ES2646913T3 - Un derivado de 6-oxo-1,6-dihidro-piridazina para usar en el tratamiento del carcinoma hepatocelular (HCC) - Google Patents

Abstract

El 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmacéuticamente aceptable de éste, para usar en el tratamiento del carcinoma hepatocelular (HCC).

Description

DESCRIPCION

Un derivado de 6-oxo-1,6-dihidro-piridazina para usar en el tratamiento del carcinoma hepatocelular (HCC)

CAMPO DE LA INVENCION

Esta invencion esta relacionada con el 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidi n-4-ilmetoxi)-pi rimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro- 5 piridazin-3-il)-benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, para usar en el tratamiento del carcinoma hepatocelular (HCC).

ANTECEDENTES DE LA INVENCION

La invencion tuvo por objeto hallar nuevas composiciones farmaceuticas con propiedades valiosas, que en particular fueran utiles para preparar medicamentos.

10 Mas aun, el objetivo de esta invencion fue hallar nuevas composiciones que fueran utiles para prevenir y tratar el carcinoma hepatocelular.

Se ha descubierto que el 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidi n-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-pi ridazin-3-il)- benzonitrilo segun la invencion, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, tiene propiedades farmacologicas muy valiosas y puede ser bien tolerado.

15 El HCC es la quinta afeccion maligna mas comun en el mundo, con un total de 667000 nuevos casos, 17500 de los cuales se dan en Estados Unidos. 80% de los pacientes presentan una enfermedad avanzada o no resecable en el momento del diagnostico. En los palses occidentales, aproximadamente 40% de los pacientes son elegibles para un posible tratamiento curativo (reseccion, trasplante, ablacion local), mientras que aproximadamente 20% son elegibles para una quimioembolizacion. En los pacientes bien seleccionados, la reseccion y el trasplante proveen 20 tasas de supervivencia despues de 5 anos de 70%, y 50% de los pacientes recaen en un perlodo de 3 anos. En la presente se demuestra que el 3-(1-{3-[5-(1-metil-pi peridin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-pi ridazin- 3-il)-benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, es activo sobre tumores de HCC con signos de senalizacion de c-Met activa.

Antes de la aprobacion del sorafenib, no habla un tratamiento sistemico eficaz para prolongar la supervivencia al 25 HCC: los agentes citotoxicos convencionales administrados en monoterapias o reglmenes combinados tenlan tasas de respuesta bajas y no prolongaban la supervivencia (Thomas, M. B., O'Beirne, J. P., Furuse, J., Chan, A. T., Abou- Alfa, G., Johnson, P., Ann. Surg. Oncol., 2008, 15, (4):1008-14). Sin embargo, aunque con el sorafenib se ha prolongado la duracion de la PFS, la PFS y la supervivencia en general siguen siendo limitadas. Suele surgir resistencia secundaria despues de varias semanas de exposicion al farmaco. Una vez que la enfermedad progresa, 30 actualmente no hay otras opciones terapeuticas. Debido a esta necesidad medica importante insatisfecha, se necesitan otras opciones eficaces para tratar el HCC.

ANTECEDENTES TECNICOS

El 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo ha sido descripto en WO 2009/006959 A1.

35 El hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3- il)-benzonitrilo ha sido descripto en Wo 2009/007074 A1.

RESUMEN DE LA INVENCION

La invencion esta relacionada con el 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro- piridazin-3-il)-benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, para usar en el tratamiento 40 del carcinoma hepatocelular (HCC).

Ademas, la invencion esta relacionada con el hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)- pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, para usar en el tratamiento del carcinoma hepatocelular (HCC).

Ademas, la invencion esta relacionada con el 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6- 45 dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, donde el compuesto se administra en un paciente en una cantidad de entre 100 mg a 800 mg por dla.

Ademas, la invencion esta relacionada con el 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6- dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, donde el compuesto se administra oralmente.

Ademas, la invencion esta relacionada con el uso del 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6- 5 oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, en la manufactura de un medicamento para tratar el carcinoma hepatocelular (HCC).

La terapia con 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidi n-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-pi ridazin-3-il)- benzonitrilo, o una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, o con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3- [5-( 1 -metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-di hidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, opcionalmente

10 puede abarcar un tratamiento con radiacion.

La invencion tambien esta relacionada con la posibilidad de usar solvatos de sales del compuesto, por ejemplo, mono o dihidratos o clorhidratos.

El termino solvatos del compuesto hace referencia a aducciones de moleculas de solventes inertes sobre los compuestos, que se forman debido a la fuerza de atraccion mutua. Los solvatos son, por ejemplo, mono o dihidratos 15 o alcoholatos.

La expresion “cantidad eficaz” hace referencia a la cantidad de un medicamento o un ingrediente activo farmaceutico que provoca una respuesta biologica o medica buscada o deseada, por ejemplo, por un investigador o un medico, en un tejido, un sistema, un ser humano u otro animal.

Ademas, la expresion “cantidad terapeuticamente eficaz” hace referencia a una cantidad que es util para los 20 propositos que se detallan mas adelante, en comparacion con un sujeto no tratado con ella:

provocar una mejora en el tratamiento, la curacion, la prevencion o la supresion de una enfermedad, un slndrome, una afeccion, una dolencia, un trastorno o un efecto secundario, o tambien disminuir el avance de una enfermedad, una dolencia o un trastorno.

La expresion “cantidad terapeuticamente eficaz” tambien abarca las cantidades que son eficaces para potenciar la 25 funcion fisiologica normal.

Sales farmaceuticas y otras formas

Los compuestos segun la invencion pueden usarse en su forma no salina final. Sin embargo, la presente invencion tambien abarca la posibilidad usar compuestos en forma de sales farmaceuticamente aceptables, que pueden obtenerse con diversos acidos o bases organicas o inorganicas, segun procedimientos conocidos en la tecnica. Las 30 sales farmaceuticamente aceptables del 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-

dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo y la N-((S)-2,3-dihidroxi-propil)-3-(2-fluoro-4-iodo-fenilamino)-isonicotinamida tienden a prepararse con metodos convencionales.

Si un compuesto contiene un grupo carboxilo, puede formarse una sal de adicion basica apropiada haciendolo reaccionar con una base apropiada. Estas bases abarcan, por ejemplo, hidroxidos de metales alcalinos, incluyendo 35 hidroxido de potasio, hidroxido de sodio e hidroxido de litio; hidroxidos de metales alcalinoterreos, por ejemplo, hidroxido de bario o hidroxido de calcio; alcoxidos de metales alcalinos, por ejemplo, etoxido de potasio o propoxido de sodio; y diversas bases organicas, por ejemplo, piperidina, dietanolamina o N-metilglutamina. Tambien se incluyen las sales de aluminio de los compuestos. Pueden formarse sales de adicion acida de determinados compuestos tratandolos con acidos organicos o inorganicos farmaceuticamente aceptables, por ejemplo, haluros de 40 hidrogeno, por ejemplo, cloruro de hidrogeno, bromuro de hidrogeno o ioduro de hidrogeno, otros acidos minerales y las sales correspondientes, por ejemplo, sulfato, nitrato o fosfato, alquil o monoarilsulfonatos, por ejemplo, etanosulfonato, toluensulfonato o bencenosulfonato, y otros acidos organicos y las sales correspondientes, por ejemplo, acetato, trifluoroacetato, tartrato, maleato, succinato, citrato, benzoato, salicilato o ascorbato. Como consecuencia, las sales de adicion acida farmaceuticamente aceptables de los compuestos abarcan, sin 45 limitaciones, las siguientes: acetato, adipato, alginato, arginato, aspartato, benzoato, bencenosulfonato (besilato), bisulfato, bisulfito, bromuro, butirato, canforato, canforsulfonato, caprilato, cloruro, clorobenzoato, citrato, ciclopentanopropionato, digluconato, dihidrogenofosfato, dinitrobenzoato, dodecilsulfato, etanosulfonato, fumarato, galacterato (de acido mucico), galacturonato, glucoheptanoato, gluconato, glutamato, glicerofosfato, hemisuccinato, hemisulfato, heptanoato, hexanoato, hipurato, clorhidrato, bromhidrato, iodhidrato, 2-hidroxietanosulfonato, ioduro, 50 isetionato, isobutirato, lactato, lactobionato, malato, maleato, malonato, mandelato, metafosfato, metanosulfonato, metilbenzoato, monohidrogenofosfato, 2-naftalenosulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, oleato, palmoato, pectinato, persulfato, fenilacetato, 3-fenilpropionato, fosfato, fosfonato y ftalato.

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Ademas, las sales basicas de los compuestos segun la invencion abarcan, sin limitaciones, sales de aluminio, amonio, calcio, cobre, hierro(III), hierro(II), litio, magnesio, manganeso(III), manganeso(II), potasio, sodio y cinc. Entre las sales mencionadas, se prefieren las sales de amonio, de los metales alcalinos sodio y potasio y de los metales alcalinoterreos calcio y magnesio. Las sales de los compuestos que se obtienen con bases organicas no toxicas farmaceuticamente aceptables abarcan sales de aminas primarias, secundarias o terciarias, aminas sustituidas, incluyendo aminas sustituidas de origen natural, aminas clclicas y resinas basicas de intercambio ionico, por ejemplo y sin limitaciones, arginina, betalna, cafelna, cloroprocalna, colina, N,N'-dibenciletilendiamina (benzatina), diciclohexilamina, dietanolamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamina, etilendiamina, N-etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lidocalna, lisina, meglumina, N-metil-D-glucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procalna, purinas, teobromina, trietanolamina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina o tris(hidroximetil)metilamina (trometamina).

Los compuestos de la presente invencion que contienen grupos con atomos de nitrogeno basicos pueden ser cuaternizados con agentes como haluros de (Ci-C4)alquilo, por ejemplo, cloruro, bromuro o ioduro de metilo, etilo, isopropilo o terbutilo; sulfatos de di(Ci-C4)alquilo, por ejemplo, sulfato de dimetilo, dietilo o diamilo; haluros de (Cio- Ci8)alquilo, por ejemplo, cloruro, bromuro o ioduro de decilo, dodecilo, laurilo, miristilo o estearilo; o haluros de aril(Ci-C4)alquilo, por ejemplo, cloruro de bencilo o bromuro de fenetilo. Los compuestos solubles en agua o aceite segun la invencion pueden prepararse usando estas sales.

Entre las sales farmaceuticas mencionadas con anterioridad, se prefieren, sin limitaciones, las sales de acetato, trifluoroacetato, besilato, citrato, fumarato, gluconato, hemisuccinato, hipurato, clorhidrato, bromhidrato, isetionato, mandelato, meglumina, nitrato, oleato, fosfonato, pivalato, fosfato de sodio, estearato, sulfato, sulfosalicilato, tartrato, tiomalato, tosilato y trometamina.

Se prefieren especialmente las sales de clorhidrato, diclorhidrato, bromhidrato, maleato, mesilato, fosfato, sulfato y succinato.

Las sales de adicion de acida de los compuestos basicos se preparan poniendo la forma de base libre en contacto con una cantidad suficiente del acido deseado, para formar la sal de una manera convencional. La base libre puede regenerarse poniendo en contacto la forma salina con una base y aislando la base libre de una manera convencional. Las formas de bases libres difieren de las formas salinas correspondientes en determinadas propiedades flsicas, por ejemplo, la solubilidad en solventes polares, aunque para los propositos de la invencion, las sales corresponden a las formas de bases libres respectivas.

Segun se ha mencionado, las sales de adicion basica farmaceuticamente aceptables de los compuestos se forman con metales o aminas, por ejemplo, metales alcalinos, metales alcalinoterreos o aminas organicas. Los metales preferidos abarcan sodio, potasio, magnesio y calcio. Las aminas organicas preferidas abarcan N,N'- dibenciletilendiamina, cloroprocalna, colina, dietanolamina, etilendiamina, N-metil-D-glucamina y procalna.

Las sales de adicion basica de los compuestos acidos segun la invencion se preparan poniendo en contacto la forma de acido libre con una cantidad suficiente de la base deseada, para formar la sal de una manera convencional. El acido libre puede regenerarse poniendo en contacto la forma salina con un acido y aislando el acido libre de una manera convencional. Las formas de acidos libres difieren de las formas salinas correspondientes en determinadas propiedades flsicas, por ejemplo, la solubilidad en solventes polares, aunque para los propositos de la invencion, las sales corresponden a las formas de acidos libres respectivas.

En este contexto, la expresion “farmaceuticamente aceptable” se aplica a un ingrediente activo que comprende un compuesto en una forma salina, particularmente cuando esta forma salina le confiere propiedades farmacocineticas superiores a las que podrla presentar la forma libre del ingrediente activo o cualquier otra forma salina usada con anterioridad. La forma salina farmaceuticamente aceptable del ingrediente activo tambien puede conferirle al ingrediente activo una propiedad farmacocinetica deseada que no ha tenido antes, e incluso puede tener una influencia positiva sobre su farmacodinamica, particularmente en el contexto de su eficacia terapeutica en el cuerpo.

Las formulaciones farmaceuticas pueden administrarse en forma de unidades de dosificacion que comprenden una cantidad predeterminada del ingrediente activo. Cada unidad puede comprender, por ejemplo, entre 0,5 mg y i g, preferiblemente entre i mg y 700 mg, y mas preferiblemente entre 5 mg y i00 mg de un compuesto segun la invencion, dependiendo de la afeccion que se desea tratar, el metodo de administration y la edad, el peso y el estado del paciente, o pueden administrarse formulaciones farmaceuticas que comprenden una cantidad preestablecida del ingrediente activo. Las formulaciones de unidades de dosificacion preferidas abarcan aquellas que comprenden una dosis diaria o una dosis parcial, segun se indico con anterioridad, o una fraccion apropiada de una dosis de un ingrediente activo. Ademas, las formulaciones farmaceuticas de este tipo pueden prepararse con procesos generalmente conocidos en la tecnica farmaceutica.

Las formulaciones farmaceuticas pueden adaptarse para una administracion por cualquier via apropiada y deseada, por ejemplo, oral (incluyendo bucal o sublingual), rectal, nasal, topica (incluyendo bucal, sublingual o transdermica), vaginal o parenteral (incluyendo subcutanea, intramuscular, intravenosa o intradermica). Estas formulaciones pueden prepararse con cualquier proceso conocido en la tecnica farmaceutica, por ejemplo, combinando el 5 ingrediente activo con uno o mas excipientes o coadyuvantes.

Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para una administracion oral pueden ser administradas como unidades separadas, por ejemplo, capsulas o tabletas; polvos o granulos; soluciones o suspensiones en llquidos acuosos o no acuosos; espumas o alimentos espumosos comestibles; o emulsiones llquidas de aceite en agua o emulsiones llquidas de agua en aceite.

10 Asl, por ejemplo, en el caso de una administracion oral en forma de una tableta o una capsula, el componente del ingrediente activo puede combinarse con un vehlculo oral, no toxico y un excipiente inerte farmaceuticamente aceptable, por ejemplo, etanol, glicerol o agua. Los polvos se preparan triturando el compuesto hasta un obtener tamano fino apropiado y mezclandolo con un excipiente farmaceutico triturado de una manera similar, por ejemplo, un hidrato de carbono comestible, tal como almidon o manitol. Tambien puede incluirse un sabor, un conservante, un 15 dispersante o un colorante.

Las capsulas se producen preparando una mezcla en polvo segun se describio con anterioridad e introduciendola en cascaras de gelatina con la forma apropiada. A la mezcla en polvo pueden agregarsele deslizantes o lubricantes, por ejemplo, acido sillcico altamente disperso, talco, estearato de magnesio, estearato de calcio o polietilenglicol en forma solida, antes de la operacion de relleno. Tambien puede agregarse un desintegrante o un solubilizante, por 20 ejemplo, agar-agar, carbonato de calcio o carbonato de sodio, para mejorar la disponibilidad del medicamento una vez tomada la capsula.

De resultar deseable o necesario, tambien pueden incorporarse aglutinantes, lubricantes, desintegrantes o colorantes en la mezcla. Los aglutinantes apropiados abarcan almidon, gelatina, azucares naturales, por ejemplo, glucosa o beta-lactosa, edulcorantes de malz, gomas naturales o sinteticas, por ejemplo, acacia, tragacanto o 25 alginato de sodio, carboximetilcelulosa, polietilenglicol y ceras, entre otros. Los lubricantes usados en estas formas de dosificacion abarcan oleato de sodio, estearato de sodio, estearato de magnesio, benzoato de sodio, acetato de sodio y cloruro de sodio, entre otros. Los desintegrantes abarcan, sin limitaciones, almidon, metilcelulosa, agar, bentonita y goma xantana. Las tabletas se formulan, por ejemplo, preparando una mezcla en polvo, granulandola o prensandola en seco, agregando un lubricante y un desintegrante y prensando toda la mezcla. Puede prepararse 30 una mezcla en polvo combinando un compuesto triturado de una manera apropiada con un diluyente o una base, segun se describio con anterioridad, opcionalmente con un aglutinante, por ejemplo, carboximetilcelulosa, un alginato, gelatina o polivinilpirrolidona, un retardante de la disolucion, por ejemplo, parafina, un acelerador de la absorcion, por ejemplo, una sal cuaternaria, y/o un absorbente, por ejemplo, bentonita, caolln o fosfato de dicalcio. La mezcla en polvo puede granularse mojandola con un aglutinante, por ejemplo, jarabe, pasta de almidon, mucllago 35 de acadia o soluciones de materiales de celulosa o polimericos, y prensandola a traves de un tamiz. Como alternativa a la granulacion, la mezcla en polvo puede hacerse pasar a traves de una tableteadota para obtener grumos no uniformes, los cuales pueden romperse para formar granulos. Los granulos pueden lubricarse agregando acido estearico, una sal de estearato, talco o un aceite mineral, para evitar que se adhieran a los moldes de la tableteadota. Posteriormente, la mezcla lubricada puede prensarse para obtener tabletas. Los compuestos segun la 40 invencion tambien pueden combinarse con excipientes inertes de flujo libre y luego pueden prensarse directamente para obtener tabletas, sin pasos de granulacion o prensado en seco. Puede haber una capa protectora transparente u opaca compuesta por una capa de sellado de goma laca, una capa de un azucar o un material polimerico y una capa de cera con brillo. Pueden agregarseles colorantes a los recubrimientos poder diferenciar las unidades de dosificacion.

45 Pueden prepararse llquidos orales, por ejemplo, soluciones, jarabes o elixires, en forma de unidades de dosificacion, de manera tal que una cantidad determinada comprenda una cantidad preestablecida del compuesto. Los jarabes pueden prepararse disolviendo el compuesto en una solucion acuosa con un sabor apropiado, mientras que los elixires se preparan usando un vehlculo alcoholico no toxico. Las suspensiones pueden formularse dispersando el compuesto en un vehlculo no toxico. Tambien pueden agregarse solubilizantes o emulsionantes, por ejemplo, 50 alcoholes isoestearllicos etoxilados o eteres de polioxietilen sorbitol, conservantes, aditivos saborizantes, por ejemplo, aceite de menta, edulcorantes naturales, sacarina u otros edulcorantes artificiales, entre otras posibilidades.

Si se lo desea, las formulaciones de unidades de dosificacion para una administracion oral pueden encapsularse en microcapsulas. La formulacion tambien puede prepararse de manera tal de prolongar o demorar la liberacion, por ejemplo, aplicando un recubrimiento o incrustando materiales particulados en pollmeros, ceras o compuestos 55 similares.

Los compuestos o sus sales, sus solvatos, sus tautomeros o sus estereoisomeros tambien pueden administrarse en forma de sistemas de liberacion en liposomas, por ejemplo, veslculas unilamelares pequenas, veslculas

unilamelares grandes o veslcuias multilamelares. Los liposomas pueden formarse a partir de diversos fosfollpidos, por ejemplo, colesterol, estearilamina o fosfatidilcolinas.

Los compuestos o sus sales, sus solvatos, sus tautomeros o sus estereoisomeros tambien pueden administrarse usando anticuerpos monoclonales como vehlculos individuales a los que se unen las moleculas de los compuestos.

5 Los compuestos tambien pueden unirse a pollmeros solubles como vehlculos para medicamentos dirigidos. Estos pollmeros pueden comprender polivinilpirrolidona, copollmeros de pirano, polihidroxipropil-metacrilamidofenol, polihidroxietilaspartamidofenol o polilisina de oxido de polietileno sustituida con radicales de palmitollo. Los compuestos pueden unirse a pollmeros biodegradables apropiados para efectuar una liberacion controlada del medicamento, por ejemplo, acido polilactico, poli-epsilon-caprolactona, acido polihidroxibutlrico, poli-ortoesteres, 10 poliacetales, polidihidroxipiranos, policianoacrilatos o copollmeros de bloques de hidrogeles reticulados o anfipaticos.

Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para una administracion transdermica pueden administrarse como yesos independientes para obtener un contacto prolongado y estrecho con la epidermis del receptor. Asl, por ejemplo, el ingrediente activo puede liberarse del yeso por iontoforesis, segun se describe en terminos generales en Pharmaceutical Research, 3(6), 318 (1986).

15 Los compuestos farmaceuticos adaptados para una administracion topica pueden formularse como unguentos, cremas, suspensiones, lociones, polvos, soluciones, pastas, geles, atomizaciones, aerosoles o aceites.

Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para una administracion rectal pueden administrarse como supositorios o enemas.

Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para una administracion nasal, donde la sustancia portadora es un 20 solido, comprenden un polvo grueso compuesto por partlculas con un tamano, por ejemplo, de 20-500 micrones, que se administra de manera similar al rape, es decir, mediante una inhalacion rapida a traves de los conductos nasales, manteniendo el recipiente que contiene el polvo cerca de la nariz. Las formulaciones apropiadas para una administracion mediante una atomizacion nasal o con gotas nasales, con llquidos como sustancias portadoras, abarcan las soluciones del ingrediente activo en agua o aceite.

25 Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para una administracion por inhalacion abarcan los polvos o las neblinas de partlculas finas, que pueden generarse con diversos tipos de dispensadores presurizados, con aerosoles, nebulizadores o insufladores.

Las formulaciones farmaceuticas adaptadas para una administracion parenteral abarcan soluciones inyectables esteriles acuosas o no acuosas que comprenden antioxidantes, amortiguadores, bacteriostaticos o solutos, merced a 30 los cuales la formulacion se torna isotonica con relacion a la sangre del receptor; asl como suspensiones esteriles acuosas o no acuosas, que pueden comprender medios de suspension y espesantes. Las formulaciones pueden administrarse con recipientes para una o varias dosis, por ejemplo, ampollas o viales sellados, y pueden almacenarse secas y congeladas (liofilizadas), de modo tal que solamente sea necesario agregar el llquido portador esteril, por ejemplo, agua para inyeccion, inmediatamente antes del uso. Segun esta receta, las soluciones y las 35 suspensiones inyectables pueden prepararse a partir de polvos, granulos o tabletas esteriles.

Evidentemente, ademas de los constituyentes mencionados con anterioridad, las formulaciones tambien pueden comprender otros agentes habituales en la tecnica para cada tipo de formulacion; por ejemplo, las formulaciones apropiadas para una administracion oral pueden contener saborizantes.

Una cantidad terapeuticamente eficaz de un compuesto depende de diversos factores, incluyendo, por ejemplo, la 40 edad y el peso del animal, la afeccion que se desea tratar y su gravedad, la naturaleza de la formulacion y el metodo de administracion, y en ultima instancia es determinada por el medico o el veterinario a cargo. Sin embargo, una cantidad eficaz de un compuesto segun la invencion generalmente esta en el rango de entre 0,1 y 100 mg/kg de peso corporal del receptor (mamlfero) por dla, tipicamente en el rango de entre 1 y 10 mg/kg de peso corporal por dla. Por ende, la cantidad real por dla para un mamlfero adulto de 70 kg suele ser de entre 70 y 700 mg, donde esta 45 cantidad puede administrarse como una sola dosis por dla, aunque generalmente se administra mediante dosis parciales (por ejemplo, dos, tres, cuatro, cinco o seis), de manera tal que la dosis diaria total es identica. Una cantidad eficaz de una sal, un solvato, un tautomero o un estereoisomero de un compuesto de la invencion puede determinarse como una fraccion de la cantidad eficaz del compuesto por si solo. Puede suponerse que las otras afecciones mencionadas con anterioridad podran ser tratadas con dosis similares.

50 El tratamiento anticanceroso definido en la presente puede aplicarse como una terapia exclusiva o puede abarcar, ademas de una composicion de la invencion, una cirugla o una radioterapia convencional.

El “tratamiento”, segun se lo emplea en la presente, hace referenda al alivio total o parcial de los slntomas asociados a un trastorno o una enfermedad, la demora o la interrupcion del progreso o el empeoramiento de estos slntomas o la prevention o la profilaxis de la enfermedad o el trastorno en un sujeto en riesgo de contraerlo.

El termino “cantidad eficaz”, con relation a un compuesto, puede hacer referencia a una cantidad apropiada para 5 aliviar total o parcialmente los slntomas asociados a un trastorno o una enfermedad, demorar o interrumpir el progreso o el empeoramiento de estos slntomas o prevenir o proveer profilaxis para una enfermedad descripta en la presente, tal como un cancer, en un sujeto en riesgo de contraerla.

El termino “cantidad terapeuticamente eficaz” o “terapeuticamente eficaz”, aplicado a una cantidad de un farmaco, denota que la cantidad es eficaz para tratar una enfermedad o un trastorno en un mamlfero. En el caso del cancer, 10 una cantidad terapeuticamente eficaz del farmaco puede disminuir la cantidad de celulas cancerosas; disminuir el tamano de un tumor; inhibir (es decir, demorar hasta un cierto punto, y preferiblemente interrumpir) la infiltration de celulas cancerosas en los organos perifericos; inhibir (es decir, demorar hasta un cierto punto, y preferiblemente interrumpir) la metastasis tumoral; inhibir hasta un cierto punto el crecimiento tumoral; y/o aliviar hasta un cierto punto uno o mas slntomas asociados a un cancer. Si un farmaco puede prevenir el crecimiento y/o destruir las 15 celulas cancerosas existentes, puede ser citostatico y/o citotoxico. Para la terapia del cancer, la eficacia puede evaluarse, por ejemplo, determinando el tiempo que transcurre hasta el progreso de la enfermedad (TTP) y/o la tasa de respuesta (RR).

USO

El hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3- 20 il)-benzonitrilo es apropiado como ingrediente farmaceutico activo para mamlferos, especialmente para seres humanos, en el tratamiento del carcinoma hepatocelular.

SECCION EXPERIMENTAL

Evaluation del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6- dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo en un modelo de xenoinjertos de HCC MHCC97H

25 Resumen: El 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo presenta una actividad mayor que el sorafenib en un modelo de xenoinjertos de hepatocarcinoma y en explantes primarios de HCC, todos los cuales se caracterizan por una expresion alta de c-Met y/o HGF. Mientras que el sorafenib indujo una perdida sustancial de peso corporal en la mayorla de los modelos de explantes de HCC (8/9) en todas las dosis evaluadas (50 mg/kg, 5 de 7 dlas, y 60 mg/kg, diariamente), el hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1- 30 metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo fue bien tolerado en todos, lo cual se manifesto como la ausencia de una perdida de peso sustancial en los animales.

En funcion de los resultados de los estudios precllnicos realizados, se destaco la participation de c-Met en el mantenimiento y el progreso del HCC y se concluyo que la inhibition de c-Met podrla ser util para tratar el HCC. La llnea celular MHCC97H fue establecida a partir de xenoinjertos subcutaneos de un modelo metastasico de HCC 35 humano en ratones desnudos (LCI-D20) y tiende a producir metastasis en los pulmones (Wu, F. S., Zheng, S. S., Wu, L. J., Teng, L. S., Ma, Z. M., Zhao, W. H., Wu, W., Liver Int., Junio de 2007; 27(5):700-7).

c-Met y HGF se expresan en las celulas MHCC97H, y desde ellas tambien se secreta la protelna fetal alfa (AFP), un antlgeno glicoproteico especlfico del feto que se usa como marcador tumoral en el tratamiento de los pacientes con HCC.

40 El tratamiento de tumores MHCC97H subcutaneos establecidos con un crecimiento rapido con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-pi peridin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-pi ridazin-3-il)-benzonitrilo inhibio completamente el crecimiento y las regresiones inducidos. En comparacion con el tratamiento de xenoinjertos subcutaneos MHCC97H con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6- oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, la administration de sorafenib solamente dio como resultado una actividad 45 antitumoral marginal, sin regresiones tumorales. Para evaluar el efecto de la inhibicion de c-Met bajo condiciones mas similares a las fisiologicas, se injertaron celulas MHCC97H ortotopicamente en el hlgado de ratones.

La administracion oral del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6- oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, iniciada una semana despues de la implantation de los fragmentos de tumores, tuvo una actividad antitumoral significativa e indujo una regresion completa en todos los ratones al final del 50 tratamiento el dla 35. Como criterio de valoracion secundario, se evaluo el peso corporal durante el estudio. La perdida de peso corporal en el grupo tratado con el vehlculo se observo desde el dla 18 en adelante, y probablemente fue causada por una mayor carga tumoral en el hlgado y/o por las metastasis pulmonares. En contraste, no se observaron perdidas de peso corporal entre los ratones tratados con el inhibidor de c-Met. Al final

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del perlodo de tratamiento, se evaluo el nivel de la AFP en la circulation. Mientras que en el grupo control se observo un nivel alto de la AFP, no se la detecto en los ratones tratados con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1- metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo.

Modelo de tumores subcutaneos MHCC97H - Comparacion entre monoterapias con hidrato de clorhidrato de 3-(1- {3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo o sorafenib

Metodo: Se sometieron ratones desnudos BalB/c macho (edad: 6-8 semanas) a una inyeccion subcutanea de celulas tumorales de hlgado humanas MHCC97H y se los distribuyo entre los grupos de tratamiento (diez animales por grupo) una vez establecidos los tumores (aproximadamente 500 mm3). Los grupos fueron tratados oralmente con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidi n-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-pi ridazin- 3-il)-benzonitrilo en diversas dosis (10, 30 o 100 mg/kg) durante 5 o 2 dlas o con sorafenib (50 mg/kg) diariamente. Al final del tratamiento, se calculo el valor de T/C y se observo si se hablan recuperado los tumores.

Resultados: Todas las dosis del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}- 6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo tuvieron una actividad antitumoral significativa: indujeron la regresion de los tumores con un valor de T/C de -57%, -93% y -93%, respectivamente, y demoraron el crecimiento de los tumores (lo cual se determino con el TGD, el tiempo transcurrido para alcanzar un volumen tumoral de 1000 mm3) 24, 53 y mas de 53 dlas, respectivamente. El tratamiento con sorafenib estuvo asociado a una actividad antitumoral menor en comparacion con MSC2156119J, con un valor de T/C de 27%.

Modelo ortotopico de tumores MHCC97H - Comparacion entre monoterapias con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3- [5-( 1 -metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo o sorafenib

Metodo: Se sometieron ratones desnudos BalB/c macho (edad: 7-8 semanas) a una implantation ortotopica de tumores MHCC97H (2-3 mm3) en el lobulo izquierdo del hlgado. Una semana despues de la implantacion intrahepatica, los animales se distribuyeron entre los grupos de tratamiento (diez animales por grupo). Los grupos fueron tratados oralmente con 100 mg/kg de hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)- pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo durante 5 dlas, con 2 dlas de descanso, durante 5 semanas. Al final del tratamiento, se determino el tamano y el peso de los tumores y el nivel de la AFP en el plasma y se evaluaron las metastasis pulmonares.

Resultados: El tratamiento con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}- 6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo tuvo una actividad antitumoral significativa, que dio como resultado la regresion del tumor primario (p<0,001) y la merma de las metastasis pulmonares (p<0,01). El nivel de la AFP en el plasma de los ratones analizados al final del tratamiento tambien se redujo significativamente (p<0,001). El tratamiento con hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6- dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo fue bien tolerado.

Evaluation del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6- dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo en explantes de HCC primarios

Resumen: Para estudiar el potencial terapeutico del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)- pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo en pacientes con hCc, se evaluo la actividad del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidi n-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-pi ridazin-3-il)- benzonitrilo en un estudio precllnico de la fase II (estudio PP2T) con explantes de HCC primarios humanos. El tratamiento de nueve explantes primarios subcutaneos establecidos dio como resultado 1/9 respuestas completas (CR), 2/9 enfermedades estables (SD) y una actividad marginal en un modelo adicional. La actividad del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo estuvo correlacionada positivamente con el estado de activation del receptor de c-Met expresado en estos modelos, lo cual se determino a partir del nivel de expresion de c-Met y HGF. Ninguno de los modelos con senales de serialization detectables de c-Met escasas o nulas (c-Met, nivel de fosfo c-Met y/o HGF) respondio al hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-( 1 -metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo como monoterapia, y no se observo una mejora en la actividad con una combination con sorafenib.

Metodo: Se sometieron ratones desnudos Balb/c (edad: 6-8 semanas) a un transplante subcutaneo con un fragmento de un tumor de HCC primario. Los animales se distribuyeron entre los grupos de tratamiento (12 animales por grupo) una vez establecidos los tumores. Los grupos fueron tratados oralmente con 100 mg/kg de hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo durante 5 de 7 dlas. Al final del tratamiento, se calculo el valor de T/C y se observo si se hablan recuperado los tumores.

Resultados: El hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6- dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo (100 mg/kg, 5 de 7 dlas) inhibio significativamente el crecimiento de 4 de los 9

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model os (LIM612, LIM801, LIM1098, LIM941; valor de T/C: entre 49% y -97%). El sorafenib (50 mg/kg, 5 de 7 dlas) presento actividad antitumoral en 7 de los 9 modelos (LIM348, LIM612, LIM941, LIM752, LIM1098, LIM801, LIM1081; valor de T/C: entre 45% y -8%). La actividad antitumoral del hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil- piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo fue superior a la de la monoterapia con sorafenib en Li M801 y LIM612, dos modelos con signos fuertes de senalizacion de c-Met. La combinacion del sorafenib con el hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]- bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo tuvo una actividad antitumoral superior a la de la monoterapia en 2 de los 9 modelos (LIM1098 y LIM752; valor de T/C: -32% y 4%, respectivamente).

Determinacion del nivel de las protelnas c-Met, fosfo c-Met y HGF en explantes primarios

Metodo: Se evaluo la expresion de c-Met, fosfo c-Met y HGFalfa mediante un analisis IHC en animales que alojaban explantes de tumores primarios y xenoinjertos humanos (tabla 1). Los xenoinjertos se extirparon, se seccionaron, se fijaron en una solucion de formaldehldo amortiguado al 4% durante 48 horas a temperatura ambiente y se embebieron en parafina. Se montaron secciones de 3 pm de tejido fijado con formaldehldo y embebido en parafina (FFPE) en portaobjetos cargados positivamente SuperFrost®Plus (Menzel-Glaser, Braunschweig, Alemania). La coloracion inmunohistoqulmica posterior a la desparafinacion de las secciones se realizo con un instrumento de coloracion Discovery™ o Discovery® XT (Ventana Medical Systems, Inc., Tucson, EEUU). Despues de la desparafinacion, las secciones se calentaron para recuperar los epltopos en un amortiguador de Tris-EDTA con un pH de 8. Las peroxidasas endogenas se bloquearon mediante una incubacion en peroxido de hidrogeno al 3% (parte del conjunto de elementos OmniMap™, Ventana Medical Systems). Las secciones se incubaron con los anticuerpos diluidos en PBS, y luego con el anticuerpo secundario, los pollmeros conjugados con HRP del conjunto de elementos OmniMap, a 37°C durante 16 minutos. La peroxidasa de rabano picante (HRP) cataliza la reaccion con el tetraclorhidrato de 3,3'-diaminobencidina (DAB)/H2O2 para producir un precipitado marron oscuro insoluble que puede visualizarse. Las secciones se contrastaron con hematoxilina. Los portaobjetos se lavaron con agua corriente, se deshidrataron y se cubrieron con cubreobjetos de vidrio en un medio de montaje permanente Entellan® Neu (VWR, Alemania). Los protocolos detallados del procedimiento, generados por los instrumentos de coloracion, se almacenaron en Merck Serono, Darmstadt, Alemania. Las coloraciones inmunohistoqulmicas se exploraron con un dispositivo MiraxSCAN (Zeiss), con una resolution x/y donde 1 plxel=0,23x0,23 pm2. Las exploraciones se analizaron con el programa Visiopharm Integrator System (VIS; version 4.0.3.0; Visiopharm A/S, Dinamarca). Se destaco el area de tejido viable y se evitaron las areas necroticas evidentes y el tejido conectivo. Para determinar la cantidad de antlgenos presentes, se calculo el area positiva para la coloracion como un porcentaje del area de tejido viable. La coloracion de los anticuerpos (AU) se calculo con la siguiente formula (en unidades arbitrarias): area positiva (%) * (255 - intensidad)/100% de color marron.

Resultados: Con el analisis inmunohistoqulmico (IHC), se detecto una expresion alta de c-Met y fosfo-Met y una expresion moderada de HGFalfa en algunos explantes de carcinoma humano hepatocelular (HCC). De 9 explantes de HCC, 8 fueron positivos para c-Met. Dos de los explantes (LIM1098 y LIM612) presentaron una expresion alta de pTyr 1234/1235 Met y pTyr 1349 Met. En 3 explantes de tumores adicionales, se observo una expresion entre baja y moderada de pTyr1349-Met. Debido a la coloracion alta del fondo con el sistema para detectar el anticuerpo contra el HGF, el clon B-3 (IgG de raton), los tumores no pudieron ser sometidos a un analisis de imagenes en varios explantes de xenoinjertos. Se aplico una calificacion semicuantitativa (C. Wilm) comparando la coloracion especlfica anti-HGF con la coloracion de una IgG control del mismo isotipo.

Calificaciones

0 = negativa

1 = baja

2 = media

3 = alta

Dos de los 9 explantes de HCC presentaron una expresion entre baja y moderada de HGF alfa. LIM612, con una expresion baja de HGF, fue altamente positivo para fosfo-Met. LIM801, con una expresion moderada de HGF, fue negativo para fosfo-Met.

Claims (2)

1. REIVINDICACIONES

   1. El 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo, o

   una sal y/o un solvato farmaceuticamente aceptable de este, para usar en el tratamiento del carcinoma hepatocelular (HCC).

   5 2. El hidrato de clorhidrato de 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-

   piridazin-3-il)-benzonitrilo, para usar en el tratamiento del carcinoma hepatocelular (HCC).
2. 3. El 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidi n-4-ilmetoxi)-pi rimidi n-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo

   segun la reivindicacion 1 o 2, donde el compuesto se administra en un paciente en una cantidad de entre 100 mg y 800 mg por dla.

   10 4. El 3-(1-{3-[5-(1-metil-piperidin-4-ilmetoxi)-pirimidin-2-il]-bencil}-6-oxo-1,6-dihidro-piridazin-3-il)-benzonitrilo

   segun la reivindicacion 1, 2 o 3, donde el compuesto se administra por via oral.