ES2711073T3 - Anticuerpos anti-alfa-sinucleína humanos - Google Patents
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Abstract
Un anticuerpo monoclonal humano aislado o fragmento de unión al antígeno del mismo que se une a α- sinucleína humana en forma agregada y no se une específicamente a ß-sinucleína o γ-sinucleína.
Description
DESCRIPCION
Anticuerpos anti-alfa-sinuclema humanos
Campo de la invencion
La presente invencion se refiere en general a moleculas de union espedficas de a-sinuclema novedosas, particularmente anticuerpos humanos asf como fragmentos, derivados y variantes de los mismos, que reconocen asinuclema y formas agregadas de a-sinuclema, respectivamente. Ademas, la presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas y de diagnostico que comprenden tales moleculas de union, anticuerpos y mimeticos de los mismos valiosos tanto como herramientas de diagnostico para identificar especies toxicas de a-sinuclema en plasma y LCR como en estrategias de vacunacion pasiva para tratar trastornos relacionados con agregados de asinuclema tales como enfermedad de Parkinson (EP), demencia con cuerpos de Lewy (DCL) y variante con cuerpos de Lewy de la enfermedad de Alzheimer (EA) y otras enfermedades sinucleinopaticas.
ANTECEDENTES DE LA INVENCION
El mal plegamiento y agregacion de protemas son aspectos patologicos de numerosas enfermedades neurodegenerativas. Los agregados de a-sinuclema son los componentes principales de los cuerpos de Lewy y las neuritas de Lewy asociados con la enfermedad de Parkinson (EP). Una protema nativamente no plegada, a-sinuclema, puede adoptar diferentes morfologfas agregadas, incluyendo oligomeros, protofibrillas y fibrillas. Los agregados oligomericos pequenos han mostrado ser particularmente toxicos.
Se han detectado autoanticuerpos de origen natural contra a-sinuclema en personas sanas y los niveles alterados en pacientes estaban asociados con trastornos neurodegenerativos particulares; vease para revision Neff y col., Autoimmun. Rev. 7 (2008), 501-507. Por tanto, los anticuerpos de origen natural en pacientes que padecen enfermedad de Parkinson, espontaneamente o tras vacunacion, en particular en pacientes sanos, pueden servir para un papel protector con respecto a la agregacion de a-sinuclema; vease, p. ej.Woulfe y col., Neurology 58 (2002), 1435-1436y Papachroni y col., J. Neurochem. 101 (2007), 749-756. Hasta ahora, la significacion terapeutica de los autoanticuerpos hada sido diffcil de valorar. Esto es debido principalmente a la falta de enfoques experimentales directos para su aislamiento y posterior caracterizacion in vitro.
Recientemente, se han resenado especies oligomericas de a-sinuclema extracelulares en plasma y LCR (El-Agnaf y col., FASEB J. 20 (2006), 419-425) y los estudios de inmunizacion en modelos de raton de EP muestran que los anticuerpos monoclonales de raton extracelulares contra a-sinuclema pueden reducir la acumulacion de agregados de a-sinuclema intracelulares (Masliah y col., Neuron, 46 (2005), 857-868) apoyando la idea de que los anticuerpos que neutralizan los agregados neurotoxicos sin interferir con las funciones beneficiosas de la a-sinuclema monomerica pueden ser terapias utiles. Sin embargo, la utilidad terapeutica de los anticuerpos basados en murinos en seres humanos esta obstaculizada por la respuesta de anticuerpos humanos anti-raton (HAMA) en vista de su origen no humano.
Emadi y col. en J. Mol. Biol. 368 (2007), 1132-1144, describen el aislamiento de fragmentos de anticuerpo monocatenarios (scFv) de una coleccion de anticuerpos presentados en fagos basada en secuencias humanas contra a-sinuclema, que se unen solo a una forma oligomerica de a-sinuclema e inhiben tanto la agregacion como la toxicidad de a-sinuclema in vitro. Sin embargo, aunque la generacion de scFv de presentacion en fagos es bastante simple, esta tecnica tiene graves inconvenientes, puesto que los anticuerpos asf producidos corren el riesgo de reactividad cruzada indeseada contra autoantfgenos y carecen de las caractensticas de los anticuerpos humanos naturales optimizados evolutivamente producidos por el sistema inmunitario humano. Ademas, tales anticuerpos pueden no ser suficientemente espedficos debido a la reactividad cruzada con otras protemas y/o con la protema diana en el contexto de un entorno y funcion fisiologicos normales. En el caso de enfermedad de Parkinson, por ejemplo, los anticuerpos que reaccionan de forma cruzada tambien con derivados fisiologicos de a-sinuclema presentan el potencial de causar efectos secundarios relacionados con las funciones normales de las estructuras diana fisiologicas. A este respecto, se inducina una enfermedad autoinmunitaria indeseada flagrante, un riesgo apenas calculable tambien en el diseno conceptual de experimentos de inmunizacion activa que emplean estructuras proteicas que, en forma variante, aparecen tambien fisiologicamente.
Mas recientemente, Seitz y col. (81. Kongress der Deutschen Gesellschaft fur Neurologie mit Fortbildungsakademie Hamburg 10-13/09/2008), resenaron el aislamiento de un autoanticuerpo policlonal anti-a-sinuclema a partir de diferentes soluciones de inmunoglobulina y muestras de donantes de sangre unicos mediante cromatograffa de afinidad. Sin embargo, aparte del hecho de que este enfoque proporciona solamente cantidades limitadas del
anticuerpo deseado, los anticuerpos policlonales son solo de uso limitado para aplicacion terapeutica, por ejemplo debido a su heterogeneidad y al riesgo de contaminarse con otras moleculas asociadas de a-sinuclema que tengan efectos secundarios indeseados. Igualmente, el valor de diagnostico de los anticuerpos policlonales es reducido, puesto que la variabilidad de la composicion de los anticuerpos influira en la especificidad y reactividad globales. Esto es todavfa mas cierto para anticuerpos contra protemas sujetas a agregacion y deposicion debido al mal plegamiento. Por tanto, existe la necesidad de superar las limitaciones anteriormente descritas y proporcionar un anticuerpo contra a-sinuclema humano terapeutico y de diagnostico.
RESUMEN DE LA INVENCION
La presente invencion se refiere a las realizaciones caracterizadas en las reivindicaciones y hace uso de la respuesta inmunitaria espedfica de a-sinuclema de sujetos de control sanos ancianos y pacientes con enfermedad neurologica para el aislamiento de anticuerpos monoclonales humanos espedficos de a-sinuclema naturales. En particular, los experimentos efectuados de acuerdo con la presente invencion fueron exitosos en el aislamiento de anticuerpos monoclonales espedficos de a-sinuclema de un grupo de sujetos de edad avanzada sin signos de parkinsonismo. Por tanto, la presente invencion se dirige a anticuerpos humanos, fragmentos de union al antfgeno y moleculas de union al antfgeno similares que son capaces de reconocer espedficamente a-sinuclema. Se entiende por «reconocer espedficamente a-sinuclema», «anticuerpo espedfico de a-sinuclema» y «anticuerpo anti-a-sinuclema» espedfica, general y colectivamente anticuerpos de la forma nativa de a-sinuclema, o a-sinuclema mal plegada u oligomerica o agregada o modificada postraduccionalmente. Se proporcionan en el presente documento anticuerpos humanos selectivos de las formas monomerica nativa, de longitud completa, truncada y agregada.
En una realizacion particularmente preferida de la presente invencion, el anticuerpo humano o fragmento de union al antfgeno del mismo demuestra las caractensticas de union inmunologicas de un anticuerpo caracterizado por las regiones variables Vh y/o Vl como se expone en la Fig. 1B.
El fragmento de union al antfgeno del anticuerpo puede ser un fragmento Fv monocatenario, un fragmento F(ab'), un fragmento F(ab) y un fragmento F(ab')2, o cualquier otro fragmento de union al antfgeno.
En una realizacion espedfica, mas adelante, el anticuerpo o fragmento del mismo es un anticuerpo de isotipo IgG humano. Como alternativa, el anticuerpo es un anticuerpo quimerico humano-murino o murinizado, siendo el ultimo particularmente util para procedimientos de diagnostico y estudios en animales.
Ademas, la presente invencion se refiere a composiciones que comprenden el anticuerpo de la presente invencion, o fragmentos activos del mismo, o agonistas y moleculas cognadas o, como alternativa, antagonistas del mismo y a procedimientos inmunoterapeuticos e inmunodiagnosticos que usan tales composiciones en la prevencion, diagnostico o tratamiento de una enfermedad sinucleinopatica, donde se administra una cantidad efectiva de la composicion a un paciente necesitado de ello.
La presente invencion se refiere tambien a polinucleotidos que codifican al menos una region variable de una cadena de inmunoglobulina del anticuerpo de la invencion. Preferentemente, dicha region variable comprende al menos una region determinante de complementariedad (CDR) de Vh y/o Vl de la region variable como se expone en la Figura 1B. Por consiguiente, la presente invencion tambien incluye vectores que comprenden dichos polinucleotidos y celulas huesped transformadas con los mismos, asf como su uso para la produccion de un anticuerpo y moleculas de union equivalentes que son espedficas para a-sinuclema. Son conocidos en la tecnica medios y procedimientos para la produccion recombinante de anticuerpos y mimeticos de los mismos, asf como procedimientos de cribado de moleculas de union competitivas que pueden ser o no anticuerpos. Sin embargo, como se describe en el presente documento, en particular con respecto a las aplicaciones terapeuticas en seres humanos, el anticuerpo de la presente invencion es un anticuerpo humano en el sentido de que la aplicacion de dicho anticuerpo esta sustancialmente libre de una respuesta HAMA observada de otro modo para anticuerpos quimericos e incluso humanizados.
Ademas, se divulgan en el presente documento composiciones y procedimientos que pueden usarse para identificar a-sinuclema en muestras. Los anticuerpos anti-a-sinuclema divulgados pueden usarse para cribar en sangre, LCR y orina humanos la presencia de a-sinuclema en muestras, por ejemplo, usando un ensayo basado en ELISA o adaptado a la superficie. Los procedimientos y composiciones divulgados en el presente documento pueden ayudar en enfermedades sinucleinopaticas tales como el diagnostico de la enfermedad de Parkinson y pueden usarse para monitorizar la progresion de la enfermedad y la eficacia terapeutica.
Como se demuestra en el Ejemplo 4, el anticuerpo anti-a-sinuclema de la presente invencion es capaz de mejorar el rendimiento motor y el comportamiento en el laberinto en cruz elevado en un modelo de raton transgenico de enfermedad de Parkinson. Estos resultados confirman el valor terapeutico esperado de los anticuerpos anti-asinuclema derivados de seres humanos de la presente invencion.
Por ello, es un objetivo particular de la presente invencion proporcionar procedimientos para tratar o prevenir una enfermedad sinucleinopatica tal como enfermedad de Parkinson (EP), demencia por enfermedad de Parkinson (DEP), demencia con cuerpos de Lewy (DCL), la variante con cuerpos de Lewy de enfermedad de Alzheimer (VCLEA), atrofia sistemica multiple (ASM), insuficiencia autonomica pura (IAP), neurodegeneracion con acumulacion cerebral de hierro de tipo 1 (NACH-I), enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Pick, distrofia neuroaxonal generalizada de inicio juvenil (enfermedad de Hallervorden-Spatz), esclerosis lateral amiotrofica, lesion cerebral traumatica y smdrome de Down. Los procedimientos comprenden administrar una concentracion efectiva de un anticuerpo humano o derivado de anticuerpo al sujeto donde se orienta la a-sinuclema.
Realizaciones adicionales de la presente invencion seran evidentes a partir de la descripcion y los Ejemplos a continuacion.
BREVE DESCRIPCION DE LOS DIBUJOS
Fig. 1:
Secuencias de aminoacidos y nucleotidos de la region variable, es decir, cadena pesada y cadena ligera kappa/lambda de los anticuerpos humanos NI-202.3G12 (A), NI-202.12F4 (B) y NI-202.3D8 (C). Para el anticuerpo humano NI-202.3D8, se han clonado dos secuencias variables de cadena ligera VKal (C) y VKcl (D), cada una de las cuales puede emparejarse con la secuencia variable de cadena pesada VHE1 (C). Las regiones determinantes de complementariedad (CDR) y marco (FR) se indican con las CDR subrayadas. La region de union a la cadena pesada (JH) y la ergion de union a la cadena ligera (JK) se indican tambien. Debido a la estrategia de clonacion, la secuencia de aminoacidos en el extremo N-terminal de la cadena pesada y la cadena ligera puede contener potencialmente alteraciones inducidas por cebadores en FR1 que, sin embargo, no afectan sustancialmente a la actividad biologica del anticuerpo. Para poder proporcionar un anticuerpo humano consenso, las secuencias de nucleotidos y de aminoacidos del clon original se alinearon y se ajustaron de acuerdo con las secuencias de region variable de lmea germinal humana pertinentes en la base de datos; vease, por ejemplo, Vbase (http://vbase.mrc-cpe.cam.ac.uk/) alojada por el MRC Centre for Protein Engineering (Cambridge, Reino Unido). Estos aminoacidos, que se considera que se desvfan potencialmente de la secuencia de lmea germinal de consenso y, por lo tanto, podnan deberse al cebador de PCR, se indican en negrita.
Fig. 2:
Los anticuerpos de a-sinuclema humanos recombinantes estan dirigidos contra distintos epftopos. Se recubrio asinuclema de longitud completa y truncada recombinante sobre placas ELISA a igual concentracion de recubrimiento (20 |jg/ml). (A) El anticuerpo de a-sinuclema humano recombinante NI-202.3G12 se une a a-sinuclema de longitud completa pero no a truncamientos de a-sinuclema en un ELISA directo, apuntando a un epftopo de reconocimiento estructural de NI-202.3G12. (B) NI-202-12F4 recombinante se une a a-sinuclema de longitud completa y a truncamientos de a-sinuclema que contienen los aminoacidos (aa) 1-60 en un ELISA directo, apuntando a un epftopo de NI-202.12F4 en la region de repeticion anfipatica N-terminal de la alfa-sinuclema. (C) El anticuerpo LB509 se une a fragmentos de a-sinuclema C-terminales, confirmando el epftopo anteriormente determinado (aa 115-122). Los valores son medias ± EEM (n= 2-3).
Fig. 3:
Los anticuerpos de a-sinuclema humana recombinante se unen a a-sinuclema pero no a p y Y-sinuclema en un ELISA directo. Se incubaron las a, p y Y-sinuclemas recombinantes recubiertas sobre placas ELISA a igual concentracion de recubrimiento (2 jg/ml) con anticuerpos de a-sinuclema humanos recombinantes o con un pananticuerpo de sinuclema. (A) El ultimo detecta las tres protemas sinuclemas, mientras que los anticuerpos de a-sinuclema humanos recombinantes (B) NI-202.3G12 y (C) NI-202.12F4 se unen selectivamente a a-sinuclema. Los valores son medias ± EEM (n= 2-3).
Fig. 4:
El anticuerpo NI-202.12F4 de a-sinuclema humano recombinante se une a a-sinuclema pero no a p y Y-sinuclema en analisis de transferencia Western. Se sometieron a, p y Y-sinuclema (750 ng cada una) a PAGE-SDS y posteriormente a analisis de transferencia Western. (A) La tincion con Coomasie revela igual concentracion de protema en PAGE-SDS. (B) NI-202.12F4 interacciona fuertemente con a-sinuclema pero no con beta o gamma-sinuclema. (C) No se
detecto senal sin anticuerpo primario.
Fig. 5
:
(A) El analisis de inmunotransferencia de NI-202.12F4 de extractos cerebrales de ratones transgenicos de alfasinuclema humana y no transgenicos muestra union preferencial por a-sinuclema humana. Se analizaron extractos cerebrales de ratones de tipo silvestre y transgenicos de a-sinuclema humana por inmunotransferencia con anticuerpo LB509 humano espedfico de a-sinuclema y los anticuerpos reactivos con a-sinuclema humana y de raton clon 42 y NI202.12F4. Aunque el clon 42 detecta las bandas destacadas correspondientes a a-sinuclema de raton y humana, LB509 y NI-202.12F4 muestran una fuerte preferencia por a-sinuclema humana. (B) El analisis de inmunotransferencia de NI-202.12F4 de extractos cerebrales muestra union preferencial a agregados de a-sinuclema humana. Se analizaron por transferencia Western extractos cerebrales corticales de un sujeto de control sano y un paciente con demencia con cuerpos de Lewy (DCL) asf como extractos cerebrales de ratones de tipo silvestre y ratones transgenicos de a-sinuclema A30P humana. NI-202.12F4 detecta las formas oligomerica y fibrilar de agregados de asinuclema en extracto cerebral de DCL y transgenico de a-sinuclema A30P con alta sensibilidad. Se observa una union minima a formas monomericas de a-sinuclema en tejidos humanos o de raton de tipo silvestre y una union moderada en extractos cerebrales transgenicos de a-sinuclema A30P de alta sobreexpresion de a-sinuclema. En contraposicion, el anticuerpo clon 42 detecta formas monomericas y fragmentos de a-sinuclema con una alta sensibilidad y se une mal a especies de a-sinuclema agregadas.
Fig. 6:
NI-202.12F4 recombinante muestra una alta afinidad de union a a-sinuclema humana de tipo silvestre y mutantes causantes de enfermedad. Se recubrieron a-sinuclemas humanas de tipo silvestre (•), A53T (■), A30P (*) y E64K (0) recombinantes sobre placas ELISA (2 pg/ml) y se sondearon con diversas concentraciones de NI202.12F4. Las concentraciones semimaximas efectivas (CE50) fueron 321 pM para a-sinuclema de tipo silvestre, 293 pM para asinuclema humana mutante A53T, 228 pM para A30P y 483 pM para E64K.
Fig. 7:
Analisis de union inmunohistoqmmica de NI-202.12F4. NI-202.12F4 muestra una destacada tincion de la patologfa de a-sinuclema, incluyendo cuerpos de Lewy e inclusion de tipo neurita de Lewy, asf como pequenas acumulaciones de a-sinuclema somateodendntica y sinaptica en secciones flotantes de ratones transgenicos que expresan a-sinuclema A53T (A) o A30P (B) humana asf como en tejidos cerebrales humanos de enfermedad de Parkinson (C) y demencia con cuerpos de Lewy (D). El anticuerpo Syn211 detecta a-sinuclema sinaptica fisiologica con una alta sensibilidad en ratones transgenicos de a-sinuclema A30P (E), mientras que NI-202.12F4 se une preferentemente a agregados de asinuclema patologicos (B). La union de NI-202.12F4 esta practicamente ausente de secciones cerebrales de ratones de tipo silvestre (F) comparable a tincion de control solo con anticuerpo secundario (G), mientras que el anticuerpo clon 42 muestra una tincion sinaptica destacada de protema a-sinuclema de raton (H).
Fig. 8:
NI-202.12F4 recombinante muestra union preferente por a-sinuclema recubierta de alta densidad. Se recubrieron asinuclemas de longitud completa o truncadas recombinantes sobre placas ELISA a las concentraciones indicadas y se sondearon con diversas concentraciones de anticuerpos NI-202.12F4 o Syn211 por ELISA directo (o 20 pg/ml; ▲ 2 [jg/ml; T 1 [jg/ml; ♦ 250 ng/ml; ^ concentracion de recubrimiento 100 ng/ml de a-sinuclema de longitud completa o 1-60 recombinante). Se determino la concentracion semimaxima efectiva (CE50) que indica la potencia de los anticuerpos. (A) La union de alta afinidad de NI-202.12F4 recombinante con a-sinuclema requiere altas densidades de recubrimiento de protema a-sinuclema. Aunque se observa una CE50 de 111 pM para a-sinuclema recubierta a concentracion 20 pg/ml, los valores de CE50 aumentan bruscamente al disminuir las concentraciones de recubrimiento, demostrando una perdida drastica de afinidad a menores concentraciones de recubrimiento de asinuclema. Estos rasgos apuntan a un epftopo conformacional de NI-202.12F4 que se forma preferentemente a altas concentraciones de recubrimiento de a-sinuclema. (B) La union de Syn211 no se afecta por la concentracion de recubrimiento. No se observa disminucion de la afinidad del anticuerpo Syn211 comercialmente disponible a menores concentraciones de recubrimiento, con CE50 oscilando de 335 pM para 20 pg/ml a 99 pM para 100 ng/ml de densidad de recubrimiento de a-sinuclema, sugiriendo union a un epftopo no conformacional lineal. (C) La alta afinidad de union de NI-202.12F4 recombinante al fragmento de a-sinuclema N-terminal que comprende los aminoacidos 1-60 requiere altas densidades de recubrimiento. NI-202.12F4 muestra una union equivalente y dependiente de la concentracion de recubrimiento a a-sinuclema de longitud completa asf como truncada, apuntando a un epftopo conformacional de NI-202.12F4 que esta contenido en los aminoacidos 1-60 de la protema a-sinuclema. (D) Se recubrieron peptidos biotinilados que comprenden fragmentos de 20 aminoacidos superpuestos que cubren los 60 aminoacidos N-terminales de a-sinuclema sobre placas de avidina y se sondearon con NI-202-12F4 o un pananticuerpo de control de sinuclema que detecta un epftopo en los aa 21-40. Por consiguiente, el anticuerpo de control se une fuertemente al peptido 21-40 y en menor medida a los peptidos 11-30 y 31-50. En contraposicion, no se observa union para NI
Claims (17)
1. Un anticuerpo monoclonal humano aislado o fragmento de union al antigeno del mismo que se une a asinuclema humana en forma agregada y no se une espedficamente a p-sinuclema o Y-sinuclema.
2. El anticuerpo o fragmento de union al antigeno del mismo de la reivindicacion 1, donde el anticuerpo o fragmento de union al antfgeno del mismo compite por la union a a-sinuclema humana con un anticuerpo que tiene la region variable de cadena pesada (VH) expuesta en la SEQ ID NO: 10 y la region variable de cadena ligera (VL) expuesta en la SEQ ID NO: 13.
3. El anticuerpo o fragmento de union al antigeno del mismo de la reivindicacion 1, donde el anticuerpo o fragmento de union al antfgeno se une a un fragmento N-terminal 1-60 de a-sinuclema humana.
4. El anticuerpo o fragmento de union al antfgeno del mismo de la reivindicacion 1, que es un anticuerpo IgG que comprende en su region variable (i) las regiones determinantes de complementariedad (CDR) 1, 2 y 3 de la region VH con los residuos de aminoacidos expuestos en los residuos 31-25 de SEQ ID NO: 9, los residuos 50-68 de SEQ ID NO:9, y los residuos 101-102 de SEQ ID NO:9, respectivamente, y (ii) las CDR 1, 2 y 3 de la region variable VL con las secuencias de aminoacidos expuestas en los residuos 23-33 de SEQ ID NO:12, residuos 49-55 de SEQ ID NO:12 y residuos 88-98 de SEQ ID NO:12, respectivamente.
5. El anticuerpo de la reivindicacion 4, donde VH consiste en la secuencia de aminoacidos expuesta en la SEQ ID NO: 10 y VL consiste en la secuencia de aminoacidos expuesta en la SEQ ID NO: 13.
6. El anticuerpo de la reivindicacion 4 o 5, donde la cadena pesada de inmunoglobulina comprende un region constante de cadena pesada de IgG1 humana y la cadena ligera de inmunoglobulina comprende una region constante de cadena ligera lambda humana.
7. Un polinucleotido o polinucleotidos que codifican el anticuerpo o fragmento de union al antfgeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
8. Un ADNc o ADNc que comprenden la cadena ligera y pesada del anticuerpo o fragmento de union al antfgeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6.
9. Un vector de expresion o vectores de expresion que comprenden el polinucleotido o polinucleotidos de la reivindicacion 7 o el ADNc o los ADNc de la reivindicacion 8.
10. Una celula huesped que comprende el vector de expresion o vectores de expresion de la reivindicacion 9.
11. Un procedimiento para preparar un anticuerpo anti-alfa-sinuclema humana o fragmento de union a alfasinuclema humana del mismo, comprendiendo el procedimiento:
cultivar la celula huesped de la reivindicacion 10 en un cultivo celular; y
aislar el anticuerpo anti-alfa-sinuclema humana o fragmento de union a alfa-sinuclema humana del mismo del cultivo celular.
12. El anticuerpo o fragmento de union al antfgeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para uso en el tratamiento o prevencion de una enfermedad sinucleinopatica en un sujeto, donde la enfermedad sinucleinopatica se selecciona de entre el grupo consistente en enfermedad de Parkinson (EP), demencia por enfermedad de Parkinson (DEP), demencia con cuerpos de Lewy (DCL), la variante con cuerpos de Lewy de la enfermedad de Alzheimer (VCLEA), atrofia sistemica multiple (ASM), insuficiencia autonomica pura (IAP), neurodegeneracion con acumulacion de hierro cerebral de tipo 1 (NAHC-I), enfermedad de Alzheimer, enfermedad de Pick, distrofia neuroaxonal generalizada de inicio juvenil (enfermedad de Hallervorden-Spatz), esclerosis lateral amiotrofica, lesion cerebral traumatica y smdrome de Down.
13. El anticuerpo o fragmento de union al antfgeno del mismo para uso de acuerdo con la reivindicacion 12, donde la enfermedad sinucleinopatica es enfermedad de Parkinson.
14. Una composicion farmaceutica que comprende el anticuerpo o fragmento de union al antfgeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 y un portador farmaceuticamente aceptable.
15. Una composicion que comprende el anticuerpo o fragmento de union al antigeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 enlazado con un agente terapeutico o un agente de diagnostico.
16. Una composicion que comprende el anticuerpo o fragmento de union al antigeno del mismo de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 enlazado con un agente de diagnostico para uso en la deteccion in vivo de asinuclema en el cuerpo humano.
17. La composicion para uso de acuerdo con la reivindicacion 16, donde se detecta a-sinuclema por tomograffa por emision de positrones (PET), tomograffa por emision de foton unico (SPECT), imagen optica de infrarrojo cercano (NIR), imagen por resonancia magnetica (MRI) o una combinacion de los mismos.
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