ES2628383T3 - Dispositivo para cultivar un material biológico - Google Patents

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ES2628383T3 ES13762899.6T ES13762899T ES2628383T3 ES 2628383 T3 ES2628383 T3 ES 2628383T3 ES 13762899 T ES13762899 T ES 13762899T ES 2628383 T3 ES2628383 T3 ES 2628383T3
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Abstract

Dispositivo (100) para cultivar materia biológica, comprendiendo dicho dispositivo en la orientación destinada para su uso: - una placa (2) de un material, teniendo dicha placa una superficie superior (4) y una superficie inferior (6) horizontal, esencialmente plana; en el que dicha placa comprende un número de conjuntos de pocillos (8), comprendiendo dicho número de conjuntos de pocillos 3 o más; en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, comprendiendo dicho conjunto de pocillos un pocillo de cultivo (10) y uno o varios pocillos de lavado (12) asociados, en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de cultivo y dichos uno o varios pocillos de lavado asociados están agrupados entre sí; en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, comprendiendo dicho pocillo de cultivo una cavidad de pocillo de cultivo (14) en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de cultivo un reborde (16), en el que, por lo menos, una parte de dicho reborde define el comienzo de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo así una pendiente de pocillo de cultivo (18), terminando dicha pendiente de pocillo de cultivo en una meseta de la pendiente del pocillo (20); en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos (8), preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de lavado comprende una cavidad de pocillo de lavado (22) en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de lavado (22) un reborde (24), en el que, por lo menos, una parte de dicho reborde define el comienzo de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo de este modo una pendiente del pocillo de lavado (26), terminando dicha pendiente del pocillo de lavado en una meseta de la pendiente del pocillo (28); en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos (8), preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho material en la posición del fondo (30) de la cavidad del pocillo de cultivo y, opcionalmente, también en la posición del fondo (32) de la cavidad del pocillo de lavado, es transparente caracterizado por que, con respecto a uno o varios de los conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicha pendiente del pocillo de cultivo comprende un número de salientes (56) que sobresalen de la superficie de la pendiente del pocillo de cultivo, estando presentes dicho número de salientes a través de la pendiente en, por lo menos, una parte de la misma, preferentemente en una dirección horizontal.

Description

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DESCRIPCION
Dispositivo para cultivar un material biologico Campo de la invencion
La presente invencion se refiere, en un primer aspecto, a un dispositivo para el cultivo de materia biologica. En un segundo aspecto, la presente invencion se refiere a un kit de piezas que comprende una combinacion de un dispositivo del primer aspecto de la presente invencion y una incubadora. En un tercer aspecto, la presente invencion se refiere al uso de un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto, o a la utilizacion de un kit de piezas, de acuerdo con el segundo aspecto, para el cultivo de materia biologica. En un cuarto aspecto, la presente invencion se refiere a un metodo para el cultivo de un material biologico.
Antecedentes de la invencion
En el campo del cultivo de materia biologica viva es bien conocida la utilizacion de placas de cultivo para alojar el material biologico, en las que se permite que el material biologico crezca en un medio de crecimiento o medio de cultivo. Dichas placas pueden tener la forma de una simple placa cilmdrica que tiene un fondo plano, un diametro relativamente grande y una altura relativamente pequena. Dicha placa se denomina "placa de Petri" y es adecuada para el cultivo de material biologico dentro de una amplia gama de tecnologfas.
Sin embargo, en el campo de la fecundacion in vitro, en el que se cultivan embriones vivos in vitro durante unos pocos dfas despues de la concepcion de un huevo, aplicar un diseno ligeramente mas sofisticado de la placa de cultivo ha sido la practica durante decadas.
El documento US 5.891.712 describe dicha placa de cultivo. La placa de cultivo del documento US 5.891.712, describe una placa de fondo plano que comprende una serie de pocillos concavos circulares embebidos en el material de la placa en su interior. Los pocillos pueden estar dispuestos en patrones diferentes, tales como un pocillo central que tiene el resto de los pocillos dispuestos concentricamente alrededor del pocillo central; o en dos filas paralelas de pocillos. El documento US 5.891.712 no describe que ningun pocillo pueda tener una disposicion diferente de la de cualquiera de los otros en la misma placa de cultivo.
En el caso del cultivo in vitro de embriones, se ha convertido recientemente en una practica particularizada emplear una placa de cultivo que utiliza el llamado principio de pocillo-en-pocillo. En una placa de cultivo que emplea el principio de pocillo-en-pocillo, la placa esta formada de un material que tiene un numero de pocillos cortados en el propio material. Cada pocillo comprende adicionalmente, en su fondo, un pocillo mas pequeno adecuado para confinar un huevo o un embrion dentro de un espacio bastante confinado.
El documento WO 2009/003487 A2 describe dicha placa de cultivo de pocillo-en-pocillo. La placa comprende un numero de pocillos que consisten en una cavidad (un pocillo) que tiene un diametro de 1a 25 mm. Cada cavidad (pocillo) comprende en su centro una entalladura (un pocillo-en-pocillo) que consta de una cavidad mas pequena que tiene un diametro de aproximadamente 0,2 mm y una profundidad de aproximadamente 0,3 mm. Una pendiente que tiene un angulo de 5° a 60° con respecto a la direccion horizontal, conecta el reborde superior de la entalladura con el reborde inferior de la cavidad. Una placa de cultivo del documento WO 2009/003487 A2 que tiene 12 pocillos de este tipo se muestra a modo de ejemplo. El documento WO 2009/003487 A2 no revela que cualquier pocillo-en- pocillo pueda tener una disposicion diferente a cualquiera de los otros en el mismo placa de cultivo.
En el cultivo de material biologico vivo, tal como embriones o celulas madre, sera necesario cambiar ocasionalmente el medio de cultivo o el medio de crecimiento utilizado para obtener un crecimiento optimo del material biologico; ya sea refrescar el mismo tipo de medio o cambiar la composicion qmmica del medio.
En tal caso, cuando se utilizan placas de cultivo de la tecnica anterior, el material biologico tendra que ser cuidadosamente retirado de cada pocillo de cultivo y colocado intermitentemente en un lugar de almacenamiento hasta que el crecimiento o medio de cultivo se cambie. Dicho lugar de almacenamiento para alojar el material biologico durante la transferencia del medio de crecimiento a menudo sera una placa de cultivo separada, prevista para este proposito. Sin embargo, tal transferencia a una placa de cultivo externa impondra diversos riesgos a la calidad del resultado del trabajo realizado por el tecnico de laboratorio.
En primer lugar, la transferencia de un material biologico vivo durante la transferencia de medio implicara riesgos de contaminacion del material biologico.
En segundo lugar, la retirada de mas entidades de material biologico procedentes de sus respectivas ubicaciones en los pocillos de la placa de cultivo a una placa externa implicara el riesgo de entremezclar la ubicacion original en la placa de cultivo, dando como resultado una situacion en la que una entidad de material biologico no puede ser transferida de nuevo a su pocillo asignado originalmente, sino a otro pocillo de la misma placa. Tal situacion, claramente no es optima.
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En consecuencia, persiste la necesidad de una placa de cultivo mejorada para cultivar un material biologico, tal como un embrion o una o varias celulas madre.
Breve descripcion de la invencion
Las desventajas anteriormente mencionadas son superadas por la presente invencion en sus aspectos primero, segundo, tercero y cuarto.
La presente invencion se refiere en su primer aspecto a un dispositivo para cultivar materia biologica, comprendiendo dicho dispositivo en la orientacion destinada para su uso:
- una placa de un material, teniendo dicha placa una superficie superior y una superficie inferior horizontal esencialmente plana;
en el que dicha placa comprende un numero de conjuntos de pocillos, siendo dicho numero de conjuntos de pocillos 3 o mas;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho conjunto de pocillos comprende un pocillo de cultivo y uno o varios pocillos de lavado asociados;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de cultivo y dichos uno o varios pocillos de lavado asociados estan agrupados entre si;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de cultivo comprende una cavidad del pocillo de cultivo en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de cultivo un reborde, en el que por lo menos una parte de dicho reborde define el comienzo de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo de este modo una pendiente del pocillo de cultivo, terminando dicha pendiente del pocillo de cultivo en una meseta de la pendiente del pocillo;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de lavado comprende una cavidad del pocillo de lavado en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de lavado un reborde, en el que, por lo menos, una parte de dicho reborde define el principio de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo asf una pendiente del pocillo de lavado, dicha pendiente del pocillo de lavado termina en una meseta de la pendiente del pocillo;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho material en la posicion del fondo de la cavidad del pocillo de cultivo y, opcionalmente, tambien en la posicion del fondo de la cavidad del pocillo de lavado, es transparente.
El dispositivo se caracteriza por que, con respecto a uno o varios de los conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicha pendiente del pocillo de cultivo comprende un numero de salientes, que sobresalen de la superficie de la pendiente del pocillo de cultivo, estando presente dicho numero de salientes a lo largo de la pendiente por lo menos en una parte de la misma, preferentemente en una direccion horizontal.
En el caso de que un medio de crecimiento comercial contenga materia no disuelta, la presencia de dichos salientes en la pendiente del pocillo de cultivo puede actuar como filtro, ayudando de una manera facil a filtrar cualquier materia solida en la entrega y carga del medio de crecimiento.
La presente invencion se refiere, en su segundo aspecto, a un kit de piezas que comprende uno o varios dispositivos de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion; y una incubadora, en el que dicha incubadora esta configurada para alojar uno o varios de dichos dispositivos.
La presente invencion se refiere, en su tercer aspecto, a la utilizacion de un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion; o de un kit de piezas de acuerdo con el segundo aspecto de la presente invencion para cultivar un material biologico.
La presente invencion se refiere, en su cuarto aspecto, a un metodo de cultivo de un material biologico, comprendiendo dicho metodo:
- proporcionar un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion;
- disponer un material biologico en la cavidad del pocillo de cultivo de uno o varios de dichos pocillos de cultivo;
- anadir un medio de crecimiento a dichas cavidades del pocillo de cultivo;
- opcionalmente, cubrir dicho material biologico y medio de crecimiento con un fluido inerte, tal como un aceite mineral;
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- proporcionar condiciones de crecimiento viables a dicho material biologico;
- permitir que el material biologico crezca durante un tiempo predeterminado.
Proporcionar uno o varios de los conjuntos de pocillos con uno o varios pocillos de lavado ademas del pocillo de cultivo, permite a un tecnico de laboratorio durante el cambio de medio de cultivo o medio de crecimiento -con respecto a cada uno de dichos conjuntos de pocillos- transferir intermitentemente el material biologico del pocillo de cultivo a uno de los pocillos de lavado asociados a este pocillo de cultivo espedfico. Por lo tanto, no existe ningun riesgo de imponer ninguna contaminacion externa.
Asimismo, el problema con las bandejas de cultivo de la tecnica anterior, de que, durante el cambio de medio de cultivo, el material biologico puede ser devuelto accidentalmente a un pocillo de cultivo, que no es el pocillo de cultivo asignado originalmente a ese material biologico espedfico se puede evitar, porque en el dispositivo del primer aspecto de la presente invencion, cualquier pocillo de lavado esta en estrecha cercama a su pocillo de cultivo asociado.
Breve descripcion de las figuras
La figura 1 muestra, en una vista en perspectiva, un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, para cultivar un material biologico.
La figura 2 muestra, en una vista en seccion transversal, detalles de los pocillos de un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, para cultivar un material biologico.
La figura 3 muestra, en una vista en planta, detalles de los pocillos de un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, para cultivar un material biologico.
Las figuras 4a) a f) muestran diversas configuraciones del pocillo de cultivo y el o los pocillos de lavado asociados de un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, para cultivar un material biologico.
Descripcion detallada de la invencion
Primer aspecto de la presente invencion
El primer aspecto de la presente invencion se refiere a un dispositivo para cultivar una materia biologica, comprendiendo dicho dispositivo en la orientacion destinada para su uso:
- una placa de un material, teniendo dicha placa una superficie superior y una superficie inferior horizontal esencialmente plana;
en el que dicha placa comprende un numero de conjuntos de pocillos, siendo dicho numero de conjuntos de pocillos 3 o mas;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho conjunto de pocillos comprende un pocillo de cultivo y uno o varios pocillos de lavado asociados;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de cultivo y dichos uno o varios pocillos de lavado asociados estan agrupados entre sf;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de cultivo comprende una cavidad del pocillo de cultivo en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de cultivo un reborde, en el que por lo menos una parte de dicho reborde define el comienzo de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo de este modo una pendiente del pocillo de cultivo, terminando dicha pendiente del pocillo de cultivo en una meseta de la pendiente del pocillo;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de lavado comprende una cavidad del pocillo de lavado en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de lavado un reborde, en el que, por lo menos, una parte de dicho reborde define el principio de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo asf una pendiente del pocillo de lavado, dicha pendiente del pocillo de lavado termina en una meseta de la pendiente del pocillo;
en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho material en la posicion del fondo de la cavidad del pocillo de cultivo y, opcionalmente, tambien en la posicion del fondo de la cavidad del pocillo de lavado, es transparente.
El dispositivo se caracteriza por que, con respecto a uno o varios de los conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicha pendiente del pocillo de cultivo comprende un numero de salientes, que sobresalen
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de la superficie de la pendiente del pocillo de cultivo, estando presente dicho numero de salientes a lo largo de la pendiente por lo menos en una parte de la misma, preferentemente en una direccion horizontal.
De acuerdo con esto, el dispositivo segun el primer aspecto de la presente invencion comprende un pocillo que tiene un numero de conjuntos de pocillos, en el que cada conjunto de pocillos comprende un pocillo de cultivo y uno o varios pocillos de lavado. El pocillo de cultivo esta destinado a cultivar un material biologico, mientras que los pocillos de lavado estan destinados a alojar el material biologico durante el intercambio del medio de crecimiento del material biologico.
El dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion es especialmente adecuado para el cultivo de embriones que se originan a partir de un procedimiento de fecundacion in vitro o para cultivar una o varias celulas madre, tales como embriones o celulas madre de origen mairnfero, tal como de origen humano.
En la presente descripcion y en las reivindicaciones adjuntas, el termino "en la orientacion destinada al uso" se interpretara como una orientacion en la que la superficie horizontal inferior esta orientada horizontalmente y apuntando hacia abajo.
En la presente descripcion y en las reivindicaciones adjuntas, el termino "meseta" se interpretara como significando una zona en la cual termina la pendiente de un pocillo. Una meseta puede ser, por lo tanto, una zona conjunta de dos o mas pendientes en forma de una plataforma o similar o, alternativamente, una meseta puede ser simplemente un reborde que une dichas dos o varios pendientes del pocillo.
En una realizacion preferente del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, el numero de conjuntos de pocillos es de 4 a 30, tal como de 6 a 28, por ejemplo, de 8 a 26, tal como de 10 a 24, por ejemplo, de 12a 22, tal como de 14a 20, por ejemplo, 16 a 18.
El dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion es especialmente adecuado para el cultivo de embriones humanos en una fecundacion in vitro. En dicho procedimiento, se toma un numero de huevos de los ovarios de una mujer y se disponen en un disco de cultivo tal como el dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion. Por razones economicas, un procedimiento de fecundacion in vitro a menudo implica someter a la mujer a un tratamiento hormonal que garantice que la mujer produzca un numero mayor de huevos maduros listos para la concepcion, en comparacion con la situacion en la que no se proporciona tratamiento hormonal. Tras un tratamiento hormonal, normalmente se extraeran de 8 a 14 huevos de los ovarios de la mujer y estos se dispondran en un disco de cultivo con la finalidad de cultivar el huevo concebido.
Por consiguiente, sera apropiado proveer el dispositivo para cultivar un material biologico con una serie de conjuntos de pocillos que seran suficientes, en la mayona de los casos, para permitir la asignacion de un solo dispositivo a los huevos de una sola mujer. El numero de conjuntos de pocillos citado anteriormente ha demostrado ser adecuado para este proposito.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, el numero de pocillos de lavado en cada conjunto de pocillos espedfico es de 1,2, 3 o 4.
Este numero de pocillos de lavado asociados con cada pocillo de cultivo de uno o varios de los conjuntos de pocillos ha demostrado ser adecuado cuando el dispositivo es utilizado para cultivar un embrion.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, mas de la mitad de las cavidades de los pocillos de cultivo estan dispuestas de tal manera que forman una unica lmea recta que se extiende en una direccion esencialmente horizontal.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, todas las cavidades de los pocillos de cultivo estan dispuestas de tal manera que forman una unica lmea recta que se extiende en una direccion esencialmente horizontal.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, el numero de cavidades de los pocillos de cultivo dispuestos en una unica lmea recta que se extiende en una direccion esencialmente horizontal es de 3 a 20, tal como de 4 a 19, por ejemplo, de 5 a 18, tal como de 6 a 17, por ejemplo, de 7 a 16, por ejemplo, de 8 a 15, por ejemplo, de 9 a 14, tales como de 10 a 13 o de 11a 12.
Hacer que las cavidades de los pocillos de cultivo de una serie de conjuntos de pocillos se extiendan en una lmea esencialmente recta, hara posible utilizar los dispositivos en una incubadora que esta provista de medios de captura de imagen, tal como una camara, y en el que los medios de captura de imagenes estan adaptados para moverse solamente en una direccion. Permitir que los medios de captura de imagen de una incubadora se muevan solamente en una direccion maximizara la calidad de las imagenes capturadas, porque se produciran menos errores en el enfoque de la imagen por los medios de captura de imagenes.
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En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, la cavidad del pocillo de cultivo con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente con respecto a todos los conjuntos de pocillos, tiene una forma esencialmente conica o una forma esencialmente esferica.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, la cavidad o las cavidades del pocillo de lavado con respecto a uno o varios conjuntos de pocillos, preferentemente con respecto a todos los conjuntos de pocillos, tienen / tienen una forma esencialmente conica o una forma esencialmente esferica.
Se preferira que el pocillo de cultivo se distinga claramente de su pocillo o sus pocillos de lavado asociado o asociados. Esta caractenstica puede proporcionarse asegurandose de que el o los pocillos de lavado tengan una disposicion diferente a la del pocillo de cultivo; bien con respecto a la forma o con respecto al tamano, o ambos.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, dicho pocillo de cultivo y dichos uno o varios pocillos de lavado asociados, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente con respecto a todos los conjuntos de pocillos, se agrupan entre sf en un grupo distinto, tal como que estan dispuestos mas proximos entre sf en comparacion con cualquier pocillo circundante.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, el conjunto de pocillos, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, comprende los dos pocillos de lavado, en el que los dos pocillos de lavado y el pocillo de cultivo comparten una meseta comun de la pendiente y en el que la cavidad del pocillo de cultivo esta dispuesta en una direccion esencialmente opuesta a la direccion de las cavidades del pocillo de lavado, cuando se ve desde dicha meseta comun de la pendiente.
Habitualmente dos pocillos de lavado asociados con cada pocillo de cultivo seran suficientes cuando se cultivan embriones. Agrupando los pocillos de los conjuntos de pocillos en una configuracion tal como se ha expuesto anteriormente, se puede conseguir la optimizacion del espacio del dispositivo.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, la direccion de una cavidad del pocillo de cultivo a dicha meseta comun de la pendiente con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, es opuesta a la direccion de una cavidad del pocillo de cultivo a dicha meseta comun de la pendiente con respecto a un conjunto de pocillos adyacente, formando asf una configuracion escalonada de conjuntos de pocillos.
Dicha configuracion de los pocillos de los conjuntos de pocillos ha demostrado que optimiza el espacio disponible del dispositivo. Ademas, dicha configuracion permitira utilizar los dispositivos en una incubadora que esta provista de medios de captura de imagenes, tales como una camara, y en la que los medios de captura de imagenes estan adaptados para moverse solo en una direccion, en el caso de que las cavidades del pocillo de cultivo de los pocillos de lavado estan dispuestas adicionalmente en una lmea recta.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, dicha placa comprende una etiqueta de identificacion de placa.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, uno o varios, preferentemente todos los conjuntos de pocillos comprenden una etiqueta de identificacion del conjunto de pocillos.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, uno o varios de dichos pocillos de cultivo, preferentemente todos los pocillos de cultivo, comprenden una etiqueta de identificacion de pocillos de cultivo.
Proporcionar al dispositivo una o varias etiquetas de identificacion relacionadas con la identificacion del dispositivo, los conjuntos de pocillos o los pocillos individuales ayudaran a minimizar los errores relacionados con el mezclado de diferentes materiales biologicos por el tecnico de laboratorio que maneja el dispositivo.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, el area bajo la pendiente del pocillo de cultivo con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, es mayor que el area bajo cada pendiente del pocillo de lavado asociado que pertenece al mismo conjunto de pocillos.
Tal como sera principalmente el pocillo de cultivo que se utiliza para alojar un material biologico vivo, sera beneficioso por razones economicas de espacio proporcionar el area de una pendiente del pocillo de cultivo con un area mayor en comparacion con el area bajo la pendiente del pocillo de lavado asociado que pertenece al mismo conjunto de pocillos.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, el angulo de la pendiente del pocillo de cultivo con respecto al plano horizontal en lo que respecta a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente a todos los conjuntos de pocillos, es de 20° a 50°, tal como de 22° a 48°, por
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ejemplo, de 24° a 46°, por ejemplo, de 26° a 44°, tal como de 28° a 42°, por ejemplo, de 30° a 40°, tal como de 32° a 48° o de 34° a 36°.
Un angulo dentro de estos rangos ha demostrado que es mucho mas facil para que un tecnico de laboratorio maneje el trabajo con las pipetas asociado con el cambio de medio de cultivo, etc. en la situacion de cultivo de un embrion.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, parte del reborde de una o varias de dichas cavidades del pocillo con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, en un area opuesta a la pendiente del pocillo, define el comienzo de una pared que se extiende hacia arriba, definiendo con ello una pared del pocillo.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, el angulo de la pared del pocillo con respecto al plano horizontal es de 52° a 90°, tal como de 54° a 88°, por ejemplo, de 56° a 86°, tal como de 58° a 84°, por ejemplo, de 60° a 82°, por ejemplo, de 62° a 80°, tal como de 64 a 78°, tal como de 66° a 76°, por ejemplo, de 68° a 74°, por ejemplo, de 70° a 72°.
De este modo se preferira que el angulo de una pendiente del pocillo sea mas pronunciado en relacion con el plano horizontal que el angulo de una pared del pocillo en relacion con el plano horizontal.
Tambien se preferira que una o varias de las paredes de los pocillos esten dispuestas en estrecha proximidad con el reborde de cavidad de su pocillo asociado.
Proporcionar al dispositivo una pared de pocillo que se extiende desde una parte del reborde del pocillo opuesta a la pendiente del pocillo que tiene los angulos definidos anteriormente, ha demostrado ser eficiente con respecto al ahorro de espacio en la superficie del dispositivo. De este modo, se puede proporcionar un gran numero de conjuntos de pocillos en un solo dispositivo.
El reborde del pocillo de cultivo y, opcionalmente, tambien el reborde del pocillo de lavado tiene preferentemente forma circular, con un diametro de 2,0 a 4,0 mm, tal como de 2,2 a 3,8 mm, por ejemplo, de 2,4 a 3,6 mm, por ejemplo, de 2,6 a 3,4 mm, por ejemplo, de 2,8 a 3,2 mm.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, la placa comprende adicionalmente un reservorio para alojar un medio de crecimiento para materia biologica.
Proveer el dispositivo con un reservorio para alojar un medio de crecimiento evita la necesidad de proporcionar un pocillo de cultivo que comprende un material biologico con una sonda de pH que, a su vez, podna causar dano mecanico al material biologico.
El reservorio puede ademas estar provisto de una tapa. Dicha tapa esta realizada, preferentemente, de un material permeable a los gases, tal como silicona, por ejemplo, silicona de PDMS.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, dicho dispositivo comprende adicionalmente una tapa adaptada para poder cubrir todos los conjuntos de pocillos.
Proveer al dispositivo con una tapa minimizara el riesgo de contaminacion de cualquiera de los pocillos del dispositivo, alojando material biologico con materia extrana.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, la placa comprende en su superficie superior un recorte, dicho recorte tiene una extension en la direccion horizontal que es menor que la extension de la propia placa, en la que dicho dispositivo comprende adicionalmente una tapa adaptada para poder cubrir todos los conjuntos de pocillos, en el que dicha tapa esta adaptada para encajarse de forma desmontable en este recorte en la superficie superior de la placa en una configuracion bloqueada.
En dicha realizacion se evitara que un tecnico de laboratorio levante por accidente el dispositivo con su tapa, despues de lo cual el propio dispositivo puede caerse y dar lugar a danos y mezcla del material biologico cultivado.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, dicha tapa esta realizada de un material de silicona, tal como PDMS.
En una realizacion del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion, se proporcionan uno o varios orificios de ventilacion en la placa, proporcionando de este modo un acceso para que el gas entre en el espacio por encima de los conjuntos de pocillos y por debajo de la tapa, cuando la tapa esta unida a la placa en una configuracion bloqueada.
Segundo aspecto de la presente invencion
5
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45
El segundo aspecto de la presente invencion se refiere a un kit de piezas que comprende uno o varios dispositivos de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion; y una incubadora, en el que dicha incubadora esta configurada para alojar uno o varios de dichos dispositivos.
Tercer aspecto de la presente invencion
El tercer aspecto de la presente invencion se refiere a la utilizacion de un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto, o de un kit de piezas de acuerdo con el segundo aspecto para cultivar un material biologico.
En una realizacion, el uso de acuerdo con el tercer aspecto de la presente invencion, es para cultivar un embrion o una o varias celulas madre.
En una realizacion, el uso de acuerdo con el tercer aspecto de la presente invencion, el embrion o una o varias celulas madre son de origen mairnfero, tal como de origen humano.
El dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion esta especialmente adaptado para ser utilizado para dichos propositos.
Cuarto aspecto de la presente invencion
El cuarto aspecto de la presente invencion se refiere a un metodo de cultivo de un material biologico, comprendiendo dicho metodo:
- proporcionar un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion;
- disponer un material biologico en la cavidad del pocillo de cultivo de uno o varios de dichos pocillos de cultivo;
- anadir un medio de crecimiento a dichas cavidades del pocillo de cultivo,
- opcionalmente, cubrir dicho material biologico y medio de crecimiento con un fluido inerte, tal como un aceite mineral;
- proporcionar condiciones de crecimiento viables a dicho material biologico;
- permitir que el material biologico crezca durante un tiempo predeterminado.
En una realizacion, en el metodo de acuerdo con el cuarto aspecto de la presente invencion, el crecimiento del material biologico tiene lugar en una incubadora.
En una realizacion, en el uso de acuerdo con el cuarto aspecto de la presente invencion, el crecimiento del material biologico se supervisa, tal como, se supervisa mediante un sistema de camaras.
En una realizacion, en el uso de acuerdo con el tercer aspecto de la presente invencion, las condiciones de crecimiento se controlan, por ejemplo, realizando un control de temperatura, realizando un control de pH del medio de crecimiento, realizando el control del gas que rodea al material biologico.
Haciendo ahora referencia en detalle a los dibujos con el proposito de ilustrar realizaciones preferentes de la presente invencion, se muestra un dispositivo para cultivar material biologico de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion en una vista en perspectiva en la figura 1. La Figura 1 muestra una realizacion de un dispositivo 100 para cultivar material biologico de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion.
El dispositivo comprende una placa 2 realizada de un material y que tiene una superficie superior 4 y una superficie inferior 6 (no mostrada en la figura 1). La placa esta provista de 14 conjuntos de pocillos 8, que estan numerados mediante etiquetas 40 de identificacion de pocillo por los numeros del 1 a 14. Cada conjunto de pocillos 8 comprende un pocillo de cultivo 10 y dos pocillos de lavado 12 asociados.
Cada pocillo de cultivo comprende una cavidad 14 del pocillo de cultivo rodeada por un reborde 16 del pocillo de
cultivo. Parte del reborde del pocillo de cultivo define el comienzo de una pendiente 18 del pocillo de cultivo que se
extiende hacia arriba en un angulo con respecto a una meseta 20 de la pendiente del pocillo de dicho pocillo de cultivo.
Asimismo, cada pocillo de lavado comprende una cavidad 22 del pocillo de lavado rodeada por un reborde 24 del pocillo de lavado. Parte del reborde 24 del pocillo de lavado define el comienzo de una pendiente 26 del pocillo de
lavado que se extiende hacia arriba en un angulo con respecto a una meseta de la pendiente del pocillo de lavado
28 de dicho pocillo de lavado. En la realizacion mostrada en la figura 1, con respecto a cada conjunto de pocillos, se comparte la meseta de la pendiente del pocillo de lavado 28 con la meseta de la pendiente del pocillo de cultivo 20 asociada como una meseta comun de la pendiente 36.
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La meseta de la pendiente del pocillo de lavado 28 y la meseta de la pendiente del pocillo de cultivo 20 asociada, y por ello tambien la meseta de la pendiente comun 36 esta ligeramente rebajada con respecto a la superficie superior del material de la placa. Esta caractenstica impedira que cualquier medio de cultivo al ser manipulado por un tecnico de laboratorio migre de un conjunto de pocillos a otro y, en consecuencia, mejoro la calidad del resultado del trabajo realizado con el dispositivo.
La figura 1 muestra tambien un reservorio 46 de medio de cultivo dispuesto fuera de la zona de los conjuntos de pocillos. El reservorio de medio de cultivo esta en uso destinado a alojar una sonda de pH. Preferentemente, el reservorio 46 estara cubierto por una tapa (no mostrada). Preferentemente, la tapa sera permeable para gases, especialmente dioxido de carbono. Proporcionando un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion con un reservorio de medio de cultivo, sera posible controlar el pH del medio de cultivo como respuesta a la "atmosfera de gas" por encima de la placa; y, ademas, esto sera posible sin la necesidad de instalar una sonda de pH en un pocillo de cultivo que contiene materia biologica. Asegurar la separacion de la sonda de pH y la materia biologica limitara cualquier dano mecanico sobre la materia biologica que, de otro modo podna ser impuesto por dicha sonda. Ademas, puede evitarse cualquier contaminacion de dicha sonda hacia el material biologico.
La figura 1 muestra ademas un recorte 52 para una tapa. Como puede verse, el recorte 52 para la tapa (no mostrada), y por lo tanto tambien la tapa (no mostrada) tendra una extension en el plano horizontal que no excedera la dimension ffsica de la placa. La tapa esta disenada para ser prensada y bloqueada en su posicion en el recorte 52. Este diseno es una alternativa a los disenos de la tecnica anterior, en los que la tapa cubre toda la extension en un plano horizontal de la placa. Sin embargo, en dicho diseno de la tecnica anterior, un tecnico de laboratorio puede manipular facilmente el dispositivo de agarre y levantar el dispositivo con su tapa y, a continuacion, dejar caer el dispositivo.
En el diseno mostrado en la figura 1, se garantizara una manipulacion mas segura del dispositivo por un tecnico de laboratorio porque la tapa puede ser bloqueada en una configuracion bloqueada y, en consecuencia, no se producen accidentes cuando simplemente se coge la tapa al mover el dispositivo de un sitio a otro.
En el caso de que un material biologico sea incubado en un dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion en una situacion en la que el dispositivo esta cubierto con una tapa, sera de suma importancia que el material biologico tenga acceso a una atmosfera deseada de gas. Con este fin, el dispositivo esta provisto de orificios de ventilacion 54, tal como se ve en la figura 1.
El dispositivo de la figura 1 esta, ademas, provisto de una etiqueta 38 de identificacion de placa que permite al tecnico de laboratorio distinguir una placa de las otras.
Sera una ventaja que, en lo posible, preferentemente todas las cavidades de pocillos de cultivo esten alineadas sobre una lmea recta situada en una direccion horizontal, tal como se ve en la Figura 1. Tal diseno hace posible que una camara en una incubadora solo tenga que moverse en una direccion en el proceso de obtencion de imagenes de lapso de tiempo.
En la figura 1 se ve que por lo que respecta a cada conjunto de pocillos, el area bajo cada pendiente del pocillo de lavado es menor que el area bajo la pendiente del pocillo del cultivo asociado.
La figura 2 muestra un primer plano de una vista en seccion transversal de un conjunto de pocillos que comprende un pocillo de cultivo y un solo pocillo de lavado en una configuracion como la representada en la figura 4a.
La figura 2 muestra, por consiguiente, un conjunto de pocillos 8 de un dispositivo 100. El conjunto de pocillos comprende un pocillo de cultivo 10 y pocillo de lavado 12. El pocillo de cultivo comprende una cavidad del pocillo de cultivo 14 que comprende un reborde 16 de cavidad del pocillo de cultivo. Parte del reborde de la cavidad 16 del pocillo de cultivo define el comienzo de una pendiente del pocillo de cultivo 18 que se extiende hacia arriba hacia una meseta de la pendiente del pocillo de cultivo 20.
En la otra direccion de la pendiente del pocillo 18 del pocillo de cultivo 10, parte del reborde 16 de la cavidad del pocillo de cultivo 14 define el comienzo de una pared del pocillo de cultivo 44, que tiene un angulo mas pronunciado en relacion con la direccion horizontal, en comparacion con la pendiente del pocillo de cultivo 18.
El pocillo de lavado mostrado en la figura 2 comprende una cavidad del pocillo de lavado 22 que comprende el reborde 24 de la cavidad del pocillo de lavado. Parte del reborde 24 de la cavidad del pocillo de lavado define el comienzo de una pendiente del pocillo de lavado 26 que se extiende hacia arriba hasta una meseta de la pendiente del pocillo de lavado 28. La meseta de la pendiente del pocillo de cultivo 20 y la meseta de la pendiente del pocillo de lavado 28 se define por la misma area.
En la otra direccion de la pendiente del pocillo 26 del pocillo de lavado 12, parte del reborde 24 de la cavidad del pocillo de lavado 22 define el comienzo de una pared del pocillo de lavado 44, que tiene un mayor angulo de inclinacion en relacion con la direccion horizontal, en comparacion con la pendiente del pocillo de lavado 26.
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En la figura 2 se ve tambien el fondo de la cavidad del pocillo de cultivo 30 y el fondo de la cavidad de pocillo de lavado 32. Estas partes del material de la placa son preferentemente transparentes, permitiendo que una camara situada debajo de la capsula grabe imagenes a traves de dichas partes inferiores 30, 32 de un material biologico alojado en las cavidades de los pocillos 14, 22.
La figura 3 muestra un primer plano de una vista en planta de un conjunto de pocillos, tal como se muestra en la figura 1. La figura 2 muestra el conjunto de pocillos 8 que comprende un pocillo de cultivo 10 y dos pocillos de lavado 12 alojados en la superficie superior 4 de una placa 2 de un dispositivo 100. El pocillo de cultivo comprende una cavidad del pocillo de cultivo 14 que, a su vez, comprende un reborde de la cavidad del pocillo de cultivo 16. Una parte del reborde de la cavidad del pocillo de cultivo 16 define el comienzo de una pendiente del pocillo de cultivo que se extiende hacia arriba hasta una meseta de pocillo 20, 28, 36 que se comparte con la meseta de pocillo 28 de los pocillos de lavado. La figura 3 muestra tambien que en la direccion opuesta de la pendiente del pocillo de cultivo 18, el reborde 16 de la cavidad de pocillo de cultivo 14 define el comienzo de una pared del pocillo 44. La pared del pocillo de cultivo 44 tiene una pendiente mucho mas pronunciada que la pendiente del pocillo de cultivo 18.
Cada uno de los pocillos de lavado comprende una cavidad de pocillo de lavado 22 que, a su vez, comprende un reborde de la cavidad del pocillo de lavado 24. Parte del reborde de la cavidad del pocillo de lavado 24 define el comienzo de una pendiente del pocillo de lavado que se extiende hacia arriba hasta una meseta de pocillo 20, 28, 36 que se comparte con la meseta de pocillo 20 del pocillo de cultivo. La figura 3 muestra tambien que en la direccion opuesta de la pendiente del pocillo de lavado 26, el reborde 24 de la cavidad del pocillo de lavado 22 define el comienzo de una pared de pocillo 44. La pared del pocillo de lavado 44 tiene una pendiente mucho mas pronunciada que la pendiente del pocillo de cultivo 18.
El pocillo de cultivo, los pocillos de lavado y la meseta de la pendiente del pocillo, asf como el area en la estrecha proximidad de los pocillos estan dispuestos ligeramente bajados, en comparacion con la superficie superior 4 de la placa 2 del dispositivo 100.
La figura 3 muestra que la pendiente del pocillo de cultivo 18 esta provista de una gama de salientes 56 dispuestos en una lmea a traves de dicha pendiente del pocillo de cultivo. Dichos salientes pueden actuar como un filtro que filtra cualquier solido presente en el medio de cultivo anadido al pocillo de cultivo. Mediante la adicion del medio de cultivo al pocillo de cultivo en una posicion en la pendiente 18 que es mas alta que la posicion de los salientes, el medio de cultivo fluira hacia el pocillo de cultivo 14 y cualquier materia no disuelta, tal como contaminaciones solidas en el medio de cultivo sera detenida por los salientes 56.
Por razones de sencillez, estos salientes no se muestran en la figura 1 y 2 y no se muestran tampoco en la figura 4.
La figura 4 es una vista en planta que representa diversas configuraciones posibles de los conjuntos de pocillos del dispositivo de acuerdo con el primer aspecto de la presente invencion. En la Figura 4 un pocillo de cultivo esta representado por un triangulo relativamente grande con un drculo en su vertice, mientras que un pocillo de lavado esta representado por un triangulo relativamente pequeno con un drculo en su vertice.
Los conjuntos de pocillos de acuerdo con el dispositivo del primer aspecto de la presente invencion pueden comprender un pocillo de cultivo y un pocillo de lavado. Estos se pueden disponer tal como se representa en la figura 1a.
Alternativamente, los conjuntos de pocillos de acuerdo con el dispositivo del primer aspecto de la presente invencion pueden comprender un pocillo de cultivo y dos pocillos de lavado. Estos pueden estar dispuestos tal como se indica en la figura 1b.
Tambien alternativamente, los conjuntos de pocillos de acuerdo con el dispositivo del primer aspecto de la presente invencion pueden comprender un pocillo de cultivo y tres pocillos de lavado. Estos pueden estar dispuestos tal como se representa en la figura 1c, 1d o 1e.
Los conjuntos de pocillos de acuerdo con el dispositivo del primer aspecto de la presente invencion pueden tambien, como una alternativa mas, comprender un pocillo de cultivo y cuatro pocillos de lavado. Dicho conjunto de pocillos se representa en la figura 1f).
Los expertos en la tecnica apreciaran que podnan realizarse cambios en las realizaciones descritas anteriormente sin apartarse del amplio concepto de la invencion de las mismas. Por lo tanto, se entiende que esta invencion no se limita a las realizaciones particulares dadas a conocer, sino que esta destinada a cubrir modificaciones dentro del espmtu y alcance de la presente invencion, tal como se define en las reivindicaciones adjuntas.
Lista de numeros de referencia
2 Placa
4 Superficie superior de la placa
6
8
10
12
14
16
18
20
22
24
26
28
30
32
34
36
38
40
42
44
46
48
50
52
54
56
100
200
300
Superficie inferior de la placa
Conjunto de pocillos
Pocillo de cultivo
Pocillo de lavado
Cavidad del pocillo de cultivo
Borde de la cavidad del pocillo de cultivo
Pendiente del pocillo de cultivo
Meseta de la pendiente de pocillo del pocillo de cultivo
Cavidad del pocillo de lavado
Reborde del pocillo de lavado
Pendiente del pocillo de lavado
Meseta de la pendiente del pocillo del pocillo de lavado
Fondo de la cavidad del pocillo de cultivo
Fondo de la cavidad del pocillo de lavado
Lmea recta de alineacion de las cavidades del pocillo de cultivo
Meseta comun de la pendiente
Etiqueta de identificacion de la placa
Etiqueta de identificacion del conjunto de pocillos
Etiqueta de identificacion del pocillo de cultivo
Pared del pocillo
Reservorio
Materia biologica
Tapa del dispositivo
Recorte de la tapa
Orificios de ventilacion
Salientes de filtro de la pendiente
Dispositivo
Kit de piezas
Incubadora

Claims (19)

  1. 5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
    45
    50
    REIVINDICACIONES
    1. Dispositivo (100) para cultivar materia biologica, comprendiendo dicho dispositivo en la orientacion destinada para su uso:
    - una placa (2) de un material, teniendo dicha placa una superficie superior (4) y una superficie inferior (6) horizontal, esencialmente plana;
    en el que dicha placa comprende un numero de conjuntos de pocillos (8), comprendiendo dicho numero de conjuntos de pocillos 3 o mas;
    en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, comprendiendo dicho conjunto de pocillos un pocillo de cultivo (10) y uno o varios pocillos de lavado (12) asociados,
    en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de cultivo y dichos uno o varios pocillos de lavado asociados estan agrupados entre sf;
    en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, comprendiendo dicho pocillo de cultivo una cavidad de pocillo de cultivo (14) en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de cultivo un reborde (16), en el que, por lo menos, una parte de dicho reborde define el comienzo de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo asf una pendiente de pocillo de cultivo (18), terminando dicha pendiente de pocillo de cultivo en una meseta de la pendiente del pocillo (20);
    en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos (8), preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho pocillo de lavado comprende una cavidad de pocillo de lavado (22) en dicho material, teniendo dicha cavidad del pocillo de lavado (22) un reborde (24), en el que, por lo menos, una parte de dicho reborde define el comienzo de una pendiente que se extiende hacia arriba, definiendo de este modo una pendiente del pocillo de lavado (26), terminando dicha pendiente del pocillo de lavado en una meseta de la pendiente del pocillo (28);
    en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos (8), preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicho material en la posicion del fondo (30) de la cavidad del pocillo de cultivo y, opcionalmente, tambien en la posicion del fondo (32) de la cavidad del pocillo de lavado, es transparente
    caracterizado por que, con respecto a uno o varios de los conjuntos de pocillos, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, dicha pendiente del pocillo de cultivo comprende un numero de salientes (56) que sobresalen de la superficie de la pendiente del pocillo de cultivo, estando presentes dicho numero de salientes a traves de la pendiente en, por lo menos, una parte de la misma, preferentemente en una direccion horizontal.
  2. 2. Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 1, en el que el numero de conjuntos de pocillos (8) es 4 a 30, tal como de 6 a 28, por ejemplo, de 8 a 26, tal como de 10 a 24, por ejemplo, de 12 a 22, tal como de 14 a 20, por ejemplo, de 16 a 18.
  3. 3. Dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en el que el numero de pocillos de lavado (12) en cada conjunto de pocillos espedfico es 1,2, 3 o 4.
  4. 4. Dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que mas de la mitad de las cavidades del pocillo de cultivo (14) estan dispuestas de tal manera que forman una sola lmea recta (34) que se extiende en una direccion esencialmente horizontal.
  5. 5. Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 4, en el que todas las cavidades de pocillos de cultivo (14) estan dispuestas de tal manera que forman una sola lmea recta (34) que se extiende en una direccion esencialmente horizontal.
  6. 6. Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 4 o 5, en el que el numero de cavidades de los pocillos de cultivo (14) dispuestas en una unica lmea recta que se extiende en una direccion esencialmente horizontal es de 3 a 20, tal como de 4 a 19, por ejemplo, de 5 a 18, tal como de 6 a 17, por ejemplo, de 7 a 16, por ejemplo, de 8 a 15, por ejemplo, de 9 a 14, tal como de 10 a 13 o de 11a 12.
  7. 7. Dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos (8), preferentemente con respecto a todos los conjuntos de pocillos, la cavidad del pocillo de cultivo (14) tiene una forma esencialmente conica o una forma esencialmente esferica.
    5
    10
    15
    20
    25
    30
    35
    40
  8. 8. Dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos (8), preferentemente con respecto a todos los conjuntos de pocillos, dichos pocillos de cultivo (10) y dichos uno o varios pocillos de lavado (12) asociados se agrupan en un grupo distinto, tal como estar dispuestos mas proximos entre sf en comparacion con cualquier pocillo circundante.
  9. 9. Dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que uno o mas, preferentemente todos los conjuntos de pocillos, comprenden una etiqueta de identificacion (40) del conjunto de pocillos.
  10. 10. Dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que, con respecto a uno o varios de dichos conjuntos de pocillos (8), preferentemente todos los conjuntos de pocillos, el angulo de la pendiente del pocillo de cultivo con respecto al plano horizontal es de 20° a 50°, tal como de 22° a 48°, por ejemplo, de 24° a 46°, por ejemplo, de 26° a 44°, tal como de 28° a 42°, por ejemplo, de 30° a 40°, tal como de 32° a 48° o de 34° a 36°.
  11. 11. Dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en el que la placa comprende adicionalmente un reservorio (46) para alojar un medio de crecimiento para la materia biologica (48).
  12. 12. Un dispositivo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que dicha placa (2) en su superficie superior (4) comprende un recorte (52), dicho recorte tiene una extension en la direccion horizontal que es menor que la extension en una direccion horizontal de la propia placa, en el que dicho dispositivo comprende adicionalmente una tapa (50) adaptada para poder cubrir todos los conjuntos de pocillos, en el que dicha tapa esta adaptada para encajarse de forma desmontable en este recorte (52) en la superficie superior de la placa en una configuracion bloqueada.
  13. 13. Dispositivo de acuerdo con la reivindicacion 12, en el que dicha tapa esta realizada de un material de silicona, tal como PDMS.
  14. 14. Un kit de piezas (200) que comprende uno o varios de un dispositivo (100) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13; y una incubadora (300), en el que dicha incubadora esta configurada para alojar uno o varios de dichos dispositivos.
  15. 15. Uso de un dispositivo (100) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13, o de un kit de piezas (200) de acuerdo con la reivindicacion 14 para cultivar un material biologico.
  16. 16. Uso de acuerdo con la reivindicacion 15 para cultivar un embrion o una o varias celulas madre.
  17. 17. Metodo para el cultivo de un material biologico, comprendiendo dicho metodo:
    - proporcionar un dispositivo (100) de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 13;
    - disponer un material biologico en la cavidad del pocillo de cultivo (14) de uno o varios de dichos pocillos de cultivo (10);
    - anadir un medio de crecimiento a dichas cavidades de los pocillos de cultivo;
    - opcionalmente, cubrir dicho material biologico y medio de crecimiento con un fluido inerte, tal como aceite mineral;
    - proporcionar condiciones de crecimiento viables a dicho material biologico;
    - permitir que el material biologico crezca durante un tiempo predeterminado.
  18. 18. Metodo de acuerdo con la reivindicacion 17, en el que se supervisa el crecimiento del material biologico, tal como controlandolo mediante un sistema de camara.
  19. 19. Un metodo de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 17 o 18, en el que las condiciones de crecimiento estan controladas, tal como realizando un control de temperatura, un control de pH del medio de crecimiento, realizando un control de los gases que rodean al material biologico.
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