ES2856330T3 - Combinación de un antagonista de PD-1 y un inhibidor de IDO1 para el tratamiento del cáncer - Google Patents

Abstract

Medicamento que comprende un antagonista de la proteína 1 de muerte programada (PD-1) para la utilización en combinación con un inhibidor de IDO1 para el tratamiento de un cáncer en un individuo, en el que el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal con cadenas pesadas, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID nº 21 y cadenas ligeras, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID nº 22; y el inhibidor de IDO1 es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4- fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCIÓN

Combinación de un antagonista de PD-1 y un inhibidor de IDO1 para el tratamiento del cáncer

Campo de la invención

La presente invención se refiere a terapias de combinación que resultan útiles para el tratamiento del cáncer. En particular, la invención se refiere a una terapia de combinación que comprende un antagonista de la proteína 1 de muerte programada (PD-1) y un inhibidor selectivo de la indolamina 2,3-dioxigenasa 1 (IDO1).

Antecedentes de la invención

Se reconoce que PD-1 es importante en la regulación inmunitaria y en el mantenimiento de la tolerancia periférica. PD-1 se expresa a nivel moderado sobre las células T, B y NKT no sensibilizadas y resulta regulado positivamente por la señalización de receptores de células T/B sobre linfocitos, monocitos y células mieloides (1).

Dos ligandos conocidos de PD-1, PD-L1 (B7-H1) y PD-L2 (B7-DC), se expresan en cánceres humanos que aparecen en diversos tejidos. En grupos grandes de muestras de, p. ej., cánceres ovárico, renal, colorrectal, pancreático, hepático y melanoma, se ha demostrado que la expresión de PD-L1 se correlaciona con un mal pronóstico y con una supervivencia global reducida con independencia del tratamiento posterior (2-13). De manera similar, la expresión de PD-1 sobre los linfocitos infiltrantes tumorales se ha encontrado que es marcador de las células T disfuncionales en el cáncer de mama y en el melanoma (14-15) y se correlaciona con un mal pronóstico en el cáncer renal (16). De esta manera, se ha propuesto que las células tumorales expresantes de PD-L1 interactúan con las células T expresantes de PD-1, atenuando la activación de las células T y la evasión de la vigilancia inmunitaria, y contribuyendo de esta manera a una respuesta inmune defectuosa contra el tumor.

Se encuentran en desarrollo clínico para el tratamiento del cáncer varios anticuerpos monoclonales que inhiben la interacción entre PD-1 y uno o ambos de sus ligandos, PD-L1 y PD-L2. Se ha propuesto que la eficacia de dichos anticuerpos podría potenciarse en el caso de que se administrasen en combinación con otras terapias del cáncer aprobadas o experimentales, p.ej., radiación, cirugía, agentes quimioterapéuticos, terapias dirigidas, agentes que inhiben otras rutas de señalización que están desreguladas en tumores y otros agentes inmunopotenciadores.

IDO1 modula la función de las células inmunitarias a un fenotipo supresor y, por lo tanto, explica en parte el escape tumoral de la vigilancia inmune del huésped (17, 18). El enzima indolamina 2,3-dioxigenasa 1 (IDO) degrada el aminoácido esencial triptófano en quinurenina y otros metabolitos. Estos metabolitos y la escasez del triptófano conducen a la supresión de la función de las células T efectoras y a una diferenciación aumentada de las células T reguladoras (19-23). La eficacia antitumoral de anticuerpos inmunoterapéuticos tales como anti-CTLA-4, anti-PD1/anti-PD-L1 y el anticuerpo agonista anti-GITR fue significativamente superior en ratones deficientes en IDO que en ratones de tipo salvaje (24). Esto sugiere que las inmunoterapias basadas en células T resultan perjudicadas por la actividad de iDo y que el bloqueo de esta ruta podría reforzar el potencial terapéutico de dichos anticuerpos.

INCB024360 es un inhibidor selectivo de la actividad del enzima IDO1, que actualmente se encuentra en desarrollo clínico en Inctye Corporation como agente único y en combinación con otras modalidades para múltiples cánceres (25, 26, 28).

MK-3475 es un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 humano humanizado selectivo del isotipo IgG4/kappa que actualmente se encuentra en desarrollo clínico en Merck como agente único y en combinación con otras modalidades para múltiples cánceres.

Descripción resumida de la invención

La invención proporciona un medicamento que comprende un antagonista de la proteína 1 de muerte programada (PD-1) para la utilización en combinación con un inhibidor de IDO1 para el tratamiento de un cáncer en un individuo, en el que el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal con cadenas pesadas, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 21, y cadenas ligeras, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 22; y el inhibidor de IDO1 es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

El inhibidor de IDO1 de la invención puede ser 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3 -carboximidamida.

El cáncer que debe tratarse con el medicamento de la invención puede ser un tumor sólido. El cáncer que debe tratarse con el medicamento de la invención puede ser carcinoma de células renales avanzado.

El antagonista de PD-1 de la invención puede formularse en forma de un medicamento líquido que comprende 25 mg/ml de anticuerpo monoclonal anti-PD-1, sacarosa al 7% (p/v), polisorbato-80 al 0,02% (p/v) en tampón de histidina 10 mM, pH 5,5.

La invención proporciona, además, un kit que comprende un primer recipiente, un segundo recipiente y un impreso en el envase, en el que el primer recipiente comprende por lo menos una dosis de un medicamento que comprende un antagonista de la proteína 1 de muerte programada (PD-1), el segundo recipiente comprende por lo menos una dosis de un medicamento que comprende un inhibidor de IDO1 y el impreso en el envase comprende instrucciones para tratar un individuo para cáncer utilizando los medicamentos, y en el que el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal con cadenas pesadas cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 21 y cadenas ligeras, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 22; y el inhibidor de IDO1 es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

El cáncer que debe tratarse con el medicamento o kit de la presente invención puede ser cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer renal de células claras, carcinoma de células escamosas de cabeza/cuello, carcinoma de células escamosas pulmonar, melanoma, cáncer pulmonar de células no pequeñas (CPCNP), cáncer ovárico, cáncer pancreático, cáncer de próstata, cáncer de células renales, cáncer pulmonar de células pequeñas (CPCP), cáncer de mama triple negativo, cáncer endometrial, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crónica (LLC), leucemia mieloide crónica (LMC), linfoma de células B grandes difusas (LCBGD), linfoma folicular, linfoma de Hodgkin (LH), linfoma de células del manto (LCM), mieloma múltiple (MM), proteína de leucemia-1 de células mieloides (Mcl-1), síndrome mielodisplásico (SMD), linfoma no de Hodgkin (LNH) o linfoma linfocítico pequeño (LLP).

El antagonista de PD-1 de la invención puede administrarse en el individuo en una cantidad de 2 mg/kg y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg o 50 mg.

El antagonista de PD-1 de la invención puede administrarse en el individuo en una cantidad de 200 mg y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg o 50 mg.

El inhibidor de IDO1 puede administrarse en el individuo a una dosis de 25 mg BID o en el que el inhibidor de IDO1 se administra en el individuo a una dosis de 50 mg BID.

El antagonista de PD-1 puede administrarse cada tres semanas y se administra una dosis del inhibidor de IDO1 dos veces al día, preferentemente en el que el inhibidor de IDO1 se administra a intervalos de doce horas.

El antagonista de PD-1 y el inhibidor de IDO1 pueden administrarse en un periodo de dosificación de 21 días.

El cáncer que debe tratarse con el medicamento de la invención puede ser cáncer pulmonar de células no pequeñas (CPCNP), melanoma, cáncer de células transicionales de la vejiga (CCT), cáncer de células renales (CCR) o carcinoma de células escamosas de la cabeza y cuello.

La invención proporciona además el medicamento, en el que:

a) el antagonista de PD-1 se administra en el sujeto en una cantidad de 10 mg/kg, una dosis cada dos semanas o una dosis cada tres semanas, y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg BID, 50 mg BID, 100 mg BID o 300 mg BID, o

b) el antagonista de PD-1 se administra en el sujeto en una cantidad de 2 mg/kg, una dosis cada dos semanas o una dosis cada tres semanas y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg BID.

Se describe además la utilización de un antagonista de PD-1 en la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de un cáncer en un individuo en el caso de que se administre en combinación con un inhibidor de IDO1 y utilización de un inhibidor de IDO1 en la preparación de un medicamento destinado al tratamiento de un cáncer en un individuo al administrarlo en combinación con un antagonista de PD-1.

Se describe además la utilización de un antagonista de PD-1 y un inhibidor de IDO1 en la preparación de medicamentos destinados al tratamiento de un cáncer en un individuo. En algunas realizaciones preferentes, los medicamentos comprenden un kit, y el kit comprende además un impreso en el envase que comprende instrucciones para utilizar el antagonista de PD-1 en combinación con un inhibidor de IDO1 para la utilización en el tratamiento de un cáncer en un individuo.

En la totalidad de los métodos, medicamentos y usos anteriores, el antagonista de PD-1 inhibe la unión de PD-L1 a PD-1 y preferentemente inhibe además la unión de PD-L2 a PD-1. En algunas realizaciones preferentes de los métodos, medicamentos y usos anteriores, el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal, o un fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a PD-1 o a PD-L1, y bloquea la unión de PD-L1 a PD-1. En una realización particularmente preferente, el antagonista de PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1 que comprende una cadena pesada y una cadena ligera, y en el que las cadenas pesadas y ligeras comprenden las secuencias de aminoácidos mostradas en la figura 6 (Se C ID n° 21 y SEC ID n° 22).

En la totalidad de las realizaciones anteriores del método, medicamentos y usos, el inhibidor de IDO1 es un compuesto de fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:

X es:

R1 es Cl, Br, CF3 o CN,

R2 es H o F, y

R3 es Cl o Br.

En algunas realizaciones de los métodos, medicamentos y usos anteriores de la invención, el individuo es un ser humano y el cáncer es un tumor sólido y en algunas realizaciones preferentes, el tumor sólido es cáncer de células transicionales de la vejiga urinaria, adenocarcinoma del endometrio, cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer renal de células claras, carcinoma de células escamosas de cabeza/cuello, carcinoma pulmonar de células escamosas, melanoma, cáncer pulmonar de células no pequeñas (CPCNP), cáncer ovárico, cáncer pancreático, cáncer de próstata, cáncer de células renales (CCR), cáncer pulmonar de células pequeñas (CPCP) o cáncer de mama triple negativo. En otras realizaciones preferentes, el cáncer es CPCNP avanzado o metastásico, melanoma, cáncer de vejiga, cáncer de células renales, cáncer de mama triple negativo, cáncer endometrial o carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello, y en realizaciones más preferentes, el cáncer es de estadio IIIb, estadio IV o CPCNP recurrente en un individuo previamente tratado con un régimen de quimioterapia basado en el platino.

En otras realizaciones de los métodos, medicamentos y usos anteriores de la invención, el individuo es un ser humano y el cáncer es un tumor maligno hematológico y, en algunas realizaciones preferentes, el tumor maligno hematológico es leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crónica (LLC), leucemia mieloide crónica (LMC), linfoma de células B grandes difusas (LCBGD), LCBGD positivo para VEB, linfoma de células B grandes mediastinales primarias, linfoma de células B grandes rico en células T/histiocitos, linfoma folicular, linfoma de Hodgkin (LH), linfoma de células del manto (LCM), mieloma múltiple (MM), proteína de leucemia 1 de células mieloides (Mcl-1), síndrome mielodisplásico (SMD), linfoma no de Hodgkin (l n H) o linfoma linfocítico pequeño (LLP). Además, en realizaciones preferentes de cualquiera de los métodos, medicamentos y usos anteriores, los ensayos de cáncer positivos para la expresión de PD-L1, PD-L2 o ambos. En realizaciones particularmente preferentes, el cáncer presenta una expresión elevada de PD-L1.

En una realización particularmente preferente de los métodos, medicamentos y usos anteriores, el individuo es un ser humano y el cáncer es CPCNP avanzado o metastásico con resultado positivo en el ensayo para PD-L1 humano. Breve descripción de los dibujos

La FIGURA 1 muestra las secuencias de aminoácidos de las CDR de cadena ligera y cadena pesada para un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar útil en la presente invención (SEC ID n° 1 a n° 6).

La FIGURA 2 muestra las secuencias de aminoácidos de las CDR de cadena ligera y cadena pesada para otro anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar útil en la presente invención (SEC ID n° 7 a n° 12).

La FIGURA 3 muestra las secuencias de aminoácidos de la región variable de cadena pesada y cadena pesada de longitud completa para un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar útil en la presente invención (SEC ID n° 13 y SEC ID n° 14).

La FIGURA 4 muestra las secuencias de aminoácidos de regiones variables de cadena ligera alternativas da para un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar útil en la presente invención (SEC ID n° 15 a n° 17).

Las FIGURAS 5A y 5B muestran las secuencias de aminoácidos de cadenas ligeras alternativas para un anticuerpo monoclonal anti-PD-1 ejemplar útil en la presente invención (SEC ID n° 18 a n° 20).

La FIGURA 6 muestra secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera de MK-3475 (SEC ID n° 21 y n° 22, respectivamente).

La FIGURA 7 muestra secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera del nivolumab (SEC ID n° 23 y n° 24, respectivamente).

Descripción detallada

Abreviaturas. En toda la descripción detallada y ejemplos de la invención se utilizan las abreviaturas siguientes:

BID Una dosis dos veces al día

CDR Región determinante de complementariedad

CHO Ovario de hámster chino

SLE Supervivencia libre de enfermedad

TLD Toxicidad limitante de dosis

FFPE Fijado con formalina e incluido en parafina

FR Región marco

IgG Inmunoglobulina G

IHC Inmunohistoquímica o inmunohistoquímico

DMT Dosis máxima tolerada

NCBI National Center for Biotechnology Information

NCI National Cancer Institute

RG Respuesta global

SG Supervivencia global

EP Enfermedad progresiva

SLP Supervivencia libre de progresión

RP Respuesta parcial

Q2W Una dosis cada dos semanas

Q3W Una dosis cada tres semanas

QD Una dosis al día

RECIST Criterios de evaluación de respuesta en tumores sólidos

EE Enfermedad estable

VH Región variable de cadena pesada de inmunoglobulina

VK Región variable de cadena ligera kappa de inmunoglobulina

I. DEFINICIONES

A fin de que la invención pueda entenderse más claramente, se definen a continuación determinados términos técnicos y científicos. A menos que se defina específicamente en otro sitio en el presente documento, todos los demás términos técnicos y científicos presentan el mismo significado que el comprendido comúnmente por el experto ordinario en la materia a la que se refiere la presente invención.

El término "aproximadamente" utilizado para modificar un parámetro definido numéricamente (p.ej., la dosis de un antagonista de PD-1 o inhibidor de IDOl, o la duración del tiempo de tratamiento con una terapia de combinación indicada en la presente memoria) se refiere a que el parámetro puede variar hasta en 10% bajo o sobre el valor numérico indicado para ese parámetro. Por ejemplo, una dosis de aproximadamente 5 mg/kg puede variar entre 4,5 mg/kg y 5,5 mg/kg.

Tal como se utiliza en la presente memoria, incluyendo las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares “un”, “una” y “el” o “ la” incluyen los referentes plurales correspondientes, a menos que el contexto indique claramente lo contrario.

Los términos "administración" y "tratamiento", tal como se aplica a los materiales biológicos, tales como un sujeto experimental, célula, tejido, órgano o líquido biológico animal o humano, se refiere al contacto de un agente farmacéutico, terapéutico o diagnóstico exógeno, o la composición con el líquido animal, humano, de la invención, celular, tisular, orgánico o biológico. El tratamiento de una célula comprende poner en contacto un reactivo con la célula, así como poner en contacto un reactivo con un líquido, en donde el líquido se encuentra en contacto con la célula. Los términos "administración" y "tratamiento" significan además tratamientos in vitro y ex vivo, p.ej., de una célula, con un reactivo, diagnóstico, compuesto ligante o con otra célula. El término "sujeto" incluye cualquier organismo, preferentemente un animal, más preferentemente un mamífero (p.ej., rata, ratón, perro, gato o conejo) y lo más preferentemente, un ser humano.

Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "anticuerpo" se refiere a cualquier forma de anticuerpo que muestra la actividad biológica o de unión deseada. De esta manera, se utiliza en el sentido más amplio y cubre específicamente, aunque sin limitación, anticuerpos monoclonales (incluyendo anticuerpos monoclonales de longitud completa), anticuerpos policlonales, anticuerpos multiespecíficos (p.ej., anticuerpos biespecíficos), anticuerpos humanizados, anticuerpos totalmente humanos, anticuerpos quiméricos y anticuerpos de dominio único camelizados. Los "anticuerpos parentales" son anticuerpos obtenidos mediante exposición de un sistema inmunitario a un antígeno antes de la modificación de los anticuerpos para un uso pretendido, tal como la humanización de un anticuerpo para la utilización como un terapéutico humano.

En general, la unidad estructural de anticuerpo básica comprende un tetrámero. Cada tetrámero incluye dos pares idénticos de cadenas polipeptídicas, presentando cada par una cadena "ligera" (de aproximadamente 25 kDa) y una cadena "pesada" (de aproximadamente 50 a 70 kDa). La parte aminoterminal de cada cadena incluye una región variable de aproximadamente 100 a 110 o más aminoácidos principalmente responsables del reconocimiento de antígenos. La parte carboxiterminal de la cadena pesada puede definir una región constante responsable principalmente de la función efectora. Típicamente, las cadenas ligeras humanas se clasifican como cadenas ligeras kappa y lambda. Además, las cadenas pesadas humanas se clasifican típicamente como mu, delta, gamma, alfa, o epsilón, y definen el isotipo del anticuerpo como IgM, IgD, IgG, IgA e IgE, respectivamente. Dentro de las cadenas ligeras y pesadas, las regiones variables y constantes se unen mediante una región "J" de aproximadamente 12 o más aminoácidos, en la que la cadena pesada incluye también una región "D" de aproximadamente 10 o más aminoácidos. Ver generalmente Fundamental Immunology cap. 7 (Paul, W., ed., 2a ed. Raven Press, N.Y. (1989).

Las regiones variables de cada cadena ligera/pesada forman el sitio de unión del anticuerpo. De esta manera, en general, un anticuerpo intacto presenta dos sitios de unión. Excepto en los anticuerpos bifuncionales o biespecíficos, los dos sitios de unión son, en general, iguales.

Típicamente, los dominios variables de tanto cadenas pesadas como ligeras comprende tres regiones hipervariables, también denominadas regiones determinantes de complementariedad (CDR), que están situadas dentro de regiones marco (FR) relativamente conservadas. Las CDR habitualmente están alineadas por las regiones marco, permitiendo la unión a un epítopo específico. En general, de extremo N-terminal a C-terminal, los dominios variables de tanto cadenas ligeras como pesadas comprenden FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 y FR4. La asignación de aminoácidos a cada dominio se realiza, generalmente, de acuerdo con las definiciones de Sequences of Proteins of Immunological Interest, Kabat, et al.; National Institutes of Health, Bethesda, Md., 5a ed.; NIH Publ. n° 91-3242, 1991; Kabat, Adv. Prot. Chem. 32:1-75, 1978; Kabat, et al., J. Biol. Chem. 252:6609-6616, 1977; Chothia, et al., J. Mol. Biol. 196:901-917, 1987 o Chothia, et al., Nature 342:878-883, 1989.

Tal como se utiliza en la presente memoria, la expresión "región hipervariable" se refiere a los residuos aminoácidos de un anticuerpo que son responsables de la unión a antígeno. La región hipervariable comprende residuos aminoácidos de una "región determinante de complementariedad" o "CDR" (es decir, CDRL1, CDRL2 y CDRL3 en el dominio variable de cadena ligera y CDRH1, CDRH2 y CDRH3 en el dominio variable de cadena pesada). Ver Kabat et al. Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5a ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md, 1991 (que define las regiones CDR de un anticuerpo según secuencia); ver también Chothia and Lesk, J. Mol. Biol. 196: 901-917, 1987 (que define las regiones CDR de un anticuerpo según estructura). Tal como se utiliza en la presente memoria, el término de "marco" o "FR" referido a residuos se refiere a aquellos residuos del dominio variable diferentes de los residuos de la región hipervariable definidos en la presente memoria como residuos de CDR.

Tal como se utiliza en la presente memoria, a menos que se indique lo contrario, "fragmento de anticuerpo" o "fragmento de unión a anticuerpo" se refiere a fragmentos de unión a antígeno de los anticuerpos, es decir, fragmentos de anticuerpo que conservan la capacidad de unirse específicamente al antígeno unido al anticuerpo de longitud completa, p.ej., fragmentos que conservan una o más regiones CDR. Entre los ejemplos de fragmentos de unión a anticuerpo se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, los fragmentos Fab, Fab', F(ab')2 y Fv, anticuerpos lineales, moléculas de anticuerpos de cadena sencilla, p.ej., scFv, nanocuerpos y anticuerpos multiespecíficos formados a partir de fragmentos de anticuerpos.

Un anticuerpo que "se une específicamente a" una proteína diana específica es un anticuerpo que muestra unión preferente a esa diana en comparación con otras dianas, aunque dicha especificidad no requiere una especificidad de unión absoluta. Un anticuerpo se considera "específico" para su diana pretendida en el caso de que se unión se determine a partir de la presencia de la proteína diana en la muestra, p.ej., sin producir resultados no deseados, tales como falsos positivos. Los anticuerpos, o fragmentos de unión de los mismos, útiles en la presente invención se unirán a la proteína diana con una afinidad que es por lo menos dos veces superior, preferentemente por lo menos diez veces superior, más preferentemente por lo menos 20 veces superior, y lo más preferentemente, por lo menos 100 veces superior a la afinidad para proteínas no diana. Tal como se utiliza en la presente memoria, se afirma que un anticuerpo se une específicamente a un polipéptido que comprende una secuencia de aminoácidos dada, p.ej., la secuencia de aminoácidos de una molécula de PD-1 humano maduro o molécula de PD-L1 humano, en el caso de que se una a polipéptidos que comprenden la secuencia, aunque no se une a proteínas que no presentan dicha secuencia.

La expresión "anticuerpo quimérico" se refiere a un anticuerpo en el que una parte de la cadena pesada y/o ligera es idéntica u homóloga a secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de una especie particular (p.ej., el ser humano) o perteneciente a una clase o subclase particular de anticuerpos, mientras que el resto de la cadena o cadenas es idéntico u homólogo a las secuencias correspondientes en anticuerpos derivados de otra especie (p.ej., el ratón) o pertenecientes a otra clase o subclase de anticuerpos, así como fragmentos de dichos fragmentos, con la condición de que muestren la actividad biológica deseada.

La expresión "anticuerpo humano" se refiere a un anticuerpo que comprende secuencias de proteína inmunoglobulina humanas únicamente. Un anticuerpo humano puede contener cadenas de carbohidrato murinas, en caso de producirse en un ratón, en una célula de ratón o en un hibridoma derivado de una célula de ratón. De manera similar, "anticuerpo de ratón" o "anticuerpo de rata" se refiere a un anticuerpo que comprende únicamente secuencias de inmunoglobulina de ratón o rata, respectivamente.

La expresión "anticuerpo humanizado" se refiere a formas de anticuerpos que contienen secuencias de anticuerpos no humanos (p.ej., murinos), así como anticuerpos humanos. Dichos anticuerpos contienen una secuencia mínima derivada de una inmunoglobulina no humana. En general, el anticuerpo humanizado comprende sustancialmente la totalidad de por lo menos uno, y típicamente dos, dominios variables en los que la totalidad, o sustancialmente la totalidad, de los bucles hipervariables que corresponden a los de una inmunoglobulina no humana, y la totalidad, o sustancialmente la totalidad, de las FR corresponden a las de una secuencia de inmunoglobulina humana. El anticuerpo humanizado opcionalmente puede comprender por lo menos una parte de una región constante (Fc) de inmunoglobulina, típicamente la de una inmunoglobulina humana. El prefijo "hum", "hu" o "h" se añade a las designaciones del clon de anticuerpo en caso necesario para distinguirlo de los anticuerpos humanizados de anticuerpos de roedor parentales. Las formas humanizadas de anticuerpos de roedor generalmente comprenden las mismas secuencias de CDR de los anticuerpos de roedor parentales, aunque pueden incluirse determinadas sustituciones de aminoácidos para incrementar la afinidad, incrementar la estabilidad del anticuerpo humanizado, o por otros motivos.

Los términos “cáncer”, “canceroso” o "maligno" se refieren o describen la condición fisiológica en mamíferos que se caracteriza típicamente por el crecimiento celular no regulado. Entre los ejemplos de cáncer se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, carcinoma, linfoma, leucemia, blastoma y sarcoma. Entre los ejemplos más particulares de dichos cánceres se incluyen carcinoma de células escamosas, mieloma, cáncer pulmonar de células pequeñas, cáncer pulmonar de células no pequeñas, linfoma de Hodgkin, linfoma no de Hodgkin, leucemia mieloide aguda (LMA), mieloma múltiple, cáncer gastrointestinal (del tracto gastrointestinal), cáncer renal, cáncer ovárico, cáncer de hígado, leucemia linfoblástica, leucemia linfocítica, cáncer colorrectal, cáncer endometrial, cáncer de riñón, cáncer de próstata, cáncer de tiroides, melanoma, condrosarcoma, neuroblastoma, cáncer pancreático, glioblastoma multiforme, cáncer cervical, cáncer cerebral, cáncer de estómago, cáncer de vejiga, hepatoma, cáncer de mama, carcinoma de colon y cáncer de cabeza y cuello. Entre los cánceres particularmente preferentes que pueden tratarse de acuerdo con la presente invención se incluyen los caracterizados por una expresión elevada de uno o ambos de PD-L1 y PD-L2 en las muestras de tejidos sometidas a ensayo.

La expresión "agente bioterapéutico" se refiere a una molécula biológica, tal como un anticuerpo o proteína de fusión, que bloquea la señalización de ligando/receptor en cualquier ruta biológica que soporta el mantenimiento y/o crecimiento tumoral o suprime la respuesta inmune antitumoral.

"CDR" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a una o más regiones determinantes de complementariedad en una región variable de inmunoglobulina, definida utilizando el sistema de numeración de Kabat, a menos que se indique lo contrario.

La expresión "agente quimioterapéutico" es un compuesto químico que resulta útil en el tratamiento del cáncer. Entre las clases de agentes quimioterapéuticos se incluyen, aunque sin limitación, agentes alquilantes, antimetabolitos, inhibidores de quinasa, alcaloides vegetales de veneno del huso, antibióticos citotóxicos/antitumorales, inhibidores de topoisomerasa, fotosensibilizadores, antiestrógenos y moduladores selectivos de los receptores de estrógeno (SERM, por sus siglas en inglés), antiprogesteronas, reguladores negativos de receptores de estrógenos (ERD), antagonistas de receptores de estrógenos, agonistas de la hormona liberadora de hormona luteinizante, antiandrógenos, inhibidores de aromatasa, inhibidores de EGFR, inhibidores de VEGF, oligonucleótidos antisentido que inhiben la expresión de genes implicados en la proliferación celular anormal o crecimiento tumoral. Entre los agentes quimioterapéuticos útiles en los métodos de tratamiento de la presente invención se incluyen los agentes citostáticos y/o citotóxicos.

"Chothia" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a un sistema de numeración de anticuerpos descrito en Al-Lazikani et al., JMB 273:927-948, 1997.

La expresión "variantes modificadas conservadoramente" o "sustitución conservadora" se refiere a sustituciones de aminoácidos en una proteína por otros aminoácidos con características similares (p.ej., carga, tamaño de cadenas laterales, hidrofobicidad/hidrofilicidad, conformación del esqueleto y rigidez, etc.), de manera que los cambios pueden llevarse a cabo frecuentemente sin alterar la actividad biológica u otra propiedad deseada de la proteína, tal como la afinidad y/o la especificidad de antígeno. El experto en la materia reconocerá que, en general, las sustituciones de aminoácidos individuales en regiones no esenciales de un polipéptido no alteran sustancialmente la actividad biológica (ver, p.ej., Watson et al., Molecular Biology of the Gene, The Benjamin/Cummings Pub. Co., página 224 (4a ed., 1987). Además, las sustituciones de aminoácidos estructural o funcionalmente similares es menos probable que alteren la actividad biológica. Se proporcionan sustituciones conservadoras ejemplares en la Tabla 1, a continuación.

TABLA 1. sustituciones de aminoácidos conservadoras ejemplares

La expresión "consiste esencialmente en" y variaciones tales como "consiste esencialmente en" o "que consiste esencialmente en", tal como se utiliza en toda la especificación y reivindicaciones, indica la inclusión de cualesquiera elementos o grupos de elementos indicados, y la inclusión opcional de otros elementos, de naturaleza similar o diferente de la de los elementos indicados, que no modifican materialmente las propiedades básicas o nuevas del régimen de dosificación, método o composición especificad. A título de ejemplo no limitativo, un antagonista de PD-1 que consiste esencialmente en una secuencia de aminoácidos indicada puede incluir además uno o más aminoácidos, incluyendo sustituciones de uno o más residuos aminoácidos, que no afectan materialmente a las propiedades del compuesto de unión.

La expresión "anticuerpo monoclonal anti-PD-L diagnóstico" se refiere a un mAb que se une específicamente a la forma madura del PD-L designado (PD-L1 o PD-L2) que se expresa sobre la superficie de determinadas células de mamífero. Un PD-L maduro no presenta la secuencia líder presecretoria, también denominada péptido líder. Los términos "PD-L" y "PD-L maduro" se utilizan intercambiablemente en la presente memoria y debe entenderse que se refieren a la misma molécula, a menos que se indique lo contrario o resulte fácilmente evidente a partir del contexto.

Tal como se utiliza en la presente memoria, un mAb anti-PD-L1 humano o un mAb anti-hPD-L1 diagnóstico se refiere a un anticuerpo monoclonal que se une específicamente a PD-L1 humano maduro. Una molécula de PD-L1 humano maduro consiste en los aminoácidos 19 a 290 de la secuencia siguiente:

M R IF A V F IFMTYWHLLNAFTVTVPKDLYVVEYGSNMTIECKFPVEKQLDLAALIVYWEMEDKNT

IQFVHGEEDLKVQHSSYRQRARLLKDQLSLGNAALQITDVKLQDAGVYRCMISYGGADYKRITV

KVNAPYNKINQRILW DPVTSEHELTCQAE GYPKAEVIWTSSDHQVLSGKTTTTNSKREEKLFN

VTSTLRINTTTNEIFYCTFRRLDPEENHTAELVIPELPLAHPPNERTHLVILG AILLCLG VALT

FIFRLRKGRMMDVKKCGIQDTNSKKQSDTHLEET (SEC ID n° 25)

Son ejemplos específicos de mAb anti-PD-L1 humano diagnósticos que resultan útiles como mAb diagnósticos para la detección inmunohistoquímica (IHQ) de la expresión de PD-L1 en secciones de tejido tumoral fijadas con formalina e incluidas en parafina (FFPE), el anticuerpo 20C3 y el anticuerpo 22C3, que se describen en la solicitud copendiente de patente internacional n° PCT/US13/075932, presentada el 18 de diciembre de 2013. Otro mAb anti-PD-LI humano que se ha informado que resulta útil para la detección IHQ de la expresión de PD-L1 en secciones de tejido FFPE (Chen B.J. et al., Clin. Cancer Res. 19: 3462-3473, 2013) es un mAb de conejo anti-PD-L1 humano disponible públicamente de Sino Biological, Inc. (Beijing, P.R. China; número de catálogo 10084-R015).

La expresión "región marco" o "FR" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a las regiones variables de inmunoglobulina excluyendo las regiones CDR.

El término "homología" se refiere a la similitud de secuencia entre dos secuencias polipeptídicas una vez se han alineado óptimamente. En el caso de que una posición en las dos secuencias comparadas esté ocupada por la misma subunidad monomérica de aminoácido, p.ej., en el caso de que una posición en una CDR de cadena ligera de dos anticuerpos diferentes esté ocupada por alanina, los dos anticuerpos son homólogos en esa posición. El porcentaje de homología es el número de posiciones homólogas compartido por las dos secuencias, dividido por el número de posiciones comparadas X 100. Por ejemplo, en el caso de que 8 de 10 de las posiciones en las dos secuencias sean correspondientes u homólogas una vez se han alineado ópticamente las secuencias, las dos secuencias son homólogas al 80%. Generalmente, la comparación se lleva a cabo una vez las dos secuencias han sido alineadas para proporcionar el porcentaje máximo de homología. Por ejemplo, la comparación puede llevarse a cabo con un algoritmo de BLAST en el que los parámetros del algoritmo se seleccionan para proporcionar la máxima correspondencia entre las secuencias respectivas a lo largo de toda la longitud de las secuencias de referencia respectivas.

Las referencias siguientes se refieren a algoritmos de BLAST utilizados con frecuencia para el análisis de secuencias: ALGORITMOS DE BLAST: Altschul, S.F., et al., (1990) J. Mol. Biol. 215:403-410; Gish, W., et al, (1993) Nature Genet.

3:266-272; Madden, T.L., et al., (1996) Meth. Enzymol. 266:131-141; Altschul, S.F., et al., (1997) Nucleic Acids Res.

25:3389-3402; Zhang, J., et al., (1997) Genome Res. 7:649-656; Wootton, J.C., et al., (1993) Comput. Chem. 17:149-163; Hancock, J.M. et al., (1994) Comput. US Biosci. 10:67-70; SISTEMAS DE PUNTUACIÓN DE ALINEACIÓN: Dayhoff, M.O., et al., "A model of evolutionary change in proteins." in Atlas of Protein Sequence and Structure, (1978) vol. 5, suppl. 3. M.O. Dayhoff (ed.), páginas 345 a 352, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Schwartz, R.M., et al, "Matrices for detecting distant relationships." in Atlas of Protein Sequence and Structure, (1978) vol. 5, supl. 3." M.O. Dayhoff (ed.), páginas 353 a 358, Natl. Biomed. Res. Found., Washington, DC; Altschul, S.F., (1991) J. Mol. Biol. 219:555-565; States, D.J., et al., (1991) Methods 3:66-70; Henikoff, S., et al., (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 89:10915-10919; Altschul, S.F., et al., (1993) J. Mol. Evol. 36:290-300; ESTADÍSTICAS DE LAS ALINEACIONES: Karlin, S., et al., (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:2264-2268; Karlin, S., et al., (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:5873-5877; Dembo, A., et al., (1994) Ann. Prob. 22:2022-2039; and Altschul, S.F. "Evaluating the statistical significance of multiple distinct local alignments." in Theoretical and Computational Methods in Genome Research (S. Suhai, ed.), (1997) páginas 1 a 14, Plenum, New York.

La expresión "anticuerpo aislado" y "fragmento de anticuerpo aislado" se refiere al estado de purificación y en este contexto, la molécula nombrada se encuentra sustancialmente libre de otras moléculas biológicas, tales como ácidos nucleicos, proteínas, lípidos, carbohidratos u otro material, tal como residuos celulares y medios de cultivo. Generalmente, el término "aislado" no pretende referirse a una ausencia completa de dicho material o a una ausencia de agua, tampones o sales, a menos que se encuentren presentes en cantidades que interfieran sustancialmente con la utilización experimental o terapéutica del compuesto de unión tal como se indica en la presente memoria.

El término "Kabat" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a un sistema de alineación y numeración de inmunoglobulinas introducido por primera vez por Elvin A. Kabat (Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5a ed. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, Md, 1991).

La expresión "anticuerpo monoclonal", o "mAb" o "Mab", tal como se utiliza en la presente memoria, se refiere a una población de anticuerpos sustancialmente homogénea, es decir, las moléculas de anticuerpo que comprende la población son idénticas excepto por posibles mutaciones naturales que pueden encontrarse presentes en cantidades menores. En contraste, las preparaciones de anticuerpos (policlonales) convencionales típicamente incluyen una multitud de diferentes anticuerpos con diferentes secuencias de aminoácidos en sus dominios variables, particularmente sus CDR, que con frecuencia son específicas para diferentes epítopos. El modificador "monoclonal" indica el carácter del anticuerpo como obtenido de una población sustancialmente homogénea de anticuerpos y no debe interpretarse como que requiere la producción del anticuerpo mediante cualquier método particular. Por ejemplo, los anticuerpos monoclonales para la utilización según la presente invención pueden generarse mediante el método de hibridoma, descrito por primera vez por Kohler et al., Nature 256: 495, 1975, o pueden generarse mediante métodos de ADN recombinante (ver, p.ej., la patente US n° 4.816.567. Los "anticuerpos monoclonales" también pueden aislarse a partir de bibliotecas de anticuerpos fágicos utilizando las técnicas indicadas en Clackson et al., Nature 352: 624-628, 1991 y Marks et al., J. Mol. Biol. 222: 581-597, 1991, por ejemplo. Ver también Presta, J. Allergy Clin. Immunol.

116:731,2005.

El término "paciente" o "sujeto" se refiere a cualquier sujeto individual para el que se desea terapia o que participa en un ensayo clínico, estudio epidemiológico o que se utiliza a modo de control, incluyendo seres humanos o pacientes veterinarios mamíferos, tales como vacas, caballos, perros y gatos.

La expresión "antagonista de PD-1" se refiere a cualquier compuesto químico o molécula biológica que bloquea la unión de PD-L1 expresado sobre una célula de cáncer a PD-1 expresado sobre una célula inmunitaria (célula T, célula B o célula NKT) y preferentemente bloquea además la unión de PD-L2 expresado sobre una célula de cáncer a PD-1 expresado por una célula inmunitaria. Entre los nombres alternativos o sinónimos de PD-1 y sus ligandos se incluyen: PDCD1, PD1, CD279 y SLEB2 para PD-1; PDCD1L1, PDL1, B7H1, B7-4, CD274 y B7-H para PD-L1; y PDCD1L2, PDL2, B7-DC, Btdc y CD273 para PD-L2. En cualquiera de los métodos de tratamiento, medicamentos y usos de la presente invención con los que un individuo humano se encuentra bajo tratamiento, el antagonista de PD-1 bloquea la unión de PD-L1 humano a PD-1 humano, y preferentemente bloquea la unión de tanto PD-L1 como PD-L2 humano a PD-1 humano. Las secuencias de aminoácidos de PD-1 humano pueden encontrarse en NCBI locus n° NP_005009.

Las secuencias de aminoácidos de PD-L1 y PD-L2 humanos pueden encontrarse en NCBI loci n° NP_054862 y NP_079515, respectivamente.

Entre los antagonistas de PD-1 útiles en cualquiera de los métodos, medicamentos y usos de la presente invención se incluyen un anticuerpo monoclonal (mAb) o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a PD-1 o a PD-L1, y que preferentemente se une específicamente a pD-1 humano o PD-L1 humano. El mAb puede ser un anticuerpo humano, un anticuerpo humanizado o un anticuerpo quimérico, y puede incluir una región constante humana. La región constante humana se selecciona del grupo que consiste en las regiones constantes de IgG1, IgG2, IgG3 e IgG4, y en realizaciones preferentes, la región constante humana es una región constante de IgG4. En algunas realizaciones, el fragmento de unión a antígeno se selecciona del grupo que consiste en los fragmentos Fab, Fab'-SH, F(ab')2, scFv y Fv.

Los ejemplos de mAb que se unen a PD-1 humano se describen en los documentos n° US7488802, n° US7521051, n° US8008449, n° US8354509, n° US8168757, n° WO2004/004771, n° WO2004/072286, n° WO2004/056875 y n° US2011/0271358. El mAb anti-PD-1 humano específico útil como antagonista de PD-1 en los métodos, medicamentos y usos de la presente invención es MK-3475, un mAb IgG4 humanizado con la estructura indicada en WHO Drug Information, vol. 27, n° 2, páginas 161 a 162, 2013) y que comprende las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera mostradas en la figura 6. Otro mAb anti-PD-1 humano indicado en la presente memoria es nivolumab (BMS-936558), un mAb IgG4 humanizado con la estructura indicada en WHO Drug Information, vol. 27, n° 1, páginas 161 a 69, 2013, y que comprende las secuencias de aminoácidos de las cadenas pesada y ligera mostradas en la figura 7. En la presente memoria se dan a conocer los anticuerpos humanizados h409A11, h409A16 y h409A17, que se describen en el documento n° WO2008/156712, y AMP-514, que está siendo desarrollado por MedImmune.

Se describen ejemplos de mAb que se unen a PD-L1 humano en los documentos n1 WO2013/019906, n° WO2010/077634 A1 y n° US8383796. Entre los mAb anti-PD-L1 humano específicos se incluyen MPDL3280A, BMS-936559, MEDI4736, MSB0010718C y un anticuerpo que comprende las regiones variables de cadena pesada y cadena ligera de SEC ID n° 24 y SEC ID n° 21, respectivamente, del documento n° WO2013/019906.

Entre otros antagonistas de PD-1 se incluyen una inmunoadhesina que se une específicamente a PD-1 o PD-L1, y preferentemente se une específicamente a PD-1 humano o a PD-L1 humano, p.ej., una proteína de fusión que contiene la parte extracelular o de unión a PD-1 de PD-L1 o PD-L1 fusionada con una región constante, tal como una región Fc de una molécula de inmunoglobulina. Se describen ejemplos de moléculas de inmunoadhesina que se unen específicamente a PD-1 en los documentos n° WO2010/027827 y n° WO2011/066342. Entre las proteínas de fusión específicas se incluyen AMP-224 (también conocido como B7-DCIg), que es una proteína de fusión PD-L2-Fc y se une a PD-1 humano.

En la presente memoria se da a conocer el antagonista de PD-1 como un anticuerpo monoclonal, o fragmento de unión a antígeno del mismo, que comprende: (a) CDR de cadena ligera, SEC ID n° 1,2 y 3, y CDR de cadena pesada, SEC ID n° 4, 5 y 6; o (b) CDR de cadena ligera, SEC ID n° 7, 8 y 9, y CDR de cadena pesada, SEC ID n° 10, 11 y 12.

En la presente memoria se da a conocer el antagonista de PD-1 como anticuerpo monoclonal, o fragmento de unión a antígeno del mismo, que se une específicamente a PD-1 humano y comprende: (a) una región variable de cadena pesada que comprende SEC ID n° 13 o una variante de la misma, y (b) una región variable de cadena ligera que comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo que consiste en SEC ID n° 15 o una variante de la misma, SEC ID n° 16 o una variante de la misma, y SEC ID n° 17 o una variante de la misma. Una variante de una secuencia de región variable de cadena pesada es idéntica a la secuencia de referencia excepto en que presenta hasta 17 sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región de marco (es decir, fuera de las CDR), y preferentemente presenta menos de diez, nueve, ocho, siete, seis o cinco sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región de marco. Una variante de una secuencia de región variable de cadena ligera es idéntica a la secuencia de referencia excepto en que presenta hasta cinco sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región de marco (es decir, fuera de las CDR), y preferentemente presenta menos de cuatro, tres o dos sustituciones conservadoras de aminoácidos en la región de marco.

En la presente memoria se da a conocer el antagonista de PD-1 como anticuerpo monoclonal que se une específicamente a PD-1 humano y comprende: (a) una cadena pesada que comprende la SEC ID n° 14 y (b) una cadena ligera que comprende la SEC ID n° 18, Se C ID n° 19 y s Ec ID n° 2o.

En la presente memoria se da a conocer el antagonista de PD-1 como anticuerpo monoclonal que se une específicamente a PD-1 humano y comprende: (a) una cadena pesada que comprende la SEC ID n° 14 y (b) una cadena ligera que comprende la SEC ID n° 18.

En la Tabla 2, a continuación, se da a conocer una lista de secuencias de aminoácidos de los mAb anti-PD-1, y las secuencias se muestran en las figuras 1 a 5.

La expresión "PD-L1" o "PD-L2" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a cualquier nivel detectable de expresión de la proteína PD-L designada sobre la superficie celular del ARNm de PD-L designado dentro de una célula o tejido. La expresión de la proteína PD-L puede detectarse con un anticuerpo de PD-L diagnóstico en un ensayo IHQ de una sección de tejido tumoral o mediante citometría de flujo. Alternativamente, la expresión de la proteína p D-L por las células tumorales puede detectarse mediante imágenes de PET utilizando un agente ligante (p.ej., un fragmento de anticuerpo, aficuerpo y similar) que se une específicamente a la diana de PD-L deseada, p.ej., PD-L1 o PD-L2. Entre las técnicas para detectar y medir la expresión de ARNm de PD-L se incluyen RT-PCR y RT-PCR cuantitativa en tiempo real.

Se han descrito varios enfoques para cuantificar la expresión de la proteína PD-L1 en los ensayos IHQ de secciones de tejido tumoral. Ver, p.ej., Thompson, R. H., et al., PNAS 101 (49); 17174-17179, 2004; Thompson, R. H. et al., Cancer Res. 66:3381-3385, 2006; Gadiot, J., et al., Cancer 117:2192-2201,2011; Taube, J. M. et al., Sci. Transl. Med.

4, 127ra37, 2012 y Toplian, S. L. et al., New Eng. J. Med. 366 (26): 2443-2454, 2012.

Un enfoque utiliza un punto final binario simple de positivo o negativo para la expresión de PD-L1, en donde un resultado positivo se define en términos del porcentaje de células tumorales que muestran evidencia histológica de tinción membranal de la superficie celular. Se cuenta una sección de tejido tumoral como positiva para la expresión de PD-L1 con por lo menos 1%, y preferentemente 5%, del total de células tumorales.

En otro enfoque, la expresión de PD-L1 en la sección de tejido tumoral se cuantifica en las células tumorales, así como en células inmunitarias infiltrantes, que predominantemente comprenden linfocitos. El porcentaje de células tumorales y células inmunitarias infiltrantes que muestran tinción membranal se cuantifica separadamente como <5%, 5% a 9%, y después en incrementos de 10% hasta 100%. Para las células tumorales, la expresión de PD-L1 se cuenta como negativa en el caso de que la puntuación sea <5% y positiva en el caso de que la puntuación sea > 5%. La expresión de PD-L1 en el infiltrado inmunitario se informa como una medición semicuantitativa denominada puntuación de inflamación ajustada (PIA), que se determina mediante multiplicación del porcentaje de células con tinción membranal por la intensidad del infiltrado, que se clasifica como nula (0), leve (puntuación de 1, linfocitos raros), moderada (puntuación 2, infiltración focal del tumor por agregados linfohistiocíticos) o severa (puntuación de 3, infiltración difusa). Una sección de tejido tumoral se cuenta como positiva para la expresión de PD-L1 por infiltrados inmunitarios en el caso de que PIA sea > 5.

El nivel de expresión de ARNm de PD-L puede compararse con los niveles de expresión de ARNm de uno o más genes de referencia que se utilizan frecuentemente en RT-PCR cuantitativa, tal como la ubiquitina C.

En algunas realizaciones, se determina que un nivel de expresión de PD-L1 (proteína y/o ARNm) por células malignas y/o por células inmunitarias infiltrantes dentro de un tumor está "sobreexpresado" o "elevado" basándose en la comparación con el nivel de expresión de PD-L1 (proteína y/o ARNm) por un control apropiado. Por ejemplo, un nivel de expresión de control de proteína o ARNm de PD-L1 puede ser el nivel cuantificado en células no malignas del mismo tipo o en una sección de un tejido normal correspondiente. En algunas realizaciones preferentes, la expresión de PD-L1 en una muestra de tumor se determina que se encuentra elevada en el caso de que la proteína PD-L1 (y/o el ARNm de PD-L1) en la muestra es por lo menos 10%, 20% o 30% superior que en el control.

La expresión "criterios de respuesta RECIST 1.1" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a las definiciones indicadas en Eisenhauer et al., E.A. et al., Eur. J. Cancer 45:228-247, 2009 para lesiones diana o lesiones no diana, según resulte apropiado basándose en el contexto en el que se está midiendo la respuesta.

La expresión "respuesta sostenida" (RS) se refiere a un efecto terapéutico sostenida tras el cese del tratamiento con un agente terapéutico, o una terapia de combinación indicada en la presente memoria. En algunas realizaciones, la respuesta sostenida presenta una duración que es por lo menos igual a la duración del tratamiento, por lo menos 1,5, 2,0, 2,5 o 3 veces más prolongada que la duración del tratamiento.

La expresión "sección de tejido" se refiere a una única parte o trozo de una muestra de tejido, p.ej., una sección delgada de tejido cortada a partir de una muestra de un tejido normal o de un tumor.

El término "tratar" o "tratamiento" de un cáncer tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a administrar una terapia de combinación de un antagonista de PD1 y un inhibidor de IDO1 en un sujeto que presenta un cáncer, o diagnosticado con un cáncer, para conseguir por lo menos un efecto terapéutico positivo, tal como, por ejemplo, un número reducido de células de cáncer, un tamaño tumoral reducido, una tasa reducida de infiltración de las células de cáncer en órganos periféricos o una tasa reducida de metástasis tumoral o crecimiento tumoral. Los efectos terapéuticos positivos en el cáncer pueden medirse de varias maneras (ver W. A. Weber, J. Nucl. Med. 50:1S-10S, 2009). Por ejemplo, con respecto a la inhibición del crecimiento tumoral, según los estándares del NCI, una T/C ^42% es el nivel mínimo de actividad antitumoral. A T/C < 10% se considera un nivel elevado de actividad antitumoral, con T/C (%)=mediana de volumen tumoral del volumen tumoral tratado/mediana del control * 100. En algunas realizaciones, el tratamiento conseguido con una combinación de la invención es cualquiera de PR, CR, OR, TPT, SLE y OS. TPT, también denominado "tiempo hasta la progresión del tumor" indica el periodo de tiempo durante y después del tratamiento en que el cáncer no crece, e incluye la cantidad de tiempo en que los pacientes han experimentado un RC o PR, así como la cantidad de tiempo en que los pacientes han experimentado SD. SLE o "supervivencia libre de enfermedad" se refiere al periodo de tiempo durante y después del tratamiento en el que el paciente se mantiene libre de enfermedad. SG se refiere a una prolongación de la esperanza de vida en comparación con individuos o pacientes no sensibilizados o no tratados. En algunas realizaciones preferentes, la respuesta a una combinación de la invención es cualquiera de RP, RC, TPT, SLE, RG u SG, que se evalúa utilizando los criterios de respuesta RECIST 1.1. En algunas realizaciones, la respuesta a una combinación de la invención se evalúa utilizando los criterios RECIST modificados de respuesta inmune (irRECIST).

En algunas realizaciones, la respuesta a una combinación de la invención se evalúa utilizando los criterios de respuesta de tipo inmunitario (irRC).

La expresión "irCRC bidimensional" se refiere al conjunto de criterios indicado en Wolchok JD, et al., Guidelines for the evaluation of immune therapy activity in solid tumors: immune-related response criteria. Clin. Cancer Res.

15(23):7412-7420, 2009. Dichos criterios utilizan mediciones bidimensionales tumorales de las lesiones diana, que se obtienen mediante multiplicación del diámetro más largo y el diámetro perpendicular más largo (cm2) de cada lesión.

La expresión "irRC unidimensional" se refiere al conjunto de criterios indicados en Nishino M, Giobbie-Hurder A, Gargano M, Suda M, Ramaiya NH, Hodi FS, Developing a Common Language for Tumor Response to Immunotherapy: Immune-related Response Criteria using Unidimentional measurements. Clin. Cancer Res. 19(14):3936-3943, 2013). Estos criterios utilizando el diámetro más largo (cm) de cada lesión.

El régimen de tratamiento para una combinación de la invención que resulta eficaz para tratar un paciente de cáncer puede variar según factores tales como el estado de enfermedad, edad y peso del paciente, y la capacidad de la terapia de inducir una respuesta anticáncer en el sujeto. Aunque una realización de cualquiera de los aspectos de la invención puede no resultar eficaz para conseguir un efecto terapéutico positivo en todos los sujetos, debería conseguirlo en un número estadísticamente significativo de sujetos según se determina mediante cualquier prueba estadística conocida de la técnica, tal como la prueba t de Student, la prueba chi2, la prueba U según Mann y Whitney, la prueba de Kruskal-Wallis (prueba H), la prueba de Jonckheere-Terpstra y la prueba de Wilcoxon.

Las expresiones "régimen de tratamiento", "protocolo de administración" y "régimen de administración" se utilizan intercambiablemente para referirse a la dosis y temporización de la administración de cada agente terapéutico en una combinación de la invención.

El término "tumor" tal como se aplica en un sujeto diagnosticado con o que se sospecha que presenta un cáncer se refiere a un neoplasma o masa de tejido maligno o potencialmente maligno de cualquier tamaño, e incluye tumores primarios y neoplasmas secundarios. Un tumor sólido es un crecimiento o masa de tejido anormal que habitualmente no contiene quistes o zonas de líquido. Diferentes tipos de tumor sólido se nombran para el tipo de células que los forman. Son ejemplos de tumores sólidos, los sarcomas, carcinomas y linfomas. Las leucemias (cánceres de la sangre) generalmente no forman tumores sólidos (National Cancer Institute, Dictionary of Cancer Terms).

La "carga tumoral" se refiere a la cantidad total de material tumoral distribuida en todo el cuerpo. La expresión "carga tumoral" se refiere al número total de células de cáncer o al tamaño total del tumor o tumores, en todo el cuerpo, incluyendo ganglios linfáticos y médula ósea. La carga tumoral puede determinarse mediante una diversidad de métodos conocidos de la técnica, tales como, p.ej., mediante la medición de las dimensiones del tumor o tumores tras la extracción del sujeto, p.ej., utilizando pinzas, o dentro del cuerpo utilizando técnicas de obtención de imágenes, p.ej., escaneos de ultrasonidos, escaneo óseo, tomografía computerizada (TC) o de resonancia magnética (IRM). La expresión "tamaño tumoral" se refiere al tamaño total del tumor que puede medirse como la longitud y anchura de un tumor. El tamaño tumoral puede determinarse mediante una diversidad de métodos conocidos de la técnica, tales como, p.ej., mediante la medición de las dimensiones del tumor o tumores tras la extracción del sujeto, p.ej., utilizando pinzas, o en el cuerpo utilizando técnicas de captación de imágenes, p.ej., escaneo óseo, escaneos de ultrasonidos, TC o IRM.

Las "regiones variables" o "región V" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere al segmento de cadenas IgG que es de secuencia variable en diferentes anticuerpos. Se extiende hasta el residuo de Kabat 109 en la cadena ligera y 113 en la cadena pesada.

La expresión "inhibidor de IDO1" se refiere a un compuesto de fórmula I y sales farmacéuticamente aceptables del mismo. El inhibidor de IDO1 incluye compuestos de fórmula Ia y Ib, así como los compuestos 1 a 7, posteriormente, y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Los compuestos de fórmula I pueden sintetizarse tal como se indica en la patente US n° 8.088.802, o mediante cualquier otra vía sintética que resultará fácilmente evidente para el experto en la materia.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO1 es un compuesto de fórmula I:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en la que:

X es:

R1 es Cl, Br, CF3 o CN,

R2 es H o F, y

R3 es Cl o Br.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO1 es un compuesto de fórmula Ia:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la presente memoria se da a conocer un inhibidor de IDO de fórmula Ib:

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Según la presente invención, el inhibidor de IDO es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (Compuesto 1; INCB024360):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la presente memoria se da a conocer el inhibidor de IDO 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-cloro-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (Compuesto 2):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la presente memoria se da a conocer el inhibidor de IDO 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-[4-fluoro-3-(trifluorometil)fenil]-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (Compuesto 3):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la presente memoria se da a conocer el inhibidor de IDO 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N'-hidroxi-N-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (Compuesto 4):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la presente memoria se da a conocer el inhibidor de IDO 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-ciano-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (Compuesto 5):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la presente memoria se da a conocer el inhibidor de IDO 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-[(4-bromo-2-furil)metil]-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (Compuesto 6):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

En la presente memoria se da a conocer el inhibidor de IDO 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-[(4-cloro-2-furyl)metil]-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida (Compuesto 7):

o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Los compuestos 1 a 7 ilustrados anteriormente se sometieron a ensayo y se encontró que eran inhibidores activos de IDO en un ensayo de enzima indolamina-2,3-dioxigenasa (IDO) humano con IC5o de <200 nM, <200 nM, <100 nM, <500 nM, <750 nM, <500 nM y <750 nM, respectivamente (ver la patente US n° 8.088.803).

Se pretende además que los compuestos de la invención incluyan todos los posibles isómeros geométricos. Los isómeros geométricos cis y trans de los compuestos de la presente invención están descritos y pueden aislarse en forma de una mezcla de isómeros o en forma de formas isoméricas separadas. Un enlace en un diagrama estructural representado por una línea ondulada pretende indicar que la estructura representa el isómeros cis o tras, o una mezcla de los isómeros cis y trans, en cualquier proporción.

Entre los compuestos de la invención se incluyen además formas tautoméricas. Las formas tautoméricas resultan del intercambio de un enlace sencillo por un doble enlace contiguo junto con la migración concomitante de un protón. Los compuestos de la invención pueden incluir además todos los isótopos de los átomos presentes en los intermediarios o compuestos finales. Los isótopos incluyen aquellos átomos que presentan el mismo número atómico, aunque diferentes números másicos. Por ejemplo, entre los isótopos del hidrógeno se incluyen el tritio y el deuterio. La presente invención incluye, además, sales de los compuestos indicados en la presente memoria. Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "sales" se refiere a derivados de los compuestos dados a conocer, en los que el compuesto parental se modifica mediante la conversión de una fracción ácido o base existente en su forma salina. Entre los ejemplos de sales se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, sales de ácidos minerales (tales como HCl, HBr y H2SO4) o de ácidos orgánicos (tales como ácido acético, ácido benzoico y ácido trifluoroacético) de residuos básicos, tales como aminas; sales de álcali (tales como Li, Na, K, Mg y Ca) u orgánicas (tal como trialquilamonio) de residuos ácidos, tales como ácidos carboxílicos, y similares. Las sales de la presente invención pueden sintetizarse a partir del compuesto parental que contiene una fracción básica o ácida mediante métodos químicos convencionales. Generalmente, dichas sales pueden prepararse mediante la reacción de las formas de ácido o base libre de dichos compuestos con una cantidad estequiométrica de la base o ácido apropiado en agua o en un solvente orgánico, o en una mezcla de los dos; generalmente, resultan preferentes medios no acuosos, tales como éter, acetato de etilo, etanol, isopropanol o acetonitrilo (ACN).

Las "sales farmacéuticamente aceptables" de la presente invención incluyen un subgrupo de "sales" indicadas anteriormente que son sales no tóxicas convencionales del compuesto parental formado, por ejemplo a partir de ácidos inorgánicos u orgánicos no tóxicos. Se encuentran listas de sales adecuadas en Remington's Pharmaceutical Sciences, 17a ed., Mack Publishing Company, Easton, Pa., 1985, página 1418 and Journal of Pharmaceutical Science, 66, 2, 1977. La expresión "farmacéuticamente aceptable" se utiliza en la presente memoria para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas de dosis que resultan, dentro del criterio médico razonable, adecuados para la utilización en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otros problemas o complicaciones, proporcionales a una relación razonable de beneficio/riesgo.

Los profármacos del compuesto de fórmula I también se encuentran contemplados para la utilización en los métodos, medicamentos y usos de la presente invención. El término "profármaco", tal como se utiliza en la presente memoria, denota un compuesto que es un precursor farmacológico que, tras la administración en un sujeto, experimenta conversión química mediante procesos metabólicos o químicos, rindiendo un compuesto de fórmula I o una sal del mismo. Se proporciona una discusión completa de los profármacos en T. Higuchi y V. Stella, Pro-drugs as Novel Delivery Systems, vol. 14 de the A.C.S. Symposium Series, 1987, y en Bioreversible Carriers in Drug Design, Edward B. Roche, ed., American Pharmaceutical Association and Pergamon Press, 1987.

II. MÉTODOS, USOS Y MEDICAMENTOS

En un aspecto de la invención, la invención proporciona una terapia de combinación que comprende un antagonista de PD-1 y un inhibidor de IDO1 para la utilización en el tratamiento de un cáncer en un individuo.

La terapia de combinación puede comprender además uno o más agentes terapéuticos adicionales. El agente terapéutico adicional puede ser, p.ej., un quimioterapéutico diferente de un inhibidor de VEGFR, un agente bioterapéutico (incluyendo, aunque sin limitación, VEGF, EGFR, Her2/neu, otros receptores de factor de crecimiento, CD20, CD40, Cd -40l , CTLA-4, OX-40, 4-1BB y ICOS), un agente inmunogénico (por ejemplo, células cancerosas atenuadas, antígenos tumorales, células presentadoras de antígeno, tales como células dendríticas pulsadas con antígeno o ácidos nucleicos derivados de tumor, citoquinas inmunoestimulantes (por ejemplo, IL-2, IFNa2 y GM-CSF), y células transfectadas con genes codificantes de citoquinas inmunoestimulantes, tales como, aunque sin limitación, GM-CSF).

Entre los ejemplos de agentes quimioterapéuticos se incluyen agentes alquilantes tales como tiotepa y ciclofosfamida; sulfonatos de alquilo, tales como busulfán, improsulfán y piposulfán; aziridinas, tales como benzodopa, carbocuona, meturedopa y uredopa; etileniminas y metilamelaminas, incluyendo altretamina, trietilenmelamina, trietilenfosforamida, trietilentiofosforamida y trimetilolmelamina; acetogeninas (especialmente bulatacina y bulatacinona); una camptotecina (incluyendo el análogo sintético topotecán); briostatina; calistatina; CC-1065 (incluyendo sus análogos sintéticos adozelesina, carzelesina y bizelesina); criptoficinas (particularmente criptoficina-1 y criptoficina-8); dolastatina; duocarmicina (incluyendo los análogos sintéticos KW-2189 y CB1-TM1); eleuterobina; pancratistatina; una sarcodictiina; espongistatina; mostazas nitrogenadas, tales como clorambucilo, clornafacina, colofosfamida, estramustina, ifosfamida, mecloretamina, hidrocloruro de óxido de mecloretamina, melfalán, novembichina, fenesterina, prednimustina, trofosfamida, mostaza uracilo; nitrosoureas, tales como carmustina, clorozotocina, fotemustina, lomustina, nimustina y ranimnustina; antibióticos, tales como los antibióticos enediina (por ejemplo caliqueamicina, especialmente caliqueamicina gamma 11 y caliqueamicina phil1; ver, por ejemplo Agnew, Chem. Intl. Ed. Engl. 33:183-186, 1994); dinemicina, incluyendo dinemicina A; bisfosfonatos, tales como clodronato; una esperamicina, así como cromóforo neocarzinostatina y cromóforos relacionados antibiótico de cromoproteína enedina), aclacinomisinas, actinomicina, autramicina, azaserina, bleomicinas, cactinomicina, carabicina, carminomicina, carzinofilina, cromomicinas, dactinomicina, daunorrubicina, detorrubicina, 6-diazo-5-oxo-L-norleucina, doxorrubicina (incluyendo morfolino-doxorrubicina, cianomorfolino-doxorrubicina, 2-pirrolino-doxorrubicina y desoxidoxorrubicina), epirrubicina, esorrubicina, idarrubicina, marcelomicina, mitomicinas, tales como mitomicina C, ácido micofenólico, nogalamicina, olivomicinas, peplomicina, potfiromicina, puromicina, quelamicina, rodorrubicina, estreptonigrina, estreptozocina, tubercidina, ubenimex, zinostatina, zorrubicina, antimetabolitos, tales como metotrexato y 5-fluorouracilo (5-FU); análogos del ácido fólico, tales como denopterina, metotrexato, pteropterina, trimetrexato; análogos de purina, tales como fludarabina, 6-mercaptopurina, tiamiprina, tioguanina; análogos de pirimidina, tales como ancitabina, azacitidina, 6-azauridina, carmofur, citarabina, dideoxiuridina, doxifluridina, enocitabina, floxuridina; andrógenos, tales como calusterona, propionato de dromostanolona, epitiostanol, mepitiostano, testolactona; antiadrenales, tales como aminoglutetimida, mitotano, trilostano; reabastecedor de ácido fólico, tal como ácido frolínico; aceglatona; glucósido aldofosfamida; ácido aminolevulínico; eniluracilo; amsacrina; bestrabucilo; bisantreno; edatraxato; defosfamida; demecolcina; diazicuona; elfornitina; acetato de eliptinio; un epotilón; etoglúcido; nitrato de galio; hidroxiurea; lentinano,; lonidainina; maitansinoides, tales como maitansina y ansamitocinas; mitoguazona; mitoxantrona; mopidanmol; nitraerina; pentostatina; fenamet; pirarrubicina; losoxantrona; ácido podofilínico; 2-etilhidrazida; procarbazina; razoxano; rizoxina; sizofirano; espirogermanio; ácido tenuazónico; triazicuona; 2',2"-triclorotrietilamina; tricotecenos (especialmente toxina T-2, verracurina A, roridina A y anguidina); uretano; vindesina; dacarbazina; manomustina; mitobronitol; mitolactol; pipobromano; gacitosina; arabinósido ("Ara-C"); ciclofosfoamida; tiotepa; taxoides, por ejemplo paclitaxel y docetaxel; cloranbucilo; gemcitabina; 6-tioguanina; mercaptopurina; metotrexato; análogos de platino, tales como cisplatino y carboplatino; vinblastina; platino; etopósido (VP-16); ifosfamida; mitoxantrona; vincristina; vinorelbina; novantrona; tenipósido; edatrexato; daunomicina; aminopterina; xeloda; ibandronato; CPT-11; inhibidor de topoisomerasa RFS 2000; difluorometilornitina (DMFO); retinoides, tales como ácido retinoico; capecitabina; y sales farmacéuticamente aceptables o derivados de cualquiera de los anteriormente indicados. Se incluyen además agentes antihormonales que actúan regulando o inhibiendo la acción hormonal sobre tumores, tales como antiestrógenos y moduladores selectivos de receptores de estrógenos (SERM), incluyendo, por ejemplo, tamoxifeno, raloxifeno, droloxifeno, 4-hidroxitamoxifeno, trioxifeno, keoxifeno, LY117018, onapristona y toremifeno (Fareston); inhibidores de aromatasa que inhiben el enzima aromatasa, que regula la producción de estrógeno en las glándula adrenales, tales como, por ejemplo, 4(5)-imidazolas, aminoglutetimida, acetato de megestrol, exemestano, formestano, fadrozol, vorozol, letrozol y anastrozolo; y antiandrógenos, tales como flutamida, nilutamida, bicalutamida, leuprólido y goserelina; y sales, ácidos o derivados farmacéuticamente aceptables de cualquiera de los anteriormente indicados.

Cada agente terapéutico en una terapia de combinación de la invención puede administrarse solo o en un medicamento (también denominado en la presente memoria composición farmacéutica) que comprende el agente terapéutico y uno o más portadores, excipientes y diluyentes farmacéuticamente aceptables, según la práctica farmacéutica estándar.

Cada agente terapéutico en una terapia de combinación de la invención puede administrarse simultáneamente (es decir, en el mismo medicamento), concurrentemente (es decir, en medicamentos separados administrados uno inmediatamente después del otro en cualquier orden) o secuencialmente en cualquier orden. La administración secuencial resulta particularmente útil en el caso de que los agentes terapéuticos en la terapia de combinación se encuentran en diferentes formas de dosis (un agente es una tableta o cápsula y el otro agente es un líquido estéril) y/o se administren en diferentes programas de administración, p.ej., un quimioterapéutico que se administra por lo menos diariamente y un bioterapéutico que se administra menos frecuentemente, tal como una vez a la semana, una vez cada dos semanas o una vez cada tres semanas.

En algunas realizaciones, el inhibidor de IDO1 se administra antes de la administración del antagonista de PD-1, mientras que, en otras realizaciones, el inhibidor de IDO1 se administra después de la administración del antagonista de PD-1.

En algunas realizaciones, por lo menos uno de los agentes terapéuticos en la terapia de combinación se administra utilizando el mismo régimen de administración (dosis, frecuencia y duración del tratamiento) que se utiliza típicamente en el caso de que el agente se utilice como monoterapia para el tratamiento del mismo cáncer. En otras realizaciones, el paciente recibe una cantidad total inferior de por lo menos uno de los agentes terapéuticos en la terapia de combinación que en el caso de que el agente se utilice como monoterapia, p.ej., dosis más bajas, dosis menos frecuentes y/o una duración más corta del tratamiento.

Cada agente terapéutico de molécula pequeña en una terapia de combinación de la invención puede administrarse por vía oral o parenteral, incluyendo las vías de administración intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutánea, rectal, tópica y transdérmica.

Una terapia de combinación de la invención puede utilizarse antes o después de la cirugía para extraer un tumor y puede utilizarse antes, durante o después de la terapia de radiación.

En algunas realizaciones, se administra una terapia de combinación de la invención en un paciente que ha sido previamente tratado con un agente bioterapéutico o quimioterapéutico, es decir, nunca ha sido sometido a tratamiento. En otras realizaciones, la terapia de combinación se administra en un paciente que no ha conseguido una respuesta sostenida después de la terapia previa con un agente bioterapéutico o quimioterapéutico, es decir, ha sido sometido a algún tratamiento.

Típicamente se utiliza una terapia de combinación de la invención para tratar un tumor que es suficientemente grande para encontrarlo mediante palpación o mediante técnicas de captación de imágenes bien conocidas de la técnica, tales como escaneos de IRM, ultrasonidos o TAC. En algunas realizaciones preferentes, se utiliza una terapia de combinación de la invención para tratar un tumor en estadio avanzado que presenta dimensiones de por lo menos aproximadamente 200 mm3, 300 mm3, 400 mm3, 500 mm3, 750 mm3, o hasta 1000 mm3.

Una terapia de combinación de la invención se administra preferentemente en un paciente humano que presenta un cáncer con resultado positivo en el ensayo para expresión de PD-L1. En algunas realizaciones preferentes, se detecta la expresión de PD-L1 utilizando un anticuerpo diagnóstico anti-PD-L1 humano o fragmento de unión a antígeno del mismo, en un ensayo IHQ o una sección de tejido FFPE o congelada de una muestra tumoral extraída del paciente. Típicamente, el médico del paciente encargaría una prueba diagnóstica para determinar la expresión de PD-L1 en una muestra de tejido tumoral extraída del paciente antes de iniciar el tratamiento con el antagonista de PD-1 e inhibidor de IDO1, aunque se encuentra contemplado que el médico encargue la primera prueba diagnóstica o una posterior en cualquier tiempo después de iniciar el tratamiento, tal como, por ejemplo, tras completar un ciclo de tratamiento.

La selección de un régimen de dosis (también denominado en la presente memoria régimen de administración) para una terapia de combinación de la invención depende de varios factores, incluyendo la tasa de renovación del suero o tejido de la entidad, el nivel de los síntomas, la inmunogenicidad de la entidad y la accesibilidad de las células, tejido u órgano diana en el individuo bajo tratamiento. Preferentemente, un régimen de dosis maximiza la dosis de cada agente terapéutico administrado en el paciente consistentemente con un nivel aceptable de efectos secundarios. De acuerdo con lo anteriormente expuesto, la cantidad de las dosis y la frecuencia de administración de cada agente bioterapéutico y quimioterapéutico en la combinación depende en parte del agente terapéutico particular, de la severidad del cáncer bajo tratamiento y de las características del paciente. Se encuentran disponibles guías para la selección de las dosis apropiadas de anticuerpos, citoquinas y moléculas pequeñas. Ver, p.ej., Wawrzynczak (1996) Antibody Therapy, Bios Scientific Pub. Ltd, Oxfordshire, UK; Kresina (ed.) (1991) Monoclonal Antibodies, Cytokines and Arthritis, Marcel Dekker, New York, NY; Bach (ed.) (1993) Monoclonal Antibodies and Peptide Therapy in Autoimmune Diseases, Marcel Dekker, New York, NY; Baert et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:601-608; Milgrom et al. (1999) New Engl. J. Med. 341:1966-1973; Slamon et al. (2001) New Engl. J. Med. 344:783-792; Beniaminovitz et al. (2000) New Engl. J. Med. 342:613-619; Ghosh et al. (2003) New Engl. J. Med. 348:24-32; Lipsky et al. (2000) New Engl. J. Med. 343:1594-1602; Physicians' Desk Reference 2003 (Physicians' Desk Reference, 57a ed.); Medical Economics Company; ISBN: 1563634457; 57a edición (noviembre, 2002). La determinación del régimen de dosis apropiado puede ser realizada por el médico, p.ej., utilizando parámetros o factores conocidos o que se sospecha en la técnica que afectan al tratamiento o se predice que afectan al tratamiento, y dependerá, por ejemplo, de la historia clínica del paciente (p.ej., la terapia anterior), del tipo y estadio del cáncer que debe tratarse y de los biomarcadores de respuesta a uno o más de los agentes terapéuticos en la terapia de combinación.

Los agentes bioterapéuticos en una terapia de combinación de la invención pueden administrarse mediante infusión continua o mediante dosis a intervalos, p.ej., diarios, días alternados, tres veces a la semana o una vez cada una semana, dos semanas, tres semanas, al mes, cada dos meses, etc. Una dosis semanal total es generalmente de por lo menos 0,05 pg/kg, 0,2 pg/kg, 0,5 pg/kg, 1 pg/kg, 10 pg/kg, 100 pg/kg, 0,2 mg/kg, 1,0 mg/kg, 2,0 mg/kg, 10 mg/kg, 25 mg/kg, 50 mg/kg de peso corporal o superior. Ver, p.ej., Yang et al., (2003) New Engl. J. Med. 349:427-434; Herold et al. (2002) New Engl. J. Med. 346:1692-1698; Liu et al. (1999) J. Neurol. Neurosurg. Psych. 67:451-456; Portielji et al. (20003) Cancer Immunol. Immunother. 52:133-144, 1999.

En algunas realizaciones que utilizan un mAb anti-PD-1 humano como el antagonista de PD-1 en la terapia de combinación, el régimen de administración comprenderá la administración del mAb anti-PD-1 humano a una dosis de 1, 2, 3, 5 o 10 mg/kg a intervalos de aproximadamente 14 días (± 2 días) o de aproximadamente 21 días (± 2 días) o de aproximadamente 30 días (± 2 días) durante todo el curso del tratamiento.

En otras realizaciones que utilizan un mAb anti-PD-1 humano como el antagonista de p-D1 en la terapia de combinación, el régimen de administración comprenderá administrar el mAb anti-PD-1 humano a una dosis de entre aproximadamente 0,005 mg/kg y aproximadamente 10 mg/kg, con escalado de las dosis intrapaciente. En otras realizaciones de escalado de las dosis, el intervalo entre las mismas se acorta progresivamente, p.ej., de aproximadamente 30 días (± 2 días) entre la primera y la segunda dosis, aproximadamente 14 días (± 2 días) entre la segunda y tercera dosis. En determinadas realizaciones, el intervalo de administración será de aproximadamente 14 días (± 2 días), para dosis posteriores a la segunda dosis.

En determinadas realizaciones, en el sujeto se administra una infusión intravenosa (IV) de un medicamento que comprende cualquiera de los antagonistas de PD-1 indicados en la presente memoria.

En la presente memoria se da a conocer el antagonista de PD-1 en la terapia de combinación como nivolumab, que se administra por vía intravenosa a una dosis seleccionada del grupo que consiste en: 1 mg/kg Q2W, 2 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q2W, 5 mg/kg Q2W, 10 mg Q2W, 1 mg/kg Q3W, 2 mg/kg Q3W, 3 mg/kg Q3W, 5 mg/kg Q3W y 10 mg Q3W.

Según la presente invención, el antagonista de PD-1 en la terapia de combinación es MK-3475, que se administra en un medicamento líquido a una dosis seleccionada del grupo que consiste en 1 mg/kg Q2W, 2 mg/kg Q2W, 3 mg/kg Q2W, 5 mg/kg Q2W, 10 mg Q2W, 1 mg/kg Q3W, 2 mg/kg Q3W, 3 mg/kg Q3W, 5 mg/kg Q3W, 10 mg Q3W y equivalentes de dosis fija de cualquiera de dichas dosis, tal como 200 mg Q3W. En algunas realizaciones particularmente preferentes, se administra MK-3475 en forma de un medicamento líquido que comprende 25 mg/ml de MK-3475, sacarosa al 7% (p/v), polisorbato-80 al 0,02% (p/v) en tampón de histidina 10 mM, pH 5,5, y la dosis seleccionada del medicamento se administra mediante infusión IV durante un periodo de tiempo de aproximadamente 30 minutos.

La dosis óptima de un compuesto de fórmula I en combinación con MK-3475 puede identificarse mediante escalado de dosis de uno de dichos agentes o ambos. En una realización, se administra MK-3475 a una dosis inicial de 10 mg/kg Q2W o Q3W y el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra a una dosis inicial de 25 mg BID, 50 mg BID, 100 mg BID, o 300 mg BID. En el caso de que la combinación de dosis inicial no resulte tolerada por el paciente, la dosis de MK-3475 se reduce a 2 mg/kg Q2W o a 2 mg/kg Q3W y el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra a una dosis de 25 mg BID.

En una realización, se administran 25 mg del compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) con o sin alimento BID, administrando cada dosis separada por aproximadamente 12 horas. El día de la administración de MK-3475 en un ciclo e tratamiento, puede administrarse el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) antes o después de la administración de m K-3475.

En algunas realizaciones, el paciente se trata con cada agente secuencialmente, y en una realización preferente, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) a una dosis de 25 mg se administra durante un ciclo de tratamiento de diez días seguido de MK-3475 una vez cada cinco días (p.ej., dos ciclos). En otra realización preferente, se administran 25 mg de MK-3475 una vez cada cinco días durante 2 ciclos seguido del compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360).

En una realización particular dirigida a una combinación de la invención, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 25 mg o 50 mg durante un ciclo de 21 días en un programa de dosis de cada tres semanas (Q3W) de MK-3475. En una realización particular, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral en dosis separadas por aproximadamente 12 horas. En una realización particular, se administra MK-3475 a una dosis de 2 mg/kg o 200 mg IV durante un periodo de 30 minutos el día 1 de cada ciclo de 3 semanas y el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 25 mg o 50 mg. En una realización, la dosis BID del compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra en dosis separadas por 12 horas, con independencia del alimento. En una realización, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 25 mg. En otra realización del compuesto de fórmula (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 50 mg. En una realización, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 25 mg en combinación con una dosis de MK-3475 de 2 mg/kg IV. En una realización, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 25 mg en combinación con una dosis de MK-3475 de 200 mg IV. En una realización, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 50 mg en combinación con una dosis de MK-3475 de 2 mg/kg IV. En una realización, el compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) se administra por vía oral BID a una dosis de 50 mg en combinación con una dosis de MK-3475 de 200 mg IV. Entre las realizaciones específicas se incluyen, por ejemplo, MK-3475 administrado a una dosis de 2 mg/kg cada tres semanas con 25 mg o 50 mg de INCB024360 BID, y se administra MK-3475 a una dosis de 200 mg cada tres semanas con 25 mg o 50 mg de INCB024360 BID. Pueden continuarse los ciclos de tratamiento durante tanto tiempo como los pacientes continúen beneficiándose del tratamiento. En algunas realizaciones, se continúa el tratamiento durante 3, 6, 9, 12, 15, 18 o 24 meses.

En algunas realizaciones, se inicia un ciclo de tratamiento con el primer día de tratamiento de combinación y dura 2 semanas o 3 semanas. En dichas realizaciones, la terapia de combinación se administra preferentemente durante por lo menos 12 semanas (6 ciclos de tratamiento), más preferentemente por lo menos 24 semanas, 36 semanas o 48 semanas, y todavía más preferentemente por lo menos 2 semanas después de que el paciente alcance una CR.

En algunas realizaciones, el paciente que se selecciona para tratamiento con la terapia de combinación de la invención presenta un CPCNP con resultado positivo en el ensayo para una expresión elevada de PD-L1.

La presente invención proporciona además un medicamento que comprende un antagonista de PD-1 tal como se ha indicado anteriormente y un excipiente farmacéuticamente aceptable. En el caso de que el antagonista de PD-1 sea un agente bioterapéutico, p.ej., un mAb, el antagonista puede producirse en células CHO utilizando un cultivo celular convencional y tecnologías de recuperación/purificación.

En algunas realizaciones, puede proporcionarse un medicamento que comprende un anticuerpo anti-PD-1 como el antagonista de PD-1 en forma de una formulación líquida o prepararse mediante reconstitución de unos polvos liofilizados con agua estéril para la inyección antes de la utilización. El documento n° WO 2012/135408 describe la preparación de medicamentos líquidos y liofilizados que comprenden MK-3475 que resultan adecuados para la utilización en la presente invención. En algunas realizaciones preferentes, se proporciona un medicamento que comprende MK-3475 en un vial de vidrio que contiene aproximadamente 50 mg de MK-3475.

La presente invención proporciona además un medicamento que comprende un compuesto de fórmula I y un excipiente farmacéuticamente aceptable. El compuesto de fórmula I puede prepararse tal como se indica en la patente US n° 8.088.803 y puede formularse tal como se indica en la presente memoria. En una realización, el compuesto de fórmula I es INCB024360.

Los medicamentos de anti-PD-1 y compuesto de fórmula I indicados en la presente memoria pueden proporcionarse en forma de un kit que comprende un primer recipiente y un segundo recipiente y un impreso en el envase. El primer recipiente contiene por lo menos una dosis de un medicamento que comprende un antagonista anti-PD-1; el segundo recipiente contiene por lo menos una dosis de n medicamento que comprende un compuesto de fórmula I (p.ej., INCB024360) y el impreso en el envase, o etiqueta, que comprende instrucciones para tratar el paciente para cáncer mediante la utilización de los medicamentos. El primer y segundo recipientes pueden comprender la misma forma o formas diferentes (p.ej., viales, jeringas y botellas) y/o el mismo material o materiales diferentes (p.ej., plástico o vidrio). El kit puede comprender además otros materiales que pueden resultar útiles en la administración de los medicamentos, tales como diluyentes, filtros, bolsas y líneas IV, agujas y jeringas. En algunas realizaciones preferentes del kit, el antagonista anti-PD-1 es un anticuerpo anti-PD-1 y las instrucciones indican que los medicamentos están destinados a la utilización en el tratamiento de un paciente que presenta un cáncer con resultado positivo para la expresión de PD-L1 mediante un ensayo IHQ.

Estos aspectos y otros de la invención, incluyendo las realizaciones específicas ejemplares listadas posteriormente, resultarán evidentes a partir de las enseñanzas contenidas en la presente memoria.

MÉTODOS GENERALES

Se describen métodos estándares de biología molecular en Sambrook, Fritsch y Maniatis (1982 y 1989, 2a edición, 2001,2a edición) Molecular Cloning, A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY; Sambrook y Russell, Molecular Cloning, 3a ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 2001; Wu, Recombinant DNA, Vol.217, Academic Press, San Diego, CA, 1993). Los métodos estándares también aparecen en Ausubel et al., Current Protocols in Molecular Biology, Vols. 1-4, John Wiley and Sons, Inc. New York, NY, 2001, que describe la clonación en células bacterianas y la mutagénesis del ADN (vol. 1), la clonación en células de mamífero y levaduras (vol. 2), la expresión de glucoconjugados y proteínas (vol. 3), y bioinformática (vol. 4).

Se describen métodos para purificación de las proteínas, incluyendo la inmunoprecipitación, la cromatografía, la electroforesis, la centrifugación y la cristalización (Coligan et al., Current Protocols in Protein Science, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York, 2000). Se describe el análisis químico, la modificación química, la modificación postraduccional, la producción de proteínas de fusión y la glucosilación de proteínas (ver, p.ej., Coligan et al., Current Protocols in Protein Science, vol. 2, John Wiley and Sons, Inc., New York, 2000; Ausubel, et al. Current Protocols in Molecular Biology, Vol. 3, John Wiley and Sons, Inc., NY, NY, páginas 16.0.5 a 16.22.17, 2001; Sigma-Aldrich, Co., Products for Life Science Research, St. Louis, MO; páginas 45 a 89, 2001; Amersham Pharmacia Biotech, BioDirectory, Piscataway, N.J., páginas 384 a 391,2001). Se describe la producción, purificación y fragmentación de anticuerpos policlonales y monoclonales (Coligan et al., Current Protcols in Immunology, Vol. 1, John Wiley and Sons, Inc., New York, 2001; Harlow y Lane, Using Antibodies, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, 1999; Harlow y Lane, supra). Las técnicas estándares para caracterizar las interacciones de ligando/receptor se encuentran disponibles (ver, p.ej., Coligan, et al. Current Protocols in Immunology, vol. 4, John Wiley, Inc., New York, 2001).

Pueden prepararse anticuerpos monoclonales, policlonales y humanizados (ver, p.ej., Sheperd y Dean (eds.), Monoclonal Antibodies, Oxford Univ. Press, New York, NY, 2000; Kontermann y Dubel (eds.) (2001) Antibody Engineering, Springer-Verlag, New York; Harlow y Lane (1988) Antibodies A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY, páginas 139 a 243; Carpenter, et al. (2000) J. Immunol. 165:6205; He, et al. (1998) J. Immunol. 160:1029; Tang et al. (1999) J. Biol. Chem. 274:27371-27378; Baca et al. J. Biol. Chem.

272:10678-10684, 1997; Chothia et al., Nature 342:877-883, 1989; Foote y Winter, J. Mol. Biol. 224:487-499, 1992; patente US n° 6.329.511.

Una alternativa a la humanización es la utilización de bibliotecas de anticuerpos humanos expresados sobre bibliotecas fágicas o de anticuerpos humanos en ratones transgénicos (Vaughan et al., (1996) Nature Biotechnol. 14:309-314; Barbas, Nature Medicine 1:837-839, 1995; Mendez et al. Nature Genetics 15:146-156, 1997; Hoogenboom y Chames, Immunol. Today 21:371-377, 2000; Barbas et al. Phage Display: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, New York, 2001; Kay et al. Phage Display of Peptides and Proteins: A Laboratory Manual, Academic Press, San Diego, CA, 1996; de Bruin et al. Nature Biotechnol. 17:397-399, 1999).

La purificación de antígenos no resulta necesaria para la generación de anticuerpos. Los animales pueden inmunizarse con células portadoras del antígeno de interés. A continuación, pueden aislarse esplenocitos a partir de animales inmunizados, y los esplenocitos se fusionan con una línea celular de mieloma para producir un hibridoma (ver, p.ej., Meyaard et al., Immunity 7:283-290, 1997; Wright et al. Immunity 13:233-242, 2000; Preston et al., supra; Kaithamana et al. J. Immunol. 163:5157-5164, 1999).

Los anticuerpos pueden conjugarse con, p.ej., moléculas farmacológicas pequeñas, enzimas, liposomas y polietilenglicol (PEG). Los anticuerpos resultan útiles para los propósitos terapéuticos, diagnósticos, kits u otros propósitos, e incluyen anticuerpos acoplados con, p.ej., pigmentos, isótopos radioactivos, enzimas o metales, p.ej., oro coloidal (ver, p.ej., Le Doussal et al., J. Immunol. 146:169-175, 1991; Gibellini et al. J. Immunol. 160:3891-3898, 1998; Hsing y Bishop, J. Immunol. 162:2804-2811, 1999; Everts et al., J. Immunol. 168:883-889, 2002).

Los métodos de citometría de flujo, incluyendo la separación celular activada por fluorescencia (FACS), se encuentran disponibles (ver, p.ej., Owens et al., Flow Cytometry Principles for Clinical Laboratory Practice, John Wiley and Sons, Hoboken, n J, 1994; Givan, Flow Cytometry, 2a ed.; Wiley-Liss, Hoboken, NJ, 2001; Shapiro, Practical Flow Cytometry, John Wiley and Sons, Hoboken, NJ, 2003). Los reactivos fluorescentes adecuados para modificar ácidos nucleicos, incluyendo cebadores de ácidos nucleicos y sondas, polipéptidos y anticuerpos, para la utilización, p.ej., como reactivos diagnósticos, se encuentran disponibles (Molecular Probesy, Catalogue, Molecular Probes, Inc., Eugene, OR, 2003; Catálogo de Sigma-Aldrich, St. Louis, m O, 2003).

Los métodos estándares de histología del sistema inmunitario están descritos (ver, p.ej., Muller-Harmelink (ed.), Human Thymus: Histopathology and Pathology, Springer Verlag, New York, NY, 1986; Hiatt, et al., Color Atlas of Histology, Lippincott, Williams, and Wilkins, Phila, PA, 2000; Louis, et al. Basic Histology: Text and Atlas, McGraw-Hill, New York, NY, 2002).

Los paquetes de software y bases de datos para determinar, p.ej., fragmentos antigénicos, secuencias líder, plegamiento de proteínas, dominios funcionales, sitios de glucosilación y alineaciones de secuencias, se encuentran disponibles (ver, p.ej., GenBank, Vector NTI® Suite (Informax, Inc, Bethesda, MD); GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, c A); DeCypher® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, Nevada); Menne, et al. (2000) Bioinformatics 16: 741-742; Menne, et al. (2000) Bioinformatics Applications Note 16:741-742; Wren, et al. Comput. Methods Programs Biomed. 68:177-181, 2002; von Heijne, Eur. J. Biochem. 133:17-21, 1983; von Heijne, Nucleic Acids Res. 14:4683-4690, 1986).

EJEMPLO 1

Estudio clínico de evaluación de una combinación de la invención en el tratamiento de pacientes con tumores sólidos.

El presente ejemplo describe un estudio clínico de fase 1/2 actualmente en curso para la evaluación de la seguridad, tolerabilidad y eficacia de la combinación inventiva de MK-3475 e INCB024360 en sujetos que se presentan con diversos tumores sólidos y cáncer pulmonar de células no pequeñas avanzado (CPCNP). La fase 1 del estudio es una fase de escalado de dosis y la fase 2 es un estudio aleatorizado de doble ciego controlado con placebo. La fase 1 del estudio se llevó a cabo en sujetos con tumores sólidos avanzados o metastásicos seleccionados. La fase 2 del estudio se llevó a cabo en sujetos con CPCNP avanzado, p.ej., CPCNP en estadio IIIB, IV o recurrente. La fase de escalado de dosis (fase 1) era de etiqueta abierta y se diseñó para identificar la dosis máxima tolerada (DMT) o las dosis farmacológicamente aceptables (DFA) de INCB024360 en combinación con MK-3475 en sujetos con CPCNP en estadio IIIB, IV o recurrente, melanoma, carcinoma de células transicionales del tracto genitourinario (GU), cáncer de células renales, cáncer de mama triple negativo, adenocarcinoma del endometrio o carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello que presentan progresión de la enfermedad en por lo menos 1 línea de terapia para cáncer avanzado o metastásico.

La fase 2 explora adicionalmente la seguridad y la eficacia de la dosis recomendada de INCB024360 en combinación con MK-3475 determinada en la fase 1 en sujetos con CPCNP cuya enfermedad había progresado en un régimen de quimioterapia basado en platino para CPCNP en estadio IIIB, IV o recurrente. En la parte aleatorizada de fase 2 del estudio, se aleatorizaron los sujetos para recibir MK-3475 con INCB024360 o con placebo y se estratificaron según la expresión de PD-L1 (alta vs negativa/baja). La aleatorización de fase 2 era 1:1 (principio activo:placebo).

La parte de escalado de dosis de fase 1 del estudio implicó aproximadamente 45 sujetos, seguido de aproximadamente 82 sujetos en la parte aleatorizada de fase 2 del estudio (aleatorizado 1:1 en cada uno de 2 grupos de tratamiento).

La fase de escalado de dosis de fase 1 incluía cohortes de sujetos tratados con INCB024360 dos veces al día (BID) a dosis iniciales de 25 mg BID, 50 mg BID y 100 mg BID en combinación con MK-3475 a una dosis de 2 mg/kg cada 3 semanas. Un ciclo de tratamiento consistía en 21 días. Se incluyó y trató en cada cohorte un mínimo de 3 sujetos y se observó la totalidad de los 3 sujetos durante un mínimo de 42 días (6 semanas) antes de iniciar la formación de la siguiente cohorte. Se incluyeron sujetos adicionales en una cohorte para conseguir el mínimo de 3 sujetos evaluables en caso de que se produjesen abandonos o interrupciones o reducciones de la dosis que resultasen en que un sujeto fuese no evaluable para toxicidades limitantes de dosis (TLD). Al alcanzar la DMT o DFA, se incluyeron sujetos adicionales hasta un total de 9 sujetos, aunque se trataron los sujetos adicionales con MK-3475 a una dosis de 200 mg cada 3 semanas y la DMT o DFA de INCB024360 para evaluar adicionalmente la seguridad y confirmarla como la dosis de fase 2 recomendada (DF2R). Las cohortes de sujetos del estudio se resumen de la manera siguiente:

Basándose en los resultados de las cohortes de estudio 1 y 2, también pueden evaluarse los escalados de dosis de INCB024360, tal como 100 mg o 300 mg BID por vía oral en combinación con 2 mg/kg de MK-3475 IV Q3W.

Para la aleatorización de fase 2, se aleatorizaron 82 sujetos 1:1 en 2 grupos de tratamiento. Los sujetos de cohorte de grupo 1 recibieron MK-3475, 200 mg cada 3 semanas, INCB024360 (41 sujetos); los sujetos de cohorte de grupo 2 recibieron MK-3475, 200 mg cada 3 semanas placebo correspondiente (41 sujetos). Los sujetos se estratificaron según la expresión de PD-L1 (alta versus negativa/baja).

Según el estudio de fase 1/2, el cribado fue hasta los 28 días. El periodo de tratamiento con la terapia de combinación (MK-3475 INCB024360 o placebo) continuó cada 21 días durante hasta 24 meses y después se continuó el tratamiento con monoterapia de INCB024360 con la condición de que los sujetos se beneficiasen del tratamiento y no hubiesen experimentado progresión de la enfermedad o cumplido ningún criterio de retirada del estudio. Los sujetos que habían completado 24 meses de MK-3475, continuaron con monoterapia de INCB024360 y después experimentaron progresión de la enfermedad con monoterapia de INCB024360 pueden considerarse para el nuevo tratamiento con la combinación durante 12 meses adicionales, seguido de monoterapia de INCB024360 con la condición de que se beneficien del tratamiento y no cumplan ningún criterio de retirada del estudio. Se realizaron visitas de seguimiento de seguridad 42 a 49 días después de administrar la última dosis de INCB024360. Para el seguimiento, se recogieron muestras de sangre de todos los sujetos para farmacocinética (FC) y anticuerpo antifármaco (AAF) 1 mes, 3 meses y 6 meses después de la última dosis de MK-3475. Los sujetos que abandonaron el estudio por motivos diferentes de la farmacodinámica o enfermedad progresiva (EP) fueron sometidos a seguimiento post-tratamiento para el estado de la enfermedad hasta la progresión de la enfermedad, hasta que iniciaron un tratamiento del cáncer no experimental, hasta que retiraron el consentimiento o hasta el abandono del seguimiento. Para el seguimiento de la supervivencia, todos los sujetos fueron sometidos a seguimiento cada 12 semanas después de la última dosis de tratamiento. Las evaluaciones tumorales también podían continuar para los sujetos que se habían retirado del estudio por motivos diferentes de la progresión de la enfermedad, cada 9 semanas durante los primeros 18 meses y después cada 12 meses hasta el inicio de una nueva terapia para el cáncer, hasta progresión de la enfermedad o hasta la muerte.

Para el tratamiento, se autoadministró INCB024360 por vía oral BID y continuó BID durante el ciclo de 21 días durante un programa de administración de cada 3 semanas de MK-3475. La DMT de INCB024360 (o DFA) definida durante la fase 1 se utilizó para la fase 2. Todas las dosis BID se administraron por la mañana y por la tarde-noche, separadas por aproximadamente 12 horas con independencia del alimento. En el caso de que se retrasase una dosis en más de 4 horas, se omitía la dosis y se reiniciaba la administración en el tiempo programado. Se administró MK-3475 a una dosis de 2 mg/kg o 200 mg por vía intravenosa (IV) durante un periodo de 30 min el día 1 de un ciclo de cada 3 semanas, sin escalado de dosis intrasujeto. La media de participación de los sujetos en el estudio fue de aproximadamente 6 meses.

Se incluyeron en el estudio de fase 1 sujetos con CPCNP de estadio IIIB, IV o recurrente, melanoma, carcinoma de células transicionales del tracto GU, cáncer de células renales, cáncer de mama triple-negativo, adenocarcinoma de endometrio o carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello que habían recibido por lo menos 1 línea de terapia anterior y eran refractarios o para los que no se encontraba disponible ningún tratamiento curativo. Se incluyeron en el estudio de fase 2 sujetos con CPCNP de estadio IIIB, IV o recurrente que presentaban progresión de la enfermedad o que eran intolerantes a la terapia a base de platino o que presentaban progresión de la enfermedad dentro de los 6 meses posteriores a completar la terapia de adyuvante que incluía terapia a base de platino.

Los criterios clave de inclusión del estudio de fase 1/2 fueron los siguientes: sujetos varón o hembra, edad: 18 años o más, voluntad de proporcionar consentimiento/asentimiento informado por escrito, CPCNP confirmado histológica o citológicamente, carcinoma de células transicionales del tracto GU, cáncer de células renales, cáncer de mama triplenegativo, adenocarcinoma de endometrio o carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello (Fase 1) o CPCNP de estadio IIIB, IV o recurrente (Fase 2); esperanza de vida > 12 semanas; estado funcional 0 a 1 del Eastern Cooperative Oncology Group (ECOG); presencia de enfermedad medible según RECIST v1.1; parámetros de laboratorio e historia médica dentro de los intervalos definidos por el protocolo. Para el estudio de fase 1, los criterios de inclusión incluyeron sujetos que presentaban enfermedad avanzada o metastásica que habían recibido por lo menos 1 terapia anterior para la enfermedad a estudio o que presentaban enfermedad avanzada o metastásica para la que no se disponía de ningún tratamiento curativo. Para el estudio de fase 2,

Para el estudio de fase 2, se incluyeron los sujetos que habían recibido únicamente 1 régimen de quimioterapia sistémica anterior para CPCNP de estadio IIIB, IV o recurrente (no incluyendo terapia de neoadyuvante y/o adyuvante, excepto por lo siguiente: Los regímenes sistémicos anteriores debían incluir una terapia a base de platino; se permitieron los agentes investigacionales utilizados en combinación con terapias estándares; se permitían las mutaciones conductoras (positiva para mutación de receptor de factor de crecimiento epidérmico (EGFR) o positiva para oncogén de fusión de linfoma anaplásico quinasa) tratadas con un inhibidor de tirosina quinasa y no se consideraron un segundo régimen de quimioterapia sistémica (los sujetos debían mostrar progresión o ser intolerantes a la terapia dirigida); la terapia de mantenimiento o de cambio de mantenimiento después de la quimioterapia de primera línea se consideró parte del 1 régimen de quimioterapia sistémica anterior y se consideró aceptable; los sujetos que habían completado y progresado en un régimen que contenía platino como adyuvante, neoadyuvante o como parte de un curso de terapia de quimiorradiación dentro de los 6 meses anteriores al cribado se contaron como receptores de 1 régimen anterior que contenía platino y, por lo tanto, que no requerían nuevo tratamiento con un régimen que contenía platino para enfermedad de estadio IIIB, IV o recurrente; se requirieron biopsias nuevas de tumor de línea base, es decir, un espécimen de biopsia extraído desde que se había completado el régimen anterior más reciente de quimioterapia; y mujeres potencialmente fértiles y hombres con control de natalidad adecuado en los 120 días siguientes a la última dosis del tratamiento de estudio).

Entre los criterios clave de exclusión de los estudios de fase 1/2 se incluyen los siguientes: sujetos que habían participado en cualquier otro estudio en el que se había producido la recepción de un fármaco o dispositivo de estudio investigacional en los 28 días o 5 semividas (la más larga de los dos) antes de la primera dosis. (para los agentes investigacionales con semividas largas (p.ej., >5 días), la inclusión antes de la quinta semivida requería la aprobación del monitor médico); diagnóstico de inmunodeficiencia o recepción de esteroide sistémico o cualquier otra forma de terapia inmunosupresora en los 7 días anteriores a la primera dosis del tratamiento de estudio; anticuerpo monoclonal anterior en las 4 semanas anteriores al día de estudio 1 o no recuperado (< Grado 1 o en la línea base) de sucesos adversos (SA) debido a agentes administrados hace más de 4 semanas.

Para el estudio de fase 2, entre los criterios clave de exclusión se incluían los siguientes: más de 1 tratamiento sistémico anterior para CPCNP de estadio IIIB, IV o recurrente; quimioterapia anterior o terapia de molécula pequeña dirigida en las 2 semanas anteriores al día de estudio 1 o no recuperado (< Grado 1 o en la línea base) de SA debidos a agentes administrados anteriormente (sujetos con neuropatía de grado <2 eran una excepción y podían incluirse; en el caso de que un sujeto recibiese cirugía mayor, debía haberse recuperado adecuadamente de la toxicidad y/o complicaciones de la intervención antes de iniciar la terapia; terapia anterior con un anticuerpo anti-PD-1, anti-PD-L1, anti-PD-L2, anti-CD137 o anticuerpo antiantígeno 4 asociado a linfocito T citotóxico (incluyendo ipilimumab o cualquier otro anticuerpo o fármaco con diana específica en las rutas de coestimulación de las células T o de punto de comprobación); neoplasia maligna adicional conocida que está progresado o requiere tratamiento activo (entre las excepciones se incluyen el carcinoma de células basales de la piel, el carcinoma de células escamosas de la piel o el cáncer cervical in situ que ha sido sometido a terapia potencialmente curativa); metástasis del sistema nervioso central (SNC) activas conocidas y/o meningitis carcinomatosa (los sujetos con metástasis cerebrales previamente tratadas pueden participar con la condición de que estén estables (sin evidencia de progresión en imágenes durante por lo menos las 4 semanas anteriores a la primera dosis del tratamiento de estudio y todos los síntomas neurológicos han vuelto a la línea base); sin evidencia de metástasis cerebrales nuevas o en crecimiento y que no han requerido esteroides durante como mínimo los 7 días anteriores al tratamiento de estudio); enfermedad autoinmune activa o una historia documentada de la misma, o un síndrome que ha requerido el tratamiento sistémico en los últimos 2 años (es decir, con utilización de agentes modificadores de la enfermedad, corticoesteroides o fármacos inmunosupresores). La terapia de sustitución (p.ej., tiroxina, insulina o terapia de sustitución de corticoesteroides fisiológicos para insuficiencia adrenal o pituitaria, etc.) no se considera una forma de tratamiento sistémico; evidencia de enfermedad pulmonar intersticial o neumonitis no infecciosa activa; radioterapia anterior en las 2 semanas de terapia (los sujetos deben haberse recuperado de todas las toxicidades relacionadas con la radiación, no requerir corticoesteroides y no haber presentado neumonitis de radiación; viremia conocida de virus de hepatitis B (VHB) o de virus de hepatitis C (VHC) o en riesgo de reactivación del VHB (el ADN de VHB y el ARN de VHC) deben ser indetectables. El riesgo de reactivación del VHB se define como: positivo para antígeno de superficie de hepatitis B o positivo para anticuerpo nuclear antihepatitis B); mujeres embarazadas o mujeres gestantes o sujetos que se espera que conciban o tengan hijos dentro de la duración proyectada del estudio, desde la visita de cribado hasta 120 días después de la última dosis del tratamiento de estudio; historia conocida de virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) (anticuerpos de VIH 1/2); vacuna viva en los 30 días anteriores a la primera dosis del tratamiento de estudio; inhibidores de monoamina oxidasa en los 21 días anteriores al cribado; cualquier historia de síndrome de serotonina después de recibir 1 o más fármacos serotonérgicos; presencia de una condición gastrointestinal que pueda afectar a la absorción del fármaco; historia o evidencia actual de cualquier condición, terapia o anormalidad de laboratorio que pueda confundir los resultados del estudio, interferir con la participación del sujeto durante toda la duración del estudio, o no esté en los mejores intereses del sujeto participar, según la opinión del investigador responsable del tratamiento; trastornos psiquiátricos o de abuso de sustancias conocidos que puedan interferir con la cooperación con los requisitos del estudio; miembro familiar inmediato (uno mismo, esposo o hijo) directamente relacionado con el sitio investigacional o el personal patrocinador del estudio, a menos que se proporcione aprobación institucional prospectiva del panel de revisión (por presidente o persona designada) que conceda una excepción a este criterio para el sujeto específico, y una alergia o reacción conocida a cualquier componente de cualquier formulación del fármaco de estudio.

El programa y procedimientos de estudio para el estudio de fase 1/2 eran los siguientes: los sujetos realizaron visitas de estudio regularmente programadas en el sitio clínico el día 1 de cada ciclo (CXD1) y en el punto intermedio del ciclo en el ciclo 1 (día 8 ± 3 días) en el que se llevaron a cabo evaluaciones de laboratorio, recogida de los signos vitales y exámenes físicos. La monitorización de ensayo de la función hepática se realizó semanalmente durante las primeras 6 semanas del tratamiento de estudio durante la fase 1 y después se sometió a ensayo cada 3 semanas posteriormente y en la fase 2 para los sujetos que se quedaron en el tratamiento de estudio. La evaluación del tamaño tumoral (mediante captación de imágenes de resonancia magnética o escaneo de tomografía computerizada) se llevó acabo en el cribado o en la línea base (antes de iniciar la terapia), cada 9 semanas durante 18 meses, y después cada 12 semanas posteriormente hasta la progresión de la enfermedad. Se definió la progresión de la enfermedad como progresión confirmada por una segunda evaluación consecutiva separada por como mínimo 4 semanas con la opción de continuar el tratamiento mientras se espera a la confirmación radiológica de la progresión en caso posible, y en la que los sujetos son clínicamente estables, definido como lo siguiente: ausencia de signos y síntomas (incluyendo el empeoramiento de los valores de laboratorio), indicando progresión de la enfermedad, sin caída del estado funcional ECOG, ausencia de progresión rápida de la enfermedad y ausencia de tumores progresivos en sitios anatómicos críticos (p.ej., compresión de la médula espinal) que requiera una intervención médica alternativa urgente. Se realizó un seguimiento de todos los sujetos para supervivencia por lo menos cada 12 semanas (± 7 días) hasta la muerte.

Se requerían biopsias tumorales en la línea base y opcionalmente en cualquier tiempo después de C1D14 o con una respuesta confirmada o progresión en sujetos con tumores accesibles para evaluar la expresión tumoral de IDO1/PD-1/PD-L1, grado y tipo de infiltración de células inmunitarias mediante inmunohistoquímica y otros biomarcadores exploratorios, incluyendo el perfilado de expresión de ARNm. También se recogieron especímenes de biopsia para evaluar las toxicidades a fin de evaluar la expresión relacionada con la diana. Se determinaron los parámetros FC estándares (p.ej., ty2 Css, VdSS, AUC y lavado) para MK-3475 e INCB024360. Se recogieron todas las evaluaciones radiográficas de los tumores para la operación de revisión independiente por un revisor central ciego a los tratamientos. Antes de la inclusión no se requirieron lecturas centrales de las imágenes. Todas las revisiones centrales fueron retrospectivas e incluyeron la revisión de los escaneos de línea base y todos los escaneos durante el estudio.

Los puntos finales primarios del estudio de fase 1 fueron los siguientes: la seguridad y la tolerabilidad se evaluaron mediante monitorización de la frecuencia, duración y severidad de los SA, mediante exámenes físicos, mediante evaluación de los cambios en los signos vitales y electrocardiogramas y mediante evaluaciones clínicas de laboratorio de muestras de sangre y orina. Los puntos finales primarios del estudio de fase 2 fueron los siguientes: supervivencia libre de progresión, definida como el tiempo desde la aleatorización hasta la fecha más temprana de progresión de la enfermedad, determinada mediante evaluación por el investigador de evaluaciones objetivas radiográficas de enfermedad según RECIST v1.1 modificado o muerte debido a cualquier causa, en el caso de que se produzca antes de la progresión. Las imágenes se archivaron para una posible confirmación central retrospectiva de progresión y respuesta de la enfermedad.

Entre los puntos finales secundarios de fase 2 se incluyen: tasa de respuesta objetiva determinada mediante evaluaciones radiográficas de enfermedad según RECIST (v1.1) modificado; puntuación de respuesta categórica ordinal, determinada mediante evaluaciones radiográficas de enfermedad según RECIST (v1.1) modificado; durabilidad de la respuesta determinada mediante evaluación radiográfica de la enfermedad definida como el tiempo entre la fecha más temprana de respuesta de la enfermedad hasta la fecha más temprana de progresión de la enfermedad y tiempo hasta progresión de la enfermedad, definido como el tiempo entre la fecha de aleatorización y la fecha más temprana de progresión de la enfermedad; supervivencia global determinada entre la fecha de aleatorización y la muerte debido a cualquier causa, y seguridad y tolerabilidad de los regímenes de tratamiento mediante evaluación de los SA y cambios en las evaluaciones de seguridad, incluyendo parámetros de laboratorio.

Entre los puntos finales exploratorios en el estudio se incluyen: duración del control de enfermedad (incluyendo CR, RP y E) medidos entre el primer informe de EE o mejor hasta progresión de la enfermedad (fase 2); tasa de respuesta objetiva, TPT y SG tal como se ha definido anteriormente en subgrupos de concentración alta y baja/negativo para PD-L1 (fase 2); resumen farmacodinámico de INCB024360 y MK-3475 en sangre completa y en plasma (incluyendo la relación plasmática de kinurenina/triptófano; perfil de población de células inmunitarias de sangre periférica, y marcadores tumorales plasmáticos relevantes y marcadores de modulación inmunitaria) (fase 1 y fase 2); análisis de biopsia tumoral para evaluar la expresión de IDO1 (+/-) expresión de PD-1/L1 (alta/baja-negativa) en tejido tumoral e infiltrado de células tumorales en la línea base y correlación de la expresión con la respuesta, TPT y/o OS; evaluación de biomarcadores histológicos exploratorios (fase 1 y fase 2); resumen de la FC de MK-3475 e INCB024360, así como evaluación de los anticuerpos anti-MK-3475. Se comparó la FC de MK-3475 entre los grupos de placebo e INCB024360, mientras que se evaluó la FC de INCB024360 con administración concomitante de MK-3475 (fase 1 y fase 2); evaluación de la formación de anticuerpos antifármaco de MK-3475 (fase 1 y fase 2); ORR, TPT y SG tal como se han definido anteriormente, en sujetos con enfermedad avanzada o metastásica incluidos en la parte de fase 1 del estudio; supervivencia libre de progresión y SG tal como se ha definido anteriormente en subgrupos de sujetos con CPCNP, incluyendo subgrupos basados en tabaquismo previo. (Fase 2).

Se llevó a cabo un análisis exploratorio para la respuesta ordinal de 5 categorías en la semana 24 determinada por el investigador y/o revisión aplicando RECIST v1.1 modificado. Se determinó el punto final de respuesta ordinal de 5 categorías en un punto temporal dado mediante clasificación de la respuesta en uno de los grupos siguientes: CR: muy buena respuesta, definida como RP con porcentaje de reducción respecto a la línea base de la longitud de la línea tumoral >60%; respuesta menor, definida como RP con porcentaje de reducción respecto a la línea base de la longitud de la línea tumoral < 60%; EE y EP.

Para el estudio de fase 1, se derivaron estadísticos descriptivos (p.ej., media, desviación estándar e intervalo), en caso apropiado. Se proporciona un resumen de la inclusión de sujetos, disposición, demografía e historial médico en la línea base. Para cada cohorte se resume la tasa de TLD. Para cada cohorte se calculó la exposición y densidad de dosis. Se compararon los datos de seguridad y respuesta de enfermedad durante el tiempo a fin de evaluar el cambio respecto a la línea base, durante el tratamiento y el seguimiento. Los datos farmacocinéticos y FD se analizaron con software analítico no lineal estándar apropiado. Para el estudio de fase 2, se analizó la supervivencia sin progresión mediante el método de Kaplan-Meier tras 52 sucesos en la parte aleatorizada del estudio. Se determinó el cociente de riesgo (CR) y su intervalo de confianza al 95% basándose en el modelo de riesgos proporcionales de Cox utilizando la aproximación de probabilidad de Efron para considerar los empates en los tiempos de suceso. El tamaño muestral de 82 sujetos (41 en cada grupo, incluyendo 10% de pérdida en el seguimiento) rendía una potencia de 80% para detectar una diferencia de supervivencia entre INCB024360 en combinación con MK-3475 y m K-3475 placebo en el caso de que el RC real sea de 0,5. Lo anterior supone un alfa unilateral de 0,05; una mediana de TPT de 4 meses en el grupo de MK-3475 placebo, inclusión a los 12 meses, y 6 meses de seguimiento tras la aleatorización del último sujeto.

La Tabla 3 a continuación presenta datos preliminares de eficacia evaluables y confirmados relacionados con las respuestas clínicas de sujetos incluidos en el estudio de fase 1 anteriormente descrito. Más específicamente, los sujetos fueron tratados según el protocolo de estudio de fase 1/2 con INCB024360, tal como se muestra en la Tabla 3. De acuerdo con el protocolo, se administró INCB024360 en combinación con MK-3475. Se administró por vía intravenosa MK-3475 a una dosis de 2 mg/kg tal como se ha indicado.

TABLA 3

La Tabla 3 presenta datos preliminares de eficacia y los resultados de sujetos evaluados hasta la fecha en el estudio descrito en el presente ejemplo. En la cohorte de 25 mg BID, se encontró una respuesta parcial (RP) en un sujeto que presentaba carcinoma de células transicionales (CCT) en la vejiga (también denominado carcinoma de células uroteliales o CCU). Se encontró una RP en un segundo sujeto con melanoma (MEL). Además, en la cohorte de 25 mg BID, se encontró enfermedad estable (EE) en un sujeto con melanoma (MEL); también se encontró EE en un segundo sujeto con cáncer pulmonar de células no pequeñas (CPCNP).

Para los sujetos evaluables en la cohorte de 50 mg BID, se encontró una respuesta completa (RC) en un sujeto con melanoma (MEL). En la cohorte de 50 mg BID, se encontró una respuesta parcial (RP) en un sujeto con melanoma (MEL) y se encontró un RP en un segundo sujeto con carcinoma renal (cáncer de células renales (CCR)). En el estudio en curso, la cohorte de 50 mg BID también presentaba cuatro sujetos incluidos que están siendo sometidos a tratamiento pero que todavía no han llegado a la primera evaluación de tumor durante el estudio. De dichos cuatro sujetos de estudio que reciben tratamiento, uno presentaba carcinoma de células escamosas histológica o citológicamente confirmado de cabeza y cuello; uno presentaba adenocarcinoma de endometrio, y dos presentaban cáncer de células renales.

Tal como se indica en la presente memoria, los sujetos, pacientes o individuos en el estudio de fase 1 se trataron para diferentes tipos de cáncer. En aspectos particulares, un sujeto, paciente o individuo sometido a tratamiento presentaba un cáncer seleccionado de entre cáncer pulmonar de células no pequeñas (CPCNP), melanoma, cáncer de células transicionales de vejiga, cáncer de células renales (CCR), cáncer de mama triple-negativo, adenocarcinoma de endometrio o carcinoma de células escamosas de cabeza y cuello.

Basándose en los datos preliminares mostrados en la Tabla 3, la mejor respuesta global total (según RECIST v1.1 modificado) era de 71% (5/7) y la tasa de control de la enfermedad era de 100% (7/7), calculada incluyendo sólo los sujetos evaluables para la respuesta (tasa de respuesta objetiva (TRO) 4/7 y tasa de control de la enfermedad (TCE) 7/7). Tal como apreciará el experto en la materia, la TCE tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a sujetos, pacientes o individuos que presentan enfermedad estable o mejor (es decir, EE, RP o RC).

La Tabla 4, a continuación, presenta datos preliminares de sucesos adversos (SA), incluyendo SA de tipo inmunitario, informados en el estudio descrito.

TABLA 4

En la Tabla 4, se informó de una erupción de grado 3 como SA en la cohorte de 50 mg BID relacionada con toxicidad limitante de dosis (TLD) basándose en el Grado de la erupción. El sujeto se recuperó sin esteroides y continuó en el estudio, con reducciones de la dosis, y presentó una RP. Una caída informada en la cohorte de 50 mg BID presentó un resultado fatal; sin embargo, la caída no estaba relacionada con el tratamiento del estudio. Entre los SA listados en la Tabla 4, TVP (IJ) se refiere a Trombosis Venosa Profunda (yugular interna).

tal como se observa en la Tabla 3, anteriormente, los resultados, aunque preliminares, indican una prometedora actividad antitumoral de la terapia de combinación de la invención contra múltiples tipos tumorales, y en particular, contra por lo menos tres tipos tumorales diferentes, incluyendo tumores de vejiga, melanoma y renal. Además, los resultados preliminares indican que los sujetos evaluados en el estudio no experimentaron sucesos adversos mayores o sucesos adversos de tipo inmunitario relacionados con el estudio.

La Tabla 5 proporciona una breve descripción de las secuencias en el Listado de secuencias.

TABLA 5

REFERENCIAS

1. Sharpe, A.H, Wherry, E.J., Ahmed R., and Freeman G.J. The function of programmed cell death 1 and its ligands in regulating autoimmunity and infection. Nature Immunology (2007); 8:239-245.

2. Dong H et al. Tumor-associated B7-H1 promotes T-cell apoptosis: a potential mechanism of immune evasion. Nat Med. 2002 Aug; 8(8):793-800.

3. Yang et al. PD-1 interaction contributes to the functional suppression of T-cell responses to human uveal melanoma cells in vitro. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2008 Jun; 49(6 (2008): 49: 2518-2525.

4. Ghebeh et al. The B7-H1 (PD-L1) T lymphocyte-inhibitory molecule is expressed in breast cancer patients with infiltrating ductal carcinoma: correlation with important high-risk prognostic factors. Neoplasia (2006) 8: 190-198.

5. Hamanishi J et al. Programmed cell death 1 ligand 1 and tumor-infiltrating CD8+ T lymphocytes are prognostic factors of human ovarian cancer. Proceeding of the National Academy of Sciences (2007): 104: 3360-3365. 6. Thompson RH et al. Significance of B7-H1 overexpression in kidney cancer. Clinical genitourin Cancer (2006): 5: 206-211.

7. Nomi, T. Sho, M., Akahori, T., et al. Clinical significance and therapeutic potential of the programmed death- 1 ligand/programmed death-1 pathway in human pancreatic cancer. Clinical Cancer Research (2007);13:2151-2157.

8. Ohigashi Y et al. Clinical significance of programmed death-1 ligand-1 and programmed death-1 ligand 2 expression in human esophageal cancer. Clin. Cancer Research (2005): 11: 2947-2953.

9. Inman et al. PD-L1 (B7-H1) expression by urothelial carcinoma of the bladder and BCG-induced granulomata: associations with localized stage progression. Cancer (2007): 109: 1499-1505.

10. Shimauchi T et al. Augmented expression of programmed death-1 in both neoplastic and nonneoplastic CD4+ T-cells in adult T-cell Leukemia/ Lymphoma. Int. J. Cancer (2007): 121:2585-2590.

11. Gao et al. Overexpression of PD-L1 significantly associates with tumor aggressiveness and postoperative recurrence in human hepatocellular carcinoma. Clinical Cancer Research (2009) 15: 971-979.

12. Nakanishi J. Overexpression of B7-H1 (PD-L1) significantly associates with tumor grade and postoperative prognosis in human urothelial cancers. Cancer Immunol Immunother. (2007) 56: 1173- 1182.

13. Hino et al. Tumor cell expression of programmed cell death-1 is a prognostic factor for malignant melanoma. Cancer (2010) 00:1-9.

14. Ghebeh H. Foxp3+ tregs and B7-H1+/PD-1+ T lymphocytes co-infiltrate the tumor tissues of high-risk breast cancer patients: implication for immunotherapy. BMC Cancer. (2008) 8:57.

15. Ahmadzadeh M et al. Tumor antigen-specific CD8 T cells infiltrating the tumor express high levels of PD-1 and are functionally impaired. Blood (2009) 114: 1537-1544.

16. Thompson RH et al. PD-1 is expressed by tumor infiltrating cells and is associated with poor outcome for patients with renal carcinoma. Clinical Cancer Research (2007) 15: 1757-1761.

17. Platten, M., W. Wick, and B.J. Van den Eynde, Tryptophan catabolism in cancer: beyond IDO and tryptophan depletion. Cancer Res (2012) 72(21): 5435-5440.

18. Munn, D.H., Blocking IDO activity to enhance anti-tumor immunity. Front Biosci (Elite Ed) (2012) 4:734-745.

19. Weber, W.P., et al., Differential effects of the tryptophan metabolite 3-hydroxyanthranilic acid on the proliferation of human CD8+ T cells induced by TCR triggering OS Ohomeostatic cytokines. Eur J Immunol (2006) 36(2):296-304.

20. Uyttenhove, C., et al., Evidence for a tumoral immune resistance mechanism based on tryptophan degradation by indoleamine 2,3-dioxygenase. Nat Med (2003) 9(10)1269-1274.

21. Liu, X., et al., Selective inhibition of IDO1 effectively regulates mediators of antitumor immunity. Blood (2010) 115(17):3520-3530.

22. Lee, G.K., et al., Tryptophan deprivation sensitizes activated T cells to apoptosis prior to cell division. Immunology (2002) 107(4)452-460.

23. Bonanno, G., et al., Indoleamine 2,3-dioxygenase 1 (IDO1) activity correlates with immune system abnormalities in multiple myeloma. J Transl Med (2012) 10:247.

24. Holmgaard, R.B., et al., Indoleamine 2,3-dioxygenase is a critical resistance mechanism in antitumor T cell immunotherapy targeting CTLA-4. J Exp Med (2013) 210 (7):1389-1402.

25. Yue, E.W., et al., Discovery of potent competitive inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase with in vivo pharmacodynamic activity and efficacy in a mouse melanoma model. J Med Chem (2009) 52(23):7364-7367. 26. Koblish, H.K., et al., Hydroxyamidine inhibitors of indoleamine-2,3-dioxygenase potently suppress systemic tryptophan catabolism and the growth of IDO-expressing tumors. Mol Cancer Ther (2010) 9(2):489-498.

27. Liu, X., et al., Indoleamine 2,3-dioxygenase, an emerging target for anti-cancer therapy. Curr Cancer Drug Targets (2009) 9(8): p. 938-52.

28. Spranger, S.,et al., "Rational combinations of immunotherapeutics that target discrete pathways", Journal for ImmunoTherapy of Cancer, 2013, 1:16 : 1-14.

Claims (14)

1. REIVINDICACIONES

   i. Medicamento que comprende un antagonista de la proteína 1 de muerte programada (PD-1) para la utilización en combinación con un inhibidor de IDO1 para el tratamiento de un cáncer en un individuo, en el que el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal con cadenas pesadas, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 21 y cadenas ligeras, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 22; y el inhibidor de IDO1 es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
2. 2. Medicamento para la utilización según la reivindicación 1, en el que el inhibidor de IDO es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida.
3. 3. Medicamento para la utilización según la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en el que el cáncer es un tumor sólido.
4. 4. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en el que el cáncer es carcinoma de células renales avanzado.
5. 5. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el antagonista de PD-1 se formula en forma de un medicamento líquido que comprende 25 mg/ml de anticuerpo monoclonal anti-PD-1, sacarosa al 7% (p/v), polisorbato-80 al 0,02% (p/v) en tampón de histidina 10 mM, pH 5,5.
6. 6. Kit que comprende un primer recipiente, un segundo recipiente y un impreso en el envase, en el que el primer recipiente comprende por lo menos una dosis de un medicamento que comprende un antagonista de la proteína 1 de muerte programada (PD-1), el segundo recipiente comprende por lo menos una dosis de un medicamento que comprende un inhibidor de IDO1 y el impreso en el envase comprende instrucciones para tratar un individuo para cáncer utilizando los medicamentos, y en el que el antagonista de PD-1 es un anticuerpo monoclonal con cadenas pesadas cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 21 y cadenas ligeras, cada una de las cuales presenta la secuencia de aminoácidos SEC ID n° 22; y el inhibidor de IDO1 es 4-({2-[(aminosulfonil)amino]etil}amino)-N-(3-bromo-4-fluorofenil)-N'-hidroxi-1,2,5-oxadiazol-3-carboximidamida o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.
7. 7. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1, 2 o 5, o kit según la reivindicación 6, en el que el cáncer es cáncer de vejiga, cáncer de mama, cáncer renal de células claras, carcinoma de células escamosas de cabeza/cuello, carcinoma de células escamosas pulmonar, melanoma, cáncer pulmonar de células no pequeñas (CPCNP), cáncer ovárico, cáncer pancreático, cáncer de próstata, cáncer de células renales, cáncer pulmonar de células pequeñas (CPCP), cáncer de mama triple negativo, cáncer endometrial, leucemia linfoblástica aguda (LLA), leucemia mieloide aguda (LMA), leucemia linfocítica crónica (LLC), leucemia mieloide crónica (LMC), linfoma de células B grandes difusas (LCBGD), linfoma folicular, linfoma de Hodgkin (LH), linfoma de células del manto (LCM), mieloma múltiple (MM), proteína de leucemia-1 de células mieloides (Mcl-1), síndrome mielodisplásico (SMD), linfoma no de Hodgkin (LNH) o linfoma linfocítico pequeño (LLP).
8. 8. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el antagonista de PD-1 se administra en el individuo en una cantidad de 2 mg/kg y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg o 50 mg.
9. 9. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que el antagonista de PD-1 se administra en el individuo en una cantidad de 200 mg y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg o 50 mg.
10. 10. Medicamento para la utilización según la reivindicación 8 o la reivindicación 9, en el que el inhibidor de IDO1 se administra en el individuo a una dosis de 25 mg BID o en el que el inhibidor de IDO1 se administra en el individuo a una dosis de 50 mg BID.
11. 11. Medicamento para la utilización según la reivindicación 8 o la reivindicación 9, en el que el antagonista de PD-1 puede administrarse cada tres semanas y se administra una dosis del inhibidor de IDO1 dos veces al día, preferentemente en el que el inhibidor de IDO1 se administra a intervalos de doce horas.
12. 12. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 11, en el que el antagonista de PD-1 y el inhibidor de IDO1 se administran durante un periodo de administración de 21 días.
13. 13. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 12, en el que el cáncer es cáncer pulmonar de células no pequeñas (CPCNP), melanoma, cáncer de células transicionales de la vejiga (CCT), cáncer de células renales (CCR) o carcinoma de células escamosas de la cabeza y cuello.
14. 14. Medicamento para la utilización según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que:

    a) el antagonista de PD-1 se administra en el sujeto en una cantidad de 10 mg/kg, una dosis cada dos semanas o una dosis cada tres semanas, y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg BID, 50 mg BID, 100 mg BID o 300 mg BID, o

    b) el antagonista de PD-1 se administra en el sujeto en una cantidad de 2 mg/kg, una dosis cada dos semanas o una dosis cada tres semanas y el inhibidor de IDO1 se administra en el sujeto a una dosis de 25 mg BID.