kDa hasta aproximadamente 17 kDa, desde aproximadamente 17 kDa hasta aproximadamente 39 kDa, o desde aproximadamente 39 kDa hasta aproximadamente 80 kDa.
8. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en el que la concentración total de FPS en el relleno de tejido es desde aproximadamente 0,1 mg/ml hasta aproximadamente 15 mg/ml.
9. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en el que el relleno de tejido tiene un módulo de almacenamiento (G') desde aproximadamente 25 Pa hasta aproximadamente 1500 Pa.
10. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que el relleno de tejido tiene una viscosidad compleja desde aproximadamente 1 Pas hasta aproximadamente 10 Pas.
11. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en el que el relleno de tejido transmite de forma difusa como máximo el 95 % de la luz.
12. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en el que el relleno de tejido transmite de aproximadamente 0,1 % a aproximadamente 75 % de la luz.
13. El relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12 para uso como medicamento, preferiblemente para uso en el tratamiento de una afección de la piel.
14. Un uso cosmético no terapéutico del relleno de tejido de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12.
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