ES2910225T3

ES2910225T3 - Síntesis de ent-progesterona e intermediarios de la misma

Info

Publication number: ES2910225T3
Application number: ES15841632T
Authority: ES
Inventors: Daniel E Levy; John W Cran
Original assignee: PREVACUS Inc; Florida State University Research Foundation Inc
Current assignee: PREVACUS Inc; Florida State University Research Foundation Inc
Priority date: 2014-09-17
Filing date: 2015-09-17
Publication date: 2022-05-12
Anticipated expiration: 2035-09-17
Also published as: BR112017005167A2; EP3194418A1; WO2016044558A1; ZA201701976B; EA201790428A1; AR101951A1; TW201619183A; US20160108081A1; EP3194418B1; UY36306A; TN2017000088A1; IL251237A0; CL2017000645A1; MA39411A; EP3194418A4; CN108064228A; AU2015317651A1; SG11201702115SA; CA2961628A1; JP2017535596A

Abstract

Un método para preparar ent-progesterona, el método comprende la etapa de (a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula U: **(Ver fórmula)** para formar un intermediario de tricetona de fórmula U': **(Ver fórmula)** a través de las etapas de: i. poner en contacto el compuesto de fórmula U con un reactivo dihidroxilante que es un reactivo de osmio o un reactivo de manganeso, para formar así un diol vecinal, y, ii. escindir oxidativamente el diol vecinal, para formar así el compuesto de fórmula U', y (b) ciclar el compuesto de fórmula U' para formar ent-progesterona.

Description

DESCRIPCIÓN

Síntesis de ent-progesterona e intermediarios de la misma

Campo de la invención

La presente invención se refiere al método para preparar ent-progesterona.

Antecedentes

La progesterona es una hormona esteroide C-21 que se involucra en el ciclo menstrual femenino, el embarazo y la embriogénesis de humanos y otras especies. La progesterona pertenece a una clase de hormonas llamadas progestágenos y es el principal progestágeno humano natural.

La progesterona se produce naturalmente por los ovarios de los mamíferos, pero también puede producirse por algunas plantas y levaduras. Una semisíntesis económica de progesterona a partir del esteroide vegetal diosgenina que se aísla del ñame se desarrolló por Russell Marker en 1940 para la compañía farmacéutica Parke-Davis [Marker Re , Krueger J (1940). "Esterales. cX iI. Sapogeninas. XLI. La preparación de Trillin y su conversión a progesterona". J. Am. Chem. Soc. 62 (12): 3349-3350]. Esta síntesis se conoce como degradación de Marker. También se reportan semisíntesis adicionales de progesterona a partir de una variedad de esteroides. Por ejemplo, la cortisona puede desoxigenarse simultáneamente en las posiciones C-17 y C-21 mediante tratamiento con yodotrimetilsilano en cloroformo para producir 11-ceto-progesterona (cetogestina), que a su vez puede reducirse en la posición 11 para producir progesterona. [Numazawa M, Nagaoka M, Kunitama Y (Septiembre de 1986). "Regiospecific deoxygenation of the dihydroxyacetone moiety at C-17 of corticoid steroids with iodotrimethylsilane". Chem. Pharm. Bull. 34 (9): 3722-6].

Una síntesis total de progesterona se reportó en 1971 por W.S. Johnson. [Johnson WS, Gravestock MB, McCarry BE (Agosto de 1971). "Acetylenic bond participation in biogenetic-like olefinic cyclizations. II. Synthesis of dlprogesterone". J. Am. Chem. Soc. 93 (17): 4332-4].

El uso de progesterona y sus análogos tiene muchas aplicaciones médicas, tanto para abordar situaciones agudas como para abordar la disminución a largo plazo de los niveles naturales de progesterona. Otros usos de la progesterona incluyen la prevención del parto prematuro, el control del sangrado por anovulación, el aumento de la elasticidad de la piel y la fortaleza de los huesos y el tratamiento de la esclerosis múltiple.

La progesterona también es útil para el tratamiento de lesiones cerebrales traumáticas: reduce los malos resultados posteriores tras la lesión al inhibir los factores inflamatorios (TNF-a e IL-113) y, posteriormente, reducir el edema cerebral (Pan, D., y otros (2007), Biomed Environ Sci 20, 432-438; Jiang, C., y otros (2009), Inflamm Res 58, 619 624.) Progesterone-treated rats have demonstrated significant improvements on a Neurological Severity Score (test for motor and cognitive functioning) following injury (Roof, R. L., y otros (1992), Restor Neurol Neurosci 4, 425-427). La progesterona atenúa eficazmente el edema en roedores de ambos sexos después de una lesión.Djebaili, M., y otros (2005), J Neurotrauma 22, 106-118)). La administración de Progesterona o su derivado alopregnanolona (ALLO) también resulta en una disminución de la presencia de los factores de muerte celular (caspasa-3) y gliosis (GFAP) (Cutler, S. M., y otros (2007), J Neurotrauma 24, 1475-1486 ) después de una lesión (Van Landingham, J. W., y otros (2007), Neurosci Lett 425, 94-98; Wright, D. W., y otros (2007), Ann Emerg Med 49, 391-402, 402 e391-392). Véase también, Progesterone for the Treatment of Traumatic Brain Injury (ProTECT III), ClinicalTrials.gov Identificador: NCT00822900; Efficacy and Safety Study of Intravenous Progesterone in Patients With Severe Traumatic Brain Injury (SyNAPSe), ClinicalTrials.gov Identificador: NCT01143064; Progesterone Treatment of Blunt Traumatic Brain Injury, ClinicalTrials.gov Identificador: NCT00048646 y Blood Tests to Study Injury Severity and Outcome in Traumatic Brain Injury Patients (BioProTECT), ClinicalTrials.gov Identificador: NCT01730443. Véase además, ProTECTTmIII, Progesterone for the Treatment of Traumatic Brain Injury en http://sitemaker.umich.edu/protect/home; Progesterone for Traumatic Brain Injury Tested in Phase III Clinical Trial en http://www.sciencedaily.com/releases/2010/02/100219204407.htm; BHR Pharma Investigational Traumatic Brain Injury Treatment Receives European Medicines Agency Orphan Medicinal Product Designation en http://finance.yahoo.com/news/bhr-pharma-investigational-tractigational-brain-151600948.html y BHR Pharma SyNAPSe® Trial DSMB Data Analyses Determine No Safety Issues; Study Should Continue to Conclusion en http://www.prnewswire.com/news-releases/bhr-pharma-synapse-trial-dsmb-data-analyses-determine-no-safetyissues-study-should-continue-to- conclusión-187277871.html.

La progesterona existe en una forma enantiomérica no natural conocida como ent-progesterona.

ent-progesterona

Se demostró que la ent-progesterona tiene la misma eficacia que la progesterona para reducir la muerte celular, la hinchazón del cerebro y la inflamación. Además, la ent-progesterona tiene tres veces la actividad antioxidante de la progesterona. De manera similar, se descubrió que la ent-progesterona tiene menos efectos secundarios sexuales, tales como la supresión de la espermatogénesis; la inhibición de la conversión de testosterona en dihidrotestosterona; la reducción del tamaño de los testículos, epidídimo y células de Leydig y ningún riesgo hipercoagulante como puede observarse con la progesterona. Además, las utilidades de la ent-progesterona se describieron en la solicitud de patente de EE. UU. No. 13/645 881, que se presentó el 5 de octubre de 2012 y se titula "Nasal Delivery Mechanism for Prophylactic and Post-Acute Use for Progesterone and/or Its Enantiomer for Use in Treatment of Mild Traumatic Brain Injuries", solicitud de patente de EE. UU. No. 13/645854, que se presentó el 12 de octubre de 2012 y se titula "Prophylactic and Post-Acute Use of Progesterone and Its Enantiomer to Better Outcomes Associated with Concussion" y solicitud de patente de EE. UU. 13/645,925, que se presentó el 12 de octubre de 2012 y se titula Prophylactic and Post-15 Acute Use of Progesterone in Conjunction with Its Enantiomer for Use in Treatment of Traumatic Brain Injuries". Véase también VanLandingham y otros, Neuropharmacology, The enantiomer of progesterone acts as a molecular neuroprotectant after traumatic brain injury, 2006, 51, 1078- 1085. Sin embargo, es difícil sintetizar ent-progesterona. Los intentos previos de sintetizar ent-progesterona adolecen de dificultades tales como: bajos rendimientos, condiciones peligrosas, etapas de reacción peligrosas, numerosas etapas de reacción y etapas de reacción costosas. Estas dificultades para sintetizar ent-progesterona hacen inviable el uso comercial de ent-progesterona y el escalado de la producción de ent-progesterona. WO2010/088409 describe composiciones y métodos para tratar o prevenir lesiones del sistema nervioso mediante el uso de ent-progesterona y también describe la síntesis de este compuesto.

Como tal, existe la necesidad de una síntesis eficiente de ent-progesterona.

Resumen de la invención

En un aspecto, la invención proporciona un método para preparar ent-progesterona que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula U:

para formar un intermediario de tricetona de fórmula U'

a través de las etapas de:

poner en contacto el compuesto de fórmula U con un reactivo dihidroxilante que es un reactivo de osmio o un reactivo de manganeso, para formar así un diol vecinal, y,

escindir oxidativamente el diol vecinal, para formar así el compuesto de fórmula U',

seguido de la ciclización del compuesto de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona.

Cualquier experto en la técnica reconocerá que existen muchos métodos para convertir olefinas en dioles vecinales. La presente invención hace uso de reacciones de dihidroxilación mediante el uso de reactivos de osmio que incluyen tetróxido de osmio o reactivos de manganeso, y reacciones que comprenden una primera etapa de formación de un epóxido seguido de una segunda etapa de hidrolización de un epóxido. También se apreciará que hay muchos reactivos útiles para la escisión oxidativa de dioles vecinales. Los reactivos útiles para la escisión oxidativa de dioles vecinales incluyen, pero no se limitan a, peryodato de sodio y tetraacetato de plomo.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar ent-progesterona que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula A:

con bromuro metálico para producir 5-bromopent-2-ino, en donde LG representa un grupo saliente. En ciertas modalidades, el grupo saliente se selecciona del grupo que incluye, pero no se limita a, tosilato, mesilato, triflato, bromuro, cloruro y yoduro. En algunas otras modalidades, LG es un grupo tosilato.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para el 5-bromopent-2-ino, el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula A:

en donde LG representa un grupo saliente, con un bromuro de metal, para producir 5-bromopent-2-ino.

En ciertas modalidades de los aspectos anteriores, el grupo saliente se selecciona del grupo que incluye, pero no se limita a, tosilato, mesilato, triflato, bromuro, cloruro y yoduro. En algunas otras modalidades, ^lG es un grupo tosilato. En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar ent-progesterona que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula D: Et0-2(

con tal como hidruro de diisobutilaluminio para formar un compuesto de fórmula E:

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar un compuesto de fórmula E:

que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula D:

con un agente reductor tal como hidruro de diisobutilaluminio para formar el compuesto de fórmula E.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar ent-progesterona, el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula V:

con alcohol propargílico para formar un compuesto de fórmula W:

Dicha reacción se puede realizar, por ejemplo, en condiciones de acoplamiento de Sonogashira, por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio y/o cobre.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar un compuesto de fórmula W:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula V:

con alcohol propargílico para formar el compuesto de fórmula W. Como se mencionó anteriormente, dicha reacción se puede realizar, por ejemplo, en condiciones de acoplamiento de Sonogashira, por ejemplo, en presencia de un catalizador de paladio y/o cobre.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar ent-progesterona que comprende la etapa de hidrogenar un compuesto de fórmula W:

para formar un compuesto de fórmula X:

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar un compuesto de fórmula X:

el método comprende la etapa de hidrogenar un compuesto de fórmula W:

para formar el compuesto de fórmula X.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar ent-progesterona que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de

fórmula K:

con un compuesto de fórmula M:

para formar un compuesto de fórmula N:

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar un compuesto de fórmula N:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula K:

V K

con un compuesto de fórmula M:

para formar el compuesto de fórmula N.

En ciertas modalidades de los aspectos anteriores, la reacción de K y M es en presencia de un compuesto de litio. En otras modalidades, la reacción de K y M se realiza en presencia de un disolvente. En algunas otras modalidades, el disolvente es dimetil-2-imidazolidinona o 1,3-dimetil1-3,4,5,6-tetrahidro-2(1H)-pirimidinona o hexametilfosforamida o mezclas de los mismos.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar ent-progesterona que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula U:

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de una tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona. El compuesto U se puede preparar mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula A:

con bromuro metálico para producir 5-bromopent-2-ino, en donde LG representa un grupo saliente. En ciertas modalidades, el grupo saliente se selecciona del grupo que incluye, pero no se limita a, tosilato, mesilato, triflato, bromuro, cloruro y yoduro. En ciertas modalidades, LG es un grupo tosilato.

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de una tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula D:

con hidruro de diisobutilaluminio para formar un compuesto de fórmula E:

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de una tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula K: K

con un compuesto de fórmula M:

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar ent-progesterona que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula U: \,,,,-0

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de una tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula H:

con un compuesto de fórmula S:

para formar un compuesto de fórmula T:

en donde cada ejemplo de R es independientemente un grupo alquilo C1-C4 lineal o ramificado o un grupo cicloalquilo C3-C8. El compuesto de fórmula T puede usarse para preparar un compuesto de fórmula U, por ejemplo, mediante la adición de un grupo metilo sintón (mediante el uso de, por ejemplo, metil litio o un reactivo de metil Grignard tal como bromuro de metilmagnesio) seguido de la ciclización (por ejemplo, mediante el uso de un catalizador ácido tal como el ácido trifluoroacético). En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar un compuesto de fórmula U:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula H:

con un compuesto de fórmula S:

para formar un compuesto de fórmula T:

en donde cada ejemplo de R es independientemente un grupo alquilo C1-04 lineal o ramificado o un grupo cicloalquilo C3-C8, y la ciclización del compuesto de fórmula T para formar el compuesto de fórmula U.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporciona un método para preparar un compuesto de fórmula T:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula H:

en donde cada ejemplo de R es independientemente un grupo alquilo C1-04 lineal o ramificado o un grupo cicloalquilo C3-C8, con un compuesto de fórmula S:

para formar el compuesto de fórmula T.

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de una tricetona de fórmula U' para formar ent-progesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula E:

con un compuesto de fórmula R:

para formar un compuesto de fórmula T:

en donde cada ejemplo de R es independientemente un grupo alquilo C1-04 lineal o ramificado o un grupo cicloalquilo C3-C8.

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula E:

con un compuesto de fórmula R:

en donde cada ejemplo de R es independientemente un grupo alquilo C1-04 lineal o ramificado o un grupo cicloalquilo C3-C8,

para formar el compuesto de fórmula T.

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de una tricetona de fórmula U' para formar ent-progesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula V:

con alcohol propargílico para formar un compuesto de fórmula W:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula V:

con alcohol propargílico para formar el compuesto de fórmula W

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de la tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hidrogenación de un compuesto de fórmula W:

para formar un compuesto de fórmula X:

el método comprende la etapa de

hidrogenación de un compuesto de fórmula W:

para formar el compuesto de fórmula X.

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de la tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula E:

Con un compuesto de fórmula Q : para formar un compuesto de fórmula T:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula E:

con un compuesto de fórmula Q:

para formar el compuesto de fórmula T.

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de una tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona, en donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula I:

con un compuesto de fórmula S:

para formar un compuesto de fórmula T:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula I:

con un compuesto de fórmula S:

para formar el compuesto de fórmula T.

para formar una tricetona de fórmula U'

seguido de la ciclización de la tricetona de fórmula U' (por ejemplo, en presencia de una base) para formar entprogesterona, donde el compuesto U se prepara mediante un método que comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula I:

para formar un compuesto de fórmula Y:

para formar un compuesto de fórmula T:

el método comprende la etapa de hacer reaccionar un compuesto de fórmula I:

con un compuesto de fórmula Y:

para formar el compuesto de fórmula T. En ciertas modalidades, la etapa de reacción se realiza en presencia de una base fuerte tal como fenil litio.

De acuerdo con otros métodos no de acuerdo con la invención, la ent-progesterona enantioméricamente enriquecida puede obtenerse por separación de enantiómeros, ya sea de un intermediario racémico o de progesterona racémica. Por lo tanto, la presente invención contempla además un método para preparar ent-progesterona al aislar entprogesterona enantioméricamente enriquecida a partir de progesterona racémica, por ejemplo, progesterona producida por cualquiera de los métodos descritos en la presente descripción. La presente invención también contempla la preparación de ent-progesterona al hacer reaccionar un intermediario enriquecido enantioméricamente, por ejemplo, el intermediario U o U' enriquecido enantioméricamente que se describe en la presente descripción y la transformación del intermediario enriquecido enantioméricamente a través de una o más etapas de reacción para proporcionar ent-progesterona.

En un aspecto no de acuerdo con la invención, se proporcionan uno o más intermediarios del método de síntesis de la invención. En ciertos aspectos, el intermediario es un compuesto que tiene una de las siguientes fórmulas:

Debe entenderse además que el resumen anterior de la presente invención no pretende describir cada modalidad descrita o cada implementación de la presente invención. La descripción ejemplifica además modalidades ilustrativas. En varios lugares a lo largo de la especificación, se proporciona orientación a través de ejemplos, cuyos ejemplos pueden usarse en varias combinaciones. En cada ejemplo, los ejemplos sirven solo como grupos representativos y no deben interpretarse como ejemplos exclusivos.

Descripción detallada

A modo de ilustrar y proporcionar una apreciación más completa de la presente invención y muchas de las ventajas concomitantes de la misma, se da la siguiente descripción detallada y los ejemplos que se relacionan con las síntesis novedosas para hacer ent-progesterona, las etapas individuales novedosas dentro de las síntesis y los intermediarios individuales novedosos que se forman durante las síntesis novedosas de la presente invención. Como se usa en la descripción de la invención y las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares "un", "una" y "el" se usan indistintamente y pretenden incluir también las formas plurales y que estén dentro de cada significado, a menos que el contexto indique claramente de lo contrario. Además, como se usa en la presente descripción, "y/o" se refiere y abarca todas y cada una de las posibles combinaciones de uno o más de los elementos que se enumeran, así como la falta de combinaciones cuando se interpreta en la alternativa ("o").

Como se usa en la presente descripción, "al menos uno" pretende significar "uno o más" de los elementos que se enumeran.

El término "alquilo" se refiere a un radical de cadena hidrocarbonada, lineal o ramificada, que consta únicamente de átomos de carbono e hidrógeno, que no contiene insaturación, que tiene de uno a ocho átomos de carbono, y que se une al resto de la molécula por un enlace simple, tal como por ejemplo, metilo, etilo, n-propil 1-metiletilo (isopropilo), n-butilo, n-pentilo y 1,1 -dimetiletilo (terc-butilo).

El término "cicloalquilo" denota un sistema de anillo mono o multicíclico no aromático de 3 a 12 átomos de carbono, tales como el ciclopropilo, el ciclobutilo, el ciclopentilo, el ciclohexilo y ejemplos de grupos cicloalquilo multicíclicos que incluyen grupos perhidronaftilo, adamantilo y norbornilo, con puentes cíclicos o grupos espirobicíclicos, por ejemplo espiro(4,4)non-2-ilo.

El término "grupo saliente" o "LG", como se usa en la presente descripción, se refiere a cualquier grupo que se va en el curso de una reacción química que involucra al grupo e incluye, pero no se limita a, halógeno, brosilato, mesilato, tosilato, triflato, p-nitrobenzoato, grupos fosfonato, por ejemplo.

Las formas verbales singulares incluyen las formas verbales plurales y se usan indistintamente en la presente descripción, cuando corresponda, y están comprendidas en cada una de las acepciones, a menos que se indique expresamente lo contrario.

Salvo que se indique lo contrario, las formas en mayúsculas y no mayúsculas de un término se incluyen dentro del significado del término.

A menos que se indique lo contrario, debe entenderse que todos los números que expresan cantidades, proporciones y propiedades numéricas de los ingredientes, condiciones de reacción, etc., que se usan en la especificación y las reivindicaciones se contemplan para poder modificarse en todos los casos por el término "aproximadamente".

Todas las partes, porcentajes, proporciones, etc. de esta descripción son en peso a menos que se indique lo contrario.

Métodos generales de preparación

El proceso particular a utilizarse en la preparación de los compuestos que se usan en esta modalidad de la presente invención depende del compuesto específico que se desea. Dichos factores como la selección de los sustituyentes específicos juegan un papel en el camino a seguir en la preparación de los compuestos específicos de esta invención. Esos factores se reconocen fácilmente por un experto en la técnica.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar mediante el uso de reacciones y procedimientos químicos que se conocen. Sin embargo, los siguientes métodos generales de preparación se presentan para ayudar al lector a sintetizar los compuestos de la presente invención, con ejemplos particulares más detallados que se presentan a continuación en la sección experimental que describe ejemplos de trabajo ejemplares.

Los compuestos de la presente invención pueden hacerse de acuerdo con métodos químicos convencionales y/o como se describe a continuación, a partir de materiales de partida que están disponibles comercialmente o que pueden producirse de acuerdo con métodos químicos convencionales de rutina. Los métodos generales para la preparación de los compuestos se dan a continuación, y la preparación de los compuestos representativos se ilustra específicamente en ejemplos

Las transformaciones sintéticas que pueden emplearse en la síntesis de ciertos compuestos de esta invención y en la síntesis de ciertos intermediarios que se involucran en la síntesis de compuestos de esta invención son conocidas o accesibles para los expertos en la técnica. Las colecciones de transformaciones sintéticas se pueden encontrar en compilaciones, tales como:

J. March. Advanced Organic Chemistry, 4th ed.; John Wiley: New York (1992)

R.C. Larock. Comprehensive Organic Transformations, 2nd ed.; Wiley-VCH: New York (1999)

F. A. Carey; R.J. Sundberg. Advanced Organic Chemistry, 2nd ed.; Plenum Press: New York (1984) T.W. Greene; P.G.M. Wuts. Protective Groups in Organic Synthesis, 3rd ed.; John Wiley: New York (1999) L.S. Hegedus. Transition Metals in the Synthesis of Complex Organic Molecules, 2nd ed.; University Science Books: Mill Valley, CA (1994)

L.A. Paquette, Ed. The Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis; John Wiley: New York (1994)

A. R. Katritzky; 0. Meth-Cohn; C.W Rees, Eds. Comprehensive Organic Functional Group Transformations; Pergamon Press: Oxford, UK (1995)

G. Wilkinson; F.G A. Stone; E.W. Abel, Eds. Comprehensive Organometallic Chemistry; Pergamon Press: Oxford, UK (1982)

B. M. Trost; I. Fleming. Comprehensive Organic Synthesis; Pergamon Press: Oxford, UK (1991)

A.R. Katritzky; C.W. Rees Eds. Comprehensive Heterocylic Chemistry; Pergamon Press: Oxford, UK (1984) A.R. Katritzky; C.W. Rees; E.F.V. Scriven, Eds. Comprehensive Heterocylic Chemistry 11; Pergamon Press: Oxford, UK (1996)

C. Hansch; P.G. Sammes; J.B. Taylor, Eds. Comprehensive Medicinal Chemistry: Pergamon Press: Oxford, UK (1990).

Además, las revisiones periódicas de la metodología sintética y los temas relacionados incluyen Organic Reactions; John Wiley: New York; Organic Syntheses; John Wiley: New York; Reagents for Organic Synthesis: John Wiley: New York; The Total Synthesis of Natural Products; John Wiley: New York; The Organic Chemistry of Drug Synthesis; John Wiley: New York; Annual Reports in Organic Synthesis; Academic Press: San Diego CA y Methoden der Organischen Chemie (Houben-Weyl); Thieme: Stuttgart, Germany. Además, las bases de datos de transformaciones sintéticas incluyen Chemical Abstracts, cada uno de los cuales se puede buscar mediante el uso de CAS OnLine o SciFinder, Handbuch der Organischen Chemie (Beilstein), y en las cuales se puede buscar mediante el uso de SpotFire y REACCS.

Los métodos inventivos de la presente invención para producir ent-progesterona se ilustran en el Esquema de Reacción 7. Las reacciones de los otros Esquemas de Reacción son relevantes como modalidades preferidas, en el sentido de cómo se prefiere producir los materiales de partida del proceso de la invención. Los métodos inventivos incluyen un número de productos intermediarios y métodos de reacción que permiten una síntesis más eficiente y menos costosa que la conocida hasta ahora.

Esquema 1

En el Esquema 1, el 3-pentin-1-ol se convierte en 4-metilbencenosulfonato de pent-3-inilo (Intermediario A) por tosilación del grupo hidroxilo. El grupo tosilo del Intermediario A luego se broma para formar 5-bromopent-2-ino (Intermediario B). El intermediario B se hace reaccionar con metacroleína para producir 2-metiloct-1-en-6-in-3-ol (Intermediario C) a través de una reacción de Grignard. El intermediario C se hace reaccionar con trimetilortoacetato para producir (E)-4-metildec-4-en-8-inoato de etilo (Intermediario D).

Luego, el Intermediario D se reduce para formar (E)-4-metildec-4-en-8-inal (Intermediario E) o (E)-4-metildec-4-en-8-in-1-ol (Intermediario F); cualquiera de los cuales puede ser bromado para formar (E)-10-bromo-7-metildec-6-en-2-ino (Intermediario G).

Finalmente, el Intermediario G se hace reaccionar para formar un intermediario que tiene un grupo voluminoso de fósforo o silicio: Intermediario I o Intermediario H.

Una alternativa al Esquema 1 anterior, el Intermediario H puede prepararse como se muestra en el Esquema 1 b. En el Esquema 1b, el Intermediario C se prepara al hacer reaccionar 1-bromobut-2-ino con dimetilmalonato en presencia de hidruro de sodio para producir un malonato sustituido que luego se hace reaccionar con cloruro de litio seguido de por un reactivo de Grignard.

De manera similar, el Intermediario G se prepara por tosilación seguida de bromación del Intermediario F.

En la segunda fase de la síntesis, que se muestra en el Esquema 2 a continuación, la metilciclopentenona se convierte en terc-butildimetil(3-(7-metil-1,4-dioxaespiro[4.4]non-6-en-6-il)propoxi)silano (Intermediario N) a través de la bromación del doble enlace, seguido de la glicolización de la cetona.

Esquema 2

La conversión de 6-bromo-7-metil-1,4-dioxaespiro[4.4]non-6-ene (Intermediario K) a intermediario N utiliza tercbutil(3-yodopropoxi)dimetilsilano (Intermediario M) que se produce como se muestra en el Esquema 3, a continuación.

En el Esquema 3, se hace reaccionar 1,3-propanodiol con cloruro de terc-butildimetilsililo seguido de la reacción con yodo para producir terc-butil(3-yodopropoxi)dimetilsilano (Intermediario M). El Compuesto N también se puede preparar mediante el uso de una preparación alternativa que se muestra en el Esquema 4, a continuación.

En el Esquema 4, la 2-bromometilciclopentenona se convierte en té-butildimetil(3-(7-metil-1,4-dioxaespiro[4.4]non-6-en-6-il)propoxi)silano (Intermediario N) mediante la conversión del grupo bromo en el grupo propilsilano mediante el uso de un reactivo de boro (Véase, Molander, G. A.; Ham, J.; Seapy, D. G. Tetrahedron, 2007, 63, 768-775); seguido de la glicolización de la cetona.

En el Esquema 5, que se muestra a continuación, el intermediario N se convierte en el intermediario hidroxilo (intermediario 0). Luego, el intermediario 0 se convierte en uno de los tres intermediarios: 3-(7-metil-1,4-dioxaespiro[4,4]non-6-en-6-il)propanal (intermediario S), o un intermediario que tiene un grupo fósforo o silicio voluminoso: Intermediario Q o Intermediario R; cada uno de los cuales puede utilizarse en la siguiente fase de la reacción.

En el esquema 6, que se muestra a continuación, la 3-metN-2-((3E,7E)-7-metNtndeca-3,7-dien-11-inN)ddopent-2-enona (intermediario T) puede producirse mediante uno de dos enfoques de reacción.

Esquema 6

ENFOQUE PETERSON

En el enfoque de Peterson, W. Adam, C. M. Ortega-Schulte, Synlett, 2003, 414,416 and A. Barbero, Y. Blanco, C. García, Synthesis, 2000, 1223-1228, los Intermediarios H y S o los Intermediarios E y R se hacen reaccionar en presencia de s-butil litio para producir el Intermediario T. Esto representa un nuevo método en la síntesis de progesterona.

En el enfoque de Wittig, Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McCarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332, los Intermediarios E y Q o los Intermediarios I y S se hacen reaccionar en presencia de fenil litio para producir el Intermediario T.

En la fase final de la síntesis, que se muestra en el Esquema 7 que se muestra a continuación, el intermediario Tis es ciclado para formar una mezcla racémica de l-((lR,3aR,3bR,8aS,8bR,10aR)-6,8a,10a-trimetil-1,2,3,3a,3b,4,5,7,8,8a,8b,9,10,10a-tetradecahidrodiciclopenta[aJ]naftalen-1-ipetanona y 1-((1S,3aS,3bS,8aR,8bS ,10aS)-6,8a,10a-trimetiM,2,3,3a,3b,4,5,7,8,8a,8b,9,10,10a-tetradecahidrodiciclopenta[aJ]naftalen-1-ipetan-1-ona (Intermediario U, se muestra un enantiómero).

que es ciclado por tratamiento con una base, tal como hidróxido de potasio, para formar ent-progesterona. Se entenderá que la ciclización de T producirá el Compuesto U racémico. Los enantiómeros del Compuesto U pueden separarse, si se desea, y el enantiómero apropiado puede usarse en una síntesis quiral adicional de U' y entprogesterona.

Por lo tanto, en una modalidad, la invención proporciona un método para preparar ent-progesterona, el método comprende la etapa de (a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula U:

en el que el compuesto de fórmula U está enriquecido enantioméricamente, para formar un intermediario de tricetona de fórmula U', las condiciones del proceso son como se definen en la reivindicación 1:

y (b) la ciclización del compuesto de fórmula U' para formar ent-progesterona.

En otra modalidad, la invención proporciona un método para preparar ent-progesterona, el método comprende la etapa de (a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula U:

en el que el compuesto de fórmula U es una mezcla racémica con su enantiómero, para formar un intermediario de tricetona de fórmula U', las condiciones del proceso son como se definen en la reivindicación 1:

en el que el compuesto de fórmula U' es una mezcla racémica con su enantiómero,

(b)separación de los enantiómeros del compuesto de fórmula U' para proporcionar el compuesto de fórmula U' enriquecido enantioméricamente; y (c)ciclización del compuesto enriquecido enantioméricamente de fórmula U' para formar ent-progesterona.

(b) cidización del compuesto enriquecido enantioméricamente de fórmula U' para formar progesterona racémica; y

(c) separar los enantiómeros de la progesterona racémica para formar ent-progesterona.

En ciertas modalidades no de acuerdo con la presente invención, la conversión de U en U' se alcanza con un catalizador de rutenio y un agente oxidante (tal como peryodato de sodio). Un experto en la técnica reconocerá que un catalizador de rutenio útil es el cloruro de rutenio (III) y que la reacción del cloruro de rutenio (III) puede realizarse en presencia de un disolvente, que incluye, pero sin limitarse a, dicloroetano.

La conversión de U en U' se alcanza a través de una reacción de dihidroxilación, mediante el uso de un reactivo de osmio o un reactivo de manganeso, seguido de la escisión oxidativa de un diol vecinal. En otras modalidades, la conversión de U en U' se alcanza a través de una reacción de dihidroxilación, mediante el uso de un reactivo de osmio o un reactivo de manganeso, seguido de la escisión oxidativa de un diol vecinal. Dichos métodos se refieren a reacciones de dihidroxilación (por ejemplo, mediante el uso de reactivos tal como el tetróxido de osmio (que puede usarse en cantidades catalíticas con un oxidante estequiométrico tal como el N-óxido de N-metilmorfolina). También se apreciará que existen muchos reactivos útiles para la escisión oxidativa de dioles vecinales. Los reactivos útiles para la escisión oxidativa de dioles vecinales incluyen, pero no se limitan a, peryodato de sodio y tetraacetato de plomo.

El uso de grupos protectores puede mejorar los resultados químicos al eliminar la pluralidad de sitios reactivos en una molécula dada. Sin embargo, la incorporación y posterior eliminación de los grupos protectores añade etapas a la síntesis. Por lo tanto, se prefieren las rutas sintéticas que no requieren grupos protectores. El esquema 8, que se muestra a continuación, ilustra la preparación de los compuestos Y, AAy BB, sin necesidad de grupos protectores.

Como se muestra en el Esquema 8, la 3-metil-2-ciclopentenona se yoda en el tratamiento con yodo y dicromato de piridinio para formar el compuesto V. Un experto en la técnica reconocerá que existen múltiples métodos alternativos para formar yoduros de vinilo. El compuesto V se acopla posteriormente con alcohol propargílico mediante la utilización de las condiciones de Sonogashira. El alquino del eno-ino resultante (compuesto W) se hidrogena luego selectivamente para formar el compuesto X. Finalmente, el compuesto X se oxida al compuesto aldehído Y en condiciones de PCC. Un experto en la técnica reconocerá que existen múltiples métodos alternativos para la oxidación de un alcohol a un aldehído que incluyen, entre otros, el dióxido de manganeso, el permanganato de potasio, el TEMPO, el IBX y el Swern.

A partir del compuesto X, las alternativas al compuesto Y incluyen sales de fosfonio y silanos. Un experto en la técnica reconocerá que existen múltiples métodos útiles para la conversión de alcoholes en bromuros u otros haluros. Como se ilustra en el Esquema 8, el compuesto X se convierte en un bromuro (compuesto Z) al tratarlo con tetrabromuro de carbono y trifenilfosfina. En el tratamiento con trifenilfospina, el compuesto Z se convierte en su correspondiente sal de trifenilfosfonio, el compuesto AA. Alternativamente, el compuesto Z se convierte en un reactivo de Grignard al tratarlo con magnesio y el reactivo de Grignard resultante se hace reaccionar con cloruro de terc-butildifenilsililo para dar el compuesto ^bB. Las alternativas a los reactivos de Grignard incluyen, pero no se limitan a, reactivos de organozinc, organocupratos y reactivos de alquil litio. Se apreciará que todos los reactivos de organozinc, organocupratos y los reactivos de alquil litio se pueden preparar a partir de bromuros de alquilo.

El aldehído (compuesto Y), la sal de fosfonio (compuesto AA) y el silano (compuesto BB) del Esquema 8 son útiles para reacciones análogas a las que se ilustran en el Esquema 6 que implican reacciones de Wittig y olefinaciones de Peterson. Un ejemplo específico se muestra en el Esquema 9, a continuación. Como se ilustra, el compuesto I (Esquema 1) se combina con el compuesto Y (Esquema 8) en condiciones de Wittig para generar el compuesto T. El Compuesto T se convierte luego en ent-progesterona como se ilustra en el Esquema 7.

Como se describió anteriormente, se puede obtener una ent-progesterona enriquecida enantioméricamente por separación de enantiómeros, ya sea de un intermediario racémico (tal como U o U') o de progesterona racémica. Así, la presente invención contempla además un método para preparar ent-progesterona al aislar ent-progesterona de progesterona racémica. La presente invención también contempla la preparación de ent-progesterona mediante la reacción de un intermediario enriquecido enantioméricamente, por ejemplo, el intermediario U o U' como se describe en la presente descripción, y la transformación del intermediario enriquecido enantioméricamente a través de una o más etapas de reacción para proporcionar ent-progesterona, siempre que dicho proceso comprenda las etapas de reacción que se definen en la reivindicación 1.

La separación de compuestos enriquecido enantioméricamente, por ejemplo, intermediarios o progesterona, de una mezcla racémica se puede realizar de acuerdo con una variedad de métodos, algunos de los cuales se conocen en la técnica. Por ejemplo, la cromatografía líquida de alta resolución (HPLC) quiral y la cromatografía de fluidos supercríticos (SFC) pueden usarse para separar enantiómeros. Las columnas de cromatografía que tienen fases estacionarias quirales adecuadas para HPLC quiral o SFC quiral están disponibles comercialmente. Alternativamente, los enantiómeros pueden separarse por métodos tales como (i) recristalización o complejización con un material quiral, seguido del aislamiento del enantiómero; (ii) derivatización con un auxiliar quiral y separación de los diastereómeros, seguido de la escisión del auxiliar y recuperación del enantiómero; (iii) resolución por reacción selectiva con un reactivo enriquecido enantioméricamente, por ejemplo una enzima o un reactivo de reducción u oxidación quiral, que modifique un enantiómero mientras deja el otro sin alteración sustancial, seguido de la separación del enantiómero que se desea.

Antes del método inventivo, la preparación de ent-progesterona a partir del Intermediario U requería el uso de una peligrosa y costosa etapa de ozonólisis. El método inventivo de la presente invención utiliza materiales fácilmente disponibles y resulta en un compuesto que tiene una pureza de aproximadamente >98 %.

Los presentes ejemplos ilustran la invención tal como se define en las reivindicaciones, pero, en la medida en que los presentes ejemplos se refieren a etapas de reacción que involucran los intermediarios que se mencionan en la reivindicación 1, usan un agente de dihidroxilación diferente a los que se especifican en la reivindicación 1.

Ejemplos

Abreviaturas y Acrónimos

Una lista exhaustiva de las abreviaturas que usan los químicos orgánicos con conocimientos en la técnica aparecen en The ACS Style Guide (tercera edición) o las Guidelines for Authors for the Journal of Organic Chemistry. Para efectos de esta invención, los elementos químicos se identifican de acuerdo con la Tabla Periódica de los Elementos, versión CAS, Handbook of Chemistry and Physics, 67th Ed., 1986-87.

Más específicamente, cuando se usan las siguientes abreviaturas a lo largo de esta descripción, tienen los siguientes significados:

Atm atmósfera

br s singlete amplio

Buchi evaporador rotativo ®BUCHI Labortechnik AG

C Celsius

CDCI3 triclorometano deuterado

Celite agente filtrante de tierra de diatomeas ®Celite Corp.

d doblete

dd doblete de dobletes

DIBAL-Hhidruro de diisobutilaluminio

DCM diclorometano

DMI dimetil-2-imidazolidinona

g gramo

h hora, horas

1H RMNresonancia magnética nuclear de protones

HPLC cromatografía líquida de alta resolución

j constante de acoplamiento (espectroscopia RMN)

L litro

LAH hidruro de litio y aluminio

47

LG grupo saliente

M mol L-1 (molar)

m multiplete

MHz megahercio

min minuto, minutos

ml mililitro

pM picomolar

mol mol

MS espectro de masas, espectrometría de masas

m/z proporción masa-carga

N equivalentes L-1 (normal)

NBS N-bromo succinimida

NMO N-óxido de N-metilmorfolina

RMN Resonancia Magnética Nuclear

pH logaritmo negativo de la concentración de iones de hidrógeno

q cuarteto

RBF matraz de fondo redondo

rt temperatura ambiente

RT tiempo de retención (HPLC)

rt temperatura ambiente

s singlete

t triplete

THE tetrahidrofurano

TLC cromatografía de capa fina

TsCI cloruro de tosilo

Los rendimientos porcentuales que se reportan en los siguientes ejemplos se basan en los componentes de partida que se usan en la cantidad molar más baja. Los líquidos y soluciones sensibles al aire y la humedad se transfieren a través de una jeringa o cánula, y se introducen en los recipientes de reacción a través de tabiques de goma. Los reactivos y disolventes de calidad comercial se usan sin purificación adicional. El término "concentrado a presión reducida" se refiere al uso de un evaporador rotatorio Buchi a 15 mm de Hg. Todas las temperaturas se reportan sin corregir en grados Celsius (°C). La cromatografía en capa fina (TLC) se realiza en placas con cubierta de vidrio prerrecubiertas con gel de sílice 60 A F-254 de 250 pm.

Las estructuras de los compuestos de esta invención se confirman mediante el uso de uno o más de los siguientes procedimientos.

RMN

Los espectros de RMN se adquieren para cada compuesto cuando se indica en los procedimientos a continuación. Los espectros de RMN que se obtuvieron fueron consistentes con las estructuras mostradas.

La espectroscopia de RMN unidimensional de rutina se realizó en espectrómetros Varian® Mercury-plus de 300 o 500 MHz. Las muestras fueron disueltas en disolventes deuterados. Los desplazamientos químicos se registraron en la escala de ppm y se referenciaron a las señales de disolvente apropiadas, tal como 2,49 ppm para DMSO-d6, 1,93 ppm para C^d3^cN, 3,30 ppm para CD3OD, 5,32 ppm para CD2Cl2 y 7,26 ppm para CDCI3 para espectros 1H.

Materiales

Se usa agitador magnético VWR Dyastir para todas las reacciones. Se usa cristalería de la marca Pyrex® a menos que se indique lo contrario. Los productos químicos y los disolventes que se usan en los trabajos experimentales se adquieren de Sigma Aldrich, Fisher Scientific o EMD, a menos que se indique lo contrario, y los disolventes que se usan son de grado ACS o HPLC y los dos grados se usan indistintamente. Para el análisis por TLC, las placas de TLC con cubierta de vidrio con gel de sílice 60 se adquieren de EMD.

Síntesis del Intermediario A

El compuesto A se preparó de acuerdo con el método de Battenberg, O. A.; Nodwell, M. B.; Sieber, S. A. J. Org. Chem., 2011, 76, 6075-6087. A un matraz de fondo redondo (RBF) seco de 1 L, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadieron 250 ml de diclorometano (DCM) de grado ACS (Fisher Chemicals), 18,5 ml, 200 mmol, de 3-pentin-1-ol (Sigma-Aldrich), 76 g, 400 mmol de cloruro de tolunesulfonilo (TsCl) y 45 ml de piridina (Fisher Chemicals) secuencialmente. Luego, la reacción se agitó durante 18 h y se monitoreó mediante cromatografía en capa fina (TLC). Después de que el análisis por TLC indicó que la reacción se completó, la mezcla de reacción se extinguió con 200 ml de una solución acuosa saturada de sulfato de cobre. La mezcla bifásica se agitó vigorosamente y se separó mediante el uso de un embudo de decantación de 1 L. La fase orgánica se recogió y se extrajo además la fase acuosa con dos porciones de 75 ml de DCM. Luego, las fases orgánicas combinadas se lavaron con hidrogenocarbonato de sodio (NaHCO3) y la capa acuosa se separó y extrajo como antes con dos porciones de 75 ml de DCM. Las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un embudo sinterizado de 250 ml en un RBF de 1 L ml. El residuo filtrado se lavó con 100 ml adicionales de DCM y la solución que se recogió en el RBF se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio (Buchi) para dar el Compuesto A como un aceite transparente. El espectro de resonancia magnética nuclear (RMN) de protones en cloroformo deuterado (CDCI3) coincidió con los datos que se reportaron anteriormente. (Véase, Fang, F.; Vogel, M.; Hines, J. V.; Bergmeier, S. C.; Org. Biomol. Chem., 2012, 10, 3080-3091.)

Síntesis del Intermediario B

El compuesto B se preparó de acuerdo con el método de Snider, B. B.; Kirk, T. C.; J. Am. Chem. Soc., 1983, 105, 2364-2368. A un RBF seco de 500 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadieron 200 ml de acetona de grado ACS (Fisher Chemicals) y 48 g, 200 mmol, del Compuesto A. La solución se agitó vigorosamente y se enfrió a 0 °C con un baño de hielo, tras lo cual se añadieron 35 g de bromuro de litio en porciones durante 5 minutos. El baño de hielo se retiró después de 10 minutos más y la reacción se dejó calentar a temperatura ambiente donde se agitó durante 24 horas más. Después de que el análisis de TLC indicó que la reacción se completó, la mezcla de reacción se diluyó con 200 ml de hexano (EMI) y la mezcla se filtró a través de un embudo sinterizado de 250 ml con un lecho de Celite (Sigma-Aldrich) de 2,54 cm (1 pulgada) en un RBF de 500 ml. Luego, el filtrado que se recogió se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio (Buchi) para dar el Compuesto B como un aceite transparente. Si un precipitado blanco estaba presente, el producto crudo se redisolvió en hexano y se repitió el procedimiento de trabajo. El espectro de resonancia magnética nuclear (RMN) de protones en CDCI3 coincidió con los datos que se reportaron anteriormente. (Véase, Lubell, W. D.; Jamison, T. F.; Rapoport, H.J. Org. Chem., 1990, 55, 3511, 3522.)

Síntesis del Intermediario C

método de Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McCarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332-4334. A un RBF seco de 500 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadieron 120 ml de THF destilado, seguido de 0,62 g, 31 mmol, de virutas de magnesio (Sigma Aldrich) y la mezcla se agitó vigorosamente a temperatura ambiente. Se añadió el compuesto B (4,41 g, 30 mmol) al matraz a través de una jeringa en una porción y la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas o hasta que se consumió la mayor parte del magnesio, tras lo cual la mezcla de reacción se enfrió con un baño de hielo a 0 °C.

Mientras tanto, en un RBF separado y seco de 25 ml se enfrió a 0 °C con un baño de hielo 2,56 ml, 31 mmol, de metacroleína en 10 ml de Th F destilado. Luego, la solución de metacroleína se añadió a la solución de Grignard a través de una cánula durante 10 minutos. Luego, la mezcla de reacción se dejó calentar a temperatura ambiente y se dejó durante 1 hora. La mezcla de reacción se extinguió posteriormente con 75 ml de una solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se diluyó con 150 ml de acetato de etilo. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separó luego con un embudo de decantación y se extrajo además la fase acuosa con dos porciones de 75 ml de acetato de etilo. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite y 2,54 cm (1 pulgada) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un ^rB^fde 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 75 ml adicionales de acetato de etilo. Luego, la solución recogida se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi para dar el compuesto C como un aceite amarillo claro con un rendimiento del 90 % y una pureza >95 %. El espectro de RMN de protones en CDCI3 estuvo de acuerdo con los datos que se reportaron anteriormente. (Véase, Apparu, M.; Barrelle, M. Bulletin de la Societe Chimique de France, 1983, 3-4, Pt. 2, 83,86).

Síntesis del Intermediario D

El compuesto D se preparó de acuerdo con el método de Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McCarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332-4334. A un RBF seco de 150 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadió una solución de 4,14 g, 30 mmol, del Compuesto C en 7 equivalentes molares de trimetilortoacetato (Sigma-Aldrich) a través de una jeringa seguido de 1 mol % de ácido propiónico (Sigma-Aldrich). El recipiente de reacción se equipó con un condensador de reflujo y luego la mezcla se calentó a reflujo con un baño de aceite Instatherm® de 1200 ml durante 12 horas. Luego, la reacción se retiró del baño de aceite y se dejó enfriar a temperatura ambiente. La mezcla de producto crudo se lavó con una solución saturada de hidrogenocarbonato de sodio (100 ml) y la capa acuosa se eliminó a través de un embudo de decantación de 1 L, antes de volver a extraerla con 100 ml de acetato de etilo que posteriormente se combinó con la mezcla de producto y se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. La purificación a través de la destilación de recorrido corto a presión reducida dio el Compuesto D como un aceite transparente con un rendimiento del 71 % y una pureza >95 %. RMN 1H (500 MHz, CDCI3): 5 = 5,19 (tq, J = 6,8, 1,2, 1H), 4,10 (q, J = 7,2, 2H), 2,44-2,35 (m, 2H), 2,32-2,27 (m , 2H), 2,18-2,08 (m, 4H), 1,76 (t, J = 2,4, 3H), 1,61 (bs, 3H), 1,23 (t, J = 7,10, 3H).

Síntesis del Intermediario E

El compuesto E se preparó de acuerdo con el método de Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McCarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332-4334. A un RBF seco de 150 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadieron 50 ml de THF destilado y 2,08 g, 10 mmol, del Compuesto D y la mezcla se enfrió a -78 °C en un baño de hielo seco/acetona. Después de 15 minutos, se añadieron 12 ml, 12 mmol, de una solución 1 M de hidruro de diisobutilaluminio (DIBAL-H) en THF durante 10 minutos y luego la mezcla de reacción se dejó en agitación durante 2,5 horas. Luego, la reacción se extinguió con 5 ml de metanol a -78 °C durante 10 minutos y luego se dejó calentar a temperatura ambiente antes de añadir 20 ml de agua. La mezcla de reacción se extrajo con 100 ml de acetato de etilo a través de un embudo de decantación de 1 L y se extrajo además la fase acuosa con 2 porciones más de 50 ml de acetato de etilo y los extractos combinados se secaron con 100 g de sulfato de sodio y se redujeron bajo vacío sobre un evaporador rotatorio Buchi para dar el producto crudo, Compuesto E, como un aceite amarillo claro. La purificación mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, hexano/acetato de etilo 10:1) dio el Compuesto E como un aceite transparente con un rendimiento del 64 % y una pureza >95 %. RMN 1H (300 MHz, CDCI3): 5 = 9,75 (t, J = 1,8, 1H), 5,20 (m, 1H), 2,52 (tm, J = 7,5, 2H), 2,32 (t, J = 7,5, 2H), 2,22-2,07 (m, 4H), 1,76 (t, J = 2,4, 3H), 1,62 (bs, 3H).

Síntesis del Intermediario F

El co m p u e s to F se p re pa ró de acu e rd o con el m é tod o de Jo h n so n , W . S .; G ra ve s to ck , M. B.; M cC arry , B. E. J. A m . C hem . S oc., 1971, 93, 4332 -4334. A un R B F seco de 1 l, que se equ ipa con una ba rra de ag itac ión , ba jo una a tm ó s fe ra de A rgó n , se añ ad ie ro n 250 m l de é te r seg u ido de 3 ,42 g, 90 m m ol, de h id ru ro de litio y a lum in io (LAH , S ig m a -A ld rich ). La m ezc la se en frió a 0 °C con un ba ño de h ie lo y d e sp u é s de 15 m in u to s se añ ad ió el C o m p u e s to D (9 ,0 g, 45 m m ol), d isu e lto en 50 ml de é te r d u ra n te 10 m in u tos . D e sp u é s de 1 ho ra m ás o cu a n d o el a n á lis is de T L C ind icó que la reacc ión se com p le tó , la rea cc ió n se ex tin gu ió con 100 ml de una so luc ió n a cu osa de h id ró x ido de so d io al 10 % p/p d u ra n te 5 m in u to s y luego con 50 m l de ag ua an tes de lle va rla a te m p e ra tu ra a m b ie n te . La m ezc la de re a cc ió n se e x tra jo con 100 ml de a ce ta to de e tilo y la fa se a cu o sa a d e m á s con a ce ta to de e tilo (2 x 100 m l) con la u tilizac ión de un e m b u d o de d e ca n ta c ió n de 1 L. Las fa se s o rg á n ica s c o m b in a d a s se seca n con 50 g de su lfa to de sod io , se filtran a través de un em b ud o s in te riza d o de 100 m l y se reducen ba jo vac ío en un e v a p o ra d o r ro ta to rio (B uch i) pa ra d a r el p ro du c to c rudo , C o m p u e s to F, com o un ace ite tra n sp a re n te . La pu rifica c ión m ed ia n te c ro m a to g ra fía en co lu m n a ráp id a (G el de s ílice 60, E M D , h e xa n o /a ce ta to de e tilo 5:1 ) d io el C o m p u e s to F com o un a ce ite tra n sp a re n te con un re n d im ie n to de l 92 % y una pu reza >95 % . R M N 1H (500 M Hz, C D C I3 ): 5= 5 ,22 (t, J = 6 ,8 , 1H), 3 ,64 (t, J = 6 ,4 , 2H ), 2 ,21 -2 ,11 (m, 4H ), 2 ,08 (t, J = 7,5 , 2H ), t77 (bs, 3H ), 1,68 (tt, J = 6 ,9 , 6 ,9 , 2H ), 1,63 (s, 3H ).

Síntesis del Intermediario G

El co m p u e s to G se p repa ró de a cu e rd o con el m é tod o de B aughm an , T. W .; S w oren , J. C.; W age ne r, K. B. T e tra h e d ro n , 2004 , 60, 10943 -10948. A un R B F seco , que se eq u ip a con una ba rra de ag ita c ió n , ba jo una a tm ó s fe ra de A rg ó n se a ñ a d ie ro n 35 m l de D C M a lo que s ig u ie ron 3 ,88 g de te tra b ro m u ro de ca rb o n o (S ig m a -A ld rich ) y 2 ,56 g de tr ife n ilfo s fin a (S ig m a -A ld rich ). La m ezc la de rea cc ió n se en frió a 0 °C con un baño de h ie lo y, d e spu és de 15 m in u tos , se añ ad ie ro n 1,06 g de l C o m p u e s to F, d is u e lto en 10 m l de D C M d u ran te 5 m in u tos . D e spu és de 2 ho ras m ás o cua nd o el an á lis is de T LC in d icó que la rea cc ió n se co m p le tó , la rea cc ió n se d iluyó con 100 ml de hexano y se filtró a tra vé s de 2 ,54 cm (1 pu lg ada ) de C e lite a tra v é s de un e m b ud o s in te riza d o de 100 m l en un R B F de 500 m l. La so luc ió n se redu jo ba jo va c ío en un e v a p o ra d o r ro ta to rio B uch i pa ra d a r el C o m p u e s to G co m o un ace ite tra n s p a re n te . Si un p re c ip ita d o b la n co e s ta b a p re sen te , el p ro d u c to c ru d o se re d iso lv ió en he xa n o y se filtró a tra vé s de un lecho de 2 ,54 cm (1 pu lg ada ) de C e lite a n te r io r a 2 ,54 cm (1 pu lg ada ) de s ílice ráp ida (ge l de s ílice 60, E M D ) y se redu jo ba jo va c ío pa ra d a r el C o m p u e s to G, un ace ite tra n sp a re n te con un ren d im ie n to de l 97 % y una pu reza >95 ^{% . R M N 1H (500 M H z, C D C I3): 5= 5,21 (t,} J ^{= 6,8 , 1H), 3 ,38 (t,} J ^{= 6,8, 2H ), 2 ,20-2 ,11 (m, 6H ), t98 -t90 (m, 2H ), t77}(bs, 3H ), 1,61 (s, 3H).

Síntesis del Intermediario H

El co m p u e s to H se p re pa ró de acu e rd o con el m é tod o de D ixon , T. A .; S tee le , K. P.; W ebe r, W . P. J. O rgan om e t. C hem . 1982, 231 ,299 -305. A un R B F seco de 100 m l, que se e q u ipa con una ba rra de ag itac ión , ba jo una a tm ó s fe ra de A rgón , se añad ie ro n 20 ml de T H F de s tila do , seg u ido de 50 m g de v iru ta s de m ag ne s io (S ig m a -A ld rich ) y la m ezc la se ag itó v ig o ro s a m e n te a te m p e ra tu ra a m b ie n te . S e añ ad ió el co m p u e s to G (0 ,46 g, 2 m m o l) en 5 m l de T H F de s tila d o al m a tra z a tra vé s de una je r in g a en una po rc ión y la m ezc la de reacc ión se ag itó a te m p e ra tu ra a m b ie n te d u ra n te 3 ho ras o hasta que se co n su m ió la m a y o r pa rte de l m agnes io , tras lo cua l se añ ad ió 0 ,5 m l, 2 m m ol, de c lo ru ro de te rc -b u tild ife n ils ililo , d isue lto en 5 m l de T H F de s tila do , en una po rc ión a tra vé s de una je r in g a y la rea cc ió n se de jó en ag itac ión a te m p e ra tu ra am b ie n te p o r 3 ho ras m ás. La m ezc la de rea cc ió n se ex tin gu ió p o s te rio rm e n te con 50 ml de una so luc ió n acu osa sa tu ra d a de c lo ru ro de a m o n io y se d iluyó con 100 m l de ace ta to de e tilo y se tra n s fir ió a un e m b u d o de d e ca n ta c ió n . D e sp u é s de a g ita r v ig o ro s a m e n te , se se p a ró la m e zc la b ifá s ica y se ex tra jo a d e m á s la fase acu osa con do s p o rc io n e s de 50 m l de ace ta to de etilo . Luego, las fa se s o rg án icas co m b in a d a s se se ca n con su lfa to de sod io y se filtran a tra vé s de un lecho de 2 ,54 cm (1 pu lg ada ) de C e lite y 2 ,54 cm (1 p u lg a d a ) de s ílice ráp ida (ge l de s ílice 60, E M D ) a tra vé s de un em b ud o s in te riza d o de 100 ml ba jo va c ío en un R B F de 500 m l, con el res idu o de su lfa to de so d io que se lavó con 50 ml a d ic io n a le s de ace ta to de etilo . Luego, la so luc ió n reco g ida se redu jo ba jo va c ío en un e v a p o ra d o r ro ta to rio B uch i pa ra d a r el c o m p u e s to H, c rudo, com o un a ce ite tra n s p a re n te . La pu rifica c ió n m e d ia n te c ro m a to g ra fía en co lu m n a ráp ida (G el de s ílice 60, E M D , he xan o ) dio el C o m p u e s to H com o un ace ite tra n s p a re n te con un re n d im ie n to de l 76 % y una p u reza >95 % . R M N 1H (300 M Hz, C D C I3 ): 5 = 7 ,79 -7 ,73 (m , 4H ), 7 ,49 -7 ,36 (m , 6H ), 5 ,16 (t, J = 63, 1H), 2 ,24 -2 ,09 (m, 4H ), 1,96 (t, J = 7,5 , 2H ), 1,78 (t, J = 2 ,4 , 3H ), 1 ,60 (bs, 3H ), 1 ,48 -1 ,33 (m , 2H ), 1,14 (s, 9H ), 0 ,87 (t, J = 7,2, 2H ).

Síntesis del Intermediario I

A un matraz de fondo redondo seco, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadieron 0,228 g del Compuesto G en 5 ml de acetonitrilo. A esta solución se añadieron 0,262 g de trifenilfosfina. Se conectó un condensador de reflujo y la reacción se calentó a reflujo bajo Argón durante 48 h. Después de enfriar a temperatura ambiente, el disolvente se eliminó bajo vacío. Se añadió benceno (30 ml) y la reacción se enfrió a -20 °C durante 30 min. Después de este tiempo, el producto se filtró como un sólido blanco con un rendimiento del 57 % y una pureza >90 %. RMN 1H (300 MHz, CDCI3): 8 = 7,90-7,60 (m, 15H), 5,21-5,10 (m, 1H), 3,80-3,65 (m, 2H), 2,29 (t, J = 6,6, 2H), 2,17-2,02 (m, 4H), 1,87 (s, 3H), 1,65-1,80 (m, 2H), 1,60 (s, 3H).

Síntesis del Intermediario J

El compuesto J se preparó de acuerdo con el método de Bliese, M.; Cristiano, D.; Tsanaktsidis, J. Aust. J. Chem., 1997, 50, 1043-1045. A un RBF seco de 1 L, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadieron 60 ml de metanol (Aldrich, grado HPLC) a lo que siguieron 0,99 ml, 10 mmol, de 3-metilciclopentenona y 1,762 g, 9,9 mmol, de N-bromo succinimida. La mezcla de reacción se enfrió a 0 °C con un baño de hielo durante 15 minutos, tras lo cual se añadió ácido sulfúrico concentrado (0,2 eq.) y la reacción se dejó en agitación durante 3 horas, dejándose calentar a temperatura ambiente durante este tiempo. Posteriormente se añadieron 50 ml de hidrogenocarbonato de sodio saturado y 40 ml de DCM y la mezcla se transfirió a un embudo de decantación. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separó y se extrajo además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de DCM. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite y 2,54 cm (1 pulgada) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 500 ml, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de DCM. Luego, la solución recogida se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi para dar el compuesto J, crudo, como un sólido amarillo claro. La purificación mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, hexano) dio el Compuesto J como una crema cristalina con un rendimiento del 85 % y una pureza >98 %. El espectro de RMN 1H en CDCI3 estuvo de acuerdo con los datos que se reportaron anteriormente. (véase, Bliese, M.; Cristiano, D.; Tsanaktsidis, J. Aust. J. Chem., 1997, 50, 1043-1045.)

Síntesis del Intermediario K

El compuesto K se preparó de acuerdo con el método de Richter, A.; Hedberg, C.; Waldmann, H.J. Org. Chem., 2011, 76, 6694-6702. A un RBF de 500 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón se añadieron 200 ml de ortoacetato de trietilo (Aldrich), 7,8 g, 40 mmol, del Compuesto J y 38 mg, 0,2 mmol de ácido paratoluenosulfónico. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas o hasta que el análisis por TLC indicó que la reacción se completó y el producto se eliminó se destiló bajo vacío para dar el Compuesto K como un aceite transparente que se solidificó en un sólido blanco al enfriarse con un rendimiento del 88 % y una pureza >96 %. El espectro de RMN 1H en CDCI3 estuvo de acuerdo con los datos que se reportaron anteriormente. (Véase, Richter, A.; Hedberg, C.; Waldmann, H. J. Org. Chem., 2011, 76,6694-6702.)

Síntesis del Intermediario L

El compuesto L se preparó de acuerdo con el procedimiento de McDougal, P. G.; Rico, J. G.; Oh, Y.-1.; Condon, B. J. Org. Chem., 1986, 51, 3388-3390. A 250 ml de RBF seco bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añadieron 100 ml de THF destilado y 2,1 g de hidruro de sodio (dispersión al 60 % en aceite mineral; Aldrich). La mezcla se agitó vigorosamente y se añadió 1,3-propanodiol (4,0 g, 50 mmol; Aldrich) durante 10 minutos a través de una jeringa. La reacción se dejó en agitación durante 45 minutos antes de añadir cloruro de terc-butildimetilsililo (7,9 g, 52,7 mmol; Aldrich) en porciones durante 5 minutos. Luego, la reacción se dejó en agitación durante 45 minutos más a temperatura ambiente antes de extinguirla lentamente con 20 ml de una solución acuosa de carbonato de sodio al 10 %. Luego, esta mezcla se transfirió a un embudo de decantación. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separó y se extrajo además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de éter. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite y 2,54 cm (1 pulgada) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un r Bf de 500 ml, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi para dar el compuesto L, como un aceite amarillo claro con un rendimiento del 99 % y una pureza >95 %. El espectro de RMN 1H en CDCI3 estuvo de acuerdo con los datos que se reportaron anteriormente. (Véase, McDougal, P. G.; Rico, J. G.; Oh, Y.-1.; Condon, B. J. Org. Chem., 1986, 51,3388-3390.)

Síntesis del Intermediario M

El compuesto M se preparó de acuerdo con el procedimiento de Jakobsche, C. E.; Peris, G.; Miller, S. J. Angew. Chemie., Int. Ed., 2008, 47, 6707. A 100 ml de RBF seco bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añadieron 25 ml de DCM grado HPLC, 0,81 g (5 mmol) del Compuesto L, 0,37 g (5,5 mmol) de imidazol (Aldrich), 1,45 g (5,5 mmol) de trifenilfosfina (Aldrich) y 1,4 g (5,5 mmol) de yodo (Fisher Chemicals). Luego, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 12 horas, después de lo cual se diluyó con hexano (100 ml) y se filtró a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite y 5,08 cm (2 pulgadas) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 500 ml. Luego, la solución recogida se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi para dar el compuesto M, como un aceite transparente claro con un rendimiento del 80 % y una pureza >95 %. La trifenilfosfina residual se puede eliminar luego de volver a disolver el producto en hexano y filtrar a través de otro lecho de Celite/sílice como se describe anteriormente. El espectro de ^rMⁿ1H en CDCIJ coincidió con los datos que se reportaron anteriormente. (Véase, Jakobsche, C. E.; Peris, G.; Miller, S. J. Angew. Chemie., Int. Ed., 2008, 47, 6707.)

Síntesis del Intermediario N

El compuesto N se preparó de acuerdo con el procedimiento de Smith Ill, A. B.; Branca, S. J.; Pilla, N. N.; Guaciaro, M. A. J. Org. Chem., 1982, 47, 1855-1869, adaptado con HMPA sustituido por DMI. (véase: Lo, C.-C.; Chao, P.-M. J. Chem. Ecology., 1990, 16, 3245-3253.) A un RBF seco de 100 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añadieron 25 ml de THF destilado que luego se enfrió a -78 °C con un baño de hielo seco. Luego, se añadieron 3,44 ml, 5,5 mmol, de una solución 1,6 M de n-Butil litio en hexanos (Aldrich) a través de una jeringa y se dejó en agitación la solución durante 15 minutos más. Luego, se añadió el compuesto K (1,1 g, 5 mmol) en 5 ml de THF destilado durante 5 minutos y la reacción se dejó en agitación a -78 °C durante 1 hora más. Luego de este tiempo, se añadieron 3 equivalentes de 1,3-Dimetil-2-imidazolidinona (DMI), (1,71 ml, 15 mmol) gota a gota a la mezcla de reacción, seguido de, 30 minutos después, 1,36 g, 5 mmol, del Compuesto M disuelto en 5 ml de THF que se añadió durante 10 minutos. Luego, la reacción se dejó en agitación hasta que el análisis por TLC indicó el consumo completo del material de partida, tiempo durante el cual se dejó calentar a -55 °C y posteriormente se extinguió con 25 ml de una solución acuosa saturada de dihidrogenofosfato de sodio. Luego, la mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se diluyó con 75 ml de éter y la mezcla se transfirió a un embudo de decantación. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separó y se extrajo además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de éter. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite y 2,54 cm (1 pulgada) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 500 ml, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de acetato de etilo. Luego, la solución recogida se redujo bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi para dar el compuesto N, crudo, como un aceite amarillo claro. La purificación por cromatografía en columna rápida (gel de Sílice 60, EMD, hexano/acetato de etilo 5:1) dio el Compuesto N como un aceite amarillo claro con un rendimiento del 45 % y una pureza >98 % por GC-MS. GC-MS: 10,57 min, m[H]+ = 313,2.

Síntesis combinada del Intermediario N

Una síntesis alternativa del compuesto N, que puede denominarse "síntesis combinada", se muestra a continuación en el Esquema 10.

Esquema 10 se proporciona una descripción detallada de cada uno de las cinco etapas del Esquema 10.

(Etapa 1)

Bajo atmósfera de nitrógeno, cargar 3-metil-2-ciclopenten-1-ona (1,0 eq) y MeOH (6,0 v) al reactor con agitación. Cargar por lotes NBS (0,99 eq) a 1525 °C, luego cargar H2SO4 concentrado (0,02 eq) por debajo de 5 °C. Agitar el sistema a 15-25 °C hasta que se complete la reacción que se muestra en la TLC. Cargar NaHCO3 saturado (6,0 v) y DCM (4,0 v) en el sistema y agitar durante 10 minutos. Separar y extraer la capa de agua con DCM (2,0 v) dos veces. Combinar la capa orgánica y lavar con salmuera (6,0 v). Separar y recoger la capa orgánica. Cargar HCl concentrado (2,5 v) a la capa orgánica y agitar durante 20 horas a temperatura ambiente, separar y extraer la capa de agua con DCM (2,0 v) dos veces. Combinar la capa orgánica y lavar con salmuera (6,0 v). Secar la capa orgánica con Na2SO4. Filtrar y concentrar el filtrado bajo vacío a 3035 °C. El residuo se recristalizó en PE/EE = 0,8 v/1,2 v para dar un producto sólido del Intermediario J. El rendimiento fue del 85 %.

(Etapa 2)

Cargar el Intermediario J (1,0 eq), ortoformiato de trietilo (3,5 eq), glicol (7,0 eq) y TsOH (0,01 eq) al reactor bajo N2. Agitar a 20-25 °C durante 16 horas. Cargar NaHCO3 saturado (5,0 v) y ciclohexano (4,0 v) en el sistema. Agitar durante 10 min y separar. Extraer la capa de agua con ciclohexano (3,0 v) dos veces y combinar la capa orgánica. Lavar la capa orgánica con salmuera (4,0 v). Secar la capa orgánica con Na2SO4. Filtrar y concentrar el filtrado bajo vacío. Destilar el residuo bajo 5 mmHg para obtener el producto del Intermediario K. El rendimiento fue del 88 %. (Etapa 3)

Cargar propanodiol (4,0 eq), THF (8,0 v) e imidazol (1,0 eq) al reactor. Cargar TBSCI (1,0 eq) gota a gota a -2~2 °C, agitar a -2~2 °C durante 2 horas y luego a 20~25 °C durante 3 horas. Cargar agua (10,0 v) y EE (5,0 v) al sistema. Agitar durante 10 minutos y separar. Extraer la capa de agua con EE (2,0 v) dos veces y combinar la capa orgánica. Lavar la capa orgánica con salmuera (4,0 v) y secar con Na2SO4. Filtrar y concentrar el filtrado bajo vacío para dar el producto crudo del Intermediario L que se usa directamente para la siguiente etapa.

(Etapa 4)

Cargar el Intermediario L crudo (1,0 eq), DCM (10,0 v), imidazol (1,5 eq) y PPh3 (1,5 eq) en el reactor. Cargar 12 (1,5 eq) a 0-5 °C, agitar a 0-5 °C durante 0,5 horas y luego a 2025 °C durante 0,5 horas. Cargar agua (5,0 v) al sistema y agitar durante 10 minutos. Separar y lavar la capa orgánica con salmuera (5,0 v) dos veces. Secar la capa orgánica con Na2SO4. Filtrar y concentrar el filtrado bajo vacío. El residuo se purificó por columna para dar el producto oleoso del Intermediario M. El rendimiento para 2 etapas fue del 80 %.

(Etapa 5)

Cargar el Intermediario K (1,0 eq) y THF (10,0 v) al reactor bajo N2. Enfriar el sistema por debajo de - 78 °C. Cargar n-BuLi (1,5 eq) gota a gota por debajo de -70 °C y agitar durante 1 h. Cargar HMPA (3,0 eq) gota a gota por debajo de -65 °C y agitar durante 0,5 horas. Cargar PH-PRV-1301-102 (1,0 eq) gota a gota por debajo de -65 °C y agitar durante 5 horas a -60-50 °C. Cargar agua (20,0 v) y EA (5,0 v). Agitar durante 10 minutos y separar. Extraer la capa de agua con EA (2,0 v) dos veces y combinar la capa orgánica. Lavar la capa orgánica con salmuera (5,0 v). Secar la capa orgánica con Na2SO4. Filtrar y concentrar el filtrado bajo vacío para dar el producto crudo del Intermediario M (rendimiento crudo ~= 96 % y pureza -,55 %).

Síntesis del Intermediario O

A un RBF de 500 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 150 ml de THF (grado ACS), 15,6 g, 50 mmol, de Compuesto N y 100 ml de una solución 1 M de fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF) en THF (Sigma-Aldrich). La reacción se agita a temperatura ambiente durante 4 horas o hasta que el análisis por ^tL^cindicó que la reacción se completó, tras lo cual se añaden secuencialmente 150 ml de agua y 150 ml de acetato de etilo. Luego, esta mezcla se transfiere a un embudo de decantación. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de acetato de etilo. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 500 ml, y el residuo de sulfato de sodio se lavó con 50 ml adicionales de acetato de etilo. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi para dar el compuesto O.

Síntesis del Intermediario P

El compuesto P puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de Lubell, W. D.; Jamison, T. F.; Rapoport, H.J. Org. Chem., 1990, 55, 3511-3522. A un RBF de 500 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 200 ml de DCM destilado, 9,9 g, 50 mmol, del Compuesto O y 42,2 g, 100 mmol, de dibromotrifenilfosforano (Sigma-Aldrich). La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente y se monitorea mediante análisis TLC. Se puede añadir un baño de hielo al principio para evitar una exotermia. Una vez que el análisis de TLC indicó que la reacción se completó, la mezcla de reacción se filtra a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite y 2,54 cm (1 pulgada) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un ^rB^fde 500 ml. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi para dar el compuesto P. Si hay un poco de precipitado, el producto crudo se vuelve a disolver en hexano y se filtra a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite anterior a 2,54 cm (1 pulgada) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) y se reduce bajo vacío para dar el Compuesto P.

Síntesis del Intermediario Q

El compuesto Q puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de Lubell, W. D.; Jamison, T. F.; Rapoport, H.J. Org. Chem., 1990, 55, 3511-3522 and Byrne, P.A.; Gilheany, D. G. J. Am. Chem. Soc., 2012, 134,9225-9239.

A un RBF de 500 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 200 ml de DCM destilado, 9,9 g, 50 mmol, del Compuesto O y 42,2 g, 100 mmol de dibromotrifenilfosforano (Sigma-Aldrich). La mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente y se monitorea mediante análisis TLC. Se puede añadir un baño de hielo al principio para evitar una exotermia. Una vez que el análisis de TLC indicó que la reacción se completó, la mezcla de reacción se transfiere directamente a un evaporador rotatorio Buchi y se reduce bajo vacío. El residuo se recoge en 200 ml de tolueno grado ACS y se le añaden 26,2 g, 100 mmol de trifenilfosfina. La mezcla de reacción se agita durante 24 h más o hasta su finalización, como indica el análisis por TLC. Luego, la mezcla de reacción se transfiere directamente a un evaporador rotatorio Buchi y se reduce bajo vacío. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto Q.

Síntesis del Intermediario R

El compuesto R puede prepararse mediante una adaptación del procedimiento de Dixon, T. A.; Steele, K. P.; Weber, W. P. J. Organomet. Chem. 1982, 231,299-305. A un RBF seco de 250 ml, que se equipó con una barra magnética de agitación, bajo atmósfera de Argón, se añaden 100 ml de THF destilado, seguido de 0,48 g, 20 mmol, de virutas de magnesio (Sigma-Aldrich) y la mezcla se agita vigorosamente a temperatura ambiente. El Compuesto P (4,96 g, 19 mmol) en 10 ml de THF destilado se añade al matraz a través de una jeringa en una porción y la mezcla de reacción se agita a temperatura ambiente durante 3 horas o hasta que se consumió la mayor parte del magnesio, tras lo cual se añaden 4,47 ml, 21 mmol, de cloruro de terc-butildifenilsililo disuelto en 10 ml de THF destilado en una porción a través de una jeringa y la reacción se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 3 horas más. La mezcla de reacción se extingue posteriormente con 50 ml de solución acuosa saturada de cloruro de amonio y se diluyó con 100 ml de acetato de etilo y se transfiere a un embudo de decantación. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de acetato de etilo. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite y 2,54 cm (1 pulgada) de sílice rápida (gel de sílice 60, EMD) a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un ^rB^fde 500 ml, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de acetato de etilo. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto R.

Síntesis del Intermediario S

El compuesto S puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de Miyata, O.; Muroya, K.; Kobayashi, T.; Yamanaka, R.; Kajisa, S.; Koide, J.; Naito, T. Tetrahedron, 2002, 58, 4459-4479. A un ^rB^fde 250 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón, se añaden 40 ml de DCM destilado y 0,77 ml, 9 mmol, de cloruro de oxalilo (Sigma-Aldrich) y la mezcla de reacción se enfrió a -78 °C con un baño de hielo seco. Luego, se añaden gota a gota con una jeringa 1,25 ml, 17,6 mmol, de dimetilsulfóxido (Sigma-Aldrich) y la reacción se agita durante 10 minutos más. Luego de este tiempo se añaden a través de una jeringa una solución de 0,87 g, 4,5 mmol del compuesto N, disuelto en 10 ml de DCM y se agita la reacción durante 15 minutos más, tras lo cual se añaden a través de una jeringa 2,5 ml de trietilamina (Sigma-Aldrich) durante 5 minutos. La reacción se agita durante 15 minutos más antes de calentarse a 0 °C. Después de que el análisis por TLC muestra que la reacción se completó, la mezcla se transfiere directamente a una columna de gel de sílice (Gel de sílice 60, EMD) y el Compuesto S se aísla a través de cromatografía rápida (sistema disolvente de hexano/acetato de etilo).

Síntesis del Intermediario T (a partir de los Intermediarios E y Q)

El compuesto T puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McCarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332-4334. A un RBF seco de 250 ml bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 100 ml de THF destilado y 10A4 g, 20 mmol, del Compuesto Q. Luego, la solución resultante se trata con 11,11 ml, 20 mmol, de fenil litio 1,8 M en dibutil éter (Sigma-Aldrich) y después de 15 minutos se enfría a -78 °C con un baño de hielo seco. Después de 15 minutos más, se añaden a través de una jeringa 2,68 g, 20 mmol, del Compuesto E disuelto en 5 ml de THF seco y la mezcla de reacción se calienta a -30 °C mediante la transferencia del aparato a un criostato Luego, se añade un segundo equivalente de fenil litio 1,8 M seguido de un exceso de metanol con la temperatura mantenida a -30 °C. Después de agitar durante 5 minutos, la reacción se lleva a temperatura ambiente y se añaden 40 ml de agua y la mezcla de reacción se transfiere a un embudo de decantación de 1 L donde se añaden 200 ml de acetato de etilo. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de acetato de etilo. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto T.

Síntesis del Intermediario T (a partir de los Intermediarios I y S)

El compuesto T puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McCarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332-4334 mediante el uso de diferentes materiales de partida.

A un RBF seco de 250 ml bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 100 ml de THF destilado y 7,76 g, 20 mmol, del Compuesto I. Luego, la solución resultante se trata con 11,11 ml, 20 mmol, de fenil litio 1,8 M en dibutil éter (Sigma-Aldrich) y después de 15 minutos se enfría a -78 °C con un baño de hielo seco. Después de 15 minutos más, se añaden a través de una jeringa 3,92 g, 20 mmol, del Compuesto S disuelto en 5 ml de THF seco y la mezcla de reacción se calienta a -30 °C mediante la transferencia del aparato a un criostato. Luego, se añade un segundo equivalente de fenil litio 1,8 M seguido de un exceso de metanol con la temperatura mantenida a -30 °C. Después de agitar durante 5 minutos, la reacción se lleva a temperatura ambiente y se añaden 40 ml de agua y la mezcla de reacción se transfiere a un embudo de decantación de 1 L donde se añaden 200 ml de acetato de etilo. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de acetato de etilo. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto T.

Síntesis del intermediario T (a partir de los intermediarios H y S)

El compuesto T puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de W. Adam, C. M. Ortega-Schulte, Synlett, 2003, 414-416 and A. Barbero, Y. Blanco, C. Garcia, Synthesis, 2000, 1223-1228. A un RBF seco de 250 ml bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 100 ml de THF destilado y 9,82 g, 20 mmol, del Compuesto H. Luego, la solución resultante se enfría a -78 °C con un baño de hielo seco y se añaden 14,29 ml, 20 mmol, de sec-butil litio 1,4 M en ciclohexano (Sigma-Aldrich) durante 5 minutos. Después de 45 minutos más, se añaden a través de una jeringa 3,92 g, 20 mmol, del Compuesto S disuelto en 5 ml de ^tH^fseco y la mezcla de reacción se calienta a temperatura ambiente. Después de agitar durante 2 horas más, la reacción se diluye con 150 ml de éter y luego se añaden 40 ml de agua y la mezcla de reacción se transfiere a un embudo de decantación de 1 L. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de éter. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto T.

Síntesis del Intermediario T (a través de los intermediarios E y R)

El compuesto T puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de W. Adam, C. M. Ortega-Schulte, Synlett, 2003, 414-416 and A. Barbero, Y. Blanco, C. García, Synthesis, 2000, 1223-1228, con diferentes materiales de partida. A un RBF seco de 250 ml bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 100 ml de THF destilado y 8,4 g, 20 mmol, del Compuesto R. Luego, la solución resultante se enfría a -78 °C con un baño de hielo seco y se añaden 14,29 ml, 20 mmol, de sec-butil litio 1,4 M en ciclohexano (Sigma-Aldrich) durante 5 minutos. Después de 45 minutos más, se añaden a través de una jeringa 2,68 g, 20 mmol, del Compuesto E disuelto en 5 ml de THF seco y la mezcla de reacción se calienta a temperatura ambiente. Después de agitar durante 2 horas más, la reacción se diluye con 150 ml de éter y luego se añaden 40 ml de agua y la mezcla de reacción se transfiere a un embudo de decantación de 1 L. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de éter. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto T.

Síntesis del Intermediario T ( a través de los Intermediarios I e Y)

El compuesto T puede prepararse mediante una adaptación de los procedimientos de Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McCarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332-4334 mediante el uso de diferentes materiales de partida. A un RBF seco de 250 ml bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente se añaden 100 ml de THF destilado y 7,76 g, 20 mmol, del Compuesto I. Luego, la solución resultante se trata con 11,11 ml, 20 mmol, de fenil litio 1,8 M en dibutil éter (Sigma-Aldrich) y después de 15 minutos se enfría a -78 °C con un baño de hielo seco. Después de 15 minutos más, se añaden a través de una jeringa 20 mmol del Compuesto Y disuelto en 5 ml de THF seco y la mezcla de reacción se calienta a -30 °C mediante la transferencia del aparato a un criostato. Luego, se añade un segundo equivalente de fenil litio 1,8 M seguido de un exceso de metanol con la temperatura mantenida a -30 °C. Después de agitar durante 5 minutos, la reacción se lleva a temperatura ambiente y se añaden 40 ml de agua y la mezcla de reacción se transfiere a un embudo de decantación de 1 L donde se añaden 200 ml de acetato de etilo. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de acetato de etilo. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía en columna rápida (Gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto T.

Síntesis del Intermediario U|

El compuesto U se puede preparar en forma racémica mediante una adaptación de los procedimientos de Johnson, W. S.; Gravestock, M. B.; McGarry, B. E. J. Am. Chem. Soc., 1971, 93, 4332,4334. A un RBF seco de 250 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo una atmósfera de Argón a temperatura ambiente, se añaden 100 ml de éter destilado y 5,68 g, 20 mmol, del Compuesto T. Luego, la solución resultante se trata con 25 ml, 40 mmol, de metil litio 1,6 M en éter (Sigma-Aldrich) a temperatura ambiente y la mezcla de reacción se monitoreó por TLC. Una vez que se consumió todo el material de partida, la reacción se extingue con 25 ml de cloruro de amonio acuoso saturado y se transfiere a un embudo de decantación de 1 L donde se añaden 200 ml adicionales de éter. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de éter. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi y el alcohol crudo se usa sin purificación adicional por su inestabilidad.

Así en un RBF de 500 ml, que se equipa con una barra de agitación, bajo Argón, el alcohol crudo se recoge en 200 ml de dicloroetano destilado (DCE), al que se añaden 59,5 g de carbonato de etileno. Luego, esta mezcla se enfría a 0 °C con un baño de hielo y se añaden 37 ml de ácido trifluoroacético a través de una jeringa. La mezcla de reacción se agita durante 3 horas antes de añadir un exceso de carbonato de potasio en metanol acuoso (50 ml) y la mezcla de reacción se transfiere a un embudo de decantación de 1 L. Después de agitar vigorosamente, la mezcla bifásica se separa y se extrae además la fase acuosa con dos porciones de 50 ml de éter. Luego, las fases orgánicas combinadas se secan con sulfato de sodio y se filtran a través de un lecho de 2,54 cm (1 pulgada) de Celite a través de un embudo sinterizado de 100 ml bajo vacío en un RBF de 1 L, con el residuo de sulfato de sodio que se lavó con 50 ml adicionales de éter. Luego, la solución recogida se reduce bajo vacío en un evaporador rotatorio Buchi. Luego, el residuo se recoge en una mezcla de hexano/acetato de etilo 5:1 y se purifica mediante cromatografía rápida en columna (gel de sílice 60, EMD, sistema disolvente de hexano/acetato de etilo) para dar el Compuesto U como una mezcla racémica. Los enantiómeros del compuesto U se pueden separar para proporcionar el compuesto U enriquecido enantioméricamente para su uso en la síntesis adicional de ent-progesterona enantioméricamente enriquecida.

La e tapa I puede p re pa ra rse m ed ia n te la ad ap ta c ió n de los p ro ce d im ie n to s de Y ang , D.; Z han g , C. J. O rg. C hem ., 2001 ,66 , 4814 -4818 ; La e ta pa ii puede p re p a ra rse m ed ia n te la a d a p ta c ió n de los p ro ce d im ie n to s de Jo h n so n , W . S.; G ra ve s to ck , M. B.; M cC arry , B. E. J. A m . C hem . S oc., 1971, 93, 4332 -4334. No de acu e rd o con la p re sen te in ven c ión y a un R BF de 250 m l, que se e q u ipa con una ba rra de ag itac ión , ba jo una a tm ó s fe ra de A rgó n a te m p e ra tu ra a m b ie n te se a ñ a d e n 100 m l de una m ezc la de D C E /H 20 1 :1 ,5 ,68 g, 20 m m ol, de l C o m p u e s to U, 0 ,145 g, 0 ,7 m m o l, de c lo ru ro de ru ten io (III) (S ig m a -A ld r ic h ) y 8 ,56 g, 40 m m ol, de p e ryo d a to de sod io (S ig m a -A ld rich ). La m ezc la de rea cc ió n se ag ita a te m p e ra tu ra am b ie n te y se m o n ito re a p o r T LC . Una ve z co m p le ta da , la m ezc la de rea cc ió n se d iluye con 100 ml de é te r y se tra n s fie re a un e m b ud o de d e ca n ta c ió n de 500 ml do nd e se añ ad e una ca n tid a d a d ic io na l. D e spu és de a g ita r v ig o ro sa m e n te , la m ezc la b ifá s ica se sep a ra y se ex trae a d e m á s la fase a cu o sa con do s p o rc io n e s de 50 m l de é te r. Luego, las fa s e s o rg á n ic a s c o m b in a d a s se seca n con su lfa to de so d io y se filtran a tra vé s de un lecho de 2 ,54 cm (1 pu lg ada ) de C e lite a n te r io r a 2 ,54 cm (1 pu lg ada ) de s ílice ráp ida (ge l de s ílice 60, E M D ) a tra v é s de un e m b u d o s in te riza d o de 100 m l ba jo va c ío en un 1 L de R B F, con el res idu o de su lfa to de sod io que se lavó con 50 m l ad ic io n a le s de é te r. Luego, la so luc ió n reco g ida se red uce ba jo va c ío en un e v a p o ra d o r ro ta to rio B uch i y la tr ice to n a c rud a se usa sin pu rifica c ión a d ic io na l. A sí, en un R B F de 100 m l, que se eq u ip a con una ba rra de ag itac ión , ba jo A rgón , la tr ice to n a cruda se tra ta con 50 ml de so luc ió n de h id ró x ido de po tas io al 5 % /a g u a 5:2 du ran te 20 ho ras a te m p e ra tu ra am b ien te . Luego de ese tiem p o , se añaden 100 ml de ace ta to de e tilo a la m ezc la de reacc ión , que luego se tra n s fie re a un e m b ud o de d e ca n ta c ió n de 1 L. D e spu és de a g ita r v ig o ro sa m e n te , la m ezc la b ifá s ica se sep ara y se ex trae ad em á s la fase acu osa con dos po rc io nes de 50 ml de a ce ta to de e tilo . Luego, las fa s e s o rg á n ic a s c o m b in a d a s se se ca n con su lfa to de so d io y se filtran a tra v é s de un lecho de 2 ,54 cm (1 p u lg a d a ) de C e lite a tra v é s de un e m b ud o s in te riza d o de 100 m l ba jo vac ío en un R B F de 1 L, con el re s id u o de su lfa to de so d io que se lavó con 50 m l a d ic io n a le s de a ce ta to de etilo . Luego, la so lu c ió n reco g ida se reduce ba jo va c ío en un e v a p o ra d o r ro ta to rio B uch i. Luego, el res idu o se recoge en una m ezc la de h e xa n o /a ce ta to de e tilo 5:1 y se pu rifica m ed ia n te c ro m a to g ra fía en co lu m n a ráp ida (G el de s ílice 60, E M D , s is tem a ^{d iso lve n te de h e xa n o /a ce ta to de e tilo ) pa ra d a r} rac- ^{p ro g e s te ro n a . Los e n a n tió m e ro s se sep a ra n p o s te rio rm e n te con}H P LC qu ira l pa ra d a r en t-p ro g e s te ro n a .

Síntesis del Intermediario V

El co m p u e s to V se p re pa ró de a cu e rd o con el m é tod o de R ich te r, A ; H edberg , C; W a ld m a n n , H. J. O rg. C hem . 2011 , 76, 6694 -6702. A un m a tra z de fon do red on do seco , e q u ipad o con una barra de ag itac ión , ba jo una a tm ó s fe ra de A rg ó n , se a ñ ad ie ro n 400 m l de DC M , 25 m l de 3 -m e til-2 -c ic lo p e n te n o n a , 95 ,25 g de y o d o y 28 ,5 g de d ic rom a to de p irid in io se cu e n c ia lm e n te . La rea cc ió n se ag itó a te m p e ra tu ra am b ie n te du ra n te 72 -96 h an tes de lava rla con una so luc ió n acu osa sa tu ra d a de b isu lfito de sod io (3 x 200 m l) y red uc irla ba jo vacío . El só lido c ris ta lino m arró n c la ro re su lta n te se a is ló con un re n d im ie n to de l 85 % y se usó sin pu rifica c ión a d ic io na l. La RM N 1H es tu vo de acu e rd o con los da tos que se re p o rta ro n a n te rio rm en te . RM N 1H (300 M H z, C D C I3 ): 5 = 2 ,75 (m, 2H ), 2 ,59 (m, 2H ), 2 ,22 (s, 3H ).

Síntesis de Intermediario W

El co m p u e s to W se p re pa ró de acu e rd o con el m é tod o de D avie , C. P.; D a nhe ise r, R. L. A ng ew . C hem . Int. Ed.

2005 , 44 , 5867 -5870. El o rden de ad ic ión de los rea c tivos se a lte ró con re sp e c to al m é tod o pu b licad o . A un R BF seco , que se equ ipa con una ba rra de ag itac ión , en a tm ó s fe ra de A rgó n , se añ ad ie ro n 450 m l de T H F , 33 ,6 g de 2-yo d o -3 -m e til-2 -c ic lo p e n te n o n a (co m p u e s to V ), 150 m l de d iiso p ro p ila m in a y 13 ,468 m l de a lcoh o l p ropa rg ílico . Luego, la m ezc la se lavó con A rgó n d u ran te 15 m in u tos an tes de que se añad ie ra n se cu e n c ia lm e n te 5 ,34 g de d ic lo ru ro de B is (tr ife n ilfo s fin a ) pa la d io (II) y 1,14 g de y o d u ro de cob re . Luego, la m ezc la de rea cc ió n se ag itó d u ran te 2 ho ras a te m p e ra tu ra am b ie n te , tra s lo cua l la R M N 1H de una pe qu eñ a a lícu o ta de la m ezc la de rea cc ió n ind icó que la rea cc ió n se com p le tó . D e sp u é s de la ad ic ió n de 250 ml de agua , la m ezc la se e x tra jo con D C M (2 x 250 m l) y se redu jo pa rc ia lm e n te ba jo vac ío ha s ta que qu ed a ron a p ro x im a d a m e n te 200 m l de d iso lve n te . U na R M N de 1H de la so lu c ió n in d icó una p ro po rc ión de d iso lve n te de a p ro x im a d a m e n te 4:4:1 de D C M /T H F /'P r2 N H . Esta m ezc la se usó d ire c ta m e n te en la p re pa rac ió n de l co m p u e s to X. P ara el co m p u e s to a is lad o W - R M N 1H (300 M H z, C D C I3): 5 = 4 ,45 (s, 2H ), 2 ,65 (m, 2H ), 2 ,50 (m , 2H ), 2 ,22 (s, 3H ), 2J0 (bs, 1H).

ntesis del Intermediario X

A la mezcla aislada descrita en la preparación del compuesto W, se añadieron 24 g de Pd al 10 % sobre carbón activado (Sigma Aldrich). El matraz de reacción y la mezcla se lavaron con H2 y posteriormente se mantuvieron bajo 1 atmósfera de H2 durante 12-24 h. Después de que la RMN 1H de la mezcla de reacción indicó la reducción completa del alcohol propargílico intermediario, la mezcla de reacción se filtró a través de celite y se redujo bajo vacío para dar un aceite de color marrón/negro oscuro. El sometimiento adicional a una columna corta dio el alcohol que se deseaba como un aceite rojo/marrón con un rendimiento del 70 % y una pureza >80 %. RMN 1H (300 MHz, CDCI3): 5 = 3,52 (t, 2H), 2,57 (m, 2H), 2,50 (bs, 1H), 2,44 (m, 2H), 2,35 (t, 2H), 2,10 (s, 3H), 1,65 (m, 2H).

Síntesis del Intermediario Y

A temperatura ambiente se disolvieron 154 mg del alcohol en 10 ml de DCM en un RBF, que se equipa con una barra de agitación y bajo una atmósfera de Argón. A esta solución se añadieron 431 mg de Celite seguidos de 431 mg de clorocromato de piridinio. La mezcla de reacción se agitó durante 4 horas, tras lo cual el análisis por TLC indicó que la reacción se completó. La mezcla de reacción se redujo bajo vacío y el residuo resultante se extrajo con hexano/acetato de etilo 5:1 (4 x 20 ml). Los extractos que se combinaron se filtraron a través de un lecho de sílice y se redujeron bajo vacío para dar el aldehído que se deseaba como un aceite amarillo con un rendimiento del 74 % y una pureza >85 %.

Lista de referencia

1. Publicación de EE. UU. No. US 2005/0187188 de Stein y otros, publicada el 25 de Agosto de 2005-"Methods for the Treatment of a Traumatic Central Nervous System Injury"

2. Publicación de EE. UU. No. US 2007/0078117 de Hoffman y otros, publicada el 5 de Abril de 2007-"Methods for the Treatment of a Traumatic Central Nervous System Injury"

3. Publicación de EE. UU. No. US 2008/0318914 de Hoffman y otros, publicada el 25 de Deciembre de 2008-"Methods for the Treatment of a Traumatic Central Nervous System Injury"

4. Publicación de EE. UU. No. US 2009/0221544 de Stein y otros, publicada el 3 de Septiembre de 2009-"Methods for the Treatment of a Traumatic Central Nervous System Injury via a Tapered Administration Protocol"

5. Publicación de EE. UU. No. US 2009/0325920 de Hoffman y otros, publicada el 31 de Deciembre de 2009-"Methods for the Treatment of a Traumatic Central Nervous System Injury"

6. Publicación de EE. UU. No. US 2011/0306579 de Stein y otros, publicada el 15 de Deciembre de 2011-"Methods of Neuroprotection using Neuroprotective Steroids and a Vitamin D"

7. R. J. Auchus y otros, "The Enantiomer of Progesterone (ent-progesterone) is a Competitive Inhibitor of Human Cytochromees P450c17 and P450c21," Archives of Biochemistry and Biophysics 409 (2003) 134-144 8. S. D. Rychnovsky y otros, "Synthesis of ent-Cholesterol, the Unnatural Enantiomer," J. Org. Chem. 57 (1992) 2732-2736

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10. H. Nemoto y otros, " First Enantioselective Total Synthesis of (+)-Cortisone," J. Org. Chem. 55 (1990) 5625 5631

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12. M. Weimar y otros, "Enantioselective Synthesis of (+)-Estrone Exploiting a Hydrogen Bond-Promoted Diels-Alder Reaction," J. Org. Chem 75 (2010) 2718-2721

13. Herrmann y otros, "Formal Total Synthesis of (±)-Estrone and Zirconocene-Promoted Cyclization of 2-Fluoro-1-7-octadienes and Ru-Catalyzed Ring Closing Metathesis," J. Org. Chem 73 (2008) 6202-6206 14. Q. Hu y otros, "Simple, Catalytic Enantioselective Synthesis of Estrone and Desogestrel," J. Am Chem Soc 126 (2004) 5984-5986

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16. Solicitud de Patente de EE. UU. No. 13/645,854 de VanLandingham y otros, "Prophylactic and Post-Acute Use of Progesterone to Better Outcomes Associates with Concussion"

17. Solicitud de Patente de EE. UU. No. 13/645,881 de VanLandingham y otros, "Nasal Delivery Mechanism for Prophylactic and Post-Acute Use for Progesterone and/or Its Enantiomer for Use in Treatment of Mild Traumatic Brain Injuries"

18. Solicitud de Patente de EE. UU. No. 13/645,925 de VanLandingham y otros, "Prophylactic and Post-Acute Use of Progesterone in Conjunction with its Enantiomer for Use in Treatment of Mild Traumatic Brain Injuries" 19. Solicitud de Patente Internacional PCT No. PCT/US2012/59030 de VanLandingham y otros, "Prophylactic and Post-Acute Use of Progesterone to Better Outcomes Associated with Concussion"

20. Solicitud de Patente Internacional PCT No. PCT/US2012/59087 de VanLandingham y otros, "Nasal Delivery Mechanism for Prophylactic and Post-Acute Use for Progesterone and/or Its Enantiomer for Use in Treatment of Mild Traumatic Brain Injuries"

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22. Anand Kumar, T.C., David, G.F.X., Sankaranarayanan, A., Puri, V. and Sundram, K. R., 1982. Pharmacokinetics of progesterone after its administration to ovariectomized rhesus monkeys by injection, infusion or intranasal spraying. Proceedings of the National Academy of Science 79, 4185-4189.

23. Anand Kumar, T.C., David, G.F.X., Kumar, K., Umberkoman, B. and Krishnamoorthy, M.S., 1974b. A new approach to fertility regulation by interfering with neuroendocrine pathways. In: Neuroendocrine Regulation of Fertility. Karger, Basel, 314-322.

24. Anand Kumar, T.C., David, G.F., Umberkoman, B. and Saini, K.D., 1974a. Uptake of radioactivity by body fluids and tissues in rhesus monkeys after intravenous injection or intranasal spray of tritium-labelled oestradiol and progesterone. Curr. Sci. 43, 435439.

25. Cincinelli y otros, "Effects of the repetitive administration of progesterone by nasal spray in postmenopausal women," Fertil. Steril. 60(6): 1020-1024 (1993).

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método para preparar ent-progesterona, el método comprende la etapa

de (a) hacer reaccionar un compuesto de fórmula U:

para formar un intermediario de tricetona de fórmula U':

a través de las etapas de:

i. poner en contacto el compuesto de fórmula U con un reactivo dihidroxilante que es un reactivo de osmio o un reactivo de manganeso, para formar así un diol vecinal, y,

ii. escindir oxidativamente el diol vecinal, para formar así el compuesto de fórmula U', y

(b) ciclar el compuesto de fórmula U' para formar ent-progesterona.

2. El método de la reivindicación 1, en donde el reactivo dihidroxilante comprende un catalizador de osmio, un catalizador de manganeso y la etapa de escindir oxidativamente el diol vecinal comprende poner en contacto el diol vecinal con un reactivo de peryodato o tetraacetato de plomo.