ES2879963T3

ES2879963T3 - Inhibidores de fibrosis de moléculas pequeñas

Info

Publication number: ES2879963T3
Application number: ES15867774T
Authority: ES
Inventors: Luke Lairson; Arnab Chatterjee; Michael Bollong; Baiyuan Yang; Peter Schultz
Original assignee: Scripps Research Institute
Current assignee: Scripps Research Institute
Priority date: 2014-12-10
Filing date: 2015-12-09
Publication date: 2021-11-23
Anticipated expiration: 2035-12-09
Also published as: EP3250036A4; CA2968874A1; JP6706023B2; KR102548066B1; US20170362211A1; US10336735B2; EP3250036B1; CN107404878B; CN107404878A; HK1249361A1; EP3250036A1; CA2968874C; WO2016094570A1; AU2015360583B2; AU2015360583A1; JP2017537937A; KR20170091154A

Abstract

Un compuesto de Fórmula (I) o Fórmula (Ia): **(Ver fórmula)** en donde: R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2, -CH(CH2CH3)2, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, - alquileno(cicloalquilo), o **(Ver fórmula)** R2 es alquilo, o -NR13R14; R3 es -OH, alquilo, o -NR13R14; R5 es H, -CN, halógeno, haloalquilo, alquilo, -NR13R14, -alquileno(NR13R14), o -SO2R13; cada R8 se selecciona independientemente de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14- NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, -C(O)R14, -C(O)OR14, y - C(O)NR13R14; o dos R8 adyacentes forman un anillo heterociclilo; cada R13 y cada R14 se selecciona cada uno independientemente de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilalquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, arilo y heteroarilo; o R13 y R14 tomados juntos forman un heterociclo con los átomos a los que están unidos; y n se selecciona de 0, 1,2, 3, y 4; o una sal farmacéuticamente aceptable, o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma.

Description

DESCRIPCIÓN

Inhibidores de fibrosis de moléculas pequeñas

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

[0001] La fibrosis, generalmente definida como la producción de cantidades excesivas de tejido conectivo, se desarrolla como consecuencia de diversas enfermedades subyacentes. La inflamación crónica o el daño/remodelación tisular son eventos típicos que inducen fibrosis. Ejemplos de enfermedades específicas incluyen fibrosis pulmonar idiopática (FPI), fibrosis hepática asociada con las etapas posteriores de cirrosis hepática alcohólica y no alcohólica, fibrosis renal, fibrosis cardíaca y formación de queloides como resultado de la cicatrización anormal de heridas [Wynn, TA (2004) Nature Reviews Immunology. 4: 583-594; Friedman, SL (2013) Science Translation Medicine. 5 (167): 1-17]. Además, la fibrosis es una característica patológica clave asociada con enfermedades autoinmunes crónicas, que incluyen artritis reumatoide, enfermedad de Crohn, lupus eritematoso sistémico y esclerodermia. Las enfermedades que representan una grave necesidad médica no satisfecha incluyen la fibrosis pulmonar idiopática (FPI), la esclerodermia y la fibrosis hepática relacionada con la esteatohepatitis no alcohólica (NASH). Se espera que la mayor incidencia de fibrosis hepática relacionada con NASH sea directamente paralela a la de la diabetes tipo 2 y la obesidad.

[0002] La esclerodermia es una enfermedad autoinmune crónica rara caracterizada por la sustitución de tejido normal por tejido fibroso denso y grueso. Si bien se desconoce la causa subyacente exacta de la esclerodermia, la enfermedad generalmente implica la activación de miofibroblastos dérmicos mediada por células inmunitarias que conduce al depósito de cantidades excesivas de proteínas de la matriz (p. ej., colágeno tipo I) que provoca un engrosamiento de la piel y, en algunos casos, el endurecimiento y eventual fallo de múltiples órganos. En la actualidad, no existe cura para la esclerodermia. El tratamiento se limita a los intentos de controlar los síntomas y, por lo general, requiere una combinación de enfoques. Si bien la esclerodermia localizada en la piel generalmente no es potencialmente mortal, la esclerodermia sistémica que afecta a múltiples órganos internos puede ser una enfermedad potencialmente mortal.

RESUMEN DE LA INVENCIÓN

[0003] En un aspecto de la invención, en este documento se proporcionan los compuestos de Fórmula (I) que tiene la estructura:

en la que:

R1 es -CH(CHa)CH2CH2R2, -CH(CH2CHs)2, -CH(CHs)2, -CH2CH(CHs)2, -CH(CH2CHa)CH(R3)CHa, -alquileno(cicloalquilo), o

R2 es alquilo, o -NR13R14;

R3 es -OH, alquilo, o -NR13R14;

R5 es H, -CN, halógeno, haloalquilo, alquilo, -NR13R14, -alquileno(NR13R14), o -SO2R13;

cada R8 se selecciona independientemente de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14, -NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, - NR13C(O)NR13R14, -C(O)R14, -C(O)OR14, y - C(O)NR13R14; o dos R8 adyacentes forman un anillo heterociclilo;

cada R13y cada R14se selecciona cada uno independientemente de H, alquilo, cicloalquilo, heterocicíMaiquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, arilo y heteroarilo; o R13y R14tomados juntos forman un heterociclo con los átomos a los que están unidos; y

n se selecciona de 0, 1, 2, 3, y 4;

o una sal farmacéuticamente aceptable, o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma.

[0004] En otro aspecto de la invención, en este documento se proporcionan compuestos de fórmula (IA) que tienen la estructura:

en la que:

R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2, -CH(CH2CH3)2, -CH(CH3)2, -CH2CH(CH3)2, -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, -alquileno(cicloalquilo), o

R2 es alquilo, o -NR13R14;

R3 es -OH, alquilo, o -NR13R14;

cada R8 se selecciona independientemente de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14, -NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, -C(O)R14, -C(O)OR14 y-C(O)NR13R14; o dos R8 adyacentes forman un anillo heterociclilo;

cada R13 y cada R14 se selecciona cada uno independientemente de H, alquilo, cicloalquilo, heterociclilalquilo, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, arilalquilo, heteroarilalquilo, arilo y heteroarilo; o R13y R14 tomados juntos forman un heterociclo con los átomos a los que están unidos; y

n se selecciona de 0, 1, 2, 3, y 4;

o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma.

[0005] En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I) o (la), en la que R1 es - alquileno(cicloalquil). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I) o (la), en la que R1 es -CH2-(cicloalquilo). En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (la), en donde R1 es -CH2-(ciclopentilo). En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (la), en donde R1 es -CH(CH2CH3)2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en la que R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -CH3. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en donde n es 0. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en donde n es 1. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en la que n es 1 y R8 es halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, o haloalquilo. En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en donde n es 2. En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en la que n es 2 y cada R8 se selecciona independientemente de halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi y haloalquilo. En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en la que n es 2 y cada R8 es halógeno. En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en la que n es 2 y cada R8 es Cl. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en donde R5 es H. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), en donde R5 es halógeno. En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I) o (la), en la que R5 es F.

[0006] En el presente documento también se proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) como se describe arriba y abajo, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0007] También se proporciona aquí un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), como se describe arriba y abajo, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso en un método de tratamiento de la fibrosis o un trastorno caracterizado por fibrosis que comprende administrar una cantidad terapéuticamente eficaz de dicho compuesto al sujeto.

[0008] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para uso en un método de tratamiento de fibrosis, en el que la fibrosis es fibrosis hepática, fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis renal, o fibrosis cardiaca.

[0009] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis, en el que la fibrosis hepática está asociada con las etapas posteriores de la cirrosis hepática alcohólica o no alcohólica.

[0010] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) para uso en un método de tratamiento de la fibrosis, en el que la fibrosis es fibrosis pulmonar idiopática.

[0011] Se proporciona además en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), para uso en un método de tratamiento de una enfermedad o trastorno caracterizado por fibrosis, en el que dicha enfermedad o trastorno es una enfermedad autoinmune crónica.

[0012] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método de tratamiento de la enfermedad autoinmune crónica, en donde la enfermedad autoinmune crónica es artritis reumatoide, esclerodermia, enfermedad de Crohn o lupus eritematoso sistémico.

[0013] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método de tratamiento de la enfermedad autoinmune crónica, en el que la enfermedad autoinmune crónica es la esclerodermia.

[0014] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis, en el que la fibrosis es la formación de queloide resultante de curación anormal de heridas.

[0015] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis, en el que la fibrosis se produce después de trasplante de órganos.

[0016] También se proporciona en este documento una composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) en combinación con uno o más agentes farmacéuticos para uso en un método para tratar fibrosis, un trastorno caracterizado por fibrosis, o una enfermedad caracterizada por fibrosis. En determinadas realizaciones descritas anteriormente, el uno o más agentes farmacéuticos son agentes antifibróticos. En determinadas realizaciones descritas anteriormente, el uno o más agentes farmacéuticos son agentes antifúngicos.

DESCRIPCIÓN DETALLADA DE LA INVENCIÓN

[0017] La fibrosis representa un problema de salud críticamente importante pero sorprendentemente descuidado. Casi el 45% de todas las muertes naturales en el mundo occidental se atribuyen a enfermedades fibroproliferativas crónicas. Sin embargo, actualmente solo existe un fármaco clínicamente aprobado (pirfenidona) que se dirige específicamente a la patogenia de la fibrosis y está directamente indicado para el tratamiento de una enfermedad fibrótica. La fibrosis afecta a casi todos los tejidos del cuerpo y, cuando es muy progresiva, puede provocar un mal funcionamiento de los órganos y la muerte. Claramente, la identificación de nuevos fármacos antifibróticos representa una necesidad médica insatisfecha que tendría un impacto beneficioso significativo en los pacientes de múltiples poblaciones de enfermedades. Además, en la actualidad no existe cura para la esclerodermia y el tratamiento se limita al manejo de los síntomas.

[0018] La fibrosis, generalmente definida como la producción de cantidades excesivas de tejido conectivo, se desarrolla como consecuencia de diversas enfermedades subyacentes. La inflamación crónica o el daño/remodelación tisular son eventos típicos que inducen fibrosis. La fibrosis afecta a casi todos los tejidos del cuerpo y, cuando es muy progresiva, puede provocar un mal funcionamiento de los órganos y la muerte. Los ejemplos de enfermedades específicas incluyen fibrosis pulmonar idiopática (FPI); fibrosis hepática asociada con las últimas etapas de cirrosis hepática alcohólica y no alcohólica; fibrosis renal; fibrosis cardiaca; y formación de queloides como resultado de una cicatrización anormal de heridas. Además, la fibrosis es una característica patológica clave asociada con enfermedades autoinmunes crónicas, que incluyen artritis reumatoide, esclerodermia, enfermedad de Crohn y lupus eritematoso sistémico. Como tal, la fibrosis representa un problema de salud de importancia crítica pero sorprendentemente desatendido. De hecho, casi el 45% de todas las muertes naturales en el mundo occidental se atribuyen a enfermedades fibroproliferativas crónicas. Sin embargo, en la actualidad, solo existe un fármaco clínicamente aprobado (pirfenidona, aprobado para el tratamiento de la FPI solo en Europa) que se dirige específicamente a la patogenia de la fibrosis y está directamente indicado para el tratamiento de una enfermedad fibrótica. Desafortunadamente, la pirfenidona tiene efectos secundarios hepáticos y gastrointestinales importantes, y se recomienda a los pacientes tratados con pirfenidona que eviten la exposición directa a la luz solar, ya que se sabe que causa reacciones de fotosensibilidad que provocan erupciones cutáneas, piel seca o prurito. Recientemente, se ha demostrado que los antagonistas del ácido lisofosfatídico 1 (LPA1) (por ejemplo, AM-152) son eficaces en modelos preclínicos de FPI. Sin embargo, queda por demostrar la eficacia clínica de a M-152. Claramente, la identificación de nuevos fármacos antifibróticos representa una importante necesidad médica insatisfecha que tendría un impacto beneficioso significativo en los pacientes de múltiples poblaciones de enfermedades.

[0019] A pesar de la diversidad de enfermedades y factores desencadenantes que pueden iniciar un proceso fibrótico en un tejido u órgano dado, los mecanismos bioquímicos y celulares comunes se producen en todos los casos estudiados hasta la fecha. Después de una lesión o una agresión inflamatoria, los fibroblastos residentes (en algunos casos reclutaron fibrocitos circulantes derivados de la médula ósea o células epiteliales que han experimentado una transición epitelial a mesenquimatosa) se activan y se "transdiferencian" en actina muscular a-lisa (a-AMS) expresan miofibroblastos que secretan los componentes de la matriz extracelular (MEC) necesarios para la reparación de heridas. En el caso de la fibrosis hepática, una población residente de pericitos denominada célula estrellada hepática (HSC) en reposo se "transdiferencia" en una HSC "activada" fibrogénica que produce colágeno de tipo I que expresa a-AMS. La señalización de Smad 3/4 mediada por factor de crecimiento transformante-p1 (TGF-p1) comúnmente conduce la transdiferenciación de fibroblastos residentes o HSC a miofibroblastos o HSC activadas y estimula la producción de componentes de ECM en las últimas poblaciones. El factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF) también sirve como una citoquina profibrótica común que impulsa la activación y proliferación celular.

[0020] Un enfoque terapéutico para el tratamiento de enfermedades de fibrosis progresiva es apuntar a una de las multitudes de procesos inmunológicos causales complejos. Este enfoque está limitado por la falta de claridad mecanicista y la posible exacerbación de la enfermedad subyacente. Un enfoque alternativo atractivo para el tratamiento de diversas enfermedades fibróticas es apuntar directamente a la vía de transdiferenciación responsable de la interconversión de fibroblastos inactivos y miofibroblastos profibróticos activados. Los fármacos capaces de bloquear la conversión de fibroblastos en miofibroblastos activados podrían administrarse profilácticamente después de una lesión o agresión (p. ej., infarto de miocardio) o terapéuticamente en las primeras etapas de la enfermedad en órganos capaces de reparación (p. ej., fibrosis hepática, FPI o esclerodermia). Los supresores directos de la producción de TGF-p1 (por ejemplo, pirfenidona) no son candidatos ideales para la dosificación crónica y son especialmente indeseables para el tratamiento de enfermedades autoinmunes, ya que tienen el potencial de exacerbar las respuestas autoinmunes. Alternativamente, los fármacos capaces de inducir la reversión de miofibroblastos existentes a un destino celular inactivo tendrían una amplia aplicabilidad para el tratamiento de la fibrosis en múltiples tipos de tejidos y podrían ser potencialmente eficaces en etapas posteriores de la enfermedad.

[0021] Se han establecido ensayos de formación de imágenes de alto contenido, utilizando fibroblastos primarios de pulmón humano y HSCs de roedores primarios, que permiten la identificación de pequeñas moléculas que o bien inhiben la formación/activación de miofibroblastos o inducen la reversión de miofibroblastos activados a un estado de reposo de fibroblastos. Se han identificado condiciones, que implican la inanición de suero y el posterior tratamiento con TGF-p, que facilitan la transdiferenciación in vitro sólida en un formato miniaturizado (placa de 384 pocillos) que es susceptible de detección de moléculas pequeñas de alto rendimiento. El ensayo de inhibición se basa en la tinción inmunofluorescente a-SMA y los cambios en la morfología celular asociados con la transdiferenciación de fibroblastos a miofibroblastos. Utilizando el inhibidor selectivo del receptor ALK-5 TGF-p1 (SB-43154) como control positivo, se ha utilizado el ensayo de inhibición para iniciar una pantalla de una colección de ~ 100.000 moléculas pequeñas que consta de pequeñas moléculas bioactivas y un conjunto de diversidad que se ha ensamblado en función de la diversidad estructural 2D y 3D y las propiedades inherentes de "similitud con las drogas". El cribado preliminar condujo a la identificación de múltiples moléculas antifibróticas previamente identificadas. La mayoría de estas tienen una utilidad clínica limitada, como resultado de problemas conocidos de toxicidad fuera de la diana o falta demostrada de eficacia in vivo. Sin embargo, además de estos, el agente antifúngico triazol Itraconazol se identificó como un inhibidor altamente eficaz de la formación de miofibroblastos (en dosis muy por debajo de las asociadas con toxicidad en fibroblastos u otros tipos de células de control).

[0022] La actividad de itraconazol fue confirmada in vitro por los cambios de expresión de análisis en múltiples genes asociados con fibroblastos a la transdiferenciación de miofibroblastos usando métodos bioquímicos (es decir, transferencia Western y RT-PCR). Usando métodos farmacológicos, la base mecanicista de la actividad antifibrótica de esta molécula se ha establecido como la inhibición dual de la señalización hedgehog y la glicosilación/tráfico del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEFG) (ninguna actividad sola es suficiente). De manera alentadora, se estableció que la actividad del itraconazol se traduce en tipos de células humanas y de roedores, así como en células derivadas de múltiples tipos de tejidos (por ejemplo, pulmón, hígado, piel, corazón). Usando pirfenidona y AM-152 como compuestos de control de referencia, se demostró que el itraconazol tiene eficacia en modelos de ratón con fibrosis hepática inducida por tetracloruro de carbono y pulmón inducido por bleomicina. Como tal, el fármaco Itraconazol aprobado por la FDA ha sido identificado como un nuevo líder para el desarrollo de una nueva clase de fármacos para el tratamiento de enfermedades relacionadas con la fibrosis múltiple.

[0023] Una limitación potencial para el uso de este fármaco como un anti-fibrótico, especialmente para el tratamiento de la fibrosis hepática, es un perfil de toxicidad hepática conocida que se asocia con la coordinación de hierro hemo por N4 del resto de 1,2,4 triazol, que conduce a la inhibición de las enzimas P450 (más notablemente Cyp3A4), una actividad distinta de la actividad VEGF y Hgh del itraconazol. Como tal, se han iniciado esfuerzos de química médica destinados a identificar análogos de itraconazol optimizados con perfiles de toxicidad hepática favorables y mejoras adicionales en la eficacia antifibrótica. Desde un panel inicial de análogos ~ 30 itraconazol, en donde el pKa de N4 se reduce o N4 de nitrógeno está sustituido con el carbono, varias pistas candidatos han sido identificadas en donde se elimina la actividad de inhibición Cyp e in vitro se retiene la actividad anti-fibrótica. En particular, las propiedades farmacocinéticas de estos compuestos son comparables a las del compuesto original. En base a la actividad in vitro observada, la eficacia in vivo, la exposición al suero de roedores y los datos de exposición humana, se anticipa que es deseable una mejora de 5 veces en la eficacia y/o exposición para el candidato clínico final. Un estudio preliminar de la relación estructura-actividad ha revelado que se puede lograr una mejora de la potencia haciendo modificaciones en los sitios distales al sustituyente triazol. Los esfuerzos químicos están en curso y se utilizarán para optimizar la eficacia, la exposición (Cmax > 5 veces CE50 in vitro) y los perfiles de toxicidad (basados en perfiles de panel fuera de la diana humana, ensayos de toxicidad in vitro de hERG y AMES e inducción de Cyp/ensayos de inhibición). Se demostrará una actividad modificadora de la enfermedad reproducible, es decir, una eficacia igual o mayor que la de los estándares de atención existentes (pirfenidona) o potenciales futuros (AM-152), para un análogo de itraconazol optimizado, utilizando modelos de fibrosis pulmonar e hepática en roedores.

Definiciones

[0024] En la siguiente descripción, ciertos detalles específicos se exponen con el fin de proporcionar una comprensión completa de diversas realizaciones. Sin embargo, un experto en la técnica comprenderá que la invención se puede poner en práctica sin estos detalles. En otros casos, no se han mostrado o descrito estructuras bien conocidas en detalle para evitar que se enturbien innecesariamente las descripciones de las realizaciones. A menos que el contexto requiera lo contrario, a lo largo de la especificación y las reivindicaciones que siguen, la palabra "comprende" y las variaciones de la misma, tales como "comprende" y "que comprende" deben interpretarse en un sentido abierto, inclusivo, es decir, como "incluyendo pero no limitado a." Además, los títulos proporcionados en este documento son solo por conveniencia y no interpretan el alcance o el significado de la invención reivindicada.

[0025] La referencia a lo largo de esta especificación a "una realización" o "alguna realización" significa que una característica, estructura o característica particular descrita en relación con la realización se incluye en al menos una realización. Por tanto, las apariciones de las frases "en una realización" o "en alguna realización" en varios lugares a lo largo de esta especificación no necesariamente se refieren todas a la misma realización. Además, las características, estructuras o características particulares pueden combinarse de cualquier manera adecuada en una o más realizaciones. Además, como se usa en esta especificación y las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares “un”, “una”, “el” y “ella” incluyen referentes plurales a menos que el contenido indique claramente lo contrario. También debe tenerse en cuenta que el término "o" se emplea generalmente en su sentido que incluye "y/o" a menos que el contenido indique claramente lo contrario.

[0026] Los términos de abajo, tal como se usa en este documento, tienen los siguientes significados, a menos que se indique lo contrario:

[0027] "Amino" se refiere al radical -NH2.

[0028] "Ciano" o "nitrilo" se refiere al radical -CN.

[0029] "Hidroxi" o "hidroxilo" se refiere al radical -OH.

[0030] "Nitro" se refiere al radical -NO2.

[0031] "Oxo" se refiere al sustituyente =O.

[0032] "Oxima" se refiere al sustituyente =N-OH.

[0033] "Tioxo" se refiere al sustituyente =S.

[0034] "Alquilo" se refiere a un radical de cadena de hidrocarburo lineal o ramificado, que tiene de uno a treinta átomos de carbono, y está unido al resto de la molécula por un enlace sencillo. Se incluyen alquilos que comprenden cualquier número de átomos de carbono de 1 a 30. Un alquilo que comprende hasta 30 átomos de carbono se denomina alquilo C1-C30, igualmente, por ejemplo, un alquilo que comprende hasta 12 átomos de carbono es un alquilo C1-C12. Los alquilos (y otros restos definidos en el presente documento) que comprenden otros números de átomos de carbono se representan de forma similar. Los grupos alquilo incluyen, entre otros, alquilo C1-C30, alquilo C1-C20, alquilo C1-C15, alquilo C1-C10, alquilo C1-C8, alquilo C1-C6 alquilo, alquilo C1-C4, alquilo C1-C3, alquilo C1-C2, alquilo C2-C8, alquilo C3-C8 y alquilo C4-C8. Los grupos alquilo representativos incluyen, pero no se limitan a metilo, etilo, n-propilo, 1-metiletilo (iso-propilo), n-butilo, i-butilo, s-butilo, n-pentilo, 1,1-dimetiletilo (t-butilo), 3-metilhexilo, 2-metilhexilo, vinilo, alilo, propinilo y similares. Las insaturaciones que comprenden alquilo incluyen grupos alquenilo y alquinilo. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo alquilo puede estar opcionalmente sustituido como se describe a continuación.

[0035] "Alquileno" o "cadena de alquileno" se refiere a una cadena hidrocarbonada divalente lineal o ramificada, como se describe para alquilo anteriormente. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo alquileno puede estar opcionalmente sustituido como se describe a continuación.

[0036] "Alcoxi" se refiere a un radical de la fórmula -ORa donde Ra es un radical alquilo como se define. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo alcoxi puede estar opcionalmente sustituido como se describe a continuación.

[0037] "Arilo" se refiere a un radical derivado de un sistema de anillo de hidrocarburo que comprende hidrógeno, de 6 a 30 átomos de carbono y al menos un anillo aromático. El radical arilo puede ser un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillo condensados o con puentes. Los radicales arilo incluyen, pero no se limitan a radicales arilo derivados de los sistemas de anillo de hidrocarburos de aceantrileno, acenaftileno, acetenantrileno, antraceno, azuleno, benceno, criseno, fluoranteno, fluoreno, as-indaceno, s-indaceno, indano, indeno, naftaleno., fenileno, fenantreno, pleiadeno, pireno y trifenileno. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, el término "arilo" o el prefijo "ar-" (tal como en "aralquilo") pretende incluir radicales arilo que están opcionalmente sustituidos.

[0038] "Cicloalquilo" o "carbociclo" se refiere a un producto estable, no aromático, monocíclico o policíclico de anillo carbocíclico, que los sistemas de anillo con puente puede incluir condensado o, que está saturado o insaturado. Los cicloalquilos o carbociclos representativos incluyen, pero no se limitan a cicloalquilos que tienen de tres a quince átomos de carbono, de tres a diez átomos de carbono, de tres a ocho átomos de carbono, de tres a seis átomos de carbono, de tres a cinco átomos de carbono, o de tres a cuatro átomos de carbono. Los cicloalquilos o carbociclos monocíclicos incluyen, por ejemplo, ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, cicloheptilo y ciclooctilo. Los cicloalquilos o carbociclos policíclicos incluyen, por ejemplo, adamantilo, norbornilo, decalinilo, biciclo[3.3.0]octano, biciclo[4.3.0]nonano, cis-decalina, trans-decalina, biciclo[2.1.1]hexano, biciclo[2.2.1]heptano, biciclo[2.2.2]octano, biciclo[3.2.2]nonano y biciclo[3.3.2]decano y 7,7-dimetil-biciclo[2.2.1]heptanilo. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo cicloalquilo o carbociclo puede estar opcionalmente sustituido. Los ejemplos ilustrativos de grupos cicloalquilo incluyen, pero no se limitan a los siguientes restos:

y similares.

[0039] "Fusionado" se refiere a cualquier estructura de anillo descrita en este documento que está fusionada a una estructura de anillo existente. Cuando el anillo condensado es un anillo heterociclilo o un anillo heteroarilo, cualquier átomo de carbono de la estructura del anillo existente que se convierta en parte del anillo heterociclilo condensado o el anillo heteroarilo condensado puede reemplazarse por un átomo de nitrógeno.

[0040] "Halo" o "halógeno" se refiere a bromo, cloro, fluoro o yodo.

[0041] "Haloalquilo" se refiere a un radical alquilo, como se define anteriormente, que está sustituido por uno o más radicales halo, como se define anteriormente, por ejemplo, trifluorometilo, difluorometilo, fluorometilo, triclorometilo, 2,2,2-trifluoroetilo, 1,2-difluoroetilo, 3-bromo-2-fluoropropilo, 1,2-dibromoetilo y similares. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo haloalquilo puede estar opcionalmente sustituido.

[0042] "Haloalcoxi" se refiere de manera similar a un radical de la fórmula -ORa donde Ra es un radical haloalquilo como se define. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo haloalcoxi puede estar opcionalmente sustituido como se describe a continuación.

[0043] "Heterocicloalquilo" o "heterociclilo" o "anillo heterocíclico" o "heterociclo" se refiere a un radical de anillo no aromático estable de 3 a 24 miembros que comprende 2 a 23 átomos de carbono y de uno a 8 heteroátomos seleccionados del grupo compuesto por nitrógeno, oxígeno, fósforo y azufre. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, el radical heterociclilo puede ser un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillo condensados o con puentes ; y los átomos de nitrógeno, carbono o azufre en el radical heterociclilo pueden estar opcionalmente oxidados; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado; y el radical heterociclilo puede estar parcial o totalmente saturado. Los ejemplos de tales radicales heterociclilo incluyen, pero no se limitan a azetidinilo, dioxolanilo, tienii[1,3]ditianilo, decahidroisoquinolilo, imidazolinilo, imidazolidinilo, isotiazolidinilo, isoxazolidinilo, morfolinilo, octahidroindolilo, octahidroisoindolilo, 2-piperazinilo, 2-piperidinilo, 2-oxopirrolidinilo, oxazolidinilo, piperidinilo, piperazinilo, 4-piperidonilo, pirrolidinilo, pirazolidinilo, quinuclidinilo, tiazolidinilo, tetrahidrofurilo, tritianilo, tetrahidropiranilo, tiomorfolinilo, tiamorofolinilo, 12-tiamorofolinilo, 15-corona-5, 18-corona-6, 21-corona-7, aza-18-corona-6, diaza-18-corona-6, aza-21-corona-7 y diaza-21-corona-7. A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo heterociclilo puede estar opcionalmente sustituido. Los ejemplos ilustrativos de grupos heterocicloalquilo, también denominados heterociclos no aromáticos, incluyen:

y similares. El término heterocicloalquilo también incluye todas las formas de anillo de los carbohidratos, incluidos, entre otros, los monosacáridos, los disacáridos y los oligosacáridos. A menos que se indique lo contrario, los heterocicloalquilos tienen de 2 a 10 carbonos en el anillo. Se entiende que cuando se hace referencia al número de átomos de carbono en un heterocicloalquilo, el número de átomos de carbono en el heterocicloalquilo no es el mismo que el número total de átomos (incluidos los heteroátomos) que componen el heterocicloalquilo (es decir, los átomos del esqueleto del anillo heterocicloalquilo). A menos que se indique lo contrario específicamente en la memoria descriptiva, un grupo heterocicloalquilo puede estar opcionalmente sustituido.

[0044] El término "heteroarilo" como se usa en el presente documento, solo o en combinación, se refiere a monorradicales aromáticos opcionalmente sustituidos que contienen de aproximadamente cinco a aproximadamente veinte átomos en el anillo del esqueleto, donde uno o más de los átomos del anillo es un heteroátomo seleccionado independientemente entre oxígeno, nitrógeno, azufre, fósforo, silicio, selenio y estaño pero sin limitarse a estos átomos y con la condición de que el anillo de dicho grupo no contenga dos átomos de O o S adyacentes. En realizaciones en las que dos o más heteroátomos están presentes en el anillo, los dos o más heteroátomos pueden ser iguales entre sí, o algunos o todos los dos o más heteroátomos pueden ser cada uno diferente de los demás. El término heteroarilo incluye radicales heteroarilo condensados y no condensados opcionalmente sustituidos que tienen al menos un heteroátomo. El término heteroarilo también incluye heteroarilos condensados y no condensados que tienen de cinco a aproximadamente doce átomos del anillo esquelético, así como aquellos que tienen de cinco a aproximadamente diez átomos del anillo esquelético. La unión a un grupo heteroarilo puede ser mediante un átomo de carbono o un heteroátomo. Por tanto, como ejemplo no limitativo, un grupo imidiazol puede estar unido a una molécula parental a través de cualquiera de sus átomos de carbono (imidazol-2-ilo, imidazol-4-ilo o imidazol-5-ilo), o sus átomos de nitrógeno (imidazol-1-ilo o imidazol-3-ilo). Asimismo, un grupo heteroarilo puede estar sustituido adicionalmente mediante cualquiera o todos sus átomos de carbono y/o cualquiera o todos sus heteroátomos. Un radical heteroarilo condensado puede contener de dos a cuatro anillos condensados donde el anillo de unión es un anillo heteroaromático y los otros anillos individuales pueden ser alicíclicos, heterocíclicos, aromáticos, heteroaromáticos o cualquier combinación de los mismos. Un ejemplo no limitante de un grupo heteroarilo de un solo anillo incluye piridilo; los grupos heteroarilo de anillo condensado incluyen bencimidazolilo, quinolinilo, acridinilo; y un grupo bi-heteroarilo no condensado incluye bipiridinilo. Otros ejemplos de heteroarilos incluyen, sin limitación, furanilo, tienilo, oxazolilo, acridinilo, fenazinilo, bencimidazolilo, benzofuranilo, benzoxazolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzotiofenilo, benzoxadiazolilo, benzotriazolilo, imidazolilo, indolilo, isoxazolilo, isoquinolinilo, indolizinilo, isotiazolilo, isoindoliloxadiazolilo, indazolilo, piridilo, piridazilo, pirimidilo, pirazinilo, pirrolilo, pirazinilo, pirazolilo, purinilo, ftalazinilo, pteridinilo, quinolinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, triazolilo, tetrazolilo, tiazolilo, triazinilo, tiadiazolilo y similares, y sus óxidos, como, por ejemplo, piridil-N-óxido. Los ejemplos ilustrativos de grupos heteroarilo incluyen los siguientes restos:

y similares.

[0045] El radical heteroarilo puede ser un sistema de anillo monocíclico, bicíclico, tricíclico o tetracíclico, que puede incluir sistemas de anillos fusionados o puenteados; y los átomos de nitrógeno, carbono o azufre en el radical heteroarilo pueden estar opcionalmente oxidados; el átomo de nitrógeno puede estar opcionalmente cuaternizado. Los ejemplos incluyen, pero no se limitan a azepinilo, acridinilo, bencimidazolilo, benzotiazolilo, benzindolilo, benzodioxolilo, benzofuranilo, benzooxazolilo, benzotiazolilo, benzotiadiazolilo, benzo[£)][1,4]dioxepinilo, 1,4-benzodioxanilo, benzoonaftxazolilo, benzodioxolilo, benzodioxinilo, benzopiranilo, benzopiranonilo, benzofuranilo, benzofuranonilo, benzotienilo (benzotiofenilo), benzotriazolilo, benzo[4,6]imidazo[1,2-a] piridinilo, carbazolilo, cinolinolilo, dibenzofuranilo, imidazolilo, indazolilo, indolilo, indazolilo, isoindolilo, indolinilo, isoindolinilo, isoquinolilo, indolizinilo, isoxazolilo, naftiridinilo, oxadiazolilo, 2-oxoazepinilo, oxazolilo, oxiranilo, 1 -oxidopiridinilo, 1-oxidopirimidinilo, 1-oxidopirazinilo, 1-oxidopiridazinilo, 1-fenil-IH-pirrolilo, fenazinilo, fenotiazinilo, fenoxazinilo, ftalazinilo, pteridinilo, purinilo, pirrolilo, pirazolilo, piridinilo, pirazinilo, pirimidinilo, piridazinilo, quinazolinilo, quinoxalinilo, quinolinilo, quinuclidinilo, isoquinolinilo, tetrahidroquinolinilo, tiazolilo, tiadiazolilo, triazolilo, tetrazolilo, triazinilo y tiofenilo (es decir, tienilo).

[0046] Todos los grupos anteriores pueden ser sustituidos o no sustituidos. El término "sustituido" como se usa en este documento significa que cualquiera de los grupos anteriores (por ejemplo, alquilo, alquileno, alcoxi, arilo, cicloalquilo, haloalquilo, heterociclilo y/o heteroarilo) puede funcionalizarse adicionalmente en donde al menos un átomo de hidrógeno se reemplaza por un enlace a un sustituyente que no es un átomo de hidrógeno. A menos que se indique específicamente en la memoria descriptiva, un grupo sustituido puede incluir uno o más sustituyentes seleccionados entre: oxo, amino, -CO2H, nitrilo, nitro, hidroxilo, tiooxi, alquilo, alquileno, alcoxi, arilo, cicloalquilo, heterociclilo, heteroarilo, dialquilaminas, arilaminas, alquilarilaminas, diarilaminas, trialquilamonio (-N+R3), N-óxidos, imidas, y enaminas; un átomo de silicio en grupos tales como grupos trialquilsililo, grupos dialquilarilsililo, grupos alquildiarilsililo, grupos triarilsililo, perfluoroalquilo o perfluoroalcoxi, por ejemplo, trifluorometilo o trifluorometoxi. "Sustituido" también significa cualquiera de los grupos anteriores en los que uno o más átomos de hidrógeno están reemplazados por un enlace de orden superior (por ejemplo, un enlace doble o triple) a un heteroátomo tal como oxígeno en oxo, carbonilo, carboxilo y grupos éster; y nitrógeno en grupos tales como iminas, oximas, hidrazonas y nitrilos. Por ejemplo, "sustituido" incluye cualquiera de los grupos anteriores en los que uno o más átomos de hidrógeno se reemplazan

con -NH2, -NRgC(=O)NRgRh, -NRgC(=O)ORh, -NRgSO2Rh, -OC(=O)NRgRh, -ORg, -SRg, -SORg, -SO2Rg, -OSO2Rg, -SO2ORg, =NSO2Rgy -SO2NRgRh. En lo anterior, Rg y Rh son iguales o diferentes e independientemente hidrógeno, alquilo, alcoxi, alquilamino, tioalquilo, arilo, aralquilo, cicloalquilo, cicloalquilalquilo, haloalquilo, heterociclilo, /V-heterociclilo, heterociclilalquilo, heteroarilo y V-heteroarilo/o heteroarilalquilo. Además, cada uno de los sustituyentes anteriores también puede estar opcionalmente sustituido con uno o más de los sustituyentes anteriores. Además, cualquiera de los grupos anteriores puede estar sustituido para incluir uno o más átomos internos de oxígeno, azufre o nitrógeno. Por ejemplo, un grupo alquilo puede estar sustituido con uno o más átomos de oxígeno internos para formar un grupo éter o poliéter. Similarmente, un grupo alquilo puede estar sustituido con uno o más internos átomos de azufre para formar un tioéter, disulfuro, etc.

[0047] El término "opcional" u "opcionalmente" significa que el evento o circunstancia descrita posteriormente puede o no ocurrir, y que la descripción incluye instancias donde ocurre dicho evento o circunstancia y instancias en las que no ocurre. Por ejemplo, "alquilo opcionalmente sustituido" significa "alquilo" o "alquilo sustituido" como se definió anteriormente. Además, un grupo opcionalmente sustituido puede estar sin sustituir (por ejemplo, -CH2CH3), completamente sustituido (por ejemplo, -CF2CF3), monosustituido (por ejemplo, -CH2CH2F) o sustituido en un nivel en cualquier lugar intermedio entre totalmente sustituido y monosustituido (por ejemplo, -CH2CHF2, -CH2CF3, -CF2CH3, -CFHCHF2, etc.). Los expertos en la técnica entenderán con respecto a cualquier grupo que contenga uno o más sustituyentes que dichos grupos no pretenden introducir ninguna sustitución o patrón de sustitución (por ejemplo, alquilo sustituido incluye grupos cicloalquilo opcionalmente sustituidos, que a su vez se definen por incluir grupos alquilo opcionalmente sustituidos, potencialmente ad infinitum) que son estéricamente imprácticos y/o sintéticamente inviables. Por tanto, cualquier sustituyente descrito debe entenderse generalmente como que tiene un peso molecular máximo de aproximadamente 1.000 daltons, y más típicamente, hasta aproximadamente 500 daltons.

[0048] Una "cantidad eficaz" o "cantidad terapéuticamente eficaz" se refiere a una cantidad de un compuesto administrado a un sujeto mamífero, ya sea como una dosis única o como parte de una serie de dosis, que es eficaz para producir un efecto deseado efecto terapéutico.

[0049] "Tratamiento" de un individuo (por ejemplo, un mamífero, tal como un humano) o una célula es cualquier tipo de intervención utilizado en un intento de alterar el curso natural del individuo o célula. En algunas realizaciones, el tratamiento incluye la administración de una composición farmacéutica, posterior al inicio de un evento patológico o contacto con un agente etiológico e incluye la estabilización de la afección (por ejemplo, la afección no empeora) o el alivio de la afección. En otras realizaciones, el tratamiento también incluye el tratamiento profiláctico (por ejemplo, la administración de una composición descrita en el presente documento cuando se sospecha que un individuo padece una infección bacteriana).

[0050] Un "tautómero" se refiere a un cambio de protón de un átomo de una molécula a otro átomo de la misma molécula. Los compuestos presentados en este documento pueden existir como tautómeros. Los tautómeros son compuestos que son interconvertibles por la migración de un átomo de hidrógeno, acompañada de un cambio de un enlace simple y un enlace doble adyacente. En los arreglos de unión donde es posible la tautomerización, existirá un equilibrio químico de los tautómeros. Se contemplan todas las formas tautoméricas de los compuestos descritos en este documento. La proporción exacta de tautómeros depende de varios factores, incluidos la temperatura, el disolvente y el pH. Algunos ejemplos de interconversiones tautoméricas incluyen:

[0051] Un "metabolito" de un compuesto descrito en el presente documento es un derivado de ese compuesto que se forma cuando se metaboliza el compuesto. El término "metabolito activo" se refiere a un derivado biológicamente activo de un compuesto que se forma cuando el compuesto se metaboliza. El término "metabolizado", como se usa en este documento, se refiere a la suma de los procesos (que incluyen, pero no se limitan a reacciones de hidrólisis y reacciones catalizadas por enzimas, tales como reacciones de oxidación) mediante los cuales un organismo cambia una sustancia particular. Por tanto, las enzimas pueden producir alteraciones estructurales específicas en un compuesto. Por ejemplo, el citocromo P450 cataliza una variedad de reacciones oxidativas y reductoras mientras que las transferasas de glucuronilo de difosfato de uridina catalizan la transferencia de una molécula de ácido glucurónico activada a alcoholes aromáticos, alcoholes alifáticos, ácidos carboxílicos, aminas y grupos sulfhidrilo libres. Puede obtenerse más información sobre el metabolismo en The Pharmacological Basis of Therapeutics, novena edición, McGraw-Hill (1996). Los metabolitos de los compuestos descritos en este documento pueden identificarse mediante la administración de compuestos a un huésped y el análisis de muestras de tejido del huésped, o mediante la incubación de compuestos con células hepáticas in vitro y el análisis de los compuestos resultantes. Ambos métodos son bien conocidos en la técnica. En algunas realizaciones, los metabolitos de un compuesto se forman mediante procesos oxidativos y corresponden al correspondiente compuesto que contiene hidroxi. En algunas realizaciones, un compuesto se metaboliza a metabolitos farmacológicamente activos.

Compuestos

[0052] En un aspecto de la invención, en este documento se proporcionan compuestos de fórmula (I) que tienen la estructura:

en donde:

R1 es -CH(CHa)CH2CH2R2, -CH(CH2CHs)2, -CH(CHs)2, -CH2CH(CHs)2, -CH(CH2CHa)CH(R3)CHa, -alquileno(cicloalquMo), o

R2 es alquilo, o - NR13R14;

R3 es -OH, alquilo, o -NR13R14;

n se selecciona de 0, 1, 2, 3, y 4;

[0053] En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2, y R2 es alquilo. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es metilo. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es etilo. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es isopropilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2, y R2 es -NR13R14. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -NH2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -NHCH3. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -N(CH3)2.

[0054] En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)2. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH3)2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -OH. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es alquilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es metilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es etilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -NR13R14. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -NH2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -NHCH3. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -N(CH3)2. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -alquileno(cicloalquilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH2CH2(cicloalquilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH2(cicloalquilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH2(ciclobutilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH2(ciclopentilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es -CH2(ciclohexilo). En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (I), en donde R1 es

[0055] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es H. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es -CN. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es halógeno. En algunas realizaciones descritas anteriormente o más abajo es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es F. En algunas realizaciones descritas anteriormente o más abajo es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es Cl. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es metilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es etilo. En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es -NR13R14 En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es -NH2. En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5es -alquileno(NR13R14). En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es -alquileno(NH2). En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (I), en donde R5 es -CH2NH2.

[0056] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 0.

[0057] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 se selecciona de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14, -NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, - C(O)R14, -C(O)OR14, o -C(O)NR13R14. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 se selecciona de halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, o haloalquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es halógeno. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es F. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es Cl. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es -CN. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es metilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es etilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es alcoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es metoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es etoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es haloalcoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es -OCF3. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es haloalquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 1 y R8 es -CF3.

[0058] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 2. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14, -NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, -C(O)R14, -C(O)OR14 y -C(O)NR13R14. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), en donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, y haloalquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), donde n es 2 y R8 es halógeno. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), donde n es 2 y cada R8 es F. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), donde n es 2 y cada R8 es Cl. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de halógeno y -CN. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente entre halógeno y alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de -CN y alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (I), donde n es 2 y dos R8 adyacentes forman un anillo de heterociclilo.

[0059] En otra realización es un compuesto de Fórmula (I) que tiene la estructura:

[0060] En otro aspecto de la invención, en este documento se proporcionan compuestos de fórmula (IA) que tienen la estructura:

en donde:

R2 es alquilo, o -NR13R14;

R3 es -OH, alquilo, o -NR13R14;

cada R8 se selecciona independientemente de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14, -NR13C(O)R14-NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, -C(O)R14, -C(O)OR14, y - C(O)NR13R14; o dos R8 adyacentes forman un anillo heterociclilo;

n se selecciona de 0, 1, 2, 3, y 4;

[0061] En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2, y R2 es alquilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es metilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es etilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es isopropilo. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -NR13R14. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -NH2. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -NHCH3. En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y R2 es -N(CH3)2.

[0062] En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH3)2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -OH. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es alquilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es metilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es etilo. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -NR13R14. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -NH2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -NHCH3. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH(CH2CH3)CH(R3)CH3, y R3 es -N(CH3)2. En algunas realizaciones es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -alquileno(cicloalquilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH2CH2(cicloalquilo).

En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (la), en donde R1 es -CH2(cicloalquilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH2(ciclobutilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH2(ciclopentilo). En algunas realizaciones, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es -CH2(ciclohexilo). En algunas formas de realización es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R1 es

[0063] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es H. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es -CN. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es halógeno. En algunas realizaciones descritas anteriormente o más abajo es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es F. En algunas realizaciones descritas anteriormente o más abajo es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es Cl. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es metilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es etilo. En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es -NR13R14 En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es -NH2. En algunas realizaciones descritas anteriormente o más abajo es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es - alquileno(NR13R14). En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es -alquileno(NH2). En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación, es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde R5 es -CH2NH2.

[0064] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 0.

[0065] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 se selecciona de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14, -NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, - C(O)R14, -C(O)OR14, o -C(O)NR13R14. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 se selecciona de halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, o haloalquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es halógeno. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es F. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es Cl. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es - CN. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es metilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es etilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es alcoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es metoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es etoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es haloalcoxi. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es -OCF3. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es haloalquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 1 y R8 es -CF3.

[0066] En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14, -NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, -C(O)R14, -C(O)OR14 y -C(O)NR13R14. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, y haloalquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y R8 es halógeno. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y cada R8 es F. En algunas realizaciones descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y cada R8 es Cl. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de halógeno y -CN. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de halógeno y alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y R8 se selecciona independientemente de -CN y alquilo. En algunas formas de realización descritas anteriormente o a continuación es un compuesto de Fórmula (Ia), en donde n es 2 y dos R8 adyacentes forman un anillo de heterociclilo.

[0067] En otra realización es un compuesto de Fórmula (Ia) que tiene la estructura:

[0068] Se proporciona adicionalmente aquí uno o más compuestos de Fórmula (I) o (Ia) como se describe anteriormente para su uso en un método de tratamiento de una enfermedad o afección en un sujeto que lo necesita, comprendiendo el método administrar al sujeto uno o más compuestos de Fórmula (I) o (Ia). La enfermedad o afección puede ser una fibrosis. La fibrosis puede ser fibrosis hepática. La fibrosis hepática puede ser fibrosis pulmonar idiopática.

[0069] Además se proporcionan aquí uno de más compuestos de Fórmula (I) o (Ia) como se ha descrito anteriormente para uso en un método de tratamiento de una enfermedad o afección en un sujeto en necesidad del mismo, comprendiendo el método administrar al sujeto uno o más compuestos de Fórmula (I) o (Ia). La enfermedad o afección puede ser una fibrosis. La fibrosis puede ser una enfermedad autoinmune crónica. La enfermedad autoinmune crónica puede ser artritis reumatoide, esclerodermia, enfermedad de Crohn o lupus eritematoso sistémico.

Preparación de compuestos

[0070] En el presente documento se describen compuestos que tratan la fibrosis, un trastorno caracterizado por fibrosis o una enfermedad caracterizada por fibrosis, y procesos para su preparación. También se describen en el presente documento las sales farmacéuticamente aceptables, los solvatos farmacéuticamente aceptables, los metabolitos farmacéuticamente activos y los profármacos farmacéuticamente aceptables de tales compuestos. También se proporcionan composiciones farmacéuticas que comprenden al menos uno de tales compuestos o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato farmacéuticamente aceptable de dicho compuesto, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0071] Los compuestos de fórmula (I) o (Ia) descritos aquí se pueden sintetizar usando reacciones de síntesis estándar conocidas por los expertos en la técnica o utilizando métodos conocidos en la técnica. Las reacciones pueden emplearse en una secuencia lineal para proporcionar los compuestos o pueden usarse para sintetizar fragmentos que se unen posteriormente mediante los métodos conocidos en la técnica.

[0072] El material de partida utilizado para la síntesis de los compuestos descritos en este documento puede sintetizarse o puede obtenerse de fuentes comerciales, tales como, pero no limitado a Aldrich Chemical Co. (Milwaukee, Wisconsin), Bachem (Torrance, California), o Sigma Chemical Co. (St. Louis, Missouri). Los compuestos descritos en el presente documento y otros compuestos relacionados que tienen diferentes sustituyentes pueden sintetizarse usando técnicas y materiales conocidos por los expertos en la técnica, como se describe, por ejemplo, en marzo, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4a Ed., (Wiley 1992); Carey y Sundberg, ADVANCED ORGANIC CHEMISTRY 4a Ed., Vols. A y B (Plenum 2000, 2001); Green and Wuts, PROTECTIVE GROUPS IN ORGANIC SYNTHESIS 3a Ed., (Wiley 1999); Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis, volúmenes 1-17 (John Wiley and Sons, 1991); Rodd's Chemistry of Carbón Compounds, volúmenes 1 a 5 y suplementos (Elsevier Science Publishers, 1989); Organic Reactions, volúmenes 1-40 (John Wiley and Sons, 1991); y Larock's Comprehensive Organic Transformations (VCH Publishers Inc., 1989). Otros métodos para la síntesis de compuestos descritos en el presente documento se pueden encontrar en la Publicación de Patente Internacional N°WO 01/01982901, Arnold et al. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 10 (2000) 2167-2170; Burchat y col. Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters 12 (2002) 1687-1690. Los métodos generales para la preparación del compuesto como se describe en el presente documento pueden derivarse de reacciones conocidas en el campo, y las reacciones pueden modificarse mediante el uso de reactivos y condiciones apropiados, como reconocerá el experto en la materia, para la introducción de los diversos restos encontrados en las fórmulas que se proporcionan en el presente documento.

[0073] Los productos de las reacciones pueden aislarse y purificarse, si se desea, utilizando técnicas convencionales, incluyendo, pero no limitado a filtración, destilación, cristalización, cromatografía y similares. Dichos materiales se pueden caracterizar utilizando medios convencionales, que incluyen constantes físicas y datos espectrales.

[0074] Los compuestos descritos en el presente documento pueden prepararse como un solo isómero o una mezcla de isómeros.

Otras formas de los compuestos descritos en este documento

Isómeros

[0075] Además, en algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento existen como isómeros geométricos. En algunas realizaciones, los compuestos descritos en este documento poseen uno o más dobles enlaces. Los compuestos presentados en el presente documento incluyen todos los isómeros cis, trans, syn, anti, entgegen (E) y zusammen (Z), así como las correspondientes mezclas de los mismos. En algunas situaciones, los compuestos existen como tautómeros. Los compuestos descritos en este documento incluyen todos los tautómeros posibles dentro de las fórmulas descritas en este documento. En algunas situaciones, los compuestos descritos en el presente documento poseen uno o más centros quirales y cada centro existe en la configuración R o la configuración S. Los compuestos descritos en el presente documento incluyen todas las formas diastereoméricas, enantioméricas y epiméricas, así como las correspondientes mezclas de las mismas. En realizaciones adicionales de los compuestos y métodos proporcionados en este documento, las mezclas de enantiómeros y/o diastereoisómeros, resultantes de una única etapa preparativa, combinación o interconversión son útiles para las aplicaciones descritas en este documento. En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento se preparan como sus estereoisómeros individuales haciendo reaccionar una mezcla racémica del compuesto con un agente de resolución ópticamente activo para formar un par de compuestos diastereoisómeros, separando los diastereoisómeros y recuperando los enantiómeros ópticamente puros. En algunas realizaciones, se prefieren los complejos disociables (por ejemplo, sales diastereoméricas cristalinas). En algunas realizaciones, los diastereómeros tienen propiedades físicas distintas (por ejemplo, puntos de fusión, puntos de ebullición, solubilidades, reactividad, etc.) y se separan aprovechando estas diferencias. En algunas realizaciones, los diastereómeros se separan mediante cromatografía quiral, o preferiblemente, mediante técnicas de separación/resolución basadas en diferencias de solubilidad. En algunas realizaciones, el enantiómero ópticamente puro se recupera luego, junto con el agente de resolución, por cualquier medio práctico que no dé como resultado una racemización.

Compuestos marcados

[0076] En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento existen en sus formas marcadas isotópicamente. En algunas realizaciones, los métodos descritos en este documento incluyen métodos para tratar enfermedades mediante la administración de tales compuestos marcados isotópicamente. En algunas realizaciones, los métodos descritos en este documento incluyen métodos para tratar enfermedades mediante la administración de compuestos marcados isotópicamente como composiciones farmacéuticas. Por lo tanto, en algunas realizaciones, los compuestos descritos en este documento incluyen compuestos marcados isotópicamente, que son idénticos a los enumerados en este documento, pero por el hecho de que uno o más átomos son reemplazados por un átomo que tiene una masa atómica o número de masa diferente de la masa atómica. o número de masa que generalmente se encuentra en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar a los compuestos de la invención incluyen isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, oxígeno, fósforo, azufre, flúor y cloruro, tales como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 180, 17O, 31P, 32P, 35S, 18F y 36Cl, respectivamente. Los compuestos descritos en el presente documento y las sales y solvatos farmacéuticamente aceptables de los mismos que contienen los isótopos mencionados anteriormente y/u otros isótopos de otros átomos están dentro del alcance de esta invención. Ciertos compuestos marcados isotópicamente, por ejemplo aquellos en los que se incorporan isótopos radiactivos tales como 3H y 14C, son útiles en ensayos de distribución de fármacos y/o sustratos en tejidos. Los isótopos tritiados, es decir, 3H y carbono-14, es decir, 14C, son particularmente preferidos por su facilidad de preparación y detectabilidad. Además, la sustitución con isótopos pesados como el deuterio, es decir, 2H, produce ciertas ventajas terapéuticas que resultan de una mayor estabilidad metabólica, por ejemplo, una vida media in vivo aumentada o requisitos de dosificación reducidos. En algunas realizaciones, los compuestos marcados isotópicamente, la sal, éster, profármaco, solvato, hidrato o derivados de los mismos farmacéuticamente aceptables se preparan mediante cualquier método adecuado.

[0077] En algunas realizaciones, los compuestos descritos aquí están etiquetados por otros medios, incluyendo, pero no limitados al uso de cromóforos o restos fluorescentes, marcadores bioluminiscentes, o etiquetas quimioluminiscentes.

Sales farmacéuticamente aceptables

[0078] En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento existen como sus sales farmacéuticamente aceptables. En algunas realizaciones, los procedimientos divulgados en la presente invención incluyen métodos de tratamiento de enfermedades mediante la administración de tales sales farmacéuticamente aceptables. En algunas realizaciones, los métodos descritos en este documento incluyen métodos para tratar enfermedades mediante la administración de sales farmacéuticamente aceptables como composiciones farmacéuticas.

[0079] En algunas realizaciones, los compuestos descritos en este documento poseen grupos ácidos o básicos y por lo tanto reaccionan con cualquiera de un número de bases inorgánicas u orgánicas, y ácidos inorgánicos y orgánicos, para formar una sal farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, estas sales se preparan in situ durante el aislamiento y purificación final de los compuestos de la invención, o haciendo reaccionar por separado un compuesto purificado en su forma libre con un ácido o base adecuado, y aislando la sal así formada.

[0080] Los ejemplos de sales farmacéuticamente aceptables incluyen aquellas sales preparadas por reacción de los compuestos descritos en este documento con un mineral, ácido orgánico o base inorgánica, incluyendo tales sales, acetato, acrilato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato, bisulfato, bisulfito, bromuro, butirato, butin-1,4-dioato, canforato, canforsulfonato, caproato, caprilato, clorobenzoato, cloruro, citrato, ciclopentanopropionato, decanoato, digluconato, dihidrogenofosfato, dinitrobenzoato, dodecilsulfato, etanosulfonato, formiato, fumarato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hexino-1,6-dioato, hidroxibenzoato, Y-hidroxibutirato, hidrocloruro, hidrobromuro, hidroyoduro, 2-hidroxietanosulfonato, yoduro, isobutirato, lactato, maleato, malonato, metanosulfonato, mandelato metafosfato, metanosulfonato, metoxibenzoato, metilbenzoato, monohidrogenofosfato, 1-naftalenosulfonato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, palmoato, pectinato, persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, pirosulfato, pirofosfato, propiolato, ftalato, fenilacetato, fenilbutirato, propanosulfonato, salicilato, succinato, sulfato, sulfito, succinato, suberato, sebacato, sulfonato, tiocianato, tosilato undeconato y xilenosulfonato.

[0081] Además, los compuestos descritos en este documento se pueden preparar como sales farmacéuticamente aceptables formadas por reacción de la forma base libre del compuesto con un ácido inorgánico u orgánico farmacéuticamente aceptable, incluyendo, pero sin limitación, ácidos inorgánicos tales como ácido clorhídrico, ácido bromhídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, ácido fosfórico, ácido metafosfórico y similares; y ácidos orgánicos tales como ácido acético, ácido propiónico, ácido hexanoico, ácido ciclopentanopropiónico, ácido glicólico, ácido pirúvico, ácido láctico, ácido malónico, ácido succínico, ácido málico, ácido maleico, ácido fumárico, ácido p-toluenosulfónico, ácido tartárico, ácido trifluoroacético, ácido cítrico, ácido benzoico, ácido 3-(4-hidroxibenzoil)benzoico, ácido cinámico, ácido mandélico, ácido arilsulfónico, ácido metanosulfónico, ácido etanosulfónico, ácido 1,2-etanodisulfónico, ácido 2-hidroxietanosulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido 4-metilbiciclo-[2.2.2]oct-2-eno-1-carboxílico, ácido glucoheptónico, ácido 4,4'-metilenbis-(3-hidroxi-2-eno-1-carboxílico), ácido 3-fenilpropiónico, ácido trimetilacético, ácido terciario butilacético, ácido lauril sulfúrico, ácido glucónico, ácido glutámico, ácido hidroxinaftoico, ácido salicílico, ácido esteárico y ácido mucónico. En algunas realizaciones, otros ácidos, tales como el oxálico, aunque no son farmacéuticamente aceptables en sí mismos, se emplean en la preparación de sales útiles como intermedios para obtener los compuestos de la invención y sus sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables.

[0082] En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento que comprenden un grupo ácido libre reacciona con una base adecuada, tal como el hidróxido, carbonato, bicarbonato, sulfato, de un catión metálico farmacéuticamente aceptable, con amoníaco, o con una amina orgánica farmacéuticamente aceptable primaria, secundaria, terciaria o cuaternaria. Las sales representativas incluyen las sales alcalinas o alcalinotérreas, como las de litio, sodio, potasio, calcio y magnesio, y sales de aluminio y similares. Los ejemplos ilustrativos de bases incluyen hidróxido de sodio, hidróxido de potasio, hidróxido de colina, carbonato de sodio, N+(alquilo C-m )4 y similares.

[0083] Las aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de bases incluyen etilamina, dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares. Debe entenderse que los compuestos descritos en el presente documento también incluyen la cuaternización de cualquier grupo que contenga nitrógeno básico que contengan. En algunas realizaciones, los productos solubles o dispersables en agua o aceite se obtienen mediante dicha cuaternización.

Solvatos

[0084] En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento existen como solvatos. La invención proporciona métodos para tratar enfermedades mediante la administración de tales solvatos. La invención proporciona además métodos para tratar enfermedades mediante la administración de tales solvatos como composiciones farmacéuticas.

[0085] Los solvatos contienen cantidades estequiométricas o no estequiométricas de un disolvente y, en algunas realizaciones, se forman durante el proceso de cristalización con disolventes farmacéuticamente aceptables tales como agua, etanol y similares. Los hidratos se forman cuando el disolvente es agua, o los alcoholatos se forman cuando el disolvente es alcohol. Los solvatos de los compuestos descritos en este documento se pueden preparar o formar convenientemente durante los procesos descritos en este documento. A modo de ejemplo solamente, los hidratos de los compuestos descritos en el presente documento pueden prepararse convenientemente por recristalización en una mezcla de disolvente acuoso/orgánico, usando disolventes orgánicos incluyendo, pero no limitados a dioxano, tetrahidrofurano o metanol. Además, los compuestos proporcionados en el presente documento pueden existir en formas solvatadas y no solvatadas. En general, las formas solvatadas se consideran equivalentes a las formas no solvatadas para los propósitos de los compuestos y métodos proporcionados aquí.

Polimorfos

[0086] En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento existir como polimorfos. La invención proporciona métodos para tratar enfermedades mediante la administración de tales polimorfos. La invención proporciona además métodos para tratar enfermedades mediante la administración de polimorfos como composiciones farmacéuticas.

[0087] Por lo tanto, los compuestos descritos en este documento incluyen todas sus formas cristalinas, conocidas como polimorfos. Los polimorfos incluyen las diferentes disposiciones de empaquetamiento de cristales de la misma composición elemental de un compuesto. En ciertos casos, los polimorfos tienen diferentes patrones de difracción de rayos X, espectros infrarrojos, puntos de fusión, densidad, dureza, forma de cristal, propiedades ópticas y eléctricas, estabilidad y solubilidad. En ciertos casos, varios factores, como el disolvente de recristalización, la velocidad de cristalización y la temperatura de almacenamiento, hacen que domine una forma monocristalina.

Composiciones/formulaciones farmacéuticas

[0088] En otro aspecto, se proporciona aquí una composición farmacéutica que comprende un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) como se describe en el presente documento, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0089] En algunas realizaciones, los compuestos descritos aquí se formulan en composiciones farmacéuticas. Las composiciones farmacéuticas se formulan de manera convencional usando uno o más ingredientes inactivos farmacéuticamente aceptables que facilitan el procesamiento de los compuestos activos en preparaciones que pueden usarse farmacéuticamente. La formulación adecuada depende de la vía de administración elegida. Se puede encontrar un resumen de las composiciones farmacéuticas descritas en el presente documento, por ejemplo, en Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 19a Ed (Easton, Pensilvania: Mack Publishing Company, 1995); Hoover, John E., Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., Easton, Pensilvania 1975; Liberman, H.A. y Lachman, L., Eds., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, Nueva York, NY, 1980; y Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems, 7a Ed. (Lippincott Williams y Wilkins 1999).

[0090] Se proporcionan aquí composiciones farmacéuticas que incluyen un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) y al menos un ingrediente inactivo farmacéuticamente aceptable. En algunas realizaciones, los compuestos descritos en este documento se administran como composiciones farmacéuticas en las que un compuesto de Fórmula (I) o (la) se mezcla con otros ingredientes activos, como en la terapia de combinación. En otras realizaciones, las composiciones farmacéuticas incluyen otros agentes medicinales o farmacéuticos, vehículos, adyuvantes, agentes conservantes, estabilizantes, humectantes o emulsionantes, promotores de solución, sales para regular la presión osmótica y/o tampones. En otras realizaciones más, las composiciones farmacéuticas incluyen otras sustancias terapéuticamente valiosas.

[0091] Una composición farmacéutica, tal como se utiliza aquí, se refiere a una mezcla de un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) con otros componentes químicos (es decir, ingredientes inactivos farmacéuticamente aceptables), tales como vehículos, excipientes, aglutinantes, agentes de relleno, agentes de suspensión, agentes aromatizantes, agentes edulcorantes, agentes desintegrantes, agentes dispersantes, tensioactivos, lubricantes, colorantes, diluyentes, solubilizantes, agentes humectantes, plastificantes, estabilizadores, potenciadores de la penetración, agentes humectantes, agentes antiespumantes, antioxidantes, conservantes o una o más combinaciones de los mismos. La composición farmacéutica facilita la administración del compuesto a un organismo. Al practicar los métodos de tratamiento o uso proporcionados en este documento, se administran cantidades terapéuticamente eficaces de los compuestos descritos en este documento en una composición farmacéutica a un mamífero que tiene una enfermedad, trastorno o afección a tratar. En algunas realizaciones, el mamífero es un ser humano. Una cantidad terapéuticamente eficaz puede variar ampliamente dependiendo de la gravedad de la enfermedad, la edad y la salud relativa del sujeto, la potencia del compuesto utilizado y otros factores. Los compuestos se pueden usar solos o en combinación con uno o más agentes terapéuticos como componentes de mezclas.

[0092] Las formulaciones farmacéuticas descritas en este documento se administran a un sujeto por vías de administración apropiadas, incluyendo pero no limitadas a vías de administración oral, parenteral (por ejemplo, intravenosa, subcutánea, intramuscular), intranasal, bucal, tópica, rectal, o transdérmica. Las formulaciones farmacéuticas descritas en este documento incluyen, pero no se limitan a dispersiones líquidas acuosas, líquidos, geles, jarabes, elixires, lechadas, suspensiones, dispersiones autoemulsionantes, soluciones sólidas, dispersiones liposómicas, aerosoles, formas sólidas de dosificación oral, polvos, formulaciones de liberación, formulaciones de liberación controlada, formulaciones de fusión rápida, tabletas, cápsulas, píldoras, polvos, grageas, formulaciones efervescentes, formulaciones liofilizadas, formulaciones de liberación retardada, formulaciones de liberación prolongada, formulaciones de liberación pulsátil, formulaciones multiparticuladas y formulaciones mixtas de liberación inmediata y controlada.

[0093] Las composiciones farmacéuticas que incluyen un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) se fabrican en una forma convencional, tal como, a modo de ejemplo solamente, por medio de procesos convencionales de mezcla, disolución, granulación, fabricación de grageas, levigación, emulsión, procesos de encapsulación, atrapamiento o compresión.

[0094] Las composiciones farmacéuticas incluirán al menos un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) como un ingrediente activo en forma de ácido libre o de base libre, o en una forma de sal farmacéuticamente aceptable. Además, los métodos y composiciones farmacéuticas aquí descritos incluyen el uso de N-óxidos (si es apropiado), formas cristalinas, fases amorfas, así como metabolitos activos de estos compuestos que tienen el mismo tipo de actividad. En algunas realizaciones, los compuestos descritos en el presente documento existen en forma sin solvatar o en formas solvatadas con disolventes farmacéuticamente aceptables tales como agua, etanol y similares. Las formas solvatadas de los compuestos presentados en este documento también se consideran descritas en el presente documento.

[0095] Las preparaciones farmacéuticas para uso oral se obtienen mezclando uno o más excipientes sólidos con uno o más de los compuestos descritos en este documento, triturando opcionalmente la mezcla resultante y procesando la mezcla de gránulos, después de añadir auxiliares adecuados, si se desea, para obtener tabletas o núcleos de grageas. Los excipientes adecuados incluyen, por ejemplo, cargas tales como azúcares, que incluyen lactosa, sacarosa, manitol o sorbitol; preparaciones de celulosa tales como, por ejemplo, almidón de maíz, almidón de trigo, almidón de arroz, almidón de patata, gelatina, goma de tragacanto, metilcelulosa, celulosa microcristalina, hidroxipropilmetilcelulosa, carboximetilcelulosa de sodio; u otros como: polivinilpirrolidona (PVP o povidona) o fosfato cálcico. Si se desea, se añaden agentes desintegrantes, tales como croscarmelosa sódica reticulada, polivinilpirrolidona, agar o ácido algínico o una sal del mismo, tal como alginato sódico. En algunas realizaciones, se añaden colorantes o pigmentos a los comprimidos o recubrimientos de grageas para identificación o para caracterizar diferentes combinaciones de dosis de compuesto activo.

[0096] Las preparaciones farmacéuticas que se administran por vía oral incluyen cápsulas de ajuste suave hechas de gelatina, así como cápsulas blandas, selladas hechas de gelatina y un plastificante, tal como glicerol o sorbitol. Las cápsulas de ajuste rápido contienen los ingredientes activos mezclados con cargas como lactosa, aglutinantes como almidones y/o lubricantes como talco o estearato de magnesio y, opcionalmente, estabilizadores. En las cápsulas blandas, los compuestos activos se disuelven o suspenden en líquidos adecuados, tales como aceites grasos, parafina líquida o polietilenglicoles líquidos. En algunas realizaciones, se agregan estabilizadores.

[0097] En ciertas realizaciones, los sistemas de administración para compuestos farmacéuticos se pueden emplear, tal como, por ejemplo, liposomas y emulsiones. En determinadas realizaciones, las composiciones proporcionadas aquí también pueden incluir un polímero mucoadhesivo, seleccionado entre, por ejemplo, carboximetilcelulosa, carbómero (polímero de ácido acrílico), poli(metilmetacrilato), poliacrilamida, policarbofilo, copolímero de ácido acrílico/acrilato de butilo, alginato de sodio y dextrano.

Tratamiento de combinación

[0098] Los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I) o (Ia) descrita en este documento pueden usarse en combinación con uno o más agentes adicionales antifibróticos. El agente antifibrótico puede ser un antagonista del ácido lisofofatídico 1 (LPA1). El agente antifibrótico puede seleccionarse de pirfenidona, nintedanib, talidomida, carlumab, FG-3019, fresolimumab, interferón alfa, superóxido dismutasa lecitinizada, simtuzumab, tanzisertib, tralokinumab, hu3G9, huTBT13_2_1, 2126458, AM-152, IFN-gamma-1b, IW-001, PRM-151, PXS-25, pentoxifilina/N-acetilcisteína, pentoxifilina/vitamina E, sulfato de salbutamol, [Sar9, Met(O2)11]-Sustancia P, pentoxifilina, bitartrato de mercaptamina, ácido obeticólico, aramcol, GFT-505, éster etílico icosapent, clorhidrato de metformina, metreleptin, muromonab-CD3, oltipraz, IMM-124-e, MK-4074, PX-102, y RO-5093151.

[0099] Los compuestos de acuerdo con la Fórmula (I) o (Ia) descrita en el presente documento pueden usarse en combinación con uno o más agentes antifúngicos azólicos adicionales. El agente antifúngico azólico puede seleccionarse entre un antifúngico imidazol, un antifúngico triazol o un antifúngico tiazol. Los ejemplos de dichos agentes antifúngicos incluyen, pero no se limitan a derivados de imidazol como miconazol, ketoconazol, clotrimazol, clomidazol, croconazol, econazol, omoconazol, bifonazol, butoconazol, fenticonazol, isoconazol, miconazol, neticonazol, oxiconazol, sertaconazol, sulconazol, tioconazol; derivados de triazol como fluconazol, fosfluconazol, hexaconazol, itraconazol, isavuconazol, posaconazol, voriconazol, terconazol, albaconazol; y derivados de tiazol como abafungina.

Administración de la composición farmacéutica

[0100] Las vías adecuadas de administración incluyen, pero no se limitan a la administración oral, intravenosa, rectal, aerosol, parenteral, oftálmica, pulmonar, transmucosal, transdérmica, vaginal, ótica, nasal y tópica. Además, sólo a modo de ejemplo, la administración parenteral incluye inyecciones intramusculares, subcutáneas, intravenosas, intramedulares, así como inyecciones intratecales, intraventriculares directas, intraperitoneales, intralinfáticas e intranasales.

[0101] En algunas realizaciones, los compuestos de Fórmula (I) o (Ia) y composiciones de los mismos se administran de cualquier manera adecuada. La forma de administración se puede elegir basándose, por ejemplo, en si se desea un tratamiento local o sistémico y en el área a tratar. Por ejemplo, las composiciones se pueden administrar por vía oral, parenteral (por ejemplo, inyección intravenosa, subcutánea, intraperitoneal o intramuscular), por inhalación, extracorpórea, tópicamente (incluyendo transdérmica, oftálmica, vaginal, rectal, intranasal) o similares.

[0102] La administración parenteral de la composición, si se usa, se caracteriza generalmente por inyección. Los inyectables se pueden preparar en formas convencionales, ya sea como soluciones o suspensiones líquidas, formas sólidas adecuadas para la solución o suspensión en líquido antes de la inyección, o como emulsiones. Un enfoque revisado más recientemente para la administración parenteral implica el uso de un sistema de liberación lenta o sostenida de modo que se mantenga una dosis constante.

Método de tratamiento

[0103] También se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método de tratamiento de la fibrosis, un trastorno caracterizado por la fibrosis, o un trastorno caracterizado por la fibrosis en un sujeto que comprende administrar al sujeto una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) como se describe en este documento, o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

[0104] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis, en donde la fibrosis es fibrosis hepática, fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis renal, o fibrosis cardiaca.

[0105] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis hepática, en donde la fibrosis hepática está asociada con las etapas posteriores de la cirrosis hepática alcohólica o no alcohólica.

[0106] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia), o una sal farmacéuticamente aceptable o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma para uso en un método para tratar la fibrosis, en donde la fibrosis pulmonar idiopática es fibrosis.

[0107] Además se proporciona un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis un método para tratar una enfermedad en donde la enfermedad o trastorno caracterizado por fibrosis es una enfermedad autoinmune crónica.

[0108] Además se proporciona un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis, un método para tratar la enfermedad autoinmune crónica en donde la enfermedad autoinmune crónica es artritis reumatoide, esclerodermia, enfermedad de Crohn o lupus eritematoso sistémico.

[0109] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la enfermedad autoinmune crónica, en donde la enfermedad autoinmune crónica es la esclerodermia.

[0110] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis, en donde la fibrosis es la formación de queloide resultante de curación anormal de heridas.

[0111] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis, en donde la fibrosis se produce después de trasplante de órganos.

[0112] También se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para uso en un método para tratar fibrosis, un trastorno caracterizado por fibrosis, o una enfermedad caracterizada por fibrosis, el método comprende administrar una composición que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) como se describe en el presente documento en combinación con uno o más agentes farmacéuticos. En determinadas realizaciones descritas anteriormente, el uno o más agentes farmacéuticos son agentes antifibróticos. En determinadas realizaciones descritas anteriormente, el uno o más agentes farmacéuticos son agentes antifúngicos.

[0113] Se proporciona adicionalmente en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar fibrosis en donde la fibrosis es fibrosis hepática, fibrosis pulmonar idiopática, fibrosis renal o fibrosis cardíaca.

[0114] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis hepática en donde la fibrosis hepática está asociada con las etapas posteriores de la cirrosis hepática alcohólica o no alcohólica.

[0115] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (la) para su uso en un método para tratar la fibrosis en donde la fibrosis es fibrosis pulmonar idiopática.

[0116] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar una enfermedad en donde la enfermedad o trastorno caracterizado por fibrosis es una enfermedad autoinmune crónica.

[0117] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la enfermedad autoinmune crónica en donde la enfermedad autoinmune crónica es artritis reumatoide, esclerodermia, enfermedad de Crohn o lupus eritematoso sistémico.

[0118] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar enfermedad autoinmune crónica en donde la enfermedad autoinmune crónica es la esclerodermia.

[0119] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis en donde la fibrosis es la formación de queloide resultante de curación anormal de heridas.

[0120] Además se proporciona en el presente documento un compuesto de Fórmula (I) o (Ia) para su uso en un método para tratar la fibrosis en donde la fibrosis se produce después de trasplante de órganos.

EJEMPLOS

Lista de abreviaturas

[0121] Tal como se usa anteriormente, y en toda la descripción de la invención, las siguientes abreviaturas, a menos que de otro modo indicado, se entenderá que tienen los siguientes significados:

ACN acetonitrilo

Bn bencilo

BOC o Boc carbamato de tere-butilo

BOP benzotriazol-1-il-oxitris (dimetilamino) fosfonio

t-Bu terc-butilo

Cbz carbamato de bencilo

Cy Ciclohexilo

DBU 1,8-diazabiciclo[5,4,0]undec-7-eno

DCC diciclohexilcarbodiimida

DCM diclorometano (CH2Ch)

DIC 1,3-diisopropilcarbodiimida

DEAD Azodicarboxilato de dietilo

DIAD azodicarboxilato de diisopropilo

DIEA Diisopropiletilamina

DMAP 4-(N,N-dimetilamino)piridina

Reactivo DMP Reactivo de periodinano Dess-Martin

DMF dimetilformamida

DMA N,N-Dimetilacetamida

DME 1,2-Dimetoxi-etano

DMSO dimetilsulfóxido

Dppf 1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno

EDCI 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) carbodiimida HCl

eq equivalente(s)

Et etilo

Et2O dietiléter

EtOH etanol

EtOAc acetato de etilo

HOAt 1-hidroxi-7-azabenzotriazol

HOBT 1-hidroxibenztriazol

HOSu N-hidroxisuccinamida

HPLC cromatografía líquida de alta resolución

LAH anhídrido de litio y aluminio

Me metilo

MeI yoduro de metilo

MeOH metanol

MOMC1 cloruro de metoximetilo

MOM metoximetilo

MS espectroscopía de masas

NMP N-metil-pirrolidin-2-ona

RMN resonancia magnética nuclear

PyBOP Hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxitris-pirrolidino-fosfonio

SPHOS 2-diciclohexilfosfino-2',6'-dimetoxibifenilo

TBD 1,5,7-triazabiciclo[4.4.0]-dec-5-eno

RP-HPLC fase inversa-cromatografía líquida de alta presión

TA temperatura ambiente

TBS terc-butildimetilsililo

TBSC1 Cloruro de terc-butildimetilsililo

TBTU O-(Benzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronio

TEOC 2-trimetilsililetilcarbamato

TFA ácido trifluoroacético

TF2O anhídrido de triflato

TMG 1,1,3,3-tetrametilguanidina

THF tetrahidrofurano

THP tetrahidropirano

TLC cromatografía en capa fina

XPHOS 2-Diciclohexilfosfino-2',4',6'-triisopropilbifenilo

Ejemplos generales para la preparación de compuestos de la invención

[0122] Los materiales de partida y productos intermedios para los compuestos de esta invención se pueden preparar por la aplicación o adaptación de los métodos descritos a continuación, sus equivalentes químicos obvios, o, por ejemplo, como se describe en literatura como The Science of Synthesis, volúmenes 1-8. Editors E.M. Carreira et al. Thieme Publishers (2001-2008). Los detalles de las opciones de reactivos y reacciones también están disponibles por búsquedas de estructura y reacción utilizando motores de búsqueda informáticos comerciales como Scifinder (www.cas.org) o Reaxys (www.reaxys.com).

[0123] Los ejemplos que se refieren a la síntesis de compuestos de Fórmula (I) o (Ia) se refieren a la presente invención. Los ejemplos sintéticos relacionados con la preparación de otros compuestos se proporcionan como ejemplos de referencia.

[0124] Los siguientes esquemas de reacción A, B, y C explican la síntesis de intermedios implicados en la síntesis de compuestos descritos en el presente documento.

Esquema A: Síntesis de diol racémico (E):

[0125]

[0126] A una matraz de tres bocas de fondo redondo de 250 ml equipado con un condensador y una trampa Dean-Stark se añadió el Intermedio A (25,0 g), acetona (75,0 ml), PTSA.H2O (0,75 g) y éter de petróleo (75,0 ml). La mezcla se agitó a la temperatura de reflujo durante 12 h y se controló mediante TLC (hexano:acetato de etilo (5:5)). La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y se añadieron 0,75 g de acetato de sodio. La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos. La capa orgánica se decantó y se concentró a presión reducida para dar líquido crudo, Intermedio-B (27,0 g, 75,2%).

[0127] A una matraz de fondo redondo de tres bocas de 500 ml equipada con tubo de protección de cloruro de calcio se añadió Intermedio B (25,0 g) en cloroformo (185 ml). Se añadió TEA (79,0 ml) y la reacción se enfrió a 0°C. Se cargó lote intermedio-C (47,0 g) a la mezcla y se dejó agitar a temperatura ambiente durante 5 h. La reacción se controló mediante TLC (hexano:acetato de etilo (5:5)). La mezcla de reacción se lavó con agua (200 ml) y la capa acuosa se extrajo con CHCh (50 ml x 2). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a presión reducida para dar un aceite crudo. El aceite se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo al 6% en hexanos) para producir el Intermedio-D (21,0 g, 38,6%).

[0128] Se añadió a una matraz de tres bocas de fondo redondo 250 ml equipada con agitador magnético intermedio-D (21,0 g) en THF (100 ml). La solución de reacción se enfrió a 0°C, se mezcló con 6 N HCl (25,0 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante 6 h. La reacción se controló mediante TLC (hexano:acetato de etilo (5:5)). La mezcla de reacción se diluyó con agua (100 ml) y se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato de sodio. El producto se extrajo con CHCl3 (50 ml x 2). Las capas orgánicas se combinaron, se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron a presión reducida para dar un aceite espeso, Intermedio-E (16,0 g, 88,8%). El Intermedio-E se usó en la siguiente etapa de síntesis sin purificación adicional.

Datos espectrales intermedios:

[0129]

Esquema B: Síntesis de Intermedio-K

[0130] A una matraz de tres bocas de fondo redondo de 100 ml equipada con un tubo de cloruro de calcio se añadió intermedio F (5,0 g) en DMA (25,0 ml). Se añadió gota a gota cloroformiato de fenilo (2,8 ml) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 30 minutos. La reacción se controló mediante TLC (hexano:acetato de etilo (5:5)). La mezcla de reacción se vertió en agua helada. El precipitado resultante se recogió por filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para obtener el producto puro, Intermedio-G (4,4 g, 61,1%).

[0131] A una matraz de tres bocas de fondo redondo de 100 ml equipada con un tubo de cloruro de calcio se añadió intermedio G (4,4 g) en 1,4 dioxano (20,0 ml). Se añadió gota a gota hidrato de hidrazina (1,37 ml) y la mezcla de reacción se agitó a TA durante 24 h. La reacción se controló mediante TLC (hexano:acetato de etilo (5:5)). La mezcla de reacción se vertió en agua helada. El precipitado resultante se recogió por filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para obtener el producto puro, Intermedio-H (2,80 g, 53,8%).

[0132] A una matraz de tres bocas de fondo redondo de 100 ml equipada con un condensador se añadió intermedio H (2,80 g) en nBuOH (25,0 ml). Se añadió acetato de formimidina (4,47 g) y la mezcla de reacción se agitó a 90°C durante 4 h. La reacción se controló mediante TLC (EtOAc). La mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente y el precipitado se recogió por filtración, se lavó con acetato de etilo y se secó para obtener el producto puro, Intermedio-I (2,5 g, 86,8%).

[0133] A una matraz de tres bocas de fondo redondo de 100 ml equipada con un condensador se añadió intermedio I (2,50 g) en DMF (30,0 ml). Se añadieron NaOH (1,50 g) y sec-bromo butano (5,11 g) y la mezcla de reacción se agitó a 90°C durante 8 h. La reacción se controló mediante TLC (EtOAc). La mezcla de reacción se vertió en agua helada. El precipitado resultante se recogió por filtración, se lavó con agua y se secó al vacío para obtener el producto puro, Intermedio-J (1,45 g, 49,8%).

[0134] A un recipiente de hidrogenador de 100 ml se añadió intermedio J (1,45 g) en MeOH (25,0 ml). Pd/C al 10% (0,15 g) se añadió y la mezcla de reacción se hidrogenó a TA en 10 kg de H2 durante la noche a presión. La reacción se controló mediante TLC (EtOAc). Una vez completada la reacción, el catalizador se eliminó por filtración y el disolvente se evaporó para dar un aceite espeso. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (MeOH al 5% en MDC) para dar el Intermedio-K (0,75 g, 67,5%).

Datos espectrales intermedios:

[0135]

[0136] A una solución agitada de Intermedio-L (2,0 g) en tolueno (30,0 ml) se cargó 1H-1,2,3 triazol (1,96 g) y Na2CO3 (3,01 g) en TA. La mezcla de reacción se agitó a 100°C durante 3 h. La finalización de la reacción se controló mediante TLC (hexano:acetato de etilo (5:5)). Una vez completada la reacción, la mezcla se enfrió a TA y se diluyó con acetato de etilo (50 ml). La capa orgánica obtenida se lavó con agua (50 ml x 2). La capa orgánica se separó, se secó sobre Na2SO4 y se concentró a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo al 20% en hexanos) para dar el Intermedio-M (0,70 g, 19,2%).

[0137] A una solución agitada de intermedio M (1,30 g) en tolueno (15,0 ml) se cargó intermedio E (1,50 g) a TA en atmósfera de argón. La mezcla resultante se enfrió a 0°C y se le añadió gota a gota ácido tríflico (1,80 ml). La mezcla se calentó a TA y se agitó durante 60 h. La finalización de la reacción se controló mediante TLC (hexano:acetato de etilo (5:5)). Una vez completada la reacción, la mezcla resultante se vertió en agua (25 ml) y se neutralizó con una solución saturada de bicarbonato de sodio. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (25 ml x 2). La capa orgánica se combinó, se secó sobre Na2SO4y se concentró a presión reducida para dar un aceite espeso. El producto crudo se purificó mediante cromatografía en columna (acetato de etilo al 10% en hexanos) para dar el Intermedio-N (0,32 g, 24,6%).

Datos espectrales intermedios:

[0138]

Esquema D: Síntesis de lntermedio-0

[0139] Una mezcla de amina de isopropilo y 2-bromo-1,1-dimetoxietano en un tubo sellado se calentaron a 80°C. La mezcla de reacción se enfrió y se purificó para dar el Intermedio-O (92%).

Ejemplo 1: Síntesis de 4-(4-(4-(4-(((2S,4R)-2-((2H-1,2,3-tnazol-2-N)metN)-2-fernM,3-dioxolan-4-il)metoxi)fenil)piperazin-1-il)fenil)-(S)-1-sec-butil-lH-1,2,4-triazol-5 (4H)-ona (180)

[0140]

[0141] A una solución del compuesto 1a (10 g, 35,3 mmol) y piridina (3,12 ml, 38,8 mmol) en DCM anhidro (40 ml) a 0°C se añadió cloroformiato de fenilo (4,87 ml, 38,8 mmol) gota a gota. La reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 2 h más. Una vez completada la reacción, la mezcla de reacción se vertió en agua helada (100 ml). Los precipitados resultantes se recogieron por filtración, se lavaron con agua y se secaron para producir el compuesto 2a en forma de un sólido marrón (13,1 g, 92%), que se usó directamente en el paso siguiente sin purificación adicional. CL-EM: m/z 404,1 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh): 87,32-7,43 (m, 4H), 7,16 - 7,26 (m, 3H), 6,97 (d, J = 8,4 Hz, 4H), 6,87 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 6,81 (s, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,31 (br s, 4H), 3,24 (br s, 4H).

[0142] A una solución del compuesto 2a (13,1 g, 32,4 mmol) en 1,4-dioxano (50 ml) se añadió hidrato de hidrazina (50-60%, 9,72 ml, 97,2 mmol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo (110°C) durante 1 h, se enfrió a temperatura ambiente y luego se vertió en agua (150 ml). El precipitado obtenido se recogió por filtración, se lavó con agua y se secó para dar el compuesto 3a (10,5 g, 95%) como un sólido marrón, que se usó directamente en el siguiente paso sin purificación adicional. CL-EM: m/z 342,2 (M+H); 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 88,41 (s, 1H), 7,46 - 7,30 (m, 2H), 7,25 (s, 1H), 6,99 - 6,92 (m, 2H), 6,93 - 6,88 (m, 2H), 6,88 - 6,81 (m, 2H), 4,31 (s, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,18-3,17 (m, 8 H).

[0143] A una solución del compuesto 3a (7,65 g, 22 mmol) en DMF anhidro (25 ml) se añadió acetato de formimidine (7,0 g, 67,0 mmol). La mezcla de reacción se calentó a 130°C durante 3 h, se enfrió a temperatura ambiente y luego se añadió agua (100 ml). El precipitado se recogió por filtración, se lavó con agua y se secó para dar el producto 4a (6,70 g, 85%) como un sólido marrón, que se usó directamente en el paso siguiente sin purificación adicional. CL-EM: m/z 352,0 (M+H); 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 88,25 (s, 1H), 7,55 -7,42 (m, 2H), 7,14 -7,05 (m, 2H), 7,03 -6,91 (m, 2H), 6,91 -6,81 (m, 2H), 3,70 (s, 3H), 3,35 -3,29 (m, 4H), 3,21 (br s, 1H), 3,20 -3,11 (m, 4H).

[0144] A una solución de (R)-2-butanol 5a (5 g, 67,3 mmol), Et3N (18,8 ml, 134,6 mmol) y DMAP (822 mg, 6,73 mmol) en DCM (30 ml) a 0°C, se añadió lentamente una solución de cloruro de p-toluenosulfónico (TsCl) (15,4 g, 80,7 mmol) en DCM. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Después de diluir con agua, la mezcla de reacción se extrajo con DCM. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 10/1) para dar el producto 6a (10,5 g, 69%) como un líquido incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,90 7,74 (m, 2H), 7,43 - 7,31 (m, 2H), 4,58 (m, 1H), 2,46 (s, 3H), 1,68 - 1,49 (m, 2H), 1,27 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 0,83 (t, J = 7,5 Hz, 3H).

[0145] A una solución del compuesto 4a (5 g, 14,2 mmol) en DMSO (50 ml), se añadió K2CO3 (3,9 g, 28,4 mmol), 18-Corona-6 (3,4 g, 14,2 mmol) y 6a (3,89 g, 17,0 mmol) en orden. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche, seguido de la dilución con agua y la extracción con DCM. La capa orgánica combinada se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 1/1) para dar el producto 7a en forma de un sólido blanquecino (2,1 g, 36%). CL-EM: m/z 408.2 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh): 87,62 (s, 1H), 7,42 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,98 (br s, 2H), 6,86 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 4,29 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,37 (br s, 4H), 3,23 (br s, 4H), 1,89 (m, 1H)), 1,70 (m, 1H), 1,39 (d, J = 5,6 Hz, 3H), 0,90 (t, J = 6,0 Hz, 3H).

[0146] Una mezcla de 7a (2,0 g, 4,91 mmol) y solución de HBr al 48% (10 ml) se calentó a reflujo durante una noche y después la mezcla de reacción se enfrió a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con DCM y se neutralizó con solución sat. NaHCO3. La mezcla se extrajo con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 1/3) para dar el producto 8a en forma de un sólido blanquecino (1,26 g, 65%). CL-EM: m/z 394,2 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh): 87,64 (s, 1H), 7,41 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,00 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 6,74 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,77 (br s, 1H), 4,33 (m, 1H), 3,48 - 3,31 (m, 4H), 3,31 - 3,07 (m, 4H), 1,89 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 1,42 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,93 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

[0147] A una solución de (R)-2,2-dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol 9a (5 g, 37,8 mmol), Et3N (10,5 ml, 75,6 mmol) y DMAP (462 mg, 3,78 mmol) en DCM (20 ml) a 0°C, se añadió lentamente una solución de cloruro p-toluenosulfónico (TsCl) (10,8 g, 56,7 mmol) en DCM. La mezcla de reacción se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Después de diluir con agua, la mezcla de reacción se extrajo con DCM. Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 5/1) para dar el producto 10a (9,39 g, 87%) como un líquido incoloro. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 87,82 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,30 (tt, J = 6,0, 5,1 Hz, 1H), 4,12 - 3,91 (m, 3H), 3,79 (ddd, J = 8 ,8 , 5,1, 0,7 Hz, 1H), 2,47 (s, 3H), 1,36 (s, 3H), 1,33 (s, 3H).

[0148] Una mezcla de 10a (9,39g, 32,7 mmol) en metanol (20 ml) y 1M HCl acuoso (31 ml) se agitó a temperatura ambiente durante 3 h. El disolvente se eliminó parcialmente al vacío, se diluyó con EtOAc y se neutralizó con una solución sat. NaHCO3. La mezcla se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 1/3) para dar el producto 11a (6,9 g, 85%) en forma de un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, CDCh) 8 7,82 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,18 -4 ,06 (m, 2H), 4,96 (m, 1H), 3,78 -3,59 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,26 (br s, 2H).

[0149] A una solución de 2-bromoacetofenona 12a (10 g, 50 mmol) en CH3CN (50 ml) se añadió 1,2,3-triazol (3,48 ml, 60 mmol) y DIEA (13,2 ml, 75 mmol). La mezcla se calentó a reflujo durante 1 h, se enfrió a temperatura ambiente y luego el disolvente se eliminó al vacío. El residuo se redisolvió en EtOAc (150 ml), se lavó con agua (50 ml), ácido cítrico al 10 % (50 ml) y salmuera, luego se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 3/1) para dar el producto 13a como un sólido amarillo (1,50 g, 8,0%) y (eluyente: hexanos/EtOAc = 1/3) para dar el producto 13b en forma de un sólido amarillo (7,05 g, 75%).

13a: 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 8,05-7,93 (m, 2H), 7,76 (s, 2H), 7,72-7,60 (m, 1H), 7,60-7,51 (m, 2H), 5,95 (s, 2H).

13b: 1H RMN (400 MHz, CDCh): 88,03 (dd, J = 8,0, 1,5 Hz, 2H), 7,83 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,72-7,68 (m, 1H), 7,59-7,55 (m, 2H), 5,92 (s, 2H).

[0150] En atmósfera de nitrógeno, a una solución de cetona 13a (0,5 g, 2,67 mmol) y compuesto 11a (0,72 g, 2,93 mmol) en tolueno anhidro (10 ml) a 0°C se añadió TfOH (0,93 ml, 10,6 mmol). lentamente. Después de la adición, la mezcla se calentó a temperatura ambiente y se agitó durante 60 h. La reacción se detuvo añadiendo una solución sat. NaHCO3 a 0°C. La mezcla se extrajo con EtOAc. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El material bruto se purificó mediante cromatografía flash en gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 3/1) para obtener el producto cis 14a en forma de un sólido blanco (0,52 g, 47,2%) y (eluyente: hexanos/EtOAc = 1/1) para obtener el producto trans 14b como un líquido ligeramente amarillo (0,15 g, 14,0%). 14a: CL-EM: m/z 416,0 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh): 87,82-7,75 (m, 2H), 7,57 (s, 2H), 7,50 - 7,44 (m, 2H), 7,43 - 7,34 (m, 5H), 4,77 (dd, J = 17,6, 14,4 Hz, 2H), 4,21 (m, 1H), 3,85 - 3,75 (m, 2H), 3,70 (dd, J = 8 ,8, 4,0 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 10,0, 7.2 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H). ee (> 98%) se determinó mediante análisis de HPLC quiral con columna Phenomenex Lux Cellulose-3: 5 ul iny. 1 mg/mL (etanol); caudal, 1,0 ml/min; fase móvil, agua: CH3CN: ácido acético (40: 60: 0,1); TA = 3,24 min. 14b: CL-EM: m/z 416,1 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh): 8 7,67-7,59 (m, 2H), 7,58 (s, 2H), 7,44 - 7,32 (m, 2H), 7,31 -7,23 (m, 5H), 4,70 (s, 2H), 4.06 (m, 1H), 3.90 (dd, J = 10,3, 5,3 Hz, 1H), 3,81 (dd, J = 8 ,6 , 6,2 Hz, 1H), 3,72 (dd, J = 10,3, 6,3 Hz, 1H), 3,55 (dd, J = 8 ,6 , 6,5 Hz, 1H), 2,42 (s, 3H).

[0151] A una solución de tosilato 14a (49 mg, 0,12 mmol) y fenol 8a (43 mg, 0,11 mmol) en DMF anhidro (2 ml) se añadió KOH (25 mg, 0,44 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante la noche. Después de enfriar a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se diluyó con agua y DCM y se separó la fase orgánica. La fase acuosa se extrajo con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró en un rotavapor. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 1 /1 a 1/3) para dar 180 como un sólido blanquecino (32 mg, 46%). CL-EM: m/z 637,2 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 57,64 7,63 (m, 3H), 7,62 -7,54 (m, 2H), 7,50 -7,43 (m, 2H), 7,43 -7,36 (m, 3H), 7,11 -7,03 (m, 2H), 6,96 (br s, 2H), 6,84 -6,78 (m, 2H), 4,87 (s, 2H), 4,38 (m, 1H), 4,31 (m, 1H), 3,92 (dd, J = 8,5, 6,5 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 8,5, 4,4 Hz, 1H), 3,78 (dd, J = 9,4, 5,1 Hz, 1H), 3,49 -3,33 (m, 5H), 3,27 (br s, 4H), 1,89 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 1,41 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 0,93 (t, J = 7,4 Hz, 3H); Análisis elemental: teoría (C, 66,02; H, 6,33; N, 17,60); encontrado (C, 65,95; H, 6,39; N, 17,40).

Ejemplo 2: Síntesis de 4-(4-(4-(4-(((2S,4R)-2-((2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-2-fenil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)fenil)piperazin-1-il)fenil)-(R)-1-sec-butil-lH-1,2,4-triazol-5(4H)-ona (179)

[0152]

[0153] De una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para la preparación del compuesto 8a, el compuesto 8b se obtuvo como un rendimiento sólido de color blanquecino en 18,6% en 3 etapas, a partir de (S)-2-butanol 5b. CL-EM: m/z 394,2 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh): 57,64 (s, 1H), 7,40 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,00 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 6,89 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 6,74 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 5,81 (br s, 1H), 4,33 (m, 1H), 3,43 -3,29 (m, 4H), 3,29 -3,14 (m, 4H), 1,90 (m, 1H), 1,75 (m, 1H), 1,41 (d,, J = 6,8 Hz, 3H), 0,93 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

[0154] De una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para la preparación del compuesto 180, el compuesto 179 se obtiene a partir de tosilato 14a y fenol 8b. CL-EM: m/z 637,2 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCla) 57,64 (m, 3H), 7,57 (dt, J = 10,1, 5,5 Hz, 2H), 7,50 -7,34 (m, 5H), 7,05 (t, J = 9,8 Hz, 2H), 6,94 (m, 2H), 6,80 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 4,87 (s, 2H), 4,42 - 4,28 (m, 2H), 3,92 (dd, J = 17,5, 8,8 Hz, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,78 (dd, J = 9,4, 5,0 Hz, 1H), 3,37 (m, 5H), 3,27 (m, 4H), 1,94 - 1,82 (m, 1H), 1,82 - 1,70 (m, 1H), 1,42 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,95 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

Ejemplo 3: Síntesis de 4-(4-(4-(4-(((2R,4S)-2-((2H-1,2,3-triazol-2-il)metil)-2-fenil-1,3-dioxolan-4-il)metoxi)fenil)piperazin-1-il)fenil)-(R)-1-sec-butil-lH-1,2,4-triazol-5 (4H)-ona (182)

[0156] De una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para la preparación del compuesto 11a, 11b se obtuvo como un sólido blanco con un rendimiento del 72,2% en 2 pasos, a partir de (S)-2,2-dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol 9b. 1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,83 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 4,16 - 4,04 (m, 2H), 3,99 (m, 1H), 3,78 - 3,60 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,17 (br s, 2H).

[0157] De una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para la preparación de los compuestos 14a y 14b, los compuestos 15a y 15b se prepararon. Se obtuvo 15a en forma de un sólido blanco con un rendimiento del 45,4%. CL-EM: m/z 416,1 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,81-7,74 (m, 2H), 7,57 (s, 2H), 7,50 - 7,43 (m, 2H), 7,42 - 7,33 (m, 5H), 4,77 (dd, J = 17,6, 14,4 Hz, 2H), 4,21 (m, 1H), 3,85 - 3,75 (m, 2H), 3,70 (dd, J = 8,8, 4,0 Hz, 1H), 3,37 (dd, J = 10,0, 7,2 Hz, 1H), 2,50 (s, 3H); ee (> 98%) se determinó mediante análisis de HPLC quiral con columna Phenomenex Lux Cellulose-3: 5 ul iny. 1 mg/mL (etanol); caudal, 1,0 ml/min; fase móvil, agua: C ^C N : ácido acético (40: 60: 0,1); TA = 2,86 min. Se obtuvo 15b en forma de un sólido ligeramente amarillo con un rendimiento del 13,5%. CL-EM: m/z 416,1 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh) 87,72-7,65 (m, 2H), 7,63 (s, 2H), 7,44-7,38 (m, 2H), 7,36 - 7,29 (m, 5H), 4,74 (s, 2H), 4,11 (m, 1H), 3,96 (dd, J = 10,3, 5,2 Hz, 1H), 3,86 (dd, J = 8,6, 6,2 Hz, 1H), 3,75 (dd, J = 10,2, 6,5 Hz, 1H), 3,60 (dd, J = 8,6, 6,6 Hz, 1H), 2,47 (s, 3H).

[0158] De una manera similar a la descrita en el Ejemplo 1 para la preparación del compuesto 180, el compuesto 182 se obtiene a partir de tosilato 15a y fenol 8b. CL-EM: m/z 637,1 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh) 87,70-7,62 (m, 3H), 7,63 7,53 (m, 2H), 7,53 - 7,32 (m, 5H), 7,04 (t, J = 9,3 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 6,79 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 4,88 (s, 2H), 4,43 -4,25 (m, 2H), 3,92 (dd, J = 8,4, 6,6 Hz, 1H), 3,88 -3,81 (m, 1H), 3,77 (dd, J = 9,4, 5,0 Hz, 1H), 3,45 -3,31 (m, 5H), 3,26 (m, 4H), 1,96-1,82 (m, 1H), 1,82-1,71 (m, 1H), 1,42 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,93 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

, , , , M)metoxi)fenM)piperazm-1-N)fenM)-(S)-1-sec-butil-1H-1,2,4-triazol-5 (4H)-ona (182)

[0159]

[0160] De una manera similar como se describe en los Ejemplos 1-3, el compuesto 183 se obtuvo a partir tosilato 15a y fenol 8a. CL-EM: m/z 637,1 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCla) 87,67-7,61 (m, 3H), 7,57 (m, 2H), 7,47 - 7,33 (m, 5H), 7,04 (t, J = 9,2 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,79 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 4,86 (s, 2H), 4,42 - 4,26 (m, 2H), 3,92 (dd, J = 8,4, 6,6 Hz, 1H), 3,85 (dd, J = 8,5, 4,4 Hz, 1H), 3,78 (dd, J = 9,4, 5,0 Hz, 1H), 3,37 (m, 5H), 3,26 (m, 4H), 1,96-1,82 (m, 1H), 1,74 (m, 1H), 1,42 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 0,93 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

Ejemplo 5: Síntesis de 4-((2S,4R)-4-((4-(4-(4-(1-sec-butil-5-oxo-1H-1,2,4-triazol-4(5H)-il)fenil)piperazin-1-il) fenoxi)metil)-2-(piridazin-4-ilmetil)-1,3-dioxolan-2-il) benzamida (121)

[0161]

[0162] De una manera similar, como se ha descrito en los Ejemplos 1-4, se obtuvo el compuesto 121 partiendo de 4-bromobenzoato de etilo y 4-metilpiridazina. CL-EM: m/z 691,4 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCla) 8 0,90 - 0,94 (t, 3H), 1,40-1,42 (d, 3H), 1,70-1,77 (m, 1H), 1,86-1,88 (m, 1H), 3,17 - 3,27 (m, 5H), 3,35-3,40 (m, 4H), 3,55-3,72 (m, 1H), 3,67 3,69 (m, 1H), 3,81-3,84 (m, 2H), 4,29-4,32 (m, 3H), 5,51-5,68 (m, 1H), 6,09-6,21 (m, 1H), 6,66-6,77. (m, 2H), 6,88-6,97 (m, 2H), 7,02-7,06 (m, 2H), 7,32-7,33 (m, 1H), 7,53-7,59 (m, 2H), 7,63-7,64 (m, 1H), 7,78-7,85 (m, 2H), 9,02-9,08 (m, 2H).

[0163] Los compuestos de la Tabla 1 se prepararon usando procedimientos análogos a los descritos en los Ejemplos 1 5.

Tabla 1

(Continuación)

Ċ

ĨContinuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

Ċ

ĨContinuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

z, 64

(Continuación)

(C o n tin u a c ió n )

z, (d,

(Continuación)

Ċ

ĨContinuación)

(C o n tin u a c ió n )

(C o n tin u a c ió n )

(C o n tin u a c ió n )

Ejemplo 6: Síntesis de cis (±)-4-(4-(4-(4-((4-((2H-1,2,3-triazol-2-N)metN)-4-(2,4-difluorofenN)-1,3-dioxolan-2-il)metoxi)fenil)piperazin-1-il)fenil)-1-sec-butil-1H-1,2,4-triazol-5(4H)-ona (199)

[0165] A una solución de 2-cloro-2',4'-difluoroacetofenona (20 g, 10,5 mol) en CH3CN (100 ml) se añadió 1,2,3-triazol (9,12 ml, 15,7 mol) y DIEA (18,0 ml, 21 mol). La mezcla de reacción se calentó a reflujo durante 1 h, luego se enfrió a ta. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se redisolvió en EtOAc (150 ml) y se lavó con agua (50 ml), ácido cítrico al 10% (50 ml) y salmuera, luego se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 3/1) para dar el compuesto 195 en forma de un sólido amarillo (3,97 g, 17,2%). CL-EM: m/z 224,0 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh) 88,06 (td, J = 8,5, 6,5 Hz, 1H), 7,77 (s, 2H), 7,12 -7,04 (m, 1H), 7,04 -6,94 (m, 1H), 5,87 (d, J = 3,8 Hz, 2H).

[0166] Se añadió a una solución de 195 (3,97 g, 17,7 mmol) en tolueno (40 ml) de trimetilsulfoxonio yoduro (5,19 g, 23 mmol) seguido de la adición de solución de hidróxido de sodio al 20% (4,6 ml). Después, la mezcla de reacción se calentó a 60°C durante 4 h. Una vez finalizada la reacción, se diluyó con acetato de etilo (60 ml) y se vertió en agua helada. La capa orgánica se lavó con agua y salmuera, se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se purificó mediante una columna de gel de sílice flash (eluyente: hexanos/EtOAc = 3/1) para dar el compuesto 196 (3,68 g, 87,6%) en forma de un sólido amarillo. CL-EM: m/z 238,01 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh) 87,52 (s, 2H), 7,55 (m, 1H), 6,80-6,65 (m, 2H), 4,77 (dd, J = 14,8, 1,4 Hz, 1H), 4,45 (dd, J = 14,8, 1,3 Hz, 1H), 2,89 (dd, J = 4,7, 1,4 Hz, 1H), 2,81 (dd, J = 4,7, 1,5 Hz, 1H).

[0167] Al compuesto 196 (3,68 g, 15,5 mmol) se le añadió una solución de 10% v/v H2SO4/H2O (20 ml) a 0°C. La solución de reacción se agitó a ta durante la noche. La solución se basificó mediante la adición de solución sat. NaHCO3 y después se extrajo a partir de EtOAc. Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, luego se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto bruto se purificó mediante cromatografía flash sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 1/1) para dar el compuesto 197 en forma de un sólido amarillo claro (2,24 g, 56,7%). CL-EM: m/z 256,0 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCh): 87,52 (s, 2H), 7,50-7,42 (m, 1H), 6,78 (ddt, J = 9,7, 8,4, 1,5 Hz, 2H), 5,18 (dd, J = 14,1, 1,2 Hz, 1H), 4,98 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 4,03 (dt, J = 11,7, 1,4 Hz, 1H), 3,79 (dd, J = 11,7, 0,6 Hz, 1H), 2,22 (br s, 1H).

[0168] Bromoacetaldehído dietilacetal (1,70 ml, 11,0 mmol) se añadió gota a gota a una solución agitada de 197 (2,24 g, 8,78 mmol) en ácido metanosulfónico (5,7 ml) y DCM (50 ml) a 0°C. Después de la adición, la mezcla se dejó calentar a temperatura ambiente, se agitó durante 3 h, luego se vertió en una mezcla de hielo/NaHCO3 sat. La mezcla se extrajo con DCM. El disolvente orgánico combinado se secó sobre Na2SO4 y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se purificó por columna de gel de sílice flash (eluyente: hexanos/EtOAc = 10/1) para dar 198a como un aceite incoloro (1,72 g, 54,5%). CL-EM: m/z 360,0 (M+H); 1 H NMR (400 MHz, CDCh): 81 H NMR (400 MHz, CDCh) 87,61 (s, 2H), 7,55 (td, J = 8,7, 6,4 Hz, 1H), 6,91 (m, 1H), 6,85 (m, 1H), 5,16 (dd, J = 5,1, 3,6 Hz, 1H), 4,96 - 4,90 (m, 1H), 4,86 -4,70 (m, 2H), 4,05 (dd, J = 9,3, 1,8 Hz, 1H), 3,45 (dd, J = 11,0, 3,6 Hz, 1H), 3,28 (dd, J = 11,0, 5,1 Hz, 1H).

[0169] A una solución de 198a (55 mg, 0,15 mmol) y 8a/8b racémica (60 mg, 0,15 mmol) en DMF anhidro (1,5 ml) se añadió KOH (25 mg, 0,44 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 2 h. Después de enfriar a ta, la mezcla de reacción se diluyó con agua y DCM y la fase orgánica se separó. La fase acuosa se extrajo con DCM. La capa orgánica combinada se lavó con salmuera y se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El producto bruto se purificó mediante cromatografía en columna sobre gel de sílice (eluyente: hexanos/EtOAc = 1/3) para dar el compuesto del título 199 en forma de un sólido blanquecino (22 mg, 21%). CL-EM: m/z 637,2 (M+H); 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 8 7,81 (s, 1H), 7,65 (s, 2H), 7,51 - 7,43 (m, 2H), 7,43 - 7,32 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,07 (re, J = 8,9 Hz, 2H), 6,99 (re, J = 8,6 Hz, 2H), 6,93 -6,80 (m, 2H), 5,33 (t, J = 3,1 Hz, 1H), 4,73 (dd, J = 9,3, 3,2 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 4,55 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 4,39 -4,23 (m, 1H), 4,13 (d, J = 3,2 Hz, 2H), 4.05 (dd, J = 9,4, 1,4 Hz, 1H), 3,56 (sa, 4H), 3,40 (sa, 4H), 1,89 (m, 1H), 1,74 (m, 1H), 1,41 (d, J = 6 ,8 , 3H), 0,92 (t, J = 7,4 Hz, 3H).

[0170] El compuesto de la Tabla 2 se preparó utilizando procedimientos análogos como se describe en el Ejemplo 6.

Tabla 2

Ejemplo 7: Síntesis de cis (+)-1-(4-(4-(4-((4-((2H-1,2,3-tN azol-2-il)metil)-4-(2,4-difluorofeml)-1,3-dioxolan-2-M)metoxi)feml)piperazm-1-il)feml)-3-isopropilimidazolidm- 2-ona (203)

[0171]

[0172] El compuesto 203 se preparó como se indica en el esquema anterior usando procedimientos análogos como se describe en los ejemplos anteriores. CL-EM: m/z 660,3 (M+H).

[0173] Los compuestos de la Tabla 3 se preparan usando procedimientos análogos a los descritos en los Ejemplos 1-7.

Tabla 3

(Continuación)

Ejemplos biológicos

EJEMPLO I: Ensayos biológicos

[0174] Un ensayo de formación de imágenes de alto contenido, sobre la base de tinción a-SMAy los cambios morfológicos celulares asociados con fibroblastos a la transdiferenciación de miofibroblastos, se estableció utilizando fibroblastos humanos primarios de pulmón y HSC de roedor primarios. Condiciones, que implican la privación de suero y posterior tratamiento TGF-p, se identificaron que facilitaron transdiferenciación in vitro robusta en un formato miniaturizado (placa de 384 pocillos) que es susceptible de selección de moléculas pequeñas de alto rendimiento. Se usó un inhibidor selectivo del receptor ALK-5 TGF-p1 (SB-431542) como control positivo. El ensayo de 4 días de duración fue susceptible de cribado del orden de 100.000 pocillos y facilitó la identificación de compuestos que inhiben selectivamente la transdiferenciación de fibroblasto a miofibroblasto. Este ensayo se utilizó para evaluar compuestos de Fórmula (I), (la), (II), (IIa), (III), (Illa), (IV), (IVa), (IVb), (V), (Va), (VI), (VIa), (VIb), (VIc), (VII), (VIIa), (VIII), (VIIIa), (IX), (IXa), (X) o (Xa) generados a partir de los esfuerzos de la química médica.

[0175] La actividad de itraconazol y compuestos de Fórmula (I), (Ia), (II), (IIa), (III), (IIIa), (IV), (IVa), (IVb), (V), (Va), (VI), (VIa), (VIb), (VIc), (VII), (VIIa), (VIII), (VIIIa), (IX), (IXa), (X), o (Xa) se confirmó analizando los cambios en la expresión génica de múltiples genes asociados con la transdiferenciación de fibroblasto a miofibroblastos utilizando métodos bioquímicos (es decir, transferencia Western y RT-PCR). Estos ensayos de 4 días se utilizaron para evaluar conjuntos de 6 compuestos a la vez en una forma de respuesta a la dosis de 4 puntos.

Ensayos a-SMA

[0176] Las células estrelladas hepáticas de rata quiescente se sembraron en placas de 384 pocillos (350 células por pocillo) recubiertas con poli-D-lisina en medio de células estrelladas (Sciencell). Después de 24 horas de incubación, las células se trataron con itraconazol durante 48 horas en presencia de 10 ng/ml de TGF-p1 en medio estrellado hepático. Después de la fijación y tinción con un anticuerpo actina del músculo anti-liso, se analizó la morfología celular con un lector de imágenes Cellomics Cell Insight. Las células se analizaron para determinar el área celular media de la tinción con a-SMA o la intensidad de fluorescencia media de la tinción con SMA. En este ensayo, itraconazol indujo de forma reproducible disminuciones dependientes de la dosis tanto en el área celular media como en la tinción de la actina del músculo liso alfa, lo que indica la inhibición de la transdiferenciación y activación de los miofibroblastos.

Análisis de transferencia Western de las proteínas relacionadas con fibrosis en células expuestas a TGFp e itraconazol (Itra)

[0177] Fibroblastos de pulmón humano se sembraron a 105 células por pocilio en placas de 6 pocilios en medio de ensayo (bovino fetal al 2% de suero, DMEM). Después de 24 horas de incubación, el medio se cambió a medio de ensayo que contenía TGF-p1 (10 ng/ml) y se trató simultáneamente con itraconazol (10 j M) o control de vehículo. Después de la incubación durante 48 horas, las células se recolectaron mediante una breve tripsinización y centrifugación. Las células se lisaron en Cell Lytic M (Sigma) y las concentraciones de lisado se normalizaron mediante lecturas de absorción a 260 nm. Las muestras se hirvieron en tampón de muestra 2X y beta-mercaptoetanol al 10%. Se cargaron tres microgramos de lisado en cada línea de gel y luego se separaron por SDS-PAGE en geles Bis-Tris al 10% y luego se transfirieron mediante transferencia semiseca a membranas de PVDF. Después de bloquear en leche al 5% en solución salina tamponada con TRIS con Tween-20 (0,1%), las membranas se expusieron a los anticuerpos primarios apropiados. Las transferencias se incubaron con anticuerpos secundarios conjugados con HRP y se visualizaron usando película y sustrato quimioluminiscente SuperSignal West Dura (Pierce). En este ensayo, itraconazol indujo de forma reproducible disminuciones dependientes de la dosis en los niveles de proteína de actina de músculo liso alfa inducidos, lo que indica la inhibición de la transdiferenciación y activación de miofibroblasto.

La expresión de genes de fibroblastos de pulmón humanos tratados con itraconazol

[0178] Fibroblastos de pulmón humano se sembraron a 105 células por pocillo en placas de 6 pocillos en medio de ensayo (2% suero bovino fetal en DMEM). Después de 24 horas, el medio se cambió por medio de ensayo que contenía TGF-p1 (10 ng/ml) e itraconazol (500 nM). Después de 48 horas de incubación a 37°C, las células se recolectaron mediante breve tripsinización y centrifugación. El ARN se extrajo usando el equipo RNeasy (Qiagen) y el ADNc se amplificó usando el equipo SuperScript III First-Strand Synthesis (Life Technologies). Las reacciones de qPCR se realizaron luego usando un kit RT2 Profiler p Cr Array enfocado en fibrosis con la placa y los reactivos suministrados. Los datos se analizaron usando N = 1 por reacción por condición de tratamiento. Los datos se expresaron como pliegues de regulación con respecto a una muestra no tratada con TGF-p1. En este ensayo, itraconazol indujo de manera reproducible cambios dependientes de la dosis en genes relacionados con fibrosis múltiple, lo que indica la inhibición de la transdiferenciación y activación de miofibroblastos.

[0179] La actividad anti-fibrótica de itraconazol no fue resultado de la inhibición de P450 asociada con la actividad antifúngica. El itraconazol inhibió las vías de señalización profibróticas de VEGF y Hedgehog.

Análisis qPCR de genes relacionados hedgehog en las células estrelladas hepáticas de rata tratadas con itraconazol

[0180] Las células estrelladas hepáticas de rata se sembraron a 105 células por pocillo en placas de 6 pocillos recubiertas con poli-D-lisina en medio celular estrellado (Sciencell) y se dejó que proliferaran hasta la confluencia total (~ 2 semanas). A continuación, el medio se cambió a DMEM y suero bovino fetal al 0,5% con 1 ug/ml de SHH-N (sistemas de I+D). Las células se trataron con SHH-N y compuestos (ciclopamina 5 j M (control positivo), itraconazol 1 j M) durante 24 horas. Las células se recolectaron mediante una breve tripsinización y centrifugación. El ARN se extrajo usando el equipo RNeasy (Qiagen) y el ADNc se amplificó usando el equipo SuperScript III First-Strand Synthesis (Life Technologies). La qPCR se realizó utilizando una mezcla maestra verde SYBR (Takara). Los niveles relativos de ARNm de PTCH1 (homólogo 1 con parche de proteína) y GLI1 (dedo 1 de zinc de la familia GLI) indicaron que el itraconazol inhibe la señalización de Hedgehog en células estrelladas hepáticas de rata.

Análisis de tranferencia Western de COL1-GFP HSCs después de knockdown de Smoothened

[0181] COL1-GFP HSCs (una línea de células estrelladas hepáticas de ratón inmortalizada con GFP insertado en el locus de colágeno) se sembraron en 7,55 células por pocillo en medio de ensayo (10% fetal suero bovino, DMEM). Después de 24 horas, las células se transdujeron con partículas lentivirales. Después de 24 horas de incubación con partículas virales, las células se cambiaron a medio de ensayo nuevo y se incubaron durante 48 horas. Las células se lisaron en Cell Lytic M (Sigma) y las concentraciones de lisado se normalizaron mediante lecturas de absorción a 260 nm. Las muestras se hirvieron en tampón de muestra 2X y beta-mercaptoetanol al 10%. Se cargaron cantidades iguales de lisado en cada línea de gel y luego se separaron por SDS-PAGE en geles Bis-Tris al 10% y luego se transfirieron mediante transferencia semiseca a membranas de PVDF. Después de bloquear en leche al 5% en solución salina tamponada con TRIS con Tween-20 (0,1%), las membranas se expusieron a los anticuerpos primarios apropiados. Las transferencias se incubaron con anticuerpos secundarios conjugados con HRP y se visualizaron usando película y sustrato quimioluminiscente SuperSignal West Dura (Pierce). Las construcciones para los ARNhc administrados por vía lentiviral se obtuvieron de Sigma como reservas de glicerol MISSION. Los lentivirus se empaquetaron utilizando células 293T y vectores de empaquetado pMD2.G y pSPAX2. Los clones 71, 12 y 95 corresponden a ARNhc de SMO y pLKO es el plásmido SCH002 que codifica un ARNhc no dirigido. La caída de SMO mediada por ARNhc y la inhibición resultante de la señalización de Hedgehog en células estrelladas hepáticas de rata recapituló parcialmente la actividad antifibrótica del itraconazol.

Análisis de transferencia Western de patrón de migración VEGFR2 después del tratamiento con itraconazol

[0182] Las células estrelladas hepáticas de rata quiescente se sembraron a 105 células por pocilio en placas de 6 pocilios recubiertas con poli-D-lisina en medio de células estrelladas (Sciencell). Después de 24 horas de incubación, las células se trataron con varias dosis de itraconazol durante 24 horas. Las células se recolectaron mediante breve tripsinización y centrifugación. Las células se lisaron en Cell Lytic M (Sigma) y las concentraciones de lisado se normalizaron mediante lecturas de absorción a 260 nm. Las muestras se hirvieron en tampón de muestra 2X y beta-mercaptoetanol al 10%. Se cargaron cantidades iguales de lisado en cada línea de gel y luego se separaron por s DS-PAGE en geles Bis-Tris al 10% y luego se transfirieron mediante transferencia semiseca a membranas de PVDF. Después de bloquear en leche al 5% en solución salina tamponada con TRIS con Tween-20 (0,1%), las membranas se expusieron a los anticuerpos primarios apropiados. Las transferencias se incubaron con anticuerpos secundarios conjugados con HRP y se visualizaron usando película y sustrato quimioluminiscente SuperSignal West Dura (Pierce). El itraconazol inhibió la glicosilación y el tráfico de VEGFR2, lo que provocó una inhibición de la señalización profibrótica de VEGF en células estrelladas hepáticas de rata.

Análisis de transferencia Western de las células estrelladas de rata hepática tratadas con combinaciones de compuestos que inhiben VEGFR y Hedgehog

[0183] Se sembraron células estrelladas hepáticas de rata quiescentes en 105 células por pocillo en placas de 6 pocillos recubiertas con poli-D-lisina en medio de células estrelladas (Sciencell). Después de 24 horas de incubación, las células se cambiaron a medio de células estrelladas que contenía 10 ng/ml de TGF-p1 y las combinaciones indicadas de compuestos. Después de 48 horas de tratamiento, las células se recolectaron mediante breve tripsinización y centrifugación. Las células se lisaron en Cell Lytic M (Sigma) y las concentraciones de lisado se normalizaron mediante lecturas de absorción a 260 nm. Las muestras se hirvieron en tampón de muestra 2X y beta-mercaptoetanol al 10%. Se cargaron tres microgramos de lisado en cada línea de gel y luego se separaron por SDS-PAGE en geles Bis-Tris al 10% y luego se transfirieron mediante transferencia semiseca a membranas de PVDF. Después de bloquear en leche al 5% en solución salina tamponada con TRIS con Tween-20 (0,1%), las membranas se expusieron a los anticuerpos primarios apropiados. Las transferencias se incubaron con anticuerpos secundarios conjugados con HRP y se visualizaron usando película y sustrato quimioluminiscente SuperSignal West Dura (Pierce). La inhibición farmacológica dual de la señalización de VEGF y Hedgehog en células estrelladas hepáticas de rata recapituló la actividad antifibrótica del itraconazol.

Análisis de transferencia Western de células estrelladas hepáticas humanas LX2 después de la eliminación de VEFGR1, VEGFR2 o SMO.

[0184] Las células LX2 (una línea de células estrelladas hepáticas humanas inmortalizadas, laboratorio Scott Friedman) se sembraron a 105 células por pocillo en medio de ensayo (suero bovino fetal al 10%, DMEM). Después de 24 horas, las células se transdujeron con partículas lentivirales. Después de 24 horas de incubación con partículas virales, las células se cambiaron a medio de ensayo nuevo y se incubaron durante 48 horas. Las células se lisaron en Cell Lytic M (Sigma) y las concentraciones de lisado se normalizaron mediante lecturas de absorción a 260 nm. Las muestras se hirvieron en tampón de muestra 2X y beta-mercaptoetanol al 10%. Se cargaron cantidades iguales de lisado en cada línea de gel y luego se separaron por SDS-PAGE en geles Bis-Tris al 10% y luego se transfirieron mediante transferencia semiseca a membranas de PVDF. Después de bloquear en leche al 5% en solución salina tamponada con TRIS con Tween-20 (0,1%), las membranas se expusieron a los anticuerpos primarios apropiados. Las transferencias se incubaron con anticuerpos secundarios conjugados con HRP y se visualizaron usando película y sustrato quimioluminiscente SuperSignal West Dura (Pierce). Las construcciones para los ARNhc administrados por vía lentiviral se obtuvieron de Sigma como reservas de glicerol MISSION. Los lentivirus se empaquetaron utilizando células 293T y vectores de empaquetado pMD2.G y pSPAX2. El clon 65 corresponde a un ARNhc dirigido a SMO, 31 y 32 corresponden a un ARNhc dirigido a VEGFR1, los clones 86 y 87 corresponden a un ARNhc dirigido a VEGFR2, y pLKO es el plásmido SCH002 que codifica un ARNhc no dirigido.

[0185] La Tabla 3 abajo muestra la actividad biológica (CE50) para los compuestos descritos en este documento. La CE50 para actividad (de formación de imágenes y basada en Western) se calificó como: ++ = <500 nM; + = 500 nM a 5 pM; = 5 a 30 pM); - => 30 pM; NT = No probado.

Tabla 3

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

(Continuación)

Ensayo de inhibición reversible Cyp

[0186] El propósito de este ensayo es determinar la inhibición reversible de la enzima Cyp con un compuesto dado mediante una rotación de sonda de sustrato como el sustituto de la inhibición. Este ensayo se realiza con microsomas hepáticos humanos en lugar de una enzima aislada para explicar los metabolitos del fármaco original que conduce a una posible interacción fármaco-fármaco a través de la inhibición de Cyp. La renovación del sustrato (por ejemplo, la conversión de midazolam en hidroxil midazolam) se controla mediante CLEM-EM (Q1/Q2 = 342,2/203,2). Los compuestos de prueba se prueban en una curva de respuesta a la dosis de 7 puntos comenzando desde 50 pM hasta 50 nM (serie de diluciones de ~3 veces). Para Cyp 3A4, el compuesto de control positivo es ketoconazol.

[0187] El protocolo detallado es el siguiente:

Prepare los compuestos de ensayo y los inhibidores estándar de solución (100x) de trabajo.

Saque los microsomas del congelador a -80°C para descongelarlos en hielo, etiquetarlos con la fecha y volver a colocarlos en el congelador inmediatamente después de usarlos.

Añada 20 pL de las soluciones de sustrato a los pocillos correspondientes.

Añada 20 pL de PB a los pocillos en blanco.

Añada 2 pL de los compuestos de prueba y la solución de trabajo de control positivo a los pocillos correspondientes. Añada 2 pL de MeOH a los pocillos sin inhibidor y a los pocillos en blanco.

Prepare una solución de trabajo para HLM.

Agregue 158 pL de la solución de trabajo HLM a todos los pocillos de la placa de incubación.

Precaliente la placa durante unos 10 minutos a un baño de agua a 37°C.

Prepare la solución de cofactor NADPH.

Añada 20 pL de cofactor de NADPH a todos los pocillos de incubación.

Mezcle e incubar durante 10 minutos a un baño de agua a 37°C.

En ese momento, finalice la reacción agregando 400 pL de solución de parada en frío (200 ng/ml de tolbutamida en ACN).

Centrifugue las muestras a 4000 rpm durante 20 minutos para precipitar la proteína.

Transfiera 200 pL de sobrenadante a 200 pL de agua de HPLC y agite durante 10 min.

Analice muestras por CL/EM/EM.

Ensayo de inhibición (TDI) dependiente del tiempo Cyp

[0188] El propósito de este ensayo es determinar la capacidad de los compuestos para formar aductos P450 de citocromo inhibidos irreversiblemente (también conocidos como inhibición basada en el mecanismo (MBI)) en microsomas de hígado humano. En comparación con la inhibición competitiva de CYP, se ha reconocido que MBI es una preocupación mucho mayor en el descubrimiento y desarrollo de fármacos, porque la inactivación de CYP puede conducir a una farmacocinética no lineal y subestimar el potencial de interacción fármaco-fármaco. Los datos de este ensayo se utilizan junto con el ensayo de inhibición reversible. El ensayo de TDI se realiza generalmente en microsomas hepáticos para evaluar el potencial de TDI del fármaco original, así como de los metabolitos. La lectura es un CI50 de desplazamiento con NADPH (el conjunto inactivación/TDI) para permitir que el compuesto se convierta a una especie reactiva y sin NADPH (control en correcto para la degradación de proteínas durante la pre-incubación de 20 minutos). Luego, ambos conjuntos de incubación se diluyen con tampón de ensayo reciente que contiene sustratos específicos de NADPH Cyp (midazolam para Cyp3A4) y se mide la inhibición de la hidroxilación de midazolam por CL-EM/EM (Q1/Q2 = m/z 342,2/203,2). Se considera que un cambio de CI50 > 1,5 veces es positivo para la inhibición dependiente del tiempo en donde la preincubación de 20 minutos conduce a un aumento de la potencia. La troleandomicina se usa como un compuesto de control positivo, que muestra un cambio de TDICI50 de >20. Los compuestos de prueba se prueban en una curva de respuesta a la dosis de 7 puntos comenzando desde 50 pM hasta 50 nM (serie de dilución de ~ 3 veces).

[0189] El protocolo detallado es el siguiente:

• Prepare compuestos de ensayo y la solución de control positivo de trabajo (100x) en 1:1 de DMSO/MeOH

• Tire microsomas del congelador de -80°C a deshielo.

• Prepare la mezcla de incubación y agregue 147,5 pl a todos los pocillos de la placa de incubación.

• Prepare la solución de cofactor y la solución de dilución del sustrato.

- Añada 2,5 pL de los compuestos de prueba y la solución de trabajo de control positivo a los pocillos correspondientes. Concentraciones de compuesto finales en 7 puntos de respuesta a la dosis de 50 pM a 50 nM - Añada 2,5 pL 1:1 de DMSO/MeOH a los pocillos NIC

Precaliente la placa durante unos 10 min a 37°C.

Añada 50 pL de cofactor a los pocillos de preincubación.

Añada 50 pL de solución de dilución de sustrato a los pocillos de incubación.

Mezcle y preincube durante 20 minutos a baño maría a 37°C.

Añada 50 pL de cofactor a los pocillos de incubación;

Añada 50 pL de solución de dilución de sustrato a los pocillos de preincubación.

Mezcle e incube durante 5 minutos a baño maría a 37°C.

En ese momento, termine la reacción agregando 250 pL de solución de parada fortificada con IS fría a todos los pocillos.

Centrifugue la placa de incubación a 4000 rpm durante 20 min.

Analice muestras por CL-EM.

Ensayo de activación de PXR (Cyp 3A4)

[0190] El metabolismo CYP3A4 se evalúa usando Ensayo P450--Glo™ CYP3A4 con luciferina--IPA como el sustrato de CYP3A4 y representado como RLU (unidades relativas de luminiscencia). La activación de PXR se evalúa utilizando un reactivo de detección de luciferasa, ONE--Glo™ y se representado como RLU. La intensidad de la luz de luminiscencia es directamente proporcional al grado de activación de PXR y la transcripción del gen que lo acompaña en las células DPX2. Los compuestos se prueban a 10, 1 y 0,1 pM en el ensayo. Pliegue de inducción = (RLU/RFU de muestra tratada con compuesto)/(RLU/RFU de muestra tratada con vehículo), RFU es la señal de viabilidad celular. RLU es la señal del metabolismo de CYP3A y la activación de PXR. Se utiliza DMSO al 0,1% como vehículo. La viabilidad celular se detecta utilizando CellTiter-FluorTM y se representa como RFU (Unidades de Fluorescencia Relativa).

[0191] La activación de potencia se define como negativa, débil, moderada y fuerte. Los activadores negativos, débiles, moderados y fuertes son aquellos que dan <15%, <40%, <69% y >70%, respectivamente, de la respuesta producida por 10 pM RIF a 10 pM.

Determinación de la potencia MIC anti-hongos Candida albicans

[0192] Candida albicans de tipo salvaje (ATCC-10231) se utiliza y fluconazol, anfotericina B, itraconazol y terbinafina se adquirieron de Sigm y se utilizaron como controles positivos.

[0193] La concentración de ensayo más alta para todos los compuestos de ensayo y fluconazol es 100 pM. Fluconazol también se prueba en la concentración más alta de 64 pg/ml, y anfotericina B y terbinafina a los 16 y 64 pg/ml. Los compuestos de prueba están en solución madre de DMSO a una concentración de 10 mM. Se preparan dos soluciones madre en DMSO para fluconazol a 10 mM y 6,4 mg/ml. Se preparan soluciones madre de anfotericina B y terbinafina en DMSO a 1,6 y 6,4 mg/ml.

[0194] La dilución en serie de soluciones madre de 100X: 4 pl de solución madre se añade en 196 pL de RPMI1640 (MOPS tamponadas y libres de HEPES y bicarbonato de sodio) en el primer pocillo de una fila de una placa de 96 pocillos de fondo en U estéril. El resto de pocillos se llenan con 100 pl de RPMI1640. La dilución en serie de 2 veces se realiza secuencialmente transfiriendo 100 pl de solución al siguiente pocillo y mezclando mediante pipeteo, hasta el 11° pocillo. Los 100 pl adicionales en el 11° pocillo se descartan. Por lo tanto, los pocillos del compuesto contienen 100 pl de 2 x de concentraciones de prueba de fármacos en RPMI1640. El duodécimo pozo se llena con solo 100 pl de RPMI1640.

[0195] La solución madre congelada de glicerol de C. albicans 3147 (ATCC 10231) se esparce sobre agar dextrosa Sabouraud (SDA). La placa se incuba a 35°C en atmósfera ambiente durante 20 h. Se suspenden colonias individuales en solución salina estéril hasta que la turbidez alcanza 0,1 (1-5 x 106 UFC/ml) usando un turbidez Siemens. Esta suspensión se diluye 50 x en RPMI1640 en una cónica de 15 ml, y luego se diluye adicionalmente 20 x en RPMI1640 en una cónica de 50 ml. Esto da 1-5 x 103 UFC/ml de suspensión y se usa como inóculo. La densidad celular en el inóculo se contabiliza en placa para que sea de 4,94 x 103 UFC/ml.

[0196] Determinación MIC: Dentro de 15 min, 100 pl se añade de inóculo bacteriano preparado en cada pocillo de compuesto/placa que contiene RPMI1640. Las placas se incuban a 35°C en atmósfera ambiente. Las fotos se toman a las 24 h y 48 h. Los criterios de valoración de la CMI para fluconazol y anfotericina B se leen de acuerdo con el protocolo M27-A3 (Método de referencia para las pruebas de sensibilidad a los antifúngicos de dilución en caldo de levaduras; estándar aprobado, tercera edición, estándar M27-A3 publicado el 01/01/2008 por Clinical and Laboratory Standards Institute). La CMI para compuestos para compuestos de prueba y terbinafina (no mencionados en el protocolo M27-A3) se leen como si fueran azoles.

Estudios farmacocinéticos (PK) de ratón

[0197] Los compuestos con propiedades ADME in vitro adecuadas se progresan a estudios PK in vivo. Se utiliza un formato de instantánea en ratones para evaluar rápidamente la posibilidad de que los candidatos principales estén biodisponibles por vía oral. El formato de instantánea implica una dosis única (típicamente 20 mg/kg) administrada por vía oral en un vehículo estándar (5% PEG/DMSO en agua, por ejemplo). Los compuestos se infunden directamente en el análisis de MS para determinar la señal de MRM (monitorización de reacciones múltiples) única que depende de la concentración en los modos ESI positivo o negativo. El análisis de HPLC utilizando varios gradientes de disolvente se realiza a partir de una solución orgánica y acuosa para asegurar una buena forma de pico de las masas Q1/Q2 deseadas. Las formulaciones incluyen ciclodextrina al 45% en agua (como se usa clínicamente para el itraconazol). Otras formulaciones que pueden usarse son solutol, Eudragit, MC/Tween, etc. Las curvas estándar se generan usando plasma enriquecido con compuesto en varias concentraciones (10 ng/mL a 2000 ng/mL) para determinar el rango lineal de la señal de masa Q1/Q2 a la concentración del compuesto usando plasma heparinizado de ratón hembra. A los ratones se les administra una dosis oral de compuestos, muestras de plasma recolectadas mediante hemorragias retroorbitales. Se recogen cinco puntos de tiempo (30 min, 1 h, 4 h, 8 h, 24 h) en tubos de recogida heparinizados. Se realiza la precipitación de proteínas. Los compuestos se extraen en acetonitrilo frío y se analizan por EM. Nonwinlin se utiliza para el modelado PK según sea necesario.

EJEMPLO II: Modelos animales

[0198] Para demostrar in vivo la actividad anti-fibrótica, se establecieron modelos de fibrosis de roedores hepáticos inducidos por tetracloruro de carbono (CCU) y de pulmón y piel inducidos por bleomicina. Estos ensayos in vivo tardan entre 6 y 8 semanas en completarse (incluido el análisis histológico completo). Los experimentos típicos consisten en grupos de 6-8 animales para ser tratados con itraconazol (2-4 dosis), 1 o 2 compuestos de prueba (2-4 dosis), vehículo y tratamientos de referencia (pirfenidona y AM-152). AM-152 (Amira Pharmaceuticals) es un antagonista del receptor LPA1 (ácido lisofosfatídico 1). Esta diana se ha descrito como relevante para la exacerbación de los sistemas IPF en un modelo de bleomicina de ratón (British Journal of Pharmacology (2010), 160 , 1699-1713). AM-152 es un compuesto avanzado en esta diana, como se ha descrito previamente con más detalle en el documento WO 2012/078805.

Modelo de fibrosis pulmonar Inducida por bleomicina

[0199] Ratones macho de nueve semanas de edad B6 (granjas Taconic) se implantan quirúrgicamente con bombas osmóticas administrando 25 mg/kg de bleomicina durante siete días. 17 días después de la cirugía, los ratones se tratan con fármaco durante 2 semanas. Se administran tratamientos farmacológicos. Los fármacos antifibróticos descritos anteriormente AM-152 y pirfenidona se utilizan como fármacos de control positivo. Las secciones de pulmón se tiñen con tricrómico de Masson y, después de la exploración, se toman ocho campos aleatorios por animal para su análisis. Los datos se representan como media y s.e.m.. Las secciones de pulmón teñidas se analizan de acuerdo con un sistema de puntuación Ashcroft modificado y utilizan un método de análisis de imágenes automatizado imparcial. El área teñida con tricrómico de Masson total se genera utilizando una macro de análisis de imagen automatizada en la Imagen J. Luego, cada imagen se convierte en una pila RGB, y el umbral para el área teñida se establece de manera que solo se incluya tejido pulmonar en el análisis mientras que se excluyen los espacios vacíos como los conductos respiratorios y los alvéolos. Luego, el área teñida total se determina utilizando la función de medición de área dentro de Imagen J. Se analizan las puntuaciones medias de Ashcroft y los valores medios del porcentaje de área teñida para determinar la gravedad de la fibrosis pulmonar.

Modelo de fibrosis de hígado inducida por tetracloruro de carbono

[0200] Se administran tratamientos farmacológicos. Las secciones de hígado se tiñen con una solución de rojo Sirius. Después de escanear, se generan 5 imágenes aleatorias por animal. El porcentaje total de área positiva para la tinción con rojo Sirio se genera usando una macro de imagen automatizada en la Imagen J. Brevemente, cada imagen se convierte en una pila RGB y el umbral para el área teñida se establece de manera que no se incluyan núcleos en el análisis. El área roja total se determina cuantitativamente mediante el uso de la medida del área de función dentro de la imagen J. Trozos de hígado del modelo de fibrosis hepática inducida por CCl4 se homogeneizaron en PBS con un homogeneizador y bolas de acero. Los desechos se descartan por centrifugación y el lisado se concentra determinado por mediciones de absorbancia de Nanodrop a 260 nm. Se cargan cantidades iguales de lisado en cada línea de gel y luego se separan por SDS-PAGE en geles Bis-Tris al 10% y luego se transfieren mediante transferencia semiseca a membranas de PVDf . Después de bloquear en leche al 5% en solución salina tamponada con TRIS con Tween-20 (0,1%), las membranas se exponen a los anticuerpos primarios apropiados. Las transferencias se incuban con anticuerpos secundarios conjugados con HRP y se visualizan usando película y sustrato quimioluminiscente SuperSignal West Dura (Pierce).

Modelo de curación de herida de roedores

[0201] El efecto de itraconazol y compuestos de ensayo sobre la curación normal de la herida se evaluó usando un modelo de curación de heridas de roedores. Cinco días antes del inicio del modelo, los ratones se anestesian y se elimina el vello de la piel de la espalda con Nair. El día 1, se pesan los ratones y se hace un punzón de biopsia estéril (5 mm de diámetro) perforando a través de todo el grosor de la piel doblada hacia atrás (2 agujeros de dial de 5 mm en total). El tamaño de las heridas se mide diariamente con calibradores. El peso corporal se controla dos veces por semana durante todo el estudio. En día 1 hasta el final del estudio, el tratamiento farmacológico (25 mg/kg, SID de itraconazol, 25 mg/kg SID de compuesto de prueba o vehículo) se administra diariamente usando un volumen de dosificación de 5 ml/kg. Los días 7, 11 y 14, se sacrificaron los animales de cada grupo y se recogieron las heridas para el análisis histológico. Al recoger las heridas, se cortan las heridas incluyendo unos pocos mm de la piel circundante. Para cada animal, se recogen dos trozos de herida y se fijan para el análisis histológico.

EJEMPLO III: Fase II Estudio clínico para la esclerodermia

[0202] Un ensayo clínico doble ciego aleatorizado controlado con placebo de fase II demuestra Prueba de Concepto para un análogo de itraconazol anti-fibrótico optimizado en pacientes con esclerodermia difusa cutánea o esclerodermia sistémica con implicación cutánea difusa. Los pacientes que satisfacen los criterios de inscripción constituyen dos grupos iguales de 30. El grupo experimental recibe una única dosis alta de fármaco todos los días durante 6 meses y el grupo de comparación con placebo recibirá placebo todos los días durante 6 meses. La dosis única alta de fármaco se determina en función de la eficacia preclínica, la participación de la diana en un estudio de toxicología preclínica de cinomolgos y un estudio de seguridad de fase I. La medida de resultado primaria es una comparación de la eficacia del fármaco frente al placebo basada en la variación porcentual en m-RSS (puntuación 0-51, 17 sitios) entre la inclusión y las visitas mensuales. Las medidas de resultado secundarias son una comparación de la eficacia del fármaco frente al placebo según la variación en m-RSS entre los puntos de tiempo de inclusión y seguimiento (1, 3 y 6 meses); evaluación de la participación de la diana determinada por el perfil de expresión de los genes diana hedgehog y VEGFR utilizando biopsias de piel obtenidas en la inclusión y a los 6 meses; evaluación del grosor de la piel en el momento de la inclusión y 6 meses mediante biopsias de piel; evaluación del tratamiento de síntomas no cutáneos en pacientes con esclerodermia sistémica; evaluación de la calidad de vida mediante un cuestionario de evaluación de la salud y el Índice de Calidad de Vida en Dermatología; y evaluación de la tolerancia al tratamiento mediante la monitorización clínica y de laboratorio de los efectos secundarios (incluida la evaluación de los signos de efectos inotrópicos negativos mediante ecografía cardíaca). Se establecerá una prueba de concepto satisfactoria si >40% de los pacientes presentan una mejora de la m-RSS (definida como una disminución de la mRSS de > 5,3 unidades entre el valor inicial y la última visita del estudio a los 6 meses).

[0203] La población diana de pacientes precisa consiste en los pacientes diagnosticados con esclerodermia cutánea difusa (o grave) (puntuación de la piel de Rodnan modificada, m-RSS >16/51). Los pacientes diagnosticados con esclerodermia cutánea difusa localizada o esclerodermia sistémica con afectación cutánea difusa, según la definición del American College of Rheumatology, son los subgrupos de pacientes conocidos.

[0204] Los criterios de inclusión y exclusión para el reclutamiento de pacientes de un estudio de prueba de concepto de fase II son los siguientes. Los pacientes tendrán 18 años de edad o más con un diagnóstico documentado de esclerodermia cutánea o sistémica. Se requiere una m-RSS basal de >16/51 indicativa de esclerodermia cutánea difusa. Se requiere una puntuación de fracción de eyección de ultrasonido cardíaco previo a la inclusión de más del 55% (es decir, normal) para la inclusión. Los pacientes serán excluidos si han sido tratados con un fármaco (p. ej., metotrexato, corticosteroides, ciclofosfamida, bosentan) que tiene el potencial de interferir con el curso de la enfermedad dentro de un período de 3 meses antes del inicio del ensayo. Se excluirán los pacientes que padecen insuficiencia orgánica grave, enfermedad hepática crónica (p. ej., cirrosis hepática, hepatitis crónica), cáncer, enfermedad crónica (p. ej., artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, diabetes, VIH) o que tengan una química sanguínea anómala. Se excluirán los pacientes que se hayan sometido a una cirugía mayor menos de 4 semanas antes de la inclusión. Se excluirán los pacientes contraindicados para el itraconazol, como se especifica en las especificaciones del producto. Específicamente, se excluirán los pacientes con evidencia de disfunción ventricular (p. ej., insuficiencia cardíaca congestiva, ICC), con riesgo de ICC o que hayan sido tratados con fármacos inotrópicos. Se excluirán los pacientes que hayan sufrido un infarto de miocardio menos de 6 meses antes de la inclusión.

[0205] Los pacientes incluidos en un estudio de prueba de concepto de fase II son identificados y seleccionados para el tratamiento en colaboración con los médicos de dermatología en múltiples sitios dentro de los Estados Unidos. Un investigador coordinador que es miembro del Consorcio de Ensayos Clínicos de Esclerodermia supervisa el reclutamiento de pacientes y actúa como presidente del estudio. Los pacientes son diagnosticados con esclerodermia cutánea difusa localizada o esclerodermia sistémica con afectación cutánea difusa. Los pacientes se estratifican según el diagnóstico de esclerodermia (es decir, localizada o sistémica), el sexo y la edad para garantizar una distribución equitativa dentro de las poblaciones de tratamiento. Además, los pacientes se estratifican según la gravedad de la afectación cutánea para garantizar un número igual de pacientes con afectación cutánea grave (m-RSS > 20/51) dentro de las poblaciones de tratamiento. Esta estratificación requiere una prueba diagnóstica inicial que incluye escamas de induración cutánea y biopsia de piel. Los pacientes deben someterse a una prueba de diagnóstico de ecografía cardíaca antes de la inclusión para garantizar una función cardíaca normal (puntuación de la fracción de eyección >55%).

[0206] Como actualmente no hay tratamiento indicado directamente para inhibir la fibrosis en pacientes con esclerodermia, no hay agente de comparador para ser utilizado en estudios de pacientes. El nuevo agente se dosifica solo. Los pacientes que toman cualquier medicamento son monitoreados para asegurarse de que el nuevo agente no altere las propiedades farmacocinéticas y del metabolismo del medicamento que se está tomando.

[0207] La puntuación de la piel de Rodnan modificada (m-RSS) es un biomarcador identificado, medible y validado utilizado para evaluar la eficacia clínica en pacientes con esclerodermia. Brevemente, la superficie total de la piel se divide arbitrariamente en 17 sitios. En cada área, se usa palpitación manual para evaluar una puntuación de la piel. La puntuación de la piel varía de 0 a 3 según el grado de engrosamiento de la piel (0, no afectado; 1, leve; 2, moderado; 3, severo). La puntuación total de la piel es la suma de las puntuaciones de cada una de las 17 áreas (puntuación máxima de 51). Los pacientes con una puntuación de entre 16 y 19 se clasifican como difusos y los que tienen una puntuación > 20 se clasifican como graves. Se ha demostrado que este sistema de puntuación de la piel se correlaciona muy bien con la extensión de la fibrosis dérmica y también se correlaciona bien con la extensión de la fibrosis/disfunción en los órganos internos (en pacientes con esclerodermia sistémica). El compromiso diana en la piel se puede evaluar controlando los cambios en la expresión de los genes diana hedgehog y VEGFR usando biopsias de piel.

EJEMPLO IV: Fase II Estudio clínico para la fibrosis pulmonar idiopática

[0208] El propósito de este estudio es determinar la seguridad y eficacia del compuesto de fórmula (I) y la fórmula (II) para el tratamiento de fibrosis pulmonar idiopática, en comparación con placebo. El ensayo clínico es intervencionista. La asignación de los participantes del estudio clínico es aleatoria; el modelo de intervención es de asignación paralela; y hay un enmascaramiento doble ciego del estudio (sujeto, cuidador, investigador). El presente estudio clínico mide principalmente la tasa de cambio de la capacidad vital forzada y, en segundo lugar, mide la seguridad en función de los EA, los signos vitales y las pruebas de laboratorio clínico.

[0209] Los criterios de inclusión para el reclutamiento de pacientes son los siguientes:

Ambos sexos entre las edades de 40 y 80 años, ambos inclusive, en la aleatorización.

Presentan síntomas clínicos compatibles con fibrosis pulmonar idiopática (FPI).

Han recibido un diagnóstico de FPI por primera vez al menos 6 meses y no más de 48 meses antes de la aleatorización. La fecha del diagnóstico se define como la fecha de la primera TCAR disponible o biopsia pulmonar quirúrgica compatible con FPI/NIU.

Tienen un diagnóstico de fibrosis pulmonar intersticial habitual (NIU) o FPI mediante tomografía computarizada de alta resolución (HRCT) o biopsia pulmonar quirúrgica (SLB).

La extensión de los cambios fibróticos (cambios en panal, cambios reticulares) mayor que la extensión del enfisema en la TCAR.

No tienen características que respalden un diagnóstico alternativo de biopsia transbronquial, BAL o SLB, si se realiza. Tienen un porcentaje de CVF posbroncodilatador pronosticado entre 50% y 80%, inclusive, en el momento de la selección.

Tienen un cambio en CVF posbroncodilatador (medido en litros) entre el cribado y el día 1 que es menos del 10% de diferencia relativa, calculado como: el valor absoluto del 100% (cribado CVF (L) - día 1 CVF (L)) / cribado CVF (L). Tienen una capacidad de difusión de monóxido de carbono (DLCO) entre 30% y 80% (ajustada por hemoglobina y altitud, inclusive, en la selección.

No tienen evidencia de mejora en las medidas de gravedad de la enfermedad de FPI durante el año anterior, en opinión del investigador.

Pueden caminar 150 metros o más durante la prueba de caminata de 6 minutos (6MWT) en la selección.

Demuestran una disminución en la saturación de oxígeno de 2 puntos porcentuales o más durante 6MWT en la selección (se puede realizar con titulación de oxígeno suplementario para mantener niveles de saturación de oxígeno >88%).

Pueden comprender y firmar un formulario de consentimiento informado por escrito.

Pueden comprender la importancia de la adherencia al tratamiento del estudio y al protocolo del estudio y están dispuestos a cumplir con todos los requisitos del estudio, incluidas las restricciones de medicación concomitantes, a lo largo del estudio.

• Las mujeres en edad fértil (WOCBP) y los hombres sexualmente activos con WOCBP deben utilizar métodos anticonceptivos aceptables.

[0210] Los criterios de exclusión para el reclutamiento de pacientes son los siguientes:

i) Exclusiones de enfermedades diana

(1) Tiene un empeoramiento clínico significativo de la FPI entre el cribado y el día 1 (durante el proceso de cribado), en opinión del investigador.

(2) Tiene un volumen espiratorio forzado en 1 segundo (VEF1)/relación CVF inferior a 0,8 después de la administración de broncodilatador en la selección.

(3) Tiene una respuesta broncodilatadora, definida por un aumento absoluto del 12% o más y un aumento de 200 ml en el FEV1 o CVF o ambos después del uso de broncodilatadores en comparación con los valores antes del uso de broncodilatadores en la selección.

ii) Historial médico y enfermedades concurrentes

(1) Tiene un historial de exposición ambiental clínicamente significativa que se sabe que causa fibrosis pulmonar.

(2) Tiene una explicación conocida para la enfermedad pulmonar intersticial.

(3) Tiene un diagnóstico clínico de cualquier enfermedad del tejido conectivo.

(4) Actualmente tiene asma clínicamente significativa o enfermedad pulmonar obstructiva crónica. (5) Tiene evidencia clínica de infección activa.

(6) Tiene algún historial de malignidad que pueda resultar en una discapacidad significativa o que probablemente requiera una intervención médica o quirúrgica significativa en los próximos 2 años. Esto no incluye procedimientos quirúrgicos menores para el cáncer localizado (p. ej., carcinoma de células basales).

(7) Tiene alguna afección distinta de la FPI que, en opinión del investigador, es probable que provoque la muerte del sujeto en los próximos 2 años.

(8) Tiene antecedentes de enfermedad hepática en etapa terminal.

(9) Tiene antecedentes de enfermedad renal en etapa terminal que requiere diálisis.

(10) Tiene antecedentes de enfermedad cardíaca o pulmonar inestable o en deterioro (distinta de la FPI) en los 6 meses anteriores.

(11) Tiene antecedentes de abuso de alcohol o sustancias en los últimos 2 años.

(12) Tiene antecedentes familiares o personales de síndrome de QT largo y/o Torsades de Pointes (taquicardia ventricular polimórfica).

(13) Ha utilizado cualquiera de las siguientes terapias específicas dentro de los 7 días anteriores a la selección:

(a) Terapia de investigación, definida como cualquier medicamento que no haya sido aprobado para su comercialización para cualquier indicación en el país del sitio participante.

(b) Cualquier agente citotóxico, inmunosupresor, modulador de citocinas o antagonista del receptor, que incluye, entre otros, azatioprina, bosetan, ambrisentan, ciclofosfamida, ciclosporina, etanercept, iloprost, infliximab, antagonistas de leucotrienos, metotrenocrolimato de micofenolato, montelukast, tetratiomolibdato, inhibidores del factor de necrosis tumoral alfa, NAC, mesilato de imatinib, interferón gamma-lb, pirfenidona e inhibidores de la tirosina quinasa. (c) Colchicina, heparina y warfarina. Se puede usar sildenafil (uso diario) si se administra para una indicación distinta de la FPI si no existe una terapia alternativa clínicamente aceptable para la misma indicación; se permite el uso intermitente para la disfunción eréctil.

(d) Se permite el uso intermitente de corticosteroides para el empeoramiento respiratorio agudo.

(e) Se permite ketoconazol, ciclosporina y esteroides para uso tópico y oftálmico.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de Fórmula (I) o Fórmula (la):

en donde:

R2 es alquilo, o -NR13R14;

R3 es -OH, alquilo, o -NR13R14;

cada R8 se selecciona independientemente de halógeno, -OH, -NO2, -N3, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, haloalquilo, hidroxialquilo, alcoxialquilo, -alquileno(NR13R14), -alquileno(cicloalquilo), -alquileno(heterociclilo), cicloalquilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, -SR13, -SOR13, -SO2R13, -SO2NR13R14, -NR13R14, -NR13SO2R14-NR13C(O)R14, -NR13C(O)OR14, -NR13C(O)NR13R14, -C(O)R14, -C(O)OR14, y - C(O)NR13R14; o dos R8 adyacentes forman un anillo heterociclilo;

n se selecciona de 0, 1,2, 3, y 4;

2. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es -alquileno(cicloalquilo).

3. El compuesto de la reivindicación 2, en donde R1 es -CH2-(ciclopentilo).

4. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es -CH(CH2CH3)2.

5. El compuesto de la reivindicación 1, en donde R1 es -CH(CH3)CH2CH2R2 y en donde R2 es -CH3

6. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde n es 0.

7. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-5, en donde n es 1 ó 2.

8. El compuesto de la reivindicación 7, en donde cada R8 se selecciona independientemente de halógeno, -CN, alquilo, alcoxi, haloalcoxi, y haloalquilo.

9. El compuesto de la reivindicación 8, en donde cada R8 es Cl.

10. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde R5 es H.

11. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en donde R5 es F.

12. El compuesto de la reivindicación 1 que tiene la estructura:

o una sal farmacéuticamente aceptable, o un solvato farmacéuticamente aceptable de la misma.

13. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-12, o una sal farmacéuticamente aceptable, o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

14. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-12, o una sal farmacéuticamente aceptable, o solvato farmacéuticamente aceptable de la misma, para uso como medicamento.

15. El compuesto, sal o solvato para su uso de la reivindicación 14, para su uso en el tratamiento de la fibrosis o un trastorno caracterizado por fibrosis.