ES2935859T3 - Composición para mejorar la eficacia de un tratamiento con L-DOPA - Google Patents

Abstract

La invención se refiere a una composición para usar en (a) el tratamiento de habilidades motoras deterioradas en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson; (b) mejorar la eficacia de la levodopa (L-DOPA) en el tratamiento de habilidades motoras deterioradas en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson; y/o (c) reducir los efectos secundarios asociados con L-DOPA, preferiblemente movimientos involuntarios seleccionados del grupo que consiste en movimientos coreiformes, distónicos y discinéticos, en el tratamiento de habilidades motoras deterioradas en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson, que comprende la administración conjunta de el sujeto L-DOPA y una composición que comprende cantidades terapéuticamente eficaces de: (i) al menos uno de uridina, citidina o sales, fosfatos, derivados de acilo o ésteres de los mismos; (ii) al menos uno de ácido docosahexaenoico (22:6; DHA), ácido eicosapentaenoico (20:5; EPA) y ácido docosapentaenoico (22:5; DPA); (iii) colina, o sus sales o ésteres; y (iv) al menos una vitamina B seleccionada de las vitaminas B6, B9 y B12. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Composición para mejorar la eficacia de un tratamiento con L-DOPA

Campo de la invención

[0001] La presente invención pertenece al campo de la nutrición médica y se refiere más particularmente a composiciones nutricionales para usar en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.

Estado de la técnica

[0002] El cuadro clínico de la enfermedad de Parkinson (EP) suele estar dominado por el deterioro motor. Sin embargo, los síntomas no motores, como el deterioro cognitivo y las disfunciones gastrointestinales, pueden desarrollarse antes que los síntomas motores y son determinantes importantes de la calidad de vida. La L-3,4-dihidroxi-fenilalanina (levodopa o L-DOPA) es un precursor de la dopamina, un neurotransmisor, que suprime algunos de los síntomas motores de la EP, ya que compensa la pérdida de células dopaminérgicas al mejorar la síntesis de dopamina en las terminales restantes. Hasta el momento, la suplementación oral con levodopa es el fármaco más eficaz en el tratamiento de la EP. Entre 2001 y 2012, el 85 % de los pacientes con EP utilizaron levodopa.

[0003] Sin embargo, esta terapia tiene varios efectos secundarios, no previene la degeneración de las neuronas dopaminérgicas y muchos de los síntomas no motores no responden a la levodopa. Algunos efectos secundarios simples de la levodopa, como las náuseas y los vómitos, por lo general se reducen con la administración combinada de un inhibidor periférico de la descarboxilasa, como la benserazida o la carbidopa. En el documento WO 2015/084160 se describe una composición que comprende un derivado de pirimidina y una fuente de ácidos grasos para el tratamiento de trastornos gastrointestinales en pacientes que padecen trastornos neurológicos, en particular EP. Entre los efectos secundarios graves de tipo motor (no gastrointestinales) más frecuentes que aparecen con el uso prolongado de levodopa se incluyen movimientos involuntarios y cambios en el estado mental (en hasta el 50 % de los pacientes tratados con terapia a largo plazo). Los tipos de movimientos involuntarios debidos a la levodopa se han caracterizado como coreiformes, distónicos y discinéticos.

[0004] Los movimientos coreiformes debidos a la terapia con levodopa pueden ocurrir hasta en el 80 % de los pacientes tratados durante un año y con frecuencia incluyen muecas faciales, masticación exagerada y torsión y protrusión de la lengua. Pueden darse varios tipos de fluctuaciones motoras y tener como resultado "episodios bradicinéticos". Algunas fluctuaciones motoras están relacionadas con el momento de la administración de la dosis. Por ejemplo, los pacientes pueden experimentar "discinesia de pico de dosis" y un efecto de fin de dosis llamado "acinesia de fin de dosis". El efecto de fin de dosis puede provocar distonía matutina. Estas fluctuaciones motoras pueden controlarse mediante el aumento de la frecuencia de administración de las dosis y la disminución de la dosis administrada para lograr un efecto terapéutico más suave. Otras fluctuaciones motoras no están relacionadas con el momento de administración de la dosis. Estas fluctuaciones se caracterizan por una pérdida repentina del efecto de la levodopa que puede durar de minutos a horas y provocar acinesia seguida de un retorno repentino del efecto de la levodopa. Estas fluctuaciones intermitentes llamadas “on-off” pueden ocurrir muchas veces al día. Las fluctuaciones “on-off” pueden responder a una administración más frecuente de las dosis. Estos efectos secundarios vienen con el uso a largo plazo de la levodopa, y la solución utilizada hasta ahora es administrar dosis más frecuentes y/o más altas. Sin embargo, esto solo añade más problemas, en pacientes que cada vez tienen más problemas intestinales que provocan una absorción reducida de levodopa.

[0005] En ese contexto, existe una gran necesidad de terapias adicionales que reduzcan/modulen los síntomas motores y no motores y que puedan reducir la dependencia de la levodopa.

Resumen de la invención

[0006] Los inventores han investigado los efectos de la combinación de la administración oral de una intervención nutricional específica junto con el tratamiento con levodopa en ratones C57BL/6J a los que se les inyectó rotenona o vehículo en el cuerpo estriado. La intervención en la dieta comenzó cuatro semanas después de la cirugía, cuando se desarrollaron síntomas similares a los de la EP. Los efectos del tratamiento oral con diferentes dosis de levodopa se evaluaron cada semana. Los resultados de la Figura 1 mostraron que los problemas de desempeño en la prueba en un rotarod inducidos por la rotenona se aliviaron con la combinación de levodopa e intervención nutricional terapéutica hasta el punto de que los efectos fueron tan efectivos como un tratamiento con levodopa un 400 % más alto por sí solo.

[0007] Por lo tanto, la invención se refiere a una composición para usar en:

(a) el tratamiento del deterioro de las habilidades motoras (es decir, el tratamiento de los síntomas del deterioro motor) en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson;

(b) la mejora de la eficacia de la levodopa (L-DOPA) en el tratamiento del deterioro de las habilidades motoras (es decir, el tratamiento de los síntomas del deterioro motor) en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson; y/o

(c) la reducción de los efectos secundarios asociados a la L-DOPA como se define en las reivindicaciones adjuntas en el tratamiento del deterioro de las habilidades motoras (es decir, el tratamiento de los síntomas del deterioro motor) en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson, que comprende administrar de forma conjunta al sujeto L-DOPA y una composición que comprende cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de:

(i) al menos uno de entre uridina, citidina o sales, fosfatos, formas aciladas o ésteres de estas;

(ii) al menos uno de entre ácido docosahexaenoico (22:6; DHA), ácido eicosapentaenoico (20:5; EPA) y ácido docosapentaenoico (22:5; DPA);

(iii) colina, o sus sales o ésteres; y

(iv) al menos una vitamina B seleccionada de entre las vitaminas B6, B9 y B12.

[0008] Los efectos secundarios reducidos usando la composición de la invención son movimientos involuntarios seleccionados del grupo que consiste en movimientos coreiformes, distónicos y discinéticos asociados con la administración crónica de levodopa. El tratamiento del deterioro de las habilidades motoras preferiblemente implica o incluye mejorar la coordinación motora y el equilibrio, y la equilibriocepción.

Breve descripción de la figura.

[0009] La presente invención se describirá con más detalle a continuación, en referencia a la figura, en la que se muestran los efectos de la intervención nutricional y diferentes dosis de levodopa en el desempeño en el rotarod, en términos de mantenimiento del equilibrio postural y coordinación motora para evitar la caída del rotarod antes del final de la prueba, es decir, en 300 s. Tanto la levodopa como los tratamientos nutricionales aliviaron la deficiencia motora inducida por rotenona. La administración combinada de la dieta y la levodopa mostró efectos beneficiosos aditivos sobre el desempeño en el rotarod. Los datos se muestran como media ± EEM. Las distintas letras indican que los valores medios fueron significativamente diferentes (p<0,05, las barras con las mismas letras son estadísticamente iguales).

[0010] De la figura se puede concluir que el efecto de una combinación de 5 mg/kg de levodopa y la intervención fue al menos tan eficaz como 20 mg/kg de levodopa sola, es decir, resultó en una mejora de la eficacia de al menos un 400 %. De hecho, es muy probable que la eficacia de la administración conjunta sea aún mayor, considerando que 0 mg/kg de levodopa en animales con la Dieta Activa (DA) fueron tan eficaces como 20 mg/kg de levodopa en animales con la dieta de Control (CD), y que 5 mg/kg de levodopa en animales con DA (letra d) fueron más eficaces que 20 mg/kg de levodopa en animales con DC (letra c).

Descripción detallada de las formas de realización

[0011] La L-3,4-di-hidroxi-fenilalanina (levodopa o L-DOPA) es un precursor de la dopamina, un neurotransmisor que suprime algunos de los síntomas motores de la EP. Un experto en la materia puede acceder fácilmente a dosis diarias de dicha medicación; se hace referencia, por ejemplo, a la Parkinson Foundation. (http://wwww.toolkit.parkinson.org/content/levodopa). Es un objetivo mejorar la eficacia de la L-DOPA sobre la función motora, en particular sobre la coordinación motora, el equilibrio y el equilibriocepción, de modo que, en caso de administración conjunta de L-DOPA con la composición según la invención, la dosis de L-DOPA administrada (a diario) se pueda reducir preferiblemente a más del 50 %, preferiblemente más del 60 %, más preferiblemente más del 70 % en comparación con la dosis de L-DOPA si no se administra de forma conjunta con la composición de la invención.

[0012] Se prefiere que el mamífero reciba tratamiento con levodopa por vía oral.

[0013] El uso puede implicar además la administración conjunta de la composición de la invención y levodopa con cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de un inhibidor periférico de la descarboxilasa (como la carbidopa o la benserazida) que normalmente se usa para disminuir la degradación de levodopa en la periferia y, por lo tanto, aumentar su disponibilidad en el sistema nervioso central/cerebro, donde se metaboliza en dopamina. En la técnica, también se afirma que la benserazida reduce los efectos secundarios de la levodopa (como las náuseas) y aumenta la eficacia de la levodopa de tal manera que se puede reducir la dosis diaria. En los experimentos adjuntos, se administró benserazida en todos los grupos que recibieron L-DOPA, y así se observó la eficacia mejorada inducida por la composición de la invención además de cualquier mejora en la eficacia reivindicada en términos de eficacia de la L-DOPA ya lograda con la benserazida.

[0014] El término "administración conjunta" significa que la composición y la levodopa se administran ambas a diario, lo que, en una forma de realización, puede ser de manera simultánea o secuencial en cualquier orden. La levodopa normalmente se administra varias veces al día, mientras que la composición de la invención se administra preferiblemente una o dos veces al día, preferiblemente una vez al día. En una forma de realización, la composición de la invención se administra al menos una vez al día, independientemente del momento de la administración de la levodopa, siempre que la levodopa se prescriba a diario.

[0015] La composición de la invención está destinada preferiblemente a la administración oral.

[0016] El mamífero que padece la enfermedad de Parkinson [EP] es preferiblemente una persona humana. La persona es preferiblemente un paciente con EP temprana, es decir, un paciente con EP recién diagnosticada o prodrómica, preferiblemente un paciente con EP que ha comenzado a recibir tratamiento con levodopa hace menos de 5 años, más preferiblemente menos de 3 años, más preferiblemente menos de 2 años, de la manera más preferible menos de 1 año. En cualquier caso, se prefiere que la composición de la invención se administre de forma conjunta con levodopa antes del final del periodo (motor) llamado luna de miel (o 'luna de miel de la levodopa'), que es típicamente un período de 3 a 5 años desde el inicio del tratamiento con levodopa en el que los síntomas motores del Parkinson se controlan adecuadamente con la levodopa, mientras que los efectos secundarios y, en particular, los movimientos involuntarios mencionados anteriormente del tratamiento con levodopa no son demasiado incapacitantes. Se hace referencia a https://www.agingcare.com/articles/farewell-parkinsons-honeymoon-167436.htm. Gracias a los efectos aditivos de la combinación de la presente invención con el fármaco, es posible reducir las dosis de levodopa administradas a los pacientes, con lo que se reducen los efectos secundarios negativos y se contribuye a un uso beneficioso más prolongado del fármaco. En una forma de realización, el paciente con EP es un paciente sin tratamiento previo con fármacos que comienza con un tratamiento con levodopa.

[0017] En un aspecto de la presente invención, la composición según la invención se puede usar como un producto farmacéutico que comprende uno o más materiales de vehículo aceptables desde el punto de vista farmacéutico.

[0018] En otro aspecto de la presente invención, la composición según la invención se puede usar como un producto nutricional, por ejemplo, como un suplemento nutricional, por ejemplo, como un aditivo a una dieta normal, como un fortificante, para añadir a una dieta normal o como un alimento completo.

[0019] El producto farmacéutico, preferiblemente de aplicación enteral, puede ser una forma galénica sólida o líquida. Los ejemplos de formas galénicas sólidas son comprimidos, cápsulas (por ejemplo, cápsulas de gelatina duras o blandas), pastillas, sobres, polvos, gránulos y similares que contienen el ingrediente activo junto con vehículos galénicos convencionales. Se puede utilizar cualquier material de vehículo convencional. El material de vehículo puede ser un material de vehículo inerte orgánico o inorgánico adecuado para la administración oral. Los vehículos adecuados incluyen agua, gelatina, goma arábiga, lactosa, almidón, estearato de magnesio, talco, aceites vegetales y similares. Además, se pueden añadir aditivos tales como aromatizantes, conservantes, estabilizantes, emulsionantes, reguladores del pH y similares de acuerdo con las prácticas aceptadas de preparación de compuestos farmacéuticos.

[0020] Si la composición es un producto farmacéutico, dicho producto puede contener la dosis diaria en una o más unidades de dosificación. La unidad de dosificación puede estar en forma líquida o en forma sólida donde. en el último caso, la dosis diaria puede ser proporcionada por una o más unidades de dosificación sólidas, por ejemplo en una o más cápsulas o comprimidos.

[0021] En un aspecto de la presente invención, la composición según la invención se puede usar en un producto nutricional que comprende componentes seleccionados del grupo de los lípidos, las proteínas y los carbohidratos. Se entiende que un producto nutricional se diferencia de un producto farmacéutico en la presencia de nutrientes que proporcionan nutrición al sujeto al que se administra la composición, en particular la presencia de proteínas, lípidos, carbohidratos digeribles y fibra alimentaria. Además, puede contener ingredientes tales como minerales, otras vitaminas, ácidos orgánicos y aromatizantes. Aunque el término "producto nutracéutico" se usa a menudo en la literatura, denota un producto nutricional con un componente o un propósito farmacéutico. Por tanto, la composición nutricional según la invención también se puede utilizar en un producto nutracéutico.

[0022] El producto de la invención es una composición enteral, destinada a la administración oral. Se administra preferiblemente en forma líquida. En una forma de realización, el producto comprende una fracción lipídica y al menos una de carbohidratos y proteínas, donde la composición lipídica proporciona entre el 20 y el 50 % de la energía del producto alimenticio. Esto se basa en el supuesto de que los lípidos, los hidratos de carbono y las proteínas generan aproximadamente 9, 4 y 4 kcal/g, respectivamente, y los 3 juntos constituyen todos los aportes calóricos de la composición. En una forma de realización, el producto alimenticio es una composición líquida que contiene entre 0,8 y 1,4 kcal por ml.

DHA/EPA/DPA

[0023] La composición de la invención comprende cantidades terapéuticamente eficaces de al menos un ácido graso poliinsaturado de cadena larga (AGPI-CL; que tiene una longitud de cadena de 18 y más átomos de carbono) omega-3 seleccionado del grupo que consiste en ácido docosahexaenoico (22:6 , w-3; DHA), ácido eicosapentaenoico (20:5, w-3; EPA) y ácido docosapentaenoico (22:5 w-3; DPA), preferiblemente al menos DHA y/o EPA, más preferiblemente al menos DHA, de la manera más preferible DHA y EPA. El EPA se convierte en DPA (w-3), lo que a su vez aumenta la conversión de DPA en DHA en el cerebro. También se cree que el EPA desempeña un papel importante en el control de los procesos inflamatorios en la enfermedad de Parkinson. Por lo tanto, la presente composición contiene preferiblemente una cantidad significativa de EPA.

[0024] El DHA, EPA y/o DPA se proporcionan preferiblemente como triglicéridos, diglicéridos, monoglicéridos, ácidos grasos libres o sus sales o ésteres, fosfolípidos, lisofosfolípidos, éteres de glicerol, lipoproteínas, ceramidas, glucolípidos o combinaciones de estos. Preferiblemente, la presente composición comprende al menos DHA en forma de triglicéridos, más preferiblemente DHA y EPA. Entre las fuentes adecuadas de AGPI-CL w-3 y/o DHA/EPA se incluyen el aceite de atún, (otros) aceites de pescado, ésteres alquílicos ricos en DHA, aceite de algas, yema de huevo o fosfolípidos enriquecidos con AGPI-CL w-3, por ejemplo, fosfatidilserina-DHA. Preferiblemente, un producto, composición o kit de acuerdo con la invención comprende aceite de pescado que proporciona los AGPI-CL omega-3. Otra fuente particularmente adecuada para los AGPl-CL omega-3 es el aceite de algas.

[0025] En términos de dosis diaria, el presente uso comprende preferiblemente la administración de 500 a 5000 mg de DHA+EPA+DPA al día. En una forma de realización preferida, en términos de dosis diaria, el presente método comprende preferiblemente la administración de 500 - 5000 mg de DHA+EPA al día, más preferiblemente de 1000 a 4000 mg al día. El DHA se administra preferiblemente en una cantidad de 400 a 4500 mg al día, más preferiblemente de 750 a 3250 mg al día. Además, el EPA se administra preferiblemente en una cantidad de 100 a 4600 mg al día, más preferiblemente de 250 a 3250 mg al día.

[0026] En términos de dosis unitaria, la proporción de DHA+EPA+DPA (preferiblemente DHA+EPA) de los ácidos grasos totales es preferiblemente del 5 al 95 % en peso, más preferiblemente del 10 al 80 % en peso, de la manera más preferible del 15 al 70 % en peso, particularmente del 15 - 50 % en peso. La composición preferiblemente comprende cantidades bajas de ácido araquidónico (AA), preferiblemente menos del 5 % en peso de AA con respecto a los ácidos grasos totales, más preferiblemente por debajo del 2,5 % en peso, más preferiblemente hasta el 0,5 % en peso.

[0027] La relación en peso de EPA:DHA está preferiblemente en el rango de 1:10 y 5:1, particularmente 1:5 - 2:1, más preferiblemente 1:5 - 1:2. Las proporciones y cantidades mencionadas anteriormente tienen en cuenta y optimizan varios aspectos, incluido el sabor (las cantidades demasiado altas de LCP reducen el sabor, lo que resulta en un cumplimiento reducido del tratamiento), el equilibrio entre el DHA y sus precursores para garantizar una eficacia óptima y mantener el bajo volumen de las formulaciones. Preferiblemente, la relación en peso de DHA:AA es de al menos 5:1, preferiblemente al menos 10:1, más preferiblemente al menos 15:1, preferiblemente hasta 60:1, más preferiblemente hasta 30.

Uridina o citidina

[0028] La presente composición implica cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de uridina, citidina y/o un equivalente de estas, seleccionadas de entre sales, fosfatos, formas aciladas y/o ésteres. En términos de uridina, la composición preferiblemente comprende al menos una uridina o un equivalente de esta seleccionado del grupo que consiste en uridina (es decir, ribosil uracilo), desoxiuridina (desoxirribosil uracilo), uridina fosfatos (UMP, duMP, UDP, UTP), la nucleobase uracilo y formas de uridina aciladas. En una forma de realización, también se pueden aplicar citidina, CMP, citicolina (CDP-colina). Preferiblemente, la presente composición comprende uridina y/o un fosfato de uridina seleccionado del grupo que consiste en monofosfato de uridina (UMP), difosfato de uridina (UDP) y trifosfato de uridina (UTP); y/o un fosfato de citidina (CMP, CDP, CTP, preferiblemente CMP). De la manera más preferible, en la presente composición la fuente de uridina comprende o consiste en uridina (es decir, el ribosil uracilo) y UMP. Preferiblemente, al menos el 50 % en peso de la uridina de la presente composición es proporcionada por UMP, más preferiblemente al menos el 75 % en peso, de la manera más preferible al menos el 95 % en peso. Las dosis que deben administrarse se dan como UMP. La cantidad de fuentes de uracilo se puede calcular teniendo en cuenta el equivalente molar de la cantidad de UMP.

[0029] El presente uso comprende preferiblemente la administración de uridina (la cantidad acumulada de uridina, desoxiuridina, fosfatos de uridina, la nucleobase uracilo y formas de uridina acilada) en una cantidad de (i) 0,1 a 6 g al día, preferiblemente 0,2 a 3 g al día, más preferiblemente de 0,4 a 2 g al día, y/o (ii) de 0,1 a 6 g por 100 ml de composición (líquida), preferiblemente de 0,2 a 3 g por 100 ml de composición (líquida), más preferiblemente de 0,4 a 2 g por 100 ml (líquido) composición. Las cantidades anteriores también representan cualquier cantidad de citidina, fosfatos de citidina y citicolina incorporadas en la composición.

Colina

[0030] La presente composición implica cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de colina, una sal de colina y/o un éster de colina. La sal de colina se selecciona preferiblemente de entre cloruro de colina, bitartrato de colina o estearato de colina. El éster de colina se selecciona preferiblemente de entre una fosfatidilcolina y lisofosfatidilcolina. El presente uso comprende preferiblemente la administración de más de 50 mg de colina al día, preferiblemente de 80 a 3000 mg de colina al día, más preferiblemente de 100 a 2000 mg de colina al día, de la manera más preferible de 150 a 1000 mg de colina al día. La presente composición comprende preferiblemente de 80 mg a 3000 gramos de colina por 100 ml de la composición líquida, preferiblemente de 100 mg a 2000 mg de colina por 100 ml, preferiblemente de 200 a 1000 mg de colina por 100 ml de composición, de la manera más preferible de 200 mg a 600 mg de colina por 100 ml. Los números anteriores se basan en la colina, las cantidades de equivalentes o fuentes de colina se pueden calcular teniendo en cuenta el equivalente molar de la colina.

Vitaminas del grupo B

[0031] La presente composición involucra cantidades terapéuticamente eficaces de al menos una vitamina B y preferiblemente al menos dos vitaminas del gupo B seleccionadas del grupo de la vitamina B6 (piridoxina, piridoxal o piridoxamina o clorhidrato de piridoxina), la vitamina B9 (ácido fólico o folato) y la vitamina B12 (cobalaminas). Los equivalentes funcionales están incluidos en estos términos. En particular, se han logrado buenos resultados con una combinación que comprende cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de todas las vitaminas B6, B12 y B9.

[0032] La vitamina B debe administrarse en una dosis eficaz, la cual depende del tipo de vitamina B utilizada. Como regla general, se puede elegir una dosis mínima o máxima adecuada en función de las recomendaciones nutricionales conocidas, por ejemplo, según lo recomendado por el Institute of Medicine (IOM) de la U.S. National Academy of Sciences o por el Scientific Committee on Food (un comité científico de la UE), la información divulgada en este documento y, opcionalmente, una cantidad limitada de pruebas rutinarias. Una dosis mínima puede basarse en el requerimiento medio estimado (EAR), aunque una dosis más baja ya puede ser eficaz. Una dosis máxima generalmente no excede los niveles máximos de ingesta tolerables (UL), según lo recomendado por el IOM.

[0033] Si está presente, la vitamina B6 está preferiblemente presente en una cantidad que proporcione una dosis diaria en el rango de 0,1 a 100 mg, en particular en el rango de 0,5 a 25 mg, más en particular en el rango de 0,5 a 5 mg. La presente composición comprende preferiblemente 0,1 - 100 mg de vitamina B6 por 100 g de producto (líquido), más preferiblemente 0,5 - 5 mg de vitamina B6 por 100 g de producto (líquido), más preferiblemente 0,5 -5 mg de vitamina B6 por 100 g de producto (líquido).

[0034] Si está presente, la vitamina B12 está preferiblemente presente en una cantidad que proporcione una dosis diaria en el rango de 0,5 a 100 pg, en particular en el rango de 1 a 10 pg, más en particular en el rango de 1,5 a 5 pg. La presente composición comprende preferiblemente de 0,5 a 100 pg de vitamina B12 por 100 g de producto (líquido), más preferiblemente de 1 a 10 pg de vitamina B12 por 100 g de producto (líquido), más preferiblemente de 1,5 a 5 pg de vitamina B12 por 100 g de producto (líquido).

[0035] Si está presente, la vitamina B9 (ácido fólico) está preferiblemente presente en una cantidad que proporcione una dosis diaria en el rango de 50 a 5000 pg, en particular en el rango de 100 a 1000 pg, más en particular en el rango de 200 a 800 pg. La presente composición comprende preferiblemente de 50 a 5000 pg de ácido fólico por 100 g de producto (líquido), más preferiblemente de 100 a 1000 pg de ácido fólico por 100 g de producto (líquido), más preferiblemente de 200 a 800 pg de ácido fólico por 100 g de producto (líquido). Los folatos incluyen ácido fólico, ácido folínico, formas metiladas, meteniladas y formiladas de folatos, sus sales o ésteres, y todos en forma reducida u oxidada.

[0036] Se prefiere particularmente que la composición comprenda cantidades aumentadas de vitamina B6 y vitamina B12, ya que la levodopa reduce el estado de la vitamina B y aumenta las concentraciones de homocisteína total en plasma.

Fosfolípidos

[0037] Se prefiere incorporar al menos un fosfolípido en la composición. El término "fosfolípido" excluye la fosfatidilcolina (PC), que ya se contabiliza en la fracción de colina. La presente composición comprende preferiblemente al menos un fosfolípido en una cantidad de 0,01 a 1 gramo por 100 ml, más preferiblemente entre 0,05 y 0,5 gramos por 100 ml, más preferiblemente de 80 a 600 mg por 100 ml. El al menos un fosfolípido se proporciona preferiblemente para usar lecitina.

Vitaminas C, E, selenio

[0038] La presente composición involucra preferiblemente cantidades terapéuticamente eficaces de al menos uno y más preferiblemente al menos dos antioxidantes seleccionados de entre vitamina C, vitamina E y selenio.

[0039] La vitamina C, o un equivalente funcional de esta, puede estar presente en una cantidad que proporcione una dosis diaria en el rango de 20 a 2000 mg, en particular en el rango de 30 a 500 mg, más en particular en el rango de 75 a 150 mg. En una forma de realización, la vitamina C, o un equivalente funcional de esta, está presente en una cantidad en el rango de 20 a 2000 mg, en particular en el rango de 30 a 500 mg, más en particular en el rango de 75 a 150 mg por 100 ml de la composición.

[0040] El tocoferol y/o un equivalente de este (es decir, un compuesto con actividad vitamina E) puede estar presente en una cantidad para proporcionar una dosis diaria en el rango de 10 a 300 mg, en particular en el rango de 30 a 200 mg, más en particular en el rango de 35 a 100 mg, para prevenir el daño oxidativo en el sitio de la lesión como resultado de los AGPI alimentarios. En una forma de realización, el tocoferol y/o su equivalente está presente en una cantidad en el rango de 10 a 300 mg, en particular en el rango de 30 a 200 mg, más en particular en el rango de 35 a 100 mg por 100 ml de la composición . El término "tocoferol y/o un equivalente de este”, como se usa en esta descripción, comprende tocoferoles, tocotrienoles, derivados de estos aceptables desde el punto de vista farmacéutico y/o nutricional y cualquier combinación de estos. Los números anteriores se basan en equivalentes de tocoferoles reconocidos en la técnica.

[0041] Preferiblemente, la presente composición contiene selenio. La actividad antioxidante del selenio previene y/o inhibe ventajosamente daños en las áreas cerebrales. Preferiblemente, el presente uso proporciona la administración de una composición que comprende 0,01 y 5 mg de selenio por 100 ml de producto líquido, preferiblemente 0,02 y 0,1 mg de selenio por 100 ml de producto líquido. La cantidad de selenio administrada cada día es preferiblemente superior a 0,01 mg, más preferiblemente de 0,01 a 0,5 mg.

[0042] La composición puede comprender además material proteico. Si se incluye una fracción proteica, la fracción proteica comprende proteínas intactas, péptidos que pueden obtenerse mediante la hidrólisis de proteínas intactas y mediante síntesis, derivados de péptidos que comprenden más del 80 % en peso de aminoácidos. En el contexto de la invención, el nitrógeno del material de los nucleósidos y la colina no se calcularán como proteína.

[0043] En una forma de realización, se prefiere que la composición tenga un contenido de proteína de menos del 15 % de energía, más preferiblemente menos del 10 % de energía, de la manera más preferible menos del 5 % de energía del contenido total de energía de la composición. Los porcentajes de energía de los componentes se calculan utilizando los factores de cálculo 9 kcal por g de lípidos, 4 kcal por g de proteínas o g de carbohidratos digeribles, 2 kcal por g de fibra alimentaria y cero kcal para los demás componentes de la composición. En una forma de realización, se prefiere que la composición comprenda menos de 0,5 a 10 g de proteína por 100 ml, más preferiblemente menos de 1 a 6 gramos de proteína por 100 ml, más preferiblemente de 2 a 6 gramos de proteína/100 ml.

[0044] Se ha descubierto que no son necesarias cantidades aumentadas de manganeso y molibdeno en el método de acuerdo con la invención. La cantidad de manganeso consumido/administrado en el método de la invención es preferiblemente de menos de 300 pg por 100 ml, preferiblemente menos de 250 pg por 100 ml, más preferiblemente menos de 100 pg por 100 ml, en particular menos de 60 pg por 100 mililitros En una forma de realización, la cantidad de manganeso administrada al día es preferiblemente menos de 100 pg, más preferiblemente inferior a 50 pg. En una forma de realización, 100 ml de composición líquida según la invención comprenden menos de 0,05 mg de molibdeno, preferiblemente menos de 0,025 mg de molibdeno.

[0045] Se prefiere que la cantidad de taurina (incluidas las sales de taurina) sea inferior a 0,1 g, preferiblemente inferior a 0,05 g por dosis diaria. De manera adicional o alternativa, se prefiere que la cantidad de taurina (incluidas las sales de taurina) sea inferior a 5 mg, más preferiblemente inferior a 2,5 g por 100 g de composición. En una forma de realización, la composición comprende menos de 25 mg, más preferiblemente menos de 20 mg, de la manera más preferible menos de 15 mg de cisteína y taurina por 100 ml de la composición (líquida). En una forma de realización, la composición comprende menos de 25 mg, más preferiblemente menos de 20 mg, de la manera más preferible menos de 15 mg de cisteína por 100 ml de la composición (líquida). Se prefiere que la fracción proteica comprenda más del 70 % en peso de caseína o caseinatos, o hidrolizados de estos, y más preferiblemente el 80 % en peso o más, ya que las caseínas comprenden cantidades relativamente bajas de cisteína en comparación con otras fuentes de proteínas. Se prefiere además calentar la composición líquida para oxidar las moléculas de cisteína presentes en la proteína. Esto perjudica la disponibilidad biológica de cualquier cisteína residual presente en la fórmula. Un tratamiento térmico preferido implica la esterilización. Se prefiere mantener la temperatura por debajo de 135 °C, preferiblemente por debajo de 132 °C en combinación con un tiempo suficientemente largo para que la cisteína se oxide, es decir, más de 30 segundos, preferiblemente más de 40 segundos.

[0046] Preferiblemente, la composición nutricional comprende además cantidades de (v) fibra alimentaria eficaces desde el punto de vista terapéutico. La dosis diaria total de fibra alimentaria según la invención es preferiblemente de 1 a 15 g, más preferiblemente de 3 a 12 g, en particular de 4 a 10 g. En términos de contenido total de fibra en un producto para su uso de acuerdo con la invención, el contenido de fibra es preferiblemente de 1 a 15 g/100 g, en particular de 3 a 10 g/100 g de producto. La fibra alimentaria se puede seleccionar de entre las fibras solubles y las fibras insolubles. Como fibras solubles en el sentido de la presente invención se entienden preferiblemente aquellas que son al menos solubles en un 50 %, según un método descrito por L. Prosky et al, J. Assoc. Anal. Chem 71: 1017­ 1023, 1988. Las fibras se componen generalmente de una pluralidad de unidades de carbohidratos. Las fibras pueden ser carbohidratos no digeribles de cadena corta (sc) o carbohidratos no digeribles de cadena larga (Ic). Según el tipo de fibra, las regulaciones nacionales sobre los alimentos pueden tener diferentes definiciones de lo que constituye cadena corta o cadena larga. Como se usa en este documento, las fibras de cadena corta por lo general tienen un grado de polimerización de menos de 20, en particular de 2 - 12, más en particular de 3 - 9; las fibras de cadena larga tienen un grado de polimerización al menos un grado más alto que el especificado para las fibras de cadena corta, es decir, 10 o más, 13 o más o 20 o más.

[0047] Los pacientes de Parkinson pueden beneficiarse de las fibras productoras de butirato. Sin ceñirse a ninguna teoría, los inventores contemplan que estas fibras producen butirato que es absorbido por el cuerpo y proporciona un efecto neuroprotector relevante para mejorar la coordinación o el equilibrio corporal. Las fibras productoras de butirato son carbohidratos no digeribles que tienen butirato como producto de descomposición cuando son fermentados por la flora del colon. El término "fibra productora de butirato" se usa en este caso en particular para referirse a la fibra que es capaz de producir al menos 0,5 mmol o más, preferiblemente al menos 0,75 mmol o más, más preferiblemente al menos 1,0 mmol o más de butirato/gramo de fibra después de 24 horas de fermentación in vitro. En la práctica, la cantidad máxima de butirato que se puede producir en estas condiciones suele ser de 5 mmol o menos, en particular de 3,5 mmol o menos, más en particular de 2,5 mmol o menos de butirato/gramo de fibra después de 24 horas de fermentación in vitro.

[0048] La cantidad producible de butirato se puede determinar utilizando un modelo de colon semidinámico (por ejemplo, utilizando un sistema de intestino artificial TIM). En un modelo alternativo, se recolectan muestras fecales recientes de adultos sanos (sin problemas gastrointestinales; que no hayan consumido antibióticos durante las últimas 2 semanas anteriores a la recogida de muestras). Las muestras fecales se dividen en porciones más pequeñas y se mezclan con glicerol (10 %) en una cámara anaeróbica y se almacenan a -80 °C. En cada experimento, las muestras fecales de todos los donantes se agrupan en concentraciones iguales y se mezclan en una cámara anaeróbica, para evitar en la medida de lo posible la variación dependiente del sujeto en la microbiota adulta. Se inocula una fibra en condiciones de fermentación en las muestras y se deja que tenga lugar la fermentación. La producción de butirato se determina después de 24 h usando GC. En particular:

- el modelo utiliza muestras de cuatro adultos sanos (por ejemplo, tres donantes de sexo masculino y una donante de sexo femenino) de 19 a 35 años;

- la fibra se inocula en una suspensión de heces a un contenido de 200 mg/6 ml de suspensión de heces; - la suspensión de heces se prepara mezclando heces con un medio de fermentación a razón de 1:5 v/v; - medio de fermentación: agua de peptona tamponada 3,0 g/l, extracto de levadura 2,5 g/l, triptona 3,0 g/l, L-cisteína-HCl 0,4 g/l, sales biliares 0,05 g/l, K2HP04.3H202,6 g/l, NaHC030,2 g/l, NaCl 4,5 g/l, mgS04.7H20 0,5 g/l, CaCl2. 2H20 0,3 g/l, FeS04.7H20 0,005 g/l. Los ingredientes se pueden agregar uno por uno en 800 ml de agua, el pH se ajusta a 6.3±0.1 con K2HP04 o NaHC03 y el volumen se llena hasta 1 litro. El medio se esteriliza durante 15 minutos a 121 °C;

- la temperatura de fermentación es de 37 °C.

[0049] La dosis total de fibra productora de butirato de acuerdo con la invención es preferiblemente de 1 a 15 g por dosis, más preferiblemente de 2 a 10 g por dosis, en particular de 3 a 8 g por dosis. El contenido total de fibra productora de butirato, basado en el contenido total de fibra en una composición para usar de acuerdo con la invención, es de hasta el 100 % en peso, en particular 99 % en peso o menos, más en particular 95 % en peso o menos. El contenido total de fibra productora de butirato, basado en el contenido total de fibra, es preferiblemente de al menos el 50 % en peso %, basado en el contenido total de fibra, preferiblemente al menos 70 % en peso %, más preferiblemente al menos 80 % en peso, en particular 90 % en peso o más.

[0050] Preferiblemente, la composición nutricional su uso según la invención comprende fibra alimentaria en una cantidad suficiente para producir 0,3-5 mmol, más preferiblemente 0,5-3,5, en particular 0,7-3, más en particular 1,0­ 2,5 mmol de butirato por gramo de fibra, usando un modelo de colon semidinámico descrito anteriormente.

[0051] Las fibras productoras de butirato solubles preferidas incluyen fructooligosacáridos (FOS), galactooligosacáridos (GOS), salvado y dextrinas (por ejemplo, Nutriose®). Son muy solubles y constituyen un sustrato adecuado para que la flora del colon produzca butirato, cuando se fermentan. Los salvados preferidos son salvado de avena, salvado de arroz y salvado de trigo. En una forma de realización particularmente preferida, se utilizan varias fibras productoras de butirato, tales como un FOS y una dextrina más, opcionalmente, salvado y/o GOS; o FOS y salvado más opcionalmente dextrina y/o GOS. Se han logrado buenos resultados con una combinación de FOS de cadena corta, FOS de cadena larga, salvado de avena, GOS y dextrina. En otra forma de realización preferida, la combinación forma parte de una composición nutricional que comprende una o más fibras productoras de butirato pero que está esencialmente libre de GOS.

[0052] Las fibras productoras de butirato insolubles preferidas incluyen almidón resistente, tal como almidón con alto contenido de amilosa o almidón retrogradado o RS3. El almidón resistente es adecuado para proporcionar una producción de butirato particularmente alta por gramo de almidón resistente. El almidón resistente se define como aquellos almidones que permanecen intactos después de la digestión durante 2 horas en el sistema de Englyst et al Am J Clin Nutr 1999, 69, 448-454. Los almidones resistentes disponibles en el mercado son Actistar y Novelose 330. Los almidones resistentes preferidos son los almidones resistentes de arroz o maíz. En una forma de realización específica, el almidón resistente comprende más del 50 % en peso de polímeros lineales de alfa 1,4-glucanos que tienen un grado de polimerización entre 10 y 35. Algunas fuentes adecuadas de tales almidones resistentes son frijoles, guisantes, patatas tratadas térmicamente y cereales tratados térmicamente. La presencia simultánea en el colon de almidón resistente y beta glucanos, en combinación con un xilano, estimulará el crecimiento del tipo adecuado de especies de bacterias generadoras de butirato.

[0053] En una forma de realización preferida, la composición su uso de acuerdo con la invención comprende cantidades terapéuticamente eficaces de vitamina D. Una ventaja de la vitamina D es la reducción del deterioro del equilibrio y del riesgo de caídas. En particular, los inventores se han dado cuenta de que los pacientes de Parkinson se benefician de la vitamina D con respecto a estos efectos. Se han obtenido buenos resultados con vitamina D3 (colecalciferol, calcifediol, calcitriol). Si está presente, la concentración de vitamina D, preferiblemente de vitamina D3, en una composición nutricional para su uso de acuerdo con la invención está normalmente en el rango de 5 a 110 pg/100 g, en particular en el rango de 6 a 85 pg/100 g, preferiblemente en el rango de 10-50 pg/100 g, más preferiblemente 15-45 pg/100 g de producto. En el contexto de la invención, 1 UI de vitamina D es el equivalente biológico de 0,025 pg. Por lo tanto, 1000 UI es el equivalente biológico de 25 pg.

[0054] La composición para su uso según la invención normalmente proporciona vitamina D en una dosis diaria de hasta aproximadamente 50 pg, preferiblemente 25-40 pg. Para un producto líquido, el contenido de vitamina D3 es preferiblemente de 5 a 85 pg por dosis unitaria. La dosis unitaria de un producto líquido tiene preferiblemente un volumen de 50 a 250 ml, en particular de 100 a 150 ml.

[0055] En una forma de realización, la composición según la invención comprende, por dosis diaria o por 125 ml de líquido (preferiblemente agua):

200 - 900 mg, preferiblemente 300 - 800 mg de EPA;

900 - 1500 mg, preferiblemente 950 - 1300 mg, más preferiblemente alrededor de 1200 mg de DHA;

50 - 600 mg, preferiblemente 60 - 200 mg, más preferiblemente alrededor de 106 mg de fosfolípidos;

200 - 600 mg, preferiblemente 300 - 500 mg, más preferiblemente alrededor de 400 mg de colina;

400 - 800 mg, preferiblemente 500 - 700 mg, más preferiblemente alrededor de 625 mg de uridina y/o UMP (uridina monofosfato);

20 - 60 mg, preferiblemente 30 - 50 mg, más preferiblemente alrededor de 40 mg de vitamina E (alfa-TE);

60 - 100 mg, preferiblemente 60 - 90 mg, más preferiblemente alrededor de 80 mg de vitamina C;

40 - 80 |jg, preferiblemente 45 - 65 jg , más preferiblemente alrededor de 60 jg de selenio;

1 - 5 jg , preferiblemente 2 - 4 jg, más preferiblemente alrededor de 3 jg de vitamina B12;

0.5 - 3 mg, preferiblemente 0,5 - 2 mg, más preferiblemente alrededor de 1 mg de vitamina B6; y

200 - 600 jg, preferiblemente 300 - 500 jg, más preferiblemente alrededor de 400 jg de ácido fólico.

[0056] La composición líquida anterior según una forma de realización de la invención se administra en dosis de 125 ml al día. En una forma de realización preferida, preferiblemente la composición nutricional comprende además cantidades terapéuticamente eficaces de (v) fibra alimentaria, preferiblemente fibra productora de butirato, más preferiblemente que comprende uno o más de entre galacto-oligosacáridos y fructanos. La fibra alimentaria de acuerdo con la invención es preferiblemente de 1 a 15 g, más preferiblemente de 3 a 12 g, en particular de 4 a 10 g al día o por 125 ml de composición líquida. Preferiblemente, la composición nutricional comprende además cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de (vi) vitamina D, preferiblemente 10-50 jg , preferiblemente 25-40 jg al día o por 125 ml de producto líquido.

[0057] Se ha descubierto que la composición que se acaba de detallar mejora la eficacia de la levodopa en el tratamiento de las habilidades motoras en mamíferos que muestran varios síntomas de la enfermedad de Parkinson, particularmente en términos de coordinación motora y equilibrio, y equilibriocepción.

[0058] Las habilidades motoras son movimientos y acciones de los músculos. Se clasifican en dos grupos: motricidad gruesa y motricidad fina. La motricidad gruesa implica el movimiento de los brazos, las piernas, los pies o todo el cuerpo. Esto incluye acciones como correr, gatear, caminar, nadar y otras actividades que involucran músculos más grandes. La motricidad fina son los pequeños movimientos que ocurren en las manos, las muñecas, los dedos de las manos, los pies, los dedos de los pies, los labios y la lengua. Son las acciones más pequeñas que se realizan, como recoger objetos entre el pulgar y el índice, usar un lápiz para escribir, sostener un tenedor y usarlo para comer, y otras tareas de los músculos pequeños que se dan a diario. Una forma adecuada de evaluar la capacidad de equilibrio de un mamífero (en condiciones de laboratorio) y, por lo tanto, también de evaluar si un determinado tratamiento tiene un efecto sobre una perturbación en el equilibrio, es la prueba del rotarod, como se describe en detalle en los Ejemplos.

[0059] En los humanos, las habilidades de equilibrio se miden con la escala de equilibrio de Berg (BBS), que generalmente se considera el estándar. En un aspecto, el tratamiento implica la mejora de la coordinación y del equilibrio según la BBS. La BBS es una medida clínica de la capacidad de equilibrio estático y dinámico de una persona. La prueba dura entre 15 y 20 minutos y comprende un conjunto de 14 tareas simples relacionadas con el equilibrio, que van desde ponerse en pie desde una posición sentada hasta mantenerse sobre un pie. El grado de éxito en el logro de cada tarea recibe una puntuación de cero (incapaz) a cuatro (independiente), y el resultado final es la suma de todas las puntuaciones (http://aabf.info/pdf/Berq Balance Scale.pdf). La BBS es una medida validada para evaluar las habilidades de equilibrio en trastornos neurológicos como la enfermedad de Parkinson (Qutubuddin et al., Arch Phys Med Rehabil., 2005, abril; 85(4): 789-92. Otras pruebas incluyen la prueba de movilidad de Tinetti, que evalúa también el riesgo de caídas en la enfermedad de Parkinson (Kegelmeyer et al., 2007, Phys Ther. 87(10): 1369-78. Las habilidades motoras finas se pueden evaluar en humanos mediante un panel equipado con sensores de tiempo digitales, que recopilan información sobre la velocidad y la precisión durante tareas específicas de destreza, como se describe en Smith et al., Neurology, 53(7): 1458-1458, 1999.

[0060] “Coordinación”, como se usa en este documento, generalmente significa coordinación de las extremidades La coordinación de las extremidades se puede determinar mediante la evaluación de la capacidad del paciente para realizar correctamente movimientos alternos rápidos y de un punto a otro. Los movimientos de punto a punto son movimientos realizados con el mismo dedo índice para llevarlo de un punto a otro, por ejemplo, desde la propia nariz del sujeto hasta el dedo extendido de quien realiza el examen.

[0061] En el contexto de la presente invención, "equilibriocepción" también podría denominarse "sentido del equilibrio". El presente uso es, por tanto, para mejorar la equilibriocepción, que también puede expresarse como fomentar, dar apoyo o estimular la equilibriocepción. La equilibriocepción puede evaluarse a través de una prueba de la capacidad de equilibrio como se acaba de describir.

[0062] La presente invención se ha descrito anteriormente en referencia a una serie de formas de realización ejemplares.

Ejemplo

[0063] El propósito del estudio que sigue fue examinar si existen interacciones y/o efectos aditivos entre la dieta de la invención y la levodopa en el modelo de rotenona intraestriatal de la enfermedad de Parkinson en ratones.

Material y métodos

Ratones

[0064] Se alojaron cuarenta y ocho ratones C57BL/6J de siete semanas de edad (Charles River, Países Bajos) a temperatura ambiente en un ciclo de luz/oscuridad de 12 horas. Se les proporcionó comida y agua ad libitum. Todos los procedimientos con animales fueron aprobados por el Comité Ético de Investigación Animal de la Universidad de Utrecht, Países Bajos (número DEC 2014.1.12.106).

Cirugía

[0065] Los ratones se sometieron a cirugía estereotáctica bajo anestesia con isoflurano: se perforó un orificio en el cráneo y se insertó una cánula en el cuerpo estriado derecho en las siguientes coordenadas estereotáxicas: AP 0,4, ML -2,0 a partir del bregma y DV -3,3 por debajo de la duramadre. A los animales tratados con rotenona se les inyectaron 5,4 pg de solución de rotenona recién preparada (disuelta en 2 pl de DMSO). A los animales tratados con placebo se les inyectó el vehículo (2 pl de DMSO). 93 días después de la cirugía, los ratones fueron sacrificados por decapitación.

Prueba de función motora

[0066] El desempeño motor de cada ratón se evaluó en la prueba de Rotarod como se describe en Inden et al. "Neurodegeneration of mouse nigrostriatal dopaminergic system induced by repeated oral administration of rotenone is prevented by 4-phenylbutyrate, a chemical chaperone" J. Neurochem. 101, 1491-1504 (2007). Brevemente, los ratones se colocaron en una varilla aceleradora con velocidades que comenzaban en 2 r.p.m. y aumentaban gradualmente hasta 20 r.p.m. El tiempo hasta la primera caída se registró durante un máximo de 300 s. La prueba se realizó para observar el desarrollo de los síntomas con el paso del tiempo, la recuperación funcional durante la intervención nutricional y los efectos del tratamiento con levodopa oral.

Eficacia de la levodopa en el modelo de ratón con rotenona

[0067] Para investigar si el tratamiento con levodopa podría mejorar de manera efectiva la función motora en el modelo de ratón con rotenona intraestriatal para la enfermedad de Parkinson, se hizo una prueba a todos los animales en el rotarod (como se describe a continuación) 1 h después de la administración oral de levodopa (20 mg/kg) o de vehículo. 30 min antes de la administración oral de levodopa, todos los animales recibieron una inyección subcutánea de benserazida, un inhibidor de la descarboxilasa (6,25 mg/kg). Las pruebas en el rotarod se realizaron los días 26 y 27 después de la cirugía, es decir, cuando las disfunciones motoras inducidas por la rotenona estaban completamente desarrolladas y antes de comenzar la intervención nutricional. El orden de los tratamientos (levodopa y solución salina) se equilibró según un diseño en cuadrado latino (Tabla 1).

Tabla 1: Especificación del orden de los tratamientos recibidos por los animales según un diseño en cuadrado latino.

[0068] La intervención nutricional combinada con levodopa oral demostró tener efectos aditivos en el desempeño en el rotarod. El desempeño se evaluó en el rotarod (tiempo en el rotarod) 60 minutos después de la administración de 20 mg/kg de levodopa oral o vehículo los días 26 y 27 después de la cirugía. La inyección de rotenona en el cuerpo estriado afectó negativamente a la capacidad de los animales para permanecer en la varilla (F(1,92)=130,5, p<0,0001), en comparación con los ratones tratados con el placebo. Hubo un efecto global de la levodopa en el desempeño motor de los animales (F(1,92)=24,77, p<0,0001 para la prueba en el rotarod y un efecto de interacción entre la cirugía y el tratamiento (F(1,92)=27,66, p <0,0001).

Dietas

[0069] Los ratones recibieron la dieta de control (DC) o la dieta activa (DA), comenzando 28 días tras la cirugía, es decir, cuando los síntomas motores se estancaron, y continuando durante la duración del experimento. Los animales se dividieron en cuatro grupos de 12 animales (Placebo+DC, Placebo+DA, Rotenona+DC y Rotenona+DA). Las dietas isocalóricas fueron producidas por Research Diet Services (Wijk bij Duurstede, Países Bajos) y se basaron en la DC, es decir, el alimento estándar para para roedores de laboratorio AIN-93M30 con un 5 % de lípidos. Para la dieta activa se añadió uridina (0,51 g/100g de alimento dieta) y parte de la mezcla lipídica de la dieta control se sustituyó por aceite de pescado, aportando DHA (0,75 g/100g de alimento) y EPA (0,50 g/100g de alimento). La DA también contenía cantidades suplementarias de colina, fosfolípidos, selenio, ácido fólico y vitaminas B6, B12, C, D y E, por encima de los niveles estándar en la dieta de control. Además, las fibras de celulosa de la DC fueron reemplazadas por fibras prebióticas (1,5 g/100 g de alimento de GOS, 0,17 g/100 g de alimento de IcFOS (cadena larga), 1,67 g/100 g de alimento de scFOS (cadena corta) y 1,67 g/100 g de Nutriose alimentaria) en la DA.

Tabla 2: Com osiciones de las dietas ex erimentales

Diseño experimental

[0070] Desde el día 65 tras la cirugía en adelante, hasta el día 93 (4 semanas en total), los animales de los 4 grupos diferentes se sometieron a pruebas de función motora una vez por semana después de la administración oral de solución salina o una de las tres dosis de levodopa (5, 10 y 20 mg/kg), cuyo orden se equilibró según un diseño en cuadrado latino (Tabla 3). Todos los animales recibieron una inyección subcutánea de benserazida, un inhibidor de la descarboxilasa(6,25 mg/kg), 30 minutos antes de la administración oral de levodopa. La prueba en el rotarod se inició 1,5 horas después de la administración de benserazida y se realizó como se describe a continuación.

Tabla 3: Especificación del orden de tratamientos recibidos por los diferentes grupos experimentales según un diseño en cuadrado latino.

Análisis estadístico

[0071] Los resultados experimentales se expresan como media ± EEM. Las diferencias entre los grupos se analizaron estadísticamente con un ANOVA de tres factores, analizando los efectos de los factores entre sujetos, a saber, la cirugía (rotenona vs vehículo) y la dieta (DC vs DA), el factor intrasujeto, a saber, el tratamiento (dosis de levodopa 0, 5, 10 y 20 mg/kg), y sus interacciones. Los ANOVA fueron seguidos de una prueba de comparaciones múltiples de Tukey cuando fue apropiado. Para el desempeño en la prueba de rotarod a lo largo del tiempo, los datos se analizaron con un modelo lineal general ANOVA de medidas repetidas con el tiempo como factor intrasujeto y la cirugía y la dieta como factores entre sujetos. Los resultados se consideraron estadísticamente significativos cuando p<0,05. Los análisis se realizaron con SPSS 22.0.

Resultados

[0072] Entre el día 65 y el día 93, se evaluaron las relaciones dosis-respuesta de la levodopa en el comportamiento en animales tratados con rotenona y con placebo. Los animales tratados con rotenona exhibieron un deterioro del desempeño en el rotarod en comparación con los animales tratados con placebo (F(1.176)=425,95, p<0,0001). Los datos del rotarod mostraron que hubo un efecto de la dieta (F(1176)=48,28, p<0,0001) y del tratamiento con levodopa (F(3176)=10,40, p<0,0001). Además, hubo efectos de interacción entre la cirugía y la dieta (F(1176)=44,89, p<0,0001) y entre la cirugía y el tratamiento con levodopa (F(3176)=8,94, p<0,0001). Los análisis post-hoc mostraron que los animales tratados con rotenona con la DC tuvieron un desempeño significativamente mejor en el rotarod cuando se trataron con la dosis más alta de levodopa (20 mg/kg) en comparación con los animales tratados con la dosis más baja (5 mg/kg) o con solución salina (p<0,01). Entre los ratones inyectados con rotenona con la DA, los animales tratados con 10 o 20 mg/kg de levodopa tuvieron una mejor capacidad para permanecer en la varilla que los animales que recibieron solución salina o 5 mg/kg (p<0,001), lo que demuestra un efecto beneficioso aditivo de la levodopa.

[0073] Los ratones tratados con rotenona con la DA tuvieron un desempeño significativamente mejor que los animales con dieta DC en todas las dosis (0, 5, 10 y 20 mg/kg) (todas p < 0,05). Los resultados se representan en la figura 1.

Discusión

[0074] El estudio mostró los efectos terapéuticos de una intervención nutricional específica que contiene los precursores de fosfátidos uridina y DHA más nutrientes adicionales que aumentan la síntesis de fosfolípidos de la membrana y fibras prebióticas, en un modelo de ratón con EP, administrada después de la inducción completa de los síntomas motores.

[0075] El presente estudio demuestra que la DA combinada con el tratamiento con levodopa oral es más eficaz para reducir la deficiencia motora (desempeño en el rotarod) que la dieta o la levodopa administradas por separado. La ingesta combinada de precursores de fosfolípidos, incluida la uridina y los ácidos grasos omega-3 como el DHA, puede aumentar las concentraciones de fosfolípidos cerebrales, las concentraciones de proteínas sinápticas, el crecimiento de neuritas, la formación de espinas dendríticas y la neurotransmisión dopaminérgica. La combinación de 5 mg/día de levodopa junto con la dieta de intervención (Da ) produjo un desempeño en el rotarod mejor que el observado incluso con 20 mg/día de levodopa sola. Debido a los efectos descritos, la combinación de la dieta con el fármaco permite una reducción de las dosis administradas a los pacientes, reduciendo los efectos secundarios negativos y contribuyendo a un uso beneficioso más prolongado del fármaco.

[0076] También se descubrió que la DA tiene efectos beneficiosos sobre el funcionamiento gastrointestinal en el modelo de rotenona para la enfermedad de Parkinson (no se muestra), y podría formularse la hipótesis de que mejora la absorción y la biodisponibilidad de la levodopa con un tratamiento a largo plazo. Dado que la mayoría de los pacientes con EP toman levodopa por vía oral, se requiere un buen funcionamiento del tubo digestivo para absorber el fármaco a un ritmo beneficioso. Varios estudios clínicos revelaron que dosis únicas o múltiples de levodopa indujeron un retraso en el vaciado gástrico en voluntarios sanos y que, por lo tanto, podría exacerbar la disfunción gastrointestinal ya presente en pacientes con EP. La levodopa se absorbe a través del duodeno y el yeyuno proximal mediante un gran sistema transportador de aminoácidos neutros. El uso crónico de levodopa oral se asocia con fluctuaciones en la respuesta debido en parte a la tasa lenta de vaciado gástrico. El retraso en el vaciado gástrico en pacientes con EP retrasa la absorción adecuada de levodopa, lo que conduce a concentraciones más bajas del fármaco en el plasma sanguíneo y la aparición de fluctuaciones intermitentes llamadas “on-off”. Estas fluctuaciones motoras, junto con las discinesias, se consideran los principales efectos secundarios del tratamiento a largo plazo con levodopa.

[0077] En resumen, se demostró que la presente dieta activa (DA) disminuye una amplia gama de síntomas similares a los de la enfermedad de Parkinson en un modelo de ratón con rotenona. La DA redujo la disfunción gastrointestinal y no influyó negativamente en el efecto biológico del tratamiento con levodopa. De hecho, la DA tuvo un efecto aditivo a la levodopa sobre el desempeño motor. Los resultados anteriores sugieren que esta intervención nutricional puede conferir beneficios clínicos a los pacientes que reciben tratamiento con levodopa. Debido a los efectos aditivos descritos, la combinación de la dieta con el fármaco puede permitir una reducción de las dosis administradas a los pacientes, reduciendo los efectos secundarios negativos y contribuyendo a un uso beneficioso más prolongado del fármaco.

Claims (14)

REIVINDICACIONES

1. Composición para su uso en (a) el tratamiento del deterioro de las habilidades motoras en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson; (b) la mejora de la eficacia de la levodopa (L-DOPA) en el tratamiento del deterioro de las habilidades motoras en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson (EP); y/o (c) la reducción de los movimientos involuntarios asociados con la L-DOPA seleccionados del grupo que consiste en movimientos coreiformes, distónicos y discinéticos, para tratar el deterioro de las habilidades motoras en un mamífero que padece la enfermedad de Parkinson, que comprende la administración conjunta al sujeto de L-DOPA y una composición que comprende cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de:

(i) al menos uno de entre uridina, citidina o sales, fosfatos, formas aciladas o ésteres de estas;

(ii) al menos uno de entre ácido docosahexaenoico (22:6; DHA), ácido eicosapentaenoico (20:5; EPA) y ácido docosapentaenoico (22:5; DPA);

(iii) colina, o sus sales o ésteres; y

(iv) al menos una vitamina B seleccionada de entre las vitaminas B6, B9 y B12.

2. Composición para su uso según la reivindicación 1, donde la dosis de L-DOPA se reduce en más del 50 % en comparación con la dosis de L-DOPA si la composición no se administra conjuntamente.

3. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el sujeto es un paciente con EP que ha comenzado a recibir tratamiento con L-DOPA menos de 5 años antes del inicio de dicha administración conjunta, más preferiblemente menos de 3 años antes, más preferiblemente menos de 2 años antes, de la manera más preferible menos de 1 año antes del inicio de dicha administración conjunta.

4. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el tratamiento del deterioro de las habilidades motoras implica o incluye mejorar la coordinación motora y el equilibrio, y estimular la equilibriocepción.

5. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende (iv) al menos dos vitaminas B seleccionadas de entre las vitaminas B6, B9 y B12.

6. Composición para su uso según la reivindicación 5, que comprende (iv) vitamina B6, B9 y B12.

7. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de (v) fibra alimentaria, preferiblemente fibra productora de butirato.

8. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de (vi) vitamina D.

9. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende 500 - 5000 mg de DHA+EPA al día.

10. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la composición proporciona de 0,1 a 6 g al día de uno o más de uridina, citidina o sales, fosfatos o ésteres de estas, calculados como uridina y citidina, preferiblemente 0,1 - 6 g al día de uno o más de uridina o sales, fosfatos o ésteres de estas, calculados como uridina.

11. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la composición proporciona, al día, más de 50 mg de colina, o sales o ésteres de esta, calculados como colina.

12. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la composición comprende además cantidades eficaces desde el punto de vista terapéutico de al menos uno y más preferiblemente al menos dos antioxidantes seleccionados de entre vitamina C, vitamina E y selenio.

13. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la composición comprende además al menos un fosfolípido.

14. Composición para su uso según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la composición comprende, por 125 ml de líquido:

200 - 900 mg, preferiblemente 300 - 800 mg, de EPA;

900 - 1500 mg, preferiblemente 950 - 1300 mg, de DHA;

50 - 600 mg, preferiblemente 60 - 200 mg, de fosfolípidos;

200 - 600 mg, preferiblemente 300 - 500 mg, de colina;

400 - 800 mg, preferiblemente 500 - 700 mg, de uridina y/o UMP;

20 - 60 mg, preferiblemente 30 - 50 mg, de vitamina E (alfa-TE);

60 - 100 mg, preferiblemente 60 - 90 mg, de vitamina C;

40 - 80 |jg, preferiblemente 45 - 65 jg, de selenio;

1 - 5 jg, preferiblemente 2 - 4 jg , de vitamina B12;

0.5 - 3 mg, preferiblemente 0,5 - 2 mg, de vitamina B6; y

200 - 600 jg, preferiblemente 300 - 500 jg , de ácido fólico.