ES2631228T3 - Derivados de 1-[4-(3-fenoxi)-fenil]-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-il-amina como inhibidores de tirosina cinasa de Bruton (BTK) para el tratamiento de, por ejemplo, enfermedades proliferativas - Google Patents

Abstract

Un compuesto de acuerdo con la Fórmula 1: **Fórmula** en la que R se selecciona del grupo que consiste en: 1) hidrógeno, 2) alquilo, 3) heteroalquilo, 4) carbociclilo, 5) heterociclilo; en la que el alquilo, heteroalquilo, carbociclilo y heterociclilo pueden estar sustituidos adicionalmente; y X1 y X2 se seleccionan independientemente entre hidrógeno y halógeno; n es un número entero de 0 a 2; m es un número entero de 0 a 2; m' es un número entero de 0 a 2; W se selecciona independientemente entre: 1) halógeno, 2) aralquilo, 3) heteroaralquilo, 4) -OR3, 5) -OC(O)R4, 6) -OC(O)NR5R6, 7) -CH2O-R4, 8) -NR5R6 9) -NR2C(O)R4, 10) -NR2S(O)nR4, 11) -NR2C(O)NR5R6; y en la que el aralquilo y heteroaralquilo pueden estar sustituidos adicionalmente; R2 se selecciona entre hidrógeno o alquilo; R3 se selecciona entre alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, aralquilo o heteroaralquilo sustituido o sin sustituir; R4 se selecciona entre alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo o heteroarilo sustituido o sin sustituir; R5 y R6 se seleccionan independientemente entre hidrógeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo o R5 y R6 pueden condensarse para formar un sistema anular heterociclilo de 3 a 8 miembros.

Description

DESCRIPCION

Derivados de 1-[4-(3-fenoxi)-fenil]-1H-pirazolo[4,3-d]pirimidin-7-il-amina como inhibidores de tirosina cinasa de Bruton (BTK) para el tratamiento de, por ejemplo, enfermedades proliferativas.

CAMPO DE LA INVENClON

La presente invencion se refiere a una familia novedosa de inhibidores de protefnas cinasa. En particular, la presente invencion se refiere a inhibidores de los miembros de las familias de protefnas Tec y Src, mas particularmente Btk.

10

ANTECEDENTES DE LA INVENClON

Las protefnas cinasa son un gran grupo de protefnas de senalizacion intracelulares y transmembrana en las celulas eucariotas. Estas enzimas son responsables de la transferencia del fosfato terminal (gamma) del ATP a los residuos 15 de aminoacidos especfficos de las protefnas diana. La fosforilacion de residuos aminoacfdicos de tirosina, serina o treonina especfficos en las protefnas diana puede modular su actividad dando lugar a profundos cambios en la senalizacion celular y el metabolismo. Las protefnas cinasa se pueden encontrar en la membrana celular, citosol y los organulos tales como el nucleo y son responsables de la mediacion de multiples funciones celulares incluyendo el metabolismo, el crecimiento celular y la division, la senalizacion celular, la modulacion de la respuesta inmune, y la 20 apoptosis. Las tirosina cinasa receptoras son una gran familia de receptores de la superficie celular con actividad de protefna tirosina cinasa que responden a senales extracelulares y activan cascadas de senalizacion intracelular (Plowman et al. (1994) DN&P, 7(6): 334-339).

La activacion aberrante o expresion excesiva de diversas protefnas cinasas estan implicadas en el mecanismo de 25 multiples enfermedades y trastornos caracterizados por la proliferacion benigna y maligna, exceso de angiogenesis, asf como enfermedades resultantes de la activacion inapropiada del sistema inmune. Por lo tanto, se espera que los inhibidores de cinasas selectas o familias de cinasas sean utiles en el tratamiento cancer, enfermedades autoinmunes y afecciones inflamatorias, incluyendo, pero sin limitacion: tumores solidos, neoplasias hematologicas, artritis, enfermedad de injerto contra huesped, lupus eritematoso, psoriasis, colitis, ileitis, esclerosis multiple, uveitis, 30 vasculopatfa de la arteria coronaria, esclerosis sistemica, aterosclerosis, asma, rechazo de trasplante, alergia, dermatomiositis, penfigo y similares.

Los ejemplos de cinasas que pueden ser direccionadas para modular enfermedades incluyen tirosina cinasas receptoras tales como los miembros de las familias del receptor de factor de crecimiento derivado de plaquetas 35 (PDGFR) y del receptor del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGFR) y protefnas intracelulares, tales como miembros de las familias Syk, SRC y Tec de cinasas.

Las cinasas Tec son tirosina cinasas no receptoras predominantemente, pero no exclusivamente, expresadas en celulas de origen hematopoyetico (Bradshaw JM. Cell Signal. 2010, 22: 1175-84). La familia Tec incluye Tec, tirosina 40 cinasa de Bruton (Btk), cinasa de linfocitos T inducibles (Itk), cinasa de linfocito inactiva (Rlk/Txk), y cinasa expresada en medula osea (Bmx/Etk). Btk es una cinasa de la familia Tec que es importante en la senalizacion del receptor de linfocitos B. Btk se activa por las cinasas de la familia Src y fosforila PLC gamma que da lugar a efectos sobre la funcion y la supervivencia de los linfocitos B. Ademas, Btk es importante en la transduccion de senal en respuesta al reconocimiento del complejo inmune por macrofagos, mastocitos y neutrofilos. La inhibicion de Btk 45 tambien es importante en la supervivencia de las celulas de linfoma (Herman, SEM. Blood 2011, 117: 6287-6289) lo que sugiere que la inhibicion de Btk puede ser util en el tratamiento de linfomas. Como tales, los inhibidores de Btk y cinasas relacionadas son de gran interes como agentes antiinflamatorios, asf como agentes anticancerosos.

cSRC es el miembro prototipo de la familia SRC de tirosina cinasas que incluye Lyn, Fyn, Lck, Hck, Fgr, Blk, Syk, 50 Yrk, e Yes. cSRC esta implicado crfticamente en la senalizacion de las rutas involucradas en el cancer y a menudo se sobreexpresa en neoplasias humanas (Kim LC, Song L, Haura EB. (Kim LC, Song L, Haura EB. Nat Rev Clin Oncol. 2009 6(10): 587-9). El papel de cSRC en la adhesion celular, la migracion y la remodelacion osea implican fuertemente esta cinasa en el desarrollo y la progresion de las metastasis oseas. cSRC tambien esta implicado en la senalizacion aguas abajo de tirosina cinasas receptoras del factor de crecimiento y regula la progresion del ciclo 55 celular sugiriendo que la inhibicion de cSRC afectarfa a la proliferacion de las celulas cancerosas. Ademas, la inhibicion de los miembros de la familia SRC puede ser util en tratamientos disenados para modular la funcion inmunitaria. Los miembros de la familia SRC, incluyendo Lck, regulan la transduccion de la senal del receptor de linfocitos T que conduce a eventos de regulacion genica que dan como resultado la liberacion, supervivencia y proliferacion de citocinas. Por lo tanto, los inhibidores de Lck se han buscado intensamente como agentes

inmunosupresores con una potencial aplicacion en el rechazo de injertos y enfermedad autoinmune mediada por linfocitos T (Martin et al. Expert Opin Ther Pat. 2010, 20: 1573-93).

El documento WO 2008/121742 desvela compuestos inhibidores irreversibles de cinasa, metodos para sintetizar 5 dichos inhibidores irreversibles y metodos para utilizar dichos inhibidores irreversibles en el tratamiento de enfermedades.

El documento CA 2385769 desvela compuestos que son utiles como inhibidores de cinasa.

10 La inhibicion de cinasas utilizando inhibidores de moleculas pequenas ha conducido con exito a varios agentes terapeuticos aprobados utilizados en el tratamiento de afecciones humanas. En el presente documento, se desvela una nueva familia de inhibidores de cinasa. Ademas, se demuestra que las modificaciones en la sustitucion del compuesto pueden influir en la selectividad de las cinasas y, por lo tanto, en la funcion biologica de ese agente.

15 RESUMEN DE LA INVENCION

La presente invencion se refiere a una familia novedosa de inhibidores de cinasa. Se ha encontrado que los compuestos de esta clase tienen actividad inhibidora contra miembros de las familias de protefna cinasa Tec y Scr, mas particularmente Btk.

20

Un primer aspecto de la presente invencion se refiere a un compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1.

Se desvela en el presente documento un compuesto de Formula 1:

25

en la que

imagen1

R se selecciona del grupo que consiste en:

30 1) hidrogeno,

2) alquilo,

3) heteroalquilo,

4) carbociclilo,

5) heterociclilo;

35

en la que el alquilo, heteroalquilo, carbociclilo y heterociclilo pueden estar sustituidos adicionalmente.

Y es

40 E se selecciona entre oxfgeno,

Z se selecciona entre:

imagen2

imagen3

45 en la que Y-E-Z-W es

imagen4

1 2

X y X se seleccionan independientemente entre hidrogeno y halogeno; 5 n es un numero entero de 0 a 2;

m es un numero entero de 0 a 2;

m' es un numero entero de 0 a 2;

10

W se selecciona independientemente entre:

1) alquilo,

2) aralquilo,

15 3) heteroaralquilo,

4) -OR3,

5) -OC(O)R4

6) -OC(O)NR5R6,

7) -CH2O-R4,

20 8) -NR5R6,

9) -NR2C(O)R4

10) -NR2S(O)nR4,

11) -NR2C(O)NR5R6;

25 en la que el alquilo, aralquilo y heteroaralquilo pueden estar sustituidos adicionalmente;

2

R se selecciona entre hidrogeno o alquilo;

3

R se selecciona entre alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, 30 aralquilo o heteroaralquilo sustituido o sin sustituir;

R4 se selecciona entre alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo o heteroarilo sustituido o sin sustituir; y

35 R5 y R6 se seleccionan independientemente entre hidrOgeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo,

carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo o R5 y R6 pueden condensarse para formar un sistema anular heterociclilo de 3 a 8 miembros.

33

Las realizaciones preferidas incluyen compuestos de Formula 1 donde W se selecciona entre -OR y R se 40 selecciona entre aralquilo sustituido o sin sustituir, o heteroaralquilo sustituido o sin sustituir.

Se desvelan en el presente documento compuestos de FOrmula 1, donde W se selecciona del grupo que consiste en:

imagen5

Se desvelan en el presente documento compuestos de FOrmula 1, donde Y se selecciona del grupo que consiste en:

5

10

15

20

25

30

35

40

imagen6

Se desvelan en el presente documento compuestos de Formula 1, donde Z se selecciona del grupo que consiste en:

imagen7

Se desvelan en el presente documento compuestos de Formula 1, donde R se selecciona del grupo que consiste en:

imagen8

Se desvelan en el presente documento compuestos de Formula 1, donde W se selecciona del grupo que consiste en:

imagen9

Se desvelan en el presente documento compuestos de Formula 1, donde Z se selecciona del grupo que consiste en:

F

imagen10

Otro aspecto de la presente invenciOn proporciona una composiciOn farmaceutica que comprende una cantidad eficaz de un compuesto de Formula 1 y un vehfculo, diluyente o excipiente farmaceuticamente aceptable.

Se describe en el presente documento un uso del compuesto de Formula 1 como un inhibidor de protefna cinasa, mas particularmente, como un inhibidor de Btk.

Se describe en el presente documento un metodo para modular la funcion cinasa, comprendiendo el metodo poner en contacto una celula con un compuesto de la presente invencion en una cantidad suficiente para modular la actividad enzimatica de una cinasa o cinasas determinadas, tal como Btk, modulando asf la funcion cinasa.

Se describe en el presente documento un metodo para la modulacion de la funcion cinasa diana, comprendiendo el metodo a) poner en contacto una celula con un compuesto de la presente invencion en una cantidad suficiente para modular la funcion cinasa diana, b) modulando asf la actividad y senalizacion cinasa diana.

Se describe en el presente documento una sonda, comprendiendo la sonda un compuesto de Formula 1 etiquetado con un marcador detectable o un marcador de afinidad. En otras palabras, la sonda comprende un residuo de un compuesto de Formula 1 conjugado covalentemente con una etiqueta detectable. Dichas etiquetas detectables incluyen, pero no se limitan a, un resto fluorescente, un resto quimioluminiscente, un agente de contraste paramagnetico, un quelato de metal, un resto que contiene isotopos radiactivos, o biotina.

DESCRIPCION DETALLADA DE LAS REALIZACIONES PREFERIDAS

La presente invencion se refiere a inhibidores de cinasa novedosos. Se ha encontrado que estos compuestos tienen

actividad como inhibidores de protefnas cinasas, incluyendo miembros de tirosina cinasas Aurora, las familias de tirosina cinasa SRC (mas especfficamente Lck) y Tec (mas especfficamente Btk).

Los compuestos de la presente invencion pueden formularse en una composicion farmaceutica que comprende una 5 cantidad eficaz de un compuesto de Formula 1 con un diluyente o vehfculo farmaceuticamente aceptable. Por ejemplo, las composiciones farmaceuticas las composiciones farmaceuticas pueden estar en una forma farmaceutica convencional adecuada para la administracion oral (por ejemplo, comprimidos, capsulas, granulos, polvos y jarabes), administracion parenteral (por ejemplo, inyecciones (intravenosa, intramuscular, o subcutanea)), preparaciones para infusion en gotas, inhalacion, locion ocular, administracion topica (por ejemplo, unguento), o supositorios. 10 Independientemente de la ruta de administracion seleccionada, los compuestos se pueden formular en formas de dosificacion farmaceuticamente aceptables por metodos convencionales conocidos por los expertos en la tecnica.

La expresion "farmaceuticamente aceptable" se emplea en el presente documento para referirse a aquellos ligandos, materiales, composiciones y/o formas de dosificacion que son, dentro del alcance del criterio medico, adecuados 15 para su uso en contacto con los tejidos de seres humanos y animales sin excesiva toxicidad, irritacion, respuesta alergica, u otros problemas o complicaciones, acorde con una relacion razonable de beneficio/riesgo.

La expresion "vehfculo farmaceuticamente aceptable" como se usa en el presente documento, significa un material, composicion o vehfculo farmaceuticamente aceptable, tal como una carga lfquida o solida, diluyente, excipiente, 20 disolvente o material de encapsulacion. Cada vehfculo debe ser aceptable en el sentido de que sea compatible con los otros ingredientes de la formulacion, incluyendo el principio activo, y no perjudicial para el paciente. Algunos ejemplos de materiales que pueden servir como vehfculos farmaceuticamente aceptables incluyen: (1) azucares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; (2) almidones, tales como almidon de ir^z, almidon de patata, y p- ciclodextrina sustituida o no sustituida; (3) celulosa, y sus derivados, tales como carboximetilcelulosa sodica, 25 etilcelulosa y acetato de celulosa; (4) tragacanto en polvo; (5) malta; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorios; (9) aceites, tales como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodon, aceite de cartamo, aceite de sesamo, aceite de oliva, aceite de mafz y aceite de soja; (10) glicoles, tales como propilenglicol; (11) polioles, tales como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; (12) esteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; (13) agar; (14) agentes tamponantes, tales como hidroxido de magnesio e hidroxido 30 de aluminio; (15) acido algfnico; (16) agua libre de pirogenos; (17) solucion salina isotonica; (18) solucion de Ringer; (19) alcohol etflico; (20) soluciones tamponantes de fosfato; y (21) otras sustancias compatibles no toxicas empleadas en formulaciones farmaceuticas.

La expresion "sal farmaceuticamente aceptable" se refiere a las sales de adicion de acidos relativamente no toxicas, 35 inorganicas y organicas del compuesto o compuestos. Estas sales se pueden preparar in situ durante el aislamiento final y la purificacion del uno o mas compuestos, o haciendo reaccionar por separado uno o mas compuestos purificados en su forma de base libre con un acido organico o inorganico adecuado, y aislando la sal formada de este modo. Las sales representativas incluyen las sales bromhidrato, clorhidrato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, 40 succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato, laurilsulfonato, y sales de aminoacidos, y similares (vease, por ejemplo, Berge et al. (1977) pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66 1-19).

En otros casos, los compuestos de la presente invencion pueden contener uno o mas grupos funcionales acidos y, por lo tanto, son capaces de formar sales farmaceuticamente aceptables con bases farmaceuticamente aceptables. 45 La expresion "sales farmaceuticamente aceptables" en estos casos se refiere a las sales de adicion de bases inorganicas y organicas relativamente no toxicas de uno o mas compuestos. Estas sales pueden asimismo ser preparadas in situ durante el aislamiento final y la purificacion del uno o mas compuestos, o haciendo reaccionar por separado el uno o mas compuestos purificados en su forma de acido libre con una base adecuada, tal como el hidroxido, carbonato o bicarbonato de un cation metalico farmaceuticamente aceptable, con amoniaco, o con una 50 amina organica primaria, secundaria o terciaria farmaceuticamente aceptable. Las sales alcalinas o alcalinoterreas representativas incluyen las sales de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio, y sales de aluminio, y similares. Las aminas organicas representativas utiles para la formacion de sales de adicion de bases incluyen etilamina, dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares (vease, por ejemplo, Berge et al., anteriormente).

Como se usa en el presente documento, la expresion "etiqueta de afinidad" se refiere a un ligando o grupo, ya sea enlazado a un compuesto de la presente invencion o a un dominio de protefna cinasa, que permite que el conjugado sea extrafdo de una solucion.

El termino "alquilo" se refiere a grupos hidrocarburo saturados sustituidos o sin sustituir, incluyendo grupos alquilo de cadena lineal y alquilo de cadena ramificada, incluyendo grupos haloalquilo tales como trifluorometilo y 2,2,2- trifluoroetilo, etc. Los grupos alquilo representativos incluyen metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, t-butilo, isobutilo, sec-butilo, (ciclohexil)metilo, ciclopropilmetilo, n-pentilo, n-hexilo, n-heptilo, n-octilo, y similares. Las 5 expresiones "alquenilo" y "alquinilo" se refieren a grupos alifaticos insaturados sustituidos o sin sustituir analogos en longitud y posible sustitucion a los alquilos que se han descrito anteriormente, pero que contienen al menos un doble o triple enlace respectivamente. Los grupos alquenilo representativos incluyen vinilo, propen-2-ilo, crotilo, isopenten- 2-ilo, 1,3-butadien-2-ilo), 2,4-pentadienilo, y 1,4-pentadien-3-ilo. Los grupos alquinilo representativos incluyen etinilo, 1- y 3-propinilo y 3-butinilo. En ciertas realizaciones preferidas, los sustituyentes alquilo son grupos alquilo inferiores,

10 por ejemplo, que tienen de 1 a 6 atomos de carbono. De forma analoga, alquenilo y alquinilo se refieren preferiblemente a grupos alquenilo inferior y alquinilo, por ejemplo, que tienen de 2 a 6 atomos de carbono. Como se usa en el presente documento, "alquileno" se refiere a un grupo alquilo con dos valencias abiertas (en lugar de una unica valencia), tal como -(CH2)mo- y variantes sustituidas de las mismas.

15 El termino "alcoxi" se refiere a un grupo alquilo que tiene un oxfgeno unido al mismo. Los grupos alcoxi representativos incluyen metoxi, etoxi, propoxi, terc-butoxi y similares. Un "eter" es dos hidrocarburos unidos covalentemente por un oxfgeno. Por consiguiente, el sustituyente de un alquilo que hace de ese alquilo un eter es o se asemeja a un alcoxi.

20 El termino "alcoxialquilo" se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo alcoxi, formando de este modo un eter.

Los terminos "amida" y "amido" se reconocen en la tecnica como un carbonilo sustituido con amino e incluye un resto que puede representarse por la formula general:

O

imagen11

en la que R9, R10 son como se han definido anteriormente. Las realizaciones preferidas de la amida no incluiran imidas, que pueden ser inestables.

30 Las expresiones "aminas" y "amino" se reconocen en la tecnica y se refieren tanto a aminas sin sustituir como sustituidas y sales de las mismas, por ejemplo, un resto que puede representarse por las formulas generales:

R9 R9

/ 1+ .A

—N 0 — N-R10

R10 R10'

9 10 10'

en la que cada uno de R , R y R representa independientemente un hidrogeno, un alquilo, un alquenilo, -(CH2V- 35 R8, o R9 y R10 tomados junto con el atomo de N al que estan unidos completan un heterociclo que tiene de 4 a 8 atomos en la estructura anular; R8 representa un arilo, un cicloalquilo, un cicloalquenilo, un heterociclilo o un policiclilo; y p es cero o un numero entero de 1 a 8. En realizaciones preferidas, unicamente uno de R9 o R10 puede ser un carbonilo, por ejemplo, R9, R10, y el nitrogeno juntos no forman una imida. En realizaciones incluso mas preferidas, cada uno de R9 y R10 (y opcionalmente R10) representa independientemente un hidrogeno, un alquilo, un 40 alquenilo, o -(CH2V-R8. En ciertas realizaciones, el grupo amino es basico, lo que significa que la forma protonada tiene una pKa >7,00.

El termino "aralquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo arilo, por ejemplo -(CH2)p-Ar.

45

El termino "heteroaralquilo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo alquilo sustituido con un grupo heteroarilo, por ejemplo, -(CH2)p-Het.

El termino "arilo", como se usa en el presente documento, incluye grupos aromaticos de un unico anillo sustituidos o 50 sin sustituir de 5, 6 y 7 miembros en los que cada atomo del anillo es carbono. El termino "arilo" tambien incluye sistemas de anillo policfclicos que tienen dos o mas anillos cfclicos en los que dos o mas carbonos son comunes a dos anillos adyacentes en los que al menos uno de los anillos es aromatico, por ejemplo, los otros anillos cfclicos

pueden ser cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos, heteroarilos, y/o heterociclilos. Los grupos arilo incluyen benceno, naftaleno, fenantreno, fenol, anilina, antraceno, y fenantreno.

Las expresiones "carbociclo" y "carbociclilo", como se usa en el presente documento, se refieren a un anillo no 5 aromatico sustituido o no sustituido en el que cada atomo del anillo es carbono. Las expresiones "carbociclo" y "carbociclilo" tambien incluyen sistemas de anillo policfclicos que tienen dos o mas anillos cfclicos en los que dos o mas carbonos son comunes a dos anillos adyacentes en los que al menos uno de los anillos es carbocfclico, por ejemplo, los otros anillos cfclicos pueden ser cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos, heteroarilos, y/o heterociclilos. Los grupos carbocfclicos representativos incluyen ciclopentilo, ciclohexilo, 1-ciclohexenilo, y 310 ciclohexen-1-ilo, cicloheptilo.

El termino "carbonilo" es reconocido en la tecnica e incluye tales restos como pueden ser representados por la formula general:

O

_Xx-R"

15

en la que X es un enlace o representa un oxfgeno o un azufre, y R11 representa un hidrogeno, un alquilo, un alquenilo, -(CH2)p-R8 o una sal farmaceuticamente aceptable. Cuando X es oxfgeno y R11 no es hidrogeno, la formula representa un "ester". Cuando X es oxfgeno, y R11 es hidrogeno, la formula representa un "acido carboxflico".

20

El termino "heteroarilo" incluye estructuras anulares aromaticas sustituidas o sin sustituir de 5 a 7 miembros, mas preferiblemente anillos de 5 a 6 miembros, cuyas estructuras de anillo incluyen de uno a cuatro heteroatomos. El termino "heteroarilo" tambien incluye sistemas de anillo policfclicos que tienen dos o mas anillos cfclicos en los que dos o mas carbonos son comunes a dos anillos adyacentes en los que al menos uno de los anillos es 25 heteroaromatico, por ejemplo, los otros anillos cfclicos pueden ser cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos, heteroarilos, y/o heterociclilos. Los grupos heteroarilo incluyen, por ejemplo, pirrol, furano, tiofeno, imidazol, isoxazol, oxazol, tiazol, triazol, pirazol, piridina, pirazina, piridazina y pirimidina, y similares.

El termino "heteroatomo", como se usa en el presente documento, se refiere a un atomo de cualquier elemento 30 distinto de carbono o hidrogeno. Los heteroatomos preferidos son nitrogeno, oxfgeno y azufre.

Las expresiones "heterociclilo" o "grupo heterocfclico" se refieren a estructuras anulares sustituidas o sin sustituir no aromaticas de 3 a 10 miembros, mas preferiblemente anillos de 3 a 7 miembros, cuyas estructuras anulares incluyen de uno a cuatro heteroatomos. El termino "heterociclilo" o la expresion "grupo heterocfclico" tambien incluyen 35 sistemas de anillo policfclicos que tienen dos o mas anillos cfclicos en los que dos o mas carbonos son comunes a dos anillos adyacentes en los que al menos uno de los anillos es heterocfclico, por ejemplo, los otros anillos cfclicos pueden ser cicloalquilos, cicloalquenilos, cicloalquinilos, arilos, heteroarilos, y/o heterociclilos. Los grupos heterociclilo incluyen, por ejemplo, tetrahidrofurano, tetrahidropirano, piperidina, piperazina, pirrolidina, morfolina, lactonas, y lactamas.

40

El termino "hidrocarburo", como se usa en el presente documento, se refiere a un grupo que esta unido a traves de un atomo de carbono que no tiene un sustituyente =O o =S, y tfpicamente tiene al menos un enlace carbono- hidrogeno y una cadena principal de carbono principalmente, pero puede incluir opcionalmente heteroatomos. Por lo tanto, grupos como metilo, etoxietilo, 2-piridilo, y trifluorometilo se consideran como hidrocarbilo para los fines de 45 esta solicitud, pero los sustituyentes tales como acetilo (que tiene un sustituyente =O en el carbono de union) y etoxi (que esta unido a traves de oxfgeno, no carbono) no lo son. Los grupos hidrocarbilo incluyen, pero sin limitacion arilo, heteroarilo, carbociclo, heterociclo, alquilo, alquenilo, alquinilo, y combinaciones de los mismos.

Las expresiones "policiclilo" o "policfclico" se refieren a dos o mas anillos (por ejemplo, cicloalquilos, cicloalquenilos, 50 cicloalquinilos, arilos, heteroarilos, y/o heterociclilos) en los que dos o mas carbonos son comunes a dos anillos adyacentes, por ejemplo, los anillos son "anillos condensados". Cada uno de los anillos del policiclo puede estar sustituido o sin sustituir.

Como se usa en el presente documento, el termino "sonda" se refiere a un compuesto de la invencion que esta 55 marcado, ya sea con un marcador detectable o una etiqueta de afinidad, y que es capaz de unirse, ya sea covalentemente o no covalentemente, a un dominio de protefna cinasa. Cuando por ejemplo la sonda se une no covalentemente, puede desplazarse por un compuesto de ensayo. Cuando por ejemplo la sonda no se une

covalentemente, se puede usar para formar aductos entrelazados que pueden ser cuantificados e inhibidos por medio de un compuesto de ensayo.

El termino "sustituido" se refiere a restos que tienen sustituyentes que reemplazan un hidrogeno en uno o mas 5 carbonos de la cadena principal. Se entendera que "sustitucion" o "sustituido con" incluye la condicion implfcita de que tal sustitucion esta de acuerdo con la Valencia permitida del atomo sustituido y el sustituyente, y que los resultados de sustitucion en un compuesto estable, por ejemplo, que no sufre transformacion espontaneamente tal como por transposicion, ciclacion, eliminacion, etc. Como se usa en el presente documento, el termino "sustituido" se contempla para incluir todos los sustituyentes permisibles de compuestos organicos. En un amplio aspecto, los 10 sustituyentes permisibles incluyen sustituyentes acfclicos y cfclicos, ramificados y no ramificados, carbocfclicos y heterocfclicos, aromaticos, no aromaticos de compuestos organicos. Los sustituyentes permisibles pueden ser uno o mas y el mismo o diferentes para compuestos organicos apropiados. Para los propositos de esta invencion, los heteroatomos tales como nitrogeno pueden tener sustituyentes de hidrogeno y/o cualesquiera sustituyentes permisibles de compuestos organicos descritos en el presente documento que satisfacen las valencias de los 15 heteroatomos. Los sustituyentes pueden incluir, por ejemplo, a halogeno, un hidroxilo, un carbonilo (tal como un carboxilo, un alcoxicarbonilo, un formilo, o un acilo), un tiocarbonilo (tal como un tioester, un tioacetato, o un tioformiato), un alcoxilo, un fosforilo, un fosfato, un fosfonato, un fosfinato, un amino, un amido, una amidina, una imina, un ciano, un nitro, un azido, un sulfhidrilo, un alquiltio, un sulfato, un sulfonato, un sulfamoflo, un sulfonamido, un sulfonilo, un heterociclilo, un aralquilo, o un resto aromatico o heteroaromatico. Se entendera por los expertos en 20 la tecnica que los restos sustituidos en la cadena de hidrocarburo pueden ser sustituidos, si es apropiado.

Los compuestos de la invencion tambien incluyen todos isotopos de atomos presentes en los intermedios y/o compuestos finales. Los isotopos incluyen los atomos que tienen el mismo numero atomico pero diferente numero masico. Por ejemplo, los isotopos de hidrogeno incluyen deuterio y tritio.

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Metodos sinteticos generales

La siguiente seccion describe uno o mas metodos sinteticos generales que pueden ser utiles en la preparacion de compuestos de la presente invencion.

30

imagen12

(X2)m

(X2)m

MeO,C CN

™(X2JU ,N,.X

NaNO

N-j .Cr

N R

HCI

1 -IV

MeO^C

X=l. Br

^(X2W .N. A

Base

NaOH

(X>

(X2)m acetato de

Base, ligando

formamidma

cata izador

1 \_N.

m (X")

1 -ix

1-VIII

1 VII

Esquema 1a

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imagen13

Los siguientes metodos sinteticos pretenden ser representatives de la qufmica usada para preparar compuestos de Formula 1 y no pretenden ser limitantes.

10 Sfntesis del intermedio 2-c:

imagen14

Etapa 1: Intermedio 2-b

15

A una solucion de ciclopentanona (12,73 g, 151,0 mmol) en benceno seco (15,2 ml) se le anadieron 2-cianoacetato de metilo (15,0 g, 151,0 mmol), acetato amonico (1,52 g, 19,68 mmol) y acido acetico (3,04 ml). La mezcla de reaccion se calento a reflujo en un aparato Dean-Stark durante 12 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron al vacfo. Al residuo se le anadieron agua y acetato de etilo, la capa organica se 20 separo, se lavo con agua, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 2-b en forma de un aceite de color pardo.

A una solucion del intermedio 2-b (25,0 g, 151,0 mmol) en metanol, agitada en una atmosfera de nitrogeno, se le anadio Pd al 10 %/C (3,22 g, 1,51 mmol). La mezcla de reaccion se purgo con H2, se agito durante una noche en 1 5 atm de hidrogeno y se filtro a traves de celite. El filtrado se concentro al vacfo para proporcionar el intermedio 2-c en forma de un aceite de color amarillo.

Sfntesis del intermedio 3-d:

10

imagen15

Etapa 1: Intermedio 3-b

A una solucion de resorcinol (11,83 g, 107 mmol) en DMF (50 ml) enfriada a 0 °C se le anadieron imidazol (15,36 g, 15 226 mmol) y terc-butilclorodimetilsilano (17,0 g, 113 mmol). La reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo; la capa organica se separo, se lavo 3 veces con una solucion saturada acuosa de cloruro de amonio y salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 3-b en forma de un aceite incoloro.

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Etapa 2: Intermedio 3-c

A una solucion del intermedio 3-b (1,94 g, 8,68 mmol) y tiazol-5-ilmetanol (1,0 g, 8,68 mmol) en THF (20 ml) se le anadieron secuencialmente trifenilfosfina (3,42 g, 13,0 mmol) y DIAD (2,52 ml, 13,0 mmol) y despues la reaccion se 25 agito a temperatura ambiente durante una noche. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 3-c en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 3: Intermedio 3-d

30 A una solucion del intermedio 3-c (1,6 g, 4,98 mmol) en THF (20 ml) se le anadio una solucion 1,0 M de TBAF en THF (5,47 ml, 5,47 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. Al residuo se le anadio eter dietflico; se formo un precipitado y se recogio por filtracion para proporcionar el intermedio 3-d en forma de un solido de color blanco.

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imagen16

5 Etapa 1: Intermedio 4-b

A una solucion de 4-yodoanilina (13,14 g, 60,0 mmol) en HCl 1 N (150 ml) se le anadio gota a gota una solucion acuosa 1,0 M de nitrito sodico (60,0 ml, 60,0 mmol) a temperatura ambiente, la mezcla se agito durante 1 hora y despues se anadio gota a gota a una solucion enfriada con hielo del intermedio 2-c (5,0 g, 29,9 mmol) en etanol 10 (41,7 ml) y agua (556 ml). El pH se mantuvo a 7 anadiendo en porciones acetato sodico. La mezcla se agito a 0 °C durante 3 horas y despues a temperatura ambiente tras la finalizacion. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 4-b en forma de un aceite de color beige.

15 Etapa 2: Intermedio 4-c

A una solucion del intermedio 4-b (7,0 g, 17,6 mmol) en THF (176 ml) enfriada a 0 °C se le anadio NaOH acuoso 10 N (44,1 ml, 441,0 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con acido 20 cftrico al 10 %, NaHCO3 acuoso saturado y salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 4-c en forma de un solido de color amarillo.

Etapa 3: Intermedio 4-d

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A una solucion del intermedio 4-c (2,1 g, 6,19 mmol) y bromoacetonitrilo (474 pl, 6,81 mmol) en terc-butanol (31,0 ml) se le anadio una solucion 1,0 M de terc-butoxido sodico en terc-butanol (6,19 ml, 6,19 mmol). Despues, la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se 30 concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 4-d en forma de un solido de color amarillo.

Sfntesis del Compuesto 1:

imagen17

5 Etapa 1: Intermedio 2-I

A una solucion del intermedio 3-d (125 mg, 0,60 mmol) y el intermedio 4-d (200 mg, 0,60 mmol) en 1,4-dioxano se le anadieron secuencialmente N,N-dimetilglicina (37 mg, 0,36 mmol), carbonato de cesio (393 mg, 1,20 mmol) y yoduro de cobre (I) (23 mg, 0,12 mmol). La reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se 10 enfrio a temperatura ambiente. Se anadieron agua y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 5-a en forma de un solido de color pardo.

Etapa 11: Compuesto 1

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A una solucion del intermedio 5-a (150 mg, 0,32 mmol) en EtOH (3,0 ml) se le anadio acetato de formamidina (265 mg, 2,54 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante 3 horas, y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 12HCl en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) 20 M+H = 485,2

Sfntesis del intermedio 6-c:

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imagen18

Etapa 1: Intermedio 6-b

A una solucion del intermedio 6-a (5,05 g, 50,5 mmol) en benceno seco (5,0 ml) se le anadieron 2-cianoacetato de metilo (5,0 g, 50,5 mmol), acetato amonico (506 mg, 6,56 mmol) y acido acetico (1,0 ml). La mezcla de reaccion se 30 calento a reflujo, usando un aparato Dean-Stark, durante 12 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron al vacfo. Al residuo se le anadieron agua y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con agua, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 6-b en forma de un aceite de color pardo.

35 Etapa 2: Intermedio 6-c

A una solucion del intermedio 6-b (9,0 g, 49,7 mmol) en metanol, en una atmosfera de nitrogeno, se le anadio Pd al 10 %/C (1,06 g, 0,49 mmol). La mezcla de reaccion se purgo con H2 y se agito durante una noche en 1 atm de hidrogeno. Despues, la reaccion se filtro a traves de celite y el filtrado se concentro a presion reducida para 40 proporcionar el intermedio 6-c en forma de un aceite de color amarillo.

imagen19

5 Etapa 1: Intermedio 7-b

Se disolvieron cloroacetato de etilo (50,0 g, 0,41 mol) y formiato de etilo (30,2 g, 0,41 mol) en tolueno anhidro (500 ml) y se enfrio a 0 °C. Se anadio en porciones etoxido sodico (35,1 g, 0,49 mol). La mezcla de reaccion se agito a 0 °C durante 5 horas y despues a temperatura ambiente durante una noche. La mezcla de reaccion se inactivo con 10 agua (250 ml) y se lavo dos veces con eter dietflico. La capa acuosa se enfrio a 0 °C y se acidifico a pH 4-5 usando HCl acuoso 1 N. La capa acuosa se extrajo dos veces con eter dietflico y los extractos organicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida para proporcionar el intermedio 7-b en forma de un aceite de color beige.

15 Etapa 2: Intermedio 7-c

A una solucion de 2-cloro-3-oxopropanoato de etilo, 7-b (34,7 g, 230 mmol) en tolueno (250 ml) se le anadio tioacetamida (26,0 g, 346,0 mmol). La reaccion se agito a 90 °C durante una noche, despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con agua (300 ml) y despues se neutralizo a pH = 7 con NaHCO3 acuoso saturado. Se anadio 20 acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 7-c en forma de un aceite de color beige.

Etapa 3: Intermedio 7-d

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A una solucion del intermedio 7-c (22,2 g, 130,0 mmol) en THF (430 ml) enfriada a 0 °C se le anadio una solucion 1,0 M de LiAlH4 en THF (91,0 ml, 91,0 mmol). La solucion se calento lentamente a temperatura ambiente y se agito durante 2 horas. Se anadio lentamente agua (3,5 ml) seguido de 3,5 ml de NaOH al 15 % (3,5 ml) y agua (10,5 ml) y la mezcla se agito durante 1 hora. La reaccion se filtro a traves de celite y el filtrado se recogio. Los volatiles se 30 retiraron al vacfo para proporcionar el intermedio 7-d en forma de un aceite de color amarillo.

Sfntesis del intermedio 8-e:

imagen20

A una solucion de 1-fluoro-3,5-dimetoxibenceno (12,5 g, 80,0 mmol) en diclorometano (80 ml), enfriada a 0 °C, se le anadio una solucion 1,0 M de BBr3 en diclorometano (200 ml, 200 mmol), gota a gota durante un periodo de 30 5 minutos. La reaccion se agito durante 1 hora a 0 °C, despues se calento lentamente a temperatura ambiente y se agito durante 18 horas. La reaccion se enfrio a 0 °C y se interrumpio mediante la adicion lenta de MeOH y agua. Despues de agitar a temperatura ambiente durante 1 hora la mezcla se filtro y los volatiles se retiraron al vacfo. El solido se lavo dos veces con acetato de etilo; el filtrado se concentro al vacfo para proporcionar el intermedio 8-b en forma de un solido de color naranja.

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Etapa 2: Intermedio 8-c

A una solucion del intermedio 8-b (10,25 g, 80,0 mmol) en DMF (50 ml), enfriada a 0 °C, se le anadieron imidazol (5,99 g, 88,0 mmol) y terc-butilclorodimetilsilano (13,27 g, 88,0 mmol). Despues, la reaccion se agito a temperatura 15 ambiente durante una noche. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo; la capa organica se separo, se lavo 3 veces con una solucion saturada acuosa de cloruro de amonio y salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 8-c en forma de un aceite de color amarillo.

20 Etapa 3: Intermedio 8-d

A una solucion del intermedio 8-c (1,0 g, 105,0 mmol) y el intermedio 7-d (352 mg, 2,73 mmol) en THF (20 ml) se le anadieron secuencialmente trifenilfosfina (1,07 g, 4,1 mmol) y DIAD (796 pl, 4,1 mmol) a temperatura ambiente. Despues, la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Los volatiles se retiraron a presion reducida. 25 La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 8-d en forma de un aceite de color amarillo.

Etapa 4: Intermedio 8-e

30 A una solucion del intermedio 8-d (750 mg, 1,57 mmol) en THF (20 ml) se le anadio una solucion 1,0 M de TBAF en THF (1,72 ml, 1,72 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. Al residuo se le anadio eter dietflico; se formo un precipitado y se recogio por filtracion para proporcionar el intermedio 8-e en forma de un solido de color blanco.

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Sfntesis del intermedio 9-d:

imagen21

40 Etapa 1: Intermedio 9-b

A una solucion de 4-bromoanilina (8,43 g, 49,0 mmol) en HCl acuoso 1 N (123 ml) se le anadio gota a gota nitrito sodico acuoso 1,0 M (49,0 ml g, 49,0 mmol) a temperatura ambiente. La mezcla se agito durante 1 hora y despues se anadio gota a gota a una solucion enfriada con hielo del intermedio 6-c (4,5 g, 24,56 mmol) en etanol (34,30 ml) y 45 agua (457 ml). El pH se mantuvo a 7 anadiendo en porciones acetato sodico. La mezcla se agito a 0 °C durante 3 horas y despues a temperatura ambiente hasta la finalizacion. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 9-b en forma de un aceite de color beige.

A una solucion del intermedio 9-b (10,0 g, 27,3 mmol) en THF (273 ml), enfriada a 0 °C, se le anadio NaOH acuoso 10 N (68,3 ml, 683,0 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Se anadieron una 5 solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con acido cftrico al 10 %, NaHCO3 acuoso saturado y salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 9-c en forma de un solido de color amarillo.

10 Etapa 3: Intermedio 9-d

A una solucion del intermedio 9-c (4,0 g, 12,98 mmol) y bromoacetonitrilo (995 pl, 14,28 mmol) en terc-butanol (64,9 ml), enfriada a 0 °C se le anadio una solucion 1,0 M de terc-butoxido potasico en terc-butanol (27,3 ml, 27,3 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 2 horas. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro 15 de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 9-d en forma de un solido de color beige.

Sfntesis del Compuesto 3:

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imagen22

Etapa 1: Intermedio 10-a

25 A una solucion del intermedio 8-e (138 mg, 0,57 mmol) y el intermedio 9-d (200 mg, 0,57 mmol) en 1,4-dioxano se le anadieron secuencialmente N,N-dimetilglicina (36 mg, 0,35 mmol), carbonato de cesio (375 mg, 1,15 mmol) y yoduro de cobre (I) (22 mg, 0,11 mmol). La reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente. Se anadieron agua y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 10-a en 30 forma de un solido de color pardo.

Etapa 13: Compuesto 3

A una solucion del intermedio 10-a (291 mg, 0,57 mmol) en EtOH (6,0 ml) se le anadio acetato de formamidina (479 35 mg, 4,60 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 3,2HCl en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) M+H = 533,1

imagen23

5 Etapa 1: Intermedio 11-b

A una solucion de 3,5-difluorofenol (15,0 g, 115 mmol) en acetona (200 ml) se le anadieron K2CO3 (23,90 g, 173 mmol) y clorometil metil eter (15,85 g, 127 mmol). Despues, la reaccion se agito a temperatura ambiente durante una noche y se filtro. El filtrado se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 11-b en forma de un 10 aceite incoloro.

Etapa 2: Intermedio 11-c

A una solucion de (1-metil-1H-imidazol-5-il) metanol (3,1 g, 27,6 mmol) y el intermedio 11-b (4,01 g, 23,04 mmol) en 15 tolueno (25,0 ml) y DMPU (25,0 ml) se le anadio 2-metilpropan-2-olato sodico (4,43 g, 46,1 mmol). La reaccion se agito durante una noche a 80 °C y despues se enfrio a temperatura ambiente. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo dos veces con una solucion saturada acuosa de cloruro de amonio y salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro al vacfo. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 11-c en forma de un aceite de color 20 beige.

Etapa 3: Intermedio 11-d

A una solucion del intermedio 11-c (3,2 g, 12,02 mmol) en MeOH (25,0 ml) se le anadio HCl 4 N en 1,4-dioxano 25 (10,95 ml, 361,0 mmol) y la reaccion se agito durante una noche a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron al vacfo. Al residuo se le anadio eter dietflico; se formo un precipitado y se recogio por filtracion para proporcionar el intermedio 11-dHCl en forma de un solido de color blanco.

Sfntesis del Compuesto 4:

30

imagen24

Etapa 1: Intermedio 12-a

35 A una solucion del intermedio 11-d (120 mg, 0,54 mmol) y el intermedio 9-d (187 mg, 0,54 mmol) en 1,4-dioxano se le anadieron secuencialmente N,N-dimetilglicina (167 mg, 1,62 mmol), carbonato de cesio (528 mg, 1,62 mmol) y yoduro de cobre (I) (103 mg, 0,54 mmol). La reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y

despues se enfrio a temperatura ambiente. Se anadio acetato de etilo, y la reaccion se filtro sobre celite. Se anadio agua al filtrado, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 12-a en forma de un solido de color pardo.

5 Etapa 2: Compuesto 4

A una solucion del intermedio 12-a (250 mg, 0,51 mmol) en EtOH (6,0 ml) se le anadio acetato de formamidina (426 mg, 4,09 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente 10 de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 4 2HCl en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) M+H = 516,2

Sfntesis del intermedio 13-c:

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Etapa 1: Intermedio 13-b

A una solucion del intermedio 8-c (1,43 g, 5,89 mmol) y (2-metiloxazol-5-il)metanol (1,0 g, 8,84 mmol) en THF (20 ml) 20 se le anadieron secuencialmente trifenilfosfina (2,32 g, 8,84 mmol) y DIAD (1,72 ml, 8,84 mmol) a temperatura ambiente. Despues, la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 13-b en forma de un aceite de color amarillo.

imagen25

25 Etapa 2: Intermedio 13-c

A una solucion del intermedio 13-b (1,10 g, 3,26 mmol) en THF (32 ml) se le anadio una solucion 1,0 M de TBAF en THF (3,59 ml, 3,59 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco 30 sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 13-c en forma de un solido de color blanco.

Sfntesis del Compuesto 5:

imagen26

A una solucion del intermedio 13-c (129 mg, 0,57 mmol) y el intermedio 9-d (200 mg, 0,57 mmol) en 1,4-dioxano se le anadieron secuencialmente N,N-dimetilglicina (36 mg, 0,34 mmol), carbonato de cesio (375 mg, 1,15 mmol) y 5 yoduro de cobre (I) (22 mg, 0,11 mmol). La reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente. Se anadio acetato de etilo, y la reaccion se filtro sobre celite. Se anadio agua al filtrado, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 14-a en forma de un solido de color pardo.

10 Etapa 2: Compuesto 5

A una solucion del intermedio 14-a (384 mg, 0,78 mmol) en EtOH (7,8 ml) se le anadio acetato de formamidina (653 mg, 6,28 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente 15 de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 5 2HCl en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) M+H = 517,2

Sfntesis del intermedio 15-b:

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imagen27

A una solucion de 1-bromo-3-fluoro-5-yodobenceno 15-a (7,52 g, 25,0 mmol) en 1,4-dioxano (12,50 ml) se le anadieron (2-metiltiazol-5-il)metanol 8-e (3,55 g, 27,5 mmol), 1,10-fenantrolina (901 mg, 5,0 mmol), yoduro de cobre (I) (476 mg, 2,50 mmol) y carbonato de cesio (11,40 g, 35,0 mmol). La reaccion se agito a 110 °C durante 2 dfas y 25 despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Al filtrado se le anadio una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio, la capa organica se separo, y la fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 15-b en forma de un aceite de color beige.

30

Sfntesis del intermedio 16-b:

imagen28

35 A una solucion de 1-bromo-3-fluoro-5-yodobenceno 15-a (5,0 g, 16,62 mmol) en tolueno (8,3 ml) se le anadieron (6-

metilpiridin-3-il) metanol 16-a (2,25 g, 18,28 mmol), 1,10-fenantrolina (599 mg, 3,32 mmol), yoduro de cobre (I) (316 mg, 1,66 mmol) y carbonato de cesio (7,58 g, 23,26 mmol). La reaccion se agito a 110 °C durante 2 dfas y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Al filtrado se le anadio una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio, la capa organica se separo, y la fase acuosa se extrajo dos veces 5 con acetato de etilo. Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 16-b en forma de un solido de color beige.

Sfntesis del intermedio 17-b:

10

imagen29

A una solucion de 1-bromo-3-fluoro-5-yodobenceno 15-a (5,0 g, 16,62 mmol) en tolueno (8,3 ml) se le anadieron (2- metilpirimidin-5-il)metanol (2,26 g, 18,28 mmol), 1,10-fenantrolina (599 mg, 3,32 mmol), yoduro de cobre (I) (316 mg, 15 1,66 mmol) y carbonato de cesio (7,58 g, 23,26 mmol). La reaccion se agito a 110 °C durante 2 dfas y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Al filtrado se le anadio una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio, la capa organica se separo, y la fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el 20 intermedio 17-b en forma de un solido de color beige.

Sfntesis del intermedio 18-b:

imagen30

25

A una solucion de 2-cianoacetato de etilo 18-a (11,42 g, 101,0 mmol) en acetona (153,0 ml) se le anadieron carbonato potasico (20,94 g, 152,0 mmol) y 2-yodopropano (29,2 g, 172,0 mmol). La mezcla de reaccion se calento a reflujo durante 2 dfas, se enfrio a temperatura ambiente y se diluyo en una mezcla 1:1 de acetato de etilo/hexanos. Se anadio agua, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a 30 presion reducida para proporcionar el intermedio 18-b en forma de un aceite incoloro.

imagen31

5 Etapa 1: Intermedio 19-b

A una solucion de clorhidrato de 4-(benciloxi)anilina 19-a (14,3 g, 60,8 mmol) en HCl 1 N (51,4 ml) se le anadio gota a gota una solucion 1,0 M de nitrito sodico en agua (76,0 ml, 76,0 mmol) a temperatura ambiente, la mezcla se agito durante 1 hora, se filtro y despues se anadio gota a gota a una solucion enfriada con hielo del intermedio 6-c (10,0 g, 10 50,7 mmol) en etanol (13,7 ml) y agua (188,0 ml). El PH se mantuvo a 7 anadiendo en porciones acetato potasico. La mezcla se agito a 0 °C durante 3 horas y a temperatura ambiente durante una noche. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 19-b en forma de un aceite de color beige.

15

Etapa 2: Intermedio 19-c

A una solucion del intermedio 19-b (20,3 g, 49,8 mmol) en una mezcla 1:1 de 1,4-dioxano/agua (249,0 ml) enfriada a

0 °C se le anadio NaOH 10 N (100,0 ml, 996,0 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. 20 Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se

lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 19-c en forma de un solido de color amarillo.

Etapa 3: Intermedio 19-d

25

A una solucion del intermedio 19-c (6,5 g, 19,4 mmol) en terc-butanol (97,0 ml) se le anadio una solucion 1,0 M de terc-butoxido potasico en terc-butanol (40,7 ml, 40,7 mmol). Despues de agitar durante 15 minutos, se anadio bromoacetonitrilo (3,37 ml, 48,4 mmol) y la reaccion se agito durante 3 horas a temperatura ambiente. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, la fase acuosa se 30 extrajo con acetato de etilo, los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 19-d en forma de una espuma de color beige.

Etapa 4: Intermedio 19-e

35

A una solucion del intermedio 19-d (6,5 g, 17,36 mmol) en acetato de etilo y agitada en una atmosfera de nitrogeno se le anadio Pd al 10 %/C (3,69 g, 1,73 mmol). La mezcla de reaccion se purgo con H2 y se agito durante 1 hora en

1 atm de hidrogeno. Despues, la reaccion se filtro a traves de celite y el filtrado se concentro al vacfo. Los volatiles se retiraron a presion reducida para proporcionar el intermedio 19-e en forma de un solido de color amarillo.

imagen32

5 Etapa 1: Intermedio 20-a

A una solucion de clorhidrato de 4-(benciloxi)anilina 19-a (10,0 g, 42,4 mmol) en HCl 1 N (60,6 ml) se le anadio gota a gota una solucion 1,0 M de nitrito sodico (41,9 ml, 41,9 mmol) en agua a temperatura ambiente, la mezcla se agito durante 1 hora, se filtro y despues se anadio gota a gota a una solucion enfriada con hielo del intermedio 2-c (5,0 g, 10 29,9 mmol) en etanol (16,2 ml) y agua (222,0 ml). El pH se mantuvo a 7 anadiendo en porciones acetato potasico. La mezcla se agito a 0 °C durante 3 horas y a temperatura ambiente durante 1 hora. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 20-a en forma de un aceite de color beige.

15

Etapa 2: Intermedio 20-b

A una solucion del intermedio 20-a (10,0 g, 26,5 mmol) en una mezcla 1:1 de 1,4-dioxano/agua (265,0 ml) enfriada a

0 °C se le anadio NaOH 10 N (53,0 ml, 530,0 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. 20 Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se

lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 20-b en forma de un solido de color amarillo.

Etapa 3: Intermedio 20-c

25

A una solucion del intermedio 20-b (8,3 g, 28,8 mmol) y bromoacetonitrilo (4,33 ml, 62,1 mmol) en terc-butanol (141,0 ml) se le anadio una solucion 1,0 M de terc-butoxido sodico en terc-butanol (56,4 ml, 56,4 mmol). La reaccion se calento lentamente a temperatura ambiente y se agito durante 2 horas. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre 30 MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 20-c en forma de una espuma de color beige.

Etapa 4: Intermedio 20-d

35 A una solucion del intermedio 20-c (3,72 g, 10,38 mmol) en acetato de etilo y agitada en una atmosfera de nitrogeno se le anadio Pd al 10 %/C (2,20 g, 1,03 mmol). La mezcla de reaccion se purgo con H2 y se agito durante 1 hora en

1 atm de hidrogeno. Despues, la reaccion se filtro a traves de celite y el filtrado se concentro al vacfo. Los volatiles se retiraron a presion reducida para proporcionar el intermedio 20-d en forma de un solido de color amarillo.

40

imagen33

5 Etapa 1: Intermedio 21-a

A una solucion de clorhidrato de 4-(benciloxi)anilina 19-a (20,0 g, 85,0 mmol) en HCl 1 N (71,8 ml) se le anadio gota a gota una solucion 1,0 M de nitrito sodico (99,0 ml, 99,0 mmol) en agua a temperatura ambiente, la mezcla se agito durante 1 hora, se filtro y despues se anadio gota a gota a una solucion enfriada con hielo del intermedio 18-b (10,0 10 g, 70,8 mmol) en etanol (19,1 ml) y agua (263,0 ml). El pH se mantuvo a 7 anadiendo en porciones acetato sodico. La mezcla se agito a 0 °C durante 3 horas y a temperatura ambiente durante una noche. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 21-a en forma de un aceite de color beige.

15

Etapa 2: Intermedio 21-b

A una solucion del intermedio 21-a (24,0 g, 68,3 mmol) en una mezcla 1:1 de 1,4-dioxano/agua (341,0 ml) enfriada a 0 °C se le anadio NaOH 10 N (137,0 ml, 1366,0 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. 20 Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 21-b en forma de un solido de color amarillo.

Etapa 3: Intermedio 21-c

25

A una solucion enfriada con hielo de intermedio 21-b (8,28 g, 28,2 mmol) en terc-butanol (141,0 ml) se le anadio una solucion 1,0 M de terc-butoxido sodico en terc-butanol (56,4 ml, 56,4 mmol). Despues de agitar durante 15 minutos, se anadio bromoacetonitrilo (4,33 ml, 62,1 mmol); la reaccion se calento lentamente a temperatura ambiente y se agito durante 2 horas. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa 30 organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 21-c en forma de un solido de color amarillo.

Etapa 4: Intermedio 21-d

35

A una solucion del intermedio 21-c (5,84 g, 17,57 mmol) en acetato de etilo y agitada en una atmosfera de nitrogeno se anadio Pd al 10 %/C (1,87 g, 0,87 mmol). La mezcla de reaccion se purgo con H2 y se agito durante 1 hora en 1 atm de hidrogeno. Despues, la reaccion se filtro a traves de celite y el filtrado se concentro al vacfo. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 21-d en forma de un solido de color amarillo.

40

imagen34

5 Etapa 1: Intermedio 22-a

A una solucion del intermedio 19-e (375,0 mg, 1,32 mmol) en 1,4-dioxano (1,7 ml) se le anadieron el intermedio 16-b (391 mg, 1,32 mmol), N,N-dimetilglicina (272 mg, 2,64 mmol), yoduro de cobre (I) (166 mg, 0,87 mmol) y carbonato de cesio (1,72 g, 5,28 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una 10 noche y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 22-a en forma de una espuma de color beige.

Etapa 2: Compuesto 14

15

A una solucion del intermedio 22-a (275 mg, 0,55 mmol) en metanol (5,5 ml) se le anadio acetato de formamidina (401 mg, 3,85 mmol) y la reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 142HCl en forma de un solido 20 de color blanco. MS (m/z) M+H = 527,2

Sfntesis del Compuesto 15:

imagen35

25

Etapa 1: Intermedio 23-a

A una solucion del intermedio 19-e (375 mg, 1,32 mmol) en 1,4-dioxano (1,7 ml) se le anadieron el intermedio 17-b (392 mg, 1,32 mmol), N,N-dimetilglicina (272 mg, 2,64 mmol), yoduro de cobre (I) (166 mg, 0,87 mmol) y carbonato 30 de cesio (1,72 g, 5,28 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 23-a en forma de una espuma de color beige.

35

A una solucion del intermedio 23-a (260 mg, 0,52 mmol) en metanol (5,2 ml) se le anadio acetato de formamidina (541 mg, 5,19 mmol) y la reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se enfrio a 5 temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 152HCl en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) M+H = 528,1

Sfntesis del Compuesto 7:

10

imagen36

Etapa 2: Intermedio 24-a

15 A una solucion del intermedio 20-d (533,0 mg, 1,98 mmol) en 1,4-dioxano (1,0 ml) se le anadieron el intermedio 15-b (600 mg, 1,98 mmol), N,N-dimetilglicina (410 mg, 3,97 mmol), yoduro de cobre (I) (250 mg, 1,31 mmol) y carbonato de cesio (2,59 g, 7,94 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 24-a 20 en forma de un aceite de color beige.

Etapa 2: Compuesto 7

A una solucion del intermedio 24-a (470,0 mg, 0,96 mmol) en etanol (9,60 ml) se le anadio acetato de formamidina 25 (800 mg, 7,68 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 72HCl en forma de un solido de color amarillo. MS (m/z) M+H = 517,1

30 Sfntesis del Compuesto 6:

imagen37

Etapa 1: Intermedio 25-a

35

A una solucion del intermedio 20-d (200 mg, 0,74 mmol) en 1,4-dioxano (1,0 ml) se le anadieron el intermedio 16-b (221 mg, 0,74 mmol), N,N-dimetilglicina (231 mg, 3,23 mmol), yoduro de cobre (I) (142 mg, 0,74 mmol) y carbonato

de cesio (971 mg, 2,98 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 25-a en forma de una espuma de color beige.

5

Etapa 2: Compuesto 6

A una solucion del intermedio 25-a (360 mg, 0,74 mmol) en etanol (7,45 ml) se le anadio acetato de formamidina (620 mg, 5,96 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los 10 volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 62HCl en forma de un solido de color amarillo. MS (m/z) M+H = 511,2

Sfntesis del Compuesto 8:

15

imagen38

A una solucion del intermedio 20-d (542 mg, 2,02 mmol) en 1,4-dioxano (2,70 ml) se le anadieron el intermedio 17-b (600 mg, 2,02 mmol), N,N-dimetilglicina (416 mg, 4,04 mmol), yoduro de cobre (I) (254 mg, 1,33 mmol) y carbonato de cesio (1,97 g, 6,06 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 26-a en forma de una espuma de color beige.

Etapa 2: Compuesto 8

A una solucion del intermedio 26-a (420 mg, 0,86 mmol) en etanol (8,6 ml) se le anadio acetato de formamidina (722 30 mg, 6,93 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante 3 horas y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 82HCl en forma de un solido de color amarillo. MS (m/z) M+H = 512,1

35

20

25

5 Etapa

imagen39

A una solucion del intermedio 21-d (2,30 g, 9,49 mmol) en 1,4-dioxano (12,7 ml) se le anadieron el intermedio 15-b (2,87 g, 9,49 mmol), N,N-dimetilglicina (1,95 g, 19,0 mmol), yoduro de cobre (I) (1,19 g, 6,27 mmol) y carbonato de cesio (12,37 g, 38,0 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche 10 y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 27-a en forma de un aceite de color beige.

Etapa 2: Compuesto 9

15

A una solucion del intermedio 27-a (1,65 g, 3,56 mmol) en etanol (7,2 ml) se le anadio acetato de formamidina (741 mg, 6,93 mmol) y la reaccion se agito a 80 °C durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente. Se anadieron agua y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa 20 sobre gel de sflice proporciono el compuesto 9 en forma de un solido de color blanco. El compuesto 9 se disolvio en metanol, la solucion se acidifico con HCl 1 N en MeOH, se formo un precipitado y se recogio por filtracion para proporcionar el compuesto 92HCl en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) M+H = 491,1

Sfntesis del Compuesto 11:

25

imagen40

Etapa 1: Intermedio 28-a

30 A una solucion del intermedio 21-d (491 mg, 2,03 mmol) en 1,4-dioxano (2,7 ml) se le anadieron el intermedio 16-b (600 mg, 2,03 mmol), N,N-dimetilglicina (418 mg, 4,05 mmol), yoduro de cobre (I) (255 mg, 1,33 mmol) y carbonato de cesio (2,64 g, 8,10 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 28-a 35 en forma de una espuma de color beige.

A una solucion del intermedio 28-a (510 mg, 1,11 mmol) en metanol (11,1 ml) se le anadio acetato de formamidina (1,16 g, 11,15 mmol), la reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y los volatiles se retiraron a 5 presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 112HCl en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) M+H = 485,2

Sfntesis del Compuesto 10:

10

Etapa 1: Intermedio 29-a

A una solucion del intermedio 21-d (2,0 g, 8,26 mmol) en 1,4-dioxano (11,0 ml) se le anadieron el intermedio 17-b 15 (2,45 g, 8,26 mmol), N,N-dimetilglicina (1,7 g, 16,5 mmol), yoduro de cobre (I) (1,0 g, 5,45 mmol) y carbonato de cesio (10,76 g, 33,0 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 29-a en forma de una espuma de color beige.

20

Etapa 2: Compuesto 10

imagen41

A una solucion del intermedio 29-a (1,5 g, 3,27 mmol) en metanol (32,7 ml) se le anadio acetato de formamidina (3,41 g, 32,7 mmol) y la reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se enfrio a 25 temperatura ambiente. Se anadieron agua y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida. Los volatiles se retiraron a presion reducida. Al residuo se le anadio metanol; se formo un precipitado y se recogio por filtracion para proporcionar el compuesto 10 en forma de un solido de color blanco. MS (m/z) M+H = 486,2

30 Sfntesis del intermedio 30-a:

imagen42

A una solucion de 1-bromo-3-fluoro-5-yodobenceno 15-a (5,0 g, 16,62 mmol) en 1,4-dioxano (8,3 ml) se 35 alcohol bencflico 30-a (1,79 g, 16,62 mmol), 1,10-fenantrolina (599 mg, 3,32 mmol), yoduro de cobre

le anadieron (I) (316 mg,

1,66 mmol) y carbonato de cesio (7,58 g, 23,26 mmol). La reaccion se agito a 110 °C durante 2 dfas y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Al filtrado se le anadio una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio, la capa organica se separo, y la fase acuosa se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se 5 filtraron y se concentraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 30-a en forma de un aceite de color beige.

Sfntesis del Compuesto 12:

10

Etapa 1: Intermedio 31-a

A una solucion del intermedio 21-d (370 mg, 1,52 mmol) en 1,4-dioxano (11,0 ml) se le anadieron el intermedio 30-a 15 (429 mg, 1,52 mmol), N,N-dimetilglicina (315 mg, 3,05 mmol), yoduro de cobre (I) (192 mg, 1,0 mmol) y carbonato de cesio (1,99 g, 6,11 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante una noche despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 31-a en forma de una espuma de color beige.

20

Etapa 2: Compuesto 12

A una solucion del intermedio 31-a (130 mg, 0,29 mmol) en metanol (0,5 ml) se le anadio acetato de formamidina (306 mg, 2,94 mmol) y la reaccion se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se enfrio a 25 temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 12HCl en forma de un solido de color amarillo. MS (m/z) M+H = 470,1

imagen43

Sfntesis del intermedio 32-e:

imagen44

5 Etapa 1: Intermedio 32-b

A una solucion de 4-(benciloxi)-2-fluoroanilina 32-a (12,0 g, 47,3 mmol) en HCl 1 N (39,9 ml) se le anadio gota a gota una solucion 1,0 M de nitrito sodico (55,2 ml, 55,2 mmol) en agua a temperatura ambiente, la mezcla se agito durante 1 hora, se filtro y despues se anadio gota a gota a una solucion enfriada con hielo del intermedio 18-b (5,56 10 g, 39,4 mmol) en etanol (10,6 ml) y agua (146,0 ml). El pH se mantuvo a 7 anadiendo en porciones acetato sodico. La mezcla se agito a 0 °C durante 3 horas y a temperatura ambiente durante una noche. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 32-b en forma de un aceite de color beige.

15

Etapa 2: Intermedio 32-c

A una solucion del intermedio 32-b (15,0 g, 40,6 mmol) en una mezcla 1:1 de 1,4-dioxano/agua (203,0 ml) enfriada a 0 °C se le anadio NaOH 10 N (81,0 ml, 812,0 mmol) y la reaccion se agito a temperatura ambiente durante 1 hora. 20 Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato de etilo, la capa organica se separo, se lavo con salmuera, se seco sobre MgSO4, se filtro y se concentro a presion reducida para proporcionar el intermedio 32-c en forma de un aceite de color beige.

Etapa 3: Intermedio 32-d

25

A una solucion del intermedio 32-c (5,5 g, 17,6 mmol) en tBuOH (80 ml) a temperatura ambiente, se le anadio una solucion 1,0 M de tBuOK en tBuOH (37,1 ml, 37,1 mmol). La reaccion se agito durante 15 minutos a temperatura ambiente y se anadio gota a gota bromoacetonitrilo (3,08 ml, 44,2 mmol). Despues de completarse la adicion, la reaccion se agito durante 3 horas mas. Se anadieron una solucion acuosa saturada de cloruro de amonio y acetato 30 de etilo, la capa organica se separo y la fase organica se extrajo dos veces con acetato de etilo. Los extractos organicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 32-d en forma de un aceite de color beige.

35 Etapa 4: Intermedio 32-e

A una solucion del intermedio 32-d (1,0 g, 14,3 mmol) en acetato de etilo y agitada en una atmosfera de nitrogeno se le anadio Pd al 10 %/C (607 mg, 0,3 mmol). La mezcla de reaccion se purgo con H2 y se agito durante 3 horas en 1 atm de hidrogeno. Despues, la reaccion se filtro a traves de celite y el filtrado se concentro al vacfo. La purificacion 40 por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 32-e en forma de un solido de color amarillo.

imagen45

5 Etapa 1: Intermedio 33-a

A una solucion del intermedio 32-e (200 mg, 0,7 mmol) en 1,4-dioxano (1,0 ml) se le anadieron el intermedio 15-b (255 mg, 0,8 mmol), N,N-dimetilglicina (158 mg, 1,5 mmol), yoduro de cobre (I) (97 mg, 0,5 mmol) y carbonato de cesio (1,0 g, 3,1 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante 2 dfas y 10 despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 33-a en forma de una espuma de color beige.

Etapa 2: Compuesto 16

15

A una solucion del intermedio 33-a (70 mg, 0,1 mmol) en isopropanol (10,0 ml) se le anadio acetato de formamidina (151 mg, 1,4 mmol) y la reaccion se agito a 100 °C durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente.

Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un 20 gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 162HCl en forma de un solido de color amarillo. MS (m/z) M+H = 509,1

Sfntesis del Compuesto 17:

25

imagen46

Etapa 1: Intermedio 34-a

A una solucion del intermedio 32-e (200 mg, 0,7 mmol) en 1,4-dioxano (1,0 ml) se le anadieron el intermedio 17-b 30 (251 mg, 0,8 mmol), N,N-dimetilglicina (158 mg, 1,5 mmol), yoduro de cobre (l) (97 mg, 0,5 mmol) y carbonato de cesio (1,0 g, 3,1 mmol). La reaccion se calento en un tubo cerrado hermeticamente a 110 °C durante 2 dfas y despues se enfrio a temperatura ambiente, se diluyo con acetato de etilo y se filtro sobre celite. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purificacion por cromatograffa sobre gel de sflice proporciono el intermedio 34-a en forma de una espuma de color beige.

Etapa 2: Compuesto 17

A una solution del intermedio 34-a (35 mg, 0,07 mmol) en isopropanol (10,0 ml) se le anadio acetato de formamidina (76 mg, 0,7 mmol) y la reaction se agito a la temperatura de reflujo durante una noche y despues se enfrio a temperatura ambiente. Los volatiles se retiraron a presion reducida. La purification por cromatograffa de fase inversa eluyendo con un gradiente de HCl acuoso al 0,1 %/metanol proporciono el compuesto 172HCl en forma de un solido 5 de color amarillo. MS (m/z) M+H = 504,1

Tabla 1: Compuestos ejemplares de Formula 1

Compuesto

Estructura MS (m/z)

1

j'CX s^n w X/ N Y [M+H]+ = 485,2

2

j'Q nh20 L JL/ 1 n [M+H]+ = 499,2

3

F NH.P ^ N^VN s^n k JL> ' n y '-~o/ [M+H]+ = 533,1

Compuesto

Estructura MS (m/z)

4

F °^Xo NH2p s- xr ^ '~-o/ [M+H]+ = 516,2

5

F rCV *u n^Vn^ °-fN i* X/ \ N X ^~o [M+H]+ = 517,2

6

F T^X l d> Q n [M+H]+ = 511,2

Compuesto

Estructura MS (m/z)

7

F r0 ^ m stN N N, [M+H]+ = 517,1

8

F xk N // N l\r \,W L 1*N nA N [M+H]+ = 512,1

9

F ?J%X (S °>^N nh2 s^N nV ' N \ [M+H]+ = 491,1

Compuesto

Estructura MS (m/z)

10

F r1sX T2 V \< «V'„ w JUN N y [M+H]+ = 486,2

11

F j^X r 0 °^( N iTN' k JUN N y [M+H]+ = 485,2

12

F r0 D nVnv, k N y [M+H]+ = 470,1

Compuesto

Estructura MS (m/z)

13

F jXjt. i* JUN n y 'L-o/ [M+H]+ = 512,1

14

F j^X rP k. JUN n y A7 [M+H]+ = 527,2

15

F (S °^N r v7 v< N iTn-m w JUN n y ^-~o7 [M+H]+ = 528,1

Compuesto

Estructura MS (m/z)

16

F rS nh2 V< JrO T [M+H]+ = 509,1

17

F (S °>r f2 V\ \e\ nV". L JUN N \ [M+H]+ = 504,1

Union a cinasa

Ensayo de inhibicion de cinasa Btk

5

Los ensayos de cinasa basados en polarizacion de fluorescencia se realizaron en un formato de placa de 384 pocillos usando tirosina cinasa agammaglobulinemia de Bruton (Btk) de longitud completa humana recombinante etiquetada con histamina y un protocolo modificado del ensayo de fluorescema verde KinEASE™ FP suministrado por Millipore. Se realizaron reacciones de cinasa a temperatura ambiente durante 60 minutos en presencia de 250 10 pM de sustrato, ATP 10 pM y concentraciones variables en el articulo de ensayo. La reaction se detuvo con los reactivos de detection de EDTA/cinasa y la polarizacion se midio en un instrumento Tecan 500. A partir de la curva dosis-respuesta obtenida, se calculo la CI5o utilizando Graph Pad Prisms® utilizando una curva de ajuste no lineal. La Km para ATP en cada enzima se determino experimentalmente y los valores de Ki se calcularon usando la ecuacion de Cheng-Prusoff (vease: Cheng Y, Prusoff WH. (1973) Relationship between the inhibition constant (K1) 15 and the concentration of inhibitor which causes 50 per cent inhibition (I50) of an enzymatic reaction". Biochem Pharmacol 22 (23): 3099-108).

Los valores de ki se notifican en las Tablas 2:

Tabla 2: Inhibicion de Btk

Compuesto

ki (nM)

1

a

2

a

3

a

Compuesto

ki (nM)

4

a

5

a

6

a

7

a

8

a

9

a

10

a

11

a

12

a

13

a

14

a

15

a

16

-

17

-

a - Ki <100 nM; b - 100 nM<Ki<1000 nM, c - ki>1000 nM

Ensayo de proliferacion de celulas esplenicas

5

Los esplenocitos se obtuvieron de ratones CD1 macho de 6 semanas de edad (Charles River Laboratories Inc.). Los bazos de raton se alteraron manualmente en PBS y se filtraron utilizando un filtro de celulas de 70 um seguido de lisis de globulos rojos de cloruro de amonio. Las celulas se lavaron, se resuspendieron en medio esplenocftico (HyClone RPMI complementado con FBS al 10 % inactivado por calor, aminoacidos no esenciales 0,5 x, HEPES 10 10 mM, mercaptoetanol beta 50 uM) y se incubaron a 37 °C, CO2 al 5 % durante 2 h para retirar las celulas adherentes. Las celulas en suspension se sembraron en placas de 96 pocillos a 50.000 celulas por pocillo y se incubaron a 37 °C, CO2 al 5 % durante 1 h. Los esplenocitos se trataron previamente por triplicado con 10.000 nM de curvas de compuestos de Formula 1 durante 1 h, seguido de estimulacion de la proliferacion de linfocitos B con 2,5 ug/ml de anti-IgM F(ab')2 (Jackson ImmunoResearch) durante 72 h. La proliferacion celular se midio mediante el ensayo 15 luminescente Cell Titer-Glo (Promega). Se calcularon los valores de CE50 (50 % de proliferacion en presencia del compuesto en comparacion con los controles tratados con vehfculo) a partir de curvas del compuesto de dosis- respuesta usando el software GraphPad Prism.

Los valores de CE50 se notifican en la Tabla 3:

20

Tabla 3: Inhibicion de proliferacion de celulas esplenicas

Compuesto

CE50 (nM)

1

a

2

a

3

a

4

a

Compuesto

CE50 (nM)

5

a

6

a

7

a

8

a

9

a

10

a

11

a

12

a

13

a

14

a

15

-

16

-

17

-

a - CE5o<100 nM; b - 100 nM<CE5o<1000 nM, c - CE5o>1000 nM

Metodos: Raton Arthus

5

Se realizaron estudios de raton Arthus segun se notifica en Braselmann S, Taylor V, Zhao H, Wang S, Sylvain C, Baluom M, Qu K, Herlaar E, Lau A, Young C, Wong BR, Lovell S, Sun T, Park G, Argade A, Jurcevic S, Pine P, Singh R, Grossbard EB, Payan DG, Masuda ES: R406 an orally available spleen tyrosine kinase inhibitor blocks fc receptor signaling and reduces immune-complex mediated inflammation. J Pharmacol Exp Ther, 2006, 319: 99810 1008.

En resumen, los ratones Balb/c hembras (6-7 semanas a la llegada) se habituaron a la instalacion de animales durante al menos 4 dfas. El dfa del experimento, los animales se trataron previamente (t = menos 1 h) con el compuesto o el vehfculo en solitario por sonda gastrica (PO). A t = 0, a los animales se les inyecto por via 15 intravenosa (IV, 0,1 ml/raton) con solucion salina que contenfa ovoalbumina de pollo y azul de Evan (10 mg/ml de cada uno). Diez minutos mas tarde (t = 10 min), los animales se anestesiaron con isoflurano, se afeito la superficie dorsal y se inyecto por via intradermica un anticuerpo de ovoalbumina de conejo anti-pollo en el lado derecho del animal (25 pg en 30 pl). A continuacion, se inyecto la misma cantidad de anticuerpo de control de isotipo en el lado izquierdo.

20

A continuacion, los animales fueron devueltos a su jaula de origen y se recogieron punzonados de piel (8 mm) de cada sitio de inyeccion cuatro horas mas tarde. Las muestras se colocaron en 1 ml de formamida durante una noche a 80 grados C (1 biopsia de piel por 1 ml formamida en un tubo de vidrio). La cantidad de azul de Evan en la solucion de formamida se evaluo entonces mediante espectrofotometrfa (630 nm) como medida de extravasacion de suero en 25 la dermis.

Los compuestos 9 y 10 demostraron eficacia cuando se administraron por via oral a 30 mg/kg.

Claims (12)

1. 5

   10

   15

   20

   25

   30

   35

   40

   1. Un compuesto de acuerdo con la Formula 1:

   imagen1

   en la que

   R se selecciona del grupo que consiste en:

   1) hidrogeno,

   2) alquilo,

   3) heteroalquilo,

   4) carbociclilo,

   5) heterociclilo;

   en la que el alquilo, heteroalquilo, carbociclilo y heterociclilo pueden estar sustituidos adicionalmente; y X1 y X2 se seleccionan independientemente entre hidrogeno y halogeno; n es un numero entero de 0 a 2; m es un numero entero de 0 a 2; m' es un numero entero de 0 a 2;

   W se selecciona independientemente entre:

   1) halogeno,

   2) aralquilo,

   3) heteroaralquilo,

   4) -OR3,

   5) -OC(O)R4

   6) -OC(O)NR5R6,

   7) -CH2O-R4,

   8) -NR5R6

   9) -NR2C(O)R4,

   10) -NR2S(O)nR4,

   11) -NR2C(O)NR5R6; y

   en la que el aralquilo y heteroaralquilo pueden estar sustituidos adicionalmente;

   R2 se selecciona entre hidrogeno o alquilo;

   R3 se selecciona entre alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo, aralquilo o heteroaralquilo sustituido o sin sustituir;

   R4 se selecciona entre alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo o heteroarilo sustituido o sin sustituir;

   R5 y R6 se seleccionan independientemente entre hidrogeno, alquilo, alquenilo, alquinilo, heteroalquilo, carbociclilo, heterociclilo, arilo, heteroarilo o R5 y R6 pueden condensarse para formar un sistema anular heterociclilo de 3 a 8 miembros.
2. 2. Compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que W se selecciona entre -OR3 y R3 se selecciona del grupo que consiste en aralquilo sustituido o sin sustituir, o heteroaralquilo sustituido o sin sustituir.
3. 3. Compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que R se selecciona del grupo que consiste en:
4. 5.

   10
5. 6.

   imagen2

   Compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, que tiene la estructura

   imagen3

   Compuesto de acuerdo con la reivindicacion 2, en el que W se selecciona del grupo que consiste en

   imagen4

   Un compuesto de acuerdo con la reivindicacion 1, seleccionado del grupo que consiste en:

   Compuesto

   Estructura

   1

   ,°^Qo TV S^N 1* JL> N Y

   Compuesto

   Estructura

   2

   ?<Xo syn W 1/ 1 N Y

   3

   F ?--Q. n^VN' V w JUN ' N A, v--o/

   4

   F ,0^0 NH2p s- -N^N w JL/ N \ '"O7

   Compuesto

   Estructura

   5

   F r^XQ rP S-v Cx> °tN N' X

   6

   F r.0 L d> Q nt V

   7

   F r0 (U m stN N

   Compuesto

   Estructura

   8

   F N^X> ^

   9

   F 6 °^N nh2 y^7 s^n N^VN'm ' k JUN N y

   10

   F jr^X d °^n r v sk NnrNv, u JUN N y

   11

   F ?dx nh2 0 <^C( NnrNv, k JUN N Y

   Compuesto

   Estructura

   12

   F jr^X -0 no w JUN n y

   13

   F r^X r0 no n^tnv, w JUN N Y

   14

   F Xx no. n*V\, w JL/ N Y '"-c/

   Compuesto

   Estructura

   15

   F r^X (S T2 r v< N iTN'm 1* JUN N ^

   16

   F r^X (S NH2 S=\ JyO T

   17

   F O-Xx ^ fA °^r^N n^tnv, n y

   o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
6. 7. Un metodo de fabrication de un compuesto de Formula 1 de acuerdo con la revindication 1, teniendo

   5 dicho metodo las siguientes etapas:

   imagen5

   NaOH

   Base, ligando, catalizador

   acetato de formamidina
7. 8. Un metodo de fabricacion de un compuesto de Formula 1 de acuerdo con la reivindicacion 1, teniendo

   dicho metodo las siguientes etapas:

   5

   imagen6
8. 9. Una composicion farmaceutica que comprende un compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 y al menos un excipiente farmaceuticamente aceptable.

   5
9. 10. Un compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afeccion asociada con los miembros de la familia de cinasa Tec.

   10 11. Un compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de una cualquiera de las

   reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afeccion asociada con los miembros de la familia de cinasa Src.
10. 12. Un compuesto o una sal farmaceuticamente aceptable de un compuesto de una cualquiera de las 15 reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de una enfermedad o afeccion asociada con cinasa Btk.
11. 13. El compuesto de acuerdo con las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento de cancer, enfermedades inflamatorias y autoinmunes.

    20 14. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para uso en el tratamiento de tumores

    solidos, neoplasias hematologicas, artritis, enfermedad de injerto contra huesped, lupus eritematoso, psoriasis, colitis, ileitis, esclerosis multiple, uveitis, vasculopatfa de la arteria coronaria, esclerosis sistemica, aterosclerosis, asma, rechazo de trasplante, alergia, dermatomiositis, penfigo o proliferacion de celulas cancerosas mediada por cSRC.

    25
12. 15. El compuesto de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6 para su uso en el tratamiento o

    prevencion de cancer, un trastorno o patologfa, caracterizados por inflamacion o proliferacion de celulas cancerosas mediada por cSRC.