ES2704299T3 - Formulaciones de liposomas multivesiculares de ácido tranexámico - Google Patents

Abstract

Composición farmacéutica que comprende: liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico, comprendiendo dichos liposomas multivesiculares: ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH.

Description

DESCRIPCIÓN

Formulaciones de liposomas multivesiculares de ácido tranexámico

ANTECEDENTES

Campo

La presente solicitud se refiere a formulaciones de liposomas multivesiculares (LMV) de ácido tranexámico (TXA) que minimizan los efectos secundarios del TXA, manteniendo o mejorando simultáneamente la eficacia y prolongando el efecto terapéutico del TXA. En particular, realizaciones de la presente solicitud se refieren a composiciones que comprenden liposomas multivesiculares con TXA encapsulado, a procedimientos de preparación y a métodos de administración de los mismos. También se proporcionan métodos de preparación de liposomas multivesiculares que contienen TXA y su utilización como medicamentos.

El ácido tranexámico (TXA) es un análogo sintético del aminoácido lisina que se utiliza para tratar o evitar la pérdida excesiva de sangre después de un traumatismo, durante cirugía o durante la menstruación. El TXA es un antifibrinolítico que ejerce su efecto coagulante a través del bloqueo reversible de los sitios de unión de la lisina en las moléculas de plasminógeno. El ácido tranexámico administrado por vía intravenosa causa reducciones respecto al placebo de 29% a 54% de las pérdidas sanguíneas postoperatorias en pacientes sometidos a cirugía cardíaca con derivación cardiopulmonar, con reducciones estadísticamente significativas de las necesidades de transfusión en algunos estudios. El metaanálisis de 60 ensayos demostró que el TXA y la aprotinina, al contrario que el ácido epsilónaminocaproico y la desmopresina, redujeron significativamente el número de pacientes que requerían transfusiones sanguíneas alogénicas tras la cirugía cardíaca con CPB (por sus siglas en inglés, derivación cardiopulmonar). El TXA también redujo significativamente la pérdida sanguínea media tras cirugía oral en pacientes con hemofilia. Las reducciones de la pérdida sanguínea también se obtuvieron utilizando el fármaco en pacientes sometidos a trasplante hepático ortotópico o cirugía prostática transuretral. También se ha informado de beneficio clínico con TXA en pacientes con edema angioneurótico hereditario. Ver, p.ej., Dunn and Goa, Drugs, vol. 57, n° 6, páginas 1005-32 (1999).

Sin embargo, la administración oral de TXA resulta con frecuencia en molestias gastrointestinales y la administración intravenosa puede provocar mareo e hipotensión. Estos efectos secundarios se deben principalmente al rápido incremento de los niveles plasmáticos de TXA al administrarlo como dosis de bolo suficiente para proporcionar el necesario efecto de coagulación. Sin embargo, la administración intravenosa sostenida no siempre resulta viable, en particular para pacientes de traumatismos. Además, tras los incrementos rápidos de los niveles plasmáticos de TXA se producen una rápida reducción de la concentración de TXA debida a excreción y metabolismo. Esta rápida reducción alcanza rápidamente un nivel al que el TXA se encuentra presente en cantidades subterapéuticas. De acuerdo con lo anterior, existe una necesidad de una formulación de liberación sostenida estable de TXA para la aplicación tanto tópica como subcutánea. Además, existe una necesidad de una formulación estable que comprende TXA tanto de liberación sostenida como de liberación inmediata para la aplicación tópica y para diversas aplicaciones parenterales, tales como la inyección subcutánea, la infiltración de heridas o la instilación de heridas.

Breve descripción de las figuras

La fig. 1A ilustra la reducción de los niveles plasmáticos del TXA libre en solución salina, TXA-MVL y Depo-TXA durante 96 horas tal como se indica en el estudio animal de Ejemplo 1.

La fig. 1B ilustra el porcentaje de la superficie total bajo la curva (AUC, por sus siglas en inglés) de TXA libre en solución salina, TXA-MVL y Depo-TXA durante hasta 96 horas después de la administración tal como se indica en el estudio animal del Ejemplo 1.

Las figs. 2.4, 5A-5B, 6A-6B, 7A-7B y 8A-8B se refieren a los datos farmacocinéticos obtenidos de estudios animales, descritas en el Ejemplo 3.

La fig. 2 ilustra las concentraciones plasmáticas medias de TXA durante las 72 horas posteriores a la inyección el día de tratamiento 1. En el grupo 2 se administraron 120 mg/kg de TXA; en el grupo 3 se administraron 40 mg/kg de Depo-TXA y en el grupo 4 se administraron 120 mg/kg de Depo-TXA.

La fig. 3 ilustra las concentraciones plasmáticas medias de TXA durante las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 10. En el grupo 2 se administraron 120 mg/kg de TXA; en el grupo 3 se administraron 40 mg/kg de Depo-TXA y en el grupo 4 se administraron 120 mg/kg de Depo-TXA.

La fig. 4 ilustra la concentración de TXA en plasma durante las 12 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 1 para los grupos 2, 3 y 4.

La fig. 5A ilustra el porcentaje de la superficie total bajo la curva (AUC) de TXA durante hasta las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 1 para los grupos 2, 3 y 4.

La fig. 5B ilustra el porcentaje de la superficie total bajo la curva (AUC) de TXA durante hasta las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 10 para los grupos 2, 3 y 4.

La fig. 6A ilustra la cantidad total de TXA administrada durante las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 1 para los grupos 2, 3 y 4.

La fig. 6B ilustra la cantidad total de TXA administrada durante las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 10 para los grupos 2, 3 y 4.

La fig. 7A ilustra la reducción de los niveles plasmáticos de TXA durante las 72 horas posteriores a la administración el día 1 para los grupos 2, 3 y 4.

La fig. 7A ilustra la reducción de los niveles plasmáticos de TXA durante las 72 horas posteriores a la administración el día 10 para los grupos 2, 3 y 4.

La fig. 8A ilustra el porcentaje de la dosis total de TXA en el plasma durante las 72 horas posteriores a la administración para los grupos 2 y 4.

La fig. 8B ilustra el porcentaje de la dosis de TXA en el plasma durante las 72 horas posteriores a la administración para los grupos 2, 3 y 4.

Descripción resumida

La presente invención se refiere a una composición farmacéutica que comprende liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico, comprendiendo dichos liposomas multivesiculares: ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH.

La presente invención se refiere además a la composición farmacéutica anteriormente mencionada para la utilización en el tratamiento, mejora o prevención de la pérdida sanguínea. Algunas realizaciones de la presente solicitud se refieren a composiciones farmacéuticas que comprenden: liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico que comprenden ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH, y ácido tranexámico no encapsulado. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 1 mg/ml y aproximadamente 80 mg/ml, y el ácido tranexámico no encapsulado es de entre aproximadamente 1% y aproximadamente 80% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica.

Algunas realizaciones de la presente solicitud se refieren a métodos de tratamiento, mejora o prevención de la pérdida sanguínea, que comprenden administrar una composición farmacéutica que comprende liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico, comprendiendo los liposomas multivesiculares ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH, y ácido tranexámico no encapsulado.

Algunas otras realizaciones de la presente solicitud se refieren a procedimientos para preparar liposomas multivesiculares que comprenden ácido tranexámico, comprendiendo dicho procedimiento: preparar un primer componente acuoso que comprende ácido tranexámico y por lo menos un agente modificador del pH, preparar un componente lipídico que comprende por lo menos un solvente orgánico, por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, mezclar dicho primer componente acuoso y dicho componente lipídico para formar una emulsión de agua-en-aceite, en la que por lo menos un componente comprende ácido tranexámico, poner en contacto dicha emulsión de agua-en-aceite con un segundo componente acuoso para formar esférulas que contienen solvente, y eliminar el solvente orgánico de las esférulas que contienen solvente para formar liposomas multivesiculares. En algunas realizaciones, el procedimiento comprende además una etapa adicional de suspender el liposoma multivesicular en una solución que comprende ácido tranexámico libre para formar una composición farmacéutica que comprende tanto ácido tranexámico encapsulado como ácido tranexámico no encapsulado.

Algunas otras realizaciones de la presente solicitud se refieren a composiciones farmacéuticas que comprenden liposomas multivesiculares que contienen ácido tranexámico preparadas mediante el procedimiento descrito en la presente memoria.

Algunas realizaciones proporcionan una composición farmacéutica que comprende liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico, comprendiendo dichos liposomas multivesiculares: ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH, y ácido tranexámico no encapsulado. Algunas realizaciones proporcionan una composición farmacéutica que comprende liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico, comprendiendo dichos liposomas multivesiculares: ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH.

En algunas realizaciones, los liposomas multivesiculares comprenden además uno o más agentes osmóticos y/o agentes modificadores de la densidad. En algunas realizaciones, los liposomas multivesiculares comprenden además colesterol y/o un esterol vegetal. En algunas realizaciones, el lípido anfipático comprende fosfatidilcolina, o fosfatidilglicerol o sales de los mismos, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el fosfatidilglicerol es DPPG. En algunas realizaciones, la fosfatidilcolina se selecciona de DEPC o DOPC, o una combinación de las mismas.

En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido, éster de propilenglicol, éster de etilenglicol, o escualeno, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido. En algunas realizaciones, el triglicérido se selecciona de trioleína o tricaprilina, o una combinación de los mismos.

En algunas realizaciones, dichos agentes modificadores del pH se seleccionan de ácidos orgánicos, bases orgánicas, ácidos inorgánicos, o bases inorgánicas, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, dichos agentes modificadores del pH se seleccionan de ácidos inorgánicos, o bases orgánicas, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, dichos agentes modificadores del pH se seleccionan de ácidos orgánicos, o bases orgánicas, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el ácido inorgánico se selecciona de ácido clorhídrico o ácido fosfórico. En algunas realizaciones, el ácido orgánico se selecciona de ácido tartárico, o ácido glutámico o una combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la base orgánica se selecciona de histidina, arginina, lisina, o trometamina, o combinaciones de las mismas.

En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 1 mg/ml y aproximadamente 80 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 2,5 mg/ml y aproximadamente 40 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 5 mg/ml y aproximadamente 25 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 10 mg/ml y aproximadamente 20 mg/ml.

En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 1% a aproximadamente 80% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 20% a aproximadamente 70% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 30% a aproximadamente 60% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica.

En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 50% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 10% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica.

En algunas realizaciones, dichos liposomas multivesiculares presentan un intervalo de pH externo de entre aproximadamente 4,0 y aproximadamente 9,0. En algunas realizaciones, dicho intervalo de pH interno es de entre aproximadamente 4,5 y aproximadamente 8,5. En algunas realizaciones, dichos liposomas multivesiculares presentan un intervalo de pH interno de entre aproximadamente 3,0 y aproximadamente 9,0. En algunas realizaciones, dicho intervalo de pH interno es de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 5,5.

En algunas realizaciones, los liposomas multivesiculares con ácido tranexámico encapsulado son estables a 37°C durante por lo menos 2 días.

Algunas realizaciones proporcionan métodos para tratar, mejorar o prevenir la pérdida sanguínea, que comprenden administrar una composición farmacéutica, tal como se describe en la presente memoria, en un sujeto que necesita de la misma.

En algunas realizaciones, la administración es parenteral. En algunas realizaciones, la administración parenteral se selecciona de inyección subcutánea, inyección tisular, infiltración en heridas o instilación en heridas. En algunas realizaciones, la administración parenteral es la inyección subcutánea. En algunas realizaciones, la administración parenteral es la inyección tisular. En algunas realizaciones, la administración parenteral es la infiltración en heridas. En algunas realizaciones, la administración parenteral es la instilación en heridas.

En algunas realizaciones, la administración es tópica. En algunas realizaciones, la administración es tanto tópica como parenteral. En algunas realizaciones, la administración tópica comprende poner en contacto directamente dicha composición farmacéutica con una cavidad o una superficie del cuerpo del sujeto que necesita tratamiento.

Algunas realizaciones proporcionan un procedimiento para preparar liposomas multivesiculares que comprenden ácido tranexámico, que comprenden preparar un primer componente acuoso que comprende ácido tranexámico y por lo menos un agente modificador del pH, preparar un componente lipídico que comprende por lo menos un solvente orgánico, por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, mezclar dicho primer componente acuoso y dicho componente lipídico para formar una emulsión de agua-en-aceite, en la que por lo menos un componente comprende ácido tranexámico, poner en contacto dicha emulsión de agua-en-aceite con un segundo componente acuoso para formar esférulas que contienen solvente, y eliminar el solvente orgánico de las esférulas que contienen solvente para formar liposomas multivesiculares. Algunas realizaciones comprenden además suspender los liposomas multivesiculares en una solución que comprende solución salina para formar una composición farmacéutica que comprende ácido tranexámico encapsulado.

Algunas realizaciones comprenden además suspender los liposomas multivesiculares en una solución que comprende ácido tranexámico para formar una composición farmacéutica que comprenden tanto ácido tranexámico encapsulado como no encapsulado.

En algunas realizaciones, el componente lipídico comprende además colesterol y/o un esterol vegetal. En algunas realizaciones, el lípido anfipático comprende fosfatidilcolina, o fosfatidilglicerol o sales de los mismos, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el fosfatidilglicerol es DPPG. En algunas realizaciones, la fosfatidilcolina se selecciona de DEPC o DOPC, o una combinación de las mismas. En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido, éster de propilenglicol, éster de etilenglicol, o escualeno, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido. En algunas realizaciones, el triglicérido se selecciona de trioleína o tricaprilina, o una combinación de los mismos.

En algunas realizaciones, el primer componente acuoso comprende además por lo menos un agente osmótico y/o un agente modificador de la densidad. En algunas realizaciones, el agente modificador del pH del primer componente acuoso se selecciona de un ácido inorgánico, un ácido orgánico, una base inorgánica, o una base orgánica, o combinaciones de los mismos.

En algunas realizaciones, dicho agente modificador del pH se selecciona de ácido clorhídrico, ácido fosfórico, o ácido tartárico, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, dicho agente modificador del pH se selecciona de histidina, arginina, trometamina o combinaciones de los mismos.

En algunas realizaciones, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 2,0 y aproximadamente 9,0. En algunas realizaciones, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 5,5. En algunas realizaciones, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 4,3 y aproximadamente 5,5. En algunas realizaciones, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 7,5 y aproximadamente 9,0. En algunas realizaciones, el pH del primer componente acuoso es de aproximadamente 7,7.

En algunas realizaciones, dicho segundo componente acuoso comprende por lo menos un agente osmótico y por lo menos un agente modificador del pH.

En algunas realizaciones, el intervalo de pH del segundo componente acuoso es de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 10,5. En algunas realizaciones, el intervalo de pH del segundo componente acuoso es de entre aproximadamente 7,5 y aproximadamente 10,5.

En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 1 mg/ml y aproximadamente 80 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 2,5 mg/ml y aproximadamente 40 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 5 mg/ml y aproximadamente 25 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 10 mg/ml y aproximadamente 20 mg/ml.

En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 1% a aproximadamente 80% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 20% a aproximadamente 70% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 30% a aproximadamente 60% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 50% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 10% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica.

En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de entre 1:10 y 10:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:10. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:9. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:8. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:7. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:6. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:5. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:4. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:3. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:2. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 1:1.

En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 2:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 3:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 4:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 5:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 6:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 7:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 8:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 9:1. En algunas realizaciones, la proporción entre ácido tranexámico no encapsulado (libre) y ácido tranexámico encapsulado es de 10:1.

Algunas realizaciones proporcionan una composición farmacéutica que comprende liposomas multivesiculares que contienen ácido tranexámico preparadas mediante el procedimiento descrito en la presente memoria.

Cualquiera de las características de una realización es aplicable a todas las realizaciones identificadas en la presente memoria. Además, cualquiera de las características de una realización es independientemente combinable, parcial o totalmente con otras realizaciones descritas en la presente memoria de cualquier manera, p.ej., una, dos o tres o más realizaciones pueden ser combinables totalmente o en parte. Además, cualquiera de las características de una realización puede ser opcional para otras realizaciones. Cualquier realización de un método puede comprender otra realización de un compuesto, y cualquier realización de un compuesto puede configurarse para llevar a cabo un método de otra realización.

Descripción detallada de realizaciones

Las presentes realizaciones proporcionan formulaciones farmacéuticas que comprenden liposomas multivesiculares (LMV) que contienen ácido tranexámico (TXA) que minimizan los efectos secundarios del TXA, manteniendo o mejorando simultáneamente la eficacia y alargando la duración del efecto. Las presentes realizaciones proporcionan además formulaciones farmacéuticas que comprenden TXA encapsulado en las LMV y TXA no encapsulado. La expresión "no encapsulado" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a que el ingrediente biológicamente activo (p.ej., el ácido tranexámico) se encuentra fuera de las partículas LMV, por ejemplo, en la solución en suspensión. El TXA no encapsulado proporciona una eficacia inmediata del TXA, mientras que la utilización de las formulaciones de LMV con t Xa encapsulado en las presentes realizaciones resulta en la liberación del TXA durante un periodo prolongado. Los procedimientos de preparación de DEPO-TXAs y los métodos de utilización de las formulaciones de DEPO-TXA para tratar, mejorar o prevenir la pérdida sanguínea también se dan a conocer en la presente memoria.

Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "DEPO-TXA" se refiere a una formulación de liposomas multivesiculares que encapsula ácido tranexámico. DEPO-TXA incluye además ácido tranexámico libre en la solución de suspensión acuosa de los LMV. Preferentemente, la concentración de TXA libre en la solución de suspensión acuosa de DEPO-TXA es aproximadamente igual a la concentración de TXA encapsulado en los liposomas multivesiculares.

Tal como se utiliza en la presente memoria, la expresión "TXA libre" se refiere a una formulación farmacéutica que comprende ácido tranexámico no encapsulado, por ejemplo una solución salina que contiene TXA o TXA acuoso.

Tal como se utiliza en la presente memoria, "TXA-LMV" se refiere a una formulación farmacéutica que comprende una formulación de liposomas multivesiculares que encapsula ácido tranexámico con menos de 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1%, 0,5%, 0,2% o 0,1% de TXA libre, o un intervalo definido por cualquiera de los valores anteriores.

A menos que se indique lo contrario, todos los términos técnicos y científicos utilizados en la presente memoria presentan los mismos significados entendidos comúnmente por el experto ordinario en la materia. En el caso de que exista una pluralidad de definiciones para un término en la presente memoria, aquellos en la presente sección prevalecerán, a menos que se indique lo contrario. Tal como se utiliza en la memoria y en las reivindicaciones adjuntas, las formas singulares “un”, “una” y “el” o “la” incluyen los referentes plurales, a menos que el contexto indique claramente lo contrario. A menos que se indique lo contrario, se utilizan métodos convencionales de espectroscopía de masas, RMN, HPLC, química de proteínas, bioquímica, técnicas de ADN recombinante y farmacología. La utilización de "o" o "y" significa "y/o", a menos que se indique lo contrario. Además, la utilización del término "incluyendo", así como otras formas, tales como "incluye" e "incluido", no es limitativa. Tal como se utiliza en la memoria, en una expresión de transición o en el cuerpo de una reivindicación, las expresiones "que comprende(n)" y "comprendiendo" debe interpretarse que presentan un significado abierto. Es decir, los términos deben interpretarse como sinónimos de las expresiones "que presenta por lo menos" o "que incluye por lo menos". En el caso de que se utilice en el contexto de un procedimiento, la expresión "que comprende" se refiere a que el procedimiento incluye por lo menos las etapas indicadas, aunque puede incluir etapas adicionales. En el caso de que se utilice en el contexto de un compuesto o composición, o dispositivo, la expresión "que comprende" se refiere a que el compuesto o composición, o dispositivo, incluye por lo menos los elementos o componentes indicados, aunque puede incluir además elementos o componentes adicionales.

Los títulos de sección utilizados en la presente memoria presentan fines organizativos únicamente y no deben interpretarse como limitativos de la materia objeto descrita.

Formulaciones de liposomas multivesiculares

Las presentes realizaciones se refieren a LMV que contienen TXA. Los LMV, informados en Kim et al. (Biochim. Biophys. Acta, 728:339-348, 1983), son un grupo de formas únicas de vesículas membranales sintéticas que son diferentes de otros sistemas de administración a base de lípidos, tales como los liposomas unilamelares (Huang, Biochemistry, 8:334-352, 1969; Kim, et al., Biochim. Biophys. Acta, 646:1-10, ^{1 9 8 1} ) y liposomas multilamelares (Bangham, et al., J Mol. Bio., 13:238-252, 1965). La diferencia estructural principal entre liposomas multivesiculares y liposomas unilamelares (también conocidos como vesículas unilamelares) es que los liposomas multivesiculares contienen múltiples cámaras acuosas en cada partícula. La diferencia estructura principal entre liposomas multivesiculares y liposomas multilamelares (también conocidos como vesículas multilamelares) es que en los liposomas multivesiculares, las múltiples cámaras acuosas son no concéntricas. Los liposomas multivesiculares generalmente presentan entre 100 y 1 millón de cámaras en cada partícula y todas las cámaras internas están interconectadas por paredes de bicapa lipídica compartidas que separan las cámaras. Las diferencias estructurales entre liposomas unilamelares, multilamelares y multivesiculares se ilustran en Sankaram et al., patente US n° 5.766.627 y n° 6.132.766.

Las características estructurales y funcionales de los liposomas multivesiculares no son directamente predecibles a partir del conocimiento actual de las vesículas unilamelares y las vesículas multilamelares. Los liposomas multivesiculares presentan una morfología interna muy característica, que puede aparecer como resultado del método especial utilizado en la preparación. Topológicamente, los liposomas multivesiculares se definen como presentando múltiples cámaras no concéntricas dentro de cada partícula, similares a una matriz "de tipo espuma" o "de tipo panal de abejas", mientras que las vesículas multilamelares contienen múltiples cámaras concéntricas dentro de cada partícula de liposoma, que son similares a las "capas de una cebolla".

La presencia de membranas internas distribuidas como una red en todos los liposomas multivesiculares puede servir para conferir una resistencia mecánica incrementada a la vesícula. Las partículas mismas pueden ocupar una proporción muy grande del volumen de formulación total. El volumen de partícula empaquetado (VPE) de los LMV, que se mide de una manera análoga al hematócrito, representa el volumen de formulación que ocupan las partículas y puede aproximarse incluso a 80%. Típicamente el VPE es de aproximadamente 50%. A un VPE de 50%, la formulación de liposomas multivesiculares típicamente consiste en menos de 5% p/p de lípidos. De esta manera, el volumen encapsulado es aproximadamente 50%, mientras que presenta una concentración de lípidos relativamente baja. La naturaleza multivesicular de los liposomas multivesiculares también indica que, al contrario que las vesículas unilamelares, una sola rotura de la membrana externa de las vesículas multivesiculares no resultará en la liberación total del contenido acuoso interno.

De esta manera, las formulaciones de liposomas multivesiculares consisten en partículas esféricas microscópicas compuestas de numerosas cámaras acuosas no concéntricas que encapsulan el TXA que debe administrarse. Las cámaras individuales están separadas por membranas de bicapa lipídica compuestas de versiones sintéticas de lípidos naturales, resultando en un vehículo de administración que es tanto biocompatible como biodegradable. Las formulaciones DEPO-TXA de la invención proporcionan una administración tanto en sitio local como sistémica sostenida y pueden administrarse mediante varias vías, incluyendo la tópica y diversas aplicaciones parenterales, tales como la inyección subcutánea, la inyección muscular, la infiltración en heridas o la instilación en heridas.

Algunas realizaciones de la presente solicitud se relacionan con composiciones farmacéuticas que comprenden liposomas multivesiculares ("LMV") con ácido tranexámico encapsulado, comprendiendo los liposomas multivesiculares ácido tranexámico ("TXA"), un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH. En algunas realizaciones, los LMV pueden comprender opcionalmente un segundo agente terapéutico. En algunas otras realizaciones, TXA es el único agente terapéutico en los LMV.

Algunas realizaciones de la presente solicitud se refieren a composiciones farmacéuticas que comprenden: liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico que comprenden ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH, y ácido tranexámico no encapsulado.

En algunas realizaciones, los LMV comprenden además colesterol y/o un esterol vegetal.

En algunas realizaciones, el lípido anfipático comprende fosfatidilcolina, o fosfatidilglicerol o sales de los mismos, o combinaciones de los mismos. En algunas de tales realizaciones, el fosfatidilglicerol es DPPG. En algunas de tales realizaciones, la fosfatidilcolina se selecciona de DEPC o DOPC, o una combinación de las mismas. En algunas otras realizaciones, los LMV se encuentran libres de DEPC. En algunas realizaciones adicionales, los LMV se encuentran sustancialmente libres de fosfatidilcolinas.

En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido, éster de propilenglicol, éster de etilenglicol, o escualeno, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido. En algunas de tales realizaciones, el triglicérido se selecciona de trioleína o tricaprilina, o una combinación de los mismos.

Agentes modificadores del pH

En algunas realizaciones, los agentes modificadores del pH se seleccionan de uno o más ácidos orgánicos, bases orgánicas, ácidos inorgánicos, o bases inorgánicas, o combinaciones de los mismos. Entre los ácidos inorgánicos adecuados (también conocidos como ácidos minerales) que pueden utilizarse en la presente solicitud se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, ácido clorhídrico (HCl), ácido sulfúrico (H²SO⁴), ácido fosfórico (H³ PO⁴), ácido nítrico (HNO³ ), etc. Entre los ácidos orgánicos adecuados que pueden utilizarse en la presente solicitud se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, ácido acético, ácido aspártico, ácido cítrico, ácido fórmico, ácido glutámico, ácido glucurónico, ácido láctico, ácido málico, ácido tartárico, etc. Entre las bases orgánicas adecuadas que pueden utilizarse en la presente solicitud se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, histidina, arginina, lisina, trometamina (Tris), etc. Entre las bases inorgánicas adecuadas que pueden utilizarse en la presente solicitud se incluyen, aunque sin limitarse a ellas, hidróxido sódico, hidróxido de calcio, hidróxido de magnesio, hidróxido de potasio, etc. En algunas realizaciones, los agentes modificadores del pH se seleccionan de ácidos inorgánicos, o bases orgánicas, o combinaciones de los mismos. En algunas otras realizaciones, los agentes modificadores del pH se seleccionan de ácidos orgánicos, o bases orgánicas, o combinaciones de los mismos. En algunas de tales realizaciones, el ácido inorgánico se selecciona de ácido clorhídrico o ácido fosfórico. En algunas de tales realizaciones, el ácido orgánico se selecciona de ácido tartárico, o ácido glutámico o una combinación de los mismos. En algunas realizaciones, la base orgánica se selecciona de histidina, arginina, trometamina o lisina, o combinaciones de las mismas. En una realización, los agentes modificadores del pH de los LMV son ácido clorhídrico y lisina. En otra realización, los agentes modificadores del pH de los LMV son ácido fosfórico y lisina. En otra realización, los agentes modificadores del pH de los LMV son ácido tartárico y lisina. En todavía otra realización, los agentes modificadores del pH de los LMV son histidina y lisina. En todavía otra realización, los agentes modificadores del pH de los LMV son trometamina y lisina.

En algunas realizaciones, los LMV presentan un intervalo de pH externo de entre aproximadamente 4,0 y aproximadamente 9,0. En algunas de tales realizaciones, el intervalo del pH externo es de entre aproximadamente 4,5 y aproximadamente 8,5. En algunas realizaciones, los LMV presentan un intervalo de pH interno de entre aproximadamente 3,0 y aproximadamente 9,0. En algunas de tales realizaciones, el intervalo del pH interno es de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 5,5. En algunas realizaciones adicionales, el pH interno es de aproximadamente 5,5.

Agentes osmóticos y agentes modificadores de la densidad

En algunas realizaciones, los LMV comprenden además uno o más agentes modificadores del pH y/o agentes modificadores de la densidad. El agente osmótico utilizado en la presente solicitud proporciona la osmolalidad deseada en la preparación del primer componente acuoso y el segundo componente acuoso de los LMV. Entre los agentes osmóticos ejemplares no limitativos adecuados para la formulación de LMV de la presente solicitud se incluyen monosacáridos (p.ej., glucosa y similares), disacáridos (p.ej., sacarosa y similares) y polisacáridos o polioles (p.ej., sorbitol, manitol, dextrano y similares). En algunas otras realizaciones, los agentes osmóticos se seleccionan de dextrano-40, sacarosa, sorbitol o combinaciones de los mismos.

En algunas realizaciones, el agente osmótico también puede actuar como agente modificador de la densidad. Por ejemplo, el dextrano-40 puede actuar como agente modificador de la densidad para maximizar la densidad de los LMV con un cambio mínimo de la osmolalidad. Entre otros ejemplos no limitativos de agentes modificadores de la densidad que resultan adecuados para la presente solicitud se incluyen polisacáridos, poloxámeros, polietilenglicoles, carboximetilcelulosa, polivinilpirrolidona (PVP), polivinilpolipirrolidona (PVPP), etc.

En algunas realizaciones, un agente modificador del pH también puede actuar como un agente osmótico. En una realización particular, también se utiliza TXA como un agente osmótico.

En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 1 mg/ml y aproximadamente 100 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 1 mg/ml y aproximadamente 80 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 2,5 mg/ml y aproximadamente 40 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 5 mg/ml y aproximadamente 25 mg/ml. En algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 10 mg/ml y aproximadamente 20 mg/ml. En todavía otras algunas realizaciones, la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 15 mg/ml y aproximadamente 20 mg/ml.

En algunas realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 10% a aproximadamente 80% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas de tales realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 20% a aproximadamente 70% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas de tales realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 30% a aproximadamente 60% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas realizaciones adicionales, el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 50% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica. En algunas otras realizaciones, el ácido tranexámico no encapsulado constituye menos de aproximadamente 10% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica.

En algunas realizaciones, la formulación DEPO-TXA se administra una, dos, tres, cuatro o más veces al día. La formulación DEPO-TXA también puede administrarse menos de una vez al día, por ejemplo una vez cada 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13 o 14 días o cada 1 o 2 semanas, o en un intervalo definido por dos cualesquiera de los valores anteriores. En algunas realizaciones, el número de administraciones diarias es constante (p.ej., una vez al día). En otras realizaciones, el número de administraciones es variable. El número de administraciones puede variar dependiendo de la eficacia de la dosis, los efectos secundarios observados, la necesidad de titular hasta una dosis deseada, factores externos (p.ej., un cambio en otra medicación), o la longitud de tiempo en que se ha administrado la forma farmacéutica.

En algunas realizaciones, la formulación DEPO-TXA se administra en una dosis comprendida entre aproximadamente 10 mg/kg y aproximadamente 500 mg/kg. En algunas realizaciones adicionales, la formulación se administra en una dosis de entre aproximadamente 20 mg/kg y aproximadamente 250 mg/kg. En todavía otras realizaciones adicionales, la formulación se administra en una dosis de entre aproximadamente 40 mg/kg y aproximadamente 125 mg/kg. En una realización, la formulación DEPO-TXA se administra en una dosis de aproximadamente 40 mg/kg. En otra realización, la formulación se administra en una dosis de aproximadamente 120 mg/kg.

En algunas realizaciones, la Cmax de TXA en la formulación DEPO-TXA descrita en la presente memoria es de entre aproximadamente 10 mg/l y aproximadamente 200 mg/l, de entre aproximadamente 20 mg/l y aproximadamente 150 mg/l, o de entre aproximadamente 40 mg/l y aproximadamente 100 mg/l. En algunas realizaciones adicionales, la Cmax de TXA en la formulación DEPO-TXA es de entre aproximadamente 45 mg/l y aproximadamente 140 mg/l.

Ciclodextrinas

En determinadas realizaciones, también pueden utilizarse las ciclodextrinas en las DEPO-TXA. En algunas otras realizaciones, la composición farmacéutica de la presente solicitud se encuentra libre de ciclodextrina.

Las ciclodextrinas son moléculas quirales de forma toroidal formadas por la acción del enzima ciclodextrina transglucosilasa sobre el almidón. Estos oligómeros cíclicos contienen entre 6 y 12 unidades de glucosa unidas mediante enlaces a-(1,4). Los tres homólogos más pequeños, a-ciclodextrina, p-ciclodextrina y Y-ciclodextrina se encuentran disponibles comercialmente; los homólogos de tamaño mayor deben producirse y aislarse individualmente. Los grupos 2-hidroxi y 3-hidroxi secundarios revisten la boca de la cavidad de la ciclodextrina y presentan una orientación alternada. Los 6-hidroxilos primarios se encuentran en el extremo opuesto de la molécula. El interior de la cavidad de la ciclodextrina es relativamente hidrofóbico, ya que los hidroxilos están dirigidos hacia el exterior de la molécula.

Muchos tipos diferentes de ciclodextrina pueden resultar útiles en las composiciones y métodos de las presentes realizaciones. Entre tales ciclodextrinas se incluyen, aunque sin limitarse a ellas, (2,6-di-O-)etil-p-ciclodextrina, sal sódica de (2-carboxietil)-p-ciclodextrina, (2-hidroxietil)-p-ciclodextrina, (2-hidroxipropil)-a-ciclodextrina, sulfobutiléterp-ciclodextrina, (2-hidroxipropil)-p-ciclodextrina, 6-monodeoxi-6-monoamino-p-ciclodextrina, 6-O-a-maltosil-pciclodextrina, butil-p-ciclodextrina, butil-Y-ciclodextrina, carboximetil-p-ciclodextrina, metil-p-ciclodextrina, succinil-aciclodextrina, succinil-p-ciclodextrina, triacetil-p-ciclodextrina, a-ciclodextrina p-ciclodextrina y Y-ciclodextrina.

En algunas realizaciones, las formulaciones de LMV de la presente solicitud opcionalmente incluyen un portador farmacéuticamente aceptable.

La formulación DEPO-TXA de la presente solicitud es estable a 4°C durante por lo menos 1 semana, 2 semanas o 4 meses. La formulación DEPO-TXA de la presente solicitud también es estable a 37°C durante por lo menos 2 días. El término "estable" tal como se utiliza en la presente memoria se refiere a TXA encapsulado que permanece dentro de los LMV bajo determinadas condiciones ambientales durante un periodo de tiempo sin fuga excesiva de LMV en forma libre. En algunas realizaciones, las formulaciones DEPO-TXA de la presente solicitud son estables a 4°C durante 4 meses con menos de 6 por ciento, menos de 5 por ciento, menos de 4 por ciento, menos de 3 por ciento, menos de 2 por ciento o menos de 1 por ciento de TXA en forma libre. En algunas realizaciones, las formulaciones DEPO-TXA de la presente solicitud son estables a 37°C durante 2 días con menos de 50 por ciento, menos de 40 por ciento, menos de 35 por ciento, menos de 30 por ciento, menos de 25 por ciento, menos de 20 por ciento, menos de 15 por ciento, más preferentemente menos de 10 por ciento, menos de 5 por ciento de TXA en forma libre.

Métodos de preparación

Algunas otras realizaciones de la presente solicitud se refieren a procedimientos para preparar liposomas multivesiculares que comprenden ácido tranexámico, comprendiendo dicho procedimiento: preparar un primer componente acuoso que comprende ácido tranexámico y por lo menos un agente modificador del pH, preparar un componente lipídico que comprende por lo menos un solvente orgánico, por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, mezclar dicho primer componente acuoso y dicho componente lipídico para formar una emulsión de agua-en-aceite, en la que por lo menos un componente comprende ácido tranexámico, poner en contacto dicha emulsión de agua-en-aceite con un segundo componente acuoso para formar esférulas que contienen solvente, y eliminar el solvente orgánico de las esférulas que contienen solvente para formar liposomas multivesiculares. En algunas realizaciones, el procedimiento comprende además una etapa adicional de suspender los liposomas multivesiculares en una solución que comprende ácido tranexámico libre para formar una composición farmacéutica que comprende tanto ácido tranexámico encapsulado como ácido tranexámico no encapsulado.

Opcionalmente, se incluyen otros componentes en la fase lipídica. Entre ellos se encuentran antioxidantes, conservantes antimicrobianos y colesterol o esteroles vegetales. En algunas realizaciones, el componente lipídico comprende además colesterol y/o un esterol vegetal.

Una emulsión de tipo "agua-en-aceite" se forma a partir de dos fases inmiscibles, una fase lipídica y una primera fase acuosa. La fase lipídica está constituida de por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro en un solvente orgánico volátil, y opcionalmente colesterol y/o derivados de colesterol. La expresión "lípido anfipático" se refiere a moléculas que presentan un grupo de "cabeza" hidrofílico y un grupo de "cola" hidrofóbico y pueden presentar capacidad de formación de membrana. Tal como se utilizan en la presente memoria, los lípidos anfipáticos incluyen los que presentan una carga neta negativa, una carga neta positiva y lípidos zwiteriónicos (que presentan una carga neta nula en su punto isoeléctrico). La expresión "lípido neutro" se refiere a aceites o grasas que no presentan capacidad de formación de vesículas por sí mismas y que no presentan un grupo de "cabeza" cargado o hidrofílico. Entre los ejemplos de lípidos neutros se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, ésteres de glicerol, ésteres de glicol, ésteres de tocoferol, ésteres de esterol que no presentan un grupo de "cabeza" cargado o hidrofílico, y alcanos y escualenos.

El lípido anfipático se selecciona de un amplio abanico de lípidos con una región hidrofóbica y una región hidrofílica en la misma molécula. Entre los lípidos anfipáticos adecuados se incluyen, aunque sin limitación, fosfolípidos zwiteriónicos, incluyendo fosfatidilcolinas, fosfatidiletanolaminas, esfingomielinas, lisofosfatidilcolinas y lisofosfatidiletanolaminas; fosfolípidos anfipáticos aniónicos, tales como fosfatidilgliceroles, fosfatidilserinas, fosfatidilinositoles, ácidos fosfatídicos y cardiolipinas; lípidos anfipáticos catiónicos, tales como acil trimetilamonio propanos, diacil dimetilamonio propanos, estearilamina, y similares. Entre los lípidos anfipáticos preferentes se incluyen dioleil fosfatidilcolina (DOPC), dierucoil fosfatidilcolina o 1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina (DEPC) y dipalmitoilfosfatidilglicerol o 1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol) (DPPG). En determinadas realizaciones, entre los lípidos anfipáticos utilizados en las formulaciones DEPO-TXA se incluyen DOPC y/o DEPC junto con DPPG.

Entre los lípidos neutros adecuados se incluyen, aunque sin limitarse a ellos, triglicéridos, ésteres de propilenglicol, ésteres de etilenglicol y escualeno. Son triglicéridos ejemplares no limitativos útiles en las formulaciones y métodos de la invención, trioleína (TO), tripalmitoleína, trimiristoleína, trilinoleína, tributirina, tricaproína, tricaprilina y tricaprina. Las cadenas grasas en los triglicéridos útiles en la presente solicitud pueden ser todas iguales o no todas iguales (triglicéridos de cadena mixta) o todas diferentes. Los ésteres de propilenglicol pueden ser diésteres mixtos de los ácidos caprílico y cáprico.

En algunas realizaciones, el lípido anfipático comprende fosfatidilcolina, o fosfatidilglicerol o sales de los mismos, o combinaciones de los mismos. En algunas de tales realizaciones, el fosfatidilglicerol es DPPG. En algunas de tales realizaciones, la fosfatidilcolina se selecciona de DEPC o DOPC, o una combinación de las mismas.

En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido, éster de propilenglicol, éster de etilenglicol, o escualeno, o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el lípido neutro comprende triglicérido. En algunas de tales realizaciones, el triglicérido se selecciona de trioleína o tricaprilina, o una combinación de los mismos.

Las concentraciones de los lípidos anfipáticos, lípidos neutros y colesterol presentes en el solvente inmiscible en agua utilizado para preparar los l Mv típicamente se encuentran comprendidas entre 1 y 40 mM, 2 y 40 mM y 0 y 60 mM, respectivamente. En algunas realizaciones, las concentraciones de los lípidos anfipáticos, lípidos neutros y colesterol pueden encontrarse comprendidas entre aproximadamente 20 mM y aproximadamente 40 mM, entre aproximadamente 5 mM y aproximadamente 40 mM, y entre aproximadamente 25 mM y aproximadamente 40 mM, respectivamente. En el caso de que se incluya un lípido anfipático cargado, generalmente se encuentra presente a una concentración más baja que el lípido zwiteriónico en el caso de que se encuentre presente el lípido zwiteriónico.

Pueden utilizarse muchos tipos de solvente orgánico volátil en la presente solicitud, incluyendo éteres, ésteres, éteres halogenados, hidrocarburos, halohidrocarburos o freón. Por ejemplo, el éter dietílico, el cloroformo, el cloruro de metileno, el tetrahidrofurano, el acetato de etilo y cualesquiera combinaciones de los mismos resultan adecuados para la utilización en la preparación de las formulaciones. En algunas realizaciones, se utiliza cloruro de metileno. En algunas otras realizaciones, se utiliza cloroformo.

En determinadas realizaciones, el primer componente acuoso comprende TXA y por lo menos un agente modificador del pH, opcionalmente uno o más agentes osmóticos indicados en la presente memoria, o una o más ciclodextrinas. En algunas realizaciones, el agente modificador del pH del primer componente acuoso se selecciona de un ácido inorgánico, un ácido orgánico, una base inorgánica, o una base orgánica, o combinaciones de los mismos. En algunas de tales realizaciones, el agente modificador del pH se selecciona de ácido clorhídrico, ácido fosfórico o ácido tartárico. En algunas otras realizaciones, el agente modificador del pH se selecciona de histidina, arginina o trometamina. En algunas realizaciones, el agente osmótico se selecciona de los sacáridos, tal como sacarosa. En algunas realizaciones, el agente modificador de la densidad se selecciona de los dextranos, por ejemplo dextrano-40. En algunas realizaciones, la osmolalidad del primer componente acuoso se encuentra comprendida entre aproximadamente 10 mOsm/kg y aproximadamente 600 mOsm/kg. En algunas realizaciones adicionales, la osmolalidad del primer componente acuoso se encuentra comprendida entre aproximadamente 285 mOsm/kg y aproximadamente 335 mOsm/kg.

En algunas realizaciones, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 2,0 y aproximadamente 9,0. En algunas realizaciones adicionales, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 5,5. En una realización, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de aproximadamente 5,5. En algunas realizaciones adicionales, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 4,3 y aproximadamente 5,5. En algunas realizaciones adicionales, el intervalo de pH del primer componente acuoso es de entre aproximadamente 7,5 y aproximadamente 9,0. En algunas realizaciones adicionales, el pH del primer componente acuoso es de aproximadamente 7,7. El pH del primer componente acuoso presenta un impacto sobre la estabilidad de los LMV encapsulados con TXA acabados. En determinados casos, se observó que en el caso de que el nivel de pH fuese elevado en el primer componente acuoso, el TXA encapsulado era más probable que se fugase de los LMV. En contraste, el nivel de pH más bajo del primer componente acuoso hace que el producto acabado sea más estable a temperaturas de almacenamiento más altas (por ejemplo, la temperatura ambiente o 37°C). En algunas realizaciones, el intervalo de pH preferente es de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 5,5, más preferentemente de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 4,4.

La fase lipídica y primera fase acuosa se mezclaron mediante turbulencia mecánica, tal como mediante la utilización de cuchillas rotatorias o vibratorias, agitación, extrusión a través de estructuras deflectoras o tuberías porosas, o mediante ultrasonidos, o mediante la utilización de una boquilla de tres líquidos (descrito en Schutt et al., pub. de patente US n° 2011/0250264 A1 para producir una emulsión de agua-en-aceite. La emulsión de agua-en-aceite seguidamente puede dispersarse en una segunda fase acuosa por los medios descritos anteriormente, formando esférulas que contienen solvente suspendidas en la segunda fase acuosa; se forma una emulsión de agua-en-aceiteen-agua. La expresión "esférulas que contienen solvente" se refiere a una gota esferoide microscópica que contiene solvente orgánico dentro de la cual se encuentran suspendidas múltiples gotas más pequeñas de solución acuosa. La segunda fase acuosa puede contener componentes adicionales, tales como uno o más agentes modificadores del pH, y uno o más agentes osmóticos y combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, el segundo componente acuoso comprende lisina o histidina como agente modificador del pH. En algunas realizaciones, el intervalo de pH del segundo componente acuoso es de entre aproximadamente 3,5 y aproximadamente 10,5. En algunas realizaciones, el intervalo de pH del segundo componente acuoso es de entre aproximadamente 7,5 y aproximadamente 10,5. En algunas realizaciones, el segundo componente acuoso comprende sorbitol o sacarosa como agente osmótico. En una realización particular, también se utiliza TXA como un agente osmótico. En algunas realizaciones, la osmolalidad del segundo componente acuoso se encuentra comprendida entre aproximadamente 10 mOsm/kg y aproximadamente 600 mOsm/kg. En algunas realizaciones adicionales, la osmolalidad del segundo componente acuoso se encuentra comprendida entre aproximadamente 270 mOsm/kg y aproximadamente 350 mOsm/kg.

A continuación, se elimina el solvente orgánico volátil de las esférulas, por ejemplo mediante evaporación superficial de la suspensión, burbujeo con un gas o el contacto con un gas en una cámara de nebulización. Al evaporarse el solvente sustancial o completamente, se forman los LMV. Entre los gases que pueden utilizarse para la evaporación se incluyen nitrógeno, argón, helio, oxígeno, hidrógeno y dióxido de carbono, mezclas de los mismos, o aire comprimido limpio. Alternativamente, el solvente volátil puede eliminarse mediante burbujeo, evaporación rotatoria, diafiltración o utilizando membranas selectivas de solvente, o poniendo en contacto con un gas en una cámara de nebulización.

Tal como se ha comentado anteriormente, puede incorporarse TXA en los LMV mediante la inclusión en el primer componente acuoso. También puede incorporarse TXA en los LMV mediante inclusión en la fase lipídica o tanto en el componente lipídico como en el primer componente acuoso. La cantidad de TXA recuperada en los LMV de la invención se sometió a ensayo mediante dilución de la suspensión de DEPO-TXA 30 veces en metanol al 50% en agua, seguido de la inyección de la mezcla resultante en una HPLC (Hewlett-Packard, modelo 1100 con una columna C-18; sistema de solventes de migración: 51% MeOH, 49% tampón acuoso que contiene fosfato sódico monobásico (NaH2PO4), H³ PO⁴ , TEA y dodecilsulfato sódico ("SDS"); pH=2,5) tal como se indica en el ensayo de la Farmacopea estadounidense 37 (USP 37) para impurezas orgánicas con alguna modificación menor. En algunas realizaciones, el rendimiento en porcentaje de TXA es de entre aproximadamente 40% y aproximadamente 90% de la cantidad inicial de TXA, más preferentemente de entre aproximadamente 50% y aproximadamente 90%, más preferentemente de entre aproximadamente 60% y aproximadamente 90%.

La preparación de liposomas multivesiculares se ilustra en Sankaram et al., patentes US n° 5.766.627 y n° 6.132.766. Los métodos de preparación de las presentes formulaciones de LMV también pueden encontrarse en Hartounian et al., (WO99/25319) y Schutt et al. (publicación de patente U.S. n° 2011/0250264 A1). Alternativamente, puede cargarse remotamente TXA en las partículas de LMV blancas. Tal procedimiento se describe en García et al., publicación de patente US n° 2012/0114740.

Métodos de administración

Algunas realizaciones de la presente solicitud se refieren a métodos de tratamiento, mejora o prevención de la pérdida sanguínea, que comprenden administrar una composición farmacéutica que comprende: ácido tranexámico, liposomas multivesiculares encapsuladas, comprendiendo los liposomas multivesiculares, ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH, y ácido tranexámico no encapsulado. En algunas realizaciones la administración es parenteral. En algunas otras realizaciones, la administración es tópica. En algunas realizaciones, la administración es tanto parenteral como tópica. En algunas de tales realizaciones, la administración parenteral se selecciona de inyección subcutánea, inyección tisular, infiltración en heridas o instilación en heridas. En algunas de tales realizaciones, la administración tópica comprende el contacto directo de dicha composición farmacéutica con una cavidad o una superficie del cuerpo sujeto que necesita de tratamiento, tal como vertiendo la composición farmacéutica en una herida abierta.

Tal como se utiliza en la presente memoria, el término "sujeto" incluye animales y seres humanos. En una realización preferente, el sujeto es un ser humano.

En cualquiera de las realizaciones, las presentes composiciones farmacéuticas pueden administrarse mediante inyección de bolo, p.ej., la inyección de bolo subcutánea, la inyección de bolo intramuscular, la inyección de bolo intradérmica y similares. En cualquiera de las realizaciones, la administración puede ser mediante infusión, p.ej., infusión subcutánea, infusión intramuscular, infusión intradérmica y similares. En cualquiera de las realizaciones, la administración puede ser la infiltración directa en heridas mediante inyección local y/o en torno al margen de la herida o instilación en la incisión, herida o cavidad corporal, o combinaciones de los mismos. Las formulaciones DEPO-TXA también pueden administrarse por otras vías de administración, incluyendo, aunque sin limitarse a ellas, las administraciones tópica, nasal y sistémica, tal como IV.

La administración de las presentes formulaciones DEPO-TXA se lleva a cabo utilizando métodos y dispositivos estándares, p.ej., plumas, sistemas inyectores, aguja y jeringa, sistema de administración de puerto de inyección subcutánea, catéteres y similares.

En algunas realizaciones, las formulaciones de LMV de la presente solicitud opcionalmente incluyen un portador farmacéuticamente aceptable. La expresión "portador farmacéuticamente aceptable", tal como se utiliza en la presente memoria, se refiere a uno o más diluyentes de relleno o sustancias encapsulantes sólidas o líquidas compatibles que resultan adecuadas para la administración en un mamífero. El término "compatible", tal como se utiliza en la presente memoria, se refiere a que los componentes de la composición pueden combinarse con el compuesto sujeto y unos con otros de manera que no se produzca ninguna interacción que pueda reducir sustancialmente la eficacia farmacéutica de la composición bajo situaciones de uso ordinario. Los portadores farmacéuticamente aceptables evidentemente deben ser de pureza suficientemente elevada y toxicidad suficientemente baja para que resulten adecuadas para la administración, preferentemente en un animal, preferentemente mamífero, bajo tratamiento.

Son algunos ejemplos de sustancias que pueden servir como portadores farmacéuticamente aceptables o componentes de los mismos, azúcares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; almidones, tales como almidón de maíz y almidón de patata; celulosa y sus derivados, tales como carboximetilcelulosa sódica, etilcelulosa y metilcelulosa; malta; gelatina; talco; sulfato de calcio; polioles, tales como propilenglicol, glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; ácido algínico; emulsionantes, tales como los Tween; sales, tales como cloruro sódico; agentes humectantes, tales como laurilsulfato sódico; agentes colorantes; agentes saborizantes; estabilizantes; antioxidantes; conservantes; agua libre de pirógenos; solución salina isotónica, y soluciones tampón de fosfato.

La elección de un portador farmacéuticamente aceptable para la utilización junto con el compuesto sujeto se determina básicamente por la manera en que debe administrarse el compuesto

Las composiciones inyectables eficaces que contienen dichos compuestos pueden encontrarse en suspensión o en forma de solución. En la forma de solución, se disuelve el TXA en un vehículo fisiológicamente aceptable. Tales vehículos comprenden un solvente adecuado, un agente de tonicidad, tal como sacarosa o solución salina, conservantes tales como alcohol bencílico, en caso necesario, y tampones. Entre los solventes útiles se incluyen, por ejemplo, agua y alcoholes acuosos, glicoles, y ésteres de carbonato, tales como carbonato de dietilo.

Las composiciones en suspensión inyectable requieren un medio de suspensión líquido, con o sin adyuvantes, como vehículo. El medio de suspensión puede ser, por ejemplo, soluciones acuosas de cloruro sódico, sacarosa, polivinilpirrolidona, polietilenglicol o combinaciones de los mismos. En algunas realizaciones, la composición en suspensión comprende un medio de suspensión líquido que resulta adecuado para disolver o solubilizar el ácido tranexámico no encapsulado.

Los componentes de solución de almacenamiento fisiológicamente aceptables adecuados se utilizan para mantener el compuesto suspendido en las composiciones en suspensión. Los componentes de la solución de almacenamiento pueden seleccionarse de espesantes tales como carboximetilcelulosa, polivinilpirrolidona, gelatina y los alginatos. Muchos surfactantes también resultan útiles como agentes de suspensión. El medio de suspensión también podría contener lecitina, aductos de alquilfenol y óxido de polietileno, naftalenosulfonatos, alquilbencenosulfonatos o ésteres de polioxietilén-sorbitán. La solución en suspensión de almacenamiento de LMV puede contener uno o más aditivos adicionales.

Muchas sustancias que afectan a la hidrofilicidad, densidad y tensión superficial del medio de suspensión líquido pueden ayudar a preparar suspensiones inyectables en casos individuales. Por ejemplo, los antiespumantes de silicona, sorbitol y los azúcares pueden ser agentes de suspensión útiles.

Algunas realizaciones proporcionan una liberación sostenida de TXA durante 12 horas. Algunas realizaciones proporcionan una liberación sostenida de TXA durante 24 horas. Algunas realizaciones proporcionan una liberación sostenida de TXA durante 36 horas. Algunas realizaciones proporcionan una liberación sostenida de TXA durante 48 horas. Algunas realizaciones proporcionan una liberación sostenida de TXA durante 60 horas. Algunas realizaciones proporcionan una liberación sostenida de TXA durante 72 horas. Por ejemplo, las figuras 5A y 5B ilustran el porcentaje de AUC total durante hasta 72 horas después del tratamiento los días 1 y 10, respectivamente. En el grupo de t Xa libre, el 94% del TXA administrado se había lavado tras 12 horas, mientras que en el grupo Depo-TXA, se mantuvo el 25% de la dosis a las 12 horas, liberándose durante las siguientes 60 horas. De manera similar, las figuras 6A y 6B ilustran la cantidad total de TXA administrado durante las 72 horas posteriores a la administración los días de tratamiento 1 y 10, respectivamente. La administración de TXA por sí sola resulta en la exposición a la dosis prácticamente completa de TXA en menos de 24 horas. En contraste, Depo-TXA proporciona, por ejemplo, exposición de 100 mg/kg de t Xa (a partir de una dosis de 120 mg/kg) a las 24 horas, demostrando el perfil de liberación sostenida de Depo-TXA.

Ejemplos

Los ejemplos a continuación sirven únicamente para ilustrar la invención y no pretenden ser limitativos de la misma.

Ejemplo 1: Preparaciones DEPO-TXA

Se prepararon formulaciones DEPO-TXA de la manera siguiente: el agente terapéutico (TXA) se disolvió en la primera solución acuosa que comprendía uno o más agentes modificadores del pH y uno o más agentes osmóticos y/o modificadores de la densidad; después se mezcló la primera solución acuosa con un componente lipídico que comprendía fosfolípidos y solvente orgánico con turbulencia mecánica para formar una emulsión de agua-en-aceite; después, la emulsión de agua-en-aceite se dispersó en una segunda solución acuosa. Se pasó un flujo de gas nitrógeno sobre la mezcla para evaporar el solvente orgánico. A continuación, se añadió solución salina a la mezcla y los LMV seguidamente se aislaron mediante centrifugación y se lavaron.

Se resumen condiciones ejemplares de preparación y los resultados de ensayo de la formulación DEPO-TXA en la Tabla 1, posteriormente. El procedimiento y aparato para la preparación a escala de laboratorio de las formulaciones DEPO-TXA descritas en las entradas 1-65 y 68-120 se han dado a conocer en Sankaram et al., patente US n° 6.132.766 (por ejemplo, el Ejemplo 1). Son variaciones del ph del primer componente acuoso y las soluciones y el solvente, las indicadas en la Tabla 1. En la entrada 28 del experimento, los LMV se centrifugaron y se resuspendieron en una solución que contenía 40 mg/ml de TXA libre, resultando en una suspensión que contenía aproximadamente 60% de TXA libre.

El procedimiento y aparato para el procedimiento de pulverización de las formulaciones DEPO-TXA indicadas en las entradas 66 y 67 se dan a conocer en Schutt et al., documento n° US 2011/0250264 A1, presentada el 8 de abril de 2011 (por ejemplo, el Ejemplo 4), con la excepción de que las soluciones y solvente son los indicados en la Tabla 1, y la composición de la solución de enjuague es la misma que la segunda solución acuosa indicada en la tabla para esos experimentos.

El rendimiento de TXA en los presentes LMV se sometió a ensayo mediante dilución de la suspensión de los DEPO-TXA 30 veces en metanol al 50% en agua, inyectando después la mezcla resultante en una HPLC (Hewlett-Packard modelo 1100 con una columna C-18; sistema de solventes de fase móvil: 51% MeOH, 49% tampón acuoso que contiene NaH2PO4, H³ PO⁴ , TEA y SDS; pH=2,5) tal como se indica a continuación, en el ensayo USP 37 para impurezas orgánicas, con alguna modificación menor.

Tabla 1: Composiciones en solución y atributos de producto finales para las formulaciones DEPO-TXA

CFM es cloroformo (CFM).

DCM es diclorometano (CH²CI²).

Lys es lisina.

His es histidina.

Osm/D se refiere a agente osmótico/modificador de la densidad.

EXP comprende DEPC (1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 20 mM, 17,78 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (26,72 mM, 10,34 mg/ml); TC (tricaprilina, 9 mM, 4,32 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP comprende DEPC (1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 12 mM, 10,67 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-sn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 2,12 mM, 1,58 mg/ml); colesterol (16,03 mM, 6,20 mg/ml); TC (tricaprilina, 5,40 mM, 2,59 mg/ml), y agua (0,04%).

EXP-150 comprende DEPC (1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 30 mM, 26,67 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 5,31 mM, 3,96 mg/ml); colesterol (40,08 mM, 15,51 mg/ml); TC (tricaprilina, 13,50 mM, 6,48 mg/ml), y agua (0,11%).

EXP-C150 comprende DEPC (1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 20 mM, 17,78 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (40,08 mM, 15,51 mg/ml); TC (tricaprilina, 9 mM, 4,32 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-C75 comprende DEPC (1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 20 mM, 17,78 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (20,04 mM, 7,76 mg/ml); TC (tricaprilina, 9 mM, 4,32 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-C113 comprende DEPC (1,2-dierucoil-sn-glicero-3-fosfocolina, 20 mM, 17,78 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (30,19 mM, 11,68 mg/ml); TC (tricaprilina, 9 mM, 4,32 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-DEPC50 comprende DEPC (1,2-d¡enjco¡l-sn-glicero-3-fosfocol¡na, 10 mM, 8,89 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoilsn-gNcero-3-fosfo-rac-(1-gNcerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (26,72 mM, 10,34 mg/ml); TC (tricaprilina, 9 mM, 4.32 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-DEPC150 comprende DEPC (1,2-d¡emco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 30 mM, 26,67 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoilsn-gNcero-3-fosfo-rac-(1-gNcerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (26,72 mM, 10,34 mg/ml); TC (tricaprilina, 9 mM, 4.32 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-TC150 comprende DEPC (1,2-d¡emco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 20 mM, 17,78 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (26,72 mM, 10,34 mg/ml); TC (tricaprilina, 13,5 mM, 6,48 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-TC50 comprende DEPC (1,2-d¡emco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 20 mM, 17,78 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (26,72 mM, 10,34 mg/ml); TC (tricaprilina, 4,5 mM, 2,16 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-DOPC100 comprende DOPC (dioleoil fosfatidilcolina, 20 mM); DPPG (1,2-d¡palm¡to¡l-sn-gl¡cero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (26,72 mM, 10,34 mg/ml); TC (tricaprilina, 9 mM, 4,32 mg/ml), y agua (0,07%).

EXP-TO100 comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 20 mM, 17,78 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 3,54 mM, 2,64 mg/ml); colesterol (26,72 mM, 10,34 mg/ml); To (trioleína, 9 mM), y agua (0,07%).

OBLT comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 26 mM, 23,71 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 11 mM, 8,34 mg/ml); colesterol (40 mM, 15,48 mg/ml); TC (tricaprilina, 40 mM, 18,84 mg/ml), y agua (0,39%).

OBLT-DPPG50 comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 26 mM, 23,71 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoilsn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 5,50 mM, 4,17 mg/ml); colesterol (40 mM, 15,48 mg/ml); TC (tricaprilina, 40 mM, 18,84 mg/ml), y agua (0,39%).

OBLT-DEPC50 comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 13 mM, 11,86 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoilsn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 11 mM, 8,34 mg/ml); colesterol (40 mM, 15,48 mg/ml); TC (tricaprilina, 40 mM, 18,84 mg/ml), y agua (0,39%).

OBLT-DEPC150 comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 39 mM, 35,57 mg/ml); DPPG (1,2-d¡palm¡to¡l-sn-gl¡cero-3-fosfo-rac-(1-gl¡cerol), 11 mM, 8,34 mg/ml); colesterol (40 mM, 15,48 mg/ml); TC (tricaprilina, 40 mM, 18,84 mg/ml), y agua (0,39%).

OBLT-TC50 comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 26 mM, 23,71 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 11 mM, 8,34 mg/ml); colesterol (40 mM, 15,48 mg/ml); t C (tricaprilina, 20 mM, 9,42 mg/ml), y agua (0,39%).

OBLT-TC150 comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 26 mM, 23,71 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoilsn-glicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 11 mM, 8,34 mg/ml); colesterol (40 mM, 15,48 mg/ml); TC (tricaprilina, 60 mM, 28,26 mg/ml), y agua (0,39%).

OBLT-C75 comprende DEPC (1,2-d¡eruco¡l-sn-gl¡cero-3-fosfocol¡na, 26 mM, 23,71 mg/ml); DPPG (1,2-dipalmitoil-snglicero-3-fosfo-rac-(1-glicerol), 11 mM, 8,34 mg/ml); colesterol (30 mM, 11,61 mg/ml); TC (tricaprilina, 40 mM, 18,84 mg/ml), y agua (0,39%).

Se prepararon tres formulaciones de TXA tal como se indica en la Tabla 2, posteriormente. El TXA encapsulado en los liposomas multivesiculares se preparó siguiendo un procedimiento similar al descrito en la Formulación n° 34. Además, se prepararon formulaciones DEPO-TXA mediante la adición de una solución acuosa de TXA libre a las partículas de TXA-LMV hasta conseguir 63% de TXA libre en la composición final.

Tabla 2

Se llevaron a cabo estudios farmacocinéticos sobre la administración subcutánea de las formulaciones de TXA anteriormente indicadas, en ratas Sprague-Dawley macho (300 a 325 gramos) suministradas por Charles River Labs. Se utilizó un total de 24 ratas en el estudio, divididas en 6 grupos (N=4 ratas en cada grupo). La recolección de muestras antes de la administración y el afeitado de las patas pueden llevarse a cabo antes del día de administración. Las ratas recibieron la administración mediante inyección subcutánea en la parte media de la pata trasera izquierda, más próxima al lomo de la rata, con una jeringa desechable de 1 cm3 dotada de una aguja hipodérmica de calibre 25. El volumen de inyección era de 0,5 ml.

Se recolectó una muestra de plasma en diferentes puntos temporales (predosis, 0,5, 1, 2, 6, 24, 48, 72 y 96 horas después de la dosis) para el análisis. Se recolectaron muestras de sangre de la vena sáfena derecha utilizando una punción de aguja de calibre 19 o punción cardíaca para el punto temporal final, las cuales se introdujeron en tubos refrigerados que contenían el anticoagulante apropiado, se invirtieron varias veces para mezclarlos, se protegieron de la luz y se guardaron sobre hielo hasta la centrifugación. La reducción de los niveles plasmáticos de TXA libre y el porcentaje de la superficie total bajo la curva (AUC) de TXA libre se ilustra en las figs. 1A y 1B.

Ejemplo 2: síntesis mediante procedimiento de pulverización de DEPO-TXA

El Ejemplo 2 describe una síntesis a gran escala de una formulación DEPO-TXA (121s) en la que la solución lipídica comprendía 11,85 mg/ml de DEPC, 8,34 mg/ml de DPPG, 15,48 mg/ml de colesterol y 18,84 mg/ml de tricaprilina.

La solución lipídica se preparó mediante la disolución de 77,4 g de colesterol, 41,7 g de DPPG, 94,2 g de tricaprilina, 59,3 g de DEPC y 19,5 g de agua en una solución de cloroformo. Se mezcló la solución hasta clarificarla y que los lípidos permaneciesen en solución. Para preparar la primera solución acuosa, se mezclaron 200 g de ácido tranexámico, 300,0 g de dextrano y 4.000,0 g de agua. Se midió el pH de la mezcla en aproximadamente 7,30-7,50. A continuación, se utilizó H³ PO⁴ al 85% para titular la mezcla hasta que el pH de la primera solución acuosa fuese de aproximadamente 5,50. Se mezcló la solución lipídica con la primera solución acuosa para formar una emulsión de agua-en-aceite. Se preparó la segunda solución acuosa mediante la mezcla de 400,0 g de ácido tranexámico en 10.000,0 g de agua en un recipiente de 20 l tarado. La emulsión de agua-en-aceite seguidamente se dispersó en la segunda solución acuosa. Se preparó una solución de enjuague que contenía 400,0 g de ácido tranexámico de manera similar a la segunda solución acuosa. Tras eliminar el cloroformo, los LMV con TXA encapsulado se aislaron y se lavaron con solución de enjuague, resultando en la formulación DEPO-TXA.

Ejemplo 3: evaluación de la toxicidad de la administración subcutánea

Los objetivos del presente estudio fueron determinar la potencial toxicidad de las formulaciones de TXA, administradas mediante inyección subcutánea en perros Beagle y evaluar la potencial reversibilidad de cualesquiera resultados, en una comparación con un ítem de control de referencia, el ácido tranexámico. Además, se determinaron los perfiles toxicocinéticos.

A continuación, se describe el diseño del estudio:

El ítem de referencia, cloruro sódico al 0,9% para inyección, USP, se dispensó los días de dosis para la administración en los animales de control del grupo 1.

La formulación de dosis de ítem de control de referencia (ácido tranexámico) se preparó antes de la administración a concentraciones apropiadas para cumplir con los requisitos de nivel de dosis, utilizando agua estéril para inyección, USP. La formulación se filtró utilizando un filtro de 0,22 pm antes de la utilización. En la ocasión de formulación de la primera dosis, se determinó el pH (y era de 7,41) y se recolectó una muestra (6 ml) en un recipiente de tamaño apropiado (de vidrio o polipropileno), se mantuvo bajo condiciones ambiente, para determinar la osmolalidad (y era de 245 mOsm/kg). Las formulaciones de dosis se dispensaron para la administración en los animales del grupo 2.

Las formulaciones DEPO-TXA (ítems de ensayo) se prepararon tal como se indica en la presente memoria (ver, p.ej., la Tabla 1, formulación n° 34 y el párrafo [0020]) con adición de TXA libre adicional a las composiciones de TXA-Lm V. Se prepararon dos formulaciones diferentes DEPO-TXA (concentración del sobrenadante: 40 mg/ml y 120 mg/ml), tal como se ejemplifica en la T abla 3, posteriormente. Para la formulación de 40 mg/ml, el % PPV era de aproximadamente 50% y el volumen intersticial teórico (ml) era de aproximadamente 20%, dejando aproximadamente 62% de TXA libre fuera de los liposomas multivesiculares. Un objetivo de la formulación DEPO-TXA era reducir el sangrado inmediatamente después de la cirugía y durante los días inmediatos a la cirugía. La fracción libre aparecía inmediatamente en el plasma y la fracción encapsulada aparecía más lentamente durante un periodo de tres días. Tras la inyección de DEPO-TXa , la fracción libre de TXA aparecía inmediatamente en el plasma y era lavada sin ninguna modificación en el grupo de bolo de TXA. También inmediatamente después de la inyección, la fracción de TXA encapsulado empezó a liberarse lentamente a partir de los LMV. Durante las primeras 12 h, el TXA liberado contribuyó al pico inicial de TXA medido en el plasma. Entre las 12 y 24 h, a medida que el TXA libre era lavado rápidamente, la contribución del TXA liberado a partir de los LMV en el plasma resultó evidente. El TXA encapsulado continúa siendo liberado a una tasa de 5-10% por intervalo de tiempo durante los siguientes días. Las formulaciones se sacaron de la nevera y se dejó que se calentasen hasta la temperatura ambiente durante por lo menos 30 minutos antes de la administración en los animales del grupo 3 y del grupo 4. Sujetando cuidadosamente la botella se invirtió 20-30 veces mediante rotación de la muñeca hasta obtener una apariencia de suspensión uniforme. El ítem de ensayo NO se agitó, ni se agitó con vórtex ni se mezcló.

Las muestras de la formulación de dosis del ítem de control de referencia se recolectaron para el análisis de preparaciones de día 7 (desde la preparación para la administración en hembras únicamente) y de día 10. Se obtuvieron juegos por duplicado de muestras (5 ml) a partir del recipiente de preparación y después de la filtración. Todas las muestras que debían analizarse se guardaron en un juego en la nevera para mantenerlas a 4°C fuera de la luz directa, antes del análisis.

Se analizó la estabilidad de la formulación de TXA en paralelo con el estudio, y en puntos temporales apropiados durante todo el estudio tras completarse la etapa de vida.

En el presente estudio se utilizaron 21 perros Beagle macho y 21 hembra. Los animales presentaban 6 a 7 meses de edad y pesaban entre 7,5 y 9,8 kg (machos) y entre 6,0 y 8,2 kg (hembras) al iniciarse las dosis.

Tabla 3: diseño experimental

Los ítems de ensayo, de control de referencia y de referencia se administraron en los animales apropiados mediante inyección subcutánea en las zonas escapular y medio-dorsal los días 1, 4, 7 y 10. El volumen de dosis para cada animal se basaba en la medición más reciente de peso corporal. El volumen de cada dosis se administró utilizando una jeringa/aguja en una inyección. Los sitios de inyección se fueron alternando entre dos sitios definidos (y en el mismo sitio para todos los animales en un día dado). La zona de administración se afeitó según necesidad y se marcaron los sitios de inyección con un rotulador (zona diana de 5 cm x 5 cm). El primer sitio de administración se encontraba en la región medio-escapular del lomo y el segundo sitio de administración era caudal respecto al primer sitio en la región medio-dorsal.

Se recolectó sangre de la vena yugular. Se recolectó orina durante la noche de animales alojados individualmente. Tras la recolección, las muestras se transfirieron al laboratorio apropiado para el procesamiento. Los animales se sometieron a ayuno durante la noche antes del muestreo de sangre (para la química clínica). Los animales fueron sometidos a ayuno de alimentos y agua durante el procedimiento de recolección de orina.

Se recolectó la sangre de la vena yugular (o vena cefálica) de todos los animales en tubos que contenían heparinalitio. Las muestras se recolectaron en serie los días 1 y 10, en los puntos temporales siguientes: predosis, 15 min, 30 min, 1,2, 6, 12, 24, 36, 48 y 72 horas después de la dosis.

Las muestras se mezclaron suavemente y se dejaron sobre hielo triturado húmedo hasta la centrifugación, que se llevó a cabo tan pronto como resultase práctico. Las muestras se centrifugaron durante 10 minutos en una centrífuga refrigerada (configurada para mantener la temperatura a 4°C) a 2.700 rpm. El plasma resultante se separó, se transfirió a tubos de polipropileno transparentes con una etiqueta única y se congelaron inmediatamente sobre hielo seco y se transfirieron a un juego en la nevera para mantenerlos a -80°C.

Se analizaron las muestras de plasma para la concentración de ácido tranexámico utilizando un procedimiento analítico validado.

Se generaron parámetros toxicocinéticos a partir de las concentraciones individuales en plasma del ítem de ensayo (ácido tranexámico) los días 1 y 10, en caso de resultar práctico.

Resultados y comentario

La inyección subcutánea de 40 y 120 mg/kg/dosis de DEPO-TXA ("ítem de ensayo" en perros Beagle durante un periodo de 14 días resultó bien tolerada y no resultó en ninguna toxicidad adversa.

Se observaron signos clínicos menores relacionados con la dosis, tales como émesis ligera y ocasional, en animales en los que se había administrado DEPO-TXA. Estos signos clínicos también se observaron en animales administrados TXA con una incidencia y severidad similares. No se observaron signos clínicos relacionados con el ítem de ensayo o el ítem de control de referencia los días después de la administración ni durante el periodo de recuperación.

No se observaron efectos sobre el peso corporal, la ganancia de peso corporal, la ingesta de alimento, oftalmología, electrocardiología, hematología, coagulación, contenido de dímeros-D, parámetros del análisis de orina, pesos de los órganos o hallazgos macroscópicos en comparación con los grupos de control.

El análisis toxicocinético demostró claramente que los niveles elevados de TXA contenido en el material de administración de DEPO-TXA resultaron absorbidos en la circulación periférica tras la inyección subcutánea. No se observaron diferencias entre géneros. Las exposiciones plasmáticas (Cmax y AUC) fueron equivalentes los días de tratamiento 1 y 10.

Tabla 4: resumen de los parámetros toxicocinéticos

El día 1 después de la administración de Depo-TXA, las concentraciones medias ± desviación estándar (n=10) (géneros agrupados) de TXA alcanzaron un pico a las 0,63± 0,27 y 1,0± 0,0 horas (Tmax) tras la administración en los grupos de dosis de 40 y 120 mg/kg, respectivamente. Los niveles pico medios respectivos (Cmax) fueron de 48,9±10,8 y 109± 12,7 pg/ml. El día 10, las concentraciones pico medias respectivas se alcanzaron a las 0,55±0,16 y 0,68±0,29 horas, con niveles pico medios de 50,8±9,8 y 138±15,1 pg/ml, para los animales a dosis baja y alta, representando un cambio mínimo en la exposición máxima tras la administración los días 1, 4, 7 y 10. Los valores de medias ± desv. estándares (géneros agrupados) (n=10) para AUC0-24, AUC0-48, AUC0-72 y AuC0-inf al nivel de dosis de de 40 mg/kg de Depo-TXA el día 1 fueron de 159±15,7, 177±18,0, 188±18,5 y 201±17,2 pgh/ml, respectivamente, y para el nivel de dosis de 120 mg/kg de Depo-TXA fueron de 445±35,9, 498±35,3, 526±34,6 y 561±35,9 pgh/ml. El día 10, los valores medios respectivos para AUC0-24, AUC0-48 y AUC0-72 al nivel de dosis de 40 mg/kg fueron de 156±15,7, 173±17,5, 182± 18,3 pg h/ml, y al nivel de dosis de 120 mg/kg fueron de 455±45,0, 503±50,6 y 524±52,8 pgh/ml. La semivida de eliminación terminal media (t1/2elim) para Depo-TXA el día 1 para los niveles de dosis de 40 y 120 mg/kg fue de 28,5±7,4 y 27,9±9,8 horas, respectivamente, mientras que el día 10 fue de 22,9±6,8 y 21,7±5,7.

Para el TXA libre (ítem de control de referencia administrado en animales del grupo 2), el día 1, las medias ± desviaciones estándar (n=10), géneros agrupados, de concentración plasmática de TXA alcanzó un máximo a las 1,2±0,42 horas (Tmax) después de la administración al nivel de dosis de 120 mg/kg, con niveles pico medios (Cmax) de 140±19,2 pg/ml. El día 10, las concentraciones pico medias se alcanzaron a las 1,1±0,32 horas, con niveles pico medios de 119±15,4 pg/ml. Los valores de medias ± desv. estándares (géneros agrupados) (n=10) para AUC0-24, AUC0-48, AUC0-72 y AUC0-inf el día 1 después de TXA fueron de 475±35,1,485±36,1, 490±36,5 y 495±36,8 pgh/ml, respectivamente. El día 10, los valores medios respectivos para AUC0-24, AUC0-48 y AUC0-72 fueron de 468±42,5, 479±44,2 y 484±45,2 pgh/ml. La semivida de eliminación terminal media (t1/2elim) para el TXA el día 1 fue de 25,7±2,0 horas y el día 10 fue de 28,9±2,9.

Comparando el nivel de dosis de 120 mg/kg de Depo-TXA con TXA libre, las exposiciones pico medias (Cmax) fueron 28% más altas para el grupo de TXA libre el día 1, pero los niveles de TXA pico fueron 14% más bajo el día de estudio 10, tras la cuarta y última dosis subcutánea. Las exposiciones sistémicas globales medias (AUC0-72) el día 1 fueron 7% mayores para el grupo de Depo-TXA vs. el grupo de TXA libre, y el día 10, las exposiciones medias fueron 8% mayores para el grupo de Depo-TXA.

Se administró Depo-TXA por vía subcutánea en perros a las dosis de 40 y 120 mg/kg/dosis los días de estudio 1, 4, 7 y 10. Tras la primera y última dosis, se recolectaron muestras de sangre hasta las 72 horas después de la administración y se determinaron estimaciones de los parámetros toxicocinéticos. Los resultados del análisis TK demuestran claramente que los niveles elevados de TXA contenidos en el material de administración de Depo-TXA fueron absorbidos en la circulación periférica tras la inyección subcutánea. La administración de Depo-TXA resultó bien tolerada, sin toxicidad adversa. Las exposiciones plasmáticas (Cmax y AUC) fueron equivalentes los días 1 y 10. En la comparación de las exposiciones medias entre el grupo de 120 mg/kg de Depo-TXA y el grupo de 120 mg/kg de TXA libre, las exposiciones pico medias (Cmax) fueron superiores para el grupo de TXA libre después de una sola dosis (día 1) pero después de múltiples dosis (día 10), las exposiciones pico medias fueron superiores para el grupo de Depo-TXA. Las exposiciones sistémicas globales medias (AUC0-72) fueron ligeramente mayores para el grupo de Depo-TXA.

La fig. 2 ilustra las concentraciones plasmáticas medias de TXA durante las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 1. En el grupo 2 se administró ítem de control de referencia; en el grupo 3 se administraron 40 mg/kg de Depo-TXA y en el grupo 4 se administraron 120 mg/kg de Depo-TXA.

La fig. 3 ilustra las concentraciones plasmáticas medias de TXA durante las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 10. En el grupo 2 se administró ítem de control de referencia; en el grupo 3 se administraron 40 mg/kg de Depo-TXA y en el grupo 4 se administraron 120 mg/kg de Depo-TXA.

La fig. 4 ilustra la concentración plasmática de TXA durante las 12 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 1.

La fig. 5A ilustra el porcentaje de la superficie total bajo la curva (AUC) de TXA durante hasta 72 horas después de la inyección el día de tratamiento 1. La fig. 5B ilustra el porcentaje de la superficie total bajo la curva (AUC) de TXA durante hasta 72 horas después de la inyección el día de tratamiento 10. Específicamente, en el grupo de TXA libre, el 94% del TXA administrado resultado lavado tras 12 horas, mientras que en el grupo de Depo-TXA, se mantenía el 25% de la dosis a las 12 horas, que fue liberado durante las siguientes 60 horas.

La fig. 6A ilustra la cantidad total de TXA administrado durante las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 1. La fig. 6B ilustra la cantidad total de TXA administrado durante las 72 horas posteriores a la administración el día de tratamiento 10. La administración de TXA por sí sola resulta en la exposición a la dosis prácticamente completa de TXA en menos de 24 horas. En contraste, Depo-TXA proporciona, por ejemplo, exposición de 100 mg/kg de t Xa (a partir de una dosis de 120 mg/kg) a las 24 horas, demostrando el perfil de liberación sostenida de Depo-TXA.

La fig. 7A ilustra la reducción de los niveles plasmáticos de TXA durante las 72 horas posteriores a la administración el día 1. La fig. 7B ilustra la reducción de los niveles plasmáticos de TXA durante las 72 horas posteriores a la administración el día 10.

De esta manera, tras la inyección de DEPO-TXA, la fracción libre de TXA aparecía inmediatamente en el plasma y era lavada sin ninguna modificación, tal como en el grupo de bolo de TXA. También inmediatamente después de la inyección, la fracción de TXA encapsulado empezó a liberarse lentamente. Durante las primeras 12 h, el TXA liberado contribuyó al pico inicial de TXA medido en el plasma. Entre las 12 y 24 h, a medida que el TXA libre era rápidamente lavado, resultó más evidente la contribución del TXA liberado a los niveles plasmáticos medidos de TXA. El TXA encapsulado continuó siendo liberado a una tasa de 5-10% en cada intervalo temporal durante las siguientes 24-72 horas, tal como se muestra en las figuras 8A y 8B.

En ausencia de efectos adversos a ambas dosis de DEPO-TXA, el nivel de no observación de efecto adversos (NNOEA) en el presente estudio se consideró que era de 120 mg/kg/dosis de DEPO-T-XA con un AUC^0-72 plasmático medio, géneros agrupados, de 524 pg^h/m y una Cmax de 138 pg/ml el día 10).

Claims (28)

1. REIVINDICACIONES

   i. Composición farmacéutica que comprende:

   liposomas multivesiculares que encapsulan ácido tranexámico, comprendiendo dichos liposomas multivesiculares: ácido tranexámico, un componente lipídico que comprende por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro, y uno o más agentes modificadores del pH.
2. 2. Composición farmacéutica según la reivindicación 1, que comprende además ácido tranexámico no encapsulado.
3. 3. Composición farmacéutica según la reivindicación 1 o 2, en la que los liposomas multivesiculares comprenden además uno o más agentes osmóticos y/o agentes modificadores de la densidad.
4. 4. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que los liposomas multivesiculares comprenden además colesterol y/o un esterol vegetal.
5. 5. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en la que el lípido anfipático comprende fosfatidilcolina, o fosfatidilglicerol o sales del mismo, o combinaciones de los mismos.
6. 6. Composición farmacéutica según la reivindicación 5, en la que el fosfatidilglicerol es DPPG.
7. 7. Composición farmacéutica según la reivindicación 5, en la que la fosfatidilcolina se selecciona de DEPC o DOPC, o una combinación de las mismas.
8. 8. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, en la que el lípido neutro comprende triglicérido, éster de propilenglicol, éster de etilenglicol, o escualeno, o combinaciones de los mismos.
9. 9. Composición farmacéutica según la reivindicación 8, en la que el lípido neutro comprende triglicérido.
10. 10. Composición farmacéutica según la reivindicación 8 o 9, en la que el triglicérido se selecciona de trioleína o tricaprilina, o una combinación de los mismos.
11. 11. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en la que dichos agentes modificadores del pH se seleccionan de ácidos orgánicos, bases orgánicas, ácidos inorgánicos, o bases inorgánicas, o combinaciones de los mismos.
12. 12. Composición farmacéutica según la reivindicación 11, en la que el ácido inorgánico se selecciona de ácido clorhídrico o ácido fosfórico.
13. 13. Composición farmacéutica según la reivindicación 11, en la que el ácido orgánico se selecciona de ácido tartárico, o ácido glutámico, o una combinación de los mismos.
14. 14. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 13, en la que la base orgánica se selecciona de histidina, arginina, lisina o trometamina, o combinaciones de los mismos.
15. 15. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 14, en la que la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 1 mg/l y aproximadamente 80 mg/ml.
16. 16. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en la que la concentración de ácido tranexámico total en la composición farmacéutica es de entre aproximadamente 5 mg/l y aproximadamente 25 mg/ml.
17. 17. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 16, en la que el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 1% a aproximadamente 80% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica.
18. 18. Composición farmacéutica según la reivindicación 17, en la que el ácido tranexámico no encapsulado es aproximadamente 50% de la cantidad total de ácido tranexámico en la composición farmacéutica.
19. 19. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 16, en la que el ácido tranexámico no encapsulado es menos de aproximadamente 10% del ácido tranexámico total en la composición farmacéutica.
20. 20. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 19, en la que dichos liposomas multivesiculares presentan un intervalo de pH externo de entre aproximadamente 4,0 y aproximadamente 9,0.
21. 21. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, en la que dichos liposomas multivesiculares presentan un intervalo de pH interno de entre aproximadamente 3,0 y aproximadamente 9,0.
22. 22. Composición farmacéutica según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 para la utilización en el tratamiento, mejora o prevención de la pérdida sanguínea.
23. 23. Composición farmacéutica para la utilización según la reivindicación 22, en la que la composición farmacéutica es para la administración parenteral, la administración tópica o ambas.
24. 24. Composición farmacéutica para la utilización según la reivindicación 23, en la que la administración parenteral se selecciona de inyección subcutánea, inyección tisular, infiltración en heridas o instilación en heridas.
25. 25. Composición farmacéutica para la utilización según la reivindicación 23, en la que la administración tópica es mediante contacto directo de dicha composición farmacéutica con una cavidad o una superficie del cuerpo del sujeto que necesita de tratamiento.
26. 26. Procedimiento para preparar liposomas multivesiculares que comprenden ácido tranexámico, comprendiendo dicho procedimiento:

    preparar un primer componente acuoso que comprende ácido tranexámico y por lo menos un agente modificador del pH,

    preparar un componente lipídico que comprende por lo menos un solvente orgánico, por lo menos un lípido anfipático y por lo menos un lípido neutro,

    mezclar dicho primer componente acuoso y dicho componente lipídico para formar una emulsión de aguaen-aceite, en el que por lo menos un componente comprende ácido tranexámico,

    poner en contacto dicha emulsión de agua-en-aceite con un segundo componente acuoso para formar esférulas que contienen solvente, y

    eliminar el solvente orgánico de las esférulas que contienen solvente para formar liposomas multivesiculares.
27. 27. Procedimiento según la reivindicación 26, que comprende además suspender los liposomas multivesiculares en una solución que comprende ácido tranexámico para formar una composición farmacéutica que comprende tanto ácido tranexámico encapsulado como ácido tranexámico no encapsulado.
28. 28. Procedimiento según la reivindicación 26, que comprende además suspender los liposomas multivesiculares en una solución que comprende solución salina para formar una composición farmacéutica que comprende ácido tranexámico encapsulado.