ES2720628T3 - Extracto de uva, complemento nutricional que lo comprende y su uso como ingrediente funcional - Google Patents
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Description
DESCRIPCIÓN
Extracto de uva, complemento nutricional que lo comprende y su uso como ingrediente funcional
Campo de la técnica
La presente invención se encuadra dentro del sectoralimentario y/o farmacéutico, y de manera particular se refiere a ingredientes funcionales formados por un extracto polifenólico procedente de uvas con alto poder antioxidante.
Estado de la técnica anterior a la invención
En la naturaleza se considera oxidación cualquierproceso en el que tiene lugar una pérdida de electrones, captación de oxígeno o cesión de hidrógeno (deshidrogenación). Por el contrario, reducción es aquel proceso en el que se captan electroneso se pierden átomos de oxígeno. Todo proceso de oxidación va siempre acompañado de otro de reducción (ElejaldeJl, 2001).
Se consideran radicales libres de oxígeno o especies reactivas de oxígeno (ROS, Reactive OxygenSpecies) a aquellas moléculas que en su estructura atómica presentan un electrón desapareado en el orbital externo. Dicha configuración les confiere una elevada inestabilidad y una extraordinaria reactividad. Se caracterizan por presentar una vida efímera y una gran capacidad para combinarse inespecíficamente con cualquier molécula de la estructura celular, como son hidratos de carbono, lípidos, proteínas, ácidos nucleicos y derivados de cada uno de ellos. De losROS inorgánicos los más importantes son el oxígenomolecular (O2), el anión superóxido (O2-) y el radical hidroxilo (OH-), así como su precursor inmediato, el peróxido de hidrógeno (H2O2). Entre los ROS secundarios yorgánicos cabe destacar el radical peroxilo (ROO-), el hidroperóxido orgánico (ROOH) y los lípidos peroxidados (Elejalde JI, 2001).
Los ROS se producen en los organismos de maneracontinua como productos del metabolismo normal de las células. Juegan un papel esencial en determinados procesos biológicos, como las reacciones enzimáticas de la cadena respiratoria mitocondrial (Chance B et al., 1979), las reacciones de detoxificación llevadas a cabo por el citocromo P-450, la fagocitosis (Klebanoff SJ, 1980) o la síntesis de prostaglandinas (Porter NN, 1986). Sin embargo estos radicales, que son imprescindibles para el buen funcionamiento de la célula, pueden ser también causantes de daño celular cuando se producen de forma incontrolada.
Fuentes biológicas de radicales libres
La mitocondria constituye la principal fuente de ROS en el organismo. Estas moléculas se generan principalmente a nivel de la cadena transportadora de electrones. Su paso a través de la membrana mitocondrial interna genera un gradiente de electrones que aporta la energía necesaria para la formación de ATP (adenosíntrifosfato). En este proceso de fosforilación oxidativa, el oxígeno actúa como receptor final de los electrones. Entre los nutrientes iniciales y la generación final de energía se forman diferentes moléculas con distinto grado de oxidación, algunas de las cuales pueden entregar 1 ó 2 electrones al oxígeno y producir intermediarios parcialmente reducidos o ROS (Turrens J, 1994).
Otras fuentes importantes de ROS son los peroxisomas, orgánulos citosólicos muy ricos en oxidasas, que generan gran cantidad de H2O2; los leucocitos polimorfonucleares, que a través de la enzima NADPH oxidasa genera O2 que en presencia de hierro (en situaciones inflamatorias) se transforma en O2-o la enzima xantina deshidrogenasa, presente en los endotelios y cuya función es la depuración de las xantinas, generando O2- .
Toxicidad de los radicales libres
A mediados de los años 50 se publicó por primera vez un trabajo que ponía de manifiesto el papel de los radicaleslibres como agentes tóxicos generadores de enfermedades (Gerschman R, 1954).
En el caso de que la molécula sea un lípido se dañarán las estructuras en las que están presentes, como son las membranas celulares o las lipoproteínas. En las membranas, este proceso alterará su permeabilidad, conduciendo a la muerte celular. En las lipoproteínas, se sabe que la oxidación de las LDLs (lipoproteínas de baja densidad) juega un papel fundamental en la formación de la placa de ateroma (Hazel SL, 2000). El proceso de oxidación de los lípidos, conocido como peroxidación lipídica, genera diversos subproductos como el MDA (malonildialdehido), cuya determinación en tejidos, plasma u orina es uno de los métodos más estandarizados de evaluar el estrés oxidativo.
Cuando la molécula oxidada es una proteína, la oxidación de los aminoácidos produce la formación de entrecruzamientos de las cadenas peptídicas, fragmentación de las proteínas y pérdida de funcionalidad.
Finalmente, en el caso del ADN, la oxidación de los ácidos nucleicos produce bases modificadas, que dan lugar a mutaciones que pueden verse implicadas en la pérdida de expresión génica o en procesos de carcinogénesis.
Enfermedades, procesos degenerativos y estrés oxidativo
El estrés oxidativo se define como una alteración del equilibrio prooxidante/antioxidante a favor del primero (Sies H, 1986). Existen diversos procesos patológicos en los que se ha demostrado que juegan un papel importante los ROS, algunos de los cuales se describen a continuación:
• Envejecimiento: la teoría de los ROS y el envejecimiento se fundamenta en que el envejecimiento resulta de la acumulación de lesiones orgánicas debidas a la acción de estas moléculas (Harman D, 1993). También se ha detectado que en las células envejecidas existe una menor actividad proteolítica, una disminución de las concentraciones de antioxidantes y una inactivación de las enzimas detoxificadoras responsables de la eliminación de los ROS. Además, se ha observado una acumulación de proteínas oxidadas no degradadas.
• Aterosclerosis: se sabe que la formación de la placa de ateroma se inicia con la captación de lipoproteínas de baja densidad (LDL) por parte de los macrófagos. Estos se acumulan en el espacio subendotelial, donde inducen la migración de células musculares, su proliferación e hipertrofia. En determinadas condiciones oxidativas las LDL se oxidan y ellas, o sus productos derivados, tienen un mayor poder aterogénico, puesto que son captadas con mayor facilidad por los macrófagos. De esta manera estimulan la producción de factores de adhesión, los factores trombóticos y los factores de proliferación, iniciando o extendiendo la lesión aterogénica (Hazen SL, 2000). Se ha demostrado que existe una estrecha relación entre los ROS y la oxidación de las LDL, y se sabe que su incremento es un indicador de la aparición de aterosclerosis (Elejalde JI, 2001).
• Cáncer: la transformación de las células normales en células cancerígenas viene condicionada por la presencia de mutaciones en genes u oncogenes que controlan funciones celulares clave, lo que puede producirse por un estado celular redox. Se han detectado niveles disminuidos de enzimas antioxidantes en diversos tipos de células tumorales (Oberley TD &OberleyLW, 1997). También se ha sugerido que el estrés oxidativo tiene un papel en la progresión de la angiogénesis. Por otro lado, se ha observado la activación de algunos genes tempranos que podrían participar en el control de la transcripción de factores de crecimiento necesarios para el desarrollo tumoral.
• Otros procesos patológicos en los que se ha descrito la implicación de los ROS son la insuficiencia renal aguday crónica, diabetes mellitus, hipertensión arterial, cirrosis, insuficiencia hepática, etc. (ElejaldeJl,2001).
Polifenoles
Los polifenoles son compuestos o sustancias químicaspresentes en un gran número de alimentos de origen vegetal. El término comprende una amplia variedad de moléculas que presentan una estructura común, caracterizada por la presencia de varios grupos hidroxilo en anillos aromáticos. Aunque también forman parte de los polifenoles aquellas moléculas que presentan un anillo fenólico, como es el caso de los ácidos fenólicos o los alcoholes fenólicos (D'Archivio M et al., 2007).
Clasificación de los polifenoles
Los polifenoles se clasifican en función del número de anillos fenólicos que contienen, así como de los elementos estructurales que unen estos anillos entre sí. Así, los principales grupos de polifenoles son:
- Flavonoides: presentan un esqueleto de carbono de difenil propano y dos anillos de benceno unidos por una cadena lineal de 3 átomos de carbono. Hasta la fecha se han identificado más de 6.000 flavonoides en plantas y la lista aumenta continuamente. Los flavonoides se pueden dividir en 6 subclases, dependiendo del estado de oxidación del anillo central de pirano (D'Archivio M et al., 2007):
• Flavonoles: tienen un doble enlace entre los carbonos 2 y 3, con un grupo hidroxilo en C3. Son los flavonoides más ubicuos en los alimentos, siendo la quercetina el más representativo. Las principales fuentes de flavonoles son las cebollas, la col rizada, los puerros, el brócoli y el arándano. El té y el vino tinto contienen alrededor de 45 y 30 mg de flavonoles/L respectivamente. Esimportante destacar que la síntesis de flavonoles es estimulada por la luz, por lo que se acumulan en las partes más externas de los frutos.
• Flavonas: presentan un doble enlace entre los carbonos 2 y 3, y son los flavonoides menos comunes. Se encuentran en el perejil y en el apio.
• Flavanonas: se caracterizan por la presencia de una cadena saturada de 3 átomos de carbono y un átomo de oxígeno en el carbono 4. Sólo se encuentran a elevadas concentraciones en los cítricos, pero aparecen también en los tomates y en algunas plantas aromáticas como la menta.
• Isoflavonas: presentan similitud estructural con los estrógenos, y de hecho pueden unirse a sus receptores, por los que se conocen también como fitoestrógenos. La soja y sus derivados son las fuentes principales de isoflavonas.
• Antocianinas: son los pigmentos responsables de la coloración roja, azul y púrpura de frutos, flores y otros tejidos y productos vegetales. Se encuentran presentes en diversos productos que forman parte de la dieta como vino tinto, algunas variedades de cereales, y algunas verduras como cebolla, rábano, repollo o judías.
• Flavanoles: contienen una Cadena saturada de 3 carbonos con un grupo hidroxilo en el C3. Existen tanto en forma de monómeros como de polímeros, conocidos como catequinas y proantocianidinas respectivamente. Los principales flavanoles de la fruta son la catequina y la epicatequina, mientras que la galocatequina, epigalocatequina y galato de epigalocatequina se encuentran fundamentalmente en el té. Las catequinas se encuentran en frutas como el albaricoque y la cereza, y en otros productoscomo el té, el chocolate y el vino blanco.
-Ácidos fenólicos: se dividen en dos grupos, derivados del ácido benzoico y derivados del ácido cinámico:
• Ácidos hidroxibenzoicos: se encuentran en muy pocas plantas consumidas por el ser humano, por lo que no se considera que presenten un gran interés nutricional. Entre ellos cabe destacar el ácido gálico.
• Ácidos hidroxicinámicos: están representados fundamentalmente por el ácido cumárico, ácido caféico y ácido ferúlico. Se encuentran en todas las partes de las frutas, aunque su mayor concentración aparece en la parte más exterior de la fruta madura.
- Alcoholes fenólicos: los principales son el tirosol y el hidroxitirosol. Están presentes principalmente en el aceite de oliva. El tirosol se encuentra también en el vino, tanto blanco como tinto y en la cerveza; el hidroxitirosol, por su parte, se encuentra en el vino tinto.
-Estilbenos: el principal estilbeno presente en la dieta del ser humano es el resveratrol, aunque la cantidad de estos compuestos ingeridos en la dieta es pequeña. Los estilbenos son producidos por las plantas como respuesta a patógenos o a determinadas condiciones de estrés. Se han detectado en más de 70 especies de plantas, comouvas, bayas y cacahuetes.
Lignanos: los lignanos se producen por la dimerizaciónoxidativa de dos unidades de fenilpropano. La principal fuente de estos compuestos son las semillas de lino. El interés en el estudio de los lignanos está aumentando en los últimos años por sus potenciales aplicaciones en la quimioterapia anticancerígena y otros efectosfarmacológicos. Polifenoles: prevención y tratamiento de enfermedades
Diversos estudios epidemiológicos han sugerido que el consumo de frutas y verduras presenta un efecto protector ante enfermedades como el cáncer o las patologías cardiovasculares. Este efecto es atribuido por muchos autores a su contenido en polifenoles, que, como hemos descrito previamente, son compuestos con gran capacidad antioxidante que se encuentran de manera muy representativa en frutas y verduras. Además de sus propiedades antioxidantes, los polifenoles han demostrado poseer otras actividades que podrían ser de gran relevancia en la prevención y tratamiento de diversas patologías. Así, son capaces de quelar ROS, regular la producción de óxido nítrico, disminuir la inmovilización de leucocitos, inducir mecanismos de apoptosis, inhibir la proliferación celular y angiogénesis e incluso han mostrado tener actividad fitoestrogénica (Higdon jV & Frei B, 2003).
Enfermedad cardiovascular
Existen cada vez más evidencias que apuntan hacia la existencia de una correlación directa entre el consumo de alimentos y bebidas ricas en polifenoles y la incidencia de enfermedades cardiovasculares en la población. Dentro de estos alimentos y bebidas encontramos las frutas, las verduras, el cacao o el vino tinto.
El concepto conocido como “paradoja francesa”, es un término acuñado por algunos epidemiólogos que pone de manifiesto la existencia de una tasa relativamente baja de enfermedades coronarias en la población francesa. Siendo ésta una población con un consumo elevado de grasas saturadas, factor altamente asociado con un incremento de las enfermedades cardiovasculares.
Estudios epidemiológicos más extensos como el proyecto MONICA pusieron de manifiesto la existencia de un gradiente decreciente en la tasa de eventos coronarios desde el norte hasta el sur de Europa (Kuulasmaa K et al.,
2000).Curiosamente, este rango relativamente bajo de eventos coronarios encontrado en Francia y otros países, del sur de Europa, estaba asociado a unos factores de riesgo cardiovascular comparables a los encontrados en países desarrollados con una tasa de eventos cardiovasculares mucho mayor (Stoclet JC et al., 2004). Teniendo en cuenta estos datos, el contenido en polifenoles del vino ha recibido una gran atención por dos motivos: por un lado porque es particularmente elevado (más del 0.2% en el vino tinto) y por otro, por la posible implicación de los polifenoles y la “paradoja francesa”, puesto que el consumo de vino en Francia es elevado (Stoclet JC et al., 2004).
Se cree que algunas de las propiedades químicas y efectos biológicos de los polifenoles podrían estar implicadas en la protección contra la enfermedad cardiovascular a través de varios mecanismos:
En primer lugar, las propiedades antioxidantes de estas moléculas podrían proteger los vasos sanguíneos del daño producido por el estrés oxidativo asociado con la mayoría de los factores de riesgo cardiovascular. Así, se ha sugerido que los flavonoides podrían proteger factores endoteliales antitrombóticos, como NO o prostaciclina, de una rotura debida a su efecto captador de superóxido. De hecho, la capacidad de los oligómeros de procianididas de taninos condensados para quelar el peroxinitrito protege a las células endoteliales de la oxidación de los lípidos de la membrana y de la citotoxicidad (Aldini G et al., 2003).
Por otro lado se ha propuesto que las propiedades antioxidantes de los polifenoles podrían proteger la función del endotelio vascular de los efectos de la oxidación de las LDLs, que afectan a la capacidad de relajación del endotelio.
Algunos estudios han puesto de manifiesto que el consumo de vino, polifenoles procedentes del vino tinto o zumo de uva negra potencia la capacidad antioxidante delplasma y disminuye la oxidación de las LDL circulantes (Nigdikar SV et al., 1998). También se ha determinado que tras el consumo de zumo de uva negra, estos efectos estaban asociados con la restauración de la función endotelial en pacientes con enfermedades coronarias.
Además de retrasar la oxidación de las LDL, algunos polifenoles como el ácido caféico pueden actuar como agentes citoprotectores. De esta manera, actuarían inhibiendo la apoptosis en las células endoteliales a través del bloqueo de las vías de señalización activadas por las LDL-oxidadas (Vieira O et al., 1998).
También se ha puesto de manifiesto que los polifenoles son capaces de incrementar la formación de NO por parte de la enzima NO sintasa endotelial (eNOS) (Aldini G et al., 2003). En todos los estudios los polifenoles procedentes de plantas indujeron una vasorrelajación dependiente de endotelio que estaba asociada, generalmente, con un aumento en la formación de GMP cíclico (GMPc) y que no se producía en presencia de inhibidores de NOS, lo que indicaba que esta respuesta estaba mediada por la vía CMPC-NOS. Además, el efecto de la relajación era directamente proporcional a la concentración de los polifenoles en el vino (Burns J et al., 2000).
Otros efectos destacables de los polifenoles, en lo que a protección del sistema cardiovascular se refiere, es el incremento de la expresión de la eNOS; la relajación e hiperpolarización del endotelio mediada por el factor EDHF; el incremento de la liberación de prostaciclina por parte de las células endoteliales; la inhibición de la síntesis de endotelina-1; y los efectos vasodilatadores y anti- hipertensivos.
El documento WANG X ET AL, "Chemical characterization and antioxidant evaluation of muscadine grape pomace extract", FOOD CHEMISTRY, ELSEVIER LTD, NL, vol. 123, n° 4, ISSN 0308-8146, describe la provision de un extracto de hollejo de uva muscadina que tiene un alto contenido de polifenoles, que tiene efectos antioxidativos. En particular, en la tabla 2 se describe un extracto de hollejo de muscadina que comprende 0,62 mg/g de ácido elágico, 0,17 mg/g de miricetina, 0,2 mg/g de quercetina, 1,46 mg/g de catequina, 1,28 mg/g de epicatequina y 0,9 mg/g de epigalocatequina. El contenido total de componentes fenólicos del extracto es 34,1 mg/g de equivalentes de ácido gálico y 3 mg/g de equivalentes de quercetina.
El documento EDUARDO PASTRANA-BONILLA ET AL, "Phenolic Content and Antioxidant Capacity of Muscadine Grapes", JOURNAL OF AGRICULTURAL AND FOOD CHEMISTRY, vol. 51, n° 18, ISSN 0021-8561, páginas 5497 -5503 describe el estudio llevado a cabo en 10 cultivares de uva muscadina que fueron separados en piel, pepitas y pulpa. Cada una de las partes del fruto y las hojas de las variedades correspondientes se extrajeron para el análisis por HPLC de componentes fenólicos principales. Ácido gálico, (+)-catequina y epicatequina eran los componentes fenólicos principales en semillas, con valores medios de 6,9, 558,4 y 1299,4 mg/100 g de peso fresco (FW), respectivamente. En las pieles, ácido elágico, miricetina, quercetina, kaempferol y trans-resveratrol eran los componentes fenólicos principales, con valores medios respectivos de 16,5, 8,4, 1,8, 0,6 y 0,1 mg/100 g de FW. Las medias de los componentes fenólicos totales eran 2178,8, 374,6, 23,8 y 351,6 mg/g de equivalente de ácido gálico en pepita, piel, pulpa y hojas, respectivamente. Los valores de capacidad antioxidante eran, de media, 2.4, 12,8, 281,3 y 236,1 pM de TEAC/g de FW para las pulpas, pieles, pepitas y hojas, respectivamente.
El documento SANDHU A K ET AL, "Effects of exogenous abscisic acid on antioxidant capacities, anthocyanins, and flavonol contents of muscadine grape (Vitisrotundifolia) skins", FOOD CHEMISTRY, ELSEVIER LTD, NL, vol. 126, n° 3, ISSN 0308-8146, páginas 982 - 988, describe los resultados de un estudio que evalúa el efecto de ácido abscísico exógeno (ABA) sobre la capacidad antioxidante y el contenido fenólico de pieles de uvas muscadina (cvs. Noble y Alachua). Piel liofilizada de uvas comprende (sobre una base de peso fresco) 4,4 mg/g de componentes fenólicos totales (Tabla 2, variedad Noble), 3,46 mg/g de ácido elágico, 0,36 mg/g de miricetina y 0,27 mg/g de quercetina.
El documento US6238673 (HOWARD ALAN NORMAN) describe un método de producir una composición con contenido en polifenol derivada de uvas, incluyendo el método: preparar un extracto de uva líquido que incluye polifenoles; poner en contacto el extracto líquido con un medio de separación que fracciona los componentes del extracto; y recuperar la fracción en la que los polifenoles estén presentes. En particular, el ejemplo 1 describe un polvo desalcoholizado de vino barbera que contiene 0,7 mg/g de miricetina, 4,3 mg/g de quercetina, 13,9 mg/g de catequina y 11,3 mg/g de epicatequina. Este documento describe también un método de enriquecer la composición con flavonol añadido. La composición con contenido en flavonol tiene efectos antioxidativos.
El documento ES2217966 (JORDA QUILES LEONARDO) describe un método de preparar un producto alimentario no lácteo enriquecido con antioxidantes, obtenido al añadir un extracto de pepitas de uva negra, piel y tallo al producto alimentario a enriquecer. El extracto descrito comprende 1,2 mg/g de quercetina y 8,8 mg/g de catequina.
El documento RODRIGUEZ MONTALEGRE, R. ET AL., "Phenolic compounds in skins and seeds of ten grape Vitisvinifera varieties grown in a warm climate.", JOURNAL OF FOOD COMPOSITION AND ANALYSIS, vol. 19, n° 6 7, páginas 687 - 693, describe un estudio que analiza fenoles no antocianina presentes en las pieles y las pepitas de 70 muestras de uva pertenecientes a 10 cultivares. Las pieles de las uvas contenían éstres tartáricos de ácidos hidroxicinámicos (6-45 mg/kg de uva), flavan-3-oles monoméricos y diméricos (9-96 mg/kg) y flavonoles (25-197 mg/kg). Los constituyentes de las pepitas comprendían casi exclusivamente flavan-3-oles con intervalos de concentraciones de 330-1390 mg/kg.
El documento US2010015316 (YING, W et al.) describe un método de producir extracto de uva para uso en complementos dietéticos. Las uvas son procesadas para obtener un extracto en polvo o líquido concentrado en polifenoles el cual se añade a complementos dietéticos.
El documento RODRIGO, R et al. “Modulation of endogenous antioxidant system by wine polyphenols in human disease”, ClinicaChimicaActa, 20.02.2011 Vol 412, n 5-6, páginas 410-424 ISSN: 009-8981, describe diversas composiciones de extractos de uva que contienen diferentes polifenoles.
El documento WO 9739632 (HENKEL CORPORATION) describe diferentes composiciones antioxidantes naturales que comprenden pepitas de uva machacadas y liofilizadas.
El documento ES 2319032 (MORO GONZALEZ CARLOS) describe un procedimiento para extraer polifenoles de orujo de uva de la destilación. El método descrito implica las siguientes etapas:
a) Extracción del orujo por difusión continua en contracorriente utilizando como extractante una disolución 50:50 de etanol:agua acidificada a pH 1, a una temperatura de 40-55°C y durante un tiempo de 3-4 horas, estando la relación de extracción orujo:extractante en el intervalo 1:2-3,5, obteniéndose un orujo de extracción y un jugo de extracción;
b) Prensado del orujo de extracción resultante de la etapa a) a una presión entre 2 y 10 kg/cm2, obteniéndose un orujo de prensado y un jugo de prensado;
c) Mezcla del jugo de extracción obtenido en la etapa a) y el jugo de prensado obtenido en la etapa b), seguido por enfriamiento de la mezcla resultante a 25°C, depuración de la misma mediante filtración a 100 micras y centrifugación, obteniéndose un jugo clarificado y un residuo sólido;
d) Estabilización del jugo clarificado obtenido en la etapa c) mediante adición de alginato sódico en una concentración de 0,2-0,6 g/L de jugo clarificado;
e) Concentración del jugo estabilizado obtenido en la etapa d) en un evaporador a vacío a 60-70°C hasta reducir el volumen de jugo estabilizado en aproximadamente un 50%, de tal modo que se obtiene un extracto polifenólico con un poder antioxidante en un rango entre 150.000 y 250.000 mg ácido gálico/kg de orujo seco.
El documento US 2004/166179 (ANZAGHI PIERGIORGIO ET AL.), enseña que vinaza de vino tinto líquida se mezcló con maltodextrina, seguido de liofilización para obtener un polvo que tiene alta capacidad antioxidante. Se utilizó maltodextrina con el fin de potenciar la biodisponibilidad de los complejos antioxidantes en la vinaza.
El documento US 2011/177182 (IANIRO TEODORO T ET AL.) describe un procedimiento para preparar una formulación en cápsula antioxidante, que comprende mezclar hollejo de uva con maltodextrina, seguido de liofilización. Sin embargo, la maltodextrina se utiliza en este procedimiento como un simple soporte, no se describe fin específico alguno.
Descripción de la invención
El primer objeto de esta invención es un extractoprocedente de la uva (VitisVinifera) que presenta composiciones específicas no conocidas hasta ahora ypropiedades beneficiosas para la salud, siendo adecuada para el consumo humano (y, como se verá más adelante, también para uso tópico). La composición del extracto de uva incluye uno o más compuestos polifenólicos en un porcentaje en peso del total de la composición del extracto comprendido entre 5% y 70% incluidos ambos límites, que pueden ser identificados a partir de un análisis por cromatografía líquida de alta resolución (HPLC). Dicho extracto se encuentra en estado seco.
Debe entenderse de la presente memoria que dicho porcentaje (5%-70% incluidos ambos límites) está referido al conjunto de polifenoles presente en la composición del extracto, tanto si es sólo un polifenol como si el extracto contiene dos o más polifenoles.
De manera preferida, el compuesto o compuestos polifenólicos comprendidos en el extracto de uva son seleccionados independientemente unos de otros de un grupo que consiste en flavan-3-ol, mirecitina, quercitina, ácido elágico, y cualquiera de sus combinaciones. Más preferentemente todavía, el flavan-3-ol es seleccionado dentro del grupo compuesto por: catequina, epicatequina, epigalocatequina, catequina galato y cualquier combinación de los mismos.
Debe tenerse en cuenta que cuando se cita un intervalo de valores en la presente memoria, sus límites inferior y superior están siempre incluidos en el ámbito de la invención, como realizaciones concretas de la misma.
El extracto seco de uva definido en la reivindicación 1 comprende la siguiente concentración en peso de polifenoles:
• Ácido elágico: entre 1 y 5 mg/g de composición delextracto;
• Mirecitina: entre 0,5 y 4 mg/g de composición delextracto;
• Quercitina: entre 0,5 y 4 mg/g de composición delextracto; y
• Flavan-3-oles: entre 1,1 y 10 mg/g de composición del extracto.
Los flavan-3-oles que comprende el extracto son los siguientes:
• Catequina: entre 0,5 y 5 mg/g de composición del extracto;
• Epicatequina: entre 0,1 y 1 mg/g de composición del extracto;
• Epigalocatequina: entre 0,5 y 4 mg/g de composición del extracto; y
• Catequina galato: entre 0,05 y 1 mg/g de composición del extracto.
El extracto de uva descrito, en cualquiera de sus variantes, puede extraerse directamente de uva blanca y/o uva tinta, o indirectamente de subproductos de un proceso de vinificación: estos subproductos pueden ser por ejemplo lías, orujos, hollejos, etc. y cualquier combinación de los mismos, aunque más preferentemente son los hollejos, es decir, la piel que envuelve la pulpa de la uva tras su prensa. De manera especialmente preferida, el extracto de uva procede de uva tinta Tempranillo del valle del Duero (España).
Es posible (opcionalmente) que el extracto contenga no sólo polifenoles, sino también otro u otros componentes y moléculas derivados de la uva de origen o de subproductosdel proceso de vinificación, como pueden ser fibra alimentaria, proteínas vegetales, etc., y que diferencian dicho extracto de una simple mezcla de polifenoles producida de manera artificial en una planta o laboratorio. En un caso preferido, el extracto objeto de la presente invención también puede contener el conjunto total de polifenoles presentes en la uva (entre los que se encuentran ácidos fenólicos -ácido elágico, ácido gálico...-, estilbenos -resveratrol..- y flavonoides -flavonoles, flavan-3-oles...), y/o el total de polifenoles presentes en los subproductos del proceso de vinificación.
El extracto de uva aquí descrito se obtiene preferentemente a partir de una composición líquida extraída de la uva o de al menos un subproducto derivado de un proceso de vinificación, sometiéndose dicha composición líquida a un proceso de secado. De una forma particularmente preferida, dicha composición líquida que contiene el o los
polifenoles se obtiene según el método de obtención descrito en la solitud ES2319032. Este procedimiento se basa en la recogida de los orujos residuales tras el proceso de vinificación, los cuales son sometidos a un proceso de extracción sólido-líquido por difusión continua a contracorriente.
El secado de la composición líquida que proviene de la uva para obtener el extracto de la presente invención se lleva a cabo preferentemente mediante liofilización (freeze-drying) y/o atomización (spray-drying) de dicha composición líquida.
En una realización preferida, el extracto seco comprende adicionalmente un excipiente, un diluyente, o un portador, como pueden ser por ejemplo la maltodextrina, el dióxido de silicio, la goma xantana, etc., empleado en el proceso de secado de la composición líquida por liofilización y/o atomización.
En vista de lo anterior, la presente invención cubre asimismo un proceso de obtención del extracto de uva aquídescrito, que comprende someter a secado una composición líquida extraída de la uva o de al menos un subproducto derivado de un proceso de vinificación que comprende uno o más compuestos polifenólicos, hasta obtener un producto seco que comprende al menos uno de los compuestos polifenólicos en un porcentaje en peso del total comprendido entre 5% y 70%, incluidos ambos límites, estando dicho porcentaje referido al total de polifenoles presentes en la composición del extracto, tanto si es uno como si son dos o más. Como ya se ha afirmado, dicho proceso de secado se lleva a cabo preferentemente mediante liofilización y/o atomización (spraydrying) de la composición líquida. Más preferentemente todavía, en dicho secado se emplea un excipiente, un diluyente o un portador, como pueden ser por ejemplo la maltodextrina, el dióxido de silicio, la goma xantana, etc.
Es asimismo un objeto de esta invención un complemento alimenticio (nutricional) funcional caracterizado porque comprende como ingrediente funcional el extracto de uva según ha sido anteriormente descrito. El extracto de uva funciona directamente como complemento alimenticio funcional.
Dicho complemento alimenticio se caracteriza porque comprende al menos entre 10 mg y 1 g del extracto de uva. De manera preferente, este complemento alimenticio se caracteriza por que comprende, además del extracto de uva como ingrediente funcional, al menos una substancia fisiológicamente aceptable que presenta propiedades seleccionadas dentro del grupo compuesto por: propiedades nutritivas, antioxidantes, terapéuticas, saborizantes, aromatizantes, colorantes, etc.
También de manera preferente, en cualquiera de susvariantes, la composición alimenticia ingerible comprende además al menos una sustancia seleccionada dentro del grupo compuesto por: Vitaminas (Vitamina A, Vitamina B1, Vitamina B2, Vitamina B3, Vitamina B6, Vitamina B9, Vitamina B12, Vitamina C, Vitamina E), Oligoelementos (por ejemplo, Zinc, Cobre, Magnesio, Selenio, Manganeso), fitoquímicos (como por ejemplo Carotenoides, Luteina, Zeaxantina,Astaxantina), Colágeno, Colágeno tipo II, CondroitínSulfato, Ácido Hialurónico, Ácido grasos Omega-3, Hidroxitol, Glutatión, Glucosamina, fitoextractos enriquecidos en proantocianidinas y fitoextractosprocedentes de otros productos vegetales (como pueden ser opcionalmente granada, té verde, olivo, Polygonumcuspidatum).
Tanto el extracto seco de uva descrito en esta memoria como el complemento alimenticio que lo comprende (como ingrediente funcional) pueden ser ingeridos directamente por el ser humano. De esta forma, la presente invención contempla no sólo el uso del extracto de uva como complemento alimenticio, sino también el uso del extracto de uva como ingrediente funcional de un alimento o de una composición alimenticia.
De este modo, tanto el extracto de uva como el complemento nutricional alimentario mencionado, puede estar envasado a granel o en dosis unitarias. De forma general, el extracto y el complemento alimentario se pueden envasar en lata, en tambor, en brick o en cualquier otro tipo de envase conocido en el campo. Cuando se envasa en dosis unitarias, dicho extracto y dicha composición que lo comprenden pueden presentarse en forma de tableta, de cápsula o de píldora.
Se ha demostrado que el efecto del extracto de uva aquí descrito, o de un complemento alimenticio que comprende dicho extracto de uva aporta propiedades beneficiosas sobre la salud humana, combatiendo el estrés oxidativo ymejorando los parámetros asociados a enfermedades cardiovasculares. Por ejemplo, se ha visto que un beneficio derivado del consumo de este extracto o del complemento alimenticio que lo contiene es la reducción de los niveles de lipoproteínas-colesterol y colesterol total en sangre, y el aumento de la capacidad antioxidante en el plasma celular y en la concentración de vitamina E, entre otros parámetros fisiológicos.
La presente invención contempla asimismo un alimento caracterizado porque comprende en su composición como ingrediente funcional el extracto de uva descrito o el complemento nutricional obtenible a partir del mismo, mezclado con al menos un ingrediente alimenticio. En una realización preferida del alimento, ésta comprende como ingrediente alimenticio uno de los productos seleccionados dentro del grupo compuesto por productos cárnicos, productos lácteos, derivados lácteos, salsas, pasta alimenticia, productos de panificación y repostería u otros, y cualquier mezcla de los mismos.
En otra realización preferida, el alimento es una bebida, y el extracto de uva o el complemento nutricional que lo comprende se mezcla con un líquido fisiológicamente aceptable.
Estos alimentos y bebidas tienen los mismos resultados antioxidantes en la salud que el extracto de uva que comprenden.
La presente invención también contempla el uso del extracto de uva descrito, en cualquiera de sus variantes, para la fabricación de diferentes productos funcionales. Entre estos productos se encuentran los alimentos y los complementos alimenticios de consumo humano. Dicha composición se puede emplear para reducir los niveles de lipoproteínas-colesterol y de colesterol total en sangre, y/o para aumentar la capacidad antioxidante en plasma y la concentración de vitamina E. De esta forma, conel extracto de uva de la presente invención se pueden prevenir enfermedades cardiovasculares y afecciones provocadas por el estrés oxidativo debido al metabolismo.
También se contempla el uso tópico del extracto de uva descrito, y su uso para la fabricación de composiciones cosméticas, como crema hidratante, leche limpiadora, etc.
Ejemplos comparativos
Ejemplo 1. Preparación del extracto de uva polifenólico a partir de vino tinto
Como materia prima del extracto se utilizó uva tinta Tempranillo del valle del Duero. Se emplearon los hollejos concretamente, es decir, la piel que envuelve la pulpa de la uva tras su prensa.
El método empleado para la obtención de una composición líquida que se va a emplear como materia prima del extracto de uva seco es el descrito en la solitud ES2319032. Este procedimiento se basa en la recogida de los orujos residuales tras el proceso de vinificación, los cuales son sometidos a un proceso de extracción sólido-líquido por difusión continua a contracorriente.
El extracto polifenólico obtenido se caracteriza por comprender no sólo polifenoles, sino también otros componentes y moléculas procedentes de la uva de origen, que caracterizan dicha composición líquida.
Posteriormente la composición líquida de la uva fue sometida a un proceso de atomización de secado (spray- drying) y/o liofilización, para obtener el extracto seco de uva de la presente invención.
Ejemplo 2. Presentación y composición del extracto de uva seco obtenido en el Ejemplo 1 en cápsulas El extracto seco fue encapsulado en capsulas de gelatina dura de tal manera que el contenido de las capsulas es de 374,5 miligramos, distribuidos de la siguiente manera:
- extracto seco: 350 mg.
- Celulosa microcristalina: 17,15 mg.
- Estearato de magnesio: 7,35 mg.
Ejemplo 3. Caracterización del extracto seco de uva tinta empleado en la elaboración de las capsulas del Ejemplo 2.
La composición polifenólica del extracto de uva tinta seco se detalla a continuación:
• Ácido elágico: 1-5 mg/g
• Mirecitina: 0,5-4 mg/g
• Quercitina: 0,5-4 mg/g
• Flavan-3-oles: 1,1-10 mg/g
• Catequina: 0,5-5 mg/g
• Epicatequina: 0,1-1 mg/g
• Epigalocatequina: 0,5-4 mg/g
• Catequina galato: 0,05-1 mg/g
La composición polifenólica del extracto se caracteriza por su elevada concentración de ácido elágico, siendo este un extracto integral de uva.
Ejemplo 4. Estudio con voluntarios utilizando el extracto de uva para determinar sus propiedades saludables en voluntarios sanos.
Se realizó un estudio clínico-nutricional exploratorio, aleatorizado, doble ciego, controlado con placebo, paralelo, con una muestra de voluntarios sanos utilizando la composición citada en el Ejemplo 2 con el objetivo de evaluar las propiedades saludables y la tolerabilidad del extracto sobre diferentes parámetros indicadores de riesgo cardiovascular y de estrés oxidativo.
Cada participante en el estudio tomó 700 mg/día de extracto de uva objeto de la presente invención o placebo durante 8 semanas (56 días). Entre una y cuatro semanas previas al inicio de la fase experimental fueron seleccionados los posibles participantes, dicha selección se realizó en función de si cumplían los criterios de inclusión/exclusión del estudio mediante: historia clínica(anamesis y exploración física), analítica (hemograma, bioquímica, sistemático y sedimento de orina, y pruebas complementarias (ECG).
Durante la fase experimental se realizaron tres visitas al centro de realización del estudio, al inicio (visita basal, V0), a mitad (visita intermedia, V28) y al final del estudio (visita final, V56). Una vez finalizado el periodo experimental, se volvió a realizar una revisión de los voluntarios mediante: exploración física, analítica (hemograma, bioquímica, sistemático y sedimento de orina) y pruebas complementarias (ECG).
Selección de los voluntarios.
Los voluntarios sometidos al estudio cumplieron los siguientes criterios de inclusión:
• Sujetos de ambos sexos con edades comprendidas entre los 18 y los 65 años ambos inclusive.
• Historia clínica, exploración física por aparatos y pruebas de laboratorio dentro de la normalidad (especialmente el tracto gastrointestinal), sin evidencia de enfermedad significativa, orgánica o psiquiátrica. • Adecuado nivel cultural y de comprensión del estudio clínico
• IMC entre 19 y 30 Kg/m2
• Estar de acuerdo en participar voluntariamente en el estudio y consentimiento informado por escrito.
• Presentar niveles de LDL-colesterol comprendidos entre 130 y 190 mg/dl. En el caso de presentar dos o más factores de riesgo cardiovascular, presentar niveles de LDL-colesterol comprendidos entre 100 y 190 mg/dl Los criterios de exclusión fueron los siguientes:
• Presentar niveles de LDL-colesterol superiores a 190 mg/dl
• Presentar niveles de triglicéridos superiores a 350 mg/dl
• Haber presentado algún evento isquémico cardiovascular en los últimos 6 meses
• Estar o haber estado en tratamiento con medicamentos hipolipemiantes o con cualquier tipo de tratamiento para la hipercolesterolemia durante las 4 semanas previas al inicio del estudio
• Mujeres embarazadas o en periodo de lactancia
• Presentar hipersensibilidad a algún componente del producto en estudio o del placebo
• Haber participado en el desarrollo de otro ensayo clínico durante los tres meses precedentes al inicio del ensayo actual.
Diseño experimental del estudio.
Cada sujeto ingirió dos cápsulas al día durante 56 días (8 semanas), antes del desayuno con agua o zumo. Los participantes fueron divididos en dos grupos de estudio paralelos, uno de los cuales recibió el extracto mientras que el otro recibió el placebo.
Extracto de uva: Capsulas con el extracto con las especificaciones de composición descritas en el Ejemplo 2. Fueron ingeridos por vía oral.
Extracto control: Placebo, composición: Celulosa microcristalina (315 mg) y Estearato de magnesio (6 mg). Fueron ingeridos por vía oral.
Todos los participantes en el estudio siguieron una serie de recomendaciones higiénico-dietéticas que les fueron suministradas al inicio del estudio por el Investigador Principal:
• No comenzar ni modificar ningún tratamiento hormonal durante el estudio si no estaba debidamente justificado.
• No cambiar significativamente los hábitos referentesal consumo de café o alcohol.
• No tomar ni seguir ningún tratamiento que pudiera afectar a los parámetros del estudio (peso, acumulación de grasa, sensación de hambre/saciedad...)
Desarrollo del estudio.
Cada voluntario realizó 3 visitas al centro de realización del estudio durante la fase experimental: al inicio (visita 0); a la mitad (visita 28); y al final del estudio (visita 56).
Durante cada una de las visitas se les realizaron diferentes determinaciones relacionadas con los parámetros en estudio: medida del peso; medidas antropométricas (perímetro de cintura y cadera); impedanciometría y un análisis de sangre y orina, en la que fueron analizados diferentes indicadores bioquímicos como perfil lipídico, glucemia basal y distintos marcadores de estrés oxidativo como son la capacidad antioxidante del plasma mediante ORAC, niveles de vitaminas C y E, peroxidación lipídica (TBARs) y F2-isoprostanos en orina, LDL-oxidada y Factor de Necrosis Tumoral alfa (TNF-a).
Una vez finalizado el periodo experimental, se realizó una revisión de los sujetos participantes mediante: exploración física, analítica (hemograma, bioquímica, sistemático y sedimento de orina) y pruebas complementarias (ECG). La valoración del efecto del consumo de las cápsulas con extracto de uva sobre los parámetros en estudio fueron llevadas a cabo mediante la evaluación de las diferencias entre los valores iniciales y finales de los parámetros objetivos anteriormente especificados.
La variable principal de valoración fue la evolución del LDL-colesterol al final de la ingesta de los extractos.
Además, fueron evaluadas otras variables como el colesterol total, HDL-colesterol, ratio LDL/HDL, triglicéridos, glucemia basal, peso, medidasantropométricas (perímetro de cintura y perímetro de cadera), porcentaje de grasa corporal; y diversos parámetros relacionados con el estrés oxidativo y la inflamación, como la capacidad antioxidante del plasma, la peroxidación lipídica, F2-isoprostanos en orina, niveles de vitaminas C y E, LDL-ox y TNF-a tras los tratamientos.
Así las variables del estudio fueron las siguientes:
Variables principales:
- LDL-colesterol.
Variables secundarias:
- Colesterol total.
- HDL-col.
- LDL/HDL.
- Triglicéridos.
- Glucemia basal.
- Peso.
- Perímetro de cintura y perímetro de cadera.
- % de grasa corporal.
- Capacidad antioxidante del plasma (ORAC).
- Peroxidación lipídica (TBARs).
- F2-isoprostanos.
- Niveles de vitaminas C y E.
- LDL-oxidada.
- Factor de necrosis tumoral (TNF-alfa).
Resultados
Se observaron diferencias estadísticamente significativas entre el extracto y el extracto placebo en diversas variables del estudio. Así, mejoraron parámetros asociados con el riesgo cardiovascular, como son los niveles de LDL-Colesterol y Colesterol total, también hubo un aumento en la capacidad antioxidante del plasma (ORAC) y en los niveles de vitamina E.
En cuanto al análisis por tratamientos individuales:
- El extracto de uva indujo una disminuciónestadísticamente significativa en los niveles de LDL- Colesterol y los niveles de Colesterol Total, que no se observó en el grupo tratado con Placebo.
- El consumo del extracto de uva indujo un aumento estadísticamente significativo en la capacidad antioxidante del plasma (ORAC), que no se observó en el grupo tratado con Placebo. Como se indica en la Tabla 1.
Tabla 1. Evolución de la variable ORAC, para cada uno de los grupos experimentales en función de la visita.
En cuanto a la seguridad del producto, no fueron detectadas diferencias ni en los niveles de transaminasas ni en los de creatinina entre la ingesta de los dos extractos.
Por todo lo expuesto anteriormente el extracto de uva mostró ejercer actividad antioxidante y mejorar los parámetros relacionados con el riesgo cardiovascular. De esta manera se demostraron las propiedades saludables delextracto de uva así como su buena tolerancia y seguridad.
Los ejemplos expuestos muestran las óptimas características del extracto de uva aquí descrito y loscomplementos alimenticios que lo comprenden, así como sus propiedades beneficiosas, entre las que cabe destacar su capacidad antioxidante y los efectos cardiovasculares beneficiosos que ejerce sobre la salud humana.
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Claims (16)
1. Extracto seco de uva obtenido según el método de la reivindicación 6 caracterizado por que comprende un porcentaje en peso del total de compuestos polifenólicos respecto al total de la composición del extracto entre5% y 70%, incluidos ambos límites, donde laconcentración en peso de dichos compuestos polifenólicos es la siguiente:
- Ácido elágico: entre 1 y 5 mg/g de composición extracto;
- Mirecitina: entre 0,5 y 4 mg/g de composición extracto;
- Quercitina: entre 0,5 y 4 mg/g de composición extracto; y
- Flavan-3-oles: entre 1,1 y 10 mg/g de composición extracto, siendo dichos flavan-3-oles:
• Catequina: entre 0,5 y 5 mg/g de composiciónextracto;
• Epicatequina: entre 0,1 y 1 mg/g de composición del extracto;
• Epigalocatequina: entre 0,5 y 4 mg/g de composición del extracto; y
• Catequina galato: entre 0,05 y 1 mg/g decomposición del extracto.
2. Extracto según la reivindicación 1, procedente de uva blanca, de uva tinta, de una mezcla de uva blanca con uva tinta, o de subproductos de unproceso de vinificación.
3. Extracto según la reivindicación anterior, donde los subproductos son seleccionados dentro del grupo compuesto por lías, orujos, hollejos de la uva y cualquier mezcla delos mismos.
4. Extracto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende al menos un segundo componente derivado de la uva o de los subproductos de un proceso devinificación.
5. Extracto según una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, que comprende el total de polifenoles presentes en la uva.
6. Método de obtener el extracto seco de uva descrito en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, el cual, sobre la base de hollejos de uva destilados, implica las siguientes etapas:
a) Extracción del orujo por difusión continua en contracorriente utilizando como extractante una disolución 50:50 de etanol:agua acidificada a pH 1, a una temperatura de 40-55°C y durante un tiempo de 3-4 horas, estando la relación de extracción orujo:extractante en el intervalo 1:2-3,5, obteniéndose un orujo de extracción y un jugo de extracción;
b) Prensado del orujo de extracción resultante de la etapa a) a una presión entre 2 y 10 kg/cm2, obteniéndose un orujo de prensado y un jugo de prensado;
c) Mezcla del jugo de extracción obtenido en la etapa a) y el jugo de prensado obtenido en la etapa b), seguido por enfriamiento de la mezcla resultante a 25°C, depuración de la misma mediante filtración a 100 micras y centrifugación, obteniéndose un jugo clarificado y un residuo sólido;
d) Estabilización del jugo clarificado obtenido en la etapa c) mediante adición de alginato sódico en una concentración de 0,2-0,6 g/L de jugo clarificado;
e) Concentración del jugo estabilizado obtenido en la etapa d) en un evaporador a vacío a 60-70°C hasta reducir el volumen de jugo estabilizado en aproximadamente un 50%, de tal modo que se obtiene un extracto polifenólico con un poder antioxidante en un rango entre 150.000 y 250.000 mg ácido gálico/kg de orujo seco.
caracterizado por que comprende secar la composición líquida obtenida en las etapas previas que comprende flavan-3-ol, miricetina, quercetina y ácido elágico como compuestos de polifenoles, hasta obtener un producto seco que comprende dicho extracto, en que el porcentaje en peso de los compuestos polifenólicos totales presentes en el extracto está entre 5% y 70%, ambos inclusive, con respecto al peso total de la composición del extracto,
en el que el secado se lleva a cabo liofilizando y/o atomizando, y en el que maltodextrina, dióxido de silicio o goma de xantano se emplea en el proceso de secado como un excipiente, un diluyente o un vehículo.
7. Complemento alimenticio que comprende como ingrediente funcional el extracto de uva descrito en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado por que comprende entre 10 mg y 1 g del extracto de uva.
8. Complemento alimenticio según la reivindicación 7, que comprende además al menos una substancia fisiológicamente aceptable que presenta propiedades seleccionadas dentro del grupo compuesto por: propiedades nutritivas, antioxidantes, terapéuticas, saborizantes,aromatizantes, colorantes u otras similares.
9. Complemento alimenticio según una cualquiera de las reivindicaciones 7u8, que comprende además al menos una sustancia seleccionada dentro del grupo compuesto por: Vitaminas, Oligoelementos, fitoquímicos, Colágeno, Colágeno tipo II, Condroitín Sulfato, Ácido Hialurónico, Ácido grasos Omega-3, Hidroxitol, Glutatión, Glucosamina, fitoextractos enriquecidos en proantocianidinas yfitoextractos procedentes de otros productos vegetales.
10. Complemento alimenticio según una cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9, que está envasado a granel o endosis unitarias.
11. Complemento alimenticio según la reivindicación anterior, que cuando está envasado en dosis unitarias sepresenta en forma de tableta, cápsula o píldora.
12. Complemento alimenticio segúnuna cualquiera de las reivindicaciones 7 a 9 caracterizado porque es mezclado con al menos uningrediente alimenticio para la producción de un alimento.
13. Complemento alimenticio según la reivindicación anterior, donde el ingrediente alimenticio es uno de los productos seleccionados dentro del grupo compuesto por productos cárnicos, productos lácteos, derivados lácteos, salsas, pasta alimenticia, productos de panificación y repostería y cualquier mezcla de los mismos.
14. Complemento alimenticio según la reivindicación 13, caracterizado por que el complemento alimenticio se mezcla con un líquidofisiológicamente aceptable para la fabricación de una bebida.
15. Extracto de uva según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 para su uso en la reducción de los niveles delipoproteínas-colesterol y de colesterol total en sangre, y/o para aumentar la capacidad antioxidante en plasma y laconcentración de vitamina E.
16. Uso del extracto de uva descrito en una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, para la fabricación de productos cosméticos.
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