ES2857192T3 - Conjugado de mitomicina - Google Patents
Conjugado de mitomicina Download PDFInfo
- Publication number
- ES2857192T3 ES2857192T3 ES15803150T ES15803150T ES2857192T3 ES 2857192 T3 ES2857192 T3 ES 2857192T3 ES 15803150 T ES15803150 T ES 15803150T ES 15803150 T ES15803150 T ES 15803150T ES 2857192 T3 ES2857192 T3 ES 2857192T3
- Authority
- ES
- Spain
- Prior art keywords
- ala
- asn
- cancer
- pabc
- peptide
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
- A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
- A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
- A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
- A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
- A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
- A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug, i.e. a dimer, oligomer or polymer of pharmacologically or therapeutically active compounds
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
- A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
- A61K47/65—Peptidic linkers, binders or spacers, e.g. peptidic enzyme-labile linkers
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
Abstract
Un conjugado péptido-fármaco que es: **(Ver fórmula)** o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
Description
DESCRIPCIÓN
Conjugado de mitomicina
Campo de la invención
La presente invención se refiere a conjugados péptido-fármaco y composiciones farmacéuticas que incluyen los conjugados específicos de tumores. La invención se refiere además al uso de tales conjugados y composiciones como agentes antitumorales para el tratamiento del cáncer en mamíferos, particularmente humanos.
Antecedentes y técnica relacionada
Las células cancerosas a menudo sobreexpresan ciertas proteasas en comparación con las células normales. Esto ha impulsado esfuerzos para apuntar a las células cancerosas enlazando un agente terapéutico citotóxico con un péptido que escinde una proteasa tumoral, para liberar el fármaco citotóxico cerca o dentro de las células cancerosas a la vez que conserva o afecta menos sustancialmente a las células normales.
La Patente de Estados Unidos N° 6.214.345 divulga conjugados de fármaco-péptido específicos de tumores que incluyen un conector autoinmolante y se activan selectivamente en el sitio de un tumor, en donde el fármaco puede ser mitomicina o doxorubicina y el conector autoinmolante es alcohol p-aminobencílico.
Las células que expresan asparaginasas son objetivos atractivos para el enfoque del conjugado péptidofármaco, ya que muchos tumores sobreexpresan estas proteasas. Una como la paraginasa, legumaína, ha atraído especial atención a este respecto (Wu et al, Cancer Research 2006; 66: 970- 980; Liu et al, Cancer Research 2003; 63: 2957-2964; Bajjuri et al, ChemMedChem. 2011; 6, 54-59).
La mitomicina, la doxorubicina y la camptotecina han atraído la atención como fármacos empleados en terapias de conjugados péptido-fármaco. La Patente de Estados Unidos N° 7.608.591; Solicitud Publicada de Estados Unidos 20110300147; La Solicitud Publicada de Estados Unidos 20090175873; y la Patente de Estados Unidos N° 8.314.060 divulgan ejemplos de conjugados péptido-fármaco que se dirigen a la legumaína con fármacos que incluyen doxorubicina.
Estos enfoques previos han implicado generalmente la modificación química de la fracción del fármaco, lo que puede afectar adversamente a la eficacia del fármaco. El acoplamiento de péptidos directamente (a través del grupo carboxilo C-terminal) al átomo de aziridina N de la mitomicina produce una amida secundaria, un grupo funcional que típicamente no está sujeto al ataque de proteasas. Además, los estudios sobre mitomicina indican la función de un grupo NH en el anillo de aziridina para la actividad biológica. Por tanto, hay una necesidad de conjugados mejorados que dirijan fármacos antitumorales como la mitomicina a células tumorales que expresan legumaína y otras asparaginasas.
Breve descripción de los dibujos
La Fig. 1 es un gráfico que muestra la velocidad de descomposición del ácido Na-succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [conjugado 8 en la presente] como una función del tiempo cuando se expone al plasma humano.
La Fig. 2 es un gráfico que muestra el peso corporal de ratones Balb/c en función del tiempo después administración de ácido Na-succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina.
La Fig. 3 es un gráfico que muestra la curva de crecimiento tumoral del modelo de cáncer de colon singénico CT-26 subcutáneo en ratones Balb/c después de la administración de ácido Na-succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina.
Sumario de la invención
En un aspecto, la invención proporciona un conjugado péptido-fármaco que es:
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
En un aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende por lo menos un péptido-fármaco de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y por lo menos un portador farmacéuticamente aceptable.
En un aspecto, la invención proporciona un conjugado péptido-fármaco de la invención, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método para tratar el cáncer en un mamífero.
En un aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica de acuerdo con la invención para su uso en un método de tratar el cáncer en un mamífero.
Ciertas realizaciones de la divulgación son conjugados de péptido-fármaco, que comprenden, generalmente: 1) una fracción de péptido que puede escindirse mediante proteasas celulares, unido a 2) un conector autoinmolante, en particular la fracción p-aminobencil carbamoílo o p-aminobencil carbonato, que a su vez se une a 3) una fracción de fármaco citotóxica. En estas realizaciones, la fracción conectora se une a un residuo de asparagina, en cuya posición se produce la escisión proteolítica.
En realizaciones de la divulgación, los conjugados péptido-fármaco tienen la estructura de la Fórmula 1 siguiente:
R-Y-Z-Asn-Conector-D (Fórmula I)
en donde
R comprende un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de
i) un grupo acilo, un grupo carbamoílo, un grupo sulfonilo, grupo fosforilo o un grupo alquilo derivado de un ácido carboxílico C1 a aproximadamente C20 lineal, ramificado o alicíclico, opcionalmente sustituido con de uno a aproximadamente cinco grupos hidroxilo, amina, carboxilo, sulfónico o fosforilo,
ii) un péptido con de uno a aproximadamente cincuenta residuos de L- o D-aminoácidos, y
iii) un polietilenglicol con un peso molecular de 400 a aproximadamente 40.000;
Y es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Ser, Leu, Arg, Pro, Val, Tyr, Phe;
Z es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Asn y Pro;
Asn es un residuo de asparagina;
El conector es una fracción de p-aminobencil carbamoílo o una fracción de p-aminobencil carbonato;
D es una fracción de fármaco antitumoral unida a la fracción conectora, en donde el fármaco se selecciona del grupo que consiste de mitomicina, doxorubicina, aminopterina, actinomicina, bleomicina, 9-amino-camptotecina, N8-acetil espermidina, 1-(2-cloroetil)-1,2-dimetanosulfonil hidrazida, tallisomicina, citarabina, etopósido, camptotecina, taxol, esperamicina, podofilotoxina, anguidina, vincristina, vinblastina, morfolina-doxorubicina, n-(5,5-diacetoxi-pentil)doxorubicina), y derivados de los mismos.
En realizaciones de la divulgación de Fórmula I:
R comprende un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de
i) un grupo acilo derivado de un ácido carboxílico de C1 hasta aproximadamente C20 lineal, ramificado o alicíclico, opcionalmente sustituido con de uno a aproximadamente cinco grupos hidroxilo, amina, carboxilo, sulfónico o fosforilo,
ii) un péptido con de uno a aproximadamente cincuenta residuos de L-aminoácidos, y
iii) un polietilenglicol con un peso molecular de 400 a aproximadamente 40.000;
Y es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Ser, Leu, Arg, Pro, Val, Tyr, Phe;
Z es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Asn y Pro;
Asn es un residuo de asparagina;
El conector es una fracción de p-aminobencilcarbamoílo;
D es una fracción de fármaco antitumoral, en donde el fármaco se selecciona del grupo que consiste de mitomicina y doxorrubincina.
En otras realizaciones de la divulgación de la Fórmula I:
R comprende un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de
i) un grupo acilo, un grupo carbamoílo, un grupo sulfonilo, un grupo fosforilo o un grupo alquilo derivado de un ácido carboxílico de C1 hasta aproximadamente C20 lineal, ramificado o alicíclico, opcionalmente sustituido con de uno a aproximadamente cinco grupos hidroxilo, amina, carboxilo, sulfónico o fosforilo,
ii) un péptido con de uno a aproximadamente cincuenta residuos de L- o D-aminoácidos, y
iii) un polietilenglicol con un peso molecular de 400 a aproximadamente 40.000;
Y es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Ser, Leu, Arg, Pro, Val, Tyr, Phe;
Z es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Asn y Pro;
Asn es un residuo de asparagina;
El conector es una fracción de p-aminobencil carbonato; y
D es una fracción de fármaco antitumoral unida a la fracción conectora y en donde el fármaco es camptotecina.
En realizaciones adicionales la divulgación comprende un conjugado de péptido-fármaco dimérico de la fórmula mostrada en la Fórmula II:
D'-Conector-Asn-Z-Y-R'-Y-Z-Asn-Conector-D (Fórmula II)
En donde D y D' son fracciones de fármaco citotóxicas que son iguales o diferentes entre sí y se seleccionan independientemente del grupo que consiste de mitomicina, doxorubicina, aminopterina, actinomicina, bleomicina, 9-amino-camptotecina, N8-acetil espermidina, 1-(2-cloroetil)-1,2-dimetanosulfonil hidrazida, talisomicina, citarabina, etopósido, camptotecina, taxol, esperamicina, podofilotoxina, anguidina, vincristina, vinblastina, morfolinadoxorubicina, n-(5,5-diacetoxi-pentil)doxorubicina y derivados de los mismos;
El conector es una fracción de p-aminobencil carbamato o una fracción de p-aminobencil carbonato, en dondelos conectores pueden ser iguales o diferentes;
R' comprende un sustituyente seleccionado del grupo que consiste de
i) un grupo bis-funcional seleccionado de un grupo acilo, un grupo carbamoílo, un grupo sulfonilo, grupo fosforilo o un grupo alquilo derivado de un ácido carboxílico de C1 a aproximadamente C2 lineal, ramificado o alicíclico, opcionalmente sustituido con de uno a aproximadamente cinco grupos hidroxilo, amina, carboxilo, sulfónico o fosforilo,
ii) un péptido conde uno a aproximadamente cincuenta residuos de L o D-aminoácidos, y
iii) un polietilenglicol con un peso molecular de 400 a aproximadamente 40.000; y
Y es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Ser, Leu, Arg, Pro, Val, Tyr, Phe; Asn es un residuo de asparagina; y
Z es un residuo de aminoácido seleccionado del grupo que consiste de Ala, Thr, Asn y Pro.
Como se apreciará, los conjugados de Fórmula II son esencialmente versiones diméricas de los conjugados de Fórmula I, que pueden dirigirse a dos moléculas de fármaco citotóxico por conjugado a las células o tejido objetivo.
Realizaciones adicionales de la divulgación comprenden una composición farmacéutica que comprende por lo menos un conjugado de péptido-fármaco de Fórmula I o Fórmula II en por lo menos un portador farmacéuticamente aceptable.
Ralizaciones adicionales de la divulgación comprenden un método para tratar el cáncer en un mamífero, que puede ser un humano, que comprende administrar una cantidad eficaz antitumoral del conjugado o composición farmacéutica de la invención.
Descripción detallada de la invención
"Mitomicina", como se usa aquí, se refiere a miembros de la familia de fármacos que contienen aziridina aislados de Streptomyces caespitosus o Streptomyces lavendulae, e incluye específicamente mitomicina C y mitomicina A.
"Doxorubicina", como se usa aquí, se refiere a miembros de la familia de antraciclinas derivadas de la bacteria de Streptomyces Streptomyces peucetius var. caesius, e incluye doxorubicina, daunorrubicina, epirrubicina e idarrubicina.
"Camptotecina" como se usa aquí se refiere a miembros de la familia de alcaloides aislados de Camptotheca acuminata y sus derivados químicos, e incluye camptotecina, irinotecán, topotecán y rubitecán.
La presente divulgación proporciona conjugados péptido-fármaco específicos de tumores que comprenden una fracción de péptido, un conector autoinmolante que es p-aminobencil-carbamoilo o p-aminobencil-carbonato (dependiendo del tipo de grupo funcional contenido en el fármaco al que se une el conector autoinmolante) y una fracción de fármaco citotóxica. Los conjugados actúan como profármacos en el sentido de que el conjugado es sustancialmente inactivo y no tóxico. La fracción de péptido puede escindirse selectivamente mediante una enzima proteasa in vivo para liberar la fracción conectora autoinmolante/fármaco citotóxico. Tras tal escisión enzimática, el conector autoinmolante se hidroliza espontáneamente para producir el fármaco libre en su forma activa, pero más dirigido al medio objetivo, como el sitio de un tumor en un paciente humano. De esta manera, el fármaco citotóxico se dirige a un sitio particular que necesita tratamiento, mientras que se reduce el daño celular y tisular en sitios distintos del sitio objetivo.
La fracción de fármaco citotóxica tiene un grupo funcional químicamente reactivo por medio del cual la estructura principal del fármaco se une covalentemente al conector autoinmolante. El grupo funcional que une el fármaco citotóxico al conector autoinmolante es tal que, tras la hidrólisis del conector autoinmolante, el fármaco citotóxico se libera de forma citotóxicamente activa. Dicho grupo funcional puede incluir, por ejemplo, una amina primaria, una amina secundaria o hidroxilo. Los fármacos citotóxicos incluyen mitomicina, doxorubicina, aminopterina, actinomicina, bleomicina, 9-amino-camptotecina, N8-acetil espermidina, 1-(2-cloroetil)-1,2-dimetanosulfonil hidrazida, talisomicina, citarabina, etopósido, camptotecina, taxol, esperamicina, podofilotoxina, anguidina, vincristina, vinblastina, morfolina-doxorubicina, n-(5,5-diacetoxi-pentil)doxorubicina y derivados de los mismos. Las realizaciones de la divulgación se basan en doxorrubincina y/o camptotecina. El conjugado péptidofármaco de la invención se basa en la mitomicina.
En realizaciones específicas de la divulgación en las que el fármaco (D) es mitomicina, los conjugados péptido-fármaco tienen la estructura que se muestra en la Fórmula III (en donde R se define como antes y Ala es un residuo de alanina):
En realizaciones específicas de la divulgación en las que el fármaco (D) es doxorubicina, los conjugados péptido-fármaco tienen la estructura que se muestra en la Fórmula IV (en donde R se define como antes y Ala es un residuo de alanina):
En realizaciones específicas de la divulgación en las que el fármaco (D) es camptotecina, los conjugados péptido-fármaco tienen la estructura que se muestra en la Fórmula V (en donde R, se define como antes y Ala es un residuo de alanina):
En realizaciones específicas de la divulgación de conjugados diméricos en los que el fármaco (D) es mitomicina y el fármaco (D') es doxorubicina, los conjugados péptido-fármaco tienen la estructura que se muestra en la Fórmula V i (en donde R' se define como antes y Ala es un residuo de alanina)
Formula VI
En realizaciones específicas de la divulgación de conjugados diméricos en los que el fármaco (D) es mitomicina y el fármaco (D') es camptotecina, los conjugados péptido-fármaco tienen la estructura que se muestra en la Fórmula VII (en donde R' se define como antes y Ala es un residuo de alanina)
Formula VII
Un conjugado de la invención es Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina. Los conjugados de la divulgación incluyen:
Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina;
Na-acetamida-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina;
Na-butiramida-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina;
Na-hexanamida-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina;
Na-[-(2-amida-2-oxoetoxi) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina; y
Na-[-((2-amida-2-oxoetoxi)(metil) amino) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina; Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina;
Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina;
Na-acetamida-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina;
Na-butiramida-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina; y
Na-hexanamida-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina;
Na-[-(2-amida-2-oxoetoxi) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina; y Na-[-((2-amida-2-oxoetoxi)(metil)amino) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina; en donde PABC es una fracción conectora de p-aminobencil carbamoílo.
Otros conjugados de la divulgación incluyen:
Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina;
Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina;
Na-[-(2-amida-2-oxoetoxi) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina; y
Na-[-((2-amida-2-oxoetoxi)(metil) amino) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina
En donde PABC es una fracción de p-aminobencil carbonato.
Los conjugados diméricos de la divulgación incluyen:
N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N4-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina -succinamida:
N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina-bis(Oa)-acetamida:
N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorrubicin-bis(Na-metil)-acetamida;
N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N4-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina-succinamida;
N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina-bis(Oa)-acetamida; y
N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina-bis(Na-metil)-acetamida.
En donde PABC es una fracción conectora de p-aminobencil carbamoílo o p-aminobencil carbonato.
Preparación de conjugados péptido-fármaco
En general, los conjugados péptido-fármaco de Fórmula I y Fórmula II pueden prepararse usando materiales disponibles y técnicas de síntesis orgánica convencionales. Por ejemplo, los fármacos citotóxicos del tipo descrito están disponibles comercialmente y su síntesis se describe en la bibliografía científica.
Generalmente, los conjugados péptido-fármaco de la presente invención pueden construirse uniendo covalentemente la fracción de fármaco a la secuencia del péptido a través del conector autoinmolante. Las vías sintéticas específicas de preparación que se muestran a continuación son ejemplos de las que pueden utilizarse.
El esquema de síntesis 1 muestra una vía sintética para producir conjugados de péptido-mitomicina:
Esquema de Síntesis 1
El esquema de síntesis 2 muestra una vía sintética para producir conjugados de péptido-doxorubicina:
Esquema de Síntesis 2
El esquema de síntesis 3 muestra una vía sintética para producir conjugados de péptido-camptotecina:
Esquema de Síntesis 3
El esquema de síntesis 4 muestra una vía sintética para producir conjugados de doxorubicina-péptidomitomicina (conjugado dimérico):
Es uema de Síntesis 4
El esquema de síntesis 5 muestra una vía sintética para producir conjugados de camptotecina-péptidomitomicina (conjugados diméricos):
Es uema de Síntesis 5
En general para las reacciones de síntesis descritas:
a) Se emplearon métodos estándar de síntesis de péptidos para la deportación de Fmoc y tritilo y el acoplamiento de péptidos;
b) El conector autoinmolante se unió a amino ácido haciendo reaccionar Na-Fmoc-Asn o Na-Fmoc-Asn protegido con tritilo con alcohol p-aminobencílico, usando EEDQ como reactivo de acoplamiento en la mezcla de solventes orgánicos/acuosos;
c) El carbonato activado de alcohol p-aminobencílico podría obtenerse haciendo reaccionar cloroformiato de pnitrofenilo con Na-Fmoc-Asn-PAB-OH o Na-Fmoc-Ala-Ala-N-Tritilo-Asn-PAB-OH;
d) Se obtuvieron conjugados péptido-fármaco de mitomicina y doxorubicina haciendo reaccionar con el carbonato activado correspondiente de Na-Fmoc-Asn-PABC-PNP o Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-PNP en DMF en presencia de HOBT;
e) Para la síntesis de conjugados de camptotecina, la camptotecina se hizo reaccionar con trifosgeno para proporcionar cloroformiato de canptotecina in situ, que luego se acopló con Na-Fmoc-Asn-PAB-OH para obtener el Na-Fmoc-Asn-PABC-camptotecina correspondiente;
f) Los conjugados péptido-fármaco finales se obtuvieron mediante acilación con varios anhídridos, cloruros de acilo o ácidos carboxílicos mediante métodos de acoplamiento de péptidos.
Los conjugados finales sintetizados pueden purificarse mediante varios métodos que incluyen cromatografía en columna de sílice, HPLC, cromatografía de intercambio iónico, precipitación de ácido/base y cristalización.
Los conjugados finales pueden caracterizarse por 1H-NMR, 13C-NMR, MS, LC/MS, UV/VIS, y/o IR.
Muchos de los conjugados divulgados pueden existir como clorhidrato u otras sales. Los expertos en química médica apreciarán que la elección de la sal no es crítica, y pueden prepararse otras sales farmacéuticamente aceptables mediante métodos bien conocidos y pueden utilizarse en la preparación de composiciones farmacéuticas. Ver, por ejemplo, Handbook of Pharmaceutical Salts : Properties, Selection and Use. (P. Heinrich Stahl and Camille G. Wermuth, eds.) International Union of Pure and Applied Chemistry, Wiley-VCH 2002 y L.D. Bighley, S.M. Berge, D.C. Monkhouse, in "Encyclopedia of Pharmaceutical Technology'. Eds. J. Swarbrick and J.C. Boylan, Vol. 13, Marcel Dekker, Inc., New York, Basel, Hong Kong 1995, pp. 453-499.
Además, los expertos en la técnica apreciarán que no solo pueden producirse y usarse una variedad de sales, sino que también pueden producirse hidratos, solvatos y polimorfos a partir de los conjugados divulgados en la presente. Además, también pueden producirse fácilmente varias variantes isotópicamente sustituidas (mediante, por ejemplo, sustitución de deuterio por hidrógeno, 13C por carbono, 15N por nitrógeno). Tales derivados se contemplan dentro del alcance de esta divulgación.
Para preparar las composiciones farmacéuticas de la invención, uno o más de los conjugados se combinan con por lo menos un portador farmacéuticamente aceptable. "Portadores farmacéuticamente aceptables" se refiere a compuestos biocompatibles que son adecuados para una vía de administración particular de una sustancia farmacológicamente eficaz. Incluyen agentes estabilizantes, agentes humectantes y emulsionantes, sales para variar la osmolalidad, agentes encapsulantes, tampones y potenciadores de la penetración cutánea. Ejemplos de portadores farmacéuticamente aceptables se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences (Alfonso R. Gennaro, ed., 18a edición, 1990). La elección particular de portadores depende de la terapia específica que se contempla. Varias formulaciones para composiciones farmacéuticas y componentes de las mismas se describen en la solicitud de patente publicada de Estados Unidos 2014/0057844.
La selección de la fracción de fármaco citotóxico en los conjugados está guiada por el tipo de cáncer a tratar. Para el tratamiento de un tipo específico de cáncer o tumor, la fracción de fármaco citotóxico debe basarse en un fármaco citotóxico eficaz para tratar dicho tipo de cáncer. Por ejemplo, los conjugados de fármacos basados en mitomicina pueden usarse para tratar cánceres de acuerdo con, o guiados por, protocolos de administración de mitomicina que se conocen y recomiendan actualmente en la técnica.
El conjugado y las composiciones de la invención pueden usarse en métodos para tratar diferentes tipos de cánceres, incluyendo pero no limitados a, cáncer de vejiga, cánceres de mama, cáncer cervical, cáncer de ovario, cáncer de estómago, cáncer de páncreas, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, cáncer de esófago, cáncer de intestino; cáncer de piel y cáncer de próstata.
Las vías de administración incluyen inyección, administración oral, administración bucal, administración parenteral, inhalación y administración rectal.
La dosificación del conjugado a administrar, y las vías y regímenes particulares de administración, dependen del tipo de cáncer a tratar y de las circunstancias de las condiciones particulares del cáncer, pero pueden
ser determinados por los expertos en la técnica.
El conjugado de la invención puede usarse en combinación con otros agentes o tratamientos quimioterapéuticos. Por ejemplo, una terapia que usa el conjugado de la invención puede usarse en combinación con radioterapia. Los ejemplos que siguen ilustran ciertas realizaciones de la invención.
EJEMPLOS
Actividad biológica
Se probaron conjugados péptido-fármaco representativos de la presente invención en sistemas tanto in vitro como in vivo para determinar su actividad biológica. En estas pruebas, se determinó la potencia de los conjugados de los fármacos citotóxicos midiendo la citotoxicidad de los conjugados frente a células de origen canceroso humano. Un experto en la técnica reconocerá que cualquier línea celular tumoral que exprese las proteasas asociadas al tumor deseadas (proteasas que escinden los conjugados de la invención para liberar el fármaco en forma activa) podría usarse en lugar de las líneas celulares tumorales específicas usadas en el siguiente análisis. A continuación se describen pruebas representativas usadas y los resultados obtenidos.
Prueba I
Estabilidad del plasma humano
Se diluyeron 20 pl de conjugado de péptido-fármaco 500 pM Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [en la presente compuesto 8] en solución madre de DMSO a 1 ml con plasma humano (concentración final: 10 pM, 2% de DMSO), y la mezcla se incubó a 37° C. Se retiraron alícuotas de 100 pl en los puntos temporales de 0, 0,25, 0,5, 1, 2, 4, 6 horas y se diluyeron con 400 pl de acetonitrilo frío que contenía tolbutamida (200 ng/ml) como estándar interno. Las muestras se centrifugaron a 14.000 rpm durante 4 minutos. Se diluyeron 100 pl de los sobrenadantes anteriores con 300 pl de agua de HPLC de ácido fórmico al 0,1% y se tomaron 10 pl para análisis LC/MS/MS (columna: C-18; fase móvil: ácido fórmico al 0,1% en agua/ácido fórmico al 0,1% en acetonitrilo; transición iónica: ion Q1 (m/z) = 840,5, ion Q2 (m/z) = 462,2). Como se muestra en la Figura 1, el conjugado péptidofármaco es relativamente estable en el plasma humano con una vida media mayor de 15 horas (T1/2>15 h). Se detectó menos del 2% de fármaco mitomicina libre.
Prueba II
Ensayo de citotoxicidad in vitro
Los cultivos monocapa de células de carcinoma humano se recogieron usando tripsina-EDTA, y las células se contaron y se volvieron a suspender a 1 x105/ml en RPMI-1640 o DMEM que contenía FBS al 10%. Se añadieron células (0,1 ml/pocillo) a cada pocillo de placas de microtitulación de 96 pocillos y se incubaron durante la noche a 37° C en una atmósfera humidificada de CO2 al 5%. Se retiró el medio de las placas y se añadieron diluciones en serie de mitomicina o conjugados en medio (concentración final de DMSO <0,1%) a los pocillos. Todas las diluciones se realizaron por triplicado. Las células tratadas con el fármaco se incubaron durante otras 72 horas a 37° C en una atmósfera humidificada de CO2 al 5%. Se añadieron 50 pl de TCA frío (50%, p/vol) a cada pocillo y se incubaron las placas a 4° C durante 1 hora. Las placas se lavaron con agua del grifo lenta tres veces y se secaron a temperatura ambiente. Se añadieron 50 pl de solución de sulforrodamina B (0,4%, p/vol) a cada pocillo y las placas se dejaron a temperatura ambiente durante 1 hora. Las placas se aclararon con una solución de ácido acético (1%, vol/vol) para eliminar el colorante no unido y se secaron a temperatura ambiente. Se añadieron 200 pl de solución base Tris 10 mM a cada pocillo y las placas se agitaron en un agitador giratorio durante 15 minutos para solubilizar el colorante unido a proteínas. Se midió la densidad óptica de los pocillos a 510 nm en un lector de microplacas, y se calculó la IC50 mediante GraphPad a partir de tres experimentos separados por triplicado en cada experimento y se expresa como media (Tabla 1).
Tabla 1 IC50 M n=3
Los ensayos de líneas celulares de carcinoma humano HCT116 y HepG2 revelan que la citotoxicidad de los conjugados péptido-fármaco se redujo de 76 a 17 veces en comparación con el fármaco original mitomicina, dependiendo de las diferentes líneas celulares tumorales. La proteasa asociada a tumores legumaína se sobreexpresa en el microambiente tumoral del tumor sólido en condiciones hipóxicas y ácidas. Sin embargo, se ha informado con anterioridad de algún nivel de expresión de legumaína de tanto la línea celular HCT116 como la HepG2 en cultivo celular, lo que puede dar como resultado la actividad residual del conjugado péptido-fármaco como se observa en este ensayo.
Prueba III
Dosis máxima tolerada in vivo (MTD) en ratones Balb/c
Se evaluaron por separado la tolerabilidad de la mitomicina y su conjugado péptido-fármaco Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [compuesto 8] como agente individual en ratones Balb/c. Los resultados de los pesos corporales en diferentes grupos en diferentes puntos temporales después del tratamiento se muestran en la Figura 2.
En el grupo de dosis de mitomicina de 10 mg/kg, una vez por semana, se observó la muerte del animal. En el grupo de 5 mg/kg, los ratones mostraron comportamientos de piloerección y retraso. En el grupo de mitomicina de 5 mg/kg se observó pérdida de peso corporal (>15%). Por otra parte, no se observó apariencia y peso corporal anormales (<10%) para el conjugado péptido-fármaco Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [8] en los grupos de dosis de 25, 50 y 100 mg/kg, una vez a la semana, tres inyecciones en total durante 24 días. El estudio de toxicidad murina reveló que el conjugado péptido-fármaco Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [8] es mucho menos tóxico que el fármaco original mitomicina in vivo. La dosis máxima tolerada en ratones (MTD) de conjugado péptido-fármaco aumenta por lo menos 20 veces en comparación con el fármaco original mitomicina.
Prueba IV
Actividad antitumoral in vivo
El efecto tumoricida del conjugado de péptido-fármaco Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [8] se evaluó en un modelo de cáncer de colon singénico CT-26 subcutáneo en ratones Balb/c. Cada ratón se inoculó por vía subcutánea en la región del flanco derecho con células tumorales CT-26 (5x105) en 0,1 ml de PBS. Cuando el tamaño tumoral medio alcanzó aproximadamente 180 mm3 (después de aproximadamente 10 días), los ratones con tumor CT-26 se trataron mediante administración intravenosa con: vehículo (2% de DMA y 98% de 2HP-p-CD al 40%), mitomicina (2 mg/kg; 5 mg/kg, QW) y conjugado Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [8] (25 mg/kg; 50 mg/kg, QW) durante tres semanas, total de tres inyecciones por ratón. La curva de crecimiento tumoral del modelo CT-26 se muestra en la Fig.3.
Como se ha informado anteriormente, aunque las células CT-26 tienen una expresión débil de la proteasa legumaína asociada a tumores in vitro, se expresa abundantemente in vivo en TME en la superficie de células endoteliales viables y macrófagos asociados a tumores en el microambiente de tumores sólidos CT-26, ya que la expresión de legumaína se induce en condiciones de hipoxia y estrés. El conjugado de activación específica de legumaína Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [8] demostró una fuerte eficacia antitumoral en el modelo de cáncer de colon singénico CT-26 subcutáneo en ratones Balb/c como se muestra en la Fig. 3. A una dosis de 50 mg/kg, que es mucho más baja que su MTD, el conjugado inhibe significativamente el crecimiento del tumor frente al control no tratado (T/C = 36,4%, p <0,01). Mientras que en su dosis de MTD (5 mg/kg), el fármaco original mitomicina demostró un efecto de inhibición del crecimiento tumoral mucho más débil (T/C = 50,4%). Por lo tanto, los experimentos in vivo muestran que el conjugado péptido-mitomicina de la presente invención producen actividad antitumoral con mayor potencia y menos toxicidad para el huésped que el fármaco original mitomicina.
Ejemplos de síntesis
Ejemplo 1
Preparación de Na-Fmoc-Ala-Ala [1]
Se agitó una solución de Na-Fmoc-Ala (1,58 g, 5,0 mmoles), N-hidroxil succinimida (0,63 g, 5,5 mmoles) y DCC (1,03 g, 5,0 mmoles) en CH2Cl2 (50 ml) a 5° C durante 6 horas. Se filtró la DCU y se concentró el filtrado. El residuo se volvió a disolver en THF (50 ml) y se mantuvo en el frigorífico (4° C) durante la noche. Se filtró más DCU y se añadió la solución de THF a una solución de alanina (0,99 g, 7,5 mmoles) y NaHCÜ3 (1,68 g, 20 mmoles) en THF/H2O al 25% (80 ml). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente a 25° C durante 5 horas. El THF se eliminó por concentración y la suspensión acuosa se ajustó a pH 4 con HCl concentrado. La suspensión acuosa se agitó a 25° C durante otras 3 horas y el precipitado se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con agua desalinizada y se secó al vacío sobre KOH para dar un producto sólido blanco (1,77 g, rendimiento del 83,7%). LC/MS: (MH)+ = 383
Ejemplo 2
Preparación de Na-Fmoc-Asn-PAB-OH [2]
Se agitó una solución de Na-Fmoc-Asn (1,77 g, 5,0 mmoles), alcohol p-aminobencílico (0,86 g, 7,0 mmoles) y EEDQ (1,48 g, 6 mmoles) en THF/H2O (100/20 ml) a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió una cantidad adicional de EEDQ (0,61 g, 2,5 mmoles) y se agitó durante otras 24 horas. El THF se eliminó por concentración y la suspensión del residuo se diluyó con solución acuosa de NaOH/NaHCO3 (2/8 g, 200 ml) y se agitó durante 3 horas. El precipitado se recogió por filtración, se enjuagó con agua y se volvió a suspender en ácido cítrico al 10% (150 ml). El precipitado se recogió por filtración, se enjuagó con ácido cítrico al 10% seguido de agua desalinizada y se secó al vacío. El sólido obtenido anteriormente se trituró en acetato de etilo (100 ml). El sólido se recogió por filtración y se secó al vacío para dar un producto blanquecino (0,95 g, 40% de rendimiento).
LC/MS: (MH)+ = 460
Ejemplo 3
Preparación de Na-Fmoc-Asn-PABC-PNP [3]
Se trató Na-Fmoc-Asn-PAB-OH [2] (0,75 g, 1,6 mmoles) en THF/DMF seco (50/5 ml) a temperatura ambiente con cloroformiato de p-nitrofenilo (0,4 g, 2,0 mmoles) y piridina (0,15 g, 2,0 mmol). Después de 16 horas, se añadió una cantidad adicional de cloroformiato de p-nitrofenilo (0,2 g, 1,0 mmoles) y la solución de la reacción se agitó durante otras 6 horas. La solución anterior se diluyó con acetato de etilo (250 ml) y se lavó con ácido cítrico al 5% (2 x 100 ml) seguido de salmuera, se secó con Na2SO4 y se evaporó hasta la sequedad. El residuo se trituró en EA/Hexano al 50% y el sólido se recogió por filtración para dar un producto de color amarillento (0,8 g, rendimiento del 81%).
LC/MS: (MH)+ = 625
Ejemplo 4
Preparación de Na-Fmoc- Asn-PABC-mitomicina [4]
Se trataron Na-Fmoc-Asn-PABC-PNP [3] (624 mg, 1,0 mmoles) y mitomicina (400 mg, 1,2 mmoles) en DMF seco (15 ml) a temperatura ambiente con HOBT (675 mg, 5,0 mmoles) y DIEA (650 mg, 5,0 mmoles) durante 4 horas. La mezcla de la reacción se diluyó con acetato de etilo (150 ml) y se lavó tres veces con NaOH/NaHCO3 (1/4 g, 200 ml) seguido de salmuera. La capa orgánica se secó con Na2SO4 y se concentró hasta la sequedad a presión reducida. El residuo se trituró en acetato de etilo/hexano al 50% (50 ml) y el sólido se recogió por filtración, se enjuagó con acetato de etilo/hexano y se secó al vacío para dar un producto púrpura (635 mg, rendimiento del 76,3%).
LC/MS: (MH)+ = 820
Ejemplo 5
Preparación de Asn-PABC-mitomicina [5]
Se trató Na-Fmoc-Asn-PABC-mitomicina [4] (624 mg, 0,76 mmoles) con morfolina/NMP al 20% (15 ml) a temperatura ambiente. Después de 30 minutos, se añadió acetato de etilo/hexano al 50% (100 ml) y se eliminó el sobrenadante. El proceso anterior se repitió dos veces. El residuo se volvió a disolver en metanol (25 ml) y el disolvente se evaporó a presión reducida hasta la sequedad. El residuo se trituró en acetato de etilo/hexano al 50% (100 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó con
acetato de etilo/hexano y se secó al vacío para dar un producto de color púrpura (440 mg, 95,6% de rendimiento). LC/MS: (MH)+ = 598
Ejemplo 6
Preparación de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [6]
Se trataron Asn-PABC-mitomicina [5] (440 mg, 0,73 mmoles) y Na-Fmoc-Ala-Ala [1] (286 mg, 0,75 mmoles) en NMP (15 ml) con PyBop (390 mg, 0,75 mmoles)) y DIEA (585 mg, 4,5 mmoles) a temperatura ambiente. Después de 1 hora, la mezcla de la reacción se diluyó con acetato de etilo (200 ml). La solución orgánica se lavó con ácido cítrico al 5% (3x100 ml), salmuera y se secó con Na2SO4. El solvente se evaporó a presión reducida y el residuo se trituró en acetato de etilo/hexano al 50% (100 ml) y se agitó a temperatura ambiente durante la noche. El sólido se recogió por filtración y se volvió a suspender en acetato de etilo (50 ml) y se sonicó. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto de color púrpura (530 mg, 75,4% de brillo).
LC/MS: (MH)+ = 962
Ejemplo 7
Preparación de Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [7]
Se trató Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [6] (481 mg, 0,5 mmloes) en morfolina/NMP al 20% (10 ml) a temperatura ambiente. Después de 30 minutos, se añadió acetato de etilo/hexano al 50% (150 ml) y se agitó durante 1 hora. Se eliminó el sobrenadante y el residuo se trituró en CH2Cl2 (50 ml). El sólido se recogió por filtración y se volvió a disolver en metanol (20 ml). El solvente se evaporó a presión reducida y el residuo se trituró en acetato de etilo. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto de color púrpura (277 mg, rendimiento del 75%).
LC/MS: (MH)+ = 740
Ejemplo 8
Preparación de Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [8]
Se trató Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [7] (260 mg, 0,35 mmoles) en DMA/CH2Cl2 (2/6 ml) a temperatura ambiente con anhídrido succínico (50 mg, 0,5 mmoles) y DIEA (130 mg, 1,0 mmoles). La mezcla de la reacción se agitó durante la noche. A la mezcla de la reacción anterior, se le añadió éter etílico (100 ml) y se agitó durante 30 minutos. Se eliminó el sobrenadante y se repitió el proceso dos veces. El residuo se trituró en HOAc/acetato de etilo al 2% (50 ml) y el sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto de color púrpura (265 mg, rendimiento del 90%).
LC/MC: (M-H) = 838
Ejemplo 9
Preparación de Na-acetamida-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [9]
Se trató Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [7] (37 mg, 0,05 mmoles) en DMA/CH2Cl2 (1/3 ml) a temperatura ambiente con anhídrido acético (10 mg, 0,1 mmoles) y DIEA (13 mg, 0,1 mmoles). Después de 30 minutos, se añadió éter etílico (50 ml) y se agitó durante 60 minutos. El sólido blando se recogió por filtración, se enjuagó con éteres etílicos y se volvió a disolver en metanol (5 ml). El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se trituró en acetato de etilo/hexano al 50% (10 ml) y el sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo/hexano, se secó al vacío para dar un producto de color púrpura (35 mg, rendimiento del 90%). LC/MC: (MH)+ = 780; (M+Na)+=805
Ejemplo 10
Preparación de Na-butiramida-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [10]
Se trató Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [7] (37 mg, 0,05 mmoles) en DMA/CH2Cl2 (1/3 ml) a temperatura ambiente con cloruro de butirilo (6,3 mg, 0,06 mmoles) y DIEA (13 mg, 0,1 mmoles). Después de 30 minutos, se añadió éter etílico (50 ml) y se agitó durante 60 minutos. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó con éteres etílicos y se volvió a disolver en metanol (5 ml). El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se trituró en acetato de etilo (10 ml). El sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto de color púrpura (27 mg, rendimiento del 67%).
LC/MC: (MH)+ = 808; (M+Na)+ = 833.
Ejemplo 11
Preparación de Na-hexanamida-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [11]
Se trató Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [7] (37 mg, 0,05 mmoles) en DMA/CH2CI2 (1/3 ml) a temperatura ambiente con cloruro de hexanoílo (9,0 mg, 0,06 mmoles) y DIEA (13 mg, 0,1 mmoles). Después de 30 minutos, se añadió éter etílico (50 ml) y se agitó durante 60 minutos. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó con éteres etílicos y se volvió a disolver en metanol (5 ml). El solvente se eliminó a presión reducida y el residuo se trituró en acetato de etilo/hexano al 50% (10 ml). El sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto de color púrpura (27 mg, 67% de rendimiento).
LC/MC: (MH)+=836; (M+Na)+=860
Ejemplo 12
Preparación de Na-[-(2-amida-2-oxoetoxi) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [12]
Se trató Ala-Ala-Asn-PANC-mitomicina [7] (295 mg, 0,4 mmoles) en THF/DMF (4/0,5 ml) con 1,4-dioxano-2,6-diona (70 mg, 0,6 mmoles) y DIEA (60 mg, 0,5 mmoles) a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió lentamente éter etílico (10 ml) y la mezcla se agitó durante 30 min. Se eliminó el solvente y el residuo se trituró y se sonicó en ácido acético al 1% en acetato de etilo. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto de color oscuro (276 mg, rendimiento del 80%).
LC/MC: (M-H)- = 854
Ejemplo 13
Preparación de Na-[-((2-amida-2-oxoetoxi)(metil) amino) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [13]
Se trató Ala-Ala-Asn-PANC-mitomicina [7] (295 mg, 0,4 mmoles) en THF/DMF (4/0,5 ml) con 4-metilmorfolina-2,6-diona (77 mg, 0,6 mmoles) y DIEa (130 mg, 1,0 mmol) a temperatura ambiente durante 2 horas. Se añadió lentamente éter etílico (10 ml) y la mezcla se agitó durante 30 min. Se eliminó el solvente y el residuo se trituró y se sonicó en ácido acético al 1% en acetato de etilo. El sólido se recogió por filtración, se enjuagó concienzudamente con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto de color oscuro (339 mg, rendimiento del 97%).
LC/MS: (M-H)' = 867
Ejemplo 14
Preparación de Na-Fmoc-Asn(N-tritilo)-PAB-OH [14]
Se agitó una solución de Na-Fmoc-Asn(N-tritilo) ((1,49 g, 2,5 mmoles), alcohol p-aminobencílico (0,37 g, 3,0 mmoles) y EEDQ (0,74 g, 3 mmoles) en THF (50 ml) a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió una cantidad adicional de EEDQ (0,25 g, 1,0 mmol) y se agitó durante otras 6 horas. La solución de la reacción se diluyó con acetato de etilo (300 ml), se lavó con HCl 0,1 N tres veces y se secó sobre Na2SÜ4. La solución de acetato se filtró a través de un lecho corto de sílice, se enjuagó con acetato de etilo y se concentró hasta la sequedad. El residuo se trituró en éter etílico, se filtró, se enjuagó con éter etílico y se secó al vacío para dar un sólido blanco (1,65 g, rendimiento del 93%).
LC/MS: (MH)+ = 702
Ejemplo 15
Preparación de Asn(N-tritilo)-PAB-OH [15]
A una solución de Na-Fmoc-Asn(N-tritilo)-Pab-OH [14] (1,6 g, 2.28mmoles) en CH2Cl2 (50 ml) se le añadió DBU (1 ml. La solución de la reacción se agitó durante 15 min. La solución de la reacción se diluyó con CH2Cl2 (200 ml), se lavó con salmuera dos veces y se secó sobre Na2SO4 , se filtró y se concentró hasta la sequedad. El residuo se trituró en hexano/éter etílico (1/1). El sólido se recogió por filtración, se enjuagó con éter etílico y se secó al vacío para dar un producto blanco (1 g, rendimiento del 100%).
LC/MS: (MH)+ =480
Ejemplo 16
Preparación de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn(N-tritilo)-PAB-OH [16]
Se agitó una solución de Asn(N-tritilo)-PAB-OH [15] (0,72 g, 1,5 mmoles), Na-Fmoc-Ala-Ala [1] (0,57 g, 1,5 mmol), PyBop (0,94 g, 1,8 mmoles)) y DIEA (1,17 g, 9,0 mmoles) en NMP (20 ml) a temperatura ambiente durante 1
hora. A la reacción anterior, se le añadió lentamente una solución acuosa de ácido cítrico al 5% (150 ml) a temperatura de agua con hielo y se agitó durante 2 horas. El precipitado se recogió mediante filtración y se enjuagó con una solución de ácido cítrico al 5%, seguido de agua desalinizada. El sólido se volvió a suspender en solución de NaHCO3 acuosa, se trituró, se filtró, se enjuagó con agua desalinizada y se secó al vacío sobre KOH para dar un producto blanco (1,1 g, rendimiento del 87%).
LC/MS: (MH)+ = 845
Ejemplo 17
Preparación de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn(N-tritilo)-PABC-PNP [17]
Se agitó una solución de reacción de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn(N-tritilo)-PAB-OH [16] (1,1 g, 1,3 mmol), cloroformato de p-nitrofenilo (0,31 g, 1,6 mmol) y piridina (0,13 g, 1,6 mmoles) en THF seco a temperatura ambiente durante la noche. Se añadió una cantidad adicional de cloroformato de p-nitrofenilo (0,2 g, 1,0 mmol) y piridina (0,08 g, 1,0 mmol) y se agitó durante otras 4 horas. La solución anterior se diluyó con acetato de etilo (300 ml) y se lavó con una solución de ácido cítrico al 5% (3 x 100 ml), seguido de salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró hasta la sequedad. El residuo se trituró en éter etílico, se filtró, se enjuagó con éter etílico y se secó al vacío para dar un producto blanquecino (1,1 g, rendimiento del 83%).
LC/MS: (MH)+ = 1010
Ejemplo 18
Preparación de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-PNP [18]
Se agitó una solución de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn(N-tritilo)-PABC-PNP [17] (l.Og, 1 mmole) y TIPS (2.5 ml) en TFA/CH2Cl2 (6/24 ml) a temperatura ambiente durante 2 horas. A la solución de la reacción anterior, se le añadió lentamente éter etílico (150 ml) y la suspensión se agitó durante 1 hora. El precipitado se recogió por filtración y se lavó con éter etílico. El sólido se trituró en acetato de etilo, se filtró, se enjuagó con acetato de etilo y se secó al vacío para dar un producto blanquecino (0,75 g, rendimiento del 97%).
LC/MS: (MH)+ = 767
Ejemplo 19
Preparación de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina [19]
Se agitó una solución de reacción de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-PNP [18] (383 mg, 0,5 mmoles), sal de clorhidrato de doxorubicina (348 mg, 0,6 mmoles), HOBT (202 mg, 1,5 mmoles) y DIEA (325 mg, 2,5 mmoles) en DMF seca (5 ml) en un lugar oscuro durante la noche. A la solución anterior, se añadió lentamente ácido cítrico al 5% (100 ml) a temperatura de agua con hielo y se agitó durante 1 hora. El precipitado se recogió por filtración, se enjuagó con ácido cítrico al 5%, seguido de agua desalinizada. El sólido se volvió a suspender en una solución acuosa de NaHCO3 y se agitó durante 30 min. Se recogió el sólido, se enjuagó concienzudamente con solución de NaHCO3, seguido de agua desalinizada. El sólido se volvió a suspender en isopropanol, metanol/acetato de etilo al 10%, se trituró, se filtró y se secó al vacío para dar un producto rojo oscuro (550 mg, rendimiento del 94%).
LC/MS: (MH)+=1171
Ejemplo 20
Preparación de Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina [20]
Se agitó una solución de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina [19] (500 mg, 0,42 mmoles) en morfolina/NMP al 20% (5 ml) durante 1 hora. A la solución de reacción anterior, se le añadió lentamente éter etílico (50 ml) y la suspensión resultante se agitó durante 30 min. Se vertió el éter etílico (se repitió tres veces). El residuo se trituró en acetato de etilo, metanol/acetato de etilo al 20%. El sólido se recogió por filtración y se secó al vacío. El sólido se volvió a suspender en agua, se sonicó, se filtró y se secó al vacío sobre KOH para dar un producto rojo oscuro (320 mg, rendimiento del 80%).
LC/MC: (MH)+ = 949
Se usaron métodos similares para la preparación de los Ejemplos 8, 12 y 13 para la preparación de los Ejemplos 21,22 y 23 a partir del compuesto [20].
Ejemplo 21
Na-ácido succinámico- Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina [21]
LC/MS: (MH)+ = 1049
Ejemplo 22
Na-[-(2-amida-2-oxoetoxi) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina [22]
LC/MS: (MH)+ = 1065
Ejemplo 23
Na-[-((2-amida-2-oxoetoxi)(metil) amino) ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina [23]
LC/MS: (MH)+ = 1078
Ejemplo 24
Preparación de Na-Fmoc-Asn-PABC-camptotecina [24]
A una suspensión de camptotecina (348 mg, 1 mmol) y DAMP (366 mg, 3 mmoles) en CH2CI2 seco (20 ml), se le añadió trifosgeno (100 mg, 0,33 mmoles) a temperatura de agua conm hielo con agitación. Después de 20 min, se añadió una suspensión de Na-Fmoc-Asn-PAB-OH [2] (459mg, 1 mmol) en CH2CI2 seco (10 ml) a la mezcla de la reacción anterior y se agitó durante la noche a temperatura ambiente. A la mezcla de la reacción resultante se le añadió cloroformato de p-nitrofenilo (100 mg, 0,5 mmoles), seguido de una cantidad adicional de DAMP (60 mg, 0,5 mmoles) y la mezcla de la reacción se agitó durante otras 4 horas. Después de la concentración, el residuo resultante se trituró con CH2Ch/acetato de etilo al 25%, se filtró, se enjuagó con CH2Cl2/acetato de etilo al 25% y se secó al vacío. El sólido se suspendió en NaHCO3 acuoso, se sonicó, se filtró, se enjuagó concienzudamente con una NaHCO3 acuoso, seguido de ácido cítrico al 5%, agua desalinizada y se secó al vacío sobre KOH para dar un producto amarillento (763 mg, rendimiento del 91%).
LC/MS: (MH)+ = 834
Ejemplo 25
Preparación de Asn-PABC-camptotecina [25]
Se agitó una solución de Na-Fmoc-Asn-PABC-camptotecina [24] (500 mg, 0,6 mmoles) en DBU/CH2Cl2 al 2% (15 ml) durante 20 min. Se añadió lentamente éter etílico (80 ml) a la solución de la reacción anterior y se agitó durante 30 min. El precipitado se trituró, se recogió por filtración y se enjuagó concienzudamente con éter etílico. El sólido se volvió a triturar en CH2Ch/acetato de etilo al 20%, se filtró y se secó. El sólido se volvió a suspender en NaHCO3 acuoso, se trituró, se filtró, se enjuagó con agua desalinizada y se secó al vacío sobre KOH para dar un producto de color amarillento (295 mg, rendimiento del 80%).
LC/MS: (MH)+ = 612
Ejemplo 26
Preparación de NP-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina [26]
Se agitó una solución de H2N-Asn-PABC-camptotecina [25] (244 mg, 0,4 mmol), Na-Ala-Ala [1] (190 mg, 0,5 mmol), PyBop (260 mg, 0,5 mmol) y DIEA (325 mg, 2,5 mmoles) en NMP (5 ml) durante 1 hora. A la solución de la reacción anterior se le añadió lentamente ácido cítrico al 5% (50 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 30 min. El precipitado se recogió por filtración, se enjuagó con ácido cítrico al 5%, seguido de agua desalinizada y se secó al vacío sobre KOH. El sólido se trituró en C^Ch/acetato de etilo al 15%, se sonicó, se filtró y se secó para dar un producto gris (274 mg, rendimiento del 70%).
LC/MS: (MH)+ = 976
Ejemplo 27
Preparación de Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina 27]
Se agitó una solución de Na-Fmoc-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina [26] (487 mg, 0,5 mmoles) en DBU/CH2 Cl2 al 2% (10 ml) durante 10 min. A la solución de la reacción anterior, se le añadió lentamente éter etílico (50 ml) y se agitó durante 30 min. Se recogió el precipitado y se enjuagó con éter. El sólido se suspendió en Ch2Ch/acetato de etilo al 20%, se trituró, se filtró, se enjuagó con acetato de etilo y se secó para dar un producto de color gris (290 mg, 77% de rendimiento).
LC/MS: (MH)+ = 754
Se usaron métodos similares para la preparación de los Ejemplos 8, 12 y 13 para la preparación de los
Ejemplos 28, 29 y 30 a partir del compuesto [27].
Ejemplo 28
Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina [28]
LC/MS: (MH)+ = 854
Ejemplo 29
Na-[-(2-amida-2-oxoetoxi)ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina [29]
LC/MS: (MH)+ = 870
Ejemplo 30
Na-[-((2-amida-2-oxoetoxi)(metil)amino)ácido acético]-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina [30]
LC/MS: (MH)+ = 883
Ejemplo 31
Preparación de N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N4-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina-succinamida [31]
Se agitó una solución de Na-ácido succinámico-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina [8] (85 mg, 0,1 mmole), Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina [20] (104 mg, 0,11 mmoles), PyBop (62 mg, 0,12 mmoles) y DIEA (78 mg, 0,6 mmoles) en NMP (2 ml) durante 1 hora. Se añadió éter etílico (20 ml) y la mezcla resultante se agitó y se sonicó. Se vertió el éter (se repitió dos veces) y se trituró el residuo en metanol, se filtró y se secó para dar un producto de color oscuro (100 mg, rendimiento del 57%)
LC/MS: (MH)+=1770
Ejemplo 32
Preparación de N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina-bis(Oa)-acetamida [32] Se usaron métodos similares a los de la preparación del Ejemplo 31 para la preparación del Ejemplo 32, a partir del compuesto [20] y el compuesto [12].
LC/MS: (MH)+ = 1786
Ejemplo 33
Preparación de N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-doxorubicina-bis(Na-metil) -acetamida [33] Se usaron métodos similares a los de la preparación del Ejemplo 31 para la preparación del Ejemplo 33, a partir del compuesto [20] y el compuesto [13].
LC/MS: (MH)+ = 1799
Ejemplo 34
Preparación de N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N4-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina-succinamida [34]
Se usaron métodos similares a los de la preparación del Ejemplo 31 para la preparación del Ejemplo 34, a partir del compuesto [27] y el compuesto [8].
LC/MS: (MH)+ = 1575
Ejemplo 35
Preparación de N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina-bis(Oa)-acetamida [35] Se usaron métodos similares a los de la preparación del Ejemplo 31 para la preparación del Ejemplo 34, a partir del compuesto [27] y el compuesto [12].
LC/MS: (MH)+=1591
Ejemplo 36
Preparación de N1-Ala-Ala-Asn-PABC-mitomicina, N5-Ala-Ala-Asn-PABC-camptotecina-bis(Na-metil)-acetamida [36]
Se usaron métodos similares a los de la preparación del Ejemplo 31 para la preparación del Ejemplo 34, a partir del compuesto [27] y el compuesto [13].
LC/MS: (MH)+ = 1604
Abreviaturas usadas en los ejemplos:
DCC = diciclohexilcarbodiimida
DCM = diclorometano
DCU = diciclohexilurea
DIEA = diisopropiletilamina
DMA = dimetilacetamida
DMEM = medio de Eagle modificado de Dulbecco
DMF = N,N-dimetilformamida
DMSO = dimetilsulfóxido
EDC = 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)carbodiimida
EDTA = N,N',N",N'",N""-ácido etilendiaminotetraacético
FBS = suero fetal bovino
Fmoc = fluorenilmetoxicarbamoilo
HATU = hexafluorofosfato de 1-[bis(dimetilamino)metileno]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinio-3-óxido
HOBT = N-hidroxibenzotriazol
HPLC = cromatografía líquida de alta presión
IR = espectroscopia infrarroja
LC/MS = cromatografía líquida/espectrometría de masas
MS = espectrometría de masas
MTD = dosis máxima tolerada
NMP = N-metilpirrolidinona
NMR = resonancia magnética nuclear
PABC = p-aminobencilcarbamoílo
PBS = solución salina tamponada con fosfato
Py = piridina
QW = por semana
TCA = ácido tricloroacético
Tr = tritilo, trifenilmetilo
UV/VIS = espectroscopia ultravioleta/visible
Claims (10)
1. Un conjugado péptido-fármaco que es:
o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. Una composición farmacéutica que comprende por lo menos un conjugado péptido-fármaco de la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, y por lo menos un portador farmacéuticamente aceptable.
3. La composición farmacéutica de la reivindicación 2, envasada como una o más dosificaciones individuales.
4. Un conjugado péptido-fármaco de la reivindicación 1, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en un método para tratar un cáncer en un mamífero.
5. Una composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 2 o 3 para su uso en un método para tratar cáncer en un mamífero.
6. El conjugado péptido-fármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismos, para su uso de acuerdo con la reivindicación 4 o la composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, en donde dicho cáncer es un tumor sólido.
7. El conjugado péptido-fármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso de acuerdo con la reivindicación 4 o la composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, en donde dicho cáncer es cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer cervical, cáncer de ovario, cáncer de estómago, cáncer de páncreas, cáncer de pulmón, cáncer de hígado, cáncer de esófago, cáncer de intestino, cáncer de piel o cáncer de próstata.
8. El conjugado péptido-fármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso de acuerdo con la reivindicación 4 o la composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, en donde dicho cáncer es cáncer de colon.
9. El conjugado péptido-fármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso de acuerdo con la reivindicación 4, 6, 7 u 8, o la composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, 6, 7, u 8, en donde el conjugado péptido-fármaco se usa en combinación con otros agentes terapéuticos.
10. El conjugado péptido-fármaco o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso de acuerdo con la reivindicación 4, 6, 7 u 8, o la composición farmacéutica para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, 6, 7, u 8, en donde el conjugado péptido-fármaco se usa en combinación con radioterapia.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US201462007159P | 2014-06-03 | 2014-06-03 | |
| PCT/US2015/033509 WO2015187540A1 (en) | 2014-06-03 | 2015-06-01 | Peptide-drug conjugates |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| ES2857192T3 true ES2857192T3 (es) | 2021-09-28 |
Family
ID=54700553
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ES15803150T Active ES2857192T3 (es) | 2014-06-03 | 2015-06-01 | Conjugado de mitomicina |
Country Status (9)
| Country | Link |
|---|---|
| US (2) | US9579317B2 (es) |
| EP (1) | EP3152223B1 (es) |
| JP (2) | JP6539729B2 (es) |
| CN (1) | CN106456799B (es) |
| AU (1) | AU2015270924B2 (es) |
| CA (1) | CA2951049C (es) |
| ES (1) | ES2857192T3 (es) |
| MA (1) | MA40030A (es) |
| WO (1) | WO2015187540A1 (es) |
Families Citing this family (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CA2958495C (en) | 2014-08-22 | 2023-04-18 | Yafei Shanghai Biolog Medicine Science & Technology Co., Ltd. | Small molecule conjugates specifically activated in tumor microenvironment for targeting and use thereof |
| KR20180123047A (ko) | 2016-03-24 | 2018-11-14 | 바이엘 파마 악티엔게젤샤프트 | 효소적으로 절단가능한 기를 갖는 세포독성 활성제의 전구약물 |
| CN107375288B (zh) * | 2016-05-16 | 2019-08-23 | 博瑞生物医药（苏州）股份有限公司 | 多臂的聚合靶向抗癌偶联物 |
| CN110312533B (zh) | 2016-12-21 | 2023-11-03 | 拜耳公司 | 具有酶促可裂解的基团的细胞毒性活性剂的前药 |
| CN108314703B (zh) * | 2017-01-17 | 2022-02-01 | 亚飞（上海）生物医药科技有限公司 | 分子定点靶向和激活的激酶抑制剂的制备和用途 |
| US11191843B2 (en) | 2017-04-21 | 2021-12-07 | Brightgene Bio-Medical Technology Co., Ltd. | Multi-arm targeting anti-cancer conjugate |
| CN107670048B (zh) | 2017-08-30 | 2019-04-26 | 南京明臻医药科技有限公司 | 具有协同抗癌活性的中间体药物和聚乙二醇偶联协同抗癌药物、及其制备方法和应用 |
| CN113853382A (zh) * | 2019-01-07 | 2021-12-28 | 森纳生物科学公司 | 新型肽及其用途 |
| WO2020241445A1 (ja) * | 2019-05-24 | 2020-12-03 | 学校法人慈恵大学 | 薬剤、肺胞の洗浄用の薬液、及び、ネブライザー |
Family Cites Families (9)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US3803223A (en) * | 1970-07-20 | 1974-04-09 | Searle & Co | 3-amino-n-substituted succinamic acids and intermediates thereto |
| US6214345B1 (en) | 1993-05-14 | 2001-04-10 | Bristol-Myers Squibb Co. | Lysosomal enzyme-cleavable antitumor drug conjugates |
| EP1257296A2 (en) * | 2000-02-24 | 2002-11-20 | Genentech, Inc. | Caspase activated prodrugs therapy |
| US8314060B2 (en) | 2000-09-05 | 2012-11-20 | Biosight Ltd. | Peptide conjugated anti-cancer prodrugs |
| WO2004111192A2 (en) | 2003-05-29 | 2004-12-23 | The Scripps Research Institute | Targeted delivery to legumain-expressing cells |
| CN101374856A (zh) * | 2005-11-29 | 2009-02-25 | 斯克里普斯研究学院 | 抑制肿瘤细胞浸润、转移和血管生成 |
| EP2266964B1 (en) * | 2009-06-22 | 2013-01-09 | KTB Tumorforschungsgesellschaft mbH | Acid-labile trigger units |
| US8394922B2 (en) * | 2009-08-03 | 2013-03-12 | Medarex, Inc. | Antiproliferative compounds, conjugates thereof, methods therefor, and uses thereof |
| US20140057844A1 (en) | 2010-12-03 | 2014-02-27 | Tin Tin Su | Chemical entities and therapeutic uses thereof |
-
2015
- 2015-06-01 CA CA2951049A patent/CA2951049C/en active Active
- 2015-06-01 EP EP15803150.0A patent/EP3152223B1/en active Active
- 2015-06-01 ES ES15803150T patent/ES2857192T3/es active Active
- 2015-06-01 AU AU2015270924A patent/AU2015270924B2/en active Active
- 2015-06-01 US US14/726,897 patent/US9579317B2/en active Active
- 2015-06-01 JP JP2017516251A patent/JP6539729B2/ja active Active
- 2015-06-01 WO PCT/US2015/033509 patent/WO2015187540A1/en active Application Filing
- 2015-06-01 CN CN201580029854.5A patent/CN106456799B/zh active Active
- 2015-06-01 MA MA040030A patent/MA40030A/fr unknown
-
2017
- 2017-01-27 US US15/417,615 patent/US20170232023A1/en not_active Abandoned
-
2019
- 2019-06-10 JP JP2019107602A patent/JP2019189623A/ja active Pending
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP6539729B2 (ja) | 2019-07-03 |
| WO2015187540A1 (en) | 2015-12-10 |
| MA40030A (fr) | 2015-12-10 |
| CN106456799A (zh) | 2017-02-22 |
| US9579317B2 (en) | 2017-02-28 |
| AU2015270924A1 (en) | 2016-12-15 |
| EP3152223A4 (en) | 2017-12-20 |
| EP3152223B1 (en) | 2020-11-25 |
| JP2019189623A (ja) | 2019-10-31 |
| CA2951049C (en) | 2023-01-03 |
| CA2951049A1 (en) | 2015-12-10 |
| CN106456799B (zh) | 2020-05-22 |
| AU2015270924B2 (en) | 2019-09-12 |
| JP2017521486A (ja) | 2017-08-03 |
| EP3152223A1 (en) | 2017-04-12 |
| US20150343083A1 (en) | 2015-12-03 |
| US20170232023A1 (en) | 2017-08-17 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| ES2857192T3 (es) | Conjugado de mitomicina | |
| WO2015106599A1 (en) | Conjugates and compositions for drug delivery | |
| ES2198421T3 (es) | Derivados de la camptotecina unidos a polimeros. | |
| ES2918425T3 (es) | Conjugados de anticuerpo-fármaco | |
| ES2230860T3 (es) | Sistema de administracion de farmacos que comprende un peptido homeobos y un agente citotoxico o antineoplasico. | |
| ES2321114T3 (es) | Camptotecinas conjugadas en posicion 7 con peptidos ciclicos como agentes citostacios. | |
| ES2882634T3 (es) | Compuestos peptídicos y conjugados con péptidos para el tratamiento del cáncer mediante quimioterapia mediada por receptores | |
| CA3193485A1 (en) | Peptidic conjugates of sn38 useful in the treatment of cancer | |
| US20020173468A1 (en) | Modified cytostatic agents | |
| CA2562572A1 (en) | Camptothecin derivatives conjugated in position 20 with integrin antagonists | |
| CA2754846C (en) | Prostate-specific antigen cleavable prodrugs | |
| CA2562569A1 (en) | 7-t-butoxyiminomethylcamptothecin conjugated in position 20 with integrin antagonists | |
| Uddin et al. | In Vitro Cytotoxicity and In Vivo Anti-Tumor Efficacy of CD13 Targeted Peptide-Monomethyl Auristatin E (MMAE) Conjugates | |
| Albericio et al. | The sea as a source of new drugs | |
| Tripodi | Development of a novel class of cyclic NGR peptides for targeted drug delivery | |
| Pina | SYNTHESIS OF NEW RGD PEPTIDOMIMETIC-DRUG CONJUGATES TARGETING ΑVΒ3 INTEGRIN | |
| CA2895779A1 (en) | Legumain activated doxorubicin derivative as well as preparation method and application thereof |