ES2932248T3

ES2932248T3 - Combinaciones sinérgicas antiinflamatorias que comprenden ácido graso omega-3, licopeno de tomate, luteína y ácido carnósico

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Publication number: ES2932248T3
Application number: ES14778751T
Authority: ES
Inventors: Rachel Levy; Nurit Hadad; Tanya Sedlov; Morris Zelkha; Masha Sapojnik
Original assignee: Lycored Ltd
Current assignee: Lycored Ltd
Priority date: 2013-04-04
Filing date: 2014-04-03
Publication date: 2023-01-17
Anticipated expiration: 2034-04-03
Also published as: US20160303063A1; EP2981256B1; JP6803898B2; CN105407885A; US20180153843A1; US10154980B2; CN105407885B; US9901562B2; WO2014162313A1; JP2019052168A; JP2016519101A; EP2981256A4; AU2014246728B2; EP2981256A1; AU2014246728A1

Abstract

Esta invención está dirigida a composiciones que tienen combinaciones sinérgicas de ácidos grasos omega-3 tales como OMEGA-3 con licopeno de extracto de tomate y, opcionalmente, con ácido carnósico y/o luteína. Más específicamente, la presente invención proporciona composiciones que tienen combinaciones sinérgicas de los compuestos antes mencionados, que pueden usarse, entre otras cosas, para inhibir/suprimir la inflamación mediante la supresión de la expresión de mediadores antiinflamatorios o mediante la supresión de la secreción de antiinflamatorios. mediadores inflamatorios de macrófagos en un sitio de inflamación. (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)

Description

DESCRIPCIÓN

Combinaciones sinérgicas antiinflamatorias que comprenden ácido graso omega-3, licopeno de tomate, luteína y ácido carnósico

Campo de la invención

Esta invención se refiere, entre otros, a una composición que comprende una combinación sinérgica de un ácido graso omega-3, que comprende ácido eicosapentaénico (EPA) y ácido docosahexaenoico (DHA), con licopeno, luteína y ácido carnósico. Más específicamente, la presente invención proporciona una composición que comprende una combinación sinérgica de los compuestos mencionados anteriormente, que puede usarse, entre otras cosas, para inhibir/suprimir la inflamación.

Antecedentes de la invención

El proceso inflamatorio, que forma una parte importante del sistema inmunológico inespecífico, se caracteriza por un conjunto complejo de cambios químicos y celulares que son esenciales para la defensa del hospedero frente a agentes microbianos y otros factores ambientales potencialmente dañinos. Sin embargo, en muchos casos, la inflamación puede desencadenarse de manera inapropiada y/o puede persistir hasta un grado en que se vuelve perjudicial para el hospedero. En tales casos, puede ser necesario inhibir o prevenir el desarrollo de uno o más aspectos del proceso inflamatorio, en particular, en casos de enfermedades inflamatorias no infecciosas.

Se demostró que un gran número de diferentes mediadores químicos intervienen en el desarrollo y control del proceso inflamatorio. Estudios recientes realizados por diversos laboratorios diferentes implican al óxido nítrico (NO) como un modulador importante de una variedad de trastornos inflamatorios agudos y crónicos, que incluyen diversos tipos de artritis, enfermedades gastrointestinales, afecciones inflamatorias del sistema nervioso central y determinadas formas de asma. En consecuencia, se propuso que la inhibición de la producción de NO podría proporcionar un mecanismo terapéutico útil para el tratamiento y/o atención de estos trastornos inflamatorios. Además, también se demostró que la inhibición de la síntesis de NO es útil en algunas afecciones o estados que no son de naturaleza inflamatoria mayormente. De este modo, por ejemplo, se descubrió que la inhibición de la síntesis de NO reduce la captación de glucosa en el tejido de las extremidades en individuos con diabetes tipo 2 durante el ejercicio.

La producción de NO in vivo depende de una familia de enzimas sintasas de óxido nítrico (NOS), que incluye la sintasa de óxido nítrico inducible (I-NOS), que se activa por una gran cantidad de estímulos inmunológicos diferentes, que incluyen lipopolisacáridos (LPS), interferón gamma e interleucina 1 (IL-1).

Además, también se demostró que varios otros compuestos, incluyendo varios productos naturales, inhiben la producción de NO. El último grupo incluye compuestos tales como luteína [Rafi M.M. y col. Mol Nutr Food Res. Marzo de 2007;51(3):333-40; Choi, J.S. Nutrition. Junio de 2006;22(6):668-71] y licopeno [Rafi, M.M. y col. J Food Sci. Enero de 2007;72(1):S069-74]. Sin embargo, se demostró que la eficacia y la potencia de muchos productos naturales inhibidores del NO no son particularmente altas. Por tanto, existe la necesidad de composiciones de origen natural mejoradas que inhiban la producción de NO.

El documento WO 2011/057183 describe composiciones que comprenden EPA/DHA, licopeno y ácido carnósico para su uso como complemento alimenticio en el tratamiento de xeroftalmia.

FENG-YAO TANG Y COL: “ Concomitant consumption of lycopene and fish oil inhibits tumor growth and progression in a mouse xenograft model of colon cancer” , MOLECULAR N^uTRITION & FOOD RESEARCH, vol. 56, n.° 10, 7 de septiembre de 2012 (07-09-2012), páginas 1520-1531 describe una complementación concomitante de licopeno y EPA que suprime significativamente la inflamación tumoral en ratones que portan de tumores.

L. VERSCHUREN Y COL. “A Dietary Mixture Containing Fish Oil, Resveratrol, Lycopene, Catechins, and Vitamins E and C Reduces Atherosclerosis in Transgenic Mice” , THE JOURNAL OF NUTRITION, vol. 141, n.° 5, 16 de marzo de 2011 (16 03-2011), páginas 863-869 describe una mezcla que contiene aceite de pescado (que incluye EPA y DHA), resveratrol, licopeno, catequinas y vitaminas E y C que reducen la inflamación y la lesión de ateroesclerosis en ratones transgénicos.

GARCIA-ALONSO F J Y COL: “ Effect of consumption of tomato juice enriched with n-3 polyunsaturated fatty acids on the lipid profile, antioxidant biomarker status, and cardiovascular disease risk in healthy women” , EUROPEAN JOURNAL OF NUTRITION, vol. 51, n.° 4, 14 de julio de 2011 (14-07-2011), páginas 415-424 describe la adición de ácidos grasos poliinsaturados n-3 al zumo de tomate (que contiene licopeno), dando como resultado un efecto antioxidante sinérgico y la reducción del riesgo de enfermedad cardiovascular.

YASUNO FUMIHIKO Y COL: “ Combination of Antioxidant Supplements Improved Cognitive Function in the Elderly” , JOURNAL OF ALZHEIMER'S DISEASE, vol. 32, n.° 4, agosto de 2012 (08-2012), páginas 895-903 describe la combinación de los antioxidantes AGPI omega-3 (en forma de aceite de pescado), licopeno (en forma de extracto de tomate) y extractos secos de hojas de Ginkgo biloba, dando como resultado una potenciación de sus propiedades antioxidantes y una mejora en la función cognitiva de ancianos.

NURIT HADAD Y COL: “The synergistic anti-inflammatory effects of lycopene, lutein, [beta]-carotene, and carnosic acid combinations via redox-based inhibition of NF-[kappa]B signaling” , ^fR^eE RADICAL BIOLOGY AND MEDICINE, vol. 53, n.° 7, octubre de 2012 (10-2012), páginas 1381-1391 describen los efectos antiinflamatorios sinérgicos de combinaciones de licopeno, luteína y ácido carnósico. Se describe una razón molar de luteína con respecto a licopeno con respecto a ácido carnósico de 1:1:2.

T Ohata Y COL: “ Suppression of nitric oxide production in lipopolysaccharide-stimulated macrophage cells by omega 3 polyunsaturated fatty acids” ., Jpn J Cancer Res., vol. 88, n.° 3, 1 de marzo de 1997 (01-03-1997), páginas 234-237 describe los ácidos grasos omega-3 DHA, EPA y ácido alfa-linolénico que tienen actividad antiinflamatoria inhibiendo la producción de NO.

Es un propósito de la presente invención proporcionar una composición que pueda usarse para inhibir la producción de uno o más mediadores inflamatorios claves, tal como superóxido NO o TNF-alfa, como un medio para tratar o atender estados y procesos patológicos en los que están implicados dichos mediadores.

Otro propósito de la invención es proporcionar una composición que sea capaz de inhibir la producción de los mediadores inflamatorios antes mencionados con mayor eficacia y/o potencia que los compuestos y composiciones descritos en la técnica anterior.

Resumen de la invención

En una realización, la presente invención proporciona una composición que comprende un ácido graso omega-3, ácido carnósico, licopeno de tomate y luteína, en donde dicho ácido graso omega-3 comprende ácido eicosapentaénico (EPA) y ácido docosahexaenoico (DHA), en donde dicha luteína, licopeno, ácido carnósico, EPA y DHA están en una cantidad de 0,1 mM, 0,1 mM, 0,2 mM, 20 mM y 10 mM, respectivamente. En otra realización, la presente invención proporciona además que la composición comprende además fitoeno, fitoflueno, betacaroteno, un tocoferol, fitoesteroles o cualquier combinación de los mismos.

En ejemplos adicionales descritos en el presente documento no según la invención reivindicada, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate es de desde 2000:1 hasta 10:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de ácido graso omega-3 con respecto a ácido carnósico es de desde 1500:1 hasta 2:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate con respecto a ácido carnósico es de desde 2000:1:5 hasta 2:1:1.

En otra modalidad, la presente invención proporciona además que la composición tiene un efecto antiinflamatorio sinérgico.

En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar a un sujeto que padece inflamación, que comprende la etapa de administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición que comprende luteína, licopeno, ácido carnósico, EPA y DHA están en una cantidad de 0,1 mM, 0,1 mM, 0,2 mM, 20 mM y 10 mM, respectivamente, tratando de este modo a un sujeto que padece inflamación. En otra realización, la presente invención proporciona además que el tratamiento de un sujeto que padece inflamación es la inhibición de la producción de NO, PGE2, TNF-alfa o cualquier combinación de los mismos.

Breve descripción de los dibujos

Figura 1. Gráficos de barras (A y B) que muestran la inhibición dependiente de la dosis de la producción de NO en células por omega-3. Las concentraciones de EPA y DHA (en micromolar) en 1A son las siguientes:

Muestra EPA DHA

1 3170 1540

2 1585 770

3 792,5 385

4 630 308

5 315 154

6 157,5 77

7 78,75 38,5

8 39,375 19,25

9 19,6875 9,625

Las concentraciones de EPA y DHA (en micromolar) en 1B son las siguientes:

Muestra EPA DHA

4 630 308

5 315 154

6 157,5 77

7 78,75 38,5

8 39,38 19,25

9 19,69 9,62

10 9,84 4,81

11 4,92 2,40

12 2,46 1,20

13 1,23 0,60

Figura 2. Son gráficos de barras que muestran el efecto de inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de NO en células por omega-3 (2A) y las combinaciones de diversas concentraciones de Lyc-O-Mato® y omega-3 (Lyc-O-Mato® 0,5 micromolar (2B), Lyc-O-Mato® 1 micromolar (2C), y Lyc-O-Mato® 2 micromolar (2D)). Las concentraciones de omega-3 EPA y DHA (en micromolar) corresponden a las mismas muestras que las de la figura 1. Las barras marcadas con “ S” presentaron un efecto sinérgico que es la porción superior de la barra. Figura 3. Gráficos de barras que muestran el efecto de inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de NO en células por omega-3, ácido carnósico y Lyc-O-Mato®. 3A es omega-3, 3B es omega-3 y ácido carnósico 0,2 micromolar, 3C es omega-3 y Lyc-O-Mato® 0,1 micromolar y 3D es omega-3 y ácido carnósico 0,2 micromolar y Lyc-O-Mato® 0,1 micromolar.

Figura 4. Gráficos de barras que muestran el efecto de inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de NO por omega-3, ácido carnósico y Lyc-O-Mato®. 3A/4A es omega-3, 3B/4B es omega-3 y ácido carnósico 0,2 micromolar, 3C/4C es omega-3 y Lyc-O-Mato® 0,1 micromolar y 3D/4D es omega-3 y ácido carnósico 0,2 micromolar y Lyc-O-Mato® 0,1 micromolar. Las barras marcadas con “ S” presentaron un efecto sinérgico que es la porción superior de la barra.

Figura 5. Gráficos de barras que muestran el efecto de inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de NO en células por omega-3, ácido carnósico y luteína. 5A es omega-3, 5B es omega-3 y ácido carnósico 0,2 micromolar, 5C es omega-3 y luteína 0,1 micromolar y 5D es omega-3 y ácido carnósico 0,2 micromolar y luteína 0,1 micromolar. Las barras marcadas con “ S” presentaron un efecto sinérgico que es la porción superior de la barra.

Figura 6. Gráficos de barras que muestran que los ácidos grasos omega-3 DHA y EPA con ácido carnósico, luteína y licopeno de tomate, inhiben de manera sinérgica la producción de NO en las células. 6A es omega-3 y 6B es omega-3 y ácido carnósico 0,2 micromolar y luteína 0,1 micromolar y Lyc-O-Mato® 0,1 micromolar. Las barras marcadas con “ S” presentaron un efecto sinérgico que es la porción superior de la barra.

Figura 7. Gráficos de barras que muestran que el aceite con omega-3 con mayor contenido de DHA que de EPA también es eficaz en la inhibición de la producción de NO en las células (7A). Se proporciona una combinación de omega-3 con mayor contenido de DHA que de EPA y licopeno de tomate en 7B, la porción superior de las barras, que se divide en 2, es la porción sinérgica de la inhibición de NO en células, obtenidas tanto por omega-3 como por licopeno de tomate.

Descripción detallada de la invención

En una realización, la presente invención proporciona una composición que comprende un ácido graso omega-3, ácido carnósico, licopeno de tomate y luteína, en donde dicho ácido graso omega-3 comprende ácido eicosapentaénico (EPA) y ácido docosahexaenoico (DHA), en donde dicha luteína, licopeno, ácido carnósico, EPA y DHA están en una cantidad de 0,1 mM, 0,1 mM, 0,2 mM, 20 mM y 10 mM, respectivamente.

Según algunas realizaciones, el licopeno de tomate es mucho más eficaz que el licopeno sintético en su actividad antiinflamación tal como se mide mediante la inhibición de la producción de NO.

En otra modalidad, el licopeno de tomate es licopeno que se extrae de una planta de tomate. En otra modalidad, el licopeno de tomate es un extracto de tomate enriquecido con licopeno. En otra modalidad, el licopeno de tomate es un extracto de tomate rico en licopeno que es totalmente natural. En otra modalidad, el licopeno de tomate es un complejo de licopeno de tomate. En otra modalidad, el complejo de licopeno de tomate comprende un complejo de fitonutrientes que incluyen fitoeno, fitoflueno, betacaroteno, tocoferoles y fitoesteroles. En otra realización, el licopeno de tomate es Lyc-O-Mato® (LycoRed Ltd., Be'er Sheva, Israel). En otra realización, una composición de la invención comprende licopeno de tomate y un ácido graso omega-3. En otra realización, una composición de la invención comprende Lyc-O-Mato® y un ácido graso omega-3.

Los procedimientos adecuados para preparar este extracto y extractos similares se describen en la patente estadounidense n.° 5.837.311. Sin embargo, debe reconocerse que pueden usarse muchos otros tipos de procedimientos preparatorios para obtener la composición de una variedad de fuentes vegetales.

En otra realización, un ácido graso omega-3 está en un aceite. En otra realización, un ácido graso omega-3 se deriva de aceites de origen marino o vegetales. En otra realización, un ácido graso omega-3 se deriva de aceite de pescado.

En otra realización, un ácido graso omega-3 se deriva de aceite de algas. En otra realización, un ácido graso omega-3 se deriva de aceite de calamar. En otra realización, un ácido graso omega-3 se deriva de aceite de Echium. En otra realización, un ácido graso omega-3 se deriva de aceite de linaza. En otra realización, un ácido graso omega-3 es aceite de pescado. En otra realización, un ácido graso omega-3 es aceite de algas. En otra realización, un ácido graso omega-3 es aceite de calamar. En otra realización, un ácido graso omega-3 es aceite.

La composición de la invención comprende ácido graso omega-3, comprendiendo el ácido graso omega-3 EPA y DHA en una cantidad de 20 mM y 10 mM, respectivamente. También se describen en el presente documento ejemplos de otras composiciones que no son según la invención, un ácido graso omega-3 comprende alto contenido de DHA y bajo contenido de EPA (véanse la sección experimental y las figuras). En otro ejemplo descrito en el presente documento, un ácido graso omega-3 comprende un alto contenido de DHA y un bajo contenido de EPA (véanse la sección experimental y las figuras). En otra realización, un ácido graso omega-3 es ácido alfa-linolénico (ALA). En otra realización, un ácido graso omega-3 es una combinación de EPA, DHA y ALA.

En el presente documento también se describen ejemplos adicionales de composiciones que no son según la invención reivindicada. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de 1:5 a 1:1. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de 1:10 a 2:1. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de

1:8 a 1:2. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de 1:4 a 1:1,5.

En el presente documento también se describen ejemplos adicionales de composiciones que no son según la invención reivindicada. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de 5:1 a 1:1. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de 10:1 a 2:1. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de

4:1 a 1:3. En otro ejemplo, una composición tal como se describe en el presente documento comprende tanto EPA como DHA en una razón molar de 2,5:1 a 1:2,5.

En otra modalidad, una composición como se describe en la presente descripción comprende además fitoeno. En otra modalidad, una composición como se describe en la presente descripción comprende además fitoflueno. En otra modalidad, una composición como se describe en la presente descripción comprende además betacaroteno. En otra modalidad, una composición como se describe en la presente descripción comprende además tocoferol. En otra realización, una composición tal como se describe en el presente documento comprende además fitoesteroles. En otra realización, una composición tal como se describe en el presente documento comprende además una combinación de cualesquiera dos o más de: fitoeno, fitoflueno, betacaroteno, tocoferol y fitoesteroles. En otra realización, el fitoeno, el fitoflueno, el betacaroteno, el tocoferol y los fitoesteroles son de origen natural. En ot realización, el fitoeno, el fitoflueno,

betacaroteno, el tocoferol y los fitoesteroles se derivan de tomate. En ot realización, el fitoeno, el fitoflueno,

betacaroteno, el tocoferol, los fitoesteroles o cualquier combinación de lo mismos se produce de manera sintética.

En el presente documento también se describen ejemplos adicionales de composiciones que no son según la invención reivindicada. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate es de desde 4000:1 hasta 1:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate es de desde 1000:1 hasta 10:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate es de desde 500:1 hasta 50:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate es de desde 200:1

hasta 1:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate es de desde 150:1 hasta 20: 2.

En otro ejemplo, la razón de concentración molar de licopeno de tomate con respecto a EPA con respecto a DHA es de desde 1:200:400 hasta 1:600:600. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de licopeno de tomate con respecto a EPA con respecto a DHA es de desde 1:100:100 hasta 1:300:100. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de licopeno de tomate con respecto a EPA con respecto a DHA es de desde 1:50:100 hasta 1:150:250.

En otro ejemplo, la razón de concentración molar de luteína con respecto a licopeno de tomate con respecto a ácido carnósico con respecto a EPA con respecto a DHA es de desde 1:200:400 hasta 1:600:600. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de licopeno de tomate con respecto a EPA con respecto a DHA es de desde 1:1:2:200:400 hasta 1:1:4:400:400. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de licopeno de tomate con respecto a EPA con respecto a DHA es de desde 1:1:1:500:500 hasta 2:1:4:100:100. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de licopeno de tomate con respecto a EPA con respecto a DHA es de desde 1:1:1:100:500 hasta 1:1:1:200:200.

En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido omega-3 con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 3500:1 hasta 1:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 2000:1 hasta 1:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 1500:1 hasta 50:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido omega-3 con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 500:1 hasta 100:1.

En otro ejemplo, la razón de concentración molar de ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 5000:1:2 hasta 50:1:1. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 2500:1:5 hasta 20:1:2. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 1000:1:10 hasta 100:1:10. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de un ácido graso omega-3 con respecto a licopeno de tomate con respecto a ácido carnósico en una composición de la invención es de desde 2000:1:2 hasta 50:1:1.

En otro ejemplo, la razón de concentración molar de luteína con respecto a licopeno con respecto a ácido carnósico es de desde 1:1:1 hasta 1:2:4. En otro ejemplo, la razón de concentración molar de luteína con respecto a licopeno con respecto a ácido carnósico es de desde 1:1:1 hasta 1:2:4.

La composición de la invención comprende además luteína. En otra modalidad, la luteína comprende (3R, 3'R, 6'R)-beta,épsilon-caroteno-3,3'-diol. En otra modalidad, la luteína es una luteína vegetal. En otra realización, la luteína es luteína de caléndula. En otra modalidad, la luteína es una luteína sintética. En otra modalidad, la luteína comprende ácido graso saponificante.

Los componentes de las composiciones descritas anteriormente pueden ser compuestos purificados, compuestos sintéticos o pueden estar presentes en mezcla con otros componentes, por ejemplo en extractos de plantas tales como extracto de romero (en el caso del ácido carnósico), extracto de caléndula (en el caso de luteína) o un extracto de tomate (tal como Lyc-O-Mato® que está disponible comercialmente en LycoRed, Be'er Sheva, Israel, en el caso del licopeno y otros carotenoides).

En algunas modalidades, una composición como se describe en la presente descripción tiene un efecto antiinflamatorio sinérgico. En algunas modalidades, una composición como se describe en la presente descripción es una composición oral. En algunas realizaciones, una composición tal como se describe en el presente documento comprende además un excipiente farmacéuticamente aceptable.

En algunas realizaciones, una composición tal como se describe en el presente documento inhibe la producción y/o la secreción de mediadores inflamatorios y citocinas que desempeñan papeles en la patogenia de un gran número de enfermedades inflamatorias de mamíferos. En otra realización, una composición de la invención es una combinación de fitonutrientes que provoca una inhibición inmediata, efectiva y sinérgica de la producción de superóxido interno inducida por LPS.

En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar a un sujeto que padece inflamación o choque séptico, que comprende la etapa de administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición tal como se describe en el presente documento. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para inhibir la producción de citocinas proinflamatorias, tal como, pero sin limitarse a, TNF-a, por macrófagos y monocitos en sitios inflamatorios que comprende la etapa de administrar a un sujeto que lo necesita, una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición tal como se describe en el presente documento. En otra realización, la presente invención proporciona además la composición para su uso en un método para inhibir la liberación de citocinas proinflamatorias, tal como, pero sin limitarse a, TNF-a, por macrófagos y monocitos en sitios inflamatorios que comprende la etapa de administrar a un sujeto que lo necesita, una cantidad terapéuticamente eficaz de una composición tal como se describe en el presente documento.

En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar a un sujeto que padece inflamación, en donde la inflamación es una parte inherente de un estado patológico. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la artritis reumatoide. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la enfermedad de Crohn. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la colitis ulcerosa. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar el síndrome de choque séptico. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la ateroesclerosis. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la artritis reumatoide juvenil. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la artropatía psoriásica. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la artrosis. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la artritis reumatoide resistente. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la artritis reumatoide no crónica. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la osteoporosis/reabsorción ósea. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar el choque endotóxico. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la lesión por isquemia-reperfusión. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la cardiopatía coronaria. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la vasculitis. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la amiloidosis. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la esclerosis múltiple. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la septicemia. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la uveítis crónica recurrente. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la infección por el virus de la hepatitis C. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la malaria. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la colitis ulcerosa. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la caquexia. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar el plasmocitoma. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la endometriosis. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la enfermedad de Behcet. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la granulomatosis de Wegenrer. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar una enfermedad autoinmunitaria. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la espondilitis anquilosante. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la inmunodeficiencia común variable (CVID). En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la enfermedad crónica de injerto contra huésped. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar traumatismos y rechazo de trasplantes. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar el síndrome de dificultad respiratoria aguda. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la fibrosis pulmonar. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar una enfermedad linfoproliferativa. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar el mieloma múltiple resistente. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar un trastorno mieloproliferativo. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la diabetes. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la diabetes tipo 1. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la meningitis. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar trastornos de hipersensibilidad de tipo retardado de la piel. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar la enfermedad de Alzheimer. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar el lupus eritematoso sistémico. En otra realización, la presente invención proporciona además una composición para su uso en un método para tratar cualquier otro estado clínico que esté asociado de manera inherente o dependa de un proceso inflamatorio.

En otra realización, la presente invención proporciona una composición para tratar a un sujeto que padece inflamación que inhibe la producción de una citocina antiinflamatoria, un glucocorticoide, un neuropéptido antiinflamatorio o un mediador de inflamación lipídica. En otra realización, la presente invención proporciona esa para tratar a un sujeto que padece inflamación que inhibe la producción de NO, PGE, TNF-alfa o cualquier combinación de los mismos en un sitio de inflamación. En otra realización, la presente invención proporciona esa para tratar a un sujeto que padece inflamación que inhibe la producción por macrófagos de NO, PGE, TNF-alfa o cualquier combinación de los mismos. En otra realización, la presente invención proporciona esa para tratar a un sujeto que padece inflamación que inhibe el reclutamiento de neutrófilos en el sitio de la inflamación. En otra realización, la presente invención proporciona esa para tratar a un sujeto que padece inflamación que inhibe la activación de los neutrófilos en el sitio de la inflamación. En otra modalidad, PGE es PGE2 (prostaglandina E2).

Además, la presente invención también proporciona una composición para su uso en un método de tratamiento de estados patológicos en donde los iones superóxido, NO, TNF-alfa y/o PGE2 actúan como moduladores o mediadores del estado en un sujeto mamífero que necesita tal tratamiento, en donde el método comprende administrar al sujeto una composición terapéutica según una cualquiera de las realizaciones descritas anteriormente en el presente documento.

En algunas realizaciones de los métodos descritos anteriormente en el presente documento, el sujeto es un sujeto humano. En algunas realizaciones de los métodos descritos anteriormente en el presente documento, el sujeto es un mamífero. En algunas realizaciones de los métodos descritos anteriormente en el presente documento, el sujeto es una mascota. En algunas realizaciones de los métodos descritos anteriormente en el presente documento, el sujeto es un animal de granja. En algunas realizaciones de los métodos descritos anteriormente en el presente documento, el sujeto es un animal de laboratorio.

Si bien en los métodos descritos anteriormente la composición terapéutica puede administrarse mediante cualquier medio conveniente, en una realización la composición se administra en una forma de dosificación farmacéutica. Sin embargo, en otra modalidad preferida, la composición terapéutica se incorpora a un alimento o bebida.

En una realización, la composición de la presente invención puede proporcionarse al individuo por sí misma. En una realización, la composición de la presente invención puede proporcionarse al individuo como parte de una composición farmacéutica adicional donde se mezcla con un portador farmacéuticamente aceptable.

En una realización, una “ composición farmacéutica” se refiere a una preparación de una composición tal como se describe en el presente documento con otros componentes químicos tales como portadores y excipientes fisiológicamente adecuados. El propósito de una composición farmacéutica es facilitar la administración de la composición a un organismo.

En una modalidad, “ una preparación combinada” define especialmente un “ kit de partes” en el sentido de que los miembros de la combinación como se definieron anteriormente pueden dosificarse de forma independiente o mediante el uso de diferentes combinaciones fijas con cantidades distintivas de los miembros de la combinación, es decir, simultáneamente, concurrentemente, por separado o secuencialmente. En algunas modalidades, las partes del kit de partes pueden administrarse entonces, por ejemplo, simultáneamente o escalonadas cronológicamente, es decir, en diferentes puntos de tiempo y con intervalos de tiempo iguales o diferentes para cualquier parte del kit de partes. La proporción de las cantidades totales de los miembros de la combinación, en algunas modalidades, puede administrarse en la preparación combinada. En una modalidad, la preparación combinada puede variarse, por ejemplo, para hacer frente a las necesidades de una subpoblación de pacientes a tratar o las necesidades de un solo paciente, cuyas diferentes necesidades pueden deberse a una enfermedad particular, la gravedad de una enfermedad, la edad, el sexo o el peso corporal, como puede determinarlo fácilmente un experto en la técnica.

En una realización, las expresiones “ portador fisiológicamente aceptable” y “ portador farmacéuticamente aceptable” que se usan de manera intercambiable se refieren a un portador o a un diluyente que no provocan irritación significativa a un organismo y no anulan la actividad biológica y las propiedades de la composición administrada. Bajo estas frases se incluye un adyuvante.

En una modalidad, “ excipiente” se refiere a una sustancia inerte añadida a una composición farmacéutica para facilitar aún más la administración de un ingrediente activo. En una modalidad, los excipientes incluyen carbonato de calcio, fosfato de calcio, diversos azúcares y tipos de almidón, derivados de la celulosa, gelatina, aceites vegetales y polietilenglicoles.

Las técnicas de formulación y administración de fármacos se encuentran en “ Remington's Pharmaceutical Sciences” , Mack Publishing Co., Easton, PA, última edición.

En una modalidad, las vías de administración adecuadas incluyen, por ejemplo, administración oral, rectal, transmucosal, transnasal, intestinal o parenteral, que incluyen inyecciones intramusculares, subcutáneas e intramedulares, así como también inyecciones intratecales, intraventriculares directas, intravenosas, intraperitoneales, intranasales o intraoculares.

En una modalidad, la preparación se administra de manera local en lugar de sistémica, por ejemplo, mediante la inyección de la preparación directamente en una región específica del cuerpo de un paciente.

Esta invención contempla diversas modalidades de intervalos de dosificación. La dosificación de la composición de la presente invención, en una modalidad, está en el intervalo de 0,5 a 2000 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 5-500 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 500-2000 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 0,1-10 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 50-500 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 5-4000 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 0,5-50 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 5-80 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 100-1000 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 1000-2000 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 200-600 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 400-1500 mg/día. En otra realización, la dosificación está en un intervalo de 800-1500 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 500-2500 mg/día. En otra realización, la dosificación está en un intervalo de 600-1200 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 1200 2400 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 40-60 mg/día. En otra realización, la dosificación está en un intervalo de 2400-4000 mg/día. En otra modalidad, la dosis está en un intervalo de 450-1500 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 1500-2500 mg/día. En otra realización, la dosificación está en el intervalo de 5-10 mg/día. En otra modalidad, la dosis está en el intervalo de 550-1500 mg/día.

En una modalidad, la dosis es 200 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 300 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 400 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 500 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 600 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 700 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 800 mg/día. En otra realización, la dosificación es de 900 mg/día. En otra modalidad, la dosis es 1000 mg/día.

La administración oral, en una realización, comprende una forma de dosificación unitaria que comprende comprimidos, cápsulas, pastillas para chupar, comprimidos masticables, suspensiones, emulsiones y similares. Tales formas de dosificación unitaria comprenden una cantidad segura y efectiva de la composición. Los portadores aceptables farmacéuticamente adecuados para la preparación de formas de dosificación unitarias para administración oral se conocen bien en la técnica. En algunas realizaciones, los comprimidos comprenden normalmente adyuvantes farmacéuticamente compatibles convencionales como diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato de sodio, manitol, lactosa y celulosa; aglutinantes tales como almidón, gelatina y sacarosa; disgregantes tales como almidón, ácido algínico y croscarmelosa; lubricantes tales como estearato de magnesio, ácido esteárico y talco. En una modalidad, pueden usarse agentes de deslizamiento tal como dióxido de silicio para mejorar las características de flujo de la mezcla de polvo. En una modalidad, pueden añadirse agentes colorantes, tal como los tintes FD&C, para mejorar la apariencia. Los edulcorantes y saborizantes, tal como aspartamo, sacarina, mentol, menta y aromas de frutas, son adyuvantes útiles para comprimidos masticables. Las cápsulas comprenden típicamente uno o más diluyentes sólidos descritos anteriormente. En algunas modalidades, la selección de los componentes del portador depende de consideraciones secundarias como el sabor, el costo y la estabilidad en almacenamiento, que no son críticas para los propósitos de esta invención y pueden que se realicen fácilmente por una persona experta en la técnica.

En una modalidad, la forma de dosificación oral comprende un perfil de liberación predefinido. En una modalidad, la forma de dosificación oral de la presente invención comprende comprimidos, cápsulas, grageas o comprimidos masticables de liberación prolongada. En una modalidad, la forma de dosificación oral de la presente invención comprende comprimidos, cápsulas, grageas o comprimidos masticables de liberación lenta. En una modalidad, la forma de dosificación oral de la presente invención comprende comprimidos, cápsulas, grageas o comprimidos masticables de liberación inmediata. En una realización, la forma de dosificación oral se formula según el perfil de liberación deseado del principio activo farmacéutico tal como se conoce por un experto en la técnica.

Las composiciones perorales, en algunas modalidades, comprenden soluciones líquidas, emulsiones, suspensiones y similares. En algunas modalidades, los portadores aceptables farmacéuticamente adecuados para la preparación de tales composiciones se conocen bien en la técnica. En algunas realizaciones, las composiciones orales líquidas comprenden desde aproximadamente el 0,012% hasta aproximadamente el 0,933 % de la composición, o en otra realización, desde aproximadamente el 0,033 % hasta aproximadamente el 0,7 %.

En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas para su uso en los métodos de esta invención comprenden disoluciones o emulsiones, que en algunas realizaciones son disoluciones o emulsiones acuosas que comprenden una cantidad segura y eficaz de la composición de la presente invención y, opcionalmente, otros compuestos, destinados a la administración intranasal tópica. En algunas realizaciones, las composiciones comprenden desde aproximadamente el 0,01 % hasta aproximadamente el 10,0 % p/v de una combinación en cuestión.

Además, en otra realización, las composiciones farmacéuticas se administran por vía tópica en las superficies corporales y, por tanto, se formulan en una forma adecuada para la administración tópica. Las formulaciones tópicas adecuadas incluyen geles, ungüentos, cremas, lociones, gotas y similares. Para la administración tópica, la composición de la presente invención se combina con un agente o agentes terapéuticos apropiados adicionales, se preparan y se aplican como soluciones, suspensiones o emulsiones en un diluyente aceptable fisiológicamente con o sin un portador farmacéutico.

En una modalidad, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se fabrican mediante procesos bien conocidos en la técnica, por ejemplo, mediante procesos convencionales de mezclado, disolución, granulado, elaboración de grageas, levigación, emulsión, encapsulación, atrapamiento o liofilización.

En una realización, las composiciones farmacéuticas para su uso según la presente invención se formulan de manera convencional usando uno o más portadores fisiológicamente aceptables que comprenden excipientes y agentes auxiliares, que facilitan el procesamiento de los principios activos en preparaciones que pueden usarse farmacéuticamente. En una modalidad, la formulación depende de la vía de administración elegida.

Las composiciones también comprenden, en algunas realizaciones, conservantes, tales como cloruro de benzalconio y timerosal y similares; agentes quelantes, tales como edetato de sodio y otros, tampones tales como fosfato, citrato y acetato; agentes de tonicidad tales como cloruro de sodio, cloruro de potasio, glicerina, manitol y otros; antioxidantes tales como ácido ascórbico, acetilcistina, metabisulfito de sodio y otros; agentes aromáticos; agentes de ajuste de la viscosidad, tales como polímeros, que incluyen celulosa y derivados de los mismos; y poli(alcohol vinílico) y ácido y bases para ajustar el pH de estas composiciones acuosas según sea necesario. Las composiciones también comprenden, en algunas modalidades, anestésicos locales u otros principios activos. Las composiciones pueden usarse como aerosoles, neblinas, gotas y similares.

En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas incluyen disoluciones acuosas de la preparación activa en forma soluble en agua. Además, las suspensiones de los ingredientes activos, en algunas modalidades, se preparan como suspensiones a base de agua o aceitosas apropiadas. Los disolventes o portadores lipófilos adecuados incluyen, en algunas modalidades, aceites grasos como aceite de sésamo o ésteres de ácidos grasos sintéticos como oleato de etilo, triglicéridos o liposomas. Las suspensiones acuosas contienen, en algunas modalidades, sustancias que aumentan la viscosidad de la suspensión, tal como carboximetilcelulosa de sodio, sorbitol o dextrano. En otra realización, la suspensión también contiene estabilizadores o agentes adecuados que aumentan la solubilidad de los principios activos para permitir la preparación de disoluciones altamente concentradas.

En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas adecuadas para su uso en el contexto de la presente invención incluyen composiciones que contienen los principios activos en una cantidad eficaz para lograr el propósito que se pretende. En algunas modalidades, una cantidad efectiva terapéuticamente significa una cantidad de ingredientes activos efectiva para prevenir, aliviar o mejorar los síntomas de la enfermedad o prolongar la supervivencia del sujeto que está en tratamiento.

En una modalidad, la determinación de una cantidad efectiva terapéuticamente está dentro de la capacidad de los expertos en la técnica.

Algunos ejemplos de sustancias que pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables o componentes de los mismos son azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones, tales como almidón de maíz y almidón de patata; celulosa y sus derivados, tales como carboximetilcelulosa, etilcelulosa y metilcelulosa de sodio; tragacanto en polvo; malta; gelatina; talco; lubricantes sólidos, tales como ácido esteárico y estearato de magnesio; sulfato de calcio; aceites vegetales, tales como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de theobroma; polioles tales como propilenglicol, glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; ácido algínico; emulsionantes, tales como los emulsionantes de la marca Tween™; agentes humectantes, tales como laurilsulfato de sodio; agentes colorantes; agentes aromatizantes agentes de preparación de comprimidos, estabilizadores; antioxidantes; conservantes; agua libre de pirógenos; solución salina isotónica; y disoluciones de tampón fosfato. La elección de un portador farmacéuticamente aceptable para su uso junto con el compuesto se determina básicamente de acuerdo a la forma en la que va a administrarse el compuesto. Si el compuesto en cuestión va a inyectarse, en una realización, el portador farmacéuticamente aceptable es solución salina fisiológica estéril, con un agente de suspensión compatible con la sangre, al cual se le ajustó el pH a aproximadamente 7,4.

Además, las composiciones comprenden además aglutinantes (por ejemplo, goma arábiga, almidón de maíz, gelatina, carbómero, etilcelulosa, goma guar, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, povidona), agentes desintegrantes (por ejemplo, almidón de maíz, almidón de patata, ácido algínico, dióxido de silicio, croscarmelosa sodio, crospovidona, goma guar, almidón glicolato sódico), tampones (por ejemplo, Tris-HCl, acetato, fosfato) de diversos pH y fuerza iónica, aditivos como albúmina o gelatina para evitar la absorción en las superficies, detergentes (por ejemplo, Tween 20, Tween 80, Pluronic F68, sales de ácidos biliares), inhibidores de proteasa, tensioactivos (por ejemplo, lauril sulfato de sodio), potenciadores de la permeación, agentes solubilizantes (por ejemplo, glicerol, polietilenglicerol), antioxidantes (por ejemplo, ácido ascórbico, metabisulfito de sodio, butilado hidroxianisol), estabilizantes (por ejemplo, hidroxipropilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa), agentes que aumentan la viscosidad (por ejemplo, carbómero, dióxido de silicio coloidal, etilcelulosa, goma guar), edulcorantes (por ejemplo, aspartamo, ácido cítrico), conservantes (por ejemplo, timerosal, alcohol bencílico, parabenos), lubricantes (por ejemplo, ácido esteárico, estearato de magnesio, polietilenglicol, lauril sulfato de sodio), auxiliares de flujo (por ejemplo, dióxido de silicio coloidal), plastificantes (por ejemplo, ftalato de dietilo, citrato de trietilo), emulsionantes (por ejemplo, carbómero, hidroxipropilcelulosa, lauril sulfato de sodio), revestimientos poliméricos (por ejemplo, poloxámeros o poloxaminas), agentes de revestimiento y formadores de película (por ejemplo, etilcelulosa, acrilatos, polimetacrilatos) y/o adyuvantes.

Los componentes típicos de portadores para jarabes, elixires, emulsiones y suspensiones incluyen etanol, glicerol, propilenglicol, polietilenglicol, sacarosa líquida, sorbitol y agua. Para una suspensión, los agentes de suspensión típicos incluyen metilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio, celulosa (por ejemplo, Avicel™, RC-591), tragacanto y alginato de sodio; los agentes humectantes típicos incluyen lecitina y polioxietilensorbitano (por ejemplo, polisorbato 80). Los conservantes típicos incluyen metilparabeno y benzoato de sodio. En otra modalidad, las composiciones líquidas perorales también contienen uno o más componentes tal como edulcorantes, agentes saborizantes y colorantes descritos anteriormente.

Las composiciones también incluyen la incorporación del material activo, las composiciones de la invención, en o sobre preparaciones particuladas de compuestos poliméricos tal como poli(ácido láctico), poli(ácido glicólico), hidrogeles, etc., o sobre liposomas, microemulsiones, micelas, vesículas unilaminares o multilaminares, fantasmas de eritrocitos o esferoplastos). Tales composiciones influirán en el estado físico, la solubilidad, la estabilidad, la velocidad de liberación in vivo y la velocidad de aclaramiento in vivo. También se incluyen en la invención las composiciones en partículas recubiertas con polímeros (por ejemplo, poloxámeros o poloxaminas).

En algunas modalidades, la preparación de una cantidad o dosis efectiva puede estimarse inicialmente a partir de ensayos in vitro. En una modalidad, puede formularse una dosis en modelos animales y dicha información puede usarse para determinar con mayor precisión dosis útiles en humanos.

En una realización, la toxicidad y la eficacia terapéutica de la composición descrita en el presente documento pueden determinarse mediante procedimientos farmacéuticos convencionales in vitro, en cultivos celulares o animales de experimentación. En una realización, los datos obtenidos de estos ensayos en cultivo celular e in vitro y estudios en animales pueden usarse para formular un intervalo de dosificación para su uso en seres humanos. En una modalidad, las dosis varían en dependencia de la forma de dosificación empleada y la vía de administración que se usa. En una modalidad, el médico individual puede elegir la formulación, la vía de administración y la dosificación exactas tomando en cuenta el estado del paciente. [Véase, por ejemplo, Fingl, y col., (1975) “ The Pharmacological Basis of Therapeutics” , cap. 1, pág.1].

En una modalidad, en dependencia de la gravedad y la capacidad de respuesta de la afección a tratar, la dosificación puede ser de una o diversas administraciones, con un curso de tratamiento que dura desde diversos días hasta diversas semanas o hasta que se logra la curación o la disminución del estado patológico.

En una modalidad, la cantidad de una composición a administrar dependerá, por supuesto, del sujeto que se trata, la gravedad de la aflicción, la forma de administración, el criterio del médico que prescribe, etc.

En una realización, también se preparan las composiciones que incluyen la preparación de la presente invención formuladas en un portador farmacéuticamente compatible, se colocan en un recipiente apropiado y se etiquetan para el tratamiento de un estado indicado.

En una modalidad, las composiciones de la presente invención se presentan en un paquete o dispositivo dispensador, tal como un kit aprobado por la FDA, que contiene una o más formas de dosificación unitarias que contienen la composición. En una modalidad, el paquete, por ejemplo, comprende una hoja de metal o plástico, tal como un blíster. En una modalidad, el paquete o dispositivo dispensador se acompaña de instrucciones para su administración. En una realización, el paquete o dispensador se adapta a un aviso asociado con el recipiente en una forma prescrita por una agencia gubernamental que regula la fabricación, el uso o la venta de productos farmacéuticos, tal aviso refleja la aprobación por parte de la agencia de la forma de las composiciones o la administración veterinaria o a seres humanos. Dicho aviso, en una modalidad, es un etiquetado aprobado por la Administración de Medicamentos y Alimentos de Estados Unidos para medicamentos por prescripción o de un prospecto de producto aprobado.

Objetos, ventajas y características novedosas adicionales de la presente invención resultarán evidentes para un experto en la técnica tras el examen de los siguientes ejemplos, que no pretenden ser limitantes. Además, cada una de las diversas modalidades y aspectos de la presente invención según se define y reivindica en la sección de reivindicaciones más adelante encuentra apoyo experimental en los siguientes ejemplos.

Ejemplos

Generalmente, la nomenclatura que se usa en la presente descripción y los procedimientos de laboratorio que se usan en la presente invención incluyen técnicas químicas, moleculares, bioquímicas y de biología celular. Dichas técnicas se explican a fondo en la literatura. Véase, por ejemplo, “ Molecular Cloning: A laboratory Manual” Sambrook y col., (1989); “ Current Protocols in Molecular Biology” Volúmenes I-III Ausubel, R. M., ed. (1994); “ Cell Biology: A Laboratory Handbook” , Volúmenes I-III Cellis, J. E., ed. (1994); The Organic Chemistry of Biological Pathways de John McMurry y Tadhg Begley (Roberts and Company, 2005); Organic Chemistry of Enzyme-Catalyzed Reactions de Richard Silverman (Academic Press, 2002); Organic Chemistry (6a edición) de Leroy “ Skip” G Wade; Organic Chemistry de T. W. Graham Solomons y Craig Fryhle.

Material y métodos

Células

Se recogieron macrófagos peritoneales de aislamiento y cultivo de macrófagos de la cavidad peritoneal de ratones ICR macho de 6 a 8 semanas (Harlan, Israel) después de una inyección intraperitoneal de 1,5 ml de caldo de tioglicolato (4 %) 4 días antes de la recogida. Se lavaron los macrófagos peritoneales tres veces con solución salina tamponada con fosfato (PBS) y, cuando fue apropiado, se realizó una lisis hipotónica de eritrocitos, lo que produjo una población de células altamente enriquecida en macrófagos (90-95 %). Se identificaron los macrófagos mediante análisis de FACS (Becton-Dickinson, Mountain View, CA, EE. UU.) usando anticuerpo de rata anti-IgG de ratón F4/80 conjugado con FITC (MCA497F; Serotec, Oxford, Reino Unido) mediante microfluorimetría de flujo. Para cada muestra, se analizaron 10 000 células viables filtradas de acuerdo a la dispersión de la luz. Se cultivaron los macrófagos peritoneales (1x106 células/pocillo) en placas de 96 pocillos a 37 °C en una atmósfera del 5 % de CO2 en medio RPMI 1640 que contenía suero de ternero fetal al 10 %, L-glutamina 2 mM. Penicilina 100 U/ml. 100 mg/ml de estreptomicina (Beit-Haemek, Israel). Se estimularon las células con 1 mg/ml de LPS de Salmonella enterica serotipo Typhimurium en ausencia o presencia de una combinación diferente tal como se describe en el presente documento (véanse las figuras en la sección de ejemplos). Se disolvieron los fitonutrientes en dimetilsulfóxido (DMSO; en una concentración final de 5 mM). Se agitó con vórtex la mezcla y se incubó en un baño de agua a 37 °C (con agitación) durante 10 minutos y se sometió a sonicación en un baño de sonicación durante 15 segundos tres veces. Las concentraciones de trabajo de los compuestos se prepararon a partir de la solución concentrada mediante la adición de volúmenes apropiados al medio de cultivo calentado. Se calculó la concentración final en disolución mediante la adición de 0,5 ml de isopropanol y 1,5 ml de hexano/diclorometano (1/5 v/v) que contenía BHT al 0,025 % a 1 ml del medio de cultivo. Se agitó con vórtex la disolución y se separaron las fases líquidas mediante centrifugación a 3000 rpm durante 10 minutos. Se realizó espectrofotometría para medir las concentraciones de licopeno, astaxantina, luteína, b-caroteno. A los volúmenes apropiados de DMSO (0,1-0,2 %) se les añadieron los controles y se calculó el porcentaje de inhibición en cada tubo de ensayo en relación con su control.

Producción de Superóxido

1. Se midió la liberación del anión superóxido (O2") como la reducción superóxido dismutasa inhibible de ferricitocromo c mediante la técnica de la placa de microtitulación. A la reducción del ferricitocromo c le siguió un cambio de absorbancia a 550 nm a intervalos de 2 minutos durante 30 minutos en un lector de microplacas Thermomax (Molecular Devices, Melno Park, CA, EE. UU.). Se determinaron las tasas máximas de generación de superóxido y se expresaron como nmol de O2V106 células/ 10 minutos usando el coeficiente de extinción E550=21 mM/cm.

2. Se detectó la producción interna de superóxido mediante la reducción de dihidrorodamina 123 (DHR123): Se incubaron 3*105 células en 490 ml de disolución de Hanks, pH = 7,4, con 5 ml de DHR123 en una concentración final de 1 mM en tubos de ensayo de polipropileno durante 5 min a 37 °C. Las células estimuladas y no estimuladas se analizaron inmediatamente mediante FACS (BeckmanCoulter, Fullerton, CA, EE. UU).

Algunos de los siguientes ejemplos no son según la invención reivindicada.

Ejemplo 1

Inhibición dependiente de la dosis de la producción de no mediante omega-3

Se detectó el efecto antiinflamatorio sobre las células tal como se describe en el presente documento mediante la inhibición de la producción de NO por los macrófagos estimulados por LPS.

Los gráficos de la figura 1 muestran que las combinaciones de ácidos grasos omega-3 DHA y EPA inhibieron la producción de NO de una manera dependiente de la dosis.

Ejemplo 2

Inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de no mediante omega-3 y licopeno de tomate Se detectó el efecto antiinflamatorio sobre las células tal como se describe en el presente documento mediante la inhibición de la producción de NO por los macrófagos estimulados por LPS.

Los gráficos de la figura 2 muestran que las combinaciones de ácidos grasos omega-3 DHA y EPA con licopeno de tomate, inhibieron de manera sinérgica la producción de NO en determinadas dosificaciones. La letra S sobre las líneas horizontales marca un efecto sinérgico medido.

Ejemplo 3

Inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de no mediante omega-3, ácido carnósico y licopeno de tomate Se detectó el efecto antiinflamatorio sobre las células tal como se describe en el presente documento mediante la inhibición de la producción de NO por los macrófagos estimulados por LPS.

Los gráficos de la figura 3 y 4 muestran que las combinaciones de ácidos grasos omega-3 DHA y EPA con ácido carnósico y licopeno de tomate inhibieron de manera sinérgica la producción de NO en determinadas dosificaciones. La letra S sobre las líneas horizontales marca un efecto sinérgico medido.

Ejemplo 4

Inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de no mediante omega-3, ácido carnósico y luteína Se detectó el efecto antiinflamatorio sobre las células tal como se describe en el presente documento mediante la inhibición de la producción de NO por los macrófagos estimulados por LPS.

Los gráficos de la figura 5 muestran que las combinaciones de ácidos grasos omega-3 DHA y EPA con ácido carnósico y luteína inhibieron de manera sinérgica la producción de NO en determinadas dosificaciones. La letra S sobre las líneas horizontales marca un efecto sinérgico medido.

Ejemplo 5

Inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de no mediante omega-3, ácido carnósico, luteína y licopeno de tomate

Los gráficos de la figura 6 muestran que las combinaciones de ácidos grasos omega-3 DHA y EPA con ácido carnósico, luteína y licopeno de tomate inhibieron de manera sinérgica la producción de NO en determinadas dosificaciones. Ejemplo 6

Inhibición sinérgica dependiente de la dosis de la producción de no mediante aceite con omega-3 solo o en combinación con licopeno de tomate

Los gráficos de la figura 7 muestran que otro aceite con omega-3 con mayor contenido de DHA que de EPA también es eficaz en la inhibición de la producción de NO en las células (7A). Los experimentos con combinaciones de omega-3 con mayor contenido de DHA que de EPA y licopeno de tomate, inhibieron de manera sinérgica la producción de NO en células en determinadas dosificaciones tal como se indica.

En conclusión, los datos presentados en el presente documento proporcionan una composición altamente sinérgica que tiene utilidad en aplicaciones antiinflamatorias. Además, estos datos muestran que ambas composiciones de ácido carnósico, y licopeno de tomate que comprenden omega-3 con alto contenido de DHA y bajo contenido de EPA y omega-3 con bajo contenido de DHA y alto contenido de EPA muestran un efecto sinérgico sobre la liberación antiinflamatoria de NO en las células.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición que comprende un ácido graso omega-3, ácido carnósico, licopeno de tomate y luteína, en donde dicho ácido graso omega-3 comprende ácido eicosapentaénico (EPA) y ácido docosahexaenoico (DHA), en donde dicha luteína, licopeno, ácido carnósico, ^eP^ay DHA están en una cantidad de 0,1 mM, 0,1 mM, 0,2 mM, 20 mM y 10 mM, respectivamente.

2. La composición de la reivindicación 1, en donde dicha composición comprende además fitoeno, fitoflueno, betacaroteno, un tocoferol, fitoesteroles o cualquier combinación de estos.

3. La composición según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en donde dicha composición es una composición oral.

4. La composición según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que comprende además un excipiente farmacéuticamente aceptable.

5. La composición según la reivindicación 1, para su uso en el tratamiento de un sujeto afectado por inflamación.