ES2861124T3 - Un inhibidor del receptor de estradiol o receptor de andrógenos para usar en el tratamiento de una afección cancerosa o no cancerosa - Google Patents

Un inhibidor del receptor de estradiol o receptor de andrógenos para usar en el tratamiento de una afección cancerosa o no cancerosa Download PDF

Info

Publication number
ES2861124T3
ES2861124T3 ES12840836T ES12840836T ES2861124T3 ES 2861124 T3 ES2861124 T3 ES 2861124T3 ES 12840836 T ES12840836 T ES 12840836T ES 12840836 T ES12840836 T ES 12840836T ES 2861124 T3 ES2861124 T3 ES 2861124T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
molecule
pro
arg
ala
lys
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES12840836T
Other languages
English (en)
Inventor
Mark Eccleston
Satu Vainikka
George Steven Morris
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
ValiRx PLC
Original Assignee
ValiRx PLC
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by ValiRx PLC filed Critical ValiRx PLC
Application granted granted Critical
Publication of ES2861124T3 publication Critical patent/ES2861124T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/08—Tripeptides
    • C07K5/0821—Tripeptides with the first amino acid being heterocyclic, e.g. His, Pro, Trp
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/643—Albumins, e.g. HSA, BSA, ovalbumin or a Keyhole Limpet Hemocyanin [KHL]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A61K47/646—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent the entire peptide or protein drug conjugate elicits an immune response, e.g. conjugate vaccines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A61P15/08—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives for gonadal disorders or for enhancing fertility, e.g. inducers of ovulation or of spermatogenesis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/24—Drugs for disorders of the endocrine system of the sex hormones
    • A61P5/26—Androgens
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/705—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants
    • C07K14/72—Receptors; Cell surface antigens; Cell surface determinants for hormones
    • C07K14/721—Steroid/thyroid hormone superfamily, e.g. GR, EcR, androgen receptor, oestrogen receptor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2869—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against hormone receptors
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/10—Tetrapeptides
    • C07K5/1024—Tetrapeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/06—Linear peptides containing only normal peptide links having 5 to 11 amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/04—Linear peptides containing only normal peptide links
    • C07K7/08—Linear peptides containing only normal peptide links having 12 to 20 amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/689—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to pregnancy or the gonads
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/705—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • G01N2333/72—Assays involving receptors, cell surface antigens or cell surface determinants for hormones
    • G01N2333/723—Steroid/thyroid hormone superfamily, e.g. GR, EcR, androgen receptor, oestrogen receptor
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/02—Screening involving studying the effect of compounds C on the interaction between interacting molecules A and B (e.g. A = enzyme and B = substrate for A, or A = receptor and B = ligand for the receptor)
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/36—Gynecology or obstetrics
    • G01N2800/364—Endometriosis, i.e. non-malignant disorder in which functioning endometrial tissue is present outside the uterine cavity

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Gynecology & Obstetrics (AREA)
  • Pregnancy & Childbirth (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Virology (AREA)

Abstract

Una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src y un receptor de andrógenos (AR) o un receptor de estradiol (ER), para un uso en la prevención o el tratamiento de una afección no cancerosa en un sujeto, o para un uso en la prevención o el tratamiento de una afección cancerosa en un sujeto que es fértil y cuya fertilidad debe conservarse, en la que la molécula comprende la estructura: Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp, o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp, o uno de sus fragmentos o derivados, en la que B es un primer resto químico, j es 0 o 1, n es un número entero de 1-10, X es cualquier aminoácido, r es un número entero de 0 a 2, m es un número entero de 1 a 3, R es un segundo resto químico, p es 0 o 1, y [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n] es el péptido retro-inverso de [(Pro)n-Xr-His-Pro- His-Ala-Arg-Ile-Lys], y en la que la molécula es un péptido con una longitud de entre 3 y 57 aminoácidos, y en la que la molécula no reduce ni previene la fertilidad en el sujeto, en la que el derivado comprende uno o más aminoácidos químicamente derivatizados mediante la reacción de un grupo lateral funcional y/o uno o más derivados de aminoácidos naturales de los veinte aminoácidos convencionales, y en la que la afección no cancerosa es una afección reproductiva, tal como una afección ginecológica, o es una afección no cancerosa seleccionada del grupo que consiste en: endometriosis, quistes ováricos, hiperplasia de pólipos fibroides, neoplasia, sangrado anovulatorio y crecimiento endometrial en el escroto, vejiga o próstata, en la que la afección cancerosa es una afección reproductiva, tal como una afección ginecológica, o es una afección cancerosa seleccionada del grupo que consiste en: fibroides uterino, hiperplasia de pólipos fibroides, cáncer ovárico, cáncer de vejiga, cáncer cervical, cáncer uterino, cáncer testicular y cáncer de próstata.

Description

DESCRIPCIÓN
Un inhibidor del receptor de estradiol o receptor de andrógenos para usar en el tratamiento de una afección cancerosa o no cancerosa
La presente descripción se refiere a un uso médico de moléculas y, en particular, al uso de moléculas para tratar afecciones en las que un factor contribuyente es una actividad del receptor de andrógenos ("androgen receptor", AR) y/o del receptor de estradiol ("estradiol receptor", ER). La invención se define en las reivindicaciones.
La endometriosis es una enfermedad prevalente en mujeres en edad reproductiva, en la que las células del revestimiento del útero surgen y se desarrollan fuera de la cavidad uterina, de forma más habitual en los ovarios. Tiene propensión a seguir una trayectoria crónica y recurrente después del tratamiento, que conduce a dolor pélvico crónico debilitante e infertilidad. Es la principal causa de admisión en el hospital por dolor abdominal e infertilidad y se cree que aparece en 5-10% de las mujeres.
Los métodos actuales para tratar la endometriosis tienen numerosos inconvenientes.
Los fármacos antiinflamatorios no esteroideos ("non-steroidal anti-inflammatories", NSAID), tales como ibuprofeno y naproxeno, tratan la inflamación provocada por la endometriosis, así como alivian el dolor y las molestias; sin embargo, pueden provocar náuseas, vómitos y diarrea. El uso a largo plazo también puede provocar irritación gastrointestinal, lesiones renales y un mayor riesgo de ataques cardíacos e ictus, y puede reducir la eficacia de la aspirina para reducir acontecimientos cardiovasculares adversos. Cuando se toman con antibióticos con base de quinolona, los NSAID pueden inducir ataques.
Puede recetarse paracetamol y codeína (por sí sola o con paracetamol) a las pacientes con endometriosis, pero a menudo provocan estreñimiento, que puede agravar los síntomas.
Desde finales de la década de los cincuenta, el sostén de la gestión de los síntomas de la endometriosis ha sido la píldora anticonceptiva oral combinada. Aunque no es curativa, la píldora en general se tolera bien y alivia los principales síntomas del dolor suprimiendo el ciclo menstrual. El régimen de tratamiento varía de un ciclo de tres semanas de toma/una semana de descanso, que habitualmente se usa para la anticoncepción, a un ciclo de tres a cuatro meses de toma/una semana de descanso en el caso de enfermedad grave. Los efectos secundarios habituales incluyen sangrado vaginal irregular, retención de fluidos, hinchamiento abdominal, ganancia de peso, aumento del apetito, náuseas, cefaleas, sensibilidad a la presión en los pechos y depresión. Una desventaja significativa es el efecto anticonceptivo y, por tanto, la píldora anticonceptiva no resulta adecuada para las mujeres que desean conservar su fertilidad.
La progesterona sintética (por ejemplo, progestina/progestágenos) evita la ovulación y se ha usado con éxito para tratar la endometriosis desde mediados de la década de los cincuenta, por ejemplo, como un dispositivo intrauterino (por ejemplo, el DIU Mirena). Además del efecto anticonceptivo obvio, otros efectos secundarios incluyen cambios en el estado de ánimo, hinchamiento, sangrado irregular y ganancia de peso.
Se han usado antiprogestágenos, tales como derivados de testosterona sintéticos (por ejemplo, danzol y gestrinona) para inducir un estado similar a la menopausia disminuyendo los niveles de estrógeno y progesterona naturales; sin embargo, pueden inducir una ganancia de peso, acné, crecimiento de vello y voz más grave.
Los análogos de la hormona liberadora de gonadotropina ("gonadotropin-releasing hormone", GnRH) (por ejemplo, goserelina, nafarelina, leuprorelina/leuprona y triptorelina) también inducen un estado menopáusico artificial bloqueando la producción de estrógeno. Sin embargo, los efectos secundarios habituales incluyen sofocos, sequedad vaginal y disminución de la libido. El uso a largo plazo, por ejemplo, durante más de seis meses, está asociado con una pérdida ósea que conduce a la osteoporosis.
En fechas más recientes, se ha explorado el uso de inhibidores de aramatasa (por ejemplo, letrozol y anastrozol), que bloquean la conversión de la testosterona en estrógeno, en combinación con agonistas de GnRH que son necesarios para evitar la sobreestimulación de los ovarios y el desarrollo de quistes ováricos en mujeres premenopáusicas. Sin embargo, son necesarios calcio, vitamina D y bisfosfonatos para aliviar la pérdida ósea asociada con una terapia larga.
Pueden emplearse tres tipos principales de intervenciones quirúrgicas para combatir la endometriosis. En primer lugar, puede usarse la laparoscopia mínimamente invasiva ("keyhole"), en la que una ablación por calor, láser o eléctrica elimina lesiones, a menudo durante un procedimiento diagnóstico. El tiempo típico hasta el examen laparoscópico puede ser mayor de ocho años, y los síntomas con frecuencia recurren debido a la retirada incompleta de lesiones y/o a no haber podido identificar lesiones ocultas. En segundo lugar, puede realizarse una laparotomía para acceder a la cavidad abdominal; sin embargo, esta es una intervención quirúrgica mayor con riesgos asociados y una estancia prolongada en el hospital. La tercera opción final es una histerectomía, pero incluso esta no es curativa y las lesiones pueden volver, en especial si no se retiran los ovarios.
Ngó et al. (J. Pathol., 2010, 222:148-157) analizan el potencial de controlar la progresión de la endometriosis in vitro e in vivo, e identifican la vía de ERK como nueva diana para tratar la endometriosis. Sin embargo, los autores recalcan que son necesarios más estudios clínicos para evaluar los efectos y la tolerabilidad en seres humanos, y no se menciona la conservación de la fertilidad.
Por consiguiente, sigue siendo necesario tratar la endometriosis y/u otras afecciones en las cuales una actividad de los AR y/o ER es un factor contribuyente, de un modo que conserve la fertilidad, y que preferiblemente no tenga tantas desventajas como las indicada anteriormente.
De modo sorprendente e inesperado, los inventores ahora han demostrado que la reducción de la interacción entre la tirosina quinasa Src y AR o ER puede proporcionar un alivio sintomático para los pacientes con endometriosis y, al mismo tiempo, no tiene un efecto anticonceptivo.
Se sabe que tanto AR como ER interaccionan con la tirosina quinasa Src y, potencialmente, con otras quinasas de la familia Src. El receptor AR se une al dominio SH3 de Src (Migliaccio et al. (Oncogene, 2007, 26:6619)). Los dominios SH3 tienen una longitud de 50-70 aminoácidos y a menudo aparecen en proteínas citoesqueléticas y de transducción de señales en eucariotas. Los dominios se unen a péptidos ricos en prolina y, con ello, desempeñan un papel principal en la regulación de la actividad quinasa, así como en la localización y el reconocimiento del sustrato. El recepto ER se une al dominio SH2 de Src (Migliaccio et al. (Cancer Research, 2005, 65(22):10585-93)). Los dominios SH2 en general tienen una longitud de aproximadamente 100 aminoácidos y generalmente se unen a un resto tirosina fosforilado en el contexto de un motivo peptídico más largo en una proteína diana.
Aunque no se pretenda limitación alguna por la teoría, los inventores creen que reduciendo la interacción entre una quinasa de la familia Src y AR o ER, la regulación no genómica de la transducción de señales por hormonas esteroideas puede inhibirse selectivamente (por ejemplo, la activación de una señalización de quinasas de la familia Src, la expresión de ciclina D1 y la síntesis de ADN), mientras que, al mismo tiempo, se conserva la regulación genómica de la transcripción de señales por las hormonas esteroideas. De esta forma, se evitan muchos de los efectos secundarios asociados con el bloqueo de hormonas esteroideas o la ablación convencionales (que abolen los efectos genómicos y no genómicos) y el tratamiento puede ser más sostenido. Además, los inventores han descubierto que la reducción de la interacción entre una quinasa de la familia Src y AR o ER, de forma sorprendente, no tiene un efecto anticonceptivo. Esto contrasta absolutamente con los tratamientos existentes. La conservación de la fertilidad representa un avance significativo en el tratamiento de la endometriosis puesto que, en la actualidad, el tratamiento con antiandrógenos y/o antiestrógenos debe suspenderse para permitir la concepción, y esta suspensión puede conducir a la recurrencia de la enfermedad. Por tanto, los inventores creen que una actuación sobre esta interacción será útil para combatir la endometriosis y/u otras afecciones en las cuales una actividad de los AR y/o ER desempeña un papel.
Por consiguiente, un primer aspecto de la invención proporciona una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src y un AR o ER, para su uso en la prevención o el tratamiento de una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, o para su uso en la prevención o el tratamiento de un trastorno cancerosos en el que una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto que desea conservar la fertilidad, o para su uso en la prevención o el tratamiento de una afección ginecológica en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto.
De modo similar, la presente descripción proporciona el uso de una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src y un AR o ER en la fabricación de un medicamento para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, o para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto que desea conservar la fertilidad, o para prevenir o tratar una afección ginecológica en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto.
De modo similar, la presente descripción proporciona un método para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, o para prevenir o tratar una afección cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto que desea conservar la fertilidad, o para prevenir o tratar una afección ginecológica en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, comprendiendo dicho método administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad eficaz de una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src y un AR o ER.
En "prevenir o tratar" una afección en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente se incluye el significado de que la invención puede usarse para aliviar los síntomas del trastorno (es decir, un uso paliativo), o para tratar el trastorno (por ejemplo, mediante la inhibición o la eliminación del agente causal), o para prevenir el trastorno (es decir, un uso profiláctico, previniendo el agravamiento o la progresión de los síntomas o reduciendo la progresión de un trastorno).
Preferiblemente, la afección en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente se previene o se trata en un sujeto mamífero, tal como un ser humano. Como alternativa, el sujeto puede ser un animal, por ejemplo, un animal domesticado (por ejemplo, un perro o un gato), un animal de laboratorio (por ejemplo, un roedor, ratón, rata o conejo de laboratorio) o un animal importante en la agricultura (concretamente, ganado), por ejemplo, ganado vacuno, ovejas, caballos o cabras. El sujeto puede ser hembra o macho.
En una quinasa de la familia Src se incluye cualquier quinasa de la familia Src. Por ejemplo, la quinasa puede ser cualquiera que no sea una tirosina quinasa seleccionada de Src, Yes, Fyn y Fgr (es decir, una quinasa de la subfamilia SrcA), Lck, Hck, Blk y Lyn (es decir, una quinasa de la subfamilia SrcB) y Frk (Amanchy et al., Proteome Res., 2008, 7(8):3447). Lo más preferiblemente, la quinasa de la familia Src es una quinasa Src.
En una quinasa de la familia Src se incluye el significado de una quinasa de la familia Src humana, tal como una quinasa Src humana, en un receptor de andrógenos (AR) se incluye el significado de AR humanos, y en un receptor de estradiol (ER) se incluye el significado de ER humanos, cuyas secuencias se proporcionan en Migliaccio et al. (Cancer Research, 2005, 65(22):10585-93), Migliaccio et al. (Oncogene, 2007, 26:6619), Venter et al. (Science, 2001, 291(5507):1304-51) y el documento Wo 2008/113770 . Se apreciará que existe una variabilidad natural con respecto a las secuencias de genes y ARNm, y que dicha variabilidad se incluye dentro del significado de cada uno de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src), AR y ER, según se definen en la presente.
Los variantes de la quinasa de la familia Src humana (por ejemplo. quinasa Src), AR y/o ER también se incluyen, con la condición de que compartan una o más actividades de la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src), AR o ER originarios. En otras palabras, los variantes son variantes funcionales. Por ejemplo, los variantes pueden compartir al menos 60 % de identidad de secuencia, por ejemplo, al menos 65 %, 70 %, 75 %, 80 % y 85 % de identidad de secuencia, y más preferiblemente 90 %, 95 % o 99 % de identidad de secuencia con la correspondiente secuencia humana. Las variaciones incluyen inserciones, deleciones y sustituciones, conservativas o no conservativas. Las "sustituciones conservativas" incluyen combinaciones, tales como Gly, Ala; Val, Ile, Leu; Asp, Glu; Asn, Gln; Ser, Thr; Lys, Arg; y Phe, Tyr.
Para cada uno de la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src), AR y ER, también se incluyen los ortólogos de la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src), AR y ER humanos. Los ejemplos de homólogos adecuados de las quinasas de la familia Src, AR y ER incluyen los procedentes de ratones y ratas. Otros ortólogos incluyen los procedentes de las especies listadas en la figura 3. Se apreciará que existe una variabilidad natural con respecto a las secuencias de genes y ARNm que codifican los ortólogos de cada uno de la quinasa de la familia Src humana, AR y ER, y que dicha variabilidad se incluye dentro del significado de un homólogo de una quinasa de la familia Src, AR y ER, según se define.
En una realización, la molécula es una molécula que inhibe o previene una interacción entre el dominio SH3 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos. Los detalles de esta interacción se proporcionan en Migliaccio et al. (Oncogene, 2007, 26:6619).
En el "dominio SH3" de una quinasa de la familia Src se incluye el significado del dominio de homología-3 de Src N-terminal de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src). Los dominios SH3 generalmente tienen una longitud de 50-70 aminoácidos y se unen a péptidos ricos en prolina. Los trabajos de Migliaccio et al. (EMBO J., 2000, 19:5406-5417) han demostrado la importancia del dominio SH3 de la quinasa Src en su interacción con AR. En otra realización, la molécula es una molécula que inhibe o previene una interacción entre el dominio SH2 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de estradiol. Los detalles de esta interacción se proporcionan en Migliaccio et al. (Cancer Research, 2005, 65(22):10585-93).
En el "dominio SH2" de una quinasa de la familia Src se incluye el significado del dominio de homología-2 de Src de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src). Los dominios SH2 en general tienen una longitud de aproximadamente 100 aminoácidos y generalmente se unen a restos tirosina fosforilados.
Con respecto al sujeto mamífero que se va a tratar, se apreciará que la molécula es una molécula que puede inhibir o prevenir la interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, de esta especie de mamífero. Por ejemplo, cuando el sujeto mamífero es un ser humano, la molécula puede inhibir o prevenir la interacción entre una quinasa de la familia Src humana (por ejemplo, quinasa Src) y AR humanos o ER humanos, etc.
En una molécula que previene o inhibe la interacción entre una quinasa de la familia Src y AR o ER se incluye el significado de prohibir que, en primer lugar, se forme una interacción, y de reducir una interacción después de que se haya formado. Preferiblemente, la molécula prohíbe o reduce la interacción hasta un nivel indetectable.
En una realización preferida, la molécula previene o inhibe la interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER selectivamente. Por ejemplo, se prefiere que la molécula prevenga o inhiba una interacción entre una quinasa de la familia Src y AR o ER en un grado mayor (por ejemplo, al menos en 5 veces, en 10 veces, en 20 veces, en 50 veces, en 100 veces o en 1000 veces) que con el que previene las interacciones entre una quinasa de la familia Src y cualquier otra molécula. De modo similar, se prefiere que la molécula prevenga o inhiba una interacción entre AR o ER y una quinasa de la familia Src en un grado mayor (por ejemplo, al menos en 5 veces, en 10 veces, en 20 veces, en 50 veces, en 100 veces o en 1000 veces) que con el que previene las interacciones entre AR o ER y cualquier otra molécula.
Si una molécula previene o no previene o inhibe o no inhibe la interacción entre una quinasa de la familia Src y AR o ER se determina de modo conveniente evaluando la interacción entre una quinasa de la familia Src y AR o ER, en presencia y en ausencia de la molécula concreta. Tal como se mencionó anteriormente, se cree que el dominio SH3 de la quinasa Src media en una interacción entre la quinasa Src y AR y, por tanto, puede evaluarse la interacción entre el dominio SH3 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR en presencia y en ausencia de la molécula concreta. De modo similar, se cree que el dominio SH2 de la quinasa Src media en una interacción entre la quinasa Src y ER y, por tanto, puede evaluarse la interacción entre el dominio SH2 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y ER en presencia y en ausencia de la molécula concreta. Los métodos para evaluar la interacción entre dos proteínas son muy conocidos en la técnica, y puede usarse cualquier método adecuado. Los ejemplos incluyen ensayos de inmunoabsorción ligado a enzimas ("enzyme linked immunosorbent assays", ELISA), ensayos de resonancia de plasmón de superficie, ensayos de competición, ensayos basados en chips, inmunocitofluorescencia, tecnología de dos híbridos de levaduras y presentación de fagos, todos los cuales se ejecutan habitualmente en la técnica y se describen, por ejemplo, en Plant et al. (1995), Analyt. Biochem., 226(2), 342-348, y en Sambrook et al. (2001), Molecular Cloning A Laboratory Manual, 3a edición, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, Nueva York. Otros métodos para evaluar las interacciones de proteínas incluyen métodos de ultrafiltración con espectroscopia de masas de nebulización de iones/HPLC u otros métodos físicos y analíticos. Pueden usarse los métodos de transferencia de resonancia de energía de fluorescencia ("Fluorescence Energy Resonance Transfer", FRET), por ejemplo, que son muy conocidos por los expertos en la técnica, y en los que puede medirse la unión de dos entidades marcadas con fluorescencia midiendo la interacción de los marcadores fluorescentes cuando están muy cerca entre sí. En una realización particularmente preferida, se emplea un ensayo de inmunoprecipitación, tal como es descrito en Migliaccio et al. (Oncogene, 2007, 26:6619) para evaluar la interacción entre el dominio SH3 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR y/o la interacción entre el dominio SH2 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y ER.
En una realización preferida, la molécula es una molécula que comprende o que consiste en la estructura: Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp, o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-Xr-(pro)n]m-Rp, o uno de sus fragmentos o derivados,
en la que B es un primer resto químico, j es 0 o 1, n es un número entero de 1-10, X es cualquier aminoácido, r es un número entero de 0 a 2, m es un número entero de 1 a 3, R es un segundo resto químico, p es 0 o 1, y [lys-ilearg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n] es el péptido retro-inverso de [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys].
Debe entenderse que la molécula que comprende o que consiste en la estructura Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp, o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-Xr-(pro)n]m-Rp en general contiene una porción de péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-Xr-(pro)n]m, y opcionalmente otros restos químicos en uno o ambos terminales (es decir, Bj y Rp). En otras palabras, j = 0 y p = 0; o j = 1 y p = 0; o j = 0 y p = 1; o j = 1 y p = 1. En una realización, j = 0 y p = 0 son de tal forma que la molécula es un péptido con la estructura [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-Xr-(pro)n]m.
B y R pueden ser, independientemente, cualquier resto químico, tal como uno de un lípido (por ejemplo, un glicolípido, fosfolípido, esfingolípido), un ácido graso, un triglicérido, glicerol, un resto prenilo o isoprenilo (por ejemplo, restos farnesilo o geranil geranilo), un carbohidrato (por ejemplo, mono- y polisacáridos), un aminoácido, un péptido, un polipéptido o un ácido nucleico, o una de sus combinaciones. Por tanto, el resto puede ser un glicopéptido o un lipopéptido. El resto puede ser un polietilenglicol de alto o bajo peso molecular, por ejemplo, con un peso molecular que varía de 200-70000. Los expertos en la técnica pueden determinar cualquier resto adecuado adicional.
En una realización, B es cualquiera de H, o un grupo acetilo, o uno o una secuencia de aminoácidos proporcionados con un grupo NH2 libre o derivatizado con acetilo.
En otra realización, R es cualquiera de un grupo OH, o un grupo NH2, o uno o una secuencia de aminoácidos con un grupo carboxiamida C-terminal.
Los restos químicos B y R pueden estar unidos opcionalmente a la porción de péptido de la molécula de tal modo que puedan escindirse de la porción de péptido cuando la molécula se administra al sujeto. Por ejemplo, cualquiera de los restos B y R puede comprender un sitio de ruptura que es capaz de romperse cuando la molécula se administra al cuerpo. En general, el sitio de ruptura es un sitio de ruptura de proteasa que es capaz de ser roto por una proteasa que reside en el sujeto.
Los restos químicos B y/o R pueden unirse a la porción de péptido mediante cualquier método adecuado conocido en la técnica. Por ejemplo, los restos B y/o R pueden unirse a la porción de péptido mediante cualquiera de las formas convencionales de reticular polipéptidos, tales como las que se describen en general en O'Sullivan et al., Anal. Biochem., (1979), 100, 100-108. Por ejemplo, la primera porción puede estar enriquecida en grupos tiol, y la segunda porción se hace reaccionar con una agente bifuncional capaz de reaccionar con esos grupos tiol, por ejemplo, el éster de N-hidroxisuccinimida del ácido yodoacético (NHIA) o N-succinimidil-3-(2-piridilditio)propionato (SPDP), un agente reticulante heterobifuncional que incorpora un puente disulfuro entre las especies conjugadas. En general, los enlace amida y tioéter, por ejemplo, que se logran con el éster de m-maleimidobenzoil-N-hidroxisuccinimida, son más estables in vivo que los enlaces disulfuro.
Otros agentes reticulantes útiles incluyen el éster de N-hidroxisuccinimida del ácido S-acetiltioglicólico (SATA), que es un reactivo tiolante para amina primarias que permite la desprotección del grupo sulfhidrilo en condiciones suaves (Julian etal. (1983), Anal. Biochem., 132, 68), diclorhidrato de dimetilsuberimidato y N,N'-o-fenilendimaleimida. Otras formas de unir los restos químicos B y/o R a la porción de péptido incluyen un protocolo de acoplamiento químico, un protocolo para el acoplamiento que emplea la química de "click" o mediante el uso de un protocolo para el acoplamiento que emplea el acoplamiento de Staudinger, que son muy conocidos en la técnica. Los expertos en la técnica pueden determinar otros métodos adecuados.
Cuando los restos químicos B y/o R son péptidos o polipéptidos, se apreciará que la porción de péptido de la molécula y los restos químicos B y/o R pueden ser parte de un polipéptido de fusión, que puede ser codificado por una molécula de ácido nucleico. Por ejemplo, el resto químico B y/o R puede modificarse genéticamente para que contenga la porción de péptido de la molécula usando técnicas de ingeniería genética bien establecidas en la técnica.
De modo conveniente, la porción de péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m de la molécula tiene una longitud de menos de 57 aminoácidos, tal como una longitud de menos de 55, 50, 45, 40, 35, 30, 25, 20 o 15 aminoácidos. Por tanto, la porción de péptido puede tener una longitud de 8 a 60 restos aminoácidos, o una longitud de 10 a 15 restos aminoácidos, o una longitud de 15 a 20 restos aminoácidos, o una longitud de 20 a 25 restos aminoácidos, o una longitud de 25 a 30 restos aminoácidos, o una longitud de 30 a 35 restos aminoácidos, o una longitud de 35 a 40 restos aminoácidos, o una longitud de 40 a 45 restos aminoácidos, o una longitud de 45 a 50 restos aminoácidos, o una longitud de 50 a 55 restos aminoácidos. Preferiblemente, la porción de péptido tiene una longitud de 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24 o 25 aminoácidos y, lo más preferiblemente, tiene una longitud de 10 aminoácidos.
Se entenderá que puede usarse un fragmento de la molécula que comprende o que consiste en la estructura Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp, o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp, con la condición de que sea capaz de prevenir o inhibir una interacción entera una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR y/o ER. Por tanto, es posible que la molécula contenga menos de los 8 aminoácidos mencionados anteriormente. Generalmente, el fragmento es un fragmento de la porción de péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lysile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m de la molécula y, en general, tiene una longitud de al menos 3 aminoácidos, tal como una longitud de al menos 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14 o 15 aminoácidos. Por tanto, la molécula puede comprender o consistir en un fragmento del péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lys-ile-arg-ala-his-prohis-xr-(pro)n]m, con la condición de que sea capaz de prevenir o inhibir una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR y/o ER.
Puede utilizarse un derivado o sal del fragmento, tal como se describe más a fondo a continuación. Por ejemplo, pueden añadirse restos de terminación de cadena a uno o ambos extremos del fragmento para mejorar la estabilidad.
Pueden seleccionarse ejemplos de fragmentos adecuados del grupo que consiste en: HPHARIK, HPHAR, PHPHAR, HPH, PHPH, PPHPH, PPPHPH, PHP, PPHP, PPPHP, PPPH, PPH y PPP. Pueden seleccionarse derivados o sales concretos de los fragmentos del grupo que consiste en: Ac-HPHARIK-NH2, Ac-HPHAR-NH2, Ac-PHPHAR-NH2, Ac-HPH-NH2, Ac-PHPH-NH2, Ac-PPHPH-NH2, Ac-PPPHPH-NH2, Ac-PHP-NH2, Ac-PPHP-NH2, Ac-PPPHP-NH2P, Ac-PPPH-NH2, Ac-PPH-NH2 y Ac-PPP-NH2.
Se apreciará que cuando los restos B y/o R son péptidos, la molécula entera puede ser un péptido y que dicho péptido puede tener una longitud mayor que 57 aminoácidos. Sin embargo, si la molécula entera es un péptido, se prefiere que tenga una longitud menor que 150 aminoácidos, tal como una longitud menor que 140, 130, 120, 110, 100, 90, 80, 70 o 60 aminoácidos.
En general, la molécula tiene un peso molecular menor que 50 kDa, tal como menor que 40, 30, 20, 10 o 5 kDa. Generalmente, la molécula tiene un peso molecular entre 1000 y 5000 Da. Por tanto, la molécula puede tener un peso molecular de aproximadamente 4500, 4000, 3500, 3000 o 2500 Da, o un peso molecular de entre 1000 y 2500 Da.
En una realización, n es cualquiera de 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 o 10, y lo más preferiblemente, n = 3. En otra realización, m es cualquiera de 1, 2 o 3, y lo más preferiblemente, m = 1. Por tanto, en una realización particularmente preferida, n es 3 y m es 1.
Xr representa un tramo de 1 o 2 restos aminoácidos que pueden ser, independientemente o ambos, cualquier resto aminoácido. Por tanto, los restos aminoácidos representados por Xr pueden ser cualquier resto aminoácido natural que es codificado por el ADN, seleccionado de alanina (Ala, A), arginina (Arg, R), asparagina (Asn, N), ácido aspártico (Asp, D), cisteína (Cys, C), glutamina (Gin, Q), ácido glutámico (Glu, E), glicina (Gly, G), histidina (His, H), isoleucina (lie, I), leucina (Leu, L), lisina (Lys, K), metionina (Met, M), fenilalanina (Phe, F), prolina (Pro, P), serina (Ser, S), treonina (Thr, T), triptófano (Trp, W), tirosina (Tyr, Y) y valina (Val, V). Sin embargo, en los casos en que la porción de péptido no se prepara mediante expresión a partir de un polinucleótido, los restos aminoácidos representados por Xr pueden comprender uno o más restos aminoácidos que no son codificados por el ADN, incluyendo los descritos anteriormente. En una realización, r es 0 y, en una realización alternativa, r es 1 y X es un resto treonina.
Para evitar dudas, la molécula no es AR o ER.
Aunque no se pretenda limitación alguna por la teoría, el inventor cree que el péptido PPPHPHARIK es la porción del AR humano que media en la interacción con el dominio SH3 de una quinasa de la familia Src. Por tanto, en una realización particularmente preferida, la porción de péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lys-ile-arg-alahis-pro-his-xr-(pro)n]m de la molécula es PPPHPHARIK, o su péptido retro-inverso, kirahphppp.
El péptido PPPHPHARIK es equivalente a los restos aminoácidos 377-386 del AR humano y, aunque no se pretenda limitación alguna por la teoría, el inventor cree que las correspondientes porciones de AR de otras especies compartirán la misma actividad. En una "correspondiente porción" se incluye el significado de la secuencia de restos aminoácidos en otro AR que se alinea con la secuencia de aminoácidos concreta en el AR humano cuando el AR humano y el otro AR se comparan, por ejemplo, usando una herramienta de alineación, tal como MacVector o CLUSTALW. Por tanto, en otra realización preferida, la porción de péptido es un péptido que se corresponde con la secuencia de aminoácidos en las posiciones 377-386 (PPPHPHARIK) del AR humano. Por ejemplo, el correspondiente péptido en AR de ratón y de rata es PPTHPHARIK y, por tanto, la porción de péptido puede ser PPTHPHARIK, o su péptido retro-inverso, kirahphtpp. Se proporcionan los correspondientes péptidos en una selección de otras especies en la figura 3 y, por tanto, la porción de péptido puede ser cualquiera de los péptidos enumerados en la figura 3, o sus péptidos retro-inversos. Preferiblemente, el péptido PPPHPHARIK se administra a sujetos humanos, y el péptido PPTHPHARIK se administra a sujetos ratones o ratas, etc.
La alineación de dos proteínas puede llevarse a cabo usando el programa Clustal W (Thompson et al., 1994). Los parámetros usados pueden ser los siguientes: parámetros de alineamiento apareado Fast: tamaño K-tuple(palabra); 1, tamaño de ventana; 5, penalización de hueco; 3, número de diagonales superiores; 5. Método de puntuación: x porcentaje. Parámetros de alineamiento múltiple: penalización de hueco abierto; 10, penalización de extensión de hueco; 0,05. Matriz de puntuación: BLOSUM.
En una realización particularmente preferida, la molécula comprende o consiste en el péptido PPPHPHARIK o PPTHPHARIK.
La porción de péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m o uno de sus fragmentos de la molécula definida anteriormente se prepara generalmente usando técnicas de química de proteínas, por ejemplo, usando la proteólisis parcial (de forma exolítica o endolítica), o mediante síntesis de novo. Como alternativa, los péptidos pueden prepararse mediante la tecnología del ADN recombinante. Las técnicas adecuadas para la clonación, la manipulación, la modificación y la expresión de ácidos nucleicos y la purificación de las proteínas expresadas son muy conocidas en la técnica y se describen, por ejemplo, en Sambrook et al. (2001), "Molecular Cloning, a Laboratory Manual", 3a edición, Sambrook et al. (eds.), Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, EE. UU.
La porción de péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m o uno de sus fragmentos de la molécula definida anteriormente también pueden sintetizarse de modo químico, por ejemplo, mediante la síntesis de péptidos en fase sólida de Merrifield et al. (1964). Como alternativa, la porción de péptido puede sintetizarse usando métodos en disolución convencionales (véase, por ejemplo, Bodanszky, 1984, y Dugas et al., 1981). Los péptidos recién sintetizados pueden purificarse, por ejemplo, mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), y pueden caracterizarse usando, por ejemplo, espectrometría de masas o análisis de la secuencia de aminoácidos.
Se apreciará que otras moléculas adecuadas pueden incluir cualquier anticuerpo contra una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) o contra cualquiera de AR y ER que sea capaz de prevenir o inhibir la interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER. Tal como se mencionó previamente, el inventor cree que el dominio SH3 de la quinasa Src y los restos aminoácidos 377-386 de AR median en la interacción entra la quinasa Src y AR. Por tanto, se entenderá que las moléculas adecuadas que inhiben o previenen una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER incluyen cualquier anticuerpo contra el dominio SH3 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) o un anticuerpo que se une a AR en una posición que corresponde con los aminoácidos 377-386 del AR humano (por ejemplo, un anticuerpo contra un péptido que tiene la estructura (Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys, en la que n es un número entero de 1-10, X es cualquiera aminoácido, y r es un número entero de 0 a 2, tal como un anticuerpo contra PPPHPHARIK o PPTHPHARIK). De modo similar, se cree que el dominio SH2 de la quinasa Src media en la interacción entre la quinasa Src y ER. Por tanto, se entenderá que las moléculas adecuadas que inhiben o previenen una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER incluyen cualquier anticuerpo contra el dominio SH2 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src). Preferiblemente, el anticuerpo previene o inhibe la interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER selectivamente, tal como se analizó anteriormente.
Tal como se emplea en la presente, el término "anticuerpo" incluye, pero no se limita a un anticuerpo policlonal, monoclonal, quimérico, monocatenario, fragmentos Fab y fragmentos producidos por un banco de expresión de Fab. Estos fragmentos incluyen fragmentos de anticuerpos enteros que conservan su actividad de unión con una sustancia diana, fragmentos Fv, F(ab') y F(ab')2, así como anticuerpos monocatenarios (scFv), proteínas de fusión y otras proteínas sintéticas que comprenden el sitio de unión al antígeno del anticuerpo. También se incluyen anticuerpos de dominio (dAb), diacuerpos, anticuerpos de camélido y anticuerpos de camélido modificados. Además, para la administración a seres humanos, los anticuerpos y sus fragmentos pueden ser anticuerpos humanizados, que en la actualidad son muy conocidos en la técnica (Janeway et al. (2001), Immunobiology., 5a ed., Garland Publishing).
Los expertos en la técnica pueden preparar anticuerpos adecuados descritos anteriormente que se unen a regiones concretas de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) o AR y ER, usando tecnologías bien establecidas durante mucho tiempo en la técnica. Los métodos para la preparación de anticuerpos monoclonales y fragmentos de anticuerpo son muy conocidos en la técnica e incluyen la tecnología del hibridoma (Kohler y Milstein (1975), "Continuous cultures of fused cells secreting antibody of predefined specificity", Nature, 256:495-497); presentación de anticuerpos en la superficie de fagos (Winter et al. (1994), "Making antibodies by phage display technology", Annu. Rev. Immunol., 12:433-455); presentación de ribosomas (Schaffitzel et al. (1999), "Ribosome display: an in vitro method for selection and evolution of antibodies from libraries", J. Immunol. Methods, 231:119-135); y selección iterativa de colonias en filtros (Giovannoni et al. (2001), "Isolation of anti-angiogenesis antibodies from a large combinatorial repertoire by colony filter screening", Nucleic Acids Res., 29:E27). Además, se describen anticuerpos y fragmentos de anticuerpo adecuados para su uso en la presente invención, por ejemplo, en las siguientes publicaciones: " Monoclonal Hybridoma Antibodies: Techniques and Application", Hurrell (CRC Press, 1982); " Monoclonal Antibodies: A Manual of Techniques", H. Zola, CRC Press, 1987, ISBN: 0-84936-476­ 0; " Antibodies: A Laboratory Manual", 1a edición, Harlow & Lane, eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Nueva York, 1988, ISBN 0-87969-314-2; " Using Antibodies: A Laboratory Manual", 2a edición, Harlow & Lane, eds., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Nueva York, 1999, ISBN 0-87969-543-9; y "Handbook of Therapeutic Antibodies", Stefan Dübel, ed., 1a edición, Wiley-VCH, Weinheim, 2007, ISBN: 3-527-31453-9.
Se apreciará que la molécula de la invención puede comprender la secuencia de un péptido penetrante en células (también conocido como dominio de transducción de proteínas) que facilita la entrada en el interior de células. Tal como se conoce en la técnica, los péptidos penetrantes en células son, en general, péptidos cortos de hasta 30 restos que tienen una carga neta positiva y actúan de una manera independiente de receptor e independiente de la energía (Lindgren et al., 2000; Deshayes et al., 2005a y 2005b; Takeuchi et al., 2006,
Por tanto, cualquiera de los restos químicos B y R mencionados anteriormente puede ser un péptido penetrante en células. Si es así, el péptido penetrante en células se escinde preferiblemente de la porción de la molécula responsable de inhibir o prevenir una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER. Por ejemplo, puede ser escindible dentro de una célula.
La molécula también puede modificarse para que pueda detectarse con más facilidad, por ejemplo, mediante su biotinilación o incorporando cualquier marcador detectable conocido en la técnica, tales como radiomarcadores, marcadores fluorescentes o marcadores enzimáticos.
Los restos aminoácidos de las moléculas descritas en la presente pueden estar en la forma isomérica "L". Sin embargo, cualquier resto L-aminoácido puede ser sustituido por restos en la forma isomérica “D”, con la condición de que las moléculas aún puedan inhibir o prevenir una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER. Esta definición incluye, a menos que se indique específicamente lo contrario, aminoácidos químicamente modificados, que incluyen análogos de aminoácidos (tales como penicilamina, 3-mercapto-D-valina), aminoácidos no proteogénicos naturales (tales como norleucina), y compuestos sintetizados químicamente que tienen propiedades conocidas en la técnica como características de un aminoácido. El término "proteogénico" indica que el aminoácido puede incorporarse en una proteína en una célula a través de vías metabólicas muy conocidas.
Por lo tanto, en una realización, la porción de péptido de la anterior molécula es el péptido retro-inverso del péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m o uno de sus fragmentos (cuyas preferencias incluyen las definidas anteriormente). En un péptido retro-inverso (también conocido como péptidos todo-D-retro o retro-enantio) se incluye el significado de un péptido en el que todos los L-aminoácidos están reemplazados por D-aminoácidos, y los enlaces peptídicos están invertidos. Por tanto, los péptidos están compuestos de D-aminoácidos ensamblados en el orden inverso del de la L-secuencia originaria. El péptido retro-inverso de [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m es [lysile-arg-ala-his-pro-his-Xr(pro)n]m (en el que las letras en minúscula indican los correspondientes D-aminoácidos). Los péptidos retro-inversos pueden sintetizarse mediante métodos conocidos en la técnica, por ejemplo, los descritos en Meziere et al. (1997) J. Immunol., 159:3230-3237. Esta estrategia implica preparar pseudopéptidos que contienen cambios que implican al esqueleto y no a la orientación de las cadenas laterales, que siguen siendo muy similares a las del péptido originario. Los péptidos retro-inversos son mucho más resistentes a la proteólisis.
Para evitar dudas, todas las preferencias indicadas anteriormente para Xr también se aplican a su correspondiente D-aminoácido xr.
La porción de péptido de la molécula descrita anteriormente puede ser un péptido "mimético", es decir, peptidomiméticos que imitan las características estructurales del péptido que comprende o que consiste en la secuencia de aminoácidos según se describió anteriormente.
Pueden diseñarse y sintetizarse peptidomiméticos que no tienen una naturaleza peptídica mediante métodos de química orgánica convencionales. Los peptidomiméticos que no tienen una naturaleza peptídica pueden ser aún más ventajosos en un uso terapéutico, con respecto a la resistencia a la degradación, la permeabilidad y la posible administración oral.
Los peptidomiméticos son moléculas pequeñas que pueden unirse a proteínas imitando ciertos aspectos estructurales de péptidos y proteínas. Se emplean mucho en ciencia y en medicina como agonistas y antagonistas de ligandos de proteínas y péptidos de receptores celulares y otros receptores, y como sustratos y análogos de sustratos para enzimas. Algunos ejemplos son alcaloides de morfina (análogos de endorfinas naturales), penicilinas (semisintéticas), e inhibidores de la proteasa del VIH (sintéticos). Estos compuestos tienen características estructurales que imitan un péptido o una proteína y, como tales, son reconocidos y unidos por otras proteínas. La unión del peptidomimético induce a que la proteína de unión realice la función normal que provoca dicha unión (agonista) o altera dicha función (antagonista, inhibidor).
Un objetivo principal en el diseño de miméticos de péptidos ha sido reducir la susceptibilidad de los miméticos a la ruptura e inactivación por peptidasas. En una estrategia, tal como se describe en Sherman et al. (1990), uno o más enlace amida se reemplazan de una manera fundamentalmente isostérica por una diversidad de grupos funcionales químicos. Esta estrategia discontinua ha tenido cierto éxito, puesto que se han obtenido análogos activos. En algunos casos, estos análogos han demostrado poseer semividas biológicas más largas que sus homólogos naturales. En otra estrategia, se ha usado una diversidad de aminoácidos no codificados o modificados, tales como D-aminoácidos y N-metil-aminoácidos, para modificar péptidos de mamífero. Como alternativa, se ha establecido una conformación bioactiva supuesta mediante una modificación covalente, tal como ciclación, o mediante la incorporación de Y-lactama u otros tipos de puentes (Veber et al., 1978) y Thorsett et al., 1983). Otra estrategia, descrita por Rich (1986), ha sido diseñar miméticos de péptidos mediante la aplicación del concepto de análogo de estado de transición en el diseño de inhibidores de enzimas. Por ejemplo, se sabe que el alcohol segundario de la estatina imita el estado de transición tetraédrico del enlace amida sésil del sustrato de pepsina.
En el documento US 5.552.534 se describen compuestos no peptídicos que imitan o inhiben la actividad química y/o biológica de una diversidad de péptidos. Estos compuestos pueden producirse uniendo a ciertas especies de núcleo central, tales como el anillo tetrahidropiranilo, grupos funcionales químicos que provocan que los compuestos presenten una reactividad cruzada al menos parcial con el péptido. Otras técnicas para preparar peptidomiméticos se describen en los documentos US 5.550.251 y US 5.288.707 .
Pueden usarse paquetes de software disponibles en el mercado para diseñar péptidos pequeños y/o peptidomiméticos, preferiblemente análogos no hidrolizables, como antagonistas/inhibidores específicos. Un software disponible en el mercado adecuado para analizar la estructura cristalina, diseñar y optimizar péptidos pequeños y peptidomiméticos incluye, pero no se limita a: Macromolecular X-ray Crystallography QUANTA Environment (Molecular Simulations, Inc.); TeXsan, BioteX y SQUASH (Molecular Structure Corporation); y Crystallographica (Oxford Cryostsystems).
Se apreciará que una sal o derivado de la molécula descrita en la presente puede ser útil para prevenir o tratar una afección en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente, con la condición de la sal o el derivado pueda prevenir o inhibir una interacción de una quinasa de la familia Src (por ejemplo. quinasa Src) con AR o ER. En "derivativo" se incluye el significado de péptidos (por ejemplo, la porción de péptido ([(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m que es [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m de la anterior molécula) que contienen uno o más restos químicamente derivatizados mediante una reacción de un grupo lateral funcional. Estas moléculas derivatizadas incluyen, por ejemplo, las moléculas en las que grupos amino libres se han derivatizado para formar clorhidratos de amina, grupos p-toluensulfonilo, grupos carbobenzoxi, grupos t-butiloxicarbonilo, grupos cloroacetilo o grupos formilo. Los grupos carboxilo libres pueden derivatizarse para formar sales, metil y etil ésteres u otros tipos de ésteres o hidrazidas. Los grupos hidroxilo libres pueden derivatizarse para formar derivados de O-acilo o O-alquilo. También se incluyen como derivados las porciones de péptido que contienen uno o más derivados de aminoácidos naturales de los veinte aminoácidos convencionales. Por ejemplo, la 4-hidroxiprolina puede sustituir a la prolina; la 5-hidroxilisina puede sustituir a la lisina; la 3-metilhistidina puede sustituir a la histidina; la homoserina puede sustituir a la serina; y la ornitina puede sustituir a la lisina. La derivatización no incluye cambios en los grupos funcionales que cambian un aminoácido por otro.
Algunas modificaciones útiles se diseñan para aumentar la estabilidad y, por tanto, la semivida de las moléculas (por ejemplo, péptidos) en disoluciones, en particular en fluidos biológicos, tales como sangre, plasma o suero, bloqueando la actividad proteolítica en la sangre. Por tanto, un péptido puede contener un grupo estabilizante en uno o ambos terminales. Los grupos estabilizantes típicos incluyen amido, acetilo, bencilo, fenilo, tosilo, alcoxicarbonilo, alquilcarbonilo, benciloxicarbonilo y modificaciones de grupos terminales similares. Otras modificaciones incluyen el uso de un "D" aminoácido en lugar de un "L" aminoácido en los terminales, y un terminal amida en lugar de amino o carboxi terminales para inhibir la actividad exopeptidasa. Por tanto, se apreciará que la porción de péptido [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m que es [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m de la molécula definida anteriormente puede contener un resto de terminación de cadena en uno o ambos extremos, preferiblemente un resto que tenga un peso molecular menor que 200 Da. Otros restos de terminación de cadena incluyen un grupo naftilo y un grupo polietilenglicol. Se apreciará que los péptidos retro-inversos ya son relativamente estables y, por tanto, pueden no requerir restos de terminación de cadena adicionales.
Por consiguiente, en una realización particularmente preferida, la molécula comprende o consiste en la estructura Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2 o Ac-Pro-Pro-Thr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2, en la que Ac es un grupo acetilo.
La molécula de la invención es una molécula que no reduce o previene la fertilidad en un sujeto. Tal como se describe en los ejemplos, el inventor ha demostrado que la administración del péptido Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2 a ratones no afecta su fertilidad y se espera que otras moléculas que previenen o inhiben una interacción entra una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y AR o ER tengan la misma actividad. Los métodos para evaluar la fertilidad en un sujeto son muy conocidos en la técnica e incluyen ensayos, tales como los descritos en los ejemplos.
En una realización, la molécula se administra como una vacuna para generar anticuerpos. Por ejemplo, la molécula que tiene la estructura definida anteriormente puede usarse en la preparación de un anticuerpo que se une específicamente al AR y, por tanto, puede prepararse como una vacuna.
Puede ser deseable unir la molécula a una molécula portadora, tal como una molécula proinmunogénica. Los ejemplos adecuados incluyen albúmina de suero bovina ("bovine serum albumin", BSA) o hemocianina de lapa ("keyhole limpet hemocyanin", KLH). Además, o como alternativa, la molécula puede incluirse en una composición de lípidos, tal como una partícula de lípidos, una nanocápsula, un liposoma o una vesícula de lípidos. La molécula también puede incorporarse en cápsulas de revestimiento para la liberación lenta, como se describe más en detalle a continuación.
En una afección en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente se incluye cualquier afección o trastorno biológico o médico en el que al menos parte de la patología es mediada por una actividad de AR y/o ER. La patología puede ser debida a un aumento o una disminución de la actividad de AR y/o ER. La afección puede estar provocada por la actividad de AR y/o ER o simplemente puede estar caracterizada por una actividad de AR y/o ER. La actividad de AR y/o ER puede contribuir directamente a la afección o puede contribuir indirectamente a la afección. En general, la afección en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente es una afección en la que la patogénesis implica una señalización aberrante a través del AR y/o ER (por ejemplo, una afección en la que la proliferación células es mediada por AR y/o ER). Por ejemplo, la afección puede implicar una señalización aberrante a través de la vía de las quinasas de la familia Src. Estas afecciones pueden diagnosticarse con facilidad usando métodos convencionales disponibles en la técnica.
La afección puede ser no cancerosa (que incluye trastornos proliferativos no cancerosos) o puede ser cancerosa (por ejemplo, cánceres benignos o malignos). La afección puede ser una afección reproductiva, en la cual se incluye el significado de una afección que afecta a algunos o a todos los órganos o tejidos del sistema reproductor. La afección reproductiva puede ser una afección ginecológica, es decir, una afección que afecta al sistema reproductor femenino.
En una primera realización preferida, la afección es una afección no cancerosa, que incluye cualquier trastorno proliferativo en el que AR y/o ER son un factor contribuyente. Los ejemplos incluyen endometriosis, quistes ováricos, hiperplasia de pólipos fibroides, neoplasia, sangrado anovulatorio, crecimiento endometrial en el escroto, vejiga o próstata, y trastornos proliferativos no cancerosos en tejido de mama. Preferiblemente, la afección es una endometriosis.
En una segunda realización preferida, la afección es una afección cancerosa, y el sujeto es un sujeto que desea conservar la fertilidad. En "desea conservar la fertilidad" se incluye el significado de un sujeto en el que se desea no reducir la fertilidad. Por ejemplo, el sujeto puede desear concebir. Por tanto, esto sujetos representan un subgrupo de pacientes con cáncer, puesto que, además de padecer cáncer, también desean conservar la fertilidad. Los ejemplos de dichas afecciones cancerosas incluyen fibroides uterinos, hiperplasia de pólipos fibroides, cáncer ovárico, cáncer de vejiga, cáncer cervical, cáncer uterino, cáncer testicular y cáncer de próstata.
En una tercera realización preferida, la afección (por ejemplo, cancerosa o no cancerosa) es una afección ginecológica. Preferiblemente, la afección es una endometriosis.
Se entenderá que, en la primera y la tercera realización preferida, puede ser particularmente deseable usar la molécula en sujetos que desean conservar la fertilidad. Por tanto, también en estas realizaciones, se prefiere que el sujeto sea un sujeto que desea conservar la fertilidad. Lo más preferiblemente, la afección es una endometriosis, y el sujeto es un sujeto que desea conservar la fertilidad.
Se apreciará que la molécula, o su derivado o fragmento, descrita en la presente puede formularse con un excipiente, disolvente, diluyente o vehículo farmacéuticamente aceptable (incluyendo sus combinaciones). El vehículo, diluyente, disolvente o excipiente debe ser "aceptable" en el sentido de ser compatible con la molécula o derivado y no ser perjudicial para el receptor de los mismos. Generalmente, los vehículos serán agua o disolución salina (por ejemplo, disolución salina fisiológica) que serán estériles y apirógenas. Los excipientes adecuados incluyen manitol y dextrosa. Los vehículos, disolventes, diluyentes y excipientes aceptables para un uso terapéutico son muy conocidos en la técnica farmacéutica, y se describen, por ejemplo, en Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R. Gennaro, ed., 1985). La elección del vehículo, disolvente, excipiente o diluyente farmacéutico puede realizarse con respecto a la vía de administración prevista y la práctica farmacéutica convencional. Las composiciones farmacéuticas pueden comprender como vehículo, excipiente, disolvente o diluyente, o además de estos, cualquier ligante, lubricante, agente suspensor, agente de revestimiento o agente solubilizante adecuado. Pueden proporcionarse conservantes, estabilizantes, tintes e incluso agentes aromatizantes en la composición farmacéutica.
Las formulaciones pueden presentarse de modo conveniente en una forma de dosificación unitaria y pueden prepararse mediante cualquiera de los métodos muy conocidos en la técnica de la farmacia. Estos métodos incluyen la etapa de asociar la molécula con el vehículo que constituye uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan asociando, de modo uniforme e íntimo, el ingrediente activo con vehículos líquidos o vehículos sólidos finamente divididos, o ambos, y después, si es necesario, dar forma al producto.
Las formulaciones según la presente invención adecuadas para la administración oral pueden presentarse como unidades discretas, tales como cápsulas, sellos o comprimidos, que contienen cada una una cantidad predeterminada del ingrediente activo; como un polvo o gránulos; como una disolución o una suspensión en un líquido acuoso o un líquido no acuoso; o como una emulsión líquida de aceite en agua o una emulsión líquida de agua en aceite. El ingrediente activo también puede presentarse como una píldora grande, electuario o pasta.
Puede fabricarse un comprimido mediante compresión o moldeado, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos prensados pueden prepararse comprimiendo, en una máquina adecuada, el ingrediente activo en forma fluida, tal como un polvo o gránulos, opcionalmente mezclado con un ligante (por ejemplo, povidona, gelatina, hidroxipropilmetilcelulosa), lubricante, diluente inerte, conservante, disgregante (por ejemplo, almidón glicolato de sodio, povidona reticulada, carboximetilcelulosa sodio reticulada), agente tensioactivo o dispersante. Los comprimidos moldeados pueden fabricarse moldeando, en una máquina adecuada, una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte. Los comprimidos pueden estar opcionalmente revestidos o llevar marcas y pueden formularse para proporcionar una liberación lenta o controlada del ingrediente activo contenido en su interior usando, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa en proporciones variables para proporcionar el perfil de liberación deseado.
Las formulaciones adecuadas para la administración tópica en la boca incluyen comprimidos para chupar que comprenden el ingrediente activo en una base aromatizada, habitualmente sacarosa y goma arábiga o tragacanto; pastillas que comprenden el ingrediente activo en una base inerte, tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y goma arábiga; y colutorios que comprenden el ingrediente activo en un vehículo líquido adecuado.
Las formulaciones adecuadas para la administración parenteral incluyen disoluciones para inyección estériles acuosas y no acuosas que pueden contener antioxidantes, tampones, bacteriostatos y solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del receptor previsto; y suspensiones estériles acuosas y no acuosas, que pueden incluir agentes suspensores y agentes espesantes. Las formulaciones pueden presentarse en recipientes de dosis única o de múltiples dosis, por ejemplo, ampollas y viales sellados, y pueden conservarse en una condición liofilizada que solo requiera la adición de un vehículo líquido estéril, por ejemplo, agua para inyección, inmediatamente antes del uso. Pueden prepararse disoluciones y suspensiones para inyección improvisadas a partir de polvos, gránulos y comprimidos estériles del tipo que se describió previamente.
Además de los ingredientes mencionados en concreto anteriormente, las formulaciones pueden incluir otros agentes convencionales en la técnica con respecto al tipo de formulación en cuestión, por ejemplo, los que son adecuados para la administración oral pueden incluir agentes aromatizantes.
La molécula, o su derivado o fragmento, o una formulación de los mismos, puede administrarse mediante cualquier método convencional, que incluye oral, intranasal e inyección parenteral (por ejemplo, subcutánea o intramuscular). Las vías preferidas incluyen la vía oral, e inyección intravenosa o subcutánea. El tratamiento puede consistir en una sola dosis o una pluralidad de dosis a lo largo de un periodo de tiempo. La molécula, o su derivado, puede formularse en una formulación de liberación sostenida para proporcionar una liberación sostenida a lo largo de un periodo de tiempo prolongado, tal como a lo largo de al menos 2 o 4 o 6 u 8 semanas. Preferiblemente, se proporciona la liberación sostenida a lo largo de al menos 4 semanas.
En una realización particular, la molécula, o su derivado o fragmento, se formula de tal forma que permita la administración directa al sistema reproductor. Por tanto, la molécula, o su derivado o fragmento, puede formularse en un supositorio vaginal o rectal, un tampón intravaginal, un anillo intravaginal, un pesario intravaginal, una esponja intravaginal, o un dispositivo intrauterino (DIU) medicado.
Se apreciará que la invención incluye una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, tal como una molécula que comprende o que consiste en la estructura Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-prohis-xr-(pro)n]m-Rp definida anteriormente, formulada de tal forma que permita la administración directa al sistema reproductor, o que permita una liberación sostenida. Por tanto, la invención incluye una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, tal como una molécula que comprende o que consiste en la estructura Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp o uno de sus derivados o fragmentos, formulada en uno cualquiera de un supositorio vaginal o rectal; un tampón intravaginal; un anillo intravaginal; un pesario intravaginal; una esponja intravaginal; un dispositivo intrauterino (DIU) medicado; o una formulación de liberación sostenida. En otras palabras, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, y dicha molécula está adaptada para la formulación en uno cualquiera de un supositorio vaginal o rectal; un tampón intravaginal; un anillo intravaginal; un pesario intravaginal; una esponja intravaginal; un dispositivo intrauterino (DIU) medicado; o una formulación de liberación sostenida, y cuya composición opcionalmente comprende un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
La cantidad de la molécula, o su derivado o fragmento, que se administra al sujeto es una cantidad eficaz para combatir la afección del sujeto concreto. La cantidad puede ser determinada por el médico.
En una realización, la molécula, tal como la molécula que comprende o que consiste en la estructura Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr (pro)n]m-Rp definida anteriormente, se administra a un sujeto empleando una dosis diaria de entre 1 -1000 ng, tal como una dosis diaria de 1 -900 ng, 1 -800 ng, 1 -700 ng, 1-600 ng, 1-500 ng, 1-400 ng, 1-300 ng, 1-200 ng o 1-100 ng. Por tanto, la molécula, tal como la molécula que comprende o que consiste en la estructura Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-prohis-xr-(pro)n]m-Rp definida anteriormente, puede administrarse a un sujeto usando una dosis diaria de al menos 1 ng, 10 ng, 20 ng, 30 ng, 40 ng, 50 ng, 60 ng, 70 ng, 80 ng, 90 ng o 100 ng, o al menos 150 ng o 200 ng.
En otra realización, la molécula, tal como la molécula que comprende o que consiste en la estructura Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp definida anteriormente, se administra en intervalos (por ejemplo, a diario, dos veces diarias o cada semana) a lo largo de al menos 5, 10, 15, 20, 25, 30, 35, 40, 45, 50, 55 o 60 días, e incluso a lo largo de al menos 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12 o 18 meses, o a lo largo de al menos 2, 3, 4 o 5 años. Cuando la molécula o derivado se administra a intervalos, se entenderá que puede resultar deseable usar diferentes vías de administración a diferentes intervalos. Por ejemplo, la molécula o derivado puede administrarse primero mediante inyección y después administrar una dosis de seguimiento mediante un implante subcutáneo. El intervalo de administración y la duración del tratamiento óptimos dependerán, en general, de la gravedad de la afección.
En una realización, al sujeto se le administra otro agente terapéutico además de la molécula o derivado descritos en la presente. Por ejemplo, cuando la administra la molécula, o su derivado, para prevenir o tratar una afección concreta, puede administrarse otro agente terapéutico conocido por ser útil para prevenir o tratar esa afección. Por tanto, cuando se previene o se trata la endometriosis, el otro agente terapéutico puede ser un agente conocido por prevenir o tratar la endometriosis, cuando se previenen o se tratan los fibroides uterinos, el otro agente terapéutico puede ser un agente conocido por prevenir o tratar los fibroides uterinos, etc.
Generalmente, la afección en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente es un trastorno proliferativo y, por tanto, el otro agente terapéutico puede ser cualquier agente que reduzca la proliferación, tal como cualquiera de un agente citostático o un agente citosídico o un agente anticáncer.
Se apreciará que el otro agente terapéutico puede administrarse al mismo tiempo que la molécula, o su derivado, descrita en la presente (es decir, una administración simultánea opcionalmente en una coformulación) o en un momento diferente a la molécula, o su derivado, descrita en la presente (es decir, una administración secuencial, en la que el otro agente terapéutico se administra antes o después de la administración de la molécula, o su derivado). El otro agente terapéutico puede administrarse del mismo modo que la molécula de la invención descrita en la presente, o usando las vías de administración habituales para ese otro agente terapéutico.
Un segundo aspecto de la invención proporciona una composición que comprende (i) una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, y (ii) un agente terapéutico adecuado para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente, junto con un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable. La composición puede ser una composición farmacéutica que comprende además un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
Las preferencias por la molécula, derivado, otro agente terapéutico, afección y sujeto que se va a tratar incluyen las mencionadas anteriormente con respecto al primer aspecto de la invención. Por ejemplo, la molécula puede comprender o consistir en la estructura:
Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp, o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp, o uno de sus fragmentos o derivados,
en la que B es un primer resto químico, j es 0 o 1, n es un número entero de 1-10, m es un número entero de 1 a 3, R es un segundo resto químico, p es 0 o 1, y [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n] es el péptido retro-inverso de [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]. Lo más preferiblemente, la molécula tiene la estructura Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2 o Ac-Pro-Pro-Thr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2, en la que Ac es un grupo acetilo. Preferiblemente, el sujeto es un ser humano. Preferiblemente, el otro agente terapéutico es un agente adecuado para prevenir o tratar la endometriosis.
Por consiguiente, la invención incluye una composición que comprende (i) una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, y (ii) un agente terapéutico adecuado para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente, junto con un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, para su uso en la prevención o el tratamiento de una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente. La composición puede ser una composición farmacéutica que comprende además un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
De modo similar, la invención incluye el uso de una composición que comprende (i) una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, y (ii) un agente terapéutico adecuado para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente, junto con un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable, en la fabricación de un medicamento para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente. La composición puede ser una composición farmacéutica que comprende además un excipiente, vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.
Se apreciará que la invención incluye una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, para su uso en la prevención o el tratamiento de una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, o para su uso en la prevención o el tratamiento de una afección cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto que desea conservar la fertilidad, o para su uso en la prevención o el tratamiento de una afección ginecológica en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, en el que al sujeto se le administra también un agente terapéutico adecuado para prevenir o tratar dicha afección.
De modo similar, se entenderá que la presente descripción incluye el uso de una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) y un receptor de andrógenos o estradiol, en la fabricación de un medicamento para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, o para prevenir o tratar una afección cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto que desea conservar la fertilidad, o para prevenir o tratar una afección ginecológica en la cual una actividad de Ar y/o ER es un factor contribuyente en un sujeto, en el que al sujeto se le administra también un agente terapéutico adecuado para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente.
Preferiblemente, la molécula puede comprender o consistir en la estructura:
Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp, o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp, o uno de sus fragmentos o derivados,
en la que B es un primer resto químico, j es 0 o 1, n es un número entero de 1-10, m es un número entero de 1 a 3, R es un segundo resto químico, p es 0 o 1, y [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n] es el péptido retro-inverso de [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]. Lo más preferiblemente, la molécula tiene la estructura Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2 o Ac-Pro-Pro-Thr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2, en la que Ac es un grupo acetilo.
Los inventores han descubierto que pueden usarse moléculas que inhiben o previenen una interacción entre una quinasa de la familia Src y AR y/o ER para prevenir o tratar una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente. Por tanto, se apreciará que, mediante la evaluación del efecto de los agentes de ensayo sobre esta interacción, se pueden identificar agentes para prevenir o tratar una afección no cancerosa.
Por consiguiente, otro aspecto proporciona un método para seleccionar un agente para prevenir o tratar un trastorno no canceroso en el cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente, comprendiendo dicho método determinar si un agente de ensayo reduce una interacción entre (a) AR o ER o una de sus porciones, siendo capaz dicha porción de unirse a una quinasa de la familia Src, y (b) una quinasa de la familia Src o una de sus porciones, siendo capaz dicha porción de unirse a AR o ER.
Las preferencias por AR, ER y la quinasa de la familia Src y por la afección no cancerosa incluyen las definidas anteriormente con respecto al primer aspecto de la invención.
Se apreciará que no es necesario proporcionar el AR o ER o la quinasa de la familia Src enteros con el objetivo del método de selección. Pueden usarse porciones del AR o ER que son capaces de unirse a la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src), y pueden usarse porciones de la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) que son capaces de unirse al AR o ER. Por ejemplo, tal como se describió anteriormente, se cree que los dominios SH3 y SH2 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) median en la interacción entre la quinasa la familia Src y cada uno de AR y ER, respectivamente. Por tanto, puede usarse una porción de la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) que corresponde al dominio SH3 o a una parte de este capaz de unirse a AR, o una porción de la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src) que corresponde al dominio SH2 o a una parte de este capaz de unirse a ER. De modo similar, puede usarse una porción de AR que corresponde a los restos aminoácidos 377-386 de AR, que se cree que media en la interacción entre AR y el dominio SH3 de una quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src). Los expertos en la técnica pueden determinar otras porciones adecuadas, y estas se describen, por ejemplo, en Migliaccio et al. (Oncogene, 2007, 26:6619) y Migliaccio et al. (Cancer Research, 2005, 65(22):10585-93).
El agente de ensayo puede ser cualquier agente de ensayo adecuado, que incluye un polipéptido, un anticuerpo, una molécula pequeña, un producto natural, un peptidomimético o un ácido nucleico. Se apreciará que puede seleccionarse un banco de agentes de ensayo como parte de una selección de alta capacidad de procesamiento. Pueden emplearse diversas técnicas para determinar el efecto del agente de ensayo sobre la interacción entre AR o ER y la quinasa de la familia Src (por ejemplo, quinasa Src), o sus porciones, por ejemplo, como se describió anteriormente, y que son muy conocidas en la técnica (por ejemplo, en Migliaccio et al. (Oncogene, 2007, 26:6619) y Migliaccio et al. (Cancer Research, 2005, 65(22):10585-93).
En una realización, el método comprende la etapa de aislar un agente de ensayo que reduce una interacción entre (a) AR o ER o una de sus porciones, siendo capaz dicha porción de unirse a una quinasa de la familia Src, y (b) una quinasa de la familia Src o una de sus porciones, siendo capaz dicha porción de unirse a AR o ER.
Preferiblemente, el agente de ensayo seleccionado es un agente que reduce una interacción entre (a) AR o ER o una de sus porciones, siendo capaz dicha porción de unirse a una quinasa de la familia Src, y (b) una quinasa de la familia Src o una de sus porciones, siendo capaz dicha porción de unirse a AR o ER, en un factor de al menos 10 %, 20 %, 30 %, 40 % o 50 % de la unión original en ausencia del agente de ensayo, y más preferiblemente en un factor de al menos 60 %, 70 %, 80 %, 90 % o 95 %.
En una realización, el método comprende además identificar el agente de ensayo como un agente que previene o trata una afección no cancerosa en la cual una actividad de AR y/o ER es un factor contribuyente. Por ejemplo, el método puede comprender además evaluar la eficacia del agente de ensayo en un ensayo apropiado para la afección concreta en cuestión (por ejemplo, un modelo animal de la afección). Por ejemplo, el método puede usarse para seleccionar un agente para prevenir o tratar la endometriosis, de modo que implique la evaluación del efecto del agente en un modelo de endometriosis. Los modelos adecuados de dichas afecciones son muy conocidos en la técnica.
Se apreciará que el agente de ensayo seleccionado es un agente que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src y un AR o Er , dentro del significado del primer aspecto de la invención y, por tanto, puede utilizarse como tal.
Se apreciará que, en el método descrito en la presente, que puede ser un método para seleccionar fármacos, un término muy conocido por los expertos en la técnica, el agente de ensayo puede ser un compuesto similar a un fármaco o compuesto de partida para el desarrollo de un compuesto similar a un fármaco.
La expresión "compuesto similar a un fármaco" es muy conocido por los expertos en la técnica y puede incluir el significado de un compuesto que tiene características que le hace adecuado para su uso en medicina, por ejemplo, como ingrediente activo en un medicamento. Así, por ejemplo, un compuesto similar a un fármaco puede ser una molécula que puede sintetizarse mediante las técnicas de la química orgánica, menos preferiblemente mediante técnicas de biología molecular o bioquímica, y es preferiblemente una molécula pequeña, que puede ser menor de 5000 dáltones y que puede ser hidrosoluble. Un compuesto similar a un fármaco puede mostrar además características de interacción selectiva con una proteína o proteínas concretas y ser biodisponible y/o ser capaz de penetrar a través de membranas celulares diana o de la barrera hematoencefálica, pero se apreciará que estas características no son fundamentales.
La expresión "compuesto de partida", de modo similar, es muy conocido por los expertos en la técnica y puede incluir el significado de que el compuesto, aunque en sí mismo no es adecuado para su uso como un fármaco (por ejemplo, porque solo es débilmente potente contra su diana prevista, no es selectivo en su acción, es inestable, es poco soluble, es difícil de sintetizar o tiene mala biodisponibilidad), puede proporcionar un punto de partida para el diseño de otros compuestos que puedan tener unas características más deseables.
En una realización, el método se realiza in vitro. En in vitro se incluyen ensayos sin células y ensayos basados en células. Por ejemplo, el método puede realizarse en líneas celulares humanas aisladas o en líneas celulares que pueden manipularse con facilidad dentro de un laboratorio (por ejemplo, Escherichia coli y Saccharomyces cerevisiae).
En una realización alternativa, el método se realiza in vivo, por ejemplo, en modelos animales de las afecciones concretas (por ejemplo, endometriosis).
La invención se describirá a continuación con la ayuda de las siguientes figuras y ejemplos.
Figura 1: Peso del ratón (g) en el estudio de intervalo de dosis.
Figura 2: Crecimiento de lesiones después del tratamiento (mm2) en el estudio de intervalo de dosis.
Figura 3: Homólogos de PPPHPHARIK en una selección de especies.
Ejemplo 1: El péptido Ac-PPPHPHARIK-NH2 muestra eficacia terapéutica contra la endometriosis sin afectar a la fertilidad
Resumen
Se han realizado dos estudios que demuestran la eficacia del péptido Ac-PPPHPHARIK-NH2 (también definido en las tablas 1 -4 como ValiRx1) para tratar la endometriosis sin reducir la fertilidad.
Resultados
En un primer estudio, se generó un total de 4 animales de tratamiento y 5 animales control en un nuevo modelo in vivo de endometriosis (Research Horizons, University of Cambridge, 2009, publicación 8, GB 0715635.9 ). Se cruzaron ratones transgénicos K-rasV12/Ah-Crecon ratones Rosa26Rpara generar ratones transgénicos KrasV12+/-/Ah-Cre+/-/ROSA26R-LacZ+/-. La descendencia F1 se cruzó endogámicamente para generar ratones transgénicos F2 K-rasV12+/-/Ah-Cre+/+/ROSA26R-LacZ+/+. La presencia de los transgenes se determinó mediante PCR usando cebadores específicos de gen para K-ras, Cre y Rosa26R-LacZ. Se recogió tejido de animales donantes previamente tratados con hormonas, etc., y se dividió entre animales de tipo salvaje que después fueron inyectados con el fármaco o con vehículo durante 21 días.
De un total de cuatro animales tratados, tres mostraron una ausencia completa de lesión después de un tratamiento con un no respondedor. En los grupos control, que incluían 5 animales, uno no desarrolló una lesión.
Se diseñó un segundo estudio para evaluar el efecto del péptido sobre la reproducción en ratones sanos y la eficacia contra lesiones autoinjertadas derivadas de un útero reimplantado en el mismo animal (Becker et al., AM. J. Pathol., 178 (4): 1782-91).
Ciclo estral
Se aclimataron durante 1 semana ratones C57BL6 hembra nulíparas de 8-10 semanas. Un grupo de 10 animales se trató con 10 ng del péptido inyectado por vía subcutánea 3 días antes de la experimentación y un grupo de 10 controles se dosificó solo con vehículo. Se tomaron frotis vaginal diarios durante un periodo de 10 días. Se obtuvieron frotis normales en todos los casos.
Reproducción (grupo de tratamiento de hembras)
Se aclimataron durante 1 semana ratones C57BL6 hembra nulíparas de 8-10 semanas. Un grupo de 10 animales hembra se dosificó con 10 ng del péptido inyectado por vía subcutánea 3 días antes de la experimentación y un grupo control de 10 animales se trató solo con vehículo.
Se introdujeron 5 animales C57BL6 macho, y las hembras se comprobaron a diario para la presencia de un tapón mucoso (antes de 9 a.m.). Cuando se registró un tapón mucoso, las hembras se evaluaron para:
a) la duración del posible embarazo (días)
b) el número de crías
c) anomalías en las crías
Todos los animales parieron camadas normales (con la excepción de uno del grupo dosificado).
Reproducción (grupo de tratamiento de machos)
Se aclimataron durante 1 semana ratones C57BL6 nulíparos de 8-10 semanas. Un grupo de 5 animales macho se dosificó con 10 ng del péptido inyectado por vía subcutánea 3 días antes de la experimentación y un grupo control de 5 animales se dosificó solo con vehículo (10 ng diarios SC).
Se introdujeron 10 animales C57BL6 hembra no tratadas en cada grupo, y las hembras se comprobaron a diario para la presencia de un tapón mucoso (antes de 9 a.m.). Cuando se registró un tapón mucoso, las hembras se evaluaron para:
a) la duración del posible embarazo (días)
b) el número de crías
c) anomalías en las crías
Como anteriormente, todos los animales parieron camadas normales.
Reproducción (2 generación procedente de las hembras tratadas)
Las crías de las hembras dosificadas se cruzaron y se comprobó su fertilidad para determinar posibles efectos heredables. Los animales se evaluaron como se indicó anteriormente después de la formación del tapón y no se advirtieron anomalías.
Estudio de prevención de intervalo de dosis
Se trasplantaron ratones C57BL6 hembra nulíparas de 8-10 semanas con 6x tapones de tejido uterino procedente de animales donantes después de una semana de aclimatación. Tres grupos de 5 animales comenzaron con una dosificación diaria inmediata de 1 ng, 10 ng o 100 ng de péptido inyectado por vía subcutánea con el péptido ARP, y un grupo control de 5 animales se trataron solo con vehículo. El crecimiento de lesiones después del tratamiento en el grupo dosificado fue significativamente menor, en comparación con el grupo control (véase la figura 2).
El modelo produjo un excelente establecimiento de lesión (97,67 %-100 %, tabla 4), una reducción en la carga de lesión (6,02 mm2, 5,53 mm2 y 4,52 mm2 frente a 7,18 mm2, tabla 2) y crecimiento (6,23 mm2, 5,72 mm2 y 4,52 frente a 7,18 mm2, tabla 3).
Con respecto a la dosis, existe la opción de sincronizar el ciclo estral mediante una única inyección de estrógeno 2-3 días antes de la cirugía.
Los datos obtenidos de los experimentos descritos anteriormente se ilustran en las figuras 1 y 2 y las tablas 1-4.
Figure imgf000017_0001
Figure imgf000018_0001
Figure imgf000019_0001
Figure imgf000020_0001

Claims (19)

  1. REIVINDICACIONES
    1 Una molécula que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src y un receptor de andrógenos (AR) o un receptor de estradiol (ER), para un uso en la prevención o el tratamiento de una afección no cancerosa en un sujeto, o para un uso en la prevención o el tratamiento de una afección cancerosa en un sujeto que es fértil y cuya fertilidad debe conservarse, en la que la molécula comprende la estructura:
    Bj-[(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys]m-Rp, o Bj-[lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n]m-Rp, o uno de sus fragmentos o derivados,
    en la que B es un primer resto químico, j es 0 o 1, n es un número entero de 1-10, X es cualquier aminoácido, r es un número entero de 0 a 2, m es un número entero de 1 a 3, R es un segundo resto químico, p es 0 o 1, y [lys-ile-arg-ala-his-pro-his-xr-(pro)n] es el péptido retro-inverso de [(Pro)n-Xr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys], y en la que la molécula es un péptido con una longitud de entre 3 y 57 aminoácidos, y en la que la molécula no reduce ni previene la fertilidad en el sujeto, en la que el derivado comprende uno o más aminoácidos químicamente derivatizados mediante la reacción de un grupo lateral funcional y/o uno o más derivados de aminoácidos naturales de los veinte aminoácidos convencionales, y
    en la que la afección no cancerosa es una afección reproductiva, tal como una afección ginecológica, o es una afección no cancerosa seleccionada del grupo que consiste en: endometriosis, quistes ováricos, hiperplasia de pólipos fibroides, neoplasia, sangrado anovulatorio y crecimiento endometrial en el escroto, vejiga o próstata, en la que la afección cancerosa es una afección reproductiva, tal como una afección ginecológica, o es una afección cancerosa seleccionada del grupo que consiste en: fibroides uterino, hiperplasia de pólipos fibroides, cáncer ovárico, cáncer de vejiga, cáncer cervical, cáncer uterino, cáncer testicular y cáncer de próstata.
  2. 2. - Una molécula para un uso según la reivindicación 1, en la que la quinasa de la familia Src es cualquiera de Src, Yes, Fyn, Fgr, Lck, Hck, Blk, Lyn y Frk.
  3. 3. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que n es 3 y m es 1.
  4. 4. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que B es cualquiera de H, o un grupo acetilo, o uno o una secuencia de aminoácidos proporcionados con un grupo NH2 libre o derivatizado con acetilo.
  5. 5. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que R es cualquiera de un grupo OH, o un grupo NH2, o uno o una secuencia de aminoácidos con un grupo carboxiamida C-terminal.
  6. 6. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que el primer y el segundo resto químico B y R comprende independientemente, o ambos comprenden, cualquiera de un lípido, un ácido graso, un polietilenglicol, un triglicérido, glicerol, un resto prenilo o isoprenilo, un carbohidrato, un aminoácido, un péptido, un polipéptido o un ácido nucleico, o una de sus combinaciones.
  7. 7. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que r es 0.
  8. 8. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que la molécula comprende la estructura Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys o Ac-Pro-Pro-Pro-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2, en la que Ac es un grupo acetilo.
  9. 9. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que X es treonina y r es 1.
  10. 10. - Una molécula para un uso según la reivindicación 9, en la que la molécula comprende la estructura Pro-Pro-Thr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys, o Ac-Pro-Pro-Thr-His-Pro-His-Ala-Arg-Ile-Lys-NH2, en la que Ac es un grupo acetilo.
  11. 11. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que la molécula comprende una estructura seleccionada del grupo que consiste en HPHARIK, HPHAR, PHPHAR, HPH, PHPH, PPHPH, PPPHPH, PHP, PPHP, PPPHP, PPPH, PPH y PPP, tal como una molécula que comprende una estructura seleccionada del grupo que consiste en Ac-HPHARIK-NH2, Ac-HPHAR-NH2, Ac-PHPHAR-NH2, Ac-HPH-NH2, Ac-PHPH-NH2, Ac-PPHPH-NH2, Ac-PPPHPH-NH2, Ac-PHP-NH2, Ac-PPHP-NH2, Ac-PPPHP-NH2P, Ac-PPPH-NH2, Ac-PPH-NH2 y Ac-PPP-NH2, en la que Ac es un grupo acetilo.
  12. 12. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que la molécula se administra como una vacuna para generar anticuerpos.
  13. 13. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que la molécula se une a una molécula portadora, tal como albúmina de suero bovina (BSA) o hemocianina de lapa (KLH).
  14. 14. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que la molécula está incluida en una composición de lípidos, tal como una partícula de lípidos, una nanocápsula, un liposoma o una vesícula de lípidos.
  15. 15. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que al sujeto se le administra otro agente terapéutico.
  16. 16. - Una molécula para un uso según la reivindicación 15, en la que el otro agente terapéutico es un agente antiproliferativo, tal como cualquiera de un agente citostático o un agente citosídico o un agente anticáncer.
  17. 17.- Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que el sujeto es un ser humano.
  18. 18. - Una molécula para un uso según cualquier reivindicación anterior, en la que la molécula se formula en cualquiera de un supositorio vaginal o rectal; un tampón intravaginal; un anillo intravaginal; un pesario intravaginal; una esponja intravaginal; un dispositivo intrauterino (DIU) medicado; o una formulación de liberación sostenida.
  19. 19. - Una molécula según se define en la reivindicación 1 que inhibe o previene una interacción entre una quinasa de la familia Src y un receptor de andrógenos o de estradiol formulada en cualquiera de un tampón intravaginal; un anillo intravaginal; un pesario intravaginal; una esponja intravaginal; o un dispositivo intrauterino (DIU) medicado.
ES12840836T 2011-11-01 2012-11-01 Un inhibidor del receptor de estradiol o receptor de andrógenos para usar en el tratamiento de una afección cancerosa o no cancerosa Active ES2861124T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GB1118831.5A GB2496135B (en) 2011-11-01 2011-11-01 Inhibitors of the interaction between a Src family kinase and an androgen receptor or estradiol receptor for treatment of endometriosis
PCT/GB2012/052722 WO2013064830A2 (en) 2011-11-01 2012-11-01 Medical use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2861124T3 true ES2861124T3 (es) 2021-10-05

Family

ID=45375628

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES12840836T Active ES2861124T3 (es) 2011-11-01 2012-11-01 Un inhibidor del receptor de estradiol o receptor de andrógenos para usar en el tratamiento de una afección cancerosa o no cancerosa

Country Status (14)

Country Link
US (2) US10023612B2 (es)
EP (1) EP2773427B1 (es)
JP (2) JP2015505814A (es)
KR (1) KR20140116060A (es)
CN (2) CN104136082B (es)
AU (2) AU2012330952A1 (es)
BR (1) BR112014010432A2 (es)
CA (1) CA2853671A1 (es)
ES (1) ES2861124T3 (es)
GB (1) GB2496135B (es)
IL (1) IL232239B (es)
MY (1) MY198205A (es)
RU (2) RU2684315C2 (es)
WO (1) WO2013064830A2 (es)

Families Citing this family (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB2496135B (en) * 2011-11-01 2015-03-18 Valirx Plc Inhibitors of the interaction between a Src family kinase and an androgen receptor or estradiol receptor for treatment of endometriosis
GB2513615A (en) * 2013-05-01 2014-11-05 Cancer Rec Tech Ltd Medical use
US20230226138A1 (en) 2020-06-01 2023-07-20 Black Cat Bio Limited Compositions and methods for treating infections and netopathy
WO2023243698A1 (en) * 2022-06-15 2023-12-21 Okinawa Institute Of Science And Technology School Corporation Peptides for opioid tolerance by blocking receptors dimerization

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5288707A (en) 1990-08-13 1994-02-22 Sandoz Ltd. Borolysine peptidomimetics
US5552534A (en) 1991-08-22 1996-09-03 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Non-Peptide peptidomimetics
US5550251A (en) 1991-12-12 1996-08-27 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Alicyclic peptidomimetics
RO118566B1 (ro) * 1996-11-19 2003-07-30 Searle & Co Metoda pentru prevenirea si tratamentul unei boli asociata cu angiogeneza
BR9808863A (pt) * 1997-04-14 2001-09-18 Univ California Composições antiestrogênicas peptìdicas e métodos para tratar câncer de mama
AU4494399A (en) * 1998-06-30 2000-01-24 University Of British Columbia, The Inhibitors of androgen-independent activation of androgen receptor
GB0215676D0 (en) 2002-07-05 2002-08-14 Novartis Ag Organic compounds
US7916186B2 (en) 2005-04-07 2011-03-29 Micron Technology, Inc. Anti-eclipse circuitry with tracking of floating diffusion reset level
DE102006027156A1 (de) 2006-06-08 2007-12-13 Bayer Schering Pharma Ag Sulfimide als Proteinkinaseinhibitoren
US7910565B2 (en) 2006-09-01 2011-03-22 Wisconsin Alumni Research Foundation Prostate cancer vaccine
EP2532235A1 (en) 2006-09-22 2012-12-12 Pharmacyclics, Inc. Inhibitors of bruton's tyrosine kinase
PE20121126A1 (es) 2006-12-21 2012-08-24 Plexxikon Inc Compuestos pirrolo [2,3-b] piridinas como moduladores de quinasa
CN101631877A (zh) * 2007-01-09 2010-01-20 百时美施贵宝公司 用于预测可与前列腺细胞中蛋白酪氨酸激酶和/或蛋白酪氨酸激酶途径相互作用和/或对其进行调节的化合物的活性的多核苷酸的鉴定
US20100189776A1 (en) * 2007-03-16 2010-07-29 Cancer Research Technology Ltd Anti-androgen peptides and uses thereof in cancer therapy
EP2276345A4 (en) * 2008-04-24 2012-06-06 Univ California SMALL MOLECULAR INHIBITORS OF THE ANDROGEN RECEPTOR
GB2496135B (en) 2011-11-01 2015-03-18 Valirx Plc Inhibitors of the interaction between a Src family kinase and an androgen receptor or estradiol receptor for treatment of endometriosis
GB2513615A (en) 2013-05-01 2014-11-05 Cancer Rec Tech Ltd Medical use

Also Published As

Publication number Publication date
US20140322306A1 (en) 2014-10-30
AU2012330952A1 (en) 2014-05-15
IL232239B (en) 2021-06-30
BR112014010432A2 (pt) 2017-04-18
CN109806395A (zh) 2019-05-28
AU2017225015A1 (en) 2017-09-28
CA2853671A1 (en) 2013-05-10
WO2013064830A2 (en) 2013-05-10
RU2019109072A (ru) 2019-07-15
JP2015505814A (ja) 2015-02-26
RU2684315C2 (ru) 2019-04-05
GB2496135B (en) 2015-03-18
IL232239A0 (en) 2014-06-30
KR20140116060A (ko) 2014-10-01
CN104136082B (zh) 2019-03-08
RU2014122158A (ru) 2015-12-10
MY198205A (en) 2023-08-11
EP2773427A2 (en) 2014-09-10
CN104136082A (zh) 2014-11-05
US10023612B2 (en) 2018-07-17
GB2496135A (en) 2013-05-08
JP2018012723A (ja) 2018-01-25
EP2773427B1 (en) 2021-01-13
WO2013064830A3 (en) 2013-08-22
AU2017225015B2 (en) 2019-08-01
GB201118831D0 (en) 2011-12-14
US20180273585A1 (en) 2018-09-27

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2479441T3 (es) Tratamiento de cáncer de próstata en estadio metastásico con degarelix
ES2443347T3 (es) Utilización de inhibidores peptídicos permeables celulares de la vía de transducción de señales JNK para el tratamiento de enfermedades cardiovasculares
US20180273585A1 (en) Medical Use
US20200397894A1 (en) Compositions and methods for treating cancer
WO2006135783A2 (en) Compositions and methods for modulating angiogenesis
CN105358704B (zh) Ptd-smad7治疗剂
CN101861160A (zh) 亲吻肽拮抗剂及其用途
AU2021250911A1 (en) Modulators of the src-kinase activitiy for preventing or treating metastatic cancer
US9895410B2 (en) Methods for preventing and treating oral cancers
RU2825641C2 (ru) Способ повышения терапевтической эффективности фексапотида трифлутата при лечении снмп
US20220211860A1 (en) Peptide derivatives and conjugates thereof for treating cancer
BR112021003812A2 (pt) terapias peptídicas para o tratamento de câncer e usos das mesmas
WO2021016667A1 (en) Inhibitors and use thereof in cancer treatment