EA045185B1 - Тканевые филлеры на основе шелка и гиалуроновой кислоты и способы их применения - Google Patents
Тканевые филлеры на основе шелка и гиалуроновой кислоты и способы их применения Download PDFInfo
- Publication number
- EA045185B1 EA045185B1 EA202090145 EA045185B1 EA 045185 B1 EA045185 B1 EA 045185B1 EA 202090145 EA202090145 EA 202090145 EA 045185 B1 EA045185 B1 EA 045185B1
- Authority
- EA
- Eurasian Patent Office
- Prior art keywords
- approximately
- cross
- silk
- spf
- kda
- Prior art date
Links
- 239000000945 filler Substances 0.000 title claims description 792
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 title claims description 441
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 title claims description 436
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 title claims description 436
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 128
- 108010022355 Fibroins Proteins 0.000 claims description 343
- 238000004132 cross linking Methods 0.000 claims description 237
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 claims description 181
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 claims description 181
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 claims description 181
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims description 73
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 claims description 59
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 claims description 54
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 50
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 claims description 41
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 claims description 38
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 claims description 37
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 36
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 30
- 230000004048 modification Effects 0.000 claims description 26
- 238000012986 modification Methods 0.000 claims description 26
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 25
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 claims description 25
- AOBIOSPNXBMOAT-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(oxiran-2-ylmethoxy)ethoxymethyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCCOCC1CO1 AOBIOSPNXBMOAT-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 24
- 239000004971 Cross linker Substances 0.000 claims description 23
- NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N Lidocaine Chemical compound CCN(CC)CC(=O)NC1=C(C)C=CC=C1C NNJVILVZKWQKPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- 230000003444 anaesthetic effect Effects 0.000 claims description 16
- 229960004194 lidocaine Drugs 0.000 claims description 16
- 230000003416 augmentation Effects 0.000 claims description 15
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 claims description 15
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 15
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 claims description 15
- 150000003333 secondary alcohols Chemical class 0.000 claims description 12
- 150000001335 aliphatic alkanes Chemical class 0.000 claims description 11
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims description 11
- 125000004185 ester group Chemical group 0.000 claims description 10
- 210000004207 dermis Anatomy 0.000 claims description 9
- 230000037303 wrinkles Effects 0.000 claims description 7
- 206010033546 Pallor Diseases 0.000 claims description 6
- 206010040925 Skin striae Diseases 0.000 claims description 6
- 208000031439 Striae Distensae Diseases 0.000 claims description 6
- 230000028709 inflammatory response Effects 0.000 claims description 6
- 230000036558 skin tension Effects 0.000 claims description 6
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000018044 dehydration Effects 0.000 claims description 2
- 238000006297 dehydration reaction Methods 0.000 claims description 2
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 claims 1
- 238000007788 roughening Methods 0.000 claims 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 691
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 427
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 307
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 307
- AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M lithium bromide Chemical compound [Li+].[Br-] AMXOYNBUYSYVKV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 305
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 300
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 274
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 242
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 92
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 87
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 82
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 80
- 108010013296 Sericins Proteins 0.000 description 76
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 70
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 56
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 53
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 52
- SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(oxiran-2-ylmethoxy)butoxymethyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCCCCOCC1CO1 SHKUUQIDMUMQQK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 48
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 47
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 44
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 42
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 33
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 31
- CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N Ascorbic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@H]1OC(=O)C(O)=C1O CIWBSHSKHKDKBQ-JLAZNSOCSA-N 0.000 description 28
- 229910000029 sodium carbonate Inorganic materials 0.000 description 28
- 235000017550 sodium carbonate Nutrition 0.000 description 28
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 26
- NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N hexane-1,6-diamine Chemical compound NCCCCCCN NAQMVNRVTILPCV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 24
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 23
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 22
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 22
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 21
- 239000000463 material Substances 0.000 description 20
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 20
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 19
- 238000009295 crossflow filtration Methods 0.000 description 17
- 239000010408 film Substances 0.000 description 16
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 16
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 16
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 16
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 16
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 16
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N citric acid Chemical compound OC(=O)CC(O)(C(O)=O)CC(O)=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 15
- -1 polytetramethylene Polymers 0.000 description 15
- UWFRVQVNYNPBEF-UHFFFAOYSA-N 1-(2,4-dimethylphenyl)propan-1-one Chemical compound CCC(=O)C1=CC=C(C)C=C1C UWFRVQVNYNPBEF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N D-erythro-ascorbic acid Natural products OCC1OC(=O)C(O)=C1O ZZZCUOFIHGPKAK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000004593 Epoxy Substances 0.000 description 14
- 229920002683 Glycosaminoglycan Polymers 0.000 description 14
- 229930003268 Vitamin C Natural products 0.000 description 14
- 230000003534 oscillatory effect Effects 0.000 description 14
- 235000019154 vitamin C Nutrition 0.000 description 14
- 239000011718 vitamin C Substances 0.000 description 14
- 150000004347 all-trans-retinol derivatives Chemical class 0.000 description 13
- 238000000502 dialysis Methods 0.000 description 13
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 13
- PLDLPVSQYMQDBL-UHFFFAOYSA-N 2-[[3-(oxiran-2-ylmethoxy)-2,2-bis(oxiran-2-ylmethoxymethyl)propoxy]methyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCC(COCC1OC1)(COCC1OC1)COCC1CO1 PLDLPVSQYMQDBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000700199 Cavia porcellus Species 0.000 description 12
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VYLDEYYOISNGST-UHFFFAOYSA-N bissulfosuccinimidyl suberate Chemical compound O=C1C(S(=O)(=O)O)CC(=O)N1OC(=O)CCCCCCC(=O)ON1C(=O)C(S(O)(=O)=O)CC1=O VYLDEYYOISNGST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N divinyl sulfone Chemical compound C=CS(=O)(=O)C=C AFOSIXZFDONLBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 12
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 11
- AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N Glycolic acid Chemical compound OCC(O)=O AEMRFAOFKBGASW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 10
- GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N Titan oxide Chemical compound O=[Ti]=O GWEVSGVZZGPLCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 229940061720 alpha hydroxy acid Drugs 0.000 description 10
- 150000001280 alpha hydroxy acids Chemical class 0.000 description 10
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 10
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 10
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D pentacalcium;hydroxide;triphosphate Chemical compound [OH-].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O XYJRXVWERLGGKC-UHFFFAOYSA-D 0.000 description 10
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 9
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 9
- 241000255789 Bombyx mori Species 0.000 description 8
- LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N Ethylene glycol Chemical compound OCCO LYCAIKOWRPUZTN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 8
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 8
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 8
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 8
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 230000008569 process Effects 0.000 description 8
- 150000001718 carbodiimides Chemical class 0.000 description 7
- 238000012937 correction Methods 0.000 description 7
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 7
- 125000003700 epoxy group Chemical group 0.000 description 7
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 7
- 239000012460 protein solution Substances 0.000 description 7
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 7
- LFKLPJRVSHJZPL-UHFFFAOYSA-N 1,2:7,8-diepoxyoctane Chemical compound C1OC1CCCCC1CO1 LFKLPJRVSHJZPL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- PGMKGZOHRBZSSQ-UHFFFAOYSA-N 2-[2-(oxiran-2-ylmethoxy)ethenoxymethyl]oxirane Chemical group C1OC1COC=COCC1CO1 PGMKGZOHRBZSSQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- XOBTWQWSFMZPNQ-UHFFFAOYSA-N 5-(oxiran-2-ylmethyl)-7-oxabicyclo[4.1.0]heptane Chemical compound C1CCC2OC2C1CC1CO1 XOBTWQWSFMZPNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 6-{[2-carboxy-4,5-dihydroxy-6-(phosphanyloxy)oxan-3-yl]oxy}-4,5-dihydroxy-3-phosphanyloxane-2-carboxylic acid Chemical compound O1C(C(O)=O)C(P)C(O)C(O)C1OC1C(C(O)=O)OC(OP)C(O)C1O FHVDTGUDJYJELY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 6
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 6
- 229920001661 Chitosan Polymers 0.000 description 6
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 6
- SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N Glutaraldehyde Chemical compound O=CCCCC=O SXRSQZLOMIGNAQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 229920002907 Guar gum Polymers 0.000 description 6
- 206010040954 Skin wrinkling Diseases 0.000 description 6
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 6
- IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N adipic acid dihydrazide Chemical compound NNC(=O)CCCCC(=O)NN IBVAQQYNSHJXBV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 6
- 235000010419 agar Nutrition 0.000 description 6
- 229940023476 agar Drugs 0.000 description 6
- 229940072056 alginate Drugs 0.000 description 6
- 235000010443 alginic acid Nutrition 0.000 description 6
- 229920000615 alginic acid Polymers 0.000 description 6
- 229940121363 anti-inflammatory agent Drugs 0.000 description 6
- 239000002260 anti-inflammatory agent Substances 0.000 description 6
- 235000010418 carrageenan Nutrition 0.000 description 6
- 239000000679 carrageenan Substances 0.000 description 6
- 229920001525 carrageenan Polymers 0.000 description 6
- 229940113118 carrageenan Drugs 0.000 description 6
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 6
- 229940045110 chitosan Drugs 0.000 description 6
- 229940094517 chondroitin 4-sulfate Drugs 0.000 description 6
- KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N chondroitin sulfate Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](OS(O)(=O)=O)[C@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C(O)=O)O1 KXKPYJOVDUMHGS-OSRGNVMNSA-N 0.000 description 6
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 6
- 239000000665 guar gum Substances 0.000 description 6
- 235000010417 guar gum Nutrition 0.000 description 6
- 229960002154 guar gum Drugs 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 6
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 6
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 6
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 6
- 229920001277 pectin Polymers 0.000 description 6
- 235000010987 pectin Nutrition 0.000 description 6
- 239000001814 pectin Substances 0.000 description 6
- 229960000292 pectin Drugs 0.000 description 6
- 210000004872 soft tissue Anatomy 0.000 description 6
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 6
- 229940032147 starch Drugs 0.000 description 6
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 6
- 229920001285 xanthan gum Polymers 0.000 description 6
- 239000000230 xanthan gum Substances 0.000 description 6
- 235000010493 xanthan gum Nutrition 0.000 description 6
- 229940082509 xanthan gum Drugs 0.000 description 6
- UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L zinc;1-(5-cyanopyridin-2-yl)-3-[(1s,2s)-2-(6-fluoro-2-hydroxy-3-propanoylphenyl)cyclopropyl]urea;diacetate Chemical compound [Zn+2].CC([O-])=O.CC([O-])=O.CCC(=O)C1=CC=C(F)C([C@H]2[C@H](C2)NC(=O)NC=2N=CC(=CC=2)C#N)=C1O UHVMMEOXYDMDKI-JKYCWFKZSA-L 0.000 description 6
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 5
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 5
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 5
- FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N Tartaric acid Natural products [H+].[H+].[O-]C(=O)C(O)C(O)C([O-])=O FEWJPZIEWOKRBE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 5
- 235000015165 citric acid Nutrition 0.000 description 5
- 230000037319 collagen production Effects 0.000 description 5
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 5
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 5
- 238000002513 implantation Methods 0.000 description 5
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 5
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 5
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 230000037394 skin elasticity Effects 0.000 description 5
- 239000011975 tartaric acid Substances 0.000 description 5
- 235000002906 tartaric acid Nutrition 0.000 description 5
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 5
- 239000004408 titanium dioxide Substances 0.000 description 5
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 5
- WTYYGFLRBWMFRY-UHFFFAOYSA-N 2-[6-(oxiran-2-ylmethoxy)hexoxymethyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCCCCCCOCC1CO1 WTYYGFLRBWMFRY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KUAUJXBLDYVELT-UHFFFAOYSA-N 2-[[2,2-dimethyl-3-(oxiran-2-ylmethoxy)propoxy]methyl]oxirane Chemical compound C1OC1COCC(C)(C)COCC1CO1 KUAUJXBLDYVELT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- ZJCCRDAZUWHFQH-UHFFFAOYSA-N Trimethylolpropane Chemical compound CCC(CO)(CO)CO ZJCCRDAZUWHFQH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 4
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 4
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- GPLRAVKSCUXZTP-UHFFFAOYSA-N diglycerol Chemical compound OCC(O)COCC(O)CO GPLRAVKSCUXZTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- GYZLOYUZLJXAJU-UHFFFAOYSA-N diglycidyl ether Chemical compound C1OC1COCC1CO1 GYZLOYUZLJXAJU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 238000005227 gel permeation chromatography Methods 0.000 description 4
- 150000002484 inorganic compounds Chemical class 0.000 description 4
- 229910010272 inorganic material Inorganic materials 0.000 description 4
- 150000002894 organic compounds Chemical class 0.000 description 4
- 229940059574 pentaerithrityl Drugs 0.000 description 4
- WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N pentaerythritol Chemical compound OCC(CO)(CO)CO WXZMFSXDPGVJKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 4
- 229920000223 polyglycerol Polymers 0.000 description 4
- 229920001451 polypropylene glycol Polymers 0.000 description 4
- 238000002834 transmittance Methods 0.000 description 4
- 229940113165 trimethylolpropane Drugs 0.000 description 4
- WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N (2s,3s,4r,5r,6r)-3-[(2s,3r,5s,6r)-3-acetamido-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxy-4,5,6-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](C(O)=O)O[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WCDDVEOXEIYWFB-VXORFPGASA-N 0.000 description 3
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 3
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 101710138657 Neurotoxin Proteins 0.000 description 3
- 241000909829 Samia ricini Species 0.000 description 3
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 3
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 3
- 229960005475 antiinfective agent Drugs 0.000 description 3
- 239000004599 antimicrobial Substances 0.000 description 3
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 3
- 230000008859 change Effects 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N diethylene glycol Chemical compound OCCOCCO MTHSVFCYNBDYFN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 229940125532 enzyme inhibitor Drugs 0.000 description 3
- 239000002532 enzyme inhibitor Substances 0.000 description 3
- 238000000105 evaporative light scattering detection Methods 0.000 description 3
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 3
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 3
- 229960003444 immunosuppressant agent Drugs 0.000 description 3
- 230000001861 immunosuppressant effect Effects 0.000 description 3
- 239000003018 immunosuppressive agent Substances 0.000 description 3
- 239000002581 neurotoxin Substances 0.000 description 3
- 231100000618 neurotoxin Toxicity 0.000 description 3
- 230000004962 physiological condition Effects 0.000 description 3
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 3
- 238000011045 prefiltration Methods 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- 229960002429 proline Drugs 0.000 description 3
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 3
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 3
- 238000001542 size-exclusion chromatography Methods 0.000 description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 3
- 239000000600 sorbitol Substances 0.000 description 3
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 3
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 3
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 3
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- 241000239290 Araneae Species 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000063299 Bacillus subtilis Species 0.000 description 2
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 2
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 2
- 102000010834 Extracellular Matrix Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010037362 Extracellular Matrix Proteins Proteins 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000194017 Streptococcus Species 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 2
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 2
- 230000002776 aggregation Effects 0.000 description 2
- 238000004220 aggregation Methods 0.000 description 2
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 2
- 229960003767 alanine Drugs 0.000 description 2
- VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N ammonium formate Chemical compound [NH4+].[O-]C=O VZTDIZULWFCMLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009697 arginine Nutrition 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003121 arginine Drugs 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960005261 aspartic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N calcium nitrate Chemical compound [Ca+2].[O-][N+]([O-])=O.[O-][N+]([O-])=O ZCCIPPOKBCJFDN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 2
- 229920006037 cross link polymer Polymers 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 2
- 229960002433 cysteine Drugs 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 2
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 2
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 2
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 2
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 2
- 238000010894 electron beam technology Methods 0.000 description 2
- 230000007515 enzymatic degradation Effects 0.000 description 2
- 210000002744 extracellular matrix Anatomy 0.000 description 2
- 238000001879 gelation Methods 0.000 description 2
- 210000004907 gland Anatomy 0.000 description 2
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 2
- 229960002989 glutamic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 2
- 235000004554 glutamine Nutrition 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960002743 glutamine Drugs 0.000 description 2
- 235000014304 histidine Nutrition 0.000 description 2
- 229960002885 histidine Drugs 0.000 description 2
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940014041 hyaluronate Drugs 0.000 description 2
- 230000003301 hydrolyzing effect Effects 0.000 description 2
- 235000014705 isoleucine Nutrition 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000005772 leucine Nutrition 0.000 description 2
- 229960003136 leucine Drugs 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 239000007791 liquid phase Substances 0.000 description 2
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 2
- 235000018977 lysine Nutrition 0.000 description 2
- 229960003646 lysine Drugs 0.000 description 2
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 2
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 2
- 229960004452 methionine Drugs 0.000 description 2
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 2
- 235000008729 phenylalanine Nutrition 0.000 description 2
- 229960005190 phenylalanine Drugs 0.000 description 2
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 2
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 2
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 2
- 235000013930 proline Nutrition 0.000 description 2
- 229960001153 serine Drugs 0.000 description 2
- 235000004400 serine Nutrition 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- 235000008521 threonine Nutrition 0.000 description 2
- 229960002898 threonine Drugs 0.000 description 2
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 2
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 2
- 229960004799 tryptophan Drugs 0.000 description 2
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960004295 valine Drugs 0.000 description 2
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 2
- RGHNJXZEOKUKBD-NRXMZTRTSA-N (2r,3r,4r,5s)-2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanoic acid Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C(O)=O RGHNJXZEOKUKBD-NRXMZTRTSA-N 0.000 description 1
- XLVSIIHGQYACPK-UHFFFAOYSA-N 5-(oxiran-2-yl)-4-(oxiran-2-ylmethyl)pentane-1,4-diol Chemical compound C1OC1CC(O)(CCCO)CC1CO1 XLVSIIHGQYACPK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 101710132601 Capsid protein Proteins 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010016654 Fibrosis Diseases 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 1
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 229930182821 L-proline Natural products 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 102000016611 Proteoglycans Human genes 0.000 description 1
- 108010067787 Proteoglycans Proteins 0.000 description 1
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 1
- 229920002385 Sodium hyaluronate Polymers 0.000 description 1
- 229920001872 Spider silk Polymers 0.000 description 1
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 1
- ZWIJWDCFGVKPGY-RTRLPJTCSA-N [[(3R,4R,5S,6R)-2,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-3-yl]amino] acetate Chemical group C(C)(=O)ON[C@H]1C(O)O[C@@H]([C@H]([C@@H]1O)O)CO ZWIJWDCFGVKPGY-RTRLPJTCSA-N 0.000 description 1
- 230000009102 absorption Effects 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 230000010398 acute inflammatory response Effects 0.000 description 1
- 239000000853 adhesive Substances 0.000 description 1
- 230000001070 adhesive effect Effects 0.000 description 1
- 208000030961 allergic reaction Diseases 0.000 description 1
- AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N alpha-D-glucuronic acid Chemical compound O[C@H]1O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O AEMOLEFTQBMNLQ-WAXACMCWSA-N 0.000 description 1
- 229910000147 aluminium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 1
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 1
- 239000012491 analyte Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 238000000149 argon plasma sintering Methods 0.000 description 1
- 210000001367 artery Anatomy 0.000 description 1
- 229920002988 biodegradable polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000004621 biodegradable polymer Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000002051 biphasic effect Effects 0.000 description 1
- 230000023555 blood coagulation Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 1
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 1
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000011088 calibration curve Methods 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 125000003178 carboxy group Chemical group [H]OC(*)=O 0.000 description 1
- 125000002843 carboxylic acid group Chemical group 0.000 description 1
- 238000005266 casting Methods 0.000 description 1
- 238000006555 catalytic reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 1
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 210000002808 connective tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 150000003950 cyclic amides Chemical class 0.000 description 1
- 125000004122 cyclic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011026 diafiltration Methods 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 230000006862 enzymatic digestion Effects 0.000 description 1
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 210000000981 epithelium Anatomy 0.000 description 1
- 125000001033 ether group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 210000001508 eye Anatomy 0.000 description 1
- 239000011552 falling film Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 230000004761 fibrosis Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007863 gel particle Substances 0.000 description 1
- 239000003193 general anesthetic agent Substances 0.000 description 1
- 229960002449 glycine Drugs 0.000 description 1
- 208000010758 granulomatous inflammation Diseases 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000000774 hypoallergenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000002596 lactones Chemical class 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 238000012417 linear regression Methods 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 1
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 239000000178 monomer Substances 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000017074 necrotic cell death Effects 0.000 description 1
- 210000005036 nerve Anatomy 0.000 description 1
- 230000000269 nucleophilic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 239000013618 particulate matter Substances 0.000 description 1
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 230000002028 premature Effects 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 238000002271 resection Methods 0.000 description 1
- 239000012488 sample solution Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000011080 single-pass tangential flow filtration Methods 0.000 description 1
- 229940010747 sodium hyaluronate Drugs 0.000 description 1
- YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N sodium;(2s,3s,4s,5r,6r)-6-[(2s,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2-[(2s,3s,4r,5r,6r)-6-[(2r,3r,4r,5s,6r)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2- Chemical compound [Na+].CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 YWIVKILSMZOHHF-QJZPQSOGSA-N 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 238000012430 stability testing Methods 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000008961 swelling Effects 0.000 description 1
- 210000001179 synovial fluid Anatomy 0.000 description 1
- 210000002435 tendon Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 238000009827 uniform distribution Methods 0.000 description 1
- 229940124549 vasodilator Drugs 0.000 description 1
- 239000003071 vasodilator agent Substances 0.000 description 1
- 229920003169 water-soluble polymer Polymers 0.000 description 1
Description
Перекрестная ссылка на родственные заявки
По заявке на настоящий патент испрашивается приоритет по временной патентной заявке США № 62/525131, поданной 26 июня 2017 г., и временной патентной заявке США № 62/641095, поданной 9 марта 2018 г., включенным в настоящее описание в качестве ссылок в полном объеме.
Уровень техники
Шелк является природным полимером, продуцируемым различными насекомыми и пауками. Шелк содержит фибриллярный коровый белок фиброин шелка и клееобразное покрытие, состоящее из нефибриллярного белка серицина. На протяжении истории шелк исследовали для использования в области медицины. Гиалуроновая кислота является гликозаминогликаном, распространенным по всему организму и обнаруживаемым в соединительной и эпителиальной тканях. Из-за ее биосовместимости и структурных преимуществ она является полезным компонентом в медицинских устройствах и имплантируемых материалах.
Мягкие ткани организма человека частично обязаны своей структурой внеклеточному матриксу, включающему коллаген, эластин и гликозаминогликан. Могут возникать дефекты мягких тканей, искажающие, деформирующие или иным образом изменяющие их структуры. Такую структуру можно восстанавливать с использованием тканевых филлеров, которые могут накапливаться в участке дефекта, исправляя его. Например, тканевые филлеры можно помещать в участок лицевой морщины для ее исправления.
Однако, в этой области необходимы новые тканевые филлеры, с помощью которых можно исправлять ряд дефектов тканей, одновременно обеспечивая их настраиваемые свойства, которые могут сделать возможной адаптацию тканевого филлера к конкретному дефекту ткани.
Сущность изобретения
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, содержащему: гиалуроновую кислоту (НА) и анестезирующее средство, фиброин шелка (SPF), где часть НА или часть фиброина шелка (SPF), модифицируют или сшивают с помощью одной или более линкерных молекул, содержащих одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта, где линкерные молекулы ковалентно присоединены к НА или SPF, где SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 250 кДа, где модифицированные или перекрестно-сшитые НА или SPF содержат линкер или перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую цепь полиэтиленгликоля (PEG), где модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства и/или перекрестно-сшивающего предшественника, представляющего собой диглицидиловй простой эфир полиэтиленгликоля.
В некоторых вариантах осуществления количество перекрестно-сшитой НА в мас./мас.%, относительно общего количества НА составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитой НА составляет от приблизительно 1% до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитой НА составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизи
- 1 045185 тельно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитой НА составляет от приблизительно 1% до приблизительно 15%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестносшитой НА составляет одно или более из приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14% и приблизительно 15%.
В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитая НА содержит перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую цепь полиэтиленгликоля (PEG). В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство и/или перекрестно-сшивающий предшественник содержит эпокси-группу. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестносшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства, выбранного из группы, состоящей из полиэпокси-линкера, диэпокси-линкера, полиэпокси-PEG, диэпоксиPEG, полиглицидил-PEG, диглицидил-PEG, полиакрилат-PEG, диакрила-PEG, 1,4-бис(2,3эпоксипропокси)бутана, 1,4-бисглицидилоксибутана, дивинилсульфона (DVS), диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), УФ-излучения, глутаральдегида, 1,2-бис(2,3-эпоксипропокси)этилена (EGDGE), 1,2,7,8-диэпоксиоктана (DEO), бискарбодиимида (BCDI), тетраглицидилового простого эфира пентаэритрита (PETGE), дигидразида адипиновой кислоты (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберата (BS), гексаметилендиамина (HMDA), 1-(2,3-эпоксипропил)-2,3-эпоксициклогексана, карбодиимида и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием полифункционального эпокси-соединения, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), диглицидилового простого эфира этиленгликоля (EGDGE), диглицидилового простого эфира 1,6-гександиола, диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диглицидилового простого эфира полипропиленгликоля, диглицидилового простого эфира политетраметиленгликоля, диглицидилового простого эфира неопентилгликоля, полиглицидилового простого эфира полиглицерина, полиглицидилового простого эфира диглицерина, полиглицидилового простого эфира глицерина, полиглицидилового простого эфира три-метилолпропана, полиглицидилового простого эфира пентаэритрита и полиглицидилового простого эфира сорбита. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства и/или перекрестно-сшивающего предшественника, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диэпокси-PEG, диглицидилового простого эфира PEG, бис-глицидилового простого эфира полиоксиэтилена, PEGDE и PEGDGE. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, имеющего среднюю Mn приблизительно 500, приблизительно 1000, приблизительно 2000 или приблизительно 6000. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, содержащего от 2 до 25 групп этиленгликоля. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестносшивающего средства и/или перекрестно-сшивающего предшественника, выбранного из группы, состоящей из полиэпокси-линкера с фиброином шелка, диэпокси-линкера с фиброином шелка, полиэпоксилинкера с фрагментом фиброина шелка, диэпокси-линкера с фрагментом фиброина шелка, полиглицидил-линкера с фиброином шелка, диглицидил-линкера с фиброином шелка, полиглицидил-линкера с фрагментом фиброина шелка и диглицидил-линкера с фрагментом фиброина шелка.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевому филлеру, дополнительно содержащему органическое соединение и/или неорганическое соединение. В некоторых вариантах осуществления неорганическое соединение содержит гидроксиапатит кальция. В некоторых вариантах осуществления гидроксиапатит кальция составляют в виде частиц, имеющих диаметр от приблизительно
- 2 045185 мкм до приблизительно 100 мкм, от приблизительно 1 мкм до приблизительно 10 мкм, от приблизительно 2 мкм до приблизительно 12 мкм, от приблизительно 3 мкм до приблизительно 10 мкм, от приблизительно 4 мкм до приблизительно 15 мкм, от приблизительно 8 мкм до приблизительно 12 мкм, от приблизительно 5 мкм до приблизительно 10 мкм, от приблизительно 6 мкм до приблизительно 12 мкм, от приблизительно 7 мкм до приблизительно 20 мкм, от приблизительно 9 мкм до приблизительно 18 мкм или от приблизительно 10 мкм до приблизительно 25 мкм. В некоторых вариантах осуществления концентрация гидроксиапатита кальция составляет от приблизительно 0,001% до приблизительно 5%. В некоторых вариантах осуществления концентрация гидроксиапатита кальция составляет приблизительно 0,001%, приблизительно 0,002%, приблизительно 0,003%, приблизительно 0,004%, приблизительно
0,005%, приблизительно 0,006%, приблизительно 0,007%, приблизительно 0,008%, приблизительно
0,009%, приблизительно 0,01%, приблизительно 0,011%, приблизительно 0,012%, приблизительно
0,013%, приблизительно 0,014%, приблизительно 0,015%, приблизительно 0,016%, приблизительно
0,017%, приблизительно 0,018%, приблизительно 0,019% или приблизительно 0,02%. В некоторых вариантах осуществления концентрация гидроксиапатита кальция составляет приблизительно 0,05%, приблизительно 0,1%, приблизительно 0,15%, приблизительно 0,2%, приблизительно 0,25%, приблизительно 0,3%, приблизительно 0,35%, приблизительно 0,4%, приблизительно 0,45%, приблизительно 0,5%, приблизительно 0,55%, приблизительно 0,6%, приблизительно 0,65%, приблизительно 0,7%, приблизительно 0,75%, приблизительно 0,8%, приблизительно 0,85%, приблизительно 0,9%, приблизительно 0,95%, приблизительно 1%, приблизительно 1,05%, приблизительно 1,1%, приблизительно 1,15%, приблизительно 1,2%, приблизительно 1,25%, приблизительно 1,3%, приблизительно 1,35%, приблизительно 1,4%, приблизительно 1,45%, приблизительно 1,5%, приблизительно 1,55%, приблизительно 1,6%, приблизительно 1,65%, приблизительно 1,7%, приблизительно 1,75%, приблизительно 1,8%, приблизительно 1,85%, приблизительно 1,9%, приблизительно 1,95% или приблизительно 2%. В некоторых вариантах осуществления органическое соединение содержит аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из глицина, Lпролина, аланина, аргинина, аспарагина, аспарагиновой кислоты, цистеина, глутаминовой кислоты, глутамина, гистидина, изолейцина, лейцина, лизина, метионина, фенилаланина, пролина, серина, треонина, триптофана, тирозина и валина.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевому филлеру, содержащему НА, где НА получают из бактерий Streptococcus или бактерий Bacillus subtilis.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, содержащему: гликозаминогликан, выбранный из группы, состоящей из гиалуроновой кислоты (НА), карбоксиметилцеллюлозы (CMC), крахмала, альгината, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, ксантановой камеди, хитозана, пектина, агара, каррагенана и гуаровой камеди; и анестезирующее средство; где часть гликозаминогликана перекрестно сшита перекрестно-сшивающими молекулами, содержащим одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта; и где перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства. В некоторых вариантах осуществления анестезирующее средство является лидокаином. В некоторых вариантах осуществления концентрация анестезирующего средства в тканевом филлере составляет от приблизительно 0,001% до приблизительно 5%. В некоторых вариантах осуществления концентрация лидокаина в тканевом филлере составляет приблизительно 0,3%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, содержащему: гликозаминогликан, выбранный из группы, состоящей из гиалуроновой кислоты (НА), карбоксиметилцеллюлозы (CMC), крахмала, альгината, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, ксантановой камеди, хитозана, пектина, агара, каррагенана и гуаровой камеди; и анестезирующее средство; где часть гликозаминогликана перекрестно сшита перекрестно-сшивающими молекулами, содержащими одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта; и где перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства; где тканевой филлер представляет собой гель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер представляет собой гидрогель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация НА в тканевом филлере составляет от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация НА в тканевом филлере составляет приблизительно 15 мг/мл, приблизительно 16 мг/мл, 17 мг/мл, приблизительно 18 мг/мл, приблизительно 19 мг/мл, приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 21 мг/мл, приблизительно 22 мг/мл, приблизительно 23 мг/мл, приблизительно 24 мг/мл, приблизительно 25 мг/мл, приблизительно 26 мг/мл, приблизительно 27 мг/мл, приблизительно 28 мг/мл, приблизительно 29 мг/мл или приблизительно 30 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация перекрестно-сшитой НА в тканевом филлере составляет от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация перекрестно-сшитой НА в тканевом филлере составляет приблизительно 15 мг/мл, приблизительно 16 мг/мл, приблизительно 17 мг/мл, приблизительно 18 мг/мл, приблизительно 19 мг/мл, приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 21 мг/мл, приблизительно 22 мг/мл, приблизительно
- 3 045185 мг/мл, приблизительно 24 мг/мл, приблизительно 25 мг/мл, приблизительно 26 мг/мл, приблизительно 27 мг/мл, приблизительно 28 мг/мл, приблизительно 29 мг/мл или приблизительно 30 мг/мл.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, содержащему: гликозаминогликан, выбранный из группы, состоящей из гиалуроновой кислоты (НА), карбоксиметилцеллюлозы (CMC), крахмала, альгината, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, ксантановой камеди, хитозана, пектина, агара, каррагенана и гуаровой камеди; и анестезирующее средство; где часть гликозаминогликана перекрестно сшита перекрестно-сшивающими молекулами, содержащими одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта; и где перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства; тканевому филлеру, содержащему белок шелка или фрагменты белка шелка (SPF). В некоторых вариантах осуществления белок шелка является фиброином шелка. В некоторых вариантах осуществления белок шелка является фиброином шелка, по существу, не содержащим серицин. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют низкую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления фрагменты белка шелка (SPF) имеют полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют степень кристалличности до 60%. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно сшитой. В некоторых вариантах осуществления количество перекрестно-сшитых SPF в мас./мас.%, относительно общего количества SPF составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитых SPF составляет от приблизительно 1% до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитых SPF составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизи
- 4 045185 тельно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитых SPF составляет от приблизительно 1% до приблизительно 15%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестносшитых SPF представляет собой одно или более из приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14% и приблизительно 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, содержащему: гликозаминогликан, выбранный из группы, состоящей из гиалуроновой кислоты (НА), карбоксиметилцеллюлозы (CMC), крахмала, альгината, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, ксантановой камеди, хитозана, пектина, агара, каррагенана и гуаровой камеди; и анестезирующее средство; где часть гликозаминогликана перекрестно сшита перекрестно-сшивающими молекулами, содержащими одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта; и где перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства; тканевому филлеру, содержащему белок шелка или фрагменты белка шелка (SPF), где часть SPF перекрестно сшита. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитые SPF содержат перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую алкановую или алкильную цепь и/или эфирную группу. В некоторых вариантах осуществления перекрестносшитые SPF содержат перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую цепь полиэтиленгликоля (PEG). В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитые SPF содержат перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую вторичный спирт. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство и/или перекрестно-сшивающий предшественник содержит эпокси-группу. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства, выбранного из группы, состоящей из полиэпокси-линкера, диэпокси-линкера, полиэпокси-PEG, диэпокси-PEG, полиглицидилPEG, диглицидил-PEG, полиакрилат-PEG, диакрилат-PEG, 1,4-бис(2,3-эпоксипропокси)бутана, 1,4бисглицидилоксибутана, дивинилсульфона (DVS), диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), УФ-излучения, глутаральдегида, 1,2-бис(2,3-эпоксипропокси)этилена (EGDGE), 1,2,7,8диэпоксиоктана (DEO), бискарбодиимида (BCDI), тетраглицидилового простого эфира пентаэритрита (PETGE), дигидразида адипиновой кислоты (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберата (BS), гексаметилендиамина (HMDA), 1-(2,3-эпоксипропил)-2,3-эпоксициклогексана, карбодиимида и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием полифункционального эпокси-соединения, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), диглицидилового простого эфира этиленгликоля (EGDGE), диглицидилового простого эфира 1,6-гександиола, диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диглицидилового простого эфира полипропиленгликоля, диглицидилового простого эфира политетраметиленгликоля, диглицидилового простого эфира неопентилгликоля, полиглицидилового простого эфира полиглицерина, полиглицидилового простого эфира диглицерина, полиглицидилового простого эфира глицерина, полиглицидилового простого эфира три-метилолпропана, полиглицидилового простого эфира пентаэритрита и полиглицидилового простого эфира сорбита. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства и/или перекрестносшивающего предшественника, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диэпокси-PEG, диглицидилового простого эфира PEG, бис-глицидилового простого эфира полиоксиэтилена, PEGDE и PEGDGE. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, имеющего среднюю Mn приблизительно 500, приблизительно 1000, приблизительно 2000 или приблизительно 6000. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, содержащего от 2 до 25 групп этиленгликоля. В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства и/или перекрестно-сшивающего предшественника, выбранных из группы, состоящей из полиэпокси
- 5 045185 линкера из фиброина шелка, диэпокси-линкера из фиброина шелка, полиэпокси-линкера из фрагмента фиброина шелка, диэпокси-линкера из фрагмента фиброина шелка, полиглицидил-линкера из фиброина шелка, диглицидил-линкера из фиброина шелка, полиглицидил-линкера из фрагмента фиброина шелка и диглицидил-линкера из фрагмента фиброина шелка. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с НА. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер представляет собой гель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер представляет собой гидрогель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация SPF в тканевом филлере составляет от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация SPF в тканевом филлере составляет приблизительно 0,1 мг/мл, приблизительно 0,5 мг/мл, приблизительно 1 мг/мл, приблизительно 1,5 мг/мл, приблизительно 2 мг/мл, приблизительно 2,5 мг/мл, приблизительно 3 мг/мл, приблизительно 3,5 мг/мл, приблизительно 4 мг/мл, приблизительно 4,5 мг/мл, приблизительно 5 мг/мл, приблизительно 5,5 мг/мл, приблизительно 6 мг/мл, приблизительно 6,5 мг/мл, приблизительно 7 мг/мл, приблизительно 7,5 мг/мл, приблизительно 8 мг/мл, приблизительно 8,5 мг/мл, приблизительно 9 мг/мл, приблизительно 9,5 мг/мл, приблизительно 10 мг/мл, приблизительно 10,5 мг/мл, приблизительно 11 мг/мл, приблизительно 11,5 мг/мл, приблизительно 12 мг/мл, приблизительно 12,5 мг/мл, приблизительно 13 мг/мл, приблизительно 13,5 мг/мл, приблизительно 14 мг/мл, приблизительно 14,5 мг/мл или приблизительно 15 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация перекрестно-сшитого SPF в тканевом филлере составляет от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация перекрестно-сшитого SPF в тканевом филлере составляет приблизительно 0,1 мг/мл, приблизительно 0,5 мг/мл, приблизительно 1 мг/мл, приблизительно 1,5 мг/мл, приблизительно 2 мг/мл, приблизительно 2,5 мг/мл, приблизительно 3 мг/мл, приблизительно 3,5 мг/мл, приблизительно 4 мг/мл, приблизительно 4,5 мг/мл, приблизительно 5 мг/мл, приблизительно 5,5 мг/мл, приблизительно 6 мг/мл, приблизительно 6,5 мг/мл, приблизительно 7 мг/мл, приблизительно 7,5 мг/мл, приблизительно 8 мг/мл, приблизительно 8,5 мг/мл, приблизительно 9 мг/мл, приблизительно 9,5 мг/мл, приблизительно 10 мг/мл, приблизительно 10,5 мг/мл, приблизительно 11 мг/мл, приблизительно 11,5 мг/мл, приблизительно 12 мг/мл, приблизительно 12,5 мг/мл, приблизительно 13 мг/мл, приблизительно 13,5 мг/мл, приблизительно 14 мг/мл, приблизительно 14,5 мг/мл или приблизительно 15 мг/мл.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, содержащему: гликозаминогликан, выбранный из группы, состоящей из гиалуроновой кислоты (НА), карбоксиметилцеллюлозы (CMC), крахмала, альгината, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, ксантановой камеди, хитозана, пектина, агара, каррагенана и гуаровой камеди; и анестезирующее средство; где часть гликозаминогликана перекрестно сшита перекрестно-сшивающими молекулами, содержащими одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта; и где перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства; тканевому филлеру, необязательно, содержащему белок шелка или фрагменты белка шелка (SPF), где часть SPF перекрестно сшита. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является дермальным филлером. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является инъецируемым. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') от приблизительно 25 Па до приблизительно 1500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') приблизительно 25 Па, приблизительно 26 Па, приблизительно 27 Па, приблизительно 28 Па, приблизительно 29 Па, приблизительно 30 Па, приблизительно 31 Па, приблизительно 32 Па, приблизительно 33 Па, приблизительно 34 Па, приблизительно 35 Па, приблизительно 36 Па, приблизительно 37 Па, приблизительно 38 Па, приблизительно 39 Па, приблизительно 40 Па, приблизительно 41 Па, приблизительно 42 Па, приблизительно 43 Па, приблизительно 44 Па, приблизительно 45 Па, приблизительно 46 Па, приблизительно 47 Па, приблизительно 48 Па, приблизительно 49 Па, приблизительно 50 Па, приблизительно 51 Па, приблизительно 52 Па, приблизительно 53 Па, приблизительно 54 Па, приблизительно 55 Па, приблизительно 56 Па, приблизительно 57 Па, приблизительно 58 Па, приблизительно 59 Па, приблизительно 60 Па, приблизительно 61 Па, приблизительно 62 Па, приблизительно 63 Па, приблизительно 64 Па, приблизительно 65 Па, приблизительно 66 Па, приблизительно 67 Па, приблизительно 68 Па, приблизительно 69 Па, приблизительно 70 Па, приблизительно 71 Па, приблизительно 72 Па, приблизительно 73 Па, приблизительно 74 Па, приблизительно 75 Па, приблизительно 76 Па, приблизительно 77 Па, приблизительно 78 Па, приблизительно 79 Па, приблизительно 80 Па, приблизительно 81 Па, приблизительно 82 Па, приблизительно 83 Па, приблизительно 84 Па, приблизительно 85 Па, приблизительно 86 Па, приблизительно 87 Па, приблизительно 88 Па, приблизительно 89 Па, приблизительно 90 Па, приблизительно 91 Па, приблизительно 92 Па, приблизительно 93 Па, приблизительно 94 Па, приблизительно 95 Па, приблизительно 96 Па, приблизительно 97 Па, приблизительно 98 Па, приблизительно 99 Па, приблизительно 100 Па, приблизительно 101 Па, приблизительно 102 Па, приблизительно 103 Па, приблизительно 104 Па, приблизительно 105 Па, приблизительно 106 Па, приблизительно 107 Па, приблизительно
- 6 045185
108 Па, приблизительно 109 Па, приблизительно 110 Па, приблизительно 111 Па, приблизительно 112 Па, приблизительно 113 Па, приблизительно 114 Па, приблизительно 115 Па, приблизительно 116 Па, приблизительно 117 Па, приблизительно 118 Па, приблизительно 119 Па, приблизительно 120 Па, приблизительно 121 Па, приблизительно 122 Па, приблизительно 123 Па, приблизительно 124 Па или приблизительно 125 Па. В некоторых вариантах осуществления в настоящем описании G' измеряют посредством колебательного напряжения от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 1 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 5 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет комплексную вязкость от приблизительно 1 Па-с до приблизительно 10 Па-с. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет комплексную вязкость приблизительно 1 Па-с, приблизительно 1,5 Па-с, приблизительно 2 Па-с, приблизительно 2,5 Па-с, приблизительно 3 Па-с, приблизительно 3,5 Па-с, приблизительно 4 Па-с, приблизительно 4,5 Па-с, приблизительно 5 Па-с, приблизительно 5,5 Па-с, приблизительно 6 Па-с, приблизительно 6,5 Па-с, приблизительно 7 Па-с, приблизительно 7,5 Па-с, приблизительно 8 Па-с, приблизительно 8,5 Па-с, приблизительно 9 Па-с, приблизительно 9,5 Па-с или приблизительно 10 Па-с. В некоторых вариантах осуществления комплексную вязкость измеряют посредством колебательного напряжения от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления комплексную вязкость измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 1 Гц. В некоторых вариантах осуществления комплексную вязкость измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 5 Гц.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения состояния у нуждающегося в этом индивидуума и/или способу косметического лечения нуждающегося в этом индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества биосовместимого тканевого филлера, содержащего: гликозаминогликан, выбранный из группы, состоящей из гиалуроновой кислоты (НА), карбоксиметилцеллюлозы (CMC), крахмала, альгината, хондроитин-4-сульфата, хондроитин-6-сульфата, ксантановой камеди, хитозана, пектина, агара, каррагенана и гуаровой камеди; и анестезирующее средство; где часть гликозаминогликана перекрестно сшита перекрестно-сшивающими молекулами, содержащими одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта; и где перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства; тканевой филлер, необязательно, содержащий белок шелка или фрагменты белка шелка (SPF), где часть SPF перекрестно сшита. В некоторых вариантах осуществления состояние является состоянием кожи. В некоторых вариантах осуществления состояние кожи выбрано из группы, состоящей из дегидратация кожи, недостатка эластичности кожи, огрубления кожи, недостатка натяжения кожи, растяжек на коже, бледности кожи, впадин на коже, впалых щек, тонких губ, ретроорбитального дефекта, складки на лице и морщин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер вводят в область дермы индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию, реконструкцию, лечение заболевания, лечение нарушения, коррекцию дефекта или несовершенства части или области тела. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер устойчив к биодеградации, биоэрозии, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, приблизительно 7 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 21 дня, приблизительно 28 дней, приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев или приблизительно 6 месяцев. В некоторых вариантах осуществления введение тканевого филлера индивидууму приводит к сниженному воспалительному ответу по сравнению с воспалительным ответом, индуцируемым контрольным тканевым филлером, содержащим полисахарид и лидокаин, где контрольный тканевой филлер не включает фрагменты белка шелка (SPF). В некоторых вариантах осуществления введение тканевого филлера индивидууму приводит к повышенной продукции коллагена по сравнению с продукцией коллагена, индуцируемой контрольным тканевым филлером, содержащим полисахарид и лидокаин, где контрольный тканевой филлер не включает фрагменты белка шелка (SPF).
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В варианте осуществления настоящее изобретение включает тканевые филлеры, которые можно получать из шелка и гиалуроновой кислоты.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF) со средней молекулярной массой в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF) со средней
- 7 045185 молекулярной массой в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 80 кДа до приблизительно 150 кДа.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), которые на приблизительно 0-100% перекрестно сшиты с SPF. В некоторых вариантах осуществления SPF перекрестно сшивали с SPF с использованием сшивающих средств, таких как BDDE, или одного из других перекрестно-сшивающих средств, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет до приблизительно 100%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и гиалуроновую кислоту (НА), где приблизительно от 0% до 100% SPF перекрестно сшиты с SPF, и SPF перекрестно сшивали с SPF с использованием перекрестно-сшивающего средства, такого как BDDE, или одного из других перекрестно-сшивающих средств, представленных в настоящем описании, и степень перекрестной сшивки SPF составляет до приблизительно 100%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и гиалуроновую кислоту (НА), где до 100% НА перекрестно сшито с НА с использованием перекрестно-сшивающего средства, такого как BDDE, или одного из других перекрестносшивающих средств, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления до приблизительно 100% SPF перекрестно сшито с SPF, где SPF перекрестно сшивали с SPF с использованием перекрестно-сшивающего средства, такого как BDDE, или одного из других перекрестносшивающих средств, представленных в настоящем описании, и степень перекрестной сшивки SPF составляет до приблизительно 100%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и гиалуроновую кислоту (НА), где от 0% до 100% НА не является перекрестносшитой. В некоторых вариантах осуществления до приблизительно 100% SPF являются перекрестносшитыми, где SPF перекрестно сшивали с использованием перекрестно-сшивающего средства, такого как BDDE, или одного из других перекрестно-сшивающих средств, представленных в настоящем описании, и степень перекрестной сшивки SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления вся НА не является перекрестно-сшитой.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и гиалуроновую кислоту (НА), где от 0% до 100% SPF перекрестно сшито с НА. В некоторых вариантах осуществления SPF и НА перекрестно сшивали с использованием перекрестносшивающего средства, такого как BDDE, или одного из сшивающих средств, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки SPF-HA составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления до 100% НА перекрестно сшито с НА. В некоторых вариантах осуществления НА перекрестно сшивали с НА с использованием перекрестносшивающего средства, такого как BDDE, или одного из сшивающих средств, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере 0,1% НА не является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления вся НА не является перекрестно-сшитой.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и гиалуроновую кислоту (НА), где по меньшей мере 0,1% НА не является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления до приблизительно 100% SPF являются перекрестно-сшитыми, где SPF перекрестно сшивали с использованием перекрестно-сшивающего средства, такого как BDDE, или одного из других перекрестно-сшивающих средств, представленных в настоящем описании, и степень перекрестной сшивки SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления вся НА не является перекрестно-сшитой.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и гиалуроновую кислоту (НА), где по меньшей мере 0,1% SPF перекрестно сшито с НА. В некоторых вариантах осуществления SPF и НА перекрестно сшивали с использованием перекрестно-сшивающего средства, такого как BDDE, или одного из перекрестно-сшивающих средств, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки SPF-HA составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления до 100% НА пере
- 8 045185 крестно сшито с НА. В некоторых вариантах осуществления НА перекрестно сшивали с НА с использованием перекрестно-сшивающего средства, такого как BDDE, или одного из перекрестно-сшивающих средств, представленных в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления по меньшей мере 0,1% НА не является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления вся НА не является перекрестно-сшитой.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, где SPF, по существу, не содержит серицин.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому гелевому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому гидрогелевому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, полисахарид и воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, где SPF имеют степень кристалличности от приблизительно 0% до приблизительно 60%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, и дополнительно включающему активное средство. В некоторых вариантах осуществления активное средство может являться ингибитором фермента, анестезирующим средством, лекарственным нейротоксином, антиоксидантом, противоинфекционным средством, вазодилататорами, отражающим средством, противовоспалительным средством, блокатором ультрафиолета (УФ), красителем, гормоном, иммуносупрессором или противовоспалительным средством. В одном из вариантов осуществления анестезирующее средство является лидокаином.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к инъецируемому биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 Гц. В одном из вариантов осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 1 Гц.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу получения биосовместимого тканевого филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, включающему получение раствора SPF и добавление к раствору усилителя желирования, который может являться любым донором протонов.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу получения биосовместимого тканевого филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, включающему получение раствора SPF и подвергание раствора механическому возбуждению.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу лечения состояния у нуждающегося в этом индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества биосовместимого тканевого филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид. В некоторых вариантах осуществления состояние является состоянием кожи. В некоторых вариантах осуществления состояние кожи может являться дегидратацией кожи, недостатком эластичности кожи, огрублением кожи, недостатком натяжения кожи, растяжками на коже, бледностью кожи, впадинами на коже, впалыми щеками, впалой височной областью, тонкими губами, ретроорбитальным дефектом, складками на лице или морщинами.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к способу косметического лечения нуждающегося в этом индивидуума, включающему введение индивидууму эффективного количества биосовместимого тканевого филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид.
В некоторых вариантах осуществления способы по изобретению включают введение биосовместимого тканевого филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, в область дермы индивидуума.
В одном из вариантов осуществления способ по изобретению, включающий введение биосовмести
- 9 045185 мого тканевого филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, может представлять собой аугментацию, реконструкцию, лечение заболевания, лечение нарушения, коррекцию дефекта или несовершенства части или области тела.
В одном из вариантов осуществления способ по изобретению, включающий введение биосовместимого тканевого филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, может представлять собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица.
В одном из вариантов осуществления биосовместимый тканевой филлер, включающий фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, вводимый способом по изобретению, устойчив к биодеградации, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней после введения.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестно-сшивающие молекулы, например, перекрестно-сшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно-сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно-сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестносшивающие молекулы, например, перекрестно-сшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некото
- 10 045185 рых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду.
В некоторых вариантах осуществления количество перекрестно-сшитого SPF в мас./мас.%, относительно общего количества SPF составляет до приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%.
В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки SPF составляет до приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%,
- 11 045185 приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%.
В некоторых вариантах осуществления количество перекрестно-сшитой НА в мас./мас.%, относительно общего количества НА составляет до приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%.
В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки НА составляет до приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает пе
- 12 045185 рекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестносшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство и/или перекрестно-сшивающий предшественник содержат эпокси-группу. В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство и/или перекрестно-сшивающий предшественник содержат эпоксигруппу. В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестносшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства, выбранного из группы, состоящей из 1,4-бис(2,3-эпоксипропокси)бутана, 1,4-бисглицидилоксибутана, дивинилсульфона (DVS), диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), УФ-излучения, глутаральдегида, 1,2-бис(2,3-эпоксипропокси)этилена (EGDGE), 1,2,7,8-диэпоксиоктана (DEO), бискарбодиимида (BCDI), тетраглицидилового простого эфира пентаэритрита (PETGE), дигидразида адипиновой кислоты (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберата (BS), гексаметилендиамина (HMDA), 1-(2,3эпоксипропил)-2,3-эпоксициклогексана, карбодиимида и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF пе
- 13 045185 рекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства, выбранного из группы, состоящей из 1,4бис(2,3-эпоксипропокси)бутана, 1,4-бисглицидилоксибутана, дивинилсульфона (DVS), диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), УФ-излучения, глутаральдегида, 1,2-бис(2,3эпоксипропокси)этилена (EGDGE), 1,2,7,8-диэпоксиоктана (DEO), бискарбодиимида (BCDI), тетраглицидилового простого эфира пентаэритрита (PETGE), дигидразида адипиновой кислоты (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберата (BS), гексаметилендиамина (HMDA), 1-(2,3-эпоксипропил)-2,3эпоксициклогексана, карбодиимида и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к гелю биосовместимого тканевого филлера, например, гелю дермального филлера, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления гель дополнительно содержит воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к гелю биосовместимого тканевого филлера, например, гелю дермального филлера, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления гель дополнительно содержит воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к гидрогелю биосовместимого тканевого филлера, например, гидрогелю дермального филлера, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть поли
- 14 045185 сахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления гидрогель дополнительно содержит воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к гидрогелю биосовместимого тканевого филлера, например, гидрогелю дермального филлера, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления гидрогель дополнительно содержит воду.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF имеет степень кристалличности до приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60% или более 60%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита
- 15 045185 с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF имеет степень кристалличности до приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60% или более 60%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит активное средство. В некоторых вариантах осуществления активное средство выбрано из группы, состоящей из ингибитора фермента, анестезирующего средства, лекарственного нейротоксина, антиоксиданта, противоинфекционных средств, противовоспалительного средства, блокатора ультрафиолета (УФ), красителя, гормона, иммуносупрессора и противовоспалительного средства. В некоторых вариантах осуществления анестезирующее средство является лидокаином.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, например, дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит активное средство. В некоторых вариантах осуществления активное средство выбрано из группы, состоящей из ингибитора фермента, анестезирующего сред
- 16 045185 ства, лекарственного нейротоксина, антиоксиданта, противоинфекционного средства, противовоспалительного средства, блокатора ультрафиолета (УФ), красителя, гормона, иммуносупрессора и противовоспалительного средства. В некоторых вариантах осуществления анестезирующее средство является лидокаином.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому инъецируемому тканевому филлеру, например, инъецируемому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестносшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА).
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому инъецируемому тканевому филлеру, например, инъецируемому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА).
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, имеющему динамический модуль упругости (G') от приблизительно 50 Па до приблизительно 1500 Па, например, дермальному филлеру, имеющему динамический модуль упругости (G') от приблизительно 50 Па до приблизительно 1500 Па, филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 1 Гц.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, имеющему динамический модуль упругости (G') от приблизительно 50 Па до приблизительно 1500 Па, например, дермальному филлеру, имеющему динамический модуль упругости (G') от приблизитель
- 17 045185 но 50 Па до приблизительно 1500 Па, филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка включает перекрестную сшивку с помощью химических связей. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой перекрестную сшивку нулевой длины. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 1 Гц.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу получения биосовместимого тканевого филлера, например, дермального филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, включающему получение композиции, содержащей SPF и полисахарид, и добавление в раствор перекрестносшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника, активирующего средства или усилителя желирования, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестно-сшивающие молекулы, например, перекрестно-сшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу получения биосовместимого тканевого филлера, например, дермального филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, включающему получение композиции, содержащей SPF и полисахарид, и добавление в раствор перекрестносшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника, активирующего средства или усилителя желирования, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестно-сшивающие молекулы, например, перекрестносшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу лечения состояния у нуждающегося в этом индивидуума, например, состояния кожи, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества биосовместимого тканевого филлера, например, дермального филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную
- 18 045185 массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестно-сшивающие молекулы, например, перекрестно-сшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления состояние кожи выбрано из группы, состоящей из дегидратации кожи, недостатка эластичности кожи, огрубления кожи, недостатка натяжения кожи, растяжек на коже, бледности кожи, впадин на коже, впалых щек, тонких губ, ретроорбитального дефекта, складок на лице и морщин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер вводят в область дермы индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию, реконструкцию, лечение заболевания, лечение нарушения, коррекцию дефекта или несовершенства части или области тела. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер устойчив к биодеградации, биоэрозии, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, приблизительно 7 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 21 дня, приблизительно 28 дней, приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев или приблизительно 6 месяцев.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу лечения состояния у нуждающегося в этом индивидуума, например, состояния кожи, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества биосовместимого тканевого филлера, например, дермального филлера, включающего фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестно-сшивающие молекулы, например, перекрестно-сшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления состояние кожи выбрано из группы, состоящей из дегидратации кожи, недостатка эластичности кожи, огрубления кожи, недостатка натяжения кожи, растяжек на коже, бледности кожи, впадин на коже, впалых щек, тонких губ, ретроорбитального дефекта, складок на лице и морщин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер вводят в область дермы индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию, реконструкцию, лечение заболевания, лечение нарушения, коррекцию дефекта или несовершенства части или области тела. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер устойчив к биодеградации, биоэрозии, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, приблизительно 7 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 21 дня, приблизительно 28 дней, приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев или приблизительно 6 месяцев.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу косметического лечения нуждающегося в этом индивидуума, включающему введение индивидууму эффективного количества биосовместимого тканевого филлера, например, дермального филлера, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид,
- 19 045185 при этом SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа или от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестносшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестно-сшивающие молекулы, например, перекрестносшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер вводят в область дермы индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию, реконструкцию, лечение заболевания, лечение нарушения, коррекцию дефекта или несовершенства части или области тела. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер устойчив к биодеградации, биоэрозии, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, приблизительно 7 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 21 дня, приблизительно 28 дней, приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев или приблизительно 6 месяцев.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу косметического лечения нуждающегося в этом индивидуума, способ включающий введение индивидууму эффективного количества биосовместимого тканевого филлера, например, дермального филлера, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, и полисахарид, при этом SPF имеют низкую молекулярную массу, среднюю молекулярную массу и/или высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления часть SPF является перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления часть полисахарида перекрестно-сшита с полисахаридом. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает перекрестно-сшивающие молекулы, например, перекрестно-сшивающие молекулы на основе эпокси-групп. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестной сшивки представляет собой аутоперекрестную сшивку. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитых SPF составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления часть перекрестно сшитого полисахарида составляет до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления полисахарид является гиалуроновой кислотой (НА). В некоторых вариантах осуществления SPF, по существу, не содержит серицин. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер вводят в область дермы индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию, реконструкцию, лечение заболевания, лечение нарушения, коррекцию дефекта или несовершенства части или области тела. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер устойчив к биодеградации, биоэрозии, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, приблизительно 7 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 21 дня, приблизительно 28 дней, приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев или приблизительно 6 месяцев.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к биосовместимому тканевому филлеру, содержащему гиалуроновую кислоту (НА) и анестезирующее средство, где часть НА модифицируют с помощью одной или более линкерных молекул, содержащих одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта, где линкерные молекулы присоединяют к НА на один конец линкера. В некоторых вариантах осуществления модификацию осуществляют с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства. В некоторых вариантах осуществления НА в тканевом филлере имеет степень модификации (MoD) приблизительно 10,0%, приблизительно 10,1%, приблизительно 10,2%, приблизительно 10,3%, приблизительно 10,4%, приблизительно 10,5%, приблизительно 10,6%, приблизительно 10,7%, приблизительно 10,8%, приблизительно 10,9%, приблизительно 11,0%, приблизительно 11,1%, приблизительно
- 20 045185
11,2%, приблизительно 11,3%, приблизительно 11,4%, приблизительно 11,5%, приблизительно 11,6%, приблизительно 11,7%, приблизительно 11,8%, приблизительно 11,9%, приблизительно 12,0%, приблизительно 12,1%, приблизительно 12,2%, приблизительно 12,3%, приблизительно 12,4%, приблизительно 12,5%, приблизительно 12,6%, приблизительно 12,7%, приблизительно 12,8%, приблизительно 12,9%, приблизительно 13,0%, приблизительно 13,1%, приблизительно 13,2%, приблизительно 13,3%, приблизительно 13,4%, приблизительно 13,5%, приблизительно 13,6%, приблизительно 13,7%, приблизительно 13,8%, приблизительно 13,9%, приблизительно 14,0%, приблизительно 14,1%, приблизительно 14,2%, приблизительно 14,3%, приблизительно 14,4%, приблизительно 14,5%, приблизительно 14,6%, приблизительно 14,7%, приблизительно 14,8%, приблизительно 14,9%, приблизительно 15,0%, приблизительно 15,1%, приблизительно 15,2%, приблизительно 15,3%, приблизительно 15,4%, приблизительно 15,5%, приблизительно 15,6%, приблизительно 15,7%, приблизительно 15,8%, приблизительно 15,9%, приблизительно 16,0%, приблизительно 16,1%, приблизительно 16,2%, приблизительно 16,3%, приблизительно 16,4%, приблизительно 16,5%, приблизительно 16,6%, приблизительно 16,7%, приблизительно 16,8%, приблизительно 16,9%, приблизительно 17,0%, приблизительно 17,1%, приблизительно 17,2%, приблизительно 17,3%, приблизительно 17,4%, приблизительно 17,5%, приблизительно 17,6%, приблизительно 17,7%, приблизительно 17,8%, приблизительно 17,9%, приблизительно 18,0%, приблизительно 18,1%, приблизительно 18,2%, приблизительно 18,3%, приблизительно 18,4%, приблизительно 18,5%, приблизительно 18,6%, приблизительно 18,7%, приблизительно 18,8%, приблизительно 18,9%, приблизительно 19,0%, приблизительно 19,1%, приблизительно 19,2%, приблизительно 19,3%, приблизительно 19,4%, приблизительно 19,5%, приблизительно 19,6%, приблизительно 19,7%, приблизительно 19,8%, приблизительно 19,9% или приблизительно 20,0%. В некоторых вариантах осуществления количество модифицированной НА в мас./мас.%, относительно общего количества НА в тканевом филлере составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%.
В некоторых вариантах осуществления модифицированная НА включает перекрестно-сшитую НА, где степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитой НА составляется от приблизительно 1% до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестносшитой НА составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизи
- 21 045185 тельно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки перекрестно-сшитой НА составляет от приблизительно 1% до приблизительно 15%.
В некоторых вариантах осуществления модифицированная или перекрестно-сшитая НА содержит линкер или перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую цепь полиэтиленгликоля (PEG). В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство и/или перекрестно-сшивающий предшественник содержит эпокси-группу. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства, перекрестносшивающего предшественника или активирующего средства, выбранного из группы, состоящей из полиэпокси-линкера, диэпокси-линкера, полиэпокси-PEG, диэпокси-PEG, полиглицидил-PEG, диглицидилPEG, полиакрилат-PEG, диакрилат-PEG, 1,4-бис(2,3-эпоксипропокси)бутана, 1,4бисглицидилоксибутана, дивинилсульфона (DVS), диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), УФ-излучения, глутаральдегида, 1,2-бис(2,3-эпоксипропокси)этилена (EGDGE), 1,2,7,8диэпоксиоктана (DEO), бискарбодиимида (BCDI), тетраглицидилового простого эфира пентаэритрита (PETGE), дигидразида адипиновой кислоты (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберата (BS), гексаметилендиамина (HMDA), 1-(2,3-эпоксипропил)-2,3-эпоксициклогексана, карбодиимида и любой их комбинации. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием полифункционального эпокси-соединения, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), диглицидилового простого эфира этиленгликоля (EGDGE), диглицидилового простого эфира 1,6-гександиола, диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диглицидилового простого эфира полипропиленгликоля, диглицидилового простого эфира политетраметиленгликоля, диглицидилового простого эфира неопентилгликоля, полиглицидилового простого эфира полиглицерина, полиглицидилового простого эфира диглицерина, полиглицидилового простого эфира глицерина, полиглицидилового простого эфира три-метилолпропана, полиглицидилового простого эфира пентаэритрита и полиглицидилового простого эфира сорбита. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства и/или перекрестно-сшивающего предшественника, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диэпокси-PEG, диглицидилового простого эфира PEG, бис-глицидилового простого эфира полиоксиэтилена, PEGDE и PEGDGE. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, имеющего среднюю Mn приблизительно 500, приблизительно 1000, приблизительно 2000 или приблизительно 6000. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, содержащего от приблизительно 2 до приблизительно 25 групп этиленгликоля. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием перекрестно-сшивающего средства и/или перекрестно-сшивающего предшественника, выбранного из группы, состоящей из полиэпокси-линкера из фиброина шелка, диэпокси-линкера из фиброина шелка, полиэпоксилинкера из фрагмента фиброина шелка, диэпокси-линкера из фрагмента фиброина шелка, полиглицидиллинкера из фиброина шелка, диглицидил-линкера из фиброина шелка, полиглицидил-линкера из фрагмента фиброина шелка и диглицидил-линкера из фрагмента фиброина шелка.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно включает органическое соединение и/или неорганическое соединение. В некоторых вариантах осуществления неорганическое соединение содержит гидроксиапатит кальция. В некоторых вариантах осуществления гидроксиапатит кальция составляют в виде частиц, имеющих диаметр от приблизительно 1 мкм до приблизительно 100 мкм, от приблизительно 1 мкм до приблизительно 10 мкм, от приблизительно 2 мкм до приблизительно 12 мкм, от приблизительно 3 мкм до приблизительно 10 мкм, от приблизительно 4 мкм до и приблизительно 15 мкм, от приблизительно 8 мкм до приблизительно 12 мкм, от приблизительно 5 мкм до приблизительно 10 мкм, от приблизительно 6 мкм до приблизительно 12 мкм, от приблизительно 7 мкм до приблизительно 20 мкм, от приблизительно 9 мкм до приблизительно 18 мкм или от приблизительно 10 мкм до приблизительно 25 мкм. В некоторых вариантах осуществления концентрация гидроксиапатита кальция составляет от приблизительно 0,001% до приблизительно 5%. В некоторых вариантах осуществления концентрация гидроксиапатита кальция составляет приблизительно 0,001%, приблизительно 0,002%, приблизительно 0,003%, приблизительно 0,004%, приблизительно 0,005%, приблизительно 0,006%, приблизительно 0,007%, приблизительно 0,008%, приблизительно 0,009%, приблизительно 0,01%, приблизительно 0,011%, приблизительно 0,012%, приблизительно 0,013%, приблизительно 0,014%, приблизительно 0,015%, приблизительно 0,016%, приблизительно 0,017%, приблизительно
- 22 045185
0,018%, приблизительно 0,019% или приблизительно 0,02%. В некоторых вариантах осуществления концентрация гидроксиапатита кальция составляет приблизительно 0,05%, приблизительно 0,1%, приблизительно 0,15%, приблизительно 0,2%, приблизительно 0,25%, приблизительно 0,3%, приблизительно 0,35%, приблизительно 0,4%, приблизительно 0,45%, приблизительно 0,5%, приблизительно 0,55%, приблизительно 0,6%, приблизительно 0,65%, приблизительно 0,7%, приблизительно 0,75%, приблизительно 0,8%, приблизительно 0,85%, приблизительно 0,9%, приблизительно 0,95%, приблизительно 1%, приблизительно 1,05%, приблизительно 1,1%, приблизительно 1,15%, приблизительно 1,2%, приблизительно 1,25%, приблизительно 1,3%, приблизительно 1,35%, приблизительно 1,4%, приблизительно 1,45%, приблизительно 1,5%, приблизительно 1,55%, приблизительно 1,6%, приблизительно 1,65%, приблизительно 1,7%, приблизительно 1,75%, приблизительно 1,8%, приблизительно 1,85%, приблизительно 1,9%, приблизительно 1,95%, или приблизительно 2%. В некоторых вариантах осуществления органическое соединение содержит аминокислоту, выбранную из группы, состоящей из глицина, L-пролина, аланина, аргинина, аспарагина, аспарагиновой кислоты, цистеина, глутаминовой кислоты, глутамина, гистидина, изолейцина, лейцина, лизина, метионина, фенилаланина, пролина, серина, треонина, триптофана, тирозина и валина.
В некоторых вариантах осуществления НА получают из бактерий Streptococcus или бактерий Bacillus subtilis. В некоторых вариантах осуществления активное средство является лидокаином. В некоторых вариантах осуществления концентрация активного средства в тканевом филлере составляет от приблизительно 0,001% до приблизительно 5%. В некоторых вариантах осуществления концентрация лидокаина в тканевом филлере составляет приблизительно 0,3%.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, представляет собой гель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер представляет собой гидрогель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация НА в тканевом филлере составляет от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация НА в тканевом филлере составляет приблизительно 15 мг/мл, приблизительно 16 мг/мл, 17 мг/мл, приблизительно 18 мг/мл, приблизительно 19 мг/мл, приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 21 мг/мл, приблизительно 22 мг/мл, приблизительно 23 мг/мл, приблизительно 24 мг/мл, приблизительно 25 мг/мл, приблизительно 26 мг/мл, приблизительно 27 мг/мл, приблизительно 28 мг/мл, приблизительно 29 мг/мл или приблизительно 30 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация модифицированной или перекрестно-сшитой НА в тканевом филлере составляет от приблизительно 10 мг/мл до приблизительно 50 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация модифицированного или перекрестно-сшитого НА в тканевом филлере составляет приблизительно 15 мг/мл, приблизительно 16 мг/мл, приблизительно 17 мг/мл, приблизительно 18 мг/мл, приблизительно 19 мг/мл, приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 21 мг/мл, приблизительно 22 мг/мл, приблизительно 23 мг/мл, приблизительно 24 мг/мл, приблизительно 25 мг/мл, приблизительно 26 мг/мл, приблизительно 27 мг/мл, приблизительно 28 мг/мл, приблизительно 29 мг/мл или приблизительно 30 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления описанный тканевой филлер дополнительно включает белок шелка или фрагменты белка шелка (SPF). В некоторых вариантах осуществления белок шелка является фиброином шелка. В некоторых вариантах осуществления белок шелка является фиброином шелка, по существу, не содержащим серицин. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют низкую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют среднюю молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют высокую молекулярную массу. В некоторых вариантах осуществления фрагменты белка шелка (SPF) имеют полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В некоторых вариантах осуществления SPF имеют степень кристалличности до 60%.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевому филлеру, включающему НА и SPF, где часть SPF является модифицированной или перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления количество модифицированных или перекрестно-сшитых SPF в мас./мас.%, относительно общего количества SPF составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%,
- 23 045185 приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень модификации или перекрестной сшивки модифицированных или перекрестносшитых SPF составляет от приблизительно 1% до приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень модификации или перекрестной сшивки модифицированных или перекрестно-сшитых SPF составляет приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%. В некоторых вариантах осуществления степень модификации или перекрестной сшивки модифицированных или перекрестно-сшитых SPF составляет от приблизительно 1% до приблизительно 15%. В некоторых вариантах осуществления степень модификации или перекрестной сшивки модифицированных или перекрестно-сшитых SPF составляет одно или более из приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, приблизительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14% и приблизительно 15%.
В некоторых вариантах осуществления модифицированные или перекрестно-сшитые SPF содержат линкер или перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую алкановую или алкильную цепь и/или эфирную группу, где линкер или перекрестно-сшивающую молекулу присоединяют к SPF на одном конце линкера или перекрестно-сшивающей молекулы. В некоторых вариантах осуществления модифицированные или перекрестно-сшитые SPF содержат линкер или перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую цепь полиэтиленгликоля (PEG). В некоторых вариантах осуществления модифицированные или перекрестно-сшитые SPF содержат линкер или перекрестно-сшивающую молекулу, содержащую вторичный спирт. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием модифицирующего или перекрестно-сшивающего средства, модифицирующего или перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства. В некоторых вариантах осуществления модифицирующее или перекрестно-сшивающее средство и/или модифицирующий или перекрестно-сшивающий предшественник содержит эпокси-группу. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием модифицирующего или пере
- 24 045185 крестно-сшивающего средства, модифицирующего или перекрестно-сшивающего предшественника или активирующего средства, выбранного из группы, состоящей из полиэпокси-линкера, диэпокси-линкера, полиэпокси-PEG, диэпокси-PEG, полиглицидил-PEG, адиглицидил-PEG, полиакрилат-PEG, диакрилатPEG, 1,4-бис(2,3-эпоксипропокси)бутана, 1,4-бисглицидилоксибутана, дивинилсульфона (DVS), диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), УФ-излучения, глутаральдегида, 1,2-бис(2,3эпоксипропокси)этилена (EGDGE), 1,2,7,8-диэпоксиоктана (DEO), бискарбодиимида (BCDI), тетраглицидилового простого эфира пентаэритрита (PETGE), дигидразида адипиновой кислоты (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберата (BS), гексаметилендиамина (HMDA), 1-(2,3-эпоксипропил)-2,3эпоксициклогексана, карбодиимида и любых их комбинаций. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием полифункционального эпоксисоединения, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), диглицидилового простого эфира этиленгликоля (EGDGE), диглицидилового простого эфира 1,6-гександиола, диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диглицидилового простого эфира полипропиленгликоля, диглицидилового простого эфира политетраметиленгликоля, диглицидилового простого эфира неопентилгликоля, полиглицидилового простого эфира полиглицерина, полиглицидилового простого эфира диглицерина, полиглицидилового простого эфира глицерина, полиглицидилового простого эфира три-метилолпропана, полиглицидилового простого эфира пентаэритрита и полиглицидилового простого эфира сорбита.
В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием модифицирующего или перекрестно-сшивающего средства и/или модифицирующего или перекрестно-сшивающего предшественника, выбранного из группы, состоящей из диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, диэпокси-PEG, диглицидилового простого эфира PEG, бисглицидилового простого эфира полиоксиэтилена, PEGDE и PEGDGE. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, имеющего среднюю Mn приблизительно 500, приблизительно 1000, приблизительно 2000 или приблизительно 6000. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля, содержащего от приблизительно 2 до приблизительно 25 групп этиленгликоля. В некоторых вариантах осуществления модификации или перекрестной сшивки достигают с использованием модифицирующего или перекрестно-сшивающего средства и/или модифицирующего или перекрестно-сшивающего предшественника, выбранного из группы, состоящей из полиэпокси-линкера из фиброина шелка, диэпоксилинкера из фиброина шелка, полиэпокси-линкера из фрагмента фиброина шелка, диэпокси-линкера из фрагмента фиброина шелка, полиглицидил-линкера из фиброина шелка, диглицидил-линкера из фиброина шелка, полиглицидил-линкера из фрагмента фиброина шелка и диглицидил-линкера из фрагмента фиброина шелка.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевому филлеру, включающему НА и SPF, где часть SPF перекрестно сшита с НА. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевому филлеру, включающему НА и SPF, где часть SPF перекрестно сшита с SPF. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер представляет собой гель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер представляет собой гидрогель. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер дополнительно содержит воду. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация SPF в тканевом филлере составляет от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления общая концентрация SPF в тканевом филлере составляет приблизительно 0,1 мг/мл, приблизительно 0,5 мг/мл, приблизительно 1 мг/мл, приблизительно 1,5 мг/мл, приблизительно 2 мг/мл, приблизительно 2,5 мг/мл, приблизительно 3 мг/мл, приблизительно 3,5 мг/мл, приблизительно 4 мг/мл, приблизительно 4,5 мг/мл, приблизительно 5 мг/мл, приблизительно 5,5 мг/мл, приблизительно 6 мг/мл, приблизительно 6,5 мг/мл, приблизительно 7 мг/мл, приблизительно 7,5 мг/мл, приблизительно 8 мг/мл, приблизительно 8,5 мг/мл, приблизительно 9 мг/мл, приблизительно 9,5 мг/мл, приблизительно 10 мг/мл, приблизительно 10,5 мг/мл, приблизительно 11 мг/мл, приблизительно 11,5 мг/мл, приблизительно 12 мг/мл, приблизительно 12,5 мг/мл, приблизительно 13 мг/мл, приблизительно 13,5 мг/мл, приблизительно 14 мг/мл, приблизительно 14,5 мг/мл или приблизительно 15 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация модифицированных или перекрестно-сшитых SPF в тканевом филлере составляет от приблизительно 0,1 мг/мл до приблизительно 15 мг/мл. В некоторых вариантах осуществления концентрация модифицированных или перекрестно-сшитых SPF в тканевом филлере составляет приблизительно 0,1 мг/мл, приблизительно 0,5 мг/мл, приблизительно 1 мг/мл, приблизительно 1,5 мг/мл, приблизительно 2 мг/мл, приблизительно 2,5 мг/мл, приблизительно 3 мг/мл, приблизительно 3,5 мг/мл, приблизительно 4 мг/мл, приблизительно 4,5 мг/мл, приблизительно 5 мг/мл, приблизительно 5,5 мг/мл, приблизительно 6 мг/мл, приблизительно 6,5 мг/мл, приблизительно 7 мг/мл, приблизительно 7,5 мг/мл, приблизительно 8 мг/мл, приблизительно 8,5 мг/мл, приблизительно 9 мг/мл, приблизительно 9,5 мг/мл, приблизительно 10 мг/мл, приблизительно 10,5 мг/мл, приблизительно 11 мг/мл, приблизительно 11,5 мг/мл, приблизительно 12 мг/мл, приблизительно 12,5 мг/мл, приблизительно 13 мг/мл, приблизительно 13,5 мг/мл, приблизительно 14 мг/мл, приблизительно 14,5 мг/мл или при
- 25 045185 близительно 15 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевому филлеру, включающему модифицированную или перекрестно-сшитую НА и/или модифицированные или перекрестно-сшитые SPF, где тканевой филлер является дермальным филлером. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является биодеградируемым. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер является инъецируемым. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') от приблизительно 25 Па до приблизительно 1500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') приблизительно 25 Па, приблизительно 26 Па, приблизительно 27 Па, приблизительно 28 Па, приблизительно 29 Па, приблизительно 30 Па, приблизительно 31 Па, приблизительно 32 Па, приблизительно 33 Па, приблизительно 34 Па, приблизительно 35 Па, приблизительно 36 Па, приблизительно 37 Па, приблизительно 38 Па, приблизительно 39 Па, приблизительно 40 Па, приблизительно 41 Па, приблизительно 42 Па, приблизительно 43 Па, приблизительно 44 Па, приблизительно 45 Па, приблизительно 46 Па, приблизительно 47 Па, приблизительно 48 Па, приблизительно 49 Па, приблизительно 50 Па, приблизительно 51 Па, приблизительно 52 Па, приблизительно 53 Па, приблизительно 54 Па, приблизительно 55 Па, приблизительно 56 Па, приблизительно 57 Па, приблизительно 58 Па, приблизительно 59 Па, приблизительно 60 Па, приблизительно 61 Па, приблизительно 62 Па, приблизительно 63 Па, приблизительно 64 Па, приблизительно 65 Па, приблизительно 66 Па, приблизительно 67 Па, приблизительно 68 Па, приблизительно 69 Па, приблизительно 70 Па, приблизительно 71 Па, приблизительно 72 Па, приблизительно 73 Па, приблизительно 74 Па, приблизительно 75 Па, приблизительно 76 Па, приблизительно 77 Па, приблизительно 78 Па, приблизительно 79 Па, приблизительно 80 Па, приблизительно 81 Па, приблизительно 82 Па, приблизительно 83 Па, приблизительно 84 Па, приблизительно 85 Па, приблизительно 86 Па, приблизительно 87 Па, приблизительно 88 Па, приблизительно 89 Па, приблизительно 90 Па, приблизительно 91 Па, приблизительно 92 Па, приблизительно 93 Па, приблизительно 94 Па, приблизительно 95 Па, приблизительно 96 Па, приблизительно 97 Па, приблизительно 98 Па, приблизительно 99 Па, приблизительно 100 Па, приблизительно 101 Па, приблизительно 102 Па, приблизительно 103 Па, приблизительно 104 Па, приблизительно 105 Па, приблизительно 106 Па, приблизительно 107 Па, приблизительно 108 Па, приблизительно 109 Па, приблизительно 110 Па, приблизительно 111 Па, приблизительно 112 Па, приблизительно 113 Па, приблизительно 114 Па, приблизительно 115 Па, приблизительно 116 Па, приблизительно 117 Па, приблизительно 118 Па, приблизительно 119 Па, приблизительно 120 Па, приблизительно 121 Па, приблизительно 122 Па, приблизительно 123 Па, приблизительно 124 Па или приблизительно 125 Па. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 1 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 5 Гц. В некоторых вариантах осуществления G' измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет комплексную вязкость от приблизительно 1 Па-с до приблизительно 10 Па-с. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер имеет комплексную вязкость приблизительно 1 Па-с, приблизительно 1,5 Па-с, приблизительно 2 Па-с, приблизительно 2,5 Па-с, приблизительно 3 Па-с, приблизительно 3,5 Па-с, приблизительно 4 Па-с, приблизительно 4,5 Па-с, приблизительно 5 Па-с, приблизительно 5,5 Па-с, приблизительно 6 Па-с, приблизительно 6,5 Па-с, приблизительно 7 Па-с, приблизительно 7,5 Па-с, приблизительно 8 Па-с, приблизительно 8,5 Па-с, приблизительно 9 Па-с, приблизительно 9,5 Па-с или приблизительно 10 Па-с. В некоторых вариантах осуществления комплексную вязкость измеряют посредством колебательного напряжения от приблизительно 0,1 до приблизительно 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления комплексную вязкость измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 1 Гц. В некоторых вариантах осуществления комплексную вязкость измеряют посредством колебательного напряжения приблизительно 5 Гц.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу лечения состояния у нуждающегося в этом индивидуума, включающему введение индивидууму терапевтически эффективного количества тканевого филлера, включающего модифицированную или перекрестно-сшитую НА, и/или модифицированные или перекрестно-сшитые SPF. В некоторых вариантах осуществления состояние является состоянием кожи. В некоторых вариантах осуществления состояние кожи выбрано из группы, состоящей из дегидратации кожи, недостатка эластичности кожи, огрубления кожи, недостатка натяжения кожи, растяжек на коже, бледности кожи, впадин на коже, впалых щек, тонких губ, ретроорбитального дефекта, складок на лице и морщин.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способу косметического лечения нуждающегося в этом индивидуума, включающий введение индивидууму эффективного количества тканевого филлера, включающего модифицированную или перекрестно-сшитую НА и/или модифицированные или перекрестно-сшитые SPF. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер вводят в область дермы индивидуума. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию, реконструкцию, лечение заболевания, лечение нарушения, коррекцию дефекта или несовершенства
- 26 045185 части или области тела. В некоторых вариантах осуществления способ представляет собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица.
В некоторых вариантах осуществления способов, представленных в настоящем описании, тканевой филлер устойчив к биодеградации, биоэрозии, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 3 дней, приблизительно 7 дней, приблизительно 14 дней, приблизительно 21 дня, приблизительно 28 дней, приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев или приблизительно 6 месяцев. В некоторых вариантах осуществления способов, представленных в настоящем описании, введение тканевого филлера индивидууму приводит к сниженному воспалительному ответу по сравнению с воспалительным ответом, индуцируемым контрольным тканевым филлером, содержащим полисахарид и лидокаин, где контрольный тканевой филлер не включает фрагменты белка шелка (SPF).
В некоторых вариантах осуществления способов, представленных в настоящем описании, введение тканевого филлера индивидууму приводит к повышенной продукции коллагена по сравнению с продукцией коллагена, индуцируемой контрольным тканевым филлером, содержащим полисахарид и лидокаин, где контрольный тканевой филлер не включает фрагменты белка шелка (SPF).
Краткое описание фигур
Описанные варианты осуществления будут дополнительно объяснены со ссылкой на сопутствующие чертежи. Представленные чертежи не обязательно показаны в масштабе, вместо этого, как правило, сделан акцент на иллюстрировании принципов описанных вариантов осуществления настоящего изобретения.
Фиг. 1 представляет собой блок-схему, на которой показаны различные варианты осуществления для получения чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка (SPF) по настоящему изобретению.
Фиг. 2 представляет собой блок-схему, на которой показаны различные параметры, которые можно модифицировать во время получения SPF по настоящему изобретению на стадиях экстракции и растворения.
Фиг. 3 является таблицей, в которой приведена концентрация LiBr и карбоната натрия (Na2CO3) в растворах белка шелка по настоящему изобретению.
Фиг. 4 является таблицей, в которой приведена концентрация LiBr и Na2CO3 в растворах белка шелка по настоящему изобретению.
Фиг. 5 является таблицей, в которой приведены молекулярные массы в растворах белка шелка по настоящему изобретению.
Фиг. 6 и 7 представляют собой графики, на которых показан эффект объема извлечения на % потери массы.
Фиг. 8 является таблицей, в которой приведены молекулярные массы шелка, растворенного при разных концентрациях LiBr и разных масштабах экстракции и растворения.
Фиг. 9 является графиком, на котором показан эффект времени экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, LiBr при 100°С и растворения в печи при 100°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 10 является графиком, на котором показан эффект времени экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, кипящего LiBr и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 11 является графиком, на котором показан эффект времени экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, LiBr при 60°С и растворения в печи 60°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 12 является графиком, на котором показан эффект времени экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, LiBr при 80°С и растворения в печи 80°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 13 является графиком, на котором показан эффект времени экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, LiBr при 80°С и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 14 является графиком, на котором показан эффект времени экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, LiBr при 100°С и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 15 является графиком, на котором показан эффект времени экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, LiBr при 140°С и растворения в печи 140°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 16 является графиком, на котором показан эффект температуры экстракции в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях времени экстракции 60 мин, LiBr при 100°С и растворения в печи при 100°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 17 является графиком, на котором показан эффект температуры LiBr в отношении молекуляр
- 27 045185 ной массы шелка, обрабатываемого в условиях времени экстракции 60 мин, температуры экстракции 100°С и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 18 является графиком, на котором показан эффект температуры LiBr в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях времени экстракции 30 мин, температуры экстракции 100°С и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 19 является графиком, на котором показан эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 30 мин и бромида лития при 100°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 20 является графиком, на котором показан эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 60 мин и бромида лития при 100°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 21 является графиком, на котором показан эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 60 мин и бромида лития при 140°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 22 является графиком, на котором показан эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени 30 мин экстракции и бромида лития при 140°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 23 является графиком, на котором показан эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 60 мин и бромида лития при 80°С (время в печи/растворения варьировали).
Фиг. 24 является графиком, на котором приведены молекулярные массы шелка, обрабатываемого в различных условиях, включающих время экстракции, температуру экстракции, температуру бромида лития (LiBr), температуру печи для растворения, время в печи для растворения.
Фиг. 25 является графиком, на котором приведены молекулярные массы шелка, обрабатываемого в условиях, когда температура печи/растворения равна температуре LiBr.
Фиг. 26 является изображением составов шелка/НА в воде или фосфатно-солевом буфере (PBS) при различных концентрациях, где показано, что составы шелка/НА приводят к получению гомогенных, непрозрачных растворов. Первый немаркированный флакон является контрольным флаконом (22 мг/мл НА в воде).
Фиг. 27 является изображением водных составов шелка/НА, набранных в шприцы, где показано, что составы шелка/НА приводят к получению гомогенных, непрозрачных растворов. Контроль представлял собой раствор 22 мг/мл НА в вода.
Фиг. 28 является графиком, на котором показан профиль деградации гидрогелей шелк-НА и НА.
Фиг. 29 является изображением интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали контрольный дермальный филлер (коммерчески доступный филлер с НА, включающий лидокаин); повышенную степень воспаления отражает объем гранулематозных областей. Коммерчески доступный филлер обозначен как синий/серый материал. Гранулематозное воспаление, ассоциированное с материалом, можно наблюдать через 7 дней.
Фиг. 30 является изображением интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали контрольный дермальный филлер (коммерчески доступный филлер с НА, включающий лидокаин); коммерчески доступный продукт обозначен как синий/серый материал. Через 30 дней можно наблюдать воспаление с фиброзом.
Фиг. 31 является изображением интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (24 мг/мл НА, 9,6 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый BDDE); уменьшенные гранулематозные области по сравнению с контрольной инъекцией свидетельствуют о незначительном остром воспалительном ответе и лучшей биодеградируемости филлера шелк-НА по сравнению с контролем. Наблюдали очень небольшое воспаление через 7 дней. Воспаление является фокальным, и временами его трудно обнаружить. Не обнаруживали материал имплантата.
Фиг. 32 является изображением интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (24 мг/мл НА, 9,6 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый BDDE); через 30 дней воспаление крайне сложно обнаружить, и оно было минимальным. Не обнаруживали материал имплантата.
Фиг. 33 является изображением интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (24 мг/мл НА, 0,48 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый BDDE); введение филлера приводило к фокальному слабому воспалению за 7 дней. Воспаление являлось хроническим. Для этого воспаления потребовалась тщательная оценка, т.к. оно было фокальным и минимальным. Не обнаруживали материал имплантата.
Фиг. 34 является изображением интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (24 мг/мл НА, 0,48 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый BDDE); на изображении, полученном через 30 дней, показано даже меньшее воспаление. Его было даже труднее идентифицировать, чем имплантаты через 7 дней. Не обнаруживали материал имплантата.
Фиг. 35 является графиком, на котором показано измерение мутности гидрогеля шелк-НА. Черная
- 28 045185 кривая (а): стандартное пропускание; красная кривая (b): пропускание и прямое рассеяние.
Фиг. 36 является графиком, на котором показано измерение мутности гидрогеля НА без шелка. Черная кривая (а): стандартное пропускание; красная кривая (b): пропускание и прямое рассеяние.
Фиг. 37 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали контрольный дермальный филлер.
Фиг. 38 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер НА по изобретению (24 мг/мл НА, перекрестно-сшитый PEGDE, образец С4 - табл. 25).
Фиг. 39 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (22,8 мг/мл НА, 1,2 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец L - табл. 25).
Фиг. 40 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (23,76 мг/мл НА, 0,24 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец М - табл. 25).
Фиг. 41 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (22,8 мг/мл НА, 1,2 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец N - табл. 25).
Фиг. 42 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (22,8 мг/мл НА, 1,2 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец О - табл. 25).
Фиг. 43 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на деградацию геля через 7 дней после имплантации (составы в табл. 25 - составы перекрестно-сшитого BDDE являлись наиболее деградировавшими; баллы: 0 - норма; 1 - минимальная; 2 - слабая; 3 - умеренная и 4 тяжелая).
Фиг. 44 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на миграцию геля через 7 дней после имплантации (составы в табл. 25; баллы: 0 - норма; 1 - минимальная; 2 - слабая; 3 - умеренная и 4 - тяжелая).
Фиг. 45 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на воспаление через 7 дней после имплантации (составы в табл. 25 - не наблюдали некроз тканей, не наблюдали свертывания крови, и наблюдали минимальное отложение коллагена на контрольном составе и некоторых из тестируемых составов; баллы: 0 - норма; 1 - минимальная; 2 - слабая; 3 - умеренная и 4 - тяжелая).
Фиг. 46 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на макрофаги через 7 дней после имплантации (составы в табл. 25; баллы: 0 - норма; 1 - минимальная; 2 - слабая; 3 умеренная и 4 - тяжелая).
На фиг. 47А и 47В показан G' гидрогелей с различными концентрациями шелка до и после диализа. Фиг. 47А: смешанная перекрестно-сшитая НА при 100 мг/мл, и фиг. 47В: перекрестно-сшитая НА одной MW при 25 мг/мл.
На фиг. 48А и 48В показана степень набухания гидрогеля с различными концентрациями шелка во время диализа. Фиг. 48А: смешанная перекрестно-сшитая НА при 100 мг/мл, и фиг. 48В: перекрестносшитая НА одной MW при 25 мг/мл.
На фиг. 49А и 49В показаны калибровочные кривые для растворов шелка средней и низкой молекулярной массы, соответственно.
На фиг. 50А и 50В показаны спектры поглощения разведенных гелей шелк-НА с неизвестной концентрацией шелка; теоретическая концентрация шелка (мг/мл) показана для каждого образца геля шелкНА в табл. 26.
На фиг. 51 показано измерение мутности гидрогеля НА без шелка (красный; более высокое пропускание по всему интервалу длины волны) и с 3 мг/мл шелка (синий; более низкое пропускание по всему интервалу длины волны); более высокий % пропускания свидетельствует о менее мутном образце с меньшей оптической мутностью.
Хотя описанные выше чертежи соответствуют описываемым вариантам осуществления, также предусмотрены другие варианты осуществления, как указано в описании. В описании представлены иллюстративные варианты осуществления, не предназначенные для ограничения изобретения. Специалисты в этой области могут осуществлять многочисленные другие модификации и варианты осуществления, попадающие в объем и соответствующие сущности принципов описываемых вариантов осуществления настоящего изобретения.
- 29 045185
Подробное описание изобретения
Настоящее изобретение относится к тканевым филлерам, включающим фрагменты белка шелка (SPF). В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры получают из композиций, представленных в настоящем описании, которые могут включать SPF и гиалуроновую кислоту (НА). В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут являться дермальными филлерами.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием НА, имеющей MW от приблизительно 5 кДа до приблизительно 5 МДа, от приблизительно 100 кДа до приблизительно 4 МДа, или от приблизительно 500 кДа до приблизительно 3 МДа. В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием НА, имеющей MW приблизительно 50 кДа, приблизительно 100 кДа, приблизительно 150 кДа, приблизительно 200 кДа, приблизительно 250 кДа, приблизительно 300 кДа, приблизительно 350 кДа, приблизительно 400 кДа, приблизительно 450 кДа, приблизительно 500 кДа, приблизительно 550 кДа, приблизительно 600 кДа, приблизительно 650 кДа, приблизительно 700 кДа, приблизительно 750 кДа, приблизительно 800 кДа, приблизительно 850 кДа, приблизительно 900 кДа, приблизительно 950 кДа, приблизительно 1000 кДа, приблизительно 1050 кДа, приблизительно 1100 кДа, приблизительно 1150 кДа, приблизительно 1200 кДа, приблизительно 1250 кДа, приблизительно 1300 кДа, приблизительно 1350 кДа, приблизительно 1400 кДа, приблизительно 1450 кДа, приблизительно 1500 кДа, приблизительно 1550 кДа, приблизительно 1600 кДа, приблизительно 1650 кДа, приблизительно 1700 кДа, приблизительно 1750 кДа, приблизительно 1800 кДа, приблизительно 1850 кДа, приблизительно 1900 кДа, приблизительно 1950 кДа, приблизительно 2000 кДа, приблизительно 2050 кДа, приблизительно 2100 кДа, приблизительно 2150 кДа, приблизительно 2200 кДа, приблизительно 2250 кДа, приблизительно 2300 кДа, приблизительно 2350 кДа, приблизительно 2400 кДа, приблизительно 2450 кДа, приблизительно 2500 кДа, приблизительно 2550 кДа, приблизительно 2600 кДа, приблизительно 2650 кДа, приблизительно 2700 кДа, приблизительно 2750 кДа, приблизительно 2800 кДа, приблизительно 2850 кДа, приблизительно 2900 кДа, приблизительно 2950 кДа, приблизительно 3000 кДа, приблизительно 3050 кДа, приблизительно 3100 кДа, приблизительно 3150 кДа, приблизительно 3200 кДа, приблизительно 3250 кДа, приблизительно 3300 кДа, приблизительно 3350 кДа, приблизительно 3400 кДа, приблизительно 3450 кДа, приблизительно 3500 кДа, приблизительно 3550 кДа, приблизительно 3600 кДа, приблизительно 3650 кДа, приблизительно 3700 кДа, приблизительно 3750 кДа, приблизительно 3800 кДа, приблизительно 3850 кДа, приблизительно 3900 кДа, приблизительно 3950 кДа или приблизительно 4000 кДа. НА с любой из указанных выше MW можно смешивать с НА с любой другой из указанных выше MW в любых возможных пропорциях. В некоторых вариантах осуществления дермальный филлер получают посредством смешивания НА с высокой MW с НА с низкой MW, где НА с высокой MW имеет долю приблизительно 0,01%, или приблизительно 0,1%, или приблизительно 0,2%, или приблизительно 0,3%, или приблизительно 0,4%, или приблизительно 0,5%, или приблизительно 0,6%, или приблизительно 0,7%, или приблизительно 0,8%, или приблизительно 0,9%, или приблизительно 1%, или приблизительно 2%, или приблизительно 3%, или приблизительно 4%, или приблизительно 5%, или приблизительно 6%, или приблизительно 7%, или приблизительно 8%, или приблизительно 9%, или приблизительно 10%, или приблизительно 11%, или приблизительно 12%, или приблизительно 13%, или приблизительно 14%, или приблизительно 15%, или приблизительно 16%, или приблизительно 17%, или приблизительно 18%, или приблизительно 19%, или приблизительно 20%, или приблизительно 21%, или приблизительно 22%, или приблизительно 23%, или приблизительно 24%, или приблизительно 25%, или приблизительно 26%, или приблизительно 27%, или приблизительно 28%, или приблизительно 29%, или приблизительно 30%, или приблизительно 31%, или приблизительно 32%, или приблизительно 33%, или приблизительно 34%, или приблизительно 35%, или приблизительно 36%, или приблизительно 37%, или приблизительно 38%, или приблизительно 39%, или приблизительно 40%, или приблизительно 41%, или приблизительно 42%, или приблизительно 43%, или приблизительно 44%, или приблизительно 45%, или приблизительно 46%, или приблизительно 47%, или приблизительно 48%, или приблизительно 49%, или приблизительно 50%, или приблизительно 51%, или приблизительно 52%, или приблизительно 53%, или приблизительно 54%, или приблизительно 55%, или приблизительно 56%, или приблизительно 57%, или приблизительно 58%, или приблизительно 59%, или приблизительно 60%, или приблизительно 61%, или приблизительно 62%, или приблизительно 63%, или приблизительно 64%, или приблизительно 65%, или приблизительно 66%, или приблизительно 67%, или приблизительно 68%, или приблизительно 69%, или приблизительно 70%, или приблизительно 71%, или приблизительно 72%, или приблизительно 73%, или приблизительно 74%, или приблизительно 75%, или приблизительно 76%, или приблизительно 77%, или приблизительно 78%, или приблизительно 79%, или приблизительно 80%, или приблизительно 81%, или приблизительно 82%, или приблизительно 83%, или приблизительно 84%, или приблизительно 85%, или приблизительно 86%, или приблизительно 87%, или приблизительно 88%, или приблизительно 89%, или приблизительно 90%, или приблизительно 91%, или приблизительно 92%, или приблизительно 93%, или приблизительно 94%, или приблизительно 95%, или приблизительно 96%, или приблизительно 97%, или приблизительно 98%, или приблизительно 99%, или
- 30 045185 приблизительно 99,5% или приблизительно 99,9%.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием SPF шелка, имеющих MW от приблизительно 5 кДа до приблизительно 35 кДа. В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием SPF шелка, имеющих MW приблизительно 5 кДа, или приблизительно 6 кДа, или приблизительно 7 кДа, или приблизительно 8 кДа, или приблизительно 9 кДа, или приблизительно 10 кДа, или приблизительно 11 кДа, или приблизительно 12 кДа, или приблизительно 13 кДа, или приблизительно 14 кДа, или приблизительно 15 кДа, или приблизительно 16 кДа, или приблизительно 17 кДа, или приблизительно 19 кДа, или приблизительно 19 кДа, или приблизительно 20 кДа, или приблизительно 21 кДа, или приблизительно 22 кДа, или приблизительно 23 кДа, или приблизительно 24 кДа, или приблизительно 25 кДа, или приблизительно 26 кДа, или приблизительно 27 кДа, или приблизительно 28 кДа, или приблизительно 29 кДа или приблизительно 30 кДа.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием начальной концентрации НА приблизительно 80 мг/мл, или приблизительно 81 мг/мл, или приблизительно 82 мг, мл, или приблизительно 83 мг/мл, или приблизительно 84 мг/мл, или приблизительно 85 мг/мл, или приблизительно 86 мг/мл, или приблизительно 87 мг/мл, или приблизительно 88 мг/мл, или приблизительно 89 мг/мл, или приблизительно 90 мг/мл, или приблизительно 91 мг/мл, или приблизительно 92 мг/мл, или приблизительно 93 мг/мл, или приблизительно 94 мг/мл, или приблизительно 95 мг/мл, или приблизительно 96 мг/мл, или приблизительно 97 мг/мл, или приблизительно 98 мг/мл, или приблизительно 99 мг/мл, или приблизительно 100 мг/мл, или приблизительно 101 мг/мл, или приблизительно 102 мг/мл, или приблизительно 103 мг/мл, или приблизительно 104 мг/мл, или приблизительно 105 мг/мл, или приблизительно 106 мг/мл, или приблизительно 107 мг/мл, или приблизительно 108 мг/мл, или приблизительно 109 мг/мл, или приблизительно 110 мг/мл, или приблизительно 111 мг/мл, или приблизительно 112 мг/мл, или приблизительно 113 мг/мл, или приблизительно 114 мг/мл, или приблизительно 115 мг/мл, или приблизительно 116 мг/мл, или приблизительно 117 мг/мл, или приблизительно 118 мг/мл, или приблизительно 119 мг/мл, или приблизительно 120 мг/мл или более.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры, представленные в настоящем описании, имеют концентрацию SPF шелка приблизительно 0,1%, или приблизительно 0,2%, или приблизительно 0,3%, или приблизительно 0,4%, или приблизительно 0,5%, или приблизительно 0,6%, или приблизительно 0,7%, или приблизительно 0,8%, или приблизительно 0,9%, или приблизительно 1%, или приблизительно 1,1%, или приблизительно 1,2%, или приблизительно 1,3%, или приблизительно 1,4%, или приблизительно 1,5%, или приблизительно 1,6%, или приблизительно 1,7%, или приблизительно 1,8%, или приблизительно 1,9%, или приблизительно 2%, или приблизительно 2,1%, или приблизительно 2,2%, или приблизительно 2,3%, или приблизительно 2,4%, или приблизительно 2,5%, или приблизительно 2,6%, или приблизительно 2,7%, или приблизительно 2,8%, или приблизительно 2,9%, или приблизительно 3%, или приблизительно 3,1%, или приблизительно 3,2%, или приблизительно 3,3%, или приблизительно 3,4%, или приблизительно 3,5%, или приблизительно 3,6%, или приблизительно 3,7%, или приблизительно 3,8%, или приблизительно 3,9%, или приблизительно 4%, или приблизительно 4,1%, или приблизительно 4,2%, или приблизительно 4,3%, или приблизительно 4,4%, или приблизительно 4,5%, или приблизительно 4,6%, или приблизительно 4,7%, или приблизительно 4,8%, или приблизительно 4,9% или приблизительно 5% от всей НА и SPF шелка.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием кросс-линкера PEGDE, имеющего Mn приблизительно 100, приблизительно 200, приблизительно 300, приблизительно 400, приблизительно 500, приблизительно 600, приблизительно 700, приблизительно 800, приблизительно 900, приблизительно 1000, приблизительно 1100 или приблизительно 1200.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием условий реакции, включающих стадию перекрестной сшивки при приблизительно 35°С, приблизительно 36°С, приблизительно 37°С, приблизительно 38°С, приблизительно 39°С, приблизительно 40°С, приблизительно 41°С, приблизительно 42°С, приблизительно 43°С, приблизительно 44°С, приблизительно 45°С, приблизительно 46°С, приблизительно 47°С, приблизительно 48°С, приблизительно 49°С, приблизительно 50°С, приблизительно 51°С, приблизительно 52°С, приблизительно 53°С, приблизительно 54°С или приблизительно 55°С. В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры получают способом, представленным в настоящем описании, с использованием условий реакции, включающих стадию перекрестной сшивки в течение приблизительно 15 мин, приблизительно 16 мин, приблизительно 17 мин, приблизительно 18 мин, приблизительно 19 мин, приблизительно 20 мин, приблизительно 21 мин, приблизительно 22 мин, приблизительно 23 мин, приблизительно 24 мин, приблизительно 25 мин, приблизительно 26 мин, приблизительно 27 мин, приблизительно 28 мин, приблизительно 29 мин, приблизительно 30 мин, приблизительно 31 мин, приблизительно 32 мин, приблизительно 33 мин, приблизительно 34 мин, приблизительно 35 мин, приблизительно 36 мин, приблизительно 37 мин, приблизительно 38 мин, приблизительно 39 мин, приблизительно 40 мин, при
- 31 045185 близительно 41 мин, приблизительно 42 мин, приблизительно 43 мин, приблизительно 44 мин, приблизительно 45 мин, приблизительно 46 мин, приблизительно 47 мин, приблизительно 48 мин, приблизительно 49 мин, приблизительно 50 мин, приблизительно 51 мин, приблизительно 52 мин, приблизительно 53 мин, приблизительно 54 мин, приблизительно 55 мин, приблизительно 56 мин, приблизительно 57 мин, приблизительно 58 мин, приблизительно 59 мин, приблизительно 60 мин, приблизительно 61 мин, приблизительно 62 мин, приблизительно 63 мин, приблизительно 64 мин или приблизительно 65 мин.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры включают свободную НА, например, неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры включают приблизительно 0,1%, или приблизительно 0,2%, или приблизительно 0,3%, или приблизительно 0,4%, или приблизительно 0,5%, или приблизительно 0,6%, или приблизительно 0,7%, или приблизительно 0,8%, или приблизительно 0,9%, или приблизительно 1%, или приблизительно 1,1%, или приблизительно 1,2%, или приблизительно 1,3%, или приблизительно 1,4%, или приблизительно 1,5%, или приблизительно 1,6%, или приблизительно 1,7%, или приблизительно 1,8%, или приблизительно 1,9%, или приблизительно 2%, или приблизительно 2,1%, или приблизительно 2,2%, или приблизительно 2,3%, или приблизительно 2,4%, или приблизительно 2,5%, или приблизительно 2,6%, или приблизительно 2,7%, или приблизительно 2,8%, или приблизительно 2,9%, или приблизительно 3%, или приблизительно 3,1%, или приблизительно 3,2%, или приблизительно 3,3%, или приблизительно 3,4%, или приблизительно 3,5%, или приблизительно 3,6%, или приблизительно 3,7%, или приблизительно 3,8%, или приблизительно 3,9%, или приблизительно 4%, или приблизительно 4,1%, или приблизительно 4,2%, или приблизительно 4,3%, или приблизительно 4,4%, или приблизительно 4,5%, или приблизительно 4,6%, или приблизительно 4,7%, или приблизительно 4,8%, или приблизительно 4,9%, или приблизительно 5%, приблизительно 5,1%, или приблизительно 5,2%, или приблизительно 5,3%, или приблизительно 5,4%, или приблизительно 5,5%, или приблизительно 5,6%, или приблизительно 5,7%, или приблизительно 5,8%, или приблизительно 5,9%, или приблизительно 6%, или приблизительно 6,1%, или приблизительно 6,2%, или приблизительно 6,3%, или приблизительно 6,4%, или приблизительно 6,5%, или приблизительно 6,6%, или приблизительно 6,7%, или приблизительно 6,8%, или приблизительно 6,9%, или приблизительно 7%, или приблизительно 7,1%, или приблизительно 7,2%, или приблизительно 7,3%, или приблизительно 7,4%, или приблизительно 7,5%, или приблизительно 7,6%, или приблизительно 7,7%, или приблизительно 7,8%, или приблизительно 7,9%, или приблизительно 8%, или приблизительно 8,1%, или приблизительно 8,2%, или приблизительно 8,3%, или приблизительно 8,4%, или приблизительно 8,5%, или приблизительно 8,6%, или приблизительно 8,7%, или приблизительно 8,8%, или приблизительно 8,9%, или приблизительно 9%, или приблизительно 9,1%, или приблизительно 9,2%, или приблизительно 9,3%, или приблизительно 9,4%, или приблизительно 9,5%, или приблизительно 9,6%, или приблизительно 9,7%, или приблизительно 9,8%, или приблизительно 9,9% или приблизительно 10% общей НА (перекрестносшитой НА и неперекрестно-сшитой НА). В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры не включают свободную НА.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры включают НА в количестве приблизительно 10 мг/мл, приблизительно 11 мг/мл, приблизительно 12 мг/мл, приблизительно 13 мг/мл, приблизительно 14 мг/мл, приблизительно 15 мг/мл, приблизительно 16 мг/мл, приблизительно 17 мг/мл, приблизительно 18 мг/мл, приблизительно 19 мг/мл, приблизительно 20 мг/мл, приблизительно 21 мг/мл, приблизительно 22 мг/мл, приблизительно 23 мг/мл, приблизительно 24 мг/мл, приблизительно 25 мг/мл, приблизительно 26 мг/мл, приблизительно 27 мг/мл, приблизительно 28 мг/мл, приблизительно 29 мг/мл или приблизительно 30 мг/мл.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры имеют MoD приблизительно 10,0%, приблизительно 10,1%, приблизительно 10,2%, приблизительно 10,3%, приблизительно 10,4%, приблизительно 10,5%, приблизительно 10,6%, приблизительно 10,7%, приблизительно 10,8%, приблизительно 10,9%, приблизительно 11,0%, приблизительно 11,1%, приблизительно 11,2%, приблизительно 11,3%, приблизительно 11,4%, приблизительно 11,5%, приблизительно 11,6%, приблизительно 11,7%, приблизительно 11,8%, приблизительно 11,9%, приблизительно 12,0%, приблизительно 12,1%, приблизительно 12,2%, приблизительно 12,3%, приблизительно 12,4%, приблизительно 12,5%, приблизительно 12,6%, приблизительно 12,7%, приблизительно 12,8%, приблизительно 12,9%, приблизительно 13,0%, приблизительно 13,1%, приблизительно 13,2%, приблизительно 13,3%, приблизительно 13,4%, приблизительно 13,5%, приблизительно 13,6%, приблизительно 13,7%, приблизительно 13,8%, приблизительно 13,9%, приблизительно 14,0%, приблизительно 14,1%, приблизительно 14,2%, приблизительно 14,3%, приблизительно 14,4%, приблизительно 14,5%, приблизительно 14,6%, приблизительно 14,7%, приблизительно 14,8%, приблизительно 14,9%, приблизительно 15,0%, приблизительно 15,1%, приблизительно 15,2%, приблизительно 15,3%, приблизительно 15,4%, приблизительно 15,5%, приблизительно 15,6%, приблизительно 15,7%, приблизительно 15,8%, приблизительно 15,9%, приблизительно 16,0%, приблизительно 16,1%, приблизительно 16,2%, приблизительно 16,3%, приблизительно 16,4%, приблизительно 16,5%, приблизительно 16,6%, приблизительно 16,7%, приблизительно 16,8%, приблизительно 16,9%, приблизительно 17,0%, приблизительно 17,1%, приблизительно 17,2%, приблизительно 17,3%, приблизительно 17,4%, приблизительно 17,5%, приблизительно 17,6%, приблизительно 17,7%, приблизительно 17,8%,
- 32 045185 приблизительно 17,9%, приблизительно 18,0%, приблизительно 18,1%, приблизительно 18,2%, приблизительно 18,3%, приблизительно 18,4%, приблизительно 18,5%, приблизительно 18,6%, приблизительно 18,7%, приблизительно 18,8%, приблизительно 18,9%, приблизительно 19,0%, приблизительно 19,1%, приблизительно 19,2%, приблизительно 19,3%, приблизительно 19,4%, приблизительно 19,5%, приблизительно 19,6%, приблизительно 19,7%, приблизительно 19,8%, приблизительно 19,9% или приблизительно 20,0%.
В некоторых вариантах осуществления дермальные филлеры имеют силу инъекционного введения приблизительно 5 Н, приблизительно 6 Н, приблизительно 7 Н, приблизительно 8 Н, приблизительно 9 Н, приблизительно 10 Н, приблизительно 11 Н, приблизительно 12 Н, приблизительно 13 Н, приблизительно 14 Н, приблизительно 15 Н, приблизительно 16 Н, приблизительно 17 Н, приблизительно 18 Н, приблизительно 19 Н, приблизительно 20 Н, приблизительно 21 Н, приблизительно 22 Н, приблизительно 23 Н, приблизительно 24 Н или приблизительно 25 Н. В некоторых вариантах осуществления сила инъекционного введения относится к инъекции через иглу 30G.
Тканевые филлеры по настоящему изобретению включают композиции, дополнительно включающие один или более компонентов, таких как SPF, например, перекрестно-сшитые SPF и/или неперекрестно-сшитые SPF, гиалуроновая кислота, например, перекрестно-сшитая НА и/или неперекрестносшитая НА. В рамках изобретения термин перекрестно-сшитые SPF относится к SPF, перекрестносшитым с идентичными или неидентичными SPF. Перекрестно-сшитые SPF также можно обозначать как гомо-перекрестно-сшитые SPF. В рамках изобретения термин перекрестно-сшитая НА относится к НА, перекрестно-сшитой с идентичной или неидентичной НА. Перекрестно-сшитую НА также можно обозначать как гомо-перекрестно-сшитая НА. Тканевые филлеры по настоящему изобретению также могут включать SPF, перекрестно-сшитые с НА, и/или НА, перекрестно-сшитую с SPF. SPF, перекрестносшитые с НА, и/или НА, перекрестно-сшитую с SPF, также можно обозначать как перекрестно-сшитые SPF-HA или гетеро-перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции по изобретению являются монофазными. В некоторых вариантах осуществления композиции по изобретению являются двухфазными или многофазными. В некоторых вариантах осуществления композиции по изобретению включают неперекрестносшитую полимерную фазу, например, неперекрестно-сшитые SPF и/или неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции по изобретению включают перекрестно-сшитую фазу, например, перекрестно-сшитые SPF и/или перекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции по изобретению включают жидкую фазу, например, воду и/или водный раствор. В некоторых вариантах осуществления водный раствор может включать SPF. В некоторых вариантах осуществления водная фаза может включать НА. В некоторых вариантах осуществления жидкая фаза может включать неперекрестно-сшитый полимер, такой как неперекрестно-сшитая НА и/или неперекрестносшитые SPF.
В некоторых вариантах осуществления композиция по изобретению содержит фазу носителя. В связи с этим, описываемые композиции могут являться монофазными или многофазными композициями. В рамках изобретения термин фаза носителя является синонимом носителя и относится к материалу, используемому для повышения текучести гидрогеля. Носитель, предпочтительно, является, физиологически приемлемым носителем и может включать один или более общепринятых эксципиентов, которые можно использовать в фармацевтических композициях. В рамках изобретения термин физиологически приемлемый носитель относится к носителю, соответствующему или характерному для нормального функционирования живого организма. В связи с этим, введение композиции, содержащей гидрогель и носитель, по существу, не имеет долговременного или перманентного неблагоприятного эффекта при введении млекопитающему. Тканевые филлеры по настоящему изобретению включают носитель, где основная часть объема приходится на воду или физиологический раствор. Однако, другие носители, которые можно использовать, включают любой физиологически переносимый материал, улучшающийся в результате экструдируемости или intrudability гидрогеля через иглу или в целевую среду в организмехозяине. Потенциальные носители могут включать, в качестве неограничивающих примеров, физиологические буферные растворы, сыворотку, другие растворы белков, гели, состоящие из полимеров, включающих белки, гликопротеины, протеогликаны или полисахариды. Любые из указанных потенциальных носителей могут являться природными носителями, полностью синтетическими носителями или их комбинациями.
В одном из вариантов осуществления композиция, представленная в настоящем описании, включает один или более из модифицированных SPF, перекрестно-сшитых SPF, неперекрестно-сшитых SPF, модифицированной НА, перекрестно-сшитой НА, неперекрестно-сшитой НА, гомо-перекрестно-сшитых SPF, гомо-перекрестно-сшитой НА и гетеро-перекрестно-сшитых SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF и неперекрестно-сшитые SPF. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF и неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF и перекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осущест
- 33 045185 вления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают неперекрестно-сшитые SPF и неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают неперекрестно-сшитые SPF и перекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают неперекрестно-сшитые SPF и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитые SPF и неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестносшитые SPF, неперекрестно-сшитые SPF и перекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитые SPF и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА и неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестносшитые SPF, перекрестно-сшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают неперекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА и неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают неперекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании включают неперекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА и неперекрестносшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитые SPF, неперекрестносшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА, неперекрестно-сшитую НА и перекрестносшитые SPF-HA. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают неперекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА, неперекрестно-сшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF, неперекрестно-сшитые SPF, перекрестно-сшитую НА, неперекрестносшитую НА и перекрестно-сшитые SPF-HA.
В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые SPF. В некоторых вариантах осуществления композиции, представленные в настоящем описании, включают SPF и гиалуроновую кислоту (НА). В одном из аспектов композиции на основе SPF/HA, представленные в настоящем описании, включают перекрестно-сшитые молекулы НА. В некоторых вариантах осуществления композиции включают перекрестно-сшитые молекулы SPF-HA. В некоторых вариантах осуществления композиции включают неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления композиции могут включать неперекрестно-сшитые SPF. В некоторых вариантах осуществления композиции могут включать по меньшей мере одно дополнительное средство. В некоторых вариантах осуществления композиции включают перекрестно-сшитые SPF-SPF, SPF-HA и/или НА-НА с разной стабильностью, что приводит к получению композиций с различной степенью биоабсорбируемости и/или биорезорбируемости.
В некоторых вариантах осуществления НА перекрестно-сшита в матрице. В некоторых вариантах осуществления в матрице НА инкапсулируют или полуинкапсулируют один или более SPF. В некоторых вариантах осуществления НА перекрестно-сшита с одним или более SPF.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры или их части являются биосовместимыми, биодеградируемыми, биоабсорбируемыми, биорезорбируемыми или их комбинацией. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, включают жидкий компонент, например, однокомпонентную жидкость или раствор, включающий, по существу, одну или более жидкостей. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры включают воду или водный раствор. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры являются инъецируемыми, имплантируемыми или вводимыми под кожу любыми способами, известными в этой области, например, после хирургической резекции ткани. В некоторых вариантах осуществления композиции представляют собой
- 34 045185 дермальные филлеры. В некоторых вариантах осуществления композиции являются стерильными.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать приблизительно 1 мас./мас.% SPF и приблизительно 0,3 мас./мас.% лидокаина.
Настоящее изобретение относится к способам производства композиций, включающих фрагменты белка шелка (SPF) и гиалуроновую кислоту (НА), способам введения композиций, включающих SPF и НА, и способам лечения с использованием композиций, включающих SPF и НА.
Определения.
В рамках изобретения термин фиброин включает фиброин, белок шелка тутового шелкопряда, насекомого или паука, или рекомбинантный фиброин шелка. В варианте осуществления фиброин получают из Bombyx mori.
В рамках изобретения термины по существу, не содержит серицин или по существу, не содержащий серицин относятся к волокнам шелка, из которого удалена основная часть белка серицина, и/или SPF, полученным из волокон шелка, из которых удалена основная часть белка серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,01 мас./мас.% до приблизительно 10,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,01 мас./мас.% до приблизительно 9,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,01 мас./мас.% до приблизительно 8,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,01 мас./мас.% до приблизительно 7,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,01 мас./мас.% до приблизительно 6,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,01 мас./мас.% до приблизительно 5,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,05 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,1 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 0,5 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 1,0 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 1,5 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 2,0 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, содержащим от приблизительно 2,5 мас./мас.% до приблизительно 4,0 мас./мас.% серицина. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, имеющим содержание серицина от приблизительно 0,01 мас./мас.% до приблизительно 0,1 мас./мас.%. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, имеющим содержание серицина ниже приблизительно 0,1 мас./мас.%. В варианте осуществления термин фиброин шелка и SPF, по существу, не содержащие серицин относится к фиброину шелка и SPF, имеющим содержание серицина ниже приблизительно 0,05 мас./мас.%. В варианте осуществления, если источник шелка добавляют к кипящему (100°С) водному раствору карбоната натрия при времени обработки от приблизительно 30 мин до приблизительно 60 мин, достигают потери при обесклеивании от приблизительно 26 мас.%, до приблизительно 31 мас.%.
В рамках изобретения термин по существу, гомогенный может относиться к чистым фрагментам белка на основе фиброина шелка, имеющим нормальное распределение относительно идентифицированной молекулярной массы. В рамках изобретения термин по существу гомогенный может относиться к равномерному распределению добавки, например, лидокаина, по всей композиции по настоящему изобретению.
В рамках изобретения термин по существу, не содержит неорганические примеси означает, что композиция содержит 0,1 мас./мас.% примесей или менее. В варианте осуществления термин по существу, не содержит неорганические примеси относится к композиции, содержащей 0,05 мас./мас.% примесей или менее. В варианте осуществления термин по существу, не содержит неорганические приме- 35 045185 си относится к композиции, содержащей 0,01 мас./мас.% примесей или менее. В варианте осуществления количество неорганических примесей составляет от 0 м.д. (неопределимо или ND) до 1000 м.д. В варианте осуществления количество неорганических примесей составляет от ND до приблизительно 500 м.д. В варианте осуществления количество неорганических примесей составляет от ND до приблизительно 400 м.д. В варианте осуществления количество неорганических примесей составляет от ND до приблизительно 300 м.д. В варианте осуществления количество неорганических примесей составляет от ND до приблизительно 200 м.д. В варианте осуществления количество неорганических примесей составляет от ND до приблизительно 100 м.д. В варианте осуществления количество неорганических примесей составляет от 10 м.д. до 1000 м.д.
В рамках изобретения термин по существу, не содержит органические примеси означает, что композиция содержит 0,1 мас./мас.% примесей или менее. В варианте осуществления термин по существу, не содержит органические примеси относится к композиции, содержащей 0,05 мас./мас.% примесей или менее. В варианте осуществления термин по существу, не содержит органические примеси относится к композиции, содержащей 0,01 мас./мас.% примесей или менее. В варианте осуществления количество органических примесей составляет от 0 м.д. (неопределимо или ND) до 1000 м.д. В варианте осуществления количество органических примесей составляет от ND до приблизительно 500 м.д. В варианте осуществления количество органических примесей составляет от ND до приблизительно 400 м.д. В варианте осуществления количество органических примесей составляет от ND до приблизительно 300 м.д. В варианте осуществления количество органических примесей составляет от ND до приблизительно 200 м.д. В варианте осуществления количество органических примесей составляет от ND до приблизительно 100 м.д. В варианте осуществления количество органических примесей составляет от 10 м.д. до 1000 м.д.
В рамках изобретения термин неперекрестно-сшитый относится к отсутствию межмолекулярных связей, соединяющих отдельные полимерные молекулы матрицы, макромолекулы и/или мономерные цепи. В связи с этим, неперекрестно-сшитый полимер матрицы не соединен с каким-либо другим полимером матрицы с помощью внутримолекулярной цепи.
Тканевые филлеры, композиции или их части по настоящему изобретению проявляют биосовместимость или являются биосовместимыми, что означает, что композиции совместимы с живой тканью или живой системой, не являясь, по существу, токсичными, вредными или физиологически реактивными и не вызывая иммунологическое отторжение. Термин биосовместимый включает термины биоабсорбируемый, биорезорбируемый и биодеградируемый, определенные в настоящем описании.
Тканевые филлеры, композиции или их части по настоящему изобретению могут являться биоабсорбируемыми, биорезорбируемыми и/или биодеградируемыми. В рамках изобретения термин биоабсорбируемый относится к материалам или веществам, распадающимся после имплантации в организм, независимо от механизма распада, такого как растворение, деградация, абсорбция и экскреция. В рамках изобретения термин биорезорбируемый означаемый способный абсорбироваться организмом. В рамках изобретения термин биодеградируемый относится к материалам, разрушающимся в физиологических условиях на побочные продукты. Такие физиологические условия включают, например, гидролиз (разрушение посредством гидролитического расщепления), ферментативный катализ (ферментативную деградацию), механические взаимодействия и т.п. В рамках изобретения термин биодеградируемый также включает термин биорезорбируемый, означающий материал или вещество, разрушающееся в физиологических условиях до продуктов, подвергающихся биорезорбции в организме-хозяине, а именно, становящихся метаболитами биохимических систем организма-хозяина. В рамках изобретения термины биорезорбируемый и биорезорбция включают такие процессы, как клеточно-опосредованная деградация, ферментативная деградация и/или гидролитическая деградация биорезорбируемого полимера, и/или элиминация биорезорбируемого полимера из живой ткани, как будет понятно специалисту в этой области. В некоторых вариантах осуществления композиции и материалы SPF-HA, представленные в настоящем описании, могут являться биосовместимыми, биорезорбируемыми, биоабсорбируемыми и/или биодеградируемыми.
Если тканевые филлеры по настоящему изобретению являются биодеградируемыми или биорезорбируемыми, они могут быть устойчивыми к биодеградации или биорезорбции в течение по меньшей мере приблизительно 1 дня, или по меньшей мере приблизительно 2 дней, или по меньшей мере приблизительно 3 дней, или по меньшей мере приблизительно 4 дней, по меньшей мере приблизительно 5 дней, или по меньшей мере приблизительно 10 дней, или по меньшей мере приблизительно 15 дней, или по меньшей мере приблизительно 20 дней, или по меньшей мере приблизительно 25 дней, или по меньшей мере приблизительно 30 дней, или по меньшей мере приблизительно 35 дней, или по меньшей мере приблизительно 40 дней, или по меньшей мере приблизительно 45 дней, или по меньшей мере приблизительно 50 дней, или по меньшей мере приблизительно 60 дней, или по меньшей мере приблизительно 70 дней, или по меньшей мере приблизительно 80 дней, или по меньшей мере приблизительно 90 дней, или по меньшей мере приблизительно 100 дней, или по меньшей мере приблизительно 110 дней, или по меньшей мере приблизительно 120 дней, или по меньшей мере приблизительно 130 дней, или по меньшей мере приблизительно 140 дней, или по меньшей мере приблизительно 140 дней, или по меньшей
- 36 045185 мере приблизительно 150 дней, или по меньшей мере приблизительно 160 дней, или по меньшей мере приблизительно 170 дней, или по меньшей мере приблизительно 180 дней, или по меньшей мере приблизительно 190 дней, или по меньшей мере приблизительно 200 дней, или по меньшей мере приблизительно 250 дней, или по меньшей мере приблизительно 300 дней, или по меньшей мере приблизительно 1 года, или по меньшей мере приблизительно 2 лет, или они могут быть устойчивыми к биодеградации в течение менее приблизительно 5 дней, или не более приблизительно 10 дней, или не более приблизительно 15 дней, или не более приблизительно 20 дней, или не более приблизительно 25 дней, или не более приблизительно 30 дней, или не более приблизительно 35 дней, или не более приблизительно 40 дней, или не более приблизительно 45 дней, или не более приблизительно 50 дней, или не более приблизительно 60 дней, или не более приблизительно 70 дней, или не более приблизительно 80 дней, или не более приблизительно 90 дней, или не более приблизительно 100 дней, или не более приблизительно 110 дней, или не более приблизительно 120 дней, или не более приблизительно 130 дней, или не более приблизительно 140 дней, или не более приблизительно 140 дней, или не более приблизительно 150 дней, или не более приблизительно 160 дней, или не более приблизительно 170 дней, или не более приблизительно 180 дней, или не более приблизительно 190 дней, или не более приблизительно 200 дней, или не более приблизительно 250 дней, или не более приблизительно 300 дней, или не более приблизительно 1 года, или не более приблизительно 2 лет.
Если тканевые филлеры по настоящему изобретению являются биоабсорбируемыми, они могут быть устойчивыми к биоабсорбции в течение по меньшей мере приблизительно 1 дня, или по меньшей мере приблизительно 2 дней, или по меньшей мере приблизительно 3 дней, или по меньшей мере приблизительно 4 дней, по меньшей мере приблизительно 5 дней, или по меньшей мере приблизительно 10 дней, или по меньшей мере приблизительно 15 дней, или по меньшей мере приблизительно 20 дней, или по меньшей мере приблизительно 25 дней, или по меньшей мере приблизительно 30 дней, или по меньшей мере приблизительно 35 дней, или по меньшей мере приблизительно 40 дней, или по меньшей мере приблизительно 45 дней, или по меньшей мере приблизительно 50 дней, или по меньшей мере приблизительно 60 дней, или по меньшей мере приблизительно 70 дней, или по меньшей мере приблизительно 80 дней, или по меньшей мере приблизительно 90 дней, или по меньшей мере приблизительно 100 дней, или по меньшей мере приблизительно 110 дней, или по меньшей мере приблизительно 120 дней, или по меньшей мере приблизительно 130 дней, или по меньшей мере приблизительно 140 дней, или по меньшей мере приблизительно 140 дней, или по меньшей мере приблизительно 150 дней, или по меньшей мере приблизительно 160 дней, или по меньшей мере приблизительно 170 дней, или по меньшей мере приблизительно 180 дней, или по меньшей мере приблизительно 190 дней, или по меньшей мере приблизительно 200 дней, или по меньшей мере приблизительно 250 дней, или по меньшей мере приблизительно 300 дней, или по меньшей мере приблизительно 1 года, или по меньшей мере приблизительно 2 лет, или они могут быть устойчивыми к биоабсорбции в течение менее приблизительно 5 дней, или не более приблизительно 10 дней, или не более приблизительно 15 дней, или не более приблизительно 20 дней, или не более приблизительно 25 дней, или не более приблизительно 30 дней, или не более приблизительно 35 дней, или не более приблизительно 40 дней, или не более приблизительно 45 дней, или не более приблизительно 50 дней, или не более приблизительно 60 дней, или не более приблизительно 70 дней, или не более приблизительно 80 дней, или не более приблизительно 90 дней, или не более приблизительно 100 дней, или не более приблизительно 110 дней, или не более приблизительно 120 дней, или не более приблизительно 130 дней, или не более приблизительно 140 дней, или не более приблизительно 140 дней, или не более приблизительно 150 дней, или не более приблизительно 160 дней, или не более приблизительно 170 дней, или не более приблизительно 180 дней, или не более приблизительно 190 дней, или не более приблизительно 200 дней, или не более приблизительно 250 дней, или не более приблизительно 300 дней, или не более приблизительно 1 года или не более приблизительно 2 лет.
Как представлено в настоящем описании, степень биодеградации, биоабсорбции и биорезорбции можно модифицировать и/или контролировать, например, добавляя в композиции, представленные в настоящем описании, одно или более средств, задерживающих биодеградацию, биоабсорбцию и/или биорезорбцию. Кроме того, степень биодеградации, биоабсорбции и биорезорбции можно модифицировать и/или контролировать, повышая или снижая степень перекрестной сшивки полимеров, присутствующих в полимерных материалах, представленных в настоящем описании. Например, скорость биодеградации, биоабсорбции и/или биорезорбции композиций, представленных в настоящем описании, можно повышать, снижая степень перекрестной сшивки в полимерных материалах, представленных в настоящем описании. Альтернативно, скорость биодеградации, биоабсорбции и/или биорезорбции тканевых филлеров и композиций, представленных в настоящем описании, можно снижать, повышая степень перекрестной сшивки в полимерных материалах, представленных в настоящем описании.
Тканевые филлеры и композиции по настоящему изобретению являются гипоаллергенными, что означает, что маловероятно, что они вызовут аллергическую реакцию. Такую гипоаллергенность могут подтверждать участники исследования местно, нанося композиции по настоящему изобретению на кожу на длительный период времени. В варианте осуществления длительный период времени составляет приблизительно 3 дня. В варианте осуществления длительный период времени составляет приблизительно 7
- 37 045185 дней. В варианте осуществления длительный период времени составляет приблизительно 14 дней. В варианте осуществления длительный период времени составляет приблизительно 21 день. В варианте осуществления длительный период времени составляет приблизительно 30 дней. В варианте осуществления длительный период времени выбран из группы, состоящей из приблизительно 1 месяца, приблизительно 2 месяцев, приблизительно 3 месяцев, приблизительно 4 месяцев, приблизительно 5 месяцев, приблизительно 6 месяцев, приблизительно 7 месяцев, приблизительно 8 месяцев, приблизительно 9 месяцев, приблизительно 10 месяцев, приблизительно 11 месяцев, приблизительно 12 месяцев и бесконечности.
В рамках изобретения термин низкомолекулярный шелк относится к фрагментам белка шелка, имеющим молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 20 кДа. В некоторых вариантах осуществления целевая низкая молекулярная масса для некоторых фрагментов белка шелка может составлять приблизительно 11 кДа.
В рамках изобретения среднемолекулярный шелк относится к фрагментам белка шелка, имеющим молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 20 кДа до приблизительно 55 кДа. В некоторых вариантах осуществления целевая низкая молекулярная масса для некоторых фрагментов белка шелка может составлять приблизительно 40 кДа.
В рамках изобретения термин высокомолекулярный шелк относится к фрагментам белка шелка, имеющим молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 55 кДа до приблизительно 150 кДа. В некоторых вариантах осуществления целевая низкая молекулярная масса для некоторых фрагментов белка шелка может составлять от приблизительно 100 кДа до приблизительно 145 кДа.
В некоторых вариантах осуществления молекулярные массы, представленные в настоящем описании, например, в отношении низкомолекулярных SPF, среднемолекулярных SPF, высокомолекулярных SPF, можно преобразовывать в приблизительное количество аминокислот, содержащихся в соответствующих природных или рекомбинантных белках, таких как природные или рекомбинантные белки шелка, как будет понятно специалисту в этой области. Например, средняя масса аминокислоты может составлять приблизительно 110 дальтон, т.е. 110 г/моль. Таким образом, в некоторых вариантах осуществления разделение молекулярной массы линейного белка на 110 дальтон можно использовать для приблизительного определения количества аминокислотные остатки в нем.
В рамках изобретения термин полидисперсность относится к мере распределения молекулярной массы в указанном образце полимера. Полидисперсность можно вычислять посредством разделения средневзвешенной молекулярной массы (Mw) на среднечисловую молекулярную массу (Mn). В рамках изобретения термин средневзвешенная молекулярная масса (Mw), как правило, относится к измерению молекулярной массы, зависящему от долей полимерных молекул в соответствии с их размерами. Средневзвешенную молекулярную массу можно определять по формуле:
Mw ——L
ΣΝ^ ,
где Mi является молекулярной массой цепи, a Ni является количеством цепей с такой молекулярной массой. В рамках изобретения термин среднечисловая молекулярная масса (Mn), как правило, относится к измерению молекулярной массы, вычисляемой посредством разделения общей массы всех молекул полимеров в образце на общее количество молекул полимеров в образце. Среднечисловую молекулярную массу можно определять по формуле:
где Mi является молекулярной массой цепи, a Ni является количеством цепей с такой молекулярной массой. Например, монодисперсный полимер, в котором все полимерные цепи равны, имеет полидисперсность (Mw/Mn) 1. В основном, средние значения молекулярной массы можно определять посредством гель-проникающей хроматографии (GPC) и эксклюзионной хроматография (SEC). Чем больше индекс полидисперсности, тем шире диапазон молекулярной массы.
В рамках изобретения термин тканевой филлер в широком смысле относится к материалу, который можно вводить в мягкую ткань и вокруг нее для добавления объема, добавления поддержки или другого лечения недостаточности мягкой ткани. Термин тканевой филлер также включает дермальные филлеры; однако, термин дермальный филлер не следует истолковывать как накладывающий какоелибо ограничение на локализацию и тип введения такого филлера. Несмотря на это, дермальные филлеры, представленные в настоящем описании, как правило, могут включать использование и введение таких дермальных филлеров на множестве уровней под дермой. В рамках изобретения термин мягкая ткань может относиться к тканям, соединяющим, поддерживающим или окружающим другие структуры и органы тела. Например, мягкие ткани, представленные в настоящем описании, могут включать, в качестве неограничивающих примеров, кожу, дермальные ткани, субдермальные ткани, кожные ткани, подкожные ткани, интрадуральную ткань, мышцы, сухожилия, связки, фиброзные ткани, жир, кровеносные сосуды и артерии, нервы и синовиальные (интрадермальные) ткани.
В рамках изобретения термин кросс-линкер на основе эпокси-группы относится к молекулярному мостику между двумя молекулами в одной или разных полимерных цепях, получаемых с использовани
- 38 045185 ем перекрестно-сшивающего предшественника, включающего эпокси-группу, например, диглицидилового простого эфира 1,4-бутандиола (BDDE), диглицидилового простого эфира полиэтиленгликоля (PEGDE, или PEGDGE) или полиэпокси-линкера с фиброином шелка или фрагментом фиброина шелка. Без желания быть связанными какой-либо конкретной теорией, полагают, что при реакции с активным центром в полимерной цепи, включенном в боковую цепь полимера, эпоксидное кольцо открывается с образованием вторичного спирта и новой связи (схема 1). Реакционноспособные группы включают, в качестве неограничивающих примеров, нуклеофильные группы, такие как карбоксильные группы, ами ногруппы или гидроксильные группы.
Схема 1
В рамках изобретения термин ауто-перекрестная сшивка относится к а) перекрестной сшивке между двумя цепями полимеров схожей химической природы, например, перекрестной сшивке между двумя цепями гиалуроновой кислоты или перекрестной сшивке между двумя цепями SPF, или b) перекрестной сшивке между перекрестно-сшивающими группами на одной полимерной цепи с образованием циклического сложного эфира (лактона), циклического амида, циклической конструкции, включающей перекрестно-сшивающую молекулу, или т.п., например, перекрестной сшивке между двумя группами на одной цепи гиалуроновой кислоты или перекрестной сшивке между двумя группами на одной цепи SPF.
В рамках изобретения термины перекрестная сшивка нулевой длины, и/или перекрестная сшивка, включающая связь, и/или перекрестная сшивка с использованием активирующего средства относятся к перекрестной сшивке между двумя группами на отдельных полимерных цепях или одной полимерной цепи, где группы реагируют непосредственно друг с другом, и между ними не встраивается дополнительная перекрестно-сшивающая молекула. Перекрестная сшивка между группой карбоновой ки слоты и амином или спиртом, где одну из групп активируют с помощью активирующего средства, например карбодиимида, является примером перекрестной сшивки нулевой длины.
В рамках изобретения эффект Тиндаля и/или рассеяние Тиндаля является нежелательным явлением, возникающим у некоторых пациентов, которым вводят тканевые филлеры. Эффект Тиндаля отличается появлением синей окраски в месте инъекции тканевого филлера, соответствующей видимой композиции дермального филлера, наблюдаемой через полупрозрачный эпидермис. Эффект Тиндаля можно наблюдать, когда рассеивающие свет твердые частицы диспергированы в, в ином случае, пропускающей свет среде, если поперечный срез частиц имеет размер в конкретном диапазоне, как правило, несколько ниже или вблизи длины волны видимого света. При эффекте Тиндаля свет с большей длиной волны (например, красный) в большей степени проходит через среду, при этом свет с меньшей длиной волны (например, синий) в большей степени отражается благодаря рассеянию, создавая общее впечатление, что среда окрашена в синий цвет.
Фрагменты белка шелка.
В некоторых вариантах осуществления композиции на основе белка шелка и фрагменты белка шелка или способы их получения могут включать композиции, фрагменты и способы, описанные в публикациях патентных заявок США № 2015/00933340, 2015/0094269, 2016/0193130, 2016/0022560, 2016/0022561, 2016/0022562, 2016/0022563, и 2016/0222579, 2016/0281294 и патентах США № 9187538, 9522107, 9517191, 9522108, 9511012 и 9545369, полное содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки.
В рамках изобретения термин фрагменты белка шелка (SPF), как правило, относится к смеси, композиции или популяции пептидов и/или белков, получаемых из шелка. В некоторых вариантах осу
- 39 045185 ществления SPF получают в виде, по существу, чистых и легко масштабируемых растворов смесей SPF, которые можно использовать в различных областях. Растворы получают из сырого, чистого, интактного материала белка шелка и обрабатывают для удаления любого серицина и достижения желаемой средневзвешенной молекулярной массы (MW) и полидисперсности смеси фрагментов. Выбранные параметры способа можно изменять для достижения индивидуальных характеристик конечного фрагмента белка шелка в зависимости от предполагаемого использования. Получаемый раствор конечных фрагментов представляют собой чистые фрагменты белка шелка и воду с уровнями технологических загрязнений от м.д. до неопределимых уровней, приемлемых в области фармацевтики, медицины и косметологии. Можно дополнительно изменять концентрацию, размер и полидисперсность фрагментов белка шелка в растворе в зависимости от желаемого использования и требований к характеристикам. В варианте осуществления чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка в растворе, по существу, не содержат серицин, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа и имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В варианте осуществления чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка в растворе, по существу, не содержат серицин, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа и имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В варианте осуществления чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка в растворе, по существу, не содержат серицин, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа и имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В варианте осуществления чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка в растворе, по существу, не содержат серицин, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа и имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В варианте осуществления чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка в растворе, по существу, не содержат серицин, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа и имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В варианте осуществления чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка в растворе, по существу, не содержат серицин, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 80 кДа до приблизительно 150 кДа и имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0.
В варианте осуществления фрагменты белка шелка, представленные в настоящем описании, можно получать в растворе или в виде твердого вещества, при этом твердое вещество суспендируют в физиологическом растворе (например, воде, физиологическом растворе и т.п.) или геле НА, как представлено в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления фрагменты белка шелка, представленные в настоящем описании, можно получать в липосомах или микросферах перед их накоплением в геле НА.
В варианте осуществления растворы шелка по настоящему изобретению можно использовать для получения композиций тканевого филлера, представленных в настоящем описании. В варианте осуществления растворы можно использовать для получения гелей, которые можно гомогенизировать с НА и дополнительными средствами для получения тканевых филлеров, представленных в настоящем описании. В зависимости от используемого раствора шелка и способов отливки пленок или гелей достигают различных свойств.
В некоторых вариантах осуществления процентное содержание SPF по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет по меньшей мере 0,01%, или по меньшей мере 0,1%, или по меньшей мере 0,2%, или по меньшей мере 0,3%, или по меньшей мере 0,4%, или по меньшей мере 0,5%, или по меньшей мере 0,6%, или по меньшей мере 0,7%, или по меньшей мере 0,8%, или по меньшей мере 0,9%, или по меньшей мере 1%, или по меньшей мере 2%, или по меньшей мере 3%, или по меньшей мере 4%, или по меньшей мере 5%, или по меньшей мере 6%, или по меньшей мере 7%, или по меньшей мере 8%, или по меньшей мере 9%, или по меньшей мере 10%, или по меньшей мере 11%, или по меньшей мере 12%, или по меньшей мере 13%, или по меньшей мере 14%, или по меньшей мере 15%, или по меньшей мере 16%, или по меньшей мере 17%, или по меньшей мере 18%, или по меньшей мере 19%, или по меньшей мере 20%, или по меньшей мере 21%, или по меньшей мере 22%, или по меньшей мере 23%, или по меньшей мере 24%, или по меньшей мере 25%, или по меньшей мере 26%, или по меньшей мере 27%, или по меньшей мере 28%, или по меньшей мере 29%, или по меньшей мере 30%, или по меньшей мере 31%, или по меньшей мере 32%, или по меньшей мере 33%, или по меньшей мере 34%, или по меньшей мере 35%, или по меньшей мере 36%, или по меньшей мере 37%, или по меньшей мере 38%, или по меньшей мере 39%, или по меньшей мере 40%, или по меньшей мере 41%, или по меньшей мере 42%, или по меньшей мере 43%, или по меньшей мере 44%, или по меньшей мере 45%, или по меньшей мере 46%, или по меньшей мере 47%, или по меньшей мере 48%, или по меньшей мере 49%, или по меньшей мере 50%, или по меньшей мере 51%, или по меньшей мере 52%, или по меньшей мере 53%, или по меньшей мере 54%, или по меньшей мере 55%, или по меньшей мере 56%, или по меньшей мере 57%, или по меньшей мере 58%, или по меньшей мере 59%, или по меньшей мере 60%, или по меньшей мере 61%, или по меньшей мере 62%, или по меньшей мере 63%, или по меньшей мере
- 40 045185
64%, или по меньшей мере 65%, или по меньшей мере 66%, или по меньшей мере 67%, или по меньшей мере 68%, или по меньшей мере 69%, или по меньшей мере 70%, или по меньшей мере 71%, или по меньшей мере 72%, или по меньшей мере 73%, или по меньшей мере 74%, или по меньшей мере 75%, или по меньшей мере 76%, или по меньшей мере 77%, или по меньшей мере 78%, или по меньшей мере 79%, или по меньшей мере 80%, или по меньшей мере 81%, или по меньшей мере 82%, или по меньшей мере 83%, или по меньшей мере 84%, или по меньшей мере 85%, или по меньшей мере 86%, или по меньшей мере 87%, или по меньшей мере 88%, или по меньшей мере 89%, или по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 91%, или по меньшей мере 92%, или по меньшей мере 93%, или по меньшей мере 94%, или по меньшей мере 95%, или по меньшей мере 96%, или по меньшей мере 97%, или по меньшей мере 98%, или по меньшей мере 99%, или по меньшей мере 99,5%, или по меньшей мере 99,9%.
В некоторых вариантах осуществления процент содержание SPF по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет не более 0,01%, или не более 0,1%, или не более 0,2%, или не более 0,3%, или не более 0,4%, или не более 0,5%, или не более 0,6%, или не более 0,7%, или не более 0,8%, или не более 0,9%, или не более 1%, или не более 2%, или не более 3%, или не более 4%, или не более 5%, или не более 6%, или не более 7%, или не более 8%, или не более 9%, или не более 10%, или не более 11%, или не более 12%, или не более 13%, или не более 14%, или не более 15%, или не более 16%, или не более 17%, или не более 18%, или не более 19%, или не более 20%, или не более 21%, или не более 22%, или не более 23%, или не более 24%, или не более 25%, или не более 26%, или не более 27%, или не более 28%, или не более 29%, или не более 30%, или не более 31%, или не более 32%, или не более 33%, или не более 34%, или не более 35%, или не более 36%, или не более 37%, или не более 38%, или не более 39%, или не более 40%, или не более 41%, или не более 42%, или не более 43%, или не более 44%, или не более 45%, или не более 46%, или не более 47%, или не более 48%, или не более 49%, или не более 50%, или не более 51%, или не более 52%, или не более 53%, или не более 54%, или не более 55%, или не более 56%, или не более 57%, или не более 58%, или не более 59%, или не более 60%, или не более 61%, или не более 62%, или не более 63%, или не более 64%, или не более 65%, или не более 66%, или не более 67%, или не более 68%, или не более 69%, или не более 70%, или не более 71%, или не более 72%, или не более 73%, или не более 74%, или не более 75%, или не более 76%, или не более 77%, или не более 78%, или не более 79%, или не более 80%, или не более 81%, или не более 82%, или не более 83%, или не более 84%, или не более 85%, или не более 86%, или не более 87%, или не более 88%, или не более 89%, или не более 90%, или не более 91%, или не более 92%, или не более 93%, или не более 94%, или не более 95%, или не более 96%, или не более 97%, или не более 98%, или не более 99%, или не более 99,5%, или не более 99,9%.
В некоторых вариантах осуществления процент содержания SPF по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет приблизительно 0,01%, или приблизительно 0,1%, или приблизительно 0,2%, или приблизительно 0,3%, или приблизительно 0,4%, или приблизительно 0,5%, или приблизительно 0,6%, или приблизительно 0,7%, или приблизительно 0,8%, или приблизительно 0,9%, или приблизительно 1%, или приблизительно 2%, или приблизительно 3%, или приблизительно 4%, или приблизительно 5%, или приблизительно 6%, или приблизительно 7%, или приблизительно 8%, или приблизительно 9%, или приблизительно 10%, или приблизительно 11%, или приблизительно 12%, или приблизительно 13%, или приблизительно 14%, или приблизительно 15%, или приблизительно 16%, или приблизительно 17%, или приблизительно 18%, или приблизительно 19%, или приблизительно 20%, или приблизительно 21%, или приблизительно 22%, или приблизительно 23%, или приблизительно 24%, или приблизительно 25%, или приблизительно 26%, или приблизительно 27%, или приблизительно 28%, или приблизительно 29%, или приблизительно 30%, или приблизительно 31%, или приблизительно 32%, или приблизительно 33%, или приблизительно 34%, или приблизительно 35%, или приблизительно 36%, или приблизительно 37%, или приблизительно 38%, или приблизительно 39%, или приблизительно 40%, или приблизительно 41%, или приблизительно 42%, или приблизительно 43%, или приблизительно 44%, или приблизительно 45%, или приблизительно 46%, или приблизительно 47%, или приблизительно 48%, или приблизительно 49%, или приблизительно 50%, или приблизительно 51%, или приблизительно 52%, или приблизительно 53%, или приблизительно 54%, или приблизительно 55%, или приблизительно 56%, или приблизительно 57%, или приблизительно 58%, или приблизительно 59%, или приблизительно 60%, или приблизительно 61%, или приблизительно 62%, или приблизительно 63%, или приблизительно 64%, или приблизительно 65%, или приблизительно 66%, или приблизительно 67%, или приблизительно 68%, или приблизительно 69%, или приблизительно 70%, или приблизительно 71%, или приблизительно 72%, или приблизительно 73%, или приблизительно 74%, или приблизительно 75%, или приблизительно 76%, или приблизительно 77%, или приблизительно 78%, или приблизительно 79%, или приблизительно 80%, или приблизительно 81%, или приблизительно 82%, или приблизительно 83%, или приблизительно 84%, или приблизительно 85%, или приблизительно 86%, или приблизительно 87%, или приблизительно 88%, или приблизительно 89%, или приблизительно 90%, или приблизительно 91%, или приблизительно 92%, или приблизительно 93%, или приблизительно 94%, или приблизительно 95%, или приблизительно 96%, или приблизительно 97%, или приблизительно 98%, или приблизительно 99%, или приблизительно 99,5%, или приблизительно 99,9%.
- 41 045185
В некоторых вариантах осуществления процент содержания SPF по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет от приблизительно 0,01% до приблизительно 100%, или от приблизительно 0,01% до приблизительно 99,9%, или от приблизительно 0,01% до приблизительно 75%; или от приблизительно 0,1% до приблизительно 95%, или от приблизительно 1% до приблизительно 95%, или от приблизительно 10% до приблизительно 95%; или от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 2%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 3%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 4%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 5%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 6%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 7%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 8%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 9%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 10%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 11%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 12%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 13%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 14%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 15%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 16%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 17%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 18%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 19%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 21%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 22%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 23%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 24%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 25%; или от приблизительно 1% до приблизительно 2%, или от приблизительно 1% до приблизительно 3%, или от приблизительно 1% до приблизительно
4%, или от приблизительно 1% до приблизительно 5%, или от приблизительно
6%, или от приблизительно 1% до приблизительно 7%, или от приблизительно
8%, или от приблизительно 1% до приблизительно 9%, или от приблизительно
10%, или от приблизительно 1% до приблизительно 11%, или от приблизительно 12%, или от приблизительно 1% до приблизительно 13%, или от приблизительно 14%, или от приблизительно 1% до приблизительно 15%, или от приблизительно 16%, или от приблизительно 1% до приблизительно 17%, или от приблизительно 18%, или от приблизительно 1% до приблизительно 19%, или от приблизительно 20%, или от приблизительно 1% до приблизительно 21%, или от приблизительно 22%, или от приблизительно 1% до приблизительно 23%, или от приблизительно
1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно 1% до приблизительно
24%, или от приблизительно 1% до приблизительно 25%; или от приблизительно 10% до приблизительно 20%, или от приблизительно 10% до приблизительно 25%, или от приблизительно 10% до приблизительно 30%, или от приблизительно 10% до приблизительно 35%, или от приблизительно 10% до приблизительно 40%, или от приблизительно 10% до приблизительно 45%, или от приблизительно 10% до приблизительно 50%, или от приблизительно 10% до приблизительно 55%, или от приблизительно 10% до приблизительно 60%, или от приблизительно 10% до приблизительно 65%, или от приблизительно 10% до приблизительно 70%, или от приблизительно 10% до приблизительно 75%, или от приблизительно 10% до приблизительно 80%, или от приблизительно 10% до приблизительно 85%, или от приблизительно 10% до приблизительно 90%, или от приблизительно 10% до приблизительно 100%.
SPF, представленные в настоящем описании, могут иметь различные механические и физические свойства в зависимости от степени кристалличности пептидов и/или белков SPF. В варианте осуществления композиция SPF по настоящему изобретению нерастворима в водном растворе по причине кристалличности белка. В варианте осуществления композиция SPF по настоящему изобретению растворима в водном растворе. В варианте осуществления SPF из композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть, составляющую приблизительно две трети, и аморфную область, составляющую приблизительно одну треть. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть, составляющую приблизительно половину, и аморфную область, составляющую приблизительно половину. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 99% и аморфную область 1%. В варианте осуществления SPF композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 95% и аморфную область 5%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 90% и аморфную область 10%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 85% и аморфную область 15%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 80% и аморфную область 20%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 75% и аморфную область 25%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 70% и аморфную область 30%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 65% и аморфную область 35%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 60% и аморфную область 40%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 50% и аморфную область 50%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 40% и аморфную область 60%. В варианте осуществления SPF в ком
- 42 045185 позиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 35% и аморфную область 65%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 30% и аморфную область 70%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 25% и аморфную область 75%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 20% и аморфную область 80%.В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 15% и аморфную область 85%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 10% и аморфную область 90%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 5% и аморфную область 90%. В варианте осуществления SPF в композиции по настоящему изобретению включают кристаллическую часть 1% и аморфную область 99%.
В некоторых вариантах осуществления физические и механические свойства SPF варьируются в зависимости от степени наличия в композиция SPF областей α-спиралей и/или случайных спиралей. В некоторых вариантах осуществления гидрогель SPF, представленный в настоящем описании, имеет белковую структуру, по существу, не содержащую области α-спиралей и случайных спиралей. В аспектах этих вариантов осуществления гидрогель имеет белковую структуру, включающую, например, приблизительно 5% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 10% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 15% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 20% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 25% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 30% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 35% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 40% областей α-спиралей и случайных спиралей, приблизительно 45% областей α-спиралей и случайных спиралей или приблизительно 50% областей αспиралей и случайных спиралей. В других аспектах этих вариантов изобретения гидрогель имеет белковую структуру, включающую, например, не более 5% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 10% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 15% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 20% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 25% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 30% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 35% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 40% областей α-спиралей и случайных спиралей, не более 45% областей α-спиралей и случайных спиралей, или не более 50% областей α-спиралей и случайных спиралей. В других аспектах этих вариантов осуществления гидрогель имеет белковую структуру, включающую, например, от приблизительно 5% до приблизительно 10% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 5% до приблизительно 15% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 5% до приблизительно 20% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 5% до приблизительно 25% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 5% до приблизительно 30% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 5% до приблизительно 40% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 5% до приблизительно 50% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 10% до приблизительно 20% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 10% до приблизительно 30% областей αспиралей и случайных спиралей, от приблизительно 15% до приблизительно 25% областей α-спиралей и случайных спиралей, от приблизительно 15% до приблизительно 30% областей α-спиралей и случайных спиралей или от приблизительно 15% до приблизительно 35% областей α-спиралей и случайных спиралей.
В некоторых вариантах осуществления композиции растворов SPF по настоящему изобретению имеют стабильность при хранении, т.е. они не будут медленно или спонтанно желироваться при хранении в водном растворе без очевидной агрегации фрагментов и/или повышения молекулярной массы с течением времени от 10 дней до 3 лет в зависимости от условий хранения, процента шелка, количества транспортировок и условий транспортировок. Кроме того, можно изменять pH для увеличения срока годности и/или поддержания условий транспортировки, предотвращая преждевременный фолдинг и агрегацию шелка. В варианте осуществления композиция раствора SPF по настоящему изобретению имеет стабильность при хранении в течение до 2 недель при комнатной температуре (RT). В варианте осуществления композиция раствора SPF по настоящему изобретению имеет стабильность при хранении в течение до 4 недель при RT. В варианте осуществления композиция раствора SPF по настоящему изобретению имеет стабильность при хранении в течение до 6 недель при RT. B варианте осуществления композиция раствора SPF по настоящему изобретению имеет стабильность при хранении в течение до 8 недель при RT. В варианте осуществления композиция раствора SPF по настоящему изобретению имеет стабильность при хранении в течение до 10 недель при RT. В варианте осуществления композиция раствора SPF по настоящему изобретению имеет стабильность при хранении в течение до 12 недель при RT. В варианте осуществления композиция раствора SPF по настоящему изобретению имеет стабильность при хранении в диапазоне от приблизительно 4 недель до приблизительно 52 недель при RT. В табл. 1 ниже показаны результаты тестирования стабильности при хранении для вариантов осуществления компози
- 43 045185 ций SPF по настоящему изобретению.
Таблица 1
Стабильность при хранении композиций SPF по настоящему изобретению
| % шелка | Температура | Время до желирования |
| 2 | RT | 4 недели |
| 2 | 4°С | >9 недель |
| 4 | RT | 4 недели |
| 4 | 4°С | >9 недель |
| 6 | RT | 2 недели |
| 6 | 4°С | >9 недель |
В композицию раствора SPF по настоящему изобретению можно добавлять известную добавку, такую как витамин (например, витамин С), для получения геля, являющегося стабильным в период от 10 дней до 3 лет при комнатной температуре (RT). Оба примера, композицию SPF и композицию SPF с добавкой, можно лиофилизировать для усиленного контроля хранения в диапазоне от 10 дней до 10 лет в зависимости от условий хранения и транспортировки. В качестве сырого ингредиента в медицине, на потребительском рынке и в электронике также можно использовать лиофилизированный порошок шелка. Кроме того, лиофилизированный порошок шелка после хранения можно ресуспендировать в воде, HFIP или органическом растворе для получения растворов шелка разной концентрации, включая более концентрированные растворы, чем полученные исходно. В другом варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка сушат с использованием испарителя Rototherm или другими известными в этой области способами получения сухой формы белка, содержащей менее 10 мас.% воды.
SPF, используемые в тканевых филлерах и способах, представленных в настоящем описании, можно обрабатывать и включать различными способами, например, в форме раствора, который можно комбинировать с другими материалами (например, НА) для получения композиций тканевых филлеров, представленных в настоящем описании. Далее приведены неограничивающие примеры подходящих диапазонов различных параметров для получения растворов шелка по настоящему изобретению. Растворы шелка по настоящему изобретению могут включать один или более, но не обязательно все, из этих параметров, и их можно получать с использованием различных комбинаций диапазонов таких параметров.
В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 30%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 25%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 20%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 19%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 18%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 17%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 16%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 15%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 14%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 13%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 12%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 11%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 10%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 9%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 8%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 7%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 6%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 3%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 2%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 1%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,9%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,8%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,7%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,6%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,3%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,2%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет менее 0,1%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,1%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,2%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,3%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,6%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,7%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,8%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 0,9%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 1%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 2%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 3%. В
- 44 045185 варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 6%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 7%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 8%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 9%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 10%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 11%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 12%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 13%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 14%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 15%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 16%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 17%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 18%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 19%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 20%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет более 25%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 30%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 25%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 20%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 15%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 10%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 9%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 8%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 7%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 6,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 6%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 5,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 4,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 3,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 3%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 2,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 2,0%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 2,4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,5 до 5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,5 до 4,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,5 до 4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,5 до 3,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,5 до 3%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,5 до 2,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 1 до 4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 1 до 3,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 1 до 3%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 1 до 2,5%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 1 до 2,4%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 1 до 2%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 20 до 30%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 0,1 до 6%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 6 до 10%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 6 до 8%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 6 до 9%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 10 до 20%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 11 до 19%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 12 до 18%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 13 до 17%. В варианте осуществления процент шелка в растворе составляет от 14 до 16%.
В варианте осуществления композиции шелка, представленные в настоящем описании, можно комбинировать с НА для получения композиции тканевого филлера. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 30%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 25%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 20%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 19%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 18%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 17%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 16%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 15%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 14%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 13%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 12%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 11%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 10%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 9%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции
- 45 045185 тканевого филлера составляет менее 8%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 7%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 6%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 3%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 2%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 1%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,9%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,8%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,7%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,6%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,3%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,2%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,1%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,1%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,2%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,3%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,6%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,7%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,8%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,9%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 1%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 2%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 3%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 6%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 7%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 8%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 9%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 10%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 11%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 12%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 13%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 14%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 15%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 16%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 17%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 18%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 19%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 20%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет более 25%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 30%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 25%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 20%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 15%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 10%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 9%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 8%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 7%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 6,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 6%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 5,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в
- 46 045185 композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 4,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 3,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 3%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 2,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 2,0%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 2,4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,5 до 5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,5 до 4,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,5 до 4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,5 до 3,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,5 до 3%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,5 до 2,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 1 до 4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 1 до 3,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 1 до 3%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 1 до 2,5%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 1 до 2,4%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 1 до 2%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 20 до 30%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 0,1 до 6%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 6 до 10%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 6 до 8%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 6 до 9%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 10 до 20%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 11 до 19%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 12 до 18%. В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 13 до 17%.В варианте осуществления процент шелка по массе в композиции тканевого филлера составляет от 14 до 16%.
В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера является неопределимым или составляет до 30%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера является неопределимым или составляет до 5%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера составляет 1%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера составляет 2%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера составляет 3%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера составляет 4%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера составляет 5%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера составляет 10%. В варианте осуществления процент серицина в растворе или композиции тканевого филлера составляет 30%.
В варианте осуществления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 0 до 1 года. В варианте осуществления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 0 до 2 лет. В вариан те осуществления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 0 до 3 лет. В варианте осу ществления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 0 до 4 лет. В варианте осуществ ления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 0 до 5 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 1 до 2 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 1 до 3 лет. В варианте осуществления стабиль ность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 1 до 4 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBr-фрагмент шелка составляет от 1 до 5 лет. В варианте осуществления стабильность раство ра LiBr-фрагмент шелка составляет от 2 до 3 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBrфрагмент шелка составляет от 2 до 4 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBrфрагмент шелка составляет от 2 до 5 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBrфрагмент шелка составляет от 3 до 4 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBrфрагмент шелка составляет от 3 до 5 лет. В варианте осуществления стабильность раствора LiBrфрагмент шелка составляет от 4 до 5 лет.
В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 10 дней до 6 месяцев. В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 6 месяцев до 12 месяцев. В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов
- 47 045185 на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 12 месяцев до 18 месяцев. В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 18 месяцев до 24 месяцев. В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 24 месяцев до 30 месяцев. В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 30 месяцев до 36 месяцев. В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 36 месяцев до 48 месяцев. В варианте осуществления стабильность композиций белковых фрагментов на основе фиброина шелка, которые можно включать в тканевые филлеры по настоящему изобретению, составляет от 48 месяцев до 60 месяцев.
В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 250 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 5 до 150 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 6 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 6 до 17 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 17 до 39 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 39 до 80 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 80 до 150 кДа.
В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 250 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 240 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 230 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 220 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 210 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 200 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 190 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 180 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 170 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 160 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 150 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 140 кДа.
В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 130 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю
- 48 045185 средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 120 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 110 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 100 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 90 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 80 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 70 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 60 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 50 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 40 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 30 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 20 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 10 кДа.
В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 5 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 5 до 10 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 10 до 15 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 15 до 20 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 20 до 25 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 25 до 30 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 30 до 35 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 35 до 40 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 40 до 45 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 45 до 50 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 50 до 55 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 55 до 60 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 60 до 65 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 65 до 70 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 70 до 75 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, пред
- 49 045185 ставленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 75 до 80 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 80 до 85 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 85 до 90 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 90 до 95 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 95 до 100 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 100 до 105 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 105 до 110 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 110 до 115 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 115 до 120 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 120 до 125 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 125 до 130 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 130 до 135 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 135 до 140 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 140 до 145 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 145 до 150 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 150 до 155 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 155 до 160 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 160 до 165 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 165 до 170 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 170 до 175 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 175 до 180 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 180 до 185 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 185 до 190 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 190 до 195 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 195 до 200 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 200 до 205 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 205 до 210 кДа. В варианте
- 50 045185 осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 210 до 215 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 215 до 220 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 220 до 225 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 225 до 230 кДа.В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 230 до 235 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 235 до 240 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 240 до 245 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 245 до 250 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 250 до 255 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 255 до 260 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 260 до 265кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 265 до 270 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 270 до 275 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 275 до 280 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 280 до 285 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 285 до 290 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 290 до 295 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 295 до 300 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 300 до 305 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 305 до 310 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 310 до 315 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 315 до 320 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 320 до 325 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 325 до 330 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 330 до 335 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 35 до 340 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании,
- 51 045185 имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 340 до 345 кДа. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 345 до 350 кДа.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий один или более из низкомолекулярного шелка, среднемолекулярного шелка и высокомолекулярного шелка.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий один или более из низкомолекулярного шелка, среднемолекулярного шелка и высокомолекулярного шелка. В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий низкомолекулярный шелк и среднемолекулярный шелк. В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий низкомолекулярный шелк и высокомолекулярный шелк. В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий среднемолекулярный шелк и высокомолекулярный шелк. В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий низкомолекулярный шелк, среднемолекулярный шелк и высокомолекулярный шелк.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий низкомолекулярный шелк и среднемолекулярный шелк. В некоторых вариантах осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и среднемолекулярным шелком составляет от приблизительно 99:1 до приблизительно 1:99, от приблизительно 95:5 до приблизительно 5:95, от приблизительно 90:10 до приблизительно 10:90, от приблизительно 75:25 до приблизительно 25:75, от приблизительно 65:35 до приблизительно 35:65 или от приблизительно 55:45 до приблизительно 45:55. В некоторых вариантах осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и среднемолекулярным шелком составляет от приблизительно 99:1 до приблизительно 55:45, от приблизительно 95:5 до приблизительно 45:55, от приблизительно 90:10 до приблизительно 35:65, от приблизительно 75:25 до приблизительно 15:85, от приблизительно 65:35 до приблизительно 10:90 или от приблизительно 55:45 до приблизительно 1:99. В варианте осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и среднемолекулярным шелком составляет приблизительно 99:1, приблизительно 98:2, приблизительно 97:3, приблизительно 96:4, приблизительно 95:5, приблизительно 94:6, приблизительно 93:7, приблизительно 92:8, приблизительно 91:9, приблизительно 90:10, приблизительно 89:11, приблизительно 88:12, приблизительно 87:13, приблизительно 86:14, приблизительно 85:15, приблизительно 84:16, приблизительно 83:17, приблизительно 82:18, приблизительно 81:19, приблизительно 80:20, приблизительно 79:21, приблизительно 78:22, приблизительно 77:23, приблизительно 76:24, приблизительно 75:25, приблизительно 74:26, приблизительно 73:27, приблизительно 72:28, приблизительно 71:29, приблизительно 70:30, приблизительно 69:31, приблизительно 68:32, приблизительно 67:33, приблизительно 66:34, приблизительно 65:35, приблизительно 64:36, приблизительно 63:37, приблизительно 62:38, приблизительно 61:39, приблизительно 60:40, приблизительно 59:41, приблизительно 58:42, приблизительно 57:43, приблизительно 56:44, приблизительно 55:45, приблизительно 54:46, приблизительно 53:47, приблизительно 52:48, приблизительно 51:49, приблизительно 50:50, приблизительно 49:51, приблизительно 48:52, приблизительно 47:53, приблизительно 46:54, приблизительно 45:55, приблизительно 44:56, приблизительно 43:57, приблизительно 42:58, приблизительно 41:59, приблизительно 40:60, приблизительно 39:61, приблизительно 38:62, приблизительно 37:63, приблизительно 36:64, приблизительно 35:65, приблизительно 34:66, приблизительно 33:67, приблизительно 32:68, приблизительно 31:69, приблизительно 30:70, приблизительно 29:71, приблизительно 28:72, приблизительно 27:73, приблизительно 26:74, приблизительно 25:75, приблизительно 24:76, приблизительно 23:77, приблизительно 22:78, приблизительно 21:79, приблизительно 20:80, приблизительно 19:81, приблизительно 18:82, приблизительно 17:83, приблизительно 16:84, приблизительно 15:85, приблизительно 14:86, приблизительно 13:87, приблизительно 12:88, приблизительно 11:89, приблизительно 10:90, приблизительно 9:91, приблизительно 8:92, приблизительно 7:93, приблизительно 6:94, приблизительно 5:95, приблизительно 4:96, приблизительно 3:97, приблизительно 2:98 или приблизительно 1:99. В варианте осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и среднемолекулярным шелком составляет приблизительно 9:1, приблизительно 8:1, приблизительно 7:1, приблизительно 6:1, приблизительно 5:1, приблизительно 4:1, приблизительно 3:1, приблизительно 2:1 или приблизительно 1:1. В варианте осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и среднемолекулярным шелком составляет приблизительно 1:9, приблизительно 1:8, приблизительно 1:7, приблизительно 1:6, приблизительно 1:5, приблизительно 1:4, приблизительно 1:3, приблизительно 1:2 или приблизительно 1:1.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий низкомолекулярный шелк и высокомолекулярный шелк. В некоторых вариантах осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет от приблизительно 99:1 до приблизительно 1:99, от приблизительно 95:5 до
- 52 045185 приблизительно 5:95, от приблизительно 90:10 до приблизительно 10:90, от приблизительно 75:25 до приблизительно 25:75, от приблизительно 65:35 до приблизительно 35:65 или от приблизительно 55:45 до приблизительно 45:55. В некоторых вариантах осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет от приблизительно 99:1 до приблизительно 55:45, от приблизительно 95:5 до приблизительно 45:55, от приблизительно 90:10 до приблизительно 35:65, от приблизительно 75:25 до приблизительно 15:85, от приблизительно 65:35 до приблизительно 10:90 или от приблизительно 55:45 до приблизительно 1:99. В варианте осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет приблизительно 99:1, приблизительно 98:2, приблизительно 97:3, приблизительно 96:4, приблизительно 95:5, приблизительно 94:6, приблизительно 93:7, приблизительно 92:8, приблизительно 91:9, приблизительно 90:10, приблизительно 89:11, приблизительно 88:12, приблизительно 87:13, приблизительно 86:14, приблизительно 85:15, приблизительно 84:16, приблизительно 83:17, приблизительно 82:18, приблизительно 81:19, приблизительно 80:20, приблизительно 79:21, приблизительно 78:22, приблизительно 77:23, приблизительно 76:24, приблизительно 75:25, приблизительно 74:26, приблизительно 73:27, приблизительно 72:28, приблизительно 71:29, приблизительно 70:30, приблизительно 69:31, приблизительно 68:32, приблизительно 67:33, приблизительно 66:34, приблизительно 65:35, приблизительно 64:36, приблизительно 63:37, приблизительно 62:38, приблизительно 61:39, приблизительно 60:40, приблизительно 59:41, приблизительно 58:42, приблизительно 57:43, приблизительно 56:44, приблизительно 55:45, приблизительно 54:46, приблизительно 53:47, приблизительно 52:48, приблизительно 51:49, приблизительно 50:50, приблизительно 49:51, приблизительно 48:52, приблизительно 47:53, приблизительно 46:54, приблизительно 45:55, приблизительно 44:56, приблизительно 43:57, приблизительно 42:58, приблизительно 41:59, приблизительно 40:60, приблизительно 39:61, приблизительно 38:62, приблизительно 37:63, приблизительно 36:64, приблизительно 35:65, приблизительно 34:66, приблизительно 33:67, приблизительно 32:68, приблизительно 31:69, приблизительно 30:70, приблизительно 29:71, приблизительно 28:72, приблизительно 27:73, приблизительно 26:74, приблизительно 25:75, приблизительно 24:76, приблизительно 23:77, приблизительно 22:78, приблизительно 21:79, приблизительно 20:80, приблизительно 19:81, приблизительно 18:82, приблизительно 17:83, приблизительно 16:84, приблизительно 15:85, приблизительно 14:86, приблизительно 13:87, приблизительно 12:88, приблизительно 11:89, приблизительно 10:90, приблизительно 9:91, приблизительно 8:92, приблизительно 7:93, приблизительно 6:94, приблизительно 5:95, приблизительно 4:96, приблизительно 3:97, приблизительно 2:98 или приблизительно 1:99. В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий среднемолекулярный шелк и высокомолекулярный шелк. В некоторых вариантах осуществления массовое соотношение между среднемолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет от приблизительно 99:1 до приблизительно 1:99, от приблизительно 95:5 до приблизительно 5:95, от приблизительно 90:10 до приблизительно 10:90, от приблизительно 75:25 до приблизительно 25:75, от приблизительно 65:35 до приблизительно 35:65 или от приблизительно 55:45 до приблизительно 45:55. В некоторых вариантах осуществления массовое соотношение между среднемолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет от приблизительно 99:1 до приблизительно 55:45, от приблизительно 95:5 до приблизительно 45:55, от приблизительно 90:10 до приблизительно 35:65, от приблизительно 75:25 до приблизительно 15:85, от приблизительно 65:35 до приблизительно 10:90 или от приблизительно 55:45 до приблизительно 1:99. В варианте осуществления массовое соотношение между среднемолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет приблизительно 99:1, приблизительно 98:2, приблизительно 97:3, приблизительно 96:4, приблизительно 95:5, приблизительно 94:6, приблизительно 93:7, приблизительно 92:8, приблизительно 91:9, приблизительно 90:10, приблизительно 89:11, приблизительно 88:12, приблизительно 87:13, приблизительно 86:14, приблизительно 85:15, приблизительно 84:16, приблизительно 83:17, приблизительно 82:18, приблизительно 81:19, приблизительно 80:20, приблизительно 79:21, приблизительно 78:22, приблизительно 77:23, приблизительно 76:24, приблизительно 75:25, приблизительно 74:26, приблизительно 73:27, приблизительно 72:28, приблизительно 71:29, приблизительно 70:30, приблизительно 69:31, приблизительно 68:32, приблизительно 67:33, приблизительно 66:34, приблизительно 65:35, приблизительно 64:36, приблизительно 63:37, приблизительно 62:38, приблизительно 61:39, приблизительно 60:40, приблизительно 59:41, приблизительно 58:42, приблизительно 57:43, приблизительно 56:44, приблизительно 55:45, приблизительно 54:46, приблизительно 53:47, приблизительно 52:48, приблизительно 51:49, приблизительно 50:50, приблизительно 49:51, приблизительно 48:52, приблизительно 47:53, приблизительно 46:54, приблизительно 45:55, приблизительно 44:56, приблизительно 43:57, приблизительно 42:58, приблизительно 41:59, приблизительно 40:60, приблизительно 39:61, приблизительно 38:62, приблизительно 37:63, приблизительно 36:64, приблизительно 35:65, приблизительно 34:66, приблизительно 33:67, приблизительно 32:68, приблизительно 31:69, приблизительно 30:70, приблизительно 29:71, приблизительно 28:72, приблизительно 27:73, приблизительно 26:74, приблизительно 25:75, приблизительно 24:76, приблизительно 23:77, приблизительно 22:78, приблизительно 21:79, приблизительно 20:80, приблизительно 19:81, приблизительно 18:82, приблизительно 17:83, приблизительно 16:84, приблизительно 15:85, приблизительно 14:86, приблизительно 13:87, приблизительно 12:88, приблизительно 11:89, приблизительно 10:90, приблизительно 9:91, приблизительно
- 53 045185
8:92, приблизительно 7:93, приблизительно 6:94, приблизительно 5:95, приблизительно 4:96, приблизительно 3:97, приблизительно 2:98 или приблизительно 1:99.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать белок шелка, содержащий низкомолекулярный шелк, среднемолекулярный шелк и высокомолекулярный шелк. В варианте осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком, среднемолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет приблизительно 1:1:8, 1:2:7, 1:3:6, 1:4:5, 1:5:4, 1:6:3, 1:7:2, 1:8:1, 2:1:7, 2:2:6, 2:3:5, 2:4:4, 2:5:3, 2:6:2, 2:7:1, 3:1:6, 3:2:5, 3:3:4, 3:4:3, 3:5:2, 3:6:1, 4:1:5, 4:2:4, 4:3:3, 4:4:2, 4:5:1, 5:1:4, 5:2:3, 5:3:2, 5:4:1, 6:1:3, 6:2:2, 6:3:1, 7:1:2, 7:2:1 или 8:1:1. В варианте осуществления массовое соотношение между низкомолекулярным шелком, среднемолекулярным шелком и высокомолекулярным шелком составляет приблизительно 3:0,1:0,9, 3:0,2:0,8, 3:0,3:0,7, 3:0,4:0,6, 3:0,5:0,5, 3:0,6:0,4, 3:0,7:0,3, 3:0,8:0,2 или 3:0,9:0,1.
В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1 до приблизительно 5,0. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1 до приблизительно 1,5. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 1,5 до приблизительно 2,0. В варианте осуществления белковые фрагменты на основе фиброина шелка, включенные в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют полидисперсность в диапазоне от приблизительно 2,0 до приблизительно 2,5. В варианте осуществления композиция по настоящему изобретению, содержащая чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка, имеет полидисперсность в диапазоне от приблизительно 2,0 до приблизительно 3,0. В варианте осуществления композиция по настоящему изобретению, содержащая чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка, имеет полидисперсность в диапазоне от приблизительно 2,5 до приблизительно 3,0.
В варианте осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании и включающий SPF, имеет недетектируемые уровни примесей LiBr. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 10 м.д. до 1000 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 10 м.д. до 300 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 25 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 50 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 75 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 100 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 200 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 300 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 400 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 500 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 600 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 700 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 800 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 900 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет менее 1000 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 500 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 450 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 400 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 350 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 300 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере,
- 54 045185 представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 250 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 200 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 150 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 100 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 100 м.д. до 200 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 200 м.д. до 300 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 300 м.д. до 400 м.д. В варианте осуществления количество примесей LiBr в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 400 м.д. до 500 м.д.
В варианте осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, включающий SPF, содержащие чистые белковые фрагменты на основе фиброина шелка, имеет недетектируемые уровни примесей Na2CO3. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 100 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 200 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 300 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 400 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 500 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 600 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 700 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 800 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 900 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF составляет менее 1000 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 500 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 450 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 400 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 350 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 300 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 250 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 200 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 150 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, является недетектируемым или составляет до 100 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 100 м.д. до 200 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 200 м.д. до 300 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 300 м.д. до 400 м.д. В варианте осуществления количество примесей Na2CO3 в тканевом филлере, представленном в настоящем описании и включающем SPF, составляет от 400 м.д. до 500 м.д.
В варианте осуществления растворимость в воде чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению составляет от 50 до 100%. В варианте осуществления растворимость в воде чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению составляет от 60 до 100%. В варианте осуществления растворимость в воде чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению составляет от 70 до 100%. В варианте осуществления растворимость в воде чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению
- 55 045185 составляет от 80 до 100%. В варианте осуществления растворимость в воде составляет от 90 до 100%. В варианте осуществления фрагменты на основе фиброина шелка по настоящему изобретению нерастворимы в водных растворах.
В варианте осуществления растворимость чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению в органических растворах составляет от 50 до 100%. В варианте осуществления растворимость чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению в органических растворах составляет от 60 до 100%. В варианте осуществления растворимость чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению в органических растворах составляет от 70 до 100%. В варианте осуществления растворимость чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению в органических растворах составляет от 80 до 100%. В варианте осуществления растворимость чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка по настоящему изобретению в органических растворах составляет от 90 до 100%. В варианте осуществления фрагменты на основе фиброина шелка по настоящему изобретению нерастворимы в органических растворах.
Способы получения фрагментов белка шелка, используемых в композициях по настоящему изобретению, описаны в публикациях патентной заявки США № 2015/00933340, 2015/0094269, 2016/0193130, 2016/0022560, 2016/0022561, 2016/0022562, 2016/0022563, и 2016/0222579, 2016/0281294 и патентах США № 9187538, 9522107, 9517191, 9522108, 9511012 и 9545369, полное содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки. Однако, пример способа показан на фиг. 1, представляющей собой блок-схему, на которой показаны различные варианты осуществления для получения чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка (SPF) по настоящему изобретению. Следует понимать, что не все проиллюстрированные стадии обязательно требуются для получения всех растворов шелка по настоящему изобретению. Как показано на фиг. 1, на стадии А в качестве источника шелка можно использовать коконы (термически обработанные или термически необработанные), волокна шелка, порошок шелка или паутинный шелк. Если начинают с сырых коконов шелкопряда Bombyx mori, коконы можно нарезать на небольшие куски, например, куски приблизительно равного размера, стадия В1. Затем сырой шелк экстрагируют и промывают для удаления любого серицина, стадия С1а. Это приводит к получению, по существу, несодержащего серицин сырого шелка. В варианте осуществления воду нагревают до температуры от 84°С до 100°С (в идеале кипящей), а затем в кипящую воду добавляют Na2CO3 (карбонат натрия) до полного растворения Na2CO3. К кипящей воде/Na2CO3 (100°С) добавляют сырой шелк и погружают его на приблизительно 15-90 мин, при этом кипячение в течение большего времени приводит к получению меньших фрагментов белка шелка. В варианте осуществления объем воды равен приблизительно 0,4-кратной массе сырого шелка, и объем Na2CO3 равен приблизительно 0,848-кратной массе сырого шелка. В варианте осуществления объем воды равен 0,1-кратной массе сырого шелка, и объем Na2CO3 поддерживают на уровне 2,12 г/л. Это показано на фиг. 6 и фиг. 7: массу шелка (ось x) варьировали в одном объеме экстракционного раствора (т.е. одинаковом объеме воды и концентрации Na2CO3), достигая удаления серицина (по существу так, чтобы он не содержал серицин), о чем свидетельствует общая потеря массы шелка от 26 до 31 процентов (ось y). Затем дренируют раствор Na2CO3 в воде и удаляют избыток воды/Na2CO3 из волокон фиброина шелка (например, отделяют экстракт фиброина вручную, центрифугируют с использованием устройства и т.д.). Получаемый экстракт фиброина шелка промывают теплой или горячей водой для удаления какого-либо оставшегося абсорбированного серицина или загрязнения, как правило, при диапазоне температур от приблизительно 40°С до приблизительно 80°С, изменяя объем воды по меньшей мере однократно (можно повторять столько раз, сколько необходимо). Получаемый экстракт фиброина шелка, по существу, представляет собой фиброин шелка без серицина. В варианте осуществления получаемый экстракт фиброина шелка промывают водой при температуре приблизительно 60°С. В варианте осуществления объем промывочной воды для каждого цикла равен 0,1-0,2 л на массу сырого шелка. Предпочтительным может являться встряхивание, переворачивание или циркуляция промывочной воды для максимизации эффекта промывки. После промывки удаляют избыток воды из экстрагированных волокон фиброина шелка (например, экстракт фиброина отделяют вручную или с использованием устройства). Альтернативно, в целях экстракции серицина можно использовать способы, известные специалисту в этой области, например, с использованием давления, температуры или других реагентов или их комбинаций. Альтернативно, шелкоотделительную железу (белок шелка на 100% несодержащий серицин) можно удалять напрямую из гусеницы. Это будет приводить к получению жидкого белка шелка без какого-либо изменения структуры белка, не содержащего серицин.
Затем экстрагированным волокнам фиброина позволяют полностью высохнуть. После сушки экстрагированный фиброин шелка растворяют с использованием растворителя, добавляемого к фиброину шелка при температуре от температуры окружающей среды дл температуры кипения, стадия C1b. В варианте осуществления растворитель является раствором бромида лития (LiBr) (температура кипения LiBr составляет 140°С). Альтернативно, экстрагированные волокна фиброина являются не сухими, а влажными, и их помещают в растворитель; затем концентрацию растворителя можно варьировать для достижения концентраций, схожих с ситуацией, когда сухой шелк добавляют в растворитель. Конечная концентрация растворителя LiBr может находиться в диапазоне от 0,1 М до 9,3 М. Фиг. 8 является таб
- 56 045185 лицей, в которой приведены молекулярные массы шелка, растворенные в разных концентрациях бромида лития (LiBr), и для разных объемов экстракции и растворения. Полного растворения экстрагированных волокон фиброина можно достигать, варьируя время обработки и температуру вместе с концентрацией растворителя. Можно использовать другие растворители, включающие, в качестве неограничивающих примеров, раствор фосфорной кислоты, нитрата кальция, хлорида кальция или другие концентрированные водные растворы неорганических солей. Для обеспечения растворения волокна шелка необходимо полностью погружать в уже нагретый раствор растворителя, а затем держать при температуре в диапазоне от приблизительно 60°С до приблизительно 140°С в течение 1-168 ч. В варианте осуществления волокна шелка необходимо полностью погружать в раствор растворителя, а затем помещать в сушильный шкаф с температурой приблизительно 100°С на приблизительно 1 ч.
Температура, при которой экстракт фиброина шелка добавляют в раствор LiBr (или наоборот), имеет эффект в отношении времени, необходимого для полного растворения фиброина, и получаемых молекулярной массы и полидисперсности конечного раствора смеси SPF. В варианте осуществления концентрация раствора растворителя шелка составляет 20 мас./об.% или менее. Кроме того, для облегчения растворения при разных температурах и концентрациях можно использовать встряхивание во время внесения или растворения. Температура раствора LiBr позволит контролировать молекулярную массу и полидисперсность полученной смеси фрагментов белка шелка. В варианте осуществления при более высокой температуре шелк будет растворяться быстрее, что обеспечивает улучшенную масштабируемость способа и массовое производство раствора шелка. В варианте осуществления использование раствора LiBr, нагретого до температуры 80-140°С, снижает время пребывания в печи, необходимое для достижения полного растворения. Разное время и температура растворителя 60°С или выше позволяют изменять и контролировать MW и полидисперсность растворов смесей SPF, полученных из нативного белка фиброина шелка с исходной молекулярной массой.
Альтернативно, целые коконы можно помещать непосредственно в растворитель, такой как LiBr, пропуская экстракцию, стадия В2. В этом случае необходима последующая фильтрация частиц гусениц шелкопрядов от шелка и удаление раствора растворителя и серицина способами, известными в этой области для разделения гидрофобных и гидрофильных белков, такими как разделение и/или хроматография на колонках, ионообменная хроматография, химическое осаждение с использованием соли и/или pH и/или ферментативное расщепление, и фильтрация или экстракция, все способы являются общепринятыми примерами и не ограничены стандартными способами разделения белков, стадия С2. Альтернативно, термически необработанные коконы с удаленными шелкопрядами можно помещать в растворитель, такой как LiBr, пропуская экстракцию. Описанные выше способы можно использовать для отделения серицина с тем преимуществом, что термически необработанные коконы будут содержать значимо меньше остатков шелкопрядов.
Для удаления растворителя из получаемого раствора растворенного фрагмента белка фиброина можно использовать диализ, диализуя раствор против объема воды, стадия Е1. Для удаления любого дебриса (т.е. останков шелкопрядов) из шелка и раствора LiBr перед диализом используют предварительную фильтрацию, стадия D. в одном из примеров используют фильтр 3 мкм или 5 мкм со скоростью потока 200-300 мл/мин для фильтрации от 0,1% до 1,0% раствора шелк-LiBr перед диализом и, при желании, потенциальным концентрированием. В способе, представленном в настоящем описании, как описано выше, используют время и/или температуру для снижения концентрации с 9,3 М LiBr до диапазона 0,1-9,3 М для облегчения фильтрации и последующего диализа, в частности, с учетом получения масштабируемого способа. Альтернативно, без использования дополнительного времени или температуры раствор 9,3 М LiBr-фрагмент белка шелка можно разводить водой для облегчения фильтрации дебриса и диализа. Результатом растворения в течение желаемого времени и при желаемой температуре является прозрачный, несодержащий дисперсные частицы, стабильный при хранении раствор фрагмента белка шелка-LiBr комнатной температуры с известными MW и полидисперсностью. Предпочтительно регулярно менять воду для диализа до удаления растворителя (например, менять воду через 1 ч, 4 ч, а затем каждые 12 ч всего 6 раз). Общее количество замен объема воды можно варьировать с учетом получаемой концентрации растворителя, используемого для растворения и фрагментации белка шелка. После диализа конечный раствор шелка можно дополнительно фильтровать для удаления любого оставшегося дебриса (т.е. останков шелкопрядов).
Альтернативно, для удаления растворителя из получаемого раствора растворенного фиброина можно использовать тангенциальную поточную фильтрацию (TFF), являющуюся быстрым и эффективным способом разделения и очистки биомолекул, стадия Е2. С помощью TFF можно получать очень чистый водный раствор фрагмента белка шелка, и она делает возможной масштабируемость способа для получения больших объемов раствора контролируемым и воспроизводимым образом. Раствор шелка и LiBr можно разводить перед TFF (с 20% до 0,1% шелка в воде или LiBr). С помощью предварительной фильтрации, как описано выше, перед TFF можно поддерживать эффективность фильтра и потенциально избегать образования пограничных слоев геля шелка на поверхности фильтра в результате наличия частиц дебриса. Предварительную фильтрацию перед TFF также можно использовать для удаления любого оставшегося дебриса (т.е. останков шелкопрядов) из раствора шелка и LiBr, которые могут вызывать спон
- 57 045185 танное или длительное желирование получаемого исключительно водного раствора, стадия D. TFF, циркуляционную или однопроходную, можно использовать для получения растворов вода-фрагмент белка шелка в диапазоне от 0,1% шелка до 30,0% шелка (более предпочтительно - 0,1-6,0% шелка). В зависимости от желаемой концентрации, молекулярной массы и полидисперсности смеси фрагментов белка шелка в растворе могут потребоваться мембраны для TFF с разными пороговыми значениями. Мембраны в диапазоне от 1-100 кДа могут потребоваться для растворов шелка с разной молекулярной массой, полученных, например, посредством варьирования времени экстракции кипячением или времени и температуры в растворителе (например, LiBr). В варианте осуществления для очистки раствора смеси фрагментов белка шелка и для достижения конечного желаемого соотношения шелка и воды используют мембрану для TFF 5 или 10 кДа. Кроме того, для концентрирования раствора после удаления растворителя (например, LiBr) (с получением желаемой концентрации в диапазоне от 0,1% до 30% шелк) можно использовать однопроходную TFF, TFF и другие известные в этой области способы, такие как использование испарителя с падающей пленкой. Их можно использовать в качестве альтернативы стандартным, известным в этой области способам концентрирования HFIP для получения водного раствора. Также можно использовать мембрану с более крупными порами для фильтрации небольших фрагментов белка шелка и получения раствора шелка с большей молекулярной массой и более близкими значениями полидисперсности и/или без них. Фиг. 5 является таблицей, в которой приведены молекулярные массы для некоторых вариантов осуществления растворов белка шелка по настоящему изобретению. Условия обработки раствора белка шелка являлись следующими: экстракция при 100°С в течение 20 мин, промывка при комнатной температуре, LiBr в печи при 60°С в течение 4-6 ч. Условия обработки при TFF для водорастворимых пленок являлись следующими: экстракция при 100°С в течение 60 мин, промывка при 60°С, LiBr 100°С в печи при 100°С в течение 60 мин. На фиг. 12-23 дополнительно показаны манипуляции со временем экстракции, условиями растворения LiBr и TFF и молекулярные массы и полидисперсностей полученных примеров. Эти примеры не являются ограничивающими, а предназначены для демонстрации потенциала определяющих параметров для растворов фрагментов шелка с конкретной молекулярной массой.
Анализ LiBr и детекцию Na2CO3 осуществляли с использованием системы ВЭЖХ, оборудованной испарительным детектором светорассеяния (ELSD). Вычисление осуществляли с помощью линейной регрессии получаемых площадей пиков аналита, график которых строили относительно концентрации. Для подготовки и анализа образцов использовали несколько образцов из ряда составов по настоящему изобретению. Как правило, четыре образца разных составов взвешивали непосредственно в мерную колбу 10 мл. Образцы суспендировали в 5 мл 20 мМ формиата аммония (pH 3,0) и держали при 2-8°С в течение 2 ч с периодическим встряхиванием для экстракции аналитов из пленки. Через 2 ч раствор разводили 20 мМ формиата аммония (pH 3,0). Раствор образца из мерной колбы переносили в сосуды для ВЭЖХ и впрыскивали в систему ВЭЖХ-ELSD для анализа карбоната натрия и бромида лития.
Обнаруживали, что аналитический способ, разработанный для количественного анализа Na2CO3 и LiBr в составах белка шелка, является линейным в диапазоне 10-165 мкг/мл, с RSD для точности впрыска 2% и 1% для площади и 0,38% и 0,19% для времени удержания в случае карбоната натрия и бромида лития, соответственно. Аналитический способ можно использовать для количественного определения карбоната натрия и бромида лития в составах белка шелка.
Конечный раствор фрагмента белка шелка представляет собой чистые фрагменты белка шелка и воду с уровнями дебриса из макрочастиц и/или технологических загрязнений, включающих LiBr и Na2CO3, от м.д. до неопределимых. Фиг. 3 и 4 являются таблицами, в которых приведены концентрации LiBr и Na2CO3 в растворах по настоящему изобретению. На фиг. 3 условия обработки включали экстракцию при 100°С в течение 60 мин, промывку при 60°С, LiBr при 100°С в печи при 100°С в течение 60 мин. Варьировали условия TFF, включая разность давлений и количество объемов диафильтрации. На фиг. 4 условия обработки включали кипячение при 100°С в течение 60 мин, промывку при 60°С, LiBr в печи при 60°С в течение 4-6 ч.
Растворы фрагмент шелка-вода, лиофилизированную смесь фрагментов белка шелк, или любые другие композиции, включающие SPF, можно стерилизовать стандартными способами, известными в этой области, включая, в качестве неограничивающих примеров, фильтрацию, нагревание, облучение или стерилизацию электронным пучком. Ожидают, что смесь фрагментов белка шелка, из-за меньшей длины белковых полимеров, будет лучше переносить стерилизацию, чем растворы интактного белка шелка, описанные в этой области. Кроме того, изделия из шелка, полученные из смесей SPF, представленных в настоящем описании, можно стерилизовать в соответствии с предполагаемым использованием. Например, дермальный филлер с SPF, нагруженный молекулой, предназначенной для использования в медицине в отношении открытых ран/рассечений, можно стерилизовать стандартными способами, такими как облучение или стерилизация электронным пучком.
Фиг. 2 представляет собой блок-схему, на которой показаны различные параметры, которые можно модифицировать во время получения раствора фрагмента белка шелка по настоящему изобретению на стадиях экстракции и растворения. Можно изменять выбранные параметры способа для достижения индивидуальных характеристик конечного раствора в зависимости от предполагаемого использования, на
- 58 045185 пример, молекулярной массы и полидисперсности. Следует понимать, что не все проиллюстрированные стадии необходимы для получения всех растворов шелка по настоящему изобретению.
В варианте осуществления способ получения раствора фрагмента белка шелка по настоящему изобретению включает получение кусков коконов шелкопряда Bombyx mori; экстракцию кусков при приблизительно 100°С в растворе воды и Na2CO3 в течение приблизительно 60 мин, где объем воды равен приблизительно 0,4-кратной массе сырого шелка, и количество Na2CO3 равно приблизительно 0,848кратной массе кусков для получения экстракта фиброина шелка; тройную промывку экстракта фиброина шелка при приблизительно 60°С в течение приблизительно 20 мин на промывку в объеме промывочной воды, где объем промывочной воды для каждого цикла равен приблизительно 0,2 л на массу кусков; удаление избытка воды из экстракта фиброина шелка; сушку экстракта фиброина шелка; растворение сухого экстракта фиброина шелка в растворе LiBr, где раствор LiBr сначала нагревают до приблизительно 100°С для получения раствора шелка и LiBr и держат при этой температуре; помещение раствора шелка и LiBr в сушильный шкаф при приблизительно 100°С на приблизительно 60 мин для достижения полного растворения и дальнейшей фрагментации нативной структуры белка шелка в смесь с желаемой молекулярной массой и полидисперсностью; фильтрацию раствора для удаления любого оставшегося дебриса шелкопрядов; разведения раствора водой для получения 1% раствора шелка и удаления растворителя из раствора с использованием тангенциальной поточной фильтрации (TFF). В варианте осуществления для очистки раствора шелка и получения конечного желаемого соотношения шелка и воды используют мембрану с отсечкой 10 кДа. Затем TFF можно использовать для дальнейшего концентрирования чистого раствора шелка до концентрации 2% шелка в воде.
Каждую стадию способа от сырых коконов до диализа можно масштабировать для повышения эффективности производства. В настоящее время целые коконы приобретают в виде сырья, но также используют предварительно очищенные коконы или термически необработанные коконы, в случае которых после удаления гусеницы остается минимальный дебрис. Нарезание и очистку коконов осуществляют вручную, однако для масштабируемости этот способ можно делать менее трудозатратным, например, с использованием автоматизированного устройства в комбинации со сжатым воздухом для удаления гусеницы и любых твердых частиц, или с использованием режущей мельницы для нарезки коконов на меньшие куски. Стадию экстракции, в настоящее время осуществляемую в небольших партиях, можно проводить в более крупных сосудах, например, промышленной стиральной машине, где можно поддерживать температуры от 60 до 100°С. Стадию промывки также можно осуществлять в промышленной стиральной машине, устраняя циклы промывки вручную. Растворение шелка в растворе LiBr можно осуществлять в ином сосуде, чем конвекционная печь, например, в реакторе с мешалкой. Диализ шелка с помощью серии замен воды является ручным и времязатратным способом, который можно ускорять, изменяя некоторые параметры, например, разбавляя раствор шелка перед диализом. Способ диализа можно масштабировать для производства с использованием полуавтоматизированного оборудования, например, системы тангенциальной поточной фильтрации.
Варьирование параметров экстракции (т.е. времени и температуры), LiBr (т.е. температуры раствора LiBr при добавлении к экстракту фиброина шелка или наоборот) и растворения (т.е. времени и температуры) приводит к получению растворов растворителя и шелка с разными вязкостями, гомогенностью и цветом. Все из повышения температуры экстракции, увеличения времени экстракции, использования более высокой температуры раствора LiBr при всплывании и во время растворения шелка и повышения времени и температуры (например, в печи, как приведено в настоящем описании, или альтернативном источнике тепла) приводило к получению менее вязких и более гомогенных растворов растворителя и шелка. Хотя почти все параметры приводили к получению устойчивого раствора шелк, способы, позволяющие достигать полного растворения за менее чем 4-6 ч, являются предпочтительными для масштабируемости способа.
Молекулярную массу фрагментов белка шелка можно контролировать в соответствии с конкретными параметрами, используемыми на стадии экстракции, включая время экстракции и температуру; конкретными параметрами, используемыми на стадии растворения, включая температуру LiBr в момент погружения шелка в бромид лития и время, в течение которого раствор держат при конкретных температурах; и конкретными параметрами, используемыми на стадии фильтрации. Контролируя технологические параметры описываемыми способами, можно получать растворы смесей SPF с полидисперсностью, равной 2,5 или менее при различных молекулярных массах в диапазоне от 1 до 250 кДа, от 5 до 200 кДа, от 5 до 150 кДа, от 10 до 150кДа, или от 10 до 80 кДа. Изменяя параметры способа для получения растворов шелка с разными молекулярными массы, можно воздействовать на диапазон конечных продуктов смесей фрагментов с желаемой полидисперсностью 2,5 или менее с учетом требований к желаемым характеристикам. Например, пленка шелка с меньшей молекулярной массой, содержащей лекарственное средство, может иметь более высокую скорость высвобождения по сравнению с препаратом SPF с более высокой молекулярной массой. Кроме того, можно получать растворы смесей SPF с полидисперсностью более 2,5. Кроме того, для получения комбинированных растворов можно смешивать два раствора с разными средними молекулярными массами и полидисперсностями. Альтернативно, жидкую шелкоотделительную железу (белок шелка, на 100% не содержащую серицин), удаленную непосредственно из гусеницы,
- 59 045185 можно использовать в комбинации с любым из растворов смесей SPF по настоящему изобретению. Молекулярную массу композиции белковых фрагментов чистого фиброина шелка определяли с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с рефрактометрическим детектором (RID). Полидисперсность вычисляли с использованием программного обеспечения Cirrus GPC Online GPC/SEC версии 3.3 (Agilent).
Параметры варьировали во время переработки сырых шелковых коконов в раствор шелка. Изменение этих параметров влияло на MW получаемого раствора шелка. Параметры, на которые воздействовали, включали (i) время и температуру экстракции, (ii) температуру LiBr, (iii) температуру при растворении в печи и (iv) время растворения. Молекулярную массу определяли с использованием массспектрометрии, как показано на фиг. 9-25.
Эксперименты осуществляли для определения эффекта варьирования времени экстракции. Фиг. 915 являются графиками, на которых показаны эти результаты, и в табл. 2-8 обобщены результаты. Ниже приведены краткие итоги:
время экстракции серицина 30 мин приводило к достижению большей MW, чем при времени экстракции серицина 60 мин;
MW снижалась в печи с течением времени;
температура LiBr и печи 140°С приводила к тому, что нижний предел доверительного интервала соответствовал MW менее 9500 Да;
при 30-минутной экстракции в моменты времени 1 ч и 4 ч обнаруживали нерасщепленный шелк;
при 30-минутной экстракции в момент времени 1 ч достигали значимо высокой молекулярной массы, при этом нижний предел доверительного интервала составлял 35000 Да;
диапазон достигнутой MW в случае верхнего предела доверительного интервала составлял от 18000 до 216000 Да (что важно для получения растворов с определенным верхним пределом).
Таблица 2
Эффект времени экстракции (30 мин и 60 мин) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, 100°С бромида лития (LiBr) и растворения в печи при
100°С (время в печи/растворения варьировали)
| Время кипячения | Время в печи | Средняя Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 30 | 1 | 57247 | 12780 | 35093 | 93387 | 1,63 |
| 60 | 1 | 31520 | 1387 | 11633 | 85407 | 2,71 |
| 30 | 4 | 40973 | 2632 | 14268 | 117658 | 2,87 |
| 60 | 4 | 25082 | 1248 | 10520 | 59803 | 2,38 |
| 30 | 6 | 25604 | 1405 | 10252 | 63943 | 2,50 |
| 60 | 6 | 20980 | 1262 | 10073 | 43695 | 2,08 |
Таблица 3
Эффект времени экстракции (30 мин и 60 мин) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, кипящего бромида лития (LiBr) и растворения в печи при 60°С в течение 4 ч
| Образец | Время кипячения | Средняя Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 30 мин, 4 ч. | 30 | 49656 | 4580 | 17306 | 142478 | 2,87 |
| 60 мин, 4 ч. | 60 | 30042 | 1536 | 11183 | 80705 | 2,69 |
Таблица 4
Эффект времени экстракции (30 мин и 60 мин) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, 60°С бромида лития (LiBr) и растворения в печи при
60°С (время в печи/растворения варьировали)
| Образец | Время кипяч ения | Время в печи | Средняя Mw | Стандартно е отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 30 мин, 1 ч. | 30 | 1 | 58436 | 22201 | 153809 | 2,63 | |
| 60 мин, 1 ч. | 60 | 1 | 31700 | 11931 | 84224 | 2,66 | |
| 30 мин, 4 ч. | 30 | 4 | 61956,5 | 13337 | 21463 | 178847 | 2,89 |
| 60 мин, 4 ч. | 60 | 4 | 25578,5 | 2446 | 9979 | 65564 | 2,56 |
- 60 045185
Таблица 5
Эффект времени экстракции (30 мин и 60 мин) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, 80°С бромида лития (LiBr) и растворения в печи при 80°С в течение 6 ч
| Образец | Время кипячения | Средняя Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 30 мин, 6 ч. | 30 | 63510 | 18693 | 215775 | 3,40 | |
| 60 мин, 6 ч. | 60 | 25164 | 238 | 9637 | 65706 | 2,61 |
Таблица 6
Эффект времени экстракции (30 мин и 60 мин) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, 80°С бромида лития (LiBr) и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали).
| Образец | Время кипяч ения | Время в печи | Средняя Mw | Стандартно е отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 30 мин, 4 ч. | 30 | 4 | 59202 | 14028 | 19073 | 183760 | 3,10 |
| 60 мин, 4 ч. | 60 | 4 | 26312,5 | 637 | 10266 | 67442 | 2,56 |
| 30 мин, 6 ч. | 30 | 6 | 46824 | 18076 | 121293 | 2,59 | |
| 60 мин, 6 ч. | 60 | 6 | 26353 | 10168 | 68302 | 2,59 |
Таблица 7
Эффект времени экстракции (30 мин и 60 мин) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, 100°С бромида лития (LiBr) и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали)
| Образец | Врем я кипяч ения | Вре мя в печи | Средняя Mw | Стандартн ое отклонение | Дов ер ите л ьный интервал | PD | |
| 30 мин, 4 ч. | 30 | 4 | 47853 | 19758 | 115900 | 2,42 | |
| 60 мин, 4 ч. | 60 | 4 | 25082 | 1248 | 10520 | 59804 | 2,38 |
| 30 мин, 6 ч. | 30 | 6 | 55421 | 8992 | 19153 | 160366 | 2,89 |
| 60 мин, 6 ч. | 60 | 6 | 20980 | 1262 | 10073 | 43694 | 2,08 |
Таблица 8
Эффект времени экстракции (30 мин и 60 мин) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, 140°С бромида лития (LiBr) и растворения в печи при 140°С (время в печи/растворения варьировали).
| Образец | Время кипячения | Врем я в печи | Средня я Mw | Стандартное отклонение | Доверительны й интервал | PD | |
| 30 мин, 4 ч. | 30 | 4 | 9024,5 | 1102 | 4493 | 18127 | 2,00865 |
| 60 мин, 4 ч. | 60 | 4 | 15548 | 6954 | 34762 | 2,2358 | |
| 30 мин, 6 ч. | 30 | 6 | 13021 | 5987 | 28319 | 2,1749 | |
| 60 мин, 6 ч. | 60 | 6 | 10888 | 5364 | 22100 | 2,0298 |
Эксперименты осуществляли для определения эффекта варьирования температуры экстракции. Фиг. 16 является графиком, на котором показаны эти результаты, и в табл. 9 результаты обобщены. Ниже приведены краткие итоги:
экстракция серицина при 90°С приводила к достижению более высокой MW, чем экстракция серицина при 100°С;
- 61 045185 при 90°С и 100°С наблюдали снижение MW в печи с течением времени.
Таблица 9
Эффект температуры экстракции (90°С и 100°С) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях 60 мин. Температуры экстракции, 100°С бромида лития (LiBr) и растворение в печи при
100°С (время в печи/растворения варьировали)
| Образец | Время кипячения | Время в печи | Средняя Mw | Стандартно е отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 90°С, 4 ч. | 60 | 4 | 37308 | 4204 | 13368 | 104119 | 2,79 |
| 100°С, 4 ч. | 60 | 4 | 25082 | 1248 | 10520 | 59804 | 2,38 |
| 90°С, 6 ч. | 60 | 6 | 34224 | 1135 | 12717 | 92100 | 2,69 |
| 100°С, 6 ч. | 60 | 6 | 20980 | 1262 | 10073 | 43694 | 2,08 |
Эксперименты осуществляли для определения эффекта варьирования температуры бромида лития (LiBr) при добавлении к шелку. Фиг. 17-18 являются графиками, на которых показаны эти результаты, и в табл. 10-11 обобщены результаты. Ниже приведены краткие итоги:
отсутствие влияния на MW или доверительный интервал (все CI ~10500-6500 Да);
исследования показали, что, когда добавляют LiBr и он начинает растворяться, температура раствора LiBr-шелк быстро падает ниже исходной температуры LiBr, т.к. основная часть массы представляет собой шелк при комнатной температуре.
Таблица 10
Эффект температуры бромида лития (LiBr) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях времени экстракции 60 мин, температуры экстракции 100°С и растворения в печи при 60°С (время в печи/растворения варьировали)
| Образец | Температ ура LiBr (°C) | Врем я в печи | Средняя Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 60°С LiBr, 1 ч. | 60 | 1 | 31700 | 11931 | 84223 | 2,66 | |
| 100°С LiBr, 1 ч. | 100 | 1 | 27907 | 200 | 10735 | 72552 | 2,60 |
| RT LiBr, 4 ч. | RT | 4 | 29217 | 1082 | 10789 | 79119 | 2,71 |
| 60°С LiBr, 4 ч. | 60 | 4 | 25578 | 2445 | 9978 | 65564 | 2,56 |
| 80°С LiBr, 4 ч. | 80 | 4 | 26312 | 637 | 10265 | 67441 | 2,56 |
| 100°С LiBr, 4 ч. | 100 | 4 | 27681 | 1729 | 11279 | 67931 | 2,45 |
| Кипящий LiBr, 4 ч. | Кипение | 4 | 30042 | 1535 | 11183 | 80704 | 2,69 |
| RT LiBr, 6 ч. | RT | 6 | 26543 | 1893 | 10783 | 65332 | 2,46 |
| 80°С LiBr, 6 ч. | 80 | 6 | 26353 | 10167 | 68301 | 2,59 | |
| 100°С LiBr, 6 ч. | 100 | 6 | 27150 | 916 | 11020 | 66889 | 2,46 |
- 62 045185
Таблица 11
Эффект температуры бромида лития (LiBr) в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях времени экстракции 30 мин, температура экстракции 100°С и растворение в печи при 60°С __________ (время в печи/растворения варьировали)_____________
| Образец | Температу pa LiBr (°C) | Время в печи | Средняя Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 60°С LiBr, 4 ч. | 60 | 4 | 61956 | 13336 | 21463 | 178847 | 2,89 |
| 80°С LiBr, 4 ч. | 80 | 4 | 59202 | 14027 | 19073 | 183760 | 3,10 |
| 100°С LiBr, 4 ч. | 100 | 4 | 47853 | 19757 | 115899 | 2,42 | |
| 80°С LiBr, 6 ч. | 80 | 6 | 46824 | 18075 | 121292 | 2,59 | |
| 100°С LiBr, 6 ч. | 100 | 6 | 55421 | 8991 | 19152 | 160366 | 2,89 |
Эксперименты осуществляли для определения эффекта температуры печи/растворения. Фиг. 19-23 являются графиками, на которых показаны эти результаты, и в табл. 12-16 результаты обобщены. Ниже приведены краткие итоги:
температура печи имеет меньший эффект в отношении шелка, экстрагируемого в течение 60 мин, чем экстрагируемого в течение 30 мин. Не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что 30-минутный шелк меньше деградирует во время экстракции и, таким образом, температура печи имеет больший эффект в отношении менее деградировавшей части шелка с большей MW;
в случае температуры печи 60°С и 140°С экстрагируемый в течение 30 мин шелк демонстрировал очень достоверный эффект, связанный с более низкой MW при более высокой температуре печи, в то время как шелк, экстрагируемый в течение 60 мин, имел гораздо меньший эффект;
температура печи 140°С приводила к получению нижнего предела доверительного интервала -6000 Да.
Таблица 12
Эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 30 мин и 100°С бромида лития (LiBr) (время в печи/растворения варьировали)
| Время кипячения | Температур а печи(°С) | Время в печи | Средняя Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 30 | 60 | 4 | 47853 | 19758 | 115900 | 2,42 | |
| 30 | 100 | 4 | 40973 | 2632 | 14268 | 117658 | 2,87 |
| 30 | 60 | 6 | 55421 | 8992 | 19153 | 160366 | 2,89 |
| 30 | 100 | 6 | 25604 | 1405 | 10252 | 63943 | 2,50 |
Таблица 13
Эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 60 мин и 100°С бромида лития (LiBr) (время в печи/растворения варьировали)
| Время кипячения | Температ УРа | Вре мя в | Средняя Mw | Стандарта ое | Доверительный интервал | PD | |
| печи(°С) | печ и | отклонени е | |||||
| 60 | 60 | 1 | 27908 | 200 | 10735 | 72552 | 2,60 |
| 60 | 100 | 1 | 31520 | 1387 | 11633 | 85407 | 2,71 |
| 60 | 60 | 4 | 27681 | 1730 | 11279 | 72552 | 2,62 |
| 60 | 100 | 4 | 25082 | 1248 | 10520 | 59803 | 2,38 |
| 60 | 60 | 6 | 27150 | 916 | 11020 | 66889 | 2,46 |
| 60 | 100 | 6 | 20980 | 1262 | 10073 | 43695 | 2,08 |
-63045185
Таблица 14
Эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 60 мин и 140°С бромида лития (LiBr) (время в печи/растворения варьировали)
| Время кипячения | Темпера тура печи (°C) | Время в печи | Средня я Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 60 | 60 | 4 | 30042 | 1536 | 11183 | 80705 | 2,69 |
| 60 | 140 | 4 | 15548 | 7255 | 33322 | 2,14 |
Таблица 15
Эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 30 мин и 140°С бромида лития (LiBr) (время в печи/растворения варьировали)
| Время кипячения | Темпера тура печи (°C) | Врем я в печи | Средня я Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 30 | 60 | 4 | 49656 | 4580 | 17306 | 142478 | 2,87 |
| 30 | 140 | 4 | 9025 | 1102 | 4493 | 18127 | 2,01 |
| 30 | 60 | 6 | 59383 | 11640 | 17641 | 199889 | 3,37 |
| 30 | 140 | 6 | 13021 | 5987 | 28319 | 2,17 |
Таблица 16
Эффект температуры печи/растворения в отношении молекулярной массы шелка, обрабатываемого в условиях температуры экстракции 100°С, времени экстракции 60 мин и 80°С бромида лития (LiBr) (вре__________ мя в. печи/растворения варьировали)______________
| Время кипячения | Темпера тура печи (°C) | Врем я в печи | Средня я Mw | Стандартное отклонение | Доверительный интервал | PD | |
| 60 | 60 | 4 | 26313 | 637 | 10266 | 67442 | 2,56 |
| 60 | 80 | 4 | 30308 | 4293 | 12279 | 74806 | 2,47 |
| 60 | 60 | 6 | 26353 | 10168 | 68302 | 2,59 | |
| 60 | 80 | 6 | 25164 | 238 | 9637 | 65706 | 2,61 |
В варианте осуществления способы, представленные в настоящем описании, приводят к получению раствора с характеристиками, которые можно контролировать при производстве, включая, в качестве неограничивающих примеров: MW - можно варьировать, изменяя время и температуру экстракции и/или растворения (например, температуру LiBr), давление и фильтрацию (например, эксклюзионную хроматографию); структура - удаление или расщепление тяжелой или легкой цепи белкового полимера фиброина; чистота - температура промывки горячей водой для улучшенного удаления серицина или пропускная способность фильтра для улучшенного удаления твердых частиц, неблагоприятно влияющих на стабильность при хранении раствора смеси фрагментов белка шелка; цвет - цвет раствора можно контролировать, например, с использованием температуры или времени обработки LiBr; вязкость; прозрачность и стабильность раствора. Получаемый pH раствора, как правило, составляет приблизительно 7, и его можно изменять с использованием кислоты или основания, при необходимости, в соответствии с требованиями для хранения.
Описанные выше растворы смеси SPF можно использовать для получения тканевых филлеров, содержащих SPF, как представлено в настоящем описании.
Способ получения водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, имеющих среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, включает стадии: обесклеивания источника шелка посредством добавления источника шелка в кипящий (100°С) водный раствор карбоната натрия на время от приблизительно 30 мин до приблизительно 60 мин; удаления серицина из раствора для получения экстракта фиброина шелка, содержащего неопределимые уровни серицина; дренирования раствора из экстракта фиброина шелка; растворения экстракта фиброина шелка в растворе бромида лития, имеющего начальную температуру
- 64 045185 после помещения экстракта фиброина шелка в раствор бромида лития в диапазоне от приблизительно 60°С до приблизительно 140°С; поддержания раствора фиброина шелка-бромида лития в печи, имеющей температуру приблизительно 140°С в течение по меньшей мере 1 ч; удаления бромида лития из экстракта фиброина шелка; и получения водного раствора фрагментов белка шелка, содержащего: фрагменты, имеющие среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, и где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка имеет полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. Способ может дополнительно включать сушку экстракта фиброина шелка перед стадией растворения. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный бромид лития менее 300 м.д., что измеряют с использованием анализа бромида лития посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный карбонат натрия менее 100 м.д., что измеряют с использованием анализа карбоната натрия посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Способ может дополнительно включать добавление терапевтического средства в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление молекулы, выбранной из антиоксиданта или фермента, в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление витамина в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Витамин может являться витамином С или его производным. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка можно лиофилизировать. Способ может дополнительно включать добавление альфа-гидроксикислот в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Альфа-гидроксикислота может быть выбрана из группы, состоящей из гликолевой кислоты, молочной кислоты, винной кислоты и лимонной кислоты. Способ может дополнительно включать добавление гиалуроновой кислоты или ее солевой формы в концентрации от приблизительно 0,5% до приблизительно 10,0% в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление по меньшей мере одного из оксида цинка или диоксида титана. Пленку можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, полученных этим способом. Пленка может содержать от приблизительно 1,0 мас.%, до приблизительно 50,0 мас.%, витамина С или его производного. Пленка может иметь содержание воды в диапазоне от приблизительно 2,0 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%. Пленка может содержать от приблизительно 30,0 мас.%, до приблизительно 99,5 мас.%, чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Гель можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, полученных этим способом. Гель может содержать от приблизительно 0,5 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%, витамина С или его производного. Гель может иметь содержание шелка по меньшей мере 2% и содержание витамина по меньшей мере 20%.
Способ получения водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, имеющих среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, включает стадии: обесклеивания источника шелка посредством добавления источника шелка в кипящий (100°С) водный раствор карбоната натрия на время от приблизительно 30 мин до приблизительно 60 мин; удаления серицина из раствора для получения экстракта фиброина шелка, содержащего недетектируемые уровни серицина; дренирования раствора из экстракта фиброина шелка; растворения экстракта фиброина шелка в растворе бромида лития, имеющем начальную температуру после помещения экстракта фиброина шелка в раствор бромида лития в диапазоне от приблизительно 60°С до приблизительно 140°С; поддержания раствора фиброина шелка-бромида лития в печи, имеющей температуру приблизительно 140°С, в течение по меньшей мере 1 ч; удаления бромида лития из экстракта фиброина шелка; и получения водного раствора фрагментов белка шелка, содержащего: фрагменты, имеющие среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, и где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка имеет полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. Способ может дополнительно включать сушку экстракта фиброина шелка перед стадией растворения. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный бромид лития менее 300 м.д., что измеряют с использованием анализа бромида лития посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный карбонат натрия менее 100 м.д., что измеряют с использованием анализа карбоната натрия посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Способ может дополнительно включать добавление терапевтического средства в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление молекулы, выбранной из антиоксиданта или фермента, в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление витамина в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Витамин может являться витамином С или его производным. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка можно лиофилизировать. Способ может дополнительно включать добавление альфа-гидроксикислоты в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Альфа-гидроксикислота может быть выбрана из группы, со
- 65 045185 стоящей из гликолевой кислоты, молочной кислоты, винной кислоты и лимонной кислоты. Способ может дополнительно включать добавление гиалуроновой кислоты или ее солевой формы в концентрации от приблизительно 0,5% до приблизительно 10,0% в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление по меньшей мере одного из оксида цинка или диоксида титана. Пленку можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, получаемых этим способом. Пленка может содержать от приблизительно 1,0 мас.%, до приблизительно 50,0 мас.%, витамина С или его производного. Пленка может иметь содержание воды в диапазоне от приблизительно 2,0 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%. Пленка может содержать от приблизительно 30,0 мас.%, до приблизительно 99,5 мас.%, чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Гель можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, получаемых этим способом. Гель может содержать от приблизительно 0,5 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%, витамина С или его производного. Гель может иметь содержание шелка по меньшей мере 2% и содержание витамина по меньшей мере 20%.
Способ получения водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, имеющих среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, включает стадии: обесклеивания источника шелка посредством добавления источника шелка в кипящий (100°С) водный раствор карбоната натрия на время от приблизительно 30 мин до приблизительно 60 мин; удаления серицина из раствора для получения экстракта фиброина шелка, содержащего недетектируемые уровни серицина; дренирования раствора из экстракта фиброина шелка; растворения экстракта фиброина шелка в растворе бромида лития, имеющего начальную температуру после помещения экстракта фиброина шелка в раствор бромида лития в диапазоне от приблизительно 60°С до приблизительно 140°С; поддержания раствора фиброина шелка-бромида лития в печи, имеющей температуру приблизительно 140°С, в течение по меньшей мере 1 часа; удаления бромида лития из экстракта фиброина шелка; и получения водного раствора фрагментов белка шелка, содержащего: фрагменты, имеющие среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, и где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка имеет полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. Способ может дополнительно включать сушку экстракта фиброина шелка перед стадией растворения. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный бромид лития менее 300 м.д., что измеряют с использованием анализа бромида лития посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный карбонат натрия менее 100 м.д., что измеряют с использованием анализа карбоната натрия посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Способ может дополнительно включать добавление терапевтического средства в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление молекулы, выбранной из антиоксиданта или фермента, в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление витамина в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Витамин может являться витамином С или его производным. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка можно лиофилизировать. Способ может дополнительно включать добавление альфа-гидроксикислоты в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Альфа-гидроксикислота может быть выбрана из группы, состоящей из гликолевой кислоты, молочной кислоты, винной кислоты и лимонной кислоты. Способ может дополнительно включать добавление гиалуроновой кислоты или ее солевой формы в концентрации от приблизительно 0,5% до приблизительно 10,0% в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление по меньшей мере одного из оксида цинка или диоксида титана. Пленку можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, получаемых этим способом. Пленка может содержать от приблизительно 1,0 мас.%, до приблизительно 50,0 мас.%, витамина С или его производного. Пленка может иметь содержание воды в диапазоне от приблизительно 2,0 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%. Пленка может содержать от приблизительно 30,0 мас.%, до приблизительно 99,5 мас.%, чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Гель можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, получаемых этим способом. Гель может содержать от приблизительно 0,5 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%, витамина С или его производного. Гель может иметь содержание шелка по меньшей мере 2% и содержание витамина по меньшей мере 20%.
Способ получения водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, имеющих среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа, включает стадии: добавления источника шелка в кипящий (100°С) водный раствор карбоната натрия на время от приблизительно 30 мин до приблизительно 60 мин так, чтобы достигать обесклеивания; удаления серицина из раствора для получения экстракта фиброина шелка, содержащего недетектируемые уровни серицина; дренирования раствора из экстракта фиброина шелка; растворения экстракта фиброина шелка в растворе бромида лития, имеющем начальную температуру после помещения экстракта фиброина шелка в раствор бромида лития в диапазоне от приблизительно 80°С до
- 66 045185 приблизительно 140°С; поддержания раствора фиброина шелка-бромида лития в сушильном шкафу, имеющем температуру в диапазоне от приблизительно 60°С до приблизительно 100°С, в течение по меньшей мере 1 ч; удаления бромида лития из экстракта фиброина шелка; и получения водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка содержит остаточный бромид лития от приблизительно 10 м.д. до приблизительно 300 м.д., где водный раствор фрагментов белка шелка содержит остаточный карбонат натрия от приблизительно 10 м.д. до приблизительно 100 м.д., где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка содержит фрагменты, имеющие среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа, и где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка имеет полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. Способ может дополнительно включать сушку экстракта фиброина шелка перед стадией растворения. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный бромид лития менее 300 м.д., что измеряют с использованием анализа бромида лития посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный карбонат натрия менее 100 м.д., что измеряют с использованием анализа карбоната натрия посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Способ может дополнительно включать добавление терапевтического средства в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление молекулы, выбранной из антиоксиданта или фермента, в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление витамина в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Витамин может являться витамином С или его производным. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка можно лиофилизировать. Способ может дополнительно включать добавление альфагидроксикислоты в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Альфагидроксикислота может быть выбрана из группы, состоящей из гликолевой кислоты, молочной кислоты, винной кислоты и лимонной кислоты. Способ может дополнительно включать добавление гиалуроновой кислоты или ее солевой формы в концентрации от приблизительно 0,5% до приблизительно 10,0% в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление по меньшей мере одного из оксида цинка или диоксида титана.
Гель можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, получаемых этим способом. Гель может содержать от приблизительно 0,5 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%, витамина С или его производного. Гель может иметь содержание шелка по меньшей мере 2% и содержание витамина по меньшей мере 20%.
В аспектах, проиллюстрированных в настоящем описании, описан способ получения водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, имеющих среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа, включающий стадии: добавления источника шелка в кипящий (100°С) водный раствор карбоната натрия на время приблизительно 30 мин так, чтобы достигать обесклеивания; удаления серицина из раствора для получения экстракта фиброина шелка, содержащего недетектируемые уровни серицина; дренирования раствора из экстракта фиброина шелка; растворения экстракта фиброина шелка в растворе бромида лития, имеющего начальную температуру после помещения экстракта фиброина шелка в раствор бромида лития в диапазоне от приблизительно 80°С до приблизительно 140°С; поддержания раствора фиброина шелка-бромида лития в сушильном шкафу, имеющем температуру в диапазоне от приблизительно 60°С до приблизительно 100°С, в течение по меньшей мере 1 часа; удаления бромида лития из экстракта фиброина шелка; и получения водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка содержит остаточный бромид лития от приблизительно 10 м.д. до приблизительно 300 м.д., остаточный карбонат натрия от приблизительно 10 м.д. до приблизительно 100 м.д., фрагменты, имеющие среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 40 кДа до приблизительно 65 кДа, и где водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка имеет полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0. Способ может дополнительно включать сушку экстракта фиброина шелка перед стадией растворения. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный бромид лития менее 300 м.д., что измеряют с использованием анализа бромида лития посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка может содержать остаточный карбонат натрия менее 100 м.д., что измеряют с использованием анализа карбоната натрия посредством высокоэффективной жидкостной хроматографии. Способ может дополнительно включать добавление терапевтического средства в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление молекулы, выбранной из антиоксиданта или фермента, в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление витамина в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Витамин может являться витамином С или его производным. Водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина
- 67 045185 шелка можно лиофилизировать. Способ может дополнительно включать добавление альфагидроксикислоты в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Альфагидроксикислота может быть выбрана из группы, состоящей из гликолевой кислоты, молочной кислоты, винной кислоты и лимонной кислоты. Способ может дополнительно включать добавление гиалуроновой кислоты или ее солевой формы в концентрации от приблизительно 0,5% до приблизительно 10,0% в водный раствор чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка. Способ может дополнительно включать добавление по меньшей мере одного из оксида цинка или диоксида титана.
Гель можно получать из водного раствора чистых белковых фрагментов на основе фиброина шелка, получаемых этим способом. Гель может содержать от приблизительно 0,5 мас.%, до приблизительно 20,0 мас.%, витамина С или его производного. Гель может иметь содержание шелка по меньшей мере 2% и содержание витамина по меньшей мере 20%.
Гиалуроновая кислота и гели гиалуроновой кислоты.
Биодеградируемый полимерный компонент по настоящему изобретению представляет собой гиалуронат, также известный как гиалуроновая кислота (НА). НА состоит из чередующихся остатков Dглюкуроновой кислоты и N-ацетил-О-глюкозамина. Этот водорастворимый полимер в природе обнаруживают почти во всех тканях, особенно, во внеклеточном матриксе, глазах и синовиальной жидкости суставов. НА коммерчески доступна в чистой форме. Филлеры с небольшими гелевыми частицами НА можно использовать для стимуляции природной продукции коллагена, которая, как предполагают, вызвана механическим растяжением дермы и активацией дермальных фибробластов.
Концентрация НА в получаемых дермальных филлерах по изобретению вносит вклад в жесткость и долговечность дермального филлера. В некоторых вариантах осуществления повышенная концентрация НА в получаемых дермальных филлерах, представленных в настоящем описании, может повышать жесткость и/или долговечность получаемого дермального филлера по сравнению с дермальным филлером, имеющим сравнительно меньшую концентрацию НА.
В некоторых вариантах осуществления НА, включенная в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеет молекулярную массу 100000 дальтон или более, 150000 дальтон или более, 1 миллион дальтон или более или 2 миллиона дальтон или более. В некоторых вариантах осуществления НА, включенная в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеет молекулярную массу 100000 дальтон или менее, 150000 дальтон или менее, 1 миллион дальтон или менее или 2 миллиона дальтон или менее. В некоторых вариантах осуществления НА, включенная в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеет высокую молекулярную массу (например, молекулярная масса НА составляет от приблизительно 1 МДа до приблизительно 4 МДа). В некоторых вариантах осуществления НА включенная в тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеет низкую молекулярную массу (например, молекулярная масса НА составляет менее приблизительно 1 МДа).
В некоторых вариантах осуществления источником НА может являться гиалуронатная соль, такая как, например, гиалуронат натрия. В некоторых вариантах осуществления НА является перекрестносшитой. Перекрестно-сшитую НА можно составлять в различных формах, таких как мембраны, гели, полугели, губки или микросферы. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитая НА находится в форме жидкого геля, т.е. принимает форму контейнера. Вязкость геля или полугеля НА можно изменять посредством добавления неконъюгированной НА и/или гиалуроната. Вязкость также можно настраивать, варьируя степень перекрестной сшивки SPF-SPF, SPF-НА и/или НА-НА, как представлено в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления от приблизительно 4% до приблизительно 12% НА может быть перекрестно-сшитой в виде НА-НА или HA-SPF.
В варианте осуществления композиции SPF, представленные в настоящем описании, можно комбинировать с НА для получения композиции тканевого филлера. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 99%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 98%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 97%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 96%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 95%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 94%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 93%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 92%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 91%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 90%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 85%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 80%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 75%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 70%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 65%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 60%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 55%. В варианте осуществления процент НА по
- 68 045185 массе в композиции тканевого филлера составляет менее 50%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 45%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 40%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 35%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 30%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 25%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 20%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 19%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 18%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 17%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 16%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 15%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 14%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 13%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 12%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 11%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 10%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 9%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 8%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 7%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 6%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 4%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 3%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 2%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 1%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,9%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,8%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,7%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,6%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,4%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,3%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,2%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет менее 0,1%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,1%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,2%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,3%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,4%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,6%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,7%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,8%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 0,9%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 1%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 2%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 3%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 4%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 6%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 7%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 8%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 9%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 10%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 11%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 12%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 13%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 14%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 15%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 16%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 17%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера
- 69 045185 составляет более 18%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 19%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 20%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 25%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 30%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 35%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 40%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 45%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 50%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 55%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 60%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 65%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 70%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 75%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 80%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 85%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 90%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 91%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 92%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 93%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 94%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 95%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 96%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 97%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет более 98%.
В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,1%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,2%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,3%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,4%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,6%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,7%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,8%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 0,9%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 1%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 2%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 3%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 4%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 6%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 7%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 8%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 9%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 10%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 11%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 12%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 13%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 14%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 15%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 16%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 17%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 18%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 19%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 20%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 25%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 30%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 35%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизи
- 70 045185 тельно 40%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 45%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 50%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 55%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 60%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 65%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 70%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 75%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 80%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 85%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 90%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 91%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 92%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 93%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 94%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 95%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 96%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 97%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет приблизительно 98%.
В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 0,1% до приблизительно 1%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 0,5% до приблизительно 1,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 1% до приблизительно 5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 1,5% до приблизительно 5,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 2% до приблизительно 6%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 2,5% до приблизительно 6,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 3% до приблизительно 7%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 3,5% до приблизительно 7,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 4% до приблизительно 8%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 4,5% до приблизительно 8,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 5% до приблизительно 9%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 5,5% до приблизительно 9,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 6% до приблизительно 10%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 6,5% до приблизительно 10,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 7% до приблизительно 11%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 7,5% до приблизительно 11,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 8% до приблизительно 12%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 8,5% до приблизительно 12,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 9% до приблизительно 13%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 9,5% до приблизительно 13,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 10% до приблизительно 14%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 10,5% до приблизительно 14,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 11% до приблизительно 15%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 11,5% до приблизительно 15,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 12% до приблизительно 16%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 12,5% до приблизительно 16,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 13% до приблизительно 17%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 13,5% до приблизительно 17,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 14% до приблизительно 18%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканево
- 71 045185 го филлера составляет от приблизительно 14,5% до приблизительно 18,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 15% до приблизительно 19%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 15,5% до приблизительно 19,5%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 16% до приблизительно 20%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 20% до приблизительно 30%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 30% до приблизительно 40%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 40% до приблизительно 50%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 50% до приблизительно 60%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 60% до приблизительно 70%. В варианте осуществления процент НА по массе в композиции тканевого филлера составляет от приблизительно 80% до приблизительно 90%.
В некоторых вариантах осуществления процент НА по массе в композициях тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, составляет от приблизительно 1% до приблизительно 2%, или от приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно приблизительно
1% до приблизительно 3%, или от приблизительно 1% до приблизительно 4%, или от
1% до приблизительно 5%, или от приблизительно 1% до приблизительно 6%, или от
1% до приблизительно 7%, или от приблизительно 1% до приблизительно 8%, или от
1% до приблизительно 9%, или от приблизительно 1% до приблизительно 10%, или от
1% до приблизительно 11%, или от приблизительно 1% до приблизительно 12%, или от 1% до приблизительно 13%, или от приблизительно 1% до приблизительно 14%, или от 1% до приблизительно 15%, или от приблизительно 1% до приблизительно 16%, или от 1% до приблизительно 17%, или от приблизительно 1% до приблизительно 18%, или от 1% до приблизительно 19%, или от приблизительно 1% до приблизительно 20%, или от 1% до приблизительно 21%, или от приблизительно 1% до приблизительно 22%, или от 1% до приблизительно 23%, или от приблизительно 1% до приблизительно 24%, или от 1% до приблизительно 25%, или от приблизительно 1% до приблизительно 30%, или от 1% до приблизительно 40%, или от приблизительно 1% до приблизительно 50%, или от 1% до приблизительно 60%, или от приблизительно 1% до приблизительно 70%, или от приблизительно 1% до приблизительно 80%, или от приблизительно 1% до приблизительно 95%; или от приблизительно 10% до приблизительно 20%, или от приблизительно 10% до приблизительно 25%, или от приблизительно 10% до приблизительно 30%, или от приблизительно 10% до приблизительно 35%, или от приблизительно 10% до приблизительно 40%, или от приблизительно 10% до приблизительно 45%, или от приблизительно 10% до приблизительно 50%, или от приблизительно 10% до приблизительно 55%, или от приблизительно 10% до приблизительно 60%, или от приблизительно 10% до приблизительно 65%, или от приблизительно 10% до приблизительно 70%, или от приблизительно 10% до приблизительно 75%, или от приблизительно 10% до приблизительно 80%, или от приблизительно 10% до приблизительно 85%, или от приблизительно 10% до приблизительно 90%, или от приблизительно 10% до приблизительно 95%.
В некоторых вариантах осуществления НА, представленную в настоящем описании, можно получать в коммерческих источниках, или ее могут продуцировать бактерии Streptococcus equi.
Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании и включающие НА, можно охарактеризовывать по видам их биологической активности in vitro и видам биологической активности in vivo. На пример, можно осуществлять анализы in vitro части тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, на клеточную токсичность, резистентность к ферментативной деградации, возможность прохождения через шприц (например, вязкость раствора, скорость инъецирования, диаметр шприца/иглы) и/или морфологический анализ частиц. См., например, Park, et al., J. Eur. Acad. Dermatol. Venerol. (2014) 28:565-568. Анализы in vivo можно осуществлять для определения исходных морфологических профилей, общего остаточного филлера, гистологической оценки, и они могут включать исследование образования гранулем или кожные побочные реакции. См., например, Park, et al., J. Eur. Acad. Dermatol. Venerol. (2014) 28:565-568; и Ramot, et al., Toxicology Pathology (2015) 43: 267-271.
Желирование.
В варианте осуществления можно получать гели шелка с использованием средства для желирования. В некоторых вариантах осуществления средство для желирования может представлять собой кислоту, электричество, смешивание и/или обработку ультразвуком.
В варианте осуществления при получении геля шелка в раствор шелка, представленный в настоящем описании, можно добавлять кислоту для облегчения желирования. В варианте осуществления при получении геля шелка, включающего нейтральную или основную молекулу и/или терапевтическое средство, для облегчения желирования можно добавлять кислоту. В варианте осуществления при получении геля шелка при повышении pH (когда гель делают более основным) повышают стабильность геля при хранении. В варианте осуществления при получении геля шелка повышение pH (когда гель делают более
- 72 045185 основным) позволяет нагружать большее количество кислой молекулы на гель.
В варианте осуществления при получении геля шелка для облегчения желирования через раствор шелка, представленный в настоящем описании, можно пропускать электричество.
В варианте осуществления при получении геля шелка для облегчения желирования можно использовать перемешивание раствора шелка, представленного в настоящем описании.
В варианте осуществления при получении геля шелка для облегчения желирования можно использовать обработку раствора шелка, представленного в настоящем описании, ультразвуком.
В варианте осуществления в гель шелка можно добавлять природные добавки для дополнительной стабилизации добавок. Например, можно использовать микроэлементы, такие как селен, или магний, или L-метионин. Кроме того, для дополнительного повышения стабильности можно добавлять светонепроницаемый контейнер.
В некоторых вариантах осуществления можно использовать усилители желирования для ускорения желирования SPF. В некоторых вариантах осуществления раствор SPF можно смешивать с чистым спиртом или водным раствором спирта в разных объемных соотношениях с сопутствующим смешиванием посредством перемешивания или других форм встряхивания. В некоторых вариантах осуществления затем в этот спиртовой раствор-усилитель можно добавлять количество амфифильного пептида в качестве дополнительного усилителя конечного желирования. Степень ускорения можно повышать или снижать, при необходимости, посредством добавления большего или меньшего количества компонента-усилителя в систему.
В некоторых вариантах осуществления скорость желирования можно повышать, повышая концентрацию SPF в растворе, используемом для получения геля. С этой целью можно использовать различные способы, включая, в качестве неограничивающих примеров: диализ промежуточного раствора SPF против буфера, включающего гигроскопические молекулы, такие как полиэтиленгликоль, стадию лиофилизации и/или стадию выпаривания. Повышенную температуру также можно использовать в качестве усилителя желирования. Кроме того, для усиления желирования можно использовать манипуляции с pH промежуточного раствора шелка способами, включающими, в качестве неограничивающих примеров, прямое титрование и газовый обмен. Для повышения скорости желирования также можно использовать включение избранных ионов, включая кальций и калий.
В некоторых вариантах осуществления желирования можно способствовать с использованием зародышеобразователей, включая органические и неорганические вещества, растворимые и нерастворимые в промежуточном продукте SPF. Зародышеобразователи могут включать, в качестве неограничивающих примеров, пептидные последовательности, связывающие молекулы шелка, уже желированный шелк и плохорастворимые богатые β-листами структуры. В некоторых вариантах осуществления дополнительным средством усиления желирования является использование механического возбуждения, достигаемого с помощью устройства ножничного типа, ультразвукового устройства или механического миксера.
Время, необходимое для полного желирования раствора шелка, может варьироваться от секунд до часов или дней, в зависимости от значений указанных выше параметров, а также исходного состояния агрегации и организации в растворе SPF. Объемная доля добавляемого усилителя может варьироваться от приблизительно 0% до приблизительно 99% общего объема системы (т.е. любой компонент можно добавлять к значительному избытку другого компонента или в любой относительной концентрации в этом диапазоне). Концентрация используемого раствора SPF может находиться в диапазоне от приблизительно 1 мас./об.% до приблизительно 20 мас./об.% и в любом другом подходящем диапазоне. Усилитель можно добавлять в раствор SPF или раствор SPF можно добавлять к усилителю. Полученный гидрогель SPF можно дополнительно химически или физически перекрестно сшивать для достижения измененных механических свойств.
В некоторых вариантах осуществления раствор усилителя добавляют в раствор SPF или наоборот, при этом раствор SPF имеет концентрацию SPF приблизительно 1 мас./об.%, приблизительно 2 мас./об.%, приблизительно 3 мас./об.%, приблизительно 4 мас./об.%, приблизительно 5 мас./об.%, приблизительно 6 мас./об.%, приблизительно 7 мас./об.%, приблизительно 8 мас./об.%, приблизительно 9 мас./об.%, приблизительно 10 мас./об.%, приблизительно 12 мас./об.%, приблизительно 15 мас./об.%, приблизительно 18 мас./об.%, приблизительно 20 мас./об.%, приблизительно 25 мас./об.% или приблизительно 30 мас./об.%. В некоторых вариантах осуществления раствор усилителя добавляют в раствор SPF, или наоборот, при этом раствор SPF имеет концентрацию SPF по меньшей мере 1 мас./об.%, по меньшей мере 2 мас./об.%, по меньшей мере 3 мас./об.%, по меньшей мере 4 мас./об.%, по меньшей мере 5 мас./об.%, по меньшей мере 6 мас./об.%, по меньшей мере 7 мас./об.%, по меньшей мере 8 мас./об.%, по меньшей мере 9 мас./об.%, по меньшей мере 10 мас./об.%, по меньшей мере 12 мас./об.%, по меньшей мере 15 мас./об.%, по меньшей мере 18 мас./об.%, по меньшей мере 20 мас./об.%, по меньшей мере 25 мас./об.% или по меньшей мере 30 мас./об.%. В некоторых вариантах осуществления раствор усилителя добавляют в раствор SPF, или наоборот, при этом раствор SPF имеет концентрацию SPF от приблизительно 1 мас./об.% до приблизительно 5 мас./об.%, от приблизительно 1 мас./об.% до приблизительно 10 мас./об.%, от приблизительно 1 мас./об.% до приблизительно 15 мас./об.%, от приблизительно 1 мас./об.% до приблизительно 20 мас./об.%, от приблизительно 1 мас./об.% до приблизительно 25
- 73 045185 мас./об.%, от приблизительно 1 мас./об.% до приблизительно 30 мас./об.%, от приблизительно 5 мас./об.% до приблизительно 10 мас./об.%, от приблизительно 5 мас./об.% до приблизительно 15 мас./об.%, от приблизительно 5 мас./об.% до приблизительно 20 мас./об.%, от приблизительно 5 мас./об.% до приблизительно 25 мас./об.%, от приблизительно 5 мас./об.% до приблизительно 30 мас./об.%, приблизительно 10 мас./об.% до приблизительно 15 мас./об.%, от приблизительно 10 мас./об.% до приблизительно 20 мас./об.%, от приблизительно 10 мас./об.% до приблизительно 25 мас./об.% или от приблизительно 10 мас./об.% до приблизительно 30 мас./об.%.
Гели и гидрогели - модификация и перекрестная сшивка.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к композициям, содержащим один или более гидрогелей, содержащих один или более перекрестно-сшитый полимеров матрицы. В рамках изобретения термин перекрестно-сшитый относится к межмолекулярным связям, соединяющим отдельные полимерные молекулы, макромолекулы и/или мономерные цепи в более стабильную структуру, подобную гелю. В связи с этим, перекрестно-сшитый полимер матрицы имеет по меньшей мере одну межмолекулярную связь, соединяющую по меньшей мере одну отдельную полимерную молекулу с другой, где первая отдельная полимерная молекула может иметь схожую или иную химическую природу относительно других молекул. Полимеры матрицы, представленные в настоящем описании, можно перекрестно сшивать с использованием диальдегидных и дисульфидных сшивающих средств, включая, в качестве неограничивающих примеров, многофункциональные перекрестно-сшивающие средства на основе PEG, дивинилсульфоны, диглицидиловые простые эфиры и бис-эпоксиды. Неограничивающие примеры сшивающих средств для SPF и/или НА включают дивинилсульфон (DVS), диглицидиловый простой эфир 1,4-бутандиола (BDDE), УФ-излучение, глутаральдегид, 1,2-бис(2,3-эпоксипропокси)этилен (EGDGE), 1,2,7,8-диэпоксиоктан (DEO), бискарбодиимид (BCD), тетраглицидиловый простой эфир пентаэритрита (PETGE), дигидразид адипиновой кислоты (ADH), бис(сульфосукцинимидил)суберат (BS), гексаметилендиамин (HMDA), 1-(2,3-эпоксипропил)-2,3-эпоксициклогексан или их комбинации. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство для НА может включать BDDE или DVS. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство для НА и/или SPF может являться BDDE, DVS, УФ-излучением, глутаральдегидом или карбодиимидом, как представлено в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут содержать остаточное перекрестно-сшивающее средство. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут содержать лишь незначительные количества перекрестно-сшивающего средства, такие как, например, не более приблизительно 2 м.д., или не более приблизительно 1,9 м.д., или не более приблизительно 1,8 м.д., или не более приблизительно 1,7 м.д., или не более приблизительно 1,6 м.д., или не более приблизительно 1,5 м.д., или не более приблизительно 1,4 м.д., или не более приблизительно 1,3 м.д., или не более приблизительно 1,2 м.д., или не более приблизительно 1,1 м.д., или не более приблизительно 1,0 м.д., или не более приблизительно 0,9 м.д., или не более приблизительно 0,8 м.д., или не более приблизительно 0,7 м.д., или не более приблизительно 0,6 м.д., или не более приблизительно 0,5 м.д., или не более приблизительно 0,4 м.д., или не более приблизительно 0,3 м.д., или не более приблизительно 0,2 м.д., или не более приблизительно 0,1 м.д. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут содержать незначительные количества BDDE, но в концентрации не более приблизительно 2 м.д., или не более приблизительно 1,9 м.д., или не более приблизительно 1,8 м.д., или не более приблизительно 1,7 м.д., или не более приблизительно 1,6 м.д., или не более приблизительно 1,5 м.д., или не более приблизительно 1,4 м.д., или не более приблизительно 1,3 м.д., или не более приблизительно 1,2 м.д., или не более приблизительно 1,1 м.д., или не более приблизительно 1,0 м.д., или не более приблизительно 0,9 м.д., или не более приблизительно 0,8 м.д., или не более приблизительно 0,7 м.д., или не более приблизительно 0,6 м.д., или не более приблизительно 0,5 м.д., или не более приблизительно 0,4 м.д., или не более приблизительно 0,3 м.д., или не более приблизительно 0,2 м.д., или не более приблизительно 0,1 м.д. Как будет понятно специалисту в этой области, количество остаточного перекрестно-сшивающего средства, присутствующего в конкретном образце тканевого филлера, можно определять посредством газовой хроматографии-масс-спектрометрии.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включают матрицу, которая может включают часть матрицы SPF и часть матрицы НА, где часть матрицы SPF включает смесь перекрестно-сшитых и неперекрестно-сшитых SPF, и часть матрицы НА включает смесь перекрестно-сшитой и неперекрестно-сшитой НА.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению включают линкермодифицированную НА. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению включают линкер-модифицированные SPF. Бифункциональные кросс-линкеры могут реагировать с обоими концами, соединяя две разные молекулы НА, две разные молекулы SPF или молекулу НА с молекулой SPF. В некоторых вариантах осуществления кросс-линкер связывается с молекулой НА только на одном конце, оставляя другой конец свешиваться боковой группой. В некоторых вариантах осуществления кросс-линкер связывается с молекулой SPF только на одном конце, оставляя другой конец свеши
- 74 045185 ваться боковой группой.
В рамках изобретения степень модификации (MoD) можно определять следующим образом (см., например, J. Kablik et al., Dermatol Surg, 2009 (35): 302-312):
Общий % степени модификации=% перекрестной сшивки+% боковых групп.
MoD ее также можно определять следующим образом (см., например, L. Kenne et al., Carbohydrate Polymers, 2013 (91):410-418):
Повязанных кросс-линкеров
MoD =--------------------------------Лдисахаридов НА + Π πлнтлр π-Μίτ я· единиц SPF где Связанных кросс-линкеров является количеством связанных молекул кросс-линкеров, nдисаχаридов HA является количеством дисахаридов в НА, и пповторяющихся единиц SPF является количеством повторяющихся единиц в SPF. Эти количества можно определять посредством ЯМР с использованием характерных химических сдвигов кросс-линкера, НА и SPF.
В некоторых вариантах осуществления MoD составляет от приблизительно 1% до 25%, от приблизительно 2% до приблизительно 20% или от приблизительно 3,5% до приблизительно 17,5%. В некоторых вариантах осуществления MoD составляет приблизительно 1,1%, приблизительно 1,2%, приблизительно 1,3%, приблизительно 1,4%, приблизительно 1,5%, приблизительно 1,6%, приблизительно 1,7%, приблизительно 1,8%, приблизительно 1,9%, приблизительно 2,0%, приблизительно 2,1%, приблизительно 2,2%, приблизительно 2,3%, приблизительно 2,4%, приблизительно 2,5%, приблизительно 2,6%, приблизительно 2,7%, приблизительно 2,8%, приблизительно 2,9%, приблизительно 3,0%, приблизительно 3,1%, приблизительно 3,2%, приблизительно 3,3%, приблизительно 3,4%, приблизительно 3,5%, приблизительно 3,6%, приблизительно 3,7%, приблизительно 3,8%, приблизительно 3,9%, приблизительно 4,0%, приблизительно 4,1%, приблизительно 4,2%, приблизительно 4,3%, приблизительно 4,4%, приблизительно 4,5%, приблизительно 4,6%, приблизительно 4,7%, приблизительно 4,8%, приблизительно 4,9%, приблизительно 5,0%, приблизительно 5,1%, приблизительно 5,2%, приблизительно 5,3%, приблизительно 5,4%, приблизительно 5,5%, приблизительно 5,6%, приблизительно 5,7%, приблизительно 5,8%, приблизительно 5,9%, приблизительно 6,0%, приблизительно 6,1%, приблизительно 6,2%, приблизительно 6,3%, приблизительно 6,4%, приблизительно 6,5%, приблизительно 6,6%, приблизительно 6,7%, приблизительно 6,8%, приблизительно 6,9%, приблизительно 7,0%, приблизительно 7,1%, приблизительно 7,2%, приблизительно 7,3%, приблизительно 7,4%, приблизительно 7,5%, приблизительно 7,6%, приблизительно 7,7%, приблизительно 7,8%, приблизительно 7,9%, приблизительно 8,0%, приблизительно 8,1%, приблизительно 8,2%, приблизительно 8,3%, приблизительно 8,4%, приблизительно 8,5%, приблизительно 8,6%, приблизительно 8,7%, приблизительно 8,8%, приблизительно 8,9%, приблизительно 9,0%, приблизительно 9,1%, приблизительно 9,2%, приблизительно 9,3%, приблизительно 9,4%, приблизительно 9,5%, приблизительно 9,6%, приблизительно 9,7%, приблизительно 9,8%, приблизительно 9,9%, приблизительно 10,0%, приблизительно 10,1%, приблизительно 10,2%, приблизительно 10,3%, приблизительно 10,4%, приблизительно 10,5%, приблизительно 10,6%, приблизительно 10,7%, приблизительно 10,8%, приблизительно 10,9%, приблизительно 11,0%, приблизительно 11,1%, приблизительно 11,2%, приблизительно 11,3%, приблизительно 11,4%, приблизительно 11,5%, приблизительно 11,6%, приблизительно 11,7%, приблизительно 11,8%, приблизительно 11,9%, приблизительно 12,0%, приблизительно 12,1%, приблизительно 12,2%, приблизительно 12,3%, приблизительно 12,4%, приблизительно 12,5%, приблизительно 12,6%, приблизительно 12,7%, приблизительно 12,8%, приблизительно 12,9%, приблизительно 13,0%, приблизительно 13,1%, приблизительно 13,2%, приблизительно 13,3%, приблизительно 13,4%, приблизительно 13,5%, приблизительно 13,6%, приблизительно 13,7%, приблизительно 13,8%, приблизительно 13,9%, приблизительно 14,0%, приблизительно 14,1%, приблизительно 14,2%, приблизительно 14,3%, приблизительно 14,4%, приблизительно 14,5%, приблизительно 14,6%, приблизительно 14,7%, приблизительно 14,8%, приблизительно 14,9%, приблизительно 15,0%, приблизительно 15,1%, приблизительно 15,2%, приблизительно 15,3%, приблизительно 15,4%, приблизительно 15,5%, приблизительно 15,6%, приблизительно 15,7%, приблизительно 15,8%, приблизительно 15,9%, приблизительно 16,0%, приблизительно 16,1%, приблизительно 16,2%, приблизительно 16,3%, приблизительно 16,4%, приблизительно 16,5%, приблизительно 16,6%, приблизительно 16,7%, приблизительно 16,8%, приблизительно 16,9%, приблизительно 17,0%, приблизительно 17,1%, приблизительно 17,2%, приблизительно 17,3%, приблизительно 17,4%, приблизительно 17,5%, приблизительно 17,6%, приблизительно 17,7%, приблизительно 17,8%, приблизительно 17,9%, приблизительно 18,0%, приблизительно 18,1%, приблизительно 18,2%, приблизительно 18,3%, приблизительно 18,4%, приблизительно 18,5%, приблизительно 18,6%, приблизительно 18,7%, приблизительно 18,8%, приблизительно 18,9%, приблизительно 19,0%, приблизительно 19,1%, приблизительно 19,2%, приблизительно 19,3%, приблизительно 19,4%, приблизительно 19,5%, приблизительно 19,6%, приблизительно 19,7%, приблизительно 19,8%, приблизительно 19,9% или приблизительно 20,0%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению включают перекрестносшитые SPF. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению включают перекрестно-сшитую НА. Фрагмент SPF можно перекрестно сшивать с другим фрагментом SPF или НА. Пе
- 75 045185 рекрестно-сшитые молекулы SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА можно получать с использованием перекрестно-сшивающих средств различной длины, включая нулевую длину.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно получать в форме гидрогеля, содержащего перекрестно-сшитую НА и/или перекрестно-сшитые SPF. Перекрестно-сшитая НА и/или перекрестно-сшитые SPF (или перекрестно-сшитые молекулы SPFHA) могут иметь измеримую степень перекрестной сшивки. В рамках изобретения термин степень перекрестной сшивки относится к количеству перекрестно-сшивающих единиц (или молекул, или остатков) относительно количества мономерных единиц в полимерной макромолекуле, являвшейся перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления мономерные единицы являются аминокислотами в SPF. В некоторых вариантах осуществления мономерные единицы являются дисахаридными мономерными единицами НА. Таким образом, композиция, содержащая перекрестно-сшитый полимер матрицы со степенью перекрестной сшивки 4%, означает, что, в среднем, есть четыре перекрестно-сшивающие молекулы на каждые 100 мономерных единиц. Если все остальные параметры равны, чем больше степень перекрестной сшивки, тем тверже становится гель. Не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что степень перекрестной сшивки в НА и/или SPF может приводить к получению более жестких материалов или получаемых из них композиций. Например, чем выше степень перекрестной сшивки, тем дольше такие материалы будут оставаться в организме. Фактически, не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что биосовместимые материалы, включающие перекрестно-сшитые материалы, будут иметь разные скорости биорезорбции, биоабсорбции и/или биодеградации в зависимости от степени перекрестной сшивки, где степень перекрестной сшивки обратно пропорциональна скорости биорезорбции, биоабсорбции и/или биодеградации. Кроме того, более значительная перекрестная сшивка в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, может снижать гидрофильность и подъемную силу таких тканевых филлеров.
В неограничивающем примере перекрестно-сшитые SPF, имеющие степень перекрестной сшивки приблизительно 5%, содержат приблизительно 5 перекрестно-сшивающих молекул на каждые 100 мономерных единиц, например, аминокислот, в перекрестно-сшитых SPF.
Неограничивающие примеры степени перекрестной сшивки включают от приблизительно 1% до приблизительно 15%, или от приблизительно 2% до приблизительно 14%, или от приблизительно 1% до приблизительно 2%, от приблизительно 1,5% до приблизительно 2,5%, или от приблизительно 2% до приблизительно 3%, или от приблизительно 2,5% до приблизительно 3,5%, или от приблизительно 3% до приблизительно 4%, или от приблизительно 3,5% до приблизительно 4,5%, или от приблизительно 4% до приблизительно 5%, или от приблизительно 4,5% до приблизительно 5,5%, или от приблизительно 5% до приблизительно 6%, или от приблизительно 5,5% до приблизительно 6,5%, или от приблизительно 6% до приблизительно 7%, или приблизительно 6,5% или приблизительно 7,5%, или от приблизительно 7% до приблизительно 8%, или приблизительно 7,5% или приблизительно 8,5%, или от приблизительно 8% до приблизительно 9%, или от приблизительно 8,5% до приблизительно 9,5%, или от приблизительно 9% до приблизительно 10%, или от приблизительно 9,5% до приблизительно 10,5%, или от приблизительно 10% до приблизительно 11%, или от приблизительно 10,5% до приблизительно 11,5%, или от приблизительно 11% до приблизительно 12%, или от приблизительно 11,5% до приблизительно 12,5%, или от приблизительно 12% до приблизительно 13%, или от приблизительно 12,5% до приблизительно 13,5%, или от приблизительно 13% до приблизительно 14%, или от приблизительно 13,5% до приблизительно 14,5%, или от приблизительно 14% до приблизительно 15%.
В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 1%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
2%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
3%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
4%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
5%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
6%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
7%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
8%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
9%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере
10%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 11%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 12%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 13%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 14%. В некоторых вариантах осуществления степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 15%.
В некоторых вариантах осуществления композиция по изобретению содержит перекрестно-сшитые SPF, где степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 1%, по меньшей мере 2%, по меньшей мере 3%, по меньшей мере 4%, по меньшей мере 5%, по меньшей мере 6%, по меньшей мере 7%, по меньшей мере 8%, по меньшей мере 9%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 11%, по меньшей мере
- 76 045185
12%, по меньшей мере 13%, по меньшей мере 14% или по меньшей мере 15%. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит перекрестно-сшитые SPF, где степень перекрестной сшивки составляет не более 1%, не более 2%, не более 3%, не более 4%, не более 5%, не более 6%, не более 7%, не более 8%, не более 9%, не более 10%, не более 11%, не более 12%, не более 13%, не более 14% или не более 15%. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит перекрестно-сшитые SPF, где степень перекрестной сшивки составляет от приблизительно 1% до приблизительно 15%, от приблизительно 2% до приблизительно 11%, от приблизительно 3% до приблизительно 10%, от приблизительно 1% до приблизительно 5%, от приблизительно 10% до приблизительно 15%, от приблизительно 11% до приблизительно 15%, от приблизительно 6% до приблизительно 10%, или от приблизительно 6% до приблизительно 8%, или от приблизительно 1% до приблизительно 2%, от приблизительно 1,5% до приблизительно 2,5%, или от приблизительно 2% до приблизительно 3%, или от приблизительно 2,5% до приблизительно 3,5%, или от приблизительно 3% до приблизительно 4%, или от приблизительно 3,5% до приблизительно 4,5%, или от приблизительно 4% до приблизительно 5%, или от приблизительно 4,5% до приблизительно 5,5%, или от приблизительно 5% до приблизительно 6%, или от приблизительно 5,5% до приблизительно 6,5%, или от приблизительно 6% до приблизительно 7%, или приблизительно 6,5% или приблизительно 7,5%, или от приблизительно 7% до приблизительно 8%, или приблизительно 7,5% или приблизительно 8,5%, или от приблизительно 8% до приблизительно 9%, или от приблизительно 8,5% до приблизительно 9,5%, или от приблизительно 9% до приблизительно 10%, или от приблизительно 9,5% до приблизительно 10,5%, или от приблизительно 10% до приблизительно 11%, или от приблизительно 10,5% до приблизительно 11,5%, или от приблизительно 11% до приблизительно 12%, или от приблизительно 11,5% до приблизительно 12,5%, или от приблизительно 12% до приблизительно 13%, или от приблизительно 12,5% до приблизительно 13,5%, или от приблизительно 13% до приблизительно 14%, или от приблизительно 13,5% до приблизительно 14,5%, или от приблизительно 14% до приблизительно 15%.
В некоторых вариантах осуществления композиция по изобретению содержит перекрестно-сшитую НА, где степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 1%, по меньшей мере 2%, по меньшей мере, 3%, по меньшей мере 4%, по меньшей мере 5%, по меньшей мере 6%, по меньшей мере 7%, по меньшей мере 8%, по меньшей мере 9%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 11%, по меньшей мере 12%, по меньшей мере 13%, по меньшей мере 14% или по меньшей мере 15%. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит перекрестно-сшитую НА, где степень перекрестной сшивки составляет не более 1%, не более 2%, не более 3%, не более 4%, не более 5%, не более 6%, не более 7%, не более 8%, не более 9%, не более 10%, не более 11%, не более 12%, не более 13%, не более 14%, или не более 15%. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит перекрестно-сшитую НА, где степень перекрестной сшивки составляет от приблизительно 1% до приблизительно 15%, от приблизительно 2% до приблизительно 11%, от приблизительно 3% до приблизительно 10%, от приблизительно 1% до приблизительно 5%, от приблизительно 10% до приблизительно 15%, от приблизительно 11% до приблизительно 15%, от приблизительно 6% до приблизительно 10%, или от приблизительно 6% до приблизительно 8%, или от приблизительно 1% до приблизительно 2%, от приблизительно 1,5% до приблизительно 2,5%, или от приблизительно 2% до приблизительно 3%, или от приблизительно 2,5% до приблизительно 3,5%, или от приблизительно 3% до приблизительно 4%, или от приблизительно 3,5% до приблизительно 4,5%, или от приблизительно 4% до приблизительно 5%, или от приблизительно 4,5% до приблизительно 5,5%, или от приблизительно 5% до приблизительно 6%, или от приблизительно 5,5% до приблизительно 6,5%, или от приблизительно 6% до приблизительно 7%, или приблизительно 6,5% или приблизительно 7,5%, или от приблизительно 7% до приблизительно 8%, или приблизительно 7,5% или приблизительно 8,5%, или от приблизительно 8% до приблизительно 9%, или от приблизительно 8,5% до приблизительно 9,5%, или от приблизительно 9% до приблизительно 10%, или от приблизительно 9,5% до приблизительно 10,5%, или от приблизительно 10% до приблизительно 11%, или от приблизительно 10,5% до приблизительно 11,5%, или от приблизительно 11% до приблизительно 12%, или от приблизительно 11,5% до приблизительно 12,5%, или от приблизительно 12% до приблизительно 13%, или от приблизительно 12,5% до приблизительно 13,5%, или от приблизительно 13% до приблизительно 14%, или от приблизительно 13,5% до приблизительно 14,5%, или от приблизительно 14% до приблизительно 15%.
В некоторых вариантах осуществления композиция по изобретению содержит перекрестно-сшитые SPF-HA, где степень перекрестной сшивки составляет по меньшей мере 1%, по меньшей мере 2%, по меньшей мере 3%, по меньшей мере 4%, по меньшей мере 5%, по меньшей мере 6%, по меньшей мере 7%, по меньшей мере 8%, по меньшей мере 9%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 11%, по меньшей мере 12%, по меньшей мере 13%, по меньшей мере 14% или по меньшей мере 15%. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит перекрестно-сшитые SPF-HA, где степень перекрестной сшивки составляет не более 1%, не более 2%, не более 3%, не более 4%, не более 5%, не более 6%, не более 7%, не более 8%, не более 9%, не более 10%, не более 11%, не более 12%, не более 13%, не более 14% или не более 15%. В некоторых вариантах осуществления композиция содержит перекрестносшитые SPF-HA, где степень перекрестной сшивки составляет от приблизительно 1% до приблизительно
- 77 045185
15%, от приблизительно 2% до приблизительно 11%, от приблизительно 3% до приблизительно 10%, от приблизительно 1% до приблизительно 5%, от приблизительно 10% до приблизительно 15%, от приблизительно 11% до приблизительно 15%, от приблизительно 6% до приблизительно 10%, или от приблизительно 6% до приблизительно 8%, или от приблизительно 1% до приблизительно 2%, от приблизительно 1,5% до приблизительно 2,5%, или от приблизительно 2% до приблизительно 3%, или от приблизительно 2,5% до приблизительно 3,5%, или от приблизительно 3% до приблизительно 4%, или от приблизительно 3,5% до приблизительно 4,5%, или от приблизительно 4% до приблизительно 5%, или от приблизительно 4,5% до приблизительно 5,5%, или от приблизительно 5% до приблизительно 6%, или от приблизительно 5,5% до приблизительно 6,5%, или от приблизительно 6% до приблизительно 7%, или приблизительно 6,5% или приблизительно 7,5%, или от приблизительно 7% до приблизительно 8%, или приблизительно 7,5% или приблизительно 8,5%, или от приблизительно 8% до приблизительно 9%, или от приблизительно 8,5% до приблизительно 9,5%, или от приблизительно 9% до приблизительно 10%, или от приблизительно 9,5% до приблизительно 10,5%, или от приблизительно 10% до приблизительно 11%, или от приблизительно 10,5% до приблизительно 11,5%, или от приблизительно 11% до приблизительно 12%, или от приблизительно 11,5% до приблизительно 12,5%, или от приблизительно 12% до приблизительно 13%, или от приблизительно 12,5% до приблизительно 13,5%, или от приблизительно 13% до приблизительно 14%, или от приблизительно 13,5% до приблизительно 14,5%, или от приблизительно 14% до приблизительно 15%.
Например, можно перекрестно сшивать 1 моль SPF с 1 моль НА, где моль НА может иметь молекулярную массу от приблизительно 1 кДа до приблизительно 2 миллионов кДа. В некоторых вариантах осуществления можно перекрестно сшивать 1 моль SPF и 1 миллион моль НА, или наоборот, где SPF могут иметь массу от 100 Да до 350 кДа, где любая процентная доля каждого моля может быть перекрестно-сшитой или свободной. Способ перекрестной сшивки SPF с другим SPF может включать одну или более стадий. На первой стадии эпоксид, такой как BDDE, добавляют к раствору SPF в избытке и позволяют реакции произойти. Эпоксиды могут реагировать с различными группами на макромолекуле SPF, такими как карбоксил, амин, спирт, тиол и т.п., что приводит к образованию таких соединений, как сложные эфиры, вторичные или третичные амины, простые эфиры, тиоэфиры и т.п. Если оба эпоксида в BDDE прореагировали с функциональными группами в одной или более макромолекулах SPF, SPF становится перекрестно-сшитым. В варианте осуществления перекрестную сшивку НА можно осуществлять с помощью реакции с BDDE в щелочных условиях для получения ковалентной связи между НА и кросслинкером, как описано в Schante et al., Carbohydrate Polymers (2011) 85:469-489. Степень модификации или перекрестной сшивки можно определять посредством ЯМР известными в этой области способами (например, Edsman et al., Dermatol. Surg. (2012) 38: 1170-1179).
Способы соединения пептидов известны в этой области. Соединение отдельных изолированных SPF в олигомерные и/или перекрестно-сшитые пептиды SPF, как указано в настоящем описании, можно осуществлять способами химической конъюгации, известными в этой области, например, посредством создания пептидных связей, использования конденсирующих средств и хорошо известных бифункциональных перекрестно-сшивающих средств. Конъюгация может быть прямой, включающей связи, не затрагивающие какую-либо промежуточную группу, например, прямые пептидные связи, или косвенной, где соединение содержит промежуточный остаток, такой как белок или пептид, например, альбумин плазмы, или другую спейсерную молекулу. Например, связывание можно осуществлять с помощью гетеробифункционального или гомобифункционального кросс-линкера, например, карбодиимида, глутаральдегида, N-сукцинимидил-3-(2-пиридилдитио)пропионата (SPDP) и его производных, бис-малеимида, 4(№малеимидометил)циклогексан-1-карбоксилата и т.п.
Перекрестную сшивку также можно осуществлять без экзогенных кросс-линкеров, используя реакционноспособные группы на молекулах, подлежащих конъюгации. Способы химической перекрестной сшивки пептидных молекул, как правило, известны в этой области, и ряд гетеро- и гомобифункциональных средств описан, например, в патентах США № 4355023, 4657853, 4676980, 4925921 и 4970156, и Immuno Technology Catalogue and Handbook, Pierce Chemical Co. (1989), каждый из которых включен в настоящее описание в качестве ссылки. Такую конъюгацию, включая перекрестную сшивку, следует осуществлять так, чтобы, по существу, не влиять на желаемую функцию пептидного олигомера или конъюгируемого с ним вещества, включая терапевтические средства, и веществ, способных связываться с интересующими веществами.
Специалисту в этой области будет понятно, что можно использовать альтернативные линкеры для соединения пептидов SPF, например, химические белковые кросс-линкеры. Например, гомобифункциональный кросс-линкер, такой как дисукцинимидил-суберимидат-дигидрохлорид; диметил-адипимидатдигидрохлорид; 1,5,-2,4-динитробензол, или гетеробифункциональные кросс-линкеры, такие как Nгидроксисукцинимидил-2,3-дибромпропионат; 1 -этил-3-[3-диметиламинопропил]карбодиимида гидрохлорид; и сукцинимидил-4-[n-малеимидометил] -циклогексан-1 -карбоксилат.
Настоящее изобретение также относится к композициям, включающим SPF, перекрестно-сшитые с НА. Перекрестной сшивки SPF с НА можно достигать различными способами, например, способами с использованием эпоксида, способами с использованием периодата и/или способами с использованием
- 78 045185 трезилхлорида. В некоторых вариантах осуществления SPF перекрестно сшиты с НА с использованием эпоксида, например, многофункционального эпоксида. Например, можно использовать бифункциональный эпоксид, такой как диглицидиловый простой эфир 1,4-бутандиола (BDDE). Другие многофункциональные эпоксиды включают, в качестве неограничивающих примеров, полиглицидиловый простой эфир полиглицерина (PGPGE), полиглицидиловый простой эфир пентаэритрита (PEPGE) и полиглицидиловый простой эфир диглицерина (DGPGE). Перекрестную сшивку нулевой длины между SPF и НА также осуществляют с использованием активирующего средства.
Способ перекрестной сшивки SPF с другими макромолекулами, например, НА, может включать одну или более стадий. На первой стадии эпоксид, такой как BDDE, добавляют к раствору SPF в избытке и позволяют реакции произойти. Эпоксиды могут реагировать с различными группами на макромолекуле SPF, такой как карбоксил, амин, спирт, тиол и т.п., что приводит к получению соединений, таких как сложные эфиры, вторичные или третичные амины, простые эфиры, тиоэфиры и т.п. Если только один эпоксид прореагировал с SPF, остается свободный эпоксид, присоединенный к SPF и доступный для перекрестной сшивки с другим SPF или другой макромолекулой, например, НА, или т.п. Можно варьировать порядок добавления реагентов. Например, сначала можно добавлять BDDE к НА, а затем добавлять SPF для получения перекрестно-сшитых SPF-HA. В некоторых вариантах осуществления сначала можно смешивать SPF и НА, а затем в смесь добавляют BDDE. В некоторых вариантах осуществления добавление BDDE в смесь SPF и НА приводит к получению композиции, включающей SPF, перекрестно-сшитые с SPF, НА, перекрестно-сшитую с НА, и SPF, перекрестно-сшитые с НА.
В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитые SPF-HA можно получать с использованием трезилхлоридного способа, включающего одну или более стадий. На одной стадии перекрестносшитую НА и/или неперекрестно-сшитую НА можно активировать трезилхлоридом, т.е. 2,2,2трифтопентансульфонилхлоридом, или любым другим подходящим хлорангидридом. Трезилхлорид добавляют, например, по каплям к раствору основания/растворителя, например, раствору пиридина/ацетона, содержащему перекрестно-сшитую и/или неперекрестно-сшитую НА. В некоторых вариантах осуществления трезилхлорид реагирует со всеми четырьмя гидроксильными группами на циклах сахаров перекрестно-сшитой и/или неперекрестно-сшитой НА. На необязательной стадии получаемый НА-трезилат промывают. На стадии добавляют фрагменты SPF, которые будут реагировать с НАтрезилатом.
В некоторых вариантах осуществления трезилхлоридный способ можно использовать для присоединения SPF непосредственно к перекрестно-сшитой и/или неперекрестно-сшитой НА. В других вариантах осуществления трезилхлоридный способ можно использовать для присоединения SPF к перекрестносшитой и/или неперекрестно-сшитой НА с помощью спейсера, например, 6-амино-1-гексанола. В некоторых вариантах осуществления сначала спейсер можно сочетать с перекрестно-сшитой или неперекрестно-сшитой НА посредством активации трезилом и сочетания. Для сочетания SPF со спейсером затем повторяют активацию трезилом и сочетание. Можно использовать любой подходящий спейсер, т.е. спейсеры, имеющие по меньшей мере некоторые характеристики, схожие с 6-амино-1-гексанолом, т.е. первичный амин для сочетания с НА-трезилатом и реакционноспособную группу, например, гидроксильную группу, для активации и сочетания SPF.
В некоторых вариантах осуществления трезилхлорид не сшивает перекрестно НА. Однако, матрицу НА, используемую в трезилхлоридном способе, можно перекрестно сшивать для дополнительной стабильности. Перекрестную сшивку можно осуществлять, например, с использованием многофункционального эпоксида, такого как BDDE, как описано выше. Перекрестную сшивку можно осуществлять до или после сочетания пептида.
Трезилхлоридный способ обладает преимуществами по сравнению с другими способами иммобилизации, включая эффективное сочетание в очень слабых условиях, отсутствие побочных реакций во время активации и сочетания, и пептиды RGD можно связывать непосредственно с атомами углерода основы НА.
В различных вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать гели и гидрогели на основе НА. В рамках изобретения термин на основе НА относится к композициям или материалам, включающим перекрестно-сшитую НА, и композициям, включающим перекрестно-сшитую НА с одним или более другими перекрестно-сшитыми полимерами. Кроме того, термин НА может относиться к гиалуроновой кислоте и любой из ее гиалуронатных солей, включая, в качестве неограничивающих примеров, гиалуронат натрия (NaHA), гиалуронат калия, гиалуронат магния, гиалуронат кальция и их комбинации. Использование нескольких биосовместимых полимеров конкретно не исключено из настоящего изобретения. Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, которые могут находиться в форме гелей и гидрогелей, могут включать несколько биосовместимых полимеров, например, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 или более биосовместимых полимеров в дополнение к НА и/или SPF. Подходящие биосовместимые полимеры включают полисахариды (например, НА, хитозан, хондроитинсульфат, альгинат, карбоксиметилцеллюлозу), полиэтиленгликоль, полимолочную кислоту, полигидроксиэтилметакрилат, полиметилметакрилат, иные белки, чем SPF (например, эластин и коллаген).
- 79 045185
НА, представленная в настоящем описании, может являться межмолекулярно перекрестно-сшитой. В некоторых вариантах осуществления перекрестная сшивка стабилизирует физические свойства НА. В некоторых вариантах осуществления настоящее изобретение относится к образованию стабильной перекрестно-сшитой НА с использованием многофункциональных эпоксидов. В рамках изобретения термин многофункциональный эпоксид означает химический реагент, содержащий два или более эпоксида, таких как низшие алифатические эпоксиды или соответствующие им эпигалогидрины. Неограничивающие примеры многофункциональных эпоксидов включают диэпоксиды диглицидиловый простой эфир 1,4-бутандиола (BDDE), полиглицидиловый простой эфир полиглицерина (PGPGE), полиглицидиловый простой эфир пентаэритрита (PEPGE) и полиглицидиловый простой эфир диглицерина (DGPGE). В предпочтительном варианте осуществления диэпоксид BDDE используют в качестве перекрестносшивающего средства. Остатки сахара в НА перекрестно сшивают через два эпоксида BDDE. В других вариантах осуществления перекрестно-сшивающие средства включают алкилдиэпоксисоединения, такие как диэпоксид 1,3-бутадиена, 1,2,7,8-диэпоксиоктан, диэпоксид 1,5-гексадиена и т.п., диглицидиловые простые эфиры, такие как диглицидиловый простой эфир этиленгликоля, диглицидиловый простой эфир 1,4-бутандиола, диглицидиловый простой эфир бисфенола А и т.п., дивинилсульфон и эпихлоргидрин. Из них, в частности, можно соответствующим образом использовать дивинилсульфон, диглицидиловый простой эфир 1,4-бутандиола и диглицидиловый простой эфир этиленгликоля. В настоящем изобретении можно использовать два или более типов перекрестно-сшивающих средств, комбинируя их соответствующим образом.
В некоторых вариантах осуществления НА перекрестно-сшита с НА. Способ перекрестной сшивки НА с НА может включать одну или более стадий. На первой стадии эпоксид, такой как BDDE, добавляют к раствору НА в избытке и позволяют реакции произойти. Эпоксиды могут реагировать с 1-4 гидроксильными группами на циклах сахаров НА с образованием 1-4 простых эфирных связей. Альтернативно, или в дополнение к реакции с гидроксильными группами, эпоксид может реагировать с карбоновой кислотой полисахарида с образованием сложноэфирной связи. Если эпоксиды BDDE прореагировали с функциональными группами а циклах сахаров одной или более макромолекул НА, НА становится перекрестно-сшитой.
В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее средство может являться перекрестно-сшивающим средством нулевой длины, таким как химическая связь, получаемая с использованием активирующего средства, такого как 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид (EDC) или BCDI. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшивающее активирующее средство нулевой длины реагирует с НА в присутствии N-гидроксисукцинимида (NHS), сульфо-NHS (или сульфонил-NHS) или 4диметиламинопиридина (DMAP). В некоторых вариантах осуществления гели и гидрогели, представленные в настоящем описании, получают посредством реакции по меньшей мере одного перекрестносшиваемого биосовместимого полимера, такого как НА и/или белок, например, белок SPF, или любого другого дополнительного белка по меньшей мере с одним перекрестно-сшивающим активирующим средством.
В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитые SPF-SPF, перекрестно-сшитые SPF-HA и/или перекрестно-сшитая НА-НА могут иметь разное время удержания после введения, например, после инъекции в виде интрадермального, субдермального или, как правило, дермального филлера. В некоторых вариантах осуществления на время удержания можно влиять в способе с использованием периодата натрия в зависимости от количества реакционноспособных групп в SPF, доступных для присоединения к другой макромолекуле SPF или НА. Примером реакционноспособной группы в SPF, которую можно присоединять к НА, является первичный амин. SPF, содержащие две реакционноспособные группы, такие как два первичных амина, сами могут перекрестно сшивать НА в периодатном способе, таким образом, образуя более стабильный конъюгат. В других вариантах осуществления, в которых в SPF есть только одна реакционноспособная группа, такая как единственный первичный амин, например, на аминоконце, перекрестная сшивка SPF-HA снижена, что приводит к получению более биодеградируемой матрицы.
В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитая BDDE НА может иметь разное время удержания после введения, например, после инъекции в виде интрадермального, субдермального или, как правило, дермального филлера. В некоторых вариантах осуществления перекрестно-сшитая BDDE НА может находиться где-либо в ткани кожи в течение от одного до по меньшей мере тридцати дней в зависимости от степени перекрестной сшивки. Переменное время удержания перекрестно-сшитой НА можно настраивать, встраивая гидролизуемые связи во время перекрестной сшивки эпоксидом. В некоторых вариантах осуществления материалы, перекрестно-сшитые эпоксидом при более низком pH, имеют большее количество образующихся сложноэфирных связей и, таким образом, быстрее гидролизуются.
В одном из вариантов осуществления перекрестно-сшивающее средство является перекрестносшивающим активирующим средством нулевой длины. Как правило, перекрестно-сшивающие активирующие средства нулевой длины позволяют сочетать полимеры без добавления каких-либо дополнительных атомов спейсерной группы, и, таким образом, перекрестно-сшивающие активирующие средства
- 80 045185 нулевой длины не включают в матрицу перекрестно-сшитого полимера. Подходящие сшивающие средства нулевой длины включают карбодиимиды, такие как, например, 1-этил-3-(3диметиламинопропил)карбодиимид (EDC) и BCDI. Нерастворимые в воде карбодиимиды включают дициклогексилкарбодиимид (DCC) и диизопропилкарбодиимид (DIC), которые также можно использовать.
Карбодиимид-опосредованное сочетание между карбоксилатами и спиртовыми или аминофункциональными группами легко происходит при температуре окружающей среды, нейтральном pH и в водных условиях. Нейтральный pH, например, может составлять от приблизительно 6,0 и приблизительно 8,0, например, от приблизительно 6,5 до приблизительно 7,5, например, приблизительно 7,0. Как правило, в воде 1-этил-3-(3-диметиламинопропил)карбодиимид гидрохлорид (EDC) можно использовать для опосредования этерификации между карбоксилатами и спиртами или амидирования между карбоксилатами и аминами. Таким образом, перекрестно-сшитую НА получают, используя реакционноспособные группы, присутствующие на НА (например, карбоксилат и спирт). Кроме того, используя преимущество высокой реакционной способности аминогрупп на белках, например, белках SPF, достигают амидирования между боковыми цепями лизина в белках и карбоксилатными группами НА с получением НАбелковых перекрестно-сшитых гидрогелей. Перекрестно-сшивающие средства и непрореагировавшие полимеры можно удалять с помощью диализа.
В некоторых вариантах осуществления EDC используют в комбинации с N-гидроксисукцинимидом (NHS) или сульфонил-NHS (сульфо-NHS), в совокупности обозначаемыми в настоящем описании как NHS. NHS стабилизирует реакционноспособные промежуточные соединения, образованные EDC; таким образом, добавление NHS может повышать эффективность EDC в отношении реакции сочетания. Альтернативно, для катализа реакции сочетания можно использовать 4-диметиламинопиридин (DMAP).
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры на основе НА по изобретению включают композиции на основе перекрестно-сшитой НА и композиции на основе по меньшей мере частично перекрестно-сшитой НА. В рамках изобретения термин неперекрестно-сшитая НА относится к истинно неперекрестно-сшитым (например, свободным) цепям НА, а также слегка перекрестно-сшитым цепям и их фрагментам, как правило, находящимся в растворимой жидкой форме.
В некоторых вариантах осуществления композиции гидрогеля по изобретению включают по меньшей мере некоторую перекрестную сшивку между НА и SPF.
Неограничивающие примеры вариантов осуществления.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестно
- 81 045185 сшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему низкомолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему среднемолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестно-сшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему низкомолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, среднемолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестно-сшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPFHA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%; где массовое соотношение между низкомолекулярными SPF и среднемолекулярными SPF составляет приблизительно 3:1.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему высокомолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестно-сшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка происходит в результате использования кросс-линкера на основе эпоксида, например, BDDE, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 1 кДа до приблизительно 250 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 5 кДа до приблизительно 150 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и HA-HA; пере
- 82 045185 крестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 6 кДа до приблизительно 17 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 17 кДа до приблизительно 39 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и HA-HA; перекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0 и среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от приблизительно 39 кДа до приблизительно 80 кДа, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и HA-HA; перекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему низкомолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестносшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему среднемолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестно-сшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; перекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему низкомолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, среднемолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестно-сшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPFHA и НА-НА; перекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%; где массовое соотношение между низкомолекулярными SPF и среднемолекулярными SPF составляет приблизительно 3:1.
В одном из вариантов осуществления изобретение относится к биосовместимому дермальному филлеру, включающему высокомолекулярные фрагменты белка шелка (SPF), имеющие полидисперсность от приблизительно 1,5 до приблизительно 3,0, гиалуроновую кислоту (НА), воду и от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,5% лидокаина, например, приблизительно 0,3% лидокаина; где часть до 100 мас./мас.%. SPF является перекрестно-сшитой, и часть до 100 мас./мас.%. НА является перекрестно-сшитой, перекрестная сшивка представляет собой одно или более из SPF-SPF, SPF-HA и НА-НА; пе
- 83 045185 рекрестная сшивка, включая перекрестную сшивку нулевой длины, происходит в результате использования активирующего средства, например, BCDI, и со степенью перекрестной сшивки до 15%.
Дополнительные средства.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, включают активное средство, такое как лекарственное средство. В некоторых вариантах осуществления активное средство может являться одним или более из ингибиторов ферментов, анестезирующих средств, лекарственных нейротоксинов, антиоксидантов, противоинфекционных средств, противовоспалительных средств, вазодилататоров, блокаторов ультрафиолета (УФ), красителей (например, красителя, чернил или пигмента для татуировки), отражающего средства, гормонов, иммуносупрессоров и их комбинаций. Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать активное средство, выбранное из группы, состоящей из ингибиторов ферментов, анестезирующих средств, лекарственных нейротоксинов (например, ботулинического токсина и клостридиального токсина), антиоксидантов, противоинфекционных средств (например, антибиотиков), вазодилататоров, красителей (например, чернил или пигмента для татуировки), отражающих средств, противовоспалительных средств, блокаторов ультрафиолета (УФ), красителей, гормонов, иммуносупрессоров и их комбинаций.
В некоторых вариантах осуществления иммуносупрессор является рапамицином или рапамицинподобным соединением.
В некоторых вариантах осуществления активное средство может являться антибиотиком, выбранным из группы, состоящей из пенициллина (например, пенициллина V, амоксициллина), эритромицина (например, стеарата эритромицина), линкозамида (например, клиндамицина), цефалоспорина (например, цефалексина) и их комбинации.
В некоторых вариантах осуществления активное средство может являться вазодилататором, выбранным из группы, состоящей из нитроглицерина, лабеталола, тиазида, изосорбид-динитрата, тетранитрата пентаэритрита, дигиталиса, гидралазина, диазоксида, амринона, L-аргинина, сульфата баметана, фумарата бенциклана, гемисукцината бенфуродила, бензилникотината, гидрохлорида буфломедила, гидрохлорида буфенина, гидрохлорида буталамина, цитрата цетидила, циклониката, малеат цинепазида, цикланделата, дихлорацетата диизопропиламмония, этилникотината, гепрониката, гексилникотината, тартрата ифенпродила, никотината инозитола, гидрохлорида изоксуприна, каллидиногеназы, метилникотината, оксалата нафтидрофурила, цитрата никаметата, ницеритрола, никобоксила, никофуранозы, никотинилового спирта, тартрата никотинилового спирта, оксида азота, нонивамида, окспентифиллина, папаверина, папаверолина, пентифиллина, пероксинитрита, пинацидила, пипратекола, пропентофилтина, раубазина, сулоктидила, теасуприна, гидрохлорид тимоксамина, никотината токоферола, толазолина, никотината ксантинола, диазоксида, гидралазина, миноксидила и нитропруссида натрия и их комбинации.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать активное средство в концентрации по массе по меньшей мере 0,01%, или по меньшей мере 0,02%, или по меньшей мере 0,03%, или по меньшей мере 0,04%, или по меньшей мере 0,05%, или по меньшей мере 0,06%, или по меньшей мере 0,07%, или по меньшей мере 0,08%, или по меньшей мере 0,09%, или по меньшей мере 0,1%, или по меньшей мере 0,2%, или по меньшей мере 0,3%, или по меньшей мере 0,4%, или по меньшей мере 0,5%, или по меньшей мере 0,6%, или по меньшей мере 0,7%, или по меньшей мере 0,8%, или по меньшей мере 0,9%, или по меньшей мере 1,0%, или по меньшей мере 1,5%, или по меньшей мере 2,0%, или по меньшей мере 2,5%, или по меньшей мере 3,0%, или по меньшей мере 3,5%, или по меньшей мере 4,0%, или по меньшей мере 4,5%, или по меньшей мере 5,0%, или по меньшей мере 5,5%, или по меньшей мере 6,0%, или по меньшей мере 6,5%, или по меньшей мере 7,0%, или по меньшей мере 7,5%, или по меньшей мере 8,0%, или по меньшей мере 8,5%, или по меньшей мере 9,0%, или по меньшей мере 9,5%, или по меньшей мере 10%, или по меньшей мере 15%, или по меньшей мере 20%, или по меньшей мере 25%, или по меньшей мере 30%, или по меньшей мере 35%, или по меньшей мере 40%, или по меньшей мере 45%, или по меньшей мере 50%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать активное средство в концентрации по массе не более 0,01%, или не более 0,02%, или не более 0,03%, или не более 0,04%, или не более 0,05%, или не более 0,06%, или не более 0,07%, или не более 0,08%, или не более 0,09%, или не более 0,1%, или не более 0,2%, или не более 0,3%, или не более 0,4%, или не более 0,5%, или не более 0,6%, или не более 0,7%, или не более 0,8%, или не более 0,9%, или не более 1,0%, или не более 1,5%, или не более 2,0%, или не более 2,5%, или не более 3,0%, или не более 3,5%, или не более 4,0%, или не более 4,5%, или не более 5,0%, или не более 5,5%, или не более
6,0%, или не более 6,5%, или не более 7,0%, или не более 7,5%, или не более 8,0%, или не более 8,5%, или не более 9,0%, или не более 9,5%, или не более 10%, или не более 15%, или не более 20%, или не более 25%, или не более 30%, или не более 35%, или не более 40%, или не более 45%, или не более 50%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать активное средство в концентрации по массе от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,1%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,15%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,2%, или от приблизительно 0,15% до приблизительно 0,25%, или от приблизительно 0,2%
- 84 045185 до приблизительно 0,3%, или от приблизительно 0,25% до приблизительно 0,35%, или от приблизительно 0,3% до приблизительно 0,4%, или от приблизительно 0,35% до приблизительно 0,45%, или от приблизительно 0,4% до приблизительно 0,5%, или от приблизительно 0,45% до приблизительно 0,55%, или от приблизительно 0,5% до приблизительно 0,6%, или от приблизительно 0,55% до приблизительно 0,65%, или от приблизительно 0,6% до приблизительно 0,7%, или от приблизительно 0,65% до приблизительно 0,75%, или от приблизительно 0,7% до приблизительно 0,8%, или от приблизительно 0,75% до приблизительно 0,85%, или от приблизительно 0,8% до приблизительно 0,9%, или от приблизительно 0,85% до приблизительно 0,95%, или от приблизительно 1% до приблизительно 2%, или от приблизительно 1,5% до приблизительно 2,5%, или от приблизительно 2% до приблизительно 3%, или от приблизительно 2,5% до приблизительно 3,5%, или от приблизительно 3% до приблизительно 4%, или от приблизительно 3,5% до приблизительно 4,5%, или от приблизительно 4% до приблизительно 5%, или от приблизительно 4,5% до приблизительно 5,5%, или от приблизительно 5% до приблизительно 6%, или от приблизительно 5,5% до приблизительно 6,5%, или от приблизительно 6% до приблизительно 7%, или от приблизительно 6,5% до приблизительно 7,5%, или от приблизительно 7% до приблизительно 8%, или от приблизительно 7,5% до приблизительно 8,5%, или от приблизительно 8% до приблизительно 9%, или от приблизительно 8,5% до приблизительно 9,5%, или от приблизительно 9% до приблизительно 10%, или от приблизительно 10% до приблизительно 15%, или от приблизительно 15% до приблизительно 20%, или от приблизительно 20% до приблизительно 25%, или от приблизительно 25% до приблизительно 30%, или от приблизительно 30% до приблизительно 35%, или от приблизительно 35% до приблизительно 40%, или от приблизительно 40% до приблизительно 45%, или от приблизительно 45% до приблизительно 50%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать активное средство в концентрации по массе приблизительно 0,01%, или приблизительно 0,02%, или приблизительно 0,03%, или приблизительно 0,04%, или приблизительно 0,05%, или приблизительно 0,06%, или приблизительно 0,07%, или приблизительно 0,08%, или приблизительно 0,09%, или приблизительно 0,1%, или приблизительно 0,2%, или приблизительно 0,3%, или приблизительно 0,4%, или приблизительно 0,5%, или приблизительно 0,6%, или приблизительно 0,7%, или приблизительно 0,8%, или приблизительно 0,9%, или приблизительно 1,0%, или приблизительно 1,5%, или приблизительно 2,0%, или приблизительно 2,5%, или приблизительно 3,0%, или приблизительно 3,5%, или приблизительно 4,0%, или приблизительно 4,5%, или приблизительно 5,0%, или приблизительно 5,5%, или приблизительно 6,0%, или приблизительно 6,5%, или приблизительно 7,0%, или приблизительно 7,5%, или приблизительно 8,0%, или приблизительно 8,5%, или приблизительно 9,0%, или приблизительно 9,5%, или приблизительно 10%, или приблизительно 11%, или приблизительно 12%, или приблизительно 13%, или приблизительно 14%, или приблизительно 15%, или приблизительно 16%, или приблизительно 17%, или приблизительно 18%, или приблизительно 19%, или приблизительно 20%, или приблизительно 21%, или приблизительно 22%, или приблизительно 23%, или приблизительно 24%, или приблизительно 25%, или приблизительно 26%, или приблизительно 27%, или приблизительно 28%, или приблизительно 29%, или приблизительно 30%, или приблизительно 31%, или приблизительно 32%, или приблизительно 33%, или приблизительно 34%, или приблизительно 35%, или приблизительно 36%, или приблизительно 37%, или приблизительно 38%, или приблизительно 39%, или приблизительно 40%, или приблизительно 41%, или приблизительно 42%, или приблизительно 43%, или приблизительно 44%, или приблизительно 45%, или приблизительно 46%, или приблизительно 47%, или приблизительно 48%, или приблизительно 49%, или приблизительно 50%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, включают ингибирующее фиброз средство. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут дополнительно включать соединение, имеющее ингибиторный эффект в отношении патологических процессов в очаге лечения или вокруг него. В некоторых аспектах активное средство можно выбирать из одного из следующих классов соединений: противовоспалительных средств (например, дексаметазона, кортизона, флудрокортизона, преднизона, преднизолона, 6а-метилпреднизолона, триамцинолона, бетаметазона и аспирина).
В некоторых вариантах осуществления с активным средством можно использовать, в качестве неограничивающих примеров, антиоксиданты и ферменты. В варианте осуществления активное средство может включать, в качестве неограничивающих примеров, селен, производные убихинона, антиоксиданты на основе тиола, сахарид-содержащие антиоксиданты, полифенолы, растительные экстракты, кофейную кислоту, апигенин, пикногенол, ресвератрол, фолиевую кислоту, витамин В12, витамин В6, витамин В3, витамин Е, витамин С и их производные, витамин D, витамин А, астаксантин, лютеин, ликопин, незаменимые жирные кислоты (омега-3 и -6), железо, цинк, магний, флавоноиды (флавоноиды сои, куркумин, силимарин, пикногенол), факторы роста, экстракт алоэ, гиалуроновую кислоту, белки внеклеточного матрикса, клетки, нуклеиновые кислоты, биомаркеры, биологические реагенты, оксид цинка, бензоила пероксид, ретиноиды, титан, аллергены в известной дозе (для сенсибилизационного лечения), эфирные масла, включая, в качестве неограничивающих примеров, лемонграссовое или розмариновое масло, и ароматизаторы. Если рассматривать активные средства в более широком смысле, активные средства мо
- 85 045185 гут включать терапевтические средства, такие как низкомолекулярные соединения, лекарственные средства, белки, пептиды и нуклеиновые кислоты.
В определенных вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать одно или более анестезирующих средств в количестве, эффективном для улучшения или уменьшения боли или дискомфорта в месте инъекции тканевого филлера. Местное анестезирующее средство можно выбирать из группы амбукаина, амоланона, амилокаина, беноксината, бензокаина, бетоксикаина, бифенамина, бупивакаина, бутакаина, бутамбена, бутаниликаина, бутетамина, бутоксикаина, картикаина, хлорпрокаина, кокаэтилена, кокаина, циклометикаина, дибукаина, диметизохина, диметокаина, диперодона, дицикломина, экгонидина, экгонина, этилхлорида, этидокаина, бета-эукаина, эупроцина, феналкомина, формокаина, гексилкаина, гидрокситетракаина, изобутил-р-аминобензоата, лейцинокаина мезилата, левоксадрола, лидокаина, мепивакаина, меприлкаина, метабутоксикаина, метилхлорида, миртекаина, наепаина, октакаина, ортокаина, оксетазаин, паретоксикаина, фенакаина, фенола, пиперокаина, пиридокаина, полидоканола, прамоксина, прилокаина, прокаина, пропанокаина, пропаракаина, пропипокаина, пропоксикаина, псевдококаина, пиррокаина, ропивакаина, салицилового спирта, тетракаина, толикаина, тримекаина, золамина и их солей.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать лидокаин или другое указанное выше анестезирующее средство в концентрации по массе по меньшей мере 0,01%, или по меньшей мере 0,02%, или по меньшей мере 0,03%, или по меньшей мере 0,04%, или по меньшей мере 0,05%, или по меньшей мере 0,06%, или по меньшей мере 0,07%, или по меньшей мере 0,08%, или по меньшей мере 0,09%, или по меньшей мере 0,1%, или по меньшей мере 0,2%, или по меньшей мере 0,3%, или по меньшей мере 0,4%, или по меньшей мере 0,5%, или по меньшей мере 0,6%, или по меньшей мере 0,7%, или по меньшей мере 0,8%, или по меньшей мере 0,9%, или по меньшей мере 1,0%, или по меньшей мере 1,5%, или по меньшей мере 2,0%, или по меньшей мере 2,5%, или по меньшей мере 3,0%, или по меньшей мере 3,5%, или по меньшей мере 4,0%, или по меньшей мере 4,5%, или по меньшей мере 5,0%, или по меньшей мере 5,5%, или по меньшей мере 6,0%, или по меньшей мере 6,5%, или по меньшей мере 7,0%, или по меньшей мере 7,5%, или по меньшей мере 8,0%, или по меньшей мере 8,5%, или по меньшей мере 9,0%, или по меньшей мере 9,5%, или по меньшей мере 10%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать лидокаин или другое указанное выше анестезирующее средство в концентрации по массе не более 0,01%, или не более 0,02%, или не более 0,03%, или не более 0,04%, или не более 0,05%, или не более 0,06%, или не более 0,07%, или не более 0,08%, или не более 0,09%, или не более 0,1%, или не более 0,2%, или не более 0,3%, или не более 0,4%, или не более 0,5%, или не более 0,6%, или не более 0,7%, или не более 0,8%, или не более 0,9%, или не более 1,0%, или не более 1,5%, или не более 2,0%, или не более 2,5%, или не более 3,0%, или не более 3,5%, или не более 4,0%, или не более 4,5%, или не более 5,0%, или не более 5,5%, или не более 6,0%, или не более 6,5%, или не более 7,0%, или не более 7,5%, или не более 8,0%, или не более 8,5%, или не более 9,0%, или не более 9,5%, или не более 10%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать лидокаин или другое указанное выше анестезирующее средство в концентрации по массе приблизительно 0,01%, или приблизительно 0,02%, или приблизительно 0,03%, или приблизительно 0,04%, или приблизительно 0,05%, или приблизительно 0,06%, или приблизительно 0,07%, или приблизительно 0,08%, или приблизительно 0,09%, или приблизительно 0,1%, или приблизительно 0,2%, или приблизительно 0,3%, или приблизительно 0,4%, или приблизительно 0,5%, или приблизительно 0,6%, или приблизительно 0,7%, или приблизительно 0,8%, или приблизительно 0,9%, или приблизительно 1,0%, или приблизительно 1,5%, или приблизительно 2,0%, или приблизительно 2,5%, или приблизительно 3,0%, или приблизительно 3,5%, или приблизительно 4,0%, или приблизительно 4,5%, или приблизительно 5,0%, или приблизительно 5,5%, или приблизительно 6,0%, или приблизительно 6,5%, или приблизительно 7,0%, или приблизительно 7,5%, или приблизительно 8,0%, или приблизительно 8,5%, или приблизительно 9,0%, или приблизительно 9,5%, или приблизительно 10%.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать лидокаин или другое указанное выше анестезирующее средство в концентрации по массе от приблизительно 0,01% до приблизительно 0,02%, или от приблизительно 0,03% до приблизительно 0,04%, или от приблизительно 0,05% до приблизительно 0,06%, или от приблизительно 0,06% до приблизительно 0,07%, или от приблизительно 0,08% до приблизительно 0,09%, или от приблизительно 0,1% до приблизительно 0,2%, или от приблизительно 0,3% до приблизительно 0,4%, или от приблизительно 0,5% до приблизительно 0,6%, или от приблизительно 0,7% до приблизительно 0,8%, или от приблизительно 0,9% до приблизительно 1,0%, или от приблизительно 1% до приблизительно 1,5%, или от приблизительно 1,5% до приблизительно 2,0%, или от приблизительно 2,0% до приблизительно 2,5%, или приблизительно 2,5% до приблизительно 3,0%, или от приблизительно 3,0% до приблизительно 3,5%, или от приблизительно 3,5% до приблизительно 4,0%, или от приблизительно 4,0% до приблизительно 4,5%, или от приблизительно 4,5% до приблизительно 5,0%, или от приблизительно 5,0% до приблизительно 5,5%, или от приблизительно 5,5% до приблизительно 6,0%, или от приблизительно 6,0% до
- 86 045185 приблизительно 6,5%, или от приблизительно 6,5% до приблизительно 7,0%, или от приблизительно 7,5% до приблизительно 8,0%, или от приблизительно 8,0% до приблизительно 8,5%, или от приблизительно 8,5% до приблизительно 9,0%, или от приблизительно 9,5% до приблизительно 10%.
В одном из вариантов осуществления анестезирующее средство является лидокаином, например, в форме лидокаина HCl. Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут содержать лидокаин или другое анестезирующее средство в концентрации от приблизительно 0,1% до приблизительно 5% по массе композиции, например, от приблизительно 0,2% до приблизительно 1,0% по массе тканевого филлера. В одном из вариантов осуществления тканевой филлер имеет концентрацию лидокаина приблизительно 0,3 мас./мас.% тканевого филлера. Концентрация лидокаина в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, может являться терапевтически эффективным, что означает, что концентрация является достаточной для получения терапевтической пользы, такой как, например, улучшение или уменьшение боли или дискомфорта в месте инъекции тканевого филлера.
Оптические свойства.
Когда свет попадает на материал, он может взаимодействовать с ним несколькими способами. Эти взаимодействия зависят от природы света, т.е. его длины волны, частоты, энергии и т.д., и природы материала. Свет взаимодействует с объектом посредством некоторой комбинации отражения и пропускания с преломлением. Оптически прозрачный материал позволяет большей части падающего света проходить через него, при этом отражается немного света. Материалы, не пропускающие свет, называют оптически непрозрачными или просто непрозрачными.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевому филлеру, представленному в настоящем описании, имеющему прозрачность и/или просвечиваемость. Прозрачность (также называемая светопроницаемостью) является физическим свойством, состоящим в допущении прохождения света через материал, в то время как просвечиваемость (также называемая полупрозрачностью) позволяет свету проходить через материал диффузно. Противоположным свойством является непрозрачность. Через прозрачные материалы можно видеть четко, в то время как через полупрозрачные нельзя видеть четко. Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут проявлять или не проявлять оптические свойства, такие как прозрачность и/или просвечиваемость. В некоторых вариантах осуществления, включающих способы заполнения поверхностных мелких морщин, преимуществом может являться использование непрозрачного гидрогеля. Факторы, используемые для контроля оптических свойств тканевых филлеров, включают, в качестве неограничивающих примеров, концентрацию SPF, степень кристалличности и/или гомогенность гидрогеля.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, являются непрозрачными.
В варианте осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, является оптически прозрачным. В аспектах этого варианта осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, приблизительно 75% света, приблизительно 80% света, приблизительно 85% света, приблизительно 90% света, приблизительно 95% света, или приблизительно 100% света. В других аспектах этого варианта изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании пропускает, например, по меньшей мере 75% света, по меньшей мере 80% света, по меньшей мере 85% света, по меньшей мере 90% света, или по меньшей мере 95% света. В других аспектах этого варианта осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, от приблизительно 75% до приблизительно 100% света, от приблизительно 80% до приблизительно 100% света, от приблизительно 85% до приблизительно 100% света, от приблизительно 90% до приблизительно 100% света или от приблизительно 95% до приблизительно 100% света.
В другом варианте осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, является оптически непрозрачным. В аспектах этого варианта осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, приблизительно 0,1% света, приблизительно 1% света, приблизительно 10% света, приблизительно 15% света, приблизительно 20% света, приблизительно 25% света, приблизительно 30% света, приблизительно 35% света, приблизительно 40% света, приблизительно 45% света, приблизительно 50% света, приблизительно 55% света, приблизительно 60% света, приблизительно 65% света, приблизительно 70% света, приблизительно 75% света, приблизительно 80% света, приблизительно 85% света, приблизительно 90% света, приблизительно 95% света или приблизительно 100% света. В других аспектах этого варианта изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, не более 0,1% света, не более 1% света, не более 10% света, не более 15% света, не более 20% света, не более 25% света, не более 30% света, не более 35% света, не более 40% света, не более 45% света, не более 50% света, не более 55% света, не более 60% света, не более 65% света, не более 70% света или не более 75% света. В других аспектах этого варианта изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, по меньшей мере 0,1% света, по меньшей мере 1% света, по меньшей мере 10% света, по меньшей мере 15% света, по меньшей мере 20% света, по меньшей мере 25% света, по меньшей мере 30% света, по меньшей мере 35% света, по меньшей мере 40% света, по меньшей мере 45% света, по меньшей мере 50% света, по меньшей мере 55% света, по меньшей мере 60% света, по меньшей мере 65% света, по меньшей мере
- 87 045185
70% света, или по меньшей мере 75% света. В других аспектах этого варианта изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, от приблизительно 0,1% до приблизительно 15%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 20%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 25%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 30%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 35%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 40%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 45%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 50%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 55%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 60%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 65%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 70%, от приблизительно 0,1% до приблизительно 75%, от приблизительно 1% до приблизительно 15%, от приблизительно 1% до приблизительно 20%, от приблизительно 1% до приблизительно 25%, от приблизительно 1% до приблизительно 30%, от приблизительно 1% до приблизительно 35%, от приблизительно 1% до приблизительно 40%, от приблизительно 1% до приблизительно 45%, от приблизительно 1% до приблизительно 50%, от приблизительно 1% до приблизительно 55%, от приблизительно 1% до приблизительно 60%, от приблизительно 1% до приблизительно 65%, от приблизительно 1% до приблизительно 70%, от приблизительно 1% до приблизительно 75%, от приблизительно 10% до приблизительно 20%, от приблизительно 10% до приблизительно 25%, от приблизительно 10% до приблизительно 30%, от приблизительно 10% до приблизительно 35%, от приблизительно 10% до приблизительно 40%, от приблизительно 10% до приблизительно 45%, от приблизительно 10% до приблизительно 50%, от приблизительно 10% до приблизительно 55%, от приблизительно 10% до приблизительно 60%, от приблизительно 10% до приблизительно 65%, от приблизительно 10% до приблизительно 70%, от приблизительно 10% до приблизительно 75%, от приблизительно 25% до приблизительно 35%, от приблизительно 25% до приблизительно 40%, от приблизительно 25% до приблизительно 45%, от приблизительно 25% до приблизительно 50%, от приблизительно 25% до приблизительно 55%, от приблизительно 25% до приблизительно 60%, от приблизительно 25% до приблизительно 65%, от приблизительно 25% до приблизительно 70% или от приблизительно 25% до приблизительно 75% света.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, является оптически полупрозрачным. В аспектах этих вариантов осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, диффузно пропускает, например, приблизительно 75% света, приблизительно 80% света, приблизительно 85% света, приблизительно 90% света, приблизительно 95% света, или приблизительно 100% света. В других аспектах этих вариантов изобретения тканевой филлер диффузно пропускает, например, по меньшей мере 0,1% света, по меньшей мере 1% света, по меньшей мере 5% света, по меньшей мере 10% света, по меньшей мере 15% света, по меньшей мере 20% света, по меньшей мере 25% света, по меньшей мере 30% света, по меньшей мере 35% света, по меньшей мере 40% света, по меньшей мере 45% света, по меньшей мере 50% света, по меньшей мере 55% света, по меньшей мере 60% света, по меньшей мере 65% света, по меньшей мере 70% света, 75% света, по меньшей мере 80% света, по меньшей мере 85% света, по меньшей мере 90% света, или по меньшей мере 95% света. В других аспектах этих вариантов изобретения тканевой филлер диффузно пропускает, например, не более 0,1% света, не более 1% света, не более 5% света, не более 10% света, не более 15% света, не более 20% света, не более 25% света, не более 30% света, не более 35% света, не более 40% света, не более 45% света, не более 50% света, не более 55% света, не более 60% света, не более 65% света, не более 70% света, 75% света, не более 80% света, не более 85% света, не более 90% света, не более 95% света или не более 100% света. В других аспектах этих вариантов осуществления тканевой филлер диффузно пропускает, например, от приблизительно 0,1% до приблизительно 100% света, от приблизительно 1% до приблизительно 100% света, от приблизительно 5% до приблизительно 100% света, от приблизительно 10% до приблизительно 100% света, от приблизительно 15% до приблизительно 100% света, от приблизительно 20% до приблизительно 100% света, от приблизительно 25% до приблизительно 100% света, от приблизительно 30% до приблизительно 100% света, от приблизительно 35% до приблизительно 100% света, от приблизительно 45% до приблизительно 100% света, от приблизительно 50% до приблизительно 100% света, от приблизительно 55% до приблизительно 100% света, от приблизительно 60% до приблизительно 100% света, от приблизительно 65% до приблизительно 100% света, от приблизительно 70% до приблизительно 100% света, от приблизительно 75% до приблизительно 100% света, от приблизительно 80% до приблизительно 100% света, от приблизительно 85% до приблизительно 100% света, от приблизительно 90% до приблизительно 100% света или от приблизительно 95% до приблизительно 100% света.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно описывать с помощью его коэффициента ослабления, определяемого как описание способности материала рассеивать или поглощать свет.
Тканевой филлер и свойства кожи могут влиять на появление побочного эффекта Тиндаля в коже после введения некоторых тканевых филлеров, известных в этой области. Филлеры с высокой жесткостью и эластичностью можно использовать для коррекции областей на лице, таких как носогубные складки, щеки и подбородок без опасений в отношении изменения цвета лица, т.к. материалы инъецируют в средние и глубокие области дермы. Однако, если филлеры используют для более поверхностного
- 88 045185 нанесения, например, для коррекции мелких морщин, или ошибочно вводят слишком поверхностно в верхние области дермы, зачастую наблюдают синеватое окрашивание кожи. Это явление, как считают, являющееся результатом эффекта Тиндаля, оставляет почти постоянное изменение цвета в участках введения. В некоторых вариантах осуществления эффект исчезает после введения ферментов, например, гиалуронидазы, для деградации материала филлера. Таким образом, эффект Тиндаля более распространен у пациентов, у которых лечению подвергали поверхностные мелкие морщины. Длительное проявление эффекта Тиндаля, как правило, при условии, что филлер остается в коже, является нежелательным побочным эффектом и вызывает опасения у пациентов.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, позволяют уменьшать эффект Тиндаля благодаря их гомогенности и являющейся ее результатом непрозрачности.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, не приводят к эффекту Тиндаля или не приводят к какому-либо визуально заметному синему окрашиванию, являющемуся результатом эффекта Тиндаля. В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевым филлерам и способам эстетического улучшения внешности, включающим введение в область дермы пациента, по существу, оптически прозрачной композиции дермального филлера, не проявляющей эффект Тиндаля или проявляющей незначительный эффект Тиндаля. Возникновение синего окрашивания на коже в месте инъекции тканевого филлера (эффект Тиндаля) является значительным нежелательным явлением, возникающим у некоторых пациентов, которым вводят дермальный филлер. Эффект Тиндаля более распространен у пациентов, у которых лечению подвергали поверхностные мелкие морщины. Разработаны варианты осуществления настоящего изобретения, относящиеся к долговременным, полупрозрачным филлерам, которые можно инъецировать поверхностно для лечения мелких и неглубоких морщин даже в областях относительно тонкой кожи без какого-либо синего окрашивания в результате эффекта Тиндаля. Мелкими или поверхностными морщинами, как правило, считают морщины или складки кожи, как правило, обнаруживаемые в областях лица (морщины на лбу, у внешнего угла глаза, у красной каймы губ/около рта), где кожа является наиболее тонкой, т.к. где кожа имеет толщину дермы менее 1 мм. На лбу средняя толщина дермы составляет приблизительно 0,95 мм для нормальной кожи и приблизительно 0,81 мм для морщинистой кожи. Дерма вокруг внешнего угла глаза является даже более тонкой (например, приблизительно 0,61 мм для нормальной кожи и приблизительно 0,41 мм для морщинистой кожи). Средний внешний диаметр иглы калибра 30 или 32 (игл, как правило, используемых для введения геля в мелкие морщины) составляет приблизительно 0,30 и приблизительно 0,24 мм.
В варианте осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, является оптически непрозрачным. В аспектах этого варианта осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, приблизительно 5% света, приблизительно 10% света, приблизительно 15% света, приблизительно 20% света, приблизительно 25% света, приблизительно 30% света, приблизительно 35% света, приблизительно 40% света, приблизительно 45% света, приблизительно 50% света, приблизительно 55% света, приблизительно 60% света, приблизительно 65% света или приблизительно 70% света. В других аспектах этого варианта изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, не более 5% света, не более 10% света, не более 15% света, не более 20% света, не более 25% света, не более 30% света, не более 35% света, не более 40% света, не более 45% света, не более 50% света, не более 55% света, не более 60% света, не более 65% света, не более 70% света или не более 75% света. В других аспектах этого варианта изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании, пропускает, например, от приблизительно 5% до приблизительно 15%, от приблизительно 5% до приблизительно 20%, от приблизительно 5% до приблизительно 25%, от приблизительно 5% до приблизительно 30%, от приблизительно 5% до приблизительно 35%, от приблизительно 5% до приблизительно 40%, от приблизительно 5% до приблизительно 45%, от приблизительно 5% до приблизительно 50%, от приблизительно 5% до приблизительно 55%, от приблизительно 5% до приблизительно 60%, от приблизительно 5% до приблизительно 65%, от приблизительно 5% до приблизительно 70%, от приблизительно 5% до приблизительно 75%, от приблизительно 15% до приблизительно 20%, от приблизительно 15% до приблизительно 25%, от приблизительно 15% до приблизительно 30%, от приблизительно 15% до приблизительно 35%, от приблизительно 15% до приблизительно 40%, от приблизительно 15% до приблизительно 45%, от приблизительно 15% до приблизительно 50%, от приблизительно 15% до приблизительно 55%, от приблизительно 15% до приблизительно 60%, от приблизительно 15% до приблизительно 65%, от приблизительно 15% до приблизительно 70%, от приблизительно 15% до приблизительно 75%, от приблизительно 25% до приблизительно 35%, от приблизительно 25% до приблизительно 40%, от приблизительно 25% до приблизительно 45%, от приблизительно 25% до приблизительно 50%, от приблизительно 25% до приблизительно 55%, от приблизительно 25% до приблизительно 60%, от приблизительно 25% до приблизительно 65%, от приблизительно 25% до приблизительно 70% или от приблизительно 25% до приблизительно 75% света.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, демонстрирует снижение эффекта Тиндаля, например, на приблизительно 5%, приблизительно 10%,
- 89 045185 приблизительно 15%, приблизительно 20%, приблизительно 25%, приблизительно 30%, приблизительно 35%, приблизительно 40%, приблизительно 45%, приблизительно 50%, приблизительно 55%, приблизительно 60%, приблизительно 65%, приблизительно 70%, приблизительно 75%, приблизительно 80%, приблизительно 85%, приблизительно 90%, приблизительно 95%, приблизительно 100%. В других аспектах этих вариантов изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании, демонстрирует снижение эффекта Тиндаля, например, на по меньшей мере 5%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 15%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 25%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 35%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 45%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 95% или по меньшей мере 100%. В других аспектах этих вариантов изобретения тканевой филлер, представленный в настоящем описании, демонстрирует снижение эффекта Тиндаля на, например, от приблизительно 20% до приблизительно 100%, от приблизительно 50% до приблизительно 100%, от приблизительно 70% до приблизительно 100%, от приблизительно 15% до приблизительно 35%, от приблизительно 20% до приблизительно 40%, от приблизительно 25% до приблизительно 45%, от приблизительно 30% до приблизительно 50%, от приблизительно 35% до приблизительно 55%, от приблизительно 40% до приблизительно 60%, от приблизительно 45% до приблизительно 65%, от приблизительно 50% до приблизительно 70%, от приблизительно 55% до приблизительно 75%, от приблизительно 60% до приблизительно 80%, от приблизительно 65% до приблизительно 85%, от приблизительно 70% до приблизительно 90%, от приблизительно 75% до приблизительно 95% или от приблизительно 80% до приблизительно 100%.
Содержание воды.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут включать воду. Например, некоторые тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут являться гелями, такими как гидрогели, и могут включать воду, абсорбированную, заключенную или иным образом содержащуюся в них.
В варианте осуществления процент содержания воды по массе в тканевых филлерах по настоящему изобретению составляет от 1% до 95%. В варианте осуществления процент содержания воды по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет по меньшей мере 1%, или по меньшей мере 2%, или по меньшей мере 3%, или по меньшей мере 4%, или по меньшей мере 5%, или по меньшей мере 6%, или по меньшей мере 7%, или по меньшей мере 8%, или по меньшей мере 9%, или по меньшей мере 10%, или по меньшей мере 11%, или по меньшей мере 12%, или по меньшей мере 13%, или по меньшей мере 14%, или по меньшей мере 15%, или по меньшей мере 16%, или по меньшей мере 17%, или по меньшей мере 18%, или по меньшей мере 19%, или по меньшей мере 20%, или по меньшей мере 21%, или по меньшей мере 22%, или по меньшей мере 23%, или по меньшей мере 24%, или по меньшей мере 25%, или по меньшей мере 26%, или по меньшей мере 27%, или по меньшей мере 28%, или по меньшей мере 29%, или по меньшей мере 30%, или по меньшей мере 31%, или по меньшей мере 32%, или по меньшей мере 33%, или по меньшей мере 34%, или по меньшей мере 35%, или по меньшей мере 36%, или по меньшей мере 37%, или по меньшей мере 38%, или по меньшей мере 39%, или по меньшей мере 40%, или по меньшей мере 41%, или по меньшей мере 42%, или по меньшей мере 43%, или по меньшей мере 44%, или по меньшей мере 45%, или по меньшей мере 46%, или по меньшей мере 47%, или по меньшей мере 48%, или по меньшей мере 49%, или по меньшей мере 50%, или по меньшей мере 51%, или по меньшей мере 52%, или по меньшей мере 53%, или по меньшей мере 54%, или по меньшей мере 55%, или по меньшей мере 56%, или по меньшей мере 57%, или по меньшей мере 58%, или по меньшей мере 59%, или по меньшей мере 60%, или по меньшей мере 61%, или по меньшей мере 62%, или по меньшей мере 63%, или по меньшей мере 64%, или по меньшей мере 65%, или по меньшей мере 66%, или по меньшей мере 67%, или по меньшей мере 68%, или по меньшей мере 69%, или по меньшей мере 70%, или по меньшей мере 71%, или по меньшей мере 72%, или по меньшей мере 73%, или по меньшей мере 74%, или по меньшей мере 75%, или по меньшей мере 76%, или по меньшей мере 77%, или по меньшей мере 78%, или по меньшей мере 79%, или по меньшей мере 80%, или по меньшей мере 81%, или по меньшей мере 82%, или по меньшей мере 83%, или по меньшей мере 84%, или по меньшей мере 85%, или по меньшей мере 86%, или по меньшей мере 87%, или по меньшей мере 88%, или по меньшей мере 89%, или по меньшей мере 90%, или по меньшей мере 91%, или по меньшей мере 92%, или по меньшей мере 93%, или по меньшей мере 94%, или по меньшей мере 95%.
В варианте осуществления процент содержания воды по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет не более 1%, или не более 2%, или не более 3%, или не более 4%, или не более 5%, или не более 6%, или не более 7%, или не более 8%, или не более 9%, или не более 10%, или не более 11%, или не более 12%, или не более 13%, или не более 14%, или не более 15%, или не более 16%, или не более 17%, или не более 18%, или не более 19%, или не более 20%, или не более 21%, или не более 22%, или не более 23%, или не более 24%, или не более 25%, или не более 26%, или не более 27%, или не более 28%, или не более 29%, или не более 30%, или не более 31%, или не более 32%, или не более 33%, или не более 34%, или не более 35%, или не более 36%, или не более 37%, или не более 38%, или не более 39%, или не более 40%, или не более 41%, или не более 42%, или не более 43%,
- 90 045185 или не более 44%, или не более 45%, или не более 46%, или не более 47%, или не более 48%, или не более 49%, или не более 50%, или не более 51%, или не более 52%, или не более 53%, или не более 54%, или не более 55%, или не более 56%, или не более 57%, или не более 58%, или не более 59%, или не более 60%, или не более 61%, или не более 62%, или не более 63%, или не более 64%, или не более 65%, или не более 66%, или не более 67%, или не более 68%, или не более 69%, или не более 70%, или не более 71%, или не более 72%, или не более 73%, или не более 74%, или не более 75%, или не более 76%, или не более 77%, или не более 78%, или не более 79%, или не более 80%, или не более 81%, или не более 82%, или не более 83%, или не более 84%, или не более 85%, или не более 86%, или не более 87%, или не более 88%, или не более 89%, или не более 90%, или не более 91%, или не более 92%, или не более 93%, или не более 94%, или не более 95%.
В варианте осуществления процент содержания воды по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет от 1% до 2%, или от 2% до 3%, или от 3% до 4%, или от 4% до 5%, или от 5% до 6%, или от 6% до 7%, или от 7% до 8%, или от 8% до 9%, или от 9% до 10%, или от 10% до 11%, или от 11% до 12%, или от 12% до 13%, или от 13% до 14%, или от 14% до 15%, или от 15% до 16%, или от 16% или 17%, или от 17% до 18%, или от 18% до 19%, или от 19% до 20%, или от 20% до 21%, или от 21% до 22%, или от 22% до 23%, или от 23% до 24%, или от 24% до 25%, или от 25% до
26%, или от 26% до 27%, или от 27% до 28%, или от 28% до 29%, или от 30% до 31%, или от 31% до
32%, или от 32% до 33%, или от 33% до 34%, или от 34% до 35%, или от 35% до 36%, или от 36% до
37%, или от 37% до 38%, или от 38% до 39%, или от 39% до 40%, или от 40% до 41%, или от 41% до
42%, или от 42% до 43%, или от 43% до 44%, или от 44% до 45%, или от 45% до 46%, или от 46% до
47%, или от 47% до 48%, или от 48% до 49%, или от 49% до 50%, или от 50% до 51%, или от 51% до
52%, или от 52% до 53%, или от 53% до 54%, или от 54% до 55%, или от 55% до 56%, или от 56% до
57%, или от 57% до 58%, или от 58% до 59%, или от 59% до 60%, или от 60% до 61%, или от 61% до
62%, или от 62% до 63%, или от 63% до 64%, или от 64% до 65%, или от 65% до 66%, или от 66% до
67%, или от 67% до 68%, или от 68% до 69%, или от 69% до 70%, или от 70% до 71%, или от 71% до
72%, или от 72% до 73%, или от 73% до 74%, или от 74% до 75%, или от 75% до 76%, или от 76% до
77%, или от 77% до 78%, или от 78% до 79%, или от 79% до 80%, или от 80% до 81%, или от 81% до
82%, или от 82% до 83%, или от 83% до 84%, или от 84% до 85%, или от 85% до 86%, или от 86% до
87%, или от 87% до 88%, или от 88% до 89%, или от 89% до 90%, или от 90% до 91%, или от 91% до
92%, или от 92% до 93%, или от 93% до 94%, или от 94% до 95%, или от 95% до 96%, или от 96% до
97%, или от 97% до 98%.
В варианте осуществления процент содержания воды по массе в тканевых филлерах, представленных в настоящем описании, составляет приблизительно 1%, или приблизительно 2%, или приблизительно 3%, или приблизительно 4%, или приблизительно 5%, или приблизительно 6%, или приблизительно 7%, или приблизительно 8%, или приблизительно 9%, или приблизительно 10%, или приблизительно 11%, или приблизительно 12%, или приблизительно 13%, или приблизительно 14%, или приблизительно 15%, или приблизительно 16%, или приблизительно 17%, или приблизительно 18%, или приблизительно 19%, или приблизительно 20%, или приблизительно 21%, или приблизительно 22%, или приблизительно 23%, или приблизительно 24%, или приблизительно 25%, или приблизительно 26%, или приблизительно 27%, или приблизительно 28%, или приблизительно 29%, или приблизительно 30%, или приблизительно 31%, или приблизительно 32%, или приблизительно 33%, или приблизительно 34%, или приблизительно 35%, или приблизительно 36%, или приблизительно 37%, или приблизительно 38%, или приблизительно 39%, или приблизительно 40%, или приблизительно 41%, или приблизительно 42%, или приблизительно 43%, или приблизительно 44%, или приблизительно 45%, или приблизительно 46%, или приблизительно 47%, или приблизительно 48%, или приблизительно 49%, или приблизительно 50%, или приблизительно 51%, или приблизительно 52%, или приблизительно 53%, или приблизительно 54%, или приблизительно 55%, или приблизительно 56%, или приблизительно 57%, или приблизительно 58%, или приблизительно 59%, или приблизительно 60%, или приблизительно 61%, или приблизительно 62%, или приблизительно 63%, или приблизительно 64%, или приблизительно 65%, или приблизительно 66%, или приблизительно 67%, или приблизительно 68%, или приблизительно 69%, или приблизительно 70%, или приблизительно 71%, или приблизительно 72%, или приблизительно 73%, или приблизительно 74%, или приблизительно 75%, или приблизительно 76%, или приблизительно 77%, или приблизительно 78%, или приблизительно 79%, или приблизительно 80%, или приблизительно 81%, или приблизительно 82%, или приблизительно 83%, или приблизительно 84%, или приблизительно 85%, или приблизительно 86%, или приблизительно 87%, или приблизительно 88%, или приблизительно 89%, или приблизительно 90%, или приблизительно 91%, или приблизительно 92%, или приблизительно 93%, или приблизительно 94%, или приблизительно 95%.
Механические свойства.
Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, или их компоненты можно предоставлять в ряде физических состояний в зависимости от выбранной терапии и способа введения. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению являются жидкостями. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению являются вязкими жидкостями. В некоторых
- 91 045185 вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению являются твердыми веществами. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению являются упругими твердыми веществами.
При исследовании тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, можно оценивать ряд реологических свойств, как показано в табл. 17.
Таблица 17
| Реологические термины, используемые для описания тканевых филлеров | |
| Упругость Модуль упругости | Способность тканевого филлера восстановиться в исходную форму после деформации Мера накопленной энергии в вязкоупругом материале, обозначаемая символом G’ |
| Вязкость | Характеристика текучести тканевого филлера (плотность геля) |
| Модуль вязкости | Мера рассеянной энергии в вязкоупругом материале обозначаемая как G |
| Комплексный модуль | Общее сопротивление деформации тканевого филлера, определяемое с помощью векторной суммы G’ и G (G*) |
| Комплексная вязкость | Вязкость, вычисленная из качания частоты, обозначаемая как п* |
| Вязкоупругий | Определение тканевых филлеров, обладающих упругими и вязкими свойствами |
| Сила сдвига | Внешняя сила, прилагаемая параллельно тканевому филлеру при помещении между двумя пластинами, сдвигаемыми в противоположных направлениях |
| Истончение сдвига | Снижение вязкости тканевого филлера с повышением скорости деформации |
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению являются вязкоупругими материалами, проявляющими механические свойства упругих и вязких материалов. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению можно описывать как гели. В этой области известны способы анализа механических или реологических свойств (например, вязкоупругих свойств) материала, такие как, например, описываемые в публикации патентной заявки США № 2006/0105022 и Stocks, et al., J. Drugs. Dermatol. (2011) 10:974-980, полное содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки. Вязкоупругость материала можно охарактеризовывать с использованием динамомеханического анализа, например, прилагая колебательное напряжение к образцу и измеряя получаемое натяжение. Упругие материалы, как правило, демонстрируют синфазный стресс и натяжение, т.е. использование стресса приводит к незамедлительному натяжению. В вязких материалах натяжение является сдвинутым по фазе при использовании стресса на 90 градусов. В вязкоупругих материалах разность фаз между натяжением и стрессом составляет более 0, но менее 90 градусов. В некоторых вариантах осуществления вязкоупругость материалов SPF по изобретению можно охарактеризовывать с помощью комплексного динамического модуля G, включающего динамический модуль упругости G' (также обозначаемый как модуль упругости) и модуль потерь G (также обозначаемый как модуль вязкости):
G=G’ । iG
G' = COSO Gn= sinS Fo Fp где i2=-1, и , σ0 представляет собой амплитуду стресса, ε0 представляет собой амплитуду натяжения, и δ представляет собой сдвиг фаз.
Модуль упругости G' и модуль потерь G измеряют, подвергая образец геля SPF колебательному напряжению во вращательном или сдвиговом реометре. Образец помещают между двух пластин, одна из которых зафиксирована, а другая может вращаться, или подвергают колебаниям с заданной частотой. Значения модуля упругости G' и модуля потерь G зависят о частоты. Диапазоны частот, используемых в измерении модуля упругости G' и модуля потерь G, как правило, в качестве неограничивающих примеров, составляют от 0,1 до 10 Гц. В некоторых вариантах осуществления модуль упругости G' и модуль потерь G измеряют при частоте колебаний 1 Гц.
В некоторых вариантах осуществления реологические свойства тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, например, G' и G, можно измерять с использованием колебательного рео
- 92 045185 метра с плоскопараллельным зазором. Пластины разных диаметров, например, 25 мм, можно использовать при различной высоте зазора между пластинами, например, 1 мм. Измерения можно осуществлять при различных температурах. В некоторых вариантах осуществления измерения осуществляют при постоянной температуре 25°С. В некоторых вариантах осуществления измерение включает качание частоты между двумя значениями частот, например от 1 до 10 Гц, при конкретном значении натяжения, например, при постоянном натяжении 2%. В некоторых вариантах осуществления измерения включают логарифмическое повышение частоты с последующим качанием натяжения, которое может составлять, например, от 1 до 300% при постоянной частоте, например, 5 Гц, с логарифмическим повышением натяжения. В некоторых вариантах осуществления динамический модуль упругости G' и модуль потерь G можно получать из качания натяжения при конкретном процентном значении натяжения, например, при натяжении 1%.
В некоторых вариантах осуществления комплексный модуль (т.е. сумма G' и iG) представляет собой всеобъемлющую меру общего сопротивления деформации конкретного тканевого филлера, представленного в настоящем описании. Комплексный модуль можно тестировать с использованием реометра, где конкретный тканевой филлер (например, гель) можно зажимать между двумя параллельными круглыми пластинами и обеспечивать переменную деформацию сдвига посредством вращения одной пластины с разными частотами.
В некоторых вариантах осуществления характеристики конкретного тканевого филлера можно исследовать с помощью процента упругости этого тканевого филлера, где процент упругости равен
100xG7(G’+G).
В некоторых вариантах осуществления характеристики конкретного тканевого филлера можно исследовать с помощью коэффициента восстановления этого тканевого филлера:
Значение вязкости, получаемое во время повышения частоты
Коэффициент: _ при качании восстановления — Значение вязкости, получаемое во время снижения частоты при качании где коэффициент восстановления приблизительно 1 означает, что конкретный тканевой филлер (например, гель) сохраняет свою структуру несмотря на прилагаемую силу; коэффициент восстановления более 1 означает, что конкретный тканевой филлер (например, гель) претерпевает распад кристаллической структуры; и гель с коэффициентом восстановления менее 1 имел повышенные прочностные характеристики.
Не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что повышенный G' приводит к относительному повышению способности материала сопротивляться изменениям формы, и материал можно описать как более жесткий, твердый или более упругий, чем материал (например, гелевый тканевой филлер) с более низким G'. Таким образом, повышенный G' может приводить к соответствующему повышению способности материала обеспечивать структурную поддержку и/или увеличение объема.
Не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что повышенный G приводит к получению более вязкого материала (например, геля) по сравнению с материалом, имеющим более низкий G. Кроме того, в случае материалов с более высоким G наблюдают более значительные потери энергии в виде рассеянного тепла. В некоторых вариантах осуществления G' повышается с повышением степени перекрестной сшивки. В некоторых вариантах осуществления G повышается с повышением степени перекрестной сшивки. В некоторых вариантах осуществления G' и G повышаются с повышением степени перекрестной сшивки. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно менее 50 Па до приблизительно более 15000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 50 Па до приблизительно 500000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 100 Па до приблизительно 500000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 75 Па до приблизительно 150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 100 Па до приблизительно 250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 150 Па до приблизительно 275 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 150 Па до приблизительно 500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 250 Па до приблизительно 750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 375 Па до приблизительно 675 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 425 Па до приблизительно 850 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 500 Па до приблизительно 1000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 650 Па до приблизительно 1050 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 750 Па до приблизительно 1250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' от приблизительно 950 Па до приблизительно 1500 Па.
- 93 045185
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 50 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 200 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 225 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 275 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 300 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 325 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 350 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 375 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 400 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 425 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 450 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 475 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 500 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 525 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 550 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 575 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно по меньшей мере Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 625 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 650 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 675 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 700 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 725 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 775 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 800 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 825 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 850 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 875 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 900 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 925 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 950 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 975 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1050 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1200 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1300 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1350 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1400 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1450 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 1500 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 50 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не более 200 Па. В более 225 Па. В более 250 Па. В более 275 Па. В более 300 Па. В более 325 Па. В более 350 Па. В более 375 Па. В
- 94 045185 некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 400 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 425 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 450 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 475 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 500 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 525
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 550 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 575 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 625 Па. В некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах некоторых вариантах осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые осуществления тканевые филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не имеют G' не более 650 Па более 675 Па более 700 Па более 725 Па более 750 Па более 775 Па более 800 Па. более 825 Па более 850 Па более 875 Па более 900 Па. более 925 Па более 950 Па более 975 Па
В
В
В
В
В
В
В
В
В
В
В
В
В
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 1000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 1050 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1100
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1150
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1200
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1250
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1300
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1350
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1400
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1450
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более1500
Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 50 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 200 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 225 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 275 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 300 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 325 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 350 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 375 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 400 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 425 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 450 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 475 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 500 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 525 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 550 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 575 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 600 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 625 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 650 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 675 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 700 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые
- 95 045185 филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 725 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 775 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 800 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 825 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 850 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 875 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 900 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 925 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 950 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 975 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1050 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1200 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1300 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1350 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1400 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1450 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1500 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 2000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 2250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 2500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 2750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 3000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 3250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 3500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 3750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 4000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 4250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 4500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 4750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 5000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 5250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 5500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 5750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно по меньшей мере 6000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 6250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 6500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 6750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 7000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 7250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 7500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 7750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 8000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 8250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 8500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 8750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 9000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 9250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 9500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 9750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 10000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей
- 96 045185 мере 10500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 11000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 11500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 12000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 12500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 13000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 13500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 14000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 14500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' по меньшей мере 15000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 2000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 2250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 2500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 2750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 3000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 3250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 3500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 3750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 4000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 4250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 4500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 4750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 5000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 5250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 5500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 5750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 6000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 6250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
6500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
6750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
7000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
7250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
7500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
7750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
8000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
8250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
8500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
8750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
9000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
9250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
9500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
9750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более
10000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более 10500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более11000
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более11500
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более12000
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более12500
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более13000
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более13500
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более14000
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более14500
Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' не более15000
Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 2000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 2250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 2500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 2750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобре
- 97 045185 тению имеют G' приблизительно 3000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 3250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 3500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 3750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 4000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 4250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 4500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 4750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 5000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 5250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 5500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 5750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 6000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 6250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 6500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 6750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 7000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 7250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 7500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 7750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 8000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 8250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 8500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 8750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 9000 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 9250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 9500 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 9750 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 10000 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1050 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1200 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1250 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1300 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1350 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1400 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1450 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G' приблизительно 1500 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно менее чем 5 Па до приблизительно более 200 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 5 Па до приблизительно 200 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 5 Па до приблизительно 25 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 15 Па до приблизительно 35 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 10 Па до приблизительно 50 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 15 Па до приблизительно 75 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 20 Па до приблизительно 85 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 25 Па до приблизительно 100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 35 Па до приблизительно 125 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 45 Па до приблизительно 115 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 75 Па до приблизительно 150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 100 Па до приблизительно 175 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G от приблизительно 115 Па до приблизительно 200 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 5 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по
- 98 045185 меньшей мере 10 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 15 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 20 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 25 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 30 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 35 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 40 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 45 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 50 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 55 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 60 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 65 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 70 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 75 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 80 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 85 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 90 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 95 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 105 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 110 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 115 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 120 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 125 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 130 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 135 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 140 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 145 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 155 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 160 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 165 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 170 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 175 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 180 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 185 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 190 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 195 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G по меньшей мере 200 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 5 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 10 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по филлеры по изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению изобретению имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не имеют G не более 15 Па. более 20 Па. более 25 Па. более 30 Па. более 35 Па. более 40 Па. более 45 Па. более 50 Па. более 55 Па. более 60 Па. более 65 Па. более 70 Па. более 75 Па. более 80 Па. более 85 Па. более 90 Па. более 95 Па.
более 100 Па. более 105 Па.
В В
В В
В В
В В
В В
В В
В В
В В
В В В
- 99 045185 некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 110 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 115 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 120 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 125 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 130 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 135 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 140 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 145 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 150 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 155 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 160 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 165 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 170 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 175 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 180 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 185 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 190 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 195 Па.В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G не более 200 Па.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 5 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 10 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 15 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 20 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 25 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 30 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 35 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 40 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 45 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 50 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 55 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 60 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 65 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 70 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 75 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 80 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 85 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 90 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 95 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 100 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 105 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 110 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 115 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 120 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 125 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 130 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 135 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 140 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 145 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 150 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 155 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 160 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 165 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 170 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 175 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 180 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 185 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 190 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 195 Па. В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры по изобретению имеют G приблизительно 200 Па.
- 100 045185
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, демонстрирует динамическую вязкость. Вязкость представляет собой сопротивление жидкости сдвигу или течению, вызванным напряжением сдвига или напряжением растяжения. Вязкость соответствует внутреннему сопротивлению жидкости течению, вызванному межмолекулярным трением, возникающим, когда слои жидкости пытаются скользить друг относительно друга, и ее можно рассматривать в качестве меры трения жидкости. Чем менее вязкой является жидкость, тем легче она движется (тем больше текучесть).
Вязкость можно определять двумя способами: динамическая вязкость (μ; иногда обозначают как η) или кинематическая вязкость (v). Динамическая вязкость, также известная как абсолютная или комплексная вязкость, представляет собой тангенциальную силу на единицу площади, необходимую для движения одной горизонтальной плоскости относительно другой за единицу скорости при поддержании единичного расстояния от жидкости. Физической единицей в системе Cu для динамической вязкости является паскаль-секунда (Па-c), идентичная Н-м’2с. Динамическую вязкость можно выражать как τ=μdvx/dz, где т=напряжение сдвига, μ=динамическая вязкость, и dvx/dz является градиентом скорости во времени. Например, если жидкость с вязкостью один Па-c помещают между двумя пластинами, и одну пластину толкают вбок с напряжением сдвига в один паскаль, она сдвигается на расстояние, равное толщине слоя между пластинами за одну секунду. Кинематическая вязкость (v) представляет собой соотношение динамической вязкости и плотности, величины, в которую не вовлечена сила и определяемую следующим образом: v=μ/ρ, где μ, является динамической вязкостью, и ρ является плотностью (кг/м3). Кинематическую вязкость, как правило, измеряют с помощью стеклянного капиллярного вискозиметра в единицах системы Cu м2/с. Вязкость жидкости зависит от температуры, и, таким образом, динамическую и кинематическую вязкость регистрируют по отношению к температуре.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, демонстрирует динамическую вязкость, например, по меньшей мере 10 Па-c, по меньшей мере 20 Па-c, по меньшей мере 30 Па-c, по меньшей мере 40 Па-c, по меньшей мере 50 Па-c, по меньшей мере 60 Па-c, по меньшей мере 70 Па-c, по меньшей мере 80 Па-c, по меньшей мере 90 Па-c, по меньшей мере 100 Па-c, по меньшей мере 125 Па-c, по меньшей мере 150 Па-c, по меньшей мере 175 Па-c, по меньшей мере 200 Па-c, по меньшей мере 225 Па-c, по меньшей мере 250 Па-c, по меньшей мере 275 Па-c, по меньшей мере 300 Па-c, по меньшей мере 400 Па-c, по меньшей мере 500 Па-c, по меньшей мере 600 Па-c, по меньшей мере 700 Па-c, по меньшей мере 750 Па-c, по меньшей мере 800 Па-c, по меньшей мере 900 Па-c, по меньшей мере 1000 Па-c, по меньшей мере 1100 Па-c, или по меньшей мере 1200 Па м. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, демонстрирует динамическую вязкость например, не более 10 Па-c, не более 20 Па-c, не более 30 Па-c, не более 40 Па-c, не более 50 Па-c, не более 60 Па-c, не более 70 Па-c, не более 80 Па-c, не более 90 Па-c, не более 100 Па-c, не более 125 Па-c, не более 150 Па-c, не более 175 Па-c, не более 200 Па-c, не более 225 Па-c, не более 250 Па-c, не более 275 Па-c, не более 300 Па-c, не более 400 Па-c, не более 500 Па-c, не более 600 Па-c, не более 700 Па-c, не более 750 Па-c, не более 800 Па-c, не более 900 Па-c или не более 1000 Па-c. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, демонстрирует динамическую вязкость, например, от приблизительно 10 Па-c до приблизительно 100 Па-c, от приблизительно 10 Па-c до приблизительно 150 Па-c, от приблизительно 10 Па-c до приблизительно 250 Па-c, от приблизительно 50 Па-c до приблизительно 100 Па-c, от приблизительно 50 Па-c до приблизительно 150 Па-c, от приблизительно 50 Па-c до приблизительно 250 Па-c, от приблизительно 100 Па-c до приблизительно 500 Па-c, от приблизительно 100 Па-c до приблизительно 750 Па-c, от приблизительно 100 Па-c до приблизительно 1000 Па-c, от приблизительно 100 Па-c до приблизительно 1200 Па-c, от приблизительно 300 Па-c до приблизительно 500 Па-c, от приблизительно 300 Па-c до приблизительно 750 Па-c, от приблизительно 300 Па-c до приблизительно 1000 Па-c или от приблизительно 300 Па-c до приблизительно 1200 Па-c.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свой G' и/или G in vivo в течение по меньшей мере 1 дня, или по меньшей мере 2 дней, или по меньшей мере 3 дней, или по меньшей мере 4 дней, или по меньшей мере 5 дней, или по меньшей мере 6 дней, или по меньшей мере 1 недели, или по меньшей мере 2 недель, или по меньшей мере 3 недель, или по меньшей мере 1 месяца, или по меньшей мере 2 месяцев, или по меньшей мере 3 месяцев, или по меньшей мере 4 месяцев, или по меньшей мере 5 месяцев, или по меньшей мере 6 месяцев, или по меньшей мере 7 месяцев, или по меньшей мере 8 месяцев, или по меньшей мере 9 месяцев, или по меньшей мере 10 месяцев, или по меньшей мере 11 месяцев, или по меньшей мере 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свой G' и/или G in vivo в течение не более 1 дня, или не более 2 дней, или не более 3 дней, или не более 4 дней, или не более 5 дней, или не более 6 дней, или не более 1 недели, или не более 2 недель, или не более 3 недель, или не более 1 месяца, или не более 2 месяцев, или не более 3 месяцев, или не более 4 месяцев, или не более 5 месяцев, или не более 6 месяцев, или не более 7 месяцев,
- 101 045185 или не более 8 месяцев, или не более 9 месяцев, или не более 10 месяцев, или не более 11 месяцев, или не более 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свой G' и/или G in vivo в течение приблизительно 1 дня, или приблизительно 2 дней, или приблизительно 3 дней, или приблизительно 4 дней, или приблизительно 5 дней, или приблизительно 6 дней, или приблизительно 1 недели, или приблизительно 2 недель, или приблизительно 3 недель, или приблизительно 1 месяца, или приблизительно 2 месяцев, или приблизительно 3 месяцев, или приблизительно 4 месяцев, или приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев, или приблизительно 7 месяцев, или приблизительно 8 месяцев, или приблизительно 9 месяцев, или приблизительно 10 месяцев, или приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свою упругость in vivo в течение по меньшей мере 1 дня, или по меньшей мере 2 дней, или по меньшей мере 3 дней, или по меньшей мере 4 дней, или по меньшей мере 5 дней, или по меньшей мере 6 дней, или по меньшей мере 1 недели, или по меньшей мере 2 недель, или по меньшей мере 3 недель, или по меньшей мере 1 месяца, или по меньшей мере 2 месяцев, или по меньшей мере 3 месяцев, или по меньшей мере 4 месяцев, или по меньшей мере 5 месяцев, или по меньшей мере 6 месяцев, или по меньшей мере 7 месяцев, или по меньшей мере 8 месяцев, или по меньшей мере 9 месяцев, или по меньшей мере 10 месяцев, или по меньшей мере 11 месяцев, или по меньшей мере 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут по существу, поддерживать свою упругость in vivo в течение не более 1 дня, или не более 2 дней, или не более 3 дней, или не более 4 дней, или не более 5 дней, или не более 6 дней, или не более 1 недели, или не более 2 недель, или не более 3 недель, или не более 1 месяца, или не более 2 месяцев, или не более 3 месяцев, или не более 4 месяцев, или не более 5 месяцев, или не более 6 месяцев, или не более 7 месяцев, или не более 8 месяцев, или не более 9 месяцев, или не более 10 месяцев, или не более 11 месяцев, или не более 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свою упругость in vivo в течение приблизительно 1 дня, или приблизительно 2 дней, или приблизительно 3 дней, или приблизительно 4 дней, или приблизительно 5 дней, или приблизительно 6 дней, или приблизительно 1 недели, или приблизительно 2 недель, или приблизительно 3 недель, или приблизительно 1 месяца, или приблизительно 2 месяцев, или приблизительно 3 месяцев, или приблизительно 4 месяцев, или приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев, или приблизительно 7 месяцев, или приблизительно 8 месяцев, или приблизительно 9 месяцев, или приблизительно 10 месяцев, или приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свою вязкость in vivo в течение по меньшей мере 1 дня, или по меньшей мере 2 дней, или по меньшей мере 3 дней, или по меньшей мере 4 дней, или по меньшей мере 5 дней, или по меньшей мере 6 дней, или по меньшей мере 1 недели, или по меньшей мере 2 недель, или по меньшей мере 3 недель, или по меньшей мере 1 месяца, или по меньшей мере 2 месяцев, или по меньшей мере 3 месяцев, или по меньшей мере 4 месяцев, или по меньшей мере 5 месяцев, или по меньшей мере 6 месяцев, или по меньшей мере 7 месяцев, или по меньшей мере 8 месяцев, или по меньшей мере 9 месяцев, или по меньшей мере 10 месяцев, или по меньшей мере 11 месяцев, или по меньшей мере 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, сохранять свою вязкость in vivo в течение не более 1 дня, или не более 2 дней, или не более 3 дней, или не более 4 дней, или не более 5 дней, или не более 6 дней, или не более 1 недели, или не более 2 недель, или не более 3 недель, или не более 1 месяца, или не более 2 месяцев, или не более 3 месяцев, или не более 4 месяцев, или не более 5 месяцев, или не более 6 месяцев, или не более 7 месяцев, или не более 8 месяцев, или не более 9 месяцев, или не более 10 месяцев, или не более 11 месяцев, или не более 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свою вязкость in vivo в течение приблизительно 1 дня, или приблизительно 2 дней, или приблизительно 3 дней, или приблизительно 4 дней, или приблизительно 5 дней, или приблизительно 6 дней, или приблизительно 1 недели, или приблизительно 2 недель, или приблизительно 3 недель, или приблизительно 1 месяца, или приблизительно 2 месяцев, или приблизительно 3 месяцев, или приблизительно 4 месяцев, или приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев, или приблизительно 7 месяцев, или приблизительно 8 месяцев, или приблизительно 9 месяцев, или приблизительно 10 месяцев, или приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свой объем in vivo в течение по меньшей мере 1 дня, или по меньшей мере 2 дней, или по меньшей мере 3 дней, или по меньшей мере 4 дней, или по меньшей мере 5 дней, или по меньшей мере 6 дней, или по меньшей мере 1 недели, или по меньшей мере 2 недель, или по меньшей мере 3 недель, или по меньшей мере 1 месяца, или по меньшей мере 2 месяцев, или по меньшей мере 3 месяцев, или по меньшей мере 4 месяцев, или по меньшей мере 5 месяцев, или по меньшей мере 6 меся
- 102 045185 цев, или по меньшей мере 7 месяцев, или по меньшей мере 8 месяцев, или по меньшей мере 9 месяцев, или по меньшей мере 10 месяцев, или по меньшей мере 11 месяцев, или по меньшей мере 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свой объем in vivo в течение не более 1 дня, или не более 2 дней, или не более 3 дней, или не более 4 дней, или не более 5 дней, или не более 6 дней, или не более 1 недели, или не более 2 недель, или не более 3 недель, или не более 1 месяца, или не более 2 месяцев, или не более 3 месяцев, или не более 4 месяцев, или не более 5 месяцев, или не более 6 месяцев, или не более 7 месяцев, или не более 8 месяцев, или не более 9 месяцев, или не более 10 месяцев, или не более 11 месяцев, или не более 1 года.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут, по существу, поддерживать свой объем in vivo в течение приблизительно 1 дня, или приблизительно 2 дней, или приблизительно 3 дней, или приблизительно 4 дней, или приблизительно 5 дней, или приблизительно 6 дней, или приблизительно 1 недели, или приблизительно 2 недель, или приблизительно 3 недель, или приблизительно 1 месяца, или приблизительно 2 месяцев, или приблизительно 3 месяцев, или приблизительно 4 месяцев, или приблизительно 5 месяцев, или приблизительно 6 месяцев, или приблизительно 7 месяцев, или приблизительно 8 месяцев, или приблизительно 9 месяцев, или приблизительно 10 месяцев, или приблизительно 11 месяцев, или приблизительно 1 года.
Способы производства.
Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно получать посредством комбинирования компонента на основе SPF с компонентом на основе НА с любыми дополнительными средствами или без них. В определенных вариантах осуществления один или оба из SPF и НА можно перекрестно сшивать перед комбинированием. В некоторых вариантах осуществления SPF и НА можно комбинировать, а затем перекрестно сшивать с использованием перекрестно-сшивающего средства, как представлено в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления SPF можно перекрестно сшивать с использованием перекрестно-сшивающего средства, а затем добавлять к НА, которая может являться или не являться перекрестно-сшитой, и затем их комбинацию можно подвергать дополнительной перекрестной сшивке. В некоторых вариантах осуществления НА можно перекрестно сшивать с использованием перекрестно-сшивающего средства, а затем добавлять к SPF, которые могут являться или не являться перекрестно-сшитыми, и затем их комбинацию можно подвергать дополнительной перекрестной сшивке.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно получать посредством комбинирования компонента на основе SPF, компонента на основе НА и дополнительного средства, как описано выше в настоящем описании. В таких вариантах осуществления один или оба из SPF и НА можно перекрестно сшивать перед комбинированием. В некоторых вариантах осуществления SPF и НА можно комбинировать с дополнительным средством, и затем перекрестно сшивать с использованием перекрестно-сшивающего средства, как представлено в настоящем описании. В некоторых вариантах осуществления дополнительное средство можно добавлять после комбинирования SPF и НА.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, может включать SPF и НА в массовом соотношении (SPF:HA) от 0,1:1 до 0,1:10, или от 0,1:1 до 0,1:100, или 0,1:1000; от 1:1 до 1:10, или от 1:1 до 1:100, или от 1:1 до 1:1000.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, может включать SPF и НА в массовом соотношении (HA:SPF) от 0,1:1 до 0,1:10, или от 0,1:1 до 0,1:100, или 0,1:1000; от 1:1 до 1:10, или от 1:1 до 1:100, или от 1:1 до 1:1000.
В некоторых вариантах осуществления получаемую комбинацию HA/SPF (перекрестно-сшитую или неперекрестно-сшитую) можно гомогенизировать, например, посредством механического смешивания исходно перекрестно-сшитой НА и/или SPF.
В некоторых вариантах осуществления раствор SPF можно получать и перекрестно сшивать с использованием перекрестно-сшивающего средства для получения перекрестно-сшитых SPF, к которым можно добавлять НА в перекрестно-сшитой форме, неперекрестно-сшитой форме или их смеси. Затем получаемую смесь можно гомогенизировать и добавлять к ней любые дополнительные средства (например, лидокаин).
В некоторых вариантах осуществления раствор SPF можно получать и перекрестно сшивать с использованием перекрестно-сшивающего средства в присутствии НА для получения композиции перекрестно-сшитых SPF-HA, к которой можно добавлять или не добавлять НА в ее неперекрестно-сшитой форме. Затем получаемую смесь можно гомогенизировать и добавлять к ней любые дополнительные средства (например, лидокаин).
В некоторых вариантах осуществления конкретные составы SPF, представленные в настоящем описании, можно комбинировать с НА или можно использовать перекрестную сшивку с использованием препаратов, приведенных в патентах США № 8288347 или 8450475 или публикациях патентных заявок США № 2006/0105022, 2016/0376382 или 2017/0315828, полное содержание которых включено в настоящее описание в качестве ссылки.
- 103 045185
В некоторых вариантах осуществления способы, представленные в настоящем описании, могут включать стадию стерилизации, где тканевой филлер или его часть подвергают воздействию, например, температур от 120°С до приблизительно 130°С и давления от приблизительно 12 до приблизительно 20 фунтов/дюйм2 в течение от приблизительно 1 до приблизительно 15 мин.
В некоторых вариантах осуществления способы, представленные в настоящем описании, могут включать стадию дегазации, где растворы SPF, НА или SPF/HA, представленные в настоящем описании, используемые в получении тканевых филлеров, дегазируют.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно получать общими способами, описанными в примерах 5-20. В описанных способах шелк можно получать в водном растворе, водно-спиртовом растворе, где спиртом может являться, например, этанол или метанол. В описанных способах можно использовать любые из перекрестно-сшивающих средств, представленных в настоящем описании, в соответствии с перекрестной сшивкой SPF с SPF, SPF с НА или НА с НА, как будет понятно специалисту в этой области.
Способы лечения.
В варианте осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно использовать в способах лечения одного или более состояний у нуждающегося в этом пациента. В некоторых вариантах осуществления терапевтически эффективное количество тканевого филлера можно вводить в ткань нуждающегося в этом пациента для лечения состояния или другого дефекта ткани.
В рамках изобретения термин лечение относится к снижению или устранению у пациента косметического или клинического симптома состояния, такого как состояние мягких тканей, или замедление или профилактика дебюта косметического или клинического симптома состояния у индивидуума.
В некоторых вариантах осуществления состояние, которое лечат с помощью тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, могут включать состояние мягких тканей. Состояние мягких тканей включают, в качестве неограничивающих примеров, аугментации, реконструкции, заболевания, нарушения, дефекты или несовершенства части или области тела. В одном из аспектов состояние мягких тканей, которое лечат описываемыми тканевыми филлерами, включают, в качестве неограничивающих примеров, аугментацию лица, реконструкцию лица, заболевание лица, лицевое нарушение, лицевой дефект или несовершенство лица. В некоторых вариантах осуществления состояние мягких тканей, которое лечат тканевыми филлерами, представленными в настоящем описании, включают, в качестве неограничивающих примеров, дегидратацию кожи, недостаток эластичности кожи, огрубление кожи, недостаток натяжения кожи, растяжки на коже, бледность кожи, впадины на коже, впалые щеки, впалую височную область, тонкие губы, дефект уретры, дефект кожи, дефект молочной железы, ретроорбитальный дефект, складки на лице или морщины. В некоторых вариантах осуществления состояние мягких тканей, которое лечат тканевыми филлерами, представленными в настоящем описании, включает в качестве неограничивающих примеров, несовершенство, дефект, заболевание и/или нарушение молочной железы, такое как, например, аугментация молочной железы, реконструкция молочной железы, мастопексия, микромастия, торакальная гипоплазия, синдром Поланда, дефекты в результате осложнений имплантации, подобные сморщиванию и/или разрыву капсулы; несовершенство, дефект, заболевание или нарушение лица, такое как, например, аугментация лица, реконструкция лица, синдром Парри-Ромберга, люпуспанникулит, впадины на коже, впалые щеки, впалые височные области, тонкие губы, несовершенства или дефекты носа, ретроорбитальные несовершенства или дефекты, складки на лице, мелкие морщины и/или морщины, подобные глабеллярным морщинам, носогубным складкам, морщинам около рта и/или морщины марионетки, и/или другие контурные деформации или несовершенства лица; несовершенство, дефект, заболевание или нарушение шеи; несовершенство, дефект, заболевание и/или нарушение кожи; несовершенства, дефекты, заболевания и/или нарушения других мягких тканей, таких как, например, аугментация или реконструкция верхней части руки, предплечья, кисти руки, плеча, спины, туловища, включая область живота, ягодицы, бедра, голени, включая икры, ступни, включая жировую подушку подошвы, глаз, гениталии или другую часть или область тела, или заболевание или нарушение, поражающее эти части или области тела; недержание мочи, энкопрез, другие формы недержания; и гастроэзофагеальную рефлюксную болезнь (GERD).
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно вводить в мягкие ткани, включая, в качестве неограничивающих примеров, кожу, ткани дермы, субдермальные ткани, ткани кожи, подкожные ткани, интрадуральную ткань, мышцы, сухожилия, связки, фиброзные ткани, жир, кровеносные сосуды и артерии, нервы и синовиальные (интрадермальные) ткани.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно помещать непосредственно в рану, чтобы способствовать заживлению, обеспечивая искусственную биодеградируемую матрицу с сигналами прикрепления, миграции и пролиферации клеток. В некоторых вариантах осуществления тканевыми филлерами, представленными в настоящем описании, можно покрывать биодеградируемую стеку или другой имплантируемый материал, или самим филлерам можно придавать форму листов или других структур или поддерживать их в гидратированной форме.
В некоторых вариантах осуществления количество композиции, используемой с любым из спосо
- 104 045185 бов, представленных в настоящем описании, будут определять с учетом желаемого изменения и/или улучшения, желаемого уменьшения и/или устранения симптома состояния, клинического и/или косметического эффекта, желательного для индивидуума и/или лечащего врача, и части или области тела, подвергаемой лечению. Об эффективности введения композиция может свидетельствовать один или более из следующих клинических и/или косметических показателей: измененная и/или улучшенная форма мягких тканей, измененный и/или улучшенный размер мягких тканей, измененный и/или улучшенный контур мягких тканей, измененная и/или улучшенная функция ткани, поддержка врастания ткани и/или накопление нового коллагена, устойчивое приживление тканевого филлера, улучшение удовлетворенности и/или качества жизни пациента и снижение использования имплантируемого чужеродного материала. Например, в случае способов аугментации молочной железы об эффективности композиций и способов может свидетельствовать один или более из следующих клинических и/или косметических показателей: увеличение размера молочной железы, измененная форма молочной железы, измененный контур молочной железы, устойчивое приживление, снижение риска сморщивания капсулы, снижение показателя образования липонекротических цист, улучшение удовлетворенности и/или качества жизни пациента и снижение использования имплантатов молочной железы.
В некоторых вариантах осуществления об эффективности тканевых филлеров и способов лечения мягких тканей лица может свидетельствовать один или более из следующих клинических и/или косметических показателей: увеличение размера, формы и/или контура черт лица, подобные увеличению размера, формы и/или контура губы, щеки, виска или области глаз; изменение размера, формы и/или контура черт лица, подобное измененному размеру, форме и/или контуру губ, щек, виска или области глаза; уменьшение или устранение морщины, складки или мелкой морщины на коже; устойчивость к образованию морщин, складок или мелких морщин на коже; регидратация кожи; повышенная эластичность кожи; снижение или устранение огрубления кожи; повышенное и/или улучшенное натяжение кожи; уменьшение или устранение растяжек; повышение и/или улучшение тона, сияния, яркости и/или блеска кожи; повышение и/или улучшение цвета кожи, снижение или устранение бледности кожи; устойчивое приживление композиции; снижение побочных эффектов; улучшение удовлетворенности и/или качества жизни пациента.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к тканевым филлерам и способам лечения, затрагивающим область кожи. В рамках изобретения термин область кожи относится к области кожи, содержащей дермо-эпидермальное соединение и дерму, включающую поверхностную дерму (папиллярную область) и глубокую дерму (ретикулярную область). Кожа состоит из трех основных слоев: эпидермиса, являющегося водонепроницаемым и служащим в качестве барьера для инфекции; дермы, служащей в качестве местоположения придатков кожи; и гиподермы (подкожного жирового слоя). Эпидермис не содержит кровеносные сосуды и получает питательные вещества посредством диффузии из дермы. Основным типом клеток, составляющих эпидермис, являются кератиноциты, меланоциты, клетки Лангерганса и клетки Меркеля.
Дерма является слоем кожи под эпидермисом, состоящим из соединительной ткани и смягчает прилагаемый к телу стресс и напряжение. Дерма тесно соединена с эпидермисом посредством базальной мембраны. Она также несет многие механорецепторы/нервные окончания, обеспечивающие чувство осязания и тепла. Она содержит волосяные фолликулы, потовые железы, сальные железы, апокринные железы, лимфатические сосуды и кровеносные сосуды. Кровеносные сосуды в дерме обеспечивают питание и удаление продуктов жизнедеятельности из собственных клеток, а также базального слоя эпидермиса. Дерму структурно разделяют на две области: поверхностную область, смежную с эпидермисом, названную папиллярной областью, и глубокую, более толстую область, известную как ретикулярная область.
Папиллярная область состоит из рыхлой волокнистой соединительной ткани. Она названа по пальцеобразным выступам под названием папиллы, выступающие в сторону эпидермиса. Папиллы придают дерме бугристую поверхность, смыкающуюся с эпидермисом, усиливая соединение между двумя слоями кожи. Ретикулярная область залегает глубоко в папиллярной области и, как правило, является гораздо более толстой. Она состоит из плотной неупорядоченной соединительной ткани и получила свое названия из-за плотной концентрации коллагеновых, эластических и ретикулярных волокон, вплетенных на всем ее протяжении. Эти белковые волокна придают дерме ее свойства силы, растяжимости и эластичности. В ретикулярной области также расположены корни волос, сальные железы, потовые железы, рецепторы, ногти и кровеносные сосуды. Растяжки после беременности, например, расположены в дерме.
Гиподерма находится ниже дермы. Она предназначена для прикрепления область кожи к нижележащей кости и мышце, а также снабжения ее кровеносными сосудами и нервами. Она состоит из рыхлой соединительной ткани и эластина. Основными типами клеток являются фибробласты, макрофаги и адипоциты (гиподерма содержит 50% телесного жира). Жир служит в качестве прокладочного и изоляционного материала для организма.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, вводят в область дермы индивидуума посредством инъекции в область дермы или область гиподермы. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, вводят в область дермы индивидуума посредством инъекции, например, в дермо-эпидермальное соединение, па
- 105 045185 пиллярную область, ретикулярную область или любую их комбинацию.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способам лечения состояния мягких тканей у индивидуума, включающим введение одного или более тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, в участок состояния мягких тканей индивидуума, где введение композиции улучшает состояние мягких тканей, таким образом, приводя к лечению состояния мягких тканей. В некоторых вариантах осуществления состояние мягких тканей является состоянием тканей молочной железы, состоянием тканей лица, состоянием шеи, состоянием кожи, состоянием верхней части руки, состоянием предплечья, состоянием кисти руки, состоянием плеча, состоянием спины, состоянием туловища, включая состояние области живота, состоянием ягодиц, состоянием бедра, состоянием голени, включая состояние икр, состоянием стопы, включая состояние жировой подушки подошвы, состоянием глаз, состоянием гениталий или состоянием, затрагивающим другую часть или область тела.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способам лечения состояния кожи, включающему введение индивидууму, страдающему состоянием кожи, одного или более тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, где введение тканевого филлера улучшает состояние кожи и, таким образом, приводит к лечению состояния кожи. В некоторых вариантах осуществления состояние кожи включает дегидратацию кожи, и способ лечения включает введение индивидууму, страдающему дегидратацией кожи, одного или более тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, где введение тканевого филлера приводит к регидратации кожи и, таким образом, лечению дегидратации кожи. В другом аспекте этих вариантов осуществления способ лечения недостатка эластичности кожи включает введение индивидууму, страдающему недостатком эластичности кожи, тканевого филлера, представленного в настоящем описании, где введение тканевого филлера приводит к повышению эластичности кожи и, таким образом, лечению недостатка эластичности кожи. В еще одном аспекте этих вариантов осуществления способ лечения огрубления кожи включает введение индивидууму, страдающему огрублением кожи, композиции, представленной в настоящем описании, где введение композиции приводит к снижению огрубления кожи и, таким образом, лечению огрубления кожи. В некоторых вариантах осуществления способ лечения недостатка натяжения кожи включает введение индивидууму, страдающему недостатком натяжения кожи, тканевого филлера, представленного в настоящем описании, где введение тканевого филлера делает кожу более натянутой и, таким образом, позволяет лечить недостаток натяжения кожи.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к способам лечения растяжек на коже, включающим введение индивидууму, страдающему растяжками на коже, одного или более тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, где введение одного или более тканевых филлеров уменьшает или устраняет растяжки на коже и, таким образом, приводит к лечению растяжек на коже. В некоторых вариантах осуществления способ лечения бледности кожи включает введение индивидууму, страдающему бледностью кожи, тканевого филлера, представленного в настоящем описании, где введение тканевого филлера улучшает тон или блеск кожи и, таким образом, приводит к лечению бледности кожи. В некоторых вариантах осуществления способ лечения морщин включает введение индивидууму, страдающему морщинами, тканевого филлера, представленного в настоящем описании, где введение тканевого филлера уменьшает или устраняет морщины и, таким образом, приводит к лечению морщин. В еще одном аспекте этих вариантов осуществления способ лечения морщин включает введение индивидууму тканевого филлера, представленного в настоящем описании, где введение тканевого филлера делает кожу устойчивой к образованию морщин и, таким образом, приводит к лечению морщин.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к введению композиции, представленной в настоящем описании, где такое введение способствует накоплению или образованию нового коллагена. Тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, могут поддерживать врастание ткани и новое накопление или образование коллагена.
Не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что молекулярную массу SPF, используемых в получении тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, можно корректировать для получения слабого воспалительного ответа в выбранной ткани для запуска накопления или образования коллагена в результате ответов с пролиферацией и созреванием ткани, следующих после исходного воспалительного ответа. Фактически, SPF с более высокой молекулярной массой может приводить к повышенному воспалительному ответу, в то время как SPF с более низкой молекулярной массой могут приводить к небольшому воспалительному ответу или не приводить к нему.
Не желая быть связанными какой-либо теорией, полагают, что тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, имеют неожиданное свойство, состоящее в том, что возникающий в результате воспалительный ответ и, таким образом, образование коллагена посредством ответа с пролиферацией и созреванием ткани, можно корректировать, т.к. растворы SPF, используемые в настоящем описании, имеют ограниченные, а не широкие полидисперсности. В варианте осуществления введение тканевого филлера, представленного в настоящем описании, повышает накопление нового коллагена.
В некоторых вариантах осуществления введение тканевого филлера, представленного в настоящем описании, повышает накопление или образование нового коллагена на приблизительно 1%, приблизительно 2%, приблизительно 3%, приблизительно 4%, приблизительно 5%, приблизительно 6%, прибли
- 106 045185 зительно 7%, приблизительно 8%, приблизительно 9%, приблизительно 10%, приблизительно 11%, приблизительно 12%, приблизительно 13%, приблизительно 14%, приблизительно 15%, приблизительно 16%, приблизительно 17%, приблизительно 18%, приблизительно 19%, приблизительно 20%, приблизительно 21%, приблизительно 22%, приблизительно 23%, приблизительно 24%, приблизительно 25%, приблизительно 26%, приблизительно 27%, приблизительно 28%, приблизительно 29%, приблизительно 30%, приблизительно 31%, приблизительно 32%, приблизительно 33%, приблизительно 34%, приблизительно 35%, приблизительно 36%, приблизительно 37%, приблизительно 38%, приблизительно 39%, приблизительно 40%, приблизительно 41%, приблизительно 42%, приблизительно 43%, приблизительно 44%, приблизительно 45%, приблизительно 46%, приблизительно 47%, приблизительно 48%, приблизительно 49%, приблизительно 50%, приблизительно 51%, приблизительно 52%, приблизительно 53%, приблизительно 54%, приблизительно 55%, приблизительно 56%, приблизительно 57%, приблизительно 58%, приблизительно 59%, приблизительно 60%, приблизительно 61%, приблизительно 62%, приблизительно 63%, приблизительно 64%, приблизительно 65%, приблизительно 66%, приблизительно 67%, приблизительно 68%, приблизительно 69%, приблизительно 70%, приблизительно 71%, приблизительно 72%, приблизительно 73%, приблизительно 74%, приблизительно 75%, приблизительно 76%, приблизительно 77%, приблизительно 78%, приблизительно 79%, приблизительно 80%, приблизительно 81%, приблизительно 82%, приблизительно 83%, приблизительно 84%, приблизительно 85%, приблизительно 86%, приблизительно 87%, приблизительно 88%, приблизительно 89%, приблизительно 90%, приблизительно 91%, приблизительно 92%, приблизительно 93%, приблизительно 94%, приблизительно 95%, приблизительно 96%, приблизительно 97%, приблизительно 98%, приблизительно 99% или приблизительно 100%, относительно того же или схожего тканевого филлера, содержащего НА, но не SPF.
В некоторых вариантах осуществления введение тканевого филлера, представленного в настоящем описании, повышает накопление или образование нового коллагена на по меньшей мере 1%, по меньшей мере 2%, по меньшей мере 3%, по меньшей мере 4%, по меньшей мере 5%, по меньшей мере 6%, по меньшей мере 7%, по меньшей мере 8%, по меньшей мере 9%, по меньшей мере 10%, по меньшей мере 11%, по меньшей мере 12%, по меньшей мере 13%, по меньшей мере 14%, по меньшей мере 15%, по меньшей мере 16%, по меньшей мере 17%, по меньшей мере 18%, по меньшей мере 19%, по меньшей мере 20%, по меньшей мере 21%, по меньшей мере 22%, по меньшей мере 23%, по меньшей мере 24%, по меньшей мере 25%, по меньшей мере 26%, по меньшей мере 27%, по меньшей мере 28%, по меньшей мере 29%, по меньшей мере 30%, по меньшей мере 31%, по меньшей мере 32%, по меньшей мере 33%, по меньшей мере 34%, по меньшей мере 35%, по меньшей мере 36%, по меньшей мере 37%, по меньшей мере 38%, по меньшей мере 39%, по меньшей мере 40%, по меньшей мере 41%, по меньшей мере 42%, по меньшей мере 43%, по меньшей мере 44%, по меньшей мере 45%, по меньшей мере 46%, по меньшей мере 47%, по меньшей мере 48%, по меньшей мере 49%, по меньшей мере 50%, по меньшей мере 51%, по меньшей мере 52%, по меньшей мере 53%, по меньшей мере 54%, по меньшей мере 55%, по меньшей мере 56%, по меньшей мере 57%, по меньшей мере 58%, по меньшей мере 59%, по меньшей мере 60%, по меньшей мере 61%, по меньшей мере 62%, по меньшей мере 63%, по меньшей мере 64%, по меньшей мере 65%, по меньшей мере 66%, по меньшей мере 67%, по меньшей мере 68%, по меньшей мере 69%, по меньшей мере 70%, по меньшей мере 71%, по меньшей мере 72%, по меньшей мере 73%, по меньшей мере 74%, по меньшей мере 75%, по меньшей мере 76%, по меньшей мере 77%, по меньшей мере 78%, по меньшей мере 79%, по меньшей мере 80%, по меньшей мере 81%, по меньшей мере 82%, по меньшей мере 83%, по меньшей мере 84%, по меньшей мере 85%, по меньшей мере 86%, по меньшей мере 87%, по меньшей мере 88%, по меньшей мере 89%, по меньшей мере 90%, по меньшей мере 91%, по меньшей мере 92%, по меньшей мере 93%, по меньшей мере 94%, по меньшей мере 95%, по меньшей мере 96%, по меньшей мере 97%, по меньшей мере 98%, по меньшей мере 99%, по меньшей мере 100%, по меньшей мере 125%, по меньшей мере 150%, по меньшей мере 175%, по меньшей мере 200%, по меньшей мере 225%, по меньшей мере 250%, по меньшей мере 275% или по меньшей мере 300% относительно того же или схожего тканевого филлера, содержащего НА, но не SPF.
В некоторых вариантах осуществления введение тканевого филлера, представленного в настоящем описании, повышает накопление или образование нового коллагена на не более 1%, не более 2%, не более 3%, не более 4%, не более 5%, не более 6%, не более 7%, не более 8%, не более 9%, не более 10%, не более 11%, не более 12%, не более 13%, не более 14%, не более 15%, не более 16%, не более 17%, не более 18%, не более 19%, не более 20%, не более 21%, не более 22%, не более 23%, не более 24%, не более 25%, не более 26%, не более 27%, не более 28%, не более 29%, не более 30%, не более 31%, не более
32%, не более 33%, не более 34%, не более 35%, не более 36%, не более 37%, не более 38%, не более
39%, не более 40%, не более 41%, не более 42%, не более 43%, не более 44%, не более 45%, не более
46%, не более 47%, не более 48%, не более 49%, не более 50%, не более 51%, не более 52%, не более
53%, не более 54%, не более 55%, не более 56%, не более 57%, не более 58%, не более 59%, не более
60%, не более 61%, не более 62%, не более 63%, не более 64%, не более 65%, не более 66%, не более
67%, не более 68%, не более 69%, не более 70%, не более 71%, не более 72%, не более 73%, не более
74%, не более 75%, не более 76%, не более 77%, не более 78%, не более 79%, не более 80%, не более
81%, не более 82%, не более 83%, не более 84%, не более 85%, не более 86%, не более 87%, не более
- 107 045185
88%, не более 89%, не более 90%, не более 91%, не более 92%, не более 93%, не более 94%, не более 95%, не более 96%, не более 97%, не более 98%, не более 99%, не более 100%, не более 125%, не более 150%, не более 175%, не более 200%, не более 225%, не более 250%, не более 275% или не более 300% относительно того же или схожего тканевого филлера, содержащего НА, но не SPF.
В некоторых вариантах осуществления введение тканевого филлера, представленного в настоящем описании, повышает накопление или образование нового коллагена на от приблизительно 1% до приблизительно 10%, от приблизительно 10% до приблизительно 50%, от приблизительно 10% до приблизительно 100%, от приблизительно 50% до приблизительно 150%, от приблизительно 100% до приблизительно 200%, от приблизительно 150% до приблизительно 250%, от приблизительно 200% до приблизительно 300%, от приблизительно 350% до приблизительно 450%, от приблизительно 400% до приблизительно 500%, от приблизительно 550% до приблизительно 650%, от приблизительно 600% до приблизительно 700% относительно того же или схожего тканевого филлера, содержащего НА, но не SPF.
В некоторых вариантах осуществления количество тканевого филлера, используемого в любом из способов, представленных в настоящем описании, как правило, будет являться терапевтически эффективным количеством. В рамках изобретения термин терапевтически эффективное количество является синонимом эффективного количества, терапевтически эффективной дозы и/или эффективной дозы и относится к количеству тканевого филлера, которое вызовет ожидаемый биологический, косметический или клинический ответ у нуждающегося в этом пациента. В качестве неограничивающего примера, эффективное количество является количеством, достаточным для достижения одного или более из клинических и/или косметических показателей, представленных в настоящем описании. Специалисты в этой области могут определять соответствующее эффективное количество, подлежащее введению для конкретного использования описанных способов, с использованием руководства, представленного в настоящем описании. Например, эффективное количество можно экстраполировать из любых и всех анализов in vitro и in vivo, как представлено в настоящем описании. Специалисту в этой области будет понятно, что состояние индивидуума можно подвергать мониторингу на всем протяжении лечения, и что таким образом можно корректировать вводимое эффективное количество композиции, представленной в настоящем описании.
В некоторых вариантах осуществления вводимое количество тканевого филлера составляет по меньшей мере 0,001 г, или по меньшей мере 0,002 г, или по меньшей мере 0,003 г, или по меньшей мере 0,004 г, или по меньшей мере 0,005 г, или по меньшей мере 0,006 г, или по меньшей мере 0,007 г, или по меньшей мере 0,008 г, или по меньшей мере 0,009 г, или по меньшей мере 0,01 г, или по меньшей мере 0,02 г, или по меньшей мере 0,03 г, или по меньшей мере 0,04 г, или по меньшей мере 0,05 г, или по меньшей мере 0,06 г, или по меньшей мере 0,07 г, или по меньшей мере 0,08 г, или по меньшей мере 0,09 г, или по меньшей мере 0,1 г, или по меньшей мере 0,2 г, или по меньшей мере 0,3 г, или по меньшей мере 0,4 г, или по меньшей мере 0,5 г, или по меньшей мере 0,6 г, или по меньшей мере 0,7 г, или по меньшей мере 0,8 г, или по меньшей мере 0,9 г, или по меньшей мере 1 г, или по меньшей мере 2 г, или по меньшей мере 3 г, или по меньшей мере 4 г, или по меньшей мере 5 г, или по меньшей мере 6 г, или по меньшей мере 7 г, или по меньшей мере 8 г, или по меньшей мере 9 г, или по меньшей мере 10 г, или по меньшей мере 11 г, или по меньшей мере 12 г, или по меньшей мере 13 г, или по меньшей мере 14 г, или по меньшей мере 15 г, или по меньшей мере 20 г, или по меньшей мере 25 г, или по меньшей мере 30 г, или по меньшей мере 35 г, или по меньшей мере 40 г, или по меньшей мере 45 г, или по меньшей мере 50 г, или по меньшей мере 55 г, или по меньшей мере 60 г, или по меньшей мере 65 г, или по меньшей мере 70 г, или по меньшей мере 75 г, или по меньшей мере 80 г, или по меньшей мере 85 г, или по меньшей мере 90 г, или по меньшей мере 95 г, или по меньшей мере 100 г.
В некоторых вариантах осуществления вводимое количество тканевого филлера составляет не более 0,001 г, или не более 0,002 г, или не более 0,003 г, или не более 0,004 г, или не более 0,005 г, или не более 0,006 г, или не более 0,007 г, или не более 0,008 г, или не более 0,009 г, или не более 0,01 г, или не более 0,02 г, или не более 0,03 г, или не более 0,04 г, или не более 0,05 г, или не более 0,06 г, или не более 0,07 г, или не более 0,08 г, или не более 0,09 г, или не более 0,1 г, или не более 0,2 г, или не более 0,3 г, или не более 0,4 г, или не более 0,5 г, или не более 0,6 г, или не более 0,7 г, или не более 0,8 г, или не более 0,9 г, или не более 1 г, или не более 2 г, или не более 3 г, или не более 4 г, или не более 5 г, или не более 6 г, или не более 7 г, или не более 8 г, или не более 9 г, или не более 10 г, или не более 11 г, или не более 12 г, или не более 13 г, или не более 14 г, или не более 15 г, или не более 20 г, или не более 25 г, или не более 30 г, или не более 35 г, или не более 40 г, или не более 45 г, или не более 50 г, или не более 55 г, или не более 60 г, или не более 65 г, или не более 70 г, или не более 75 г, или не более 80 г, или не более 85 г, или не более 90 г, или не более 95 г, или не более 100 г.
В некоторых вариантах осуществления вводимое количество тканевого филлера составляет приблизительно 0,001 г, или приблизительно 0,002 г, или приблизительно 0,003 г, или приблизительно 0,004 г, или приблизительно 0,005 г, или приблизительно 0,006 г, или приблизительно 0,007 г, или приблизительно 0,008 г, или приблизительно 0,009 г, или приблизительно 0,01 г, или приблизительно 0,02 г, или приблизительно 0,03 г, или приблизительно 0,04 г, или приблизительно 0,05 г, или приблизительно 0,06 г, или приблизительно 0,07 г, или приблизительно 0,08 г, или приблизительно 0,09 г, или приблизительно
- 108 045185
0,1 г, или приблизительно 0,2 г, или приблизительно 0,3 г, или приблизительно 0,4 г, или приблизительно 0,5 г, или приблизительно 0,6 г, или приблизительно 0,7 г, или приблизительно 0,8 г, или приблизительно 0,9 г, или приблизительно 1 г, или приблизительно 2 г, или приблизительно 3 г, или приблизительно 4 г, или приблизительно 5 г, или приблизительно 6 г, или приблизительно 7 г, или приблизительно 8 г, или приблизительно 9 г, или приблизительно 10 г, или приблизительно 11 г, или приблизительно 12 г, или приблизительно 13 г, или приблизительно 14 г, или приблизительно 15 г, или приблизительно 20 г, или приблизительно 25 г, или приблизительно 30 г, или приблизительно 35 г, или приблизительно 40 г, или приблизительно 45 г, или приблизительно 50 г, или приблизительно 55 г, или приблизительно 60 г, или приблизительно 65 г, или приблизительно 70 г, или приблизительно 75 г, или приблизительно 80 г, или приблизительно 85 г, или приблизительно 90 г, или приблизительно 95 г, или приблизительно 100 г.
В некоторых вариантах осуществления вводимое количество тканевого филлера составляет от 0,001 г до 0,01 г, или от 0,01 г до 0,1 г, или от 0,1 г до 1 г, или от 1 г до 10 г, или от 10 г до 20 г, или от 20 г до 30 г, или от 30 г до 40 г, или от 40 г до 50 г, или от 50 г до 60 г, или от 60 г до 70 г, или от 70 г до 80 г, или от 80 г до 90 г, или от 90 г до 100 г.
В некоторых вариантах осуществления вводимый объем тканевого филлера составляет по меньшей мере 0,01 мл, или по меньшей мере 0,02 мл, или по меньшей мере 0,03 мл, или по меньшей мере 0,04 мл, или по меньшей мере 0,05 мл, или по меньшей мере 0,06 мл, или по меньшей мере 0,07 мл, или по меньшей мере 0,08 мл, или по меньшей мере 0,09 мл, или по меньшей мере 0,10 мл, или по меньшей мере 0,15 мл, или по меньшей мере 0,20 мл, или по меньшей мере 0,25 мл, или по меньшей мере 0,30 мл, или по меньшей мере 0,35 мл, или по меньшей мере 0,40 мл, или по меньшей мере 0,45 мл, или по меньшей мере 0,50 мл, или по меньшей мере 0,55 мл, или по меньшей мере 0,60 мл, или по меньшей мере 0,65 мл, или по меньшей мере 0,70 мл, или по меньшей мере 0,75 мл, или по меньшей мере 0,80 мл, или по меньшей мере 0,85 мл, или по меньшей мере 0,90 мл, или по меньшей мере 0,95 мл, или по меньшей мере 1 мл, или по меньшей мере 2 мл, или по меньшей мере 3 мл, или по меньшей мере 4 мл, или по меньшей мере 5 мл, или по меньшей мере 6 мл, или по меньшей мере 7 мл, или по меньшей мере 8 мл, или по меньшей мере 9 мл, или по меньшей мере 10 мл, или по меньшей мере 15 мл, или по меньшей мере 20 мл, или по меньшей мере 25 мл, или по меньшей мере 30 мл, или по меньшей мере 35 мл, или по меньшей мере 40 мл, или по меньшей мере 45 мл, или по меньшей мере 50 мл, или по меньшей мере 55 мл, или по меньшей мере 60 мл, или по меньшей мере 65 мл, или по меньшей мере 70 мл, или по меньшей мере 75 мл, или по меньшей мере 80 мл, или по меньшей мере 85 мл, или по меньшей мере 90 мл, или по меньшей мере 95 мл, или по меньшей мере 100 мл, или по меньшей мере 110 мл, или по меньшей мере 120 мл, или по меньшей мере 130 мл, или по меньшей мере 140 мл, или по меньшей мере 150 мл, или по меньшей мере 160 мл, или по меньшей мере 170 мл, или по меньшей мере 180 мл, или по меньшей мере 190 мл, или по меньшей мере 200 мл, или по меньшей мере 210 мл, или по меньшей мере 220 мл, или по меньшей мере 230 мл, или по меньшей мере 240 мл, или по меньшей мере 250 мл, или по меньшей мере 260 мл, или по меньшей мере 270 мл, или по меньшей мере 280 мл, или по меньшей мере 290 мл, или по меньшей мере 300 мл, или по меньшей мере 325, 350 мл, или по меньшей мере 375 мл, или по меньшей мере 400 мл, или по меньшей мере 425 мл, или по меньшей мере 450 мл, или по меньшей мере 475 мл, или по меньшей мере 500 мл, или по меньшей мере 525 мл, или по меньшей мере 550 мл, или по меньшей мере 575 мл, или по меньшей мере 600 мл, или по меньшей мере 625 мл, или по меньшей мере 650 мл, или по меньшей мере 675 мл, или по меньшей мере 700 мл, или по меньшей мере 725 мл, или по меньшей мере 750 мл, или по меньшей мере 775 мл, или по меньшей мере 800 мл, или по меньшей мере 825 мл, или по меньшей мере 850 мл, или по меньшей мере 875 мл, или по меньшей мере 900 мл, или по меньшей мере 925 мл, или по меньшей мере 950 мл, или по меньшей мере 975 мл, или по меньшей мере 1000 мл.
В некоторых вариантах осуществления вводимый объем тканевого филлера составляет не более 0,01 мл, или не более 0,02 мл, или не более 0,03 мл, или не более 0,04 мл, или не более 0,05 мл, или не более 0,06 мл, или не более 0,07 мл, или не более 0,08 мл, или не более 0,09 мл, или не более 0,10 мл, или не более 0,15 мл, или не более 0,20 мл, или не более 0,25 мл, или не более 0,30 мл, или не более 0,35 мл, или не более 0,40 мл, или не более 0,45 мл, или не более 0,50 мл, или не более 0,55 мл, или не более 0,60 мл, или не более 0,65 мл, или не более 0,70 мл, или не более 0,75 мл, или не более 0,80 мл, или не более 0,85 мл, или не более 0,90 мл, или не более 0,95 мл, или не более 1 мл, или не более 2 мл, или не более 3 мл, или не более 4 мл, или не более 5 мл, или не более 6 мл, или не более 7 мл, или не более, 8 мл, или не более 9 мл, или не более 10 мл, или не более 15 мл, или не более 20 мл, или не более 25 мл, или не более 30 мл, или не более 35 мл, или не более 40 мл, или не более 45 мл, или не более 50 мл, или не более 55 мл, или не более 60 мл, или не более 65 мл, или не более 70 мл, или не более 75 мл, или не более 80 мл, или не более 85 мл, или не более 90 мл, или не более 95 мл, или не более 100 мл, или не более 110 мл, или не более 120 мл, или не более 130 мл, или не более 140 мл, или не более 150 мл, или не более 160 мл, или не более 170 мл, или не более 180 мл, или не более 190 мл, или не более 200 мл, или не более 210 мл, или не более 220 мл, или не более 230 мл, или не более 240 мл, или не более 250 мл, или не более 260 мл, или не более 270 мл, или не более 280 мл, или не более 290 мл, или не более 300 мл, или не более 325, 350 мл, или не более 375 мл, или не более 400 мл, или не более 425 мл, или не более 450 мл, или не более
- 109 045185
475 мл, или не более 500 мл, или не более 525 мл, или не более 550 мл, или не более 575 мл, или не более
600 мл, или не более 625 мл, или не более 650 мл, или не более 675 мл, или не более 700 мл, или не более
725 мл, или не более 750 мл, или не более 775 мл, или не более 800 мл, или не более 825 мл, или не более
850 мл, или не более 875 мл, или не более 900 мл, или не более 925 мл, или не более 950 мл, или не более
975 мл, или не более 1000 мл.
В некоторых вариантах осуществления вводимый объем тканевого филлера составляет приблизительно 0,01 мл, или приблизительно 0,02 мл, или приблизительно 0,03 мл, или приблизительно 0,04 мл, или приблизительно 0,05 мл, или приблизительно 0,06 мл, или приблизительно 0,07 мл, или приблизительно 0,08 мл, или приблизительно 0,09 мл, или приблизительно 0,10 мл, или приблизительно 0,15 мл, или приблизительно 0,20 мл, или приблизительно 0,25 мл, или приблизительно 0,30 мл, или приблизительно 0,35 мл, или приблизительно 0,40 мл, или приблизительно 0,45 мл, или приблизительно 0,50 мл, или приблизительно 0,55 мл, или приблизительно 0,60 мл, или приблизительно 0,65 мл, или приблизительно 0,70 мл, или приблизительно 0,75 мл, или приблизительно 0,80 мл, или приблизительно 0,85 мл, или приблизительно 0,90 мл, или приблизительно 0,95 мл, или приблизительно 1 мл, или приблизительно 2 мл, или приблизительно 3 мл, или приблизительно 4 мл, или приблизительно 5 мл, или приблизительно 6 мл, или приблизительно 7 мл, или приблизительно, 8 мл, или приблизительно 9 мл, или приблизительно 10 мл, или приблизительно 11 мл, или приблизительно 12 мл, или приблизительно 13 мл, или приблизительно 14 мл, или приблизительно 15 мл, или приблизительно 16 мл, или приблизительно 17 мл, или приблизительно 18 мл, или приблизительно 19 мл, или приблизительно 20 мл, или приблизительно 21 мл, или приблизительно 22 мл, или приблизительно 23 мл, или приблизительно 24 мл, или приблизительно 25 мл, или приблизительно 26 мл, или приблизительно 27 мл, или приблизительно 28 мл, или приблизительно 30 мл, или приблизительно 35 мл, или приблизительно 36 мл, или приблизительно 37 мл, или приблизительно 38 мл, или приблизительно 39 мл, или приблизительно 40 мл, или приблизительно 41 мл, или приблизительно 42 мл, или приблизительно 43 мл, или приблизительно 44 мл, или приблизительно 45 мл, или приблизительно 46 мл, или приблизительно 47 мл, или приблизительно 48 мл, или приблизительно 49 мл, или приблизительно 50 мл, или приблизительно 51 мл, или приблизительно 52 мл, или приблизительно 53 мл, или приблизительно 54 мл, или приблизительно 55 мл, или приблизительно 56 мл, или приблизительно 57 мл, или приблизительно 58 мл, или приблизительно 59 мл, или приблизительно 60 мл, или приблизительно 61 мл, или приблизительно 62 мл, или приблизительно 63 мл, или приблизительно 64 мл, или приблизительно 65 мл, или приблизительно 66 мл, или приблизительно 67 мл, или приблизительно 68 мл, или приблизительно 69 мл, или приблизительно 70 мл, или приблизительно 71 мл, или приблизительно 72 мл, или приблизительно 73 мл, или приблизительно 74 мл, или приблизительно 75 мл, или приблизительно 76 мл, или приблизительно 77 мл, или приблизительно 78 мл, или приблизительно 79 мл, или приблизительно 80 мл, или приблизительно 81 мл, или приблизительно 82 мл, или приблизительно 83 мл, или приблизительно 84 мл, или приблизительно 85 мл, или приблизительно 86 мл, или приблизительно 87 мл, или приблизительно 88 мл, или приблизительно 89 мл, или приблизительно 90 мл, или приблизительно 91 мл, или приблизительно 92 мл, или приблизительно 93 мл, или приблизительно 94 мл, или приблизительно 95 мл, или приблизительно 96 мл, или приблизительно 97 мл, или приблизительно 98 мл, или приблизительно 99 мл, или приблизительно 100 мл, или приблизительно 110 мл, или приблизительно 120 мл, или приблизительно 130 мл, или приблизительно 140 мл, или приблизительно 150 мл, или приблизительно 160 мл, или приблизительно 170 мл, или приблизительно 180 мл, или приблизительно 190 мл, или приблизительно 200 мл, или приблизительно 210 мл, или приблизительно 220 мл, или приблизительно 230 мл, или приблизительно 240 мл, или приблизительно 250 мл, или приблизительно 260 мл, или приблизительно 270 мл, или приблизительно 280 мл, или приблизительно 290 мл, или приблизительно 300 мл, или приблизительно 310 мл, или приблизительно 320 мл, или приблизительно 330 мл, или приблизительно 340 мл, или приблизительно 350 мл, или приблизительно 360 мл, или приблизительно 370 мл, или приблизительно 380 мл, или приблизительно 390 мл, или приблизительно 400 мл, или приблизительно 410 мл, или приблизительно 420 мл, или приблизительно 430 мл, или приблизительно 440 мл, или приблизительно 450 мл, или приблизительно 460 мл, или приблизительно 470 мл, или приблизительно 480 мл, или приблизительно 490 мл, или приблизительно 500 мл, или приблизительно 510 мл, или приблизительно 520 мл, или приблизительно 530 мл, или приблизительно 540 мл, или приблизительно 550 мл, или приблизительно 560 мл, или приблизительно 570 мл, или приблизительно 580 мл, или приблизительно 590 мл, или приблизительно 600 мл, или приблизительно 610 мл, или приблизительно 620 мл, или приблизительно 630 мл, или приблизительно 640 мл, или приблизительно 650 мл, или приблизительно 660 мл, или приблизительно 670 мл, или приблизительно 680 мл, или приблизительно 690 мл, или приблизительно 700 мл, или приблизительно 710 мл, или приблизительно 720 мл, или приблизительно 730 мл, или приблизительно 740 мл, или приблизительно 750 мл, или приблизительно 760 мл, или приблизительно 770 мл, или приблизительно 780 мл, или приблизительно 790 мл, или приблизительно 800 мл, или приблизительно 810 мл, или приблизительно 820 мл, или приблизительно 830 мл, или приблизительно 840 мл, или приблизительно 850 мл, или приблизительно 860 мл, или приблизительно 870 мл, или приблизительно 880 мл, или приблизительно 890 мл, или приблизительно 900 мл, или приблизительно 910 мл, или приблизительно 920
- 110 045185 мл, или приблизительно 930 мл, или приблизительно 940 мл, или приблизительно 950 мл, или приблизительно 960 мл, или приблизительно 970 мл, или приблизительно 980 мл, или приблизительно 990 мл, или приблизительно 1000 мл.
В некоторых вариантах осуществления вводимый объем тканевого филлера составляет от 0,01 мл до 0,10 мл, или от 0,10 мл до 1 мл, или от 1 мл до 10 мл, или от 10 мл до 100 мл, или от 50 мл до 100 мл, или от 100 мл до 150 мл, или от 150 мл до 200 мл, или от 200 мл до 250 мл, или от 250 мл до 300 мл, или от 300 мл до 350 мл, или от 350 мл до 400 мл, или от 400 мл до 450 мл, или от 450 мл до 500 мл, или от 500 мл до 550 мл, или от 550 мл до 600 мл, или от 600 мл до 650 мл, или от 650 мл до 700 мл, или от 700 мл до 750 мл, или от 750 мл до 800 мл, или от 800 мл до 850 мл, или от 850 мл до 900 мл, или от 900 мл до 950 мл, или от 950 мл до 1000 мл, или от 1 мл до 25 мл, или от 1 мл до 50 мл, или от 1 мл до 75 мл, или от 1 мл до 100 мл, или от 10 мл до 25 мл, или от 10 мл 50 мл, или от 10 мл до 75 мл, или от 100 мл до 250 мл, или от 100 мл до 500 мл, или от 100 мл до 750 мл, или от 100 мл до 1000 мл.
В некоторых вариантах осуществления изобретение относится к введению тканевого филлера, представленного в настоящем описании. В рамках изобретения термин введение означает любой механизм введения, посредством которого индивидууму предоставляют тканевой филлер, представленный в настоящем описании, и который потенциально приводит к клинически, терапевтически или экспериментально благоприятному результату. Конкретный механизм введения, используемый для введения тканевого филлера индивидууму, может определять специалист в этой области, принимая во внимание факторы, включающие, в качестве неограничивающих примеров, тип состояния, локализацию состояния, причину состояния, тяжесть состояния, желаемую степень облегчения, желаемую длительность облегчения, конкретный используемый тканевой филлер, скорость биодеградации, биоабсорбции, биорезорбции и т.п. конкретного используемого тканевого филлера, природу компонентов, включенных в конкретный используемый тканевой филлер, конкретный путь введения, конкретные характеристики, анамнез и факторы риска у пациента, такие как, например, возраст, масса, общее состояние здоровья и т.п. или любую их комбинацию. В аспекте этого варианта осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, вводят в область у пациента посредством инъекции, где область может находиться в коже, тканях дермы, субдермальных тканях, тканях кожи, подкожных тканях, интрадуральной ткани, мышцах, сухожилиях, связках, фиброзных тканях, жире, кровеносных сосудах и артериях, нервах или синовиальных (интрадермальных) тканях.
В некоторых вариантах осуществления путь введения тканевого филлера, вводимого пациенту, будут определять с учетом косметического и/или клинического эффекта, желательного для пациента и/или лечащего врача, и части или области тела, подвергаемой лечению. Тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно вводить любыми способами, известными специалистам в этой области, включая, в качестве неограничивающих примеров, использование шприца с иглой, катетера, местное введение или прямую хирургическую имплантацию. Тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно вводить в область кожи, такую как, например, область дермы или область гиподермы. Кроме того, тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно вводить один раз, два раза, три раза или множество раз в зависимости от требований конкретной терапии.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно инъецировать. В рамках изобретения термин инъецируемый относится к тканевому материалу, имеющему свойства, необходимые для введения тканевого филлера в область кожи индивидуума с использованием инъекционного устройства с иглой, такой как, например, тонкая игла. В рамках изобретения термин тонкая игла относится к игле, имеющей калибр 27 или менее. В некоторых вариантах осуществления тонкая игла может являться иглой калибром 27-30. Инъецируемости тканевого филлера, представленного в настоящем описании, можно достигать, варьируя некоторые параметры тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, например, корректируя степень перекрестной сшивки, иным образом варьируя параметры G' и/или G, добавляя неперекрестно-сшитые полимеры (например, SPF или НА) и т.п.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно инъецировать через тонкую иглу. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании можно инъецировать через иглу, например, 20 калибра, или 21 калибра, или 22 калибра, или 23 калибра, или 24 калибра, или 25 калибра, или 26 калибра, или 27 калибра, или 28 калибра, или 29 калибра, или 30 калибра, или 31 калибра, или 32 калибра, или 33 калибра, или 34 калибра. В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно инъецировать через иглу 20 калибра, или 21 калибра, или 22 калибра, или 23 калибра, или 24 калибра, или 25 калибра, или 26 калибра, или 27 калибра, или 28 калибра, или 29 калибра, или 30 калибра.
В некоторых вариантах осуществления тканевой филлер, представленный в настоящем описании, можно инъецировать с помощью шприца, имеющего объем от приблизительно 0,8 до приблизительно 1,0 мл.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно вводить в пустоты в мягких тканях или вокруг них в целях, например, аугментации ткани (например, аугментации молочной железы или ягодиц). При введении тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, в такие пустоты можно использовать более крупные шприцы и иглы (например,
- 111 045185 иглы 27 калибра или более).
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно вводить в рану без использования иглы для покрытия раны или медицинского устройства вблизи раны.
В некоторых вариантах осуществления тканевые филлеры, представленные в настоящем описании, можно наносить на поверхность медицинского устройства.
Следующие примеры использованы для предоставления специалистам в этой области полного описания получения и использования описанных вариантов осуществления, и они не предназначены для ограничения объема того, что авторы считают своим изобретением, кроме того, они не означают, что описанные ниже эксперименты являются всеми и единственными осуществленными экспериментами. Были предприняты усилия для обеспечения точности в отношении используемых чисел (например, количеств, температуры и т.д.), но следует учитывать некоторые экспериментальные ошибки и отклонения. Если не указано иначе, части являются массовыми частями, молекулярная масса является средневзвешенной молекулярной массой, температура приведена в градусах Цельсия, и давление является атмосферным или близким к нему.
Примеры
Пример 1. Оценка эффекта Тиндаля в гелях.
Для дополнительного подтверждения визуальных наблюдений и осуществления сравнительного анализа характеристик дермальных филлеров осуществляют количественный анализ эффекта Тиндаля. Учитывая существующее научное представление о рассеянии света и взаимодействии света с кожей для количественного анализа эффекта Тиндаля в коже используют два разных подхода на основе (а) колориметрии и (b) спектроскопии. Основываясь на этих способах, определяют три разных количественных параметра (приведены ниже) для измерения эффекта Тиндаля in vivo.
Визуальные баллы эффекта Тиндаля.
Шкала имеет диапазон от 1 до 5 с приращениями 0,5. Балл 1 приписывают местам инъекций с нормальным тоном кожи и без синего окрашивания. Максимальный балл 5 дают плотному и выраженному синему окрашиванию. Перед маскированным анализом тестируемых образцов трех независимых наблюдателей обучают с использованием шкалы.
Синий компонент цвета кожи - b: хронометр используют для количественного анализа синего компонента цвета света, отражаемого участками кожи, в которые инъецировали различные филлеры. Этого достигают с использованием компонента b цветной шкалы L-a-b.
% синего света испускаемого кожей: портативный спектрофотометр используют для количественного анализа % синего света, отражаемого кожей в общем диапазоне видимого света. Его получают посредством интегрирования площади под спектром видимого света 400-490 нм и ее нормализации по общей площади под спектром (400-700 нм).
Гели по настоящему изобретению и коммерчески доступные гели инъецируют интрадермально с помощью соответствующей иглы способом линейной инъекции в бедра бесшерстных крыс возрастом два месяца. Гели имплантируют поверхностно для имитации клинических способов коррекции мелких морщин. Тесты на эффект Тиндаля осуществляют через 48 ч после имплантации геля. Перед тестами на эффект Тиндаля животных гуманно умерщвляли для улучшения контрастирования эффекта Тиндаля.
Для балльной оценки мест инъекций используют визуальную шкалу 1-5 с приращениями 0,5. В местах инъекций с баллами 1 не наблюдали нарушение окрашивания кожи, в то время в местах инъекций с баллами 5 наблюдают выраженное синие окрашивание кожи. Спектроскопический анализ также осуществляли на местах инъекций с помощью хронометра. Синий компонент цвета кожи b и % синего света, отражаемого кожей (400-700 нм), измеряли независимо.
Пример 2. Тестирование тканевых филлеров in vivo.
Тканевые филлеры, полученные по изложенному выше описанию, можно тестировать после интрадермальной имплантации, имплантации в мышцы и подкожной инъекции.
Например, дозу тканевого филлера можно набирать в шприц и инъецировать интрадермально, внутримышечно или подкожно с использованием шприца соответствующего размера, обеспечивающего течение тканевого филлера через иглу в место инъекции.
После исходной инъекции в сравнении с контролем (например, водой и/или реализуемым на рынке тканевым филлером на основе НА, такого как Juvederm) места инъекций можно подвергать мониторингу с интервалами в 1 неделю или 2 недели, когда пациентов наблюдают на предмет проблем с биосовместимостью, включая цитотоксичность, пирогенность, образование эндотоксинов, острую системную токсичность, субхроническую токсичность, интрадермальную реактивность, генотоксичность и сенсибилизацию кожи.
Кроме того, физические свойства тканевого филлера можно подвергать мониторингу, исследуя наличие эффекта Тиндаля или потери объема, эластичности или прочности в месте инъекции.
Пример 3. Исследование реологии тканевого филлера.
Для измерения реологических свойств тканевых филлеров, представленных в настоящем описании, можно использовать колебательный реометр с плоскопараллельным зазором (Anton Paar Physica MCR
- 112 045185
301). Можно использовать диаметр пластины 25 мм с высотой зазора 1 мм. Измерения можно осуществлять при постоянной температуре 25°С. Каждое измерение будет состоять из качания частоты от 1 до 10 Гц при постоянном натяжении 2% и логарифмическом повышении частоты с последующим качанием натяжения от 1 до 300% при постоянной частоте 5 Гц с логарифмическим повышением натяжения. Результатами таких анализов будут являться динамический модуль упругости G' и модуль потерь G' для каждого тестируемого тканевого филлера.
Пример 4. Исследование непрозрачности раствора шелка/НА.
Растворы НА и шелка получали в воде или фосфатно-солевом буфере по табл. 18.
Таблица 18
| Образец | Описание |
| 1 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 0,3 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл |
| 2 | Растворитель: вода MW шелка: средняя Концентрация шелка: 0,6 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 3 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 3,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 4 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 6,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 5 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 15,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 6 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 30,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 7 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 45,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 8 | MW шелка: низкая Концентрация шелка: 0,6 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 9 | MW шелка: низкая Концентрация шелка: 15,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 10 | MW шелка: низкая |
- 113 045185
| Концентрация шелка: 30,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода | |
| И | MW шелка: низкая Концентрация шелка: 45,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: вода |
| 12 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 0,6 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: PBS |
| 13 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 15,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: PBS |
| 14 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 30,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: PBS |
| 15 | MW шелка: средняя Концентрация шелка: 45,0 мг/мл Концентрация НА: 22 мг/мл Растворитель: PBS |
Низкая=молекулярные массы шелка от 0 до 25 кДа.
Средняя=молекулярные массы шелка от 25 кДа до 60 кДа.
Получаемые растворы, приведенные в указанной выше таблице, показаны на фиг. 26 и 27. Контроль на фиг. 26 и 27 (немеченый флакон на фиг. 26 и контрольный шприц на фиг. 27) являлся раствором НА (22 мг/мл) в воде. Как показано на фиг. 26 и 27, растворы шелк/НА были гомогенными и визуально непрозрачными по сравнению с НА в отдельности.
Пример 5. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуроновую кислоту можно растворять в растворе NaOH и добавлять в раствор шелка, как представлено в настоящем описании.
Стадия b. Добавление растворенного BDDE в NaOH к раствору шелк/HA/NaOH.
Стадия с. Перекрестная сшивка посредством смешивания при нагревании.
Стадия d. Пропускают через металлическое сито и позволяют набухать в воде.
Стадия е. Осаждение набухшего геля в этаноле.
Стадия f. Промывка этанолом, водой и раствором NaOH.
Стадия g. Конечная перекрестная сшивка в растворе этанол/NaOH в течение приблизительно 2 ч при нагревании (50°С).
Стадия h. Нейтрализация pH раствора до 7.
Стадия i. Преципитат промывают и сушат.
Стадия j. Полученному сухому порошку позволяют набухать в гель в забуференном 0,9% растворе NaCl.
Стадия k. Гель набирают в шприц и автоклавируют, получая конечный тканевой филлер.
Пример 6. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуроновую кислоту можно растворять в растворе NaOH.
Стадия b. Добавление шелка в растворе NaOH к раствору шелка, а затем добавление растворенного BDDE в NaOH к раствору шелк/HA/NaOH.
Стадия с. Перекрестная сшивка посредством смешивания при нагревании.
Стадия d. Пропускают через металлическое сито и позволяют набухать в воде.
- 114 045185
Стадия е. Осаждение набухшего геля в этаноле.
Стадия f. Промывка этанолом, водой и раствором NaOH.
Стадия g. Конечная перекрестная сшивка в растворе этанол/NaOH в течение приблизительно 2 ч при нагревании (50°С).
Стадия h. Нейтрализация pH раствора до 7.
Стадия i. Преципитат промывают и сушат.
Стадия j. Полученному сухому порошку позволяют набухать в гель в забуференном 0,9% растворе NaCl.
Стадия k. Гель набирают в шприц и автоклавируют, получая конечный тканевой филлер.
Пример 7. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуроновую кислоту можно растворять в растворе NaOH.
Стадия b. Добавление растворенного BDDE в NaOH к раствору HA/NaOH.
Стадия с. Добавление раствора шелка к раствору со стадии b и перекрестная сшивка посредством смешивания при нагревании.
Стадия d. Пропускают через металлическое сито и позволяют набухать в воде.
Стадия е. Осаждение набухшего геля в этаноле.
Стадия f. Промывка этанолом, водой и раствором NaOH.
Стадия g. Конечная перекрестная сшивка в растворе этанол/NaOH в течение приблизительно 2 ч при нагревании (50°С).
Стадия h. Нейтрализация pH раствора до 7.
Стадия i. Преципитат промывают и сушат.
Стадия j. Полученному сухому порошку позволяют набухать в гель в забуференном 0,9% растворе NaCl.
Стадия k. Гель набирают в шприц и автоклавируют, получая конечный тканевой филлер.
Пример 8. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуроновую кислоту можно растворять в растворе NaOH.
Стадия b. Добавление растворенного BDDE в NaOH в раствор HA/NaOH.
Стадия с. Перекрестная сшивка посредством смешивания при нагревании.
Стадия d. Добавляют раствор шелка в раствор перекрестно-сшитой HA/NaOH, пропускают через металлическое сито и позволяют набухать в воде.
Стадия е. Осаждение набухшего геля в этаноле.
Стадия f. Промывка этанолом, водой и раствором NaOH.
Стадия g. Конечная перекрестная сшивка в растворе этанол/NaOH в течение приблизительно 2 ч при нагревании (50°С).
Стадия h. Нейтрализация pH раствора до 7.
Стадия i. Преципитат промывают и сушат.
Стадия j. Полученному сухому порошку позволяют набухать в гель в забуференном 0,9% растворе NaCl.
Стадия k. Гель набирают в шприц и автоклавируют, получая конечный тканевой филлер.
Пример 9. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Шелк/НА тканевой филлер, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуроновую кислоту можно растворять в растворе NaOH.
Стадия b. Добавление растворенного BDDE в NaOH к HA/NaOH раствор.
Стадия с. Перекрестная сшивка посредством смешивания при нагревании.
Стадия d. Пропускают через металлическое сито и позволяют набухать в воде.
Стадия е. Осаждение набухшего геля в этаноле.
Стадия f. Промывка этанолом, водой и раствором NaOH.
Стадия g. Добавление раствора шелка к материалу, полученному на стадии f, и конечная перекрестная сшивка в растворе этанол/NaOH в течение приблизительно 2 ч при нагревании (50°С).
Стадия h. Нейтрализация pH раствора до 7.
Стадия i. Преципитат промывают и сушат.
Стадия j. Полученному сухому порошку позволяют набухать в гель в забуференном 0,9% растворе NaCl.
Стадия к. Гель набирают в шприц и автоклавируют, получая конечный тканевой филлер.
Пример 10. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
- 115 045185
Стадия а. Гиалуронат натрия можно смешивать с раствором NaOH и раствором шелка, как представлено в настоящем описании.
Стадия b. BDDE можно добавлять к раствору со стадии а.
Стадия с. Продукту стадии b позволяют реагировать.
Стадия d. Добавляют аммиак в диализную смесь со стадии с и смесь наливают в чашку Петри.
Стадия е. Продукту стадии d позволяют высохнуть до состояния пленки.
Стадия f. Пленку со стадии е делят на частицы и позволяют набухать в физиологическом растворе.
Стадия g. Продукт стадии f добавляют в шприц и автоклавируют.
Стадия h (необязательная). Продукт стадии f можно подвергать второй, конечной перекрестной сшивке с раствором BDDE или другим перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании, и промывают.
Пример 11. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуронат натрия можно смешивать с раствором NaOH.
Стадия b. Раствор шелка можно добавлять в раствор со стадии а и можно добавлять BDDE.
Стадия с. Продукту стадии b позволяют реагировать.
Стадия d. Добавляют аммиак в диализную смесь со стадии с и смесь наливают в чашку Петри.
Стадия е. Продукту стадии d позволяют высохнуть до состояния пленки.
Стадия f. Пленку со стадии е делят на частицы и позволяют набухать в физиологическом растворе.
Стадия g. Продукт стадии f добавляют в шприц и автоклавируют.
Стадия h (необязательная). Продукт стадии f можно подвергать второй, конечной перекрестной сшивке с раствором BDDE или другим перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании, и промывают.
Пример 12. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуронат натрия можно смешивать с раствором NaOH.
Стадия b. BDDE можно добавлять в раствор со стадии а.
Стадия с. Продукт стадии b добавляют в раствор шелка и позволяют реагировать.
Стадия d. Добавляют аммиак в диализную смесь со стадии с и смесь наливают в чашку Петри.
Стадия е. Продукту стадии d позволяют высохнуть до состояния пленки.
Стадия f. Пленку со стадии е делят на частицы и позволяют набухать в физиологическом растворе.
Стадия g. Продукт стадии f добавляют в шприц и автоклавируют.
Стадия h (необязательная). Продукт стадии f можно подвергать второй, конечной перекрестной сшивке с раствором BDDE или другим перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании, и промывают.
Пример 13. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Гиалуронат натрия можно смешивать с раствором NaOH.
Стадия b. BDDE можно добавлять к раствору со стадии а.
Стадия с. Продукту стадии b позволяют реагировать.
Стадия d. Продукт стадии с добавляют к раствору шелка, а затем в их диализную смесь добавляют аммиак и смесь наливают в чашку Петри.
Стадия е. Продукту стадии d позволяют высохнуть до состояния пленки.
Стадия f. Пленку со стадии е делят на частицы и позволяют набухать в физиологическом растворе.
Стадия g. Продукт стадии f добавляют в шприц и автоклавируют.
Стадия h (необязательная). Продукт стадии f можно подвергать второй, конечной перекрестной сшивке с раствором BDDE или другим перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании, и промывают.
Пример 14. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. Раствор шелка можно получать, как представлено в настоящем описании, в который можно добавлять BDDE в воде.
Стадия b. НА можно добавлять в раствор со стадии а.
Стадия с. Смесь со стадии b можно перемешивать (например, 5 мин) и позволять отстаиваться в течение приблизительно 1 дня.
Стадия d. Получаемому гелю со стадии с можно позволять отстаиваться в физиологическом растворе в течение 1 недели для получения итогового тканевого филлера.
Пример 15. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
- 116 045185
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия a. BDDE можно добавлять в воду.
Стадия b. Раствор шелка можно добавлять в раствор со стадии а, к которому затем можно добавлять НА.
Стадия с. Смесь со стадии b можно перемешивать (например, 5 мин) и позволять отстаиваться в течение приблизительно 1 дня.
Стадия d. Получаемому гелю со стадии с можно позволять отстаиваться в физиологическом растворе в течение 1 недели для получения итогового тканевого филлера.
Пример 16. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия a. BDDE можно добавлять в воду.
Стадия b. НА можно добавлять в раствор со стадии а.
Стадия с. Раствор шелка можно добавлять в смесь со стадии b и получаемую смесь можно перемешивать (например, 5 мин) и позволять отстаиваться в течение приблизительно 1 дня.
Стадия d. Получаемому гелю со стадии с можно позволять отстаиваться в физиологическом растворе в течение 1 недели для получения итогового тканевого филлера.
Пример 17. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. К раствору шелка, как представлено в настоящем описании, можно добавлять НА, растворенную (смешиваемую в течение приблизительно 12 ч при 400 об/мин) в растворе NaOH.
Стадия b. Раствор со стадии а можно дегазировать.
Стадия с. Раствор со стадии b можно смешивать с перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании (например, BDDE), при 50°С в течение приблизительно 10-20 мин.
Стадия d. Перекрестно-сшитый гель смешивают с лидокаином HCl.
Стадия е. Диализ скорректированного перекрестно-сшитого раствора можно осуществлять в течение 3 дней, затем 2 дней с PBS, затем 1 дня с водой.
Стадия f. Затем фильтрованный полученный продукт лиофилизируют для получения твердого вещества.
Стадия g. Твердое вещество растворяют в PBS, а затем инкубируют.
Стадия h (необязательная). К продукту стадии g можно добавлять свободную НА.
Стадия i. Получаемый продукт стадии g или h можно стерилизовать посредством стерилизации паром.
Пример 18. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. НА можно растворять (смешивать в течение приблизительно 12 ч при 400 об/мин.) в растворе NaOH.
Стадия b. Раствор шелка можно добавлять к раствору со стадии а и полученную смесь можно дегазировать.
Стадия с. Раствор со стадии b можно смешивать с перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании (например, BDDE), при 50°С в течение приблизительно 10-20 мин.
Стадия d. Перекрестно-сшитый гель смешивают с лидокаином HCl.
Стадия е. Диализ скорректированного перекрестно-сшитого раствора можно осуществлять в течение 3 дней, затем 2 дней с PBS, затем 1 дня с водой.
Стадия f. Затем фильтрованный полученный продукт лиофилизируют для получения твердого вещества.
Стадия g. Твердое вещество растворяют в PBS, а затем инкубируют.
Стадия h (необязательная). К продукту стадии g можно добавлять свободную НА.
Стадия i. Получаемый продукт стадии g или h можно стерилизовать посредством стерилизации паром.
Пример 19. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. НА можно растворять (смешивать в течение приблизительно 12 ч при 400 об/мин.) в растворе NaOH.
Стадия b. Раствор со стадии а можно дегазировать.
Стадия с. Раствор шелка можно добавлять в раствор со стадии b и получаемую смесь можно смешивать с перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании (например, BDDE), при 50°С в течение приблизительно 10-20 мин.
- 117 045185
Стадия d. Перекрестно-сшитый гель смешивают с лидокаином HCl.
Стадия е. Диализ скорректированного перекрестно-сшитого раствора можно осуществлять в течение 3 дней, затем 2 дней с PBS, затем 1 дня с водой.
Стадия f. Затем фильтрованный полученный продукт лиофилизируют для получения твердого вещества.
Стадия g. Твердое вещество растворяют в PBS, а затем инкубируют.
Стадия h (необязательная). К продукту стадии g можно добавлять свободную НА.
Стадия i. Получаемый продукт стадии g или h можно стерилизовать посредством стерилизации паром.
Пример 20. Предлагаемый способ получения тканевого филлера.
Тканевой филлер шелк/НА, как представлено в настоящем описании, можно получать следующим общим способом.
Стадия а. НА можно растворять (смешивать в течение приблизительно 12 ч при 400 об/мин.) в растворе NaOH.
Стадия b. Раствор со стадии а можно дегазировать.
Стадия с. Раствор со стадии b можно смешивать с перекрестно-сшивающим средством, представленным в настоящем описании (например, BDDE), при 50°С в течение приблизительно 10-20 мин.
Стадия d. Раствор шелка можно добавлять к продукту стадии с и смесь можно смешивать с лидокаином HCl.
Стадия е. Диализ скорректированного перекрестно-сшитого раствора можно осуществлять в течение 3 дней, затем 2 дней с PBS, затем 1 дня с водой.
Стадия f. Затем фильтрованный полученный продукт лиофилизируют для получения твердого вещества.
Стадия g. Твердое вещество растворяют в PBS, а затем инкубируют.
Стадия h (необязательная). К продукту стадии g можно добавлять свободную НА.
Стадия i. Получаемый продукт стадии g или h можно стерилизовать посредством стерилизации паром.
Пример 21. Составы дермальных филлеров, состоящих из шелка и гиалуроновой кислоты, перекрестно-сшитых с BDDE.
Материалы: диглицидиловый простой эфир 1,4-бутандиола (BDDE; Sigma-Aldrich); гиалуронат натрия (НА; Lifecore); шелк, 6% раствор (Silk Therapeutics); гидроксид натрия, 0,1 Н раствор (BDH); соляная кислота, 5 Н (Ricca Chemical); фосфатно-солевой буфер (PBS; 20-кратный; VWR Life Science).
Переменные состава: Молекулярная масса шелка: раствор шелка со средней и низкой MW (6%); Молекулярная масса НА: 1,5 МДа и 2,2 МДа; концентрация шелка: 1% об./об. (0,6 мг/мл), 2% об./об. (6 мг/мл) 5% об./об. (3 мг/мл) и 20% об./об. (12 мг/мл).
Перекрестная сшивка гидрогеля: (а) добавляли 6% раствор шелка к 0,1 Н гидроксида натрия; (b) в полученный ранее раствор постепенно добавляли порошок НА с помощью верхнеприводной мешалки со скоростью 200-400 об/мин в зависимости от содержания шелка; осторожно перемешивали во избежание образования избытка пузырьков воздуха; продолжали перемешивать до полного растворения НА; (с) в указанный выше раствор добавляли 1 мас./мас.%. BDDE; (d) нагревали до 50°С и продолжали перемешивать при 100-200 об/мин в течение 30 мин; (е) перекрестно-сшитому гелю позволяли охлаждаться до температуры ниже 30°С; (f) добавляли 5 Н соляную кислоту для коррекции pH до 7,0-7,4.
Диализ гидрогеля: (а) гидратировали диализную кассету в течение 2 мин; вытирали избыток воды и измеряли общую массу пустой кассеты; (b) в диализную кассету добавляли приблизительно 18 г состава гидрогеля; измеряли общую массу кассеты после внесения геля; (с) суспендировали диализную кассету в 2 л 1-кратного буфера PBS и устанавливали магнитную мешалку при 200 об/мин; регистрировали время начала диализа и заменяли буфер PBS через 4 ч, 24 ч и 48 ч диализа; собирали гель через 72 ч.
Характеризация: динамический модуль упругости при сдвиге (G') и вязкость; ферментативная деградация; остаточный BDDE; плотность перекрестной ссылки; 30-дневное исследование на животных; цитотоксичность; бактериальный эндотоксин; мутность.
Вязкоупругие свойства: для определения динамического модуля упругости (G') и комплексной вязкости (η) составов дермального филлера использовали гибридный реометр Discovery HR-1 (ТА Instruments). Образцы тестировали, меняя частоту колебаний с 0,1 Гц на 10 Гц с 10 точками данных на десятичный интервал. Данные регистрировали и сравнивали при скорости сдвига 5 Гц. Данные G' и γ для составов гидрогеля (после диализа) с постоянной концентрацией НА и переменной концентрацией шелка приведены в табл. 19. В этой партии использовали молекулярную массу НА 1,5 МДа.
- 118 045185
Таблица 19
Вязкоупругие свойства гидрогелей с постоянной концентрацией НА
| Образец | Концентрация НА.* (мг/мл) | Концентрация шелка.* (мг/мл) | MW шелка | G’ при 5 Гц (Па) | η при 5 Гц (Пас) |
| С2 | 24 | 0 | Не определена | 46,9 | 2,88 |
| А | 24 | 9,6 | Средняя | 105,5 | 4,93 |
| В | 24 | 0,48 | Низкая | 69,7 | 3,62 |
| С | 24 | 4,8 | Средняя | 102,7 | 4,82 |
| D | 24 | 0,48 | Средняя | 66,4 | 3,59 |
| Е | 24 | 2,4 | Низкая | 41,4 | 2,56 |
| F | 24 | 0,96 | Низкая | 42,7 | 2,67 |
*: Гидрогель абсорбировал буфер PBS после диализа, что приводило к повышению объема. Концентрации НА и шелка пересчитывали с учетом коэффициента разбавления.
Данные G' и γ для составов гидрогелей (после диализа) с постоянной общей концентрацией 30 мг/мл НА и шелка приведены в табл. 20.
Таблица 20
Вязкоупругие свойства гидрогелей с постоянной общей концентрацией
| Образец | Концентра ция НА.* (мг/мл) | НА MW (МДа) | Концентр ация шелка.* (мг/мл) | MW шелка | % Шелка | G’ при 5 Гц (Па) | η при 5 Гц (Па с) |
| ХНА15М01 SL17122002 | 23,52 | 1,5 | 0,48 | Низкая | 1% | 94,1 | 4,52 |
| ХНА15МО5 SL17112002 | 21,60 | 1,5 | 2,4 | Низкая | 5% | 29,5 | 2,06 |
| ХНА15М20 SL17122102 | 14,40 | 1,5 | 9,6 | Низкая | 20% | 31,7 | 1,63 |
| ХНА15М01 SM17121802 | 23,52 | 1,5 | 0,48 | Средняя | 1% | 118,1 | 5,55 |
| ХНА15МО5 SM17111602 | 21,60 | 1,5 | 2,4 | Средняя | 5% | 38,4 | 2,35 |
| ХНА15М20 SM17112702 | 14,40 | 1,5 | 9,6 | Средняя | 20% | 15,6 | 1,06 |
| ХНА2М01 SL17112190 2 | 23,52 | 2,2 | 0,48 | Низкая | 1% | 176,3 | 7,50 |
| ХНА2М05 SL17122002 | 21,60 | 2,2 | 2,4 | Низкая | 5% | 85,1 | 4,03 |
| ХНА2М20 SL17122002 | 14,40 | 2,2 | 9,6 | Низкая | 20% | 36,0 | 1,76 |
| ХНА2М01 SM17121902 | 23,52 | 2,2 | 0,48 | Средняя | 1% | 158,1 | 6,69 |
| ХНА2М05 SM17122002 | 21,60 | 2,2 | 2,4 | Средняя | 5% | 106,7 | 4,76 |
| ХНА2М20 SM17111302 | 14,40 | 2,2 | 9,6 | Средняя | 20% | И,5 | 0,86 |
*: Гидрогель абсорбировал буфер PBS после диализа, что приводило к повышению объема. Концентрацию НА и шелка пересчитывали с учетом коэффициента разбавления.
- 119 045185
Обратимость гидрогеля: гидрогели с белком шелка и без него получали и подвергали диализу. Конечные композиции представляли собой 33,3 мг/мл НА+8 мг/мл шелка в случае гидрогеля шелк-НА и 33,3 мг/мл НА в случае гидрогеля НА, соответственно. 1 г ±100 г полученных ранее гидрогелей добавляли в стеклянный флакон 20 мл, а затем 3 мл 16 ед./мл гиалуронидазы в 1-кратном PBS. Образцы инкубировали при 37°С в течение 3 дней. Контрольные образцы также подготавливали с использованием гидрогеля НА без добавления гиалуронидазы. Профиль деградации показан на фиг. 28. Контрольные образцы без гиалуронидазы не деградировали в течение 3 дней инкубации. В первые 6 ч инкубации гидрогели абсорбировали буфер и набухали, что приводило к повышению процента по массе. Гидрогель шелк-НА и гидрогель НА полностью деградировали через 3 дня инкубации. При наличии шелка гидрогель расщеплялся быстрее, чем чистый гидрогель НА. Через 12 ч инкубации фермент расщеплял приблизительно 90% гидрогеля шелк-НА.
Остаточный кросс-линкер (BDDE): образцы, указанные в табл. 19, тестировали на остаточный BDDE с использованием GC-FID от Millennium Research Laboratories, Inc. (MRL). В отчете о тесте MRL MRL18JAN06 указано, что остаточный BDDE во всех образцах был неопределимым, что соответствует критериям приемлемости, равным 2 м.д. или менее.
Плотность перекрестной сшивки: образцы, указанные в табл. 19, дополнительно полностью расщепляли гиалуронидазой и анализировали с использованием ЯМР для определения плотности перекрестной сшивки в терминах процента модификации.
Результаты теста приведены в табл. 21 (отчет о тесте MRL MRL18JAN07).
Таблица 21
Процентная степень модификации (плотность перекрестной сшивки) для различных составов
| Ш образца | MoD (%) |
| XHA15M00SX17110202 (С2) | 2,87 |
| XHA15M20SM17103002 (А) | 4,68 |
| XHA15M01SL17103002 (В) | 2,58 |
| XHA15M10SM17103002 (С) | 3,02 |
| XHA15M01SM17103002 (D) | 2,54 |
| XHA15M05SL17110202 (Е) | 3,76 |
Исследование на животных: 30-дневное исследование на животных с использованием модели на морских свинках осуществляли в WuXi AppTec Minneapolis, MN для решения проблем с безопасностью продукта. В исследовании было 2 момента прерывания, 7 дней и 30 дней, для оценки ответа ткани. Исследование приведено в отчете WuXi AppTec D28195 (Проект С19879). Для интрадермальной инъекции использовали два контрольных образца (Juvederm Ultra Plus и образец С2 в табл. 19) и 6 составов (образцы A-F в табл. 19). Образцы A-F и контрольный образец С2 стерилизовали паром (протокол 201707289) в Nelson Laboratories, LLC перед инъекцией. Краткое описание исследования: в этом исследовании использовали двадцать четыре животных, двенадцать на период. Каждому животному делали шесть дорзальных интрадермальных инъекций с использованием линейного способа (инъецирования линии вместо болюса): один контрольный участок на одной стороне от позвоночника, второй контрольный участок на противоположной стороне (при этом стороны назначали животным поочередно) и четыре тестовых участка с не более чем одной инъекцией указанного тестового препарата (при этом правую и левую сторону назначали животным поочередно). Животных наблюдали ежедневно на всем протяжении исследования для оценки общего состояния здоровья. Животных гуманно умерщвляли в запланированные даты прекращения. Участки имплантации и окружающую ткань у всех животных вырезали, помещали в формалин и получали парафиновые блоки, затем осуществляя гистопатологический анализ. Типичные гистологические изображения и результаты патологического исследования приведены в табл. 22. В целом, не наблюдали признаков сепсиса или иммунного ответа в любом из участков имплантации.
Таблица 22
Гистопатологический анализ
| Образцы | 7 дней | 30 дней |
| Коммерческий | Фиг. 29 | Фиг. 30 |
| контроль | Коммерческий продукт отмечен на обоих изображениях как синий/серый материал. Наблюдали | Коммерческий продукт отмечен на обоих изображениях как синий/серый материал. Через |
- 120 045185
| слабое ассоциированное с материалом гранулематозное воспаление через 7 дней. | 30 дней наблюдали минимальную степень воспаления с очень слабым фиброзом. | |
| Продукт А: 24 мг/мл НА 9,6 мг/мл шелка | Фиг. 31 | Фиг. 32 |
| Наблюдали очень небольшое воспаление через 7 дней. Воспаление было фокальным, и иногда его трудно было найти. Не обнаруживали имплантируемый материал. | Через 30 дней воспаление было крайне трудно найти, и оно было минимальным. Не обнаруживали имплантируемый материал. | |
| Продукт В: 24 мг/мл НА 0,48 мг/мл шелка | Фиг. 33 | Фиг. 34 |
| В случае продукта В наблюдали фокальное слабое воспаление через 7 дней. Воспаление являлось хроническим. Это воспаление требовало тщательной оценки для идентификации, т.к. оно являлось фокальным и минимальным. Не обнаруживали имплантируемый материал. | На 30-дневном изображении видно даже меньшее воспаление. Его было даже труднее обнаружить, чем по 7-дневные имплантаты. Не обнаруживали имплантируемый материал. | |
| В целом, не было признаков сепсиса или иммунного ответа в любом из участков имплантации. |
Бактериальный эндотоксин: из 7 составов, использованных в исследовании на животных (указанных в табл. 19), выбирали три образца после стерилизации (образец А, образец Е и образец С2) для тестирования на бактериальные эндотоксины. Для определения уровня эндотоксина использовали кинетический турбидиметрический способ. Результаты теста приведены в табл. 23 и были ниже критериев приемлемости 20 ЕЭ/мл (отчет об исследовании Nelson Labs 1006775-S01).
Таблица 23
Результаты тестирования на эндотоксин
| Ш образца | Определенный эндотоксин |
| XHA15M20SM17103002 (А) | 0,498 (ЕЭ/мл) |
| XHA15M00SX17110202 (С2) | <0,400 (ЕЭ/мл) |
| XHA15M05SL17110202 (Е) | 1,56 (ЕЭ/мл) |
Биосовместимость - цитотоксичность: из 7 составов, использованных в исследовании на животных (указанных в табл. 19) выбирали четыре образца после стерилизации (образец А, образец В, образец D и образец Е) для теста на цитотоксичность ISO-10993-5 (элюирование ISO MEM с использованием фибробластов мыши L-929). Эти образцы соответствовали самому высокому и самому низкому содержанию шелка в случае среднемолекулярного шелка и низкомолекулярного шелка в тестируемых составах дермальных филлеров. В отчетах о тестировании указано, что все тестируемые образцы имели баллы 0, что означает, что они были нетоксичными (Wuxi AppTec Reports D28287-1, D28287-2, D28287-3, D28287-4).
Мутность: чистый гидрогель НА является прозрачным при естественном освещении. Если НА перекрестно-сшита с белком шелка, гидрогель становится немного мутным, и мутность зависит от общей концентрации шелка в составе. Мутность измеряли с помощью спектрофотометра Lambda X50S UV-Vis (PerkinElmer), оборудованного шаровым фотометром InGaAs, способным собирать рассеянный вперед свет в дополнение к стандартному проходящему свету. Измерение мутности гидрогеля шелк-НА показано на фиг. 35. Черная кривая соответствует стандартному пропусканию, а красная кривая, получаемая с помощью шарового фотометра, свидетельствует о значительном прямом рассеянии. Чистый гидрогель НА без шелка использовали в качестве контрольного образца. Кривые на фиг. 36 являются почти идентичными, что свидетельствует об очень небольшом рассеянии чистого геля НА. Измерение мутности позволяет предполагать, что гидрогель шелк-НА обладает способностью рассеивать свет, что может устранять эффект Тиндаля при его использовании в качестве дермального филлера.
Выводы: составы дермальных филлеров разработаны с учетом постоянной концентрации НА с различным содержанием шелка и постоянной общей концентрацией. Эти составы обладают широким спектром динамического модуля упругости, вязкости и плотности перекрестной сшивки, что приводит к возможности разного использования. Гидрогель шелк-НА являлся ферментативно обратимым. Остаточный
- 121 045185 кросс-линкер после диализа составов гидрогеля соответствовал критериям приемлемости. Тестирование на цитотоксичность показало, что гидрогели шелк-НА с содержанием шелка в диапазоне от 0,48 мг/мл до 9,6 мг/мл являлись нецитотоксическими и биосовместимыми. 30-дневное исследование на животных показало, что все составы с содержанием шелка до 9,6 мг/мл не вызывали сепсис и иммунный ответ.
Пример 22. Составы дермальных филлеров, состоящие из шелка и гиалуроновой кислоты, перекрестно-сшитых с использованием PEGDE (PEGDGE).
Кросс-линкер: диглицидиловый простой эфир полиэтиленгликоля (PEGDE), средняя молекулярная масса Mn=500. Условия реакции: те же, что и для перекрестной сшивки BDDE (пример 21). Общее количество PEGDE было эквивалентно BDDE в молях.
Таблица 24
Перекрестно-сшитый PEGDE состав и результаты тестирования
| Образец | Концен трация | MW НА | Концен трация | MW шелка | % шелк | Кросс линке | G’ при 5 | η при 5 Гц |
| НА* (мг/мл) | (МДа) | шелка.* (мг/мл) | а | Р | Гц (Па) | (Па с) | ||
| ХНА15М05 SM17111602 | 21,60 | 1,5 | 2,4 | Средня я | 10% | BDD Е | 38,4 | 2,35 |
| ХНА15М05 SM18020802P | 20,45 | 1,5 | 2,27 | Средня я | 10% | PEG- X | 67,5 | 3,10 |
| ХНА15М05 SM18020902P | 19,28 | 1,5 | 2,14 | Средня я | 10% | PEG- X | 73,5 | 3,40 |
*: гидрогель абсорбировал буфер PBS после диализа, что приводило к повышению объема. Концентрацию НА и шелка пересчитывали с учетом коэффициента разбавления.
Пример 23. Исследование на животных С20419.
Составы и характеризация образцов для исследования на животных С20419 приведены в табл. 25.
Таблица 25
Составы и характеризация образцов для исследования на животных С20419
| Образец | ID | Кро сел инк ер | Конц ентр ация НА (мг/ мл) | Конц ентр ация шелк а (мг/ мл) | MW НА (Да) | MW шелк а | G’ при 5 Гц (Па) | η при 5 Гц (Па с) | Сила инъе кцио нног о введ ения при 30G (Н) | MoD (%) | |
| Гру ппа 1 | СЗ | ХНА700КЗМ 00SX180510 | BD DE | 24 | 0 | 700К /зм | Не опр. | 0,2 | 0,1 | 7,41 | 4,87 |
| G | ХНА700КЗМ 05SM180510 | 22,8 | 1,2 | 700К /ЗМ | Сред няя | 3,8 | 0,2 | 8,17 | 4,54 | ||
| Н | ХНА700КЗМ 01SL180510 | 23,76 | 0,24 | 700К /ЗМ | Низка я | 0 | 0,1 | 6,95 | 5,42 | ||
| I | ХНА700КЗМ 05SL180510 | 22,8 | 1,2 | 700К /ЗМ | Низка я | 0,5 | 0,1 | 7,96 | 6,23 | ||
| к | XHA26M05S М180510 | 22,8 | 1,2 | 2,6М | Сред няя | 0,1 | 0,1 | 8,48 | 2,51 |
- 122 045185
| Гру ппа 2 | С4 | РХНА700КЗ M00SX18051 4 | РЕ GD Е | 24 | 0 | 700К /зм | Не опр. | 52,3 | 2,4 | 16,19 | 15,14 |
| L | РХНА700КЗ M05SM18051 4 | 22,8 | 1,2 | 700К /ЗМ | Сред няя | 31,8 | 1,6 | 12,96 | 10,97 | ||
| М | РХНА700КЗ M01SL18051 4 | 23,76 | 0,24 | 700К /ЗМ | Низка я | 32,2 | 1,5 | 15,96 | 11,02 | ||
| N | РХНА700КЗ M05SL18051 4 | 22,8 | 1,2 | 700К /ЗМ | Низка я | 51,9 | 2,1 | 17,82 | 11,23 | ||
| О | РХНА26М05 SM180514 | 22,8 | 1,2 | 2,6М | Сред няя | 18,9 | 1,1 | 10,56 | 17,23 | ||
| Гру ппа | С5 | Группа 2+свободная НА | 700К /ЗМ | Не опр. | 63,0 | 2,8 | 19,02 | 8,02 | |||
| Р | 700К /ЗМ | Сред няя | 28,3 | 1,4 | 11,22 | 9,71 | |||||
| Q | 700К /ЗМ | Низка я | 42,7 | 1,9 | 16,80 | 10 | |||||
| R | 700К /ЗМ | Низка я | 83,9 | 3,2 | 20,90 | 10,12 | |||||
| S | 2,6М | Сред няя | 75,8 | 3,4 | 12,78 | 11,92 |
На фиг. 37-46 показаны результаты исследования. Фиг. 37 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали контрольный дермальный филлер. Фиг. 38 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер НА по изобретению (24 мг/мл НА, перекрестно-сшитый PEGDE, образец С4 - табл. 25). Фиг. 39 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (22,8 мг/мл НА, 1,2 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец L - табл. 25). Фиг. 40 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (23,76 мг/мл НА, 0,24 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец М - табл. 25). Фиг. 41 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (22,8 мг/мл НА, 1,2 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец N - табл. 25). Фиг. 42 представляет собой типичное изображение гистологического среза интрадермальной области морской свинки, которой инъецировали дермальный филлер шелк-НА по изобретению (22,8 мг/мл НА, 1,2 мг/мл шелка, перекрестно-сшитый PEGDE, образец О - табл. 25).
Фиг. 43-46 являются графическими представлениями результатов гистологического исследования составов из таблицы 25 через 7 дней после имплантации (баллы: 0 - норма; 1 - минимальная; 2 - слабая; 3 - умеренная и 4 - тяжелая). Фиг. 43 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на деградацию геля через 7 дней после имплантации; перекрестно-сшитые BDDE составы деградировали сильнее всего. Фиг. 44 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на миграцию геля через 7 дней после имплантации. Фиг. 45 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на воспаление через 7 дней после имплантации; не наблюдали некроза тканей, не наблюдали свертывания крови и наблюдали минимальное накопление коллагена на контрольном составе и некоторых из тестовых составов. Фиг. 46 является графиком, на котором показаны результаты гистологического анализа на макрофаги через 7 дней после имплантации.
Пример 24. Свойства перекрестно-сшитых PEGDE гидрогелей шелк-НА: 1) динамический модуль упругости при сдвиге (С) и 2) степень набухания во время диализа.
Получение дермального филлера, материалы: диглицидиловый простой эфир полиэтиленгликоля (PEGDE), Mn=500, Sigma-Aldrich; гиалуронат натрия (НА), Lifecore; шелк, 6% раствор, Silk Inc.; гидроксид натрия, 0,1 Н раствор, BDH; соляная кислота, 5 Н, Ricca Chemical; фосфатно-солевой буфер (PBS),
- 123 045185
20-кратный, VWRLife Science.
Переменные составов дермальных филлеров: Молекулярная масса шелка: раствор (6%) шелка со средней и низкой MW; молекулярная масса НА: 700 кДа и 1,5 МДа; концентрация шелка (исходная): 015 мг/мл.
Перекрестная сшивка гидрогеля при высокой концентрации: добавляли 6% раствор шелка к 0,1 Н гидроксиду натрия; в полученный ранее раствор постепенно добавляли 100 мг/мл НА смешанной молекулярной массы (700 кДа/1,5 МДа=90/10) при осторожном перемешивании до полного растворения НА; в указанный выше раствор добавляли PEGDE; водяную баню нагревали до 40°С и поддерживали перекрестную сшивку на водяной бане в течение 45 мин; перекрестно-сшитому гелю позволяли охлаждаться до температуры ниже 30°С; добавляли 5 Н соляную кислоту к 1-кратному PBS, разбавляли гель до 40 мг/мл и корректировали конечный pH до 7,0-7,4.
Перекрестная сшивка гидрогеля при низкой концентрации: добавляли 6% раствор шелка к 0,1 Н гидроксиду натрия; в полученный ранее раствор постепенно добавляли 25 мг/мл НА массой 1,5 МДа при осторожном перемешивании до полного растворения НА; в указанный выше раствор добавляли PEGDE; водяную баню нагревали до 40°С и поддерживали перекрестную сшивку на водяной бане в течение 45 мин; перекрестно-сшитому гелю позволяли охлаждаться до температуры ниже 30°С; к перекрестносшитому гелю добавляли 5 Н соляную кислоту и корректировали конечный pH до 7,0-7,4.
Диализ гидрогеля: гидратировали диализную кассету (20 кДа MWCO) в течение 2 минут; вытирали избыток воды и измеряли общую массу пустой кассеты; в диализную кассету добавляли приблизительно 18 г гидрогеля; измеряли общую массу кассету после внесения геля; суспендировали диализную кассету в 2 л 1-кратного буфера PBS и устанавливали магнитную мешалку на 200 об/мин; через 72 ч диализа собирали гель.
Вязкоупругие свойства.
Для определения динамического модуля упругости (G') составов гидрогелей использовали гибридный реометр Discovery HR-1 (ТА Instruments). Образцы тестировали, меняя частоту колебаний с 0,1 Гц до 10 Гц с 10 точками данных на десятичный интервал. Данные регистрировали и сравнивали при скорости сдвига 5 Гц. G' составов гидрогелей до и после диализа с постоянной концентрацией НА и переменной концентрацией шелка приведены на фиг. 47А и 47В. В случае гидрогеля, перекрестно-сшитого PEGDE при высокой исходной концентрации НА, влияние концентрации шелка на G' является минимальным из-за относительно низкого соотношения шелка и общей НА. Это также может быть связано со смешанной НА, содержащей 90% низкомолекулярной НА (700 кДа), нечувствительной к изменениям концентрации шелка. В случае гидрогеля, перекрестно-сшитого PEGDE при низкой исходной концентрации НА, G' повышался с повышением добавляемого в состав шелка. Изменения концентрации шелка оказывали больше влияния на G', когда исходная концентрация НА была низкой, а также оказывали больше влияния на высокомолекулярную НА (1,5 МДа). Не наблюдали значительного влияния молекулярной массы шелка на G' в случае обоих способов перекрестной сшивки.
Степень набухания во время диализа: не наблюдали четкой тенденции, свидетельствовавшей о том, что количество шелка, добавляемого в состав гидрогеля, имело какое-либо влияние на набухание геля во время диализа в случае обоих способов перекрестной сшивки, и не наблюдали существенных различий между среднемолекулярным и низкомолекулярным шелком (фиг. 48А и 48В).
Концентрация шелка в составах гидрогеля имела минимальное влияние на G', если смешанная НА была перекрестно-сшита PEGDE при высокой исходной концентрации НА, но была пропорциональна G', если только высокомолекулярную НА перекрестно сшивали при низкой исходной концентрации НА. В случае разных молекулярных масс шелка в составах геля не наблюдали значимых различий при сравнении вклада в G' и набухание, если НА перекрестно-сшита PEGDE.
Пример 25. Концентрация шелка в составах дермальных филлеров шелк-НА.
Материалы: шелк, 6% раствор, Silk Inc.; фосфатно-солевой буфер (PBS), 20-кратный, VWR Life Science; гель перекрестно-сшитой гиалуроновой кислоты (НА).
Оборудование: влагоанализатор НЕ53, Mettler Toledo; спектрофотометр Cary 100 UV/Vis.
Калибровочная стандартная кривая: измеряют содержание сухой массы для 6% растворов среднемолекулярного и низкомолекулярного шелка для определения фактического содержания сухой массы (мг/мл) в растворах шелка; получают серию стандартных растворов шелка посредством разведения 6% раствора шелка с использованием 1-кратного PBS (например, 1 мг/мл шелка, 0,75 мг/мл шелка, 0,5 мг/мл шелка, 0,25 мг/мл шелка и 0 мг/мл шелка); измеряют поглощение каждого стандартного раствора при 275 нм в кварцевой кювете - измерения поглощения можно осуществлять со сканированием при 200-800 нм, интервалом данных 5 нм и средним временем получения 0,1 с; строят график поглощения при 275 нм относительно концентрации шелка (мг/мл) для получения стандартной кривой.
Измерение концентрации шелка: разводят образцы геля НА 1-кратным PBS таким образом, что поглощение при 275 нм составляет от 0 до 1,0 (например, образцы можно разводить в соотношении 1:12 геля к 1-кратному PBS, т.е. разведение составляет 1200%); проводят сканирование поглощения образца геля шелк-НА относительно референсного 1-кратного PBS в области 200-800 нм, измеряют пик поглощения при 275 нм для каждого образца геля; сигналы поглощения для образцов геля корректируют по
- 124 045185 различиям между сигналами поглощения для образца без шелка и интерцепту калибровочной кривой, считая образец без шелка имеющим концентрацию шелка 0 мг/мл; концентрацию шелка в образцах геля шелк-НА можно вычислять с помощью калибровочной кривой и коэффициента разбавления.
Калибровочные кривые получали посредством измерения поглощения при 275 нм для серии стандартных образцов с разными концентрациями шелка в диапазоне от 0 мг/мл от 1 мг/мл. Калибровочные кривые для растворов среднемолекулярного и низкомолекулярного шелка приведены на фиг. 49А и 49В. Значения R2 0,99947 для среднемолекулярного шелка и 0,99949 для низкомолекулярного шелка свидетельствуют о том, что калибровочные кривые являются линейными в рабочем диапазоне концентрации шелка 0-1 мг/мл. Эти кривые можно использовать для определения концентраций шелка в образцах геля.
Определение концентрации шелка в гидрогелях НА-шелк: поглощение при 275 нм разведенных гидрогелей шелк-НА измеряли для каждого образца, как показано на фиг. 50А и 50В. Концентрацию шелка в каждом образце вычисляли с помощью калибровочной кривой и коэффициента разбавления, что приведено в табл. 26.
Таблица 26 Концентрации шелка для гелей шелк-НА с неизвестной концентрацией шелка, вычисленные с помощью калибровочной кривой
| Образец геля | Теоретическая концентрация шелка (мг/мл) | Вычисленная концентрация шелка (мг/мл) |
| XHA15M00SX17110 201 | 0 | 0 |
| XHA15M01SL171030 01 | 0,6 | 0,49 |
| XHA15M02SL171102 01 | 1,2 | 1,26 |
| XHA15M05SL171102 01 | 3 | 3,08 |
| XHA15M01SM17103 001 | 0,6 | 0,57 |
| XHA15M10SM17103 001 | 6 | 6,21 |
| XHA15M20SM17103 001 | 12 | 13,83 |
Пример 26. Составы дермальных филлеров шелк-НА: непрозрачность геля.
Материалы: гель перекрестно-сшитой гиалуроновой кислоты (НА); фосфатно-солевой буфер (PBS), 20-кратный, VWRLife Science.
Оборудование: спектрофотометр Сагу 100UV/Vis.
Получение образцов: в чистую кварцевую кювету впрыскивали приблизительно 2 мл геля НА таким образом, чтобы достигать минимального количества пузырьков воздуха в образце; инъекция с использованием иглы 18G может помочь снизить количество пузырьков в образце; во вторую чистую кварцевую кювету можно добавлять пустой референсный образец с 1-кратным PBS (примечание: для измерений непрозрачности можно использовать пластиковую кювету, т.к. пластиковая кювета не имеет поглощения в видимом диапазоне, 400-800 нм).
Измерение непрозрачности геля: устанавливают диапазон Х-сканирования от 200 нм до 800 нм с интервалом данных 5 нм и средним временем получения 0,1 с; выбирают Y-режим как %Т для измерения пропускаемого света (примечание: также можно измерять поглощение и %Т можно вычислять из значений поглощения); осуществляют сканирование образца геля относительно референсного стандарта 1кратного PBS; данные можно сохранять в виде файла csv и строить график спектра.
Непрозрачность геля можно измерять с использованием спектрофотометра UV/Vis для стандартного пропускаемого света. Оптически прозрачный образец будет пропускать 100% света, в то время как немного мутный образец может пропускать лишь часть этого света. На фиг. 51 показано измерение мутности гидрогеля НА с шелком и без него. Синей кривой показан % прозрачности для пропускаемого света для образца геля шелк-НА с 3 мг/мл шелка и 26 мг/мл НА. Красной кривой показан пропускаемый свет для образца без шелка и с 20 мг/мл НА, и наблюдали больше пропускания света, чем в образце с шелком. Измерения мутности позволяют предполагать, что гель шелк-НА обладает способностью рассеивать видимый свет больше, чем гель НА без шелка.
-125045185
Пример 27. Степень модификации (MoD) гидрогеля НА, определяемая посредством ЯМР.
Степень модификации (MoD) определяют в виде стехиометрического соотношения всех связанных молекул кросс-линкера и молей повторяющихся единиц НА. В MoD включают перекрестно-сшитые и моно-связанные линкеры. MoD определяют с помощью спектра ХН ЯМР, интегрируя сигнал от Nацетильной группы в НА при 2,1 м.д. и кросс-линкера BDDE при 1,7 м.д. или кросс-линкера PEGDE при 3,0-4,5 м.д.
Перед ферментативной деградацией гидрогель НА сначала подвергали диализу против раствора PBS (1-кратного, 2 лх5) для удаления свободного кросс-линкера. Использовали диализную кассету SlideA-Lyzer (MWCO 3,5К, Thermo Scientific, Rockford, IL) и раствор PBS перемешивали при RT в течение 72 ч. После диализа отбирали 1 мл раствора гидрогеля НА и лиофилизировали с помощью лиофилизатора Labconco FreeZone (2,5 л) для получения сухого порошка.
Для подготовки образца к ЯМР 10 мг сухого порошка помещали в пробирку для ЯМР (5 мм, Wilmad-LabGlass) и добавляли 0,6 мл раствора гиалуронидазы (MP Biomedicals, Solon, ОН) в оксиде дейтерия (D2O, Alfa Aesar, Ward Hill, MA). Количество гиалуронидазы составляло 5 ед. на 1 мг НА. Пробирку для ЯМР инкубировали при 37°С в течение ночи, чтобы вся НА деградировала. Спектры ЯМР регистрировали с помощью автоматизированной системы ЯМР 400 МГц Varian MR. Время релаксационной задержки составляет 1 с, и количество сканирований составляет 256. Все данные обрабатывали с использованием программного обеспечения MestReNova (Edition 12.0.2).
Пример 28. 2-стадийный способ перекрестной сшивки шелк-НА.
Гидрогель шелк-НА можно получать 2-стадийным способом перекрестной сшивки для улучшения эффективности связывания шелка с НА. Для указанного состава на первой стадии весь белок шелка и небольшую часть низкомолекулярной НА добавляют в раствор NaOH с pH 10, а затем проводят реакцию с частью кросс-линкера. Без желания быть связанным какой-либо конкретной теорией, полагают, что на этой стадии с кросс-линкером реагирует настолько много шелка, насколько это возможно. На второй стадии добавляют раствор NaOH для разведения продукта стадии 1 и повышают pH до 13. Затем в раствор добавляют оставшуюся низкомолекулярную НА, всю высокомолекулярную НА и оставшийся кросс-линкер и завершают реакцию перекрестной сшивки.
Пример 29. Синтез гидрогеля НА.
Гидрогель НА синтезировали с использованием разной молекулярной массы НА, кросс-линкера, времени реакции, температуры реакции, концентрации НА, соотношения кросс-линкера, способа смешивания и способа перемешивания. В табл. 27 и 28 приведены различные используемые условия реакции и различные полученные гидрогели.
Таблица 27
| MWHA | 700 кДа, 1,5 МДа, 2,2 МДа, 3 МДа или смесь с разными MW в разных соотношениях |
| Кросслинкер | PEG500DE и BDDE |
| Время реакции | 30 мин, 60 мин, 90 мин, 120 мин, или 240 мин |
| Температура реакции | 40°С или 50°С |
| Концентрация НА | 30 мг/мл, 90 мг/мл, 100 мг/мл, и 140 мг/мл |
| Доля кросслинкера | 7% масс, или 10% масс. |
| Способ смешивания | Предварительное смешивание НА и кросслинкера или добавление кросслинкера в раствор НА частями |
| Перемешивание | С использованием механической мешалки и без нее |
- 126045185
Таблица 28
| Образец | НА/кросс линкер | Доля кроссли нкера (% масс.) | Концен трация НА (мг/мл) | Смеш ивание | Пер еме шив ание | Врем я реакц ИИ (мин) | Тем пера тура °C | G’ (после диализа ) | MoD (%) |
| РХНА2 M00SX 1804254 1 | 2,2М/РЕ G500DE | 10 | 30 | Частя ми | Да | 30 | 40 | 163 | 13,0 2 |
| РХНА2 M00SX 1804254 3 | 2,2М/РЕ G500DE | 10 | 30 | Частя ми | Да | 60 | 40 | 106 | 9,55 |
| РХНА2 M00SX 1804254 5 | 2,2М/РЕ G500DE | 10 | 30 | Частя ми | Да | 120 | 40 | 95 | И,7 3 |
| РХНА2 M00SX 1804254 7 | 2,2М/РЕ G500DE | 10 | 30 | Частя ми | Да | 240 | 40 | 10,6 | 15,6 |
| РХНА2 M00SX 1805104 1 | 2,2М/РЕ G500DE | 10 | 30 | За один раз | Нет | 30 | 40 | 148,67 | 5,3 |
- 127 045185
| PXHA2 M00SX 1805104 3 | 2,2M/PE G500DE | 10 | 30 | 3a один раз | Нет | 60 | 40 | 134,61 | 7,88 |
| PXHA2 MOOSX 1805104 5 | 2,2M/PE G500DE | 10 | 30 | За один раз | Нет | 120 | 40 | 46,53 | 9,44 |
| PXHA2 MOOSX 1805104 7 | 2,2M/PE G500DE | 10 | 30 | За один раз | Нет | 240 | 40 | 28,9 | ИД |
| BXHA7 OOKOOS X 1805014 1 | 700K/BD DE | 10 | 30 | По капля м | Да | 30 | 40 | 42 | 0 |
| BXHA7 OOKOOS X 1805014 3 | 700K/BD DE | 10 | 30 | По капля м | Да | 60 | 40 | 38 | 0 |
| BXHA7 OOKOOS X 1805014 5 | 700K/BD DE | 10 | 30 | По капля м | Да | 120 | 40 | 15 | 0,54 |
| PXHA2 MOOSX 1805164 1 | 2,2M/PE G500DE | 10 | 30 | За один раз/в течени е ночи | Нет | 30 | 40 | 182,91 | 4,62 |
| PXHA2 MOOSX | 2,2M/PE G500DE | 10 | 30 | За один | Нет | 60 | 40 | 129,76 | 8,87 |
- 128 045185
| 1805164 3 BXHA7 00K00S X 1805294 | 700K/BD DE | 10 | 30 | раз/в течени e ночи Частя ми | Нет | 30 | 40 | 17,99 | 0 |
| 1 BXHA7 00K00S X 1805294 3 | 700K/BD DE | 10 | 30 | Частя ми | Нет | 60 | 40 | 33,76 | 0,48 |
| BXHA2 M00SX 1805294 1 | 2,2M/BD DE | 10 | 30 | Частя ми | Нет | 30 | 40 | 295,6 | 0,52 |
| 1 BXHA2 M00SX 1805294 3 | 2,2M/BD DE | 10 | 30 | Частя ми | Нет | 60 | 40 | 222,28 | 0,66 |
| BXHAl 5M00S X 1806085 1 | 1,5M/BD DE | 10 | 90 | Смеш ивали раздел ьно | Нет | 30 | 50 | 261,76 | 3,26 |
| 1 BXHAl 5M00S X 1806085 3 | 1,5M/BD DE | 10 | 90 | Смеш ивали раздел ьно | Нет | 60 | 50 | 196,8 | 3,4 |
| BXHAl 5M00S X | 1,5M/BD DE | 10 | 90 | Смеш ивали раздел | Нет | 90 | 50 | 93,6 | 4,84 |
- 129 -
Claims (23)
1806085
5
ьно
ВХНА1
5M00S
X 1806085
7
1,5M/BD
DE
10
90
Смет ивали раздел ьно
Нет
120
50
72,98
4,51
РХНА1 5M00S X 1806135 1
1,5М/РЕ
GDE
10
90
Смет ивали раздел ьно
Нет
30
50
151,65
Прет ерпе вает
РХНА1 5M00S X 1806135 1
1,5М/РЕ
GDE
10
90
Смет ивали раздел ьно
Нет
60
50
71,87
Прет ерпе вает
ВХНА1 5M00S X 1806155 1
1,5M/BD
DE
10
100
За один раз
Нет
30
50
234,69
4,6
ВХНА1 5M00S X 1806155
3
1,5M/BD
DE
10
100
За один раз
Нет
60
50
219,43
6,1
ВХНАЗ M00SX 1806195
1
3M/BDD
E
10
100
За
один
раз
Нет
60
50
268,41
Прет ерпе вает
ВХНАЗ
M00SX 1806195
3M/BDD
E
7
100
За один раз
Нет
60
50
189,13
Прет ерпе вает
Все патенты, патентные заявки и опубликованные ссылки, процитированные в настоящем описании, включены в него, таким образом, в качестве ссылок в полном объеме. Хотя способы по настоящему изобретению описаны в свете конкретных вариантов осуществления, следует понимать, что их можно дополнительно модифицировать. Кроме того, настоящая заявка должна охватывать любые варианты, применение или адаптации способов по настоящему изобретению, включая отклонения от настоящего описания, проистекающие из общеизвестной или общепринятой практики в области, к которой относятся способы по настоящему изобретению.
ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ
1. Биосовместимый тканевой филлер, содержащий гиалуроновую кислоту (НА) и анестезирующее средство и фиброин шелка (SPF), где часть НА или часть фиброина шелка (SPF), модифицирована или перекрестно сшита с помощью одной или более линкерных молекул, содержащих одно или более из алкановой или алкильной цепи, эфирной группы и вторичного спирта, где линкерные молекулы ковалентно присоединены к НА или SPF, где SPF имеет среднюю средневзвешенную молекулярную массу в диапазоне от 1 до 250 кДа, где модифицированные или перекрестно-сшитые НА или SPF содержат линкер или перекрестносшивающую молекулу, содержащую цепь полиэтиленгликоля (PEG), где модификация или перекрестная сшивка осуществлена с использованием перекрестносшивающего средства и/или перекрестно-сшивающего предшественника, представляющего собой диглицидиловый простой эфир полиэтиленгликоля.
- 130 045185
2. Тканевой филлер по п.1, где SPF имеет среднюю средневзвешенную молекулярную массу от 5 до 150 кДа.
3. Тканевой филлер по п.1, где SPF имеет среднюю средневзвешенную молекулярную массу от 6 до 17 кДа, от 17 до 39 кДа или от 39 до 80 кДа.
4. Тканевой филлер по любому из пп.1-3, где SPF имеет полидисперсность от 1 до 5.
5. Тканевой филлер по любому из пп.1-4, где SPF имеет степень кристалличности до 60%.
6. Тканевой филлер по любому из пп.1-5, где часть SPF является модифицированной или перекрестно-сшитой.
7. Тканевой филлер по п.6, где степень модификации или перекрестной сшивки модифицированных или перекрестно-сшитых НА или SPF составляет от 1 до 100%.
8. Тканевой филлер по п.6 или 7, где степень модификации или перекрестной сшивки модифицированных или перекрестно-сшитых НА или SPF составляет от 1 до 15%.
9. Тканевой филлер по любому из пп.1-8, где тканевой филлер представляет собой гидрогель.
10. Тканевой филлер по любому из пп.1-9, где общая концентрация SPF в тканевом филлере составляет от 0,1 до 15 мг/мл.
11. Тканевой филлер по любому из пп.1-10, где тканевой филлер является дермальным филлером.
12. Тканевой филлер по любому из пп.1-10, где тканевой филлер является биодеградируемым.
13. Тканевой филлер по любому из пп.1-12, где тканевой филлер является инъецируемым.
14. Тканевой филлер по любому из пп.1-13, где тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') от 25 до 1500 Па.
15. Тканевой филлер по любому из пп.1-14, где тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') от 50 до 100 Па.
16. Тканевой филлер по любому из пп.1-14, где тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') от 100 до 200 Па.
17. Тканевой филлер по любому из пп.1-14, где тканевой филлер имеет динамический модуль упругости (G') от 200 до 300 Па.
18. Тканевой филлер по любому из пп.1-17, где тканевой филлер имеет комплексную вязкость от 1 до 10 Па-с.
19. Способ лечения состояния кожи у нуждающегося в этом индивидуума, включающий введение индивидууму терапевтически эффективного количества тканевого филлера по любому из пп.1-18.
20. Способ по п.19, где состояние выбрано из группы, состоящей из дегидратации кожи, недостатка эластичности кожи, огрубления кожи, недостатка натяжения кожи, растяжек на коже, бледности кожи, впадин на коже, впалых щек, тонких губ, ретроорбитального дефекта, складок на лице и морщин, где тканевой филлер вводят в область дермы индивидуума.
21. Способ по п.19 или 20, где способ представляет собой аугментацию лица, реконструкцию лица, лечение заболевания лица, лечение лицевого нарушения, лечение лицевого дефекта или лечение несовершенства лица.
22. Способ по любому из пп.19-21, где тканевой филлер устойчив к биодеградации, биоэрозии, биоабсорбции и/или биорезорбции в течение по меньшей мере 3 дней, 7 дней, 14 дней, 21 дня, 28 дней, 1 месяца, 2 месяцев, 3 месяцев, 4 месяцев, 5 месяцев или 6 месяцев.
23. Способ по любому из пп.19-22, где введение тканевого филлера индивидууму приводит к сниженному воспалительному ответу, оцениваемому по объему грануломатозных и/или фиброзных областей, по сравнению с воспалительным ответом, индуцируемым контрольным тканевым филлером, содержащим полисахарид и лидокаин, где контрольный тканевой филлер не включает SPF.
- 131 -
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US62/525,131 | 2017-06-26 | ||
| US62/641,095 | 2018-03-09 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| EA045185B1 true EA045185B1 (ru) | 2023-10-31 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20230338614A1 (en) | Silk-Hyaluronic Acid Based Tissue Filers and Methods of Using the Same | |
| KR102161861B1 (ko) | 잔주름 치료를 위한 진피 필러 조성물 | |
| EP3520827B1 (en) | Cross-linked hydrogels for soft tissue augmentation | |
| US20230114250A1 (en) | Silk-hyaluronic acid tissue fillers and methods of making and using the same | |
| US11660372B2 (en) | Silk-hyaluronic acid based tissue fillers and methods of using the same | |
| CA3183134A1 (en) | Silk-hyaluronic acid compositions for tissue filling, tissue spacing, and tissue bulking | |
| EP3316921B1 (en) | Method for producing crosslinked hyaluronic acid | |
| EA045185B1 (ru) | Тканевые филлеры на основе шелка и гиалуроновой кислоты и способы их применения | |
| BR112019027687B1 (pt) | Enchimento de tecido biocompatível e uso de um enchimento de tecido | |
| CN116507315A (zh) | 用于组织填充、组织间隔和组织膨胀的丝-透明质酸组合物 |