ES2924410T3 - Péptidos antagonistas de CGRP - Google Patents
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Abstract
Esta divulgación se refiere a compuestos de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables: en la que m, p, A, Ar1, Ar2, Ar3, R1, R2 y R3 se definen en la memoria descriptiva. Los compuestos de fórmula (I) se pueden usar como antagonistas de CGRP y se pueden usar para tratar (Traducción automática con Google Translate, sin valor legal)
Description
DESCRIPCIÓN
Péptidos antagonistas de CGRP
CAMPO TÉCNICO
Esta divulgación se refiere a péptidos antagonistas de CGRP, así como a composiciones y a métodos relacionados.
ANTECEDENTES
La migraña es una afección debilitante caracterizada por ataques recurrentes de dolor de cabeza punzante a menudo agudo, típicamente junto con náuseas y sensibilidad a la luz y al sonido. Las migrañas suelen estar precedidas por un síntoma neurológico focal denominado aura. El patrón actual de atención para el tratamiento de la migraña es el uso de la clase de medicamentos triptán. Sin embargo, aproximadamente el 30 % de los pacientes no encuentran alivio con los triptanes. Además, los triptanes están contraindicados en pacientes migrañosos con alto riesgo de enfermedades cardiovasculares (p. ej., diabetes, obesidad e hipercolesterolemia). Por lo tanto, sigue existiendo la necesidad de nuevos paradigmas terapéuticos para el tratamiento de la migraña.
El péptido relacionado con el gen de la calcitonina (CGRP, por sus siglas en inglés) es un péptido de 37 aminoácidos, resultante del corte y empalme alternativo del gen de la calcitonina. CGRP está implicado en muchas afecciones fisiológicas y fisiopatológicas. Se descubrió que los péptidos truncados (p. ej., CGRP(8-37) o CGRP(27-37)) podían actuar como antagonistas en el receptor de CGRP. Estos péptidos fueron útiles como herramientas de investigación, pero péptidos de este tipo no se buscaron en ensayos clínicos. Los esfuerzos de descubrimiento de fármacos centrados en moléculas pequeñas no peptídicas produjeron varios compuestos que avanzaron hacia el desarrollo clínico, tales como olcegepant y telcagepant. A pesar de la aparente eficacia en el tratamiento de la migraña, todos estos programas se detuvieron, principalmente debido a la preocupación por la toxicidad hepática. Más recientemente, los esfuerzos de desarrollo de fármacos dirigidos a la vía CGRP para la migraña se han vuelto a centrar en anticuerpos monoclonales contra CGRP o su receptor.
El receptor CGRP es el CLR (siglas inglesas de receptor similar a la calcitonina) de transmembrana siete en complejo con RAMP1 (siglas inglesas de Péptido Modulador de la Actividad del Receptor 1). Además del receptor de CGRP, CGRP también activa los receptores de adrenomedulina (AM) AM1 y AM2 (CLR+RAMP2 y CLR+RAMP3, respectivamente) a concentraciones más altas. Se cree que los receptores de AM tienen un efecto sobre la reproducción; función cardiovascular y renal; inflamación y otras afecciones. Un antagonista selectivo de CGRP-R con actividad reducida en los receptores de AM reduciría el riesgo de eventos adversos debido a la interrupción de la señalización de AM.
Yan et al., J. Pept. Sci, 2011, 17, 383-386 describe antagonistas de CGRP basados en péptidos centrados en CGRP(27-37). Los antagonistas de CGRP basados en péptidos de Yan et al., J. Pept. Sci. 2011, 17, 383-386 no abordan la selectividad de CGRP y los receptores de AM.
SUMARIO
En un aspecto, esta divulgación presenta un compuesto de fórmula (I) o una de sus sales:
en que m es 0, 1, 2, 3, 4 o 5; p es 0, 1, 2 o 3; A es un enlace carbono-carbono sencillo o doble; Ar1 es heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, nitro, alquilo C1-C4 , hidroxialquilo C1-C4, ORa o N(RaRa), en que cada uno de los Ra, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Ra', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; Ar2 es arilo o heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, ciano, nitro, alquilo C1-C4, aminoalquilo C1-C4,
hidroxialquilo C1-C4 , ORb, N(RbRb'), C(O)-N(RbRb,) o NH-C(O)-N(RbRb'), en donde cada uno de los Rb, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rb', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; Ar3 es arilo o heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, alquilo C1-C4 , hidroxialquilo C1-C4, ORc o N(RcRc), en que cada uno de los Rc, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rc', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; cada uno de los R1, independientemente, es alquilo C1-C4, aminoalquilo C1-C4 , hidroxialquilo C1-C4, ORd o C(O)-N(RdRd'), en que cada uno de los Rd, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rd', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; R2 es -(CH2)n-R, en que n es 0, 1,2 o 3 y R es N(CH3)2, NH(CH(CH3)2), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(CH3)2, NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-NH2 , 3-amino-1,2,4-triazol-5-ilo, N(CH2CH3)2 o guanidino sustituido con CH3 ; y cada uno de los R3, independientemente, es halógeno, alquilo C1-C4 u ORf , en que cada uno de los Rf, independientemente, es H o alquilo C1-C4.
En otro aspecto, esta divulgación presenta una composición farmacéutica que incluye un compuesto de fórmula (I) descrito en esta memoria y un soporte farmacéuticamente aceptable.
En aún otro aspecto, esta divulgación presenta una composición farmacéutica descrita en esta memoria para, o para uso en, el tratamiento de la migraña, incluyendo el método administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de la composición farmacéutica descrita en esta memoria.
Otras características, objetos y ventajas resultarán evidentes a partir de la descripción y las reivindicaciones.
DESCRIPCIÓN DETALLADA
Esta divulgación se refiere generalmente a péptidos antagonistas de CGRP y a su uso para tratar la migraña. En particular, esta divulgación se basa en el descubrimiento inesperado de que determinados péptidos son antagonistas de CGRP que exhiben una potencia mejorada para el receptor de CGRP y pueden utilizarse de manera efectiva para tratar la migraña. En determinadas realizaciones, los péptidos antagonistas de CGRP son más selectivos para el receptor de CGRP frente al receptor de AM2. En determinadas realizaciones, los péptidos antagonistas de CGRP tienen una solubilidad mejorada. En determinadas realizaciones, los péptidos antagonistas de CGRP tienen una biodisponibilidad mejorada.
En algunas realizaciones, los péptidos antagonistas de CGRP descritos en esta memoria son los de fórmula (I) o una de sus sales farmacéuticamente aceptables:
En la fórmula I, m es 0, 1,2, 3, 4 o 5; p es 0, 1,2 o 3; A es un enlace carbono-carbono sencillo o doble; Ar1 es heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno (p. ej., F, Cl, Br o I), nitro, alquilo C1-C4, hidroxialquilo C1-C4 (p. ej., CH2OH), ORa o N(RaRa), en que cada uno de los Ra, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Ra', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; Ar2 es arilo o heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, ciano, nitro, alquilo C1-C4, aminoalquilo C1-C4 (p. ej., CH2NH2),, hidroxialquilo C1-C4, ORb, N(RbRb'), C(O)-N(RbRb') o NH-C(O)-N(RbRb), en donde cada uno de los Rb, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rb', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; Ar3 es arilo o heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, alquilo C1-C4 , hidroxialquilo C1-C4, ORc o N(RcRc), en que cada uno de los Rc, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rc', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; cada uno de los R1, independientemente, es alquilo C1-C4, aminoalquilo C1-C4 , hidroxialquilo C1-C4, ORd o C(O)-N(RdRd'), en que cada uno de los Rd, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rd', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ; R2 es -(CH2)n-R, en que n es 0, 1,2 o 3 y R es N(CH3)2, NH(CH(CH3)2), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(CH3)2, NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-NH2, 3-amino-1,2,4-triazol5-ilo, N(CH2CH3)2 o guanidino sustituido con CH3 ; y cada uno de los R3, independientemente, es halógeno, alquilo C1-C4 u ORf , en que cada uno de los Rf, independientemente, es H o alquilo C1-C4.
El término "alquilo" se refiere a un resto hidrocarbonado saturado, lineal o ramificado, tal como -CH3 o -CH(CH3)2. El término "cicloalquilo" se refiere a un resto hidrocarbonado cíclico saturado, tal como ciclohexilo. El término "heterocicloalquilo" se refiere a un resto cíclico saturado que tiene al menos un heteroátomo en el anillo (p. ej., N, O o S), tal como 4-tetrahidropiranilo. El término "arilo" se refiere a un resto hidrocarbonado que tiene uno o más anillos aromáticos. Ejemplos de restos arilo incluyen fenilo (Ph), fenileno, naftilo, naftileno, pirenilo, antrilo y fenantrilo. El término "heteroarilo" se refiere a un resto que tiene uno o más anillos aromáticos que contienen al menos un heteroátomo (p. ej., N, O o S). Ejemplos de restos heteroarilo incluyen furilo, furileno, fluorenilo, pirrolilo, tienilo, oxazolilo, imidazolilo, tiazolilo, piridinilo, pirimidinilo, quinazolinilo, quinolilo, isoquinolilo e indolilo.
En algunas realizaciones, el residuo de aminoácido unido a Ar1C(O) puede ser D-Val.
En algunas realizaciones, Ar1 puede ser piridinilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirimidinilo, pirolilo o triazolilo, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, tales como F, Cl, NO2, CH3 , CH2OH o NH2. En algunas realizaciones, Ar2 puede ser fenilo o piridinilo, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, tales como CH2NH2, C(O)NH2, OH, CN, CH2OH, NH2 o NH-C(O)-NH2.
En algunas realizaciones, Ar3 puede ser piridinilo.
En algunas realizaciones, R1 puede ser OH, C(O)NH 2 o CH2NH2. En realizaciones de este tipo, m en la fórmula (I) puede ser 1.
En algunas realizaciones, n en R2 en la fórmula (I) puede ser 0, 1 o 2.
En algunas realizaciones, p en la fórmula (I) es 0.
Compuestos ejemplares de fórmula (I) incluyen los enumerados en la Tabla 1 que figura a continuación. Los compuestos 1,3 a 5, 7, 11 a 13, 16 a 23, 26, 29, 31 a 34, 36, 37, 47 a 53 y 56 no están de acuerdo con la invención y están presentes únicamente con fines ilustrativos.
Tabla 1
A menos que se especifique lo contrario, el código de aminoácidos en la Tabla 1 se refiere a su isómero L. Por ejemplo, Orn se refiere a L-ornitina, 3Pal se refiere a 3-(3-piridil)-L-alanina, Dhp se refiere a 3,4-deshidro-L-prolina y Phe(2-Cbm) se refiere a 3-(2-carbamoil)fenil-L-alanina.
Compuestos ejemplares son aquellos de fórmula (I), en que m es 1, p es 0, Ar3 es 3-piridinilo y A, Ar1, Ar2, R1, n y R son los que se muestran en la Tabla 2 que figura a continuación. Los compuestos 1,3 a 5, 7, 11 a 13, 16 a 23, 26, 29, 31 a 34, 36, 37, 47 a 53 y 56 no están de acuerdo con la invención y están presentes únicamente con fines ilustrativos.
Tabla 2
Los compuestos de fórmula (I) se pueden preparar mediante métodos conocidos en la técnica o métodos descritos en esta memoria. Los Ejemplos 1-5 que figuran más adelante proporcionan descripciones detalladas de cómo se prepararon realmente los compuestos 1-70.
Esta divulgación también presenta composiciones farmacéuticas que contienen una cantidad terapéuticamente efectiva de al menos uno (p. ej., dos o más) de los péptidos antagonistas de CGRP descritos en esta memoria (es decir, los compuestos de fórmula (I)) o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos como un ingrediente activo, así como al menos un soporte farmacéuticamente aceptable (p. ej., adyuvante o diluyente). Ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen sales por adición de ácidos, p. ej., sales formadas por reacción con ácidos hidrohalogenados (tales como ácido clorhídrico o ácido bromhídrico), ácidos minerales (tales como ácido sulfúrico, ácido fosfórico y ácido nítrico) y ácidos alifáticos, alicíclicos, aromáticos o sulfónicos o carboxílicos heterocíclicos (tales como ácido fórmico, ácido acético, ácido propiónico, ácido succínico, ácido glicólico, ácido láctico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido ascórbico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, ácido pirúvico, ácido p-hidroxibenzoico, ácido embónico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido hidroxietanosulfónico, ácido halobencenosulfónico, ácido trifluoroacético, ácido trifluorometanosulfónico, ácido toluenosulfónico y ácido naftalenosulfónico).
El soporte en la composición farmacéutica debe ser "aceptable" en el sentido de que sea compatible con el ingrediente activo de la composición (y preferiblemente, capaz de estabilizar el ingrediente activo) y no perjudicial para el sujeto a tratar. Se pueden utilizar uno o más agentes solubilizantes como soportes farmacéuticos para el suministro de un péptido antagonista de CGRP activo. Ejemplos de otros soportes incluyen óxido de silicio coloidal, estearato de magnesio, celulosa, laurilsulfato de sodio y D&C Amarillo n° 10.
La composición farmacéutica descrita en esta memoria puede incluir opcionalmente al menos un aditivo adicional seleccionado de un agente disgregante, aglutinante, lubricante, agente saborizante, conservante, colorante y cualquier mezcla de los mismos. Se pueden encontrar ejemplos de estos y otros aditivos en "Handbook of Pharmaceutical Excipients"; Ed. A.H. Kibbe, 3a Ed., American Pharmaceutical Association, EE.UU. y Pharmaceutical Press, Reino Unido, 2000.
La composición farmacéutica descrita en esta memoria se puede adaptar para la administración parenteral, oral, tópica, nasal, rectal, bucal o sublingual o para la administración a través del tracto respiratorio, p. ej., en forma de un aerosol o un polvo fino suspendido en aire. El término "parenteral", tal como se utiliza en esta memoria, se refiere a la inyección subcutánea, intracutánea, intravenosa, intramuscular, intraarticular, intraarterial, intrasinovial, intraesternal, intratecal, intralesional, intraperitoneal, intraocular, intra-aural o intracraneal, así como a cualquier técnica de infusión adecuada. En algunas realizaciones, la composición puede estar en forma de comprimidos, cápsulas, polvos, micropartículas, gránulos, jarabes, suspensiones, soluciones, espray nasal, parches transdérmicos o supositorios.
En algunas realizaciones, la composición farmacéutica descrita en esta memoria puede contener un péptido antagonista de CGRP descrito en esta memoria que se disuelve en una solución acuosa. Por ejemplo, la composición puede incluir una solución acuosa de cloruro de sodio (p. ej., que contiene 0,9 % en peso de cloruro de sodio) para servir como diluyente.
Además, esta divulgación presenta un péptido antagonista de CGRP como se describe anteriormente para, o para uso en el tratamiento de la migraña o para la fabricación de un medicamento para un tratamiento de este tipo. El uso puede incluir administrar a un paciente que lo necesite una cantidad eficaz de la composición farmacéutica descrita en esta memoria. "Una cantidad eficaz" se refiere a la cantidad de la composición farmacéutica que se requiere para conferir un efecto terapéutico al sujeto tratado. Las dosis efectivas variarán, como reconocen los expertos en la técnica, dependiendo de los tipos de enfermedades tratadas, de la vía de administración, del uso de excipientes y de la posibilidad de uso conjunto con otro tratamiento terapéutico.
Tal como se utiliza en esta memoria, los términos "tratamiento", "tratar" y "tratando" se refieren a revertir, aliviar, retrasar el inicio o inhibir el progreso de una migraña o uno o más síntomas de la misma, como se describe en esta memoria. En algunas realizaciones, un péptido antagonista de CGRP como se esboza arriba puede administrarse después de que se hayan desarrollado uno o más síntomas. En otras realizaciones, un péptido antagonista de CGRP como se esboza arriba puede administrarse en ausencia de síntomas. Por ejemplo, un péptido antagonista de CGRP como se esboza arriba puede administrarse a un individuo susceptible antes de la aparición de los síntomas (p. ej., a la vista de un historial de síntomas y/o a la vista de factores genéticos u otros factores de susceptibilidad). La administración también puede continuar después de que los síntomas se hayan resuelto, por ejemplo, para prevenir o retrasar su recurrencia.
La dosificación típica del péptido antagonista de CGRP descrito en esta memoria puede variar dentro de un amplio intervalo y dependerá de diversos factores tales como las necesidades individuales de cada uno de los pacientes y de la vía de administración. Dosificaciones diarias ejemplares (p. ej., para la administración subcutánea) pueden ser de al menos 0,5 mg (p. ej., al menos 1 mg, al menos 5 mg, al menos 10 mg o al menos 15 mg) y/o a .lo sumo de aproximadamente 100 mg (p. ej., a lo sumo de aproximadamente 75 mg, a lo sumo de aproximadamente 50 mg, a lo sumo de aproximadamente 20 mg o a lo sumo de aproximadamente 15 mg) de un péptido antagonista de CGRP. La persona experta en la materia o el médico pueden considerar variaciones relevantes de este intervalo de dosificaciones e implementaciones prácticas para adaptarse a la situación actual.
En algunas realizaciones, la composición farmacéutica descrita en esta memoria se puede administrar una vez al día. En algunas realizaciones, la composición farmacéutica se puede administrar más de una vez al día (p. ej., dos veces al día, tres veces al día o cuatro veces al día).
Los siguientes ejemplos son ilustrativos y no pretenden ser limitativos.
Ejemplos
Métodos de Síntesis Generales
1. Derivados de aminoácidos
Derivados de aminoácidos se adquirieron de proveedores comerciales (tales como Aapptec, Chem Impex International, EMD Millipore, PPL, PepTech y Peptides International), excepto Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH. Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH se preparó como sigue: 50,0 g (105,8 mmol) de Fmoc-Orn(Boc)-OH se disolvieron en 100 mL de diclorometano (DCM). Posteriormente se añadieron 100 mL de ácido trifluoroacético (TFA). La mezcla de reacción se agitó magnéticamente durante 1 hora y los disolventes se evaporaron. Para eliminar el exceso de TFA, el residuo se reconstituyó en DCM y se evaporó varias veces. El residuo oleoso se disolvió en 400 mL de MeOH y 100 mL de acetona, seguido de 30 mL de ácido acético. La mezcla de reacción se agitó vigorosamente y se añadieron 120,0 g (0,57 mol, 5,4 eq) de NaBH(OAc)3 sólido en porciones de 10 g hasta que se consumió Fmoc-Orn-OH (aproximadamente 2 horas, vigilado por HPLC analítica). Luego se evaporaron los disolventes y el residuo sólido resultante se utilizó en la siguiente etapa sin purificación.
El residuo obtenido en la etapa anterior se disolvió en 100 mL de agua y se ajustó el pH de la solución a aproximadamente 9,5 con Na2CO3 sólido. Posteriormente se añadieron 100 mL de t-BuOH a la mezcla de reacción agitada magnéticamente. Luego se añadió en porciones a lo largo de 10 horas Boc2O (60,0 g, 275 mmol, 2,6 eq) en 100 mL de t-BuOH. El pH de la mezcla de reacción se mantuvo en aproximadamente 9,5 con la adición de Na2CO3 (ac.) saturado. Después de añadir la última porción de Boc2O, la mezcla de reacción se agitó durante 9 horas más. La mezcla de reacción se diluyó con 1 L de agua y se extrajo con 2 x 200 mL de hexano. La fase acuosa se acidificó con HCl 2 M y el producto se extrajo con dietil éter (3 x 300 mL). Los extractos orgánicos combinados se lavaron a fondo con HCl 2 M (3 x 200 mL) y agua y, posteriormente, se secaron sobre MgSO4 anhidro. El agente secante se separó por filtración y se evaporó el disolvente. El residuo sólido resultante se trató con éter de petróleo, se decantó y se secó en vacío. El producto cristalino se disolvió en 200 mL de t-BuOH y se liofilizó. Se obtuvieron 41,8 g (84 mmol, 79,5 % de rendimiento) del derivado liofilizado.
2. Síntesis de péptidos
Resinas se adquirieron de proveedores comerciales (p. ej., PCAS BioMatrix Inc. y EMD Millipore). Los ácidos carboxílicos para la introducción del grupo acilo N-terminal se obtuvieron de AstaTech, ChemBridge Corp. Frontier Scientific, J&W Pharmalab, Oakwood Products y TCI America. Todos los reactivos, productos químicos y disolventes adicionales se adquirieron de Sigma-Aldrich y VWR.
Los compuestos descritos en esta memoria se sintetizaron mediante métodos estándares en la química de péptidos en fase sólida utilizando la metodología Fmoc. Los péptidos se ensamblaron manual o automáticamente utilizando un sintetizador de péptidos Tribute (Protein Technologies Inc., Tucson, Arizona) o un sintetizador de péptidos 433A de Applied Biosystems, o mediante una combinación de síntesis manual y automática.
La HPLC preparativa se realizó en un sistema Waters Prep LC utilizando un cartucho PrepPack Delta-Pack C18, 300 Á, 15 pm, 47 x 300 mm a un caudal de 100 mL/min y/o en una columna Phenomenex Luna C18, 100 Á, 5 pm, 30 x 100 mm a un caudal de 40 mL/min. La HPLC analítica de fase inversa se realizó en un cromatógrafo de líquidos Agilent Technologies Serie 1200rr utilizando una columna Agilent Zorbax C18, 1,8 pm, 4,6 x 110 mm a un caudal de 1,5 mL/min. Los análisis de compuestos finales se realizaron en un cromatógrafo Agilent Technologies Serie 1200 mediante HPLC de fase inversa en una columna Phenomenex Gemini 110 Á C18, 3 pm, 2 x 150 mm a un caudal de 0,3 mL/min. Los espectros de masas se registraron en un espectrómetro de masas de electropulverización MAT Finnigan LCQ. A menos que se indique lo contrario, todas las reacciones se realizaron a temperatura ambiente. Las siguientes referencias brindan orientación adicional sobre la configuración experimental general, así como sobre la disponibilidad del material de partida y los reactivos necesarios: Kates, S.A., Albericio, F., Eds., Solid Phase Synthesis: A Practical Guide, Marcel Dekker, Nueva York , Basilea, 2000; Greene, T.W., Wuts, PGM, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley Sons Inc., 2a Edición, 1991; Stewart, J.M., Young, J.D., Solid Phase Synthesis, Pierce Chemical Company, 1984; Bisello et al., J. Biol. Chem.
1998, 273, 22498-22505; Merrifield, J. Am. Chem. Soc. 1963, 85, 2149-2154; y Chang y White P.D., 'Fmoc Solid Phase Synthesis: a Practical Approach', Oxford University Press, Oxford, 2000 .
Se utilizaron los siguientes grupos protectores para proteger los grupos funcionales de la cadena lateral de aminoácidos dados: Pbf (2,2,4,6,7-pentametildihidrobenzofuran-5-sulfonilo) para Arg; tBu (t-butilo) para Tyr y Asp; Boc (tbutoxicarbonilo) para Dab, Orn, Orn(iPr) y Lys; y Trt (tritilo) para Cys.
Acoplamientos de aminoácidos protegidos con Fmoc en el sintetizador Tribute se mediaron con HBTU/NMM en DMF, excepto para los derivados de cisteína que se acoplaron con DIC/HOBt en DMF. Durante la síntesis se utilizaron ciclos sencillos de 30-60 minutos con un exceso de 5 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc activados. La eliminación del grupo protector Fmoc se controló mediante UV. Se realizaron múltiples (hasta 10 veces, según fuese necesario) lavados de dos minutos de la resina peptídica con piperidina al 20 % en DMF.
Se utilizaron protocolos de ciclo especificados por Applied Biosystems en el sintetizador 433A. Los acoplamientos se mediaron con HATU/DIPEA o DIC/HOBt en DMF/NMP. Se emplearon acoplamientos sencillos de 35-50 minutos con un
exceso de 4 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc activados. La eliminación del grupo protector Fmoc se controló mediante UV y se consiguió mediante un sencillo lavado de 20 minutos con piperidina al 20 %/NMP.
Se emplearon acoplamientos mediados por DIC/HOBt en DMF para todos los aminoácidos en modo manual. Durante la síntesis se utilizaron ciclos individuales de al menos 2 horas con un exceso de hasta 3 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc activados. La completitud de los acoplamientos se evaluó con el test de ninhidrina (Kaiser). La eliminación del grupo protector Fmoc se logró con un solo lavado de 30 minutos de la resina peptídica con piperidina al 20 % en DMF.
Una vez completada la síntesis de péptidos, las resinas peptídicas se lavaron con DCM y se secaron en vacío. Las resinas se trataron con TFA que contenía cantidades variables de H2O (hasta 10 %) y diisopropilsilano (TIS; hasta 4 %) durante 2 horas para eliminar los grupos protectores de la cadena lateral con la escisión concomitante del péptido de la resina. Los péptidos se filtraron, se precipitaron con dietil éter y se decantaron. Para obtener péptidos con puentes disulfuro, el precipitado se disolvió en TFA puro o AcOH y la solución se vertió posteriormente en acetonitrilo al 10 % en agua. En algunos casos se añadió una cantidad adicional de acetonitrilo para solubilizar el sustrato. El péptido lineal se oxidó con I2 0,1 M en MeOH o AcOH. La solución oxidante se añadió gota a gota hasta que persistió el color amarillo. El exceso de yodo se redujo con ácido ascórbico. Luego se ajustó el pH a aproximadamente 4 con amoníaco concentrado. La solución obtenida se cargó directamente en una columna de HPLC prep y se eluyó con un gradiente de Componente B mostrado en la Tabla 3 que figura más adelante.
Cada uno de los péptidos brutos se purificó con Tampón T mostrado en la Tabla 3. Las fracciones con una pureza superior al 90 %, determinada por HPLC analítica de fase inversa, se agruparon y volvieron a cargar en la columna y se eluyeron con Tampón T para proporcionar sales trifluoroacetato. En algunos casos, se realizó una purificación adicional con Tampón C mostrado en la Tabla 3. Para obtener las sales de hidrocloruro, las fracciones de las operaciones con Tampón T o C se volvieron a cargar en la columna y la columna se lavó con 3-5 volúmenes de cloruro sódico 0,1 M en HCl 1 mM. El producto final se eluyó con Tampón H mostrado en la Tabla 3. Las fracciones se agruparon y liofilizaron. Se encontró típicamente que los compuestos así preparados tenían una pureza de al menos aproximadamente el 90 %.
Tabla 3. Composiciones de Tampones para HPLC Prep
Las síntesis de determinados compuestos ejemplares de fórmula (I) descritos en esta memoria se proporcionan a continuación.
Ejemplo 1: Síntesis de Compuesto 30
El péptido se ensambló manualmente a partir de 3,0 g (1,95 mmol) de resina Fmoc-Rink amida MBHA (EMD Millipore, número de catálogo 855003, 0,65 mmol/g). Se emplearon acoplamientos mediados por DIC/HOBt en DMF. Durante la síntesis se usaron ciclos individuales de al menos 2 horas con un exceso de hasta 3 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc activados. La completitud de los acoplamientos se evaluó con el test de ninhidrina. La eliminación del grupo protector Fmoc se consiguió con un único lavado de 30 minutos de la resina peptídica con piperidina al 20 % en DMF. Se utilizaron los siguientes derivados de aminoácidos para ensamblar el péptido unido a la resina: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe(2-Cbm)-OH y Fmoc-D-Val-OH. Después de ensamblar el fragmento de péptido 1-11, la resina se cubrió con ácido oxazol-2-carboxílico/DIC/HOBt (4 eq), se lavó a fondo con DCM y se secó en vacío. El péptido lineal bruto se escindió de la resina con 50 mL de TFA/H2O /TIS 96:2:2 (v/v/v) durante 2 horas. Después de evaporar el disolvente, el péptido bruto se precipitó con dietil éter y se decantó. El precipitado se disolvió en 1 L de TFA acuoso al 1 % y se oxidó con I20,1 M/MeOH. La solución oxidante se añadió gota a gota hasta que persistió el color amarillo. El exceso de yodo se redujo con ácido ascórbico sólido. Luego se ajustó el pH a aproximadamente 4 con amoníaco concentrado. La solución obtenida se cargó directamente en una columna de HPLC prep y se purificó con Tampón T. Las fracciones con una pureza > 90 %, determinada por HPLC analítica de fase inversa, se agruparon y se volvieron a cargar en la columna. La columna se equilibró con HCl 1 mM, se lavó con 3 volúmenes de NaCl 0,1 mM en HCl 1 mM y el compuesto se eluyó con Tampón H para proporcionar la sal hidrocloruro. Las fracciones se agruparon y liofilizaron. Se obtuvieron 1009,8 mg (0,63 mmol, 32,3% global basado en un contenido de péptido del 89,6 %) de polvo de péptido blanco (Compuesto 30).
La pureza del producto se determinó mediante HPLC analítica como 90,7 %. Los datos de MS observados y calculados (es decir, M+H) se proporcionan en la Tabla 4 que figura más adelante.
Ejemplo 2: Síntesis de Compuesto 40
La síntesis en fase sólida de este péptido se realizó en el sintetizador de péptidos Tribute utilizando la estrategia Fmoc. La resina de partida fue 0,23 g (0,15 mmol) de resina Rink Amide MBHA (EMD Millipore, número de catálogo 855003, malla 100-200, 0,65 mmol/g). Se emplearon acoplamientos mediados por DIC/HOBt en DMF para todos los aminoácidos, excepto para el ácido oxazol-2-carboxílico N-terminal que requería el método de acoplamiento HBTU/NMM. Durante la síntesis se utilizaron ciclos sencillos de 2 horas con un exceso de 3 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc activados. El grupo protector Fmoc se eliminó mediante tratamiento con piperidina al 20 % en DMF, 1 x 5 min y 1 x 25 min. Los siguientes derivados de aminoácidos se utilizaron consecutivamente para ensamblar el péptido unido a la resina: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(/Pr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe(2-Cbm)-OH y Fmoc-D-Val-OH. El grupo acilo N-terminal se introdujo tratando el fragmento peptídico unido a la resina (1-11) con una mezcla preactivada de ácido oxazol-2-carboxílico (0,5 mmol), HBTU (0,5 mmol) y DIEA (1,0 mmol) en DMF durante 4 horas. La resina peptídica ensamblada final se lavó con DCM y se secó en vacío. El péptido lineal bruto se escindió de la resina con 25 mL de TFA/H2O/TIS (94:3:3, v/v/v) durante 2,5 horas. El disolvente se evaporó en vacío y el péptido bruto se precipitó con dietil éter. El precipitado se recogió por filtración y luego se disolvió en 400 mL de TFA al 0,1 % en ACN al 5 % y se oxidó con I20,1 M/AcOH. La solución de yodo se añadió gota a gota hasta que persistió el color amarillo. El exceso de yodo se redujo con una solución saturada de ácido ascórbico en agua. La solución resultante se cargó directamente en una columna de HPLC preparativa y se purificó con Tampón T. Las fracciones con una pureza > 90 %, determinada por HPLC analítica de fase inversa, se agruparon y se liofilizaron en un liofilizador. Se obtuvieron 80,2 mg (45,0 gmol, rendimiento global del 30 % basado en un contenido de péptido estimado del 80 %) de polvo de péptido blanco (Compuesto 40).
La pureza del producto se determinó mediante HPLC analítica como 96,8 %. Los datos de MS observados y calculados (es decir, M+H) se proporcionan en la Tabla 4 que figura más adelante.
Ejemplo 3: Síntesis de Compuesto 62
El péptido se ensambló manualmente a partir de 3,0 g (1,77 mmol) de resina Rink amide MBHA (Novabiochem, número de catálogo 8.55003, 0,59 mmol/g), utilizando SPPS a alta temperatura (75 °C, baño de agua Lauda E100, recipiente de reacción encamisado de SPPS de 50 mL). Durante la síntesis se utilizaron ciclos únicos de al menos 15 minutos con un exceso de hasta 4 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc preactivados (HOBt, DIC, sin preactivación para Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH). El grupo protector Fmoc se eliminó con 2 lavados x 5 minutos de la resina peptídica con piperidina al 25 % en DMF. Se utilizaron los siguientes derivados de aminoácidos para ensamblar el péptido unido a la resina: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe-OH, Fmoc-Pro-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH y Fmoc-D-Val-OH. Después de ensamblar el fragmento de péptido 1-11, la resina se recubrió con ácido 3,5-difluoropicolínico/HATU/DIPEA (4 eq), se lavó minuciosamente con MeOH y se secó en vacío. El péptido lineal bruto se escindió de la resina con 75 mL de TFA/H2O/TIS 96:2:2 (v/v/v) durante 2 horas. Después de evaporar el disolvente, el péptido bruto se precipitó con dietil éter y se decantó. El precipitado se disolvió en 1 L de MeCN al 10 % en TFA acuoso al 0,5 % y se oxidó con l20,05 M/AcOH. La solución oxidante se añadió gota a gota hasta que persistió el color amarillo. El exceso de yodo se redujo con ácido ascórbico 1 M. La solución obtenida se cargó directamente en una columna de HPLC prep y se purificó con Tampón T modificado (Componente A: TFA al 0,01 %, Componente B: 95 % de acetonitrilo en TFA al 0,01 %). Las fracciones con una pureza > 95 %, determinada por HPLC analítica de fase inversa, se agruparon y se volvieron a cargar en la columna. La columna se equilibró con HCl 1 mM, se lavó con 3 volúmenes de NaCl 0,1 mM en HCl 1 mM y el compuesto se eluyó posteriormente con Tampón H para proporcionar la sal hidrocloruro. Las fracciones se agruparon y liofilizaron. Se obtuvieron 583 mg (0,63 mmol, 20 % total basado en un contenido de péptido del 87,3 % y una pureza del 98,8 %) de polvo de péptido blanco (Compuesto 62).
La pureza del producto se determinó mediante HPLC analítica como 98,8 %. Los datos de MS observados y calculados (es decir, M+H) se proporcionan en la Tabla 4 que figura más adelante.
Ejemplo 4: Síntesis del Compuesto 65
El compuesto se ensambló en fase sólida mediante una combinación de síntesis manual y automática. En primer lugar, el tripéptido C-terminal se sintetizó manualmente a partir de 7,3 g (3,5 mmol) de resina Fmoc-Rink amide Chem Matrix (Biotage, número de catálogo 7-600-1310-25, 0,48 mmol/g). Los acoplamientos mediados por HATU/DIPEA en DMF se emplearon para 3Pal y Phe(3-Cbm), y el acoplamiento mediado por DIC/HOBt en DMF se utilizó para Cys. Durante la síntesis se utilizaron ciclos individuales de al menos 2 horas con un exceso de hasta 3 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc activados. La completitud de los acoplamientos se evaluó con el test de ninhidrina. La eliminación del grupo protector Fmoc se logró con piperidina al 30 % en DMF utilizando dos lavados de 5 y 25 minutos, respectivamente. Se utilizaron los siguientes derivados de aminoácidos para ensamblar el péptido unido a la resina: Fmoc-3Pal-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH y Fmoc-Phe(3-Cbm)-OH. La síntesis continuó en el sintetizador 433A con un octavo (0,44 mmol) de la resina. Se emplearon acoplamientos mediados por HATU/DIPEA o DIC/HOBt (para Cys) en NMP/DMF. Durante la síntesis se utilizaron ciclos únicos de al menos 30 minutos con un exceso de hasta 5 veces de aminoácidos protegidos con Fmoc activados. La eliminación del grupo protector Fmoc se logró con un único lavado de 30 minutos de la resina peptídica con piperidina al 20 % en NMP. Se utilizaron los siguientes derivados de aminoácidos para terminar el ensamblaje del péptido unido a la resina: Fmoc-Dhp-OH, Fmoc-Gly-OH, Fmoc-Val-OH, Fmoc-Asp(tBu)-OH, Fmoc-Orn(iPr,Boc)-OH, Fmoc-Cys(Trt)-OH, Fmoc-Phe(2-Cbm)-OH y Fmoc-D-Val-OH. Después de ensamblar el fragmento de péptido 1-11, la resina se
tapó manualmente con ácido oxazol-2-carboxílico/HATU/DIPEA (4 eq), se lavó a fondo con DCM y se secó en vacío. El péptido lineal bruto se escindió de la resina con 50 mL de TFA/H2O/TIS 90:8:2 (v/v/v) durante 2 horas. El disolvente se evaporó y el péptido bruto se precipitó con MTBA, se centrifugó y se decantó. El precipitado se disolvió en 15 mL de AcOH y se vertió en 250 mL de acetonitrilo acuoso al 10 % (v/v) y se oxidó con I20,1 M/MeOH. La solución oxidante se añadió gota a gota hasta que persistió el color amarillo. El exceso de yodo se redujo con ácido ascórbico sólido. Luego se ajustó el pH a aproximadamente 4 con amoníaco concentrado. La solución obtenida se cargó directamente en una columna de HPLC prep y se purificó con Tampón T (consulte la tabla anterior). Las fracciones con una pureza > 90 %, determinada por HPLC analítica de fase inversa, se agruparon y liofilizaron. Se obtuvieron 116,2 mg (0,06 mmol, 14,1 % global basado en un contenido de péptido del 78,5 %) de polvo de péptido blanco (Compuesto 65).
La pureza del producto se determinó mediante HPLC analítica como 98,3 %. Los datos de MS observados y calculados (es decir, M+H) se proporcionan en la Tabla 4 que figura más adelante.
Ejemplo 5: Síntesis de Compuestos 1-29, 31-39, 41-61,63, 64 y 66-70
Compuestos 1-29, 31-39, 41-61, 63, 64 y 66-70 se sintetizaron utilizando los métodos descritos en los Ejemplos 1-4. Compuestos 1,3 a 5, 7, 11 a 13, 16 a 23, 26, 29, 31 a 34, 36, 37, 47 a 53 y 56 no están de acuerdo con la invención y están presentes únicamente con fines ilustrativos.
Los datos de MS observados y calculados (es decir, M+H) de Compuestos 1-70 se resumen en la Tabla 4 que figura a continuación.
Tabla 4
Ejemplo 6: Actividad antagonista del receptor de CGRP medida por ensayo cAMP
Los agonistas de los receptores de CGRP aumentan el monofosfato de adenosina cíclico (cAMP, por sus siglas en inglés) intracelular. Los antagonistas de los receptores de CGRP pueden reducir el efecto agonista. La actividad antagonista se evaluó midiendo el monofosfato de adenosina cíclico (cAMP) utilizando una línea celular que expresaba de forma estable el receptor hCGRP (GeneBLAzer® CALCRL:RAMP 1-CRE-bla Freestyle™ 293F, Invitrogen). Las células que expresan el receptor hCGRP se mantuvieron en DMEM alto en glucosa con GlutaMAX™ que contenía FBS al 10 % (v/v), NeAA 0,1 mM, HEPES 25 mM, 5 ug/ml de blasticidina, 100 ug/ml de higromicina y 400 ug/ml de geneticina. a 37 °C bajo 5 % de CO2 en una atmósfera humidificada. Para la medición de AMPc, las células se lavaron una vez con 5 ml de 1X PBS, el medio de mantenimiento celular se reemplazó por tampón compuesto ((CB, por su siglas en inglés): DMEM que contenía BSA al 0,1 % e IBMX 0,5 mM) y los matraces se incubaron durante 1 hora a 37 °C en 5% de CO2 en una atmósfera humidificada. Las células se extrajeron de los matraces de cultivo utilizando un tampón de disociación celular no enzimático y se recogieron en CB. La reacción se realizó en placas blancas de pequeño volumen de 384 pocillos (Greiner) a una densidad de 10.000 células/pocillo. Las células se expusieron a concentraciones variables de compuestos antagonistas durante 30 minutos en presencia de una concentración fija de agonista (a-CGRP humano). Los niveles de cAMP se midieron utilizando un inmunoensayo de cAMP competitivo basado en HTRF (fluorescencia resuelta en el tiempo homogéneo, por sus siglas en inglés) (kit cAMP Dynamic 2, Cisbio), de acuerdo con las instrucciones del fabricante. Se calculó la relación de lecturas de fluorescencia resueltas en el tiempo (RFU, por sus siglas en inglés) de 665 nm y 615 nm y un sitio de unión único, modelo de respuesta de concentración de cuatro parámetros: (MIN+((MAX-MIN)/(1+((CE50/x)A Hill)))), se utilizó para realizar un análisis de regresión no lineal, generando la curva de concentración-respuesta. Los parámetros reseñados incluyen la potencia antagonista CI50 (la concentración que provoca la mitad de la inhibición máxima de la respuesta agonista para compuestos antagonistas) y la eficacia (% MPE: porcentaje del efecto máximo posible).
Compuestos 1-70 y tres compuestos peptídicos de referencia se testaron en el ensayo anterior. Los tres compuestos peptídicos de referencia son: (1) Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Agp-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2 ("Compuesto de Referencia 1", es decir, Compuesto 36 en Yan et al., J. Pept. Sci.2011, 17, 383-386), (2) Bz-D-Val-Tyr-c(Cys-Dpr-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2 ("Compuesto de Referencia 2", Compuesto 33 en Yan et al., J. Pept. Sci. 2011, 17, 383-386)
y (3) H-Val-Thr-His-Arg-Leu-Ala-Gly-Leu-Leu-Ser-Arg-Ser-Gly-Gly-Val-Val-Lys-Asn-Asn-Phe-Val-Pro-Thr-Asn-Val-Gly-Ser-Lys-Ala-Phe-NH2 ("Compuesto de Referencia 3", antagonista de a-CGRP(8-37)-NH2 humano). Los resultados se resumen en la Tabla 5 que figura más adelante.
Tal como se muestra en la Tabla 5, Compuestos 1-70 exhibieron generalmente una potencia mejorada en comparación con los Compuestos de Referencia 1-3.
Ejemplo 7: Actividad antagonista del receptor AM2 medida por ensayo cAMP
La actividad antagonista para el receptor de adrenomedulina AM2 se determinó utilizando el método descrito en el Ejemplo 6 anterior, con las siguientes modificaciones. En lugar de células GeneBLAzer® CALCRL:RAMP 1-CRE-bla Freestyle™ 293F se utilizaron células GeneBLAzer® CALCRL :RAMP3-CRE-bla Freestyle™ 293F para testar la actividad en los receptores hAM2. El agonista fue adrenomedulina humana, en lugar de a-CGRP.
En este ensayo se ensayaron Compuestos 1-70 y los tres compuestos peptídicos de referencia descritos en el Ejemplo 6. Los resultados se resumen en la Tabla 5 que figura a continuación. En la Tabla 5, la relación de selectividad para hCGRP sobre hAM2 se calcula como CI50 hAM2-R/CI50 hCGR-PR.
Como se muestra en la Tabla 5, una mayoría de Compuestos 1 -70 exhibieron una selectividad mejorada para el receptor hCGRP sobre el receptor hAM2 en comparación con los Compuestos de Referencia 1-3. Compuestos 1,3 a 5, 7, 11 a 13, 16 a 23, 26, 29, 31 a 34, 36, 37, 47 a 53 y 56 no están de acuerdo con la invención y están presentes únicamente con fines ilustrativos.
Tabla 5.
Otras realizaciones están dentro del alcance de las siguientes reivindicaciones.
Claims (16)
1. Un compuesto de fórmula (I) o un sal farmacéuticamente aceptable del mismo:
en donde
m es 0, 1,2, 3, 4 o 5;
p es 0, 1, 2 o 3;
A es un enlace carbono-carbono sencillo o doble;
Ar1 es heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, nitro, alquilo C1-C4, hidroxialquilo C1-C4, ORa o N(RaRa), en que cada uno de los Ra, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Ra', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ;
Ar2 es arilo o heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, ciano, nitro, alquilo C1-C4 , aminoalquilo C1-C4, hidroxialquilo C1-C4, ORb, N(RbRb'), C(O)-N(RbRb') o NH-C(O)-N(RbRb'), en donde cada uno de los Rb, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rb', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ;
Ar34567es arilo o heteroarilo de 5 o 6 miembros, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente halógeno, alquilo C1-C4 , hidroxialquilo C1-C4, ORc o N(RcRc), en que cada uno de los Rc, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rc', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ;
cada uno de los R1, independientemente, es alquilo C1-C4, aminoalquilo C1-C4 , hidroxialquilo C1-C4, ORd o C(O)-N(RdRd'), en que cada uno de los Rd, independientemente, es H o alquilo C1-C4 y cada uno de los Rd', independientemente, es H o alquilo C1-C4 ;
R2 es -(CH2)n-R, en que n es 0, 1,2 o 3 y R es N(CH3)2, NH(CH(CH3)2), NH-C(O)-CH(NH2)-(CH2)4-N(CH3)2, NH-C(O)-CH2-(OCH2CH2)2-n H2 , 3-amino-1,2,4-triazol-5-ilo, N(CH2CH3)2 o guanidino sustituido con CH3 ; y
cada uno de los R3, independientemente, es halógeno, alquilo C1-C4 u ORf , en que cada uno de los Rf, independientemente, es H o alquilo C1-C4.
2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde Ar1 es piridinilo, oxazolilo, tiazolilo, imidazolilo, pirimidinilo, pirolilo o triazolilo, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada uno de los sustituyentes independientemente F, Cl, NO2 , CH3, CH2OH o NH2.
3. El compuesto de la reivindicación 1, en donde Ar2 es fenilo o piridinilo, cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes, siendo cada sustituyente independientemente CH2NH2, C(O)NH2 , OH, CN, CH2OH, NH2 o NH-C(O)-NH2.
4. El compuesto de la reivindicación 1, en donde Ar3 es piridinilo.
5. El compuesto de la reivindicación 1, en donde m es 1.
6. El compuesto de la reivindicación 5, en donde R1 es OH, C(O)NH2 o CH2NH2.
7. El compuesto de la reivindicación 1, en donde n es 0, 1 o 2.
8. El compuesto de la reivindicación 1, en donde p es 0.
9. El compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto es Oxazol-2-carbonil-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2.
10. El compuesto de la reivindicación 1, en donde el compuesto es
Picolinoil-D-Val-Tyr-c(Cys-Dab(Et2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil-D-Val-Tyr-c(Cys-Dab(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(Et2)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-3Pal-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2;
Oxazol-2-carbonil-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2;
Oxazol-2-carbonil-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-CH2NH2)-Cys)-3Pal-NH2;
Oxazol-2-carbonil-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-4Aph-Cys)-3Pal-NH2;
Oxazol-2-carbonil-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-4Uph-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(3,5-F2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2;
Oxazol-2-carbonil-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2;
Oxazol-2-carbonil-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(5-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(2-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2;
Oxazol-2-carbonil-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2;
Picolinoil(5-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2; o
Picolinoil-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn(iPr)-Asp-Val-Gly-Dhp-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2.
11. Una composición farmacéutica que comprende el compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 y un soporte farmacéuticamente aceptable.
12. La composición farmacéutica de la reivindicación 11, en donde la composición comprende una solución acuosa.
13. La composición farmacéutica de la reivindicación 12, en donde la composición comprende una solución acuosa de cloruro sódico.
14. La composición farmacéutica de la reivindicación 13, en donde la solución acuosa comprende aproximadamente 0,9 % en peso de cloruro sódico.
15. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para, o para uso en el tratamiento de la migraña.
16. Un compuesto seleccionado de:
Picolinoil-D-Val-Tyr-c(Cys-Orn-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(4-CH2OH)-Cys)-3Pal-NH2; o
Picolinoil(3,5-F2)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2; o
Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-3Pal-Cys)-3Pal-NH2; o
Bz(4-F)-D-Val-Tyr-c(Cys-Dpr-Asp-Val-Gly-Pro-Phe(3-Cbm)-Cys)-3Pal-NH2; o
Bz(4-F)-D-Val-Phe(2-Cbm)-c(Cys-Arg-Asp-Val-Gly-Pro-Phe-Cys)-3Pal-NH2.
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