ES2575908T3

ES2575908T3 - Composiciones farmacéuticas antibacterianas

Info

Publication number: ES2575908T3
Application number: ES14197877.5T
Authority: ES
Inventors: Francis Xavier Wilson; Peter David Johnson; Richard Vickers; Richard Storer; Graham Michael Wynne; Alan Geoffrey Roach; Olivier De Moor; Colin Richard Dorgan; Paul James Davis
Original assignee: Summit Therapeutics Ltd
Current assignee: Summit Therapeutics Ltd
Priority date: 2008-12-02
Filing date: 2009-12-01
Publication date: 2016-07-04
Anticipated expiration: 2029-12-01
Also published as: JP5665756B2; US9763925B2; SI2907813T1; BRPI0922220B1; PT2907813T; RU2525915C2; DK2907813T3; US9314456B2; ZA201103751B; WO2010063996A3; KR101643435B1; AU2009323854A1; US20160184283A1; IL213325A; RU2011127165A; HK1162169A1; LT2907813T; EP2907813B1; AU2009323854B2; BR122020013025B1

Abstract

Una composición farmacéutica que comprende el compuesto 2,2'-di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol, o un N-óxido farmacéuticamente aceptable, sal, hidrato o solvato del mismo, y un excipiente farmacéuticamente aceptable.

Description

DESCRIPCION

Composiciones farmaceuticas antibacterianas.

5 Campo de la invencion

La presente invencion se refiere a composiciones farmaceuticas que comprenden el compuesto 2,2'-di(piridin-4-il)- 1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol, o un N-oxido farmaceuticamente aceptable, sal, hidrato o solvato del mismo que son de uso en el tratamiento de enfermedades bacterianas infecciones, a composiciones que comprenden un hidrato del 10 compuesto 2,2'-di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol. En particular, los compuestos de la presente invencion son utiles para el tratamiento de infeccion con, y enfermedades causadas por, Clostridium difficile.

Antecedentes de la invencion

15 (a) Farmacos antibacterianos y Clostridium difficile

El desarrollo de farmacos antibacterianos representa uno de los avances medicos mas importantes del siglo XX. Las enfermedades anteriormente intratables ahora podrfan controlarse facilmente y se considera que muchas enfermedades se erradicarfan con estos nuevos farmacos maravillosos. A pesar de estos avances significativos en 20 el tratamiento, las enfermedades infecciosas son la tercera causa principal de muerte en Estados Unidos (Clin. Infect. Dis., 2004, 38, 1279-1286) y siguen siendo uno de los problemas sanitarios mundiales mas importantes. Las tasas de resistencia en todas las bacterias patogenas principales estan aumentando dramaticamente y es de particular preocupacion el creciente numero y la gravedad de las infecciones nosocomiales (Infectious Disease Society of America, 2004, Bad Bugs, No Drugs). La aparicion de patogenos resistentes a multiples farmacos ha 25 hecho que muchos de los farmacos de primera lfnea actuales sean totalmente ineficaces en el control de muchas enfermedades.

Un subconjunto particular de patogenos bacterianos de interes son las clasificadas como bacterias formadoras de esporas. Las esporas bacterianas (endosporas) son estructuras latentes, no reproductoras formadas por bacterias 30 en respuesta al estres ambiental. Una vez que las condiciones ambientales se han vuelto favorables, las esporas germinan y las bacterias proliferan. En el caso de las bacterias patogenas, la germinacion en un huesped humano puede dar como resultado una enfermedad.

Las esporas bacterianas son extremadamente resistentes a muchos agentes y condiciones ambientales, incluyendo 35 la radiacion, desecacion, temperatura, falta de nutrientes y agentes qufmicos. Esta tolerancia natural a los agentes qufmicos permite que las esporas resistan durante muchos meses en entornos clave tales como hospitales, otros centros sanitarios y centros de produccion de alimentos, donde los agentes de limpieza estandar, los germicidas y los procesos de esterilizacion no erradican las bacterias. En el caso de la produccion de alimentos, la presencia de esporas puede tener consecuencias significativas que van desde el deterioro de los alimentos simples a la 40 propagacion de agentes patogenos transmitidos por alimentos e intoxicacion alimentaria. Mas recientemente, se ha dirigido la atencion a los riesgos asociados con las esporas de Bacillus antracis, el agente causante del antrax. Las esporas pueden prepararse facilmente en forma de un polvo seco que puede diseminarse por numerosos metodos y usarse como un agente bioterrorista. El antrax es considerado el unico agente de bioterrorismo mas preocupante (CDC Emerg. Infect. Dis., 2004, 5 (4), 552-555). Esto puede destacarse por los ataques postales de antrax en 45 Estados Unidos en 2001. Hubo 22 infecciones confirmadas que dieron como resultado 5 muertes con un coste de limpieza y descontaminacion tras los ataques estimado en 1 billon de dolares.

Las bacterias formadoras de esporas importantes son las bacterias formadoras de endosporas gram-positivas de los generos Bacillus y Clostridium. Los ejemplos del genero Bacillus de preocupacion para la salud para los seres 50 humanos incluyen, pero sin limitacion, B. antracis y B. cereus. Bacillus antracis es de particular preocupacion como el agente causante del antrax. La infeccion por antrax puede ocurrir a traves de ingestion, inhalacion o contacto cutaneo con esporas de Bacillus antracis dando como resultado tres formas clfnicas distintas. La infeccion cutanea se registra en aproximadamente el 95 % de todas las infecciones y generalmente se controla bien con el uso de los antibioticos adecuados. Aproximadamente el 20 % de los casos no tratados de antrax cutaneo daran como daran 55 resultado la muerte. La infeccion intestinal se caracteriza por una inflamacion aguda del tracto intestinal que da como resultado nauseas, perdida de apetito, vomitos, fiebre, dolor abdominal, vomitos de sangre y diarrea grave. El antrax intestinal da como resultado la muerte en el 25 % a 60 % de los casos. La forma mas grave de la enfermedad es el antrax pulmonar, que a menudo es mortal, incluso con una administracion de antibioticos agresiva y oportuna. La capacidad de dispersar facilmente las esporas de antrax a traves del aire y sobre un area amplia para inducir antrax

pulmonar hace del antrax el principal agente de terrorismo biologico.

Los miembros del genero Clostridium son anaerobios obligados formadores de esporas gram-positivas. Las especies ejemplares que causan enfermedad en seres humanos incluyen, pero sin limitacion, C. perfringens, C. tetani, C. 5 botulinium, C. sordelliiy C. difficile. Los clostridios estan relacionados con diversas enfermedades humanas, incluyendo tetanos, gangrena gaseosa, botulismo y colitis pseudomembranosa y puede ser un agente causante de intoxicaciones alimentarias.

Es de particular preocupacion una enfermedad causada por Clostridium difficile. Clostridium difficile causa 10 enfermedades asociadas a Clostridium difficile (CDAD) y ha habido un aumento de diez veces en el numero de casos en los ultimos 10 anos, con cepas hiper-virulentas y resistentes a los farmacos cada vez mas endemicas. Cifras recientes de la HPA muestran que hubo 55.681 casos de infeccion por C. difficile en pacientes de 65 anos y mayores en Inglaterra en 2006 (un 8 % con respecto al ano anterior). Quizas los mas preocupantes son los casos de CDAD sin el uso de ningun antibiotico subyacente que ahora se indican.

15

Clostridium difficile es una bacteria enterica comensal, cuyos los niveles se mantienen bajo control por la flora intestinal normal. Sin embargo, la bacteria es el agente causante de enfermedad asociada a C. difficile (CDAD) y se ha identificado como la causa principal de la manifestacion mas grave de CDAD, colitis pseudomembranosa. La CDAD esta asociada a una amplia gama de sfntomas que van de diarrea leve a colitis pseudomembranosa, 20 megacolon toxico y muerte. El principal factor de riesgo para el desarrollo de CDAD es el uso de antibioticos que interrumpe la flora bacteriana enterica normal causando un crecimiento excesivo de Clostridium difficile. Aunque la clindamicina es el principal antibiotico asociado a CDAD, la enfermedad esta ahora asociada a casi todos los antibioticos, incluyendo miembros de las fluoroquinolonas, cefalosporinas, macrolidos, p-lactamas y muchas otras clases.

25

La CDAD es principalmente preocupante en el ambito hospitalario y es motivo de preocupacion particular entre los pacientes ancianos, en los que las tasas de mortalidad son particularmente altas. Las tasas indicadas de CDAD se han disparado en los ultimos anos con mas de 55.000 casos informados en Reino Unido en 2006 (Health Protection Agency Surveillance of Healthcare Associated Infections Report 2007).

30

Las tasas de mortalidad en Estados Unidos han aumentado de 5,7 por millon de poblacion en 1999 a 23,7 por millon en 2004. Las tasas de colonizacion de C. difficile en la poblacion general son de hasta el 3 %, aunque la hospitalizacion aumenta dramaticamente las tasas de colonizacion en hasta el 25 %. Es particularmente preocupante la aparicion de nuevas cepas endemicas. Un ejemplo particularmente pertinente es la cepa hiper- 35 virulenta BI/NAP1 (tambien conocida como ribotipo 027) que muestra un aumento de la produccion de toxina A y B, asf como la produccion de toxinas binarias novedosas adicionales.

Un factor crftico asociado a los clostridios son los altos indices de esporas bacterianas presentes en los entornos hospitalarios. Recientemente se ha demostrado que muchos de los agentes de limpieza hospitalarios habituales en 40 uso son ineficaces en la erradicacion de esporas clostridiales para el entorno, dando como resultado un control de las enfermedades ineficaz (Infect Cont. Hosp. Epidemiol., 2007, 28, 920-5). Las caracteristicas de hiper-esporulacion de las cepas tal como BI/NAP1 contribuyen significativamente a la cuestion.

Aunque los principales factores de riesgo asociados a una CDAD son el uso de antibioticos subyacente y la edad 45 (CmAj, 2008, 179 (8), 767-772; J. Antimicrob. Chem., 2003, 51, 1339-1350), existen numerosos factores asociados diferentes, incluyendo, por ejemplo el uso de inhibidores de la bomba de protones, el uso de antagonistas del receptor H2, el uso de diureticos, la duracion de la estancia hospitalaria, el uso de tubos de alimentacion, la ventilacion mecanica y una co-morbilidad subyacente.

50 La acidez gastrica es parte del mecanismo natural de defensa frente a patogenos ingeridos y cualquier reduccion de la acidez del estomago puede dar como resultado la colonizacion del tracto gastrointestinal superior normalmente esteril que puede dar como resultado una alteracion de la microflora enterica normal. Como tal, el uso de agentes supresores de la acidez gastrica, tales como inhibidores de la bomba de protones (PPI) y antagonistas del receptor H2 de la histamina (H2RA), esta relacionado con un aumento del riesgo de colonizacion de C. difficile y un posterior 55 desarrollo de CDAD. El uso de PPI y H2RA se ha relacionado previamente con otras infecciones entericas, tales como diarrea del viajero, salmonelosis y colera. Dial y col. han indicado que el riesgo de CDAD aumenta con el uso de agentes supresores de la acidez gastrica tanto en entornos comunitarios (JAMA, 2005, 294(23), 2989-2995) como entornos hospitalarios (CMAJ, 2004, 171(1), 33-38).

Los PPI incluyen, pero sin limitacion, omeprazol (Losec, Prilosec, Zegerid), lansoprazol (Prevacid, Zoton, Inhibitol), esomeprazol (Nexium), pantoprazol (Protonix, Somac, Pantoloc, Pantozol, Zurcal, Pan) y rabeprazol (Rabecid, Aciphex, Pariet, Rabeloc).

5 Los H2RA incluyen, pero sin limitacion, cimetidina (Tagamet), ranitidina (Zinetac, Zantac), famotidina, (Pepcidine, Pepcid), roxatidina (Roxit) y nizatidina (Tazac, Axid).

La terapia triple con PPI o H2RA junto con una combinacion de dos antibioticos es un tratamiento reconocido para la erradicacion de infecciones por Helicobacter pylori (Aliment. Pharmacol. Ther., 2001, 15(5), 613-624; Helicobacter., 10 2005, 10(3), 157-171). Sin embargo, hay pocos informes de que esta triple terapia pueda conducir a efectos secundarios de CDAD (Am. J. Gastroenterol., 1998, 93(7), 1175-1176; J. Int. Med., 1998, 243(3), 251-253; Aliment. Pharm. Ther., 2001, 15(9), 1445-1452; Med. Sci. Monit., 2001, 7(4), 751-754). Los productos antibacterianos tfpicos usados para tratar infecciones por Helicobacter pylori son una combinacion de agentes seleccionados entre, pero sin limitacion metronidazol, amoxicilina, levofloxacina y claritromicina - muchos de los cuales estan asociado en gran 15 medida al desarrollo de CDAD. Las terapias actuales son extremadamente limitadas; particularmente en vista del hecho de que casi todas las clases de antibioticos estan relacionadas con la causa de la enfermedad. El unico farmaco aprobado por la FDA para el tratamiento de CDAD es la vancomicina, aunque tambien se usa ampliamente metronidazol. El uso extendido de vancomicina para el tratamiento de CDAD es motivo de preocupacion debido a su accion bacteriostatica contra clostridios, un coste relativamente alto y la posible seleccion de cepas resistentes de C. 20 difficile, asf como otras bacterias (particularmente Enterococcus spp.). Una cuestion clave tanto con metronidazol como con la vancomicina es la alta tasa de recidiva, experimentando al menos un 20 % de los pacientes al menos un episodio recurrente. Se propone que la recafda se produce debido a la incapacidad para erradicar las esporas de clostridium durante la terapia, dando como resultado un sobrecrecimiento posterior a un estado patogenico. Esta incapacidad para controlar la formacion de esporas permite una contaminacion continuada del entorno hospitalario. 25 Como tal, los agentes capaces de erradicar las celulas vegetativas y las endosporas de control tendran una ventaja significativa.

La opcion de terapia principal para el tratamiento de CDAD es la interrupcion de cualquier tratamiento antimicrobiano actual seguido de un uso adecuado de vancomicina o metronidazol. Ambos agentes se administran normalmente 30 por via oral, aunque el metronidazol tambien puede administrarse por via intravenosa y casos graves, la vancomicina tambien puede administrarse a traves de numerosas otras rutas, incluyendo dentro del colon, a traves de sonda nasogastrica o como un enema de retencion de vancomicina. Los agentes antibioticos adicionales que se han indicado para usarse en el tratamiento de CDAD incluyen acido fusfdico, rifamicina y sus analogos, teicoplanina y bacitracina, aunque ninguno muestra una eficacia particular sobre la vancomicina o metronidazol. Ademas de 35 detener cualquier exclusion del tratamiento antibacteriano, el uso de agentes antiperistalticos, opiaceos o loperamida ha de evitarse ya que pueden reducir la eliminacion de las toxinas de C. difficile y exacerbar la lesion colonica mediada por las toxinas. Dichos agente tambien pueden precipitar el fleo y causar una dilatacion toxica del colon (J. Med. Microbiol., 2005, 54, 101-111; JAMA, 1993, 269, 71-5; Postgrad. Med. J., 1990, 66(777), 582).

40 Las terapias alternativas, usadas como agentes convencionales en solitario o junto con antibacterianos, tienen el objeto de intentar restablecer la poblacion de microorganismos intestinales nativa, reduciendo los niveles de toxinas de C. difficile o estimulando el sistema inmune (para revisiones, vease Antibiotic Treatment for Clostridium difficile- Associated Diarrhea in Adults, Cochrane Database of Systematic Reviews 2007, Issue 3, Art. N°: CD004610; Clin. Inf. Dis., 2008, 46(S1), S32-S42; Clin. Inf. Dis., 2007, 45(S2), S122-S128; J. Med. Microbiol., 2005, 54, 101-111 y 45 referencias en el mismo). Por lo tanto, las terapias de CdAd alternativas incluyen proporcionar Saccharomyces boulardii o Lactobacillus acidophilus junto con antibioticos, trasplante fecal, y en casos graves en los que todas las demas opciones de terapia han fracasado, cirugfa. Aunque los indices de colectomia son bajos (hasta el 3 % de los casos), se asocia con altos indices de mortalidad (hasta el 60 %).

50 Como tal, hay una necesidad apremiante de agentes nuevos y eficaces para tratar enfermedades asociadas a bacterias formadoras de esporas, particularmente las causadas por miembros de los generos Clostridium y Bacillus y, en particular, una enfermedad asociada a infeccion por Clostridium difficile. Esta necesidad es particularmente intensa a la luz de la naturaleza refractaria de Clostridium difficile con respecto a muchos antibioticos de amplio espectro (incluyendo antibioticos de p-lactama y quinolona) y la frecuencia con la que surge resistencia (Antimicrob. 55 Agents Chemother., 1985, 28(6): 842-844).

(b) Tecnica anterior

Los documentos WO2007056330, WO2003105846 y WO2002060879 divulgan diversos 2-amino bencimidazoles

como agentes antibacterianos.

El documento WO2007148093 divulga diversos 2-amino benzotiazoles como agentes antibacterianos.

5 Los documentos WO2006076009, WO2004041209 y Bowser y col. (Bioorg. Med. Chem. Lett., 2007, 17, 5652-5655) divulgan diversos compuestos de bencimidazol sustituidos utiles como antiinfeciosos que disminuyen la resistencia, la virulencia o el crecimiento de microbios. Se dice que los compuestos no muestran actividad antimicrobiana intrfnseca in vitro.

10 El documento US 5.824.698 divulga diversos dibencimidazoles como antibioticos de amplio espectro, divulgando actividad tanto contra bacterias gram-negativas como gram-positivas, incluyendo Staphylococcus spp. y Enterococcus spp. Sin embargo, este documento no divulga actividad frente a bacterias formadoras de esporas anaerobias y, en particular no divulga actividad frente a cualquier Clostridium spp. (incluyendo C. difficile).

15 El documento US 2007/0112048 A1 divulga diversas bi y triarilimidazolidinas y bi y triarilamidinas como antibioticos de amplio espectro, divulgando actividad tanto contra bacterias gram-negativas como gram-positivas, incluyendo Staphylococcus spp., Enterococcus spp. y Clostridium spp. Sin embargo, este documento no divulga compuestos de formula general (I) como se describe en el presente documento.

20 Chaudhuri y col. (J. Org. Chem., 2007, 72, 1912-1923) describen diversos bis-2-(piridil)-1H-bencimidazoles (incluyendo compuestos de formula I como se describe en el presente documento) como agentes de union a ADN. Este documento no menciona nada sobre la actividad antibacteriana potencial.

Resumen de la invencion

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Por lo tanto, en un primer aspecto de la presente invencion, se proporciona una composicion farmaceutica que comprende el compuesto 2,2'-di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol un N-oxido farmaceuticamente aceptable, sal, hidrato o solvato del mismo, y un excipiente farmaceuticamente aceptable.

30 En otro aspecto, se proporciona una composicion que comprende un hidrato del compuesto 2,2'-di(piridin-4-il)- 1H,1 'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol.

Otros aspectos de la invencion se definen en las reivindicaciones expuestas a continuacion.

35 Descripcion detallada de la invencion I. Definiciones y preferencias aenerales

Cuando se usan en el presente documento, y a menos que se indique especfficamente otra cosa, los siguientes 40 terminos pretenden tener los siguientes significados ademas de cualquier significado mas amplio (o mas estricto) que los terminos puedan poseer en la tecnica:

A menos que se requiera otra cosa por el contexto, el uso en el presente documento del singular se interpretara que incluye el plural y viceversa. El termino "un" o "una" usado en relacion con una entidad se 45 interpretara que se refiere a una o mas de esta entidad. Como tal, los terminos "un" (o "una"), "uno o mas",

y "al menos uno" se usan de forma intercambiable en el presente documento.

Como se usa en el presente documento, el termino "comprender", o variaciones del mismo, tales como "comprende" o "que comprende", se interpretaran que indican la inclusion de cualquier numero entero citado (por ejemplo, una 50 funcion, elemento, caracterfstica, propiedad, etapa de metodo/proceso o limitacion) o un grupo de numeros enteros (por ejemplo, funciones, elementos, caracterfsticas, propiedades, etapas de metodo/proceso o limitaciones), pero no la exclusion de cualquier otro numero entero o grupo de numeros enteros. Por lo tanto, como se usa en el presente documento, la expresion "que comprende" es inclusiva o indefinida y no excluye numeros enteros o etapas de metodo/proceso no citadas adicionales.

La expresion "que consiste basicamente en" se usa en el presente documento para requerir el numero o numeros enteros o etapas especificados, asf como los que no afectan materialmente al caracter o funcion de la invencion reivindicada.

Como se usa en el presente documento, la expresion "que consiste" se usa para indicar la presencia del numero entero citado (por ejemplo, una funcion, elemento, caractenstica, propiedad, etapa de metodo/proceso o limitacion) o un grupo de numeros enteros (por ejemplo, funciones, elementos, caractensticas, propiedades, etapas de metodo/proceso o limitaciones) en solitario.

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Como se usa en el presente documento, el termino "enfermedad" se usa para definir cualquier afeccion anormal que altere la funcion fisiologica y este asociada a unos smtomas espedficos. El termino se usa ampliamente para incluir cualquier trastorno, enfermedad, anomalfa, patologfa, mal, afeccion o smdrome en el que la funcion fisiologica esta deteriorada independientemente de la naturaleza de la etiologfa (o de hecho, si se establece la base etiologica para 10 la enfermedad). Por lo tanto, incluye afecciones que surgen a partir de un trame, lesion, cirugfa, ablacion radiologica, envenenamiento o carencias nutricionales.

Como se usa en el presente documento, la expresion "enfermedad bacteriana" se refiere a cualquier enfermedad que implica (por ejemplo, esta causada, exacerbada, asociada a o caracterizada por la presencia de) una bacteria 15 que reside y/o se replica en el cuerpo y/o las celulas de un sujeto. Por lo tanto, la expresion incluye enfermedades causadas o exacerbadas por toxinas bacterianas (que tambien puede denominarse en el presente documento como "intoxicacion bacteriana").

Como se usa en el presente documento, la expresion enfermedad asociada a Clostridium difficile (CDAD) se usa 20 para definir cualquier enfermedad que implique (por ejemplo, este causada, exacerbada, asociada a o caracterizada por la presencia de) Clostridium difficile que reside y/o se replica en el cuerpo de un sujeto. Por lo tanto, la expresion incluye cualquier enfermedad, trastorno, patologfa, smtoma, afeccion clmica o smdrome en los que las bacterias de las especies Clostridium difficile actuan como agentes etiologicos o en los que la infeccion esta implicada, detectada o involucrada con una o mas cepas de Clostridium difficile. Por lo tanto, la expresion incluye las diversas formas de 25 colitis, colitis pseudomembranosa, diarrea y enfermedad asociada a antibioticos.

Como se usa en el presente documento, la expresion "infeccion bacteriana" se usa para definir una afeccion en la que un sujeto esta infectado con una bacteria. La infeccion puede ser sintomatica o asintomatica. En este ultimo caso, el sujeto puede identificarse como infectado sobre la base de diversas pruebas, incluyen, por ejemplo pruebas 30 bioqmmicas, pruebas serologicas, cultivos microbiologicos y/o microscopfa.

Las expresiones bacteriostatico y bactericida son terminos de la tecnica usados para definir la capacidad de impedir el (o reducir la velocidad del) crecimiento bacteriano y de mediar (directa o indirectamente) la destruccion celular de celulas bacterianas, respectivamente. Las expresiones no son exclusivas entre sf, y muchos agentes ejercen tanto 35 efectos bacteriostaticos como bactericidas (en algunos casos de manera espedfica de la dosis o espedfica de la diana). En general, los agentes bactericidas proporcionan mejores resultados terapeuticos y son preferidos.

Como se usa en el presente documento, el termino "antibiotico de amplio espectro" define un agente que es bactericida y/o bacteriostatico para una gama de bacterias, incluyendo tanto bacterias gram-positivas como gram- 40 negativas.

La expresion "resistente a multiples farmacos" (MDR) como se aplica en el presente documento a una bacteria, define una bacteria que es resistente a dos o mas clases de antibioticos, incluyendo, pero sin limitacion, antibioticos seleccionados entre penicilina, meticilina, quinolona, macrolido y/o vancomicina.

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Como se usa en el presente documento, el termino "tratamiento" o "tratar" se refiere a una intervencion (por ejemplo, la administracion de un agente a un sujeto) que cura, mejora o reduce los smtomas de una enfermedad o elimina (o reduce el impacto de) su causa o causas (por ejemplo, la bacteria causante). En este caso, el termino se usa como sinonimo del termino "terapia". Por lo tanto, el tratamiento de una infeccion de acuerdo con la invencion puede 50 caracterizarse por la accion (directa o indirecta) bacteriostatica y/o bactericida de los compuestos de la invencion.

Ademas, los terminos "tratamiento" o "tratar" se refieren a una intervencion (por ejemplo, la administracion de un agente a un sujeto) que impide o retrasa la aparicion o avance de una enfermedad o reduce (o erradica) su incidencia en una poblacion tratada. En este caso, el termino tratamiento se usa como sinonimo del termino 55 "profilaxis".

El termino "sujeto" (que se interpretara que incluye "individuo", "animal", "paciente" o "mairnfero" cuando el contexto lo permita) define cualquier sujeto, particularmente un sujeto mai^ero, para el que esta indicado el tratamiento. Los sujetos mam^feros incluyen seres humanos, animales domesticos, animales de granja, animales de zoologico,

animales de practica deportiva, mascotas, tales como perros, gatos, cobayas, conejos, ratas, ratones, caballos, ganado bovino, vacas; primates, tales como simios, monos, orangutanes y chimpances; canidos, tales como perros y lobos; felinos, tales como gatos, leones y tigres; equinos, tales como caballos, burros o cebras; animales destinados a la alimentacion, tales como vacas, cerdos y ovejas; ungulados, tales como ciervos y jirafas; roedores, tales como 5 ratones, ratas, hamsteres y cobayas; etc. En realizaciones preferidas, el sujeto es un ser humano, por ejemplo un humano infante.

La expresion bacteria gram-positiva es un termino de la tecnica que define una clase particular de bacterias que se agrupan juntas sobre la base de ciertas caracterfsticas de tincion de la pared celular.

10

La expresion bacteria gram-positiva con bajo contenido de G+C es una expresion de la tecnica que define una subclase particular de bacterias relacionadas a nivel evolutivo en las gram-positivas sobre la base de la composicion de las bases en el ADN. La subclase incluye Streptococcus spp., Staphylococcus spp., Listeria spp., Bacillus spp., Clostridium spp., Enterococcus spp. y Lactobacillus spp.

15

La expresion "concentracion inhibitoria minima" o "MIC" define la menor concentracion de un compuesto de ensayo que es necesaria para inhibir el crecimiento de un aislado bacteriano in vitro. Un metodo comun para determinar la MIC de un antibiotico es preparar varios tubos que contengan diluciones seriadas del compuesto de ensayo que despues se inoculan con el aislado bacteriano de interes. Tras la incubacion en una atmosfera y temperatura 20 apropiadas, la MIC de un antibiotico puede determinarse a partir del tubo con la menor concentracion que no muestre turbidez.

La expresion sal farmaceuticamente aceptable como se aplica a los compuestos de la invencion define cualquier sal de adicion de acidos no toxica organica o inorganica del compuesto de base libre que es adecuado para su uso en 25 contacto con tejidos mamiferos sin demasiada toxicidad, irritacion, respuesta alergica y que son proporcionales con una relacion beneficio/riesgo razonable. Las sales farmaceuticamente aceptables adecuadas se conocen bien en la tecnica. Los ejemplos son las sales con acidos inorganicos (por ejemplo, acidos clorhfdrico, bromhidrico, sulfurico y fosforico), acidos carboxilicos organicos (por ejemplo, acidos acetico, propionico, glicolico, lactico, piruvico, malonico, succinico, fumarico, malico, tartarico, citrico, ascorbico, maleico, hidroximaleico, dihidroximaleico, benzoico, 30 fenilacetico, 4-aminobenzoico, 4-hidroxibenzoico, antranilico, cinnamico, salicilico, 2-fenoxibenzoico, 2- acetoxibenzoico y mandelico) y acidos sulfonicos organicos (por ejemplo, acido metanosulfonico y acido p- toluenosulfonico). Los compuestos de la invencion tambien pueden convertirse en sales por reaccion con un haluro de metal alcalino, por ejemplo, cloruro sodico, yoduro sodico o yoduro de litio. Preferiblemente, los compuestos de la invencion se convierten en sus sales por reaccion con una cantidad estequiometrica de cloruro sodico en presencia 35 de un disolvente tal como acetona.

Estas sales y los compuestos de base libre pueden existir en forma hidratada o una forma sustancialmente anhidra. Las formas cristalinas de los compuestos de la invencion tambien se contemplan y, en general, las sales de adicion de acidos de los compuestos de la invencion son materiales cristalinos que son solubles en agua y diversos 40 disolventes organicos hidrofilos y que en comparacion con sus formas de base libre, demuestran puntos de fusion mayores y un aumento de la solubilidad.

La expresion solvato farmaceuticamente aceptable como se aplica a los compuestos de la invencion define cualquier forma de solvato farmaceuticamente aceptable de un compuesto especificado que conserva la eficacia biologica de 45 dicho compuesto. Los ejemplos de solvatos incluyen compuestos de la invencion junto con agua (hidratos), isopropanol, etanol, metanol, dimetilsulfoxido, acetato de etilo, acido acetico, etanolamina o acetona. Tambien se incluyen formulaciones miscibles de mezclas de disolvente tales como un compuesto de la invencion junto con una mezcla de acetona y etanol. En una realizacion preferida, el solvato incluye un compuesto de la invencion junto con etanol aproximadamente al 20 % y acetona aproximadamente al 80 %. Por lo tanto, las formulas estructurales 50 incluyen compuestos que tienen la estructura indicada, incluyendo las formas hidratadas, asi como las no hidratadas.

En su aspecto mas amplio, la presente invencion contempla todos los isomeros opticos, formas racemicas y diaestereoisomeros de los compuestos descritos en el presente documento. Los expertos en la tecnica apreciaran 55 que, debido a los atomos de carbono asimetricamente sustituidos presentes en los compuestos de la invencion, los compuestos pueden producirse en forma opticamente activa y racemica. Si un centro quiral u otra forma de centro isomerico esta presente en un compuesto de la presente invencion, todas las formas de dicho isomero o isomeros, incluyendo enantiomeros y diaestereoisomeros, pretenden incluirse en el presente documento. Los compuestos de la invencion que contienen un centro quiral (o multiples centros quirales) pueden usarse como una mezcla racemica,

una mezcla enriquecida con enantiomeros, o la mezcla racemica puede separarse usando tecnicas ya conocidas y un enantiomero individual puede usarse en solitario. Por lo tanto, las referencias a los compuestos de la presente invencion incluyen los productos como una mezcla de diaestereoisomeros, como diaestereoisomeros individuales, como una mezcla de enantiomeros, asf como en forma de enantiomeros individuales.

5

Por lo tanto, la presente invencion contempla todos los isomeros opticos y formas racemicas de los mismos del compuesto de la invencion, y a menos que se indique otra cosa (por ejemplo, mediante el uso de formulas estructurales de cuna discontinua) los compuestos mostrados en el presente documento pretenden incluir todos los isomeros opticos posibles de los compuestos asf representados. En los casos en los que la forma estereoqufmica 10 del compuesto es importante para la utilidad farmaceutica, la invencion contempla el uso de un eutomero aislado.

II. Aplicaciones medicas

La invencion encuentra aplicacion en metodos para tratar una infeccion por Clostridium difficile y para tratar una 15 enfermedad asociada a Clostridium difficile (CDAD). La CDAD puede seleccionarse entre: diarrea causada por Clostridium difficile, hinchazon causada por Clostridium difficile, sfntomas tipo gripe causados por Clostridium difficile, fiebre causada por Clostridium difficile, perdida de apetito causada por Clostridium difficile, dolor abdominal causado por Clostridium difficile, nauseas causadas por by Clostridium difficile, deshidratacion causada por Clostridium difficile, colitis causada por Clostridium difficile y colitis pseudomembranosa causada por Clostridium 20 difficile.

(III) Posoloqfa

Los compuestos de la presente invencion pueden administrarse por rutas orales o parenterales, incluyendo 25 administracion intravenosa, intramuscular, intraperitoneal, subcutanea, transdermica, aerea (aerosol), rectal, vaginal y topica (incluyendo bucal y sublingual).

La cantidad del compuesto administrado puede variar ampliamente de acuerdo con la unidad de dosificacion particular empleada, el periodo de tratamiento, la edad y sexo del paciente tratado, la naturaleza y extension del 30 trastorno tratado, y el compuesto particular seleccionado.

En general, la cantidad eficaz del compuesto administrado variara generalmente de aproximadamente 0,01 mg/kg a 10000 mg/kg al dfa. Una dosificacion unitaria puede contener de 0,05 a 500 mg del compuesto, y puede tomarse una o mas veces al dfa. El compuesto puede administrarse con un vehfculo farmaceutico usando formas unitarias de 35 dosificacion convencionales por via oral, parenteral o topica, como se describe a continuacion.

La ruta de administracion preferida es una administracion oral. En general, una dosis adecuada estara en el intervalo de 0,01 a 500 mg por kilogramo de peso corporal del receptor al dfa, preferiblemente en el intervalo de 0,1 a 1000 mg por kilogramo de peso corporal al dfa, y mucho mas preferiblemente en el intervalo de 1 a 5 mg por 40 kilogramo de peso corporal al dfa.

La dosis deseada se presenta preferiblemente como una dosis individual para una administracion diaria. Sin embargo, tambien pueden emplearse dos, tres, cuatro, cinco o seis o mas sub-dosis administradas a intervalos apropiados a lo largo del dfa. Estas sub-dosis pueden administrarse en formas de dosificacion unitarias, por ejemplo, 45 que contienen de 0,001 a 100 mg, preferiblemente de 0,01 a 10 mg, y mucho mas preferiblemente de 0,5 a 1,0 mg de principio activo por forma de dosificacion unitaria.

En la determinacion de una cantidad o dosis eficaz, se consideran varios factores por el doctor tratante, incluyendo, pero sin limitacion, la potencia y duracion de accion de los compuestos usados, la naturaleza y gravedad de la 50 enfermedad a tratar, asf como el sexo, la edad, el peso, la salud general y la capacidad de respuesta individual del paciente a tratar, y otras circunstancias pertinentes. Los expertos en la tecnica apreciaran que las dosificaciones tambien pueden determinarse con la orientacion de Goodman & Goldman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, Novena Edicion (1996), Apendice II, pags. 1707-1711.

55 La cantidad del compuesto que puede combinarse con materiales de vehfculo para producir una forma de dosificacion individual varfa dependiendo del sujeto a tratar y el modo de administracion particular. Por ejemplo, una formulacion destinada a la administracion oral para seres humanos puede contener de aproximadamente 0,5 mg a aproximadamente 7 g de agente activo compuesto opcionalmente con una cantidad apropiada y conveniente de material de vehfculo que puede variar de aproximadamente el 5 a aproximadamente el 95 por ciento de la

composicion total. Las formas unitarias de dosificacion para los compuestos de la invencion contienen generalmente de aproximadamente 1 mg a aproximadamente 500 mg del principio activo, por ejemplo 5 mg, 10 mg, 20 mg, 25 mg, 50 mg, 100 mg, 200 mg, 300 mg, 400 mg, 500 mg, 600 mg, 800 mg o 1000 mg.

5 La eficacia de una dosificacion particular del compuesto de la invencion puede determinarse controlando el efecto de una dosificacion determinada sobre el avance de la enfermedad o su prevencion.

(IV) Formulacion

10 El compuesto de la invencion puede tomar cualquier forma. Puede ser sintetico, purificado o aislado de fuentes naturales usando tecnicas descritas en la tecnica.

Las sales farmaceuticamente aceptables ilustrativas se preparan a partir de acidos formico, acetico, propionico, succfnico, glicolico, gluconico, lactico, malico, tartarico, cftrico, ascorbico, glucuronico, maleico, fumarico, piruvico, 15 aspartico, glutamico, benzoico, antranflico, mesflico, estearico, salicflico, p-hidroxibenzoico, fenilacetico, mandelico, embonico (pamoico), metanosulfonico, etanosulfonico, bencenosulfonico, pantotenico, toluenosulfonico, 2- hidroxietanosulfonico, sulfanflico, ciclohexilaminosulfonico, algenico, b-hidroxibutfrico, galactarico y galacturonico.

Las sales de adicion de bases farmaceuticamente aceptables adecuadas incluyen sales de iones metalicos y sales 20 de iones organicos. Las sales ionicas metalicas incluyen, pero sin limitacion, sales de metales alcalinos apropiadas (grupo la), sales de metales alcalinoterreos (grupo Ila) y otros iones metalicos fisiologicamente aceptables. Dichas sales pueden prepararse a partir de los iones de aluminio, calcio, litio, magnesio, potasio, sodio y cinc. Las sales organicas pueden prepararse a partir de aminas terciarias y sales de amonio cuaternario, incluyendo en parte, trimetilamina, dietilamina, N,N'-dibenciletilendiamina, cloroprocafna, colina, dietanolamina, etilendiamina, meglumina 25 (N-metilglucamina) y procafna. Cada una de las sales anteriores puede prepararse por los expertos en la tecnica por medios convencionales a partir del compuesto correspondiente.

Las composiciones farmaceuticas pueden incluir estabilizantes, antioxidantes, colorantes y diluyentes. Los vehfculos y aditivos farmaceuticamente aceptables se seleccionan de tal forma que los efectos secundarios del compuesto 30 farmaceutico se minimizan y el rendimiento del compuesto no se ve comprometido en tal extension que el tratamiento sea ineficaz.

Las composiciones farmaceuticas pueden administrarse por via enteral y/o parenteral. La via oral (intra-gastrica) es una ruta tfpica de administracion. Los vehfculos farmaceuticamente aceptables pueden estar en formas de 35 dosificacion solidas, incluyendo comprimidos, capsulas, pfldoras y granulos, que pueden prepararse con recubrimientos y revestimientos, tales como recubrimientos entericos y otros ya conocidos en la tecnica. Las formas de dosificacion lfquidas para administracion oral incluyen emulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmaceuticamente aceptables.

40 La administracion parenteral incluye las rutas subcutanea, intramuscular, intradermica, intravenosa y otras rutas conocidas en la tecnica. La administracion enteral incluye una solucion, comprimidos, capsulas de liberacion sostenida, capsulas con recubrimiento enterico y jarabes.

Cuando se administra, la composicion farmaceutica puede estar en o casi a la temperatura corporal.

45

Las composiciones destinadas a su uso oral pueden prepararse de acuerdo con cualquier procedimiento conocido en la tecnica para la fabricacion de composiciones farmaceuticas, y dichas composiciones pueden contener uno o mas agentes seleccionados entre el grupo que consiste en agentes edulcorantes, agentes saporfferos, agentes colorantes y agentes conservantes para proporcionar preparaciones farmaceuticamente elegantes y con agradable 50 sabor. Los comprimidos contienen el principio activo en mezcla con excipientes farmaceuticamente aceptables no toxicos, que son adecuados para la fabricacion de comprimidos. Estos excipientes pueden ser, por ejemplo, diluyentes inertes, tales como carbonato de calcio, carbonato sodico, lactosa, fosfato calcico o fosfato sodico, agentes de granulacion y disgregantes, por ejemplo, almidon de mafz, o acido algfnico, agentes de union, por ejemplo almidon, gelatina o acacia, y agentes lubricantes, por ejemplo, estearato de magnesio, acido estearico o 55 talco. Los comprimidos pueden estar sin recubrir o pueden estar recubiertos mediante tecnicas conocidas, por ejemplo, para retrasar la desintegracion y absorcion en el tracto gastrointestinal y proporcionar asf una accion sostenida durante un periodo mayor. Por ejemplo, puede emplearse un material de retardo tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo.

Las formulaciones para su uso oral tambien pueden presentarse como capsulas de gelatina dura en las que los principios activos se mezclan con un diluyente solido inerte, por ejemplo, carbonato calcico, fosfato calcico o caolfn, o como capsulas de gelatina blanda en las que los principios activos estan presentes tal cual, o mezclas con agua o un medio oleoso, por ejemplo, aceite de cacahuete, parafina lfquido o aceite de oliva.

5

Las suspensiones acuosas que pueden producirse contienen los materiales activos en una mezcla con excipientes adecuados para la fabricacion suspensiones acuosas. Dichos excipientes incluyen agentes de suspension, por ejemplo, carboximetilcelulosa sodica, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, alginato sodico, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto y goma acacia; los agentes dispersantes o humectantes pueden ser fosfatidos de origen 10 natural, por ejemplo lecitina, o productos de condensacion de un oxido de alquileno con acidos grasos, por ejemplo estearato de polioxietileno, o productos de condensacion de oxido de etileno con alcoholes alifaticos de cadena larga, por ejemplo, heptadecaetilenooxicetanol, o productos de condensacion de oxido de etileno con esteres parciales obtenidos a partir de acidos grasos y un hexitol tal como monooleato de polioxietilensorbitol, o productos de condensacion de oxido de etileno con esteres parciales obtenidos a partir de acidos grasos y anhfdridos de 15 hexitol, por ejemplo, monooleato de polioxietilensorbitan.

Las suspensiones acuosas tambien pueden contener uno o mas conservantes, por ejemplo, p-hidroxibenzoato de etilo o n-propilo, uno o mas agentes colorantes, uno o mas agentes saporfferos, o uno o mas agentes edulcorantes, tales como sacarosa o sacarina.

20

Pueden formularse suspensiones oleosas suspendiendo los principios activos en un acido graso de omega-3, un aceite vegetal, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de oliva, aceite de sesamo o aceite de coco, o en un aceite mineral, tal como parafina lfquida. Las suspensiones oleosas pueden contener un agente espesante, por ejemplo, cera de abejas, parafina dura o alcohol cetflico.

25

Los agentes edulcorantes, tales como los que se han expuesto anteriormente, y los agentes saporfferos pueden anadirse para proporcionar una preparacion oral agradable. Estas composiciones pueden conservarse mediante la adicion de un antioxidante, tal como acido ascorbico.

30 Los polvos y granulos dispersables adecuados para la preparacion de una suspension acuosa mediante la adicion de agua proporcionan un principio activo en mezcla con un agente dispersante o humectante, un agente de suspension y uno o mas conservantes. Los agentes dispersantes o humectantes y los agentes de suspension adecuados se ilustran mediante los ya mencionados anteriormente. Tambien pueden estar presentes excipientes adicionales, por ejemplo, agentes edulcorantes, saporfferos y colorantes.

35

Pueden formularse jarabes y elixires que contienen el compuesto de la invencion con agentes edulcorantes, por ejemplo, glicerol, sorbitol o sacarosa. Dichas formulaciones tambien pueden contener un emoliente, un conservante y agentes saporfferos y colorantes.

40 El compuesto de la invencion puede administrarse por via parenteral, por ejemplo, por via subcutanea, intravenosa o intramuscular, o mediante tecnicas de infusion, en forma de suspensiones acuosas u oleaginosas inyectables esteriles. Dichas suspensiones pueden formularse de acuerdo con la tecnica conocida usando agentes dispersantes o humectantes adecuados y agentes de suspension tales como los que se han mencionado anteriormente, u otros agentes aceptables. Una preparacion inyectable esteril puede ser una solucion o suspension inyectable esteril en un 45 diluyente o disolvente parenteralmente aceptable no toxico, por ejemplo una solucion en 1,3-butanodiol. Entre los vehfculos y disolventes aceptables que pueden emplearse se encuentran el agua, solucion de Ringer y una solucion isotonica de cloruro sodico. Ademas, se emplean convencionalmente aceites fijos esteriles como disolvente o medio de suspension. Para este fin, puede emplearse cualquier aceite fijo blando, incluyendo mono o digliceridos sinteticos. Ademas, los acidos grasos poliinsaturados de omega-3 pueden encontrar uso en la preparacion de 50 inyectables.

La administracion tambien puede ser por inhalacion, en forma de aerosoles o soluciones para nebulizadores, o por via rectal, en forma de supositorios preparados mezclando el farmaco con un excipiente no irritable adecuado que es solido a una temperatura normal, pero liquido a temperatura rectal y, por lo tanto, se fundira en el recto para liberar 55 el farmaco. Dichos materiales son manteca de cacao y polietilenglicoles.

Tambien se incluye por la presente invencion la administracion bucal y sublingual, incluyendo una administracion en forma de grageas, pastillas o goma masticable que comprenden los compuestos expuestos en el presente documento. Los compuestos pueden depositarse en una base con sabor, normalmente, sacarosa, y acacia o

tragacanto.

Otros metodos para la administracion de los compuestos de la invencion incluyen parches dermicos que liberan los medicamentos directamente en y/o a traves de la piel de un sujeto.

Los sistemas de administracion topica tambien se incluyen por la presente invencion e incluyen pomadas, polvos, pulverizadores, cremas, gelatinas, colirios, soluciones o suspensiones. Las composiciones de la presente invencion pueden complementarse opcionalmente con agentes adicionales, tales como, por ejemplo, potenciadores de la viscosidad, conservantes, tensioactivos y potenciadores de la penetracion. Los agentes formadores de viscosidad 10 incluyen, por ejemplo, alcohol polivinflico, polivinil pirrolidona, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa, hidroxietilcelulosa, carboximetilcelulosa, hidroxipropilcelulosa u otros agentes conocidos por los expertos en la tecnica. Dichos agentes se emplean tfpicamente a un nivel de aproximadamente el 0,01 % a aproximadamente el 2 % en peso de una composicion farmaceutica.

15 Los conservantes se emplean opcionalmente para impedir el crecimiento microbiano antes de o durante el uso. Los conservantes adecuados incluyen policuaternio-1, cloruro de benzalconio, timerosal, clorobutanol, metilparabeno, propilparabeno, feniletil alcohol, edetato disodico, acido sorbico, u otros agentes conocidos por los expertos en la tecnica. Tfpicamente, dichos conservantes se emplean a un nivel de aproximadamente el 0,001 % a aproximadamente el 1,0 % en peso de una composicion farmaceutica.

20

La solubilidad de los componentes de las presentes composiciones puede mejorarse por un tensioactivo u otro codisolvente apropiado en la composicion. Dichos codisolventes incluyen polisorbatos 20, 60 y 80, tensioactivos de polioxietileno/polioxipropileno (por ejemplo, Pluronic F-68, F-84 y P-103), ciclodextrina, u otros agentes conocidos por los expertos en la tecnica. Tfpicamente, dichos codisolventes se emplean a un nivel de aproximadamente el 25 0,01 % a aproximadamente el 2 % en peso de una composicion farmaceutica.

Los excipientes y vehfculos farmaceuticamente aceptables incluyen todos los anteriores y similares. Las consideraciones anteriores relativas a las formulaciones efectivas y procedimientos de administracion se conocen bien en la tecnica y se describen en libros de textos convencionales. Vease, por ejemplo, Remington: The Science 30 and Practice of Pharmacy, 20a Edicion, (Lippincott, Williams y Wilkins), 2000; Lieberman y col., ed., Pharmaceutical Dosage Forms, Marcel Decker, Nueva York, N. Y. (1980) y Kibbe y col., ed., Handbook of Pharmaceutical Excipients (3a Edicion), American Pharmaceutical Association, Washington (1999).

Por lo tanto, en realizaciones en las que el compuesto de la invencion se formula junto con un excipiente 35 farmaceuticamente aceptable, puede usarse cualquier excipiente adecuado, incluyendo, por ejemplo, diluyentes inertes, agentes disgregantes, agentes de union, agentes lubricantes, agentes edulcorantes, agentes saporfferos, agentes colorantes y conservantes. Los diluyentes inertes adecuados incluyen carbonato sodico y calcico, fosfato sodico y calcico, y lactosa, aunque el almidon de mafz y el acido algfnico son agentes disgregantes adecuados. Los agentes de union pueden incluir almidon y gelatina, mientras que el agente lubricante, si esta presente, sera 40 generalmente estearato de magnesio, acido estearico o talco. Las composiciones farmaceuticas pueden tomar cualquier forma, e incluyen por ejemplo comprimidos, elixires, capsulas, soluciones, suspensiones, polvos, granulos, lacas de unas, barnices y enchapados, partes dermicos y aerosoles.

La composicion farmaceutica puede tomar la forma de un kit de parches, cuyo kit puede comprender la composicion 45 de la invencion junto con instrucciones para su uso y/o una pluralidad de diferentes componentes en forma de dosificacion unitaria.

Para la administracion oral el compuesto de la invencion puede formularse en preparaciones solidas o lfquidas, tales como capsulas, pfldoras, comprimidos, trociscos, grageas, fundidos, polvos, granulos, soluciones, suspensiones, 50 dispersiones o emulsiones (cuyas soluciones, suspensiones, dispersiones o emulsiones pueden ser acuosas o no acuosas). Las formas de dosificacion unitarias solidas pueden ser una capsula que puede ser del tipo de gelatina recubierta dura o blanda habitual que contiene, por ejemplo, tensioactivos, lubricantes y cargas inertes, tales como lactosa, sacarosa, fosfato calcico y almidon de mafz. Los comprimidos para su uso oral pueden incluir el compuesto de la invencion, en solitario o junto con excipientes farmaceuticamente aceptables, tales como diluyentes inertes, 55 agentes disgregantes, agentes de union, agentes lubricantes, agentes edulcorantes, agentes saporfferos, agentes colorantes y conservantes. Los diluyentes inertes adecuados incluyen carbonato sodico y calcico, fosfato sodico y calcico, y lactosa, mientras que el almidon de mafz y el acido algfnico son agentes disgregantes adecuados. Los agentes de union pueden incluir almidon y gelatina, mientras que el agente lubricante, si esta presente, sera generalmente estearato de magnesio, acido estearico o talco. Si se desea, los comprimidos pueden recubrirse con

un material tal como monoestearato de glicerilo o diestearato de glicerilo, para retrasar la absorcion en el tracto gastrointestinal. Las capsulas para su uso oral incluyen capsulas de gelatina dura en las que el compuesto de la invencion se mezcla con un diluyente solido, y las capsulas de gelatina blanda en las que el principio activo se mezcla con agua o un aceite tal como aceite de cacahuete, parafina lfquida o aceite de oliva.

5

Las formulaciones para administracion rectal pueden presentarse en forma de un supositorio con una base adecuada que comprende, por ejemplo, manteca de cacao o un salicilato. Las formulaciones adecuadas para administracion vaginal pueden presentarse como supositorios vaginales, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en pulverizacion que contienen, ademas, del principio activo, dichos vehfculos como se conocen en 10 la tecnica como apropiados.

Para su uso intramuscular, intraperitoneal, subcutaneo e intravenoso, los compuestos de la invencion se proporcionaran generalmente en soluciones acuosas esteriles o suspensiones, tamponadas en un pH e isotonicidad apropiados.

15

Los vehfculos acuosos adecuados incluyen solucion de Ringer y cloruro sodico isotonico. Las suspensiones acuosas de acuerdo con la invencion pueden incluir agentes de suspension, tales como derivados de celulosa, alginato sodico, polivinilpirrolidona y goma de tragacanto, y un agente humectante, tal como lecitina. Los conservantes adecuados para suspensiones acuosas incluyen p-hidroxibenzoato de etilo y n-propilo.

20

Los compuestos de la invencion tambien pueden estar presentes como formulaciones en liposomas.

En otra realizacion, los compuestos de la invencion se preparan en forma de comprimidos con bases de comprimidos convencionales tales como lactosa, sacarosa y almidon de mafz, junto con aglutinantes, tales como 25 acacia, almidon de mafz o gelatina, agentes disgregantes disenados para facilitar la descomposicion y disolucion del comprimido tras la administracion, tal como almidon de patata, acido algfnico, almidon de mafz, y goma guar, lubricantes destinados a mejorar el flujo de granulaciones de los comprimidos y para impedir la adhesion del material de comprimido a las superficies de las matrices y punzones para comprimidos, por ejemplo, talco, acido estearico o estearato de magnesio, calcio o cinc, tintes, agentes colorantes y agentes saporfferos destinados a mejorar las 30 cualidades esteticas de los comprimidos y hacerlos mas aceptables para el paciente.

Los excipientes adecuados para su uso en formas de dosificacion lfquidas orales incluyen diluyentes, tales como agua y alcoholes, por ejemplo, etanol, alcohol bencflico, y los alcoholes de polietileno, con o sin la adicion de un tensioactivo farmaceuticamente aceptable, un agente de suspension o agente emulsionante.

35

Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse por via parenteral, es decir, por via subcutanea, intravenosa o intraperitoneal. En dichas realizaciones, el compuesto se proporciona como dosis inyectables en un diluyente fisiologicamente aceptable junto con un vehfculo farmaceutico (que puede ser un lfquido esteril o mezcla de lfquidos). Los lfquidos adecuados incluyen agua, solucion salina, dextrosa acuosa y soluciones de compuestos 40 relacionadas, un alcohol (tales como etanol, isopropanol o hexadecil alcohol), glicoles (tales como propilenglicol o polietilenglicol), glicerol cetales (tal como 2,2-dimetil-1,3-dioxolano-4-metanol), eteres (tal como poli(etileno-glicol) 400), un aceite, un acido graso, un ester de acido graso o glicerido, o un glicerido de acido graso acetilado con o sin la adicion de un tensioactivo farmaceuticamente aceptable (tal como un jabon o un detergente), agente de suspension (tal como pectina, carbomeros, metilcelulosa, hidroxipropilmetilcelulosa o carboximetilcelulosa), o agente 45 de emulsion y otros adyuvantes farmaceuticos. Los aceites adecuados que pueden usarse en las formulaciones parenterales de esta invencion son los de petroleo, de origen animal, vegetal o sintetico, por ejemplo, aceite de cacahuete, aceite de soja, aceite de sesamo, aceite de semilla de algodon, aceite de mafz, aceite de oliva, vaselina, y aceite mineral.

50 Los acidos grasos adecuados incluyen acido oleico, acido estearico y acido isostearico. Los esteres de acidos grasos adecuados son, por ejemplo, oleato de etilo y miristato de isopropilo. Los jabones adecuados incluyen sales de metales alcalinos grasos, de amonio y de trietanolamina, y los detergentes adecuados incluyen detergentes cationicos, por ejemplo, haluros de dimetil dialquil amonio, haluros de alquil piridinio y acetatos de alquilaminas; detergentes anionicos, por ejemplo, sulfonatos de alquilo, arilo y olefina, sulfatos de alquilo, olefina, eter y 55 monoglicerido, y sulfosuccinatos; detergentes no ionicos, por ejemplo, oxidos de aminas grasas, alcanolamidas de acidos grasos, y copolfmeros de polioxietilenopolipropileno; y detergentes anfotericos, por ejemplo, alquil-beta- aminopropionatos, y sales de amonio cuaternario de 2-alquilimidazolina, asf como mezclas.

Las composiciones parenterales de esta invencion contendran tfpicamente de aproximadamente 0,5 a

aproximadamente el 25 % en peso del compuesto de la invencion en solucion. Tambien pueden usarse conservantes y tampones. Para minimizar o eliminar la irritacion en el sitio de inyeccion, dichas composiciones pueden contener un tensioactivo no ionico que tiene un equilibrio hidrofilo-lipofilo (HLB) de aproximadamente 12 a aproximadamente 17. La cantidad de tensioactivo en dichas formulaciones varfa de aproximadamente 5 a 5 aproximadamente el 15 % en peso. El tensioactivo puede ser un unico componente que tiene el HLB anterior o puede ser una mezcla de dos o mas componentes que tienen el HLB deseado. Los tensioactivos ilustrativos usados en las preparaciones parenterales son la clase de esteres de acidos grasos de polietilensorbitan, por ejemplo, monooleato de sorbitan y los aductos de alto peso molecular de oxido de etileno con una base hidrofoba, formada por la condensacion de oxido de propileno con propilenglicol.

10

Los compuestos de la invencion tambien pueden administrarse por via topica, y cuando se hace de este modo el vehfculo puede comprender adecuadamente una solucion, pomada o base en gel. La base, por ejemplo, puede comprender uno o mas de los siguientes: vaselina, lanolina, polietilenglicoles, cera de abejas, aceite mineral, diluyentes tales como agua y alcohol, y emulsionantes y estabilizantes. Las formulaciones topicas pueden contener 15 una concentracion del compuesto de aproximadamente el 0,1 a aproximadamente el 10 % p/v (peso por volumen unitario).

Cuando se usan complementariamente, los compuestos de la invencion pueden formularse para su uso con uno o mas farmacos distintos. En particular, los compuestos de la invencion pueden usarse junto con analgesicos, 20 antiinflamatorios (por ejemplo, esteroides), agentes inmunomoduladores y anti-espasmodicos.

Por lo tanto, el uso adyuvante puede reflejarse en una dosificacion unitaria especffica disenada para ser compatible (o sinergizar) con los demas farmacos, o en formulaciones en las que el compuesto se mezcla con uno o mas antiinflamatorios, citocinas o agentes inmunosupresores (o de otra manera ffsicamente asociados a los demas 25 farmacos en una dosis unitaria individual). El uso adyuvantes tambien puede reflejarse en la composicion de los kits farmaceuticos de la invencion, en los que el compuesto de la invencion se envase conjuntamente (por ejemplo, como parte de un conjunto de dosis unitarias) con los agentes antimicrobianos y/o antiinflamatorios. El uso adyuvante tambien puede reflejarse en la informacion y/o instrucciones en relacion con la co-administracion del compuesto con agentes antimicrobianos y/o antiinflamatorios.

30

(V) Ejemplos

(i) Experimentacion general

35 Se realizo un analisis por HPLC-UV-MS en una HPLC Gilson 321 con deteccion realizada por Gilson 170 DAD y un espectrometro de masas Finnigan AQA funcionando en un modo de ionizacion por electronebulizacion. La columna de HPLC usada es una columna Phenomenex Gemini C18 150 x 4,6 mm o una columna Phenomenex Gemini C18 50 x 4,6 mm 3 p. El analisis por HPLC preparativa se realizo en Gilson 321 con una deteccion realizada por Gilson 170 DAD. Las fracciones se recogieron usando un colector de fracciones Gilson 215. La columna de HPLC 40 preparativa usada es una columna Phenomenex Gemini C18 150 x 10 mm y la fase movil es acetonitrilo/agua.

Los espectros de 1H RMN se registraron en un instrumento Bruker funcionando a 300 MHz. Los espectros de RMN se obtuvieron como soluciones de CDCl3 o DMSO-cfe (indicadas en ppm), usando cloroformo como el patron de referencia (7,26 ppm) o DMSO-cfe (2,50 ppm). Cuando se indican multiplicidades de pico, se usan las siguientes 45 abreviaturas s (singlete), d (doblete), t (triplete), m (multiplete), a (ancho), dd (doblete de dobletes), dt (doblete de tripletes), td (triplete de dobletes), osc. (oscurecido), ap. (aparente). Las constantes de acoplamiento, cuando se dan, se indican en Hertzios (Hz).

La cromatograffa en columna se realizo por cromatograffa ultrarrapida (40-65 pm de gel de sflice) o usando un 50 sistema de purificacion automatizado (SP1™ Purification System de Biotage® o CombiFlash Companion de ISCO). Las reacciones en el microondas se realizaron en un Initiator 8™ (Biotage) o un Explorer 48 (CEM).

Las abreviaturas usadas son DMSO (dimetilsulfoxido), DMF (dimetilformamida), IMS (alcoholes metilados industriales), TLC (cromatograffa de capa fina), Boc (ferc-butiloxicarbonilo), TR (tiempo de retencion), DCM 55 (diclorometano), TFA (acido trifluoroacetico), LCMS (cromatograffa lfquida-espectrometrfa de masas), RMN (resonancia magnetica nuclear), DME (1,2-dimetoxietano).

Los datos MIC se determinaron por microdilucion en caldo de acuerdo con los protocolos CLSI descritos en Methods for Antimicrobial Susceptibility Testing of Anaerobic Bacteria; Estandar Aprobado-Septima Edicion [M11-A7, Vol. 27,

N° 2, enero de 2007] y Methods for Dilution Antimicrobial Susceptibility Tests for Bacteria That Grow Aerobically; Estandar Aprobado-Septima Edicion [M7-A7, Vol. 26, N° 2, enero de 2006].

4,4,-(1-metil-1H,1,H-5,5,-bibenzo[d]imidazol-2,2,-diil)bis(4,1-fenileno)dicarbamato de terc-butilo (Intermedio 8)

5

Se disolvio W4-Metilbifenil-3,3',4,4'-tetraamina (150 mg, 0,66 mmol) en DMF (10 ml). Se anadio Oxone® (810 mg, 1,32 mmol) seguido de una solucion de W-Boc-4-aminobenzaldehido (preparada de acuerdo con J. Med. Chem., 1992, 35, 4150 y J. Med. Chem., 2004, 47, 2411) 320 mg, 1,45 mmol) en DMF (5 ml). La mezcla se agito a temperatura ambiente durante 5 h. Se anadio K2CO3 acuoso, y el precipitado resultante se filtro y se lavo con agua 10 (3 x 100 ml). Este material en bruto se seco con succion, y se purifico por cromatograffa en columna (75:25 de EtOAc-petroleo con respecto a EtOAc al 100 %). El material se purifico adicionalmente por recristalizacion en MeOH para dar el producto en forma de un solido de color blanco (83 mg, 20 %).

'h RMN (DMSO): 12,81 (1 H, s a), 9,67 (2 H, d, J6, 1), 8,15-8,05 (2 H, m), 7,96-7,89 (1,5 H, m), 7,86-7,77 (2,5 H, m), 7,73-7,49 (8 H, m), 3,91 (3 H, s) y 1,51 (18 H, s). Se preparo 2,2,-di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5,-bibenzo[d]imidazol de 15 una manera similar, purificando por cristalizacion o cromatograffa en columna cuando fue necesario:

TR LCMS = 1,46 min, MH+ 389,1; 1H RMN (DMSO+D2O): 8,79-8,74 (4 H, m), 8,12-8,08 (4 H, m), 8,00-7,89 (2 H, m a), 7,81-7,73 (2 H, m) y 7,70-7,63 (2 H, m a).

Actividad del compuesto de la invencion frente a C. difficile

20

La concentracion inhibitoria minima (MIC) frente a Clostridium difficile ATCC700057 y un aislado clfnico (CI) de Clostridium difficile se resumen en la Tabla 2 (a continuacion):

Tabla 2

Compuesto: MIC (ATCC700057) MIC (CI)

2,2'-Di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol: + + + + + +

25

En la tabla anterior, los sfmbolos usados para indicar los valores de MIC son:

+++ = <1 pg/ml ++ = 1-16 pg/ml + = 17-64 pg/ml 30 - = >64 pg/ml

Actividad del compuesto de la invencion frente a C. perfringens

La concentracion inhibitoria minima (MIC) frente a Clostridium perfringens ATCC13124 y un aislado clfnico de 35 Clostridium perfringens (CI) se resumen en la Tabla 3 (a continuacion). Los sfmbolos usados para indicar los valores de MIC son como para la Tabla 2 (anterior).

Tabla 3

Compuesto: MIC (ATCC13124) MIC (CI)

2,2'-Di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol: - -

40 Actividad del compuesto de la invencion frente a S. pneumoniae

45

La concentracion inhibitoria minima (MIC) frente a Streptococcus pneumoniae ATCC49619 y una cepa de Streptococcus pneumoniae MDR (MDR) se resumen en la Tabla 4 (a continuacion). Los sfmbolos usados para indicar los valores de MIC son como para la Tabla 2 (anterior).

Tabla 4

Compuesto numero: MIC (ATCC49619) MIC (MDR)

2,2'-Di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzofdlimidazol: + + + + + +

Actividad del compuesto de la invencion frente a S. aureus

50 La concentracion inhibitoria minima (MIC) frente a Staphylococcus aureus ATCC29213 y una cepa de Staphylococcus aureus MDR (MDR) se resumen en la Tabla 5 (a continuacion). Los sfmbolos usados para indicar los valores de MIC son como para la Tabla 2 (anterior).

Tabla 5

Compuesto: MIC (ATCC29213) MIC (MDR)

2,2'-Di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol: - -

Actividad del compuesto de la invencion frente a E. faecium

5

La concentracion inhibitoria minima (MIC) frente a Enterococcus faecium y una cepa de Enterococcus faecium MDR (MDR) se resumen en la Tabla 6 (a continuacion). Los simbolos usados para indicar los valores de MIC son como para la Tabla 2 (anterior).

10 Tabla 6

Compuesto: MIC MIC (MDR)

2,2'-Di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol: - -

Actividad del compuesto de la invencion frente a E. faecalis

La concentracion inhibitoria minima (MIC) frente a una cepa resistente a la vancomicina de Enterococcus faecalis 15 ATCC51299 (VR) se resume en la Tabla 7 (a continuacion). Los simbolos usados para indicar los valores de MIC son como para la Tabla 2 (anterior).

Tabla 7

Compuesto: MIC

2,2'-Di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol: -

20 Especificidad del compuesto de la invencion

El compuesto no mostro actividad significativa (MIC >64 pg/ml) frente a la bacteria facultativamente anaerobia Gram- negativa Escherichia coli (ATCC25922). 2,2'-Di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol es altamente selectivo para Clostridium difficile con respecto a C. perfringens, Staphylococcus aureus, Enterococcus faecium y 25 Enterococcus faecalis. Este compuesto tampoco mostro una actividad antibacteriana significativa frente a Bacillus subtilis o Bacteroides fragilis.

Por lo tanto, los datos muestran que el compuesto de la invencion puede encontrar utilidad en el tratamiento de CDAD sin causar una alteracion patologica de la flora intestinal normal.

30

Claims

REIVINDICACIONES

1. Una composicion farmaceutica que comprende el compuesto 2,2'-di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-

bibenzo[d]imidazol, o un N-oxido farmaceuticamente aceptable, sal, hidrato o solvato del mismo, y un excipiente

5 farmaceuticamente aceptable.
2. La composicion farmaceutica de la reivindicacion 1 que comprende un hidrato del compuesto 2,2'- di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-bibenzo[d]imidazol, y un excipiente farmaceuticamente aceptable.

10 3. Una composicion que comprende un hidrato del compuesto 2,2'-di(piridin-4-il)-1H,1'H-5,5'-

bibenzo[d]imidazol.
4. La composicion de una cualquiera de las reivindicaciones anteriores para su uso en un metodo para tratar una infeccion por Clostridium difficile.

15
5. La composicion de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3 para su uso en un metodo para tratar una enfermedad asociada a Clostridium difficile (CDAD).
6. La composicion de la reivindicacion 5, en la que dicha CDAD se selecciona entre: diarrea causada por 20 Clostridium difficile, hinchazon causada por Clostridium difficile, sfntomas tipo gripe causados por Clostridium

difficile, fiebre causada por Clostridium difficile, perdida del apetito causada por Clostridium difficile, color abdominal causado por Clostridium difficile, nauseas causadas por Clostridium difficile, deshidratacion causada por Clostridium difficile, colitis causada por Clostridium difficile y colitis pseudomembranosa causada por Clostridium difficile.