ES2543098T3 - Sales cristalinas inhibidoras de CDC7 - Google Patents

Abstract

Formas cristalinas de la sal maleato del compuesto de NMS-E354 con la fórmula:**Fórmula** y polimorfos del mismo.

Description

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En muestras libres de cualquier material adicional (otras formas cristalinas, excipientes), debiera ser posible observar picos de difracción a aproximadamente los valores de 2-theta (grados) descritos en la tabla 2 más adelante.

5 En otra realización preferida, la forma I de la sal sulfato esencialmente pura 1:1 de NMS-E354 muestra el diagrama de difracción de rayos-X indicado en la Fig. 2E.

También se otorga una alta preferencia por la forma I de la sal sulfato 1:1 de NMS-E354 que muestra un diagrama de difracción de rayos-X del tipo mostrado en la Fig. 2E, con intensidades de pico a aproximadamente los valores de

10 2-theta (grados) descritos en la tabla 1 anterior. En muestras libres de cualquier material adicional (otras formas cristalinas, excipientes), debiera ser posible observar picos de difracción a aproximadamente los valores de 2-theta (grados) descritos en la tabla 3 más adelante.

En otra realización preferida, la forma I de la sal mesilato esencialmente pura 1:1 de NMS-E354 muestra el diagrama 15 de difracción de rayos-X indicado en la Fig. 2D.

También se otorga una alta preferencia por la forma I de la sal mesilato 1:1 de NMS-E354 que muestra un diagrama de difracción de rayos-X del tipo mostrado en la Fig. 2D, con intensidades de pico a aproximadamente los valores de 2-theta (grados) descritos en la tabla 1 anterior. En muestras libres de cualquier material adicional (otras formas

20 cristalinas, excipientes), debiera ser posible observar picos de difracción a aproximadamente los valores de 2-theta (grados) descritos en la tabla 4 más adelante.

En otra realización preferida, la forma I de la sal hemifumarato esencialmente pura 1:1 de NMS-E354 muestra un diagrama de difracción de rayos-X indicado en la Fig. 2C.

25 También se otorga una alta preferencia por la forma I de la sal hemifumarato 1:1 de NMS-E354 que muestra un diagrama de difracción de rayos-X del tipo mostrado en la Fig. 2C, con intensidades de pico a aproximadamente los valores de 2-theta (grados) descritos en la tabla 1 anterior. En muestras libres de cualquier material adicional (otras formas cristalinas, excipientes), debiera ser posible observar picos de difracción a aproximadamente los valores de

30 2-theta (grados) descritos en la tabla 5 más adelante.

En otra realización preferida, la forma I cristalina de la base libre esencialmente pura 1:1 de NMS-E354 muestra el diagrama de difracción de rayos-X indicado en la Fig. 2A.

35 También se otorga una alta preferencia por la forma I de la base libre 1:1 de NMS-E354 que muestra un diagrama de difracción de rayos-X del tipo mostrado en la Fig. 2A, con intensidades de pico a aproximadamente los valores de 2-theta (grados) descritos en la tabla 1 anterior.

En muestras libres de cualquier material adicional (otras formas cristalinas, excipientes), debiera ser posible

40 observar picos de difracción a aproximadamente los valores de 2-theta (grados) descritos en la tabla 6 más adelante.

Esencialmente puro significa que las formas cristalinas de la presente invención tienen una pureza de al menos 90%. Más preferiblemente, las formas cristalinas de la presente invención tienen una pureza de al menos 95%, y

45 más preferiblemente al menos el 99% en peso de los cristales de sal una adición de ácidos o de base libre de NMS-E354 están presentes en la forma cristalina de la presente invención.

Solubilidad de las sales cristalinas de NMS-E354 y de la base libre

50 La determinación de solubilidad de sales de NMS-E354 ha sido realizada de acuerdo al siguiente procedimiento: cantidades conocidas de sales cristalinas de NMS-E354 o de base libre se agitaron durante 4 horas a temperatura ambiente en una solución al 0,9% de NaCl, en condiciones de exceso de sólido considerando una concentración objetivo de 10 mg/ml. Las preparaciones obtenidas se filtraron y se analizaron mediante HPLC. Los resultados se especifican en la Tabla 1a a continuación.

55

Tabla 1a – Solubilidad de las formas cristalinas de sales representativas y de la base libre de NMS-E354

Forma cristalina de NMS-E354

Valor de solubilidad en agua

Sal maleato

0,07 mg/ml

Sal sulfato

0,15 mg/ml

Sal mesilato

0,12 mg/ml

Sal hemifumarato

0,02 mg/ml

Base libre

<0,01 mg/ml

5

15

25

35

45

55

65

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Resultados analíticos mediante Difracción de Polvo de Rayos-X (PXRD)

Las sales de NMS-E354 se caracterizaron por difracción de rayos-X de polvo realizada utilizando un aparato Thermo/ARL XTRA, irradiando muestras de polvo con una fuente de CuKα (45 kV, 40 mA, 1,8 kW -radiación Kα1, longitud de onda  = 1,54060 Angstrom) entre 5º y 40º de 2-theta, a temperatura ambiente.

La velocidad de barrido fue de 1,20º/min (0,020º de paso con un tiempo de conteo de 1 segundo por paso). En los difractogramas de rayos-X, los ángulos de difracción 2-theta se representaron en el eje horizontal (eje-x) y la línea de intensidad en el eje vertical (eje-y).

En los párrafos que definen los picos de difracción de rayos-X del polvo para las formas cristalinas de las sales y la base libre de NMS-E354, el término 'aproximadamente a' se utiliza en la expresión '...aproximadamente a los ángulos 2-theta en la tabla...' para indicar que la posición precisa de los picos (p. ej. los valores recitados de 2-theta) no se deben interpretar como valores absolutos porque, como se podrá apreciar por el experto en la materia, la posición precisa de los picos puede variar ligeramente entre una máquina y otra, entre diferentes muestras, o como resultado de pequeñas variaciones en las condiciones de medición.

También se menciona en los párrafos precedentes que las formas cristalinas de las sales y de la base libre de NMS-E354 proporcionan patrones de difracción de polvo de rayos-X 'sustancialmente' iguales a los patrones de difracción de polvo de rayos-X mostrados en las Figuras 1, 2 y 3, tienen sustancialmente los picos más prominentes en valores de ángulo 2-theta mostrados en las tablas 1, 2, 3, 4, 5 y 6. Se podrá apreciar que con el uso del término 'sustancialmente' en este contexto se pretende indicar que los valores del ángulo 2-theta de los patrones de difracción de polvo de rayos-X pueden variar ligeramente de una máquina a otra, de una muestra a otra, o como resultado de pequeñas variaciones en las condiciones aplicadas en la medición, con lo que las posiciones mostradas de los picos en las figuras o mencionadas en las tablas tampoco se pueden interpretar como valores absolutos.

A este respecto, es conocido en la técnica que un patrón de difracción de polvo de rayos-X se pueden obtener con uno más errores de medición dependiendo de las condiciones de medición (tales como la preparación de la muestra, equipo o máquina utilizada). En particular, es de conocimiento general que las intensidades en un patrón de difracción de polvo de rayos-X pueden fluctuar dependiendo de las condiciones de medición y la preparación de la muestra.

Por ejemplo, las personas expertas en la materia de la difracción de polvo de rayos-X se darán cuenta que la intensidad relativa de los picos puede verse afectada, por ejemplo, por tamaño de grano por encima de 50 micras y por relaciones aspectos no unitarias, que pueden afectar el análisis de muestras.

La persona experta en la materia se dará cuenta de que la posición de reflexión puede verse afectada por la altura precisa a la que descansa la muestra en el difractómetro y la calibración del cero del difractómetro.

La planitud de la superficie de la muestra también puede tener un pequeño efecto.

Por consiguiente, una persona experta en la materia podrá apreciar que los datos de patrones de difracción presentados aquí no se deben interpretar como absolutos (para más información, véase "Fundamentals of Powder Diffraction and Structural Characterization", Pecharsky y Zavalij, Kluwer Academic Publishers, 2003). Por lo tanto, se debería entender que la forma cristalina de las sales y la base libre de NMS-E354 descritas en la presente invención no está limitada a los cristales que proporcionan un patrón de difracción de polvo de rayos-X idéntico a los patrones de difracción de polvo de rayos-X mostrados en las Figuras 1, 2 y 3, y que cualesquiera cristales que proporcionen patrones de difracción de polvo de rayos-X sustancialmente iguales a los mostrados en las Figuras 1, 2 y 3 están dentro del ámbito de la presente invención.

Una persona experta en la materia de la difracción de polvo de rayos-X es capaz de juzgar la identidad sustancial de patrones de difracción de polvo de rayos-X.

Generalmente, un error de medición de un ángulo de difracción en un difractograma de polvo de rayos-X es de aproximadamente 2-theta = 0,5 grados o menos (o, más adecuadamente, aproximadamente 2-theta = 0,2 grados o menos) y este grado de error de medición debe ser tenido en cuenta cuando se consideran los patrones de difracción de polvo de rayos-X de la Figuras 1, 2 y 3, y cuando se interpretan las posiciones de los picos referidos tanto en el texto como en las tablas 1, 2, 3, 4, 5 y 6.

Por lo tanto, donde se menciona, por ejemplo, que las sales y la base libre de NMS-E354 tienen un patrón de difracción de rayos-X con al menos un pico específico de aproximadamente 2-theta = 5,3 grados (o cualquier otro de los ángulos mencionados), entonces esto se puede interpretar como 2-theta = 5,3 grados más o menos 0,5 grados,

o 2-theta = 5,3 grados más o menos 0,2 grados.

Los ángulos 2-theta de los picos principales de difracción de rayos-X de las sales de maleato, sulfato, mesilato, hemifumarato y clorhidrato y la base libre de NMS-E354 se describen en la tabla 1 anterior, mientras que los

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conjuntos de datos completos se presentan en las tablas 2, 3, 4, 5 y 6.

Tabla 2 -Sal maleato de NMS-E354

Posición (Grados)

Intensidad (CPS) Intensidad Relativa (%)

5,8

1692,9 100,0

10,6

247,7 14,6

11,5

170,5 10,1

12,2

12,3 0,7

12,6

1675,2 99,0

14,7

280,0 16,5

15,5

69,7 4,1

16,1

309,8 18,3

16,6

600,2 35,5

17,4

748,9 44,2

19,5

73,4 4,3

19,9

175,7 10,4

20,9

67,5 4,0

21,2

352,9 20,9

22,0

100,1 5,9

22,6

300,0 17,7

23,2

172,5 10,2

23,4

106,0 6,3

23,7

247,1 14,6

24,0

50,9 3,0

24,4

123,1 7,3

25,0

417,3 24,7

25,2

220,9 13,1

25,6

497,2 29,4

25,9

156,7 9,3

26,7

68,4 4,0

27,0

132,8 7,9

27,2

158,2 9,4

27,9

826,8 48,8

29,0

139,9 8,3

31,4

80,6 4,8

32,2

265,6 15,7

33,6

107,2 6,3

34,7

167,8 9,9

35,0

37,8 2,2

35,4

160,2 9,5

37,3

52,6 3,1

37,5

35,2 2,1

38,3

37,2 2,2

39,3

31,0 1,8

5 Tabla 3 -Sal sulfato de NMS-E354

Posición (Grados)

Intensidad (CPS) Intensidad Relativa (%)

12,0

195,0 32,1

12,3

83,1 13,7

16,2

52,0 8,6

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Posición (Grados)

Intensidad (CPS) Intensidad Relativa (%)

16,7

90,2 14,9

17,0

36,4 6,0

18,5

46,0 7,6

19,1

17,9 3,0

19,9

29,3 4,8

20,5

126,5 20,8

21,8

606,7 100,0

23,4

99,9 16,5

24,1

30,1 5,0

24,8

164,2 27,1

25,3

134,8 22,2

25,6

18,0 3,0

26,0

34,7 5,7

26,5

100,6 16,6

28,1

49,5 8,2

28,8

438,3 72,2

29,6

25,3 4,2

31,1

58,5 9,6

38,7

52,2 8,6

Tabla 4 -Sal mesilato de NMS-E354

Posición (Grados)

Intensidad (CPS) Intensidad Relativa (%)

6,3

49,2 11,2

10,3

49,7 11,3

12,4

232,1 52,7

15,4

41,1 9,4

15,9

44,4 10,1

16,5

93,2 21,2

19,0

123,1 28,0

19,7

79,3 18,0

20,0

168,0 38,2

20,4

42,5 9,7

20,7

50,2 11,4

21,2

46,5 10,6

21,3

39,7 9,0

21,9

249,6 56,7

22,2

98,5 22,4

23,8

171,8 39,0

24,1

32,2 7,3

24,5

440,1 100,0

25,0

51,5 11,7

25,4

230,5 52,4

25,9

180,5 41,0

26,1

11,8 2,7

28,1

191,5 43,5

31,2

13,5 3,1

31,6

36,3 8,3

34,1

86,5 19,6

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Posición (Grados)

Intensidad (CPS) Intensidad Relativa (%)

34,6

40,8 9,3

35,9

36,7 8,3

36,5

22,0 5,0

37,3

33,3 7,6

38,6

102,1 23,2

Tabla 5 -Sal hemifumarato de NMS-E354

Posición (Grados)

Intensidad (CPS) Intensidad Relativa (%)

3,6

162,3 56,6

7,3

100,8 35,2

12,5

108,6 37,9

13,1

80,4 28,1

14,5

286,6 100,0

16,7

282,8 98,7

19,3

157,9 55,1

19,8

40,8 14,2

20,0

14,1 4,9

20,7

15,4 5,4

22,2

81,1 28,3

22,9

52,9 18,4

25,3

247,3 86,3

26,4

135,0 47,1

27,6

115,8 40,4

28,0

210,6 73,5

28,7

146,6 51,2

29,0

12,3 4,3

29,3

38,9 13,6

29,5

22,9 8,0

31,1

15,3 5,4

31,3

23,1 8,1

32,0

22,6 7,9

33,2

23,6 8,2

33,7

30,0 10,5

35,6

44,3 15,5

37,2

23,2 8,1

37,4

25,3 8,8

39,3

53,0 18,5

Tabla 6 -Base libre de NMS-E354

Posición (Grados)

Intensidad (CPS) Intensidad Relativa (%)

7,1

338,7 21,6

11,7

1567,2 100,0

14,1

121,3 7,7

15,2

134,8 8,6

15,5

96,3 6,1

17,0

26,7 1,7

17,3

85,7 5,5

17,6

30,0 1,9

20,2

66,4 4,2

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química esperada tanto de la molécula como de los contraiones.

De acuerdo con otro aspecto de la invención, una composición farmacéutica puede ser formulada de acuerdo con métodos conocidos en la técnica en cualquiera de las formas farmacéuticas conocidas en la técnica para la 5 administración a un mamífero, incluyendo seres humanos.

El experto en la materia apreciará a partir de los datos descritos y de los ejemplos experimentales más adelante, que las nuevas sales de NMS-E354 descritas en la invención son una herramienta nueva, mejorada y valiosa en terapia.

10 Las composiciones farmacéuticas que contienen los compuestos de la invención se preparan usualmente siguiendo métodos convencionales y se administran en una forma farmacéuticamente adecuada.

Por ejemplo, las formas sólidas orales pueden contener, junto con el compuesto activo, diluyentes, p. ej. lactosa, dextrosa, sacarosa o sucrosa, celulosa, almidón de patata o maíz; lubricantes, p. ej. sílice, talco, ácido esteárico, 15 magnesio o estearato cálcico, y/o polietilenglicoles; lubricantes, p. ej. dióxido de silicio coloidal; aglutinantes, p. ej. almidones, goma arábiga, gelatina de metilcelulosa, carboximetilcelulosa o polivinil pirrolidona; agentes disgregantes, p. ej. almidón, ácido algínico, alginatos o almidón glicolato de sodio; mezclas efervescentes; colorantes; edulcorantes; agentes humectantes como lecitina, polisorbatos, laurilsulfatos; y en general, sustancias no-tóxicas y farmacológicamente inactivas utilizadas en las formulaciones farmacéuticas. Estas preparaciones

20 farmacéuticas se pueden fabricar de forma conocida, por ejemplo, mediante la mezcla, granulado, compresión, grageado, o procesos de recubrimiento con película.

Las dispersiones líquidas para administración oral pueden ser, p. ej. jarabes, emulsiones y suspensiones.

25 Como ejemplo, los jarabes pueden contener, como portador, sacarosa o sacarosa con glicerina y/o manitol y sorbitol.

Las suspensiones y las emulsiones pueden contener, como ejemplo de portadores, goma natural, agar, alginato sódico, pectina, metilcelulosa, carboximetilcelulosa, o alcohol polivinílico.

30 Las suspensiones o soluciones para inyecciones intramusculares pueden contener, junto con el compuesto activo, un portador farmacéuticamente aceptable, p. ej. agua estéril, aceite de oliva, oleato de etilo, glicoles, p. ej. propilenglicol y, si se desea, una cantidad adecuada de clorhidrato de lidocaína.

35 Las soluciones para inyecciones intravenosas o infusiones pueden contener, como portador, agua estéril o preferiblemente pueden estar en la forma de soluciones salinas, isotónicas, acuosas, estériles o pueden contener propilenglicol como portador.

Los supositorios pueden contener, junto con el compuesto activo, un portador farmacéuticamente aceptable, p. ej. 40 manteca de cacao, polietilenglicol, un surfactante éster de ácido graso polioxietileno sorbitán o lecitina.

Por ejemplo, una composición farmacéutica que contiene una sal NMS-E354, como se define aquí en asociación con un portador o diluyente farmacéuticamente aceptable.

45 Ejemplos

Los siguientes ejemplos ilustran la invención.

Las temperaturas se midieron en grados Celsius (ºC). 50 A menos que se indique lo contrario, las reacciones o experimentos tienen lugar a temperatura ambiente.

Abreviaturas:

55 TA: temperatura ambiente HR: humedad relativa

Ejemplo 1: Forma cristalina I de la base libre de NMS-E354

60 Una solución de base libre (preparada como se describe en el Ejemplo 19, etapas 1-3 del documento WO 2007 110344) en metanol a reflujo (75 vol) se trató con carbón decolorante (10% p/p). La mezcla caliente se filtró y el filtrado transparente se mantuvo a +4ºC durante 20 horas. El precipitado sólido se recogió mediante filtración, se lavó en el filtro con éter dietílico (5 vol) y se secó bajo vacío a +50ºC rindiendo el producto cristalizado como sólido blanco.

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Ejemplo 2: sal maleato de NMS-E354

Una alícuota de la base libre de NMS-E354 (aprox. 40 mg) se disolvió a temperatura ambiente en 10 ml de metanol, obteniendo una concentración nominal de 4 mg/ml.

5 La formación de la sal se llevó a cabo mediante la adición de una cantidad equimolar de ácido maleico disuelto en metanol a la solución preparada a TA de la base libre de NMS-E354.

La cristalización por enfriamiento se realizó a -30ºC con un tiempo de reposo de aproximadamente 24-36 horas. El 10 precipitado obtenido se recogió mediante filtración al vacío y se secó a 40ºC bajo vacío.

Ejemplo 3: sales de NMS-E354

Operando de forma análoga al Ejemplo 2, pero empleando una cantidad equimolar del contraión ácido apropiado en 15 un disolvente (metanol, etanol o agua) se prepararon también las sales siguientes:

sal L-aspartato de NMS-E354, sal hemifumarato de NMS-E354, sal clorhidrato de NMS-E354, sal mesilato de NMS-E354, sal fosfato de NMS-E354, sal sulfato de NMS-E354 y sales L-tartrato de NMS-E354.

20 Si la cristalización no tuvo lugar, las soluciones se concentraron mediante evaporación a TA bajo flujo suave de nitrógeno para permitir la precipitación. En algunos casos se requirió un paso adicional de re-cristalización (p. ej. compuesto triturado en éter dietílico) para aislar una muestra cristalina o, al menos, una muestra en polvo a partir de un residuo pegajoso.

25 La identificación química de NMS-E354 y el contraión ácido en los compuestos obtenidos se realizó mediante 1H-RMN como se describe anteriormente.

Ejemplo 4: sales de maleato, sulfato, mesilato, hemifumarato y clorhidrato de NMS-E354

30 La base libre de NMS-E354 (372 mg, 1,07 mmol) se disolvió en metanol caliente (60 ml) y después se dejó enfriar a temperatura ambiente. El ácido apropiado (1,05 equivalentes) se añadió bajo agitación disuelto en metanol o agua en el caso del ácido fumárico. Las mezclas resultantes se envejecieron a 4ºC durante 48 horas y luego se concentraron a la mitad del volumen en vacío. Se filtraron los sólidos, se lavaron con éter dietílico y finalmente se secaron a 40ºC bajo vacío rindiendo las sales deseadas.

35 Ejemplo 5: sal maleato de NMS-E354

710 g de la base libre de NMS-E354 se calentaron a reflujo y bajo agitación en 60 l de etanol 95% durante 20 min permitiendo la completa disolución del material de partida (concentración de aproximadamente 12 g/l).

40 Se disolvió aproximadamente 1 equivalente de ácido maleico (250 g) en 1,45 l de etanol 95% (concentración de aproximadamente 170 g/l) y se añadió a la solución de la base libre. Después de 10 min a reflujo (la precipitación de la sal empezó después permanecer la misma cantidad de minutos a reflujo), se interrumpió la calefacción y se dejó descender espontáneamente la temperatura de la mezcla a aproximadamente 25ºC.

45 Después de la interrupción de la calefacción, la mezcla se agitó durante aproximadamente 21 horas, se filtró lavando con 1,5 l de etanol 95%, y después se secó bajo vacío a una temperatura externa establecida a 50ºC, obteniendo 564 g del compuesto del título.

50 Ejemplo 6: preparación de cápsulas de gelatina dura, intervalo de potencia entre 2,5 y 60 mg

Las composiciones farmacéuticas orales que contenían los compuestos de la invención se prepararon con un método de mezclado convencional, junto con el compuesto activo y otros excipientes en los intervalos de porcentajes mencionados en la Tabla 7.

55

Tabla 7

Ingrediente

Intervalo %

Compuesto activo: sal maleato de NMS-E354

3,0  38,0

Diluyente: lactosa monohidrato

0,0  52,0

Diluyente: almidón pre-gelatinizado

8,0  97,0

Lubricante: estearato de magnesio

0,8  1,0

Deslizante: dióxido de silicio coloidal

0,0  0,7

Claims (1)

1. imagen1