ES2802174T3 - Compuestos - Google Patents

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Qian Liu
Yingxia Sang
Luigi Piero Stasi
Zehong Wan
Baowei Zhao
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Abstract

Un compuesto de Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este **(Ver fórmula)** donde R1 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, y halo; R2 es alquilo C1-5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, alcoxilo C1-3, halo, y CN; o R2 es -(CRaRb)n-Y, donde n es 0, 1 o 2, cada aparición de Ra y Rb es independientemente H o metilo, Y es 1) un heterociclilo con cuatro a seis miembros opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo; 2) un cicloalquilo C3-6 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, u oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo, o 3) **(Ver fórmula)** cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con un grupo OH; R3 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, cicloalquilo C3-6 y halo; R4 es CH o N; R5 es H, CN o metilo; y R6 se selecciona del grupo que consiste en alcoxi C1-3, y -O-CH2-cicloalquilo C3-6.

Description

DESCRIPCIÓN
Compuestos
Campo de la invención
La presente invención se refiere a compuestos novedosos que inhiben la actividad de las cinasas LRRK2, procesos para su preparación, composiciones que las contienen y su uso en el tratamiento de enfermedades caracterizadas por la actividad de las cinasas LRRK2, por ejemplo, la enfermedad de Parkinson, esclerosis lateral amiotrófica (ELA) y la enfermedad de Alzheimer.
Antecedentes de la invención
La enfermedad de Parkinson (PD, por sus siglas en inglés) es un trastorno neurodegenerativo caracterizado por la degeneración selectiva y la muerte celular de las neuronas dopaminérgicas en la región de sustancia negra del cerebro. Generalmente, se consideraba que la enfermedad de Parkinson era una enfermedad esporádica y de etiología desconocida, pero, en los últimos 15 años, ha habido un desarrollo importante de esta enfermedad y los mecanismos patogénicos asociados. Un área de desarrollo es la comprensión de la proteína cinasa de repetición rica en leucina 2 (LRRK2). Una cantidad de mutaciones contrasentido en el gen de LRRK2 se han vinculado estrechamente con la enfermedad de Parkinson autosómica dominante en estudios familiares (Ver WO2006068492 y WO2006045392; Trinh y Farrer 2013, Nature Reviews in Neurology 9: 445-454; Paisan-Ruiz et al., 2013, J. Parkinson’s Disease 3: 85­ 103). La mutación G2019S en LRRK2 es la mutación contrasentido más frecuente y se asocia al fenotipo clínico que se asemeja en gran medida a la enfermedad de Parkinson esporádica. La mutación G2019S en LRRK2 también está presente en aproximadamente 1.5 % de los casos de enfermedad de Parkinson esporádica (Ver Gilks et al., 2005, Lancet, 365: 415-416). Además de las mutaciones de codificación patogénicas conocidas en LRRK2, se han identificado variantes de codificación de aminoácidos adicionales de LRRK2 que también se asocian al riesgo de desarrollar la enfermedad de Parkinson (Ver Ross et al., 2011 Lancet Neurology 10: 898-908). Además, los estudios de asociación del genoma completo (GWAS, por sus siglas en inglés) han identificado la LRRK2 como un locus de susceptibilidad de la enfermedad de Parkinson, que indica que la LRRK2 también puede ser importante en los casos de enfermedad de Parkinson esporádica sin las mutaciones que producen sustituciones de aminoácidos en la proteína LRRK2. (Ver Satake et al., 2009 Nature Genetics 41:1303-1307; Simon-Sanchez et al 2009 Nature Genetics 41: 1308-1312) .
La LRRK2 es miembro de la familia de proteínas ROCO y todos los miembros de esta familia comparten cinco dominios conservados. La mutación patogénica más común G2019S se produce en el dominio cinasa altamente conservado de LRRK2. Esta mutación confiere un aumento en la actividad de la cinasa LRRK2 en ensayos enzimáticos in vitro de proteínas LRRK2 recombinantes (Ver Jaleel et al., 2007, Biochem J, 405: 307-317) en las proteínas LRRK2 purificadas de las células derivadas del paciente G2019S p D (Ver Dzamko et al., 2010 Biochem. J. 430: 405-413). También se ha demostrado que una mutación patogénica de LRRK2 menos frecuente que confiere sustitución de aminoácidos a un residuo diferente, R1441, eleva la actividad de la cinasa LRRK2 al disminuir la velocidad de la hidrólisis de GTP por medio del dominio GTPasa de LRRK2 (Ver Guo et al., 2007 Exp Cell Res. 313: 3658-3670; West et al., 2007 Hum. Mol Gen. 16: 223-232). Por lo tanto, la evidencia indica que las actividades de la cinasa y la GTPasa de LRRK2 son importantes para la patogénesis, y que el dominio de la cinasa LRRK2 puede regular las funciones generales de LRRK2 (Ver Cookson, 2010 Nat. Rev. Neurosci. 11: 791-797).
Existe evidencia que muestra que el aumento de la actividad de la cinasa LRRK2 se asocia a la toxicidad neuronal en los modelos de cultivo celular (Ver Smith et al., 2006 Nature Neuroscience 9: 1231-1233) y los compuestos inhibidores de cinasas protegen contra la muerte celular mediada por LRRK2 (Ver Lee et al., 2010 Nat. Med. 16: 998-1000).
Se ha descubierto que las células madre pluripotentes inducidas (iPSC, por sus siglas en inglés) derivadas deG2019S en LRRK2 de pacientes con enfermedad de Parkinson presentan defectos en el crecimiento de neuritas y un aumento en la susceptibilidad a la rotenona, que se puede mejorar ya sea por medio de la corrección genética de la mutación G2019S o el tratamiento de las células con inhibidores de moléculas pequeñas de la actividad de la cinasa LRRK2 (Ver Reinhardt et al., 2013 Cell Stem Cell 12: 354-367). El aumento del daño mitocondrial asociado a la mutación G2019S en LRRK2 en las iSPC también se bloquea por medio de la corrección genética de la mutación G2019S (Ver Sanders et al., 2013 Neurobiol. Dis. 62: 381-386).
La evidencia adicional vincula la función y la disfunción de la LRRK2 con las vías lisosómicas de la autofagia Ver Manzoni y Lewis, 2013 Faseb J. 27:3234-3429). Las proteínas LRRK2 confieren defectos en la autofagia mediada por chaperona que tienen un impacto negativo sobre la capacidad de las células para degradar la alfa-sinucleína (Orenstein et al., 2013 Nature Neurosci. 16394-406). En otros modelos celulares, se ha demostrado que los inhibidores de LRRK2 selectivos estimulan la macroautofagia (Ver Manzoni et al., 2013 BBA Mol. Cell Res. 1833: 2900-2910). Estos datos sugieren que los inhibidores de moléculas pequeñas de la actividad de la cinasa LRRK2pueden ser útiles para el tratamiento de enfermedades caracterizadas por defectos en la proteóstasis que se produce a partir de las vías de degradación lisosómica/autofagia anómala que incluyen formas de la enfermedad de Parkinson asociadas a las mutaciones de GBA (Ver Swan y Saunders-Pullman 2013 Curr. Neurol. Neurosci Rep. 13: 368), otras alfasinucleinopatías, tauopatías, enfermedad de Alzheimer (VerLi et al., 2010 Neurodegen. Dis. 7: 265-271) y otras enfermedades neurodegenerativas (Ver Nixon 2013 Nat. Med. 19: 983-997) y la enfermedad de Gaucher (Ver Westbroek et al., 2011 Trends. Mol. Med. 17: 485-493). Además, también se han observado niveles significativamente elevados de ARNm de LRRK2 en los fibroblastos de pacientes con la enfermedad de Niemann-Pick Tipo C (NPC) en comparación con fibroblastos de sujetos normales, lo que indica que la función de LRRK2 anómalas pueden tener un rol importante en los trastornos lisosómicos (Ver Reddy et al., 2006 PLOS One 1 (1):e19 doi: 10.1371/journal.pone.0000019 - información de respaldo, Conjunto de datos S1). Esta observación sugiere que los inhibidores de LRRK2 pueden ser útiles para el tratamiento de NPC.
También se ha informado que la forma mutante G2019S asociada a PD de LRRK2 mejora la fosforilación de Tau asociada a tubulina (VerKawakami et al., 2012 PLoS ONE 7: e30834, doi 10.1371), y se han propuesto modelos de enfermedad en los cuales LRRK2 actúa corriente arriba de los efectos patogénicos de Tau y la alfa-sinucleína (Ver Taymans & Cookson, 2010, BioEssays 32: 227-235). Para respaldar lo anterior, la expresión de LRRK2 se ha asociado a un aumento en la agregación de Tau, insoluble y el aumento de la fosforilación de Tau, en un modelo de ratón transgénico (Ver Bailey et al., 2013 Acta Neuropath. 126:809-827). Se informa que la sobreexpresión de la proteína mutante R1441G en LRRK2 de PD patogénica causa los síntomas de la enfermedad de Parkinson y la hiperfosforilación de Tau en los modelos de ratón transgénicos (Ver Li, Y. et al. 2009, Nature Neuroscience 12: 826­ 828). Por lo tanto, estos datos sugieren que los inhibidores de LRRK2 de la actividad catalítica de la cinasa pueden ser útiles para el tratamiento de las enfermedades tautopáticas caracterizadas por la hiperfosforilación de Tau tales como la enfermedad con granos argirófilos, la enfermedad de Pick, la degeneración corticobasal, parálisis supranuclear progresiva y la demencia frontotemporal hereditaria y el parkinsonismo vinculado al cromosoma 17 (fTd P-17) (Ver Goedert, M y Jakes, R (2005) Biochemica et Biophysica Acta 1739, 240-250). Adicionalmente, los inhibidores de LRRK2 pueden ser útiles para el tratamiento de otras enfermedades caracterizadas por una disminución en los niveles de dopamina, tales como los síntomas de abstinencia/recaída asociados a la adición a las drogas (Ver Rothman et al., 2008, Prog. Brain Res, 172: 385).
Otros estudios también han demostrado que la sobreexpresión de la forma mutante G2019S de LRRK2 confiere defectos en la migración y proliferación de las células neuroprogenitoras de la zona subventricular (SVZ, por sus siglas en inglés) en modelos de ratones transgénicos (Ver Winner et al., 2011 Neurobiol. Dis. 41: 706-716) y reduce la longitud de las neuritas y la ramificación de los modelos de cultivo celular (Ver Dachsel et al., 2010 Parkinsonism & Related Disorders 16: 650-655). Asimismo se informó que los agentes que promueven la migración y proliferación de las células neuroprogenitoras de la SVZ también mejoran los resultados neurológicos tras una lesión isquémica en modelos de roedores de apoplejía (Ver Zhang et al., 2010 J. Neurosci. Res. 88: 3275-3281). Estos hallazgos sugieren que los compuestos que inhiben la actividad anómala de LRRK2 pueden ser útiles para los tratamientos designados para estimular la restauración de las funciones del SNC tras una lesión neuronal, tal como apoplejía isquémica, lesión cerebral traumática, lesión de médula espinal.
También se ha identificado que las mutaciones en LRRK2 se asocian cínicamente a la transición del deterioro cognitivo leve (MCI) a la enfermedad de Alzheimer (Ver WO2007149798). Estos datos sugieren que los inhibidores de la actividad de la cinasa LRRK2 pueden ser útiles para el tratamiento de enfermedades tales como la enfermedad de Alzheimer, otras demencias y trastornos neurodegenerativos relacionados.
También se observa una regulación anómala de las proteínas LRRK2 normales en algunos tejidos de enfermedad y modelos de enfermedad. Los mecanismos normales de control de la traducción de LRRK2 por medio de miR-205 se encuentran perturbados en algunos casos de PD esporádica, donde las disminuciones significativas en los niveles de miR-205 en las muestras cerebrales de PD coinciden con niveles elevados de la proteína LRRK2en esas muestras (Ver Cho et al., (2013) Hum. Mol. Gen. 22: 608-620). Por lo tanto, los inhibidores de LRRK2 se pueden utilizar en el tratamiento de pacientes con PD esporádica con niveles elevados de proteínas LRRK2 normales.
En un modelo experimental de la enfermedad de Parkinson en titíes, se observa una elevación del ARNm de LRRK2 de manera que se correlaciona con el nivel de discinesia inducida por L-Dopa (Ver Hurley, M.J et al., 2007 Eur. J. Neurosci. 26: 171-177). Esto sugiere que los inhibidores de LRRK2 pueden ser útiles para mejorar dichas discinesias.
Se han informado niveles significativamente elevados de ARNm de LRRK2 en muestras de biopsias musculares de pacientes con ELA (Ver Shtilbans et al., 2011 Amyotrophic Lateral Sclerosis 12: 250-256) Se sugiere que los niveles elevados de la actividad de la cinasa LRRK2 pueden ser un aspecto característico de ELA. Por lo tanto, esta observación indica que los inhibidores de LRRK2 pueden ser útiles para el tratamiento de ELA.
También existe evidencia que indica que la actividad de la cinasa LRRK2 puede tener un rol importante en la mediación de las respuestas proinflamatorias microgliales (Ver Moehle et al., 2012, J. Neuroscience 32: 1602-1611). Esta observación sugiere una posible utilidad de los inhibidores de LRRK2 en el tratamiento de los mecanismos neuroinflamatorios anómalos que son responsables de una gama de enfermedades neurodegenerativas, que incluyen enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, esclerosis múltiple, demencia inducida por VIH, esclerosis lateral amiotrófica, apoplejía isquémica, lesión cerebral traumática y lesión de la médula espinal. Parte de la evidencia también indica que tiene un rol importante en la regulación de LRRK2 la diferenciación de progenitores neuronales in vitro (Ver Milosevic, J. et al., 2009 Mol. Neurodegen. 4: 25). Esta evidencia sugiere que los inhibidores de LRRK2 pueden ser útiles en la producción de células progenitoras neuronales in vitro para la aplicación terapéutica consecuente en el tratamiento a base de células de los trastornos del SNC.
Se ha dado a conocer que los pacientes con enfermedad de Parkinson que presentan la mutación G2019S de LRRK2 muestran un aumento de la frecuencia de cánceres no cutáneos, que incluyen cánceres renales, de mama, de pulmón, de próstata así como leucemia mielógena aguda (AML, por sus siglas en inglés). Incluso existe evidencia que muestra que la mutación G2019S en LRRK2 aumenta la actividad catalítica del dominio de la cinasa LRRK2, los inhibidores de moléculas pequeñas de LRRK2 pueden ser útiles en el tratamiento de cánceres, por ejemplo, cáncer de riñón, cáncer de mama, cáncer de pulmón, cáncer de próstata (por ejemplo, tumores sólidos) y cáncer sanguíneo (Ver. AML; Saunders-Pullman et al., 2010, Movement Disorders, 25:2536-2541; Inzelberg et al., 2012 Neurology 78: 781-786). También se ha informado la amplificación y la sobreexpresión de LRRK2 en carcinomas de tiroides y renales papilares, donde la cooperatividad entre LRRK2 y el oncogén MET puede promover el crecimiento celular y la supervivencia del tumor (Ver Looyenga et al., 2011 PNAS 108: 1439-1444.)
Algunos estudios sugirieron la asociación genética de las variantes comunes de LRRK2 con susceptibilidad con respecto a la espondilitis anquilosante (Ver Danoy P, et al., 2010. PLoS Genet.; 6(12):e1001195; y la infección leprosa. (Ver Zhang FR, et al. 2009, N Engl J Med. 361:2609-18.) Estos hallazgos sugieren que los inhibidores de LRRK2 pueden ser útiles en el tratamiento de la espondilitis anquilosante y la infección leprosa.
Un meta-análisis de los estudios de asociación genómica para la enfermedad de Crohn identificaron una cantidad de locus asociados a la enfermedad, inclusive el locus que contenía el gen de LRRK2 (Ver Barrett et al., 2008, Nature Genetics, 40: 955-962). La evidencia también sugirió que LRRK2 en un gen objetivo de IFN-y implicado en las vías de señalización pertinentes para la patogénesis de la enfermedad de Crohn (Ver Gardet et al., 2010, J. Immunology, 185: 5577-5585). Estos hallazgos sugieren que los inhibidores de LRRK2 pueden ser útiles en el tratamiento de la enfermedad de Crohn.
Como un gen objetivo de IFN-y, LRRK2 también puede cumplir una función en los mecanismos de las células T que subyacen otras enfermedades del sistema inmunitario tales como esclerosis múltiple y artritis reumatoide. La posible utilidad adicional de los inhibidores de LRRK2 surge del hallazgo que indica que los linfocitos B constituyen una población principal de células que expresan LRRK2 (Ver Maekawa et al. 2010, BBRC 392: 431-435). Esto sugiere que los inhibidores de LRRK2 pueden ser eficaces para el tratamiento de enfermedades del sistema inmunitario para las cuales la eliminación de las células B es o puede ser eficaz en enfermedades tales como linfomas, leucemias, esclerosis múltiple (Ver Ray et al., 2011 J. Immunol. 230: 109), artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, anemia hemolítica autoinmunitaria, aplasia eritrocitaria pura, púrpura trombocitopénica idiopática (ITP, por sus siglas en inglés), Síndrome de Evans, vasculitis, trastornos vesiculares de la piel, diabetes mellitus tipo 1, síndrome de Sjogren, enfermedad de Devic y miopatías inflamatorias (Ver Engel et al., 2011 Pharmacol. Rev. 63: 127-156; Homam et al., 2010 J. Clin. Neuromuscular Disease 12: 91-102), WO 2012/062783, WO 2014/001973, WO 2013/079496, WO 2011/038572 and WO 2013/139882 relate to inhibitors of LRRK2 .
Compendio de la invención
La presente invención proporciona, en un primer aspecto, un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este
Figure imgf000004_0001
R1 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, y halo;
R2 es alquilo C1-5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, alcoxilo C1-3, halo, y CN
o R2 es -(CRaRb)n-Y, donde
n es 0, 1 o 2,
cada aparición de Ra y Rb es independientemente H o metilo,
Y es
1) un heterociclilo con cuatro a seis miembros opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo;
2) un cicloalquilo C3-6 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo, o
3)
Figure imgf000005_0001
cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con un grupo OH;
R3 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, cicloalquilo C3-6 y halo;
R4 es CH o N;
R5 es H, CN o metilo; y
R6 se selecciona del grupo que consiste en alcoxi C1-3, y -O-CH 2-cicloalquilo C3-6.
En un aspecto adicional de la invención, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este y un portador farmacéuticamente aceptable.
En un aspecto adicional, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad de Parkinson o la enfermedad de Alzheimer.
Descripción detallada de la invención
Lo mencionado anteriormente y otros aspectos de la presente invención se describirán a continuación más detalladamente con respecto a la descripción y las metodologías que se proporcionan en la presente. Debería observarse que la invención puede incorporarse de formas diferentes y no debería interpretarse que esta se limita a las realizaciones establecidas en la presente. En su lugar, estas realizaciones se proporcionan de modo que esta descripción resultará exhaustiva y completa, y trasmitirá a los expertos en la técnica el alcance de la invención en su totalidad.
La terminología utilizada en la descripción de la invención en la presente tiene el único fin de describir realizaciones particulares y no se pretende que limite la invención. Tal como se usan en la descripción de las realizaciones de la invención y las reivindicaciones adjuntas, se pretende que las formas singulares "un", "una" y "el/la" incluyan también las formas plurales, a menos que el contexto indique claramente lo contrario. Además, tal como se usa en la presente, "y/o" se refiere a y comprende cualquier y todas las combinaciones posibles de uno o más de los artículos enumerados asociados. Se comprenderá además que los términos “comprende” y/o “que comprende”, cuando se usan en la presente memoria descriptiva, especifican la presencia de las características, los enteros, las etapas, las operaciones, los elementos y/o los componentes que se indican, pero no excluyen la presencia o incorporación de una o más características, enteros, etapas, operaciones, elementos, componentes y/o grupos adicionales de estos.
Generalmente, la nomenclatura usada en la presente y los procedimientos de laboratorio en química orgánica, química medicinal y biología descritos en la presente son los conocidos y comúnmente empleados en la técnica. A menos que se indique lo contrario, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente tienen generalmente el mismo significado comúnmente entendido por un experto en la técnica a la que pertenece la presente descripción. En caso de que exista una pluralidad de definiciones para un término utilizado en la presente, aquellas en esta sección prevalecerán a menos que se establezca lo contrario.
A. Definiciones
Tal como se usa en la presente, “ alquilo” se refiere a una cadena de hidrocarburos saturados monovalentes con una cantidad especificada de átomos de carbono. Por ejemplo, alquilo C1-3 se refiere a un grupo alquilo con de 1 a 3 átomos de carbono. Alquilo C1-5 se refiere a un grupo alquilo con de 1 a 5 átomos de carbono. Los grupos alquilo pueden ser lineales o ramificados. En algunas realizaciones, los grupos alquilo ramificados pueden tener una, dos o tres ramificaciones. Los grupos alquilo de ejemplo incluyen, de modo no taxativo, metilo, metiletilo, etilo, propilo (n-propilo y isopropilo), metilpropilo, butilo (n-butilo, isobutilo, y t-butilo), pentilo (n-pentilo, isopentilo, y neopentilo), y hexilo.
Tal como se usa en la presente, “ alcoxi” se refiere al grupo -O-alquilo. Por ejemplo, los grupos alcoxilo C1-5 contienen de 1 a 5 átomos de carbono. Los grupos alcoxilo C1-3 contienen de 1 a 3 átomos de carbono. Los grupos alcoxi de ejemplo incluyen, de modo no taxativo, metoxi, etoxi, propoxi, butoxilo, y pentiloxi.
Tal como se usa en la presente, “cicloalquilo” se refiere a un anillo de hidrocarburo monocíclico saturado de 3 a 10 átomos de carbono como átomos miembro en el anillo. Por ejemplo, cicloalquilo C3-6 contiene 3 a 6 átomos de carbono como átomos miembro en el anillo. Por ejemplo, cicloalquilo C4-6 contiene 4 a 6 átomos de carbono como átomos miembro en el anillo. Los ejemplos de cicloalquilo incluyen ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo y ciclohexilo.
Tal como se usa en la presente, "exceso enantiomérico" o "ee" es el exceso de un enantiómero sobre el otro expresado como un porcentaje. Como resultado, debido a que ambos enantiómeros están presentes en cantidades iguales en una mezcla racémica, el exceso enantiomérico es cero (ee = 0 %). Sin embargo, si un enantiómero está enriquecido de modo tal que este constituye 95 % del producto, el exceso enantiomérico es 90 % (la cantidad del enantiómero enriquecido, 95 %, menos la cantidad del otro enantiómero, 5 %).
Tal como se usa en la presente, "halógeno" se refiere a flúor (F), cloro (Cl), bromo (Br) o yodo (I). “ Halo” se refiere a los radicales de halógeno: fluoro (-F), cloro (-Cl), bromo (-Br) o yodo (-I).
Tal como se usa en la presente, “haloalquilo" se refiere a un grupo alquilo, tal como se definió anteriormente, con uno o más átomos de halógeno que se seleccionan de F, Cl, Br y I, que se sustituyen en cualquier o todos los átomos de carbono del grupo alquilo por medio del reemplazo de los átomos de hidrógeno unidos a los átomos de carbono. Por ejemplo, haloalquilo C1-3 se refiere a un grupo alquilo C1-3 sustituido con uno o más átomos de halógeno. En algunas realizaciones, “haloalquilo” se refiere a un grupo alquilo sustituido con uno o más átomos de halógeno que se seleccionan independientemente de F y Cl. Los grupos haloalquilo de ejemplo incluyen, de modo no taxativo, clorometilo, bromoetilo, trifluorometilo, diclorometilo, difluorometilo y difluoroetilo.
Tal como se usa en la presente, “heterociclilo con cuatro a seis miembros” se refiere a un anillo monoheterocíclico con cuatro a seis miembros saturado que contiene uno o dos heteroátomos que se seleccionan independientemente de N, S y O. Los ejemplos de heterociclilos con cuatro a seis miembros incluyen, de modo no taxativo, tetrahidro-2H-piranilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxetanilo, morfolinilo, y azetidinilo.
Tal como se usa en la presente, “sustituido” con referencia a un grupo indica que uno o más átomos de hidrógeno unidos a un átomo miembro (por ejemplo, átomo de carbono) dentro del grupo se remplazan por un sustituyente que se selecciona del grupo de sustituyentes definidos. Se entenderá que el término "sustituido" incluye la condición implícita de que dicha sustitución concuerda con la valencia permitida del átomo sustituido y del sustituyente, y que la sustitución produce un compuesto estable, (es decir, uno que no se ha sometido espontáneamente a transformación tal como por reorganización, ciclación, o eliminación y que es suficientemente sólido como para sobrevivir al aislamiento de una mezcla de reacción). Cuando se establece que un grupo puede contener uno o más sustituyentes, uno o más (según corresponda) átomos miembro dentro del grupo pueden estar sustituidos. Además, un átomo miembro simple dentro del grupo puede estar sustituido por más de un sustituyente siempre que dicha sustitución concuerde con la valencia permitida del átomo. Los sustituyentes de ejemplo incluyen, de modo no taxativo, alquilo, alcoxilo, halo, haloalquilo, OH, CN, morfolinilo y oxetanilo. Los sustituyentes adecuados se definen en la presente para cada grupo sustituido u opcionalmente sustituido.
Tal como se usa en la presente, "opcionalmente sustituido" indica que un grupo, tal como alquilo, heterociclilo, cicloalquilo,
Figure imgf000006_0001
puede estar sustituido o no sustituido con uno o más sustituyentes tal como se definió.
Tal como se usa en la presente, el término "enfermedad" se refiere a cualquier alteración en el estado del cuerpo o de algunos de los órganos, que interrumpe o perturba el cumplimiento de las funciones y/o causa síntomas tales como, molestias, disfunción, aflicción o, incluso, la muerte a la persona afligida o aquellos que se encuentran en contacto con una persona. Una enfermedad también puede incluir un mal, descomposición, achaque, dolencia, trastorno, padecimiento, sufrimiento, interdisposición y/o afección.
Tal como se usa en la presente, “tratar” “que trata” o “tratamiento” en cuanto a una enfermedad se refiere a: (1) mejorar la enfermedad o una o más de las manifestaciones biológicas de la enfermedad, (2) interferir con (a) uno o más puntos en la cascada biológica que conduce a la enfermedad o es responsable de esta o (b) una o más de las manifestaciones biológicas de la enfermedad, (3) aliviar uno o más de los síntomas o efectos asociados a la enfermedad, (4) enlentecer la evolución de la enfermedad o una o más de las manifestaciones biológicas de la enfermedad y/o (5) disminuir la probabilidad de gravedad de una enfermedad o las manifestaciones biológicas de la enfermedad.
Tal como se usa en la presente, “prevenir”, “que previene” o “prevención” se refiere a la administración profiláctica de un fármaco para disminuir la probabilidad de la aparición o retrasar la aparición de una enfermedad o la manifestación biológica de esta.
Tal como se usa en la presente, "sujeto" se refiere a un sujeto mamífero (por ejemplo, perro, gato, caballo, vaca, oveja, cabra, mono, etc.), y sujetos humanos que incluyen sujetos femeninos y masculinos, y que incluyen sujetos neonatales, lactantes, juveniles, adolescentes, adultos y geriátricos, e incluyen adicionalmente, varias razas y etnias, que incluyen, de modo no taxativo, blanca, negra, asiática, indoamericana e hispana.
Tal como se usa en la presente, "sal/es farmacéuticamente aceptable/s" se refiere a la sal o las sales que retienen la actividad biológica deseada del compuesto previsto y presentan efectos toxicológicos no deseados mínimos. Estas sales farmacéuticamente aceptables se pueden preparar in situ durante el aislamiento final y la purificación del compuesto, o mediante la reacción por separado del compuesto purificado en su forma de ácido libre o base libre con una base o ácido adecuado, respectivamente.
Tal como se usa en la presente, “cantidad terapéuticamente eficaz” con referencia a un compuesto de la invención u otro agente farmacéuticamente activo se refiere a una cantidad del compuesto suficiente para tratar o prevenir la enfermedad del paciente pero lo suficientemente baja para evitar efectos secundarios graves (con una relación beneficio/riesgo razonable) dentro del alcance del criterio médico sensato. Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto variará según el compuesto particular elegido (por ejemplo, se considera la potencia, eficacia y semivida del compuesto); la vía de administración elegida; la enfermedad que se tratará; la gravedad de la enfermedad que se tratará; la edad, tamaño, peso y enfermedad física del paciente que se tratará; la historia clínica del paciente que se tratará; la duración del tratamiento; la naturaleza de la terapia simultánea; el efecto terapéutico deseado; y factores similares, pero, sin embargo, puede ser determinada de forma rutinaria por el experto en la técnica.
B. Compuestos
Esta invención proporciona, en un primer aspecto, un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este
Figure imgf000007_0001
donde
R1 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, y halo;
R2 es alquilo C1-5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, alcoxilo C1-3, halo, y CN
o R2 es -(CRaRb)n-Y, donde
n es 0, 1 o 2,
cada aparición de Ra y Rb es independientemente H o metilo,
Y es
1) un heterociclilo con cuatro a seis miembros opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo;
2) un cicloalquilo C3-6 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo, o
3)
Figure imgf000008_0001
cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con un grupo OH;
R3 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, cicloalquilo C3-6 y halo; R4 es CH o N;
R5 es H, CN o metilo; y
R6 se selecciona del grupo que consiste en alcoxi C1-3, y -O-CH 2-cicloalquilo C3-6.
En una realización, la presente invención se refiere a un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este
Figure imgf000008_0002
donde
R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, alquilo C1-3 , y halo;
R2 es alquilo C1-5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, alcoxilo C1-3 , halo, y CN,
o R2 es -(CH2)n-Y, donde
n es 0, 1 o 2,
Y es
1) un heterociclilo con cuatro a seis miembros opcionalmente sustituido con uno o dos (o uno, dos o tres) sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3 , halo, OH y oxetanilo,
2) un cicloalquilo C3-6 opcionalmente sustituido con uno o dos (o uno, dos o tres) sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3 , halo, OH o
3)
Figure imgf000008_0003
cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con un grupo OH;
R3 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, cicloalquilo C3-6 y halo;
R4 es CH o N;
R5 es H, CN o metilo; y
R6 se selecciona del grupo que consiste en alcoxilo C1-3, y -O-CH 2-cicloalquilo C3-6.
En una realización, la presente invención se refiere a un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este
Figure imgf000009_0001
donde
R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, y halo;
R2 es alquilo C1-5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, alcoxilo C1-3, halo, y CN
o R2 es -(CRaRb)n-Y, donde
n es 0, 1 o 2,
cada aparición de Ra y Rb es independientemente H o metilo,
Y es
1) un cicloalquilo C3-6 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo, o
2)
Figure imgf000009_0002
cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con un grupo OH;
R3 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, cicloalquilo C3-6 y halo;
R4 es CH o N;
R5 es H, CN o metilo; y
R6 se selecciona del grupo que consiste en alcoxi C1-3, y -O-CH 2-cicloalquilo C3-6.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I), donde R1 se selecciona del grupo que consiste en H, alquilo C1-3, y halo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I), donde R1 es H, metilo o Cl, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I), donde R1 es H o metilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I), donde R1 es H, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es alquilo C1-5opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, alcoxilo C1-3, halo y CN, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es alquilo Ci-5opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, metoxilo, Cl, F y CN, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es alquilo C1-5opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, metoxilo, Cl, F y CN, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CRaRb)n-Y, donde Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3, y morfolinilo.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piranilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxetanilo, y morfolinilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piranilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxetanilo, y morfolinilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en azetidinilo, tetrahidro-2H-piranilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxetanilo, y morfolinilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piranilo, piperidinilo y morfolinilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en azetidin-1-ilo, tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, pyirrolidin-1-ilo, pirrolidin-3-ilo, piperidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, oxetan-3-ilo, morfolin-2-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, pyirrolidin-1-ilo, pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, oxetan-3-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, pyirrolidin-1-ilo, pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, oxetan-3-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-4-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con un sustituyente que se selecciona del grupo que consiste en metilo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-4-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con un sustituyente que se selecciona del grupo que consiste en metilo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es cicloalquilo C3-6 opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo y OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es cicloalquilo C3-6 opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo y OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es cicloalquilo C4-6 opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo y OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es cicloalquilo C4-6 opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo y OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, e Y se selecciona del grupo que consiste en ciclobutanilo, ciclopentanilo y ciclohexilo, donde ciclobutanilo, ciclopentanilo o ciclohexilo están opcionalmente sustituidos con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en metilo y OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, e Y se selecciona del grupo que consiste en ciclobutanilo, ciclopentanilo y ciclohexilo, donde ciclobutanilo, ciclopentanilo o ciclohexilo están opcionalmente sustituidos con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en metilo y OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, e Y se selecciona del grupo que consiste en ciclobutanilo, ciclopentanilo y ciclohexilo, donde ciclobutanilo, ciclopentanilo o ciclohexilo están opcionalmente sustituidos con un sustituyente de OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, pyirrolidin-1 -ilo, pirrolidin-3-ilo, piperidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, oxetan-3-ilo, morfolin-2-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, piperidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, morfolin-2-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en halo y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es
Figure imgf000012_0001
cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con un grupo OH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 se selecciona del grupo que consiste en alquilo C1-3 y halo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 se selecciona del grupo que consiste en H, metilo, ciclopropilo y Cl, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 se selecciona del grupo que consiste en metilo, ciclopropilo y Cl, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 es Cl o metilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 es metilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R4 es CH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R4 es N, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R5 es H o metilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R5 es H, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R6 es alcoxi C1-3 , o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R6 es etoxi o -O-CH 2-ciclopropilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos. En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R6 es etoxi, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde
R1 se selecciona del grupo que consiste en H, metilo y Cl;
R2 es alquilo C1-5 opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, alcoxilo C1-3 , halo, y CN y
o R2 es -(CH2)n-Y, donde
n es 0 o 2,
Y es
(1) un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piranilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxetanilo y morfolinilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3 , halo, OH y oxetanilo,
(2) un cicloalquilo C4-6 opcionalmente sustituido con uno o dos sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH o
(3)
Figure imgf000013_0001
cada uno de los cuales está opcionalmente sustituido con un grupo OH;
R3 se selecciona del grupo que consiste en H, Cl, alquilo C1-3 , y ciclopropilo;
R4 es CH;
R5 es H o metilo; y
R6 es etoxi;
o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde
R1 es H;
R2 es alquilo C1-5 opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en OH, metoxi, Cl, F y CN,
o R2 es -(CH2)n-Y, donde
n es 0 o 2,
Y es
(1) un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en pirrolidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-4-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con un sustituyente que se selecciona del grupo que consiste en alquilo metilo, OH y oxetanilo, o
(2) un cicloalquilo C4-6que se selecciona del grupo que consiste en ciclobutanilo, ciclopentanilo y ciclohexilo, donde el cicloalquilo está opcionalmente sustituido con un sustituyente de OH,
R3 es metilo;
R4 es CH;
R5 es H; y
R6 es etoxi;
o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde
R1 es H,
R2 es -(CH2)n-Y, donde n es 0, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en piperidin-4-ilo, piperidin-3-ilo y morfolin-2-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan del grupo que consiste en metilo, OH, halo y oxetanilo,
R3 es halo,
R4 es CH,
R5 es H, y
R6 es alcoxilo C1-3 ,
o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (I), donde R1 es H, R3 es alquilo C1-3 , R4 es CH, y R5 es H, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de cualquiera de los Ejemplos 1 a 80, una forma de base libre, una forma de ácido libre o una sal (por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable) de estos. En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) es un compuesto de cualquiera de los Ejemplos 81 a 151, una forma de base libre, una forma de ácido libre o una sal (por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable) de estos. En una realización, el compuesto de Fórmula (I) es un compuesto de cualquiera de los Ejemplos 1 a 151 o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) es
Figure imgf000014_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) es
Figure imgf000014_0002
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) es
Figure imgf000014_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) es
Figure imgf000014_0004
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) es una mezcla de
Figure imgf000014_0005
o una sal farmacéuticamente aceptable de este, y
Figure imgf000015_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) tiene la estructura de la Fórmula (IA)
Figure imgf000015_0002
R1 se selecciona independientemente del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, y halo;
R2 es -(CRaRb)n-Y, donde n es 0, 1 o 2, cada aparición de Ra y Rb son independientemente H o metilo, e Yes un heterociclilo con cuatro a seis miembros opcionalmente sustituido con uno o más sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH, oxetanilo, haloalquilo C1-3 y morfolinilo; R3 se selecciona del grupo que consiste en H, alcoxilo C1-3, alquilo C1-3, cicloalquilo C3-6 y halo;
R4 es CH o N;
R5 es H, CN o metilo; y
R6 se selecciona del grupo que consiste en alcoxi C1-3, y -O-CH 2-cicloalquilo C3-6,
o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA), donde R1 es H, metilo o Cl, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA), donde R1 es H, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, 1 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en azetidinilo, tetrahidro-2H-piranilo, tetrahidrofuranilo, pirrolidinilo, piperidinilo, oxetanilo, y morfolinilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piranilo, piperidinilo y morfolinilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en azetidin-1-ilo, tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, pyirrolidin-1-ilo, pirrolidin-3-ilo, piperidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, oxetan-3-ilo, morfolin-2-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, pyirrolidin-1-ilo, pirrolidin-3-ilo, piperidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, oxetan-3-ilo, morfolin-2-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en alquilo C1-3, halo, OH y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R2 es -(CH2)n-Y, n es 0 o 2, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en tetrahidro-2H-piran-4-ilo, tetrahidro-2H-piran-3-ilo, tetrahidrofuran-3-ilo, piperidin-3-ilo, piperidin-4-ilo, morfolin-2-ilo y morfolin-4-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan independientemente del grupo que consiste en halo y oxetanilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 se selecciona del grupo que consiste en alquilo C1-3 y halo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 se selecciona del grupo que consiste en metilo y Cl, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En determinada realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R3 es metilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R4 es CH, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R5 es H o metilo, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R5 es H, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R6 es alcoxi C1-3, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En otra realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde R6 es etoxi, o sales farmacéuticamente aceptables de estos.
En una realización, la presente invención se refiere a compuestos de la Fórmula (IA) y cualquiera de las realizaciones aplicables anteriores, donde
R1 es H,
R2 es -(CH2)n-Y, donde n es 0, e Y es un heterociclilo con cuatro a seis miembros que se selecciona del grupo que consiste en piperidin-4-ilo, piperidin-3-ilo y morfolin-2-ilo, donde el heterociclilo está opcionalmente sustituido con uno, dos o tres sustituyentes que se seleccionan del grupo que consiste en metilo, OH, halo y oxetanilo,
R3 es halo,
R4 es CH,
R5 es H, y
R6 es alcoxilo C1-3,
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I) o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000017_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000018_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de estos.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000018_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000018_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000019_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000019_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000019_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000020_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000020_0002
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000020_0003
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000020_0004
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
En una realización, el compuesto de la Fórmula (I o la Fórmula (1A) es
Figure imgf000021_0001
o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
Además de la forma de base libre y la forma de ácido libre de los compuestos que se describen en la presente, la forma de sal de los compuestos también se encuentra dentro del alcance de la presente invención. Las sales o sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos que se describen en la presente se pueden preparar in situ durante el aislamiento final y la purificación del compuesto, o mediante la reacción por separado del compuesto purificado en su forma de ácido libre o forma de base libre con una base o ácido adecuado, respectivamente. Para consultar un análisis de las sales farmacéuticamente aceptables ver Berge et al, J. Pharm, Sci., 66, 1-19, 1977; P L Gould, International Journal of Pharmaceutics, 33 (1986), 201-217; y Bighley et al, Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, Marcel Dekker Inc, Nueva York 1996, Volumen 13, página 453-497.
En determinadas realizaciones, los compuestos de la presente invención pueden contener un grupo funcional ácido, que es suficientemente ácido para formar sales. Las sales representativas incluyen sales metálicas farmacéuticamente aceptables tales como sales de sodio, potasio, litio, calcio, magnesio, aluminio y zinc; carbonatos y bicarbonatos de un catión metálico farmacéuticamente aceptable tal como sodio, potasio, litio, calcio, magnesio, aluminio y zinc; aminas primarias, secundarias o terciarias farmacéuticamente aceptables que incluyen aminas alifáticas, aminas aromáticas, diaminas alifáticas e hidroxialquilaminas tales como metilamina, etilamina, dietilamina, trietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina y ciclohexilamina.
En determinadas realizaciones, los compuestos de la presente invención pueden contener un grupo funcional base y por lo tanto, son capaces de formar sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables por medio del tratamiento con un ácido adecuado. Los ácidos adecuados incluyen ácidos inorgánicos farmacéuticamente aceptables y ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables. Estas sales pueden ser cristalinas o amorfas. Las sales de adición de ácido farmacéuticamente aceptables de ejemplo incluyen clorhidrato, bromhidrato, nitrato, metilnitrato, sulfato, bisulfato, sulfamato, fosfato, acetato, hidroxiacetato, fenilacetato, propionato, butirato, isobutirato, valerato, maleato, hidroximaleato, acrilato, fumarato, malato, tartrato, citrato, salicilato, p-aminosaliciclato, glicolato, lactato, heptanoato, ftalato, oxalato, succinato, benzoato, o-acetoxibenzoato, clorobenzoato, metilbenzoato, dinitrobenzoato, hidroxibenzoato, metoxibenzoato, mandelato, tanato, formiato, estearato, ascorbato, palmitato, oleato, piruvato, pamoato, malonato, laurato, glutarato, glutamato, estolato, metanosulfonato (mesilato), etanosulfonato (esilato), 2-hidroxietanosulfonato, bencenosulfonato (besilato), p-aminobencenosulfonato, p-toluenosulfonato (tosilato), y naftalen-2-sulfonato. En algunas realizaciones, las sales farmacéuticamente aceptables incluyen L-tartrato, etanodisulfonato (edisilato), sulfato, fosfato, p-toluenosulfonato (tosilato), sal de clorhidrato, metanosulfonato, citrato, fumarato, bencenosulfonato, maleato, hidrobromato, L-lactato, malonato, y S-canfor-10-sulfonato. En determinadas realizaciones, algunas de estas sales forman solvatos. En determinadas realizaciones, algunas de estas sales son cristalinas.
Los compuestos de la Fórmula (I), las sales (por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables) de estos pueden existir en formas estereoisoméricas (por ejemplo, contienen uno o más átomos de carbono asimétricos). Los estereoisómeros individuales (enantiómeros y diastereómeros) y mezclas de estos se incluyen en el alcance de la presente invención. La invención también abarca los estereoisómeros individuales de los compuestos de la Fórmula (I), las sales (por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables) de estos como mezclas con estereoisómeros de estos en las cuales se invierten uno o más centros quirales. De manera similar, se entiende que los compuestos de la Fórmula (I), las sales (por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables) de estos pueden existir en formas tautoméricas distintas a la que se muestran en la fórmula y estas también se encuentran comprendidos por el alcance de la presente invención. Se entiende que la presente invención incluye todas las combinaciones y subconjuntos de los grupos particulares definidos anteriormente en la presente. El alcance de la presente invención incluye mezclas de estereoisómeros, así como también enantiómeros purificados o mezclas enriquecidas de manera enantiomérica o diastereomérica.
Los isómeros individuales de los compuestos de la Fórmula (I), las sales (por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables) de estos, así como cualquier mezcla parcial o totalmente equilibrada de estos se encuentran incluidos dentro del alcance de la invención. Las diferentes formas estereoisoméricas se pueden separar o disolver nuevamente con respecto a las demás por medio de métodos convencionales o cualquier estereoisómero determinado se puede obtener mediante métodos de síntesis convencionales o síntesis asimétrica o estereoespecífica.
La invención también incluye sales y compuestos marcados isotópicamente, que son idénticos a los compuestos de la Fórmula (I) o sales de estos, salvo por el hecho de que se reemplazan uno o más átomos por un átomo con una masa atómica o un número de masa diferente a la masa atómica o el número de masa que se encuentra más comúnmente en la naturaleza. Los ejemplos de isótopos que se pueden incorporar a los compuestos de la Fórmula (I) o sales de estos son isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno, flúor, tales como 3H, 11C, 14C y 18F. Dichos compuestos de la Fórmula (I) o sales de estos marcados isotópicamente son útiles en los ensayos de distribución tisular del fármaco y/o sustrato. Por ejemplo, los isótopos 11C y 18F son útiles en PET (tomografía de emisión de positrones). La PET es útil para la imaginología de cerebro. Los compuestos de la Fórmula (I) o sales de estos marcados isotópicamente en general se pueden preparar mediante los siguientes procedimientos, mediante la sustitución de un reactivo marcado isotópicamente fácilmente disponible con un reactivo no marcado isotópicamente. En una realización, los compuestos de la Fórmula (I) o sales de estos no se encuentran marcados isotópicamente.
Determinados compuestos de la Fórmula (I) o sales de estos pueden existir en forma sólida o líquida. En el estado sólido, los compuestos de la Fórmula (I) o sales de estos puede existir en forma cristalina o no cristalina, o como mezcla de estas. Para los compuestos de la Fórmula (I) o sales que se encuentran en forma cristalina, el experto en la técnica apreciará que se pueden formar solvatos farmacéuticamente aceptables donde las moléculas de solvente se incorporan a la estructura cristalina durante la cristalización. Los solvatos pueden implicar solventes no acuosos tales como etanol, isopropanol, DMSO, ácido acético, etanolamina, y acetato de etilo, o pueden implicar agua como el solvente que se incorpora en la estructura cristalina. Los solvatos, donde el solvente que se incorpora a la estructura cristalina es agua, típicamente se denominan “hidratos”. Los hidratos incluyen hidratos estequiométricos así como también composiciones que contienen cantidades variables de agua. La invención incluye todos dichos solventes.
El experto en la técnica apreciará además que determinados compuestos de la Fórmula (I), sales o solvatos farmacéuticamente aceptables de estos que existen en forma cristalina, inclusive los diversos solvatos de estos, pueden presentar polimorfismo (es decir, la capacidad de ocurrir en diferentes estructuras cristalinas). Estas diferentes formas cristalinas se conocen típicamente como “polimorfos”. Los polimorfos tienen la misma composición química pero difieren en el empaquetado, la disposición geométrica, y otras propiedades descriptivas del estado sólido cristalino. Entonces, los polimorfos pueden tener diferentes propiedades físicas tales como propiedades de forma, densidad, dureza, deformabilidad, estabilidad y disolución. Los polimorfos típicamente muestran diferentes puntos de fusión, espectros IR, y patrones de difracción en polvo de rayos X, que se pueden usar para la identificación. El experto en la técnica entenderá que se pueden producir diferentes polimorfos, por ejemplo, al cambiar o ajustar las condiciones de reacción o los reactivos, que se utilizan en la elaboración del compuesto. Por ejemplo, los cambios en la temperatura, la presión o el solvente pueden producir polimorfos. Además, un polimorfo se puede convertir espontáneamente en otro polimorfo en determinadas condiciones. La invención incluye todos dichos polimorfos.
El experto en la técnica también entenderá que la presente invención puede contener varias formas deuteradas de los compuestos de la Fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de estos. Cada átomo de hidrógeno disponible unido a un átomo de carbono se puede reemplazar independientemente con un átomo de deuterio. Un experto en la técnica sabrá cómo sintetizar las formas deuteradas de los compuestos de la Fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de estos. Se pueden emplear materiales de partida deuterados comercialmente disponibles en la preparación de formas deuteradas de los compuestos de la Fórmula (I), o sales farmacéuticamente aceptables de estos, o se pueden sintetizar utilizando técnicas convencionales que emplean reactivos deuterados (por ejemplo, aluminodeuteruro de litio).
Los compuestos que se describen en la presente, sus sales (por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables), formas deuteradas, solvatos o hidratos de estos, pueden existir en una o más formas polimórficas. Por lo tanto, en un aspecto adicional, la invención proporciona un polimorfo de un compuesto definido en la presente, sus sales (por ejemplo, sales farmacéuticamente aceptables) o un polimorfo de un solvato o hidrato de un compuesto descrito en la presente o una sal (por ejemplo, sal farmacéuticamente aceptable) de este.
Tal como se usa en la presente, las expresiones “compuesto/s de la invención” o “compuesto/s de la presente invención” se refieren a un compuesto de la Fórmula (I), tal como se define en la presente, en cualquier forma, es decir, cualquier forma de sal o no sal-(por ejemplo, como una forma de ácido o base libre, o como una sal, por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable de este), forma deuterada o cualquier forma física de este (por ejemplo, incluso las formas no sólidas-(por ejemplo, formas líquidas o semisólidas), y formas sólidas (por ejemplo, formas amorfas o cristalinas, formas polimórficas específicas, formas solvatadas, que incluyen formas hidratadas (por ejemplo, mono-, di- y hemi- hidratos)), y mezclas de varias formas.
Por consiguiente, un compuesto de la invención incluye un compuesto de la Fórmula (I), o sal de este, por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable de este. Los compuestos representativos de la presente invención incluyen los compuestos específicos descritos.
C. Métodos de uso
Los compuestos de la Fórmula (I) o sales farmacéuticamente aceptables de este son inhibidores de la actividad de la cinasa LRRK2 y, por lo tanto, se cree que tienen un uso potencial en el tratamiento o la prevención de enfermedades neurológicas. Las enfermedades neurológicas de ejemplo incluyen, de modo no taxativo, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, demencia (que incluye demencia de cuerpos de Lewy y demencia vascular, demencia inducida por VIH), esclerosis lateral amiotrófica (ELA), disfunción de la memoria relacionada con la edad, deterioro cognitivo leve, enfermedad con granos argirófilos, la enfermedad de Pick, la degeneración corticobasal, parálisis supranuclear progresiva y la demencia frontotemporal hereditaria y el parkinsonismo vinculado al cromosoma 17 (FTDP-17), síntomas de abstinencia/recaída asociados a la adición a las drogas, disquinesia inducida por L-Dopa, apoplejía isquémica, lesión cerebral traumática y lesión de la médula espinal. Otros trastornos incluyen, de modo no taxativo, trastornos lisosómicos (por ejemplo, enfermedad de Niemann-Pick Tipo C, enfermedad de Gaucher), enfermedad de Crohn, cáncer de tiroides, renal (que incluye renal papilar), de mama, pulmonar y de próstata, leucemias (que incluyen leucemia mielógena aguda (AML)), linfomas, leucemias, esclerosis múltiple, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, anemia hemolítica autoinmunitaria, aplasia eritrocitaria pura, púrpura trombocitopénica idiopática (ITP), Síndrome de Evans, vasculitis, trastornos vesiculares de la piel, diabetes mellitus tipo 1, síndrome de Sjogren, enfermedad de Devic y miopatías inflamatorias.
Un aspecto de la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para utilizar en una terapia. En una realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento o la prevención de la enfermedad de Parkinson. En una realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
Un aspecto adicional de la invención proporciona el uso de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este en forma de un medicamento para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de Parkinson. Un aspecto adicional de la invención proporciona el uso de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de la enfermedad de Parkinson.
También se describen métodos para el tratamiento o la prevención de la enfermedad de Parkinson, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este. En determinadas realizaciones, el sujeto es un ser humano.
En el contexto de la presente invención, el tratamiento de la enfermedad de Parkinson se refiere al tratamiento de la enfermedad de Parkinson esporádica y/o una enfermedad de Parkinson familiar. En una realización, la enfermedad de Parkinson familiar incluye pacientes que expresan la cinasa LRRK2 que presenta la mutación G2019S o la mutación R1441G. En una realización adicional, la enfermedad de Parkinson familiar incluye pacientes que expresan la cinasa LRRK2 que presenta la mutación G2019S, la mutación N1437H, la mutación R1441G, la mutación R1441C, la mutación R1441H, la mutación Y1699C , la mutación S1761R o la mutación I2020T para la enfermedad de Parkinson. En otra realización, la enfermedad de Parkinson esporádica incluye pacientes que expresan la cinasa LRRK2 que presenta la mutación G2019S, la mutación N1437H, la mutación R1441G, la mutación R1441C, la mutación R1441H, la mutación Y1699C , la mutación S1761R o la mutación I2020T para la enfermedad de Parkinson. En otra realización, la enfermedad de Parkinson incluye pacientes que expresan la cinasa LRRK2 que presenta otras mutaciones codificante, tales como G2385R o polimorfismos de un solo nucleótido no codificantes en el locus de LRRK2 se asocian a la enfermedad de Parkinson. En una realización, el tratamiento de la enfermedad de Parkinson se refiere al tratamiento de la enfermedad de Parkinson familiar e incluye pacientes que expresan cinasa LRRK2 que presenta la mutación G2019S. En otra realización, la enfermedad de Parkinson incluye pacientes que expresan niveles altos anómalos de la cinasa LRRK2 normal. El tratamiento de la enfermedad de Parkinson puede ser sintomático o puede modificar la enfermedad. En una realización, el tratamiento de la enfermedad de Parkinson se refiere al tratamiento sintomático. En una realización, el tratamiento de la enfermedad de Parkinson se refiere a modificar la enfermedad.
Los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles para tratar pacientes identificados como propensos a la evolución de parkinsonismo grave por medio de una o más características leves asociadas a la evolución de la enfermedad, tales como la historia familiar, deterioro del olfato, constipación, defectos cognitivos, indicadores biológicos o de la marcha de la evolución de la enfermedad, obtenidas a partir de tecnologías moleculares, bioquímicas, inmunológicas o de imaginología. En este contexto, el tratamiento puede ser sintomático o modificar la enfermedad.
En el contexto de la presente invención, el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer se refiere al tratamiento de la enfermedad de Alzheimer esporádica y/o una enfermedad de Alzheimer familiar. El tratamiento de la enfermedad de Alzheimer puede ser sintomático o puede modificar la enfermedad. En una realización, el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer se refiere al tratamiento sintomático. De manera similar, el tratamiento de la demencia (que incluye demencia de cuerpos de Lewy, demencia vascular y demencia inducida por VIH), disfunción de la memoria relacionada con la edad, deterioro cognitivo leve, enfermedad con granos argirófilos, esclerosis lateral amiotrófica (ELA), enfermedad de Pick, degeneración corticobasal, parálisis supranuclear progresiva, la demencia frontotemporal hereditaria y el parkinsonismo vinculado al cromosoma 17 (FTDP-17), apoplejía isquémica, lesión cerebral traumática, lesión de la médula espinal, trastornos lisosómicos (por ejemplo, enfermedad de Niemann-Pick Tipo C, enfermedad de Gaucher), enfermedad de Crohn, cáncer de tiroides, renal (que incluye renal papilar), de mama, pulmonar y de próstata, leucemias (que incluyen leucemia mielógena aguda (AML)), linfomas, leucemias, esclerosis múltiple, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, anemia hemolítica autoinmunitaria, aplasia eritrocitaria pura, púrpura trombocitopénica idiopática (ITP), Síndrome de Evans, vasculitis, trastornos vesiculares de la piel, diabetes mellitus tipo 1, síndrome de Sjogren, enfermedad de Devic y miopatías inflamatorias, puede ser sintomático o modificar la enfermedad. En algunas realizaciones, el tratamiento de la demencia (que incluye demencia de cuerpos de Lewy, demencia vascular y demencia inducida por VIH), disfunción de la memoria relacionada con la edad, deterioro cognitivo leve, enfermedad con granos argirófilos, esclerosis lateral amiotrófica (ELA), enfermedad de Pick, degeneración corticobasal, parálisis supranuclear progresiva, la demencia frontotemporal hereditaria y el parkinsonismo vinculado al cromosoma 17 (FTDP-17), apoplejía isquémica, lesión cerebral traumática, lesión de la médula espinal, trastornos lisosómicos (por ejemplo, enfermedad de Niemann-Pick Tipo C, enfermedad de Gaucher), enfermedad de Crohn, cáncer de tiroides, renal (que incluye renal papilar), de mama, pulmonar y de próstata, leucemias (que incluyen leucemia mielógena aguda (AML)), linfomas, leucemias, esclerosis múltiple, artritis reumatoide, lupus eritematoso sistémico, anemia hemolítica autoinmunitaria, aplasia eritrocitaria pura, púrpura trombocitopénica idiopática (ITP), Síndrome de Evans, vasculitis, trastornos vesiculares de la piel, diabetes mellitus tipo 1, síndrome de Sjogren, enfermedad de Devic y miopatías inflamatorias, se refiere al tratamiento sintomático.
También se describen métodos para el tratamiento de la espondilitis anquilosante y/o infección leprosa, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este. En algunas realizaciones, el sujeto es un ser humano.
En el contexto de la presente invención, el tratamiento de los síntomas de abstinencia/recaída asociados a la adición a las drogas y la disquinesia inducida por L-Dopa se refiere al tratamiento sintomático. En un aspecto adicional, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en el tratamiento de los trastornos anteriores, por ejemplo, la enfermedad de Parkinson. En algunas realizaciones, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este para su uso en la prevención de la enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, demencia (que incluye demencia de cuerpos de Lewy, demencia vascular y demencia inducida por VIH), disfunción de la memoria relacionada con la edad, deterioro cognitivo leve, enfermedad con granos argirófilos, esclerosis lateral amiotrófica (ELA), enfermedad de Pick, degeneración corticobasal, parálisis supranuclear progresiva, la demencia frontotemporal hereditaria y el parkinsonismo vinculado al cromosoma 17 (FTDP-17), trastornos lisosómicos (por ejemplo, enfermedad de Niemann-Pick Tipo C, enfermedad de Gaucher), o cáncer renal, de mama, pulmonar, de próstata así como leucemia mielógena aguda (AML). En una realización, la invención proporciona un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este, para su uso en la prevención de la enfermedad de Parkinson.
También se describe un método para el tratamiento de los trastornos anteriores, por ejemplo, la enfermedad de Parkinson en mamíferos, incluso en humanos, que comprende administrar a un sujeto que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este.
La invención proporciona además el uso del compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este en la fabricación de un medicamento para su uso en el tratamiento de los trastornos anteriores, por ejemplo, la enfermedad de Parkinson. La invención proporciona además el uso del compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este en la fabricación de un medicamento para su uso en la prevención de la enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, demencia (que incluye demencia de cuerpos de Lewy y demencia vascular), disfunción de la memoria relacionada con la edad, deterioro cognitivo leve, enfermedad con granos argirófilos, esclerosis lateral amiotrófica (ELA), enfermedad de Pick, degeneración corticobasal, parálisis supranuclear progresiva, la demencia frontotemporal hereditaria y el parkinsonismo vinculado al cromosoma 17 (FTDP-17), o cáncer renal, de mama, pulmonar, de próstata así como leucemia mielógena aguda (AML), trastornos lisosómicos (por ejemplo, enfermedad de Niemann-Pick Tipo C, enfermedad de Gaucher). En algunas realizaciones, la invención proporciona el uso de un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este en la fabricación de un medicamento para su uso en la prevención de la enfermedad de Parkinson.
La invención proporciona además el uso de inhibidores de LRRK2 en la producción de células progenitoras neuronales in vitro para la aplicación terapéutica consecuente en el tratamiento a base de células de los trastornos del SNC.
La invención proporciona además el uso de inhibidores de LRRK2 para estimular la restauración de las funciones del SNC tras una lesión neuronal, que incluye, de modo no taxativo, apoplejía isquémica, lesión cerebral traumática y/o lesión de médula espinal.
La invención también proporciona el uso de inhibidores de LRRK2 para tratar los mecanismos neuroinflamatorios anómalos que son responsables de una gama de enfermedades neurodegenerativas, que incluyen enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, esclerosis múltiple, demencia inducida por VIH, esclerosis lateral amiotrófica, apoplejía isquémica, lesión cerebral traumática y lesión de la médula espinal.
Cuando se utiliza en la terapia, un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este se formula usualmente en una composición farmacéutica estándar. Dichas composiciones se pueden preparar utilizando procedimientos estándares.
La presente invención proporciona además una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este y un portador farmacéuticamente aceptable.
Cuando un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este se destina para uso en el tratamiento de la enfermedad de Parkinson, este se puede utilizar en combinación con medicamentos reivindicados por ser útiles para tratamientos sintomáticos de la enfermedad de Parkinson. Los ejemplos adecuados de dichos otros agentes terapéuticos incluyen L-dopa y agonistas de dopamina (por ejemplo, pramipexol, ropinirol).
Cuando un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este se destina para uso en el tratamiento de la enfermedad de Alzheimer, este se puede utilizar en combinación con medicamentos reivindicados por ser útiles para tratamientos sintomáticos o para modificar la enfermedad de Alzheimer. Los ejemplos adecuados de dichos otros agentes terapéuticos pueden ser agentes sintomáticos, por ejemplo, los que se conocen por modificar la transmisión colinérgica, tales como, moduladores alostéricos o agonistas de los receptores muscarínicos M1, antagonistas muscarínicos M2, inhibidores de la acetilcolinesterasa (tales como, tetrahidroaminoacridina, clorhidrato de donepezilo y rivastigmina), moduladores alostéricos o agonistas de los receptores nicotínicos (tales como, moduladores alostéricos o agonistas de 7 o moduladores alostéricos o agonistas de 42), agonistas de PPAR (tales como, agonistas de PPAR), agonistas parciales de los receptores de 5-HT4, antagonistas de los receptores de 5-HT6 o antagonistas de los receptores de 5HT1A y moduladores o antagonistas de los receptores de NMDA, o agentes que modifican la enfermedad tales como inhibidores de la p o Y-secretasa, estabilizantes mitocondriales, estabilizantes de microtúbulos o moduladores de la patología de Tau tales como inhibidores de agregación de Tau (por ejemplo, azul de metileno y REMBER™).
Cuando un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este se utiliza en combinación con otros agentes terapéuticos, los compuestos se pueden administrar de manera secuencial o simultánea por medio de cualquier vía conveniente.
La invención también proporciona, en un aspecto adicional, una combinación que comprende un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este junto con uno o más agentes terapéuticos adicionales.
Las combinaciones a las que se hizo referencia anteriormente se pueden presentar convenientemente para usarse en forma de una formulación farmacéutica y, por lo tanto, las formulaciones farmacéuticas que comprenden una combinación tal como se definió anteriormente junto con un portador o excipiente farmacéuticamente aceptable, comprenden un aspecto adicional de la invención. Los componentes individuales de dichas combinaciones se pueden administrar de manera secuencial o simultánea en formulaciones farmacéuticas separadas o combinadas.
Cuando un compuesto de la Fórmula (I) o una sal farmacéuticamente aceptable de este se utiliza en combinación con un segundo agente terapéutico activo contra el mismo estado de la enfermedad, la dosis de cada compuesto puede ser diferente de aquella que se usa cuando el compuesto se utiliza solo. Las dosis apropiadas serán fácilmente comprendidas por los expertos en la técnica.
D. Composición
Los compuestos de la presente invención se pueden formular en composiciones farmacéuticas antes de la administración a un sujeto. Según un aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende un compuesto de la invención y uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables. Según otro aspecto, la invención proporciona un proceso para la preparación de una composición farmacéutica que comprende mezclar un compuesto de la Fórmula (I), o una sal (por ejemplo, una sal farmacéuticamente aceptable) de este, solvatos, etc. de este, con uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
Las composiciones farmacéuticas se pueden presentar en formas de dosis unitarias que contienen una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. Dicha unidad puede contener, por ejemplo, 0.1 mg, 0.5 mg, o de 1 mg a 50 mg, 100 mg, 200 mg, 250 mg, 500 mg, 750 mg o 1 g de un compuesto de la presente invención, dependiendo de la enfermedad que se tratará, la vía de administración y la edad, el peso y el estado del sujeto, o las composiciones farmacéuticas pueden presentarse en formas de dosis unitarias que contienen una cantidad predeterminada de ingrediente activo por dosis unitaria. En otras realizaciones, las composiciones de dosificación unitaria son aquellas que contienen una dosis o una subdosis diaria, tal como se describe en la presente, o una fracción adecuada de estas, de un ingrediente activo. Además, dichas composiciones farmacéuticas se pueden preparar por medio de cualquiera de los métodos conocidos por los expertos en la técnica.
Una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención dependerá de una cantidad de factores que incluyen, por ejemplo, la edad y el peso del destinatario previsto, la afección precisa que requiere tratamiento y su gravedad, la naturaleza de la formulación y la vía de administración, y finalmente quedará a criterio del médico tratante que prescribe la medicación. Sin embargo, una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la presente invención para el tratamiento de las enfermedades que se describen en la presente invención se encontrarán generalmente en el intervalo de 0.1 a 100 mg/kg del peso corporal del destinatario por día y, más usualmente, en el intervalo de 1 a 10 mg/kg del peso corporal por día. Por lo tanto, para un mamífero adulto de 70 kg, la cantidad real por día sería usualmente de 70 a 700 mg y esta cantidad se puede proporcionar en una única dosis por día o en una cantidad de subdosis por día como, por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco o seis dosis por día. O la dosificación puede hacerse de manera intermitente, tal como una vez cada día por medio, una vez a la semana o una vez al mes. Una cantidad terapéuticamente eficaz de una sal o solvato, etc., se puede determinar como una proporción de una cantidad terapéuticamente eficaz del compuesto de la Fórmula (I) per se. Se considera que dosis similares podrían ser adecuadas para el tratamiento de las otras enfermedades a las que se hacen referencia anteriormente.
Las composiciones farmacéuticas de la invención pueden contener uno o más compuestos de la invención. En algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas pueden contener más de un compuesto de la invención. Por ejemplo, en algunas realizaciones, las composiciones farmacéuticas pueden contener dos o más compuestos de la invención. Además, las composiciones farmacéuticas opcionalmente pueden comprender además uno o más compuestos farmacéuticamente activos.
Tal como se usa en la presente, “excipiente farmacéuticamente aceptable” se refiere un material, composición o vehículo farmacéuticamente aceptable implicado en dar forma o consistencia a la composición farmacéutica. Cada excipiente puede ser compatible con los otros ingredientes de la composición farmacéutica cuando se entremezclan de modo que se evitan las interacciones que sustancialmente reducen la eficacia del compuesto de la invención cuando se administra a un sujeto y las interacciones que podrían producir composiciones farmacéuticas que no son farmacéuticamente aceptables.
Los compuestos de la invención y el o los excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden formular en una forma de dosificación adaptada para su administración al paciente por la vía de administración deseada. Por ejemplo, las formas de dosificación incluyen las adaptadas para (1) la administración oral (que incluye bucal o sublingual) tales como comprimidos, cápsulas, píldoras, pastillas, polvos, jarabes, elíxires, suspensiones, soluciones, emulsiones, sobres y obleas; (2) la administración parenteral (que incluye subcutánea, intramuscular, intravenosa o intradérmica) tal como soluciones estériles, suspensiones, y polvos para reconstitución; (3) la administración transdérmica tal como parches transdérmicos; (4) la administración rectal tal como supositorios; (5) la inhalación nasal tal como polvos secos, aerosoles, suspensiones, y soluciones; y (6) la administración tópica (que incluye bucal, sublingual o transdérmica) tal como cremas, ungüentos, lociones, soluciones, pastas, aerosoles, espumas y geles. Dichas composiciones se pueden preparar por medio de cualquier método conocido en la técnica farmacéutica, por ejemplo, mediante la asociación de un compuesto de la Fórmula (I) con el o los portadores o excipientes.
Las composiciones farmacéuticas adaptadas para administración oral se pueden presentar como unidades separadas como cápsulas o comprimidos; polvos o gránulos; soluciones o suspensiones en líquidos acuosos o no acuosos; espumas o cremas batidas comestibles; o emulsiones líquidas de aceite en agua o emulsiones líquidas de agua en aceite.
Los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados pueden variar dependiendo de la forma de dosificación particular elegida. Además, los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados se pueden elegir por una función particular que puede servir en la composición. Por ejemplo, determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden elegir por su capacidad de facilitar la producción de formas de dosificación uniformes. Determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden elegir por su capacidad de facilitar la producción de formas de dosificación estables. Determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden elegir por su capacidad de facilitar el traslado o transporte del compuesto o los compuestos de la invención una vez administrados al sujeto desde un órgano, o una parte del cuerpo, a otro órgano o una parte del cuerpo. Determinados excipientes farmacéuticamente aceptables se pueden elegir por su capacidad de potenciar el cumplimiento por parte del paciente.
Los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados incluyen los siguientes tipos de excipientes: diluyentes, rellenos, aglutinantes, disintegrantes, lubricantes, antiadherentes, agentes granulantes, agentes de revestimiento, agentes humectantes, solventes, cosolventes, agentes de suspensión, emulsionantes, endulzantes, agentes saborizantes, agentes enmascaradores del sabor, agentes colorantes, agentes antiaglomerantes, humectantes, agentes quelantes, plastificantes, agentes que aumentan la viscosidad, antioxidantes, conservantes, estabilizadores, tensioactivos y, agentes amortiguadores. El experto en la técnica apreciará que determinados excipientes farmacéuticamente aceptables pueden cumplir más de una función y pueden cumplir funciones alternativas dependiendo de qué cantidad del excipiente está presente en la formulación y qué otros ingredientes se encuentran presentes en la formulación.
Los expertos en la técnica poseen el conocimiento y la experiencia para permitirles seleccionar excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados en cantidades apropiadas para su uso en la invención. Además, existen una cantidad de recursos, que están disponibles para el experto en la técnica, que describen los excipientes farmacéuticamente aceptables y pueden ser útiles para seleccionar los excipientes farmacéuticamente aceptables adecuados. Los ejemplos incluyen Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), y The Handbook of Pharmaceutical Excipients (the American Pharmaceutical Association and the Pharmaceutical Press).
Las composiciones farmacéuticas de la invención se preparan usando técnicas y métodos conocidos por los expertos en la técnica. Algunos de los métodos comúnmente usados en la técnica se describen en Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Company).
En un aspecto, la invención se refiere a una forma de dosificación oral sólida tal como un comprimido o cápsula que comprende una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de la invención y un diluyente o relleno. Los diluyentes y rellenos adecuados incluyen lactosa, sacarosa, dextrosa, manitol, sorbitol, almidón (por ejemplo, almidón de trigo, almidón de papa, y almidón pregelatinizado), celulosa y sus derivados (por ejemplo, celulosa microcristalina), sulfato de calcio y fosfato de calcio dibásico. La forma de dosificación sólida puede comprender además un aglutinante. Los aglutinantes adecuados incluyen almidón (por ejemplo, almidón de trigo, almidón de papa, y almidón pregelatinizado), gelatina, acacia, alginato de sodio, ácido algínico, tragacanto, goma guar, povidona y celulosa y sus derivados (por ejemplo, celulosa microcristalina). La forma de dosificación sólida puede comprender además un desintegrante. Los desintegrantes adecuados incluyen crospovidona, glicolato de almidón de sodio, croscarmelosa, ácido algínico, y carboximetil celulosa de sodio. La forma de dosificación sólida puede comprender además un lubricante. Los lubricantes adecuados incluyen ácido esteárico, estearato de magnesio, estearato de calcio, y talco.
En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende de 0.01 a 1000 mg de uno o más compuestos descritos en la presente o una sal farmacéuticamente aceptable de estos y de 0.01 a 5 g de uno o más excipientes farmacéuticamente aceptables.
E. Proceso para la preparación de compuestos
El proceso a utilizarse para la preparación de los compuestos que se describen en la presente depende de los compuestos deseados. Dichos factores como la selección del sustituyente específico y las diversas ubicaciones posibles del sustituyente específico tienen una función importante en la vía a seguir en la preparación de los compuestos específicos de la presente invención. Los expertos en la técnica reconocerán fácilmente estos factores.
En general, los compuestos de la presente invención se pueden preparar por medio de técnicas estándares conocidas en la técnica y por medio de procesos análogos a estas. Los métodos generales para la preparación de compuestos de la presente invención se establecen a continuación. Todos los reactivos y materiales de partida que se describen en los siguientes esquemas experimentales generales se encuentran comercialmente disponibles o se pueden preparar por medio de métodos conocidos por los expertos en la técnica. El experto en la técnica apreciará que si un sustituyente descrito en la presente no es compatible con los métodos sintéticos descritos en la presente, el sustituyente puede estar protegido con un grupo protector adecuado que es estable para las condiciones de reacción. El grupo protector se puede retirar en un punto adecuado en la secuencia de reacción para proporcionar un intermedio deseado o compuesto objetivo. Los grupos protectores adecuados y los métodos para proteger y desproteger diferentes sustituyentes usando dichos grupos protectores adecuados son conocidos por los expertos en la técnica; los ejemplos de estos se pueden encontrar en T. Greene y P. Wuts, Protecting Groups in Chemical Synthesis (3.a ed.), John Wiley & Sons, NY (1999). En algunos casos, un sustituyente se puede seleccionar específicamente para reaccionar en las condiciones de reacción usadas. En estas circunstancias, las condiciones de reacción convierten el sustituyente seleccionado en otro sustituyente que es útil como un compuesto intermedio o es un sustituyente conveniente en un compuesto objetivo.
Los Esquemas Generales 1-3 proporcionan procesos de síntesis de ejemplo para preparar los compuestos de la presente invención.
Esquema General 1
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El Esquema General 1 proporciona un ejemplo de síntesis para preparar los compuestos X y XI. El grupo protector puede ser cualquier grupo protector (PG) adecuado, tal como 4-metilbenceno-1-sulfonilo (Ts) o carboxilato de tercbutilo (Boc). En el Esquema General 1, R1, R2, R3, R4, R5, y R6, son como se definen en la Fórmula (I).
Los intermedios II se pueden obtener al hacer reaccionar los intermedios I con reactivos de halógeno tales como C2Cl6 en la etapa (i) en presencia de bases adecuadas tales como n-BuLi en solventes adecuados tales como THF a temperaturas adecuadas tales como de -78°C a 0°C. Los intermedios III se pueden obtener por medio de reacción de acoplamiento Suzuki de los intermedios II con ácidos borónicos o ésteres borónicos en la etapa (ii) utilizando catalizadores de paladio adecuados tales como Pd(PPh3)4 en presencia de bases adecuadas tales como Na2CO3 en solventes adecuados tales como 1,4-dioxano a temperaturas adecuadas tales como de 90°C a 130°C.
Los intermedios IV que reaccionan con reactivos de alquilación adecuados en la etapa (iii) en presencia de bases adecuadas tales como NaH en solventes adecuados tales como DMF a temperaturas adecuadas tales como de 25°C a 90°C pueden proporcionar los intermedios III. Los intermedios de amino V se pueden obtener al hacer reaccionar los intermedios III con agentes reductores adecuados tales como hidrógeno en presencia de catalizadores adecuados tales como Pd/C en solventes polares tales como metanol a temperaturas adecuadas tales como de 25°C a 100°C en la etapa (iv).
La etapa (v) se puede llevar a cabo al hacer reaccionar los intermedios VI con alcoxis de sodio en presencia de solventes polares adecuados tales como EtOH a temperaturas adecuadas tales como de 70°C a 90°C para proporcionar los intermedios VII. Los intermedios IX se pueden obtener al hacer reaccionar los intermedios VIII en la etapa (vi) con reactivos adecuados tales como NIS en solventes adecuados tales como DMF a temperaturas adecuadas tales como de 0°C a 25°C. Los intermedios IX que reaccionan con reactivos adecuados tales como CuCN en presencia de catalizadores de paladio o cobre en solventes adecuados tales como DMF a temperaturas adecuadas tales como de 90°C a 130°C pueden proporcionar los intermedios VII en la etapa (vii).
La etapa (viii) puede consistir en reacciones de acoplamiento de Buchwald al hacer reaccionar los intermedios VII con los intermedios V utilizando catalizadores de paladio adecuados tales como Pd(dppf)Cl2 en presencia de bases adecuadas tales como K2CO3 y ligandos adecuados tales como X-Phos en solventes adecuados tales como 1,4-dioxano a temperaturas adecuadas tales como de 90°C a 120°C para proporcionar el compuesto X. Si Z=PG, el compuesto XI se puede obtener al hacer reaccionar el compuesto X con bases adecuadas tales como NaOH en solventes adecuados tales como MeOH a temperaturas adecuadas tales como de 25°C a 60°C en la etapa (ix).
Esquema General 2
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El Esquema General 2 proporciona un ejemplo de síntesis para preparar los compuestos X y XI. El grupo protector puede ser cualquier grupo protector adecuado, tal como 4-metilbenceno-1-sulfonilo (Ts) o carboxilato de terc-butilo (Boc). En el Esquema General 2, R1, R3, R4, R5 y R5 son como se definen en la Fórmula (I).
Los intermedios XIII se pueden obtener al hacer reaccionar los intermedios XII con reactivos de alquilación adecuados en la etapa (x) en presencia de bases adecuadas tales como K2CO3 en solventes adecuados tales como CH3CN a temperaturas adecuadas tales como de 28°C a 90°C. La etapa (xi) se puede llevar a cabo al hacer reaccionar los intermedios XIII con reactivos de oxidación tales como SeO2 en solventes adecuados tales como 1, 4-dioxano a temperaturas adecuadas tales como de 80°C a 100°C para proporcionar los intermedios XIV.
Los intermedios XV se pueden obtener al hacer reaccionar los intermedios XIV con reactivos de halógeno tales como C2Cl6 en la etapa (xii) en presencia de bases adecuadas tales como n-BuLi en solventes adecuados tales como THF a temperaturas adecuadas tales como de -78°C a 0°C. Los intermedios XVI se pueden obtener por medio de reacción de acoplamiento Suzuki de los intermedios XV con ácidos borónicos o ésteres borónicos en la etapa (xiii) utilizando catalizadores de paladio adecuados tales como Pd(PPhm)4 en presencia de bases adecuadas tales como Na2CO3 en solventes adecuados tales como 1,4-dioxano a temperaturas adecuadas tales como de 90°C a 130°C.
La etapa (xiv) se puede llevar a cabo al hacer reaccionar los intermedios XVI con carbenos en solventes adecuados tales como DCM a temperaturas adecuadas tales como de 0°C a 25°C para proporcionar los intermedios XVII. Los intermedios de amino XVIII se pueden obtener al hacer reaccionar los intermedios XVII con agentes reductores adecuados tales como hidrógeno en presencia de catalizadores adecuados tales como Pd/C en solventes polares tales como metanol a temperaturas adecuadas tales como de 25°C a 60°C en la etapa (xv). La etapa (xvi) puede consistir en reacciones de acoplamiento de Buchwald al hacer reaccionar los intermedios XVIII con los intermedios VII utilizando catalizadores de paladio adecuados tales como Pd(dppf)Cl2 en presencia de bases adecuadas tales como K2CO3 y ligandos adecuados tales como X-Phos en solventes adecuados tales como 1,4-dioxano a temperaturas adecuadas tales como de 90°C a 120°C para proporcionar el compuesto X. Si Z=PG, el compuesto XI se puede obtener al hacer reaccionar el compuesto X con bases adecuadas tales como NaOH en solventes adecuados tales como MeOH a temperaturas adecuadas tales como de 25°C a 60°C en la etapa (xvii).
Esquema General 3
Figure imgf000030_0001
El Esquema General 3 proporciona un ejemplo de síntesis para preparar los compuestos X y XI. El grupo protector
puede ser cualquier grupo protector adecuado, tal como 4-metilbenceno-1-sulfonilo (Ts) o carboxilato de terc-butilo
(Boc).El grupo saliente puede ser cualquier grupo saliente adecuado, tal como halógeno (Cl, Br, I) o metanosulfonato.
En el Esquema General 3, R1, R3, R4, R5, R6 e Y, son como se definen en la Fórmula (I).
Los intermedios XIX se pueden obtener por medio de reacción de los intermedios IV con reactivos de alquilación
adecuados en la etapa (x) en presencia de bases adecuadas tales como K2CO3 en solventes adecuados tales como
DMF a temperaturas adecuadas tales como de 28°C a 90°C. Los intermedios de amino XX se pueden obtener por
medio de reacción de los intermedios XIX con agentes reductores adecuados tales como hidrógeno en presencia de
catalizadores adecuados tales como Pd/C en solventes polares tales como metanol a temperaturas adecuadas tales
como de 25°C a 60°C en la etapa (xix). La etapa (xx) puede consistir en reacciones de acoplamiento de Buchwald al
hacer reaccionar los intermedios XX con los intermedios VII en el Esquema 1, utilizando catalizadores de paladio
adecuados tales como Pd(dppf)Cl2 en presencia de bases adecuadas tales como K2CO3 y ligandos adecuados tales
como X-Phos en solventes adecuados tales como 1,4-dioxano a temperaturas adecuadas tales como de 90°C a 120°C
para proporcionar los intermedios XXI. Los intermedios XXI reaccionan con reactivos de halógeno adecuados tales
como MsCl en presencia de bases adecuadas tales como Et3N en la etapa (xxi) en solventes adecuados tales como
DCM a temperaturas adecuadas tales como de 0°C a 25°C para proporcionar los intermedios XXII. La etapa (xxii) se
puede llevar a cabo al hacer reaccionar los intermedios XXII con diferentes aminasen presencia de bases adecuadas
tales como K2CO3 en solventes adecuados tales como DMF a temperaturas adecuadas tales como de 25°C a 120°C
para proporcionar los compuestos X. Si Z=PG, el compuesto XI se puede obtener al hacer reaccionar el compuesto X
con bases adecuadas tales como NaOH en solventes adecuados tales como MeOH a temperaturas adecuadas tales
como de 25°C a 60°C en la etapa (xxiii).
El material de partida y los reactivos que se describen en los esquemas anteriores se encuentran comercialmente
disponibles o se pueden preparar fácilmente a partir de compuestos comercialmente disponibles utilizando
procedimientos conocidos por los expertos en la técnica.
Ejemplos
Procedimientos experimentales generales
Las siguientes descripciones y ejemplos ilustran la invención. No se pretende que estos ejemplos limiten el alcance
de la presente invención, sino que proporcionen una guía al experto en química para preparar y usar los compuestos,
composiciones y métodos de la presente invención.
La reacciones por microondas se llevaron a cabo en los siguientes instrumentos: Smith Creator (obtenido de Personal
Chemistry, Forboro/MA, actualmente de propiedad de Biotage), Emrys Optimizer (obtenido de Personal Chemistry) y
CEM Explorer (suministrado por CEM Discover, Matthews/NC).
Las técnicas convencionales se pueden utilizar en la presente para los trabajos de reacción y purificación de los productos de los Ejemplos.
Las referencias en los Ejemplos a continuación relativas al secado de las fases o capas orgánicas se pueden referir a secar la solución en sulfato de magnesio o sulfato de sodio y filtrar el agente de secado según las técnicas convencionales. Los productos se pueden obtener generalmente al retirar el solvente mediante evaporación a presión reducida.
La purificación de los compuestos en los ejemplos se puede llevar a cabo mediante métodos convencionales tales como cromatografía y/o recristalización utilizando solventes adecuados. Los métodos cromatográficos son conocidos por los expertos en la técnica e incluyen, por ejemplo, cromatografía en columna, cromatografía ultrarrápida, HPLC (cromatografía líquida de alto rendimiento) y MDAP (autopreparación dirigida a la masa, también denominada purificación por LCMS dirigida a la masa). MDAP se describe en, por ejemplo, W. Goetzinger et al, Int. J. Mass Spectrom, 2004, 238, 153-162.
Se usaron placas de capa fina Analtech Silica Gel GF y E. Merck Silica Gel 60 F-254 para cromatografía de capa fina. Se realizó cromatografía ultrarrápida y de gravedad en gel de sílice E. Merck Kieselgel 60 (230-400 mesh). Se llevaron a cabo HPLC preparativas mediante el uso de un sistema preparativo de Gilson Preparative System que utiliza una columna de fase inversa Luna 5u C18(2) 100A con elución de un gradiente 10-80 (TfA al 0.1 % en CH3CN/TFA al 0.1 % acuoso) o un gradiente 10-80 (CH3CN/agua). El sistema Combi-Flash utilizado para la purificación en esta solicitud se obtuvo de Isco, Inc. La purificación por Combi-Flash se llevó a cabo utilizando una columna de SiO2 preenvasada, un detector con longitud de onda de UV a 254 nm y mezcla de solventes.
Las expresiones “Combi-Flash”, “Biotage®”, “Biotage 75” y “Biotage SP4®” cuando se utilizan en la presente se refieren a sistemas de purificación automática comercialmente disponibles que utilizan cartuchos de gel de sílice preenvasados.
Los compuestos finales se caracterizaron con LCMS (las condiciones se enumeran a continuación) o NMR. Las estructuras de los regiosómeros o estereoisómeros se designaron en base a la constante de acoplamiento de NMR y/o estudios de efecto nuclear Overhauser (NOE, por sus siglas en inglés) u otros métodos analíticos conocidos por el experto en la técnica. Los espectros 1H-NMR se registraron utilizando un espectrómetro Bruker Avance 400 MHz. CDCl3 es deuteriocloroformo, DMSO-afe es hexadeuteriodimetilsulfóxido, y CD3OD (o MeOD) es tetradeuteriometanol. Los cambios químicos se indican en partes por millón (ppm) con respecto al estándar interno de tetrametilsilano (TMS) o el solvente de NMR. Las abreviaturas para datos NMR son las siguientes: s = singlete, d = doblete, t = triplete, q = cuarteto, m = multiplete, dd = doblete de dobletes, dt = doblete de triplete, app = aparente, br = amplio. J indica la constante de acoplamiento de NMR medida en Hertz. Se tomaron espectros de masa en los instrumentos, mediante el uso de técnicas de ionización por electroaspersión (ES). Todas las temperaturas se indicaron en grados Celsius. Otras abreviaturas se describen en ACS Stile Guide (American Chemical Society, Washington, DC, 1986).
La estereoquímica absoluta se puede determinar mediante métodos conocidos por los expertos en la técnica, por ejemplo, dicroísmo circular vibratorio (VCD, por sus siglas en inglés) o por rayos X.
En los procedimientos que siguen, después de cada material de partida, típicamente se proporciona una referencia a un intermedio. Este se proporciona únicamente como ayuda para el experto en química. El material de partida no necesariamente se prepara a partir del lote al que se hace referencia.
Condiciones LCMS:
1) Condiciones ácidas:
Fase móvil: agua que contiene TFA al 0.05 % / CH3CN al 0.05 %
Columna: Agilent SB-C184.6 x 30 mm-1.8 micrómetros
Detección: detector de matriz de fotodiodos (PDA) y MS
2) Condiciones básicas:
Fase móvil: agua que contiene NH4HCO3 10 mmol / CH3CN
Columna: XBridgeTM C184.6 x 50 mm-3.5 micrómetros
Detección: detector de matriz de fotodiodos (PDA) y MS
3) Condiciones básicas:
Fase móvil: agua que contiene NH4OAc al 0.02 % / CH3CN
Columna: Welch Ultimate XB-C18 5 gm 4.6*33 mm
Detección: detector de matriz de fotodiodos (PDA) y MS
Condiciones de MDAP:
1) Condiciones ácidas:
Instrumento: instrumento Waters
Columna: columna Sunfire Prep C18 (5 um, 19 x 50 mm)
Fase móvil: agua que contiene TFA al 0.05% / CH3CN.
2) Condiciones básicas:
Instrumento: instrumento Waters
Columna: columna Xbridge Prep C18 (5 um, 19 x 50 mm)
Fase móvil: agua que contiene amoníaco al 0.04% / CH3CN.
Condiciones de HPLC preparativa
Instrumento: instrumento Waters
Columna: columna OBD Xbridge Prep C18 (10 um, 19 x 250 mm)
Fase móvil: agua que contiene amoníaco al 0.08 % / acetonitrilo.
Instrumentos de aislamiento de HPLC quiral:
1. Gilson Gx-281 Prep LC (Gilson 806 Manometric Module, Gilson 811D Dynamic Mixer,Gilson Gx-281 prep liquid handler, Gilson 306 Pump *2, Gilson 156 Detector),
2. Agilent 1200 serie Prep LC (Agilent G1361A Prep pump *2, Agilent G2260A Prep ELA, Agilent G1315D DAD Detector, Agilent G1364B Prep FC),
3. Thar SFC Prep 80 (TharSFC ABPR1, TharSFC SFC Prep 80 CO2 Pump, TharSFC Co-Solvent Pump, TharSFC Cooling Heat Exchanger y Circulating Bath, TharSFC Mass Flow Meter, TharSFC Static Mixer, TharSFC Injection Module, Gilson u V Detector, TharSFC Fraction Collection Module).
Condiciones de análisis de HPLC quiral:
Instrumento: Agilent 1200 serie HPLC o Thar Analytical SFC
Columna y fase móvil: tal como se describe a continuación en los ejemplos.
[a]D se obtuvo al utilizar un polarímetro automático: SGW®-1.
Abreviaturas y fuentes de recursos
Las siguientes abreviaturas y recursos se utilizan en la presente a continuación:
ACN Acetonitrilo
Ac. - acuoso
Boc2O - Dicarbonato de di-ferc-butilo
n-BuLi - Butilo
CbzCl - Cloroformiato de bencilo
DAST - Trifluoruro de dietilaminoazufre
dba - dibencilidenoacetona
DBU- 1,8-Diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno
DCE - 1,2-Dicloroeteno
DCM - Diclorometano
DIAD - Azodicarboxilato de diisopropilo
DIPEA - N, N-Diisopropiletilamina
DMA - N, N-dimetilacetamida
DMF - Dimetilformamida
DMAP - 4-Dimetilaminopiridina
DMSO - Dimetilsulfóxido
dppf - 1,1'-Bis(difenilfosfino)ferroceno
EA - Acetato de etilo
Et - Etilo
Et2O - Éter dietílico
EtOAc - Acetato de etilo
LDA - Diisopropilamida de litio
LiAlH4 - Hidruro de litio y aluminio
LHMDS (o LiHMDS) - Bis(trimetilsilil)amida de litio
Me - Metilo
MsCl - Cloruro de metanosulfonilo
NIS - N-yodosuccinimida
NaBH4 - Borohidruro de sodio
HOAc- Ácido acético
SEMCl-(2-(Clorometoxi)etil)trimetilsilano
SOCl2 -Cloruro de tionilo
TBAF- Fluoruro de tetrabutilamonio
TEA - Trietilamina
TFA - Ácido trifluoroacético
THF - Tetrahidrofurano
PE - Éter de petróleo
X-Phos - 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetflxanteno
Descripción D1
2-cloro-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idina (D1)
Figure imgf000033_0001
Método A: Una solución de 2,4-dicloro-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (500 mg, 2.66 mmol) y etóxido de sodio (181 mg, 2.66 mmol) en etanol (8 mL) y THF (8.00 mL) se agitó a 90°C durante la noche. La mezcla se enfrió a temperatura ambiente y se evaporó. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=25:1) para proporcionar el compuesto del título D1 (300 mg, 1.214 mmol, 45.7 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 198 [M+1] . tñ=1523 min. (LCMS condición 2)
Método B: Una solución de 2,4-dicloro-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (13 g, 69.1 mmol), etóxido de sodio (5,65 g, 83 mmol) en etanol (100 mL) se calentó durante la noche a 90°C. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se agregó agua. El sólido formado se filtró y luego se secó para proporcionar el compuesto del título D1 (10.0 g, 50.6 mmol, 73.2 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 198 [M+1] . tR=1.871 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-cfe): 5 12.23 (br. s., 1H), 7.38 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.50 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 4.51 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.39 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Descripción D2
2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirim idina (D2)
Figure imgf000034_0001
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (que se puede preparar según D1) (8 g, 40.5 mmol) en DMF (50 mL) se agregó hioduro de sodio (1.619 g, 40.5 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 5 min a temperatura ambiente. Luego, se agregó cloruro de 4-metilbenceno-1-sulfonilo (7.72 g, 40.5 mmol) a esta mezcla. La mezcla de reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con agua (450 mL) y se filtró. El sólido filtrado se lavó con agua (90 mL) y luego se secó para proporcionar el compuesto del título D2 (10 g, 26.2 mmol, 64.6 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 352 [M+H]+. tR=1.871 min. (LCMS condición 2)
Descripción D3
N-(1,3-dimetil-1 H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D3)
Figure imgf000034_0002
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (200 mg, 0.568 mmol), 1,3-dimetil-1 H-pirazol-4-amina, clorhidrato (105 mg, 0.568 mmol) y (9,9-dimetil-9H-xanteno- 4,5-diil)bis(difenilfosfina) (49.3 mg, 0.085 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (157 mg, 1.137 mmol) y PdCl2(pddf) (46.4 mg, 0.057 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 90°C. Luego, la mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH=25:1) para proporcionar el compuesto del título D3 (100 mg, 0.234 mmol, 41.2 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 427 [M+H]+, tR=1.75 min. (LCMS condición 2)
Descripción D4
N-(5-cloro-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-amina (D4)
Figure imgf000034_0003
Una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (100 mg, 0.284 mmol) y 3-cloro-1-metil-1 H-pirazol-4-amina (44.9 mg, 0.341 mmol), carbonato de potasio (79 mg, 0.568 mmol), PdCl2(pddf)-CH2Cl2 (23.21 mg, 0.028 mmol) y diciclohexil(2’,4’,6’-triisopropil-[1,1’-bifenil]-2-il)fosfina (20.33 mg, 0.043 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0.300 mL) se irradió por microondas a 100°C durante 2 horas. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto D4 (100 mg, 0.190 mmol, 66.9 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 447 [M+H]+, tR=1.542 min. (LCMS condición 2)
Descripción D5
1-(3,5-dimetil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol (D5)
Figure imgf000035_0001
A una solución de 3,5-dimetil-4-nitro-1 H-pirazol (1.0 g, 7.09 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se agregó 2,2-dimetiloxirano (1.788 g, 24.80 mmol) y DBU (2.136 mL, 14.17 mmol). La reacción se agitó a 60°C durante 20 horas. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). La capa orgánica combinada se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D5 (800 mg, 3.75 mmol, 52.9 % de rendimiento).
LCMS: 214 [M+H]+, tR=1.06 min. (LCMS condición 2)
Descripción D6
1-(4-amino-3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol (D6)
Figure imgf000035_0002
A una solución de 1 -(3,5-dimetil-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)-2-metilpropan-2-ol (que se puede preparar según D5) (800mg, 3.75 mmol) en metanol (15 mL) se agregó Pd/C (100 mg, 0.094 mmol) en nitrógeno. La mezcla se agitó durante la noche bajo hidrógeno a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y el filtrado se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D6 (680 mg, 3.66 mmol, 98 % de rendimiento).
LCMS: 184 [M+H]+, tR=0.74 min. (LCMS condición 2)
Descripción D7
1,3,5-trimetil-4-nitro-1 H-pirazol (D7)
Figure imgf000035_0003
A una solución de 3,5-dimetil-4-nitro-1 H-pirazol (1.0 g, 7.09 mmol) en THF (25 mL) se agregó formaldehído (0.255 g, 8.50 mmol) a 0°C. Luego de agitar durante 30 min, se agregó NaCNBH3 (0,668 g, 10,63 mmol). La reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). La capa orgánica combinada se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D7 (850 mg, 4.99 mmol, 70.5 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 156.1 [M+H]+. tR =1.35 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 53.73 (3H, s), 2.54 (3H, s), 2.36 (3H, s).
Descripción D8
1,3,5-trimetil-1 H-pirazol-4-amina (D8)
Figure imgf000036_0001
Una solución de 1,3,5-trimetil-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D7) (850 mg, 5.48 mmol) y Pd/C (146 mg, 0.137 mmol) en metanol (15 mL) se agitó durante la noche bajo hidrógeno a temperatura ambiente. La suspensión se filtró a través de Celite y la almohadilla se lavó con EtOH (10 mL x 3). EL filtrado se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D8 (650 mg, 4.88 mmol, 89 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 126,1 [M+H]+, tR=0.69 min. (LCMS condición 2)
Descripción D9
ferc-butil-(3-cloro-1 H-pirazol-4-il)carbamato (D9)
Figure imgf000036_0002
A una solución de 3-cloro-1 H-pirazol-4-amina (1 g, 8.51 mmol) (que se puede preparar según un ejemplo de la solicitud internacional de PCT WO2011048082), (Boc)2O (2.043 g, 9.36 mmol) en THF (50 mL) y agua (5 mL) a 20°C se agregó carbonato de sodio (1.984 g, 18.72 mmol). La reacción se agitó a 20°C durante 16 horas. La mezcla se inactivó con agua y, luego se dividió entre acetato de etilo (50 mL) y solución de NaHCO3 (50 mL). La capa orgánica se evaporó al vacío para proporcionar el compuesto del título D9 (1.5 g, 6.89 mmol, 81 % de rendimiento) como un aceite amarillo. LCMS: 218 [M+H]+. tR =1.416 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 5: 10.78 - 11.60 (m, 1H), 7.92 (s, 1H), 6.29 (br. s., 1H), 1.52 (s, 9H).
Descripción D10
ferc-butil-(3-cloro-1-(2-hidroxi-2-metilpropil)-1H-pirazol-4-il)carbamato (D10)
Figure imgf000036_0003
A una solución de ferc-butil-(3-cloro-1 H-pirazol-4-il)carbamato (que se puede preparar según D9) (320 mg, 1.470 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se agregó DBU (0.443 mL, 2.94 mmol) y 2,2-dimetiloxirano (318 mg, 4.41 mmol). La reacción se agitó a 60°C durante 20 horas. La mezcla de reacción se concentró al vacío. El residuo se disolvió en acetato de etilo y se lavó con HCl 1 N, agua y salmuera. La capa orgánica se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: CH3OH=20:1)para proporcionar el compuesto del título D10 (260 mg, 0.610 mmol, 41.5 % de rendimiento).
LCMS: 290 [M+H]+. tR =1.186 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, METANOL-d*): 57.79 (br. s., 1H), 3.99 (s, 2H), 1.52 (s, 9H), 1.18 (s, 6H).
Descripción D11
1 -(4-amino-3-cloro-1 H-pirazol-1 -il)-2-metilpropan-2-ol (D11)
Figure imgf000036_0004
Una solución de ferc-butil-(3-cloro-1-(2-hidroxi-2-metilpropil)-1H-pirazol-4-il)carbamato que se puede preparar según D10) (100 mg, 0.345 mmol) y HCl (3 mL, 12.00 mmol, 4M en dioxano) se agitó a 35°C durante 12 horas. El solvente se evaporó al vacío para proporcionar el compuesto del título D11 (50 mg, 0.264 mmol, 76 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 190 [M+H]+. tR =1.046 min. (LCMS condición 2)
Descripción D12 y D13
4-etoxi-W-(1-(2-metoxietil)-3-metil-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-amina (D12)
4-etoxi-W-(1-(2-metoxietil)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-amina (D13)
Figure imgf000037_0001
Una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (318 mg, 2.047 mmol), una mezcla de 1-(2-metoxietil)-3-metil-1 H-pirazol- 4-amina y 1-(2-metoxietil)-5-metil-1H-plrazol-4-amina (318 mg, 2.047 mmol) (que se puede preparar según la solicitud internacional PCT 2012062783) diciclohexil(2’,4’,6’-triisopropil-[1,1’-bifenil]-2-il)fosfina (148 mg, 0.256 mmol), carbonato de potasio (471 mg, 3.41 mmol) y PdCb(dppf)-CH2Cl2 (139 mg, 0.171 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agitaron durante la noche a 90°C. Luego, la mezcla se diluyó con agua (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 40 mL). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 mL), se secó en Na2SÜ4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=3:1) para proporcionar la mezcla del compuesto del título D12 y D13 (650 mg, 0.995 mmol, 58.3 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 471 [M+H]+. tR =1.76 min. (LCMS condición 2)
Descripción D14
2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-etanol (D14)
Figure imgf000037_0002
A una solución de 3-metil-4-nitro-1 H-pirazol (2.0g, 15.74 mmol) y 1, 3-dioxolan-2-ona (6.93 g, 79 mmol) en acetonitrilo (5 mL) se agregó hidróxido de sodio (1.888 g, 47.2 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 80°C durante 15 horas. Luego, la mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó en Na2SÜ4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título D14 (400 mg, 2.337 mmol, 14.85 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 172 [M+H]+. tR =1.130 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.11 (s, 1H), 4.17 - 4.26 (m, 2H), 3.99 - 4.13 (m, 2H), 2.77 (t, 1H), 2.68 (s, 3H). Descripción D15
2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il) etil-metanosulfonato (D15)
Figure imgf000037_0003
A una solución de 2-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-etanol (que se puede preparar según D14) (200mg, 1.169 mmol) y DIPEA (0.204 mL, 1.169 mmol) en THF (5 mL) se agregó anhídrido metanosulfónico hipocloroso (0.210 mL, 1.169 mmol). Luego, la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La mezcla se diluyó con NaHCO3 acuoso (20 mL), se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó y se concentró para proporcionar el compuesto del título D15 (300 mg, 0.951 mmol, 81 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 250 [M+H]+. tR =1.316 min. (LCMS condición 2)
Descripción D16
3-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-etil)-3-azabiciclo-[3.1.0]hexano (D16)
Figure imgf000038_0001
Una solución de 2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il) etil-metanosulfonato (que se puede preparar según D15) (288 mg, 1.155mmol), 3-azabiciclo[3.1.0]hexano (80 mg, 0.962 mmol) y carbonato de potasio (399 mg, 2.89 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D16 (150 mg, 0.552 mmol, 57.4 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 237 [M+H]+. tR =1.612 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.08 (s, 1H), 4.11 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.79 - 2.98 (m, 4H), 2.64 (s, 3H), 2.39 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 1.25 - 1.37 (m, 2H), 0.54 (q, J = 3.8 Hz, 1H), 0.33 (td, J = 7.7, 4.3 Hz, 1H)
Descripción D17
1-(2-(3-azabiciclo-[3.1.0]-hexan-3-il)etil)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D17)
Figure imgf000038_0002
Una solución de 3-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-etil)-3-azabiciclo-[3.1.0]hexano (que se puede preparar según D16) (200mg, 0.846 mmol) y Pd/C (45,0 mg, 0.042 mmol) en metanol (20 mL) se agitó durante la noche a 20°C bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=10:1) para proporcionar el compuesto del título D17 (150mg, 0.727 mmol, 86 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 151 [M+H]+. tR =1.207 min. (LCMS condición 2)
Descripción D18
W-(1-(2-(3-azabiciclo-[3.1.0]-hexan-3-il)etil)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D18)
Figure imgf000038_0003
Una solución de 2-cloro-4-etoxy-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (200 mg, 0.568 mmol), D17 (117 mg, 0.568 mmol), PdCb(dppf) (46.4 mg, 0.057 mmol), (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (49.3 mg, 0.085 mmol) y carbonato de potasio (157 mg, 1.137 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se evaporó. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=1:3) para proporcionar el compuesto del título D18 (100 mg, 0.165 mmol, 29.0 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 522 [M+H]+. tR =1.869 min. (LCMS condición 2)
Descripción D19
(±)-4-etoxi-W-(5-metil-1-(1-metil-pirrolidin-3-il)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-amina (D19)
Figure imgf000038_0004
A una solución de 5-metil-1 -(1 -metilpirrolidin-3-il)-1 H-pirazol-4-amina (237 mg, 1.313 mmol), 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (420 mg, 1.194 mmol) y (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis-(difenilfosfina) (104 mg, 0.179 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL)se agregó carbonato de potasio (330 mg, 2.388 mmol) y PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (97 mg, 0.119 mmol). La reacción se agitó durante la noche a 90°C . La mezcla se diluyó con agua (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 40 mL). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera (20 mL), se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=3:1) para proporcionar el compuesto del título D19 (240 mg, 0.498 mmol, 41.7 % de rendimiento) como un sólido negro.
LCMS: 495.7 [M+H]+. tR =1.58min. (LCMS condición 2)
Descripción D20
1-(5-cloro-4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol (D20)
Figure imgf000039_0001
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (224 mg, 0.638 mmol), 1-(4-amino-5-cloro-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol, (110 mg, 0.580 mmol) (que se puede preparar según la solicitud internacional de PCT WO2012062783) y (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0.300 mL) se agregó PdCh(dppf)-CH2Cl2 (47.4 mg, 0.058 mmol) y carbonato de sodio (123 mg, 1.160 mmol). La mezcla se irradió por microondas a 90°C durante 45 min. La reacción se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc (20 mL x 3). La capa orgánica combinada se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D20 (200 mg, 0.285 mmol, 49.2 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 504.5 [M+H]+. tR =1.614min. (LCMS condición 2)
Descripción D21 y D22
4-etoxi-W-(5-metil-1-(1-metilpiperidin-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-amina (D21)
4-etoxi-W-(3-metil-1-(1-metilpiperidin-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-amina (D22)
Figure imgf000039_0002
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (362 mg, 1.029 mmol), una mezcla de 5-metil-1 -(1 -metilpiperidin-4-il)-1 H-pirazol-4-amina y 3-metil-1 -(1 -metilpiperidin-4-il)-1 H- pirazol-4- amina (200 mg, 1.029 mmol), (que se puede preparar según la solicitud internacional PCT WO 2012062783), (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (89 mg, 0.154 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (285 mg, 2.059 mmol) y PdCb(dppf) (84 mg, 0.103 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 90°C durante la noche. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó. EL producto en bruto se purificó mediante Biotage para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D11 y D12 (130 mg, 0.140 mmol, 13.63 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 510.1 [M+H]+. tR =1.45min. (LCMS condición 2)
Descripción D23
5- metoxi-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-pirazol (D23)
A una solución de 5-cloro-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol (200 mg, 0.863 mmol) (que se puede preparar según la solicitud internacional Pc T, WO2012062783) en DMF (3 mL) se agregó hidruro de sodio (51.8 mg, 2.159 mmol) lentamente bajo nitrógeno a 0°C. La mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. Se agregó metanol (41.5 mg, 1,295 mmol) y la mezcla se agitó a 0°C durante otras 3 horas. La reacción se inactivó con NH4Cl acuoso y se evaporó. El producto en bruto se purificó mediante Biotage para proporcionar el compuesto del título D23 (140 mg, 0.592 mmol, 68.5 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 228 [M+H]+. tR =1.503 min. (LCMS condición 2)
Descripción D24
5-metoxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-pirazol-4-amina (D24)
Figure imgf000040_0001
Una solución de 5-metoxi-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol (que se puede preparar según D23) (200 mg, 0.880 mmol), clorhidrato de amoníaco (235 mg, 4.40 mmol) y hierro (246 mg, 4.40 mmol) en agua (2 mL) y etanol (2.000 mL) se agitó durante la noche a 70°C bajo nitrógeno. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en etanol y se filtró. El filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del título D24 (160 mg, 0.811 mmol, 92 % de rendimiento) como un aceite marrón que se utilizó directamente en la siguiente etapa.
LCMS: 198 [M+H]+. tR =0.896 min. (LCMS condición 2)
Descripción D25
4-etoxi-W-(5-metoxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-amina (D25)
Figure imgf000040_0002
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (241 mg, 0.686 mmol), 5-metoxi-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-amina (que se puede preparar según D24) (123 mg, 0.624 mmol) y diciclohexil-(2',4',6'-triisopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)fosfina (44.6 mg, 0.094 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0.300 mL) se agregó PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (50.9 mg, 0.062 mmol) y carbonato de sodio (132 mg, 1.247 mmol). La mezcla se irradió por microondas a 90°C durante 45 min. La reacción se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc (20 mL x 3). La capa orgánica combinada se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D25 (80 mg, 0.106 mmol, 17.02 % de rendimiento).
LCMS: 513 [M+H]+. tR =1.961 min. (LCMS condición 2)
Descripción D26
2-cloro-4-etoxi-5-yodo-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (D26)
Figure imgf000040_0003
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidina (que se puede preparar según D1) (500 mg, 2.53 mmol) en DMF (5 mL) se agregó NIS (683 mg, 3.04 mmol) en una parte. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se diluyó con Na2S2O3 acuoso y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó y se concentró para proporcionar el compuesto del título D26 (800 mg, 2.473 mmol, 98 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 324 [M+H]+. tR =3.210 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 57.59 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.51 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.40 (t, 3H).
Descripción D27
2-cloro-4-etoxi-7H-pirrolo-[2,3-d]pirim idina-5-carbonitrilo (D27)
Figure imgf000041_0001
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-5-yodo-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (que se puede preparar según D26) (610 mg, 1.886 mmol) en DMA (5 mL) se agregó cianuro de cobre (I) (507 mg, 5.66 mmol). La reacción se irradió por microondas a 120°C durante 2 horas. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se lavó con agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en Na2SÜ4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=3:2) para proporcionar el compuesto del título D27 (200 mg, 0.898 mmol, 47.6 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 223 [M+H]+. tR =2.777 min. (LCMS condición 1)
Descripción D28
6-cloro-4-etoxi-3-metil-1 H-pirazolo[3,4-d]pirimidina (D28)
Figure imgf000041_0002
A una solución de etanol (0.227 g, 4.93 mmol) en THF (60 mL) se agregó hidruro de sodio (0.591, 14.78 mmol) en baño de hielo. Después de 20 minutos, se agregó 4,6-dicloro-3-metil-1 H-pirazolo-[3,4-a(|-pirimidina (1g, 4.93 mmol). La mezcla de reacción se calentó gradualmente hasta temperatura ambiente y luego se agitó durante la noche. Luego, la mezcla se diluyó con agua (20 mL), se concentró para retirar el solvente y se diluyó con acetato de etilo (220 mL). La capa orgánica se lavó con agua (60 mL x 2), se secó en Na2SÜ4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. Rendimiento: 86 %.
LCMS: 213 [M+H]+. tR =2.775 min. (LCMS condición 1)
Descripción D29
6-cloro-4-(ciclopropilmetoxi)-1H-pirazolo[3,4-d]pirimidina (D29)
Figure imgf000041_0003
A una solución de ciclopropilmetanol (1.908 g, 26.5 mmol) en THF (200 mL) se agregó hidruro de sodio (3.17 g, 79 mmol) en baño de hielo. Después de agitar durante 30 minutos, se agregó 4,6-dicloro-1 H- pirazolo-[3,4-a(]-pirimidina (5 g, 26.5 mmol). La reacción se calentó gradualmente hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. Luego, la mezcla se diluyó con agua (80 mL), se concentró para retirar el solvente y se diluyó con acetato de etilo (220 mL). La capa orgánica se lavó con agua (80 mL x 2), se secó en Na2SÜ4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. Rendimiento: 84%.
LCMS: 225 [M+H]+. tR =2.918 min. (LCMS condición 1)
Descripción D30 y D31
1-(2-fluoroetil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol (D30)
1-(2-fluoroetil)-3-metil-4-nitro-1H-pirazol (D31)
Figure imgf000042_0001
Una solución de 5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (2.0 g, 15.74 mmol), 1-bromo-2-fluoroetano (2.197 g, 17.31 mmol) y CS2CO3 (10.25 g, 31.5 mmol) en acetonitrilo (100 mL) se agitó durante la noche a 60°C. La mezcla se filtró y la solución se concentró al vacío para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D30 (2.6 g, 6.01 mmol, 38.2 % de rendimiento) y D31 (2.6 g, 9.01 mmol, 57.3 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 174 [M+H]+. tR =1.161 min. (LCMS condición 2)
Descripción D32 y D33
1-(2-fluoroetil)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D32)
1-(2-fluoroetil)-3-metil-1H-pirazol-4-amina (D33)
Figure imgf000042_0003
Una solución de la mezcla de 1-(2-fluoroetil)-5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D30) y 1-(2-fluoroetil)-3-metil-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D31) (D30 y D31 juntos, 1200 mg, 2.772 mmol) y Pd/C (100 mg, 0.940 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno a temperatura ambiente durante 2 horas. Luego el producto en bruto se filtró y la solución se concentró para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D32 (500 mg, 1.397 mmol, 50 % de rendimiento) y D33 (500 mg, 2.096 mmol, 75 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
D32: LCMS: 144 [M+H]+. tR =0.64 min. (LCMS condición 1)
D33: LCMS: 144 [M+H]+. tR =0.73 min. (LCMS condición 1)
Descripción D34
5-cloro-1-(oxetan-3-il-metil)-1 H-pirazol-4-amina (D34)
Figure imgf000042_0002
Una solución de 5-cloro-4-nitro-1 -(oxetan-3-ilmetil)-1 H-pirazol (290 mg, 1.333 mmol) (que se puede preparar según la publicación de la solicitud de patente estadounidense 20130079321) y hierro (372 mg, 6.66 mmol) en etanol (2 mL) y agua (2.000 mL) se agitó a 80°C durante 1 hora. La mezcla se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título D34 (140 mg, 0.746 mmol, 56.0 % de rendimiento) como un sólido.
LCMS: 188 [M+H]+. tR =0.76 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-ds): 57.07 (s, 1H), 4.54 - 4.70 (m, 2H), 4.38 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 4.25 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.90 - 4.08 (m, 2H), 3.33 - 3.37 (m, 1H).
Descripción D35
5-metil-4-nitro-1-(oxetan-3-ilmetil)-1 H-pirazol (D35)
Figure imgf000043_0001
A una solución de ácido metilborónico (413 mg, 6.89 mmol), 5-cloro-4-nitro-1-(oxetan-3-il-metil)-1 H-pirazol (500 mg, 2.298 mmol) y carbonato de sodio (731 mg, 6.89 mmol) en 1,4-dioxano (4 mL) y agua (0.400 mL) se agregó aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (188 mg, 0.230 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 75°C bajo nitrógeno durante la noche. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D35 (280 mg, 1.278 mmol, 55.6 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 198 [M+H]+. tR =1.421 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.06 (s, 1H), 4.79 - 4.91 (m, 2H), 4.52 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 4.39 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 3.42 - 3.62 (m, 1H), 2.59 - 2.73 (m, 3H).
Descripción D36
5-metil-1-(oxetan-3-ilmetil)-1H-pirazol-4-amina (D36)
Figure imgf000043_0002
Una solución de 5-metil-4-nitro-1-(oxetan-3-ilmetil)-1 H-pirazol (que se puede preparar según D35) (260 mg, 1.319 mmol) y hierro (368 mg, 6.59 mmol) en etanol (2 mL) y agua (2.000 mL) se agitó a 80°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para obtener el compuesto del título D36 (275 mg, 0.822 mmol, 62.4 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 168 [M+H]+. tR =0.32 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-ds): 57.65 (s, 1H), 5.23 (br. s., 1H), 4.71 (br. s., 2H), 4.43 (ddd, J = 11.2, 8.3, 2.8 Hz, 2H), 4.15 - 4.25 (m, 2H), 3.55 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.25 (s, 3H).
Descripción D37 y D38
(±)-5-metil-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-3-il)-1 H-pirazol (D37)
(±)-3-metil-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-3-il)-1 H-pirazol (D38)
Figure imgf000043_0003
Una solución de 5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (1.5 g, 11.80 mmol) y metanosulfonato de tetrahidro-2H-piran-3-il (3.19 g, 17.70 mmol) en DMF (15 mL) se agregó carbonato de potasio (2.447 g, 17.70 mmol) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2: 1) y además se purificó mediante HPLC preparativa para obtener la mezcla de los compuestos del título D37 y D38 (500 mg, 50 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 212 [M+H]+. tR =1.266 min. (LCMS condición 2)
Descripción D39 y D40
(±)-5-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-pirazol-4-amina (D39)
(±)-3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-pirazol-4-amina (D40)
Figure imgf000044_0001
Una solución de mezcla de (±)-5-metil-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-3-il)-1H-pirazol (que se puede preparar según D37) y (±)-3-metil-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-3-il)-1 H-pirazol (que se puede preparar según D38) (D37 y D38 juntos, 450mg, 2.131 mmol) y hierro (595 mg, 10.65 mmol) en etanol (2 mL) y agua (2.000 mL) se agitó a 80°C durante alrededor de 1 hora La mezcla se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D39 y D40 (150 mg, 0.828 mmol, 38.8 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 182 [M+H]+. tR =0.98 min. (LCMS condición 2)
Descripción D41
(±)-frans-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D41)
Figure imgf000044_0002
Una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (5.0g, 44.2 mmol), 6-oxabiciclo-[3.1.0]-hexano (4.46 g, 53.1 mmol) (que se puede preparar según Tetrahedron, 64(39), 9253-9257; 2008) y Cs2CÜ3 (18.73 g, 57.5 mmol) en DMF (40 mL) se calentó durante la noche a 80°C. La mezcla se agregó al agua (300 mL), se extrajo con EA. La capa orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2:1) para proporcionar el compuesto del título D41 (7,0g, 33.4 mmol, 75 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 198 [M+H]+. tR =1.118 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.21 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 4.32 - 4.48 (m, 2H), 2.73 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 2.30 - 2.42 (m, 1H), 2.07 - 2.25 (m, 2H), 1.86 - 2.00 (m, 2H), 1.71 - 1.83 (m, 1H).
Descripción D42
(±)-frans-2-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D42)
Figure imgf000044_0003
A una solución de (±)-trans-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (que se puede preparar según D41)(3.5g, 17.75 mmol)en THF seco (100 mL) agitada bajo nitrógeno a -78°C se agregó una solución bis(trimetilsilil)amida de litio (53.2 mL, 53.2 mmol) en THF por goteo durante 15 min. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min. Se agregó una solución de percloroetano (10.50 g, 44.4 mmol) en THF (100 mL) y la mezcla se agitó durante 3 horas a -78°C bajo nitrógeno. La mezcla se inactivó con NH4Cl acuoso y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D42 (1,3g, 5.61 mmol, 31.6 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 232 [M+H]+. tR =1.258 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.20 (s, 1H), 4.60 - 4.73 (m, 2H), 2.14 - 2.37 (m, 2H), 1.91 - 2.08 (m, 3H), 1.70 - 1.82 (m, 1H).
Descripción D43
(±)-frans-2-(4-amino-5-cloro-1 H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D43)
Figure imgf000045_0001
La mezcla de (±)-frans-2-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (que se puede preparar según D42) (500mg, 2.159 mmol) y hierro (1205 mg, 21.59 mmol) en etanol (40 mL) y agua (40.0 mL) se agitó durante la noche a 20°C. La mezcla se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=10:1) para proporcionar el compuesto del título D43 (350 mg, 1.649 mmol, 76 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 202 [M+H]+. tR =0.944 min. (LCMS condición 2)
Descripción D44
(±)-frans-2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D44)
Figure imgf000045_0002
A una mezcla de (±)-frans-2-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopentanol (que se puede preparar según D42) (700mg, 3.02 mmol), ácido metilborónico (543 mg, 9.07 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) y agua (2.000 mL) se agregó PdCL(dppf) (111 mg, 0.151 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a 75°C bajo nitrógeno. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D44 (400 mg, 1.515 mmol, 50.1 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 212 [M+H]+. tR =1.265 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.10 (s, 1H), 4.56 - 4.68 (m, 1H), 4.32 - 4.46 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.08 - 2.24 (m, 3H), 1.86 - 1.98 (m, 2H), 1.68 - 1.82 (m, 1H).
Descripción D45
(±)-frans-2-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D45)
Figure imgf000045_0003
Una solución de (±)-frans-2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (que se puede preparar según D44) (400mg, 1.894 mmol) y Pd/C (101 mg, 0.095 mmol) en metanol (20 mL) se agitó durante la noche a 20°C bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=10:1) para proporcionar el compuesto del título D45 (300 mg, 1.407 mmol, 74,3 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 182 [M+H]+. tR =1.057 min. (LCMS condición 2)
Descripción D46
(±)-frans-2-(5-cloro-4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D46)
Figure imgf000045_0004
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (600 mg, 1.705 mmol), (±)-frans-2-(4-amino-5-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (que se puede preparar según D43) (344 mg, 1.705 mmol) y (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (148 mg, 0.256 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (471 mg, 3.41 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (139 mg, 0.171 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:3) para proporcionar el compuesto del título D46 (350 mg, 0.555 mmol, 32.5 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 517 [M+H]+. tR =1.820 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.36 (br. s., 1H), 7.97 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.23 - 7.32 (m, 5H), 6.46 - 6.57 (m, 1H), 4.72 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 4.54 - 4.62 (m, 1H), 4.49 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.15 (q, J = 7.3 Hz, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.30 - 2.37 (m, 1H), 2.18 - 2.27 (m, 1H), 2.08 - 2.15 (m, 1H), 1.90 - 1.99 (m, 2H), 1.72 - 1.83 (m, 1H), 1.43 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
Descripción D47
(±)-ffans-2-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1HLpyirazol-1-il)ciclopentanol (D47)
Figure imgf000046_0001
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (500 mg, 1.421 mmol), (±)-frans-2-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (que se puede preparar según D45) (300 mg, 1.655 mmol) y (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diyl)bis(difenilfosfina) (123 mg, 0.213 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (393 mg, 2.84 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (116 mg, 0.142 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=1:3) para proporcionar el compuesto del título D47 (250mg, 0.337 mmol, 23.73% de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 497 [M+H]+. tR =1.547 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 57.70 - 7.80 (m, 2H), 7.67 (s, 1H), 7.13 - 7.25 (m, 4H), 6.42 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 6.22 (br. s., 1H), 4.59 - 4.70 (m, 1H), 4.38 - 4.47 (m, 3H), 2.35 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.13 - 2.28 (m, 3H), 1.82 -1.98 (m, 2H), 1.74 (dq, J = 12.8, 8.2 Hz, 1H), 1.38 (t, J = 7.0 Hz, 3H).
Descripción D48
(±)-2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il- metanosulfonato (D48)
Figure imgf000046_0002
A una solución de 2-metiltetrahidro-2H-piran-4-ol (1 g, 8.61 mmol) y DIPEA (2.255 mL, 12.91 mmol) en DCM (10 mL) agitada a 0°C se agregó una solución de cloruro de metanosulfonilo (0.356 mL, 10.33 mmol) en DCM (2 mL) por goteo. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se agregó una solución de NaHCO3 saturado y la mezcla se extrajo con DCM (10 mLx3). La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró al vacío para proporcionar D48 (1.1g, 5.66 mmol, 65.8 % de rendimiento) como un aceite incoloro.1
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 54.70 - 4.87 (m, 1H), 4.04 (ddd, J = 12.0, 4.9, 1.6 Hz, 1H), 3.31 - 3.52 (m, 2H), 3.03 (s, 3H), 2.01 - 2.20 (m, 2H), 1.73 - 1.87 (m, 1H), 1.44 - 1.57 (m, 1H), 1.20 - 1.26 (m, 3H).
Descripción D49
(±)-5-metil-1-(2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D49)
Figure imgf000046_0003
Una solución de 5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (3.04 g, 23.89 mmol), (±)-2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il- metanosulfonato (que se puede preparar según D48) (5.8 g, 29.9 mmol) y Cs2CO3 (9.73 g, 29.9 mmol) en acetonitrilo (50 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se filtró y la solución se evaporó. El producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título D49 (870 mg, 3.86 mmol, 16.1 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 226 [M+H]+. tR =1.52 min. (LCMS condición 2)
Descripción D50
(±)-5-metil-1-(2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-pirazol-4-amina (D50)
Figure imgf000047_0001
Una solución de (±)-5-metil-1-(2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (que se puede preparar según D49) (220 mg, 0.977 mmol) y hierro (545 mg, 9.77 mmol) en etanol (4 mL) y agua (4.00 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y la solución se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=10:1) para proporcionar el compuesto del título D50 (200 mg, 0.727 mmol, 74,5 % de rendimiento) como un aceite negro.
LCMS: 196 [M+H]+. tR =1.16 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 57.15 (s, 1H), 4.43 (m, J = 4.5 Hz, 1H), 4.20 - 4.30 (m, J = 9.3, 6.3, 6.3, 6.3, 3.0 Hz, 1H), 4.11 (td, J = 10.9, 3.0 Hz, 2H), 3.76 - 3.89 (m, 2H), 2.17 (s, 3H), 1.98 - 2.09 (m, 2H), 1.88 - 1.97 (m, 1H), 1.74 (dt, J = 9.2, 4.7 Hz, 1H), 1.20 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Descripción D51
(±)-4-etoxi-W-(5-metil-1-(2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (D51)
Figure imgf000047_0002
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (541 mg, 1.536 mmol), (±)-5-metil-1 -(2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-pirazol-4-amina (que se puede preparar según D50) (200 mg, 1.024 mmol) y (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (73.2 mg, 0.154 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (283 mg, 2.049 mmol) y PdCl2(dppf) (84 mg, 0.102 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (100 mL) y agua (80 mL). La capa orgánica se lavó con agua (80 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=3:1) para proporcionar el compuesto del título D51 (300 mg, 0.382 mmol, 37.3 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 511 [M+H]+. tR =1.62 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 57.70 - 7.86 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 7.12 - 7.21 (m, 3H), 6.42 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 4.62 (t, J = 4.4 Hz, 1H), 4.43 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.27 - 4.37 (m, 1H), 4.16 - 4.26 (m, 1H), 3.88 (dt, J = 11.5, 4.4 Hz, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 2.14 - 2.23 (m, 1H), 2.11 (dt, J = 8.7, 4.5 Hz, 2H), 1.82 (ddd, J = 13.9, 9.0, 5.0 Hz, 1H), 1.38 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.19 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Descripción D52
5-ciclopropil-4-nitro-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol (D52)
Figure imgf000047_0003
A una solución de ácido ciclopropilborónico (556 mg, 6.48 mmol), 5-cloro-4-nitro-1 -(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-pirazol (500 mg, 2.159 mmol) y carbonato de sodio (458 mg, 4.32 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0.300 mL) se agregó PdCl2(pddf) (176mg, 0.216 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 90°C durante 3 horas bajo nitrógeno. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante Biotage para proporcionar el compuesto D52 (300 mg, 1.151 mmol, 53.3 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 328 [M+H]+. Xr =1.304 min. (LCMS condición 2)
Descripción D53
5-ciclopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D53)
Figure imgf000048_0001
Una solución de 5-ciclopropil-4-niXro-1-(XeXrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol (que se puede preparar según D52) (200 mg, 0.843 mmol), clorhidrato de amoníaco (225 mg, 4.21 mmol) y hierro (235 mg, 4.21 mmol) en agua (2 mL) y etanol (2.000 mL) se agitó a 70°C bajo nitrógeno durante la noche. El solvente se evaporó y el producto en bruto se disolvió en etanol y se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D53 (150 mg, 0.651 mmol, 77 % de rendimiento) como un aceite marrón.
LCMS: 208 [M+H]+. Xr =0.995 min. (LCMS condición 2)
Descripción D54
W-(5-ciclopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo- [2,3-d]-pirimidin-2-amina (D54)
Figure imgf000048_0002
Una solución de 2-cloro-4-eXoxi-7-Xosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (18.67 mg, 0.053 mmol), 5-ciclopropil-1-(XeXrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-amina (que se puede preparar según D53) (10 mg, 0.048 mmol), carbonato de sodio (10.23 mg, 0.096 mmol), PdCl2(pddf)-CH2Cl2 (3.94 mg, 4.82 pmol) y (9,9-dimetil-9H-xanXeno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (3.45 mg, 7.24 pmol) en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0.300 mL) se irradió por microondas 120°C durante 45 min. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con EtOAc (20 mL x 3). La capa orgánica combinada se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D54 (18 mg, 0.024 mmol, 50.0 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 523 [M+H]+. Xr =1.834 min. (LCMS condición 2)
Descripción D55
4-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)etil)-morfolino (D55)
Figure imgf000048_0003
Una solución de 2-(5-meXil-4-niXro-1H-pirazol-1-il)-eXil-meXanosulfonaXo (que se puede preparar según D15) (200 mg, 0.802 mmol), morfolino (80 mg, 0.918 mmol) y carbonato de potasio (381 mg, 2.75 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D55 (150mg, 0.312 mmol, 34.0 % de rendimiento) como un aceite. LCMS: 241 [M+H]+. Xr =1.120 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.10 (s, 1H), 4.16 - 4.24 (m, 2H), 3.62 - 3.74 (m, 4H), 2.80 (X, J = 6.3 Hz, 2H), 2.69 (s, 3H), 2.44 - 2.52 (m, 4H).
Descripción D56
5-metil-1-(2-morfolinoetil)-1H-pirazol-4-amina (D56)
Figure imgf000049_0001
Una solución de 4-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)etil)-morfolino (que se puede preparar según D55) (150mg, 0.624 mmol) y Pd/C (33.2 mg, 0.031 mmol) en metanol (5 mL) se agitó durante la noche a°C bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y la solución se concentró para proporcionar el compuesto del título D56 (100 mg, 0.476 mmol, 76 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 211 [M+H]+. tR =1.008 min. (LCMS condición 2)
Descripción D57
4-etoxi-W-(5-metil-1-(2-morfolinoetil)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D57)
Figure imgf000049_0002
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-c/]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (150 mg, 0.426mmol), 5-metil-1-(2-morfolinoetil)-1H-pirazol-4-amina (que se puede preparar según D56) (100 mg, 0.476 mmol) y (9,9- dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (37.0 mg, 0.064 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (118 mg, 0.853 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (34.8 mg, 0.043 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó al vacío, se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D57 (70 mg, 0.109 mmol, 25.6 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 525 [M+H]+. tR =1.743 min. (LCMS condición 2)
Descripción D58
metanosulfonato de 3-benciloxi-ciclobutilo (D58)
Figure imgf000049_0003
Una solución de DIPEA (5.33 mL, 30.5 mmol) y 3-(benciloxi)ciclobutanol (3.63 g, 20.34 mmol) en DCM (10 mL) se enfrió hasta 0°C y se agregó cloruro de metanosulfonilo (2.33 g, 20.34 mmol). Luego se agitó la mezcla a temperatura ambiente durante 2 horas. Luego, la mezcla se diluyó con EtOAc (50 mL) y se lavó con NaHCO3 acuoso, se secó en Na2SO4 , se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título D58 (3.3 g, 12.87 mmol, 63.3 % de rendimiento) como un aceite incoloro, que se utilizó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
LCMS: 257 [M+H]+. tR =1.460 min. (LCMS condición 2)
Descripción D59
1-(3-(benciloxi)-ciclobutil)-4-nitro-1H-pirazol (D59)
Figure imgf000049_0004
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (765 mg, 6.77 mmol) y metanosulfonato de 3-benciloxi-ciclobutilo (que se puede preparar según D58) (2601 mg, 10.15 mmol) en DMF (15 mL) se agregó carbonato de potasio (1403 mg, 10.15 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla de reacción se extrajo con EtOAc y la capa orgánica se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D59 (1,4 g, 5.12 mmol, 76 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 274 [M+H]+. tR =1.499 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.98 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.25 - 7.44 (m, 5H), 5.01 - 5.18 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.30 - 4.40 (m, 1H), 2.64 - 2.75 (m, 2H), 2.48 - 2.61 (m, 2H).
Descripción D60
1-(3-(benciloxi)ciclobutil)-5-cloro-4-nitro-1H-pirazol (D60)
Figure imgf000050_0001
A una solución de 1 -(3-(benciloxi)-ciclobutil)-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D59) (1.4 g, 5.12 mmol) en THF seco (10 mL) agitada bajo nitrógeno a -70°C se agregó una solución de bis(trimetilsilil)amida de litio (3.43 g, 20.49 mmol) en THF (10 mL) durante15 min. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min. Se agregó una solución de percloroetano (3.64 g, 15.37 mmol) en THF (10 mL) y la mezcla se agitó a -78°C bajo nitrógeno durante 2 horas. La mezcla se inactivó con una solución de NH4Cl acuoso (50 mL) y se extrajo con EtOAc (2 x 100 mL). La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D60 (700 mg, 2.275 mmol, 44.4 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 308 [M+H]+. tR =1.79 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.53 (s, 1H), 7.25 - 7.40 (m, 5H), 5.09 - 5.25 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.32 - 4.41 (m, 1H), 2.65 - 2.77 (m, 2H), 2.54 - 2.65 (m, 2H).
Descripción D61
1-(3-(benciloxi)-ciclobutil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol (D61)
Figure imgf000050_0002
A una solución de ácido metilborónico (233 mg, 3.90 mmol), 1-(3-(benciloxi)ciclobutil)-5-cloro-4-nitro-1H-pirazol (que se puede preparar según D60) (400 mg, 1.300 mmol) y carbonato de sodio (413 mg, 3.90 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0.300 mL) se agregó aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (106 mg, 0.130 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 75°C bajo nitrógeno. Luego, la mezcla se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D61 (130 mg, 27.8 %).
LCMS: 288 [M+H]+. tR =1.549 min. (LCMS condición 2)
Descripción D62
3-(4-amino-5-metil-1 H-pirazol-1-il)ciclobutanol (D62)
Figure imgf000050_0003
Una solución de 1-(3-(benciloxi)-ciclobutil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol (que se puede preparar según D61) (200 mg, 0.696 mmol) y Pd/C (50mg, 0.047 mmol) en metanol (20 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título D62 (100 mg, 0.598 mmol, 86 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 168 [M+H]+. tR =0.693 min. (LCMS condición 2)
Descripción D63
(±)-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)ciclohexanol (D63)
Figure imgf000051_0001
Una solución de 5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (2.053 g, 16.16 mmol), ciclohexano-1,4-diil dimetanosulfonato (5.5 g, 20.20 mmol) y Cs2CO3 (6.58 g, 20.20 mmol) en acetonitrilo (50 mL) se calentó a 90°C durante 40 horas. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=10:1) para obtener un producto en bruto (1.1 g, 2.502 mmol, 12.39 % de rendimiento), que se purificó además mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título (180 mg, 0.757 mmol) como un aceite incoloro.
LCMS: 226 [M+H]+. tR =1.02 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 8.18 (s, 1H), 4.69 - 4.93 (m, 1H), 4.05 - 4.09 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.33 - 2.49 (m, 1H), 2.07 - 2.20 (m, 4H), 1.97 - 2.01 (m, 2H), 1.87 - 1.93 (m, 1H).
Descripción D64
(±)-4-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclohexanol (D64)
Figure imgf000051_0002
Se agitó una solución de D63 (170 mg, 0.755 mmol) y hierro (421 mg, 7.55 mmol) en etanol (6 mL) y agua (6.00 mL) durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título D64 (160 mg, 0.492 mmol, 65.1 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 196 [M+H]+. tR =1.03 min. (LCMS condición 2)
Descripción D65
(±)-4-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclohexanol (D65)
Figure imgf000051_0003
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (432 mg, 1.229mmol), (±)-4-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclohexanol (que se puede preparar según D64) (160 mg, 0.819 mmol) y diciclohexil(2',4',6'-triisopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)fosfina (58.6 mg, 0.123 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (226 mg, 1.639 mmol) y PdCb(pddf) (66.9 mg, 0.082 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó al vacío, se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D65 (100 mg, 0.143 mmol, 17.45 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 511 [M+H]+. tR =1.93 min. (LCMS condición 2)
Descripción D66
(±)-3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D66)
Figure imgf000051_0004
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (1.3 g, 11.50 mmol), metanosulfonato de 3-hidroxiciclopentilo (3 g, 16.65 mmol) y Cs2COa (7.49 g, 22.99 mmol) en DMF (20 mL) se agitó a 90°C durante 4 horas. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con acetato de etilo. La capa orgánica se secó con Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D66 (1,3 g, 5.80 mmol, 50.5 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 198 [M+H]+. tR =1.39 min. (LCMS condición 2)
Descripción D67
(±)-3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-ciclopentanol (D67)
Figure imgf000052_0001
A una solución de (±)-3-(4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopentanol (que se puede preparar según D66)(3.5g, 17.75 mmol)en THF seco (100 mL) agitada bajo nitrógeno a -70°C se agregó una solución bis(trimetilsilil)amida de litio (19.78 mL, 19.78 mmol 1 M en THF) por goteo durante 15 min. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min. Se agregó una solución de percloroetano (3.12 g, 13.19 mmol) en THF (20 mL) y la mezcla se agitó durante 2 horas a -78°C bajo nitrógeno. La mezcla se inactivó con NH4Cl ac. Luego, la mezcla se extrajo con EtOAc (2 x100 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D67 (1,1g, 4.23 mmol, 64.1 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 232 [M+H]+. tR =1.56 min. (LCMS condición 2)
Descripción D68
(±)-3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D68)
Figure imgf000052_0002
A una solución de ácido metilborónico (0.775 g, 12.95 mmol), (±)-3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-ciclopentanol (que se puede preparar según D67) (1 g, 4.32 mmol) y carbonato de sodio (1.373 g, 12.95 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) y agua (4.00 mL) se agregó aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0.353 g, 0.432 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 90°C. Luego, se agregó agua (100 mL) y luego se extrajo con acetato de etilo (2 x 50 mL). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera (20 mL), se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=3:1) para proporcionar el compuesto del título D68 (500 mg, 2.367 mmol, 54.8 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 212 [M+H]+. tR =1.12 min. (LCMS condición 2)
Descripción D69 y D70
(±)-frans-3-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D69)
(±)-c/'s-3-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D70)
Figure imgf000052_0003
Una solución de (±)-3-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)ciclopentanol (que se puede preparar según D68) (500 mg, 2.367 mmol) y Pd/C (650 mg, 6.11 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno a temperatura ambiente durante 4 horas. Luego, la mezcla se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=3:1) para proporcionar el compuesto del título D69 (50 mg, 0.276 mmol, 11.65 % de rendimiento) y D70 (270 mg, 1.490 mmol, 62.9 % de rendimiento) como sólidos blancos.
D69: LCMS: 182 [M+H]+. tR =0.82 min. (LCMS condición 2)
D70: LCMS: 182 [M+H]+. tR =1.03 min. (LCMS condición 2)
Descripción D71
3-hidroxi-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)pirrolidin-1-catboxilato( de ±)-ferc-butilo (D71)
Figure imgf000053_0001
Boc
Una solución de 5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (5.0g, 39.3 mmol), 6-oxa-3-azabiciclo- [3.1.0]hexano-3-catboxilato de terc-butilo (8.74 g, 47.2 mmol) (que se puede preparar según la publicación de la solicitud de patente estadounidense 20070037853), y Cs2CO3 (1 6 . 6 6 g, 51.1 mmol) en DMF (20 mL) se calentó hasta 80°C durante la noche. La mezcla se agregó al agua (300 mL) y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=2:1) para proporcionar el compuesto del título (5,0g, 11.21 mmol, 28.5 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 313 [M+H]+. tR =1.543 min. (LCMS condición 2)
Descripción D72
3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)pirrolidina-1-catboxilato de (±)-ferc-butilo (D72)
Figure imgf000053_0002
Boc
A una solución de DAST (7.61 mL, 57.6 mmol) en DCM (30 mL) se agregó una solución de 3-hidroxi-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)pirrolidin-1 -catboxilato de (±)-terc-butilo (que se puede preparar según D71) (6.0 g, 19.21 mmol) en DCM (200 mL) at 0°C. Luego, la mezcla se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 4 horas. La mezcla se diluyó con NaHCO3 al 10 % y se extrajo con DCM. La capa orgánica se lavó con NaHCO3 al 10 %, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D72 (500mg, 1.432 mmol, 7.45 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 315 [M+H]+. tR =1.683 min. (LCMS condición 2)
Descripción D73
(±)-1 -(4-fluoro-1 -metilpirrolidin-3-il)-5-metil-1 H-pirazol-4-amina (D73)
Figure imgf000053_0003
Una solución de LiAlH4 (72.5 mg, 1.909 mmol, 1 M en THF) y 3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)pirrolidin-1 -carboxilato de (±)-terc-butilo (que se puede preparar según D72) (200 mg, 0.636 mmol) en THF (5 mL) se agitó durante la noche a 60°C durante la noche bajo nitrógeno. La mezcla se inactivó con agua, se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (EA: MeOH=20:1) para proporcionar el compuesto del título D73 (100 mg, 0.444 mmol, 69.8 % de rendimiento).
LCMS: 199 [M+H]+. tR =1.093 min. (LCMS condición 2)
Descripción D74
(±)-4-etoxi-W-(1-(4-fluoro-1-metilpirrolidin-3-il)-5-metil-1 H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D74)
Figure imgf000053_0004
Una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (150 mg, 0.426mmol), (±)-1-(4-fluoro-1-metilpirrolidin-3-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (que se puede preparar según D73) (90 mg, 0.454 mmol), carbonato de potasio (118 mg, 0.853 mmol), (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (37.0 mg, 0.064 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (34.8 mg, 0.043 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agitó a 90°C durante 6 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:3) para proporcionar el compuesto del título D74 (70 mg, 0.061 mmol, 14.39 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 514 [M+H]+. tR =1.595 min. (LCMS condición 2)
Descripción D75
metanosulfonato de 2-ciano-2-metilpropilo (D75)
Figure imgf000054_0001
A una solución de 3-hidroxi-2,2-dimetilpropanonitrilo (1.3 g, 13.11 mmol) y DIPEA (2.290 mL, 13.11 mmol) at 0°C en THF (50 mL) se agregó anhídrido metanosulfónico hipocloroso (2.358 mL, 13.11 mmol) y luego la mezcla se agitó a 0°C durante 30 min. La mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 acuoso (20 mL), se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró para proporcionar el compuesto del título D75 (2,0 g, 10.16 mmol, 77 % de rendimiento) como un aceite que se utilizó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 54.13 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 1.45 (s, 6H).
Descripción D76
2,2-dimetil-3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)propanonitrilo (D76)
Figure imgf000054_0002
Una solución de 5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (1.2 g, 9.44 mmol) y metanosulfonato de 2-ciano-2-metilpropilo (que se puede preparar según D75) (1.8 g, 10.16 mmol) y K2CO3 (3.91 g, 28.3 mmol) en DMF (20 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título D76 (230mg, 1.005 mmol, 10.65 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 209 [M+H]+. tR =1.465 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.33 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 2.68 (s, 3H), 1.38 (s, 6H).
Descripción D77
3-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)-2,2-dimetilpropanonitrilo (D77)
Figure imgf000054_0003
Una solución de 2,2-dimetil-3-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)propanonitrilo (que se puede preparar según D76) (150 mg, 0.720 mmol) y hierro (402 mg, 7.20 mmol) en etanol (4 mL) y agua (4.00 mL) se agitó durante la noche a 20°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=3:1) para proporcionar el compuesto del título D77 (100 mg, 0.561 mmol, 78 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 179 [M+H]+. tR =0.934 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 56.96 (s, 1H), 4.03 (s, 2H), 3.63 (br. s., 2H), 2.13 (s, 3H), 1.31 (s, 6H).
Descripción D78
3-(4-((4-etoxi-7-tosil-7HLpirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1HLpirazol-1-il)-2,2-dimetilpropanonitrilo (D78)
Figure imgf000055_0001
A una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-c/|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (150 mg, 0.426 mmol), 3-(4-amino-5-metil-1 H-pirazol-1 -il)-2,2-dimetilpropanonitrilo (que se puede preparar según D77) (100mg, 0.561 mmol) y (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (37.0 mg, 0.064 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agregó carbonato de potasio (118 mg, 0.853 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (34.8 mg, 0.043 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 90°C durante 6 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se dividió entre EtOAc (25 mL) y agua (20 mL). La capa orgánica se lavó con agua (20 mL), se secó en Na2SO4 y se evaporó al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=3:1) para proporcionar el compuesto del título D78 (80 mg, 0.128 mmol, 30.0 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 494 [M+H]+. tR =1.613 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.73 (s, 1H), 7.78 - 7.95 (m, 2H), 7.22 - 7.37 (m, 4H), 6.53 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 4.28 (br. s., 2H), 3.98 - 4.08 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 1.99 (s, 2H), 1.41 (s, 6H), 1.18 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
Descripción D79
2-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1 H-pirazol-1-il)-etanol (D79)
Figure imgf000055_0002
Una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidina (que se puede preparar según D2) (600 mg, 1.705 mmol), 2-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)etanol (289 mg, 2.047 mmol) (que se puede preparar según la solicitud internacional PCT, WO2012062783), carbonato de potasio (707mg, 5.12 mmol), X-Phos (122 mg, 0.256 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (139 mg, 0.171 mmol) en 1,4-dioxano (16 mL) y agua (4 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA) para proporcionar el compuesto del título D79 (500 mg, 0.931 mmol, 54.6 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 457 [M+H]+. tR =1.464 min. (LCMS condición 2)
Descripción D80
metanosulfonato de 2-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-etilo (D80)
Figure imgf000055_0003
Una solución de 2-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-etanol (que se puede preparar según d 79) (500 mg, 1.095 mmol) y DIPEA (212 mg, 1.643 mmol) en DCM (10 mL) se enfrió hasta 0°C y se agregó cloruro de metanosulfonilo (125 mg, 1.095 mmol) y se agitó durante 2 horas. Se agregó EtOAc (50 mL) a la mezcla y se lavó con NaHCO3 acuoso, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título D80 (550 mg, 1.029 mmol, 94 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 534 [M+H]+. tR =1.531 min. (LCMS condición 2)
Descripción D81
(fí)-4-etoxi-WL(1-(2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etil)-5-metil-1 H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D81)
Figure imgf000056_0001
Una solución de metanosulfonato de (R)-3-fluoropirrolidina (23.66 mg, 0.266 mmol), 2-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-etilo (que se puede preparar según D80) (95 mg, 0.177 mmol) en acetonitrilo (3 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna utilizando EtOAc para proporcionar el compuesto del título D81 (50 mg, 0.087 mmol, 49.1 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 528 [M+H]+. tR =1.578 min. (LCMS condición 2)
Descripción D82
(S)-4-etoxi-A/-(1-(2-(3-fluoropirrolidin-1-il)etil)-5-metil-1 H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D82)
Figure imgf000056_0002
Una solución de metanosulfonato de (S)-3-fluoropirrolidine (37.5 mg, 0.421 mmol), 2-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(|-pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1 H-pirazol-1-il)-etilo (que se puede preparar según D80) (150mg, 0.281 mmol) en acetonitrilo (4 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EtOAc) para proporcionar el compuesto del título D82 (90 mg, 0.162 mmol, 57.8 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 528 [M+H]+. tR =1.539 min. (LCMS condición 2)
Descripción D83
1-(2-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metoxi)propan-2-il)-4-nitro-1H-pirazol (D83)
Figure imgf000056_0003
Una solución de 2-metil-2-(4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)propan-1 -ol (2 g, 10.80 mmol) (que se puede preparar según solicitud internacional PCT WO2012062783) e hidruro de sodio (0.864 g, 21.60 mmol) en DMF (30 mL) se agitó en un baño de hielo durante 30 min. Se agregó SEMCl (2.299 mL, 12.96 mmol) y luego la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 horas. Luego, la reacción se inactivó con agua (100 mL) y se extrajo con éter dietílico (50 mL x 3). La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D83 (1,2 g, 3.61 mmol, 33.5 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 314 [M+H|+. t R =2.09 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.91 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.30-3.45 (m, 3H), 2.55 (br. s., 1H), 1.60 (s, 6H), 0.79-0.94 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Descripción D84
5-cloro-1-(2-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metoxi)propan-2-il)-4-nitro-1H-pirazol (D84)
Figure imgf000057_0001
A una solución de 1-(2-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metoxi)propan-2-il)-4-nitro-1H-pirazol (que se puede preparar según D83) (1.2 g, 3.80 mmol) en THF seco (30 mL) agitada bajo nitrógeno a -70°C se agregó una solución de bis(trimetilsilil)amida de litio (11.41 mL, 11.41 mmol, 1 M en THF) por goteo durante 20 min. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min. Se agregó una solución de percloroetano (1.351 g, 5.71 mmol) y la mezcla se agitó durante 1 hora a -78°C bajo nitrógeno. La mezcla se inactivó con NH4Cl acuoso. Luego, la mezcla se extrajo con EtOAc (2 x100 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na2SÜ4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=30:1) para proporcionar el compuesto del título D84 (1,2 g, 3.43 mmol, 90 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 322 [M+H]+. tR =2.17 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.13 (s, 1H), 4.58-4.69 (m, 2H), 3.89-3.99 (m, 2H), 3.41-3.59 (m, 2H), 1.70­ 1.84 (m, 6H), 0.79-0.97 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Descripción D85
5-metil-1-(2-metil-1-((2-(trimetilsilil)-etoxi)-metoxi)propan-2-il)-4-nitro-1H-
pirazol (D85)
Figure imgf000057_0002
Una solución de 2,4,6-trimetil-1,3,5,2,4,6-trioxatriborinano (0.897 g, 7.15 mmol), 5-cloro-1-(2-metil-1-((2-(trimetilsilil)etoxi)metoxi)propan-2-il)-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D84) (1.0 g, 2.86 mmol), carbonato de sodio (0.909 g, 8.57 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0.467 g, 0.572 mmol) en 1,4-dioxano (2 mL) y agua (0.400 mL) se combinó en un tubo de vidrio de paredes gruesas y se agitó a 90°C durante 40 horas. Luego, la mezcla se diluyó con agua (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (2 x 100 mL). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera (20 mL), se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=30:1) para proporcionar el compuesto del título D85 (530 mg, 1.609 mmol, 56.3 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 330 [M+H]+. t R =2.14 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.06 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.34-3.56 (m, 2H), 2.71-2.95 (m, 3H), 1.72 (s, 6H), 0.79-0.95 (m, 2H), 0.00 (s, 9H).
Descripción D86
2-metil-2-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)propan-1-ol (D86)
Figure imgf000057_0003
Una solución de 5-metil-1-(2-metil-1-((2-(trimetilsilil)-etoxi)-metoxi)propan-2-il)-4-nitro-1H-pirazol (que se puede preparar según D85) (500 mg, 1.518 mmol) y cloruro de hidrógeno (15 mL, 60.0 mmol, 4 M en agua) se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. Luego, la mezcla se trató con solución de NaHCO3 saturado hasta que el pH = 8. Luego, la mezcla se extrajo con EtOAc (2 x 50 mL). La capa orgánica se secó con Na2SO4 , se filtró y se concentró para proporcionar el compuesto del título D86 (270 mg, 1.355 mmol, 89 % de rendimiento) como un aceite marrón.
LCMS: 200 [M+H]+. t R =0.83 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.06 (s, 1H), 7.26 (s, 1H), 3.94 (s, 2H), 2.83 (s, 3H), 1.46-1.75 (m, 6H).
Descripción D87
2-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-1-ol (D87)
Figure imgf000058_0001
Una solución de 2-metil-2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)propan-1-ol (que se puede preparar según D86) (260 mg, 1.305 mmol) y Pd/C (290 mg, 2.73 mmol) en metanol (30 mL) se agitó bajo hidrógeno a temperatura ambiente durante 4 horas. Luego, la mezcla se filtró y la solución se concentró para proporcionar el compuesto del título D87 (200 mg, 1.064 mmol, 81 % de rendimiento) como un aceite marrón.
LCMS: 170 [M+H]+. tR =0.72 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 57.27 (s, 1H), 7.09 (s, 1H), 3.88 (s, 2H), 2.31 (s, 3H), 1.49 ppm (s, 6H). Descripción D88
(±)-Trans-1-metil-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)-ciclopentanol (D88)
Figure imgf000058_0002
Una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (10 g, 88 mmol), 1-metil-6-oxabiciclo-[3.1.0]-hexano (13.02 g, 133 mmol) (que se puede preparar según la solicitud internacional Pc T WO2013055577) y K2CO3 (24.44 g, 177 mmol) en DMF (200 mL) se agitó durante la noche a 120°C. La mezcla se agregó al agua con hielo y luego se extrajo con EtOAc. Luego, la capa orgánica se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D88 (4,0g, 18.94 mmol, 21.41 % de rendimiento) como un aceite amarillo. LCMS: 212 [M+H]+. tR =1.196 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.20-8.23 (m, 1H), 8.09 (s, 1H), 4.47 (t, J=8.6 Hz, 1H), 2.09-2.24 (m, 2H), 1.79-1.91 (m, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.19-1.25 (m, 2H).
Descripción D89
(±)-Trans-2-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-metilciclopentanol (D89)
Figure imgf000058_0003
A una solución de (±)-7rans-1-metil-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)-ciclopentanol (que se puede preparar según D88) (6.5g, 30.8 mmol) en THF seco (100 mL) bajo nitrógeno a -78°C se agregó bis(trimetilsilil)amida de litio (92 mL, 92 mmol, 1 M en THF) por goteo durante 15 min. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min. Luego, se agregó una solución de percloroetano (18.21 g, 77 mmol) en THF seco (100 mL) y la mezcla se agitó a -78°C durante 3 horas bajo nitrógeno. La mezcla se inactivó con NH4Cl acuoso y se extrajo con EtOAc. La capa orgánica se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D89 (5,0g, 19.13 mmol, 62.2 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 246 [M+H]+. tR =1.513 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.19 (s, 1H), 4.77 (dd, J=5.6, 8.0 Hz, 1H), 2.33-2.49 (m, 2H), 1.94-2.08 (m, 3H), 1.75-1.87 (m, 1H), 1.02 (s, 3H).
Descripción D90
(±)-Trans-2-(5-ciclopropil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-metilciclopentanol (D90)
Figure imgf000059_0001
Una solución de (±)-frans-2-(5-cloro-4-n¡tro-1H-p¡razol-1-¡l)-1-metilc¡clopentanol (que se puede preparar según D89) (1.5g, 6.11 mmol), ácido ciclopropilborónico (0.524 g, 6.11 mmol), PdCl2(dppf) (4.47 g, 6.11 mmol) y Na2CO3 (0.647 g, 6.11 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) y agua (2.000 mL) se agitó a 75°C bajo nitrógeno durante 6 horas. La mezcla se concentró y el producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=6:1) para proporcionar el compuesto del título D90 (600 mg, 2.388 mmol, 39.1 % de rendimiento) como un aceite amarillo. LCMS: 252 [M+H]+. tR =1.540 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.07 (s, 1H), 4.88-5.03 (m, 1H), 2.24-2.44 (m, 2H), 1.87-2.04 (m, 3H), 1.73­ 1.84 (m, 1H), 1.26-1.32 (m, 1H), 0.99 (s, 3H), 0.63-0.69 (m, 2H), 0.56 (qd, J=2.8, 5.6 Hz, 2H).
Descripción D91
(±)-Trans-2-(4-amino-5-ciclopropil-1H-pirazol-1-il)-1-metilciclopentanol (D91)
Figure imgf000059_0002
Una solución de (±)-frans-2-(5-ciclopropil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-1-metilciclopentanol (que se puede preparar según D90) (550mg, 2.189 mmol) y Pd/C (116 mg, 0.109 mmol) en metanol (20 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y la solución se concentró para proporcionar el compuesto del título D91 (400 mg, 1.808 mmol, 83 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 222 [M+H]+. tR =1.184 min. (LCMS condición 2)
Descripción D92
(±)-Trans-2-(5-ciclopropil-4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-1H- pirazol-1 -il)-1 -metilciclopentanol (D92)
Figure imgf000059_0003
Una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (700 mg, 1.990 mmol), (±)-frans-2-(4-amino-5-ciclopropil-1 H-pirazol-1 -il)-1 -metilciclopentanol (que se puede preparar según D91) (440 mg, 1.990 mmol), carbonato de potasio (550 mg, 3.98 mmol), (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (173 mg, 0.298 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (162 mg, 0.199 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agitó a 90°C durante 6 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (25 mL) y se lavó con agua (20 mL). La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=6:1) para proporcionar el compuesto del título D92 (300 mg, 0.498 mmol, 25.01 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 537 [M+H]+. tR =1.822 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 58.00 (s, 1H), 7.93 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.18-7.24 (m, 3H), 6.45 (d, J=3.8 Hz, 1H), 4.88 (t, J=7.6 Hz, 1H), 4.45 (q, J=7.11 Hz, 2H), 2.34-2.53 (m, 5H), 1.88-2.13 (m, 3H), 1.80-1.85 (m, 1H), 1.45-1.56 (m, 1H), 1.39 (t, J=7.0 Hz, 3H), 0.96-1.10 (m, 5H), 0.83-0.91 (m, 1H), 0.63-0.72 (m, 1H).
Descripción D93
(±)-Trans-1-metil-2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D93)
Figure imgf000060_0001
Una solución de (±)-trans-2-(5-cloro-4-n¡tro-1H-p¡razol-1-¡l)-1-metilc¡clopentanol (que se puede preparar según D89) (1.5g, 6.11 mmol), ácido metilborónico (0.366 g, 6.11 mmol), PdCl2(dppf) (0.48 g, 0.611 mmol) y Na2CO3 (0.647 g, 6.11 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) y agua (2.000 mL) se agitó a 75°C bajo nitrógeno durante 6 horas. La mezcla se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=6:1) para proporcionar el compuesto del título D93 (500mg, 2.064 mmol, 33.8 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 226 [M+H]+. tR =1.121 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d): 5 8.10 (s, 1H), 4.52 (t, J=7.6 Hz, 1H), 2.74 (s, 3H), 2.41-2.55 (m, 1H), 2.24­ 2.39 (m, 1H), 1.75-2.05 (m, 4H), 0.98 (s, 3H).
Descripción D94
(±)-Trans-2-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)-1-metilciclopentanol (D94)
Figure imgf000060_0002
Una mezcla de (±)-frans-1-metil-2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D93)
(500 mg, 2.220 mmol) y Pd/C (118 mg, 0.111 mmol) en metanol (20 mL) se agitó durante la noche a 20°C bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y la solución se concentró para proporcionar el compuesto del título D94 (350 mg, 1.792 mmol, 81 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 196 [M+H]+. tR =1.056 min. (LCMS condición 2)
Descripción D95
(±)-Trans-2-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-1-m etilciclopentanol (D95)
Figure imgf000060_0003
Una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (650 mg, 1.848 mmol), (±)-frans-2-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)-1-metilciclopentanol (que se puede preparar según D94) (350 mg, 1.792 mmol), carbonato de potasio (511 mg, 3.70 mmol), (9,9-dimetil-9H-xanteno-4,5-diil)bis(difenilfosfina) (160 mg, 0.277 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (151 mg, 0.185 mmol) en 1,4-dioxano (2.0 mL) y agua (0.2 mL) se agitó a 90°C durante 6 horas. La mezcla se diluyó con EtOAc (25 mL) y se lavó con agua (20 mL). La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=6:1) para proporcionar el compuesto del título D95 (300 mg, 0.505 mmol, 27.3 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 511 [M+H]+. tR =1.767 min. (LCMS condición 2)
Descripción D96
1-(ciclopent-3-en-1-il)-4-nitro-1 H-pirazol (D96)
Una solución de metanosulfonato de 4-nitro-1 H-pirazol (750 mg, 6.63 mmol), ciclopent-3-en-1 -il (1614 mg, 9.95 mmol) y K2CO3 (1375 mg, 9.95 mmol) en DMF (20 mL) se agitó a 90°C durante 1 hora. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EA dos veces. Luego, la capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2: 1) para proporcionar el compuesto del título D96 (1,20 g, 6.54 mmol, 99 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 180 [M+H]+. tR =2.750 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.16 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 5.80 - 5.88 (m, 2H), 5.05 (tt, J = 8.1,3.9 Hz, 1H), 2.93 - 3.10 (m, 2H), 2.62 - 2.84 (m, 2H).
Descripción D97
5-cloro-1-(ciclopent-3-en-1-il)-4-nitro-1 H-pirazol (D97)
Figure imgf000061_0001
A una solución de 1-(ciclopent-3-en-1-il)-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D96) (750 mg, 4.19 mmol) en THF (20 mL) se agregó LHMDS (1 M en THF) (9 mL, 9.00 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -78°C durante 30 min, se agregó una solución de percloroetano (1486 mg, 6.28 mmol) en THF (20 mL) por goteo y la mezcla resultante se agitó a -78°C durante otras 2 horas. La reacción se inactivó con solución de NH4Cl saturado (50 mL) y se extrajo con EA dos veces. Luego, la capa orgánica combinada se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D97 (704 mg, 3.06 mmol, 73.2 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 214 [M+H]+. tR =3.226 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-ds): 58.11 (s, 1H), 5.65 - 5.78 (m, 2H), 5.10 - 5.24 (m, 1H), 2.71 - 2.94 (m, 4H).
Descripción D98
1-(ciclopent-3-en-1-il)-5-ciclopropil-4-nitro-1 H-pirazol (D98)
Figure imgf000061_0002
Una solución de 5-cloro-1-(ciclopent-3-en-1-il)-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D97) (500 mg, 2.341 mmol), ácido ciclopropilborónico (503 mg, 5.85 mmol), carbonato de sodio (744 mg, 7.02 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (96 mg, 0.117 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) y agua (1.00 mL) se agitó bajo nitrógeno at 90°C durante la noche. La mezcla se diluyó con DECM, se lavó con agua. La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D98 (386 mg, 1.673 mmol, 71.5 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 220 [M+H]+. tR =3.313 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.09 (s, 1H), 5.77 - 5.88 (m, 2H), 5.39 - 5.53 (m, 1H), 2.74 -3.02 (m, 4H), 1.88 (tt, J = 8.4, 5.6 Hz, 1H), 1.21 - 1.34 (m, 2H), 0.77 - 0.92 (m, 2H).
Descripción D99
(±)-Trans-5-(5-ciclopropil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopent-2-enol (D99)
Figure imgf000061_0003
Una solución de 1-(ciclopent-3-en-1-il)-5-ciclopropil-4-nitro-1 H-pirazol (que se puede preparar según D98)(385 mg, 1.756 mmol) y dióxido de selenio (585 mg, 5.27 mmol) en 1,4-dioxano (9 mL), agua (0.2 mL) y piridina (0.02 mL) se agitó a 80°C durante la noche. La mezcla se filtró y el filtrado se evaporó. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D99 (91 mg, 0.371 mmol, 21.15 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 236 [M+H]+. tR =2.418 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.03 (s, 1H), 5.73 - 5.98 (m, 2H), 5.19 (br. s., 1H), 5.10 (dt, J = 5.59, 8.38 Hz, 1H), 2.83 - 2.97 (m, 1H), 2.58 - 2.79 (m, 1H), 1.85 (tt, J = 5.53, 8.53 Hz, 1H), 1.16 - 1.27 (m, 4H).
Descripción D100
(±)-7rans-3-(5-ciclopropil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)biciclo-[3.1.0]-hexan-2-ol (D100)
Figure imgf000062_0001
A una solución de (±)-7rans-5-(5-ciclopropil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)ciclopent-2-enol (que se puede preparar según D99) (85 mg, 0.361 mmol) en DCM (5 mL) a 0°C bajo nitrógeno se agregó dietilzinc (1 M en heptano) (1.807 mL, 1.807 mmol) por goteo. Después de 15 min, la mezcla se trató con diyodometano (0.292 mL, 3.61 mmol) por goteo a 0°C Luego, la mezcla se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. La reacción se inactivó con solución de NH4Cl saturado (10 mL) y luego se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D100 (45 mg, 0.181 mmol, 50.0 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 250 [M+H]+. tR =2.559 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 58.02 (s, 1H), 4.94 (br. s., 1H), 4.44 (dt, J = 7.64, 10.15 Hz, 1H), 2.31 - 2.44 (m, 1H), 2.14 (dd, J = 7.70, 12.59 Hz, 1H), 1.70 - 1.79 (m, 1H), 1.60 (td, J = 4.03, 7.27 Hz, 1H), 1.43 - 1.50 (m, 1H), 1.18 (d, 2H), 0.85 - 0.95 (m, 1H), 0.62 - 0.70 (m, 2H), 0.52 - 0.61 (m, 1H).
Descripción D101
(±)-Trans-3-(4-am¡no-5-c¡cloprop¡l-1H-pirazol-1-¡l)b¡c¡clo-[3.1.0]-hexan-2-ol (D101)
Figure imgf000062_0002
Una solución de (±)-7rans-3-(5-ciclopropil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)biciclo-[3.1.0]-hexan-2-ol (que se puede preparar según D100) (45 mg, 0.181 mmol) y Pd/C (19.21 mg, 0.018 mmol) en metanol (10 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D101 (37,3 mg, 0.170 mmol, 94 % de rendimiento) como un aceite amarillo, que se utilizó en la siguiente etapa sin purificación adicional.
LCMS: 220 [M+H]+. tR =1.359 min. (LCMS condición 2)
Descripción D102
(±)-Trans-3-(5-ciclopropil-4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-1H-pirazol-1-il)biciclo-[3.1.0]-hexan-2-ol (D102)
Figure imgf000062_0003
Una solución de (±)-frans-3-(4-amino-5-ciclopropil-1H-pirazol-1-il)biciclo-[3.1.0]-hexan-2-ol (que se puede preparar según D101) (34 mg, 0.155 mmol), 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (65.5 mg, 0.186 mmol), diciclohexil(2',4',6'-triisopropil-[1,1'-bifenil]-2-il)fosfina (3.70 mg, 7.75 pmol), aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (6.33 mg, 7.75 pmol) y carbonato de potasio (64.3 mg, 0.465 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) y agua (1 mL) se agitó a 100°C por microondas durante 2 horas. La mezcla se concentró directamente a sequedad y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 3) para proporcionar el compuesto del título D102 (40 mg, 0.071 mmol, 45.8 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 535 [M+H]+. tR =3.075 min. (LCMS condición 2)
Descripción D103
3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D103)
Figure imgf000063_0001
A una solución de 3-fluoro-4-((metilsulfonil)oxi)piperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (14.93 g,
50.2 mmol) (que se puede preparar según solicitud internacional PCT, 2012062783) en DMF (25.0 mL) se agregó K2CO3 (13.88 g, 100mmol) y 4-nitro-1 H-pirazol (5.68 g, 50.2 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 90°C durante la noche. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: eA=4: 1) para proporcionar el compuesto del título D103 (10,0 g, 31.2 mmol, 62.1 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 259.1 [M-56+H]+. tR =1.45 min. (LCMS condición 2)
Descripción D104
4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-fluoropiperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D104)
Figure imgf000063_0002
A una solución de ferc-butil-3-fluoro-4-(4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)piperidin-1 -catboxilato (que se puede preparar según D103) (10.0 g, 31.8 mmol) en THF seco (50.0 mL) bajo nitrógeno a -70°C se agregó bis(trimetilsilil)amida de litio (127 mL, 127 mmol, 1 M en THF) por goteo durante 15 min. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min. Se agregó una solución de percloroetano (22.60 g, 95 mmol) en THF seco (50,0 mL) y la mezcla se agitó durante 2 horas a -78°C bajo nitrógeno. La mezcla se inactivó con NH4Cl acuoso (50 mL) y se extrajo con EtOAc (2 x 100 mL). La capa orgánica se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=4: 1) para proporcionar el compuesto del título D104 (6,0 g, 15.31 mmol, 48.1 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 293 [M-56+H]+. tR =1.55 min. (LCMS condición 2)
Descripción D105 y 106
3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D105)
3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D106)
Figure imgf000063_0003
Una solución de ácido metilborónico (3.09 g, 51.6 mmol), 4-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)-3-fluoropiperidin-1 -catboxilato de ferc-butilo (que se puede preparar según D104) (D105 y D106 juntos, 6.0 g, 17.20 mmol), aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (1.405 g, 1.720 mmol) y carbonato de sodio (5.47 g, 51.6 mmol) en 1,4-dioxano (30 mL) y agua (3.0 mL) se combinó en un tubo de vidrio de paredes gruesas y se agitó durante la noche a 75°C. La mezcla se vertió en agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en sílice (PE: EA=4: 1) para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D105 y D106 (2,0 g, 6.09 mmol, 35.4 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
D105: LCMS: 273.1 [M-56+H]+. tR =1.53 min. (LCMS condición 2)
Descripción D107 y D108
3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidina (D107)
3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidina (D108)
Figure imgf000064_0001
Una solución de 3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (que se puede preparar según D105) y 3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (que se puede preparar según D106) (D105 y D106 juntos, 6.0 g, 18.27 mmol) en DCM (50 mL) se agregó a TFA (14.08 mL, 183 mmol) se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se inactivó con NaHCO3 acuoso y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH =20:1) para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D107 y D107 (4.0 g, 17.53mmol, 96 % de rendimiento) como un sólido amarillo. D107: LCMS: 229.1 [M+H]+. tR =1.11 min. (LCMS condición 2)
D108: LCMS: 215. [M+H]+. tR =1.04 min. (LCMS condición 2)
Descripción D109 y D110
3-fluoro-1-metil-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidina (D109)
3-fluoro-1-metil-4-(4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidina (D110)
Figure imgf000064_0002
A una solución de 3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)piperidina (que se puede preparar según D107) y 3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidina (que se puede preparar según D108) (D107 y D108 juntos, 4.0 g, 17.53 mmol) y formaldehído (1.579 g, 52.6 mmol) en metanol (5.0 mL) se agregó AcOH (0.100 mL, 1.753 mmol). La reacción se agitó a 65°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta 0°C y se le agregó triacetoxiborohidruro de sodio (3,71 g, 17,53 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con un solvente mixto de DCM y MeOH (10:1, 20 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2: 1) para proporcionar el compuesto del título D109 y D110 (3.0 g, 12.38 mmol, 70.7 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
D109: LCMS: 243.1 [M+H]+. tR =1.47 min. (LCMS condición 2)
D110: LCMS: 229 [M+H]+. tR =1.41 min. (LCMS condición 2)
Descripción D111 y D112
1-(3-fluoro-1-metilpiperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D111)
1-(3-fluoro-1-metilpiperidin-4-il)- 1H-pirazol-4-amina (D112)
Figure imgf000064_0003
A una solución de 3-fluoro-1-metil-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidina (que se puede preparar según D109) y 3-fluoro-1 -metil-4-(4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)piperidina (que se puede preparar según D110) (D109 y D110 juntos, 3.0 g, 12.38 mmol) en etanol (10.0 mL) y agua (10.0 mL) se agregó hierro (1.383 g, 24.77 mmol) y cloruro de amonio (0.331 g, 6.19 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y se lavó con EtOH (10 mL x3). El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (DCM: MeOH=20:1) para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D111 y D112 (1.5 g, 7.07 mmol, 57.1 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
D111: LCMS: 213.1 [M+H]+. tR =0.94 min. (LCMS condición 2)
D112: LCMS: 199.2 [M+H]+. tR =0.67 min. (LCMS condición 2)
Descripción D113 y D114
4-etoxi-WL(1-(3-fluoro-1-metilpiperidin-4-il)-5-metil-1 HLpirazol-4-il)-7-tosil-7HLpirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-amina (D113) 4-etoxi-W-(1-(3-fluoro-1-metilpiperidin-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-amina (D114)
Figure imgf000065_0001
Una solución de 2-cloro-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo-[2,3-a(]-pirimidina (que se puede preparar según D2) (180 mg, 0.512 mmol), 1 -(3-fluoro-1 -metilpiperidin-4-il)-5-metil-1 H-pirazol-4-amina (que se puede preparar según D111) y 1 -(3-fluoro-1-metilpiperidin-4-il)-1H-pirazol-4-amina (que se puede preparar según D112) (D111 y D112 juntos, 108 mg, 0.512 mmol), K2CO3 (212 mg, 1.535 mmol), X-Phos (73.2 mg, 0.153 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (84 mg, 0.102 mmol) en 1,4-dioxano (1.50 mL) y agua (0.20 mL) bajo nitrógeno se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla de reacción se vertió en agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Las fases orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: Ea =2: 1) para proporcionar la mezcla de los compuestos del título D113 y D114 (250 mg, 0.256 mmol, 50.1 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
D113: LCMS: 528.3 [M+H]+. tR =1.57 min. (LCMS condición 2)
D114: LCMS: 514 [M+H]+. tR =1.57 min. (LCMS condición 2)
Descripción D115
(fí)-3-metil-4-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)etil)morfolino (D115)
Figure imgf000065_0002
A una solución de D15 (125 mg, 0.502 mmol) en DMF (10 mL) se agregó (R)-3-metilmorfolino (50.7 mg, 0.502 mmol) y K2CO3 (208 mg, 1.505 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente, se inactivó con agua, se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D115 (80.0 mg, 0.315 mmol, 62.7 % de rendimiento).
LCMS: 255 [M+H]+. tR =1.13 min. (LCMS condición 2)
Descripción D116
(fí)-5-metil-1-(2-(3-metilmorfolino)etil)-1H-pirazol-4-amina (D116)
Figure imgf000065_0003
Una solución de D115 (80.0 mg, 0.315 mmol) y Pd/C (84 mg, 0.079 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno durante la noche a temperatura ambiente. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite y la almohadilla se lavó con EtOH (10 mL x 3). Los filtrados combinados se concentraron para proporcionar el compuesto del título D116 (60 mg, 0.267 mmol, 85 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
Descripción D117
(S)-3-metil-4-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)etil)morfolino (D117)
Figure imgf000066_0001
A una solución de D15 (120 mg, 0.481 mmol) en acetonitrilo (10 mL) se agregó (S)-3-metilmorfolino (80 mg, 0.791 mmol) y K2CO3 (328 mg, 2.373 mmol). La reacción se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título D117 (90 mg, 0.354 mmol, 44.7 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 255 [M+H]+. tR =1.21 min. (LCMS condición 2)
Descripción D118
(S)-5-metil-1-(2-(3-metilmorfolino)etil)-1H-pirazol-4-amina (D118)
Figure imgf000066_0002
Una solución de D117 (90 mg, 0.354 mmol) y Pd/C (50 mg, 0.047 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró con diatomita y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título D118 (60 mg, 0.118 mmol, 33.3 % de rendimiento) como un aceite amarillo. Descripción D119
(fí)-2-metil-4-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)etil)morfolino (D119)
Figure imgf000066_0003
A una solución de D15 (200 mg, 0.80 mmol) en DMF (10 mL) se agregó (R)-2-metilmorfolino (97 mg, 0.963 mmol) y K2CO3 (333 mg, 2.407 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla de reacción se inactivó con agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D119 (180 mg, 0.708 mmol, 88 % de rendimiento).
LCMS: 255 [M+H]+. t R =1.19 min. (LCMS condición 2)
Descripción D120
(fí)-5-metil-1-(2-(2-metilmorfolino)etil)-1H-pirazol-4-amina (D120)
Figure imgf000066_0004
Una solución de D119 (180 mg, 0.708 mmol) y Pd/C (18.83 mg, 0.018 mmol) en metanol (10 mL) se agitó bajo hidrógeno durante la noche a temperatura ambiente. La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite y la almohadilla se lavó con EtOH (10 mL x 3). Los filtrados combinados se concentraron para proporcionar el compuesto del título D120 (120 mg, 0.535 mmol, 76 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 225 [M+H]+. t R =0.89 min. (LCMS condición 2)
Descripción D121
(S)-2-metil-4-(2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)etil)morfolino (D121)
Figure imgf000067_0001
A una solución de D15 (240 mg, 0.963 mmol) en DMF (5 mL) se agregó (S)-2-metilmorfolino (146 mg, 1.444 mmol) y K2CO3 (200 mg, 1.444 mmol). La mezcla se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se extrajo con EtOAc y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título D121 (140 mg, 0.551 mmol, 57.2 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 255 [M+H]+. tR =1.20 min. (LCMS condición 2)
Descripción D122
(S)-5-metil-1-(2-(2-metilmorfolino)etil)-1H-pirazol-4-amina (D122)
Figure imgf000067_0002
Una solución de D121 (200 mg, 0.787 mmol) y Pd/C (50 mg, 0.047 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró con diatomita y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título D122 (120 mg, 0.118 mmol, 14.96 % de rendimiento) como un aceite amarillo. LCMS: 225 [M+H]+. t R =0.93 min. (LCMS condición 2)
Descripción D123
3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)pirrolidin-1-catboxilato de (fí)-terc-butilo (D123)
Figure imgf000067_0003
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (1 g, 8.84 mmol), trifenilfosfina (2.78 g, 10.61 mmol) y 3-hidroxipirrolidin-1-catboxilato de (S)-ferc-butilo (1.656 g, 8.84 mmol) en THF (60 mL) se agregó por goteo DIAD (2.264 mL, 11.50 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. Luego, la mezcla se calentó lentamente hasta temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D123 (2,31 g, 8.18 mmol, 93 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 227 [M-t-Bu+H]+. tR =3.136 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.19 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 3.46-3.98 (m, 5H), 2.34- 2.51 (m, 2H), 1.49 (s, 9H). Descripción D124
(fí)-4-nitro-1-(pirrolidin-3-il)-1H-pirazol (D124)
Figure imgf000067_0004
Una solución de D123 (2.31 g, 8.18 mmol) y TFA (12.61 mL, 164 mmol) en DCM (50 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se diluyó con DCM y se lavó con solución de NaOH 2N. La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró para proporcionar el compuesto del título D124 (1,39 g, 7.63 mmol, 93 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 183 [M+H]+. tR =0.58 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.26 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 4.84 (d, J = 1.96 Hz, 1H), 3.16 - 3.39 (m, 3H), 2.92 - 3.09 (m, 1H), 2.31 - 2.48 (m, 1H), 2.09 - 2.27 (m, 1H).
Descripción D125
(fí)-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-4-nitro-1H-pirazol (D125)
Figure imgf000068_0001
Una solución de D124 (1.39 g, 7.63 mmol), 2,2-difluoroetil 4-metilbencenosulfonato (2.343 g, 9.92 mmol) y K2CO3 (3.16 g, 22.89 mmol) en DMF (20 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EA. La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D125 (1.508 g, 4.53 mmol, 59.4 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 247 [M+H]+. tR =1.14 min. (LCMS condición 1)
Descripción D126
(fí)-5-cloro-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-4-nitro-1H-pirazol (D126)
Figure imgf000068_0002
A una solución de D121 (1.500 g, 4.51 mmol) en THF (25 mL) se agregó LHMDS (1 M en THF, 9.02 mL, 9.02 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -78°C durante 30 min, se agregó una solución de percloroetano (1,601 g, 6.76 mmol) en THF (25 mL) por goteo y la mezcla resultante se agitó a -78°C durante otras 2 horas. La reacción se inactivó con solución de NH4Cl saturado (100 mL) y se extrajo con EA dos veces. Luego, las capas orgánicas combinadas se concentraron y se purificaron mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D126 (1.508 g, 4.53 mmol, 59.4 % de rendimiento) como un aceite amarillo. LCMS: 281 [M+H]+. tR =1.526 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.21 (s, 1H), 5.68-6.16 (m, 1H), 5.04-5.22 (m, 1H), 3.20-3.35 (m, 1H), 2.85­ 3.10 (m, 5H), 2.19-2.56 (m, 2H).
Descripción D127
(fí)-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol (D127)
Figure imgf000068_0003
Una solución de D126 (265 mg, 0.944 mmol), ácido metilborónico (0.329 mL, 4.72 mmol), Na2CO3 (300 mg, 2.83 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (77 mg, 0.094 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) y agua (1 mL) se agitó bajo nitrógeno a 120°C durante 24 horas. La solución se diluyó con EA y se lavó con agua. La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D127 (223 mg, 0.591 mmol, 62.6 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 261 [M+H]+. tR =1.500 min. (LCMS condición 1)
Descripción D128
(fí)-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-5-metil-1 H-pirazol-4-amina (D128)
Figure imgf000068_0004
Una solución de D127 (223 mg, 0.591 mmol) y Pd/C (6.29 mg, 0.059 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y la solución se evaporó para proporcionar el producto en bruto D128 (186,2 mg, 0.518 mmol, 88 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 231 [M+H]+. t R =2.390 min. (LCMS condición 1)
Descripción D129
3-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclobutanol (D129)
Figure imgf000069_0001
Una solución de D2 (315 mg, 0.895 mmol), D62 (180 mg, 1.074 mmol), K2CO3 (371 mg, 2.69 mmol), X-phos (64.0 mg, 0.134 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (73.1 mg, 0.090 mmol) en 1,4-dioxano (0.8 mL) y agua (0.2 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D129 (311 mg, 0.580 mmol, 64.8 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 483 [M+H]+. tR =1.48 min. (LCMS condición 2)
Descripción D130
metanosulfonato de 3-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclobutilo (D130)
Figure imgf000069_0002
A una solución de D129 (311 mg, 0.644 mmol) en metanol (20 mL) se agregó DIPEA (0.113 mL, 0.644 mmol) y MsCl (0.050 mL, 0.644 mmol). La mezcla se filtró con diatomita y el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D130 (360 mg, 0.424 mmol, 65.8 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 561 [M+H]+. tR =1.568 min. (LCMS condición 2)
Descripción D131
4-etoxi-W-(5-metil-1-(3-morfolinociclobutil)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D131)
Figure imgf000069_0003
A una solución de D130 (360 mg, 0.642 mmol) en acetonitrilo (12 mL) se agregó morfolino (0.839 mL, 9.63 mmol). La mezcla se agitó a 100°C durante 4 horas por microondas y luego se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice utilizando EA para proporcionar el compuesto del título D131 (200 mg, 0.337 mmol, 52.5 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 552 [M+H]+. tR =1.549 min. (LCMS condición 2)
Descripción D132
(S)-ferc-butil 3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)pirrolidin-1-catboxilato (D132)
Figure imgf000069_0004
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (1 g, 8.84 mmol), trifenilfosfina (2.78 g, 10.61 mmol) y 3-hidroxipirrolidin-1-catboxilato (R)-ferc-butilo (1.656 g, 8.84 mmol) en THF (50 mL) se agregó DIAD (2.264 mL, 11.50 mmol) por goteo t 0°C bajo nitrógeno. Luego, la mezcla calentó lentamente hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2: 1) para proporcionar el compuesto del título D132 (2,23 g, 7.90 mmol, 89 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 227 [M-t-Bu+H]+. tR =2.295 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.20 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 3.50-3.94 (m, 5H), 2.43 (d, J=6.36 Hz, 2H), 1.49 (s, 9H).
Descripción D133
(S)-4-nitro-1-(pirrolidin-3-il)-1H-pirazol (D133)
Figure imgf000070_0001
Una solución de D132 (2.23 g, 7.90 mmol) y TFA (12.17 mL, 158 mmol) en DCM (100 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 5 horas. La mezcla se diluyó con DCM y se lavó con agua. Luego, a la capa acuosa se agregó una solución de NaOH 2N y se extrajo con DCM. Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D133 (1,39 g, 7.63 mmol, 97 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 183 [M+H]+. tR =0.60 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.26 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.99 (dt, J = 6.14, 12.41 Hz, 1H), 4.84 (d, J = 1.96 Hz, 1H), 3.19 - 3.45 (m, 3H), 2.89 - 3.13 (m, 1H), 2.31 - 2.50 (m, 1H), 2.10 - 2.27 (m, 1H).
Descripción D134
(S)-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-4-nitro-1H-pirazol (D134)
Figure imgf000070_0002
Una solución de D133 (1.39 g, 7.63 mmol), 2,2-difluoroetil4-metilbencenosulfonato (2.343 g, 9.92 mmol) y K2 CO3 (3.16 g, 22.89 mmol) en DMF (20 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EA. La capa orgánica combinada se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D134 (1,54 g, 5.07 mmol, 66.4 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 247 [M+H]+ . t R =0.954 min. (LCMS condición 1)
Descripción D135
(S)-5-cloro-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-4-nitro-1H-pirazol (D135)
Figure imgf000070_0003
A una solución de D134 (1.64 g, 6.66 mmol) en THF (25 mL) se agregó LHMDS (1 M en THF, 13.32 mL, 13.32 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -78°C durante 30 min, se agregó una solución de percloroetano (1,892 g, 7.99 mmol) en THF (25 mL) por goteo y la mezcla resultante se agitó a -78°C durante otras 2 horas. La reacción se inactivó con solución de NH4Cl saturado (100 mL) y se extrajo con EA dos veces. Las capas orgánicas combinadas se concentraron y se purificaron mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D135 (552 mg, 1.790 mmol, 26.9 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 281 [M+H]+. tR =1.526 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.22 (s, 1H), 5.73-6.10 (m, 1H), 5.05-5.17 (m, 1H), 3.28 (t, J=8.80 Hz, 1H), 2.91-3.07 (m, 5H), 2.29-2.49 (m, 2H).
Descripción D136
(S)-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-5-metil-4-nitro-1 H-pirazol (D136)
Una solución de D130 (552 mg, 1.967 mmol), ácido metilborónico (0.821 mL, 11.80 mmol), K2CO3 (1087 mg, 7.87 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (161 mg, 0.197 mmol) en 1,4-dioxano (10 mL) y agua (1 mL) se agitó por microondas a 120°C durante 3 horas. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D136 (287 mg, 1.079 mmol, 54.8 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 261 [M+H]+. tR =1.436 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.12 (s, 1H), 5.67-6.15 (m, 1H), 4.82-4.98 (m, 1H), 3.26 (t, J=8.68 Hz, 1H), 2.86-3.08 (m, 5H), 2.69 (s, 3H), 2.19-2.49 (m, 2H).
Descripción D137
(S)-1-(1-(2,2-difluoroetil)pirrolidin-3-il)-5-metil-1 H-pirazol-4-amina (D137)
Figure imgf000071_0001
Una solución de D136 (287 mg, 1.103 mmol) y Pd/C (117 mg, 0.110 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno durante 2 horas. La mezcla se filtró y la solución se evaporó para proporcionar el compuesto del título D137 (176 mg, 0.746 mmol, 67.6 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 231 [M H]+. tR =2.384 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 57.20 (s, 1H), 5.66-6.12 (m, 1H), 4.75 (td, J=7.2, 14.61 Hz, 1H), 3.21 (t, J=8.44 Hz, 1H), 2.83-3.06 (m, 5H), 2.67 (br. s., 2H), 2.27-2.41 (m, 2H), 2.19 (s, 3H).
Descripción D138
2-metil-2-morfolinopropan-1-ol (D138)
Figure imgf000071_0002
A una solución de 2-metil-2-morfolinopropanoato de etilo (3,8 g, 18.88 mmol) en THF (30 mL) se agregó LiAlH4 (2,87 g,76 mmol) a 0°C. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 25°C La reacción se inactivó con agua y solución de NaOH al 10 %. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de Celite y la almohadilla se lavó con THF (10 mL). Los filtrados combinados se concentraron y se purificaron mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:2) para proporcionar el compuesto del título D138 (2.5 g, 15.70 mmol, 83 % de rendimiento).
LCMS: 160 [M+H]+. tR =0.70 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 53.72 (m, 4H), 3.33 (s, 2H), 2.55 (m, 4H), 1.03 (s, 6H).
Descripción D139
metanosulfonato de 2-metil-2-morfolinopropilo (D139)
Figure imgf000071_0003
A una solución de D138 (2.2 g, 13.82 mmol) y DIPEA (4.83 mL, 27.6 mmol) en DCM (10 mL) se cloruro de metanosulfonilo (1.283 mL, 16.58 mmol) a 0°C. La reacción se agitó a 0°C durante 2 horas. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D139 (3,28 g, 13.82 mmol, 100 % de rendimiento).
Descripción D140
4-(2-metil-1-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)propan-2-il)morfolino (D140)
Figure imgf000071_0004
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (1.560 g, 13.80 mmol) y D139 (3.27 g, 13.80 mmol) en DMF (10 mL) se agregó K2CO3 (5.72 g, 41.4 mmol). La reacción se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na24 , se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D140 (1.50 g, 5.90 mmol, 42.7 % de rendimiento).
LCMS: 255 [M+H]+. tR =1.19 min. (LCMS condición 2)
Descripción D141
4-(1 -(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)-2-metilpropan-2-il)morfolino (D141)
Figure imgf000072_0001
A una solución de D140 (1.50 g, 5.90 mmol) en THF (100 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 23.60 mL, 23.60 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -78°C durante 30 min, se agregó percloroetano (4.19 g, 17.70 mmol) en THF (100 mL) y la mezcla se agitó durante otras 2 horas a -78°C bajo nitrógeno. La reacción se inactivó con NH4Cl ac. La mezcla se extrajo con EA (100 x2 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na2SÜ4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D141 (1,1 g, 3.15 mmol, 53.4 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 289 [M+H]+. tR =1.34 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 58.18 (s, 1H), 4.17 (s, 2H), 3.70 (m, 4H), 2.66 (m, 4H), 1.11 (s, 6H).
Descripción D142
4-(2-metil-1-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)propan-2-il)morfolino (D142)
Figure imgf000072_0002
Una solución de D141 (1,1 g, 3.81 mmol), ácido metilborónico (0.684 g, 11.43 mmol), Na2CO3 (1,211 g, 11.43 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,311 g, 0.381 mmol) en 1,4-dioxano (3 mL) y agua (0,3 mL) se agitó a 80°C durante 12 horas. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4: 1) para proporcionar el compuesto del título D142 (800 mg, 2.83 mmol, 74.3 % de rendimiento).
LCMS: 269 [M+H]+. tR =1.10 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.07 (s, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.69 (m, 4H), 2.68 (s, 3H), 2.63 (m, 4H), 1.06 (s, 6H).
Descripción D143
4-(2-metil-1-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)propan-2-il)morfolino (D143)
Figure imgf000072_0003
Una solución de D142 (800 mg, 2.98 mmol) y Pd/C (79 mg, 0.075 mmol) en metanol (10 mL) se agitó durante la noche bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y la solución se evaporó para proporcionar el compuesto del título D143 (600 mg, 2.439 mmol, 82 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 239 [M+H]+. t R =0,75 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 57.15 (s, 1H), 3.94 (s, 2H), 3.71 (m, 4H), 2.63 (m, 6H), 2.19 (s, 3H), 1.03 (s, 6H).
Descripción D144
1-(2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol (D144)
Figure imgf000073_0001
A una solución de D15 (40,2 mg, 0.161 mmol) en DMF (8 mL) se agregó 3,3-difluoroazetidina (10 mg, 0.107 mmol) y K2CO3 (44,5 mg, 0.322 mmol). La reacción se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se concentró para obtener el compuesto del título D144.
Descripción D145
1-(2-(3,3-difluoroazetidin-1-il)etil)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D145)
Figure imgf000073_0002
Una solución de D144 (20 mg, 0.081 mmol) y Pd/C (10 mg, 9.40 gmol) en metanol (20 mL) se agitó durante la noche bajo H2 (excedente). La mezcla se filtró con diatomita y la solución se evaporó para obtener el compuesto del título D145. Descripción D146
2-metil-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)propanoato de etilo (D146)
Figure imgf000073_0003
A una mezcla de 4-nitro-1 H-pirazol (10.0 g, 8.85 mmol), 2-bromo-2-metilpropanoato de etilo (20.7 g, 10.6 mmol) y K2CO3 (24.4 g, 177 mmol) en DMF (100 mL) se agitó a 80°C durante 2 horas. La mezcla se filtró a través de una almohadilla de celite y el filtrado se concentró. El residuo se diluyó con EtOAc (300 mL), luego se lavó con salmuera (100 mLx2), se secó en Na2SO4 se filtró y se concentró al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=15:1 a 8:1) para proporcionar el compuesto del título D146 (16,7 g, 83 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.31 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 4.18 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.86 (s, 6H), 1.20 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
Descripción D147
2-metil-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)propan-1-ol (D147)
Figure imgf000073_0004
A una solución de D146 (17.0 g, 74.8 mmol) en THF (50 mL) y agua (3 mL) se agregó NaBH4 (5.66 g, 150 mmol) a 0°C. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: CH3OH=20:1)para proporcionar el compuesto del título D147 (10,0 g, 54.0 mmol, 72.2 % de rendimiento).
LCMS: 186 [M+H]+. tR =1.12 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (300 MHz, DMSO-ds): 58.79 (s, 1H), 8.26 (s, 1H), 5.09 (t, J=9.0 Hz,1 H), 3.57 (d, J=9.0 Hz, 2H), 1.48 (s, 6H).
Descripción D148
metanosulfonato de 2-metil-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)propilo (D148)
Figure imgf000074_0001
A una solución de D147 (5 g, 27.0 mmol) y DIPEA (9.43 mL, 54.0 mmol) en DCM (100 mL) at 0°C se agregó una solución de MsCl (2.95 mL, 37.8 mmol) en DCM (10 mL) por goteo. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. Se agregó una solución de NaHCO3 saturado y la mezcla se extrajo con DCM (100 mLx3). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D148 (6,2 g, 21.90 mmol, 81 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 264 [M+H]+. tR =1.52 min. (LCMS condición 2)
Descripción D149
4-(2-metil-2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)propil)morfolino (D149)
Figure imgf000074_0002
A una mezcla de D148 (6.2 g, 23.55 mmol) y morfolino (30 mL, 23.55 mmol) se agitó a 135°C durante 7 días. Luego, se agregó agua (150 mL) y la fase acuosa se extrajo con EA (100 mL x 2). La fase orgánica combinada se lavó con salmuera (50 mL), se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D149 (3,7 g, 14.55 mmol, 61,8 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 255 [M+H]+. tR =1.35 min. (LCMS condición 2)
Descripción D150
4-(2-metil-2-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)propil)morfolino (D150)
Figure imgf000074_0003
A una solución de D149 (1g, 3.93 mmol) en THF (100 mL) se agregó LiHMDS (1M en THF) (1.974 g, 11.80 mmol) a -70°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -70°C durante 30 min, se agregó yodometano (1.675 g, 11.80 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min a -78°C bajo nitrógeno. La reacción se inactivó con NH4Cl ac. Luego, la mezcla se extrajo con EA, se lavó con salmuera, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título D150 (100 mg, 0.373 mmol, 9.48 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 269 [M+H]+. tR =1.38 min. (LCMS condición 2)
Descripción D151
5-metil-1 -(2-metil-1 -morfolinopropan-2-il)-1 H-pirazol-4-amina (D151)
h 2n •’W ' N ^ O
Una solución de D150 (100 mg, 0.373 mmol) y Pd/C (70 mg, 0.658 mmol) en metanol (30 mL) se agitó durante la noche bajo hidrógeno. La mezcla se filtró con diatomita y la solución se evaporó para obtener el compuesto del título D151 (70 mg, 0.294 mmol, 79 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 239 [M+H]+. tR =1.43 min. (LCMS condición 2)
Descripción D152
(±)-1 -(4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)propan-2-ol (D152)
Figure imgf000075_0001
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (5g, 44.2 mmol) y 2-metiloxirano (5.14 g, 88 mmol) en DMF (50 mL) se agregó CS2CO3 (18.73 g, 57.5 mmol). La reacción se agitó a 80°C durante 15 horas. Se agregó agua (100 mL) y la mezcla se extrajo con EA. La fase orgánica se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=3:1) para proporcionar el compuesto del título D152 (6g, 23.14 mmol, 52,3 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 172 [M+H]+. tR =0.846 min. (LCMS condición 2)
Descripción D153
metanosulfonato de (±)-1-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)propan-2-il (D153)
Figure imgf000075_0002
A una solución de D152 (6 g, 35.1 mmol) y DIPEA (6.12 mL, 35.1 mmol) en THF (50 mL) se agregó anhídrido metanosulfónico hipocloroso (6.30 mL, 35.1 mmol) y la mezcla resultante se agitó a 0°C durante 30 min. A la reacción se agregó NaHCO3 ac. (20 mL), se extrajo con EA. La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró para proporcionar el compuesto del título D153 (6g, 17.09 mmol, 48,8 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 250 [M+H]+. tR =1.396 min. (LCMS condición 2)
Descripción D154
(±)-4-(1-(4-nitro-1 H-pirazol-1-il)propan-2-il)morfolino (D154)
Figure imgf000075_0003
Una solución de D153 (5.8g, 23.27 mmol), Cs2CO3 (15.16 g, 46.5 mmol) y morfolino (4.05 g, 46.5 mmol) en acetonitrilo (200 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D154 (5,0g, 16.65 mmol, 71.5 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 241 [M+H]+. tR =1.516 min. (LCMS condición 2)
Descripción D155
(±)-4-(1 -(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)propan-2-il)morfolino (D155)
Figure imgf000075_0004
A una solución de D154 (4 g, 16.65 mmol) en THF (50 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 49.9 mL, 49.9 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -78°C durante 30min, se agregó percloroetano (9.85 g, 41.6 mmol) en THF (50 mL) y la mezcla se agitó durante otras 2 horas a -78°C bajo nitrógeno. La reacción se inactivó con NH4Cl ac. La mezcla se extrajo con EA (100 x2 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D155 (2,0 g, 5.68 mmol, 34.1 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 275 [M+H]+. t R =1.615 min. (LCMS condición 2)
Descripción D156
(±)-4-(1-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)propan-2-il)morfolino (D156)
Figure imgf000076_0001
Una solución de D155 (1,0g, 3.64 mmol), ácido metilborónico (0.218 g, 3.64 mmol), Na2CO3 (0,386 g, 3.64 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (266 mg, 0.364 mmol) en 1,4-dioxano (20 mL) y agua (2 mL) se agitó a 70°C durante 6 horas. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1: 1) para proporcionar el compuesto del título D156 (250 mg, 0.853 mmol, 23.44 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 255 [M+H]+. tR =1.198 min. (LCMS condición 2)
Descripción D157
(±)-5-metil-1-(2-morfolinopropil)-1 H-pirazol-4-amina (D157)
Figure imgf000076_0002
Una solución de D156 (250 mg, 0.983 mmol) y Pd/C (52,3 mg, 0.049 mmol) en metanol (30 mL) se agitó durante la noche bajo H2 (excedente). La mezcla se filtró con diatomita y la solución se evaporó para proporcionar el compuesto del título D157 (200 mg, 0.731 mmol, 74.4 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 225 [M+H]+ . t R =0.86 min. (LCMS condición 2)
Descripción D158
(±)-4-etoxi-W-(5-metil-1-(2-morfolinopropil)-1H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D158)
Figure imgf000076_0003
Una solución de D2 (300 mg, 0.853 mmol), D157 (191 mg, 0.853 mmol), K2 CO3 (236 mg, 1.705 mmol), X-phos (74.0 mg, 0.128 mmol) y aducto de PdCh(dppf)-CH2 Cl2 (69.6 mg, 0.085 mmol) en 1,4-dioxano (8 mL) y agua (2 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D158 (180 mg, 0.260 mmol, 30.5 % de rendimiento) como un sólido amarillo. LCMS: 540 [M+H]+ . tR =1.92 min. (LCMS condición 1)
Descripción D159
2-(benciloxi)-5,8-dioxaspiro[3.4]octano (D159)
Figure imgf000076_0004
A una solución de 3-(benciloxi)ciclobutanona (5000 g, 28.4 mmol) en tolueno (100.0 mL) se agregó etano-1,2-diol (3.17 mL, 56.7 mmol) y ácido 4-metilbencenosulfónico (0.489 g, 2.84 mmol). La reacción se agitó a 110°C durante 2 horas utilizando el ensamblaje Dean-Stark. La mezcla se inactivó con agua y se extrajo con un solvente mixto de DCM y MeOH (10:1,20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D159 (6.0 g, 27.2 mmol, 96 % de rendimiento).
LCMS: 221 [M+H]+. tR =1.396 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe): 57.33 (m, 5H), 4.35 (s, 2H), 3.88 (m, 1H), 3.78 (m, 4H), 2.48 (m, 2H), 2.19 (m, 2H).
Descripción D160
5,8-dioxaspiro[3.4]octan-2-ol (D160)
Figure imgf000077_0001
Una solución de D159 (2,5 g, 11.35 mmol) y Pd/C (0,302 g, 0.284 mmol) en metanol (50 mL) se agitó durante la noche bajo H2 (excedente). La suspensión se filtró a través de una almohadilla de Celite y la solución se concentró para proporcionar el compuesto del título D160 (1,25 g, 9.60 mmol, 85 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
Descripción D161
5,8-dioxaspiro[3.4]octan-2-il 4-metilbencenosulfonato (D161)
Figure imgf000077_0002
A una solución de D160 (2.5 g, 19.21 mmol) en DCM (10 mL) se agregó DIPEA (10.07 mL, 57.6 mmol) y cloruro de 4-metilbenceno-1 -sulfonilo (4.39 g, 23.05 mmol) a 0°C. La reacción se agitó a 0°C durante 2 horas. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D161 (5,46 g, 19.21 mmol, 100 % de rendimiento). Descripción D162
4-nitro-1-(5,8-dioxaspiro[3.4]octan-2-il)-1H-pirazol (D162)
Figure imgf000077_0003
Una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (2.61 g, 23.05 mmol), K2CO3 (7.96 g, 57.6 mmol) y D161 (5.46 g, 19.21 mmol) en DMF (10 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La reacción se inactivó con agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: CH3OH=20:1)para proporcionar el compuesto del título D162 (2,2 g, 6.62 mmol, 34.4 % de rendimiento).
LCMS: 226 [M+H]+. tR =1.03 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.25 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 4.69 (m, 1H), 3.97 (m, 4H), 2.95 (m, 4H).
Descripción D163
5-cloro-4-nitro-1-(5,8-dioxaspiro[3.4]octan-2-il)-1 H-pirazol (D163)
Figure imgf000077_0004
A una solución de D162 (2,2 g, 9.77 mmol) en THF (100 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 39.1 mL, 39.1 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -70°C durante 30 min, se agregó percloroetano (6.94 g, 29.3 mmol) en THF (100 mL) y la mezcla se agitó durante otras 2 horas a -78°C bajo nitrógeno. La reacción se inactivó con NH4Cl ac. La mezcla se extrajo con EA (100 x2 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D163 (1,1 g, 4.09 mmol, 41.9 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 260 [M+H]+. tR =1.17 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe): 58.21 (s, 1H), 4.86 (m, 1H), 3.96 (m, 4H), 3.09 (m, 2H), 2.86 (m, 2H).
Descripción D164
5-metil-4-nitro-1-(5,8-dioxaspiro[3.4]octan-2-il)-1H-pirazol (D164)
Figure imgf000078_0001
Una solución de D163 (1,1 g, 4.24 mmol), ácido metilborónico (0.761 g, 12.71 mmol), Na2CO3 (1,347 g, 12.71 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0,346 g, 0.424 mmol) en 1,4-dioxano (30 mL) y agua (3 mL) se agitó a 80°C durante 24 horas. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4: 1) para proporcionar el compuesto del título D164 (600 mg, 1.933 mmol, 45.6 % de rendimiento).
LCMS: 240 [M+H]+. tR =1.09 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 58.12 (s,1H), 1.61 (m, 1H), 3.97 (m, 4H), 3.11 (m, 2H), 2.82 (m, 2H), 2.64 (s, 3H). Descripción D165
5-metil-1-(5,8-dioxaspiro[3.4]octan-2-il)-1H-pirazol-4-amina (D165)
Figure imgf000078_0002
Una solución de D164 (600 mg, 2.508 mmol) y Pd/C (26,7 mg, 0.251 mmol) en metanol (10 mL) se agitó durante la noche bajo H2 (excedente). La mezcla se filtró con diatomita y la solución se evaporó para obtener el compuesto del título D165 (350 mg, 1.56 mmol, 62,3 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 210 [M+H]+. tR =0.91 min. (LCMS condición 2)
Descripción D166
4-etoxi-A/-(5-metil-1-(5,8-dioxaspiro[3.4]octan-2-il)-1 H-pirazol-4-il)-7-tosil-7H-pirrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (D166)
Figure imgf000078_0003
Una solución de D2 (500 mg, 1.421 mmol), D165 (357 mg, 1.705 mmol), K2CO3 (589 mg, 4.26 mmol) y Pd2(dba)3 (65.1 mg, 0.071 mmol) en 2-butanol (2 mL) se irradió por microondas a 120°C durante 45 min. La mezcla se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice mediante el uso de EA y se purificó adicionalmente mediante HPLC preparativa para proporcionar el compuesto del título D166 (570 mg, 1.039 mmol, 73.1 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 525 [M+H]+. tR =1.429 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 57.77 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.20 (m, 3H), 6.43 (s, 1 H), 6.24 (s,1 H), 4.65 (m, 1H), 4.43 (dd, J=9.0 Hz, 2H), 3.96 (m, 4H), 3.16 (m, 2H), 2.82 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.38 (t, J=9.0 Hz, 3H). Descripción D167
3-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)ciclobutanona (D167)
Figure imgf000078_0004
A una solución de D166 (550 mg, 1.048 mmol) en acetona (10 mL) y agua (1 mL) se agregó ácido 4-metilbencenosulfónico (18.05 mg, 0.105 mmol). La reacción se agitó durante la noche a 55°C. La mezcla se vertió en agua y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4 , se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1) para proporcionar el compuesto del título D167 (350 mg, 0.553 mmol, 52,8 % de rendimiento).
LCMS: 481 [M+H]+. Xr =1.46 min. (LCMS condición 2)
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 57.78 (m, 3H), 7.21 (m, 3H), 6.44 (m, 1H), 6.27 (m, 1H), 5.04 (m, 1H), 4.42 (dd, J=9.0 Hz, 2H), 3.96 (m, 2H), 3.56 (m, 2H), 2.36 (s, 6H), 1.39 (X, J=9.0 Hz, 3H).
Descripción D168
-(4-((4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-1-metilciclobutanol (D168)
Figure imgf000079_0001
A una solución de D167 (350 mg, 0.728 mmol) en THF (10 mL) se agregó bromuro de metilmagnesio (0.607 mL, 1.821 mmol) a 0°C. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se inactivó con NaHCO3 acuoso y se extrajo con DCM (20 mL x 3). Los extractos combinados se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: CH3OH=20:1)para proporcionar el compuesto del título D168 (300 mg, 0.604 mmol, 83 % de rendimiento).
LCMS: 497 [M+H]+. Xr =1.41 min. (LCMS condición 2)
Descripción D169
(fí)-2-(difluorometil)-1-((fí)-1-feniletil)-1,2-dihidropiridin-4-ol (D169)
Figure imgf000079_0002
ZnCl2 (20 g) en SOCl2 (10 mL) se mantuvo con agitación a 100°C durante 3 horas. El solvente se retiró y el residuo se disolvió nuevamente en tolueno (10 mL). El tolueno se retiró y se secó a presión reducida, luego se mantuvo bajo N2. Una solución de cloruro de zinc (II) (13.39 g, 98 mmol), (£)-A/-(2,2-difluoroetilideno)-1 -feniletanamina (6 g, 32.8 mmol), (£)-((4-metoxibuta-1,3-dien-2-il)oxo)trimetilsilano (5.64 g, 32.8 mmol) en THF (20 mL) se mantuvo con agitación durante la noche a temperatura ambiente. Se vertió la mezcla en agua (50 mL) y se extrajo con EA (50 mL x 3). La capa orgánica se concentró y el producto en bruto se purificó con cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2:1 a 1:1) para proporcionar el compuesto del título D169 (2.8 g, 11.14 mmol, 34.0 % de rendimiento).
Descripción D170
(±)-(2fí)-2-(difluorometil)-1-((fí)-1-feniletil)piperidin-4-ol (D170)
Figure imgf000079_0003
Una solución de NaBH4 (1.518 g, 40.1 mmol) y D169 (2.8 g, 11.14 mmol) en etanol (30 mL) se mantuvo con agitación a 1 reflujo durante 4 horas. El solvente se retiró. El residuo se diluyó con agua (30 mL) y se extrajo con EA (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D170 (2,7 g, 10.58 mmol, 95 % de rendimiento).
LCMS: 256 [M+H]+. tR =1.41 min. (LCMS condición 2)
Descripción D171
metanosulfonato de (±)-(2fí)-2-(difluorometil)-1-((fí)-1-feniletil)piperidin-4-il (D171)
Figure imgf000080_0001
A una solución de D170 (1.5g, 5.88 mmol) y DIPEA (1.026 mL, 5.88 mmol) en THF (30mL) se agregó anhídrido metanosulfónico hipocloroso (1.057 mL, 5.88 mmol) y la mezcla se agitó a 0°C durante 2 horas. A la mezcla de reacción se agregó NaHCO3 acuoso (20 mL) y se extrajo con EA. La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró para proporcionar el compuesto del título D171 (1,5g, 3.82 mmol, 65.1 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 334 [M+H]+. tR =1.524 min. (LCMS condición 2)
Descripción D172
(±)-(2fí}-2-(difluorometil)-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-((fí)-1-feniletil)piperidina (D172)
Figure imgf000080_0002
Una solución de D171 (1.5g, 4.50 mmol), Cs2CO3 (2.93 g, 9.00 mmol) y 4-nitro-1 H-pirazol (1.017 g, 9.00 mmol) en acetonitrilo (20 mL) se agitó durante la noche a 80°C. La mezcla se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D172 (600mg, 0.856 mmol, 19,03 % de rendimiento) como un aceite.
LCMS: 351 [M+H]+. tR =1.450 min. (LCMS condición 2)
Descripción D173 y D174
(2fí,4fí)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-2-(difluorometil)-1-((fí)-1-feniletil) piperidina (D173)
(2fí,4S)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-2-(difluorometil)-1-((fí)-1-feniletil) piperidina (D174)
Figure imgf000080_0003
A una solución de D172 (600mg, 1.713 mmol) en THF (50 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 5.14 mL, 5.14 mmol) a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse a -78°C durante 30min, se agregó percloroetano (1014 mg, 4.28 mmol) en THF (50 mL) y la mezcla se agitó durante otras 2 horas a -78°C bajo nitrógeno. La reacción se inactivó con NH4Cl ac. La mezcla se extrajo con EA (100 x2 mL), se lavó con salmuera, se secó con Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=20:1) para proporcionar los compuestos del título D173 (230 mg, 0.586 mmol, 34.2 % de rendimiento) y D174 (230 mg, 0.598 mmol, 34.9 % de rendimiento) como sólidos amarillos.
D173: LCMS: 385 [M+H]+. tR =1.655 min. (LCMS condición 2)
D174: LCMS: 385 [M+H]+. tR =1.703 min. (LCMS condición 2)
Descripción D175
(2fí,4fí)-2-(difluorometil)-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-((fí)-1-feniletil) piperidina (D175)
Una solución de D173 (200 mg, 0.520 mmol), ácido metilborónico (0.761 g, 1.559 mmol), Na23 (165 mg, 1.559 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (42,2 mg, 0.052 mmol) en 1,4-dioxano (15 mL) y agua (1,5 mL) se agitó durante la noche a 80°C. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=3: 1) para proporcionar el compuesto del título D175 (100 mg, 0.198 mmol, 38.0 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 365 [M+H]+. tR =1.98 min. (LCMS condición 1)
Descripción D176
1-((2fí,4fí)-2-(difluorometil)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D176)
Figure imgf000081_0001
Una solución de D175 (100 mg, 0.274 mmol) y Pd/C (29,2 mg, 0.027 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno durante 2 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se evaporó hasta sequedad para proporcionar el compuesto del título D176 (40 mg, 0.174 mmol, 63.3 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
Descripción D177
(2fí,4S)-2-(difluorometil)-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-((fí)-1-feniletil) piperidina (D177)
Figure imgf000081_0002
Una solución de D174 (230 mg, 0.598 mmol), ácido metilborónico (0.125 mL, 1.793 mmol), Na2CÜ3 (190 mg, 1.793 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (48,8 mg, 0.060 mmol) se agitó por microondas a 120°C durante 4 horas. La mezcla se diluyó con EA y se concentró. El producto en bruto se purificó directamente mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2: 1) para proporcionar el compuesto del título D177 (123 mg, 0.338 mmol, 56.5 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 365 [M+H]+. tR =2.614 min. (LCMS condición 2)
Descripción D178
1-((2fí,4S)-2-(difluorometil)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D178)
Figure imgf000081_0003
Una solución de D177 (123 mg, 0.338 mmol) y Pd/C (35,9 mg, 0.034 mmol) en metanol (20 mL) se agitó bajo hidrógeno durante 2 horas. La mezcla se filtró y el filtrado se evaporó para proporcionar el compuesto del título D178 (56 mg, 0.243 mmol, 72.1 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 231 [M+H]+. tR =0.244 min. (LCMS condición 2)
Descripción D179
2-metil-2-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)propanoato de etilo (D179)
Figure imgf000081_0004
A una solución de D146 de etilo (14.0 g, 61.7 mmol) en THF (200 mL) se agregó LDA (2.0 M, 62 mL, 123.30 mmol) a -30°C. La mezcla se agitó a -30°C durante 30 min. Luego, se agregó MeI (17.5 g, 7.7 mL, 123 mmol) y la mezcla se agitó a 15°C durante 2 horas. La reacción se inactivó con agua (200 mL) y la mezcla se extrajo con EtOAc (300 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron en Na2SO4, se filtraron y evaporaron al vacío. Se purificó el residuo mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=30:1 a 15:1) para proporcionar el compuesto del título D179 (5,0 g, 34 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 242 [M+H]+. tR =1.61 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.08 (s, 1H), 4.26 (q, J = 5.7 Hz, 2H), 2.55 (s, 3H), 1.85 (s, 6H), 1.27 (X, J = 5.4 Hz, 3H).
Descripción D180
ácido 2-metil-2-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)propanoico (D180)
Figure imgf000082_0001
A una solución de D179 (5.00 g, 20.7 mmol) se agregó por goteo NaOH 1N (4.0 g, 100 mL, 0.104 mol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas y luego se ajustó hasta pH~1.0 con HCl 1 N (20 mL), y luego se extrajo con EA (200 mLx3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (200 mL), se secaron en Na2SO4, se filtraron y se evaporaron al vacío para proporcionar el compuesto del título D180 como un sólido blanco. LCMS: 212 [M+H]+. Xr =1.30 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.09 (s, 1H), 2.62 (s, 3H), 1.91 (s, 6H).
Descripción D181
2-metil-2-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)propanamida (D181)
Figure imgf000082_0002
A una solución de D180 (4.10 g, 19.2 mmol) en DCM (100 mL) se agregó cloruro de oxalilo (4.80 g, 3.7 mL, 38.5 mmol) por goteo. Se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 12 minutos. Luego, se agregó DMF (0,5 mL) por goteo y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. EL solvente se evaporó, el residuo se disolvió en THF (30 mL) y se agregó en NH4OH por goteo (60 mL). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La solución se concentró y el residuo se repartió entre EA (100 mL) y agua (100 mL). La fase acuosa se extrajo con EA (100 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con NH4Cl saturado (100 mL), se secaron en Na2SO4, se filtraron y se evaporaron para proporcionar el compuesto del título D181 (3.9 g, 95 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 211 [M+H]+. tR =0.52 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.12 (s, 1H), 5.46 (br. s., 1H), 5.28 (br. s., 1H), 2.64 (s, 3H), 1.85 (s, 6H). Descripción D182
2-(4-amino-5-metil-1 H-pirazol-1-il)-2-metilpropanamida (D182)
Figure imgf000082_0003
A una mezcla de D181 y Pd/C (400 mg, 20 %) en MeOH (15 mL) se agitó bajo hidrógeno durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y se concentró al vacío. El residuo se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 5:100) para proporcionar el compuesto del título D182 (820 mg, 48 % de rendimiento) como un sólido amarillo. LCMS: 183 [M+H]+. tR =0.36 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.20 (s, 1H), 5.34 (br s, 1H), 5.25 (br s, 1H), 2.73 (br s, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.79 (s, 6H).
Descripción D183
2-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropanamida (D183)
Figure imgf000083_0001
A una mezcla de D182 (660 mg, 3.63 mmol), D1 (786 mg, 3.99 mmol), X-phos (345 mg, 0.730 mmol), Pd2(dba)3 (327 mg, 0.357 mmol) y K2CO3 (1.5 g, 10.88 mmol) en dioxano (50 mL) se agitó a 100°C durante 16 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de celite. El filtrado se concentró y se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 40/60) para proporcionar el compuesto del título D183 (513mg, 41% de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 344 [M+H]+. tR =1.63 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-cfe): 11.16 (br. s., 1H), 8.03 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.85-6.87 (m, 1H), 6.19-6.22 (m, 1H), 4.41 (q, J= 7.5 Hz, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.64 (s, 6H), 1.34 (t, J= 7.2 Hz, 3H).
Descripción D184
(±)-(frans)-3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D184)
Figure imgf000083_0002
A una solución de D105 (1.00 g, 4.38 mmol), oxetan-3-ona (785 mg, 10.9 mmol) en DCE (40 mL) se agregó NaBH(OAc)3 (2.78 g, 13.1 mmol) en partes a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó una solución de NaHCO3 acuoso (30 mL) y la mezcla se extrajo con DCM (50 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D184 (1,00 g, 80 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 285 [M+H]+. tR =1.53 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.14 (s, 1H), 5.07-4.83 (m, 1H), 4.71-4.58 (m, 4H), 4.17-4.04 (m, 1H), 3.70­ 3.61 (m, 1H), 3.26-3.18 (m, 1H), 2.90-2.84 (m, 1H), 2.67 (s, 3H), 2.52-2.44 (m, 1H), 2.14-1.93 (m, 3H).
Descripción D185
(±)-(frans)-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D185)
Figure imgf000083_0003
Una solución de D184 (500 mg, 1.76 mmol) y Pd/C (160 mg, 10%) en MeOH (20 mL) se agitó a 30°C bajo H2 durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto bruto se purificó mediante columna (DCM: MeOH=15: 1) para proporcionar el compuesto del título D185 (420 mg, 94 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 255 [M+H]+. tR =1.32 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.23 (s, 1H), 5.07-4.83 (m, 1H), 4.69-4.61 (m, 4H), 4.01-3.89 (m, 1H), 3.67­ 3.60 (m, 1H), 3.49 (s, 1H), 3.21 -3.13 (m, 1H), 2.85-2.79 (m, 1H), 2.48-2.34 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.07-1.90 (m, 3H).
Descripción D186
2-(hidroximetil)morfolino-4-carboxilato de (S)-ferc-butilo (D186)
Figure imgf000084_0001
A una solución de ácido (S)-4-(ferc-butoxicarbonil)morfolino-2-carboxílico (2.50 g, 10.8 mmol) en THF (25 mL) se agregó borano (1 M, 20 mL) por goteo a 0°C durante 15 min. Después de la adición, la mezcla de reacción se calentó hasta temperatura ambiente y se agitó durante 2 horas. La reacción se inactivó con MeOH/AcOH (9:1, 10 mL) a 0°C. Luego, la mezcla se concentró y el residuo se vertió en 35 mL de agua y 35 mL de EtOAc. La capa orgánica se lavó con solución acuosa de Na2CO3 saturado (30 mL), se secó en Na2SO4 y se concentró para proporcionar el compuesto del título D186 (2.6 g, 100 %) como un aceite incoloro.
LCMS: 118 [M+H]+. tR =1.96 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 53.84-3.91 (m, 3H), 3.49-3.68 (m, 4H), 2.70-2.97 (m, 2H), 2.03 (t, 1H), 1.45 (s, 9H); Descripción D187
sal de TFA de (S)-morfolin-2-ilmetanol (D187)
o: OH
TFA
A una solución de D186 (2,6 g, 12 mmol) en DCM (25 mL) se agregó TFA (10 mL, 132 mmol). Después de agitarse a temperatura ambiente durante 2 días, la mezcla se concentró para proporcionar el compuesto del título D187 (5.0 g, 100%) como un aceite amarillo.
LCMS: 118 [M+H]+. tR =1.75 min. (LCMS condición 3)
Descripción D188
2-(hidroximetil)morfolino-4-carboxilato de (S)-bencilo (D188)
Figure imgf000084_0002
Cbz
A una solución de D187 (700 mg, 5.98 mmol), Na2CO3 (1.27 g, 12.0 mmol) en dioxano (12 mL) y H2O (5 mL) se agregó CbzCl (1.53 g, 9.00 mmol). Después de agitarse a temperatura ambiente durante 2 horas, la mezcla de reacción se vertió en 200 mL de agua y se extrajo con DCM (30 mLx3). La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 40 % - 60 %) para proporcionar el compuesto del título D188 (870 mg, 58 %) como un aceite incoloro.
LCMS: 252 [M+H]+. t R =2.73 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.31-7.39 (m, 5H), 5.14 (s, 2H), 3.92-3.99 (m, 3H), 3.50-3.67 (m, 4H), 2.81­ 3.03 (m, 2H), 2.02 (t, J = 6.3 Hz, 1H).
Descripción D189
2-formylmorfolino-4-carboxilato de (S)-bencilo (D189)
Figure imgf000084_0003
A una botella seca de 100 mL se agregó (COCl)2 y DCM seco (25 mL). Después de que la solución se enfrió hasta -78°C, se agregó DMSO (2.16 g, 27.7 mmol) en d Cm seco (1.0 mL) por goteo. La reacción se agitó a -78°C durante 1 hora y se agregó lentamente una solución de D188 (870 mg, 3.46 mmol) en DCM (1.0 mL). La mezcla se agitó a -78°C durante 30 min y se agregó TEA (1.20 g, 41.5 mmol). Luego, la mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 30 min y a 0°C durante 30 min. -La mezcla se diluyó con Dc M (100 mL), se lavó con agua (30 mL), HCl (1 N, 30 mL), NaHCO3 (30 mL) saturado y salmuera (30 mL), luego se secó en Na2SÜ4 y se concentró para proporcionar el compuesto del título D189 (1.0 g, 100 %) como un aceite incoloro.
LCMS: 250 [M+H]+. tR =2.09 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-afe): 9.57 (s, 1H), 7.30-7.38 (m, 5H), 5.75 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 3.55-4.15 (m, 4H), 3.13-3.43 (m, 2H), 2.73-2.92 (m, 1H)
Descripción D190
2-(difluorometil)morfolino-4-carboxilato de (S)-bencilo (D190)
Figure imgf000085_0001
A una solución de D189 (1.0 g, 4.0 mmol) en DCM (15 mL) se agregó DAST (1.3 g, en 3 mL de DCM) por goteo a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse durante la noche a temperatura ambiente, la mezcla de reacción se enfrió hasta 0°C y se agregó 30 mL de NaHCO3 saturado. La mezcla se extrajo con DCM (50 mL x 2). La capa orgánica combinada se lavó con agua (30 mL), se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:20-1:15-1:10) para proporcionar el compuesto del título D190 (240 mg, 25 %).
LCMS: 138 [M-Cbz]+. tR =2.21 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-afe): 7.32-7.38 (s, 5H), 5.72 (td, J = 54.9, 3.9 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 3.91-4.13 (m, 3H), 3.52­ 3.63 (m, 2H), 2.98-3.05 (m, 2H);
Descripción D191
clorhidrato de (S)-2-(difluorometil)morfolino (D191)
Figure imgf000085_0002
Una solución de D190 (240 mg, 0.88 mmol) y Pd/C (al 10 %, 50 mg) en MeOH (20 mL) se agitó bajo H2 a 40°C durante 16 horas. La mezcla se filtró y se agregaron 3 gotas de HCl concentrado, luego la mezcla se concentró para proporcionar el compuesto del título D191 (170 mg, 100 %) como aceite incoloro.
LCMS: 138 [M+H]+. tR =1.93 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, D2O): 5.96 (td, J = 53.4, 3.0 Hz, 1H), 4.11-4.22 (m, 2H), 3.84-3.93 (m, 1H), 3.13-3.49 (m. 4H). Descripción D192
(S)-W-(1-(2-(2-(difluorometil)morfolino)etil)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D192)
Figure imgf000085_0003
A una solución de D191 (170 mg, 0.979 mmol), D80 (427 mg, 0.800 mmol) en dioxano (10 mL) se agregó K2CO3 (550 mg, 4 mmol) y H2O (3 gotas). Después de agitarse a 115°C durante 30 horas, la mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se concentró. El residuo se vertió en 100 mL de agua y se extrajo con EA (40 mL x 3). La fase orgánica se secó en Na2SO4 , se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=5:1 -2:1 -1:1) para proporcionar el compuesto del título D192 (150 mg, 21 %) como un aceite marrón.
LCMS: 576 [M+H] .tR =2.63 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-afe): 8.66 (s, 1H), 7.65-7.79 (m, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.25-7.30 (m, 3H), 6.51 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 5.97 (td, J = 55.2, 3.9 Hz, 1H), 4.37-4.46 (m, 2H), 4.18-4,21 (m, 2H), 3.83 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 3.60-3.64 (m, 1H), 3.44-3.51 (m, 1H), 2.73-2.85 (m, 4H), 2.33 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.01 -2.18 (m, 2H), 1.32 (t, J = 6.9 Hz, 3H).
Descripción D193
2-(hidroximetil)morfolino-4-carboxilato de (fí)-terc-butilo (D193)
Figure imgf000086_0001
El compuesto del título D193 (2.50 g, 83 % de rendimiento) se preparó como un aceite incoloro mediante un procedimiento similar al que se describió para D186 a partir de ácido (R)-4-(ferc-butoxicarbonil)morfolino-2-carboxílico (3.30 g, 14.3 mmol).
LCMS: 218 [M+H]+. tR =1.96 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 53.84-3.91 (m, 3H), 3.49-3.68 (m, 4H), 2.70-2.97 (m, 2H), 2.03 (s, 1H), 1.45 (s, 9H); Descripción D194
sal de TFA de (fí)-morfolin-2-ilmetanol (D194)
Figure imgf000086_0002
EL compuesto del título D194 (700 mg, 100 % de rendimiento) se preparó como un aceite incoloro mediante un procedimiento similar al que se describió para D187 a partir de D193 (1.30 g, 5.99 mmol).
LCMS: 118 [M+H]+. tR =1.75 min. (LCMS condición 3)
Descripción D195
2-(hidroximetil)morfolino-4-carboxilato de (fí)-bencilo (D195)
Figure imgf000086_0003
EL compuesto del título D195 (970 mg, 65% de rendimiento) se preparó como un aceite incoloro mediante un procedimiento similar al que se describió para D188 a partir de D194 (700 mg, 5.98 mmol).
LCMS: 252 [M+H]+ . t R =2.73 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-da ): 7.30-7.41 (m, 5H), 5.09 (s, 2H), 4.78-4.81 (m, 1H), 3.76-3.95 (m, 3H), 3.31-3.43 (m, 4H), 2.62-2.93 (m, 2H);
Descripción D196
2-formylmorfolino-4-carboxilato de (fí)-bencilo (D196)
Figure imgf000086_0004
Cbz
EL compuesto del título D196 (800 mg, 100% de rendimiento) se preparó como un aceite incoloro mediante un procedimiento similar al que se describió para D189 a partir de D195 (820 mg, 3.27 mmol).
LCMS: 250 [M+H]+. t R =2.09 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-ds): 9.57 (s, 1H), 7.30-7.38 (m, 5H), 5.10 (s, 2H), 3.14-4.15 (m, 7H).
Descripción D197
2-(difluorometil)morfolino-4-carboxilato de (fí)-bencilo (D197)
Figure imgf000087_0001
Cbz
EL compuesto del título D197 (340 mg, 39% de rendimiento) se preparó mediante un procedimiento similar al que se describió para D190 a partir de D196 (800 mg, 3.21 mmol).
LCMS: 272 [M+H]+. tR =2.20 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-afe): 7.32-7.38 (s, 5H), 6.08 (td, J= 54.9, 3.9 Hz, 1H), 5.11 (s, 2H), 3.72-3.93 (m, 4H), 3.45­ 3.54 (m, 1H), 2.95-3.02 (m, 2H).
Descripción D198
clorhidrato (fí)-2-(difluorom etil)m orfolino (D198)
Figure imgf000087_0002
EL compuesto del título D198 (120 mg, 55% de rendimiento) se preparó como un aceite incoloro mediante un procedimiento similar al que se describió para D191 a partir de D197 (340 mg, 1.25 mmol).
1H NMR (300 MHz, DMSO-afe): 9.94 (br s, 1H), 9.74 (br s, 1H), 6.14 (td, J= 53.1,3.3 Hz, 1H), 3.81-4.18 (m, 4H), 3.18­ 3.26 (m, 2H), 2.92-2.98 (m. 2H).
Descripción D199
(fí)-W-(1-(2-(2-(difluorometil)morfolino)etil)-5-metil-1 H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7-tosil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (D199)
Figure imgf000087_0003
EL compuesto del título D199 (125 mg, 31% de rendimiento) se preparó como un sólido blanco mediante un procedimiento similar al que se describió para D192 a partir de D198 (120 mg, 0.667 mmol).
LCMS: 576 [M+H]+. t R =2.06 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-afe): 8.66 (s, 1H), 7.65-7.79 (m, 2H), 7.65 (s, 1H), 7.25-7.30 (m, 3H), 6.51 (d, J= 3.9 Hz, 1H), 5.97 (td, J= 55.2, 3.9 Hz, 1H), 4.37-4.46 (m, 2H), 4.18-4.21 (m, 2H), 3.83 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 3.60-3.64 (m, 1H), 3.44­ 3.51 (m, 1H), 2.73-2.85 (m, 4H), 2.33 (s, 3H), 2.25 (s, 3H), 2.01 -2.18 (m, 2H), 1.32 (t, J= 6.9 Hz, 3H).
Descripción D200
(±)-3-(4-amino-5-cloro-1H-pirazol-1-il)ciclopentanol (D200)
Figure imgf000087_0004
A una mezcla de D67 (400 mg, 1.727 mmol), cloruro de amonio de (462 mg, 8.63 mmol) y hierro (482 mg, 8.63 mmol) en agua (10 mL) y etanol (10 mL) se agitó a 80°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. EL producto en crudo se purificó mediante cromatografía en C18 (CH3CN/H2O, 0.1% TFA) para proporcionar el compuesto del título D200 (412 mg, 0.959 mmol, 55.5 % de rendimiento) como un sólido amarillo. LCMS: 202 [M+H]+. t R =0.36 min. (LCMS condición 1)
Descripción D201
3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (±)-c/s-ferc-butilo (D201)
cis
Figure imgf000088_0002
(
Figure imgf000088_0001
N-"Boc
A una solución de 3-fluoro-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato de trans-terc-butilo (2.0 g, 9.1 mmol), 4-nitro-1 H-pirazol (1.03 g, 9.11 mmol), PPh3 (3.57 g, 13.6 mmol) en THF (50 mL) se agregó lentamente DIAD (2.75 g, 13.6 mmol) a 0°C. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió en DCM (30 mL) y se agregó n-hexano (60 mL). La suspensión se agitó vigorosamente durante 1 hora y luego se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en C18 (ACN: H2O=4:1-1:1) para proporcionar el compuesto del título D201 como un aceite amarillo (2.4 g, 86 % de rendimiento).
LCMS: 314 [M+H]+. tR =1.93 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.25 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 5.03-4.86 (m, 1H), 4.55-4.39 (m, 3H), 3.13-2.85 (m, 2H), 2.38-2.24 (m, 1H), 2.08-2.00 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D202
4-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-3-fluoropiperidin-1-carboxilato de (±)-c/s-ferc-butilo (D202)
Figure imgf000088_0003
A una solución de DIPEA (0.98 g, 9.7 mmol) en THF (15 mL) se agregó n-BuLi (3.9 mL, 9.7 mmol) a -78°C bajo atmósfera de N2. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 30 min y luego a 0°C durante 30 min. A una solución de D201 (1.7 g, 5.40 mmol) en THF (20 mL) se agregó encima una solución de LDA a -78°C. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 1.5 h y se agregó percloroetano (2.30 g, 9.72 mmol). La mezcla de reacción se calentó a -78°C durante 30 min y luego se dejó calentar hasta temperatura ambiente durante 1 hora. Se agregó NH4Cl ac. y la solución se extrajo con EtOAc (50 mL x 2). La capa orgánica se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA = 8:1) para proporcionar el compuesto del título D202 (640 mg, 36 % de rendimiento) como un sólido blanco.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.22 (s, 1H), 4.94-4.74 (m, 1H), 4.68-4.33 (m, 3H), 3.26-2.97 (m, 2H), 2.84­ 2.71 (m, 1H), 1.96-1.88 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D203
3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (±)-c/s-ferc-butilo (D203)
Figure imgf000088_0004
Una solución de D202 (640 mg, 1.86 mmol), 2,4,6-trimetil-ciclotriboroxano (224 mg, 1.77 mmol), Pd(dppf)Cl2 (310 mg, 0.37 mmol), Na2CO3 (297 mg, 2.80 mmol) y k Oac (224 mg, 2.80 mmol) en H2O (2.8 mL) y acetonitrilo (15 mL) se irradió por microondas a 130°C durante 1.5 horas. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de una almohadilla de celite. La solución se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D203 (710 mg, 60 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
LCMS: 229 [M+H-100]+. tR =1.53 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.11 (s, 1H), 4.84-4.69 (m, 1H), 4.52-4.26 (m, 3H), 3.33-3.10 (m, 2H), 2.77­ 2.64 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 1.99-1.92 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).
Descripción D204
(±)-c/s-3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidina (D204)
Figure imgf000089_0001
A una solución de D203 (710 mg, 2.16 mmol) en MeOH (7 mL) se agregó HCl/dioxano (5.7 M, 10 mL). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se retiró y el residuo se disolvió en solución acuosa de Na2CO3 (20 mL) y se extrajo con DCM/MeOH (10:1, 20 mL x 5). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D204 (500 mg, 100 % de rendimiento) como un sólido amarillo. LCMS: 229 [M+H]+. tR =0.52 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.12 (s, 1H), 4.78-4.61 (m, 1H), 4.44-4.32 (m, 1H), 3.47-3.35 (m, 3H), 2.87­ 2.63 (m, 2H), 2.71 (s, 3H), 1.91 -1.85 (m, 1H), 1.64-1.57 (m, 1H).
Descripción D205 y D206
Enantiómero 1: c/s-3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D205) Enantiómero 2: c/'s-3-fluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D206)
Figure imgf000089_0002
A una solución de D204 (500 mg, 2.20 mmol), oxetan-3-ona (395 mg, 5.48 mmol) en DCE (20 mL) se agregó NaBH(OAc)3 en partes (1.4 g, 6.6 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó una solución acuosa de Na2CO3 (30 mL) y se extrajo con DCM (530 mL x 5). La capa orgánica combinada se secó y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en C18 (ACN al 25-60 % en agua) para obtener el producto deseado (470 mg, 75 % de rendimiento) como un sólido blanco, que se separó mediante HPLC quiral (chiralpak IA 5 um 4.6*250 mm, Hex/EtOH: 50/50, 1.0 mL/min) para proporcionar los compuestos del título D205 (200 mg, tR=7.939 min) y D206 (180 mg, tR=10.224 min) que se prepararon como sólidos blancos.
LCMS: 285 [M+H]+. tR =1.64 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.09 (s, 1H), 4.93-4.76 (m, 1H), 4.70-4.60 (m, 4H), 4.50-4.37 (m, 1H), 3.74­ 3.68 (m, 1H), 3.09-2.96 (m, 2H), 2.77-2.75 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.50-2.27 (m, 2H), 2.09-2.00 (m, 1H).
Descripción D207
Enantiómero 1: c/'s-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D207)
Figure imgf000089_0003
Una solución de D1205 (200 mg, 0.70 mmol) y Pd/C (60 mg, 10 %) en MeOH (8 mL) se agitó a 30°C bajo hidrógeno durante 1 hora. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D207 (150 mg, 0.598 mmol, 85 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 255 [M+H]+. tR =0.47 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.18 (s, 1H), 4.89-4.61 (m, 5H), 4.32-4.18 (m, 1H), 3.73-3.64 (m, 1H), 3.10­ 3.02 (m, 2H), 2.78-2.74 (m, 1H), 2.66-2.61 (br. s., 2H), 2.40-2.17 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.01-1.93 (m, 1H).
Descripción D208
Enantiómero 2: c/s-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D208)
Figure imgf000090_0001
Una solución de D206 (180 mg, 0.63 mmol) y Pd/C (30 mg, 10%) en MeOH (8 mL) se agitó a 30°C bajo globo de H2 durante 1 hora. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D208 (140 mg, 0.598 mmol, 87 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 255 [M+H]+. tR =0.47 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.18 (s, 1H), 4.89-4.61 (m, 5H), 4.32-4.18 (m, 1H), 3.73-3.64 (m, 1H), 3.10­ 3.02 (m, 2H), 2.78-2.74 (m, 1H), 2.66-2.61 (br. s., 2H), 2.40-2.17 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 2.01-1.93 (m, 1H).
Descripción D209
3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (3S,4S)-ferc-butilo (D209)
Figure imgf000090_0002
A una solución de 3-fluoro-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato de (3S, 4R)-ferc-butilo (3.40 g, 15.5 mmol), 4-nitro-1H-pirazol (1.75 g, 15.5 mmol), PPh3 (6.10 g, 23.3 mmol) en THF (100 mL) se agregó lentamente DIAD (4.71 g, 23.3 mmol) a 0°C. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se concentró y el residuo se disolvió en EtOAc (50 mL) y luego se agregó hidrato de n-hexano (100 mL). La suspensión se agitó vigorosamente durante 1 hora y luego se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en C18 (MeCN/agua: al 20 % a 80 %) para proporcionar el compuesto del título D209 (4.05 g, 83 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.22 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 4.86-4.57 (m, 2H), 4.29-4.18 (m, 2H), 2.85 (br s, 2H), 2.28-2.12 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D210
4-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-3-fluoropiperidin-1-carboxilato de (3S,4S)-ferc-butilo (D210)
Figure imgf000090_0003
A una solución de D209(2.7 g, 8.6 mmol) en THF (50 mL) se agregó LiHMDS (26 mL, 25.8 mmol, 1M en THF) a -78°C bajo N2. La mezcla de reacción se agitó a -78°C durante 40 min. Se agregó una solución de hexacloroetano (4.07 g, 17.2 mmol) en THF (20 mL) y la reacción se agitó a -78°C durante 2 horas bajo N2. Se agregó una solución de NH4Cl ac. y la solución se extrajo con EtOAc (50 mL x 2). Se secaron y se concentraron las capas orgánicas. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D210 (1.2 g, 40 % de rendimiento) como un sólido amarillo.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.23 (s, 1H), 4.99-4.75 (m, 1H), 4.61-4.48 (m, 2H), 4.32-4.22 (m, 1H), 2.99­ 2.83 (m, 2H), 2.31-2.16 (m, 1H), 2.03-1.96 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D211
(3S,4S)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-fluoropiperidina (D211)
Figure imgf000090_0004
A una solución de D210 (1,2 g, 3.44 mmol) en MeOH (6 mL) se agregó HCl/dioxano (8 M, 6 mL). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se evaporó y el residuo se disolvió en solución acuosa de Na23 (20 mL) y se extrajo con DCM/MeOH (10:1,50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D211 (820 mg, 96 % de rendimiento).
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.23 (s, 1H), 4.99-4.75 (m, 1H), 4.56-4.44 (m, 1H), 3.58-3.51 (m, 1H), 3.23­ 3.15 (m, 1H), 2.81-2.68 (m, 2H), 2.27-2.13 (m, 1H), 2.06-1.97 (m, 1H).
Descripción D212
(3S,4S)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D212)
Figure imgf000091_0001
A una solución de D211 (400 mg, 1.61 mmol), oxetan-3-ona (290 mg, 4.03 mmol) in DCE (15 mL) se agregó NaBH(OAc)3 (1.02 g, 4.83 mmol) en partes a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó una solución acuosa de Na2CO3 (30 mL) y se extrajo con DCM (30 mL x 5). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D212 (410 mg, 83 % de rendimiento) como un sólido amarillo claro.
LCMS: 305 [M+H]+. tR =1.02 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.24 (s, 1H), 5.16-4.91 (m, 1H), 4.69 (t, J = 6.6 Hz, 2H), 4.63-4.58 (m, 2H), 4.49-4.37 (m, 1H), 3.70-3.62 (m, 1H), 3.27-3.20 (m, 1H), 2.90-2.85 (m, 1H), 2.43-2.28 (m, 1H), 2.18-2.08 (m, 2H), 2.02­ 1.96 (m, 1H).
Descripción D213
5-cloro-1-((3S, 4S)-3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D213)
Figure imgf000091_0002
A una solución de D212 (410 mg, 1.35 mmol) en EtOH/H2O (4 mL/ 4mL) se agregó polvo de hierro (151 mg, 2.70 mmol) y NH4Cl (150 mg, 2.70 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La solución se filtró a través de una almohadilla de celite y se lavó con MeOH (10 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se concentraron y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en C18 (acetonitrilo al 20-50 % en agua, tR = 5 min) para proporcionar el compuesto del título D213 (260 mg, 70 % de rendimiento) como un aceite rojo. LCMS: 275 [M+H]+. tR =1.55 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.29 (s, 1H), 5.13-4.88 (m, 1H), 4.69-4.58 (m, 4H), 4.28-4.15 (m, 1H), 3.68­ 3.59 (m, 1H), 3.21-3.15 (m, 1H), 2.97-2.76 (m, 3H), 2.34-2.20 (m, 1H), 2.13-1.92 (m, 3H).
Descripción D214
3-fluoro-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (3R,4R)-terc-butilo (D214)
Figure imgf000091_0003
A una solución de 3-fluoro-4-hidroxipiperidin-1-carboxilato de (3R, 4S)-ferc-butilo (2.2 g, 10.04 mmol), 4-nitro-1H-pirazol (1.19 g, 10.5 mmol), PPh3 (3.94 g, 15.06 mmol) en THF (50 mL) se agregó lentamente DIAD (3.04 g, 15.06 mmol) bajo enfriamiento con hielo. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El solvente se retiró y el residuo se disolvió en Et2O (50 mL). La suspensión se agitó vigorosamente durante 30 min y luego se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en C18 (ACN al 30-60 % en agua) para proporcionar el compuesto del título D214 (2.7 g, 85 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 313 [M-H]+. tR =1.80 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.23 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 4.87-4.62 (m, 2H), 4.29-4.17 (m, 2H), 2.93-2.80 (m, 2H), 2.33-2.12 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
Descripción D215
4-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-3-fluoropiperidin-1-carboxilato de (3R, 4R)-ferc-butilo (D215)
Figure imgf000092_0001
A una solución de D214(2.7 g, 8.6 mmol) en THF (50 mL) se agregó LiHMDS (17 mL, 17.2 mmol, 1M en THF) por goteo a -78°C bajo N2. La mezcla de reacción se agitó a esta temperatura durante 1 hora. Se agregó una solución de hexacloroetano (4.07 g, 17.2 mmol) en THF (20 mL) a -78°C. La reacción resultante se agitó a -78°C durante 20 min bajo N2. Se agregó una solución acuosa de NH4Cl y la solución se extrajo con EA (50 mL x 2). Se secaron y se concentraron las capas orgánicas. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D215 (2,7 g, 90 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.24 (s, 1H), 5.00-4.76 (m, 1H), 4.61-4.54 (m, 2H), 4.29-4.24 (m, 1H), 2.91­ 2.87 (m, 2H), 2.26-2.20 (m, 1H), 2.03-2.01 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D216
(3R,4R)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-fluoropiperidina (D216)
Figure imgf000092_0002
A una solución de D215 (2,7 g, 7.75 mmol) en MeOH (20 mL) se agregó HCl/dioxano (8 M, 20 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El solvente se retiró y el residuo se disolvió en solución acuosa de Na2CO3 (30 mL) y se extrajo con DCM/MeOH (10:1, 50 mL x 3). La capa orgánica combinada se secaron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D216 (1,83 g, 95 % de rendimiento) como un sólido amarillo.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.23 (s, 1H), 5.00-4.74 (m, 1H), 4.56-4.44 (m, 1H), 3.56-3.51 (m, 1H), 3.20­ 3.16 (m, 1H), 2.81-2.66 (m, 2H), 2.27-2.12 (m, 1H), 2.05-1.97 (m, 2H).
Descripción D217
(3R,4R)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D217)
Figure imgf000092_0003
A una solución de D216 (500 mg, 2.01 mmol), oxetan-3-ona (363 mg, 5.04 mmol) en DCE (16 mL) se agregó NaBH(OAc)3 en partes (1.27 g, 6.03 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó una solución acuosa de Na2CO3 (60 mL) y se extrajo con DCM (80 mL x 4). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2:1) para proporcionar el compuesto del título D217 (520 mg, 85 % de rendimiento) como un sólido incoloro.
LCMS: 305 [M+H]+. tR =1.02 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.24 (s, 1H), 5.12-4.94 (m, 1H), 4.71-4.58 (m, 4H), 4.48-4.38 (m, 1H), 3.69­ 3.63 (m, 1H), 3.25-3.22 (m, 1H), 2.89-2.85 (m, 1H), 2.41-2.30 (m, 1H), 2.16-2.03 (m, 2H), 2.01-1.99 (m, 1H).
Descripción D218
5-cloro-1-((3fí, 4fí)-3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D218)
Figure imgf000093_0001
A una solución deD217 (5.90 g, 19.4 mmol) en EtOH/hbO (50 mL/ 50 mL) se agregó polvo de hierro (5.4 g, 97 mmol) y NH4 (5.2 g, 97 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 50°C. La solución se filtró a través de una almohadilla de celite y se lavó con MeOH (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se concentraron, se disolvieron en EtOAc (50 mL) y se filtraron. La solución orgánica se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en C18 (acetonitrilo al 10-40 % en agua, tR = 20 min) para proporcionar el compuesto del título D218 (3,5 g, 6 6 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 275 [M+H]+. tR =1.495 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.29 (s, 1H), 5.13-4.88 (m, 1H), 4.69-4.57 (m, 4H), 4.28-4.15 (m, 1H), 3.68­ 3.59 (m, 1H), 3.21-3.14 (m, 1H), 2.90 (br s, 2H), 2.83-2.79 (m, 1H), 2.34-2.20 (m, 1H), 2.13-1.92 (m, 3H).
Descripción D219
(±)-(c/s)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-fluoropiperidina (D219)
Figure imgf000093_0002
A una solución de D202 (1.0 g, 2.87 mmol) en MeOH (10 mL) se agregó HCl/dioxano (5.7 M, 10 mL). La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. El solvente se retiró y el residuo se disolvió en solución acuosa de Na2CO3 (40 mL) y se extrajo con EtOAc (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D219 como un sólido amarillo (650 mg, 90 % de rendimiento). LCMS: 249 [M+H]+. t R =0.57 min. (LCMS condición 3)
Descripción D220
(±)-(c/s)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D220)
Figure imgf000093_0003
A una solución de D219 (650 mg, 2.62 mmol), oxetan-3-ona (472 mg, 6.55 mmol) en DCE (30 mL) se agregó NaBH(OAc)3 en partes (1.66 g, 7.86 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Se agregó una solución acuosa de Na2CO3 (40 mL) y se extrajo con DCM (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=1:2) para proporcionar el compuesto del título D220 (640 mg, 84 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 305 [M+H]+. tR =1.96 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.21 (s, 1H), 4.99-4.83 (m, 1H), 4.70-4.55 (m, 5H), 3.75-3.67 (m, 1H), 3.16­ 3.02 (m, 2H), 2.93-2.80 (m, 1H), 2.48-2.24 (m, 2H), 2.08-1.98 (m, 1H).
Descripción D221
(±)-(c/s)-5-cloro-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D221)
Figure imgf000093_0004
A una solución deD220 (640 mg, 2.10 mmol) en EtOH/H2O (10 mL/ 10 mL) se agregó polvo de hierro (707 mg, 12,6 mmol) y NH4 (670 mg, 12,6 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante la noche a 50°C. La solución se filtró a través de una almohadilla de celite. La capa orgánica combinada se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en C18 (acetonitrilo al 0-20% en agua) para proporcionar el compuesto del título D221 (400 mg, 80 % de rendimiento) como un aceite rojo.
LCMS: 275 [M+H]+. tR =1.32 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.27 (s, 1H), 4.93-4.77 (m, 1H), 4.72-4.64 (m, 4H), 4.38-4.25 (m, 1H), 3.74­ 3.65 (m, 1H), 3.15-2.78 (m, 5H), 2.41-2.18 (m, 2H), 1.99-1.94 (m, 1H).
Descripción D222
metanosulfonato de (±)-c/s-3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentilo (D222)
Figure imgf000094_0001
A una solución de D68 (1.00 g, 4.74 mmol) y TEA (2.39 g, 23.7 mmol) en DCM (15 mL) se agregó MsCl (1.09 g, 9.48 mmol) a 0°C bajo nitrógeno. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en agua (100 mL) y luego se extrajo con DCM (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron en Na2SO4 , se filtraron y concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en C18 (ACN: H2O= 1:4) para proporcionar el compuesto del título D222 (630 mg, 48 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 290 [M+H]+. tR =1.76 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.10 (s, 1H), 5.29-5.21 (m, 1H), 4.66-4.61 (m, 1H), 3.05 (s, 3H), 2.68 (s, 3H), 2.63-2.09 (m, 6 H).
Descripción D223
(±)-(frans)-4-(3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentil)morfolino (D223)
l " " ?
o
O.N^ ' O '
Una solución de D222 (630 mg, 2.07 mmol), morfolino (541 mg, 6.22 mmol) y K2CO3 (860 mg, 6.22 mmol) en ACN/DMF (10 mL/3 mL) se agitó durante la noche a 90°C. La mezcla de reacción se vertió en agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (30 mL x3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron en Na2SO4, se filtraron y concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D223 (320 mg, 55 % de rendimiento) como un sólido marrón.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.06 (s, 1H), 4.74-4.69 (m, 1H), 3.72-3.69 (m, 4H), 3.00-2.86 (m, 1H), 2.63 (s, 3H), 2.52-2.47 (m, 4H), 2.26-1.93 (m, 5H), 1.57-1.53 (m, 1H).
Descripción D224
(±)-(frans)-5-metil-1-(3-morfolinociclopentil)-1H-pirazol-4-amina (D224)
trans
Figure imgf000094_0002
~<y
Una solución de D223 (315 mg, 1.13 mmol) y Pd/C (300 mg, 10 %) en MeOH ( 6 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo hidrógeno. La mezcla se filtró y se concentró para proporcionar el producto del título D224 (279 mg, 99 %) como un sólido blanco.
LCMS: 251 [M+H]+. tR =1.46 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, DMSO-ds): 56 . 8 6 (s, 1H), 4.56-4.54 (m, 1H), 3.55-3.46 (m, 4H), 2.76-2.74 (m, 1H), 2.35 (s, 4H), 2.04-1.79 (m, 8 H), 1.43-1.40 (m, 1H).
Descripción D225
metanosulfonato de c/s/frans-3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentilo (D225)
o 2n OMs
X K T '
A una solución de D66 (3.10 g, 15.7 mmol) y TEA (7.95 g, 78.7 mmol) en DCM (45 mL) se agregó MsCI (3.60 g, 31.5 mmol) a 0°C. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en agua (50 mL), se extrajo con DCM (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron en Na2SO4, se filtraron y concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en C18 con ACN/H2O (15 %-55 %) para proporcionar el producto del título D225 (2.00 g, >80 % de pureza y 1.20 g de producto en bruto) como un aceite.
LCMS: 276 [M+H]+. tR =2.196 min. (LCMS condición 3)
Descripción D226 y D227
(±)-(Yrans>M -[3-(4-nitro-pirazol-1-il)-ciclopentil]-m orfolino (D226)
(±)-(c/s>M -[3-(4-nitro-pirazol-1-il)-ciclopentil]-m orfolino (D227)
Figure imgf000095_0001
Una solución de D225 (2,00 g, 7.27 mmol), morfolino (1,90 g, 21.8 mmol) y K2CO3 (3,00 g, 21.8 mmol) en DMF (50 mL) se agitó durante la noche a 115°C. La mezcla se vertió en agua (50 mL), se extrajo con DCM (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), se secaron en Na2SO4, se filtraron y concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1-0:1) para proporcionar los compuestos del título D226 (550 mg, rendimiento 28 %) y D227 (297 mg, rendimiento 15 %) como un aceite marrón.
D226: LCMS: 267 [M+H]+. tR =1.984 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.15 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.81-4.72 (m, 1H), 3.73 (t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.98­ 2.87 (m, 1H), 2.52-2.48 (m, 4H), 2.42-2.03 (m, 6H);
D227: LCMS: 267 [M+H]+. tR =1.999 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.31 (s, 1H), 8.05 (s, 1H), 4.75-4.65 (m, 1H), 3.73 (t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.78­ 2.67 (m, 1H), 2.57-2.44 (m, 4H), 2.29-1.97 (m, 6H).
Descripción D228 y D229
Enantiómero 1: (frans)-4-(3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentil)morfolino (D228)
Enantiómero 2: (frans)-4-(3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentil)morfolino (D229)
Figure imgf000095_0002
A una solución de D226 (550 mg, 2.07 mmol) en THF (30 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 4.2 mL,4.2 mmol) por goteo a -78°C. La mezcla se agitó durante 1 hora a -78°C y luego se agregó una solución de hexacloroetano (981 mg, 4.14 mmol) en THF seco (4 mL) por goteo. La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La reacción se inactivo con solución de NH4Cl saturado (30 mL). La mezcla se extrajo con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mL x 2). La capas orgánicas se concentraron al vacío y se purificaron mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=3:1-0:1 y CH2Cl2:MeOH=20:1-10:1) para obtener el racemato, que se separó mediante HPLC quiral (Condición quiral: chiralpak IF, 60-40 Hex-EtOH, Flujo: 1.0 mL/Min, T = 30°C) para proporcionar los compuestos del título D228 (283 mg, tR =10.208) y D229 (278 mg, tR =13.517) como sólidos amarillos.
LCMS: 301 [M+H]+. Xr =2.199 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.17 (s, 1H), 5.04-4.95 (m, 1H), 3.73 (X, J = 4.8 Hz, 4H), 3.03-2.93 (m, 1H), 2.59-2.43 (m, 4H), 2.35-2.02 (m, 5H), 1.67-1.53 (m, 1H).
Descripción D230
Enantiómero 1: (frans)-5-cloro-1-(3-morfolinociclopentil)-1H-pirazol-4-amina (D230)
Figure imgf000096_0001
A una solución deD228 (283 mg, 0.943 mmol) en EXOH/H2O (4 mL/ 4 mL) se agregó polvo de hierro (216 mg, 3,77 mmol) y NH4 (101 mg, 1,886 mmol). Luego, la reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar un aceite rojo, que se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en C18 (CH3CN al 5~45 % en agua) para proporcionar el compuesto del título D230 (181 mg, 71 % de rendimiento) como un sólido rojo.
LCMS: 271 [M+H]+. Xr =1.546 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.22 (s, 1H), 4.86-4.77 (m, 1H), 3.73 (X, J = 4.8 Hz, 1H), 2.98-2.88 (m, 3H), 2.54-2.45 (m, 4H), 2.67-1.93 (m, 5H), 1.57-1.51 (m, 1H).
Descripción D231
Enantiómero 2: (frans)-5-cloro-1-(3-morfolinociclopentil)-1H-pirazol-4-amina (D231)
Figure imgf000096_0002
A una solución deD229 (278 mg, 0.927 mmol) en EXOH/H2O (4 mL/ 4 mL) se agregó polvo de hierro (208 mg, 3,71 mmol) y NH4 (99 mg, 1,85 mmol). Luego, la reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se filtró y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el producto en bruto como un aceite rojo, que se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en C18 (CH3CN al 5~45 % en agua) para proporcionar el compuesto del título D231 (162 mg, 69% de rendimiento) como un sólido rojo.
LCMS: 271 [M+H]+. Xr =1.547 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.22 (s, 1H), 4.86-4.76 (m, 1H), 3.72 (X, J = 4.8 Hz, 1H), 2.98-2.85 (m, 3H), 2.54-2.46 (m, 4H), 2.67-1.93 (m, 5H), 1.59-1.51 (m, 1H).
Descripción D232 y D233
Enantiómero 1: (c/'s)-4-(3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentil)morfolino (D232)
Enantiómero 2: (c/'s)-4-(3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclopentil)morfolino (D233)
Figure imgf000096_0003
A una solución de D227 (297 mg, 1.12 mmol) en THF (15 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 2.24 mL, 2.24 mmol) por goteo a -78°C. La mezcla se agitó durante 1 hora a -78°C y luego se agregó una solución de hexacloroetano (531 mg, 2.24 mmol) en THF seco (2 mL) por goteo durante 20 min. La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La reacción se inactivo con solución de NH4Cl saturado (30 mL). La mezcla se extrajo con EtOAc (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mL x 2). La capas orgánicas se concentraron al vacío y se purificaron mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=3:1-0:1 y CH2Cl2:MeOH=20:1-10:1) para obtener el racemato, que se separó mediante HPLC quiral (Condición quiral: chiralpak IF, 60-40 Hex-EeOH, Flujo: 1.0 mL/Min, T = 30°C) para proporcionar los compuestos del título D232 (66 mg, tR =10.10) y D233 (67 mg, tR =11.60) como sólidos amarillos.
LCMS: 301 [M+H]+. tR =2.199 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.17 (s, 1H), 4.92-4.81 (m, 1H), 3.73 (t, J= 4.8 Hz, 4H), 2.79-2.68 (m, 1H), 2.59-2.44 (m, 4H), 2.41-2.35 (m, 1H), 2.25-2.06 (m, 1H), 2.02-1.87 (m, 2H).
Descripción D234
Enantiómero 2: (c/s)-5-cloro-1-(3-morfolinociclopentil)-1HLpirazol-4-amina (D234)
Figure imgf000097_0001
A una solución deD233 (60 mg, 0.20 mmol) en EtOH/H2O (5 mL/ 5 mL) se agregó polvo de hierro (45 mg, 0,8 mmol) y NH4 (43 mg, 0,8 mmol). Luego, la reacción se agitó a 50°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió con EtOAc (5 mL) y se lavó con agua (50 mL). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (10 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D234 (30 mg, 56 %) como un aceite marrón.
LCMS: 271 [M+H]+. tR =1.723 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.21 (s, 1H), 4.70-4.62 (m, 1H), 3.72 (t, J = 4.8 Hz, 4H), 2.74-2.66 (m, 1H), 2.56-2.47 (m, 4H), 2.34-2.27 (m, 1H), 2.16-2.00 (m, 3H), 1.95-1.82 (m, 2H).
Descripción D235
(c/'s/frans)-3-metiltetrahidro-2H-piran-4-ol (D235)
Figure imgf000097_0002
A una solución de 3-metildihidro-2H-piran-4(3H)-ona (3.06 g, 26.8 mmol) en THF anhidro (40 mL) se agregó LiHBEt3 (35 mL, 1M en THF) a 0°C. La reacción se agitó a 0°C durante 2 horas y luego a temperatura ambiente durante 2 horas. Se agregó agua (15 mL) y EtOH (22.5 mL) y la capa orgánica se oxidó con NaOH 6N (13.5 mL) y H2O2 al 36 % (18 mL) a 0°C. Después de agitarse a temperatura ambiente durante 30 min, la mezcla se saturó con K2CO3y la fase orgánica se separó. La fase acuosa se extrajo con éter (150 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se concentraron y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA: PE: MeOH= 8:2:0.1) para proporcionar el compuesto del título D235 (1.50 g, rendimiento 48 %) como un aceite incoloro.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 54.01-3.92 (m, 1H), 3.86-3.76 (m, 1H), 3.64-3.57 (m, 0.5H), 3.52 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.45-3.27 (m, 1H), 2.99 (t, J = 10.8 Hz, 0.5 H), 1.94-1.51 (m, 4H), 0.94-0.90 (m, 3H)
Descripción D236
(c/'s/frans)-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D236)
Figure imgf000097_0003
A una solución de D235 (1.50 g, 12.9 mmol), 4-nitro-1 H-pirazol (2.19 g, 19.4 mmol), PPh3 (5.08 g, 19.4 mmol) en THF (15 mL) se agregó lentamente DIAD (5.22 g, 25.9 mmol) a 0°C. Después de agitarse durante la noche a temperatura ambiente, la mezcla se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA: PE = 1:2) y cromatografía en columna ultrarrápida en C18 (CH3CN al 15-50 % en agua) para proporcionar el compuesto del título D236 (1.03 g, 38 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 5 8.15-8.09 (m, 2H), 4.58-4.50 (m, 0.5H), 4.25-4.10 (m, 1H), 4.00-3.85 (m, 1.5H), 3.71-3.54 (m, 1.5H), 3.15 (t, J= 11.1 Hz, 0.5H), 2.45-2.32 (m, 1H), 2.23-2.14 (m, 1H), 2.14-1.90 (m, 1H), 0.810 . 7 0 ( m , 3 H ) .
Descripción D237
(c/'s/frans)-5-cloro-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D237)
Figure imgf000098_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D236 ( 1 . 4 4 g , 6 . 8 2 m m o l ) e n T H F ( 2 0 m L ) s e a g r e g ó l e n t a m e n t e L i H M D S ( 1 3 m L , 1 3 m m o l ) a - 7 8 ° C b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a e s t a t e m p e r a t u r a d u r a n t e 4 0 m i n . S e a g r e g ó p e r c l o r o e t a n o ( 3 . 2 3 g , 1 3 . 6 m m o l ) e n T H F ( 8 m L ) a - 7 8 ° C y l a m e z c l a s e a g i t ó a e s t a t e m p e r a t u r a d u r a n t e 0 . 5 h y l u e g o s e i n a c t i v ó m e d i a n t e N H 4 C l a c . ( 1 5 m L ) . L a s o l u c i ó n s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 5 0 m L x 2 ) . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 4 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D237 ( 1 , 5 0 g , 8 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 2 2 ( s , 0 . 4 H ) , 8 . 1 8 ( s , 0 . 6 H z ) , 4 . 7 7 - 4 . 7 0 ( m , 0 . 6 H ) , 4 . 2 3 - 4 . 1 4 ( m , 1 . 5 H ) , 4 . 1 3 - 4 . 0 6 ( m , 0 . 4 H ) , 4 . 0 4 - 3 . 9 8 ( m , 0 . 6 H ) , 3 . 8 5 - 3 . 4 9 ( m , 1 . 5 H ) , 3 . 1 8 ( t , J = 1 1 . 1 H z , 0 . 4 H ) , 2 . 6 2 - 2 . 2 7 ( m , 2 H ) , 1 . 9 0 - 1 . 7 8 ( m , 1 H ) , 0 . 8 4 ( d , J = 6 . 9 H z , 1 . 8 H ) , 0 . 6 7 ( d , J = 6 . 6 H z , 1 . 2 H ) .
Descripción D238, D239, D240 y D241
Enantiómero 1: c/s-5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D238)
Enantiómero 2: c/s-5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D239)
Enantiómero 3: frans5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1 H-pirazol (D240)
Enantiómero 4: frans5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1 H-pirazol (D241)
enantiomer 1 (cis) enantiomer 2 cis n ni m r r n n ni m r 4
Figure imgf000098_0002
U n a s o l u c i ó n d e D237 ( 1 . 5 0 g , 6 . 0 7 m m o l ) , á c i d o m e t i l b o r ó n i c o ( 2 . 2 8 g , 3 8 . 0 m m o l ) , P d ( d p p f ) C l 2 - C H 2 C l 2 ( 7 4 3 m g , 0 . 9 1 m m o l ) , N a 2 C O 3 ( 1 . 9 3 g , 1 8 . 2 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) y H 2O ( 3 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e b a j o N 2 a 1 0 0 ° C . L a r e a c c i ó n s e e n f r i ó h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y s e f i l t r ó a t r a v é s d e u n a a l m o h a d i l l a d e c e l i t e . L a t o r t a d e f i l t r a d o s e l a v ó c o n D C M / M e O H ( 2 0 : 1 , 6 0 m L ) . E l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 5 : 1 ) y S F C ( m é t o d o i n s t r u m e n t a l : 8 0 - 2 0 - C O 2 - M e O H ; c o s o l v e n t e : M e O H ; c o l u m n a : I E ; C O 2 v e l o c i d a d d e f l u j o : 2 . 4 ; v e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e : 0 . 6 ; T = 4 0 . 1 ° C ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l i s ó m e r o c i s ( t R= 2 . 9 8 m i n , 2 0 5 m g ) y e l i s ó m e r o t r a n s ( t R= 2 . 6 6 m i n , 1 4 7 m g ) , q u e s e s e p a r a r o n a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( c o n d i c i ó n q u i r a l : C h i r a l p a k A S - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m , F a s e : H e x : E t O H = 8 0 : 2 0 , F : 1 m L / m i n , W : 2 3 0 n m , T : 3 0 ° C ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o D238 ( 8 0 m g , t R = 5 . 5 8 4 ) , D239 ( 8 3 m g , t R = 6 . 0 0 2 ) , D240 ( 4 1 m g , t R = 6 . 8 8 5 ) y D241 ( 4 0 m g , t R = 6 . 0 9 4 ) c o m o u n a c e i t e m a r r ó n .
Descripción D242
Enantiómero 1: (c/s)-5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D242)
enantiomer 1 (cis)
Figure imgf000098_0003
A u n a s o l u c i ó n d e D238 ( 8 0 m g , 0 . 3 5 m m o l ) e n M e O H ( 1 5 m L ) s e a g r e g ó P d / C ( 6 0 m g , 1 0 % h ú m e d o ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e , l u e g o l a r e a c c i ó n s e a g i t ó b a j o g l o b o d e H 2 d u r a n t e 1 h o r a . L a m e z c l a s e f i l t r ó . E l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D242 ( 7 0 m g , 1 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e i n c o l o r o .
Descripción D243
Enantiómero 2: (c/s)-5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D243)
enantiomer 2 (cis)
Figure imgf000099_0001
A una solución de D239 (83 mg, 0.37 mmol) en MeOH (15 mL) se agregó Pd/C (60 mg, 10 % húmedo) a temperatura ambiente, y luego la reacción se agitó bajo globo de H2durante 1 hora. La mezcla se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D243 (66 mg, 92 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
Descripción D244
Enantiómero 3: (frans)-5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D244)
enantiomer 3 (trans)
H,N
Figure imgf000099_0002
D239
A una solución de D239 (40 mg, 178 mmol) en MeOH (20 mL) se agregó Pd/C (30 mg, 10 % húmedo) a temperatura ambiente, y luego la reacción se agitó bajo globo de H2durante 1 hora. La mezcla se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D244 (35 mg, 100 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
Descripción D245
Enantiómero 4: frans5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D245)
enantiomer 4 (trans)
Figure imgf000099_0003
A una solución de D241 (40 mg, 178 mmol) en MeOH (20 mL) se agregó Pd/C (30 mg, 10 % húmedo) a temperatura ambiente, luego la reacción se agitó bajo globo de H2durante 1 hora. La mezcla se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D245 (35 mg, 100 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
Descripción D246
3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)-4-oxopiperidin-1-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D246)
Boc
Figure imgf000099_0004
A una solución de 3-bromo-4-oxopiperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (10.0 g, 35.9 mmol) y 4-nitro-1 H-pirazol (4.47 g, 39.5 mmol) en DMF (50 mL) se agregó K2CO3 (9.92 g, 71.9 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se vertió en 500 mL de agua y se extrajo con EA (300 mL x 2). Los extractos se concentraron y el residuo se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 35-57 %) para proporcionar el compuesto del título D246 (4,0g, 36 %) como un aceite amarillo.
LCMS: 211 [M+H-100]+. tR =1.92 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.22 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 4.93-4.97 (m, 1H), 4.74 (br s, 1H), 4.43 (br s, 1H), 3.63 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 3.23-3.33 (m, 1H), 2.68-2.64 (m, 2H), 1.51 (s, 9H).
Descripción D244
(±)-ferc-butilo 4,4-difluoro-3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato (D247)
Boc
Figure imgf000100_0001
A una solución de D246 (2.00 g, 6.45 mmol) en DCM (20 mL) se agregó DAST (5.19 g, 32.3 mmol) por goteo a -78°C bajo atmósfera de N2. La reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se vertió en 300 mL de NaHCO3 saturado y se extrajo con DCM (150 mL x 3). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El residuo se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 4560 %) para proporcionar el compuesto del título D247 (2,20 g, 98 %) como un sólido blanco.
LCMS: 233 [M+H-100]+. tR =2.21 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.29 (s, 1H), 8.11 (s, 1H), 4.50-4.56 (m, 1H), 4.36-4.42 (m, 1H), 4..05-4.12 (m, 1H), 3.61-3.68 (m, 1H), 3.24-3.32 (m, 1H), 2.26-2.40 (m, 1H), 1.96-2.13 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
Descripción D248
3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidin-1-catboxilato de (±)-ferc-butilo (D248)
Boc
Figure imgf000100_0002
A una solución de D247 (2.20 g, 6.60 mmol) en THF (30 mL) se agregó LiHDMS (1 M en THF, 20 mL, 20.0 mmol) por goteo a -78°C bajo atmósfera de N2. La reacción se agitó a -78°C durante 1 hora. Luego se agregó C2Cl6 (3.12 g, 13.2 mmol) en THF (10 mL) por goteo y la mezcla se agitó a -78°C durante 1 hora. Se agregó NH4Cl (ac., 30 mL) a -78°C y la mezcla de reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se concentró y se agregó 30 mL de agua. La mezcla se extrajo con EtOAc (100 mL x 3). Los extractos se concentraron y el residuo se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 57-67 %) para proporcionar el compuesto del título D248 (1,93 g, 80 %) como un aceite amarillo.
LCMS: 311 [M+H-56]+. tR =2.845 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.21 (s, 1H), 4.59-4.70 (m, 1H), 4.04-4.06 (m, 2H), 3.75-3.89 (m, 1H), 3.51.­ 3.60 (m, 1H), 2.38-2.61 (m, 1H), 1.97-2.15 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).
Descripción D249 y D250
Enantiómero 1: 3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D249) Enantiómero 2: 3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D250)
Figure imgf000100_0003
Los compuestos del título D249 (1.15 g) y D250 (1.35 g) se obtuvieron como sólidos blancos mediante la separación de D248 utilizando HPLC quiral (Chiralpak IB; 5 um 4.6*250 mm; Fase:Hex:IPA = 80:20; F:1.0 mL/min W: 230 nm T: 30). LCMS: 267 [M+H-100]+. tR =2.31 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.21 (s, 1H), 4.70-4.59 (m, 1H), 4.05 (m, 2H), 3.87-3.82(m, 1H), 3.60-3.52 (m, 1H), 2.54-2.39 (m, 1H), 2.13-1.98(m, 1H), 1.45 (s, 9H).
Descripción D251
4,4-difluoro-3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-catboxilato de (±)-ferc-butilo (D751)
Boc
Figure imgf000101_0001
A una solución de D248 (3.2 g, 8.73 mmol) en DMF (8 mL) y agua (2 mL) se agregó fosfato de tripotasio (5.56 g, 26.2 mmol), ácido metilborónico (3.66 g, 61.1 mmol) y aducto de PdCl2(dppf)-CH2Cl2 (0.713 g, 0.873 mmol). La mezcla resultante se irradió a 100°C por microondas durante 1 hora. La mezcla se diluyó con EA y se agregó agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título D1251 (2,75 g, 7.94 mmol, 91 % de rendimiento).
LCMS: 291 [M+H-56]+. tR =3.630 min. (LCMS condición 1)
Descripción D252
3-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidin-1-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D252)
Boc
Figure imgf000101_0002
Una mezcla de D251 (1 g, 2.89 mmol) y Pd/C (1,229 g, 1.155 mmol) en etanol (15 mL) se agitó bajo hidrógeno durante 16 horas. Después de la filtración, el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D252 (0.913 g, 2.89 mmol, 100 % de rendimiento).
LCMS: 317 [M+H]+. tR =3.116 min. (LCMS condición 1)
Descripción D253
3-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidin-1-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D253)
Figure imgf000101_0003
A una mezcla de D252 (898 mg, 2.84 mmol), D1 (510 mg, 2.58 mmol), X-phos (246 mg, 0.516 mmol), Pd2(dba)3 (236 mg, 0.258 mmol), K2CO3 (1070 mg, 7.74 mmol) en isobutanol (15 mL) se irradió por microondas a 110°C durante 1 hora. Se agregó EA y la solución se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título D253 (760 mg, 1.592 mmol, 61.7 % de rendimiento).
LCMS: 478 [M+H]+. tR =3.284 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, DMSO-afe): 5 11.20 (br. s., 1H), 8.09 (br. s., 1H), 7.62-7.76 (m, 1H), 6.87 (br. s., 1H), 6.22 (br. s., 1H), 4.73 (d, J=17.8 Hz, 1H), 4.33-4.53 (m, 2H), 4.03 (q, J=6.8 Hz, 2H), 3.86 (br. s., 2H), 2.31 (d, J=12.96 Hz, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.11 (br. s., 1H), 1.31-1.47 (m, 12H).
Descripción D254
(±)-3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidina (D254)
Figure imgf000101_0004
A una solución de D248 (1,93 g, 5.27 mmol) en MeOH (10 mL) se agregó HCl/EtOAc (10 mL, 4 M). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentró por debajo de 40°C y el residuo se vertió en 100 mL de NaHCÜ3 saturado. Luego, la mezcla se extrajo con EtOAc (100 mL x 2) y los extractos se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 35-50 %) para proporcionar el compuesto del título D254 (850 mg, 61 %).
LCMS: 267 [M+H]+ . tR =1.92 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.23 (s, 1H), 4.59-4.68 (m, 1H), 3.54-3.61 (m, 1H), 3.30-3.36 (m, 1H), 3.13­ 3.22 (m, 1H), 3.00-3.08 (m, 1H), 2.13-2.32 (m, 1H), 2.00-2.09 (m, 1H).
Descripción D255 y D256
Enantiómero 1: 3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D255) Enantiómero 2: 3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D256)
Figure imgf000102_0001
A una solución de D254 (850 mg, 3.20 mmol) y oxetan-3-ona (576 mg, 7.99 mmol) en 1,2-dicloroetano (80 mL) se agregó NaBH(OAc)3 (2.03 g, 9.60 mmol) en partes. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se vertió en 50 mL de Na2 CO3 acuoso y se extrajo con DCM (70 mL x 3). Los extractos se secaron en Na2 SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna (PE: EA = 5:1-3:1-2:1) para obtener el racemato del título como un sólido blanco (820 mg, 80 %), que se separó mediante HPLC quiral (Chiralpak IB 5um 4.6*250 mm; Fase:Hex:EtOH=70:30; F:1.0 mL/min; W:230 nm; T:30) para proporcionar los compuestos del título D255 (322 mg, 23 % de rendimiento, t R =8.401min) y D256 (322 mg, 23 % de rendimiento, t R =9.439 min).
LCMS: 323 [M+H]+ . tR =1.98 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.23 (s, 1H), 4.79-4.90 (m, 1H), 4.56-4.71 (m, 4H), 3.67-3.75 (m, 1H), 3.04­ 3.12 (m, 1H), 2.91-2.98 (m, 1H), 2.82-2.87 (m, 1H), 2.13-2.38 (m, 3H).
Descripción D257
Enantiómero 1: 5-cloro-1-(4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1 H-pirazol-4-amina (D257)
Figure imgf000102_0002
A una solución deD255 (322 mg, 1.00 mmol) en EtOH/H2O (5 mL/ 5 mL) se agregó polvo de hierro (224 mg, 4,00 mmol) y NH4 (212 mg, 4,00 mmol). Luego, la reacción se agitó a 50°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El residuo se disolvió con EtOAc (50 mL) y se lavó con agua (50 mL).La capa acuosa se extrajo con EtOAc (50 mL). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2 SO4 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D257 (280 mg, 90 %) como un aceite rojo.
LCMS: 293 [M+H]+ . t R =0.62 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.30 (s, 1H), 4.56-4.72 (m, 5H), 3.65-3.70 (m, 1H), 2.79-3.05 (m, 5H), 2.04­ 2.33 (m, 3H).
Descripción D258
Enantiómero 2: 5-cloro-1-(4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1 H-pirazol-4-amina (D258)
Figure imgf000103_0001
A una solución deD256 (322 mg, 1.00 mmol) en EtOH/H2O (5 mL/ 5 mL) se agregó polvo de hierro (224 mg, 4,00 mmol) y NH4 (212 mg, 4,00 mmol). Luego, la mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 2 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D258 (280 mg, 90 %) como un aceite rojo.
LCMS: 293 [M+H]+ . tR =0.62 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.30 (s, 1H), 4.59-4.72 (m, 5H), 3.65-3.72 (m, 1H), 2.79-3.05 (m, 5H), 2.04­ 2.33 (m, 3H).
Descripción D259
Enantiómero 1: 3-(4-amino-5-cloro-1H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D259)
Figure imgf000103_0002
A una solución deD250 (200 mg, 0.546 mmol) en EtOH/H2O (5 mL/ 5 mL) se agregó polvo de hierro (122 mg, 2,18 mmol) y NH4 Cl (115 mg, 2,18 mmol). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 1.5 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se vertió en 25 mL de agua y se extrajo con EtOAc (20 mL x 2). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 40-65 %) para proporcionar el compuesto del título D259 (145 mg, 79 %).
LCMS: 237 [M+H-100]+ . tR =1.96 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.29 (s, 1H), 4.49-4.37 (m, 1H), 4.20-3.85 (m, 3H), 3.47-3.38 (m, 1H), 3.00­ 2.88 (m, 2H), 2.48-2.35 (m, 1H), 2.09-1.91 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).
Descripción D260
Enantiómero 2: 3-(4-amino-5-cloro-1H-pirazol-1-il)-4,4-difluoropiperidin-1-catboxilato de ferc-butilo (D260)
Figure imgf000103_0003
A una solución deD249 (480 mg, 1.31 mmol) en EtOH/H2O (10 mL/ 10 mL) se agregó polvo de hierro (440 mg, 7,86 mmol) y NH4 (417 mg, 7,86 mmol). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a 50°C durante 1.5 horas. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se vertió en 50 mL de agua y se extrajo con EtOAc (50 mL x 2). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O = 30-60 %) para proporcionar el compuesto del título D260 (400 mg, 90 %).
LCMS: 237 [M+H-100]+. Xr =1.95 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.29 (s, 1H), 4.49-4.38 (m, 1H), 4.08-3.85 (m, 3H), 3.47-3.38 (m, 1H), 2.99­ 2.91 (m, 2H), 2.48-2.34 (m, 1H), 2.09-1.91 (m, 1H), 1.45 (s, 9H).
Descripción D261
Enantiómero 1: 3-(5-cloro-4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-1H-pirazol-1-il) -4,4-difluoropiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (D261)
Figure imgf000104_0001
A una solución de D259 (80 mg, 0.24 mmol), D1 (52 mg, 0.26 mmol), K2CO3 (263 mg, 1.90 mmol) y X-phos (17 mg, 0.036 mmol) en dioxano (6 mL) se agregó Pd2 (dba)3 (22 mg, 0.024 mmol) bajo atmósfera de N2. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante la noche a reflujo. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante columna en C18 (ACN/H2O =35-60 %) para proporcionar el compuesto del título D261 (40 mg, 34 %) como un aceite marrón.
LCMS: 499 [M+H]+ . Xr =2.30 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.28 (s, 2H), 6.83 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 6.32 (s,1H), 4.54-4.49 (m, 3H), 4.18­ 3.89 (m, 3H), 3.50-3.40 (m, 1H), 2.52-2.40 (m, 1H), 2.12-1.95 (m, 1H), 1.48-1.43 (m, 12H).
Descripción D262
Enantiómero 2: 3-(5-cloro-4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-1H-pirazol-1-il) -4,4-difluoropiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (D262)
Figure imgf000104_0002
A una solución de D260 (150 mg, 0.446 mmol), D1 (109 mg, 0.536 mmol), K2CO3 (492 mg, 3.57 mmol) y X-phos (32 mg, 0.067 mmol) en dioxano (12 mL) se agregó Pd2 (dba)3 (41 mg, 0.045 mmol) bajo atmósfera de N2. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó a reflujo durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=5:1 -3:1) para proporcionar el compuesto del título D262 (55 mg, 25 %) como un sólido amarillo.
LCMS: 499 [M+H]+ . Xr =2.30 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.32 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 6.83 (dd, J = 3.6, 2.1 Hz, 1H), 6.43 (dd, J = 3.6, 2.1 Hz, 1H), 6.32 (s,1 H), 4.56-4.45 (m, 3H), 4.14-3.86 (m, 3H), 3.51-3.39 (m, 1H), 2.51-2.35 (m, 1H), 2.12-1.92 (m, 1H), 1.49-1.34 (m, 12H).
Descripción D263
-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D263)
Figure imgf000104_0003
A una suspensión de 4-nitro-1 H-pirazol (12.0 g, 106 mmol) y 2-(3,6-dihidro-2H-piran-4-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (16.0 g, 76.1 mmol), Cu(OAc)2.H2O (28.2 g. 141 mmol) en DMF (300 mL) se agregó piridina (33.5 g, 423 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante la noche a 110°C . La mezcla se vertió en NH3.H2O (20 %, 1000 mL) se agitó durante 20 minutos y luego se extrajo con EtOAc (300 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con H2O (150 mL), salmuera (130 mL), se secaron en Na2 SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=4:1-0:1) para proporcionar el compuesto del título D258 (7,80 g, 52 % de rendimiento) como un sólido amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.31 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 6.36-6.34 (m, 1H), 4.38-4.35 (m, 2H), 3.99 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 2.69-2.65 (m, 2H).
Descripción D264
(±)-4-(4-nitro-1 H-pirazol-1-il)tetrahidro-2H-piran-3-ol (D264)
Figure imgf000105_0001
A una solución de D263 (5.80 g, 29.5 mmol) en THF (100 mL) se agregó BH3.Me2 S (10 M, 15 mL, 150 mmol) a 0°C. La reacción se agitó a temperatura ambiente durante la noche bajo nitrógeno. Se agregó una solución de NaOH (2 M, 45 mL) a 0°C por goteo seguida de H2O2 (30 %, 31 mL, 273 mmol). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y se inactivó con solución de Na2 SO3 sat. (50 mL). El solvente se retiró y el residuo se extrajo con EA (80 mL x 2). La capa orgánica combinada se secó en Na2 SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=3:1-1:1) para proporcionar el compuesto del título D264 (2,1 g, rendimiento 34 %) como un sólido amarillo.
1 H NMR (300 MHz, CD3OD): 58.60 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 4.19-4.14 (m, 1H), 4.04-3.88 (m, 4H), 3.50 (td, J = 12.3, 2.1 Hz, 1H), 3.19 (t, J = 10.2 Hz, 1H), 2.29-2.23 (m, 1H), 2.07-2.00 (m, 1H).
Descripción D265
(±)-1-(3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D265)
Figure imgf000105_0002
A una solución de D264 (1.90 g, 8.86 mmol) en DCM (70 mL) se agregó DAST (15 mL, 55,5 mmol) a -70°C bajo nitrógeno. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se inactivó al dejarla caer en una solución de NaHCO3 sat. (200 mL) y se extrajo con DCM (50 mL x 2). La capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=2:1) para proporcionar el compuesto del título D265 (570 mg, rendimiento 31 %) como un sólido amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.29 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 4.91 (d, J = 48.9 Hz, 1H), 4.66-4.50 (m, 1H), 4.33­ 4.11 (m, 2H), 3.74-3.51 (m, 2H), 2.57-2.43 (m, 1H), 2.19-2.04 (m, 1H).
Descripción D266
(±)-5-cloro-1-(3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)-4-nitro-1H-pirazol (D266)
Figure imgf000105_0003
A una solución de D265 (650 mg, 3.00 mmol) en THF (50 mL) se agregó LiHMDS (1.0 M, 6.5 mL, 6.5 mmol) con protección de N2 por goteo a -70°C. La reacción se agitó a -70 °C durante 2 horas. Se agregó C2Cl6 (3.07 g, 13.0 mmol) en THF (5 mL) y la mezcla se agitó a -70°C durante otras 2 horas. La reacción se inactivó con solución de NH4 Cl sat. (5 mL). La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=3:1 -1:1) para proporcionar el compuesto del título D266 (500 mg, 67 % de rendimiento) como un sólido amarillo.1
1 H NMR (400 MHz, CD3OD): 58.28 (s, 1H), 5.02-4.87 (m, 2H), 4.15-4.09 (m, 2H), 3.81-3.65 (m, 2H), 2.93-2.86 (m, 1H), 1.91-1.87 (m, 1H).
Descripción D267
(±)-1-(3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol (D267)
A una solución de D266 (500 mg, 2.00 mmol), MeB(OH)2 (360 mg, 6.00 mmol) en dioxano (30 mL) se agregó Na2 CO3 (636 mg, 6.00 mmol), Pd(dppf)Cl2 (250 mg, 0.300 mmol) a temperatura ambiente bajo atmósfera de N2. La mezcla se agitó durante la noche a 100°C. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: eA=3:1-1 :1 ) para proporcionar el compuesto del título D267 (330 mg, rendimiento 72%) como un sólido amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.14 (s, 1H), 4.75 (d, J= 60.0 Hz, 1H), 4.68-4.48 (m, 1H), 4.33-4.16 (m, 2 H), 3.76-3.61 (m, 2H), 2.98-2.90 (m, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.04-1.94 (m, 1H).
Descripción D268
(±)-1-(3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D268)
Figure imgf000106_0001
Una solución de D267 (310 mg, 1.35 mmol) y Pd/C (120 mg, 10 %) en MeOH (15 mL) y THF (10 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo H2 durante 3 horas. La mezcla se filtró y se lavó con MeOH (5 mL). El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D268 (250 mg, rendimiento 93 %) como un sólido amarillo.
1 H NMR (300 MHz, CD3OD): 5 7.14 (s, 1H), 4.81-4.43 (m, 2H), 4.12-4.04 (m, 2H), 3.78-3.61 (m, 2H), 2.87-2.70 (m, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.04-1.94 (m, 1H).
Descripción D269
3-fluoro-4-(4-nitro-5-vinil-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (±)-(trans)-tero-butilo (D269)
Figure imgf000106_0002
-Boc
Una solución de D104 (700 mg, 2.01 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (775 mg, 5.03 mmol), Na2CO3 (640 mg, 6.03 mmol) y PdCb(dppf) ( 1 8 0 mg, 0 . 2 2 mmol) en dioxano ( 10 mL) y agua ( 2 mL) se agitó a 1 2 0 oC bajo nitrógeno durante 2 días. La mezcla se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró. El filtrado se concentró. EL residuo se vertió en 50 mL de agua y se extrajo con EtOAc (50 mL x 3). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D269 (400 mg, 58 %) como un aceite rojo.
LCMS: 241 [M+H-100]+. tR =2.24 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.16 (s, 1H), 6.85-6.95 (m, 1H), 5.80-5.97 (m, 2H), 4.82-5.06 (m, 1H), 4.42­ 4.65 (m, 2H), 4.19-4.26 (m, 1H), 2.72-2.93 (m, 2H), 2.23-2.37 (m, 1H), 1.90-1.95 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D270
(±)-(trans)-3-fluoro-4-(4-nitro-5-vinil-1H-pirazol-1-il)piperidina (D270)
Figure imgf000106_0003
A una solución de D269 (400 mg, 1.18 mmol) en MeOH (5 mL) se agregó HCl/dioxano (4 M, 5 mL). Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se concentró y el residuo se vertió en 40 mL de agua y se extrajo con EtOAc (40 mL x 2). La capa acuosa se basificó con NaOH (ac., 2N, 10 mL) hasta pH=9 y se extrajo con EtOAc (40 mL x 3). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D270 (200 mg, rendimiento 70 %) como un aceite marrón.
LCMS: 241 [M+H]+ . tR =1. 86 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.17 (s, 1H), 6.85-6.95 (m, 1H), 5.81-5.96 (m, 2H), 4.81-5.07 (m, 1H), 4.38­ 4.52 (m, 1H), 3.51-3.56 (m, 1H), 3.15-3.19 (m, 1H), 2.62-2.76 (m, 2H), 2.04-2.30 (m, 1H), 1.93-1.98 (m, 1H).
Descripción D271
(±)-(frans)-3-fluoro-4-(4-nitro-5-vinil-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D271)
Figure imgf000107_0001
A una solución de D270 (200 mg, 0.83 mmol) y oxetan-3-ona (150 mg, 2.08 mmol) en 1,2-dicloroetano (10 mL) se agregó NaBH(OAc)3 a temperatura ambiente en partes. Luego, la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla se vertió en 40 mL de solución acuosa de Na2CO3 saturado y se extrajo con DCM (40 mL x 3). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante columna en C18 (ACN al 30-60 %/H2O) para proporcionar el compuesto del título D271 (150 mg, 61 % de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 297 [M+H]+. tR =1.94 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.18 (s, 1H), 6.84-6.94 (m, 1H), 5.79-5.95 (m, 2H), 4.98-5.22 (m, 1H), 4.60­ 4.69 (m, 5H), 4.31 -4.44 (m, 1H), 3.61 -3.69 (m, 1H), 3.21 -3.27 (m, 1H), 2.83-2.87 (m, 1H), 2.36-2.50 (m, 1H), 1.90-2.12 (m, 2H).
Descripción D272
(±)-(frans)-5-etil-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-amina (D272)
Figure imgf000107_0002
Una solución de D271 (150 mg, 0.51 mmol) y Pd/C (10 %, 50 mg) en MeOH (5 mL) se agitó bajo H2 a temperatura ambiente durante 2 horas. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró para proporcionar el producto del título D272 (125 mg, 0.598 mmol, 91% de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 269 [M+H]+. tR =1.94 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.23 (s, 1H), 4.88-5.13 (m, 1H), 4.61-4.67 (m, 4H), 3.88-3.98 (m, 1H), 3.60­ 3.69 (m, 1H), 3.15-3.21 (m, 1H), 2.79-2.84 (m, 1H), 2.61-2.64 (m, 2H), 2.32-2.46 (m, 1H), 1.98-2.11 (m, 2H), 1.89-1.95 (m, 1H), 1.16 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
Descripción D273
3-hidroxi-4-(4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (D273)
Figure imgf000107_0003
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (8.43 g, 74.62 mmol) en DCM (500 mL) se agregó Cs2CO3 y ferc-butilo 7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano-3-carboxilato (13.5 g,67.84 mmol). La mezcla se agitó a 100°C. La mezcla se concentró al vacío y se vertió en agua (100 mL), se extrajo con EtOAc (100 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (500 mL x 2), se secaron en Na2SO4 y concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D273 (8,7 g, 41% de rendimiento) como un sólido blanco.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.24 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 4.50-4.20 (m, 2H), 4.05-3.92 (m, 2H), 2.99-2.65 (m, 2H), 2.15-2.08 (m, 2H), 1.46 (s, 9H).
Descripción D274
4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3-oxopiperidin-1-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D274)
Figure imgf000107_0004
A una suspensión de D273 (6.00 g, 19.2 mmol) en DCM (200 mL) se agregó DMP (10.6 g, 25.0 mmol) en partes a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 2 horas. La mezcla se filtró a través de celite y el filtrado se lavó con agua (50 mL), salmuera (50 mL), se secó en Na2 SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna ultrarrápida en C18 (fase móvil: de 95 % de agua y 5 % de CH3CN a 20 % de agua y 80 % de CH3CN) para proporcionar el compuesto del título D274 (4.0 g, 66 % de rendimiento) como un sólido amarillo
Descripción D275
3,3-difluoro-4-(4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D275)
Figure imgf000108_0001
- Boc
A una solución de D274 (4.00 g, 12.9 mmol) en DCM (60 mL) se agregó DAST (8.31 g, 51.6 mmol) a -78°C bajo N2. La reacción se agitó durante 2 horas a 0°C y luego durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se inactivó con solución de NaHCO3 sat. (50 mL) a 5°C seguido de 50 mL de agua y luego se extrajo con DCM (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (75 mL), se secaron en Na2SO4 y concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=30:1-5:1) para proporcionar el compuesto del título D275 (1,65 g, 38 % de rendimiento) como una espuma amarilla.
LCMS: 233 [M+H-100]+. tR =2.08 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.29 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 4.29-4.71 (m, 3H), 2.94-3.31 (m, 2H), 2.18-2.42 (m, 2H), 1.49 (s, 9H).
Descripción D276
4-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-3,3-difluoropiperidin-1-catboxilato de (±)-ferc-butilo (D276)
Figure imgf000108_0002
A una solución de D275 (1,40 g, 4.22 mmol) en THF seco (25 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 7.6 mL, 7.6 mmol) por goteo a -78°C bajo N2. La mezcla se agitó durante 1 hora a esta temperatura y luego se agregó una solución de hexacloroetano (2,50 g, 10.6 mmol) en THF seco (5 mL) por goteo. La reacción se agitó adicionalmente durante 30 min a -78°C. La reacción se inactivó con solución de NH4Cl sat. (30 mL) seguido de 50 mL de agua después de retirar el baño de hielo seco. La mezcla se extrajo con EtOAc (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron en Na2SO4 y se filtraron. El solvente se evaporó al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=30:1-5:1) para proporcionar el compuesto del título D276 (1,13 g, 73 % de rendimiento) como una espuma amarilla.
LCMS: 267 [M+H-100]+. tR =1.77 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.25 (s, 1H), 4.69-4.83 (m, 1H), 4.17-4.42 (m, 2H), 3.34-3.55 (m, 1H), 3.20­ 3.30 (m, 1H), 2.54-2.68 (m, 1H), 2.07-2.18 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D277
3,3-difluoro-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidin-1-catboxilato de (±)-ferc-butilo (D277)
Figure imgf000108_0003
A una mezcla de D276 (750 mg, 2.05 mmol), ácido metilborónico (1.1 g, 18 mmol) en dioxano (12 mL) se agregó Pd(dppf)Cl2 (155 mg, 0.210 mmol), seguido de Na2CO3 (2M, 3.1 mL, 6.2 mmol) bajo N2. Se agitó la mezcla durante 1 día a reflujo. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de celite. El filtrado se diluyó con agua (50 mL) y se extrajo con EtOAc (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 mL), se secaron en Na2SO4 y se filtraron. El solvente se evaporó al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=30:1-5:1) para proporcionar el compuesto del título D277 (480 mg, 67 % de rendimiento) como una espuma amarilla.
LCMS: 247 [M+H-100]+. Xr =1.74 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.15 (s, 1H), 4.40-4.55 (m, 1H), 4.18-4.35 (m, 1H), 3.43-3.56 (m, 1H), 3.22­ 3.38 (m, 1H), 2.56-2.73 (m, 4H), 2.11-2.21 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D278 y D279
Enantiómero 1: 3,3-difluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D278)
Enantiómero 2: 3,3-difluoro-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D279)
Figure imgf000109_0001
Una mezcla de D277 (480 mg, 1.39 mmol) en HCl/dioxano (4M, 10 mL) se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente y luego se evaporó al vacío para proporcionar un sólido blanco (LCMS: 247 [M+H]+ . Xr =1.79 min. (LCMS condición 3) H NMR (300 MHz, DMSO-ds ): 59.90 (br s, 2H), 8.35 (s, 1H), 5.38-5.46 (m, 1H), 3.70-3.97 (m, 2H), 3.45-3.49 (m, 1H), 3.12-3.22 (m, 1H), 2.64-2.77 (m, 4H), 2.24-2.33 (m, 1H).) Una mezcla del intermedio (350 mg, 1.24 mmol) y oxetan-3-ona (786 mg, 10.9 mmol) en DCM (15 mL) se agitó durante 30 min a temperatura ambiente. Se agregó NaBH(OAc)3 (1.18 g, 5.56 mmol) por goteo. La mezcla se agitó durante 2 horas. La reacción se inactivó con solución de NaHCO3 sat. (50 mL) y luego se extrajo con DCM (40 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mL), se secaron en Na2 SO4 y se filtraron. El solvente se evaporó al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA= 5:1-1:1) para proporcionar el compuesto del título como una espuma amarilla (250 mg, 66 % de rendimiento), que se separó mediante HPLC quiral para proporcionar los compuestos del título D278 (75 mg, Xr =6.627, 100 % ee) y D279 (130 mg, Xr =7.895, 100 % ee) como una espuma blanca.
LCMS: 303 [M+H]+ . Xr =1.82 min. (LCMS condición 3)
H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.15 (s, 1H), 4.61-4.72 (m, 4H), 4.33-4.42 (m, 1H), 3.75-3.81 (m, 1H), 3.05­ 3.15 (m, 2H), 2.77-2.85 (m, 1H). 2.70 (s, 3H), 2.43-2.56 (m, 1H), 2.34 (X, J = 11.4 Hz, 1H), 2.10-2.17 (m, 1H).
Descripción D280
Enantiómero 1: 1-(3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-amina (D280)
Figure imgf000109_0002
Una mezcla de D278 (100 mg, 0.330 mmol) y Pd/C (10 %, 20 mg) en MeOH (5 mL) se agitó durante 3 horas bajo atmósfera de H2 (globo). La reacción se filtró y el filtrado se evaporó al vacío para proporcionar el compuesto del título D280 como un sólido blanco (70 mg, 78 % de rendimiento).
LCMS: 273 [M+H]+ . Xr =1.63 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CD3OD): 57.20 ( s, 1H), 4.42-4.70 (m, 5H), 3.68-3.76 (m, 1H), 2.96-3.13 (m, 2H), 2.59-2.73 (m, 1H), 2.38-2.52 (m, 1H), 2.21- 2.31 (m, 4H), 1.93-2.02 (m, 1H).
Descripción D281
Enantiómero 2: 1 -(3,3-difluoro-1 -(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1 H-pirazol-4-amina (D281)
Figure imgf000110_0001
Una mezcla de D279 (170 mg, 0.560 mmol) y Pd/C (10 %, 50 mg) en MeOH (5 mL) se agitó durante 2 horas bajo atmósfera de H2 (globo). La reacción se filtró y el filtrado se evaporó al vacío para proporcionar el compuesto del título D281 (80 mg, 52 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 273 [M+H]+ . tR =1.63 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CD3OD): 57.20 (s, 1H), 4.41-4.70 (m, 5H), 3.66-3.78 (m, 1H), 2.90-3.15 (m, 2H), 2.58-2.75 (m, 1H), 2.38-2.51 (m, 1H), 2.21- 2.36 (m, 4H), 1.90-2.03 (m, 1H).
Descripción D282
(±)-4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3,3-difluoropiperidina (D282)
Figure imgf000110_0002
A una solución en agitación de D276 (750 mg, 2.05 mmol) en MeOH (5 mL) se agregó una solución de HCl/dioxano (4 N, 10 mL). Luego, la mezcla de reacción se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla de reacción se concentró para proporcionar los compuestos del título D282 (650 mg) como un sólido amarillo.
LCMS: 267 [M+H]+. tR =1.30 min. (LCMS condición 3)
Descripción D283 y D284
Enantiómero 1: 4-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D283) Enantiómero 2: 4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D284)
Figure imgf000110_0003
En dos preparaciones separadas se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (238 mg, 1.13 mmol y 2.18 g, 10.35 mmol) a una solución en agitación de D282 (100 mg, 0.376 mmol y 550 mg, 2.07 mmol) y oxetan-3-ona (135 mg, 1.88 mmol y 1.50 g, 20.7 mmol) en DCE (10 mL y 50 mL). Las reacciones se agitaron a temperatura ambiente (durante la noche y durante 15 horas). Las mezclas se inactivaron mediante una solución de NaHCO3 (50 mL and 100 mL), y se extrajeron con CH2Cl2 (50mL x 3 y 50 mL x 4). Las capas orgánicas combinadas se secaron y se concentraron. Los productos en bruto se purificaron mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA = 4:1 a 1:1) para obtener el producto deseado (60 mg y 350 mg) como un sólido incoloro a amarillo. Luego, las dos preparaciones se juntaron y se separaron mediante HPLC quiral (chiralpak IA 5 um 4.6*250 mm, MeOH/EtOH: 50/50, 1.0 mL/min) para proporcionar los compuestos del título D2 8 3 (120 mg, t R =9.694) y D284 (120 mg, t R =11.664) como sólidos amarillos. LCMS: 323 [M+H]+ . tR =1.85 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.24 (s, 1H), 4.72-4.60 (m, 4H), 3.81-3.72 (m, 1H), 3.24-3.02 (m, 2H), 2.84­ 2.71 (m, 1H), 2.57-2.44 (m, 1H), 2.38-2.30 (m, 1H), 2.17-2.04 (m, 1H).
Descripción D285
Enantiómero 1: 5-cloro-1-(3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-pirazol-4-amina (D285)
Figure imgf000111_0001
A una solución deD283 (120 mg, 0.373 mmol) en EtOH (20 mL) se agregó polvo de hierro (104 mg, 1,86 mmol) y NH4 (100 mg, 1,86 mmol). La reacción se calentó hasta 45°C y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró y se lavó con EtOH (80 mL). The combined filtrate was concentrated to give the title compound D285 (100 mg) as red solid.
LCMS: 293 [M+H]+. tR =1.57 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.31 (s, 1H), 4.67-4.63 (m, 4H), 4.49-4.43 (m, 1H), 3.77-3.73 (m, 1H), 3.12­ 2.97 (m, 2H), 2.69-2.62 (m, 1H), 2.53-2.41 (m, 1H), 2.35-2.27 (m, 1H), 2.10-2.03 (m, 1H).
Descripción D286
Enantiómero 2: 5-cloro-1-(3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-pirazol-4-amina (D286)
Figure imgf000111_0002
A una solución de D284 (120 mg, 0.373 mmol) in EtOH (20 mL) and H2O (20 mL) se agregó polvo de hierro (104 mg, 1.86 mmol) and NH4Cl (100 mg, 1.86 mmol). La reacción se calentó hasta 45°C y se agitó durante la noche. La mezcla de reacción se enfrió hasta temperatura ambiente, se filtró y se lavó con EtOH (80 mL). El filtrado combinado se concentró para proporcionar el compuesto del título D286 (100 mg) como un sólido rojo.
LCMS: 293 [M+H]+. tR =1.57 min. (LCMS condición 3)
Descripción D287
3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (fí)-ferc-butilo (D287)
Figure imgf000111_0003
A una solución de 3-hidroxipiperidin-1-carboxilato de (S-erc-butilo (4.50 g, 22.4 mmol), 4-nitro-1 H-pirazol (2.53 g, 22.4 mmol), PPh3 (11.7 g, 44.8 mmol) en THF (100 mL) se agregó lentamente DIAD (9.05 g, 44.8 mmol) a temperatura ambiente bajo N2. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se inactivó con H2O (100 mL) y se concentró. El residuo se extrajo con EtOAc (100 mL x 3), se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=10:1) y luego cromatografía en columna en C18 para proporcionar el compuesto del título D287 (2,67 g, 40 % de rendimiento) como un aceite rojo.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.26 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.28-4.19 (m, 1H), 4.17-4.07 (m, 1H), 3.82-3.74 (m, 1H), 3.49-3.43 (m, 1H), 3.17-3.08 (m, 1H), 2.20-2.13 (m, 2H), 1.79-1.60 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
Descripción D288
3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (fí)-terc-butilo (D288)
Boc
Figure imgf000111_0004
A una solución de D287 (1.20 g, 4.05 mmol) en THF (30 mL) se agregó lentamente LiHMDS (1 M en THF, 8 mL, 8 mmol) a -70°C bajo N2. La reacción se agitó a -70°C durante 45 minutos y se agregó una solución de hexacloroetano (1.80 g, 7.60 mmol) en THF (5 mL) a -78°C. La reacción se agitó a -70°C durante 1 hora y luego se inactivó mediante NH4Cl ac. (5 mL). La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE:EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D288 (1,2 g, 90% de rendimiento) como un aceite incoloro.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.17 (s, 1H), 4.40-4.06 (m, 3H), 3.18 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.82 (td, J = 11.4, 2.4 Hz, 1H), 2.17-2.09 (m, 2H), 1.94-1.88 (m, 1H), 1.71-1.60 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
Descripción D289
3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (fí)-ferc-butilo (D289)
Figure imgf000112_0001
Una mezcla de D288 (1.20 g, 3.62 mmol), ácido metilborónico (2.17 g, 36.2 mmol), Na2CO3 (3.84 g, 36.2 mmol) y Pd(dppf)Cl2 (440 mg, 0.543 mmol) en dioxano (40 mL) y H2O (5 mL) se agitó durante la noche bajo N2 a 100°C. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de una almohadilla de celite. El filtrado se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D289 (900 mg, 90% de rendimiento) como un aceite incoloro.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.09 (s, 1H), 4.27-4.03 (m, 3H), 3.15 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.78 (t, J = 12.4 Hz, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.28-2.18 (m, 1H), 2.16-2.02 (m, 1H), 1.92-1.86 (m, 1H), 1.68-1.54 (m, 1 H).
Descripción D290
clorhidrato de (fí)-3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidina (D290)
Figure imgf000112_0002
A una solución de 3N HCl/dioxano (15 mL) se agregó D289 (900 mg, 8.98 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente y luego se concentró para proporcionar el producto del título D290 (700 mg, 98 %) como un sólido blanco.
1H NMR (300 MHz, DMSO-ds): 59.25 (br s, 2H), 8.33 (s, 1H), 4.79 (br s, 1H), 3.45 (dd, J = 11.1, 3.3 Hz, 1H), 3.28­ 3.20 (m, 2H), 3.02~2.92 (m, 1H), 2.66 (s, 3 H), 2.09~1.90 (m, 4H).
Descripción D291
(fí)-3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D291)
Figure imgf000112_0003
A una solución de D290 (500 mg, 2.03 mmol) y oxetan-3-ona (1.46 g, 20.3 mmol) en DCM (30 mL) se agregó NaBH(OAc)3 (2.16 g, 10.2 mmol) en partes. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se inactivó con solución de NaHCO3 (15 mL) y se extrajo luego con DCM (30 mL x 2). El DCM se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EtOAc) para proporcionar el producto del título D291 (400 mg, rendimiento 84 %) como un sólido blanco.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.07 (s, 1 H), 4.70-4.55 (m, 4H), 4.35-4.25 (m, 1H), 3.61-3.52 (m, 1H), 2.86­ 2.76 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.40 (t, J =10.5 Hz, 1H), 2.02-1.71 (m, 5H).
Descripción D292
(fí)-5-metil-1-(1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1H-pirazol-4-amina (D292)
Figure imgf000113_0001
Una solución de D291 (400 mg, 1.50 mmol) y Pd/C (200 mg, 10 % húmedo) en MeOH (30 mL) se agitó a 30°C bajo H2. La mezcla se filtró y se lavó con MeOH (5 mL). El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D292 (300 mg, 85 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.15 (s, 1 H), 4.69-4.56 (m, 4H), 4.18~4.08 (m, 1H), 3.58-3.51 (m, 1H), 2.85­ 2.74 (m, 2H), 2.32 (t, J = 10.8 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.97-1.71 (m, 5H).
Descripción D293
3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (S)-ferc-butilo (D293)
Boc
0,N
Figure imgf000113_0002
A una solución de 3-hidroxipiperidin-1-carboxilato de (Rj-terc-butilo (5.00 g, 24.7 mmol), 4-nitro-1 H-pirazol (2.80 g, 24.7 mmol), PPh3 (13.0 g, 49.4 mmol) en THF (100 mL) se agregó lentamente DIAD (10.0 g, 49.4 mmol) a temperatura ambiente con protección de N2. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se inactivó con H2O (100 mL) y se concentró. El residuo se extrajo con EA (100 mL x 3), se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=10:1) y cromatografía en columna ultrarrápida en C18 para proporcionar el compuesto del título D293 como un aceite rojo (3.10 g, 42 % de rendimiento).
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.26 (s, 1H), 8.08 (s, 1H), 4.28-4.19 (m, 1H), 4.14-4.07 (m, 1H), 3.82-3.74 (m, 1H), 3.49-3.42 (m, 1H), 3.16-3.07 (m, 1H), 2.20-2.13 (m, 2H), 1.79-1.60 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
Descripción D294
3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (S)-ferc-butilo (D294)
Figure imgf000113_0003
A una solución de D293 (1.20 g, 4.05 mmol) en THF (30 mL) se agregó LiHDMS (1 M en THF, 8 mL, 8 mmol) lentamente a -70°C bajo atmósfera de N2. La reacción se agitó a esta temperatura durante 45 min. Se agregó hexacloroetano (1.80 g, 7.60 mmol) en THF (5 mL) a -78°C. Se agitó la reacción a esta temperatura durante 1 hora y luego se inactivó mediante NH4Cl ac. (5 mL). La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en gel de sílice (PE: EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D294 (1,1 g, 83 % de rendimiento) como un aceite incoloro.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.17 (s, 1H), 4.42-4.07 (m, 3H), 3.18 (t, J= 12.0 Hz, 1H), 2.82 (td, J= 12.0, 2.4 Hz, 1H), 2.17-2.09 (m, 2H), 1.94-1.88 (m, 1H), 1.71-1.57 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
Descripción D295
3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (S)-ferc-butilo (D295)
Boc
0,N
Figure imgf000113_0004
A una solución de D294 (1.10 g, 3.32 mmol), ácido metilborónico (1.72 g, 33.2 mmol), Na2CO3 (3.50 g, 33.2 mmol) en dioxano (40 mL) y H2O (5 mL) se agregó Pd(dppf)Cl2 (407 mg, 0.498 mmol). La mezcla se agitó durante la noche bajo N2a 100°C. La reacción se enfrió hasta temperatura ambiente y se filtró a través de una almohadilla de celite. El filtrado se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=5:1) para proporcionar el compuesto del título D295 (830 mg, 81% de rendimiento) como un aceite incoloro.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.09 (s, 1H), 4.23-4.03 (m, 3H), 3.15 (t, J = 11.7 Hz, 1H), 2.78 (t, J = 11.7 Hz, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.26-2.19 (m, 1H), 2.18-2.02 (m, 1H), 1.93-1.86 (m, 1H), 1.68-1.53 (m, 1 H).
Descripción D296
clorhidrato de (S)-3-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidina (D296)
Figure imgf000114_0001
A una solución de HCl 3 N/dioxano (15 mL) se agregó D295 (830 mg, 2.68 mmol) a temperatura ambiente. La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente y luego se concentró para proporcionar el compuesto del título D296 (600 mg, 91 %) como un sólido blanco.
1H NMR (300 MHz, DMSO-ds): 59.39 (br s, 2H), 8.32 (s, 1H), 4.91-4.77 (m, 1H), 3.44 (dd, J= 11.4, 3.0 Hz, 1H), 3.32­ 3.14 (m, 2H), 3.02-2.88 (m, 1H), 2.66 (s, 3 H), 2.09-1.90 (m, 4H).
Descripción D297
(S)-3-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D297)
Figure imgf000114_0002
A una solución de D296 (500 mg, 2.03 mmol) y oxetan-3-ona (1,46 g, 20.3 mmol) en DCM (30 mL) se agregó NaBH(OAc)3 (2.16 g, 10.2 mmol) en partes. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente y, luego se inactivó con NaHCO3 (15 mL) y se extrajo con DCM (30 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante columna (EA) para proporcionar el compuesto del título D297 (400 mg, rendimiento 74 %) como un sólido blanco.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.07 (s, 1 H), 4.70-4.55 (m, 4H), 4.35-4.25 (m, 1H), 3.61-3.52 (m, 1H), 2.86­ 2.76 (m, 2H), 2.68 (s, 3H), 2.40 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 2.02-1.86 (m, 5H). -Descripción D298
(S)-5-metil-1-(1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1 H-pirazol-4-amina (D298)
Figure imgf000114_0003
A una solución de D297350 mg, 1.31 mmol) en MeOH (30 mL) se agregó Pd/C (200 mg, 10 % húmedo). La reacción se agitó a temperatura ambiente con 1 atmósfera de H2 durante 2 horas. La mezcla se filtró y se lavó con MeOH (5 mL). El filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D298 (283 mg, 91 % de rendimiento) como un aceite amarillo.1
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.15 (s, 1 H), 4.69-4.56 (m, 4H), 4.19-4.09 (m, 1H), 3.58-3.49 (m, 1H), 2.85­ 2.74 (m, 2H), 2.33 (t, J= 10.5 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.97-1.73 (m, 5H).
Descripción D299
3-(benciloxi)-1 -metilciclobutanol (D299)
Figure imgf000114_0004
Se agregó bromuro de metilmagnesio (34.0 mL, 34.0 mmol) por goteo a una solución de 3-(benciloxi)ciclobutanona (4 g, 22.70 mmol) en tolueno (40 mL) y THF (4.00 mL) a -78°C. La mezcla se agitó a -78°C durante 1 hora. Luego, la reacción se inactivó con solución de NH4CI acuosa. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo y las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron en Na2 SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en C18 (TFA al 0.05 % en agua) para proporcionar el compuesto del título D299 (800 mg, 4.16 mmol, 18.33 % de rendimiento).
Descripción D300
1-(3-(benciloxi)-1-metilciclobutil)-4-nitro-1 H-pirazol (D300)
Figure imgf000115_0001
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (471 mg, 4.16 mmol), trifenilfosfino (2183 mg, 8.32 mmol), D299 (800 mg, 4.16 mmol) en THF (20 mL) se agregó DIAD (1.618 mL, 8.32 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 3 días. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 20 % en PE) para proporcionar el compuesto del título D300.
LCMS: 288 [M+H]+. tR =3.742 min. (LCMS condición 1)
Descripción D301
1-(3-(benciloxi)-1-metilciclobutil)-5-cloro-4-nitro-1H-pirazol (D301)
Figure imgf000115_0002
A una solución de D300 (1200 mg, 4.18 mmol) en THF (30 mL) se agregó LiHMDS (6.26 mL, 6.26 mmol, 1M en THF) por goteo a -78°C durante 1 hora. Luego, se agregó percloroetano (1483 mg, 6.26 mmol) en THF (5 mL) y la reacción se agitó a -78°C durante 2 horas. La solución de reacción se vertió en NH4Cl saturado (30 mL) y se extrajo con acetato de etilo (15 mL x 2). Los extractos combinados se lavaron con salmuera, se secaron en Na2SO4, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 20% en PE) para proporcionar el compuesto del título D301 (1 g, 3.11 mmol, 74.4 % de rendimiento).
LCMS: 322 [M+H]+. tR =4.090 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, DMSO-afe): 5 8.47 (s, 1H), 7.34 (m, 5H), 4.85 (m, 1H), 4.44 (s, 2H), 4.10 (m, 1H), 3.16 (m, 2H), 1.70 (s, 3H).
Descripción D302
1-(3-(benciloxi)-1-metilciclobutil)-5-metil-4-nitro-1H-pirazol (D302)
Figure imgf000115_0003
Una mezcla de D301 (900 mg, 2.80 mmol), ácido metilborónico (1172 mg, 19.58 mmol), fosfato de potasio (1781 mg, 8.39 mmol) y PdCL(dtbpf) (182 mg, 0.280 mmol) en DMF (8 mL) y agua (2 mL) se irradió por microondas a 100°C durante 1 h. La mezcla se diluyó con acetato de etilo y se agregó agua. Las capas se separaron y la capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en sulfato de sodio, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó utilizando cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 20% en PE) para proporcionar el compuesto del título D302 (1050 mg, 3.48 mmol).
LCMS: 302 [M+H]+. tR =3.87 min. (LCMS condición 1)
Descripción D303
3-(4-amino-5-metil-1H-pirazol-1-il)-3-metilciclobutanol (D303)
Figure imgf000116_0001
Una mezcla de D302 (230. mg, 0.763 mmol) y Pd/C (81 mg, 0.076 mmol) en metanol (10 mL) se agitó a temperatura ambiente bajo hidrógeno durante 16 horas. Después de la filtración, el filtrado se concentró para proporcionar el compuesto del título D303 (120 mg, 0.662 mmol, 8 7 % de rendimiento).
LCMS: 182 [M+H]+. tR =3.32 min. (LCMS condición 1)
Descripción D304
3-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-3-metilciclobutanol (D304)
Figure imgf000116_0002
A una solución de D303 (431 mg, 2.378 mmol) en isobutanol (12 mL) se agregó carbonato de potasio (986 mg, 7.13 mmol), Pd2dba3 (218 mg, 0.238 mmol), D1 (470 mg, 2.378 mmol), X-phos (227 mg, 0.476 mmol). La mezcla de reacción resultante se irradió por microondas a 110°C durante 1 hora. La mezcla de reacción se diluyó con acetato de etilo (15 mL) y se filtró. El filtrado se concentró y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice (MeOH al 30 % en DCM) para proporcionar el compuesto del título D304 (650 mg, 1.898 mmol, 80 % de rendimiento).
LCMS: 343 [M+H]+. t R =2.25 min. (LCMS condición 1)
Descripción D305
1-metil-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptane-3-carboxilato de ferc-butilo (D305)
Figure imgf000116_0003
N
Boc
A una solución de 3-metil-5,6-dihidropiridin-1 (2H)-carboxilato de ferc-butilo (13.5 g, 68.5 mmol) en DCM (200 mL) se agregó m-CPBA (23.6 g, 137 mmol) a 0°C durante 40 min. La mezcla se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La reacción se vertió en una solución de Na2CO3 sat. (50 mL) y luego se extrajo con DCM (50 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL) y concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=10:1-6:1) para proporcionar el compuesto del título D305 (9,70 g, rendimiento 66 %) como un aceite amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 53.69-3.54 (m, 2H), 3.32-3.20 (m, 2H), 3.09 (t, J= 1.8 Hz, 1H), 2.06-1.81 (m, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.33 (s, 3H).
Descripción D306
3-hidroxi-3-metil-4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (±)-(frans)-terc-butilo (D306)
Figure imgf000116_0004
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (5.66 g, 50.1 mmol) en DMF (500 mL) se agregó Cs2CO3 (29.7 g, 91.1 mmol) y D305 (9.70 g, 45.5 mmol). La reacción se agitó a 100 oC durante 48 horas. La mezcla se concentró al vacío y se vertió en agua (100 mL), se extrajo con DCM (100 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (300 mL x 2), se secaron en Na2SO4 y concentraron. El producto en bruto se tituló con éter dietílico (200 mL) para proporcionar el compuesto del título D306 (8,1 g, rendimiento 54 %) como un sólido blanco.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.22 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 4.53-4.35 (m, 1H), 4.23 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 4.16­ 4.04 (m, 1H), 3.78-3.66 (br s, 1H), 3.00-2.85 (m, 2H), 2.17-2.12 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 0.96 (s, 3H).
Descripción D307
3-fluoro-3-metil-4-(4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (±)-(c/s)-terc-butilo (D307)
Figure imgf000117_0001
A una solución de D306 (8.10 g, 24.8 mmol) en DCM (500 mL) se agregó DAST (12.0 g, 74.55 mmol) a -78°C bajo N2 durante 30 min. La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla se inactivó con solución de NaHCO3 sat. (300 mL) a 5°C y luego se extrajo con DCM (200 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se concentraron al vacío. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA =8:1 a 5:1) para proporcionar el compuesto del título D307 (4,5 g, 55 % de rendimiento) como un sólido blanco.
LCMS: 273 [M+H-55]+. tR =2.622 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.23 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 4.40-4.18 (m, 3H), 3.08-2.91 (m, 2H), 2.47-2.33 (m, 1H), 2.19-2.10 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.15 (d, J = 22.8 Hz, 3H).
Descripción D308
4-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-3-fluoro-3-metilpiperidin-1-carboxilato de (±)-(c/'s)-ferc-butilo (D308)
Figure imgf000117_0002
A una solución de D307 (4,2 g, 12.8 mmol) en THF seco (100 mL) se agregó LiHMDS (1 M en THF, 19.2 mL, 19.2 mmol) por goteo a -78°C bajo N2 durante 1 hora. Luego, se agregó una solución de hexacloroetano (6.06 g, 25.6 mmol) en THF seco (5 mL) por goteo. La reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La reacción se inactivó con solución de NH4Cl sat. (100 mL), y luego se extrajo con EtOAc (100 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (100 mL), y se concentraron para proporcionar un sólido amarillo, que se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=8:1-5:1) para proporcionar el compuesto del título D308 (4,2 g, rendimiento 85 %) como un sólido amarillo.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.21 (s, 1H), 4.74-4.63 (m, 1H), 4.26-4.09 (m, 2H), 3.24-3.08 (m, 2H), 2.42­ 2.30 (m, 1H), 2.05-1.94 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.26 (d, J = 22.8 Hz, 3H).
Descripción D309
3-fluoro-3-metil-4-(5-metil-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (±)-(c/'s)-ferc-butilo (D309)
Figure imgf000117_0003
A una mezcla de D308 (2.10 g, 5.8 mmol), ácido metilborónico (0.696 g, 11.6 mmol) en dioxano/H2O (12 mL/ 8 mL) se agregó Pd(dppf)Cl2 (0.520 g, 0.580 mmol), seguido de Na2 CO3 (1.84 g, 17.4 mmol) bajo N2. La mezcla se agitó durante la noche a 100°C. Se concentró la mezcla al vacío y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=8:1-5:1) para proporcionar el compuesto del título D309 (1,7 g, rendimiento 89%) como un sólido blanco.
LCMS: 287 [M-55]+ . tR =2.458 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.11 (s, 1H), 4.41-4.17 (m, 3H), 3.13-2.95 (m, 2H), 2.70 (s, 3H), 2.59-2.43 (m, 1H), 2.01-1.93 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.23 (d, J = 23.1 Hz, 3H).
Descripción D310
(±)-(c/s)-3-fluoro-3-metil-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidina (D310)
Figure imgf000118_0001
A una solución de D309 (1.00 g, 2.92 mmol) en MeOH (24 mL) se agregó HCl conc. (12 mL). La mezcla de reacción se agitó durante 30 min a temperatura ambiente y se acidificó con Na2CO3 hasta pH=10. La mezcla se extrajo con EA (30 mL x 3), se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título D310 (700 mg, rendimiento 99 %) como un aceite amarillo.
LCMS: 243 [M+H]+. tR =0.645 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.11 (s, 1H), 4.38-4.29 (m, 1H), 3.29-3.15 (m, 2H), 2.89-2.71 (m, 2H), 2.69 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.52-2.38 (m, 1H), 1.97-1.91 (m, 1H), 1.29 (d, J = 23.7 Hz, 3H).
Descripción D311 y D312
Enantiómero 1: (c/s)-3-fluoro-3-metil-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D311) Enantiómero 2: (c/'s)-3-fluoro-3-metil-4-(5-metil-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-1-(oxetan-3-il)piperidina (D312)
Figure imgf000118_0002
A una mezcla de D310 (700 mg, 2.89 mmol) y oxetan-3-ona (500 mg, 6.93 mmol) en DCE (20 mL) se agregó NaBH(OAc)3 (3.10 g, 14.4 mmol) en partes. La mezcla se agitó durante la noche. La reacción se inactivó con solución de NaHCO3 sat. (20 mL) y luego se extrajo con DCM (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se concentraron al vacío y se purificaron mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=3:1-1:1) para proporcionar el racemato, que se separó adicionalmente mediante HPLC quiral para proporcionar los compuestos del título D311 (tR = 5.953 min, 260 mg) y D312 (tR = 6.759 min, 250 mg) como sólidos blancos.
LCMS: 299 [M+H]+. t R =2.276 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.12 ( s, 1H), 4.71-4.57 (m, 4H), 4.31-4.21 (m, 1H), 3.66-3.56 (m, 1H), 2.97­ 2.90 (m , 1H), 2.83-2.80 (m, 1H), 2.68 (d, J = 1.5 Hz, 3H), 2.22-2.04 (m, 2H),1.97-1.93 (m, 1H), 1.36 (d, J = 23.7 Hz, 3H). Descripción D313
Enantiómero 1: (c/'s)-1-(3-fluoro-3-metil-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H pirazol-4-amina (D313)
Figure imgf000118_0003
Una mezcla de D311 (210 mg, 0.705 mmol) y Pd/C (10 %, 42 mg) en MeOH/THF (10 mL) se agitó durante la noche bajo atmósfera de H2 (globo). La reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título D313 como un sólido blanco (189 mg, rendimiento 99 %).
LCMS: 269 [M+H]+ . tR =1.726 min. (LCMS condición 3)
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.19 (s, 1H), 4.69-4.56 (m, 4H), 4.15-4.05 (m, 1H), 3.64-3.55 (m, 1H), 2.93­ 2.85 (m , 1H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.66-2.49 (m, 3H), 2.18 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.17-1.91 (m, 3H), 1.30 (d, J = 23.7 Hz, 3H).
Descripción D314
Enantiómero 2: (c/s)-1-(3-fluoro-3-metil-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1 H pirazol-4-amina (D314)
Figure imgf000119_0001
Una mezcla de D312 (250 mg, 0.84 mmol) y Pd/C (10 %, 50 mg) en MeOH/THF (10 mL) se agitó durante la noche bajo atmósfera de H2 (globo). La reacción se filtró y el filtrado se concentró al vacío para proporcionar el compuesto del título D314 como un sólido blanco (240 mg, rendimiento 99 %).
LCMS: 269 [M+H]+. tR =1.726 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.17 ( s, 1H), 4.69-4.54 (m, 4H), 4.13-4.02 (m, 1H), 3.61-3.53 (m, 1H), 2.90­ 2.85 (m , 1H), 2.77-2.75 (m, 1H), 2.72-2.46 (m, 3H), 2.16 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.13-1.90 (m, 3H), 1.28 (d, J = 23.7 Hz, 3H). Descripción D315
2-hidroximorfolino-4-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D315)
Figure imgf000119_0002
1
Boc
A la suspensión de clorhidrato de morfolin-2-ol (2.00 g, 14.3 mmol) en acetato de etilo (80 mL) se agregó (Boc)2O (4.65 g, 21.5 mmol) y DIPEA (5.53 g, 42.9 mmol). La mezcla resultante se sometió a reflujo durante la noche bajo de N2. Se agregó agua y la reacción se agitó a temperatura ambiente durante 10 min. La capa acuosa se extrajo con acetato de etilo (50 mL x 2). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 mL x 2), se secaron en Na2 SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D315 (3.45 g) como un sólido amarillo claro.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 54.91-4.87 (m, 1H), 4.03-3.96 (m, 1H), 3.68 (dd, J = 13.2, 2.4 Hz, 1H), 3.62­ 3.45 (m, 2H), 3.36-3.28 (m, 1H), 3.18 (dd, J = 13.2 and 5.4 Hz, 1H), 2.99 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H).
Descripción D316
2-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)morfolino-4-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D316)
Boc
Figure imgf000119_0003
A una solución de D315 (3.27 g, 16.1 mmol), 4-nitro-1 H-pirazol (1.82 g, 16.1 mmol), PPh3 (6.33 g, 24.2 mmol) en THF anhidro (65 mL) se agregó DIAD (4.89 g, 24.2 mmol) a 0°C bajo N2. La mezcla amarilla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. La reacción se inactivó con agua (100 mL) y se extrajo con acetato de etilo (80 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (50 mL x 2), se secaron en Na2 SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=12:1) y se purificó adicionalmente mediante C18 (CH3CN al 20-40 %/H2O) para proporcionar el compuesto del título D316 (2.4 g, rendimiento 50 %) como un aceite blanco espeso.1
1 H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.39 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 5.48 (dd, J = 7.2, 3.3 Hz, 1H), 4.18-4.12 (m, 1H), 3.96-3.90 (m, 1H), 3.82-3.72 (m, 2H), 3.61 (dd, J = 13.5, 7.2 Hz, 1H), 3.38-3.30 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D317
2-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)morfolino-4-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D317)
Figure imgf000120_0001
A una solución de D236 (474 mg, 1.59 mmol) en THF (10 mL) se agregó lentamente LiHMDS (3,18 mL, 13 mmol) a -78°C bajo atmósfera de N2. La solución amarilla resultante se agitó por debajo de -65°C durante 1 hora. Luego, se agregó una solución de C2Cl6 (753 mg, 3.18 mmol) en THF (2 mL) a -65°C y la mezcla se agitó por debajo de -65°C durante 1 hora adicional. La reacción se inactivó con NH4Cl (20 mL, sat.) y se extrajo con acetato de etilo (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera (30 mL x 2), se secaron en Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=10:1) para proporcionar el compuesto del título D317 (470 mg, rendimiento 89 %) como un sólido blanco.
LCMS: tR =2.04 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.21 (s, 1H), 5.56 (dd, J = 8.4, 3.3 Hz, 1H), 4.17-4.06 (m, 1H), 4.03-3.97 (m, 1H), 3.87-3.72 (m, 3H), 3.31 -3.22 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
Descripción D318
(±)-2-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)morfolino (D318)
Figure imgf000120_0002
A una solución de D317 (160 mg, 0.48 mmol) en DCM anhidro (4 mL) se agregó ZnBr2 (216 mg, 0.96 mmol). La mezcla resultante se agitó durante la noche a temperatura ambiente bajo N2. La reacción se inactivó con solución de Cs2CO3 (10 mL, pH ~ 12) y se extrajo con acetato de etilo (20 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 anhidro, se filtraron y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D318 (110 mg, rendimiento 100 %) como un aceite amarillo.
LCMS: 233 [M+H]+. tR =1.88 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.22 (s, 1H), 5.66 (dd, J = 5.4, 3.3 Hz, 1H), 3.83-3.77 (m, 2H), 3.61 (dd, J = 13.5, 5.4 Hz, 1H), 3.34 (dd, J = 13.5 and 3.3 Hz, 1H), 3.05 (t, J = 4.8 Hz, 2H).
Descripción D319
(±)-2-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-4-(oxetan-3-il)morfolino (D319)
Figure imgf000120_0003
A una solución de D318 (110 mg, 0.48 mmol) en DCM (3 mL) y MeOH (5 mL) se agregó oxetan-3-ona (0.3 mL). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. Luego, se agregó NaBHaCN (151 mg, 2.4 mmol) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 2 días. La reacción se trabajó con solución de Cs2CO3 (20 mL, pH ~ 12) y se extrajo con DCM (30 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 anhidro, se filtraron y concentraron. El producto en bruto se purificó con C18 (CH3CN al 15-40 % en H2O) para proporcionar el compuesto del título D319 (26 mg, rendimiento 19 %) como un aceite amarillo claro.
LCMS: 289 [M+H]+. t R =2.05 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.19 (s, 1H), 5.71-5.67 (m, 1H), 4.73-4.59 (m, 4H), 4.09-4.05 (m, 1H), 3.97­ 3.89 (m, 1H), 3.70-3.62 (m, 1H), 2.88 (d, J = 6.3 Hz, 2H), 2.65 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 2.28 (td, J = 11.4, 3.3 Hz, 1H).
Descripción D320
(±)-5-cloro-1-(4-(oxetan-3-il)morfolin-2-il)-1H-pirazol-4-amina (D320)
Figure imgf000121_0001
A una solución deD319 (105 mg, 0.36 mmol) en EtOH (3 mL) se agregó polvo de hierro (101 mg, 1,80 mmol) y NH4 CI (39 mg, 0,72 mmol) en agua (3 mL). La mezcla resultante se agitó durante la noche a 50°C. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó con C18 (CH3 CN alc10-25 % en H2O) para proporcionar el compuesto del título D320 (70 mg, rendimiento 75 %) como un aceite incoloro.
LCMS: 259 [M+H]+. tR =1.492 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.29 (s, 1H), 5.52-5.48 (m, 1H), 4.71-4.61 (m, 4H), 4.04-3.99 (m, 1H), 3.94-3.86 (m, 1H), 3.67-3.58 (m, 1H), 2.96-2.84 (m, 4H), 2.64-2.59 (m, 1H), 2.28-2.19 (m, 1H).
Descripción D321
c/'s/frans-4-(benciloxi)-2-bromociclohexanona (D321)
Figure imgf000121_0002
A una solución enfriada de 4-(benciloxi)ciclohexanono (8.4 g, 41.1 mmol) en éter dietílico (200 mL) se agregó bromuro (2.119 mL, 41.1 mmol) con enfriamiento de hielo y agua. Tras agitarse durante 1 hora, se agregó trisulfato de sodio acuoso saturado y la mezcla se extrajo con acetato de etilo. Las fases orgánicas combinadas se secaron, se concentraron y se purificaron mediante cromatografía ultrarrápida en gel de sílice (EA al 15-25 % en PE) para proporcionar el compuesto del título D321 (10 g, 35.3 mmol, 86 % de rendimiento).
LCMS: 305 [M+Na]+. t R =3.537 min. (LCMS condición 1)
Descripción D322
c/'s/frans-4-(benciloxi)-2-(4-nitro-1 H-pirazol-1 -il)ciclohexanona (D322)
Figure imgf000121_0003
Una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (4.0 g, 35.4 mmol), D321 (10.02 g, 35.4 mmol), carbonato de potasio (9.78 g, 70.7 mmol) en DMF (70 mL) se calentó hasta 40°C durante 16 horas. Después de enfriarse hasta temperatura ambiente, la mezcla se diluyó con acetato de etilo y se agregó agua. La capa orgánica se lavó con salmuera, se secó en Na2SO4, se filtró y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 40­ 45 % en PE) para proporcionar el compuesto del título D119 (7,59 g, 24.07 mmol, 68,0 % de rendimiento).
LCMS: 316 [M+H]+. tR =3.824 min. (LCMS condición 1)
Descripción D323
c/'s/frans-1-(5-(benciloxi)-2,2-difluorociclohexil)-4-nitro-1H-pirazol (D323)
Figure imgf000121_0004
A una solución de D322 (2,6 g, 12 mmol) en DCM (25 mL) se agregó DAST (15.90 mL, 120 mmol) por goteo a -78°C. Después de la adición, se dejó que la reacción se calentara hasta temperatura ambiente y se agitó durante otras 16 horas. La mezcla se vertió en NaHCÜ3 acuoso saturado y se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó en Na2SÜ4,se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 25-30 % en PE) para proporcionar el compuesto del título D323 (6.32 g, 18.74 mmol, 78 % de rendimiento).
LCMS: 338 [M+H]+. tR =3.824 min. (LCMS condición 1)
Descripción D324
c/'s/frans-4,4-difluoro-3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclohexanol (D324)
Figure imgf000122_0001
Una solución de D323 (6,32 g, 18,74 mmol) y trifenilfosfina (11,57 g, 33,7 mmol) en acetonitrilo (15 mL) se calentó hasta 100°C en un tubo sellado durante 16 horas. Después de enfriarse hasta temperatura ambiente, la reacción se diluyó con acetato de etilo, se lavó con salmuera y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 75-85 % en PE) para proporcionar el compuesto del título D324 (4.61 g, 99 % de rendimiento).
LCMS: 248 [M+H]+. t R =2.460 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 59.05 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 5.05 (m, 2H), 4.17 (br. s., 1H), 2.46 (m, 1H), 2.20 (m, 3H), 1.83 (m, 1H), 1.70 (m, 1H).
Descripción D325
(±)-4,4-difluoro-3-(4-nitro-1 H-pirazol-1-il)ciclohexanona (D325)
Figure imgf000122_0002
A una solución de D324 (1.82 g, 7.36 mmol) en DCM (50 mL) se agregó periodinana de dess-martin (6.25 g, 14.72 mmol) a 0°C y la reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó durante 16 horas. La mezcla se vertió en NaHCO3 acuoso saturado y se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó, se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 60-70% en PE) para proporcionar el compuesto del título D325 (1.6 g, 6.53 mmol, 89 % de rendimiento).
LCMS: 246 [M+H]+. tR =3.112 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400 MHz, DMSO-cfe): 59.08 (s, 1H), 8.39 (s, 1H), 5.45 (dt, J=6.11, 13.69 Hz, 1H), 3.12-3.21 (m, 1H), 2.97­ 3.06 (m, 1H), 2.55-2.62 (m, 2H), 2.33-2.48 (m, 2H).
Descripción D326 y D327
(±)-frans-4-(4,4-difluoro-3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclohexil)morfolino (D326)
(±)-c/'s-4-(4,4-difluoro-3-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclohexil)morfolino (D327)
Figure imgf000122_0003
Una solución de D325 (2.7 g, 11.01 mmol), morfolino (1.919 mL, 22.02 mmol), ácido acético (0.630 mL, 11.01 mmol) en DCE (150 mL) se agitó a temperatura ambiente durante 16 horas. Luego se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (4.67 g, 22.02 mmol) y la mezcla se agitó durante otras 5 horas. La reacción se inactivó con agua y se extrajo con DCM. La capa orgánica se secó, se concentró y se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA al 100 % ) para proporcionar los compuestos del título D326 (1.71 g, 5.41 mmol, 49.1 % de rendimiento) y D327 (240 mg, 0.759 mmol, 6.89 % de rendimiento).
D321: LCMS: 317 [M+H]+. tR =2.011 min. (LCMS condición 1)
D322 : L C M S : 3 1 7 [ M H ] . Xr = 1 . 9 2 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
Descripción D328
(±)-frans-4-(3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-4,4-difluorociclohexil)morfolino (D328)
Figure imgf000123_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D326( 1 . 7 1 g , 5 . 4 1 m m o l ) e n T H F ( 5 0 m L ) s e a g r e g ó L i H M D S ( 8 , 1 1 m L , 8 . 1 1 m m o l , 1 M e n T H F ) p o r g o t e o a - 7 8 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L u e g o , s e a g r e g ó p e r c l o r o e t a n o ( 1 , 9 2 0 g , 8 . 1 1 m m o l ) e n T H F ( 5 m L ) y l a r e a c c i ó n s e a g i t ó a - 7 8 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e v e r t i ó e n N H 4 C l s a t u r a d o ( 2 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n E A ( 3 0 m L x 2 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a , s e s e c a r o n s o b r e N a 2 S Ü 4 , s e f i l t r a r o n y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( E A a l 1 0 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D328 ( 1 , 6 9 g , 4 . 8 2 m m o l , 8 9 % d e r e n d i m i e n t o ) .
L C M S : 3 5 1 [ M H ] . Xr = 2 . 2 0 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
Descripción D329
(±)-frans-5-cloro-1-(2,2-difluoro-5-morfolinociclohexil)-1H-pirazol-4-amina (D329)
Figure imgf000123_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D328 ( 1 . 6 9 g , 4 . 8 2 m m o l ) e n a g u a ( 2 7 m L ) s e a g r e g ó c l o r u r o d e a m o n i o ( 1 . 2 8 9 g , 2 4 . 0 9 m m o l ) , h i e r r o ( 1 . 6 1 4 g , 2 8 . 9 m m o l ) y e t a n o l ( 1 8 . 0 0 m L ) . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a 7 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a y s e d i l u y ó c o n D C M . L a m e z c l a s e f i l t r ó a t r a v é s d e c e l i t e y s e a g r e g ó b i c a r b o n a t o d e s o d i o a c u o s o s a t u r a d o . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a j o a d i c i o n a l m e n t e c o n D C M y l a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó y s e c o n c e n t r ó p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D329 ( 1 . 5 8 g , 4 . 9 3 m m o l ) .
L C M S : 3 2 1 [ M H ] . t R = 1 . 1 5 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
Descripción D330
(±)-c/'s-4-(3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-4,4-difluorociclohexil)morfolino (D330)
Figure imgf000123_0003
A u n a s o l u c i ó n d e D327( 2 4 0 m g , 0 . 7 5 9 m m o l ) e n T H F ( 8 m L ) s e a g r e g ó L i H M D S ( 1 , 1 3 8 m L , 1 . 1 3 8 m m o l , 1 M e n T H F ) p o r g o t e o a - 7 8 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L u e g o , s e a g r e g ó p e r c l o r o e t a n o ( 2 6 9 m g , 1 . 1 3 8 m m o l ) e n T H F ( 2 m L ) y l a r e a c c i ó n s e a g i t ó a - 7 8 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e v e r t i ó e n N H 4 C l s a t u r a d o ( 5 m L ) y s e e x t r a j o c o n E A ( 8 m L x 2 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a , s e s e c a r o n s o b r e N a 2 S Ü 4 , s e f i l t r a r o n y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( E A a l 5 5 - 6 0 % e n P E ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D330 ( 2 0 0 m g , 0 . 5 7 0 m m o l , 7 5 % d e r e n d i m i e n t o ) .
L C M S : 3 5 1 [ M H ] . t R = 2 . 5 0 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
Descripción D331
(±)-c/s-5-cloro-1-(2,2-difluoro-5-morfolinociclohexil)-1 H-pirazol-4-amina (D331)
Figure imgf000124_0001
A una solución de D330 (200 mg, 0.570 mmol) en agua (9 mL) se agregó cloruro de amonio (153 mg, 2.85 mmol), hierro (191 mg, 3.42 mmol) y etanol (6mL). La reacción se agitó a 70°C durante 1 hora y se diluyó con DCM. La mezcla se filtró a través de celite y se agregó bicarbonato de sodio acuoso saturado. La capa acuosa se extrajo adicionalmente con DCM y la capa orgánica combinada se secó y se concentró para proporcionar el compuesto del título D331 (160 mg, 0.499 mmol, 87 % de rendimiento).
LCMS: 321 [M+H]+. tR =1.020 min. (LCMS condición 1)
Descripción D332
4-nitro-1-(1,4-dioxaspiro[4.5]deACN-8-il)-1H-pirazol (D332)
Figure imgf000124_0002
A una solución de 4-nitro-1 H-pirazol (2 g, 17.69 mmol), DIAD (6.88 mL, 35.4 mmol) y 1,4-dioxaspiro[4.5]decan-8-ol (3.08 g, 19.46 mmol) en THF (50 mL) se agregó Ph3P (9.28 g, 35.4 mmol). La reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. El solvente se retiró y el residuo se volvió a disolver en EA. La capa orgánica se lavó con agua, se secó en sulfato de sodio anhidro y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título D332 (4,48 g, 17.69 mmol, 100 % de rendimiento).
LCMS: 254 [M+H]+. tR =2.641 min. (LCMS condición 1)
Descripción D333
4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclohexanona (D333)
Figure imgf000124_0003
A una solución de D332 (4,48 g, 17,69 mmol) en acetona (30 mL) se agregó HCl (15 mL, 17,69 mmol). Se agitó la reacción a temperatura ambiente durante 5 horas. Se agregó una solución de NaHCO3 acuoso a la mezcla hasta pH ~8.0 y luego se evaporó el solvente. El residuo se diluyó con agua (15 mL) y se extrajo con EA (10 mL x 3). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 anhidro y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título D333 (623,2 mg, 2.98 mmol, 16,84 % de rendimiento).
LCMS: 210 [M+H]+. tR =2.020 min. (LCMS condición 2)
Descripción D334
4-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclohexanona (D334)
Figure imgf000124_0004
Una solución de D333 (500 mg, 2.390 mmol), morfolino (416 mg, 4.78 mmol) y HOAc (5 gotas) en DCM (10 mL) se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Luego se agregó triacetoxiborohidruro de sodio (557 mg, 2.63 mmol) y la mezcla se agitó durante otras 4 horas. La reacción se basificó utilizando una solución de NaHCO3 acuoso saturado hasta pH~8.0. Luego, la mezcla se diluyó con agua (15 mL) y se extrajo con DCM (10 mLx2). Las capas orgánicas combinadas se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice para proporcionar el compuesto del título D334 (402,5 mg, 1.436 mmol, 60,1 % de rendimiento).
LCMS: 281 [M+H]+. í r =1.225 min. (LCMS condición 1)
Descripción D335
4- (4-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)ciclohexil)morfolino (D335)
Figure imgf000125_0001
A una solución de D334(458 mg, 1.634 mmol) en THF (10 mL) se agregó LiHMDS (2,451 mL, 2.451 mmol) por goteo a -78°C bajo nitrógeno. Después de agitarse durante 1 hora a -78°C, se agregó percloroetano (580 mg, 2.451 mmol) y la reacción se agitó a -78°C durante otras 2 horas. Se agregó agua (15 mL) y la mezcla se calentó hasta temperatura ambiente. La mezcla se extrajo con EA (10 mL x 3). La fase orgánica combinada se secó en sulfato anhidro y concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (EA/PE: 0 to 40%) para proporcionar el compuesto del título D335 (253,8 mg, 0.806 mmol, 49.4 % de rendimiento).
LCMS: 315 [M+H]+. í r =1.955 min. (LCMS condición 1)
1H NMR (400MHz, DMSO-cfe): 58.48 (s, 1H), 4.57 - 4.47 (m, 1H), 3.60 (t, J=4.6 Hz, 4H), 2.39 (br. s., 3H), 2.20 - 1.98 (m, 5H), 1.70 - 1.60 (m, 2H), 1.55 (t, J=13.0 Hz, 2H).
Descripción D336
5- cloro-1-(4-morfolinociclohexil)-1H-pirazol-4-amina (D336)
Figure imgf000125_0002
A una solución de D335 (253,8 mg, 0.806 mmol), hierro (270 mg, 4.84 mmol) y cloruro de amonio de (216 mg, 4.03 mmol) en etanol (10 mL) y agua (15,00 mL) se agitó a 70°C durante 19 horas. La mezcla se filtró a través de celite y se extrajo con DCM. La fase orgánica se secó en sulfato de sodio anhidro y se y concentró para proporcionar el compuesto del títuloD336 (202.1 mg, 0.710 mmol, 88 % de rendimiento).
LCMS: 285 [M+H]+. í r =0.54 min. (LCMS condición 1)
Descripción D337
1-bencil-4-hidroxipirrolidin-2-carboxilato de (2S, 4fí)-metilo (D337)
HO,. O—
r w\ O
Bn
A una solución de clorhidrato de 4-hidroxipirrolidin-2-carboxilato de (2S, 4R)-metilo (50.0 g, 276 mmol) y BnBr (48.0 g, 276 mmol) en DCM (500 mL) se agregó TEA (92.0 g, 911 mmol). La mezcla resultante se agitó durante la noche a 50°C. El solvente se evaporó y el producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D337 (40,0 g, 62 %) como un aceite incoloro.
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.31-7.22 (m 5H), 4.45-4.41 (m, 1H), 3.89 (d, J = 12.9 Hz, 1H), 3.67-3.57 (m, 5H), 3.31 (dd, J = 10.2, 5.4 Hz, 1H), 2.46 (dd, J = 10.2, 3.6 Hz, 1H), 2.28-2.19 (m, 1H), 2.10-2.02 (m, 2H).
Descripción D338
(3fí,5S)-1-bencil-5-(hidroximetil)pirrolidin-3-ol (D338)
Figure imgf000125_0003
Una suspensión de LiAlH4 (26.0 g, 680 mmol) en THF (500 mL) en baño de hielo se agregó una solución de D337 (40.0 g, 170 mmol) en THF (240 mL) por goteo. Después de la adición, la mezcla resultante se agitó durante la noche a temperatura ambiente. Se agregó agua cuidadosamente a 0°C y la mezcla se filtró. El filtrado se extrajo con EtOAc (300 mL x 3). La capa orgánica combinada se lavó con salmuera, se secó en Na2SO4 y se concentraron para proporcionar el compuesto del título D338 (22,0 g, 63%) como un aceite incoloro.
LCMS: 208 [M+H]+. Xr =1.486 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.34-7.23 (m, 5H), 4.36-4.29 (m, 1H), 3.98 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 3.67 (dd, J = 10.8, 3.0 Hz, 1H), 3.47 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.40 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.24 (dd, J = 10.2, 5.4 Hz, 1H), 3.10-3.05 (m, 1H), 2.67 (br s, 1H), 2.37 (dd, J = 10.2, 5.1 Hz, 1H), 2.19-2.04 (m, 1H), 1.91-1.79 (m, 2H)
Descripción D339
(3R, 5R)-1-bencilpiperidin-3,5-diol (D339)
Figure imgf000126_0001
Se agregó anhídrido trifluoroacético (19.6 mL, 138 mmol) por goteo a una solución de D338 (22.0 g, 106 mmol) en THF (900 mL) y luego se enfrió hasta 0°C. Después de 1 hora, se agregó TEA (66.0 mL, 476 mmol) por goteo a -78 0°C. La mezcla de reacción se calentó a 0°C durante 20 min y luego calentó a reflujo durante 60 horas. Después de la adición de una solución de NaOH 2.5 M acuoso (900 mL), la mezcla se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se lavó con EtOAc (400 mL x 3), se secó en Na2SO4 y se concentró. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (DCM: MeOH = 20:1 a 10:1) para proporcionar el compuesto del título D339 (16.5 g, 75 %) como un aceite amarillo.
LCMS: 208 [M+H]+. Xr =2.052 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 57.34-7.26 (m, 5H), 4.03-3.96 (m, 2H), 3.56 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 2.60 (d, J = 9.0 Hz, 2H), 2.37-2.31 (m, 2H), 2.16 (br s, 2H), 1.76-1.73 (m, 2H).
Descripción D340
3,5-dihidroxipiperidin-1-carboxilato de (3R,5R)-ferc-butilo (D340)
Figure imgf000126_0002
A una solución de D339 (9.00 g, 43.0 mmol) y (Boc)2O (12.2 g, 56.5 mmol) en EtOH (100 mL) se agregó Pd/C (10 %, 200 mg) bajo atmósfera de N2. Luego, la mezcla de reacción se agitó durante la noche en una atmósfera de H2 a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se filtró y el filtrado se concentró. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA = 1:1 a 0:1) para dar el compuesto del título D340 como un sólido blanco (9.00 g, 95 %).
LCMS: 118 [M+H-100]+. Xr =1.858 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 54.08-4.05 (m, 2H), 3.52 (br s, 2H), 3.29 (br s, 2H), 1.83 (br s, 2H), 1.45 (s, 9H).
Descripción D341
3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-hidroxipiperidin-1-carboxilato de (3R,5R)-ferc-butilo (D341)
Figure imgf000126_0003
1
Boc
A una solución de D340 (9.00 g, 41.5 mmol) y imidazol (14.1 g, 207 mmol) en DCM (500 mL) se agregó TBSCl (18.7 g, 124 mmol). La reacción se agitó durante la noche a 55°C . La mezcla se concentró y el residuo se purificó mediante cromatografía en columna (PE) para proporcionar el intermedio como un aceite incoloro, que se disolvió en DCM (200 mL) y se trató con TBAF (1.0 M en THF, 40 mL). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora y se concentró. El residuo se vertió en agua (150 mL) y se extrajo con EtOAc (100 mL x 3). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó por cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=8:1) para dar el compuesto del título D341 como un aceite incoloro (5.0 g, 40 %).
LCMS: 232 [M+H-100]+. tR =3.319 min. (LCMS condición 3)
Descripción D342
3-((tere-butildimetilsilil)oxi)-5-((metilsulfonil)oxi)piperidin-1- carboxilato de (3R,5R)-tere-butilo (D342)
Figure imgf000127_0001
Boc
A una solución de D341 (2.12 g, 6.3 mmol) y TEA (3.2 g, 31.7 mmol) en DCM (60 mL) se agregó MsCI (1.45 g, 12.7 mmol) por goteo a 0°C bajo atmósfera de N2. Después de la adición, la mezcla de reacción se agitó durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se lavó con HCl (1 N, 50 mL) y agua (50 mL). Luego, la capa orgánica se secó en Na2SO4 y se concentró para proporcionar el compuesto del título D342 (2,2 g,85 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 310 [M+H-100]+. tR =3.265 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 54.94 (br s, 1H), 3.96 (br s, 1H), 3.79 (br s, 1H), 3.69 (br s, 1H), 3.44-3.39 (m, 1H), 3.05-3.00 (m, 4H), 2.09 (br s, 1H), 1.87-1.83 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 0.88 (s, 9H), 0.09 (s, 6H).
Descripción D343
3-((tere-butildimetilsilil)oxi)-5-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1- carboxilato de (3R,5S)-tere-butilo (D343)
Figure imgf000127_0002
Boc
A una solución de D342 (2.6 g, 6.3 mmol) y 4-nitro-1 H-pirazol (10.0 g, 88.0 mmol) en DMF (30 mL) se agregó Cs2CO3 (8.50 g, 26.0 mmol). La reacción se agitó a 100°C durante 2 horas. La mezcla se vertió en 100 mL de agua y se extrajo con EtOAc (100 mL x 2). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE: EA=10:1-8:1) para proporcionar el compuesto del título D343 (1,1 g, 41% de rendimiento) como un aceite incoloro.
LCMS: 371 [M+H-56]+. tR =2.245 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.31 (s, 1H), 8.08 (m, 1H), 4.31-4.25 (m, 1H), 4.22-4.16 (m, 1H), 3.95-3.92 (m, 1H), 3.78 (br s, 1H), 3.28 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 2.91 (dd, J = 13.6, 9.2 Hz, 1H), 2.36-2.33 (m, 1H), 2.17-2.06 (m, 1H), 1.48 (s, 9H), 0.86 (s, 9H), 0.09 (s, 3H), 0.06 (s, 3H).
Descripción D344
3-hidroxi-5-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (3R,5S)-tere-butilo (D344)
Figure imgf000127_0003
Boc
A una solución de D343 (1,37 g, 3,21 mmol) en THF (25 mL) se le agregó TBAF (1,01 g, 3,86 mmol). La reacción se agitó a temperatura ambiente durante 0,5 h. La mezcla se concentró y el residuo se vertió en 50 mL de agua. La mezcla se extrajo con EtOAc (50 mL x 2). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA=1:1) para proporcionar el compuesto del título D344 (1,0 g, 100 % de rendimiento).
LCMS: 257 [M+H-56]+. tR =1.52 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.33 (s, 1H), 8.09 (m, 1H), 4.38-4.33 (m, 1H), 3.97 (dd, J = 13.6, 4.2 Hz, 1H), 3.90-3.80 (m, 2H), 3.52 (dd, J = 13.6, 7.2 Hz, 1H), 3.29-3.21 (m, 2H), 2.50-2.39 (m, 1H), 2.24-2.14 (m, 1H), 1.43 (s, 9H).
Descripción D345
3-fluoro-5-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (3S,5S)-ferc-butilo (D345)
Figure imgf000128_0001
A una solución de D344 (1.06 g, 3.40 mmol) en DCM (20 mL) se agregó DAST (1.09 g, 6.80 mmol) por goteo bajo atmósfera de N2 a -78°C. La reacción se dejó calentar hasta temperatura ambiente y se agitó a temperatura ambiente durante 4 horas. La mezcla se vertió en 150 mL de NaHCO3 saturado acuoso y se extrajo con EtOAc (100 mL x 2). Los extractos se secaron en Na2SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante cromatografía en columna en gel de sílice (PE:EA = 8:1-6:1 -4/1) para proporcionar el compuesto del título D345 (500 mg, 50 % de rendimiento).
LCMS: 259 [M+H-56]+. tR =1.86 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.38 (s, 1H), 8.09 (m, 1H), 4.79-4.64 (m, 1H), 4.43-4.36 (m, 1H), 3.97-3.89 (m, 1H), 3.86-3.75 (m, 2H), 3.61-3.51 (m, 1H), 2.56-2.40 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D346
5-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-5-fluoropiperidin-1-carboxilato de (3S,3S)-ferc-butilo (D346)
Figure imgf000128_0002
1
Boc
A una solución de D345 (500 mg, 1.59 mmol) en THF (5 mL) se agregó LiHDMS (1 M en THF, 3,18 mL, 3.18mmol) por goteo a -78°C bajo atmósfera de N2. La reacción se agitó a -78°C durante 40 min. Luego se agregó C2 Cl6 (754 mg, 3.18 mmol) en THF (2 mL) por goteo y la mezcla se agitó a -78°C durante 40 min Se agregó NH4 Cl saturado acuoso (20 mL) y la mezcla se concentró. EL residuo se vertió en 20 mL de agua y se extrajo con EtOAc (30 mL x 3). Los extractos se secaron en Na2 SO4 y se concentraron. El producto en bruto se purificó mediante columna en C18 (ACN al 0-100%/H2 O) para proporcionar el producto del título D346 (440 mg, 80 % de rendimiento) como un aceite amarillo.
LCMS: 293 [M+H-56]+. tR =1.80 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.20 (s, 1H), 4.72-4.54 (m, 1H), 4.50-4.41 (m, 2H), 4.29 (br s, 1H), 3.07 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.84-2.75 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 1H), 2.42-2.31 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
Descripción D347
(3S,5S)-3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-5-fluoropiperidina (D347)
Figure imgf000128_0003
A una solución de D346 (190 mg, 0.546 mmol) en MeOH (3 mL) se agregó HCl/dioxano (7 mL,4 M) y la mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 1 hora. La mezcla se concentró y el residuo se vertió en NaHCO3 saturado acuoso (15 mL). La mezcla se extrajo con EtOAc (15 mLx 2) y los extractos se secaron en Na2SO4, y luego se concentraron para proporcionar el compuesto del título D347 (135 mg, 99 % de rendimiento) como un sólido amarillo. LCMS: 249 [M+H]+. t R =0.48 min. (LCMS condición 3)
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 58.19 (s, 1H), 4.73-4.54 (m, 1H), 4.48-4.41 (m, 1H), 3.36-3.29 (m, 1H), 3.19­ 3.16 (m, 1H), 3.09 (dd, J = 12.4, 8.8 Hz, 1H), 2.81-2.74 (m, 1H), 2.49-2.43 (m, 1H), 2.42-2.34 (m, 1H).
Descripción D348
(3S,5S)-3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-5-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D348)
Figure imgf000129_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D347 ( 1 3 5 m g , 0 . 5 4 m m o l ) y o x e t a n - 3 - o n a ( 1 4 8 m g , 2 . 0 5 m m o l ) e n 1 , 2 - d i c l o r o e t a n o ( 1 0 m L ) s e a g r e g ó N a B H ( O A c ) 3 ( 5 3 6 m g , 2 . 5 7 m m o l ) e n p a r t e s a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . D e s p u é s d e l a a d i c i ó n , l a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . L a m e z c l a s e v e r t i ó e n N a 2 C O 3 s a t u r a d o a c u o s o ( 4 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 4 5 m L x 2 ) . L o s e x t r a c t o s s e s e c a r o n e n N a 2 S O 4 y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 4 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D348 ( 1 1 0 m g , 6 6 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 0 5 [ M H ] . tR = 1 . 3 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 1 8 ( s , 1 H ) , 4 . 9 1 - 4 . 8 0 ( m , 0 . 5 H ) , 4 . 7 3 - 4 . 5 4 ( m , 4 . 5 H ) , 3 . 7 4 - 3 . 6 5 ( m , 1 H ) , 3 . 1 7 ­ 3 . 1 4 ( m , 1 H ) , 2 . 8 8 - 2 . 8 5 ( m , 1 H ) , 2 . 5 6 - 2 . 5 0 ( m , 1 H ) , 2 . 4 0 ( t , J = 1 0 . 5 H z , 1 H ) , 2 . 2 7 - 2 . 1 7 ( m , 1 H ) , 2 . 1 1 - 2 . 0 3 ( m , 1 H ) . Descripción D349
5-cloro-1-((3S,5S)-5-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1H-pirazol-4-amina (D349)
Figure imgf000129_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D348 ( 1 1 0 m g , 0 . 3 6 1 ) e n E t O H / H 2 O ( 8 m L / 8 m L ) s e a g r e g ó p o l v o d e h i e r r o ( 8 0 m g , 1 , 4 4 m m o l ) y N H 4 C l ( 7 6 m g , 1 , 4 4 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó l u e g o a 5 0 ° C d u r a n t e 1 , 5 h o r a s . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O = 5 - 1 0 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D349 ( 6 0 m g , 6 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e i n c o l o r o .
L C M S : 2 7 5 [ M H ] . t R = 0 . 5 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Descripción D350
clorhidrato de 4-hidroxipirrolidin-2-carboxilato de (2fí,4fl)-m etilo (D350)
Figure imgf000129_0003
A u n a s u s p e n s i ó n d e á c i d o ( 2 R , 4 R ) - 4 - h i d r o x i p i r r o l i d i n - 2 - c a r b o x í l i c o ( 1 0 0 g , 0 . 7 6 3 m o l ) e n M e O H ( 1 L ) s e a g r e g ó S O C l 2 ( 1 1 5 g , 0 . 9 6 6 m o l ) l e n t a m e n t e a 1 0 ° C . L u e g o , l a r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a 6 5 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó a a l t o v a c í o . E l r e s i d u o s e l a v ó c o n é t e r , s e f i l t r ó p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D350 ( 1 3 8 g , 1 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 1 4 6 [ M H ] . t R = 0 . 3 6 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Descripción D351
1-bencil-4-hidroxipirrolidin-2-carboxilato (2R,4R)-metilo (D351)
A u n a s u s p e n s i ó n d e D350 ( 1 2 8 g , 0 . 7 0 7 m o l ) , t r i e t i l a m i n a ( 2 3 6 g , 2 . 3 4 m o l ) e n D C M ( 1 . 1 L ) s e a g r e g ó B n B r ( 1 2 1 g , 0 . 7 0 8 m o l ) l e n t a m e n t e . L a r e a c c i ó n s e s o m e t i ó a r e f l u j o d u r a n t e 4 h o r a s . L a r e a c c i ó n s e c o n c e n t r ó a a l t o v a c í o , l u e g o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a ( P E : E A = 1 0 : 1 a 5 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D351 ( 1 4 0 g , 7 8 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 3 1 - 7 . 2 2 ( m , 5 H ) , 4 . 2 7 - 4 . 2 1 ( m , 1 H ) , 3 . 8 6 ( d , J = 1 3 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 7 0 ( d , J = 1 3 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 6 3 ( s , 3 H ) , 3 . 3 5 ( d d , J = 1 0 . 0 , 4 . 0 H z , 1 H ) , 3 . 1 7 ( d , J = 1 1 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 0 1 ( d , J = 1 1 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 6 2 ( d d , J = 9 . 6 H z , 4 . 0 H z , 1 H ) , 2 . 4 2 - 2 . 3 4 ( m , 1 H ) , 1 . 9 6 - 1 . 9 2 ( m , 1 H )
Descripción D352
1-bencil-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-carboxilato de (2fí,4fí)-m etilo (D352)
Figure imgf000130_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D351 ( 3 0 . 0 g , 1 2 8 m m o l ) e i m i d a z o l ( 2 6 . 4 g , 3 8 3 m m o l ) e n D C M ( 2 5 0 m L ) s e a g r e g ó T B S C l ( 2 8 . 5 g , 1 9 1 m m o l ) p o r g o t e o a 0 ° C . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L u e g o s e i n a c t i v ó l a r e a c c i ó n c o n s o l u c i ó n s a t u r a d a d e N H 4 C l ( 2 5 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n D C M ( 2 0 0 m L x 3 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a , s e s e c a r o n s o b r e N a 2 S O 4 a n h i d r o , s e f i l t r a r o n y s e c o n c e n t r a r o n a a l t o v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 5 0 : 1 - 8 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D352 ( 4 2 , 9 g , 9 6 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o c l a r o .
L C M S : 3 5 0 [ M H ] . tR = 3 . 0 7 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 3 2 - 7 . 2 1 ( m , 5 H ) , 4 . 3 8 - 4 . 3 0 ( m , 1 H ) , 3 . 9 6 ( d , J = 1 3 . 5 H z , 1 H ) , 3 . 6 8 ( s , 3 H ) , 3 . 6 2 ( d , J = 1 3 . 5 H z , 1 H ) , 3 . 3 5 ( t , J = 7 . 5 H z , 1 H ) , 2 . 9 4 ( d d , J = 9 . 9 , 3 . 6 H z , 1 H ) , 2 . 6 9 ( d d , J = 9 . 9 , 6 . 6 H z , 1 H ) , 2 . 4 4 - 2 . 3 5 ( m , 1 H ) , 2 . 0 3 - 1 . 9 4 ( m , 1 H ) , 0 . 8 5 ( s , 9 H ) , 0 . 0 1 ( s , 3 H ) , 0 . 0 0 ( s , 3 H )
Descripción D353
((2fí,4fí)-1-bencil-4-((terc-butildimetilsilil)oxi)pirrolidin-2-il)metanol (D353)
Figure imgf000130_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D352 ( 2 2 , 8 g , 6 5 , 2 m m o l ) e n T H F ( 3 4 0 m L ) s e a g r e g ó L i B H 4 ( 2 , 2 0 g , 1 0 0 m m o l ) e n p a r t e s p e q u e ñ a s a 0 ° C . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a 0 ° C d u r a n t e 0 , 5 h o r a s y l u e g o a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 2 d í a s . S e a g r e g ó u n a s o l u c i ó n s a t u r a d a d e N a H C O 3 ( 2 0 0 m L ) . L u e g o , l a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 2 0 0 m L x 3 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s s e c o m b i n a r o n , s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a y s e c o n c e n t r a r o n a a l t o v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 5 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D353 ( 1 2 , 6 g , 6 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e i n c o l o r o . 1
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 3 4 - 7 . 2 2 ( m , 5 H ) , 4 . 2 7 - 4 . 2 5 ( m , 1 H ) , 4 . 0 2 ( d , J = 1 4 . 0 H z , 1 H ) , 3 . 7 2 ( d d , J = 1 0 . 8 , 2 . 8 H z , 1 H ) , 3 . 4 6 ( d d , J = 1 0 . 8 , 1 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 4 0 ( d , J = 1 4 . 0 H z , 1 H ) , 2 . 9 1 - 2 . 8 6 ( m , 1 H ) , 2 . 4 3 ( d d , J = 1 0 . 0 , 4 . 0 H z , 1 H ) , 2 . 2 5 - 2 . 1 8 ( m , 1 H ) , 1 . 9 0 - 1 . 8 5 ( m , 1 H ) , 0 . 8 8 ( s , 9 H ) , 0 . 0 4 ( s , 3 H ) , 0 . 0 0 ( s , 3 H )
Descripción D354
(3S,5fí)-1-bencil-5-((terc-butildimetilsilil)oxi)piperidin-3-ol (D354)
Figure imgf000130_0003
A u n a s o l u c i ó n d e D353 ( 1 6 , 0 g , 4 9 , 8 m m o l ) e n T H F ( 4 1 5 m L ) s e a g r e g ó a n h í d r i d o t r i f l u o r o a c é t i c o ( 2 0 , 9 g , 9 9 , 7 m m o l ) p o r g o t e o a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . L a m e z c l a s e a g i t ó a 0 ° C d u r a n t e 3 h o r a s . L u e g o , l a r e a c c i ó n s e e n f r i ó h a s t a - 7 0 ° C y s e a g r e g ó t r i e t i l a m i n a ( 2 2 . 7 g , 2 2 4 m m o l ) p o r g o t e o . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a - 7 0 ° C d u r a n t e 0 , 5 h o r a s y l u e g o a r e f l u j o d u r a n t e 3 d í a s . S e a g r e g ó u n a s o l u c i ó n d e N a O H ( 4 M , 3 0 0 m L ) y l a r e a c c i ó n s e a g r e g ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 1 h o r a , y l u e g o s e c o n c e n t r ó a a l t o v a c í o . E l r e s i d u o s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 3 0 0 m L x 3 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s s e c o m b i n a r o n , s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a y s e c o n c e n t r a r o n a a l t o v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a ( P E : E A = 1 0 : 1 - 3 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D354 ( 1 6 , 0 g , 1 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 3 8 - 7 . 2 5 ( m , 5 H ) , 3 . 9 6 ( b r s , 1 H ) , 3 . 8 5 ( b r s , 1 H ) , 3 . 6 8 ( d , J = 1 3 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 4 7 ( d , J = 1 3 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 9 8 ( d , J = 2 1 . 6 H z , 1 H ) , 2 . 7 0 - 2 . 3 2 ( m , 4 H ) , 1 . 8 2 - 1 . 7 3 ( m , 2 H ) , 0 . 9 1 ( s , 9 H ) , 0 . 0 6 ( s , 3 H ) , 0 . 0 0 ( s , 3 H )
Descripción D355
3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-hidroxipiperidin-1-carboxilato de (3fí,5S)-ferc-butilo (D355)
Figure imgf000131_0001
A u n a m e z c l a d e D354 ( 1 6 . 0 g , 4 9 . 8 m m o l ) y ( B o c ) 2 O ( 1 4 . 0 g , 6 4 . 8 m m o l ) e n E t O H ( 1 1 4 m L ) s e a g r e g ó P d / C ( 1 0 % , 2 , 0 0 g ) b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L u e g o , l a r e a c c i ó n s e a g i t ó b a j o a t m ó s f e r a d e H 2 a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a ( P E : E A = 5 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D355 ( 1 5 , 1 g , 9 2 % ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 4 . 0 1 - 3 . 7 6 ( m , 4 H ) , 3 . 1 5 - 3 . 0 7 ( m , 2 H ) , 1 . 9 6 - 1 . 7 2 ( m , 2 H ) , 1 . 5 2 ( s , 1 H ) , 1 . 4 6 ( s , 9 H ) , 0 . 9 0 ( s , 9 H ) , 0 . 1 2 ( s , 3 H ) , 0 . 1 1 ( s , 3 H )
Descripción D356
3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-((metilsulfonil)oxi)piperidin-1- carboxilato de (3 R,5S)-tero-butilo (D356)
Figure imgf000131_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D355 ( 5 . 0 0 g , 1 5 . 1 m m o l ) , t r i e t i l a m i n a ( 7 . 6 0 g , 7 5 . 4 m m o l ) e n D C M ( 6 7 m L ) s e a g r e g ó M s C l ( 3 . 5 0 g , 3 0 . 0 m m o l ) a 0 ° C . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 3 h o r a s . L a r e a c c i ó n s e d i l u y ó c o n D C M ( 2 0 0 m L ) , s e l a v ó c o n H C l 1 M ( 2 0 0 m L x 2 ) , s a l m u e r a , s e c o n c e n t r ó p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D356 ( 6 . 2 g , 1 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 4 . 5 9 - 4 . 4 9 ( m , 1 H ) , 4 . 3 0 - 4 . 2 5 ( m , 1 H ) , 4 . 0 2 ( b r s , 1 H ) , 3 . 6 9 - 3 . 5 8 ( m , 1 H ) , 3 . 1 4 ( s , 3 H ) , 2 . 7 6 ( t , J = 1 0 . 5 H z , 1 H ) , 2 . 5 9 - 2 . 5 3 ( m , 1 H ) , 2 . 4 2 - 2 . 3 9 ( m , 1 H ) , 1 . 7 1 - 1 . 5 7 ( m , 1 H ) , 1 . 4 6 ( s , 9 H ) , 0 . 8 8 ( s , 9 H ) , 0 . 0 9 ( s , 3 H ) , 0 . 0 8 ( s , 3 H ) .
Descripción D357
3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-5-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1- carboxilato de (3fí,5fí)-ferc-butilo (D357)
Figure imgf000131_0003
A u n a s o l u c i ó n d e D356 ( 6 . 1 7 g , 1 5 . 0 m m o l ) y 4 - n i t r o - 1 H - p i r a z o l ( 3 . 4 0 g , 3 0 . 0 m m o l ) e n D M F ( 8 2 m L ) s e a g r e g ó C s 2 C O a ( 2 0 . 2 g , 6 1 . 8 m m o l ) . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 9 0 ° C . L a m e z c l a s e v e r t i ó e n a g u a ( 4 0 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 4 0 0 m L x 2 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a y c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a ( P E : E A = 1 0 : 1 - 8 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D357 ( 3 , 8 g , 5 9 % ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o . 1
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 2 2 ( s , 1 H ) , 8 . 0 8 ( s , 1 H ) , 4 . 6 2 - 4 . 5 3 ( m , 1 H ) , 4 . 3 6 - 4 . 1 2 ( m , 1 H ) , 4 . 0 4 ( b r s , 1 H ) , 3 . 8 6 - 3 . 8 0 ( m , 1 H ) , 3 . 4 4 - 3 . 2 2 ( m , 1 H ) , 3 . 1 3 ( d d , J = 1 3 . 5 H z , 1 H ) , 2 . 3 4 - 2 . 2 5 ( m , 1 H ) , 2 . 1 4 - 2 . 0 7 ( m , 1 H ) , 1 . 4 6 ( s , 9 H ) , 0 . 9 0 ( s , 9 H ) , 0 . 1 0 ( s , 3 H ) , 0 . 0 8 ( s , 3 H ) .
Descripción D358
3-hidroxi-5-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (3R,5R)-tere-butilo (D358)
Figure imgf000132_0001
Boc
A u n a s o l u c i ó n d e D357 ( 3 , 7 g , 8 , 7 m m o l ) e n T H F ( 6 8 m L ) s e a g r e g ó u n a s o l u c i ó n d e T B A F ( 1 , 0 M e n T H F , 1 0 , 4 m L , 1 0 , 4 m m o l ) . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c o n c e n t r ó y e l r e s i d u o s e d i l u y ó c o n E t O A c ( 4 0 0 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a s e l a v ó c o n a g u a ( 2 0 0 m L ) , s a l m u e r a y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 1 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D358 ( 2 , 7 g , 1 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c u z c o .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 2 4 ( s , 1 H ) , 8 . 0 8 ( s , 1 H ) , 4 . 6 7 - 4 . 6 0 ( m , 1 H ) , 4 . 2 3 - 4 . 1 7 ( m , 2 H ) , 3 . 9 7 - 3 . 9 1 ( m , 1 H ) , 3 . 3 7 ( d d , J = 1 3 . 2 , 1 0 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 1 9 ( d , J = 1 4 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 3 5 - 2 . 2 1 ( m , 2 H ) , , 1 . 4 6 ( s , 9 H ) .
Descripción D359
3-fluoro-5-(4-nitro-1H-pirazol-1-il)piperidin-1-carboxilato de (3S,5R)-tere-butilo (D359)
Figure imgf000132_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D358 ( 2 . 8 g , 9 . 0 m m o l ) e n D C M ( 5 3 m L ) s e a g r e g ó D A S T ( 3 . 6 0 g , 2 2 . 4 m m o l ) p o r g o t e o b a j o a t m ó s f e r a d e N 2 a - 7 0 ° C . L a r e a c c i ó n s e d e j ó c a l e n t a r h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 4 h o r a s . L a m e z c l a s e v e r t i ó e n 2 0 0 m L d e N a H C O 3 s a t u r a d o a c u o s o y s e e x t r a j o c o n D C M ( 2 0 0 m L x 2 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s s e c o m b i n a r o n , s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 1 0 : 1 a 8 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D359 ( 2 5 0 m g , 2 5 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 2 2 ( s , 1 H ) , 8 . 1 0 ( s , 1 H ) , 5 . 0 2 - 4 . 8 6 ( m , 1 H ) , 4 . 6 1 - 4 . 5 1 ( m , 1 H ) , 4 . 4 1 - 4 . 3 0 ( m , 2 H ) , 3 . 2 3 - 3 . 0 1 ( m , 2 H ) , 2 . 5 5 - 2 . 2 6 ( m , 2 H ) , 1 . 4 8 ( s , 9 H ) .
Descripción D360
5-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-5-fluoropiperidin-1-carboxilato de (3S,3R)-tere-butilo (D360)
Figure imgf000132_0003
A u n a m e z c l a d e D359 ( 6 0 0 m g , 1 . 9 1 m m o l ) e n T H F ( 6 m L ) s e a g r e g ó L i H D M S ( 3 . 8 2 m L , 3 . 8 2 m m o l , 1 M e n T H F ) p o r g o t a a g o t a a - 7 8 ° C b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L u e g o d e l a a d i c i ó n , l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g i t ó a - 7 8 ° C d u r a n t e 4 0 m i n . L u e g o , s e a g r e g ó C 2 C l 6 ( 9 0 0 m g , 3 . 1 8 m m o l ) e n 2 m L d e T H F p o r g o t e o y l a m e z c l a s e a g i t ó a - 7 8 ° C d u r a n t e 4 0 m i n S e a g r e g ó N H 4 C l s a t u r a d o a c u o s o ( 1 0 m L ) a - 7 8 ° C y l a m e z c l a s e c o n c e n t r ó . E L r e s i d u o s e v e r t i ó e n 2 0 m L d e a g u a y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 5 0 m L x 3 ) . L o s e x t r a c t o s s e s e c a r o n e n N a 2 S O 4 y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 1 3 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D360 ( 5 1 0 m g , 7 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o .
L C M S : 2 9 4 [ M H - 5 5 ] . tR = 2 . 0 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1H NMR (300 MHz, CLOROFORMO-d): 5 8.18 (s, 1H), 5.14-4.89 (m, 1H), 4.86-4.75 (m, 1H), 4.48-4.23 (m, 2H), 3.26­ 2.97 (m, 2H), 2.51-2.30 (m, 2H), 1.48 (s, 9H)
Descripción D361
clorhidrato de (3fí,5S)-3-(5-cloro-4-nitro-1 H-pirazol-1-il)-5-fluoropiperidina (D361)
c i <N 0 ’
FY 'N
HY HCNI'N
A u n a s o l u c i ó n d e D360 ( 5 1 0 m g , 0 . 5 4 6 m m o l ) e n M e O H ( 5 m L ) s e a g r e g ó H C l / d i o x a n o ( 5 m L , 4 M ) y l a r e a c c i ó n s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 1 h o r a . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D361 ( 3 6 3 m g ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 2 4 9 [ M H ] . tR = 0 . 4 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Descripción D362
(3fí,5S)-3-(5-cloro-4-nitro-1H-pirazol-1-il)-5-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidina (D362)
Figure imgf000133_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D361 ( 3 6 3 m g , 1 . 4 5 m m o l ) y o x e t a n - 3 - o n a ( 5 2 8 m g , 7 . 3 0 m m o l ) e n 1 , 2 - d i c l o r o e t a n o ( 3 0 m L ) s e a g r e g ó N a B H ( O A c ) 3 ( 1 . 8 4 g , 8 . 7 0 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e v e r t i ó e n 2 0 m l d e N a 2 C O 3 a c u o s o y s e e x t r a j o c o n D C M ( 3 0 m L x 2 ) . L o s e x t r a c t o s s e s e c a r o n e n N a 2 S O 4 y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 1 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D362 ( 3 5 0 m g , 8 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 0 5 [ M H ] . t R = 1 . 6 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 1 7 ( s , 1 H ) , 5 . 1 0 - 4 . 9 2 ( m , 2 H ) , 4 . 7 1 - 4 . 5 7 ( m , 4 H ) , 3 . 7 5 - 3 . 6 7 ( m , 1 H ) , 3 . 1 6 ­ 3 . 0 7 ( m , 1 H ) , 3 . 0 2 - 2 . 9 7 ( m , 1 H ) , 2 . 5 1 - 2 . 1 6 ( m , 4 H ) .
Descripción D363
5-cloro-1-((3fí,5S)-5-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1H-pirazol-4-amina (D363)
Figure imgf000133_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D362 ( 3 5 0 m g , 0 . 3 6 1 ) e n E t O H / H 2 O ( 5 m L / 5 m L ) s e a g r e g ó p o l v o d e h i e r r o ( 3 2 2 m g , 5 , 7 6 m m o l ) y N H 4 C l ( 3 0 5 m g , 5 , 7 6 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y l a r e a c c i ó n s e a g i t ó a 4 5 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O = 5 -3 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D363 ( 2 3 0 m g , 7 3 % ) c o m o u n a c e i t e i n c o l o r o .
L C M S : 2 7 5 [ M H ] . t R = 0 . 7 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 2 2 ( s , 1 H ) , 5 . 0 7 - 4 . 9 2 ( m , 1 H ) , 4 . 8 1 - 4 . 6 1 ( m , 4 H ) , 3 . 7 1 - 3 . 6 3 ( m , 1 H ) , 3 . 0 7 ( t , J = 1 2 . 0 H z , 1 H ) , 2 . 9 8 - 2 . 9 0 ( m , 2 H ) , 2 . 4 3 - 2 . 1 0 ( m , 4 H ) .
Descripción D364
2-(4-amino-5-cloro-1 H-pirazol-1-il)morfolino-4-carboxilato de (±)-ferc-butilo (D364)
Boc
Figure imgf000134_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D317 ( 1 , 0 g , 3 . 0 m m o l ) e n E t O H ( 3 5 m L ) s e a g r e g ó p o l v o d e h i e r r o ( 8 4 0 m g , 1 5 , 0 m m o l ) y N H 4 ( 3 2 1 m g , 6 0 m m o l ) e n a g u a ( 3 5 m L ) . L a m e z c l a r e s u l t a n t e s e a g i t ó a 5 0 ° C d u r a n t e 3 h o r a s . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . A l r e s i d u o s e a g r e g ó a c e t a t o d e e t i l o ( 5 0 m L ) y s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 1 0 m i n , l u e g o s e s e p a r ó . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o ( 3 0 m L x 3 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e s e c a r o n s o b r e N a 2 S O 4 a n h i d r o , s e f i l t r a r o n y c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó c o n C 1 8 ( C H 3 C N a l 2 5 ­ 4 0 % e n H 2 O ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D364 ( 6 5 0 m g , r e n d i m i e n t o 7 2 % ) c o m o u n a c e i t e a m a r i l l o .
L C M S : 3 0 3 [ M H ] . tR = 2 . 1 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 3 0 ( s , 1 H ) , 5 . 3 3 ( d d , J = 9 . 6 , 2 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 1 4 - 4 . 0 9 ( m , 1 H ) , 3 . 9 7 ( d , J = 1 1 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 8 8 ( d , J = 1 2 . 4 H z , 1 H ) , 3 . 7 5 - 3 . 6 9 ( m , 2 H ) , 3 . 1 1 ( t , J = 1 3 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 9 4 ( b r s , 2 H ) , 1 . 4 7 ( s , 9 H ) . Descripción D365 y D366
Enantiómero 1: 2-(5-cloro-4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-1H-pirazol-1-il) morfolino-4-carboxilato de ferc-butilo (D365)
Enantiómero 2: 2-(5-cloro-4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-1H-pirazol-1-il) morfolino-4-carboxilato de ferc-butilo (D366)
Figure imgf000134_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D364 ( 6 5 0 m g , 2 . 1 5 m m o l ) e n d i o x a n o ( 9 0 m L ) s e a g r e g ó D1 ( 1 . 0 6 g , 5 . 3 8 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 9 4 m g , 0 . 4 3 m m o l ) , X - p h o s ( 4 0 9 m g , 0 . 8 6 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 8 9 0 m g , 6 . 4 5 m m o l ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C b a j o N 2. L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l r e s i d u o s e d i s o l v i ó e n a g u a ( 1 0 0 m L ) y a c e t a t o d e e t i l o ( 1 0 0 m L ) . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o ( 5 0 m L x 2 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a ( 5 0 m L x 2 ) , s e s e c a r o n e n N a 2 S O 4 a n h i d r o , s e f i l t r a r o n y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó c o n C 1 8 ( C H 3 C N a l 3 5 - 5 0 % / H 2 O ) y s e s e p a r ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( c h i r a l p a k I C 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m , f a s e : H e x : E t O H = 6 0 : 4 0 , F : 1 . 0 m L / m i n , W : 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o D365 ( 1 8 2 m g , r e n d i m i e n t o 4 6 % , t R = 6 . 8 4 m i n , 1 0 0 % e e ) y D366 ( 1 8 5 m g , r e n d i m i e n t o 4 6 % , t R = 1 2 . 4 8 m i n , 1 0 0 % e e ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
L C M S : 4 6 4 [ M H ] . t R = 2 . 6 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 4 7 ( s , 1 H ) , 8 . 2 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 2 ( d d , J = 3 . 6 a n d 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 4 3 ( d d , J = 3 . 6 a n d 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 3 3 ( s , 1 H ) , 5 . 4 3 ( d d , J = 9 . 2 a n d 2 . 4 H z , 1 H ) , 4 . 5 2 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 2 7 - 4 . 1 6 ( m , 1 H ) , 4 . 1 4 ( d , J = 1 1 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 9 6 - 3 . 7 3 ( m , 3 H ) , 3 . 1 6 ( J = 1 2 . 0 H z , 1 H ) , 1 . 4 9 ( s , 9 H ) , 1 . 4 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 1
W-(1,3-dimetil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (E1)
Figure imgf000134_0003
U n a s o l u c i ó n d e W -( 1 , 3 - d i m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 4 - e t o x i - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 3 ) ( 1 0 0 m g , 0 . 2 3 4 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 0 . 5 8 6 m L , 1 . 1 7 2 m m o l ) e n i s o p r o p a n o l ( 1 0 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 5 0 ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c o n c e n t r ó a l v a c í o . E L r e s i d u o s e v e r t i ó e n a g u a y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 2 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E1 ( 1 2 m g , 0 . 0 4 2 m m o l , 1 8 , 1 2 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 2 7 3 . 1 [ M H ] . tR = 1 . 1 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 6 6 - 9 . 0 5 ( m , 1 H ) , 7 . 8 0 ( s , 1 H ) , 6 . 6 9 ( d , J = 1 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 4 1 ( d , J = 1 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 2 4 ( s , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 7 . 1 H z , 2 H ) , 3 . 8 2 ( s , 3 H ) , 2 . 2 7 ( s , 3 H ) , 1 . 4 7 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 2 y 3
1-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-3-metil-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol (E2)
1-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol (E3)
Figure imgf000135_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 2 0 0 m g , 1 . 0 1 2 m m o l ) , u n a m e z c l a d e 1 -( 4 - a m i n o - 3 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 2 - m e t i l p r o p a n - 2 - o l y 1 -( 4 - a m i n o - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 2 -m e t i l p r o p a n - 2 - o l ( 2 0 6 m g , 1 . 2 1 4 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 4 6 . 3 m g , 0 . 0 5 1 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s -( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 5 8 . 6 m g , 0 . 1 0 1 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 4 2 0 m g , 3 . 0 4 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 . 0 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n a g u a y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 2 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 2 0 : 1 ) p a r a o b t e n e r u n a m e z c l a , q u e s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ; C o l u m n a A Y - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; T e m p e r a t u r a d e l a c o l u m n a 4 0 ; C O 2 V e l o c i d a d d e f l u j o 2 . 4 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e 0 . 6 ; % d e C o s o l v e n t e 2 0 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 2 0 ; F l u j o t o t a l 3 1 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E2 ( 3 0 m g , 0 . 0 8 6 m m o l , 8 . 5 3 % d e r e n d i m i e n t o ) y E3 ( 2 0 m g , 0 . 0 5 8 m m o l , 5 . 7 6 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s g r i s e s . L a e s t r u c t u r a d e E 3 s e d e t e r m i n ó m e d i a n t e e f e c t o d e N O E e n t r e e l g r u p o m e t i l o e n l a p o s i c i ó n 5 d e l p i r a z o l ( C H 3 , 2 . 2 3 p p m ) y e l g r u p o m e t i l e n o e n l a p o s i c i ó n N 1 d e l p i r a z o l ( C H 2 , 3 . 9 6 p p m ) .
E2 : L C M S : 3 3 1 . 1 [ M H ] , t R = 1 . 0 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 6 9 ( s , 1 H ) , 7 . 9 2 ( s , 1 H ) , 6 . 7 9 ( m , 1 H ) , 6 . 4 3 ( m , 1 H ) , 6 . 3 0 ( s , 1 H ) , 4 . 5 3 ( d d , J = 9 . 0 H z , 9 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 9 8 ( s , 2 H ) , 2 . 2 9 ( s , 3 H ) , 1 . 7 5 ( s , 1 H ) , 1 . 4 7 ( t , J = 9 . 0 H z , 3 H ) , 1 . 2 0 ( s , 6 H ) .
E3 : L C M S : 3 3 1 . 1 [ M H ] , t R = 1 . 3 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 0 4 ( s , 1 H ) , 7 . 7 5 ( s , 1 H ) , 6 . 7 1 ( d , J = 4 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 4 1 ( d , J = 4 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 1 5 ( s , 1 H ) , 4 . 5 0 ( d d , J = 9 . 0 H z , 9 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 9 6 , ( s , 2 H ) , 2 . 2 3 ( s , 3 H ) , 1 . 8 9 ( s , 1 H ) , 1 . 4 5 ( t , J = 9 . 0 H z , 3 H ) , 1 . 2 0 ( s , 6 H ) .
Ejemplo 4
W-(5-cloro-1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-amina (E4)
Figure imgf000135_0002
U n a s o l u c i ó n d e W -( 5 - c l o r o - 1 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 4 - e t o x i - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - d ] - p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 4 ) ( 5 0 m g , 0 . 1 1 2 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 1 m L , 2 . 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n m e t a n o l ( 3 m L ) s e a g i t ó a 5 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E4 ( 1 9 m g , 0 . 0 6 5 m m o l , 5 8 , 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 2 9 3 [ M H ] . t R = 1 . 2 7 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - c k ) : 5 7 . 8 2 - 8 . 0 1 ( m , 1 H ) , 6 . 8 6 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 3 2 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 8 5 ( s , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 5
1-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-3,5-dimetil-1H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol(E5)
Figure imgf000136_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 5 0 m g , 0 . 7 5 9 m m o l ) , 1 -( 4 - a m i n o - 3 , 5 - d i m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 2 - m e t i l p r o p a n - 2 - o l ( D 6 ) ( 1 6 7 m g , 0 . 9 1 1 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 5 . 4 m g , 0 . 0 3 9 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 4 4 . 4 m g , 0 . 0 7 7 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 3 1 9 m g , 2 . 3 0 7 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 . 0 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n a g u a y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 2 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 2 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E5 ( 1 2 1 m g , 0 . 3 5 1 m m o l , 4 6 . 3 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 4 4 , 9 [ M H ] . tR = 1 . 1 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 0 ( s , 1 H ) , 7 . 7 0 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( m , 1 H ) , 6 . 1 6 ( m , 1 H ) , 4 . 7 0 ( s , 1 H ) , 4 . 3 8 ( s , 2 H ) , 3 . 8 3 ( s , 2 H ) , 2 . 0 6 ( s , 3 H ) , 1 . 9 6 ( s , 3 H ) , 1 . 3 0 ( t , J = 9 . 0 H z , 3 H ) , 1 . 0 8 ( s , 6 H ) .
Ejemplo 6
4-etoxi-W-(1,3,5-trimetil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-amina(E6)
Figure imgf000136_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 5 0 m g , 0 . 7 5 9 m m o l ) , 1 , 3 , 5 - t r i m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 8 ) ( 1 1 4 m g , 0 . 9 1 1 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 5 . 4 m g , 0 . 0 3 9 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 4 4 . 4 m g , 0 . 0 7 7 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 3 1 9 m g , 2 . 3 0 7 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 3 . 0 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n a g u a y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 2 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 2 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E6 ( 6 5 m g , 0 . 2 2 7 m m o l , 2 9 . 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 2 8 6 , 9 [ M H ] . t R = 1 . 1 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - c f e ) : 5 1 1 . 1 9 ( s , 1 H ) , 7 . 6 8 ( s , 1 H ) , 7 . 8 0 ( d , J = 4 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 1 7 ( d , J = 4 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 4 1 ( d d , J = 9 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 6 2 ( s , 3 H ) , 2 . 0 2 ( s , 3 H ) , 1 . 9 3 ( s , 3 H ) , 1 . 3 3 ( t , J = 9 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 7
1-(3-cloro-4-((4-etoxi-7H-pirrolo-[2,3-d]-pirimidin-2-il)amino)-1 H-pirazol-1-il)-2-metilpropan-2-ol (E7)
Figure imgf000136_0003
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 6 0 m g , 0 . 3 0 4 m m o l ) , 1 -( 4 - a m i n o - 3 - c l o r o - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 2 - m e t i l p r o p a n - 2 - o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 1 ) ( 6 0 m g , 0 . 3 1 6 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 3 . 9 0 m g , 0 . 0 1 5 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 1 7 . 5 7 m g , 0 . 0 3 0 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 1 2 6 m g , 0 . 9 1 1 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 3 . 0 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n a g u a y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 2 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 2 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E7 ( 2 , 6 m g , 6 . 8 0 g m o l , 2 . 2 4 1 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 5 1 [ M H ] . tR = 1 . 6 3 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 3 3 - 8 . 5 5 ( m , 1 H ) , 8 . 1 5 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 1 . 3 H z , 1 H ) , 6 . 5 7 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 4 4 ( d , J = 3 . 3 H z , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 2 ( s , 2 H ) , 1 . 4 7 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) , 1 . 2 3 ( s , 6 H ) .
Ejemplo 8 y 9
4-etox¡-W-(1-(2-metox¡et¡l)-3-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡md¡n-2-am¡na (E8 )
4-etox¡-W-(1-(2-metox¡et¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡md¡n-2-am¡na (E9)
Figure imgf000137_0001
U n a s o l u c i ó n d e l a m e z c l a d e 4 - e t o x i - W -( 1 -( 2 - m e t o x i e t i l ) - 3 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o - [ 2 , 3 - d ] - p i r i m i d i n - 2 -a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 2 ) y 4 - e t o x i - W - ( 1 - ( 2 - m e t o x i e t i l ) - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o - [ 2 , 3 -d ] - p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 3 ) ( 3 0 0 m g , 0 . 1 9 1 m m o l ) , h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 3 m L , 6 . 0 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n m e t a n o l ( 1 5 m L ) s e a g i t ó a 5 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e a g r e g ó N a H C O 3 s a t u r a d o h a s t a p H = 8 . L a m e z c l a s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 5 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 2 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E8 ( 1 0 0 m g , 0 . 3 1 6 m m o l , 7 0 . 8 % d e r e n d i m i e n t o ) y E9 ( 2 5 m g , 0 . 0 7 9 m m o l , 1 7 . 7 1 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E8 : L C M S : 3 1 6 . 9 [ M H ] . t R = 1 . 2 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 6 9 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 8 5 ( s , 1 H ) , 6 . 5 0 - 6 . 6 4 ( m , 1 H ) , 6 . 3 7 ( d , J = 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( s , 1 H ) , 4 . 5 2 ( q , J = 7 . 1 H z , 2 H ) , 4 . 1 6 ( t , J = 5 . 3 H z , 2 H ) , 3 . 6 8 ( t , J = 5 . 3 H z , 2 H ) , 3 . 2 3 - 3 . 3 9 ( m , 3 H ) , 2 . 2 6 ( s , 3 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
E9: L C M S : 3 1 6 . 9 [ M H ] . t R = 1 . 2 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 1 0 . 0 5 - 1 0 . 3 3 ( m , 1 H ) , 7 . 6 4 ( s , 1 H ) , 6 . 4 1 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 5 - 6 . 3 4 ( m , 1 H ) , 6 . 1 2 ( s , 1 H ) , 4 . 4 9 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 1 1 ( t , J = 5 . 5 H z , 2 H ) , 3 . 6 6 ( t , J = 5 . 5 H z , 2 H ) , 3 . 2 5 ( s , 3 H ) , 2 . 2 1 ( s , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 10
W-(1-(2-(3-aza-b¡c¡clo-[3.1.0]hexan-3-¡l)et¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E10)
Figure imgf000137_0002
U n a s o l u c i ó n d e W -( 1 -( 2 -( 3 - a z a b i c i c l o -[ 3 . 1 . 0 ] - h e x a n - 3 - i l ) e t i l ) - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 4 - e t o x i - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 -d ] p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 8 ) ( 1 5 0 m g , 0 . 2 8 8 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 0 . 4 3 1 m L , 0 . 8 6 3 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n i s o p r o p a n o l ( 5 m L ) s e a g i t ó a 6 0 ° C d u r a n t e l a n o c h e . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e a g r e g ó H C l 2 N h a s t a p H = 7 . E l p r o d u c t o s e e x t r a j o c o n E t O A c d o s v e c e s . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E10 ( 4 0 m g , 0 . 1 0 9 m m o l , 3 7 , 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 6 8 [ M H ] . t R = 1 . 2 3 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1H NMR (400MHz, DMSO-ds): 511.00 - 11.25 (m, 1H), 8.00 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 6.85 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 3.3 Hz, 1H), 4.43 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 4.02 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.94 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 2.64 - 2.78 (m, 2H), 2.28 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.15 (s, 3H), 1.27 - 1.47 (m, 5H), 0.53 (q, J = 3.5 Hz, 1H), 0.28 (td, J = 7.7, 3.8 Hz, 1H).
Ejemplo 11 y 12
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E11) 4-etox¡-W-(3-met¡l-1-(tetrah¡dro-2H-piran-4-¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E12)
Figure imgf000138_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 9 0 m g , 0 . 4 5 5 m m o l ) , u n a m e z c l a d e 5 - m e t i l - 1 -( t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 4 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a a n d 3 - m e t i l - 1 -( t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 4 - i l ) - 1 H -p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 4 1 . 3 m g , 0 . 2 2 8 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 4 1 . 7 m g , 0 . 0 4 6 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s - ( d i f e n i l f o s f i n o ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 1 8 9 m g , 1 . 3 6 6 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 3 . 0 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n a g u a y l u e g o s e d i v i d i ó e n t r e a c e t a t o d e e t i l o ( 2 5 m L ) y a g u a ( 5 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a s e l a v ó c o n a g u a y l u e g o s o l u c i ó n d e N a H C O 3 s a t u r a d o . L u e g o , l a c a p a o r g á n i c a r e s u l t a n t e s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E11 ( 1 6 m g , 0 . 0 4 7 m m o l , 1 0 , 2 6 % d e r e n d i m i e n t o ) y E12 ( 4 0 m g , 0 . 1 1 7 m m o l , 2 5 . 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s m a r r o n e s . E11 : L C M S : 3 4 3 [ M H ] . tR = 1 . 4 7 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 0 . 9 4 - 1 1 . 3 3 ( m , 1 H ) , 8 . 0 1 ( s , 1 H ) , 7 . 6 0 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 3 . 3 H z , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d , J = 3 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 4 . 2 0 - 4 . 3 9 ( m , 1 H ) , 3 . 9 6 ( d d , J = 1 0 . 9 , 3 . 6 H z , 2 H ) , 3 . 4 8 ( t , J = 1 1 . 4 H z , 2 H ) , 2 . 2 0 ( s , 3 H ) , 2 . 0 3 ( q d , J = 1 2 . 2 , 4 . 5 H z , 2 H ) , 1 . 7 6 ( d d , J = 1 2 . 4 , 1 . 9 H z , 2 H ) , 1 . 3 5 ( t , 3 H ) .
E12 : L C M S : 3 4 3 [ M H ] . t R = 1 . 1 2 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 3 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 9 ( s , 1 H ) , 7 . 9 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 4 - 7 . 0 2 ( m , 1 H ) , 6 . 2 2 ( d , J = 1 . 3 H z , 1 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 1 2 - 4 . 3 2 ( m , 1 H ) , 3 . 8 4 - 4 . 0 5 ( m , 2 H ) , 3 . 4 5 ( t d , J = 1 1 . 3 , 2 . 3 H z , 2 H ) , 2 . 1 2 ( s , 3 H ) , 1 . 8 1 - 2 . 0 2 ( m , 4 H ) , 1 . 3 7 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 13 y 14
Enant¡ómero 1: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-met¡lp¡rrol¡d¡n-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H- p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E13) Enant¡ómero 2: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-met¡lp¡rrol¡d¡n-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H- p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E14)
Figure imgf000138_0002
A u n a s o l u c i ó n d e ( ± ) - 4 - e t o x i - W -( 5 - m e t i l - 1 -( 1 - m e t i l - p i r r o l i d i n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o - [ 2 , 3 - a ( | - p i r i m i d i n - 2 -a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 9 )
( 2 4 0 m g , 0 . 4 8 4 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 3 m L , 6 . 0 0 m m o l ) e n m e t a n o l ( 1 5 m L ) s e a g i t ó a 5 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e a g r e g ó N a H C O 3 s a t u r a d o h a s t a p H = 8 . L a m e z c l a s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 5 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 8 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l p r o d u c t o r a c é m i c o , q u e s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E a a l 0 . 1 % ) ; C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; T e m p e r a t u r a d e l a c o l u m n a 3 9 , 8 ; C O 2 V e l o c i d a d d e f l u j o 1 . 9 5 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e 1 . 0 5 ; % d e C o s o l v e n t e 3 5 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 2 0 ; F l u j o t o t a l 3 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E1 3 ( 3 0 m g , 0 . 0 8 8 m m o l , 1 8 . 1 5 % d e r e n d i m i e n t o ) y E14 ( 3 0 m g , 0 . 0 8 8 m m o l , 1 8 . 1 5 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E13: L C M S : 3 4 2 [ M H ] . Xr = 1 . 2 4 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : Xr = 3 . 2 m i n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 8 . 0 1 ( s , 1 H ) , 7 . 5 8 ( s , 1 H ) , 6 . 6 3 - 6 . 9 6 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d , J = 1 . 3 H z , 1 H ) , 4 . 7 1 - 4 . 9 6 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 0 0 (X, J = 8 . 3 H z , 1 H ) , 2 . 6 4 - 2 . 7 6 ( m , 1 H ) , 2 . 5 3 - 2 . 6 1 ( m , 2 H ) , 2 . 2 6 - 2 . 3 1 ( m , 2 H ) , 2 . 1 3 - 2 . 2 6 ( m , 5 H ) , 1 . 3 5 (X, J = 7 . 0 H z , 3 H )
E14: L C M S : 3 4 2 [ M H ] . Xr = 1 . 2 3 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : Xr = 4 . 9 m i n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 8 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 5 8 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 1 ( d , J = 1 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 8 3 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 3 . 0 0 (X, J = 8 . 3 H z , 1 H ) , 2 . 6 5 - 2 . 7 4 ( m , 1 H ) , 2 . 5 3 - 2 . 6 1 ( m , 2 H ) , 2 . 2 8 ( s , 3 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 2 6 ( m , 5 H ) , 1 . 3 5 (X, J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 15
1-(5-cloro-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H-pirazol-1-¡l)-2-met¡lpropan-2-ol (E15)
Figure imgf000139_0001
U n a s o l u c i ó n d e 1 -( 5 - c l o r o - 4 -( ( 4 - e X o x i - 7 - X o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - d ] - p i r i m i d i n - 2 - i l ) a m i n o ) - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 2 - m e t i l p r o p a n - 2 - o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 2 0 ) ( 4 0 m g , 0 . 0 7 9 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 1 m L , 2 . 0 0 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n m e t a n o l ( 3 m L ) s e a g i t ó a 2 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó c o n N a 2 S O 4 y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E15 ( 9 m g , 0 . 0 2 6 m m o l , 3 2 , 4 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 5 2 [ M H ] . Xr = 1 . 6 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - a 4 ) : 5 7 . 9 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 1 3 - 6 . 3 7 ( m , 1 H ) , 4 . 5 0 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 1 2 ( s , 2 H ) , 1 . 4 2 (X, J = 7 . 0 H z , 3 H ) , 1 . 2 4 ( s , 6 H ) .
Ejemplo 16 y 17
Enant¡ómero 1: 4-etox¡-A/-(5-met¡l-1-(tetrah¡drofuran-3-¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E16) Enant¡ómero 2: 4-etox¡-A/-(5-met¡l-1-(tetrah¡drofuran-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo- [2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E17)
Figure imgf000139_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 4 9 m g , 0 . 2 4 8 m m o l ) , 5 -m e t i l - 1 -( t e t r a h i d r o f u r a n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 4 9 . 8 m g , 0 . 2 9 8 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T , W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 1 . 3 5 m g , 0 . 0 1 2 m m o l ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 1 0 3 m g , 0 . 7 4 4 m m o l ) y ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) - b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 1 1 . 8 2 m g , 0 . 0 2 5 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 5 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n a g u a y l u e g o s e d i v i d i ó e n t r e a c e t a t o d e e t i l o ( 2 5 m L ) y a g u a ( 5 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a s e l a v ó c o n a g u a y l u e g o N a H C O 3 s a t u r a d o . L u e g o , l a f a s e o r g á n i c a r e s u l t a n t e s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ; C o l u m n a O J - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; T e m p e r a t u r a d e l a c o l u m n a 3 9 , 8 ; C O 2 V e l o c i d a d d e f l u j o 2 . 4 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e 0 . 6 ; % d e C o s o l v e n t e 2 0 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 2 0 ; F l u j o t o t a l 3 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E16 ( 1 8 m g , 2 4 . 5 6 % d e r e n d i m i e n t o ) y E17 ( 1 0 m g , 1 5 . 4 3 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E16: L C M S : 3 2 9 [ M H ] . t R = 1 . 2 6 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 2 . 8 5 m i n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a O J - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 0 . 9 5 - 1 1 . 2 9 ( m , 1 H ) , 8 . 0 2 ( s , 1 H ) , 7 . 6 0 ( s , 1 H ) , 6 . 8 4 ( d , J = 2 . 3 H z , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d , J = 2 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 8 8 - 5 . 0 0 ( m , 1 H ) , 4 . 4 3 ( d , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 9 0 - 4 . 1 3 ( m , 2 H ) , 3 . 6 8 - 3 . 9 0 ( m , 2 H ) , 2 . 2 3 - 2 . 3 2 ( m , 2 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 3 4 ( t , 3 H ) .
E17: L C M S : 3 2 9 [ M H ] . t R = 1 . 2 5 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 4 . 2 8 m i n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a O J - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) s e d e s c o n o c e l a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 6 ( s , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 6 . 7 8 - 6 . 9 6 ( m , 1 H ) , 6 . 0 0 - 6 . 3 4 ( m , 1 H ) , 4 . 8 9 - 5 . 0 5 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 3 . 9 2 - 4 . 1 0 ( m , 2 H ) , 3 . 6 6 - 3 . 8 9 ( m , 2 H ) , 2 . 2 9 ( q , J = 6 . 6 H z , 2 H ) , 2 . 2 0 ( s , 3 H ) , 1 . 3 6 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 18 y 19
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E18)
4-etox¡-W-(3-met¡l-1-(1-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E19)
Figure imgf000140_0001
U n a s o l u c i ó n d e u n a m e z c l a d e 4 - e t o x i - W -( 5 - m e t i l - 1 -( 1 - m e t i l p i p e r i d i n - 4 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 -a d p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 2 1 ) y 4 - e t o x i - W -( 3 - m e t i l - 1 -( 1 - m e t i l p i p e r i d i n - 4 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 7 -t o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - a d p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 2 2 ) ( 2 6 0 m g , 0 . 5 1 0 m m o l ) , h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 0 . 5 1 0 m L , 1 . 0 2 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n T H F ( 5 m L ) s e a g i t ó a 6 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e v e r t i ó e n E t O A c ( 2 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n a g u a ( 3 x 3 0 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a s e e v a p o r ó a l v a c í o y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E18 ( 1 6 m g , 0 . 0 4 5 m m o l , 8 , 8 2 % d e r e n d i m i e n t o ) y E19 ( 5 m g , 0 . 0 1 4 m m o l , 2 . 7 6 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E18: L C M S : 3 5 6 , 3 [ M H ] . t R = 1 . 1 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 1 2 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 1 ( s , 1 H ) , 6 . 6 7 ( m , 1 H ) , 6 . 3 8 ( d , J = 1 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( s , 1 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 8 8 - 4 . 1 4 ( m , 1 H ) , 2 . 9 7 ( d , J = 1 1 . 3 H z , 2 H ) , 2 . 3 3 ( s , 3 H ) , 2 . 2 6 ( s , 3 H ) , 1 . 9 6 - 2 . 1 8 ( m , 6 H ) , 1 . 4 5 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
E19: L C M S : 3 5 6 , 2 [ M H ] . t R = 1 . 2 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 1 6 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 9 ( s , 1 H ) , 6 . 6 0 ( m , 1 H ) , 6 . 3 5 ( d , J = 1 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 0 6 ( s , 1 H ) , 4 . 4 9 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 0 ( m , 1 H ) , 3 . 0 5 ( m , 2 H ) , 2 . 1 0 - 2 . 4 4 ( m , 1 0 H ) , 1 . 9 0 ( m , 2 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) . Ejemplo 20
4-etox¡-W-(5-metox¡-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E20)
Figure imgf000140_0002
U n a s o l u c i ó n d e 4 - e t o x i - W -( 5 - m e t o x i - 1 -( t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 4 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n - 2 -a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 2 5 ) ( 4 0 m g , 0 . 0 7 8 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 1 m L , 2 . 0 0 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n m e t a n o l ( 3 m L ) s e a g i t ó a 2 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó c o n N a 2 S O 4 y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E20 ( 4 m g , 1 0 . 8 3 g m o l , 1 3 , 8 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 5 9 [ M H ] . tR = 1 . 5 8 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 4 7 - 8 . 8 7 ( m , 1 H ) , 7 . 5 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 ( d d , J = 3 . 4 , 1 . 9 H z , 1 H ) , 6 . 3 9 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 5 . 9 8 ( m . , 1 H ) , 4 . 4 8 ( q , J = 7 . 1 H z , 2 H ) , 4 . 2 9 ( t t , J = 1 1 . 6 , 4 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 0 6 - 4 . 1 6 ( m , 2 H ) , 3 . 9 9 ( s , 3 H ) , 3 . 4 5 - 3 . 5 8 ( m , 2 H ) , 2 . 1 5 - 2 . 3 2 ( m , 2 H ) , 1 . 8 5 ( d d , J = 1 2 . 7 , 2 . 1 H z , 2 H ) , 1 . 4 2 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 21
W-(5-cloro-1-(2-metox¡et¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E21)
Figure imgf000141_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 2 0 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) , 5 - c l o r o - 1 -( 2 - m e t o x i e t i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 1 2 8 m g , 0 . 7 2 9 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 7 . 8 m g , 0 . 0 3 0 m m o l ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 1 6 8 m g , 1 . 2 1 4 m m o l ) y ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s ( d f e n i l f o s f i n a ) ( 3 5 . 1 m g , 0 . 0 6 1 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 3 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 7 0 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e v e r t i ó e n E t O A c ( 5 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n a g u a ( 3 0 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a s e e v a p o r ó a l v a c í o y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E21 ( 5 0 m g , 0 . 1 4 8 m m o l , 2 4 . 4 5 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 3 7 [ M H ] . t R = 1 . 3 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 4 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 1 6 ( s , 1 H ) , 6 . 8 1 ( d d , J = 3 . 4 , 2 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 4 3 ( d d , J = 3 . 4 , 2 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 2 7 ( s , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 3 0 ( t , J = 5 . 6 H z , 2 H ) , 3 . 7 8 ( t , J = 5 . 8 H z , 2 H ) , 3 . 3 5 ( s , 3 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 22
W-(5-cloro-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E22)
Figure imgf000141_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 7 0 m g , 0 . 3 5 4 m m o l ) , 5 -c l o r o - 4 - n i t r o - 1 -( t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 4 - i l ) - 1 H - p i r a z o l ( 7 9 m g , 0 . 3 9 0 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 2 . 4 m g , 0 . 0 3 5 m m o l ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 1 4 7 m g , 1 . 0 6 3 m m o l ) y ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s ( d f e n i l f o s f i n a ) ( 3 0 . 7 m g , 0 . 0 5 3 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d i v i d i ó e n t r e a c e t a t o d e e t i l o ( 2 5 m L ) y a g u a ( 2 5 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a s e l a v ó c o n a g u a , s o l u c i ó n d e N a H C O 3 y s a l m u e r a , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E22 ( 1 5 m g , 0 . 0 4 1 m m o l , 1 1 , 6 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 4 3 [ M H ] . t R = 1 . 1 2 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) 5 : 1 1 . 2 9 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 1 6 ( s , 1 H ) , 7 . 8 2 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( d , J = 3 . 3 H z , 1 H ) , 4 . 3 3 - 4 . 6 0 ( m , 3 H ) , 3 . 9 8 ( d d , J = 1 1 . 2 , 3 . 6 H z , 2 H ) , 3 . 5 1 ( t , J = 1 1 . 2 H z , 2 H ) , 1 . 9 2 - 2 . 1 2 ( m , 2 H ) , 1 . 8 3 ( d d , J = 1 2 . 5 , 2 . 0 H z , 2 H ) , 1 . 3 5 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 23
1-(4-((4-etox¡-3-met¡l-1 H-p¡razolo-[3,4-d]-p¡r¡m¡d¡n-6-¡l)am¡no)-3-met¡l-1 H-p¡razol-1-¡l)-2-met¡lpropan-2-ol (E23)
Figure imgf000142_0001
E24: L C M S : 3 5 8 [ M H ] . t R = 1 . 0 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 8 9 ( s , 1 H ) , 7 . 7 0 ( s , 1 H ) , 4 . 5 1 ( m , 1 H ) , 4 . 2 6 ( d , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 9 8 ( s , 2 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 1 . 3 2 ( m , 1 H ) , 1 . 2 1 ( s , 7 H ) , 0 . 5 8 - 0 . 7 2 ( m , 2 H ) , 0 . 3 7 ( d , J = 4 . 8 H z , 2 H ) .
E25: L C M S : 3 5 8 [ M H ] . t R = 1 . 0 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1H NMR (400MHz, CLOROFORMO-d) 5: 7.91 (s, 1H), 7.86 (br. s., 1H), 4.29 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 4.15 (m, 1H), 3.98 (s, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.27 - 1.45 (m, 1H), 1.20 (s, 6H), 0.59 - 0.75 (m, 2H), 0.39 (q, J = 4.8 Hz, 2H).
Ejemplo 26 y 27
4-etox¡-W-(1-(2-fluoroet¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E26)
4-etox¡-W-(1-(2-fluoroet¡l)-3-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E27)
Figure imgf000143_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 2 0 0 m g , 1 . 0 1 2 m m o l ) , u n a m e z c l a d e 1 -( 2 - f l u o r o e t i l ) - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 3 2 ) y 1 -( 2 - f l u o r o e t i l ) - 3 - m e t i l -1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 3 3 ) ( 2 0 0 m g , 0 . 8 3 8 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 4 6 . 3 m g , 0 . 0 5 1 m m o l ) , ( 9 , 9 -d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s -( d i f e n i l f o s f i n o ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 2 8 0 m g , 2 . 0 2 4 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 0 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 0 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L u e g o , s e a g r e g ó a g u a ( 1 0 0 m L ) y l a f a s e a c u o s a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o ( 3 x 5 0 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e l a v ó c o n s a l m u e r a ( 2 0 m L ) , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 1 : 3 ) y s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e B i o t a g e ( N H 4 O H 2 M e n M e t a n o l ; c o l u m n a B i o t a g e 4 0 M ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E26 ( 3 5 m g , 0 . 1 1 5 m m o l , 1 1 . 3 6 % d e r e n d i m i e n t o ) y E27 ( 1 0 0 m g , 0 . 3 2 9 m m o l , 3 2 . 5 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E26: L C M S : 3 0 5 [ M H ] . tR = 1 . 2 6 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 7 0 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 0 ( s , 1 H ) , 6 . 4 4 - 6 . 5 8 ( m , 1 H ) , 6 . 2 8 - 6 . 4 0 ( m , 1 H ) , 6 . 0 9 ( s , 1 H ) , 4 . 7 6 ( t , J = 4 . 9 H z , 1 H ) , 4 . 6 4 ( t , J = 4 . 9 H z , 1 H ) , 4 . 4 9 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 2 6 - 4 . 3 4 ( m , 1 H ) , 4 . 1 4 - 4 . 2 5 ( m , 1 H ) , 2 . 1 8 - 2 . 2 8 ( m , 3 H ) , 1 . 6 9 ( s , 3 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
E27: L C M S : 3 0 5 [ M H ] . t R = 1 . 2 7 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 9 8 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 4 ( s , 1 H ) , 6 . 6 4 - 6 . 7 3 ( m , 1 H ) , 6 . 4 0 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( s , 1 H ) , 4 . 7 8 ( t , J = 4 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 6 6 ( t , J = 4 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 5 2 ( q , J = 7 . 1 H z , 2 H ) , 4 . 3 4 ( t , J = 4 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 2 8 ( t , J = 4 . 8 H z , 1 H ) , 2 . 2 2 - 2 . 3 2 ( m , 3 H ) , 1 . 4 6 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 28
W-(5-cloro-1-(oxetan-3-¡l-met¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E28)
Figure imgf000143_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 2 0 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) , 5 - c l o r o - 1 -( o x e t a n - 3 - i l - m e t i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 3 4 ) ( 1 2 5 m g , 0 . 6 6 8 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 5 . 6 m g , 0 . 0 6 1 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 5 2 . 7 m g , 0 . 0 9 1 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o e n 2 - b u t a n o l ( 1 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 3 0 ° C d u r a n t e 9 0 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d i v i d i ó e n t r e a c e t a t o d e e t i l o ( 2 5 m L ) y a g u a ( 2 5 m L ) . S e l a v ó l a f a s e o r g á n i c a c o n a g u a , N a H C O 3 s a t u r a d y s a l m u e r a , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E28 ( 5 0 m g , 0 . 1 4 3 m m o l , 2 3 , 6 1 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 3 4 9 [ M H ] . t R = 1 . 1 7 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 9 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 1 6 ( s , 1 H ) , 7 . 7 7 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 3 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( d d , J = 3 . 4 , 1 . 9 H z , 1 H ) , 4 . 6 6 ( d d , J = 7 . 5 , 6 . 3 H z , 2 H ) , 4 . 3 1 - 4 . 5 2 ( m , 6 H ) , 3 . 3 8 - 3 . 4 9 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 29
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(oxetan-3-¡l-met¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E29)
Figure imgf000144_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 2 0 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) , 5 - m e t i l - 1 -( o x e t a n - 3 - i l m e t i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 3 6 ) ( 1 1 2 m g , 0 . 6 6 8 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 5 . 6 m g , 0 . 0 6 1 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 5 2 . 7 m g , 0 . 0 9 1 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o e n 2 - b u t a n o l ( 1 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 3 0 ° C d u r a n t e 9 0 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d i v i d i ó e n t r e a c e t a t o d e e t i l o ( 2 5 m L ) y a g u a ( 2 5 m L ) . S e l a v ó l a f a s e o r g á n i c a c o n a g u a , N a H C O 3 s a t u r a d y s a l m u e r a , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E29 ( 6 6 m g , 0 . 2 0 1 m m o l , 3 3 , 1 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 3 2 9 [ M H ] . tR = 1 . 4 4 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 9 ( s , 1 H ) , 7 . 5 5 ( s , 1 H ) , 6 . 8 3 - 6 . 8 7 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 6 5 ( d d , J = 7 . 8 , 6 . 3 H z , 2 H ) , 4 . 3 8 - 4 . 4 7 ( m , 4 H ) , 4 . 2 4 - 4 . 3 3 ( m , 2 H ) , 3 . 3 6 - 3 . 4 5 ( m , 1 H ) , 2 . 1 4 - 2 . 2 1 ( m , 3 H ) , 1 . 3 5 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 30-31-32-33
Enant¡ómero 1: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H- p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E30)
Enant¡ómero 2: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H- p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E31)
Enant¡ómero 1: 4-etox¡-W-(3-met¡l-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H- p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E32)
Enant¡ómero 2: 4-etox¡-W-(3-met¡l-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H- p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E33)
Figure imgf000144_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 2 6 m g , 0 . 6 3 8 m m o l ) , u n a m e z c l a d e ( ± ) - 5 - m e t i l - 1 -( t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 3 9 ) y ( ± ) - 3 -m e t i l - 1 -( t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 4 0 ) ( 1 3 9 m g , 0 . 7 6 5 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 5 . 6 m g , 0 . 0 6 1 m m o l ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 2 6 4 m g , 1 . 9 1 3 m m o l ) y ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 -d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n a ) ( 3 0 . 4 m g , 0 . 0 6 4 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 4 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . D e s p u é s d e l a f i l t r a c i ó n , e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ; C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; T e m p e r a t u r a d e l a c o l u m n a 3 9 , 8 ; C O 2 V e l o c i d a d d e f l u j o 2 . 1 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e 0 . 9 ; % d e C o s o l v e n t e 3 0 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 2 0 ; F l u j o t o t a l 3 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E30 ( 2 1 m g , 0 . 0 6 1 m m o l , 9 . 6 2 % d e r e n d i m i e n t o ) y E31 ( 2 1 m g , 0 . 0 6 1 m m o l , 9 . 6 2 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s , E32 ( 1 3 m g , 0 . 0 3 8 m m o l , 5 . 9 5 % d e r e n d i m i e n t o ) y E33 ( 1 9 m g , 0 . 0 5 5 m m o l , 8 . 7 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s a m a r i l l o s .
E30: L C M S : 3 4 3 [ M H ] . t R = 1 . 3 2 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 3 . 5 3 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 6 . 7 8 - 6 . 9 3 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d d , J = 3.3 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 3 7 - 4 . 5 1 ( m , 2 H ) , 4 . 0 9 - 4 . 2 6 ( m , 1 H ) , 3 . 8 7 ( d d , J = 1 0 . 8 , 2 . 3 H z , 2 H ) , 3 . 4 6 - 3 . 6 1 ( m , 1 H ) , 3 . 3 3 - 3 . 3 8 ( m , 1 H ) , 2 . 2 0 ( s , 3 H ) , 1 . 9 2 - 2 . 1 6 ( m , 2 H ) , 1 . 6 3 - 1 . 8 2 ( m , 2 H ) , 1 . 3 0 - 1 . 4 4 ( m , 3 H ) .
E31: L C M S : 3 4 3 [ M H ] . tR = 1 . 3 3 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 4 . 1 5 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 1 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 4 . 0 5 - 4 . 2 9 ( m , 1 H ) , 3 . 8 7 ( d , J = 1 0 . 3 H z , 2 H ) , 3 . 5 4 ( t , J = 1 0 . 5 H z , 1 H ) , 3 . 4 1 ( m , 1 H ) , 2 . 2 0 ( s , 3 H ) , 1 . 9 4 - 2 . 1 4 ( m , 2 H ) , 1 . 6 5 - 1 . 8 3 ( m , 2 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
E32: L C M S : 3 4 3 [ M H ] . t R = 1 . 3 3 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 6 9 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 6 ( s , 1 H ) , 7 . 9 5 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 - 6 . 9 5 ( m , 1 H ) , 6 . 2 2 ( d , J = 1 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 8 - 4 . 2 3 ( m , 1 H ) , 3 . 9 5 ( d d , J = 1 0 . 7 , 3 . 1 H z , 1 H ) , 3 . 6 9 - 3 . 8 5 ( m , 1 H ) , 3 . 5 5 ( t , J = 1 0 . 0 H z , 1 H ) , 3 . 4 0 - 3 . 4 4 ( m , 1 H ) , 1 . 9 1 - 2 . 2 2 ( m , 5 H ) , 1 . 5 5 - 1 . 8 2 ( m , 2 H ) , 1 . 3 7 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
E33: L C M S : 3 4 3 [ M H ] . t R = 1 . 3 3 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 7 . 6 4 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 6 ( s , 1 H ) , 7 . 9 5 ( s , 1 H ) , 6 . 7 7 - 6 . 9 5 ( m , 1 H ) , 6 . 2 2 ( d , J = 1 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 7 - 4 . 2 1 ( m , 1 H ) , 3 . 9 5 ( d d , J = 1 0 . 7 , 3 . 1 H z , 1 H ) , 3 . 7 1 - 3 . 8 5 ( m , 1 H ) , 3 . 5 5 ( t , J = 1 0 . 0 H z , 1 H ) , 3 . 4 0 - 3 . 4 5 ( m , 1 H ) , 1 . 9 4 - 2 . 1 9 ( m , 5 H ) , 1 . 5 7 - 1 . 8 0 ( m , 2 H ) , 1 . 3 7 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 34
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(oxetan-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E34)
Figure imgf000145_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 2 0 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) , 5 - m e t i l - 1 -( o x e t a n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 1 0 2 m g , 0 . 6 6 8 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 5 . 6 m g , 0 . 0 6 1 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 -d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 5 2 . 7 m g , 0 . 0 9 1 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 2 5 2 m g , 1 . 8 2 2 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 3 0 ° C d u r a n t e 9 0 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d i v i d i ó e n t r e a c e t a t o d e e t i l o ( 2 5 m L ) y a g u a ( 2 5 m L ) . S e l a v ó l a f a s e o r g á n i c a c o n a g u a , N a H C O 3 s a t u r a d y s a l m u e r a , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E34 ( 6 0 m g , 0 . 1 9 1 m m o l , 3 1 , 4 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 1 5 [ M H ] . t R = 1 . 4 4 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 8 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 7 ( s , 1 H ) , 7 . 7 5 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 - 6 . 9 2 ( m , 1 H ) , 6 . 2 1 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 5 . 3 7 - 5 . 6 2 ( m , 1 H ) , 4 . 9 2 - 4 . 9 9 ( m , 2 H ) , 4 . 8 4 - 4 . 9 1 ( m , 2 H ) , 4 . 4 5 ( q , J = 7 . 1 H z , 2 H ) , 2 . 1 3 ( s , 3 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 35
W-(5-cloro-1-(oxetan-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E35)
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 2 0 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) , 5 - c l o r o - 1 -( o x e t a n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 1 1 6 m g , 0 . 6 6 8 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 5 . 6 m g , 0 . 0 6 1 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 -d i i l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n o ) ( 5 2 . 7 m g , 0 . 0 9 1 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 2 5 2 m g , 1 . 8 2 2 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 3 0 ° C d u r a n t e 9 0 m i n . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d i v i d i ó e n t r e a c e t a t o d e e t i l o ( 2 5 m L ) y a g u a ( 2 5 m L ) . S e l a v ó l a f a s e o r g á n i c a c o n a g u a , N a H C O 3 s a t u r a d y s a l m u e r a , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E35 ( 4 0 m g , 0 . 1 1 9 m m o l , 1 9 , 6 8 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 3 5 [ M H ] . tR = 1 . 1 2 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 3 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 2 4 ( s , 1 H ) , 7 . 9 7 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 - 7 . 0 6 ( m , 1 H ) , 6 . 2 4 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 5 . 6 4 ( q , J = 6 . 9 H z , 1 H ) , 4 . 9 0 - 4 . 9 8 ( m , 4 H ) , 4 . 4 5 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) .
Ejemplo 36
(±)-2-(5-cloro-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-il)am¡no)-1 H-pirazol-1-il)c¡clopentanol (E36)
Figure imgf000146_0001
U n a s o l u c i ó n d e ( ± ) - f r a n s - 2 -( 5 - c l o r o - 4 -( ( 4 - e t o x i - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - c / ] - p i r i m i d i n - 2 - i l ) a m i n o ) - 1 H - p i r a z o l - 1 -i l ) c i c l o p e n t a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 4 6 ) ( 3 5 0 m g , 0 . 6 7 7 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 1 , 0 1 5 m L , 2 . 0 3 1 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n i s o p r o p a n o l ( 5 m L ) s e a g i t ó a 6 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e e v a p o r ó y s e a g r e g ó H C l 2 N h a s t a p H = 7 . E l p r o d u c t o s e e x t r a j o c o n E t O A c . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó c o n M g S O 4 y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E36 ( 2 0 0 m g , 0 . 5 5 1 m m o l , 8 1 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 6 3 [ M H ] . t R = 1 . 5 4 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - c 4 ) : 5 7 . 9 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 6 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 3 2 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 5 8 - 4 . 6 8 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 - 4 . 5 6 ( m , 3 H ) , 2 . 0 0 - 2 . 2 8 ( m , 3 H ) , 1 . 8 4 - 1 . 9 7 ( m , 2 H ) , 1 . 6 4 - 1 . 7 7 ( m , 1 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 37 y 38
Enantiómero 1: frans-2-(5-cloro-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡rim¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H- pirazol-1-il)-c¡clopentanol (E37)
Enantiómero 2: frans-2-(5-cloro-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-il)am¡no)-1H- pirazol-1-¡l)c¡clopentanol (E38)
Figure imgf000146_0002
E37 : L C M S : 3 6 3 [ M H ] . t R = 1 . 5 6 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 2 1 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - c 4 ) : 5 7 . 9 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 3 2 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 5 9 - 4 . 6 7 ( m , 1 H ) , 4 . 4 5 - 4 . 5 5 ( m , 3 H ) , 2 . 0 2 - 2 . 2 9 ( m , 3 H ) , 1 . 8 3 - 1 . 9 8 ( m , 2 H ) , 1 . 6 5 - 1 . 7 7 ( m , 1 H ) , 1 . 4 4 ( t , 3 H ) .
E38 : L C M S : 3 6 3 [ M H ] . Xr = 1 . 3 4 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : Xr = 6 . 2 8 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - c 4 ) : 5 7 . 9 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 3 2 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 5 9 - 4 . 6 9 ( m , 1 H ) , 4 . 4 2 - 4 . 5 6 ( m , 3 H ) , 2 . 0 0 - 2 . 2 9 ( m , 3 H ) , 1 . 8 3 - 1 . 9 9 ( m , 2 H ) , 1 . 6 3 - 1 . 7 7 ( m , 1 H ) , 1 . 4 4 (X, 3 H ) .
Ejemplo 39
-(±)-2-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H-p¡razol-1-¡l)c¡clopentanol (E39)
Figure imgf000147_0001
U n a s o l u c i ó n d e ( ± ) - f r a n s - 2 -( 4 -( ( 4 - e X o x i - 7 - X o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - a ( ] - p i r i m i d i n - 2 - i l ) a m i n o ) - 5 - m e X i l - 1 H - p i r a z o l - 1 -y l ) c i c l o p e n t a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 4 7 ) ( 2 5 0 m g , 0 . 5 0 3 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 0 , 7 5 5 m L , 1 . 5 1 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n i s o p r o p a n o l ( 5 m L ) s e a g i t ó a 6 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e a g r e g ó H C l 2 N h a s t a p H = 7 . E l p r o d u c t o s e e x t r a j o c o n E t O A c d o s v e c e s . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E39 ( 1 2 0 m g , 0 . 3 4 3 m m o l , 6 8 , 2 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 4 3 [ M H ] . Xr = 1 . 2 5 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 2 0 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 8 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 5 8 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 1 1 - 6 . 2 5 ( m , 1 H ) , 4 . 9 8 ( d , J = 5 . 4 H z , 1 H ) , 4 . 4 5 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 4 . 2 7 - 4 . 3 5 ( m , 1 H ) , 4 . 1 5 - 4 . 2 5 ( m , 1 H ) , 2 . 2 0 ( s , 3 H ) , 1 . 9 0 - 2 . 1 3 ( m , 3 H ) , 1 . 7 0 - 1 . 8 3 ( m , 2 H ) , 1 . 5 0 - 1 . 6 2 ( m , 1 H ) , 1 . 3 6 (X, 3 H ) .
Ejemplo 40 y 41
Enant¡ómero 1: frans-2-(4-((4-ethox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H- p¡razol-1 -¡l)-c¡clopentanol (E40)
Enant¡ómero 2: frans-2-(4-((4-ethox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1 H- p¡razol-1 -¡l)-c¡clopentanol (E41)
Figure imgf000147_0002
E40 : L C M S : 3 4 3 [ M H ] . Xr = 1 . 4 8 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : Xr = 2 . 8 2 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó . 1
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 8 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 6 ( s , 1 H ) , 7 . 5 6 ( s , 1 H ) , 6 . 7 6 - 6 . 8 9 ( m , 1 H ) , 6 . 1 9 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 9 6 ( d , J = 5 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 2 4 - 4 . 3 4 ( m , 1 H ) , 4 . 1 9 ( m , J = 5 . 8 H z , 1 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 8 8 - 2 . 1 2 ( m , 3 H ) , 1 . 7 0 - 1 . 8 0 ( m , 2 H ) , 1 . 5 0 - 1 . 6 1 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , 3 H ) .
E41 : L C M S : 3 4 3 [ M H ] . Xr = 1 . 4 8 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : Xr = 4 . 0 6 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 2 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 3 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 5 6 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 2 . 3 H z , 1 H ) , 6 . 1 8 - 6 . 2 3 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 2 5 - 4 . 3 5 ( m , 1 H ) , 4 . 1 9 ( q , J = 6 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 8 8 - 2 . 1 3 ( m , 3 H ) , 1 . 7 0 -1 . 8 1 ( m , 2 H ) , 1 . 5 0 - 1 . 6 2 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 42 y 43
Enantiómero 1: cis-4-etoxi-W-(5-metil-1-((2S, 4S)-2-metil-tetrahidro-2H-p¡ran-4-¡l)-1HL pirazol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-pyirimidin-2-amina (E42)
Enantiómero 2: cis-4-etoxi-W-(5-metil-1-((2S, 4S)-2-metil-tetrahidro-2H-piran-4-il)-1H- pirazol-4-il)-7H-pirrolo-[2,3-d]-pyirimidin-2-amina (E43)
Figure imgf000148_0001
U n a s o l u c i ó n d e ( ± ) - 4 - e t o x ¡ - W -( 5 - m e t ¡ l - 1 -( 2 - m e t ¡ l - t e t r a h ¡ d r o - 2 H - p ¡ r a n - 4 - ¡ l ) - 1 H - p ¡ r a z o l - 4 - ¡ l ) - 7 - t o s ¡ l - 7 H - p ¡ r r o l o [ 2 , 3 -d ] p ¡ r ¡ m i d ¡ n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 5 1 ) ( 3 0 0 m g , 0 . 5 8 8 m m o l ) e h ¡ d r ó x ¡ d o d e s o d ¡ o ( 0 , 5 8 8 m L , 1 . 1 7 5 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n T H F ( 2 m L ) y m e t a n o l ( 0 , 5 0 0 m L ) s e a g i t ó a 5 0 ° C d u r a n t e 3 h o r a s . D e s p u é s d e e n f r ¡ a r l a , l a m e z c l a d e r e a c c ¡ ó n s e v e r t ¡ ó e n a g u a ( 5 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 4 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n ¡ c a c o m b ¡ n a d a s e s e c ó y s e e v a p o r ó a l v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r ¡ f ¡ c ó m e d ¡ a n t e H P L C p r e p a r a t ¡ v a p a r a p r o p o r c ¡ o n a r e l p r o d u c t o ( 1 5 0 m g , 0 . 3 9 1 m m o l , 6 6 .6 % d e r e n d ¡ m ¡ e n t o ) , q u e s e p u r i f i c ó a d ¡ c ¡ o n a l m e n t e m e d ¡ a n t e H P L C q u ¡ r a l ( C o l u m n a A Y - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; F a s e m ó v ¡ l : n - H e x a n o ( D e a a l 0.1 % ) : E t O H ( D E A a l 0.1 % ) = 8 5 : 1 5 ) p a r a p r o p o r c ¡ o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E42 ( 4 4 m g , 0 . 1 2 3 m m o l , 2 9 . 3 % d e r e n d ¡ m ¡ e n t o ) y E43 ( 5 0 m g , 0 . 1 4 0 m m o l , 3 3 . 3 % d e r e n d ¡ m ¡ e n t o ) c o m o s ó l ¡ d o s b l a n c o s .
E42 : L C M S : 3 5 7 [ M H ] . tR = 1 . 2 1 m ¡ n . ( L C M S c o n d ¡ c ¡ ó n 2 )
H P L C q u ¡ r a l : t R = 6 . 6 1 m ¡ n . ( C o n d ¡ c ¡ ó n : C o l u m n a A Y - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 9 9 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 6 ( s , 1 H ) , 6 . 4 2 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 0 ( d , J = 2 . 2 H z , 1 H ) , 6 . 1 0 ( s , 1 H ) , 4 . 4 9 ( q , J = 7 . 3 H z , 2 H ) , 4 . 4 3 ( t , J = 4 . 3 H z , 1 H ) , 4 . 2 1 ( t , J = 6 . 1 H z , 1 H ) , 4 . 0 7 - 4 . 1 6 ( m , 1 H ) , 3 . 8 1 ( d t , J = 1 1 . 4 , 4 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 2 2 ( s , 3 H ) , 1 . 9 5 - 2 . 0 5 ( m , 2 H ) , 1 . 8 5 - 1 . 9 5 ( m , 1 H ) , 1 . 6 4 - 1 . 7 5 ( m , 3 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 1 H z , 3 H ) , 1 . 1 6 ( d , 3 H ) .
E43 : L C M S : 3 5 7 [ M H ] . t R = 1 . 2 1 m ¡ n . ( L C M S c o n d ¡ c ¡ ó n 2 )
H P L C q u ¡ r a l : t R = 7 . 9 9 m ¡ n . ( C o n d ¡ c ¡ ó n : C o l u m n a A Y - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó . 1
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 6 6 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 8 ( s , 1 H ) , 6 . 4 9 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 2 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 0 8 ( s , 1 H ) , 4 .41 - 4 .5 4 ( m , 3 H ) , 4 . 1 8 - 4 . 2 8 ( m , 1 H ) , 4 . 1 3 ( t d , J = 1 1 . 0 , 2 . 7 H z , 1 H ) , 3 . 8 2 ( d t , J = 1 1 . 5 , 4 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 2 2 ( s , 3 H ) , 1 . 9 7 - 2 . 0 7 ( m , 2 H ) , 1 . 8 7 - 1 . 9 7 ( m , 1 H ) , 1 . 7 1 ( d d d , J = 1 4 . 0 , 9 . 2 , 4 . 9 H z , 3 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 1 H z , 3 H ) , 1 . 1 7 ( d , 3 H ) .
Ejemplo 44
W-(5-ciclopropil-1-(tetrahidro-2H-piran-4-yl)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo-[2,3-d]pirimidin-2-amina (E44)
Figure imgf000148_0002
U n a s o l u c ¡ ó n d e W -( 5 - c ¡ c l o p r o p ¡ l - 1 -( t e t r a h ¡ d r o - 2 H - p ¡ r a n - 4 - ¡ l ) - 1 H - p ¡ r a z o l - 4 - ¡ l ) - 4 - e t o x ¡ - 7 - t o s ¡ l - 7 H - p ¡ r r o l o - [ 2 , 3 - d ] - p ¡ r ¡ m ¡ d ¡ n -2 - a m ¡ n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 5 4 )
( 4 0 m g , 0 . 0 7 7 m m o l ) e h ¡ d r ó x ¡ d o d e s o d ¡ o ( 1 m L , 2 . 0 0 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n m e t a n o l ( 3 m L ) s e a g i t ó a 2 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t ¡ l o . L a c a p a o r g á n ¡ c a s e s e c ó c o n N a 2 S O 4 y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r ¡ f ¡ c ó m e d ¡ a n t e H P L C p r e p a r a t ¡ v a p a r a p r o p o r c ¡ o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E44 ( 1 0 m g , 0 . 0 2 7 m m o l , 3 5 , 5 % d e r e n d ¡ m ¡ e n t o ) c o m o u n s ó l ¡ d o b l a n c o .
L C M S : 3 6 9 [ M H ] . Xr = 1. 6 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 2 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 7 . 4 8 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 1 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 6 1 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 4 3 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 3 . 9 2 - 4 . 0 6 ( m , 2 H ) , 3 . 5 0 (X, J = 1 1 . 8 H z , 2 H ) , 1 . 9 9 - 2 . 1 8 ( m , 2 H ) , 1 . 6 1 - 1 . 8 8 ( m , 3 H ) , 1 . 3 5 (X, J = 6 . 9 H z , 3 H ) , 0 . 8 5 ( m , 2 H ) , 0 . 6 8 ( m , 2 H ) .
Ejemplo 45
4-etox¡-W-(5-meth¡l-1-(2-morfol¡noet¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E45)
Figure imgf000149_0001
U n a s o l u c i ó n d e 4 - e X o x i - W -( 5 - m e X i l - 1 -( 2 - m o r f o l i n o e X i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 7 - X o s i l - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - a ( ] p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 5 7 ) ( 7 0 m g , 0 . 1 3 3 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 0 . 2 0 0 m L , 0 . 4 0 0 m m o l ) e n i s o p r o p a n o l ( 2 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 6 0 ° C . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e a g r e g ó H C l 2 N h a s t a p H = 7 . L u e g o , l a m e z c l a s e e x t r a j o c o n E t O A c d o s v e c e s . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E45 ( 2 5 m g , 0 . 0 6 5 m m o l , 4 9 , 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 7 2 [ M H ] . Xr = 1 . 2 2 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 8 ( s , 1 H ) , 7 . 5 5 ( s , 1 H ) , 6 . 6 6 - 6 . 9 4 ( m , 1 H ) , 6 . 1 9 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 4 2 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 9 (X, J = 6 . 7 H z , 2 H ) , 3 . 5 5 (X, J = 4 . 5 H z , 4 H ) , 2 . 5 6 - 2 . 7 3 ( m , 2 H ) , 2 . 4 1 ( b r . s . , 4 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 3 4 (X, J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 46
4-etox¡-2-((5-met¡l-1-(tetrah¡dro-2H-p¡ran-4-¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-am¡no)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-5-carbon¡tr¡lo (E46)
Figure imgf000149_0002
L C M S : 3 6 8 [ M H ] . Xr = 2 . 6 3 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 2 . 1 5 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 3 3 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 8 ( s , 1 H ) , 7 . 5 1 ( s , 1 H ) , 4 . 4 1 ( q , J = 6 . 7 H z , 2 H ) , 4 . 2 7 (XX, J = 1 1 . 2 , 4 . 0 H z , 1 H ) , 3 . 8 9 ( d d , J = 1 1 . 0 , 3 . 9 H z , 2 H ) , 3 . 4 1 (X, J = 1 1 . 2 H z , 2 H ) , 2 . 1 3 ( s , 3 H ) , 1 . 8 8 - 1 . 9 9 ( m , 2 H ) , 1 . 6 2 - 1 . 7 5 ( m , 2 H ) , 1 . 3 0 (X, J = 6 . 7 H z , 3 H ) .
Ejemplo 47 y 48
4-etox¡-2-((1-(2-metox¡et¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-am¡no)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-5-carbon¡tr¡lo (E47) 4-etox¡-2-((1-(2-metox¡et¡l)-3-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-am¡no)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-5-carbon¡tr¡lo (E48)
Figure imgf000150_0001
E47 : L C M S : 3 4 2 [ M H ] . tR = 1 . 5 5 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - a 4 ) : 5 7 . 6 6 ( s , 1 H ) , 7 . 5 6 ( s , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 2 3 ( t , J = 5 . 3 H z , 2 H ) , 3 . 7 1 ( t , J = 5 . 3 H z , 2 H ) , 2 . 2 5 ( s , 3 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
E48 : L C M S : 3 4 2 [ M H ] . t R = 1 . 4 3 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 2 . 2 7 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 4 6 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 8 7 ( d , J = 2 . 3 H z , 1 H ) , 7 . 8 2 ( s , 1 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 1 3 ( t , J = 5 . 3 H z , 2 H ) , 3 . 6 5 ( t , J = 5 . 3 H z , 2 H ) , 3 . 2 4 ( s , 3 H ) , 2 . 1 0 ( s , 3 H ) , 1 . 3 8 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 49
(S)-4-etox¡-2-((5-met¡l-1-(1-met¡l-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-am¡no)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-5-carbon¡tr¡lo (E49)
Figure imgf000150_0002
L C M S : 3 6 7 [ M H ] . t R = 2 . 0 6 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 2 . 1 6 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 3 4 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 8 ( s , 1 H ) , 7 . 4 9 ( s , 1 H ) , 4 . 6 9 - 4 . 8 4 ( m , 1 H ) , 4 . 4 1 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 2 . 9 4 ( t , J = 8 . 3 H z , 1 H ) , 2 . 5 9 - 2 . 7 0 ( m , 1 H ) , 2 . 4 7 - 2 . 5 7 ( m , 2 H ) , 2 . 2 2 ( s , 3 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 2 1 ( m , 2 H ) , 2 . 1 1 ( s , 3 H ) , 1 . 3 0 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 50
4-etox¡-2-((1-(2-fluoroet¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-am¡no)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-5-carbon¡tr¡lo (E50)
Figure imgf000151_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o - [ 2 , 3 - a d p i r i m i d i n - 5 - c a r b o n i t r i l o ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 2 7 ) ( 2 2 0 m g , 0 . 9 8 8 m m o l ) , 1 -( 2 - f l u o r o e t i l ) - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 1 7 0 m g , 1 . 1 8 6 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 4 1 0 m g , 2 . 9 6 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 4 5 . 2 m g , 0 . 0 4 9 m m o l ) y d i c i c l o h e x i l ( 2 ’ , 4 ’ , 6 ’ - t r i i s o p r o p i l -[ 1 , 1 ’ - b i f e n i l ] - 2 - y l ) f o s f i n a ( 4 7 . 1 m g , 0 . 0 9 9 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 8 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 0 0 ° C d u r a n t e 4 0 m i n . D e s p u é s d e l a f i l t r a c i ó n , e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P ( f a s e m ó v i l d e r e f e r e n c i a ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o E50 ( 1 7 m g , 0 . 0 5 2 m m o l , 5 . 2 2 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 3 0 [ M H ] . tR = 1 1 . 8 5 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 2 . 1 8 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 3 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 8 ( s , 1 H ) , 7 . 5 2 ( s , 1 H ) , 4 . 7 3 ( t , J = 4 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 6 1 ( t , J = 4 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 4 1 ( q , J = 6 . 7 H z , 2 H ) , 4 . 3 0 ( t , J = 4 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 2 3 ( t , J = 4 . 6 H z , 1 H ) , 2 . 1 0 ( s , 3 H ) , 1 . 3 0 ( t , 3 H ) . Ejemplo 51
(fí)-4-etox¡-2-((5-met¡l-1-(1-met¡l-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-am¡no)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-5-carbon¡tr¡lo (E51)
Figure imgf000151_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - d | p i r i m i d i n - 5 - c a r b o n i t r i l o ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 2 7 ) ( 1 0 0 m g , 0 . 4 4 9 m m o l ) , ( ' R ) - 5 - m e t i l - 1 -( 1 - m e t i l p i r r o l i d i n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 9 7 m g , 0 . 5 3 9 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 1 8 6 m g , 1 . 3 4 8 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) a ( 2 0 . 5 7 m g , 0 . 0 2 2 m m o l ) y d i c i c l o h e x i l ( 2 ’ , 4 ’ , 6 ’ - t r i i s o p r o p i l -[ 1 , 1 ’ - b i f e n i l ] - 2 - y l ) f o s f i n a ( 2 1 . 4 1 m g , 0 . 0 4 5 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 8 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s h a s t a 1 2 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . D e s p u é s d e l a f i l t r a c i ó n , e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P ( f a s e m ó v i l d e r e f e r e n c i a ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o E51 ( 2 6 m g , 0 . 0 7 1 m m o l , 1 5 . 8 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 6 7 [ M H ] . t R = 2 . 1 8 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 2 . 1 6 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 3 4 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 8 ( s , 1 H ) , 7 . 4 9 ( s , 1 H ) , 4 . 7 0 - 4 . 8 8 ( m , 1 H ) , 4 . 2 4 - 4 . 5 1 ( m , 2 H ) , 2 . 9 4 ( t , J = 8 . 3 H z , 1 H ) , 2 . 6 4 ( t d , J = 7 . 9 , 5 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 4 7 - 2 . 5 8 ( m , 2 H ) , 2 . 2 2 ( s , 3 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 2 0 ( m , 2 H ) , 2 . 1 1 ( s , 3 H ) , 1 . 3 0 ( t , 3 H ) .
Ejemplo 52
3-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]-p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-am¡no)-5-met¡l-1H-p¡razol-1-¡l)c¡clo-butanol (E52)
Figure imgf000151_0003
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 9 0 m g , 0 . 4 5 5 m m o l ) , 3 -( 4 - a m i n o - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) c i c l o b u t a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 6 2 ) ( 91 m g , 0 . 5 4 6 m m o l ) , ( 9 , 9 - d i m e t i l -9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d i y l ) b i s ( d i f e n i l f o s f i n a ) ( 2 1 . 7 1 m g , 0 . 0 4 6 m m o l ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 1 8 9 m g , 1 . 3 6 6 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 0 . 8 5 m g , 0 . 0 2 3 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s h a s t a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E52 ( 3 5 m g , 0 . 1 0 6 m m o l , 2 3 . 1 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 2 9 [ M H ] . t R = 1 . 1 8 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 9 ( s , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 6 . 7 3 - 6 . 9 5 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 5 . 1 5 ( d , J = 5 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 7 7 - 4 . 9 7 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 6 . 9 H z , 3 H ) , 2 . 5 7 - 2 . 7 2 ( m , 2 H ) , 2 . 3 1 ( d d d , J = 1 2 . 4 , 8 . 3 , 3 . 9 H z , 2 H ) , 2 . 1 2 ( s , 3 H ) , 1 . 2 9 - 1 . 4 1 ( m , 3 H ) .
Ejemplo 53
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-(oxetan-3-¡l)-p¡per¡d¡n-4-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]- pirimidin-2-amina (E53)
Figure imgf000152_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x ¡ - 7 H - p ¡ r r o l o [ 2 , 3 - d ] p ¡ r i m ¡ d ¡ n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 5 m g , 0 . 0 7 6 m m o l ) , 5 -m e t ¡ l - 1 -( 1 -( o x e t a n - 3 - ¡ l ) p ¡ p e r i d ¡ n - 4 - ¡ l ) - 1 H - p ¡ r a z o l - 4 - a m i n a ( 2 1 . 5 2 m g , 0 . 0 9 1 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , ( 9 , 9 - d ¡ m e t ¡ l - 9 H - x a n t e n o - 4 , 5 - d ¡ i l ) b ¡ s ( d ¡ f e n ¡ l f o s f ¡ n a ) ( 3 . 6 2 m g , p m o l ) , c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 3 1 . 5 m g , 0 . 2 2 8 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 . 4 8 m g , 3 . 8 0 p m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s h a s t a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E53 ( 4 m g , 1 0 . 0 6 p m o l , 1 3 . 2 6 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 8 [ M H ] . tR = 1 . 2 4 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 8 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 8 ( s , 1 H ) , 7 . 5 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 1 - 6 . 8 7 ( m , 1 H ) , 6 . 1 6 - 6 . 2 2 ( m , 1 H ) , 4 . 5 2 - 4 . 5 9 ( m , 2 H ) , 4 . 3 7 - 4 . 4 9 ( m , 4 H ) , 4 . 0 0 - 4 . 1 5 ( m , 1 H ) , 3 . 4 0 - 3 . 4 6 ( m , 1 H ) , 2 . 8 1 ( d , J = 1 0 . 8 H z , 2 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 9 1 - 2 . 0 6 ( m , 4 H ) , 1 . 8 0 ( d , J = 1 1 . 0 H z , 2 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 54
c/s-4-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H-pirazol-1-¡l)-c¡clohexanol (E54)
Figure imgf000152_0002
U n a s o l u c i ó n d e ( ± ) - 4 -( 4 -( ( 4 - e t o x ¡ - 7 - t o s ¡ l - 7 H - p ¡ r r o l o - [ 2 , 3 - d ] p ¡ r ¡ m ¡ d ¡ n - 2 - ¡ l ) a m ¡ n o ) - 5 - m e t ¡ l - 1 H - p ¡ r a z o l - 1 - ¡ l ) c ¡ c l o h e x a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 6 5 ) ( 1 0 0 m g , 0 . 1 9 6 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 0 , 1 9 6 m L , 0 . 3 9 2 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n T H F ( 5 m L ) y m e t a n o l ( 1 , 2 5 0 m L ) s e a g i t ó a 2 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . D e s p u é s d e e n f r i a r l a , l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e v e r t i ó e n a g u a ( 5 0 m L ) y s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 4 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó e n M g S O 4 y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E54 ( 4 m g , 0 . 0 1 1 m m o l , 8 , 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 5 7 [ M H ] . t R = 1 . 4 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 8 . 6 6 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 0 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 8 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 0 5 ( s , 1 H ) , 4 . 4 9 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 1 0 ( b r . s . , 1 H ) , 3 . 9 0 - 4 . 0 6 ( m , 1 H ) , 2 . 2 9 - 2 . 5 1 ( m , 2 H ) , 2 . 2 3 ( s , 3 H ) , 1 . 9 1 - 2 . 0 7 ( m , 2 H ) , 1 . 6 5 - 1 . 8 1 ( m , 4 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 55 y 56
Enantiómero 1: cis-3-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1 W- pirazol-1-il)ciclopentanol (E55)
Enantiómero 2: cis-3-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1 H- pirazol-1-il)ciclopentanol (E56)
Figure imgf000153_0001
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 2 3 0 m g , 1 . 1 6 4 m m o l ) , ( ± ) - c / ' s - 3 -( 4 - a m i n o - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 1 - y l ) c i c l o p e n t a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 7 0 ) ( 2 6 0 m g , 1 . 4 3 5 m m o l ) , x a n t p h o s ( 1 0 1 m g , 0 . 1 7 5 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 3 . 3 m g , 0 . 0 5 8 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 3 2 2 m g , 2 . 3 2 8 m m o l ) e n 2 -b u t a n o l ( 1 0 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L u e g o s e a g r e g ó a g u a ( 1 0 m L ) y l a m e z c l a s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o ( 2 x 5 0 m L ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e l a v ó c o n s a l m u e r a ( 2 0 m L ) , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 1 : 2 ) p a r a o b t e n e r e l p r o d u c t o r a c é m i c o , q u e s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E55 ( 6 5 m g , 0 . 1 9 0 m m o l , 1 6 . 3 1 % d e r e n d i m i e n t o ) y E56 ( 6 5 m g , 0 . 1 9 0 m m o l , 1 6 . 3 1 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s . ( c o n d i c i ó n d e H P L C q u i r a l : C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ; C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; T e m p e r a t u r a d e l a c o l u m n a 3 9 , 8 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e C O 2 2 . 1 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e 0 . 9 ; % d e C o s o l v e n t e 3 0 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 1 8 ; F l u j o t o t a l 3 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 )
E55: L C M S : 3 4 3 [ M H ] . tR = 1 . 4 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 4 . 5 9 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 9 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 1 ( s , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 6 . 7 6 - 6 . 9 2 ( m , 1 H ) , 6 . 2 1 ( b r . s . , 1 H ) , 5 . 0 5 ( d , J = 6 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 6 9 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 2 - 4 . 2 2 ( m , 1 H ) , 2 . 2 2 - 2 . 3 6 ( m , 1 H ) , 2 . 1 7 ( s , 3 H ) , 1 . 9 6 - 2 . 0 6 ( m , 2 H ) , 1 . 9 1 ( d t , J = 1 2 . 9 , 6 . 3 H z , 1 H ) , 1 . 6 4 - 1 . 8 6 ( m , 2 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
E56: L C M S : 3 4 3 [ M H ] . t R = 1 . 4 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 6 0 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 9 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 1 ( s , 1 H ) , 7 . 6 0 ( s , 1 H ) , 6 . 6 7 - 6 . 9 7 ( m , 1 H ) , 6 . 2 1 ( b r . s . , 1 H ) , 5 . 0 4 ( d , J = 6 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 6 9 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 6 - 4 . 2 2 ( m , 1 H ) , 2 . 2 1 - 2 . 3 4 ( m , 1 H ) , 1 . 9 6 - 2 . 0 6 ( m , 2 H ) , 1 . 9 1 ( d t , J = 1 2 . 9 , 6 . 3 H z , 1 H ) , 1 . 6 4 - 1 . 8 6 ( m , 2 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 57 y 58
Enantiómero 1: frans-3-(4-((4-ethoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H- pirazol-1-il)ciclopentanol (E57)
Enantiómero 2: frans-3-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H- pirazol-1-il)ciclopentanol (E58)
Figure imgf000153_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 6 0 m g , 0 . 3 0 4 m m o l ) , ( ± ) - 3 -( 5 - m e t i l - 4 - n i t r o - 1 H - p i r a z o l - 1 - y l ) c i c l o p e n t a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 6 9 ) ( 5 0 m g , 0 . 2 7 6 m m o l ) , x a n t p h o s ( 2 6 , 4 m g , 0 . 0 4 6 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 3 . 9 0 m g , 0 . 0 1 5 m m o l ) y c a r b o n a t o d e p o t a s i o ( 8 4 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l E60: L C M S : 3 6 0 [ M H ] . Xr = 1 . 3 2 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : Xr = 5 . 0 9 m i n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a O Z - H ( 4 . 6 * 1 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e E t O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - c k ) : 5 7 . 7 1 ( s , 1 H ) , 6 . 8 2 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 3 0 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 5 . 2 3 - 5 . 4 5 ( m , 1 H ) , 4 . 4 9 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 3 . 4 0 - 3 . 4 9 ( m , 1 H ) , 3 . 1 8 - 3 . 2 8 ( m , 1 H ) , 2 . 6 7 - 2 . 9 6 ( m , 3 H ) , 2 . 4 5 ( s , 3 H ) , 2 . 2 9 ( s , 3 H ) , 1 . 4 2 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
E61: L C M S : 3 6 0 [ M H ] . Xr = 1 . 3 0 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : Xr = 4 . 0 3 n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a O Z - H ( 4 . 6 * 1 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e E t O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - c í í ) : 5 8 . 0 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 3 2 ( d , J = 3 . 3 H z , 1 H ) , 5 . 1 2 - 5 . 4 3 ( m , 1 H ) , 4 . 5 2 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 3 5 - 3 . 4 2 ( m , 1 H ) , 3 . 0 5 - 3 . 1 8 ( m , 1 H ) , 2 . 7 2 - 3 . 0 1 ( m , 3 H ) , 2 . 4 4 ( s , 3 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 1 . 4 5 (X, J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 62
3-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H-p¡razol-1-¡l)-2,2-d¡met¡lpropanon¡tr¡lo (E62)
Figure imgf000155_0001
U n a s o l u c i ó n d e 3 -( 4 -( ( 4 - e X o x i - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o -[ 2 , 3 - d ] - p i r i m i d i n - 2 - y l ) a m i n o ) - 5 - m e X i l - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 2 , 2 -d i m e t i l p r o p a n e n i t r i l o ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 7 8 ) ( 8 0 m g , 0 . 1 6 2 m m o l ) y N , N - d i b u t i l - N - p r o p i l b u t a n - 1 - a m o n i o ( 1 8 5 m g , 0 . 8 1 0 m m o l ) e n T H F ( 1 0 m L ) s e c a l e n t ó a r e f l u j o d u r a n t e 1 h o r a L u e g o , l a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a o b t e n e r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E62 ( 2 7 m g , 0 . 0 7 6 m m o l , 4 6 . 6 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 4 0 [ M H ] . Xr = 1 . 3 3 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 9 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 5 ( s , 1 H ) , 7 . 6 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( d , J = 2 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d , J = 3 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 4 2 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 2 0 ( s , 2 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 1 . 3 0 - 1 . 4 0 ( m , 9 H ) .
Ejemplo 63
(fí)-4-etox¡-W-(1-(2-(3-fluorop¡rrol¡d¡n-1-¡l)-et¡l)-5-met¡l-1 H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E63)
Figure imgf000155_0002
U n a s o l u c i ó n d e ( R ) - 4 - e t o x i - N -( 1 -( 2 -( 3 - f l u o r o p i r r o l i d i n - 1 - i l ) e t i l ) - 5 - m e X i l - 1 R - p i r a z o l - 4 - y l ) - 7 - X o s i l - 7 R - p i r r o l o [ 2 , 3 -d ] p ¡ r ¡ m ¡ d ¡ n - 2 - a m ¡ n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 8 1 ) ( 1 5 0 m g , 0 . 2 8 4 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 5 . 0 0 m L , 1 0 . 0 0 m m o l , 2 N e n a g u a ) e n i s o p r o p a n o l ( 5 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 6 0 ° C . E l s o l v e n t e s e e v a p o r ó y s e a g r e g ó H C l 2 N h a s t a p H = 7 . L u e g o , l a m e z c l a s e e x t r a j o c o n E t O A c d o s v e c e s . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó c o n M g S O 4 y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E63 ( 4 0 m g , 0 . 1 0 7 m m o l , 3 7 , 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 7 4 [ M H ] . Xr = 1 . 3 0 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1H NMR (400MHz, DMSO-afe): 511.19 (br. s., 1H), 8.00 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 6.81 - 6.88 (m, 1H), 6.20 (dd, J = 3.3, 1.8 Hz, 1H), 5.07 - 5.29 (m, 1H), 4.43 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.10 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.72 - 2.93 (m, 4H), 2.53 - 2.68 (m, 1H), 2.34 (q, J = 7.9 Hz, 1H), 2.18 (s, 3H), 2.00 - 2.15 (m, 1H), 1.72 - 1.95 (m, 1H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
Ejemplo 64
(S)-4-etox¡-W-(1-(2-(3-fluorop¡rrol¡d¡n-1-¡l)et¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E64)
Figure imgf000156_0001
U n a s o l u c i ó n d e ( S ) - 4 - e t o x i - W -( 1 -( 2 -( 3 - f l u o r o p i r r o l i d i n - 1 - i l ) e t i l ) - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - y l ) - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 -a d p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 8 2 ) ( 1 5 0 m g , 0 . 2 8 4 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 5 . 0 0 m L , 1 0 . 0 0 m m o l , 2 N e n a g u a ) e n i s o p r o p a n o l ( 5 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 6 0 ° C . E l s o l v e n t e s e e v a p o r ó y s e a g r e g ó H C l 2 N h a s t a p H = 7 . L u e g o , l a m e z c l a s e e x t r a j o c o n E t O A c d o s v e c e s . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó c o n M g S C U y s e e v a p o r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E63 ( 3 0 m g , 0 . 0 8 0 m m o l , 2 8 , 3 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 7 4 [ M H ] . tR = 1 . 2 9 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 9 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 9 ( s , 1 H ) , 7 . 5 6 ( s , 1 H ) , 6 . 7 7 - 6 . 9 4 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d d , J = 3 . 1 , 1 . 6 H z , 1 H ) , 5 . 0 4 - 5 . 3 3 ( m , 1 H ) , 4 . 4 3 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 1 0 ( t , J = 6 . 8 H z , 2 H ) , 2 . 7 3 - 2 . 9 2 ( m , 4 H ) , 2 . 5 3 - 2 . 6 9 ( m , 1 H ) , 2 . 2 7 - 2 . 3 9 ( m , 1 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 2 . 0 0 - 2 . 1 7 ( m , 1 H ) , 1 . 7 4 - 1 . 9 6 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 8 H z , 3 H ) .
Ejemplo 65
2-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H-p¡razol-1-¡l)-2-met¡lpropan-1-ol (E65)
Figure imgf000156_0002
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 6 0 m g , 0 . 3 0 4 m m o l ) , 2 -( 4 - a m i n o - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 2 - m e t i l p r o p a n - 1 - o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 8 7 ) ( 4 6 , 2 m g , 0 . 2 7 3 m m o l ) , x a n t p h o s ( 2 6 , 4 m g , 0 . 0 4 6 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 8 4 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 7 . 8 m g , 0 . 0 3 0 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E 6 5 ( 3 0 m g , 0 . 0 9 1 m m o l , 2 9 , 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 3 1 [ M H ] . t R = 1 . 1 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C H L O R O F O R M - d ) : 5 9 . 4 5 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 6 . 4 8 - 6 . 6 4 ( m , 1 H ) , 6 . 3 5 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 0 4 ( s , 1 H ) , 4 . 4 2 - 4 . 5 9 ( m , 3 H ) , 3 . 8 9 ( b r . s . , 2 H ) , 2 . 3 5 ( s , 3 H ) , 1 . 4 1 - 1 . 4 9 ( m , 9 H ) .
Ejemplo 6 6
4-Etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-(oxetan-3-¡l)p¡rrol¡d¡n-3-¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E6 6 )
Figure imgf000156_0003
U n a s o l u c i ó n d e 2 - c l o r o - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n a ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 ) ( 1 8 0 m g , 0 . 9 1 1 m m o l ) , 5 - m e t i l - 1 -( 1 -( o x e t a n - 3 - i l ) - p i r r o l i d i n - 3 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - a m i n a ( 1 8 2 m g , 0 . 8 2 0 m m o l ) ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n l a s o l i c i t u d i n t e r n a c i o n a l P C T W O 2 0 1 2 0 6 2 7 8 3 ) , x a n t p h o s ( 7 9 m g , 0 . 1 3 7 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 8 3 m g , 0 . 0 9 1 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 2 5 2 m g , 1 . 8 2 2 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 8 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L a m e z c l a s e f i l t r ó y l a s o l u c i ó n s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E6 6 ( 4 5 m g , 0 . 1 1 3 m m o l , 1 2 , 3 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 8 4 [ M H ] . t R = 1 . 0 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 7 5 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 8 ( s , 1 H ) , 6 . 4 7 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 3 - 6 . 3 4 ( m , 1 H ) , 6 . 0 8 ( s , 1 H ) , 4 . 5 8 - 4 . 8 0 ( m , 5 H ) , 4 . 5 0 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 7 3 ( q u i n , J = 6 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 0 0 ( t , J = 8 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 7 8 - 2 . 9 2 ( m , 1 H ) , 2 . 6 4 ( d q , J = 1 6 . 2 , 8 . 1 H z , 2 H ) , 2 . 2 6 - 2 . 4 1 ( m , 2 H ) , 2 . 2 2 ( s , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7.2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 67 y 68
Enantiómero 1: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-(oxetan-3-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]pir¡m¡d¡n-2-am¡na (E67)
Enant¡ómero 2: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-(oxetan-3-¡l)-p¡rrol¡d¡n-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E68)
Figure imgf000157_0001
L o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E67 ( 3 0 m g , 0 . 0 7 8 m m o l , 2 5 . 8 % d e r e n d i m i e n t o ) y n d E68 ( 3 0 m g , 0 . 0 7 8 m m o l , 2 5 . 8 % d e r e n d i m i e n t o ) s e p r e p a r a r o n a p a r t i r d e l a s e p a r a c i ó n m e d i a n t e H P L C q u i r a l d e E66 c o m o u n s ó l i d o b l a n c o ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ; C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; T e m p e r a t u r a d e c o l u m n a 3 9 . 6 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e C O 2 2 . 5 5 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e 0 . 4 5 ; % d e c o s o l v e n t e 1 5 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 2 0 ; F l u j o t o t a l 3 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 ) .
E67 : L C M S : 3 8 4 [ M H ] . tR = 1 . 0 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 4 . 0 8 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 7 3 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 8 ( s , 1 H ) , 6 . 4 8 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 1 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 0 8 ( s , 1 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 7 8 ( m , 5 H ) , 4 . 5 0 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 7 2 ( q u i n , J = 6 . 3 H z , 1 H ) , 2 . 9 9 ( t , J = 8 . 5 H z , 1 H ) , 2 . 8 7 ( t d , J = 8 . 1 , 4 . 9 H z , 1 H ) , 2 . 5 4 - 2 . 7 3 ( m , 2 H ) , 2 . 2 5 - 2 . 4 2 ( m , 2 H ) , 2 . 2 2 ( s , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) .
E68 : L C M S : 3 8 4 [ M H ] . t R = 1 . 0 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 9 6 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a A D - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 6 5 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 9 ( s , 1 H ) , 6 . 4 9 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 1 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 0 7 ( s , 1 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 8 2 ( m , 5 H ) , 4 . 5 0 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 7 2 ( q u i n , J = 6 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 0 0 ( t , J = 8 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 8 7 ( t d , J = 8 . 2 , 4 . 8 H z , 1 H ) , 2 . 5 3 - 2 . 7 2 ( m , 2 H ) , 2 . 2 8 - 2 . 4 0 ( m , 2 H ) , 2 . 2 2 ( s , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 69
Trans-2-(5-c¡cloprop¡l-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H-p¡razol-1-¡l)-1-met¡lc¡clopentanol (E69)
Figure imgf000157_0002
U n a s o l u c i ó n d e ( ± ) - 7 r a n s - 2 -( 5 - c i c l o p r o p i l - 4 - ( ( 4 - e t o x i - 7 - t o s i l - 7 H - p i r r o l o - [ 2 , 3 - d ] - p i r i m i d i n - 2 - i l ) a m i n o ) - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 1 -m e t i l c i c l o p e n t a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 9 2 ) ( 3 0 0 m g , 0 . 5 5 9 m m o l ) y N , N - d i b u t i l - N - p r o p i l b u t a n - 1 - a m o n i o ( 6 3 9 m g , 2 . 8 0 m m o l ) e n T H F ( 1 0 m L ) s e c a l e n t ó h a s t a r e f l u j o d u r a n t e 1 h o r a L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E69 ( 1 5 0 m g , 0 . 3 7 7 m m o l , 6 7 . 4 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 8 3 [ M H ] . t R = 1 . 0 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 2 ( s , 1 H ) , 7 . 3 4 - 7 . 4 8 ( m , 1 H ) , 6 . 7 4 - 6 . 8 9 ( m , 1 H ) , 6 . 1 8 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 6 1 - 4 . 7 5 ( m , 2 H ) , 4 . 3 7 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 2 . 0 9 - 2 . 3 1 ( m , 2 H ) , 1 . 5 9 - 1 . 9 0 ( m , 5 H ) , 1 . 3 0 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) , 0 . 7 5 - 0 . 8 8 ( m , 6 H ) , 0 . 4 1 - 0 . 5 8 ( m , 1 H ) .
Ejemplo 70
Trans-2-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H-p¡razol-1-¡l)-1-met¡lc¡clopentanol (E70)
Figure imgf000158_0001
U n a m e z c l a d e ( ± ) - 7 r a n s - 2 -( 4 -( ( 4 - e t o x i - 7 - t o s ¡ l - 7 H - p ¡ r r o l o -[ 2 , 3 - d ] p ¡ r i m ¡ d ¡ n - 2 - ¡ l ) a m ¡ n o ) - 5 - m e t ¡ l - 1 H - p i r a z o l - 1 - i l ) - 1 -m e t i l c i c l o p e n t a n o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 9 5 ) ( 4 0 0 m g , 0 . 7 8 3 m m o l ) y N , N - d i b u t i l - N - p r o p i l b u t a n - 1 - a m o n i o ( 8 9 5 m g , 3 . 9 2 m m o l ) e n T H F ( 1 0 m L ) s e c a l e n t ó h a s t a r e f l u j o d u r a n t e 1 h o r a L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E70 ( 1 5 0 m g , 0 . 4 2 1 m m o l , 5 3 . 7 % d e r e n d ¡ m ¡ e n t o ) c o m o u n s ó l ¡ d o b l a n c o .
L C M S : 3 5 7 [ M H ] . tR = 1 . 1 5 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - c / 6 ) : 5 1 0 . 7 7 - 1 1 . 4 2 ( m , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 5 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 4 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 1 9 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 7 0 ( s , 1 H ) , 4 . 2 7 - 4 . 4 6 ( m , 3 H ) , 2 . 1 4 - 2 . 3 1 ( m , 5 H ) , 1 . 7 9 ( b r . s . , 3 H ) , 1 . 6 3 ( b r . s . , 1 H ) , 1 . 3 2 ( t , J = 7 . 0 3 H z , 3 H ) , 0 . 7 3 ( s , 3 H ) .
Ejemplo 71 y 72
Enant¡ómero 1: 3-(5-c¡cloprop¡l-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H-p¡razol-1-¡l)b¡c¡clo-[3.1.0]-hexan-2-ol (E71)
Enant¡ómero 2: 3-(5-c¡cloprop¡l-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H-p¡razol-1-¡l)b¡c¡clo-[3.1.0]-hexan-2-ol (E72)
Figure imgf000158_0002
U n a s o l u c i ó n d e ( ± ) - 7 r a n s - 3 -( 5 - c ¡ c l o p r o p ¡ l - 4 - ( ( 4 - e t o x i - 7 - t o s ¡ l - 7 H - p ¡ r r o l o [ 2 , 3 - d ] p ¡ r i m ¡ d ¡ n - 2 - ¡ l ) a m ¡ n o ) - 1 H - p i r a z o l - 1 -i l ) b i c i c l e -[ 3 . 1 . 0 ] - h e x a n - 2 - o l ( q u e s e p u e d e p r e p a r a r s e g ú n D 1 0 2 ) ( 3 0 m g , 0 . 0 5 6 m m o l ) y T B A F ( 1 M e n t H f ) ( 0 . 5 6 1 m L , 0 . 5 6 1 m m o l ) e n T H F ( 1 0 m L ) s e a g i t ó a 6 0 ° C d u r a n t e 4 h o r a s . E l s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l r e s i d u o s e d i s o l v i ó e n E A , s e l a v ó c o n a g u a d o s v e c e s . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a i n v e r s a e n C 1 8 ( f a s e d e r e f e r e n c i a ) p a r a p r o p o r c i o n a r l a m e z c l a , q u e s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ; C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; T e m p e r a t u r a d e l a c o l u m n a 3 9 , 9 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e C O 2 2 . 1 ; V e l o c i d a d d e f l u j o d e l c o s o l v e n t e 0 . 9 ; % d e C o s o l v e n t e 3 0 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 2 0 ; F l u j o t o t a l 3 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E71 ( 4 m g , 1 0 . 5 1 p m o l , 2 1 . 0 5 % d e r e n d i m i e n t o ) y E72 ( 5 m g , 0 . 0 1 3 m m o l , 2 6 . 3 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E71 : L C M S : 3 8 1 [ M H ] . t R = 1 . 5 4 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 3 . 2 2 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó . 1
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 4 5 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 9 ( s , 1 H ) , 6 . 6 2 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 7 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 1 ( s , 1 H ) , 4 . 8 8 - 5 . 0 5 ( m , 1 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 2 6 - 4 . 4 3 ( m , 1 H ) , 2 . 3 6 - 2 . 5 5 ( m , 1 H ) , 2 . 1 7 ( d d , J = 1 2 . 4 , 7 . 7 H z , 1 H ) , 1 . 5 6 ­ 1 . 6 6 ( m , 2 H ) , 1 . 4 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 4 H ) , 0 . 7 2 - 0 . 9 4 ( m , 4 H ) , 0 . 5 2 - 0 . 6 4 ( m , 2 H ) .
E72 : L C M S : 3 8 1 [ M H ] . t R = 1 . 5 4 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 3 . 9 7 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 5 2 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 9 6 ( s , 1 H ) , 7 . 6 1 ( s , 1 H ) , 6 . 7 9 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 5 6 ( s , 1 H ) , 6 . 4 1 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 7 3 - 5 . 0 6 ( m , 1 H ) , 4 . 3 9 - 4 . 5 8 ( m , 2 H ) , 4 . 0 1 - 4 . 1 7 ( m , 1 H ) , 3 . 2 4 - 3 . 3 6 ( m , 1 H ) , 2 . 9 2 ( d , J = 9 . 8 H z , 1 H ) , 2 . 3 8 ( s , 3 H ) , 2 . 1 1 - 2 . 3 2 ( m , 4 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 77 y 78
Enantiómero 1: frans-2-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H-p¡razol-1-¡l)-1-m etilciclopentanol (E77)
Enant¡ómero 1: frans-2-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-5-met¡l-1H-p¡razol-1-¡l)-1-met¡lc¡clopentanol (E78)
Figure imgf000160_0001
E77 : L C M S : 3 5 7 [ M H ] . tR = 1 . 1 4 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 2 . 3 1 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 6 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 5 7 ( s , 1 H ) , 6 . 7 8 - 6 . 9 0 ( m , 1 H ) , 6 . 1 9 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 7 0 ( s , 1 H ) , 4 . 1 9 - 4 . 4 8 ( m , 3 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 3 6 ( m , 5 H ) , 1 . 7 3 - 1 . 8 5 ( m , 3 H ) , 1 . 5 7 - 1 . 6 9 ( m , 1 H ) , 1 . 3 2 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) , 0 . 7 3 ( s , 3 H ) .
E78 : L C M S : 3 5 7 [ M H ] . t R = 1 . 1 5 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 2 . 5 3 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 6 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 5 7 ( s , 1 H ) , 6 . 7 8 - 6 . 9 0 ( m , 1 H ) , 6 . 1 9 ( d d , J = 3 . 3 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 7 0 ( s , 1 H ) , 4 . 1 9 - 4 . 4 8 ( m , 3 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 3 6 ( m , 5 H ) , 1 . 7 3 - 1 . 8 5 ( m , 3 H ) , 1 . 5 7 - 1 . 6 9 ( m , 1 H ) , 1 . 3 2 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) , 0 . 7 3 ( s , 3 H ) .
Ejemplo 79 y 80
Enant¡ómero 1: frans-2-(5-c¡cloprop¡l-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H-p¡razol-1-¡l)-1-met¡lc¡clopentanol (E79)
Enant¡ómero 2: frans-2-(5-c¡cloprop¡l-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo-[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H-p¡razol-1-¡l)-1-met¡lc¡clopentanol (E80)
Figure imgf000160_0002
c o s o l v e n t e 0 . 6 ; % d e c o s o l v e n t e 2 0 ; C o n t r a p r e s i ó n 1 2 0 ; F l u j o t o t a l 3 ; L o n g i t u d d e o n d a d e p a r t i d a d e P D A 2 1 4 ; L o n g i t u d d e o n d a d e d e t e n c i ó n d e P D A 3 5 9 ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E79 : L C M S : 3 8 3 [ M H ] . tR = 1 . 2 1 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 2 . 1 9 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 2 ( s , 1 H ) , 7 . 4 3 ( s , 1 H ) , 6 . 6 9 - 7 . 0 3 ( m , 1 H ) , 6 . 1 8 ( d d , J = 3 . 2 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 6 3 - 4 . 7 2 ( m , 2 H ) , 4 . 3 7 ( q , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 2 . 0 6 - 2 . 3 4 ( m , 2 H ) , 1 . 5 8 - 1 . 9 2 ( m , 5 H ) , 1 . 3 0 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) , 0 . 7 5 ­ 0 . 9 0 ( m , 5 H ) , 0 . 4 6 - 0 . 5 7 ( m , 1 H ) .
E80 : L C M S : 3 8 3 [ M H ] . t R = 1 . 2 2 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 2 . 4 2 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I C ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 2 ( s , 1 H ) , 7 . 4 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 - 6 . 9 2 ( m , 1 H ) , 6 . 1 8 ( d d , J = 3 . 2 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 4 . 5 5 - 4 . 7 7 ( m , 2 H ) , 4 . 3 7 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 2 . 0 7 - 2 . 3 3 ( m , 2 H ) , 1 . 5 7 - 1 . 9 1 ( m , 5 H ) , 1 . 3 0 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) , 0 . 7 3 ­ 0 . 8 9 ( m , 6 H ) , 0 . 4 2 - 0 . 5 9 ( m , 1 H ) .
Ejemplo 81
(fí)-4-etox¡-N-(5-met¡l-1-(2-(3-met¡lmorfol¡no)et¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E81)
Figure imgf000161_0001
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 5 0 m g , 0 . 2 5 3 m m o l ) , D116 ( 6 8 , 1 m g , 0 . 3 0 4 m m o l ) , X - p h o s ( 1 2 . 6 m g , 0 . 0 2 5 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 1 0 5 m g , 0 . 7 5 9 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 1 . 5 8 m g , 0 . 0 1 3 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E81 ( 5 , 0 m g , 0 . 0 1 3 m m o l , 5 , 1 3 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 8 6 [ M H ] . t R = 1 . 1 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 7 9 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 6 6 ( s , 1 H ) , 6 . 6 6 - 6 . 7 2 ( m , 1 H ) , 6 . 3 7 ( d d , J = 2 . 0 , 3 . 2 H z , 1 H ) , 6 . 0 3 ( s , 1 H ) , 4 . 4 9 ( q , J = 7 . 1 1 H z , 2 H ) , 4 . 1 0 ( t , J = 7 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 7 8 ( d , J = 11 . 2 9 H z , 1 H ) , 3 . 5 6 - 3 . 7 0 ( m , 2 H ) , 3 . 2 0 ( d , = 2 . 0 H z , 2 H ) , 2 . 5 8 - 2 . 7 7 ( m , 2 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 5 2 ( m , 2 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7 . 0 H z , 3 H ) , 0 . 9 3 ( d , J = 6 . 4 H z , 3 H ) . Ejemplo 82
(S)-4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(2-(3-met¡lmorfol¡no)et¡l)-1H-pirazol-4-¡l)-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E82)
Figure imgf000161_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 2 9 m g , 0 . 1 4 7 m m o l ) , D118 ( 3 9 , 5 m g , 0 . 1 7 6 m m o l ) , X - p h o s ( 7 m g , 0 . 0 1 5 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 6 0 , 8 m g , 0 . 4 4 0 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 6 . 7 2 m g , 7 . 3 4 p m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E82 ( 5 m g , 0 . 0 1 3 m m o l , 8 , 8 4 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 8 6 [ M H ] . t R = 1 . 2 5 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - a 4 ) : 5 7 . 5 6 ( s , 1 H ) , 6 . 7 1 ( d , J = 3 . 5 1 H z , 1 H ) , 6 . 1 9 ( d , J = 3 . 5 1 H z , 1 H ) , 4 . 3 7 ( q , J = 7 . 1 1 H z , 2 H ) , 4 . 0 8 ( t , J = 6 . 6 5 H z , 2 H ) , 3 . 6 6 ( d , J = 1 1 . 2 9 H z , 1 H ) , 3 . 4 3 - 3 . 5 8 ( m , 2 H ) , 2 . 9 7 - 3 . 1 0 ( m , 2 H ) , 2 . 6 7 ( b r . s . , 1 H ) , 2 . 4 9 ­ 2 . 5 8 ( m , 1 H ) , 2 . 2 9 - 2 . 4 3 ( m , 2 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 3 1 ( t , J = 7 . 1 5 H z , 3 H ) , 0 . 8 2 ( d , J = 6 . 2 7 H z , 3 H ) .
Ejemplo 83
(fí)-4-etox¡-N-(5-met¡l-1-(2-(2-met¡lmorfol¡no)et¡l)-1H-p¡razol-4-il)-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E83)
Figure imgf000162_0001
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 1 0 0 m g , 0 . 5 0 6 m m o l ) , D120 ( 1 3 6 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) , X - p h o s ( 2 4 . 1 2 m g , 0 . 0 5 1 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 2 1 0 m g , 1 . 5 1 8 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 3 . 1 7 m g , 0 . 0 2 5 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E83 ( 6 0 , 0 m g , 0 . 1 5 6 m m o l , 3 0 , 8 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 8 6 [ M H ] . tR = 1 . 2 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 8 8 ( s , 1 H ) , 7 . 6 2 ( s , 1 H ) , 6 . 4 8 ( m , 1 H ) , 6 . 3 2 ( m , 1 H ) , 6 . 0 8 ( m , 1 H ) , 4 . 5 1 ( d d , J = 9 . 0 H z , 2 H ) , 4 . 0 9 ( t , J = 9 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 8 3 ( m , 1 H ) , 3 . 6 3 ( m , 2 H ) , 2 . 6 3 ( m , 4 H ) , 2 . 2 1 ( s , 3 H ) , 2 . 1 6 ( m , 1 H ) , 1 . 8 4 ( m , 1 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 9 . 0 H z , 3 H ) , 1 . 1 4 ( d , J = 9 . 0 H z , 3 H ) .
Ejemplo 84
(S)-4-etox¡-N-(5-met¡l-1-(2-(2-met¡lmorfol¡no)et¡l)-1H-pirazol-4-¡l)-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E84)
Figure imgf000162_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 7 5 m g , 0 . 3 8 0 m m o l ) , D122 ( 1 2 0 m g , 0 . 5 3 5 m m o l ) , X - p h o s ( 1 8 . 0 9 m g , 0 . 0 3 8 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 1 5 7 m g , 1 . 1 3 9 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 7 . 3 8 m g , 0 . 0 1 9 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E84 ( 1 3 m g , 0 . 0 3 4 m m o l , 8 , 8 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 8 6 [ M H ] . t R = 1 . 2 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 1 1 . 2 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 2 ( s , 1 H ) , 7 . 5 5 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 - 6 . 9 2 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d d , J = 1 . 8 8 , 3 . 3 9 H z , 1 H ) , 4 . 4 3 ( q , J = 7 . 0 3 H z , 2 H ) , 4 . 1 0 ( t , J = 6 . 7 8 H z , 2 H ) , 3 . 6 5 - 3 . 7 9 ( m , 1 H ) , 3 . 4 0 - 3 . 5 2 ( m , 2 H ) , 2 . 6 6 - 2 . 8 1 ( m , 2 H ) , 2 . 6 2 ( t , J = 6 . 7 8 H z , 2 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 9 7 - 2 . 0 9 ( m , 1 H ) , 1 . 7 5 ( t , J = 1 0 . 5 4 H z , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 7 . 0 3 H z , 3 H ) , 1 . 0 3 ( d , J = 6 . 2 7 H z , 3 H ) .
Ejemplo 85
(R)-N-(1 -(1 -(2,2-difluoroet¡l)p¡rrol¡d¡n-3-il)-5-met¡l-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]pir¡m¡d¡n-2-am¡na (E85)
Figure imgf000162_0003
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 2 3 9 m g , 1 . 2 1 2 m m o l ) , D128 ( 1 8 6 m g , 0 . 8 0 8 m m o l ) , X - p h o s ( 7 , 7 0 m g , 0 . 0 1 6 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 2 , 1 9 m g , 0 . 0 2 4 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 3 3 5 m g , 2 . 4 2 3 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 2 m L ) a g i t ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L u e g o , l a r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P ( b a s e ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E85 ( 7 5 m g , 0 . 1 9 2 m m o l , 2 3 , 7 2 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 2 [ M H ] . t R = 2 . 1 7 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 8 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 5 ( s , 1 H ) , 6 . 6 2 - 6 . 7 3 ( m , 1 H ) , 6 . 3 9 ( b r . s . , 1 H ) , 5 . 6 8 - 6 . 1 4 ( m , 2 H ) , 4 . 7 4 - 4 . 8 6 ( m , 1 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 6 . 8 5 H z , 2 H ) , 3 . 2 0 ( t , J = 8 . 4 4 H z , 1 H ) , 2 . 8 4 - 3 . 0 6 ( m , 5 H ) , 2 . 3 0 - 2 . 4 6 ( m , 2 H ) , 2 . 2 5 ( s , 3 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 7 . 0 9 H z , 3 H ) .
Ejemplo 86
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(3-morfol¡noc¡clobut¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E86)
Figure imgf000163_0001
U n a s o l u c i ó n d e D131 ( 2 0 0 m g , 0 . 3 6 3 m m o l ) e h i d r ó x i d o d e s o d i o ( 5 . 0 0 m L , 1 0 . 0 0 m m o l , 2 M e n a g u a ) e n i s o p r o p a n o l ( 5 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 6 0 ° C . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e a g r e g ó H C l 2 N h a s t a p H = 7 . L a m e z c l a s e e x t r a j o c o n E t O A c . L a f a s e a c u o s a s e e x t r a j o c o n E t O A c y l o s e x t r a c t o s o r g á n i c o s c o m b i n a d o s s e s e c a r o n e n M g S O 0 . 1 9 2 m m o l y c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E8 6 ( 4 6 m g , 0 . 1 1 6 m m o l , 3 1 , 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 8 [ M H ] . tR = 1 . 3 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - c f e ) : 11.20 (b r . s ., 1 H ), 8.02 (s , 1 H ), 7.51 - 7.69 (m , 1 H ), 6.78 - 6.91 (m , 1 H ), 6.20 (d d , J = 1. 7 6 , 3 . 2 6 H z , 1 H ) , 4 . 3 8 - 4 . 5 9 ( m , 3 H ) , 3 . 5 9 ( t , J = 4 . 1 4 H z , 4 H ) , 2 . 5 3 - 2 . 6 2 ( m , 1 H ) , 2 . 4 3 - 2 . 4 8 ( m , 2 H ) , 2 . 2 4 - 2 . 3 9 ( m , 6 H ) , 2 . 1 4 ( s , 3 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 7 . 0 3 H z , 3 H )
Ejemplo 87
(S)-A/-(1-(1-(2,2-d¡fluoroet¡l)p¡rrol¡d¡n-3-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E87)
Figure imgf000163_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 2 2 7 m g , 1 . 1 4 7 m m o l ) , D137 ( 1 7 6 m g , 0 . 7 6 4 m m o l ) , X - p h o s ( 7 , 2 9 m g , 0 . 0 1 5 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 1 , 0 0 m g , 0 . 0 2 3 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 3 1 7 m g , 2 . 2 9 3 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 2 m L ) a g i t ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . L u e g o , l a r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P ( b a s e ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E87 ( 1 3 0 m g , 0 . 3 3 2 m m o l , 4 3 , 5 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 3 9 2 [ M H ] . t R = 2 . 0 1 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 1 9 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 7 4 ( s , 1 H ) , 6 . 6 0 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 7 ( b r . s . , 1 H ) , 5 . 7 1 - 6 . 1 2 ( m , 2 H ) , 4 . 7 8 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 0 9 H z , 2 H ) , 3 . 1 7 ( t , J = 8 . 6 8 H z , 1 H ) , 2 . 7 9 - 3 . 0 4 ( m , 5 H ) , 2 . 2 8 - 2 . 4 3 ( m , 2 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 7 . 0 9 H z , 3 H ) .
Ejemplo 8 8
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(2-met¡l-2-morfol¡noprop¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E8 8 )
Figure imgf000163_0003
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 1 0 0 m g , 0 . 5 0 6 m m o l ) , D143 ( 1 4 5 m g , 0 . 6 0 7 m m o l ) , X - p h o s ( 1 8 . 0 9 m g , 0 . 0 3 8 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 2 1 0 m g , 1 . 5 1 8 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 4 . 1 2 m g , 0 . 0 5 1 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E8 8 ( 1 0 5 m g , 0 . 2 6 3 m m o l , 5 1 , 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 0 0 [ M H ] . t R = 1 . 2 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 1 1 . 2 0 ( s , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 5 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 6 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 2 1 ( d , J = 3 . 5 H z , 1 H ) , 4 . 4 2 ( d d , J = 9 . 0 H z , 2 H ) , 3 . 9 7 ( s , 2 H ) , 3 . 5 7 ( m , 4 H ) , 2 . 5 8 ( m , 4 H ) , 2 . 1 9 ( s , 3 H ) , 1 . 3 4 ( t , J = 9 . 0 H z , 3 H ) , 0 . 9 7 ( s , 6 H ) .
Ejemplo 89
W-(1-(2-(3,3-d¡fluoroazet¡d¡n-1-¡l)eth¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-il)-4-etox¡-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E89)
Figure imgf000164_0001
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 1 5 m g , 0 . 0 7 6 m m o l ) , D145 ( 1 9 , 7 0 m g , 0 . 0 9 1 m m o l ) , X - p h o s ( 3 , 6 2 m g , 7 . 5 9 g m o l ) , K 2 C O 3 ( 3 1 , 5 m g , 0 . 2 2 8 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 . 4 8 m g , 3 . 8 0 g m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 2 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E89 ( 3 m g , 7 . 9 5 g m o l , 1 0 , 4 7 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 7 8 [ M H ] . tR = 1 . 3 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , M E T A N O L - d * ) : 5 7 . 6 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 2 ( d , J = 3 . 5 1 H z , 1 H ) , 6 . 3 0 ( d , J = 3 . 5 1 H z , 1 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 0 3 H z , 2 H ) , 4 . 1 4 ( t , J = 6 . 1 5 H z , 2 H ) , 3 . 5 5 ( t , J = 1 2 . 1 7 H z , 4 H ) , 3 . 0 2 ( t , J = 6 . 1 5 H z , 2 H ) , 2 . 2 7 ( s , 3 H ) , 1 . 4 1 ( t , J = 7 . 0 3 H z , 3 H ) . Ejemplo 90
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(2-met¡l-1-morfol¡nopropan-2-¡l)-1H-p¡razol-4-yl)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pir¡m¡d¡n-2-am¡na (E90)
Figure imgf000164_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 5 0 m g , 0 . 2 5 3 m m o l ) , D151 ( 7 0 m g , 0 . 2 9 4 m m o l ) , X - p h o s ( 1 4 . 6 4 m g , 0 . 0 2 5 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 6 9 , 9 m g , 0 . 5 0 6 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 3 . 1 7 m g , 0 . 0 2 5 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 , 5 m L ) s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 4 5 m i n . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E90 ( 4 5 m g , 0 . 1 1 3 m m o l , 4 4 , 5 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 0 0 [ M H ] . t R = 1 . 7 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 6 3 ( s , 1 H ) , 6 . 5 6 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 4 ( d d , J = 2 . 0 1 , 3 . 2 6 H z , 1 H ) , 6 . 0 2 ( s , 1 H ) , 4 . 4 8 ( q , J = 7 . 0 3 H z , 2 H ) , 3 . 5 1 - 3 . 6 7 ( m , 4 H ) , 2 . 6 0 ( s , 2 H ) , 2 . 4 3 ( s , 3 H ) , 2 . 1 8 - 2 . 3 0 ( m , 4 H ) , 1 . 6 1 ( s , 6 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 1 5 H z , 3 H ) .
Ejemplo 91 y 92
Enantiómero 1: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(2-met¡l-1-morfol¡nopropan-2-¡l)-1H-p¡razol-4-yl)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pir¡m¡d¡n-2-amina (E91)
Enantiómero 2: 4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(2-met¡l-1-morfol¡nopropan-2-¡l)-1H-p¡razol-4-yl)-7H-pirrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E92)
Figure imgf000164_0003
U n a m e z c l a d e D158 ( 1 8 0 m g , 0 . 3 3 4 m m o l ) y T B A F ( 3 8 1 m g , 1 . 6 6 8 m m o l ) e n T H F ( 1 0 m L ) s e c a l e n t ó h a s t a r e f l u j o d u r a n t e 1 h o r a . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a y s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E91 ( 2 1 m g , 0 . 0 5 4 m m o l , 1 4 . 4 8 % d e r e n d i m i e n t o ) y E92 ( 1 6 m g , 0 . 0 4 2 m m o l , 1 1 . 0 3 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E91: L C M S : 3 8 6 [ M H ] . t R = 1 . 2 7 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 5 6 m i n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a O Z - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d 6 ) : 1 1 . 1 9 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 0 0 ( s , 1 H ) , 7 . 5 6 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 - 6 . 9 6 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( d d , J = 1. 7 6 , 3 . 2 6 H z , 1 H ) , 4 . 4 2 ( q , J = 7 . 0 3 H z , 2 H ) , 4 . 1 4 ( d d , J = 5 . 9 0 , 1 3 . 9 3 H z , 1 H ) , 3 . 8 4 ( d d , J = 7 . 9 1 , 1 3 . 9 3 H z , 1 H ) , 3 . 5 4 ( t , J = 4 . 3 9 H z , 4 H ) , 2 . 9 3 - 3 . 0 3 ( m , 1 H ) , 2 . 5 3 - 2 . 6 0 ( m , 2 H ) , 2 . 4 1 - 2 . 4 8 ( m , 2 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 3 4 ( t , J = 7 . 0 3 H z , 3 H ) , 0 . 8 9 ( d , J = 6 . 7 8 H z , 1 H ) . E92: L C M S : 3 8 6 [ M H ] . t R = 1 . 2 7 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
H P L C q u i r a l : t R = 7 . 5 5 m i n . ( C o n d i c i o n e s : C o l u m n a O Z - H ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ( D E A a l 0 . 1 % ) ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 11.19 (b r . s ., 1 H ), 8.02 (s , 1 H ), 7.57 (s , 1 H ), 6.80 - 6.90 (m , 1 H ), 6.20 ( d d , J = 1 . 7 6 , 3 . 2 6 H z , 1 H ) , 4 . 4 2 ( q , J = 6 .8 6 H z , 2 H ) , 4 . 1 4 ( d d , J = 6 . 0 2 , 1 3 . 8 0 H z , 1 H ) , 3 . 8 4 ( d d , J = 7 . 9 1 , 1 3 . 9 3 H z , 1 H ) , 3 . 5 5 ( t , J = 4 . 3 9 H z , 4 H ) , 2 . 9 9 ( q , J = 6 . 6 1 H z , 1 H ) , 2 . 5 4 - 2 . 6 1 ( m , 2 H ) , 2 . 4 2 - 2 . 4 8 ( m , 2 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 1 . 3 4 ( t , J = 7 . 0 3 H z , 3 H ) , 0 . 8 9 ( d , J = 6 . 7 8 H z , 3 H )
Ejemplo 93
3-(4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡i)am¡no)-5-met¡!-1 H-p¡razol-1-¡l)-1-metilc¡clobutanol (E3)
Figure imgf000165_0001
U n a m e z c l a d e D168 ( 3 0 0 m g , 0 . 6 0 4 m m o l ) y T B A F ( 7 9 0 m g , 3 . 0 2 m m o l ) e n T H F ( 1 0 m L ) s e c a l e n t ó h a s t a r e f l u j o d u r a n t e 2 h o r a . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : C H 3 O H = 2 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E93 ( 6 4 , 0 m g , 0 . 1 8 2 m m o l , 3 0 . 2 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 4 3 [ M H ] . t R = 1 . 0 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 2 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 7 ( s , 1 H ) , 7 . 9 8 ( s , 1 H ) , 7 . 5 8 ( s , 1 H ) , 6 . 8 4 ( d , J = 4 . 5 H z , 1 H ) , 6 . 1 8 ( d , J = 4 . 5 H z , 1 H ) , 5 . 1 6 ( s , 1 H ) , 4 . 4 3 ( d d , J = 9 . 6 H z , 2 H ) , 4 . 3 5 ( d d , J = 1 0 . 0 H z , 1 H ) , 2 . 5 6 ( m , 2 H ) , 2 . 3 7 ( m , 2 H ) , 2 . 1 2 ( s , 3 H ) , 1 . 3 4 ( m , 6 H ) .
Ejemplo 94
W-(1-((2fí,4fí)-2-(d¡fluoromet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E94)
Figure imgf000165_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 5 1 , 5 m g , 0 . 2 6 1 m m o l ) , D176 ( 4 0 m g , 0 . 1 7 4 m m o l ) , X - p h o s ( 1 , 6 5 6 m g , 3 . 4 7 p m o l ) , P d 2 ( d b a )3 ( 4 , 7 7 m g , 5 . 2 1 p m o l ) y K 2 C O 3 ( 7 2 , 0 m g , 0 . 5 2 1 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 2 m L ) a g i t ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L u e g o , l a r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P ( b a s e ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E94 ( 1 7 m g , 0 . 0 4 3 m m o l , 2 5 , 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 2 [ M H ] . t R = 2 . 0 3 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 6 0 0 M H z , M E T A N O L - d 4 ) : 5 7 . 6 4 ( s , 1 H ) , 6 . 8 3 ( d , J = 3 . 3 0 H z , 1 H ) , 6 . 3 1 ( d , J = 3 . 6 7 H z , 1 H ) , 5 . 8 9 - 6 . 1 5 ( m , 1 H ) , 4 . 6 3 ( q d , J = 3 . 9 7 , 7 . 8 9 H z , 1 H ) , 4 . 5 0 ( q , J = 7 . 2 1 H z , 2 H ) , 3 . 6 1 ( d t , J = 5 . 3 2 , 1 4 . 2 1 H z , 1 H ) , 3 . 1 7 - 3 . 2 4 ( m , 1 H ) , 3 . 0 2 ( d d d , J = 3 . 4 8 , 8 . 3 4 , 1 2 . 3 8 H z , 1 H ) , 2 . 2 6 ( s , 3 H ) , 2 . 2 0 ( d d d , J = 4 . 9 5 , 8 . 1 6 , 1 3 . 6 6 H z , 1 H ) , 1 . 9 5 - 2 . 1 1 ( m , 3 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 1 5 H z , 3 H ) .
Ejemplo 95
W-(1-((2S,4fí)-2-(d¡fluoromet¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E95)
Figure imgf000165_0003
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 5 7 , 7 m g , 0 . 2 9 2 m m o l ) , D178 ( 5 6 m g , 0 . 2 4 3 m m o l ) , X - p h o s ( 2 , 3 1 9 m g , 4 . 8 6 p m o l ) , P d 2 ( d b a )3 ( 6 , 6 8 m g , 7 . 3 0 g m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 0 1 m g , 0.730 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 2 m L ) a g i t ó p o r m i c r o o n d a s a 1 2 0 ° C d u r a n t e 2 h o r a s . L u e g o , l a r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . L u e g o , e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P ( b a s e ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E95 ( 5 1 m g , 0 . 1 2 7 m m o l , 5 2 , 1 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 2 [ M H ] . tR = 1 . 8 9 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 6 0 0 M H z , M E T A N O L - d 4 ) : 5 7 . 6 0 - 7 . 7 2 ( m , 1 H ) , 6 . 8 3 ( d , J = 3 . 3 0 H z , 1 H ) , 6 . 3 1 ( d , J = 3 . 3 0 H z , 1 H ) , 5 . 7 0 - 5 . 9 4 ( m , 1 H ) , 4 . 5 0 ( q , J = 7 . 2 1 H z , 2 H ) , 4 . 3 4 - 4 . 4 4 ( m , 1 H ) , 3 . 3 0 ( d , J = 13 . 2 0 H z , 1 H ) , 3 . 1 6 - 3 . 2 6 ( m , 1 H ) , 2 . 8 9 ( b r . s . , 1 H ) , 2 . 2 8 ( s , 3 H ) , 1 . 9 2 - 2 . 1 3 ( m , 4 H ) , 1 . 4 3 ( t , J = 7 . 1 5 H z , 3 H ) .
Ejemplo 96
2-(4-((4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)amino)-5-metil-1H-pirazol-1-il)-2-metilcipropanonitrilo (E96)
Figure imgf000166_0001
S e s o m e t i ó a r e f l u j o u n a s o l u c i ó n d e D183 ( 5 1 0 m g , 1 , 4 9 m m o l ) e n P O C l 3 ( 5 0 m L ) a 9 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . S e r e t i r ó e l P O C l a m e d i a n t e e v a p o r a c i ó n y l a m e z c l a s e a g r e g ó a a g u a c o n g e l a d a ( 1 0 0 m L ) . S e a g r e g ó N a 2 C O 3 s a t . h a s t a p H a 8 y l a c a p a o r g á n i c a s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 1 0 0 m L x 3 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e l a v a r o n c o n s a l m u e r a ( 2 0 0 m L ) , s e s e c a r o n e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r a r o n y c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O : 4 5 / 5 5 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E96 ( 3 8 0 m g , 7 8 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 2 6 [ M H ] . t R = 3 . 5 3 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 3 ( b r s , 1 H ) , 8 . 1 7 ( s , 1 H ) , 7 . 7 1 ( s , 1 H ) , 6 . 8 6 - 6 . 8 9 ( m , 1 H ) , 6 . 2 1 - 6 . 2 3 ( m , 1 H ) , 4 . 4 2 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 2 . 4 1 ( s , 3 H ) , 1 . 9 4 ( s , 6 H ) , 1 . 3 4 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 97 y 98
4-etoxi-W-(1-((3S,4S)-3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (E97)
4-etoxi-W-(1-((3fí,4fí}-3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (E98)
Figure imgf000166_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 3 9 0 m g , 1 . 9 8 m m o l ) , D185 ( 4 2 0 m g , 1 . 6 5 m m o l ) , X - p h o s ( 1 5 7 m g , 0 . 3 3 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 4 4 m g , 0 . 1 6 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 6 8 3 m g , 4 . 9 5 m m o l ) e n d i o x a n o ( 2 0 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C b a j o N 2 . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 4 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l r a c e m a t o ( 3 2 0 m g , 4 9 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o c l a r o , q u e s e s e p a r ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a [ W a t e r s x b r i d g e ™ C 1 8 , 5 u m , 1 9 * 1 5 0 m m ; F a s e d e f l u j o : H 2 O ( N H 4 H C O 3 a l 0 . 1 % ) / M e C N : f o r m a d e M e C N 1 0 % a 9 5 % , 1 5 m l / m i n , T = 6 m i n ] p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E97 y E98.
E97: L C M S : 4 1 6 [ M H ] . t R = 3 . 5 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 6 . 6 8 8 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 n m , H e x : E t O H : D E A = 7 0 : 3 0 : 0 . 2 , F l u j o : 1 . 0 m l / m i n , 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C ) 1
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 0 ( s , 1 H ) , 8 . 0 3 ( s , 1 H ) , 7 . 6 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( s , 1 H ) , 6 . 2 0 ( s , 1 H ) , 5 . 0 3 - 4 . 7 7 ( m , 1 H ) , 4 . 5 8 - 4 . 5 5 ( m , 2 H ) , 4 . 5 0 - 4 . 4 0 ( m , 4 H ) , 4 . 3 0 - 4 . 2 4 ( m , 1 H ) , 3 . 5 9 - 3 . 5 5 ( m , 1 H ) , 3 . 2 0 - 3 . 1 5 ( m , 1 H ) , 2 . 7 8 - 2 . 7 5 ( m , 1 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 0 4 ( m , 3 H ) , 1 . 9 6 - 1 . 8 7 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 6 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - a f e ) : 5 - 1 8 6 . 1 .
E98: L C M S : 4 1 6 [ M H ] . t R = 2 . 9 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 9 6 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 n m , H e x : E t O H : D E A = 7 0 : 3 0 : 0 . 2 , F l u j o : 1 . 0 m l / m i n , 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 2 0 ( s , 1 H ) , 8 . 0 3 ( s , 1 H ) , 7 . 6 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( s , 1 H ) , 6 . 2 0 ( s , 1 H ) , 5 . 0 3 - 4 . 7 7 ( m , 1 H ) , 4 . 5 8 - 4 . 5 5 ( m , 2 H ) , 4 . 5 0 - 4 . 4 0 ( m , 4 H ) , 4 . 3 0 - 4 . 2 4 ( m , 1 H ) , 3 . 5 9 - 3 . 5 5 ( m , 1 H ) , 3 . 2 0 - 3 . 1 5 ( m , 1 H ) , 2 . 7 8 - 2 . 7 5 ( m , 1 H ) , 2 . 1 8 ( s , 3 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 0 4 ( m , 3 H ) , 1 . 9 6 - 1 . 8 7 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 6 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - d a ) : 5 - 1 8 6 . 1 .
Ejemplo 99
(fí)-WL(1-(2-(2-(d¡fluoromet¡l)morfol¡no)et¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7HLp¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (D199)
Figure imgf000167_0001
L C M S : 4 2 2 [ M H ] . tR = 3 . 2 7 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 6 6 ( s , 1 H ) , 6 . 8 1 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 9 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 5 . 7 6 ( t d , J = 5 5 . 5 , 4 . 2 H z , 1 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 2 2 ( t , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 3 . 8 9 ( d , J = 1 0 . 5 H z , 1 H ) , 3 . 5 9 - 3 . 7 6 ( m , 2 H ) , 2 . 6 9 - 2 . 8 7 ( m , 4 H ) , 2 . 2 2 - 2 . 3 2 ( m , 4 H ) , 2 . 1 9 ( t , J = 1 0 . 5 H z , 1 H ) , 1 . 4 1 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) ;
1 9 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D 3 O D ) : 5 - 1 3 0 . 1 ( d , J = 2 9 5 H z , 1 F ) ; - 1 3 2 . 7 ( d , J = 2 9 5 H z , 1 F ) .
Ejemplo 100
(S)-W-(1-(2-(2-(d¡fluoromet¡l)morfol¡no)et¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na(E100)
Figure imgf000167_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D192 ( 1 5 0 m g , 0 . 2 6 0 m m o l ) e n H 2 O ( 2 m L ) , d i o x a n o ( 3 m L ) y E t O H ( 5 m L ) s e a g r e g ó C s 2 C O 3 ( 1 , 0 0 g , 3 . 0 7 m m o l ) . L a r e s e c a l e n t ó h a s t a 1 0 5 ° C y s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y e l r e s i d u o s e v e r t i ó e n 1 5 m L d e a g u a , s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 1 0 m L x 2 ) . L a c a p a o r g á n i c a s e s e c ó s o b r e N a 2 S O 4 y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a ( S u n F i r e C 1 8 5 u m 1 9 * 1 5 m m , 1 5 - 7 0 % B , A : H 2 O ( N H 4 H C O 3 a l 0 . 1 % ) , B : A C N , U V 2 1 4 n m , V e l o c i d a d d e f l u j o 1 5 m L / m i n , R T : 8 0 m i n ) y H P L C q u i r a l ( C o n d i c i ó n q u i r a l : C h i r a l p a k I C 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 n m , H e x : E t O H = 8 0 : 2 0 , F l u j o : 1 . 0 m l / m i n , 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C . R t = 8 . 4 1 7 m i n ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E100 c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o ( 1 5 m g , 9 8 . 7 % e e , r e n d i m i e n t o 1 4 % ) .
L C M S : 4 2 2 [ M H ] . t R = 3 . 3 3 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 6 6 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 9 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 5 . 7 7 ( t d , J = 5 4 . 8 , 3 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 2 2 ( t , J = 6 . 8 H z , 2 H ) , 3 . 8 9 ( d , J = 1 1 . 2 H z , 1 H ) , 3 . 6 0 - 3 . 7 2 ( m , 2 H ) , 2 . 7 8 - 2 . 8 6 ( m , 3 H ) , 2 . 7 1 ( d , J = 1 1 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 2 1 - 2 . 3 1 ( m , 4 H ) , 2 . 1 8 ( t , J = 1 0 . 8 H z , 1 H ) , 1 . 4 1 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) ;
1 9 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D 3 O D ) : 5 - 1 3 0 . 1 ( d , J = 2 9 5 H z , 1 F ) ; - 1 3 2 . 7 ( d , J = 2 9 5 H z , 1 F ) .
Ejemplo 101
(±)-frans-3-(5-cloro-4-((4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)am¡no)-1H-pirazol-1-¡l) ciclopentanol (E101)
Figure imgf000168_0001
U n a s o l u c i ó n d e D200 ( 3 2 0 m g , 0 . 7 4 5 m m o l ) , D1 ( 1 7 7 m g , 0 . 8 9 4 m m o l ) , X - p h o s ( 7 . 1 0 m g , 0 . 0 1 5 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 6 1 8 m g , 4 . 4 7 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 0 . 4 6 m g , 0 . 0 2 2 m m o l ) e n 2 - b u t a n o l ( 1 0 m L ) s e a g i t ó p o r m i c r o o n d a s d u r a n t e 4 5 m i n . E l s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó d i r e c t a m e n t e m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 1 : 0 - 0 : 1 ) y l u e g o s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e M D A P ( d a s e d e r e f e r e n c i a , C H 3 C N a l 3 0 ~ 7 0 % e n a g u a ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E101 ( 7 5 m g , 0 . 2 0 7 m m o l , 2 7 . 8 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 3 6 3 [ M H ] . tR = 2 . 5 2 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 7 5 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 1 5 ( s , 1 H ) , 6 . 7 9 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 4 4 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 3 1 ( s , 1 H ) , 5 . 0 8 ( q u i n , J = 7 . 2 7 H z , 1 H ) , 4 . 6 5 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 5 6 ( q , J = 7 . 0 9 H z , 2 H ) , 2 . 3 1 - 2 . 4 8 ( m , 2 H ) , 2 . 2 1 - 2 . 3 0 ( m , 1 H ) , 2 . 1 2 - 2 . 2 0 ( m , 1 H ) , 1 . 9 9 - 2 . 1 1 ( m , 1 H ) , 1 . 7 6 ( d , J = 6 . 3 6 H z , 1 H ) , 1 . 4 8 ( t , J = 6 . 9 7 H z , 3 H ) .
Ejemplo 102
Enant¡ómero 1: c/s-4-etox¡-W-(1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E102)
Figure imgf000168_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 1 2 8 m g , 0 . 6 4 8 m m o l ) , D207 ( 1 5 0 m g , 0 . 5 9 0 m m o l ) , X - p h o s ( 6 0 m g , 0 . 1 1 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 3 m g , 0 . 0 5 8 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 2 4 4 m g , 1 . 7 7 m m o l ) e n d i o x a n o ( 1 0 m L ) s e a g i t ó 1 1 0 ° C b a j o N 2 d u r a n t e 8 h o r a s . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E L p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N a l 2 0 - 5 0 % e n a g u a ) y s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a ( I n s t r u m e n t o : C o l u m n a : B o s t o n C 1 8 , 5 u m , 2 1 * 1 5 0 m m ; F a s e m ó v i l : H 2 O ( N H 4 H C O 3 a l 0 . 1 % ) / M e C N : M e C N d e 2 0 % a 7 0 % , 2 0 m l / m i n , T = 1 5 m i n , t a = 7 . 2 m i n ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E102 ( 3 0 m g , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o c l a r o .
L C M S : 4 1 6 [ M H ] . t R = 3 . 2 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 6 . 7 3 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : O D - H ; 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 n m , H e x : E t O H : D E A = 7 0 : 3 0 : 0 . 2 , F l u j o : 1 . 0 m l / m i n , 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C . ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , D M S O - d a ) : 5 1 1 . 2 0 ( s , 1 H ) , 8 . 0 3 ( s , 1 H ) , 7 . 5 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( m 1 H ) , 4 . 8 9 - 4 . 7 7 ( m , 1 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 3 6 ( m , 7 H ) , 3 . 5 7 - 3 . 5 2 ( m , 1 H ) , 2 . 9 9 - 2 . 8 9 ( m , 2 H ) , 2 . 6 7 - 2 . 5 8 ( m , 1 H ) , 2 . 2 1 ( s , 3 H ) , 2 . 3 5 - 2 . 0 7 ( m , 2 H ) , 1 . 8 2 - 1 . 7 8 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 6 H z , 3 H ) .
1 9 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - d a ) : 5 - 1 9 8 . 1 .
Ejemplo 103
Enant¡ómero 2: c/s-4-etox¡-W-(1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E103)
Figure imgf000168_0003
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 1 1 9 m g , 0 . 6 0 2 m m o l ) , D208 ( 1 4 0 m g , 0 . 5 5 0 m m o l ) , X - p h o s ( 5 2 m g , 0 . 1 0 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 0 m g , 0 . 0 5 m m o l ) , y K 2 C O 3 ( 2 2 7 m g , 1 . 6 5 m m o l ) e n d i o x a n o ( 1 0 m L ) s e a g i t ó 1 1 0 ° C b a j o N 2 d u r a n t e 8 h o r a s . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E L p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N a l 2 0 - 5 0 % e n a g u a ) y s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a ( I n s t r u m e n t o : C o l u m n a : B o s t o n C 1 8 , 5 u m , 2 1 * 1 5 0 m m ; F a s e m ó v i l : H 2 O ( N F U H C C ^ a l 0 . 1 % ) / M e C N : M e C N d e 2 0 % a 7 0 % , 2 0 m l / m i n , T = 1 5 m i n , t a = 7 . 2 m i n ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E103 ( 2 0 m g , 1 1 . 5 % d e r e n d i m i e n t o , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o c l a r o .
L C M S : 4 1 6 [ M H ] . tR = 3 . 2 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 7 . 6 1 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : O D - H 5 u m ; 4 . 6 * 2 5 0 n m , H e x : E t O H : D E A = 7 0 : 3 0 : 0 . 2 , F l u j o : 1 . 0 m l / m i n , 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 2 0 ( s , 1 H ) , 8 . 0 3 ( s , 1 H ) , 7 . 5 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( m , 1 H ) , 6 . 2 0 ( m 1 H ) , 4 . 8 9 - 4 . 7 7 ( m , 1 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 3 6 ( m , 7 H ) , 3 . 5 7 - 3 . 5 2 ( m , 1 H ) , 2 . 9 9 - 2 . 8 9 ( m , 2 H ) , 2 . 6 7 - 2 . 5 8 ( m , 1 H ) , 2 . 2 1 ( s , 3 H ) , 2 . 3 5 - 2 . 0 7 ( m , 2 H ) , 1 . 8 2 - 1 . 7 8 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 6 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - a f e ) : 5 - 1 9 8 .
Ejemplo 104
W-(5-cloro-1-((3S, 4S)-3-fluoro-1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-amina (E104)
Figure imgf000169_0001
U n a m e z c l a d e D1 ( 1 8 1 m g , 0 . 9 2 m m o l ) , D213 ( 2 1 0 m g , 0 . 7 6 m m o l ) , X - p h o s ( 7 1 m g , 0 . 1 5 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 7 0 m g , 0 . 0 7 m m o l ) , y K 2 C O 3 ( 3 1 4 m g , 2 . 2 8 m m o l ) e n d i o x a n o ( 2 0 m L ) s e a g i t ó 1 1 0 ° C b a j o N 2 d u r a n t e 8 h o r a s . L a m e z c l a s e e n f r i ó h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y s e f i l t r ó . E l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a u l t r a r r á p i d a e n C 1 8 ( a c e t o n i t r i l o a l 2 0 - 5 0 % e n a g u a ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l p r o d u c t o e n b r u t o ( 1 0 0 m g , 3 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o c l a r o , q u e s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a [ W e l c h X B C 1 8 5 u m 2 1 . 2 * 1 5 0 m m , a c e t o n i t r i l o a l 1 0 - 7 0 % e n H 2 O , U V : 2 1 4 n m , v e l o c i d a d d e f l u j o : 2 0 m L / m i n , t R = 1 0 . 8 m i n ] p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E104 ( 6 0 m g , 9 9 . 7 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 6 [ M H ] . t R = 3 . 8 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000169_0002
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d f e ) : 5 1 1 . 3 1 ( s , 1 H ) , 8 . 2 0 ( s , 1 H ) , 7 . 9 0 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( d , J = 2 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( d , J = 2 . 8 H z , 1 H ) , 5 . 0 0 - 4 . 8 6 ( m , 1 H ) , 4 . 5 8 - 4 . 5 4 ( m , 2 H ) , 4 . 5 1 - 4 . 3 9 ( m , 5 H ) , 3 . 6 0 - 3 . 5 7 ( m , 1 H ) , 3 . 2 1 - 3 . 1 8 ( m , 1 H ) , 2 . 7 9 - 2 . 7 7 ( m , 1 H ) , 2 . 1 6 - 2 . 0 7 ( m , 3 H ) , 1 . 9 6 - 1 . 9 4 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 8 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - d s ) : 5 - 1 8 6 . 6 .
E 1 0 4 [ a ] D = - 6 . 6 3 o ( C o n c e n t r a c i ó n = 1 . 6 6 0 g / 1 0 0 m L , C H C h , T : 2 0 . 2 ° C ) )
Ejemplo 105
W-(5-cloro-1-((3fí, 4fí)-3-fluoro-1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E105)
Figure imgf000169_0003
U n a m e z c l a d e D1 ( 2 5 8 m g , 1 . 3 1 m m o l ) , D218 ( 3 0 0 m g , 1 . 0 9 m m o l ) , X - p h o s ( 9 9 m g , 0 . 2 1 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 9 0 m g , 0 . 1 0 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 4 5 1 m g , 3 . 2 7 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 0 ° C b a j o N 2. L a m e z c l a s e e n f r i ó h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y s e f i l t r ó . E l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a u l t r a r r á p i d a e n C 1 8 ( a c e t o n i t r i l o a l 2 0 - 5 0 % e n a g u a ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l p r o d u c t o e n b r u t o ( 2 0 0 m g , 5 0 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o c l a r o , q u e s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a [ W e l c h X B C 1 8 5 u m 2 1 . 2 * 1 5 0 m m , a c e t o n i t r i l o a l 1 0 - 7 0 % e n H 2 O , U V : 2 1 4 n m , v e l o c i d a d d e f l u j o : 2 0 m L / m i n , t R = 1 1 . 0 m i n ] p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E105 c o m o u n s ó l i d o b l a n c o ( 1 0 0 m g , 9 9 . 5 % e e ) .
L C M S : 4 3 6 [ M H ] . t R = 3 . 8 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000170_0001
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d 6 ) : 5 1 1 . 3 1 ( s , 1 H ) , 8 . 2 1 ( s , 1 H ) , 7 . 9 0 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( d , J = 2 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( d , J = 2 . 8 H z , 1 H ) , 5 . 0 0 - 4 . 8 6 ( m , 1 H ) , 4 . 5 8 - 4 . 5 5 ( m , 2 H ) , 4 . 5 1 - 4 . 4 1 ( m , 5 H ) , 3 . 6 1 - 3 . 5 7 ( m , 1 H ) , 3 . 2 3 - 3 . 1 7 ( m , 1 H ) , 2 . 7 9 - 2 . 7 7 ( m , 1 H ) , 2 . 1 6 - 2 . 0 9 ( m , 3 H ) , 1 . 9 7 - 1 . 9 4 ( m , 1 H ) , 1 . 3 4 ( t , J = 6 . 8 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - a f e ) : 5 - 1 8 6 . 6 ;
[ a ] D = 6 . 0 2 o ( C o n c e n t r a c i ó n = 1 . 6 2 9 g / 1 0 0 m L , C H C l 3 , T : 2 0 . 3 ° C ) )
Ejemplo 106 y 107
Enantiómero 1: c/s-W-(5-cloro-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-i)-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-etoxi-7H-p¡rrolo[2,3-d]piimidin-2-amina (E106)
Enant¡ómero 2: c/s-W-(5-cloro-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-i)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]piimidin-2-amina (E107)
Figure imgf000170_0002
U n a m e z c l a d e D1 ( 3 4 5 m g , 1 . 7 5 m m o l ) , D221 ( 4 0 0 m g , 1 . 4 6 m m o l ) , X - p h o s ( 1 3 9 m g , 0 . 2 9 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 3 2 m g , 0 . 1 4 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 6 0 4 m g , 4 . 3 8 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 5 ° C b a j o N 2. L a m e z c l a s e e n f r i ó h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y s e f i l t r ó . E l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a u l t r a r r á p i d a e n C 1 8 ( a c e t o n i t r i l o a l 2 0 - 5 0 % e n a g u a ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l p r o d u c t o d e l t í t u l o ( 1 5 0 m g , 2 4 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o c l a r o , q u e s e s e p a r ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e S F C p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E106 ( 4 0 m g , í r = 5 . 5 m i n , 1 0 0 % e e ) y E107 ( 4 0 m g , í r = 6 . 5 m i n , 9 9 % e e )
E106 : L C M S : 4 3 6 [ M H ] . í r = 3 . 6 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : í r = 5 . 5 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 2 5 0 m m * 4 . 6 m m , C O 2 : M e O H ( D E A a l 0 . 2 % ) = 7 0 : 3 0 , F l u j o : V e l o c i d a d d e f l u j o d e C O 2 : 2 . 1 , C o s o l v e n t e : 0 . 8 9 9 , c o n t r a p r e s i ó n : 1 0 0 , T = 3 9 . 9 ° C . T i e m p o = 1 0 m i n . ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - c f e ) : 5 1 1 . 3 0 ( s , 1 H ) , 8 . 2 0 ( s , 1 H ) , 7 . 8 2 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( t , J = 2 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( d d , J = 3 . 2 , 1 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 9 5 - 4 . 8 3 ( m , 1 H ) , 4 . 6 1 - 4 . 4 0 ( m , 7 H ) , 3 . 5 8 - 3 . 5 2 ( m , 1 H ) , 3 . 0 4 - 2 . 9 0 ( m , 2 H ) , 2 . 6 7 - 2 . 5 7 ( m , 1 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 1 8 ( m , 2 H ) , 1 . 9 0 - 1 . 8 7 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - d a ) : 5 - 1 9 8 . 6 .
E107 : L C M S : 4 3 6 [ M H ] . í r = 3 . 6 1 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : í r = 6 . 5 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 2 5 0 m m * 4 . 6 m m , C O 2 : M e O H ( D E A a l 0 . 2 % ) = 7 0 : 3 0 , F l u j o : V e l o c i d a d d e f l u j o d e C O 2 : 2 . 1 , C o s o l v e n t e : 0 . 8 9 9 , c o n t r a p r e s i ó n : 1 0 0 , T = 3 9 . 9 ° C . T i e m p o = 1 0 m i n . ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - c f e ) : 5 1 1 . 3 0 ( s , 1 H ) , 8 . 2 0 ( s , 1 H ) , 7 . 8 2 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( t , J = 2 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( d d , J = 3 . 2 , 1 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 9 5 - 4 . 8 3 ( m , 1 H ) , 4 . 6 1 - 4 . 4 0 ( m , 7 H ) , 3 . 5 8 - 3 . 5 2 ( m , 1 H ) , 3 . 0 4 - 2 . 9 0 ( m , 2 H ) , 2 . 6 7 - 2 . 5 8 ( m , 1 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 1 6 ( m , 2 H ) , 1 . 9 0 - 1 . 8 7 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , D M S O - d a ) : 5 - 1 9 8 . 6 .
Ejemplo 108 y 109
Enantiómero 1: (frans)-4-etoxi-AÍ-(5-met¡l-1-(3-morfoMnoc¡clopent¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-amina (E108)
Enant¡ómero 2: (frans)-4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(3-morfol¡noc¡clopent¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E109)
Figure imgf000171_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D230 ( 1 8 1 m g , 0 . 6 7 m m o l ) , D1 ( 1 9 8 m g , 1 . 0 1 m m o l ) , X - p h o s ( 6 4 m g , 0 . 1 3 4 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 2 9 0 m g , 2 . 1 1 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 6 2 m g , 0 . 0 6 7 m m o l ) b a j o N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( e l u y e n t e : E t O A c ) y H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E110 ( 2 3 m g , 1 0 % d e r e n d i m i e n t o , 9 7 . 5 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 2 [ M H ] . t R = 3 . 9 3 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000171_0002
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 5 9 ( s , 1 H ) , 8 . 1 4 ( s , 1 H ) , 6 . 7 8 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 4 2 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 2 7 ( s , 1 H ) , 4 . 9 4 - 4 . 8 5 ( m , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 3 . 7 4 ( t , J = 4 . 8 H z , 1 H ) , 3 . 0 3 - 2 . 9 2 ( m , 1 H ) , 2 . 5 9 ­ 2 . 4 6 ( m , 4 H ) , 2 . 3 1 - 2 . 1 4 ( m , 4 H ) , 2 . 0 6 - 1 . 9 6 ( m , 1 H ) , 1 . 6 0 - 1 . 5 3 ( m , 1 H ) , 1 . 4 5 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) .
Ejemplo 111
Enantiómero 2: (frans)-W-(5-cloro-1-(3-morfolinociclopentil)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo [2,3-djpirim idin-2-amina (E111)
Figure imgf000172_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D231 ( 1 6 2 m g , 0 . 6 0 m m o l ) , D1 ( 1 7 8 m g , 0 . 9 0 m m o l ) , X - p h o s ( 5 8 m g , 0 . 1 2 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 2 5 0 m g , 1 . 8 0 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 5 5 m g , 0 . 0 6 0 m m o l ) b a j o N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( E t O A c ) y H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E111 ( 6 2 m g , 2 0 % d e r e n d i m i e n t o , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 2 [ M H ] . tR = 3 . 4 0 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000172_0002
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 8 5 ( s , 1 H ) , 8 . 1 2 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 4 0 ( d d , J = 3 . 3 , 2 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 2 7 ( s , 1 H ) , 4 . 9 3 - 4 . 8 4 ( m , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 3 . 7 3 ( t , J = 4 . 5 H z , 1 H ) , 3 . 0 1 - 2 . 9 1 ( m , 1 H ) , 2 . 5 8 ­ 2 . 4 5 ( m , 4 H ) , 2 . 2 9 - 2 . 1 1 ( m , 4 H ) , 2 . 0 6 - 1 . 9 5 ( m , 1 H ) , 1 . 6 2 - 1 . 5 1 ( m , 1 H ) , 1 . 4 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 112
(c/'s)-W-(5-cloro-1-(3-morfolinociclopentil)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E112)
Figure imgf000172_0003
A u n a s o l u c i ó n d e D234 ( 2 0 m g , 0 . 0 7 4 m m o l ) , D1 ( 1 6 m g , 0 . 0 8 1 m m o l ) , X - p h o s ( 5 , 3 m g , 0 . 0 1 1 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 8 2 m g , 0 . 5 9 m m o l ) e n d i o x a n o ( 5 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 7 m g , 0 . 0 0 7 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 2 0 ° C . L a m e z c l a s e e n f r i ó h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e y s e f i l t r ó . E l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l r e s i d u o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O = 4 0 - 6 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E112 ( 1 , 7 m g , 5 % ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 2 [ M H ] . t R = 3 . 3 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 4 6 ( s , 1 H ) , 8 . 1 3 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d d , J = 3 . 6 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 4 2 ( d d , J = 3 . 6 , 1 . 8 H z , 1 H ) , 6 . 2 9 ( s , 1 H ) , 4 . 8 0 - 4 . 7 0 ( m , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 3 . 7 3 ( t , J = 4 . 8 H z , 4 H ) , 2 . 7 8 - 2 . 6 6 ( m , 1 H ) , 2 . 5 9 ­ 2 . 4 6 ( m , 4 H ) , 2 . 3 9 - 2 . 3 0 ( m , 1 H ) , 2 . 2 5 - 2 . 0 6 ( m , 3 H ) , 1 . 9 7 - 1 . 8 5 ( m , 2 H ) , 1 . 4 7 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 113
Enantiómero 1: (c/'s)-4-etoxi-W-(5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-1 H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E113)
Figure imgf000172_0004
U n a s o l u c i ó n d e D242 ( 7 0 m g , 0 . 3 6 m m o l ) , D1 ( 1 0 9 m g , 0 . 4 3 m m o l ) , X - p h o s ( 3 4 m g , 0 . 0 7 2 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 2 m g , 0 . 0 3 6 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 4 8 m g , 1 . 0 8 m m o l ) e n d i o x a n o ( 6 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 0 ° C b a j o N 2. L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( D C M : M e O H = 1 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E113 ( 2 2 . 0 m g , r e n d i m i e n t o 1 7 % , 1 0 0 % e e ) .
L C M S : 3 5 7 [ M H ] . t R = 3 . 8 0 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 4 . 5 4 m i n . ( c o l u m n a : I D ; c o s o l v e n t e : M e O H ( 0 . 2 D E A ) ; v e l o c i d a d d e f l u j o d e C O 2 : 2 . 1 ; v e l o c i d a d d e flujo del cosolvente: 0.899; T = 40°C). La estereoquímica absoluta no se determinó.
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 7 . 6 3 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 6 2 - 4 . 5 5 ( m , 1 H ) , 4 . 4 5 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 2 0 - 4 . 1 3 ( m , 1 H ) , 3 . 8 3 - 3 . 7 4 ( m , 2 H ) , 3 . 7 3 - 3 . 6 0 ( m , 1 H ) , 2 . 6 9 - 2 . 5 7 ( m , 1 H ) , 2 . 2 6 ( s , 3 H ) , 2 . 1 6 - 2 . 0 8 ( m , 1 H ) , 1 . 8 2 - 1 . 7 3 ( m , 1 H ) , 1 . 3 9 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) , 0 . 8 6 ( d , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 114
Enantiómero 2: (c/s)-4-etoxi-W-(5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E114)
Figure imgf000173_0001
U n a s o l u c i ó n d e D243 ( 6 6 m g , 0 . 3 6 m m o l ) , D1 ( 1 0 9 m g , 0 . 4 3 m m o l ) , X - p h o s ( 3 4 m g , 0 . 0 7 2 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 3 2 m g , 0 . 0 3 6 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 4 8 m g , 1 . 0 8 m m o l ) e n d i o x a n o ( 6 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 0 ° C b a j o N 2. L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a
( D C M : M e O H = 1 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E114 ( 5 5 . 8 m g , r e n d i m i e n t o 4 4 % , 1 0 0 % e e ) .
L C M S : 3 5 7 [ M H ] . tR = 3 . 8 0 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000173_0002
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C D 3O D ) : 5 7 . 6 8 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 4 5 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 1 0 - 3 . 9 2 ( m , 3 H ) , 3 . 6 4 - 3 . 5 5 ( m , 1 H ) , 3 . 2 2 ( t , J = 1 1 . 1 H z , 1 H ) , 2 . 4 1 - 2 . 3 3 ( m , 1 H ) , 2 . 2 5 ( s , 3 H ) , 2 . 2 1 - 2 . 1 5 ( m , 1 H ) , 1 . 8 7 - 1 . 7 8 ( m , 1 H ) , 1 . 3 9 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) , 0 . 6 6 ( d , J = 6 . 6 H z , 3 H ) .
Ejemplo 116
Enantiómero 2: (frans)-4-etoxi-W-(5-metil-1-(3-metiltetrahidro-2H-piran-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E116)
U n a s o l u c i ó n d e D245 ( 3 5 m g , 0 . 1 8 m m o l ) , D1 ( 5 5 m g , 0 . 2 2 m m o l ) , X - p h o s ( 1 7 m g , 0 . 0 3 6 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 6 m g , 0 . 0 1 8 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 7 4 m g , 0 . 5 4 m m o l ) e n d i o x a n o ( 6 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 0 ° C b a j o N 2. L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( D C M : M e O H = 1 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E116 ( 1 5 . 0 m g , r e n d i m i e n t o 2 4 % , 9 7 , 3 % e e ) .
L C M S : 3 5 7 [ M H ] . tR = 3 . 7 9 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000174_0001
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 6 8 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 4 5 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 4 . 1 0 - 4 . 0 6 ( m , 1 H ) , 4 . 0 6 - 3 . 9 8 ( m , 2 H ) , 3 . 6 4 - 3 . 5 5 ( m , 1 H ) , 3 . 2 2 ( t , J = 1 1 . 1 H z , 1 H ) , 2 . 4 1 - 2 . 3 5 ( m , 1 H ) , 2 . 3 2 ( s , 3 H ) , 2 . 2 3 ­ 2 . 1 6 ( m , 1 H ) , 1 . 8 8 - 1 . 8 0 ( m , 1 H ) , 1 . 3 9 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) , 0 . 6 6 ( d , J = 6 . 9 H z , 3 H ) .
Ejemplo 117 y 118
Enantiómero 1: W-(1-(4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-3-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-amina (E117)
Enant¡ómero 2: W-(1-(4,4-d¡fluorop¡per¡d¡n-3-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E118)
Figure imgf000174_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D253 ( 7 6 0 m g , 1 , 5 9 2 m m o l ) e n i s o p r o p a n o l ( 1 0 m L ) s e a g r e g ó H C l ( 7 , 6 4 m L , 3 8 , 2 m m o l ) . S e a g i t ó l a r e a c c i ó n a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 1 6 h o r a s . E l s o l v e n t e s e e v a p o r ó p a r a p r o p o r c i o n a r e l r a c e m a t o ( 6 0 1 m g , 1 . 5 9 2 m m o l , 1 0 0 % d e r e n d i m i e n t o ) , 2 0 0 m g d e l c u a l s e s e p a r ó m e d i a n t e S F C y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( C H 2 C l 2 : m e t a n o l = 1 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E117 ( 3 0 m g , r e n d i m i e n t o 1 5 % , 1 0 0 % e e ) y E118 ( 4 5 m g , r e n d i m i e n t o 2 3 % , 9 9 . 1 % e e ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E117 : L C M S : 3 7 8 [ M H ] . t R = 3 . 5 6 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000174_0003
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 7 3 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 5 9 - 4 . 4 2 ( m , 3 H ) , 3 . 5 8 ­ 3 . 5 1 ( m , 1 H ) , 3 . 3 1 - 3 . 2 3 ( m , 1 H ) , 3 . 0 7 - 3 . 0 3 ( m , 2 H ) , 2 . 3 3 - 2 . 2 0 ( m , 4 H ) , 2 . 0 9 - 2 . 1 0 ( m , 1 H ) , 2 . 1 0 - 1 . 9 2 ( m , 1 H ) , 1 . 3 9 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) ;
Ejemplo 119 y 120
Enantiómero 1: W-(1-(4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E119)
Enant¡ómero 2: W-(1-(4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E120)
Figure imgf000175_0001
A u n a s o l u c i ó n d e W -( 1 -( 4 , 4 - d i f l u o r o p i p e r i d i n - 3 - i l ) - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - a ( | p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( 2 0 0 m g , 0 . 5 3 0 m m o l ) e n D M F ( 1 0 m L ) s e a g r e g ó o x e t a n - 3 - o n a ( 7 6 4 m g , 1 0 . 6 0 m m o l ) e n p a r t e s , s e g u i d a d e t r i a c e t o x i b o r o h i d r u r o d e s o d i o ( 3 3 7 m g , 1 . 5 9 0 m m o l ) . S e a g i t ó l a r e a c c i ó n a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 1 6 h o r a s . E l s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a i n v e r s a d e C 1 8 p a r a p r o p o r c i o n a r e l r a c é m i c o ( 2 0 0 m g , 0 . 4 6 1 m m o l , 8 7 % d e r e n d i m i e n t o ) , q u e s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C q u i r a l p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E119 ( 9 . 2 m g , r e n d i m i e n t o 7 . 7 % , 9 6 . 5 % e e ) y E120 ( 8 . 1 m g , r e n d i m i e n t o 6 . 8 % , 7 0 . 9 % e e ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E119 : L C M S : 4 3 3 [ M H ] . tR = 3 . 7 1 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 6 . 0 9 7 m i n . ( O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 n m , H e x : E t O H = 7 0 : 3 0 , F l u j o : 1 . 0 m l / m i n , 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 7 2 ( s , 1 H ) , 6 . 7 9 ( s , 1 H ) , 6 . 2 8 ( s , 1 H ) , 4 . 7 7 - 4 . 7 0 ( m , 3 H ) , 4 . 6 6 - 4 . 5 8 ( m , 2 H ) , 4 . 4 6 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 3 . 7 6 - 3 . 6 7 ( m , 1 H ) , 3 . 0 3 - 2 . 9 3 ( m , 2 H ) , 2 . 9 1 - 2 . 8 6 ( m , 1 H ) , 2 . 3 1 - 2 . 1 5 ( m , 6 H ) , 1 . 3 9 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) . E120 : L C M S : 4 3 3 [ M H ] . t R = 3 . 7 1 4 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 7 . 5 8 8 m i n . ( O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 n m , H e x : E t O H = 7 0 : 3 0 , F l u j o : 1 . 0 m l / m i n , 2 3 0 n m , T = 3 0 ° C ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 7 2 ( s , 1 H ) , 6 . 7 9 ( s , 1 H ) , 6 . 2 8 ( s , 1 H ) , 4 . 7 5 - 4 . 6 8 ( m , 3 H ) , 4 . 6 3 - 4 . 5 8 ( m , 2 H ) , 4 . 4 6 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 3 . 7 3 - 3 . 6 9 ( m , 1 H ) , 3 . 0 0 - 2 . 9 3 ( m , 2 H ) , 2 . 9 0 - 2 . 8 5 ( m , 1 H ) , 2 . 2 7 - 2 . 1 6 ( m , 6 H ) , 1 . 3 9 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) . Ejemplo 121 y 122
Enantiómero 1: W-(1-(4,4-difluoro-1-metilpiperidin-3-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E121)
Enantiómero 2: W-(1-(4,4-difluoro-1-metilpiperidin-3-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E122)
Figure imgf000175_0002
A u n a s o l u c i ó n d e W -( 1 -( 4 , 4 - d i f l u o r o p i p e r i d i n - 3 - i l ) - 5 - m e t i l - 1 H - p i r a z o l - 4 - y l ) - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - a ( | p i r i m i d i n - 2 - a m i n a ( 1 2 2 m g , 0 . 3 2 3 m m o l ) , f o r m a l d e h í d o ( 0 . 2 4 1 m L , 3 . 2 3 m m o l ) e n D M F ( 5 m L ) s e a g r e g ó t r i a c e t o x i b o r o h i d r u r o d e s o d i o ( 2 0 6 m g , 0 . 9 7 0 m m o l ) a - 1 0 ° C y l a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e 5 h o r a s . L a m e z c l a s e v e r t i ó e n N a H C O 3 a c u o s o s a t u r a d o y s e e x t r a j o c o n a c e t a t o d e e t i l o . L a c a p a o r g á n i c a s e l a v ó c o n s a l m u e r a , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a C 1 8 , S F C y T L C p r e p a r a t i v a ( C H 2 C l 2 : m e t a n o l = 1 2 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E121 ( 1 5 m g , r e n d i m i e n t o 1 7 % , 1 0 0 % e e ) y E122 ( 1 4 m g , r e n d i m i e n t o 1 6 % , 9 8 . 5 % e e ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E121 : L C M S : 3 9 1 [ M H ] . Xr = 3 . 2 3 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : Xr = 2 . 9 6 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : c o l u m n a I C , C O 2 : M e O H : D E A = 7 5 : 2 5 : 0 . 2 , F l u j o : 2 . 2 5 m l / m i n , 2 3 0 n m ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 9 3 ( s , 1 H ) , 7 . 7 5 ( s , 1 H ) , 6 . 4 7 ( d , J = 5 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 3 0 ( d , J = 5 . 1 H z , 1 H ) , 6 . 1 7 ( s , 1 H ) , 4 . 5 1 - 4 . 3 2 ( m , 3 H ) , 3 . 2 0 - 3 . 1 2 ( m , 1 H ) , 2 . 9 3 - 2 . 8 3 ( m , 2 H ) , 2 . 4 6 - 2 . 4 2 ( m , 1 H ) , 2 . 3 8 ( s , 3 H ) , 2 . 2 5 - 2 . 1 5 ( m , 4 H ) , 2 . 1 3 - 2 . 1 0 ( m , 1 H ) , 1 . 4 1 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) ;
1 9 F N M R ( 2 8 2 M H z , C D C l a ) : 5 - 1 0 2 . 7 9 , - 1 0 3 . 6 2 , - 1 1 6 . 1 4 , - 1 1 6 . 9 8 .
E122 : L C M S : 3 9 1 [ M H ] . Xr = 3 . 2 3 5 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : Xr = 4 . 0 8 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : c o l u m n a I C , C O 2 : M e O H : D E A = 7 5 : 2 5 : 0 . 2 , F l u j o : 2 . 2 5 m l / m i n , 2 3 0 n m ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 1 0 . 4 4 ( s , 1 H ) , 7 . 7 3 ( s , 1 H ) , 6 . 3 8 - 6 . 3 6 ( m , 1 H ) , 6 . 2 8 - 6 . 2 6 ( m , 1 H ) , 6 . 2 3 ( s , 1 H ) , 4 . 5 1 - 4 . 3 0 ( m , 3 H ) , 3 . 1 3 (X, J = 1 1 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 8 8 - 2 . 8 4 ( m , 2 H ) , 2 . 4 6 - 2 . 4 1 ( m , 1 H ) , 2 . 3 7 ( m , 3 H ) , 2 . 2 7 - 2 . 0 4 ( m , 5 H ) , 1 . 4 0 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) ;
1 9 F N M R ( 2 8 2 M H z , C D C l a ) : 5 - 1 0 2 . 8 3 , - 1 0 3 . 7 2 , - 1 1 6 . 0 9 , - 1 1 6 . 9 4 .
Ejemplo 123
Enantiómero 1: W-(5-cloro-1-(4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E123)
Figure imgf000176_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D257 ( 2 8 0 m g , 0 . 9 6 m m o l ) , D1 ( 2 0 8 m g , 1 . 0 5 m m o l ) , X - p h o s ( 6 9 m g , 0 . 1 4 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 7 9 5 m g , 5 . 7 6 m m o l ) e n d i o x a n o ( 2 0 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 8 8 m g , 0 . 0 9 6 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 5 ° C y l u e g o s e e n f r i ó h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a C 1 8 ( A C N / H 2 O = 4 0 - 6 0 % ) y s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a ( S u n f i r e 1 9 x 1 5 0 m m ; 2 5 - 6 5 % B ; A : H 2 O ( N H 4 H C O 3 a l 0 . 1 % ) B : A C N ; V = 2 0 m L / m i n ; Xr = 1 2 . 6 m i n ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E123 ( 5 5 m g , 1 3 % , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 5 5 [ M H ] . Xr = 2 . 0 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : Xr = 9 . 7 3 7 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m , 4 . 6 * 2 5 0 m m , f a s e : H e x : E t O H = 7 0 : 3 0 , F : 1 . 0 m l / m i n , W : 2 3 0 n m , T : 3 0 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 6 3 ( s , 1 H ) , 8 . 2 7 ( s , 1 H ) , 6 . 7 9 ( s , 1 H ) , 6 . 4 3 ( s , 1 H ) , 6 . 3 2 ( s , 1 H ) , 4 . 5 2 - 4 . 7 9 ( m , 7 H ) , 3 . 6 8 - 3 . 7 2 ( m , 1 H ) , 3 . 0 4 - 3 . 1 0 ( m , 1 H ) , 2 . 9 5 ( m , 1 H ) , 2 . 8 1 - 2 . 8 4 ( m , 1 H ) , 2 . 1 3 - 2 . 3 5 ( m , 3 H ) , 1 . 4 5 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) . Ejemplo 124
Enantiómero 2: W-(5-cloro-1-(4,4-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-3-il)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E124)
Figure imgf000176_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D258 ( 2 8 0 m g , 0 . 9 6 m m o l ) , D1 ( 2 0 8 m g , 1 . 0 5 m m o l ) , X - p h o s ( 6 9 m g , 0 . 1 4 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 7 9 5 m g , 5 . 7 6 m m o l ) e n d i o x a n o ( 2 0 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 8 8 m g , 0 . 0 9 6 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 5 ° C y l u e g o s e e n f r i ó h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a C 1 8 ( A C N / H 2 O = 4 0 - 6 0 % ) y s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e H p L C p r e p a r a t i v a ( S u n f i r e 1 9 x 1 5 0 m m ; 2 5 - 6 5 % B ; A : H 2 O ( N H 4 H C O 3 a l 0 . 1 % ) B : A c N ; V = 2 0 m L / m i n ; Xr = 1 2 . 6 m i n ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E124 ( 4 2 m g , 1 0 % , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o .
L C M S : 4 5 5 [ M H ] . t R = 2 . 0 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : Xr = 7 . 8 2 3 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m , 4 . 6 * 2 5 0 m m , f a s e : H e x : E t O H = 7 0 : 3 0 , F : 1 . 0 m l / m i n , W : 2 3 0 n m , T : 3 0 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 6 5 ( s , 1 H ) , 8 . 2 6 ( s , 1 H ) , 6 . 7 8 ( s , 1 H ) , 6 . 4 1 ( s , 1 H ) , 6 . 3 2 ( s , 1 H ) , 4 . 5 2 - 4 . 7 1 ( m , 7 H ) , 3 . 6 8 - 3 . 7 2 ( m , 1 H ) , 3 . 0 4 - 3 . 1 0 ( m , 1 H ) , 2 . 9 5 ( m , 1 H ) , 2 . 8 1 - 2 . 8 4 ( m , 1 H ) , 2 . 1 3 - 2 . 3 5 ( m , 3 H ) , 1 . 4 5 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) . Ejemplo 125
Enantiómero 1: W-(5-cloro-1-(4,4-difluoropiperidin-3-il)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo [2,3-d] pirimidin-2-amina (E125)
Figure imgf000177_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D261 ( 4 0 m g , 0 . 0 8 0 m m o l ) e n M e O H ( 3 m L ) s e a g r e g ó H C l / d i o x a n o ( 2 m L , 4 M ) . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y e l r e s i d u o s e v e r t i ó e n 5 m L d e N a H C O 3 s a t u r a d o a c u o s o . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 1 0 m L x 2 ) . L o s e x t r a c t o s s e c o n c e n t r a r o n y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O = 3 0 - 5 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E125 ( 9 m g , r e n d i m i e n t o 2 8 % , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 8 [ M H ] . t R = 3 . 3 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 7 . 5 2 3 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m , F a s e : H e x : E t O H = 7 0 : 3 0 ; F : 1 .0 m L / m i n ; W : 2 3 0 n m ; T : 30 ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 3 9 ( s , 1 H ) , 8 . 2 4 ( s , 1 H ) , 6 . 8 2 ( d d , J = 4 . 0 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 4 4 ( d d , J = 4 . 0 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 3 1 ( s , 1 H ) , 4 . 5 6 - 4 . 4 8 ( m , 3 H ) , 3 . 5 8 - 3 . 5 3 ( m , 1 H ) , 3 . 3 0 ( d d , J = 1 4 . 0 , 4 . 0 H z , 1 H ) , 3 . 2 3 - 3 . 1 9 ( m , 1 H ) , 3 . 0 3 ­ 2 . 9 9 ( m , 1 H ) , 2 . 3 7 - 2 . 2 2 ( m , 1 H ) , 2 . 0 4 - 1 . 9 5 ( m , 1 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 126
Enantiómero 2: W-(5-cloro-1-(4,4-difluoropiperidin-3-il)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo [2,3-d] pirimidin-2-amina (E126)
Figure imgf000177_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D262 ( 5 5 m g , 0 . 1 1 0 m m o l ) e n M e O H ( 5 m L ) s e a g r e g ó H C l / d i o x a n o ( 4 m L , 4 M ) . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 2 h o r a s . L a m e z c l a s e c o n c e n t r ó y e l r e s i d u o s e v e r t i ó e n 5 0 m L d e N a H C O 3 s a t u r a d o a c u o s o . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a j o c o n E t O A c ( 5 0 m L x 2 ) . L o s e x t r a c t o s s e c o n c e n t r a r o n y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O = 3 5 - 5 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E126 ( 1 7 m g , 2 8 % d e r e n d i m i e n t o , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 8 [ M H ] . t R = 2 . 9 9 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 3 9 1 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m , F a s e : H e x : E t O H = 7 0 : 3 0 ; F : 1 . 0 m L / m i n ; W : 2 3 0 n m ; T : 3 0 ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó . 1
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 7 7 ( s , 1 H ) , 8 . 2 2 ( s , 1 H ) , 6 . 7 8 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 4 2 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 3 5 ( s , 1 H ) , 4 . 5 6 - 4 . 4 8 ( m , 3 H ) , 3 . 5 6 - 3 . 5 3 ( m , 1 H ) , 3 . 3 0 ( d d , J = 1 4 . 0 , 4 . 0 H z , 1 H ) , 3 . 2 3 - 3 . 1 9 ( m , 1 H ) , 3 . 0 4 ­ 2 . 9 7 ( m , 1 H ) , 2 . 3 7 - 2 . 2 2 ( m , 1 H ) , 2 . 0 3 - 1 . 9 5 ( m , 1 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 127 y 128
Enantiómero 1: (c/s)-4-etoxi-AÍ-(1-(3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)-5-metil-1 H-p¡razol-4-il)-7H-p¡rrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E127)
Enant¡ómero 2: (c/'s)-4-etoxi-W-(1-(3-fluorotetrahidro-2H-piran-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E128)
Figure imgf000178_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D268 ( 2 5 0 m g , 1 . 2 6 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) s e a g r e g ó D1 ( 3 1 1 m g , 1 . 5 8 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 1 5 m g , 0 . 1 2 6 m m o l ) , X - p h o s ( 1 2 0 m g , 0 . 2 5 2 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 5 2 0 m g , 3 . 7 8 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a m e z c l a s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a ( P E : E A = 1 : 1 a 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l r a c e m a t o c o m o u n s ó l i d o a m a r i l l o ( 2 0 0 m g , r e n d i m i e n t o 4 4 % ) , q u e s e s e p a r ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e S F C p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E127 ( 1 1 . 1 m g , tR = 4 . 7 2 m i n ) y E128 ( 1 3 . 0 m g , t R = 5 . 9 2 m i n ) .
E127 : L C M S : 3 6 1 [ M H ] . t R = 3 . 5 0 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 4 . 7 2 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : C h i r a l p a k I E , 8 0 - 2 0 - C O 2 - M e O H , F l u j o : 2 . 4 ; T = 3 9 . 9 ° C ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 1 8 ( s , 1 H ) , 8 . 0 2 ( s , 1 H ) , 7 . 6 0 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( s , 1 H ) , 6 . 2 1 ( s , 1 H ) , 4 . 8 3 - 4 . 5 8 ( m , 2 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 0 5 - 3 . 9 6 ( m , 2 H ) , 3 . 7 4 - 3 . 5 6 ( m , 2 H ) , 2 . 7 6 - 2 . 6 7 ( m , 1 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 1 . 7 7 - 1 . 7 3 ( m , 1 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( D M S O - a f e , 3 7 6 M H z ) : 5 - 2 0 3 . 4 .
E128 : L C M S : 3 6 1 [ M H ] . t R = 3 . 5 2 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 5 . 9 2 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : C h i r a l p a k I E , 8 0 - 2 0 - C O 2 - M e O H , F l u j o : 2 . 4 ; T = 3 9 . 9 ° C ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 1 9 ( s , 1 H ) , 8 . 0 2 ( s , 1 H ) , 7 . 6 0 ( s , 1 H ) , 6 . 8 5 ( s , 1 H ) , 6 . 2 1 ( s , 1 H ) , 4 . 8 3 - 4 . 5 8 ( m , 2 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 0 5 - 3 . 9 6 ( m , 2 H ) , 3 . 7 4 - 3 . 5 6 ( m , 2 H ) , 2 . 7 6 - 2 . 6 7 ( m , 1 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 1 . 7 6 - 1 . 7 4 ( m , 1 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( D M S O - d a , 3 7 6 M H z ) : 5 - 2 0 3 . 4 .
Ejemplo 129 y 130
Enantiómero 1: (frans)-4-etoxi-W-(5-etil-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1 H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E129)
Enantiómero 2: (frans)-4-etoxi-W-(5-etil-1-(3-fluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-il)-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E130)
Figure imgf000178_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D272 ( 1 2 5 m g , 0 . 4 7 m m o l ) , D1 ( 1 0 1 m g , 0 . 5 1 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 2 5 9 m g , 1 . 8 8 m m o l ) y X - p h o s ( 4 1 m g , 0 . 0 7 1 m m o l ) e n d i o x a n o ( 15 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 4 2 m g , 0 . 0 4 7 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a 1 2 0 ° C d u r a n t e 1 6 h o r a s . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l r e s i d u o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a ( D C M : M e O H = 5 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l r a c e m a t o d e s e a d o ( 8 0 m g , 7 5 % ) , q u e s e s e p a r ó m e d i a n t e H P L C q u i r a l ( O J - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m f a s e : H e x / E t O H = 7 0 / 3 0 , F : 1 m l / m i n w : 2 3 0 n m T : 3 0 ) y c o l u m n a e n C 1 8 ( M e C N / h h O = 3 5 - 5 5 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r l o s c o m p u e s t o s d e l t í t u l o E129 ( 1 4 m g , t R = 8 . 7 3 5 m i n , 1 0 0 % e e ) y E130 ( 1 0 m g , t R = 1 1 . 2 6 2 m i n , 9 7 . 5 % e e ) c o m o s ó l i d o s b l a n c o s .
E129 : L C M S : 4 3 0 [ M H ] . t R = 3 . 2 9 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 8 . 7 3 5 m i n . ( C h i r a l c e l O J - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m f a s e : H e x / E t O H = 7 0 / 3 0 , F : 1 m l / m i n w : 2 3 0 n m T : 3 0 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 7 4 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 5 . 0 9 - 4 . 9 0 ( m , 1 H ) , 4 . 7 1 ( t , J = 6 . 4 H z , 2 H ) , 4 . 6 3 ( q , J = 6 . 4 H z , 2 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 3 0 - 4 . 2 0 ( m , 1 H ) , 3 . 7 2 - 3 . 6 5 ( m , 1 H ) , 3 . 2 5 - 3 . 2 3 ( m , 1 H ) , 2 . 8 9 - 2 . 8 6 ( m , 1 H ) , 2 . 7 3 ( q , J = 7 . 6 H z , 2 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 2 8 ( m , 1 H ) , 2 . 1 8 - 2 . 1 0 ( m , 2 H ) , 2 . 0 3 - 1 . 9 7 ( m , 1 H ) , 1 . 4 0 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) , 1 . 1 7 ( t , J = 7 . 6 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( C D 3 O D , 3 7 6 M H z ) : 5 - 1 8 9 . 1 .
E130 : L C M S : 4 3 0 [ M H ] . t R = 3 . 2 9 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 1 1 . 2 6 2 m i n . ( C h i r a l c e l O J - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m f a s e : H e x / E t O H = 7 0 / 3 0 , F : 1 m l / m i n w : 2 3 0 n m T : 3 0 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C D 3 O D ) : 5 7 . 7 4 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 5 . 0 8 - 4 . 9 0 ( m , 1 H ) , 4 . 7 1 ( t , J = 6 . 4 H z , 2 H ) , 4 . 6 3 ( q , J = 6 . 4 H z , 2 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 3 0 - 4 . 2 0 ( m , 1 H ) , 3 . 7 2 - 3 . 6 5 ( m , 1 H ) , 3 . 2 5 - 3 . 2 3 ( m , 1 H ) , 2 . 8 9 - 2 . 8 6 ( m , 1 H ) , 2 . 7 3 ( q , J = 7 . 6 H z , 2 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 2 8 ( m , 1 H ) , 2 . 1 8 - 2 . 1 0 ( m , 2 H ) , 2 . 0 3 - 1 . 9 6 ( m , 1 H ) , 1 . 4 0 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) , 1 . 1 7 ( t , J = 7 . 6 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( C D 3 O D , 3 7 6 M H z ) : 5 - 1 8 9 . 1 .
Ejemplo 131
Enantiómero 1: W-(1-(3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-5-metil-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E131)
Figure imgf000179_0001
U n a s o l u c i ó n d e D281 ( 8 0 m g , 0 . 2 9 m m o l ) , D1 ( 9 0 m g , 0 . 4 5 m m o l ) , X - p h o s ( 5 0 m g , 0 . 1 0 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 4 2 m g , 0 . 0 5 0 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 2 0 m g , 0 . 8 7 0 m m o l ) e n 1 , 4 - d i o x a n o ( 5 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a r e f l u j o b a j o n i t r ó g e n o .
L a m e z c l a s e e v a p o r ó y e l r e s i d u o s e s u s p e n d i ó e n D C M y s e f i l t r ó . E l s o l v e n t e s e e v a p o r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P C L p r e p a r a t i v a y s e p u r i f i c ó a d i c i o n a l m e n t e m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( E A : M e O H = 2 0 : 1 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o E132 ( 2 0 m g , 1 5 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 4 [ M H ] . tR = 3 . 6 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 6 . 1 0 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I D ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; ( C o s o l v e n t e M e O H ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , M E T A N O L - a 4 ) : 5 7 . 7 3 ( s , 1 H ) , 6 . 8 1 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 6 0 - 4 . 7 1 ( m , 5 H ) , 4 . 4 6 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 3 . 7 0 - 3 . 7 9 ( m , 1 H ) , 3 . 0 1 - 3 . 1 6 ( m , 2 H ) , 2 . 6 9 - 2 . 8 1 ( m , 1 H ) , 2 . 4 2 - 2 . 6 0 ( m , 1 H ) , 2 . 2 6 - 2 . 3 5 ( m , 4 H ) , 2 . 0 3 - 2 . 0 9 ( m , 1 H ) , 1 . 3 9 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D 3 O D ) : 5 - 1 0 7 . 3 ( d , J = 2 4 2 H z , 1 F ) , - 1 1 6 . 1 ( d , J = 2 4 2 , 1 F ) .
Ejemplo 133
Enantiómero 1: W-(5-cloro-1-(3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E133)
Figure imgf000180_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D285 ( 1 0 0 m g , 0 . 3 4 2 m m o l ) e n d i o x a n o ( 1 5 m L ) s e a g r e g ó D1 ( 1 0 1 m g , 0 . 5 1 4 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 6 3 m g , 0 . 0 6 8 m m o l ) , X - p h o s ( 5 7 m g , 0 . 1 2 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 4 2 m g , 1 . 0 3 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( E A : P E = 3 : 1 ) y H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E133 ( 1 1 m g , r e n d i m i e n t o 2 0 % , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 5 4 [ M H ] . t R = 3 . 3 5 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 6 . 0 8 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I D ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ; V e l o c i d a d d e f l u j o : 0 . 8 9 9 ; T e m p . : 4 0 , 2 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - a ) : 5 8 . 5 9 ( s , 1 H ) , 8 . 2 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 1 ( s , 1 H ) , 6 . 4 2 ( s , 1 H ) , 6 . 3 3 ( s , 1 H ) , 4 . 6 9 - 4 . 5 9 ( m , 4 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 5 0 ( m , 3 H ) , 3 . 8 2 - 3 . 7 3 ( m , 1 H ) , 3 . 1 6 - 3 . 0 1 ( m , 2 H ) , 2 . 8 1 - 2 . 6 7 ( m , 1 H ) , 2 . 5 7 - 2 . 4 5 ( m , 1 H ) , 2 . 3 9 - 2 . 3 1 ( m , 1 H ) , 2 . 1 9 - 2 . 0 8 ( m , 1 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) .
1 9 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D 3 O D ) : 5 - 1 0 7 . 2 ( d , J = 2 4 1 , 0 H z , 1 F ) , - 1 1 5 . 8 ( d , J = 2 4 1 , 0 , 1 F ) .
Ejemplo 134
Enantiómero 2: W-(5-cloro-1-(3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirim idin-2-amina (E134)
Figure imgf000180_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D286 ( 1 0 0 m g , 0 . 5 1 4 m m o l ) y D1 ( 1 0 1 m g , 0 . 5 1 4 m m o l ) e n d i o x a n o ( 1 5 m L ) s e a g r e g ó K 2 C O 3 ( 1 4 2 m g , 1 . 0 3 m m o l ) , s e g u i d o d e P d 2 ( d b a ) 3 ( 6 3 m g , 0 . 0 6 8 m m o l ) y X - p h o s ( 5 7 m g , 0 . 1 2 m m o l ) a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e b a j o N 2. L a m e z c l a s e c a l e n t ó h a s t a r e f l u j o y s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e . L a m e z c l a s e d i l u y ó c o n C H 2 C L ( 1 0 0 m L ) y s e f i l t r ó . E l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y e l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e T L C p r e p a r a t i v a ( E A : P E = 3 : 1 ) y H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E134 ( 1 0 m g , r e n d i m i e n t o 7 . 0 % , 9 9 , 7 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 5 4 [ M H ] . t R = 3 . 3 5 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t R = 7 . 1 2 m i n . ( C o n d i c i ó n : C o l u m n a I D ( 4 . 6 * 2 5 0 m m , 5 u m ) ; C o s o l v e n t e M e O H ; V e l o c i d a d d e f l u j o : 0 . 8 9 9 ; T e m p . : 4 0 , 2 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó . 1
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - a ) : 5 8 . 5 3 ( s , 1 H ) , 8 . 2 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 1 ( s , 1 H ) , 6 . 4 2 ( s , 1 H ) , 6 . 3 2 ( s , 1 H ) , 4 . 7 2 - 4 . 6 2 ( m , 4 H ) , 4 . 5 6 - 4 . 5 0 ( m , 3 H ) , 3 . 8 0 - 3 . 7 5 ( m , 1 H ) , 3 . 1 6 - 3 . 0 1 ( m , 2 H ) , 2 . 8 1 - 2 . 6 8 ( m , 1 H ) , 2 . 5 7 - 2 . 4 5 ( m , 1 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 3 1 ( m , 1 H ) , 2 . 1 9 - 2 . 0 7 ( m , 1 H ) , 1 . 4 6 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) .
1 9 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D 3 O D ) : 5 - 1 0 7 . 2 ( d , J = 2 4 1 , 0 H z , 1 F ) , - 1 1 5 . 8 ( d , J = 2 4 1 , 0 , 1 F ) .
[ a ] D = 4 2 . 7 6 ° ( C o n c e n t r a c i ó n = 0 . 2 9 g / 1 0 0 m L , C H C h , T : 2 1 . 4 ° C ) )
Ejemplo 135
(fí)-4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E135)
Figure imgf000181_0001
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 3 7 6 m g , 1 . 9 1 m m o l ) , D292 ( 3 0 0 m g , 1 . 2 7 m m o l ) , X - p h o s ( 1 2 1 m g , 0 . 2 5 4 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 5 2 5 m g , 3 . 8 1 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 1 6 m g , 0 . 1 2 7 m m o l ) e n 1 , 4 - d i o x a n o ( 4 0 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 0 ° C b a j o n i t r ó g e n o . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E135 ( 4 0 m g , 8 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 8 [ M H ] . t n = 3 . 5 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , M E T A N O L - d o ) : 5 7 . 6 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 6 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 7 3 - 4 . 6 1 ( m , 4 H ) , 4 . 4 8 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 3 6 - 4 . 2 6 ( m , 1 H ) , 3 . 6 1 - 3 . 5 3 ( m , 1 H ) , 2 . 8 9 - 2 . 8 0 ( m , 2 H ) , 2 . 3 0 - 2 . 2 3 ( m , 1 H ) , 2 . 2 6 ( s , 3 H ) , 2 . 0 5 ­ 1 . 7 4 ( m , 4 H ) , 1 . 4 1 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 136
(S)-4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-3-¡l)-1H-pirazol-4-¡l)-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E136)
Figure imgf000181_0002
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 3 6 0 m g , 1 . 8 2 m m o l ) , D298 ( 2 8 0 m g , 1 . 1 9 m m o l ) , X - p h o s ( 1 4 0 m g , 0 . 2 9 4 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 5 0 0 m g , 3 . 6 2 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 2 1 m g , 0 . 1 3 2 m m o l ) e n 1 , 4 - d i o x a n o ( 4 0 m L ) s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C b a j o n i t r ó g e n o . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p r e p a r a t i v a p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E136 ( 6 7 , 1 m g , 1 4 % d e r e n d i m i e n t o ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 9 8 [ M H ] . t n = 3 . 5 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , M E T A N O L - d o ) : 5 7 . 6 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 6 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 6 . 2 7 ( d , J = 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 7 3 - 4 . 5 6 ( m , 4 H ) , 4 . 4 8 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 3 4 - 4 . 2 7 ( m , 1 H ) , 3 . 6 1 - 3 . 5 3 ( m , 1 H ) , 2 . 8 9 - 2 . 8 1 ( m , 2 H ) , 2 . 3 0 - 2 . 2 3 ( m , 1 H ) , 2 . 2 5 ( s , 3 H ) , 2 . 0 3 ­ 1 . 7 7 ( m , 4 H ) , 1 . 4 0 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 137
4-etox¡-W-(5-met¡l-1-(1-met¡l-3-morfolinoc¡clobut¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-7H-pirrolo[2, 3-d]pirimidin-2-amina (E137)
Figure imgf000181_0003
L C M S : 4 1 2 [ M H ] . t n = 2 . 0 6 0 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , D M S O - c f e ) : 5 1 1 . 1 8 ( b r s . , 1 H ) , 7 . 9 7 ( b r . s . , 1 H ) , 7 . 5 3 ( s , 1 H ) , 6 . 8 6 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 1 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 4 4 ( d , J = 6.6 H z , 2 H ) , 3 . 5 6 ( b r . s . , 4 H ) , 2 . 7 4 ( t , J = 7 . 2 H z , 1 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 4 8 ( m , 4 H ) , 2 . 2 7 ( b r . s . , 4 H ) , 2 . 1 4 ( s , 3 H ) , 1 . 4 7 ( s , 3 H ) , 1 . 3 6 ( t , J = 6 . 4 H z , 3 H ) .
Ejemplo 138
Enantiómero 1: (4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-yl)-[1-(3-fluoro-3-met¡l-1-oxetan-3-¡l-p¡per¡d¡n-4-¡l)-5-met¡l-1H-pirazol-4-¡l]-am¡na (E138)
Figure imgf000182_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D313 ( 2 3 0 m g , 0 . 8 6 m m o l ) , D1 ( 2 5 4 m g , 1 . 2 9 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 3 5 6 m g , 2 . 5 8 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) s e a g r e g ó X - p h o s ( 8 2 m g , 0 . 1 7 2 m m o l ) , s e g u i d o d e P d 2 ( d b a ) 3 ( 7 9 m g , 0 . 0 8 6 m m o l ) b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o p a r a p r o p o r c i o n a r u n a c e i t e a m a r i l l o , q u e s e p u r i f i c ó m e d i a n t e H P L C p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E138 ( 1 2 . 9 m g , r e n d i m i e n t o 5 % , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 0 [ M H ] . t ñ = 3 . 3 6 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t ñ = 5 . 7 5 6 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m , F a s e : H e x : E t O H = 7 0 / 3 0 , F : 1 . 0 m L / m i n , W : 2 3 0 n m , T : 3 0 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 0 9 ( s , 1 H ) , 7 . 7 6 ( s , 1 H ) , 6 . 6 4 ( s , 1 H ) , 6 . 3 5 ( s , 1 H ) , 6 . 1 9 ( s , 1 H ) , 4 . 6 8 - 4 . 5 7 ( m , 4 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 4 . 2 1 - 4 . 1 2 ( m , 1 H ) , 3 . 6 6 - 3 . 5 7 ( m , 1 H ) , 2 . 9 3 - 2 . 8 9 ( m , 1 H ) , 2 . 8 1 - 2 . 7 8 ( m , 1 H ) , 2 . 6 7 ­ 2 . 5 5 ( m , 1 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 2 . 2 0 - 1 . 9 6 ( m , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) , 1 . 3 5 ( d , J = 2 3 . 7 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D C h ) : 5 - 1 4 2 . 8 .
Ejemplo 139
Enant¡ómero 2: (4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-yl)-[1-(3-fluoro-3-met¡l-1-oxetan-3-¡l-p¡per¡d¡n-4-¡l)-5-met¡l-1H-p¡razol-4-¡l]-am¡na (E139)
Figure imgf000182_0002
A u n a m e z c l a d e D314 ( 2 4 0 m g , 0 . 9 0 m m o l ) , D1 ( 2 6 6 m g , 1 . 3 5 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 3 7 2 m g , 2 . 7 m m o l ) e n d i o x a n o ( 3 0 m L ) s e a g r e g ó X - p h o s ( 8 6 , 0 m g , 0 . 1 8 m m o l ) , s e g u i d o d e P d 2 ( d b a ) 3 ( 8 3 m g , 0 . 0 9 0 m m o l ) b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . L a m e z c l a s e f i l t r ó y s e c o n c e n t r ó a l v a c í o p a r a p r o p o r c i o n a r u n a c e i t e a m a r i l l o , q u e s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( D C M : M e O H = 1 0 : 1 ) y H P L C p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E139 ( 2 1 . 8 m g , r e n d i m i e n t o 6 % , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 0 [ M H ] . t ñ = 0 . 8 9 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : t ñ = 7 . 3 0 5 m i n . ( C h i r a l p a k O D - H 5 u m 4 . 6 * 2 5 0 m m , F a s e : H e x : E t O H = 7 0 / 3 0 , F : 1 . 0 m L / m i n , W : 2 3 0 n m , T : 3 0 ) L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 0 8 ( s , 1 H ) , 7 . 7 6 ( s , 1 H ) , 6 . 6 2 ( s , 1 H ) , 6 . 3 5 ( s , 1 H ) , 6 . 1 1 ( s , 1 H ) , 4 . 7 0 - 4 . 5 1 ( m , 4 H ) , 4 . 4 7 ( q , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 4 . 2 0 - 4 . 1 1 ( m , 1 H ) , 3 . 6 5 - 3 . 5 8 ( m , 1 H ) , 2 . 9 4 - 2 . 8 8 ( m , 1 H ) , 2 . 8 0 - 2 . 7 5 ( m , 1 H ) , 2 . 6 6 - 2 . 5 3 ( m , 1 H ) , 2 . 2 4 ( s , 3 H ) , 2 . 2 0 - 1 . 9 7 ( m , 3 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 6 . 9 H z , 3 H ) , 1 . 3 5 ( d , J = 2 3 . 1 H z 3 H ) .
19 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D C h ) : 5 - 1 4 2 . 8 ( s , 1 F ) ,
Ejemplo 140
(±)-W-(5-cloro-1-(4-(oxetan-3-¡l)morfol¡n-2-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E140)
Figure imgf000183_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D320 ( 7 0 m g , 0 . 2 7 m m o l ) e n d i o x a n o ( 1 5 m L ) s e a g r e g ó D1 ( 1 0 6 m g , 0 . 5 4 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 5 m g , 0 . 0 2 7 m m o l ) , X - p h o s ( 2 6 m g , 0 . 0 5 4 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 1 2 m g , 0 . 8 1 m m o l ) . L a m e z c l a r e s u l t a n t e s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . S e a g r e g ó a d e m á s D1 ( 1 0 6 m g , 0 . 5 4 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 5 m g , 0 . 0 2 7 m m o l ) , X - p h o s ( 2 6 m g , 0 . 0 5 4 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 1 2 m g , 0 . 8 1 m m o l ) ; l a m e z c l a r e s u l t a n t e s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C b a j o t N 2. L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o b r u t o s e p u r i f i c ó c o n T L C p r e p a r a t i v a ( P E : E A = 1 : 1 0 ) y l u e g o C 1 8 ( C H 3 C N / H 2 O a l 1 0 - 2 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E140 ( 1 8 m g , r e n d i m i e n t o 1 6 % ) c o m o u n a c e i t e i n c o l o r o .
L C M S : 4 2 0 [ M H ] . tR = 3 . 1 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 9 2 ( s , 1 H ) , 8 . 2 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 7 ( d , J = 5 . 7 H z , 1 H ) , 6 . 4 1 - 6 . 3 9 ( m , 1 H ) , 5 . 5 9 ( t , J = 6 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 7 3 - 4 . 6 1 ( m , 4 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 0 5 ( d d , J = 1 1 . 4 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 3 . 9 2 ( d t , J = 1 1 . 4 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 3 . 6 5 ( t , J = 6 . 3 H z , 1 H ) , 2 . 8 9 ( d , J = 6 . 3 H z , 2 H ) , 2 . 6 4 ( d , J = 1 1 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 2 6 ( d t , J = 1 1 . 4 , 3 . 6 H z , 1 H ) , 1 . 4 4 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
D e m a n e r a a l t e r n a t i v a , E140 t a m b i é n s e p o d r í a p r e p a r a r m e d i a n t e e l s i g u i e n t e p r o c e d i m i e n t o :
A u n a s o l u c i ó n d e D320 ( 2 0 5 m g , 0 . 7 9 m m o l ) e n d i o x a n o ( 8 0 m L ) s e a g r e g ó D1 ( 3 9 1 m g , 1 . 9 9 m m o l ) , P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 4 5 m g , 0 . 1 6 m m o l ) , X - p h o s ( 1 5 0 m g , 0 . 3 2 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 3 2 7 m g , 2 . 3 7 m m o l ) . L a m e z c l a r e s u l t a n t e s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 0 0 ° C . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l r e s i d u o s e d i s o l v i ó e n a g u a ( 2 0 m L ) , E A ( 2 0 m L ) y l u e g o s e s e p a r ó . L a c a p a a c u o s a s e e x t r a j o c o n E A ( 2 0 m L x 3 ) . L a c a p a o r g á n i c a c o m b i n a d a s e l a v ó c o n s a l m u e r a ( 2 0 m L x 2 ) , s e s e c ó e n N a 2 S O 4 , s e f i l t r ó y c o n c e n t r ó . E L p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó c o n C 1 8 ( C H 3 C N a l 2 5 - 5 0 % / H 2 O ) y c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( P E : E A = 5 : 1 a 1 : 1 0 ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l t í t u l o E140 ( 1 4 9 m g ) c o m o u n a c e i t e i n c o l o r o .
Ejemplo 141 y 142
Enantiómero 1: W-(5-cloro-1-(4-(oxetan-3-il)morfol¡n-2-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etoxi-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E141)
Enantiómero 2: W-(5-cloro-1-(4-(oxetan-3-il)morfol¡n-2-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etoxi-7H-p¡rrolo [2,3-d]pirimidin-2-amina (E142)
Figure imgf000183_0002
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 7 1 ( s , 1 H ) , 8 . 2 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 6 ( d d , J = 3 . 6 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 6 . 4 0 ( d d , J = 3 . 6 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 6 . 3 4 ( s , 1 H ) , 5 . 5 9 ( t , J = 6 . 0 H z , 1 H ) , 4 . 7 3 - 4 . 6 1 ( m , 4 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 0 5 ( d d , J = 1 1 . 4 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 3 . 9 2 ( d t , J = 1 1 . 4 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 3 . 6 9 - 3 . 6 1 ( m , 1 H ) , 2 . 9 0 ( d , J = 6 . 6 H z , 2 H ) , 2 . 6 4 ( d , J = 1 1 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 2 6 ( d t , J = 1 1 . 4 , 3 . 6 H z , 1 H ) , 1 . 4 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
[ a ] D = 5 9 . 5 o ( C o n c e n t r a c i ó n = 0 . 4 4 7 g / 1 0 0 m L , C H C h , T : 1 8 . 5 ° C ) )
E142 : L C M S : 4 2 0 [ M H ] . Xr = 3 . 7 1 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000184_0001
1 H N M R ( 3 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 9 . 0 3 ( s , 1 H ) , 8 . 2 3 ( s , 1 H ) , 6 . 7 5 ( d d , J = 3 . 6 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 6 . 4 0 ( d d , J = 3 . 6 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 6 . 3 5 ( s , 1 H ) , 5 . 5 8 (X, J = 5 . 7 H z , 1 H ) , 4 . 7 3 - 4 . 6 1 ( m , 4 H ) , 4 . 5 1 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 0 5 ( d d , J = 1 1 . 4 , 3 . 6 H z , 1 H ) , 3 . 9 2 ( d t , J = 1 1 . 4 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 3 . 6 9 - 3 . 6 1 ( m , 1 H ) , 2 . 9 0 ( d , J = 6 . 9 H z , 2 H ) , 2 . 6 4 ( d , J = 1 1 . 4 H z , 1 H ) , 2 . 2 6 ( d t , J = 1 1 . 4 , 3 . 6 H z , 1 H ) , 1 . 4 5 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 143
Enantiómero 1: W-(5-cloro-1-(morfol¡n-2-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-amina (E143)
Figure imgf000184_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D365 ( 9 0 m g , 0 . 1 9 m m o l ) e n D C M a n h i d r o ( 9 m L ) s e a g r e g ó Z n B r 2 ( 2 2 4 m g , 0 . 9 8 m m o l ) . L a m e z c l a r e s u l t a n t e s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 7 h o r a s . L a r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n N a H C O 3 ( 2 0 m L , s a t . ) . L a s u s p e n s i ó n s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 2 0 m i n , l u e g o s e e x t r a j o c o n D C M ( 6 x 1 5 m L ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e s e c a r o n e n N a 2 S O 4 a n h i d r o , s e f i l t r a r o n y s e c o n c e n t r a r o n . E l r e s i d u o s e p u r i f i c ó c o n C 1 8 ( C H 3 C N a l 2 0 - 3 0 % / H 2 O ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E143 ( 5 3 m g , r e n d i m i e n t o 7 5 % , 9 2 . 2 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 6 4 [ M H ] . Xr = 3 . 5 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000184_0003
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 6 7 ( s , 1 H ) , 8 . 2 5 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 4 2 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 3 5 ( s , 1 H ) , 5 . 5 0 ( d d , J = 5 . 6 , 3 . 6 H z , 1 H ) , 4 . 5 3 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 3 . 8 4 - 3 . 7 9 ( m , 1 H ) , 3 . 7 2 - 3 . 6 0 ( m , 2 H ) , 3 . 2 7 ( d d , J = 1 3 . 2 , 3 . 6 H z , 1 H ) , 2 . 9 9 (X, J = 4 . 8 H z , 2 H ) , 1 . 4 6 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
Ejemplo 144
Enant¡ómero 2: W-(5-cloro-1-(morfol¡n-2-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E144)
Figure imgf000184_0004
A u n a s o l u c i ó n d e D366 ( 1 8 0 m g , 0 . 3 8 8 m m o l ) e n D C M a n h i d r o ( 2 0 m L ) s e a g r e g ó Z n B r 2 ( 5 3 0 m g , 2 . 3 5 6 m m o l ) . L a m e z c l a r e s u l t a n t e s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 9 h o r a s . L a r e a c c i ó n s e i n a c t i v ó c o n N a H C O 3 ( 5 0 m L , s a t . ) y l a m e z c l a s e a g i t ó a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e d u r a n t e 3 0 m i n . L a c a p a o r g á n i c a s e s e p a r ó y l a c a p a a c u o s a s e e x t r a j o c o n D C M ( 3 0 m L x 3 ) . L a s c a p a s o r g á n i c a s c o m b i n a d a s s e s e c a r o n e n N a 2 S O 4 a n h i d r o , s e f i l t r a r o n y s e c o n c e n t r a r o n . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó c o n C 1 8 ( C H 3 C N a l 2 0 - 3 0 % / H 2 O ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E144 ( 1 0 5 m g , r e n d i m i e n t o 7 4 % , 1 0 0 % e e ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 3 6 4 [ M H ] . Xr = 3 . 5 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
Figure imgf000184_0005
1H NMR (400 MHz, CLOROFORMO-d): 5 8.78 (s, 1H), 8.25 (s, 1H), 6.79 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.42 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 6.35 (s, 1H), 5.50 (dd, J= 5.6, 3.6 Hz, 1H), 4.53 (q, J= 7.2 Hz, 2H), 3.84-3.79 (m, 1H), 3.72-3.60 (m, 2H), 3.27 (dd, J= 13.2, 3.6 Hz, 1H), 2.99 (X, J= 4.8 Hz, 2H), 1.46 (X, J= 7.2 Hz, 3H).
Ejemplo 145
(±)-frans-W-(5-cloro-1-(2,2-d¡fluoro-5-morfol¡noc¡clohex¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-amina (E145)
Figure imgf000185_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D329 ( 1 3 0 m g , 0 . 4 0 5 m m o l ) e n i s o b u t a n o l ( 1 0 m L ) s e a g r e g ó K 2 C O 3 ( 2 8 0 m g , 2 . 0 2 6 m m o l ) , P d 2 d b a 3 ( 3 7 . 1 m g , 0 . 0 4 1 m m o l ) , D1 ( 9 6 m g , 0 . 4 8 6 m m o l ) y X - p h o s ( 3 8 . 6 m g , 0 . 0 8 1 m m o l ) . L a r e a c c i ó n s e i r r a d i ó p o r m i c r o o n d a s a 1 1 0 ° C d u r a n t e 1 h o r a . D e s p u é s d e l a f i l t r a c i ó n , e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E145 ( 3 1 m g , 0 . 0 5 2 m m o l , 1 2 , 8 4 % d e r e n d i m i e n t o ) .
L C M S : 4 8 2 [ M H ] . tR = 2 . 4 7 2 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 3 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 2 2 ( s , 1 H ) , 7 . 9 0 ( s , 1 H ) , 6 . 9 2 ( d d , J = 2 . 3 2 , 3 . 3 0 H z , 1 H ) , 6 . 2 4 ( d d , J = 1 . 8 3 , 3 . 3 0 H z , 1 H ) , 4 . 7 6 - 4 . 9 6 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 6 . 8 5 H z , 2 H ) , 3 . 5 8 ( t , J = 4 . 2 8 H z , 4 H ) , 2 . 8 4 ( t , J = 1 1 . 6 2 H z , 1 H ) , 2 . 5 2 - 2 . 5 9 ( m , 4 H ) , 2 . 3 1 - 2 . 4 4 ( m , 1 H ) , 1 . 9 8 - 2 . 2 4 ( m , 3 H ) , 1 . 8 9 ( d , J = 1 3 . 4 5 H z , 1 H ) , 1 . 4 4 - 1 . 6 2 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 9 7 H z , 3 H ) .
Ejemplo 146
(±)-c/s-W-(5-cloro-1-(2,2-d¡fluoro-5-morfol¡noc¡clohex¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E146)
Figure imgf000185_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D331 ( 1 6 0 m g , 0 . 4 9 9 m m o l ) e n 1 , 4 - d i o x a n o ( 1 0 m L ) s e a g r e g ó K 2 C O 3 ( 3 4 5 m g , 2 . 4 9 4 m m o l ) , P d 2d b a 3 ( 4 5 . 7 m g , 0 . 0 5 0 m m o l ) , D1 ( 9 9 m g , 0 . 4 9 9 m m o l ) y X - p h o s ( 4 7 . 6 m g , 0 . 1 0 0 m m o l ) . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e c a l e n t ó a r e f l u j o d u r a n t e 1 h o r a . D e s p u é s d e l a f i l t r a c i ó n , e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó y s e p u r i f i c ó m e d i a n t e M D A P p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E146 ( 7 m g , 0 . 0 1 5 m m o l , 2 , 9 1 % d e r e n d i m i e n t o ) .
L C M S : 4 8 2 [ M H ] . t R = 2 . 7 3 1 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - a f e ) : 5 1 1 . 3 0 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 2 6 ( s , 1 H ) , 7 . 9 2 ( s , 1 H ) , 6 . 9 2 ( d d , J = 2 . 3 2 , 3 . 3 0 H z , 1 H ) , 6 . 2 4 ( d d , J = 1 . 9 6 , 3 . 4 2 H z , 1 H ) , 4 . 8 2 - 4 . 9 9 ( m , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 0 1 H z , 2 H ) , 3 . 6 3 ( t , J = 4 . 0 3 H z , 4 H ) , 2 . 6 6 ( b r . s . , 1 H ) , 2 . 4 4 ( b r . s . , 4 H ) , 2 . 3 7 ( d , J = 1 1 . 4 9 H z , 1 H ) , 1 . 9 9 - 2 . 3 0 ( m , 4 H ) , 1 . 6 0 - 1 . 7 6 ( m , 1 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 6 . 9 7 H z , 3 H ) .
Ejemplo 147 y 148
Enant¡ómero 1: frans-W-(5-cloro-1-(2,2-d¡fluoro-5-morfol¡noc¡clohex¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E147)
Enant¡ómero 2: frans-W-(5-cloro-1-(2,2-d¡fluoro-5-morfol¡noc¡clohex¡l)-1 H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-am¡na (E148)
Figure imgf000185_0003
Los compuestos del titulo E147 (36 mg, rendimiento 18 %, 100 % ee) y E148 (33 mg, rendimiento 17 %, 98.7 % ee) se obtuvieron como sólidos blancos mediante la separación de E145 (198 mg, 0.410 mmol) utilizando HPLC preparativa quiral y TLC preparativa (CH2Cl2 : metanol = 12: 1).
E147 : L C M S : 4 8 2 [ M H ] . Xr = 3 . 6 0 8 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : Xr = 6 . 6 3 6 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : I C c o l u m n a : 5 u m , 4 . 6 * 2 5 0 m m , F a s e : H e x : E X O H = 6 0 : 4 0 , v e l o c i d a d d e f l u j o : 1 m l / m i n , 2 3 0 n m ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 6 8 ( s , 1 H ) , 8 . 2 7 ( s , 1 H ) , 6 . 7 9 ( s , 1 H ) , 6 . 4 2 ( s , 1 H ) , 6 . 3 5 ( s , 1 H ) , 4 . 5 9 - 4 . 4 7 ( m , 3 H ) , 3 . 7 4 - 3 . 7 1 ( m , 4 H ) , 2 . 7 5 - 2 . 5 7 ( m , 6 H ) , 2 . 4 0 - 2 . 3 0 ( m , 1 H ) , 2 . 2 4 - 2 . 1 6 ( m , 1 H ) , 2 . 0 3 - 1 . 7 7 ( m , 3 H ) , 1 . 4 5 (X, J = 6 . 9 H z , 3 H ) ;
1 9 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D C l a ) : 5 - 1 0 2 . 7 4 , - 1 0 3 . 3 7 , - 1 1 5 . 3 6 , - 1 1 5 . 9 9 .
E148 : L C M S : 4 8 2 [ M H ] . Xr = 4 . 0 6 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
H P L C q u i r a l : Xr = 7 . 9 6 1 m i n . C o n d i c i ó n q u i r a l : I C c o l u m n a : 5 u m , 4 . 6 * 2 5 0 m m , F a s e : H e x : E X O H = 6 0 : 4 0 , v e l o c i d a d d e f l u j o : 1 m l / m i n , 2 3 0 n m ) . L a e s t e r e o q u í m i c a a b s o l u t a n o s e d e t e r m i n ó .
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 3 9 ( s , 1 H ) , 8 . 2 9 ( s , 1 H ) , 6 . 8 3 - 6 . 8 1 ( m , 1 H ) , 6 . 4 4 - 6 . 4 2 ( m , 1 H ) , 6 . 3 3 ( s , 1 H ) , 4 . 5 7 - 4 . 5 1 ( m , 3 H ) , 3 . 7 4 - 3 . 7 1 ( m , 4 H ) , 2 . 7 1 - 2 . 6 4 ( m , 6 H ) , 2 . 3 8 - 2 . 3 1 ( m , 1 H ) , 2 . 2 4 - 2 . 1 7 ( m , 1 H ) , 2 . 0 3 - 1 . 7 4 ( m , 3 H ) , 1 . 4 5 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) ;
1 9 F N M R ( 3 7 6 M H z , C D C l a ) : 5 - 1 0 2 . 7 4 , - 1 0 3 . 3 7 , - 1 1 5 . 3 9 , - 1 1 6 . 0 2 .
Ejemplo 149
W-(5-cloro-1-(4-morfol¡noc¡clohex¡l)-1H-p¡razol-4-il)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d] pirimidin-2-amina (E149)
Figure imgf000186_0001
U n a s o l u c i ó n d e D1 ( 1 6 8 m g , 0 . 8 5 2 m m o l ) , D336 ( 2 0 2 , 1 m g , 0 . 7 1 0 m m o l ) , X - p h o s ( 6 7 , 7 m g , 0 . 1 4 2 m m o l ) , K 2 C O 3 ( 4 9 0 m g , 3 . 5 5 m m o l ) y P d 2 ( d b a ) 3 ( 6 5 , 0 m g , 0 . 0 7 1 m m o l ) e n 1 , 4 - d i o x a n o ( 1 0 m L ) s e a g i t ó a 1 2 0 ° C d u r a n t e 5 h o r a s . D e s p u é s d e e n f r i a r s e h a s t a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e , l a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e d i l u y ó c o n a g u a ( 2 0 m L ) . L u e g o , l a m e z c l a s e e x t r a j o c o n E A ( 1 0 m L x 3 ) . L a f a s e o r g á n i c a c o m b i n a d a s e s e c ó e n s u l f a t o d e s o d i o a n h i d r o , s e f i l t r ó y c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c r o m a t o g r a f í a e n c o l u m n a e n g e l d e s í l i c e ( M e O H / D C M : 0 a 1 5 % ) y l u e g o M D A P ( b a s e ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E149 ( 8 . 6 m g , 0 . 0 1 9 m m o l , 2 . 7 2 % d e r e n d i m i e n t o ) .
L C M S : 4 4 6 [ M H ] . Xr = 2 . 4 4 6 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 1 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , D M S O - d s ) : 5 1 1 . 2 8 ( b r . s . , 1 H ) , 8 . 1 2 ( s , 1 H ) , 7 . 7 9 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( b r . s . , 1 H ) , 6 . 2 4 ( b r . s . , 1 H ) , 4 . 4 4 ( q , J = 7 . 0 1 H z , 2 H ) , 4 . 3 4 ( b r . s . , 1 H ) , 3 . 6 2 ( b r . s . , 4 H ) , 2 . 4 1 ( b r . s . , 4 H ) , 1 . 9 8 - 2 . 2 1 ( m , 5 H ) , 1 . 4 6 - 1 . 6 8 ( m , 4 H ) , 1 . 3 5 (X, J = 7 . 0 9 H z , 3 H ) .
Ejemplo 150
W-(5-cloro-1-((3S, 5S)-5-fluoro-1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-3-il)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-amina (E150)
Figure imgf000186_0002
A u n a s o l u c i ó n d e D349 ( 6 0 m g , 0 . 2 2 m m o l ) , D1 ( 5 1 m g , 0 . 2 6 3 m m o l ) , X - p h o s ( 1 5 m g , 0 . 0 3 3 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 1 8 1 m g , 1 . 3 0 m m o l ) e n d i o x a n o ( 1 0 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 2 0 m g , 0 . 0 2 2 m m o l ) b a j o a t m ó s f e r a d e N 2. L a r e a c c i ó n s e a g i t ó d u r a n t e l a n o c h e a 1 1 5 ° C . L u e g o , l a m e z c l a s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O = 3 5 - 5 5 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o D150 ( 9 , 5 m g , 1 1 % ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 6 [ M H ] . Xr = 4 . 2 3 3 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 8 . 4 7 ( s , 1 H ) , 8 . 1 7 ( s , 1 H ) , 6 . 8 0 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 6 . 4 2 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 4 H z , 1 H ) , 6 . 2 8 ( s , 1 H ) , 4 . 8 8 - 4 . 8 1 ( m , 0 . 5 H ) , 4 . 7 5 - 4 . 5 5 ( m , 7 . 5 H ) , 3 . 7 0 - 3 . 6 3 ( m , 1 H ) , 3 . 1 5 - 3 . 1 2 ( m , 1 H ) , 2 . 8 8 - 2 . 8 5 ( m , 1 H ) , 2 . 5 7 - 2 . 5 3 ( m , 1 H ) , 2 . 3 5 ( m , 2 H ) , 2 . 0 5 (X, J = 1 0 . 8 H z , 1 H ) , 2 . 2 6 - 2 . 2 0 ( m , 1 H ) , 2 . 0 8 - 2 . 0 0 ( m , 1 H ) , 1 . 4 6 (X, J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
19 F N M R ( 3 8 6 M H z , C D C I 3 ) : 5 - 1 8 3 . 4 .
Ejemplo 151
W-(5-cloro-1-((3fí,5S)-5-fluoro-1-(oxetan-3-¡l)p¡per¡d¡n-3-¡l)-1H-p¡razol-4-¡l)-4-etox¡-7H-p¡rrolo[2,3-d]p¡r¡m¡d¡n-2-amina (E151)
Figure imgf000187_0001
A u n a s o l u c i ó n d e D363 ( 2 3 0 m g , 0 . 8 3 9 m m o l ) , D1 ( 2 4 9 m g , 1 . 2 6 m m o l ) , X - p h o s ( 1 2 0 m g , 0 . 2 5 2 m m o l ) y K 2 C O 3 ( 4 6 3 m g , 3 . 3 6 m m o l ) e n d i o x a n o ( 1 0 m L ) s e a g r e g ó P d 2 ( d b a ) 3 ( 1 5 5 m g , 0 . 1 6 8 m m o l ) b a j o n i t r ó g e n o . L a r e a c c i ó n s e a g i t ó a 1 1 5 ° C d u r a n t e 4 h o r a s . L a m e z c l a d e r e a c c i ó n s e f i l t r ó y e l f i l t r a d o s e c o n c e n t r ó . E l p r o d u c t o e n b r u t o s e p u r i f i c ó m e d i a n t e c o l u m n a e n C 1 8 ( A C N / H 2 O = 3 5 - 5 0 % ) p a r a p r o p o r c i o n a r e l c o m p u e s t o d e l t í t u l o E151 ( 9 4 m g , 2 6 % ) c o m o u n s ó l i d o b l a n c o .
L C M S : 4 3 6 [ M H ] . tR = 3 . 9 3 7 m i n . ( L C M S c o n d i c i ó n 3 )
1 H N M R ( 4 0 0 M H z , C L O R O F O R M O - d ) : 5 1 1 . 2 8 ( s , 1 H ) , 8 . 2 3 ( s , 1 H ) , 7 . 8 5 ( s , 1 H ) , 6 . 9 0 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 6 . 2 3 ( d d , J = 3 . 2 , 2 . 0 H z , 1 H ) , 5 . 1 3 - 5 . 0 1 ( m , 1 H ) , 4 . 6 7 - 4 . 6 1 ( m , 1 H ) , 4 . 5 4 ( q , J = 7 . 2 H z , 2 H ) , 4 . 4 8 - 4 . 4 0 ( m , 4 H ) , 3 . 6 3 - 3 . 5 7 ( m , 1 H ) , 3 . 0 1 - 2 . 8 7 ( m , 2 H ) , 2 . 3 4 - 2 . 1 3 ( m , 4 H ) , 1 . 3 5 ( t , J = 7 . 2 H z , 3 H ) .
F. Datos b¡ológ¡cos
T a l c o m o s e e s t a b l e c i ó a n t e r i o r m e n t e , l o s c o m p u e s t o s d e l a p r e s e n t e i n v e n c i ó n s o n i n h i b i d o r e s d e l a c i n a s a L R R K 2 y s o n ú t i l e s p a r a e l t r a t a m i e n t o d e e n f e r m e d a d e s m e d i a d a s p o r L R R K 2 . L a s a c t i v i d a d e s b i o l ó g i c a s d e l o s c o m p u e s t o s d e l a p r e s e n t e i n v e n c i ó n s e p u e d e n d e t e r m i n a r u s a n d o c u a l q u i e r e n s a y o a d e c u a d o p a r a d e t e r m i n a r l a a c t i v i d a d d e u n c o m p u e s t o c a n d i d a t o c o m o u n i n h i b i d o r d e l a c i n a s a L R R K 2 , a s í c o m o t e j i d o y m o d e l o s i n v i v o .
Producción de 6H¡s-Tev-LRRK2 (1326-2527)
Figure imgf000187_0002
U n s e d i m e n t o d e 2 6 0 g s e d e j ó d e s c o n g e l a r e n u n b a ñ o d e a g u a a 2 7 ° C c o n 8 0 0 m l d e a m o r t i g u a d o r d e l i s i s / a m o r t i g u a d o r A ( T r i s - H C l 5 0 m m p H 8 . 5 , N a C l 3 0 0 m M , D T T 1 m m , g l i c e r o l a l 1 0 % , 1 m l / L d e c ó c t e l i n h i b i d o r d e p r o t e a s a c o m p l e t a d e c a l b i o c h e m y b e n z o n a s a ( 5 0 u l / 8 0 0 m l ) ) a n t e s d e s o m e t e r s e a u n h o m o g e n e i z a d o r d o u n c e e n h i e l o u t i l i z a n d o 2 0 g o l p e s c a d a 1 0 0 m l . L a s u s p e n s i ó n s e e n v a s ó e n h i e l o y s e s o n i c ó a u n a a m p l i t u d d e 5 0 % d u r a n t e 3 m i n y 1 0 s e n c e n d i d o / a p a g a d o u t i l i z a n d o u n a s o n d a d e % ” . L u e g o , l a s u s p e n s i ó n s e c e n t r i f u g ó a 1 0 0 0 0 0 g d u r a n t e 9 0 m i n a 4 ° C .
E l l i s a d o ( 7 0 0 m l ) s e d e c a n t ó a p a r t i r d e l s e d i m e n t o i n s o l u b l e y s e p u s o e n c o n t a c t o d u r a n t e 3 h a 4 C c o n 1 0 m l d e r e s i n a N i N T A u n i d a a H i s p o r m e d i o d e m e z c l a d o d e e x t r e m o s o b r e e x t r e m o . L a r e s i n a s e r e c u p e r ó m e d i a n t e c e n t r i f u g a c i ó n , 3 0 0 0 g , 5 m i n a 4 C , y s e e n v a s ó e n u n a c o l u m n a X K 1 6 . L u e g o , l a c o l u m n a s e l a v ó c o n 1 0 v o l ú m e n e s d e c o l u m n a d e l a m o r t i g u a d o r A , 1 0 v o l ú m e n e s d e c o l u m n a d e l a m o r t i g u a d o r B ( a m o r t i g u a d o r A N a C l 1 M ) y 1 0 v o l ú m e n e s d e c o l u m n a d e l a m o r t i g u a d o r C ( a m o r t i g u a d o r A i m i d a z o l 2 0 m M ) . L u e g o l a c o l u m n a s e e l u y ó c o n 1 5 v o l ú m e n e s d e c o l u m n a d e l a m o r t i g u a d o r D ( a m o r t i g u a d o r A i m i d a z o l 3 0 0 m M ) , r e c o l e c t a n d o f r a c c i o n e s d e 2 m l . T o d o s l o s l a v a d o s y l a e l u c i ó n s e l l e v a r o n a c a b o a 4 m l / m i n .
L a s f r a c c i o n e s i d e n t i f i c a d a s m e d i a n t e S D S - P A G E p o r c o n t e n e r p r o t e í n a d e i n t e r é s s e a g r u p a r o n y s e c a r g a r o n d i r e c t a m e n t e e n u n a c o l u m n a d e 3 2 0 m l S E C S u p e r d e x 2 0 0 p g q u e s e e q u i l i b r ó p r e v i a m e n t e c o n e l a m o r t i g u a d o r E ( T r i s - H C l 5 0 m M p H 8 . 5 , N a C l 3 0 0 m M , g l i c e r o l a l 1 0 % , D T T 1 m M ) . L a c o l u m n a s e c a r g ó y s e e l u y ó c o n 1 , 2 v o l ú m e n e s d e c o l u m n a d e l a m o r t i g u a d o r E a 2 m l / m i n r e c o l e c t a n d o f r a c c i o n e s d e 2 m l .
L a s f r a c c i o n e s i d e n t i f i c a d a s m e d i a n t e S D S - P A G E p o r c o n t e n e r p r o t e í n a d e i n t e r é s s e a n a l i z a r o n p a r a d e t e r m i n a r s u a c t i v i d a d .
Producción de LRRKtida largo de biotina
Figure imgf000188_0001
Producción de LRRKtida para el ensayo de espectrometría de masas de la inhibición de LRRK2
Figure imgf000188_0002
Ensayo TR-FRET de sustrato peptídico de enzima de LRRK2 recombinante
Figure imgf000188_0003
Protocolo de ensayo
1 . U n c o m p u e s t o d e p r u e b a 1 0 m M s e d i s o l v i ó e n D M S O a l 1 0 0 % y s e d i l u y ó e n s e r i e 1 e n 4 . L u e g o , s e a g r e g ó 1 0 0 n L a u n a p l a c a n e g r a d e v o l u m e b a j o d e 3 8 4 p o c i l l o s , c o n e x c e p c i ó n d e l a s c o l u m n a s 6 y 1 8 . S e a g r e g ó 1 0 0 n L d e D M S O a l a s c o l u m n a s 6 y 1 8 c o m o p o c i l l o s d e c o n t r o l . L a d i l u c i ó n e n e l e n s a y o p r o p o r c i o n ó u n a c o n c e n t r a c i ó n d e e n s a y o m á x i m a f i n a l d e l c o m p u e s t o d e p r u e b a d e 1 6 6 . 6 7 p M
2 . S e a g r e g ó 3 u L d e ‘ s o l u c i ó n e n z i m á t i c a ’ q u e c o n t e n í a 1 2 0 n M d e 6 H I S - T e v - L R R K 2 r e c o m b i n a n t e p u r i f i c a d a ( 1 3 2 6 ­ 2 5 2 7 ) e n a m o r t i g u a d o r d e e n s a y o ( H e p e s 5 0 m M ( p H 7 . 2 ) , M g C l 2 1 0 m M , N a C l 1 5 0 m M , g l i c e r o l a l 5 % , t r i t o n X -1 0 0 a l 0 . 0 0 2 5 % y D T T 1 m M ) a t o d o s l o s p o c i l l o s c o n e x c e p c i ó n d e l a c o l u m n a 1 8 u t i l i z a n d o u n d i s p e n s a d o r c o m b i d e g o t a s m ú l t i p l e s , l o q u e p r o p o r c i o n ó u n a c o n c e n t r a c i ó n d e e n s a y o f i n a l d e e n z i m a d e L R R K 2 d e 6 0 n M . S e a g r e g ó 3 u L d e a m o r t i g u a d o r d e e n s a y o ú n i c a m e n t e a l a c o l u m n a 1 8 u t i l i z a n d o u n d i s p e n s a d o r c o m b i d e g o t a s m ú l t i p l e s c o m o u n a i n h i b i c i ó n d e 1 0 0 % , s i n c o n t r o l e n z i m á t i c o . L a c o l u m n a 6 ( e n z i m a m á s D M S O ) p r o p o r c i o n ó u n a i n h i b i c i ó n d e 0 % . L u e g o s e i n c u b a r o n l a s p l a c a s d e p r u e b a d u r a n t e 3 0 m i n u t o s a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e .
3 . S e a g r e g ó 3 u L d e s o l u c i ó n d e s u s t r a t o ’ q u e c o n t e n í a s u s t r a t o p e p t í d i c o d e L R R K t i d a l a r g o d e b i o t i n a 2 u M y A T P 2 0 u M a t o d o s l o s p o c i l l o s d e l a p l a c a u t i l i z a n d o u n d i s p e n s a d o r c o m b i d e g o t a s m ú l t i p l e s , l o q u e p r o p o r c i o n ó u n a c o n c e n t r a c i ó n d e e n s a y o f i n a l d e L R R K t i d a l a r g o d e b i o t i n a d e 1 u M y A T P 1 0 u M . L u e g o s e i n c u b a r o n l a s p l a c a s d e p r u e b a d u r a n t e 2 h o r a s a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . ( L a i n c u b a c i ó n p u e d e v a r i a r d e p e n d i e n d o d e l a t a s a y l a l i n e a l i d a d d e r e a c c i ó n c o n d i f e r e n t e s l o t e s e n z i m á t i c o s d i f e r e n t e s ) .
Figure imgf000188_0004
Ensayo de espectrometría de masas de la inhibición de LRRK2
E s t e e n s a y o p a r a l a i n h i b i c i ó n d e l a c i n a s a d e r e p e t i c i ó n r i c a e n l e u c i n a 2 ( L R R K 2 ) s e b a s a e n l a m e d i c i ó n d i r e c t a d e l p é p t i d o ‘ L R R K t i d a ' ( L R R K t i d a : R L G R D K Y K T * L R Q I R Q ( H - R L G R D K Y K T L R Q I R Q - O H u t i l i z a d o p a r a e s t e a n á l i s i s ) ) y e l ‘ L R R K t i d a ' f o s f o r i l a d o u t i l i z a n d o u n e n s a y o d e e s p e c t r o m e t r í a d e m a s a s d e a l t o r e n d i m i e n t o R a p i d F i r e . L o s i n h i b i d o r e s 5 s e d e f i n e n c o m o c o m p u e s t o s q u e r e d u c e n l a c o n v e r s i ó n d e l L R R K t i d a e n f o s f o - L R R K t i d a .
P r o t o c o l o d e e n s a y o
1 . U n c o m p u e s t o d e p r u e b a 1 0 m M s e d i s o l v i ó e n D M S O a l 1 0 0 % y s e d i l u y ó e n s e r i e 1 e n 4 . L u e g o , s e a g r e g ó 1 0 0 n L d e e s t a s e r i e d e d i l u c i ó n a u n a p l a c a d e p o l i p r o p i l e n o d e 3 8 4 p o c i l l o s c o n f o n d o e n v , c o n e x c e p c i ó n d e l a s c o l u m n a s 6 y 1 8 . S e a g r e g ó 1 0 0 n L d e D M S O a l a s c o l u m n a s 6 y 1 8 c o m o p o c i l l o s d e c o n t r o l . L a d i l u c i ó n e n 0 e l e n s a y o p r o p o r c i o n ó u n a c o n c e n t r a c i ó n d e e n s a y o m á x i m a f i n a l d e l c o m p u e s t o d e p r u e b a d e 1 6 6 . 6 7 p M
2 . S e a g r e g ó 5 u L d e ‘ s o l u c i ó n e n z i m á t i c a ' q u e c o n t e n í a 1 2 0 n M d e 6 H I S - T e v - L R R K 2 r e c o m b i n a n t e p u r i f i c a d a ( 1 3 2 6 - 2 5 2 7 ) e n a m o r t i g u a d o r d e e n s a y o ( H e p e s 5 0 m M ( p H 7 . 2 ) , M g C l 2 1 0 m M , N a C l 1 5 0 m M , g l i c e r o l a l 5 % , t r i t o n X - 1 0 0 a l 0 . 0 0 2 5 % y D T T 1 m M ) a t o d o s l o s p o c i l l o s c o n e x c e p c i ó n d e l a c o l u m n a 1 8 u t i l i z a n d o u n d i s p e n s a d o r c o m b i d e g o t a s m ú l t i p l e s , l o q u e p r o p o r c i o n ó u n a c o n c e n t r a c i ó n d e e n s a y o f i n a l d e e n z i m a d e L R R K 2 d e 6 0 n M .
5 S e a g r e g ó 5 u L d e a m o r t i g u a d o r d e e n s a y o ú n i c a m e n t e a l a c o l u m n a 1 8 u t i l i z a n d o u n d i s p e n s a d o r c o m b i d e g o t a s m ú l t i p l e s c o m o u n c o n t r o l d e i n h i b i c i ó n d e 1 0 0 % , l a c o l u m n a 6 ( e n z i m a m á s D M S O ) p r o p o r c i o n ó u n a i n h i b i c i ó n d e 0 % . L u e g o s e i n c u b a r o n l a s p l a c a s d e p r u e b a d u r a n t e 3 0 m i n u t o s a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e .
3 . S e a g r e g ó 5 u L d e s o l u c i ó n d e s u s t r a t o ' q u e c o n t e n í a s u s t r a t o p e p t í d i c o d e L R R K t i d a l a r g o d e b i o t i n a 5 0 u M y A T P 4 0 u M a t o d o s l o s p o c i l l o s d e l a p l a c a u t i l i z a n d o u n d i s p e n s a d o r c o m b i d e g o t a s m ú l t i p l e s , l o q u e 0 p r o p o r c i o n ó u n a c o n c e n t r a c i ó n d e e n s a y o f i n a l d e L R R K t i d a d e 2 5 u M y A T P 1 0 u M . L u e g o s e i n c u b a r o n l a s p l a c a s d e p r u e b a d u r a n t e 1 h o r a a t e m p e r a t u r a a m b i e n t e . ( L a i n c u b a c i ó n p u e d e v a r i a r d e p e n d i e n d o d e l a t a s a y l a l i n e a l i d a d d e r e a c c i ó n c o n d i f e r e n t e s l o t e s e n z i m á t i c o s d i f e r e n t e s ) .
Figure imgf000189_0001
L a s d i l u c i o n e s y c o n c e n t r a c i o n e s d e l o s r e a c t i v o s s e d e t e r m i n a r o n d e l o t e a l o t e .
C o n f i g u r a c i o n e s d e R a p i d F i r e :
• A l t u r a d e S i p = 2 m m , A s p i r a d o = 5 0 0 m s , T i e m p o d e c a r g a = 3 0 0 0 m s , T i e m p o d e e l u c i ó n = 3 0 0 0 m s , 0 R e q u i l i b r i o = 5 0 0 m s ,
• V e l o c i d a d e s d e f l u j o : b o m b a 1 = 1 . 5 m L / m i n , b o m b a 2 1 . 2 5 m L / m i n b o m b a 3 = 0 . 8 m L / m i n
C o n f i g u r a c i o n e s d e l e s p e c t r ó m e t r o d e m a s a s
• C o n f i g u r a c i o n e s d e d e t e c c i ó n d e L R R K t i d a : Q 1 m a s a 6 4 4 . 8 D a , Q 3 m a s a 6 3 8 . 8 , p o t e n c i a l d e d e s a g r u p a m i e n t o 5 7 6 v o l t i o s , e n e r g í a d e c o l i s i ó n 3 7 v o l t i o s , C X P 3 4 v o l t i o s
• C o n f i g u r a c i o n e s d e d e t e c c i ó n d e f o s f o - L R R K t i d a : Q 1 m a s a 6 7 1 . 4 D a , Q 3 m a s a 6 3 8 . 8 , p o t e n c i a l d e d e s a g r u p a m i e n t o 7 6 v o l t i o s , e n e r g í a d e c o l i s i ó n 3 7 v o l t i o s , C X P 3 4 v o l t i o s .
0 • S e u t i l i z e u n c a r t u c h o C 4 y l o s a m o r t i g u a d o r e s d e e j e c u c i ó n f u e r o n : A á c i d o f ó r m i c o ( a c u o s o ) a l 0 . 1 % e n a g u a B á c i d o f ó r m i c o ( o r g á n i c o ) a l 0 . 1 % , a c e t o n i t r i l o a l 8 0 % , a g u a a l 2 0 %
5 . L o s d a t o s s e a n a l i z a r o n u t i l i z a n d o e l s o f t w a r e A c t i v i t y B a s e ( I D B S ) . S e c a l c u l ó u n p o r c e n t a j e d e c o n v e r s i o n d e L R R K t i d a e n f o s f o - L R R K t i d a u t i l i z a n d o l a s i g u i e n t e f ó r m u l a :
% d e c o n v e r s i ó n = ( á r e a p i c o d e l p r o d u c t o d e f o s f o - L R R K t i d a / ( á r e a p i c o d e l p r o d u c t o d e f o s f o - L R R K t i d a á r e a 5 p i c o d e l s u s t r a t o d e L R R K t i d a ) ) * 1 0 0
Ensayo alfaScreen de LRRK2 celular recombinante
P a r a d e t e r i n a r l a a c t i v i d a d d e l o s c o m p u e s t o s c o n t r a l a a c t i v i d a d d e l a c i n a s a L R R K 2 e n l a s c é l u l a s , s e u t i l i z ó l a m o d u l a c i ó n d e p e n d i e n t e d e l a c i n a s a L R R K 2 o b s e r v a d a d e l a f o s f o r i l a c i ó n d e L R R K 2 S e r 9 3 5 ( D z a m k o e t a l. , 2 0 1 0 , B i o c h e m . J . 4 3 0 : 4 0 5 - 4 1 3 ) p a r a d e s a r r o l l a r u n i n m u n o e n s a y o c u a n t i t a t i v o b a s a d o e n p l a c a s d e 3 8 4 p o c i l l o s d e l a 0 f o s f o r i l a c i ó n d e L R R K 2 S e r 9 3 5 e n l a l í n e a c e l u l a r d e n e u r o b l a s t o m a s h u m a n a S H - S Y 5 Y , m o d i f i c a d a p a r a q u e e x p r e s e l a p r o t e í n a L R R K 2 r e c o m b i n a n t e d e l o n g i t u d c o m p l e t a .
S e o b t u v o u n v i r u s d e B a c M a m v i r u s q u e e x p r e s a b a L R R K 2 r e c o m b i n a n t e d e l o n g i t u d c o m p l e t a d e I n v i t r o g e n y s e a m p l i f i c ó m e d i a n t e l a i n o c u l a c i ó n d e c é l u l a s S F - 9 e n M O I 0 . 3 d u r a n t e 4 - 5 d í a s e n m e d i o S f - 9 0 0 III S F M c o m p l e m e n t a d o c o n s u e r o f e t a l b o b i n o a l 3 % . L u e g o , s e c e n t r i f u g a r o n l o s c u l t i v o s c e l u l a r e s i n f e c t a d o s a 2 0 0 0 g d u r a n t e 2 0 m i n u t o s , s e d e t e r m i n ó l a t i t u l a c i ó n d e l s o b r e n a d a n t e v i r a l m e d i a n t e e n s a y o d e p l a c a s a n t i - g p 6 4 y s e a l m a c e n ó a 4 ° C .
E l a n t i c u e r p o p o l i c l o n a l d e o v e j a L R R K 2 S e r 9 3 5 a n t i - f o s f o p r i f i c a d o p o r a f i n i d a d ( D z a m k o e t a l . , 2 0 1 0 , B i o c h e m . J .
4 3 0 : 4 0 5 - 4 1 3 ) s e b i o t i n i l ó p o r m e d i o d e m é t o d o s e s t á n d a r e s ( P e r k i n E l m e r ) . E l a n t i c u e r p o p o l i c l o n a l d e c o n e j o a n t i -L R R K 2 s e o b t u v o d e N o v u s B i o l o g i c a l s . E l k i t d e P r o t e í n a A I g G A l p h a S c r e e n ( q u e i n c l u y e e l a c e p t o r y l a s p e r l a s d e l 5 d o n a n t e ) s e o b t u v o d e P e r k i n E l m e r .
S e c u l t i v a r o n c é l u l a s S H - S Y 5 Y e n m e d i o D M E M / F 1 2 c o n s u e r o f e t a l b o b i n o d i a l i s a d o a l 1 0 % y s e r e c o g i e r o n m e d i a n t e t r a t a m i e n t o c o n t r i p s i n a - E D T A a l 0 . 5 % d u r a n t e 5 m i n u t o s a 3 7 ° C s e g u i d o d e c e n t r i f u g a c i ó n a 1 0 0 0 r p m d u r a n t e 4 m i n u t o s . E l s e d i m e n t o c e l u l a r s e s u s p e n d i ó n u e v a m e n t e e n m e d i o d e s u e r o r e d u c i d o O p t i - M E M ( I n v i t r o g e n ) c o n 2 0 0 0 0 0 c é l u l a s / m l y s e m e z c l ó c o n v i r u s d e B a c M a m L R R K 2 a M O I = 5 0 . L u e g o , s e d i s p e n s a r o 5 0 p l d e s o l u c i o n e s 0 c e l u l a r e s p a r a c a d a p o c i l l o d e u n a p l a c a d e 3 8 4 p o c i l l o s y s e i n c u b a r o n a 3 7 ° C , C O 2 5 % d u r a n t e 2 4 h o r a s .
S e r i a l d i l u t i o n s o f t e s t c o m p o u n d s w e r e p r e p a r e d i n O p t i - M E M r e d u c e d s e r u m m e d i a ( I n v i t r o g e n ) a n d 5 . 6 u l t r a n s f e r r e d f r o m c o m p o u n d p l a t e t o c e l l a s s a y p l a t e t o a c h i e v e a t o p f i n a l a s s a y c o n c e n t r a t i o n o f 1 0 u M . D M S O w a s u s e d i n c e r t a i n w e l l s a s c o n t r o l s . C e l l s w e r e i n c u b a t e d a t 3 7 ° C , 5 % C O 2 f o r 6 0 m i n u t e s . T h e m e d i u m w a s t h e n r e m o v e d a n d c e l l s l y s e d b y a d d i t i o n o f 2 0 u l c e l l l y s i s b u f f e r ( C e l l S i g n a l i n g T e c h n o l o g y ) a n d i n c u b a t i o n a t 4 o C f o r 2 0 m i n u t e s . 1 0 u l o f 5 a n t i b o d y / a c c e p t o r b e a d m i x [ ( 1 / 1 0 0 0 b i o t i n y l a t e d - p S 9 3 5 L R R K 2 a n t i b o d y , 1 / 1 0 0 0 t o t a l - L R R K 2 a n t i b o d y , 1 / 1 0 0 A c c e p t o r b e a d s i n A l p h a S c r e e n d e t e c t i o n b u f f e r ( 2 5 m M H e p e s ( p H 7 . 4 ) , 0 . 5 % T r i t o n X - 1 0 0 , 1 m g / m l D e x t r a n 5 0 0 a n d 0 . 1 % B S A ) ] w a s t h e n a d d e d t o e a c h w e l l a n d p l a t e s i n c u b a t e d f o r 2 h o u r s a t a m b i e n t t e m p e r a t u r e i n t h e d a r k . 1 0 p l o f d o n o r b e a d s s o l u t i o n ( 1 / 3 3 . 3 d o n o r b e a d s i n A l p h a S c r e e n d e t e c t i o n b u f f e r ) w a s t h e n a d d e d t o e a c h w e l l . F o l l o w i n g i n c u b a t i o n f o r a f u r t h e r 2 h o u r s a t a m b i e n t t e m p e r a t u r e i n t h e d a r k , p l a t e s w e r e r e a d o n a n E n V i s i o n ™ p l a t e r e a d e r a t 0 e m i s s i o n 5 2 0 - 6 2 0 n m w i t h e x c i t a t i o n 6 8 0 n m . D o s e r e s p o n s e c u r v e d a t a w a s b a s e d o n s i g m o i d a l d o s e - r e s p o n s e m o d e l .
Datos farmacológicos
L o s c o m p u e t s o s d e l o s E j e m p l o s E 1 - E 1 5 1 s e a n a l i z a r o n e n e l e n s a y o T R - F R E T d e s u s t r a t o p e p t í d i c o d e e n z i m a d e L R R K 2 r e c o m b i n a n t e , e l e n s a y o a l f a S c r e e n d e L R R K 2 c e l u l a r r e c o m b i n a n t e , y / o e l e n s a y o d e e s p e c t r o m e t r í a d e m a s a s d e l a i n h i b i c i ó n d e L R R K 2 . S e d e s c u b r i ó q u e l o s c o m p u e s t o s d e l o s E j e m p l o s E 1 - E 1 5 1 i n h i b e n l a a c t i v i d a d d e 5 l a c i n a s a L R R K 2 e n a l m e n o s u n e n s a y o .
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Claims (1)

  1. REIVINDICACIONES
    1 . U n c o m p u e s t o d e F ó r m u l a ( I ) o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e
    Figure imgf000192_0001
    d o n d e
    R 1 s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n H , a l c o x i l o C 1-3 , a l q u i l o C 1-3 , y h a l o ;
    R 2 e s a l q u i l o C 1-5 o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n O H , a l c o x i l o C 1 -3 , h a l o , y C N ;
    o R 2 e s -( C R a R b ) n - Y , d o n d e
    n e s 0 , 1 o 2 ,
    c a d a a p a r i c i ó n d e R a y R b e s i n d e p e n d i e n t e m e n t e H o m e t i l o ,
    Y e s
    1) u n h e t e r o c i c l i l o c o n c u a t r o a s e i s m i e m b r o s o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1 -3 , h a l o , O H , o x e t a n i l o , h a l o a l q u i l o C 1-3 , y m o r f o l i n i l o ;
    2) u n c i c l o a l q u i l o C 3-6 o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1-3 , h a l o , O H , u o x e t a n i l o , h a l o a l q u i l o C 1-3 , y m o r f o l i n i l o , o
    3 )
    Figure imgf000192_0002
    c a d a u n o d e l o s c u a l e s e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n g r u p o O H ;
    R 3 s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n H , a l c o x i l o C 1-3 , a l q u i l o C 1-3 , c i c l o a l q u i l o C 3-6 y h a l o ;
    R 4 e s C H o N ;
    R 5 e s H , C N o m e t i l o ; y
    R 6 s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l c o x i C 1-3 , y - O - C H 2 - c i c l o a l q u i l o C 3 -6.
    2 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 , d o n d e R 1 e s H o m e t i l o .
    3 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 o l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 , d o n d e R 2 e s -( C H 2 ) n - Y , n e s 0 , 1 o 2 , e Y e s c i c l o a l q u i l o C 3-6 o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o d o s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1-3 , h a l o y O H .
    4 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 o l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 , d o n d e R 2 e s -( C R a R b ) n - Y , d o n d e n e s 0 , 1 o 2 , c a d a a p a r i c i ó n d e R a y R b s o n i n d e p e n d i e n t e m e n t e H o m e t i l o , e Y e s u n h e t e r o c i c l i l o c o n c u a t r o a s e i s m i e m b r o s o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1-3 , h a l o , O H , o x e t a n i l o , h a l o a l q u i l o C 1-3 y m o r f o l i n i l o .
    5 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 o l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 , d o n d e R 2 e s -( C H 2 ) n - Y , d o n d e d o n d e n e s 0 , 1 o 2 e Y e s u n h e t e r o c i c l i l o c o n c u a t r o a s e i s m i e m b r o s o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1-3 , h a l o , O H , o x e t a n i l o , h a l o a l q u i l o C 1-3 y m o r f o l i n i l o .
    6 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 o l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 , d o n d e R 2 e s -( C H 2 ) n - Y , n e s 0 , 1 o 2 , e Y e s u n h e t e r o c i c l i l o c o n c u a t r o a s e i s m i e m b r o s q u e s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e 5 c o n s i s t e e n a z e t i d i n i l o , t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n i l o , t e t r a h i d r o f u r a n i l o , p i r r o l i d i n i l o , p i p e r i d i n i l o , o x e t a n i l o , y m o r f o l i n i l o , d o n d e e l h e t e r o c i c l i l o e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o , d o s o t r e s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1-3 , h a l o , O H y o x e t a n i l o .
    7 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 o l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 , d o n d e R 2 e s -( C H 2 ) n - Y , n e s 0 o 2 , e Y e s u n h e t e r o c i c l i l o c o n c u a t r o a s e i s m i e m b r o s q u e s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e c o n s i s t e 1 0 e n t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 4 - i l o , t e t r a h i d r o - 2 H - p i r a n - 3 - i l o , t e t r a h i d r o f u r a n - 3 - i l o , p i p e r i d i n - 3 - i l o , p i p e r i d i n - 4 - i l o , m o r f o l i n - 2 - i l o y m o r f o l i n - 4 - i l o , d o n d e e l h e t e r o c i c l i l o e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o , d o s o t r e s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n h a l o y o x e t a n i l o .
    8 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 7 , d o n d e R 3 e s C l o m e t i l o .
    1 5 9 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 8 , d o n d e R 4 e s C H .
    1 0 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 9 , d o n d e R 5 e s H o m e t i l o .
    1 1 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 a 1 0 , 2 0 d o n d e R 6 e s e t o x i .
    1 2 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 , d o n d e
    R 1 e s H ,
    R 2 e s -( C H 2 ) n - Y , d o n d e n e s 0 , e Y e s u n h e t e r o c i c l i l o c o n c u a t r o a s e i s m i e m b r o s q u e s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n p i p e r i d i n - 4 - i l o , p i p e r i d i n - 3 - i l o y m o r f o l i n - 2 - i l o , d o n d e e l h e t e r o c i c l i l o e s t á o p c i o n a l m e n t e 2 5 s u s t i t u i d o c o n u n o , d o s o t r e s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n m e t i l o , O H , h a l o y o x e t a n i l o ,
    R 3 e s h a l o ,
    R 4 e s C H ,
    R 5 e s H , y
    3 0 R 6 e s a l c o x i l o C 1-3 .
    1 3 . U n c o m p u e s t o o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 , d o n d e
    R 1 e s H ,
    R 2 e s a l q u i l o C 1-5 o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n
    i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n O H , a l c o x i l o C 1-3 , h a l o , y C N ; o
    3 5 R 2 e s -( C R a R b ) n - Y ;
    d o n d e
    n e s 0 , 1 o 2 ,
    c a d a a p a r i c i ó n d e R a y R b e s i n d e p e n d i e n t e m e n t e H o m e t i l o ,
    Y e s
    4 0 1 ) u n h e t e r o c i c l i l o c o n c u a t r o a s e i s m i e m b r o s o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1 - 3 , h a l o , O h , o x e t a n i l o , h a l o a l q u i l o C 1-3 , y m o r f o l i n i l o ;
    2 ) u n c i c l o a l q u i l o C 3 - 6 o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n o o m á s s u s t i t u y e n t e s q u e s e s e l e c c i o n a n i n d e p e n d i e n t e m e n t e d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l q u i l o C 1-3 , h a l o , O H , u o x e t a n i l o , h a l o a l q u i l o 4 5 C 1-3 , y m o r f o l i n i l o , o
    3)
    Figure imgf000194_0001
    c a d a u n o d e l o s c u a l e s e s t á o p c i o n a l m e n t e s u s t i t u i d o c o n u n g r u p o O H ; R 3 s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n H , a l c o x i l o C 1-3 , a l q u i l o C 1-3 , c i c l o a l q u i l o C 3-6 y C l ; 5 R 4 e s C H ;
    R 5 e s H ;
    R 6 s e s e l e c c i o n a d e l g r u p o q u e c o n s i s t e e n a l c o x i C 1-3 , y - O - C H 2 - c i c l o a l q u i l o C 3 -6.
    1 4 . U n c o m p u e s t o s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 , q u e e s
    Figure imgf000194_0002
    1 0
    Figure imgf000194_0003
    Figure imgf000194_0004
    Figure imgf000195_0001
    o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t o s .
    1 5 . U n c o m p u e s t o s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 4 q u e e s
    Figure imgf000195_0002
    5 o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e .
    1 6 . U n c o m p u e s t o s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 5 q u e e s
    Figure imgf000195_0003
    Figure imgf000196_0001
    Figure imgf000197_0001
    o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e .
    19. Un compuesto según la reivindicación 1 que es(R)-N-(5-cloro-1-(3,3-difluoro-1-(oxetan-3-il)piperidin-4-il)-1H-pirazol-4-il)-4-etoxi-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina
    Figure imgf000198_0001
    o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e e s t e .
    2 0 . U n c o m p u e s t o s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 q u e e s ( R ) - N -( 5 - c l o r o - 1 -( 3 , 3 - d i f l u o r o - 1 - ( o x e t a n - 3 - i l ) p i p e r i d i n - 4 - i l ) - 1 H -p i r a z o l - 4 - i l ) - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n - 2 - a m i n a
    5
    Figure imgf000198_0002
    2 1 . U n c o m p u e s t o s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 1 q u e e s u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e ( R ) - N - ( 5 - c l o r o - 1 -( 3 , 3 -d i f l u o r o - 1 -( o x e t a n - 3 - i l ) p i p e r i d i n - 4 - i l ) - 1 H - p i r a z o l - 4 - i l ) - 4 - e t o x i - 7 H - p i r r o l o [ 2 , 3 - d ] p i r i m i d i n - 2 - a m i n a
    Figure imgf000198_0003
    2 2 . U n a c o m p o s i c i ó n f a r m a c é u t i c a q u e c o m p r e n d e e l c o m p u e s t o d e l a F ó r m u l a ( I ) o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e 1 0 a c e p t a b l e d e e s t e , s e g ú n c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s d e 1 a 2 1 y u n o o m á s e x c i p i e n t e s f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e s .
    2 3 . U n a c o m p o s i c i ó n f a r m a c é u t i c a s e g ú n l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 2 q u e c o m p r e n d e e l c o m p u e s t o d e F ó r m u l a ( I ) o u n a s a l f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e d e l m i s m o s e g ú n u n a c u a l q u i e r a d e l a s r e i v i n d i c a c i o n e s 1 9 , 2 0 y 2 1 , y u n o o m á s e x c i p i e n t e s f a r m a c é u t i c a m e n t e a c e p t a b l e s .
    Figure imgf000198_0004
    Figure imgf000199_0001
    2 9 . U n c o m p u e s t o p a r a u s o d e a c u e r d o c o n l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 6 o u n a c o m p o s i c i ó n f a r m a c é u t i c a p a r a u s o d e a c u e r d o c o n l a r e i v i n d i c a c i ó n 2 8 e n d o n d e l a e n f e r m e d a d d e P a r k i n s o n e s l a e n f e r m e d a d d e P a r k i n s o n f a m i l i a r y e l s u j e t o e x p r e s a l a c i n a s a L R R K 2 q u e l l e v a m u t a c i ó n G 2 0 1 9 S .
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