ES2562977T3 - Composición oral con un efecto antienvejecimiento sobre la piel - Google Patents
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Abstract
Una composición adaptada para consumo oral y capaz de proporcionar un efecto antienvejecimiento en la piel del consumidor, que comprende: (i) un ligando PPAR; (ii) un agente de unión de un receptor de estrógenos; (iii) un agente que está implicado en la modificación postraduccional de colágeno; y (iv) un carotenoide, en la que la composición está sustancialmente libre de cinc y/o selenio añadidos, en la que la composición está en la forma de una cápsula, a condición de que cuando la composición contenga al menos el 0,01 % en peso de un emulsionante fosfolipídico de calidad alimentaria, la cantidad total de ácido docosahexanoico (DHA) y de ácido eicosapentaenoico (EPA) en la composición sea mayor que el 0,6 % en peso o menor que el 0,024 % en peso; en la que el ligando PPAR comprende un ácido graso omega-3 seleccionado entre DHA, EPA y mezclas de los mismos, en la que el agente que está implicado en la modificación postraduccional de colágeno es vitamina C y en la que el agente de unión del receptor de estrógenos es genisteína.
Description
colágeno en la piel y las composiciones de la invención pueden usarse para aumentar la síntesis de colágeno (como parte, o separadamente, del efecto antienvejecimiento); preferiblemente la síntesis de colágeno se aumenta en al menos el 10 %, más preferiblemente en al menos el 20 % tal como puede ser en al menos el 25 % en peso (por ejemplo, según se determinó sobre la base del peso de colágeno sintetizado preferiblemente en un período de 14 semanas).
La piel puede incluir la piel del cuerpo entero, preferiblemente la cara, el cuello y/o las manos. La piel puede ser también piel del cuero cabelludo con beneficios para el cabello (incluido el envejecimiento reducido) y para el picor
o la irritación.
Los siguientes ejemplos no limitativos ilustran la invención y no limitan de forma alguna su ámbito. En los ejemplos y a lo largo de esta memoria descriptiva, todos los porcentajes, partes y relaciones son en peso a no ser que se indique lo contrario.
Ejemplos
Determinación del aumento de la síntesis de colágeno
Exposición general del enfoque experimental
Se desarrolló un ensayo bioquímico y un procedimiento de extracción de proteínas para determinar cambios en síntesis de colágeno nueva en la piel.
- a.
- Se tomaron biopsias de la piel en la línea de base (T1) y al final (T15) del período de intervención.
- b.
- Se tomaron en cada punto temporal, dos biopsias por punción de 3 mm (profundidad de 4 mm), se pusieron en un criotubo e inmediatamente se congelaron instantáneamente en nitrógeno líquido.
- c.
- Estas biopsias se almacenaron luego a –80 ºC.
Materiales y procedimientos
Preparación del lisado celular
Todas las biopsias se pusieron en un homogeneizador de tipo Dounce con 1 ml de tampón de lisis celular y se molieron completamente (hasta que no quedaran grumos de piel o matriz extracelular). El tampón de lisis contenía NP-40 al 1 %, desoxicolato sódico al 0,1 %, SDS al 0,1 %, cloruro sódico 6 mM y Tris 0,05 M a pH 7,6. Antes del uso se añadió un cóctel inhibidor de proteasa (1000X; Sigma P8340) a un nivel de 10 l por ml de tampón de lisis. Después de la homogeneización completa del tejido, se eliminó por centrifugación durante 20 min a 20.000 g a 4 ºC el desecho de células innecesarias. Se congeló a –80 ºC hasta que fue necesario el lisado de células clarificado.
Ensayo del total de proteínas (Pierce)
La concentración del total de proteínas de cada lisado de células se midió usando el kit de ensayo de proteínas Pierce BCA., Se preparó a partir de una solución madre de BSA de 2 mg/ml un conjunto de 8 soluciones patrón del intervalo de 0 a 1200 g/ml. Se añadieron 10 l de lisado patrón o de células a pocillos duplicados de una placa de microtitulación de 96 pocillos, de fondo plano. La solución de reactivo se preparó de acuerdo con las instrucciones del kit a partir de 50 partes de reactivo A y 1 parte de reactivo B. A cada pocillo de la placa de microtitulación se añadieron 200 l del reactivo final. Se mezcló la placa, se cubrió e incubó a 37 ºC durante 30 min y se midió la absorbancia a 562 nm. Se creó una curva patrón de proteínas y se usó para determinar la concentración de proteína de cada lisado de células.
Péptido IC de Procolágeno. KIT EIA (Takara Bio Inc.)
Se sintetiza Colágeno I como una molécula precursora, Procolágeno I. La cantidad de péptido libre por lo tanto, refleja estequiométricamente la cantidad de colágeno I sintetizado. El kit de Inmunoensayo Enzimático (EIA) de Péptido C-terminal de Procolágeno de Tipo I permite la determinación cuantitativa de Péptido C-terminal de Procolágeno de Tipo I (PIP).
Se prepararon 8 patrones de PIP en diluyente de muestra a concentraciones variables entre 0 y 640 ng/ml. A pocillos duplicados se añadieron 100 l de solución de anticuerpo-conjugado de peroxidasa y 20 l de lisado de células (1 g de proteína) o patrón. Se selló la placa y se incubó a 37 ºC durante 3 h antes de lavarse tres veces con 400 l de PBS. Cada pocillo recibió después 100 l de solución de sustrato y se incubó la placa a temperatura ambiente en la cabecera del banco durante 15 min. Después de este periodo, se añadieron a cada pocillo 100 l de solución de parada y se midió la absorbancia a 450 nm con un lector de placas.
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35
40
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Se trazó una curva patrón de absorbancia media frente a concentración de PIP y se calculó la línea de mejor ajuste por análisis de regresión. La concentración desconocida de PIP en todas las muestras se estimó a partir de esto.
Medida de la hidratación de la piel
Diversos procedimientos para determinar el estado de hidratación del estrato córneo se han resumido por Fluhr y cols., Skin Res Technol. 1999, 5:161-170. En resumen, el Corneómetro (Courage & Khazaka) mide la hidratación de la piel mediante la detección de la capacitancia epidérmica. La sonda se hace de dos placas metálicas de tipo dedo próximas entre sí, con una profundidad de medida de aproximadamente 30 mm. El instrumento determina el nivel de humedad de las capas cutáneas más externas del estrato córneo. El principio de acción del Corneometer está basado en la modificación de las capacidades eléctricas del detector que está diseñado en forma de un condensador. La superficie de la cabeza de medición, en contacto con la piel, modifica su capacidad eléctrica de acuerdo con el nivel de humedad de la piel. Un aumento del valor medido por el corneómetro es indicativo de mejora de hidratación de la piel.
Medida de la pérdida de agua transepidérmica (TEWL)
Un análisis de los procedimientos para medir la TEWL se ha llevado a cabo por Wilson & Malbach (1989) Transepidermal water loss, A review, en: Cutaneous Investigación in Health and Disease, Non Invasive Methods and Instrumentation (Leveque, J.J. eds), págs. 113-130, Dekker, Nueva York, NY. La barrera cutánea actúa como un regulador en el equilibrio hídrico de la piel. Cuando este se estropea, el sistema de regulación de intercambio de agua llega a desestabilizarse. Esto significa que el agua emigra más fácilmente al medio externo, aumentando la pérdida de agua transepidérmica. La eficiencia de la barrera cutánea disminuye con la edad. Sin embargo, si mejora el estado de la barrera cutánea, la pérdida de agua disminuye a medida que el mecanismo de regulación del intercambio de agua recupera su equilibrio. Las mediciones de la pérdida de agua transepidérmica se pueden realizar con un “Evaporimeter” EP. Una sonda hecha con dos captadores se atraviesa por una corriente de vapor de agua. La diferencia de la presión parcial se mide entre los dos captadores. Este valor corresponde a la velocidad de evaporación de una sustancia volátil (en este caso, agua). Una reducción de la TEWL es indicativa de mejora de las propiedades de la piel.
Medida de la elasticidad y firmeza de la piel
Las mediciones de la elasticidad y la firmeza de la piel se hacen con un cutómetro y se describe por Escoffier y cols., J. Invest. Dermatol. 93(3): 353-7. La medición se hace con un instrumento que, usando el principio del vacío, sorbe una zona definida de superficie de la piel y la registra ópticamente. El análisis de las curvas de medidas registradas hace posible determinar las características elásticas y plásticas de la piel. La piel nueva muestra un grado alto de elasticidad y pierde la forma sólo gradualmente mientras que recupera su estado original al terminar el proceso de succión. La piel que es joven, sana, elástica y adecuadamente húmeda tendrá una elasticidad más alta que una piel rugosa, seca envejecida. El cutómetro da por lo tanto una serie de mediciones que permite a los autores de la invención cuantificar las características elásticas. La técnica consiste en aspiración cutánea con una sonda de medición. La piel se succiona dentro del orificio de la sonda por la presión negativa creada dentro del dispositivo. La profundidad a la que penetra la piel en la sonda se mide mediante un sistema de medición óptica sin contacto. Este sistema consiste en una fuente luminosa y receptor de luz, así como por dos prismas uno frente al otro, que proyectan la luz desde el transmisor al receptor. La intensidad de la luz varía con la profundidad de penetración de la piel. La resistencia de la piel a succionarse da una indicación de la firmeza de la piel y la capacidad de retornar a su posición original da una indicación de la elasticidad de la piel. Al final de cada medición se muestra una curva que permite hacer varios cálculos que corresponden a las propiedades mecánicas de la piel.
Análisis de las líneas finas, arrugas y suavidad de la piel
La rugosidad y las arrugas de la piel se pueden estimar usando réplicas y perfilometría de la piel según se describe por Cook, J. Soc. Cosmet Chem., 1980, 31:339-359. Se prepara un material de caucho de silicio tal como Silflo y se aplica a la zona de ensayo. Una vez constituido ello se quita y analiza usando perfilometría óptica. Con este procedimiento de ensayo, se proyecta un modelo de tira paralela sobre la superficie de la piel y se reproduce en el chip de CCD de una cámara. La medición en 3 dimensiones se logra por el hecho de que diferencias en la evaluación mínimas en la superficie de la piel desvían las tiras de proyección paralelas y que estas desviaciones constituyen una medición cualitativa y cuantitativa del perfil de la piel. Los perfiles de la piel se registran por la cámara de CCD, se digitalizan y se transfieren a la calculadora de medición y evaluación para evaluación cuantitativa.
Ejemplo 1 -Composición de la invención
La siguiente es una composición de la invención.
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imagen1
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