ES2814552T3 - Composición cosmética y/o farmacéutica que contiene un producto extracelular bacteriano de la Pseudoalteromonas antarctica y su uso - Google Patents

Composición cosmética y/o farmacéutica que contiene un producto extracelular bacteriano de la Pseudoalteromonas antarctica y su uso Download PDF

Info

Publication number
ES2814552T3
ES2814552T3 ES15790909T ES15790909T ES2814552T3 ES 2814552 T3 ES2814552 T3 ES 2814552T3 ES 15790909 T ES15790909 T ES 15790909T ES 15790909 T ES15790909 T ES 15790909T ES 2814552 T3 ES2814552 T3 ES 2814552T3
Authority
ES
Spain
Prior art keywords
extract
inci
skin
treatment
cosmetic
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
ES15790909T
Other languages
English (en)
Inventor
Astals Albert Soley
Domènech Núria Alminana
Montiel Antonio Ferrer
Gonzalez Marc Esplugas
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Lipotec SA
Original Assignee
Lipotec SA
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Lipotec SA filed Critical Lipotec SA
Application granted granted Critical
Publication of ES2814552T3 publication Critical patent/ES2814552T3/es
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
    • A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
    • A61K35/74—Bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/97—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from algae, fungi, lichens or plants; from derivatives thereof
    • A61K8/9728—Fungi, e.g. yeasts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/96—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution
    • A61K8/99—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing materials, or derivatives thereof of undetermined constitution from microorganisms other than algae or fungi, e.g. protozoa or bacteria
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/08—Antiseborrheics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/10—Anti-acne agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/14—Drugs for dermatological disorders for baldness or alopecia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/16—Emollients or protectives, e.g. against radiation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/18—Antioxidants, e.g. antiradicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P23/00—Anaesthetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/10—Anthelmintics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00—General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06—Free radical scavengers or antioxidants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/04—Topical preparations for affording protection against sunlight or other radiation; Topical sun tanning preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/008—Preparations for oily skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/08—Anti-ageing preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair
    • A61Q5/008—Preparations for oily hair
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q5/00—Preparations for care of the hair
    • A61Q5/02—Preparations for cleaning the hair
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Gerontology & Geriatric Medicine (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Anesthesiology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)

Abstract

Extracto de peso molecular inferior a 10 000 Da que comprende un producto extracelular secretado por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno de la piel y/o las membranas mucosas, en donde dicho extracto puede obtenerse por filtración de un sobrenadante obtenido de la fermentación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica para eliminar moléculas de alto peso molecular, en donde la filtración se lleva a cabo después de la separación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica del sobrenadante donde se encuentra el extracto.

Description

DESCRIPCIÓN
Composición cosmética y/o farmacéutica que contiene un producto extracelular bacteriano de la Pseudoalteromonas antárctica y su uso
Campo de invención
Esta invención se refiere a un producto extracelular de origen bacteriano, que promueve la reducción de sebo. Dicho producto es secretado por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica. Esta invención también se refiere al uso de dicho producto extracelular de origen bacteriano en composiciones cosméticas o dermofarmacéuticas para el tratamiento y/o cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello.
Antecedentes de la invención
La piel, las membranas mucosas, el cabello y/o las uñas constituyen una barrera física entre el organismo y su medio ambiente. La piel está compuesta por dos tejidos: la dermis y la epidermis. La epidermis es la capa más externa de la piel, es impermeable y, por tanto, proporciona protección contra agentes externos. Es un epitelio queratinizado pluriestratificado en continua renovación.
La epidermis tiene un alto contenido en queratina, procedente del principal tipo de células de la epidermis (queratinocitos), melanina y un contenido significativo de lípidos, que se encuentran tanto en el estrato córneo como en la película hidrolipídica en la superficie cutánea. Los lípidos de origen sebáceo y de queratinocitos se encuentran en una película lipídica que cubre la superficie cutánea, donde la mayor parte de estos lípidos son de origen sebáceo. [A. Pappas, “Epidermal Surface Lipids”, Dermato-Endocrinology 2009, 1, 72-76]. La secreción sebácea se produce en las glándulas sebáceas, que se encuentran por todo el cuerpo, excepto en las palmas de las manos y los pies, en densidades de 400-900 glándulas por cm2 en la cara [K. R. Smith and D. M. Thiboutot, “Sebaceous gland lipids: friend or foe?”, Journal of Lipid Research 2008, 49, 271-281], principalmente asociadas a los folículos pilosos, donde las secreciones sebáceas llegan a la superficie de la piel a través de su canal. La secreción de las glándulas sebáceas, el sebo, es una sustancia grasienta y cerosa que consiste en una mezcla constituida principalmente por ácidos grasos, diglicéridos, triglicéridos, colesterol y escualeno, que desempeña funciones termorreguladoras y disminuye la pérdida de agua de la superficie de la piel.
En los seres humanos, la cantidad de sebo producido varía en función del grupo poblacional, dependiendo de la edad y también de los factores hormonales de regulación. Dependiendo de la cantidad de sebo, se distingue entre:
- Piel grasa. La piel grasa es resultado de una excesiva función de las glándulas sebáceas. Cuando hay un exceso del sebo en la piel, ésta se caracteriza por una textura más gruesa, una apariencia grasienta y brillante, así como la presencia de poros dilatados e imperfecciones cutáneas.
- Piel mixta. Se caracteriza por la presencia simultánea de áreas secas y grasas. Normalmente, el área grasa se localiza en la frente, la nariz y la barbilla (conocida como la zona T). La parte de la cara que se encuentra fuera de la zona T suele ser el área seca, debido a que en esa zona la piel es más fina, lo que incrementa su descamación.
- Piel seca. La falta de sebo implica una incapacidad de retener una hidratación suficiente, lo que da lugar a una piel frágil, una mayor tendencia a la descamación y arrugas finas. Con la característica de mostrar poros imperceptibles, la capacidad reducida de función de barrera implica una mayor susceptibilidad a agresiones externas, como los rayos UV, el frío o el viento.
- Piel normal. Con la cantidad apropiada de sebo que aporta un buen equilibrio hídrico, este tipo de piel muestra una buena elasticidad y resistencia, con poros apenas visibles y un tono de piel uniforme. Aunque depende en gran medida de la edad y el origen étnico, hay un elevado promedio de la población con piel grasa, junto con una existencia adicional de la población con piel mixta y una zona T grasa.
Algunos trastornos dermatológicos relacionados con el exceso de sebo son:
- Seborrea, un trastorno funcional de las glándulas sebáceas que produce una hipersecreción del sebo que causa una piel roja, irritada y escamosa.
- Acné, una infección que ocurre cuando se taponan los poros de la piel donde quedan atrapados el sebo, las células muertas y las bacterias.
- Comedón, una acumulación de sebo endurecido y una masa de células queratinizadas que causan un bloqueo en el canal del folículo.
- Milium o puntos blancos, una acumulación de células queratinizadas y material sebáceo atrapado bajo la piel.
Dentro de las glándulas sebáceas, el sebo se libera cuando los sebocitos maduros se rompen dentro de la glándula y el sebo sale a la superficie de la piel a través del canal del folículo piloso. Hasta llegar a la liberación del sebo, la función de la glándula comprende que hay una población de células no diferenciadas en la capa adyacente al folículo piloso que inician su proliferación a medida que se mueven hasta la capa basal de la glándula y se convierten en sebocitos cargados de lípidos a medida que llegan a la parte central de la glándula, donde se rompen eventual y progresivamente. [C. Nieman and V. Horsley, “Development and Homeostasis of the sebaceous gland”, Seminars in Cell & Developmental Biology 2012, 23, 928- 936].
Un amplio número de compuestos ha mostrado sus efectos en la regulación de la función de las glándulas sebáceas como andrógenos, estrógenos, retinoides, receptores de tipo LXR (receptor X del hígado), recepto­ res activados mediante proliferadores de peroxisoma, hormonas del crecimiento/factores de crecimiento simi­ lares a la insulina, y la familia de las melanocortinas [K. R. Smith and D. M. Thiboutot, “Sebaceous gland lipids: friend or foe?”, Journal of Lipid Research 2008, 49, 271-281].
La familia de las melanocortinas está compuesta por un grupo de péptidos relacionados estructuralmente con propiomelanocortina (POMC) y con receptores de melanocortina (MCR) que regulan los efectos de los péptidos melanocortínicos. Los MCR están asociados a proteínas G (GPCR) y transfieren la señal mediante diferentes rutas: producción de adenosín monofosfato cíclico (AMPc), activación de la proteína quinasa A y aumento de la concentración del catión [Ca2+].
El MC5R es uno de los diferentes receptores de melanocortina que han sido caracterizados en varios tejidos humanos y está implicado en la producción de lípidos. [M.A. Bednarek et al, “Potent and Selective Peptide Agonists of a-Melanocite Stimulating Hormonone (aMSH) Action at Human Melanocortin Receptor 5; their Synthesis and Biological Evaluation in vitro’’, Chem. Biol. Drug. Des. 2007, 69, 350-355]. Por ejemplo, los ratones transgénicos que pierden la expresión del receptor MC5R muestran una marcada reducción en la producción de sebo. [D.M. Thibotout et al, “The Melanocortin 5 Receptor is Expressed in Human Sebaceous Glands and Rat Preputial Cells”, J. Invest. Dermatol. 2000, 115, 614-619]. Asimismo, el MC5R se considera un marcador de diferenciación del sebocito, puesto que el MC5R no es detectado en células sebáceas no diferenciadas mientras que sí es detectado en células sebáceas en las últimas etapas de diferenciación, pero no en células sebáceas no diferenciadas basales. De forma similar, el MC5R sólo es detectado en cultivos in vitro al inicio de la diferenciación y en células sebáceas totalmente diferenciadas que muestran gránulos lipídicos promi­ nentes [L. Zhang et al, “Melanocortin-5 receptor: A marker of human sebocyte differentiation”, Peptides 2006, 27, 413-420]. Dado que el MC5R es un marcador que está vinculado con el proceso de diferenciación sebáceo que conduce a la producción de sebo, la inhibición de este receptor MC5R se puede utilizar como estrategia para la reducción de la producción de sebo y en consecuencia para el tratamiento y/o prevención de trastornos y/o enfermedades relacionadas con el exceso de sebo.
Asimismo, la inhibición del receptor MC5R ha mostrado ser beneficioso en el tratamiento de la dermatitis seborreica, cáncer y enfermedades inflamatorias (US 2009/221558). Por ejemplo, el síndrome Muir-Torre con­ siste en adenomas en glándulas sebáceas asociadas a un adenocarcinoma interno (normalmente en el colon, próstata, mama u ovario) y la prevención de la diferenciación de células sebáceas mediante la inhibición del receptor MC5R puede ser efectiva para el tratamiento del crecimiento tumoral. (US 2009/221558). También se ha observado que la inhibición del receptor MC5R es beneficiosa para el tratamiento de anorexia o caquexia (US 2003/110518) y para el tratamiento de hidrosadenitis supurativa y excesiva producción de cerumen (WO 03/040118 A1).
También se conoce que ciertos compuestos, como los estrógenos, que inhiben las glándulas sebáceas, tienen un efecto estimulador en la síntesis de colágeno y por tanto tienen un efecto de firmeza sobre la piel [A. Parchami, R.A. Fatahian Dehkordi, “Effect of ovariectomy and chronic sex steroid administration on rabbit skin”, Global Veterinaria, 2010, 4(6), 610-615].
Se describe en el estado de la técnica una sustancia extracelular polimérica procedente del mar, Matmarine™, que actúa sobre el receptor MC5R [Soap, Perfumery & Cosmetics, Product Innovation 2013, página 39]. Se plantea que Matmarine™ disminuye la proporción de sebo (8,4 %) y el número (20,5 %) y el área de los poros (18,8 %).
Sorprendentemente, el solicitante de la presente invención ha descubierto que extractos de peso molecular inferiores a 10 kDa producidos por cepas de la especie Pseudoalteromonas antarctica inhiben el receptor MC5R y aumenta la síntesis de colágeno en la piel.
Se conoce del estado de la técnica que una glicoproteína producida por la especie Pseudoalteromonas An­ tárctica tiene propiedades curativas (EP 1402898 B1), hidratantes y repara los trastornos de queratinización de la piel (EP 2337556 A1). El estado de la técnica también describe un perfil de proteínas en la vesícula de la membrana de la especie Pseudoalteromonas Antárctica con pesos moleculares de 109 KDa, 52,5 KDa, 48 KDa, 44 KDa, 42 KDa, 34,5 KDa, 33 KDa, 31 KDa y 24 KDa. El peso molecular promedio de la proteína principal se sitúa entre 98 y112 KDa [Morphological and physiological study of Pseudoalteromonas antarctica NF3 and characterization of membrane vesicles present in the produced extracellular material, Tesis Doctoral de María Nevot, presentada en la Universidad de Barcelona].
Resumen de la invención
La tecnología descrita ofrece una solución para la reducción del sebo en la piel, las membranas mucosas y/o el cabello mediante un extracto de una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica.
Breve descripción del dibujo
Figura 1: Los diagramas de densidad muestran parámetros morfológicos de tamaño (FSC-A) y granularidad (SSC-A) para el crecimiento de sebocitos en diferentes condiciones de cultivo. Los sebocitos no diferenciados muestran dos poblaciones de células principales caracterizadas por niveles de granularidad elevados y un tamaño celular pequeño. Los sebocitos tratados con 2,5 pg/ml del extracto obtenido según el ejemplo 1 mues­ tran un cambio en la morfología, disminuyendo la granularidad y aumentando el tamaño celular similar a los sebocitos no diferenciados.
Descripción de la invención
La invención se define en las reivindicaciones adjuntas.
Esta invención se refiere al uso cosmético y dermofarmacéutico de extractos con un peso molecular inferior a 10 000 Da producidos por la especie Pseudoalteromonas antarctica. Sorprendentemente, los inventores de la presente invención han descubierto que los extractos antes mencionados reducen la cantidad de sebo en la piel y/o el cabello, aumentan la síntesis de colágeno en la piel y también actúan como fotoprotectores. En una realización, la inhibición del receptor MC5R reduce la producción de sebo en la piel y/o el cabello y disminuye la cantidad de sebo.
Definiciones
Con el fin de facilitar la comprensión de esta invención, se incluyen los significados de algunos términos y expresiones tal y como se usan en el contexto de la invención.
En el contexto de esta invención, “piel” se entiende como las capas que la comprenden, desde la capa más externa o estrato córneo hasta la capa más interna o hipodermis, ambas inclusive. Estas capas están com­ puestas por diferentes tipos de células como queratinocitos, fibroblastos, melanocitos y/o adipocitos, entre otros. En el contexto de esta invención, el término “piel” incluye el cuero cabelludo.
El término “tratamiento”, como se utiliza en el contexto de esta especificación cuando no va acompañado del calificativo “cosmético, no terapéutico”, significa la administración de un compuesto según la invención para aliviar o eliminar una enfermedad o trastorno o reducir o eliminar uno o varios síntomas asociados a esta enfermedad o trastorno. El término “tratamiento” también abarca la capacidad de aliviar o eliminar las consecuencias fisiológicas de la enfermedad o trastorno.
Cuando el término “tratamiento” va acompañado de los calificativos “cosmético, no terapéutico”, se refieren a la aplicación del compuesto en la piel, el cabello y/o las membranas mucosas, especialmente con el propósito de mejorar las cualidades cosméticas de la piel, el cabello y/o las membranas mucosas, incluidas, pero no limitadas a: su nivel de hidratación, elasticidad, firmeza, brillo, tono o textura, entre otros. El término “cuidado” en esta invención se refiere al mantenimiento de las cualidades de la piel, el cabello y/o las membranas mucosas. Estas cualidades están sujetas a mejora y mantenimiento a través de un tratamiento cosmético y/o cuidado de la piel, el cabello y/o las membranas mucosas, tanto en sujetos sanos como aquellos que presenten enfermedades y/o trastornos en la piel y/o las membranas mucosas, incluidos, pero no limitados a: úlceras y lesiones en la piel, psoriasis, dermatitis, acné o rosácea, entre otros.
El término “prevención”, tal y como se utiliza en esta invención, se refiere a la capacidad de un compuesto de la invención de prevenir, retrasar u ocultar la apariencia o desarrollo de una enfermedad o trastorno, antes de su aparición.
En el contexto de esta invención, el término “envejecimiento” se refiere a los cambios experimentados por la piel con los años (cronoenvejecimiento) o por exposición al sol (fotoenvejecimiento) o por agentes medioam­ bientales como el humo del tabaco, condiciones climáticas extremas de frío, calor o viento, agentes contami­ nantes químicos, e incluye todos los cambios externos visibles y/o perceptibles a través del tacto, incluidos pero no limitados a: el desarrollo de discontinuidades en la piel como arrugas, líneas finas, surcos, irregulari­ dades o aspereza, aumento del tamaño de los poros, pérdida de elasticidad, pérdida de firmeza, pérdida de suavidad, pérdida de capacidad de recuperación de la deformación, descolgamiento de la piel como el des­ colgamiento de las mejillas, la aparición de bolsas bajo los ojos o aparición de papada entre otros, cambios en el color de la piel como manchas, rojeces, bolsas bajo los ojos o aparición de áreas hiperpigmentadas como manchas de la edad o pecas entre otros, diferenciación anómala, hiperqueratinización, elastosis, queratosis, pérdida de cabello, piel de naranja, pérdida de la estructura del colágeno y otros cambios histológicos del estrato córneo, de la dermis, de la epidermis, del sistema vascular (por ejemplo, la aparición de telangiectasias o arañas vasculares). El término “fotoenvejecimiento” agrupa el conjunto de procesos como resultado de la exposición prolongada de la piel a la radiación ultravioleta que resulta en un envejecimiento prematuro de la piel, y presenta las mismas características físicas que el envejecimiento, incluidas, pero no limitadas a la flacidez, descolgamiento, cambios de color o irregularidades en la pigmentación, queratinización anómala o excesiva.
Por tanto, un primer aspecto de la presente invención se refiere al extracto con un peso molecular inferior a 10 000 Da producido por la especie Pseudoalteromonas antárctica para su uso en el tratamiento de la piel y/o las membranas mucosas donde el tratamiento se refiere al tratamiento y/o prevención de inflamación, come­ dones, acné, seborrea, dermatitis seborreica o fotoprotección de la piel. En una realización, la inflamación se selecciona de, por ejemplo y sin sentido limitativo, a, un grupo formado por psoriasis, piel sensible, dermatitis, dermatitis atópica, dermatitis por contacto, dermatitis de pañal, dermatitis seborreica, eczema, rosácea, acné, enfermedad hiperproliferativa de la piel, quemaduras, quemaduras solares, paroniquia, inflamación de la piel tras cirugía, tras un tratamiento mediante terapia con luz pulsada intensa (ILP), tras un tratamiento mediante terapia con luz pulsada monocromática (láser), tras un tratamiento con agentes químicos exfoliantes o tras exposición excesiva a agentes externos agresivos, inflamación de la membrana mucosa de la vagina, inflama­ ción de la membrana mucosa oral, gingivitis, periodontitis, rinitis, rinitis alérgica, entre otras.
En la presente invención se describe el extracto con peso molecular inferior a 10 000 Da producido por la especie Pseudoalteromonas antarctica para su uso en el tratamiento del cáncer, anorexia y caquexia. En una realización, el tratamiento del cáncer es un tratamiento de inhibición del crecimiento tumoral o del síndrome Muir-Torre.
En otro aspecto, la presente invención se refiere al uso del extracto con peso molecular inferior a 10000 Da producido por la especie Pseudoalteromonas antarctica para el tratamiento cosmético, no terapéutico y/o el cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello. En una realización, el tratamiento cosmético, no terapéutico y/o el cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello es un tratamiento de reducción de la cantidad de sebo en la piel y/o el cabello, tratamiento y/o prevención del envejecimiento de la piel, trata­ miento y/o prevención de las arrugas de la piel, tratamiento de la pérdida de firmeza de la piel y/o la higiene del cabello.
En otra realización, el tratamiento de la piel y/o las membranas mucosas y el tratamiento cosmético, no tera­ péutico y/o el cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello inhiben el receptor MC5R.
En otra realización, el tratamiento de la piel y/o las membranas mucosas y el tratamiento cosmético, no tera­ péutico y/o el cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello estimulan la síntesis de colágeno.
En otra realización, el tratamiento de la piel y/o las membranas mucosas y el tratamiento cosmético, no tera­ péutico y/o el cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello se realiza mediante aplicación tópica o transdérmica.
En otra realización, el peso molecular del extracto producido por la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica es superior a 50 Da e inferior a 10 000 Da, se encuentra entre 100 Da y 8000 Da, entre 150 Da y 6000 Da, o entre 300 Da y 5000 Da.
En otra realización, la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica es una cepa con número de depósito CECT 8690. Dicha cepa se depositó el día 29 de julio de 2014 en la Colección Española de Cultivos Tipo (CECT) (Edificio 3 CUE, Parc Científic Universitat de Valencia, Catedrático Agustín Escardino 9, 46980 Pa­ terna, Valencia, España) como institución legalmente reconocida para dicho propósito, de conformidad con el Tratado de Budapest relativo al Reconocimiento Internacional del Depósito de Microorganismos, del 28 de abril de 1977.
En otra realización el extracto con peso molecular inferior a 10000 Da se puede obtener mediante fermenta­ ción de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica en un medio de cultivo adecuado, aireado y agitado de forma convencional para sintetizar y secretar dicho producto en el medio de cultivo, seguido de aislamiento y purificación. La fermentación para producir el extracto de esta invención puede realizarse en un medio aireado y agitado a una temperatura que oscile entre 5 °C y 37 °C, o entre 8 °C y 20 °C, con un pH entre 5,5 y 9, o entre 6,5 y 7,5 ajustándolo según sea necesario durante la fermentación. El proceso de fer­ mentación puede durar entre 24 y 120 horas, o entre 36 y 72 horas. En una realización, el método de aisla­ miento y purificación del extracto con peso molecular inferior a 10 000 Da se realiza mediante los procedi­ mientos conocidos por el experto en la técnica, como los procesos de centrifugación y filtración. Tras pasos de centrifugación y filtración que tienen como objetivo la separación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antárctica del sobrenadante donde se encuentra el extracto, se realizan filtraciones para eliminar las moléculas de alto peso molecular con el objeto de purificar este extracto y se utilizan membranas que retienen moléculas con un peso molecular superior a 10000 Da. En una realización, la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica es la cepa con número de depósito CECT 8690.
En otra realización, el extracto con peso molecular inferior a 10000 Da de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica tiene un tiempo de retención entre 5 y 20 minutos, o entre 8 y 17 minutos, en un análisis cromatográfico mediante cromatografía líquida de alta resolución (HPLC), con una columna cromatográfica TSKGel G2000SWXL, 5 m, 125 A 7,8 mm x 30 mm (TOSOH Bioscience) y 0,1 M de agua con pH=6,70 0,1 M tampón fosfato 0,1 M sulfato de sodio como eluyente.
En otra realización, en la fermentación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica contiene azú­ cares exógenos, incluidos, pero no limitados a galactosa, glucosa, manosa, amigdalina, celobiosa, maltosa, almidón, glucógeno, lactosa, mezclas de los mismos y/o extractos que contienen mezclas de estos azúcares pueden utilizarse como fuente de carbono. En una realización, se aporta un suministro exógeno de glucosa de 2 a 40 g/L o de 10 a 30 g/L.
En otra realización, el medio de cultivo comprende fuentes adicionales de nitrógeno y de carbono, como ex­ tractos de levadura, extractos de malta o peptonas, con concentraciones de cada uno de estos componentes de 0,1 a 20 g/L o de 0,5 a 10 g/L.
En otra realización, también se añaden sales minerales al medio de cultivo de la fermentación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica y dichas sales minerales se seleccionan de entre las sales que apor­ tan los iones Na+, K+, NH4+, Ca2+, Mg2+, PO43', SO42', Cl-, CO32' u oligoelementos tales como Cu, Mn, Fe y Zn.
Otro aspecto de la esta invención se refiere a una composición cosmética o dermofarmacéutica caracterizada por que comprende una cantidad con eficacia cosmética o dermofarmacéutica del extracto con peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica y al menos un exci­ piente, adyuvante y/o ingrediente aceptable para el uso cosmético y dermofarmacéutico. Dichas composicio­ nes se pueden preparar mediante métodos convencionales conocidos por el experto en la técnica [ “Harry’s Cosmeticology", Séptima edición, (1982), Wilkinson J.B., Moore R.J., ed. Longman House, Essex, GB]. En una realización, la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica es una cepa con número de depósito CECT 8690.
La cantidad con eficacia cosmética o dermofarmacéutica del extracto con peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica que se debe administrar en la composi­ ción de la invención, así como su dosis, dependerá de numerosos factores, incluidos la edad, el estado del paciente, la naturaleza o severidad de la afección, trastorno o enfermedad a tratar y/o cuidar, vía y frecuencia de administración del extracto.
Se entiende que la “cantidad con eficacia cosmética o dermofarmacéutica” es no tóxica, pero tiene la suficiente cantidad de extracto con peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoal­ teromonas antarctica para ofrecer el efecto deseado. El extracto de la invención se utiliza en concentraciones cosméticas o dermofarmacéuticas para conseguir el efecto deseado; en una realización, respecto al peso total de la composición, entre 0,0000000001 % (por peso) y 20 % (por peso), entre 0,00000001 % (por peso) y 10 % (por peso), entre 0,000001 % (por peso) y 5 % (por peso) o entre 0,0001 % (por peso) y 5 % (por peso).
En otra realización, el extracto de la invención también puede incorporarse a sistemas de suministro cosmético o dermofarmacéutico y/o sistemas de liberación controlada.
El término “sistemas de suministro” se refiere a un diluente, adyuvante, vehículo o aditivo con el que se admi­ nistra el extracto de la invención. Estos portadores cosméticos o dermofarmacéuticos pueden ser líquidos, como el agua, aceites, tensioactivos, entre los que se incluyen los de origen petrolífero, animal, vegetal o sintético, incluido pero no restringido a aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite mineral, aceite de sésamo, aceite de ricino, polisorbatos, ésteres de sorbitán, éter sulfatos, sulfatos, betaínas, glucósidos, maltósidos, alcoholes grasos, nonoxinoles, poloxámeros, polioxietilenos, polietilenglicoles, dextrosa, glicerina, digitonina y similares. Una persona experta en la técnica conoce los diluentes, adyuvantes o aditivos que pueden utili­ zarse en diferentes sistemas de suministro en los que el extracto de la invención se puede administrar. El término “ liberación controlada” se utiliza en un sentido convencional relacionado con un sistema de sumi­ nistro de un compuesto que proporciona una liberación gradual de este compuesto durante un periodo de tiempo y en una realización, aunque no sea necesario, con periodos de liberación de un compuesto relativa­ mente constantes durante un periodo determinado.
Ejemplos de sistemas de suministro o de liberación controlada incluyen, sin sentido limitativo: liposomas, liposomas mixtos, oleosomas, niosomas, etosomas, milipartículas, micropartículas, nanopartículas y nanopartículas lipídicas sólidas, portadores lipídicos nanoestructurados, esponjas, ciclodextrinas, vesículas, micelas, micelas mixtas de tensioactivos, micelas mixtas de fosfolípidos y tensioactivos, miliesferas, microesferas y nanoesferas, lipoesferas, milicápsulas, microcápsulas, nanocápsulas, así como microemulsiones y nanoemulsiones, que se pueden añadir para conseguir una mayor penetración del principio activo de la invención y/o para mejorar las propiedades farmacocinéticas y farmacodinámicas del mismo. En una realización, los siste­ mas de suministro o de liberación controlada son liposomas, micelas mixtas de fosfolípidos y tensioactivos y microemulsiones, microemulsiones de agua en aceite con una estructura micelar interna inversa y nanocáp­ sulas que contienen microemulsiones.
El sistema de liberación controlada se puede preparar mediante métodos conocidos en el estado de la técnica y las composiciones que los contienen se pueden administrar, por ejemplo, mediante administración tópica o transdérmica, incluidos parches adhesivos, parches no adhesivos, parches oclusivos y parches microelectrónicos, o mediante administración sistémica, por ejemplo y no restringida a, vía oral o parenteral, incluida nasal, rectal, implantación subcutánea o inyección, o implantación directa o inyección en una parte específica del cuerpo. En una realización, el sistema de liberación controlada debe liberar una cantidad relativamente cons­ tante del extracto de la invención. La cantidad de extracto contenida en el sistema de liberación controlada dependerá, por ejemplo, de donde se administre la composición, la cinética y duración de la liberación del extracto de la invención, así como la naturaleza de la afección, el trastorno y/o enfermedad a tratar o prevenir.
La composición que contiene el extracto de esta invención también se puede absorber en polímeros sólidos orgánicos o soportes minerales sólidos, por ejemplo y sin limitaciones, talco, bentonita, sílice, almidón o maltodextrina, ente otros.
Las composiciones que contienen el extracto con peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antárctica se puede incorporar también a materiales tejidos, materiales no tejidos o dispositivos médicos que están en contacto directo con la piel, liberando de esta manera el extracto de la invención bien mediante biodegradación del sistema vinculante a los materiales tejidos, materiales no tejidos o dispositivo médico, o debido a la fricción entre ellos y el cuerpo, debido a la humedad del cuerpo, el pH de la piel o la temperatura corporal. Además, el extracto de la invención se puede incorporar a los mate­ riales tejidos y materiales no tejidos utilizados en la manufactura de prendas que estén en contacto directo con el cuerpo. En una realización, los materiales tejidos, materiales no tejidos y dispositivos médicos que contienen el extracto de la invención se utilizan para el tratamiento y/o prevención de afecciones, trastornos y/o enfermedades que mejoran o se evitan mediante la inhibición del receptor MC5R o mediante estimulación de la síntesis de colágeno.
Ejemplos de materiales tejidos, materiales no tejidos, prendas, dispositivos médicos y medios para la inmovi­ lización de los compuestos a ellos, entre los que figuran los sistemas de suministro y sistemas de liberación controlada descritos anteriormente, se pueden encontrar en la bibliografía y son conocidos en el estado de la técnica [Schaab C.K. (1986) HAPPI Mayo de 1986; Nelson G., “Application of microencapsulation in textiles”, (2002), Int. J. Pharm., 242(1-2), 55-62; “Biofunctional Textiles and the Skin” (2006) Curr. Probl. Dermatol. v.33, Hipler U.C. y Elsner P., eds. S. Karger AG, Basel, Switzerland; Malcolm R.K. et al., “Controlled release of a model antibacterial drug from a novel self-lubricating silicone biomaterial", (2004), J. Cont. Release, 97(2), 313-320]. Los materiales tejidos, materiales no tejidos, prendas y dispositivos médicos preferidos son vendas, gasas, camisetas, calcetines, medias, ropa interior, fajas, guantes, pañales, compresas higiénicas, vendajes, colchas, toallitas, parches adhesivos, parches no adhesivos, parches oclusivos, parches microelectrónicos y/o máscaras faciales.
Las composiciones cosméticas o dermofarmacéuticas que contienen el extracto de esta invención se pueden utilizar en diferentes tipos de composiciones de aplicación tópica o transdérmica, incluyendo de forma opcional excipientes aceptables para el uso cosmético y dermatológico necesarios para formular la forma de adminis­ tración deseada.
Las composiciones de aplicación tópica o transdérmica se pueden producir en cualquier formulación sólida, líquida y semisólida, como por ejemplo y sin sentido limitativo, cremas, múltiples emulsiones, como por ejemplo y sin sentido limitativo, emulsiones de aceite y/o silicona en agua, emulsiones de agua en aceite y/o silicona, emulsiones del tipo agua/aceite/agua o agua/silicona/agua y emulsiones del tipo aceite/agua/aceite o silicona/agua/silicona, composiciones anhidras, dispersiones acuosas, aceites, leches, bálsamos, espumas, lo­ ciones, geles, geles crema, soluciones hidroalcóholicas, soluciones hidroglicólicas, hidrogeles, linimentos, sueros, jabones, champús, acondicionadores, suero, películas de polisacáridos, ungüentos, espumas, poma­ das, polvos, barras, lápices y vaporizadores ("sprays") o aerosoles incluyendo las formulaciones de perma­ nencia ("leave on") y las de enjuagado (''rinse-off'). Estas formulaciones de aplicación tópica o transdérmica se pueden incorporar utilizando técnicas conocidas por el experto en la técnica en diferentes tipos de acceso­ rios sólidos, como por ejemplo y sin sentido limitativo, vendas, gasas, camisetas, calcetines, medias, ropa interior, fajas, guantes, pañales, compresas higiénicas, vendajes, colchas, toallitas, parches, adhesivos, par­ ches no adhesivos, parches oclusivos, parches microelectrónicos o máscaras faciales o se pueden incorporar a diferentes productos de maquillaje como por ejemplo, base de maquillaje, como por ejemplo bases fluidas y bases compactas, lociones desmaquillantes, leches desmaquillantes, correctores, sombras de ojos, pintalabios, bálsamos de labios, brillo de labios y polvos, entre otros.
Las composiciones cosméticas o dermofarmacéuticas de la invención pueden incluir agentes que incrementen la absorción percutánea de los compuestos de esta invención, como por ejemplo y sin sentido limitativo, dimetilsulfóxido, dimetilacetamida, dimetilformamida, tensioactivos, azona (1-dodecilazacicloheptan-2-ona), al­ cohol, urea, etoxidiglicol, acetona, propilenglicol o polietilenglicol, entre otros. Asimismo, las composiciones cosméticas y dermofarmacéuticas de esta invención pueden aplicarse en las áreas locales a tratar mediante iontoforesis, sonoforesis, electroporación, parches microelectrónicos, presión mecánica, gradiente de presión osmótica, cura oclusiva, microinyecciones, inyecciones sin aguja, mediante presión, como, por ejemplo, in­ yecciones mediante presión de oxígeno u otra combinación de la misma, para lograr una mayor penetración del extracto de la invención. El área de aplicación quedará determinada por la naturaleza de la afección, trastorno y/o enfermedad a tratar y/o prevenir.
Entre los excipientes, adyuvantes y/o ingredientes aceptables para el uso cosmético o dermofarmacéutico contenidos en las composiciones cosméticas o dermofarmacéuticas descritas en esta invención están los in­ gredientes adicionales utilizados habitualmente en composiciones cosméticas o dermofarmacéuticas, como por ejemplo y sin sentido limitativo, otros agentes que disminuyen la producción de sebo, agentes antiseborreicos, agentes matificantes, agentes antiacné, agentes estimuladores de la síntesis de macromoléculas dér­ micas o epidérmicas y/o capaces de inhibir o evitar su degradación, agentes estimuladores de la síntesis de colágeno, agentes estimuladores de la síntesis de elastina, agentes estimuladores de la síntesis de decorina, agentes estimuladores de la síntesis de laminina, agentes estimuladores de la síntesis de defensina, agentes estimuladores de la síntesis de chaperona, agentes estimuladores de la síntesis de AMPc, agentes modula­ dores de AQP-3, agentes moduladores de la síntesis de acuaporina, proteínas de la familia de las acuaporinas, agentes estimuladores de la síntesis de ácido hialurónico, agentes estimuladores de la síntesis de glucosaminoglicanos, agentes estimuladores de la síntesis de fibronectina, agentes estimuladores de la síntesis de sirtuina, proteínas de choque térmico, agentes estimuladores de la síntesis de proteínas de choque térmico, agentes inhibidores de la exocitosis neuronal, otros agentes anticolinérgicos, agentes inhibidores de la con­ tracción muscular, agentes antienvejecimiento, agentes antiarrugas, agentes antitranspirantes, agentes anti­ inflamatorios y/o analgésicos, agentes contra el picor, agentes calmantes, agentes anestésicos, inhibidores de la agregación del receptor de acetilcolina, agentes inhibidores de acetilcolinesterasa, agentes relajantes de la piel, agentes estimuladores o inhibidores de la síntesis de melanina, agentes aclarantes o de despig­ mentación, agentes propigmentación, agentes autobronceadores, agentes inhibidores de la NO-sintasa, agen­ tes inhibidores de la 5a-reductasa, agentes inhibidores de lisil- y/o prolil-hidroxilasa, antioxidantes, agentes depuradores de radicales libres y/o anticontaminación atmosférica, depuradores de especies reactivas de carbonilo, agentes antiglicación, agentes antihistamínicos, agentes antivirales, agentes antiparasitarios, emulsio­ nantes, emolientes, disolventes orgánicos, propelentes líquidos, acondicionadores de la piel, humectantes, sustancias que retienen la humedad, alfa hidroxiácidos, beta hidroxiácidos, hidratantes, enzimas hidrolíticas epidérmicas, vitaminas, aminoácidos, proteínas, pigmentos o colorantes, tintes, biopolímeros, polímeros gelificantes, espesantes, tensioactivos, agentes suavizantes, emulsionantes, agentes aglutinantes, conservantes, agentes capaces de disminuir o tratar las bolsas bajo los ojos, agentes exfoliantes, agentes queratolíticos, agentes descamantes, agentes antimicrobianos, agentes antifúngicos, agentes fungistáticos, agentes bacteri­ cidas, agentes bacteriostáticos, agentes estimuladores de la síntesis de lípidos y componentes del estrato córneo, ceramidas, ácidos grasos, agentes inhibidores de la degradación de colágeno, agentes inhibidores de metaloproteinasas de la matriz, agentes inhibidores de la degradación de elastina, agentes inhibidores de proteasas de serina como calicreínas, elastasa leucocitaria o catepsina G, agentes estimuladores de la proli­ feración de fibroblastos, agentes estimuladores de la proliferación de queratinocitos, agentes estimuladores de la proliferación de adipocitos, agentes estimuladores de la proliferación de melanocitos, agentes estimula­ dores de la diferenciación de queratinocitos, agentes que estimulan o retrasan la diferenciación de los adipo­ citos, agentes antihiperqueratosis, agentes comedolíticos, agentes antipsoriasis, agentes reparadores del ADN, agentes protectores del ADN, agentes de protección de células madre, estabilizantes, agentes para el tratamiento y/o cuidado de pieles sensibles, agentes reafirmantes, agentes antiestrías, agentes aglutinantes, agentes lipolíticos o que estimulan la lipólisis, agentes adipogénicos, agentes moduladores de la expresión de PGC-1a, agentes inhibidores de la actividad de PPARy, agentes que aumentan o reducen el contenido de triglicérido de los adipocitos, agentes anticelulíticos, agentes inhibidores de la actividad de PAR-2, agentes estimuladores de la cicatrización de heridas, agentes coadyuvantes de la cicatrización de heridas, agentes estimuladores de la reepitelización, agentes coadyuvantes de la reepitelización, factores de crecimiento de citocinas, agentes que actúan sobre la circulación capilar y/o la microcirculación, agentes estimuladores de la angiogénesis, agentes inhibidores de la permeabilidad vascular, agentes venotónicos, agentes que actúan sobre el metabolismo de las células, agentes destinados a mejorar la unión dermis-epidermis, agentes induc­ tores del crecimiento del cabello, agentes inhibidores o retardantes del crecimiento del cabello, agentes retar­ dantes de la caída del cabello, conservantes, perfumes, desodorantes para enmascarar el olor corporal y/o absorbentes de olor, agentes quelantes, extractos vegetales, aceites esenciales, extractos marinos, agentes obtenidos a partir de un procedimiento biotecnológico, sales minerales, extractos celulares, filtros solares y agentes fotoprotectores de naturaleza orgánica o mineral activos contra los rayos ultravioleta A y/o B y/o rayos infrarrojos A o mezclas de ellos, siempre y cuando sean física y químicamente compatibles con el resto de los componentes de la composición y, en particular, con el extracto de peso molecular inferior a 10000 Da pro­ ducido por la cepa de la especie Pseudoalteromonas antárctica. Asimismo, la naturaleza de estos ingredientes adicionales no debe alterar bajo ningún concepto los beneficios del extracto de esta invención. La naturaleza de dichos ingredientes adicionales puede ser sintética o natural, como por ejemplo extractos vegetales o pro­ cedentes de un proceso biotecnológico o a partir de una combinación de un proceso sintético y un proceso biotecnológico. Se pueden encontrar ejemplos adicionales en CTFA International Cosmetic Ingredient Dictionary & Handbook, 12ma Edición (2008). En el contexto de esta invención, se entiende que el proceso biotec­ nológico es cualquier proceso destinado a producir el principio activo, o parte del mismo, en un organismo, o parte del mismo.
En una realización, la composición cosmética y/o dermofarmacéutica de la invención contiene:
- entre 0,0000000001 % (por peso) y 20 % (por peso) del extracto de peso molecular inferior a 10 000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica;
- entre 0,1 % (por peso) y 20 % (por peso) de un humectante seleccionado del grupo de (Denominaciones INCI) Glicerina, Propilenglicol, Butilenglicol, Pentilenglicol, Caprililglicol, Ácido Láctico, Urea, Hialuronato de sodio;
- entre 0,1 % (por peso) y 20 % (por peso) de un emoliente o acondicionador de la piel seleccionado del grupo de (Denominaciones INCI) Dimeticona, Estearato de Glicerilo, Triglicérido Cáprico/Caprílico, Al­ cohol Cetearílico, Lecitina, Benzoato de Alquilo C12-15, Escualano, Lanolina, Alcohol Behenílico, Ace­ tato de Tocoferilo, Pantenol, Manteca de Karité (Butyrospermum Parkii), Palmitato de Retinol, Retinol;
- entre 0,1 % (por peso) y 20 % (por peso) de un tensioactivo seleccionado del grupo de (Denominaciones INCI) Goma Xantano, Lauril Éter Sulfato Sódico, Ácido Esteárico, Polisorbato 20, Polisorbato 80, Al­ cohol Estearílico, Alcohol Cetílico, Steareth-2, Ceteareth-20, Cocamidopropil Betaína.
En un realización, el agente que disminuye la producción de sebo, agente antiseborreico, agente matificante, agente antiacné, se selecciona, por ejemplo y sin sentido limitativo, del grupo formado por Mat-XS Clinical [INCI: Sarcosina, Goma Xantano], Mat-XS Bright [INCI: Extracto de hoja de Ortosifón Stamineus, Maltodextrina, Goma Xantano], Betapur [INCI: Extracto de la hoja de Reumus Boldus, Goma Xantano] o Neurobiox [INCI: Extracto de Achillea Millefolium, Goma Xantano] comercializado por BASF, Evermat [INCI: Extracto de la corteza de Enantia Chlorantha, Ácido oleanólico], Ac.net [INCI: Butilenglicol, PEG-60 Glicéridos de almen­ dra, Caprilil Glicol, Glicerina, Carbómero, Ácido nordihidroguaiarético, Ácido oleanólico] o Sebuless [INCI: Maltodextrina, Extracto de Syringa Vulgaris (Lila)] comercializado por Sederma/Croda, Phytessence Purple Ginseng [INCI: Glicerina o Extracto de la raíz de Polygonum Bistorta] comercializado por Crodarom, P-Refinyl [INCI: Extracto de la semilla de Lens Esculenta (Lenteja)], comercializado por Silab, EPS Seamat [INCI: Exopolisacárido planctónico-5, Fenoxietanol] o Epidermist 4.0 [INCI: Extracto de Plancton], comercializado por Codif, Seborami [INCI: Extracto de Sisymbrium Ofiicinale, Extracto de la raíz de Arctium Lappa, Ácido Cítrico, Ácido glicólico, Zinc PCA, Goma esclerótica] comercializado por Alban Muller, Poreaway [INCI: Goma de Pistacia Lentiscus/Goma de Pistacia Lentiscus (Masilla), Lecitina] comercializado por Mibelle, Citrustem [INCI: Goma Xantano, Benzoato de sodio, Gluconolactone, Gluconato de calcio] o Affipore [INCI: Extracto de la hoja de Barosma Betulina, Ácido Cítrico], comercializado por Provital, Sweetone [INCI: Hidrolizado de Sacáridos, Mal­ todextrina], comercializado por Laboratories Expanscience, Seboxyl [INCI: Extracto de la hoja de Ribes Nigrum (Grosella Negra), Extracto de la hoja de Rubus Idaeus (Frambuesa)] o Saniskin [INCI: Extracto de la raíz de Polygonum Cuspidatum, Alcohol mirístico], comercializado por Solabia, Alpaflor Alp-Sebum [INCI: Extracto de Epilobium Fleischeri, Ácido Cítrico, Sorbato de potasio] o Regu-Seb [INCI: Extracto del fruto de Argania Spinosa, Extracto de la fruta de Serenoa Serrulata, Extracto de la semilla de Sesamum Indicum (Sésamo)], co­ mercializado por DSM, Dermaclarine [INCI: Proteína (y) proteasa de huevo hidrolizada] comercializado por Aqua Bio Technology, Linumine [INCI: Extracto de la semilla de Linum Usitatissimum (Linaza)], comercializado por Lucas Meyer, Granactive Acne [INCI: Extracto de salvado de Oryza Sativa (arroz), Extracto de Boswellia Serrata, Extracto de miel, Oligopeptido-10], comercializado por Evonik, Sepicontrol A5 [INCI: Capriloglicina, Sarcosina, Extracto de la corteza de Cinnamonium Zeylanicum], comercializado por Seppic, Sympeptide 380 [INCI: Hexapéptidos de miristoilo-23] comercializado por Symrise, o Sebaryl [INCI: Niacinamida, Extracto de levadura, Extracto de la semilla de Aesculus Hippocastanum (Castaño de Indias), Glicirrizato de amonio, Pan­ tenol, Propilenglicol, Gluconato de Zinc, Cafeína, Biotina], comercializado por Laboratoires Serobiologiques/Cognis/BASF, entre otros.
En una realización, el agente antiarrugas, agente antienvejecimiento se selecciona, por ejemplo y sin sentido limitativo, del grupo formado por los extractos o extractos hidrolizados de: Vitis vinifera, Rosa canina, Curcuma longa, Theobroma cacao, Ginkgo biloba, Leontopodium alpinum o Dunaliella salina entre otros, Matrixyl® [INCI: Palmitoil Pentapéptido-4], Matrixyl® 3000® [InCi: Palmitoil Tetrapéptido-7, Palmitoil oligopéptido], Matrixyl® Synthe'6™ [INCI: Glicerina, Agua, Hidroxipropil Ciclodextrina, Palmitoil Tripéptido-38], Essenskin™ [INCI: hidroximetionina de calcio], Renovage [INCI: teprenona], Resistem™ [INCI: Fermento de Globularia Cordifolia], Beautifeye [INCI: Extracto de la corteza de Albizia Julibrissin, Darutoside], Meiritage [INCI: Extracto de la raíz de Astragalus Membranaceus, Extracto de la raíz de Atractyloides Macrocephala, Extracto de la raíz de Bupleurum Falcatum], Senestem [INCI: Extracto de la hoja de Plantago Lanceolata], Venuceane [INCI: Fermento de Thermus Thermophillus] o Dermaxyl® [INCI: Palmitoil oligopéptido] comercializado por Sederma/Croda, Vialox® [INCI: Pentapéptido-3], Syn®-Ake® [iNCI: Dipéptido Diaminobutiroil Bencilamida Di-acetato], Syn®-Coll [INCI: Palmitoil Tripéptido-5], Phytaluronate [INCI: Goma de Algarrobo (Ceratonia siliqua)], Regu-Scence [INCI: Extracto del tallo de Asparagus Officinalis, Benzoato de sodio, Sorbato de potasio, Gluconolactona, Gluconato de calcio], Syn-TC [INCI: trifluoroacetato de tetradecil aminobutiroilvalilaminobutírico urea, Palmitoil Tripéptido-5, Palmitoil Dipeptido-5 Diaminobutiroil Hidroxitironina] o Preregen® [INCI: Proteína de Glicina soja (Soja), Oxido Reductasas] comercializado por Pentapharm/DSM, Myoxinol™ [INCI: Extracto de Hibisco Esculentus hidrolizado], Syniorage™ [INCI: Acetil Tetrapéptido-11], Dermican™ [iNc I: Acetil Tetrapéptido-9], Shadownyl [INCI: Extracto de algas, Hexilenglicol, Caprilil Glicol, Goma Xantano] o DN AGE™ lS [INCI: Extracto de la hoja de Cassia alata] comercializado por Laboratoires Sérobiologiques/Cognis/BASF, Algisum C® [INCI: Manuronato de Metilsilano], Exage [INCI: lmidazoliletil Diaminopropanamida] o Hidroxiprolisilano CN® [INCI: Aspartato de Metilsilanol Hidroxiprolina] comercializado por Exsymol, Argireline® [INCI: Aceti1Hexapéptido-8], SNAP-7 [INCI: Acetil Heptapéptido-4], SNAP-8 [INCI: Acetil Octapéptido-3], Serilesine® [INCI: Hexapéptido-10], Leuphasyl® [INCI: Pentapéptido-18], Inyline® [INCI: Acetil Hexapéptido-30], Aldenine® [INCI: Proteína hidrolizada de Trigo, Proteína hidrolizada de Soja, Tripéptido-1], Preventhelia® [INCI: Diaminopropionoil Tripéptido-33], Decorinyl® [INCI: Tripéptido-10 Citrulina], Decorinol® [INCI: Tripéptido-9 Citrulina], Trylagen® [INCI: Extracto de fermentación de pseudoalteromonas, Proteína hidrolizada de Trigo, Proteína hidrolizada de Soja, Tripéptido-10 Citrulina, Tripéptido-1], Eyeseryl® [INCI: Acetil Tetrapéptido-5], Péptido AC29 [INCI: Acetil Tripéptido-30 Citrulina], Relistase® [INCI: Acetilarginiltriptofilo difenilglicina], Thermostressine® [INCI: Acetil Tetrapéptido-22], Lipochroman™ [INCI: Dimetilmetoxi cromanol], Chromabright® [INCI: Palmitato de dimetilmetoxi cromanilo], Antarcticine® [INCI: Extracto de fermentación de Pseudoalteromonas], dGlyage™ [INCI: Lisina HCl, Lecitina, Tripéptido-9 Citrulina], Vilastene™ [INCI: Lisina HCl, Lecitina, Tripéptido-10 Citrulina], Hyadisine™ [INCI: Extracto de fermentación de Pseudoalteromonas], Hyanify™ [INCI: Isomerado de Sacáridos], Diffuporine™ [INCI: Acetil Hexapéptido-37], Silusyne™ [INCI: Aceite de Soja (Glicina soja), Sesquioleato de sorbitano, Isohexadecano, Hialuronato de sodio, Laurdimonio hidroxipropil proteína hidrolizada de Soja, Acetil Hexapéptido-39], Adifyline™ [INCI: Acetil Hexapéptido-38], Uplevity™ [INCI: Acetil Tetrapéptido-2], Juveleven™ [INCI: Acetil Hexapéptido-51 Amida] o Telangyn™ [INCI: Acetil Tetrapéptido-40] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Kollaren® [INCI: Tripéptido-1, Dextrano] comercializado por Institut Europeen de Biologie Cellulaire, Collaxyl® IS [INCI: Hexapéptido-9], Laminixyl iS™ [INCI: Heptapéptido], Orsirtine™ GL [INCI: Extracto de Oryza sativa (arroz)], D'Orientine™ IS [INCI: Extracto de la semilla de Phoenix dactylifera (Datilera)], Phytoquintescine™ [INCI: Extracto de Einkorn (solo grano) (Triticum monococcum)], Péptido Q10 [INCI: Pentapéptido-34 Trifluoroacetato], Telosense [INCI: Proteína hidrolizada de Levadura, Proteína hidrolizada de Soja] o Quintescine™ IS [INCI: Dipéptido-4] comercializado por Vincience/ISP/Ashland, BONT-L-Peptide [INCI: Pal­ mitoil Hexapéptido-19] comercializado por Infinitec Activos, Deepaline™ PVB [INCI: Proteína hidrolizada de Trigo derivado de Palmitoilo] o Sepilift® DPHP [INCI: Dipalmitoil Hidroxiprolina] comercializado por Seppic, Gatuline® Expression [INCI: Extracto de Acmella oleracea], Gatuline® In-Tense [INCI: Extracto de la flor de Spilanthes acmella] o Gatuline® Age Defense 2 [INCI: Extracto de la semilla de Juglans regia (Nogal de Cas­ tilla)] comercializado por Gattefossé, Thalassine™ [INCI: Extracto de algas] comercializado por Biotechmarine, ChroNOline™ [INCI: Caprooil Tetrapéptido-3] o Thymulen-4 [INCI: Acetil Tetrapéptido-2] comercializado por Atrium/Unipex Innovations, EquiStat [INCI: Extracto de la fruta de Pyrus malus, Extracto de la semilla de Gli­ cina soja] o Juvenesce [INCI: Etoxidiglicol y Triglicéridos caprílicos, Retinol, Ácido ursólico, Fitonadiona, Ilomastat] comercializado por Coletica/Engelhard/BASF, Ameliox [INCI: Carnosina, Tocoferol, Extracto de la fruta de Silybum marianum], Phytocelltec Symphytum [INCI: Isomalt, Cultivo de células de la raíz de Symphytum Officinale, Lecitina, Benzoato de sodio], Snow Algae Powder [INCI: Extracto de Chlamydocapsa, Maltodextrina, Lecitina], Dermcom [INCI: Goma de Acacia Senegal, Extracto de bulbo de Crocus Chyrsanthus Bulb], Anagain [INCI: Pisum Sativum (Guisante), Extracto de germinado] o PhytoCellTec Malus Domestica [INCI: Cultivo de células de frutas de Malus domestica] comercializado por Mibelle Biochemistry, Bioxilift [INCI: Extracto de Pimpinella anisum], Vitagenyl [INCI: Extracto de la hoja de Prunus Persica (Melocotón)] o SMS Anti-Wrinkle® [INCI: Extracto de semilla de Annona squamosa] comercializado por Silab, Symvital Agerepair [INCI: Extracto de la raíz de Zingiber Officinale (Jengibre)] comercializado por Symrise, Citrustem [INCI: Goma Xantano, Ben­ zoato de sodio, Gluconolactona, Gluconato de calcio], Melavoid [INCI: Extracto de la raíz de Boerhavia Diffusa], Darkout [INCI: Extracto del rizoma de Hypoxis Rooperi, Goma de Caesalpinia Spinosa] o Linefill [INCI: Dimetil Isosorbida, Extracto de la semilla de Sesamum Indicum (Sésamo)] comercializado por Provital, Adipofill'in [INCI: Ornitina, Fosfolípidos, Glucolípidos], Elix-IR [INCI: Extracto de Polygonum Aviculare] o Progeline [INCI: Trifluoroacetil Tripéptido-2] comercializado por Lucas Meyer, Amiperfect [INCI: Extracto de la hoja de Gaultheria Procumbens (Gaulteria)] o Repulpami ER [INCI: Extracto de la pulpa de Adansonia Digitata, Ex­ tracto de la flor de Hibiscus Sabdariffa] comercializado por Alban Muller, Celloxyl [INCI: Extracto de la hoja de Uapaca Bojeri] o Resistress [INCI: Extracto de la flor de Sophora Japónica] comercializado por Solabia, Actiporine 8G [INCl: Extracto de Jania Rubens] o EPS Seafill [INCI: Extracto de Plancton] comercializado por Codif, Novhyal Biotech G [INCI: Acetilglucosamina Fosfato disódico] o Rubixyl [INCI: Hexapéptido-47] comer­ cializado por Induchem, antagonistas del canal Ca2+ tales como y no limitadas a, alverina, sales de magnesio o manganeso, ciertas aminas secundarias o terciarias, retinol y sus derivados, la idebenona y sus derivados, la coenzima Q10 y sus derivados, ácido boswélico y sus derivados, GHK y sus derivados y/o sales, carnosina y sus derivados, enzimas de reparación del ADN, tales como y no se limita a, fotoliasa o T4 endonucleasa V, o agonistas del canal de cloruro, entre otros, y/o mezclas de los mismos.
En otra realización, el agente antiinflamatorio y/o analgésico se selecciona, por ejemplo y sin sentido limitativo, de entre el grupo formado por extracto de madecasósido, extracto de equinácea, aceite de la semilla de ama­ ranto, aceite de madera de sándalo, extracto de la hoja de árbol de melocotón, extracto de Aloe vera, Arnica montana, Artemisia vulgaris, Asarum máximum, Caléndula officinalis, Capsicum, Centipeda cunninghamii, Chamomilla recutita, Crinum asiaticum, Hamamelis virginiana, Harpagophytum procumbens, Hypericum perforatum, Lilium candidum, Malva sylvestris, Melaleuca alternifolia, Origanum majorana, Origanum vulgare, Prunus laurocerasus, Rosmarinus officialis, Salix alba, Silybum marianum, Tanacetum parthenium, Thymus vulgaris, Uncaria guianensis o Vaccinum myrtillus, ácidos grasos omega-3 y omega-6, Neutrazen™ [INCI: Agua, Butilenglicol, Dextrano, Palmitoil Tripéptido-8] comercializado por Atrium Innovations/Unipex Group, Delisens™ [propuesta INCI: Acetil Hexapéptido-46] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Meliprene® [INCI: Dextrano, Acetil Heptapéptido-1] comercializado por Institut Européen de Biologie Cellulaire/Unipex Group, Skinasensyl™ [INCI: Acetil Tetrapéptido-15] o Anasensyl™ [INCI: Manitol, Glicirrizato de amonio, Cafeína, Extracto de Hippocastanum (Castaño de Indias)] comercializado por Laboratoires Serobiologiques/Cognis/BASF, Calmosensine™ [INCI: Acetil Dipéptido-1] comercializado por Sederma/Croda, coenzima Q10 o éteres de alquil glicerilo.
En otra realización, el agente de firmeza y/o redensificación y/o reestructuración se selecciona del grupo for­ mado por extractos de Malpighia punicitolia, Cynara scolymus, Gossypium herbaceum, Aloe Barbadensis, Panicum miliaceum, Morus nigra, Sesamum indicum, Glicina soja, Triticum vulgare, Pronalen® Refirming HSC [INCI: Triticum Vulgare, Silybum Marianum, Glicina Soja, Equisetum Arvense, Alchemilla Vulgaris, Medicago Sativa, Raphanus Sativus], Lipoout [INCI: Extracto de Plancton] o Polyplant® Refirming [INCI: Equinácea, Cen­ tella Asiática, Fucus, Fenugreek] comercializado por Provital, Lanablue® [INCI: Sorbitol, Extracto de algas] comercializado por Atrium Biotechnologies/Unipex Innovations, Pepha®-Nutrix [INCI: Factor Natural de Nutri­ ción] comercializado por Pentapharm/DSM, extractos vegetales que contienen isoflavonas, Biopeptide ELTM [INCI: Palmitoil oligopéptido], Biopeptide CLTM [INCI: Palmitoil oligopéptido], Vexel® [INCI: Agua (Aqua), Propilenglicol, Lecitina, Cafeína, Palmitoil Carnitina], Matrixyl® [INCI: Palmitoil Pentapéptido-3], Matrixyl® 3000 [INCI: Palmitoil Tetrapéptido-3, Palmitoil oligopéptido] o Bio-BustylTM [INCI: Polimetacrilato de glicerilo, Fer­ mento de proteína de soja Rahnella, Agua (Aqua), Propilenglicol, Glicerina, PEG-8, Palmitoil oligopéptido] comercializado por Sederma/Croda, Dermosaccharides® HC [INCI: Glicerina, Agua (Aqua), Glucosaminoglicanos, Glucógeno], Aglycal® [INCI: Manitol, Ciclodextrina, Glucógeno, Extracto de la hoja de Arctostaphylos Uva Ursi], Cytokinol® LS [INCI: Caseína hidrolizada, Proteína hidrolizada de Levadura, Lisina HCl] o Firmiderm® LS9120 [INCI: Extracto de la hoja de Terminalia Catappa, Extracto de la flor de Sambucus Negra, PVP, Ácido tánico] comercializado por Laboratoires Serobiologiques/Cognis/BASF, Liftline® [INCI: Proteína hidroli­ zada de Trigo], Raffermine® [INCI: Harina hidrolizada de Soja] o Ridulisse C® [Proteína hidrolizada de Soja] comercializado por Silab, Serilesine® [INCI: Hexapéptido-10], Decorinyl™ [INCI: Tripéptido-10 Citrulina], Trylagen® [INCI: Extracto de fermentación de Pseudoalteromonas, Proteína hidrolizada de Trigo, Proteína hidro­ lizada de Soja, Tripéptido-10 Citrulina, Tripéptido-1], Silusyne™ [INCI: Aceite de Soja (Glicina soja), Sesquioleato de sorbitano, Isohexadecano, Hialuronato de sodio, laurildimonio hidroxipropil proteína de soja hidroli­ zada, Acetil Hexapéptido-39] o Adifyline™[INCI: Acetil Hexapéptido-38] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Ursolisome® [INCI: Lecitina, Ácido ursólico, Atelocolágeno, Goma Xantano, Sulfato de condroitina sódica], Eperuline [INCI: Maltodextrina, Extracto de la corteza de Eperua Falcata] o Collalift® [INCI: Extracto hidrolizado de malta] comercializado por Coletica/Engelhard/BASF, Syn®-Coll [INCI: Palmitoil Tripéptido-5] comercializado por Pentapharm/DSM, Hydriame® [INCI: Agua (Aqua), Glucosaminoglicanos, Goma esclerótica] comerciali­ zado por Atrium Biotechnologies/Unipex Innovations, Sphingokine NP [INCI: Fitoesfingosina Caprooil] comer­ cializado por Evonik, Body3 Complex [INCI: Bentonita, Extracto de la nuez de Butyrospermum Parkii (Karité), Extracto de la fruta de Persea Gratissima (Aguacate)] comercializado por Lucas Meyer, Prosynergen DF [INCI: Filtrado del Extracto de la fermentación de Lactobacillus/Ulkenia Amoeboidea] comercializado por Lonza o IP2000 [INCI: Dextrano, Trifluoroacetil Tripéptido-2] comercializado por Institut Europeen de Biologie Cellu­ laire/Unipex Innovations, entre otros.
En otra realización, el agente estimulador de la síntesis de macromoléculas dérmicas y epidérmicas se selec­ ciona de, por ejemplo y sin sentido limitativo, un grupo formado por agentes estimuladores de la síntesis de colágeno, agentes estimuladores de la síntesis de elastina, agentes estimuladores de la síntesis de decorina, agentes estimuladores de la síntesis de laminina, agentes estimuladores de la síntesis de chaperona, agentes estimuladores de la síntesis de sirtuina, agentes activadores de la sirtuina, agentes moduladores de la síntesis de acuaporina, agentes estimuladores de la síntesis de fibronectina, agentes inhibidores de la degradación de colágeno, agentes inhibidores de la degradación de elastina, agentes inhibidores de proteasas de serina como calicreínas, elastasa leucocitaria o catepsina G, agentes estimuladores de la proliferación de fibroblastos, agentes estimuladores de la proliferación de los adipocitos, agentes que aceleran o retardan la diferenciación de los adipocitos y agentes reparadores del ADN y/o agentes protectores del ADN, como por ejemplo y sin sentido limitativo, Centella asiática, Saccharomyces cerivisiae, Solanum tuberosum, Rosmarinus officinalis, Vaccinium angustifolium, Extracto del alga Macrocystis pyrifera, Padina pavonica, Extracto de soja, malta, linaza, salvia, trébol rojo, kakkon, plantas de lupino blanco, Extracto de avellana, Extracto de maíz, Extracto de levadura, Extracto de brote de haya, Extracto de semilla de leguminosa, Extracto de hormona vegetal, como por ejemplo giberelinas, auxinas o citoquininas, entre otros, o extracto del zooplancton salino, el producto de fermentación de leche con Lactobacillus Bulgaricus, asiaticósidos y sus derivados, vitamina C y sus derivados, ácido cinámico y sus derivados, Matrixyl® [INCI: Palmitoil Pentapéptido-3], Matrixyl® 3000 [INCI: Palmitoil Tetrapéptido-3, Palmitoil oligopéptido] o Biopeptide CLTM [INCI: Polimetacrilato de glicerilo, Propilenglicol, Pal­ mitoil oligopéptido] comercializado por Sederma/Croda, Antarcticine® [INCI: Extracto de la fermentación de Pseudoalteromonas], Decorinyl® [INCI: Tripéptido-10 Citrulina], Serilesine® [INCI: Hexapéptido-10], Lipeptide [INCI: Proteína hidrolizada vegetal], Aldenine® [INCI: Proteína hidrolizada de Trigo, Proteína hidrolizada de Soja, Tripéptido-1 ], Relistase™ [INCI: Acetilarginiltriptofilo difenilglicina], Thermostressine™ [INCI: Acetil Tetrapéptido-22], Péptido AC29 [INCI: Acetil Tripéptido-30 Citrulina], Diffuporine™ [INCI: Aceti1Hexapéptido-37], Silusyne™ [INCI: Aceite de Soja (Glicina soja), Sesquioleato de sorbitano, Isohexadecano, Hialuronato de sodio, laurildimonio hidroxipropil proteína de soja hidrolizada, Acetil Hexapéptido-39] o Adifyline™[INCI: Acetil Hexapéptido-38] comercializado por Lipotec/Lubrizol, Drieline® PF [INCI: Betaglucano de levadura] comercia­ lizado por Alban Muller, Phytovityl C® [INCI: Agua, Extracto de Zea Mays] comercializado por Solabia, Collalift® [INCI: Extracto hidrolizado de malta] comercializado por Coletica/Engelhard/BASF, Phytocohesine PSPTM [INCI: Sulfato de Beta-Sitosterol Sódico] comercializado por Vincience/ISP/Ashland, minerales como por ejem­ plo, calcio, entre otros, retinoides y sus derivados, isoflavonoides, carotenoides, en particular licopeno, pseudodipéptidos, retinoides y sus derivados como por ejemplo retinol o palmitato de retinol, entre otros, o heparinoides, entre otros.
Aplicaciones
En otro aspecto, esta invención se refiere al uso del extracto de peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica para el tratamiento y/o cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello. En una realización, el tratamiento y/o cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello se refiere al tratamiento y/o prevención de la inflamación, comedones, el acné, la seborrea, dermatitis seborreica, la fotoprotección de la piel, el tratamiento de reducción de la cantidad de sebo en la piel y/o el cabello, tratamiento y/o prevención de envejecimiento de la piel, el tratamiento y/o prevención de arrugas de la piel, el tratamiento de firmeza de la piel, la prevención de la pérdida de firmeza de la piel y/o la higiene del cabello. En una realización, la inflamación se selecciona, por ejemplo y sin sentido limitativo, del grupo formado por psoriasis, piel sensible, dermatitis, dermatitis atópica, dermatitis de contacto, dermatitis del pañal, dermatitis seborreica, eczema, la rosácea, el acné, enfermedad hiperproliferativa de la piel, quemaduras, quemaduras solares, paroniquia, in­ flamación de la piel después de la cirugía, después del tratamiento con la terapia de luz pulsada intensa (IPL), después del tratamiento con la terapia de luz pulsada monocromática (láser), después del tratamiento con agentes exfoliantes químicos o después de la sobreexposición a los agentes externos agresivos, inflamación de la membrana mucosa de la vagina, inflamación de la membrana mucosa bucal, gingivitis, periodontitis, rinitis, rinitis alérgica, entre otros.
En la presente invención también se describe el uso del extracto de peso molecular inferior a 10 000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica en la preparación de una composición farmacéutica para el tratamiento del cáncer, anorexia o caquexia. En una realización, el tratamiento del cáncer es un tratamiento de cáncer de piel, tratamiento de la inhibición del crecimiento tumoral o para el Síndrome de Muir-Torre.
En otro aspecto, esta invención se refiere al uso del extracto de peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica para la inhibición del receptor MC5R.
En otro aspecto, esta invención se refiere al uso del extracto de peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica en la preparación de una composición cosmética o dermofarmacéutica para la estimulación de la síntesis de colágeno.
En la presente invención también se describe un método de tratamiento y/o cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello que comprende la administración de una cantidad con eficacia cosmética y/o dermo­ farmacéutica del extracto de peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseu­ doalteromonas antárctica. En una realización, el tratamiento y/o cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello se refiere al tratamiento y/o prevención de la inflamación, comedones, milia, acné, seborrea, dermatitis seborreica, hidrosadenitis supurativa, fotoprotección de la piel, el tratamiento de reducción de la cantidad de sebo en la piel y/o el cabello, tratamiento y/o prevención del envejecimiento de la piel, el trata­ miento y/o prevención de arrugas de la piel, el tratamiento de firmeza de la piel, la prevención de la pérdida de firmeza de la piel y/o la higiene del cabello. En una realización, la inflamación se selecciona, por ejemplo y sin sentido limitativo, del grupo formado por psoriasis, piel sensible, dermatitis, dermatitis atópica, dermatitis de contacto, dermatitis del pañal, dermatitis seborreica, eczema, rosácea, acné, enfermedad hiperproliferativa de la piel, quemaduras, quemaduras solares, paroniquia, inflamación de la piel después de la cirugía, después del tratamiento con terapia de luz pulsada intensa (IPL), después del tratamiento con la terapia de luz pulsada monocromática (láser), después del tratamiento con agentes exfoliantes químicos o después de la sobreex­ posición a los agentes externos agresivos, inflamación de la membrana mucosa de la vagina, en la inflamación de la membrana mucosa bucal, gingivitis, periodontitis, rinitis, alérgica rinitis, entre otros.
En la presente invención también se describe un método de tratamiento del cáncer, la anorexia o la caquexia que comprende la administración de una cantidad con eficacia cosmética y/o dermofarmacéutica del extracto de peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antárctica. En una realización, el tratamiento del cáncer es un tratamiento de cáncer de piel, tratamiento de la inhibición del crecimiento tumoral o para el síndrome de Muir-Torre.
En la presente invención también se describe un método de inhibición del receptor MC5R que comprende la administración de una cantidad con eficacia cosmética y/o dermofarmacéutica del extracto de peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica.
En la presente invención también se describe un método de estimulación de la síntesis de colágeno, que comprende la administración de una cantidad con eficacia cosmética y/o dermofarmacéutica del extracto de peso molecular inferior a 10000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica.
En otra realización, el peso molecular del extracto producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica es mayor que 50 y menor que Da 10000 Da, es decir entre 100 Da y 8000 Da, entre 150 Da y 6000 Da, o entre 300 Da y 5000 Da.
En otra realización, la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica es una cepa con número de depósito CECT 8690.
En otro aspecto, el extracto de peso molecular inferior a 10 000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica se puede administrar mediante cualquier medio que provoque el contacto con el punto de acción en el cuerpo de un mamífero, preferentemente el de un ser humano, y en una realización en forma de una composición que lo contenga. La administración del extracto de peso molecular inferior a 10 000 Da producido por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica se realiza por vía tópica o trans­ dérmica. En una realización, la administración por vía tópica o transdérmica se lleva a cabo mediante iontoforesis, sonoforesis, electroporación, presión mecánica, gradiente de presión osmótica, cura oclusiva, microinyecciones, inyecciones sin aguja que pueden realizarse mediante presión, parches microelectrónicos, másca­ ras faciales o cualquier otra combinación de las mismas.
La frecuencia de aplicación o administración puede variar ampliamente, en función de las necesidades de cada sujeto, sugiriéndose como rango de aplicación o administración de 1 vez al mes hasta 10 veces al día, de una vez a la semana hasta 4 veces al día, de 3 veces a la semana hasta 3 veces al día o una sola vez al día.
Depósito de material biológico
La cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica se depositó en la Colección Española de Cultivos Tipo (CECT) (Edificio 3 CUE, Parc Científic Universitat de Valencia, Catedrático Agustín Escardino 9, 46980 Pa­ terna, Valencia, España) de conformidad con las condiciones estipuladas en el Tratado de Budapest. Se efec­ tuó el depósito el día 29 de julio de 2014 bajo con número de depósito CECT 8690.
Ejemplos
Cada uno de los documentos antes mencionados quedan incorporados por referencia, incluyendo cualquier so­ licitud anterior tanto si aparece específicamente indicada o no, de la que se reivindica prioridad. La mención de cualquier documento no se considerará como admisión de que dicho documento se califique como estado de la técnica ni tampoco que constituya conocimiento general del experto en la técnica en ninguna jurisdicción. Salvo en los Ejemplos, o el apartado reservado a los Ejemplos, o donde se indique expresamente lo contrario, todas las cantidades numéricas en esta descripción que especifiquen cantidades de materiales, condiciones de reac­ ción, pesos moleculares, número de átomos de carbono y similares, se entenderán de forma aproximada, es decir, sujeto a una variabilidad de ± 5 %, ± 3 %, ± 1 %, ± 0,1 %, o ± 0,01 % sobre el valor indicado. Se entiende que las cantidades superiores e inferiores, rango y límites de relaciones especificados en la presente pueden combinarse de forma independiente. Asimismo, los rangos y cantidades de cada elemento de la tecnología des­ crita en el presente documento pueden utilizarse junto con los rangos y cantidades de cualquiera de los otros elementos.
Ejemplo 1: Preparación y aislamiento del extracto secretado por la cepa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690.
a) Método de cultivo de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690.
La cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690 se cultiva en un birreactor, a 12 °C y a un pH=7,0, cuyo medio de cultivo contenía 20 g/L de glucosa, 7 g/L of cloruro de amonio y una solución salina que contiene 1 g/L de NaCl, 1 g/L de sulfato de magnesio heptahidratado, 5 g/L de fosfato disódico, 2 g/L de fosfato potásico, 0,05 g/L de cloruro cálcico y 0,018 g/L de sulfato de hierro heptahidratado. La inoculación se realiza usando una cantidad requerida de precultivo en fase exponencial, para tener una densidad óptica inicial de 0,2 AU (550nm). El cultivo dura 48 horas, a una concentración de oxígeno controlada de 30 % de saturación de aire, y la agitación con valores alrededor de 250 rpm.
b) Separación del extracto inferior a 10 KDa
Las bacterias se separan del caldo de cultivo mediante centrifugación a 6000 g durante 1 h. Se completó la eliminación de las bacterias mediante filtración con membranas a un tamaño de poro final de 0,22 pm. Poste­ riormente, el extracto no purificado se filtra con una membrana polietersulfona con un tamiz de 10 KDa y el producto de interés pasa a través de la membrana.
Ejemplo 2: Cuantificación de la concentración de proteína en el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseu­ doalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690.
Los valores de concentración del extracto inferior a 10 KDa purificado según el ejemplo 1, usados en los ejemplos 3 a 14, es la concentración total de proteínas medida mediante el método del ácido bicinconínico y las instrucciones facilitadas por el proveedor del kit usado (Pierce® BCA Protein Assay Kit, 23227).
La concentración total de proteínas medidas del extracto inferior 10 KDa obtenida según el ejemplo 1, es 361,55 pg/ml.
Ejemplo 3: Análisis cromatográfico SE-HPLC-UV.
Una solución del producto obtenido según el ejemplo 1 a 250 pg/ml se prepara y analiza por HPLC-UV. 100 pl se inyectan en un instrumento LC20A SHIMADZU de Cromatografía Líquida de Alta Resolución (HPLC). La columna cromatográfica usada es TSKGel G2000SWXL, 5 m, 125 A, 7,8 mm x 30 mm (TOSOH Bioscience) y agua, con 0,1 M de tampón fosfato a un pH=6,70 0,1 M sulfato sódico como eluyente.
Bajo estas condiciones, el producto muestra picos entre 10 y 15 minutos y alcanza un pico promedio a los 10,75 minutos. El peso molecular se calcula usando diferentes estándares: Albúmina de Suero Bovino (66000 Da), Ribonucleasa A procedente de páncreas bovino Tipo I (13700 Da) y Ácido Salicílico (138 Da). El logaritmo del peso molecular se relaciona con el tiempo de retención, para obtener una correlación lineal. Usando esta correlación, el producto muestra un peso molecular entre 7714 Da y 178 Da. También conforme a esta corre­ lación, el tiempo de permanencia del valor máximo del pico principal (10,75 minutos) corresponde a un peso molecular de 4381 Da.
Ejemplo 4: Evaluación de la inhibición del promotor del Receptor de Melanocortina 5 (MC5R) humano en una línea celular estable transfectada de células mamarias epiteliales no diferenciadas usando un ensayo de gen reportero.
Se transfecta una línea celular (MCF7) de forma estable con un plásmido que contiene el gen de luciferasa de la luciérnaga sobre una región del promotor de MC5R. El clon 16 seleccionado de esta línea celular, MCF7-MC-16, se trata con el extracto obtenido según el ejemplo 1 para medir la inhibición del promotor de MC5R humano.
Treinta mil células MCF7-MC-16 por pocillo en medio de Eagle modificado de Dulbecco (DMEM) (Glucosa alta) suplementado con 10 % FBS (Suero Fetal Bovino), 1 % penicilina-estreptomicina y 1 pg/ml puromicina se sembraron en placas blancas de 96 pocillos tratados con solución de Poli-L-lisina para la medición de la acti­ vidad de Luciferasa. De forma paralela, treinta mil células MCF7-MC-16 por pocillo se siembran en placas transparentes de 96 pocillos tratados con solución de Poli-L-lisina, como se indicó anteriormente, para la cuantificación del número de células totales mediante tinción de cristal violeta. Las células se siembran 24 h antes de empezar con los tratamientos y se incuban a 37 °C y 5 % CO2 en una incubadora de CO2.
El día del tratamiento, las células MCF7-MC-16 se lavan dos veces con tampón fosfato salino de Dulbecco (DPBS) con cloruro de calcio y cloruro de magnesio, y se incuban durante 6 h con DMEM Glucosa alta sin fenol rojo, a 37 °C en una incubadora de CO2. Luego, las células se tratan con el extracto de Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, en concentraciones de 0,25 pg/mL o 2,5 pg/mL. Como control para la activación basal, las células se incuban con el medio solo. Las células se incuban en DMEM Glucosa alta sin fenol rojo y suplementado con 1 % de CS-FBS (Suero Fetal Bovino tratado con carbón) durante 16 a 24 h.
Tras el periodo de incubación, se miden las Unidades Relativas de Luz por segundo (RLU/sec) producidas mediante la reacción con Luciferasa de la Luciérnaga en las placas blancas de 96 pocillos y se determina el número de células totales/pocillo en las placas transparentes de 96 pocillos.
Determinación de la actividad de Luciferasa
Se añade sustrato de Luciferasa de la Luciérnaga (sistema de ensayo de Luciferasa Steady-Glo, Promega) a placas blancas de 96 pocillos siguiendo las instrucciones del fabricante. Brevemente en primer lugar, se lisan las células y se añade el sustrato de Luciferasa de la Luciérnaga. Tras 10-15 min de incubación, se lee la luminiscencia de la actividad de la Luciferasa de la Luciérnaga. Las Unidades Relativas de Luz por segundo (RLU/sec) producidas mediante la reacción entre la Luciferasa de la Luciérnaga y su sustrato se cuantifican usando un luminómetro multiplacas (Lumistar-BMG).
Determinación del número total de células mediante ensayo de tinción de Cristal Violeta.
Placas transparentes de 96 pocillos que contienen células se lavan con DPBS y se incuban con una solución de Cristal Violeta (0,05 % Cristal Violeta, 4 % Formalina) durante 20 min a temperatura ambiente. El ADN de las células se tiñe mediante solución colorante de Cristal Violeta. A continuación, se separa la solución de Cristal Violeta y se lavan los pocillos con agua Milli-Q. La cantidad de tinte de Cristal Violeta captado por las células es directamente proporcional al número de células en cada pocillo. Finalmente, cuando las células se secan durante 1-2 horas a temperatura ambiente y se añade una solución de HCl 0,1 M, la absorbancia se lee a 630 nm en un Lector de Absorbancia de Microplacas (Multiskan-Thermo Electro Corporation). Los resultados de luminiscencia de la Luciferasa de Luciérnaga por segundo (RLU/sec) se normalizan con el número total de células para la dosis del ensayo y se calcula la disminución en la inducción del promotor de MC5R humano respecto al control basal
Producto Dosis de ensayo Inducción relativa del promotor de MC5R vs control basal
Extracto obtenido según ejemplo 1 0,25 pg/mL -14,88 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 2,5 pg/mL -15,72 %
Tabla 1
Los resultados muestran que el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica dismi­ nuye la inducción del promotor de MC5R humano.
Ejemplo 5: Inhibición de la acumulación de lípidos sebáceos en sebocitos primarios humanos usando un En­ sayo de Fluorescencia de Gotas de Lípidos.
La inhibición de la acumulación de lípidos se determina mediante la medición de la señal de fluorescencia de rojo Nilo en sebocitos primarios humanos en un medio de diferenciación acondicionado tras un tratamiento con el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1.
Las células de sebocitos humanos se siembran en placas de 96 pocillos cubiertas de matriz extracelular a 5000 células/pocillo en un medio de crecimiento de sebocitos (50 % del medio de crecimiento completo con suero y 50 % del medio libre de suero) y se incuban durante 3 días en una incubadora de CO2 (37 °C y 5 % de CO2 ).
Tras la incubación, las células de sebocitos humanos se tratan tanto con un medio de diferenciación acondi­ cionado (10 nM Hormona estimulante de [Nle4,D-Phe7]-a-melanocitos, NDP-a-MSH, en un medio de creci­ miento de sebocitos) como control basal para la acumulación de lípidos o con el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, a 0,25 |jg/ml y 2,5 jg/m l en un medio de diferenciación acondicionado. Cada tratamiento se realiza por tripli­ cado y de forma paralela para el ensayo de acumulación de lípidos y conteo de células. Las células se incuban dentro de los diferentes tratamientos durante 4 días en una incubadora de CO2 (37 °C y 5 % de CO2 ).
En el control basal, los sebocitos diferenciados se tratan con medio de diferenciación acondicionado, que es la condición de diferenciación máxima y, por tanto, la acumulación de lípidos máxima en este modelo de sebocito.
Cuantificación de la acumulación de lípidos sebáceos mediante ensayo del reactivo AdipoRed™ Siguiendo las instrucciones del fabricante, se lavan las células de sebocitos humanos para cada condición mediante solución salina tamponada con fosfato (PBS) con calcio y magnesio y se añade el reactivo Adipo­ Red™ diluido. Completada la adición del reactivo, las células de sebocitos humanos se incuban a temperatura ambiente durante 15 min. A continuación, se mide la fluorescencia de los lípidos neutros usando un lector FLUOstar Galaxy con longitudes de onda de excitación y emisión de 485 nm y 530 nm, respectivamente. Cuantificación de la densidad de células (número de células/ml) mediante ensayo de Conteo de Células. Las células de sebocitos humanos se desprenden de las placas de 96 pocillos mediante un tratamiento con tripsina. Tras recoger los volúmenes de muestras por triplicado, las células desprendidas se centrifugan. Se desechó alrededor del 80 % del sobrenadante para concentrar las células para el ensayo de conteo de células con un contador de células automatizado TC10TM (Biorad).
A continuación, la señal de fluorescencia de cada condición se normaliza mediante densidad de células (cé­ lulas/ml) para obtener valores normalizados de acumulación de lípidos. Finalmente, se calcula el porcentaje de acumulación de lípidos normalizada comparado con el control basal.
Los resultados obtenidos muestran que el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, disminuye el porcentaje de lípidos sebáceos en cultivos de sebocitos humanos.
Producto Concentración % Acumulación de lípidos vs control basal
Extracto obtenido según ejemplo 1 0,25 jg/mL 67,98 Extracto obtenido según ejemplo 1 2,5 jg/mL 64,77
Tabla 3
Ejemplo 6: Estudio in vitro de fotoprotección contra una dosis citotóxica de luz solar simulada usando fibro­ blastos dérmicos humanos adultos.
La eficacia fotoprotectora se mide como un aumento de la captación del colorante vital Rojo Neutro cuando se mide 24 horas después con una dosis citotóxica de luz solar simulada.
Los fibroblastos dérmicos humanos adultos se mantienen en un cultivo durante 24 horas para producir monocapas en placas de 96 pocillos. A continuación, las células se preincuban con solución salina tamponada con fosfato (PBS) para el control irradiado o con el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, a 2,5 jg/mL, durante 1 h en la oscuridad a 37 °C, 5 % de CO2 , aire humidificado.
A continuación, las células incubadas se exponen a la dosis de irradiación de ~30 a 60 J/cm2 a temperatura ambiente durante 150/180/210 minutos. Se conserva otra placa en la oscuridad durante el mismo tiempo y se utiliza como control no irradiado. El medio de cultivo de las placas irradiadas que contienen las células incu­ badas se sustituye por un medio de cultivo fresco y las placas se dejan durante 24 h de incubación. La viabi­ lidad de las células se determina por captación del Rojo Neutro, es decir, tras una incubación de 2 horas con una Solución de Rojo Neutro (Sigma), las células se lisan y la densidad óptica de los lisados celulares se mide a 540 nm en un espectrofotómetro. El Rojo Neutro es un colorante catiónico débil que penetra fácilmente en las membranas celulares sin difusión. El Rojo Neutro se acumula intracelularmente en los lisosomas de células no dañadas y se capta poco en células dañadas o no viables. Para calcular el porcentaje de viabilidad celular, las células no tratadas se usan de referencia. El potencial fotoprotector del producto analizado se calcula como el aumento de la viabilidad celular de las células tratadas respecto a las células irradiadas no tratadas (tratadas con PBS). Se muestran los resultados en la tabla 4.
Producto Tiempo de irradiación Aumento de la viabilidad celular (min) vs control
Extracto obtenido según ejemplo 1 150 min 41,7 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 180 min 99,3 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 210 min 14,2 %
Tabla 4
Ejemplo 7: Estudio in vitro de la síntesis de colágeno tipo I en fibroblastos dérmicos humanos mediante Ensayo de inmunoabsorción ligado a enzima (ELISA).
Los fibroblastos dérmicos humanos adultos se tratan con tripsina y 5x104 células/pocillos se siembran en placas de 48 pocillos. Tras 24 h de incubación a 37 °C en 5 % de CO2 , aire humidificado, se añade un medio de cultivo fresco que contiene el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, a 12,5 pg/mL, 6,25 pg/mL, 2,5 pg/mL y 1,25 pg/mL. Cada concentración se analiza por triplicado. Se siembran fibroblastos dérmicos humanos no tratados como controles en 6 pocillos en placas de 48 pocillos. Se incuban fibroblastos dérmicos humanos durante 48 h adicionales a 37 °C en 5 % de CO2 , aire humidificado. A continuación, se recogen los medios de cultivo para analizarlos mediante ELISA.
Se prepara una curva patrón para cuantificar el colágeno de tipo I con colágeno de tipo I de piel de becerro (Sigma) comenzando a partir de una solución madre de 1 mg/ml. Estas diluciones se transfieren, junto con el medio previamente recogido, a placas de 96 pocillos. Las diluciones de la curva patrón y los sobrenadantes recogidos de los tratamientos de cultivo de células se transfieren a las placas de 96 pocillos. El colágeno en las muestras y en las diluciones de la curva patrón recubre las paredes de las placas de 96 pocillos a 4 °C en atmósfera humidificada durante la noche. A continuación, las placas de pocillos se lavan tres veces con solu­ ción salina tamponada con fosfato (PBS) con Tween-20 (Sigma) al 0,05 % y se bloquean durante 1 h con una solución de Albúmina del Suero Bovino (Sigma) al 3 %. Tras el bloqueo, las placas de pocillos se incuban con anticuerpo anticolágeno de tipo I (Sigma) durante 2 h. Tras esta incubación, se añade el anticuerpo secundario (anti-IgG de ratón-HRP en cabra, Molecular Probes). A continuación, las placas de pocillos se incuban con sustrato de fosfatasa (OPD, Sigma) durante 30 minutos bajo agitación. La reacción se detiene con la adición de H2SO4 3 M. Se lee la absorbancia a 490 nm en un lector de placas de microtitulación y se determina la concentración de colágeno usando una regresión lineal de la curva patrón de colágeno de tipo I. Los resultados del aumento de la síntesis de colágeno frente a células no tratadas se muestran en la tabla 5.
Producto Concentración Aumento
o d
t e
ip l
o a
I síntesis del colágen vs control
Extracto obtenido según ejemplo 1 12,5 pg/mL 128,4 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 6,25 pg/mL 82,6 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 2,5 pg/mL 67,8 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 1,25 pg/mL 59,9 %
Tabla 5
Ejemplo 8: Estudio de la inhibición in vitro de la peroxidación lipídica mediante ensayo de TBARS.
La peroxidación lipídica se mide usando liposomas como modelo de membrana celular y fluorescencia monitorizada debido a la formación de aductos entre MDA (malonildialdehído) y el TBA (ácido tiobarbitúrico) durante el ensayo de TBARS (sustancias reactivas al ácido tiobarbitúrico). Los liposomas se tratan con extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, y comparado con un control basal para estudiar la disminución de la peroxidación lipídica de liposomas.
Preparación de liposomas
Una solución que contiene 30 mM de fosfatidilcolina de soja (Emulmetik 930) disuelta en cloroformo:metanol (1:1) se seca bajo una corriente de N2 libre de oxígeno para obtener una película fina. Las últimas trazas de disolventes se eliminan a alto vacío durante 3 h. Se forman vesículas multilamelares (MLV) mediante la adición del tampón Tris-NaCl (140 mM NaCl, 20 mM Tris pH=7,4) seguida de 5 min de agitación para asegurar la suspensión completa. A continuación, La suspensión de vesículas se somete a ultrasonidos para descomponer las vesículas de fosfolípidos en pequeñas vesículas unilamelares (SUV).
Peroxidación de liposomas
Se añade 1 ml de suspensión de las SUV a tubos de ensayo. A continuación, se añaden a diferentes tubos de ensayo 40 pl de diferentes concentraciones del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica. Se añaden 40 pl de tampón Tris-NaCl como control basal de la peroxidación. Los tubos se incuban durante 30 min a 37 °C, y cada concentración se evalúa por duplicado.
Se inicia la peroxidación lipídica mediante la adición de 40 pl de dihidrocloruro de 2,2'-azobis(2-amidinopropano) (AAPH) recién preparado (270 mM). A continuación, los tubos se incuban durante 1 h a 37 °C y se agitan a 100 rpm. La peroxidación se detiene con la adición de 200 pl de BHT (hidroxitolueno butilado) (4 % m/v en etanol) y congelación de las muestras a -20 °C.
Ensayo de TBARS
Preparación de la curva de calibración de MDA: a partir de una solución de MDA obtenida por hidrólisis ácida del TEP (1,1,3,3-Tetraetoxipropano) (10 mM en H2 SO41 %), se preparan cinco tubos con 0, 0,8, 1,6, 2,4 y 3,2 nmol de MDA respectivamente. Finalmente, se añaden a cada tubo 500 pl de agua destilada y 100 pl de BHT (4 % m/v en etanol)
Para la reacción con TBA, se descongelan las muestras, se toman 600 pl con pipetas y se añaden a 250 pl de SDS (Dodecilsulfato sódico) (3 % m/v). Tras la mezcla, se añaden 500 pl de t Ba recién preparado (1 % m/v en agua caliente) y se mezclan. A continuación, se añaden 500 pl de HCl 7 mM, se agitan y se incuban en un baño de agua a 95 °C durante 15 min. Finalmente, las muestras se ponen a temperatura ambiente y se añaden 2 ml de 1-Butanol. Las muestras se agitan vigorosamente y se centrifugan durante 5 minutos a 1500 rpm. 150 pl por pocillo de la fase superior de cada muestra se coloca por duplicado en placas negras de fondo opaco de 96 pocillos. Se mide la fluorescencia a la longitud de onda de excitación de 500 nm y a una longitud de onda de emisión de 530 nm en un lector de fluorescencia de multiplacas (modelo FluoStar Galaxy, BMG Labtech GmbH, Offenburg, Alemania). La peroxidación lipídica se mide por mediciones de fluorescencia, donde 100 % es el valor de la condición de control basal.
Producto Concentración Peroxidación lipídica vs con­ trol basal Extracto obtenido según ejemplo 1 2,5 pg/mL 96,0 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 10 pg/mL 92,2 %
Extracto obtenido según ejemplo 1 15,5 pg/mL 83,7 %
Tabla 6
Ejemplo 9: Efecto del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, en el nivel de proteína MC5R en sebocitos humanos pri­ marios.
Se siembran sebocitos humanos primarios en matraces T25 cm2 recubiertos con matriz extracelular (EM) a 150000 células para la condición del medio de crecimiento y a 250000 células para el resto de las condiciones en medio de suero reducido. Las células se incuban en una incubadora de CO2 (37 °C y 5 % de CO2 ) durante 3 días en medio de crecimiento de sebocitos.
Tras la incubación, se ensayan diferentes condiciones: sebocitos en medio de crecimiento como un control negativo de diferenciación, sebocitos en un medio de suero reducido como control positivo de diferenciación, y sebocitos con el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, a 0,25 y 2,5 pg/ml en medio de suero reducido.
Tras el tratamiento, las células se preparan para ¡nmunocitoquímica por citometría de flujo indirecta.
Preparación de las muestras para citometría de flujo indirecta. Inmunocitoquímica.
Se resuspenden las células a aproximadamente 1-5x106 células/ml en solución salina tamponada con fosfato (PBS) fría, 10 % de Suero de Becerro recién nacido (NCS), 1 % de azida sódica. La suspensión que contiene las células para cada condición se divide en dos tubos, un tubo se tiñe con un anticuerpo primario (Anticuerpo Anti-receptor MC5R [EPR8386], ABCAM) y un anticuerpo secundario (Anticuerpo secundario policlonal de cabra contra IgG de conejo-H&L (APC), ABCAM)) y el otro tubo se tiñe solo con anticuerpo secundario (control de anticuerpo secundario).
Las suspensiones que contienen las células se fijan con 0,5 % de Formaldehído (Sigma) en PBS a temperatura ambiente en la oscuridad. A continuación, se lavan las suspensiones mediante centrifugación con PBS frío. Finalmente, se volvieron a suspender las células aproximadamente a 0,5-2,5x106 células/ml en 500 pl de PBS frío que contiene 3 % de BSA y 1 % de azida sódica. Tras el conteo, las suspensiones de células se almacenan a 4 °C en la oscuridad, durante toda la noche.
Determinación del nivel de proteína extracelular MC5R mediante Citometría de Flujo
Se realiza el ensayo al menos 3 veces. Las suspensiones de células para cada tratamiento se realizan a través de Citometría de Flujo (FACSCanto II, BD Biosciences) y se recogen 100000-200 000 eventos, el número de eventos depende de cada ensayo particular. Los datos se analizan usando el Sofware WinMDI 2.9.
Se representa el diagrama de puntos de luz dispersada de la morfología de cada muestra (SSC versus FSC) y se traza una región de puntos o portal (R1) para descartar los restos de células.
Se representa el diagrama de puntos de fluorescencia de APC (fluorocromo) versus FSC (tamaño celular) de cada portal de muestra (R1). Comparando cada condición con su control de anticuerpo secundario, se traza un portal (R2) para definir las células APC positivas (MC5R). Para cada muestra se contabilizan los eventos incluidos dentro de las regiones R1+R2. A los eventos MC5R positivos de cada condición se les resta el control de anticuerpo secundario.
El nivel de proteína MC5R se calcula respecto a la condición del medio de suero reducido. Como se muestra en la tabla 7, el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, reduce el nivel de proteína MC5R en sebocitos humanos primarios en medio de suero reducido.
Producto Concentración Nivel de proteína MC5R resp
i ecto al me­ dio de suero reduc do Medio de crecimiento - 43,7
Extracto obtenido según ejemplo 1 0,25 pg/mL 63,4
Extracto obtenido según ejemplo 1 2,5 pg/mL 77,2
Tabla 7
Ejemplo 10: Efecto en el proceso de diferenciación de sebocitos humanos primarios por el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690.
Se siembran sebocitos en matraces T25 cm2 recubiertos con matriz extracelular (EM) a 250 000 células/T25 en medio de crecimiento de sebocitos (50 % de medio de crecimiento completo con suero: 50 % de medio libre de suero) y se incuban durante 3 días, en una incubadora de CO2 (37 °C y 5 % de CO2 ).
Tras la incubación, las células de sebocitos humanos se tratan con medio de crecimiento como un control negativo de diferenciación o con medio de diferenciación acondicionado (10 nM hormona estimulante de [Nle4,D-Phe7]-a-melanocitos, NDP-a-MSH, en un medio de crecimiento de sebocitos) como control positivo de diferenciación o el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, a 2,5 pg/ml en medio de diferenciación acondicionado. Las células se incuban con los diferentes tratamientos durante 4 días en una incubadora de CO2 (37 °C y 5 % de CO2 ). Después de 4 días de tratamiento se preparan para ser procesadas por Citometría de Flujo.
Preparación de la muestra para Citometría de Flujo
Se lavan las células de sebocitos humanos 3 veces mediante centrifugación a 100 g durante 5 min con PBS frío, se fijan durante 10 min a temperatura ambiente con 0,5 % de solución de formaldehído (Sigma) y se lavan otra vez con PBS frío. Los sedimentos de células finalmente se resuspenden en PBS frío que contiene 3 % de Albúmina de Suero Bovino (BSA) y 1 % de azida sódica y se almacenan a 4 °C en la oscuridad durante la noche.
Análisis de la morfología de la célula: Tamaño ((Dispersión frontal; FSC) y Granularidad ((Dispersión Lateral; SSC) mediante Citometría de Flujo
Se realiza el ensayo al menos 3 veces. Las suspensiones que contienen las células de cada tratamiento se analizan en un citómetro de flujo (FACSCanto II, BD Biosciences) y se recogen 100000-200 000 eventos, el número de eventos depende de cada ensayo particular. En la tecnología de la Citometría de Flujo, la FSC (Dispersión frontal) es proporcional al área de superficie de la célula y la SSC (Dispersión Lateral) es propor­ cional a la granularidad o complejidad interna de la célula. FSC versus SSC permite identifican la morfología específica de diferentes tipos de células. Los cambios morfológicos de los sebocitos para cada tratamiento se analizan usando el Software WinMDI 2.9 y representan la granularidad versus el tamaño (SSC vs. FSC). Se traza un portal A para descartar los restos de células y se representa la morfología de las células separadas en portales con un diagrama de densidad de SSC versus FSC, Los cambios morfológicos se evalúan mediante el establecimiento de ejes de orientación en los controles de diferenciación positivos y negativos.
Una representación de diagrama de puntos de datos de citometría de flujo se usa para la determinación de la distribución de eventos dentro de los diagramas, Tabla 8. Se cuantifica el número de eventos en cada cua­ drante.
Figure imgf000020_0001
Figure imgf000020_0002
FSC
Tabla 8
La Tabla 9 muestra un experimento representativo de los tres experimentos independientes que se llevaron a cabo. En este ensayo, las suspensiones de células correspondientes con cada tratamiento se analizan en un citómetro de flujo y se recogen 100000 eventos. La Tabla 9 muestra el número de eventos en cada cuadrante de los parámetros morfológicos representados de tamaño vs granularidad de sebocitos cultivados en diferen­ tes condiciones de cultivo. Los sebocitos diferenciados en comparación con los no diferenciados muestran un cambio en la morfología caracterizado por altos niveles de granularidad (aumento de Q2) y el tamaño de células pequeñas (aumento de Q3 y disminución de Q4). Los sebocitos tratados con el extracto obtenido según el ejemplo 1 muestran un cambio morfológico de disminución de la granularidad (disminución de Q2) y un aumento del tamaño celular similar a sebocitos no diferenciados (disminución de Q3 y aumento de Q4).
SSC/FSC global
Q2 Q3 Q4 Sebocitos no diferenciados 0,5 13 87 Sebocitos diferenciados 7,6 61 31
Extracto obtenido según ejemplo 1 a 2,5 ug/ml 4,8 21 75
Tabla 9
Los resultados de la Tabla 9 muestran que el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, mantiene algunos sebocitos no diferenciados en presencia del medio de diferenciación acondicionado.
La Figura 1 muestra los diagramas de densidad de los parámetros morfológicos de tamaño (FSC-A) y granularidad (SSC-A) para sebocitos cultivados en diferentes condiciones de cultivo. Los sebocitos no diferenciados muestran dos poblaciones de células principales con niveles de granularidad similares, pero con dos tamaños diferentes. Los sebocitos diferenciados muestran una única población de células caracterizada por altos nive­ les de granularidad y tamaño de células pequeños. Los sebocitos tratados con 2,5 mg/ml del extracto obtenido según el ejemplo 1, muestran un cambio en la morfología disminuyendo la granularidad y aumentando el tamaño celular similar a sebocitos no diferenciados. Las imágenes que pertenecen al mismo experimento se muestran en la Tabla 9.
Ejemplo 11. Estudio del perfil de la expresión génica de los queratinocitos epidérmicos humanos.
Se estudia el número de veces en que los conjuntos de genes aumentan/disminuyen significativamente, dentro del perfil de genes de los queratinocitos epidérmicos humanos, mediante tratamiento con 2,5 mg/ml del ex­ tracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, en comparación con los niveles basales en las células no tratadas (control ne­ gativo).
Se siembran los queratinocitos epidérmicos humanos adultos, HEKa, (Cascade Biologics) en matraces T25 pretratados con matriz de recubrimiento (15x104 células/matraz T25). Los queratinocitos epidérmicos humanos adultos se incuban en un medio Epilife completo (medio Epilife complementado con EDGS, Cascade Biologics) durante 6 días a 37 °C en una atmósfera con 5 % de CO2. Después de la incubación, las células se tratan durante 24 horas a 37 °C en una atmósfera con 5 % de CO2 con 2,5 pg/ml del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, en medio Epilife completo o medio Epilife completo como un control negativo. Las incubaciones y los tratamientos se llevan a cabo en, al menos 4 ensayos biológicos (matraces) para cada condición.
Después de los tratamientos, las células se lisan y el ARN se extrae y se purifica a partir de cada matraz y cada condición por medio del kit RNeasyPlus Mini (Qiagen). Las células lisadas se homogeneizan y las RNasas se inactivan. El ADN genómico se elimina de las muestras mediante el uso de las columnas de centrifu­ gación gDNA Eliminator. A continuación, las muestras se pasan a través de columnas de unión de ARN espe­ ciales y tras varios lavados de microcentrifugación para eliminar los contaminantes y las impurezas, el ARN purificado se eluye con 50 pl de agua ultrapura.
La pureza, la integridad y la concentración del ARN obtenido se evalúan por medio de espectrofotometría (Nanodrop) y con un bioanalizador (Agilent Bioanalyzer).
Más tarde, se lleva a cabo el etiquetado y las muestras se hibridan en una micromatriz de expresión génica humana (G3 ASurePrint, Agilent).
Los valores normalizados obtenidos con el tratamiento se comparan con los valores normalizados obtenidos con el control negativo para obtener genes con expresión diferencial. A continuación, se lleva a cabo un aná­ lisis paramétrico de los datos con el software Bioconductor. Los valores obtenidos se evalúan a continuación mediante GSEA (análisis de enriquecimiento de conjuntos de genes) para agrupar los genes con expresión diferencial en términos de ontología de genes y rutas biológicas.
Los resultados obtenidos se muestran a continuación en las Tablas 10 a la 13, en las que se agrupan los genes.
Símbolo Nombre % Cambio inducido
CCL2 Quimiocina (motivo C-C) ligando 2 -35,68
CSF1 Factor 1 estimulante de colonias (macrófago) -17,39
CSF3 Factor 3 estimulante de colonias (granulocito) -53,46
IL1A Interleucina 1, alfa -41,72
IL6 Interleucina 6 -55,85
IL8 Interleucina 8 -33,19
TNF Factor de necrosis tumoral -14,44
PTGS2 Prostaglandina-endoperóxido sintasa 2 (p
y ciclooxigenasa) rostaglandina G/H sintasa -29,67
Tabla 10. Genes implicados en la INFLAMACIÓN, regulados negativamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1.
Símbolo Nombre % Cambio inducido
CYP1A1 Citocromo P450, familia 1, subfamilia A, polipéptido 1 88,48
SOD2 Superóxido dismutasa 2, mitocondrial 64,35
ALDH3A1 Familia de aldehído deshidrogenasa 3, miembro A1 112,12
ATP7A ATPasa, transportadora de Cu++, polipéptido alfa 28,62
CYP1B1 Citocromo P450, familia 1, subfamilia B, polipéptido 1 25,71
GCLC Cisteína-glutamato ligasa, subunidad catalítica 69,94
GGT6 Gamma-glutamiltransferasa 6 57,35
GSTM1 Glutatión S-transferasa mu 1 26,86
NUDT7 motivo 7 tipo Nudix (nucleósido difosfato unido al residuo X) 26,05
Tabla 11. Genes implicados en el ESTRESS OXIDATIVO y/o DETOXIFICACIÓN, regulados positivamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1.
Símbolo Nombre % Cambio inducido
NLRP10 Familia NLR, dominio de pirina que contiene 10 35,39
PGLYRP4 Proteína 4 de reconocimiento del péptidoglicano 54,86
Tabla 12. Genes implicados en la RESPUESTA ANTIINFLAMATORIA, regulados positivamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1.
Símbolo Nombre % Cambio inducido
AQP9 Acuaporina 9 51,27
Tabla 13. Genes implicados en la HIDRATACIÓN, regulados positivamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1.
Ejemplo 12: Estudio del perfil de la expresión génica de sebocitos humanos.
Se estudia el número de veces que conjuntos de genes aumentan/disminuyen significativamente, dentro del perfil de genes de sebocitos humanos, mediante tratamiento con 2,5 pg/ml del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con el número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, en comparación con los niveles basales en las células no tratadas (control negativo).
Se siembran los sebocitos humanos (CELPROGEN) en matraces T25 recubiertos con matriz extracelular (CEL-PROGEN) (25x104 células/matraz) y se incuban en medio de crecimiento de sebocitos (medio de crecimiento completo de sebocitos humanos al 50 % y medio libre de suero de sebocito humano al 50 %, CELPROGEN) durante 3 días a 37 °C en una atmósfera con 5 % de CO2. Después de 3 días, el suero se reduce del cultivo y el medio de crecimiento de sebocitos se sustituye por un medio de suero reducido (medio de crecimiento completo de sebocitos humanos al 5 % y medio libre de suero de sebocitos humanos al 95 %, CELPROGEN) y se incuban los sebocitos durante 3 días. Después de la incubación, las células se tratan durante 24 horas a 37 °C en una atmósfera con 5 % de CO2 con 2,5 pg/ml del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoal­ teromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenido según el ejemplo 1, en un medio de suero reducido o en medio de suero reducido como control negativo. Las incubaciones y los tratamientos se llevan a cabo en, al menos, 4 ensayos biológicos (matraces) para cada condición.
Después de los tratamientos, se lisan las células y se extrae y purifica el ARN a partir de cada matraz y cada condición mediante el kit RNeasyPlus Mini (Qiagen). Las células lisadas se homogeneizan y las RNasas se inactivan. El ADN genómico se elimina de las muestras mediante el uso de columnas de centrifugación gDNA Eliminator. Entonces, las muestras se pasan a través de columnas de unión de ARN especiales y tras varios lavados de microcentrifugación para eliminar los contaminantes y las impurezas, el ARN purificado se eluye con 50 pl de agua ultrapura.
La pureza, la integridad y la concentración del ARN obtenido se evalúan por medio de espectrofotometría (Nanodrop) y con un bioanalizador (Agilent Bioanalyzer).
Más tarde, se lleva a cabo el etiquetado y las muestras se hibridan en una micromatriz de expresión génica humana (G3 ASurePrint, Agilent).
Los valores normalizados obtenidos con el tratamiento se comparan con los valores normalizados obtenidos con el control negativo para obtener genes con expresión diferencial. A continuación, se lleva a cabo un aná­ lisis paramétrico de los datos con el software Bioconductor. Los valores obtenidos se evalúan a continuación mediante GSEA (análisis de enriquecimiento de conjuntos de genes) para agrupar los genes con la expresión diferencial en términos de ontología de genes y rutas biológicas.
Los resultados obtenidos se muestran a continuación en las Tablas 14 a la 17, en las que se agrupan los genes.
Símbolo Nombre % Cambio indu­
cido
CCL2 Quimiocina (motivo C-C) ligando 2 -62,13 LTB Linfotoxina beta (TNF superfamilia, miembro 3) -46,26 TLR2 Receptor 2 tipo Toll -25,10 TNF Factor de necrosis tumoral -36,57 CXCR7 Receptor de quimiocina tipo 7 (motivo C-X-C) -30,19 SAA1 Amiloide sérica A1 -55,36 IL8 Interleucina 8 -28,03 CXCL1 Quimiocina
to (m
de o
l ti
m vo
el C-X-C) ligando 1 (actividad estimulante del -50,97 crecimien anoma, alfa)
CXCL5 Quimiocina (motivo C-X-C) ligando 5 -45,32
Tabla 14. Genes implicados en la INFLAMACIÓN, regulados negativamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1.
Símbolo Nombre % Cambio inducido BORA Bora, activador de la Aurora A quinasa -24,02 CCNB1 Ciclina B1 -22,58 CCND3 Ciclina D3 -25,22 WNT5A Familia de sitios de integración de MMTV tipo wingless, miembro 5A -20,85
Tabla 15. Genes implicados en la PROLIFERACIÓN Y DIFERENCIACIÓN DE SEBOCITOS, regulados nega­ tivamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1.
Símbolo Nombre % Cambio inducido CYP1A1 Citocromo P450, familia 1, subfamilia A, polipéptido 1 62,62 GADD45A Detención del crecimiento y daño de ADN-inducible, alfa 36,36
Tabla 16. Genes implicados en el ESTRÉS OXIDATIVO Y REPARACIÓN DEL ADN, regulados positivamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1.
Símbolo Nombre % Cambio indu­ cido RLBP1 Proteína de unión 1 al retinoaldehído 83,26
STRA6 Estimulada por el ácido retinoico 6 47,36
Tabla 17. Genes implicados en el METABOLISMO DE RETINOIDES, regulados positivamente por el extracto obtenido según el ejemplo 1. El metabolismo de retinoides está relacionado con la producción de sebo en la piel.
Ejemplo 13: Preparación de una composición cosmética del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690.
En un recipiente adecuado, los ingredientes de la Fase A se disuelven en agua bajo turbina de agitación, hasta que se consigue una dispersión total. Posteriormente, se añade poco a poco la fase B, Novemer EC2 [INCI: AGUA (AQUA), ACRILATOS SÓDICOS, BEHENETH-25 METACRILATO, POLÍMERO CRUZADO, POLIDE-CENO HIDROGENADO, LAURIL GLUCÓSIDO] bajo turbina de agitación.
A continuación, se añaden una solución de agua del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas Antarctica, obtenido según el ejemplo 1, en una concentración de 62,5 pg/ml, y salicilato de sodio (Fase ).
La lista de ingredientes está en la Tabla 18
INGREDIENTE (Nombre INCI) % en Fase peso
AGUA (AQUA) 90,50 A
Disolución acuosa del Extracto obtenido según ejemplo 1 5,00 C
SALICILATO DE SODIO 0,01 C
AGUA (AQUA) 1,4 B
ACRILATOS SÓDICOS/BEHENETH-25 METACRILATO/POLÍ-
MERO CRUZADO 0,83 B
POLIDECENO HIDROGENADO 0,68 B
LAURIL GLUCÓSIDO 0,09 B
FENOXIETANOL 0,86 A
METILPARABENO 0,19 A
PROPILPARABENO 0,10 A
ETILPARABENO 0,05 A
EDTA DISÓDICO 0,30 A
Tabla 18
Ejemplo 14: Preparación de una composición cosmética del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690.
En un recipiente adecuado, los ingredientes de la Fase A se disuelven en agua bajo turbina de agitación, hasta que se consigue una dispersión total. El extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas An­ tarctica, obtenido según el ejemplo 1, se añade a la Fase A como solución acuosa del extracto a una concen­ tración de 250 pg/ml.
A continuación, se añaden los componentes de la Fase B poco a poco bajo turbina de agitación, hasta que se consigue una dispersión total, El pH se ajusta a 6,3-6,8.
La lista de ingredientes está en la Tabla 19
INGREDIENTE (Nombre INCI) % en peso FASE
AGUA (AQUA) 94,74 A
Extracto obtenido según ejemplo 1 0,75 A
AGUA (AQUA) 1,41 B
ACRILATOS SÓDICOS/BEHENETH-25 METACRI-
LATO/POLÍMERO CRUZADO 0,83 B
POLIDECENO HIDROGENADO 0,68 B
LAURIL GLUCÓSIDO 0,09 B
FENOXIETANOL 0,86 A
METILPARABENO 0,19 A
PROPILPARABENO 0,10 A
ETILPARABENO 0,05 A
EDTA DISÓDICO 0,30 A
SALICILATO DE SODIO 0,01 A
Tabla 19
Ejemplo 15: Estudio en vivo de la eficacia del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690 en piel grasa de voluntarios de piel asiática.
El estudio se lleva a cabo en 20 mujeres asiáticas voluntarias entre 20 y 35 años de edad. Las voluntarias se aplican la composición del ejemplo 14, en la cara y la frente dos veces al día (mañana y noche) durante 28 días. El estudio mide el número y superficie de los folículos activos que secretan sebo, puntos, en el momento inicial antes del uso de la composición del ejemplo 14 en el día 28. Los sujetos sirvieron como su propia referencia para comparar el resultado obtenido en el día 28 con el resultado obtenido en el momento inicial. La eficacia se mide con Sebutape®, una película de adhesivo sensible a sebo. Los resultados se muestran en la Tabla 20.
Figure imgf000025_0001
Tabla 20
Los resultados muestran una disminución media de 9,5 % de folículos activos que secretan sebo y una dismi­ nución media de 27,2 % de la superficie de folículos activos que secretan sebo en 20 voluntarias.
Ejemplo 16 Preparación de una composición de una crema BB del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690
En un recipiente adecuado, los ingredientes de la Fase A [INCI: AGUA, METIL GLUCETH-20, ALANTOÍNA, HIDRÓXIDO DE SODIO, EDTA DISÓDICO, SORBATO DE POTASIO] se disuelven en agua bajo turbina de agitación, y la mezcla se calienta a 50 °C hasta que se consigue una dispersión total.
Posteriormente, se humedece la Fase B1 [INCI: CARBOPOL ®ULTREZ 20 ACRILATOS/C10-30 ACRILATO DE ALQUILO CROSSPOLÍMERO], y luego se dispersa, y se añade la Fase B2 [INCI: GOMA XANTANO] se humedece y luego se dispersa también.
A continuación, se adicionan los ingredientes de la Fase C [INCI: CI 77891 Y AGUA & GLICERINA Y GOMA XANTANO Y CITRATO DE SODIO, Cl 77492 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XANTANO Y CITRATO DE SODIO, CI 77491 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XANTANO Y CITRATO DE SODIO, Cl 77499 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XAN­ TANO Y CITRATO DE SODIO] y se permite homogeneizar el color en sí mismo por agitación. Cuando la mezcla es homogénea, la temperatura se eleva a 75 °C.
Dentro de otro vaso de precipitados se pesan los ingredientes de la Fase D [INCI: ISOSTEARATO DE ISO-PROPILO, TRIGLICÉRIDO CÁPRICO-CAPRÍLICO, SESQUISTEARATO DE METILGLUCOSA, ALCOHOL BEHENÍLICO, DIMETICONA, PEG-20 SESQUISTEARATO DE METILGLUCOSA, FENOXIETANOL, ACE­ TATO DE VITAMINA E] y la mezcla se calienta a 80 °C.
Cuando se alcanzan las temperaturas respectivas, la emulsión se hace añadiendo lentamente la mezcla de la fase D a la mezcla de las fases A, B1, B2 y C bajo agitación, primero a 600 rpm y luego un minuto con un Turax a 10000 rpm.
Cuando la mezcla se enfría a 65 °C, se adiciona la Fase E [INCI: MICA, NITRURO DE BORO, MICA]. Luego una solución acuosa del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690 obtenido según el ejemplo 1 a una concentración de 62,5 pg/ml y salicilato de sodio (Fase F) [INCl: AGUA, EXTRACTO DE FERMENTACIÓN DE PSEUDOALTEROMONAS, SALICILATO DE SO­ DIO], y se añade la Fase G [INCI: FRAGANCIA] a la mezcla anterior cuando la masa está a 30 °C.
La Lista de ingredientes está en la Tabla 21
INGREDIENTE (Nombre INCI) % en peso FASE
AGUA 56,95 A
METIL GLUCETH-20 5 A
ALANTOÍNA 0,2 A
HIDRÓXIDO DE SODIO 0,15 A
EDTA DISÓDICO 0,1 A
SORBATO DE POTASIO 0,05 A
CARBOPOL ®ULTREZ 20 ACRILATOS/C10-30
ACRILATO DE ALQUILO CROSSPOLÍMERO 0,01 B
GOMA XANTANO 0,3 B
CI 77891 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XANTANO
Y CITRATO DE SODIO 6 C
Cl77492 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XANTANO Y
CITRATO DE SODIO 0,6 C
CI 77491 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XANTANO
Y CITRATO DE SODIO 0,4 C
Cl77499 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XANTANO Y
CITRATO DE SODIO 0,2 C
ISOSTEARATO DE ISOPROPILO 5,9 D
TRIGLICÉRIDO CÁPRICO-CAPRÍLICO 4,1 D
SESQUISTEARATO DE METILGLUCOSA 3,4 D
ALCOHOL BEHENÍLICO 3 D
DIMETICONA 2 D
PEG-20 SESQUISTEARATO DE METILGLUCOSA 1,6 D
FENOXIETANOL 0,5 D
ACETATO DE VITAMINA E 0,2 D
MICA 3 E
NITRURO DE BORO 3 E
MICA 1 E
AGUA, EXTRACTO DE FERMENTACIÓN DE PSEU­
DOALTEROMONAS, SALICILATO DE SODIO 2 F
FRAGANCIA 0,25 G
Tabla 21
Ejemplo 17 Preparación de una crema BB de composición placebo
La composición se prepara según las instrucciones del ejemplo 16, pero sin el extracto de Pseudoalteromonas antárctica, con los siguientes ingredientes incluidos en la Tabla 22
INGREDIENTE (Nombre INCI) % peso FASE
AGUA DESIONIZADA 58,95 A
METIL GLUCETH-20 5 A
ALANTOÍNA 0,2 A
HIDRÓXIDO DE SODIO 0,15 A
EDTA DISÓDICO 0,1 A
SORBATO DE POTASIO 0,05 A
CARBOPOL ®ULTREZ 20 ACRILATOS/C10-30
ACRILATO DE ALQUILO CROSSPOLÍMERO 0,1 B
GOMA XANTANO 0,3 B
CI 77891 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XAN­
TANO Y CITRATO DE SODIO 6 C
Cl77492 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XAN­
TANO Y CITRATO DE SODIO 0,6 C
CI 77491 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XAN­
TANO Y CITRATO DE SODIO 0,4 C
Cl77499 Y AGUA Y GLICERINA Y GOMA XAN­
TANO Y CITRATO DE SODIO 0,2 C
ISOSTEARATO DE ISOPROPILO 5,9 D
TRIGLICÉRIDO CÁPRICO-CAPRÍLICO 4,1 D
SESQUISTEARATO DE METILGLUCOSA 3,4 D
ALCOHOL BEHENÍLICO 3 D
DIMETICONA 2 D
PEG-20 SESQUISTEARATO DE METILGLUCOSA 1,6 D
FENOXIETANOL 0,5 D
ACETATO DE VITAMINA E 0,2 D
MICA 3 E
NITRURO DE BORO 3 E
MICA 1 E
FRAGANCIA 0,25 F
Tabla 22
Ejemplo 18: Estudio en vivo de la eficacia del extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antarctica con número de depósito CECT 8690 en el efecto matificante de larga duración de una crema BB
El estudio se lleva a cabo en 22 voluntarias caucásicas de entre 18 y 42 años de edad. Las voluntarias aplican la composición del ejemplo 16, en una mitad de la cara y el placebo (ejemplo 17) en la otra mitad de la cara. Después de una sola aplicación del producto se mide el brillo de la piel, en el momento inicial antes del uso de la composición, inmediatamente después de la aplicación del producto y 2 horas y 8 horas después de la aplicación del producto. La eficacia se mide con el Skin-Glossymeter® GL 200. Los resultados se muestran en la Tabla 23.
Figure imgf000028_0001
Tabla 23
Las mediciones realizadas inmediatamente después de la aplicación del producto muestran que la disminución del brillo de la piel es mayor con la crema activa (la composición del ejemplo 16, con el extracto inferior a 10 KDa de la especie Pseudoalteromonas antárctica con número de depósito CECT 8690) que con la crema placebo. Un resultado similar se encuentra después de 2 horas. Sin embargo, después de 8 horas de aplica­ ción del producto la crema activa es capaz de disminuir el brillo de la piel mientras que con la crema placebo el brillo de la piel aumenta.
Ejemplo 19: Estudio in vivo el producto extracelular bacteriano secretado por la cepa de la especie Pseudoal­ teromonas antarctica con número de depósito CECT 8690, obtenida según el ejemplo 1; ensayo de la eficacia del tratamiento de la piel grasa en voluntarios de piel caucásica.
El estudio se llevó a cabo durante 28 días con mediciones en el momento inicial, después de 14 días y después de 28 días. Se incluyeron 20 voluntarios que eran mujeres caucásicas de entre 20 y 35 años. Los sujetos se aplicaron el gel-crema del ejemplo 13, dos veces al día (mañana y noche). Los sujetos sirvieron como su propia referencia y los resultados obtenidos en diferentes momentos se compararon con los obtenidos en el momento inicial.
Se evaluó la eficacia del producto mediante:
- Mediciones con Sebumeter® para determinar la tasa de sebo de la piel de ambos lados de la nariz; los resultados se muestran en la tabla 24.
- Fotografías digitales con Epiflash para el análisis de imágenes de los poros de ambos lados de la nariz;
los resultados se muestran en la tabla 25.
- Fotografías digitales con Visia-CR para el análisis de imágenes del brillo de la piel en la frente; los resultados se muestran en la tabla 26.
Figure imgf000028_0002
*calculadas con los valores medios
Tabla 24. Variaciones porcentuales de la cantidad total de sebo a los 14 y 28 días respecto al momento inicial.
Los resultados muestran una disminución de la tasa de sebo del 8,4 % después de 14 días de aplicación del producto. Después de 28 días, la reducción de la tasa de sebo es de hasta el 9,4 %.
Figure imgf000029_0002
*calculadas con los valores medios
Tabla 25. Variaciones porcentuales del número y la superficie total de los puntos a los 14 y 28 días respecto al momento inicial.
Los resultados muestran una reducción del número de poros del 20,5 % después de 14 días y del 18,0 % después de 28 días de aplicación del producto. En relación con el área total de los poros, se encontraron reducciones del 18,8 % y 18,7 % después de 14 y 28 días de aplicación del producto, respectivamente.
Figure imgf000029_0001
*calculadas con los valores medios
Tabla 26. Variaciones porcentuales del brillo de la piel en la frente a los 14 y 28 días respecto al momento inicial.
Los resultados muestran una reducción de la intensidad del brillo de la piel del 17 % después de 14 días de tratamiento. Después de 28 días de aplicación del producto, la reducción fue de hasta el 27,3 % de la intensi­ dad del brillo de la piel.

Claims (14)

REIVINDICACIONES
1. Extracto de peso molecular inferior a 10000 Da que comprende un producto extracelular secretado por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antárctica para su uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno de la piel y/o las membranas mucosas, en donde dicho extracto puede obtenerse por filtra­ ción de un sobrenadante obtenido de la fermentación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica para eliminar moléculas de alto peso molecular, en donde la filtración se lleva a cabo después de la separación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica del sobrenadante donde se encuentra el extracto.
2. Extracto para el uso según la reivindicación 1, en donde el tratamiento es un tratamiento y/o prevención de la inflamación, comedones, acné, seborrea, dermatitis seborreica o fotoprotección de la piel.
3. Extracto para el uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 o 2, en donde el tratamiento inhibe el receptor MC5R y/o estimula la síntesis de colágeno.
4. Uso de un extracto de peso molecular inferior a 10 000 Da que comprende un producto extracelular secretado por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica para el tratamiento cosmético, no terapéutico y/o el cuidado de la piel, las membranas mucosas y/o el cabello, en donde dicho extracto puede obtenerse por filtración de un sobrenadante obtenido de la fermentación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica para eliminar moléculas de alto peso molecular, en donde la filtración se lleva a cabo después de la separación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica del sobrenadante donde se encuentra el extracto.
5. Uso del extracto según la reivindicación 4, en donde el tratamiento cosmético, no terapéutico y/o el cui­ dado es un tratamiento de reducción de la cantidad de sebo en la piel y/o el cabello, tratamiento y/o prevención del envejecimiento de la piel, tratamiento y/o prevención de las arrugas de la piel, trata­ miento de la firmeza de la piel, prevención de la pérdida de firmeza de la piel y/o para la higiene del cabello.
6. Uso del extracto según la reivindicación 4 o la reivindicación 5, en donde el tratamiento cosmético, no terapéutico y/o el cuidado es el mantenimiento o la mejora de la hidratación de la piel.
7. Uso del extracto según cualquiera de las reivindicaciones 4 a 6, en donde el tratamiento cosmético, no terapéutico y/o el cuidado inhibe el receptor MC5R y/o estimula la síntesis de colágeno.
8. Uso del extracto según cualquiera de las reivindicaciones 4 a 6, en donde el peso molecular del extracto es superior a 50 Da e inferior a 10000 Da y está preferentemente entre 100 Da y 8000 Da.
9. Extracto para el uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en donde el peso molecular es superior a 50 Da e inferior a 10000 Da, y está preferentemente entre 100 Da y 8000 Da.
10. Extracto para el uso según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 o 9, o el uso del extracto según cualquiera de las reivindicaciones 4 a 8, en donde la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica es una cepa con número de depósito CECT 8690.
11. Composición cosmética o dermofarmacéutica que comprende una cantidad con eficacia cosmética o dermofarmacéutica de un extracto de peso molecular inferior a 10000 Da que comprende un producto extra­ celular secretado por una cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica, y al menos un excipiente, adyuvante y/o ingrediente aceptable para el uso cosmético o dermofarmacéutico en donde dicho extracto, en donde dicho extracto puede obtenerse por filtración de un sobrenadante obtenido de la fermentación de la cepa de la especie Pseudoalteromonas antarctica para eliminar moléculas de alto peso molecular, en donde la filtración se lleva a cabo después de la separación de la cepa de la especie Pseudoaltero­ monas antarctica del sobrenadante donde se encuentra el extracto.
12. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según la reivindicación 11, en donde el extracto está incor­ porado a un sistema de suministro o a un sistema de liberación controlada aceptable para el uso cosmético o dermofarmacéutico seleccionado del grupo formado por liposomas, liposomas mixtos, oleosomas, niosomas, etosomas, milipartículas, micropartículas, nanopartículas y nanopartículas lipídicas sólidas, por­ tadores lipídicos nanoestructurados, esponjas, ciclodextrinas, vesículas, micelas, micelas mixtas de tensioactivos, micelas mixtas de fosfolípidos y tensioactivo, miliesferas, microesferas y nanoesferas, lipoesferas, milicápsulas, microcápsulas, nanocápsulas, microemulsiones y nanoemulsiones o se ad­ sorbe a un polímero orgánico sólido o soporte mineral sólido seleccionado del grupo formado por talco, bentonita, sílice, almidón o maltodextrina.
13. Composición cosmética o dermofarmacéutica, según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 12, en donde esta composición se presenta en una formulación seleccionada del grupo formado por múltiples emulsio­ nes, soluciones, cristales líquidos, composiciones anhidras, dispersiones acuosas, aceites, leches, bál­ samos, espumas, lociones acuosas o aceitosas, geles acuosos o aceitosos, cremas, soluciones, solu­ ciones hidroalcóholicas, soluciones hidroglicólicas, hidrogeles, linimentos, sueros, jabones, champús, acondicionadores, máscaras faciales, lacas para el cabello, sueros, películas de polisacáridos, ungüen­ tos, espumas, pomadas, pastas, polvos, barras, lápices, vaporizadores o aerosoles.
14. Composición cosmética o dermofarmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 12, que se incorpora en un material tejido, material no tejido o dispositivo médico.
ES15790909T 2014-10-31 2015-11-02 Composición cosmética y/o farmacéutica que contiene un producto extracelular bacteriano de la Pseudoalteromonas antarctica y su uso Active ES2814552T3 (es)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP14382430 2014-10-31
PCT/EP2015/075485 WO2016066857A1 (en) 2014-10-31 2015-11-02 Cosmetic and/or pharmaceutical composition containing a bacterial extracellular product from pseudoalteromonas antarctica, and use thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
ES2814552T3 true ES2814552T3 (es) 2021-03-29

Family

ID=51842467

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
ES15790909T Active ES2814552T3 (es) 2014-10-31 2015-11-02 Composición cosmética y/o farmacéutica que contiene un producto extracelular bacteriano de la Pseudoalteromonas antarctica y su uso

Country Status (9)

Country Link
US (1) US10265348B2 (es)
EP (1) EP3212206B1 (es)
JP (1) JP6714589B2 (es)
KR (1) KR102448943B1 (es)
CN (2) CN107106617A (es)
AU (1) AU2015340458B2 (es)
BR (1) BR112017008344B1 (es)
ES (1) ES2814552T3 (es)
WO (1) WO2016066857A1 (es)

Families Citing this family (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BR112018074202B1 (pt) * 2016-05-24 2022-08-02 Natura Cosméticos S.A Composição cosmética antissinais, kit de composições e método para tratamento cosmético da pele
CN106333886B (zh) * 2016-08-29 2020-06-02 欧标（广州）化妆品有限公司 一种具有保湿和美白亮肤作用的组合物及其应用
EP3295927A1 (en) 2016-09-19 2018-03-21 Institut Univ. de Ciència i Tecnologia, S.A. Uses of an exopolysaccharide-protein complex obtained from a bacterium
KR102311724B1 (ko) * 2017-09-15 2021-10-13 (주)아모레퍼시픽 슈도알터로모나스 펩티도라이티카의 배양물 또는 이의 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물
KR102395984B1 (ko) * 2017-09-27 2022-05-11 (주)아모레퍼시픽 슈도알터로모나스 카라기노보라의 배양물 또는 이의 추출물을 포함하는 피부 미백용 조성물
US20230012468A9 (en) * 2018-02-19 2023-01-12 Snails, LLC Treatment Application Garment
KR102172355B1 (ko) * 2018-09-18 2020-10-30 (주)한국기능성화장품연구센터 Rx 콤플렉스 에스를 함유하는 피부 피지 조절용 화장료 조성물
CN109125706A (zh) * 2018-09-20 2019-01-04 深圳市维琪医药研发有限公司 一种有效改善痤疮及修复皮损的多肽组合物
CN113226278B (zh) 2019-01-02 2023-07-21 宝洁公司 含有肽化合物和水前寺海苔胞外多糖提取物的皮肤护理组合物
WO2020201055A1 (en) * 2019-03-29 2020-10-08 Evonik Operations Gmbh Preparations containing berry extracts for use in the prophylaxis and/or treatment of viral infections caused by pneumoviridae
KR102376516B1 (ko) * 2020-09-08 2022-03-21 주식회사 바이오솔루션 수득률이 향상된 미생물 유래 세포 외 소포체의 제조 방법 및 이의 방법으로 제조된 세포 외 소포체를 포함하는 피부 상태 개선용 조성물
CN112057478A (zh) * 2020-10-16 2020-12-11 常州市艾斯康生物医药有限公司 一种用于舒缓和预防过敏性鼻炎的药物制剂
KR102643628B1 (ko) * 2020-12-10 2024-03-04 민흥기 유산균을 함유하는 비립종 개선용 조성물
US11771637B2 (en) 2021-01-22 2023-10-03 The Procter & Gamble Company Skin care composition and method of using the same
US11571378B2 (en) 2021-01-22 2023-02-07 The Procter & Gamble Company Skin care composition and method of using the same
CN115025129B (zh) * 2021-03-05 2024-04-19 葡萄王生技股份有限公司 含乳酸杆菌的组合物及其预防及/或改善皮肤老化的用途
CN113403247B (zh) * 2021-05-14 2023-02-14 南宁汉和生物科技股份有限公司 多粘芽孢杆菌高产胞外多糖培养基及其应用方法
KR102652692B1 (ko) * 2021-06-29 2024-04-01 주식회사 라비오 남극 미생물 배양액을 포함하는 화장료 조성물
CN113712845B (zh) * 2021-09-25 2023-10-24 周绵燕 一种抗衰修护紫草组合物及其在护肤品中的应用
CN114344202B (zh) * 2022-03-02 2023-05-23 法国科兰黎化妆品实验室 一种抗衰老组合物、护肤品及化妆品
US11878036B2 (en) 2022-05-25 2024-01-23 Neuvian LLC Vaginal care compositions and methods of improving vaginal health

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2181592B1 (es) 2001-06-14 2003-11-01 Lipotec Sa Uso de glicoproteina para el tratamiento y re-epitelizacion de heridas
US20030110518A1 (en) 2001-09-28 2003-06-12 Houseknecht Karen L. Melanocortin-5 receptor sequences and uses thereof
US7319107B2 (en) 2001-11-08 2008-01-15 Johnson & Johnson Consumer Companies, Inc. 1,2,4-thiadiazolium derivatives as melanocortin receptor modulators
ITBO20050140A1 (it) * 2005-03-11 2006-09-12 Lucio Lenzi Tessuto con principi attivi e metodo collegato di ricarica dei principi attivi
US8377925B2 (en) 2008-02-29 2013-02-19 Mimetica Pty Ltd Methods of modulating the activity of the MC5 receptor and treatment of conditions related to this receptor
ES2336995B1 (es) * 2008-10-13 2011-02-09 Lipotec, S.A. Composicion cosmetica o dermofarmaceutica para el cuidado de la piel,cuero cabelludo y uñas.
ES2390033B1 (es) 2010-11-30 2013-10-31 Lipotec S.A. Exopolisacárido para el tratamiento y/o cuidado de la piel, mucosas, cabello y/o uñas.

Also Published As

Publication number Publication date
BR112017008344B1 (pt) 2022-04-26
KR102448943B1 (ko) 2022-09-28
JP2018500279A (ja) 2018-01-11
AU2015340458B2 (en) 2021-07-08
KR20170072341A (ko) 2017-06-26
CN116370397A (zh) 2023-07-04
AU2015340458A1 (en) 2017-05-04
CN107106617A (zh) 2017-08-29
US20170333491A1 (en) 2017-11-23
US10265348B2 (en) 2019-04-23
BR112017008344A2 (pt) 2017-12-19
EP3212206A1 (en) 2017-09-06
EP3212206B1 (en) 2020-07-08
JP6714589B2 (ja) 2020-06-24
WO2016066857A1 (en) 2016-05-06

Similar Documents

Publication Publication Date Title
ES2814552T3 (es) Composición cosmética y/o farmacéutica que contiene un producto extracelular bacteriano de la Pseudoalteromonas antarctica y su uso
US10413501B2 (en) Cosmetic composition containing halomonas ferment extract, and use thereof
ES2747124T3 (es) Exopolisacárido para el tratamiento y/o cuidado de la piel, medios de cultivo y composiciones de estos
CN107567329B (zh) 皮壳正青霉的发酵提取物和其美容用途
ES2424294B1 (es) Exopolisacárido para el tratamiento y/o cuidado de la piel, mucosas, cabello y/o uñas
KR102447417B1 (ko) 아디포넥틴 수준의 증가를 위한 박테리아 균주의 발효 추출물
AU2014343701A1 (en) Exopolysaccharide for the treatment and/or care of the skin, culture media and compositions thereof