ES2909903T3

ES2909903T3 - Proporciones fijas de medicamentos para el tratamiento de cáncer hematopoyético y trastornos proliferativos

Info

Publication number: ES2909903T3
Application number: ES17200498T
Authority: ES
Inventors: Arthur Louie; Christine Swenson; Lawrence Mayer; Andrew Janoff
Original assignee: Rotalec Ip Holdings LLC
Current assignee: Rotalec Ip Holdings LLC
Priority date: 2007-02-16
Filing date: 2008-02-15
Publication date: 2022-05-10
Anticipated expiration: 2028-02-15
Also published as: EP3300601A1; HUE058334T2; US20080199515A1; KR20100014441A; AU2008216083A1; WO2008101214A2; JP2010519224A; HRP20220428T3; US8092828B2; JP5314600B2; EP2120568A2; AU2008216083A2; PL2120568T3; WO2008101214A3; NO2022027I1; PT2120568T; SI3300601T1; FR22C1034I1; CA2678332A1; US20100303895A1

Abstract

Una composición farmacéutica que comprende citarabina y daunorrubicina en una relación molar no antagónica fija de citarabina a daunorrubicina de aproximadamente 5:1 para usar en el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (LMA) en un paciente humano, en la que dicha relación fija se mantiene en el plasma durante al menos 4 horas después de la administración, y en el que dicha relación molar no antagonista fija de citarabina a daunorrubicina está encapsulada en liposomas.

Description

DESCRIPCIÓN

Proporciones fijas de medicamentos para el tratamiento de cáncer hematopoyético y trastornos proliferativos

Campo técnico

[0001] La invención, que está definida por las reivindicaciones adjuntas, se refiere a métodos para mejorar la administración y la eficacia terapéutica de una combinación de proporción fija de citarabina y daunorrubicina.

Antecedentes de la técnica

[0002] Los estudios in vitro han demostrado que la actividad antitumoral puede potenciarse cuando se utilizan fármacos citotóxicos en combinación. Esto ha llevado, a lo largo de los años, al uso de combinaciones de fármacos en la clínica, de modo que las combinaciones de fármacos citotóxicos ahora son estándar en muchas formas de quimioterapia contra el cáncer. Los nuevos medicamentos contra el cáncer generalmente se introducen por primera vez en los pacientes como agentes únicos. Después de determinar la dosis máxima tolerada para un agente, se agrega un segundo agente y la dosis de uno o ambos agentes se ajusta en función de la toxicidad. Por lo general, el agente más activo o eficaz se usa a la dosis completa y el otro agente se reduce y aumenta la dosis hasta que la toxicidad limitante de la dosis define la dosis máxima tolerada para la combinación. Como resultado, el desarrollo de la mayoría de los regímenes combinados se determina empíricamente sobre la base de la tolerabilidad. Sin embargo, in vitro, donde se puede controlar la proporción molar de los fármacos utilizados en combinación, se ha demostrado que las combinaciones de fármacos que proporcionan sinergia en una proporción pueden ser simplemente aditivas o incluso antagónicas en otras proporciones (Mayer, LD, et al., Mol Cancer Ther. (2006) 5:1854-1863). Cuando se administran medicamentos libres individuales en "cócteles" de quimioterapia, cada agente es manejado de manera diferente por el cuerpo, lo que resulta en una distribución y eliminación variable de cada medicamento, lo que puede resultar en proporciones de medicamentos que son subóptimas o ineficaces durante parte o la mayor parte del tiempo. La observación de que la actividad sinérgica in vitro de los fármacos antineoplásicos depende de proporciones específicas de fármacos sugiere que la actividad clínica e in vivo de una combinación puede mejorarse manteniendo la proporción sinérgica. De esta manera, el desarrollo de regímenes quimioterapéuticos combinados particulares puede basarse en la relación más eficaz en lugar de basarse empíricamente en la toxicidad.

[0003] Las quimioterapias de combinación que comprenden análogos de citidina y agentes de antraciclina han sido bien estudiadas para el tratamiento contra varios cánceres o trastornos proliferativos hematológicos. Los cócteles de fármacos del análogo de citidina, citarabina y una antraciclina como la daunorrubicina demuestran cierta eficacia en pacientes con neoplasias malignas hematológicas. Véase, por ejemplo, Tallum y col., Blood (2005) 106:2243. Desde 1973, la citarabina combinada con una antraciclina ha sido el tratamiento estándar de primera línea para la leucemia mielógena aguda (LMA), con la que se comparan otros regímenes. En la actualidad, el estándar de atención para la LMA es una combinación de citarabina y daunorrubicina administrada en el régimen clásico "7 y 3" con citarabina administrada durante 7 días consecutivos y daunorrubicina durante los primeros 3 de esos 7 días consecutivos.

[0004] La citarabina (arabinósido de citosina, Ara-C o 1-p-D-arabinofuranosilcitosina) es un agente antineoplásico específico de la fase del ciclo celular, que afecta a las células predominantemente durante la fase S de la división celular. Intracelularmente, la citarabina se convierte en citarabina-5'-trifosfato (ara-CTP), que es el metabolito activo. El mecanismo de acción no se comprende por completo, pero parece que ara-CTP actúa principalmente a través de la inhibición de la ADN polimerasa. La incorporación en el ADN y el ARN también puede contribuir a la citotoxicidad de la citarabina. La citarabina es citotóxica para una amplia variedad de células de mamíferos en proliferación en cultivo.

[0005] El clorhidrato de daunorrubicina es la sal de clorhidrato de un antibiótico citotóxico de antraciclina producido por una cepa de Streptomyces coeruleorubidus. La daunorrubicina tiene actividad antimitótica y citotóxica a través de varios mecanismos de acción propuestos. La daunorrubicina forma complejos con el ADN por intercalación entre pares de bases. Inhibe la actividad de la topoisomerasa II al estabilizar el complejo ADN-topoisomerasa II, evitando la parte de religación de la reacción de ligación-religación que cataliza la topoisomerasa II. Resultan roturas de ADN de cadena simple y cadena doble. La daunorrubicina también puede inhibir la actividad de la polimerasa, afectar la regulación de la expresión génica y producir daños por radicales libres en el ADN. La daunorrubicina posee un efecto antitumoral frente a un amplio espectro de tumores animales, ya sean injertados o espontáneos.

[0006] Aunque las combinaciones de estos dos fármacos administrados como cócteles de fármacos han proporcionado algún beneficio, existen varios inconvenientes que limitan su uso terapéutico. Por ejemplo, la administración de cócteles de fármacos gratuitos normalmente da como resultado una eliminación rápida de uno o todos los fármacos antes de llegar al sitio de la enfermedad. Si los fármacos individuales en el cóctel solo son óptimamente efectivos dentro de una proporción estrecha entre sí, una eliminación rápida de un fármaco pero no del otro puede reducir la eficacia general de la combinación al tiempo que aumenta la toxicidad. Esto a veces puede conducir a una mayor toxicidad a medida que se incrementan las dosis de fármacos individuales para lograr un mayor efecto terapéutico. Los intentos de mejorar la actividad y reducir la toxicidad también pueden incluir tiempos de infusión más prolongados. Por ejemplo, la administración actual de citarabina que se administra en dosis altas (1 gramo/m2/día) en bolos lentos durante 1 hora/día o en dosis más bajas, más típicas (100-200 mg/m2/día) por infusión continua durante los 7 días consecutivos. Tal administración de infusión prolongada da como resultado una mayor complejidad, tiempo de hospitalización y gastos, así como un mayor riesgo de complicaciones de infusión.

[0007] Se ha estudiado la adición de otros agentes como 6-tioguanina o etopósido y los cambios en la dosis o el programa de administración para mejorar los resultados, pero aunque se han logrado ganancias incrementales, el uso de 30 años de una antraciclina y citarabina sigue siendo la base para el tratamiento de inducción estándar en LMA. Por lo tanto, para mejorar sustancialmente la supervivencia global en la enfermedad junto con una menor toxicidad, existe la necesidad de terapias de inducción y/o consolidación más eficaces y mejor toleradas.

[0008] Johnstone, S. et al., Proc Amer Assoc Cancer Res, Volumen 46, 2005, describe "Synergistic anti-tumor activity observed for a fixed ratio liposome formulation of cytarabine (Cyt): Daunorubicin (Daun) against preclinical leukemia models". WO2005/102359A1 describe "formulaciones liposomales de agentes de antraciclina y análogos de citidina".

[0009] Los regímenes de administración de fármacos para estos agentes, como los identificados aquí, que permiten la administración sostenida de proporciones de fármacos no antagonistas son muy deseables ya que permitirán tiempos de administración reducidos sin aumentar la toxicidad o disminuir la eficacia del tratamiento. Dichas mejoras en los regímenes también pueden permitir que se administren al paciente dosis más eficaces de lo que sería posible con otros regímenes que, de otro modo, estarían limitados por la toxicidad.

Descripción de la invención

[0010] La invención está definida por las reivindicaciones adjuntas. En una forma de realización, la proporción molar no antagonista fija se mantiene durante al menos aproximadamente 8 horas, al menos aproximadamente 16 horas o al menos aproximadamente 24 horas. La antraciclina es daunorrubicina. La citarabina y la antraciclina están asociadas de manera estable con uno o más vehículos de administración. La encapsulación en vehículos de administración permite administrar dos o más agentes en el sitio de la enfermedad de manera coordinada, asegurando así que los agentes estarán presentes en el sitio de la enfermedad en una proporción no antagónica. Este resultado se logrará tanto si los agentes se encapsulan conjuntamente en vehículos de administración como si se encapsulan por separado en vehículos de administración administrados de manera que se mantengan proporciones no antagónicas en el sitio de la enfermedad. La farmacocinética (PK) de la composición está controlada por los propios vehículos de administración, de modo que se logra una administración coordinada (siempre que la PK de los sistemas de administración sea comparable). El vehículo de suministro es un liposoma.

[0011] En algunas formas de realización, la composición farmacéutica se administra en al menos aproximadamente 30 minutos y menos de aproximadamente 8 o 12 horas. En una forma de realización específica, la composición farmacéutica se administra en aproximadamente 90 minutos. En otra forma de realización, la composición farmacéutica se administra de forma ambulatoria. En una forma de realización específica, la citarabina se administra a aproximadamente 100-180 mg/m2/día en menos de 3 horas. En otra forma de realización, la citarabina en dosis baja se administra en aproximadamente 90 minutos.

[0012] La relación no antagónica fija de citarabina:antraciclina es de aproximadamente 5:1. La combinación de citarabina y antraciclina en una proporción fija no antagónica se encapsula en un liposoma.

[0013] El cáncer es un cáncer hematológico avanzado y es leucemia mieloide aguda (LMA). A veces, el cáncer es un cáncer en recaída. El sujeto puede haberse sometido previamente al menos a un régimen antitumoral. En una forma de realización, el paciente ha fallado o se ha vuelto refractario a uno o más regímenes antitumorales. A veces, el régimen antitumoral anterior es un régimen de múltiples agentes. En una forma de realización, el régimen antitumoral anterior consiste en citarabina con o sin antraciclina.

[0014] En una forma de realización específica, la terapia de primera línea se proporciona para pacientes de alto riesgo, preferiblemente, pacientes ancianos de alto riesgo. En una forma de realización adicional, la citarabina se administra a aproximadamente 100 mg/m2/día o menos a pacientes de alto riesgo.

Breve descripción de los dibujos

[0015] La Figura 1 muestra las concentraciones de fármaco en plasma y la relación molar fija sostenida de citarabina:daunorrubicina en el plasma después de la administración de citarabina y daunorrubicina encapsuladas en liposomas. A. Concentración media de citarabina y daunorrubicina en el plasma de pacientes después de la infusión del día 5 (en un ciclo de administración de CPX-351 de los días 1, 3 y 5) de 24 unidades/m2 de CPX-351 hasta 7 días (concentraciones determinadas por LC-MS/MS; Cada línea representa un solo paciente; N=3). B. Proporción molar de citarabina y daunorrubicina en el plasma de pacientes después de la infusión del día 5 de 24 unidades/m2 de CPX-351 hasta 24 horas (concentraciones determinadas por LC-MS/MS; Cada línea representa un solo paciente; N=3). C. Proporción molar de citarabina y daunorrubicina en el plasma de pacientes después de la infusión del día 5 de 57 unidades/m2 de CPX-351 hasta 48 horas (concentraciones determinadas por LC/MS/MS; Cada línea representa un solo paciente; N=3).

Modos de llevar a cabo la invención

[0016] La invención está definida por las reivindicaciones adjuntas. A menos que se defina de otro modo, todos los términos técnicos y científicos utilizados en el presente documento tienen el mismo significado que comúnmente entiende un experto en la técnica a la que pertenece esta invención. Si una definición establecida en esta sección es contraria o incompatible con una definición establecida en las patentes, solicitudes, solicitudes publicadas y otras publicaciones, prevalecerá la definición establecida en esta sección.

[0017] Como se usa en el presente documento, "un" o "una" significa "al menos uno" o "uno o más".

[0018] Para citarabina y antraciclina, la relación molar no antagónica in vitro estaba entre 25:1 y aproximadamente 1:1, donde se encontró que una relación molar de 5:1 era óptima. La antraciclina es daunorrubicina. El desarrollo de la inyección de liposomas CPX-351 (citarabina:daunorrubicina) se basó en 1) definir una proporción no antagónica de los dos grupos activos, citarabina y daunorrubicina, utilizando ensayos de cribado basados en células y 2) diseñando un vehículo de fármaco liposomal para mantener esta proporción tras la administración intravenosa. Esta proporción no se basó en los regímenes derivados empíricamente que se usan actualmente para la citarabina y las antraciclinas.

[0019] En el presente documento se proporcionan métodos para administrar proporciones molares no antagónicas fijas de citarabina y una antraciclina para mejorar la actividad antitumoral al mismo tiempo que se proporcionan las ventajas de una administración rápida. En resumen, las proporciones no antagónicas de estos agentes quimioterapéuticos se determinaron in vitro utilizando técnicas de selección basadas en células. Si estas mismas proporciones se administran por separado como cócteles de fármacos libres (p. ej., formulaciones farmacéuticas convencionales de base acuosa sin liberación de liposomas), la proporción no se mantiene porque los fármacos se distribuyen y eliminan de forma independiente, lo que da como resultado una proporción que cambia continuamente. Usando fármacos encapsulados en liposomas, los métodos proporcionados en este documento permiten el mantenimiento de la relación no antagónica después de la administración durante períodos de tiempo prolongados. La formulación liposomal administra cada fármaco en la proporción correcta controlando la farmacocinética individual de cada fármaco y manteniendo así la relación no antagónica.

[0020] Típicamente, la administración sostenida requiere que se administre una mayor cantidad de un fármaco en un esfuerzo por mantener un nivel terapéuticamente eficaz del fármaco en el plasma y, en última instancia, en el sitio del tumor o de la enfermedad. Estas grandes dosis se administran durante un largo período de tiempo, a menudo uno o más días, lo que requiere largas estancias en el hospital y/o la dependencia de protocolos de infusión prolongados que aumentan el riesgo de complicaciones como infección o mal funcionamiento de la bomba. Otra desventaja es que la toxicidad resultante de las dosis más altas puede impedir que se alcance un nivel plasmático óptimo.

[0021] CPX-351 es una formulación liposomal con una relación molar fija de 5:1 de citarabina y daunorrubicina y ha mostrado una mayor eficacia en cultivos celulares y en modelos in vivo. (Mayer, LD y col., Mol. Cancer Ther. (2006) 5:1854-1863). Cualquier fuente adecuada de citarabina (también conocida como 4-amino-1-[(2R,3S,4R,5R)-3,4-dihidroxi-5-(hidroximetil)oxolan-2-il]pirimidin-2-ona o 1 p-arabinofuranosilcitosina) y daunorrubicina (también conocida como (8S,10S)-8-acetil-10-[(2S,4S,5S,6S)-4-amino-5-hidroxi-6-metil-oxan-2-il]oxi-6,8,11-trihidroxi-1-metoxi-9,10-dihidro-7H-tetraceno-5,12-diona o daunomicina cerubidina).

[0022] Se emplea una formulación liposomal. Los liposomas están diseñados para la administración sostenida de los fármacos encapsulados en una proporción no antagónica a un tumor o sitio de enfermedad. En una forma de realización, la citarabina y la daunorrubicina se asocian de manera estable con uno o más liposomas. Normalmente, los liposomas tienen un diámetro medio inferior a 300 nm, a veces inferior a 200 nm. En un ejemplo, el tamaño nominal de estos liposomas es de aproximadamente 100 nm y la esterilización se logra mediante filtración a través de un filtro de 0,2 mm. En una forma de realización específica, la membrana del liposoma está compuesta por diestearoilfosfatidilcolina (DSPC), diestearoilfosfatidilglicerol (DSPG) y colesterol (CHOL) en una proporción molar de 7:2:1. En un caso, los liposomas se preparan mediante un método de liposomas derivados de agua en aceite y los liposomas extruidos se suspenden en sacarosa tamponada con fosfato a pH 7,4. En formas de realización específicas, la proporción de citarabina a lípidos es de aproximadamente 1:1,5 a 1:2,6 y la proporción de daunorrubicina a lípidos es de aproximadamente 1:7,7 a 1:12,5. Preferiblemente, la proporción de citarabina a lípidos es de aproximadamente 1:2 y la proporción de daunorrubicina a lípidos es de 1:10. Los vehículos de entrega ejemplares incluyen, pero no se limitan a los descritos en Torchilin, et al. (eds.), LIPOSOMES: A PRACTICAL APPROACH (Oxford University Press 2a Ed. 2003); Gregoriadis, LIPOSOME TECHNOLOGY (Taylor & Francis 3a Ed. 2006). Puede emplearse cualquier medio adecuado para encapsular la combinación de fármacos en los liposomas. En una forma de realización específica, la citarabina y la daunorrubicina se encapsulan en el liposoma por lo que la citarabina se encapsula pasivamente en liposomas preformados y la daunorrubicina se acumula activamente dentro de los liposomas con altas eficiencias de captura utilizando un procedimiento de carga basado en gluconato de cobre/trietanolamina. Ver, por ejemplo, Solicitud PCT N° WO 07/076117.

[0023] El cáncer abarca cualquier célula maligna con un crecimiento anormal, descontrolado. Tales células poseen una serie de propiedades características tales como proliferación incontrolada, inmortalidad, potencial metastásico, velocidad de crecimiento y proliferación rápidos y ciertas características morfológicas típicas. A menudo, las células cancerosas estarán en forma de tumor, pero tales células también pueden existir solas dentro de un mamífero, o pueden ser una célula cancerosa no tumorigénica, tal como una célula de leucemia. Una célula se identifica como cáncer por cualquiera de varias formas, que incluyen, entre otras, la detección de la presencia de un tumor o tumores (p. ej., por medios clínicos o radiológicos), el examen de células dentro de un tumor o de otra muestra biológica (p. ej., de una biopsia de tejido), medir marcadores sanguíneos indicativos de cáncer (p. ej., CA125, PAP, PSA, CEA y similares) y/o detectar un genotipo indicativo de cáncer (p. ej., TP53, ATM y similares). El término "tumores hematopoyéticos" se refiere a tumores o cánceres de la sangre. Como se usa en el presente documento, el término "tumores hematopoyéticos avanzados" se refiere a un tumor maligno que está en recaída o es refractario a uno o más regímenes antitumorales previos. Los tumores hematopoyéticos pueden ser una leucemia o un linfoma. Dichos tumores incluyen la leucemia mielógena aguda (LMA), la leucemia linfocítica aguda (LLA), la leucemia promielocítica aguda (LPA), las neoplasias de células B precursoras y maduras, la leucemia linfocítica crónica (LLC), las neoplasias de células plasmáticas, la leucemia mielocítica crónica (LMC), mieloma, linfoma de Hodgkin, linfoma no Hodgkin, síndromes mielodisplásicos (SMD), enfermedades mielodisplásicas y mieloproliferativas, leucemia mielomonocítica crónica (LMMC), policitemia vera, neoplasias de células T precursoras y maduras, leucemias y linfomas de células T, micosis fungoides y síndrome de Sezary. Véase, por ejemplo, un resumen de neoplasias malignas hematopoyéticas y linfoides en Greer, et al. (eds.), WINTROBE'S CLINICAL HEMATOLOGY (Lippincott Williams & Wilkins 11a Ed. (2003)) en la Tabla 71.3 (World Health Organization Classification of Hematopoietic and Lymphoid Neoplasms). Los tumores tratados utilizando las composiciones proporcionadas en el presente documento incluyen los de pacientes adultos y pediátricos. Las composiciones se pueden emplear en inducción y terapia de mantenimiento. Las composiciones descritas también son útiles en trastornos hematológicos relacionados tales como mielofibrosis y amiloidosis debidas a enfermedades de cadenas ligeras. Más particularmente, la LMA puede incluir aquellos con anomalías genéticas recurrentes (independientemente del porcentaje de blastos) como LMA con t(8;21)(q22;q22), (AML1/ETO), LMA con eosinófilos anormales en la médula ósea e inv(16) (p13q22) o t(16:16)(p13;q22), (CBFP/MYH11), leucemia promielocítica aguda con o t(15;17)(q22;q12), (PML/RARa) y variantes y LMA con 11q23 (LLM) anomalías; LMA con displasia multilinaje (mínimo 20 % de blastos), como después de SMD o SMD/DPM, sin antecedentes de SMD o SMD/DPM, pero con displasia en al menos el 50 % de las células en 2 o más linajes mieloides; LMA y SMD relacionados con la terapia (mínimo 20 % de blastos), como el tipo relacionado con el agente alquilante/la radiación y el tipo relacionado con el inhibidor de la topoisomerasa II (algunos pueden ser linfoides), así como la LMA no clasificada de otra manera.

[0024] Los métodos descritos en el presente documento proporcionan una administración sostenida de una proporción molar no antagónica fija de citarabina y daunorrubicina. Por ejemplo, la proporción molar no antagónica de citarabina:daunorrubicina en el plasma se mantiene durante al menos unas 4 horas, al menos unas 8 horas, al menos unas 12 horas, al menos unas 16 horas y, a menudo, al menos unas 24 horas después de una sola administración de la combinación de medicamentos. Además, la concentración sostenida de la combinación de fármacos encapsulados en liposomas en el plasma es mayor que la concentración de fármacos de la combinación de fármacos libres en el plasma.

[0025] Por "mantenido" o "mantener", se entiende que la relación fármaco:fármaco cambia en menos de 5 veces, preferiblemente menos de 4 veces, menos de 3 veces, y lo más preferiblemente, menos de 2 veces.

[0026] Los métodos divulgados también son terapéuticamente efectivos en el tratamiento del cáncer recurrente. Un "cáncer en recaída" se refiere a un cáncer que ha recurrido después de una remisión completa o parcial anterior en respuesta a un tratamiento anterior. La recurrencia se puede definir de cualquier manera, incluida la reaparición o el nuevo crecimiento de células tumorales detectadas mediante ensayos clínicos, radiológicos o bioquímicos, o por un nivel elevado de un marcador de cáncer. Los tratamientos anteriores pueden incluir, entre otros, quimioterapia, terapias biológicas u hormonales, radioterapia y trasplante de médula ósea.

[0027] En algunas formas de realización, los pacientes tratados con los métodos proporcionados en el presente documento son aquellos que han sido tratados previamente, progresaron después o son resistentes a otras terapias. Por ejemplo, los pacientes pueden tratarse con los métodos proporcionados en el presente documento después de recibir o volverse resistentes a cualquier quimioterapia o terapia biológica. Por ejemplo, algunos pacientes pueden haber recibido previamente uno o más de los siguientes agentes: ciclofosfamida, prednisona, metilprednisolona, imatinib, ifosfamida, metotrexato, leucovorina, vincristina, citarabina, etopósido, dexametasona, doxorrubicina, daunorrubicina, asparaginasa, 6-mercaptopurina, 6-tioguanina, carboplatino, fludarabina, gemtuzumab, trióxido de arsénico, tretinoína, idarrubicina, mitoxantrona, alemtuzumab, clorambucilo, cladribina, rituximab, pentostatina, hidroxiurea, interferón alfa 2B, nelarabina y azacitidina.

[0028] En formas de realización específicas, los pacientes tratados con los métodos proporcionados en el presente documento son aquellos que han sido tratados, progresaron después o son resistentes a otras terapias que se administraron menos de 18 meses antes, o más específicamente, menos de 12 meses antes, o más específicamente, menos de 6 meses antes. Esto es cierto incluso si el paciente ha recaído dentro de este tiempo.

[0029] Los métodos descritos en el presente documento también se pueden emplear como terapia de primera línea para el cáncer o los cánceres hematológicos que no se han tratado previamente. En formas de realización específicas, la terapia de primera línea se administra a pacientes de alto riesgo, más específicamente, pacientes de edad avanzada de alto riesgo. En algunas formas de realización, los pacientes de alto riesgo reciben dosis de citarabina de aproximadamente 100 mg/m2/día o menos.

[0030] Las respuestas a los métodos terapéuticos descritos incluyen cualquier cambio positivo clínicamente evidente en el cáncer hematológico o el estado de la enfermedad del trastorno. Dichas respuestas pueden incluir una remisión completa o parcial, aumentos en la supervivencia general y aumentos en la supervivencia libre de progresión. Las respuestas a la enfermedad se evalúan por cualquier medio adecuado. Por ejemplo, para la LMA, la LLA y los síndromes mielodisplásicos, la remisión completa requiere la normalización de los neutrófilos en sangre periférica a > 1000/dl, las plaquetas a más de 100.000/dl y la médula ósea normocelular con menos del 5 % de blastos sin bastones de Auer. Si hay bastoncillos de Auer con menos del 5 % de blastos, la respuesta se considera parcial. Las respuestas se consideran parciales si se normalizan los recuentos de neutrófilos y plaquetas en sangre periférica, pero persisten entre un 6 % y un 25 % de blastos en la médula ósea. La duración de la respuesta general se puede medir desde el momento en que se cumplen por primera vez los criterios de respuesta para la remisión completa (RC) o la remisión parcial (RP) (lo que se registre primero) hasta la primera fecha en que se documenta la enfermedad recurrente o progresiva. La duración de la respuesta se puede medir desde el momento en que se cumplen por primera vez los criterios de medición para RC o RP hasta la primera fecha en que se documenta objetivamente la enfermedad recurrente o progresiva.

[0031] Preferiblemente, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se administran por vía intravenosa. La dosificación de las formulaciones del vehículo de administración dependerá de la opinión del médico que las administre en función de la edad, el peso y el estado del paciente. Si bien el juicio individual puede variar por parte del médico, se ha encontrado sorprendentemente que se puede obtener una dosis suficiente de la combinación de proporción fija de la invención usando tiempos sustancialmente más cortos en dosis sustancialmente más bajas que las que se emplean actualmente en los protocolos estándar de atención que incluyen citarabina y daunorrubicina. Como se indicó anteriormente, el régimen "7 y 3" tiene citarabina administrada las 24 horas del día durante 7 días consecutivos y daunorrubicina, por vía IV, durante los primeros 3 de esos 7 días consecutivos. Esto significa que el paciente debe estar conectado a una bomba de infusión continua para la administración de citarabina en lugar de un goteo intravenoso. El uso de estas bombas aumenta el riesgo de una administración inadecuada del fármaco, ya que se ha observado que las bombas, que están precargadas con los 7 días completos de citarabina, puede funcionar mal y liberar los 7 días de fármaco a la vez o, alternativamente, no liberar ningún fármaco. Los pacientes que usan una bomba también deben registrarse diariamente en el hospital para que la bomba pueda ser inspeccionada, lo que aumenta los costos del hospital y las molestias para el paciente. Se ha encontrado que las composiciones de la invención con una proporción fija de citarabina:daunorrubicina u otra antraciclina en una proporción fija no antagónica pueden administrarse en tiempos mucho más cortos, típicamente 12 horas o menos, 8 horas o menos y más típicamente 3 horas o menos. El logro de tiempos de infusión de esta magnitud, especialmente 8 horas o menos, permite la administración en forma ambulatoria. También permite la administración por goteo intravenoso en lugar de una bomba de infusión. Estos parámetros reducen aún más el riesgo de que el paciente tenga una reacción a la infusión.

[0032] Por lo tanto, el método de la invención, que requiere tiempos de infusión por goteo IV de menos de 12 horas o menos, preferiblemente 8 horas o menos, más preferiblemente 3 horas o menos, es ventajoso desde el punto de vista de la comodidad y seguridad del paciente.

[0033] Las composiciones farmacéuticas que comprenden vehículos de administración de la invención se preparan de acuerdo con técnicas estándar y pueden comprender agua, agua tamponada, solución salina al 0,9 %, glicina al 0,3 %, dextrosa al 5 % y similares, incluidas glicoproteínas para mejorar la estabilidad, como albúmina, lipoproteína, globulina y similares. Estas composiciones pueden esterilizarse mediante técnicas de esterilización convencionales bien conocidas. Las soluciones acuosas resultantes pueden envasarse para su uso o filtrarse en condiciones asépticas y liofilizarse, combinándose la preparación liofilizada con una solución acuosa estéril antes de la administración. Las composiciones pueden contener sustancias auxiliares farmacéuticamente aceptables según se requiera para aproximarse a las condiciones fisiológicas, tales como agentes tamponadores y de ajuste del pH, agentes de ajuste de la tonicidad y similares, por ejemplo, acetato de sodio, lactato de sodio, cloruro de sodio, cloruro de potasio, cloruro de calcio y el me gusta. Además, la suspensión del vehículo de suministro puede incluir agentes protectores de lípidos que protegen los lípidos contra daños por radicales libres y peroxidativos de lípidos durante el almacenamiento. Son adecuados los inhibidores de radicales libres lipofílicos, tales como alfa-tocoferol, palmitato de ascorbilo y quelantes específicos de hierro solubles en agua, tales como ferrioxamina.

[0034] La concentración de vehículos de administración en las formulaciones farmacéuticas puede variar ampliamente, por ejemplo, desde menos del 0,05 %, normalmente al menos entre el 2 y el 5 %, hasta entre el 10 y el 30 % en peso, y se seleccionará principalmente por volúmenes de fluido, viscosidades y similares, de acuerdo con el modo particular de administración seleccionado. Por ejemplo, se puede aumentar la concentración para reducir la carga de fluido asociada con el tratamiento. Alternativamente, los vehículos de administración compuestos por lípidos irritantes pueden diluirse a concentraciones bajas para disminuir la inflamación en el sitio de administración. Para el diagnóstico, la cantidad de vehículos de administración administrados dependerá de la etiqueta particular utilizada, el estado de la enfermedad que se diagnostica y el juicio del médico.

[0035] Los resultados del método de la invención son típicamente más eficaces que los proporcionados por el protocolo de "estándar de atención". En el "protocolo de atención estándar", la citarabina se administra a una dosis de 100 a 200 mg/m2/día mediante infusión continua durante 7 días y la daunorrubicina se administra por vía intravenosa a una dosis de 45 a 60 mg/m2 durante los primeros 3 días de este régimen.

[0036] La seguridad del procedimiento se puede ajustar evaluando los efectos secundarios, tales como alopecia, celulitis, reacciones en el lugar de la inyección o extravasación, o mucositis. La mucositis se puede medir por inflamación o ulceración oral o anal; por ulceración esofágica o esofagitis; náuseas, vómitos o diarrea; y por anorexia. Los efectos secundarios se reducen al evitar una línea permanente durante largos períodos de tiempo.

[0037] Los siguientes ejemplos se ofrecen para ilustrar pero no para limitar la invención.

Ejemplo 1

Estudios in vivo con CPX-351

[0038] Se ha estudiado la toxicología de la inyección de liposomas de CPX-351 (citarabina:daunorrubicina) en ratas y perros que recibieron dosis únicas y dosis repetidas (cada dos días durante 3 dosis, repetidas después de 2 semanas).

[0039] Estudios de dosis única. En los estudios de dosis única (Tabla 1), se administró CPX-351 mediante infusión intravenosa durante una hora y los animales se observaron durante 14 días. El "vehículo de control" consistía en liposomas que contenían gluconato de cobre pero no fármacos. No hubo mortalidad relacionada con el fármaco en ratas que recibieron una dosis única de CPX-351. Se observaron cambios relacionados con la dosis en varios parámetros hematológicos y hematopoyesis extramedular hepática y esplénica el día 15 en los grupos de dosis media y alta de machos y hembras en comparación con las ratas de control. Los niveles sin efectos adversos observados (NOAEL) para una dosis única de CPX-351 en ratas fueron de 10 mg/kg de citarabina:4,4 mg/kg de daunorrubicina. En perros a los que se les administró una dosis única de CPX-351, el mal estado condujo al sacrificio preterminal de los animales que recibieron la dosis alta (6 mg/kg de citarabina:2,64 mg/kg de daunorrubicina) y los animales que recibieron la dosis media (3 mg/kg de citarabina:1,32 mg/kg de daunorrubicina) hembra entre los días 8 y 10 después de la dosificación. Antes del sacrificio, estos perros mostraron una ingesta de alimentos y una pérdida de peso severamente reducidas, así como una disminución severa de los recuentos de glóbulos blancos y plaquetas. Los hallazgos histopatológicos en perros que terminaron temprano incluyeron hipocelularidad linfoide, atrofia del bazo y el timo y necrosis/hemorragia en el tracto GI. No hubo signos clínicos relacionados con el fármaco en los animales que recibieron la dosis baja (1,5 mg/kg de citarabina:0,66 mg/kg de daunorrubicina) o el control con vehículo. No hubo cambios relacionados con el fármaco en hematología, química clínica, coagulación, análisis de orina o evaluación macroscópica en animales que sobreviven hasta la terminación programada. En el macho de dosis media, hubo evidencia microscópica de hipocelularidad linfoide y atrofia del bazo. Las concentraciones de cobre en sangre entera el día 2 (~24 horas después del tratamiento) se elevaron de manera relacionada con la dosis en todos los animales que recibieron CPX-351, pero volvieron a los niveles normales entre los días 8 y 15.

[0040] Estudios de dosis repetidas. En los estudios de dosis repetidas (dosificación planificada en los días 1, 3, 5 y 22, 24 y 26; [Tabla 2]), hubo mortalidad relacionada con el fármaco tanto en ratas como en perros. En ratas, la patología subyacente que condujo a la terminación prematura o muerte en los grupos 3 (10 mg/kg de citarabina:4,4 mg/kg de daunorrubicina) y 4 (15 mg/kg de citarabina:6,6 mg/kg de daunorrubicina) fue una marcada o grave hipocelularidad hematopoyética de la médula ósea y la hipocelularidad linfoide/atrofia del bazo y el timo. También hubo necrosis del epitelio glandular y de las criptas de la mucosa del intestino grueso y delgado en animales que murieron o fueron sacrificados prematuramente. En comparación con los valores medios de control obtenidos el día 34 (7 días después de la última dosis), se observó una reducción moderada relacionada con el fármaco en los recuentos de glóbulos blancos en las ratas del grupo 2 (5 mg/kg de citarabina:2,2 mg/kg de daunorrubicina). Los animales del grupo de dosis alta (grupo 4) que se asignaron al grupo de recuperación se encontraron muertos o se sacrificaron antes de tiempo (entre los días 10 y 16), por lo que no se pudo demostrar la reversibilidad de los efectos citotóxicos de CPX-351 en este estudio.

[0041] Después del primer ciclo de dosificación, todos los perros del grupo de dosis alta de CPX-351 (grupo 5; 3 mg/kg de citarabina:1,32 mg/kg de daunorrubicina) se encontraron muertos (2 machos) o se sacrificaron debido a su mal estado entre los días 7 y 10. Dos perros del grupo de dosis media (grupo 4, un macho y una hembra) fueron sacrificados en malas condiciones el día 12. La causa probable de muerte en los perros encontrados muertos y la principal aflicción subyacente de esos que sufrieron un sacrificio no programado se consideró hipocelularidad grave de la médula ósea y/o necrosis entérica (duodeno, yeyuno, íleon, ciego, colon y recto) de moderada a grave (duodeno, yeyuno, íleon, ciego, colon y recto) necrosis criptal/glandular y atrofia linfoide del tejido linfoide asociado al intestino.

[0042] Las disminuciones en los glóbulos blancos de la sangre periférica fueron evidentes en los animales del grupo 3 (1 mg/kg de citarabina:0,44 mg/kg de daunorrubicina) y del grupo 6 (citarabina libre 2 mg/kg y daunorrubicina libre 0,88 mg/kg) el día 33 (6 días después de su última dosis de CPX-351 o de los medicamentos gratuitos). Estas reducciones de glóbulos blancos fueron el resultado de marcadas disminuciones en los recuentos absolutos y relativos de neutrófilos, monocitos y eosinófilos. Además, se observaron disminuciones de leves a moderadas en los recuentos de hemoglobina, hematocrito y plaquetas en los grupos 3 y 6. Los animales del grupo 4, que recibieron solo un ciclo de tratamiento farmacológico, mostraron valores hematológicos medios similares a los del control el día 33 (con la excepción de RDW y HDW). Después del período de recuperación de 22 días (día 56), los valores hematológicos de los animales del Grupo 4 fueron comparables a los de los animales de control, incluidos RDW y HDW, lo que sugiere que los efectos hematológicos de CPX-351 son reversibles.

[0043] Después del período de recuperación, no se observaron cambios histopatológicos relacionados con el fármaco en los perros del grupo 4 supervivientes (con la excepción de 1 animal que mostró necrosis linfoide esplénica moderada), lo que sugiere que los hallazgos asociados con la administración de CPX-351 son parcialmente o completamente reversibles. No se observaron cambios histopatológicos relacionados con el fármaco en los tejidos del control (grupo 1), del vehículo (grupo 2) de dosis baja de CPX-351 (grupo 3) y de los animales tratados con el fármaco libre comparativo (grupo 6). Las concentraciones de cobre en sangre entera en animales que terminaron temprano (días 7-9; grupo 5) estaban ligeramente elevadas. Para el día 33, los niveles de cobre en los perros tratados que sobrevivieron volvieron a ser normales, lo que sugiere que el cobre se elimina de la sangre de los perros que reciben CPX-351.

Ejemplo 2

Ensayo clínico de fase I

[0045] Información física, química y farmacéutica. CPX-351 es una formulación liposomal de una combinación fija de los fármacos antineoplásicos citarabina y daunorrubicina. Los dos fármacos están presentes dentro del liposoma en una proporción molar de 5:1 que ha demostrado tener actividad no antagónica en estudios preclínicos. La membrana del liposoma está compuesta por diestearoilfosfatidilcolina, diestearoilfosfatidilglicerol y colesterol en una proporción molar de 7:2:1. Estos liposomas tienen un diámetro nominal de aproximadamente 100 nm y se suspenden en tampón de sacarosafosfato a pH 7,4. La esterilización se logra por filtración a través de un filtro de 0,22 mm.

[0046] CPX-351 se proporciona como una suspensión opaca, púrpura, libre de pirógenos estéril de 5 ml en viales de vidrio de 10 ml de un solo uso y también se puede proporcionar como suspensiones de 20 o 25 ml en viales de vidrio de 50 ml. CPX-351 se almacena congelado (-20 °C) y se descongela a temperatura ambiente durante 60 minutos antes de la dilución y administración. CPX-351 también se puede liofilizar para almacenar y resuspender antes de la administración. La dispersión se diluye en solución salina normal o dextrosa para inyección antes de la administración intravenosa al paciente.

[0047] Cada vial de 10 ml de un solo uso de inyección de liposomas CPX-351 (citarabina:daunorrubicina) proporcionó 25 mg de citarabina y 11 mg de daunorrubicina. Cada mililitro de la formulación descongelada se enumera en la Tabla 3 a continuación.

Tabla 3 Componentes de la inyección liposomal CPX-351

[0048] Estudios clínicos - Dosis inicial. Para los agentes antineoplásicos citotóxicos, la dosis inicial habitual para el primer ensayo en humanos se calcula sobre la base del área de superficie corporal (mg/m2) y generalmente se administra como 1/10 de la DL10 en roedores (si esta dosis no es gravemente tóxica en no roedores) o 1/3 de la "Dosis Tóxica Baja" (la dosis más baja que produce alteraciones patológicas inducidas por fármacos en los parámetros hematológicos, químicos, clínicos o morfológicos) en las especies más sensibles si el doble de esta dosis no es letal y no causa graves, toxicidad irreversible. La DL10 (basada en la dosis de citarabina) en roedores fue de aproximadamente 10 mg/kg (60 mg/m2), por lo que 1/10 equivale a 6 mg/m2. La TDL en perros fue de 1 mg/kg (20 mg/m2), pero el doble de esta dosis (40 mg/m2) fue letal. Por lo tanto, 1/3 de 20 mg/m2 es igual a 6,7 mg/m2, pero use la mitad de esto por seguridad (1/6 de la dosis no letal más alta), por lo tanto, la dosis inicial basada en este cálculo es 3 mg/ m2. Esto es citarabina 3 mg/m2 y daunorrubicina 1,32 mg/m2 en la formulación CPX-351.

[0049] Horario. Los regímenes estándar de inducción a la remisión para la LMA generalmente consisten en un antibiótico de antraciclina durante tres días y citarabina durante 5 a 7 días. Se utiliza un régimen de los días 1,3 y 5, que está cerca de los regímenes estándar. CPX-351 se administró los días 1,3 y 5 de cada curso de inducción. Se permitió un segundo curso de inducción si había evidencia de efecto antileucémico y leucemia persistente en una médula ósea de 14 días.

[0050] Tiempos de infusión. Se han observado reacciones agudas asociadas a la infusión (p. ej., sofocos, dificultad para respirar, dolor de cabeza, escalofríos, dolor de espalda, opresión en el pecho y/o hipotensión) en grandes ensayos clínicos de pacientes que reciben agentes quimioterapéuticos liposomales. En la mayoría de los pacientes, estas reacciones se resuelven en varias horas o un día una vez que finaliza la infusión. En algunos pacientes, la reacción se resuelve al disminuir la velocidad de infusión. La siguiente tabla (Tabla 4) compara la cantidad de lípidos en varios productos de liposomas y en CPX-351. Se eligió un tiempo de infusión de 90 minutos en base a esta información.

Tabla 4 Cantidad de lípidos en los productos de liposomas

[0051] Aumento de dosis y niveles. Hay una experiencia de más de 30 años con las fracciones activas de CPX-351, citarabina y daunorrubicina, y las toxicidades son bien reconocidas. También hay experiencia significativa con la encapsulación liposomal de fármacos citotóxicos (p. e j, Doxil®, DaunoXome®, Myocet®) y, en general, las dosis del resto activo, cuando se encapsulan, no son significativamente diferentes en toxicidad del fármaco libre. Debido a esta experiencia y debido a que no es deseable la exposición de pacientes con enfermedad que progresa rápidamente a dosis subóptimas de agentes terapéuticos en ensayos de fase 1, antes del inicio del ensayo, propusimos un cronograma acelerado de escalada con una duplicación de la dosis (fase temprana) e incrementos de dosis del 50 % (fase tardía) hasta que se observó toxicidad o un efecto farmacodinámico, y aumentos de dosis subsiguientes con incrementos del 33 % (véase la Tabla 5A).

Tabla 5A: Escalada de dosis propuesta de CPX-351

Nivel CPX-351 Daunorubicina Citarabina Fase

unidades/m2 mg/m2 mg/m2

1 3 1,32 3

2 6 2,64 6

3 12 5,28 12 Escalada temprana por duplicación de dosis 4 24 10,6 24

5 48 21,1 48

6 72 31,7 72

7 108 47,5 108

8 162 71,3 162 Escalada tardía en incrementos del 50 % 9 243 107,0 243

[0052] La escalada de dosis en pacientes que reciben inyección de liposomas CPX-351 se produciría en dos fases. La fase inicial comenzaría con 3 unidades/m2 (1 unidad = 1 mg de citarabina y 0,44 mg de daunorrubicina) con cohortes de un solo paciente y escalaría con dosis duplicadas hasta el nivel de dosis 5 (48u/m2), o hasta que hubiera evidencia de actividad antileucémica o un efecto farmacodinámico (PD) definido como:

• Reducción de la celularidad de la médula ósea (>50 % de reducción, con reducción de blastos) y/o

• Evento emergente del tratamiento no hematológico que posiblemente, probablemente o definitivamente esté relacionado con CPX-351 (> grado 2 <DLT).

[0053] Cuando se observa un efecto PD; se ingresa un segundo paciente en la cohorte. Si ese paciente también experimenta un efecto de EP, entonces los aumentos de dosis continúan en incrementos del 33 % con tres pacientes por cohorte. Si el segundo paciente no tiene un efecto de DP, entonces la escalada continúa con un paciente por cohorte y la dosis se duplica en la fase temprana y se incrementa en un 50 % en la fase tardía. El aumento de fase tardía comienza en el nivel de dosis 6 (72 u/m2) con aumentos de dosis del 50 % y pacientes individuales por cohorte hasta que se observa un efecto de DP como se describe anteriormente. Si durante la escalada de fase temprana o tardía se observa una DLT en el primer sujeto, se ingresan hasta 5 pacientes adicionales (sin exceder los 6 pacientes) y la escalada de dosis se detendrá si un segundo paciente experimenta una DLT (ver a continuación). Si ningún otro paciente experimenta DLT, la escalada de la dosis continúa en incrementos del 33 %. Si > 2 pacientes tratados con un nivel de dosis determinado experimentan DLT, se considera que se ha excedido la MTD y se inscriben tres pacientes más en el siguiente nivel de dosis más bajo. El aumento de la dosis a un nivel de dosis posterior no tendrá lugar hasta que el último paciente del nivel anterior haya sido evaluado durante al menos 14 días después de la última dosis de cada ciclo de inducción; y si no hay evidencia de DLT hematológico potencial.

[0054] Hasta la fecha, los aumentos de dosis permanecen en el 33 % y no han aumentado a incrementos del 50 % como se describe en la Tabla 5B a continuación.

Tabla 5B: Aumento de dosis real de CPX-351

Nivel CPX-351 Daunorubicina Citarabina Fase

unidades/m2 mg/m2 mg/m2

1 3 1,32 3

2 6 2,64 6

3 12 5,28 12 Escalada temprana por duplicación de dosis 4 24* 10,6 24

5 32 14,1 32

6 43 18,9 43

7 57 25,1 57

8 76 33,4 76 Escalada tardía en incrementos del 33 % 9 101 44,4 101

10 134 59,0 134

*El efecto PD fue observado en dos pacientes con el nivel de dosis de 24 unidades/m2, las cohortes posteriores ingresaron 3 pacientes por cohorte y los aumentos de dosis se redujeron al 33 %.________

[0055] Repetición de la inducción. Los pacientes pueden recibir un segundo ciclo de inducción con la misma dosis que la primera inducción si la biopsia/aspirado de médula ósea en o alrededor del día 14 del estudio indica persistencia de la leucemia. No se permite aumentar la dosis intrapaciente. Si la biopsia/aspirado de médula ósea indica <20 % de celularidad y <5 % de blastos, se debe repetir la biopsia/aspirado de médula ósea entre 5 y 7 días después si la leucemia persistente es incierta y aún se considera posible la aplasia. Los pacientes con aplasia (<20 % de celularidad y <5 % de blastos) se observan para determinar la recuperación hematopoyética y la toxicidad hasta aproximadamente el día 42 del estudio o hasta el inicio de la terapia de consolidación. Los pacientes con leucemia residual pueden recibir una segunda inducción siempre que haya evidencia de un efecto antileucémico sustancial después de la primera inducción. Si se administra una segunda inducción, se realiza un seguimiento del paciente hasta aproximadamente 42 días después del inicio del segundo ciclo de inducción.

[0056] Criterios de evaluación de la enfermedad. Para LMA, LLC, anemia refractaria con exceso de blastos o exceso de blastos en transformación, la remisión completa requiere la normalización de neutrófilos en sangre periférica a > 1000/dL, plaquetas a más de 100.000/dL y médula ósea normocelular con menos del 5 % de blastos sin varillas Auer. Si hay varillas de Auer con menos del 5 % de blastos, la respuesta se considera parcial. Las respuestas se consideran parciales si se normalizan los recuentos de neutrófilos y plaquetas en sangre periférica, pero persisten entre un 6 % y un 25 % de blastos en la médula ósea.

[0057] Duración de la respuesta. La duración de la respuesta se mide desde el momento en que se cumplen por primera vez los criterios de medición para RC o RP hasta la primera fecha en que se documenta objetivamente la enfermedad recurrente o progresiva.

[0058] Resultados. Este estudio es un ensayo de fase 1 de escalamiento de dosis, de un solo brazo, abierto, no aleatorizado. La duración de la inscripción en el estudio hasta la fecha tardó aproximadamente 18 meses. 33 sujetos (22 hombres: 11 mujeres), mediana de edad 62 años (24-81), todos con terapia previa, inscritos en 10 cohortes. Los datos demográficos y la disposición de las primeras 10 cohortes se resumen en la Tabla 6 a continuación:

Tabla 6 Datos demográficos y disposición del ensayo clínico de fase I para CPX-351

(Continuación)

[0059] Como es típico en los ensayos clínicos de fase I, los pacientes en esta población de fase I eran pacientes pretratados intensamente que no tenían opciones de tratamiento alternativas. Los resultados para estos pacientes de leucemia a las dosis en las que comenzamos a lograr respuestas terapéuticas se resumen a continuación en la Tabla 7. En la Tabla 7 se usan las siguientes abreviaturas: "RC" representa "remisión completa"; "RP" representa "remisión parcial"; "RCp" representa "remisión completa con recuperación de plaquetas incompleta" (es decir, un fracaso para lograr una recuperación de plaquetas mayor o igual a 100.000/mL para el Día de Estudio 42); "BMT" representa "trasplante de médula ósea"; "PD" representa el efecto farmacodinámico (PD) definido como:

• Evento emergente del tratamiento no hematológico que posiblemente, probablemente o definitivamente esté relacionado con CPX- 351 (>grado 2 <DLT).

[0060] Como demuestran los resultados, se observaron respuestas terapéuticas con la administración de tan solo 32 unidades/m2 de CPX-351 y, sorprendentemente, continuaron observándose en casi todos los niveles de dosis hasta 134 unidades/m2 inclusive.

Tabla 7 Resultados de ensayo clínico de fase 1 para CPX-351

(Continuación)

(Continuación)

Ejemplo 3

Ensayo clínico de fase I de CPX-351: estudios de casos

[0061] A continuación se muestran 5 estudios de casos de pacientes tratados en el ensayo clínico de fase I de CPX-351 en curso.

[0062] Estudio de caso 1: el paciente con LMA responde a CPX-351 a pesar de que no respondió al tratamiento anterior convencional con citarabina/daunorrubicina 7/3): el paciente 02-011, un hombre de 62 años diagnosticado con LMA en 2007, recibió tratamiento inicial con Revlimid de septiembre a noviembre de 2007 y no mostró respuesta. En diciembre de 2007, se le administró el tratamiento convencional estándar de citarabina/daunorrubicina 7+3, pero nuevamente no respondió. El análisis de su médula ósea 14 días después del inicio del tratamiento convencional con citarabina/daunorrubicina 7+3 mostró un 5 % de celularidad y un 24 % de blastos. El paciente se inscribió de inmediato en el ensayo clínico de fase I de CPX-351 y recibió 134 unidades/m2 de CPX-351 en un programa de los días 1,3 y 5 a partir del 2 de enero de 2008. El análisis de su médula ósea 15 días después mostró aplasia (<10 % Celularidad, <5 % Blastos).

[0063] Estudio de caso 2 : un paciente con LMA muy pretratado logra una respuesta completa después del tratamiento con CPX-351: el paciente 03-015, una mujer de 67 años, recibió tratamiento con idarubicina/citarabina en mayo de 2002, así como una dosis alta de ara-C (o citarabina) también llamado HDAC, tratamiento de consolidación de junio a agosto de 2002. El paciente logró una respuesta completa (RC) que duró 4 años y 8 meses. La paciente recayó y el 29 de octubre de 2007 se inscribió en el ensayo clínico de fase I de CPX-351 y recibió 134 unidades/m2 de CPX-351 en un programa de los días 1,3 y 5. El análisis de su médula ósea 15 días después mostró < 10 % de celularidad. La paciente logró una RC 42 días después de comenzar a tomar CPX-351. Los únicos efectos adversos registrados fueron encías sangrantes y sarpullido de grado 3 alrededor de los días 10 a 15 después de comenzar con CPX-351.

[0064] Estudio de caso 3 : el paciente con LMA que no puede recibir la terapia convencional con citarabina/daunorrubicina 7+3 debido a la edad, la mala salud y la esperada falta de tolerancia a los tratamientos altamente citotóxicos logra una respuesta completa con efectos adversos mínimos después de la terapia de inducción con CPX-351: Paciente 03-008 una mujer de 74 años que recibió terapia ligera previa debido a su edad y la incapacidad esperada para tolerar terapias convencionales altamente citotóxicas. Fue tratada de abril de 2004 a abril de 2006 con Zarnestra y no tuvo respuesta. De mayo de 2006 a febrero de 2007 recibió terapia de inducción con arsénico/citarabina y logró una RC que duró 7 meses. El paciente recayó y desde marzo de 2007 hasta abril de 2007 recibió lintuzumab pero no tuvo respuesta. El paciente se inscribió en el ensayo clínico de fase I de CPX-351 y, a partir del 30 de abril de 2007, recibió tres dosis de CPX-351 a 43 unidades/m2.35 Días después de iniciar el tratamiento con CPX-351, el paciente logró una RC (3 % blastos); el paciente también recibió CPX-351 como terapia de consolidación (administrada los días 1 y 3, omitiendo el día 5) a partir del día 52 después del tratamiento de inducción inicial. LMA no fue detectable a los 204 días después del tratamiento inicial con CPX-351.

[0065] Estudio de caso 4 : paciente con LMA programado para trasplante de médula ósea después del tratamiento con CPX-351 cuando no responde al tratamiento convencional con citarabina/daunorrubicina 7+3 o al tratamiento con clofarabina/citarabina: Paciente 02-008, un hombre de 49 años que recibió tratamiento convencional con citarabina 7+3 tratamiento con citarabina/daunorrubicina y no respondió. Luego se administró al paciente tratamiento con clofarabina/citarabina y tampoco respondió. Luego, el paciente se inscribió en el ensayo clínico de fase I de CPX-351 y el 24 de septiembre de 2007 comenzó a tomar CPX-351 a 101 unidades/m2.15 días después de su tratamiento inicial con CPX-351, el análisis de la médula ósea mostró un 5 % de celularidad y un 16 % de blastos y el día 29 estaba programado para un trasplante de médula ósea. Los únicos efectos adversos informados fueron fatiga y erupción cutánea de grado 1 el día 8 después del tratamiento inicial con CPX-351. Este paciente en particular demuestra el uso potencial de CPX-351 como agente acondicionador de la médula ósea.

[0066] Estudio de caso 5 : el paciente con LLA muy pretratado con terapias anteriores logra una respuesta completa con el tratamiento con CPX-351: el paciente 01 -002, una mujer de 44 años, recibió ciclofosfamida/daunorrubicina seguida de dexametasona/vincristina/L-asparagina como parte de una terapia de acondicionamiento de trasplante de células madre tratamiento hematopoyético de marzo a abril de 2006 y logró una RC que duró 8 meses. Posteriormente, el paciente se inscribió en el ensayo clínico de fase I de CPX-351 y el 7 de mayo de 2007 comenzó con CPX-351 a 43 unidades/m2.12 días después de la infusión inicial, el análisis de la médula ósea mostró celularidad <10 % y blastos 0 % y se registró una RC en el día 43 después del tratamiento inicial con CPX-351. Este paciente en particular demuestra el uso potencial de CPX-351 en la leucemia linfoblástica aguda.

Ejemplo 4

Ensayo clínico de fase I de CPX-351 - Farmacocinética

[0067] Objetivos del análisis de farmacocinética (PK) del estudio

• Determinar la farmacocinética de dosis única y dosis múltiples de citarabina y daunorrubicina, y metabolitos seleccionados (Ara-U y daunorrubicinal) después de administración de CPX-351 en pacientes leucémicos.

• Recopilar información preliminar sobre la exposición general, la proporcionalidad de la dosis y la acumulación de CPX-351 en pacientes con cáncer.

• Establecer, si es posible, una correlación entre la intensidad de la exposición a los componentes del CPX-351 y el efecto (seguridad y eficacia).

[0068] Esquema de muestreo PK. Las muestras de plasma para el análisis FC se recogieron los días 1, 3 y 5 del primer ciclo. Se recogieron muestras de sangre (aproximadamente 7 ml) de una vena periférica del brazo contralateral al brazo utilizado para la infusión y se colocaron en tubos que contenían ácido etilendiaminotetraacético (EDTA) como anticoagulante. Las muestras se recogieron en los siguientes momentos (en relación con el inicio de la infusión) durante la primera inducción:

• Antes de la dosificación el Día 1, durante la infusión a los 45 minutos (o el punto medio de la infusión) y 90 minutos (o al final de la infusión), luego a las 2, 4, 6, 8, 12 y 24 horas con respecto al inicio de la infusión.

• Antes de la dosificación del Día 3, durante la infusión a los 45 y 90 minutos.

• Antes de la dosificación el Día 5, durante la infusión a los 45 minutos (o el punto medio de la infusión) y 90 minutos (o al final de la infusión), luego a los 2, 4, 6, 8, 12, 24, 48, 72, 96 y 168 horas relativas al inicio de la infusión.

[0069] Análisis farmacocinético. Las muestras de plasma se analizaron para citarabina, daunorrubicina y los metabolitos ara-U y daunorrubicinal mediante LC-MS/MS utilizando métodos de espectrometría de masas de cromatografía líquida de alto rendimiento validados y específicos. Se generaron perfiles de concentración plasmática-tiempo para citarabina y daunorrubicina para cada paciente. Los parámetros farmacocinéticos se estimaron a partir del perfil de concentración plasmática-tiempo de todos los pacientes evaluables. Usando métodos no compartimentales y WinNonlin® Professional (Versión 4,0 o superior), los parámetros farmacocinéticos que se pueden calcular incluyen, entre otros, los siguientes:

Cmax Concentración máxima observada

Tmax Hora de aparición de Cmax

Constante de velocidad de eliminación obtenida a partir de una regresión lineal de los datos Az de concentración transformada en log natural (In) versus tiempo en la fase terminal (después de la dosificación en el día 5 solamente)

t1/2 Vida media terminal, calculada como ln(2)/Az

AUC(0- Área bajo la curva de concentración plasmática-tiempo desde el tiempo cero hasta el último) momento de la última concentración plasmática cuantificable posterior a la dosis, obtenida por el método trapezoidal lineal

AUC(0- Área bajo la concentración plasmática-curva de tiempo desde el tiempo cero extrapolada inf) hasta el tiempo infinito

Aclaramiento sistémico calculado como Dosis/AUC(0-inf) (para citarabina y daunorrubicina CL solo en el día 5 del estudio)

[0070] También pueden emplearse métodos compartimentales de análisis farmacocinético para evaluar la cinética de disposición de metabolitos y/o para realizar modelos farmacocinéticos/farmacodinámicos.

[0071] Se pueden usar estadísticas descriptivas (media, SD, CV%, mediana, min y max) para resumir la concentración plasmática y los parámetros PK, así como otros análisis apropiados para cada cohorte de tratamiento. El análisis farmacocinético hasta la fecha se resume en la Figura 1. La Figura 1A muestra la concentración plasmática media de citarabina y daunorrubicina hasta 7 días después de la infusión del día 5 entre pacientes que recibieron 24 unidades/m2 de CPX-351 (N=3). La Figura 1B muestra la relación molar plasmática de citarabina a daunorrubicina hasta 24 horas después de la infusión del día 5 entre pacientes que recibieron 24 unidades/m2 de CPX-351 (N=3). Como se ve en la figura, en todos los sujetos analizados, la proporción molar de citarabina a daunorrubicina 5:1 se mantuvo cerca de 5:1 durante al menos 24 horas. La Figura 1C muestra la relación molar plasmática de citarabina a daunorrubicina hasta 48 horas después de la infusión del día 5 entre pacientes que recibieron 57 unidades/m2 de CPX-351 (N=3). El gráfico de la Figura 1C demuestra claramente que la proporción molar de citarabina a daunorrubicina se mantuvo en aproximadamente 5:1 en la sangre de los pacientes durante al menos aproximadamente 48 horas.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composición farmacéutica que comprende citarabina y daunorrubicina en una relación molar no antagónica fija de citarabina a daunorrubicina de aproximadamente 5:1 para usar en el tratamiento de la leucemia mieloide aguda (LMA) en un paciente humano, en la que dicha relación fija se mantiene en el plasma durante al menos 4 horas después de la administración, y en el que dicha relación molar no antagonista fija de citarabina a daunorrubicina está encapsulada en liposomas.

2. La composición para uso según la reivindicación 1, en la que dicha composición se va a administrar por vía intravenosa en 3 horas o menos.

3. La composición para uso según la reivindicación 2, en la que dicha composición se administrará en aproximadamente 90 minutos.

4. La composición para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en la que dicho paciente se ha sometido previamente a al menos un régimen anticanceroso y/o ha experimentado previamente una remisión.

5. La composición para uso según la reivindicación 4, en la que dicho paciente ha experimentado una recaída dentro de los 18 meses posteriores a dicho régimen anticancerígeno anterior.

6. La composición para uso según la reivindicación 5, en la que dicho paciente ha experimentado una recaída dentro de los 6 meses posteriores a dicho régimen anticancerígeno anterior.

7. La composición para uso según cualquiera de las reivindicaciones 2-3, en la que dichos liposomas comprenden diestearoil fosfatidilcolina (DSPC), diestearoil fosfatidil glicerol (DSPG) y colesterol.

8. La composición para uso según la reivindicación 7, en la que dichos liposomas comprenden DSPC:DSPG:colesterol en una proporción molar de 7:2:1.

9. La composición para uso de acuerdo con la reivindicación 8, donde la dosis de dicha composición es de 32-134 unidades por m2, donde 1 unidad es 1 mg de citarabina y 0,44 mg de daunorrubicina.

10. La composición para uso según la reivindicación 1, en la que la composición es para uso como terapia de primera línea.

11. La composición para uso según la reivindicación 10, en la que la terapia de primera línea es para pacientes de alto riesgo.

12. La composición para su uso según la reivindicación 11, en la que los pacientes de alto riesgo reciben dosis de citarabina de aproximadamente 100 mg/m2/día o menos.

13. La composición para uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 -6, en la que la LMA a tratar es LMA con displasia multilinaje, LMA que está relacionada con la terapia o LMA con anomalías genéticas recurrentes.

14. La composición para su uso según la reivindicación 9, en la que dicha composición se va a administrar en un programa de dosificación de los días 1, 3 y 5.

15. La composición para uso de acuerdo con la reivindicación 14, en donde dicha composición también comprende gluconato de cobre, trietanolamina y sacarosa y debe administrarse en 90 minutos.

16. La composición para uso según la reivindicación 14 o la reivindicación 15, en la que dicha composición es para uso en un régimen de inducción.

17. La composición para su uso según la reivindicación 13, en la que la LMA a tratar es LMA con displasia multilinaje (mínimo 20 % de blastos), LMA relacionada con la terapia (mínimo 20 % de blastos) o LMA con anomalías genéticas recurrentes (independientemente del % explosiones).

18. La composición para uso según la reivindicación 17, en la que la LMA con displasia multilinaje sigue a síndromes mielodisplásicos (SMD) o SMD/DPM, sin antecedentes de SMD o SMD/DPM, pero con displasia en al menos el 50 % de las células en 2 o más linajes mieloides.

19. La composición para uso según la reivindicación 17, en la que la LMA que está relacionada con la terapia es del tipo relacionado con agente alquilante/radiación, tipo relacionado con inhibidor de la topoisomerasa II (opcionalmente linfoide) y/o LMA no clasificada de otro modo.

20. La composición para su uso según la reivindicación 17, en la que la LMA con anomalías genéticas recurrentes es LMA con t(8; 21)(q22;q22), (AML1/ETO), LMA con eosinófilos anormales en la médula ósea e inv(16)(p13q22) o t(16:16)(p13;q22), (CBFb/MYH11), leucemia promielocítica aguda con o t(15; 17)(q22;q12), (PML/RARa) y variantes y LMA con anomalías 11q23 (LLM).